WO2005120435A2 - Method for preparing sustained release compositions and the use of said compositions for treating chronic diseases of central nervous system (cns) - Google Patents

Method for preparing sustained release compositions and the use of said compositions for treating chronic diseases of central nervous system (cns) Download PDF

Info

Publication number
WO2005120435A2
WO2005120435A2 PCT/FR2005/001128 FR2005001128W WO2005120435A2 WO 2005120435 A2 WO2005120435 A2 WO 2005120435A2 FR 2005001128 W FR2005001128 W FR 2005001128W WO 2005120435 A2 WO2005120435 A2 WO 2005120435A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
microspheres
gel
ethyl acetate
active substance
volume
Prior art date
Application number
PCT/FR2005/001128
Other languages
French (fr)
Other versions
WO2005120435A3 (en
Inventor
Frédéric LAGARCE
Joël Richard
Jean-Pierre Benoit
Nathalie Faisant
Philippe Menei
Original Assignee
Ethypharm
Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ethypharm, Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) filed Critical Ethypharm
Publication of WO2005120435A2 publication Critical patent/WO2005120435A2/en
Publication of WO2005120435A3 publication Critical patent/WO2005120435A3/en

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0085—Brain, e.g. brain implants; Spinal cord
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system

Definitions

  • the present invention relates to a process for preparing microspheres, the microspheres thus obtained and their use in therapy.
  • Central Nervous System CNS is physiologically isolated from the rest of the body by two cell barriers: the blood-brain barrier (BBB) which isolates the blood of the central nervous tissue and the barrier hemo-meningeal (BHM) which isolates the cerebrospinal fluid (LCS) blood.
  • BBB blood-brain barrier
  • BHM barrier hemo-meningeal
  • This double barrier makes any treatment by conventional route (parenteral or oral) difficult.
  • Certain routes of administration make it possible to reach the structures of the CNS by breaking in through the BHM.
  • compositions in the form of microparticles of polymer (s) dispersed, in a homogeneous manner in a solution of biocompatible polymer which is capable of forming a gel in situ in the organism after administration appears particularly suitable for intrathecal, epidural, intracerebroventricular or intracerebral administration.
  • active substance in microparticulate form means any microparticle of active substance the mean size of which by volume is between 0.5 and 10 micrometers, preferably between 2 and 5 micrometers.
  • the polymer has an average molar mass in weight between 55,000 g / mole and 120,000 g / mole, preferably between 70,000 g / mole and 100,000 g / mole. Examples include the PGLA 50/50, 65/35, 75/25, 85/15 and the PLA3.00 / as well as their mixtures.
  • the shear rate is between 900 s "1 and 1400 s ' 1.
  • the process according to the invention can be used for any active ingredient insoluble in ethyl acetate, in the form of a base or of a salt thereof.
  • analgesics in particular local analgesics, opioids, anticancer agents, interleukins, growth factors and cytokines.
  • the method can in particular be used for the encapsulation of active principles useful in the treatment of spasticity, such as baclofen, ziconotide, and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine.
  • the present invention also relates to a composition for the sustained release of at least one active substance, comprising the previously described microspheres dispersed homogeneously in at least one solution of biocompatible polymer which is capable of forming a gel in situ in the organism after administration.
  • a composition for the sustained release of at least one active substance comprising the previously described microspheres dispersed homogeneously in at least one solution of biocompatible polymer which is capable of forming a gel in situ in the organism after administration.
  • the characteristics of the medium in which the suspension is injected causes the viscosity of said suspension of microparticles to increase in order to form a gel phase in situ, - in which the microparticles are homogeneously dispersed .
  • the compositions of the present invention are presented before administration to the subject treated in the form of a liquid, low-viscosity suspension of biodegradable microparticles in a solution of biocompatible polymer (s).
  • compositions of the present invention are presented after administration to the subject treated in the form of a viscous gel, in which are homogeneously dispersed the biodegradable microparticles previously described.
  • the gel is advantageously a heat-sensitive gel having a gelation temperature of between 27 and 37 ° C. It is advantageously chosen from heat-sensitive gels, cellulosic gels and polysaccharide gels.
  • thermosensitive gel mention may be made especially Poloxamer gels, such as Poloxamer 407, such as Lutrol ® PF-127.
  • a polysaccharide gel mention may be made of chitosan gels.
  • the gel has a viscosity between 4 and 2000 rnPa.s "1 , measured at 37 ° C.
  • the concentration of microspheres in the gel is advantageously between 10 and 500 mg / ml.
  • the compositions according to the invention allow the active substance to be released in vivo over a period of at least 100 days
  • the microspheres and the compositions described above can be used for the preparation of a medicament intended to treat spasticity and capable of being administered by the In this indication, the active substance encapsulated in the microspheres is chosen from baclofen, ziconotide and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine.
  • microspheres and the compositions described above can also be used for the preparation of a medicament intended to treat chronic pain and able to be administered by epidural route, int rathecal or intracerebral.
  • the active substance is chosen from analgesics, in particular local painkillers, alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine, opioids, anticancer drugs, interleukins, growth factors and cytokines. Examples 1 to 3 and Figures 1 to 5 which follow illustrate the invention.
  • FIG. 1 represents the in vi tro release profile in flow-through cells of baclofen from the preparation of microspheres made of PLAGA 85/15 loaded at 11%.
  • FIG. 2 illustrates the effect of the suspension medium on the in vitro release of microencapsulated baclofen during the first hours.
  • Table 1 gives the average speed measured baclofen release in vitro from a suspension of microspheres in different media: PBS buffer, 1% CMC, Lutrol gel ® PF-127 21% gel and chitosan.
  • FIG. 3 illustrates the monitoring of baclofen concentrations in the LCS in goats after intrathecal implantation of a suspension of microspheres loaded with 11% in suspension in various media: Ringer lactate, carboxymethylcellulose (CMC) 1% or 0.5% or 21% PF-127 gel. Standardized data for an injected dose of 10 g of encapsulated baclofen.
  • Figure 4 illustrates the monitoring of plasma baclofen concentrations in goats after intrathecal implantation of a suspension of 11% charged microspheres suspended in various media: carboxymethylcellulose (CMC) 0.5%, CMC 1% and PF-127 gel 21%.
  • CMC carboxymethylcellulose
  • CMC carboxymethylcellulose
  • Example 1 Preparation and characterization of PLAGA microspheres loaded with baclofen 1.1.
  • Materials and methods The microspheres are prepared using polymers from the poly (DL-lactide-co glycolide), Medisorb ® Alkermes series: 50/50 (M w 74000 g / mole, specific viscosity 0.75 dL / g) or 85/15 (M w 95,000 g / mol, specific viscosity 0.63 dL / g), polyvinyl alcohol 88% hydrolysis, Rhodoviol ® 4/125, and ethyl acetate.
  • Micronized baclofen powder comes from the company Heumann (Germany). •
  • the resulting suspension is then emulsified in 40 ml of an aqueous solution of 5% polyvinyl alcohol maintained at 4 ° C. in a 250 ml reactor with vigorous stirring (1000 revolutions per minute), producing a constant shear of 1200 s - 1 .
  • the bottle containing the suspension is rinsed with 2 ml of ethyl acetate which are added to the emulsion during formation.
  • the precipitation of the polymer in the form of microparticles by extraction of ethyl acetate is initiated by adding 100 ml of water at 20 ° C in one minute, directly on the emulsion during formation.
  • the extraction of the organic solvent is finalized by rapid transfer of the emulsion into 2 L of water at 20 ° C with stirring for 5 minutes.
  • the microspheres are then isolated by filtration on an ethylcellulose membrane, under nitrogen pressure in 30 seconds and rinsed twice with one liter of water by this same process. Finally, the microparticles are lyophilized, then vacuum-packed and sterilized with gamma rays at a dose of 20 kGy.
  • the size distribution is evaluated using a Multisizer ® type particle analyzer (Coultronics), using a 100 ⁇ m diameter probe and counting at least 100,000 particles.
  • the baclofen content (or loading rate) is determined by liquid chromatography associated with two tandem mass spectrometers (LC / MSMS), after dissolution of a test sample of 10 mg of microspheres in 1 mL of chloroform and extraction liquid / liquid per 3 mL of water.
  • the encapsulation rate obtained is 13.09% ⁇ 0.44% corresponding to an encapsulation yield of 62.69% ⁇ 2.59%.
  • the coefficients of variation obtained over 5 batches for the actual charge rates and the encapsulation yields are therefore always less than or equal to o •
  • the average sizes by volume are 30.05 ⁇ m ⁇ 1.76 ⁇ m and 29.21 ⁇ m ⁇ 1.81 ⁇ m with less than 7% of the particles having a size greater than 60 ⁇ m.
  • the average size is 34.52 ⁇ m ⁇ 1.95 ⁇ m.
  • the release of baclofen from the microparticles produced can be maintained in vitro for a period of six months.
  • the slowest releases are obtained with lower theoretical rates and 85/15 polymers ( Figure 1).
  • burst immediate release
  • the release of baclofen is relatively constant (40 ⁇ g per day on average, for 100 mg of microparticles).
  • the release is however greater and reaches 150 ⁇ g / day (FIG. 1).
  • the quantities of baclofen released are compatible with a therapeutic effect in the context of treatment of spasticity by the intrathecal route in humans, the average dose administered being 160 ⁇ g / day with a range of approximately 50 to 800 ⁇ g / day, obtained by implanting up to 500 mg of microparticles in the subarachnoid space.
  • Example 2 Use of a suspension medium limiting the immediate release effect (“burst”) The microspheres are produced by the process described in Example 1. A suspension medium which exhibits gelation properties when it is placed in an environment of temperature above 30 ° C is then prepared. The microspheres are then dispersed in this medium to reach a concentration of 50 mg / mL.
  • thermosensitive gel An aqueous solution of 21% of Poloxamer 407 (Lutrol ® PF-127) is prepared "by dissolving in sterile water at 2 ° C. The solution is left overnight at 4 ° C.
  • PF-127 compared to batches suspended in phosphate buffer.
  • the average baclofen release rates for a standardized amount of microspheres show that the maximum release reduction is achieved with the PF-127 gel.
  • the rheological study shows that the 21% PF-127 solution has a gelation temperature of 28.3 ° C.
  • the behavior at 37 ° C is plastic with a flow threshold of 48.5 Pa and a viscosity measured at 50 s -1 of 1219 mPa.s.
  • LCS samples are taken aseptically using a 1 mL syringe. A volume of 150 ⁇ L corresponding to twice the dead volume of the catheter is rejected at each puncture, 150 ⁇ L is then withdrawn and kept for analysis in LC / MSMS as described in Example 1.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

The inventive method for preparing microspheres comprising poly (D,L-lactide-co-glycolide), poly(D,L-lactide (PLAGA or PLA)) or the mixtures thereof which are ethyl acetate soluble and encapsulate at least one type of ethyl acetate non-soluble active substance. Compositions containing microspheres homogeneously dispersed in a biocompatible polymer solution capable to form a gel in situ after administration through a haemo-meningeal barrier (HMB) for treating CNS chronic diseases are also disclosed.

