BR102013029865A2 - process of obtaining a new milk coagulant from green fruit peels of achachairu (garcinia humilis vahl) - Google Patents

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Gileno Vitor Mota Lima
Gilvany Rodrigues De Andrade
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Abstract

processo de obtenção de um novo coagulante de leite a partir de cascas de frutos verdes de achachairu (garcinia humilis vahl). a presente invenção descreve o processo de obtenção de uma nova fonte de coagulante de leite de baixo custo a partir de extrato vegetal produzido com cascas verdes de achachairu (garcinia humilis vahl) propondo uma alternativa aos coagulantes de leite convencionais para aplicação industrial em âmbito alimenticio, estando incluso no campo da biotecnologia aplicada.process of obtaining a new milk coagulant from green fruit peels of achachairu (garcinia humilis vahl). The present invention describes the process of obtaining a new source of low-cost milk coagulant from green bark extract of achachairu (garcinia humilis vahl) by proposing an alternative to conventional milk coagulants for industrial food application. being included in the field of applied biotechnology.

Description

RELATÓRIO DESCRITIVO da patente de invenção “PROCESSO DE OBTENÇÃO DE UM NOVO COAGULANTE DE LEITE A PARTIR DE CASCAS DE FRUTOS VERDES DE ACHACHAIRU (GARCINIA HUMILIS VAHL)” O presente invento denominado “Processo de obtenção de um novo coagulante de leite a partir de cascas de frutos verdes de achachairu (Garcinia humilis Vahl)” está incluído no campo da biotecnologia aplicada.DESCRIPTION REPORT OF THE INVENTION "PROCESS FOR OBTAINING A NEW MILK COAGULANT FROM ACHACHAIRU GREEN FRUIT SHELLS" (GARCINIA HUMILIS VAHL) green fruits of achachairu (Garcinia humilis Vahl) ”is included in the field of applied biotechnology.

No momento presente, ocorre a utilização de microorganismos para a produção de quimosina idêntica à produzida pelas células de estômago de bezerros. Obteve-se esse avanço mediante a introdução de genes responsáveis pela produção de quimosina num microorganismo hospedeiro, como a levedura Kluyveromyces lactis.At present, microorganisms are used for the production of chymosin identical to that produced by calf stomach cells. This advance was achieved by introducing genes responsible for the production of chymosin in a host microorganism, such as yeast Kluyveromyces lactis.

Atualmente, apenas 20 a 30% da demanda mundial de coagulantes do leite são supridas pelo coalho de origem animal, logo esse fornecimento é limitado devido à escassez de matéria-prima. Além disso, o alto custo do coalho, fatores religiosos, dieta (vegetarianismo), incidência da encefalopatia espongiforme bovina ou a proibição do coalho de vitelo recombinante (França, Alemanha e Países Baixos) têm incentivado a pesquisa por novas fontes de coagulantes de leite provenientes de microorganismos e vegetais.Currently, only 20-30% of the world's demand for milk coagulants is supplied by animal rennet, so this supply is limited due to the shortage of raw materials. In addition, the high cost of rennet, religious factors, diet (vegetarianism), incidence of bovine spongiform encephalopathy or the prohibition of recombinant calf rennet (France, Germany and the Netherlands) have encouraged research into new sources of milk coagulants. of microorganisms and vegetables.

Estima-se que o coalho de origem animal seja utilizado em 80% dos queijos fabricados no Brasil e aproximadamente 20% por coagulação microbiana. Proteases microbianas de fungos e outros microorganismos têm sido considerados como substitutos de coalho, mas a maioria revelou-se impróprios para a indústria de queijo. O coagulante microbiano mais conhecido e mais utilizado é produzido a partir de Rhizomucor miehei. Embora tenha sido usada com sucesso em uma variedade de queijos leves, mais suaves, sua ação proteolítica não específica reduz os rendimentos em queijos duros e semi-duros, causando amargor em queijos de longa maturação.Animal rennet is estimated to be used in 80% of cheeses made in Brazil and approximately 20% by microbial coagulation. Microbial proteases of fungi and other microorganisms have been considered as rennet substitutes, but most have proved unsuitable for the cheese industry. The best known and most widely used microbial coagulant is made from Rhizomucor miehei. Although successfully used in a variety of milder, milder cheeses, its non-specific proteolytic action reduces yields in hard and semi-hard cheeses, causing bitterness in long-ripened cheeses.

