BR112015018278B1

BR112015018278B1 - Método para aprimoramento de tolerância à tensão de estiagem de milho

Info

Publication number: BR112015018278B1
Application number: BR112015018278-0A
Authority: BR
Inventors: Roger Kaiser; Eric Ott; Paul Silverman; Jim Wargo; Neil Badenhop; Subbaiah Chalivendra
Original assignee: Valent Biosciences Corporation
Priority date: 2013-01-31
Filing date: 2014-01-30
Publication date: 2022-05-24
Also published as: BR112015018278A2; EP2950633A1; US20140213454A1; AR095100A1; CA2898868C; US9730452B2; HUE042495T2; EP2950633A4; PL2950633T3; CA2898868A1; AR124693A2; ES2705701T3; EP2950633B1; WO2014120882A1

Abstract

MÉTODO PARA APRIMORAMENTO DE TOLERÂNCIA À TENSÃO DE ESTIAGEM DE UM GRÃO DE CEREAL A presente invenção está direcionada a métodos para aprimorar a tolerância à tensão de estiagem de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior. A presente invenção também está direcionada a métodos para aprimorar a produção de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior.

Description

REFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido Provisório dos EUA com número de série 61/759.063 preenchido em 31 de janeiro de 2013. Todo o ensinamento deste pedido é incorporado aqui por referência.

CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A presente invenção em geral está direcionada a métodos para aprimorar tolerância à tensão de estiagem e a produção de grãos de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para os grãos de cereal durante um estágio de crescimento vegetativo anterior. FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[003] A estiagem é uma tensão abiótica comum que limita a produtividade de todas os cultivos principais. Cerca de 80% da terra agrícola nos Estados Unidos da América passou por estiagem em 2012, impactando 70 a 75% da área cultivada de milho e soja (United States Department of Agriculture, Economic Research Service, 2012). De acordo com as Nações Unidas, a intensidade da estiagem está aumentando no mundo (United Nations News Center, 2012). Mesmo estiagem sazonal leve ou moderada em estágios de crescimento críticos podem reduzir os rendimentos em 10 a 20% em fazendas alimentadas por chuva ou aquelas com irrigação limitada. De acordo com o National Climatic Data Center, tanto estiagem moderada quanto severa à extrema está se tornando mais comum. Acoplada com o esgotamento crescente de recursos de água, existe uma necessidade por novos produtos e soluções para satisfazer as tensões da estiagem. Várias abordagens estão sendo usadas com níveis variáveis de sucesso para se endereçar a este problema incluindo agronomia, cruzamento de planta tradicional, tratamentos químicos e de engenharia genética. Cada uma destas estratégias possui benefícios tradicionais, mas também possui desvantagens significativas.

[004] Existem várias práticas culturais na produção de cultivos projetadas para ajudar a evitar os efeitos da estiagem. Uma estratégia para “escapar da estiagem” pode ser empregada plantando variedades adequadas cedo na estação de forma que elas maturem antes do surgimento da estiagem de verão tardia. Uma estratégia para “evitar a estiagem” pode ser usada selecionando variedades de planta com um sistema de raiz profunda, área de folha reduzida e/ou fechamento rápido dos estômatos. Estas estratégias podem ter consequências indesejáveis. A fuga da estiagem envolve estação de crescimento deslocada ou encurtada, enquanto mecanismos para evitar a estiagem podem divergir carbono para sumidouros não cultiváveis. Produtores de plantas incorporam características de tolerância à estiagem para colheitas como uma parte de programas de aprimoramento de rendimento regulares. No entanto, o processo de cruzamento é lento e intensivo em trabalho mesmo quando auxiliado por marcadores moleculares. Esforços de cruzamento recentes pela indústria de sementes resultaram em híbridos de elite com 10 a 15% a mais de rendimento sob estiagem moderada.

[005] A engenharia genética oferece ferramentas precisas para alterar características da planta. Já que o final dos anos 90, a expressão transgênica de genes de “tolerância à estiagem” foram buscados como um método para impulsionar o desempenho de cultivo sob estiagem. Por exemplo, milho híbrido Genuity® DroughtGard™ de Monsanto Company foi aprovado pelo United Stated Department of Agriculture e pela United Stated Environment Protection Agency para cultivo comercial. Este milho híbrido demonstrou um aumento de rendimento de aproximadamente 6% sob estiagem moderada.

