BR102022011248A2 - Composições e método para melhorar o crescimento de plantas - Google Patents

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BR102022011248-7A
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Meng-Ying Li
Cho-Chun Huang
Gui-Jun Li
Kai Xia
Chen-Pang WU
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Ch Biotech R&D Co., Ltd.
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Abstract

A invenção se refere a uma composição para melhorar o crescimento de plantas. A composição inclui auxina, citocinina, cloreto de colina e ácido γ-aminobutírico (GABA). A invenção também se refere a um método para melhorar o crescimento de plantas.

Description

COMPOSIÇÕES E MÉTODO PARA MELHORAR O CRESCIMENTO DE PLANTAS REFERÊNCIA CRUZADA AO PEDIDO RELACIONADO
[001] Este pedido reivindica prioridade do Pedido Provisório dos EUA 63/209.581, depositado em 11 de junho de 2021, que é incorporado neste documento por referência em sua totalidade.
FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO 1. CAMPO DA INVENÇÃO
[002] A presente invenção se refere a uma composição para melhorar o crescimento de plantas. Mais particularmente, a presente invenção se refere a uma composição que inclui auxina, citocinina, cloreto de colina e ácido γ-aminobutírico (GABA).
2. DESCRIÇÃO DA TÉCNICA ANTERIOR
[003] Como a população mundial atinge aproximadamente 7,9 bilhões, a segurança alimentar tem sido um problema sério em muitos países. De acordo com a Organização das Nações Unidas para Agricultura e Alimentação (FAO), a produção global de alimentos precisará aumentar em 70% se a população atingir 9,1 bilhões até 2050.
[004] Embora existam produtos reguladores de crescimento de plantas (PGR) para aumentar o crescimento das plantas e melhorar o rendimento das culturas, estresses como seca e deriva de herbicidas afetam o desempenho desses produtos PGR. Para ajudar as culturas a crescer bem sob várias condições, formulações avançadas para liberar o potencial de desenvolvimento das culturas estão em demanda.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[005] Em um aspecto, a presente invenção se refere a uma composição concentrada para melhorar o crescimento de plantas. A composição concentrada compreende entre cerca de 0,8 g/L a cerca de 80 g/L de auxina, entre cerca de 0,18 g/L a cerca de 18 g/L de citocinina, entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 50 g/L de GABA e entre cerca de 2,5 g/L a cerca de 250 g/L de cloreto de colina.
[006] Em outro aspecto, a presente invenção se refere a uma composição pronta para uso para melhorar o crescimento de plantas. A composição pronta para uso compreende entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina, entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina, entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L GABA e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina.
[007] Em outro aspecto, a presente invenção se refere a um método para melhorar o crescimento de plantas.
[008] A presente invenção é ilustrada, mas não limitada pelas seguintes modalidades e desenhos.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[009] A Figura 1A e a Figura 1B mostram o peso seco da parte aérea das plantas de milho no Exemplo 1. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em comparação com o grupo de controle. O número acima da barra do grupo de teste 9 indica o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 12) T1 a T9: grupo de teste 1 ao grupo de teste 9. *p < 0,05; **p < 0,01.
[0010] A Figura 2A e a Figura 2B mostram o peso seco da parte aérea das plantas de soja no Exemplo 1. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em comparação com o grupo de controle. O número acima da barra do grupo de teste 9 indica o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 12) T1 a T9: grupo de teste 1 ao grupo de teste 9. *p < 0,05; **p < 0,01.
[0011] A Figura 3A e a Figura 3B mostram o peso seco da parte aérea das plantas de milho no Exemplo 2. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em comparação com o grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 12) T1 a T9: grupo de teste 1 ao grupo de teste 9. *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0012] A Figura 4A e a Figura 4B mostram o peso seco da parte aérea das plantas de soja no Exemplo 2. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em comparação com o grupo de controle. Os números acima das barras do grupo de teste 9 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 12) T1 a T9: grupo de teste 1 ao grupo de teste 9. *p < 0,05; **p < 0,01
[0013] A Figura 5A mostra a observação do fenótipo de plantas de milho 7 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. A Figura 5B mostra a observação do fenótipo de folhas de milho 7 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. Os números indicam a ordem de emergência das folhas e os triângulos indicam a 6ª folha.
[0014] A Figura 6 mostra o vazamento de eletrólitos de plantas de milho 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica o aumento percentual em comparação com grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam a diminuição percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) **p < 0,01.
[0015] A Figura 7 mostra os níveis de substâncias reativas de ácido 2- tiobarbitúrico (TBARS) de plantas de milho 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica o aumento percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam a diminuição percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) *p < 0,05 e ***p < 0,001.
[0016] A Figura 8 mostra as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de milho 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) *p < 0,05.
[0017] A Figura 9 mostra as atividades da glutamina sintetase (GS) de plantas de milho 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) *p < 0,05 e ***p < 0,001.
[0018] A Figura 10 mostra as atividades de glutamato sintase (GOGAT) de plantas de milho 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) **p < 0,01.
[0019] A Figura 11 mostra a observação do fenótipo de plantas de soja em 0, 1, 5 e 7 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3.
[0020] A Figura 12 mostra a observação do fenótipo de folhas de soja 7 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. Os triângulos indicam áreas necróticas e as setas indicam sintomas de enrolamento das folhas.
[0021] A Figura 13 mostra o vazamento de eletrólitos de plantas de soja 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica o aumento percentual em comparação com grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam a diminuição percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) *p < 0,05 e **p < 0,01.
[0022] A Figura 14 mostra os níveis de TBARS de plantas de soja 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica o aumento percentual em comparação com grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam a diminuição percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) **p < 0,01 e ***p < 0,001.
[0023] A Figura 15 mostra as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de soja 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) *p < 0,05 e ***p < 0,001.
[0024] A Figura 16 mostra as atividades da glutamina sintetase (GS) de plantas de soja 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) ***p < 0,001.
[0025] A Figura 17 mostra as atividades de glutamato sintase (GOGAT) de plantas de soja 3 dias após a aplicação com (grupo apenas glifosato e grupos de teste 1 a 2) ou sem (grupo de controle) glifosato no Exemplo 3. O número acima da barra do grupo apenas glifosato indica a diminuição percentual em relação ao grupo de controle. Os números acima das barras dos grupos de teste 1 e 2 indicam o aumento percentual em relação ao grupo apenas glifosato. (N = 5) **p < 0,01.
[0026] A Figura 18 mostra o peso seco da parte aérea das plantas de milho no Exemplo 4. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 12) T1 a T5: grupo de teste 1 a grupo de teste 5. *p < 0,05.
[0027] A Figura 19 mostra o peso seco da parte aérea das plantas de soja no Exemplo 4. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 12) T1 a T5: grupo de teste 1 a grupo de teste 5. *p < 0,05; **p < 0,01.
[0028] A Figura 20A mostra a observação do fenótipo de folhas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os triângulos indicam a 7ª folha. A Figura 20B mostra a análise da área foliar de folhas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. *p < 0,05.
[0029] A Figura 21A mostra o peso fresco da parte aérea das plantas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. A Figura 21B mostra o peso seco da parte aérea das plantas de milho 7 dias após a aplicação dos reagentes no Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em relação ao grupo de controle. *p < 0,05.
[0030] A Figura 22A mostra a observação do fenótipo de raízes de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. A Figura 22B mostra a análise do comprimento da raiz das folhas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam a porcentagem aumento em relação ao grupo de controle.
[0031] A Figura 23 mostra o peso seco das raízes de plantas de milho 5 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. O número acima da barra do grupo de teste 2 indica o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 12) *p < 0,05; **p < 0,01.
[0032] A Figura 24 mostra as taxas de transporte de elétrons (ETR) de plantas de milho 4 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5.
[0033] A Figura 25 mostra as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 3) *p < 0,05; **p < 0,01.
[0034] A Figura 26 mostra as atividades da glutamina sintetase (GS) de plantas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 3) **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0035] A Figura 27 mostra as atividades da glutamato sintase (GOGAT) de plantas de milho 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 3) **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0036] A Figura 28 mostra os níveis de expressão do gene ZmG2 de plantas de milho 3 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. (N = 3) *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0037] A Figura 29 mostra os níveis de expressão do gene ZmGLK1 de plantas de milho 3 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) *p <0,05.
[0038] A Figura 30 mostra os níveis de expressão do gene ZmDOF1 de plantas de milho 1 dia após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) **p < 0,01.
[0039] A Figura 31 mostra os níveis de expressão do gene ZmPPdK de plantas de milho 3 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) *p < 0,05; ***p < 0,001.
[0040] A Figura 32 mostra os níveis de expressão do gene ZmPIP2;1 de plantas de milho 3 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0041] A Figura 33A mostra a observação do fenótipo de folhas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os triângulos indicam as folhas do 5º composto. A Figura 33B mostra a análise da área foliar de folhas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. ***p < 0,001.
[0042] A Figura 34A mostra o peso fresco da parte aérea das plantas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. A Figura 34B mostra o peso seco da parte aérea das plantas de soja 7 dias após a aplicação dos reagentes no Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em relação ao grupo de controle. *p < 0,05; ***p < 0,001.
[0043] A Figura 35A mostra a observação do fenótipo das raízes de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. A Figura 35B mostra a análise do comprimento da raiz das folhas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em relação ao grupo de controle. (N = 6) *p < 0,05.
[0044] A Figura 36 mostra o peso seco da raiz de plantas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. O número acima da barra do grupo de teste 2 indica o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 12) *p < 0,05.
[0045] A Figura 37 mostra as taxas de transporte de elétrons (ETR) de plantas de soja 4 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em relação ao grupo de controle. *p < 0,05.
[0046] A Figura 38 mostra as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5.
[0047] A Figura 39 mostra as atividades da glutamina sintetase (GS) de plantas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. ***p < 0,001.
