BE1027699B1

BE1027699B1 - Procédé de purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine radiomarqués

Info

Publication number: BE1027699B1
Application number: BE20215067A
Authority: BE
Inventors: Charles Vriamont; Frédérique Blanc-Beguin; Jean-Luc Morelle; Julien Masset; Roux Pierre-Yves Le; Corentin Warnier; Peter Eu; Thomas Vergote
Original assignee: Trasis S A
Priority date: 2021-01-28
Filing date: 2021-01-28
Publication date: 2022-04-01
Also published as: BE1027699A1; CN116806212A; KR20230137371A; JP2024504453A; CA3208780A1; EP4284771A1; WO2022161897A1; IL304662A; US20240076248A1; AU2022212395A1

Abstract

La présente invention concerne un procédé pour la purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) radio-marquée dans une solution injectable à un patient en utilisant un filtre de seringue, caractérisé en ce que le filtre de seringue utilisé a la caractéristique de piéger et de libérer le MAA radio-marqué tandis que les impuretés de la solution totale ne sont pas retenues.

Description

PROCÉDÉ DE PURIFICATION DE MACRO-AGRÉGATS DE SÉRUMALBUMINE HUMAINE RADIOMARQUÉS DOMAINE DE L’INVENTION

[0001] La présente invention se rapporte à un procédé simplifié pour la purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) marqués par un métal radioactif, désignés par la suite plus simplement comme radio-marqués. Cette simplification permet une automatisation plus aisée de telles synthèses de radio-traceurs.

ARRIÈRE-PLAN TECHNOLOGIQUE Tomographie par émission de positrons

[0002] La tomographie par émission de positrons (Positron Emission Topography ou PET) est un procédé d'imagerie médicale qui vise à obtenir une information moléculaire et biochimique quantitative des processus physiologiques se produisant dans le corps. Le produit radio-pharmaceutique PET le plus couramment utilisé aujourd’hui est le [18F]-fluorodésoxyglucose ([18F] -FDG), une molécule de glucose radio-marquée. L'imagerie PET au [18F]-FDG permet de visualiser le métabolisme du glucose et inclut un large éventail d'indications cliniques. Parmi les émetteurs de positrons, le 18F est le plus utilisé aujourd’hui dans l’environnement clinique. En raison de la pression réglementaire croissante, les produits radio-pharmaceutiques sont …— généralement préparés aujourd’hui sur des composants à usage unique assemblés dans des cassettes prêtes à l’emploi.

[0003] Outre le 18F, les radio-métaux (par exemple 64Cu, 89Zr, 67Ga, 68Ga, 86Y, 90Y, 177Lu et 99MTc) jouent un rôle central en médecine nucléaire en tant qu’agents thérapeutiques et d'imagerie pour la radiothérapie et le marquage de molécules — biologiquement importantes à faible poids moléculaire et de macromolécules comme les protéines, les peptides et les anticorps.

[0004] Dans un passé récent, une augmentation rapide a été observée dans les études tant cliniques que précliniques impliquant des produits radio-pharmaceutiques marqués au 68Ga (Velikyan |., Prospective of 68Ga-radiopharmaceutical development. Theranostics 2014; 4:47-80; Banerjee S.R., Pomper M.G. Clinical applications of Gallium-68. Appl. Radiat. Isot. 2013; 76:2-13; Zimmerman B.E. Current status and future needs for standards of radionuclides used in positron emission tomography. Appl. Radiat. Isot. 2013; 76:31-37; Smith D.L., Breeman W.A.P., Sims-Mourtada J., The untapped potential of Gallium-68 PET: The next wave of 68Ga-agents. Appl. Radiat. sot. 2013; 76:14-23). Cette augmentation peut être attribuée aux caractéristiques physiques favorables du 68Ga (Eßmax 1,8 MeV, B+ 89%, T1;2= 67,7 minutes, contre environ 6 heures pour le 99mTc) pour l'imagerie de divers processus à évolution rapide (prolifération, apoptose, angiogenèse) et cibles (hormones de croissance, perfusion myocardique et pulmonaire, inflammation et infection) et, dans une certaine mesure, à des méthodes de production et de marquage plus récentes et plus fiables. Par exemple, les analogues de la somatostatine marqués au Gallium-68 ont déjà montré leur supériorité sur l’agent existant 111In-DTPA-octréotide grâce à leur sensibilité, spécificité, précision et rentabilité améliorées pour le diagnostic des patients atteints de tumeurs neuroendocrines (Oberg K., Ga/lium-68 somatostatin receptor PET/CT: Is it time to replace 111Indium DTPA octrotide for patients with neuroendocrine tumors? Endocrine 2012; 42:3-4; Schreiter N.F., Brenner W., Nogami M., Buchert R., Huppertz A., Pape U.F., Prasad V., Hamm B., Maurer M.H., Cost comparison of 111In-DTPA-octrotide scintigraphy and 68Ga-DOTATOC PET/CT for staging enteropancreatic neuroendocrine tumours. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging 2012; 39: 72-82; Hofman M.S., Kong G., Neels O.C. Eu P., Hong E., Hicks R.J., High management impact of Ga-68 DOTATATE (GaTate) PET/CT for imaging neuro-endocrine and other somatostatin expressing tumours. J. Med. Imaging Radiat. Oncol. 2012; 56-40-47).

