<EMI ID=1.1>
et leur application comme médicaments.
La présente invention a pour objet de nouveaux dérivés de la tetrahydro-équinocandine B, leur préparation et leur application en thérapeutique, à titre de principes actifs de médicaments.
L'invention concerne plus particulièrement les composés répondant à la formule I
<EMI ID=2.1>
dans laquelle
m signifie 0 ou un nombre entier de 1 à 4 inclus,
<EMI ID=3.1>
de 1 à 12 atomes de carbone, un groupe cycloalkyle contenant de 3 à 7 atomes de carbone, un groupe alkyle contenant de
1 à 3 atomes de carbone substitué par un groupe cycloalkyle contenant de 3 à 7 atomes de carbone, un groupe hydroxyéthyle, un groupe alcoxyéthyle contenant de 3 à 6 atomes de carbone, un groupe furylméthyle ou tétrahydrofurylméthyle,
ou encore un groupe phényle ou un groupe phénylalkyle contenant de 7 à 10 atomes de carbone, dont les noyaux benzéniques portent éventuellement un ou deux substituants choisis parmi les atomes de fluor, de chlore et de brome, le groupe hydroxy et les groupes alkyle et alcoxy contenant de 1 à 4 atomes de carbone, ces substituants devant être identiques lorsqu'ils sont au nombre de deux, et
R2 représente un atome d'hydrogène ou un groupe alkyle contenant
de 1 à 4 atomes de carbone, ou bien
<EMI ID=4.1>
fie l'hydrogène ou un groupe alkyle contenant de 1 à 4 atomes de carbone, et
<EMI ID=5.1>
<EMI ID=6.1>
<EMI ID=7.1>
et les sels que ces composés forment avec des acides minéraux ou organiques.
Le symbole m désigne de préférence 0 ou le nombre 1.
<EMI ID=8.1>
kyle, cycloalkylalkyle, hydroxyéthyle, alcoxyéthyle ou, en
<EMI ID=9.1>
présente de préférence un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle.
<EMI ID=10.1>
contient de préférence de 1 à 9 atomes de carbone, en particulier de 1 à 6 atomes de carbone, et est avantageusement à chaîne droite ou ramifiée en a. Tout autre groupe alkyle représenté
<EMI ID=11.1>
atomes de carbone, en particulier un seul. Lorsque R. représente ou contient un groupe cycloalkyle, celui-ci contient de préférence 3, 5 ou 6 atomes de carbone.
Pour préparer les composés de formule I conformément au procédé de l'invention, a) on condense le composé de formule III
<EMI ID=12.1>
dans laquelle R3 a la signification, déjà donnée, avec des composés de formule IV
<EMI ID=13.1>
<EMI ID=14.1>
données.
La réaction peut être effectuée en présence d'un
<EMI ID=15.1>
fonique ou méthanesulfonique, ou d'un acide minéral, comme par exemple l'acide chlorhydrique. On utilise de préférence de 8 à 20 moles du composé de formule IV par mole de composé de formule III. On opère de préférence dans un solvant polaire aprotique tel que le diméthylformamide.
<EMI ID=16.1> formule V
<EMI ID=17.1>
<EMI ID=18.1>
senter un groupe phényle ou phénylalkyle substitués par un ou deux atomes d'halogène, R6 représente un groupe de formule II'
<EMI ID=19.1>
<EMI ID=20.1> atomes de carbone réunis par une double liaison présentent la configuration cis, et R7 représente un reste susceptible d'être éliminé sous les conditions d'une hydrogénolyse, ce qui donne les composés de formule la
<EMI ID=21.1>
dans laquelle m, Ri et R- ont les significations déjà données.
On peut effectuer la réaction selon les méthodes habituellement utilisées pour une hydrogénolyse ménagée, en présence d'un catalyseur. Comme catalyseur approprié, on peut
<EMI ID=22.1>
groupe benzyloxycarbonyle convient particulièrement bien. On opère avantageusement dans un mélange d'éthanol et d'acide acétique.
c) On soumet à une alkylation réductrice des composés de formule VI
<EMI ID=23.1>
<EMI ID=24.1>
<EMI ID=25.1>
données, ce qui donne les composés de formule Ib
<EMI ID=26.1>
dans laquelle m et R-. ont les significations déjà données
<EMI ID=27.1>
peut pas représenter un atome d'hydrogène et doit posséder un atome de carbone en a ayant au moins un atome d'hydrogène,
<EMI ID=28.1>
de 1 à 4 atomes de carbone, dont l'atome de carbone en a porte au moins un atome d'hydrogène.
