BR102021019418A2 - Método de tratamento ou prevenção da formação de hérnia - Google Patents

Abstract

Compreende a presente patente de Invenção em um MÉTODO DE TRATAMENTO OU PREVENÇÃO DA FORMAÇÃO DE HÉRNIA que fornece métodos de prevenção e redução da ocorrência e/ou desenvolvimento de uma hérnia dentro de um sujeito em risco de desenvolver uma hérnia onde o material de enxerto pode compreender tecido placentário em que o material de enxerto pode promover a cicatrização da abertura da parede abdominal, prevenindo ou reduzindo assim a ocorrência e/ou desenvolvimento de uma hérnia na pessoa em que o material de enxerto pode ser implantado em um procedimento de reparo de hérnia para prevenir inclusive reduzir a recorrência da hérnia onde o tecido da placenta pode incluir um tecido derivado da desta podendo incluir âmnio, córion, veia do cordão umbilical processado ou não, geleia de Wharton, ou suas combinações, como dHACM, cordão umbilical crio preservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, cordão umbilical processado e/ou não processado, ou cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica onde o material de enxerto pode ser alinhado com a abertura na parede abdominal onde o material de enxerto pode ser ancorado à parede abdominal, por pressão; por um adesivo, um clipe, uma tacha, uma sutura, um grampo ou um parafuso em que a incisão cirúrgica compreende uma incisão da fáscia abdominal e os aspectos da presente divulgação são ainda direcionados a um método de reparação de uma hérnia, compreendendo: a seleção de um material de enxerto; e o implante do material de enxerto em contato com uma abertura na parede abdominal, em que o material de enxerto repara a abertura da parede abdominal destacando os aspectos da presente divulgação sendo direcionados a um método de prevenção da recorrência de hérnia, compreendendo: a obtenção de um material de enxerto; e o implante do material de enxerto em uma pessoa, em que o material de enxerto é implantado em contato com uma abertura na parede abdominal e em que o material de enxerto evita a recorrência de hérnia.

Description

MÉTODO DE TRATAMENTO OU PREVENÇÃO DA FORMAÇÃO DE HÉRNIA CAMPO TECNOLÓGICO

[001] A presente patente de invenção se refere a métodos para prevenir o desenvolvimento ou reduzir a ocorrência de uma hérnia, mais especificamente, a presente patente está relacionada ao uso de material de enxerto de tecido para prevenir o desenvolvimento ou reduzir a ocorrência de uma hérnia.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

[002] Dois milhões de laparotomias são realizadas anualmente nos Estados Unidos com as hérnias incisionais (IH) sendo uma das principais complicações. Uma laparotomia se refere a uma incisão cirúrgica na cavidade abdominal, como para o diagnóstico de uma doença ou condição ou na preparação para uma cirurgia. A incidência de IH após laparotomia é em média de 12%, mas demonstrou atingir 73% em populações de alto risco. Isso leva a 400.000 novas IH por ano. Essas hérnias representam um grande fardo para o sistema de saúde, pacientes e cirurgiões. O reparo de IH (IHR) custa US$ 6-10 bilhões por ano (Dispositivos e consumíveis para reparo de hérnia). Pacientes submetidos a complicações de risco de IHR, incluindo infecção de local cirúrgico (20-30%) e recorrência de hérnia (20-30%) (Goodenough C, Ko TC, Kao LS". Desenvolvimento e validação de uma pontuação de estratificação de risco para hérnia incisional ventral após cirurgia abdominal: taxas de expectativa de hérnia em cirurgia intraabdominal (Projeto HÉRNIA). " J Am Coll Surg. 2015. Abril; 220 (4): 405-413). Os cirurgiões que realizam o RSI frequentemente usam malha sintética, o que os expõe a processos por imperícia relacionados à malha.

[003] A patogênese da IH não é totalmente compreendida. O mecanismo mais comumente citado é a falha mecânica, como ruptura de sutura. Os pacientes com IH enfrentam complicações importantes, incluindo obstrução intestinal, isquemia intestinal, dor crônica e incapacidade. O reparo é, portanto, indicado, mas mesmo em circunstâncias eletivas e limpas, as complicações relacionadas ao reparo são frequentes e incluem recorrência de hérnia, infecção de malha, dor crônica, lesão intestinal e intra-abdominal, ventilação restritiva e patologias abdominais e sepse. Quando os reparos de IH são realizados de emergência, como é necessário para obstrução ou estrangulamento intestinal, a incidência de complicações aumenta ainda mais.

[004] Prevenir e/ou reduzir as taxas de ocorrência de IH primária é, portanto, uma chave, mas sob estratégia desenvolvida. Até agora, a prevenção de IH tem se concentrado amplamente na otimização do suporte mecânico para a incisão fascial. As diretrizes cirúrgicas aceitas incluem o uso de incisões não medianas, escolha de sutura monofilamentar não absorvente, fechamento da fáscia do reto com uma única sutura contínua e manutenção de uma relação sutura para comprimento da ferida de 4:1. Em pacientes de alto risco, pode ser usada a malha sintética de camada inferior profilática, mas não é o tratamento padrão devido aos riscos associados. Mesmo quando usadas, tais estratégias profiláticas de malha subjacente não incluem o uso de tecidos placentários (PT), como tecidos derivados da placenta (PDT).

[005] Antes de nosso trabalho, não foi identificada nenhuma estratégia clinicamente comprovada para rednzir as taxas de formação de IH.

[006] A presente divulgação fornece métodos para promover a cura fascial, prevenir ou reduzir a ocorrência e/ou desenvolvimento de uma hérnia, ou prevenir ou reduzir a recorrência de hérnia ou o desenvolvimento de uma hérnia recorrente. Em várias formas de realização, os métodos podem incluir a seleção de um material de enxerto, como um que compreende um tecido placentário (PT) do mesmo para implante em contato com, em estreita proximidade, ou adjacente a uma abertura na fáscia ou parede abdominal. O PT pode compreender PDT. Em uma outra forma de realização, os métodos podem incluir o implante de material de enxerto compreendendo PT em contato com, em estreita proximidade ou adjacente a uma abertura na fáscia ou parede abdominal. Em várias formas de realização, tais métodos usando PT, que pode incluir PDT, poderá ser utilizado material de enxerto para reduzir drasticamente a taxa e/ou extensão de formação de hérnia em indivíduos, como indivíduos em risco de desenvolver uma hérnia. As formas de realização aqui descritas podem compreender o uso de PT, PDT, membranas, componentes e dispositivos médicos na prevenção ou redução da ocorrência, recorrência e/ou desenvolvimento de hérnias, tais como hérnias incisionais e parastomais.

[007] Descrições detalhadas de uma ou mais formas de realização preferidas, exemplos e configurações são fornecidas aqui. Deve ser entendido, no entanto, que a presente invenção pode ser realizada em várias formas. Portanto, os detalhes específicos divulgados neste documento não devem ser interpretados como limitantes, mas sim como uma base para as reivindicações e como uma base representativa para ensinar um versado na técnica a empregar a presente invenção de qualquer maneira apropriada.

[008] Os aspectos da presente divulgação são direcionados a métodos de cura de uma abertura na fáscia, como uma incisão ou uma hérnia. O termo "fáscia" refere-se a uma camada de tecido fibroso que envolve o corpo ou partes do corpo sob a pele. Também inclui músculos ou grupos de músculos. Nas formas de realização, poderá ser evitada uma abertura ou incisão na fáscia, ou poderá ser tratada conforme descrito neste documento. Por exemplo, a abertura pode compreender a fáscia incisada, que é o tecido da fáscia que foi cortado, como por uma incisão ou eletrocautério, e a fáscia excisada, que é o tecido da fáscia que foi removido por qualquer meio.

[009] Os aspectos da presente divulgação também são direcionados a métodos de cura de uma abertura na parede abdominal, como uma incisão abdominal ou uma hérnia abdominal. A parede abdominal representa os limites da cavidade abdominal, e é dividida nas paredes posterior (traseira), lateral (lados), anterior (frontal), superior (superior ou em direção à cabeça) e inferior (inferior ou em direção à pelve). Na anatomia humana, as camadas da parede abdominal são (da superficial à profunda) pele, tecido subcutâneo; fáscia (fáscia de Camper e fáscia de Scarpa); músculo (músculo abdominal oblíquo externo; músculo abdominal oblíquo interno; reto abdominal; músculo transverso abdominal; músculo piramidal; fáscia transversal; gordura extraperitoneal; e peritônio. Também inclui a linha alba, que vai do apêndice xifóide à sínfisc púbica na linha média do abdome e é uma coalescêneia de várias camadas da parede abdominal. O limite superior da cavidade abdominal é composto pelo diafragma. O limite inferior da cavidade abdominal é composto pelo assoalho pélvico.

[010] Nas formas de realização, a abertura, como uma abertura causada por uma incisão cirúrgica ou punção, pode resultar em uma hérnia. As hérnias também podem ser congênitas ou ocorrer sem serem resultado de eirurgia. Isso inelui hérnias inguinais, hérnias esportivas e hérnias de Spigel, por exemplo.

[011] O termo " hérnia" pode referir-se a uma protrusão de uma parte ou estrutura através dos tecidos que normalmente a contém. As hérnias são normalmente nomeadas de acordo com a área onde ocorre a protrusão. Por exemplo, a hérnia umbilical é uma protusão de gordura ou vísceras através da parede abdominal ao nível do umbigo. Como outro exemplo, uma "hérnia abdominal" pode se referir a uma protrusão através ou para dentro de qualquer parte da parede abdominal, como o caso quando os intestinos extrudem através de uma área enfraquecida na parede abdominal. Os limites da parede abdominal são o diafragma superior, pelve inferior, coluna posterior, parede abdominal muscular lateral e anterior. Por exemplo, uma hérnia da parede abdominal pode se referir a uma protrusão de órgão abdominal ou protusão de gordura através do limite.

[012] Os tipos mais comuns de hérnias são inguinal (virilha), incisional (resultante de uma ineisão), femoral (virilha), umbilical (umbigo), parassomática e hiatal / diafragmática (abdome superior). Exemplos não limitativos de outros tipos de hérnias ineluem lombar, diafragmátiea, ventral, pós-operatória, epigástrica, spigeliana, fraqueza no assoalho pélvico (como hérnia obturatória) ou geralmente qualquer hérnia relacionada à parede abdominal. Exemplos não limitativos de hérnias não incisionais incluem hérnias inguinais, hérnias spigelianas, hérnias esportivas, hérnia lombar, hérnia femoral, hérnia diafragmática, hérnia hiatal e/ou hérnia obturadora. O versado na técnica reconhecerá que na interpretação mais geral, poderá ocorrer uma hérnia em quaisquer órgãos ocos do corpo e/ou nos referidos orifícios naturais e/ou artificiais e/ou nos referidos espaços e/ou nos referidos espaços pós-operatórios.

[013] Por exemplo, as formas de realização da presente divulgação podem ser particularmente adequadas para prevenir, reduzir a ocorrência ou desenvolvimento e/ou tratar uma hérnia parastomal. A hérnia parasstomal é um tipo de hérnia incisional (IH) que permite a protrusão do conteúdo abdominal através do defeito da parede abdominal criado durante a formação da ostomia. Ao contrário do desenvolvimento de uma hérnia em uma incisão cirúrgica para a qual o problema fundamental é a cicatrização entre os tecidos que foram aproximados, a criação de ostomia introduz um defeito na parede abdominal para o qual não é esperada nenhuma cicatrização. Uma hérnia parastomal se forma à medida que o defeito é continuamente alongado pelas forças tangenciais à sua circunferência. Esse alongamento permite que as vísceras abdominais adicionais formem uma hérnia adjacente à ostomia. A incidência relatada de hérnia paraestomal varia amplamente e está relacionada ao tipo de estomia confeccionada, a duração do acompanhamento após a confecção da estomia e a definição usada para identificar a hérnia parestomal. A incidência de hérnia parastomal é relatada como variando de 0 a 50 por cento, dependendo do tipo de ostomia.