[006] Produtos químicos foram solicitados e usados comercialmente para aliviar os efeitos de estiagem incluem ácido abscísico, antitranspirantes, e inibidores de crescimento de triazol (por exemplo, uniconazol). Por exemplo, antitranspirantes reduzem a troca de gás e assim inibem a perda de água. No entanto, a redução de troca de gás inibe a fotossíntese, e assim diminui o crescimento da planta. Apesar de estes produtos químicos poderem ser eficazes em combater a estiagem, eles podem não ser aceitáveis para o uso em cultivos de campo devido aos efeitos negativos no rendimento, custo, efeitos colaterais adversos, ou duração curta do efeito.

[007] De maneira apropriada, existe uma necessidade por novos métodos para aprimorar a resposta de grão de cereal à tensão da estiagem e para aprimorar o rendimento de grãos de cereal.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[008] Em um aspecto, a presente invenção está direcionada a métodos para aprimorar tolerância à tensão de estiagem de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior.

[009] Em um aspecto adicional, a presente invenção está direcionada aos métodos para aprimorar o rendimento de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0010] Inesperadamente, os Depositantes descobriram que quando a giberelina foi aplicada aos grãos de cereal durante o estágio vegetativo anterior, os grãos de cereal tiveram maior rendimento e resistência aprimorada à tensão da estiagem.

[0011] Especificamente, os Depositantes foram surpreendidos quando aplicaram ácido giberélico (“GA3”) às plantas de milho para aplicações de pulverização foliares durante o desenvolvimento da planta entre a segunda e a sexta folhas (estágios de crescimento V2-V6) as plantas se tornam mais resistentes à subsequente tensão da estiagem. Isto foi inesperado já que um perito na técnica pode prover que a aplicação de GA3 pode aumentar a susceptibilidade de plantas à estiagem. As razões por que isto pode resultar foi inesperado são explicadas abaixo.

[0012] Giberelinas são hormônios de planta que ocorrem naturalmente estão envolvidos na maioria das fases de crescimento da planta e desenvolvimento incluindo a germinação, proliferação de célula, alongamento de célula, brotação, floração, determinação do sexo, frutificação, desenvolvimento da semente e senescência (revisado em Olszewski et al., Giberellin Signaling: Biosynthesis, Catabolism, and Response Pathways, The plant Cell, S61-S80, Supplement 2002). GA3 é bem conhecido para a sua promoção do crescimento da planta e foi usado na agricultura desde o início dos anos 60. Os usos comerciais principais de giberelinas incluem afinamento e dimensionamento de uvas de mesa sem sementes, o aprimoramento do tamanho de fruta e da firmeza, estímulo de crescimento e rendimento aumentado de gramas de pasto, promoção de frutificação, e avanço da floração em cultivos de horticultura (Sponsel, A Companion to Plant Physiology, Quinta Edição por Lincoln Taiz e Eduardo Zeiger, disponível em http://5e.plantphys.net/article.php?ch=0&id=372, 2010).

[0013] Giberelinas não foram usadas em esforços para aprimorar a tolerância à estiagem já que efeitos conhecidos de giberelinas na verdade ensinam longe do aprimoramento da tensão da estiagem. Primeiro, a aplicação de GA3 promove o crescimento de folha, aumentando assim a transpiração e o uso de água, como foi mostrado por Larson, et al., RyzUp® on Cotton: Report on Trials 1994-96, Beltwide Cotton Conference, (1997). O uso de água aumentado aumenta o potencial para a tensão da estiagem. Por segundo, a promoção de GA3 do crescimento de folha pode ocorrer sem o crescimento da raiz aumentado (por exemplo, Nagel et al., Growth rate and biomass partitioning of wildtype and low-giberellin tomato (Solanum lycopersicum) plants growing at a high and low nitrogen supply, Physiologia Plantarum, 111: 33-39. 2001). O aumento do crescimento de folha sem aumentar o crescimento da raiz também aumenta o potencial para a tensão da estiagem na planta já que a planta não precisa de raízes adicionais para suportar o crescimento vegetativo.

