<Desc/Clms Page number 1>
@ Oxime d'azido-2-cyclohexanone et son utilisation comme agent hypotenseur.
L'invention est relative au contrôle de la pression sanguine ou tension artérielle chez les mammifères et elle a pour objet un nouvel agent hypotenseur.
La généralité et la persistance de l'hypertension et les désordres physiques sérieux qui lai sont associés ont déclenché des recherches importantes pour trouver des agents chimiothérapeutiques pouvant être administrés sans accident pendant des durées prolongées en vue de diminuer la pression ,du sang, en particulier la pression diastolique, sans provoquer de manifestations toxiques et d'effets secon- daires nuisi'bles, Il est extrêmement avantageux qu'un agent hypotenseur possède non seulement une faible toxicité et ne donne pas d'effets secondaires,
mais aussi qu'il ait une acti- vité de longue durée et une action douce et stable 'pour que la
<Desc/Clms Page number 2>
réduction désirée de la pression sanguine puisse être obtenue per l'administration de doses sensiblement cons- tantes du médicament qui continue à être efficace pendant les périodes les plus longues possibles. Le recherche d'un agent hypotenseur ayant ces propriétés n'a pas été entiè- rement couronnée de sucobs.
On a trouvé qu'un composé encore inconnu, l'oxi- ne d'azido-2-cyclohexanone est un agent hypotenseur stable ayant une très faible toxicité et présentant une aotivité . douce et prolongée. Ceci est surprenant car divers azotures font partie des oomposés dont l'aotivité comme hypotenseurs a été teetée. Par exemple, l'utilisation d'azoture de so- dium est bien connue, mais ce composé est assez toxique.
Divers azotures organiques ont aussi -été testés dans le passé par d'autres chercheurs qui ont rapporté qu'ils s'étaient révélas inefficaces, d'une action trop fugace ou d'un effet insuffisant pour permettre leur utilisation comme agents hypotenseurs efficaces. Ainsi, les azotures .organiques n'ont pas pu être considérés comme un domaine prometteur dans lequel on aurait pu trouver un agent hypo- tenseur supérieur.
Le nouveau composé est rarticulièrement intéres. aant par le fait que l'augmentation modérée d'une dose non toxique quoique efficace conduit à une augmentation proportionnelle du degré et de la durée de l'effet hypo- tenseur sans accroissement observable des manifestations toxiques. La faible toxioité du nouveau composé a été établie comme suit :
On a utilisé des rate albinos mâles Charles
River pesant do 200 à 400 g. Les rats ont été divisés
<Desc/Clms Page number 3>
en groupes de 5 rats chacun et on leur a administré le composé testé par voie 'buccale en augmentant loga- rithmiquement la dose de façon à encadrer la dose létha- le 50% (DL 50).
Le composé a été mis en suspension dans une dispersion aqueuse de 1% de méthylcellulose (produit disponible sur le marché sous la dénomination "Méthocel") et administré à un volume constant de 2 ml/100 g de poids à tous 'Les dosages.
Tous les rats ont été attaohés pendant 16 heures avant administration du composé.
On a observé chez tous les animaux les preuves des signes pharmacotoxiques et la mortalité à intervalles périodiques immédiatement après administration puis chaque jour pendant une période totale de 14 jours.
Des autopsies ont été faites sur tous les rats qui ont succombé pendant la période d'observation.
On lisa pas observé à l'autopsie de lésions qui ont pu être attribuées à un effet produit par l'adminis- tration du nouveau composé.
Les lésions ne correspondant pas au composé étaient la congestion, les hémorragies localisées et la pneumonie dans 4 des 11 rats examinés.
La dose aiguë par voie orale DL50 est reportée dans le tableau 1.
Tableau 1 Valeurs DL50 de la toxicité aiguë par voie orale de l'oxime d'azido-2-cyclohexanone chez le rat albinos
<Desc/Clms Page number 4>
Dose en mg/kg DL50 et limites de nombre de morts/nombre testé confiance (mg/kg) 215 316 464 681 1000 1470 2150 0/5 0/5 0/5 - 1/5 5/5 5/5 1120 (963-1310)
Pour tester l'activité comme l'hypotenseur du nouveau composé, la tension artérielle' de ohiens bâtards traités au pentobarbital (35 mg/kg) ayant une pression sanguine normale, des deux sexes, a été enregistrée à pprtir de l'artère fémorale gauche ou droite dans laquelle a été introduite une canule, par l'intermédiaire d'un pont salin héparinisé relié à un transmetteur de pression par déplacement à faible déplacement en volume (appareil "Statham-P-23Db")
ou d'un transmetteur de pression pho- toélectrique "Bourdon", relié à un enregistreur électro- nique. La veine fémorale contre latérale a été isolée et on y a introduit une canule pour l'injection du compo- sé testé et des substances témoin.
