UA68868A - A method for preparation of plasminogen - Google Patents
A method for preparation of plasminogen Download PDFInfo
- Publication number
- UA68868A UA68868A UA20031110248A UA20031110248A UA68868A UA 68868 A UA68868 A UA 68868A UA 20031110248 A UA20031110248 A UA 20031110248A UA 20031110248 A UA20031110248 A UA 20031110248A UA 68868 A UA68868 A UA 68868A
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- plasminogen
- solution
- sorbent
- sodium chloride
- lysine
- Prior art date
Links
- 102000013566 Plasminogen Human genes 0.000 title claims abstract description 47
- 108010051456 Plasminogen Proteins 0.000 title claims abstract description 47
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 35
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 claims abstract description 13
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 14
- SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 6-aminohexanoic acid Chemical compound NCCCCCC(O)=O SLXKOJJOQWFEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 229960002684 aminocaproic acid Drugs 0.000 claims description 8
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 8
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 238000003795 desorption Methods 0.000 claims description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 3
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 abstract 2
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 abstract 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 6
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 6
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 3
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 3
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 102000010911 Enzyme Precursors Human genes 0.000 description 2
- 108010062466 Enzyme Precursors Proteins 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 101000605403 Homo sapiens Plasminogen Proteins 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- -1 aminopropyl Chemical group 0.000 description 2
- 108700038176 azofibrin Proteins 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical class CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920006184 cellulose methylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000020764 fibrinolysis Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000003334 potential effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000001814 protein method Methods 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Опис винаходуDescription of the invention
Винахід відноситься до галузі біотехнології одержанні очищених білкових препаратів, і може бути 2 використаний в медико-біологічній промисловості, наприклад, на станціях переливання крові, заводах по виробництву бакпрепаратів, а також в науково-дослідних лабораторіях.The invention relates to the field of biotechnology for the production of purified protein preparations, and can be used in the medical and biological industry, for example, at blood transfusion stations, plants for the production of tank preparations, as well as in research laboratories.
Препарат очищеного плазміногену використовується в медичній клінічній практиці для досліджень фібринолітичної активності плазми крові, визначення активності активаторів фібринолізу та його інгібіторів, в наукових лабораторіях медико-біологічного просиплю при дослідженні існуючих та розробці нових 70 тромболітичних препаратів. На даний момент вітчизняна промисловість не випускає препаратів очищеної о плазміногену людини.The preparation of purified plasminogen is used in medical clinical practice for studies of the fibrinolytic activity of blood plasma, determination of the activity of fibrinolysis activators and its inhibitors, in scientific laboratories of medical and biological sleep during the study of existing and development of 70 new thrombolytic drugs. Currently, the domestic industry does not produce preparations purified from human plasminogen.
Відомі способи одержання очищеного плазміногену людини шляхом афінної хроматографії на сорбентах, що містять в якості ліганда залишки І-лізину, а носієм служить сефароза |1|, біогель |), целюлоза і карбоксиметилцелюлоза |З), кремнезем |4). Сорбцію нлазміногену з розчинів проводять при рН 7-9, домішкові 12 білки видаляють промиванням сорбенту 0,5М розчином натрію хлориду. Специфічну десорбцію плазміногену здійснюють 0,2М-0,25М розчином є-амінокапронової кислоти структурним аналогом бокового ланцюга І -лізину.There are known methods of obtaining purified human plasminogen by affinity chromatography on sorbents containing I-lysine residues as a ligand, and sepharose |1|, biogel |), cellulose and carboxymethyl cellulose |C), silica |4) as a carrier. Sorption of lasminogen from solutions is carried out at pH 7-9, impurity 12 proteins are removed by washing the sorbent with a 0.5M sodium chloride solution. Specific desorption of plasminogen is carried out with a 0.2M-0.25M solution of ε-aminocaproic acid, a structural analog of the I-lysine side chain.