[0014] Em adição, como as giberelinas promovem o crescimento da planta e maiores plantas tendem a usar mais água, têm existido algumas tentativas de reduzir a tensão da estiagem regulando de maneira negativa as giberelinas. Em cultivos de arroz, milho e outros cereais, GA3 é particularmente conhecido para o seu efeito de alongamento do galho que pode levar a acomodação. Os genes de “revolução verde” bastante populares (isto é, genes de nanismo) atuam por redução dos efeitos de giberelina e desta forma reduzindo o crescimento da planta. Enquanto os genes de nanismo de trigo evitam a sinalização de giberelina (Peng, et al., ‘Green Revolution’ Genes Encode Mutant Giberelina Response Modulators, Nature, volume 400, 1999), os genes sd1 ou semi-dwarf1 em arroz fazem enzima de biossíntese de giberelina ineficazes (Hedden, The Genes of the Green Revolution, Trends in Genetics, volume 19, emissão 1, 2003). Através tanto da inibição genética de biossíntese de giberelina ou sinalização, ou produtos químicos anti-giberelina, plantas mais compactas são produzidas. É pensado que plantas mais compactas devem tolerar a tensão da estiagem melhor do que plantas dimensionadas completas.

[0015] Adicionalmente, produtos químicos que reduzem o crescimento vegetativo podem minimizar a perda de semeação durante o transporte ou após o transporte de sementes jovens através da redução do tamanho da planta e a demanda por água. Inibidores de crescimento de biossíntese de giberelina atuam em um de quatro estágios ao longo da rota biossintética (Rademacher, Growth Retardants: Effects on Giberelin Biosythesis and Other Metabolic Pathways, BASF Agricultural Center, 501531, 2000). Inibidores de biossíntese de giberelina de estágio 1 tais como cloreto de clormequato e cloreto de mepiquato são retardantes de crescimento que atuam pela inibição da síntese do precursor de giberelina ent-kaurene e são usados para reduzir a acomodação de grãos pequenos e crescimento vegetativo em algodão, respectivamente. O cloreto de clormequato de inibidor de estágio 1 é conhecido há bastante tempo para induzir a resistência à estiagem em milho (Robertson e Greenway, Effects of CCC on Drought Resistance of Triticum aestivum, L e Zea mays, L, Ann. Bot., 929-34, 1973). Inibidores de biossíntese de giberelina de estágio 2 tais como paclobutrazol e uniconazol inibem a biossíntese de giberelina e são usados para restringir o crescimento de plantas ornamentais e sementes de vegetais. Inibidores de biossíntese de giberelina de estágio 3 tais como cálcio prohexadiona e trinexapac-etil são inibidores de dioxigenase eu também são usados para inibir o crescimento. Trinexapac-etil foi mostrado para induzir a tolerância à estiagem em azevém perene (Jiang e Fry, Drought Responses of perennial ryegrass Treated with Plant Growth Regulators, HortScience, 33(2);270-273, 1998). A tolerância à estiagem transmitida em milho e monocotiledôneas por inibidores de biossíntese de giberelina e os genes de revolução verde ensina que a inibição do crescimento promove a tolerância à estiagem. Portanto, pode ser esperado que aumentando os níveis de giberelina em plantas, tanto através de mudanças na expressão de gene quanto na aplicação exógena, deve aumentar a sensibilidade do milho à estiagem.

[0016] De maneira apropriada, a capacidade potencial de giberelinas, e especificamente GA3, de aumentar a tolerância de grãos de cereal à tensão da estiagem sazonal e rendimentos de grão ainda não foi demonstrada anteriormente.

[0017] Apesar de todos estes ensinamentos, os Depositantes inesperadamente descobriram que a aplicação da estação sazonal de uma giberelina inicia as mudas de milho para tolerar melhor a estiagem que ocorre posteriormente na estação de crescimento, provendo uma vantagem de rendimento substancial tanto em silagem quanto em variedades de milho em grão. Este efeito de preparação de estiagem mediado pelo estímulo do crescimento aprimora o uso de água efetivo sob uma faixa de tensões da estiagem, a partir de tensão de água leve, sazonal até estiagem prolongada severa. Esta faixa de situações de tensão de água comumente é acompanhada por tensão térmica.

[0018] Em uma modalidade, a presente invenção está direcionada aos métodos para aprimorar tolerância à tensão de estiagem de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior.