La réaction peut être effectuée selon les méthodes habituellement utilisées pour une alkylation réductrice d'une amine au moyen d'une cétone ou d'un aldéhyde. On opère par exemple par hydrogénation en présence d'un catalyseur tel que le palladium sur charbon ou l'oxyde de platine, avantageusementdans un solvant inerte, comme par exemple l'éthanol ou un mélange d'éthanol et d'acide acétique. Pour préparer des composés de formule Ib portant des atomes d'halogène comme substituants, on utilise de préférence le cyanoborohydrure de sodium en opérant par exemple dans le méthanol. En utilisant un excès de la cétone ou de l'aldéhyde appropriés, il est possible de transformer directement un composé de formule VI
<EMI ID=29.1>
opératoire convient particulièrement bien pour préparer les composés diméthylés.
Afin d'éviter la scission du cycle peptidique de la tétrahydro-équinocandine B, il convient d'effectuer les procédés décrits ci-dessus ainsi que le traitement ultérieur des produits obtenus, sous des conditions ménagées, par exemple en milieu neutre ou faiblement acide. Tous les procédés sont de préférence effectués à une température comprise entre -10 et
50[deg.], en particulier entre 0 et 20[deg.].
Les composés de formule I sont avantageusement isolés sous forme de leurs acétates, qu'on peut ensuite transformer en sels d'addition d'acides minéraux tels que le chlorhydrate, ou en bases libres, selon les méthodes habituelles. Ces bases libres peuvent être transformées en sels d'addition d'acides et inversement, selon les méthodes connues.
Les composés de formule V, utilisés comme produits de départ sous b), peuvent être préparés par réaction des composés de formule VII
<EMI ID=30.1>
dans laquelle m, R et R7 ont les significations déjà données, avec des composés de formule VIII
R6H (VIII) dans laquelle R6 a la signification déjà donnée. On peut opérer comme décrit sous a).
Le composé de formule III, utilisé comme produit de départ sous a), est connu. Il s'agit de la tétrahydro-équinocandine B qui est décrite dans le brevet belge n[deg.] 834 289 sous la dénomination tétrahydro-SL 7810/F.
Lorsque la préparation des produits de départ n'est pas décrite, ceux-ci sont connus ou peuvent être préparés selon des méthodes connues ou analogues à celles décrites dans la présente description, à partir de composés connus.
Les exemples suivants illustrent la présente invention sans aucunement en limiter la portée. Les températures sont exprimées en degrés centigrades et sont données non corrigées. Par vide poussé, il faut entendre environ 0,01 mm Hg. Toutes les proportions relatives à des mélanges de solvants sont
S
exprimées en parties en volume; les autres proportions sont des rapports pondéraux. Sauf indication contraire, les produits finals sont séchés sous pression réduite à la température ambiante, pendant 15 heures.
Exemple 1
Ether 2-aminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B a) A une solution de 21,32 g de tétrahydro-équinocandine B dans 180 ml de diméthylformamide, on ajoute sous agitation
39 g de chlorhydrate de 2-aminoéthanol et 33,2 ml d'une solution anhydre d'acide chlorhydrique dans du diméthylformamide, contenant 1,46 g d'acide chlorhydrique. On agite ce mélange pendant 7 heures et demie, puis on le neutralise par addition de 35 ml
<EMI ID=31.1>
mélange à siccité sous pression réduite à 60[deg.] et on reprend le résidu d'évaporation dans 100 ml de méthanol à 30-35[deg.]. On fait passer ce mélange à travers une colonne de 1,2 kg de Sêphadex
<EMI ID=32.1>
produit dans un mélange à parts égales de chloroforme et de méthanol, on ajoute 40 g de gel de silice et on évapore. On chromatographie le résidu d'évaporation sur colonne en utilisant, comme éluant, un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau dans le rapport 80:17,5:2 additionné de 0,5% d'acide acétique. On obtient ainsi l'acétate du composé du titre.
b) Sous refroidissement à la glace, on traite l'acétate dans 20 ml de méthanol avec environ 30 ml d'une solution éthérée <EMI ID=33.1>
soit faiblement acide. On ajoute 400 ml d'éther, on filtre le précipité qui s'est formé et, après lavage avec de l'éther, on le sèche à la température ambiante pendant 15 heures sous vide poussé, ce qui donne le composé du titre sous forme de son
<EMI ID=34.1>
le méthanol).
c) Pour préparer le composé du titre à l'état libre, on agite pendant une heure 120 g de l'acétate obtenu sous a) dans 250 ml d'eau et 500 ml d'un mélange de chloroforme et d'isopropanol dans le rapport 7:3. On ajoute à ce mélange 450 ml <EMI ID=35.1>
phase organique. On extrait la phase aqueuse à 4 reprises avec
500 ml d'un mélange de chloroforme et d'isopropanol dans le rapport 7:3. On réunit les phases organiques, on les sèche sur sulfate de sodium et on les évapore à siccité. On reprend le résidu d'évaporation dans 300 ml de méthanol et on ajoute goutte à goutte 3 litres d'éther, ce qui fait précipiter le composé du titre à l'état de base libre, sous forme d'une poudre amorphe incolore qu'on laisse sécher pendant 15 heures
<EMI ID=36.1>
Exemple 2
Ether 2-(l-pyrrolidinyl)éthylique de la têtrahydroëquinocandine B
A une solution de 11,5 g de 1-(2-hydroxyéthyl)pyrrolidine dans 500 ml de dioxanne on ajoute sous agitation 20 g d'hydrate
0 d'acide p-toluènesulfonique et 100 g de tamis moléculaire (Merck 4 A). Après 30 minutes, on sépare le tamis moléculaire par filtration et on traite le filtrat par 10,63 q de tétrahydroéquinocandine B. Trois heures après, on neutralise le mélange et on le traite comme décrit à l'exemple 1, ce qui donne le chlorhydrate du composé du titre sous forme d'une poudre
<EMI ID=37.1>
méthanol).
