BR102017024173A2

BR102017024173A2 - DEHYDRATED COCONUT WATER SOLUTION, PROCESS OF OBTAINATION, AND ITS USE FOR PRESERVATION OF ORGANS AND FABRICS

Info

Publication number: BR102017024173A2
Application number: BR102017024173-4A
Authority: BR
Inventors: Ivelise Regina Canito Brasil; Cristiane Clemente Mello Salgu; José Ferreira Nunes
Original assignee: Cristiane Clemente De Mello Salgueiro; Ivelise Regina Canito Brasil; José Ferreira Nunes
Priority date: 2017-11-10
Filing date: 2017-11-10
Publication date: 2019-06-04

Abstract

a presente invenção refere-se a uma solução contendo produtos derivados do coco (cocos nucifera l.), particularmente ao uso de água de coco desidratada, bem como ao processo de obtenção de dita solução e seu uso na conservação, perfusão e/ou reperfusão de um órgão ou de tecidos de humanos e de animais para transplante.The present invention relates to a solution containing coconut products (cocos nucifera l.), particularly the use of dehydrated coconut water, as well as the process of obtaining said solution and its use in preservation, perfusion and / or reperfusion. from an organ or tissue from humans and animals for transplantation.

Description

“SOLUÇÃO DE ÁGUA DE COCO DESIDRATADA, PROCESSO DE OBTENÇÃO, E SEU USO PARA PRESERVAÇÃO DE ÓRGÃOS E TECIDOS”"COCONUT DEHYDRATED WATER SOLUTION, OBTAINING PROCESS, AND ITS USE FOR THE PRESERVATION OF ORGANS AND TISSUES"

Γ0011 O presente pedido de patente de invenção trata de solução contendo produtos derivados do coco (Cocos nucifera L.), particularmente ao uso de água de coco desidratada, bem como do processo de obtenção de dita solução com aplicação na área de biotecnologia em saúde visando a conservação, perfusão e/ou reperfusão de um órgão ou de tecidos de humanos e de animais para transplante.Γ0011 The present application for a patent deals with a solution containing products derived from coconut (Cocos nucifera L.), particularly the use of dehydrated coconut water, as well as the process of obtaining this solution with application in the field of biotechnology in health aiming the conservation, perfusion and / or reperfusion of an organ or tissue of humans and animals for transplantation.

[0021 Na era moderna, o transplante de órgãos (TxH) representa uma opção terapêutica eficaz e crescente em diversas patologias. O TxH é um procedimento consagrado como tratamento de escolha para uma série de doenças crônicas e agudas graves (MIRANDA et al, 2005). Tem sido realizado cada vez mais precoce e não em fase final de doença avançada quando o paciente se encontra em condições desesperadoras (WIESNER et al, 2003).[0021 In the modern era, organ transplantation (TxH) represents an effective and growing therapeutic option in several pathologies. TxH is a procedure established as the treatment of choice for a series of serious and chronic diseases (MIRANDA et al, 2005). It has been performed earlier and not in the final stage of advanced disease when the patient is in desperate conditions (WIESNER et al, 2003).

[003] Além da recidiva das doenças que mais comumente são as indicações para o TxH, podemos ter outros fatores para o comprometimento dos resultados, que é a utilização do doador marginal ou mais modernamente chamado doador com critérios expandidos a fim de aumentar o poo/ de doadores (GASTACA, 2009).[003] In addition to the recurrence of diseases that are most commonly indications for TxH, we may have other factors for the compromise of results, which is the use of the marginal donor or more modernly called donor with expanded criteria in order to increase the poo / of donors (GASTACA, 2009).

[004] Todos estes fatores podem contribuir para a disfunção primária do enxerto que representa importante causa de mortalidade e morbidade pósoperatória, o que torna tão importante o estudo de toda as fases que envolvem o TxH a fim de melhorarmos cada vez mais seus resultados (MIRANDA, 2004).[004] All of these factors can contribute to the primary dysfunction of the graft, which represents an important cause of postoperative mortality and morbidity, which makes it so important to study all the phases that involve TxH in order to increasingly improve its results (MIRANDA , 2004).

[005] A preservação do enxerto é um ponto crucial no manejo do transplante, sendo um dos fatores determinantes para uma evolução cirúrgica favorável. Existem inúmeros pontos preocupantes nesse processo, porém dois dos pontos de maior relevância é a redução do tempo de isquemia fria e a diminuição da lesão de reperfusão, sendo neste momento que as soluções de preservação guardam sua importância (MAATHUIS, 2007).[005] The preservation of the graft is a crucial point in the management of transplantation, being one of the determining factors for a favorable surgical evolution. There are countless points of concern in this process, but two of the most relevant points are the reduction of the time of cold ischemia and the reduction of the reperfusion injury, being at this moment that the preservation solutions keep their importance (MAATHUIS, 2007).

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 7/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 7/27

2/15 [006] As soluções de preservação foram incorporadas às técnicas de preservação e permanecem como um fundamento essencial na manutenção de órgãos para transplante. Para reduzir esses efeitos indesejáveis, as soluções de preservação incluem uma serie de componentes específicos (BAICU et al., 2002; TAYLOR, 2000).2/15 [006] Preservation solutions have been incorporated into preservation techniques and remain an essential foundation in the maintenance of organs for transplantation. To reduce these undesirable effects, preservation solutions include a series of specific components (BAICU et al., 2002; TAYLOR, 2000).

[007] As soluções de preservação podem ser classificadas de acordo com a sua semelhança com o meio intracelular ou extracelular, chamadas então de soluções intracelulares ou extracelulares. Inicialmente, as primeiras estratégias de preservação como as soluções de EuroCoIlins e da Universidade Wisconsin (UW) tinham o objetivo de recriar um ambiente similar ao intracelular, com alta concentração de potássio e baixa concentração de sódio, para com isso prevenir o edema celular (ABOUNA et al., 1971; DEMMY etal., 1997).[007] Preservation solutions can be classified according to their similarity to the intracellular or extracellular medium, then called intracellular or extracellular solutions. Initially, the first preservation strategies such as the EuroCoIlins and the University of Wisconsin (UW) solutions aimed to recreate an environment similar to the intracellular one, with high potassium concentration and low sodium concentration, in order to prevent cell edema (ABOUNA et al., 1971; DEMMY etal., 1997).

[008] Entretanto, estudos recentes tem sugerido iguais ou melhores resultados das soluções do tipo extracelular com baixa concentração de potássio e alta concentração de sódio, como as soluções de Celsior e HTK (Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate) (HAUET etal., 2003).[008] However, recent studies have suggested equal or better results for extracellular type solutions with low potassium concentration and high sodium concentration, such as Celsior and HTK solutions (Histidine-Tryptophan-Ketoglutarate) (HAUET etal., 2003) .

[009] A primeira solução de preservação para armazenamento a frio foi desenvolvida por G.M. Collins em 1969 (COLLINS et al., 1969) e posteriormente modificada pela Eurotrasnplant Foundation com a retirada do magnésio da sua composição em 1976 (Annual Report Eurotransplant International Foundation, 1976). O fosfato servia como como tampão e a glicose como agente osmótico.[009] The first preservation solution for cold storage was developed by GM Collins in 1969 (COLLINS et al., 1969) and later modified by the Eurotrasnplant Foundation with the removal of magnesium from its composition in 1976 (Annual Report Eurotransplant International Foundation, 1976). Phosphate served as a buffer and glucose as an osmotic agent.

[010] Em 1987, Belzer e Southard desenvolveram a solução da Universidade Wisconsin. Substratos metabólicos inertes como lactobionato e rafinose são os agentes osmóticos. HES (hidroxietilamido) é usado como colóide. Glutationa e alopurinol servem como agentes antioxidantes e adenosina como precursor de ATP. Hoje ainda é considerada como solução padrão ouro na preservação de rim, fígado pâncreas e intestino (PLOEG et al., 1992).[010] In 1987, Belzer and Southard developed the University of Wisconsin solution. Inert metabolic substrates such as lactobionate and raffinose are the osmotic agents. HES (hydroxyethyl starch) is used as a colloid. Glutathione and allopurinol serve as antioxidant agents and adenosine as a precursor to ATP. Today it is still considered a gold standard solution in the preservation of kidney, liver, pancreas and intestine (PLOEG et al., 1992).

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 8/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 8/27

3/15 [011] Inicialmente introduzida por Bretschneider nos anos 70 como solução durante cardioplegia na cirurgia cardíaca, a solução HTK (HistidineTryptophan-Ketoglutarate) também foi testada em transplantes de rim, fígado e pâncreas (BRETSCHNEIDER et al., 1980). A histidina funciona como um potente tampão, o triptofano como estabilizador de membranas, enquanto o cetoglutarato age como substrato energético durante o metabolismo anaeróbico. Um estudo mostrou resultados semelhantes em termos de atraso no inicio da função renal (GDF) comparando HTK com UW, porém poucos dados estão disponíveis para tempos de isquemia mais prolongados, ou seja, mais de 24 h (vinte e quatro horas) (DE BOER et al., 1999).3/15 [011] Initially introduced by Bretschneider in the 1970s as a solution during cardioplegia in cardiac surgery, the HTK solution (HistidineTryptophan-Ketoglutarate) was also tested in kidney, liver and pancreas transplants (BRETSCHNEIDER et al., 1980). Histidine acts as a potent buffer, tryptophan as a membrane stabilizer, while ketoglutarate acts as an energy substrate during anaerobic metabolism. A study has shown similar results in terms of delayed onset of renal function (GDF) comparing HTK with UW, however few data are available for longer ischemic times, that is, more than 24 h (twenty-four hours) (DE BOER et al., 1999).

[012] Em 1994 foi desenvolvida a solução de Celsior para preservação de enxertos cardíacos, porém, também demonstrou ser efetiva na preservação de órgãos abdominais (MENASCHE et al., 1994; PEDOTTI et al., 2004). Combinou os agentes osmóticos da solução de UW com a grande capacidade de tampão da solução HTK. A glutationa foi adicionada como antioxidante. Por isso, a solução de Celsior tem potencial para substituir a solução UW dependendo para isso de estudos multicêntricos bem desenhados (MAATHUIS et al., 2007).[012] In 1994, Celsior's solution for preserving cardiac grafts was developed, but it also proved to be effective in preserving abdominal organs (MENASCHE et al., 1994; PEDOTTI et al., 2004). It combined the osmotic agents of the UW solution with the large buffering capacity of the HTK solution. Glutathione was added as an antioxidant. For this reason, Celsior's solution has the potential to replace the UW solution depending on well-designed multicenter studies (MAATHUIS et al., 2007).

[013] Mais recentemente, no início deste século, a solução IGL-1 surgiu como uma combinação das soluções de Celsior e UW (BEN ABDENNEBI et al., 2002). Estudos clínicos preliminares mostram bons resultados na preservação de enxertos renais quando comparados com a solução UW, inclusive com melhores índices de GDF. Entretanto, como o número de pacientes dos estudos é pequeno, não se pode ainda ser considerada sucessora da solução UW (BADET et al., 2005).[013] More recently, at the beginning of this century, the IGL-1 solution emerged as a combination of Celsior and UW solutions (BEN ABDENNEBI et al., 2002). Preliminary clinical studies show good results in the preservation of renal grafts when compared with the UW solution, even with better GDF indexes. However, as the number of patients in the studies is small, it cannot yet be considered a successor to the UW solution (BADET et al., 2005).

[014] A solução padrão é a UW, sendo a mais utilizada mundialmente. Apesar de suas vantagens, um problema importante é a alta viscosidade da solução de UW, o que pode levar à perfusão sinusoidal inadequada, causando distúrbio microcirculatório com repercussão negativa no resultado do transplante (FENG et al, 2006). A busca pela solução ideal é constante, existindo no mercado atualmente várias soluções como HTK, Euro-Collins, UW,[014] The standard solution is UW, being the most used worldwide. Despite its advantages, an important problem is the high viscosity of the UW solution, which can lead to inadequate sinusoidal perfusion, causing microcirculatory disturbance with negative repercussions on the transplant result (FENG et al, 2006). The search for the ideal solution is constant, and there are currently several solutions on the market such as HTK, Euro-Collins, UW,

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 9/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 9/27

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Celsior, porém nenhuma consegue associar qualidade e custo de maneira a tornar seu uso amplo e econômico.Celsior, however, none can associate quality and cost in order to make its use wide and economical.

[015] Nesse contexto, surge a necessidade de encontrar uma solução equivalente em qualidade às soluções padrões vigentes mais utilizadas clinicamente, porém economicamente viável de maneira mais ampla e com reprodutibilidade mais fácil. A água de coco se constitui em um dos mais promissores produtos biotecnológicos atualmente estudados na conservação de órgãos e tecidos (FAGUNDES; TAHA, 2004).[015] In this context, the need arises to find a solution equivalent in quality to the current standard solutions most used clinically, but economically viable in a broader way and with easier reproducibility. Coconut water is one of the most promising biotechnological products currently studied in the conservation of organs and tissues (FAGUNDES; TAHA, 2004).

[016] A água de coco ou líquido endospérmico proveniente do fruto do coqueiro (Cocos nucifera L.), pertence à subfamília Cocosidea da família Palmea, sendo uma solução natural e estéril, ligeiramente ácida, apresentando um valor de pH na faixa de 4.0 a 5.6, que é função, principalmente, da variedade e grau de maturação (CAMPOS et al., 1996).[016] Coconut water or endospheric liquid from the fruit of the coconut tree (Cocos nucifera L.), belongs to the subfamily Cocosidea of the Palmea family, being a natural and sterile solution, slightly acidic, with a pH value in the range of 4.0 to 5.6, which is mainly a function of variety and degree of maturity (CAMPOS et al., 1996).

[017] Além de ser um produto natural e praticamente livre de contaminações, a água de coco vem ganhando espaço no mercado como uma bebida de vasto potencial comercial, também por possuir baixo teor calórico, considerável valor nutricional e apresentar aroma e sabor suaves, apresentando aproximadamente 20 kcal / 100 ml, sendo composta por água (93%), carboidratos (5%), sais minerais e vitaminas (IMEN, 2016).[017] In addition to being a natural product and practically free from contamination, coconut water has been gaining space in the market as a drink of vast commercial potential, also for having low caloric content, considerable nutritional value and presenting a mild aroma and flavor, presenting approximately 20 kcal / 100 ml, consisting of water (93%), carbohydrates (5%), minerals and vitamins (IMEN, 2016).

[018] Estéril, a água extraída de cocos jovens apresenta composição química próxima à do soro glicosado isotônico empregado em hospitais, o que possibilita o seu uso na esfera médica (PETROIANU et al., 2004). A densidade da água de coco é semelhante à do plasma sanguíneo, isenta de pirogênicos e não causadora de hemólise tanto in vivo quanto in vitro, podendo ser usada como infusão intravenosa em quadros que necessitem reposição de carboidratos (ARAGÃO, 2000).[018] Sterile, the water extracted from young coconuts has a chemical composition close to that of the isotonic glycated serum used in hospitals, which allows its use in the medical sphere (PETROIANU et al., 2004). The density of coconut water is similar to that of blood plasma, free of pyrogens and does not cause hemolysis both in vivo and in vitro, and can be used as an intravenous infusion in conditions that require carbohydrate replacement (ARAGÃO, 2000).

[019] O pH da água de coco varia de acordo com a idade do fruto, sendo que, quando da idade de cinco meses, o pH encontra-se em torno de 4,7 a 4,8, elevando-se acima de 5 até o final do crescimento do fruto (ARAGÃO; ISBERNER; CRUZ., 2001).[019] The pH of coconut water varies according to the age of the fruit, and when the age of five months, the pH is around 4.7 to 4.8, rising above 5 until the end of fruit growth (ARAGÃO; ISBERNER; CRUZ., 2001).

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 10/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 10/27

5/15 [020] Esta solução hipotônica é mais ácida do que o plasma e tem uma gravidade especifica (densidade) de aproximadamente 1.020, comparável com o plasma sanguíneo. A água de coco tem alta osmolaridade, devido aos carboidratos presentes, que primeiramente são frutose e glicose. É rica em aminoácidos, incluindo-se lisina, cistina, fenilalanina, histidina e triptofano (CAMPBELL-FALCK et al., 2000).5/15 [020] This hypotonic solution is more acidic than plasma and has a specific gravity (density) of approximately 1,020, comparable to blood plasma. Coconut water has high osmolarity, due to the carbohydrates present, which are primarily fructose and glucose. It is rich in amino acids, including lysine, cystine, phenylalanine, histidine and tryptophan (CAMPBELL-FALCK et al., 2000).

[021] O principal constituinte químico da água do coco é o carboidrato na forma redutora (glicose e frutose) e não redutora (sacarose). A glicose e a frutose se combinam na água do coco a partir do sétimo mês de frutificação para formar a sacarose, que é menos doce quando comparada à frutose. Além de carboidratos, a água de coco possui proteínas (aproximadamente 370 mg/100 ml), vitaminas (ácido ascórbico, ácido nicotínico, biotina, riboflavina e ácido fólico) e aminoácidos, incluindo-se lisina, cistina, fenilalanina, histidina e triptofano (AROUCHA; VIANNI, 2002). Entretanto, não é uma fonte expressiva de vitamina C (RICHTER et al., 2005).[021] The main chemical constituent of coconut water is carbohydrate in a reducing (glucose and fructose) and non-reducing form (sucrose). Glucose and fructose combine in coconut water from the seventh month of fruiting to form sucrose, which is less sweet when compared to fructose. In addition to carbohydrates, coconut water contains proteins (approximately 370 mg / 100 ml), vitamins (ascorbic acid, nicotinic acid, biotin, riboflavin and folic acid) and amino acids, including lysine, cystine, phenylalanine, histidine and tryptophan ( AROUCHA; VIANNI, 2002). However, it is not an expressive source of vitamin C (RICHTER et al., 2005).

[022] O sódio consiste no principal cátion do fluido extracelular e regula o tamanho do compartimento celular bem como o volume do plasma sanguíneo. Esse cátion também auxilia na condução de impulsos nervosos e no controle da contração muscular. Todas as secreções do trato gastrintestinal contêm sódio, que se absorve em condições normais. Portanto, toda perda anômala de secreções gastrintestinais pode produzir um déficit de sódio. Também se perde sódio pela pele ou pelos rins (WHITMIRE, 2002).[022] Sodium consists of the main cation of extracellular fluid and regulates the size of the cell compartment as well as the volume of blood plasma. This cation also helps in conducting nerve impulses and in controlling muscle contraction. All secretions in the gastrointestinal tract contain sodium, which is absorbed under normal conditions. Therefore, any anomalous loss of gastrointestinal secretions can produce a sodium deficit. Sodium is also lost through the skin or kidneys (WHITMIRE, 2002).

[023] O potássio, o principal cátion do fluido intracelular, está presente em pequenas quantidades no fluido extracelular. Juntamente com o sódio, participa da manutenção do equilíbrio hídrico normal. Juntamente com o cálcio, é importante na regulação da atividade neuromuscular. O potássio também promove o crescimento celular (WHITMIRE, 2002).[023] Potassium, the main cation in intracellular fluid, is present in small amounts in extracellular fluid. Together with sodium, it participates in maintaining normal water balance. Together with calcium, it is important in regulating neuromuscular activity. Potassium also promotes cell growth (WHITMIRE, 2002).

[024] As diversas aplicações da água de coco podem ser devidas à composição química única de carboidratos, vitaminas, minerais, proteínas, aminoácidos e de fatores promotores de crescimento (ARDITTI, 1992). Esses fatores promotores de crescimento são um grupo de substâncias orgânicas[024] The different applications of coconut water may be due to the unique chemical composition of carbohydrates, vitamins, minerals, proteins, amino acids and growth-promoting factors (ARDITTI, 1992). These growth-promoting factors are a group of organic substances

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 11/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 11/27

6/15 naturais conhecidas como fito hormônios (auxinas e giberelinas). Os fito hormônios, como o ácido 3-indol acético (IAA), hormônios vegetais que exercem numerosas respostas fisiológicas importantes no desenvolvimento de plantas como divisão celular, crescimento e diferenciação, formação de frutos, dormência, germinação de sementes, senescência e queda de folhas e frutos, em baixas concentrações (DAVIES, 2004).6/15 natural known as phytohormones (auxins and gibberellins). Phytohormones, such as 3-indole acetic acid (IAA), plant hormones that exert numerous important physiological responses in the development of plants such as cell division, growth and differentiation, fruit formation, dormancy, seed germination, senescence and leaf fall and fruits, in low concentrations (DAVIES, 2004).

[025] Algumas propriedades da água de coco podem ser explicadas pelas citocininas, que desempenham papéis importantes em vários aspectos de desenvolvimento e crescimento de plantas, incluindo diferenciação e divisão celular, expressão gênica e a inibição da senescência foliar. Encontrou-se que algumas citocininas, como também em seus derivados, poderiam potencialmente ser utilizadas para aplicação médica, como na supressão de crescimento tumoral de mamíferos, prevenindo coágulos sanguíneos, atrasando o início da formação do fibroblasto humano e salvando RNAm humano de defeitos durante splicing (RATTAN et al., 2005). Embora existam extensivas pesquisas relacionadas com a fisiologia e bioquímica das citoquininas, a regulação da biossíntese, do metabolismo e o sinal de transdução são ainda pouco conhecidos. Ainda se debate se as citoquininas nas plantas são diretamente sintetizadas ou em parte resultam da degradação do ácido ribonucleico transportador (RNAt) e por isto seus constituintes mononucleotídeos não terem sido desvendados ainda (KIEBER; SCHALLER, 2010).[025] Some properties of coconut water can be explained by cytokinins, which play important roles in various aspects of plant development and growth, including cell differentiation and division, gene expression and the inhibition of leaf senescence. It has been found that some cytokinins, as well as their derivatives, could potentially be used for medical applications, such as in suppressing tumor growth in mammals, preventing blood clots, delaying the onset of human fibroblast formation and saving human mRNA from defects during splicing (RATTAN et al., 2005). Although there is extensive research related to the physiology and biochemistry of cytokinins, the regulation of biosynthesis, metabolism and the signal of transduction are still little known. It is still debated whether the cytokinins in plants are directly synthesized or in part result from the degradation of the transporter ribonucleic acid (tRNA) and that is why their mononucleotide constituents have not yet been unveiled (KIEBER; SCHALLER, 2010).

[026] A dinâmica biotecnológica avança as fronteiras do conhecimento e concomitantes pesquisas inovadoras medeiam à construção e reprodução de bioprocessos e/ou bioprodutos. Neste âmbito, ampliam-se oportunidades e novos desafios. A água de coco é uma fonte natural com potencial gerador de bioprocessos e/ou bioprodutos que remonta longas décadas. Nos caminhos percorridos, avultaram-se evidências e consolidaram-se experiências sobre as riquezas naturais e o potencial científico da água de coco. Com a introdução de pesquisas direcionadas para utilização da água de coco na reprodução animal, com resultados satisfatórios, ampliaram-se, bastante, as possibilidades e os avanços na área de bioprocessos e/ou bioprodutos.[026] The biotechnological dynamics advances the frontiers of knowledge and concomitant innovative research mediates the construction and reproduction of bioprocesses and / or bioproducts. In this context, opportunities and new challenges are expanded. Coconut water is a natural source with the potential to generate bioprocesses and / or bioproducts that goes back for many decades. In the paths taken, there was a great deal of evidence and experiences were consolidated on the natural wealth and scientific potential of coconut water. With the introduction of research aimed at the use of coconut water in animal reproduction, with satisfactory results, the possibilities and advances in the area of bioprocesses and / or bioproducts have greatly expanded.

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 12/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 12/27

7/15 [027] Com efeito, evidenciou-se, a eficiência da água de coco na preservação de sêmen de animais domésticos, com ênfase para caprinos (FREITAS, 1988); suínos (TONIOLI, 1989a; 1989b); ovinos (FREITAS, 1992) e caninos (UCHOA, 2004). Nesta sequência de estudos, a água de coco demonstrou ser capaz de preservar sêmen de peixes de água doce como o tambaqui (Colossoma macropomum, CUVIER, 1818) (FARIAS et al., 1999).7/15 [027] Indeed, the efficiency of coconut water in the preservation of semen of domestic animals was evidenced, with emphasis on goats (FREITAS, 1988); pigs (TONIOLI, 1989a; 1989b); sheep (FREITAS, 1992) and canines (UCHOA, 2004). In this sequence of studies, coconut water has been shown to be able to preserve semen from freshwater fish such as tambaqui (Colossoma macropomum, CUVIER, 1818) (FARIAS et al., 1999).

[028] A despeito do êxito da água de coco na preservação de sêmen, ressalte-se que o componente ativo, o ácido 3-indol acético (IAA), isolado na água de coco por (NUNES; COMBARNOUS; PRYSCILA, 1994), influi nos resultados. No entanto, depende do estágio de maturação e da espécie do fruto (NUNES; SALGUEIRO, 1999). O IAA é uma substância de ação hormonal com atividade no crescimento de vegetais e que estimula o metabolismo dos espermatozóides (NUNES; SALGUEIRO, 1999). Com o advento do IAA, sendo adicionado na composição de diluentes convencionais do sêmen de diferentes espécies, verificou-se maior motilidade, aumento da taxa de fertilidade e de conservação dos espermatozóides (CRUZ, 1994; NUNES; COMBARNOUS; PRYSCILA, 1994).[028] Despite the success of coconut water in preserving semen, it should be noted that the active component, 3-indole acetic acid (IAA), isolated in coconut water by (NUNES; COMBARNOUS; PRYSCILA, 1994), influences the results. However, it depends on the stage of ripeness and the species of the fruit (NUNES; SALGUEIRO, 1999). IAA is a substance with hormonal action with activity in the growth of vegetables and that stimulates the metabolism of sperm (NUNES; SALGUEIRO, 1999). With the advent of IAA, being added to the composition of conventional semen diluents of different species, there was greater motility, increased fertility rate and sperm conservation (CRUZ, 1994; NUNES; COMBARNOUS; PRYSCILA, 1994).

[029] A água de coco verde pode ser utilizada em situações emergenciais, onde não há possibilidade de atendimento hospitalar, como fluido de hidratação intravenosa (PETROIANU et al., 2004; ISMAIL; SINGH; SIRISINGHE, 2007). Em alguns países onde a deficiência nutricional na população é alta, a água de coco é utilizada como substituta de produtos proteicos.[029] Green coconut water can be used in emergency situations, where there is no possibility of hospital care, such as intravenous hydration fluid (PETROIANU et al., 2004; ISMAIL; SINGH; SIRISINGHE, 2007). In some countries where nutritional deficiency in the population is high, coconut water is used as a substitute for protein products.

[030] Em casos de pacientes com disenteria e cólera ou outros tipos de diarréia severa, em que os níveis de potássio podem ser baixos, a água-decoco pode ser tanto utilizada por via oral, quanto por via intravenosa (ATUKORALE, 2001). Com pequenas modificações, serve de veículo adequado para reidratação oral em casos de desidratação pediátrica (WOSIACKI; DEMIATE; MELLO, 1996). Também pode ser utilizada para reidratação oral em casos de diarréia moderada (ADANS; BRATT, 1992; KHAN; MUTI-UR-REHMAN; KHAN, 2003).[030] In cases of patients with dysentery and cholera or other types of severe diarrhea, in which potassium levels may be low, water-decoction can be used both orally and intravenously (ATUKORALE, 2001). With minor modifications, it serves as an adequate vehicle for oral rehydration in cases of pediatric dehydration (WOSIACKI; DEMIATE; MELLO, 1996). It can also be used for oral rehydration in cases of moderate diarrhea (ADANS; BRATT, 1992; KHAN; MUTI-UR-REHMAN; KHAN, 2003).

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 13/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 13/27

8/15 [031] O impacto dessas evidências tem contribuído para desdobramentos de outros processos biotecnológicos. Na agenda de bioprocessos e/ou bioprodutos, obtidos pela utilização da água de coco, destacam-se o uso na criopreservação de embriões murídeos (BLUME; MARQUES Jr., 1994); no cultivo de embriões murídeos e bovinos (BLUME et al., 1997a); na maturação de ovócitos bovinos (BLUME et al., 1997b); no estimulo à fertilidade de sêmen de galo (BLESBOIS et al., 1996).8/15 [031] The impact of this evidence has contributed to developments in other biotechnological processes. In the agenda of bioprocesses and / or bioproducts, obtained through the use of coconut water, the use in cryopreservation of murine embryos (BLUME; MARQUES Jr., 1994); in the cultivation of murine and bovine embryos (BLUME et al., 1997a); in the maturation of bovine oocytes (BLUME et al., 1997b); in stimulating rooster semen fertility (BLESBOIS et al., 1996).

[032] As soluções conhecidas têm influenciado o ritmo de difusão da água de coco na adoção de novas alternativas biotecnológicas. Deste modo, os bioprocessos e/ou bioprodutos aglutinam várias inovações. Em torno dessas perspectivas, diluentes de sêmen, à base de água de coco, têm sido utilizados para diversas espécies animais, com ênfase para suínos (TONIOLLI; MESQUITA, 1990); caprinos e ovinos (NUNES; SALGUEIRO, 1999); bubalinos (VALE et al., 1997); humanos (NUNES; SALGUEIRO, 2007), e canídeos (CARDOSO et al., 2003; CARDOSO; SILVA; SILVA, 2006). A riqueza destas evidências imprime uma visão ampla da potencialidade da água de coco.[032] The known solutions have influenced the rate of diffusion of coconut water in the adoption of new biotechnological alternatives. In this way, bioprocesses and / or bioproducts bring together several innovations. Around these perspectives, semen extenders, based on coconut water, have been used for several animal species, with emphasis on pigs (TONIOLLI; MESQUITA, 1990); goats and sheep (NUNES; SALGUEIRO, 1999); buffaloes (VALE et al., 1997); humans (NUNES; SALGUEIRO, 2007), and canids (CARDOSO et al., 2003; CARDOSO; SILVA; SILVA, 2006). The richness of this evidence gives a broad view of the potential of coconut water.

[033] Nesse campo em evolução e de amplas dimensões, ressalte-se o efetivo funcionamento da água de coco como meio de cultura para: Mycobacterium tuberculosis (VASANTHAKUMARI; JAGANNTH, 1998); folículos pré-antrais de caprinos (SILVA et al., 1999; 2000; 2004); folículos préantrais de ovinos (ANDRADE et al., 2002), e folículos pré-antrais de bovinos (LUCCI et al., 2004). E, nestes eventos, estão inseridos estudos recentes que enfatizam a utilização da água de coco na manutenção de células periodontais (GOPIKRISHNA et al., 2008); como suplemento no crescimento de culturas celulares para cultivo de células de astrócitos e macrófagos (BASTOS et al., 2008), e como promotor de crescimento para cultivo do fungo Schizochytríum mangrovei SK-2 (UNAGUL et al., 2007). Estas evidências demonstram aplicações da água de coco como meio de cultura.[033] In this evolving and wide-ranging field, the effective functioning of coconut water as a culture medium for: Mycobacterium tuberculosis (VASANTHAKUMARI; JAGANNTH, 1998); goat preantral follicles (SILVA et al., 1999; 2000; 2004); pre-antral sheep follicles (ANDRADE et al., 2002), and pre-antral bovine follicles (LUCCI et al., 2004). And, in these events, recent studies are inserted that emphasize the use of coconut water in the maintenance of periodontal cells (GOPIKRISHNA et al., 2008); as a supplement in the growth of cell cultures for the cultivation of astrocyte and macrophage cells (BASTOS et al., 2008), and as a growth promoter for the cultivation of the fungus Schizochytríum mangrovei SK-2 (UNAGUL et al., 2007). This evidence demonstrates applications of coconut water as a culture medium.

[034] Vale pontuar que a água de coco conferiu longevidade para células de córneas humanas utilizadas em transplante; funcionou como meio de cultura para tecidos, vírus e bactérias, e demonstrou resultado satisfatório na obtenção[034] It is worth noting that coconut water provided longevity for human corneal cells used in transplantation; functioned as a culture medium for tissues, viruses and bacteria, and demonstrated satisfactory results in obtaining

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 14/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 14/27

9/15 de vacinas contra febre aftosa, raiva e leishmaniose (ARAGÃO, 2000). Em tais descobertas, incluem-se a eficiência da água de coco como meio de cultivo para diversos cogumelos (MARQUES; SILVA, 1981).9/15 of vaccines against foot-and-mouth disease, rabies and leishmaniasis (ARAGÃO, 2000). Such discoveries include the efficiency of coconut water as a means of cultivation for several mushrooms (MARQUES; SILVA, 1981).

[035] Vários estudos têm demonstrado a eficiência da água de coco no tocante à preservação de células e tecidos. Nogueira e Vasconcelos (2000) ao utilizar a água de coco como meio conservante de córneas de coelhos, observaram que não houve alteração estrutural expressiva em relação às córneas conservadas no Optisol®, produto padrão. Campbell-Falck et al. (2000) publicaram um relato de caso onde a água de coco foi utilizada com sucesso como fluido de hidratação intravenosa. Pummer et al. (2001) analisaram a influência da água de coco na homeostase sanguínea, e não observaram diferenças em comparação com a solução salina fisiológica.[035] Several studies have demonstrated the efficiency of coconut water in terms of preserving cells and tissues. Nogueira and Vasconcelos (2000) when using coconut water as a preservative medium for rabbit corneas, observed that there was no significant structural change in relation to corneas conserved in Optisol®, a standard product. Campbell-Falck et al. (2000) published a case report where coconut water was successfully used as an intravenous hydration fluid. Pummer et al. (2001) analyzed the influence of coconut water on blood homeostasis, and found no differences in comparison with physiological saline.

[036] Sabendo-se da relevância da água de coco associado ao seu benefício clínico, em 1997 iniciou-se, no Estado do Ceará, um estudo que levou à padronização do fruto que seria o ideal para a utilização em processos biotecnológicos. Dessa forma, uma vez selecionado o fruto ideal, buscou-se a estabilização da água de coco na forma de pó, fato logrado no início de 2002. As amostras são diretamente secas e transformadas em pó, as reações são inibidas pela mudança de fase e, portanto, mantêm inalterada todas as suas qualidades (NUNES; SALGUEIRO; GONDIM, 2005).[036] Knowing the relevance of coconut water associated with its clinical benefit, in 1997 a study was initiated in the State of Ceará that led to the standardization of the fruit that would be ideal for use in biotechnological processes. Thus, once the ideal fruit was selected, the stabilization of coconut water in the form of powder was sought, a fact achieved in early 2002. The samples are directly dried and transformed into powder, the reactions are inhibited by the phase change and therefore, they keep all their qualities unchanged (NUNES; SALGUEIRO; GONDIM, 2005).

[037] O processo de produção de água de coco em pó se baseia numa sequência de procedimentos. Conforme a finalidade do produto, o fruto é selecionado em função de suas propriedades físico-químicas, como: volume, peso, diâmetro do albúmen, pH, osmolaridade, teor de carboidratos, teor de aminoácidos, teor de minerais, dentre outros. A obtenção do fruto é iniciada pela rigorosa seleção e higienização do mesmo, seguida de colheita do líquido endospérmico do coco (água de coco), sob forma asséptica, realizada amostragem após a filtração. O líquido filtrado é homogeneizado e bombeado para o sistema de secagem. Submetida a um tratamento térmico, a mostra é seca e transformada em um pó, destituído de água livre, com alta solubilidade.[037] The process of producing powdered coconut water is based on a sequence of procedures. Depending on the purpose of the product, the fruit is selected according to its physical and chemical properties, such as: volume, weight, albumen diameter, pH, osmolarity, carbohydrate content, amino acid content, mineral content, among others. The obtaining of the fruit is initiated by the rigorous selection and cleaning of the same, followed by the collection of the endospheric liquid of the coconut (coconut water), in aseptic form, carried out sampling after the filtration. The filtered liquid is homogenized and pumped into the drying system. Undergoing a heat treatment, the sample is dried and transformed into a powder, devoid of free water, with high solubility.

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 15/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 15/27

10/15 [038] Baseado em resultados obtidos com o uso da água de coco na sua forma natural, na conservação de células espermáticas durante os anos 80 e 90, foi desenvolvida uma solução à base de água de coco desidratada voltada para a conservação, perfusão e/ou reperfusão de um órgão ou de tecidos de humanos e de animais para transplante.10/15 [038] Based on results obtained with the use of coconut water in its natural form, in the conservation of sperm cells during the 80s and 90s, a solution based on dehydrated coconut water aimed at conservation was developed, perfusion and / or reperfusion of an organ or tissue of humans and animals for transplantation.

[039] No âmbito patentário, foram localizados alguns documentos relevantes que serão descritos a seguir.[039] In the patent field, some relevant documents were found, which will be described below.

[040] O documento PI0517333-7, de 11/11/2005, descreve uma solução de conservação e perfusão de órgãos para manter a viabilidade do órgão doador, e, método para conservar um órgão, na qual a solução é quimicamente definida e contém compostos testados farmaceuticamente.[040] Document PI0517333-7, 11/11/2005, describes an organ preservation and perfusion solution to maintain the viability of the donor organ, and a method for conserving an organ, in which the solution is chemically defined and contains pharmaceutically tested compounds.

[041] O documento PI0606623-2, de 13/01/2006 trata de uma solução de aspersão e/ou conservação para órgãos contendo inibidores peptídicos da proteína quinase C beta-ll e/ou da proteína quinase C ômega.[041] Document PI0606623-2, dated 13/01/2006, deals with a sprinkling and / or preservation solution for organs containing peptide inhibitors of protein kinase C beta-ll and / or protein kinase C omega.

[042] O documento PI0010314-4, de 18/05/2000, descreve uma solução aquosa de conservação de tecidos e órgãos, do tipo extracelular, compreendendo íons cálcio e polietilenoglicol purificado de peso molecular igual a 35.000.[042] Document PI0010314-4, of 18/05/2000, describes an aqueous solution for the preservation of tissues and organs, of the extracellular type, comprising calcium ions and purified polyethylene glycol of molecular weight equal to 35,000.

[043] O documento BR 102013031477-3, de 06/12/2013, relata uma solução de água de coco verde modificada, processo de obtenção e seu uso para a preservação de órgãos. Tal solução utiliza a água de cocos in natura, na forma líquida.[043] The document BR 102013031477-3, of 06/12/2013, reports a modified green coconut water solution, process of obtaining and its use for the preservation of organs. Such a solution uses fresh coconuts water, in liquid form.

[044] Além das patentes depositadas decorrentes das pesquisas dos inventores, José Ferreira Nunes e Cristiane Clemente de Mello Salgueiro: PI0203590-1 (Meio de conservação de células espermáticas e processo de obtenção de fração constituinte do meio de conservação de células espermáticas); PI0401254-2 (Beneficiamento do líquido endospérmico do coco para produção de água de coco em pó (ACP); PI 0505920-8 (Composição cicatrizante, uso de água de coco desidratada e uso da composição); PI 1002346-1 (Processo de obtenção de água de coco desidratada e produto resultante); P11009940-9 (Processo de re-diluição de sêmen bovino);[044] In addition to the patents filed as a result of the inventors' research, José Ferreira Nunes and Cristiane Clemente de Mello Salgueiro: PI0203590-1 (Sperm cell preservation medium and process for obtaining the constituent fraction of the sperm cell conservation medium); PI0401254-2 (Improvement of coconut endospheric liquid for the production of powdered coconut water (ACP); PI 0505920-8 (Healing composition, use of dehydrated coconut water and use of the composition); PI 1002346-1 (Obtaining process dehydrated coconut water and resulting product); P11009940-9 (Process of dilution of bovine semen);

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 16/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 16/27

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Pl 1010496-8 (Processo de obtenção de adjuvante para vacinas aviárias); Pl 1005032-9 (Processo de obtenção de meio de manutenção e crescimento celular, meio obtido, e, método de cultivo de células); PI1100032-5 (Processo de diluição e preservação de sêmen de canídeos); Pl 1101610-8 (Meio de diluição de sêmen canídeo e processo de preservação do mesmo); 0000221010886023 (Processo de produção de meio de cultivo e isolamento de bactérias, meio de cultivo e isolamento e método de cultivo e isolamento); PI1106369-6 (Processo de colheita, diluição e conservação de sêmen aviário, diluente de sêmen aviário e, processo de fertilização); BR 10 2014 016754 4 (Processo de Criopreservação de sêmen de mamíferos e diluente de sêmen com produtos naturais); BR 10 2016 028381 7 (Composição para reidratação durante o exercício de atletas e método de obtenção); BR 10 2017 023976 4 (Formulação para alimentação hospitalar e uso da formulação); BR 10 2017 024099 1 (Composição cicatrizante, uso de produtos derivados do coco e uso da composição).Pl 1010496-8 (Process for obtaining adjuvant for avian vaccines); Pl 1005032-9 (Process of obtaining maintenance medium and cell growth, obtained medium, and method of culturing cells); PI1100032-5 (Canine semen dilution and preservation process); Pl 1101610-8 (Canine semen dilution medium and preservation process); 0000221010886023 (Production process of bacteria culture and isolation medium, culture and isolation medium and culture and isolation method); PI1106369-6 (Process of collection, dilution and conservation of avian semen, diluent of avian semen and, fertilization process); BR 10 2014 016754 4 (Cryopreservation process of mammalian semen and semen diluent with natural products); BR 10 2016 028381 7 (Composition for rehydration during the exercise of athletes and method of obtaining); BR 10 2017 023976 4 (Formulation for hospital food and use of formulation); BR 10 2017 024099 1 (Healing composition, use of products derived from coconut and use of the composition).

[045] Do que se depreende da literatura pesquisada, não foram encontrados documentos antecipando ou sugerindo os ensinamentos da presente invenção, de forma que a solução aqui proposta ao olhar dos inventores possui novidade e atividade inventiva frente ao estado da técnica.[045] From what can be inferred from the researched literature, no documents were found anticipating or suggesting the teachings of the present invention, so that the solution proposed here in the eyes of the inventors has novelty and inventive activity in view of the state of the art.

[046] Com o intuito de solucionar tais problemas desenvolveu-se a presente invenção, referente a uma solução contendo produtos derivados do coco (Cocos nucifera L.), particularmente ao uso de água de coco desidratada, bem como ao processo de obtenção de dita solução e seu uso na conservação, perfusão e/ou reperfusão de um órgão ou de tecidos de humanos e de animais para transplante.[046] In order to solve these problems, the present invention was developed, referring to a solution containing products derived from coconut (Cocos nucifera L.), particularly the use of dehydrated coconut water, as well as the process of obtaining said solution and its use in the conservation, perfusion and / or reperfusion of an organ or tissue of humans and animals for transplantation.

[047] Conforme sentido aqui empregado, “água de coco em pó”, “água de coco desidratada” ou “ACP” são expressões sinônimas que indicam tanto a origem (água de coco, ou líquido do endosperma do fruto da planta Cocos nucifera L.) quanto à forma física (pó, granulado, material pulverulento) como o material ao qual a invenção se refere. Não se referem a pós e granulados obtidos a partir de leite de coco, ou da polpa (albúmen) do coco, ainda que[047] As used here, “powdered coconut water”, “dehydrated coconut water” or “ACP” are synonymous expressions that indicate both the origin (coconut water, or liquid from the endosperm of the fruit of the Cocos nucifera L plant .) as to the physical form (powder, granules, powdery material) as the material to which the invention refers. They do not refer to powders and granules obtained from coconut milk, or from coconut pulp (albumen), although

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 17/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 17/27

12/15 esses possam estar presentes, de forma alternativa, nas composições da invenção.12/15 these may alternatively be present in the compositions of the invention.

[048] “Perfusão” trata do fluxo de sangue constante e pulsátil ou dentro do escopo da presente invenção, uma solução de perfusão e conservação de órgãos substituindo sangue no ou em torno de um órgão, parte deste ou tecido, preferencialmente através da vasculatura.[048] "Perfusion" deals with the constant and pulsating blood flow or within the scope of the present invention, an organ perfusion and preservation solution replacing blood in or around an organ, part of it or tissue, preferably through the vasculature.

[049] A expressão “órgãos, tecidos ou parte destes” neste pedido compreende todas as partes de um corpo de mamífero que pode ser transplantadas hoje ou no futuro.[049] The term "organs, tissues or parts thereof" in this application includes all parts of a mammalian body that can be transplanted today or in the future.

[050] A osmolaridade é uma medida de pressão osmótica exercida por uma solução através de uma membrana semi-permeável perfeita (uma que vai permitir a passagem livre de água e evitar completamente movimento de solutos) comparada com a água pura. A osmolaridade é dependente do número de partículas em solução, mas independe da natureza das partículas.[050] Osmolarity is a measure of osmotic pressure exerted by a solution through a perfect semi-permeable membrane (one that will allow free passage of water and completely prevent movement of solutes) compared to pure water. Osmolarity is dependent on the number of particles in solution, but does not depend on the nature of the particles.

[051] Um “tampão” é aqui definido como “substância que, pela sua presença em solução, aumenta a quantidade de ácido ou álcali que deve ser adicionado para provocar alteração unitária no pH”. Os tampões são, assim, componentes muito importantes em soluções de conservação e perfusão de órgãos, pela manutenção de uma concentração constante de íons de hidrogênio dentro da faixa fisiológica. O pH do sangue de mamífero é mantido próximo a 7,38 por sistemas tamponantes. Os tampões universalmente aplicáveis e biologicamente aceitáveis para a solução, de acordo com a presente invenção, devem ter: solubilidade em água, não interferir nos processos biológicos ou ter tendência de formação de complexos conhecidos como íon de metal, não ser tóxico e não interferir com membranas biológicas (tal como penetração, solubilização e adsorção na superfície).[051] A “buffer” is defined here as “a substance that, due to its presence in solution, increases the amount of acid or alkali that must be added to cause a unitary change in pH”. Tampons are thus very important components in organ conservation and perfusion solutions, by maintaining a constant concentration of hydrogen ions within the physiological range. The pH of mammalian blood is maintained close to 7.38 by buffer systems. The universally applicable and biologically acceptable buffers for the solution, according to the present invention, must have: solubility in water, do not interfere with biological processes or have a tendency to form complexes known as metal ions, be non-toxic and do not interfere with biological membranes (such as penetration, solubilization and adsorption on the surface).

[052] A menção à água de coco desidratada como princípio ativo significa que se está fazendo referência aos compostos químicos nela contidos.[052] The mention of dehydrated coconut water as an active ingredient means that reference is being made to the chemical compounds contained therein.

[053] Também conforme aqui empregado, “água de coco” refere-se ao endosperma líquido de cocos jovens. De maneira particular, sem excluir qualquer outra, a água de coco desidratada, utilizada na invenção, é a obtida a[053] Also as used here, “coconut water” refers to the liquid endosperm of young coconuts. In particular, without excluding any other, the dehydrated coconut water used in the invention is obtained from

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 18/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 18/27

13/15 partir de frutos coletados quando se observa o maior volume de líquido, tipicamente entre quatro e oito meses de idade.13/15 from fruits collected when the highest volume of liquid is observed, typically between four and eight months of age.

[055] Sem que se crie limitações à invenção, com lastro em teorias, a água de coco contém biopolímeros compostos por resíduos glicosídicos que mostram uma piezeletricidade comparada a do colágeno (NUNES; SALGUEIRO, 2011).[055] Without creating limitations to the invention, based on theories, coconut water contains biopolymers composed of glycosidic residues that show a piezoelectricity compared to that of collagen (NUNES; SALGUEIRO, 2011).

[056] Foram realizados testes toxicológicos e resultados obtidos em laboratório no sentido de esclarecer dúvidas sobre toxidade da água de coco.[056] Toxicological tests and laboratory results were performed in order to clarify doubts about the toxicity of coconut water.

[057] O estudo de “Toxicidade oral aguda para ratos” foi executado pelo Laboratório Bioensaios Análises e Consultoria Ambiental Ltda. em 26/01/2011, de acordo com o OECD - Guidelines for Testing of Chemicals. Método 423 de 07/12/2001. Este estudo em laboratório foi feito para determinar a toxicidade aguda oral da água de coco em pó para ratos Wistar adultos (Rattus norvegicus), sendo conduzido utilizando-se seis animais, fêmeas adultas, dispostas em dois grupos teste, recebendo a dose de 2.000 mg/Kg. O teste foi realizado sob condições artificiais, com fotoperíodo de 12 horas claro /12 horas escuro, temperatura entre 19,0 e 21,1 °C e umidade relativa entre 38,1 e 83,2%. O resultado final foi baseado na mortalidade dos animais durante 14 dias de observação. Foram avaliados os sinais e sintomas clínicos dos animais expostos, assim como o parâmetro de massa corporal durante 14 dias. Ao final do período de observação, os animais foram eutanasiados e realizada necropsia e avaliação macroscópica dos órgãos internos. O resultado final do estudo foi o seguinte: DLso oral para ratos > 5.000 mg de água de coco em pó / Kg de massa corporal.[057] The study of “Acute oral toxicity to rats” was carried out by Laboratório Bioensaios An Análise e Consultoria Ambiental Ltda. on 26/01/2011, according to the OECD - Guidelines for Testing of Chemicals. Method 423 of 12/07/2001. This laboratory study was done to determine the acute oral toxicity of powdered coconut water for adult Wistar rats (Rattus norvegicus), being conducted using six adult female animals, arranged in two test groups, receiving a dose of 2,000 mg / Kg. The test was performed under artificial conditions, with a 12 hour light / 12 hour dark photoperiod, temperature between 19.0 and 21.1 ° C and relative humidity between 38.1 and 83.2%. The final result was based on the animals' mortality during 14 days of observation. The clinical signs and symptoms of the exposed animals were evaluated, as well as the body mass parameter for 14 days. At the end of the observation period, the animals were euthanized and an autopsy and macroscopic evaluation of the internal organs were performed. The final result of the study was as follows: Oral DLso for rats> 5,000 mg of powdered coconut water / kg of body weight.