Une inoision médiane a été faite dans la zone cervicale du cou, la traohée a été isolée et on y a intro- duit une canule pour produire une entrée d'air libre.
Les deux artères carotides ont été exposées en vue d'occlusions ultérieures. Le nerf vague droit a été divisé et on a fait passer le faisceau périphérique à travers des électrodes de platine tubulaires pour une stimulation ultérieure.
On a laissé passer une demi-heure après avoir divisé le nerf vague pour permettre à l'animal de réou- pérer après l'opération chirurgicalé et pour permettre à la pression sanguine de se stabiliser. Avant l'admi- nistration par voie intraveineuse de l'oxime de l'azido-
<Desc/Clms Page number 5>
2-oyolohexanone, on a obtenu au moins-deux réponses témoins selon les procédés suivants : 1. Chlorure d'acétylcholine, 2 mog./Kg administré par voie intraveineuse.
2, Phosphate d'histamine 4-5 mcg/Kg administré par voie intraveineuse.
3. Bitartrate de L-épinéphrine 2 mcg/Kg, administré par voie intraveineuse.
4. Angiotensine II ("Hypertensine"), 1 meg/Kg, adminis- trée par voie intraveineuse.
5. Stimulation vague périphérique 5-15 secondes.
6, Occlusion bilatérale des carotides 15-30 secondes,
Les séries témoins ont été administrées au moins 2 fois avant injection du composé testé. Les séries témoins ont été appliquées périodiquement après administration du composé tant que l'effet a persisté sur la pression sanguine.
Le nuveau composé est soluble dans le polyé- thylène glycol ("Carbowax 300"), et a été préparé pour l'administration intraveineuse par dilution dans ce support une concentration de 25% en poids par volume.
On a ensuite dilué une certaine quantité du nouveau composé, solubilisé de cette manière, comme le requiert chaque dosage administré ne dépassant pas 2 ml en volume pour toute administration simple. On a périodiquement administré des volumes comparables de solvant sans compo- sé comme témoins dans chaque expérience. Le nouveau com- posé a été administré individuellement à des doses de 1 à 20 mg/kg à doux chiens au moins.
Une dose de 1 mg/kg diminuait la pression
<Desc/Clms Page number 6>
artérielle moyenne de 14% pendant 120 minutes. Une augmen, talion de dose augmentait proportionnellement le degré et la durée de l'effet d'une façon qui dépendait de la dose.
Il s'est produit une bradycardie (10 à 20%) pour les trois doses administrée . Il ne s'est pas produit de changement de l'activité ou du rythmé respi- ratoire.
Les réponses aux dépresseurs du type acétyl- choline et histamine et les réponses au presseur ou
EMI6.1
hypertenseur(occlusion bilatérale des serotides) ont été bloquées pendant 1 heure environ à des doses de 1 et 10 mg/kg (pour le même chien). Néanmoins, . 5 mg/kg dans un autre animal ces réponses ont été seulement un peu inhibées. Les réponses à l'épinéphrine et à l'angio- tensine utilisées comme hypertenseur ont été inhibées dans le premier animal nais pas dans le seoond.
Tableau 2.
Pouvoir dépresseur et durée d'action de l'oxime azido-
EMI6.2
2.-cyclohexanone sur la tension artérielle moyenne de chiens batard anesthésiés à pression normale..
Chien n Dose Tension artérielle Durée mg/kg moyenne (mm Hg) (minute) témoin changement $; de changement
EMI6.3
.¯,..¯.", ..¯¯....,¯ .. f -
EMI6.4
<tb> 234 <SEP> 1 <SEP> 147 <SEP> -14 <SEP> 10 <SEP> 120
<tb>
<tb>
<tb> 236 <SEP> 5 <SEP> 153-24 <SEP> 17 <SEP> 300 <SEP>
<tb>
<tb> 234 <SEP> 10 <SEP> 152 <SEP> -74 <SEP> 49 <SEP> 240
<tb>
D'autres résultats d'essai sont reportés dans le tableau a uivant :
Tableau .
