BR112016023363B1 - Controle da infestação de artrópodes - Google Patents

Abstract

controle da infestação de artrópodes uma formulação em pó seco que compreende esporos de um fungo entomopatogênico que tem atividade contra artrópodes que infestam áreas de armazenamento de mercadorias secas, em que os esporos estão presentes em uma quantidade de 2 a 5% p / p da formulação; partículas de um mineral industrial em uma quantidade de 80 a 88% p / p da formulação e tendo um diâmetro médio volumétrico de = 5 µm; e partículas de eletreto em uma quantidade de 10 a 15% p / p da formulação e seus usos.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção se refere a um método de controle de infestação de artrópodes, as formulações para o tratamento de infestação de artrópodes e usos dos mesmos. Em particular, a invenção se refere a métodos para controlar a infestação de artrópodes em áreas de armazenamento de mercadorias secas, os métodos para a aplicação de formulações na forma de pó seco para os artrópodes, formulações de pó seco que compreende agentes biológicos, partículas de eletreto, e partículas terrosas industriais, e métodos de produção de tais formulações, e suas utilizações. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] As áreas de armazenamento de mercadorias secas, tais como silos de grãos e caixas de grãos, onde o grão é armazenado imediatamente após a colheita ou antes do processamento atrai artrópodes, tais como ácaros e besouros, particularmente, besouros. Outras áreas de armazenamento de mercadorias secas incluem armazéns, instalações de armazenamento de supermercado, suporte do navio, contentores de carga, tais como caixas, engradados e recipientes associados com e / ou em trens, navios, aviões e veículos de transporte rodoviário. Para os fins da presente invenção, os termos “mercadoria seca” e “mercadorias secas" são usados alternadamente e abrangem mercadorias secas, incluindo grãos integrais para a dissiminação ou grãos integrais para uso como alimento e / ou na confecção de alimentos processados e armazenamento locais para a madeira e produtos feitos de madeira. Os cereais integrais incluem aqueles, tais como trigo, arroz, cevada e milho (muitas vezes referida como o amido), leguminosas, feijão, lentilhas e produtos derivados ou feitos com matérias-primas secas. Tais produtos de mercadorias secas também incluem alimentos processados, como massas, farinhas de grãos, cuscuz, cereais, ervas secas, cereais para lanche, alimento para o animais doméstico, por exemplo, para porcos, vacas, ovelhas e cavalos, sêmolas, pães, nozes (do solo, em flocos e / ou inteira), alimentos para lanche, como doces e salgados, incluindo biscoitos, batatas fritas, batatas fritas vegetais, pretzels, biscoitos de queijo, bolachas secas, e assim por diante. Amadeiramento inclui madeira serrada, forro de madeira, artigos feitos de madeira, tais como andaimes de telhado de edifícios, painéis, portas e molduras de portas, vergas, rodapé, compensados, madeira compensada, móveis e similares. Artrópodes, tais como insetos, por exemplo, besouros de armazenamento de grãos, besouros e traças de madeira alimentam-se de mercadorias secas e são uma das principais causas de perdas econômicas para os agricultores e as indústrias de alimentos e utilização de madeira.

[0003] Quando mercadorias secas são removidas de áreas de armazenamento de mercadorias secas, muitos artrópodes são deixados para trás, habitando rachaduras e fendas em paredes, pisos e outras estruturas de apoio, como pilares e / ou prateleiras. Os procedimentos convencionais para controlar as infestações de artrópodes que se baseiam na utilização de produtos químicos aplicados como formulações fluídicas para esvaziar áreas de armazenamento das matérias- primas secas são eficazes na medida em que elas matam artrópodes que entram em contato com o produto químico aplicado. No entanto, as formulações químicas fluídicas normalmente não entram em rachaduras e fendas habitadas por populações de artrópodes. Tais populações sobrevivem à aplicação de produtos químicos que são aplicados às superfícies do ambiente circundante e estão, portanto, livre para infestar novas transferências de mercadoria secas que são depositadas na área de armazenamento, e, assim, o ciclo de infestação é repetido na mercadoria com perdas econômicas concomitantes.

[0004] Outros métodos de tratamento de zonas de armazenamento de mercadorias secas confiam na aplicação de níveis relativamente elevados de produtos químicos artropodicidas em forma de pó seco. No entanto, a eficácia destes tratamentos diminui ao longo do tempo.

[0005] Os agentes biológicos têm sido utilizados no estado da técnica em tentativas para controlar a infestação de artrópodes de vários tipos em vários contextos. Em particular, certas cepas de fungos entomopatogênicos, como Beauveria bassiana, Paecilomyces fumosoroseus e Lecanicillium spp. têm utilização encontrada no controle de certos artrópodos. Apesar de fungos entomopatogênicos são claramente vistos como candidatos para controlar infestações de artrópodes, é também evidente que a maioria das cepas de fungos entomopatogênicos é inadequada como candidatas para o controle de infestações de artrópodes na miríade dos chamados ambientes de armazenamento de mercadorias secas em que o uso efetivo de ceás de fungos seria desejável. Muitas vezes, tem- se mostrado que as cepas candidatas aparentemente adequadas de fungo são incapazes de tolerar as condições ambientais extremas que muitas vezes existem em ambientes feitos pelo homem, tais como áreas de armazenamento das matérias-primas secas ou outros ambientes nos quais gêneros alimentícios das matérias-primas secas como descrito acima pode ser colocado.

[0006] Um problema na utilização de agentes biológicos, tais como cepas candidatas de fungo entomopatogênico que podem ser descobertas em um país e propostas para uso em um ambiente em um país diferente é que estas cepas não podem desempenhar bem no novo ambiente porque não são capazes de tolerar as condições extremas que prevalecem no ambiente do país em que elas estão a ser utilizadas. Além disso, as restrições regulatórias podem ser tão árduas como para fazer a importação de uma cepa provável candidata inviável e isso pode ser acoplado com dúvidas sobre a possibilidade de provar a sua provável eficácia em um ambiente exótico.

[0007] O documento US 4,925,663 descreve a utilização de, inter alia uma formulação em pó seco que compreende arroz em pó, e uma determinada cepa de um fungo, Beauveria bassiana, que tem uma virulência particular contra as formigas de fogo, quando utilizada em um ambiente aberto.

[0008] Meikle et al (2007) J. Econ. Entomol. 100: pp 1-10 descreve o uso de cera de carnaúba como um transportador de esporos de Beauveria bassiana (cepa Bb05002 que é indígena para a França) em colmeias para controlar ácaro de varroa. O ambiente dentro da colmeia é relatado como tendo uma umidade relativa (HR) de 40% a 50%, aparentemente, a temperaturas desde 33 ° C a 36 ° C. Parece que o meio ambiente no interior da colmeia não é sujeito a grandes extremos de HR e de temperatura, designadamente porque as abelhas ativamente regulam a temperatura no interior.

[0009] O documento WO 2006/121350 descreve a previsão de certas culturas biologicamente puras das cepas de fungos entomopatogênicos, como a Beauveria bassiana para o controle de insetos fitopatogênicos para uso contra Thysanoptera (tripes), Hemiptera (mosca branca) e outros. As composições aí descritas parecem ser aplicadas às plantas no campo como spray úmido. O documento WO 2011/157983 descreve a provisão de uma cepa de Beauveria bassiana que é útil no controle da infestação das áreas de armazenamento de grãos, inter alia, através do emprego de uma composição seca que consiste de uma cera na forma de partículas que transporta esporos ou conídios para o local alvo. A composição descrita não contém referência à utilização de determinadas percentagens de peso seco de partículas minerais industriais, de eletreto e entomopatógeno nas composições nele reivindicados.

[0010] Uma vantagem das formulações da invenção é que o efeito do componente mineral terroso, o componente de partículas de eletreto e componente entomopatôgenico parece ser sinérgica e fornece significativamente um melhor controle de artrópodes sobre mercadoria seca que infestam, do que o efeito de cada componente individual quando adicionados em conjunto. A sinergia é evidente a partir dos exemplos anexos.

[0011] Uma outra vantagem das composições da presente invenção é que elas são mais baratas de fabricar do que as composições do estado da técnica. Além disso, as composições da invenção não levam a um acúmulo de resíduos tóxicos em locais de armazenamento, ou, na verdade, em produtos secos que podem ser armazenados e / ou tratados no local.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0012] É um objetivo da presente invenção superar ou pelo menos reduzir as desvantagens dos métodos convencionais de tratamento de zonas de armazenamento de mercadorias secas por infestação de artrópodes. Este e outros objetivos serão evidentes a partir da seguinte descrição e exemplos.

[0013] De acordo com a presente invenção, é fornecida uma formulação de pó seco compreendendo: i) esporos de um fungo entomopatogênico que tem atividade contra artrópodes que infestam áreas de armazenamento de mercadorias secas, em que os esporos estão presentes em uma quantidade de 2 a 5% p / p de a formulação; ii) partículas de um mineral industrial em uma quantidade de 80 a 88% p / p da formulação; e ter um volume médio de diâmetro > 5μm; e iii) partículas de eletreto, em uma quantidade de 10 a 15% p / p da formulação.

[0014] De preferência, os esporos estão presentes em uma quantidade de 2 - 4,5% p / p, as partículas de material industrial estão presentes em uma quantidade de 82,5 - 87% p / p, e as partículas de eletreto estão presentes em uma quantidade de 11 a 13% p / p da formulação em pó seco da invenção. Um exemplo de uma composição da formulação seca da presente invenção é aquele em que os esporos estão presentes em 2,12 - 4,167% p / p, partículas de material industrial estão presentes em 83,3 a 85,1% p / p e partículas de eletreto estão presentes em 12,5 a 12,80% p / p.

[0015] As formulações da invenção contêm, pelo menos, 1 x 109 CFU / grama de peso seco, de preferência, os esporos estão presentes em uma quantidade de pelo menos 1 x 1010 CFU / grama de peso seco, ou em uma quantidade de pelo menos 1 x 1011 CFU / grama de peso seco. É para ser entendido que os termos “conídios”, “esporo" e "CFU" (padronizam para Unidade Formadora de Colônias) podem ser utilizados de forma intercambiável dependendo do contexto e referem-se à mesma coisa, isto é, esporos viáveis, conídios viáveis ou UFC viáveis. O UFC é frequentemente referido como valores exibidos de ordens de magnitude do número de UFC viáveis, tais como a partir de 1 x 108 a 1 x 1011 ou superior. O técnico versado no assunto apreciará que, em tais ordens de magnitude a viabilidade de CFUs irá tipicamente estar na gama de 80% a 99% ou mesmo 100%.

[0016] As partículas de eletreto utilizadas na presente invenção tipicamente têm um volume médio de diâmetro de > 10μm, de preferência de 10 a 40μm, e mais preferivelmente, de 10 a 30 μm. Pensa-se que o tamanho das partículas de eletreto deve ser a cerca de 10 μm ou mais para minimizar potenciais efeitos respiratórios negativos para os trabalhadores.

[0017] As partículas de minerais industriais são preferencialmente de um volume médio de diâmetro de > 5μm ou mais em tamanho, tal como 22 μm. Pensa-se que o tamanho das partículas de mineral terroso desempenha um papel na inibição da respiração nos artrópodes que entram em contato com elas. O mineral industrial pode ser selecionado a partir de qualquer mineral industrial capaz de ser utilizado na presente invenção, tais como argilas, terra de diatomáceas, areia, cascalho, diatomita, caulin, bentonita, sílica, barite, gesso, montmorilonite e talco ou uma mistura de dois ou mais destes. Preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin, talco e bentonita ou uma mistura de dois ou mais destes. Mais preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin e talco ou uma mistura dos mesmos.

[0018] Os esporos ou conídios do fungo entomopatogênico de utilização na invenção pode ser selecionado a partir de espécies tais como Beauveria bassiana spp., Paecilomyces fumosoroseus spp. e Lecanicillium spp. De um modo preferido, o fungo entomopatogênico é selecionado de espécies Beauveria bassiana que são capazes de germinar e de penetrar as cutículas dos artrópodes na área de armazenamento de mercadorias secas que infestam em uma área de armazenamento de mercadorias secas, tal como aqui definido. As cepas de fungos entomopatogênicos preferidos para aquisição de esporos ou conídios de utilização em formulações e composições da invenção incluem aquelas selecionadas entre a espécie Beauveria bassiana. Uma cepa adequada de Beauveria bassiana para uso no fornecimento de esporos ou conídios de utilidade na invenção é a cepa depositada sob o Tratado de Budapeste, IMI 398548, depositada no Centro de Agricultura e Biociências Internacional (CABI), Bakeham Lane, Egham, Surrey, TW20 9TY, Reino Unido, em 11 de maio de 2010.