Muitas plantas produzem proteinases que apresentam potencialidade para coagular o leite. Apesar de apresentarem-se como alternativa viável na fabricação de queijos com sabores diferenciados, proteases coagulantes de origem vegetal têm sido pouco utilizadas industrialmente ficando restritas à produção artesanal principalmente na Europa.Many plants produce proteinases that have the potential to coagulate milk. Despite being a viable alternative in the manufacture of cheeses with different flavors, coagulant proteases of vegetable origin have been little used industrially and are restricted to artisanal production mainly in Europe.

Em Portugal, enzimas de origem vegetal são tradicionalmente utilizadas na coagulação do leite para fabricação de queijos artesanais. Em lugar dos coalhos extraídos do quarto estômago de bezerros lactentes, tem-se utilizado enzimas proteolíticas extraídas de flores secas de plantas do gênero Cynara, para a fabricação de queijos artesanais. Mesmo sendo este procedimento realizado desde a época romana, a utilização empírica destes coalhos vegetais está restringindo o seu uso atual a umas poucas elaborações que incluem os queijos Serra da Estrela em Portugal, o Caccio Fiore italiano e os espanhóis Pedroche, Serena e Flor de Guia Canário.In Portugal, enzymes of plant origin are traditionally used in the coagulation of milk to make artisanal cheese. In place of the curds extracted from the fourth stomach of nursing calves, proteolytic enzymes extracted from dried flowers of plants of the genus Cynara have been used to make artisanal cheeses. Even though this procedure has been performed since Roman times, the empirical use of these vegetable curds is restricting their current use to a few elaborations that include Serra da Estrela cheeses in Portugal, the Italian Caccio Fiore and the Spanish Pedroche, Serena and Flor de Guia. Canary.

Em países da África Ocidental como a Nigéria e a República do Benin, extratos de Calotropis procera têm sido utilizados na produção artesanal de queijos. Há relatos que proteases de gengibre pode ser uma alternativa de fonte enzímática para coagulação de leite e para a produção de queijo. Além disso, queijo produzido usando extrato de frutas de Bromelia hieronymi é aceitável na aparência, corpo, textura, e no sabor.In West African countries such as Nigeria and the Republic of Benin, Calotropis procera extracts have been used in artisanal cheese production. Ginger proteases have been reported to be an alternative enzyme source for milk coagulation and cheese production. In addition, cheese made using Bromelia hieronymi fruit extract is acceptable in appearance, body, texture, and taste.

Algumas patentes citam o uso de coagulante de leite de origem vegetal como as patentes BRPI0613979-5 que se refere a um método para a produção de leite fermentado que possui um excelente sabor e aroma bem como funcionalidade, onde há utilização de protease tal como a papaína. A patente PI0822069-7 que trata de extrato de cardo leiteiro, método para preparação e uso e a patente P11002202-3 a qual descreve o processo de fabricação de produtos alimentícios com baixo teor de gordura. Em especial, o invento acima descrito compreende um processo de produção de alimento com uma etapa de coagulação que utiliza enzimas coagulantes, especialmente do látex vegetal, obtido de plantas de Brosimum.Some patents cite the use of plant-based milk coagulant such as BRPI0613979-5 which relates to a method for producing fermented milk that has excellent taste and aroma as well as functionality where protease such as papain is used. . Patent PI0822069-7 dealing with milk thistle extract, method for preparation and use and patent P11002202-3 which describes the process of manufacturing low fat food products. In particular, the invention described above comprises a coagulation step food production process utilizing coagulant enzymes, especially vegetable latex, obtained from Brosimum plants.

Os estudos mencionados acima evidenciam a potencialidade de utilização dos vegetais para obtenção de agentes coagulantes alternativos para a fabricação de novos produtos lácteos com sabores diferenciados, no entanto as pesquisas voltadas para esse tema são limitadas.The studies mentioned above show the potential use of vegetables to obtain alternative coagulant agents for the manufacture of new dairy products with different flavors, however research on this topic is limited.

Diante do exposto, as vantagens desse processo de obtenção de um coagulante de leite de origem vegetal a partir de cascas de frutos verdes de achachairu reside no fato de ser uma alternativa na geração de novos derivados do leite tanto para os mercados regionais, nacionais como internacionais. Contribuindo para redução da demanda mundial de coagulantes, podendo ser consumido por todas as pessoas, sem restrições religiosas ou dietéticas. Ressalta-se ainda a limitação de relatos em âmbito nacional da utilização de coagulantes vegetais na fabricação de produtos lácteos.Given the above, the advantages of this process of obtaining a vegetable-based milk coagulant from green fruit peel lies in the fact that it is an alternative in the generation of new milk derivatives for both regional, national and international markets. . Contributing to reducing the worldwide demand for coagulants, which can be consumed by all people, without religious or dietary restrictions. Also noteworthy is the limitation of national reports of the use of vegetable coagulants in the manufacture of dairy products.

Outro aspecto a ser enaltecido é a viabilidade econômica, em decorrência da facilidade do processo, baixo custo das pesquisas e produção quando comparado com os coagulantes utilizados atualmente. A patente propõe um processo de baixo custo para obtenção de uma nova fonte de coagulante de leite a partir de extrato vegetal produzido com cascas verdes de achachairu (Garcinia humilis Vahl.) para aplicação em âmbito alimentício. A inovação da proposta consiste na obtenção de um bioproduto utilizando matéria prima obtida exclusivamente de origem vegetal, o que constitui uma alternativa viável devido à facilidade de obtenção e ao baixo custo. O Brasil é o segundo maior produtor mundial de leite perdendo apenas para os Estados Unidos e a sua produção vem crescendo desde o ano de 2000, além disso, o Brasil dentre os países da América é o segundo maior produtor de queijo em toneladas.Another aspect to be emphasized is the economic viability, due to the ease of the process, low cost of research and production when compared with the coagulants used today. The patent proposes a low-cost process for obtaining a new source of milk coagulant from green bark extract of Garchair (Garcinia humilis Vahl.) For food application. The innovation of the proposal is to obtain a bioproduct using raw material obtained exclusively from plant origin, which is a viable alternative due to the ease of obtaining and the low cost. Brazil is the second largest world producer of milk second only to the United States and its production has been growing since the year 2000, besides Brazil among the countries of America is the second largest producer of cheese in tons.

Levantamento da Leite Brasil (Associação Brasileira dos Produtores de Leite), mostra um aumento de 23% no consumo per capita de lácteos nos últimos sete anos. O crescimento é puxado por derivados como queijos e requeijão. Desde 2005, o consumo per capita desses produtos aumentou 52%.Survey of Milk Brazil (Brazilian Association of Milk Producers) shows a 23% increase in per capita dairy consumption in the last seven years. Growth is driven by derivatives such as cheese and curd. Since 2005, per capita consumption of these products has increased by 52%.

Somente no ano passado, o avanço foi de 16%. Nesta década, a produção brasileira de queijo cresceu a uma taxa média de 5% ao ano. Em 2011 foram produzidos 867,1 mil toneladas de queijos no país, 9,4% mais que em 2010, em 2012 o crescimento da produção de queijos foi próximo a 10,0% e em 2013 deve ultrapassar 1,0 milhão de toneladas, segundo a Associação Brasileira das Indústrias de Queijos. A tendência para os próximos anos é que a produção de queijos aumente, pois a demanda, impulsionada pelo aumento no poder aquisitivo tende a crescer. Estes dados ilustram bem a importância social e econômica do Produto.Last year alone, the advance was 16%. This decade, Brazilian cheese production grew at an average rate of 5% per year. In 2011, 867.1 thousand tons of cheese were produced in the country, 9.4% more than in 2010, in 2012 the growth of cheese production was close to 10.0% and in 2013 it should exceed 1.0 million tons, according to the Brazilian Cheese Industry Association. The trend for the coming years is for cheese production to increase as demand, driven by the increase in purchasing power tends to grow. These data illustrate well the social and economic importance of the Product.

Na indústria queijeira têm-se os mais distintos métodos de processamento para um grande número de diferentes tipos de produtos. Algumas etapas são comuns em todos os fluxogramas de produção láctea. Uma destas etapas imprescindíveis é a coagulação. Têm-se didaticamente três tipos de coagulação: enzimática, ácida e mista. Cada uma dessas coagulações leva à formação de gel lácteo com características físico-químicas e nutricionais distintas além dos aspectos sensoriais. A coagulação enzimática é a mais utilizada no processo de fabricação de queijos, devido, principalmente, ao maior rendimento obtido em relação à coagulação ácida. Além disso, utiliza-se com freqüência a tecnologia ácida, a qual se adapta muito bem em países de clima temperado, uma vez que, para a conservação e maturação destes queijos, necessita-se de baixas temperaturas, devido à sua grande umidade. No entanto, para países de clima tropical a tecnologia enzimática tem-se mostrado a mais adaptada, uma vez que o queijo pode ser acondicionado à temperatura ambiente, por apresentar uma baixa umidade, como o exemplo, do queijo de coalho Nordestino.In the cheese industry there are the most distinct processing methods for a large number of different types of products. Some steps are common in all dairy production flowcharts. One of these essential steps is coagulation. There are didactically three types of coagulation: enzymatic, acidic and mixed. Each of these coagulations leads to the formation of milk gel with distinct physicochemical and nutritional characteristics as well as sensory aspects. Enzymatic coagulation is the most used in the cheese manufacturing process, mainly due to the higher yield obtained in relation to acid coagulation. In addition, acid technology is often used, which adapts very well in temperate countries, since low temperatures are required for the preservation and maturation of these cheeses due to their high humidity. However, for tropical countries, enzymatic technology has been shown to be the most suitable, since cheese can be packaged at room temperature, as it has a low humidity, such as Nordestino rennet cheese.

As enzimas utilizadas para a coagulação de leite podem ser oriundas de animais, vegetais e/ou de microrganismos, que podem ser usadas isoladamente ou misturadas entre si. Esta mistura de enzimas pode proporcionar, entre outros efeitos, um ajuste da taxa de proteólise durante a maturação, a um nível desejado. A renina é a principal enzima utilizada na produção de queijos. Ela está presente no coalho de animais ruminantes e é tradicionalmente obtida do 4o estômago de bezerros em lactação. Este coalho é composto pelas enzimas quimosina e pepsina, em proporção de cerca de 85-95% de quimosina para 5-15% de pepsina. A demanda de estômagos de bezerro para a extração de coalho é muito elevada, o que se torna um fator que dificulta a produção, devido não só ao alto custo, mas também à escassez da matéria-prima.The enzymes used for milk coagulation may come from animals, plants and / or microorganisms, which may be used alone or mixed together. This enzyme mixture may provide, among other effects, an adjustment of the rate of proteolysis during maturation to a desired level. Renin is the main enzyme used in cheese production. It is present in the ruminant animal rennet and is traditionally obtained from the 4th stomach of lactating calves. This rennet is composed of the enzymes chymosin and pepsin, in a ratio of about 85-95% chymosin to 5-15% pepsin. The demand for calf stomachs for curd extraction is very high, which becomes a factor that hinders production due not only to the high cost but also to the scarcity of the raw material.

Como consequências da escassez de matéria prima, alto preço e crescimento da produção mundial de queijo, houve um aumento na busca por substitutos de mesma qualidade. Um substituto adequado deve possuir intensa atividade coagulante e baixa atividade proteolítica para minimizar a dissolução do coágulo.As a consequence of the scarcity of raw materials, high prices and growth of world cheese production, there was an increase in the search for substitutes of the same quality. A suitable substitute should have intense clotting activity and low proteolytic activity to minimize clot dissolution.

Proteases são também tradicionalmente utilizadas na fabricação de queijos. Elas são empregadas para maturação e desenvolvimento da textura e do sabor do queijo, sendo a responsável pela coagulação do leite na fabricação de queijos, através da hidrólise da k-caseína.Proteases are also traditionally used in cheese making. They are used for the maturation and development of the texture and flavor of cheese, being responsible for the coagulation of milk in cheese manufacture through the hydrolysis of k-casein.

Na Europa, particularmente na Espanha e em Portugal, enzimas de origem vegetal são tradicionalmente utilizadas na coagulação do leite para fabricação de queijos artesanais os quais as possuem o selo DOP (Denominação de origem protegida). Em lugar dos coalhos extraídos do quarto estômago de bezerros lactentes, tem-se utilizado enzimas proteolíticas extraídas de flores secas de plantas do gênero Cynara, para a fabricação de queijos artesanais. O surgimento no mercado de coalhos de origem vegetais perfeitamente tipificados poderá ter importância econômica inigualável, pelo fato de se poder trabalhar no futuro com queijos hoje considerados artesanais, e que poderão ser adaptados à produção semi-industrial sem necessidade de troca do coalho vegetal pelos comerciais de origem animal. Sem contar com o potencial da qualidade de queijos como o Flor de Guia e Serra de Estrela, produzidos a partir de leites caprino e ovino, entre outros que teriam mercado seguro devido às suas inigualáveis características.In Europe, particularly Spain and Portugal, enzymes of plant origin are traditionally used in the coagulation of milk for the manufacture of artisanal cheeses which carry them with the PDO (Protected Designation of Origin) seal. In place of the curds extracted from the fourth stomach of nursing calves, proteolytic enzymes extracted from dried flowers of plants of the genus Cynara have been used to make artisanal cheeses. The emergence of perfectly typified vegetable curds in the market may be of unparalleled economic importance, given that it is possible to work in the future with cheeses that are now considered artisanal, and which can be adapted to semi-industrial production without the need to trade vegetable rennet of animal origin. Not to mention the quality potential of cheeses such as Flor de Guia and Serra de Estrela, produced from goat and sheep milk, among others that would have a safe market due to their unique characteristics.

Entretanto, os substitutos do coalho animal pelas enzimas coagulantes de origem vegetal são interessantes tendo em vista da sua constante disponibilidade e baixo custo, além de ter maior aceitação entre pessoas cujos hábitos alimentares e crenças religiosas são contra o uso de produtos contendo derivados de animais sacrificados. A utilização de plantas como coagulante para leite é uma alternativa viável e promissora, existindo na literatura diversas pesquisas realizadas com vegetais demonstrando essa viabilidade, entretanto nenhuma até o momento faz menção ao achachairu (Garcinia humilis Vahl.) e a nenhum de seus metabólitos.However, animal rennet substitutes for plant-based coagulant enzymes are interesting in view of their constant availability and low cost, and have greater acceptance among people whose eating habits and religious beliefs are against the use of products containing sacrificial animals. . The use of plants as a milk coagulant is a viable and promising alternative, and there are several studies in the literature that show this viability. However, none of them has yet been mentioned for achachairu (Garcinia humilis Vahl.) And none of its metabolites.

Um coagulante de origem vegetal muito utilizado em países mediterrâneos, principalmente Portugal e Espanha, é o extrato obtido a partir do cardo (Cynara cardunculus L.). Este extrato contém uma mistura de enzimas (cardosinas/ciprosinas) com elevada atividade proteólitica não específica, mas com comportamento coagulante que se revela muito eficaz em leite de ovelha, proporcionando a fabricação de queijos muito característicos. Existem relatos da atividade coagulante de leite em folhas de alface (Lactuca sativa) em leite desnatado e em leites com diferentes teores de gordura.A coagulant of vegetable origin widely used in Mediterranean countries, mainly Portugal and Spain, is the extract obtained from the thistle (Cynara cardunculus L.). This extract contains a mixture of enzymes (cardosins / cyprosines) with high non-specific proteolytic activity, but with coagulant behavior that proves to be very effective in sheep's milk, providing the production of very characteristic cheeses. There are reports of milk coagulant activity in lettuce leaves (Lactuca sativa) in skimmed milk and in milk with different fat content.

Alguns pesquisadores testaram a atividade coagulante de extratos vegetais em leite de vaca e cabra obtendo resultados parciais animadores de plantas nativas e/ou exóticas do Nordeste. Os mesmos testaram 130 amostras vegetais, dentre as quais cinco apresentaram atividades coagulantes satisfatórias, com tempos de coagulação que variavam de 2 a 120 minutos. Estudos realizados na Embrapa Caprinos e Ovinos, utilizando extratos de sementes de girassol, apresentaram atividade coagulante de leite e consequentemente potencial para fabricação de queijos.Some researchers have tested the coagulant activity of plant extracts in cow's and goat's milk to obtain encouraging partial results from native and / or exotic Northeastern plants. They tested 130 plant samples, of which five presented satisfactory coagulant activities, with coagulation times ranging from 2 to 120 minutes. Studies carried out at Embrapa Caprinos e Ovinos, using sunflower seed extracts, showed milk coagulant activity and consequently potential for cheese production.

Alguns estudos afirmam que coagulação do leite pela bromelina, papaína e ficina causa amargor em seus produtos e uma alternativa seria a utilização de proteases de gengibre como fonte enzimática para coagulação de leite. Já outras pesquisas afirmam que a bromelina é uma enzima extraída de vegetais e apresenta atividade coagulante de leite para fabricação de queijo.Some studies claim that coagulation of milk by bromelain, papain and ficina causes bitterness in their products and an alternative would be the use of ginger proteases as an enzymatic source for milk coagulation. Other research claims that bromelain is an enzyme extracted from vegetables and has milk coagulant activity for cheese making.

Posteriormente os estudos concluíram que as proteases vegetais como a papaína, ficina e bromelina extraídas do mamão, figo e abacaxi, respectivamente têm uma relação entre coagulação do leite e atividade proteolítica desfavorável sendo esse fator o principal obstáculo na fabricação de queijo. Há relatos na literatura sobre a atividade coagulante de leite em látex de Ficus religiosa e Madura pomifera respectivamente. Além da coagulação de leite a partir de flores de Moringa oleifera sendo potencialmente útil no processo de fabricação de queijo por não promover extensa hidrólise.Later studies concluded that vegetable proteases such as papain, ficin and bromelain extracted from papaya, fig and pineapple, respectively, have a relationship between milk coagulation and unfavorable proteolytic activity and this factor is the main obstacle in cheese making. There are reports in the literature about the latex milk coagulant activity of Ficus religiosa and Madura pomifera respectively. In addition to milk coagulation from Moringa oleifera flowers, it is potentially useful in the cheese making process because it does not promote extensive hydrolysis.

Verifica-se com o estado da técnica que a atividade coagulante de leite utilizando extratos naturais de plantas vem sendo demonstrada. Entretanto inexistem relatos ou similares a respeito da atividade da coagulação de leite a partir de cascas de frutos verdes de achachairu (Gardnia humiiis Vahl.) e a nenhum de seus metabólitos. Como também não há atualmente no âmbito científico nenhum estudo que discorra a respeito da eficácia e efetividade da coagulação de leite a partir de vegetais em escala industrial. A seguir, a invenção será descrita em maiores detalhes com o auxílio de exemplos de forma de apresentação exemplificados em figuras.It is verified with the state of the art that the coagulant activity of milk using natural plant extracts has been demonstrated. However, there are no or similar reports regarding the activity of milk coagulation from green fruit peel of achachairu (Gardnia humiiis Vahl.) And none of its metabolites. As there is currently no scientific study on the efficacy and effectiveness of milk coagulation from vegetables on an industrial scale. In the following, the invention will be described in more detail with the aid of embodiment examples exemplified in figures.

Se mostra: Na figura 01: vista frontal de cascas de frutos verdes de achachairu desidratadas a temperatura ambiente e trituradas.Shown: In Figure 01: Frontal view of green fruit shells dehydrated at room temperature and crushed.

Na figura 02: vista frontal de tubos de ensaio evidenciando a coagulação de leite pelas cascas de frutos verdes de achachairu (Gardnia humiiis Vhal). A atividade coagulante do leite pelas cascas verdes de achachairu é evidenciada a partir de teste baseado no tempo necessário para coagular uma solução de leite desnatado.Figure 02: Frontal view of test tubes showing the coagulation of milk by green fruit peels of achachairu (Gardnia humiiis Vhal). The coagulant activity of milk by achachairu green peels is evidenced from time-based testing to coagulate a skim milk solution.

Os frutos verdes de achachairu foram coletados, lavados, despolpados e as cascas foram separadas e desidratadas à temperatura ambiente, sendo posteriormente trituradas para obtenção de um pó exemplificado na figura 01. O mesmo foi armazenado sob refrigeração à -20°C. A partir do pó preparou-se uma solução com a concentração de 0,15g/mL, obtida a partir da imersão do pó das cascas de achachairu em água destilada. Essa mistura foi mantida em repouso por 1 hora à temperatura ambiente e em seguida foi filtrada em papel de filtro, obtendo assim o extrato vegetal utilizado posteriormente na determinação da atividade coagulante do leite.Achachairu green fruits were collected, washed, pulped and the shells were separated and dehydrated at room temperature and then ground to obtain a powder exemplified in figure 01. It was stored refrigerated at -20 ° C. From the powder, a 0.15 g / mL solution was prepared by immersing the achachairu bark powder in distilled water. This mixture was kept at rest for 1 hour at room temperature and then filtered on filter paper, thus obtaining the vegetable extract used later in the determination of milk coagulant activity.

Para a atividade coagulante do leite foi elaborada uma solução de leite desnatado (100g/ml) e água destilada com 0,01 M de cloreto de cálcio. A amostra do extrato vegetal (0,5ml_) foi adicionada a tubos de ensaio contendo 5,0 mL da solução de leite desnatado, pré-aquecidos em banho termostatizado a 35°C por 10 minutos. Após a adição do extrato vegetal cronometra-se o tempo necessário para iniciar a formação de coágulo. O fim da reação é definido como o tempo necessário para iniciar a coagulação do leite. Os testes foram feitos em triplicatas e os resultados foram expressos como unidades de renina (UR). Onde cada minuto requerido para coagular o substrato será equivalente a 400 UR. A coagulação do leite pelas cascas de achachairu exemplificada na figura 02 obteve tempo de coagulação do leite, em média 130 segundos o que equivale a 600 UR.For the coagulant activity of the milk a solution of skimmed milk (100g / ml) and distilled water with 0,01 M of calcium chloride was elaborated. The plant extract sample (0.5 ml) was added to test tubes containing 5.0 ml skim milk solution, preheated in a thermostated bath at 35 ° C for 10 minutes. After addition of the plant extract, the time required to start clot formation is timed. The end of the reaction is defined as the time required to start milk coagulation. The tests were done in triplicate and the results were expressed as renin units (UR). Where each minute required to coagulate the substrate will be equivalent to 400 RH. The coagulation of milk by the Achachairu peels exemplified in Figure 02 obtained a coagulation time of milk, on average 130 seconds, which is equivalent to 600 RH.

REIVINDICAÇÕES “PROCESSO DE OBTENÇÃO DE UM NOVO COAGULANTE DE LEITE A PARTIR DE CASCAS DE FRUTOS VERDES DE ACHACHAIRU (GARCINIA HUMILIS VAHL)”CLAIMS "PROCESS FOR OBTAINING A NEW MILK COAGULANT FROM ACHACHAIRU GREEN FRUIT SHELLS" (GARCINIA HUMILIS VAHL)

Claims (3)

1. Processo de obtenção de um novo coagulante de leite caracterizado por utilização de cascas de frutos verdes de achachairu (Garcinia humilis Vahl)1. Process for obtaining a new milk coagulant characterized by the use of green fruit husks from achachairu (Garcinia humilis Vahl) 2. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por obtenção de um novo coagulante em pó para leite a partir de cascas de frutos verdes de achachairu (Garcinia humilis Vahl)Process according to Claim 1, characterized in that a new milk powder coagulant is obtained from green fruit peels of achachairu (Garcinia humilis Vahl). 3. Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por obtenção de um novo coagulante em pó para leite a partir de cascas de frutos verdes de achachairu (Garcinia humilis Vahl) para uso industrial no âmbito alimentício.Process according to Claim 1, characterized in that a new milk powder coagulant is obtained from green fruit peels of achachairu (Garcinia humilis Vahl) for industrial use in the field of food.
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