[0019] Em uma modalidade preferida, os grãos de cereal são milho, arroz, trigo, cevada, sorgo, painço, aveia, triticale, centeio, trigo sarraceno, fónio, ou quinoa. Em uma modalidade mais preferida, os grãos de cereal são milho, arroz, trigo e sorgo. Em outra modalidade preferida, o grão de cereal é milho. O grão de cereal da presente invenção pode ser modificado geneticamente (GM) ou não modificado geneticamente.

[0020] Em uma modalidade, a giberelina é giberelina 1, GA3, giberelina 4, giberelina 7, e uma combinação dos mesmos. Em uma modalidade preferida, a giberelina é GA3 ou uma combinação de giberelina 4 e 7. Em outra modalidade preferida, a giberelina é GA3.

[0021] Em uma modalidade adicional, o grão de cereal é milho e o estágio de crescimento vegetativo anterior é durante o estágio de crescimento V2 - V6.

[0022] Em uma modalidade, a quantidade eficaz é de cerca de 1 a 30 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 3 a 20 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade mais preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 6 a 16 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade ainda mais preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 8 a 16 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade preferida, GA3 é aplicado a partir de cerca de 1 até cerca de 30, preferivelmente a partir de cerca de 3 até cerca de 20, a partir de cerca de 6 até cerca de 16, e a partir de cerca de 8 até cerca de 16 gramas (a partir de cerca de 3,2 até cerca de 6,4 gramas de GA3 por acre) por hectare.

[0023] Em outra modalidade, a giberelina é aplicada com pelo menos um herbicida, fungicida, inseticida, fertilizante ou regulador de crescimento de planta que não é a giberelina. Em uma modalidade preferida, a giberelina é aplicada com pelo menos um regulador de crescimento de planta diferente do que a giberelina.

[0024] Em outra modalidade, os herbicidas incluem, mas não estão limitados a, glifosfato, mesotriona, halosulfurona, saflufenacil ou dicamba.

[0025] Em uma modalidade adicional, os fungicidas incluem mas não estão limitados a tetraconazol, metconazol, uma estrobilurina, ou um produto combinado de estrobilurina - azol.

[0026] Em outra modalidade, os inseticidas incluem, mas não estão limitados a metilparationa, bifentrina, esfenvalerato, lorsban, carbaril ou lanato.

[0027] Em mais uma modalidade, os fertilizantes foliares incluem, mas não estão limitados a CoRoN (disponível a partir de Helena Chemical), um nitrogênio de liberação controlada, ou BioForge (disponível a partir de Stoller USA), que é bastante N,N’-diformil uréia, ou outras pulverizações que contêm micronutriente.

[0028] Em uma modalidade, os reguladores de crescimento de plantas incluem, mas não estão limitados a ácido abscísico, aminoetoxivinilglicina, 6- benziladenina, ácido jasmônico, ácido naftil acético ou ácido salicílico.

[0029] Em mais uma modalidade, a presente invenção está direcionada aos métodos para aprimorar o rendimento de um grão de cereal compreendendo aplicar uma quantidade eficaz de pelo menos uma giberelina para o grão de cereal durante o estágio de crescimento vegetativo anterior.

[0030] Em uma modalidade preferida, os grãos de cereal são milho, arroz, trigo, cevada, sorgo, painço, aveia, triticale, centeio, trigo sarraceno, fónio, ou quinoa. Em uma modalidade mais preferida, os grãos de cereal são milho, arroz, trigo e sorgo. Em outra modalidade preferida, o grão de cereal é milho. O grão de cereal da presente invenção pode ser modificado geneticamente (GM) ou não modificado geneticamente.

[0031] Em uma modalidade, a giberelina é giberelina 1, GA3, giberelina 4, giberelina 7, e uma combinação dos mesmos. Em uma modalidade preferida, a giberelina é GA3 ou uma combinação de giberelina 4 e 7. Em outra modalidade preferida, a giberelina é GA3.

[0032] Em uma modalidade adicional, o grão de cereal é milho e o estágio de crescimento vegetativo anterior é durante o estágio de crescimento V2 - V6.

[0033] Em uma modalidade, a quantidade eficaz é de cerca de 1 a 30 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 3 a 20 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade mais preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 6 a 16 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade ainda mais preferida, a quantidade eficaz é de cerca de 8 a 16 gramas de giberelina por hectare. Em uma modalidade preferida, GA3 é aplicado a partir de cerca de 1 até cerca de 30, preferivelmente a partir de cerca de 3 até cerca de 20, a partir de cerca de 6 até cerca de 16, e a partir de cerca de 8 até cerca de 16 gramas (a partir de cerca de 3,2 até cerca de 6,4 gramas de GA3 por acre) por hectare.

