BR112016002571B1 - Comprimidos de liberação sustentada com um inibidor jak1 - Google Patents

Abstract

FORMAS DE DOSAGEM DE LIBERAÇÃO SUSTENTADA PARA UM INIBIDOR JAK1. Esta invenção refere-se às formas de dosagem de liberação sustentada compreendendo {1-{1-[3-fluor- 2-(trifluormetil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il} acetonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável e doses e métodos relacionados aos mesmos.

Description

[001] Este pedido reivindica o benefício de prioridade do Pedido Provisório U.S. N° 61/863.325, apresentado em 07 de agosto de 2013, e pedido provisório U.S. N° 61/913.066, depositado em 6 de dezembro de 2013, cada uma das quais é aqui incorporado por referência na sua totalidade.

CAMPO TÉCNICO

[002] Este pedido refere-se a um forma de dosagem de liberação sustentada que compreende {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil) isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H- pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e métodos de doses e com eles relacionados.

ANTECEDENTES

[003] As proteínas quinases (PKs) regulam diversos processos biológicos, incluindo o crescimento, a sobrevivência, a diferenciação, a formação de órgãos, a morfogênese, a neovascularização, a reparação de tecidos e a regeneração das células, entre outros. As proteínas quinases também desempenham funções especializadas em um hospedeiro de doenças humanas, incluindo câncer. As citocinas, polipeptídeos de baixo peso molecular ou glicoproteínas, regulam várias vias envolvidas na resposta inflamatória hospedeira a sepse. As citocinas influenciam na diferenciação, proliferação e ativação das células e pode modular as respostas pró-inflamatórias e anti- inflamatórias para permitir que o hospedeiro reaja de maneira apropriada aos patógenos. A sinalização de uma ampla gama de citocinas envolve a família da quinase de Janus (JAKs) e os Transdutores de Sinal e Ativadores de Transcrição (STATs). Há quatro JAKs de mamíferos conhecidos: JAK1 (Janus quinase-1), JAK2, JAK3 (também conhecida como quinase de Janus, leucócitos; JAKL; e L-JAK) e TYK2 (proteína-tirosina-quinase 2).

[004] Respostas imunológicas estimuladas por citocina e inflamatórias contribuem à patogênese de doenças: patologias como a imunodeficiência combinada aguda (SCID) surgem da supressão do sistema imunológico, enquanto que uma resposta inflamatória/imunológica hiperativa ou inapropriada contribui para a patologia de doenças autoimunes (por exemplo, asma, lúpus eritematoso sistêmico, tiroidite, miocardite) e doenças como escleroderma e osteoartrite (Ortmann, R.A., T. Cheng,et al. (2000) Arthritis Res 2(1): 16-32).

[005] Deficiências na expressão da JAK estão associadas a muitos estados de doença. Por exemplo, os camundongos Jak1-/- são raquíticos ao nascer, não conseguem mamar e morrem no período perinatal (Rodig, S. J., M. A. Meraz, et al. (1998) Cell 93(3): 373-83). Os embriões de camundongos Jak2-/- são anêmicos e morrem pelo dia 12,5 pós-coito devido à falta de eritropoiese definitiva.

[006] A via JAK/STAT, e em particular todos os quatro JAKs, acredita-se, desempenha uma função na patogênese da resposta asmática, na doença pulmonar obstrusiva crônica, na bronquite e outras doenças inflamatórias relacionadas do trato respiratório inferior. Várias citocinas que sinalizam através de JAKs têm sido associadas a doenças/condições inflamatórias do trato respiratório superior, como aquelas que afetam o nariz e os seios nasais (por exemplo, rinite e sinusite), sendo ou não reações classicamente alérgicas. A via JAK/STAT também tem sido implicado em doenças/condições inflamatórias do olho e respostas alérgicas crônicas.

[007] A ativação da via JAK/STAT em cânceres pode ocorrer por estímulo de citocina (por exemplo, IL-6 ou GM-CSF) ou por uma redução dos supressores endógenos de JAK que sinalizam esses SOCs (sinalização de citocina ou supressor) ou PIAS (inibidor de proteína de STAT ativada) (Boudny, V., and Kovarik, J., Neoplasm.. 49:349-355, 2002). A ativação da sinalização de STAT, bem como de outras vias à jusante das JAKs (por exemplo, Akt), foi correlacionada a um mau prognóstico em muitos tipos de câncer (Bowman, T., et al. Oncogene 19:2474-2488, 2000). Os níveis elevados de citocinas que sinalizam através de JAK/STAT têm uma função causal na caquexia e/ou fadiga crônica. Como tal, a inibição da JAK pode ser benéfica para pacientes com câncer por motivos que se estendem além da atividade anti-tumoral potencial.

[008] A tirosina quinase JAK2 pode ser benéfica para pacientes com distúrbios mieloproliferativos, por exemplo, policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (ET), metaplasia mieloide com mielofibrose (MMM) (Levin, et al., Cancer Cell, vol. 7, 2005: 387-397). A inibição da quinase JAK2V617F diminui a proliferação de células hematopoiéticas, sugerindo JAK2 como um alvo potencial para a inibição farmacológica em pacientes com PV, ET e MMM.

[009] A inibição das JAKs pode beneficiar os pacientes que sofrem de distúrbios do sistema imunológico da pele, como psoríase e sensibilização da pele. A manutenção da psoríase, acredita-se, depende de uma série de citocinas inflamatórias, além de várias quimiocinas e fatores de crescimento (JCI, 113: 1664-1675), muitos dos quais sinalizam através das JAKs (Adv Pharmacol. 2000;47:113-74).

[0010] Devido à utilidade dos compostos que inibem a JAK visando o aumento ou supressão das vias imunitárias e inflamatórias (tais como agentes imunossupressores para transplantes de órgãos), bem como o tratamento de doenças autoimunes, doenças envolvendo uma resposta inflamatória hiperativa (por exemplo, Eczema), alergias, câncer (por exemplo, próstata, leucemia, mieloma múltiplo), e algumas reações imunitárias (por exemplo, erupção da pele ou dermatite de contato ou diarreia) causada por outros agentes terapêuticos, existe uma necessidade de formulações melhoradas para a administração de quinases JAK. As formas de dosagens aqui descritas, bem como as doses e os métodos descritos supra são direcionados para esta necessidade e outros fins.

SUMÁRIO

[0011] Inibidores de JAK são descritos em US N° de Série 13/043.986 (US 2011/0224190), depositado a 9 de março de 2011, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade, incluindo {1-{1-[3- flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, que está representado abaixo como a Fórmula I.

[0012] O presente pedido proporciona, inter alia, As formas de dosagem de libertação sustentada compreendendo cerca de 25 mg a cerca de 600 mg (por exemplo, 25 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, ou 600 mg) numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0013] A presente invenção fornece ainda uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada compreendendo cada {1-{1-[3-flúor- 2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que a referida uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0014] A presente invenção também fornece uma dose, compreendendo uma ou formas de dosagem de liberação mais sustentada compreendendo cada {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que a referida dose fornece uma dose oral uma vez por dia de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0015] O presente pedido proporciona adicionalmente uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0016] O presente pedido ainda proporciona uma dosagem compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0017] O presente pedido de patente ainda proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma ou mais liberação sustentada das formas de dosagem como aqui descrito.

[0018] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente de uma dose única diária de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a dose compreende formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada compreendendo cada uma delas {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0019] O presente pedido de patente ainda proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma ou liberação mais sustentada de dosagem, como aqui descrito.

[0020] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0021] A FIG. 1A-C ilustra as concentrações plasmáticas para o composto de Fórmula I (Meio ± SE) em indivíduos saudáveis tratados com doses únicas de 300 mg de cápsulas IR (1A: Grupos 1-4, em jejum), comprimidos SR1, SR2, SR3 e SR4 (2B: Grupos 1-4, em jejum; e 2C: Grupos 1-4, alimentados com uma refeição com elevado teor de gordura).

[0022] A FIG. 2A-B descreve uma dose única de 300 mg SR3 perfis PK (Meio ± SE) (2A: Grupos 3, SR3, em jejum contra refeição rica em gorduras; e 2B: Grupos 5, SR3, em jejum contra refeição com média gordura).

[0023] A FIG. 3 representa uma comparação dos perfis farmacocinéticos (Meio ± SE) entre as 25 mg e 100 mg, comprimidos SR3 (tratamento A vs C) e o efeito dos alimentos de uma refeição rica em gorduras sobre o comprimido SR3 de 25 mg (tratamento B vs A).

[0024] A FIG. 4 mostra a variação percentual da linha de base para a hemoglobina para vários regimes de dosagem de comprimidos de libertação prolongada versus placebo.

[0025] A FIG. 5(a) mostra a porcentagem de doentes com uma redução > 50% na pontuação total de sintomas (TSS) na semana 12 por grupo em dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD).

[0026] A FIG. 5(b) mostra a variação percentual na pontuação total de sintomas (TSS) da linha de base na semana 12 por grupo da dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD).

[0027] A FIG. 6(a) mostra os níveis médios de hemoglobina ao longo do tempo por grupo de dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD).

[0028] A FIG. 6(b) mostra os níveis médios de hemoglobina (g/dL) ao longo do tempo por grupo de dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD) durante 48 semanas.

[0029] A FIG. 6(c) ilustra os níveis médios de hemoglobina (g/dL) ao longo do tempo por grupo de dose às 48 semanas como uma média de três grupos de dose em comparação com os indivíduos que receberam doses de placebo ou ruxolitinibe.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0030] O presente pedido proporciona formas de dosagem de libertação prolongada compreendendo {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, o presente pedido proporciona uma forma de dosagem de libertação sustentada compreendendo cerca de 25 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0031] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0032] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0033] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0034] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de sal de ácido adípico.

[0035] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0036] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de sal de ácido adípico.

[0037] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 100 nM a cerca de 1000 nM. Tal como utilizado neste contexto, significa que a administração oral de uma única dose é administrada ao indivíduo (neste caso, a 3 x 100 mg) e o parâmetro farmacocinético é calculado a partir das medições de concentração no plasma ao longo do tempo. Neste contexto, o parâmetro farmacocinético (neste caso, Cmax) está sendo utilizado para caracterizar a forma única de dosagem de libertação sustentada (isto é, as reivindicações são direcionadas a uma forma de dosagem única, e não três formas de dosagens).

[0038] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 400 nM a cerca de 700 nM.

[0039] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Tmax) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 0,5 horas a cerca de 3 horas.

[0040] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Tmax) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 0,5 horas.

[0041] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma relação da concentração média no plasma de pico (Cmax) para o meio da concentração de plasma de 12 horas (C12h) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 5 a cerca de 50.

[0042] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) para a média da concentração do plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor- 2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 9 a cerca de 40.

[0043] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) para a média da concentração do plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor- 2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 15 a cerca de 30.

[0044] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 5 horas a cerca de 15 horas.

[0045] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 7 horas a cerca de 12 horas.

[0046] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora a cerca de 20 horas.

[0047] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum fornece uma biodisponibilidade média (AUCo-~) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1000 nM*h para cerca de 4000 nM*h.

[0048] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em jejum fornece uma biodisponibilidade média (AUCo—«) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1500 nM*h para cerca de 3100 nM*h.

[0049] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em após fornecer uma refeição rica em gordura uma concentração média no plasma de pico (Cmax) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 200 nM a cerca de 2000 nM.

[0050] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em após fornecer uma refeição rica em gordura uma concentração média no plasma de pico (Cmax) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 500 nM a cerca de 1500 nM.

[0051] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em após fornecer uma refeição rica em gordura uma concentração do tempo médio no plasma de pico (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora a cerca de 9 horas.

[0052] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo em após fornecer uma refeição rica em gordura uma concentração do tempo médio no plasma de pico (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de pelo menos 1,5 horas.

[0053] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo fornecer uma refeição rica em gordura e proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) para uma concentração média do plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}- 3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de cerca de 10 a cerca de 70.

[0054] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo fornecer uma refeição rica em gordura e proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) para uma concentração média do plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}- 3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de cerca de 15 a cerca de 50.

[0055] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo fornecer uma refeição rica em gordura e proporciona uma concentração média no plasma de pico (Cmax) para uma concentração média do plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}- 3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de cerca de 25 a cerca de 45.

[0056] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo após proporcionar uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora a cerca de 7 horas.

[0057] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo após proporcionar uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 2 horas a cerca de 5 horas.

[0058] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo após uma refeição rica em gordura fornecer uma biodisponibilidade média (AUCo-~) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 2000 nM*h para cerca de 5000 nM*h.

[0059] Em algumas modalidades da forma de dosagem de liberação sustentada compreendendo cerca de 100 mg, a administração oral de três das referidas formas de dosagem a um indivíduo após uma refeição rica em gordura fornecer uma biodisponibilidade média (AUCo—«) de {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 3000 nM*h para cerca de 4000 nM*h.

[0060] Em algumas modalidades, a porcentagem da razão da média geométrica da forma de dosagem de liberação sustentada em relação a uma forma de dosagem de liberação imediata para Cmax é de cerca de 15% a cerca de 30%, em que uma ou mais formas de dosagem de liberação imediata e uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada são independentemente administradas oralmente a indivíduos em jejum, como uma dose única, em que a mesma dose de tamanho {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é administrado.

[0061] Em algumas modalidades, a porcentagem da razão da média geométrica da forma de dosagem de liberação sustentada em relação a uma forma de dosagem de liberação imediata para Cmax é de cerca de 15% a cerca de 30%, em que uma ou mais formas de dosagem de liberação imediata e uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada são independentemente administradas oralmente a indivíduos em jejum, como uma dose única, em que a mesma dose de tamanho {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é administrado.