Exemple 3
Ether 2-aminoéthylique de la tëtrahydro-équinocandine B a) On hydrogène pendant une heure une suspension de
400 mg de charbon palladié à 10% dans un mélange d'éthanol et d'acide acétique dans le rapport 9:1. On ajoute à cette suspension une solution de 4 g d'éther 2-(benzyloxycarbonylamino) éthylique de la tétrahydro-équinocandine B dans 50 ml d'un mélange d'éthanol et d'acide acétique dans le rapport 9:1. On hydrogène ce mélange à 20[deg.] pendant 5 heures sous la pression normale. On élimine le catalyseur par filtration et on évapore le filtrat, ce qui donne le composé du titre sous forme d'acétate. b) A 3,8 g de l'acétate obtenu ci-dessus dans 20 ml de méthanol on ajoute à 0[deg.] 12 ml d'une solution éthanolique d'acide chlorhydrique contenant exactement 99 mg d'acide chlorhydrique.
On ajoute à ce mélange 500 ml d'éther afin de faire précipiter le composé du titre sous forme de chlorhydrate. Après filtration, lavage avec de l'éther et séchage pendant
16 heures, on obtient le chlorhydrate du composé du titre sous forme d'une poudre amorphe incolore fondant à 200-203[deg.];
<EMI ID=38.1>
Pour préparer le composé de départ, on procède comme décrit ci-après:
On traite une suspension de 10,8 g de tétrahydroéquinocandine B dans 100 ml de dioxanne par 9,95 g de 2-
(benzyloxycarbonylamino)éthanol et 300 mg d'acide p-tcluènesulfonique. On agite ce mélange pendant 2 heures à la température ambiante, on le dilue avec 100 ml d'éther et on ajoute
un litre d'hexane. On filtre le précipité qui s'est formé et on le reprend dans 500 ml d'un mélange de chloroforme et d'isopropanol dans le rapport 7:3. On lave la phase organique
à trois reprises avec 100 ml d'eau, on la sèche sur sulfate de sodium et on l'évapore à siccité. On chromatographie le résidu d'évaporation sur gel de silice en utilisant, comme éluant, un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau dans le rapport
80:17,5:2, puis on le rechromatographie sur gel de silice en utilisant, comme éluant, un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau dans le rapport 88:11:1, ce qui donne l'éther 2-(benzyloxycarbonylamino)éthylique de la tétrahydro-équinocandine B.
Exemple 4
Ether 2-aminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B
On hydrogène 0,92 g d'éther 2-(benzyloxycarbonylamino)
<EMI ID=39.1>
(c = 0,705 dans le méthanol)1 dans 10 ml d'un mélange d'éthanol et d'acide acétique dans le rapport 9:1, en présence de 100 mg de charbon palladié à 10%, en procédant comme décrit à l'exemple 3. On filtre le produit obtenu et on l'évapore à
�
siccité. On traite le résidu par 5 g de gel de silice et on
le chromatographie sur une colonne de gel de silice en utilisant, comme éluant, un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau
<EMI ID=40.1>
obtient ainsi le composé du titre sous forme d'acétate. On peut convertir ce dernier en chlorhydrate et en base libre en procédant comme décrit à l'exemple 1 sous b) et c).
Exemple 5
Ether 3-isopropylaminopropylique de la tétrahydroéquinocandine B
On hydrogène pendant une heure une suspension de
600 g d'oxyde de platine dans 60 ml d'éthanol. On y ajoute ensuite une solution de 6,5 g d'acétate de l'éther 3-aminopropylique de la tétrahydro-équinocandine B (voir exemple 8) dans
20 ml d'acétone et 60 ml d'éthanol. On hydrogène ce mélange pendant 6 heures à 20[deg.] et sous la pression atmosphérique. On élimine le catalyseur par filtration et on évapore le filtrat
à siccité. On traite le résidu d'évaporation par 15 g de gel de silice, on le dispose sur une colonne de gel de silice et on élue avec un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau
dans le rapport 80:17,5:2 additionné de 0,5% d'acide acétique, ce qui donne le composé du titre sous forme d'acétate. On peut convertir l'acétate en chlorhydrate amorphe, comme décrit à
<EMI ID=41.1>
(c = 0,645 dans le mêthanol).