[0019] As formulações da invenção também são usadas para fornecer uma cobertura ou camada para secar superfícies de armazenamento de mercadorias de, pelo menos, 1 x 109 conídios / m2, preferivelmente, de 1 x 109 a 1 X 1011 conídios / m2 . Para os fins da presente invenção e de acordo com o que é afirmado acima CFUs 'esporos' e 'conídios" são utilizados indiferentemente a menos que de outro modo o contexto exija. Assim, os valores numerados para CFU / m2, esporos / m2 e conídios / m2 significam a mesma coisa, por exemplo, 1x109 esporos / m2 significa a mesma coisa que 1 x 109 UFC / m2 e 1 x 109 conídios / m2.

[0020] As formulações da invenção podem também conter excipientes adequados normalmente empregados no estado da técnica, tais como agentes de fluxo ou agentes anti- aglomerantes selecionados a partir de bicarbonato de sódio, ferrocianeto de sódio, ferrocianeto de potássio, ferrocianeto de cálcio, fosfato ósseo, silicato de sódio, dióxido de silício, silicato de cálcio, trissilicato de magnésio, aluminossilicato de sódio, silicato de potássio e alumínio, alumino-silicato de cálcio, ácido esteárico, polidimetilsiloxano e semelhantes.

[0021] Além disso, as formulações da invenção podem conter outros componentes tais como aditivos selecionados a partir de bloqueadores de UV, tais como beta-caroteno ou o ácido p-aminobenzóico, agentes corantes, tais como branqueadores óticos e agentes corantes disponíveis comercialmente, tais como agentes corantes de alimentos, plastificantes, tais como glicerina ou óleo de soja, os agentes antimicrobianos, tais como sorbato de potássio, nitratos, nitritos, óxido de propileno e semelhantes, os antioxidantes tais como a vitamina e, hidroxila butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), e outros antioxidantes que possam estar presentes, ou as suas misturas. O técnico versado no assunto irá apreciar que a seleção de tais aditivos incluídos normalmente será feita dependendo do efeito final e da necessidade percebida.

[0022] Naturalmente, o técnico versado no assunto apreciará também que as formulações da invenção podem também ser aplicadas às massas das matérias-primas secas e misturas dessas conferindo, assim, proteção contra a infestação de artrópode ao produto seco por si só durante o armazenamento. O técnico versado no assunto também apreciará que as formulações secas da presente invenção que contêm os três componentes acima definidos, podem ser aplicadas para massas de sementes destinados a disseminação ou massas de sementes destinadas a um dado consumo, uma vez que os componentes individuais da formulação de pó seco não são considerados tóxicos para os animais e / ou o homem ao nível de adição aqui definido.

[0023] As formulações, de acordo com a invenção são ativos contra artrópodes de armazenamento de mercadorias secas, tais como Trigoderma spp. (Besouro-do-arroz), besouro- do-fumo (besouro cigarro), Ahasversus advena (caruncho estrangeiro), Sitophilus oryzae, Sitophilus granarius, Sitophilus zeamais, Rhyzopertha dominica, Ahasverus advena, Oryzaephilus spp, como Oryzaephilus surinamensis, Prostephanus trunca, Rhyzopertha dominica (broca do grão menor), Cryptolestes spp., tais como Cryptolestes ferrugineus, Tribolium spp., Plodia interpunctella (traça da refeição indiana), Ephestia cautella (traça de amêndoa), ácaros incluindo Acarus siro (ácaro da farinha), Acer tulipae (ácaro do fel) e Psocoptera (piolho de livro). Normalmente, as formulações da invenção mostram atividade contra artrópodes, tal como Oryzaephilus surinamensis, Sitophilus granarius (gorgulho do grão) e Cryptolestes ferrugineus.

[0024] Em um aspecto adicional da invenção é proporcionada a utilização de uma formulação da presente invenção no controle de infestação de artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias seca (instalação). As áreas de armazenagem de mercadorias secas em que o uso de uma formulação da invenção é apropriado incluem áreas de armazenamento das matérias-primas secas, tais como silos de grãos e caixas de grãos, onde o grão é armazenado imediatamente após a colheita ou antes do processamento. Outras áreas de armazenamento de mercadorias secas incluem armazéns, instalações de armazenamento do supermercado, porão de navio, contentores de carga, tais como caixas, engradados e recipientes associados com e / ou em trens, navios, aviões e veículos de transporte rodoviário. Para os fins da presente invenção, os termos “mercadoria seca' e “mercadorias secas" são usados alternadamente e abrangem mercadorias secas, incluindo grãos integrais para a disseminação ou grãos integrais para uso como alimento e / ou na fabricação de alimentos processados e armazenamento nos locais para a madeira e produtos feitos de madeira. Os cereais integrais incluem aqueles tais como trigo, arroz, cevada e milho (muitas vezes referida como o milho), leguminosas, feijão, lentilhas e produtos derivados ou feitos com matérias-primas secas. Tais produtos de mercadorias secas também incluem alimentos processados, como massas, farinhas de grãos, cuscuz, cereais, ervas secas, cereais de pequeno almoço, sêmolas, pães, nozes (solo, em flocos e / ou nozes inteiras), merendas de alimentos, como doces e salgados incluindo biscoitos, batatas fritas, batatas fritas vegetais, pretzels, biscoitos de queijo, bolachas secas e assim por diante. Madeira de construção inclui madeira, compensados, artigos feitos de madeira, tais como andaimes de telhado de edifícios, painéis, portas e molduras de portas, vergas, rodapé, compensados, rodapés, móveis e similares, e ração de animal doméstico para porcos, vacas, ovelhas e cavalos, e semelhantes.

[0025] Em um aspecto adicional da invenção é proporcionado um método de produção de uma formulação em pó seca da invenção compreendendo as etapas de: i) Micronizar as partículas eletreto secos; ii) misturar os esporos secos de Beauveria bassiana, tais como esporos secos da cepa IMI 398548, e com as referidas partículas de eletreto; e iii) misturar as partículas seca de mineral terroso industrial com o produto do passo ii).

[0026] Partículas de eletreto utilizadas na presente invenção, tais como partículas de cera de carnaúba são fabricadas por moagem de cera de carnaúba bruta (disponível a partir da The British Wax Refining Co. Ltd., 62 Holmethorpe Avenue, Holmethorpe Industrial Estate, Redhill, Surrey, Reino Unido), moendo-as, seguido por uma etapa de micronização usando técnicas comumente empreguadas no estado da técnica. Para obter partículas de eletreto de um diâmetro médio volumétrico de utilização na presente invenção, blocos sólidos de material a partir do qual as partículas de eletreto podem ser fabricados sob a forma de, por exemplo, 1 a 5 blocos quilograma ou comprimidos podem ser discriminados ou partidos em pequenos milímetros -sized peças (como a partir de 2 - 8 mm de diâmetro aproximado em tamanho, por exemplo de 4 a 6 mm) de uma máquina de kibbling. As partes de tamanho de milímetro-são então passadas através de meios de trituração, tais como um moinho padrão, por exemplo, um moinho de trituração Apex, e moído ou triturado em partículas com um diâmetro aproximado no intervalo de 100μm - 500 μm, por exemplo, a partir de 250μm - 300μm. As partículas trituradas micronizadas são então passadas através de um aparelho de micronização, tais como um moinho de micronização a ar AFG para se obter partículas de uma faixa de tamanho VMD desejado, como aqui descrito, tal como de 22 μm - 40 μm, que é de utilização na presente invenção. O técnico versado no assunto apreciará que tais processos para a obtenção de pequenas partículas são bem conhecidos no estado da técnica.

[0027] A micronização das partículas de eletreto seca pode ser realizado por moagem a < 4000 rpm. Se a eficácia pode ser mantida através da utilização de concentrações mais elevadas de cera de carnaúba (por exemplo, 75% de cera em comparação com 25%), em seguida, isso irá reduzir o risco de respiração colocado pela formulação. É também provável que o aumento da concentração de cera de carnaúba vai ser de benefício para a aplicação do produto por aumentar a massa do produto com a mesma concentração de esporos, assim, tornando- o mais fácil de aplicar uniformemente sobre a mesma área de superfície.

[0028] As partículas de minerais industriais são preferencialmente de um diâmetro médio volumétrico de > 5μm ou mais na dimensão média, tais como 10 μm - 50 μm, de preferência, 10 μm - 40 μm, por exemplo, 10 μm. Sem a intenção de estar limitado pela teoria, pensa-se que o tamanho das partículas de terra mineral desempenha um papel na inibição da respiração no artrópodes que entram em contacto com eles. O mineral industrial pode ser selecionado a partir de qualquer mineral industrial capaz de ser utilizado na presente invenção, tais como argilas, terra de diatomáceas, areia, cascalho, diatomomita, caulin, bentonite, sílica, barite, gesso, montmorilonite e talco ou uma mistura de dois ou mais destes. Preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin, talco e bentonita ou uma mistura de dois ou mais destes. Mais preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin e talco ou uma mistura dos mesmos.

[0029] De acordo com um outro aspecto da invenção, proporciona-se uma formulação em pó seco da invenção produzido pelo processo de: i) Micronizar as partículas eletreto secos; ii) misturar os esporos secos de Beauveria bassiana, tais como esporos secos da cepa IMI 398548, e com as referidas partículas de eletreto; e iii) misturar as partículas secas de mineral terroso industrial com o produto do passo ii).

[0030] Quanto ao método de produção de uma formulação em pó seco da invenção contém partículas de eletreto de um diâmetro médio volumétrico de utilização na presente invenção significa, blocos sólidos de material a partir do qual as partículas de eletreto podem ser fabricadas sob a forma de, por exemplo, 1 a 5 kg blocos ou os comprimidos podem ser divididos ou partidos em pedaços pequenos de apenas alguns milímetros (tais como a partir de 2 - 8 mm de diâmetro aproximado em tamanho, por exemplo de 4 a 6 mm) a partir de uma máquina de triturar. As partes de tamanho de milímetro- são então passadas através de meios de trituração, tal como um moinho padrão, por exemplo, um moinho de trituração Apex, e moída ou triturada em partículas com um diâmetro aproximado no intervalo de 100μm - 500μm, por exemplo, de 250 μm - 300 μm. As partículas trituradas micronizadas são então passadas através de um aparelho de micronização, tais como um moinho de jato de classificador de ar, por exemplo, um moinho de micronização a ar AFG para obter partículas com uma faica de tamanho VMD desejado, como aqui descrito, tal como de 10 μm- 40 μm, que é de utilização na presente invenção. O técnico versado no assunto apreciará que tais processos para a obtenção de pequenas partículas são bem conhecidos no estado da técnica.

[0031] A micronização das partículas de eletreto seco pode ser realizado por moagem a < 4000 rpm. Os esporos têm uma influência muito mais forte no VMD do que a cera de carnaúba, porque eles são menos densas e, portanto, para o mesmo peso que ocupam cerca de três vezes o volume (estimativa visual), como a cera de carnaúba. Se a eficácia pode ser mantida através da utilização de concentrações mais elevadas de cera de carnaúba (por exemplo, 75% de cera em comparação com 25%), em seguida, isso irá reduzir o risco de respiração colocado pela formulação. É também provável que o aumento da concentração de cera de carnaúba vai ser de benefício para a aplicação do produto por aumentar a massa do produto com a mesma concentração de esporos, assim, tornando- o mais fácil de aplicar uniformemente sobre a mesma área de superfície.

[0032] As partículas de mineral industrial são de um modo preferido de > 5 μm ou mais em tamanho, de preferência, >10 μm, por exemplo, 22 μm. Pensa-se que o tamanho das partículas do mineral terroso desempenha um papel na inibição da respiração nos artrópodes que entram em contacto com eles. O mineral industrial pode ser selecionado a partir de qualquer mineral industrial capaz de ser utilizado na presente invenção, tais como argilas, terra de diatomáceas, areia, cascalho, diatomita, caulin, bentonita, sílica, barita, gesso, montmorilonite e talco ou uma mistura de dois ou mais destes. Preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin, conto e bentonite ou uma mistura de dois ou mais destes. Mais preferivelmente, o mineral industrial é selecionado a partir de caulin e talco ou uma mistura dos mesmos.

