BG2759U1 - Имуномодулиращ синбиотичен състав - Google Patents

Abstract

Полезният модел се отнася до имуномодулиращ синбиотичен състав, по-специално пробиотичен бактериален състав, допълнително обогатен с пребиотик и биологичнo активни вещества, повлияващи благотворно здравето на човека при профилактика и/или терапия на възпалителни и имунни заболявания на гастроинтестиналния тракт, в т.ч при симптоми на чревна дисбиоза и синдром на възпаленото черво. По-специално съставът включва пробиотична компонента от живи клетки на биологически чиста култура от бактериалените щамове Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLВ -06- НБПМК 8918, Lactobacillus helveticus LLH-108- НБПМК 8760, Lactobacillus acidophilus LLA-10- НБПМК 8242, Lactobacillus rhamnosus LLR-L1- НБПМК 8769 и Lactobacillus fermentum LLF-01- НБПМК 8781, пребиотик- арабиногалактан и коластра. Използваните щамове млечно-кисели бактерии са подбрани така, че в комбинация помежду си и с останалите компоненти- пребиотика и коластрата дават висока преживяемост, постигат специфичния пробиотичен ефект и гарантираната антимикробна активност срещу човешки патогени, както адхезионните и имуномодулиращите свойства на състава. Несмилаемите диетични растителни фибри от арабиногалактан, благодарение на своята имуномодулираща (антивирусна и антитуморна) активност, съчетано в синбиотичната формула формират защитен слой около пробиотиците и контролират тяхното освобождаване в чревния тракт. Обогатената мултифункционална формула на синбиотичния състав съгласно полезния модел, включваща богата на пролин полипептиди (4.5%) и съдържание на IgG (минимум 20%) коластра, доставя необходимите имунни, растежни фактори и балансирана комбинация от витамини и минерали.

Description

(54) ИМУНОМОДУЛИРАЩ СИНБИОТИЧЕН СЪСТАВ (57) Полезният модел се отнася до имуномодулиращ синбиотичен състав, по-специално пробиотичен бактериален състав, допълнително обогатен с пребиотик и биологично активни вещества, повлияващи благотворно здравето на човека при профилактика и/или терапия на възпалителни и имунни заболявания на гастроинтестиналния тракт, в т.ч. при симптоми на чревна дисбиоза и синдром на възпаленото черво. По-специално съставът включва пробиотична компонента от живи клетки на биологически чиста култура от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLB-06 - НБПМКК 8918, Lactobacillus helveticus LLH-108 - НБПМКК 8760, Lactobacillus acidophilus LLA-10 - НБПМКК 8242, Lactobacillus rhamnosus LLR-L1 - НБПМКК 8769 и Lactobacillus fermentum LLF-01 - НБПМКК 8781, пребиотик - арабиногалактан и коластра. Използваните щамове млечнокисели бактерии са подбрани така, че в комбинация помежду си и с останалите компоненти - пребиотика и коластрата, дават висока преживяемост, постигат специфичния пробиотичен ефект и гарантирана антимикробна активност срещу човешки патогени, както адхезионните и имуномодулиращите свойства на състава. Несмилаемите диетични растителни фибри от арабиногалактан, благодарение на своята имуномодулираща (антивирусна и антитуморна) активност, съчетано в синбиотичната формула формират защитен слой около пробиотиците и контролират тяхното освобождаване в чревния тракт. Обогатената мултифунк

2759 UI ционална формула на синбиотичния състав съгласно полезния модел, включваща богата на пролин полипептиди (4.5 %) и съдържание на IgG (минимум 20 %) коластра, доставя необходимите имунни, растежни фактори и балансирана комбинация от витамини и минерали.

претенции, 7 фигури

2759 UI (54) ИМУНОМОДУЛИРАЩ СИНБИОТИЧЕН СЪСТАВ

Област на техниката

Полезният модел се отнася до имуномодулиращ синбиотичен състав, по-специално включващ пробиотичен бактериален състав, допълнително обогатен с пребиотик и биологично-активни вещества, повлияващи благотворно здравето на човека при профилактика и/или терапия на възпалителни и имунни заболявания на гастроинтестиналния тракт в т.ч при симптоми на чревна дисбиоза и синдром на възпаленото черво.