Серед перерахованих носіїв виділяються кремнеземні макропористі матриці з регульованим розміром пор.Among the listed carriers, silica macroporous matrices with adjustable pore size stand out.
Вони достатньо жорсткі, хімічно інертні, термостійкі а хроматографічні сорбенти на їх основі легко регенеруються, витримують високу швидкість пропускання розчинів з достатньою специфічною ємкістю по відношенню до речовин, які необхідно сорбувати, не піддаються гідролізу мікроорганізмами.They are hard enough, chemically inert, heat-resistant, and chromatographic sorbents based on them are easily regenerated, withstand a high rate of passage of solutions with a sufficient specific capacity in relation to the substances to be sorbed, and are not subject to hydrolysis by microorganisms.
Найближчим по сукупності ознак, подібних до сукупності суттєвих ознак даного винаходу є спосіб одержання плазміногену, який полягає в пропусканні через колонку з І-лізин-силохромом екстракту фракції 111 плазми крові за Коном (|5). Для здійснення цього способу осад фракції ПІ за Коном екстрагують 0,05М Тріс-НСЇІ буферним розчином, рН 8,0, що містить 0,5М натрію хлориду. Потім екстракт пропускають через колонку з 29 амінопропілсилохромом, промивають 1М розчином натрію хлориду і здійснюють елюцію плазміногену 0,25М « розчином є-амінокапронової кислоти. Одержаний розчин плазміногену діалізують проти вихідного буферного розчину і пропускають через колонку з афінним сорбентом І -лізин силохромом, промивають 1М розчином натрію хлориду і десорбують плазміноген 0.25М розчином є-амінокапронової кислоти. со 20 Недоліками способу-прототипу є наступні: 1. Для досягнення високої очистки плазміногену проводиться двоетанна хроматографія - на (Се) амінопропілсилохромі та І-лізин силохромі. Використання тільки останнього етапу не дозволяє досягнути со вищого ступеню очищення плазміногену у порівнянні з |4|. 2. Одержаний за даним методом плазміноген за результатами електрофоретичних досліджень містить до 0 5-80 плазміну активної форми ферменту, - яка з'являється в процесі автокаталітичної активації плазміногену с при його тривалому виділенні. Плазміноген з домішками плазміну непридатний для ряду діагностичних досліджень, не може бути використаний для одержання ефективних тромболітичних агентів, погано зберігається в розчинах, швидше втрачає свою потенційну активність в замороженому та ліофілізованому стані у порівнянні з вільним плазміногепом. « 20 3. Двоетапність хроматографії зменшує кінцевий вихід продукту внаслідок втрат на кожному з етанів. -в 4. Недостатня десорбція баластних білків 0,5-1,0М розчином натрію хлориду з сорбенту приводить до с зменшення на кінцевому стані питомої активності плазміногену. :з» 5. При елюції плазміногену 0,25М розчином є-амінокапронової кислоти з І-лізин-силохрому профермент виходить доволі широким піком у великому об'ємі розчину, внаслідок чого концентрація плазміногену складає лише О,Змг/мл (по білку). б Задачею даного винаходу є підвищення ступеню очищення плазміногену, збільшення його кінцевого виходу, спрощення технології внаслідок одностадійності, і, як наслідок, одержання плазміногену без домішок плазміну. бо Поставлена задача досягається запропонованим способом одержання плазміногену, яка включає одержання оо екстракту осаду (фракції І за Коном, пропускання екстракту через колонку з І-лізин-силохромом, десорбцію 20 баластних білків 2595 розчином ізопропанолу, естрагуючим буферним розчином, 0,5М розчином натрію хлориду, (2) елюцію плазміногену О0,25М розчином є-амінокапронової кислоти в присутності О,5М розчину натрію хлориду, с діаліз одержаного розчину та ліофілізацію.The method of obtaining plasminogen, which consists in passing through a column with I-lysine-silochrome the extract of blood plasma fraction 111 according to Kohn (|5), is the closest in terms of a set of features similar to the set of essential features of this invention. To implement this method, the precipitate of fraction PI according to Kohn is extracted with a 0.05M Tris-HCII buffer solution, pH 8.0, containing 0.5M sodium chloride. Then the extract is passed through a column with 29 aminopropyl silochrome, washed with a 1 M sodium chloride solution, and plasminogen is eluted with a 0.25 M solution of ε-aminocaproic acid. The resulting plasminogen solution is dialyzed against the original buffer solution and passed through a column with the affinity sorbent I-lysine silochrome, washed with a 1M sodium chloride solution and desorbed plasminogen with a 0.25M solution of ε-aminocaproic acid. со 20 Disadvantages of the prototype method are the following: 1. To achieve high purification of plasminogen, two-ethane chromatography is performed - on (Ce) aminopropyl silochrome and I-lysine silochrome. The use of only the last stage does not allow achieving a higher degree of plasminogen purification compared to |4|. 