[0033] Em um aspecto adicional da invenção é proporcionado um método de controle de infestação seco mercadoria de artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias a seco, em que uma formulação de pó seco da invenção é apresentada para as superfícies de uma área de armazenamento de mercadorias seco i) recolher a formulação de pó seco em um aparelho de varredura; e ii) liberar a referida formulação em pó seco a partir do referido aparelho de varredura e para a dita área de armazenamento de mercadorias seca.

[0034] Para os efeitos da presente invenção "controlar a mercadoria seco de infestação por artrópode" significa que a população de artrópodes para a qual formulações da invenção são aplicadas são aquelas que sofrem perdas devido à morte, problemas de saúde que podem levar à morte, e / ou incapacidade de reproduzir ou a redução na capacidade de reprodução. De um modo preferido, o controle de populações de artrópodes de armazenamento significa que pelo menos 80%, de preferência, pelo menos 90%, da população de artrópodes morre em um prazo de 28 dias após a aplicação das composições da invenção. De um modo preferido, as populações de artrópodes que são adversamente afetadas pelas composições da invenção morrem ou pelo menos sofrem efeitos sub-letais, que contribuem para a redução da população de longa duração, como resultado da aplicação de formulações de pó seco da invenção para a área de armazenamento de mercadorias seco. O técnico versado no assunto irá apreciar que a população de artrópodes de armazenamento de mercadorias secas a que as formulações da invenção são aplicadas pode ser constituída por uma ou mais de uma espécie de artrópodes. Assim, o método de controle mercadorias secas por infestação de artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias que apresenta uma formulação de pó seco da invenção para as superfícies de uma área de armazenamento de mercadorias seca.

DESCIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0035] Há agora a seguir exemplos e que ilustram a invenção. É para ser entendido que o ensinamento dos exemplos não é para ser interpretado como limitando a invenção de qualquer maneira. Seção experimental

Experimento 1

[0036] Uso de Beauveria bassiana (Bals.) para o controle da broca maior de grão (Prostephanus trunca Horn.) de milho armazenado: Resposta de Prostephanus truncatus a quatro concentrações (CFU / kg de milho) de B. bassiana, IMI 398548 no laboratório.

Sumário

[0037] Um estudo anterior sobre a patogenicidade de Beauveria bassiana, IMI 398.548 para Prostephanus truncatus, Sitophilus zeamais e Teretrius nigrescens identificou B. bassiana, IMI 398.548 para ser patogênica contra adultos de P. truncatus, S. zeamais e T. nigrescens. Para determinar a concentração mais eficaz de B. bassiana para o controle de P. truncatus para os ensaios de meio-campo, um estudo de laboratório da resposta de adulto P. truncatus a quatro concentrações de B. bassiana, IMI 398548 (108 a 1011 UFC / kg de milho) foi estudado.

[0038] Um delineamento inteiramente casualizado (DIC) foi usado com 5 tratamentos (P. truncatus infestado com quatro concentrações (108 a 1011 CFU / kg de milho) de B. bassiana, o esporo em pó IMI 398548 e um controle negativo em que nenhuma B. bassiana foi adicionado com cinco repetições.

[0039] Grãos de milho (1250 g cada) foram cuidadosamente misturados com as várias concentrações (108, 109, 1010 e 1011 CFU) de B. bassiana IMI 398548. Cada um dos quatro tratamentos foi, em seguida, dividido em cinco partes iguais para representar 5 repetições (250 g) cada um e colocados em 500 ml de frascos de Kilner em um delineamento inteiramente casualizado (DIC). P. truncatus (50) adultos foram então introduzidos nos tratamentos após 24 horas. A fim de determinar a viabilidade do outro fungo, 1,250 g de milho foi tratado com 1011 unidades de colônias fumegantes (UFC) de B. bassiana e CFU foram contados no início e no final do experimento. Houve um tratamento de controle negativo em que não foi adicionada nenhuma B. bassiana. Todos os tratamentos foram realizados a 25 ± 2° C e 65 ± 5% de umidade relativa.

[0040] A mortalidade de P. truncatus foi avaliada em intervalos de sete dias durante 3 semanas. Para determinar se a morte foi como resultado das micoses causadas por B. bassiana, o IMI 398548, os cadáveres dos insetos foram incubados em placas de Petri para verificar a colonização por fungos.

[0041] A colonização dos cadáveres foi observada ao longo de um período de 4 a 6 dias, a 26 ± 2° C e 65 ± 5% de HR. Os resultados revelaram que, B. bassiana, o IMI 398548 em 1010 e 1011 CFU por kg de milho resultou em uma maior mortalidade significativa (P <0,05) de P. Truncatus adutos em comparação com 108 e 109 CFU por kg de milho.

[0042] Para estas concentrações (1010 e 1011 CFU por kg de milho), a mortalidade de P. Truncatus adultos foi de 64,7- 68,0% após 7 dias de exposição, atingindo 96,0% e 98,7%, respectivamente, 14 dias após o tratamento. Em contraste, a mortalidade de P. Truncatus adultos em 108 e 109 CFU por kg de milho B. bassiana, o IMI 398548 foi 13% 7 dias após a exposição e manteve-se inferior a 30%, 21 dias após a exposição. A mortalidade de P. truncatus no tratamento de controle (onde nenhum B. bassiana foi adicionado) foi de 0% ao final de 21 dias.

[0043] O micélio pós-mortem e crescimento de conídios mostrou que a maioria de P. truncatus tinha morrido de infecção pelo fungo com porcentagem de micose para as quatro concentrações (108, 109, 1010 e 1011 CFU por kg de milho) de B. bassiana sendo 97,1, 98,6, 99,6 e 99,6, respectivamente. 2. OBJETIVO • Avaliar a resposta de Prostephanus Truncatus a quatro concentrações (UFC / kg de milho) de B. bassiana, IMI 398548 no laboratório. 3. INTRODUÇÃO E LINHAS DE ESTUDO • Para determinar a concentração mais eficaz de B. bassiana para o controle de P. truncatus para os ensaios de meio-campo, um estudo de laboratório da resposta de P. truncatus adulto para quatro concentrações de B. bassiana, IMI 398548 (108 a 1011 CFU por kg de milho) foi estudado.

DESCRIÇÃO DA EXPERIMENTO

[0044] P. truncatus adultos foram criados no Laboratório de Plant Protection and Regulatory Service of Ghana (PPRSD) sob condições ambientes (28 ± 2 ° C, 65 ± 5% UR). Um mês após a eclosão dos insetos, os adultos foram cultivados em grãos de milho inteiros. Grãos de milho (1250 g cada) foram cuidadosamente misturados com as várias concentrações (108, 109, 1010 e 1011 CFU) de B. bassiana IMI 398548. Cada um dos quatro tratamentos foi, em seguida, dividido em cinco partes iguais para representar 5 repetições (250 g) cada e colocado em 500 ml. De frascos de Kilner. P. truncatus adutos (50) foram então introduzidos nos tratamentos após 24 horas. A fim de determinar a viabilidade do outro fungo, 1,250 g de milho foi tratado com B. bassiana a 1011 CFU e unidades de colônias fumegantes (UFC) foram determinados no início e no final do ensaio. Houve um tratamento de controle negativo, em que não nenhum B. bassiana foi adicionado. Todos os tratamentos foram realizados a 25 ± 2 ° C e 65 ± 5% de umidade relativa. A mortalidade de P. truncatus foi avaliada em intervalos de sete dias durante 3 semanas (dias 7, 14 e 21). O Post-mortem foi feito em cadáveres dos insetos para determinar se a morte foi o resultado de micoses causadas por B. bassiana, o IMI 398548.

MÉTODOS 4. ITENS DE DETALHES DO TESTE

[0045] Materiais fornecidos pela Exosect para experimento de dose-resposta foram: A: Quatro saquetas, contendo cada uma 3 g de formulação A (108 CFU por kg de milho). B: Quatro saquetas, contendo cada uma 3 g de formulação B (109 CFU por kg de milho). C: Quatro saquetas, cada uma contendo 3,2 g de formulação C (1010 UFC por kg de milho). D: Quatro saquetas, cada uma contendo 4,5 g de formulação D (1011 CFU por kg de milho). E: 2 g de caulin + 0,3 g entostat + 0,001 g de esporos / kg de milho F: 2,0 g de caulin + 0,3 g de entostat + 0,01 g de esporos / kg de milho G: 2,0 de caulin + 0,3g de entostat + 0,1 de esporos / kg de milho H: 2,0 g de caulin + 0,3 g de entostat + 1,0 g de esporos / kg de milho

Fonte de Insetos

[0046] A um mês após eclosão de P.truncatus, adutos foram usado para o experimento, e foram criados em grãos de milho inteiros a 28 ± 2 ° C e 65 ± 5% de umidade relativa no laboratório de Entomologia da Unidade de biocontrole, do Plant Protection and Regulatory Service of MOFA, Accra.

Determinação das concentrações de Beauveria bassiana, IMI 398.548 para a proteção de milho armazenado contra Prostephanus truncatus

[0047] Para determinar a concentração mais eficaz de formulação de B. bassiana, IMI 398548 para proteção de milho armazenado contra P.truncatus, um estudo de laboratório foi realizado com quatro concentrações (108, 109, 1010 e 1011 CFU por kg de milho) de B . bassiana, IMI 398.548.

[0048] O milho (cultivar “Obatanpa”) foi armazenado em um congelador, a - 4 ° C durante 2 dias. O milho foi então removido, seco em estufa durante um dia a 50 ° C e deixado durante mais dias para resfriar. O milho (2500 g) foi tratado com 4,5 g de B. bassiana (1 x 1011 UFC / kg de milho) e divido em frascos contendo 10 alíquotas de 250 g cada. Cinco destes frascos foram utilizados para a avaliação da mortalidade, enquanto, os outros cinco foram utilizados para os ensaios de viabilidade inicial e final. Para as outras concentrações, um 1,250 g de milho cada um foi misturado com 3,2 g de B. bassiana a 1010 CFU / kg de milho, de 3 g de B. bassiana, em 108 e 109 CFU e dividido em cinco partes iguais (250 g), representando cinco repetições. Houve um controle negativo no qual não se adicionou qualquer B. bassiana. Os grãos foram deixados durante 24 horas após o qual 50 P. truncatus não sexados foram introduzidos em cada frasco. Os tratamentos foram deixados em condições de laboratório, a 25 ± 2 ° C e 65 ± 5% de umidade relativa. A temperatura e a umidade relativa do ar no laboratório de Entomologia do Departamento de Fitotecnia, Legon onde este bioensaio foi realizado foi monitorado através de um coletor de dados.

[0049] Após os insetos tenham sido introduzidos, 5 g de grãos de milho foi amostrado a partir de cada réplica de B. bassiana a 1 x 1011 UFC / kg de milho (que não tinha insetos) e lavou-se em 10 mL de Tween a 0,05% estéril 80. A suspensão foi agitada por pouco agitando suavemente durante alguns poucos minutos antes de realizar uma diluição em série de 10 vezes, resultando em 8 diluições. As alíquotas de 200 μl de cada diluição foi inoculada em duplicado em Sabouraud Dextrose Agar (SDA), utilizando a técnica de espalhamento em placa e incubou-se durante 4 dias para determinar o número de unidades formadoras de colónias (CFU) por mL.

[0050] A mortalidade de P. truncatus foi registrada em intervalos de 7 dias para três semanas esvaziando cada frasco em bandejas de laboratório. Os insetos mortos foram removidos em cada momento de avaliação e esterilizadas à superfície em hipoclorito de sódio a 2% durante 1 minuto, seguido por duas lavagens em água destilada estéril durante 1 minuto. Os cadáveres de cada tratamento foram, em seguida, transferidos para papel de filtro Whatman umedecido com 1 ml de água destilada estéril, colocado em placas de Petri de 9 cm e selada com Parafilm. Insetos em papéis de filtro umedecido foram mantidas separadas e incubadas em condições ambientais e examinadas após 6 dias para crescimento de B. bassiana, IMI 398.548.

[0051] No dia 21, a viabilidade fúngica foi determinada como foi feito no primeiro dia do experimento, determinando contagem de CFU por mL. Grãos foram peneiradas para separar o pó de grãos do kernel. O peso do pó, kernel e número de P. truncatus vivo em cada frasco foram registados. Percentagem de perda de peso (L) foi calculada utilizando a fórmula indicada abaixo L = [(Wi-Wf) / Wi)] x100, onde, Wi é o peso inicial dos grãos, e Wf é o peso final dos grãos.