Предшестващо състояние на техниката

Имунната система се явява сложна многокомпонентна система, състояща се от няколко подсистеми, които защитават организма на гостоприемника от инфекциозни агенти и туморни клетки. Имунната система осъществява контрола и е отговорна по подходящ начин да атакува патогенните агенти, да ги разпознава и отстранява от организма. Поддържайки придобития имунитет, имунната система непрекъснато повишава и имунния си отговор по отношение възможната бързина за унищожаване на чуждия антиген в организма.

От друга страна стомашно-чревният тракт съдържа богата флора от над 500 различни видове бактерии, важни за неговото здраве. При изменение на обичайното състояние на здравето, някои бактерии могат да се увеличат прекомерно и да предизвикат инфекции и отслабване на имунитета. Отслабването и дисбалансът на естествената защитна система може да позволи на потенциално патогенните микроорганизми да предизвикат клинични инфекции. Поддържането баланса на стомашно-чревния тракт е от особено значение за човека и той е отговорен за правилното функциониране и хранене на всяка клетка от организма. Млечнокиселите бактерии се явяват един инструмент за обогатяване на стомашночревния тракт с ползотворни бактерии.

Млечнокиселите бактерии, през последните години, се използват за превенция или съпътстващи лечението средства на имунни заболявания. Известно е от WO 2015/046407 профилактично средство под формата хранителен състав, и като медикамент, съдържащо млечнокисели бактерии, по-специално щамове Lactobacillus helveticus, предназначено за профилактика на имунни заболявания посредством инхибиране пролиферацията на имунните растежни клетки IL-10 / IL-12. (свързани с ентерит, ревматоиден артрит, имунни заболявания като хепатит).

Известен е също така от ЕР 2482826 състав, съдържащ арабиногалактан, предназначен за подпомагане на адаптивния имунен отговор срещу чужди антигени вследствие ваксиниране и прилаган под формата на функционални състави или диетични добавки.

Известен е още от RU 2 599 544 и сух таблетен състав на млечна основа за орално и/ или перорално приложение, съдържащ сухо обезмаслено мляко и/или суха суроватка, и/или суха лактоза от 20-50%; подслаждащи агенти от 10-30%; пълнители - сухи плодове от 5-20%; лифилизирани пробиотични култури, избрани от Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii и/или Bifidobacterium adolesescentis, и/ или Lactobacillus acidophilus, и/или Lactobacillus casei, и/или Lactobacillus rhamnosus общо от 0-20%; биологично активни вещества (БАВ) в т.ч. арабиногалактан и витаминен комплекс от 0-5%; олигозахариди от 0-20% и структурообразуващи вещества 0-5%.

От BG 65 614 е известен синбиотик, представляващ смес от монокултури Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Streptococcus thermophilus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum и инулин, и в даден случай пчелен прашец или пчелно млечице в описани количества.

Известен е също от CZ 28707 и млечен пробиотичен ферментирал продукт с положително въздействие върху реологията на продукта, съдържащ 1-10% коластра, 1-2% пробиотична култура от Bifidobacterium animalis subsp. lactis, Enterococcus faecium и L. acidophilus, 0,01-4% киселомлечна или сметаново-кефирна култура, 1 -7% пребиотик, избран от фруктоолигозахарид или инулин и до 100% козе/краве мляко.

Недостатък на описания млечен пробиотичен продукт е неговата недостатъчна биологична ценност на избраните пробиотични култури, както и недостатъчната им преживяемост при попадане в стомашно-чревния тракт.

Проблемът, който трябва да се реши е разширяване на асортиментите на функционалните

2759 UI млечни продукти, но и създаване на принципно нова форма на продукт с имуномодулиращо действие, който да обогатява и балансира стомашно-чревния тракт с млечнокисели бактерии със специфично пробиотично действие и с техните продукти от жизнената им дейност, както и същевременно да осигурява условия за развитие, намножаване и повишаване ефекта на пробиотика.