Abaissement de la tension artérielle.
<Desc/Clms Page number 7>
EMI7.1
<tb> Chien <SEP> n <SEP> Dose <SEP> Tension <SEP> artérielle <SEP> Durée
<tb> mg/kg <SEP> moyenne <SEP> (mm <SEP> Hg) <SEP> ), <SEP> de <SEP> chute <SEP> (minute)
<tb>
<tb> ¯¯¯¯¯¯ <SEP> témoin <SEP> ohute
<tb>
EMI7.2
24? ¯ xi 120 -12 10 30 245 o,2ti 123 -33¯¯¯¯¯¯¯2¯7¯¯¯¯¯H
EMI7.3
<tb> Moyenne <SEP> -22 <SEP> 18 <SEP> 50
<tb>
<tb> 250 <SEP> 0,5 <SEP> 145 <SEP> -le <SEP> 13 <SEP> 32
<tb>
<tb> 251 <SEP> 0,5 <SEP> 133 <SEP> - <SEP> 8 <SEP> 6 <SEP> 114
<tb>
<tb> Moyenne <SEP> -13 <SEP> 10 <SEP> 73
<tb>
<tb> 245 <SEP> 1,0 <SEP> 128 <SEP> -50 <SEP> 39 <SEP> 38
<tb>
<tb> 234 <SEP> 1,0 <SEP> 157-24 <SEP> 15 <SEP> 119
<tb>
<tb> 247 <SEP> 1,0 <SEP> 103 <SEP> -il <SEP> la <SEP> ¯ <SEP> 110
<tb>
<tb> Moyenne <SEP> -28 <SEP> 21 <SEP> 89
<tb>
<tb> 250 <SEP> 2,
0 <SEP> 155 <SEP> -3P <SEP> 25 <SEP> 168
<tb>
EMI7.4
251 2,0 135 -28 ,¯ ¯" 21 300
EMI7.5
<tb> Moyenne <SEP> -33 <SEP> 23 <SEP> 234
<tb>
Pour que l'invention soit complètement acces- eible aux spécialistes, on décrit brièvement la prépara- tion du nouveau composé On a préparé une solution aqueuse concentrée de 6,9 g de chlorhydrate d'hydroxylamine et de 5,3 g de oarbonate de sodium anhydre. On y a ajouté 13 g d'azido- 2-cyclohexanone et assez d'éthanol pour faire une solution claire. Après avoir agité pendant 24 heures à température ordinaire, on a versé le mélange dans un excès d'eau. On a extrait au chloroforme l'huile formée.
Après avoir séché sur sulfate de sodium, on a chassé le solvant et on a distillé le résidu dans un petit appareil de distillation à 60 C sous une pression de 0,05 mm de mercure pour obtenir environ 10 g d'une huile claire.
183/68
<Desc/Clms Page number 8>
EMI8.1
<tb> ±1?loulé <SEP> trouvé
<tb>
<tb> C <SEP> 46,74 <SEP> 46, <SEP> 81
<tb>
<tb> H <SEP> 6,54 <SEP> 6,63
<tb>
<tb> N <SEP> 36,34 <SEP> 36,64
<tb>
L'oxime d'azido-2-cyolohexanone de l'invention peut être administrée par vole intraveineuse, orale, par inhalation ou par pulvérisation. Pour l'administration par voie orale, le composé peut être associe à un support pharmaceutique solide sous forme d'un comprimé, d'une pilule, d'une poudre, d'une capsule ou de tout autre forme de dosage convenable pour l'administration par voie buccale. Les supports solides .convenables sont le lactose, l'amidon de blé, la cellulose microcristalline, le talc, l'acide stéarique, le stéarate de magnésium, les gommes etc.
Les comprimes ou pilules enrobés conviennent particulièrement car l'enrobage empêche l'évaporation de l'azoture liquide du support pharmaceutique. Les capsules sont aussi particulièrement intéressantes pour la même raison. On peut utiliser des capsules pharmaceutiques classiques telles que les capsules de gélatine.