[0062] Em algumas modalidades, a porcentagem da razão da média geométrica da forma de dosagem de liberação sustentada em relação a uma forma de dosagem de liberação imediata para AUCo-« é de cerca de 40% a cerca de 55%, em que uma ou mais formas de dosagem de liberação imediata e uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada são independentemente administradas oralmente a indivíduos em jejum, como uma dose única, em que a mesma dose de tamanho {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é administrado.

[0063] Em algumas modalidades, a razão percentual média geométrica para Cmax da forma de dosagem de liberação sustentada administrada oralmente a um indivíduo depois de uma refeição rica em gordura em relação à forma de dosagem de liberação sustentada administrada oralmente a um indivíduo em jejum é de cerca de 150% a cerca de 250%.

[0064] Em algumas modalidades, a razão percentual média geométrica para AUCo-« da forma de dosagem de liberação sustentada administrada oralmente a um indivíduo depois de uma refeição rica em gordura em relação à forma de dosagem de liberação sustentada administrada oralmente a um indivíduo em jejum é de cerca de 125% a cerca de 170%.

[0065] Em algumas modalidades, as formas de dosagem de liberação sustentada da presente invenção podem incluir um formador da matriz de liberação sustentada. Exemplo de formadores de matriz de liberação sustentada incluem éteres celulósicos, tais como hidroxipropil metilcelulose (HPMC, hipromelose), que é um polímero de viscosidade alta, e celulose de metil. Exemplo hidroxipropilmetilceluloses incluem Methocel™ K15M, Methocel™ K4M, K100LV Methocel™, Methocel™ E3, Methocel™ E5, Methocel™ E6, Methocel™ E15, Methocel™ E50, Methocel™ E10M, Methocel™ E4M e Methocel™ E10M. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende um ou mais hipromeloses. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende um primeiro hipromelose caracterizado por ter uma viscosidade aparente, a uma concentração de 2% em água de cerca de 80 cP e cerca de 120 cP e um segundo hipromelose caracterizado por ter uma viscosidade aparente, a uma concentração de 2 % em água de cerca de 3000 cP a cerca de 5600 cP. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende cerca de 8% a cerca de 20% em peso de um ou mais hipromeloses. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende cerca de 10% a cerca de 15% em peso de um ou mais hipromeloses.

[0066] Em algumas modalidades, as formas de dosagem de liberação sustentada da presente invenção podem ainda incluir um ou mais agentes de preenchimento, deslizantes, desintegrantes, ligantes, lubrificantes ou como ingredientes inativos. Em algumas modalidades, o preenchimento compreende celulose microcristalina, lactose mono- hidratada, ou ambos. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende cerca de 16% a cerca de 22% em peso de celulose microcristalina. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende cerca de 45% a cerca de 55% em peso de mono-hidrato de lactose.

[0067] Em algumas modalidades, os lubrificantes podem estar presentes nas formas de dosagem da invenção numa quantidade de 0 a cerca de 5% em peso. Exemplos não limitativos de lubrificantes incluem estearato de magnésio, ácido esteárico (estearina), óleo hidrogenado, polietilenoglicol, estearil fumarato de sódio, e beenato de gliceril. Em algumas modalidades, as formulações incluem estearato de magnésio, ácido esteárico, ou ambos. Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende cerca de 0,3% a cerca de 0,7% em peso de estearato de magnésio.

[0068] Em algumas modalidades, agentes de deslizamento podem estar presentes nas formas de dosagens. Em algumas modalidades, os lubrificantes podem estar presentes nas formas de dosagens da invenção numa quantidade de 0 a cerca de 5% em peso. Exemplos não limitativos de agentes de deslizamento incluem o talco, dióxido de silício coloidal, e amido de milho. Em algumas modalidades, o deslizante é dióxido de silício coloidal.

[0069] Em algumas modalidades, agentes da película de revestimento pode estar presente numa quantidade de 0 a cerca de 5% em peso. Os exemplos não limitativos ilustrativos dos agentes de revestimento de película de revestimento à base incluem hipromelose ou álcool polivinílico com dióxido de titânio, talco e, opcionalmente, corantes disponíveis em vários sistemas de revestimento completos disponíveis comercialmente.

[0070] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende amido pré-gelatinizado.

[0071] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada é um comprimido.

[0072] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada é preparada pelo processo que compreende a granulação por via úmida.

[0073] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende um ou mais excipientes selecionados independentemente a partir de hipromeloses e celuloses microcristalinas.

[0074] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende um ou mais excipientes selecionados independentemente a partir de hipromeloses, celuloses microcristalinas, estearato de magnésio, lactose e lactose mono-hidratada.

[0075] Em algumas modalidades, a forma de dosagem de liberação sustentada compreende um ou mais excipientes selecionados independentemente a partir de hipromeloses, celuloses microcristalinas, estearato de magnésio, lactose, mono-hidrato de lactose e amido pré- gelatinizado.

[0076] A presente invenção fornece ainda uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada compreendendo cada {1-{1-[3-flúor- 2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que a referida uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0077] A presente invenção também fornece uma dose, compreendendo uma ou formas de dosagem de liberação mais sustentada compreendendo cada {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que a referida dose fornece uma dose oral uma vez por dia de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0078] O presente pedido proporciona adicionalmente uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0079] O presente pedido proporciona adicionalmente uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 500 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0080] O presente pedido proporciona adicionalmente uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0081] Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada é uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é fornecido.

[0082] O presente pedido ainda proporciona uma dosagem compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0083] O presente pedido ainda proporciona uma dosagem compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 500 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0084] O presente pedido ainda proporciona uma dosagem compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente.

[0085] Em algumas modalidades, uma dose compreende seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, uma dose compreende três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, uma dose compreende duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, uma dose compreende uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0086] O presente pedido proporciona adicionalmente um kit compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente. Em algumas modalidades, o kit compreende, ainda, uma instrução para administrar as formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada como uma dose única diária de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0087] O presente pedido proporciona adicionalmente um kit compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 600 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente. Em algumas modalidades, o kit compreende, ainda, uma instrução para administrar as formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada como uma dose única diária de cerca de 600 mg, numa base de base livre {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0088] O presente pedido proporciona adicionalmente um kit compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 500 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente. Em algumas modalidades, o kit compreende, ainda, uma instrução para administrar as formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada como uma dose única diária de cerca de 600 mg, numa base de base livre {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0089] O presente pedido proporciona adicionalmente um kit compreendendo uma ou mais formas de dosagem de libertação sustentada, conforme descrito aqui, que em conjunto proporcionam uma dosagem oral uma vez por dia de cerca de 400 mg, numa base de base livre de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, a um paciente. Em algumas modalidades, o kit compreende, ainda, uma instrução para administrar as formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada como uma dose única diária de cerca de 600 mg, numa base de base livre {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0090] Em algumas modalidades, um kit compreende seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor- 2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, um kit compreende três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, um kit compreende duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalidades, um kit compreende uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[0091] Tal como aqui utilizado, "liberação sustentada" é usado como é geralmente compreendido na técnica e refere-se a uma formulação concebida para liberar lentamente o ingrediente ativo para um paciente após administração oral.

[0092] Tal como aqui utilizado, "dose" refere-se à quantidade total do composto da Fórmula I administrado oralmente ao indivíduo ou paciente. A dose pode estar numa forma de dosagem única, ou uma pluralidade de formas de dosagem (por exemplo, uma dose de 600 mg pode ser uma dosagem de 600 mg, duas formas de dosagens 300 mg, três formas de dosagens 200 mg, seis formas de dosagem 100 mg, etc.). Assim, a dose pode se referir a uma pluralidade de comprimidos a serem ingeridos pelo paciente em quase simultaneamente.

[0093] Tal como aqui utilizado, "um indivíduo em jejum" significa um indivíduo que jejuou durante pelo menos 10 horas antes da administração da dose.

[0094] Tal como aqui utilizado, "média" quando um valor anterior farmacocinético (por exemplo, Cmax média) representa a média aritmética do valor farmacocinético feito a partir de uma população de pacientes a menos que especificado de outra forma.

[0095] Como aqui utilizado, "Cmax" média da concentração máxima observada no plasma.

[0096] Como aqui utilizado, "C12h" refere-se à concentração no plasma medida a 12 horas de administração.

[0097] Como aqui utilizado, "Tmax" refere-se ao tempo em que a concentração máxima no plasma sanguíneo é observado.

[0098] Como aqui utilizado, "T1/2" refere-se ao tempo no qual a concentração no plasma é metade do máximo observado.

[0099] Tal como aqui utilizado, "AUC" significa a área sob o tempo da curva da concentração plasmática, que é uma medida da biodisponibilidade total.

[00100] Tal como aqui utilizado, "AUCo-~" refere-se à área sob o tempo da curva da concentração plasmática extrapolada ao infinito.

[00101] Tal como aqui utilizado, "AUC0-t" refere-se à área sob o tempo da curva da concentração plasmática desde o tempo 0 até ao último ponto de tempo com uma concentração de plasma quantificável, geralmente cerca de 12-36 horas.

[00102] Tal como aqui utilizado, "AUCO-T" refere-se à área sob o tempo da curva na concentração plasmática desde o tempo 0 a hora da próxima dose.

[00103] Tal como aqui utilizado, "Cl/F" refere-se à depuração oral.

[00104] A presente invenção também inclui sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos aqui descritos. Tal como aqui utilizado, "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se a derivados dos compostos divulgados em que o composto de origem é modificado através da conversão de um ácido ou uma fração de base existente na sua forma de sal. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, entre outros, sais de ácido mineral ou orgânico de resíduos básicos como aminas; alcalinos ou sais orgânicos de resíduos ácidos, como ácidos carboxílicos; e afins. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção incluem os sais não tóxicos, do composto de origem formado, por exemplo, a partir de ácidos inorgânicos ou orgânicos não tóxicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto de origem que contém uma fração básica ou acídica por métodos químicos convencionais. Geralmente, esses sais podem ser preparados fazendo reagir as formas de ácido ou base livres destes compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou ácido apropriado em água ou num solvente orgânico, ou numa mistura dos dois; geralmente, meios não aquosos como éter, acetato de etilo, álcoois (por exemplo, metanol, etanol, iso-propanol, ou butanol) ou acetonitrilo (ACN) são preferidos. Listas de sais adequados são encontradas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th Ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, p. 1418 e Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977), cada uma das quais é aqui incorporada por referência na sua totalidade. Em algumas modalidades, os compostos aqui descritos incluem as suas formas de N-óxido.

Métodos

[00105] O presente pedido de patente ainda proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma ou mais liberação sustentada das formas de dosagem como aqui descrito.

[00106] O presente pedido também proporciona um método de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente de uma dose única diária de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a dose compreende formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada compreendendo cada uma delas {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. O presente pedido de patente ainda proporciona um método de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma ou liberação mais sustentada de dosagem, como aqui descrito.

[00107] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[00108] O presente pedido também proporciona um método de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 500 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[00109] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 400 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[00110] Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada é uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é fornecido.

[00111] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum proporciona um tempo significativo até à concentração máxima no plasma (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de cerca de 0,5 horas a cerca de 3 horas.

[00112] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum proporciona um tempo significativo até à concentração máxima no plasma (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de pelo menos 0,5 horas.

[00113] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3- flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 5 a cerca de 50.

[00114] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3- flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 9 a cerca de 40.

[00115] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3- flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 15 a cerca de 30.

[00116] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo em jejum proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora até cerca de 20 horas.

[00117] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo depois de uma refeição rica em gordura proporciona um tempo significativo até à concentração máxima no plasma (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora até cerca de 9 horas.

[00118] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição rica em gordura proporciona um tempo significativo até à concentração máxima no plasma (Tmax) de {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de pelo menos 1,5 horas.

[00119] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo uma refeição rica em gordura fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 10 a cerca de 70.

[00120] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo uma refeição rica em gordura fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 15 a cerca de 50.

[00121] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo uma refeição rica em gordura fornece uma razão de concentração média no plasma de pico (Cmax) a concentração média no plasma de 12 horas (C12h) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 25 a cerca de 45.

[00122] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição rica em gordura proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 1 hora até cerca de 7 horas.

[00123] Em algumas modalidades, a administração oral de uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição rica em gordura proporciona uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de cerca de 2 horas até cerca de 5 horas.

[00124] Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada são cada um comprimido. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada são preparadas pelo processo que compreende a granulação por via úmida.

[00125] Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende um ou mais hipromeloses. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende um ou mais excipientes selecionados independentemente a partir de hipromeloses e celuloses microcristalinas. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende um ou mais excipientes selecionados independentemente a partir de hipromeloses, celuloses microcristalinas, estearato de magnésio, lactose e lactose mono-hidratada. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende um primeiro hipromelose caracterizado por ter uma viscosidade aparente, a uma concentração de 2% em água de cerca de 80 cP e cerca de 120 cP e um segundo hipromelose caracterizado por ter uma viscosidade aparente, a uma concentração de 2 % em água de cerca de 3000 cP a cerca de 5600 cP.

[00126] Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende cerca de 10% a cerca de 15% em peso de um ou mais hipromeloses. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende cerca de 16% a cerca de 22% em peso de celulose microcristalina. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende cerca de 45% a cerca de 55% em peso de mono-hidrato de lactose. Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens de liberação sustentada cada uma compreende cerca de 0,3% a cerca de 0,7% em peso de estearato de magnésio.

[00127] Em algumas modalidades, o presente pedido proporciona um método de tratamento de mielofibrose num doente, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente de uma dose única diária de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3- flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3- d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a dose compreende uma ou mais formas de dosagem de liberação sustentada compreendendo cada uma delas {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o método resulta numa reduzida escala de sintomas totais (TSS) do referido paciente em comparação com os valores basais. Em algumas modalidades, o presente pedido proporciona um método de tratamento de mielofibrose num doente, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma das formas ou mais de dosagem de libertação sustentada como uma dose única diária de cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o método resulta numa reduzida escala de sintomas totais (TSS) do referido paciente em comparação com os valores basais.