[0034] Em outra modalidade, a giberelina é aplicada com pelo menos um herbicida, fungicida, inseticida, fertilizante ou regulador de crescimento de planta que não é a giberelina. Em uma modalidade preferida, a giberelina é aplicada com pelo menos um regulador de crescimento de planta diferente do que a giberelina.

[0035] Em outra modalidade, os herbicidas incluem, mas não estão limitados a glifosfato, mesotriona, halosulfurona, saflufenacil ou dicamba.

[0036] Em uma modalidade adicional, os fungicidas incluem, mas não estão limitados a tetraconazol, metconazol, uma estrobilurina, ou um produto combinado de estrobilurina - azol.

[0037] Em outra modalidade, os inseticidas incluem, mas não estão limitados um metilparationa, bifentrina, esfenvalerato, lorsban, carbaril ou lanato.

[0038] Em mais uma modalidade, os fertilizantes foliares incluem, mas não estão limitados a CoRoN (disponível a partir de Helena Chemical), um nitrogênio de liberação controlada, ou BioForge (disponível a partir de Stoller USA), que é bastante N,N’-diformil uréia, ou outras pulverizações que contêm micronutriente.

[0039] Em uma modalidade, o regulador de crescimento de plantas incluem mas não estão limitados a ácido abscísico, aminoetoxivinilglicina, 6- benziladenina, ácido jasmônico, ácido naftil acético ou ácido salicílico.

[0040] É suspeitado que os métodos da presente invenção trabalhem induzindo um impulso de crescimento por aplicações únicas ou múltiplas de pelo menos uma giberelina sozinha quando o crescimento do cultivo não está limitado pela umidade do solo. Isto produz uma planta que é iniciada para tolerar melhor a tensão da estiagem posteriormente na temporada de crescimento.

[0041] O GA3 pode ser aplicado por qualquer meio conveniente. Os peritos na técnica são familiares com os modos de aplicação que incluem aplicações foliares tais como aplicações de pulverização, sova e granular; e aplicações de solo incluindo pulverização, tratamentos no sulco, ou vestimenta lateral.

[0042] Soluções aquosas de pulverização usadas na presente invenção em geral contêm a partir de cerca de 0,01% a 0,5% (v/v) de um agente ativo em superfície.

[0043] O agente ativo em superfície compreende pelo menos um surfactante não iônico. Em geral, o surfactante não iônico pode ser qualquer surfactante não iônico conhecido na técnica. Surfactantes não iônicos adequados em geral são oligômeros e polímeros. Polímeros adequados incluem copolímeros de bloco e aleatórios de óxido de alquileno tais como copolímeros de bloco de óxido de etileno - óxido de propileno (copolímeros de bloco de EO/PO), incluindo ambos os copolímeros de bloco de EO-PO-EO e de PO-EO-PO; copolímeros de bloco e aleatórios de óxido de etileno - óxido de butileno, C2-6 alquil adutos de copolímeros de bloco e aleatório de óxido de etileno - óxido de propileno, C2-6 alquil adutos de copolímeros de bloco e aleatório de óxido de etileno - óxido de butileno, polioxietileno - polioxipropileno monoalquiléteres, tais como metil éter, etil éter, propil éter, butil éter ou misturas dos mesmos; copolímeros de acetato de vinil/vinilpirrolidona; copolímeros de vinilpirrolidona alquilados; polivinilpirrolidona; e polialquilenoglicol, incluindo os polipropileno glicóis e polietileno glicóis. Outros agentes não iônicos são as lecitinas; e agentes ativos em superfície de silicone (agentes ativos em superfície de dispersáveis em solúveis em água tendo um esqueleto que compreende uma cadeia de siloxano, por exemplo, Silwet L77.RTM.). Uma mistura adequada em óleo mineral é ATPLUS 411 F.RTM.

[0044] Depositantes se referiram aos estágios de desenvolvimento de milho através da aplicação como estágios “V”. Os estágios “V” são designados numericamente como V1, V2, V3, etc. Neste sistema de identificação de V(n), (n) representa o número de folhas com colares visíveis. Cada estágio de folha é definido de acordo com a folha mais superior que o colar é visível. “VT” se refere a fase de crescimento de surgimento de borla e não é um estágio vegetativo anterior do milho.

[0045] Como usado aqui, “tolerância à tensão de estiagem” se refere a mitigar os efeitos de pouca água para o cereal.

[0046] Como usado aqui, “silagem” é um certo tipo de forragem de armazenamento. Em geral, a silagem está sendo feita a partir de plantas em um processo chamado de ensilagem. Durante este processo, plantas ou partes de planta passam por fermentação anaeróbica que converte açucares para ácidos no material de cultivo que faz a foragem preservável. Dependendo das plantas usadas, outros nomes em vez de silagem são empregados, por exemplo, ensilagem de aveia para aveia ou ensilagem de alfafa para alfafa. Silagem é bastante usada para alimentar animais que produzem leite e carne tais como gado leiteiro e bovino.

[0047] Como usado aqui, “quantidade eficaz” se refere à quantidade de giberelina que vai melhorar a tolerância à tensão de estiagem ou aprimorar o rendimento. A “quantidade eficaz” vai variar dependendo da concentração de giberelina, os cereais sendo tratados, a gravidade da estiagem, o resultado desejado, e o estágio de vida dos cereais, dentre outros fatores. Assim, nem sempre é possível especificar uma “quantidade eficaz” exata. No entanto, uma “quantidade eficaz” apropriada em qualquer caso individual pode ser determinada por um perito na técnica.

[0048] Como usado aqui, “cereal” ou “grão de cereal” se refere a uma grama que é cultivada para os componentes comestíveis dos seus grãos. Os cereais são membros da família de monocotiledônea Poaceae.

[0049] Como usado aqui, “estágio de crescimento vegetativo anterior” se refere ao estágio de crescimento que começa na germinação e termina quando a planta é 50% do tamanho de planta madura.

[0050] Como usado aqui, “aprimoramento” quer dizer que o grão de cereal possui mais da qualidade do que o grão de cereal pode ter tido se não foi tratado pelos métodos da presente invenção.

[0051] As modalidades descritas são simplesmente modalidades de exemplo dos conceitos da invenção descritos aqui e não devem ser considerados como limitantes, a menos que as reivindicações sejam declaradas expressamente de outra forma.

[0052] Como usado aqui, todos os valores numéricos que se referem às quantidades, porcentagens em peso e semelhantes são definidos como “cerca de” ou “aproximadamente” cada valor particular, designadamente, mais ou menos 10% (± 10%). Por exemplo, a frase “pelo menos 5% em peso” deve ser entendida como “pelo menos 4,5% a 5,5% em peso. ” Portanto, quantidades dentro de 10% dos valores reivindicados são englobados pelo escopo das reivindicações.

[0053] Os artigos “um”, “uma”, “a” e “o” são intencionados a incluir o plural bem como o singular, a menos que o contexto indique claramente de outra forma.

[0054] Os seguintes exemplos são intencionados para ilustrar a presente invenção e ensinar os peritos na técnica como usar as formulações da invenção. Eles não são intencionados de ser limitantes de qualquer modo. EXEMPLOS

Exemplo 1

[0055] Um estudo de silagem de milho replicado foi conduzido em 2012. O milho foi plantado em 18 de maio de 2012, e tratado com duas taxas de GA3 tanto no estágio de crescimento V2 (Junho 2) quanto V5 (Junho 18), cada vez em duas taxas de GA3. Rendimentos de grãos foram estimados a partir das colheitas de 20 pés de fileira e convertidas para alqueires de grão por acre. Havia 1,5 polegada de chuva nas duas semanas antes de plantar, mas nenhuma chuva de 10 de maio até 29 de maio, quando havia 0,7 polegada de chuva. Durante junho havia 2,9 polegadas de chuva espalhadas durante o mês. Haviam apenas dois eventos de chuva a partir de 1 a 25 de julho, cada um de menos do que 0,2 polegada. Em 26 de julho haviam aproximadamente 2 polegadas de chuva. Chuvas em junho, julho e agosto foram de cerca de um terço abaixo da média de 30 anos para a área e o milho estava sob condições de estiagem moderada. Condições de umidade de cultivo em julho foram descritas como “excessivamente secas” pelo National Climate Data Center de NOAA.

[0056] Como pode ser observado a partir dos rendimentos de silagem na Tabela 1 todas as taxas e tempos de aplicação de GA3 aumentaram a produção de milho. Tabela 1. Teste do milho

Exemplo 2

[0057] Em uma tentativa replicada conduzida em 2012, o cultivo de milho passa por estiagem extrema e excepcional em julho, como descrito por National Climate Data Center. O milho foi plantado no fim de abril e tratado com GA3 tanto nos estágios de crescimento V2 quanto V5. Trinta e dois dias após a aplicação, o milho tratado com GA3 tinha aproximadamente 10 polegadas a mais de altura do que o não tratado na média. Apesar de os rendimentos na colheita serem significativamente menores do que o “normal” devido à estiagem, GA3 aplicado no estágio V2 a V5, várias semanas antes do surgimento da estiagem, teve um impacto positivo no rendimento contra o milho não tratado (Tabela 2). Tabela 2. Teste do milho

Exemplo 3

[0058] Em outro teste de campo conduzido em 2012 um curso de tempo de aplicações de GA3 foi realizado. Neste teste, o milho híbrido foi plantado em 24 de abril de 2012 em uma densidade de 32.000 plantas/acre. As plantas foram pulverizadas com GA3 tanto na quinta folha (V5) quanto no surgimento de borla (VT) em 6 de junho ou 7 de julho, respectivamente. Este teste foi sujeitado à estiagem extrema e excepcional em julho durante o ajuste e enchimento do grão. Como é mostrado na Tabela 3 abaixo, o efeito dos tratamentos de pulverização de GA3 foi dependente da temporização da aplicação de GA3. Ou seja, a aplicação de GA3 na temporização de pulverização de V5 foi superior à aplicação de pulverização em VT para aumentar o rendimento de grão. Este resultado é inesperado e surpreendente, como aplicações de outros reguladores de crescimento de planta ou agroquímicos com efeitos de regulador de crescimento de planta em milho, tais como o fungicida, piraclostrobina mostram o melhor rendimento aumenta quando aplicações são feitas em torno do surgimento de borla (VT). Tabela 3. Teste de milho Tratamento Estágio de aplicação Rendimento de Grão (Bu/Acre)

Exemplo 4

[0059] Neste teste um híbrido de milho comercial foi plantado em 12 de abril de 2012. Em seis semanas após o plantio, as plantas estavam no estágio de desenvolvimento V5-V6 quanto tratamentos de pulverização foram aplicados. O experimento foi conduzido com três replicatas e o GA3 a 6,4 gramas/acre foi aplicado em uma mistura com o fungicida Domark® (disponível a partir de Valent BioSciences Corporation, contém Tebuconazol) em 15 galões/acre (a 26,8 gramas/acre). O rendimento que pode ser colhido foi estimado pela coleta das orelhas coletáveis em 30 de julho de 2012. O índice de Palmer do National Climate Data Center caracteriza a estiagem no momento da temporização (meio para o fim de maio) na faixa média (menos do que moderada), mas pelo fim do junho (5 semanas após a aplicação) este local estava sob extrema estiagem. Os rendimentos de milho foram baixos nesta tentativa devido à falta de água, mas o tratamento com GA3 resulta em mais alqueires/acre do que o não tratado (ver a Tabela 4). Tabela 4. Estimativa de Rendimento do Teste de Campo

Claims

1. Método para aprimoramento de tolerância à tensão de estiagem de milho, caracterizado pelo fato de que compreende aplicar de 0,9 a 33 gramas por hectare de giberelina 3 a milho durante o estágio de crescimento V2-V6 do milho e quando o crescimento de milho não é limitado por uma falta de umidade do solo e em que a intolerância à tensão de estiagem é melhorado mais tarde na estação de crescimento do que a aplicação de giberelina 3.

2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a giberelina 3 é aplicada em uma quantidade de 2,7 a 22 gramas por hectare; preferivelmente, em que a giberelina 3 é aplicada em uma quantidade de 5,4 a 17,6 gramas por hectare; ou preferivelmente, em que giberelina 3 é aplicada em uma quantidade de 7,2 a 17,6 gramas por hectare.

3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a giberelina 3 é aplicada com pelo menos um herbicida, fungicida, inseticida, fertilizante ou regulador de crescimento de planta que não é a giberelina.