BR102017024052A2

BR102017024052A2 - TOPICAL FORMULATIONS AND USE OF THE SAME

Info

Publication number: BR102017024052A2
Application number: BR102017024052-5A
Authority: BR
Inventors: Simone Vieira Pereira; Danielle Cristina Garbuio; Luis Alexandre Pedro De Freitas; Camila Razuk Kfuri
Original assignee: Universidade De São Paulo - Usp
Priority date: 2017-11-08
Filing date: 2017-11-08
Publication date: 2019-06-04
Also published as: BR102017024052B1

Abstract

esta invenção descreve formulações tópicas compreendendo extratos, óleos ou outros derivados de origem natural, em especial plantas medicinais, os quais apresentam-se na forma microencapsulada em polímero. preferencialmente, as formulações tópicas compreendem extrato de inflorescências de camomila (chamomilla recutita l.) microencapsulado em quitosana baixo ou médio peso molecular. as formulações visam à prevenção de lesões de pele, tais como aquelas decorrentes do tratamento radioterápico, lesões por pressão, lesões na pele ao redor de estomas, ou lesões de origens diversas, como queimaduras ou feridas por artefatos mecânicos.This invention describes topical formulations comprising extracts, oils or other derivatives of natural origin, especially medicinal plants, which are in polymer microencapsulated form. preferably, the topical formulations comprise chamomile inflorescence extract (chamomilla recutita l.) microencapsulated in low or medium molecular weight chitosan. The formulations aim to prevent skin lesions, such as those resulting from radiotherapy treatment, pressure injuries, skin lesions around stomata, or injuries of various origins, such as burns or wounds by mechanical artifacts.

Description

FORMULAÇÕES TÓPICAS E USO DAS MESMASTOPICAL FORMULATIONS AND USE OF THE SAME

Campo da invenção:Field of the invention:

[001] A presente invenção se insere no campo da farmácia e medicina e descreve formulações tópicas compreendendo extratos, óleos ou outros derivados de origem natural, em especial plantas medicinais, os quais apresentam-se na forma microencapsulada em polímero.[001] The present invention falls within the field of pharmacy and medicine and describes topical formulations comprising extracts, oils or other derivatives of natural origin, especially medicinal plants, which are presented in polymer microencapsulated form.

[002] Em uma modalidade preferida desta invenção, as formulações tópicas compreendem extrato de inflorescências de camomila (Chamomilla recutita L.) microencapsulado em quitosana baixo ou médio peso molecular.[002] In a preferred embodiment of this invention, the topical formulations comprise extract of inflorescences of chamomile (Chamomilla recutita L.) microencapsulated in low or medium molecular weight chitosan.

[003] As referidas formulações visam à prevenção de lesões de pele, tais como aquelas decorrentes do tratamento radioterápico, lesões por pressão, lesões na pele ao redor de estornas, ou lesões de origens diversas, como queimaduras ou feridas por artefatos mecânicos.[003] The aforementioned formulations aim at the prevention of skin injuries, such as those resulting from radiotherapy treatment, pressure injuries, skin injuries around starlings, or injuries of different origins, such as burns or wounds caused by mechanical artifacts.

Fundamentos da invenção:Basics of the invention:

[004] A terapia com radiação para o tratamento de tumores teve início no final do século 19 e, atualmente, é uma das principais terapias utilizadas para o tratamento da doença, uma vez que a maioria dos tipos de câncer pode ser tratada com radiação ionizante.[004] Radiation therapy for the treatment of tumors began in the late 19th century and is currently one of the main therapies used to treat the disease, since most types of cancer can be treated with ionizing radiation .

[005] A radiação ionizante é usada em áreas previamente demarcadas no epitélio, com objetivo de eliminar o tecido patológico com menor lesão possível nos tecidos adjacentes.[005] Ionizing radiation is used in areas previously demarcated in the epithelium, in order to eliminate pathological tissue with the least possible damage to adjacent tissues.

[006] No entanto, apesar dos inúmeros progressos nas terapias com radiação ionizante para o tratamento do câncer, os problemas com a pele continuam como um efeito colateral, pois os tecidos normais respondem de forma variada a este estímulo.[006] However, despite the numerous advances in ionizing radiation therapies for the treatment of cancer, problems with the skin continue as a side effect, as normal tissues respond in a varied way to this stimulus.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 11/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 11/54

2/30 [007] O reparo tecidual da pele é um dos mais complexos processos, sendo caracterizado pela interação entre muitas etapas e fatores que ocorrem em uma sequência precisa nas diferentes camadas da pele. A cicatrização anormal da pele, por exemplo, é um resultado típico em uma pele irradiada.2/30 [007] Tissue repair of the skin is one of the most complex processes, characterized by the interaction between many steps and factors that occur in a precise sequence in the different layers of the skin. The abnormal healing of the skin, for example, is a typical result in irradiated skin.

[008] O tratamento tópico das radiodermatites deve ser capaz de melhorar a qualidade de vida do paciente, reduzindo os efeitos adversos da terapia ionizante, sem, no entanto, interromper o tratamento e interferir na ação da radiação no tratamento neoplásico.[008] Topical treatment of radiodermatitis should be able to improve the patient's quality of life, reducing the adverse effects of ionizing therapy, without, however, interrupting the treatment and interfering with the action of radiation in the neoplastic treatment.

[009] Atualmente, o Ministério da Saúde está investindo cada vez mais no uso da fitoterapia como prática integrativa complementar do Sistema Único de Saúde e novas pesquisas se fazem necessárias para aprimorar estes conhecimentos.[009] Currently, the Ministry of Health is investing more and more in the use of phytotherapy as an integrative practice complementary to the Unified Health System and new research is needed to improve this knowledge.

[010] Dentre as plantas medicinais com perspectivas de ação anti-inflamatória e cicatrizante e possível aplicação em modelos de formulação compreendendo micropartículas aqui propostos na presente invenção, a camomila é utilizada na forma de infuso durante o tratamento radioterápico para prevenção de lesões. Seu uso em formulações compreendendo micropartículas não foi reportado.[010] Among medicinal plants with prospects for anti-inflammatory and healing action and possible application in formulation models comprising microparticles proposed here in the present invention, chamomile is used as an infusion during radiotherapy treatment to prevent injuries. Its use in formulations comprising microparticles has not been reported.

[011] Sabe-se que os extratos de plantas têm menor estabilidade e, por este motivo, a sua utilização em formulações não é viável. Deste modo, a presente invenção provê o uso de sistemas microencapsulados, os quais apresentam, como vantagens, o aumento da estabilidade do composto encapsulado, a sustentação e o controle da liberação dos ativos, além da redução na perda de substâncias voláteis.[011] It is known that plant extracts have less stability and, for this reason, their use in formulations is not viable. In this way, the present invention provides the use of microencapsulated systems, which have, as advantages, the increased stability of the encapsulated compound, the support and the control of the release of the assets, in addition to the reduction in the loss of volatile substances.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 12/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 12/54

3/30 [012] Ainda, estudos comprovam que a citotoxicidade destas partículas é menor quando comparada ao extrato puro. Nesta invenção, as formulações desenvolvidas foram ainda avaliadas quanto ao potencial para liberação dos ativos em pele de orelha de porco ex vivo e também quanto à sua estabilidade acelerada e de longa duração.3/30 [012] Still, studies prove that the cytotoxicity of these particles is lower when compared to the pure extract. In this invention, the formulations developed were further evaluated in terms of the potential for release of the active ingredients in pig ear skin ex vivo and also in terms of its accelerated and long-lasting stability.

[013] As melhores formulações foram as desenvolvidas à base de lanolina, mas formulações à base de silicone também foram avaliadas. A lanolina tem tendência a oxidação, sendo recomendado o uso de um antioxidante como o BHT (ButilHidroxiTolueno) ou a vitamina E. Por outro lado, os silicones possuem um ótimo sensorial, mas, devido a sua polaridade, podem apresentar problemas de estabilidade com ciclodextrinas.[013] The best formulations were those developed on the basis of lanolin, but formulations based on silicone were also evaluated. Lanolin tends to oxidize, and the use of an antioxidant such as BHT (ButylHydroxyToluene) or vitamin E is recommended. On the other hand, silicones have an excellent sensory effect, but due to their polarity, they may present stability problems with cyclodextrins .

[014] Os resultados demonstraram que as formulações ora propostas promoveram uma liberação adequada dos ativos na pele, sem que estes ativos ultrapassassem as camadas da pele e atingissem a circulação sanguínea, como desejado.[014] The results showed that the formulations now proposed promoted an adequate release of the assets in the skin, without these assets going beyond the skin layers and reaching the blood circulation, as desired.

[015] Cabe ressaltar que o efeito técnico inovador da presente invenção encontra-se na superação da dificuldade de incorporar a quitosana em uma formulação, uma vez que este polímero natural é altamente hidrofílico e tem grande capacidade de absorção de água. Esta característica faz com que a micropartícula, ao entrar em contato com a água, absorva o conteúdo aquoso e cause o intumescimento e ruptura da membrana com consequente liberação do conteúdo.[015] It should be noted that the innovative technical effect of the present invention is to overcome the difficulty of incorporating chitosan in a formulation, since this natural polymer is highly hydrophilic and has a great water absorption capacity. This characteristic makes the microparticle, when in contact with water, absorb the water content and cause the membrane to swell and rupture, with consequent release of the content.

Estado da técnica:State of the art:

[016] Alguns documentos do estado da técnica descrevem formulações tópicas que visam o tratamento e prevenção de lesões na pele.[016] Some state-of-the-art documents describe topical formulations for the treatment and prevention of skin lesions.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 13/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 13/54

4/30 [017] O documento de anterioridade US 2016/199343 Al fornece formulações tópicas para o tratamento de feridas contendo extratos botânicos. Menciona-se que a pomada pode ter como base lanolina anidra e gorduras animais e óleos vegetais, dentre outras, destacando que pomadas à base emulsionável contêm pouca ou nenhuma água.4/30 [017] Previous document US 2016/199343 Al provides topical formulations for the treatment of wounds containing botanical extracts. It is mentioned that the ointment may be based on anhydrous lanolin and animal fats and vegetable oils, among others, highlighting that emulsifiable ointments contain little or no water.