[00128] Em algumas modalidades, o presente pedido proporciona um método de tratamento de mielofibrose num doente, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma das formas ou mais de dosagem de libertação sustentada como uma dose única diária de cerca de 500 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o método resulta numa reduzida escala de sintomas totais (TSS) do referido paciente em comparação com os valores basais.

[00129] Em algumas modalidades, o presente pedido proporciona um método de tratamento de mielofibrose num doente, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente uma das formas ou mais de dosagem de libertação sustentada como uma dose única diária de cerca de 400 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o método resulta numa reduzida escala de sintomas totais (TSS) do referido paciente em comparação com os valores basais.

[00130] Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades os métodos nos três parágrafos precedentes, de uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada é uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é fornecido.

[00131] Em algumas modalidades, "escala de sintomas totais (TSS)" refere-se ao derivado do TSS modificado da Forma de Avaliação Sintoma Mielofibrose (MFSAF) (por exemplo, v3.0) diário eletrônico, em comparação com os valores basais (linha de base é TSS basal do paciente antes do tratamento) . Em algumas modalidades, mielofibrose é mielofibrose primária (PMF), pós-policitemia vera MF, ou trombocitemia pós-essencial MF.

[00132] O presente pedido também proporciona um método de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, compreendendo administrar oralmente ao referido paciente de uma dose única diária de cerca de 400 mg a cerca de 600 mg, numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a dose compreende formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada compreendendo cada uma delas {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o referido método resulta na redução de anemia.

[00133] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o referido método resulta na redução de anemia.

[00134] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 500 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o referido método resulta na redução de anemia.

[00135] O presente pedido também proporciona métodos de tratamento de uma doença autoimune, um câncer, um distúrbio mieloproliferativa, uma doença inflamatória, uma doença de reabsorção óssea, ou rejeição de transplante de órgão, em um paciente em necessidade do mesmo, em que o método compreende a administração oral ao referido paciente de um ou formas de dosagem de liberação mais apoiado como uma dose única diária de cerca de 400 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4- il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável; em que o referido método resulta na redução de anemia. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são seis formas de dosagens de cerca de 100 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são três formas de dosagens de cerca de 200 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada são duas formas de dosagens de cerca de 300 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são fornecidos. Em algumas modalidades, uma ou mais forma de dosagem de liberação sustentada é uma forma de dosagem de cerca de 600 mg numa base de base livre {1-{1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, é fornecido.

[00136] A anemia é reduzida em relação àquela experimentada para uma dose de duas vezes ao dia de 200 mg numa base de base livre {1- {1-[3-flúor-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H- pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a dose compreende formas de dosagem de um ou mais de liberação sustentada compreendendo cada uma delas {1-{1-[3-flúor-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

[00137] O composto da Fórmula I é um inibidor de JAK. Um inibidor seletivo de JAK1 é um composto que inibe a atividade de JAK1 preferencialmente em relação a outras quinases de Janus. JAK1 desempenha um papel central em diversas vias de sinalização de citocinas e fatores de crescimento que, quando desregulado, pode resultar em ou contribuir para estados de doença. Por exemplo, os níveis de IL-6 são elevados em artrite de reumatoide, uma doença em que tem sido sugerido para ter efeitos prejudiciais (Fonesca, J.E. et al., Autoimmunity Reviews, 8:538-42, 2009). Já que IL-6 sinaliza, pelo menos, em parte, através de JAK1, antagonizar IL-6 diretamente ou indiretamente através da inibição de JAK1 é esperado para fornecer o benefício clínico (Guschin, D., N., et al Embo J 14:1421, 1995; Smolen, J. S., et al. Lancet 371:987, 2008). Além disso, em alguns tipos de câncer, JAK1 sofre mutação, resultando no crescimento e na sobrevivência de células tumorais indesejáveis constitutivos (Mullighan CG, Proc Natl Acad Sci U S A.106:9414-8, 2009; Flex E., et al.J Exp Med. 205:751-8, 2008). Em outras doenças autoimunes e cânceres sistêmicos, níveis elevados de citocinas inflamatórias que ativam JAK1 também podem contribuir para a doença e/ou os sintomas associados. Por conseguinte, os pacientes com tais doenças podem beneficiar da inibição de JAK1. Os inibidores seletivos de JAK1 podem ser eficazes enquanto evitando efeitos indesejáveis e potencialmente desnecessárias de inibir outras quinases de JAK.

[00138] Os inibidores seletivos de JAK1, em relação a outras quinases de JAK, podem ter várias vantagens terapêuticas sobre inibidores menos seletivos. No que diz respeito à seletividade contra JAK2, um número de importantes citocinas e fatores de crescimento sinalizam através de JAK2 incluindo, por exemplo, eritropoietina (Epo) e trombopoietina (TPO) (Parganas E, et al. Cell. 93:385-95, 1998). EPO é um fator de crescimento chave para a produção de hemácias; portanto, uma escassez de sinalização dependente de EPO pode resultar em números reduzidos de hemácias e anemia (Kaushansky K, NEJM 354:2034-45, 2006). Tpo, um outro exemplo de um fator de crescimento dependente de JAK2, desempenha um papel central no controle da proliferação e maturação de megacariócitos - as células a partir da qual são produzidas as plaquetas (Kaushansky K, NEJM 354: 2034-45, 2006). Como tal, a sinalização reduzida de Tpo diminuiria os números de megacariócitos (megacariocitopenia) e abaixar as contagens de plaquetas circulantes (trombocitopenia). Isto pode resultar em sangramento indesejável e/ou incontrolável. Redução da inibição de outros JAKs, tais como JAK3 e Tyk2, pode também ser desejável já que seres humanos que carecem a versão funcional destas quinases têm sido mostrados para sofrerem de numerosas doenças tais como imunodeficiência severa combinada, ou síndrome de hiperimunoglobulina E (Minegishi, Y, et al. Immunity 25:745-55, 2006; Macchi P, et al. Nature. 377:65-8, 1995). Portanto, um inibidor de JAK1 com afinidade reduzida para outros JAKs teria vantagens significativas em relação a um inibidor menos seletivo no que diz respeito a efeitos secundários reduzidos envolvendo supressão imune, anemia e trombocitopenia.

[00139] Outro aspecto da presente invenção diz respeito a métodos de tratamento de uma doença associada a JAK ou distúrbio num indivíduo (por exemplo, paciente), por administração ao indivíduo em necessidade de tal tratamento de uma forma de dosagem de liberação sustentada da invenção. Uma doença associada a JAK pode incluir qualquer doença, distúrbio ou condição que está diretamente ou indiretamente ligada à expressão ou à atividade de JAK, incluindo sobre-expressão e/ou os níveis de atividade anormais. Uma doença associada a JAK pode também incluir qualquer doença, distúrbio ou condição que pode ser prevenida, melhorada, ou curada por modulação da atividade de JAK.

[00140] Exemplos de doenças associadas a JAK incluem doenças que envolvem o sistema imune incluindo, por exemplo, rejeição de órgãos transplantados (por exemplo, rejeição de enxertos e doença do enxerto versus hospedeiro).

[00141] Outros exemplos de doenças associadas a JAK incluem doenças autoimunes, tais como esclerose múltipla, artrite de reumatoide, artrite juvenil, artrite psoriática, diabetes do tipo I, lúpus, psoríase, doença inflamatória do intestino, colite ulcerativa, doença de Crohn, miastenia gravis, nefropatias de imunoglobulina, miocardite, distúrbios da tiroide autoimunes, doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), e semelhantes. Em algumas modalidades, a doença autoimune é uma doença autoimune da pele bolhosa, tais como pênfigo vulgaris (PV) ou o penfigoide bolhoso (BP).

[00142] Outros exemplos de doenças associadas a JAK incluem condições alérgicas, tais como asma, alergias alimentares, dermatite ezematosa, dermatite de contato, dermatite atópica (eczema atrópica), e rinite. Outros exemplos de doenças associadas a JAK incluem doenças virais, tais como vírus de Epstein Barr (EBV), Hepatite B, Hepatite C, HIV, HTLV 1, Varicela-Zoster (VZV) e vírus de papiloma humana (HPV).

[00143] Outros exemplos de doenças associadas a JAK incluem doenças associadas à renovação de cartilagem, por exemplo, artrite gotosa, artrite séptica ou infecciosa, artrite reativa, distrofia simpática reflexa, algodistrofia, síndrome de Tietze, atropatia costal, deformante endêmica de osteoartrite, doença de Mseleni, doença de Handigodu, degeneração resultante de fibromialgia, lúpus eritematosos sistêmicos, esclerodermia, ou espondilite anquilosante.

[00144] Outros exemplos de doenças associadas a JAK incluem malformações congênitas da cartilagem, incluindo crondrólise hereditária, crondrodisplasia e pseudocrondrodisplasia (por exemplo, microtia, enotia, e metafiseal crondrodisplasia).

[00145] Outros exemplos de doenças ou condições associadas a JAK incluem doenças da pele tais como a psoríase (por exemplo, psoríase vulgar), dermatite atópica, erupções cutâneas, irritação da pele, sensibilização da pele (por exemplo, dermatite de contato ou dermatite de contato alérgica). Por exemplo, certas substâncias incluindo alguns medicamentos quando aplicadas topicamente podem causar a sensibilização da pele. Em algumas modalidades, a co- administração ou administração sequencial de pelo menos um inibidor de JAK da invenção conjuntamente com o agente causador da sensibilização indesejada pode ser útil no tratamento de tal sensibilização indesejada ou dermatite. Em algumas modalidades, a desordem da pele é tratada através da administração tópica de pelo menos um inibidor de JAK da invenção.

[00146] Noutras modalidades, a doença associada a JAK é câncer, incluindo aqueles caracterizados por tumores sólidos (por exemplo, câncer de próstata, câncer renal, câncer hepático, câncer pancreático, câncer gástrico, câncer de mama, câncer de pulmão, câncer de cabeça e pescoço, câncer de tiroide, glioblastoma, sarcoma de Kaposi, doença de Castleman, leiomiossarcoma uterino, melanoma etc.), cânceres hematológicos (por exemplo, linfoma, leucemia tal como leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (AML) ou mieloma múltiplo), e câncer da pele, tais como linfoma de célula T cutâneo (CTCL) e linfoma de célula B cutâneo. Exemplo de CTCLs incluem síndrome de Sezary e fungoide de micose.

[00147] Em algumas modalidades, as formas de dosagens descritas aqui, ou em combinação com outros inibidores de JAK, tais como os relatados em US N° de Série 11/637.545, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade, podem ser utilizados para tratar cânceres associados à inflamação. Em algumas modalidades, o câncer está associado à doença inflamatória do intestino. Em algumas modalidades, a doença inflamatória do intestino é a colite ulcerosa. Em algumas modalidades, a doença inflamatória do intestino é a doença de Crohn. Em algumas modalidades, o câncer associado à inflamação é câncer associado a colite. Em algumas modalidades, o câncer associado à inflamação é o câncer do cólon ou câncer colorretal. Em algumas modalidades, o câncer é o câncer gástrico, tumor carcinoide gastrointestinal, tumor do estroma gastrointestinal (GIST), adenocarcinoma, câncer do intestino delgado, ou o câncer retal.

[00148] Doenças associadas a JAK podem incluir ainda aquelas caracterizadas pela expressão de: Mutantes de JAK2, tais como os que têm pelo menos uma mutação no domínio da pseudo-quinase (por exemplo, JAK2V617F); mutantes de JAK2 que possuem pelo menos uma mutação fora do domínio de pseudo-quinase; mutantes de JAK1; mutantes de JAK3; mutantes de receptor da eritropoietina (R-EPO); ou expressão desregulamentada de CRLF2.

[00149] Doenças associadas a JAK podem incluir ainda desordens mieloproliferativas (MPDs), tais como policitemia vera (PV), trombocitemia essencial (ET), mielofibrose com metaplasia de mieloide (MMM), mielofibrose primária (FMP), leucemia de mieloide crônica (LMC), leucemia mielomonocítica crônica (CMML), hipereosinofilia (HES), doença sistêmica de mastócitos (SmcD), e semelhantes. Em algumas modalidades, o distrúrbio mieloproliferativa é mielofibrose (por exemplo, mielofibrose primária (FMP) ou pós policitemia vera/mielofibrose trombocitemia essencial (Pós-PV/ET MF)). Em algumas modalidades, o distúrbio mieloproliferativa é pós- trombocitemia essencial mielofibrose (Pós-ET). Em algumas modalidades, o distúrbio mieloproliferativa é pós mielofibrose policitemia vera (PV Pós-MF).

[00150] Em algumas modalidades, formas de dosagem aqui descritas podem ser utilizadas para tratar a hipertensão arterial pulmonar.

[00151] A presente invenção proporciona ainda um método de tratamento de efeitos secundários dermatológicos de outros produtos farmacêuticos, por administração das formas de dosagens da invenção. Por exemplo, numerosos agentes farmacêuticos resultam em reações alérgicas indesejadas que podem se manifestar como erupção acneiforme ou dermatite relacionada. Exemplos de agentes farmacêuticos que possuem tais efeitos secundários indesejáveis incluem drogas anticancerosas, tais como gefitinibe, cetuximabe, erlotinibe e semelhantes. As formas de dosagem da invenção podem ser administradas por via sistêmica em combinação com (por exemplo, simultaneamente ou sequencialmente) o agente farmacêutico possuindo o efeito colateral indesejável dermatológico.