[0048] A Figura 40 mostra as atividades da glutamato sintase (GOGAT) de plantas de soja 7 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. Os números acima das barras dos grupos de teste indicam o aumento percentual em comparação com o grupo de controle. (N = 3) ***p < 0,001.
[0049] A Figura 41 mostra os níveis de expressão do gene GmWRKY58 de plantas de soja 3 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) ***p < 0,001.
[0050] A Figura 42 mostra os níveis de expressão do gene GmWRKY76 de plantas de soja 3 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 5. (N = 3) *p < 0,05; **p < 0,01.
[0051] A Figura 43 mostra os níveis de expressão gênica da proteína reguladora da transcrição do domínio NAC de plantas de soja 3 dias após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0052] A Figura 44 mostra os níveis de expressão do gene GmCab3 de plantas de soja 1 dia após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) **p < 0,01; ***p < 0,001.
[0053] A Figura 45 mostra os níveis de expressão do gene GmPIP1;6 de plantas de soja 1 dia após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) **p < 0,01.
[0054] A Figura 46 mostra os níveis de expressão do gene GmPIP2 de plantas de soja 1 dia após a aplicação com os reagentes no Exemplo 5. (N = 3) *p < 0,05.
[0055] A Figura 47 mostra os níveis de expressão de genes envolvidos na síntese de lignina e alongamento celular de plantas de soja 6 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 6. (N = 3) ***p < 0,001.
[0056] A Figura 48 mostra os níveis de expressão de genes envolvidos no crescimento e alongamento de raízes de plantas de soja 6 dias após a aplicação com os reagentes do Exemplo 6. (N = 3) ***p < 0,001.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0057] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece uma composição para melhorar o crescimento de plantas. A composição compreende auxina, citocinina, GABA e cloreto de colina.
[0058] Em algumas modalidades, a auxina é selecionada a partir de ácido indol-3-butírico (IBA), ácido indol-3-acético (IAA), ácido 2- fenilacético (PAA), ácido indol-3-propiônico (IPA) e ácido 1- naftalenoacético (NAA). Em algumas modalidades, a auxina é IBA.
[0059] Em algumas modalidades, a citocinina é selecionada a partir de N6-furfuriladenina (cinetina), 6-benzilaminopurina (BA), zeatina (ZT), N6-(2-isopentenil)adenina (2ip), difenilureia (DPU). Em algumas modalidades, a citocinina é cinetina.
[0060] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção é uma composição concentrada, compreendendo entre cerca de 0,8 g/L a cerca de 80 g/L de auxina, entre cerca de 0,18 g/L a cerca de 18 g/L de citocinina, entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 50 g/L de GABA e entre cerca de 2,5 g/L a cerca de 250 g/L de cloreto de colina. Uma solução concentrada se refere a uma solução que se destina a ser diluída com água para formar uma solução de uso antes da aplicação na planta
[0061] Em algumas modalidades, a concentração de auxina na composição concentrada está entre cerca de 0,8 g/L a cerca de 80 g/L, entre cerca de 1,6 g/L a cerca de 40 g/L, entre cerca de 3 g/L a cerca de 20 g/L, entre cerca de 6 g/L a cerca de 10 g/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,8 g/L, cerca de 1,5 g/L, cerca de 3 g/L, cerca de 6 g/L, cerca de 8 g/L, cerca de 10 g/L, cerca de 20 g/L, cerca de 30 g/L, cerca de 40 g/L, cerca de 50 g/L, cerca de 60 g/L, cerca de 70 g/L, cerca de 80 g /L, ou qualquer concentração entre cerca de 0,8 g/L a cerca de 80 g/L, tal como cerca de 1,853 g/L, cerca de 13,748 g/L ou cerca de 62,739 g/L. Em algumas modalidades, a concentração de auxina na composição concentrada é de cerca de 0,8 g/L, cerca de 8 g/L ou cerca de 80 g/L.
[0062] Em algumas modalidades, a concentração de citocinina na composição concentrada está entre cerca de 0,18 g/L a cerca de 18 g/L, entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 9 g/L, entre cerca de 1 g/L a cerca de 5 g/L, entre cerca de 1,5 g/L a cerca de 3 g/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,18 g/L, cerca de 0,5 g/L, cerca de 1 g/L, cerca de 1,5 g/L, cerca de 2 g/L, cerca de 5 g/L, cerca de 7,5 g/L, cerca de 10 g/L, cerca de 15 g/L, cerca de 18 g/L ou qualquer concentração entre cerca de 0,18 g/L a cerca de 18 g/L, tal como cerca de 1,267 g/L, cerca de 7,823 g/L, cerca de 14,869 g/L. Em algumas modalidades, a concentração de citocinina na composição concentrada é de cerca de 0,18 g/L, 1,8 g/L ou 18 g/L.
[0063] Em algumas modalidades, a concentração de GABA na composição concentrada está entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 50 g/L, entre cerca de 1 g/L a cerca de 25 g/L, entre cerca de 2 g/L a cerca de 12 g/L, entre cerca de 4 g/L a cerca de 6 g/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,5 g/L, cerca de 1 g/L, cerca de 5 g/L, cerca de 10 g/L, cerca de 15 g/L, cerca de 20 g/L, cerca de 25 g/L, cerca de 30 g/L, cerca de 35 g/L, cerca de 40 g/L, cerca de 45 g/L, cerca de 50 g/L ou qualquer concentração entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 50 g/L, tal como cerca de 1,097 g/L, cerca de 16,062 g/L, cerca de 28,502 g/L. Em algumas modalidades, a concentração de GABA na composição concentrada é de cerca de 0,5 g/L, 5 g/L ou 50 g/L.
[0064] Em algumas modalidades, a concentração de cloreto de colina na composição concentrada está entre cerca de 2,5 g/L a cerca de 250 g/L, entre cerca de 5 g/L a cerca de 125 g/L, entre cerca de 10 g/L a cerca de 60 g/L, entre cerca de 20 g/L a cerca de 30 g/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 2,5 g/L, cerca de 5 g/L, cerca de 10 g/L, cerca de 25 g/L, cerca de 50 g/L, cerca de 100 g/L, cerca de 150 g/L, cerca de 200 g/L, cerca de 225 g/L, cerca de 250 g/L ou qualquer concentração entre cerca de 2,5 g/L a cerca de 250 g/L, tal como cerca de 6,978 g/L, cerca de 24,234 g/L, cerca de 182,607 g/L. Em algumas modalidades, a concentração de cloreto de colina na composição concentrada é de cerca de 2,5 g/L, 25 g/L ou 250 g/L.
[0065] Em algumas modalidades, a composição concentrada para melhorar o crescimento de plantas é diluída em torno de 500 a 1.500 vezes com água antes do uso.
[0066] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção é uma composição pronta para uso, compreendendo entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina, entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina, entre cerca de 0,5 mg /L a cerca de 50 mg/L de GABA e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina. Uma solução pronta para uso não é diluída com água antes da aplicação na planta. Uma solução pronta para uso é uma solução de uso quando aplicada na planta sem diluição adicional.
[0067] Em algumas modalidades, a concentração de auxina na composição pronta para uso está entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L, entre cerca de 1,6 mg/L a cerca de 40 mg/L, entre cerca de 3 mg/L a cerca de 20 mg/L, entre cerca de 6 mg/L a cerca de 10 mg/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,8 mg/L, cerca de 1,5 mg/L, cerca de 3 mg/L, cerca de 6 mg/L, cerca de 8 mg/L, cerca de 10 mg/L, cerca de 20 mg/L, cerca de 30 mg/L, cerca de 40 mg/L, cerca de 50 mg/L, cerca de 60 mg/L, cerca de 70 mg/L, cerca de 80 mg/L, ou qualquer concentração entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L, tal como cerca de 1,853 mg/L, cerca de 13,748 mg/L ou cerca de 62,739 mg/L. Em algumas modalidades, a concentração de auxina na composição pronta para uso é de cerca de 0,8 mg/L, cerca de 8 mg/L ou cerca de 80 mg/L.
[0068] Em algumas modalidades, a concentração de citocinina na composição pronta para uso está entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L, entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 9 mg/L, entre cerca de 1 mg/L a cerca de 5 mg/L, entre cerca de 1,5 mg/L a cerca de 3 mg/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,18 mg/L, cerca de 0,5 mg/L, cerca de 1 mg/L, cerca de 1,5 mg/L, cerca de 2 mg/L, cerca de 5 mg/L, cerca de 7,5 mg/L, cerca de 10 mg/L, cerca de 15 mg/L, cerca de 18 mg/L ou qualquer concentração entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg /L, tal como cerca de 1,267 mg/L, cerca de 7,823 mg/L, cerca de 14,869 mg/L. Em algumas modalidades, a concentração de citocinina na composição pronta para uso é de cerca de 0,18 mg/L, 1,8 mg/L ou 18 mg/L.
[0069] Em algumas modalidades, a concentração de GABA na composição pronta para uso está entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L, entre cerca de 1 mg/L a cerca de 25 mg/L, entre cerca de 2 mg/L a cerca de 12 mg/L, entre cerca de 4 mg/L a cerca de 6 mg/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,5 mg/L, cerca de 1 mg/L, cerca de 5 mg/L, cerca de 10 mg/L, cerca de 15 mg/L, cerca de 20 mg/L, cerca de 25 mg/L, cerca de 30 mg/L, cerca de 35 mg/L, cerca de 40 mg/L, cerca de 45 mg/L, cerca de 50 mg/L, ou qualquer concentração entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L, tal como cerca de 1,097 mg/L, cerca de 16,062 mg/L, cerca de 28,502 mg/L. Em algumas modalidades, a concentração de GABA na composição pronta para uso é de cerca de 0,5 mg/L, 5 mg/L ou 50 mg/L.