[0005] Une autre raison qui explique l’infatuation actuelle du Gallium-68 est qu’il peut être produit sur place par des générateurs 68Ge/68Ga largement disponibles dans le commerce. De tels générateurs 68Ge/68Ga sont largement accessibles dans les installations de médecine nucléaire qui ne sont pas équipées d’un cyclotron sur site. La simplicité et le coût d’investissement inférieur du générateur 68Ge/68Ga l'ont rendu plus populaire parmi les installations de médecine nucléaire où le besoin de doses marquées au 68Ga est relativement moindre (Rosch F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 2013; 76:24-30).

Macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) radio-marquée

[0006] L'utilisation de macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) comme agent de perfusion est évaluée depuis 1965 (Furth E.D., Okinaka A.J., Focht EF, Becker D.V., The distribution, metabolic fate and radiation dosimetry of 131! labelled macroaggregated albumin. J. Nucl. Med. 1965; 6:506-518). En 1974, un kit instantané pour la préparation de MAA marqué au 99mTc a été évalué à cet effet en utilisant la tomoscintigraphie par émission monophotonique (Single Photon Emission Computed Tomography ou SPECT) (Charidra R., Shamoun J., Braunstein P., DuHov O.L., Clinical evaluation of an instant kit for preparation of 99mTc MAA for lung scanning. J. Nucl. Med. 1974; 14-9:702-705). Ce médicament est devenu la norme pour les études de perfusion pulmonaire et domine toujours le marché (Suga K., Kawakami Y., Zaki M., Yamashita T., Matsumoto T., Matsunaga N., Pulmonary perfusion assessment with respiratory gated Tc-99m macroaggregated albumin SPECT: preliminary results. Nucl. Med. Commun. 2004; 25: 183-193). De nos jours, de nombreux kits de marquage MAA au 99mTc approuvés par la FDA sont disponibles dans le commerce (par exemple Pulmocis® (de CisBio), LyoMAA® (de Covidien), HAS-B20® (de Rotop ), MAASOL® (de GE), etc.). Tous ces kits sont fournis sous la forme d’un flacon stérile à usage unique qui contient -2,0 mg de particules de MAA, -0,05 mg de SnCl: (en tant qu’agent de réduction S9mTc ) et -5,0 mg d’albumine libre.

[0007] Dans le contexte de la pénurie mondiale de 99Mo, qui se désintègre pour former le 99mTc et est utilisé dans environ 600,000 procédures d'imagerie médicale dans le monde chaque semaine, il convient de réfléchir à des alternatives afin de ne pas dépendre d’un quelconque manque de 99mTc. Le générateur 68Ge/68Ga représente une alternative intéressante à cet égard. De plus, la PET/CT fournit des images avec une résolution nettement plus élevée que la SPECT. Ainsi, le MAA marqué au 68Ga pour l'imagerie PET/CT de perfusion représente une alternative intéressante au MAA marqué au 99mTc.