[00152] Outras doenças associadas a JAK incluem inflamação e doenças inflamatórias. Exemplos de doenças inflamatórias incluem a sarcoidose, doenças inflamatórias do olho (por exemplo, irite, uveite, esclerite, conjuntivite, ou doença relacionada), doenças inflamatórias do trato respiratório (por exemplo, o trato respiratório superior, incluindo o nariz e os seios, tais como a rinite ou sinusite ou o trato respiratório inferior, incluindo bronquite, doença pulmonar obstrutiva crônica, e afins), miopatias inflamatórias, tais como miocardite, e outras doenças inflamatórias. Em algumas modalidades, a doença de inflamação do olho é blefarite.

[00153] As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar lesões de reperfusão de isquemia ou de uma doença ou condição relacionada com um evento inflamatório isquêmico tais como acidente vascular cerebral ou paragem cardíaca. As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar estado de doença impulsionado por endotoxinas (por exemplo, complicações após cirurgia de ponte de safena ou estados crônicos de endotoxinas que contribuem para a insuficiência cardíaca crônica). As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar a anorexia, caquexia, ou fadiga, tal como a resultante de ou associada ao câncer. As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar a restenose, esclerodermite ou fibrose. As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar condições associadas à hipoxia ou astrogliose, tais como, por exemplo, retinopatia diabética, câncer ou neurodegeneração. Ver, por exemplo, Dudley, A.C. et al. Biochem. J. 2005, 390(Pt 2):427- 36 e Sriram, K. et al. J. Biol. Chem. 2004, 279(19):19936-47. Epub 2004 Mar 2, ambas as quais são aqui incorporadas por referência na sua totalidade. Os inibidores de JAK descritos no presente documento podem ser utilizados para tratar a doença de Alzheimer.

[00154] As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar outras doenças inflamatórias, tais como a síndrome de resposta inflamatória sistêmica (SIRS) e choque séptico.

[00155] As formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados no tratamento da gota e o aumento do tamanho da próstata, devido a, por exemplo, a hipertrofia benigna da próstata ou hiperplasia prostática benigna.

[00156] Outras doenças associadas a JAK incluem doenças de reabsorção óssea, como a osteoporose, osteoartrite. A reabsorção óssea pode também ser associada às outras condições, tais como o desequilíbrio hormonal e/ou terapia hormonal, doença autoimune (por exemplo, sarcoidose óssea), ou câncer (por exemplo, mieloma múltiplo). A redução da reabsorção do osso, devido ao composto da Fórmula I pode ser de cerca de 10%, cerca de 20%, cerca de 30%, cerca de 40%, cerca de 50%, cerca de 60%, cerca de 70%, cerca de 80%, ou cerca de 90%.

[00157] Em algumas modalidades, as formas de dosagens descritas no presente documento podem ainda ser utilizados para tratar uma desordem do olho seco. Tal como aqui utilizado, "desordem do olho seco" pretende englobar os estados de doença resumidos num recente relatório oficial da Oficina do Olho Seco (DEWS: Dry Eye Workshop), que define como olho seco "uma doença multifatorial das lágrimas e da superfície ocular, que resulta em sintomas de desconforto, distúrbios visuais e instabilidade do filme lacrimal com potencial de danos à superfície ocular. É acompanhada por um aumento da osmolaridade do filme lacrimal e inflamação da superfície ocular". Lemp, "The Definition and Classification of Dry Eye Disease: Report of the Definition and Classification Subcommittee of the International Dry Eye Workshop", The Ocular Surface, 5(2), 75-92 abril 2007, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade. Em algumas modalidades, o distúrbio do olho seco é selecionado a partir do olho com deficiência de lágrima aquosa seca (ADDE) ou desordem do olho seco por evaporação, ou combinações adequadas dos mesmos. Em algumas modalidades, o distúrbio do olho seco é a síndrome do olho seco de Sjogren (SSDE). Em algumas modalidades, o distúrbio do olho seco é a síndrome do olho seco de não-Sjogren (NSSDE).

[00158] Num outro aspecto, a presente invenção proporciona um método de tratamento de conjuntivite, o distúrbiouveíte (incluindo uveíte crônica), coriodite, retinite, ciclite, esclierite, episclerite ou irite; tratamento da inflamação ou dor relacionada com a transplante de córnea, LASIK (in situ queratomileusis assistida por laser), ceratectomia fotorrefrativa, ou LASEK (queratomileusis sub-epitelial assistida por laser); inibindo a perda da acuidade visual relacionada com transplante de córnea, LASIK, ceratotomia fotorrefrativa, ou LASEK; ou inibição de rejeição de transplantes num paciente em necessidade do mesmo, compreendendo a administração ao paciente numa forma de dosagem da invenção.

[00159] Além disso, as formas de dosagens da invenção, ou em combinação com outros inibidores de JAK, tais como os relatados em U.S. N° de Série 11/637.545, que é aqui incorporado por referência na sua totalidade, podem ser usadas para tratar a disfunção ou falha respiratória associada à infecção viral, tais como a gripe e SARS.

[00160] Em algumas modalidades, a presente invenção proporciona uma forma de dosagem, tal como descrito em qualquer uma das modalidades aqui, para utilização num método de tratamento de qualquer das doenças ou distúrbios aqui descritos. Em algumas modalidades, a presente invenção proporciona a utilização da forma de dosagem, tal como descrito em qualquer uma das modalidades aqui, para a preparação de um medicamento para utilização num método de tratamento de qualquer uma das doenças ou distúrbios aqui descritos.

[00161] Em algumas modalidades, a presente invenção proporciona uma forma de dosagens, como aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para utilização num método de modulação de JAK1. Em algumas modalidades, a presente invenção também proporciona a utilização da forma de dosagem, como aqui descrito, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para a preparação de um medicamento para utilização num método de modulação de JAK1.

[00162] Tal como aqui utilizado, o termo "indivíduo" é um ser humano. Em algumas modalidades, o sujeito é um humano adulto.

[00163] Tal como aqui utilizado, o termo "tratar" ou "tratamento" refere-se a um ou mais de (1) inibição da doença; por exemplo, inibição de uma doença, condição ou desordem num indivíduo que sofre ou exibe a patologia ou sintomatologia da doença, condição ou desordem (isto é, parar o desenvolvimento posterior da patologia e/ou sintomatologia); e (3) melhoramento da doença; por exemplo, melhoramento de uma doença, condição ou desordem num indivíduo que sofre ou exibe a patologia ou sintomatologia da doença, condição ou desordem (isto é, inversão da patologia e/ou sintomatologia) tal como a diminuição da gravidade da doença. Terapias de Combinação

[00164] Um ou mais agentes farmacêuticos adicionais, tais como, por exemplo, agentes quimioterapêuticos, agentes anti-inflamatórios, esteroides, imunossupressores, bem como Bcr-Abl, Flt-3, inibidores de quinase RAF e FAK, tais como, por exemplo, aqueles descritos no documento WO 2006/056399, o qual é aqui incorporado por referência na sua totalidade, ou outros agentes podem ser usados em combinação com as formas de dosagens aqui descritos para o tratamento de doenças associadas a JAK, distúrbios ou condições. Um ou mais agentes farmacêuticos adicionais podem ser administrados a um paciente simultaneamente ou sequencialmente.

[00165] Exemplos de quimioterapêuticos incluem inibidores de proteossoma (por exemplo, bortezomib), talidomida, revlimid, e agentes que danificam o DNA, tais como melfalano, doxorrubicina, ciclofosfamida, vincristina, etoposida, carmustina e semelhantes.

[00166] Esteroides de exemplo incluem coriticosteroides, como a dexametasona ou prednisona.

[00167] Exemplos de inibidores de Bcr-Abl incluem os compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, dos gêneros e espécies descritos na Pat. US N° 5.521.184, WO 04/005281 e US N° de Série 60/578.491, todos os quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

[00168] Exemplos de inibidores de Flt-3 adequados incluem os compostos e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, tal como divulgado no documento WO 03/037347, WO 03/099771, WO 04/046120 e, todos os quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

[00169] Inibidores da RAF adequados de exemplo incluem compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, tais como os descritos em WO 00/09495 e WO 05/028444, ambos os quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

[00170] Inibidores de FAK adequados de exemplo incluem compostos, e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, tal como divulgado no documento WO 04/080980, WO 04/056786, WO 03/024967, WO 01/064655, WO 00/053595, WO 01/014402 e, todos os quais são aqui incorporadas por referência na sua totalidade.

[00171] Em algumas modalidades, uma ou mais das formas de dosagens da invenção podem ser utilizados em combinação com um ou mais de outros inibidores da quinase, incluindo imatinibe, particularmente para o tratamento de doentes resistentes a imatinibe ou outros inibidores de quinase.

[00172] Em algumas modalidades, uma ou mais formas de dosagens da invenção podem ser utilizados em combinação com um agente quimioterapêutico no tratamento do câncer, tal como mieloma múltiplo, e pode melhorar a resposta ao tratamento, em comparação com a resposta a apenas o agente quimioterapêutico, sem exacerbação dos seus efeitos tóxicos. Exemplos de agentes farmacêuticos adicionais utilizados no tratamento de mieloma múltiplo, por exemplo, podem incluir, sem limitação, melfalano, melfalano e prednisona [MP], doxorrubicina, dexametasona e Velcade (bortezomibe). Além disso os agentes adicionais utilizados no tratamento de mieloma múltiplo incluem inibidores da quinase de Bcr-Abl, Flt-3, RAF e FAK. Efeitos aditivos ou sinérgicos são resultados desejáveis de combinar uma forma de dosagem da presente invenção com um agente adicional. Além disso, a resistência de células de mieloma múltiplo para agentes, tais como dexametasona podem ser reversíveis por tratamento com uma forma de dosagem da presente invenção. Os agentes podem ser combinados com os presentes compostos numa forma de dosagem única ou contínua, ou os agentes podem ser administrados simultaneamente ou sequencialmente como formas de dosagem separadas.

[00173] Em algumas modalidades, um corticosteroide tal como a dexametasona é administrada a um paciente em combinação com uma forma de dosagem da invenção, onde a dexametasona é administrada intermitentemente ao contrário de forma contínua.

[00174] Em algumas outras modalidades, as combinações de um ou mais inibidores de JAK da presente invenção com outros agentes terapêuticos podem ser administrados a um paciente antes de, durante e/ou depois de um transplante de medula óssea ou transplante de células estaminais.

[00175] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é acetonida de fluocinolona (Retisert®), ou rimexolona (AL-2178, Vexol, Alcon).

[00176] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é ciclosporina (Restasis®).

[00177] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um corticosteroide. Em algumas modalidades, o corticosteroide é triamcinolona, dexametasona, fluocinolona, cortisona, prednisolona ou flumetolona.

[00178] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é selecionado de entre Dehydrex™ (Holles Labs), Civamide (Opko), hialuronato de sódio (Vismed, Lantibio/TRB Chemedia), ciclosporina (ST-603, Sirion Therapeutics), ARG101 (T) (testosterona, Argentis), AGR1012 (P) (Argentis), Ecabet de sódio (Senju-Ista), gefarnato (Santen), 15-(s)ácido -hidroxieicosatetraenóico (15(s)-HETE), cevilemine, doxiciclina (Alty-0501, alacrity), minociclina, iDestrin™ (NP50301, Nascente Pharmaceuticals), ciclosporina A (Nova22007, Novagali), oxitetraciclina (duramicina, MOLI1901, Lantibio), CF101 (2S, 3S, 4R, 5R)-3,4-di-hidroxi-5-[6-[(3-iodofenil)metilamino]purin-9-il]-N- metil-2-oxolano-carbamilo, Can-Fite Biopharma), voclosporin (LX212 ou LX214, Lux Biosciences), ARG103 (Agentis), RX -10045 (analógico resolvin sintética, Resolvyx), DYN15 (Dyanmis Therapeutics), rivoglitazona (DE011, Daiichi Sanko), TB4 (RegeneRx), OPH-01 (Ophtalmis Monaco), PCS101 (Pericor Science), REV1-31 (Evolutec), Lacritin (Senju), rebamipide (Otsuka-Novartis), OT-551 (otherâ), PAI-2 (Universidade da Pensilvânia e da Universidade de Temple), pilocarpina, tacrolimus, pimecrolimus (AMS981, Novartis), loteprednol etabonato, rituximab, diquafosol tetrassódico ( INS365, Inspire), KLS- 0611 (Kissei Pharmaceuticals), dehidroepiandrosterona, anakinra, efalizumab, micofenolato de sódio, etanercept (Embrel®), hidroxicloroquina, NGX267 (TorreyPines Therapeutics), Actemra, gemcitabina, oxaliplatina, L-asparaginase ou talidomida.

[00179] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um agente antiangiogênico, agonista colinérgico, TRP-1 modulador do receptor, um bloqueador do canal de cálcio, um secretagogo de mucina, MUC1 estimulante, um inibidor da calcineurina, um corticosteroide, um agonista do receptor de P2Y2, um muscarínico agonista do receptor, um inibidor de mTOR, um outro inibidor de JAK, BCR-ABL inibidor de quinase, Flt-3, inibidor de quinase, inibidor de quinase RAF e inibidor de quinase FAK tal como, por exemplo, aqueles descritos no documento WO 2006/056399, o qual é aqui incorporado por referência na sua totalidade. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um derivado de tetraciclina (por exemplo, minociclina ou doxiclina). Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional se liga a FKBP12.