[0052] Os dados percentuais de mortalidade cumulativos e porcentagem de micose foram arcsine transformada; dados adicionais recolhidos foram o número total de P. truncatus vivos no dia 21, o peso do kernel e pó no final do experimento, número de colônias formadas pela maior concentração no início e no final do experimento.

[0053] Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). Menor diferença significativa (5% LSD) foi usada para meios separados. A análise estatística foi realizada utilizando o software estatístico Genstat (9th edição).

5. SISTEMA DE TESTE

[0054] Todos os insetos, totalizando 1000 adulto indeterminado de P. truncatus foram fornecidos pela Plant Protection and Regulatory Service Ghana (PPRSD). Os insetos foram criados em grãos de milho inteiros na Unidade de biocontrole de PPRSD em condições ambientais (28 ± 2 ° C e 65 ± 5% UR). Os insetos utilizados foram de aproximadamente um mês eclosão pós adulta.

6. LOCALIZAÇÃO DO TESTE

[0055] O bioensaio de resposta à dose foi conduzido no Laboratório de Entomologia do Departamento de Fitotecnia, Legon a uma temperatura ambiente média de 25 ± 2 ° C e 65 ± 5% de umidade relativa. Os cadáveres de insetos foram incubados a 26 ± 2 ° C e 65 ± 5% UR, respectivamente, no Laboratório de Patologia do Departamento de Fitotecnia da Universidade de Gana.

7. MODELO EXPERIMENTAL

[0056] Um delineamento inteiramente casualizado (DIC) foi usado com 5 tratamentos (P. truncatus infestadas com quatro concentrações (108 a 1011 CFU / kg de milho) de B. bassiana, o IMI 398548 esporo em pó e um controle negativo que não tinham B. bassiana foi acrescentado, com cinco repetições. Cada parcela continha 50 adultos P. truncatus.

8. INFORMAÇÕES SOBRE APLICAÇÃO E REGIME

[0057] O peso de caroço de milho em pó e no final da experimento foi pesado utilizando uma balança eletrônica.

9. ANÁLISE ESTATÍSTICA

[0058] O controle da mortalidade no final do estudo (21 dias) foi relativamente baixo (< 10%), em consequência, os dados de mortalidade percentuais cumulativo não foram corrigidos para o controle de mortalidade correspondente (Abbott, 1925).

[0059] Os dados de mortalidade percentual e percentual fungóide cumulativos foram arcsine transformada; Dados adicionais foram recolhidos o número total de P. truncatus vivo ao dia 21, em peso, de pó de kernel e no final da experimento, o número de colónias formadas a partir de B. bassiana a 10 11 CFU / kg de milho (que não tinha insetos) ao início e o fim do ensaio (apêndice 3-10).

[0060] Os dados foram submetidos à análise de variância (ANOVA). Menor diferença significativa (LSD%) foi usada para meios separados. A análise estatística foi realizada utilizando o software estatístico Genstat (9 th edição).

10. DESVIOS AO PROTOCOLO

[0061] O protocolo proposto foi rigorosamente respeitado, exceto que, não houve menção de "controle" que o experimento conveniente e, portanto, incluídos neste ensaio.

11. RESULTADOS Resposta de Prostephanus Truncatus a quatro concentrações (UFC / kg de milho) de B. bassiana, IMI 398548 no laboratório.

[0062] A resposta de P. truncatus de B. bassiana, IMI 398548 foi avaliada através da aplicação de quatro concentrações de B. bassiana (108, 109, 1010 e 1011 CFU) por kg de milho durante 21 dias para determinar o seu efeito sobre a mortalidade de P. truncatus. Quantificação da mortalidade de um mês após a eclosão de P. truncatus adulto foi feita aos 7, 14 e 21 dias depois da infestação. Para todas as concentrações, a mortalidade de P. truncatus aumentou com o aumento de dias de exposição. Beauveria bassiana, IMI 398548 em 1010 e 1011 CFU por kg de milho resultou em uma significativa (P <0,05) maior mortalidade de P. truncatus adultos em comparação com 108 e 109 CFU por kg de milho. Para estas concentrações (1010 e 1011), a mortalidade de P. truncatus foi de 64,7 - 68,0% após 7 dias de exposição, atingindo 96,0% e 98,7%, respectivamente, após 14 dias. Em contraste, a mortalidade de P. truncatus adultos em B. bassiana, IMI 398548 a 108 e 109 CFU por kg de milho era < 13% após 7 dias de exposição e manteve-se inferior a 30%, 21 dias após a exposição. A mortalidade de P. truncatus no tratamento de controle (onde nenhum B. bassiana foi adicionada) foi < 10% ao final de 21 dias (Tabela 1). Tabela 1. Percentagem de mortalidade cumulativa (%) de P. truncatus infestado com esporos

Percentagem média da perda de peso de semente após a infestação por P. truncatus tratados com B. bassiana (108 a 1011 CFU) por kg de milho e incubado a 25 ± 2° C e 65 ± 5% de HR durante 21 dias.

[0063] A perda de peso percentual de semente de milho causada por P. truncatus tratados com B. bassiana a 108 e 109 CFU por kg de milho não foram significativamente diferentes do tratamento controle. A perda de peso (%) de semente produzida por P. truncatus sobre B. bassiana a 1010 e 1011 CFU por kg de milho foram semelhantes, mas diferem significativamente (P < 0,05) do controle. Uma significativamente (P <0,05) perda de peso de grão superior foi registrado em grãos de milho tratados com B. bassiana, IMI 398548 a 108 e 109 CFU por kg de milho em comparação com 1010 e 1011 CFU por kg de milho após a infestação por P. truncatus durante 21 dias (Tabela 2). Tabela 2. Média (%) de perda de peso da semente após a infestação por P. truncatus infestado com B. bassiana (108 a 1011 CFU) por kg de milho e incubados durante 21 dias a 25 ± 2° C e 65 ± 5% de HR no laboratório.

[0064] O número de colónias formadas pela concentração mais elevada (1011 CFU por kg de milho) no dia 1 não era significativamente diferente das do dia 21 (t = 0,10, t -prob. = 0,922, df = 4). Micélio pós-mortem e crescimento de conídios mostrou que a maioria dos insetos morreram de infecção pelo fungo com porcentagem de micose para as quatro concentrações (108, 109, 1010 e 1011 CFU por kg de milho) de B. bassiana sendo 97,1, 98,6, 99,6 e 99,6, respectivamente (Tabela 3). Tabela 3. Média (%) de micose de P. truncatus, infestado com B. bassiana (108 a 1011 CFU) por kg de milho e incubadas durante 4 dias a 26 ± 2 ° C e 65 ± 5% de umidade relativa no laboratório.

A análise de variância foi feita em dados percentual arcsine esporulados

12. DISCUSSÃO

[0065] Este é o primeiro relatório de um novo isolado de B. bassiana (IMI 398548) para o controle de P. truncatus. B. bassiana, IMI 398548 em 1010 e 1011 CFU por kg de milho resultaram em maior mortalidade de P. truncatus adultos em comparação com 108 e 109 UFC por kg de milho. No presente estudo, a mortalidade mais elevada (64,7 - 68,0%) de P. truncatus foi conseguida em B. bassiana a 1010 e 1011 CFU por kg de milho, respectivamente, a 25 ± 2° C e umidade relativa 65 ± 5% após 7 dias de exposição atingindo 96,0% e 98,7%, respectivamente, 14 dias após o tratamento.

[0066] No estudo atual, a viabilidade de conídios de B. bassiana a 1011 CFU por milho kg persistiu, embora fora do período de estudo de 21 dias. Isto demonstra o requisito de que, a formulação micopesticida deve persistir no ambiente por um tempo considerável após a aplicação (de Burges, 1998). Um resultado semelhante está previsto em condições de meio- campo, uma vez que as condições sob armazenagem de grãos no Gana são mais estáveis e semelhantes às condições observadas no estudo.

[0067] Uma das grandes vantagens da utilização de sistemas de controle microbiano é que o ciclismo da infecção da doença ocorre quando insetos infectados e mortos aumentam a quantidade de inóculos após a esporulação para efetivamente aumentar a persistência do micopesticida (Hidalgo et al., 1998). Durante este estudo cadáveres de insetos foram consistentemente removidos do grão de milho, no entanto, micélio de B. bassiana e esporulação de esporos apareceram 34 dias após a incubação e cobriram completamente os cadáveres de P. truncatus, indicando a existência de uma transferência de dose adequada do grão de milho tratados. O presente estudo indicou a possibilidade de controlar com sucesso P. truncatus do milho armazenado e infestado utilizando pó de esporos de B. bassiana em 1 x 1010 UFC por kg de milho em laboratório.

13. REFERÊNCIAS

[0068] Abbott, W.S. (1925). A method of computing the effectiveness of an insecticide. Journal of Economic Entomology. 18: 265-267.

[0069] Burges H. D. (1998). Formulation of mycoinsecticides, In H. D. Burges, (ed.), Formulation of microbial biopesticides: beneficial microorganisms, nematodes and seed treatments: Kluwer Academic Publisher, Dordrecht pp 132-185.

[0070] Hidalgo, E., D. Moore & G. Le Patourel. (1998). The effect of different formulations of Beauveria bassiana on Sitophilus zeamais in stored maize. Journal of Stored Product Research 34: 171-179.

Experimento 2 Experimento em escala piloto de formulações biopesticida na armazenagem de grãos 1. Objetivo

[0071] Para avaliar conídios seco de um isolado do fungo Beauveria bassiana entomopatogênico em diferentes concentrações contra três espécies de insetos quando aplicados a arenas feita de aço galvanizado e armazenada no ambiente de armazenamento de grãos.

2. Introdução

[0072] O objetivo deste estudo foi realizar um teste do intervalo de doses para determinar a dose eficaz de pó de conídios seco de B. bassiana IMI398548 (uma cultura biologicamente pura de um novo isolado de Beauveria bassiana depositado junto CABI, Bakeham Lane, Egham, Surrey, TW20 9TY, Reino Unido em 11 de maio de 2010, em conformidade com o Tratado de Budapeste para o depósito de microorganismos e concedido o número de depósito de IMI 398548) contra três espécies de besouros quando aplicado a arenas de aço na estocagem Fera de grãos. Entostat não foi incluído no presente estudo, uma vez que o objetivo foi o de avaliar o efeito dos conídios na ausência de qualquer material que possa aumentar o efeito.

3. Materiais 3.1 - Isolado testado

[0073] O isolado de B. bassiana (IMI398548) foi produzido por Somycel SA usando um método de produção em massa e foi verificado utilizando controle de qualidade (QC) procedimentos in-house. o produto final continha 9,3 x 1010 conídios / g. O isolado foi designado como TA 2645 para os fins deste estudo e foi armazenado em um frigorífico a 4 - 8° C. 3.2 - K-Obiol K-Obiol EC25 (TA 2644) (contendo 25 g / L de ingrediente activo) foi obtido a partir de Killgerm Chemicals e foi utilizado como controle positivo. Antes do tratamento com o pesticida foi armazenado em um armário seguro situado em um laboratório com uma temperatura média de 20° C ± 0,5 e umidade relativa (RH). Uma solução contendo a taxa de aplicação recomendada de campo foi feita em água, de acordo com as recomendações do fabricante, no dia da utilização. 3.3 - Insetos

[0074] Três espécies de insetos foram testadas. Estes foram Oryzaephilus surinamensis cepa Tram (caruncho em dente de serra), Sitophilus granarius cepa Gainsborough (gorgulho do grão) e Cryptolestes ferrugineus cepa Stow (besouro do grão vermelho-ferrugem). Insetos utilizados foram de idade mista e sexo. Todas as três espécies foram utilizadas simultaneamente dentro da arena. Insetos foram fornecidos pela Unidade de alimentação dos invertebrados em Fera e criados de acordo com Procedimentos Operacionais Padrão Fera (ISU / 018 e ISU / 034 revisão 3).

3.4 - Construção de arenas

[0075] As arenas foram construídas dentro de instalações de armazenagem de grãos da Fera. Os insetos foram confinados a quadrados de aço galvanizado (500 x 500 x 0,8 mm) dentro de anéis de aço galvanizado circulares (cerca de 450 mm de diâmetro, 150 mm de altura). A superfície interior do anel de aço foi revestida com Fluon (Whitford Plásticos, Reino Unido) para impedir a fuga dos insetos. Os anéis foram vedados à folha de aço utilizando decoradores calafetar para que os insetos não podessem atingir sob o anel. Um refúgio feito a partir de uma peça de conduíte eléctrico (25 x 16 x 100 mm), contendo trigo partido para fornecer alimento para os insetos foi colocado no centro de cada anel de, aproximadamente, 1 hora após a introdução dos insetos.