[058] O estudo “Toxicidade cutânea aguda para ratos” foi executado pelo Laboratório Bioensaios Análises e Consultoria Ambiental Ltda. em 26/01/2011, de acordo com o OECD - Guidelines for Testing of Chemicals. Método 402 de 24/02/1987. O referido estudo foi conduzido utilizando-se cinco machos e cinco fêmeas adultas, dispostos em um grupo recebendo uma dose da substância teste, totalizando 10 animais no grupo. O teste foi realizado em condições artificiais, com fotoperíodo de 12 horas claro / 12 horas escuro, temperatura[058] The study “Acute skin toxicity to rats” was carried out by Laboratório Bioensaios An Análise e Consultoria Ambiental Ltda. on 26/01/2011, according to the OECD - Guidelines for Testing of Chemicals. Method 402 of 2/24/1987. This study was conducted using five males and five adult females, arranged in a group receiving a dose of the test substance, totaling 10 animals in the group. The test was performed under artificial conditions, with a 12 hour light / 12 hour dark photoperiod, temperature

Petição 870170086822, de 10/11/2017, pág. 19/27Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 19/27

14/15 entre 19,0 e 19,9 °C e umidade relativa entre 48,7 e 82,1%. O resultado final baseou-se na mortalidade dos animais durante 14 dias de observação, tendo sido avaliados os sinais e sintomas clínicos dos animais expostos, assim como o parâmetro de massa corporal durante 14 dias. Ao final do período de observação, os animais foram eutanasiados e em seguida realizada necropsia e avaliação macroscópica dos órgãos internos. O resultado final do estudo foi o seguinte: DLso cutânea para ratos > 2.044 mg de água de coco em pó / Kg de massa corporal.14/15 between 19.0 and 19.9 ° C and relative humidity between 48.7 and 82.1%. The final result was based on the mortality of the animals during 14 days of observation, and the clinical signs and symptoms of the exposed animals were evaluated, as well as the body mass parameter during 14 days. At the end of the observation period, the animals were euthanized and then an autopsy and macroscopic evaluation of the internal organs was performed. The final result of the study was as follows: DLso cutaneous for rats> 2,044 mg of powdered coconut water / kg of body weight.

[059] O insumo água de coco em pó (ACP) que foi utilizado para a preparação da composição, é padronizada (FIGURA 1), com constituintes idênticos à água de coco in natura e é produzido segundo as normas da legislação vigentes do Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento, bem como da ANVISA (Resolução CNNPA n° 12 de 24/07/1978 e Resolução RDC n° 12, de 02/01/2001) pela empresa ACP Biotecnologia (ACP Pesquisa, Desenvolvimento e Inovação Ltda., CNPJ: 09.599.874/0001-81, IncubaUECE, Fortaleza, Ceará, Brasil).[059] The raw powdered coconut water (ACP) input that was used to prepare the composition is standardized (FIGURE 1), with constituents identical to fresh coconut water and is produced according to the legislation rules in force at the Ministry of Agriculture, Livestock and Supply, as well as ANVISA (Resolution CNNPA No. 12 of 07/24/1978 and Resolution RDC No. 12, of 02/01/2001) by the company ACP Biotecnologia (ACP Pesquisa, Desenvolvimento e Inovação Ltda., CNPJ: 09.599.874 / 0001-81, IncubaUECE, Fortaleza, Ceará, Brazil).

[060] É um dos objetos da presente invenção uma solução contendo água de coco desidratada formulada especificamente para a conservação, perfusão e/ou reperfusão de um órgão ou de tecidos de humanos e de animais para transplante, onde seus constituintes encontram-se especificados na FIGURA 1.[060] One of the objects of the present invention is a solution containing dehydrated coconut water formulated specifically for the conservation, perfusion and / or reperfusion of an organ or tissue of humans and animals for transplantation, where its constituents are specified in FIGURE 1.

[061] A ACP, insumo para as composições da invenção, é obtida por qualquer processo adequado. Pode ser cristalina ou amorfa, ou mistura delas. É adequada à invenção, sem excluir qualquer alternativa, quando obtida por liofilização ou spray drying, opcionalmente em presença de um carreador, por exemplo, um produto da hidrólise do amido, como maltodextrina, ou material com características semelhantes.[061] ACP, an input for the compositions of the invention, is obtained by any suitable process. It can be crystalline or amorphous, or a mixture of them. It is suitable for the invention, without excluding any alternative, when obtained by lyophilization or spray drying, optionally in the presence of a carrier, for example, a starch hydrolysis product, such as maltodextrin, or material with similar characteristics.

[062] É um dos objetos da presente invenção a preparação da solução de conservação, perfusão e/ou reperfusão, caracterizada pelas etapas: (a) adicionar agentes tamponantes; (b) diluir os constituintes em água destilada;[062] One of the objects of the present invention is the preparation of the preservation, perfusion and / or reperfusion solution, characterized by the steps: (a) adding buffering agents; (b) dilute the constituents in distilled water;

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15/15 (c) realizar a esterilização mecânica em filtros de millipore; (d) acondicionar em recipientes herméticos; e (e) manter a solução congelada até seu uso.15/15 (c) perform mechanical sterilization on millipore filters; (d) pack in airtight containers; and (e) keep the solution frozen until use.

[063] Em uma realização preferencial são adicionadas substâncias tamponantes à água de coco desidratada para que seu pH seja ajustado para 7,4.[063] In a preferred embodiment, buffering substances are added to the dehydrated coconut water so that its pH is adjusted to 7.4.

[064] Em uma realização preferencial a taxa de diluição é de 7,12 g de água de coco desidratada em 100 ml de água destilada (q.s.p.).[064] In a preferred embodiment the dilution rate is 7.12 g of dehydrated coconut water in 100 ml of distilled water (q.s.p.).

[065] Em uma realização preferencial a solução possui uma pressão osmótica de aproximadamente 318 mOsm/Kg H2O.[065] In a preferred embodiment, the solution has an osmotic pressure of approximately 318 mOsm / Kg H2O.

[066] Em uma realização preferencial a solução é esterilizada por ação mecânica através de filtro de milipore de 0,22 micras.[066] In a preferred embodiment, the solution is sterilized by mechanical action through a 0.22 micron milipore filter.

[067] Em uma realização preferencial a solução esterilizada é mantida congelada até seu uso.[067] In a preferred embodiment, the sterile solution is kept frozen until use.

Claims

CLAIMS “DEHYDRATED COCONUT WATER SOLUTION, OBTAINING PROCESS, AND ITS USE FOR THE PRESERVATION OF ORGANS AND TISSUES”

1. “Solution for the preservation of organs and tissues”, characterized by comprising dehydrated coconut water and buffering substances.

2. "Solution for preserving organs and tissues", according to claim 1, characterized by the fact that it contains between 1 and 99.9% by weight of dehydrated coconut water, preferably 5.26% of dehydrated coconut water.

3. “Solution for preserving organs and tissues”, according to claim 1, characterized by the fact that said dehydrated coconut water is obtained by lyophilization or spray drying.

4. "Solution for preserving organs and tissues", according to claim 1, characterized by the fact that it contains biologically compatible buffering substances.

5. “Solution for preserving organs and tissues”, according to claim 1, characterized by the fact that the pH range is 7.0 to 7.8, preferably 7.4.

6. “Solution for preserving organs and tissues”, according to claim 1, characterized in that it is preferably diluted in distilled water at a proportion of 4 to 10% by weight, preferably 7.12%.

7. “Solution for preserving organs and tissues”, according to claim 1, characterized by an osmotic pressure between 280 and 340 mOsm / Kg H2O, preferably 318 mOsm / Kg H2O.

8. “Solution for preserving organs and tissues”, according to claim 1, characterized by being sterilized by any methodology currently available on the market, preferably by action

Petition 870170086822, of 11/10/2017, p. 22/27

2/2 mechanics using millipore filters with a diameter varying between 0.20 and 0.22 microns.

9. “Solution for the preservation of organs and tissues”, according to claim 1, characterized by being kept frozen until its use.

10. "Use of the solution for the preservation of organs and tissues", characterized by being for obtaining products aimed at the conservation, perfusion and / or reperfusion of an organ or tissues of humans and animals for transplantation.