[0008] MAA a été avec succès marqué au 68Ga en 1986 (Maziere B., Loc'h C., Steinling M., Comar D., Stable /abelling of serum albumin microspheres with gallium-68. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. Part A 1986; 37:360-361) et en 1989 (Even G.A., Green M.A, Gallium-68-labeled macroaggregated human serum albumin, 68Ga-MAA. Int. J. Radiat. Appl. Instr. 1989; 16:319-321) mais n’a jamais été utilisé à l’époque, probablement en raison du manque de fiabilité des générateurs 68Ge/68Ga existants et de la faible disponibilité des caméras d'imagerie PET. Plus tard, Mathias et al. (Mathias C.J. Green M.A., A convenient route to [68Ga]Ga-MAA for use as a particulate PET — perfusion tracer. Appl. Radiat. Isot. 2008; 66:1910-1912) ont également réussi à marquer du MAA au 68Ga. Des résultats similaires ont été rapportés en utilisant des systèmes de kit MAA-99mTc disponibles dans le commerce (Jain A., Subramanian S., Pandey U., Sarma H.D., Ram R., Dash A., /n-house preparation of macroaggregated albumin (MAA) for 68Ga labelling and its comparison with commercially available MAA. J. Radioanal. Nucl. Chem. 2016 ; 308:817-824 ; Amor-Coarasa A., Milera A., Carvajal D., Gulec S., McGoron A.J., Lyophilized kit for the preparation of the PET perfusion agent [68Ga]- MAA. Int. J. Mol. Imaging 2014:1-7; Ament S.J., Maus S., Reber H., Buchholz H.G,

Bausbacher N., Brochhausen C., Graf F., Miederer M., Schreckenberger M., PET lung ventilation/perfusion imaging using 68Ga aerosol (Galligas) and 68Ga-labeled macroaggregated albumin.

Recent Results Cancer Res. 2013; 194:395-423). Pour éliminer les composants indésirables tels que le chlorure stanneux, qui est habituellement utilisé en tant que composant de réduction, le lyophilisat du système de kit MAA a été remis en suspension et lavé par centrifugation avec une solution saline à 0,9%. Une pré-conjugaison du MAA avec le chélateur DOTA (Kotzerke J., Andreeff M., Wunderlich G., Wiggermann P., Zphel K., Ventilation/Perfusion scans using Ga-68 labeled tracers.

Abstracts of invited lectures.

World J.

Nucl.

Med. 2011; 10:26-59) pour un marquage efficace au 68Ga n’est pas nécessaire dans cette procédure.

Après marquage, les MAA-68Ga ont été purifiés par centrifugation, ce qui prend du temps, diminue significativement le rendement final et n’est pas sujet à l’automatisation.

Les auteurs ont également montré qu’il n’y avait pas de différence de morphologie entre les particules de MAA marquées et non marquées.

Maus et coll. (Maus S., Buccholz H.G.,

Ament S., Brochhausen C., Bausbacher N., Schreckenberger M., Labelling of commercially available human serum albumin kits with 68Ga as surrogates for 99mTc-

MAA microspheres.

Appl.

Radiat.

Isot. 2011; 69:171-175) sont arrivés à des résultats similaires et ont utilisé cette méthode pour étudier l’efficacité du marquage en utilisant un tampon HEPES.

Une efficacité de marquage maximum de 70% a été trouvée et la

— pureté radiochimique après une étape de purification finale par extraction en phase solide (Solide Phase Extraction ou SPE) (en utilisant une cartouche SEP-Pack C18) était supérieure à 95%. || a toutefois été montré que cette purification finale SPE réduit considérablement le résultat final du MAA-68Ga (>30% du MAA marqué restent coincés sur la cartouche SPE). Tous ces rapports publiés sur le radio-marquage du MAA divulguent l’utilisation directe d’une fraction brute de l’éluat du générateur 68Ge/68Ga.

En raison de l’utilisation d’une fraction brute de l’éluat, une percée 68Ge du générateur ne peut pas être séparée du produit final lors de la procédure de marquage.

De plus,

cette méthode n’utilise qu’une partie de l’activité éluable du 68Ga.

Pour surmonter ce désavantage, Mueller et al. (Mueller D., Kulkarni H., Baum R.P., Odparlik A., Rapid synthesis of 68Ga-labeled macroaggregated human serum albumin (MAA) for routine application in perfusion imaging using PET/CT. 2017; 122:72-77) ont récemment fourni une préparation adéquate de MAA-68Ga grâce à une pré-purification cationique de l’éluat du générateur.