[00180] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é um agente de alquilação de DNA ou agente de ligação cruzada; um anti- metabolito/agente de desmetilação (por exemplo, 5-fluorouracil, capecitabina ou azacitidina); uma terapia anti-hormonal (por exemplo, antagonistas do receptor de hormona, SERM, ou inibidor aromotase); um inibidor mitótico (por exemplo, vincristina ou paclitaxel); uma topoisomerase (I ou II) inibidor (por exemplo, a mitoxantrona e irinotecano); um indutor apoptótico (por exemplo ABT-737); uma terapia de ácido nucleico (por exemplo, anti-sense ou de RNAi); ligantes do receptor nuclear (por exemplo, agonistas e/ou antagonistas: ácido retinoico todo-trans ou bexaroteno); agentes epigenético direcionamento, tais como inibidores da desacetilase de histona (por exemplo, vorinostat), agentes de hipometilação (por exemplo, a decitabina); reguladores de estabilidade da proteína, tais como inibidores de Hsp90, ubiquitina e/ou ubiquitina como conjugar ou desconjugação das moléculas; ou um inibidor de EGFR (erlotinibe).

[00181] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional (s) são gotas para os olhos demulcente (também conhecidos como "lágrimas artificiais"), que incluem, mas não estão limitados a composições que contêm álcool polivinílico, hidroxipropilmetilcelulose, glicerina, polietilenoglicol (por exemplo PEG400), ou carboximetil celulose. As lágrimas artificiais podem ajudar no tratamento do olho seco, compensando a reduzida capacidade de umedecimento e da película lacrimal lubrificante. Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional é uma droga mucolítica, tal como N-acetil-cisteína, que podem interagir com as mucoproteínas e, portanto, para diminuir a viscosidade da película lacrimal.

[00182] Em algumas modalidades, o agente terapêutico adicional inclui um antibiótico, antiviral, antifúngico, anestésico, agentes anti- inflamatórios esteroides, incluindo e anti-inflamatórios não-esteroides, e agentes antialérgicos. Exemplos de medicamentos adequados incluem aminoglicosídeos tais como amicacina, gentamicina, tobramicina, estreptomicina, netilmicina, e canamicina; fluoroquinolonas, como a ciprofloxacina, norfloxacina, ofloxacina, trovafloxacina, lomefloxacina, levofloxacina e enoxacina; naftiridina; sulfonamidas; polimixina; cloranfenicol; neomicina; paramomicina; colistimetato; bacitracina; vancomicina; tetraciclinas; rifampina e seus derivados ("rifampins"); cicloserina; beta-lactâmicos; cefalosporinas; anfotericinas; fluconazol; flucitosina; natamicina; miconazol; cetoconazole; corticosteroides; diclofenaco; flurbiprofeno; cetorolaco; suprofeno; cromolino; lodoxamida; levocabastina; nafazolina; antazolina; feniramina; ou antibiótico azalido.

[00183] É adicionalmente apreciado que certas características da invenção, que são, para clareza, descritas no contexto das modalidades separadas, podem também ser fornecidos em combinação numa única modalidade (como se as modalidades da especificação são escritas como reivindicações dependentes múltiplas). Exemplo 1. Preparação de formulações de liberação sustentada

[00184] Pastilhas de libertação prolongada foram preparadas com os excipientes estando nas quantidades mostradas na tabela abaixo. O protocolo A foi utilizado para os comprimidos SR1, o protocolo B foi utilizado para os comprimidos SR2, o Protocolo C foi utilizado para os comprimidos SR3 e para os comprimidos SR de 25 mg, e Protocolo D foi utilizado para os comprimidos SR4. Protocolo A:

[00185] Etapa 1. Peneire individualmente o sal de ácido adípico do composto da Fórmula I, celulose microcristalina, (Methocel K100 hypromelloses LV e Methocel K4M), e mono-hidrato de lactose.

[00186] Etapa 2. Transfira o material peneirado da Etapa 1 num misturador adequado e mistura.

[00187] Etapa 3. Transfira a mistura da Etapa 2 para um granulador adequado e mistura.

[00188] Etapa 4. Adicione água purificada enquanto se mistura.

[00189] Etapa 5. Transfira os grânulos da Etapa 4 num secador adequado e seco até que LOD seja inferior a 3%.

[00190] Etapa 6. Peneire os grânulos da Etapa 5.

[00191] Etapa 7. Misture o Estearato de Magnésio peneirado com os grânulos da Etapa 6 num misturador adequado.

[00192] Etapa 8. Comprima a mistura final da Etapa 7 em uma prensa de comprimidos rotativa adequada. Protocolo B:

[00193] Etapa 1. Individualmente rastreie o sal de ácido adípico do composto da Fórmula I, celulose microcristalina, hipromelose e amido pré-gelatinizado.

[00194] Etapa 2. Transfira o material crivado da Etapa 1 num misturador adequado e misture.

[00195] Etapa 3. Transfira a mistura da Etapa 2 para um granulador adequado e misture.

[00196] Etapa 4. Adicione água purificada enquanto se mistura.

[00197] Etapa 5. Transfira os grânulos da Etapa 4 num secador adequado e seque até que LOD seja inferior a 3%.

[00198] Etapa 6. Peneire os grânulos da Etapa 5.

[00199] Etapa 7. Rastreie individualmente Polyox, hidroxitolueno butilado e dióxido de silicone coloidal.

[00200] Etapa 8. Transfira os grânulos da Etapa 6 e Etapa 7 do material em um misturador apropriado e misture.

[00201] Etapa 9. Adicione o Estearato de Magnésio crivado com o material na Etapa 8 e continue misturando.

[00202] Etapa 10. Comprima a mistura final da Etapa 9 em uma prensa de comprimidos rotativa adequada. Protocolo C:

[00203] Etapa 1. Rastreie individualmente a lactose mono-hidratada, o sal de ácido adípico do composto da Fórmula I, celulose microcristalina e hipromeloses através de um crivo apropriado.

[00204] Etapa 2. Transfira o material crivado da Etapa 1 num misturador adequado e mistura.

[00205] Etapa 3. Transfira a mistura da Etapa 2 para um granulador adequado e mistura.

[00206] Etapa 4. Adicione água purificada enquanto se mistura.

[00207] Etapa 5. Peneire os grânulos úmidos através de uma malha adequada.

[00208] Etapa 6. Transfira os grânulos da Etapa 5 num secador adequado e seque até que LOD seja inferior a 3%.

[00209] Etapa 7. Moa os grânulos da Etapa 6.

[00210] Etapa 8. Misture o Estearato de Magnésio peneirado com os grânulos da Etapa 7 num misturador adequado.

[00211] Etapa 9. Comprima a mistura final da Etapa 8 em uma prensa de comprimidos rotativa adequada. Protocolo D:

[00212] Etapa 1. Peneire individualmente o amido pré-gelatinizado, o sal de ácido adípico do composto da Fórmula I, hipromelose, e uma porção de celulose microcristalina necessária através de uma malha adequada.

[00213] Etapa 2. Transfira o material crivado da Etapa 1 num misturador adequado e misture.

[00214] Etapa 3. Transfira a mistura da Etapa 2 para um granulador adequado e misture.

[00215] Etapa 4. Adicione água purificada enquanto se mistura.

[00216] Etapa 5. Peneire os grânulos úmidos através de uma malha adequada.

[00217] Etapa 6. Transfira os grânulos da Etapa 5 num secador adequado e seque até que LOD seja inferior a 3%.

[00218] Etapa 7. Mo Peneire os grânulos da Etapa 6.

[00219] Etapa 8. Peneire a parte restante da celulose microcristalina e metade de bicarbonato de sódio.

[00220] Etapa 9. Transfira os grânulos moídos a partir da Etapa 7 e dos materiais crivados da Etapa 8 em um misturador apropriado e mistura.

[00221] Etapa 10. Peneire a porção restante de bicarbonato de sódio e misture com mistura na Etapa 9.

[00222] Etapa 11. Peneire o estearato de magnésio e misture com mistura na Etapa 10.

[00223] Etapa 12. Comprima a mistura final da Etapa 11 em uma prensa de comprimidos rotativa adequada. SR1: Composição de 100 mg Comprimidos de Liberação Sustentada a fator de conversão de sal de adipato a base livre é 0,7911 b Adicionado após granulação c Removido durante o processamento SR2: Composição de 100 mg Comprimidos de Liberação Sustentada a fator de conversão de sal de adipato a base livre é 0,7911 b Adicionado após granulação c Removido durante o processamento SR3 (100 mg): Composição de 100 mg Comprimidos de Liberação Sustentada a fator de conversão de sal de adipato a base livre é 0,7911 b Adicionado após granulação c Removido durante o processamento SR4: Composição de 100 mg Comprimidos de Liberação Sustentada a fator de conversão de sal de adipato a base livre é 0,7911 b Adicionado após granulação c Removido durante o processamento d Parcial adicionado antes e depois da granulação parcial adicionada 25mg SR: Composição de 25 mg Comprimidos de Liberação Sustentada a fator de conversão de sal de adipato a base livre é 0,7911 b Adicionado após granulação c Removido durante o processamento Exemplo 2. Preparação da Formulação IR de o composto da Fórmula I

[00224] A formulação de IR utilizada nos estudos no Exemplo 3 foi preparada como se 50 mg de cápsulas com a composição mostrada na tabela abaixo de acordo com o protocolo E abaixo.

Protocolo E:

[00225] Etapa 1. Pré-misture a quantidade necessária de sal de ácido adípico do composto da Fórmula I e uma quantidade aproximadamente igual de celulose microcristalina silicificada (SMCC).

[00226] Etapa 2. Passe a mistura da Etapa 1 através de uma malha adequada (por exemplo 40 de malha).

[00227] Etapa 3. Peneire o restante SMCC através da mesma malha usada na Etapa 2.

[00228] Etapa 4. Misture o SMCC peneirado a partir da Etapa 3, juntamente com a mistura da Etapa 2 num misturador adequado (por exemplo misturador Turbula) durante aproximadamente 5 minutos.

[00229] Etapa 5. Encha a mistura em cápsulas de peso de preenchimento desejado. * Sal de ácido adípico do composto de Fórmula I com um fator de conversão de sal de 0,7911 Exemplo 3. Estudo de Biodisponibilidade Relativa de Liberação Prolongada Formas de Dosagem

[00230] Um total de 72 indivíduos adultos saudáveis foram inscritos em 6 grupos (12 indivíduos por grupo) e randomizados para sequências de tratamento dentro de cada grupo de acordo com um programa de distribuição aleatória. Todos os tratamentos foram administrações de dose única do composto da Fórmula I. Houve um período de lavagem de 7 dias, entre os períodos de tratamento.

[00231] As formulações SR1, SR2, SR3 e SR4 foram avaliadas em grupos 1, grupo 2, Grupo 3, e Grupo 4, respectivamente (ver Exemplo 1 para SR1, SR2, SR3, SR4, e comprimidos de 25 mg SR usado no estudo). Os indivíduos receberam o IR e tratamentos SR de acordo com um estudo cruzado de 3 vias:

[00232] Tratamento A: 300 mg (6 x 50 mg cápsula) formulação de IR do composto da Fórmula I administrados oralmente depois de um jejum noturno de pelo menos 10 horas.

[00233] Tratamento B: 300 mg (3 x comprimidos de 100 mg) formulação SR do composto da Fórmula I administrado por via oral, após uma noite de jejum de pelo menos 10 horas.

[00234] Tratamento C: 300 mg (3 x 100 mg) formulação SR do composto de Fórmula I administrados oralmente após uma refeição rica em gorduras.

[00235] Os sujeitos em Grupo 5 receberam os seguintes tratamentos em um estudo cruzado de 2 vias:

[00236] Tratamento A: 300 mg (3 x comprimidos de 100 mg do composto da Fórmula I) SR3 administrado oralmente depois de um jejum noturno de pelo menos 10 horas.

[00237] Tratamento B: 300 mg (3 x comprimidos de 100 mg do composto da Fórmula I) SR3 administrados por via oral, depois de uma refeição de gordura média.

[00238] Os sujeitos em Grupo 6 receberam os seguintes tratamentos em um projeto de cruzamento de 3 vias:

[00239] Tratamento A: 50 mg (2 x comprimidos de 25 mg do composto com a Fórmula I (comprimidos de 25 mg de SR Exemplo 1)), administrado por via oral, após uma noite de jejum de pelo menos 10 horas.

[00240] Tratamento B: 50 mg (2 x comprimidos de 25 mg do composto com a Fórmula I (25 mg a partir de comprimidos SR Exemplo 1)), administrado por via oral, após uma refeição rica em gorduras.

[00241] Tratamento C: 100 mg (1 x comprimidos de 100 mg) SR3 administrado oralmente depois de um jejum noturno de pelo menos 10 horas.

[00242] As amostras de sangue para determinação das modalidades plasmáticas do composto da Fórmula I foram coletados usando a lavanda de tubos superiores (K2EDTA) Vacutainer®, a 0, 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 36, e 48 horas após a dose.

[00243] As amostras de plasma foram analisadas por um validado método de GLP, LC/MS/MS com um intervalo linear de 5,0 a 5000 nM. A Tabela 1 resume a exatidão e precisão (CV%) das amostras de controle de qualidade de ensaio durante a análise das amostras de plasma a partir deste estudo. Tabela 1: Exatidão e precisão das Amostras de Controle de Qualidade do Ensaio do Plasma % CV = percentagem do coeficiente de variabilidade; QC controle = qualidade; Theo = concentração teórica ou nominal.

[00244] Para a análise farmacocinética, utilizaram-se os tempos reais de coleta de amostra. Para qualquer amostra com tempo de coleção real em falta, foi utilizado o horário programado, desde que não houve desvio de protocolo observado para a coleta dessas amostras.

[00245] Métodos não compartimentais padrão PK foram utilizados para analisar os dados para a concentração no plasma do composto da Fórmula utilizando WinNonlin Phoenix versão 6.0 (Pharsight Corporation, Mountain View, CA). Assim, Cmax e Tmax foram tirados diretamente dos dados de concentração de plasma observadas. A constante de velocidade disposição em fase terminal (Xz) foi estimada por meio de uma regressão log-linear dos dados de concentração na fase de disposição terminal, e T/ foi estimada como ln(2) ZAz. AUCo- t foi estimado utilizando a regra linear trapezoidal para concentrações crescentes e do Estado log-trapezoidal para diminuir as concentrações, e o AUC total deo-z foi calculado como AUCo- t +Ct/Àz. O apuramento da dose oral (CLZF) foi estimado em DoseZAUCo-», e o volume de fase do terminal de distribuição (VzZF) foi estimado como a DoseZ[AUCo-»*Àz].