Exemple 6
Ether 2-diméthylaminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B
On hydrogène pendant une heure 500 mg de charbon palladié à 10% dans 50 ml d'un mélange d'éthanol et d'acide acétique dans le rapport 9:1. On ajoute à ce mélange une solution de 5 g d'acétate de l'éther 2-aminoêthylique de la tétrahydro-équinocandine B [voir exemple 1 a)] dans 50 ml d'un mélange d'éthanol et d'acide acétique dans le rapport 9:1 et
17,2 ml d'une solution à 35% de formaldéhyde. On hydrogène
ce mélange pendant 18 heures à 20[deg.], sous la pression atmosphérique. On élimine le catalyseur par filtration, on évapore le
ni filtrat et on traite le résidu d'évaporation par- 10 g de gel de silice. On le place ensuite sur une colonne de gel de silice et on élue avec un mélange de chloroforme, de méthanol et d'eau dans le rapport 65:30:5 additionné de 0,5% d'acide acétique, ce qui donne le composé du titre sous forme d'acétate. On transforme ensuite l'acétate en chlorhydrate amorphe, en procédant comme décrit à l'exemple 3 b). Ce dernier
<EMI ID=42.1>
Exemple 7
Ether 2-(o-chlorobenzylamino)éthylique de la tétrahydroéquinocandine B
On ajoute 315 mg de cyanoborohydrure de sodium à une solution de 5,85 g d'acétate de l'éther 2-aminoéthylique
<EMI ID=43.1>
déhyde dans 125 ml de méthanol. On agite ce mélange pendant 2 heures, puis on l'évapore sous pression réduite à la température ambiante. On chromatographie le résidu d'évaporation sur gel de silice et on le traite comme décrit à l'exemple 5, ce qui donne le composé du titre sous forme de chlorhydrate
<EMI ID=44.1>
méthanol).
En procédant comme décrit aux exemples prédécents, on peut préparer les composés de formule I du tableau I suivant
TABLEAU I
<EMI ID=45.1>
1) préparé comme décrit à l'un quelconque des exemples 1 à 4
2) préparé comme décrit à l'un quelconque des exemples 1 à 6
3) préparé comme décrit à l'un quelconque des exemples 1, 2, 5
et 6.
Les composés de formule I et leurs sels n'ont pas été décrits jusqu'à présent dans la littérature. Ils se signalent par d'intéressantes propriétés pharmacodynamiques, notamment par une action antimycotique.
Alors que sous les conditions habituelles les composés de formule I s'avèrent sans effet ou au plus faiblement efficaces contre les représentants habituels des souches bactériennes Gram positives et Gram négatives, ils présentent une remarquable action contre les levures et les champignons inférieurs, en particulier contre différentes souches de l'espèce Candida, pathogènes pour l'homme.
<EMI ID=46.1>
males des composés de formule I contre différents champignons et levures. Les essais de dilution en série utilisés pour ces déterminations ont été effectués selon les méthodes habituelles, avec un facteur de dilution de 2. Dans ces essais, l'incubation est pratiquée dans un mélange de glucose et de milieu de Sabouraud de pH 6,8, à 30[deg.]. On évalue les résultats après 48 heures d'incubation pour les levures et les moisissures et après 7 jours pour les dermatophytes. A titre d'exemple, on a rassemblé dans le tableau IV suivant les résultats obtenus
avec l'éther 2-aminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B contre un certain nombre de souches.
TABLEAU IV
<EMI ID=47.1>
<EMI ID=48.1>
Candida albicans a également été mise en évidence in vivo dans l'essai de l'infection expérimentale de l'intestin chez la souris femelle. Selon cette méthode, on déplace par traitement aux antibiotiques l'équilibre de la flore intestinale normale en faveur de Candida albicans administré par voie orale (voir à ce sujet H.B.R. Seeliger, Handbuch der experimentellen Pharmakologie XVI/ll/A, page 27 et suivantes). Avec l'éther 2-aminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B, par exemple, on a constaté la guërison de 75% des animaux soumis à l'essai après administration de la substance par\voie sous-cutanée à la dose dé 25 mg/kg/jour, et la guérison de la totalité des animaux à la dose de 50 mg/kg/jour.
L'action des composés de formule I contre Candida albicans a encore été confirmée in vivo dans l'essai de l'infection hêmatogêne expérimentale chez la souris, décrit par
<EMI ID=49.1>
L'éther 2-aminoéthylique de la tétrahydro-équinocandine B exerce dans cet essai une nette inhibition de l'infection après administration par voie sous-cutanée à la dose de 0,4 mg/kg/ jour.
Grâce à ces propriétés, les composés de formule I
et leurs sels acceptables du point de vue pharmaceutique peuvent être utilisés en thérapeutique comme antimycotiques, en particulier pour combattre Candida albicans. Ils seront
?n prescrits à des doses quotidiennes comprises entre 10 et
500 mg de substance active, à prendre en une seule fois ou
en plusieurs doses unitaires.