4. Métodos 4.1 - Tratamento das arenas

[0076] Os tratamentos foram os seguintes: Nenhum tratamento (controle negativo) Água (controle de K-Obiol) K-Obiol (controle positivo) aplicada a 0,05 litros / m 2 1 x 109 conídios / m 2 1 x 1010 conídios / m 2 1 x 1011 conídios / m 2

[0077] Os tratamentos foram distribuídos em cada arena usando um delineamento em blocos casualizados. Havia cinco anéis de réplicas para cada tratamento.

[0078] Os conídios foram pesados para pequenos pedaços de folha de alumínio, que foi dobrada para evitar a perda de material durante o transporte para o armazenamento de grãos. A quantidade apropriada de material foi distribuída uniformemente em toda a área do piso dos anéis atribuídos usando um pincel pequeno.

[0079] O controles água e K-Obiol foram tratados por pulverização da solução para obter uma cobertura de 0,05 litros / m2. Um volume conhecido (12,5 ml) de solução de pesticida ou água foi aplicado aos quadrados de aço, utilizando um pulverizador manual de laboratório 'De Vilbis' (EBGF-047). A pistola de pulverização foi realizada cerca de 20 cm acima da superfície do quadrado e o pesticida ou água foi pulverizado sobre a superfície, trabalhando progressivamente em frente e abaixo de quadrado em movimentos em zigue-zague, a fim de obter um mesmo tratamento em toda a superfície.

4.2 - Adição de insetos

[0080] Os insetos foram contados em laboratório, transportados em frascos e liberados para os anéis de aço de 24 horas após o tratamento. Todas as três espécies estavam presentes dentro de cada um dos anéis de aço e 50 insetos de cada espécie foram usados em cada repetição. O refúgio contendo trigo partido foi adicionado para a arena de aproximadamente uma hora após a introdução dos insetos.

4.3 - Avaliação de insetos

[0081] A mortalidade dos insetos foi avaliada após 14 e 28 dias. Os insetos foram coletados a partir dos anéis em tubos de vidro marcados com a ajuda de um pincel de artista. Refúgios foram removidos a partir dos anéis e colocados em sacos de plástico de auto-vedação marcados. O número de insetos vivos e mortos de cada espécie dentro de cada anel de aço e do refúgio foi anotado. Os insetos vivos foram devolvidos para os anéis a partir do qual eles foram removidos após a avaliação de 14 dias para a re-avaliação de mortalidade após 28 dias. Os abrigos também foram devolvidos para os anéis a partir do qual tinha sido removido.

4.4 - Monitoramento das condições ambientais

[0082] A temperatura foi monitorada durante todo o experimento usando termopares calibrados (Type-T com uma ponta de contas e isolamento PTFE (-50 a + 250 ° C)) ligado a um 'Squirrel' (modelo no.1045) logger de temperatura (EBGF 121/122). As temperaturas foram registradas a cada 60 minutos. Os dados foram baixados e analisados usando o software 'SquirrelView'. Temperatura e umidade também foram monitoradas através dataloggers Tinytag (TGP 1500, Gêmeos Dataloggers Ltd, UK) (OPAO / AppEnt 001-003) posicionados em três das arenas. Luzes dentro da armazenagem foram ligadas durante o tratamento e avaliações, mas permaneceu desligada em todas as outras vezes. 4.5 - Análise estatística

[0083] A diferença na mortalidade entre os tratamentos foi analisada por um modelo linear generalizado (GLM) com uma função de ligação logit. Testes post hoc foram usados para testar as diferenças entre os tratamentos por comparação da diferença menos significativa para os tratamentos.

5. Resultados 5.1 - Condições ambientais

[0084] A temperatura média observada no armazenamento de cereais durante todo o ensaio foi de 14,3 ° C com um mínimo de 7,2 ° C e um máximo de 20,9 ° C. Havia muito pouca variação de temperatura observada entre as arenas. A umidade média durante o ensaio registado utilizando os registadores Tinytag foi de 81,7% com um mínimo de 51,2% e um máximo de 98,2%.

5.2 - Dados de mortalidade de insetos

[0085] A aplicação de K-Obiol à taxa recomendada resultou em 100% de mortalidade de todas as três espécies de besouros testados após 14 dias de exposição. Embora uma avaliação precisa não tenha sido feita, observação das arenas após 24 horas indicou que muitos, se não todos, dos besouros mas arenas tratados com K-Obiol foram mortos. Como o objetivo desta experimento foi o de determinar a taxa de aplicação efetiva do isolado de B. bassiana, o tratamento K-Obiol e o controle de água não foram incluídos na análise estatística.

[0086] Houve um efeito altamente significativo do tratamento com diferentes doses de conídios de mortalidade para as três espécies de besouros após 14 dias de exposição (GLM F3,19 = 79,76, P <0,001, F3,19 = 31,34, P <0,001, F3,19 = 106,64, P <0,001 para S. granarius, O. surinamensis e C. ferrugineus, respectivamente (Tabela 1). Não houve diferença significativa na mortalidade, em comparação com o controle à taxa de aplicação mais baixa testada (1 x 109 conídios / m2) para S. granarius e O. surinamensis (P> 0,05). Houve diferença significativa na mortalidade em comparação com o controle na maior taxa de aplicação testado (1 x 1011 conídios / m2) para todas as três espécies de besouros.

[0087] A taxa de aplicação intermediária (1 x 1010 conídios / m 2 ) resultou em uma mortalidade significativa de S. granarius e C. ferrugineus após 14 dias de exposição. Aplicação de 1 x 1011 conídios / m 2 resultou em níveis mais elevados de mortalidade para as três espécies de besouros, e essa mortalidade foi significativamente maior do que com 1 x 1010 conídios / m 2 .

[0088] Tabela 1. Média derivada da % de mortalidade de insetos de 14 dias após a exposição aos diferentes tratamentos. % de mortalidade é expressa em termos do número de insetos recuperados para cada espécie. Os números em parêntesis são os derivados de intervalos de confiança de 95%.

Em cada coluna média seguida pela mesma letra não são significativamente diferentes (GLM; P> 0,05).

[0089] Houve um efeito muito significativo do tratamento com diferentes doses de conídios na mortalidade por todas as três espécies de besouro após exposição de 28 dias (GLM F3,19 = 171,61, P < 0,001, F3,19 = 87,14, P < 0,001 e F3,19 = 54,89, P < 0,001 para S. granarius, O. surinamensis e C. ferrugineus, respectivamente (Tabela 2). Todas as três taxas de aplicação de conídios resultaram em níveis significativos de mortalidade para S. granarius e O. surinamensis em comparação com o controle (P < 0,05). As taxas de aplicação e mais altos intermediários resultou em significativa mortalidade de O. surinamensis em comparação com o controle (P <0,05). Aplicação de 1 x 1011 conídios / m2 resultou em níveis mais elevados de mortalidade para as três beetle espécies, e esta mortalidade foi significativamente maior do que com 1 x 1010 conídios / m2. Tabela 2. Média derivada da % de mortalidade de insetos de 28 dias após a exposição aos diferentes tratamentos. % de mortalidade é expressa em termos do número acumulado de insetos mortos recuperados após 14 e 28 dias, dividido pelo total do número de insetos recuperadas após 28 dias e o número de insetos mortos após 14 dias. Os números em parêntesis são os derivados de intervalos de confiança de 95%.

Em cada coluna médias seguida pela mesma letra não são significativamente diferentes (GLM; P> 0,05).

6. DISCUSSÃO

[0090] O ensaio foi concebido para determinar a taxa de aplicação efetiva de um pó seco de conídios de B. bassiana IMI398548 para três espécies de besouros quando aplicada como um tratamento de superfície em uma armazenamento de grãos em condições típicas do Reino Unido. Uma resposta à dose foi observada para todas as três espécies de besouro e isto foi particularmente evidente após 28 dias de exposição à superfície tratada. A taxa de aplicação mais elevada utilizada (1 x 1011 conídios / m2), resultou em uma mortalidade significativa de todas as três espécies de besouro após 14 e 28 dias, em comparação com o controle. A menor taxa de aplicação 1 x 109 conídios / m2 não resultou em uma mortalidade significativa de S. granarius ou O. surinamensis após 14 dias de exposição e qualquer mortalidade significativa de O. surinamensis após 28 dias de exposição. Das três espécies de besouros testados, C. ferrugineus foi a mais suscetível ao tratamento com isolado IMI398548. Em conclusão: • Uma taxa de aplicação superior a 1 x 10 9 conídios / m2 de IMI398548 é necessária para o controle eficaz das três espécies de besouros testados. • uma taxa de aplicação de 1 x 1011 conídios / m2 resultou em mortalidade superior a 96% para todas as três espécies de besouro após 28 dias de exposição. Experimento 3 Experimento em escala piloto de formulações de biopesticidas no armazenamento de grão - formulação de caulin 1 . Objetivo

[0091] Para avaliar a formulação de um isolado do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana misturado com caulin em diferentes concentrações contra duas espécies de insetos quando aplicados a arenas de aço galvanizado e armazenado no ambiente de armazenamento de grãos. 2 . Introdução

[0092] O objetivo deste estudo foi determinar a eficácia de uma formulação em pó de B. bassiana IMI 398548 misturado com caulin e Entostat contra duas espécies de besouros quando aplicado a arenas de aço na estocagem de grãos Fera. 3. Materiais 3.1 Isolado testado

[0093] O isolado de B. bassiana (IMI398548) foi produzido por Somycel SA usando um método de produção em massa e foi verificada utilizando procedimentos de controle de qualidade (QC) in-house. O produto final continha 3,8 x 1010 conídios / g. O isolado foi designado como TA 2654 para os fins deste estudo e foi armazenado em um frigorífico a 4 - 8° C. 3.2 Caulin e Entostat

[0094] A caulin utilizada foi produzida pela Omega Opal e foi fornecida para Fera pela Exosect Ltd. A Entostat foi fornecida por Exosect Ltd. Tanto a caulin e Entostat foram mantidos à temperatura ambiente. 3 .3 Insetos

[0095] Duas espécies de insetos foram testadas. Estes foram Oryzaephilus surinamensis cepa Tram (besouro serra de dente do grão), e Cryptolestes ferrugineus cepa Stow (besouro vermelho-ferrugem do grão). Insetos utilizados foram de idade mista e sexo. Ambas as espécies foram utilizadas simultaneamente dentro da arena. Insetos foram fornecidos pela Unidade de alimentação dos invertebrados na Fera e criados de acordo com Procedimentos Operacionais Padrão Fera (ISU / 018 Revisão 4 e ISU / 034 revisão 3). 4 .4 Construção das arenas

[0096] Os insetos foram confinados a quadrados de aço galvanizado (500 x 500 x 0,8 mm) dentro de anéis de aço galvanizado circulares (cerca de 450 mm de diâmetro, 150 mm de altura). A superfície interior do anel de aço foi revestido com Fluon (Whitford Plásticos, Reino Unido) para impedir a fuga dos insetos. Os anéis foram vedados à folha de aço utilizando decoradores calafetados para que os insetos não pudesse atingir o anel. Um refúgio feito a partir de uma peça de conduíte elétrico (25 x 16 x 100 mm), contendo trigo partido para fornecer alimento para os insetos foi colocado no centro de cada anel de, aproximadamente, 1 hora após a introdução dos insetos. 4. Métodos 4.1 Tratamento das arenas

[0097] Os tratamentos foram os seguintes: 1. Nenhum tratamento (controle) 2. Entostat + caulin (peso igual ao que foi utilizado no IMI398548 5 x 109 conídios / m2 + Entostat + caulin (1:3:20) formulação) = veículo baixo 3. Entostat + caulin (peso igual ao que foi utilizado no IMI398548 1x10 10 conídios / m2 + Entostat + caulin (1: 3: 20) formulação) = veículo alto 4. IMI398548 5 x 109 conidia/m2 5. IMI398548 1 x 1010 conidia/m2 6. IMI398548 5 x 109 conidia/m2 + Entostat + caolina (1:3:20) 7. IMI398548 5 x 109 conidia/m2 + Entostat + caolina (1:6:40) 8. IMI398548 1 x 1010 conidia/m2 + Entostat + kaolin (1:3:20)

[0098] Os tratamentos foram distribuídos em cada arena usando um delineamento em blocos casualizados. Havia cinco anéis de réplicas para cada tratamento.