L'oxime d'azido-2-cyolohcxanone peut aussi être administrée sous forme liquide. Pour l'utilisation par voie buccale, les émulsions ou suspensions liquides conte- nant 5 à 50; environ d'azoture dans l'eau, oonviennent.
On. peut ajouter comme stabilisants lès agents émulsifiants et de mise en suspension courants. Ces compositions peu- vent aussi contenir une petite quantité d'éthanol qui dissout partiellement l'azoture. Les graisses liquides ne conviennent pas comme support car les azotures sont extrêmement solubles dans ces graisses et ont semble- . @
<Desc/Clms Page number 9>
t-il, tendance à rester dissous dans le ohyle.
Pour l'injection intraveineuse ou l'utilisa- tion par voie buccale, l'azoture peut être utilisée à sa concentration maximale, dissoute dans l'éthanol, un oxyde de polyalcoylène ou tout autre support pharmpoolo- giquement inerte dans lequel l'azoture est soluble. Pour l'injection intraveineuse, il peut être aussi éaulsifié dans une solution aqueuse isotonique inerte. Des concen- trations cn azoture de 15 à 75% environ conviennent.
L'azoture peut; aussi être administré par inhalations ou pulvérisations nasales mais il n'est pae normalement utilisé de cette manière par suite de la difficulté à relier le dosage. Néanmoins, dans les situations aiguës où il est nécessaire de diminuer immédiatement la pression sanguine, les inhalation? et pulvérisations sont appro- priées.
<Desc / Clms Page number 1>
@ Azido-2-cyclohexanone oxime and its use as a hypotensive agent.
The invention relates to the control of blood pressure or arterial pressure in mammals and it relates to a novel hypotensive agent.
The generality and persistence of hypertension and the serious physical disorders associated with it have triggered significant research to find chemotherapeutic agents which can be administered without accident for prolonged periods of time in order to lower blood pressure, especially blood pressure. diastolic pressure, without causing toxic manifestations and harmful side effects. It is extremely advantageous that a hypotensive agent not only has low toxicity and does not give side effects,
but also that it has a long-lasting activity and a soft and stable action 'so that the
<Desc / Clms Page number 2>
The desired reduction in blood pressure can be achieved by the administration of substantially constant doses of the drug which continues to be effective for the longest possible periods of time. The search for a hypotensive agent with these properties has not been entirely successful.
A still unknown compound, azido-2-cyclohexanone oxide, has been found to be a stable hypotensive agent having very low toxicity and exhibiting potency. soft and prolonged. This is surprising because various azides are among the compounds whose potency as hypotensive has been tested. For example, the use of sodium azide is well known, but this compound is quite toxic.
Various organic azides have also been tested in the past by other researchers who have reported that they have been shown to be ineffective, of too fleeting action or of insufficient effect to allow their use as effective hypotensive agents. Thus, organic azides could not be considered a promising area in which a superior hypotensive agent could have been found.
The new compound is particularly interesting. This is because a moderate increase in a non-toxic although effective dose leads to a proportional increase in the degree and duration of the hypotensive effect without an observable increase in toxic manifestations. The low toxicity of the new compound was established as follows:
We used male albino spleen Charles
River weighing 200 to 400 g. The rats were divided
<Desc / Clms Page number 3>
in groups of 5 rats each and they were administered the test compound orally while increasing the dose logarithmically so as to frame the 50% lethal dose (LD 50).
The compound was suspended in an aqueous dispersion of 1% methylcellulose (product available commercially under the name "Methocel") and administered at a constant volume of 2 ml / 100 g of weight in all dosages.
All rats were attenuated for 16 hours prior to compound administration.
Evidence of pharmacotoxic signs and mortality were observed in all animals at periodic intervals immediately after administration and then daily for a total of 14 days.
Autopsies were performed on all rats which succumbed during the observation period.
No lesions were observed on autopsy which could be attributed to an effect produced by the administration of the new compound.
Non-compound lesions were congestion, localized hemorrhages and pneumonia in 4 of 11 rats examined.
The acute oral LD50 dose is reported in Table 1.