[00246] O log-transformado Cmax e os valores de AUC (após normalização da dose, em que as doses foram diferentes) foram comparados entre os tratamentos de dosagem em jejum e alimentados, e entre os tratamentos de dosagem SR e IR utilizando um cruzamento ANOVA (fator fixo = tratamento, sequência e período, efeito aleatório = sujeito (sequência)). As razões médias geométricas ajustadas de Cmax e AUC entre os tratamentos (referência = IR ou administração em jejum de SR) e os respectivos intervalos de confiança de 90% (CIs) foram determinados. Além disso, a correlação entre o efeito dos alimentos observados de uma refeição rica em gorduras sobre a AUCo-/ e a biodisponibilidade relativa das formulações de SR (com referência à cápsula IR) foram explorados por um plot quantil usando os dados de todos os indivíduos que completaram o Tratamento A, B, e C em grupos de 1 a 4. A análise estatística foi realizada utilizando Phoenix WinNonlin versão 6.0.

[00247] A FIG. 1 apresenta as concentrações plasmáticas do composto de Fórmula I (média ± SE) para os sujeitos em grupos de 1 a 4 seguintes do Tratamento A (administração IR de 300 mg no estado em jejum) Tratamento B (administração de SR de 300 mg no estado em jejum), e tratamento C (administração SR de 300 mg com uma refeição rica em gordura). A FIG. 2 compara o efeito de uma refeição rica em gordura e refeição de gordura média no perfil farmacocinético médio após uma dose única de 300 mg (3 x 100 mg) a administração do composto da Fórmula I comprimidos SR3. A FIG. 3 apresenta as concentrações plasmáticas do composto da Fórmula I (média ± SE) para os sujeitos em grupo 6 a seguir ao Tratamento A (2 x 25 mg de administração SR comprimido em jejum) Tratamento B (2 x 25 mg Comprimido SR com uma refeição rica em gordura), e Tratamento C (1 x 100 mg administração SR3 em jejum).

[00248] Tabelas 2A, 2B, 3A e 3B resumir parâmetros farmacocinéticos médios para os sujeitos em grupos de 1 a 4, a biodisponibilidade relativa (= IR cápsula de referência) e do efeito dos alimentos (refeição rica em gorduras) para os comprimidos de 100 mg força SR1-SR4. Tabelas 4A e 4B resumem os parâmetros médios PK para sujeitos em Grupo 5, e efeito dos alimentos (refeição de gordura média) para o 100 mg dosagem do comprimido SR3. Tabelas 5A e 5B resumem parâmetros farmacocinéticos médios para indivíduos na Grupo 6, a biodisponibilidade da dose normalizada relativa (referência = 100 mg comprimido SR3), e o efeito dos alimentos (refeição rica em gorduras) para o SR 25 mg comprimido. Os valores dos parâmetros PK são médios ± DP e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (90% intervalo de confiança) é relatado. Os valores dos parâmetros PK são médios ± DP e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (Intervalo de confiança de 90%) é relatado. Os valores dos parâmetros farmacocinéticos são médios SD ± e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (Intervalo de confiança de 90%) é relatado. Os valores dos parâmetros farmacocinéticos são médios SD ± e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (Intervalo de confiança de 90%) é relatado. NC = não calculado por causa de um número significativo de descasamento Tmais recente dentro dos sujeitos entre tratamentos; NR = não relatado, pois um número significativo de C12h valores foram BQL. Os valores dos parâmetros PK são médios ± DP e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (intervalo de confiança de 90%) é relatado. i) A comparação estatística foi dose normalizada. NC = não calculado por causa de um número significativo de descasamento Tmais recente dentro dos sujeitos entre tratamentos; NR = não relatado, pois um número significativo de C12h valores foram BQL. Os valores dos parâmetros PK são médios ± DP e média geométrica com exceção de Tmax, onde mediano (90% intervalo de confiança) é relatado. i) A comparação estatística foi dose normalizada.

[00249] Os perfis farmacocinéticos médios após a administração de dose única em jejum, de 300 mg de cápsulas de IR foram semelhantes entre os sujeitos em grupos de 1 a 4 (FIG. 1). Em comparação com a formulação de IR, a seguir à administração de dose única em jejum das formulações SR1-SR4 (3 × 100 mg, comprimidos), o plasma observado de tmax valores medianos foram moderadamente prolongados (0,3 a 1,5 horas), com média significativamente reduzida Cmax (valores dos limites superiores do CI de 90% para as relações médias geométricas Cmax foram <30%), sugerindo a diminuição da taxa de absorção do composto da Fórmula I para os comprimidos SR. A média aparente disposição t½ observada na fase terminal foi significativamente mais longa, que varia de 7,3 a 11 horas para SR1-SR4, em comparação com cerca de 2 horas para as cápsulas de IR, indicando que a eliminação sistêmica do composto da Fórmula I era provável taxa limitada por sua absorção, que foi sustentado na fase de disposição terminal. Como resultado do menor Cmax e maior disposição t½, as relações Cmax/ C12h foram significativamente menores para os comprimidos SR em comparação com a cápsula de IR para os mesmos sujeitos estudados. A média geométrica das relações Cmax/C12h foram 11,6-, 8,6-, 19,3-, e 8,9- vezes, respectivamente, para SR1, SR2, SR3, comprimidos e SR4, em comparação com o 112- a 162 vezes para as cápsulas IR administradas no estado de jejum.

[00250] Para a administração no estado de jejum, os 4 comprimidos SR apresentaram redução de biodisponibilidade relativa em comparação com a cápsula IR dosada nos mesmos indivíduos. As relações médias das porcentagens geométricas (IC 90%) de Cmax foram 14,2% (11,4% -17,5%), 8,9% (6,7% -11,9%), 22,3% (17,4% -28,6%) e 9,0% (6,8% -11,9%) para SR1, SR2, SR3, e SR4, respectivamente. As relações médias por cento geométrico (IC 90%) de AUCo-« foram de 36,1% (33,3% -39,2%), 26,0% (21,6% -31,3%), 47,5% (41,9% 53,9%), e 28,5% (23,2% -35,1%) para SR1, SR2, SR3, e SR4, respectivamente. SR3 e SR1 demonstrou a melhor e segunda melhor biodisponibilidade relativa, respectivamente, entre as formulações testadas SR.

[00251] Dosado em jejum, a variabilidade intermedida pelo coeficiente percentual de variação (CV%) na exposição plasmática foi significativamente maior para a formulação de retenção gástrica SR4, mas comparável entre os 3 comprimidos SR regulares destinados para a liberação intestinal. O intersujeito CV% para o comprimido SR1 de 100 mg foi de 39% e 33% para Cmax e AUCO-«, respectivamente. O intersujeito CV% para o comprimido SR2 de 100 mg foi de 50% e 37% para Cmax e AUCO-«, respectivamente. O intersujeito CV% para o comprimido SR3 de 100 mg foi de 43% e 29% para Cmax e AUCO-«, respectivamente. O intersujeito CV% para o comprimido SR4 de 1oo mg foi de 83% e 73% para Cmax e AUC0-», respectivamente. Reunindo todos os sujeitos em grupos 1-5 (n = 59) que foram administrados 300 mg IR em jejum, o intersujeito CV% foi de 49% e 39% para Cmax e AUC0-», respectivamente, comparável aos valores observados para a% CV SR1, SR2 e SR3.

[00252] Um efeito alimentar positivo foi observado para todas as formulações SR estudadas a 300 mg (3 x 100 mg) no Nível de Dosagem. Administrado após uma refeição rica em gordura, média geométrica de Cmax e AUCü-« valores aumentados de 88% e 81%, respectivamente, para SR1; por 158% e 118%, respectivamente; para SR2; por 91% e 45%; respectivamente; para SR3; e por 93% e 115%; respectivamente; para SR4. O efeito dos alimentos foi moderado por meio de uma refeição de gordura, em comparação com uma refeição rica em gorduras, como sugerido pelos dados para SR3 em Grupo 5. Para SR3, Cmax e AUC0-» valores aumentados em 46% e 17%, respectivamente, quando foi administrada após uma refeição de gordura de forma padronizada. A administração com alimentos não alterou significativamente a CV% do intersujeito no composto da Fórmula I para exposição do plasma SR1, SR2, SR3 e que são formulações de SR concebidas para uma liberação intra-intestinal. Para SR4, que é uma formulação SR de retenção gástrica, o intersujeito CV% em exposições de plasma pareceu ser significativamente reduzida com uma refeição rica em gordura concomitante.

[00253] Este estudo também explorou a biodisponibilidade relativa normalizada da dose do comprimido SR de 25 mg em referência ao comprimido SR3 de 100 mg. Em relação aos sujeitos em Grupo 6, a dose normalizada de Cmax e AUC0-«da relação média da porcentagem geométrica para o tratamento SR3 de 2 x 25 mg foi de 59% e 66%, respectivamente, versus a 1 x 100 mg da administração SR3 no estado de jejum. No entanto, devido à relação da exposição da dose supralinear para o composto da Fórmula I, a biodisponibilidade relativa do comprimido SR de 25 mg pode ser subestimada. Para a dose de SR 2 x 25 mg, uma refeição com elevado teor de gordura aumentou composto da Fórmula I de Cmax e AUC0-» por 60% e 58%, respectivamente.

[00254] Para as quatro formulações de SR avaliadas, a disposição aparente observada t y2 foi comparável, e as relações Cmax/ Ci2h de uma administração de dose única em jejum (que é utilizado como um proxy para relação de P/T de administração duas vezes por dia) foram semelhantes entre SR1, SR2 e SR4 (~ 10 vezes) e moderadamente superior para SR3 (~ 20 vezes). No geral, todas as 4 SR formulações demonstraram um perfil significativamente mais plano de comparação PK da cápsula IV, encontrando um objetivo importante para a liberação sustentada. A biodisponibilidade de medicamentos administrados por via oral pode ser definida pela velocidade e extensão da absorção da droga para a circulação sistêmica. Uma redução da taxa de absorção da droga através da limitação da taxa de liberação da droga a partir de produtos de droga é um requisito de concepção em formulações da liberação prolongada. Portanto, para as formulações de SR, a extensão da absorção do composto da Fórmula I, tal como medida pelo AUCo-« plasmático é utilizado como o ponto final primário para avaliar a biodisponibilidade relativa. Assim, a biodisponibilidade relativa média é semelhante entre SR2 (26%) e SR4 (29%), que era ligeiramente mais baixa do que a de SR1 (36%). A melhor biodisponibilidade relativa foi observada para SR3 (48%). Os resultados estão em linha com o perfil in vitro de dissolução obtidos antes de realizar este estudo.

[00255] Houve uma correlação inversa entre o aparente efeito de comida e biodisponibilidade relativa para as formulações SR. Em média, doseados com uma refeição rica em gorduras, o efeito dos alimentos medidos pelo aumento na AUCo—« foi maior para o SR2 (118%) e SR4 (115%), que foi menor do que para SR1 (81%). O efeito menor dos alimentos foi observado por SR3 (45%). Essa correlação também foi evidente quando os dados de todos os sujeitos foram reunidos. Um plot quantil usando os dados individuais reunidos (divididos em 5 bin com 9 indivíduos por bin) sugere que o efeito dos alimentos seja mais significativo (> aumento de 2 vezes na AUC) para os indivíduos com biodisponibilidade relativa inferior a 35%, independentemente da formulação. O efeito da alimentação foi moderado (~ 50% ou menos aumento na AUC) para os indivíduos com biodisponibilidade relativa superior a 40%, independentemente da formulação. SR3 entregou uma biodisponibilidade média relativa de 48% e é suscetível de ser associada a um efeito alimentar moderado. Na verdade, quando o comprimido SR3 (3 x 100 mg) foi administrado com uma refeição de gordura média (o que é mais uma dieta diária típica), o aumento observado na média geométrica da AUCo-« foi de apenas 17%, sugerindo que esta formulação pode ser administrado independentemente média ou refeições de baixo teor de gordura. Do ponto de vista de evitar o efeito alimentar significativo, SR3 é superior a outras formulações. Exemplo 4. Os resultados clínicos em Fase 2a em doentes com artrite reumatoide ativa (RA)

[00256] Uma parte inicial de 28 dias o estudo foi realizado a fim de selecionar doses avançar, orientando a seleção da dose para a segunda parte do estudo três meses. Parte 2 do estudo foi randomizado, duplo- cego, controlado por placebo (patrocinado não blindado) com o tratamento por 84 dias. Sessenta indivíduos a serem aleatorizados, utilizando a mesma população como na Parte 1: grupo único, cinco grupos de tratamento paralelas, 12 sujeitos cada: 100 mg SR3 comprimidos BID; 300 mg (3 x 100 mg SR3 comprimidos) QD; 200 mg (2 x 100 mg SR3 comprimidos) BID; 600 mg (6 x 100 mg SR3 comprimidos) QD; e placebo. Dados provisórios foram submetidos a ACR (American College of Rheumatology) 2013 (n = 40 indivíduos que completaram dia 84). As pontuações ACR aos 3 meses são mostrados na Tabela 6. As pontuações da ACR para 600 mg QD não têm precedentes em comparação com outros inibidores de JAK que são aprovados para o tratamento da RA. Por exemplo, o produto aprovado para o citrato tofacitinibe (5 mg BID) mostrou índices muito inferiores aos 3 meses ACR: 59% (ACR 20), 31% (ACR 50), e 15% (ACR 70) (Tabela 5 de XELJANZ® - tofacitinibe comprimido citrato-rótulo).