2. According to the results of electrophoretic studies, the plasminogen obtained by this method contains up to 0 5-80 plasmin of the active form of the enzyme, which appears in the process of autocatalytic activation of plasminogen c during its long-term release. Plasminogen with plasmin impurities is unsuitable for a number of diagnostic studies, cannot be used to obtain effective thrombolytic agents, is poorly stored in solutions, and loses its potential activity faster in the frozen and lyophilized state compared to free plasminogen. « 20 3. The two-stage chromatography reduces the final yield of the product due to losses on each of the ethanes. -in 4. Insufficient desorption of ballast proteins with a 0.5-1.0 M sodium chloride solution from the sorbent leads to a decrease in the specific activity of plasminogen in the final state. :z» 5. When elution of plasminogen with a 0.25M solution of ε-aminocaproic acid from I-lysine-sylochrome, the proenzyme appears as a rather broad peak in a large volume of the solution, as a result of which the concentration of plasminogen is only 0.3 mg/ml (by protein). b The objective of this invention is to increase the degree of purification of plasminogen, increase its final yield, simplify the technology due to one-step process, and, as a result, obtain plasminogen without plasmin impurities. because The set task is achieved by the proposed method of obtaining plasminogen, which includes obtaining an extract of the sediment (fraction I according to Kohn, passing the extract through a column with I-lysine-silochrome, desorption of 20 ballast proteins with 2595 isopropanol solution, extracting buffer solution, 0.5M sodium chloride solution , (2) elution of plasminogen with a 0.25M solution of ε-aminocaproic acid in the presence of a 0.5M sodium chloride solution, with dialysis of the resulting solution and lyophilization.
Відмінність запропонованого способу полягає у десорбції баластних білків з І -лізин-силохрому розчинами у наступній послідовності: 2595 ізопропанол, вихідний буферний розчин, 0,5М натрію хлорид; та елюції 5Б плазміногену з сорбенту 0,25М розчином є-амінокапронової кислоти в присутності 0,5М натрію хлориду.The difference of the proposed method is the desorption of ballast proteins from I-lysine-sylochrome solutions in the following sequence: 2595 isopropanol, initial buffer solution, 0.5M sodium chloride; and elution of 5B plasminogen from the sorbent with a 0.25M solution of ε-aminocaproic acid in the presence of 0.5M sodium chloride.
Додаткове у порівнянні з прототипом промивання І-лізин-силохрому зі зв'язаним плазміногеном 2590 » розчином ізопропанолу та вихідним буферним розчином дозволяє підвищити ступінь очищення плазміногену на 10-30965) за рахунок додаткового видалення баластних білків. Елюція плазміногену 0,25М розчином є-амінокапронової кислоти в присутності 0,5М нагрію хлориду підвищує селективність десороції і бо зменшує час виконання процедури - плазміноген збирають в невеликому об'ємі з високою концентрацією білка.Additional washing of I-lysine-sylochrome with bound plasminogen 2590 » with an isopropanol solution and the original buffer solution in comparison with the prototype allows to increase the degree of plasminogen purification by 10-30965) due to additional removal of ballast proteins. Elution of plasminogen with a 0.25M solution of ε-aminocaproic acid in the presence of 0.5M chloride heat increases the selectivity of desorption and therefore reduces the time of the procedure - plasminogen is collected in a small volume with a high protein concentration.