[014] As formas de realização da presente divulgação são particularmente adequadas para prevenir, reduzir a ocorrência e/ou desenvolvimento e/ou tratar uma hérnia incisional (IH). Uma IH refere-se a uma protrusão de tecido que se forma no local de uma incisão cirúrgica ou cicatriz cirúrgica em cicatrização. O termo "local da incisão cirúrgica" pode referir-se ao corpo ou superfície do tecido ao qual uma incisão cirúrgica deve ser feita ou foi feita, bem como a área imediata adjacente ou próxima ã incisão. O "local da incisão cirúrgica" pode ser referido como uma "abertura" em um tecido. Esta área imediata se estende em todas as direções além da incisão. Por exemplo, a área imediata pode se estender cerca de 5 a 30 centímetros além da incisão. Por exemplo, a área imediata pode se estender de 5 a 30 centímetros além da incisão. Por exemplo, uma hérnia abdominal pode resultar de uma incisão que causa uma abertura na parede abdominal e, portanto, pode ser chamada de hérnia incisional. As cirurgias que podem resultar em IH, por exemplo, compreendem laparotomia (celiotomia), laparoscopia, cirurgia de estoma ou correção de hérnia abdominal. A hérnia também pode se formar a partir da desvascularização ou do enfraquecimento da parede abdominal, como da própria cirurgia ou de uma infecção do local cirúrgico secundário à cirurgia.

[015] As formas de realização da presente divulgação também podem ser adequadas para o tratamento de uma hérnia e área próxima à hérnia. Por exemplo, a área próxima à hérnia pode compreender uma musculatura da parede abdominal e fáscia, diafragma e/ou pelve.

[016] Embora qualquer pessoa possa ter uma hérnia, grupos específicos de indivíduos são especialmente suscetíveis ao desenvolvimento de hérnias. Em várias formas de realização, as metodologias aqui descritas podem ter aplicação benéfica para prevenir, reduzir a ocorrência e/ou desenvolvimento e/ou tratar uma hérnia em uma pessoa com risco de desenvolver uma hérnia. Por exemplo, as pessoas em risco de desenvolver uma hérnia podem compreender aquelas que são obesas e/ou afetadas com diabetes, afetadas por uma infecção (como uma infecção de local cirúrgico, infecção intra-abdominal, infecção de tecido profundo ou infecção abdominal superficial), desnutridas, em quimioterapia pré-operatória, de idade avançada, grávidas, com doença do tecido conjuntivo, com tosse crônica, submetida a transfusão sanguínea intra-operatória, submetidas a cirurgia (como uma ressecção intestinal, cirurgia de cólon ou cirurgia de emergência), que são administrados corticosteroides, fumam, têm doença pulmonar obstrutiva crônica, têm enfisema, têm doença vascular periférica, têm diabetes mellitus Tipo 1 ou Tipo 2 ou qualquer combinação dos mesmos. Outros fatores de risco incluem, mas não estão limitados a, insuficiência cardíaca congestiva, insuficiência renal, insuficiência hepática (especialmente com ascite), pacientes com constipação ou BPH (aumento intencional da pressão abdominal para urinar ou defecar), pacientes com amputações de membros superiores ou inferiores ou fraqueza (via dependência aumentada da musculatura central). Pacientes com trabalhos que exigem levantamento de peso ou cuidar de familiares inválidos também podem predispor à formação de hérnia. De acordo com a clínica Mayo, ser do sexo masculino e ser branco aumenta o risco de hérnia, assim como o histórico familiar de hérnias.

[017] Como introduzido acima, as várias formas de realização da presente divulgação incluem a administração, por exemplo, implante de material de enxerto em uma pessoa para promover a cura fascial; prevenir e/ou reduzir a ocorrência, desenvolvimento e/ou recorrência de hérnia; e/ou prevenir a falha do reparo da hérnia. O termo "material de enxerto" pode se referir a um material que pode ser colocado, ligado ou inserido em uma parte corporal. O material de enxerto pode ser um material de enxerto de tecido que compreende tecido e/ou tecido processado. O material de enxerto de tecido pode compreender ainda composições adicionais, tais como composições sintéticas ou biológicas, conforme descrito neste documento.

[018] O material de enxerto pode ser um tecido de mamífero ou seu derivado, como um PT ou PDT. Um derivado de tecido é preparado a partir de um tecido, como um tecido de mamífero, por meio de tratamento físico e/ou químico do tecido natural para produzir um tecido derivado que retém a estrutura natural e/ou características básicas do tecido natural. Por exemplo, o tecido pode ser desidratado, tal como desidratado quimicamente ou liofilizado; decelularizado; reticulado; congelado; criopreservado; revigorado; descontaminado; limpo; ou qualquer combinação dos mesmos, produzindo assim um derivado de tecido. Um derivado de tecido também pode ser preparado a partir de células isoladas do tecido, tais como exossomos derivados de células da placenta.

[020] Nas formas de realização, o material de enxerto compreende um aloenxerto. O termo "aloenxerto" pode referir-se a um enxerto de tecido de um doador da mesma espécie do receptor, mas não geneticamente idêntico. Por exemplo, o aloenxerto pode compreender um aloenxerto PT ou PDT, tal como um aloenxerto de membrana de âmnio-córion humano desidratado (dHACM). Em outras formas de realização, o material de enxerto compreende um autoenxerto. O termo "autoenxerto" pode se referir a um enxerto de tecido de um ponto a outro no corpo do mesmo indivíduo.

[021] Nas formas de realização, o material de enxerto pode ser um enxerto de tecido placentário (PT). Veja, por exemplo, a Publicação do Pedido de Patente dos EUA N° 20130230561 Al, que é incorporada neste documento por referência em sua totalidade. O termo “tecido placentário” (PT) pode referir-se a um ou mais dos componentes individuais da placenta (mas não a toda a placenta). Tais componentes são bem conhecidos na técnica e incluem uma membrana placentária (tal como âmnio e/ou córion), veia do cordão umbilical, geleia de Wharton e qualquer combinação dos mesmos. Incluídos no termo "âmnio" estão os âmnios modificados e não modificados. O âmnio modificado inclui o âmnio no qual a camada epitelial foi removida (de forma mecânica, química ou enzimática) enquanto retém a camada celular de fibroblastos, o âmnio que foi completamente descelularizado, bem como o âmnio que retém a camada epitclial enquanto a camada de fibroblasto é removida. O termo "tecido placentário" (PT) pode referir-se ao próprio tecido intacto, ou componentes do tecido, tais como a matriz descelularizada, matriz celularizada, exossomos, tais como aqueles produzidos por células-tronco derivadas da placenta ou das próprias células.

[022] O material de enxerto compreendendo PT ou "enxerto PT" refere-se a uma ou mais camadas de tecido placentário são adequadas para uso como um enxerto no tratamento de uma condição em um mamífero, como um ser humano. Os enxertos PT podem ser implantados em sua forma não processada ou, altemativamente, podem ser processados em um derivado de tecido. Por exemplo, o PT pode ser processado para gerar PDT de qualquer forma que preserve a capacidade do tecido de eluir fatores de crescimento ou preservar a matriz extracelular de uma forma que promova a cura da fáscia. Por exemplo, o PT pode ser desidratado, tal como desidratado quimicamente ou liofilizado; decelularizado; reticulado; congelado; criopreservado; revigorado; descontaminado; limpo; ou qualquer combinação dos mesmos.

[023] O PT, como o PDT, estão comercialmente disponíveis em muitas formas e têm sido usados como adjuvantes de cura para uma ampla gama de feridas externas, como incluindo feridas de pé diabético (Didomenico LA, Orgill DP, Galiano RD. Et al. "A membrana placentária processada assepticamente melhora a cura de ulcerações do pé diabético: Ensaio clinico prospectivo, randomizado. " Plast Reconstr Surg Glob Open. 2016;4(10):el095.; Zelen CM. "Uma avaliação de aloenxertos de membrana amniótica humana desidratada em pacientes com DFUx " J Wound Cate. 2013;22(7):347- 351; Zelen CM, Serena TE, Denoziere G, et al. "Um estudo prospectivo paralelo randomizado comparativo de enxerto de membrana amniótica no tratamento de úlceras de pé diabético." Int Wound J. 2013b;10(5):502-507; Zelen CM, Serena TE, Snyder RJ. "Um estudo comparativo prospectivo e randomizado da aplicação semanal versus quinzenal de aloenxerto de membrana cório/âmnio humano desidratado no tratamento de úlceras de pé diabético." Int Wound J. 2014; 1(2): 122-128; Zelen CM, Snyder RJ, Serena TE, et al. "Ο uso de membrana de âmnio/cório humano no ambiente clínico para reparo de membros inferiores: uma revisão da Clin Podiatr Med Surg. 2015b;32(l): 135-146; Zelen CM, Poka A, Andrews J. "Estudo prospectivo, randomizado, cego, comparativo de aloenxerto injetável de membrana amniótica / coriônica desidratada micronizada para fascite plantar - um estudo de viabilidade." Foot Ankle Int. 2013a;34(10): 1332-1339), fascite plantar (Zelen et. al, 2013a), feridas crônicas que não cicatrizam (Sheikh ES, Sheikh ES, Fetterolf DE. "Uso de aloenxertos de membrana amniótica humana desidratada para promover a cicatrização em pacientes com feridas refratárias que não cicatrizam." Int Wound J. 2014;11(6):711-7), e feridas de membros inferiores (Zelen et. al, 2015). O PT, no entanto, não foi usado anteriormente para melhorar a cicatrização fascial, prevenir o desenvolvimento de hérnia ou prevenir a recorrência da hérnia.

[024] Em várias formas de realização, o enxerto PT pode ser uma membrana de âmnio/córion humano desidratado (dHACM). Veja, por exemplo, Lei, Jennifer, et al. "Aloenxertos de membrana cório/âmnio humano desidratado (dHACM) como uma terapia para reparo de tecido ortopédico." Técnicas em Ortopedia 32.3 (2017): 149-157, que é incorporado por referência neste documento em sua totalidade. Este PDT elui mais de 285 moléculas reguladoras, incluindo fator de crescimento derivado de plaquetas-AA (PDGF-AA), PDGF-BB, fator de crescimento transformador a (TGFa), TGF i, fator de crescimento de fibroblastos básico (bFGF), fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento placentário (PLGF) e fator estimulador de colônia de granulôcitos (GCSF) e IL-4, 6, 8 e 10, e TIMP 1, 2 e 4. O dHACM é um adjuvante de cura disponível comercialmente e está atualmente disponível em pelo menos duas formas 1) como camadas implantáveis que eluem proteínas regulatôrias pós-implante, produzindo entrega sustentada de múltiplos fatores de crescimento, e 2) como uma injeção micronizada que pode ser colocada ao longo da incisão fascial que elui de forma semelhante vários fatores de crescimento ao longo do tempo. Por exemplo, os produtos de dHACM incluem Amniofix® e Epifix®, fabricados pela MiMedx Group Inc., Marietta, GA, EUA.

[025] Em uma forma de realização, o PT compreende o cordão umbilical criopreservado e a matriz de membrana amniótica. Um exemplo deste PDT está disponível comercialmente com o nome Neox 100®, Amniox Medicai Inc., Miami, FL. Também existe disponível comercialmente um cordão umbilical criopreservado semelhante e um produto de membrana amniótica, Neox Cord IK®, também fabricado pela Amniox Medicai Inc. Em outra forma de realização de exemplo, o PT compreende um tecido derivado da placenta desidratada de três camadas composta pela membrana amniótica não separada e pela membrana coriônica com a camada intermediária intacta, um exemplo do qual é o AminoWrap2™, Direct Biologies LLC, St. Louis, MO. Ainda outro exemplo de forma de realização, 0 PT compreende âmnio e cório de três camadas desidratados, um exemplo dos quais é o NuShield®, Organogenesis Ine., Canton MA. Deve ser apreciado que em várias formas de realização, o material de enxerto pode compreender PT incluindo uma combinação de PT nativo/não processado e derivado. Em algumas formas de realização, o material de enxerto pode compreender PT incluindo uma combinação de PDT com ou sem PT nativo/não processado.