Le procédé permet d'utiliser la majeure partie de l’activité 68Ga éluée du générateur et ne nécessite aucune étape de purification du milieu réactionnel car la percée de 68Ge est éliminée pendant la pré-purification cationique.

Néanmoins, en l’absence d’une étape finale de purification, la production peut être perdue en cas de marquage à faible rendement.

Les auteurs montrent également que l’étape de pré-

lavage par centrifugation du MAA pour éliminer le chlorure d’étain n’est pas nécessaire pour atteindre un rendement de marquage efficace.

[0009] Des générateurs Gallium-68 (68Ge/68Ga) du commerce sont largement disponibles. L’isotope parent 68Ge a une demi-vie de 270,95 jours et peut être 5 facilement livré aux hôpitaux en tant que générateur, où il peut être utilisé comme source de Ga-68 pendant au moins 1 an. Le 68Ga à demi-vie courte peut être facilement élué du générateur sur le site d’application à tout moment. Le générateur 68Ga de type chromatographique est une colonne en verre avec un sorbant à base de TiO2 modifié. Le radionucléide parent 68Ge est fixé sur ce sorbant. La colonne est placée dans un récipient à blindage de plomb et pourvue de lignes d’éluant et d’éluat. Le 68Ga qui est généré suite de la désintégration du 68Ge, est élué de la colonne par exemple en utilisant une solution de HCI 0,1 M. L’activité isotopique du parent est par exemple comprise entre 10 mCi (370 MBq) et 100 mCi (3700 MB). La percée de 68Ge est généralement inférieure à 0,005%.

PROBLÈME À RÉSOUDRE

[0010] Le MAA marqué au 99mTc est un agent de perfusion pulmonaire établi largement utilisé avec la SPECT. En raison de la supériorité du PET sur la SPECT et de la pénurie prochaine de 99Mo, le MAA marqué au 68Ga pour l’imagerie de perfusion PET/CT représente une alternative intéressante au MAA marqué au 99mTc.

[0011] Bien que les conditions de marquage du 68Ga au MAA sont bien définies, il manque un système efficace et facile à automatiser avec des cassettes à usage unique ainsi qu’une purification finale avec un bon rapport temps/rendement pour les particules MAA marquées au 68Ga à partir des milieux réactionnels de masse, qui supprimerait la percée du 68Ge et assurerait systématiquement une pureté radiochimique élevée permettant une injection sûre au patient et sans impact sur le rendement de synthèse final.

[0012] De nos jours, une telle purification finale est effectuée soit par une centrifugation, qui nécessite un appareillage supplémentaire, prend du temps, a un impact négatif sur le rendement global de synthèse (-20% de perte d'activité) et est importune d’un point de vue de la radioprotection, ou par purification SPE, qui a un impact négatif sur le rendement (>30% de perte d’activité due aux particules marquées collées sur la cartouche). Un exemple récent utilise une pré-purification cationique de Véluat du générateur, qui prend du temps, sans aucune purification finale qui n’est pas complète d’un point de vue réglementaire. Des méthodes de synthèse alternatives avec une étape de purification finale très efficace sont donc hautement souhaitables. La méthode de purification choisie doit être suffisamment efficace et fiable pour garantir un haut niveau de pureté radiochimique.

BUT DE L'INVENTION

[0013] La présente invention vise à réaliser une synthèse de particules de MAA marquées au 68Ga, qui est facilement automatisée sur les consommables prêts à l'emploi et comprend une purification finale efficace des particules marquées.

RÉSUMÉ DE L’INVENTION

[0014] La présente invention se rapporte à un procédé pour la synthèse et la purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) radio-marqués en vue de former une solution totale injectable à un patient, qui comprend les étapes suivantes consistant à : - fournir un métal radioactif à un générateur, sous la forme d’un éluat du générateur ; - éventuellement pré-purifier l’éluat du générateur sur une cartouche cationique et éluer l’éluat du générateur pré-purifié; - Synthétiser le MAA radio-marqué dans un réacteur avec des particules de MAA à partir d’un kit de marquage pour 99mTc disponible dans le commerce et ledit éluat du générateur, pré-purifié ou non; - faire passer les particules de MAA radio-marquées synthétisées sur la membrane filtrante d’une seringue, dont la composition de membrane, le diamètre et la taille de pores sont choisis de manière à piéger les particules de MAA radio-marquées, tandis que les impuretés de la solution totale ne sont pas retenues, lesdites impuretés étant essentiellement constituées d’isotopes radio-métalliques libres, d’une percée radio- métallique parente et de chlorure stanneux présent dans ledit kit de marquage MAA pour 99mTc; - libérer lesdites particules de MAA radio-marquées piégées du filtre de la seringue en utilisant une solution saline ou tamponnée qui passe à travers le filtre de la seringue dans le sens opposé au mouvement de piégeage et transvaser la solution totale finale injectable à un patient dans un flacon.