Les composés de formule I et leurs sels peuvent être utilisés comme médicaments, soit seuls, soit mis sous forme de compositions pharmaceutiques appropriées pour l'administration par la voie orale, parentérale ou rectale, tels que des comprimés, des capsules, des solutions, des suppositoires ou des pommades. Pour préparer des compositions pharmaceutiques appropriées, on travaille la substance active avec des excipients minéraux ou organiques, inertes du point de vue pharmaceutique. On peut par exemple incoporer les nouveaux antibiotiques à une pommade à raison d'environ 5 à 50 mg de substance active par gramme de pommade. Comme excipients, on pourra utiliser par exemple:
pour des comprimés et des dragées: le lactose, l'amidon, le talc, l'acide stéarique etc..;
pour des sirops: l'eau, le saccharose, le sucre inverti, le glucose etc..;
pour des préparations injectables: l'eau, des alcools, le glycérol, des huiles végétales etc..;
pour des suppositoires: des huiles naturelles ou durcies, des cires, des graisses etc...
Les compositions pharmaceutiques peuvent en outre contenir des agents de conservation, de dissolution, des stabilisants, des mouillants, des édulcorants, des colorants, des aromatisants etc.., appropriés.
<EMI ID=50.1>
Ether 2-aminoéthylique de la tétrahydro-
<EMI ID=51.1>
<EMI ID=52.1>
On mélange à sec la substance active, le stéarate
de magnésium, le polyéthylèneglycol 6000, la polyvinylpyrrolidone, le talc, l'amidon et le lactose. On granule le mélange ainsi obtenu avec de l'huile de diméthylsilicone en suspension dans de l'eau, on sèche et on comprime le granulé broyé pour en faire des comprimés.
Avec 100 g du mélange décrit ci-dessus, on peut fabriquer théoriquement 500 comprimés pesant chacun 0,200 g et contenant chacun 30 mg de substance active.
<EMI ID = 1.1>
and their application as drugs.
The present invention relates to new derivatives of tetrahydro-equinocandin B, their preparation and their application in therapy, as active principles of medicaments.
The invention relates more particularly to the compounds corresponding to formula I
<EMI ID = 2.1>
in which
m means 0 or an integer from 1 to 4 inclusive,
<EMI ID = 3.1>
from 1 to 12 carbon atoms, a cycloalkyl group containing from 3 to 7 carbon atoms, an alkyl group containing from
1 to 3 carbon atoms substituted by a cycloalkyl group containing from 3 to 7 carbon atoms, a hydroxyethyl group, an alkoxyethyl group containing from 3 to 6 carbon atoms, a furylmethyl or tetrahydrofurylmethyl group,
or a phenyl group or a phenylalkyl group containing from 7 to 10 carbon atoms, the benzene rings of which optionally bear one or two substituents chosen from fluorine, chlorine and bromine atoms, the hydroxy group and the alkyl and alkoxy groups containing from 1 to 4 carbon atoms, these substituents having to be identical when they are two in number, and
R2 represents a hydrogen atom or an alkyl group containing
from 1 to 4 carbon atoms, or
<EMI ID = 4.1>
binds hydrogen or an alkyl group containing 1 to 4 carbon atoms, and
<EMI ID = 5.1>
<EMI ID = 6.1>
<EMI ID = 7.1>
and the salts which these compounds form with mineral or organic acids.
The symbol m preferably denotes 0 or the number 1.
<EMI ID = 8.1>
kyl, cycloalkylalkyl, hydroxyethyl, alkoxyethyl or, in
<EMI ID = 9.1>
preferably has a hydrogen atom or a methyl group.
<EMI ID = 10.1>
preferably contains 1 to 9 carbon atoms, in particular 1 to 6 carbon atoms, and is preferably straight chain or branched in α. Any other alkyl group represented
<EMI ID = 11.1>
carbon atoms, especially a single one. When R represents or contains a cycloalkyl group, the latter preferably contains 3, 5 or 6 carbon atoms.
To prepare the compounds of formula I according to the process of the invention, a) the compound of formula III is condensed
<EMI ID = 12.1>
in which R3 has the meaning, already given, with compounds of formula IV
<EMI ID = 13.1>
<EMI ID = 14.1>
data.
The reaction can be carried out in the presence of a
<EMI ID = 15.1>
fonic or methanesulfonic, or of a mineral acid, such as for example hydrochloric acid. Preferably 8 to 20 moles of the compound of formula IV are used per mole of compound of formula III. The operation is preferably carried out in an aprotic polar solvent such as dimethylformamide.
<EMI ID = 16.1> formula V
<EMI ID = 17.1>
<EMI ID = 18.1>
sensing a phenyl or phenylalkyl group substituted by one or two halogen atoms, R6 represents a group of formula II '
<EMI ID = 19.1>
<EMI ID = 20.1> carbon atoms joined by a double bond have the cis configuration, and R7 represents a residue capable of being removed under the conditions of hydrogenolysis, which gives the compounds of formula la
<EMI ID = 21.1>
in which m, Ri and R- have the meanings already given.