Такий розчин швидше піддається діалізу.Such a solution undergoes dialysis faster.
Зменшення часу виділення плазміногену в 2-3 рази у порівнянні з аналогічним способ дозволяє одержати профермент без домішок плазміну.Reducing the time of plasminogen release by 2-3 times compared to a similar method allows you to obtain proenzyme without plasmin impurities.
В наведених прикладах кількість білка наведена в мг, активність плазміногену визначена після його 65 активації стрептокіназою по гідролізу азофібрину |ІбЄЇ За одну фібринолітичну активність приймали гаку кількість ферменту, яка при гідролізі азофібрину в стандартних умовах викликала приріст оптичної густини при довжині хвилі 44Онм, рівний одиниці, за одну годину.In the given examples, the amount of protein is given in mg, the activity of plasminogen was determined after its 65 activation by streptokinase by hydrolyzing azofibrin. One fibrinolytic activity was taken as the amount of enzyme that, during the hydrolysis of azofibrin under standard conditions, caused an increase in optical density at a wavelength of 44 Ohm, equal to one, in one hour.
Приклад 1. 10г осаду Фракції ІІЇ плазми крові людини за Коном екстрагують 100мл 0.05М Тріс-НСІ буферного розчину, рН 8,0, що містить О0,15М натрію хлориду, протягом 4 год при ї- 420. Екстракт центрифугують при 60009 протягом ЗОхв. Супернатант пропускають через колонку (1,3х4см) з І -лізин-силохромом, врівноважену вихідним буферним розчином) зі швидкістю 0,75мл/(см2Охв.) і послідовно промивають наступними розчинами: 1) 0,05МExample 1. 10 g of sediment Fraction III of human blood plasma according to Kohn is extracted with 100 ml of 0.05 M Tris-HCI buffer solution, pH 8.0, containing O0.15 M sodium chloride, for 4 hours at 420°C. The extract is centrifuged at 60009 for 30 minutes. The supernatant is passed through a column (1.3x4 cm) with I-lysine-silochrome, balanced with the original buffer solution) at a speed of 0.75 ml/(cm2Ochv.) and washed successively with the following solutions: 1) 0.05M
Тріс-НСІ буферний розчин, рН 8,0, що містить 2595 ізопропанолу; 2) 0.05М Тріс-НСІ буферний розчин, рН 8,0; 3) 0,05М Тріс-НСІ буферний розчин, рН 8,0, що містить О0,5М натрію хлориду. Промивання кожним розчином здійснюють до моменту, коли оптична густина розчину, що виходить з колонки, при довжині хвилі 280 нм, 70 знижується до 0,05 одиниць. Елюцію плазміногену проводять 0.05М Тріс-НСІ буферним розчином, рН 8,0, що містить 0,25М є-аміноканронової кислоти та 0,5М натрію хлориду. Одержаний розчин плазміногену діалізують проти вихідного буферного розчину і ліофільно висушують. Вихід плазміногену - 22мг, питома активність - 9,2од./мг білкаTris-HCI buffer solution, pH 8.0, containing 2595 isopropanol; 2) 0.05M Tris-HCl buffer solution, pH 8.0; 3) 0.05M Tris-HCI buffer solution, pH 8.0, containing O0.5M sodium chloride. Washing with each solution is carried out until the optical density of the solution leaving the column at a wavelength of 280 nm, 70 decreases to 0.05 units. Elution of plasminogen is carried out with 0.05M Tris-HCI buffer solution, pH 8.0, containing 0.25M ε-aminocanronic acid and 0.5M sodium chloride. The resulting plasminogen solution is dialyzed against the original buffer solution and lyophilized. Plasminogen output - 22 mg, specific activity - 9.2 units/mg of protein
В таблиці представлені характеристики плазміногену одержаного пропонованим способом (« 75 способом-прототипом. плазміногеном, мл/іелюаті, мг/мл плазміногену, од./мг/|(по ФА), о (домішки плазміну), 90 спосіб білка 2The table presents the characteristics of plasminogen obtained by the proposed method (« 75 by the prototype method. plasminogen, ml/eluate, mg/ml plasminogen, units/mg/| (according to FA), o (plasmin impurities), 90 protein method 2