[0015] Selon des modes de réalisation préférés, le procédé comprend en outre l’une des caractéristiques suivantes ou une combinaison appropriée de celles-ci: - les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec des ions métalliques détectables choisis parmi le groupe constitué de

99mTc, 94mTc, 48V, 52Fe, 55Co, 64Cu, 68Ga, 67Ga, 111In, 113In, 86Y, 89Zr, 203Pb, 212Bi, 82Rb, 186Re et 81mKr ; - les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec des ions métalliques détectables choisis parmi le groupe constitué de 99mTc, 68Ga, 86Y, 89Zr et 64Cu ; - les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec 99mTc ou 68Ga ; - la taille des pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 10,0 um ; - la taille des pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 5,0 um; - la taille des pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 0,45 um; - le diamêtre de la membrane filtrante de la seringue est compris entre 10 et 33 mm; - le diamètre de la membrane filtrante de la seringue est compris entre 20 et 33 mm; - la membrane filtrante de la seringue est une membrane hydrophile à faible liaison protéique choisie parmi le groupe constitué de PVDF, PES, CA, PTFE hydrophile, nylon, fibre de verre, RC, CE, CN et PP ; - le filtre de la seringue est une cartouche filtrante à usage unique ayant éventuellement des raccords Luer lock; - le filtre de la seringue est fixé à une cassette à usage unique dans un processus automatisé; - l’éluat du générateur est maintenu à température ambiante pendant 2 à 30 minutes ou chauffé à 40-80°C pendant 2 à 20 minutes avant l’étape de piégeage de l’éluat du générateur sur le filtre de la seringue; - le réacteur pour la synthèse du MAA radio-marqué est un synthétiseur automatisé.

BRÈVE DESCRIPTION DES DESSINS

[0016] La FIG.1 représente schématiquement les étapes de piégeage du MAA radio-marqué (côté gauche, les particules sont piégées sur le filtre, tandis que les impuretés passent à travers le filtre vers le rebut) et de libération (côté droit, le flux de solution libère les particules).

DIVULGATION DE L'INVENTION

[0017] Le procédé de la présente invention permet la purification de particules de MAA marquées au 68Ga, préparée en utilisant directement tout l’éluat du générateur ou comprenant alternativement une pré-purification cationique de l’éluat du générateur. Le procédé est en outre compatible avec tout kit de marquage MAA pour 99mTc disponible dans le commerce.

[0018] Cette purification efficace est réalisée grâce à l’utilisation d’un filtre de seringue. Un filtre de seringue est une cartouche filtrante à usage unique. Les filtres de seringue peuvent avoir des raccords Luer Lock, mais pas systématiquement. Pour la purification manuelle, il est attaché à l’extrémité d’une seringue avant utilisation. Dans les processus automatisés, les filtres à seringue peuvent être fixés sur des cassettes à usage unique. L'utilisation d’une aiguille est facultative; le cas échéant, elle peut être installée à l'extrémité du filtre de la seringue. Un filtre de seringue est généralement constitué d’un boîtier en plastique avec une membrane qui sert de filtre. Le fluide à purifier peut être nettoyé en l’aspirant à travers le filtre. Une membrane de filtre de seringue est caractérisée par sa composition (matériau et taille de pores) et son diamètre. Les tailles de pores courantes disponibles sont 0,1, 0,2, 0,22, 0,45, 5 et 10 um, bien que des tailles de pores intermédiaires soient facilement disponibles. Des diamètres de membrane de 10, 13, 25, 33 mm sont également courants. Le corps du filtre de seringue peut être fait de matériaux tels que le polypropylène et le nylon. La membrane filtrante peut être en polytétrafluoroéthylène (PTFE), nylon, acétate de cellulose (CA), polyfluorure de vinylidène (PVDF), ester de cellulose (CE), — polyéthersulfone (PES), polypropylène (PP), fibre de verre (GF), cellulose régénérée (RC), nitrate de cellulose (CN), etc.