[0070] Em algumas modalidades, a concentração de cloreto de colina na composição pronta para uso está entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L, entre cerca de 5 mg/L a cerca de 125 mg/L, entre cerca de 10 mg/L a cerca de 60 mg/L, entre cerca de 20 mg/L a cerca de 30 mg/L, e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 2,5 mg/L, cerca de 5 mg/L, cerca de 10 mg/L, cerca de 25 mg/L, cerca de 50 mg/L, cerca de 100 mg/L, cerca de 150 mg/L, cerca de 200 mg/L, cerca de 225 mg/L, cerca de 250 mg/L ou qualquer concentração entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L, tal como cerca de 6,978 mg/L, cerca de 24,234 mg/L, cerca de 182,607 mg/L. Em algumas modalidades, a concentração de cloreto de colina na composição pronta para uso é de cerca de 2,5 mg/L, 25 mmg/L ou 250 mg/L.
[0071] Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção pode incluir um ou mais adjuvantes, como um tensoativo ou um agente de controle de deriva. Em outras modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção pode não incluir um adjuvante. Por exemplo, a composição para melhorar o crescimento de plantas pode incluir um tensoativo e/ou um agente de controle de deriva. Tensoativos exemplares incluem, mas não estão limitados a, tensoativos catiônicos, tensoativos aniônicos, tensoativos zwitteriônicos e tensoativos não iônicos, de um modo preferido incluindo, mas não limitado a, Tween 20, Tween 40, Tween 60, Tween 65, Tween 80, Tween 85, Laureth-4, Ceteth-2, Ceteth-20, Steareth-2, PEG40, PEG100, PEG150, PEG200, PEG600, Span 20, Span 40, Span 60, Span 65, Span 80. Um agente de controle de desvio exemplar inclui LI 700, que está comercialmente disponível na Loveland Products (Loveland, CO, EUA).
[0072] Em algumas modalidades, a concentração do adjuvante na composição pronta para uso para melhorar o crescimento de plantas está entre cerca de 0,01 a 1% (v/v), e de um modo preferido é, mas não está limitado a, cerca de 0,01, cerca de 0,02, cerca de 0,03, cerca de 0,04, cerca de 0,05, cerca de 0,06, cerca de 0,07, cerca de 0,08, cerca de 0,09, cerca de 0,1, cerca de 0,2, cerca de 0,3, cerca de 0,4, cerca de 0,5, cerca de 0,6, cerca de 0,7, cerca de 0,8, cerca de 0,9, cerca de 1% (v/v). Em algumas modalidades, a concentração do adjuvante na composição pronta para uso para melhorar o crescimento de plantas é de cerca de 0,1% (v/v).
[0073] Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção pode ser aplicada como parte de uma mistura de tanque, que pode incluir nutrientes adicionais, como micro ou macronutrientes e/ou pesticidas, como fungicidas, herbicidas ou inseticidas.
[0074] Em um exemplo, a composição é aplicada com pelo menos um fungicida, tal como, mas não limitado a, azóis, benzimidazóis, cloronitrilas, ditiocarbamatos, fenilamidas, estrobilurinas e triazóis.
[0075] Em um exemplo, a composição é aplicada com pelo menos um herbicida, tal como, mas não limitado a, 2,4-D, acetocloro, acifluorfen-Na, alacloro, aminopiralida, amitrol, atrazina, benfluralina, bensulfuron-metila, bensulida, bentazon, bromacil, carfentrazona-etila, clorimuron-etila, clorsulfuron, cletodim, clopiralid, dicamba, diquat, diuron, EPTC, fluazifopP-butil, flumetslam, flumioxazin, fomesafen, glufosinato-amônio, glifosato, halauxifen-metil, hexazinona, imazamox, imazapir, imazetapir, isoxaflutol, lactofen, MCPA, MCPB, metribuzin, metsulfuron-metila, MSMA, nicossulfuron, norflurazon, oxadiazon, oxifluorfen, paraquat, pendimetalin, penoxsulam, picloram, prometrin, propanila, prosulfuron, quinclorac, quinmerac, rimsulfuron, s-metolacloro, saflufenacil, setoxidim, sulfentrazona, sulfossulfuron, tifensulfuron-metila, trifluralina e triflusulfuron-metila. Em um exemplo específico, a composição é aplicada com glifosato
[0076] Faixas de concentração adequadas para a composição concentrada da presente invenção são fornecidas na Tabela 1, e faixas de concentração adequadas para a composição pronta para uso da presente invenção são fornecidas na Tabela 2. Em algumas modalidades, a composição concentrada e a composição pronta para uso podem consistir ou consistir essencialmente nos componentes listados nas Tabelas 1 e 2, respectivamente.
Figure img0001
[0077] Em algumas modalidades, a presente invenção fornece um método para melhorar o crescimento de plantas, compreendendo uma etapa de aplicar uma composição de solução de uso a uma planta e a composição de solução de uso compreendendo entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina, entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina, entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L de GABA e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina.
[0078] Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção é aplicada a uma planta durante a fase vegetativa. Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção é aplicada a uma planta durante a fase reprodutiva.
[0079] A composição da presente invenção pode ser aplicada a diferentes plantas, tais como, mas não se limitando a, aspargos, bagas (como amora, mirtilo, amora, kiwi e framboesa), vegetais brássicas (como brócolis, repolho, couve-flor, e mostarda), vegetais de bulbo (como alho, alho-poró e cebola), grãos de cereais (como cevada, milho, milheto, aveia, arroz, sorgo e trigo), frutas cítricas (como toranja, limão, lima, laranja doce e tangerina), café, algodão, vegetais de cucurbitáceas (como melão, pepino, melado, melão, abóbora e melancia), forragem, forrageiras e palha de grãos de cereais, vegetais frutíferos (como berinjela, pimenta e tomate), forragem de grama, forrageiras e feno, grama cultivada para semente (como azevém perene, festuca alta ou grama bent), uva, ervas e especiarias (como manjericão, endro, mostarda e sálvia), cânhamo, lúpulo, vegetais folhosos (como aipo, alface de cabeça e folhas, couve e espinafre), legumes leguminosos (como feijão, ervilha e soja), menta, hortelã-pimenta, hortelã, rações para animais sem capim (como alfafa, trevo, feno e ervilhaca), oleaginosas (como canola, linho e girassol), amendoim, frutas de pomoide (como maçã e pera), raízes e tubérculos (como cenoura, ginseng, rábano, salsa, batata, rabanete, beterraba, batata doce e nabo), frutas de caroço (como damasco, cereja, pêssego e ameixa), morango, cana-de-açúcar, tabaco, nozes (como amêndoas, castanhas de caju e nozes). Em outro exemplo, a composição para melhorar o crescimento das plantas é aplicada ao milho, soja, trigo e algodão.
[0080] Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento de plantas da presente invenção é aplicada à folhagem da planta (por exemplo, folhas, caules, flores e/ou frutos), por exemplo, como aplicação foliar ou pulverização foliar. Em algumas modalidades, a composição para melhorar o crescimento das plantas da presente invenção é aplicada às raízes das plantas, como por uma aplicação no solo ou encharcamento do solo, e/ou às sementes, como por um tratamento de sementes.
[0081] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção melhora o crescimento de plantas por pelo menos um dos métodos selecionados entre aumentar o crescimento da parte aérea, aumentar o crescimento de raízes, aumentar a fotossíntese nas plantas, aumentar a absorção e a assimilação de nutrientes, aumentar o gerenciamento de água pelas plantas e reduzir a fototoxicidade mediada por herbicida em plantas.
[0082] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção aumenta o crescimento de parte aérea por pelo menos um dos métodos selecionados entre aumentar o peso fresco da parte aérea, aumentar o peso seco da parte aérea e aumentar a área foliar.
[0083] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção aumenta o crescimento da raiz por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar o comprimento da raiz, aumentar o peso seco da raiz e regular a expressão de genes envolvidos no crescimento e no alongamento da raiz.
[0084] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção aumenta a fotossíntese em plantas por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar a taxa de transporte de elétrons (ETR) de plantas e a regulação positiva da expressão de genes relacionados ao aumento do crescimento e/ou da fotossíntese
[0085] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção aumenta a absorção e a assimilação de nutrientes por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar a atividade da nitrato redutase (NR) nas plantas, aumentar a atividade da glutamina sintetase (GS) nas plantas, aumentar a atividade de glutamato sintase (GOGAT) nas plantas, e aumentar o crescimento de raízes.
[0086] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção aumenta o gerenciamento de água pela planta por meio de pelo menos um dos métodos selecionados a partir da regulação positiva da expressão de genes relacionados à melhoria da eficiência do uso da água e ao aumento do crescimento de raízes.
[0087] Em algumas modalidades, a composição da presente invenção reduz a fototoxicidade mediada por herbicida em plantas por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de reduzir o vazamento de eletrólitos nas plantas, reduzir o nível de substâncias reativas de ácido 2-tiobarbitúrico (TBARS) nas plantas, aumentar a atividade de nitrato redutase (NR) nas plantas, aumentar a atividade da glutamina sintetase (GS) nas plantas, aumentar a atividade da glutamato sintase (GOGAT) nas plantas, aumentar o nível de auxina nas plantas, aumentar o nível de giberelina nas plantas, aumentar o nível de citocinina nas plantas, reduzir o nível de ácido abscísico nas plantas e melhorar o crescimento das plantas, por exemplo, medido pelo peso seco da parte aérea e área foliar.
[0088] Verificou-se que quando auxina, citocinina, GABA e cloreto de colina são combinados na composição da presente invenção, as ações reguladoras do crescimento de plantas dos respectivos componentes são aumentadas sinergicamente e a combinação dos componentes exibe um efeito sinérgico marcado não visto quando os componentes são usados individualmente.
[0089] A menos que definido de outra forma, todos os termos técnicos e científicos usados neste documento têm o mesmo significado comumente entendido por uma pessoa versada na técnica a que esta invenção pertence. Em caso de conflito, prevalecerá o presente documento, incluindo as definições.