Description

Procédé de préparation de compositions à libération prolongée et utilisation de ces compositions pour le traitement des affections chroniques du Système Nerveux Central (SNC) . Process for the preparation of sustained release compositions and use of these compositions for the treatment of chronic conditions of the central nervous system (CNS).
La présente invention concerne un procédé de préparation de microsphères, les microsphères ainsi obtenues et leur utilisation en thérapeutique. Le Système Nerveux Central (SNC) est physiologiquement isolé du reste de l'organisme par deux barrières cellulaires: la barrière hémato-encéphalique (BHE) qui isole le sang du tissu nerveux central et la barrière' hémo-méningée (BHM) qui isole le sang du liquide céphalo-spinal (LCS) . Cette double barrière rend difficile tout traitement par voie conventionnelle (parentérale ou orale) . Certaines voies d'administration permettent d'atteindre les structures du SNC par effraction au travers de la BHM. Il s'agit des voies intrathécale (i.t), intracérébroventriculaire (i.c.v) ou intracérébrale (i.c); une administration épidurale peut également être envisagée pour atteindre les structures du SNC par diffusion à travers la BHM. Ces voies d'administration ne sont toutefois pas anodines, et restent pratiquées en milieu hospitalier par du personnel spécialisé. Elles présentent cependant des particularités. Lorsqu'une forme médicamenteuse est injectée par effraction au travers de la BHM par une des voies susmentionnées, elle est introduite dans un espace restreint dans lequel elle ne se distribue pas de façon homogène . Le volume du LCS est faible (40 à 70 mL) , et son flux en terme de vitesse ou de débit diffère selon les différentes zones du rachis considérées. La circulation du LCS, associée à un mélange incomplet, tend à générer des zones où le principe actif ou les excipients seront en concentration plus fortes, potentiellement toxiques. Le volume de liquide injectable en sous-arachnoïdien est très faible (<5mL en bolus lent) , car un volume trop important, associé ou non à une injection trop rapide, peut entraîner des dommages tissulaires directs. De plus, le volume injecté conditionne la distribution du principe actif de façon très importante. Contrairement à d'autres voies d'administration, augmenter la dose ne peut se faire ni en augmentant le volume injecté, ni en augmentant la concentration à cause des risques de souffrance tissulaire. Volume et concentration conditionnent donc le choix des excipients, qui doivent être bien tolérés et permettre une solubilisation excellente des principes actifs. Leurs produits de dégradation doivent aussi être non toxiques, ce qui est parfois une condition difficile à remplir pour les polymères. De nombreux principes actifs peuvent se fixer sur des cibles localisées derrière la BHM. Ces drogues sont en particulier des antalgiques administrés au long cours, à l'aide de pompes implantées, pour traiter des douleurs chroniques, consécutives à des cancers ou à un dysfonctionnement médullaire tumorale ou non. Le ciblage des structures de la moelle épinière peut se révéler très utile en thérapeutique. Le traitement médicamenteux des douleurs chroniques sévères et invalidantes a été totalement révolutionné grâce à l'administration intrathécale d'opioïdes puissants ou de substances apparentées (morphine, D-Ala-D-Leu- en éphaline, β-endorphine, octréotide, clonidine) . En réalité, il existe de nombreuses substances intéressantes à administrer par voie intrathécale en dehors des analgésiques centraux: il s'agit d' anesthésiques locaux (lidocaïne, bupivacaïne, ropivacaïne) , d'analogues de neuromédiateurs, d' anticancéreux (méthotrexate, cytarabine) , d' interleukines, de facteurs de croissance (TRH, CTNF, BDNF, GDNF, NGF) , de cytokines ou autres protéines ayant des potentialités thérapeutiques. Actuellement, la seule technique d'injection directe intrathécale au long cours réside dans l'emploi des pompes programmables implantées dans le corps du patient, et reliées à un cathéter. L'utilisation de ces pompes est limitée aux patients les plus atteints car ce type de traitement est cher, non dénué d'incidents, de complications mécaniques, et présente également un risque d'infection non négligeable par l'intermédiaire du cathéter, à l'origine d'interruptions temporaires ou définitives du traitement. A ce jour, seuls la morphine et le baclofène ont été autorisés pour une administration par voie intrathécale aux Etats-Unis, puis en Europe, pour le traitement des douleurs chroniques et de la spasticité. Le baclofène est un analogue de l'acide gamma- aminobutyrique (GABA) , dont le site d'action est médullaire. Il se fixe sur les récepteurs GABA-B insensibles à l'action de la bicuculine. Ces récepteurs sont difficiles à atteindre lorsque le baclofène est administré par voie orale, du fait d'un mauvais passage de la BHM. Pour obtenir des taux suffisants dans l'espace sous- arachnoïdien, il est nécessaire d' administrer des doses importantes par voie orale, ce qui se traduit par des effets secondaires notables de type, somnolence, nausées et confusion mentale dus à une distribution intracérébrale du baclofène. L'injection intrathécale permet une distribution médullaire préférentielle, qui conduit à des taux efficaces pour des doses plus de 1 000 fois inférieures à la voie orale et à une diminution très significative des effets secondaires. Depuis les premières injections en 1984, le rapport bénéfice/risque du baclofène est clairement évalué. Le baclofène est le traitement médicamenteux de référence de toutes les formes de spasticité. La mise sur le marché de cette molécule est autorisée depuis 1995 en France par voie intrathécale pour les formes les plus sévères de spasticité, résistantes au traitement par voie orale (autorisé depuis 1974). Aux Etats-Unis, le baclofène intrathécal est autorisé depuis 1992 dans le traitement des spasticités d'origine spinale et depuis 1996 dans le traitement des spasticités d'origine cérébrale. «La spasticité est un désordre moteur caractérisé par une exagération vitesse-dépendante du réflexe d' etirement associée à une exagération des réflexes tendineux et résultant d'une hyper excitabilité réflexe; il s'agit d'un symptôme parmi d'autres constituant le syndrome du neurone moteur supraspinal ( upper motor neurone syndrome) ». Cette définition, admise par la majorité des cliniciens, est souvent considérée comme trop restrictive en pratique. Certains, en effet, y incluent tous les signes positifs du syndrome pyramidal ou y ajoutent encore l'exagération des réflexes de flexion après lésion médullaire . La spasticité n'est responsable que d'une partie seulement de la gêne fonctionnelle liée aux lésions des voies descendantes, mais c'est actuellement le seul de ces symptômes qui soit accessible aux thérapeutiques médicamenteuses . Dans ce contexte, encapsuler du baclofène sous une forme galenique parvenant à contrôler la libération du principe actif sur plusieurs mois de façon continue, progressive et spécifiquement au niveau de ces récepteurs médullaires permet de remédier aux inconvénients de l'administration par cathéter des pompes implantables jusqu'alors disponibles, en y apportant les améliorations telles que: une réduction des coûts de suivi et d'implantation permettant d'élargir l'utilisation de la molécule qui possède un réel intérêt thérapeutique dans le traitement des spasticités sévères; un gain en sécurité et en confort pour le patient; un élargissement éventuel des indications du produit à des formes moins sévères de spasticité, au traitement des spasmes caractéristiques du syndrome de l'homme raide ( Stiff-man syndrom) ou dans le traitement des rigidités tétaniques, au traitement précoce dans certains cas de traumatismes crâniens ou encore à d'autres domaines thérapeutiques tels que les douleurs chroniques résistantes aux opioïdes ou le traitement de la dépendance pharmacologique aux amphétamines, à l'héroïne et à l'alcool. Bien entendu, les avantages liés aux coûts de traitement et au confort du patient ne sont pas uniquement limités au baclofène, mais peuvent être élargis à tout principe actif présentant une problématique similaire dans le domaine de l'administration à travers la BHM. L'utilisation d'une structure poreuse pour augmenter la surface d'échange d'un dispositif permettant la libération d'un principe actif est connue. Les brevets US 5,980,927 et 6,214,370 portent sur des implants pour l'administration contrôlée d'analgésiques vers le neuraxe par la voie intrathécale à l'aide de matrices polymères, et en particulier des implants non biodégradables en polyurethane ou silicone chargés avec du fentanyl. Ces implants qui peuvent se former in situ permettent d'obtenir des cinétiques de libération d'ordre 0, avec une augmentation de la vitesse de libération en début de contact avec le milieu extérieur. Des systèmes ont également été développés pour la voie injectable, présentant l'avantage de moduler la libération de ce type, et en particulier de limiter l'effet de décharge ou libération immédiate (burst effect) , tout en permettant une localisation et un retrait facile au cas de problème. Par ailleurs, la demande de brevet WO 02/28386 décrit un procédé d' encapsulation de principes actifs solubles dans l'eau, par extraction de solvant, sous la forme de microsphères de poly (D, L-lactide-co-glycolide) , ou de poly (D,L-lactide) (PLAGA ou PLA). Cependant, ces microsphères ne permettent une libération que pendant une durée de 5 à 50 jours, avec une libération immédiate (burst) à 24 heures de 15 à 45%.The present invention relates to a process for preparing microspheres, the microspheres thus obtained and their use in therapy. Central Nervous System (CNS) is physiologically isolated from the rest of the body by two cell barriers: the blood-brain barrier (BBB) which isolates the blood of the central nervous tissue and the barrier hemo-meningeal (BHM) which isolates the cerebrospinal fluid (LCS) blood. This double barrier makes any treatment by conventional route (parenteral or oral) difficult. Certain routes of administration make it possible to reach the structures of the CNS by breaking in through the BHM. These are the intrathecal (it), intracerebroventricular (icv) or intracerebral (ic) routes; epidural administration can also be envisaged to reach the structures of the CNS by diffusion through the BHM. These routes of administration are not trivial, however, and remain practiced in hospitals by specialized personnel. However, they have particularities. When a drug form is injected through the BHM by one of the aforementioned routes, it is introduced into a restricted space in which it does not distribute itself in a way homogeneous. The volume of the LCS is low (40 to 70 ml), and its flow in terms of speed or flow differs according to the different areas of the spine considered. The circulation of the LCS, associated with an incomplete mixture, tends to generate zones where the active principle or the excipients will be in stronger concentration, potentially toxic. The volume of liquid injectable in the subarachnoid is very low (<5mL in slow bolus), because too large a volume, associated or not with too rapid injection, can cause direct tissue damage. In addition, the volume injected conditions the distribution of the active ingredient very significantly. Unlike other routes of administration, increasing the dose can be done neither by increasing the volume injected, nor by increasing the concentration because of the risk of tissue suffering. Volume and concentration therefore condition the choice of excipients, which must be well tolerated and allow excellent solubilization of the active ingredients. Their degradation products must also be non-toxic, which is sometimes a difficult condition to fulfill for polymers. Many active ingredients can be attached to targets located behind the BHM. These drugs are in particular analgesics administered over the long term, using implanted pumps, to treat chronic pain, consecutive to cancer or to bone marrow dysfunction, tumor or not. Targeting the structures of the spinal cord can be very useful in therapy. Drug treatment for severe chronic pain and disabling drugs has been completely revolutionized thanks to the intrathecal administration of powerful opioids or related substances (morphine, D-Ala-D-Leu- in ephalin, β-endorphin, octreotide, clonidine). In