[0019] En passant par les milieux réactionnels sur la membrane filtrante de la seringue, les particules de MAA marquées et non-marquées sont retenues sur le filtre par exclusion de taille, tandis que la percée 68Ge et le 68Ga3+ libre restant passent à travers la membrane filtrante de la seringue vers le rebut (Fig.1, à gauche).

[0020] Pour libérer les particules du filtre de seringue, une solution passe à travers la membrane filtrante de la seringue, dans la direction opposée (ou inverse) du mouvement de piégeage, dans un flacon de produit final (Fig.1, à droite). La libération est causée par l’écoulement de la solution de libération. La solution de libération précitée étant injectable (par exemple, une solution appropriée de tampon phosphate ou une solution saline physiologique, soit 0,154 mol/L ou 9 g/L de NaCl), la solution de traceur qui en résulte est facilement injectable à un patient.

[0021] Plusieurs avantages sont à noter: réduction de la durée de préparation, ce qui entraîne une augmentation du rendement global; simplification de l’équipement — automatisé nécessaire à la synthèse du produit radio-pharmaceutique; procédé de purification compatible avec toute particule de MAA radio-marquée, qui n’est donc pas limité au 68Ga ou au Tc99m; assurance d’une pureté radiochimique de haut niveau même en cas de marquage à faible rendement.

[0022] Selon la présente invention, le procédé de purification est effectué en faisant passer toute la synthèse des particules de MAA radio-marquées sur un filtre de seringue, qui peut être placé sur une cassette à usage unique pour l’automatisation. Ce filtre de seringue a la particularité de retenir les produits de MAA marqués (et non marqués) mais pas le radio-isotope libre qui n’est pas marqué (à savoir le 68Ga3+ dans le cas du marquage de MAA au 68Ga, ainsi que la percée 68Ge) assurant un haut niveau de pureté radiochimique, et pas non plus le chlorure d’étain provenant du kit de marquage de MAA d'origine.

[0023] Dans certains modes de réalisation de la présente invention, les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec un ion métal détectable tel que 99mTc, 94mTc, 48V, 52Fe, 55Co, 64Cu, 68Ga, 67Ga, 111In, 113In, 86Y, 89Zr, 203Pb, 212Bi, 82Rb, 186Re, 81mKr.

[0024] Dans certains modes de réalisation préférés de la présente invention, les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées au 99mTc, 68Ga , 86Y, 89Zr ou 64CU.

[0025] Dans certains modes de réalisation préférés de la présente invention, les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées au 99mTc ou 68Ga.

[0026] Dans certains modes de réalisation, la taille de pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 10,0 um.

[0027] Dans certains modes de réalisation préférés, la taille de pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 5,0 um.

[0028] Dans certains modes de réalisation préférés, la taille de pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 0,45 um.

[0029] Dans certains modes de réalisation, le diamètre de la membrane filtrante de la seringue est dans la plage de 10 - 33 mm.

[0030] Dans certains modes de réalisation, le diamètre de la membrane filtrante de la seringue est dans la gamme de 20 - 33 mm.

[0031] Dans certains modes de réalisation, la membrane filtrante de la seringue est choisie parmi le groupe constitué des membranes hydrophiles à liaison à faible teneur en protéines (PVDF, PES, CA, PTFE hydrophile, nylon, fibre de verre, RC, CE, CN, PP).