[0090] Conforme usado neste documento, o termo "auxina" se refere a uma classe de reguladores de crescimento de plantas que promovem o alongamento do caule, inibem o crescimento de gemas laterais e, portanto, mantêm a dominância apical. As auxinas naturais (endógenas) são produzidas pelo meristema apical, como pontas de caule e pontas de raízes. A auxina se move para o lado mais escuro da planta, fazendo com que as células cresçam mais do que as células correspondentes no lado mais claro da planta, e isso produz uma curvatura da ponta do caule da planta em direção à luz. Exemplos de auxina incluem, mas não estão limitados a, ácido indol-3-butírico (IBA), ácido indol-3-acético (IAA), ácido 2-fenilacético (PAA), ácido indol-3- propiônico (IPA), ácido 1-naftalenoacético (NAA).
[0091] Conforme usado neste documento, o termo "citocinina" se refere a uma classe de reguladores de crescimento de plantas que aumentam a divisão celular, diferenciação celular e crescimento de parte aérea axilares e inibem a dominância apical. Existem dois tipos de citocininas com base em suas estruturas químicas: citocinina tipo adenina e tipo fenilureia. A maioria das citocininas é sintetizada na ponta da raiz e transportada para os tecidos fotossintéticos através do xilema. Embora as raízes sejam o principal local de biossíntese de citocininas, elas não são o único local. Cambium e possivelmente todos os tecidos em divisão ativa, como embrião, folhas, frutos, são responsáveis pela síntese de citocinina. Exemplos de citocinina incluem, mas não estão limitados a, N6-furfuriladenina (cinetina), 6- benzilaminopurina (BA), zeatina (ZT), N6-(2-isopentenil)adenina (2ip) e difenilureia (DPU).
[0092] Conforme usado neste documento, o termo "ácido γaminobutírico (GABA)", também conhecido como ácido 4-aminobutanoico, refere-se a um aminoácido não proteico com a fórmula C4H9NO2 e a seguinte estrutura química:
Figure img0002
[0093] Conforme usado neste documento, o termo "cloreto de colina" se refere a um composto orgânico com a fórmula ((CH3)3N(Cl)CH2CH2OH) e a seguinte estrutura química:
Figure img0003
[0094] Conforme usado neste documento, o termo "glifosato" se refere ao ingrediente ativo no herbicida Roundup e tem a fórmula química de C3H8NO5P. O glifosato inibe a 5-enolpiruvilshiquimato-3-fosfato sintase (EPSPS) em plantas e interrompe a síntese de aminoácidos aromáticos, como fenilalanina, tirosina e triptofano. O triptofano é um precursor do ácido indol3-acético (IAA), que é a principal auxina nas plantas e desempenha um papel importante na regulação do desenvolvimento das plantas através da promoção da divisão e do alongamento celular. Quando aplicado em plantas, o glifosato causa inibição da síntese proteica e diminuição do nível de IAA nas plantas, levando à inibição do crescimento e à morte das plantas.
[0095] Conforme usado neste documento, o termo "vazamento de eletrólitos" se refere ao fenômeno de efluxo de eletrólitos, como íon potássio (K+ ), de uma célula vegetal quando a célula morre e perde a integridade da membrana celular. O vazamento de eletrólitos é um indicador da estabilidade da membrana celular das plantas sob condições de estresse e uma marca registrada da resposta ao estresse nas células vegetais. Quanto maior o vazamento de eletrólito, menor a integridade da membrana celular.
[0096] Conforme usado neste documento, o termo "substâncias reativas ao ácido 2-tiobarbitúrico (TBARS)" se refere a substâncias que são formadas como um subproduto da peroxidação lipídica e podem ser detectadas pelo ensaio TBARS usando ácido tiobarbitúrico (TBA) como reagente. O malondialdeído (MDA) é um dos vários produtos finais formados através da decomposição de produtos de peroxidação lipídica, e outros produtos de decomposição derivados de peróxidos de gordura que não o MDA são TBA positivos. TBARS é um indicador de peroxidação lipídica da membrana celular. Níveis mais altos de TBARS indicam menor integridade da membrana celular.
[0097] Conforme usado neste documento, o termo "assimilação de nitrogênio" se refere à formação de compostos orgânicos de nitrogênio, como aminoácidos e proteínas, a partir de compostos inorgânicos de nitrogênio presentes no ambiente. Na assimilação de nitrogênio em plantas, nitrato (NO3 - ) e nitrito (NO2 - ) são primeiro reduzidos a amônio (NH4 + ) por nitrato redutase (NR) e nitrito redutase (NiR), respectivamente, e então o amônio (NH4 + ) é incorporado ao aminoácido através da via da glutamina sintetase (GS)- glutamato sintase (GOGAT). Portanto, atividades crescentes de enzimas envolvidas na assimilação de nitrogênio, como nitrato redutase (NR), glutamina sintetase (GS) e glutamato sintase (GOGAT), nas células vegetais indicam que a planta sintetiza mais aminoácidos e proteínas.
[0098] Conforme usado neste documento, o termo "taxa de transporte de elétrons (ETR)" se refere à taxa de transporte de elétrons liberados pela divisão da água durante a fotossíntese. Como a energia é gerada durante o transporte de elétrons, quanto mais rápida a taxa de transporte de elétrons, mais energia (ATP) é gerada, o que ajuda as plantas a sintetizar mais açúcar a partir do CO2.
[0099] Conforme usado neste documento, os termos "compreende", "compreendendo", "inclui", "incluindo", "tem", "tendo", "contém", "contendo", "distinguido por" ou qualquer outra variação dos mesmos, destinam-se para cobrir uma inclusão não exclusiva, sujeita a qualquer limitação explicitamente indicada. Por exemplo, uma composição, mistura, processo, método, artigo ou aparelho que compreende uma lista de elementos não está necessariamente limitado apenas a esses elementos, mas pode incluir outros elementos não expressamente listados ou inerentes a tal composição, mistura, processo, método, artigo ou aparelho.
[00100] A frase de transição “consistindo em” exclui qualquer elemento, etapa ou ingrediente não especificado. Se na reivindicação, isso encerraria a reivindicação à inclusão de outros materiais que não os citados, exceto por impurezas normalmente associadas a eles. Quando a frase “consistindo em” aparece em uma cláusula do corpo de uma reivindicação, em vez de imediatamente após o preâmbulo, limita apenas o elemento estabelecido nessa cláusula; outros elementos não são excluídos da reivindicação como um todo.
[00101] A frase de transição "consistindo essencialmente em" é usada para definir uma composição, método ou aparelho que inclui materiais, etapas, recursos, componentes ou elementos, além daqueles literalmente descritos, desde que esses materiais, etapas, recursos, componentes, ou elementos não afetem materialmente as características básicas e novas da invenção reivindicada. O termo “consistindo essencialmente em” ocupa um meio-termo entre “compreendendo” e “consistindo em”.
[00102] Quando as Requerentes definiram uma invenção ou parte dela com um termo aberto como “compreendendo”, deve ser prontamente entendido que (a menos que indicado de outra forma) a descrição deve ser interpretada para descrever também tal invenção usando os termos “consistindo essencialmente em” ou “consistindo em”.
[00103] Além disso, salvo indicação expressa em contrário, "ou" se refere a um ou inclusivo e não a um ou exclusivo. Por exemplo, uma condição A ou B é satisfeita por qualquer um dos seguintes: A é verdadeiro (ou presente) e B é falso (ou não presente), A é falso (ou não presente) e B é verdadeiro (ou presente), e A e B são verdadeiros (ou presentes).
[00104] Conforme usado neste documento, "ao redor de", "cerca de" ou "aproximadamente" geralmente significará dentro de 20 por cento, de um modo preferido dentro de 10 por cento e de um modo mais preferido dentro de 5 por cento de um determinado valor ou faixa. As quantidades numéricas fornecidas neste documento são aproximadas, o que significa que o termo "ao redor de", "cerca de" ou "aproximadamente" pode ser inferido se não for expressamente declarado.
[00105] O termo "um", "uma" ou "o/a" descrito na presente invenção se destina a cobrir um ou mais valores numéricos no relatório descritivo e nas reivindicações, a menos que especificado de outra forma. Por exemplo, “um elemento” indica um ou mais de um elemento.
[00106] Deve ser entendido que tanto a descrição geral anterior como a seguinte descrição detalhada são apenas exemplificativas e explicativas e não são restritivas da invenção.
EXEMPLOS Exemplo 1. Teste Sinérgico com Glifosato 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00107] Sementes de milho tolerantes ao glifosato (D40SS48, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de milho foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 3 no estágio de V1 (primeiro colar de folha) uma vez a uma taxa de 15 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 11 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 9 grupos de teste.
[00108] Sementes de soja tolerantes ao glifosato (S29RY05, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 3 no estágio de V1 (um conjunto de folhas trifolioladas desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 11 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 9 grupos de teste.
Figure img0004
* Diluição de 100 vezes do herbicida Roundup PowerMAX (Bayer, Leverkusen, Alemanha), que contém 48,7% (p/v) de glifosato.
2. Análises
[00109] 2.1 Peso seco da parte aérea: Sete (7) dias após a aplicação dos reagentes, as folhas e os caules de cada planta foram secos a 50 °C durante a noite e, em seguida, o peso seco foi medido.
[00110] 2.2 Estatística: O teste t de Student não pareado foi aplicado para avaliar a significância estatística dos dados numéricos. A significância estatística foi estabelecida em valor de p menor que 0,05.
3. Resultados A. Milho
[00111] Conforme mostrado na Figura 1A, a aplicação de glifosato levou a uma diminuição significativa no peso seco da parte aérea das plantas de milho (p < 0,01). Conforme mostrado na Figura 1B, plantas de milho tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 9) têm mais peso seco da parte aérea do que plantas no grupo apenas glifosato (p < 0,05) e nos grupos de teste 1 a 8. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção melhora o crescimento de plantas reduzindo os danos causados pelo glifosato, e a combinação de auxina, citocinina, GABA e cloreto de colina na composição tem um efeito mais sinérgico do que os componentes usados individualmente (grupos de teste 1 a 4) e as combinações que não sejam uma composição da presente invenção (grupos de teste 5 a 8).