reality, there are many interesting substances to be administered intrathecally apart from central analgesics: these are local anesthetics (lidocaine, bupivacaine, ropivacaine), analogs of neuromediators, anticancer drugs (methotrexate, cytarabine) , interleukins, growth factors (TRH, CTNF, BDNF, GDNF, NGF), cytokines or other proteins with therapeutic potential. Currently, the only long-term direct intrathecal injection technique is the use of programmable pumps implanted in the patient's body, and connected to a catheter. The use of these pumps is limited to the most affected patients because this type of treatment is expensive, not without incidents, mechanical complications, and also presents a significant risk of infection via the catheter, at the origin of temporary or permanent interruptions of processing. To date, only morphine and baclofen have been authorized for administration by the intrathecal route in the United States, then in Europe, for the treatment of chronic pain and spasticity. Baclofen is an analogue of gamma-aminobutyric acid (GABA), the site of action of which is medullary. It binds to GABA-B receptors insensitive to the action of bicuculin. These receptors are difficult to reach when baclofen is administered orally, due to poor passage of BHM. In order to obtain sufficient levels in the subarachnoid space, it is necessary to administer large doses orally, which results in notable side effects such as drowsiness, nausea and mental confusion due to an intracerebral distribution of the baclofen. The intrathecal injection allows a preferential medullary distribution, which leads to effective rates for doses more than 1000 times lower than the oral route and to a very significant reduction in side effects. Since the first injections in 1984, the benefit / risk ratio of baclofen has been clearly evaluated. Baclofen is the standard drug treatment for all forms of spasticity. The marketing of this molecule has been authorized since 1995 in France by the intrathecal route for the most severe forms of spasticity, resistant to oral treatment (authorized since 1974). In the United States, intrathecal baclofen has been authorized since 1992 in the treatment of spasticity of spinal origin and since 1996 in the treatment of spasticity of cerebral origin. “Spasticity is a motor disorder characterized by a speed-dependent exaggeration of the stretch reflex associated with an exaggeration of the tendon reflexes and resulting from reflex hyper excitability; it is a symptom among others constituting the syndrome of the supraspinal motor neuron (upper motor neuron syndrome) ”. This definition, accepted by the majority of clinicians, is often considered to be too restrictive in practice. Some, in fact, include all the positive signs of pyramidal syndrome or add to it the exaggeration of flexion reflexes after spinal cord injury. Spasticity is responsible for only part of the functional discomfort linked to lesions of the descending tract, but it is currently the only one of these symptoms which is accessible to drug therapy. In this context, encapsulating baclofen in a galenic form which manages to control the release of the active principle over several months in a continuous, progressive manner and specifically at the level of these spinal receptors makes it possible to remedy the drawbacks of catheter administration of pumps implantable up to 'then available, by making improvements such as: a reduction in monitoring and implantation costs, making it possible to widen the use of the molecule which has a real therapeutic interest in the treatment of severe spasticity; increased safety and comfort for the patient; a possible widening of the indications of the product to less severe forms of spasticity, to the treatment of spasms characteristic of the syndrome of the stiff man (Stiff-man syndrom) or in the treatment of tetanic rigidities, to the early treatment in certain cases of head trauma or other therapeutic areas such as chronic pain resistant to opioids or the treatment of pharmacological dependence on amphetamines, heroin and alcohol. Of course, the advantages linked to treatment costs and patient comfort are not only limited to baclofen, but can be extended to any active principle presenting a similar problem in the field of administration via BHM. The use of a porous structure to increase the exchange surface of a device allowing the release of an active principle is known. US patents 5,980,927 and 6,214,370 relate to implants for the controlled administration of analgesics to the neurax by the intrathecal route using polymer matrices, and in particular non-biodegradable polyurethane or silicone implants loaded with fentanyl. These implants which can be formed in situ make it possible to obtain release kinetics of order 0, with an increase in the rate of release at the start of contact with the external medium. Systems have also been developed for the injectable route, having the advantage of modulating the release of this type, and in particular of limiting the effect of discharge or immediate release (burst effect), while allowing easy localization and removal. in case of problem. Furthermore, patent application WO 02/28386 describes a process for encapsulating active principles soluble in water, by solvent extraction, in the form of poly (D, L-lactide-co-glycolide) microspheres, or poly (D, L-lactide) (PLAGA or PLA). However, these microspheres only allow release for a period of 5 to 50 days, with immediate release (burst) at 24 hours of 15 to 45%.
La demande de brevet WO 00/66085 décrit une composition permettant la libération d'un principe actif sous une forme prolongée, ladite composition comprenant deux phases polymères, une première phase discontinue sous la forme de microparticules de polymères biodégradables comprenant le principe actif, et une seconde phase continue sous la forme d'un gel biocompatible. Les microparticules biodégradables se trouvent emprisonnées au sein de la matrice «gel». Une variante préférée consiste à utiliser pour la phase continue, un polymère thermo-réversible. La composition est administrée sous la forme d'une suspension de microparticules dans une solution gélifiante du polymère thermo-réversible. Le gel se forme alors in si tu et se solidifie dans la cavité d'injection, emprisonnant alors les microparticules biodégradables. Toutefois ce type de composition n'est envisagé, pour la voie parentérale, que pour une administration, intramusculaire, intra- péritonéale, intra-abdominale, sous-cutanée, et éventuellement intra-artérielle ou intraveineuse.Patent application WO 00/66085 describes a composition allowing the release of an active principle in a prolonged form, said composition comprising two polymer phases, a first discontinuous phase in the form of microparticles of biodegradable polymers comprising the active principle, and a second phase continues in the form of a biocompatible gel. The biodegradable microparticles are trapped within the “gel” matrix. A preferred variant consists in using for the continuous phase, a thermo-reversible polymer. The composition is administered in the form of a suspension of microparticles in a gelling solution of the thermo-reversible polymer. The gel then forms in if you and solidifies in the injection cavity, thus trapping the biodegradable microparticles. However, this type of composition is envisaged, for the parenteral route, only for administration, intramuscular, intraperitoneal, intra-abdominal, subcutaneous, and possibly intra-arterial or intravenous.
Or la Demanderesse a 'découvert qu'une telle composition, sous forme de microparticules de polymère (s) dispersées, de façon homogène dans une solution de polymère biocompatible qui est capable de former un gel in situ dans l'organisme après administration se révèle particulièrement adaptée à une administration intrathécale, épidurale, intracérébroventriculaire ou intracérébrale . En effet, outre une limitation de l'effet de décharge ou libération immédiate («burst effect») équivalent à celui décrit pour les formes implantables précédemment citées, une telle forme galenique permet de remédier aux inconvénients des pompes implantables explicités précédemment, et présente les avantages suivants: une surface d'échange plus importante se traduisant par une distribution plus large du principe actif et donc une zone traitable plus importante; une dose injectée mieux adaptée extemporanément à chaque cas clinique, puisqu'il suffit de calculer le volume de suspension à injecter pour administrer la dose désirée; une libération prolongée du principe actif, permettant de maintenir des taux efficaces dans le LCS pendant au moins 100 jours, de préférence pendant une durée supérieure à 120 jours; une libération du principe actif présentant un phénomène de libération immédiate («burst effect») limité, moins de 10% en poids du principe actif étant libéré à 24 heures après l'administration, puis une cinétique d'ordre 0 pendant le reste de la période d'administration; une tolérance améliorée; un système totalement biocompatible. La présente invention porte donc sur un procédé de préparation de microsphères comprenant du poly(D,L- lactide-co-glycolide) , du poly (D,L-lactide) (PLAGA ou PLA) ou leurs mélanges, solubles dans l'acétate d'éthyle, encapsulant au moins une substance active insoluble dans l'acétate d'éthyle, ledit procédé comprenant les étapes suivantes : (a) préparation à température ambiante d'une phase organique comprenant: une suspension homogène de la ou des substance (s) active (s) sous forme microparticulaire dans de l'acétate d'éthyle, le polymère ou les polymères dissous dans cette suspension d'acétate d'éthyle, (b) émulsification de ladite phase organique par addition d'une solution aqueuse froide de surfactif, sous agitation vigoureuse avec un taux de cisaillement constant compris entre 600 s-1 et 2500 s-1, (c) extraction contrôlée de l'acétate d'éthyle de cette émulsion par addition lente et continue d'un premier volume d'eau, dans un ratio volumique émulsion/eau supérieur à 0,3, sous la même agitation vigoureuse qu'à l'étape (b) , puis d'un deuxième volume d'eau dans une quantité suffisante pour extraire tout l'acétate d'éthyle, ce qui conduit à la formation des microsphères, (d) filtration sous pression du mélange obtenu en (c) et récupération des microspheres, (e) éventuellement, lyophilisation des microsphères . On entend par substance active sous forme microparticulaire toute microparticule de substance active dont la taille moyenne en volume est comprise entre 0,5 et 10 micromètres, de préférence entre 2 et 5 micromètres . Dans un mode de réalisation avantageux du procédé de l'invention, le polymère a une masse molaire moyenne en poids comprise entre 55 000 g/mole et 120 000 g/mole, de préférence comprise entre 70 000 g/mole et 100 000 g/mole. On peut citer à titre d'exemple les PGLA 50/50, 65/35, 75/25, 85/15 et les PLA3.00/ ainsi que leurs mélanges . Dans un autre mode de réalisation avantageux du procédé de l'invention, le taux de cisaillement est compris entre 900 s"1 et 1400 s'1. La température de la solution aqueuse de surfactif utilisée pour réaliser l' émulsification est avantageusement comprise entre 0 et 10°C et l'agitation vigoureuse peut être réalisée par tout moyen connu de l'homme du métier; elle est effectuée à une vitesse avantageusement comprise entre 500 et 2000 tours/min. Dans un mode de réalisation avantageux du procédé de l'invention, le ratio volumique émulsion/eau du premier volume d'eau ajouté à l'étape (c) est supérieur à 0,45. L'ajout du deuxième volume d'eau de l'étape (c) durant l'extraction de l'acétate d'éthyle est effectué sous agitation à une vitesse avantageusement comprise entre 500 t/min et 2000 t/min. Le cisaillement constant utilisé à l'étape (b) permet d'obtenir une émulsion stable avant extraction du solvant, ce qui conduit à un meilleur taux d' encapsulation et à une distribution de tailles de' particules plus étroite. Ainsi, le rendement d' encapsulation du procédé selon l'invention est supérieur à 50%. Par ailleurs, les coefficients de variation sur le taux d' encapsulation (ou taux de charge) et le rendement d' encapsulation sont inférieurs à 5%. Le procédé de l'invention permet en outre d'obtenir des microsphères présentant une distribution resserrée de la taille des particules. Le procédé selon l'invention peut être utilisé pour tout principe actif insoluble dans l'acétate d'éthyle, sous la forme d'une base ou d'un de ses sels. A titre d'exemple non limitatif, on peut citer les analgésiques, notamment locaux, les opioïdes, les anticancéreux, les interleukines, les facteurs de croissance et les cytokines. Le procédé peut être en particulier utilisé pour l' encapsulation de principes actifs utiles dans le traitement de la spasticité, comme le baclofène, le ziconotide, et les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine, La présente invention a également pour objet des microsphères susceptibles d'être obtenues par le procédé décrit précédemment caractérisées en ce qu'elles: - comprennent un polymère poly (D,L-lactide-co- glycolide) ou poly (D, L-lactide) (PLAGA ou PLA) ou leurs mélanges, soluble dans l'acétate d'éthyle et ayant une masse molaire moyenne en poids comprise entre 55 000 g/mole et 120 000 g/mole, - comprennent au moins une substance active sous forme microparticulaire, insoluble dans l'acétate d'éthyle, - sont dépourvues de solvant organique chloré, - permettent la libération in vivo de la substance active sur une période d'au moins 100 jours. Dans un mode de réalisation particulièrement avantageux de l'invention, ladite substance active permet de traiter la spasticité, et est choisie de préférence parmi le baclofène, le ziconotide et les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine . Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, lesdites microsphères contiennent au moins une substance active choisie parmi les analgésiques, notamment locaux, les opioïdes, les anticancéreux, les interleukines, les facteurs de croissance, les cytokines. Les microsphères selon l'invention présentent une taille moyenne en volume comprise entre 10 micromètres et 100 micromètres. Le taux de charge en substance active est compris entre 1 et 30% en poids, de préférence entre 5% et 15% en poids . La présente invention a également pour objet une composition pour la libération prolongée d'au moins une substance active, comprenant les microsphères précédemment décrites dispersées de façon homogène dans au moins une solution de polymère biocompatible qui est capable de former un gel in situ dans l'organisme après administration. En effet après administration de la suspension de microparticules, les caractéristiques du milieu dans lequel la suspension est injectée provoque l'augmentation de viscosité de ladite suspension de microparticules pour former une phase gel in situ,- dans laquelle les microparticules se trouvent dispersées de façon homogène. Les compositions de la présente invention se présentent avant administration au sujet traité sous la forme d'une suspension liquide, peu visqueuse, de microparticules biodégradables dans une solution de polymère (s) biocompatible (s) . Les compositions de la présente invention se présentent après administration au sujet traité sous la forme d'un gel visqueux, dans lequel sont dispersées de façon homogène les microparticules biodégradables précédemment décrites. Selon l'invention, le gel est avantageusement un gel thermosensible ayant une température de gélation comprise entre 27 et 37 °C. Il est choisi avantageusement parmi les gels thermosensibles, les gels cellulosiques et les gels de polysaccharides . Comme exemple de gel thermosensible, on peut citer notamment les gels Poloxamer, comme le Poloxamer 407, tel que le Lutrol® PF-127. Comme exemple de gel de polysaccharide, on peut citer les gels de chitosan. De manière avantageuse, le gel a une viscosité comprise entre 4 et 2000 rnPa.s"1, mesurée à 37 °C. La concentration des microspheres dans le gel est avantageusement comprise entre 10 et 500 mg/mL. Les compositions selon l'invention permettent la libération in vivo de la substance active sur une période d'au moins 100 jours. Les microsphères et les compositions décrites ci- dessus peuvent être utilisées pour la préparation d'un médicament destiné à traiter la spasticité et apte à être administré par voie intrathécale ou épidurale. Dans cette indication, la substance active encapsulée dans les microsphères est choisie parmi le baclofène, le ziconotide et les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine. Les microsphères et les compositions précédemment décrites peuvent également être utilisées pour la préparation d'un médicament destiné à traiter la douleur chronique et apte à être administré par voie épidurale, intrathécale ou intracérébrale. Dans cette indication, la substance active est choisie parmi les analgésiques, notamment locaux, les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine, les opioïdes, les anticancéreux, les interleukines, les facteurs de croissance et les cytokines . Les exemples 1 à 3 et les figures 1 à 5 qui suivent illustrent l'invention. La figure 1 représente le profil de libération in vi tro en cellules à flux continu, du baclofène à partir de préparation de microsphères en PLAGA 85/15 chargées à 11%. Les résultats sont présentés en pourcentage de dose totale libérée (symboles vides) ou bien en dose moyenne quotidienne libérée (symboles pleins) . Les lignes pointillées représentent les limites de 25 μg et 75 μg de baclofène libéré par jour. La figure 2 illustre l'effet du milieu de suspension sur la libération in vi tro de baclofène microencapsulé au cours des premières heures. Le tableau 1 donne la vitesse moyenne de libération du baclofène mesurée in vitro à partir de suspension de microsphères dans différents milieux: tampon PBS, CMC 1%, gel de Lutrol® PF-127 21% et gel de chitosan. La figure 3 illustre le suivi des concentrations de baclofène dans le LCS chez la chèvre après implantation intrathécale d'une suspension de microsphères chargées à 11% en suspension dans divers milieux: Ringer lactate, carboxyméthylcellulose (CMC) 1% ou 0,5% ou gel de PF-127 à 21%. Données normalisées pour une dose injectée de 10 g de baclofène encapsulé. La figure 4 illustre le suivi des concentrations de baclofène dans le plasma chez la chèvre après implantation intrathécale d'une suspension de microsphères chargées à 11% en suspension dans divers milieux: carboxyméthylcellulose (CMC) 0,5%, CMC 1% et gel de PF-127 21%. La figure 5 illustre le suivi des concentrations de baclofène dans le LCR chez la chèvre pendant un mois suite à l'implantation intrathécale de microsphères chargées à 11% et suspendues dans de la carboxyméthylcellulose (CMC) (symboles pleins) ou un gel de PF-127 à 21% (symboles vides) .However, the Applicant has discovered that such a composition, in the form of microparticles of polymer (s) dispersed, in a homogeneous manner in a solution of biocompatible polymer which is capable of forming a gel in situ in the organism after administration appears particularly suitable for intrathecal, epidural, intracerebroventricular or intracerebral administration. Indeed, in addition to a limitation of the immediate discharge or release effect (“burst effect”) equivalent to that described for the implantable forms previously mentioned, such a galenical form makes it possible to remedy the drawbacks of the implantable pumps explained above, and presents the following advantages: a larger exchange surface resulting in a wider distribution of the active principle and therefore a larger treatable area; an injected dose better adapted extemporaneously to each clinical case, since it suffices to calculate the volume of suspension to be injected to administer the desired dose; a prolonged release of the active ingredient, making it possible to maintain effective levels in the LCS for at least 100 days, preferably for a duration greater than 120 days; a release of the active principle having a limited immediate effect (“burst effect”) phenomenon, less than 10% by weight of the active principle being released at 24 hours after administration, then kinetics of order 0 during the rest of the administration period; improved tolerance; a fully biocompatible system. The present invention therefore relates to a process for the preparation of microspheres comprising poly (D, L-lactide-co-glycolide), poly (D, L-lactide) (PLAGA or PLA) or their mixtures, soluble in acetate ethyl, encapsulating at least one active substance insoluble in ethyl acetate, said process comprising the following stages: (a) preparation at room temperature of an organic phase comprising: a homogeneous suspension of the active substance (s) in microparticulate form in ethyl acetate, the polymer or polymers dissolved in this ethyl acetate suspension, (b) emulsification of said organic phase by addition of a cold aqueous solution of surfactant, with vigorous stirring with a constant shear rate included between 600 s -1 and 2500 s -1 , (c) controlled extraction of ethyl acetate from this emulsion by slow and continuous addition of a first volume of water, in an emulsion / water volume ratio greater than 0 , 3, with the same vigorous stirring as in step (b), then with a second volume of water in an amount sufficient to extract all of the ethyl acetate, which leads to the formation of microspheres, (d) pressure filtration of the mixture obtained u in (c) and recovery of the microspheres, (e) optionally, lyophilization of the microspheres. The term active substance in microparticulate form means any microparticle of active substance the mean size of which by volume is between 0.5 and 10 micrometers, preferably between 2 and 5 micrometers. In an advantageous embodiment of the process of the invention, the polymer has an average molar mass in weight between 55,000 g / mole and 120,000 g / mole, preferably between 70,000 g / mole and 100,000 g / mole. Examples include the PGLA 50/50, 65/35, 75/25, 85/15 and the PLA3.00 / as well as their mixtures. In another advantageous embodiment of the process of the invention, the shear rate is between 900 s "1 and 1400 s ' 1. The temperature of the aqueous surfactant solution used to carry out the emulsification is advantageously between 0 and 10 ° C. and vigorous stirring can be carried out by any means known to a person skilled in the art, it is carried out at a speed advantageously between 500 and 2000 revolutions / min. In an advantageous embodiment of the process invention, the emulsion / water volume ratio of the first volume of water added in step (c) is greater than 0.45. The addition of the second volume of water in step (c) during the extraction of ethyl acetate is carried out with stirring at a speed advantageously between 500 rpm and 2000 rpm The constant shearing used in step (b) makes it possible to obtain a stable emulsion before extraction of the solvent, which leads to a better encapsulation rate and a size distribution 'more narrow particle. Thus, the encapsulation yield of the process according to the invention is greater than 50%. Furthermore, the coefficients of variation on the encapsulation rate (or charge rate) and the encapsulation yield are less than 5%. The method of the invention also makes it possible to obtain microspheres having a narrow distribution of the particle size. The process according to the invention can be used for any active ingredient insoluble in ethyl acetate, in the form of a base or of a salt thereof. By way of nonlimiting example, there may be mentioned analgesics, in particular local analgesics, opioids, anticancer agents, interleukins, growth factors and cytokines. The method can in particular be used for the encapsulation of active principles useful in the treatment of spasticity, such as baclofen, ziconotide, and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine. The present invention has also relates to microspheres capable of being obtained by the process described above, characterized in that they: - comprise a poly (D, L-lactide-co-glycolide) or poly (D, L-lactide) (PLAGA or PLA) or their mixtures, soluble in ethyl acetate and having a weight-average molar mass of between 55,000 g / mole and 120,000 g / mole, - comprise at least one active substance in microparticulate form, insoluble in l ethyl acetate, - are devoid of chlorinated organic solvent, - allow the in vivo release of the active substance over a period of at least 100 days. In a particularly advantageous embodiment of the invention, said active substance makes it possible to treat spasticity, and is preferably chosen from baclofen, ziconotide and agonists alpha (2) -adrenergics, including clonidine and tizanidine. In an advantageous embodiment of the invention, said microspheres contain at