Table 1 LD50 Values of Acute Oral Toxicity of Azido-2-cyclohexanone Oxime in Albino Rats
<Desc / Clms Page number 4>
Dose in mg / kg LD50 and limits of number of deaths / number tested confidence (mg / kg) 215 316 464 681 1000 1470 2150 0/5 0/5 0/5 - 1/5 5/5 5/5 1120 (963 -1310)
To test the hypotensive activity of the new compound, the blood pressure of bastards treated with pentobarbital (35 mg / kg) with normal blood pressure, of both sexes, was recorded from the left femoral artery. or straight into which a cannula has been introduced, via a heparinized salt bridge connected to a low volume displacement displacement pressure transmitter (device "Statham-P-23Db")
or a "Bourdon" photoelectric pressure transmitter, connected to an electronic recorder. The femoral versus lateral vein was isolated and a cannula inserted for injection of the test compound and control substances.
A median inoision was made in the cervical area of the neck, the trauma was isolated, and a cannula was inserted to produce free air entry.
Both carotid arteries were exposed for subsequent occlusions. The right vagus nerve was split and the peripheral bundle passed through tubular platinum electrodes for further stimulation.
Half an hour was allowed to pass after dividing the vagus nerve to allow the animal to reopen after surgery and to allow the blood pressure to stabilize. Prior to intravenous administration of azido- oxime
<Desc / Clms Page number 5>
2-oyolohexanone, at least two control responses were obtained according to the following methods: 1. Acetylcholine chloride, 2 mog./Kg administered intravenously.
2, Histamine phosphate 4-5 mcg / Kg administered intravenously.
3. L-epinephrine bitartrate 2 mcg / Kg, administered intravenously.
4. Angiotensin II ("Hypertensin"), 1 meg / Kg, administered intravenously.
5. Peripheral wave stimulation 5-15 seconds.
6, Bilateral carotid occlusion 15-30 seconds,
The control series were administered at least 2 times before injection of the test compound. The control series were applied periodically after administration of the compound as long as the effect on blood pressure persisted.
The new compound is soluble in polyethylene glycol ("Carbowax 300"), and was prepared for intravenous administration by diluting in this carrier to a concentration of 25% w / v.
A certain amount of the new compound, solubilized in this manner, was then diluted as required by each administered dosage not exceeding 2 ml in volume for any single administration. Comparable volumes of solvent without compound were periodically administered as a control in each experiment. The new compound was administered individually at doses of 1 to 20 mg / kg to at least mild dogs.
A dose of 1 mg / kg reduced blood pressure
<Desc / Clms Page number 6>
average blood pressure of 14% for 120 minutes. Increasing the dose proportionately increased the degree and duration of the effect in a dose dependent manner.
Bradycardia (10-20%) occurred for all three doses administered. There was no change in activity or breathing rate.
Responses to acetylcholine and histamine depressants and responses to the pressor or
EMI6.1
hypertensive (bilateral serotide occlusion) were blocked for approximately 1 hour at doses of 1 and 10 mg / kg (for the same dog). However, . 5 mg / kg in another animal these responses were only slightly inhibited. The responses to epinephrine and angiotensin used as a hypertensive agent were inhibited in the first animal but not in the seoond.
Table 2.
Depressant power and duration of action of azido oxime
EMI6.2
2.-Cyclohexanone on the mean arterial pressure of bastard dogs anesthetized at normal pressure.
Dog n Dose Blood pressure Duration mg / kg mean (mm Hg) (minute) control change $; of change
EMI6.3
.¯, .. ¯. ", ..¯¯ ...., ¯ .. f -
EMI6.4
<tb> 234 <SEP> 1 <SEP> 147 <SEP> -14 <SEP> 10 <SEP> 120
<tb>
<tb>
<tb> 236 <SEP> 5 <SEP> 153-24 <SEP> 17 <SEP> 300 <SEP>
<tb>
<tb> 234 <SEP> 10 <SEP> 152 <SEP> -74 <SEP> 49 <SEP> 240
<tb>
Other test results are reported in the following table:
Board .
Lowering of blood pressure.