[00257] A porcentagem de alteração a partir da linha de base para a hemoglobina também foi estudada para cada um dos regimes de dosagem (FIG. 4). Como pode ser visto na FIG. 4, a dose de 200 mg BID mostrou uma queda de distância da linha de base em relação às demais doses que tendiam a ficar perto dos níveis de placebo. Por exemplo, a dose de 600 mg QD não mostrou a mesma tendência para baixo, como mostrado para a dose BID. No entanto, como pode ser visto na Tabela 6, a dosagem de uma vez ao dia (600 mg QD) não compromete a eficácia em comparação com as doses BID. Isto indica que a dosagem de uma vez ao dia (tal como 600 mg QD) pode alcançar uma eficácia máxima, sem induzir efeitos colaterais, tais anemia. Conforme mostrado na FIG. 4 e Tabela 6, a dose 600 mg QD tem eficácia robusts com a mudança trivial dos níveis de hemoglobina.

[00258] Acredita-se que este perfil de efeito colateral/eficácia pode ser devido à dose QD alcançando a sinalização JAK1 máxima (ligada a eficácia) com baixa inibição de JAK2 na calha, tal como a sinalização de JAK2 está ligada a hematopoiese. Esta hipótese é suportada pelo PK derivado de JAK1 (IL-6) e dados de inibição JAK2 (TPO) para o composto da Fórmula em várias doses (Tabela 7). Em particular, a dose de QD 600 mg mostrou média semelhante a inibição IL-6 para as doses BID 200 mg BID e 400 mg (61% versus 64% e 69%), mas inferior a inibição da calha de TPO em comparação com a de 200 mg BID e 400 doses BID mg (4% versus 13% e 16%). A calha de Inibição IL-6 para a dose de 600 mg QD, também é menor do que a calha de IL-6 para a inibição de 200 mg BID e 400 mg de doses BID, o que sugere que pode haver uma redução na dose de infecção do QD. Exemplo 5. Os resultados clínicos em pacientes com Psoríase em Placas

[00259] Um estudo duplo-cego (patrocinador não cego), estudo do placebo controlado randomizado foi realizado em cerca de 48 indivíduos tratados durante 28 dias. Os requisitos de elegibilidade incluíram: psoríase em placas ativa durante pelo menos 6 meses no rastreio; área de superfície corporal (BSA) da psoríase em placas de > 5%; área de psoríase e índice de gravidade (PASI) pontuação de > 5; avaliação global do médico estático (sPGA) pontuação de > 3; resposta inadequada às terapias tópicas; design inovador que permite um progresso rápido entre as doses, com avaliação conservadora da segurança. Quatro grupos de doses escalonados de 12 indivíduos cada (9 ativas e 3 PBO) progredindo a partir de 100 mg QD para 200 mg QD para 200 mg BID e 600 mg QD. Uma vez que o quarto sujeito (bloco de 3 ativo 1 PBO) completou administração de 28 dias sem um grau 3 ou superior AE, o próximo grupo de 12 indivíduos iniciaram o tratamento com a próxima dose mais elevada; enquanto os primeiros 4 indivíduos deste grupo são tratados durante 28 dias, o primeiro grupo é preenchido 60 indivíduos com psoríase moderada a grave foram randomizados. Havia cinco grupos de tratamento: placebo, 100 mg QD, 200 mg QD, 200 mg BID e 600 mg QD. Um método sequencial de recrutamento foi utilizado, aumentando a partir da dose mais baixa para a mais alta, após a conclusão de cada de 28 dias durante os primeiros quatro pacientes em que a dose anterior. Os resultados aos 28 dias são mostrados na Tabela 8 (PASI 50 é Área de Psoríase e Índice de Gravidade). Esta pontuação PASI 50 de 81,8% para a dose de 600 mg QD não tem precedentes em comparação com outros inibidores de JAK que estão em desenvolvimento para o tratamento de psoríase. Por exemplo, 5 mg tofacitinibe (também conhecido como tasocitinibe) mostrou menor pontuação PASI 50 de 65,3% em 12 semanas (publicada em http://press.pfizer.com on 10/7/2010). A dose de 5 mg tofacitinibe é o nível de dosagem aprovado para a RA por razões de segurança nos EUA. Exemplo 6. Estudo da Fase Label II Aberta em Pacientes com Mielofibrose

[00260] Neste estudo, os pacientes com idade > 18 anos, um diagnóstico de mielofibrose primária (PMF) ou pós-policitemia vera MF ou trombocitemia essencial pós-MF (JAK2V617F estado de mutação positiva ou negativa), contagem de plaquetas > 50 x 109/L, hemoglobina níveis > 8,0 g/dL (transfusões permitido para alcançar esses níveis), intermediário-1 ou superior por critérios DIPSS, e baço palpável ou esplenectomia anterior foram matriculados. Três grupos de doses diferentes foram avaliados: (1) comprimidos SR3 de 100 mg BID) (2) 200 mg (2 x 100 mg de comprimidos de SR3) BID; e (3) 600 mg (6 x 100 mg de comprimidos de 100 mg) QD. A FIG. 5(a)-(b) mostram resultados provisórios com relação a proporção de indivíduos com redução > 50% na pontuação total de sintomas (TSS) em cada grupo da dose pela mielofibrose Sintoma Formulário de Avaliação (MFSAF) v3.0 diário eletrônico modificado na semana 12 em comparação com os valores basais (O v3.0 MFSAF modificado compreende 19 questões que avaliam sintomas relacionados com MF em uma escala de 0 (ausente) a 10 (pior que se possa imaginar)). A FIG. 5(a) mostra a porcentagem de doentes com uma redução > 50% em TSS na semana 12 por grupo da dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD) (doentes que interromperam antes da visita da semana 12 foram considerados não respondedores). A FIG. 5(b) mostra a variação percentual em TSS da linha de base na semana 12 por grupo da dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD) (apenas pacientes com início do estudo e 12 semanas de dados foram incluídas). A FIG. 6(a) mostra os níveis médios de hemoglobina (g/dL) ao longo do tempo por grupo da dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD) (resultados provisórios de estudo para todos os pacientes). A FIG. 6(b) mostra os níveis médios de hemoglobina (g/dL) ao longo do tempo por grupo de dose (100 mg BID, 200 mg BID, e 600 mg QD) durante 48 semanas. A FIG. 6(c) ilustra os níveis médios de hemoglobina (g/dL) ao longo do tempo por grupo de dose às 48 semanas como uma média de três grupos de dose em comparação com os indivíduos que receberam doses de placebo ou ruxolitinibe (ruxolitinibe foi dosado de acordo com o label por Jakafi®). Os dados mostram um aumento dos níveis de hemoglobina para a dose de 600 mg QD. Finalmente, a Tabela 9 abaixo mostra os resultados de laboratório de hematologia provisórias (novo e agravamento) para cada grupo da dose. Tabela 9a mostra os resultados de laboratório de hematologia (novos e agravamento) para cada grupo da dose após longa exposição. O evento n/N% 100 mg BID (N=10) 200 mg BID (N=45) 600 mg QD (N=32) Dias de exposição, mediano (intervalo) 102,0 (23,519) 254,0 (22,535) 192,0 (28,343) Anemia, Grau 3 3/10 (30,0) 19/45 (42,2) 8/32 (25,0) Trombocitopenia Grau 3 Grau 4 4/10 (40,0) 0/10 (0,0) 13/45 (28,9) 3/45 (6,7) 4/32 (12,5) 1/32 (3,1) Exemplo A: In vitro Análise de quinase JAK

[00261] O composto da Fórmula I aqui foi testado quanto à atividade inibidora de alvos de JAK de acordo com a análise in vitro a seguir, descrita em Park et al., Analytical Biochemistry 1999,269, 94-104. Os domínios catalíticos da JAK1 humana (a.a. 837-1142) e JAK2 (a.a. 8281132) com uma marcação His N-terminal foram expressos utilizando baculovírus em células de inseto e purificados. A atividade catalítica de JAK1 e JAK2 foi testada através da medição da fosforilação de um peptídeo biotinilado. O peptídeo fosforilado foi detectado através de fluorescência determinada por tempo homogêneo (homogenous time resolved fluorescence - HTRF). IC50S dos compostos foram medidos para cada quinase nas reações de 40 microL que contêm a enzima, ATP e 500 nM de peptídeo em tampão Tris de 50 mM (pH 7,8) com NaCl de 100 mM, DTT de 5 mM e 0,1 mg/ml (0,01%) de BSA. Para as medições de 1 mM de IC50, a concentração de ATP nas reações era de 1 mM. As reações foram realizadas à temperatura ambiente durante 1 hora e, em seguida, paradas com 20 μL de EDTA de 45 mM, 300 nM de SA-APC, 6 nM de Eu-PY20 em tampão de análise (Perkin Elmer, Boston, MA). A ligação ao anticorpo marcado com Európio ocorreu durante 40 minutos e o sinal de HTRF foi medido em um leitor de placas Fusion (Perkin Elmer, Boston, MA). O composto da Fórmula I e o sal de ácido adípico tinha um IC50 em JAK1 de < 5 nM (medido em 1 mM de ATP) com uma relação de JAK2/JAK1 de >10 (medida em ATP de 1 mM). Exemplo B: Análises celulares

[00262] As linhas celulares de câncer dependentes de citocinas e, portanto, de transdução de sinal de JAK/STAT, para o crescimento, podem ser colocadas em placas a 6000 células por poço (formato de placa de 96 poços) em RPMI 1640, FBS de 10% e 1 ng/mL da citocina apropriada. Os compostos podem ser adicionados às células em DMSO/meio (concentração final de 0,2% de DMSO) e incubadas durante 72 horas a 37 ° C, 5% de CO2. O efeito do composto sobre a viabilidade celular é avaliado usando a Análise de Viabilidade Celular Luminescente CellTiter-Glo (Promega) seguido pela quantificação TopCount (Perkin Elmer, Boston, MA). Potenciais efeitos fora do alvo dos compostos são medidos em paralelo utilizando uma linha celular não-conduzida por JAK com a mesma leitura de análise. Todos os experimentos são tipicamente realizados em duplicado.

[00263] As linhas celulares acima também podem ser utilizadas para examinar os efeitos dos compostos sobre a fosforilação das quinases de JAK ou substratos à jusante potenciais, como as proteínas de STAT Akt, Shp2 ou Erk. Esses experimentos podem ser realizados seguindo um jejum de citocina durante uma noite, seguido de uma breve pré- incubação com o composto (2 horas ou menos) e estímulo por citocina de aproximadamente 1 hora, ou menos. As proteínas são então extraídas das células e analisadas por técnicas familiares àqueles versados na técnica, incluindo Western blotting e ELISAs utilizando anticorpos que posam diferenciar entre a proteína fosforilada e a proteína total. Tais experimentos podem usar células normais ou com câncer para investigar a atividade dos compostos na biologia de sobrevivência das células do tumor ou em mediadores da doença inflamatória. Por exemplo, no que diz respeito a esta última, as citocinas, como IL-6, IL-12, IL-23 ou IFN, podem ser utilizadas para estimular a ativação de JAK, resultando na fosforilação de proteína (s) de STAT e potencialmente em perfis transcricionais (avaliados pela matriz ou por tecnologia qPCR) ou na produção e/ou secreção de proteínas, como IL- 17. A capacidade dos compostos para inibir os efeitos mediados por citocinas pode ser medida utilizando técnicas comum àqueles versados na técnica.

[00264] Os compostos desta invenção também podem ser testados em modelos celulares concebidos para avaliar a sua potência e atividade contra JAKs mutantes, por exemplo, a mutação JAK2V617F encontrada em distúrbios proliferativos mieloides. Esses experimentos costumam utilizar células dependentes de citocina de linhagem hematológica (por exemplo, BaF/3) em que as quinases de JAK de tipo selvagem ou mutante são expressadas ectopicamente (James, C., et al. Nature 434:1144-1148; Staerk, J., et al. JBC 280:41893-41899). Os pontos finais incluem os efeitos dos compostos sobre a sobrevivência celular, a proliferação e as proteínas JAK, STAT, Akt ou Erk fosforiladas.

[00265] Certos compostos desta invenção podem ser avaliados quanto à sua atividade de inibição da proliferação de células T. Essa análise pode ser considerada uma segunda citocina (ou seja, JAK) conduzida por análise de proliferação ou também uma análise simples de supressão imunológica ou inibição da ativação imunológica. O que se segue é um breve resumo de como tais experimentos podem ser realizados. As células mononucleares periféricas do sangue (PBMCs) são preparadas a partir de amostras de sangue completo humano e utilizando o método de separação de Ficoll Hypaque e as células T (fração 2000) podem ser obtidas a partir de PBMC por elutriação. Células T humanas recentemente isoladas podem ser mantidas em meio de cultivo (RPMI 1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino, 100 U/ml de penicilina, 100 μg/ml de estreptomicina), a uma densidade de 2 x 10 6células/ml a 37 ° C por até 2 dias. Para a análise de proliferação celular estimulada por IL-2, as células T são inicialmente tratadas com fito-hemaglutinina (PHA) com uma concentração final de 10 μg/ml durante 72 h. Após lavar uma vez com PBS, 6000 células/poço são plaqueadas em placas de 96 poços e tratadas com compostos a diferentes concentrações no meio de cultivo na presença de 100 U/mL de IL-2 humano (ProSpec-Tany TechnoGene; Rehovot, Israel). As placas são incubadas a 37 °C durante 72 h e o índice de proliferação é avaliado utilizando reagentes luminescentes CellTiter-Glo seguindo o protocolo sugerido pelo fabricante (Promega; Madison, WI). Exemplo C: Eficácia anti-tumoral in vivo

[00266] Os compostos desta invenção podem ser avaliados em modelos de xenoenxerto de tumor humano em camundongos imunocomprometidos. Por exemplo, uma variante tumorigênica da linha celular de plasmacitoma INA-6 pode ser usada para inocular subcutaneamente camundongos SCID (Burger, R., et al. Hematol J. 2:42-53, 2001). Animais portadores de tumor podem então ser distribuídos aleatoriamente em grupos de tratamento por veículo ou droga e diferentes doses de compostos podem ser administradas por qualquer quantidade de vias usuais, incluindo oral, i.p. ou infusão contínua utilizando bombas implantáveis. O crescimento do tumor é acompanhando ao longo do tempo utilizando compasso. Além disso, as amostras de tumor podem ser coletadas em qualquer altura após o início do tratamento para análise, como descrito acima (Exemplo B), para avaliar os efeitos do composto sobre a atividade de JAK e das vias de sinalização a jusante. Além disso, a seletividade do (s) composto (s) pode ser avaliada utilizando modelos de xenoenxerto de tumor que são conduzidos por outras quinases conhecidas (por exemplo, BCR-ABL), como o modelo de tumor K562. Exemplo D: Teste de Resposta de Hipersensibilidade Retardada ao Contato com a Pele por Murina

[00267] Os compostos desta invenção também podem ser testados quanto à sua eficácia (dos alvos de JAK de inibição) em modelos de teste de hipersensibilidade retardada por murina conduzido por células T. A resposta de hipersensibilidade de tipo retardado por contato de pele por murina (DTH) é considerada um modelo válido de dermatite de contato clínica e outros distúrbios imunológicos mediados por linfócitos T da pele, como psoríase (Immunol Today. 1998 Jan; 19(1):37-44). O murino DTH compartilha várias características com a psoríase, incluindo o infiltrado imunológico, as múltiplas características com psoríase, incluindo o infiltrado imune, o aumento correspondente nas citocinas inflamatórias e a hiperproliferação de queratinócitos. Além disso, muitas classes de agentes que sejam eficazes no tratamento de psoríase na clínica também são inibidores eficazes da resposta de DTH em camundongos (Agents Actions. 1993 Jan;38(1-2):116-21).

[00268] No dia 0 e 1, os camundongos Balb/c são sensibilizados com uma aplicação tópica ao seu abdômen raspado com o antígeno de 2,4,dinitro-fluorobenzeno (DNFB). No dia 5, as orelhas são medidas quanto à espessura utilizando um micrômetro de engenheiro. Esta medição é registada e utilizada como linha de base. Ambas as orelhas dos animais são então desafiadas por uma aplicação tópica de DNFB em um total de 20 μl (10 μl no pavilhão interno e 10 μl no pavilhão auricular externo) a uma concentração de 0,2%. Vinte e quatro a setenta e duas horas depois do desafio, as orelhas são medidas de novo. O tratamento com os compostos de teste é dado ao longo das fases de sensibilização e desafio (dia -1 ao dia 7) ou antes e durante a fase de desafio (geralmente na tarde do dia 4 ao dia 7). O tratamento dos compostos de teste (em diferentes concentrações) é administrado ou sistemicamente ou topicamente (aplicação tópica do tratamento às orelhas). A eficácia dos compostos de teste é indicada por uma redução no inchaço das orelhas em comparação à condição sem o tratamento. Os compostos que causam uma redução de 20% ou mais foram considerados eficazes. Em alguns experimentos, os camundongos são desafiados, mas não sensibilizados (controle negativo).

[00269] O efeito inibitivo (ativação de inibição das vias de JAK-STAT) dos compostos de teste pode ser confirmado por análise imuno- histoquímica. A ativação da (s) via(s) de JAK-STAT resulta na formação e na translocação de fatores de transcrição funcional. Além disso, o influxo de células do sistema imunológico e o aumento da proliferação de queratinócitos também deve proporcionar mudanças no perfil de expressão únicos na orelha que podem ser investigadas e quantificadas. Partes da orelha fixadas com parafina e formalina (coletadas após a fase de desafio no modelo de DTH) são submetidas à análise imuno-histoquímica utilizando um anticorpo que interage especificamente com STAT3 fosforilado (58E12 clone, Cell Signaling Technologies). As orelhas dos ratos são tratadas com compostos de teste, veículo ou dexametasona (um tratamento clinicamente eficaz para psoríase), ou sem tratamento nenhum, no modelo de DTH para comparação. Os compostos de teste e a dexametasona podem produzir alterações de transcrição semelhantes tanto qualitativamente como quantitativamente, e os compostos de teste e a dexametasona podem reduzir o número de células infiltrantes. Tanto a administração sistêmica quanto a tópica dos compostos de teste pode produzir efeitos inibitórios, isto é, redução do número de células que se infiltram e inibição das alterações da transcrição. Exemplo E: Atividade anti-inflamatória in vivo

[00270] Os compostos desta invenção podem ser avaliados em modelos de roedores ou não-roedores concebidos para replicar uma resposta à inflamação simples ou complexa. Por exemplo, os modelos de roedores de artrite podem ser usados para avaliar o potencial terapêutico dos compostos dosados preventivamente ou terapeuticamente. Estes modelos incluem, mas não estão limitados a artrite induzida por colágeno em camundongos ou ratos, artrite induzida por adjuvante em ratos e artrite induzida por anticorpos de colágeno. As doenças autoimunes, incluindo, mas não se limitando a, esclerose múltipla, diabetes tipo I, uveoretinite, tirodite, miastenia gravis, nefropatias de imunoglobulina, miocardite, sensibilização das vias respiratórias (asma), lúpus ou colite, também podem ser usadas para avaliar o potencial terapêutico dos compostos aqui. Estes modelos estão bem estabelecidos na comunidade de pesquisa e são familiares àqueles versados na técnica (Current Protocols in Immunology, Vol 3, Coligan, J.E. et al, Wiley Press.; Methods in Molecular Biology: Vol. 225, Inflammation Protocols., Winyard, P.G. and Willoughby, D.A., Humana Press, 2003.). Exemplo F: Modelos animais para o tratamento de olho seco, uveíte e conjuntivite

[00271] Os agentes podem ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos de olho seco conhecidos pelos versados na técnica, incluindo, sem se limitar a, modelo de glande lacrimal de concanavalina A em coelhos (ConA), modelo de escopolamina em camundongos (subcutânea ou transdérmica), modelo de glande lacrimal em camundongo Botulinumn ou qualquer um dentre uma série de modelos autoimunes de roedores espontâneos que resultam em disfunção de glande ocular (por exemplo, NOD-SCID, MRL/lpr ou NZB/NZW) (Barabino et al., Experimental Eye Research 2004, 79, 613-621 and Schrader et al., Developmental Opthalmology, Karger 2008, 41, 298312, cada um dos quais é incorporado aqui por referência em sua totalidade). Os pontos finais nesses modelos podem incluir histopatologia dos flanges oculares e do olho (córnea, etc.) e possivelmente o teste de Schirmer clássico ou versões modificadas deste (Barabino et al.), os quais medem a produção de lágrimas. A atividade pode ser avaliada pela dosagem através de várias vias de administração (por exemplo, sistêmica ou tópica), que podem iniciar antes ou depois que a doença mensurável existir.

[00272] Os agentes podem ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos de uveíte conhecidos por aqueles versados na técnica. Estes incluem, mas não estão limitados a modelos experimentais de uveíte autoimunes (EAU) e induzida uveíte por endotoxina (EIU). Os experimentos de EAU podem ser realizados em coelhos, ratos e camundongos e podem envolver imunização passiva ou ativa. Por exemplo, qualquer um dentre uma série de antígenos retinais pode ser usado para sensibilizar animais a um imunógeno relevante após o qual os animais podem ser desafiados ocularmente com o mesmo antígeno. O modelo EIU é mais agudo e envolve administração local ou sistêmica de lipopolissacarídeos em doses subletais. Os pontos finais para os modelos EIU e EAU podem incluir exame fundoscópico, histopatologia, entre outros. Estes modelos são analisados por Smith et al. (Immunology and Cell Biology 1998, 76, 497-512, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade). A atividade é avaliada pela dosagem através de várias vias de administração (por exemplo, sistêmica ou tópica), que podem iniciar antes ou depois que a doença mensurável existir. Alguns modelos listados acima também podem desenvolver esclerite/episclerite, coriodite, ciclite ou irite e são, portanto, úteis na investigação da atividade potencial de compostos para o tratamento terapêutico destas doenças.

[00273] Os agentes podem também ser avaliados em um ou mais modelos pré-clínicos de conjuntivite conhecidos por aqueles versados na técnica. Estes incluem, mas não estão limitados a modelos de roedores utilizando porquinhos-da-índia, ratos ou camundongos. Os modelos de porquinhos-da-índia incluem aqueles que utilizam imunização ativa ou passiva e/ou protocolos de desafio imunológico com antígenos como ovalbumina ou tasneira (resenhado em Groneberg, D.A., et al., Allergy 2003, 58, 1101-1113, que é incorporado aqui por referência em sua totalidade). Modelos de ratos e camundongos são semelhantes em concepção geral àqueles dos porquinhos-da-índia (também resenhado por Groneberg). A atividade pode ser avaliada pela dosagem através de várias vias de administração (por exemplo, sistêmica ou tópica), que podem iniciar antes ou depois que a doença mensurável existir. Os critérios para tais estudos podem incluir, por exemplo, análise histológica, imunológica, bioquímica ou molecular de tecidos oculares, como o conjuntivo. Exemplo G: Proteção dos ossos in vivo

[00274] Os compostos podem ser avaliados em vários modelos pré- clínicos de osteopenia, osteoporose ou reabsorção óssea conhecidos por aqueles versados na técnica. Por exemplo, roedores ovariectomizados podem ser usados para avaliar a capacidade dos compostos para afetar os sinais e marcadores de remodelação óssea e/ou de densidade (W.S.S. Jee and W. Yao, J Musculoskel. Nueron. Interact., 2001, 1(3), 193-207, o qual é incorporado aqui por referência em sua totalidade). Em alternativa, a densidade óssea e a arquitetura podem ser avaliadas nos roedores tratados por composto ou controle em modelos de osteopenia induzida por terapia (por exemplo, glucocorticoide) (Yao, et al. Arthritis and Rheumatism, 2008, 58(6), 3485-3497; e id. 58(11), 1674-1686, ambos tendo sido incorporados aqui por referência em sua totalidade). Além disso, os efeitos dos compostos sobre a reabsorção óssea e a densidade podem ser avaliáveis nos modelos de roedores de artrite discutidos acima (Exemplo E). Os pontos finais para todos esses modelos podem variar, mas muitas vezes incluem avaliações histológicas e radiológicas, bem como marcadores de imuno-histologia e bioquímicos apropriados de remodelagem óssea.

Claims (13)

1. Comprimido de liberação sustentada, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) {1-{1-[3-flúor-2-(trifluormetil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma; (ii) uma primeira hipromelose tendo uma viscosidade aparente em uma concentração de 2% em água de 80 cP a 120 cP; (iii) uma segunda hipromelose tendo uma viscosidade aparente em uma concentração de 2% em água de 3000 cP a 5600 cP, em que o comprimido compreende 8% a 20% em peso da primeira e segunda hipromeloses; (iv) 16% a 22% em peso de celulose microcristalina; e (v) 45% a 55% em peso de mono-hidrato de lactose, em que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 9 a 40.

2. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 15 a 30.

3. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição de alto teor de gordura fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 10 a 70.

4. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição de alto teor de gordura fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 15 a 50.

5. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição de alto teor de gordura fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração de plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 25 a 45.

6. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição de alto teor de gordura fornece uma uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 2 horas a 5 horas.

7. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece um tempo médio para o pico de concentração plasmática (Tmax) de {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 0,5 hora a 3 horas.

8. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece um tempo médio para o pico de concentração plasmática (Tmax) de {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 1 hora a 20 horas.

9. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo após uma refeição de alto teor de gordura fornece uma uma meia-vida média (t1/2) de {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 1 hora a 7 horas.

10. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o comprimido compreende 10% a 15% em peso da primeira e segunda hipromeloses.

11. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que dito sal é sal de ácido adípico de 1-{1-[3-flúor-2-(trifluormetil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila.

12. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) {1-{1-[3-flúor-2-(trifluormetil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3- [4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma; (j) ) uma primeira hipromelose tendo uma viscosidade aparente em uma concentração de 2% em água de 80 cP a 120 cP; (k) i) uma segunda hipromelose tendo uma viscosidade aparente em uma concentração de 2% em água de 3000 cP a 5600 cP, em que o comprimido compreende 10% a 15% em peso da primeira e segunda hipromeloses; (l) ) 16% a 22% em peso de celulose microcristalina; e (v) 45% a 55% em peso de mono-hidrato de lactose, em que: (w) a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma razão entre a média do pico da concentração plasmática (Cmax) e a média da concentração plasmática após 12 horas (C12h) do {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 15 a 30; ou (x) a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece um tempo médio para o pico de concentração plasmática (Tmax) de {1-{1-[3-fluoro-2- (trifluorometil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin- 4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila de 0,5 hora a 3 horas; ou (y) a administração oral de um ou mais comprimidos de liberação sustentada a um indivíduo em jejum fornece uma uma meia- vida média (t1/2) de {1-{1-[3-fluoro-2-(trifluorometil)isonicotinoil]piperidin- 4-il}-3-[4-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3- il}acetonitrila de 1 hora a 20 horas; ou (z) qualquer combinação de (a), (b) a (c).

13. Comprimido de liberação sustentada de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que dito sal é sal de ácido adípico de 1-{1-[3-flúor-2-(trifluormetil)isonicotinoil]piperidin-4-il}-3-[4- (7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)-1H-pirazol-1-il]azetidin-3-il}acetonitrila.