least one active substance chosen from analgesics, in particular local painkillers, opioids, anticancer agents, interleukins, growth factors, cytokines. The microspheres according to the invention have a volume average size of between 10 micrometers and 100 micrometers. The content of active substance is between 1 and 30% by weight, preferably between 5% and 15% by weight. The present invention also relates to a composition for the sustained release of at least one active substance, comprising the previously described microspheres dispersed homogeneously in at least one solution of biocompatible polymer which is capable of forming a gel in situ in the organism after administration. In fact, after administration of the suspension of microparticles, the characteristics of the medium in which the suspension is injected causes the viscosity of said suspension of microparticles to increase in order to form a gel phase in situ, - in which the microparticles are homogeneously dispersed . The compositions of the present invention are presented before administration to the subject treated in the form of a liquid, low-viscosity suspension of biodegradable microparticles in a solution of biocompatible polymer (s). The compositions of the present invention are presented after administration to the subject treated in the form of a viscous gel, in which are homogeneously dispersed the biodegradable microparticles previously described. According to the invention, the gel is advantageously a heat-sensitive gel having a gelation temperature of between 27 and 37 ° C. It is advantageously chosen from heat-sensitive gels, cellulosic gels and polysaccharide gels. Examples of thermosensitive gel, mention may be made especially Poloxamer gels, such as Poloxamer 407, such as Lutrol ® PF-127. As an example of a polysaccharide gel, mention may be made of chitosan gels. Advantageously, the gel has a viscosity between 4 and 2000 rnPa.s "1 , measured at 37 ° C. The concentration of microspheres in the gel is advantageously between 10 and 500 mg / ml. The compositions according to the invention allow the active substance to be released in vivo over a period of at least 100 days The microspheres and the compositions described above can be used for the preparation of a medicament intended to treat spasticity and capable of being administered by the In this indication, the active substance encapsulated in the microspheres is chosen from baclofen, ziconotide and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine. The microspheres and the compositions described above can also be used for the preparation of a medicament intended to treat chronic pain and able to be administered by epidural route, int rathecal or intracerebral. In this indication, the active substance is chosen from analgesics, in particular local painkillers, alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine, opioids, anticancer drugs, interleukins, growth factors and cytokines. Examples 1 to 3 and Figures 1 to 5 which follow illustrate the invention. FIG. 1 represents the in vi tro release profile in flow-through cells of baclofen from the preparation of microspheres made of PLAGA 85/15 loaded at 11%. The results are presented as a percentage of the total dose released (empty symbols) or else as the average daily dose released (solid symbols). The dotted lines represent the limits of 25 μg and 75 μg of baclofen released per day. FIG. 2 illustrates the effect of the suspension medium on the in vitro release of microencapsulated baclofen during the first hours. Table 1 gives the average speed measured baclofen release in vitro from a suspension of microspheres in different media: PBS buffer, 1% CMC, Lutrol gel ® PF-127 21% gel and chitosan. FIG. 3 illustrates the monitoring of baclofen concentrations in the LCS in goats after intrathecal implantation of a suspension of microspheres loaded with 11% in suspension in various media: Ringer lactate, carboxymethylcellulose (CMC) 1% or 0.5% or 21% PF-127 gel. Standardized data for an injected dose of 10 g of encapsulated baclofen. Figure 4 illustrates the monitoring of plasma baclofen concentrations in goats after intrathecal implantation of a suspension of 11% charged microspheres suspended in various media: carboxymethylcellulose (CMC) 0.5%, CMC 1% and PF-127 gel 21%. FIG. 5 illustrates the monitoring of baclofen concentrations in the CSF in goats for a month following the intrathecal implantation of microspheres loaded at 11% and suspended in carboxymethylcellulose (CMC) (solid symbols) or a PF-gel 127 to 21% (empty symbols).
Exemple 1 : Préparation et caracterisation de microsphères de PLAGA chargées en baclofène 1.1. Matériels et méthodes Les microsphères sont préparées en utilisant des polymères de la série des poly (DL-lactide-co glycolide), Medisorb® Alkermes: 50/50 (Mw 74000 g/mole, viscosité spécifique 0,75 dL/g) ou 85/15 (Mw 95 000 g/mole, viscosité spécifique 0,63 dL/g), de l'alcool polyvinylique 88% hydrolyse, Rhodoviol® 4/125, et de l'acétate d'éthyle. La poudre de baclofène micronisée provient de la société Heumann (Allemagne) .• Example 1: Preparation and characterization of PLAGA microspheres loaded with baclofen 1.1. Materials and methods The microspheres are prepared using polymers from the poly (DL-lactide-co glycolide), Medisorb ® Alkermes series: 50/50 (M w 74000 g / mole, specific viscosity 0.75 dL / g) or 85/15 (M w 95,000 g / mol, specific viscosity 0.63 dL / g), polyvinyl alcohol 88% hydrolysis, Rhodoviol ® 4/125, and ethyl acetate. Micronized baclofen powder comes from the company Heumann (Germany). •
1.2. Préparation des microsphères Les microsphères (MS) sont préparées à l'aide d'un nouveau procédé d' émulsion/extraction de solvant, dans lequel on utilise de l'acétate d'éthyle et où • l'extraction de l'acétate d'éthyle est parfaitement contrôlée. Le baclofène est tout d'abord broyé à l'aide d'un broyeur planétaire à boulets pendant 20 minutes à vitesse maximale pour obtenir des cristaux de taille inférieure ou égale à 5 μm. Une quantité pesée de ces cristaux (100 mg ou 150 mg) est alors suspendue dans 4 mL d'acétate d'éthyle à l'aide d'un homogénéiseur Ultra- Turrax® à 22 000 tours par minutes pendant 2 minutes. Le polymère (400mg) est alors dissous dans cette suspension organique de baclofène pendant 30 minutes à température ambiante sous agitation magnétique. La suspension résultante est ensuite émulsionnée dans 40 mL d'une solution aqueuse d'alcool polyvinylique à 5% maintenue à 4°C dans un réacteur de 250 mL sous agitation forte (1000 tours par minute) , produisant un cisaillement constant de 1200 s-1. Le flacon contenant la suspension est rincée avec 2 mL d'acétate d'éthyle qui sont ajoutés à l' émulsion en cours de formation. Après 2 minutes, la précipitation du polymère sous forme de microparticules par extraction de l'acétate d'éthyle est initiée par ajout de 100 mL d'eau à 20°C en une minute, directement sur l' émulsion en cours de formation. L'extraction du solvant organique est finalisée par transfert rapide de l' émulsion dans 2 L d'eau à 20 °C sous agitation pendant 5 minutes. Les microsphères sont alors isolées par filtration sur membrane d' éthylcellulose, sous pression d'azote en 30 secondes et rincées deux fois avec un litre d'eau par ce même procédé. Finalement les microparticules sont lyophilisées, puis conditionnées sous vide et stérilisées aux rayons gamma à la dose de 20 kGy.1.2. Preparation of the microspheres The microspheres (MS) are prepared using a new emulsion / solvent extraction process, in which ethyl acetate is used and where • the extraction of acetate ethyl is perfectly controlled. The baclofen is first ground using a planetary ball mill for 20 minutes at maximum speed to obtain crystals of size less than or equal to 5 μm. A weighed amount of these crystals (100 mg or 150 mg) is then suspended in 4 ml of ethyl acetate using an Ultra-Turrax ® homogenizer at 22,000 rpm for 2 minutes. The polymer (400 mg) is then dissolved in this organic suspension of baclofen for 30 minutes at room temperature with magnetic stirring. The resulting suspension is then emulsified in 40 ml of an aqueous solution of 5% polyvinyl alcohol maintained at 4 ° C. in a 250 ml reactor with vigorous stirring (1000 revolutions per minute), producing a constant shear of 1200 s - 1 . The bottle containing the suspension is rinsed with 2 ml of ethyl acetate which are added to the emulsion during formation. After 2 minutes, the precipitation of the polymer in the form of microparticles by extraction of ethyl acetate is initiated by adding 100 ml of water at 20 ° C in one minute, directly on the emulsion during formation. The extraction of the organic solvent is finalized by rapid transfer of the emulsion into 2 L of water at 20 ° C with stirring for 5 minutes. The microspheres are then isolated by filtration on an ethylcellulose membrane, under nitrogen pressure in 30 seconds and rinsed twice with one liter of water by this same process. Finally, the microparticles are lyophilized, then vacuum-packed and sterilized with gamma rays at a dose of 20 kGy.
1.3. Caracterisation des microsphères1.3. Characterization of microspheres
1.3.1. Méthode de caracterisation La distribution de taille est évaluée à l'aide d'un analyseur de particules de type Multisizer® (Coultronics) , en utilisant une sonde de 100 μm de diamètre et en comptant au moins 100 000 particules. La teneur en baclofène (ou taux de charge) est déterminée par chromatographie liquide associée à deux spectromètres de masse en tandem (LC/MSMS) , après dissolution d'une prise d'essai de 10 mg de microspheres dans 1 mL de chloroforme et extraction liquide/liquide par 3 mL d'eau. Le profil de libération du baclofène in vi tro est déterminé à 37 °C, en circuit ouvert, en tampon phosphate, dont le pH a été fixé à 7,35 ± 0,05, à l'aide de cellules à flux continu (Sotax®) connectées à une pompe peristaltique qui assure un flux de tampon de débit 85 μL/min au travers du lit de microparticules.1.3.1. Characterization method The size distribution is evaluated using a Multisizer ® type particle analyzer (Coultronics), using a 100 μm diameter probe and counting at least 100,000 particles. The baclofen content (or loading rate) is determined by liquid chromatography associated with two tandem mass spectrometers (LC / MSMS), after dissolution of a test sample of 10 mg of microspheres in 1 mL of chloroform and extraction liquid / liquid per 3 mL of water. The release profile of baclofen in vi tro is determined at 37 ° C., in open circuit, in phosphate buffer, the pH of which has been set at 7.35 ± 0.05, using continuous flow cells (Sotax ® ) connected to a peristaltic pump which ensures a flow buffer buffer of 85 μL / min through the bed of microparticles.