EXEMPLES Exemple 1

[0032] Cet exemple montre l'efficacité de l’utilisation d’un filtre de seringue pour purifier une masse de 68Ga-MAA. Le 68Ga-MAA a été synthétisé sur un synthétiseur automatisé, en utilisant une pré-purification cationique de l’éluat du générateur: un générateur Eckert & Ziegler 68Ge/68Ga est élué avec 5 ML de 0,1 M HCI. L’éluat du générateur est piégé sur une cartouche cationique PS-H+ qui retient le 68Ga3+ élué. L'activité est ensuite éluée vers le réacteur en utilisant une solution de NaCl concentrée acidifiée. Le MAA issu d’un kit de marquage Pulmocis®, dissout dans un tampon acétate, est ajouté au réacteur. Après un temps de chauffe de 6 minutes à 60°C, le milieu réactionnel est envoyé dans le flacon de produit final et formulé avec un tampon phosphate pour atteindre un pH final de 7,0 (le volume final est de 10 mL). Le rendement radiochimique non-désintégré corrigé (ndc) est de 75% (111,4 MBq ) et la pureté radiochimique est de 80%. Cette solution de produit final (111,4 MBq ) est passée manuellement à travers une membrane filtrante de seringue en PVDF de 25 mm avec une taille de pore de 5 um (Millipore Réf. SLSVO25LS). L’ ensemble des particules 88Ga- MAA marquées sont retenues sur le filtre (activité sur le filtre: 88,6 MBq) tandis que le 68Ga3+ libre passe à travers le filtre (activité dans le filtrat: 22,8 MBq). Après le — piégeage, 10 ML de solution physiologique saline traversent le filtre de seringue, dans la direction opposée du mouvement de piégeage, pour libérer les particules marquées. Une libération efficace de 98,2% (2 MBq restant sur le filtre) est atteinte. Une analyse par chromatographie en couche mince (Thin Layer Chromatography ou TLC ) montre une pureté radiochimique des particules 68Ga-MAA libérées de 98,9 %. Exemple 2

[0033] Cet exemple montre l'efficacité de l’utilisation d’un filtre de seringue pour piéger et libérer un volume de 99mTc-MAA. Le 99mTc-MAA est synthétisé en utilisant un kit de marquage Pulmocis® du commerce suivant la procédure habituelle: le générateur Tc est directement élué dans le kit de marquage Pulmocis®. Après 15 minutes à température ambiante avec mélange doux, la solution totale de MAA marquée au 99mTc passe manuellement à travers un filtre de seringue (25 mm de diamètre, 5 um de taille de pores, membrane PVDF, Millipore Réf. SLSVO25LS). Les particules marquées sont retenues sur le filtre (activité sur le filtre: 44163 cps/10s). Après piégeage, 10 mL de solution saline physiologique passe à travers le filtre dans le sens opposé au — mouvement de piégeage. L'efficacité de la libération est de 91% (activité restante sur le filtre: 4523 cps/10s).

Exemples 3-11

[0034] Les exemples suivants montrent l’efficacité de l’utilisation d’un filtre de seringue pour purifier une masse de 68Ga-MAA. Le 68Ga-MAA est synthétisé sur un synthétiseur automatisé, sans pré-purification de l’éluat du générateur (c’est-à-dire en utilisant tout l’éluat du générateur), mais avec une purification finale sur un filtre de seringue placé sur la cassette à usage unique. Un générateur Eckert & Ziegler 68Ge/68Ga est élué avec 5 mL de HCI 0,1 M directement dans le réacteur qui contient les particules MAA d’un kit de marquage Pulmocis® dissout dans 2 ML d’une solution d’acétate 0,35 M. Après un temps de chauffe de 6 minutes à 60°C, le milieu réactionnel passe à travers le filtre de seringue qui retient les particules marquées, tandis que le 68Ga3+ libre et la percée 68Ge passent à travers le filtre vers le rebut. 10 ML de solution saline physiologique sont ensuite utilisés pour libérer les particules marquées dans le flacon de produit final. Le temps de synthèse est de 12 minutes après l’élution du générateur. Les expériences ont été répétées en variant le type de seringue à filtre (Exemples 3 à 11). Le Tableau 1 montre le rendement radiochimique (Radio Chemical Yield ou RCY) non-désintégré corrigé (ndc.), la pureté radiochimique (RCP) et la teneur en 68Ge (lorsqu’elle est mesurée) dans le flacon de produit final pour les exemples 3 à

11. RCY (Yndc)|RCP (%) à t0 | Contenu 68Ge 25 mm, 5 um, PVDF 13 mm, 5 um, CA Steriltech Réf. CA501350 46 99,1 / 13 mm, 0,45 um, PVDF 25 mm, 0,22 um, PVDF ° | © | moche slaves | © | 190 | 000% 25 mm, 0,22 um, PVDF ° Millex Réf. SLGVO250S 50.000175 25 mm, 0,22 um, PVDF 25 mm, 0,22 um, PVDF 25 mm, 0,22 um, PVDF 25 mm, 0,22 um, PVDF Tableau 1 - Résultats des exemples 3-11 (*) Mesuré après désintégration complète de 68Ga3+. La limite d’injection du patient est de 0,001% de l'activité initiale.