B. Soja
[00112] Conforme mostrado na Figura 2A, a aplicação de glifosato levou a uma diminuição significativa no peso seco da parte aérea das plantas de soja (p < 0,01). Conforme mostrado na Figura 2B, plantas de soja tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 9) têm mais peso seco da parte aérea do que plantas no grupo apenas glifosato (p < 0,05) e grupos de teste 1 a 8. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção aumenta o crescimento das plantas reduzindo os danos causados pelo glifosato, e a combinação de auxina, citocinina, GABA e cloreto de colina na composição tem um efeito mais sinérgico do que os componentes usados individualmente (grupos de teste 1 a 4) e as combinações que não são uma composição da presente invenção (grupos de teste 5 a 8).
Exemplo 2. Teste de Diferentes Concentrações de Componentes com Glifosato 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00113] Sementes de milho tolerantes ao glifosato (D40SS48, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de milho foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 4 no estágio de V1 (primeiro colar de folha) uma vez a uma taxa de 15 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 11 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 9 grupos de teste.
[00114] Sementes de soja tolerantes ao glifosato (S29RY05, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 4 no estágio de V1 (um conjunto de folhas de trifoliolato desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 11 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 9 grupos de teste.
Figure img0005
Figure img0006
2. Análises
[00115] Os métodos para analisar o peso seco da parte aérea e as estatísticas são os mesmos descritos no Exemplo 1.
3. Resultados A. Milho
[00116] Conforme mostrado na Figura 3A, a aplicação de glifosato levou a uma diminuição significativa no peso seco da parte aérea das plantas de milho (p < 0,01). Conforme mostrado na Figura 3B, plantas de milho tratadas com glifosato e composições contendo diferentes concentrações de componentes (grupos de teste 1 a 9) têm mais peso seco da parte aérea do que plantas no grupo apenas glifosato (p < 0,05, p < 0,01 ou p < 0,001). Os resultados indicam que as composições da presente invenção melhoram o crescimento das plantas reduzindo os danos causados pelo glifosato.
B. Soja
[00117] Conforme mostrado na Figura 4A, a aplicação de glifosato levou a uma diminuição significativa no peso seco da parte aérea das plantas de soja (p < 0,01). Conforme mostrado na Figura 4B, plantas de soja tratadas com glifosato e composições contendo diferentes concentrações de componentes (grupos de teste 1 a 9) têm mais peso seco da parte aérea do que plantas no grupo apenas glifosato (p < 0,05). Os resultados indicam que as composições da presente invenção melhoram o crescimento das plantas reduzindo os danos causados pelo glifosato.
Exemplo 3. Teste de Culturas Tolerantes ao Glifosato com Glifosato 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00118] Sementes de milho tolerantes ao glifosato (D40SS48, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de milho foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 5 no estágio de V1 (primeiro colar de folha) uma vez a uma taxa de 15 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 4 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 2 grupos de teste.
[00119] Sementes de soja tolerantes ao glifosato (S29RY05, DynaGro®) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C temperatura dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 5 no estágio de V1 (um conjunto de folhas de trifoliolato desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 4 grupos neste teste, 1 grupo de controle, 1 grupo apenas glifosato e 2 grupos de teste.
Figure img0007
2. Análises
[00120] 2.1 Análises das Folhas: Sete (7) dias após a aplicação dos reagentes, a altura das plantas foi medida e as folhas coletadas. A área foliar da quarta folha de cada planta de milho e a área foliar total de cada planta de soja foram medidas por um analisador de folhas (WinFOLIATM, Regent Instruments Inc., Québec, Canadá). Folhas e caules de cada planta foram secos a 50 °C durante a noite e, em seguida, o peso seco foi medido.
[00121] 2.2 Análises de Raízes: Sete (7) dias após a aplicação dos reagentes, o comprimento da raiz da planta foi medido por um analisador de raiz (WinRHIZOTM, Regent Instruments Inc., Québec, Canadá). Além disso, as raízes de cada planta foram secas a 50 °C durante a noite e, em seguida, o peso seco foi medido.
[00122] 2.3 Vazamento de eletrólitos: Três (3) dias após a aplicação dos reagentes, as folhas da amostra foram limpas com água deionizada três vezes. Seis (6) discos de folhas (7,5 mm de diâmetro) foram cortados das folhas da amostra e imersos em 10 ml de água deionizada a 25 ºC por 24 horas. Em seguida, a primeira condutividade eletrolítica (EC1) da solução amostra foi analisada com um medidor de condutividade elétrica (SevenCompact™ S230 Conductivity Meter, Mettler-Toledo, Columbus, OH, EUA). Os discos de folhas de amostra foram então mantidos na água deionizada a 95 ºC por 2 horas. Após a temperatura da solução de amostra ter diminuído para 25 ºC, a segunda condutividade eletrolítica (EC2) da solução de amostra foi analisada novamente com o medidor de condutividade elétrica. Dez (10) mililitros de água deionizada sem qualquer amostra foram usados como controle. O vazamento de eletrólito das folhas da amostra foi analisado com a seguinte equação.
Vazamento de eletrólito (%) = (Amostra EC1 - Controle EC1) x 100/(Amostra EC2 - Controle EC2)
[00123] 2.4 Conteúdo de TBARS: As substâncias reativas ao ácido 2- tiobarbitúrico (TBARS) são um subproduto e uma indicação de peroxidação lipídica. Três (3) dias após a aplicação dos reagentes, 30 gramas de folha fresca da amostra foram moídas em nitrogênio líquido e misturadas com 1 ml de ácido tricloroacético (TCA) a 20% (v/v). A mistura foi centrifugada a 10.000 × g por 5 minutos. Duzentos (200) microlitros do sobrenadante foram então misturados com 800 µl de solução de TBARS [20% (v/v) de TCA contendo 0,5% (p/v) de ácido 2-tiobarbitúrico] , incubado a 95 °C em banho de água por 30 minutos, resfriado em gelo e centrifugado a 2.000 × g por 20 minutos. A absorbância a uma densidade óptica (D.O.) de 532 nm (A532) e 600 nm (A600) foi medida por um leitor de microplacas (Infinite M200 pro, TECAN, Männedorf, Suíça). A concentração de TBARS em uma amostra foi calculada com a seguinte equação.
TBARS (nmol/gFW) = (A532 - A600) x N x 1,8 x 1000 / 155 x W
N: fator de diluição
W: Peso fresco de uma amostra (g)
[00124] 2.5 Atividade da Nitrato Redutase (NR): Três (3) dias após a aplicação dos reagentes, 0,5 gramas de folha de amostra fresca foram moídas em nitrogênio líquido. Um (1) ml de tampão de fosfato de potássio (100 mM, pH 7,4) contendo 7,5 mM de cisteína, 1 mM de EDTA e 1,5% de caseína foi adicionado à amostra, misturado com a amostra e, em seguida, a amostra misturada foi centrifugada a 4 °C, campo centrífugo relativo de 13.000 (rcf) por 30 minutos. O ponto zero um (0,1) ml do sobrenadante e 0,9 ml da solução de reação foram incubados a 30 °C em banho-maria por 30 minutos, e a reação foi interrompida pela adição de 0,05 ml de acetato de zinco (1 M). A amostra foi centrifugada à temperatura ambiente, 3.000 rcf. O sobrenadante foi transferido para um novo tubo e misturado com 0,5 mL de sulfanilamida (5,8 mM) e 0,5 mL de N-(1-naftil)etilenodiamina (0,8 mM). A mistura foi incubada por 30 minutos. A atividade de NR é determinada pela produção de NO2 através da medição de absorbância em uma densidade óptica (D.O.) de 540 nm (A540). KNO2 é usado como padrão de concentração de NO2.
[00125] 2.6 Atividade da Glutamina Sintetase (GS): Três (3) dias após a aplicação dos reagentes, 0,5 gramas de folha de amostra fresca foi moída em nitrogênio líquido. O pó de folha e 1 ml de solução de extração, contendo 10 mM de Tris-HCl (pH 7,6), 1 mM de MgCl2, 1 mM de EDTA e 10 mM de 2- mercaptoetanol, foram centrifugados a 4 °C, 13.000 rcf por 30 minutos. O ponto zero um (0,1) ml do sobrenadante e 0,4 ml da solução de reação foram incubados a 30 °C em banho-maria por 30 minutos, e a reação foi interrompida pela adição de 1 ml de solução de parada, contendo 2,5 g de FeCl3, 5,0 g de TCA em 100 mL de HCl (1,5 N). A amostra foi centrifugada à temperatura ambiente, 3.000 rcf. Absorvância em um D.O. de 540 nm (A540) do sobrenadante.
[00126] 2.7 Atividade da Glutamato Sintase (GOGAT): Três (3) dias após a aplicação dos reagentes, 0,5 grama de folha fresca da amostra foi moída em nitrogênio líquido. O pó de folha e 1 ml de solução de extração, contendo 10 mM de Tris-HCl (pH 7,6), 1 mM de MgCl2, 1 mM de EDTA e 10 mM de 2-mercaptoetanol, foram centrifugados a 4 °C, 13.000 rcf por 30 minutos. Zero-ponto-um-cinco (0,15) ml do sobrenadante foi misturado com a solução de reação contendo 0,2 ml de L-glutamina 20 mM, 0,25 ml de 2- oxoglutarato 2 mM, 0,05 ml de KCl 10 mM, 1 ml de Tris-HCl 25 mM (pH 7,6) e 0,1 mL de NADH 3 mM para iniciar a reação. A atividade GOGAT é determinada pela redução de NADH através da medição da intensidade de fluorescência em comprimentos de onda de excitação/emissão de 340/445 nm. A concentração de NADH é determinada por referência a uma curva padrão de NADH.