1.3.2. Résultats Ils sont rassemblés dans la figure 1. Cinq lots de microsphères ont été produits pour chaque type de polymère et pour différents taux d' encapsulation théoriques. Dans le cas du PLAGA 85/15 et pour un taux théorique de 20,8% le taux d' encapsulation obtenu (déterminé par LC/MSMS) est de 10,83% ± 0,54% soit un rendement d' encapsulation de 52,61% ± 2,48%. Pour un taux de charge théorique plus important (28,2%) le taux d' encapsulation obtenu est de 15,30% ± 0,43%, ce qui correspond à un rendement d' encapsulation de 55,04% ± 1,89%. Dans le cas du PLAGA 50/50, pour un taux de charge théorique de 20,7%, le taux d' encapsulation obtenu est de 13,09% ± 0,44% correspondant à un rendement d' encapsulation de 62,69% ± 2,59%. Les coefficients de variation obtenus sur 5 lots pour les taux de charge réels et les rendements d' encapsulation sont donc toujours inférieurs ou égaux à o • Pour les lots préparés avec les PLAGA 85/15, les tailles moyennes en volume sont de 30,05 μm ± 1,76 μm et 29,21 μm ± 1,81 μm avec moins de 7 % des particules présentant une taille supérieure à 60 μm. Pour les lots réalisés à partir de PLAGA 50/50, la taille moyenne est de 34,52 μm ± 1,95 μm. Selon les lots, la libération du baclofène à partir des microparticules produites peut être maintenue in vi tro pendant une durée de six mois. Les libérations les plus lentes sont obtenues avec des taux théoriques plus faibles et des polymères 85/15 (Figure 1) . Après une libération immédiate (« burst ») de 16% sur les premières 24 heures, la libération du baclofène est relativement constante (40 μg par jour en moyenne, pour 100 mg de microparticules) . Pendant une période de trois semaines, entre le 45eme jour et .le 66eme jour, la libération est toutefois plus importante et atteint 150μg/jour (Figure 1) . Les quantités de baclofène libérées sont compatibles avec un effet thérapeutique dans le cadre de traitement de la spasticité par voie intrathécale chez l'homme, la dose moyenne administrée étant de 160 μg/jour avec une fourchette de 50 à 800 μg/jour environ, obtenue en implantant jusqu'à 500 mg de microparticules dans l'espace sous-arachnoïdien. Exemple 2: Utilisation d'un milieu de suspension limitant l'effet de libération immédiate («burst») Les microsphères sont produites par le procédé décrit dans l'exemple 1. Un milieu de suspension qui présente des propriétés de gélification lorsqu' il est placé dans un environnement de température supérieure à 30 °C est ensuite préparé. Les microsphères sont ensuite dispersées dans ce milieu pour atteindre une concentration de 50 mg/mL.1.3.2. Results They are collated in FIG. 1. Five batches of microspheres were produced for each type of polymer and for different theoretical levels of encapsulation. In the case of PLAGA 85/15 and for a theoretical rate of 20.8% the encapsulation rate obtained (determined by LC / MSMS) is 10.83% ± 0.54%, ie an encapsulation yield of 52 , 61% ± 2.48%. For a higher theoretical charge rate (28.2%) the encapsulation rate obtained is 15.30% ± 0.43%, which corresponds to an encapsulation yield of 55.04% ± 1.89 %. In the case of PLAGA 50/50, for a theoretical charge rate of 20.7%, the encapsulation rate obtained is 13.09% ± 0.44% corresponding to an encapsulation yield of 62.69% ± 2.59%. The coefficients of variation obtained over 5 batches for the actual charge rates and the encapsulation yields are therefore always less than or equal to o • For batches prepared with PLAGA 85/15, the average sizes by volume are 30.05 μm ± 1.76 μm and 29.21 μm ± 1.81 μm with less than 7% of the particles having a size greater than 60 μm. For batches made from PLAGA 50/50, the average size is 34.52 μm ± 1.95 μm. Depending on the batch, the release of baclofen from the microparticles produced can be maintained in vitro for a period of six months. The slowest releases are obtained with lower theoretical rates and 85/15 polymers (Figure 1). After an immediate release (“burst”) of 16% over the first 24 hours, the release of baclofen is relatively constant (40 μg per day on average, for 100 mg of microparticles). During a period of three weeks, between the 45 th day and the 66 th day, the release is however greater and reaches 150 μg / day (FIG. 1). The quantities of baclofen released are compatible with a therapeutic effect in the context of treatment of spasticity by the intrathecal route in humans, the average dose administered being 160 μg / day with a range of approximately 50 to 800 μg / day, obtained by implanting up to 500 mg of microparticles in the subarachnoid space. Example 2: Use of a suspension medium limiting the immediate release effect (“burst”) The microspheres are produced by the process described in Example 1. A suspension medium which exhibits gelation properties when it is placed in an environment of temperature above 30 ° C is then prepared. The microspheres are then dispersed in this medium to reach a concentration of 50 mg / mL.
2.1. Modes opératoires 2.1.1. Préparation d'un gel thermosensible Une solution aqueuse de 21% de Poloxamer 407 (Lutrol® PF-127) est préparée' "par dissolution dans de l'eau stérile à 2°C. La solution est laissée une nuit à 4°C.2.1. Procedures 2.1.1. Preparing a thermosensitive gel An aqueous solution of 21% of Poloxamer 407 (Lutrol ® PF-127) is prepared "by dissolving in sterile water at 2 ° C. The solution is left overnight at 4 ° C.
2.1.2. Détermination de la viscosité selon la température La viscosité et le comportement rhéologique de la2.1.2. Determination of the viscosity according to the temperature The viscosity and the rheological behavior of the
' solution de PF-127 sont déterminés en utilisant un "viscosimètre de type Couette (RV1, Haake) à différentes températures . The PF-127 solution is determined using a " Duvet type viscometer (RV1, Haake) at different temperatures.
2.1.3. Evaluation de la vitesse de libération in vitro 50 mg de microsphères sont suspendus dans 1 mL de différents milieux (tampon PBS, solution visqueuse de carboxyméthylcellulose (CMC) 1%, gel de chitosan 2% ou gel thermosensible de Poloxamer 407 (Lutrol® PF-127 21%) et placés dans des sacs de dialyse de pores 10 000 g/mole. Ces sacs sont placés dans des cellules à flux continu. Le test de libération est ensuite réalisé comme dans l'exemple 1. 2.2. Résultats Ils sont rassemblés dans la figure 2 et dans le tableau 1. A 37 °C, les quantités de baclofène libérées sur les 24 premières heures sont divisées par au moins un facteur deux, lorsque les microsphères sont suspendues dans la CMC ou le gel de PF-127 par rapport aux lots suspendus dans le tampon phosphate. Les vitesses moyennes de libération du baclofène pour une quantité normalisée de microspheres montrent que la réduction maximale de libération est obtenue avec le gel de PF-127. L'étude rhéologique montre que la solution de PF-127 à 21% présente une température de gélification de 28,3°C. Le comportement à 37 °C est plastique avec un seuil d'écoulement de 48,5 Pa et une viscosité mesurée à 50 s-1 de 1219 mPa.s.2.1.3. Evaluation of the rate of release in vitro 50 mg of microspheres are suspended in 1 mL of different media (PBS buffer, 1% viscous carboxymethylcellulose (CMC) solution, 2% chitosan gel or heat-sensitive gel of Poloxamer 407 (Lutrol ® PF- 127 21%) and placed in 10,000 g / mole pore dialysis bags These bags are placed in flow-through cells The release test is then carried out as in Example 1. 2.2. Results They are collated in FIG. 2 and in Table 1. At 37 ° C., the quantities of baclofen released over the first 24 hours are divided by at least a factor of two, when the microspheres are suspended in the CMC or the gel. PF-127 compared to batches suspended in phosphate buffer. The average baclofen release rates for a standardized amount of microspheres show that the maximum release reduction is achieved with the PF-127 gel. The rheological study shows that the 21% PF-127 solution has a gelation temperature of 28.3 ° C. The behavior at 37 ° C is plastic with a flow threshold of 48.5 Pa and a viscosity measured at 50 s -1 of 1219 mPa.s.
Exemple 3 : Etude pharmacocinétique chez la chèvre 3.1. Mode opératoire Cette étude est conduite sur de gros animaux pour évaluer les concentrations atteintes in vivo suite à une administration intrathécale de 100 mg de microsphères préparées avec du PLAGA 85/15 selon l'exemple 1 et chargées à 11 % en baclofène. Ces microsphères sont suspendues juste avant injection dans 2 mL de solution visqueuse de PF-127 à 21% ou de CMC 1% ou 0,5 % ou d'un soluté pour injection (Ringer Lactate) . Le suivi des concentrations a lieu par ponction à l'aide de cathéters implantés dans l'espace intrathecal et laissés à demeure pendant toute la durée de l'étude. Les animaux, des chèvres de 54 à 80 kg, sont tout d' abord anesthésiés par voie liquide (mélange kéta ine xylazine), puis par voie gazeuse à l'aide d'halothane, puis un cathéter en silicone est introduit par une aiguille de Tuohy de 15G dans l'espace intrathecal. Le dispositif est ensuite ancré à l'animal par quelques points réalisés à l'aide de sutures non résorbables. Les suspensions de microsphères sont injectées par l'aiguille de Tuohy directement dans l'espace intrathecal au niveau de la 5eme vertèbre lombaire, juste avant le passage du cathéter qui est guidé en direction crâniale jusqu'à la troisième vertèbre lombaire. La dose de baclofène encapsulée injectée est de 1,5 mg/kg. Les prélèvements de LCS sont réalisés de manière aseptique par une seringue de 1 mL. Un volume de 150 μL correspondant à deux fois le volume mort du cathéter est rejeté à chaque ponction, 150 μL sont ensuite prélevés et gardés pour analyse en LC/MSMS comme décrit dans l'exemple 1.Example 3: Pharmacokinetic study in goats 3.1. Procedure This study is carried out on large animals to evaluate the concentrations reached in vivo following an intrathecal administration of 100 mg of microspheres prepared with PLAGA 85/15 according to Example 1 and loaded with 11% in baclofen. These microspheres are suspended just before injection in 2 ml of viscous solution of PF-127 at 21% or CMC 1% or 0.5% or a solute for injection (Ringer Lactate). The concentrations are monitored by puncture using catheters implanted in the intrathecal space and left permanently for the duration of the study. The animals, goats from 54 to 80 kg, are first anesthetized by the liquid route (mixture keta ine xylazine), then by gas using halothane, then a silicone catheter is introduced by a needle. Tuohy of 15G in the intrathecal space. The device is then anchored to the animal by a few points made using non-absorbable sutures. Microsphere suspensions are injected through the Tuohy needle directly into the intrathecal space at the 5th lumbar vertebra just before the passage of the catheter which is guided cranially to the third lumbar vertebrae. The dose of encapsulated baclofen injected is 1.5 mg / kg. LCS samples are taken aseptically using a 1 mL syringe. A volume of 150 μL corresponding to twice the dead volume of the catheter is rejected at each puncture, 150 μL is then withdrawn and kept for analysis in LC / MSMS as described in Example 1.
3.2. Résultats Ils sont rassemblés dans les figures 3 à 5. La libération sur les deux premiers jours est très dépendante du milieu de suspension des microsphères (figure 3) . L'utilisation de solutions visqueuses permet de diminuer par un facteur d'au moins 10 le taux de baclofène obtenu dans le LCS les deux premiers jours. La différence d'effet sur la vitesse de libération observée in vivo par rapport au données in vi tro, suggère que le milieu de suspension a aussi un effet sur la distribution des microsphères dans le canal rachidien. La viscosité des milieux de suspension contribue à limiter la répartition des microsphères dans le canal rachidien ce qui diminue les taux mesurés localement à distance de la zone implantée du fait de la diffusion limitée du baclofène dans le LCS. Le suivi des concentrations atteintes dans le plasma après implantation dans l'espace sous-arachnoïdien (Figure 4) confirme la faculté des milieux de suspension visqueux à diminuer l'effet de libération immédiate (burst ) , puisque les concentrations maximales atteintes sont diminuées d'un facteur deux par rapport au Ringer lactate. Les meilleurs résultats sont obtenus avec le gel de PF-127. Deux groupes de chèvres ayant reçu des microsphères chargées en baclofène et suspendues dans du gel de PF-127 ou de la CMC 1% ont été suivis pendant un mois avec des cathéters implantés. Après une période de trois jours correspondant à la phase de libération rapide du baclofène à partir des microsphères, les taux de baclofène se stabilisent dans le LCS (Figure 5) . 3.2. Results They are collated in Figures 3 to 5. The release over the first two days is very dependent on the suspension medium of the microspheres (Figure 3). The use of viscous solutions makes it possible to reduce by a factor of at least 10 the level of baclofen obtained in the LCS the first two days. The difference in effect on the release rate observed in vivo compared to the data in vi tro, suggests that the suspension medium also has an effect on the distribution of microspheres in the spinal canal. The viscosity of the suspension media contributes to limiting the distribution of microspheres in the spinal canal, which decreases the rates measured locally away from the implanted area due to the limited diffusion of baclofen in the LCS. Monitoring the concentrations reached in the plasma after implantation in the subarachnoid space (Figure 4) confirms the ability of viscous suspension media to reduce the immediate release effect (burst), since the maximum concentrations reached are reduced by a factor of two compared to Ringer lactate. The best results are obtained with the PF-127 gel. Two groups of goats having received microspheres loaded with baclofen and suspended in PF-127 gel or 1% CMC were followed for one month with implanted catheters. After a period of three days corresponding to the rapid release phase of baclofen from the microspheres, baclofen levels stabilize in the LCS (Figure 5).