Техническа същност на полезния модел

Тези проблеми се решават съгласно полезния модел с имуномодулиращ синбиотичен състав - активна формула на основата на пробиотик, съдържащ живи клетки на биологически чиста култура от бактериален щам на:

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLB-06-НБПМКК 8918,

Lactobacillus helveticus LLH-108-НБПМКК 8760,

Lactobacillus acidophilus LLA-10- НБПМКК 8242,

Lactobacillus rhamnosus LLR-L1-НБПМКК 8769 и

Lactobacillus fermentum LLF-01-НБПМКК, както и пребиотик под формата на несмилаеми диетични фибри - полизахаридът арабиногалактан и първично мляко, отделяно от женските бозайници по време на лактация - коластра, където количеството в mg на компонентите, е съответно:

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLB-06-НБПМКК 8918 от 30 до 120 mg;

Lactobacillus helveticus LLH-108-НБПМКК 8760 - от 55 до 220,

Lactobacillus acidophilus LLA-10-НБПМКК 8242 - от 55 до 220,

Lactobacillus rhamnosus LLR-L1-НБПМКК 8769 - от 55 до 220,

Lactobacillus fermentum LLF-01-НБПМКК 8781 - от 55 до 220,

Арабиногалактан - от 100 до 400 и Коластра - от 50 до 200.

Прилага се по 2 капсули/таблети или 1 саше за доза от един до два пъти дневно. Употребата може да бъде неограничено време. Съхранява се на хладно и сухо място.

Предназначен за профилактика и/или съпътстващ терапията на възпалителни и имунни заболявания на гастроинтестиналния тракт (имуномодулатор на ниво мукозна имунна система и вродена имунна система), както и за нормализиране и балансиране функцията на стомашно-чревния тракт в т.ч. след продължителен прием на антибиотици, при симптоми на чревна дисбиоза и синдром на възпаленото черво.

Предимствата на полезния модел се основават на свойствата на използваните щамове млечно-кисели бактерии, (в т.ч. самостоятелно на новоизолираните), подбрани така, че в комбинация помежду си и в комбинация с останалите компоненти - пребиотика и коластрата, да дават висока преживяемост, да постигат специфичния пробиотичен ефект и гарантирана антимикробна активност срещу човешки патогени, адхезионни и имуномодулиращи свойства. Мултибактериалната формула комбинира по уникален начин щамове с: - широк спектър на антимикробна активност, като ги прави естествени антагонисти на потенциални патогенни бактерии; - добра транзитна толерантност, като позволява на щамовете да преживеят пасажа през различните отдели на гастроинтестиналния тракт и да достигнат жизнени и активни до тяхното прицелно място на действие в долните отдели на тънките черва; и - висока адхезионна способност, като гарантира трайно колонизация на чревния тракт и взаимодействие на микроорганизмите с мукозната повърхност, както и осигурява имуномодулиращата им активност.

Несмилаемите диетични растителни фибри от арабиногалактан, благодарение на своята имуномодулираща (антивирусна и антитуморна) активност, съчетано в синбиотичната формула формират защитен слой около пробиотиците и контролират тяхното освобождаване в чревния тракт. Обогатената мултифункционална формула на синбиотичния състав съгласно полезния модел, включваща богата на пролин полипептиди (4.5%) и съдържание на IgG (минимум 20%) коластра, доставя необходимите имунни, растежни фактори и балансирана комбинация от витамини и минерали.

Полученият състав съгласно настоящия полезен модел е с висока активност в границите от 10⁸ до 10¹⁰ CFU бактерии/g от състава и трайност на готовия продукт до 24 месеца. Прилаганият орално синбиотичен състав при здрави хора, демонстрира имуномодулиращ ефект като повишава % на активираните (natural killer) NK клетки в периферната кръв и понижава

2759 UI нивата на противовъзпалителни цитокини (IL-6 и IFN-y) във фекални проби, а при пациенти със синдром на раздразненото черво (IBS), намалява възпалителната активност, изразена в намаляване на фекалния калпротектин и предизвиква редукция или дори изчезване на клиничната симптоматика.