<Desc / Clms Page number 7>
EMI7.1
<tb> Dog <SEP> n <SEP> Dose <SEP> Blood pressure <SEP> <SEP> Duration
<tb> mg / kg <SEP> mean <SEP> (mm <SEP> Hg) <SEP>), <SEP> of <SEP> drop <SEP> (minute)
<tb>
<tb> ¯¯¯¯¯¯ <SEP> witness <SEP> ohute
<tb>
EMI7.2
24? ¯ xi 120 -12 10 30 245 o, 2ti 123 -33¯¯¯¯¯¯¯2¯7¯¯¯¯¯¯H
EMI7.3
<tb> Average <SEP> -22 <SEP> 18 <SEP> 50
<tb>
<tb> 250 <SEP> 0.5 <SEP> 145 <SEP> -le <SEP> 13 <SEP> 32
<tb>
<tb> 251 <SEP> 0.5 <SEP> 133 <SEP> - <SEP> 8 <SEP> 6 <SEP> 114
<tb>
<tb> Average <SEP> -13 <SEP> 10 <SEP> 73
<tb>
<tb> 245 <SEP> 1.0 <SEP> 128 <SEP> -50 <SEP> 39 <SEP> 38
<tb>
<tb> 234 <SEP> 1.0 <SEP> 157-24 <SEP> 15 <SEP> 119
<tb>
<tb> 247 <SEP> 1.0 <SEP> 103 <SEP> -il <SEP> the <SEP> ¯ <SEP> 110
<tb>
<tb> Average <SEP> -28 <SEP> 21 <SEP> 89
<tb>
<tb> 250 <SEP> 2,
0 <SEP> 155 <SEP> -3P <SEP> 25 <SEP> 168
<tb>
EMI7.4
251 2.0 135 -28, ¯ ¯ "21 300
EMI7.5
<tb> Average <SEP> -33 <SEP> 23 <SEP> 234
<tb>
In order to make the invention fully accessible to those skilled in the art, the preparation of the new compound is briefly described. A concentrated aqueous solution of 6.9 g of hydroxylamine hydrochloride and 5.3 g of sodium arbonate was prepared. anhydrous. To this were added 13 g of azido-2-cyclohexanone and enough ethanol to make a clear solution. After stirring for 24 hours at room temperature, the mixture was poured into excess water. The oil formed was extracted with chloroform.
After drying over sodium sulfate, the solvent was removed and the residue was distilled in a small distillation apparatus at 60 ° C. under a pressure of 0.05 mm Hg to obtain about 10 g of a clear oil.
183/68
<Desc / Clms Page number 8>
EMI8.1
<tb> ± 1? loulé <SEP> found
<tb>
<tb> C <SEP> 46,74 <SEP> 46, <SEP> 81
<tb>
<tb> H <SEP> 6.54 <SEP> 6.63
<tb>
<tb> N <SEP> 36.34 <SEP> 36.64
<tb>
The azido-2-cyolohexanone oxime of the invention can be administered by intravenous, oral, inhalation or spray. For oral administration, the compound may be combined with a solid pharmaceutical carrier in the form of a tablet, pill, powder, capsule or any other dosage form suitable for the administration. oral administration. Suitable solid carriers are lactose, wheat starch, microcrystalline cellulose, talc, stearic acid, magnesium stearate, gums etc.
Coated tablets or pills are particularly suitable because the coating prevents evaporation of the liquid azide from the pharmaceutical carrier. Capsules are also particularly interesting for the same reason. Conventional pharmaceutical capsules such as gelatin capsules can be used.
Azido-2-cyolohcxanone oxime can also be administered in liquid form. For oral use, liquid emulsions or suspensions containing 5 to 50; approx. of azide in the water, are appropriate.
We. can add as stabilizers common emulsifying and suspending agents. These compositions may also contain a small amount of ethanol which partially dissolves the azide. Liquid fats are not suitable as a carrier because azides are extremely soluble in these fats and appear to be. @
<Desc / Clms Page number 9>
does it tend to remain dissolved in the ohyle.
For intravenous injection or oral use, the azide can be used at its maximum concentration, dissolved in ethanol, polyalkylene oxide or any other pharmacologically inert carrier in which the azide is. soluble. For intravenous injection, it can also be aulsified in an inert isotonic aqueous solution. Azide concentrations of about 15 to 75% are suitable.
Azide can; It can also be administered by inhalations or nasal sprays but it is not normally used in this manner due to difficulty in matching the dosage. Nevertheless, in acute situations where it is necessary to immediately lower blood pressure, inhalation? and sprays are appropriate.