[0099] As formulações foram feitas por pesagem dos componentes individuais para um frasco de vidro e a mistura utilizada em um misturador vórtice. Os conídios e formulações necessárias para tratar as arenas foram pesadas para pequenos pedaços de folha de alumínio, que foram, em seguida, cuidadosamente dobrados para proteger os conteúdos durante a transferência para o armazenamento de grãos. A quantidade apropriada de material foi distribuída uniformemente em toda a área do piso dos anéis atribuídos usando um pincel pequeno. A quantidade calculada de material adicionado aos espaços de cada tratamento é mostrada na Tabela. Tabela 1. Quantidade calculada de material adicionado aos espaços de cada tratamento.

4.2 Adição de insetos

[00100] Os insetos foram contados em laboratório, transportados em frascos e liberado para os anéis de aço de 24 horas após o tratamento. Ambas as espécies estavam presentes dentro de cada um dos anéis de aço e 50 insetos de cada espécie foram usadas em cada repetição. O refúgio contendo trigo partido foi adicionado para a arena de aproximadamente uma hora após a introdução dos insetos. 4.3 Avaliação dos insetos

[00101] A mortalidade dos insetos foi avaliada após 7 dias. Os insetos foram coletados a partir dos anéis em tubos de vidro marcados com o auxílio de um dispositivo de sucção bateria operado. Refuges foram removidos a partir dos anéis e colocados em sacos de plástico de auto-vedação marcados. O número de insetos vivos e mortos de cada espécie dentro de cada anel de aço e o refúgio foi gravado. 4.4 Monitoramento das condições ambientais

[00102] Temperatura e umidade foram monitoradas usando dataloggers Tinytag (TGP 1500, Gêmeos Dataloggers Ltd, UK) (OPAO / AppEnt 002 e 003), localizado em duas posições ao redor das arenas. Luzes dentro da estocagem foram ligadas durante o tratamento e avaliações, mas permaneceram desligadas em todas as outras vezes. 4.5 Análise estatística

[00103] A diferença na mortalidade entre os tratamentos foi analisada por um modelo linear generalizado (GLM) com uma função de ligação logit. Testes post hoc foram usadas para testar as diferenças entre os tratamentos por comparação da diferença menos significativa para os tratamentos. Quando a mortalidade de tratamento foi de 0% ou 100% de um valor de diferença menos significativa, não poderia ser obtido e comparações post-hoc com base na diferença menos significativa, portanto, não eram possíveis para estes tratamentos. 5. Resultados 5.1 Condições ambientais

[00104] A temperatura média observada no armazenamento de cereais durante todo o ensaio foi de 15,8° C com um mínimo de 13,1° C e um máximo de 19,5° C. A umidade média durante o ensaio registadas utilizando os registadores Tinytag foi de 81,9% com um mínimo de 61,9% e um máximo de 98,8%. 5.2 Dados de mortalidade de insetos

[00105] Houve um efeito muito significativo do tratamento na mortalidade de O. surlnamensis e C. ferrugineus após a exposição de 7 dias (GLM F7,36 = 11,11, P < 0,001 e F7,36 = 7,98, P <0,001, respectivamente). Ver Tabela 2, abaixo.

[00106] A mortalidade nos tratamentos com conídios sozinho a taxas de aplicação de 5 x 109 ou 1 x 1010 conídios / m2 não foi significativamente diferente com a mortalidade (de controle) não tratados para ambos as arenas de O. surinamensis ou C. ferrugineus (Tabela 2). O veículo utilizado sozinho na mesma taxa de aplicação como na 5 x 109 conídios / m2 06:40 e 1 x 1010 conídios / m2 03:20 (muito veículo) resultou em uma mortalidade significativa de O. surinamensis e C. ferrugineus (P < 0,05) em comparação com o controle (Tabela 2). O veículo utilizado sozinho na mesma taxa de aplicação como na 5 x 109 / m2 03:20 (pouco veículo) resultou em uma mortalidade significativa de O. surinamensis em comparação com os tratamentos de controle. As mais elevadas taxas de mortalidade para ambos O. surinamensis e C. ferrugineus foram observadas nos tratamentos com IMI398548, Entostat e caulin (Tabela 2). Tabela 2. Média Derivada da % de mortalidade de insetos 7 dias após a exposição aos diferentes tratamentos. A % de mortalidade é expressa em termos do número de insetos recuperados para cada espécie. Os números em parêntesis são os derivados de intervalos de confiança de 95%. O. surinamensis C. ferrugineus

Em cada coluna média seguida pela mesma letra não são significativamente diferentes (GLM; P> 0,05). 6. Conclusões • Foram observados níveis elevados de mortalidade (87-100%) para O. surinamensis e C. ferrugineus em tratamentos com B. bassiana IMI398548, Entostat e caulin após a exposição 7 dias em arenas tratados. • O veículo Entostat e caulin sozinho resultaram em níveis estatisticamente significativos de mortalidade de O. surinamensis em ambas as taxas de aplicação em comparação com o controle e conídios únicos tratamentos. A maior quantidade do veículo deu o maior nível de mortalidade. • O veículo Entostat e caulin sozinhos na taxa de aplicação mais elevada resultaram em um aumento significativo da mortalidade de C. ferrugineus em comparação com o controle e conídios apenas tratamentos. A taxa de aplicação mais baixa de Entostat e caulin causaram mortalidade quase 50% de C. ferrugineus, mas esta não era significativamente diferente da mortalidade em tratamentos de controle (13,8%). Lista de Procedimentos Operacionais Padrão ISU 018 Procedimento de cultura geral de 3a revisão para os besouros de produtos armazenados ISU 034 revisão 3 dos requisitos de preparação e de cultura geral alimentar dentro da ISU Experimento 4 Experimento em escala piloto de formulações biopesticidas no armazenamento de grãos - formulação com talco 1. Objetivo

[00107] Para avaliar a formulação de um isolado do fungo entomopatogênico de Beauveria bassiana misturado com talco em diferentes concentrações contra duas espécies de insetos quando aplicados a arenas de aço galvanizado e armazenada no ambiente de armazenamento de grãos. 2. Introdução

[00108] O objetivo deste estudo foi determinar a eficácia de uma formulação em pó de B. Bassiana, IMI 398548 misturada com talco e Entostat contra duas espécies de besouros quando aplicado a arenas de aço no ambiente de grãos Fera. 3. Materiais 3.1 Isolado testado

[00109] O isolado de B. bassiana (IMI398548) foi produzido por Somycel SA usando um método de produção em massa e foi verificada utilizando in-house de controle de qualidade (QC) procedimentos. O produto final continha 3,8 x 1010 conídios / g. O isolado foi designado como TA 2654 e foi armazenada em um frigorífico a 4 - 8 ° C. 3.2 Silicato de magnésio (talco) e Entostat

[00110] O silicato de magnésio (talco) usado foi fornecido pela Alfa Aesar, Reino Unido. O Entostat foi fornecido por Exosect Ltd. Tanto o talco e Entostat foram mantidos à temperatura ambiente (aproximadamente 20 ° C). 3.3 Insetos

[00111] Duas espécies de insetos foram testadas. Estes foram Oryzaephilus surinamensis cepa Tram (besouro serra de dente do grão), e Cryptolestes ferrugineus cepa Stow (besouro vermelho-ferrugem do grão). Os insetos utilizados foram de idade mista e sexo. Ambas as espécies foram utilizadas simultaneamente dentro da arena. Os insetos foram fornecidos pela Unidade de alimentação dos invertebrados em Fera e criados de acordo com Procedimentos Operacionais Padrão Fera (ISU / 018 Revisão 4 e ISU / 034 revisão 3). 3.4 Construção de arenas

[00112] Os insetos foram confinados a quadrados de aço galvanizado (500 x 500 x 0,8 mm) dentro de anéis circulares de aço galvanizado (aprox. 450 mm de diâmetro, 150 mm de altura). A superfície interior do anel de aço foi revestida com Fluon (Whitford Plásticos, Reino Unido) para impedir a fuga dos insetos. Os anéis foram vedados à folha de aço utilizando decoradores calafetados para que os insetos não pudessem atingir o anel. Um refúgio feito a partir de uma peça de conduíte elétrico (25 x 16 x 100 mm), contendo trigo partido para fornecer alimento para os insetos, foi colocado no centro de cada anel de, aproximadamente, 1 hora após a introdução dos insetos. 4. Métodos 4.1 Tratamento das arenas 3. Entostat + caulin (peso igual ao que foi utilizado no IMI398548 1x10 10 conídios / m 2 + Entostat + talco (formulação (1:3:20)) = muito veículo; 4. IMI398548 5 x 109 conidia/m2; 5. IMI398548 1 x 1010 conidia/m2; 6. IMI398548 5 x 109 conidia/m2 + Entostat + talc (1:3:20); 7. IMI398548 5 x 109 conidia/m2 + Entostat + talc (1:6:40); 8. IMI398548 1 x 1010 conidia/m2 + Entostat + talc (1:3:20);

[00113] Os tratamentos foram os seguintes: 1. Nenhum tratamento (controle); 2. Entostat + talco (peso igual ao que foi utilizado no IMI398548 5 x 109 conídios / m* 1 2 + Entostat + talco, (formulação (1:3:20)) = pouco veículo;

[00114] Os tratamentos foram distribuídos em cada arena usando um delineamento em blocos casualizados. Havia cinco anéis de réplicas para cada tratamento.

[00115] As formulações foram feitas por pesagem dos componentes individuais para um frasco de vidro e mistura utilizando um misturador vórtice. Os conídios e formulações, necessárias para tratar as arenas foram pesados para pequenos pedaços de folha de alumínio, que foram, em seguida, cuidadosamente dobrados para proteger os conteúdos durante a transferência para o armazenamento de grãos. A quantidade apropriada de material foi distribuída uniformemente em toda a área do piso dos anéis atribuídos usando um pincel pequeno. A quantidade calculada de material adicionado aos espaços de cada tratamento é mostrada na Tabela 1 Tabela 1. Quantidade calculada de material adicionado aos espaços de cada tratamento.

4.2 Adição de insetos

[00116] Os insetos foram contados em laboratório, transportados em frascos e liberados para os anéis de aço de 24 horas após o tratamento. Ambas as espécies estavam presentes dentro de cada um dos anéis de aço e 50 insetos de cada espécie foram usados em cada repetição. O refúgio contendo trigo partido foi adicionado para a arena de aproximadamente uma hora após a introdução dos insetos. 4.3 Avaliação de insetos

[00117] A mortalidade dos insetos foi avaliada após 7 dias. Os insetos foram coletados a partir dos anéis em tubos de vidro marcados com o auxílio de um dispositivo de sucção bateria operado. Refuges foram removidos a partir dos anéis e colocados em sacos de plástico de auto-vedação marcado. O número de insetos vivos e mortos de cada espécie dentro de cada anel de aço e o refúgio foi gravado. 4.4 Monitoramento das condições ambientais

[00118] Temperatura e umidade foram monitoradas usando dataloggers Tinytag (TGP 500, Gêmeos Dataloggers Ltd, UK) (OPAO / AppEnt 002 e 003), localizado em duas posições ao redor das arenas. Luzes dentro da estocagem foram ligadas durante o tratamento e avaliações, mas permaneceram desligadas em todas as outras vezes. 4.5 Análise estatística

[00119] A diferença na mortalidade entre os tratamentos foi analisada por um modelo linear generalizado (GLM) com uma função de ligação logit. Testes post hoc foram usados para testar as diferenças entre os tratamentos por comparação da diferença menos significativa para os tratamentos. Quando a mortalidade de tratamento foi de 0% ou 100% de um valor de diferença menos significativa, não poderia ser obtido e comparações post-hoc com base na diferença menos significativa, portanto, não eram possíveis para estes tratamentos. 5. Resultados 5.1 Condições ambientais

[00120] A temperatura média observada no armazenamento de cereais durante todo o ensaio foi de 15,0° C com um mínimo de 9,3° C e um máximo de 19,2° C. A humidade média durante o ensaio registadas utilizando os registadores Tinytag foi de 77,6% com um mínimo de 51,1% e um máximo de 95,6%. 5.3 Dados de mortalidade de insetos

[00121] Houve um efeito significativo do tratamento sobre a mortalidade de ambas as espécies de besouros testados após 7 dias de exposição (GLM F7,36 = 2,42, P = 0,045, F7,36 = 44,56, P < 0,001 e F7,36 = 88,61, P < 0,001 para O. surinamensis e C. ferrugineus, respectivamente) (Tabela 2).