[018] Apesar de citar formulações com pouca ou nenhuma água que podem conter extratos botânicos, são apontadas formulações em que os óleos essenciais e extratos botânicos estão na forma livre. O produto de interesse da presente invenção utiliza o extrato de camomila em microcápsulas de quitosana, o que aumenta a sua estabilidade e reduz a toxicidade do extrato. Ainda, por conter a quitosana em sua fórmula, o produto desta invenção pode propiciar a formação de um filme de proteção ao ser aplicado na pele íntegra.[018] Despite mentioning formulations with little or no water that may contain botanical extracts, formulations are pointed out in which essential oils and botanical extracts are in free form. The product of interest of the present invention uses chamomile extract in chitosan microcapsules, which increases its stability and reduces the toxicity of the extract. Also, because it contains chitosan in its formula, the product of this invention can provide the formation of a protective film when applied to intact skin.

[019] Em US 2017/281527 Al, são fornecidas composições farmacêuticas tópicas para serem aplicadas antes da exposição à radioterapia. Nesse sentido, é descrito que, para preparação desta formulação, pode ser incluído um agente emulsificante tal como cera de abelha, éster polietoxilado de óleo de rícino hidrogenado, emulsificantes de silicone, estearato de potássio, um antioxidante tal como o BHT, um condicionador de pele tais como vaselina sólida, lanolina, vitaminas (por exemplo, E) e derivados de plantas.[019] In US 2017/281527 Al, topical pharmaceutical compositions are provided to be applied prior to exposure to radiotherapy. Accordingly, it is described that, for the preparation of this formulation, an emulsifying agent such as beeswax, hydrogenated castor oil polyethoxyl ester, silicone emulsifiers, potassium stearate, an antioxidant such as BHT, a hair conditioner, can be included. skin such as solid petroleum jelly, lanolin, vitamins (eg, E) and plant derivatives.

[020] O estudo em questão não especifica o tipo de derivado de planta que pode ser utilizado ou, ainda, a sua apresentação. Sabe-se que os derivados de plantas podem ser utilizados em diversas apresentações como extrato, óleo, seus compostos isolados, dentro de micropartículas ou[020] The study in question does not specify the type of plant derivative that can be used or, even, its presentation. It is known that plant derivatives can be used in various presentations such as extract, oil, its isolated compounds, inside microparticles or

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 14/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 14/54

5/30 nanopartículas. Quando são utilizados derivados de plantas sem a manipulação para encapsular pode ocorrer uma rápida degradação de seus compostos, o que diminuiria seu efeito.5/30 nanoparticles. When plant derivatives are used without manipulation to encapsulate, rapid degradation of their compounds can occur, which would decrease their effect.

[021][021]

Em US 2009/258841 Al, são descritas composições, incluindo formulações tópicas, métodos para tratar doenças, distúrbios e condições que afetam a pele. É um objetivo utilizar essas formulações na radioterapia.US 2009/258841 A1 describes compositions, including topical formulations, methods for treating diseases, disorders and conditions affecting the skin. It is an objective to use these formulations in radiotherapy.

As formulações compreendem um composto antioxidante em um veículo ou excipiente e estas podem ser administradas topicamente a um animal, preferencialmente, a um humano.The formulations comprise an antioxidant compound in a vehicle or excipient and these can be administered topically to an animal, preferably to a human.

Adicionalmente, são revelados aqentes condicionantes que podem ser incluídos nessas formulações, tal como extrato da flor de Chamomilla Recutita (Matricaria) [022] O produto de interesse da presente invenção utiliza o extrato de camomila em microcápsulas de quitosana, o que aumenta a estabilidade e reduz a toxicidade do extrato. Embora as formulações tópicas descritas no pedido US (acima mencionado) possam conter elementos de distribuição de micropartículas, entende-se que o extrato da flor de camomila é adicionado diretamente à base. Diferentemente, o objeto da presente invenção utiliza a quitosana, composto de baixa toxicidade, adequada biodisponibilidade e com propriedades benéficas para aplicação na pele, como formação de biofilme.In addition, conditioning agents that can be included in these formulations are revealed, such as Chamomilla Recutita flower extract (Matricaria) [022] The product of interest of the present invention uses chamomile extract in chitosan microcapsules, which increases stability and reduces the toxicity of the extract. Although the topical formulations described in the US application (mentioned above) may contain microparticle distribution elements, it is understood that the chamomile flower extract is added directly to the base. In contrast, the object of the present invention uses chitosan, a compound of low toxicity, suitable bioavailability and with beneficial properties for application to the skin, such as biofilm formation.

[023] No documento de anterioridade WO 11/091244 Al, são fornecidas composições e métodos para tratamento ou prevenção das manifestações associadas à pele de um humano, tal como cicatrizes.[023] In prior document WO 11/091244 A1, compositions and methods are provided for treating or preventing manifestations associated with the skin of a human, such as scars.

[024] As composições podem ser aplicadas topicamente e compreendem um veículo à base de vaselina, óleos minerais e[024] The compositions can be applied topically and comprise a vehicle based on petroleum jelly, mineral oils and

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 15/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 15/54

6/30 vegetais, ceras orgânicas e inorgânicas ou gordura animal, com liberação lenta ou controlada.6/30 vegetables, organic and inorganic waxes or animal fat, with slow or controlled release.

[025] A formulação proposta na presente invenção visa não somente o tratamento à estas lesões, mas sua prevenção, reduzindo os custos decorrentes delas e melhorando a qualidade de vida do paciente. Sua composição considerou minimizar possíveis reações à pele sensibilizada, que está em risco de lesão.[025] The formulation proposed in the present invention aims not only at treating these injuries, but at preventing them, reducing the costs resulting from them and improving the patient's quality of life. Its composition considered to minimize possible reactions to sensitized skin, which is at risk of injury.

[026] Em IE 20050643 Al, são descritas formulações com diferentes microcápsulas para aplicação no tratamento de várias doenças, dentre elas, microcápsulas para o tratamento oncológico. As microcápsulas podem ser constituídas por óleo vegetal, tais como óleo de Aloe Vera e de cúrcuma, e ainda revestidas com quitosana.[026] In IE 20050643 Al, formulations with different microcapsules are described for application in the treatment of various diseases, among them, microcapsules for the treatment of cancer. The microcapsules can consist of vegetable oil, such as Aloe Vera and turmeric oil, and also coated with chitosan.

[027] A formulação descrita na presente invenção é destinada para a aplicação cutânea visando à prevenção de lesões de pele, não somente decorrentes do tratamento radioterápico, mas também lesões por pressão e lesões periestoma.[027] The formulation described in the present invention is intended for cutaneous application aiming at the prevention of skin lesions, not only resulting from radiotherapy treatment, but also pressure injuries and peristomal injuries.

[028] Ademais, as formulações objeto da presente invenção utilizam micropartículas com extratos vegetais otimizados, com o objetivo de manter quantidades ótimas dos princípios ativos na microcápsula. Este aspecto difere do documento IE 20050643 Al, que descreve em sua utilização microcápsulas constituídas por óleos vegetais.[028] In addition, the formulations object of the present invention use microparticles with optimized plant extracts, in order to maintain optimal amounts of the active ingredients in the microcapsule. This aspect differs from the document IE 20050643 Al, which describes in its use microcapsules made of vegetable oils.

[029] É relevante destacar que, o procedimento para a obtenção destes óleos e seus compostos diferem dos extratos. Assim, o efeito terapêutico obtido ao utilizar um óleo vegetal será diferente do efeito terapêutico observado quando se utiliza os extratos.[029] It is important to note that the procedure for obtaining these oils and their compounds differs from extracts. Thus, the therapeutic effect obtained when using a vegetable oil will be different from the therapeutic effect observed when using the extracts.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 16/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 16/54

7/30 [030] É de conhecimento popular que a camomila possui diversas propriedades terapêuticas calmantes, antiinflamatórias, cicatrizantes e digestivas, dentre outras. Na prática clínica da radioterapia, é comum sua utilização na forma de chá para aliviar os sintomas decorrentes deste tratamento. Do mesmo modo, na quimioterapia pacientes fazem uso deste chá para aliviar os incômodos das lesões na mucosa oral. No entanto, sua apresentação como conteúdo de micropartículas revestidas de quitosana em uma formulação base de lanolina não é prevista.7/30 [030] It is popular knowledge that chamomile has several therapeutic, calming, anti-inflammatory, healing and digestive properties, among others. In the clinical practice of radiotherapy, it is common to use it in the form of tea to relieve symptoms resulting from this treatment. Likewise, in chemotherapy patients make use of this tea to relieve the discomfort of lesions in the oral mucosa. However, its presentation as content of chitosan-coated microparticles in a lanolin-based formulation is not anticipated.

[031] As micropartículas podem ser produzidas por diversas técnicas e podem ser compostas por inúmeros componentes, tanto em seu conteúdo quanto em sua parede. A quitosana é apenas um dos compostos utilizados para este fim, sendo aqui selecionada por conta de suas propriedades benéficas para a pele, principalmente devido à sua propriedade de formar biofilme, quando consideramos a prevenção de lesões de pele.[031] Microparticles can be produced by various techniques and can be composed of numerous components, both in their content and on their wall. Chitosan is just one of the compounds used for this purpose, being selected here because of its beneficial properties for the skin, mainly due to its property of forming biofilm, when considering the prevention of skin lesions.

[032] A composição das formulações com lanolina e outros compostos anidros foi selecionada devido a característica da quitosana em absorver grandes quantidades de água, o que compromete sua função enquanto estrutura da micropartícuia.[032] The composition of the formulations with lanolin and other anhydrous compounds was selected due to the characteristic of chitosan in absorbing large amounts of water, which compromises its function as a microparticle structure.

[033] A formulação proposta nesta invenção tem como futuras aplicações a prevenção de lesões de pele de interesse para a área da saúde, como radiodermites, lesões por pressão e lesões periestoma. Cabe destacar que a prevenção destas lesões traria grande impacto para o sistema de saúde, pois havería uma redução nos custos do tratamento, além de uma melhor qualidade de vida para o[033] The formulation proposed in this invention has as future applications the prevention of skin lesions of interest to the health area, such as radiodermatitis, pressure injuries and peristomal injuries. It should be noted that the prevention of these injuries would have a major impact on the health system, as there would be a reduction in treatment costs, in addition to a better quality of life for the patient.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 17/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 17/54

8/30 paciente.8/30 patient.

Breve descrição da invenção:Brief description of the invention:

[034] A presente invenção descreve formulações tópicas compreendendo extratos, óleos ou outros derivados de origem natural, como plantas medicinais, os quais apresentam-se na forma microencapsulada em polímero.[034] The present invention describes topical formulations comprising extracts, oils or other derivatives of natural origin, such as medicinal plants, which are presented in microencapsulated polymer form.

[035] Em uma modalidade preferida, estas formulações tópicas compreendem extrato de inflorescências de camomila (Chamomilla recutita L.) microencapsulado em quitosana baixo ou médio peso molecular.[035] In a preferred embodiment, these topical formulations comprise extract of inflorescences of chamomile (Chamomilla recutita L.) microencapsulated in low or medium molecular weight chitosan.

[036] As formulações visam à prevenção de lesões de pele, tais como aquelas decorrentes do tratamento radioterápico, lesões por pressão, lesões na pele ao redor de estornas, ou lesões de origens diversas, como queimaduras ou feridas por artefatos mecânicos.[036] The formulations aim to prevent skin injuries, such as those resulting from radiotherapy, pressure injuries, skin injuries around starlings, or injuries of different origins, such as burns or wounds caused by mechanical artifacts.

Breve descrição das figuras:Brief description of the figures:

[037] Para obter uma total e completa visualização do objeto desta invenção, são apresentadas as figuras as quais se faz referências, conforme se segue.[037] In order to obtain a total and complete visualization of the object of this invention, the figures to which reference is made are presented, as follows.

[038] As Figuras ΙΑ, 1B, 1C e ID representam graficamente a quantificação dos marcadores apigenina-7glicosídeo e apigenina no estrato córneo (IA e 1B) e na epiderme / derme (1C e 1D) para cada formulação avaliada.[038] Figures ΙΑ, 1B, 1C and ID graphically represent the quantification of the apigenin-7glycoside and apigenin markers in the stratum corneum (IA and 1B) and in the epidermis / dermis (1C and 1D) for each formulation evaluated.

[039] A Figura 2 mostra a comparação de imagens de[039] Figure 2 shows the comparison of images from

microscopia microscopy das of formulações nos formulations in tempos avaliados evaluated times na at estabilidade stability acelerada, em que accelerated, where (a) (The) lanolina T0, lanolin T0, (b) (B) silicone T0, silicone T0, (c) (ç) lanolina T30, lanolin T30, (d) (d) silicone T30, T30 silicone, (e) (and) lanolina T90 lanolin T90 e (f) and (f) Silicone T90. Silicone T90.

[040] A Figura 3 representa graficamente a reologia com base na consistência, fluxo e tixotropia para as[040] Figure 3 graphically represents rheology based on consistency, flow and thixotropy for the

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 18/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 18/54

9/30 formulações de lanolina e silicone.9/30 lanolin and silicone formulations.

[041] As Figuras 4A e 4B representam os valores de análise de apigenina-7-glicosideo em (a) e apigenina em (b), respectivamente, nos tempos inicial e final do estudo de estabilidade acelerada.[041] Figures 4A and 4B represent the analysis values of apigenin-7-glycoside in (a) and apigenin in (b), respectively, in the initial and final times of the accelerated stability study.

[042] A Figura 5 representa graficamente a comparação de imagens de microscopia das formulações nos tempos avaliados na estabilidade de longa duração, em que (a)[042] Figure 5 graphically represents the comparison of microscopy images of the formulations at the times evaluated in long-term stability, where (a)

lanolina lanolin T0, T0, (b) (B) silicone silicone T0, T0, (c) (ç) lanolina lanolin T90, T90, (d) (d) silicone silicone T90, T90, (e) (and) lanolina lanolin T270, T270, (f) (f) silicone silicone T270, T270, (g) (g) lanolina lanolin T360 e (h) T360 and (h) silicone silicone T360. T360.

[043] A Figura 6 representa graficamente a reologia com base na consistência, fluxo e tixotropia para as formulações de lanolina e silicone.[043] Figure 6 graphically represents rheology based on consistency, flow and thixotropy for lanolin and silicone formulations.

[044] A Figura 7 representa graficamente os valores de análise de apigenina-7-glicosideo (a) e apigenina (b) nos tempos avaliados no estudo de estabilidade de longa duração.[044] Figure 7 graphically represents the analysis values of apigenin-7-glycoside (a) and apigenin (b) at the times evaluated in the long-term stability study.

[045] A Figura 8 representa graficamente a porcentagem de absorbância relativa ao controle para cada concentração testada de extrato, quitosana e microparticulas em queratinócitos.[045] Figure 8 graphically represents the percentage of absorbance relative to the control for each tested concentration of extract, chitosan and microparticles in keratinocytes.

[046] A Figura 9 representa graficamente a porcentagem de absorbância relativa ao controle para cada concentração testada de extrato, quitosana e microparticulas em fibroblastos.[046] Figure 9 graphically represents the percentage of absorbance relative to the control for each tested concentration of extract, chitosan and microparticles in fibroblasts.

[047] A Figura 10 representa graficamente os valores de absorbância relativa ao controle para cada concentração testada de extrato, quitosana e microparticulas em queratinócitos após exposição à radiação ionizante.[047] Figure 10 graphically represents the absorbance values relative to the control for each tested concentration of extract, chitosan and microparticles in keratinocytes after exposure to ionizing radiation.

Petição 870170086203, de 08/11/2017, pág. 19/54Petition 870170086203, of 11/08/2017, p. 19/54

10/30 [048] A Figura 11 representa graficamente os valores de absorbância relativa ao controle para cada concentração testada de extrato, quitosana e microparticulas em fibroblastos após exposição à radiação ionizante.10/30 [048] Figure 11 graphically represents the absorbance values relative to the control for each tested concentration of extract, chitosan and microparticles in fibroblasts after exposure to ionizing radiation.

[049] A Figura 12 representa graficamente a distribuição dos valores médios de eritema (a) , melanina (b), pH (c), Hidratação (d) e TEWL (e) nos tempos inicial e final para cada local avaliado.[049] Figure 12 represents graphically the distribution of the mean values of erythema (a), melanin (b), pH (c), Hydration (d) and TEWL (e) in the initial and final times for each evaluated site.

[050] A Figura 13 representa graficamente a quantificação da epitelização pelo índice de Cicatrização de Úlceras (ICU) nos grupos tratados com soro fisiológico (SF) , veiculo (VE) e formulação com microparticulas de camomila (CA), nos dias 2, 7 e 14 de tratamento.[050] Figure 13 graphically depicts the epithelization quantification by the Ulcer Healing Index (ICU) in the groups treated with saline (SF), vehicle (VE) and formulation with chamomile microparticles (CA), on days 2, 7 and 14 treatment.

[051] A Figura 14 mostra as imagens do seguimento clínico das úlceras tratadas com soro fisiológico (SF) , veículo (VE) e formulação com microparticulas de camomila (CA), nos dias 2, 7 e 14 de tratamento.[051] Figure 14 shows the images of the clinical follow-up of ulcers treated with saline (SF), vehicle (VE) and formulation with chamomile microparticles (CA), on days 2, 7 and 14 of treatment.

[052] A[052] A

Figura 15 representa graficamente a quantificação dos vasos sanguíneos nas úlceras cutâneas tratadas com soro fisiológico (SF) , veículo (VE) e formulação com microparticulas de camomila (CA) , nos diasFigure 15 graphically represents the quantification of blood vessels in skin ulcers treated with saline (SF), vehicle (VE) and formulation with chamomile microparticles (CA), on days

2, 7 e 14 de tratamento.2, 7 and 14 of treatment.

[053] As figuras 15, 16 e 17 são imagens de microscopia óptica das formulações de silicone, de gel e de lanolina, respectivamente.[053] Figures 15, 16 and 17 are optical microscopy images of the silicone, gel and lanolin formulations, respectively.

Descrição detalhada da invenção:Detailed description of the invention:

[054] A presente invenção descreve formulações tópicas compreendendo extratos, óleos ou outros derivados de origem natural, como plantas medicinais, os quais apresentam-se na forma microencapsulada em polímero.[054] The present invention describes topical formulations comprising extracts, oils or other derivatives of natural origin, such as medicinal plants, which are presented in microencapsulated polymer form.

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11/3011/30

[055] 0 [055] 0 componente component de in origem natural natural origin pode can ser to be um one derivado de derived from camomila, chamomile, Aloe Aloe vera ou cúrcuma vera or turmeric e o it's the polímero polymer pode ser Can be quitosana, chitosan, maltodextrina, goma maltodextrin, gum arábica arabica ou or sorbitol. sorbitol.

[056] Em uma modalidade preferida desta invenção, as formulações tópicas compreendem micropartículas de extrato de inflorescências de camomila (Chamomilla recutita L.), as[056] In a preferred embodiment of this invention, topical formulations comprise microparticles of extract of chamomile inflorescences (Chamomilla recutita L.), the

quais são Which are they revestidas em quitosana chitosan coated baixo ou down or médio medium peso Weight molecular. molecular. [057] [057] Nas micropartículas, o In microparticles, the extrato extract pode can estar be presente gift em uma concentração que in a concentration that varia de It varies from 10 a 10 to 30 %, 30%,

enquanto a quitosana pode estar presente em uma concentração que varia de 30 a 60 %.while chitosan can be present in a concentration that varies from 30 to 60%.

[058] Em uma modalidade preferida desta invenção, a formulação compreende:[058] In a preferred embodiment of this invention, the formulation comprises:

- 0,5 a 20 % de micropartículas, preferencialmente 1 % de micropartículas e- 0.5 to 20% microparticles, preferably 1% microparticles and

- 80 a 99,5 % de veículo, preferencialmente 99 % de veículo, selecionado dentre lanolina anidra ou lanolina anidra etoxilada, silicone (DC 245 e DC 9040), vaselina sólida ou óleo vegetal.- 80 to 99.5% vehicle, preferably 99% vehicle, selected from anhydrous lanolin or ethoxylated anhydrous lanolin, silicone (DC 245 and DC 9040), solid petroleum jelly or vegetable oil.

[059] Opcionalmente, as formulações podem compreender adicionalmente:[059] Optionally, formulations can additionally comprise:

- agentes antioxidantes (tal como o BHT),- antioxidant agents (such as BHT),

- agentes de consistência (tal como a cera de abelha ou estearato de alumínio), e agentes solubilizantes (tal como óleo de rícino etoxilado).- consistency agents (such as beeswax or aluminum stearate), and solubilizing agents (such as ethoxylated castor oil).

[060] Especificamente, exemplos da invenção podem ser encontrados na tabela 1 abaixo:[060] Specifically, examples of the invention can be found in table 1 below:

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Tabela 1 - Exemplos de formulações tópicas (Fl, F2, F3, F4 e F5) da presente invenção.Table 1 - Examples of topical formulations (F1, F2, F3, F4 and F5) of the present invention.

Formulação 1 (Fl) Formulation 1 (Fl) Micropartículas Microparticles 0 f 5 3. 20 % (preferencialmente 1 %) 0 f 5 3. 20% (preferably 1%) Lanolina anidra Anhydrous Lanolin 80 a 99,5 % (preferencialmente 99 %) 80 to 99.5% (preferably 99%) Formulação 2 (F2) Formulation 2 (F2) Micropartículas Microparticles 0,5 a 20 % (preferencialmente 1 %) 0.5 to 20% (preferably 1%) Silicone DC 245 DC 245 Silicone 2 a 22 % (preferencialmente 22 %) 2 to 22% (preferably 22%) Silicone DC 9040 Silicone DC 9040 50 a 80 % (preferencialmente 77 %) 50 to 80% (preferably 77%) Formulação 3 (F3) Formulation 3 (F3) Micropartículas Microparticles 0 f 5 a 2 0 % (preferencialmente 1 %) 0 f 5 to 2 0% (preferably 1%) Cera de abelha Beeswax 2 a 5 % (preferencialmente 3 %) 2 to 5% (preferably 3%) BHT B HT 0,05 % 0.05% Lanolina anidra Anhydrous Lanolin 75 a 97,5 % (preferencialmente 95,95 %) 75 to 97.5% (preferably 95.95%) Formulação 4 (F4) Formulation 4 (F4) Micropartículas Microparticles 0 f 5 a 2 0 % (preferencialmente 1 %) 0 f 5 to 2 0% (preferably 1%) Cera de abelha Beeswax 2 a 5 % (preferencialmente 3 %) 2 to 5% (preferably 3%) BHT B HT 0,05 % 0.05% Lanolina anidra etoxilada Ethoxylated lanolin anhydrous 20 a 30 % (preferencialmente 30 %) 20 to 30% (preferably 30%)

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Vaselina sólida Solid Vaseline 50 a 78 % (preferencialmente 65,95 %) 50 to 78% (preferably 65.95%) Formulação 5 (F5) Formulation 5 (F5) Microparticulas Microparticles 0 f 5 3. 20 % (preferencialmente 1 %) 0 f 5 3. 20% (preferably 1%) Óleo de ricino etoxilado Ethoxylated castor oil 0,5 % 0.5% Estearato de alumínio Aluminum stearate 1,5 % 1.5% BHT B HT 0,05 % 0.05% Óleo vegetal Vegetable oil 78 a 98 % (preferencialmente 96,95 %) 78 to 98% (preferably 96.95%)

[061] O primeiro passo para a elaboração das formulações consiste na obtenção das microparticulas. Para tal, as inflorescências de camomila são submetidas a análise de autenticidade, análise sensorial e análise de pureza, com base nas descrições da Farmacopeia Brasileira e nas recomendações da Organização Mundial da Saúde.[061] The first step in preparing the formulations is to obtain the microparticles. For that, the chamomile inflorescences are submitted to authenticity analysis, sensory analysis and purity analysis, based on the descriptions of the Brazilian Pharmacopoeia and the recommendations of the World Health Organization.

[062] As inflorescências são submetidas a secagem e moagem até serem reduzidas à pó fino. Após, para a obtenção do extrato, 20 a 40% da planta é submetida a maceração dinâmica a 68° C por uma hora, em que o liquido extrator é uma solução hidroalcoólica cuja proporção de álcool para água é de 50 a 80 %. Além disso, outras soluções extratoras poderão ser utilizadas como solução hidroglicólica (de 40 a 80 %) ou com metanol e água (50 a 80 %).[062] The inflorescences are subjected to drying and grinding until they are reduced to fine powder. Then, to obtain the extract, 20 to 40% of the plant is subjected to dynamic maceration at 68 ° C for one hour, in which the extraction liquid is a hydroalcoholic solution whose alcohol to water ratio is 50 to 80%. In addition, other extraction solutions can be used as a hydroglycolic solution (from 40 to 80%) or with methanol and water (50 to 80%).

[063] Especificamente, o extrato hidroalcoólico de camomila utilizado na presente invenção apresenta teor de sólidos de 7,17 % (± 0,28), teor alcoólico 61,66 ° GL (± 4,39), concentração de apigenina-7-glicosideo de 19,18 pg/ml (± 0,313) e a concentração de apigenina de 3,42 pg/ml (± 0,159) .[063] Specifically, the hydroalcoholic extract of chamomile used in the present invention has a solids content of 7.17% (± 0.28), an alcohol content of 61.66 ° GL (± 4.39), apigenin-7- concentration glycoside of 19.18 pg / ml (± 0.313) and the apigenin concentration of 3.42 pg / ml (± 0.159).

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14/30 [064] As micropartículas foram obtidas através do método spray drying. Para isso, foi preparada uma solução a 1% (p/p) de quitosana em ácido acético (de 0,5 a 1,0 % v/v) e colocada em agitação mecânica até total dissolução e homogeneização. Depois, o extrato hidroalcoólico de camomila produzido é adicionado a esta solução e homogeneizado (a quantidade de extrato utilizada deve conter de 1,5 a 5,0 g de teor de sólidos) . Esta mistura é atomizada em aparelhagem adequada e as micropartículas são, então, formadas.14/30 [064] The microparticles were obtained using the spray drying method. For this, a 1% (w / w) solution of chitosan in acetic acid (from 0.5 to 1.0% v / v) was prepared and placed under mechanical stirring until completely dissolved and homogenized. Then, the produced hydro-alcoholic chamomile extract is added to this solution and homogenized (the amount of extract used must contain 1.5 to 5.0 g of solids content). This mixture is atomized in a suitable apparatus and the microparticles are then formed.

[065] Após a obtenção das micropartículas, as mesmas foram incorporadas em uma formulação à base de lanolina anidra e outra à base de silicone, tal como as Formulações 1 e 2 (F1 e F2) mostradas na Tabela 1. Neste estudo em específico foi utilizada 1 % de micropartículas no veículo.[065] After obtaining the microparticles, they were incorporated into a formulation based on anhydrous lanolin and another based on silicone, such as Formulations 1 and 2 (F1 and F2) shown in Table 1. In this specific study, 1% of microparticles are used in the vehicle.

[066] Na formulação com silicone, foi observada uma boa incorporação das micropartículas, sem o intumescimento da quitosana ou alteração nos aspectos da mistura. Mesmo após um período de 24 horas essa aparência se manteve.[066] In the formulation with silicone, a good incorporation of the microparticles was observed, without the swelling of chitosan or alteration in the aspects of the mixture. Even after a 24-hour period, this appearance remained.

[067] Na formulação com lanolina houve boa incorporação e homogeneização das micropartículas, sem sinais de agregação ou intumescimento das partículas. Após o período de 24 horas a formulação manteve as mesmas características.[067] In the formulation with lanolin there was good incorporation and homogenization of the microparticles, without signs of aggregation or swelling of the particles. After the 24-hour period, the formulation maintained the same characteristics.

[068] Devido a este comportamento, ambas as formulações foram selecionadas para as etapas posteriores do estudo.[068] Due to this behavior, both formulations were selected for the later stages of the study.

Estudos realizados:Studies carried out:

- Estudos de permeação cutânea das formulações com micropartículas:- Skin permeation studies of formulations with microparticles:

[069] Para avaliar a permeação cutânea dos princípios ativos da camomila, foi realizado um estudo ex vivo[069] To assess skin permeation of chamomile active ingredients, an ex vivo study was carried out

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15/30 utilizando uma célula vertical tipo Franz com uma membrana natural de pele de orelha de porco. Assim, permitiu-se a avaliação da permeação no estrato córneo separada da demais camadas da pele.15/30 using a vertical Franz cell with a natural pig ear skin membrane. Thus, permeation of permeation in the stratum corneum separated from the other layers of the skin was allowed.

[070] Para avaliar a exatidão do método de extração e análise dos marcadores que permearam nas camadas da pele, a recuperação do método foi realizada utilizando três concentrações do extrato de camomila conhecidas usando a mesma metodologia de análise. Em seguida, os valores obtidos foram corrigidos de acordo com os valores da recuperação.[070] To assess the accuracy of the method of extraction and analysis of the markers that permeated the layers of the skin, the recovery of the method was performed using three concentrations of the known chamomile extract using the same analysis methodology. Then, the values obtained were corrected according to the recovery values.

[071] A análise das soluções receptoras não identificou a presença de apigenina-7-glicosideo ou apigenina nos experimentos das formulações contendo as microparticulas. Somente foi encontrada apigenina-7-glicosideo nas soluções das formulações de lanolina com o extrato.[071] The analysis of the recipient solutions did not identify the presence of apigenin-7-glycoside or apigenin in the experiments of the formulations containing the microparticles. Only apigenin-7-glycoside was found in the solutions of the lanolin formulations with the extract.

[072] Neste estudo, é esperado que as formulações tenham efeito local, ou seja, que não ultrapassem a barreira da pele e atinjam a circulação sistêmica. Através dos resultados da análise das soluções receptoras, é possível inferir que as formulações contendo as microparticulas mantiveram esta propriedade, não ultrapassando a barreira da pele e, portanto, não atingindo a solução receptora.[072] In this study, it is expected that the formulations have a local effect, that is, that they do not cross the skin barrier and reach the systemic circulation. Through the results of the analysis of the recipient solutions, it is possible to infer that the formulations containing the microparticles maintained this property, not crossing the skin barrier and, therefore, not reaching the receiving solution.

[073] As quantificações dos marcadores no estrato córneo e na epiderme e derme estão apresentadas na Figura 1, que indicam que não houve detecção dos marcadores no tape da pele (branco) ou dos controles negativos.[073] The quantifications of the markers in the stratum corneum and in the epidermis and dermis are shown in Figure 1, which indicate that the markers on the skin tape (white) or negative controls were not detected.

[074] A análise estatística da penetração da apigenina7-glicosídeo no estrato córneo e a permeação na epiderme e[074] Statistical analysis of the penetration of apigenin7-glycoside in the stratum corneum and permeation in the epidermis and

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16/30 derme indicou diferença significativa apenas quando as formulações foram comparadas com a formulação de silicone com o extrato liofilizado (p < 0,05).16/30 dermis indicated significant difference only when the formulations were compared with the silicone formulation with the lyophilized extract (p <0.05).

[075] A análise para a permeação de apigenina no estrato córneo não apresentou diferenças significativas para a comparação de nenhum grupo. Na análise da epiderme e derme para este marcador, foi encontrada diferença estatística somente quando as formulações eram comparadas com a de silicone com extrato liofilizado.[075] The analysis for apigenin permeation in the stratum corneum did not show significant differences when comparing any group. In the analysis of the epidermis and dermis for this marker, a statistical difference was found only when the formulations were compared with that of silicone with lyophilized extract.

[076] Considerando as formulações contendo as micropartícuias, é possível observar que aquela que tem como veículo a lanolina apresentou as maiores médias de concentração de apigenina-7-glicosídeo e apigenina por centímetro quadrado em todas as avaliações.[076] Considering the formulations containing the microparticles, it is possible to observe that the one that has lanolin as the vehicle presented the highest mean concentrations of apigenin-7-glycoside and apigenin per square centimeter in all evaluations.

[077] Estes resultados podem ser em decorrência do alto potencial de hidratação da lanolina, que pode ter influenciado de modo positivo a penetração dos princípios ativos no estrato córneo. No entanto, esta diferença não foi considerada estatisticamente significativa.[077] These results may be due to the high hydration potential of lanolin, which may have positively influenced the penetration of the active ingredients in the stratum corneum. However, this difference was not considered statistically significant.

[078] A quantidade de apigenina-7-glicosídeo retida no estrato córneo é maior do que a quantidade de apigenina (ressalta-se que a primeira é mais abundante no extrato da camomila). Nota-se que as concentrações dos ativos nas formulações com o extrato liofilizado foram maiores que aquelas contendo as micropartículas.[078] The amount of apigenin-7-glycoside retained in the stratum corneum is greater than the amount of apigenin (it should be noted that the former is more abundant in the extract of chamomile). Note that the concentrations of the actives in the formulations with the lyophilized extract were higher than those containing the microparticles.

[079] Esta menor concentração de ativo no estrato córneo pode ocorrer devido à liberação controlada, esperada quando se utilizam sistemas encapsulados. A quantidade de apigenina que permeou estas camadas da pele é maior do que a quantidade de apigenina-7-glicosídeo. Apesar deste[079] This lower concentration of active in the stratum corneum may occur due to the controlled release, expected when using encapsulated systems. The amount of apigenin that permeated these layers of the skin is greater than the amount of apigenin-7-glycoside. Despite this

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17/30 composto ser descrito em maiores quantidades no extrato, isso pode ocorrer devido à uma diferença no peso molecular destes dois flavonoides.17/30 compound is described in greater quantities in the extract, this may occur due to a difference in the molecular weight of these two flavonoids.

[080] Neste caso, o peso molecular da apigenina é menor que o da apigenina-7-glicosideo, o que justifica a sua maior permeação na epiderme e derme, mesmo este composto estando presente em quantidades menores no extrato e nas micropartículas utilizadas na presente invenção.[080] In this case, the molecular weight of apigenin is less than that of apigenin-7-glycoside, which justifies its greater permeation in the epidermis and dermis, even though this compound is present in smaller amounts in the extract and microparticles used in the present invention.

- Estudos de estabilidade preliminar, acelerada e de longa duração:- Preliminary, accelerated and long-term stability studies:

[081] Após a obtenção das formulações compreendendo as micropartículas, estas foram submetidas aos estudos de estabilidade preliminar, acelerada e de longa duração.[081] After obtaining the formulations comprising the microparticles, they were subjected to preliminary, accelerated and long-term stability studies.

[082] Para avaliar a estabilidade preliminar, as formulações foram submetidas a ciclos alternados de 48 horas de exposição ao calor (em estufa a 40° C) e ao frio (em geladeira a 5^o C) por um período de 8 dias, totalizando 4 ciclos.[082] To evaluate preliminary stability, the formulations were subjected to alternate cycles of 48 hours of heat exposure (in an oven at 40 ° C) and cold (in a refrigerator at 5 ° C) for a period of 8 days, totaling 4 cycles.

[083] O pH e as características organolépticas (aquelas visualmente determinadas, tais como aspecto, coloração, odor, homogeneidade) foram avaliadas no tempo inicial e final.[083] The pH and organoleptic characteristics (those visually determined, such as appearance, color, odor, homogeneity) were evaluated in the initial and final time.

[084] Foi também realizado o teste de centrifugação, no qual foram observadas homogeneidade, presença de aglomerados, precipitações ou separação de fases.[084] The centrifugation test was also performed, in which homogeneity, presence of agglomerates, precipitations or phase separation were observed.

[085] Para avaliar a estabilidade acelerada, as formulações foram armazenadas em estufa (40° C ± 2^o C) por um período de 90 dias. As avaliações foram realizadas nos tempos 0, 30 e 90 dias através da análise das características organolépticas, pH e homogeneidade das[085] To assess accelerated stability, the formulations were stored in an oven (40 ° C ± 2 ^o C) for a period of 90 days. The evaluations were carried out at times 0, 30 and 90 days by analyzing the organoleptic characteristics, pH and homogeneity of the

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18/30 formulações em microscópio óptico nos três tempos.18/30 formulations in optical microscope in the three stages.

[086] A quantidade dos marcadores apigenina e apigenina -7- glicosideo foi analisada no início e no final do intervalo de tempo avaliado. A reologia foi avaliada através de reômetro com sistema Peltier de controle de temperatura.[086] The amount of the apigenin and apigenin -7-glycoside markers was analyzed at the beginning and at the end of the evaluated time interval. Rheology was assessed using a rheometer with a Peltier temperature control system.

[087] Para o estudo de estabilidade de longa duração, as amostras de cada formulação foram armazenadas em sala com temperatura controlada entre 28° C e 30° C e avaliadas em 0, 3, 9 e 12 meses, quanto às características organolépticas, pH, reologia, homogeneidade e quantidade dos marcadores apigenina e apigenina -7glicosideo, seguindo as mesmas metodologias descritas para o estudo de estabilidade acelerada.[087] For the long-term stability study, samples of each formulation were stored in a room with a controlled temperature between 28 ° C and 30 ° C and evaluated at 0, 3, 9 and 12 months, for organoleptic characteristics, pH , rheology, homogeneity and quantity of the apigenin and apigenin -7glycoside markers, following the same methodologies described for the study of accelerated stability.

[088] Na estabilidade preliminar, a formulação de silicone apresentou, ao final, uma modificação no odor. A formulação de lanolina apresentou leve modificação em sua coloração.[088] In preliminary stability, the silicone formulation showed, at the end, a change in odor. The lanolin formulation showed a slight change in its color.

[089] Na avaliação do pH, não houve alterações significativas. Na avaliação da centrifugação no tempo inicial, não houve separação de fases ou alteração na coloração de nenhuma formulação e, no tempo final, não houve alterações quanto à uniformidade, coloração ou formação de grumos na formulação de lanolina. Na formulação de silicone, observou-se a formação de pequenos grumos na superfície.[089] In the pH assessment, there were no significant changes. In the evaluation of centrifugation in the initial time, there was no phase separation or color change in any formulation and, in the final time, there were no changes in uniformity, color or lump formation in the lanolin formulation. In the formulation of silicone, the formation of small lumps on the surface was observed.

[090] Após a centrifugação no tempo final, amostras de cada formulação foram analisadas em microscópio óptico, a fim de melhor determinar a homogeneidade destas. A formulação de silicone mostrou uma tendência à aglomeração[090] After centrifugation in the final time, samples of each formulation were analyzed under an optical microscope, in order to better determine their homogeneity. The silicone formulation showed a tendency to agglomerate

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19/30 das micropartículas.19/30 of the microparticles.

[091] Na avaliação da estabilidade acelerada, os caracteres organolépticos de ambas as formulações apresentaram leves alterações, com exceção da sensação ao toque. Houve pequena variação do pH na formulação de silicone. A avaliação através de microscopia revelou uma tendência à aglomeração das micropartículas, principalmente quando incorporadas na formulação de silicone.[091] In the evaluation of accelerated stability, the organoleptic characters of both formulations showed slight changes, except for the sensation of touch. There was little variation in pH in the silicone formulation. The evaluation through microscopy revealed a tendency for microparticles to agglomerate, especially when incorporated into the silicone formulation.

[092] Nota-se uma aparente diminuição das micropartículas nas duas formulações ao final dos 90 dias. Isso pode indicar uma degradação das micropartículas ao serem incorporadas nas formulações se submetidas ao calor (Figura 2).[092] There is an apparent decrease in microparticles in both formulations at the end of 90 days. This can indicate a degradation of the microparticles when incorporated into the formulations if subjected to heat (Figure 2).

[093] O estudo reológico foi realizado com base na constante de consistência (k) , constante de fluxo (n) e tixotropia (g) . A Figura 3 apresenta os gráficos destes elementos em função do tempo.[093] The rheological study was performed based on the consistency constant (k), flow constant (n) and thixotropy (g). Figure 3 shows the graphs of these elements as a function of time.

[094] Os valores referentes à análise dos marcadores apigenina e apigenina-7-glicosídeo no início e no final deste período, para cada formulação, estão descritos na Figura 4.[094] The values referring to the analysis of the apigenin and apigenin-7-glycoside markers at the beginning and end of this period, for each formulation, are described in Figure 4.

[095] Estes dados apontam que, em ambas as formulações, houve uma perda de apigenina-7-glicosídeo, sendo que, na formulação com lanolina, esta perda foi maior do que na formulação com silicone.[095] These data indicate that, in both formulations, there was a loss of apigenin-7-glycoside, and in the formulation with lanolin, this loss was greater than in the formulation with silicone.

[096] No entanto, na análise estatística realizada com o teste t de student, esta diferença não mostrou significância (p = 0,1239). A concentração da apigenina nas duas formulações apresentou um aumento ao final do período, sendo que na formulação com lanolina este aumento foi[096] However, in the statistical analysis performed with the Student's t-test, this difference did not show significance (p = 0.1239). The concentration of apigenin in both formulations increased at the end of the period, whereas in the formulation with lanolin this increase was

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20/30 maior.20/30 higher.

[097] Na análise estatística, esta diferença também não foi significativa (p = 0,3807). Ressalta-se que a apigenina está presente na camomila em quantidades menores que a apigenina-7-glicosídeo. Acredita-se que a apiqenina-7glicosídeo pode ter sofrido alterações, perdendo sua parte glicosilada, e deste modo, tornando-se apigenina; o que podería explicar o aumento deste marcador nas formulações ao longo do tempo.[097] In the statistical analysis, this difference was also not significant (p = 0.3807). It is noteworthy that apigenin is present in chamomile in smaller quantities than apigenin-7-glycoside. It is believed that apiqenin-7 glycoside may have undergone changes, losing its glycosylated part, and thus, becoming apigenin; which could explain the increase of this marker in formulations over time.

[098] Ademais, a apigenina pode ser mais estável quando submetida às temperaturas elevadas e, por este motivo, não apresentou redução de sua concentração nas formulações testadas. A microencapsulação pode ter favorecido este processo, uma vez que promove uma liberação lenta e controlada dos ativos.[098] In addition, apigenin may be more stable when subjected to elevated temperatures and, for this reason, did not show a reduction in its concentration in the tested formulations. Microencapsulation may have favored this process, since it promotes a slow and controlled release of assets.

[099] Os dados deste estudo de estabilidade acelerada permitem inferir que ambas formulações apresentaram mínimas alterações nos caracteres organolépticos, permitindo a sua utilização em estudos posteriores. Nas avaliações da reologia, a lanolina apresentou-se mais estável ao longo do período e, apesar desta formulação ter apresentado uma variação do pH, este ainda se encontra dentro da faixa indicada para aplicações tópicas. Na avaliação dos marcadores, apesar da perda de apigenina-7-glicosídeo ter sido maior na lanolina, esta variação é muito pequena para inviabilizar o seu uso.[099] The data from this accelerated stability study allow us to infer that both formulations showed minimal changes in the organoleptic characters, allowing their use in later studies. In rheology evaluations, lanolin was more stable over the period and, although this formulation had a variation in pH, it is still within the range indicated for topical applications. In the evaluation of the markers, although the loss of apigenin-7-glycoside was greater in lanolin, this variation is too small to prevent its use.

[100] Na avaliação da estabilidade de lonqa duração, a formulação de silicone apresentou alterações no aspecto e o odor, após três meses. No aspecto foi observada a presença de grumos e, quanto ao odor, este apresentou leve[100] In assessing long-term stability, the silicone formulation showed changes in appearance and odor after three months. In the aspect, the presence of lumps was observed and, as for the odor, it presented a slight

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21/30 alteração. O pH da formulação não apresentou alteração no período avaliado.21/30 amendment. The formulation pH did not change in the evaluated period.

[101] A formulação de lanolina apresentou alterações na coloração e no aspecto. A coloração apresentou leve clareamento após nove meses de armazenamento e o aspecto apresentou alguns grumos ao final dos 12 meses. O pH da formulação apresentou alteração ao longo do tempo. A avaliação da microscopia apontou uma boa incorporação das micropartículas em ambas formulações. No entanto, a lanolina apresentou melhor dispersão das micropartículas que o silicone.[101] The lanolin formulation showed changes in color and appearance. The color showed a slight clearing after nine months of storage and the appearance showed some lumps at the end of the 12 months. The pH of the formulation changed over time. The microscopy evaluation showed a good incorporation of microparticles in both formulations. However, lanolin showed better dispersion of microparticles than silicone.

[102] Ao longo da avaliação, foi possível observar que a lanolina não apresentou diminuição ou aglomeração das micropartículas, mesmo após 12 meses de conservação.[102] Throughout the evaluation, it was observed that the lanolin did not show a decrease or agglomeration of the microparticles, even after 12 months of conservation.

[103] Por outro lado, observou-se algumas partículas rompidas no tempo de 12 meses. O silicone apresentou leve aglomeração das micropartículas, principalmente nos tempos de 9 e 12 meses.[103] On the other hand, some particles were seen to be broken in 12 months time. The silicone showed a slight agglomeration of the microparticles, mainly in the 9 and 12 months.

[104] Não foram observadas diminuição das micropartículas ou ruptura das mesmas em nenhum dos tempos avaliados (Figura 5). Quando comparadas ao estudo de estabilidade acelerada nota-se que as formulações se mantiveram estáveis quando armazenadas em temperatura ambiente, mesmo em um período maior de tempo.[104] There was no decrease in microparticles or rupture in any of the evaluated times (Figure 5). When compared to the accelerated stability study, it is noted that the formulations remained stable when stored at room temperature, even over a longer period of time.

[105] A avaliação da reologia das formulações está descrita na Figura 6.[105] The evaluation of the formulation rheology is described in Figure 6.

[106] A lanolina teve algumas alterações na consistência ao longo do período. O silicone apresentou discreto aumento, o que podería ser explicado por uma perda de conteúdo líquido. No caso da lanolina, houve redução de[106] Lanolin had some changes in consistency over the period. Silicone showed a slight increase, which could be explained by a loss of liquid content. In the case of lanolin, there was a

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22/30 sua viscosidade ao longo do tempo; isso pode acontecer por conta da diminuição de seus agentes de viscosidade ao longo do tempo.22/30 its viscosity over time; this can happen due to the decrease in its viscosity agents over time.

[107] A avaliação dos marcadores apigenina-7-glicosídeo e apigenina está descrita na Figura 7.[107] The evaluation of the apigenin-7-glycoside and apigenin markers is described in Figure 7.

[108] Na formulação de lanolina, a apigenina-7glicosídeo apresentou um decréscimo de sua concentração ao longo do tempo, enquanto o silicone apresentou um padrão diferente. Ao comparar a concentração inicial com a de três meses, nota-se que esta variação foi pequena na lanolina quando comparada ao silicone.[108] In the lanolin formulation, apigenin-7 glycoside showed a decrease in its concentration over time, while silicone showed a different pattern. When comparing the initial concentration with that of three months, it is noted that this variation was small in lanolin when compared to silicone.

[109] No entanto, aos nove meses, a formulação com silicone apresentou um aumento desta concentração. Ao final do período avaliado, em ambas as formulações, não foi quantificado este marcador. A análise da apigenina, assim como na estabilidade acelerada, descreve um aumento na concentração deste marcador para ambas formulações em três meses.[109] However, at nine months, the silicone formulation showed an increase in this concentration. At the end of the evaluated period, in both formulations, this marker was not quantified. The analysis of apigenin, as well as in accelerated stability, describes an increase in the concentration of this marker for both formulations in three months.

[110] Após este período, a sua concentração decaiu nas duas formulações, sendo que, ao final do período, não houve quantificação deste marcador. A análise dos marcadores aponta que a formulação com lanolina apresentou menor variação na quantificação do teor dos marcadores, o que pode indicar uma melhor estabilidade das microparticulas quando incorporadas a este veículo. O estudo da estabilidade de longa duração permitiu inferir que ambas formulações apresentaram mínimas alterações nos caracteres organolépticos, possibilitando a sua utilização em estudos posteriores.[110] After this period, its concentration declined in both formulations, and at the end of the period, there was no quantification of this marker. The analysis of the markers indicates that the formulation with lanolin showed less variation in the quantification of the content of the markers, which may indicate a better stability of the microparticles when incorporated into this vehicle. The study of long-term stability allowed to infer that both formulations showed minimal changes in the organoleptic characters, allowing their use in later studies.

[111] Assim como na estabilidade acelerada, a[111] As with accelerated stability, the

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23/30 formulação de lanolina apresentou leve variação do pH, mas sem inviabilizar o seu uso.23/30 lanolin formulation showed a slight variation in pH, but without making its use unfeasible.

Estudo de toxicidade celular das microparticulas:Cell toxicity study of microparticles:

[112] No estudo de toxicidade celular das microparticulas, foi utilizado o teste do hidróxido de 2,3bis (2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-5-[(fenilamino) carbonil]- 2H-tetrazólio (XTT).[112] In the cellular toxicity study of the microparticles, the 2.3bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl) -5 - [(phenylamino) carbonyl] - 2H-tetrazolium test (XTT) .

[113] As células (queratinócitos e fibroblastos de pele humana) foram colocadas em placas com 96 poços com meios de cultura condicionados (2xl0³ células por poço).[113] The cells (keratinocytes and human skin fibroblasts) were plated in 96-well plates with conditioned culture media (2 x 10 ³ cells per well).

[114] As células foram, então, encubadas com o meio de cultura descrito por 24 horas. Após este período, o meio de cultura foi substituído pelas soluções com os produtos a serem testados.[114] The cells were then incubated with the described culture medium for 24 hours. After this period, the culture medium was replaced by solutions with the products to be tested.

[115] Além das formulações testadas, utilizou-se um controle negativo apenas com meio de cultura e um controle positivo com água na mesma proporção utilizada para diluição dos materiais.[115] In addition to the tested formulations, a negative control with only culture medium and a positive control with water in the same proportion used for diluting the materials were used.

[116] Os testes foram realizados em três replicatas para cada grupo. As placas ficaram encubadas por cinco dias com os produtos e, após este período, a viabilidade celular foi determinada por leitura de absorbância das placas em espectrofotômetro.[116] Tests were performed in three replicates for each group. The plates were incubated for five days with the products and, after this period, the cell viability was determined by reading the absorbance of the plates in a spectrophotometer.

[117] Os resultados de cada concentração foram avaliados comparativamente ao branco e ao controle negativo. Foi realizada também uma avaliação do efeito das microparticulas quando as células eram expostas à radiação ionizante e, neste ensaio, os procedimentos para o preparo das linhagens celulares e concentrações dos produtos foi o mesmo do ensaio anterior.[117] The results of each concentration were evaluated against the blank and the negative control. An evaluation of the effect of microparticles was also carried out when cells were exposed to ionizing radiation and, in this test, the procedures for the preparation of cell lines and product concentrations were the same as in the previous test.

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24/30 [118] As soluções e suas diluições foram aplicadas na placa contendo as linhagens celulares e, após 24 horas, as placas foram submetidas à radiação ionizante de 2Gy, a uma taxa de dose de 110 cGy/min.24/30 [118] The solutions and their dilutions were applied to the plate containing the cell lines and, after 24 hours, the plates were subjected to 2Gy ionizing radiation, at a dose rate of 110 cGy / min.

[119] Então, ficaram encubadas por cinco dias e a viabilidade celular foi determinada por leitura de absorbância das placas em espectrofotômetro. Os resultados de cada concentração foram avaliados comparativamente ao branco e ao controle negativo.[119] Then, they were incubated for five days and cell viability was determined by reading the absorbance of the plates on a spectrophotometer. The results of each concentration were evaluated in comparison to the white and negative control.

[120] Os resultados da sobrevida das linhagens celulares de queratinócitos após o tratamento estão descritos na Figura 7.[120] The survival results of keratinocyte cell lines after treatment are described in Figure 7.

[121] Na linhagem dos queratinócitos, houve proliferação celular nas concentrações menores para todos os componentes testados até a concentração 1:10000.[121] In the keratinocyte lineage, cell proliferation occurred at the lowest concentrations for all tested components up to the 1: 10000 concentration.

[122] O extrato apresentou-se citotóxico a partir da concentração 1:1000, na qual houve 48,05 % de células viáveis. As micropartículas nesta mesma concentração não demonstraram citotoxicidade (72,45 %) .[122] The extract was cytotoxic from the concentration 1: 1000, in which there were 48.05% viable cells. Microparticles in this same concentration did not demonstrate cytotoxicity (72.45%).

[123] A quitosana somente apresentou toxicidade celular na concentração 1:1 (-1,49%).[123] Chitosan only showed cellular toxicity at 1: 1 concentration (-1.49%).

[124] Os valores de sobrevida da linhagem de fibroblastos após o tratamento estão descritos na Figura 8.[124] The survival values of the fibroblast lineage after treatment are described in Figure 8.

[125] Para os fibroblastos, não houve proliferação celular após o tratamento. O extrato apresentou potencial citotóxico também a partir da concentração de 1:100000 (64,22 %) . As micropartículas e a quitosana somente demonstraram potencial citotóxico a partir da concentração 1:10 (48,14 % e 57,01 % respectivamente).[125] For fibroblasts, there was no cell proliferation after treatment. The extract also showed cytotoxic potential from the concentration of 1: 100000 (64.22%). Microparticles and chitosan only demonstrated cytotoxic potential from the 1:10 concentration (48.14% and 57.01% respectively).

[126] Os resultados de sobrevida das linhagens[126] The survival results of the strains

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25/30 celulares de queratinócitos após tratamento e exposição à radiação ionizante estão apresentados na Figura 10.25/30 keratinocyte cells after treatment and exposure to ionizing radiation are shown in Figure 10.

[127] Na menor concentração testada (1:10000000), o efeito protetor foi baixo para as três soluções variando entre 58,55 a 69,11 observado na faixa de[127] At the lowest concentration tested (1: 10000000), the protective effect was low for the three solutions, ranging from 58.55 to 69.11 observed in the range of

%. O maior efeito protetor foi dose entre 1:1000000 e 1:10000 para as três soluções.%. The greatest protective effect was a dose between 1: 1000000 and 1: 10000 for the three solutions.

[128] O extrato demonstrou este efeito até a concentração de 1:1000 quitosana até a concentração de[128] The extract demonstrated this effect up to a concentration of 1: 1000 chitosan to a concentration of

1:100. As micropartículas apresentaram maior potencial protetor nas concentrações entre 1:1000000 e1: 100. Microparticles showed greater protective potential in concentrations between 1: 1000000 and

1:10000. A análise estatística entre os grupos apontou diferença significante (p < 0,0001).1: 10000. The statistical analysis between the groups showed a significant difference (p <0.0001).

[129][129]

Os resultados de sobrevida no estudo com a linhagem exposição celular de fibroblastos após o tratamento e à radiação ionizante estão descritos na FiguraThe survival results in the study with the cell line exposure to fibroblasts after treatment and ionizing radiation are described in Figure

11.11.

[130][130]

O efeito protetor para esta linhagem apresentou menor variação em função das diferentes concentrações, quando comparado aos queratinócitos. As maiores diferenças foram encontradas nas concentrações maiores (1:10 e 1:1), nas quais houve um decréscimo significativo na viabilidade celular.The protective effect for this strain showed less variation due to different concentrations, when compared to keratinocytes. The greatest differences were found in the highest concentrations (1:10 and 1: 1), in which there was a significant decrease in cell viability.

[131] A análise estatística confirmou os dados observados apontando diferença entre os grupos avaliados (p < 0,0001).[131] Statistical analysis confirmed the observed data pointing to a difference between the groups evaluated (p <0.0001).

[132] Ao comparar as concentrações de cada solução, observa-se que a diferença significativa foi encontrada apenas na concentração de 1:10.[132] When comparing the concentrations of each solution, it is observed that the significant difference was found only at the 1:10 concentration.

[133] Neste valor, houve uma grande mortalidade celular[133] At this figure, there was a high cell mortality

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26/30 na solução com o extrato, enquanto na quitosana e microparticulas a viabilidade celular permaneceu em 63,99 % e 58,87 %, respectivamente.26/30 in the solution with the extract, while in chitosan and microparticles the cell viability remained at 63.99% and 58.87%, respectively.

[134] Nesta linhagem celular, o melhor efeito protetor para as três formulações foi observado entre as concentrações 1:1000000 e 1:10000 (65,89 % a 73,09 %). Após esta concentração, o extrato apresentou redução da viabilidade celular com queda acentuada na concentração de 1:10.[134] In this cell line, the best protective effect for the three formulations was observed between the concentrations 1: 1000000 and 1: 10000 (65.89% to 73.09%). After this concentration, the extract showed a reduction in cell viability with a sharp drop in the 1:10 concentration.

[135] Nesta concentração, as microparticulas e a quitosana ainda apresentam efeito protetor com 58,87 % e 63,99 % de viabilidade celular, respectivamente.[135] At this concentration, microparticles and chitosan still have a protective effect with 58.87% and 63.99% cell viability, respectively.

- Estudo de segurança da formulação de lanolina com microparticulas em voluntários saudáveis:- Safety study of the lanolin formulation with microparticles in healthy volunteers:

[136] Para o estudo de segurança da formulação de lanolina com microparticulas em voluntários saudáveis, foi realizado um ensaio clínico fase I, mascarado, controlado, não aleatorizado, de dose única.[136] For the safety study of the lanolin formulation with microparticles in healthy volunteers, a masked, controlled, non-randomized, single-dose, phase I clinical trial was conducted.

[137] Os participantes aplicaram a formulação com microparticulas em um antebraço e a mesma formulação sem microparticulas no outro antebraço durante quatro semanas.[137] Participants applied the formulation with microparticles on one forearm and the same formulation without microparticles on the other forearm for four weeks.

[138] A avaliação dos locais de aplicação da pele consistiu em medidas de eritema, melanina, pH, descamação, calor, ardor, prurido e dor.[138] The assessment of skin application sites consisted of measurements of erythema, melanin, pH, flaking, heat, burning, itching and pain.

[139] No estudo, 35 participantes com idade média de 26,3 anos foram selecionados. Destes, 30 (85,71 %) eram do sexo feminino, 29 (82,90 %) brancos e 32 (91,40 %) sem antecedentes pessoais.[139] In the study, 35 participants with an average age of 26.3 years were selected. Of these, 30 (85.71%) were female, 29 (82.90%) were white and 32 (91.40%) had no personal history.

[140] Um participante foi descontinuado por referir eritema no local de aplicação da formulação e quatro por[140] One participant was discontinued for reporting erythema at the site of application of the formulation and four for

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27/30 não comparecerem à última avaliação. Nos 30 participantes que finalizaram, o estudo a formulação teste não causou eritema, descamação, ardor, prurido ou dor.27/30 do not attend the last evaluation. In the 30 participants who completed the study, the test formulation did not cause erythema, scaling, burning, itching or pain.

[141] Houve melhora na hidratação cutânea no local de aplicação da formulação com as micropartículas. Na avaliação da função barreira, houve aumento da perda transepidérmica de água em todos os locais avaliados. A Figura 12 apresenta os dados das avaliações objetivas no início e ao final do estudo.[141] There was an improvement in skin hydration at the site of application of the formulation with the microparticles. In the assessment of the barrier function, there was an increase in transepidermal water loss in all evaluated sites. Figure 12 presents the data of the objective evaluations at the beginning and at the end of the study.

[142] A formulação com micropartículas de camomila é segura para o uso tópico não provocando irritação e melhorando a hidratação cutânea ao longo de quatro semanas de uso. Seus efeitos na função barreira devem ser melhor estudados.[142] The formulation with chamomile microparticles is safe for topical use, causing no irritation and improving skin hydration over four weeks of use. Its effects on the barrier function should be further studied.

Estudo do efeito da formulação de lanolina com micropartículas na cicatrização cutânea em ratos:Study of the effect of lanolin formulation with microparticles on skin healing in rats:

[143] O estudo do efeito da formulação de lanolina com micropartículas na cicatrização cutânea em ratos teve como objetivo avaliar a eficácia desta formulação tópica com micropartículas de quitosana contendo Chamomilla recutita (L.) rauschert na cicatrização cutânea em ratos.[143] The study of the effect of the lanolin formulation with microparticles on skin healing in rats aimed to evaluate the effectiveness of this topical formulation with chitosan microparticles containing Chamomilla recutita (L.) rauschert on skin healing in rats.

[144] Foram utilizados 57 ratos Wistar sadios, machos, distribuídos aleatoriamente em três grupos, sendo que um grupo recebeu o tratamento com aplicação da formulação; um grupo recebeu o tratamento apenas com o veículo (lanolina); e o terceiro grupo recebeu o tratamento com solução fisiológica (0,9%). As avaliações foram realizadas nos dias 2, 7, 14 e 21 após o procedimento cirúrgico através de fotografia da lesão, análises histológicas e bioquímicas.[144] 57 healthy male Wistar rats were used, randomly distributed into three groups, with one group receiving treatment using the formulation; one group received treatment with the vehicle only (lanolin); and the third group received treatment with saline solution (0.9%). The evaluations were performed on days 2, 7, 14 and 21 after the surgical procedure through photograph of the lesion, histological and biochemical analyzes.

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28/30 [145] Os resultados preliminares evidenciam que, no dia28/30 [145] Preliminary results show that, on the day

2, houve diferença no índice de cicatrização entre os três grupos (p = 0,0090); o pós-teste indicou que esta diferença estava presente entre os índices do grupo soro fisiológico (SF) e grupo veículo (VE) (p=0,0026) (Figuras 13 [146] A avaliação qualitativa do infiltrado inflamatório evidenciou, em todos os grupos, a presença maciça de células inflamatórias, principalmente neutrófilos no segundo dia e com um pouco menor no sétimo dia. A avaliação quantitativa desse infiltrado não demonstrou diferença estatística entre os grupos nos tempos avaliados.2, there was a difference in the healing rate between the three groups (p = 0.0090); the post-test indicated that this difference was present between the indexes of the saline group (SF) and the vehicle group (VE) (p = 0.0026) (Figures 13 [146] The qualitative assessment of the inflammatory infiltrate showed, in all cases, groups, the massive presence of inflammatory cells, mainly neutrophils on the second day and slightly lower on the seventh day.The quantitative assessment of this infiltrate showed no statistical difference between the groups at the evaluated times.

[147] A avaliação da quantidade de fibroblastos demonstrou um aumento significativo na quantidade destas células no sétimo dia, que permaneceu no 14° dia em todos os grupos. As análises estatísticas evidenciaram diferença (p = 0,0221) na quantidade média destas células no D7 entre o grupo tratado com o veículo e o grupo tratado com a formulação contendo camomila.[147] The assessment of the amount of fibroblasts demonstrated a significant increase in the amount of these cells on the seventh day, which remained on the 14th day in all groups. Statistical analyzes showed a difference (p = 0.0221) in the average amount of these cells in D7 between the group treated with the vehicle and the group treated with the formulation containing chamomile.

[148] A avaliação qualitativa da angiogênese evidenciou um aumento na quantidade de vasos sanguíneos no segundo dia de tratamento nos grupos VE e[148] Qualitative assessment of angiogenesis showed an increase in the number of blood vessels on the second day of treatment in the LV and LV groups.

CA. Ainda nestes grupos foi observada grande quantidade de hemácias na região da lesão, principalmente nos dias de tratamento.HERE. Also in these groups, a large amount of red blood cells was observed in the region of the lesion, especially on treatment days.

A avaliação quantitativa dos vasos sanguíneos nos locais das úlceras revelou diferença no D2 entre os grupos VE eThe quantitative assessment of blood vessels at the sites of ulcers revealed a difference in D2 between the VE and

SF e também entre os grupos CA e SF (Figura 15).SF and also between the CA and SF groups (Figure 15).

[149] Assim, fica claro que as formulações visam à prevenção de lesões de pele, tais como aquelas decorrentes do tratamento radioterápico, lesões por pressão, lesões na pele ao redor de estornas, ou lesões de origens diversas,[149] Thus, it is clear that the formulations are aimed at the prevention of skin injuries, such as those resulting from radiotherapy treatment, pressure injuries, skin injuries around starlings, or injuries of different origins,

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29/30 como queimaduras ou feridas por artefatos mecânicos.29/30 such as burns or wounds from mechanical artifacts.

[150] Os resultados observados nos testes demonstraram que as formulações promoveram uma liberação adequada (lenta e controlada) dos ativos na pele sem que estes ultrapassassem as camadas da pele e atingissem a circulação sanguínea.[150] The results observed in the tests showed that the formulations promoted an adequate (slow and controlled) release of the active ingredients in the skin without them going beyond the skin layers and reaching the blood circulation.

[151] Nos estudos de estabilidade, as formulações se mostraram estáveis em temperatura ambiente (25° C) por até nove meses e em temperaturas elevadas (45° C) por até 90 dias. Este resultado é surpreendente, visto que produtos que utilizam extratos vegetais tendem a apresentam validade menor devido à degradação dos compostos naturais.[151] In stability studies, the formulations were stable at room temperature (25 ° C) for up to nine months and at high temperatures (45 ° C) for up to 90 days. This result is surprising, since products using plant extracts tend to have lesser validity due to the degradation of natural compounds.

[152] Cabe ressaltar que também foram desenvolvidas e testadas formulações à base de géis. No entanto, nos meios em que havia água, as micropartículas apresentam as paredes capsulares intumescidas devido à absorção da água presente na formulação pela quitosana. Esta absorção pode levar à ruptura da micropartícula e liberação de seu conteúdo, o que não é desejável.[152] It should be noted that formulations based on gels were also developed and tested. However, in environments where water was present, microparticles have swollen capsular walls due to the absorption of water present in the formulation by chitosan. This absorption can lead to rupture of the microparticle and release of its content, which is not desirable.

[153] As figuras 16, 17 e 18 apresentam as imagens de microscopia da formulação com silicone (anidra), com gel (com água) e com lanolina (anidra).[153] Figures 16, 17 and 18 show the microscopic images of the formulation with silicone (anhydrous), gel (with water) and lanolin (anhydrous).

[154] Na figura 16, as setas vermelhas indicam algumas das aglomerações de micropartículas e micropartículas não agregadas (circuladas em vermelho) apresentando sua parede capsular íntegra.[154] In figure 16, the red arrows indicate some of the clusters of microparticles and non-aggregated microparticles (circled in red) showing their intact capsular wall.

[155] Na Figura 17, por sua vez, são observadas discretas aglomerações de micropartículas e micropartículas isoladas com paredes capsulares intumescidas, conforme indicado nas setas vermelhas. A ruptura da micropartícula e[155] In Figure 17, in turn, discrete agglomerations of microparticles and isolated microparticles with swollen capsular walls are observed, as indicated by the red arrows. The rupture of the microparticle and

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30/30 liberação de seu conteúdo estão destacadas pelo círculo vermelho.30/30 release of your content are highlighted by the red circle.

[156] Os melhores resultados são observados na figura 18, relativos à formulação com lanolina, na qual as micropartículas mostraram melhor estado de conservação.[156] The best results are seen in figure 18, relative to the formulation with lanolin, in which the microparticles showed a better state of conservation.

[157] Os versados na arte valorizarão os conhecimentos aqui apresentados e poderão reproduzir a invenção nas modalidades apresentadas e em outras variantes, abrangidas no escopo das reivindicações anexas.[157] Those skilled in the art will value the knowledge presented here and will be able to reproduce the invention in the modalities presented and in other variants, covered by the scope of the attached claims.

Claims

1, 2 or 3, characterized by still comprising:

antioxidant agents, such as BHT, in a proportion of 0.05%;

- consistency agents, such as beeswax or aluminum stearate, in a proportion of 3% beeswax and 1.5% aluminum stearate; and

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1. Topical formulations characterized by comprising extracts, oils or other derivatives of natural origin, such as medicinal plants, which are presented in microencapsulated form in polymer, in which the component of natural origin is a derivative of chamomile, Aloe vera or turmeric and the polymer is chitosan, maltodextrin, gum arabic or sorbitol, preferably microparticles of extract of

coated chamomile inflorescences in low chitosan or medium molecular weight. 2. Formulations topical, according with the claim 1, characterized fur fact of at microparticles

comprise extract in a concentration ranging from 10 to 30% and chitosan in a concentration ranging from 30 to 60 o ·

1/2

2/2 solubilizing agents, such as ethoxylated castor oil, in a proportion of 0.5%.

Topical formulations according to claim 1 or 2, characterized by comprising:

- 0.5 to 20% microparticles, preferably 1% microparticles; and

- 80 to 99.5% vehicle, preferably 99% vehicle, selected from anhydrous lanolin or ethoxylated anhydrous lanolin, silicone (DC 245 and DC 9040), solid petroleum jelly or vegetable oil.

4. Topical formulations according to the claim

5. Use of topical formulations, as defined in claims 1 to 4, characterized by the fact that it prevents skin lesions, such as those resulting from radiotherapy treatment, pressure injuries, skin injuries around starlings or injuries of different origins, such as burns or wounds from mechanical artifacts.