[00127] 2.8 Teor de Hormônios Vegetais: Doze (12) dias após a aplicação dos reagentes, 1 g de folha de amostra fresca foi moída em nitrogênio líquido e depois misturada com 10 g de solução de extração (80% (v/v) metanol, 1% (v /v) ácido acético) por um misturador de vórtice. A amostra foi então sonicada por 1 hora e centrifugada a 2.500 rpm por 10 minutos. O sobrenadante foi coletado, concentrado, dissolvido em 1 ml de metanol 100%, e então analisado quanto ao conteúdo de hormônios vegetais com um espectrômetro de massa quadrupolo tandem (Waters® Xevo® TQ MS, Waters Corporation, Milford, MA, EUA) e ACQUITY UPLC System (Waters Corporation, Milford, MA, EUA).
[00128] 2.9 Estatísticas: Os métodos estatísticos são os mesmos descritos no Exemplo 1.
3. Resultados A. Milho
[00129] A-3.1. Uma composição da presente invenção melhora o crescimento da cultura após o tratamento com glifosato.
[00130] Conforme mostrado na Figura 5A e na Tabela 6, plantas de milho tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) são mais altas do que plantas de milho tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de milho tratadas apenas com glifosato. Além disso, conforme mostrado na Figura 5B e na Tabela 6, as plantas do grupo de teste 2 têm áreas maiores das quartas folhas, pesos secos de parte aérea mais pesados e pesos secos de raízes mais pesados do que as plantas do grupo apenas de glifosato e do grupo de teste 1. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção melhora o crescimento de plantas após o tratamento com glifosato.
Figure img0008
[00131] A-3.2. Uma composição da presente invenção alivia o dano da membrana celular da planta após o tratamento com glifosato.
[00132] Conforme mostrado na Figura 6, o glifosato causa aumento no vazamento de eletrólitos nas plantas, indicando perda de integridade da membrana celular nas plantas. Plantas de milho tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de milho tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm vazamento de eletrólitos significativamente menor do que plantas de milho tratadas apenas com glifosato (grupo de teste 1 versus grupo apenas glifosato, p < 0,01; grupo de teste 2 versus grupo apenas glifosato, p < 0,01). O grupo de teste 1 e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) diminuem o vazamento de eletrólitos em folhas de milho em 31,06% e 31,71%, respectivamente, em comparação com o grupo apenas glifosato. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção aumenta a estabilidade da membrana celular em plantas após o tratamento com glifosato.
[00133] Conforme mostrado na Figura 7, o glifosato causa aumento no nível de TBARS em plantas de milho, indicando perda de integridade da membrana celular nas plantas. Plantas de milho tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de milho tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) ambas têm nível de TBARS significativamente menor do que plantas de milho tratadas apenas com glifosato (grupo apenas glifosato) (grupo de teste 1 versus grupo apenas glifosato, p < 0,05; grupo de teste 2 versus grupo apenas glifosato, p < 0,001). O grupo de teste 1 e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) diminuem o nível de TBARS nas folhas de milho em 39% e 67,4%, respectivamente, em comparação com o grupo apenas glifosato. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção reduz o dano à membrana celular causado pelo glifosato.
[00134] A-3.3. Uma composição da presente invenção melhora as atividades de enzimas chave na assimilação de nitrogênio em plantas após tratamento com glifosato.
[00135] Conforme mostrado nas Figuras 8 a 10, o glifosato causa diminuição nas atividades de nitrato redutase (NR), glutamina sintetase (GS) e glutamato sintase (GOGAT) em plantas de milho, indicando menor eficiência de utilização de nitrogênio nas plantas. Além disso, como mostrado na Figura 8, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de milho em 15,83% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,05). Conforme mostrado na Figura 9, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades da glutamina sintetase (GS) de plantas de milho em 164,25% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,001). Conforme mostrado na Figura 10, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de glutamato sintase (GOGAT) de plantas de milho em 65,63% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,01). Os resultados demonstram que uma composição da presente invenção melhora a eficiência de utilização de nitrogênio em plantas aumentando as atividades de enzimas de assimilação de nitrogênio após tratamento com glifosato.
[00136] A-3.4. Uma composição da presente invenção aumenta os níveis de hormônio do crescimento e reduz um nível de hormônio do estresse em plantas após o tratamento com glifosato.
[00137] Conforme mostrado na Tabela 7, plantas de milho tratadas com Radiate sem glifosato e plantas de milho tratadas com Amostra 1 (8 g/mL de IBA, 1,8 mg/L de cinetina, 5 mg/L de GABA, 25 mg/L de cloreto de colina e 0,1% v/v de Tween®80) (uma composição da presente invenção) sem glifosato ambos têm maior teor de ácido indol-3-acético (IAA), giberelina A1 (GA1) e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ácido abscísico (ABA) do que o grupo de controle. Além disso, as plantas de milho tratadas com a Amostra 1 sem glifosato apresentam maior teor de giberelina A1 (GA1) e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ácido abscísico (ABA) do que as plantas de milho tratadas com Radiate sem glifosato. Os resultados mostram que uma composição da presente invenção (Amostra 1) aumenta os níveis de hormônio do crescimento (auxina, giberelina e citocinina) e reduz um nível de hormônio do estresse (ácido abscísico) em plantas sem tratamento com glifosato.
[00138] Além disso, conforme mostrado na Tabela 7, plantas de milho tratadas com glifosato e Radiate (grupo de teste 1) e plantas de milho tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm maior teor de IAA, GA1 e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que plantas de milho tratadas apenas com glifosato. Além disso, as plantas do grupo de teste 2 têm maior teor de IAA e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que as plantas do grupo de teste 1. Os resultados mostram que uma composição da presente invenção aumenta o hormônio do crescimento (auxina, giberelina e citocinina) e reduz o nível de hormônio do estresse (ácido abscísico) em plantas com tratamento com glifosato.
Figure img0009
B. Soja
[00139] B-3.1. Uma composição da presente invenção alivia a inibição do crescimento da soja após o tratamento com glifosato.
[00140] Conforme mostrado na Figura 11 e na Tabela 8, plantas de soja tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm área foliar total significativamente maior do que plantas de soja tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de soja tratadas apenas com glifosato (grupo de teste 2 versus grupo apenas glifosato, p < 0,001). Além disso, conforme mostrado na Tabela 8, as plantas no grupo de teste 2 têm comprimento de folha unifoliada mais longo, pesos frescos de parte aérea mais pesados, comprimento total de raiz mais longo e pesos secos de raiz mais pesados do que as plantas no grupo apenas glifosato e grupo de teste 1. Mais importante, como mostrado na Figura 12, o glifosato causa sintomas de enrolamento foliar e áreas necróticas em folhas de soja. No entanto, as plantas de soja no grupo de teste 2 não apresentam sintomas de enrolamento das folhas e têm menos áreas necróticas do que as plantas de soja no grupo apenas glifosato e no grupo de teste 1. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção alivia o efeito negativo no desenvolvimento das folhas causado pelo glifosato.
Figure img0010
[00141] B-3.2. Uma composição da presente invenção alivia o dano da membrana celular da planta após o tratamento com glifosato.
[00142] Conforme mostrado na Figura 13, o glifosato causa aumento no vazamento de eletrólitos em plantas de soja, indicando perda de integridade da membrana celular nas plantas. Plantas de soja tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de soja tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm vazamento de eletrólitos significativamente menor do que plantas de soja tratadas apenas com glifosato (grupo de teste 1 versus grupo apenas glifosato, p < 0,05; grupo de teste 2 versus grupo apenas glifosato, p < 0,01). O grupo de teste 1 e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) diminuem o vazamento de eletrólitos nas folhas de soja em 57,31% e 64,88%, respectivamente, em comparação com o grupo apenas glifosato. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção aumenta a estabilidade da membrana celular em plantas após o tratamento com glifosato.
[00143] Conforme mostrado na Figura 14, o glifosato causa aumento no nível de TBARS em plantas de soja, indicando perda de integridade da membrana celular nas plantas. Plantas de soja tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de soja tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) ambas têm nível de TBARS significativamente menor do que plantas de soja tratadas apenas com glifosato (grupo de teste 1 versus grupo apenas glifosato, p < 0,01; grupo de teste 2 versus grupo apenas glifosato, p < 0,001). O grupo de teste 1 e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) diminuem o nível de TBARS nas folhas de soja em 23,38% e 34,39%, respectivamente, em comparação com o grupo apenas glifosato. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção reduz o dano à membrana celular causado pelo glifosato.
[00144] B-3.3. Uma composição da presente invenção melhora as atividades de enzimas chave na assimilação de nitrogênio em plantas após tratamento com glifosato.
[00145] Conforme mostrado nas Figuras 15 a 17, o glifosato causa diminuição nas atividades de nitrato redutase (NR), glutamina sintetase (GS) e glutamato sintase (GOGAT) em plantas de soja, indicando menor eficiência de utilização de nitrogênio nas plantas. Além disso, como mostrado na Figura 15, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de nitrato redutase (NR) de plantas de soja em 33,48% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,001). Conforme mostrado na Figura 16, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de glutamina sintetase (GS) de plantas de soja em 50,16% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,001). Conforme mostrado na Figura 17, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de glutamato sintase (GOGAT) de plantas de soja em 27,01% em comparação com o grupo apenas glifosato (p < 0,01). Os resultados demonstram que uma composição da presente invenção melhora a eficiência de utilização de nitrogênio em plantas aumentando as atividades de enzimas de assimilação de nitrogênio após tratamento com glifosato.
[00146] B-3.4. Uma composição da presente invenção aumenta os níveis de hormônio do crescimento e reduz um nível de hormônio do estresse em plantas após o tratamento com glifosato.
[00147] Conforme mostrado na Tabela 9, plantas de soja tratadas com Radiate sem glifosato e plantas de soja tratadas com Amostra 1 (8 g/mL de IBA, 1,8 mg/L de cinetina, 5 mg/L de GABA, 25 mg/L de cloreto de colina e 0,1% v/v de Tween®80) (uma composição da presente invenção) sem glifosato ambos têm maior teor de IAA, GA1 e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que o grupo de controle. Além disso, plantas de soja tratadas com Amostra 1 sem glifosato apresentam maior teor de IAA e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que plantas de soja tratadas com Radiate sem glifosato. Os resultados mostram que a Amostra 1 aumenta os níveis de hormônio do crescimento (auxina, giberelina e citocinina) e reduz o nível de hormônio do estresse (ácido abscísico) em plantas sem tratamento com glifosato.
[00148] Além disso, conforme mostrado na Tabela 9, plantas de soja tratadas com glifosato e grupo de teste 1 e plantas de soja tratadas com glifosato e uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm maior teor de IAA, GA1 e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que plantas de soja tratadas apenas com glifosato. Além disso, as plantas do grupo de teste 2 têm maior teor de IAA, GA1 e citocinina (Zeatina + iPAs) e menor teor de ABA do que as plantas do grupo de teste 1. Os resultados mostram que uma composição da presente invenção aumenta o hormônio do crescimento (auxina, giberelina e citocinina) e reduz o nível de hormônio do estresse (ácido abscísico) em plantas com tratamento com glifosato.
Figure img0011
Exemplo 4. Teste de Diferentes Concentrações de Componentes sem Glifosato 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00149] Sementes de milho (White Pearl, Known-You Seed Co., Ltd., Kaohsiung, Taiwan) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de milho foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 10 no estágio de V1 (primeiro colar de folha) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 6 grupos neste teste, 1 grupo de controle e 5 grupos de teste.
[00150] Sementes de soja (Kaohsiung 10, Estação de Extensão e Pesquisa Agrícola do Distrito de Kaohsiung, Kaohsiung, Taiwan) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23°C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 10 no estágio de V1 (um conjunto de folhas trifolioladas desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 6 grupos neste teste, 1 grupo de controle e 5 grupos de teste.
Figure img0012
2. Análises
[00151] Os métodos para analisar o peso seco da parte aérea e as estatísticas são os mesmos descritos no Exemplo 1.
3. Resultados A. Milho
[00152] Conforme mostrado na Figura 18, as plantas de milho tratadas com composições contendo diferentes concentrações de componentes (grupos de teste 2 a 5) têm mais peso seco da parte aérea do que as plantas no grupo de controle e no grupo de teste 1. Os resultados indicam que as composições da presente invenção melhoram o crescimento da planta aumentando o peso seco da parte aérea.
B. Soja
[00153] Conforme mostrado na Figura 19, as plantas de soja tratadas com composições contendo diferentes concentrações de componentes (grupos de teste 2 a 5) têm mais peso seco da parte aérea do que as plantas no grupo de controle e no grupo de teste 1. Os resultados indicam que as composições da presente invenção melhoram o crescimento das plantas aumentando o peso seco da parte aérea.
Exemplo 5. Efeitos de uma composição da presente invenção sem glifosato em plantas 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00154] Sementes de milho (White Pearl, Known-You Seed Co., Ltd., Kaohsiung, Taiwan) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de milho foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 11 no estágio de V1 (primeiro colar de folha) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 3 grupos neste teste, 1 grupo de controle e 2 grupos de teste.
[00155] Sementes de soja (Kaohsiung 10, Estação de Extensão e Pesquisa Agrícola do Distrito de Kaohsiung, Kaohsiung, Taiwan) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo de turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e em um ciclo claro/escuro de 16/8. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com os reagentes listados na Tabela 11 no estágio de V1 (um conjunto de folhas trifolioladas desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar. Havia 3 grupos neste teste, 1 grupo de controle e 2 grupos de teste.
Figure img0013
2. Análises
[00156] Os métodos para analisar folhas, raízes, atividades de NR, GS e GOGAT e estatísticas são os mesmos descritos no Exemplo 3.
[00157] 2.1 Taxa de Transporte de Elétrons (ETR): Quatro (4) dias após a aplicação dos reagentes, as folhas foram analisadas com sistema de fotossíntese (LI-6400XTQ, LI-COR Biosciences, Lincoln, NE, EUA) sob luzes (1500 µmol fótons m-2s -1).
[00158] 2.2 Análise de Expressão Gênica: Um (1) ou 3 dias após a aplicação dos reagentes, todas as folhas de trifoliolato foram coletadas para extração de RNA com LabPrepTM RNA plus mini kit (LabTurbo Biotech Co., Taipei, Taiwan). A reação em cadeia da polimerase de transcrição reversa (RT-PCR) foi realizada com o RNA extraído usando o iScriptTM gDNA Clear cDNA Synthesis Kit (Bio-Rad Laboratories, Hercules, Califórnia, EUA). Em seguida, a PCR em tempo real foi realizada usando iQTM SYBR (Bio-Rad Laboratories) no CFX ConnectTM Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad Laboratories) com os primers listados na Tabela 12
Figure img0014
* ZmG2 e ZmGLK1: fatores de transcrição GOLDEN2-LIKE (GLK) que promovem a atividade fotossintética pela ativação de genes-alvo que codificam proteínas localizadas no cloroplasto e relacionadas à fotossíntese; ZmDOF1: fator de transcrição envolvido na ativação de genes fotossintéticos em milho; ZmPPdK: uma enzima chave que utiliza a via fotossintética para fixar CO2 em plantas C4; PIP2;1: uma aquaporina pertence à subfamília da proteína intrínseca da membrana plasmática (PIP) que facilita a permeabilidade da membrana à água; UBF7: poliubiquitina de Zea mays contendo 7 monômeros de ubiquitina, utilizada como gene de referência; GmWRKY58/76: Proteínas WRKY do grupo III com domínio C2HC dedo de zinco envolvidas na regulação do crescimento e nos processos de desenvolvimento das plantas, na sinalização hormonal, no metabolismo secundário e nas respostas ao estresse das plantas; GmNAC: uma proteína reguladora da transcrição do domínio NAC, desempenhando papéis importantes no desenvolvimento da planta e nas respostas ao estresse; GmCab3: um complexo de captação de luz (LHC) funciona como um receptor de luz que captura e fornece energia de excitação aos fotossistemas; GmPIP1;6 e GmPIP 2: aquaporinas que pertencem à subfamília da proteína intrínseca da membrana plasmática (PIP) e facilitam a permeabilidade à água da membrana; e GmCYP: um gene de referência.
3. Resultados A. Milho
[00159] A-3.1. Uma composição da presente invenção aumenta o crescimento da cultura.
[00160] Conforme mostrado nas Figuras 20 a 23, as plantas de milho tratadas com uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm áreas foliares maiores (Figuras 20A e 20B), mais peso fresco da parte aérea (Figura 21A), mais peso seco da parte aérea (Figura 21B), comprimento de raiz mais longo (Figuras 22A e 22B) e mais peso seco de raiz (Figura 23) do que plantas de milho tratadas com grupo de controle ou grupo de teste 1.
[00161] A-3.2. Uma composição da presente invenção melhora a eficiência das plantas na conversão de energia solar em energia química.
[00162] Conforme mostrado na Figura 24, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta as taxas de transporte de elétrons (ETR) mais altas em plantas de milho do que o grupo de controle e o grupo de teste 1. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção promove o acúmulo de energia em plantas para absorver CO2 e sintetizar açúcar.
[00163] A-3.3. Uma composição da presente invenção melhora as atividades de enzimas chave na assimilação de nitrogênio em plantas.
[00164] Conforme mostrado nas Figuras 25 a 27, em comparação com o grupo de controle, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de nitrato redutase (NR) (Figura 25), glutamina sintetase (GS) (Figura 26) e glutamato sintase (GOGAT) (Figura 27) de plantas de milho em 50,8%, 52,5% e 96,4%, respectivamente (p < 0,01 ou p < 0,001). Além disso, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta as atividades mais altas de NR, GS e GOGAT de plantas de milho.
[00165] A-3.4. Uma composição da presente invenção induz mais expressão de genes relacionados ao crescimento, à fotossíntese e à eficiência no uso da água.
[00166] Conforme mostrado nas Figuras 28 a 32, plantas de milho tratadas com uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm expressão gênica significativamente maior de ZmG2 (um gene relacionado ao aumento do crescimento e fotossíntese; Figura 28), ZmGLK1 (um gene relacionado a aumentando o crescimento e a fotossíntese; Figura 29), ZmDOF1 (um gene relacionado ao aumento da fotossíntese; Figura 30), ZmPPdK (um gene relacionado ao aumento da fotossíntese; Figura 31) e ZmPIP2;1 (um gene relacionado à melhoria da eficiência do uso da água; Figura 32) do que plantas de milho tratadas com grupo de controle ou grupo teste 1 (p < 0,05 ou p < 0,01 ou p < 0,001).
B. Soja
[00167] B-3.1. Uma composição da presente invenção aumenta o crescimento das culturas.
[00168] Conforme mostrado nas Figuras 33 a 36, as plantas de soja tratadas com uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm áreas foliares maiores (Figuras 33A e 33B), mais peso fresco da parte aérea (Figura 34A), mais peso seco da parte aérea (Figura 34B), comprimento de raiz mais longo (Figuras 35A e 35B) e mais peso seco de raiz (Figura 36) do que plantas de soja tratadas com grupo de controle ou grupo de teste 1.
[00169] B-3.2. Uma composição da presente invenção melhora a eficiência das plantas na conversão de energia solar em energia química.
[00170] Conforme mostrado na Figura 37, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta as taxas de transporte de elétrons (ETR) mais altas em plantas de soja do que o grupo de controle e o grupo de teste 1. Os resultados indicam que uma composição da presente invenção promove o acúmulo de energia em plantas para absorver CO2 e sintetizar açúcar.
[00171] B-3.3. Uma composição da presente invenção melhora as atividades de enzimas chave na assimilação de nitrogênio em plantas.
[00172] Conforme mostrado nas Figuras 38 a 40, em comparação com o grupo de controle, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta significativamente as atividades de nitrato redutase (NR) (Figura 38), glutamina sintetase (GS) (Figura 39) e glutamato sintase (GOGAT) (Figura 40) das plantas de soja em 16,8%, 74,4% e 37,9%, respectivamente (p < 0,001). Além disso, uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) aumenta atividades mais altas de NR, GS e GOGAT de plantas de soja do que o grupo de teste 1.
[00173] B-3.4. Uma composição da presente invenção induz mais expressão de genes relacionados ao crescimento, à fotossíntese e à eficiência no uso da água.
[00174] Conforme mostrado nas Figuras 41 a 46, as plantas de milho tratadas com uma composição da presente invenção (grupo de teste 2) têm expressão gênica significativamente maior de GmWRKY58 (um gene relacionado ao aumento do crescimento; Figura 41), GmWRKY76 (um gene relacionado ao aumento do crescimento; Figura 42), GmNAC (um gene relacionado ao aumento do crescimento; Figura 43), GmCab3 (um gene relacionado ao aumento da fotossíntese; Figura 44), GmPIP1;6 (um gene relacionado à melhoria da eficiência do uso da água; Figura 45) e GmPIP2 (um gene relacionado à melhoria da eficiência do uso da água; Figura 46) do que plantas de milho tratadas com grupo de controle ou grupo de teste 1 (p < 0,05 ou p < 0,01 ou p < 0,001).
[00175] Para resumir, os exemplos demonstram que uma composição da presente invenção melhora o crescimento de plantas aumentando o crescimento de raízes, aumentando a fotossíntese, aumentando a absorção e a assimilação de nutrientes e aumentando a gestão da água pelas culturas.
Exemplo 6. Análise sequencial de RNA 1. Crescimento e Tratamento de Plantas
[00176] Sementes de soja (Roundup Ready 2 Xtend) foram semeadas em vasos contendo meio de cultura (solo turfa:vermiculita = 3:1) e colocadas em um fitotron, que foi operado à temperatura de 25/23 °C dia/noite e um ciclo 16/8 claro/escuro. Uma semente foi semeada em um vaso. Plantas de soja foram aplicadas com 0,1% (v/v) de Tween 80 (grupo de controle) ou Amostra 1 (8 mg/L de IBA, 1,8 mg/L de Cinetina, 5 mg/L de GABA e 25 mg/L de cloreto de colina) e 0,1% (v/v) de Tween 80 (grupo de teste) no estágio de V1 (um conjunto de folhas trifolioladas desdobradas) uma vez a uma taxa de 10 mL/12 vasos usando um tratamento de pulverização foliar.
2. Análises
[00177] 2.1 Perfil de RNA-seq: Três (3) réplicas foram realizadas. Seis (6) dias após a aplicação dos reagentes, todas as folhas de trifoloalato foram coletadas para extração de RNA pelo LabPrepTM RNA plus mini kit (LabTurbo Biotech Co.). O DNA genômico foi removido pelo kit TURBO DNA-freeTM (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, EUA). As bibliotecas de RNA-seq foram preparadas usando o TruSeq RNA Library Prep Kit v2 (Illumina, Inc., San Diego, CA, EUA) para sequenciamento na plataforma HiSeq 2500 (Illumina, Inc.). As leituras de RNA-Seq foram montadas em contigs e, em seguida, mapeadas para o genoma de Arabidopsis e sequências de cDNA. Para identificar genes diferencialmente expressos, foram selecionadas leituras de RNA-seq com a mudança de quantidade de mais de 2.
[00178] 2.2 Estatísticas: Os métodos estatísticos são os mesmos descritos no Exemplo 1.
3. Resultados
[00179] Conforme mostrado na Tabela 13 e nas Figuras 47 e 48, a Amostra 1 (grupo de teste) regula positivamente genes envolvidos na síntese de lignina e no alongamento celular, como SETH3, BGAL3, MIOX2, GMD1 e BCB (Figura 47), e genes envolvidos no crescimento e no alongamento das raízes, como COBRA, SKU5 e WAVH1 (Figura 48). Os resultados indicam que a Amostra 1 (uma composição da presente invenção) aumenta o crescimento da planta pela regulação positiva dos genes relacionados ao crescimento de parte aérea e raízes.
Figure img0015
[00180] Muitas mudanças e modificações na modalidade da invenção acima descrita podem, é claro, ser realizadas sem sair do escopo da mesma. Assim, para promover o progresso na ciência e nas artes úteis, a invenção é descrita e pretende ser limitada apenas pelo escopo das reivindicações anexas.

Claims (20)

  1. Composição concentrada para melhorar o crescimento de plantas, caracterizada pelo fato de que compreende entre cerca de 0,8 g/L a cerca de 80 g/L de auxina; entre cerca de 0,18 g/L a cerca de 18 g/L de citocinina; entre cerca de 0,5 g/L a cerca de 50 g/L de ácido γ-aminobutírico (GABA); e entre cerca de 2,5 g/L a cerca de 250 g/L de cloreto de colina
  2. Composição concentrada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a auxina é selecionada a partir de ácido indol-3- butírico (IBA), ácido indol-3-acético (IAA), ácido 2-fenilacético (PAA), ácido indol-3-propiônico (IPA) e ácido 1-naftalenoacético (NAA).
  3. Composição concentrada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a citocinina é selecionada a partir de N6- furfuriladenina (cinetina), 6-benzilaminopurina (BA), zeatina (ZT), N6-(2- isopentenil)adenina (2ip), difenilureia (DPU) e tidiazuron (TDZ).
  4. Composição concentrada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição concentrada para melhorar o crescimento de plantas é diluída cerca de 500 a cerca de 1.500 vezes antes do uso.
  5. Composição concentrada de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a composição concentrada melhora o crescimento de plantas por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar o crescimento de raízes, aumentar a fotossíntese em plantas, aumentar a absorção e a assimilação de nutrientes, aumentar o gerenciamento de água pelas plantas e reduzir a fototoxicidade mediada por herbicida em plantas.
  6. Composição pronta para uso para melhorar o crescimento de plantas, caracterizada pelo fato de que compreende entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina; entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina; entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L de ácido γaminobutírico (GABA); e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina.
  7. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a auxina é selecionada a partir de ácido indol-3-butírico (IBA), ácido indol-3-acético (IAA), ácido 2-fenilacético (PAA), ácido indol-3-propiônico (IPA) e ácido 1-naftalenoacético (NAA).
  8. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a citocinina é selecionada a partir de N6- furfuriladenina (cinetina), 6-benzilaminopurina (BA), zeatina (ZT), N6-(2- isopentenil)adenina (2ip), difenilureia (DPU) e tidiazuron (TDZ).
  9. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente 0,01 a 1% (v/v) de adjuvante.
  10. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que o adjuvante é um tensoativo.
  11. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que o adjuvante é um agente de controle de deriva.
  12. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a composição pronta para uso consiste essencialmente em: entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina; entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina; entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L de ácido γaminobutírico (GABA); e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina.
  13. Composição pronta para uso de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a composição pronta para uso melhora o crescimento de plantas por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar o crescimento de raízes, aumentar a fotossíntese nas plantas, aumentar a absorção e a assimilação de nutrientes, aumentar o gerenciamento de água pelas plantas, e reduzir a fototoxicidade mediada por herbicidas em plantas.
  14. Método para melhorar o crescimento de plantas, caracterizado pelo fato de que compreende uma etapa de aplicar uma composição de solução de uso a uma planta, e a composição de solução de uso compreendendo entre cerca de 0,8 mg/L a cerca de 80 mg/L de auxina; entre cerca de 0,18 mg/L a cerca de 18 mg/L de citocinina; entre cerca de 0,5 mg/L a cerca de 50 mg/L de ácido γaminobutírico (GABA); e entre cerca de 2,5 mg/L a cerca de 250 mg/L de cloreto de colina.
  15. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a auxina é selecionada a partir de ácido indol-3-butírico (IBA), ácido indol-3-acético (IAA), ácido 2-fenilacético (PAA), ácido indol3-propiônico (IPA) e ácido 1-naftalenoacético (NAA).
  16. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a citocinina é selecionada a partir de N6-furfuriladenina (cinetina), 6-benzilaminopurina (BA), zeatina (ZT), N6-(2-isopentenil) adenina (2ip), difenilureia (DPU), e tidiazuron (TDZ).
  17. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente uma etapa de misturar a composição de solução de uso com um adjuvante antes da etapa de aplicar a composição de solução de uso à planta.
  18. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a composição de solução de uso é aplicada à folhagem da planta.
  19. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a composição de solução de uso é aplicada às raízes da planta.
  20. Método de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que a composição da solução de uso melhora o crescimento de plantas por pelo menos um dos métodos selecionados a partir de aumentar o crescimento de raízes, aumentar a fotossíntese nas plantas, aumentar a absorção e a assimilação de nutrientes, aumentar o gerenciamento de água pelas plantas e reduzir a fototoxicidade mediada por herbicida em plantas.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116411019A (zh) * 2023-02-24 2023-07-11 西南大学 转录因子BnGLK1a在甘蓝型油菜育种中的应用

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8895473B2 (en) * 2012-04-05 2014-11-25 Ch Biotech R&D Co., Ltd. Aqueous composition for raising antioxidant enzyme activities and enhancing cell membrane-stability in plants exposed to low temperature
WO2015116716A1 (en) * 2014-01-29 2015-08-06 Verdesian Life Sciences, Llc Adjuvants for plant growth regulators
BR112018008456B1 (pt) * 2015-10-27 2022-04-05 Ch Biotech R&D Co., Ltd Método para tratar ou prevenir o huanglongbing (hlb) em plantas cítricas
TWI737234B (zh) * 2020-03-24 2021-08-21 正瀚生技股份有限公司 控制及預防青枯病之組合物
US11553657B2 (en) * 2021-06-07 2023-01-17 Ch Biotech R&D Co., Ltd. Method and composition for regulating plant architecture

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Sohail et al. Effect of NaCl Salinity on Growth and Mineral Composition of Ziziphus spina-christi (L.) Willd.
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