[00122] Foram observadas taxas de mortalidade mais elevadas para O. surinamensis nos tratamentos com IMI398548, Entostat e talco (Tabela 2). Os tratamentos com conídios e a quantidade mais elevada de talco e Entostat (5 x 109 / m2 06:40 e 1 x 1010 / m2 03:20) deu uma mortalidade significativamente mais elevada do que o tratamento com a quantidade mais baixa de talco e Entostat (5 x 109 / m2 03:20) (P <0,05). Do mesmo modo, foi observada uma diferença significativa (P <0,05) na mortalidade de O. surinamensis entre os tratamentos com pouco veículo e muito veículo, com um menor nível de mortalidade observada com a menor quantidade de transportador (Tabela 1). Os tratamentos com os conídios sozinhos não foram significativamente diferentes do controle (P < 0,05, Tabela 2).

[00123] Foram observadas taxas mais elevadas de mortalidade para C. ferrugineus nos tratamentos com IMI398548, Entostat e talco (Tabela 2). Estes tratamentos deu mortalidade significativamente maior do que o controle e os tratamentos com os conídios sozinhos (P < 0,05, Tabela 2). O veículo só (Entostat e talco) também deu significativamente maior mortalidade do que os tratamentos controle e conídios únicos. Observou-se uma diferença significativa (P < 0,05) na mortalidade de C. ferrugineus entre os tratamentos com pouco veículo e muito veículo, com um menor nível de mortalidade observada com a menor quantidade de transportador (Tabela 2).

[00124] Tabela 2. Derivado mortalidade média% de insetos 7 dias após a exposição aos diferentes tratamentos. % mortalidade é expressa em termos do número de insetos recuperados para cada espécie. Os números em parêntesis são os derivados intervalos de confiança de 95%.

Em cada coluna média seguida pela mesma letra não são significativamente diferentes (GLM; P> 0,05) 6. Conclusões

[00125] Foram observados níveis elevados de mortalidade (80 - 100%) para O. surinamensis e C. ferrugineus em tratamentos com B. Bassiana, IMI398548, Entostat e talco após a exposição 7 dias em arenas tratados. Para O. surinamensis a mortalidade observada nos tratamentos B. Bassiana, IMI398548, Entostat e talco foi maior do que o aditivo de mortalidade dos conídios única e transportador apenas tratamentos.

[00126] O veículo Entostat e talco sozinho resultaram em níveis significativos de mortalidade de O. surinamensis e C. ferrugineus em comparação com os tratamentos controle e conídios únicos. A maior quantidade do veículo deu o maior nível de mortalidade. Experimento 5 Testes de eficácia em escala de campo de formulações de Beauveria bassiana contra pragas de grãos armazenados Resumo

[00127] A formulação em pó de um biopesticida com base em um isolado (IMI398548) do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana, que é ativo contra pragas de grãos armazenados, foi testado em uma instalação de armazenamento de grãos na fazenda. O tratamento foi aplicado ao piso de dois silos de grãos vazios e, em seguida, direcionado a pragas de besouro (Oryzaephilus surinamensis e Cryptolestes ferrugineus) foram introduzidos para arenas discretos instalados nos silos e monitorados ao longo do tempo para medir os efeitos do tratamento sobre a mortalidade dos insetos. A mortalidade foi comparada com dois silos de cereais que foram divididos, de modo que a metade não receberam nenhum tratamento (controles não tratados) e metade receberam apenas caulin (veículo de controle). Houve um silo exterior e um interior (dentro de um celeiro) para cada grupo de tratamento. O experimento foi feito no outono (setembro / outubro). A eficácia foi determinada por comparação da % de mortalidade total de cada espécie no silo exterior ou interior tratado com a % de mortalidade total de cada espécie no controle não tratado no silo exterior ou interior, em cada ponto de amostragem por meio da fórmula Schneider-Orelli (Puntener, 1981 Manual para ensaios de campo de proteção fitossanitária na segunda edição. Divisão Agrícola, Ciba-Geigy Limited.).

[00128] A % de eficácia em silos tratados interiores e exteriores em cada ponto de tempo e para cada espécie após o ajuste para a mortalidade controle é dado na tabela abaixo. A eficácia foi muito elevada (> 90% de morte devido ao tratamento) para as duas espécies dentro de 14 dias pós- tratamento.

Em conclusão, nas condições deste ensaio, os biopesticidas mostraram um elevado nível de eficácia para as duas espécies alvos.

OBJETIVO

[00129] Determinar a eficácia de uma formulação em pó seco de Beauveria bassiana cepa IMI398548 contra espécies de pragas de produtos armazenados.

INTRODUÇÃO

[00130] O objetivo deste estudo foi examinar a eficácia de uma formulação em pó de um biopesticida com base em um isolado (IMI398548) do fungo entomopatogênico Beauveria bassiana contra pragas de grãos armazenados sob condições realistas de campo.

[00131] Este experimento usou equipamento de aplicação realista operador de controle de pragas (PCO) para aplicar o produto para todos os ambientes dos silos de grãos. Este ensaio incluiu um tratamento de controle do veículo para o caulin, o acompanhamento da mortalidade aos 7 e 14 dias e testando a concentração de esporos a uma taxa alvo baixa (5 x 109 conídios total por m2). Nosso objetivo para uma deposição mínima de 1 x 109 UFC / m2.

[00132] Vinte e quatro horas após o tratamento, os grupos de amostra de besouros do grão Oryzaephilus surinamensis (caruncho em dente de serra) e Cryptolestes ferrugineus (caruncho-ferrugem vermelha) foram adicionados a arenas discretos dentro das áreas tratadas e monitorizadas ao longo do tempo para a mortalidade.

2. Locais de teste

[00133] O estudo incluiu quatro silos de armazenamento de grãos cilíndricos. Todos os silos de metal tinham paredes de papelão ondulado e pisos de concreto sólido com acesso lateral através de escotilhas ou portas. Dois dos silos foram localizados dentro de um celeiro (5 e 6) e foram de 3,6 m de diâmetro e duas foram localizados fora (7 e 8) e foram de 5,7 m de diâmetro.

[00134] Insetos foram cultivados e fornecidos pela unidade de alimentação de invertebrados em FERA. As contagens de mortalidade foram feitas no local da FERA.

[00135] A formulação foi misturada no local da CABI. Calibração e validação de trabalho também foi realizada na CABI. 3. METODOLOGIA 8.1. Modelo Experimental

[00136] Havia quatro silos disponíveis para o tratamento, dois dentro de um celeiro e dois fora. Um silo interior (6) e um silo exterior (7) foram usados para os tratamentos de controle e os restantes dois silos (5 e 8) foram tratados com a formulação de fungos. Quarenta arenas de aço inoxidável para conter os insetos estavam presentes em cada silo. Nos silos de controle, vinte das arenas foram cobertas antes do tratamento (para que eles pudessem ser mantidos como controles não tratados e o veículo caulim em pó foi aplicado a todos os silos. Os insetos foram introduzidos para vinte das arenas nos silos tratados e todos os quarenta as arenas nos silos de controle de um dia após a aplicação dos tratamentos. os insetos foram coletados de dez das arenas não tratados de controle, arenas de controle do veículo e arenas tratados após 7 dias e as arenas remanescentes após 14 dias os insetos foram submetidos a controles de mortalidade. O período experimental se estendeu por um período de 2 semanas. 8.2 Programação do Estudo

1.3 Preparação dos Locais

[00137] Antes do início do experimento, os silos de grãos tratados foram aspirado utilizando um Em umatic HZQ200- 2 poeira perigosos Aspirador de Pó. As arenas foram verificadas e completamente aspiradas para remover todos os insetos restantes ou pó de tratamento de experimento de trabalho anterior. 1.4 Instalação da Arena

[00138] Quarenta arenas em silos 6 e 7 (silos de controle) e vinte arenas em silos 5 e 8 (silos de tratamento) foram utilizados neste experimento. As arenas já estavam no local no topo de bandeiras de pavimentação de concreto (Marshalls FL1200600; 60 x 60 cm), quatro arenas por bandeira (dez bandeiras por silo) em um arranjo de 2 x 2. Duas arenas em cada bandeira em silos 5 e 8 não foram utilizados. As arenas foram feitas a partir de anéis de aço inoxidável (Instant Fabrications Ltd, Chandlers Ford, Hants, Reino Unido; 20 cm de diâmetro, 5 cm de profundidade, 0,9 mm de espessura). As superfícies internas das arenas foram revestidas com Fluon (Blades Biológica, Reino Unido) para impedir a fuga dos insetos. As arenas foram vedadas para a bandeira de concreto utilizando selante aquário (Geocel Aquaria aquário Selante: Selantes e Ferramentas Direct Ltd), de modo que os insetos não poderiam começar por baixo. Uma cobertura feita de material de malha fina e mantida nessa posição com um elástico foi colocada sobre cada arena após introdução de insetos.

[00139] Nos silos 6 e 7 as arenas em blocos de 3, 4, 5, 6 e 10 foram coberto com filme plástico e gravada para baixo antes do tratamento. Estes eram os controles não tratados e foram cobertos para protegê-los de deposição de caulim em pó. Em silos 5 e 8 apenas duas arenas, A e B, foram utilizadas; A foi amostrada em 7 d e B a 14 d. Nos silos 6 e 7, A e B foram amostrados em 7 d e C e D em 14 d. Dentro de blocos os códigos foram aleatoriamente designados para as arenas utilizando uma tabela de números aleatórios. 1.5 Calibração do Equipamento

[00140] A aplicação das formulações em pó e veículos foram feitas utilizando aplicadores B & D Mini DustR (Killgerm), por um silo. Uma calibração para o aplicador foi feita.

[00141] A natureza do mecanismo de bomba significa que pode ter havido variações na quantidade de pó aplicada a partir de cada bomba, portanto, uma posição normal foi utilizada quando da aplicação e de calibragem. O aplicador foi mantido a um ângulo de 45 ° com o bico de aplicação na posição mais baixa mais próxima do chão. Isto assegurou o tubo de alimentação para dentro da câmara de pó foi coberta com a quantidade máxima de pó em todos os momentos, minimizando, assim, a variância em taxas de aplicação. Para assegurar uma aplicação uniforme, o aplicador de pó foi transferido em um movimento 'arc' pelo aplicador com cada baforada. Isto foi mostrado para ser a maneira mais eficaz de garantir uma cobertura uniforme durante os ensaios sala de pó em instalações CABI. Os resultados da calibração do aplicador mostraram que a quantidade de pó por sopro caiu quando o aplicador de pó esvaziado, assim, para assegurar uma repartição equilibrada do pó o padrão padronizado de aplicação envolvida cobrindo todo o chão do silo em menos de 10 puffs, em seguida, repetir este padrão. Isto assegurou um padrão mais uniforme de aplicação do pó que, se o aplicador coberto tinha sistematicamente o piso do silo de uma vez até que o aplicador de pó estivesse vazio. 1.6 Coleta de Dados Ambientais

[00142] Leituras média, máximo e mínimo de temperatura e umidade diárias para cada silo de grãos foram registradas a partir do dia da introdução de insetos. Calibradores de temperatura e umidade madeireiros Lascar (modelo EL-USB-2) foram posicionados ao lado do bloco 9 em cada silo. As leituras foram coletadas a cada 60 min. Os dados foram baixados e analisados utilizando software Lascar. 1.7 Aplicação de tratamentos

[00143] Um aplicador separado foi usado para cada tratamento (quatro no total: dois tratamentos de teste e dois tratamentos de controle do veículo).

[00144] As aplicações foram feitas a partir do outro lado do silo (em frente à entrada) da altura do aplicador com o bocal dirigido para baixo em um ângulo de 45 ° em um padrão padronizado, repetido até que o aplicador estava vazio. O tratamento utilizando caulin foram feitas apenas em silos 6 e 7 para o piso também, a partir do lado de longe novamente. Somente arenas nos blocos 1, 2, 7, 8 e 9 receberam o tratamento com veículo - as outras arenas foram cobertas com filme plástico, para que pudessem ser usadas para os controles não tratados.

[00145] Antes do tratamento as escotilhas dos silos ao ar livre foram selados. Os silos internos têm portas e as portas foram removidas para que os silos foram selados fechado com cobertura de polietileno, papelão e fita adesiva. Quaisquer tubos de ventilação ou buracos em silos foram cobertos com folhas de polietileno e fita adesiva. 1.8 Aplicação de Insetos e Acompanhamento

[00146] Duas espécies de insetos foram testados: Oryzaephilus surinamensis cepa Tram (saw-toothed besouro grão), e Cryptolestes ferrugineus cepa Stow (besouro grão vermelho-ferrugem). Insetos estavam em idade mista e sexo. Insetos foram fornecidos pela Unidade de alimentação dos invertebrados em FERA e criados de acordo com Procedimentos Operacionais Padrão FERA (ISU / 018, ISU / 023, ISU / 025, ISU / 026, ISU / 034).