Пояснение на приложените фигури

Фигура 1 - преживяемост на щамове лактобацили в симулиран чревен сок;

фигура 2 - адхезионната способност на щамове лактобацили спрямо човешка колоректална аденокарциномна клетъчна линия НТ-29 (ААСС НТВ 38);

фигура 3 - имуномодулираща активност на монокултурите по отношение на TNF-α, получена от Balb/c мишки;

фигура 4 - имуномодулираща активност на монокултурите по отношение на IL-6, получена от Balb/c мишки;

фигура 5 - имуномодулираща активност на монокултурите по отношение на IL-10, получена от Balb/c мишки;

фигура 6 - имуномодулираща активност по отношение секрецията на TNF-α, IL-6 и IL-10, получени от Balb/c мишки на пробиотичния състав и синбиотичния състав;

фигура 7 - фекален калпотротектин (ФКП) на синбиотичния състав при пациенти със синдром на раздразненото черво (IBS).

Примери за изпълнение на полезния модел

Пример 1

Състав на активната формула на основата на пробиотик, съдържаща петте активни монокултури.

Активната бактериална смес в една доза съдържа следните компоненти: сух лиофилизат активни монокултури на пет щама лактобацили в mg както следва:

Компонент/ пример Активна бактериална смес	1.С.1.	1.C.2	1.C.3	1.C.4
Lactobacillus delbrueckii subsp.	30	60	75	120
bulgaricus LLB -06- НБПМК 8918 Lactobacillus helveticus LLH-108- НБПМК 8760	55	110	137.5	220
Lactobacillus acidophilus LLA-10- НБПМК 8242	55	110	137.5	220
Lactobacillus rhamnosus LLR-L1- НБПМК 8769	55	110	137.5	220
Lactobacillus fermentum LLF-01- НБПМК 8781	55	110	137.5	220
Общо/mg	250	500	625	1000

Всяка една от петте монокултури от лактобацилите се култивира поотделно, като за целта се приготвят необходимите хранителни среди, характерни за дадения щам и вид, след което същите се лиофилизират и смилат.

Култивирането на всяка монокултура протича в предварително приготвена течна хранителна среда (културална среда), към която са разтворени и ресуспендирани основните компоненти, стимулиращи ферментационния процес на съответната монокултура.

Получаване на чиста култура от Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLB-06-НБПМКК 8918 и Lactobacillus helveticus LLH-108-НБПМKK 8760.

100 1 възстановено сухо обезмаслено мляко /14% сухо вещество/ с добавка на 0.1% дрождев екстракт и 2.0 1 буферно активираща смес, представляваща воден разтвор на CH₃COONa, КН₂РО₄, Na₂HPO₄, MgSO₄, MnSO₄, и дрождевия екстракт се стерилизират при 107°С за 3 min. Средата се охлажда до 37°С и се инокулира с 4 1 опреснена лабораторна култура. Инкубира се във ферментор при 37°С в продължение на 16 h при pH 5,6 - 5,7 при автоматичен режим. Получената култура се охлажда до 4°С, смесва се с 10 1 протектираща среда, съдържаща 10% сухо обезмаслено мляко, 10% захароза и се ли45 офилизира. Получената суха култура се смила и се съхранява на -20°С до момента на смесване.

Получаване на чиста култура от Lactobacillus rhamnosus LLR-Ll-НБПМКК 8769, Lactobacillus acidophilus LLA-10-НБПМКК 8242 и Lactobacillus ₅₀ fermentum LLF-01-НБПМКК 8781.

100 1 възстановено сухо обезмаслено мляко /14% сухо вещество/ с добавка на 0.1% дрождев

2759 UI екстракт, 0.1%(w/v) MRS бульон и 2.01 буферно активираща смес, представляваща воден разтвор на CH₃COONa, КН₂РО₄, Na₂HPO₄, MgSO₄, MnSO₄ и дрождев екстракт се стерилизират при 107°СзаЗ min. Средата се охлажда до 37°С и се инокулира с 41 опреснена лабораторна култура. Инкубирасе във ферментор при 37°С в продължение на 16 h при pH 5.6 - 5.7 при автоматичен режим. Получената култура се охлажда до 4°С, смесва се с 101 протектираща среда, съдържаща 10% сухо обезмаслено мляко, 10% захароза и се лиофилизира. Получената суха култура се смила и се съхранява на -20°С до момента на смесване.

Всеки бактериален щам на пробиотика от $ състава притежава активност в границите от 10⁸ до 10¹⁰CFU бактерии/g.

Пример 2

Примерен синбиотичен състав в една доза IQ на капсули, съдържащ активната формула на основата на про, -пребиотик и коластра в mg както следва:

Компонент/ пример Синбиотичен състав	2.1.	2.2	2.3	2.4
Lactobacillus delbrueckii subsp.	30	60	75	120
bulgaricus LLB -06- НБПМК8918
Lactobacillus helveticus LLH-108- НБПМК8760	55	110	137.5	220
Lactobacillus acidophilus LLA-10- НБПМК8242	55	110	137.5	220
Lactobacillus rhamnosus LLR-L1- НБПМК 8769	55	110	137.5	220
Lactobacillus fermentum LLF-01- НБПМК 8781	55	110	137.5	220
Arabinogalactans (от Larix gmelinii)	100	200	250	400
Коластра ASP60-201-	50	100	125	200
(от крава, съдържаща мин. 20 % IgG
и мин. 4.5 % PRPs)
Общо/ mg	400	800	1000	1600

Получената многокомпонентна смес от лиофилизираните монокултури се смесва с останалите компоненти от пребиотика арабиногалактан и коластрата в съотношения съгласно настоящия полезен модел, хомогенизира се и е подходяща за дозиране на необходимата орална форма. Полученият състав се разпределя в стомашноустойчиви веган капсули, избрани от DR caps

Компонент/ пример

ТМ, Capsugel, предназначени за орален прием.

Всяка капсула съдържа 250 млн. живи бактерии към момента на производство, полученият 3 5 състав е стабилен със срок на годност 24 месеца.

Пример 3

Синбиотичен състав на готов продукт, лиофилизирана култура за 1000 g готов продукт в g, както следва:

Синбиотичен състав

3.1.

Lactobacillus delbrueckii subsp.75 bulgaricus LLB -06-NBIMCC 8918

Lactobacillus helveticus LLH-108- НБПМК 8760137.5

Lactobacillus acidophilus LLA-10- НБПМК 8242137.5

Lactobacillus rhamnosus LLR-L1- НБПМК 8769137.5

Lactobacillus fermentum LLF-01- НБПМК 8781137.5

Arabinogalactans (Ametis JSC, от Larix gmelinii)250

Коластра ASP60-201-125 (от крава, съдържаща мин. 20 % IgG и мин. 4.5 % PRPs

2759 UI

Пример 4

4.a. Резултати от проведените изпитвания върху активните монокултури лактобацили.

Щамове лактобацили са изпитани за: - антимикробна активност, - преживяемост в симулиран чревен сок, - In vitro адхезия към човешка клетъчна линия и - имуностимулираща активност, като изявилите се рекордьори от всички изпитвани щамове са представени съответно на фигури 1 - 5 и са селектирани за синбиотичния състав съгласно настоящия полезен модел.

Преживяемостта на отделните щамове е доказана в симулиран чревен сок, като активност с брой клетки в началото на изпитването и след 2 h в 0.3% жлъчни соли - pH 7, резултатите са представени на фигура 1.

Антимикробната активност е представена на таблица 1 и изпитвана срещу човешки патогени Staphylococcus aureus, Escherichia coli и Candida albicans по метода на ямките c две моделни системи бульон и мляко с кисели (А) и неутрализирани (N) безклетъчни супернатанти от експоненциални култури лактобацили, като индикираните резултати с (++) - проявяват силна инхибиция, а (+) - значима и (-) - липса на инхибиция.

Адхезионната способност на монокултурите е тествана спрямо човешка колоректална аденокарциномна клетъчна линия НТ-29 (ААСС НТВ 38), като е направено количествено определяне на броя адхезирали клетки cfu/ml на рекордьорите Lactobacillus helveticus LLH-108 и Lactobacillus fermentum LLF-01, чиято висока адхезия ги определя като потенциални колонизатори на чревния тракт. Резултатите са представени на фигура 2.

Имуномодулиращите свойства на монокултурите са подложени на тест за сравнителна имуномодулираща активност по отношение секрецията на цитотоксични сигнални пептиди от спленоцити по отношение на TNF-α, 1L-6 и IL-10, получени отВа1Ь/с мишки, съгласно съответно фигура 3-5. Намаляването на секрецията на противовъзпалителните цитокини TNF-α и 1L-6, и стимулиране секрецията на антивъзпалителния цитокин 1L-10 влияе в посока на локалния имунен толеранс и благоприятства чревната микросреда, която е непрекъснато под атака на различни хранителни антигени и микроорганизми. За определянето са използвани топлинно инактивирани клетки, получени от експоненциална култура на съответните лактобацили.

Убити клетки с определена концентрация (1 xl 0⁸ cfu/ml) се инкубират съвместно със спленоцити, изолирани от далаци на Balb/c мишки (на възраст 6-8 седмици) за 20 h / 37°С. Супернатантите, получени при третиране на спленоцитите са използвани за определяне концентрацията на произведените цитокини TNF-α, IL-6 и IL-10, посредством ензимен имуноанализ (ELISA kits).

4.6. Резултати от тестовете на активната пробиотична компонента и активната пробиотична компонента с добавен арабиногалактан и коластра.

Получената пробиотична компонента, съдържаща смес от петте щама лактобацили, както и пробиотичната компонента с добавен арабиногалактан и коластра, получени съответно съгласно полезния модел (пример 1 пример 2) са подложени на тест за сравнителна имуномодулираща активност по отношение секрецията на цитотоксични сигнални пептиди от спленоцити по отношение на TNF-α, IL-6 и IL-10, получени от Balb/с мишки, съгласно фигура 6. Добавянето на арабиногалактан и коластра съществено понижава синтезата на противовъзпалителния цитокин 1L-6 в сравнение с чистия пробиотик.

Определянето на имуномодулиращите свойства на пробиотичната компонента и синбиотичната смес е проведено както по-горе при оценката на отделните монокултури. Лактобацилите в пробиотичната компонента са представени в еднакво съотношение.

4.в. Резултати от тестовете на синбиотичния състав съгласно полезния модел върху здрави хора, доказващи имуномодулиращ ефект.

Полученият синбиотичен продукт, дозиран в капсули съгласно полезния модел, съдържащ 5 -те щама лактобацили, арабиногалактан и коластра е тестван по отношение следните компоненти на имунната система - естествени клетки убийци (NK) в периферното кръвообращение, тест върху противовъзпалителни цитокини IL-6 и IFN-γ във фекални проби при 20 здрави доброволци (7 мъже и 13 жени) на средна възраст 35±2 (19-66) години след 21-дневен прием на синбиотичния състав при режим на приемане 2 капсули / 400 mg сутрин и 2 капсули / 400 mg вечер. Кръвните проби са тествани за тотални и активирани NK клетки посредством цитометрия (FACS Calibur, BD, USA) c моноклонални антитела (анти CD3 FITC, анти-CD 16/56 РЕ, анти-HLA-DR

2759 UI

PE Cy5, BD, USA). 1 g от фекалните проби се хомогенизират в 1000 ml фосфатен буфер. Получените супернатанти от фекалните екстракти след центрофугиране са тествани за наличие на цитокините IL-6 и IFN-γ посредством ензимен имуноанализ (Human ELISA kits, Gen Probe Diaclone SAS, FR). Резултатите преди и след прием насинбиотичния състав по отношение NK клетки са представени в табл. 2, а цитокините IL-6 и IFN-γ, като концентрация в pg/ml са представени съответно на таблица 3. Прилагането на синбиотичния продукт отчита имуномодулиращ ефект след орален прием на синбиотика съгласно настоящото описание, изразен в статистически достоверното повишаване % на NK клетки в периферната кръв и понижаване на нивата на противовъзпалителните цитокини IL-6 и IFN-γ във фекалните проби.

4.с. Резултати от тестовете на синбиотичния състав съгласно полезния модел върху пациенти със синдром на раздразненото черво (IBS).

Полученият синбиотичен продукт, дозиран в капсули съгласно полезния модел, съдържащ 5-те щама лактобацили, арабиногалактани и коластра е тестван по отношение компоненти те на имунната система - маркера за оценка на чревното възпаление - фекален калпотротектин (ФКП) от фекални проби при 20 пациенти с IBS (6 мъже и 14 жени) на средна възраст 37±2 (24-52) години след 21-дневен прием на синбиотичния състав при режим на приемане 2 капсули / 400 mg сутрин и 2 капсули / 400 mg вечер.

ФКП е изследван чрез имунохроматографски тест за количествено определяне на калпротектин в човешки фекални проби (Quantum Blue, Buehlmann Laboratories AG, Switzerland). Крайният резултат се представя в микрограма на грам фецес (pg/g). Чувствителността на теста е в границите 30 pg/g - 300 pg/g. Нормалните нива на ФКП при това изследване са под 50 pg/g с посочване на „сива зона“ до 60 pg/g.

Резултатите преди и след прием на синбиотичния състав съгласно описанието по отношение ФКП са представени съответно на фигура 7, като е отчетено статистически достоверно намаляване на възпалителната активност след приема на синбиотика, изразено в намаляване на ФКП и редукция, дори изчезване на клиничната симптоматика.

2759 UI

Табл. 1 Антимикробна активност на активните монокултури

Табл. 2 Имуномодулиращ ефект на синбиотичния състав съгласно изобретението върху здрави хора по отношение NK клетки

. Здрави	ПН.ДПВИ. U1
	Предо прием на синбнотик	; След прием на ! ' синбнотик :	Статистическа разлика, р
Общ процент на i NK клетки ;	1б.1±1.2 (8.1-25.5)	; 14.6±1.2 : ; (5.1-25.7) j	0.073
Активирани NK клетки носещи (HLADR+)	4.9±0.6 (1.3-9.9)	\ ΊΛ±Ο.Ί Ϊ ; (2.6-13.5) ί	0.03

Табл.З Имуномодулиращ ефект на синбиотичния състав съгласно изобретението върху здрави хора по отношение IL-6 и IFN-y

Здрави индивиди
	Преди прием на синбнотик	След прием на синбнотик	; Статистическа ί разлика, р
1L-6, pg/ml	5.6=0.2 (3.9-6.75)	3.U0.1 (2.3-5.5)	i 0.000
IFNg, pg/ml	73.2=2.6 (55.5-92.5)	43.6±3.9 (2S.3-99)__________________	• 0.000

Claims (4)

1. Имуномодулиращ синбиотичен състав, съдържащ пробиотик, пребиотик и коластра, характеризиращ се с това, че съдържа /в mg/ пробиотична компонента, състояща от живи клетки на биологически чиста култура от бактериалните щамове:

Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus LLB-06-НБПМКК 8918 - от 30 до 120,

Lactobacillus helveticus LLH-108-НБПМКК 8760 - от 55 до 220,

Lactobacillus acidophilus LLA-10-НБПМКК 8242 - от 55 до 220,

Lactobacillus rhamnosus LLR-Ll-НБПМКК 8769 - от 55 до 220 и

Lactobacillus fermentum LLF-01-НБПМКК

8781 - от 55 до 220, като пребиотикът е арабиногалактан - от 100 до 400, а коластрата - от 50 до 200.

2. Имуномодулиращ синбиотичен състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че арабиногалактанът е получен от кора на сибирска лиственица - Larix gmelinii.

3. Имуномодулиращ синбиотичен бактериален състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че коластрата съдържа поне 4.5% пролин-съдържащи пептиди и поне 20% IgG.

4. Имуномодулиращ синбиотичен бактериален състав съгласно претенции от 1 до 3, характеризиращ се с това, че пробиотичната компонента притежава активност в границите от 10⁸ до 10¹⁰ CFU бактерии/g от състава.