Claims

REVENDICATIONS
1. Procédé de préparation de microsphères comprenant du poly (D, L-lactide-co-glycolide) , du poly (D, L-lactide (PLAGA ou PLA) ou leurs mélanges, solubles dans l'acétate d'éthyle, encapsulant au moins une substance active insoluble dans l'acétate d'éthyle, ledit procédé comprenant les étapes suivantes: (a) préparation à température ambiante d'une phase organique comprenant: une suspension homogène de la ou des substance (s) active (s) sous forme microparticulaire dans de l'acétate d'éthyle, le ou les polymère (s) dissous dans cette suspension d'acétate d'éthyle, (b) émulsification de ladite phase organique par addition d'une solution aqueuse froide de surfactif, sous agitation vigoureuse avec un taux de cisaillement constant compris entre 600 s"1 et 2500 s"1, (c) extraction contrôlée de l'acétate d'éthyle de cette émulsion par addition lente et continue d'un premier volume d'eau, dans un ratio volumique émulsion/eau supérieur à 0,3, sous la même agitation vigoureuse qu'à l'étape (b) , puis d'un deuxième volume d'eau dans une quantité suffisante pour extraire tout l'acétate d'éthyle, ce qui conduit à la formation des microsphères, (d) filtration sous pression du mélange obtenu en (c) et récupération des microsphères, (e) éventuellement, lyophilisation des microsphères. 1. Process for the preparation of microspheres comprising poly (D, L-lactide-co-glycolide), poly (D, L-lactide (PLAGA or PLA) or their mixtures, soluble in ethyl acetate, encapsulating in at least one active substance insoluble in ethyl acetate, said process comprising the following stages: (a) preparation at ambient temperature of an organic phase comprising: a homogeneous suspension of the active substance (s) under microparticulate form in ethyl acetate, the polymer (s) dissolved in this ethyl acetate suspension, (b) emulsification of said organic phase by addition of a cold aqueous solution of surfactant, with stirring vigorous with a constant shear rate of between 600 s "1 and 2500 s " 1 , (c) controlled extraction of ethyl acetate from this emulsion by slow and continuous addition of a first volume of water, in a emulsion / water volume ratio greater than 0.3, under the same agitation vigorous tion as in step (b), then a second volume of water in an amount sufficient to extract all the ethyl acetate, which leads to the formation of microspheres, (d) filtration under pressure of the mixture obtained in (c) and recovery of the microspheres, (e) optionally, lyophilization of the microspheres.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le polymère a une masse molaire moyenne en poids comprise entre 55 000 g/mole et 120 000 g/mole, de préférence comprise entre 70 000 g/mole et 100 000 g/mole .2. Method according to claim 1, characterized in that the polymer has a weight-average molar mass of between 55,000 g / mole and 120,000 g / mole, preferably between 70,000 g / mole and 100,000 g / mole .
3. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le polymère est choisi parmi les PLAGA 50/50, 65/35, 75/25, 85/15 et les PLAioo ainsi que leurs mélanges.3. Method according to claim 1, characterized in that the polymer is chosen from PLAGA 50/50, 65/35, 75/25, 85/15 and PLAioo as well as their mixtures.
4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le taux de cisaillement est compris entre 900 s-1 et 1400 s-1.4. Method according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the shear rate is between 900 s -1 and 1400 s -1 .
5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la température de la solution aqueuse de surfactif est comprise entre 0 et 10 °C.5. Method according to any one of claims 1 to 4, characterized in that the temperature of the aqueous surfactant solution is between 0 and 10 ° C.
6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que l'agitation vigoureuse est effectuée à une vitesse comprise entre 500 et 2000 tours/min.6. Method according to any one of claims 1 to 5, characterized in that the vigorous stirring is carried out at a speed between 500 and 2000 revolutions / min.
7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que le ratio volumique émulsion/eau du premier volume d'eau est supérieur à 0,45.7. Method according to any one of claims 1 to 6, characterized in that the emulsion / water volume ratio of the first volume of water is greater than 0.45.
8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce que l'ajout du deuxième volume d'eau durant l'extraction de l'acétate d'éthyle est effectuée sous agitation à une vitesse comprise entre 500 t/min et 2000 t/min.8. Method according to any one of claims 1 to 7, characterized in that the addition of the second volume of water during the extraction of ethyl acetate is carried out with stirring at a speed of between 500 rpm and 2000 rpm.
9. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 8, caractérisé en ce que la taille moyenne en volume des microparticules de substance active est comprise entre 0,5 et 10 micromètres, de préférence entre 2 et 5 micromètres .9. Method according to any one of claims 1 to 8, characterized in that the average size by volume of the microparticles of active substance is between 0.5 and 10 micrometers, preferably between 2 and 5 micrometers.
10. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisé en ce que le coefficient de variation pour le taux de charge et le rendement d' encapsulation est inférieur à 5%.10. Method according to any one of claims 1 to 9, characterized in that the coefficient of variation for the loading rate and the encapsulation efficiency is less than 5%.
11. Microsphères susceptibles d'être obtenues par le procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisées en ce qu'elles: -comprennent un polymère pol (D, L-lactide-co- glycolide)ou pol (D, L-lactide) (PLAGA ou PLA) ou leurs mélanges, solubles dans l'acétate d'éthyle et ayant une masse molaire moyenne en poids comprise entre 55 000 g/mole et 120 000 g/mole, - comprennent au moins une substance active sous forme microparticulaire, insoluble dans l'acétate d'éthyle, choisie parmi le baclofène, le ziconotide et les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine, - sont dépourvues de solvant organique chloré, -permettent la libération in vivo de la substance active sur une période d'au moins 100 jours. 11. Microspheres capable of being obtained by the method according to any one of claims 1 to 10, characterized in that they: -comprise a polymer pol (D, L-lactide-co-glycolide) or pol (D, L-lactide) (PLAGA or PLA) or their mixtures, soluble in ethyl acetate and having a weight-average molar mass of between 55,000 g / mole and 120,000 g / mole, - comprise at least one active substance in microparticulate form, insoluble in ethyl acetate, chosen from baclofen, ziconotide and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine, - are devoid of chlorinated organic solvent, - allow the release in vivo of the active substance over a period of at least 100 days.
12. Microsphères selon la revendication 11, caractérisées en ce qu'elles contiennent une substance active permettant de traiter la spasticité.12. Microspheres according to claim 11, characterized in that they contain an active substance making it possible to treat spasticity.
13. Microsphères selon la revendication 11, caractérisées en ce qu'elles contiennent une substance active choisie parmi les analgésiques, notamment locaux, les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine, les opioïdes, les anticancéreux, les interleukines, les facteurs de croissance, les cytokines.13. Microspheres according to claim 11, characterized in that they contain an active substance chosen from analgesics, especially local painkillers, alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine, opioids, anticancer agents, interleukins , growth factors, cytokines.
14. Microsphères selon l'une quelconque des revendications 11 à 13, caractérisées en ce que leur taille moyenne en volume est comprise entre 10 micromètres et 100 micromètres.14. Microspheres according to any one of claims 11 to 13, characterized in that their volume average size is between 10 micrometers and 100 micrometers.
15. Composition pour la libération prolongée d'au moins une substance active comprenant les microsphères selon l'une quelconque des revendications 11 à 14 dispersées de façon homogène dans une solution de polymère biocompatible capable de former un gel in situ après administration dans l'organisme.15. Composition for the sustained release of at least one active substance comprising the microspheres according to any one of claims 11 to 14 dispersed homogeneously in a solution of biocompatible polymer capable of forming a gel in situ after administration in the body .
16. Composition selon la revendication 15, caractérisée en ce que les microsphères sont dispersées de façon homogène dans un gel thermosensible ayant une température de gélation comprise entre 27 et 37 °C.16. Composition according to claim 15, characterized in that the microspheres are homogeneously dispersed in a heat-sensitive gel having a gelation temperature between 27 and 37 ° C.
17. Composition selon la revendication 15 ou 16, caractérisée en ce qu'elle permet la libération in vivo de la substance active sur une période d'au moins 100 jours .17. Composition according to claim 15 or 16, characterized in that it allows release in vivo of the active substance over a period of at least 100 days.
18. Composition selon l'une quelconque des revendications 15 à 17, caractérisée en ce que le gel est choisi parmi les gels thermosensibles, les gels cellulosiques et les gels de polysaccharides .18. Composition according to any one of claims 15 to 17, characterized in that the gel is chosen from heat-sensitive gels, cellulosic gels and polysaccharide gels.
19. Composition selon la revendication 18, caractérisée en ce que le gel thermosensible est un gel Poloxamer, de préférence un gel Poloxamer 407.19. Composition according to claim 18, characterized in that the heat-sensitive gel is a Poloxamer gel, preferably a Poloxamer 407 gel.
20. Composition selon la revendication 18, caractérisée en ce que le gel polysaccharide est choisi parmi les gels de chitosan.20. Composition according to claim 18, characterized in that the polysaccharide gel is chosen from chitosan gels.
21. Composition selon l'une quelconque des revendications 15 à 20, caractérisée en ce que le gel a une viscosité comprise entre 4 et 2000 mPa. s-1, mesurée à 37°C.21. Composition according to any one of claims 15 to 20, characterized in that the gel has a viscosity between 4 and 2000 mPa. s -1 , measured at 37 ° C.
22. Composition selon l'une quelconque des revendications 15 à 21, caractérisée en ce que la concentration des microsphères dans le gel est comprise entre 10 et 500 mg/mL.22. Composition according to any one of claims 15 to 21, characterized in that the concentration of microspheres in the gel is between 10 and 500 mg / ml.
23. Utilisation des microsphères selon l'une quelconque des revendications 11 et 12, ou d'une composition selon l'une quelconque des revendications 15 à 22 pour la préparation d'un médicament destiné à traiter la spasticité et apte à être administré par voie intrathécale ou épidurale. 23. Use of the microspheres according to any one of claims 11 and 12, or of a composition according to any one of claims 15 to 22 for the preparation of a medicament intended to treat spasticity and capable of being administered by the intrathecal or epidural.
24. Utilisation selon la revendication 23, caractérisée en ce que la substance active encapsulée dans les microsphères est choisie parmi le baclofène, le ziconotide, et les agonistes alpha (2) -adrénergiques, notamment la clonidine et la tizanidine .24. Use according to claim 23, characterized in that the active substance encapsulated in the microspheres is chosen from baclofen, ziconotide, and alpha (2) -adrenergic agonists, in particular clonidine and tizanidine.
25. Utilisation des microsphères selon la revendication 13, ou d'une composition selon l'une quelconque des revendications 15 à 22 pour la préparation d'un médicament destiné à traiter la douleur chronique et apte à être administré par voie épidurale, intrathécale ou intracérébrale. 25. Use of the microspheres according to claim 13, or of a composition according to any one of claims 15 to 22 for the preparation of a medicament intended for treating chronic pain and capable of being administered by epidural, intrathecal or intracerebral route .
PCT/FR2005/001128 2004-05-05 2005-05-04 Method for preparing sustained release compositions and the use of said compositions for treating chronic diseases of central nervous system (cns) WO2005120435A2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0404814 2004-05-05
FR0404814A FR2869801B1 (en) 2004-05-05 2004-05-05 PROCESS FOR THE PREPARATION OF PROLONGED RELEASE COMPOSITIONS AND USE THEREOF FOR THE TREATMENT OF CHRONIC AFFECTIONS OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM (CNS)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2005120435A2 true WO2005120435A2 (en) 2005-12-22
WO2005120435A3 WO2005120435A3 (en) 2006-05-26