The reaction can be carried out according to the methods usually used for controlled hydrogenolysis, in the presence of a catalyst. As a suitable catalyst, it is possible
<EMI ID = 22.1>
a benzyloxycarbonyl group is particularly suitable. The operation is advantageously carried out in a mixture of ethanol and acetic acid.
c) Compounds of formula VI are subjected to reductive alkylation
<EMI ID = 23.1>
<EMI ID = 24.1>
<EMI ID = 25.1>
given, which gives the compounds of formula Ib
<EMI ID = 26.1>
in which m and R-. have the meanings already given
<EMI ID = 27.1>
cannot represent a hydrogen atom and must have a carbon atom in a having at least one hydrogen atom,
<EMI ID = 28.1>
from 1 to 4 carbon atoms, of which the carbon atom has at least one hydrogen atom.
The reaction can be carried out according to the methods usually used for a reductive alkylation of an amine by means of a ketone or an aldehyde. The operation is carried out, for example, by hydrogenation in the presence of a catalyst such as palladium on carbon or platinum oxide, advantageously in an inert solvent, such as for example ethanol or a mixture of ethanol and acetic acid. In order to prepare compounds of formula Ib bearing halogen atoms as substituents, sodium cyanoborohydride is preferably used, for example by working in methanol. By using an excess of the appropriate ketone or aldehyde, it is possible to directly convert a compound of formula VI
<EMI ID = 29.1>
process is particularly suitable for preparing dimethyl compounds.
In order to avoid the splitting of the peptide cycle of tetrahydro-equinocandin B, it is appropriate to carry out the processes described above as well as the subsequent treatment of the products obtained, under controlled conditions, for example in a neutral or weakly acidic medium. All processes are preferably carried out at a temperature between -10 and
50 [deg.], In particular between 0 and 20 [deg.].
The compounds of formula I are advantageously isolated in the form of their acetates, which can then be converted into addition salts of mineral acids such as the hydrochloride, or into free bases, according to the usual methods. These free bases can be converted into acid addition salts and vice versa, according to known methods.
The compounds of formula V, used as starting products under b), can be prepared by reaction of the compounds of formula VII
<EMI ID = 30.1>
in which m, R and R7 have the meanings already given, with compounds of formula VIII
R6H (VIII) in which R6 has the meaning already given. One can operate as described under a).
The compound of formula III, used as the starting material under a), is known. It is tetrahydro-equinocandin B which is described in Belgian patent no. [Deg.] 834 289 under the name tetrahydro-SL 7810 / F.
When the preparation of the starting products is not described, they are known or can be prepared according to known methods or similar to those described in the present description, from known compounds.
The following examples illustrate the present invention without in any way limiting its scope. Temperatures are expressed in degrees centigrade and are given uncorrected. By high vacuum is meant approximately 0.01 mm Hg. All the proportions relating to mixtures of solvents are
S
expressed in parts by volume; the other proportions are weight ratios. Unless otherwise indicated, the final products are dried under reduced pressure at room temperature for 15 hours.
Example 1
2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B a) To a solution of 21.32 g of tetrahydro-equinocandin B in 180 ml of dimethylformamide is added with stirring
39 g of 2-aminoethanol hydrochloride and 33.2 ml of an anhydrous solution of hydrochloric acid in dimethylformamide, containing 1.46 g of hydrochloric acid. This mixture is stirred for 7 and a half hours, then neutralized by adding 35 ml.
<EMI ID = 31.1>
mixture to dryness under reduced pressure at 60 [deg.] and the evaporation residue is taken up in 100 ml of methanol at 30-35 [deg.]. This mixture is passed through a column of 1.2 kg of Sephadex
<EMI ID = 32.1>
produced in a mixture of equal parts of chloroform and methanol, 40 g of silica gel are added and evaporated. The evaporation residue is chromatographed on a column using, as eluent, a mixture of chloroform, methanol and water in the ratio 80: 17.5: 2 supplemented with 0.5% acetic acid. There is thus obtained the acetate of the title compound.
b) Under ice cooling, the acetate in 20 ml of methanol is treated with about 30 ml of an ethereal solution <EMI ID = 33.1>
is weakly acidic. 400 ml of ether were added, the precipitate which formed was filtered off and, after washing with ether, dried at room temperature for 15 hours under high vacuum to give the title compound as of his
<EMI ID = 34.1>
methanol).
c) To prepare the title compound in the free state, 120 g of the acetate obtained under a) are stirred for one hour in 250 ml of water and 500 ml of a mixture of chloroform and isopropanol in 7: 3 ratio. 450 ml <EMI ID = 35.1> are added to this mixture
organic phase. The aqueous phase is extracted 4 times with
500 ml of a mixture of chloroform and isopropanol in the 7: 3 ratio. The organic phases are combined, dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The evaporation residue is taken up in 300 ml of methanol and 3 liters of ether are added dropwise, which precipitates the title compound in the form of the free base, in the form of a colorless amorphous powder which let dry for 15 hours
<EMI ID = 36.1>
Example 2
Tetrahydroëquinocandin B 2- (1-pyrrolidinyl) ethyl ether
20 g of hydrate are added to a solution of 11.5 g of 1- (2-hydroxyethyl) pyrrolidine in 500 ml of dioxane.
0 of p-toluenesulfonic acid and 100 g of molecular sieve (Merck 4 A). After 30 minutes, the molecular sieve is separated by filtration and the filtrate is treated with 10.63 g of tetrahydroequinocandin B. Three hours later, the mixture is neutralized and treated as described in Example 1, which gives the hydrochloride. of the title compound as a powder
<EMI ID = 37.1>
methanol).
Example 3
2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B a) A suspension of
400 mg of 10% palladium on charcoal in a mixture of ethanol and acetic acid in the 9: 1 ratio. To this suspension is added a solution of 4 g of 2- (benzyloxycarbonylamino) ethyl ether of tetrahydro-equinocandin B in 50 ml of a mixture of ethanol and acetic acid in the ratio 9: 1. This mixture is hydrogenated at 20 deg. For 5 hours under normal pressure. The catalyst was removed by filtration and the filtrate evaporated to give the title compound as acetate. b) To 3.8 g of the acetate obtained above in 20 ml of methanol is added at 0 [deg.] 12 ml of an ethanolic solution of hydrochloric acid containing exactly 99 mg of hydrochloric acid.
To this mixture is added 500 ml of ether in order to precipitate the title compound as the hydrochloride. After filtration, washing with ether and drying for
16 hours, the hydrochloride of the title compound is obtained in the form of a colorless amorphous powder, melting point 200-203 [deg.];
<EMI ID = 38.1>
To prepare the starting compound, the procedure is as described below:
A suspension of 10.8 g of tetrahydroequinocandin B in 100 ml of dioxane is treated with 9.95 g of 2-
(benzyloxycarbonylamino) ethanol and 300 mg of p-tcluenesulfonic acid. This mixture is stirred for 2 hours at room temperature, diluted with 100 ml of ether and added.
one liter of hexane. The precipitate which has formed is filtered off and taken up in 500 ml of a mixture of chloroform and isopropanol in the 7: 3 ratio. The organic phase is washed
three times with 100 ml of water, it is dried over sodium sulfate and evaporated to dryness. The evaporation residue is chromatographed on silica gel using, as eluent, a mixture of chloroform, methanol and water in the ratio
80: 17.5: 2, then rechromatographed on silica gel using, as eluent, a mixture of chloroform, methanol and water in the ratio 88: 11: 1, to give ether 2- ethyl (benzyloxycarbonylamino) tetrahydro-equinocandin B.
Example 4
Tetrahydro-equinocandin B 2-aminoethyl ether
0.92 g of 2- (benzyloxycarbonylamino) ether is hydrogenated
<EMI ID = 39.1>
(c = 0.705 in methanol) 1 in 10 ml of a mixture of ethanol and acetic acid in the ratio 9: 1, in the presence of 100 mg of 10% palladium on charcoal, proceeding as described in Example 3. The product obtained is filtered and evaporated at
�
dryness. The residue is treated with 5 g of silica gel and
chromatography on a silica gel column using, as eluent, a mixture of chloroform, methanol and water
<EMI ID = 40.1>
thus obtains the title compound in acetate form. The latter can be converted into the hydrochloride and the free base by proceeding as described in Example 1 under b) and c).
Example 5
Tetrahydroequinocandin B 3-isopropylaminopropyl ether
A suspension of
600 g of platinum oxide in 60 ml of ethanol. A solution of 6.5 g of acetate of 3-aminopropyl ether of tetrahydro-equinocandin B (see Example 8) is then added thereto.
20 ml of acetone and 60 ml of ethanol. This mixture is hydrogenated for 6 hours at 20 [deg.] And under atmospheric pressure. The catalyst is removed by filtration and the filtrate is evaporated.
to dryness. The evaporation residue is treated with 15 g of silica gel, placed on a column of silica gel and eluted with a mixture of chloroform, methanol and water.
in the ratio 80: 17.5: 2 plus 0.5% acetic acid to give the title compound as acetate. The acetate can be converted to the amorphous hydrochloride, as described in
<EMI ID = 41.1>
(c = 0.645 in methanol).
Example 6
Tetrahydro-equinocandin B 2-dimethylaminoethyl ether
500 mg of 10% palladium on charcoal are hydrogenated for one hour in 50 ml of a mixture of ethanol and acetic acid in the 9: 1 ratio. To this mixture is added a solution of 5 g of acetate of 2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B [see example 1 a)] in 50 ml of a mixture of ethanol and acetic acid in 9: 1 ratio and
17.2 ml of a 35% formaldehyde solution. We hydrogen
this mixture for 18 hours at 20 [deg.], under atmospheric pressure. The catalyst is removed by filtration, the
ni filtrate and the evaporation residue is treated with 10 g of silica gel. It is then placed on a column of silica gel and eluted with a mixture of chloroform, methanol and water in the ratio 65: 30: 5 supplemented with 0.5% acetic acid, to give the compound. of the title in the form of acetate. The acetate is then converted to amorphous hydrochloride, by proceeding as described in Example 3 b). This last
<EMI ID = 42.1>
Example 7
Tetrahydroequinocandin B 2- (o-chlorobenzylamino) ethyl ether
315 mg of sodium cyanoborohydride are added to a solution of 5.85 g of 2-aminoethyl ether acetate.
<EMI ID = 43.1>
dehyde in 125 ml of methanol. This mixture is stirred for 2 hours, then evaporated under reduced pressure at room temperature. The evaporation residue is chromatographed on silica gel and treated as described in Example 5, to give the title compound as the hydrochloride.
<EMI ID = 44.1>
methanol).
By proceeding as described in the previous examples, it is possible to prepare the compounds of formula I in Table I below.
TABLE I
<EMI ID = 45.1>
1) prepared as described in any one of Examples 1 to 4
2) prepared as described in any one of Examples 1 to 6
3) prepared as described in any one of Examples 1, 2, 5
and 6.
The compounds of formula I and their salts have not been described so far in the literature. They are distinguished by interesting pharmacodynamic properties, in particular by an antimycotic action.
While under the usual conditions the compounds of formula I prove to have no effect or at most only slightly effective against the usual representatives of Gram positive and Gram negative bacterial strains, they exhibit a remarkable action against yeasts and lower fungi, in particular against different strains of the Candida species, pathogenic for humans.
<EMI ID = 46.1>
males of the compounds of formula I against various fungi and yeasts. The serial dilution tests used for these determinations were carried out according to the usual methods, with a dilution factor of 2. In these tests, the incubation is carried out in a mixture of glucose and Sabouraud's medium of pH 6.8. , at 30 [deg.]. The results are evaluated after 48 hours of incubation for yeasts and molds and after 7 days for dermatophytes. By way of example, the results obtained are shown in Table IV below.
with 2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B against a number of strains.
TABLE IV
<EMI ID = 47.1>
<EMI ID = 48.1>
Candida albicans has also been demonstrated in vivo in the test of experimental infection of the intestine in female mice. According to this method, the balance of the normal intestinal flora is shifted by treatment with antibiotics in favor of Candida albicans administered orally (see on this subject HBR Seeliger, Handbuch der experimentellen Pharmakologie XVI / ll / A, page 27 and following) . With 2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B, for example, 75% of the animals tested were cured after administration of the substance subcutaneously at a dose of 25 mg / kg / day, and recovery of all the animals at a dose of 50 mg / kg / day.
The action of the compounds of formula I against Candida albicans was further confirmed in vivo in the test for experimental haematogenic infection in mice, described by
<EMI ID = 49.1>
The 2-aminoethyl ether of tetrahydro-equinocandin B exerts in this test a clear inhibition of the infection after administration by the subcutaneous route at a dose of 0.4 mg / kg / day.
Thanks to these properties, the compounds of formula I
and their pharmaceutically acceptable salts can be used therapeutically as antimycotics, in particular to combat Candida albicans. They will be
? n prescribed in daily doses between 10 and
500 mg of active substance, taken all at once or
in several unit doses.
The compounds of formula I and their salts can be used as medicaments, either alone or in the form of pharmaceutical compositions suitable for administration by the oral, parenteral or rectal route, such as tablets, capsules, solutions, suppositories or ointments. To prepare suitable pharmaceutical compositions, the active substance is worked with inorganic or organic excipients which are inert from the pharmaceutical point of view. The new antibiotics can, for example, be incorporated into an ointment at a rate of approximately 5 to 50 mg of active substance per gram of ointment. As excipients, we can use for example:
for tablets and dragees: lactose, starch, talc, stearic acid etc .;
for syrups: water, sucrose, invert sugar, glucose, etc .;
for injectable preparations: water, alcohols, glycerol, vegetable oils, etc .;
for suppositories: natural or hardened oils, waxes, fats etc ...
The pharmaceutical compositions may further contain suitable preservatives, dissolvers, stabilizers, wetting agents, sweeteners, colorants, flavoring agents, etc.
<EMI ID = 50.1>
Tetrahydro- 2-aminoethyl ether
<EMI ID = 51.1>
<EMI ID = 52.1>
The active substance, the stearate, is mixed dry
magnesium, polyethylene glycol 6000, polyvinylpyrrolidone, talc, starch and lactose. The mixture thus obtained is granulated with dimethylsilicone oil suspended in water, dried and the crushed granule is compressed into tablets.
With 100 g of the mixture described above, one can theoretically produce 500 tablets each weighing 0.200 g and each containing 30 mg of active substance.