[00147] Os insetos foram adicionadas 24 h após a aplicação dos tratamentos. Nos silos 6 e 7 (controles) cada espécie adicionou-se a todos os espaços. Nos silos 5 e 8 apenas arenas A e B receberam insetos. Cada arena continha vinte de cada espécie. Um refúgio feito a partir de uma peça de conduíte eléctrica (25 x 16 x 100 mm), contendo trigo partido para fornecer alimento para os insetos, foi colocado no centro de cada arena de aproximadamente 30 minutos antes da introdução dos insetos.

[00148] Os insetos foram coletados em 7 ou 14 d usando pooters bateria operado e transferidos para frascos de vidro. Refuges foram removidos a partir dos anéis e esvaziados em sacos zip-lock marcados. Os frascos e sacos foram encaixotados e transportados durante a noite para FERA para contagem. 1.9 Análise de Dados

[00149] Foi calculado um ajuste para a mortalidade de controle para as taxas de mortalidade média para cada espécie de inseto em cada silo de tratamento em cada ponto de tempo e é apresentada.

4. RESULTADOS 4.1 Condições Ambientais

[00150] As condições dentro dos silos foram bastante diferentes entre os silos interiores e exteriores, com temperatura e umidade flutuante para um grau muito maior nos silos ao ar livre; provavelmente devido à exposição ao sol e a falta de isolamento exterior (Tabela 1). As temperaturas mínimas e máximas foram inferiores e superiores, respectivamente, em silos ao ar livre. As temperaturas médias e umidade, no entanto, foram semelhantes entre silos interiores e exteriores. As condições também foram semelhantes entre silos 5 e 6 (interior) e entre 7 e 8 (exterior). 4.2 Sobrevivência do Inseto

[00151] Quando os insetos coletados foram submetidos a exame de mortalidade alguns deles estavam faltando. Parecia improvável que eles tinham sido capazes de sair, mas em algumas arenas, devido à ligeira superfície irregular, houve intervalo suficiente sob os anéis de aço para permitir que alguns dos besouros menores para se refugiar e evitar ser recolhido no pooter. Uma vez que menos de 10 besouros de uma espécie foram recolhidos ocasionalmente, e as áreas não são verdadeiros repetições, mas as amostras, a mortalidade total no silo a partir de todas as arenas foi calculada, em vez do que a média de mortalidade por arena.

[00152] A mortalidade nos estádios de controle não tratados foi notável em cada ponto de tempo para O. surinamensis (10-20%) e C. ferrugineus (10-30%), particularmente, no silo 7, onde as condições eram mais quente e flutuaram para um grau maior. Isto poderia ser atribuído ao fato de que os insetos são criados em laboratório e usadas para condições controladas constantes. Não houve período de aclimatação porque as condições no local foram variáveis, de modo que eles podem não ter sido capaz de se adaptar a uma mudança tão abrupta. Uma possibilidade adicional é que as condições de calor causada volatilização de resíduos tóxicos (confirmado estar presente durante o trabalho pré-ensaio) a partir das superfícies da estocagem, de modo que mesmo que os insetos não estavam em contato físico com o chão do silo, eles ainda eram expostos a baixos níveis de compostos voláteis que poderiam ter afetado a sua sobrevivência.

[00153] Sobrevivência de O. surinamensis e C. ferrugineus parecia ser afetado pelos pós transportadora como a mortalidade foi maior do que os controles não tratados (27 - 60% e 28 - 82%, respectivamente), em especial no Silo 7, onde as temperaturas foram mais quente durante o dia.

[00154] Embora alguma mortalidade podesse ser atribuída ao veículo caulin em pó, a mortalidade nas arenas, as quais receberam o tratamento de formulação completa experimentou os mais altos níveis de mortalidade. Isto parece indicar que a combinação de B. bassiana IMI398548 isolado e caulin com Entostat forneceu o melhor nível de controle. Além de mais baixo do que o esperado de mortalidade (24%) no silo tratado ao ar livre no dia 7, a mortalidade de O. surinamensis exposta ao tratamento foi elevada (58% no dia 7 em silo de 5 e 100% em ambos os silos no dia 14). Mortalidade de C. ferrugineus também foi alta, mesmo depois de apenas 7 dias (7 dias: 72 - 79% e 14 D: > 98%).

[00155] A % de eficácia nos silos interiores e exteriores em cada ponto de tempo e para cada espécie foi calculada utilizando a mortalidade de controle não tratado ea mortalidade controle do veículo com a fórmula de Schneider- Orelli (Piintener de 1981 Manual para ensaios de campo em segunda edição de protecção fitossanitária. Divisão Agrícola, Ciba-Geigy Limited.), o qual ajusta a mortalidade para o controle (ver Tabela 2). Uma vez que o veículo caulim causou alguma mortalidade a % de eficácia ajustado usando estes números são mais baixos. Para examinar o efeito global da formulação sobre os insetos que é melhor para examinar a eficácia% ajustados pelos controles não tratados. Para compreender o benefício do fungo na formulação que é melhor para examinar a % de eficácia ajustada pela mortalidade controle do veículo.

5. DISCUSSÃO

[00156] Este ensaio é uma série de ensaios concebidos para avaliar a mortalidade de insetos expostos a um novo tratamento biopesticida em silos de armazenamento de grãos. Insetos foram coletados após 7 e 14 d e a concentração de esporos adicionados à formulação foi como descrito acima. A decisão para verificar a mortalidade em 7 d foi benéfica como fomos capazes de mostrar que a mortalidade de O. surinamensis foi de 20 - 60% e de C. ferrugineus foi de 80 - 90% nos silos de tratamento. Claramente alguma mortalidade pode ser atribuível a outros fatores que o tratamento, uma vez que a mortalidade nos controles não tratados foi entre 10 - 30% para estas duas espécies aos 7 d. Isso pode ser em grande parte atribuível ao choque de ser introduzida para as arenas, já que a mortalidade de controle não tratado não subiu sensivelmente entre 7 d e 14 d.

[00157] As condições ambientais nos silos foram adequadas tanto para sobrevivência do inseto e germinação dos fungos. As temperaturas não caia abaixo de 5° C e não ultrapassasse 22° C. O isolado sobrevive bem em uma ampla gama de temperaturas. Alta umidade (60 - 90% RH) vai ter ajudado a germinação inicial do fungo, embora este isolado tem requisitos mais baixos para atividade de água do que outros B. bassiana isolados.

[00158] Para um tratamento biológico a % de eficácia conseguida foi elevada para C. ferrugineus depois de apenas 7 d, particularmente, no silo interior, e muito alta (> 90%) após 14 d. Para O. Surinamensis, a % de eficácia foi baixa no silos ao ar livre depois de 7 de d, mas notável no silo coberto (> 50%). 14 d, a % de eficácia para O. surinamensis foi excepcional em 100% no interior e exterior dos silos. Conclui-se que a eficácia para as duas espécies O. surinamensis e C. ferrugineus depois de apenas 14 d foi muito boa pós-tratamento. TABELAS

Tabela 2: % de eficácia nos silos tratados interiores e exteriores em cada ponto de tempo e para cada espécie após o ajuste para o controle sem tratamento e mortalidade controle do veículo usando a fórmula de Schneider-Orelli (Piintener, 1981)

[00159] No contexto do presente relatório descritivo, o termo "partículas de eletreto" é para ser entendida como abrangendo as partículas carregadas eletrostaticamente, incluindo (mas, não limitado a) partículas de cera produzidas pelos métodos descritos anteriormente neste relatório.

Claims (17)

1. Formulação de pó seco caracterizada pelo fato de que compreende: i) os esporos de um fungo entomopatogênico que tem atividade contra artrópodes que infestam áreas secas de armazenamento de mercadorias, em que os esporos estão presentes em uma quantidade de 2 a 5% p / p da formulação; ii) partículas de um mineral industrial em uma quantidade de 80 a 88% p / p da formulação e tendo um volume médio de diâmetro de > 5 μm; e iii) partículas de eletreto em uma quantidade de 10 a 15% p / p da formulação.

2. Formulação de pó seco, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que os esporos de i) estão presentes em uma quantidade de 2 a 4,5% p / p; as partículas de ii) estão presentes em uma quantidade de 82,5 - 87% p / p; e as partículas de eletreto de iii) estão presentes em uma quantidade de 11 a 13% p / p da formulação.

3. Formulação, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que os esporos de i) estão presentes em uma quantidade de 2,10 - 4,17% p / p; as partículas de ii) estão presentes em uma quantidade de 83,0 - 85,0% p / p e as partículas de eletreto iii) estão presentes em uma quantidade de 12,5 - 12,80% p / p da formulação.

4. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que os esporos estão presentes em uma quantidade de pelo menos 1 x 109 CFU / grama de peso seco.

5. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que os esporos estão presentes em uma quantidade de pelo menos 1 x 1010 CFU / grama de peso seco.

6. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que os esporos estão presentes em uma quantidade de pelo menos 1 x 1011 CFU / grama de peso seco.

7. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que o mineral industrial é selecionado a partir de argilas, areia, cascalho, diatomita, terra de diatomáceas, caulina, bentonita, sílica, barite, gesso e talco ou uma mistura de dois ou mais destes.

8. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que o mineral industrial é selecionado a partir de caulina e talco ou uma mistura dos mesmos.

9. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que os esporos são entomopatogênico do fungo Beauveria bassiana, cepa IMI 398548.

10. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que os artrópodes compreendem Sitophilus oryzae, Sitophilus granarius, Sitophilus zeamais, Rhyzopertha dominica, Ahasverus Advena, Oryzaephilus surinamensis, Prostephanus truncatus e Cryptolestes ferrugineus.

11. Formulação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que os artrópodes compreendem Oryzaephilus surinamensis, Sitophilus granarius e Cryptolestes ferrugineus.

12. Método de produção de formulações de pó seco conforme definido por qualquer uma das reivindicações 1 a 11 caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de i) micronizar partículas de eletreto secas; ii) misturar os esporos secos de Beauveria bassiana com as referidas partículas de eletreto; e iii) misturar as partículas secas de mineral terroso industrial com o produto da etapa ii).

13. Formulação de pó seco, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que é produzida pelo método da reivindicação 12.

14. Uso de uma formulação conforme definida por qualquer uma das reivindicações 1 a 11 e 13 caracterizado pelo fato de que é para controlar a infestação de artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias secas (instalação).

15. Uso de uma formulação conforme definido por qualquer uma das reivindicações 1 a 11 e 13 caracterizado pelo fato de que é para controlar a infestação de artrópodes dentro e / ou sobre um produto seco selecionado a partir de grãos inteiros e sementes para disseminação, grãos inteiros selecionados de entre trigo, arroz, centeio, aveia, cevada e milho para uso como alimento e / ou na fabricação de alimentos processados, legumes, feijões, lentilhas e produtos feitos a partir destes a partir de ou feitos com matérias-primas secas, produtos secos transformados, incluindo massas, farinhas de grãos, cuscuz, cereais, ervas secas, cereias de café da manhã, semolinas, pães, nozes (solo, em flocos e / ou nozes inteiras), alimentos para lanches selecionados a partir de biscoitos doces e salgados, batatas fritas, batatas fritas vegetais, pretzels, bolachas secas, alimentos para animais domésticos, madeira serrada, forro de madeira, artigos de madeira, incluindo andaimes telhado para construções, painéis, portas e molduras de portas, vergas, rodapés, compensados, madeira compensada, móveis e lascas de madeira.

16. Método de controle de infestação de mercadoria secas por artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias secas caracterizado pelo fato de que uma formulação em pó seco conforme definida por qualquer uma das reivindicações 1 a 11 e 13, é apresentada às superfícies de uma área de armazenamento de mercadorias secas por i) recolher a formulação de pó seco em um aparelho de varredura; e ii) liberar a referida formulação em pó seco a partir do referido aparelho de varredura e para a dita área de armazenamento de mercadorias seca.

17. Método de controle de infestação de mercadoria seca por artrópodes em uma área de armazenamento de mercadorias secas, caracterizado pelo fato de que uma formulação em pó seco conforme definida por qualquer uma das reivindicações 1 a 11 e 13, é apresentada às superfícies de uma área de armazenamento de mercadorias secas.