[0035] Le Tableau 1 montre la grande efficacité de l’utilisation de filtres à seringue pour la purification de MAA radio-marqué.

Un rendement radiochimique de haut niveau est presque toujours obtenu, même en cas de faible rendement de marquage et de faible rendement de libération.

La procédure est également efficace en terme de temps, car le temps de synthèse, en ce compris la purification finale et la mise en flacon du produit final, est de 12 minutes après l’élution du générateur.

Claims

REVENDICATION

1. Procédé pour la synthèse et la purification de macro-agrégats de sérumalbumine humaine (MAA) radio-marquée pour former une masse de solution injectable à un patient, qui comprend les étapes suivantes consistant à : - fournir un métal radioactif dans un générateur, sous la forme d’un éluat de générateur, - éventuellement pré-purifier l’éluat du générateur sur une cartouche cationique et éluer l’éluat du générateur pré-purifié; - Synthétiser le MAA radio-marqué dans un réacteur avec des particules de MAA à partir d’un kit de marquage pour 99mTc disponible dans le commerce et ledit éluat de générateur, pré-purifié ou non; - faire passer les particules de MAA radio-marquées synthétisées sur une membrane filtrante de seringue dont la composition de membrane, le diamètre et la taille de pores sont choisis de manière à piéger les particules de MAA radio-marquées, tandis que les impuretés de la solution totale ne sont pas retenues, lesdites impuretés étant essentiellement constituées d’isotopes de métal radioactif libre, de percée de métal radioactif parent et de chlorure stanneux présent dans ledit kit de marquage au MAA pour 99mTc; - libérer lesdites particules de MAA radio-marquées piégées du filtre de seringue en utilisant une solution saline ou tamponnée passant à travers le filtre de seringue dans le sens opposé au mouvement de piégeage et fournir la solution totale finale injectable à un patient dans un flacon.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec des ions métalliques détectables choisis parmi le groupe constitué de 99mTc, 94mTc, 48V, 52Fe, 55Co, 64Cu, 68Ga, 67Ga, 111In, 113In, 86Y, 89Zr, 203Pb, 212Bi, 82Rb, 186Re et 81mKr.

3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marquées avec des ions métalliques détectables choisis parmi le groupe constitué de 99mTc, 68Ga , 86Y, 89Zr et64Cu.

4. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que les particules de MAA radio-marquées à purifier sont des particules de MAA marqués au 99mTc ou au 68Ga.

5. Procédé selon l’une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la taille de pores de la membrane filtrante de seringue est comprise entre 0,1 et 10,0 um.

6. Procédé selon la revendication 5, caractérisé en ce que la taille de pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 5,0 um.

7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que la taille de pores de la membrane filtrante de la seringue est comprise entre 0,1 et 0,45 um.

8. Procédé selon l’une quelconque des revendications 5 à 7, caractérisé en ce que le diamètre de la membrane filtrante de la seringue est dans la plage de 10-33 mm.

9. Procédé selon la revendication 8, caractérisé en ce que le diamètre de la membrane filtrante de la seringue est dans la plage de 20 - 33 mm.

10. Procédé selon la revendication 8 ou 9, caractérisé en ce que la membrane filtrante de la seringue est une membrane hydrophile à faible liaison protéique choisie parmi le groupe constitué de PVDF, PES, CA, PTFE hydrophile, nylon, fibre de verre, RC, CE, CN et PP.

11. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le filtre de seringue est une cartouche filtrante à usage unique avec éventuellement des raccords Luer lock.

12. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le filtre de seringue est fixé sur une cassette à usage unique dans un processus automatisé.

13. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que l’éluat du — générateur est maintenu à température ambiante pendant 2 à 30 minutes ou chauffé à 40-80°C pendant 2 à 20 minutes avant l’étape consistant à piéger l’éluat du générateur sur le filtre de seringue.

14. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le réacteur pour la synthèse du MAA radio-marqué est un synthétiseur automatisé.