З наведених в таблиці даних видно, що ступінь очищення плазміногену, яка характеризується підвищенням його питомої фібринолітичної активності, вища в 1,3-1,5 рази в пропонованому способі. «From the data presented in the table, it can be seen that the degree of purification of plasminogen, which is characterized by an increase in its specific fibrinolytic activity, is 1.3-1.5 times higher in the proposed method. "
Продуктивність способу - вихід сумарної фібринолітичної активності у порівнянні з активністю екстракту фракції ІІ - для пропонованого способу в 1,2-1,4 рази вища, ніж у прототипу.Productivity of the method - the output of the total fibrinolytic activity in comparison with the activity of the extract of fraction II - for the proposed method is 1.2-1.4 times higher than in the prototype.
Відсутність спонтанної фібринолітичної активності (домішок плазміну) в препараті плазміногену, одержаного даним способом, па відміну від способу-прототипу - ще одна з переваг пропонованого способу. соThe absence of spontaneous fibrinolytic activity (plasmin impurities) in the plasminogen preparation obtained by this method, unlike the prototype method, is another advantage of the proposed method. co
Скорочення часу виділення плазміногену значно здешевлюють пропонований спосіб, елюція плазміногену в Ге) меншому об'ємі спрощує к технічному виконанні наступні роботи (діаліз, ліофілізацію), внаслідок чого покращуються аналітичні показники кінцевого продукту діагностичного чи лікувального препарату. соShortening the time of plasminogen release significantly reduces the cost of the proposed method, elution of plasminogen in He) in a smaller volume simplifies the technical performance of the following work (dialysis, lyophilization), as a result of which the analytical indicators of the final product of a diagnostic or therapeutic drug are improved. co
Література, прийнята до уваги при складанні заявки: Ге) 1. Оецівспн Б.б., Меп; Б.. Ріазтіподеп. Ригіїйсайоп бот питап ріазта Бу айіпіу спготайодгарпу//Зсієпсе, 1970. 170, рр. 1095-1096. ее, 2. Кіскі ЕЕ. Нитап ріазтіподеп: а зциттагу ої віцаіев оп в ізоїацйоп, сПпагасіегігайоп апа асіїмайоп теспапізт//Л/ттипоспептівігу, 1975, м. 12, рр.629-632. 3. Кудинов С.А., Ерецкая Е.В., Позднякова Т.М. и др. Аффинньсе сорбенть! для получения плазминогена /Укр. « биохим. журн., 1979, т. 51, с.330-334. З 4. Староверов С.М., Лисичкин В.А., Малиновский В.А., Гайда А.В. и др. Сорбент для вьіделения с плазминогена. А. с. 1309584, СРСР. з» 5. Гайда А.В., Монастьірский В.А., Магеровский Ю.В., Самарский В.А. и др. Способ получения плазминогена.Literature taken into account when preparing the application: Ge) 1. Oetsivspn B.b., Mep; B.. Riaztipodep. Rygiiisayop bot pitap riazta Bu ayipiu spgotayodgarpu//Zsiepse, 1970. 170, pp. 1095-1096. ee, 2. Kiski EE. Nytap riaztipodep: a zcittagu oi vitsaiev op v isoiatsyop, sPpagasiegigayop apa asiimayop tespapizt//L/ttipospeptivighu, 1975, m. 12, pp. 629-632. 3. Kudynov S.A., Eretskaya E.V., Pozdniakova T.M. etc. Affinnse sorbent! to obtain plasminogen / Ukr. " biochem. Journal, 1979, vol. 51, pp. 330-334. Z 4. Staroverov S.M., Lysichkin V.A., Malynovsky V.A., Hayda A.V. etc. Sorbent for the removal of plasminogen. A. p. 1309584, USSR. z" 5. Hayda A.V., Monastyrskyi V.A., Magerovskyi Y.V., Samarskyi V.A. etc. The method of obtaining plasminogen.
А. с. 1325746, СРСР. 6. Гайда А.В., Монастьірский В.А., Магеровский Ю.В., Даньіш Т.В. Способ определения фибринолитической 75 активности. А.с. 1255641, СРСР. (22) соA. p. 1325746, USSR. 6. Hayda A.V., Monastyrskyi V.A., Magerovsky Y.V., Danysh T.V. A method of determining fibrinolytic 75 activity. A.s. 1255641, USSR. (22) co
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20031110248A UA68868A (en) | 2003-11-13 | 2003-11-13 | A method for preparation of plasminogen |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| UA20031110248A UA68868A (en) | 2003-11-13 | 2003-11-13 | A method for preparation of plasminogen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA68868A true UA68868A (en) | 2004-08-16 |
Family
ID=34512036
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA20031110248A UA68868A (en) | 2003-11-13 | 2003-11-13 | A method for preparation of plasminogen |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| UA (1) | UA68868A (en) |
-
2003
- 2003-11-13 UA UA20031110248A patent/UA68868A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR100871454B1 (en) | Removal of plasminogen from protein solutions | |
| AU2011350672B2 (en) | Method for immobilising nucleic ligands | |
| US4381346A (en) | Isolation of plasminogen activators useful as therapeutic and diagnostic agents | |
| US4721572A (en) | Purfication of blood clotting factors and other blood proteins on non-carbohydrate sulfated matrices | |
| US20200121846A1 (en) | Apparatus for the extracorporeal treatment of blood | |
| KR890001927B1 (en) | Method for purification of filamentous hemagglutinin | |
| Suen et al. | Hydroxyapatite-based immobilized metal affinity adsorbents for protein purification | |
| CN102234332A (en) | Process for separating and purifying recombinant human serum albumin and fusion protein thereof | |
| JPS5839513B2 (en) | Storage method for purified trypsin and trypsin-like enzymes | |
| FI96211C (en) | Process for Separate Purification and Separation of Single-Chain Tissue Plasminogen Activator (tPA) and Double-Chain TPA from a Mixture | |
| JP3471379B2 (en) | Method for preparing human antithrombin-III | |
| CA1164341A (en) | Isolation of plasminogen activators useful as therapeutic and diagnostic agents | |
| UA68868A (en) | A method for preparation of plasminogen | |
| USRE32271E (en) | Isolation of plasminogen activators useful as therapeutic and diagnostic agents | |
| JP3805378B2 (en) | Method for producing rDSPAα1 | |
| CN115161308A (en) | Purification method of tenecteplase supernatant for injection | |
| SU644796A1 (en) | Method of purifying proteolytic ferments | |
| JPS59110625A (en) | Plasminogen activating factor, manufacture and product for manufacture | |
| Sabotič et al. | The value of fungal protease inhibitors in affinity chromatography | |
| SU551339A1 (en) | The method of purification of enzyme preparations | |
| CN104419695A (en) | Purification method of chymotrypsinogen bionic affinity material and purification method of chymotrypsin | |
| JPH07508009A (en) | Purification of kringle-containing proteins and especially t-PA | |
| RU2322505C1 (en) | Isolation and purification of protein by chromatography method | |
| SU942427A1 (en) | Method for purifying proteolytic enzymes | |
| JP2714817B2 (en) | Method for producing urokinase precursor |