[026] Nas formas de realização, o material de enxerto incluindo PT pode ser aplicado ao sujeito de várias formas. Por exemplo, o material de enxerto pode ser aplicado na forma de membrana, por exemplo, como uma camada ou semelhante a uma camada. Além disso, o material de enxerto pode ser aplicado na forma micronizada ou em pó, tal como produzido quando o tecido da membrana foi cromilado e peneirado para dimensionamento de partículas. Por exemplo, enxertos de forma micronizada podem ser produzidos usando peneiras 180 e 25 μm para dimensionamento de partículas. O material de enxerto micronizado ou em pó pode ser espalhado ou espalhado sobre uma abertura, como uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura. Alternativamente, o tecido micronizado pode ser reconstituído em uma solução, como uma solução salina, e administrado para pacientes como um material fluido ou injetável. Por exemplo, o material de enxerto micronizado pode ser solubilizado/dissolvido e injetado dentro de 4 cm de uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura.

[027] Conforme discutido neste documento, o material de enxerto incluindo PT pode ser fornecido como uma camada plana ou forma semelhante a uma camada, tal como na forma de membrana, ou como uma nanopartícula ou pó, que pode ser referido como forma micronizada. Os termos "camada" e "semelhante a camada", conforme usados neste documento, geralmente se referem a uma superfície ou camada ampla e relativamente fina de um material. Essas camadas podem, mas não tem permissão para, ser relativamente flexíveis e podem ser planas ou uniformes em espessura ou podem variar em espessura ao longo de sua superfície. As camadas podem ser de uma única superfície lisa ou podem ser gradeadas ou perfuradas. A forma micronizada pode ser ressuspensa em uma solução, como água ou solução salina, antes do implante ou administração a pessoa. A forma micronizada ressuspensa ou pó pode ser referido como lodo ou lama.

[028] Nas formas de realização, o material de enxerto incluindo PT pode compreender ainda composições que fornecem propriedades mecânicas aprimoradas, funcionalidade e/ou estrutura para o material de enxerto. Por exemplo, as composições podem fornecer suporte adicional para o material de enxerto e/ou o tecido enfraquecido ou danificado, ou uma estrutura para as células endógenas povoarem de modo a promover a cura. Como outro exemplo, a composição pode permitir que o enxerto seja mais durável do que um enxerto que não contém a composição e, assim, evitar a falha do enxerto devido a foiças mecânicas. Essas composições podem compreender uma malha sintética, uma malha biológica ou uma estrutura de tecido. Em várias formas de realização, o material de enxerto inclui PT, como PDT, em combinação com uma malha sintética ou biológica ou estrutura de tecido. Ainda em outra forma de realização, o PT pode ser integrado com a malha sintética ou biológica ou estrutura de tecido. Integrado pode incluir posicionado dentro, ligado e/ou em camadas ou revestido com o PT, por exemplo.

[029] As malhas sintéticas são composições feitas pelo homem formadas pela polimerização de uma variedade de monômeros, como macromoléculas compreendendo ácido poliacrílico, ácido poliaspártico, ácido politartárico, ácido poliglutâmico, ácido polifumárico e assim por diante , bem como suas formas de sal (como sal de sódio e sal de potássio ). Exemplos não limitativos de polímeros sintéticos compreendem cianoacrilato. A malha sintética pode compreender poliglactina (como malha de Vicryl), e-PTFE, poliprolileno, poliéster, poliglieólieo, poliéster/eolágeno, polipropileno/PG910, polipropileno/e-PTFE, polipropileno/celulose, polipropileno/PVDF, polipropileno/hialuronato de sódio, polipropileno/poliglecaprone, polipropileno/titânio, polipropileno/ômega 3, BioA e semelhantes. Veja, por exemplo, Gillem, Suzanne e Joshua IS Bleier. "Reparo e reforço de hérnia parastomal: o papel de materiais biológicos e sintéticos.” Clínicas em cirurgia retal e de cólon 27.04 (2014): 162-171, que é incorporado por referência neste documento em sua totalidade.

[030] A malha feita de materiais sintéticos pode ser encontrada em malha tricotada ou em formas de camada não tricotada. Os materiais sintéticos usados podem ser absorvíveis, não absorvíveis ou uma combinação de materiais absorvíveis e não absorvíveis.

[031] As malhas biológicas são feitas de tecido de mamífero não placentário, como pele, bexiga ou intestino, que foi processado, reticulado, tratado quimicamente e/ou desinfetado para ser adequado para uso como um dispositivo implantado. A malha biológica pode ou não ser absorvível. A maioria dos tecidos usados para produzir esses implantes de tela são de origem humana, suína (porcina) ou vaca (bovina). A malha biológica pode compreender composições biológicas, tais como matriz dérmica acelular ou matriz da bexiga urinária. Veja, por exemplo, Gillem, Suzanne e Joshua IS Bleier. "Reparo e reforço de hérnia parastomal: o papel de materiais biológicos e sintéticos." Clínicas em cirurgia retal e de cólon 27.04 (2014): 162-171, que é incorporado por referência neste documento em sua totalidade. Por exemplo, a malha biológica pode compreender uma malha que era tecido vivo de origem humana ou animal, tomada acelular e composta por proteínas reticuladas ou não reticuladas. A malha biológica pode ser parcial ou totalmente reabsorvida.

[032] A malha biológica também pode ser formada pela polimerização de polímeros naturais. Os polímeros naturais ocorrem na natureza e podem ser extraídos, como polissacarídeos ou proteínas. Exemplos não limitativos de polissacarídeos compreendem sulfato de condroitina, heparina, heparano, ácido algínico (alginato), tecido hialurônico, dermatan, dermatan sulfato, pectina, carboximetilcelulose, quitosana, melanina (e seus derivados, como eumelanina, feomelanina e neuromelanina), ágar, agarose, gel, goma e semelhantes, bem como suas formas de sal (tais como sal de sódio e sal de potássio). Exemplos não limitativos de proteínas compreendem colágeno, gelatina alcalina, gelatina ácida, gelatina de recombinação de genes e assim por diante.

[033] Um andaime de tccido se refere a uma composição que pode atuar como um andaime estrutural, tal como um andaime pelo qual células viáveis podem ser prontamente preenchidas. O termo " célula viável" pode se referir a uma célula que está viva e capaz de crescimento, proliferação, migração e/ou diferenciação. Por exemplo, um andaime de tecido pode compreender matrizes, como a matriz de colágeno. O material de enxerto pode ser misturado com as matrizes e a mistura resultante pode ser aplicada no topo (camada superior) de uma abertura que foi fechada com uma sutura. Em algumas formas de realização, as células do tecido nativo (por exemplo, o sujeito hospedeiro) podem migrar para o arcabouço do tecido e prontamente repovoar o enxerto (e assim promover a cura). Nas formas de realização, o enxerto pode ser semeado com células viáveis de modo a repovoar o enxerto com as células viáveis antes do implante.

[034] Nas formas de realização, o material de enxerto é não absorvível ou substancialmente não absorvível, que permanecerá no corpo indefinidamente e é considerado um implante permanente. Ele é usado para fornecer reforço permanente à hérnia reparada.

[0358] Em outras formas de realização, o material de enxerto é absorvível ou substancialmente absorvível, o qual se degradará com o tempo. Não se destina a fornecer reforço de longo prazo para o local de reparo. A medida que o material se degrada, o crescimento de novos tecidos visa fornecer resistência ao reparo.

[036] Em outras formas de realização, o material de enxerto pode compreender ainda um ou mais agentes terapêuticos e/ou fármacos, como para a liberação sustentada ou controlada de tais agentes terapêuticos e/ou fármacos. Tais agentes podem ser usados para prevenir e/ou tratar a progressão e/ou sintomas da doença (tais como aquelas doenças e sintomas aqui descritos), e também podem ser usados para prevenir, tratar e/ou aliviar os efeitos colaterais indesejados do implante do enxerto. Exemplos não limitativos de efeitos colaterais indesejados do implante ou enxerto, por exemplo, compreendem complicações de resposta imune, dor, infecção, inflamação ou cicatriz. Esses efeitos colaterais indesejados podem ser evitados, tratados ou aliviados por meio da liberação sustentada, controlada e local de fármaco e/ou agentes terapêuticos do polímero ou do material de enxerto. Por exemplo, os materiais de enxerto aqui descritos podem incluir a adição de pelo menos um antibiótico, pelo menos um anti-inflamatório e/ou pelo menos um analgésico e/ou anestésico que pode prevenir a infecção, reduzir a inflamação local e diminuir a dor no local cirúrgico e/ou local de implante, proporcionando assim, por exemplo, alívio sintomático.

[037] Ο material de enxerto, como materiais de enxerto PT, pode ser misturado, combinado, em camadas, revestido e/ou integrado com agentes terapêuticos e/ou profiláticos permitindo a liberação sustentada do agente terapêutico e/ou profilático. Exemplos não limitativos de tais agentes compreendem antibióticos, analgésicos, antiinflamatórios ou qualquer combinação dos mesmos.

[038] "Antibiótico" pode se referir a um agente que controla o crescimento de bactérias, fungos ou microrganismos semelhantes, em que a substância pode ser uma substância natural produzida por bactérias ou fungos, ou uma substância sintetizada química/bioquimicamente (que pode ser um análogo de uma substância natural), ou uma forma quimicamente modificada de uma substância natural. Um versado na técnica reconhecerá que o andaime pode ser revestido com uma ampla variedade de antibióticos, como penicilinas, cefalosporinas, macrolídeos, fluoroquinolonas, sulfonamidas, tetraciclinas, aminoglicosídeos e semelhantes.

[039] "Analgésieo" pode se referir a um agente que pode fornecer alívio da dor. Um analgésico é qualquer membro de um grupo de fármacos usados para obter analgesia, ou seja, o alívio da dor. Por exemplo, o analgésico pode ser um derivado de pirazolona, como (ampirona, dipirona, antipirina, aminopirina e propifenazona), aspirina, paracetamol, um anti-inflamatório não esteroidal (como ibuprofeno, diclofenaco sódico ou naproxeno sódico), um opióide (como fosfato de codeína, cloridrato de tramadol, sulfato de morfina, oxicodona) ou qualquer combinação dos mesmos. Um anestésico se refere a qualquer membro de um grupo de fármacos usadas para induzir a anestesia - em outras palavras, para resultar em uma perda temporária da sensação ou percepção da dor. Exemplos não limitativos de anestésicos incluem benzocaína, cloroprocaína, cocaína, ciclometicina, dimetocaína, larocaína, piperocaína, propoxicaína, procaína, novocaína, proparacaína, tetracaína, ametocaína, articaína, bupivacaína, cinquocaína, dibucaína, etidocaína, lidocaína, prilocaína, ropivacaína, trimecaína.

[040] Um "anti-inflamatório" refere-se a uma substância que trata ou reduz a gravidade da inflamação e/ou inchaço. Exemplos não limitativos de anti-inflamatórios compreendem anti-inflamatórios esteroides (como corticosteróides) e anti-inflamatórios não esteroides (como aspirina, celecoxib, diclofenac, diflunisal, ibuprofeno, indometacina, cetoprofeno, cetorolaco, nabumetona, naproxinato, piroxicam, salsalato, sulindac, tolmetina).

[041] Materiais de enxerto de liberação sustentada podem ter um objetivo comum de melhorar o tratamento e/ou alívio sintomático em relação ao alcançado por suas contrapartes não controladas. Ο uso de uma preparação de liberação sustentada idealmente projetada em tratamento médico pode ser caracterizado por um mínimo de substância do fármaco sendo empregada para curar, controlar e/ou fornecer alivio da condição em um período mínimo de tempo. Por exemplo, os enxertos de liberação sustentada podem liberar uma quantidade de um fármaco ao longo de 1 dia, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 2 meses, 3 meses, 4 meses, 5 meses, 6 meses, 7 meses, 8 meses, 9 meses, 10 meses, 11 meses, 12 meses ou mais. As vantagens das formulações de liberação sustentada incluem atividade prolongada do fármaco, frequência de dosagem reduzida e maior adesão do paciente. Além disso, as formulações de liberação sustentada podem ser usadas para afetar o tempo de inicio da ação ou outras características, como os níveis sanguíneos do fármaco, e podem, assim, afetar a ocorrência de efeitos colaterais (por exemplo, efeitos adversos).

[042] A maioria das formulações de liberação sustentada são projetadas para liberar inicialmente uma quantidade de medicamento (ingrediente ativo) que produz imediatamente o efeito terapêutico desejado e, gradual e continuamente, liberar outras quantidades de fármaco para manter este nível de efeito terapêutico ou profilático ao longo de um período de tempo prolongado. Para manter esse nível constante de fármaco no corpo, o fármaco deve ser liberado a uma taxa que represente a quantidade de fármaco que está sendo metabolizada e excretada do corpo. A liberação sustentada de nm ingrediente ativo pode ser estimulada por várias condições, incluindo, mas não se limitando ao pH, temperatura, enzimas, água ou outras condições fisiológicas ou compostos.

[043] O material de enxerto pode compreender fatores de crescimento, como fatores de crescimento endógenos, citocinas, quimiocinas e inibidores de protease, muitos dos quais funcionam para estimular respostas parácrinas em fibroblastos, células endoteliais e células-tronco para promover a cicatrização e reparo de tecidos. Estudos anteriores identificaram mais de 226 fatores de crescimento, citocinas, quimiocinas e inibidores de protease, muitos dos quais funcionam para estimular respostas parácrinas em fibroblastos, células endoteliais e células-tronco para promover a cicatrização e reparo de tecidos. Além disso, esses fatores bioativos, incluindo fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento de fibroblastos-4 (FGF-4) e TGF-β são conhecidos por promover a proliferação, migração e secreção de fatores parácrinos por fibroblastos, células endoteliais e uma variedade de células-tronco adultas , incluindo célnlas-tronco mesenquimais derivadas da medula óssea, células-tronco derivadas do tecido adiposo e célnlas-tronco hematopoiéticas. Em um modelo de implante subcutâneo de camundongo, o recrutamento aumentado de célnlas-tronco hematopoiéticas e a angiogênese aprimorada foram demonstradas em resposta aos implantes dHACM. Esses estudos demonstram que o dHACM contém fatores de crescimento ativos e outras biomoléculas que retêm a capacidade de dirceionar ou suplementar a atividade biológica, por exemplo, regulando células endógenas em um ambiente de ferida. Exemplos não limitativos de tais fatores de crescimento, como EGF, FGF-4 e TGF-β.

[044] Como introduzido acima, os aspectos da presente divulgação são direcionados a métodos de implante de um material de enxerto em uma pessoa para promover a cura fascial; prevenir e/ou reduzir a ocorrência, desenvolvimento e/ou recorrência da hérnia; e/ou prevenir o fracasso do reparo da hérnia ou retardar o desenvolvimento de um reparo de hérnia que falhou. Tais aspectos podem ser particularmente aplicáveis a indivíduos que sofrem de hérnia e indivíduos que estão em risco de desenvolver uma hérnia.

[045] O termo "pessoa" ou "paciente" pode se referir a qualquer organismo ao qual aspectos da presente divulgação podem ser administrados, por exemplo, para fins experimentais, diagnósticos, profiláticos e/ou terapêuticos. As pessoas típicas as quais os compostos da presente divulgação podem ser administrados serão mamíferos, particularmente primatas, especiahlmente humanos. Para aplicações veterinárias, uma grande variedade de animais será adequada, por exemplo, na pecuária, como gado, ovelhas, cabras, vacas, porcos e semelhantes; aves domésticas, como galinhas, patos, gansos, perus e semelhantes; e animais domesticados, particularmente animais de estimação, como cães e gatos. Para aplicações de diagnóstico ou pesquisa, uma ampla variedade de mamíferos serão espécimes adequados, incluindo roedores (por exemplo, camundongos , ratos , hamsters), coelhos, primatas e suínos, como porcos consanguíneos e semelhantes. O termo “espécime vivo” refere-se a um espécime mencionado acima ou outro organismo que está vivo. O termo “espécime vivo” refere-se a todo o espécime ou organismo e não apenas a uma parte extirpada (por exemplo, um fígado ou outro órgão) do espécime vivo.

[046] Pessoas em risco de desenvolver uma hérnia referem-se a uma pessoa que tem um risco significativamente maior de desenvolver uma hérnia do que o risco médio de uma pessoa de mesma idade e sexo da população em geral. Veja, por exemplo, Ahn, Byung-Kwon. "Fatores de risco para hérnia incisional e hérnia parastomal após cirurgia colorretal. "Journal of the Korean Society of Coloproctology 28.6 (2012): 280, que é incorporado por referência neste documento em sua totalidade.

[047] Por exemplo, as pessoas em risco de desenvolver uma hérnia podem incluir aquelas que são obesas, afetadas por uma infecção (como uma infecção de local cirúrgico, infecção intra-abdominal, infecção de tecido profundo ou infecção abdominal superficial), submetidos a uma ressecção intestinal, submetidos a cirurgia de cólon, estão recebendo corticosteroides, fumante, tem doença pulmonar obstrutiva crônica, desnutrição, diabetes, imunossupressão, anemia, hipoproteinemia, do sexo masculino, idade avançada, aumento da pressão abdominal (como tosse, vômito, distensão, e ascite), ou qualquer combinação. Por exemplo, as pessoas em risco de desenvolver uma hérnia incluem aquelas que são submetidas a incisão cirúrgica na parede abdominal, pessoas que apresentam hérnia congênita e/ou pessoas que participam de atividades que os predispõem a hérnias, como hérnias esportivas ou tosse excessiva.

[048] No caso de hérnias incisionais, os métodos descritos neste documento podem ser realizados durante o procedimento que requer a ineisão. No caso de um procedimento que requer incisão em uma parede abdominal, os métodos descritos neste documento podem ser realizados após a incisão. Os métodos podem ser realizados antes ou após o fechamento da incisão.

[049] O implante do material de enxerto pode alinhar o material com uma abertura na parede abdominal. Isto pode ser particularmente adequado quando o material de enxerto é fornecido como uma camada ou composição semelhante a camada. Por exemplo, o material de enxerto pode ser geralmente colocado ou disposto em uma posição de modo a espelhar geralmente a abertura, como a incisão cirúrgica. Assim, o material do enxerto pode promover a cicatrização da incisão cirúrgica, como a cicatrização das bordas fasciais abdominais.

[050] Em uma forma de realização, o implante do material de enxerto pode não incluir necessariamente o material de enxerto ativamente fixado ao tecido para promover a cicatrização, mas ao invés disso, o material de enxerto pode ser colocado como uma camada superior ou camada inperior em contato com ou em estreita proximidade com a abertura. Por exemplo, o material de enxerto pode ser implantado sobre ou ventralmente a uma abertura da parede abdominal e, assim, promover a cura da abertura. Em outras formas de realização, o material de enxerto pode ser implantado superficialmente a uma abertura da parede abdominal e, assim, promover a cura da abertura. Em uma forma de realização particular, o material de enxerto incluindo PT, tal como dHACM ou outro PDT, é colocado diretamente no topo (camada superior) de uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura e o dHACM ou outro PDT não está seguro. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o material de enxerto.

[051] Em uma forma de realização alternativa, o material de enxerto ou parte do mesmo pode ser ancorado à abertura, como uma abertura na parede abdominal. O material de enxerto pode ser ancorado á abertura do tecido por prendedores conhecidos pelos versados na técnica, como por pressão, um adesivo (como cola de fibrina), um clipe, uma tacha, uma sutura, um grampo ou um parafuso. Por exemplo, o material de enxerto é implantado abaixo, profundamente ou dorsalmente à abertura da parede abdominal, como por meio de suturas.

[052] Nas formas de realização, a abertura, como a abertura da parede abdominal, pode ser substancialmente ou completamente fechada antes do implante do material de enxerto. Em uma forma de realização particular, dHACM ou outro PDT é fixado com suturas, grampos, parafusos ou outros dispositivos de fixação sob (camada superior ou camada inperior) uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre a incisão.

[053] A tela cirúrgica, como uma tela sintética ou tela biológica, é uma ferramenta atualmente disponível no reparo de hérnia; no entanto, estão repletos de complicações pós-operatórias. As complicações comuns incluem infecção, dor, aderências, extrusão da tela de seroma e recorrência de hérnia. Reduzir as complicações do implante da tela é de extrema importância, visto que as hérnias ocorrem em centenas de milhares de pacientes por ano nos Estados Unidos. Assim, em uma forma de realização, a abertura é fechada com uma tela cirúrgica e o material de enxerto é colocado ou fixado sobre a tela cirúrgica ou afixado na superfície inferior ("camada superior") da tela cirúrgica para promover a cicatrização do tecido e reduzir efeitos colaterais indesejáveis. Em uma forma de realização particular, um defeito de hérnia é fechado com malha sintética e dHACM ou outro PDT (como camadas intactas, forma micronizada ou forma de pó ou uma combinação das mesmas) é colocado no topo das áreas onde a malha faz interface com a fáscia, ou sob áreas onde a tela faz interface com a fáscia, ou sob áreas onde a tela faz interface com a cavidade abdominal e seu conteúdo (por exemplo, intestino grosso / delgado / outros órgãos intra-abdominais, como fígado, estômago, baço). O dHACM ou outro PDT pode ou não ser preso com suturas, grampos, parafusos ou outros dispositivos de fixação. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o dHACM ou outro PDT e a tela.

[054] Em outra forma de realização, a abertura, como a abertura da parede abdominal, pode ser substancial ou completamente fechada após o implante do material de enxerto. Por exemplo, o material de enxerto pode ser colocado ou afixado sob a abertura e, em seguida, a abertura pode ser substancial ou completamente fechada, permitindo assim que o material de enxerto promova a cicatrização do tecido.

[055] O colapso de um reparo de hérnia é chamado de hérnia recorrente. A protuberância retoma no local ou próximo ao local da hérnia anterior. As hérnias recorrentes aumentam muito a complexidade do reparo subsequente. Se não forem tratadas, podem ocorrer complicações graves, como o aprisionamento do intestino, conhecido como hérnia encarcerada, obstrução digestiva ou perda de suprimento sanguíneo para os intestinos, conhecida como hérnia estrangulada. Assim, aspectos da presente divulgação são direcionados a um método de prevenção da recorrência de hérnia.

[056] Conforme descrito neste documento, o material de enxerto compreendendo PT pode ser utilizado para reduzir significativamente as taxas de hérnia incisional. Por exemplo, testando formas de realização em 10 indivíduos humanos que estavam em alto risco de desenvolver hérnias após celiotomias e cirurgias de estoma, o PT preveniu completamente o desenvolvimento de todas as hérnias (0% de formação de hérnia) (veja o Exemplo 10 abaixo).

[057] Exemplos são fornecidos neste documento para facilitar uma compreensão mais completa da presente divulgação. Os exemplos ilustram validação experimental e modos exemplares de fazer e praticar a presente divulgação. No entanto, o escopo da presente divulgação não está limitado a formas de realização específicas divulgadas nestes Exemplos, que são apenas para fins de ilustração, visto que podem ser utilizados métodos alternativos para obter resultados semelhantes.

Exemplos

[058] Exemplo 1: Camadas de PT

[059] Poderá ser usado nas aplicações abaixo o material de enxerto compreendendo uma ou mais camadas de PT. O PT pode incluir âmnio, cório, veia do cordão umbilical processado ou não processado, geleia de Wharton ou combinações dos mesmos, como dHACM, cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, processada e/ou cordão umbilical não processado, cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, etc. Uma ou mais camadas de PT podem ou não ser fixadas com suturas, grampos, parafusos ou outro dispositivo de fixação. A gordura subcutânea e a pele podem então ser fechadas sobre o material de enxerto PT. Em algumas formas de realização, o material de enxerto PT compreende dHACM ou qualquer outro PDT divulgado aqui.

[059] Em uma aplicação, o material de enxerto de PT pode ser colocado diretamente no topo (camada superior) de uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura.

[00104] Em outra aplicação, o material de enxerto de PT é fixado com suturas, grampos, parafusos ou outros dispositivos de fixação sob (camada superior ou sub-camada) uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura.

[060] Em outra aplicação, o material de enxerto de PT pode ser colocado diretamente sobre (camada superior) um defeito da fáscia abdominal que não foi completamente fechado com quaisquer dispositivos cirúrgicos. Esses defeitos incluem aberturas na parede abdominal para estomas, ostomias, drenos cirúrgicos, tubos de alimentação, etc.

[061] Em outra aplicação, o material de enxerto de PT pode ser colocado diretamente em cima (camada superior) de um defeito de hérnia que foi ou não foi completamente fechado por quaisquer dispositivos cirúrgicos.

[062] Em outra aplicação, ο material de enxerto de PT pode ser preso com suturas, estábulos, parafusos ou outros dispositivos de fixação sob (camada inperior ou sub-camada) um defeito de hérnia que é então fechado.

[063] Exemplo 2: PT micronizado ou em pó

[064] Material de enxerto compreendendo PT micronizado ou em pó. O PT pode incluir âmnio, cório, veia do cordão umbilical processado ou não processado, geleia de Wharton ou combinações dos mesmos, como o dHACM, cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriôniea, processada e/ou cordão umbilical não processado, cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, etc. O material do enxerto de PT é espalhado ou espalhado sobre uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o material de enxerto de PT. Em um exemplo, o material de enxerto de PT inclui dHACM micronizado ou em pó ou qualquer outro PDT, como aqueles aqui descritos.

[065] Exemplo 3: PT solubilizado ou dissolvido

[066] O material de enxerto compreendendo PT solubilizado ou dissolvido pode ser usado nas aplicações abaixo. O PT pode incluir âmnio, cório, veia do cordão umbilical processado ou não processado, geleia de Wharton ou combinações dos mesmos, como o dHACM, cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, processada e/ou cordão umbilical não processado, cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, etc. Em um exemplo, o PT inclui dHACM solubilizado/dissolvido ou qualquer outro PDT, como aqueles aqui descritos.

[066] Em uma aplicação, o material de enxerto PT é injetado dentro de cerca de 4 cm, por exemplo, de uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura. A gordura subcutânea e a pele podem então ser fechadas sobre a incisão.

[067] Em outra aplicação, o PT solubilizado/dissolvido é misturado com uma matriz de colágeno. A mistura resultante pode ser aplicada sobre (camada superior) uma incisão da fáscia abdominal que foi fechada com sutura. A gordura subcutânea e a pele podem então ser fechadas sobre a mistura.

[068] Exemplo 4: Malha sintética do PT

[069] O material de enxerto compreendendo PT na forma de uma ou mais camadas intactas, forma micronizada, forma de pó ou uma combinação dos mesmos, pode ser usado em conjunto com a malha sintética nas aplicações abaixo. O PT pode incluir âmnio, cório, veia do cordão umbilical processado ou não processado, geleia de Wharton ou combinações dos mesmos, como o dHACM, cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, processada e/ou cordão umbilical não processado, cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, etc. Em um exemplo, o PT pode incluir dHACM ou qualquer outro PDT, como aqueles descritos neste documento. Na aplicação, um defeito de hérnia é fechado com tela sintética e o material de enxerto de PT é colocado no topo das áreas onde a tela faz interface com a fáscia.

[070] Em outra aplicação, um defeito de hérnia é fechado com tela sintética e o material de enxerto de PT é colocado sob as áreas onde a tela faz interface com a fáscia.

[071] Em outra aplicação, um defeito de hérnia é fechado com sutura e reforçado com tela sintética (na camada ou camada superior). O material de enxerto do PT é colocado no topo das áreas onde a tela faz interface com a linha de incisão da fáscia.

[072] Em outra aplicação, o material de enxerto do PT e a malha sintética podem ser empregados conforme descrito em qualquer uma das aplicações acima para prevenir ou reduzir a ocorrência de uma hérnia ou o desenvolvimento de uma hérnia ao invés de reparar ou tratar um defeito de hérnia. Por exemplo, um paciente que não tem hérnia pode apresentar um ferimento por arma de fogo no abdômen. Poderá ser realizada uma laparotomia, em que o paciente é determinado como tendo alto risco de formação de hérnia devido à emergência, obesidade, perda de sangue, etc. e o material de enxerto do PT e tela sintética são usados concomitantemente para prevenir a formação de hérnia. Em um exemplo, o paciente está determinado a ter alto risco de desenvolver uma hérnia.

[073] Nas aplicações acima, o material de enxerto do PT pode ou não ser fixado com suturas, grampos, parafusos ou outro dispositivo de fixação. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o material de enxerto de PT.

[074] Exemplo 5: Malha Biológica do PT

[075] O material de enxerto compreendendo o PT pode ser utilizado em conjunto com uma malha biológica. O PT pode compreender uma ou mais camadas intactas, forma micronizada, forma de pó ou uma combinação das mesmas. O PT pode incluir âmnio, córion, veia do cordão umbilical processado ou não, geleia de Wharton, ou suas combinações, como dHACM, cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica ou matriz de membrana, membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, cordão umbilical processado e/ou não processado, ou cordão umbilical processado e/ou não processado e membrana amniótica processada e/ou não processada e/ou membrana coriônica, etc. Em um exemplo, ο PT também pode compreender o dHACM ou qualquer outro PDT, como aqueles aqui descritos.

[076] Em uma aplicação, um defeito de hérnia é fechado com malha biológica. O material de enxerto do PT pode ser colocado no topo das áreas onde a tela faz interface com a fáscia. O material de enxerto do PT pode ou não ser fixado com suturas, grampos, parafusos ou outro dispositivo de fixação. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o material de enxerto de PT.

[077] Em outra aplicação, um defeito de hérnia é fechado com malha biológica. O material de enxerto do PT é colocado sob as áreas onde a tela faz interface com a fáscia. O material de enxerto do PT pode ou não ser fixado com suturas, grampos, parafusos ou outro dispositivo de fixação.

[078] Em outra aplicação, um defeito de hérnia é fechado com sutura e reforçado com tela biológica (na camada ou camada superior). O material de enxerto do PT é colocado no topo das áreas onde a tela faz interface com a linha de incisão da fáscia. O material de enxerto do PT pode ou não ser fixado com suturas, grampos, parafusos ou outro dispositivo de fixação. A gordura subcutânea e a pele são então fechadas sobre o material de enxerto de PT.

[079] Em outra aplicação, o material de enxerto do PT e a malha biológica podem ser empregados conforme descrito em qualquer uma das aplicações acima para prevenir ou reduzir a ocorrência de uma hérnia on o desenvolvimento de uma hérnia ao invés de reparar on tratar nm defeito de hérnia Por exemplo, nm paciente que não tem hérnia pode apresentar um ferimento por arma de fogo no abdômen. Poderá ser realizada uma laparotomia, em que o paciente é determinado como tendo risco de formação de hérnia devido à emergência, obesidade, perda de sangue, etc. e o material de enxerto do PT e malha biológica são usados concomitantemente para prevenir a formação de hérnia. Em um exemplo, o paciente está determinado a ter alto risco de desenvolver uma hérnia.

[080] Exemplo 6: Combinação de intervenções do PT

[081] As metodologias descritas acima nos Exemplos 1-5 e em outros Ingares neste documento não são exclusivas, pois podem ser usadas várias metodologias em combinação. Por exemplo, o PT dissolvido / solubilizado pode ser injetado na ou próximo a uma incisão e o PT micronizado e/on em pó pode ser espalhado ou espalhado sobre uma incisão, tal como uma incisão da fáscia abdominal, malha sintética ou malha biológica. As metodologias aqui descritas podem ser aplicadas profilaticamente ou em relação ao reparo de hérnia. Por exemplo, o material de enxerto PT pode ser utilizado profilatieamente para prevenir ou limitar a ocorrência de uma hérnia ou o desenvolvimento de uma hérnia que ocorre subsequentemente. O material de enxerto do PT também pode ser utilizado no reparo de hérnia recorrente ou original para prevenir ou limitar a recorrência de uma hérnia ou o desenvolvimento de uma hérnia recorrente.

[082] Exemplo 7

[083] Empregando um ensaio de controle randomizado prospectivo duplo-cego (RCT), foi usado um modelo de IH agudo validado para estudar a capacidade do material de enxerto do PT, incluindo dHACM, para prevenir ou reduzir profilatieamente a ocorrência e/ou desenvolvimento de IH. O modelo está associado a uma taxa de hérnia de cerca de 83%.

[084] Métodos: Para o estudo, ratos com Sprague-Dawley machos, com 400 gramas e 20 semanas de vida foram randomizados para 1 de 4 grupos de tratamento (N = 10 por grupo): 1) dHACM injetável micronizado (injeção de dHACM), 2) injeção de soro fisiológico 3)Camadas de dHACM (sobreposição de camada de dHACM) (Amniofix®, Mimedx Group, Inc., Marietta, GA) controle (sem tratamento).

[085] Cada rato recebeu uma incisão de laparotomia mediana de 5 cm, uma incisão de exemplo é fornecida na FIG. 1, seguido de fechamento. As incisões e fechamentos foram realizados por um cirurgião cego para a atribuição do grupo. As incisões foram fechadas com suturas de plaingut 5-0 interrompidas x 3. Um outro cirurgião administrou a intervenção.

[086] Um critério de avaliação primária utilizado foi a formação de IH medida no dia pós-operatório (POD) 28 por cirurgiões cegos para a atribuição de grupo. O tamanho da IH também foi usado como um critério de avaliação primária. Os desfechos secundários incluiram: força de tração da fáscia, proporção de colágeno I/IIII, marcadores inflamatórios séricos e expressão de marcadores inflamatórios em tecidos.

[087] Resultados: No geral, 26 de 34 ratos (76,4%) desenvolveram IH. Com referência à FIG. 2, apenas as camadas de dHACM reduziram significativamente a formação de IH (62,5% vs. 87,5% de controle; p = 0,04). Com referência à FIG. 3, as camadas dHACM diminuíram o tamanho/diâmetro IH (6,9 mm vs. controle de 14,4 mm; p = 0,04).

[088] Os critérios de avaliação secundários não mostraram nenhuma diferença estatisticamente significativa entre os grupos. No entanto, a resistência à tração tendeu a ser mais forte no grupo da camada (1,02 N/mm2 vs. 0,89 N/mm2 controle; p = 0,33). Os níveis séricos de CRP e IL-6 também apresentaram tendêneia mais alta com camadas, mas o tecido IL-6 tendeu para baixo com as camadas.

[089] Esses estudos indicam que o material de enxerto do PT previne profilaticamente o desenvolvimento ou reduz a ocorrência de formação e tamanho da IH, pois as camadas de dHACM reduzem signifieativamente as taxas de hérnia e as hérnias que se formam são menores que aquelas que ocorrem sem tratamento de intervenção do PT.

[090] Exemplo 8

[091] Foi realizado um ensaio prospectivo randomizado controlado (RCT) duplo-cego de PT para prevenir a IH aguda em um modelo de rato previamente validado. O material de enxerto do PT usado para o ensaio foi dHACM. O dHACM está disponível em duas formas: camada implantável e injetável micronizado. Assim, os grupos de intervenção e controles correspondentes foram (A) Sem Tratamento vs. Camada e (B) Solução Salina vs. Injeção.

[092] Métodos: Todos os procedimentos foram realizados de acordo com e aprovados pelo Comitê de Uso e Cuidado de Animais Institucionais e pelo Comitê de Revisão Institucional. O modelo de IH de rato usado em nosso estudo foi previamente validado como um modelo de IH aguda. (Franz ΜG. Kuhn MA, Nguyen Κ, et al. “O fator de transformação de crescimento beta 2 reduz a incidência de hérnias incisionais. " J Surg Res. 2001;97:109-116; Korenkov, M. et al. "A administração local de ΤΓΦ- παρα reforçar a parede abdominal anterior em um modelo de hérnia incisional de rato. " Hérnia. 2005;9:252-258; Islam KN, Bae JW, Gao E, et al. "Regulação do fator nuclear kb (NF-KB) no núcleo dos cardiomiócitos pelo receptor quinase 5 acoplado à proteína G (GRK5). " J Biol Chem. 2013;288(50):35683-9)

[093] Quarenta ratos Sprague-Dawley machos de 16 semanas de vida (Charles River) pesando 400 g foram aclimatados às condições de laboratório durante 2 semanas. Ração para ratos e água foram fornecidas ad libitum. Cada animal foi randomizado (Randomizador de Pesquisa Versão 4.0) para 1 de 4 tratamentos cirúrgicos (N = 10 por tratamento): 1) Camada: camadas dHACM de 5 cm x 1 cm sobrepostas na incisão de celiotomia, 2) Sem tratamento, 3) Injeção: 10 mg de dHACM micronizado dissolvido em 1 mL de solução salina estéril e injetado ao longo da incisão fascial antes da incisão, ou 4) Solução salina: 1 mL de solução salina estéril injetada ao longo da incisão fascial antes da incisão.

[094] Foi usado um projeto duplo-cego. O cirurgião que realizou a celiotomia e o reparo fascial desconhecia o tratamento designado. A intervenção foi administrada por um segundo cirurgião. A avaliação da formação de hérnia e outros critérios de avaliação experimentais foram realizados por indivíduos que desconheciam o tratamento.

[095] A anestesia foi induzida e mantida com isoflurano via cone nasal. O abdômen foi preparado com remoção de pelos com tesoura elétrica e desinfetado com gluconato de clorexidina 2% em álcool isopropílico 70% (Chloraprep). Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados com técnica asséptica. Foi feita uma incisão paramediana de 6 cm, 2 cm na lateral à linha média. Um retalho de pele foi levantado via dissecção do plano pré-fascial avascular, expondo a linha alba. Foi então feita uma incisão de celiotomia de 5 cm, com cuidado para não lesar as estruturas subjacentes. Foi administrada uma dose intraperitoneal de Buprenex SR de 1 mg/kg para analgesia. A fáscia foi então fechada com três suturas intestinais simples 5-0 interrompidas colocadas em intervalos iguais através da incisão da celiotomia.

[096] Um segundo cirurgião, então, executou o tratamento conforme detalhado acima. A incisão na pele foi fechada com suturas contínuas de náilon 3-0 para minimizar o risco de evisceração. Os animais foram recuperados da anestesia em gaiolas novas e limpas e não foram devolvidos à unidade de alojamento de animais até que fosse observada deambulação. No pós-operatório, sulfametoxazol/trimetoprima profilático a 160 mg/36 mg foi administrado por via oral por 7 dias. Os animais foram monitorados pela equipe do estudo e pela equipe veterinária diariamente durante a primeira semana pós-operatória e quinzenalmente durante as semanas pós-operatórias 2-4 para o desenvolvimento de desconforto, doença e complicações incisionais, como evisceração ou IH.

[097] No dia pós-operatório (POD) 28, os ratos sobreviventes foram sacrificados via dióxido de carbono. A parede abdominal ventral foi excisada e as superfícies peritoneal e subcutânea da fáscia foram inspecionadas para a formação de IH. A formação de hérnia foi definida como uma abertura mínima de 2 mm na fáscia. A fáscia foi então dividida em uma faixa de 4 cm de largura para teste de resistência à tração e duas faixas de 0,5 cm de largura para análises moleculares e histológicas (FIG. 11). A tira de 4 cm e uma tira de 0,5 cm foram imediatamente armazenadas a -80 °C até os testes tensiométricos e análises moleculares, respectivamente. A tira de 0,5 cm restante foi fixada em formalina a 10% para análise histológica. A preparação da amostra, a coleta de dados e a análise foram realizadas por uma equipe do estudo que desconhecia o tratamento.

[098] Foi realizado o teste tensiométrico. As amostras foram descongeladas em solução salina normal até atingirem a temperatura ambiente (23 °C). Segmentos da parede abdominal, incluindo cicatriz de celiotomia e quaisquer hérnias, foram presos em garras inversas pneumáticas com faces serrilhadas (Instron, Cantou, MA) com 15 mm de distância (7,5 mm de cada lado da linha alba). Uma das garras foi conectada ã célula de carga de um sistema de teste de materiais (8841 Dynamite, Instron). A carga de tração foi ortogonal ã direção da cicatriz da celiotomia. As amostras foram carregadas a 1 N de pré-tensão in situ ao longo do eixo sagital por 60 segundos. As amostras foram então pré-condicionadas com 10 ciclos de 6% de deformação vertical aplicada a 0,5 mm/seg por controle de deslocamento. Após ο pré-condicionamento, foi aplicada uma pré-carga de 1 N novamente por 60 segundos e, em seguida, as amostras foram carregadas até a falha a 10 mm/s em um únieo cielo sob controle de deslocamento. Os dados de desloeamento de earga foram registrados a 10 Hz. As amostras foram umedeeidas com solução salina normal em intervalos regulares durante o processo de teste. O carregamento de tensão foi gravado digitalmente com uma câmera digital de alta definição (Alpha 6500, Sony). A falha do tecido foi definida como ruptura visível da cicatriz da linha média e foi correlacionada com a tensão máxima registrada. A resistência à tração por amostra foi normalizada para a área da seção transversal da amostra.

[099] Reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (RT-qPCR), o tecido de cicatriz de peri-celiotomia foi analisado para determinar os níveis de expressão de marcadores inflamatórios IL-6, metaloproteinases (MMP) 1 e 13. O RNA foi preparado a partir de tecido de cicatriz de peri-celiotomia de rato via isolamento de RNA de Trizol.

[100] A concentração e a pureza da amostra foram avaliadas usando NanoDrop (Thermo Fisher). Todo 0 RT-qPCR foi realizado em um iCycler (Bio-Rad) usando um kit QuantiTect SYBR Green RT-PCR (QIAGEN). O RNA foi diluído para uma entrada final de 10 ng por reação. As amostras foram enriquecidas com 10 nM de fluoresceína (Sigma) e as reações foram realizadas com sequências de iniciador: lL-6 (direto 5'-ACTTCACAAGTCGGAGGCTT-3'; reverso 5'- AGTGCATCATCGCTGTTCAT-3'), MMP 1 (direto 5'-GGAACAGATACGAAGAGAA-3'; reverso5'-TGTTTCCTCTTCGTATCTGTTCC-3') e MMP 13 (direto5'- TCTGCACCCTCAGCAGGTTG-3 reverso 5'-CAACCTGCTGAGGGTGCAGA-3'); 5-actina (direto 5'-AGCCATGTACGTAGCCAT-3'; reverso 5'-CTCTCAGCTGTGGTGGTGAA-3'), limiar de 2 ciclos (Ct) foi usado para análise.

[101] No POD 2 e 5, foram eoletados 200-300 μL de plasma de cada rato por meio de cauda ou flebotomia da veia safena. A coleta foi realizada sob anestesia para reduzir o risco de induzir IH aguda, deiscência da incisão cutânea e evisceração. Os níveis plasmáticos de marcadores inflamatórios da proteína C reativa (CRP) e interleueina-6 (IL-6) foram quantificados usando ELISA (CRP: MyBiosource, número de eatálogo MBS2508830; IL-6: MyBiosource, número de catálogo MBS 355410).

[102] A análise semiquantitativa dos níveis de tecido cicatricial peri-celiotomia dos níveis de colágeno I e III foram determinados por Western blots. O colágeno foi extraído da região de 0,5 x 0,5 em de tecido cicatricial. O tecido triturado foi agitado em um tampão contendo NaCl 150 mM, Tris-HCl 50 mM. pH7,5,SDS a 1%, nonidet p40 a 1% e desoxicolato de sódio durante 2 horas em gelo e centrifugado durante 10 minutos. O sobrenadante contendo colágeno foi analisado por immunoblotting usando anticorpos específicos para colágeno I, colágeno 111 (Abeam) e GAPDH (Santa Cruz Biotechnology). Foi usado GAPDH como um controle de carregamento. A imagem da banda da proteína foi visualizada e digitalizada por um sistema de imagem infravermelho (Odyssey). Foi usado Image J (software de processamento de imagem desenvolvido no NIH) para a quantificação da imagem digitalizada.

[00149] As variáveis de categoria foram analisadas quanto à significância estatística (p <0,05) usando o teste de qui-quadrado (SPSS). As variáveis contínuas foram analisadas quanto à significância estatística (p < 0,05) usando testes t independentes (SPSS).

[00150] Resultados: No geral, 34 de 40 (85%) ratos sobreviveram até POD 28 (o critério de avaliação experimental). A causa da morte em todos os 6 casos foi a evisceração nos primeiros 5 DPO. Os números de mortalidade não diferiram significativamente entre os tratamentos; Grupo A: 2 animais em cada camada e sem tratamento, e Grupo B: 1 animal cada em injeção e solnção salina.

[103] Com relação aos critérios de avaliação primária: formação e tamanho da hérnia, no geral, 79,4% (27 de 34) dos ratos desenvolveram IH (FIG. 5). No Grupo A, a intervenção de Camada reduziu significativamente a taxa de IH para 62,5% vs. 87,5% no controle Sem Tratamento (RR = 0,71, p = 0,039). No Grupo B, a injeção e solnção salina produziram taxas de IH idênticas (77,8% para ambos). No Grupo A, 0 diâmetro médio da hérnia foi significativamente reduzido em Camada (6,9 mm +/- 6,01 mm) vs. Controles sem tratamento (14,4 mm +/- 8,3 mm; p = 0,037, FIG. 6). No Grupo B, o diâmetro médio da hérnia não diferiu significativamente entre a injeção (11,67 mm +/- 8,78 mm) e solução salina (10,22 mm +/- 6,67 mm).

[104] A resistência à tração da cicatriz fascial foi definida como a carga por mm2 na qual a fáscia começou a romper (FIG. 7, painel A). Não foi identificada nenhuma diferença estatística significativa na resistência à tração entre os tratamentos no Grupo A ou no Grupo B (FIG. 7, painel B).

[105] Os níveis de expressão dos marcadores inflamatórios IL-6, MMP 1, MMP 13 na cicatriz fascial no POD 28 foram medidos por RT-qPCR. Não foi identificada nenhuma diferença estatisticamente significativa entre os tratamentos no Grupo A ou no Grupo B (FIG. 8).

[106] Os níveis plasmáticos dos marcadores inflamatórios IL-6 e CRP foram medidos no POD 2 e 5. Não foi identificada nenhuma diferença estatística significativa entre os tratamentos no Grupo A ou no Grupo B em qualquer ponto no tempo (FIG. 9).

[107] Western blots dos níveis de colágeno I e III na cicatriz de celiotomia revelaram que não houve diferenças significativas entre os tratamentos no Grupo A ou no Grupo B (FIG. 10). As razões médias de colágeno I/III ± DP foram: Sem Tratamento 1,02 ± 0,51 vs Camada 1,67 ± 2,16 (Grupo A) e Salina 1,18 ± 0,51 vs Injeção 1,45 ± 1,36 (Grupo B).

[108] Consistente com estudos anteriores usando este modelo, 87,5% dos animais não tratados neste estudo desenvolveram IH. Neste estudo, os animais tratados com camadas de PT compreendendo (dHACM) ganharam uma redução de risco relativo de 28,5%. Além disso, quando se formou IH, o desenvolvimento foi limitado em que a IH foi 77,0% menor em animais tratados com PT (FIG. 6). Isso é digno de nota porque IH maiores são mais difíceis de reparar e têm maior probabilidade de recorrência. A caracterização molecular das cicatrizes de celiotomia mostra que as cicatrizes tratadas com PT tenderam a uma maior resistência à tração, menores marcadores inflamatórios e melhores razões de colágeno I/III (FIGS. 7, 8,10). Juntos, esses dados macroscópicos e moleculares indicam que 0 material de enxerto do PT, incluindo camadas de dHACM, reduz a ocorrência e o desenvolvimento da formação de hérnia incisional e suporta o uso de lâminas PDT para uso como uma intervenção profilática nova, segura e eficaz para IH.

[109] Nossa caracterização molecular da cicatriz fascial tratada com dHACM demonstrou tendências para maior resistência à tração, marcadores inflamatórios mais baixos e melhores razões de colágeno I/III (FIGS. 7, 8, 10). A base molecular da fraqueza fascial foi anteriormente caracterizada como um defeito do metabolismo do colágeno, com base em taxas elevadas de IH em pacientes com doenças do tecido conjuntivo, como a síndrome de Ehlers-Danlos. Vários autores relataram que as relações mais baixas de colágeno I/III estavam relacionadas à fáscia associada à hérnia, indicando imaturidade e desorganização do tecido fascial cicatrizado. Em nosso estudo, as proporções da proteína do colágeno I/III fascial não diferiram significativamente entre a fáscia tratada com dHACM e a fáscia curada e não tratada. Este estudo testou a fáscia coletada no POD 28. Sem desejar ser limitado pela teoria, o exame da mecânica fascial no início do processo de cura pode ter visto uma diferença mais significativa entre os braços de tratamento. Em estudos anteriores, a maioria das hérnias observadas ocorreu por DPO 7. Por exemplo, Xing et. al descobriram que a força de ruptura na parede abdominal preparada com células progenitoras derivadas de âmnio humano aumentou quando comparada aos controles no POD 7, mas não no POD 14 e 28. (Xing L, Franz ΜG, Marcelo CL, et al. "Células progenitoras multipotentes derivadas de âmnio aumentam o ganho de força de ruptura incisional e diminuem a incidência e a gravidade da falha aguda da ferida. " J Bums Wounds. 2007; 7: e5) Outros autores, entretanto, relataram aumentos persistentes na resistência à tração em tempos pós-operatórios posteriores. (Veja, por exemplo, Tyrone JM, Marcus JR, Bonomo SR, et al. "Fator de Crescimento Transformador Beta 3 promove a cicatrização de feridas fasciais em um novo modelo animal." Arch Surg. 2000;135:1154-1159).

[110] Exemplo 9
Para confirmar a aplicabilidade mais ampla do material de enxerto do PT para a redução da ocorrência e desenvolvimento de IH, quatro grupos de material de enxerto do PT adieionais foram estudados usando o modelo de rato, conforme descrito nos Exemplos 7 e 8. Os grupos de tratamento foram: Grupo A: cordão umbilical criopreservado e matriz de membrana amniótica (Neox 100®, Amniox Medicai Inc., Miami, FL); Grupo B: tecido derivado de placenta desidratado em três camadas composto por membrana amniótica não separada e membrana coriônica com a camada intermediária intacta (AmnioWrap2TM, Direct Biologies LLC, St. Louis, MO); Grupo C: cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica (Neox Cord IK®, Amniox Medical Inc., Miami, FL); e Grupo D: âmnio e cório tricamada desidratado (NuShield®, Organogenesis Inc., Canton MA).

[111] Resultados: A taxa de ocorrência de IH no modelo de rato foi significativamente reduzida em comparação com 87,5% (n = 8) (Exemplo 7) observada no grupo de controle, consistente com a redução de 62,5% (n = 8) observada com as Camadas de dHACM (Exemplo 7). Especificamente, foi observado 50% (n = 8) de ocorrência de IH em ratos do Grupo A (cordão umbilical criopreservado e matriz de membrana amniótica); 50% (η = 6) de ocorrência de IH foi observada em ratos do Grupo B (tecido tri-camada desidratado derivado da placenta composto por membrana amniótica não separada e membrana coriônica com a camada intermediária intacta); 50% (n = 4) de ocorrência de IH foi observada em ratos do Grupo C (cordão umbilical criopreservado e membrana amniótica); e 57,1% (n = 7) a ocorrência de IH foi observada nos ratos do Grupo D (âmnio e córion tricamada desidratado). O desenvolvimento de IH (tamanho) também foi significativamente reduzido em ratos onde ocorreu IH em comparação com 14,4 mm ± 8,3 mm observados nos controles (Exemplo 7), limitando significativamente o tamanho da hérnia consistente com 6,9 mm ± 6,0 mm observados com Camadas de dHACM (Exemplo 7) Especificamente, os tamanhos de hérnia observados foram os seguintes, Grupo A: 7,0 mm ± 2,7 mm; Grupo B: 8,7 mm ± 1,7 mm; Grupo C: 11,0 mm ± 2,7 mm; e Grupo D: 7,5 mm ± 2,1 mm. Essas descobertas evidenciam que o implante de todos os materiais de enxerto do PT testados reduz a formação de IH em taxas comparáveis, de 87,5% nos controles para 50-60%. Quando o IH se formou, o tamanho médio foi menor em todos os grupos PT, reduzindo as hérnias de 14,4 mm nos controles para 6,9-8,7 mm para todos os PDTs, exceto Neox IK (média 11,0 mm).

[112] Exemplo 10

[113] Os Exemplos 7 e 8 mostram que as camadas de dHACM do PT testadas reduzem significativamente a ocorrência de IH e o desenvolvimento de tamanho em um modelo animal de uma maneira consistente com outro PT, conforme evidenciado no Exemplo 9. Para validar a extensão dessa descoberta para seres humanos, foi realizado um estudo de coorte prospectivo de pacientes com alto risco de desenvolver IH após cirurgia abdominal.

[114] Métodos: Em um estudo de melhoria de qualidade multi-institueional, os indivíduos submetidos à cirurgia abdominal que estavam em alto risco para IH foram tratados profilaticamente com apenas camadas de dHACM após o fechamento de sutura de rotina de suas incisões fasciais. Não foi usada nenhuma malha. Foram registrados fatores de risco pré-operatórios. Os indivíduos foram acompanhados por um mínimo de 5 meses para o desenvolvimento da IH. O número esperado da IH foi calculado usando dados históricos.

[115] Resultados: 8 pessoas foram submetidos a 11 incisões na parede abdominal. As incisões foram agrupadas em alto risco (n = 6) ou risco extremamente alto (n = 5) com base em fatores de risco pré-operatórios (FIG. 4.). Em nossa coorte, se desenvolveu 1 IH (9,1%) em uma pessoa de risco extremamente alto, cujos fatores de risco incluíam idade avançada, cirurgia de emergência para cólon perfurado e tabagismo ativo. A IH se formou após uma infecção necrosante que exigiu desbridamento da parede abdominal. O número esperado de IH era 5,7 (51,4%), resultando em uma redução de risco relativo de 82,3%.

[116] Estes dados mostram que o material de enxerto do PT, incluindo as camadas de dHACM, reduz a formação de IH em 82,3% em pacientes de alto risco.

[117] Todas as patentes, pedidos de patentes e publicações citadas neste documento são incorporadas por meio deste por referência em sua totalidade. As divulgações dessas publicações em sua totalidade são incorporadas por meio deste por referência a este pedido, para descrever mais completamente o estado da técnica como conhecido por aqueles versados na mesma a partir da data da invenção aqui descrita e reivindicada.

[118] As formas singulares "um", "uma", "o" e "a" incluem referência ao plural, amenos que o contexto expresse claramente o contrário. O uso da palavra "um" ou "uma", quando usada em conjunto com o termo "compreendendo" nas reivindicações e/ou no relatório descritivo pode significar "um", mas também é consistente com o significado de "um ou mais","pelo menos um" e "um ou mais que um".

[119] Sempre que qualquer uma das frases "por exemplo", "tal como", "incluindo" e palavras semelhantes forem usadas neste documento, é entendida a frase "e sem limitação" a seguir, a menos que declarado explicitamente de outra forma. Da mesma forma, "um exemplo", "exemplar" e palavras semelhantes são entendidos como não limitativos.

[120] O termo "substancialmente" permite desvios do descritor que não impactam negativamente a finalidade pretendida. Os termos descritivos são entendidos como modificados pelo termo "substancialmente", mesmo se a palavra "substanciahnente" não for explicitamente recitada.

[121] Os termos "compreendendo" e "incluindo" e "tendo" e "envolvendo" (e da mesma forma "compreende", "inclui", "tem" e "envolve") e palavras semelhantes são usadas indistintamente e têm o mesmo significado. Especificamente, cada um dos termos é definido de acordo com a definição comum da lei de patentes dos Estados Unidos de "compreendendo" e, portanto, é interpretado como um termo aberto que significa "pelo menos o seguinte" e também é interpretado para não excluir recuros adicionais, limitações, aspectos, etc. Assim, por exemplo, "um processo envolvendo as etapas a, b e c" significa que o processo inclui pelo menos as etapas a, b e c. Onde quer que sejam usados os termos "um" ou "uma", "um ou mais" é entendido, a menos que tal interpretação seja absurda no contexto.

[122] Conforme usado neste documento, o termo "cerca de" pode se referir a cerca de, aproximadamente, ao redor ou na região de. Quando o termo “cerca de” é usado em conjunto com uma faixa numérica, ele modifica essa escala estendendo as ligações acima ou abaixo dos valores muméricos estabelecidos. Em geral, o termo “cerca de” é usado aqui para modificar um valor numérico acima e abaixo do valor declarado por uma variação de 20 por cento para cima ou para baixo (maior ou menor).

[123] Esta especificação foi escrita com referência a várias formas de realização não limitativas e não exaustivas. No entanto, será reconhecido pelos versados na técnica que várias substituições, modificações ou combinações de qualquer uma das formas de realização divulgadas (ou partes das mesmas) podem ser feitas dentro do escopo deste relatório descritivo. Desse modo, contempla-se e entende-se que este relatório descritivo suporta formas de realização adicionais não expressamente estabelecidas neste relatório descritivo. Tais formas de realização podem ser obtidas, por exemplo, combinando-se, modificando-se ou reorganizando-se qualquer uma das etapas, componentes, elementos, recursos, aspectos, características, limitações e similares divulgados, das diversas formas de realização não limitantes e não exaustivas neste relatório descritivo.

[124] Vários elementos aqui descritos foram descritos como alternativas ou combinações alternativas, por exemplo, em uma lista de ativos, ingredientes ou composições selecionáveis. Deve ser apreciado que as formas de realização podem incluir um, mais ou todos esses elementos. Assim, esta descrição inclni formas de realização de todos esses elementos de forma independente e formas de realização incluindo tais elementos em todas as combinações.

[125] Qualquer intcrvalo numérico recitado neste documento inclui todos os valores e varia do valor inferior ao valor superior. Por exemplo, se uma faixa de concentração for declarada como 1% a 50%, pretende-se que valores como 2% a 40%, 10% a 30%, 1% a 3% on 2%, 25%, 39% e semelhantes, sejam expressamente enumerados nesta especificação. Estes são apenas exemplos do que é especificamente pretendido e todas as combinações possíveis de valores numéricos e faixas entre e incluindo ο valor mais baixo e o valor mais elevado enumerados devem ser consideradas como expressamente afirmadas neste pedido. Os números modifieados pelo termo "cerca de" devem incluir +/- 10% do número modificado.

[126] A presente divulgação pode ser incorporada em outras formas sem se afastar do espirito ou atributos essenciais da mesma e, consequentemente, deve-se fazer referência às seguintes reivindicações, ao invés da especificação anterior como indicando o escopo da invenção. Além disso, as ilustrações dos arranjos descritos neste documento se destinam a fornecer uma compreensão geral das várias formas de realização, e não se destinam a servir como uma descrição completa. Muitos outros arranjos serão evidentes para aqueles versados na técnica após a revisão da descrição acima. Outros arranjos podem ser utilizados e derivados dos mesmos, de modo que podem ser feitas substituições e mudanças lógicas sem se afastar do escopo desta divulgação. Aqueles versados na técnica reconhecerão, ou conseguirão verificar, usando não mais do que a experimentação de rotina, inúmeros equivalentes às substâncias e procedimentos específicos aqui descritos. Tais equivalentes são considerados dentro do escopo desta divulgação e são cobertos pelas seguintes reivindicações.

Claims (31)

1. MÉTODO DE TRATAMENTO OU PREVENÇÃO DA FORMAÇÃO DE HÉRNIA Caracterizado por um método para reduzir a ocorrência e/ou desenvolvimento de uma hérnia em um sujeito em risco de desenvolver uma hérnia que compreende o seguinte: implantar um material de enxerto em contato com uma abertura na parede abdominal em que o material de enxerto promove a cicatrização da abertura da parede abdominal e compreende o tecido placentário
2. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o implante do material de enxerto inclui o alinhamento do material de enxerto com a abertura na parede abdominal
3. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que a abertura compreende uma incisão cirúrgica
4. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que a abertura compreende uma fáscia desbridada
5. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o material de enxerto promove a cicatrização das bordas fasciais abdominais
6. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o implante do material de enxerto não fixa ativamente o material de enxerto à parede abdominal
7. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o implante do material de enxerto compreende ancorar o material de enxerto à parede abdominal por pressão um adesivo um clipe uma tacha uma sutura um grampo ou um parafuso
8. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o implante do material de enxerto compreende implantar o material de enxerto sobre ou ventral à abertura da parede abdominal
9. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que o implante do material de enxerto compreende implantar o material de enxerto sob ou dorsal à abertura da parede abdominal
10. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que compreende ainda substancial ou completamente fechar a abertura da parede abdominal antes ou após o implante do material de enxerto
11. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 10 em que a abertura da parede abdominal é fechada com malha sintética ou malha biológica
12. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que a abertura da parede abdominal compreende uma incisão cirúrgica
13. Método de acordo com a reivindicação 12 em que a incisão cirúrgica compreende uma incisão da fáscia abdominal
14. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que a abertura da parede abdominal é causada pela cirurgia
15. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 14 em que a cirurgia compreende laparotomia (celiotomia) laparoscopia ou cirurgia de estomago
16. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 14 em que a hérnia compreende uma hérnia incisional hérnia ventral hérnia umbilical hérnia epigástrica hérnia lombar hérnia inguinal hérnia diafragmática hérnia hiatal hérnia de Spigel ou uma hérnia parastomal
17. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 1 em que a pessoa em risco de desenvolver uma hérnia compreende uma pessoa obesa uma pessoa que sofre de uma infecção uma pessoa que foi submetida a uma ressecção intestinal uma pessoa que foi submetida a uma cirurgia de cólon uma pessoa recebendo corticosteroides uma pessoa que fuma uma pessoa com doença pulmonar obstrutiva crônica ou qualquer combinação das mesmas
18. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 17 em que a infecção compreende uma infecção do local cirúrgico infecção intra-abdominal infecções profundas ou infecção abdominal superficial
19. Caracterizado por Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18 em que o tecido placentário compreende um tecido derivado da placenta na membrana derivada da placenta ou uma combinação dos mesmos
20. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 19 em que o material de enxerto compreende um tecido de mamífero
21. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 19 em que o tecido derivado da placenta compreende âmnio córion veia do cordão umbilical geleia de Wharton ou qualquer combinação dos mesmos
22. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 19 em que a membrana derivada da placenta compreende âmnio córion ou qualquer combinação dos mesmos
23. Caracterizado por Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18 em que 0 material de enxerto compreende membrana coriônica amniótica humana
24. Caracterizado por Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23 em que o material de enxerto compreende um tecido desidratado tecido descelularizado tecido reticulado tecido congelado tecido criopreservado tecido fresco ou qualquer combinação dos mesmos
25. Caracterizado por Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24 em que o material de enxerto compreende uma camada nanopartícula pó ou injetável
26. Caracterizado por Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25 em que o material de enxerto compreende ainda uma malha sintética malha biológica ou estrutura de tecido
27. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 26 em que a malha biológica compreende um tecido de mamífero
28. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 27 em que o tecido de mamífero compreende uma matriz dérmica ou uma matriz da bexiga urinária
29. Caracterizado por Método de acordo com a reivindicação 28 em que a estrutura de tecido de mamífero compreende uma matriz de colágeno
30. Caracterizado por Método para promover a cura de uma abertura na parede abdominal que compreende ο seguinte: obter um material de enxerto; e implantar o material de enxerto em um sujeito em que o material de enxerto é implantado em contato com a abertura na parede abdominal e em que o material de enxerto compreende tecido placentário e promove a cicatrização da abertura da parede abdominal
31. Caracterizado por Método de promoção da cura facial que compreende o seguinte: implantar 0 material de enxerto em uma pessoa em que o material de enxerto compreende o tecido placentário e é Implantado aproximadamente na região defeituosa na fáscia
    As reivindicações podem ser melhor compreendidas com o descritivo das figuras e suas novas caracteristicas das formas de realização descritas que são estabelecidas com particularidade nas reivindicações anexas As formas de realização descritas no entanto tanto quanto à organização e modo de operação podem ser melhor compreendidas por referência ã seguinte descrição tomada em conjunto com os desenhos anexos nos quais:
    A FIG 1 mostra um modelo animal de incisão de laparotomia
    A FIG 2 mostra que as camadas de dHACM reduzem significativamente a formação de hérnia incisional
    A FIG 3 mostra que as camadas de dHACM reduzem significativamente o diâmetro da hérnia
    A FIG 4 mostra dados clínicos de estudos de prevenção de hérnia humana
    A FIG 5 mostra que as camadas de dHACM reduziram significativamente a formação de IH No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) as camadas de dHACM reduziram significativamente a taxa de IH de 87 5% para 62 5% (RR = 0 71 p = 0 039 □2 (2 N = 17)) No Grupo B (solução salina vs injeção) a taxa de IH foi idêntica entre controle vs tratamento (77 8%)
    A FIG 6 mostra camadas de dHACM com diâmetro IH significativamente reduzido No geral 79 4% (27 de 34) dos ratos desenvolveram IH No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) as camadas de dHACM reduziram significativamente o diâmetro IH médio para 6 9 +/- 6 0 mm em comparação com Nenhum Tratamento 14 4 +/ - 8 3 mm (p = 0 039) No Grupo B (solução salina vs injeção) o diâmetro IH não diferiu significativamente entre solução salina 10 2 +/- 6 7 mm vs injeção 117+/-8 8 mm (p = 0 37)
    A FIG 7 mostra que a fáscia tratada com dHACM não era mais fraca do que a fáscia não tratada A) Teste tensiométrico representativo de uma única amostra de parede abdominal O teste foi realizado usando um sistema automatizado (8841 Dymamite Instron) carregando o sistema 10 mm/seg ortogonal à linha alba em um único ciclo sob controle de deslocamento Os dados de deslocamento de carga foram registrados em 10 Hz Foi registrado o pico de tensão que cada amostra pode sustentar B) O pico de tensão foi normalizado para a área da seção transversal da amostra No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) a resistência à tração média era Sem Tratamento 0 89 N/mm2 vs Camada 1 02 N/mm2 No Grupo B (solução salina vs injeção) as resistências médias à tração foram de injeção 1 15 N/mm2 vs solução salina 1 55 N/mm2
    A FIG 8 mostra que os tratamentos com dHACM não alteraram significativamente a expressão da cicatriz fascial de marcadores inflamatórios 28 dias após a celiotomia Os níveis de expressão foram normalizados para o gene doméstico β-actina A) No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) os níveis médios de expressão da cicatriz fascial de IL-6 foram: Nenhum tratamento 61 22 +/- 35 76 vs Camada 40 81 +/- 15 57 (p = 0 31) No Grupo B (solução salina vs injeção) os níveis de expressão foram solução salina 7 35 +/- 1 70 vs injeção 21 58 +/- 9 01 (p = 0 07) B) No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) os níveis médios de expressão da cicatriz fascial de MMP-1 foram: Sem tratamento 6 80 +/- 3 76 vs Camada 2 77 +/- 1 17 (p = 0 16) No Grupo B (solução salina vs injeção) os níveis de expressão foram solução salina 15 37 +/- 7 80 vs injeção 3 36 +/- 1 26 (p = 0 07) C) No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) os níveis médios de expressão da cicatriz fascial de MMP-13 foram: Sem tratamento 1 49 +/- 0 15 vs Camada 1 47 +/- 0 19 (p = 0 16) No Grupo B (solução salina vs injeção) os níveis de expressão foram solução salina 2 99 +/- 0 74 vs injeção 2 69 +/- 0 15 (p = 0 07)
    A FIG 9 mostra que os tratamentos com dHACM não alteraram significativamente os níveis plasmáticos de IL-6 e CRP no POD 2 e 5 Os níveis foram quantificados por ELISA A) No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) os níveis plasmáticos médios de IL-6 no POD 2 foram Sem Tratamento 765 9 +/- 130 5 pg / mL vs Camada 2147 9 +/- 1978 9 pg / mL (p = 0 069) No POD 5 os níveis plasmáticos médios foram Sem Tratamento 659 0 +/- 604 7 pg / mL vs Camada 1883 4 +/- 2132 9 pg / mL (p = 0 09) No Grupo B (solução salina vs injeção) os níveis plasmáticos médios de IL-6 no POD 2 foram solução salina 825 5 +/- 789 4 pg / mL vs injeção 649 8 +/- 242 5 pg/mL (p = 0 29); no POD 5 foram solução salina 870 5 +/- 787 8 pg/mL vs injeção 750 9 +/-615 3 pg/mL (p = 0 37) B) No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) os níveis plasmáticos médios de CRP no POD 2 foram Sem Tratamento 264 2 +/- 245 2 pg /mL vs Camada 201 2 +/-108 7 pg/mL (p = 0 28) No POD 5 os níveis plasmáticos médios foram Sem Tratamento 294 6 +/- 137 6 pg/mL vs Camada 704 4 +/- 493 4 pg/mL (p = 0 069) No Grupo B (solução salina vs injeção) os níveis plasmáticos médios de CRP no POD 2 foram solução salina 265 4 +/- 126 0 pg/mL vs injeção 194 9 +/- 91 1 pg/mL (p = 0 13 ); no POD 5 foram solução salina 586 7 +/- 559 5 pg/mL vs injeção 280 7 +/- 217 8 pg/mL (p = 0 11)
    A FIG 10 mostra que os tratamentos com dHACM não alteraram significativamente a expressão da cicatriz fascial de marcadores inflamatórios 28 dias após a celiotomia Foi isolada a proteína total da região de 0 5 x 0 5 cm de tecido cicatricial e analisada por imunoblotting A) Western blots para colágeno I III e GAPDH B) A imagem I foi usada para quantificação Os níveis de colágeno foram normalizados para GAPDH e foi calculada a relação Colágeno I/III No Grupo A (Sem Tratamento vs Camada) as razões médias de Colágeno I/III eram Sem Tratamento 1 02 +/- 0 23 vs Camada 1 67 +/- 0 77 (p = 0 513) No Grupo B (solução salina vs injeção) as razões médias foram solução salina 1 18 +/- 0 19 vs injeção 1 45 +/ - 0 51 (p = 0 625)
    A FIG 11 mostra um diagrama da distribuição do espécime da parede abdominal aos 28 dias após aceliotomia A linha verde demonstra a linha média Umahémia é visível nesta versão O segmento A tem 4 cm de comprimento foi imediatamente armazenado a -80 °C e posteriormente enviado para tensiometria O segmento B foi dividido ao meio; 0 5 cm de comprimento foi imediatamente armazenado a -80 °C e finalmente usado para qRT-PCR e Western blotting Outro 0 5 cm de comprimento foi colocado imediatamente em formalina a 10% para histologia

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