Family

ID=34947115

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/FR2005/001128 WO2005120435A2 (en) 2004-05-05 2005-05-04 Method for preparing sustained release compositions and the use of said compositions for treating chronic diseases of central nervous system (cns)

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR2869801B1 (en)
WO (1) WO2005120435A2 (en)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006097725A2 (en) * 2005-03-15 2006-09-21 Queen Mary & Westfield College Pharmaceutical compositions comprising microparticles for delivery into neurons
EP1849462A2 (en) * 2006-04-26 2007-10-31 Sun Pharmaceutical Advanced Research Company LTD. A method of alleviating signs and symptons of Spasticity
WO2009129210A2 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Medtronic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine
US8475823B2 (en) 2008-04-18 2013-07-02 Medtronic, Inc. Baclofen formulation in a polyorthoester carrier
US8956642B2 (en) 2008-04-18 2015-02-17 Medtronic, Inc. Bupivacaine formulation in a polyorthoester carrier

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5427796A (en) * 1990-05-15 1995-06-27 Stolle Research & Development Corporation Growth promoters for animals
US5965168A (en) * 1993-11-19 1999-10-12 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Microencapsulated 3-piperidinyl-substituted 1,2-benzisoxazoles and 1,2-benzisothiazoles
WO2002028386A1 (en) * 2000-10-03 2002-04-11 Debiopharm S.A. Method for preparing microspheres containing a water-soluble substance
WO2002058672A2 (en) * 2001-01-26 2002-08-01 Debio Recherche Pharmaceutique S.A. Microparticles of biodegradable polymer encapsulating a biologically active substance
WO2003020245A1 (en) * 2001-08-31 2003-03-13 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Residual solvent extraction method and microparticles produced thereby
US20030152638A1 (en) * 1999-08-27 2003-08-14 Southern Research Injectable opioid partial agonist or opioid antagonist microparticle compositions and their use in reducing consumption of abused substances
EP1344520A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-17 ACTIPAC Biosystems GmbH Microparticles and method for their production

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5427796A (en) * 1990-05-15 1995-06-27 Stolle Research & Development Corporation Growth promoters for animals
US5965168A (en) * 1993-11-19 1999-10-12 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Microencapsulated 3-piperidinyl-substituted 1,2-benzisoxazoles and 1,2-benzisothiazoles
US20030152638A1 (en) * 1999-08-27 2003-08-14 Southern Research Injectable opioid partial agonist or opioid antagonist microparticle compositions and their use in reducing consumption of abused substances
WO2002028386A1 (en) * 2000-10-03 2002-04-11 Debiopharm S.A. Method for preparing microspheres containing a water-soluble substance
WO2002058672A2 (en) * 2001-01-26 2002-08-01 Debio Recherche Pharmaceutique S.A. Microparticles of biodegradable polymer encapsulating a biologically active substance
WO2003020245A1 (en) * 2001-08-31 2003-03-13 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Residual solvent extraction method and microparticles produced thereby
EP1344520A1 (en) * 2002-03-15 2003-09-17 ACTIPAC Biosystems GmbH Microparticles and method for their production

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHAW C S ET AL: "WATER-SOLUBLE BETAMETHASONE-LOADED POLY(LACTIDE-CO-GLYCOSIDE) HOLLOW MICROPARTICLES AS A SUSTAINED RELEASE DOSAGE FORM" JOURNAL OF MICROENCAPSULATION, TAYLOR AND FRANCIS INC. LONDON, GB, vol. 20, no. 3, mai 2003 (2003-05), pages 349-359, XP001145291 ISSN: 0265-2048 *
CONTI B ET AL: "USE OF POLYLACTIC ACID FOR THE PREPARATION OF MICROPARTICULATE DRUG DELIVERY SYSTEMS" JOURNAL OF MICROENCAPSULATION, TAYLOR AND FRANCIS INC. LONDON, GB, vol. 9, no. 2, 1 avril 1992 (1992-04-01), pages 153-166, XP000259942 ISSN: 0265-2048 *
CRUAUD O ET AL: "The characterization and release kinetics evaluation of baclofen microspheres designed for intrathecal injection." INTERNATIONAL JOURNAL OF PHARMACEUTICS. 25 JAN 1999, vol. 177, no. 2, 25 janvier 1999 (1999-01-25), pages 247-257, XP002367212 ISSN: 0378-5173 *
GANDER B ET AL: "QUALITY IMPROVEMENT OF SPRAY-DRIED, PROTEIN-LOADED D,L-PLA MICROSPHERES BY APPROPRIATE POLYMER SOLVENT SELECTION" JOURNAL OF MICROENCAPSULATION, TAYLOR AND FRANCIS INC. LONDON, GB, vol. 12, no. 1, janvier 1995 (1995-01), pages 83-97, XP000486817 ISSN: 0265-2048 *
SAH H: "MICROENCAPSULATION TECHNIQUES USING ETHYL ACETATE AS A DISPERSED SOLVENT: EFFECTS OF ITS EXTRACTION RATE ON THE CHARACTERISTICS OF PLGA MICROSPHERES" JOURNAL OF CONTROLLED RELEASE, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS B.V. AMSTERDAM, NL, vol. 47, no. 3, 8 septembre 1997 (1997-09-08), pages 233-245, XP000689095 ISSN: 0168-3659 *
THOMASIN C ET AL: "A CONTRIBUTION TO OVERCOMING THE PROBLEM OF RESIDUAL SOLVENTS IN BIODEGRADABLE MICROSPHERES PREPARED BY COACERVATION" EUROPEAN JOURNAL OF PHARMACEUTICS AND BIOPHARMACEUTICS, ELSEVIER SCIENCE PUBLISHERS B.V., AMSTERDAM, NL, vol. 42, no. 1, janvier 1996 (1996-01), pages 16-24, XP000555019 ISSN: 0939-6411 *
YAKSH: "Spinal Drug Delivery" 1999, ELSEVIER , AMSTERDAM , XP001208327 *Chapter 15: "General Considerations in the Formulation of Drugs for Spinal Delivery"; Grouls, Korsten Yaksh; Pages 371-393 page 383, colonne 2, dernier alinéa le document en entier page 381, colonne 2 - page 384, colonne 2 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006097725A2 (en) * 2005-03-15 2006-09-21 Queen Mary & Westfield College Pharmaceutical compositions comprising microparticles for delivery into neurons
WO2006097725A3 (en) * 2005-03-15 2006-12-21 Queen Mary & Westfield College Pharmaceutical compositions comprising microparticles for delivery into neurons
EP1849462A2 (en) * 2006-04-26 2007-10-31 Sun Pharmaceutical Advanced Research Company LTD. A method of alleviating signs and symptons of Spasticity
EP1849462A3 (en) * 2006-04-26 2008-05-14 Sun Pharmaceutical Advanced Research Company LTD. A method of alleviating signs and symptons of Spasticity
WO2009129210A2 (en) * 2008-04-18 2009-10-22 Medtronic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine
WO2009129210A3 (en) * 2008-04-18 2010-09-16 Medtronic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine
US8475823B2 (en) 2008-04-18 2013-07-02 Medtronic, Inc. Baclofen formulation in a polyorthoester carrier
US8940315B2 (en) 2008-04-18 2015-01-27 Medtronic, Inc. Benzodiazepine formulation in a polyorthoester carrier
US8956642B2 (en) 2008-04-18 2015-02-17 Medtronic, Inc. Bupivacaine formulation in a polyorthoester carrier
US9132085B2 (en) 2008-04-18 2015-09-15 Warsaw Orthopedic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine
US9775800B2 (en) 2008-04-18 2017-10-03 Warsaw Orthopedic, Inc. Compositions and methods for treating post-operative pain using clonidine and bupivacaine

Also Published As

Publication number Publication date
FR2869801B1 (en) 2008-09-12
FR2869801A1 (en) 2005-11-11
WO2005120435A3 (en) 2006-05-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1313453B1 (en) Particulate vectors for improving oral absorption of active principles
RU2672596C2 (en) Biodegradable or bioerodible microspheres or sustained release microparticles suspended in solidifying depot-forming injectable drug formulation
JP2015129145A (en) Pharmaceutical compositions
EP3030225B1 (en) Continuous release compositions made from hyaluronic acid, and therapeutic applications of same
JP2000511941A (en) Long-acting anesthesia in the joint space and body space
JP2013528612A (en) Antipsychotic depot injection composition
JP2008513363A (en) Delivery vehicle comprising nanoparticles
KR102135537B1 (en) Pharmaceutical composition and use thereof
WO1999012571A1 (en) Nanocapsule preparations for treating intraarticular diseases
Koocheki et al. Development of an enhanced formulation for delivering sustained release of buprenorphine hydrochloride
WO2005120435A2 (en) Method for preparing sustained release compositions and the use of said compositions for treating chronic diseases of central nervous system (cns)
EP0804173A1 (en) Controlled release biodegradable microspheres and method of preparation
Kumbhar et al. In situ gel forming injectable drug delivery system
JP6894436B2 (en) Sustained release cyclosporine-added fine particles
CN114949220B (en) PH response analgesic for targeting damaged segment dorsal root ganglion and application thereof
TW201714611A (en) Soluble microneedle for insoluble drug delivery
CN114748428A (en) High drug-loading-rate cariprazine hydrochloride long-acting sustained-release microsphere and preparation method thereof
Gao et al. Controlled release of huperzine A from biodegradable microspheres: In vitro and in vivo studies
US20160045439A1 (en) Compositions for inhibiting inflammation in a subject with a spinal cord injury and methods of using the same
US20140005199A1 (en) Implant for the controlled release of pharmaceutically active agents
WO2022256417A1 (en) Enhanced two-stage microparticle-based localized therapeutic delivery system
RU2471478C1 (en) Pharmaceutical composition for treating alcoholism, drug addiction and chemical abuse with improved naltrexone release profile
FR2842737A1 (en) PARTICLES COATED ON THE SURFACE OF HYALURONANE OR A DERIVATIVE THEREOF AND THEIR USE AS BIOLOGICAL VECTORS FOR ACTIVE MATERIALS
Shenoy et al. Poly (DL-lactide-co-glycolide) microporous microsphere-based depot formulation of a peptide-like antineoplastic agent
WO2019079095A2 (en) Composition and method of preparation of risperidone extended release preparation

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KM KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SM SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWW Wipo information: withdrawn in national office

Country of ref document: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase