TW201217526A

TW201217526A - Chimeric clotting factors

Info

Publication number: TW201217526A
Application number: TW100124535A
Authority: TW
Inventors: Joe Salas; Robert T Peters; Alan Bitonti
Original assignee: Biogen Idec Hemophilia Inc
Priority date: 2010-07-09
Filing date: 2011-07-11
Publication date: 2012-05-01
Also published as: US20210292729A1; AU2011274423B2; EP2591006A1; CA2804280A1; SG10201505217WA; US20180320159A1; JP2013534427A; AU2011274423A1; US20170044512A1; DK2591099T3; CN103180439A; PL2591006T3; KR20140002601A; LT2591006T; EA201291482A1; EP2591099B1; EP3560962A1; WO2012006633A1; MX2013000301A; WO2012006635A1

Description

201217526 六、發明說明：【發明所屬之技術領域】本發明涉及具有增強的活性的嵌合凝血因數。的特徵尤其在於製備增強活性的凝血因數的方法，些方法製備的增強活性的凝血因數，以及使用這些數改善止血的方法。 Φ 【先前技術】外源性凝血途徑的啓動由組織因數因數Vila之的複合物介導，其由於血管壁損傷而暴露。然後該將因數IX和X轉換成其活性形式。在組織因數承受，因數Xa將數量有限的凝血酶原轉換成凝血酶。然結果導致凝血酶從組織因數承受細胞中分散並啓動，因數V和VIII，製備因數Va和Villa。在凝固的增，在活化的血小板表面，由因數IXa產生因數Xa ( φ Villa複合）。與輔因數因數Va複合的因數Xa啓動原變成凝血酶，產生凝血酶爆發。通過凝血酶將纖原轉換成纖維蛋白結束級聯反應，這導致形成血纖凝塊。在凝血過程的啓動中，因數VII和組織因數成員。因數VII是一種血漿糖蛋白，在血液迴圈作爲鏈酶原存在。該酶原催化地處於非活性狀態。在體管通過各種因數，單鏈因數VII可轉換成雙鏈因數因數Xa是因數VII的重要的生理活化劑。通過裂解本發明使用這凝血因間形成複合物細胞上後，該血小板殖階段與因數凝血酶維蛋白維蛋白是關鍵一個單內，儘 Vila，連接氨 201217526 基酸152位的精氨酸殘基和氨基酸153位的異亮氨酸殘基之間的肽鍵，將酶原因子νπ轉換成活化的兩條鏈分子。存在組織因數、磷脂和鈣離子時，這個兩條鏈的因數Vila啓動因數X或因數IX。因數VI la被認爲是通過作用在組織因數承載細胞（典型地，受損內皮細胞）表面生理啓動凝血級聯反應，產生凝血酶的初始量，然後擴散到血小板，使其啓動，觸發血小板開始凝血酶原產生的增殖階段。治療上，在活化的血小板表面，重組體FVII a被啓動的因數X活化，繞過在凝血的增殖階段需要FIXa或FVIIIa產生凝血酶爆發。由於FVIIa對血小板的親和力相對較低，重組 F VI la的劑量在超生理水準。該過程被認爲是獨立於組織因數的。人類因數IX以單鏈糖蛋白迴圈（分子量57,0 00 )。其在血漿中以酶原存在，並在鈣離子存在時通過因數XIa( 啓動的血漿促凝血酶原激酶先質）轉換成絲氛酸蛋白酶’ 因數IX ap (更普遍稱爲FIXa)。在該啓動反應中，在因數 IX中水解兩個內部肽鍵。這些斷裂在特異性精氨醯-丙氨酸肽鍵和特異性精氨醯-纈氨酸肽鍵上發生。這造成了從前體分子的內部區域中釋放啓動肽（分子量約等於1 l000 )並產生因數IXap (分子量約等於46,000 )。因數IXap由輕鏈（分子量約等於U，〇〇〇)和重鏈（分子量約等於 2 8，000 )組成，而且這些鏈由二硫鍵連在一起。因數X還以單鏈多肽合成，其含有由精氨酸-賴氨酸-精氨酸三肽連結的輕鍵和重鍵。然後該單鏈分子通過兩個

S -6- 201217526 (或多個）內部狀鍵斷裂轉換成輕鍵和重鍵。在血漿中’ 通過二硫鍵連結這兩個鏈，從而形成因數X。啓動的因數 X、因數Xa參與最終的普遍路徑’通過該路徑將凝血酶原轉換成凝血酶，其反過來將血纖維蛋白原轉換成纖維朊。給患者施用凝血因數以促進—段時間的止血。重組 DNA技術的出現極大地改進了對凝血障礙患者的治療’其使得安全又相容的蛋白質療法得以發展。例如，將重組啓動的因數VII廣泛用於治療如在患有血友病A或B、凝血因數XI或VII缺乏、血小板功能缺陷、血小板減少或血管性假血友病的患者中所發生的嚴重出血。重組因數IX也具有治療用途。儘管這樣的重組體分子是有效的，仍然需要改進的形式，其將治療定位於凝血位點，具有改進的藥代動力學性質，降低的清除率，提高的可製備性，降低的凝血活性，或具有增強的活性或具有多於一個的這些特點。【發明內容】本發明涉及具有增強的活性的嵌合凝血因數。本發明的特徵尤其在於製備增強活性的凝血因數的方法，使用這些方法製備的增強活性的凝血因數，以及使用這些凝血因數改善止血的方法。本發明的增強的凝血因數具有以下特性’其提局了效率和/或可製作性。在一個實施方案中，本發明的改進的凝血因數具有所需的增加的活性，例如，通過將凝血因數靶向血小板或者通過在受試者體內以活性 -7- 201217526 形式存在（非天然產生的活性形式），其在繕點被啓動。一方面，本發明涉及嵌合凝血因數，其包含選自F VII 、FIX和FX的凝血因數和結合於血小板的靶向部分以及非必要的在凝血因數和靶向部分之間的間隔部分。在一個實施方案中，凝血因數包由含式A、B和C表示的結構，其中A是凝血因數；其中B是間隔部分；以及其中 C是至少一個結合於血小板的靶向部分。在一個實施方案中，凝血因數選自ABC、CBA的式所表示的由氨基端到羧基端的結構。在一個實施方案中，與缺少至少一個靶向部分的適當的對照相比，存在血小板時，凝血因數展示了生成更多的凝血酶。在一個實施方案中，凝血因數包含支架部分和非必要的第二間隔部分。在一個實施方案中，凝血因數還包括D和E，其中D是間隔部分；E是支架部分，其中嵌合凝血因數包含選自A B CDE、ADEBC、EDABC、CBADE、EDCBA和C B ED A的式所表示的由氨基端到羧基端的結構。在一個實施方案中，E是二聚Fc區，其包含第一Fc部分F1和第二Fc部分F2。在一個實施方案中，凝血因數作爲多肽表達，所述多肽包含可切割的scFc (cscFc)接頭，該接頭置於兩個Fc部分之間，其中cscFc接頭與至少一個酶切位點相鄰，這導致了 cscFc多肽接頭的切割。 -8- 201217526 在一個實施方案中，cscFc接頭與至少一個酶切位點相鄰，這導致了 cscFc接頭的切割。在一個實施方案中，如請求項9的嵌合凝血因數，其中至少一個酶切位點是細胞內加工位點。在一個實施方案中，其中多肽接頭兩側爲兩個酶切位點，其被相同的酶或不同的酶識別。在一個實施方案中，多肽接頭長度爲約10個至約50個 φ 氨基酸。在一個實施方案中，多肽接頭長度爲約20個至30個氨基酸。在一個實施方案中，多肽接頭包含甘氨酸/絲氨酸肽〇在一個實施方案中，甘氨酸/絲氨酸肽的公式爲 (Gly4Ser)n，或Ser(Gly4Ser)n其中η是正整數，其選自1、2 、3、4、5、6、7、8、9和10。在一個實施方案中，（Gly4 φ Ser)n接頭選自（Gly4 Ser)6、Ser(Gly4 Ser)6、（Gly4 Ser)4和 Ser(Gly4 Ser)4。在一個實施方案中，凝血因數包含兩條肽鏈。在一個實施方案中，嵌合凝血因數具有選自以下組的結構：A經由間隔部分連接F1且c與F2連接；A經由間隔部分連接FI，C經由間隔部分連接F2 ; a連接FI，C經由間隔部分連接F2 ; A經由間隔部分連接F1，c經由間隔部分連接F2。在一個實施方案中，嵌合凝血因數包含兩條多肽鏈， -9- 201217526 其中第一·條多肽鏈包含部分A B Fl、A B Fl、A B Fl、a B FI D C，第二條多肽鏈包含部分C F2、C D F2、F2 D C 、F2 D C，其中兩條多肽鏈形成Fc區。在一個實施方案中，靶向部分融合至少一個Fc區的多肽鏈。在一個實施方案中，靶向部分直接融合F1和F2中的至少一個。在一個實施方案中，靶向部分融合經由間隔部分連接的F1和F2中的至少一個。在一個實施方案中，靶向部分經過酶切接頭融合F1和F2的至少一個。在一個實施方案中，靶向部分選自：抗體分子、抗體分子的抗原結合片段、scFv分子、受體的受體結合部分、肽。在一個實施方案中，其中靶向部分剩餘的血小板結合。在一個實施方案中’靶向部分選擇性地域活化的血小板結合。在一個實施方案中，靶向部分選擇性地與選自以下組分的靶標結合： GPIba、GPVI和GPIIb/IIIa的非活性形式。在一硇實施方案中，靶向部分選擇性地與選自以下組分的靶標結合： GPIIb/IIIa的活性形式、P選擇蛋白、GMP-33、LAMP-1、 LAMP-2、CD40L和LOX-1。在一個實施方案中，靶向部分結合GPIb複合物。在一個實施方案中，靶向部分是選自下組的肽：PS4、OS1和OS2。在一個實施方案中，靶向部分包含選自下組的抗體的可變區：SCE5、MB9和AP3。在一個實施方案中，其中凝血因數是因數VII。在一個實施方案中，凝血因數是因數VII的高活性變體。在一個實施方案中，凝血因數是因數IX。在一個實施方案中，凝血因數是因數IX的高活性變體。在一個實施方 201217526 案中’凝血因數是因數X。在一個實施方案中，凝血因數是因數X的高活性變體。在一個實施方案中，凝血因數由活性形式的細胞分泌。在一個實施方案中，凝血因數在體內啓動。在一個實施方案中，嵌合凝血因數包含不是天然存在於凝血因數中的異源酶切位點。在一個實施方案中，酶切位點基因上融合到凝血因數 φ 重鏈部分的氨基端。在一個實施方案中，支架部分是蛋白質分子，其增加增強的凝血因數的流體動力學半徑。在一個實施方案中，如果存在支架部分，選自白蛋白和 XTEN®。在另一方面本發明涉及包含FVII的多肽，所述FVII包含被凝血級聯的組分啓動的異源酶切位點。在一個實施方案中，多肽包含支架部分和非必要的間 φ 隔部分。在一個實施方案中，支架部分是二聚Fc區，其包含第 —Fc部分F1和第二Fc部分F2。在一個實施方案中，凝血因數包含兩條多肽鏈。在一個實施方案中，嵌合凝血因數具有選自以下組的結構：凝血因數經由間隔部分與第一Fc部分連接；凝血因數經由間隔部分與第二Fc部分連接；凝血因數直接連接F 1 :凝血因數直接連接F2。在一個實施方案中，嵌合凝血因數還包括靶部分。 201217526 在一個實施方案中，嵌合凝血因數作爲單獨的多肽鏈合成’所述肽鏈包含cscFc接頭。在一個實施方案中， cscFc接頭與至少一個酶切位點連接（例如，直接連接或靠近），其引起接頭的酶切。在一個實施方案中，至少一個酶切位點是細胞內加工位點。在一個實施方案中，cscFc接頭兩側爲兩個酶切位點，其被相同的酶或不同的酶識別。在一個實施方案中， cscFc接頭的長度爲約1〇個至約50個氨基酸。在一個實施方案中，cscFc接頭的長度爲約20個至30個氨基酸。在一個實施方案中，cscFc接頭包含甘氨酸/絲氨酸肽〇在一個實施方案中，甘氨酸/絲氨酸肽的公式爲（甘氨酸4絲氨酸）n，或絲氨酸（甘氨酸4絲氨酸）n其中n是正整數，其選自1' 2、3、4' 5、6、7、8、9和10。在一個實施方案中，（甘氨酸4絲氨酸）η接頭選自（甘氨酸4絲氨酸）6、絲氨酸（甘氨酸4絲氨酸）6、（甘氨酸4絲氨酸）4和絲氨酸（甘氨酸4絲氨酸）4。在一個實施方案中，凝血因數是因數VII的高活性變體。在一個實施方案中，不是天然存在於凝血因數的異源酶切位點在繕的位點被切割。在一個實施方案中，切割位點選自以下組：因數XIa切割位點、因數Xa切割位點和凝血酶切割位點。在一個實施方案中，酶切基因上融合到凝血因數重鏈部分的氨基端。在一個實施方案中，其中靶向部分剩餘的血小板結合 -12- 201217526 。在一個實施方案中，靶向部分選擇性地域活化的血小板結合。在一個實施方案中，靶向部分選擇性地與選自以下組分的靶標結合：GPIba、GPVI和GPIIb/IIIa的非活性形式。在一個實施方案中，靶向部分選擇性地與選自以下組分的靶標結合：GPIIb/IIIa的活性形式、P選擇蛋白、GMP-33 、LAMP-1、LAMP-2、CD40L和 LOX-1。在一個實施方案中，支架部分是蛋白質分子，其增加增強的凝血因數的流體動力學半徑。在一個實施方案中，如果存在支架部分，選自白蛋白和XTEN®。一方面，本發明涉及選自A B C、C B A、A B C D E 、A D E B C、E DAB C、C BAD E、EDCBA、CBED A的式所表示的由氨基端到羧基端的結構，其中A是啓動的凝血因數，沒有B或者B是接頭，C是靶部分，沒有D或者D是接頭，E是支架部分。在一個實施方案中，凝血因數包含凝血因數的輕鏈和重鏈，每條輕鏈和重鏈作爲單獨的多肽鏈表達。在一個實施方案中，核酸分子編碼本發明的嵌合凝血因數。在一個實施方案中，核酸分子存在于載體中。在一個實施方案中，載體還包括編碼酶的核苷酸序列，所述酶切割至少一個酶切位點。在一個實施方案中，本發明涉及包含表達本發明載體的宿主細胞。在一個實施方案中，宿主細胞表達能夠在細胞內加工的酶。在一個實施方案中，酶是細胞內源性的。 -13- 201217526 在一個實施方案中，酶是細胞外源的。在另一實施方案中’本發明涉及製備嵌合凝血因數的方法’所述方法包含在培養基中培養宿主細胞，並從培養基中回收增強的凝血因數。在另一實施方案中，本發明涉及包含兩條多肽的加工的、異源二聚體多肽，其中在細胞培養基中培養細胞中的載體表達產生所述加工的、異源二聚體多肽，從所述培養基中分離成熟的、異源二聚體多肽。在一個實施方案中，本發明涉及包含嵌合凝血因數和藥學上可接受的載體的組合物。在另一實施方案中，本發明涉及包含本發明核酸分子和藥學上可接受的載體的組合物。在另一實施方案中，本發明涉及給受試者止血的改進方法，其包含施用本發明的藥物組合物。圖1示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包括靶標域。這些典型的結構包含Fc區。圖2示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包括靶標域。這些典型的結構包含切割的單鏈FC ( cscFc )，其中scFc接頭由細胞處理，在所述細胞中表達形成兩個鏈的 Fc區。圖3示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包含目標結構域，其中凝血因數部分缺乏G1 a結構域。這些典型的結構包含F c區。圖4示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包含目 201217526 標結構域，其中凝血因數部分缺乏Gla結構域。這些典型的結構包含切割的單鏈FC ( cscFc )，其中scFc接頭由細胞處理，在所述細胞中表達形成兩個鏈的Fc區。圖5示出了典型的增強的凝血因數構建體，其被啓動 (例如，在體內活化後或者通過單獨表達凝血因數的輕鏈和重鏈）或者是活性形式的，也就是說其包含在體內在凝塊位元點切割的部分（參見組D和E )。這些典型的結構包 φ 含Fc區。結構A、B和C在較早的實驗中沒有很好表達》圖6示出了典型的增強的凝血因數構建體，其被啓動 (例如，在體內活化後或者通過單獨表達凝血因數的輕鏈和重鏈）或者是活性形式的，也就是說其包含在體內在凝塊位元點切割的部分。這些典型的結構包含切割的單鏈Fc (cscFc )，其中scFc接頭由細胞處理，在所述細胞中表達形成兩個鏈的Fc區。圖7示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包括靶 φ 標域。圖8示出了典型的增強的凝血因數構建體，其包含目標結構域，其中凝血因數部分缺乏GU結構域。圖9示出了典型的增強的凝血因數構建體，其被啓動 (例如’在體內活化後或者通過單獨表達凝血因數的輕鏈和重鏈）或者是活性形式的，也就是說其包含在體內在凝塊位元點切割的部分。圖1〇示出了用於純化的SDS PAGE和FVII-011的活化 -15- 201217526 圖11示出了用於純化的SDS PAGE和FVII-053的活化〇圖12示出了 FVII-01和FVII-102的示意圖，並且示出了通過FACS測定的FVIII-01 1和FVII-027與活化的血小板。圖13示出了凝血酶生成試驗在存在活化的血小板時測定 FVII-027、FVII-0 1 1 和 Novoseven的活性》圖14示出了 PAC-1消除與血小板之間的增加的結合以及與 FVII-027有關的凝血酶生成的增加速率。圖15示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其在存在活化的血小板時用於測定FVII-037和Novoseven的活性。圖1 6示出了凝血酶生成試驗在存在活化的血小板時測定 FVII-03 7 的 Novoseven 的活性。圖17示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時（如圖18所示）測定FVII-044、 FVII-045、FVII-046、FVII-011 和 Novoseven的活性。圖18示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時測定FVII-044、FVII-045、FVII-046、 FVII-011 和 Novoseven的活性。圖19示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時（如圖20所示）測定FVII-047、 FVII-048、FVII-049、FVII-0 1 1 和 Novoseven的活性。圖20示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時測定FVII-047、FVII-048、FVII- 201217526 049、FVII-011 和 Novoseven的活性。圖21示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時（如圖22所示）測定FVII-053和 FVII-01 1的活性。圖22示出了在凝血酶生成試驗中使用的構建體，其用於存在活化的血小板時測定FVII-05 3和FVII-01 1的活性。圖2 3示出了 P AC -1消除與血小板之間的增加的結合以 φ 及與 FVII-053有關的凝血酶生成的增加速率。圖24示出了在FVIIFc的蛋白質印跡分析中使用的構建體，接著在HEK293細胞中暫態轉染，蛋白A的拖帶現象如圖2 5所示。圖25示出了在FVIIFc的蛋白質印跡分析中使用的構建體，接著在HEK293細胞中暫態轉染，蛋白A的拖帶現象。圖26示出了蛋白A免疫沉澱的免疫印跡，接著在具有或不具有pSYN-PC5-003下，在pSYN-FVII-024中暫態轉染 φ 。泳道 1 : pSYN-FVII-024，非還原；泳道 2，pSYN-FVII-024，非還原；泳道3，pSYN-FVII-024，還原；泳道4， pSYN-FVII-024，還原。圖27示出了 FVIIFc種的蛋白質印跡分析（Fc印跡），接著在HEK293細胞中暫態轉染，蛋白A的拖帶現象。圖28示出了用FXIa處理的FVII-039和FVII-040。圖29示出了 FVIIaFc變體靶向GPIIbllla的活性形式，其示出了凝血酶產生速率增加。圖 30示出了 Rotation Thromoboelastometry ( ROTEM) -17- 201217526 試驗，其用於在人體血液中A型血友病中測定FVII-08 8和野生型重組FVIIaFc的活性。圖中示出了凝固時間，血塊形成的時間和α角度參數。圖3 1示出了典型的切割位點和這種切割位點在啓動的凝血因數構建體中的說明性的位置。在該圖中，F VII用作實例。圖3 2示出了圖31中示出的構建體的切割。圖33示出了另外的啓動的構建體及示出其切割的蛋白質印跡。圖34示出了使用FVII-062和-090構建體的凝血酶生成試驗結果。FVI1-062是陰性對照，其缺乏凝血酶切割位點，所以構建體不能被啓動。FVII-090包含ALRPR切割位點，所以被凝血酶啓動。圖35說明了高特異活性FVII變體的切割。FVII蓽鏈Fc 和輕鏈Fc折疊在帶1中，因爲重鏈在插入胰蛋白酶1 7〇環後失去了糖基化位點並變得很小。圖36說明了使用FVΠ-090和FVII-100的凝血酶生成試驗結果。圖37說明了使用FVII-090和FVII-1 15的凝血酶生成試驗結果。圖3 8說明了被凝血酶啓動的活性形式的FVIIFC的氨基酸分解活性。可啓動的變體的氨基酸分解活性在測定凝血酶活性後能夠被測定’與FVI1·090相比，高特異活性變體的氨基酸分解活性增加。在這些試驗中’可啓動部分被凝 -18- 201217526 血酶啓動後，加入水蛭素去抑制顯色底物的凝血酶裂解。以這種方式，凝血酶不干擾檢測FVIIa活性的能力。圖39說明了使用底物S2765通過FVIIa測定FX活性試驗的結果，所述底物不被FVIIa切割。在該試驗中，37 °C下，使用FVIIaFc培養10 UMFX15分鐘。該反應用EDTA淬火，並加入底物。圖39示出了對照實驗的結果，其證明通過 FVIIaFc啓動的FX能夠被檢測。圖40示出了通過“可啓動的FVIIFc”啓動的FXa生成活性。在圖40中示出的該實驗，其增加了對於高特異性變體的FX啓動活性。在該實驗中，FVIIFc (100 nM)被凝血酶 (100 nM)啓動，力□入水蛭素抑制凝血酶。加入FX (10uM) ，接著用EDTA抑制反應。通過檢測FXa底物測定FX活性圖41說明了典型的可啓動的構建體形式，其包括用於 FVII-118、FVII-119和FVII-127中的可啓動的單體結構。圖42說明了與異源二聚體（FVII-090 )相比，可啓動的構建體，特別是單體（FVII-1 18和-1 19 )的凝血酶切割效率。圖43說明了將野生型可啓動的FVIIFc (F VII-1 18)與高特異性活性變體（FVII-127)坐比較的凝血酶生成試驗的結構。圖44A說明了幾個靶標構成。在這種情況下，在該構成的很多位置上包括與GPIIbllla的活性構象相連的SCE5 scFv。圖44B說明了通過使用這些構成在富含血小板缺乏 -19- 201217526 FVIII的血駿中進行凝血酶產生試驗的結果。N7是 Novoseven對照。圖44C說明了通過FACs進行的重組 FVIIaFc變體與血小板的結合。圖45八說明了幾個靶？¥11&構成，其包括八？3、在休眠和活化的血小板中與GPIIbllla相對存在的scFv。圖45B示出了在富含血小板缺乏F VIII的血漿中進行凝血酶產生試驗的結果。圖45C示出了通過FACS 進行的rFVIIaFc變體與血小板的結合。圖46A示出了幾個靶FVIIa構成，其靶定使用與該分子結合的肽，特別的，PS4、OS1和OS2肽的莲GPIb»圖46B 示出了通過使用圖46A所示C端肽構成在富含血小板缺乏 F VIII的血漿中進行凝血酶產生試驗的結果。圖47 A示出了通過使用N端肽構成在富含血小板缺乏 FVIII的血漿中進行凝血酶產生試驗的結果。圖47B示出了 FVII-045與FVII-048的直接比較。圖48示出了通過FACS確定的FVII-045和FVII-048以及野生型FVIUFc與血小板的結合。該圖還示出了如Bernard 等，Biochemistry 2008，47:4674-4682中所報導的祀狀的親和力。圖49A示出了典型的靶FVIII構成。圖49B示出了在缺乏FVIII富含血小板的血漿中進行的凝血酶產生試驗的結果。在該實驗中，通過組織因數（頂面板）或血小板啓動 (底面板）啓動該試驗。圖5 0示出了測定靶FVII構成的半衰期的實驗，其包含 201217526 gla結構域（FVII-011)而缺乏gla結構域（FVII-028 )。圖51A示出了幾個FIX構成，其包含靶半分，在此實例中是3€£53仆乂。圖516示出了通過使用圖51八的構成在富含血小板缺乏FIX的血漿中進行凝血酶產生試驗的結果。圖5 1C說明了如通過凝血酶產生所測定的，FIX-06 8和FIX-088都具有比 FIX-042高出至少四倍的活性》圖52A示出了通過比較FIX-090和Benefix進行的凝血 φ 酶產生試驗的結果。圖52B示出了 FIX-090的活性幾乎爲 Benefix活性的四倍。圖53A示出了靶FIX構成，其包含與在休眠和活化的血小板中存在的GPIb相連的肽。圖53B示出了在富含血小板缺乏FIX的血漿中進行凝血酶產生試驗的結果。圖53 C說明了如通過凝血酶產生所測定的，FIX-08 9比FIX-042大約強四倍，但其具有較低的特異性活性。本發明涉及嵌合凝血因數。本發明基於，至少部分基 φ 於效率增強、藥代動力學性能增強和/或可製備性增加的凝血因數的心方法的發展。在一個實施方案中，本發明改進的凝血因數在需要的地方具有增加的活性，例如通過使凝血因數靶向血小板或者通過在受試者體內以可啓動的形式存在（分天然發生的可啓動形式），其在繕位點被啓動。這可以通過，例如靶向凝血因數或使其以活性形式存在完成。在一個實施方案中，所述凝血因數靶向凝結位點。通過將靶向凝血因數的靶部分結合到休息或活化的血小板中 -21 - 201217526 ’增強凝血因數的額活性。例如，對於因數VII，不像內源性FVII，內源性FVII同樣由組織因數（TF )在內皮細胞表面啓動以產生活性因數X ( FXa )，內源性F VII同樣以 TF依賴方式產生FXa/FIXa，最有效位於其他凝血因數受限的活性血小板表面。然而，生理學上的F VI la作用於TF承載細胞（如內皮細胞）的表面，其具有血小板低親和力。據推測’治療重組體FVIIa通過在活化的血小板表面將因數X轉化成因數Xa起作用。爲了克服低血小板的親和力並有效治療出血，重組FVIIa以超生理水準給藥。因此，對於FVIIa，靶向血小板表面能顯著增加這種部分的療效。儘管其他的凝血因數（例如FIX、FVIII、FX)具有高血小板親和力，這些也可能會通過結合血小板靶向部分以表現出增強的活性。另外，FVIIa在人體內具有相對短的半衰期（〜2.3小時）。這種短的半衰期可能歸因於需要多次給藥重組的FVIIa以控制血液。因此，使凝血因數，特別是 FVIIa靶向血小板的效率增加。靶向部分可以位於嵌合凝血因數的許多位置。列出了靶向的嵌合凝血因數的典型結構，例如在圖1 -4、7、8、 17、19、21、44、46、49、51和 53中所示。在另一實施方案中，本發明的嵌合凝血因數以可在凝結位點啓動的形式製備。只有當以啓動的形式存在時，對於使用旁路治療的外源性凝血因數才是有效的。然而，這種啓動的凝血因數通過內源性途徑快速失活（例如抗凝血酶III、TFPI))，這導致了活性形式的清楚以及短的有效 201217526 半衰期。給予高劑量並沒有解決這個問題，因爲它可以導致凝血效果。因此，在一個實施方案中，本發明涉及“可活化的”增強的凝血因數構建體，其包含不是通常存在於凝血因數中的異源酶切位點，這些分子作爲增強的酶原迴圈，並由於缺乏給藥後失活，而具有長的半衰期，但是其很容易在凝結位點被酶切割啓動。在一個實施方案中，這樣的異源酶切位點是在凝血級聯中產生的酶異源酶切位點 Φ 。例如，在一個實施方案中，可啓動的構建體的異源切割爲點包含因數XIa、Xa或凝血酶切割位點。典型的FXIa切割位點包括，例如TQSFNDFTR和SVSQTSKLTR。典型的凝血酶切割位點包括，例如DFLAEGGGVR、TTKIKPR和 ALRPR。在一個實施方案中，異源切割位點置於凝血因數的輕鏈和重鏈之間。在另一實施方案中，異源切割位點不置於凝血因數的兩條鏈之間。在一個實施方案中，異源切割位點是凝血因數重鏈的氨基端。 # 存在於可切割的接頭的異源切割位點能夠置於嵌合凝血因數的多個位置。列出了可啓動的嵌合凝血因數的典型結構’例如在圖5、6、9、29、27、31和41中所示。典型地’存在繕時’這種結構被啓動，以下將進行詳細描述。

在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數包含支架 ’例如，增加分子的流體動力學半徑。例如，本發明的嵌合凝血因數可以是融合蛋白。典型的支架包括，例如FcRn 結合部分（例如’完整Fc區或者其部分，其結合于FcRn) ’單鏈 Fc 區（ScFc區，例如，如 US 2008/0260738、WO •23- 201217526 2008/012543 或 WO 2008/1439545 中所描述），切割 SCFc 區 (如本文所描述的cscFc區），少部分的複雜蛋白及其部分，例如XTen多肽®或白蛋白。在一個實施方案中’本發明的嵌合凝血因數使用！^區或FcR η結合部分作爲支架部分。在—個實施方案中，以部分與增強的凝血因數基因上融合，所述Fc部分天然存在（或野生型（WT))。在另一實施方案中，Fc部分包含在序列中的一個或多個變體。在另一實施方案中，Fc部分是 cscFc部分。在該構建體中，未加工的分子包含可切割的單鏈Fc區，其中組分Fc部分基因上地融合單多肽鏈，以使它們形成具有功能的、單鏈的嵌合Fc區。通過多肽接頭（例如，scFc多肽接頭）基因上融合scFc的組分Fc部分。 scFc多肽接頭能夠連接構建體的Fc部分與非Fc部分，例如凝血因數或靶向部分，其反過來，連接第二Fc部分。在一個實施方案中，本發明的多肽包含可切割的scFc (cscFc)接頭（L)，其連接scFc區的Fc部分。該cscFc接頭置於Fc部分中間，所述部分包含scFc區並且兩側具有至少 —個酶切位點，例如細胞內酶加工點。在一個實施方案中，scFc接頭兩側具有兩個酶切位點，當由核酸分子編編的蛋白質在細胞中加工時，導致接頭切除（例如接頭的全部或實質上的全部）。在另一實施方案中’ scFc接頭與至少一個酶切位點臨近，其使得在多肽被細胞分泌後體外切除接頭或者包含至少一個酶切位點，其使得在構建體施用給受試者後，接頭被切割。因此，在一個實施方案中’儘管 -24- 201217526 這種多肽包含在單獨的開放閱讀框（〇RF )中編碼的scFc 區，其以爲加工的形式作爲連續核苷酸序列的部分，scFc 接頭被酶切割（例如施用之前或在體內施用之後），導致包含Fc區的異源分子的多肽不融合在單獨的氨基酸鏈種，也就是獲得的加工的構建體具有Fc區，其包括兩條多肽鏈。在該實施方案中，接頭的全部或基本上的全部被切除，而在一些實施方案中，切割位點的一部分可以保留，例如 • RRRR切割位點的四個精氨酸》在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數以活性形式製備。例如，因數VII通常重組地作爲酶原產生，並在製備期間要求活化以產生用於施用的活性形式。在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數由細胞分泌，其中以活性形式表達從而改進可製備性。正如下文中所詳細描述的 ’适種凝血因數能夠通過將單鍵Fc區整合到分子中產生。單鏈Fc區由Fc部分二聚化作用形成，所述Fc部分存在於單 φ 獨的多肽鏈中。在一個實施方案中，這種構建體包含scFc 多肽接頭’其連接scFc的兩個Fc部分，所述scFc與至少一個內源性加工位點鄰近》例如，當蛋白質與在反面高爾基體中的活性加工酶共存時，這種構建體的切割被延遲到分泌途徑後期。因此，在一個實施方案中，scFc接頭包含至少一個酶切位點（例如’細胞內加工位點）導致嵌合分子包含雨個鏈Fc區’其實質上缺少外源性氨基酸序列。在一個實施方案中，scFc接頭兩側具有用於切割的兩 -25- 201217526 個加工爲點。這兩個加工位點可以相同或不同。在一個實施方案中，至少一個加工位點是鹼性氨基酸殘基簇，其被精氣酸kex2/弗林蛋白酶酶識別。所述酶在緊挨著精氨酸殘基的C端切割。在另一實施方案中，至少一個切割位點在體內被切割，例如切割位點被凝血酶識別。在一個實施方案中，表達編碼本發明的多肽的構建體的細胞內源性的表達酶，該酶在一個或多個加工位點切割 scFc接頭，導致嵌合分子包含兩條多肽鏈。在另一實施方案中，表達編碼本發明的多肽的構建體的細胞外源性的表達酶，該酶在一個或多個加工位點切割scFc接頭。在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數能夠組合兩個或多個這些特徵以創造優化的構建體，例如使可啓動的融合蛋白構建體靶向休息的血小板，以使其能夠被有效以及在活性凝結位元點以高局部濃度被啓動》示例性這種組合構建體包括增強的凝血因數，其同時都是靶向的並包含用於增強加工的scFc接頭。在另一實施方案中，本發明的構建體是靶向並可啓動的。參照附圖和序列表對本發明示例性構建體進行說明。在一個實施方案中，本發明涉及多肽，其具有如附圖中所示的結構。在另一實施方案中，本發明涉及多肽，其具有所附序列表中列出的序列。應當理解的是這些構建體及編碼其的核酸分子能夠用於在受試者體內改善止血。參照附圖和序列表對本發明示例性構建體進行說明。在一個實施方案中，本發明涉及多肽，其具有如附圖中所 -26- 201217526 示的結構。在另一實施方案中，本發明涉及多肽，其具有所附序列表中列出的序列。應當理解的是這些構建體及編碼其的核酸分子能夠用於在受試者體內改善止血。爲了更加清楚的理解本說明書和請求項書，下面提供了以下定義。定義 Φ 本文中所使用的術語“蛋白質”或“多肽”是指兩個或兩個以上的天然氨基酸或非天然氨基酸的聚合物。術語“氨基酸”包括丙氨酸（Ala或A )、精氨酸（Arg 或R)、天冬醯胺（ASN或N)、天門冬氨酸（ASP或D) 、半胱氨酸（CYS或C)、穀氨醯胺（GLN或Q)、谷氨酸 (GLU或E)、甘氛酸（Gly或G)、組氨酸（His或H)、異亮氨酸（ILE或I )、亮氨酸（Leu或L )、賴氨酸（Lys 或K )、蛋氨酸（MET或M)、苯丙氨酸（P HE或F)，脯 φ 氨酸（Pro或P )、絲氨酸（SER或S )、蘇氨酸（THR或T )、色氨酸（TRP或W )、酪氨酸（Tyr或Y )和纈氨酸（ VAL或V )。非傳統的氨基酸也包括在本發明的範圍內，其包括正亮氨酸、鳥氨酸、正纈氨酸。高絲氨酸，以及如 Ellman等，Meth. Enzym. 202:301-336 (1991)所描述的其他氨基酸殘基類似物。要產生這樣的非天然氨基酸殘基，可以使用 Noren 等，Science 244:1 82 (1 989)和 Ellman 等，上述過程。簡言之，這些過程涉及化學地啓動具有非天然存在的氨基酸殘基的tRNA的抑制子，接著在體外轉錄和翻 -27- 201217526 譯的RNA。同樣可以使用本領域已知的狀化學完成非傳統氨基酸的引入。本文中所使用的術語“極性氨基酸，，包括氨基酸’其靜電荷爲零，但在其側鏈的不同部分具有非零部分電荷（例如M、F、W、S、Y、N、Q、C)。這些氨基酸能夠參與疏水相互作用和靜電相互作用。本文中所使用的術語“帶電氨基酸”包括氨基酸，其在其側鏈上具有非零的靜電荷（例如R、K、Η、E、D)。這些氨基酸能夠參與疏水相互作用和靜電相互作用. “氨基酸置換”是指在預定的氨基酸序列（起始多肽的氨基酸序列）中至少一個現有的氨基酸殘基被第二個不同的“替代”氨基酸殘基替代。“氨基酸插入”是指將至少一個額外的氨基酸整合到預定的氨基酸序列中》然而通常由一個或兩個氨基酸殘基組成插入，目前較大的“肽插入，，，可插入約三到五甚至高達約十，十五，或二十個氨基酸殘基。插入的殘基可以天然存在或非天然存在，如上所述。“ 氨基酸缺失”是指從預定的氨基酸序列中移除至少一個氨基酸殘基。多肽可以是單體或者多聚體。例如，在一個實施方案中’本發明的蛋白是二聚體。在一個實施方案中，本發明的二聚體是同源二聚體，其包含兩個相同的單體亞基或多肽（例如，兩個相同的F C部分或兩個相同的生物活性部分 )。在另一實施方案中，本發明的二聚體是同源二聚體，其包含兩個相同的單體亞基或多肽（例如，包含兩個不同的凝血因數或其部分或僅包含一個凝血因數）。參見，例 -28- 201217526 如’美國專利7404956，其以引用方式納入本文。本文中所使用的術語“多肽”是指肽或多肽序列（例如，合成肽或多肽序列），其以連接多肽鏈的線性氨基酸序列的兩個結構域。本發明的多肽由核酸分子編碼，所述核酸分子編碼多肽’其直接或間接的連接兩個組成構建體的 Fc部分。本文中使用的這些接頭爲“scFc接頭”，scFc接頭置於多肽的兩個Fc部分之間，並包括多肽，如果scFc接頭 φ 連續地連接在線性多肽序列中的兩個F c部分，則其爲“直接”連接。反之，scFc接頭可以連接第一 Fc部分到結合部分’其反過來連接第二Fc部分，從而形成間接連接。這些 scFc接頭（L)允許形成單鏈基因構建體。該多肽包含酶切位點，其導致scFc接頭被切割，並且在一個實施方案中，基本上被切除（例如，在細胞中的加工過程中）。因此，獲得的加工的多肽是嵌合分子，其包含至少兩個氨基酸連並基本上缺少外部接頭氨基酸序列。在一些實施方案中 •，切除了所有或基本上所有的接頭，而在一些實施方案中，切割位點的一部分可以保留，例如RRRR切割位點的四個精氨酸。在另一實施方案中，多肽接頭的另一種類型，此處也稱爲“間隔子”可以用於連接不同的部分，例如，將凝血因數或靶向部分與多肽上的Fc部分連接。接頭的這種類型可以靈活的提供給多肽分子。典型地，間隔子不被切割，然而，在某些實施方案中，這種切割是必要的。在附圖中示出了間隔子典型的位置。間隔子可以位於凝血因數、靶向 -29 - 201217526 部分和/或支架之間，例如在這些部分的N端或C端。在一個實施方案中，這些接頭在加工過程中被除去。可存在于本發明的嵌合凝血因數的第三種類型的接頭此處也稱爲“可切割的接頭”，其包括異源切割位點（例如，因數XIa、Xa或凝血酶切割位點），其可在切割爲點的N 端或C端或兩端包括額外的間隔子接頭。在附圖中示出了這種位點的典型的位置，其包括，例如鄰近靶向部分的位置。在另一實施方案中，所述接頭可以鄰近凝血因數或其部分。例如，在一個實施方案中，可切割的接頭可與凝血因數的重鏈的N端融合以製備凝血因數的可啓動的形式。在這種情況下，可切割的接頭可在切割爲點的N端包括額外的間隔子接頭，但要求切割位點的C端與凝血因數的重鏈的氨基端直接融合。本文中所使用的術語“甘氨酸/絲氨酸多肽接頭”是指由甘氨酸和絲氨酸殘基組成的肽。典型的甘氨酸/絲氨酸多肽接頭包含氨基酸序列（Gly4 Ser)n. (SEQ ID NO:4)。另一典型的甘氨酸/絲氨酸多肽接頭包含氨基酸序列S(Gly4 Ser)n。在一個實施方案中，n=l。在一個實施方案中，n = 2。在另一"實施方案中’ η = 3,也就是說（Gly4 Ser)3。在另一實施方案中’ n = 4’也就是（Gly4 Ser)4(SEQ ID NO:6)。在另一實施方案中，n = 5。在又一實施方案中，n = 6。在另一實施方案中’ π = 7。在又一實施方案中，n = 8。在另一實施方案中，n = 9。在又一實施方案中，n= 10。另一典型的甘氨 -30- 201217526 酸/絲氨酸多肽接頭包含氨基酸序列Ser(Gly4Ser)n (SEQ ID NO:26)。在一個實施方案中，n=l。在一個實施方案中， n = 2。在優選實施方案中，n = 3。在另一實施方案中，n = 4 。在另一實施方案中，n = 5。在又一實施方案中，n = 6。多肽或氨基酸序列“來自”指定的多肽或蛋白，是指多肽源。優選地，多肽或氨基酸序列來自特殊的序列，其具有實際上有與所述序列或其部分同源的氨基酸序列，其中 φ 該部分由至少10至20個氨基酸，優選地至少20至30個氨基酸，更優選地至少30至5〇個氨基酸，或其與本領域普通的具有相同來源序列的同源。來自另一個肽的多肽相對於起始多肽可具有一個或多個突變，例如，一個或多個氨基酸殘基被另外的氨基酸殘基置換或者其具有一個或多個氨基酸殘基插入或缺失。優選地，多肽包含非天然發生的氨基酸序列。這種變體必然地與初級抗體具有少於1 〇〇%的序列同源性或相似性。在優 φ 選實施方案中，變體將與起始多肽的氨基酸序列具有約 75%至少於100%的氨基酸序列的統一性和相似性，更優選地約8 0%至少於1 00%，更優選地約8 5 %至少於1 00%，更優選地約 9 0% 至少於 1 00% (例如，91%、92% ' 93%' 94%、 9 5 %、9 6 %、9 7 %、9 8 %、9 9 % )，最優選地，約 9 5 % 至少於 100%，例如，變體分子的長度。在一個實施方案中，在起始多肽序列與由此產生的序列之間有一個氨基酸差異。此處定義關於該序列的同源性和相似性爲候選序列中的氨基酸殘基與起始氨基酸殘基相同的百分比（也就是相同的殘 •31 - 201217526 基），如有必要，比對序列並引入差距以實現最大的序列同源性百分比。本發明優選的多肽包含來自人類蛋白序列的氨基酸序列（例如，至少一個凝血因數或Fc部分或結構域）。然而，多肽可包含來自其他哺乳類動物的一個或多個氨基酸。例如，凝血因數，Fc結構域或靶向部分可以來自非人物種，其包括在本發明的多肽中。可選地，在多肽中可以存在一個或多個氨基酸，其來自非人類物種。本發明優選的多肽沒有免疫原性。本領域技術人員同樣應該理解的是本發明的多肽可以改變，以使其在氨基酸序列中天然發生或天然的多肽，然而保留天然多肽的必要活性。例如，核苷酸或氨基酸置換導致“非必要的”氨基酸殘基發生保守替代或改變。通過將一個或多個核苷酸在免疫球蛋白的核苷酸序列中進行置換、增加或缺失創建來自免疫球蛋白（例如，Fc結構域、部分或抗原結合位元點）編碼多肽的非天然變體的分離的核酸分子’以在編碼的蛋白中引入一個或多個氨基酸置換、增加或缺失。通過標準技術引入突變體，例如定點突變和 PCR介導的突變。本發明的多肽在一個或多個氨基酸殘基處可包含保守的氨基酸置換，例如，必要的或非必要的氨基酸殘基。“ 保守的氨基酸置換”是氨基酸殘基被具有相似側鏈的氨基酸殘基的替代。具有相似側鏈的氨基酸殘基家族在本領域已經確定’其包括鹼性側鏈（例如，賴氨酸、精氨酸、組

-32- 201217526 氨酸），酸性側鏈（例如，天門冬氨酸，谷氨酸），不帶電荷的極性側鏈（例如’甘氨酸、天冬醯胺、穀氨醯胺、絲氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、半胱氨酸），非極性側鏈（例如 ’丙氨酸、結氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸、色氨酸），β-分支側鏈（例如，蘇氨酸、結氨酸、異亮氨酸）以及芳香族側鏈（例如，酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、組氨酸）。因此，多狀中的非必須氨基酸殘 φ 基可以被另外的來自相同側鏈家族的氨基酸殘基替代。在另一實施方案中’氨基酸串可以被結構上相同的串和/或側鏈家族成員的組合物替代，所述串順序不同。可選地，在另一實施方案中’可在編碼序列的全部或其部分隨即引入突變體’獲得的突變體能夠被納入到本發明的多肽中，並篩選其結合所需目標的能力。在上下文中的多肽，“線性序列”或“序列’，是氨基酸在多肽中從氨基端到羧基端方向的順序，其中在序列中彼此 • 緊鄰的殘基在多肽的初級結構序列中是連續的。本文中所使用的術語“連接，，，“融合的，，或“融合’’是指通過肽鍵（例如’基因融合）、化學連接或其他方式的的連接。例如’一種分子或部分能夠採用多肽進行連接的方式’所述多肽通過肽鍵連接分子或部分。使用的術語“基因融合的”，“基因連接的，，或“基因融合，，可以互換，其是指兩個或連個以上的蛋白質、多肽及其片段經過其單獨的肽骨架共線性、共價連接或連接，通過編碼這些蛋白質、多肽或其片段的單獨多聚核苷酸分子進行基因表達。這種 -33- 201217526 基因融合導致在一個單獨連續的基因序列中表達。優選的基因融合是在閱讀框中，也就是兩個或兩個以上開放閱讀框.(ORF)融合以形成連續的更長的ORF，以保持原始ORF 的正確閱讀框的方式進行。因此，獲得的重組融合蛋白是單獨的多肽，其含有兩個或兩個以上的蛋白質片段，所述片段對應於由原始ORF編碼的多肽（所述片段在天然中並不是正常連接）。在這種情況下，在加工過程中單獨的多肽被切割以產生包含兩條多肽鏈的嵌合分子。本文中所使用的術語“Fc區”應定義爲多肽的部分，所述多肽對應于原生免疫球蛋白的Fc區，也就是由兩條重鏈的各自Fc結構域的嵌合相關區形成。原生Fc區同源嵌合併包含兩條多肽鏈。相比之下，本文使用的術語“基因上融合的Fc區”或“單鏈Fc區”（scFc區）是指合成的嵌合Fc區，其由Fc結構域在單獨的多肽鏈中基因連接組成（也就是在單獨連續的基因序列中編碼）。本文中所使用的術語“Fc結構域”是指單獨的免疫球蛋白重鏈的部分，其開始于鉸鏈區，僅位於木瓜蛋白酶切割位點的上游（也就是在IgG中的殘基2 1 6，重鏈恒定區的第一殘基爲11 4位的殘基），結束於抗體C末端。因此，完整Fc結構域包含至少鉸鏈結構域、CH2結構域和CH3結構域。本文中所使用的術語“Fc結構域部分”或“Fc部分”包括 Fc結構域或來自Fc結構域的氨基酸序列。在某些實施方案中，Fc部分包含至少一個：鉸鏈（例如，上、中和/或下鉸 201217526 鏈區）結構域、CH2結構域、CH3結構域、CH4結構域或變體、部分及其片段。在其他實施方案中，Fc部分包含完整 Fc結構域（也就是鉸鏈結構域、CH2結構域和CH3結構域）。在一個實施方案中，Fc部分包含鉸鏈結構域（或其部分）融合到CH3結構域（或其部分）。在另一實施方案中，Fc部分包含CH2結構域（或其部分）融合到CH3結構域（或其部分）。在另一實施方案中，Fc部分由CH3結構域或其部分組成 φ 。在另一實施方案中，Fc部分由鉸鏈結構域（或其部分）和 CH3結構域（或其部分）組成。在另一實施方案中，Fc部分由CH2結構域（或其部分）和CH3結構域組成。在另一實施方案中，Fc部分由鉸鏈結構域（或其部分）和CH2結構域（或其部分）組成。在一個實施方案中，Fc部分缺少至少CH2結構域（例如，全部或部分CH2結構域）的部分。本文中所使用的術語“半衰期”是指特定多肽在體內的生物半衰期。半衰期可以用在施用到受試者中以在動物體 φ 內的迴圈和/或其他組織中清除，品質變爲一般時所需的時間表示。當給定多肽的清除曲線構建爲時間函數時，該曲線通常是快速α相和β相的雙相曲線。典型地，a相表示在血管內和血管外之間的空間施用Fc多肽的平衡，其部分由多肽的大小確定。典型地，β相表示位於血管內空間的多肽的分解代謝。因此在優選的實施方案中，本發明使用的術語半衰期是指多肽在β相中的半衰期。在人體中的人抗體的典型的β相半衰期爲21天。本文中所使用的術語“ 靶向部分”是指部分、及其片段或多肽的組成，其定位或 -35- 201217526 定向本發明的多肽到所需位點或細胞。在一個實施方案中，本發明的構建體包含“靶向部分”，其例如，通過將部分定位在所需位元點增強多肽的活性。這樣的部分可以例如使抗體及其變體（例如scFv )或狀。在另一實施方案中，這種靶向部分可以是多肽、配體的受體結合部分或受體的配體結合部分，其連接本發明的多肽並與所需目標（在例如細胞或組中中）結合。靶向部分可以基因上融合到構建體上，化學結合到構建體中或通過間隔子連接構建體。例如，靶向部分可以通過鍵的形式連接到本發明的構建體上，所述鍵位於構建體的靶向部分和Fc部分之間，其中靶向部分包含第一功能組並且Fc部分包含第二功能組，其中第一和第二功能組能夠彼此相互反應以形成化學鍵（參見，例如，美國專利73 8 1 408 )。在一個實施方案中，靶向部分結合血小板。以下將更加詳細的描述典型的靶向部分。在一個實施方案中，用於本發明構建體中的靶向部分包含抗體變體。術語“抗體變體”或“修飾的抗體”包括不是天然存在的抗體，其具有的氨基酸序列或氨基酸側鏈化學，通過如本發明所描述的至少一個氨基酸或氨基酸修飾而與天然獲得的抗體不同。本文中所使用的術語“抗體變體” 包括抗體的合成形式，所述抗體變改變，以使其不是天然存在的，例如，包含至少兩條重鏈部分但是不完整的兩條重鏈的抗體（例如，結構域缺失抗體）：抗體的多特異性形式（例如，雙特異性、三特異性等），其改變結合到兩個或兩個以上不同的抗原上或在單獨抗原的不同表位上） -36- 201217526 ;重鏈分子連接scFv分子；單鏈抗體；雙抗體；三抗體；以及具有改變的效應子功能的抗體及其類似物。如本發明所使用的術語“scFv分子”包括結合分子，其由一條輕鏈可變結構域（VL)或其部分及一條重鏈可變結構域（VH)或其部分組成，其中每個可變結構域（或其部分）來自相同或不同的抗體。scFv分子優選地包含scFv接頭，其置於VH結構域和VL結構域之間。scFv分子在本領域已知 φ ，並在例如，美國專利 5,892,01 9，Ho etal.，1989. Gene 77:51; Bird等，1988 Science 242:423; Pantoliano 等， 19 9 1. Biochemistry 3 0:10117; Milenic 等，1991. Cancer Research 51:6363; Takkinen等，1991. Protein Engineering 4:83 7中描述。如本發明所使用的“scFv接頭”是指置於scFv的VL和 VH結構域之間的部分。scFv接頭優選地維持scFv分子在抗原結合構象中。在一個實施方案中，scFv接頭包含或由 # scFv接頭肽組成。在某些實施方案中，scFv接頭肽包含或由甘氨酸/絲氨酸多肽接頭組成。其他實施方案中，scFv接頭包含二硫鍵。術語“糖基化”是指一個或多個碳水化合物與多肽的共價連接。典型地，糖基化是翻譯後發生的事件，其發生在細胞的細胞內環境或其提取物中。術語糖基化包括，例如，N-連接糖基化（其中一個或多個糖連接到天冬醯胺殘基 )和/或0-連接糖基化（其中一個或多個糖連接到具有羥基（例如，絲氨酸或蘇氨酸）的氨基酸殘基）。在一個實 -37- 201217526 施方案中’本發明的分子是糖基化的。另一實施方案中，本發明的分子是無糖基化的。在又一實施方案中，本發明的分子與野生型Fc區相比具有還原的糖基化。如本發明所使用的術語“二硫鍵”包括在兩個硫原子之間形成的共價鍵。氨基酸半胱氨酸包含硫醇基，其能夠形成二硫鍵或與第二個硫醇基搭橋。在大多數天然存在的 IgG分子中，CH1和CL區通過原生二硫鍵連接，並且兩條重鏈通過兩個原生二硫鍵在對應於使用Kabat編號系統編碼的239和242位元（使用EU編號系統爲226或229位元）的二硫鍵連接。本文使用的術語“載體”或“表達載體”是指根據本發明使用的載體作爲引入的工具並在細胞中表達所需的多核苷酸。如本領域技術人員已知，這種載體可以容易地選自質粒、噬菌體 '病毒和逆轉錄病毒組成的組中。一般來說，與本發明相容的載體將包含選擇標記、適當的利於克隆所需基因的限制位點並能夠進入原核或真核細胞中和/或在其中複製。可以採用許多表達載體系統以產生本發明的增強的凝血因數。例如，一類例如DNA元件的載體，所述元件來自動物病毒，例如牛乳頭狀瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、杆狀病毒、逆轉錄酶病毒（RSV、MMTV或 MOMLV)或SV40病毒。此外，具有將DNA整合到其染色體中的細胞可以通過引入一個或多個標記進行選擇，所述標記能夠選擇轉染的宿主細胞。標記可以爲營養缺陷型宿 -38- 201217526 主提供原養型’提供殺傷體抗性（例如，抗生素）或重金屬（例如銅）抗性。選擇標記基因可以直接連接DNA序列以用於表達或通過共轉化引入到相同的細胞中。在一個實施方案中’可以採用可誘導的表達系統。需要額外的元素以優化mRN A的合成。這些元素可以包括單獨的序列、剪接信號以及轉錄啓動子、增強子和終止信號。在一個實施方案中，分泌信號能夠融入本發明多肽N末端的框中以獲得多肽的優化分泌（Lei 等，（1988), Nature, 331:543; Better等，( 1 98 8) Science, 240:1 041; Mullinax等，(1 990). PNAS，87:8095)，所述分泌信號例如，幾個具有良好特徵的細菌前導肽之一（例如，pelB、phoA或ompA)。術語“宿主細胞”是指用使用重組DNA技術構建的載體轉化的細胞，其編碼至少一個異源基因。在從重組的宿主中獲得的蛋白質的分離過程的描述中，除非另有明確說明，使用的術語“細胞”或“細胞培養”可互換地表示蛋白質源 φ 。換句話說，蛋白質從“細胞”中的回收可以指從旋轉減慢整個細胞中或從含油培養基和懸浮細胞的細胞培養物中回收。用於蛋白質表達的宿主細胞系最優選地爲哺乳動物源的；本領域技術人員能夠優選地確定特殊的宿主細胞系，其最適於在其中製備並表達所需基因。典型的宿主細胞系包括，但不限於，DG44和DUXB1 1 (中國倉鼠卵巢細胞系，DHFR負）、HELA (人宮頸癌）、CVI (猴腎細胞系）、COS ( CVI與SV40T抗原的衍生物）、R1610 (中國倉鼠成纖維細胞）、BALBC/3T3 (小鼠成纖維細胞）、PerC6 -39- 201217526 細胞、HAK (倉鼠腎細胞系）、SP2/0(小鼠骨髓瘤）、 P3x63-Ag3.653(小鼠骨髓瘤）、BFA-lclBPT (牛內皮細胞 )、RAJI (人淋巴細胞）以及293 (人腎）。典型地，宿主細胞系可以從商業服務、美國組織培養物保藏中心或從公開的文獻中獲得。本發明的多肽能夠同樣在非哺乳動物細胞中表達，例如細菌或酵母或植物細胞。在這方面，將會理解的是各種單細胞非哺乳動物微生物，如細菌也可以被轉化；也就是那些可以在培養物或發酵中生長的細胞。易於轉化的細菌包括腸桿菌科的成員，如大腸桿菌或沙門氏菌株；芽胞桿菌科，如枯草芽孢桿菌、肺炎球菌、鏈球菌和流感嗜血桿菌。將進一步理解的是，當在細菌中表達時，多肽典型的變成內含體的一部分。該多肽必須被分離、純化然後組裝成功能性分子。除了原核生物，也可以使用真核微生物。在所有的真核微生物中，最常使用的是釀酒酵母或普通的麵包酵母，雖然一些其他的菌株也通常容易獲得，包括赤壁酵母。爲了在酵母中表達，通常使用質粒YRp7，例如（Stinchcom等，（ 1 979)，Nature, 282:3 9; Kingsman 等，（1 979)，Gene, 7:141; Tschemper等，（1980)，Gene, 10:157)。該質粒已經含有TRP1基因，其提供用於突變體的選擇標記，所述突變體是不能在色氨酸中生長的酵母菌株，例如AT CC No. 44076 或 PEP4-1 (Jones, (1977)，Genetics, 85:12)。然後作爲酵母宿主細胞基因組特性的trpl損傷的存在提供用於檢測不存在色氨酸時的生長轉化。 -40- 201217526 如本發明所使用的術語“內源性的”是指分子（例如，核酸和/或蛋白質分子）不是天然存在於細胞中的。相反，術語“外源性的”或“異源”是指這種分子在給定條件下（例如，在細胞中或在多肽中）通常不被發現。例如，外源性的或異源分子可以被引入到細胞中，並僅在對細胞進行操作後存在於細胞中，例如，通過轉染或其他基因工程形式 ’或者異源氨基酸序列可以存在于不是天然存在的蛋白質籲中。本文中所使用的術語“切割位點”或“酶切位點”是指酶識別的位點。某些酶切位點包含細胞內加工位點。在一個實施方案中，多肽包含被酶切割的酶切位點，其在凝血級聯中被啓動，以使這種位點的切割發生在繕位點。典型的這種位點包括例如，被凝血酶、因數XIa或因數Xa識別的位點。典型的FXIa切割位點包括，例如TQSFNDFTR和 SVSQTSKLTR。典型的凝血酶切割位點包括，例如 φ DFLAEGGGVR、TTKIKPR、LVPRG ( SEQ ID NO:35)和 ALRPR 〇其他酶切位點在本領域已知。本文中所使用的術語“加工位點”或“細胞內加工位點” 是指酶切位點在多肽中的一種類型，其靶向在多肽翻譯後起作用的酶。在一個實施方案中，這種酶在從高爾基體到轉運高爾基體部分的轉運中起作用。細胞內加工酶在蛋白質從細胞中分泌之前切割多肽。這種加工位點的實例包括，例如，被內肽酶類家族的PACE/弗林蛋白酶（其中PACE 是成對鹼性氨基酸裂解酶的首字母簡稱）靶向的位點。這 -41 - 201217526 些酶定位在高爾基體膜上，在基序Arg-[任何殘基]-(Lys或 Arg)-Arg的羧基端切割蛋白質。如本發明.所使用的“弗林蛋白酶”酶家族包括’例如，弗林蛋白酶' PC2、PC1/PC3 、PC4、PACE4、PC5/PC6 和 LPC/PC7/PC8/SPC7。其他力卩工位點在本領域已知。在構建體中’包括多餘一個的加工或切割位點，應該理解的是這種位點可以是相同的或者不同的。在體外允許規模製備，使得大量獲得本發明的所需的改變的多肽。在組織培養條件下用於培養哺乳動物細胞的技術在本領域已知’其包括均勻的懸浮培養，例如，在氣升式反應器或在連續攪拌反應器中，或固定化或包封的細胞培養’例如，在中空纖維、微膠囊中，在瓊脂糖微珠上或在陶瓷藥筒內培養。如果有必要和/或如果需要，多肽溶液能夠通過常規的色譜方法純化，例如凝膠過濾、離子交換色譜。疏水相互作用色譜儀（HIC，DEAE -纖維素色譜或親和色譜）^ 本文中所使用的短語“受試者將受益於多肽的施用，，包括受試者’如哺乳動物受試者，將受益于本發明的多肽的施用，例如，改善止血。本發明中所使用的“嵌合蛋白”或‘‘融合蛋白，，是指任何蛋白質’其由來自第一來源的第一氨基酸序列與來自第二來源的氨基酸序列共價或非共價結合，其中第一來源和第二來源不同。不同的第一來源和第二來源能包括兩個不同的生物實體’或來自相同生物實體的兩個不同的蛋白，或 -42- 201217526 生物實體或非生物實體。嵌合蛋白可能包括例如，來自至少2個不同生物源的蛋白質。生物源可能包括任何非合成地製備的核酸或氨基酸序列、基因組或cDNA序列、質粒或病毒載體、原生病毒粒子或突變體或類似物，如本發明中所進一步說明的以上任一個。合成源可能包括化學產生而不是由生物系統產生的蛋白質或核酸序列（例如，氨基酸序列的固相合成）。嵌合蛋白同樣可能包括來自至少兩 φ 個合成源的蛋白質或來自至少一個生物源和至少一個合成源的蛋白質。嵌合蛋白可還包含來自第一來源的第一氨基酸序列’其共價地或非共價地連接核酸，所述核酸來自任何來源或小的來自任何來源的有機或無機分子。嵌合蛋白可包含接頭分子’其位於第一和第二氨基酸序列之間或位於第一氨基酸序列和核酸之間，或位於第一氨基酸序列和小的有機或無機分子之間。本文中所使用的術語“凝血因數”是指分子、或其類似 • 物’天然存在或重組產生，其阻止或降低受試者體內出血事件的持續時間。換句話說，它是指具有原凝血活性也就是其負責成纖維蛋白原轉換成不溶性纖維蛋白的網，引起血液凝結或凝固的分子。本發明中所使用的凝血活性指的是參與生化反應級聯的活性，其在纖維蛋白凝固的形成和/或活性降低、流血或出血事件的時間或頻率中發揮作用。本發明所使用的止血是指使出血或者流血停止或者減慢；或者使血流通過血管或身體部分停止或減慢。 -43- 201217526 本發明使用的止血障礙是指基因遺傳或後天獲得的，其特徵在於具有流血傾向，或者自發地，或作爲創傷的結果，由於能力損傷或者不能夠形成血蛋白纖維凝塊。三種主要的形式是甲型血友病（缺乏因數VIII)、乙型血友病 (缺乏因數IX或“克雷司馬斯病”）以及丙型血友病（缺乏因數XI，中度出血傾向）、血管性血友病、缺乏因數Xi( 缺乏PTA)、缺乏因數XII、缺乏纖維蛋白原、凝血酶原、子V、因數VII、因數X或因數XIII，或纖維蛋白原、凝血酶原、子V、因數VII、因數X或因數XIII結構異常。伯納德-蘇利耶綜合症GPIb缺陷或缺乏GPIb。VWF受體的GPIb 能夠具有缺陷並導致缺少初級凝血形成（初級止血）和增加出血傾向，Glanzman和Naegeli的血小板衰弱症（血小板無力症）。在肝功能衰竭（急性或慢性形式）中，由於肝臟凝血因數的產量不足，可能會增加出血的危險。本發明使用的嵌合分子可以預防使用。如本發明所使用的術語“預防法”是指分子的施用先於出血事件。在一個實施方案中，需要一般止血劑的受試者經歷或將要經歷手術。本發明的嵌合蛋白能夠在手術之前或之後作爲預防進行施用。本發明的嵌合蛋白能夠在手術之前或之後施用以控制急性出血事件。手術可能包括，但不限於，肝移植、肝切除或幹細胞移植。按要求的治療包括出血事件、關節積血、肌肉出血、口腔出血、流血、流血到肌肉、口腔出血、創傷、創傷頭癖（頭部外傷）、消化道出血、顱內出血、腹腔內出血、 -44- 201217526 胸腔出血、骨折、中樞神經系統出血、咽後區出血、腹膜後隙出血或骼腰肌鞘出血的治療。受試者可需要預防手術，圍手術期的管理或手術治療。所述手術包括，例如小手術、大手術、拔牙、扁桃體切除術、腹股溝疝切開術、滑膜切除術、全膝關節置換術、開顱術、骨縫合術、創傷手術、顱內手術、腹腔手術、胸腔手術或關節置換手術。如本發明所使用的術語"急性失血"是指不管根本原因的出血事件。例如，受試者可具有外傷、尿毒癥、遺傳性出血性障礙（例如，缺乏因數VII )、血小板障礙或由於抗體對凝血因數的形成的抗性。如本發明所使用的治療、治療（treat、treatment、 t r e a t i n g )是指，例如減少疾病或病情的嚴重性；減少病程持續時間；改善一個或多個與疾病或病情相關的症狀；對受試者提供關於疾病或病情的有益效果，而不一定治癒疾病或病情，預防一個或多個與疾病或病情有關的症狀。 II.凝血因數特別地，本發明涉及因數VII、IX和X的改進的形式。所有這些因數在結構上相關，每個輕鏈的氨基端不順從於額外部分的整合。相似地，這三個凝血因數的重鏈的氨基端不順從於額外部分的整合，除了切割部分之外，也就是通過切割位點或由切割位元點組成的部分連接的部分。本發明的增強的凝血因數構建體的設計基於那些共用性質，應當理解的是儘管通常示出因數VII用於說明。本發明典 -45- 201217526 型的實施方案，受構建體可以使用因數VII、IX或X製備。例如，本領域技術人員將會理解的是本發明構建體的FVII 部分可能被FVIII、FIX或FX部分取代以製備這些凝血因數之一的增強的形式。示例性本發明的增強的凝血因數構建體在附圖中列出。儘管附圖通常說明了凝血因數爲單鏈的（以其酶原形式 )，應當理解的是這些凝血因數可同樣以活性形式存在于本發明的構建體中，例如以兩條鏈、二硫鍵的形式。在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數被細胞以活性形式的表達。在另一實施方案中，嵌合凝血因數以非活性形式表達並且隨後在體外在適當的條件下被啓動，以使凝血因數的活性形式存在於構建體中。在另一實施方案中，本發明的嵌合凝血因數包含非活性形式的凝血因數和在使施用後在體外被啓動的凝血因數。在一個實施方案中，scFc支架可用于產生分子的活性形式。凝血因數通常作爲酶原重組的產生，因此，要求在製備過程中啓動。因數VII、IX和X的活性形式由嵌合分子組成，其中重鏈和輕鏈僅通過二硫鍵連接。在一個實施方案中，嵌合凝血因數的啓動先于向受試者使用以改善止血。用於啓動凝血因數的方法在本領域已知。例如’在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數與含有大約濃度爲5 mM的〇&(：12的培養基接觸。在另一實施方案中’本發明的嵌合凝血因數以活性形式被表達其的細胞分泌。在一個實施方案中，活性增強的 -46- 201217526 凝血因數通過表達凝血因數的重鏈和輕鏈作爲單獨的多肽製作。在另一實施方案中，凝血因數的重鏈的N末端被修飾，以包含細胞內加工位點，其在合成直到後來在分泌途徑中顯示了凝血因數的啓動，（也就是直到蛋白質與活性加工酶在高爾基體反面網路中共定位），導致更多的產量。典型的這種細胞內加工爲點包括那些被弗林蛋白酶識別的 φ 位點。典型的該酶家族的切割位點包括基序Arg-Xaa-Lys/Arg-Arg的氨基酸序列。在優選的實施方案中，本發明的活性構建體在Fc融合蛋白的背景下製作，例如使用scFc接頭。示例性構建體在附圖中示出。在一個實施方案中，本發明涉及加工的（例如，成熟多肽），其中至少一個鄰近scFc多肽接頭的切割位點被切割，以使分子不再是單獨的多肽鏈，從而該多肽由至少兩 φ 條多肽鏈組成（由於在酶切位點P1和/或P2處的切割）。在一個實施方案中，這種加工的多肽包含凝血因數或其部分’其連接到第二Fc部分（也就是從氨基端到羧基端計數’先於多肽的切割的第二Fc部分），其在多肽接頭切割後具有游離的氨基端。在一個實施方案中，連接到第二Fc部分的N末端的凝血因數具有催化活性，例如具有酶活性。在另一實施方案中，連接到第二Fc部分的N末端的凝血因數被細胞作爲酶原分泌，所述酶原進一步酶處理凝血因數以完整被啓動。 -47- 201217526 在一個實施方案中，本發明涉及凝血因數以活性或非活性形式從細胞中分泌，而不需要在加工過程中進一步活化。例如，因數VII通常重組地作爲酶原產生，並在製備期間要求活化以產生用於施用的活性形式。在一個實施方案中，本發明的多肽由細胞分泌，其中以活性形式表達從而改進可製備性。正如下文中所詳細描述的，這種凝血因數能夠通過在scFc分子的背景下分別表達凝血因數的輕鏈和凝血因數的重鏈而製備。當蛋白質與在反面高爾基體中的活性加工酶共存時，這種構建體的切割被延遲到分泌途徑後期。在一個實施方案中，本發明的凝血因數是因數VII的成熟形式或其變體。因數VII ( FVII，F7也被稱爲因數7，凝固因數VII，血清因數VII，血清凝血酶原轉換加速器、 SPCA、轉變素原和依他凝血素α是絲氨酸蛋白酶類，其是凝血級聯的部分。F V 11包括G1 a結構域，兩個E G F結構域 (EGF-1和EGF-2)和絲氨酸蛋白酶結構域（或肽酶S1結構域 )’其在所有的絲氨酸蛋白酶肽酶S1家族中高度保守，例如糜蛋白酶。FVII以單鏈酶原形式、啓動的酶原類兩條鏈多肽和全部啓動的兩條鏈形式存在。本文中所使用的“酶原類”蛋白質或多肽是指蛋白質其被溶解蛋白切割啓動，但是仍然顯示與酶原有關的性質，如，例如，低活性或沒有活性，或組裝成蛋白質的酶原形式的構象的構象。例如 ’當不結合組織因數時，F V 11的兩條鏈的活性形式是酶原類蛋白；它保留了類似於未切割的F V 11酶原的構象，從而 201217526 展示出低活性。一旦結合組織因數，FVII的兩條鏈的活性形式經歷構象改變並獲得其作爲穩定因數的全部活性。示例性FVII變體包括那些具有增加的特異活性，例如，突變體，其通過增加自身的酶活性（Kcat或Km)從而增加FVII活性。這種突變體在本領域已被描述，其包括，例如，如 Persson等，2001 · PNAS 98:1 3 5 83 ; Petrovan和 Ruf· 2 0 0 1. J. Biol. Chem. 276:66 1 6; Persson 等，200 1 J. Biol. • Chem. 276:29 1 95; Soejima 等，200 1 · J. Biol. Chem· 276:1 7229; Soejima 等，2002. J. Biol. Chem. 247:4902 7 中描述的分子的突變體形式》在一個實施方案中，FVII的變體形式包括突變，典型的突變包括V158D-E296V-M298 Q。在另一實施方案中，FVII的變體形式包括用從胰蛋白酶的 170環種獲得的具有氨基酸EASYPGK的FVII成熟序列取代氨基酸 608-619 ( LQQSRKVGDSPN，對應於 170-環）》FIX 的高特異活性變體也在本領域已知。例如，Simioni等， φ (2009 N.E. Journal of Medicine 3 6 1 : 1 67 1 )描述了 R3 3 8 L突變體。Chang 等，( 1 988 JBC 273 :1 2089)和 Pierri 等，(2009 Human Gene Therapy 20:479)描述了 R3 3 8A 突變體。其他的突變體在本領域已知，其包括那些在例如Zogg和 Brandstetter. 2 009 Structure 1 7:1 669; Sich1er等 2003· J. Biol. Chem . 278:4121;和 Sturzebecher 等，1997. F E B S Lett 412:295中描述的突變體。它們的全部內容通過引用倂入本文。一旦從酶原類形式構象改變，一旦結合到共因數組織 -49- 201217526 因數則存在全活性。同樣，突變體。同樣，可能引入突變體從而不存在組織因數時引起構象改變。因此，提到的 FVIIa包括兩條鏈形式及其酶原類形式和全活性的兩條鏈形式。

在一個實施方案中，本發明的凝血因數是因數VIII或其變體的成熟形式。FVIII在血液凝固的內源途徑中作爲輔因數起作用以加速通過因數IXa的因數X的活化，存在鈣離子時，反應發生在帶負電荷的磷脂表面。F VIII以23 5 1 個氨基酸的單鏈合成，所述單鏈具有A1-A2-B-A3-C1-C2結構的結構域。Wehar，G. A.等，Nature 3 1 2:33 7-342 ( 1 984) 和 Toole，J. J.等，Nature 3 1 2:342-347 ( 1 984)。FVIII 的結構域結構與同源穩定因數（因數V(FV))相同。Kane， W. Η.等，PNAS (USA) 83:6800-6804 (1986)¾ Jenny, R. J. 等，PNAS (USA) 84:4846-4850 (1987)。FVIII A-結構域具有3 3 0個氨基酸並且彼此之間和與FV的A結合域以及血漿銅結合蛋白質血清銅藍蛋白具有40%的氨基酸同源性。 Takahashi，N.等，PNAS (USA) 8 1:3 90-3 94 ( 1 98 4)。每個 C-結構域具有1 50個氨基酸，並示出了與FV的C-結構域和與複合糖和負電荷的磷脂結合的蛋白有40%的同源性。

Stubbs, J. D.等，PNAS (USA) 8 7:84 1 7- 842 1 ( 1 990)。 FVIII B-結構域由單獨的外顯子編碼並展示出與任何已知的包括FV B結構域蛋白質具有很少的同源性。Gitschier, J.等，Nature 312:326-330 (1984)和 Cripe，L. D.等，

Biochemistry 31:3777-3785 (1992) ° -50- 201217526 FVIII作爲重鏈（結構域A1-A2-B)和輕鏈（結構域AS-Cl-ca)的異源二聚體分泌到血漿中，重鏈和輕鏈通過位於 A1 和A3結構域之間的非共價鍵的二價金屬離子連接。在血漿中，FVIII通過與Von Willebrand因數結合而是穩定的。更具體地說，FVIII輕鏈通過非共價鍵相互作用與von Willebrand因數氨基端的主要結合位點結合。一旦被凝血酶蛋白水解啓動，FVIII被活化成2條重鏈片段（A1，50 kDa片段和A2，43 kDa片段）和1條輕鏈（A3-C1-C2，73 kDa鏈）的異源三聚體。因此，FVIII (FVIIIa)的活性形式由A1亞基通過二價金屬離子連接到凝血酶-切割的A3-CM-C2輕鏈，游離的A2亞基通過離子連接與A1結構域相連。 Eaton, D.等 > Biochemistry 2 5: 505 ( 1 986) ； Lollar, P.等，J. Biol. Chem. 266: 1 248 1 (1 99 1 );和 Fay，P. J.等，】· Biol. Chem. 266: 895 7 ( 1 99 1 )。該 FVIIIa 異源三聚體是不穩定的，通過A2亞基在生理情況下的分解易於快速失活。在一個實施方案中，凝血因數包含因數VIII的B -結構域缺失的形式。本文中所使用的因數VIII的“B-結構域”與本領域已知的B-結構域是一樣的，其被內部氨基酸序列同一性和蛋白水解切割位點所限定，例如人因數VIII全長的殘基絲氨酸Ser741-Argl 648。其他的人因數VIII結構域被以下氨基酸殘基所限定：A1，殘基Alal-Arg3 72 ; A2,，殘基絲氨酸 3 73 -Arg740 : A3，殘基絲氨酸 Seri 690-Asn201 9 ;Cl，殘基 Lys2020-Asn2172 ; C2，殘基絲氨酸 Ser2173-Tyr23 3 2。A 3 - C 1 - C 2 序歹Ij 包括殘基絲氨酸 S e r 1 6 9 0 - T y r 2 3 3 2 -51 - 201217526 。剩餘的序列（殘基Glul 649-Argl 68 9 )通常被稱爲a3酸性區。對於豬、鼠和犬科因數VIII的所有結構域的邊界的位置，包括B結構域在本領域已知。在一個實施方案中，因數VIII的B結構域是被缺失（“B-結構域-缺失的因數 VIII” 或 “BDD FVIII”）。BDD FVIII 的一個實例是 REFACTO®(BDD FVIII 與 S743/Q1638 融合的重組體），其在本領域已知。 “B-結構域-缺失的因數VIII”可以具有全部或部分缺失，其在美國專利號 6,316,226、6,346,513、7,04 1，635、 5,789,203 ' 6,060,447 ' 5,595,886 ' 6,228,620 ' 5,972,885 、6,048,720 、 5,543,502 、 5,610,278 、 5,171,844 、

5,112,950、4,868,112和6,458,563中公開，它們的全部內容通過引用納入本文。在一些實施方案中，本發明的B -結構域-缺失的因數VIII序列包含任何一個在美國專利號 6,3 1 6,226 (也在US 6,3 46,5 1 3 )的第4欄第4行到第5欄第 28行，實例1至5中公開的缺失中的任一種。在另一實施方案中，B-結構域缺失的因數VIII是S 743/Q 1 63 8 B-結構域缺失的因數VIII (SQ形式因數VIII)(例如’因數VIII具有從氨基酸744到氨基酸1 637的缺失’例如’因數VIII具有氨基酸1 -743和氨基酸SEQ ID NO: 6的1 63 8-23 32’也就是 SEQ ID NO: 2)。在一些實施方案中，本發明的B-結構域-缺失的因數VIII具有在美國專利號5,7 89,203 (同樣US 6,060,447 ' US 5,595,886 ¾ US 6,2 2 8,6 2 0 )中的 2 欄 2 6 至 5 1 行，實例5至8中公開的缺失。在一些實施方案中’ B-結構 -52- 201217526 域-缺失的因數VIII具有在美國專利號5,972,885的第1欄第 25行至第2欄第40行；美國專利號6,048,720的第6欄第1至 22行和實例1 ;美國專利號5,543,502的第2欄第17至47行；美國專利號5, W1，844的第4欄22行至第5欄第36行.；美國專利號5，1 1 2,950的第2欄，第55至第68行，圖2和實例1 ;美國專利號4,868,112的第2欄第2行至第19欄2第1行和表2; 美國專利號7,041，63 5的第2欄第1行至第3欄第19行，第3欄 φ 第40行至第4欄第67行，第7欄43行至第8欄第26行，第1 1 欄第5行至第13欄第39行；或者美國專利號6,45 8,563的第4 欄第25至53行。在一些實施方案中，B -結構域-缺失的因數VIII缺失大部分B結構域，但仍然含有B結構域的氨基端序列，其實質上用於體內的主要的將產物翻譯成兩條多肽鏈的蛋白水解過程，如WO 91/091 22所公開，它的全部內容通過引用納入本文。在一些實施方案中，B-結構域-缺失的因數VIII用氨基酸747-1 63 8缺失構建，也就是實際上 •缺失完整的 B結構域。Hoeben R.C.，等，J. Biol. Chem. 265 ( 1 3 ): 73 1 8 -73 23 ( 1 990)，它的全部內容通過引用納入本文。AB-結構域-缺失的因數VIII可同樣含有因數VIII的氨基酸 77 1-1 666 或氨基酸 868- 1 562 的缺失，Meulien P.，等， Protein Eng. 2(4): 3 0 1 -6 ( 1 98 8)，它的全部內容通過引用納入本文。另外的B結構域也是本發明的部分，其包括：氨基酸 982 至 1 562 或 760 至 1 63 9 缺失（Toole 等，Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. ( 1 986) 83, 5 93 9-5 942)) > 797至 1 562 缺失（Eaton,等，Biochemistry ( 1 9 8 6) 25:8 343 - 8 3 47))，741 至 -53- 201217526 1 646 缺失（Kaufman (PCT published 申請號 WO 8 7/04 1 8 7)) ，747- 1 560缺失（Sarver，等，DNA ( 1 98 7) 6:5 5 3 -5 64)), 74 1 至 1 648 (Pasek (PCT 申請 No.8 8/008 3 1 ))或 816 至 1 598 或 741 至 1 648 缺失（Lagner (B ehring Inst. Mitt. ( 1 988) No 82:1 6 -2 5，EP 295 597))，它們的全部內容通過引用納入本文。每種上述缺失可以在任何因數VIII序列中製備。在一個實施方案中，本發明涉及FVIII的靶形式，其中靶（i ) 特異性結合血小板，（ii)不置於凝血因數的輕鏈和重鏈之間，其中所述增強的凝血因數，與缺乏至少一個靶向部分的適當的對照相比，在血小板存在時展示出凝血酶生成增加。在一個實施方案中，本發明的凝血因數是因數IX或其變體的成熟形式。因數IX以415個氨基酸的單鏈血漿酶原迴圈（A. Vysotchin等，J. Biol. Chem. 268，843 6 ( 1 993 ))。

FIX的酶原被FXIa啓動或被組織因數/ FVIIa複合物啓動。精氨酸-丙氨酸145-146和精氨酸-結氨酸180-181之間的特異性切割導致輕鏈和重鏈由位於半胱氨酸132和半胱氨酸 28 9 連接（S. Bajaj 等，Biochemistry 22，4047 ( 1 98 3 ))。FIX 的組織結構類似於維生素K依賴型凝血蛋白FVII、FX和蛋白C (上述B. Furie和B. Furie)。氨基端的大約45個氨基酸包含γ-羧基酸或γ-羧基谷氨酸結構域。這跟著表皮生長因數同源結構域（EGF )，啓動肽和催化的“重鏈”，起始絲氨酸蛋白酶家族的一員（A. Vysotchin等，J. Biol. Chem. 268， 8436 (1993) ; S. Spitzer等，Biochemical Journal -54- 201217526 265，2 1 9 (1 990) ; H. Brandstetter 等，Proc. Natl. Acad

Sci· USA 92，9796 (1 995))。在一個實施方案中，本發明的凝血因數是因數X的成熟形式。因數X是分子量微58.5 kDa的維生素K依賴型糖蛋白’其以酶原形式從肝細胞分泌到血漿。初始因數X作爲具有信號肽的前肽製備，該信號肽由總488個氨基酸組成。信號肽在輸出到內質網中時被信號肽酶切割，伽瑪羧基 φ 化發生在成熟的N末端鏈的N末端的第一 11谷氨酸殘基後前肽序列被切除。進一步的加工步驟出現在Arg 1 8 2和絲氨酸Seri 83之間的切割作用。該加工步驟同樣附隨地導致三肽Argl80-Lysl81-Argl82的三肽。獲得分泌因數X酶原由 139氨基酸（M，16,200)的N末端輕鏈和306氨基酸（M， 42,000)的C末端重鏈組成，其通過Cysl72和Cys342之間的二硫橋共價地連接。進一步的翻譯後加工步驟包括Asp 103 的β羥化以及N和0型糖基化。 φ 應當理解的是除了這些凝血因數或其生物活性部分的野生型（WT)形式，本發明同樣採用具有活性的切去頭端的前體形式，等位基因變體和特異性變體、由剪接變體編碼的變體以及其他變體，包括多肽，其與凝血因數的成熟形式具有至少 40%、45%、50%、55%、65%、70%、75% 、8 0% ' 85% ' 9 0%、95%、96%、97%、98% > 99%或更多的序列同源性，並保留了促凝血能力。例如，修飾的FVII 多肽及其變體保留了 F VII的至少一個活性，如TF結合、因數X結合、磷脂結合和/或FVII的促凝劑活性可以被採用。 -55- 201217526 通過保留活性，與野生型凝血因數相比，所述活性可以改變，如降低或增加活性，只要保留的活性水準足以產生可檢測的效果。可能用於構建本發明構建體的凝血因數的典型的序列可以在附加的序列表中找到。典型的修飾的多肽包括，但不限於組織特異性同種型及其變體，通過核酸的翻譯製備合成的分子，由化學合成產生的蛋白質，如包括短肽連接反應的合成，通過重組方法，從人和非人組織和細胞分離的蛋白質，嵌合多肽及其修飾的形式。本發明的凝血因數可同樣由片段或野生型分子的部分組成，所述野生（WT)型分子足夠長或包括合適的區域以保留至少一個全長成熟的多肽的活性（如果有需要則啓動）。典型的凝血因數變體在本領域已知。本文中所使用的術語“Gla結構域”是指保守膜結合基序，其存在於維生素K依賴型蛋白，如作爲凝血酶原，凝結因數VII、IX和X，蛋白C、S和Ζ»這些蛋白質需要用於 G-羧基酸的翻譯後合成維生素K，氨基酸聚集在這些蛋白質的N末端G la結構域。所有存在於結構域中的谷氨酸殘基都是潛在的羧基化位點，因此其中許多被羧基化修飾。存在鈣離子時，Gla結構域與包括磷脂醯絲氨酸的磷脂膜相互作用。GU結構域同樣在結合FVIIa輔因數，組織因數 (TF)中起作用。與TF複合，FVIIa的Gla結構域載有7個鈣離子，在細胞表面與磷脂相互作用的細胞膜方向上伸出三個疏水性側鏈，其與TF的C末端結構域明顯接觸。因數VII的Gla結構域包含罕有的氨基酸-羧基谷氨酸 201217526 (G1 a) ’其在凝血因數與負電荷磷脂表面結合中起作用。 GLA結構域扶著鈣離子的高親和活性。它起始於蛋白質的成熟形式的N末端終點，以保守的芳香族氨基酸殘基結束。在結構域的中部發現保守的Gla-x(3)-Gla-x-Cys基序 ’其似乎對於羧化酶而言是重要的底物識別部位。使用停流螢光動力學測量結合表面等離子體共振分析 ’發現Gla結構域在事件的序列中很重要，據此，FVIIa的 φ 蛋白酶結構域啓動與sTF的接觸（Biochemical and

Biophysical Research Communications. 2005. 3 3 7:1 276)。另外’凝血因數的清除可通過Gla的相互作用顯著地調節，例如在肝細胞和清除受體（例如，EPCR)上。在一個實施方案中’靶向凝血因數是修飾的，其缺乏 Gla結構域。Gla結構域負責通過多條途徑調解凝血因數的清除’如結合肝細胞’清除受體如EPCR等。因此，去除 Gla結構域對凝血因數的半衰期具有良好的作用。雖然Gia φ 結構域同樣需要通過在繕位元點定位凝血因數從而啓動，血小板的內含物靶向結構域部分，該部分使Gla缺失的凝血因數靶向血小板。在一個實施方案中，本發明的凝血因數包含靶向部分並缺少Gla結構域。例如，對於因數VII， Gla結構域存在於輕鏈的氨基端並由氨基酸i—35組成。典型的凝血因數的Gla結構域在附加的序列表中示出。該結構域可能通過使用標準的分子生物學技術去除，用靶向結構域進行替換，修飾的輕鏈結合到本發明的夠簡體中。在一個實施方案中，切割位點可以結合到構建體中，所述構 -57- 201217526 建體缺少Gla結構域而利於分子的啓動。例如，在一個實施方案中，這種切割位點可以引入到氨基酸之間，其當凝血因數被啓動時被切割（例如，對於因數VII，位於氨基酸152和153之間）。在圖中示出了典型的缺少Gla結構域的凝血因數。在一個實施方案中，切割位點可以結合到構建體中，所述構建體缺少Gla結構域而利於分子的啓動。例如，在一個實施方案中，這種切割位點可以引入到氨基酸之間，其當凝血因數被啓動時被切割（例如，對於因數VII，位於氨基酸1 5 2和1 5 3之間）。在圖中示出了典型的缺少Gla結構域的凝血因數。典型的凝血因數是那些在哺乳動物，例如，人源的。典型的凝血因數的序列在附加的序列表中示出，例如，單獨或在上下文中的嵌合凝血因數構建體。 ΠΙ.靶向部分在一個實施方案中，本發明的凝血因數通過使用“靶向部分”將凝血因數定位在繕位點被靶向到血小板中以增強其效率，所述“靶向部分”結合在血小板上表達的靶向分子。優選地，靶向分子除了血小板以外不在細胞或組織上表達，也就是靶向部分特異性結合於血小板。在一個實施方案中，在休眠的血小板上發現的受體/ 構象被靶向。這樣做，凝結位點可能爲增強效率做準備。靶向這樣的分子可同樣延長凝血因數的半衰期和/或組織

S -58- 201217526 清除。這種靶標的實例包括GpIb/V/IX複合物的Gplb， GpVI和GPIIb/IIIa的非活性形式。在一個實施方案中，爲了將凝血因數定位在活性凝結物位點’僅在活化的血小板上發現的受體/構象被靶向。這種靶標的實例包括，例如，GpIIb/IIIa以及CD62P的活性形式。在一個實施方案中，本發明的多肽包含“靶向部分”， φ 其具有對血小板的親和能力並結合血小板。例如，在一個實施方案中，靶向部分結合GPIb複合物，例如GPIb-α»這種靶向部分的實例包括肽PS4、OS1和OS2，其結合活性和非活性的血小板（Benard 等，2008 Biochemistry 47:4674) ;在另一實施方案中，靶向部分結合GPIIbllla的活性構象。這種靶向部分的實例包括SCE5和MB9可變區，其僅結合活性血小板（Schwarz 等，2004 FASEB Journal express article 10.1096 /fj.04-1513 fje; Schwarz 等， 2006 _ Circulation Research. 99:25-33;美國專利公開 2〇0702 1 8067)。在另一實施方案中，靶向部分結合 GPIIbllla的活性/非活性構象。這種靶向部分的實例是AP3 抗體的可變區（Peterson等，2003. Hemostasis, Thrombosis, and Vascular Biology 1 0 1:93 7; WO 201 0 1 1 5866)。其他的靶標和靶向部分在本領域已知。增強的本發明的凝血因數可能包含一個或多於一個的靶向部分。在附圖中列出了典型的構象。此外，兩個或兩個以上靶向部分可以彼此連續地連接（例如，通過間隔子 -59- 201217526 )’串聯排列可操作地連接本發明的夠簡體。當兩個或兩個以上的靶向部分存在于本發明的嵌合凝血因數中時，它們可以是相同的或不同的。在一個實施方案中，靶向部分通過切割接頭融合本發明的嵌合凝血因數，所述接頭其可被切割以在凝塊位點去除靶向部分。在另一實施方案中，靶向部分不通過切割接頭連接’因此，不在凝塊位點被切割。在一個實施方案中，靶向部分定位在因數VIII的N末端或C末端。在另一實施方案中，靶向部分定位在FVII、 FIX、FX的C末端’或在FVIIa、FIXa、FXa單鏈或雙鏈的C 末端。在一個實施方案中，其中採用Fc區或其部分，靶向部分可位於第二Fc鏈的N末端或C末端，或者在單Fc鏈和雙 Fc鏈的C末端。在一個實施方案中，靶向部分不與構建體基因融合，而是經由間隔子或化學鍵與構建體連接。例如，靶向部分通過在構建體的靶向部分和Fc部分之間形成的鍵連接到本發明的構建體上’其中靶向部分包含第一功能組，Fc部分包含第二功能組’其中第一和第二功能組能夠彼此相互反應形成化學鍵（參見，例如，美國專利7 3 8 1 4 0 8 ) » 在一個實施方案中，本發明的多肽包含至少一個抗原結合位點（例如，抗體的抗原結合位點、抗體變體或抗體片段）、多肽、配體的受體結合部分或受體的配體結合部分’其特異性與血小板結合，例如，休眠或活化的血小板。典型的靶向部分包括scFv分子或結合待靶向分子的肽。

-60- 201217526 在本實例和附圖中示出了靶向部分的實例。本領域技術人員通過本發明的啓示可以容易地選擇其他作爲靶向分子用途的分子。 A.結合於血小板的抗原結合位點在某些實施方案中，本發明的多肽包含至少一個抗體的抗原結合部分（例如，結合位元點）。在一個實施方案中 φ ’抗原結合部分使多肽靶向血小板。在其他實施方案中，本發明的多肽可包含抗原結合部分。術語“抗原結合部分”是指免疫球蛋白的多肽、抗體或抗體變體，其結合抗原或與完整抗體（也就是與衍生它們的完整抗體）競爭抗原結合（也就是特異性結合）。例如 ’所述抗原結合部分可能來自上述抗體或抗體變體的任一種。抗原結合部分可能通過本領域眾所周知的重組或生物化學方法製備。典型的抗原結合部分包括Fv、Fab、Fab， φ 和（Fab，）2以及scFv分子。

在其他實施方案中，本發明的嵌合凝血因數可包含結合位點’所述結合位點來自單鏈結合分子（例如單鏈可變區或scFv)。所述用於製備單鏈抗體的技術（美國專利no. 4,694,778; Bird, Science 242:423-442 (1988); Huston et al.，Proc, Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883 (1 988)和 Ward et al·, Nature 3 3 4:544-5 54 ( 1 989))可用于製備單鏈結合分子。單鏈抗體通過經過氨基酸橋連接Fv區域的重鏈和輕鏈片段而形成，從而導致單鏈抗體。還可以使用在E -61 - 201217526 coli中裝配功能Fv片段的技術（Skerra et al·，Science 242:1038-1041 (1988))。在某些實施方案中，本發明的多肽包含一個或多個結合位點或區，所述區包含或由單鏈可變區序列（scFv)組成。單鏈可變區序列包含單肽，其具有一個或多個抗原結合位點，例如，Vu結構域由靈活的街頭連接到VH結構域。 VL和/或VH結構域可來自上述抗體或抗體變體的任一種。 ScFv分子可能以VH-接頭-VL方向或VL-接頭-VH方向構建。連接VL和VH結構域的靈活的接頭彌補抗原結合位點，優選地包含約10至50個氨基酸。在一個實施方案中，多肽接頭是甘氨酸-絲氨酸多肽接頭。典型的甘氨酸/絲氨酸多肽接頭是式（Gly4Ser)n，其中η是正整數（例如，1、2、3、4、5 或6)。其他的多肽在本領域已知。具有單鏈可變區序列（例如，單鏈Fv抗體）的抗體基製備所述單鏈抗體的方法在本領域眾所周知（參見例如，Ho等，1 989. Gene 77:51; Bird 等，1 98 8 Science 2 4 2:423; Pantoliano 等，1991. Biochemistry 3 0:101 17; Milenic 等 ’ 1991. Cancer

Research 51:6363; Takkinen等，1991. Protein Engineering 4:837)。在某些實施方案中，本發明的多肽採用的scFv分子是穩定的scFv分子。在一個實施方案中’穩定的cFv分子可包含置於VH結構域和VL結構域之間的scFv接頭，其中VH 和VL結構域通過VH結構域的氨基酸和VL結構域的氨基酸之間形成的二硫鍵連接。在其他實施方案中，穩定的scFv -62- 201217526 分子可包含scFv接頭，其具有優化的長度或組成。在又一實施方案中，穩定的scFv分子可包含VH*VL結構域，其具有至少一個穩定的氨基酸置換。在又一實施方案中，穩定的scFv分子可以具有至少兩個上述列出的穩定的特徵。穩定的scFv分子具有改進的蛋白質穩定性或給予可操作連接的多肽改進的蛋白質穩定性，與常規多狀相比，本發明優選的scFv接頭使本發明的多肽的熱穩定性提高至少 φ 約2°C或3°C。比較可能例如在本發明的scFv分子之間進行。在某些優選的實施方案中，穩定的scFv分子包含 (Gly4Ser)4SCFv接頭和二硫鍵，其連接VH氨基酸44和VL氨基酸100。其他本發明的多肽採用的典型的穩定的scFv分子在2006年12月8日遞交的美國臨時專利申請號6 0/8 73,996 或2007年3月19日遞交的美國專利申請號11/7 25,970中描述，它們的全部內容通過引用納入本文。本發明的多肽可包含來自使用本領域公認的抗體的可 φ 變區或其部分（例如，VL和/或VH結構域），例如可變結構域可來自非人類哺乳動物中製備的抗體，例如小鼠、豚鼠、靈長類、兔或大鼠，通過抗原或其片段對哺乳動物進行免疫。參見，在前的Harlow & Lane，其以作爲參考方式的所有目的納入本文。免疫球蛋白可通過相關抗原（例如，純化的腫瘤相關抗原或細胞或包含所述抗原的細胞提取物）和佐劑的多次皮下注射或靜脈注射製備。典型地，該免疫誘發免疫應答，其包含從活化的脾細胞或淋巴細胞產生抗原反應抗體。 -63- 201217526 儘管可變區可來自多克隆抗體，其收穫自免疫的哺乳動物血清，它通常從脾臟、淋巴結或外周血分離單獨的脾淋巴細胞以提供獲得需要可變區的單克隆抗體的同源製劑 (MAbs)。典型地，使用兔和豚鼠製備單克隆抗體。典型地，使用小鼠製作多克隆抗體。多克隆抗體可通過將抗原片段注射到鼠中製備，製備“雜交瘤”並篩選用於特異性結合抗原的抗體的雜交瘤。在這個眾所周知的過程（Kohler等， ( 1 975), Nature，256:495)中，相對短壽命或致死的淋巴細胞來自鼠，該鼠已經用融合不死的瘤細胞系（例如，骨髓瘤細胞系）的抗原注射，因此，製備的雜交細胞或“雜交瘤”都是不死的，並能夠產生基因上由B細胞編碼的抗體。通過選擇、稀釋和與再生各個單獨的包含用於但抗體形成的特定基因的菌株，獲得的雜合物分隔成單獨的遺傳株。它們產生與所需抗原同一的抗體，參考它們的純的遺傳百分比，將其稱爲“單克隆“。接種由此製備的雜交瘤細胞並在合適的培養基中生長，所述培養基優選地含有一個或多個抑制生長或抑制非融合的親本骨髓瘤細胞存活的物質。本領域技術人員將會理解的是用於形成、選擇和使雜交瘤生長的試劑、細胞系和基質可從許多來源商業購得，已經很好的建立了其標準方法。一般來說，雜交瘤細胞生長的培養基測定單克隆抗體對抗所需抗原的產生。優選地，通過雜交瘤細胞產生的單克隆抗體的結合特異性通過免疫沉澱法或通過體外試驗測定，如放射免疫分析（RIA)或酶聯免疫吸附試驗（ELISA)。 201217526 確定雜交瘤細胞產生具有所需特異性、親和力和/或活性的抗體後，通過有限的稀釋過程可將克隆體進行亞克隆，並通過標標準方法生長（Goding，Monoclonal antibody: Principles and Practice, pp 59- 1 03 (Academic Press, 198 6))。還應進一步理解的是由亞克隆分泌的單克隆抗體可通過常規純化程式分離自培養基、腹水或血清，如，例如，親和色譜（例如，蛋白A、蛋白G或蛋白L親和色譜） φ 、羥磷灰石色譜、凝膠電泳或透析。任選地，可篩選抗體，所述抗體結合特定活性狀態的血小板上或結合到特定區域或抗原的所需片段，而不結合抗原的其他非重疊片段。後者的篩選可以通過測定抗體到抗原缺失突變體的收集物的結合並測定那個缺失的突變體結合抗體而完成。例如，通過蛋白質印跡或ELIS A可評估結合。將示出特異性結合抗體的最小的片段定位微抗體的表位。可選地，表位特異性能夠通過競爭分析測定，所述 # 競爭分析是試驗，參考抗體競爭結合抗原。如果該試驗和參考抗體競爭，那麼它們結合相同表位或表位充分接近，以使一個抗體的結合干擾其他抗體的結合。編碼所需單克隆抗體的DNA可以容易地分離並使用任 —種用於分離恒定區結構域序列（例如，通過使用寡核苷酸探針’其能特異性結合編碼鼠抗體的重鏈和輕鏈的基因 )的上述常規程式進行測序。分離的和亞克隆的雜交瘤細胞株作爲所述DNA的優選來源。尤其是，分離的DNA (其可以如本發明所描述的合成）可以用於克隆用於結合到本 -65- 201217526 發明的多肽中的所需可變區序列。在其他實施方案中，結合位點來自全人抗體。人或基本上人抗體可以在轉基因動物體內產生（例如，小鼠），其不能產生內源性的免疫球蛋白（參見例如，美國專利號 6,075，181、 5,939,598、 5,591，669和 5,589,369，它們的全部內容通過引用納入本文）。例如，據描述，在嵌合和種系突變小鼠中同源缺失抗體重鏈鏈結區導致完全抑制內源性的抗體產生。人免疫球蛋白基因排列轉移到這種種系突變小鼠中將導致產生人抗體對抗抗原攻擊》另外優選的纏身人抗體的方法是使用SCID小鼠，其在美國專利號 5,811，524中公開，它的全部內容通過引用納入本文。應當理解的時與這些人抗體相關的遺傳物質可同樣如本發明所述被分離或操作。

在其他方面，本發明的多肽可包含抗原結合位元點或其部分，其來自抗體的修飾形式。典型的這種形式包括，例如，迷你抗體、雙抗 '三抗、納米抗體、camelids、 Dabs、四價抗體、內雙抗（例如，Jendreyko等，2003. J. Biol. Chern. 27 8:47 8 1 3 )、融合蛋白（例如，抗體細胞因數融合蛋白、融合Fc受體至少一部分的蛋白）以及雙特異性抗體。其他修飾的抗體在例如，美國專利號4,745，05 5 ; EP 2 5 6，6 5 4 ; F au 1 kner 等，N a ture 2 9 8:2 8 6 ( 1 98 2) ； EP 1 20,694; EP 1 25,023 ； Morrison, J. Immun. 1 23:793 (1 9 7 9); Kohler 等，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:2197 ( 1 980) ; Raso 等 ’ Cancer Res. 4 1:2073 ( 1 98 1 ) ; Morrison 201217526 等，Ann. Rev. Immunol. 2:239 ( 1 984); Morrison, Science 2 2 9:1 202 ( 1 985) ; Morrison 等，P r o c. Natl. Acad. Sci_

USA 8 1:685 1 ( 1 984) ； EP 255,694 ； EP 266,663 和 WO 88/03559中描述。重新分類的免疫球蛋白鏈也是已知的。參見，例如，美國專利號4,444,878、WO 88/03565和EP 6 8,763以及參考文獻。在另一實施方案中，本發明的增強的凝血因數包含抗 φ 原結合位點或區，其是雙特異抗體或由此衍生的抗原結合位點。雙抗體是二聚四價分子，每個具有類似于scFv分子的多肽，單通常具有短的（例如，少於10，優選1至5)個氨基酸殘基接頭，該接頭連接兩個可變結構域，以使在相同多肽上的VL和VH結構域不能相互作用。可替代地，—個多肽鏈的vL和vH結構域與第二多肽鏈上的VlWVh結構域 (分別地）相互作用（參見，例如，WO 02/0278 1 )。在一個實施方案中，本發明的多肽包含雙特異抗體，其可操作鲁地連接至少一個基因融合的Fc區（也就是SCFC區）的N末端和/或C末端。在某些實施方案中’本發明的多肽包含單獨的結構域結合分子（例如，單結構域抗體）作爲靶向部分。典型的單結構域分子包括分離的抗體重鏈可變結構域（VH)，也就是重鏈可變結構域，而沒有輕鏈可變結構域，和分離的抗體輕鏈可變結構域（V L )，也就是輕鏈可變結構域，而沒有重鏈可變結構域。本發明的結合分子採用的典型的單結構域抗體包括，例如’ Camelid重鏈可變結構域（約118至136個 -67- 201217526 氨基酸殘基）’如在 Hamers-Casterman,等，Nature 363 :446-448 (1993)，和 Dumoulin,等，Protein Science 1 1:500-5 1 5 (2002)中所描述。其他典型的單結構域抗體包括單VH或VL結構域，同樣被稱爲Dabs® (Domantis Ltd.， Cambridge, UK)。其他單結構域抗體包括鯊魚抗體（例如，鯊魚Ig-NAR )。鯊魚Ig-NAR包含一個可變結構域（V-NAR)的同源二聚體和5個C樣恒定結構域（C-NAR)，其中多樣性集中在拉長的CDR3地區中，所述區長度變化爲5至23 個殘基。在駱駝樣本中（例如，羊駝類），稱爲VHH的重鏈可變區形成整個抗原結合結構域。駱駝VHH可變區和那些來自於常規抗體（VH )的相應的VHH區相比，主要差異包括（a)在VH的輕鏈接觸表面有更多的疏水氨基酸，（b) VHH中CDR3更長，以及（C)VHH中的CDR1和CDR3之間頻繁出現二硫鍵。用於製備單結構域結合分子的方法在美國專利號6.005,079和6,765,08 7中描述，它們的內容通過引用納入本文。典型的包含VHH結構域的單結構域抗體包括 Nanobodies® (Ablynx NV, Ghent, Belgium)= 典型的抗體在本領域已知，從所述抗體中可以獲取用於結合本發明的分子的結合位點。已知的結合血小板的抗體可用於獲取結合位點，例如，在US 2007/0218067中描述的MB9抗體或可變區或包含能夠用作本發明構建體中的祀向部分的可變區的scFv分子。 B .非免疫球蛋白血小板結合分子 201217526 在某些實施方案中，本發明的多肽包含一個或多個血小板結合位點，所述位點來自非免疫球蛋白結合分子。本文中所使用的術語“非免疫球蛋白結合分子”是那些結合位點包含來自多肽而不是免疫球蛋白的部分（例如，支架或框架）的結合分子，但是其可被設計（例如，誘變）以賦予所需的對於血小板靶標的結合特異性。結合分子的其他例子包含不是來自包括受體結合位點和結合血小板的配體 Φ 結合位點的抗體分子。可通過從來自結合分子文庫的靶向結合變體中選擇或分離進行非免疫球蛋白結合分子的鑒定，所述結合分子具有人工的多樣化結合位元點。使用完全隨機的方法或借助於本領域公認的設計策略能夠產生多樣化文庫（例如，錯配PCR、外顯子改組、或定向進化）。例如，當結合位點與其同源靶標分子相互作用時，能夠通過在編碼結合位元點的核苷酸相應的位置中插入簡並密碼子、三核苷酸、隨 φ 機肽或整個環來隨機化通常涉及的氨基酸位置（參見例如，美國公開號200401 32028)。氨基酸位置的定位能夠通過具有靶向分子的複合物的結合位元點的晶體結構的硏究而鑒定。隨機化的候選位置包括環、平面、螺旋和結合位點的結合腔。在某些實施方案中，可使用本領域已知的技術鑒定結合位點內的氨基酸，其可能是多樣化的候選。在隨機化之後，多樣化庫可能經過選擇或篩選程式以獲得具有所需結合特性的結合分子，例如，使用本領域已知方法的特異性結合血小板。可通過本領域公認的方法如噬菌體展 -69 · 201217526 示、酵母展示或核糖體展示完成選擇。在實施方案中，本發明的構建體可以採用本領域已知結合血小板的分子。例如，如本領域所描述的結合GPIba的肽（例如，PS4、OS1或 0S2)可以被使用（Benard 等，2008. Biochemistry 47:4674-4682) ° IV.可啓動的凝血因數當以活性形式給予時，凝血因數使旁路治療有效，因爲外源性的凝血因數通常不能被充足有效的動力學所啓動。然而，它們都過內源性途徑快速失活（例如，通過抗凝血酶III或TFPI)，導致活性形式的清除並縮短有效半衰期。在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數是“可啓動的”。這種可啓動的構建體作爲增強的酶原進行迴圈，所述酶原具有更長的半衰期，但是當需要時能夠容易地在凝血部位被切割。在一個實施方案中，本發明可啓動的構建體包含可切割的接頭，其包含例如，因數XIa、X a或凝血酶切割位點 ’其被分別由因數XIa、Xa或凝血酶切割，導致在繕位點形成凝血因數的活性形式。典型的因數FXI a切割位點包括，例如，TQSFNDFTR和SVSQTSKLTR。典型的凝血酶切割位點包括，例如，DFLAEGGGVR、TTKIKPR和包含ALRPR 或由ALRPR組成的序歹IJ (例如，ALRPRVVGGA )。在一個實施方案中，可切割的接頭兩側可以有被間隔部分隔開的一個或多個側（上游、下游或兩側）。 -70- 201217526 在一個實施方案中，可切割的接頭置於凝血因數的輕鏈和重鏈之間。在另一實施方案中，可切割的接頭不置於凝血因數的輕鏈和重鏈之間。在一個實施方案中，可切割的接頭位於重鏈的氨基端。典型的可啓動的構建體在附圖和以下實例中示出。 V.支架部分本發明的一些實施方案包含支架部分，其可選自例如蛋白質部分、ScFc區、Fc部分、白蛋白、XTEN等。 A.蛋白質部分在一個實施方案中，支架是蛋白質部分。這種部分可包含完整蛋白質或其部分或合成分子。優選的蛋白質部分具有足夠的分子尺寸，當結合到構建體中時，其改進本發明的嵌合凝血因數的半衰期。例如，在一個實施方案中， φ 人工蛋白（XTEN )可包括在構建體中作爲支架 (Schellenberger等，2009. 27:1186)。在另一實施方案中，白蛋白（例如，人血清白蛋白）可包括在本發明的構建體中。例如’如領域已知，血清白蛋白（例如，HSA)能用作蛋白支架。在HSA的特殊變化結構域和亞結構域中，具有相當適於用於產生血清白蛋白支架基蛋白文庫的突變和隨機化的結構。可用于本發明的白蛋白的實例，例如，及其片段是已知的。例如，美國專利號7,5 92,010、美國專利號 6,686,179和 Schulte, Thrombosis Res. 124 Suppl. 2:S6-S8 201217526 (2 0 0 9)，它們的全部內容通過引用納入本文。 B . scFc區在一個實施方案中，本發明提供編碼多肽的核酸分子，所述多肽包含位於單獨多肽鏈內的至少一個基因融合Fc 區或其部分（也就是多肽包含單鏈Fc (scFc)區），並且多肽由這些核酸分子指定。在一個實施方案中，本發明的核酸分子編碼嵌合凝血因數’其包含選自FV II、FIX和FX的凝血因數以及結合血小板的靶向部分以及非必要的位於凝血因數和靶向部分之間的間隔部分。多肽包含FVII，該FVII包含異源酶切位點，其可被凝血級聯的組分啓動。本發明還提供被所述核酸分子指定的多肽。在一個實施方案中，本發明提供未加工的多肽，其中位於相同線性多肽鏈內的至少兩個F c部分或結構域（例如，2、3、4、5 、6或更多Fc部分或結構域）能夠折疊（例如，分子內或分子間折疊）以形成一個功能s c F c區，其由F c多肽接頭連接。例如，在一個優選的實施方案中，爲了改進半衰期或觸發免疫效應功能（例如，抗體依賴性細胞毒作用（ADCC) 、吞噬作用或補體依賴性細胞毒作用（C D C C )和/或爲了改進製備性）’本發明的多肽能夠通過其scFc區結合至少一個Fc受體（例如’ FcRn、FcyR受體（例如，FcyRIII)或補體蛋白（例如’ Clq))。可替代的設計的多肽的變化在本發明的範圍內。例如 201217526 ，在一個實施方案中’本發明的核酸分子指定的多肽包含以線性順序從氨基端到羧基端的部分 A-F 1 -P 1 - L-P2-B-F2 (I) 其中’ A如果存在是凝血因數或其部分，F1是第—Fc部分或結構域，P1是酶切位點，L是ScFc接頭，P2是酶切位點 ’ B如果存在是凝血因數或其部分，F2是第二Fc部分或結構域’ ““代表肽鍵。式（I)至少包含A或B以及非必要的 φ 包含兩者。A和B如果都存在可能對應凝血因數的重鏈和輕鏈。式（I)至少包含P1或P2以及非必要的包含兩者。Pi和 P2如果都存在可能相同或不同。式（I)至少包含pi和F2。 F 1和F2如果都存在可能相同或不同. 根據式I的典型的多肽包括：A-F1-P1- L-P2-F2、Fl-pi- L-P2-B-F2、 A-F1-P1- L- F2、 Fl-Pl- L- B-F2、 A-F1-L-P2-F2和 FI- L-P2-B-F2。在一個實施方案中’每個F1和F2包含CH2和CH3部分 •。在一個實施方案中，在切割和基本上刪除cscFc接頭 (L)後’本發明的多肽包含兩條多肽鏈，其中第一多肽鏈包含連接第一 Fc部分的A，以及其中第二多肽鏈包含連接第二Fc部分的B，其中F1和F2二聚化以形成Fc區。在一個實施方案中’ A和B非必要地存在，它們是凝血因數或其部分。在一個實施方案中’ A是凝血因數的輕鏈，B是凝血因數的重鏈》在一個實施方案中，B是凝血因數的輕鏈，A是 -73- 201217526 凝血因·數的重鏈。在一個實施方案中，當A和B與多肽關聯時，然後多肽形成功能凝血因數，例如，FVII、FIX或FX 。在一個實施方案中，這種多肽一旦從細胞中分泌出來就具有酶活性。 i) Fc部分或結構域用於產生本發明的多肽的對於F1和F2有用的Fc部分可通過多種不同的來源獲得。在優選的實施方案中，多肽的 Fc部分來自人免疫球蛋白。然而，應當理解的是Fc部分可來自其他哺乳動物類的免疫球蛋白，包括例如，齧齒動物 (例如，小鼠、大鼠、兔、豚鼠）或非人靈長類（例如，黑猩猩、獼猴）種類。而且，多肽Fc結構域或其部分可來自任何免疫球蛋白類，其包括IgM、IgG、IgD、IgA和IgE，以及任何免疫球蛋白同型，其包括IgGl、IgG2、IgG3和IgG4 。在優選實施方案中，使用人同型IgG 1。各種Fc部分基因序列（例如，人恒定區基因序列）以公開可得的保藏形式獲得。能夠選擇具有特定效應子功能 (或缺少特定的效應子功能）或具有特定修飾的包含Fc部分序列的恒定區結構域以降低免疫原性。許多抗體和抗體編碼基因的序列已經被公開，合適的Fc部分序列（例如，鉸鏈、CH2和/或CH3序列或其部分）可能來自使用本領域公認技術的那些序列。使用任何前述的方法獲得的遺傳物質可然後被改變或合成以獲得本發明的多肽。應當進一步理解的是本發明的範圍涵蓋恒定區DNA序列的等位基因、變 201217526 體和突變體。例如，使用聚合酶鏈反應以及用於選擇性擴增目的結構域的引物能夠克隆Fc部分序列。爲了從抗體中克隆Fc部分序列，從雜交瘤細胞、脾或淋巴結細胞中分離mRNA，反轉錄成DNA，用PCR擴增抗體基因。詳細的PCR擴增方法在美國專利號 4,683，195 ; 4,683,202 ; 4,800,159 ; 4,965,1 88 中描述，以及在例如“PCR Protocols:A Guide to • Methods and Applications” Innis 等，eds.，Academic Press, San Diego，CA (1 990); Ho等，1 989. Gene 77:51; Horton等，1 993. Methods Enzymol. 2 1 7:270)中描述。PCR可以共有序列恒定區引物或更多基於公開的重鏈和輕鏈DNA和氨基酸序列的特異性引物開始。如上所討論的，PCR孩可以用於分離編碼抗體輕鏈和重鏈的DNA克隆。在這種情況下，可以通過共有序列引物或更大的同源探針篩選文庫，如鼠恒定區探針。列出的適用于抗體基因擴增的多數引物在本 • 領域已知（例如，基於純化的抗體N末端序列的5 ’引物） (Benhar and Pastan. 1 994. Protein Engineering 7:1 5 09); cDNA端的快速擴增（Ruberti，F_ 等，1 994· J· Immunol. Methods 1 73:3 3 );抗體前導序列（Larrick 等，1989 Biochem. Biophys. Res. Commun. 160:1250)。抗體序列的克隆進一步在1 995年1月25日遞交的Newman等，美國專利號5,658,570的申請中描述，它的全部內容通過引用納入本文。本發明的多肽可包含兩個或兩個以上Fc部分（例如， -75- 201217526 2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多Fc部分）。這些兩個或兩個以上Fc部分能夠形成Fc區。在一個實施方案中，Fc 部分可以是不同的類型。在一個實施方案中，至少一個Fc 部分存在於包含鉸鏈結構域或其部分多肽中。在另一實施方案中’本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包括至少 —個CH2結構域或其部分。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包括至少一個CH3結構域或其部分。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個 Fc部分’其包括至少一個CH4結構域或其部分。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包括至少一個鉸鏈結構域或其部分以及至少一個CH2結構域或其部分（例如，以鉸鏈-CH2方向）。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包括至少一個CH2結構域或其部分以及至少一個CH3結構域或其部分（例如，以 CH2-CH3方向）。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分包含至少一個鉸鏈結構域或其部分，至少 —個CH2結構域或其部分以及至少一個CH3結構域或其部分，例如，以鉸鏈-CH2-CH3、鉸鏈-CH3-CH2或CH2-CH3-絞鏈方向。在某些實施方案中，多肽包含至少一個完整Fc區，其來自一個或多個免疫球蛋白重鏈（例如，包括鉸鏈、CH2和 CH3結構域的Fc結構域，雖然它們不需要來自相同的抗體）。在其他實施方案中，多肽包含至少兩條完整的Fc區，其來自一個或多個免疫球蛋白重鏈。在優選的實施方案中， -76- 201217526 完整Fc部分來自人IgG免疫球蛋白重鏈（例如，人IgGi)。在另一實施方案中’本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包含完整CH3結構域（根據EU編號的抗體Fc區的約 341-438的氨基酸）。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包含完整CH2結構域（根據EU編號的抗體Fc區的約231-3 40的氨基酸）。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包含至少一個CH3 φ 結構域和至少一個鉸鏈區（根據EU編號的抗體Fc區的約 216-230氨基酸）和CH2結構域。在一個實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包含鉸鏈和CH3結構域。在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，其包含鉸鏈、CH2和CH3結構域。在優選的實施方案中，Fc部分來自人IgG免疫球蛋白重鏈（例如，人lgG1)。在 —個實施方案中，Fc部分包含或由根據EU編號的221至447 氨基酸組成。馨在另一實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分’其包含FcRn結合夥伴。FcRn結合夥伴是分子或其部分 ’其能夠被FcRn受體特異性結合，FcRn受體在被FcRn結合夥伴的FcRn受體轉運後被隨後啓動。特異性結合是指兩個分子形成複合物，其在生理條件下相對穩定。特異性結合的特徵在於高的親和力和低穩定能力，以區別於非特異性結合，其通常具有低親和力並具有高的穩定能力。典型地’當親和常數KA高於106 NT1或更多時，優選高於1〇8 M·1 ’認爲結合是特異性的。如果有必要，通過改變結合條件 -77- 201217526 能夠降低非特異性結合而基本上不影響特異性結合。適當的結合條件如分子濃度、溶液的離子強度、溫度、結合時間、阻斷劑的濃度（例如血清白蛋白、牛乳酪蛋白）等，其可以被本領域技術人員使用常規技術優化。

FcRn受體已經從幾種哺乳動物種類（包括人）中分離。人FcRn、猴FcRn、大鼠FcRn和小鼠FcRn的序列是已知的（Story 等，1 994，Exp. Med. 1 8 0:23 7 7)。FcRn 受體在相對較低的pH下結合IgG (而不是其他免疫球蛋白類，如 IgA、IgM、IgD和IgE )，積極轉運腔內IgG抗體跨細胞到在漿膜方向，然後釋放在相對高的pH下載間質流體中釋放 IgG。它在包括肺和腸上皮（Israel等，1997，Immunology 92:69)、腎小管上皮（Kobayashi 等，2002，Am. J· Physiol. Renal Physiol. 28 2:F3 5 8)以及鼻上皮、陰道表面和膽管樹表面的成人上皮組織中表達（美國專利號6,48 5,726、 6,030,613 、 6,086,875 ； WO 03 /077 8 34 ； US2003 - 023 5 53 6A1 ) 〇本發明的FcRn結合夥伴涵蓋能被FcRn受體特異性結合的分子，所述受體包括整體IgG、IgG的Fc片段和其他包括 FcRn受體完整結合區的片段。基於X射線結晶學已經描述了 IgG的Fc部分的區結合FcRn受體（Burmeister等，1994, Nature 372:3 79)。Fc與FcRn的主要接觸面接近CH2和CH3 結構域的連接。Fc-FcRn接觸都在單獨的Ig重鏈內。FcRn 結合夥伴包括整個IgG、IgG的Fc片段和其他包括FcRn受體完整結合區的IgG片段。主要的接觸位元點包括CH2結構 201217526 域的氨基酸殘基248、 250-257、 272、 285、 288、 290-291 、308-3 1 1 和 314 以及 CH3 結構域的 3 85-3 87、428 和 43 3-436 。參考面向免疫球蛋白或免疫球蛋白片段或區的氨基酸編號，所有這些都基於Kab at等，1991免疫目的蛋白的序列，美國公共衛生部，馬里蘭州貝塞斯達。根據公認的程式（如位元點定向誘變及其類似程式）， IgG的Fc區能夠被修飾以產生修飾的IgG或Fc片段及其部分 φ (其被FcRn結合）。這種修飾包括在遠離FcRn接觸位點的修飾以及在接觸位點內的銹蝕，其保護或甚至增強與FcRn 的結合。例如，以下在人1) IgG 1 Fc (Fc單獨的氨基酸殘）基能夠被置換而不明顯損失Fc對於FcRnA的親和力： P23 8A、S23 9A、K246A、K248 A、D249A、M252A、 T256A、E25 8A、T 2 6 0 A、D 2 6 5 A、S 2 6 7 A、Η 2 6 8 A、E 2 6 9 A 、D270A 、 E272A 、 L274A 、 N276A 、 Y278A 、 D280A 、 V282A 、 E283A 、 H285A 、 N286A 、 T289A 、 K290A 、 φ R292A、E293A、E294A、Q295A、Y296F、N297A、S298A 、Y300F 、 R301A 、 V303A 、 V305A 、 T307A 、 L309A 、 Q311A 、 D312A 、 N315A 、 K317A 、 E318A 、 K320A 、 K322A、S324A、K326A、A327Q、P329A、A330Q、P331A 、E333A 、 K334A 、 T335A 、 S337A 、 K338A 、 K340A 、 Q342A 、 R344A 、 E345A 、 Q347A 、 R355A 、 E356A 、 M358A 、 T359A 、 K360A 、 N361A 、 Q362A 、 Y373A 、 S375A、D3 76A、A3 78Q、E3 80A、E382A、S3 8 3A、N3 84A 、Q386A 、 E388A 、 N389A 、 N390A 、 Y391F 、 K392A 、 -79- 201217526 L398A 、 S400A 、 D401A 、 D413A 、 K414A 、 R416A 、 Q418A、 Q419 A、N421A、V422A、 S424A、E43 0A 、 N434A、T43 7A、 Q43 8 A、K43 9A、S440A、S444A 和 K4 47A，其中例如P238A表示野生型脯氨酸在第238位被丙氨酸置換。作爲一個實例，在一個具體的實施方案，結合 N297A突變除去高度保守的N-糖基化位點。除了丙氨酸，其他氨基酸對於野生型氨基酸可以在以上具體的位點被置換。突變可單獨的引入到Fc，引發超過一百個FcRn結合夥伴與原生Fc不同。此外，這些單獨突變的兩個、三個或給更多組合可以一起引入，引發數百個FcRn夥伴。此外，本發明構建體的FcRn結合夥伴的一個可以會變異而另一 FcRn 結合夥伴根本不變異，或兩個都可以用不同的突變產生變異。本發明描述的任何一種突變，包括N2 97 A可用於修飾 Fc，而不考慮生物活性分子（例如，EPO、IFN、因數VII、因數IX 、 T20)。上述某些突變體可能賦予FcRn結合配體新的功能性。例如，一個實施方案中包含去除高度保守的N-糖基化位點的N2 97A。這種突變體的結果是降低免疫原性，因此提高 FcRn結合配體的迴圈半衰期，並使FcRn結合配體不能與 RlyFc、RIIAyFc、RIIByFc 和 RIIIAyFc 結合，其不具有 FcRn 的折中親和力（Routledge 等，1995，Transplantation 60:847; Friend等，1999, Transplantation 68:1632; Shields 等，1995，Biol. Chem. 276:659 1 )。作爲上述突變體產生的新功能性的另一個實例，FcRn的親和力可能增加高於 S· -80- 201217526 一些例子中野生型的親和力。這種增加的親和力可反應爲增加的“結合”速率、降低的“脫離”速率或同時的增加的“ 結合”速率和降低的“脫離”速率。認爲能夠給予增加的 FcRn親和力的突變體包含T256A、T307A、E3 80A和N434A (Shields 等，2001，J. Biol. C h em · 2 7 6 :6 5 9 1 ) 〇此外，至少3個人Fey受體看起來識別低鉸鏈區內IgG 上的結合位點，所述低鉸鏈區一般.爲氨基酸23 4至2 3 7。因 φ 此，新功能性和潛在降低的免疫原性的另一個實例可源於本區域的突變，例如把人IgGl "ELLG"的氨基酸23 3至236 取代爲IgG2 "PVA"(缺失一個氨基酸）的相應序列。已示出引入這種突變體後，調節各種效應物功能的FqRI、 FcyRII 和 FcyRIII 不與 IgGl 結合（Ward and Ghetie 1 995, Therapeutic Immunology 2:77 和 Armour 等，1999，Eur. J. Immunol. 2 9:26 1 3 )。在一個實施方案中，FcRn結合配體是多肽，其包含序 φ 歹1JPKNSSMISNTP (SEQ ID NO: 12)，並任選地還包含選自 HQSLGTQ (SEQ ID NO: 13)、HQNLSDGK (SEQ ID NO: 14)、HQNISDGK (SEQ ID NO: 24)或 VISSHLGQ (SEQ ID NO: 25)(美國專利號5,739,277)的序列。兩個FcRn受體可結合單個Fc分子。結晶學資料表明每個FcRn分子結合FC二聚體的單一多肽。在一個實施方案中 ’ IgG的Fc片段將FcRn結合配體連接到生物活性分子並提供口服、向頰、舌下、直腸、陰道遞送生物活性分子的方法’如經鼻施用氣溶膠或經肺途徑或經眼途徑。在另一實 -81 - 201217526 施方案中，可侵入性施用嵌合蛋白，例如皮下施用或靜脈施用。組成本發明的多肽的F c部分的恒定區結構域或其部分可源自於不同的免疫球蛋白分子。例如。本發明的多肽可包含源自IgGl分子的CH2結構域或其部分及源自igG3分子的CH3區或其部分。在另一個實例中，多肽可包含Fc部分，其包含部分源自IgGl分子且部分源自IgG 3分子的鉸鏈結構域。如此處所陳述的，本領域的普通技術人員將認爲F c 部分可以被改變以使其氨基酸序列不同于天然產生的抗體分子。在另一實施方案中，本發明的多肽包含scFc區，其包含一個或多個截斷的Fc部分，所述截斷的Fc部分足以使Fc 受體（FcR)具有與Fc區的結合性能。例如，與FcRn (例如，FcRn結合部分）結合的Fc結構域的部分包含約IgGl的氛基酸282至43 8，初始接觸位點編號的EU，CH2結構域的氨基酸 248、250 至 257、272、285、28 8’、290 至 291、308 至 311和314及CH3結構域的氨基酸殘基385至387、42 8和433 至436。因此，本發明的多肽的Fc部分可包含FcRn結合部分或由其組成。FcRn結合部分可源自於任何同種型的重鏈，包含IgGl、IgG2、IgG3和IgG4。在一個實施方案中，使用來自人同種型IgGl的抗體的FcRn結合部分。在另一實施方案中，使用來自人同種型IgG4的抗體的FcRn結合部分。在一個實施方案中，本發明的多肽缺少完整Fc區的一個或多個恒定區結構域，例如，其部分或全部缺失。在某 8 -82- 201217526 個實施方案中，本發明多肽將缺乏全部的CH2結構域（ ACH2構建體）。本領域的技術人員將意識到這種構建體是優選的由於其CH2結構域對抗體代謝速率的調節屬性。在某些實施方案中，本發明的多肽包含CH2結構域缺失的 Fc區，其源自編碼IgGi人’丨旦定區結構域的載體（例如， IDEC Pharmaceuticals, San Diego )(參見，例如，WO 02/06 095 5八2和\¥002/09694 8人2)。這種典型載體設計爲缺 φ 失CH2結構域並提供爲表達結構域缺失的igG,恒定區的合成載體。人們將注意到這些典型構建體優選地設計爲融合與各自的Fc結構域的鉸鏈區結合的CH3結構域。在其他構建體中，其可取的提供爲一個或多個組成的 Fc部分的間隔部分。例如，間隔部分可位於鉸鏈區和CH2 結構域之間和/或CH2與CH3結構域之間。例如，相容的構建體可被表達’其中CH2結構域缺失且殘留的CH3結構域 (合成的或非合成的）通過5至20氨基酸間隔部分與鉸鏈 φ 區連接。可添加這種間隔部分，例如，以確保恒定區結構域的調節元件保持游離且可及的或鉸鏈區保持可彎曲性。優選地，任何與本發明相容的連接肽將爲相對地無免疫原性並不阻止scFc區的適當折疊。在某些實施方案中，本發明的多肽可包含二聚體Fc區 ’其包含相同的或大體上相同的F c部分，序列組成（此處被稱爲“同型二聚體Fc區”）。在其他實施方案中，本發明的多肽可包含二聚體Fc區，其包含至少兩個具有不同序列組成（例如，此處被稱爲“異型二聚體以區’，）的1^部分。 -83- 201217526 在一典型實施方案中，異型二聚體Fc區包含第一Fc部分的氨基酸置換（例如，天冬醯胺在EU位置297的氨基酸置換 )，但不在第二Fc部分。在某些實施方案中，Fc區是半糖基化的。例如，異聚體scFc區可包含第一糖基化的Fc部分（例如，糖基化的 CH2區）和第二無糖基化的Fc部分（例如，無糖基化的 CH2區），其中接頭插入糖基化和無糖基化的Fc部分之間。在其他實施方案中，Fc區完全糖基化，例如，所有的Fc 部分都糖基化。在又一實施方案中，Fc區可以是無糖基化的，例如，Fc部分都未被糖基化。在某些實施方案中，本發明的多肽使用的Fc部分被改變，例如，通過氨基酸突變（例如，添加、缺失或置換）。例如，在一個實施方案中，Fc部分具有至少一個氨基酸置換，相比於其Fc部分源自的野生型Fc。例如，其中Fc部分源自於人IgGl抗體，變體包含至少一個氨基酸突變（例如，置換），相比於氨基酸在人IgGIFc區的響應位置的野生型。

Fc變體的氨基酸置換可位於Fc部分內的位置，其是指對應於抗體中Fc區給定的殘基的位置序號（如使用EU編號慣例陳述的）。本領域的技術人員可容易地形成對比以確定對應於Fc部分中位置的EU編號。在一個實施方案中，Fc變體包含位於鉸鏈結構域或其部分內的氨基酸位置的置換。在另一實施方案中，Fc變體包含位於CH2結構域或其部分內的氨基酸位置的置換。在 201217526 另一實施方案中，Fc變體包含位於CH3結構域或其部分內的氨基酸位置的置換。在另一實施方案中，Fc變體包含位於CH4結構域或其部分內的氨基酸位置的置換。在某些實施方案中，本發明的多肽包含Fc變體，其包含多於一個的氨基酸置換。本發明的多肽可包含，例如， 2、3、4、5' 6、7、8、9、10或更多氨基酸置換。優選地，氨基酸置換的空間定位相互間隔至少一個氨基酸位置或 φ 更多，例如，至少2、3、4、5、6、7、8、9、10個氨基酸位置或更多。更優選地，工程化的氨基酸的空間定位相互間隔至少5、10、15、20或25個氨基酸位置或更多。在某些實施方案中，Fc變體使至少一個包含所述野生型Fc結構域的Fc區給予的效應物功能發生變化（例如，Fc 區結合Fc受體（例如，FcyRI、FcyRII或FcyRIII )或補體蛋白（例如，Clq)的能力的增強或減弱，或引發抗體依賴型細胞毒性（ADCC)、吞噬作用或補體依賴型細胞毒性 φ (CDCC))。在其他實施方案中，Fc變體提供爲工程化半胱氨酸殘基。本發明的多肽可使用領域認可的Fc變體，已知其能使效應物功能和/或FcR或FcRn結合發生變化（例如，增強或減弱）。具體地，本發明的結合分子可包括，例如，一個或多個氨基酸位置的變化（例如，置換），所述氨基酸位置公開於國際 PCT 公開 W08 8/07089A1、W096/1 4339A1、 WO98/05 787A1 、 W098/23289A1 、 W099/51642 A1 、 W099/58572A1 、 WO00/09560A2 、 WOOO/32767 A1 ' -85- 201217526 WO00/42072 A2 、 WO02/442 1 5 A2 、 W002/0609 1 9 A2 、 WO03/074569 A2 、 W Ο 0 4/0 1 6 7 5 0 A 2 、 W004/029207 A2 、 W004/03 5752 A2 、 WO 04/06 3 3 5 1 A2 、 W004/07445 5 A2 、 WO04/099249 A2 、 W O 0 5 / 0 4 0 2 1 7 A 2 、 WO04/044859 、 W005/070963 A 1 、 W005/07798 1 A2 、 W O 0 5/0 9 2 9 2 5 A 2 、 WO05/1 23 780A2 ' W O 0 6/0 1 9 4 4 7 A 1 、 W006/0473 5 0 A2 和 WO06/08 5967A2 ； US 專利公開 No. U S 2 0 0 7/0 2 3 1 3 2 9、 US2007/023 1 329、U S 2 0 0 7/0 2 3 7 7 6 5、U S 2 0 0 7/0 2 3 7 7 6 6 ' US2007/0237767 ' US2007/0243 1 88 、 US20070248603 、 US20070286859、 US20080057056;或美國專利 5,648,260 、5,739,277 ' 5,834,250 、 5,869,046 ' 6,096,871 、 6,121,022 ' 6,194,551 、 6,242,195 、 6,277,375 、 6,528,624 、6,538,124 、 6,737,056 ' 6,821,505 > 6,998,253 、 7,083,784和7,317,091，它們的全部內容通過引用倂入本文。在一個實施方案中，特異性變化（例如，一個或多個本領域公開的氨基酸位置的特異性置換）可產生於一個或多個公開的氨基酸位置。在另一實施方案中，可產生一個或多個公開的氨基酸位置的不同變化（例如，一個或多個本領域公開的氨基酸位置的不同置換）。在某些實施方案中，本發明的多肽包含Fc部分的氨基酸置換，其改變抗體的抗原非依賴型效應物功能，尤其是抗體的迴圈半衰期。與缺失這些置換的多肽相比，這種多肽顯示出與FcRn 增加的或減少的結合，因此，其分別具有血清中增加的或 -86- 201217526 減少的半衰期。預期具有增強的FcRn親和力的Fc變體具有較長的血清半衰期，且這種分子在治療哺乳動物的方法中具有有用的應用，其中需要施用的多肽的長半衰期，例如，治療慢性疾病或病症（參見，例如，美國專利7，3 4 8，0 0 4 、7,404,956和7,862,820 )。相反地，預期具有減弱的 FcRn親和力的Fc變體具有較短的血清半衰期，且這種分子也是有用的，例如，施用於哺乳動物，其中縮短的迴圈時 φ 間可以是有利的，例如，用於診斷性影像學或起始多肽在迴圈中存在長時間時具有毒性副作用的情況。具有減弱的 FcRn結合親和力的Fc變體也不太可能穿過胎盤，且因此，其還用於孕婦的疾病或病症治療》此外，需要降低的FcRn 結合親和力的其他應用包括需要定位腦、腎和/或肝的那些應用。在一典型實施方案中，本發明的多肽顯示出從脈管系統穿過腎臟腎小球上皮細胞的減少的輸送。在另一實施方案中，本發明的多肽顯示出從腦穿過血腦屏障（BBB) φ 進入血管容積的減少的輸送。在一個實施方案中，具有改變的FcRn結合的多肽包含至少一個fc部分（例如，一個或兩個Fc部分）’其具有Fc部分的“FcRn結合環”內的一個或多個氨基酸置換。FcRn結合環由野生型全長Fc部分的氨基酸殘基280至299 (根據EU編號）組成。在其他實施方案中’具有改變的FcRn結合親和力的本發明的多肽包含至少 —個Fc部分（例如，一個或兩個Fc部分），其具有15 A FcRn “接觸區”內的一個或多個氨基酸置換。本文中所使用的術語15人FcRn“接觸區”包括野生型全長Fc部分的下述 -87- 201217526 位置的殘基：243 至 261、275 至 280、282 至 293、302 至 319 、336至348、 367、 369、 372至389、 391、 393、 408、 424 、425至44〇 (EU編號）。在優選的實施方案中，具有改變的FcRn結合親和力的本發明的多肽包含至少一個Fc部分（例如，一個或兩個Fc部分），其具有對應於任何一個下述 EU位置的氨基酸位置的一個或多個氨基酸置換：256、277 至281、 283至288、 303至309、 313、 338、 342、 376、 381 、384 ' 385、387、434 (例如，N434A 或 N434K)和 438。改變FcRn結合活性的典型氨基酸置換在國際PCT公開號 WO05/0473 2 7中公開，其通過引用倂入本文。本發明的多肽可還包含領域認可的改變多肽糖基化的氨基酸置換。例如，結合多肽的scFc區可包含具有突變的 F c部分，所述突變產生減少的糖基化（例如，N _或〇 _連接的糖基化），或可包含野生型Fc部分的改變的糖形（例如，低岩藻糖或無岩藻糖聚糖）。在其他實施方案中，本發明的多肽包含至少一個Fc部分，所述Fc部分具有工程化的半胱氨酸殘基或其位於溶劑暴露表面的類似物。優選地，工程化的半胱氨酸殘基或其類似物不干擾scFc區賦予的效應物功能。更優選地，所述改變不干擾scFc區與Fc受體（例如，FcyRI、FcyRII或 FcyRIII)或補體蛋白（例如，Clq)的結合活性，或引發免疫的效應物功能（例如，抗體依賴型細胞毒性（ADCC) 、吞噬作用或補體依賴型細胞毒性（CDCC))。在一個實施方案中，本發明未處理的多肽可包含基因

-88 - 201217526 融合的Fc區（例如，scFc區）’其具有兩個或多個獨立地選自本文描述的Fc部分的組成的Fc部分。在一個實施方案中 ’二聚體Fc區的Fc部分是相同的。在另一實施方案中，至少兩個Fc部分是不同的。例如，本發明的多肽的Fc部分包含相同數目的氨基酸殘基，或其長度不同相差一個或多個氨基酸殘基（例如，約5個氨基酸殘基（例如，1、2、3、4或 5個氨基酸殘基）、約10個殘基、約15個殘基、約20個殘基 φ 、約30個殘基、約40個殘基或約5〇個殘基）。在又一實施方案中，本發明的多肽的Fc部分序列的一個或多個氨基酸位置不同。例如，至少兩個Fc部分約5個氨基酸位置（例如，1、2、3、4或5個氨基酸位置）、約10個位置、約15 個位置、約20個位置、約30個位置、約40個位置或約50 個位置不同。多肽接頭本文中所使用的術語“多肽”是指肽或多肽序列（例如，合成的肽或多肽序列），其連接多肽鏈線性氨基酸序列中的兩個結構域。編碼本發明多肽的核酸分子編碼直接或間接連接兩個Fc部分的多肽，所述Fc部分組成所述構建體。本文中這些接頭是指“scFc接頭”。如果scFc接頭在線性多肽序列中連續地連接兩個Fc部分，其爲“直接”連接。相反地，scFc接頭可將第一Fc部分連接到結合部分，結合部分依次連接到第二Fc部分，因此形成間接連接。這些scFc 接頭（L)引起單鏈基因構建體的形成。然而，多肽還包含 -89 - 201217526 導致scFc接頭切割的酶切位點，且在一個實施方案中，大體上切除（例如，細胞加工期間）。因此，加工的分子是二聚體分子，其包含至少兩個氨基酸鏈並大體上缺少外源接頭氨基酸序列。在一些實施方案中，切除所有或大體上所有接頭，然而在一些實施方案中，切割位元點的部分可保留，例如，RRRR切割位點的4個精氨酸。在另一實施方案中，多肽接頭的另一個類型，本文中指“間隔基”可用於連接不同部分，例如，凝血因數或Fc部分的靶向部分。這種類型的多肽可爲多肽分子提供柔性。間隔基一般不裂開，然而這種分裂是可取的。附圖中示出了間隔基的典型位置。間隔基可位於凝血因數、靶向部分和/或支架之間，例如，位於這些部分的N或C末端。在一個實施方案中，這些接頭在處理過程中不分離。接頭的第三種類型，可存在于本發明的嵌合凝血因數中’是可切割的接頭，其包括切割位點（例如，因數XIa、 Xa或凝血酶切割位點）且其可包括在切割位點的N末端或C 末端或兩端的另外的間隔基接頭。這些可切割的接頭倂入凝血因數時產生具有異源切割位點的嵌合分子。附圖中示出了這些位點的典型位置，且所述位置包括，例如，與靶向部分相鄰。在另一實施方案中，這種接頭可與凝血因數或其部分相鄰。例如，在一個實施方案中，可分裂的接頭可融合到凝血因數重鏈的N末端以產生凝血因數的活性形式。在這種情況下，可切割的接頭可包括切割位點N末端的另外的間隔基接頭，但需要在切割位元點C末端直接與 201217526 凝血因數重鏈的氨基端融合。本發明的基因構建體編碼包含兩個或多個Fc結構域或部分的多肽，所述Fc結構域或部分通過cscFc接頭連接以形成包含于單鏈多肽的Fc區。通過至少一個酶切位點使 c s c F c接頭位於側面，例如，胞內酶加工的位點。多肽在至少一個酶切位點的裂開產生多肽，其包括至少兩個多肽鏈。在一個實施方案中，cscFc接頭任選地通過切割位點 φ 連接F1或F2到，例如，凝血因數。如上所陳述的’其他多肽可任選地用於本發明的構建體’例如，連接凝血因數或靶向部分到Fc部分。多肽接頭的一個類型在這裏指間隔基。用於有關本發明的間隔基的一些典型位置包括，例如，包含甘氨酸絲氨酸氨基酸的多肽’如附圖中所述和以下詳述的那些。在一個實施方案中 ’間隔基可與一個或多個相互獨立地選自凝血因數、支架部分（例如F c、切割位點）和靶向部分的部分相鄰。 φ 在一個實施方案中，多肽接頭是合成的，例如，非天然產生的。在一個實施方案中，多肽接頭包括肽（或多肽 )(其可以是天然產生的或非天然產生的），其包含連接或基因融合第一線性氨基酸序列與第二氨基酸線性序列的氨基酸序列’其爲非天然地連接或非天然地基因融合。例如’在一個實施方案中，多肽接頭可包含非天然產生的多肽’其爲天然產生多狀的修飾形式（例如，包含突變，如添加、置換或刪除）。在另一實施方案中，多肽接頭可包含非天然產生的氨基酸。在另一實施方案中，多肽接頭可 • 91 - 201217526 包含天然產生的氨基酸’其產生于不存在於自然界的線性序列。在又一實施方案中’多肽接頭可包含天然產生的多肽序列。例如，在某些實施方案中，多肽接頭可用于融合相间的Fc部分，因此形成同源scFc區。在其他實施方案中，多肽接頭可用于融合不同的Fc部分（例如，野生型Fc部分和 Fc部分變體），因此形成異源^以區。在另一實施方案中，多肽接頭包含甘氨酸/絲氨酸接頭或由其組成。在一個實施方案中，ScFc接頭包含至少一個免疫球蛋白鉸鏈和甘氨酸-絲氨酸接頭的部分。本文中所使用的術語“甘氨酸/絲氨酸接頭”是指由甘氨酸和絲氨酸殘基組成的肽。典型的甘氨酸/絲氨酸接頭包含式爲 (Gly4Ser)n(SEQ ID NO: 4)的氨基酸序列，其中η爲正整數 (例如，1、2、3、4、5、6、7、8、9或 10)。優選的甘氨酸 / 絲氨酸接頭爲（Gly4Ser)2 (SEQ ID NO:29)、（Gly4Ser) 4 (SEQ ID NO:6)或（Gly4Ser)6 (SEQ ID NO: 5)。另一個典型的甘氨酸/絲氨酸接頭是GGGSSGGGSG (SEQ ID NO: 30) 。在某些實施方案中，所述甘氨酸/絲氨酸接頭可以插入多肽接頭（例如，本文描述的任何多肽接頭）的兩個其他序列之間。在其他實施方案中，甘氨酸/絲氨酸接頭連接在多肽接頭（例如，本文描述的任何多肽接頭）的另一個序列的一端或兩端。在又一實施方案中，兩個或多個甘氨酸/絲氨酸接頭倂入多肽接頭的系列中。在一個實施方案中，本發明的接頭包含至少一個上游鉸鏈區（例如，源自 201217526 於IgGl、IgG2、IgG3或IgG4分子）的部分、至少—個中間鉸鏈區（例如，源自於IgGl、IgG2、IgG3或IgG4分子）的部分和一系列甘氨酸/絲氨酸氨基酸殘基（例如，甘氨酸/絲氨酸接頭，如（Gly4Ser)n) (SEQ ID NO:4))。本發明的多肽接頭至少一個氨基酸長且長度可變。在 —個實施方案中，本發明的接頭爲約1個至約50個氨基酸長。如在本文中所使用的，術語“約” +/- 2個氨基酸殘基 φ 。由於接頭長度必須是正整數，其長度爲約1個至約50個氨基酸長，是指長度爲1到3個至48到52個氨基酸長。在另 —實施方案中’本發明的接頭爲約10至20個氨基酸長。在另一實施方案中’本發明的接頭爲約15至約50個氨基酸長。在另一實施方案中，本發明的接頭爲約20至約45個氨基酸長。在另一實施方案中，本發明的接頭爲約15至約35或約2〇至30個氨基酸長。在另一實施方案中，本發明的接頭爲約 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8、 9、 10、 11、 12、 13、 14 • 、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 24、 25、 26、 27、28、29、30、40、50或60個氨基酸長。在一個實施方案中，本發明的肽接頭爲20或30個氨基酸長。可使用本領域的已知技術將多肽接頭引入到多肽序列中。可通過DNA序列分析確定修飾。可使用質粒DNA轉化宿主細胞用於產生的多肽的穩定製備。酶切割位點在一個實施方案中，一個或多個酶切位點與例如側面 -93- 201217526 相連接或與cscFc連接子上游或下游或兩側的本發明未處理的多肽ccFc接頭（L)相鄰。例如，在一編碼本發明的多肽的構建體的實施方案中，切割位點與scFc接頭（L)的一個或兩個末端連接（例如，直接地或間接地）。例如，在一個實施方案中，本發明的核酸分子具體指以下式表示的多肽： A-F 1-P 1-L-P2-B-F2 (I)

氛基至殘基端的線性序列’其中A如果存在，爲凝血因數或其部分，F1爲第一Fc部分或結構域，P1爲酶切位點，L爲ScFc接頭’ P2爲酶切位點 B，如果存在，爲凝血因數或其部分，F2爲第二Fc部分或結構域且表示肽鍵。式（I)包含至少一個A或B及任選地另個》人和B，如果都存在，可能爲凝血因數對應的重鏈和輕鏈。式（I)包含至少一個Ρ1或Ρ2及任選地兩個。Ρ1和Ρ2，如果都存在，可爲相同的或不同的。式（I)包含至少一個F1和F2。F1和F2，如果都存在，可爲相同的或不同的。

在另一實施方案中，因數X la或Xa切割位點可倂入本發明的構建體’例如，倂入可切割的接頭中。典型的F XI a 切割位點包括，例如，TQSFNDFTR和SVSQTSKLTR。典型的凝血酶切割位點包括，例如，DFLAEGGGVR、TTKIKPR 、LVPRG SEQ ID NO:35)和 ALRPRVVGGA。其他有用的切割位點在本領域是已知的。在一個實施方案中，接頭的一些部分在至少一個酶切位點分裂後可保留。爲了儘量減少無關氨基酸序列的存在 -94- 201217526 ，本發明的多肽可包括兩個切割位點。在一些實施方案中，所有或大體上所有接頭被切除，然而在一些實施方案中，切割位元點的部分可保留，例如，RRRR切割位點的4個精氨酸。多肽的製備多種方法可用於重組產生本發明的嵌合凝血因數。在 φ 一個實施方案中，本發明涉及核酸構建體，其包含編碼本發明的嵌合蛋白的核酸序列。將理解爲由於密碼的簡並性，多種核酸序列將編碼多肽的氨基酸序列。所需的多核苷酸可通過從頭的固相DN A合成或早期製備的多核苷酸的 PCR誘變產生。寡核苷酸介導的誘變是製備置換的一種方法，框內插入，或改變（例如，改變的密碼子）以引入編碼氨基酸置換的密碼子（例如，到F c變體部分）。例如，通過使編碼所 φ 需突變體的寡核苷酸與單鏈DNA範本雜交改變起始多肽 DNA。雜交後’使用DNA聚合酶合成完整的範本的第二互補鏈’所述範本包含寡核苷酸引物。在一個實施方案中，基因工程’例如，基於引物的PCR誘變，足以包含變化，如本文所定義的’用於製備編碼本發明的多狀的多核苷酸 σ 用於重組製備，將編碼嵌合蛋白的多核苷酸序列插入到合適的表達載體中，例如，包含用於插入的編碼序列的轉錄和翻譯的必需元件，或在RN Α病毒載體的情況下，用 •95- 201217526 於複製和翻譯的必需元件的載體。將編碼嵌合蛋白的核酸插入到合適閱讀框中的載體。然後將表達載體轉染到將表大多肽的合適的靶細胞中。本領域已知的轉染技術包括，但不限於，磷酸鈣沉澱 (Wigler等，1978，Cell 14 : 725)和電穿孔（Neumann 等， 1 98 2，EMBO，J. 1 : 841)。可使用多種宿主表達載體系統表達真核細胞中本文中所述之嵌合蛋白。在一個實施方案中，真核細胞是動物細胞，包括哺乳動物細胞（例如， CHO、BHK、Cos、HeLa細胞）。嵌合蛋白在真核細胞中表達時，編碼嵌合蛋白的DN A還可編碼使嵌合蛋白分泌的信號序列。本領域的技術人員將理解爲翻譯蛋白質的同時信號序列被細胞切除以形成成熟的嵌合蛋白。各種信號序列在本領域是已知的，例如，天然因數VII信號序列、天然因數IX信號序列和鼠IgK輕鏈信號序列。可選地，不包含在嵌合蛋白中的信號序列可通過裂解細胞恢復。

本發明的嵌合蛋白可在轉基因動物中合成，如齧齒類動物、山羊、綿羊、豬或牛。術語“轉基因動物”是指將外源基因倂入其基因組的非人類動物。由於這種基因存在於生殖細胞組織，其從親代傳遞到子代。外源基因被引入單細胞胚胎（Brinster等 ’ 1985，Proc. Natl· Acad.Sci. USA 82 : 44 38)。製備轉基因動物的方法在本領域是已知的，包括產生免疫球蛋白分子的轉基因學（Wagner等’ 1981， Proc. Natl. Acad. Sci. USA 7 8: 63 76; McKnight等 ’ 1 9 8 3, Cell 3 4 : 3 3 5; Brinster等 ’ 1 98 3，Nature 3 06: 3 3 2; Ritchie -96- 201217526 等，1 984， Nature 3 12: 517; Baldassarre 等，2003,

Theriogenology 59 : 8 3 1 ; Robl等，2003，Theriogenology 5 9: 1 07; Malassagne等，2003，Xenotransplantation 10 (3): 267) ° 表達載體可編碼使重組產生的蛋白容易純化和識別的標籤。實例包括，但不限於，載體PUR278 (Ruther等， 1983, EMBO J. 2: 1791)，其中本文所述之嵌合蛋白編碼序 φ 列可在具有lac z編碼區的框架中與載體結合以產生雜交的蛋白質；pGEX載體可用于表達具有谷胱甘肽 S-轉移酶 (GST)標籤的蛋白質。通常這些蛋白質是可溶的，且可容易地通過谷胱甘肽-瓊脂糖小球的吸附及游離的谷胱甘肽的洗脫而純化。載體包括純化後易於標籤去除的切割位點 (例如，精確蛋白酶（Pharmacia, Peapack，N. J.))。對於本發明的目的，可使用許多表達載體系統。這些表達載體通常在宿主生物體內是可複製的，作爲游離基因 Φ 或宿主染色體DNA的完整部分。表達載體可包括表達調控序列，其包括，但不限於，啓動子（例如，天然結合的或異源啓動子）、增強子、信號序列、剪接信號、增強子元件和轉錄終止序列。優選地，表達調控序列是能夠轉化或轉染真核宿主細胞的真核啓動子系統。表達載體還可使用源自動物病毒的DNA元件，所述病毒如牛乳頭瘤病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、杆狀病毒、逆轉錄酶病毒 (RS V、MMTV或 MOMLV)、巨細胞病毒（CMV )或 SV40病毒。其他涉及具有內部核糖體結合位點的多順反子系統。 -97 - 201217526 通常，表達載體含有選擇標記（例如，氨苄青黴素抗性、潮黴素抗性、四環素抗性或新黴素抗性）以檢測所需 DNA序列轉化的那些細胞（參見，例如，Itakura等，美國專利4,704,362 )。可通過一個或多個可選擇轉染的宿主細胞的標記選擇將DNA整合到其染色體的細胞。該標記可提供爲營養缺陷型宿主的原養型，殺菌劑抗性（例如抗生素 )或重金屬（如銅）抗性。可選擇的標記基因能夠直接與被表達的DNA序列連接或通過共轉化引入到相同細胞中。優選的表達載體是NEOSPLA (美國專利No. 6，1 5 9,73 0) 。這個載體包含巨細胞病毒啓動子/增強子、鼠β-球蛋白主要啓動子、SV40複製原點、牛生長激素聚腺苷酸序列、新黴素磷酸轉移酶外顯子1和外顯子2、二氫葉酸還原酶基因和前導序列。已發現這種載體引起抗體很高水準的表達，倂入可變和恒定區基因、細胞中轉染及含有介質和氨甲喋呤擴增的GM8中的選擇。載體系統還出現在美國專利號 5,73 6，137和5,6 5 8,5 70中，每個都通過引用將其全部內容倂入本文。這個系統提供高表達水準，例如，> 3 0 pg/細胞/天。其他典型載體系統在例如美國專利號6,413,777中公開。在其他實施方案中，本發明的多肽可使用多順反子結構表達。在這些表達系統中，目的多基因產物如多聚體結合蛋白的多重多肽可由單個多順反子結構產生。這些系統有利地使用內部核糖體進入位點（IRES)以提供真核宿主細胞中相對高水準的本發明的多肽。相容的IRES序列在美國 201217526 專利號6,193，98 0中公開，其也倂入本文。本領域的技術人員將認爲這種表達系統可用于高效產生本應用中公開的所有多肽。更普遍地，一旦製備編碼多肽的載體或DNA序列，可將表達載體引入到合適的宿主細胞。即可轉化宿主細胞。可通過本領域技術人員眾所周知的各種技術將質粒引入到宿主細胞中。這些技術包括，但不限於，轉染（包括電泳 φ 和電穿孔）、原生質體融合、磷酸鈣沉澱、包膜DNA的細胞融合、顯微注射及完整病毒的感染。參見，Ridg way，A. A. G. "Mammalian Expression Vectors" Chapter 24.2，pp. 4 7 0-472 Vectors， Rodriguez and Denhardt， Eds. (Butterworths，Boston，Mass. 1988)。更優選地，通過電穿孔將質粒引入宿主。轉化細胞在適合輕鏈和重鏈產生的條件下生長，並測定重鏈和/或輕鏈蛋白合成。典型的檢測技術包括酶聯免疫吸附測定（ELISA)、放射免疫測定 φ (RIA)或螢光啓動的細胞分選分析（FACS)、免疫組織化學等。本文中所使用的術語“轉化”應在廣義上使用，是指 DN A弓丨入受體宿主細胞，所述細胞改變基因型且引起弓丨起受體細胞中的變化。在這些相同的系之間，“宿主細胞”是指使用重組DNA 技術構建的並編碼至少一個異源基因的載體轉化的細胞。描述多肽從重組細胞分離的過程中，可交換地使用術語 “ 細胞”和“細胞培養物”以表示多肽來源除非其明確說明。 -99- 201217526 換言之，多肽從“細胞”中回收可指來自旋轉減慢的整個細胞或來自包含培養基和懸浮細胞的細胞培養物。用於蛋白表達的宿主細胞系最優選爲哺乳動物源；本領域的技術人員有能力優選地確定最合適被表達的所需基因產物的特定宿主細胞系。典型的宿主細胞系包括但不限於DG44和DUXB11 (中國倉鼠卵巢系、DHFR minus)、 HELA (人宮頸癌）、CVI (猴腎臟系）、COS (具有SV40 T抗原的CVI的衍生物）、R1610 (中國倉鼠成纖維細胞） BALBC/3T3 (小鼠成纖維細胞）、H A K (倉鼠腎臟系）、 SP2/0 (小鼠骨髓瘤）、P3.times.63-Ag3.65 3 (小鼠骨髓瘤）、BFA-lclBPT (牛內皮細胞）、RAJI (人體淋巴細胞）和293 (人體腎臟）。通常來自商業服務、美國組織培養物保藏或發表的文章的宿主細胞系是可用的。在一個實施方案中，宿主細胞內源性表達在形成成熟多肽的加工期間切除scFc接頭（例如，如果存在這種接頭且包含胞內加工位點）必要的酶。在此加工期間，scFc接頭可被大體上移除以減少無關氨基酸的存在。在本發明另一實施方案中，宿主細胞被轉化以表達一個或多個胞外酶，以發生scFc接頭的加工或將其改善。在一個實施方案中，可由細胞內源性或外源性表達的酶是弗林蛋白酶家族的元件。人弗林蛋白酶（即PACE ) 的完整cDNA和氨基酸序列在1 990年公開。Van den Ouweland A M 等 ’ (1 990) Nucleic Acids Res. 18:664;

Erratum in: Nucleic Acids Res. 1 8:1 3 3 2 ( 1 990) o 201217526

Barr等發表的美國專利號5,460,950，描述了重組 PACE及PACE與異源蛋白的基質前體多肽的共表達以提高活性的，成熟的異源蛋白的表達。

van de Ven等發表的美國專利號5,93 5,8 1 5，同樣描述了重組人弗林蛋白酶（即PACE )及弗林蛋白酶與異源蛋白的基質前體多肽的共表達以提高活性的，成熟的異源蛋白的表達。這個專利中公開的可能的基質前體包括因數IX φ 的前體。除了 PACE，哺乳動物弗林蛋白酶/枯草桿菌蛋白酶/Kex2p-般前蛋白轉化酶（PC)家族的其他家族元件被報導包括 PC1/PC3、PC2、PC4、PC5/6 (下文中僅指 PC5)、 PACE4f〇LPC/PC7/PC8/SPC7 » [SJ 保守的整體結構特點，但它們的組織分佈、亞細胞定位、切割特異性和優選基質不同。關於綜述，參見Nakayama K (1997) Biochem J. 327:625-35 » 與 PACE相似，這些前蛋白轉移酶一般包括，氨基端起始、信號肽、前狀（其可被自 φ 身催化地分裂）、以天冬氨酸、組氨酸、絲氨酸和天冬醯胺/天冬氨酸殘基爲特徵的枯草桿菌蛋白酶般的催化結構域及也是催化活性必需的且以精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸 (RGD)序歹丨J爲特徵的Homo B結構域。P ACE、P ACE4和PC5 還包括富含半胱氨酸的結構域，其功能是未知的。此外， PC5具有含有及不含跨膜結構域的異構體；這些不同的異構體分別PC5B和PC5A。PACE的催化結構域的氨基酸序列與這個前蛋白轉移酶家族的其他元件的催化結構域的氨基酸序列之間的比較顯示下述一致程度：PC4爲70%; PACE4 -101 - 201217526 和 PC5 爲 65% ; PC1/PC3 爲 61% ; PC2 爲 54% 且 LPC/PC7/PC8/SPC7爲 51%。Nakayama K (1997) Biochem J. 327:625-35 ° 已報導PACE和PACE4部分重疊但機制不同。特別是， PACE4，與PACE顯著不同，已報導不能夠加工F IX的前體多肽。Wasley L C等，（ 1 993 ) J Biol Chem. 268:845 8-65; Rehemtu 11 a A等，( 1 993 ) Biochemistry. 3 2:1 1 5 8 6-90。

Seid ah等發表的美國專利號5,840,5 29，公開了 human PC7的核苷酸和氨基酸序列及PC7的顯著活性，相比於其他PC家族元件，以切除HIV gpl60至gpl20和gp41。

Lusson J等首次將齧齒類動物PC5的核苷酸和氨基酸序歹!1 描述爲 PC5 ’ ( 1 993) Proc Natl Acad Sci USA 90:669 1 -5 和 PC6 by Nakagawa T 等，(1 993) J Biochem (Tokyo) 113:132-5。Day等發表的美國專利號6,380,171，公開了人 PC5 A的核苷酸和氨基酸序列，PC5 A爲不含跨膜結構域的異構體》這些酶的序列和其克隆方法在本領域中是已知的編碼本發明的多肽的基因還可在非哺乳細胞中表達，如細菌或酵母菌或植物細胞。在這方面，可認爲各種單細胞非哺乳動物的微生物如細菌也可被轉化，即能在培養基或發酵液中生長的那些。易於轉化的細菌包括腸桿菌科的元件，如大腸桿菌或沙門氏菌的菌株；芽胞桿菌科，如枯草桿菌；肺炎球菌；鏈球菌和流感嗜血桿菌。還可進一步認爲，當在細菌中表達時，多肽通常成爲內含體的部分。 -102- 201217526 多肽需被分離、純化且然後整合到功能分子中。除了原核生物，還可使用真核微生物。釀酒酵母或普通的麵包酵母是真核微生物中最常使用的，雖然許多其他菌株通常是可用的。在釀酒酵母中的表達，質粒YRp7是常用的（Stinchcomb 等，Nature，2 82:3 9 ( 1 979); Kingsman 等， Gene，7:141 (1 979); Tschemper等，Gene, 1 0:1 57 ( 1 980)) 0 這種質粒包含TRP1基因，其提供用於缺乏在色氨酸中生 φ 長能力的酵母突變菌株的選擇標記，例如 ATCC第44076 號或 PEP4-1 (Jones, Genetics, 85:1 2 (1 977))。作爲酵母宿主細胞基因組的特徵的trpl病變的存在提供了用於檢測缺乏色氨酸條件下生長的轉化的有效環境。還可使用其他酵母宿主如畢赤酵母屬。需要具有表達調控序列（例如，啓動子）的酵母表達載體、複製原點、終止序列等。典型的啓動子包括3-磷酸甘油酸激酶和其他糖分解酶。誘導型酵母啓動子包括，其中，來自乙醇脫氫酶、異細胞色素C和 φ 負責甲醇、麥芽糖和半乳糖利用的酶的啓動子。可選地，多肽編碼核苷酸序列可倂入轉基因引入到轉基因動物的基因組中並隨後在轉基因動物的乳汁中表達（參見，例如，Deboer 等，US 5,74 1,957，Rosen，US 5,304,489和Meade等，US 5,849,992)。合適的轉基因包括與啓動子可操作的連接的多肽的編碼序列和來自乳腺特異基因的增強子，如酪蛋白或P-乳球蛋白。體外製備允許規模化產生大量所需多肽。在組織培養條件下用於哺乳動物細胞培養的技術在本領域是已知的， -103- 201217526 且包括均質懸浮培養，例如，在氣升式反應器或在連續攪拌反應器中，或固定的或包埋的細胞培養，例如，在中空纖維中、微膠囊中、瓊脂糖微珠上或陶瓷色譜柱上。如果必要和/或需要的，多肽溶液可通過通常的色譜法純化，例如’凝膠過濾、離子交換色譜法、DEAE-纖維素色譜或（免疫·）親和色譜法，例如，合成的鉸鏈區多肽的優選生物合成之後或本文中描述的H 1C色譜步驟之前或之後。親和標籤序列（例如，His(6)標籤）可任選地與多肽序列結合或包括在其內以促進下游純化。在一個實施方案中，本發明的宿主細胞包含編碼scFc 多肽的基因構建體和一個或多個能夠加工cscFc接頭的酶。可使用單個載體或兩個載體表達所述構建體和酶。 —旦表達，增強的凝血因數可通過本領域的標準程式純化’包括硫酸銨沉澱、親和柱色譜法、HP LC純化、凝膠電泳等（參見 generally Scopes, Protein Purification (Springer-Verlag，N.Y·，（1982))並特異性地參加用於實例的方法。大體上純化的蛋白質的至少約90%至95%的均質性是優選的，且9 8 %至9 9 %或更多的均質性是最優選的，用於藥物。在另一實施方案中，本發明涉及治療具有止血障礙的受試者的方法，其包含施用治療有效量的本發明的增強的凝血因數。施用給受試者的組合物包括核酸分子和多肽分子，所述核酸分子包含編碼本發明的嵌合凝血因數（用於基因治 -104- 201217526 療）的核苷酸序列。在一個實施方案中，本發明的增強的凝血因數組合物與至少一個其他促進止血的試劑聯合施用。所述其他促進止血的試劑是證明具有凝血活性的治療劑。例如，但不作爲限制，止血劑可包括因數V、因數VII、因數VIII、因數 IX、因數X、因數XI、因數XII、因數ΧΙΠ、凝血酶原、或血纖維蛋白原或前面任何一種的活性形式。止血劑的凝血 φ 因數還可包括抗纖維蛋白溶解藥物，例如，η·ε氨基已酸、凝血酸。在本發明一實施方案中，施用給受試者時凝血因數在組合物（例如，多肽或編碼多肽的核酸分子）中以活性形式存在。這種啓動的分子可通過活性形式細胞表達或可在施用給受試者之前體外啓動。在另一實施方案中，凝血因數在組合物中以啓動的形式存在且凝血因數在施用給受試者後在凝血位點體內啓動》 Φ 本發明的增強的凝血因數可通過以下途徑施用，如靜脈注射、皮下注射、肌肉注射、或通過任何粘膜表面、如口服、舌下含服，向頰、舌下含服、鼻腔、直腸、陰道或通過肺途徑。嵌合蛋白可移植到生物聚合物固相載體內或與其連接，所述載體能使嵌合蛋白在所需位點緩慢釋放。用於口服施用，藥物組合物可通過常規方法製備成片劑或膠囊的形式。組合物還可製成液體，例如糖漿或懸浮液。液體包括懸浮劑（例如，山梨醇糖漿、纖維素衍生物或氫化食用油脂）、乳化劑（卵磷脂或阿拉伯樹膠.）、非水 -105- 201217526 相載體（例如’杏仁油、油脂、乙醇或分餾的植物油）及防腐劑（例如’甲基或丙基-P-羥苯酸鹽或山梨酸）。製劑還可包括調味劑、著色劑和甜味劑。可選地，組合物可表示爲組分與水或其他合適載體的幹產物。用於面頰和舌下施用，組合物可根據常規方法取片劑、錠劑或快速溶劑薄膜的形式。通過吸入施用，根據本發明使用的化合物以氣溶膠噴霧形式與合適的推進劑從加壓包或霧化器（例如，PBS中 )方便地遞送，所述推進劑例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟甲烷、二氧化碳或其他合適的氣體。在加壓氣溶膠的情況下，可通過提供遞送測量數量的閥門確定劑量單位。膠囊和色譜柱，例如吸入器或吹入器中使用的明膠可製成含有化合物和合適的粉末基質（如乳糖或澱粉 )的粉末混合物。在一個實施方案中，本發明的多肽的施用途徑是腸胃外施用。本文中使用的術語腸胃外的包括靜脈內的、動脈內的、腹膜內的、肌肉內的、皮下的、直腸的或陰道的施用。腸胃外施用的靜脈內形式是優選的。然而所有的這些施用形式都清楚地作爲本發明的範圍內，施用形式可是用於注射的溶液，特別是用於靜脈注射或動脈注射或輸注。通常，用於注射的合適的藥物組合物可包含緩衝液（例如，乙酸鹽、磷酸鹽或檸檬酸鹽緩衝液）、表面活性劑（例如，多山醇酯）' 任選地穩定劑（例如，人白蛋白）等。然而，在其他與本文描述相容的方法中，多肽可直接遞送到相 -106- 201217526 反的細胞群的穩定，從而增加病變組織對治療劑的暴露。用於腸胃外施用的製劑包括無菌水、非水溶液、懸浮液和乳化液。非水溶劑的實例爲丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、和可注射的有機酯如油酸乙酯。水相載體包括水、酒精/水溶液、乳化液或懸浮液，包括鹽水和緩衝基質。在本發明中，藥學上可接受的載體包括，但不限於，〇.〇1至〇.1^^且優選爲0.051^磷酸鹽緩衝液或〇.8%鹽水。 φ 其他常見的腸胃外載體包括磷酸鈉溶液'林格氏葡萄糖、葡萄糖和氯化鈉、乳酸林格氏（注射液）或固定油類。靜脈內載體包括液體和營養物補充劑、電解質補充劑，如基於林格氏葡萄糖的那些物質等。還可存在防腐劑和其他添加劑，例如，抗微生物、抗氧化劑、螯合劑和惰性氣體等。更特別地，適合注射使用的藥物組合物包括無菌水溶液（水溶性）或分散液和用於臨時製備無菌注射液或分散液的無菌粉末。在這種情況下’組合物必須是無菌的且應 φ 該在某種程度上是流體，可以容易的存在。在製備和儲存條件下其應該是穩定的且優選地保存在無微生物污染的條件下，如細菌和真菌。載體可爲溶劑和分散介質，其含有 ’例如，水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇和液態聚乙二醇等）及其合適的混合物。可保持適當的流動性，例如，通過使用塗層如卵磷脂、通過在分散作用情況下保持所需的顆粒大小及通過使用表面活性劑。可通過各種抗細菌劑和抗真菌劑阻止微生物的作用，例如，對羥苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、抗壞血酸、乙基汞 -107- 201217526 硫代水楊酸鈉等。在許多情況下，可優選地包括等滲劑，例如，糖、多元醇，如甘露糖醇、山梨糖醇或組合物中的氯化鈉。可通過組合物中包括延遲吸收的試劑（例如單硬脂酸鋁和明膠）引起可注射組合物的長時間吸收。在任何情況下，可通過將活性化合物（例如，多肽自身或其他活性劑相結合）倂入所需數量的合適具有一個本文列舉的成分或其組合的溶劑中，根據需要，接下來是過濾消毒。通常，通過將活性化合物倂入無菌載體中製備分散劑，所述無菌載體包含基本的分散介質和上述列舉的所需的其他成分。在用於製備無菌注射液的無菌粉末的情況下，優選的製備方法是真空乾燥和冷凍乾燥，其產生活性成分和任何其他所需成分的粉末，所述其他成分來自其之前的無菌過濾溶液。將用於注射的製劑加工、裝入容器中 (如安瓿瓶、袋、瓶、注射器或小瓶）並根據本領域已知方法在無菌條件下密封。此外，可將製劑包裝並以試劑盒的形式銷售。製備這類物品將優選地具有標籤或產品說明書，其表明用於治療患有或易患凝血障礙的受試者的相關組合物。藥物組合物還可製成爲用於直腸施用的栓劑或保留灌腸劑，例如，包含常規的栓劑如可哥油或其他甘油酯。對於治療條件的本發明組合物的有效劑量，取決於多種不同因數而改變，包括施用方法、靶位點、患者的生理狀態、患者是否爲人或動物' 施用的其他藥物及治療是否爲預防性的或治療性的。通常，患者是人而不是非人類哺

-108 - 201217526 乳動物，其包括也可被治療的轉基因哺乳動物。可使用本領域技術人員已知的常規方法滴定治療劑量以優化安全性和有效性。

在一個實施方案中，生物活性部分（例如，包含FIX) 的劑量的範圍可爲25至100 IU/kg，例如，0.417 mg/kg至 1.67 mg/kg。在另一實施方案中，生物活性部分（例如，包含FV III)的劑量的範圍可爲25至65 IU/kg，例如，0.003 1 25 mg/kg至0.008 1 25 mg/kg。在另一實施方案中，生物活性部分（例如，包含FVII)的劑量的範圍可爲90至270 ug/kg或 0.090至 0.270 mg/kg ° 劑量的範圍可爲1 000 Ug/kg至0.1 ng/kg體重。在一個實施方案中，給藥範圍爲lug/kg至100 ug/kg。蛋白可連續施用或在特定時間間隔施用。可使用體外試驗確定最佳劑量範圍和/或施用方案。測定凝血因數活性的體外試驗是本領域已知的，例如，STA-CLOT Vlla-rTF凝血試驗。 φ 此外，可由動物模型（例如，患血友病的狗）獲得的劑量反應曲線推測有效劑量（Mount等，2002，Blood 99 (8): 2670) 〇上述範圍中間的劑量也將在本發明的範圍內。可以這種曰劑量、可選擇的、周劑量或根據經驗分析確定的任何其他方案施用給受試者。典型的治療需要長時期的多劑量施用，例如，至少6個月。在一些方法中，可同時施用兩種或多種多肽，在這種情況下每種多肽施用的劑量在顯示的範圍內。 -109- 201217526 本發明的多肽可在多重情況下施用。單劑量之間的間隔可以是每天、每週、每月或每年。間隔也可爲不規律的，通過測定患者中修飾的多肽或抗原的血液水準表示。可選擇地，可將多肽作爲緩釋製劑施用，在這種情況下需要較低頻率的施用。劑量和頻率取決於患者中多肽的半衰期而改變。施用的劑量和頻率可取決於治療是否是預防性的或治療性的而改變。在預防性應用中，將包含本發明多肽或其混合物的組合物施用給尙未在疾病狀態的患者以增強患者的抵抗力或最大限度地減少疾病的影響。這種數量定義爲 “預防性的有效劑量”。長週期內在相對不頻繁的間隔施用相對低的劑量。一些患者在其休息時間繼續接受治療。本發明的多肽可任選地與其他試劑相結合施用，所述其他試劑能有效地治療病症或需要治療（例如，預防性的或治療性的）的狀況。如本文中使用的，與輔助療法結合或組合的本發明的多肽的施用是指順序的、同時的、同範圍的 '共同作用的、伴隨的或同時期的施用或應用療法和公開的多肽。本領域的技術人員將認爲各種組分組合的治療方案的施用或應用可爲定時的以提供整體治療效果。技術人員（例如，內科醫生）能夠容易地辨別有效的組合治療方案不需要基於選擇的輔助治療和本說明書內容的過度實驗。將進一步認爲本發明的多肽可用於與試劑結合或組合 (例如，提供組合的治療方案）。可與本發明的多肽結合 -110- 201217526 的典型試劑包括表示護理正在治療的特定病症的現行標準的試劑。這種試劑性質上可爲化學的或生物的。術語“生物的”或“生物試劑”是指由生物體和/或其具有治療作用的產物製成的藥物活性劑。用於與本發明的多肽結合的試劑的數量可根據受試者而改變或根據本領域已知的施用。參見實例，Bruce A Chabner 等，Antineoplastic Agents, in GOODMAN & • GILMAN'S THE PHARMACOLOGICAL BASIS OF THERAPEUTICS 1 23 3 - 1 28 7 ((Joel G. Hardman等，eds.，9th ed. 199 6)。在另一實施方案中，施用與護理標準一致的這種試劑的數量。如前所述，可施用藥學上有效量的本發明的多肽用於體內治療凝血障礙。在這方面，將認爲可將本發明的多肽製成容易施用並促進穩定的活性劑。優選地，根據本發明的藥物組合物包含藥學上可接受的、無毒的、無菌載體如 φ 生理鹽水，無毒的緩衝液、防腐劑等。當然，可以單劑量或多劑量施用本發明的藥物組合物以提供多肽藥學上的有效量。在一個實施方案中，本發明的嵌合凝血因數可作爲核酸分子施用。可使用本領域已知的技術施用核酸分子，所述技術包括通過載體、質粒、脂質體、DN A導入、電穿孔、基因槍、靜脈注射或肝動脈灌注。用於基於治療實施方案的載體在本領域是已知的。按照本公開的範圍，可根據前述治療方法，以足夠產 -111 - 201217526 生治療性或預防性效果的數量將本發明的增強的凝血因數施用給人類或其他動物。本發明通過以下實例進一步說明’所述實例不應理解爲限制。本應用引用的所有文獻、專利和公佈的專利申請的內容通過引用併入本文。【實施方式】實例整個實例中使用以下材料和方法，除非另有說明。通用材料和方法在一般情況下，除非另有說明，本發明的做法使用，常規的化學、生物物理學、分子生物學、DN A重組技術，免疫學（特別是，例如，抗體技術）及電泳中的標準技術。參見’例如，Sambrook， Fritsch and Maniatis, Molecular Cloning: Cold Spring Harbor Laboratory Press ( 1 98 9); Antibody Engineering Protocols (Methods in Molecular Biology), 510, Paul, S., Humana Pr ( 1 996); Antibody EngineeringiA Practical Approach (Practical Approach Series, 169), McCafferty, Ed., Irl Pr ( 1 996); Antibodies:A Laboratory Manual, Harlow 等，CS.H.L. Press, Pub. (1999);和 Current Protocols in Molecular Biology, eds. Au s u b e 1 等，J o hn W i 1 ey & Sons (1 992) o -112- 201217526 實例1.在第二Fc鏈的氨基端包含FVII-Fc和MB9-FC的異源二聚體構建體 pS YN-FVII-027的克隆 F VII-0 2 7構建體包含在細胞中製備時用於cscFc的切割，該構建體包含靶向部分，與GPIIbllla結合的scFv部分、 MB9。

生成表達FVII-Fc和MB9-FC異源二聚體的質粒（pSYN-FVII-027)，其中MB9是之前示出的與活化血小板上的受體GPIIb/IIIa結合的scFv。來自pSYN-FVII-027的蛋白在細胞中表達爲單一的多肽，其中FVII-Fc亞基的C-末端通過 (GGGGS)6x多肽接頭與MB9-FC亞基的N-末端相連接。此外，將RRRRS和RKRRKR序列分別插入到多肽接頭的5’端和 3’端，通過每個序列最後的精氨酸後面的前蛋白轉化酶胞內切除。因此，細胞將表達雙鏈FVII-FC/MB9-FC異源二聚體，其中FVII-Fc鏈的C-末端具有RRRRS序列，但接頭的其餘部分和RKRRKR序列被删除。作爲第一步，使用以下引物產生了一系列的中間質粒

HindIII-SalI-BpsEI-Fc-F

AGTCAAGCTTGTCGACTCCGGAACTCCTGGGCGGACC BamHI-接頭-Fc-R

CATCGGATCCCCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCCCAC

CTGATCCGCCGCCACCTTTACCCGGAGACAGGGAGAGG

BclI-Fc-F -113- 201217526

CAGTCTTGATCAGACAAAACTCACACATGCCCACC

scFc-EcoRI-R

ACTGACGAATTCTCATTTACCCGGAGACAGGGAG

Hindlll-Kozak-FVII-F:

CGACAAGCTTGCCGCCACCATGGTCTCCCAGGCCCTCAGG FVII-HC-BspEI-R:

AGGAGTTCCGGAGCTGGGCACGGTGGGCATGTGTGAGTTTTGTCGGAT

CCCCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCCCACCTGATCCG

CCGCCACCGGACCCACCTCCGCCGGAGCCACCGCCACCGGGAAATGG

GGCTCGCAGGAGG 使用以下迴圈進行50 ul PCR反應，其含有25 pmol Hindlll-Sall-BpEI-Fc-F、BamHI-接頭-Fc-R和範本pSYN-Fc-001 : 95 °C 2 分鐘；30 個迴圈（95°C 30 秒，54°C 30 秒， 72 °C 1 分鐘）。用凝膠回收試劑盒（Qiagen, Valencia, Calif.) 凝膠純化預期大小的條帶（~700 bp)，並將其克隆到 pBUDCE4 (Invitrogen，Carlsbad，Calif.)的 Hindlll 和 BamHI 限制性酶切位點以產生中間體pSYN-FVII-007。弓丨物 HindIII-SalI-BpEI-Fc-F 和 BamHI-接頭-Fc-R 擴增起始於氨基酸221 (EU編號）的Fc區，並增加緊挨著Fc區上游位點的 Hindlll和Sail限制性內切酶位元點，及編碼（00003)4)1接頭的DNA片段，後面是緊挨著Fc編碼區下游的BamHI位元點。然後，使用與上面相同的迴圈進行50 ul反應，其含有 2 5 pmol BclI-Fc-F、scFc-EcoRI-R和範本 pSYN-Fc-011。如同上述凝膠純化預期大小的條帶（〜700 bp)，用限制性內切 -114- 201217526 酶BamHI和EcoRI切割，並克隆到pSYN-FVII-007的 8〇11/£(：〇111位點中以產生中間質粒？8丫心？¥11-008。引物對 BclI-Fc-F和scFc-EcoRI-R擴展Fc區，同時增加分別緊挨著 Fc編碼區的上游和下游的Bell和EcoRI限制性酶切位點。爲了產生最後的中間質粒，使用以下迴圏進行50 ul PCR反應，其含有 25 pmol HindIII-Kozak-FVII-F、FVII-HC-

BspEI-R和範本 pSYN-FVII-00 1 : 95°C 2分鐘；30個迴圈

(95°C 30秒，55°C 30秒，72°C 90秒）。引物對擴增FVII編碼區，同時增加位於編碼（GGGGS)6x#肽接頭的分子3’端的 DNA片段，所述多肽接頭後面是終止於氨基酸221(EU編號 )的Fc區片段。引物HindIII-Kozak-FVII-F產生位於分子5’ 端的Hindlll限制性酶切位點，所述分子後面是緊挨著FVII 編碼區上游的Kozak序列。FVII-HC-BspEI-R引物引入編碼多肽接頭的DNA和Fc的部分。如同上述凝膠純化預期大小的條帶（〜1 500 bp)，並將其克隆到pSYN-FVII-008的 Hindlll/BspEI位點以產生pSYN-FVII-011。然後，合成兩個DNA片段，Genescript-FVII-027-l和 Genscript-FVII-026-2。Genescript-FVII-027-l 由編碼 Fc 區的部分（起始於核苷酸1 3 06，EU編號）的DNA片段組成，所述Fc區的部分後面是序列RRRRS-(GGGGS)6x-RKRRKR及 MB 9 scFv的部分（殘基1-142)。使用遺傳密碼的簡並性將 EcoRI位點引入MB 9的編碼序列中以保持合適的氨基酸序列並與Genescript-FVII-027-l的最後6個城基重疊。此外，位於5’端的前6個城基包括發現于Fc區內的SapI位點。 -115- 201217526

Genscript-FVII-026-2由編碼 MB9的部分（殘基 143-273)的 DNA片段組成，所述MB9的部分後面是（GGGGS)6x多肽接頭及Fc區和EcoRI位點。使用遺傳密碼的簡並性將EcoRI位點引入MB9的編碼序列中以保持合適的氨基酸序列並與 Genescript-FVII-026-2 的前 6 個域基重疊。將 Genescript-FVII-027-l克隆到 pSYN-FVII-011的 SapI 和 EcoRI位點以產生 pSYN-FVII-03 6。然後，將 Genscript-FVII-026-2 克隆到 pSYN-FVII-036 的 EcoRI 位點以產生 pSYN-FVII-027。限制性內切酶分析和D N A測序證實了最後的克隆步驟的正確方向。實例2.在第二Fc鏈的羧基端包含FVII-Fc、MB9-FC和MB9 的異源二聚體構建體 FVII-037的克隆使用加工期間不裂開的scFc支架形成FVII-03 7構建體。在這個構建體中，靶向部分，相對於結合GPIIb II la的 MB9 scFv連接到第二Fc部分的C-末端。 DNA片段Genscript-FVII-03 7的合成是外包的 (Genscript)。這個片段包含Fc區的部分（殘基434至447， EU編號），其後面是（GGGGS)4x多肽接頭和MB9 scFv。將 Genscript-FVII-037的 SapI/EcoRI片段亞克隆到 pSYN-FVII-011(指P08 3 0)的SapI/EcoRI以產生中間構建體。將來自 pSYN-FVII-011的SapI片段亞克隆到中間構建體的SapI位點以產生 pSYNFVII-03 7。 -116- 201217526 實例3_包含FVII-Fc和在第二Fc鏈的C末端相對GPIb的肽的異源二聚體構建體 pSYN-FVII-041中間構建體的克隆爲了製備這種構建體，首先將FVII-041構建體製備爲中間體。DNA分子Genscript-FVII-041的合成是外包的 (Genscript)。用SapI消解這個片段並將其克隆pSYN-FVII-φ 011的SapI位點以產生PSYN-FVII-041。這個過程在第二Fc 引入唯一的Sail位點（殘基412-413 EU編號，GTG GAC至 GTC GAC)。 pSYN-FVII-044-、-045 和-046 的克隆將FVII-041構建體用作原材料以產生幾種包含靶向部分的構建體，所述靶向部分是與GPIb結合的狀。在-〇44構建體中使用PS4肽，-045構建體中使用0S1肽，-046構建體 φ 中使用0S2肽。在這些構建體中使用scFc支架且肽通過接頭與第二Fc部分的C-末端連接。

Genscript-FVII-044、-045 和-046 的合成是外包的 (Genscript)。這些DNA片段被Sall/EcoRI切割並亞克隆到 pSYN-FVII-041 的 Sall/EcoRI位點以產生 pSYN-FVII-044、- 0 4 5 和-0 4 6。實例4.包含FVII-Fc和在第二Fc鏈的C末端相對GPIb的肽的異源二聚體構建體 -117- 201217526 pSYN-FVII-043中間體的克隆爲了製備這種構建體’首先將FVII-043結構製備爲中間體。DNA片段Genscript-FVII-043的合成是外包的 (Genscript)。這個片段包含編碼Fc區的部分（殘基232至 447，EU編號）的DNA分子，所述Fc區的部分的後面是 (GGGGS)4x多肽接頭和另一個Fc區的部分（殘基221至238, EU編號）。用BspEI和RsrII消解這個DNA片段並將其亞克隆到 pS YN-FVII-042 的 BspEI/RsrII位點以產生 pS YN-FVII-050 。這個過程在第一 Fc中引入唯一的Sail位點（殘基412-413 EU 編號，GTG GAC 至 GTC GAC)。將 p S Y N F V11 - 0 5 0 的 Hindlll/EcoRI 片段亞克隆到 pSYN-FVII-011 的 Hindlll/EcoRI位點以產生 pSYN-FVII-043。 pSYN-FVII-047、-048 和-049 的克隆將F VI1-04 3構建體用作原材料以產生幾種包含靶向部分的構建體，所述靶向部分是與GPIb結合的肽。在-047構建體中使用PS4肽，-(M8構建體中使用OS1肽，-049構建體中使用OS2肽。在這些構建體中使用scFc支架且將肽插入 scFc接頭和與第二Fc部分的N-末端連接的接頭之間。 DNA分子 Genscript-FVII-047、-048 和- 049的合成是外包的（Genscript)。將來自 Genscript-FVII-047、-048 和-049 的 Sal/RsrII片段亞克隆到 pSYN-FVII-043 的 Sall/RsrII位點以分別產生pSYN-FVII-047、-0458和-049。 -118- 201217526 實例5.包含缺失Gla的FVII-Fc和靶向分子異源二聚體構建體 FVII-028中間體的克隆爲了製備這種構建體，首先將FVII-028構建體製備爲中間體。DNA片段Genscript-FVII-028的合成是外包的 (Genscript)。用Hindlll/Xbal切割這個片段並將其亞克隆至Ij pSYN-FVII-0 1 1以產生 pSYN-FVII-028。 FVII-05 3的克隆將F VII-02 8構建體用作原材料以產生包含靶向部分且使用缺乏GU結構域的凝血因數的構建體。對於這種構建體，將氨基酸1至35從FVII移除並在殘基R152 (WT FVII編號）後增加RKRRKR插入物以促進細胞內活化。MB9 scFv用作靶向部分。 DNA分子Genscript-FVII-025被外包並且來該分子的 φ Xbal/BsiWI 片段亞克隆到 PS YN-FVII-028 的 Xbal/BsiWI 位點以產生 pSYN-FVII-053。實例6.包含作爲兩個單獨的多肽的因數VII重鏈和輕鏈的 •異源二聚體構建體 pSYN-FVII-024中間構建體的克隆在FVII-024構建體中，因數FVII的重鏈和輕鏈在單鏈分子中是不鄰接的。該構建體使用cscFc以使cscFc接頭在轉運高爾基體網狀物中被蛋白酶切割。這種切割導致接頭 -119- 201217526 去除及FVII活化，產生啓動的FVIIaFc的表達。使用以下引物通過與聚合酶鏈反應結合的逆轉錄作用從人類肝臟mRNA庫獲得FVII的編碼序列： FVII-F1

GGGAATGTCAACAGGCAGGG FVII-R1

CTTGGCTTTCTCTCCACAGGC 根據製備商的標準實驗使用Superscript—步RT-PCR和 Platinum Taq 系統（Invitrogen，Carlsbad, Calif.)在 MJ 溫度迴圏器中進行含有10 pmol每種引物的50 μΐ反應。使用的迴圈爲50°C逆轉錄30分鐘，然後94°C變性2分鐘，及30個迴圈（94°C 30秒，53°C 30秒，72°C 90秒），後面是 72°C 10分鐘。使用凝膠回收試劑盒（Qiagen，Valencia, Calif.)凝膠純化預期大小的條帶（〜1 400 bp)並使用ΤΟΡΟ ΤΑ克隆試劑盒 (Invitrogen，Carlsbad, Calif.)將其克隆到 pCR2.1 ΤΟΡΟ中以產生中間質粒pSYN-FVII-001。爲了構建表達雙鏈FVII-Fc和Fc異源二聚體的質粒，使用以下引物將FVII編碼序列 PCR擴增：

HindIII-Kozak-FVII-F

CGACAAGCTTGCCGCCACCATGGTCTCCCAGGCCCTCAGG

Bspel-Fc-FVII-R

CGACTCCGGAGCTGGGCACGGTGGGCATGTGTGAGTTTTGTCGGGAAA

TGGGGCTCGCAGG 正向引物 HindIII-Kozak-FVII-F增加了 Hindlll限制性 -120 - 201217526 酶切位點，其後面是緊挨著FVII編碼區上游的Kozak序列

。反向引物Bspel-Fc-FVII-R增加了 IgGl (Fc區）恒定區的片段’所述IgGl包含氨基酸221至233 (EU編號）。這個過程還利用遺傳密碼的簡並性併入了位於氨基酸231至23 3的 BspEI限制性酶切位點以保持正確的氨基酸序列（EU編號）。根據製備商的實驗使用Platinum Pfx DNA聚合酶系統在溫度迴圈器中使用以下迴圈進行含有15 pmol每種引物和範本pSYN-FVII-001的50 ul反應：95°C 2分子；30個迴圈（95°C 15 秒，49°C 30 秒，68°C 90 秒）；68°C 10 分鐘。用 Hindlll 和 BspEI消解質粒 pSYN-FIX-027 (pBUD FIXFc/Fc) 並用凝膠提前試劑盒（Qiagen, Valencia, Calif.)純化遠離 FIX插入物（預期大小的條帶大約1 480 bp)的用於載體的預期大小的條帶（大約5800 bp)。然後，在移除FIX插入物後將PCR-擴增的FVII序列亞克隆到源自於pSYN-FIX-027 的載體的Hindlll和EcoRI位點。這產生pSYN-FVII-002 (pBUD FVIIFc/Fc)。接下來，使用以下弓|物將(GGGGS)6x 多肽接頭添加到pSYN-FVII-002中FVII和Fc區編碼序列之間： FVII-接頭-F: CATCCCCAGCACGTACGTCC FVII-接頭-R:

GGGCATGTGTGAGTTTTGTCTGATCCCCCGCCACCGGAACCTCCACCG

CCTGATCCACCCCCACCTGATCCGCCGCCACCGGACCCACCTCCGCCG

GAGCCACCGCCACCGGGAAATGGGGCTCGCAGGAGG -121 - 201217526

Fc-接頭-F: GACAAAACTCACACATGCCCACC Fc-接頭-R:

GCAGAATTCTCATTTACCCGGAG 根據製備商的標準實驗使用展開高保真系統 (Boehringer Mannheim, Indianapolis, Ind_)在 MJ溫度迴圈器中進行兩個12 μΐ PCR反應，其含有12 pmol FVII-接頭-F和FVII-接頭-R (反應1)或Fc-接頭-F和Fc-接頭-R (反應2) 。使用以下迴圈用1 pg pSYN-FVII-002作爲範本進行第一和第二反應：94°C 2分鐘；14個迴圏（94°C 30秒，55°C 30 秒，72 °C 2分鐘）；721： 10分鐘。用凝膠回收試劑盒 (Qiagen，Valencia, Calif.)凝膠純化預期大小的條帶（反應1 爲5 3 2 bp，反應2爲670 bp)，然後將其在PCR反應中與如前所述之25 pmol FVII -接頭-F和Fc -接頭-R結合，但擴增 30個迴圈。用凝膠回收試劑盒（Qiagen，Valencia，Calif.)凝膠純化預期大小的條帶（ 1 200 bp)並用限制性內切酶ΚρηΙ和 EcoRI消解。如前所述將預期大小的條帶（920 bp)凝膠純化並將其克隆到pSYN-FVII-002的KpnI/EcoRI位點以產生 pSYN-FVII-003 (pBUD FVIIFc/6x(GGGG S)/Fc) 〇 pSYN-FVII-024的克隆以表達雙鏈異源二聚體生成表達雙鏈異源二聚體的質粒（pSYN-FVII-024)，所述二聚體中一條鏈由後面是（GGGGS)6x接頭和Fc區的 FVII輕鏈（殘基1-152)組成，而另一條鏈由後面是 -122- 201217526 (GGGGS)6x接頭和Fc區的FVII重鏈（殘基1 53至406)組成。將質粒設計爲表達異源二聚體的單一的多肽，其中FVII重鏈-接頭-Fc鏈的C末端通過以下多肽序列與重鏈-接頭-Fc鏈的 N 末端相連接：RRRRS-(GGGGS)6x-RKRRKR，其中 RRRRS和RKRRKR序歹IJ是前蛋白轉化酶切割位點。在每個切割位點最後的精氨酸後面的前蛋白轉化酶的胞內切割可引起多肽接頭的去除。因此，細胞內將表達雙鏈異源二聚 φ 體，其中FVII輕鏈-接頭-Fc鏈的C末端具有RRRRS序列，但接頭的其餘部分RKRRKR序列被去除。構建pSYN-FVII-0 2 4和幾種中間質粒需要使用以下引物：

HindIII-SalI-BpEI-Fc-F

AGTCAAGCTTGTCGACTCCGGAACTCCTGGGCGGACC BamHI-接頭(PACEl)-Fc-R

CATCGGATCCCCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCCCAC CTGATCCGCCGCCACCGCTCCGGCGGCGCCGTTTACCCGGAGACAGGG • AGAGG

Hindlll-Kozak-FVII-F

CGACAAGCTTGCCGCCACCATGGTCTCCCAGGCCCTCAGG BspEI-Fc-接頭-FVIILC-R

GAGTTCCGGAGCTGGGCACGGTGGGCATGTGTGAGTTTTGTCTGATCC

CCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCCCACCTGATCCGCC

GCCACCGGACCCACCTCCGCCGGAGCCACCGCCACCTCGGCCTTGGGG

TTTGCTGG

BamHI-2xlink 間隔-HC-F -123- 201217526

CAGTCTGGATCCGGCGGTGGAGGTTCCGGTGGGGGTGGATCAAGGAA

GAGGAGGAAGAGGATTGTGGGGGGCAAGGTGTGCC

Fc-EcoRI-R

ATGTCTGAATTCTCATTTACCCGGAGACAGGGAGAGG 爲了產生第一中間質粒，根據製備商的標準實驗使用展開高保真系.統(Boehringer Mannheim, Indianapolis, Ind.)在MJ溫度迴圈器中進行PCR反應，其含有25 pmol引物 HindIII-SalI-BpEI-Fc-F和 BamHI-接頭（PACEl)-Fc-R及範本pSYN-Fc-001。使用以下迴圈：95°C 2分鐘；30個迴圈 (95°C 30秒，58°C 30秒，72°C 1分鐘）；72°C 1〇分鐘。如上所述凝膠純化合適大小的條帶（大約730 bp)並將其克隆到 PBUDCE4 載體（Invitrogen， Carlsbad, Calif.)的 Hindlll/BamHI位點，產生 pSYN-FVII-014。引物 Hindlll-Sall-BpEI-Fc-F 和 BamHI-接頭（PACEl)-Fc-R 的 PCR擴增產生編碼Fc區的部分（氨基AX-Y)的DNA片段，所述Fc區的部分後面是RRRRS序列和（GGGGS)2x#肽接頭。引物Hindlll-3&11-8?£1-?〇4引入位於分子5’端的旧11(1111和3311限制性酶切位點，而引物BamHI-接頭（PACEl)-Fc-R引入位於3’端的 BamHI，其與編碼GGGGS接頭最後兩個殘基（密碼子爲GGA TCC的殘基GS)的密碼子重疊。然後，使用pSYN-FVII-014 的克隆中描述的相同條件’如上所述進行另一個PCR反應，其含有引物 HindIII-Kozak-FVII-F 和 BspEI-Fc-接頭-FVIILC-R及範本pSYN-FVII-002，但退火溫度爲57°C。凝膠純化預期大小的條帶（大約700 bp)並將其克隆到pSYN- -124- 201217526 戸¥11-0 14的則!1(1111和83?£1位點以產生？3丫1^邛¥11-023。引物 HindIII-Kozak-FVII-F和 BspEI-Fc-接頭- FVIILC-R擴增編碼FVII輕鏈的DNA片段，所述FVII輕鏈後面是GGGGS)6x多肽接頭和直到氨基酸23 2(EU編號）的Fc區的部分。引物 HindIII-Kozak-FVII-F引入位於分子5’端後面是Kozak序列的Hindlll限制性酶切位點，而引物BspEI-Fc-接頭-FVIILC-R增加位於分子3’端的Bspel位點。

在最後一步中，使用以下迴圈如上所述進行PCR反應，其含有弓丨物BamHI-2xlink間隔-HC-F和Fc-EcoRI-R及範本 pS YN-FVII-003 : 9 5 °C 2 分鐘；3 0 個迴圈（95°C 30 秒， 55°C 30秒，72°C 2分鐘）；72 °C 7分鐘。這個PCR反應產生編碼（GGGGS)2x多肽接頭的DNA分子，所述多肽接頭後面是RKRRKR序列和FVII重鏈。弓丨物BamHI-2xlink間隔-HC-F 和Fc-EcoRI-R分別引入位於分子5’端和3’端的BamHI位點和EcoRI位點。將預期大小的條帶（大約1 600 bp)克隆到 pSYN-FVII-023 的 BamHI和EcoR位點以產生pSYN-FVII-024 中間體pSYN-FVII-073的克隆通過基於PCR的定向位點的誘變方法，將沉默的突變體引入FVII-024的第一Fc部分，產生位於編碼氨基酸412 和413(EU編號）的DNA區的Sail位點。其產生中間構建體 FVII-073 » -125- 201217526 pS YN-FVII-057的克隆包含來自？3丫1^邛¥11-05 7的8&11至88丨评1位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pSYN-FVII-073 的 Sall/BsiWI位點以產生pSYN-FVII-057。 pS YN-F VII-05 8 、 p S Y N - F V11 - 0 5 9 、 p S Y N - F V11 - 0 6 0 、 pSYN-FVII-06 1 和 pSYN-FVII-062的克隆如pSYN-FVII-057中所述之克隆這些構建體（來自Sail 至BsiWI的DNA的外包合成並亞克隆到pSYN-FVII-073 )。 pS YN-FVII-066的克隆包含來自pSYN-FVII-066的Sail至RsrII位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pSYN-F VII-043 的 Sal Ι/RsrII位點以產生 pS YN-FVII-066。 pS YN-FVII-067的克隆包含來自pSYN-FVII-067的Sail至EcoRI位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pSYN-FVII-041 的 Sall/EcoRI位點以產生 pSYN-FVII-067。 pSYN-FVII-090的克隆包含來自？3丫1^邛¥11-09 0的83111111至88丨\¥1位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。通過3種方法連接（其中 BamHI/BsiWI 將外包的 DNA 切割且 BamHI/BsiWI/Notl 將 -126- 201217526 pSYN-FVII-061 切割）將這個 DNA亞克隆到 pSYN-FVII-061 以產生 pSYN-FVII-090。 pS YN-FVII-1 00的克隆用胰蛋白酶的170環（氨基酸EASYPGK)取代FVII的 170環的部分（F VII成熟序列的氨基酸311至322)。通過標準重疊PCR方法使用pSYN-FVII-090作爲範本及主鏈結 φ 構引入這種突變體以產生pSYN-FVII-1 00。 pSYN-FVII-1 1 5的克隆通過基於PCR的定向位點誘變將三點突變體（Vi58D、 E2 96V 和 M2 98Q ;成熟 FVII序列編號）引入 pSYN-FVII-090 的FVII編碼區以產生pSYN-FVII-115。 pS ΥΝ-FVII-1 1 8的克隆 • 包含來自pSYN-FVII-118的Xbal至BsiWI位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pSYN-FVII-011 的 Xbal/BsiWI位點以產生 pSYN-FVII-118。 pS ΥΝ-FVII-1 1 9的克隆包含來自pSYN-FVII-119的Xbal至BsiWI位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pSYN-FVII-011 的 XbaI/BsiWI位點以產生pSYN-FVΠ-119。 -127- 201217526 pSYN-FVII-127的克隆通過PCR使用？3丫^?¥11-1〇〇作爲範本產生包含胰蛋白酶的170環的DNA片段。這個PCR反應產生分別位於5’和 3’端的BsiWI和BspEI限制性酶切位點。將這個DNA亞克隆到 pSYN-FVII-118 的 BsiWI/BspEI位點以產生 pSYN-FVII-127 °

pSYN-FIX-042的克隆將來自 pSYN-FIX-030 (如 US Patent 7566565 中所述）的 Hindlll/BspEI 片段亞克隆到 pSYN-FVII-011 的 Hindlll/BspEI位點以產生 pSYN-FIX-042。 pSYN-FIX-068 的克隆

將來自pSYN-FIX-030(US7566565中詳細描述的質粒）的 Hindlll/BspEI 片段亞克隆到 pSYN-FVII-066 的 1^11(1111/88?£1位點以產生？3丫]^-?1乂-068。 pSYN-FIX-08 8 的克隆將來自pSYN-FIX-06 7的BspEI-EcoRI片段亞克隆到 pSYN-FIX-053 的 BspEI-EcoRI位點以產生pSYN-FIX-088 » pSYN-FIX-089的克隆將來自pSYN-FIX-048的BspEI-EcoRI片段亞克隆到 pSYN-FIX-053 的 BspEI-EcoRI位點以產生pSYN-FIX-089。 -128- 201217526 pS YN-FIX-090的克隆包含FIX編碼區、SCE5編碼序列和EcoRI位元點的 DNA片段是外包合成的，並將其亞克隆到pSYN-FIX-05 3的 Xbal/EcoRI位點以產生pSYN-FIX-090，所述FIX編碼區爲蛋白的Xbal位點至C末端且後面是6x(GGGGGS)接頭。 SCE5序列如下所列：

AQVQLQESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFMFSRYAMSWVRQAPGKGPEW

VSGISGSGGSTYYADSVKGRFTVSRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC

ARGATYTSRSDVPDQTSFDYWGQGTLVTVSSGSASAPKLEEGEFSEARVS

ELTQDPAVSVALGQTVRITCQGDSLRNFYASWYQQKPGQAPTLVIYGLS

KRPSGIPDRFSASSSGNTASLTITGAQAEDEADYYCLLYYGGGQQGVFGG

GTKLTVLRQPKAAPSVTLFPPSSAA pSYN-FVII-094的克隆 φ 包含編碼6x(GGGGS)接頭的序列的DNA片段是合成的 (外包的），並將其克隆到預先修飾的pSYN-FVII-01 1變體的EcoRV/EcoRI位點以產生位於FVII編碼區C末端的 EcoRV位點，所述接頭後面是SCE5編碼序列。 pSYN-FVir-08 8 的克隆包含來自pSYN-FVII-08 8的Sail至RsrII位點的核苷酸的DNA序列的合成是外包的。將這個DNA亞克隆到pS YN-FVII-066 的 Sall/RsrII位點以產生 pSYN-FVII-08 8。 -129- 201217526 pSYN-FVII-125的克隆 DNA片段是由pSYN-FVII-08 8 PCR擴增的，其包含 AP3區和接頭的部分。這個PCR反應產生分別位於DNA片段的5’和3’端的BamHI和EcoRI位點。將這個DNA片段亞克隆到 pSYN-FVII-011 的 BamHI/EcoRI 位點以產生 pSYN-FVII-125。 pS YN-FVIII-041 的克隆通過逆轉錄-聚合酶鏈反應（RT-PCR)使用FVIII特異性引物從人體肝臟多聚腺苷酸RNA (Clontech)獲得人重組體B-結構域缺失的FVIII的編碼序列。FVIII序列包括FVIII 的原生信號序列。B-結構域缺失起始於絲氨酸743 (S743 ; 22 8 7 bp)之後，並終止於谷氨酸1 6 3 8 (Q 1 63 8; 4969 bp)之前，總共缺失2682 bp (SQ型）。通過RT-PCR使用Fc特異性引物從人類白細胞cDNA 文庫（Clontech)獲得人類重組Fc的編碼序列。設計引物以使B-結構域缺失的FVIII序列與Fc序列的N末端直接融合，不需要中間的接頭。在CMV啓動子的調控下將FVIIIFc DNA序列克隆到哺乳動物雙表達載體pBUDCE4.1中。通過RT-PCR獲得包括小鼠Igk信號序列的第二個相同的Fc序列，並將其克隆到表達載體pBUDCE4.l中第二個啓動子EFlcx的下游。這個最終構建體稱作pSYN-FVIII-013 -130- 201217526 使用PCR和標準分子生物學技術從相似構建體中產生第二個質粒，以表達 rFVIIIBDD-Fc-Fc，其中 rFVIIIBDDFc 編碼序列與具有（GGGGS)4接頭的第二Fc序列相融合，在暫態轉染中只產生rFVIIIBDD-Fc單體-二聚體雜交體。這個構建體稱作pSYN-FVIII-041。 pSYN-FVIII-049的克隆

通過將Nhel/Xhol片段從pBUD-CE4.1克隆到pSYN-FVIII-013產生中間體 pSYN-FVIII-048。包含 pSYN-FVIII-049的RsrII至Xbal位元點的區域的DNA片段的合成是外包的。將這個片段亞克隆到pSYN-FVII-048的RsrII/Xbal位點以產生 pSYN-FVII-049。 pSYN-FVIII-108的克隆將來自pSYN-FVII-066的Sall/RsrII片段亞克隆到 • pSYN-FVIII-049以產生 pSYN-FVIII-1 08。實例7.活化的構建體表達的其他嘗試根據表達啓動的FVII的目標製備幾種其他構建體。然而，這些構建體沒有成功地表達啓動的分子。通過蛋白質印跡表面，使用將異源信號肽融合到重鏈N末端的一般方法，FVII重鏈不能被游離的N末端表達。 pSYN-FVII-0 1 0的克隆 131 201217526 在FVII-010構建體中，因數VII的重鏈在scFc支架的範圍內表達且輕鏈分開表達。使用pSYN-FVII-001(參見上文），用引物對FVII-HC-Hind3-IggKss-F/FVII-HC-BspEI-R 進行 PCR 擴增。在 pSYN-FVII-008(參見上文）的BspEI/Hindlll位點克隆，產生 pSYN-FVII-009。使用引物 FVII-LC-Notl-F/FVII-LC-XhoI-R 由 pSYN-FVII-003 (指 P0830)PCR 擴增 FVII 輕鏈並在 pS YN-FVII-009 克隆以產生 pSYN-FVII-010 ° 引物

FVII-HC-BspEI-R

AGGAGTTCCGGAGCTGGGCACGGTGGGCATGTGTGAGTTTTGTCGGAT

CCCCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCCCACCTGATCCG

CCGCCACCGGACCCACCTCCGCCGGAGCCACCGCCACCGGGAAATGG

GGCTCGCAGGAGG FVII-HC-Hind3-IggKss-f

ACTGACAAGCTTGCCGCCACCATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGG

GTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGTTCCACTGGTATTGTGGGGGGCAAG

GTGTGC

FVII-LC-Notl-F

ACTGACGCGGCCGCGCCGCCACCATGGTCTCCCAGG

FVII-LC-XhoI-R

ACTGACCTCGAGTTATCGGCCTTGGGGTTTGCTGG -132- 201217526 pSYN-FVII-0 1 3 的克隆在FVII-013構建體中，輕鏈在scFc支架的範圍內表達且重鏈分開表達。使用引物對 FVII-LC-接頭-BamHI-R/HindIII-Kozak-FVII-F 由 pSYN-FVII-001 (指 P0830)PCR 擴增並在^丫心 FVII-011 的 BamHI/Hindlll位點克隆，產生 PSYN-FVII-012

。使用引物對 FVII-HC-Notl-F/FVII-HC-XhoI-R 由 pSYN-FVII-009 PCR 擴增 FVII-HC 並在 pSYN-FVII-012亞克隆以產生 pSYN-FVII-0 1 3。引物 FVII-LC-6X 接頭-BamHI-

RACTGACGGATCCCCCGCCACCGGAACCTCCACCGCCTGATCCACCCC

CACCTGATCCGCCGCCACCGGACCCACCTCCGCCGGAGCCACCGCCAC

CTCGGCCTTGGGGTTTGCTGGC

HindIII-Kozak-FVII-F

CGACAAGCTTGCCGCCACCATGGTCTCCCAGGCCCTCAGG

FVII-HC-Notl-F

ACTGACGCGGCCGCGCCGCCACCATGGAGACAGAC

FVII-HC-XhoI-R

ACTGACCTCGAGTTAGGGAAATGGGGCTCGCAGGAG pSYN-FVII-018的克隆 -133- 201217526 對於FVII-018構建體，FVII的重鏈表達爲Fc融合蛋白，且FVII的輕鏈分開表達爲不同的Fc融合蛋白。使用pSYN-FVII-010作爲範本，用弓丨物FVII-HC-Hind3-IggKss-F/scFc-EcoRI-R PCR 擴增 HCFVII-接頭- Fc。在 PBUDCE4 的 Hindlll/EcoRI 位點亞克隆，產生 pSYN-FVII-017。然後，用引物 FVII-LC-Notl-F/FC-XHOI-R 由 pSYN-FVII-013 PCR擴增並在FVII-017的Xhol/Notl位點亞克隆，產生 PS YN-FVII-0 1 8。引物

scFc-EcoRI-R

ACTGACGAATTCTCATTTACCCGGAGACAGGGAG

Fc-Xhol-R

AGCTCTCGAGTCATTTACCCGGAGACAGGG 實例8.可啓動的構建體表達的嘗試 FVII-039、-040的克隆嘗試製備幾種構建體以產生構建體，其中使用合適的切割位點因數VII可在凝血位點體內啓動，這種情況下所述切割位元點爲DFTR因數XIa切割位點。在scFc支架範圍內製備〇39構建體。該構建體包括 F V11輕鏈、F XI a切割位元點和線性序列中具有11 5 3 V突變體的FVII重鏈，所述線性序列與第—Fc部分的N末端相連接。 -134- 201217526 在scFc支架範圍內也製備了 040構建體。該構建體包括缺失R1 52的FVII輕鏈、FXIa切割位元點和線性序列中具有I153V突變體的FVII重鏈，所述線性序列與第一 Fc部分的N末端相連接。DFTR切割序列是FIX中發現的天然的 FXIa序列。在FIX中，DFTR序列後面是纈氨酸，所以 I152V突變體被引入pSYN-FVII-039、-040以增加FXIa切割效率。

DNA分子Genscript-FVII-039和-040的合成是外包的 (Genscript)。將來自 Genscript-FVII-039 和-040 的

Xbal/BsiWI 片段亞克隆到 pSYN-FVII-011 的 Xbal/BsiWI 位點以分別產生pSYN-FVII-03 9和-040。實例9.構建體的暫態轉染爲了表達構建體，在37°C/l〇% C02THEK-293 -F細胞在Freestyle培養基（Invitrogen)的懸浮液中生長，所述 φ Freestyle培養基增補維生素K3 (只用於FVII和FIX轉染） (Sigma Aldrich, St. Louis, MO)至 2 pg/l (生長培養基）作爲懸浮液細胞。通過細胞密度爲5x1 05細胞/ml時接種每3至4 天傳代培養細胞。在轉染前24個小時，在增補LONGTMR3IGF-l (Sigma Aldrich, St. Louis，MO)至20 pg/l (轉染培養基）的生長培養基中在密度爲7x1 05細胞/ml時接種細胞。在轉染當天，製成的轉染溶液的體積等於5%的將被轉染的細胞培養的總體積。在轉染溶液中，將DNA (終濃度20 mg/L )添加到 -135- 201217526 轉染培養基中新製成的PEI溶液（60 mg/L)。該溶液渦旋秒並室溫下培養5分鐘，然後只能直接添加到細胞培養物中。4小時後體積等於增補維生素K3的OptiCHO (Invitrogen)細胞培養物體積，將 LONGTMR3IGF-l 和 200 mM L-穀氨醯胺添加到細胞中。細胞培養物如上所示的成長並每日培養基樣本取樣評估蛋白表達。在收穫當天，使細胞旋轉減慢並將培養基在製劑中過濾，所述製劑通過蛋白質A下拉/蛋白質印跡用於蛋白質純化或蛋白質分析。實例10. FVIIFc分子（除了 FVII-028和FVII-053)的蛋白純化使用以下色譜柱的組合從條件培養液中純化FVIIFc分子：1)具有假親和洗脫的陰離子交換色譜（例如，Q瓊脂糖4FF (GE Healthcare)，其後面是不同水準的CaCl2洗脫以選擇性洗脫活性最大的種類），2) shFcRn (可溶性人類 FcRn)親和（具有瓊脂糖4FF小珠的NHS-偶聯的shFcRn)色譜，低pH (例如，pH 6.2)時結合含有蛋白質的Fc且中性pH (例如，pH 8.0)時洗脫，3)疏水作用色譜（例如，苯基FF (high sub) (GE Healthcare))及4)具有鹽洗脫的陰離子/陽離子交換色譜。這些純化步驟使用本領域技術人員已知的標準方法以產生通過SEC分析及SDS-PAGE的純度>95%的純化的蛋白質。實例13. FIXFc蛋白質的純化如前美國專利7,5 66,5 65中所述純化FIXFc蛋白質。 -136- 201217526 實例14. FIX-090的純化通過兩步色譜過程純化FIX-090，首先使用具有抗 GLA結構域抗體的免疫親和層析步驟，後面是使用與上述 FIXFc蛋白質相似的假親和洗脫的陰離子交換色譜。這些純化步驟使用本領域技術人員已知的標準方法以產生通過 SEC分析及SDS-P AGE的純度>95 %的純化的蛋白質。實例15. FVIIIFc蛋白質的純化使用兩個或三個柱純化過程，從淨化的和化學確定的收穫培養基中純化FVIIIFc蛋白質，包括FVIII-特異性親和純化步驟（McCue 2009)及陰離子交換與標準NaCl洗脫和/ 或shFcRn (可溶性人類FcRn)親和（具有瓊脂糖4FF小珠的 NHS-偶聯的shFcRn) 色譜，低pH (例如，pH 6.2)時結合含有蛋白質的Fc且中性pH (例如，pH 8.0)時洗脫》這些純 φ 化步驟使用本領域技術人員已知的標準方法以產生通過 SEC分析及SDS-PAGE的純度>95%的純化的蛋白質。實例16. FVII構建體的啓動收集由含有FVIIFc的FcRn色譜柱洗脫的片段，且總蛋白濃度爲4 mg/ml。將CaC12濃度提高到5 mM ’且在4°C下培養樣品24至48小時知道至少80%的FVIIFc被啓動。通過SDS PAGE評估啓動的程度。（圖1〇) -137- 201217526 實例17. FVIIa活性測定，可溶性組織因數法通過可溶性組織因數法測定FVIIaFc變體的特異性活性。不同于脂化的全長組織因數，可溶性組織因數（組織因數的胞外部分）不能將FVII啓動爲FVIIa，但其可作爲因數X通過FVIIa轉化爲因數Xa的啓動劑。爲了測定FVIIaFc 變體的特異性活性，按照製備商的建議使用STACLOT® FVII-rTF試劑盒(Diagnostica Stago, Asnieres, France)。表1.基於可溶性組織因數法的FVIIaFc變體的特異性活性 FVIIaFc IU/nM FVII-011 991 FVII-024 929 FVII-027 790 FVII-037 1131 FVII-044 1300 FVII-045 906 FVII-046 1145 FVII-047 924 FVII-048 973 FVII-049 1130 FVII-053 929 實例1 8. FAC試驗硏究FVIIaFc與血小板的結合在這個實例中，使用以下試劑和方法：試劑

ADP·· Sigma Aldrich，cat# A2754，儲備濃度！ mM，工作濃度1〇 uM SFLLRN肽：內部合成，儲備濃度5 mg/ml (6.7 mM) -138- 201217526 ，工作濃度 50 ug/ml (67 uM) FITC標記的FVII抗體：親和生物製品saFVII-APFTC 血小板緩衝液：15 mM HEPES、138 mM NaCl、2.7 mM KC1、1 mM MgCl2、5 mM CaCl2、5.5 mM 葡萄糖和 mg/ml B S A，pH 7.4 方法計數血小板將20 ul 2-4x1 08細胞/ml凝膠純化的血小板添加到1 ml 血小板緩衝液中 . 使每個樣品100 ul等分添加所需的激動劑和FVIIaFc (至所需濃度）37C下培養15分鐘添加等體積的HBS/5 mM CaCl2/1.5%甲醛，室溫下培養20分鐘 15’在3000g下旋轉15分鐘 HBS/5mM CaCl2/l mg/ml BSA中清洗，再次旋轉並在 1 0 0 u 1血小板緩衝液中重懸浮添加2.5 ul FITC標記的FVII抗體並在室溫下培養3〇分鐘用FAC分析實例19.凝血酶生成試驗在這個實例中’使用以下試劑和方法： -139- 201217526 試劑 F V: HTI，cat#HC V-0 1 00，lot#Z04 1 3 , 5 . 1 mg/ml Prothrombin: HTI, cat#HCP-00 1 0, lot# Z0128, 4.8 mg/ml FX: HTI, cat# HCX-0050, lot#X040 1, 5.4 mg/ml ATIII: HTI, cat# H C A T111 - 0 1 2 0, lot#Y040 1, 8.2 mg/ml TFPI: American Diagnostica, cat# 4900PC, lot# 0 8 1 0 3 1, 1 00 ug/ml

讀出器：Fluorskan，熱電子螢光劑凝血酶校準器：Thrombinoscope，cat# TS20.00 F1 uca: Thrombinoscope, cat# TS50.00 血小板緩衝液：15 mM羥乙基呱嗪乙磺酸pH 7.4、138 mM NaCl、2.7 mM KC1、1 mM MgCl2、5.5 mM葡萄糖，使用前增補1 mg/ml BSA

ADP: Sigma Aldrich, cat# A2754，儲備濃度 1 mM, 工作濃度 10 uM SFLLRN肽：內部合成，儲備濃度5 mg/ml (6.7 mM)，工作濃度 50 ug/ml (67 uM) -140- 201217526

初始儲備濃度（mg/ml) 工作濃度(ug/ml) 終濃度ug/ml FV 5.1 105.6 4.4 FII 4.8 1200 54 FX 5.4 120 5 ATIII 8.2 1800 75 TFPI 0.1 1.44 0.06 血小板 2-10E8 1.74E8 0.6E8 FVIIaFc 1 mg/ml (10 uM) 1200 nM 200 nM FVIIaFc 1 mg/ml (10 uM) 200 nM 62.5 nM FVIIaFc 1 mg/ml (10 uM) 62.5 nM 12.5 nM

方法 -根據製備商的建議安裝軟體 -預熱水和F1 u c a緩衝液 -製作凝血因數混合物。稀釋儲備濃度的FV、FII、FX 、ATIII和TFPI以製作工作溶液。需要5 ul/孔，爲30孔分析製備180 ul的每種混合物的所有凝血因數溶液 -預先製作FVIIaFc稀釋液。製作100 ul 1 200 nM溶液 (12 ul至88 ul緩衝液中）並稀釋兩次的4倍（25 ul至75 ul 緩衝液中）以獲得200 nM和62.5 nM溶液 -製作校準器溶液（校準器小瓶中1 ml溫水） -添加2 0 u 1緩衝液或校準液至孔中 -添加25 ul凝血因數混合物至？L中（或25 ul緩衝液至校準器孔中） -添加20 ul FVIIaFc至孔中（或緩衝液至校準器孔中） -添加35 ul血小板（預先添加ADP和SFLLRN)。添加血小板至校準器孔中。 -141 - 201217526 -將板放入儀器中，製備Fluca緩衝液並在板放如儀器5 分鐘後起始反應（添加 20 ul Fluca/孔）實例20.暫態轉染所產生的蛋白質的分析爲了分析暫態轉染的蛋白質，卩3丫心？¥11-010，011，-013, -018，-003, -0 1 9 -020和-024轉染的條件培養液經蛋白質A免疫沉澱反應。簡略地，細胞培養懸浮物與大約50 ul 蛋白質A-瓊脂糖 50%粘合液混合，並在4°C下搖動培養1小時，然後離心沉澱蛋白質A小珠。通過在1 ml PBS中重懸浮、懸浮和抽吸清洗小珠兩次。在還原或非還原條件下小珠重懸浮於十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS -PAGE) ，l〇〇°C下加熱5分鐘，旋轉減慢，並根據標準實驗加樣於SDS-PAGE凝膠並電泳。將凝膠轉移到硝酸纖維膜並進行蛋白質印跡以檢測Fc區或FVII輕鏈。爲了檢測Fc，使用的抗體爲羊抗人IgG (Fc特異性）-辣根過氧化物酶共軛物（Pierce ImmunoPure antibody, catalog #31413)° 爲了檢測FVII輕鏈，使用抗輕鏈單克隆抗體（Green Mountain, clone 6MA-219)。將所述抗體在具有5%脫脂牛奶的PBST ( 具有0.1% Tween-20的PBS)中稀釋1:1 5000倍（用於Fc檢測）或1 :200倍（用於輕鏈檢測）並在室溫下與膜培養1小時。然後在PBST中清洗膜3次10分鐘，並通過用於Fc檢測的化學發光法檢測信號。爲了檢測FVII輕鏈，將膜在含有 HRP標記的羊抗鼠抗體（Southern Biotech, # 1010-05)的溶液中再培養1小時，所述抗體在PBST中稀釋5 000倍。也在 -142- 201217526 PB ST中清洗膜3次10分鐘，並通過用於Fc檢測的化學發光法檢測信號。根據製備商的方案使用ECL和蛋白質印跡檢測系統（Amersham Biosciences catalog #RPN2132)進行化學發光檢測。在Storm 840感光成像儀（分子儀器）中使信號視覺化。如圖26所述檢測PC5對FVII-024接頭中前蛋白轉化酶切割位點的加工的作用。在非還原條件下檢測不到PC5對 φ 切割位點加工的作用因爲FVII輕鏈-Fc和FVII重鏈-Fc亞基仍然通過Fc區的二硫鍵（泳道2和3)相連接。在還原條件下我們觀察到，由不與PC5共轉染的細胞產生的FVII-024的部分加工（泳道4)，但細胞與PC5共轉染時的完全加工（泳道5)。接頭的完全加工產生啓動的FVII(FVIIa)的分泌，因爲游離的重鏈的N末端是所需的且足以啓動蛋白質。實例 21. FXIa 切割 FVII-039 和 FVII-040 φ 由於這些蛋白質中插入緊挨著FVII輕鏈上游的FXIa切割位點，FXIa啓動FVII-039和FVII-040是體外特徵的。含有 50 mM Tris-HCl 中的 15 nM FXIa、100 mM NaCl、10 mM CaCl2 的 1·5 μΜ FVII-039 ' FVII-040 或 FVII-011 (未啓動的 )的溶液，pH爲7.4 ’培養5或20分鐘，並通過還原條件下的 SDS PAGE及 SYPRO Ruby染色（Invitrogen)測定 FVIIFc的切割。如圖28所示’ FXIa不能切割FVII-039、FVII-040和未啓動的FVII-011。 143- 201217526 實例22.可選擇的可啓動的FVIIFc構建體 FXIa不能切割FVII-039和FVII-040可由空間位阻使蛋白酶不能接近切割位點引起的。爲了改善FXIa或凝血酶切割位點的可接近性，將位元點置於結構中的重鏈上游，在所述結構中重鏈的前面沒有輕鏈（輕鏈-接頭-Fc-scFc接頭-FXIa/凝血酶切割位點-重鏈-接頭-Fc)。在一些實施方案，重鏈包含II 52V突變體。一旦確定最佳切割位點，將引入 cscFc以使細胞分泌具有以下結構的異源二聚體蛋白質：輕鏈-接頭-Fc，其與第二鏈通過二硫鍵連接，第二鏈爲 FXIa/凝血酶切割位點-重鏈-接頭Fc。爲了提高圖28所述之構建體觀察的啓動水準，使用圖 3 1列舉的第二代可啓動的變體（與圖6E所述之結構相似）增加切割位元點的可接近性。在這個實例中，將FXIa和凝血酶切割位點用於這些構建體（參見圖3 1 )。構建體如前所述暫態轉染。從具有蛋白質A的培養基中獲得FVIIFc。將與小珠結合的FVIIFc放入緩衝液中並添加FXIa或凝血酶，並培養。100 C下從具有SDS PAGE加樣緩衝液的小珠中抽提FVIIFc 5分鐘。加樣於凝膠並如前所述進行蛋白質印跡以檢測Fc，結果如圖32所示。如圖32所示，存在合適的酶的條件下，凝血酶和因數XIa切割位點可被切割以產生 FVII重鏈和輕鏈分子。存在凝血酶的條件下，構建體 FVII-060和FVII-061中觀察到最佳切割，陰性對照（FVII-〇62)未觀察到切割。 -144- 201217526 實例23.因數VII可啓動的構建體如前所述，將圖33中所述之構建體（FVII-090、FVII-089和FVII-062)克隆、表達並純化（這些蛋白質不需要啓動 )。由於克隆錯誤“VVGGA”序列被插入到FVII-060和FVII-061的ALRPR凝血酶切割序列之後，但同時預計這個插入可影響活性，其不會影響基於SDS-PAGE檢測中凝血酶切割的評估。在FVII-089和FVII-090中去除這個序列。在125 • nM FVII-090、FVII-089、F V11 - 0 6 2 或源於血漿的 ?¥110¥11)中添加濃度增加的凝血酶並在37°(：下培養1〇分鐘。混合物在SDS-PAGE凝膠上電泳以測定凝血酶的切割（圖33)。凝血酶培養FVII-089和FVII-090後觀察到FVII輕鏈-Fc和F VII重鏈-Fc的產生。凝血酶陰性對照的源於血漿的FVII或FVII-062無切割的事實示出了特異性。FVII-089 和FVII-090未觀察到切割效率的顯著區別。使用凝血酶生成試驗測量可啓動變體FVII-090的活性 # 。如前所述在缺少FVIII富含血小板的血漿中進行凝血酶生成試驗，但用缺少FVIII富含血小板的血漿取代凝血因數和血小板。圖34描述的結果來自50 nM FVIIaFc啓動產生凝血酶的試驗。如圖34所述，由50 nM FVIIaFc產生凝血酶。添加200 nM FVII-090 (不是FVII-062，陰性對照）至 50 nM FVIIaFc引起凝血酶生成中的顯著增加，說明 FVIIaFc產生的凝血酶啓動FVI-090。相對於未啓動的 FVII-062，無任何FVIIaFc啓動的FVII-090還示出了增加的凝血酶產生。這可能由殘餘水準的組織因數或接觸途徑啓 -145- 201217526 動產生的少量的凝血酶啓動FVII-090引起的。實例24.高特異性活性因數VII可啓動的構建體爲了製備高特異性活性型因數VII，FVII-100，來自 FVII-090的FVII 成熟序列的氨基酸3 1 1至3 2 2 (LQQSRKVGDSPN ’對應於170-環）被取代爲來自胰蛋白酶 170-環的氨基酸EASYPGK。已示出這種置換具有高特異性活性。構建另外的高特異性活性型因數VII，FVII-115。在這個型中，170環是野生型，但是FVII、V158D、E296V和 M298Q的重鏈中有3個點突變。圖41中解釋說明了 FVII-1 00 和 F V11 - 1 1 5。在可溶性組織因數試驗中，FVII-011(野生型 FVIIaFc)的特異性活性爲1 0,000 IU/mg。FVII-090的特異性活性爲〇·32 IU/mg，FVII-1 00的特異性活性爲0.25 IU/mg，且FVII-115的特異性活性爲14 IU/mg。因此，每個活性形式（之前合適的酶的啓動）在這個試驗中本質上是不作用的。在啓動的FVII情況下，這種高特異性活性變體有可能更有效，但也更易受蛋白質如抗凝血酶的抑制。這種抑制取決於FVIIa活性，引起，啓動的高特異性活性變體（作爲非活性蛋白質給藥）對抗凝血酶抑制作用更具抵抗性，且一旦在損失的部位啓動其可能具有高特異性活性。如前所述檢測凝血酶切割純化的FVII-090與FVII-100 -146- 201217526 和1 1 5 (高特異性活性變體）。結果如圖3 5中所示。S D S PAGE分析示出具有相同效率的凝血酶如何切割3種蛋白質。對於FVII-100，FVII重鏈-Fc和輕鏈Fc折疊於1個條帶，因爲糖基化位點在插入蛋白酶170環後從重鏈中移除，減少FVII HC-Fc條帶的品質，因此其在凝膠上遷移更快並與 F VII LC-Fc條帶共同遷移。使用凝血酶生成試驗測量可啓動變體FVII-090和高特異性活性變體FVII-100的活性。如 φ 前所述，在具有人血小板、因數X、因數V、凝血酶原、抗凝血酶和組織因數途徑抑制子的再生系統中測定凝血酶的產生。測量具有或不具有5 nM凝血酶啓動的活性。如圖36所述，存在凝血酶時FVII-090的活性提高，說明凝血酶啓動FVII-090 »然而，在凝血酶啓動高特異性活性變體FVII-100的情況下，活性顯著提高。不存在凝血酶時，FVII-100具有較長起始時間的高活性，說明殘餘水準的組織因數、凝血酶或接觸途徑啓動可產生足夠的凝血酶 φ 在沒有外源增加凝血酶時啓動FVII-100。圖37示出了其他高特異性活性變體FVII-115獲得的相似結果。實例25.使用各種試驗確定啓動的變體的活性在這個實例中，使用顯色試驗測量FVII活性。通過測量FVIIa切割顯色底物使用一種試驗測量FVIIaFc醯胺解活性。另一個試驗通過測量FVIIa啓動FX的活性測量FX啓動活性，通過測量啓動的FX(FXa)切割的顯色底物水準測定 -147- 201217526 在醯胺解試驗中，使用顯色底物色酶t-PA。FVIIa以劑量依賴形式切割這種底物。該底物還被凝血酶切割，但凝血酶的切割可被水蛭素抑制（資料未示出）。如圖38所示，可啓動.變體的醯胺解活性可在凝血酶啓動後測量，且相比于FVII-090高特異性活性變體具有增加的醯胺解活性。在這些試驗中，凝血酶啓動可啓動的分子後，添加水蛭素以抑制凝血酶切割顯色底物。用這種方式，凝血酶不干擾檢測FVIIa活性的能力。在高特異性活性FVII可啓動變體中，FVIIa啓動FX也增強。爲了測量FVIIa啓動FX，使用底物S2765。這種顯色底物還被FX識別。在這個試驗中，10 uM FX與FVIIaFc培養15分鐘，且用EDTA抑制該反應。圖39示出了對照實驗的結果，其說明FVIIa啓動FX可被檢測。圖40所示實驗示出了對於高特異性活性可啓動變體 FV11-100，FX啓動活性增力口。在這個實驗中，FVIIFc (100 nM)在37C下被凝血酶（100 nM)啓動20分鐘。添加水蛭素抑制凝血酶。添加FX (10uM)並在37C下培養15分鐘，然後用 EDT A抑制該反應。添加S2 7 65底物並通過監測底物分裂檢測FXa生成。實例26.單體Fc分子也可以啓動的形式合成如圖41所示製備3個單體構建體。在FVI1-1 18中，將 ALRPR切割位點插入輕鏈和重鏈之間。在FVII-119中，將序列GGGGS-ALRPR插入輕鏈和重鏈之間。對於FVII-127 -148- 201217526 ，構建體類似於FVII-118，但具有FVII-100中使用的相同的高特異性活性突變體。在可溶性組織因數試驗中檢測這些構建體非啓動純化形式的特異性活性並與FVII-01 1 (野生型 FVIIaFc，其活性爲 10,000 IU/mg)相比較。FVII-118 活性爲4.5 IU/mg且FVII-127活性爲1_8 IU/mg，說明這些分子的可啓動形式本質上不具有活性。如前所示進行FVII-118、FVII-119和FVII-090凝血酶 φ 切割反應及SDS PAGE分析。如圖42所示，可啓動構建體中的切割位點在單體和異源二聚體Fc分子的情況下均可被切割。在圖中，隨著凝血酶濃度增加未啓動FVIIFc條帶的強度減少，其與FVII-118、FVII-119和FVII-090結構相似〇製備並檢測另一個可啓動單體構建體FVII-127。FVII-127具有FVII-118的主鏈，但FVII-100中使用的相同的170 環置換以具有高特異性活性。如圖43所示，相比于缺少高 φ 特異性活性氨基酸置換的FVII-1 18，FVII-127的活性顯著增加。不存在凝血酶時，FVII-127具有較長起始時間的高活性，說明殘餘水準的組織因數、凝血酶或接觸途徑啓動可產生足夠的凝血酶在沒有外源增加凝血酶時啓動FVII-127 。凝血酶促進 FVII-127活性。實例27.靶向GPIIbllla活性形式的FVIIaFc變體在這個實例中，如前所述將圖44A所示構建體克隆、暫態表達、純化並啓動。FVII-066與PC5共轉染以完全加 -149- 201217526 工cscFc接頭’蛋白質序列所描述的，連接第—Fc部分和血小板靶向部分。這些構建體使用靶向部分SCE5 , scFv對 GPIIbllla活性構象。已示出SCE5與鼠和人受體交叉反應。SCE5靶向部分位於FVIIaFc第二Fc部分的N末端（FVII-066)或C末端（FVII-067)。此外，SCE5位於FVIIa的C末端 (FVII-094)。FVIIaFc(FVII-Oll)和 Novoseven用作對照組。如圖44B所示，如前所述通過缺乏FVIII的人血獎中的凝血酶生成試驗檢測這些蛋白質。這些實驗表明，相對於對照組，所有含有SCE5靶向部分的蛋白質的凝血酶生成速率增加。最高的凝血酶生成速率觀察於F VII-066，然後是FVII-094和FVII-067，說明SCE5靶向部分的安置對於蛋白質的活性具有重要效果。如前所述通過FACS試驗測定這些蛋白質與啓動的人血小板的結合（圖44C)。相對於FVIIaFc對照，所有含有SCE5靶向部分的FVIIa蛋白質示出了與血小板增加的結合。這表明SCE5靶向部分與FVIIa的結合可增加其與血小板的親和力。因爲已示出SCE5靶向部分與鼠 GPIIbllla受體相互作用，使用鼠缺乏FVIII富含血小板的血漿在凝血酶生成試驗中檢測FVII-066，同時如前所述使用人純化的組分和血小板在再生系統中檢測（圖29)。在兩個系統中，我們都觀察到FVI1-066相對於對照組具有增加的凝血酶生成速率。實例28.靶向GPIIbllla活性形式的另一個FVIIaFc變體在這個實例中，如前所述將圖12A所示的構建體FVII- -150- 201217526 027克隆、表達（與PC5共轉染以完全加工cscFc接頭，蛋白質序列中所描述的，連接第一 Fc部分與血小板靶向部分）、純化和啓動。這個構建體使用靶向部分MB9，已示出與 GPIIbllla活性構象結合的scFv。如前所述進行FACS試驗以股價與活化的血小板的結合，且已示出FVII-027比FVII-〇1 1對照（圖12B)具有更高的與活化的血小板的親和力。如前所述，用再生的純化的人蛋白質和血小板進行凝血酶製 0 備試驗（圖13A、13B和13C)。相對於對照組，FVII-027示出增加的凝血酿製備速率。基於凝血酶生成試驗，圖13D 表明FVII-027的活性比FVII-011或Novoseven高4倍。圖14 說明PAC1取消了 FVII-027增加的血小板結合和凝血酶生成活性，PAC1爲與MB9競爭結合GPIIbllla活性形式的抗體，證明由MB 9與GPIIbllla活性形式的相互作用調節效果。 MB9靶向部分也位於FVIIaFc第二Fc部分的C-末端以生成圖15所示的FVII-037。具有血小板的缺乏FVIII的再生系統鲁中的凝血酶生成試驗顯示了相對於Novoseven對照組， FVII-037具有增加的凝血酶生成速率（圖16)。實例29.靶向活化的和未活化的血小板的因數VII構建體在這個實例中，如前所述將圖45A所示的構建體克隆、表達、純化並啓動。FVII-088與PC5共表達以完全加工 cscFc接頭’蛋白質序列中所描述的，連接第—fc部分與血小板祀向部分。FVII-088和FVII-125使用AP3耙向部分 ’與人G P 11 b 111 a活性及非活性構象結合的s c ρ v。圖4 5 B中 -151 - 201217526 的結果示出在缺乏F VIII富含血小板的血漿中的凝血酶生成試驗，相對於對照組FVII-08 8和FVII-125均示出增加的凝血酶生成速率，說明FVIIaFc或FVIIa靶向GPIIbllla的活性及非活性構象引起增加的活性。通過FACS測定FVII-08 8 和FVIIaFc與啓動的人血小板的結合（圖45C)。這些資料顯示FVII-088與血小板結合比FVIIaFc(FVII-01 1)具有更高的親和力，說明AP3靶向部分可增加FVIIaFc與血小板的親和力。 R 〇 t a t i ο η T h r 〇 m b o e 1 a s t 〇 m e t r y (R Ο T E M ®，P e n t a p h a r m GmbH，Munich，Germany)是另一種評估血小板-靶向的 FVIIa構建體的方法，因爲其能夠表徵全血液中幾個凝血參數（存在血小板）。根據製備商的建議通過ROTEM及氯化鈣作爲啓動物（NATEM)評估FVII-088和野生型重組 FVIIaFchFVIIaFc)形成堅固且穩定的凝塊的能力。來自人供體的血友病A血用FVIIFc示蹤至終濃度爲100、30或10 nM。通過添加CaCl2起始NATEM反應。如圖30所示評估凝血參數，包括凝血時間（指凝血起始時間）、凝塊形成時間（指凝血速率）和α角度（指凝血速率）。相對於野生型rFVIIaFc ’ FVII-08 8示出了凝血時間和凝塊形成時間的明顯減少及α角度的增加，與FVII-088增加的凝血動力學相一致。這些資料表明，相對於野生型FVIIaFc，FVII-088 具有增強的活性，與凝血酶生成試驗資料相一致。實例30.將FVIIa靶向血小板的肽的使用 -152- 201217526 如前所述將圖46A所示的構建體克隆、表達、純化並啓動。使用與血小板受體GPIb-alpha(發現於活性及非活性血小板中）結合的肽製備這些蛋白質，特別是PS4、OS1和 OS2作爲血小板靶向部分。製備這些分子的過程中，肽與構建體第二Fc部分的N或C末端連接。FVII-044構建體使用與構建體第二Fc部分的C末端連接的PS4肽；FVII-045構建體使用與構建體第二Fc部分的C末端連接的OS1肽；且鲁 FVII-046構建體使用與構建體第二Fc部分的C末端連接的 OS2分子。相反地，FVII-047構建體使用與構建體第二Fc 部分的N末端連接的PS4肽；FVII-048分子使用與構建體第二Fc部分的N末端連接的OS1肽；且FVII-049分子使用與構建體第二Fc部分的N末端連接的OS2肽。如前所述使用缺乏FVIII富含血小板的血漿進行凝血酶生成試驗。如圖46B 所示，在限制濃度的FVIIa下進行試驗時，每個FVII-044、 FVII-045和FVII-046C-末端融合結構顯示了相比較于 # Novoseven對照增加的凝血酶生成。圖47A示出了對於N-末端融合構建體的相似結果。圖47B示出在這個試驗中FVII-〇45構建體可略優於FVII-(H8構建體，但這兩個N和C末端融合都優於Novoseven對照。此外，公開的GPIb-α與每個肽的親和力具有相關性（圖48)且活性的增加與FVIIaFc重組融合的肽相關。圖48示出了通過FACS測定的FVII-049、 FVII-048和野生型FVIIaFc(FVII-01 1對照）與活化的血小板結合，及報導的與靶向肽的親和力（Bernard等， Biochemistry 2008. 47:4674-4682 ) 。FACS資料顯示了 -153- 201217526 FVII-045和FVII-048相對於FVII-011對照與血小板增加的親和力。實例3 1.靶向GPIIbllla活性形式的FVIIIFc變體如前所述製備圖49A所示的構建體。FVIII-041是野生型FVIIIFc，然而FVIII-108具有位於第二Fc部分N末端的 SCE5血小板靶向部分。爲了表達，FVIII-108與PC5共轉染以完全加工cscFc接頭，蛋白質序列中所描述的，連接第 —Fc部分與血小板靶向部分。如前所述使用缺乏F VIII富含血小板的血漿在凝血酶生成試驗中測定這些蛋白質，此外凝血酶生成試驗也被組織因數啓動。如圖49B所示，使用靶向型FVIIIFc未看到明顯改善。値得注意的是，本文中所描述的凝血酶生成試驗測量血小板表面的凝血酶生成，因此準確測量活性。實例32.製備並檢測靶向缺少Gla結構域的血小板的FVII 型在這個實例中，生成圖21所示的FVIIaFc型。這個蛋白質具有N末端的MB 9 scFv及去除Gla結構域的缺失。 FVII-053包含用於胞內啓動的插入重鏈和輕鏈之間的 RKRRKR序歹IJ 。FVII-0 5 3是暫態表達的（與PC5共轉染用於加工RKRRKR序列，其引起蛋白質的啓動）並如前所述純化。具有純化的組分和血小板的凝血酶生成試驗顯示了 FVII-053具有一些活性（圖22)，即使該活性相對於FVII- -154- 201217526 011對照是折中的（圖22D)。圖23中資料示出了與MB9競爭結合GPIIbllla的PAC1抗體，抑制關於]ρνιΙ_〇53的凝血酶生成活性，表明血小板靶向對於活性是重要的。製備另一個與FVII-053相同但不具有RKRRKR插入的構建體（FVII-028) ’並在非啓動FVII-011的Pk硏究中檢測。如圖50所示，靶向的少01&的？乂11-028分子的終端半衰期（2〇.3小時）幾乎爲 F V11 - 0 1 1 ( 7 · 1小時）的3倍長，表明G1 a結構域的去除增加了 φ FVIIFc的終端半衰期。實例33.血小板靶向的FIX分子在這個實例中，製備並檢測圖51 A所示的FIX構建體。 FIX-06 8與PC5共轉染以完全加工cscFc接頭，蛋白質序列中所描述的，連接第一 Fc部分與血小板靶向部分。FIX-068具有位於第二Fc部分N末端的SCE5血小板靶向部分，然而FIX-088具有位於第二Fc部分C末端的SCE5。FIX-09 0 # 是沒有Fc結構域的FIX構建體，且具有連接FIX蛋白質C末端的SCE5部分。FIX-042是沒有靶向部分的單鏈Fc的FIXFc 且製作爲對照組。爲了從BeneFIX樣品中去除痕量的啓動 FIX(FIXa)，其導致凝血酶生成試驗中的錯誤結構，用不可逆的活性部位抑制劑穀氨醯-甘氨醯-精氨醯-氯代甲基酮 (Hematologic Technologies)處理 BeneFIX樣品。室溫下用過量的抑制劑培養BeneFIX 180分鐘。然後滲析樣品以去除未結合的抑制劑。處理後的BeneFIX以下簡稱爲BeneFIX 。分子的特異性活性爲：FIX-042，6 IU/nmol ; FIX068， -155- 201217526 5.1 IU/nmol ； FIX-088 > 3.5 IU/nmol ； FIX-090 > 13.8 IU/nmol;及 BeneFIX，12 IU/nmol® 如圖 51B 所示在富含血小板缺少FIX的血漿中的凝血酶生成試驗檢測這些構建體（FIX-06 8、FIX- 08 8和FIX-042)時，每個靶向分子的活性都高於FIX-042對照。圖51C說明，FIX-068和FIX-088的活性至少比FIX-042高4倍，如凝血酶生成所測量。由於FIX-042的特異性活性高於 FIX-068 和 FIX-088 ，凝血酶生成試驗觀察的增加的活性可爲低估的，因此血小板靶向的增加的活性可能高4倍。如圖52A所示，FIX-090(缺少Fc)也示出了相對于 BeneFIX增加的活性，表面不存在Fc時FIX靶向血小板也增加活性。圖52B示出了 FIX-090的活性至少爲BeneFIX的4倍。由於FIX-090和BeneFIX具有相似的特異性活性，凝血酶生成試驗中4倍增加的活性是由血小板靶向作用引起的。實例34.將FIX靶向血小板的肽的使用在這個實例中，如前所述將圖53A所示的FIX-089構建體克隆、暫態表達並純化。該分子包含OS1肽，其與GP lb-α受體相結合，與該構建體第二Fc部分的N末端相連接。 FIX-08 9構建體的特異性活性爲2.4 IU/nmol，相比較與對照 FIX-042分子的 6 IU/nmol。如圖53B所示，在具有富含FIX-血小板的血漿中的凝血酶生成試驗，FIX-089分子比FIX-042對照更具活性，這在限制濃度的FIX下尤其明顯。圖53 C說明如凝血酶生成所 201217526 測FIX-0 89大約4倍高於FIX-042，然而具有較低的特異性活性。這進一步表面靶向GPIb增加了 FIXFc的活性。序列表 FVII-027氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或MB9與Fc區的接頭區域爲下劃線，且具有前蛋白轉化酶加工位點的接頭以粗體顯示

MVSQALRLLC LLLGLOGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

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Genscript-FVII-026-2 DNA序列

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哪Q沾AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC SFEEAREIFK'DAER^LFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE HKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL 工MTIWVVSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCWVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH 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cagaagtttc agggctgggt gagctgagca ggctgagatc ttgtataacc ggaacgaccg gtcaccgtct cctcagggag tcagaagcac gcgtacaggc cagacggcca ggattacctg cagcagaagc caggccaggc gggatccctg agcgattctc agggtcgaag ccggggatga catgtggtat tcggcggagg tcggtcactc tgttcccgcc agaatggggg ctcctgcaag tcgagggccg gaactgtgag gcggctgtga gcagtactgc aggggtactc tctgctggca gaaaaatacc tattctagaa gcaaggtgtg ccccaaaggg agttgtgtgg ggggaccctg acaaaatcaa gaactggagg acgacgggga tgagcagagc cgggcaccac caaccacgac accatgtggt gcccctctgc tgcgcttctc attggtcagc agctcatggt cctcaacgtg aggtgggaga ctccccaaat gcaaggactc ctgcaagggg ggtacctgac gggcatcgtc tgtacaccag ggtctcccag gcccaggagt cctcctgcga ccggtggcgg cggatcaggt ccgacaaaac tcacacatgc tcttcctctt ccccccaaaa catgcgtggt ggtggacgtg acggcgtgga ggtgcataat accgtgtggt cagcgtcctc agtgcaaggt ctccaacaaa aagggcagcc ccgagaacca agaaccaggt cagcctgacc agtgggagag caatgggcag ccgacggctc cttcttcctc ggaacgtctt ctcatgctcc gcctctccct gtctccgggt gaggttccgg tggcggggga aactcctggg aggaccgtca tctcccggac ccctgaggtc tcaagttcaa ctggtacgtg aggagcagta caacagcacg ggctgaatgg caaggagtac agaaaaccat ctccaaagcc catcccgcga tgagctgacc atcccagcga catcgccgtg ccacgcctcc cgtgttggac acaagagcag gtggcagcag acaaccacta cacgcagaag gcggaggtgg gtccggtggc gtggcggggg atcagcggaa gggcctcagt gaaggtctcc actgggtgcg acaggcccct gtggtggcac aaactatgca ccatcagcac cgcctacatg actgtgcgag aggccgtgct cctggggcca gggaaccctg agcttgaaga aggtgaattt cggtgtcagt ggccccagga gtaaaagtgt gcagtggtac atgatagcga ccggccctca tggccaccct gaccatcagc tgtgggatag tagtagtgat gtcagcccaa ggctgccccc FVII-053氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，連 -160- 201217526 接FVII與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fes位點的接頭以粗體顯示，且MB 9爲斜體的。

技父§2芬·EVNKPGASViC VSCKASGYIT

APGQGLEWMG WnPNSGGTN YAQKFQGWVT MTRDTSISTA YMELSRLRSD DTAVYYCARG

RALYNRNDRS PNWFDPWGQG TLVTVSSGSA SAPTLKLEEG EFSEARVQAV LTQPPSVSVA

PGQTARITCG GNNIGSKSVQ WYQQKPGQAP VLWYDDSDR PSGIPERFSG SNSGNMATLT

ISRVEAGDEA DYYCQVWDSS SDHWFGGGT KLTVLGQPKA APSVTLFPPS AAARTKLFWI

SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC

SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR RKRRKRIVGG

KVCPKGECPW QVLLLVNGAQ LCGGTLINTI WVVSAAHCFD KIKNWRNLIA VLGEHDLSEH

DGDEQSRRVA QVIIPSTYVP GTTNHDIALL RLHQPVVLTD HVVPLCLPER TFSERTLAFV

RFSLVSGWGQ LLDRGATALE LMVLNVPRLM TQDCLQQSRK VGDSPNITEY MFCAGYSDGS

KDSCKGDSGG PHATHYRGTW YLTGIVSWGQ GCATVGHFGV YTRVSQYIEW LQKLMRSEPR

PGVLLRAPFP GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV

FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVVVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY

RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK

NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG

NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSGGGGSGGG GSGGGGSDKT HTCPPCPAPE

LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCVV VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE

EQYNSTYRVV SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP

SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD

KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK

FVII-05 3 DNA 序歹[J atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcggaagtgc agctggtgca gtctggagct gaggtgaata agcctggggc ctcagtgaag gtctcctgca aggcttctgg atacaccttc accggctact atatgcactg ggtgcgacag gcccctggac aagggcttga gtggatggga tggatcaacc ctaacagtgg tggcacaaac tatgcacaga agtttcaggg ctgggtcacc atgaccaggg acacgtccat cagcaccgcc tacatggagc tgageagget gagatetgae gacacggccg tgtattactg tgegagagge cgtgctttgt ataaccggaa cgaccggtcc cccaactggt tcgacccctg gggccaggga accctggtca ccgtctcctc agggagtgca tccgccccaa cccttaaact tgaagaaggt gaattttcag aagcacgcgt acaggctgtg ctgactcagc cgccctcggt gtcagtggcc ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcag tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct gtgctggtcg tetatgatga tagcgaccgg ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg ggaacatggc caccctgacc atcagcaggg tegaageegg ggatgaggee gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggtca gcccaaggct gccccctcgg tcactctgtt cccgccgtcc gcggccgcta ggaegaaget gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattetagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga aggaagagga ggaagaggat tgtggggggc aaggtgtgcc ccaaagggga gtgtccatgg caggtcctgt tgttggtgaa tggagctcag ttgtgtgggg ggaccctgat caacaccatc tgggtggtct ccgcggccca ctgtttcgac aaaatcaaga actggaggaa cctgatcgcg gtgctgggcg agcacgacct cagcgagcac gacggggatg ageagageeg gcgggtggcg caggtcatca tccccagcac gtacgtcccg ggcaccacca accacgacat cgcgctgctc cgcctgcacc agcccgtggt cctcactgac catgtggtgc ccctctgcct gcccgaacgg acgttctctg agaggaeget ggccttcgtg cgcttctcat tggtcagcgg ctggggccag ctgctggacc gtggcgccac ggccctggag ctcatggtcc tcaacgtgcc ccggctgatg acccaggact gcctgcagca gteaeggaag gtgggagact ccccaaatat cacggagtac atgttctgtg ccggctactc ggatggcagc aaggactcct gcaaggggga cagtggaggc ccacatgcca cccactaccg gggcacgtgg tacctgacgg gcatcgtcag ctggggccag ggctgcgcaa ccgtgggcca ctttggggtg tacaccaggg tctcccagta catcgagtgg ctgcaaaagc tcatgcgctc agagccacgc -161 - 201217526

ccaggagtcc tcctgcgagc cccatttccc ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggcgg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga ggttccggtg gcgggggatc cgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctgggag gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgcgatg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatga FV II-044氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或PS4與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fes位點的接頭以粗體顯示，且PS4肽是斜體的。

哪泌AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

SFEEAREIFK DAER^LFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE

THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE

KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWVVSAA HCFDKIKNWR

NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHVVPLC

LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN

ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ

YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC

PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN

AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP

QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL

YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG

SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV

DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA

KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD

SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGKGG GGSGGGGSGG

GGSGGGGSAC TERWALHNLC GG FVII-044 atggtctccc gcagtcttcg gcgttcctgg teettegagg tcttacagtg DNA序； aggccctcag taacccagga aggagctgcg aggcccggga atggggacca gctcctctgc ggaagcccac gccgggctcc gatcttcaag gtgtgcctca cttctgcttg ggcgtcctgc ctggagaggg gaegeggaga agtccatgcc ggcttcaggg accggcgccg agtgcaagga ggaegaaget agaatggggg ctgcctggct gcgcgccaac ggagcagtgc gttctggatt ctcctgcaag

-162- 201217526

tcgagggccg gcggctgtga aggggtactc gaaaaatacc gcaaggtgtg agttgtgtgg acaaaatcaa acgacgggga cgggcaccac accatgtggt tgcgcttctc agctcatggt aggtgggaga gcaaggactc ggtacctgac tgtacaccag gcccaggagt ccggtggcgg ccgacaaaac tcttcctctt catgcgtggt acggcgtgga accgtgtggt agtgcaaggt aagggcagcc agaaccaggt agtgggagag ccgacggctc ggaacgtctt gcctctccct gaggttccgg aactcctggg tctcccggac tcaagttcaa aggagcagta ggctgaatgg agaaaaccat catcccgcga atcccagcga ccacgcctcc acaagagcag acaaccacta gtgggggtgg gggccctgca gaccagctcc acgcacaagg agtgaccaca gacggggtgt aaaagaaatg gagtgtccat atcaacacca aacctgatcg cggcgggtgg atcgcgctgc ctgcccgaac ggctggggcc ccccggctga atcacggagt gacagtggag agctggggcc tacatcgagt gccccatttc gggggtggat ccaccgtgcc cccaaggaca agccacgaag gccaagacaa accgtcctgc gccctcccag caggtgtaca tgcctggtca ccggagaaca tacagcaagc gtgatgcatg aaaggtggcg tcagacaaaa gtcttcctct acatgcgtgg gacggcgtgg taccgtgtgg aagtgcaagg aaagggcagc aagaaccagg gagtgggaga tccgacggct gggaacgtct agcctctccc ggaggttccg ggcgggtga agtcctatat atgaccagct cgggcaccaa cctgcacacc ccagcaaacc ggcaggtcct tctgggtggt cggtgctggg cgcaggtcat tccgcctgca ggacgttctc agctgctgga tgacccagga acatgttctg gcccacatgc agggctgcgc ggctgcaaaa ccggtggcgg caggcggtgg cagctccgga ccctcatgat accctgaggt agccgcggga accaggactg cccccatcga ccctgccccc aaggcttcta actacaagac tcaccgtgga aggctctgca gcggatcagg ctcacacatg tccccccaaa tggtggacgt aggtgcataa tcagcgtcct tctccaacaa cccgagaacc tcagcctgac gcaatgggca ccttcttcct tctcatgctc tgtctccggg gtggcggggg ctgcttctgc gatctgtgtg gcgctcctgt cacagttgaa ccaaggccga gttgttggtg ctccgcggcc cgagcacgac catccccagc ccagcccgtg tgagaggacg ccgtggcgcc ctgcctgcag tgccggctac cacccactac aaccgtgggc gctcatgcgc tggctccggc aggttccggt actcctgggc ctcccggacc caagttcaac ggagcagtac gctgaatggc gaaaaccatc atcccgggat tcccagcgac cacgcctccc caagagcagg caaccactac tgggggtgga cccaccgtgc acccaaggac gagccacgaa tgccaagaca caccgtcctg agccctccca acaggtgtac ctgcctggtc gccggagaac ctacagcaag cgtgatgcat taaaggtggc atcagcctgc ctccctgcct aacgagaacg cggtgccacg tatccatgtg attgtggggg aatggagctc cactgtttcg ctcagcgagc acgtacgtcc gtcctcactg ctggccttcg acggccctgg cagtcacgga tcggatggca cggggcacgt cactttgggg tcagagccac ggaggtgggt ggcgggggat ggaccgtcag cctgaggtca tggtacgtgg aacagcacgt aaggagtaca tccaaagcca gagctgacca atcgccgtgg gtgttggact tggcagcagg acgcagaaga tcaggcggtg ccagcacctg accctcatga gaccctgagg aagccgcggg caccaggact gcccccatcg accctgcccc aaaggcttct aactacaaga ctcaccgtcg gaggctctgc ggcggatcag accgagcggt gaactgtgag gcagtactgc tctgctggca tattctagaa ccccaaaggg ggggaccctg gaactggagg tgagcagagc caaccacgac gcccctctgc attggtcagc cctcaacgtg ctccccaaat ctgcaagggg gggcatcgtc ggtctcccag cctcctgcga cggatcaggt tcacacatgc ccccccaaaa ggtggacgtg ggtgcataat cagcgtcctc ctccaacaaa ccgagaacca cagcctgacc caatgggcag cttcttcctc ctcatgctcc gtctccgggt tggcggggga aggaccgtca ccctgaggtc ctggtacgtg caacagcacg caaggagtac ctccaaagcc tgagctgacc catcgccgtg cgtgttggac gtggcagcag cacgcagaag atcaggcggt caacctgtgc FVII-045氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或OS1與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fes位元點的接頭以粗體顯示，且OS1肽是斜體的。

敗聯AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 嗣sysdgdqcas spcqnggsck dqlqsyicfc lpafegrnce

THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWVVSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHVVPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC -163· 201217526

PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGKGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSAC TERMALHNLC GG FVII-045 DNA 序 ' atggtctccc aggccctcag gcagtcttcg taacccagga gcgttcctgg aggagctgcg tccttcgagg aggcccggga tcttacagtg atggggacca gaccagctcc agtcctatat acgcacaagg atgaccagct agtgaccaca cgggcaccaa gacggggtgt cctgcacacc aaaagaaatg ccagcaaacc gagtgtccat ggcaggtcct atcaacacca tctgggtggt aacctgatcg cggtgctggg cggcgggtgg cgcaggtcat atcgcgctgc tccgcctgca ctgcccgaac ggacgttctc ggctggggcc agctgctgga ccccggctga tgacccagga atcacggagt acatgttctg gacagtggag gcccacatgc agctggggcc agggctgcgc tacatcgagt ggctgcaaaa gccccatttc ccggtggcgg gggggtggat caggcggtgg ccaccgtgcc cagctccgga cccaaggaca ccctcatgat agccacgaag accctgaggt gccaagacaa agccgcggga accgtcctgc accaggactg gccctcccag cccccatcga caggtgtaca ccctgccccc tgcctggtca aaggcttcta ccggagaaca actacaagac tacagcaagc tcaccgtgga gtgatgcatg aggctctgca aaaggtggcg gcggatcagg tcagacaaaa ctcacacatg gtcttcctct tccccccaaa acatgcgtgg tggtggacgt gacggcgtgg aggtgcataa taccgtgtgg tcagcgtcct aagtgcaagg tctccaacaa aaagggcagc cccgagaacc aagaaccagg tcagcctgac gagtgggaga gcaatgggca tccgacggct ccttcttcct gggaacgtct tctcatgctc agcctctccc tgtctccggg ggaggttccg gtggcggggg gctcctctgc cttctgcttg ggaagcccac ggcgtcctgc gccgggctcc ctggagaggg gatcttcaag gacgcggaga gtgtgcctca agtccatgcc ctgcttctgc ctccctgcct gatctgtgtg aacgagaacg gcgctcctgt cggtgccacg cacagttgaa tatccatgtg ccaaggccga attgtggggg gttgttggtg aatggagctc ctccgcggcc cactgtttcg cgagcacgac ctcagcgagc catccccagc acgtacgtcc ccagcccgtg gtcctcactg tgagaggacg ctggccttcg ccgtggcgcc acggccctgg ctgcctgcag cagtcacgga tgccggctac tcggatggca cacccactac cggggcacgt aaccgtgggc cactttgggg gctcatgcgc tcagagccac tggctccggc ggaggtgggt aggttccggt ggcgggggat actcctgggc ggaccgtcag ctcccggacc cctgaggtca caagttcaac tggtacgtgg ggagcagtac aacagcacgt gctgaatggc aaggagtaca gaaaaccatc tccaaagcca atcccgggat gagctgacca tcccagcgac atcgccgtgg cacgcctccc gtgttggact caagagcagg tggcagcagg caaccactac acgcagaaga tgggggtgga tcaggcggtg cccaccgtgc ccagcacctg acccaaggac accctcatga gagccacgaa gaccctgagg tgccaagaca aagccgcggg caccgtcctg caccaggact agccctccca gcccccatcg acaggtgtac accctgcccc ctgcctggtc aaaggcttct gccggagaac aactacaaga ctacagcaag ctcaccgtcg cgtgatgcat gaggctctgc taaaggtggc ggcggatcag atcagcctgc accgagcgga ggcttcaggg ctgcctggct accggcgccg gcgcgccaac agtgcaagga ggagcagtgc ggacgaagct gttctggatt agaatggggg ctcctgcaag tcgagggccg gaactgtgag gcggctgtga gcagtactgc aggggtactc tctgctggca gaaaaatacc tattctagaa gcaaggtgtg ccccaaaggg agttgtgtgg ggggaccctg acaaaatcaa gaactggagg acgacgggga tgagcagagc cgggcaccac caaccacgac accatgtggt gcccctctgc tgcgcttctc attggtcagc agctcatggt cctcaacgtg aggtgggaga ctccccaaat gcaaggactc ctgcaagggg ggtacctgac gggcatcgtc tgtacaccag ggtctcccag gcccaggagt cctcctgcga ccggtggcgg cggatcaggt ccgacaaaac tcacacatgc tcttcctctt ccccccaaaa catgcgtggt ggtggacgtg acggcgtgga ggtgcataat accgtgtggt cagcgtcctc agtgcaaggt ctccaacaaa aagggcagcc ccgagaacca agaaccaggt cagcctgacc agtgggagag caatgggcag ccgacggctc cttcttcctc ggaacgtctt ctcatgctcc gcctctccct gtctccgggt gaggttccgg tggcggggga aactcctggg aggaccgtca tctcccggac ccctgaggtc tcaagttcaa ctggtacgtg aggagcagta caacagcacg ggctgaatgg caaggagtac agaaaaccat ctccaaagcc catcccgcga tgagctgacc atcccagcga catcgccgtg ccacgcctcc cgtgttggac acaagagcag gtggcagcag acaaccacta cacgcagaag gtgggggtgg atcaggcggt tggccctgca caacctgtgc -164- 201217526 ggcgggtga FVII-046氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或OS2與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fes位元點的接頭以粗體顯示，且OS2肽是斜體的。

敗AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 蘇Ε^Χϊ’ίΐϊΓί^Είΐϊκϊϊ^ϊ· SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHVVPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT GLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGKGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSAC TERDALHNLC GG

FVII-04i atggtctccc gcagtcttcg gcgttcctgg teettegagg tcttacagtg gaccagctcc acgcacaagg agtgaccaca gacggggtgt aaaagaaatg gagtgtccat atcaacacca aacctgatcg cggcgggtgg atcgcgctgc ctgcccgaac ggctggggcc ccccggctga atcacggagt gacagtggag agctggggcc tacatcgagt gccccatttc gggggtggat ccaccgtgcc cccaaggaca agccacgaag gccaagacaa accgtcctgc gccctcccag DNA序 \ aggccctcag taacccagga aggagctgcg aggcccggga atggggacca agtcctatat atgaccagct cgggcaccaa cctgcacacc ccagcaaacc ggcaggtcct tctgggtggt cggtgctggg egeaggteat tccgcctgca ggacgttctc agctgctgga tgacccagga acatgttctg gcccacatgc agggctgcgc ggctgcaaaa ccggtggcgg caggcggtgg cagctccgga ccctcatgat accctgaggt agccgcggga accaggactg cccccatcga gctcctctgc ggaagcccac gccgggctcc gatcttcaag gtgtgcctca ctgcttctgc gatctgtgtg gcgctcctgt cacagttgaa ccaaggccga gttgttggtg ctccgcggcc cgagcacgac catccccagc ccagcccgtg tgagaggacg ccgtggcgcc ctgcctgcag tgccggctac cacccactac aaccgtgggc gctcatgcgc tggctccggc aggttccggt actcctgggc ctcccggacc caagttcaac ggagcagtac gctgaatggc gaaaaccatc cttctgcttg ggcgtcctgc ctggagaggg gaegeggaga agtccatgcc ctccctgcct aacgagaacg cggtgccacg tatccatgtg attgtggggg aatggagctc cactgtttcg ctcagcgagc acgtacgtcc gtcctcactg ctggccttcg acggccctgg cagtcacgga teggatggea cggggcacgt cactttgggg tcagagccac ggaggtgggt ggcgggggat ggaccgtcag cctgaggtca tggtacgtgg aacagcacgt aaggagtaca tccaaagcca ggcttcaggg accggcgccg agtgcaagga ggaegaaget agaatggggg tcgagggccg gcggctgtga aggggtactc gaaaaatacc gcaaggtgtg agttgtgtgg acaaaatcaa acgacgggga cgggcaccac accatgtggt tgcgcttctc agctcatggt aggtgggaga gcaaggactc ggtacctgac tgtacaccag gcccaggagt ccggtggcgg ccgacaaaac tcttcctctt catgcgtggt acggcgtgga accgtgtggt agtgcaaggt aagggcagcc ctgcctggct gcgcgccaac ggagcagtgc gttctggatt ctcctgcaag gaactgtgag gcagtactgc tctgctggca tattetagaa ccccaaaggg ggggaccctg gaactggagg tgageagage caaccacgac gcccctctgc attggtcagc cctcaacgtg ctccccaaat ctgcaagggg gggcatcgtc ggtctcccag cctcctgcga cggatcaggt tcacacatgc ccccccaaaa ggtggacgtg ggtgcataat cagcgtcctc ctccaacaaa ccgagaacca -165- 201217526 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt ggaggttccg gtggcggggg atcagcctgc accgagcggg acgccctgca caacctgtgc ggcgggtga FVII-047氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或Fc與PS4區的接頭區域爲下劃線，且PS4肽是斜體的。

eySQ合·；AVFVTQEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 碗E巧·έϊέ'ΪΓΰΚκϊκΙΐ^ϊ· SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN 工TEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SACTERWALH NLCGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSDKTHTCP~ PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVWDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRWSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK

FVII-047 DNA序歹丨J atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc •166- 201217526

cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg gtggatccgg cgggggcgga tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca ccgagcggtg ggccctgcac aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga FVII-048氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或OS1與Fc區的接頭區域爲下劃線，且OS1肽是斜體的。以乂avfvtoeeah gvlhrrrran afleelrpgs lereckeeqc

έ^ΐΕϋέϊ’ϋϋκϊκϊ^ϊ· SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWVVSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHVVPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVVVDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SACTERMALH NLCGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSDKTHTCP" PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVWDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRWSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK -167- 201217526

FVII-048 DNA序歹！J atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg gtggatccgg cgggggcgga tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca ccgagcggat ggccctgcac aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga FVII-049氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或OS2與Fc區的接頭區域爲下劃 -168- 201217526 線，且OS2肽是斜體的。

MVSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE

THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE

KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR

NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC

LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN

ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ

YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC

PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT^EVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN

AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP

QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL

YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG

SGGGGSGGGG SACTERDALH NLCGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSDKTHTCF

PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVWDVS HEDPEVKFNW YVDGVEVHNA

KTKPREEQYN STYRWSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ

VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY

SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK

FVII-049 atggtctccc gcagtcttcg gcgttcctgg tccttcgagg tcttacagtg gaccagctcc acgcacaagg agtgaccaca gacggggtgt aaaagaaatg gagtgtccat atcaacacca aacctgatcg cggcgggtgg atcgcgctgc ctgcccgaac ggctggggcc ccccggctga atcacggagt gacagtggag agctggggcc tacatcgagt gccccatttc gggggtggat ccaccgtgcc cccaaggaca agccacgaag gccaagacaa accgtcctgc gccctcccag caggtgtaca tgcctggtca ccggagaaca tacagcaagc gtgatgcatg aaaggcggtg tccggtggcg aacctgtgcg

DNA 序 I aggccctcag taacccagga aggagctgcg aggcccggga atggggacca agtcctatat atgaccagct cgggcaccaa cctgcacacc ccagcaaacc ggcaggtcct tctgggtggt cggtgctggg cgcaggtcat tccgcctgca ggacgttctc agctgctgga tgacccagga acatgttctg gcccacatgc agggctgcgc ggctgcaaaa ccggtggcgg caggcggtgg cagctccgga ccctcatgat accctgaggt agccgcggga accaggactg cccccatcga ccctgccccc aaggcttcta actacaagac tcaccgtcga aggctctgca gcggttcagg gagggtcagg gtggcggtgg gctcctctgc ggaagcccac gccgggctcc gatcttcaag gtgtgcctca ctgcttctgc gatctgtgtg gcgctcctgt cacagttgaa ccaaggccga gttgttggtg ctccgcggcc cgagcacgac catccccagc ccagcccgtg tgagaggacg ccgtggcgcc ctgcctgcag tgccggctac cacccactac aaccgtgggc gctcatgcgc tggctccggc aggttccggt actcctggga ctcccggacc caagttcaac ggagcagtac gctgaatggc gaaaaccatc atcccgggat tcccagcgac cacgcctccc caagagcagg caaccactac tggaggaggg cggtggcgga ctccggcgga cttctgcttg ggcgtcctgc ctggagaggg gacgcggaga agtccatgcc ctccctgcct aacgagaacg cggtgccacg tatccatgtg attgtggggg aatggagctc cactgtttcg ctcagcgagc acgtacgtcc gtcctcactg ctggccttcg acggccctgg cagtcacgga tcggatggca cggggcacgt cactttgggg tcagagccac ggaggtgggt ggcgggggat ggaccgtcag cctgaggtca tggtacgtgg aacagcacgt aaggagtaca tccaaagcca gagctgacca atcgccgtgg gtgttggact tggcagcagg acgcagaaga tcaggcggtg tcagcctgca ggtgggtccg ggcttcaggg accggcgccg agtgcaagga ggacgaagct agaatggggg tcgagggccg gcggctgtga aggggtactc gaaaaatacc gcaaggtgtg agttgtgtgg acaaaatcaa acgacgggga cgggcaccac accatgtggt tgcgcttctc agctcatggt aggtgggaga gcaaggactc ggtacctgac tgtacaccag gcccaggagt ccggtggcgg ccgacaaaac tcttcctctt catgcgtggt acggcgtgga accgtgtggt agtgcaaggt aagggcagcc agaaccaggt agtgggagag ccgacggctc ggaacgtctt gcctctccct gtggatccgg ccgagcggga gtggcggcgg ctgcctggct gcgcgccaac ggagcagtgc gttctggatt ctcctgcaag gaactgtgag gcagtactgc tctgctggca tattctagaa ccccaaaggg ggggaccctg gaactggagg tgagcagagc caaccacgac gcccctctgc attggtcagc cctcaacgtg ctccccaaat ctgcaagggg gggcatcgtc ggtctcccag cctcctgcga cggatcaggt tcacacatgc ccccccaaaa ggtggacgtg ggtgcataat cagcgtcctc ctccaacaaa ccgagaacca cagcctgacc caatgggcag cttcttcctc ctcatgctcc gtctccgggt cgggggcgga cgccctgcac atcaggtggg -169- 201217526 ggtggatcag ccgtgcccag aaggacaccc cacgaagacc aagacaaagc gtcctgcacc ctcccagccc gtgtacaccc ctggtcaaag gagaacaact agcaagctca atgcatgagg tga gcggtggagg caccggaact tcatgatctc ctgaggtcaa cgcgggagga aggactggct ccatcgagaa tgcccccatc gcttctatcc acaagaccac ccgtggacaa ctctgcacaa ttccggtggc cctgggcgga ccggacccct gttcaactgg gcagtacaac gaatggcaag aaccatctcc ccgggatgag cagcgacatc gcctcccgtg gagcaggtgg ccactacacg gggggatccg ccgtcagtct gaggtcacat tacgtggacg agcacgtacc gagtacaagt aaagccaaag ctgaccaaga gccgtggagt ttggactccg cagcagggga cagaagagcc acaaaactca tcctcttccc gcgtggtggt gcgtggaggt gtgtggtcag gcaaggtctc ggcagccccg accaggtcag gggagagcaa acggctcctt acgtcttctc tctccctgtc cacatgccca cccaaaaccc ggacgtgagc gcataatgcc cgtcctcacc caacaaagcc agaaccacag cctgacctgc tgggcagccg cttcctctac atgctccgtg tccgggtaaa FVII-011氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，Gla結構域是斜體的，連接FVII或0S1與Fc 區的接頭區域爲下劃線，且連接兩個Fes位點的接頭以粗體顯示。 MVSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC ····· -1 * ... -.- ^

SFEEAREIFK DAERUKLFm SYSDGDQCAS THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT AKTKPREEQY NSTYRVVSVL TVLHQDWLNG QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRVVSVLTVL KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH

SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE NGAQLCGGTL INTIWVVSAA HCFDKIKNWR TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD EALHNHYTQK SLSLSPGK

FVII-01 1 DNA 序歹[J atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc teettegagg aggcccggga gatcttcaag gaegeggaga ggaegaaget gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattetagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgageagage cggcgggtgg egeaggteat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac teggatggea gcaaggactc ctgcaagggg -170- 201217526

gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 缺失B結構域的FVIII氨基酸序列：信號肽爲下劃線 ;HC和LC序列製劑的14氨基酸接頭（包含保留的B結構域

)爲雙下劃線；S743/Q 1 63 8融合 MOIELSTCFF LCLLRFCFSA TRRYYLGAVE PRVPKSFPFN TSWYKKTLF VEFTDHLFNI DTWITLKNM ASHPVSLHAV GVSYWKASEG GSHTYVWQVL KENGPMASDP LCLTYSYLSH GSLAKEKTQT LHKFILLFAV HTVNGYVNRS LPGLIGCHRK RQASLEISPI TFLTAQTLLM EPQLRMKNNE EAEDYDDDLT WVHYIAAEEE DWDYAPLVLA TDETFKTREA IQHESGILGP DVRPLYSRRL PKGVKHLKDF SSFVNMER DIjASGLIGPL ：SWYLTENI QRFLPNPAGV HEVAYWYILS IGAQTDFLSV MENPGLWILG CHNSDFRNRG SKNNAIEPRS FSONPPVLKR DFDIYDEDEN QSPRSFQKKT RHYFIAAVER SVPQFKKWF QEFTDGSFTQ PLYRGELNEH RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN TKDEFDCKAW AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL FALFFTIFDE TKSWYFTENM ERNCRAPCNI MDTLPGLVMA QDQRIRWYLL YNLYPGVFET VEMLPSKAGI GMASGHIRDF QITASGQYGQ LAPMIIHGIK TQGARQKFSS FFGNVDSSGI KHNIFNPPII ARYIRLHPTH MPLGMESKAI SDAQITASSY FTNMFATWSP PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM QNGKVKVFQG NQDSFTPWN SLDPPLLTRY CEAQDLY 1 51 101 151 201 251 301 351 401 451 501 551 601 651 701 751 801 851 901 951 1001 1051 1101 1151 1201 1251 1301 1351 1401 1451 ΥΥ£ NR£

FDEGKSWHSE SVYWHVIGMG DLGQFLLFCH DSEMDWRFD PDDRSYKSQY LLYGEVGDTL PILPGEIFKY LICYKESVDQ QLEDPEFQAS FFSGYTFKHK MTALLKVSSC JQEEITRTTL

位點以粗體表示。 LSWDYMQSDL GELPVDARFP AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG VDLVKDLNSG LIGALLVCRE TKNSLMQDRD AASARAWPKM TTPEVHSIFL· EGHTFLVRNH

ISSHQHDGME DDNSPSFIQI LNNGPQRIGR LIIFKNQASR KWTVTVEDGP RGNQIMSDKR NIMHSINGYV MVYEDTLTLF DKNTGDYYED

AYVKVDSCPE RSVAKKHPKT KYKKVRFMAY PYNIYPHGIT TKSDPRCLTR NVILFSVFDE FDSLQLSVCL PFSGETVFMS SYEDISAYLL

SMGSNENIHS WRVECLIGEH WAPKLARLHY LYISQFIIMY

QSDQEEIDYD DTISVEMKKE LWDYGMSSSP HVLRNRAQSG LGLLGPYIRA EVEDNIMVTF FVKPNETKTY FWKVQHHMAP LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE QMEDPTFKEN YRFHAINGYI IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL LHAGMSTLFL VYSNKCQTPL SGSINAWSTK EPFSWIKVDL

SLDGKKWQTY YSIRSTLRME SKARLHLQGR YVKEFLISSS LRIHPQSWVH

RGNSTGTLMV LMGCDLNSCS SNAWRPQVNN QDGHQWTLFF QIALRMEVLG •171 - 201217526 全長FVIII氨基酸序列

MOIELSTCFF LCLLRFCFSA 51 101 151 201 251 301 351 401 451 501 551 601 651 701 751 801 851 901 951 1001 1051 1101 1151 1201 1251 1301 1351 1401 1451 1501 1551 1601 1651 1701 1751 1801 1851 1901 1951 2001 2051 2101 2151 2201 2251 2301 2351

PRVPKSFPFN DTWITLKNM QVL QT HTVNGYVNRS RQASLEISPI EPQLRMKNNE WVHYIAAEEE TDETFKTREA DVRPLYSRRL YYSSFVNMER NRSWYLTENI HEVAYWYILS MENPGLWILG SKNNAIEPRS IQNVSSSDLL SEMTHFRPQL SNNLISTIPS SGGPLSLSEE ALLTKDNALF 工LESDTEFKK EGPIPPDAQN LGPEKSVEGQ LHENNTHNQE TRQNVEGSYD NQTKQIVEKY 工VDDTSTQWS QANRSPLPIA SHFLQGAKKN KPDLPKTSGK AIKWNEANRP SQEKSPEKTA TERLCSQNPP EDENQSPRSF KWFQEFTDG PYSFYSSLIS CKAWAYFSDV 工FDETKSWYF LVMAQDQRIR VFETVEMLPS IRDFQITASG HGIKTQGARQ SSGIKHNIFN SKAISDAQIT VDFQKTMKVT VFQGNQDSFT Y

GSHTYWQ\ GSLAKEKTC

TSWYKKTLF ASHPVSLHAV KENGPMASDP LHKFILLFAV LPGLIGCHRK TFLTAQTLLM EAEDYDDDLT DWDYAPLVLA IQHESGILGP PKGVKHLKDF DLASGLIGPL QRFLPNPAGV IGAQTDFLSV CHNSDFRNRG FSQNSRHPST MLLRQSPTPH HHSGDMVFTP DNLAAGTDNT NNDSKLLESG KVSISLLKTN VTPLIHDRML PDMSFFKMLF NFLSEKNKW KKIQEEIEKK GAYAPVLQDF ACTTRISPNT KNMKHLTPST KVSSFPSIRP NLSLAILTLE VELLPKVHIY GKVPFLRVAT FKKKDTILSL VLKRHQREIT QKKTRHYFIA SFTQPLYRGE YEEDQRQGAE DLEKDVHSGL TENMERNCRA WYLLSMGSNE KAG工WRVECL QYGQWAPKLA KFSSLYISQF PPIIARY工RL ASSYFTNMFA GVTTQGVKSL PWNSLDPPL

：信號肽 TRRYYLGAVE VEFTDHLFN工 GVSYWKASEG LCLTYSYLSH FDEGKSWHSE SVYWHVIGMG DLGQFLLFCH DSEMDWRFD PDDRSYKSQY LLYGEVGDTL PILPGEIFKY LICYKESVDQ QLEDPEFQAS FFSGYTFKHK MTALLKVSSC RQKQFNATTI GLSLSDLQEA ESGLQLRLNE SSLGPPSMPV LMNSQESSWG KTSNNSATNR MDKNATALRL LPESARWIQR VGKGEFTKDV ETLIQENWL RSLNDSTNRT SQQNFVTQRS LTQIDYNEKE IYLTRVLFQD MTGDQREVGS QKDLFPTETS ESSAKTPSKL NACESNHAIA RTTLQSDQEE AVERLWDYGM LNEHLGLLGP PRKNFVKPNE IGPLLVCHTN PCNIQMEDPT NIHSIHFSGH IGEHLHAGMS RLHYSGSINA IIMYSLDGKK HPTHYSIRST TWSPSKARLH LTSMYVKEFL LTRYLRIHPQ 下劃線表示 LSWDYMQSDL GELPVDARFP AKPRPPWMGL LGPTIQAEVY AEYDDQTSQR EKEDDKVFPG VDLVKDLNSG LIGALLVCRE TKNSLMQDRD AASARAWPKM TTPEVHSIFL EGHTFLVRNH ISSHQHDGME AYVKVDSCPE DDNSPSFIQI RSVAKKHPKT LNNGPQRIGR KYKKVRFMAY LIIFKNQASR PYNIYPHGIT KWTVTVEDGP TKSDPRCLTR RGNQIMSDKR NV工LFSVFDE NIMHSINGYV FDSLQLSVCL· MVYEDTLTLF PFSGETVFMS DKNTGDYYED SYEDISAYLL PENDIEKTDP WFAHRTPMPK KYETFSDDPS PGAIDSNNSL·

KLGTTAATEL HYDSQLDTTL KNVSSTESGR KTHIDGPSLL NHMSNKTTSS THGKNSLNSG GLKEMVFPSS

KKLDFKVSST FGKKSSPLTE LFKGKRAHGP IENSPSVWQN KNMEMVQQKK QGPSPKQLVS RNLFLTNLDN

PQ工HTVTGTK NFMKNIiFLLS KKHTAHFSKK GEEENLEGLG KRALKQFRLP LEETELEKRI KGAITQSPLS DCLTRSHSIP NSSHLPAASY RKKDSGVQES LGTSATNSVT YKKVENTVLP NGSPGHLDLV EGSLLQGTEG LDPLAWDNHY GTQIPKEEWK AINEGQNKPE IEVTWAKQGR 工DYDDTISVE MKKEDFDIYD SSSPHVLRNR AQSGSVPQFK YIRAEVEDNI MVTFRNQASR TKTYFWKVQH HMAPTKDEFD TLNPAHGRQV TVQEFALFFT FKENYRFHAI NGYIMDTLPG VFTVRKKEEY KMALYNLYPG TLFLVYSNKC QTPLGMASGH

WSTKEPFSWI WQTYRGNSTG LRMELMGCDL LQGRSNAWRP ISSSQDGHQW SWVHQIALRM

KVDLLAPMII TLMVFFGNVD NSCSMPLGME QVNNPKEWLQ TLFFQNGKVK EVLGCEAQDL FIX氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下

劃線 MQR腳J醒· ERECMEEKCS FGFEGKNCEL VSVSQTSKLT QWLNGKVDA PHHNYNAAIN HKGRSALVLQ GTSFLTGIIS

FEEAREVFEN DVTCNIKNGR RAETVFPDVD FCGGSIVNEK KYNHDIALLE YLRVPLVDRA WGEECAMKGK

SXbWMQm TERTTEFWKQ CEQFCKNSAD YVNSTEAETI WIVTAAHCVE LDEPLVLNSY TCLRSTKFTI YGIYTKVSRY

FLDHENANKI LNRPKRYNSG

YVDGDQCESN NKWCSCTEG LDNITQSTQS TGVKITWAG VTPICIADKE YNNMFCAGFH VNWIKEKTKL

PCLNGGSCKD YRLAENQKSC FNDFTRWGG EHNIEETEHT YTNIFLKFGS EGGRDSCQGD T

KLEEFVQGNL DINSYECWCP EPAVPFPCGR EDAKPGQFPW EQKRNVIRII GYVSGWGRVF SGGPHVTEVE -172- 201217526

FIX DNA序歹!J

atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta ggatatctac tcagtgctga atgtacagtt tttcttgatc atgaaaacgc acaaaatt ctgaatcggc caaagaggta taattcaggt aaattggaag agtttgttca agggaatcta gagagagaat gtatggaaga aaagtgtagt tttgaagaag cacgagaagt ttttgaaaac actgaaagaa caactgaatt ttggaagcag tatgttgatg gagatcagtg tgagtccaat ccatgtttaa atggcggcag ttgcaaggat gacattaatt cctatgaatg ttggtgtccc tttggatttg aaggaaagaa ctgtgaatta gatgtaacat gtaacattaa gaatggcaga tgcgagcagt tttgtaaaaa tagtgctgat aacaaggtgg tttgctcctg tactgaggga tatcgacttg cagaaaacca gaagtcctgt gaaccagcag tgccatttcc atgtggaaga gtttctgttt cacaaacttc taagctcacc cgtgctgaga ctgtttttcc tgatgtggac tatgtaaatt ctactgaagc tgaaaccatt ttggataaca tcactcaaag cacccaatca tttaatgact tcactcgggt tgttggtgga gaagatgcca aaccaggtca attcccttgg caggttgttt tgaatggtaa agttgatgca ttctgtggag gctctatcgt taatgaaaaa tggattgtaa ctgctgccca ctgtgttgaa actggtgtta aaattacagt tgtcgcaggt gaacataata ttgaggagac agaacataca gagcaaaagc gaaatgtgat tcgaattatt cctcaccaca actacaatgc agctattaat aagtacaacc atgacattgc ccttctggaa ctggacgaac ccttagtgct aaacagctac gttacaccta tttgcattgc tgacaaggaa tacacgaaca tcttcctcaa atttggatct ggctatgtaa gtggctgggg aagagtcttc cacaaaggga gatcagcttt agttcttcag taccttagag ttccacttgt tgaccgagcc acatgtcttc gatctacaaa gttcaccatc tataacaaca tgttctgtgc tggcttccat gaaggaggta gagattcatg tcaaggagat agtgggggac cccatgttac tgaagtggaa gggaccagtt tcttaactgg aattattagc tggggtgaag agtgtgcaat gaaaggcaaa tatggaatat ataccaaggt atcccggtat gtcaactgga ttaaggaaaa aacaaagctc acttga FX氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下

劃線。 MGRPLHLVLL SASLAGLLLL GESLFIRREO CELFTRKLCS LDNGDCDQFC HEEQNSVVCS KRSVAQATSS SGEAPDSITW KPYDAADLDP CKDGECPWQA LLINEENEGF CGGTILSEFY AVHEVEVVIK HNRFTKETYD FDIAVLRLKT VSGFGRTHEK GRQSTRLKML EVPYVDRNSC GPHVTRFKDT YFVTGIVSWG EGCARKGKYG VITSSPLK

ANNILARVTR ANSFLEEMKK GHLERECMEE ETSPCQNQGK CKDGLGEYTC TCLEGFEGKN CARGYTLADN GKACIPTGPY PCGKQTLERR TENPFDLLDF NQTQPERGDN NLTRIVGGQE ILTAAHCLYQ AKRFKVRVGD RNTEQEEGGE PITFRMNVAP ACLPERDWAE STLMTQKTGI KLSSSFIITQ NMFCAGYDTK QEDACQGDSG IYTKVTAFLK WIDRSMKTRG LPKAKSHAPE FX DNA序列 atggggcgcc ggggaaagtc gccaattcct acctgctcat tggaataaat tgtaaagacg tgtgaattat cacgaggaac ggcaaggcct aagaggtcag aagccatatg aaccagacgc cactgcacct tgttcatccg ttcttgaaga acgaagaggc acaaagatgg gcctcgggga tcacacggaa agaactctgt gcattcccac tggcccaggc atgcagccga agcctgagag cgtcctgctc cagggagcag gatgaagaaa ccgcgaggtc cgaccagtgt atacacctgc gctctgcagc ggtgtgctcc agggccctac caccagcagc cctggacccc gggcgacaac agtgcctccc gccaacaaca ggacacctcg tttgaggaca gagaccagtc acctgtttag ctggacaacg tgcgcccgcg ccctgtggga agcggggagg accgagaacc aacctcacca tggctggcct tcctggcgag aaagagagtg gcgacaagac cttgccagaa aaggattcga gggactgtga ggtacaccct aacagaccct cccctgacag ccttcgacct ggatcgtggg cctgctgctc ggtcacgagg catggaagag gaatgaattc ccagggcaaa aggcaaaaac ccagttctgc ggctgacaac ggaacgcagg catcacatgg gcttgacttc aggccaggaa -173- 201217526 tgcaaggacg tgtggtggaa gccaagagat gcggtgcacg ttcgacatcg gcctgcctcc gtgagcggct gaggtgccct aacatgttct ggcccgcacg gagggctgtg tggatcgaca gtcataacgt gggagtgtcc ccattctgag tcaaggtgag aggtggaggt ccgtgctccg ccgagcgtga tcgggcgcac acgtggaccg gtgccggcta tcacccgctt cccgtaaggg ggtccatgaa cctctccatt ctggcaggcc cgagttctac ggtaggggac ggtcatcaag gctcaagacc ctgggccgag ccacgagaag caacagctgc cgacaccaag caaggacacc gaagtacggg aaccaggggc aaagtga ctgctcatca atcctaacgg cggaacacgg cacaaccggt cccatcacct tccacgctga ggccggcagt aagctgtcca caggaggatg tacttcgtga atctacacca ttgcccaagg atgaggaaaa cagcccactg agcaggagga tcacaaagga tccgcatgaa tgacgcagaa ccaccaggct gcagcttcat cctgccaggg caggcatcgt aggtcaccgc ccaagagcca cgagggtttc tctctaccaa gggcggtgag gacctatgac cgtggcgcct gacggggatt caagatgctg catcacccag ggacagcggg cagctgggga cttcctcaag tgccccggag FVII-066 DNA序歹ij

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT

61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC

121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC

181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT

241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG

301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG

361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC

421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA

541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA ATTGTGGGGG GCAAGGTGTG CCCCAAAGGG

601 GAGTGTCCAT GGCAGGTCCT GTTGTTGGTG AATGGAGCTC AGTTGTGTGG GGGGACCCTG

661 ATCAACACCA TCTGGGTGGT CTCCGCGGCC CACTGTTTCG ACAAAATCAA GAACTGGAGG

721 AACCTGATCG CGGTGCTGGG CGAGCACGAC CTCAGCGAGC ACGACGGGGA TGAGCAGAGC

781 CGGCGGGTGG CGCAGGTCAT CATCCCCAGC ACGTACGTCC CGGGCACCAC CAACCACGAC

841 ATCGCGCTGC TCCGCCTGCA CCAGCCCGTG GTCCTCACTG ACCATGTGGT GCCCCTCTGC

901 CTGCCCGAAC GGACGTTCTC TGAGAGGACG CTGGCCTTCG TGCGCTTCTC ATTGGTCAGC

961 GGCTGGGGCC AGCTGCTGGA CCGTGGCGCC ACGGCCCTGG AGCTCATGGT CCTCAACGTG

1021 CCCCGGCTGA TGACCCAGGA CTGCCTGCAG CAGTCACGGA AGGTGGGAGA CTCCCCAAAT

1081 ATCACGGAGT ACATGTTCTG TGCCGGCTAC TCGGATGGCA GCAAGGACTC CTGCAAGGGG

1141 GACAGTGGAG GCCCACATGC CACCCACTAC CGGGGCACGT GGTACCTGAC GGGCATCGTC

1201 AGCTGGGGCC AGGGCTGCGC AACCGTGGGC CACTTTGGGG TGTACACCAG GGTCTCCCAG

1261 TACATCGAGT GGCTGCAAAA GCTCATGCGC TCAGAGCCAC GCCCAGGAGT CCTCCTGCGA

1321 GCCCCATTTC CCGGTGGCGG TGGCTCCGGC GGAGGTGGGT CCGGTGGCGG CGGATCAGGT

1381 GGGGGTGGAT CAGGCGGTGG AGGTTCCGGT GGCGGGGGAT CCGACAAAAC TCACACATGC

1441 CCACCGTGCC CAGCTCCGGA ACTCCTGGGA GGACCGTCAG TCTTCCTCTT CCCCCCAAAA

1501 CCCAAGGACA CCCTCATGAT CTCCCGGACC CCTGAGGTCA CATGCGTGGT GGTGGACGTG

1561 AGCCACGAAG ACCCTGAGGT CAAGTTCAAC TGGTACGTGG ACGGCGTGGA GGTGCATAAT

1621 GCC7U\GACAA AGCCGCGGGA GGAGCAGTAC AACAGCACGT ACCGTGTGGT CAGCGTCCTC

1681 ACCGTCCTGC ACCAGGACTG GCTGAATGGC AAGGAGTACA AGTGCAAGGT CTCCAACAAA

1741 GCCCTCCCAG CCCCCATCGA GAAAACCATC TCCAAAGCCA AAGGGCAGCC CCGAGAACCA

1801 CAGGTGTACA CCCTGCCCCC ATCCCGGGAT GAGCTGACCA AGAACCAGGT CAGCCTGACC

1861 TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA TCCCAGCGAC ATCGCCGTGG AGTGGGAGAG CAATGGGCAG

1921 CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACGCCTCCC GTGTTGGACT CCGACGGCTC CTTCTTCCTC

1981 TACAGCAAGC TCACCGTCGA CAAGAGCAGG TGGCAGCAGG GGAACGTCTT CTCATGCTCC

2041 GTGATGCATG AGGCTCTGCA CAACCACTAC ACGCAGAAGA GCCTCTCCCT GTCTCCGGGT

2101 AAACGGCGCC GCCGGAGCGG TGGCGGCGGA TCAGGTGGGG GTGGATCAGG CGGTGGAGGT

2161 TCCGGTGGCG GGGGATCCGG CGGTGGAGGT TCCGGTGGGG GTGGATCAAG GAAGAGGAGG

2221 AAGAGGGCGC AGGTGCAGCT GCAGGAGTCT GGGGGAGGCT TGGTACAGCC TGGGGGGTCC

2281 CTGAGACTCT CCTGTGCAGC CTCTGGATTC ATGTTTAGCA GGTATGCCAT GAGCTGGGTC

2341 CGCCAGGCTC CAGGGAAGGG GCCAGAGTGG GTCTCAGGTA TTAGTGGTAG TGGTGGTAGT

2401 ACATACTACG CAGACTCCGT GAAGGGCCGG TTCACCGTCT CCAGAGACAA TTCCAAGAAC

2461 ACGCTGTATC TGCAAATGAA CAGCCTGAGA GCCGAGGACA CGGCTGTATA TTACTGCGCC

2521 CGGGGCGCCA CCTACACCAG CCGGAGCGAC GTGCCCGACC AGACCAGCTT CGACTACTGG

2581 GGCCAGGGAA CCCTGGTCAC CGTCTCCTCA GGGAGTGCAT CCGCCCCAAA GCTTGAAGAA

2641 GGTGAATTTT CAGAAGCACG CGTATCTGAA CTGACTCAGG ACCCTGCTGT GTCTGTGGCC

2701 TTGGGACAGA CAGTCAGGAT CACATGCCAA GGAGACAGCC TCAGAAACTT TTATGCAAGC

2761 TGGTACCAGC AGAAGCCAGG ACAGGCCCCT ACTCTTGTCA TCTATGGTTT AAGTAAAAGG

2821 CCCTCAGGGA TCCCAGACCG ATTCTCTGCC TCCAGCTCAG GAAACACAGC TTCCTTGACC

2881 ATCACTGGGG CTCAGGCGGA AGATGAGGCT GACTATTACT GCCTGCTGTA CTACGGCGGC

2941 GGCCAGCAGG GCGTGTTCGG CGGCGGCACC AAGCTGACCG TCCTACGTCA GCCCAAGGCT

S -174- 201217526 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 3781

GCCCCCTCGG

GGTGGGTCCG

GGGGGATCAG

CCGTCAGTCT

GAGGTCACAT

TACGTGGACG

AGCACGTACC

GAGTACAAGT

AAAGCCAAAG

CTGACCAAGA

GCCGTGGAGT

TTGGACTCCG

CAGCAGGGGA

CAGAAGAGCC

TCACTCTGTT

GTGGCGGCGG

ACAAAACTCA

TCCTCTTCCC

GCGTGGTGGT

GCGTGGAGGT

GTGTGGTCAG

GCAAGGTCTC

GGCAGCCCCG

ACCAGGTCAG

GGGAGAGCAA

ACGGCTCCTT

ACGTCTTCTC

TCTCCCTGTC

CCCGCCCTCT

ATCAGGTGGG

CACATGCCCA

CCCAAAACCC

GGACGTGAGC

GCATAATGCC

CGTCCTCACC

CAACAAAGCC

AGAACCACAG

CCTGACCTGC

TGGGCAGCCG

CTTCCTCTAC

ATGCTCCGTG

TCCGGGTAAA

TCTGCGGCCG

GGTGGATCAG

CCGTGCCCAG

AAGGACACCC

CACGAAGACC

AAGACAAAGC

GTCCTGCACC

CTCCCAGCCC

GTGTACACCC

CTGGTCAAAG

GAGAACAACT

AGCAAGCTCA

ATGCATGAGG

TGA

GTGGCGGTGG

GCGGTGGAGG

CACCGGAACT

TCATGATCTC

CTGAGGTCAA

CGCGGGAGGA

AGGACTGGCT

CCATCGAGAA

TGCCCCCATC

GCTTCTATCC

ACAAGACCAC

CCGTGGACAA

CTCTGCACAA

CTCCGGCGGA

TTCCGGTGGC

CCTGGGCGGA

CCGGACCCCT

GTTCAACTGG

GCAGTACAAC

GAATGGCAAG

AACCATCTCC

CCGGGATGAG

CAGCGACATC

GCCTCCCGTG

GAGCAGGTGG

CCACTACACG FVII-066氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或SCE5與Fc區的接頭區域爲下

劃線，且具有前蛋白轉化酶加工位點的接頭以粗體顯示。

1 MVSQALRLLC__ LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 S^EE ARE IFK ' DMRTKLFW Ϊ SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR 241 NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHVVPLC 301 LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN 361 ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ 421 YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC 4 81 PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN 541 AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP 601 QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL 661 YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KRKRRSGGGG SGGGGSGGGG 721 SGGGGSGGGG SGGGGSRKRR KRAQVQLQES GGGLVQPGGS LRLSCAASGF MFSRYAMSWV 781 RQAPGKGPEW VSGISGSGGS TYYADSVKGR FTVSRDNSKN TLYLQMNSLR AEDTAVYYCA 841 RGATYTSRSD VPDQTSFDYW GQGTLVTVSS GSASAPKLEE GEFSEARVSE LTQDPAVSVA 901 LGQTVRITCQ GDSLRNFYAS WYQQKPGQAP TLVIYGLSKR PSGIPDRFSA SSSGNTASLT 961 ITGAQAEDEA DYYCLLYYGG GQQGVFGGGT KLTVLRQPKA APSVTLFPPS SAAGGGGSGG 1021 GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSDKTHTCP PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP 1081 EVTCVWDVS HEDPEVKH^W YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRWSVLT VLHQDWLNGK * 1141 EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI 1201 AVEWESNGQP ENNYKTTPPV LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT 1261 QKSLSLSPGK *

FVII-05 7 DNA序歹IJ

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT 61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC 121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC 181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT 241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG 301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG 361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC 421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA 481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA 541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC 601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCC SSI GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGAGG ACCGTCAGTC 721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA 781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC 841 GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC 901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG 961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA 1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG 1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG 1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC -175- 201217526

1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG 1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC 1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA 1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT 1441 GGTTCAAGCG TGAGCCAGAC CAGCAAGCTG ACCCGGATTG TGGGGGGCAA GGTGTGCCCC 1501 AAAGGGGAGT GTCCATGGCA GGTCCTGTTG TTGGTGAATG GAGCTCAGTT GTGTGGGGGG 1561 ACCCTGATCA ACACCATCTG GGTGGTCTCC GCGGCCCACT GTTTCGACAA AATCAAGAAC 1621 TGGAGGAACC TGATCGCGGT GCTGGGCGAG CACGACCTCA GCGAGCACGA CGGGGATGAG 1681 CAGAGCCGGC GGGTGGCGCA GGTCATCATC CCCAGCACGT ACGTCCCGGG CACCACCAAC 1741 CACGACATCG CGCTGCTCCG CCTGCACCAG CCCGTGGTCC TCACTGACCA TGTGGTGCCC 1801 CTCTGCCTGC CCGAACGGAC GTTCTCTGAG AGGACGCTGG CCTTCGTGCG CTTCTCATTG 1861 GTCAGCGGCT GGGGCCAGCT GCTGGACCGT GGCGCCACGG CCCTGGAGCT CATGGTCCTC 1921 AACGTGCCCC GGCTGATGAC CCAGGACTGC CTGCAGCAGT CACGGAAGGT GGGAGACTCC 1981 CCAAATATCA CGGAGTACAT GTTCTGTGCC GGCTACTCGG ATGGCAGCAA GGACTCCTGC 2041 AAGGGGGACA GTGGAGGCCC ACATGCCACC CACTACCGGG GCACGTGGTA CCTGACGGGC 2101 ATCGTCAGCT GGGGCCAGGG CTGCGCAACC GTGGGCCACT TTGGGGTGTA CACCAGGGTC 2161 TCCCAGTACA TCGAGTGGCT GCAAAAGCTC ATGCGCTCAG AGCCACGCCC AGGAGTCCTC 2221 CTGCGAGCCC CATTTCCCGG TGGCGGTGGC TCCGGCGGAG GTGGGTCCGG TGGCGGCGGA 2281 TCAGGTGGGG GTGGATCAGG CGGTGGAGGT TCCGGTGGCG GGGGATCAGA CAAAACTCAC 2341 ACATGCCCAC CGTGCCCAGC ACCTGAACTC CTGGGAGGAC CGTCAGTCTT CCTCTTCCCC 2401 CCAT^AACCCA AGGACACCCT CATGATCTCC CGGACCCCTG AGGTCACATG CGTGGTGGTG 2461 GACGTGAGCC ACGAAGACCC TGAGGTCAAG TTCAACTGGT ACGTGGACGG CGTGGAGGTG 2521 CATAATGCCA AGACAAAGCC GCGGGAGGAG CAGTACAACA GCACGTACCG TGTGGTCAGC 2581 GTCCTCACCG TCCTGCACCA GGACTGGCTG AATGGCAAGG AGTACAAGTG CAAGGTCTCC 2641 AACAAAGCCC TCCCAGCCCC CATCGAGAAA ACCATCTCCA AAGCCAAAGG GCAGCCCCGA 2701 GAACCACAGG TGTACACCCT GCCCCCATCC CGGGATGAGC TGACCAAGAA CCAGGTCAGC 2761 CTGACCTGCC TGGTCAAAGG CTTCTATCCC AGCGACATCG CCGTGGAGTG GGAGAGCAAT 2821 GGGCAGCCGG AGAACAACTA CAAGACCACG CCTCCCGTGT TGGACTCCGA CGGCTCCTTC 2881 TTCCTCTACA GCAAGCTCAC CGTGGACAAG AGCAGGTGGC AGCAGGGGAA CGTCTTCTCA 2941 TGCTCCGTGA TGCATGAGGC TCTGCACAAC CACTACACGC AGAAGAGCCT CTCCCTGTCT 3001 CCGGGTAAAT GA F VII-05 7氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與Factor XIa切割位元點的接頭區域以粗體顯示，且因數XIa切割位元點以虛線下劃線顯示。

1 MVSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

61 έϊΐέϋίϋϋϋίΐϋϊ SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV 241 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 301 RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK 361 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 421 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG 481 GSSVS^TSKL_TRIVGGKVCP KGECPWQVLL LVNGAQLCGG TLINTIWWS AAHCFDKIKN 541 wrniTiavlge'hdlsehdgde qsrrvaqvii pstyvpgttn hdiallrlhq pwltdhvvp 601 LCLPERTFSE RTLAFVRFSL VSGWGQLLDR GATALELMVL NVPRLMTQDC LQQSRKVGDS 661 PNITEYMFCA GYSDGSKDSC KGDSGGPHAT HYRGTWYLTG IVSWGQGCAT VGHFGVYTRV 721 SQYIEWLQKL· MRSEPRPGVL LRAPFPGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSDKTH 781 TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV 841 HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR 901 EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF 961 FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK* FVII-058 DNA 序列 1 61 121 181 241

ATGGTCTCCC

GCAGTCTTCG

GCGTTCCTGG

TCCTTCGAGG

TCTTACAGTG

AGGCCCTCAG

TAACCCAGGA

AGGAGCTGCG

AGGCCCGGGA

ATGGGGACCA

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

CTGCCTGGCT

GCGCGCCAAC

GGAGCAGTGC

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG -176- 201217526

301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG

361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC

421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA

541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC

601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCC

661 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGAGG ACCGTCAGTC

721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA

781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC

841 GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC

901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG

961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA

1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG

1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG

1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC

1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG

1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC

1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA

1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT

1441 GGTTCAGACT TCCTGGCCGA GGGCGGCGGC GTGCGGATTG TGGGGGGCAA GGTGTGCCCC

1501 AAAGGGGAGT GTCCATGGCA GGTCCTGTTG TTGGTGAATG GAGCTCAGTT GTGTGGGGGG

1561 ACCCTGATCA ACACCATCTG GGTGGTCTCC GCGGCCCACT GTTTCGACAA AATCAAGAAC

1621 TGGAGGAACC TGATCGCGGT GCTGGGCGAG CACGACCTCA GCGAGCACGA CGGGGATGAG

1681 CAGAGCCGGC GGGTGGCGCA GGTCATCATC CCCAGCACGT ACGTCCCGGG CACCACCAAC

1741 CACGACATCG CGCTGCTCCG CCTGCACCAG CCCGTGGTCC TCACTGACCA TGTGGTGCCC

1801 CTCTGCCTGC CCGAACGGAC GTTCTCTGAG AGGACGCTGG CCTTCGTGCG CTTCTCATTG

1861 GTCAGCGGCT GGGGCCAGCT GCTGGACCGT GGCGCCACGG CCCTGGAGCT CATGGTCCTC

1921 AACGTGCCCC GGCTGATGAC CCAGGACTGC CTGCAGCAGT CACGGAAGGT GGGAGACTCC

1981 CCAAATATCA CGGAGTACAT GTTCTGTGCC GGCTACTCGG ATGGCAGCAA GGACTCCTGC

2041 AAGGGGGACA GTGGAGGCCC ACATGCCACC CACTACCGGG GCACGTGGTA CCTGACGGGC

2101 ATCGTCAGCT GGGGCCAGGG CTGCGCAACC GTGGGCCACT TTGGGGTGTA CACCAGGGTC

2161 TCCCAGTACA TCGAGTGGCT GCAAAAGCTC ATGCGCTCAG AGCCACGCCC AGGAGTCCTC

2221 CTGCGAGCCC CATTTCCCGG TGGCGGTGGC TCCGGCGGAG GTGGGTCCGG TGGCGGCGGA

2281 TCAGGTGGGG GTGGATCAGG CGGTGGAGGT TCCGGTGGCG GGGGATCAGA CAAAACTCAC

2341 ACATGCCCAC CGTGCCCAGC ACCTGAACTC CTGGGAGGAC CGTCAGTCTT CCTCTTCCCC

2401 CCAAAACCCA AGGACACCCT CATGATCTCC CGGACCCCTG AGGTCACATG CGTGGTGGTG

2461 GACGTGAGCC ACGAAGACCC TGAGGTCAAG TTCAACTGGT ACGTGGACGG CGTGGAGGTG

2521 CATAATGCCA AGACAAAGCC GCGGGAGGAG CAGTACAACA GCACGTACCG TGTGGTCAGC

2581 GTCCTCACCG TCCTGCACCA GGACTGGCTG AATGGCAAGG AGTACAAGTG CAAGGTCTCC

2641 AACAAAGCCC TCCCAGCCCC CATCGAGAAA ACCATCTCCA AAGCCAAAGG GCAGCCCCGA

2701 GAACCACAGG TGTACACCCT GCCCCCATCC CGGGATGAGC TGACCAAGAA CCAGGTCAGC

2761 CTGACCTGCC TGGTCAAAGG CTTCTATCCC AGCGACATCG CCGTGGAGTG GGAGAGCAAT

2821 GGGCAGCCGG AGAACAACTA CAAGACCACG CCTCCCGTGT TGGACTCCGA CGGCTCCTTC

2881 TTCCTCTACA GCAAGCTCAC CGTGGACAAG AGCAGGTGGC AGCAGGGGAA CGTCTTCTCA

2941 TGCTCCGTGA TGCATGAGGC TCTGCACAAC CACTACACGC AGAAGAGCCT CTCCCTGTCT

3001 CCGGGTAAAT GA FVII-05 8氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯不， 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 且凝血酶切割位元點以虛線下劃線顯示。

MVSOALRLLC LLLGLOGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC SFEE^EIFk''D^WkLFWI' SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED ' PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK666 6SGGGGSGG6 GSGGGGSGGG GSGGGGSGG6 GSDFLAEGGG_VRIVGGKVCP KGECPWQVLL LVNGAQLCGG TLINTIWWS AAHCFDKIKN WRNLIAVLGE~HDLSEHDGDE QSRRVAQVII PSTYVPGTTN HDIALLRLHQ PWLTDHWP LCLPERTFSE RTLAFVRFSL VSGWGQLLDR GATALELMVL NVPRLMTQDC LQQSRKVGDS PNITEYMFCA GYSDGSKDSC KGDSGGPHAT HYRGTWYLTG IVSWGQGCAT VGHFGVYTRV SQYIEWLQKL MRSEPRPGVL LRAPFPGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSDKTH -177- 201217526 781 TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV 841 HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR 901 EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF 961 FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK* FVII-059 DNA序列 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001

ATGGTCTCCC GCAGTCTTCG GCGTTCCTGG TCCTTCGAGG TCTTACAGTG GACCAGCTCC ACGCACAAGG AGTGACCACA GACGGGGTGT AAAAGAAATG GGTGGCGGCG GACAAAACTC TTCCTCTTCC TGCGTGGTGG GGCGTGGAGG CGTGTGGTCA TGCAAGGTCT GGGCAGCCCC AACCAGGTCA TGGGAGAGCA GACGGCTCCT AACGTCTTCT CTCTCCCTGT GGTTCCGGTG GGTTCAACCA TGTCCATGGC AACACCATCT CTGATCGCGG CGGGTGGCGC GCGCTGCTCC CCCGAACGGA TGGGGCCAGC CGGCTGATGA ACGGAGTACA AGTGGAGGCC TGGGGCCAGG ATCGAGTGGC CCATTTCCCG GGTGGATCAG CCGTGCCCAG AAGGACACCC CACGAAGACC AAGACAAAGC GTCCTGCACC CTCCCAGCCC GTGTACACCC CTGGTCAAAG GAGAACAACT AGCAAGCTCA ATGCATGAGG TGA

AGGCCCTCAG TAACCCAGGA AGGAGCTGCG AGGCCCGGGA ATGGGGACCA AGTCCTATAT ATGACCAGCT CGGGCACCAA CCTGCACACC CCAGCAAACC GATCAGGTGG ACACATGCCC CCCCAAAACC TGGACGTGAG TGCATAATGC GCGTCCTCAC CCAACAAAGC GAGAACCACA GCCTGACCTG ATGGGCAGCC TCTTCCTCTA CATGCTCCGT CTCCGGGTAA GCGGGGGATC CCAAGATCAA AGGTCCTGTT GGGTGGTCTC TGCTGGGCGA AGGTCATCAT GCCTGCACCA CGTTCTCTGA TGCTGGACCG CCCAGGACTG TGTTCTGTGC CACATGCCAC GCTGCGCAAC TGCAAAAGCT GTGGCGGTGG GCGGTGGAGG CACCTGAACT TCATGATCTC CTGAGGTCAA CGCGGGAGGA AGGACTGGCT CCATCGAGAA TGCCCCCATC GCTTCTATCC ACAAGACCAC CCGTGGACAA CTCTGCACAA

GCTCCTCTGC GGAAGCCCAC GCCGGGCTCC GATCTTCAAG GTGTGCCTCA CTGCTTCTGC GATCTGTGTG GCGCTCCTGT CACAGTTGAA CCAAGGCCGA GGGTGGATCA ACCGTGCCCA CAAGGACACC CCACGAAGAC CAAGACAAAG CGTCCTGCAC CCTCCCAGCC GGTGTACACC CCTGGTCAAA GGAGAACAAC CAGCAAGCTC GATGCATGAG AGGTGGCGGC CGGCGGTGGA GCCCCGGATT GTTGGTGAAT CGCGGCCCAC GCACGACCTC CCCCAGCACG GCCCGTGGTC GAGGACGCTG TGGCGCCACG CCTGCAGCAG CGGCTACTCG CCACTACCGG CGTGGGCCAC CATGCGCTCA CTCCGGCGGA TTCCGGTGGC CCTGGGAGGA CCGGACCCCT GTTCAACTGG GCAGTACAAC GAATGGCAAG AACCATCTCC CCGGGATGAG CAGCGACATC GCCTCCCGTG GAGCAGGTGG CCACTACACG

CTTCTGCTTG GGCGTCCTGC CTGGAGAGGG GACGCGGAGA AGTCCATGCC CTCCCTGCCT AACGAGAACG CGGTGCCACG TATCCATGTG GGTGGCGGTG GGCGGTGGAG GCTCCGGAAC CTCATGATCT CCTGAGGTCA CCGCGGGAGG CAGGACTGGC CCCATCGAGA CTGCCCCCAT GGCTTCTATC TACAAGACCA ACCGTCGACA GCTCTGCACA GGATCAGGTG GGTTCCGGTG GTGGGGGGCA GGAGCTCAGT TGTTTCGACA AGCGAGCACG TACGTCCCGG CTCACTGACC GCCTTCGTGC GCCCTGGAGC TCACGGAAGG GATGGCAGCA GGCACGTGGT TTTGGGGTGT GAGCCACGCC GGTGGGTCCG GGGGGATCAG CCGTCAGTCT GAGGTCACAT TACGTGGACG AGCACGTACC GAGTACAAGT AAAGCCAAAG CTGACCAAGA GCCGTGGAGT TTGGACTCCG CAGCAGGGGA CAGAAGAGCC

GGCTTCAGGG ACCGGCGCCG AGTGCAAGGA GGACGAAGCT AGAATGGGGG TCGAGGGCCG GCGGCTGTGA AGGGGTACTC GAAAAATACC GCTCCGGCGG GTTCCGGTGG TCCTGGGAGG CCCGGACCCC AGTTCAACTG AGCAGTACAA TGAATGGCAA AAACCATCTC CCCGGGATGA CCAGCGACAT CGCCTCCCGT AGAGCAGGTG ACCACTACAC GGGGTGGATC GGGGTGGATC AGGTGTGCCC TGTGTGGGGG AAATCAAGAA ACGGGGATGA GCACCACCAA ATGTGGTGCC GCTTCTCATT TCATGGTCCT TGGGAGACTC AGGACTCCTG ACCTGACGGG ACACCAGGGT CAGGAGTCCT GTGGCGGCGG ACAAAACTCA TCCTCTTCCC GCGTGGTGGT GCGTGGAGGT GTGTGGTCAG GCAAGGTCTC GGCAGCCCCG ACCAGGTCAG GGGAGAGCAA ACGGCTCCTT ACGTCTTCTC TCTCCCTGTC

CTGCCTGGCT GCGCGCCAAC GGAGCAGTGC GTTCTGGATT CTCCTGCAAG GAACTGTGAG GCAGTACTGC TCTGCTGGCA TATTCTAGAA AGGTGGGTCC CGGGGGATCC ACCGTCAGTC TGAGGTCACA GTACGTGGAC CAGCACGTAC GGAGTACAAG CAAAGCCAAA GCTGACCAAG CGCCGTGGAG GTTGGACTCC GCAGCAGGGG GCAGAAGAGC AGGCGGTGGA AGGAGGAGGT CAAAGGGGAG GACCCTGATC CTGGAGGAAC GCAGAGCCGG CCACGACATC CCTCTGCCTG GGTCAGCGGC CAACGTGCCC CCCAAATATC CAAGGGGGAC CATCGTCAGC CTCCCAGTAC CCTGCGAGCC ATCAGGTGGG CACATGCCCA CCCAAAACCC GGACGTGAGC GCATAATGCC CGTCCTCACC CAACAAAGCC AGAACCACAG CCTGACCTGC TGGGCAGCCG CTTCCTCTAC ATGCTCCGTG TCCGGGTAAA

FVII-059氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以 • \ f - 不'刖區域爲粗體顯

S -178- 201217526

示，且凝血酶切割位元點以虛 LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH DMRTKLFWI SYSDGDQCAS NENGGCEQYC SDHTGTKRSC GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961

WSQALRLLC sfee^ei'fk THKDDQLXCV KRNASKPQGR FLFPPKPKDT RWSVLTVLH NQVSLTCLVK NVFSCSVMHE GSTTKIKPRI LIAVLGEHDL PERTFSERTL TEYMFCAGYS IEWLQKLMRS PCPAPELLGG KTKPREEQYN VYTLPPSRDE SKLTVDKSRW

LMISRTPEVT CVWDVSHED QDWLNGKEYK CKVSNKALPA GFYPSDIAVE WESNGQPENN ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG VGGKVCPKGE CPWQVLLLVN SEHDGDEQSR RVAQVIIPST AFVRFSLVSG WGQLLDRGAT DGSKDSCKGD SGGPHATHYR EPRPGVLLRA PFPGGGGSGG

線下劃線顯示。 GVLHRRRRAN AFLEELRPGS DQLQSYICFC DGVSCTPTVE DKTHTCPPCP GVEVHNAKTK GQPREPQVYT DGSFFLYSKL

SPCQNGGSCK RCHEGYSLLA GGGGSGGGGS

PEVKFNWYVD PIEKTISKAK YKTTPPVLDS GSG6GGSGGG GSGG6GSGG6 GAQLCGGTLI NTIWWSAAH YVPGTTNHDI ALLRLHQPW ALELMVLNVP RLMTQDCLQQ GTWYLTGIVS WGQGCATVGH GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG

PSVFLFPPKP KDTLMISRTP STYRWSVLT VLHQDWLNGK LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI QQGNVFSCSV MHEALHNHYT EVTCVWDVS HEDPEVKFNW EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS AVEWESNGQP ENNYKTTPPV QKSLSLSPGK *

LERECKEEQC LPAFEGRNCE YPCGKIPILE APELLGGPSV PREEQYNSTY LPPSRDELTK TVDKSRWQQG 6SGGGGS6GG CFDKIKNWRN LTDHWPLCL SRKVGDSPNI FGVYTRVSQY GGSDKTHTCP YVDGVEVHNA KAKGQPREPQ LDSDGSFFLY

FVII-060 DNA序列

1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701

ATGGTCTCCC

GCAGTCTTCG

GCGTTCCTGG

TCCTTCGAGG

TCTTACAGTG

GACCAGCTCC

ACGCACAAGG

AGTGACCACA

GACGGGGTGT

AAAAGAAATG

GGTGGCGGCG

GACAAAACTC

TTCCTCTTCC

TGCGTGGTGG

GGCGTGGAGG

CGTGTGGTCA

TGCAAGGTCT

GGGCAGCCCC

AACCAGGTCA

TGGGAGAGCA

GACGGCTCCT

AACGTCTTCT

CTCTCCCTGT

GGTTCCGGTG

GGTTCAGCCC

AAAGGGGAGT

ACCCTGATCA

TGGAGGAACC

CAGAGCCGGC

CACGACATCG

CTCTGCCTGC

GTCAGCGGCT

AACGTGCCCC

CCAAATATCA

AAGGGGGACA

ATCGTCAGCT

TCCCAGTACA

CTGCGAGCCC

TCAGGTGGGG

ACATGCCCAC

CCAAAACCCA

GACGTGAGCC

CATAATGCCA

GTCCTCACCG

AACAAAGCCC

GAACCACAGG

AGGCCCTCAG

TAACCCAGGA

AGGAGCTGCG

AGGCCCGGGA

ATGGGGACCA

AGTCCTATAT

ATGACCAGCT

CGGGCACCAA

CCTGCACACC

CCAGCAAACC

GATCAGGTGG

ACACATGCCC

CCCCAAAACC

TGGACGTGAG

TGCATAATGC

GCGTCCTCAC

CCAACAAAGC

GAGAACCACA

GCCTGACCTG

ATGGGCAGCC

TCTTCCTCTA

CATGCTCCGT

CTCCGGGTAA

GCGGGGGATC

TGCGGCCCCG

GTCCATGGCA

ACACCATCTG

TGATCGCGGT

GGGTGGCGCA

CGCTGCTCCG

CCGAACGGAC

GGGGCCAGCT

GGCTGATGAC

CGGAGTACAT

GTGGAGGCCC

GGGGCCAGGG

TCGAGTGGCT

CATTTCCCGG

GTGGATCAGG

CGTGCCCAGC

AGGACACCCT

ACGAAGACCC

AGACAAAGCC

TCCTGCACCA

TCCCAGCCCC

TGTACACCCT

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CACAGTTGAA

CCAAGGCCGA

GGGTGGATCA

ACCGTGCCCA

CAAGGACACC

CCACGAAGAC

CAAGACAAAG

CGTCCTGCAC

CCTCCCAGCC

GGTGTACACC

CCTGGTCAAA

GGAGAACAAC

CAGCAAGCTC

GATGCATGAG

AGGTGGCGGC

CGGCGGTGGA

GGTGGTGGGC

GGTCCTGTTG

GGTGGTCTCC

GCTGGGCGAG

GGTCATCATC

CCTGCACCAG

GTTCTCTGAG

GCTGGACCGT

CCAGGACTGC

GTTCTGTGCC

ACATGCCACC

CTGCGCAACC

GCAAAAGCTC

TGGCGGTGGC

CGGTGGAGGT

ACCTGAACTC

CATGATCTCC

TGAGGTCAAG

GCGGGAGGAG

GGACTGGCTG

CATCGAGAAA

GCCCCCATCC

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CGGTGCCACG

TATCCATGTG

GGTGGCGGTG

GGCGGTGGAG

GCTCCGGAAC

CTCATGATCT

CCTGAGGTCA

CCGCGGGAGG

CAGGACTGGC

CCCATCGAGA

CTGCCCCCAT

GGCTTCTATC

TACAAGACCA

ACCGTCGACA

GCTCTGCACA

GGATCAGGTG

GGTTCCGGTG

GGCGCCGTGG

TTGGTGAATG

GCGGCCCACT

CACGACCTCA

CCCAGCACGT

CCCGTGGTCC

AGGACGCTGG

GGCGCCACGG

CTGCAGCAGT

GGCTACTCGG

CACTACCGGG

GTGGGCCACT

ATGCGCTCAG

TCCGGCGGAG

TCCGGTGGCG

CTGGGAGGAC

CGGACCCCTG

TTCAACTGGT

CAGTACAACA

AATGGCAAGG

ACCATCTCCA

CGGGATGAGC

GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

TCGAGGGCCG

GCGGCTGTGA

AGGGGTACTC

GAAAAATACC

GCTCCGGCGG

GTTCCGGTGG

TCCTGGGAGG

CCCGGACCCC

AGTTCAACTG

AGCAGTACAA

TGAATGGCAA

AAACCATCTC

CCCGGGATGA

CCAGCGACAT

CGCCTCCCGT

AGAGCAGGTG

ACCACTACAC

GGGGTGGATC

TGGGGGGCAA

GAGCTCAGTT

GTTTCGACAA

GCGAGCACGA

ACGTCCCGGG

TCACTGACCA

CCTTCGTGCG

CCCTGGAGCT

CACGGAAGGT

ATGGCAGCAA

GCACGTGGTA

TTGGGGTGTA

AGCCACGCCC

GTGGGTCCGG

GGGGATCAGA

CGTCAGTCTT

AGGTCACATG

ACGTGGACGG

GCACGTACCG

AGTACAAGTG

AAGCCAAAGG

TGACCAAGAA

CTGCCTGGCT

GCGCGCCAAC

GGAGCAGTGC

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG

GAACTGTGAG

GCAGTACTGC

TCTGCTGGCA

TATTCTAGAA

AGGTGGGTCC

CGGGGGATCC

ACCGTCAGTC

TGAGGTCACA

GTACGTGGAC

CAGCACGTAC

GGAGTACAAG

CAAAGCCAAA

GCTGACCAAG

CGCCGTGGAG

GTTGGACTCC

GCAGCAGGGG

GCAGAAGAGC

AGGCGGTGGA

AGGAGGAGGT

GGTGTGCCCC

GTGTGGGGGG

AATCAAGAAC

CGGGGATGAG

CACCACCAAC

TGTGGTGCCC

CTTCTCATTG

CATGGTCCTC

GGGAGACTCC

GGACTCCTGC

CCTGACGGGC

CACCAGGGTC

AGGAGTCCTC

TGGCGGCGGA

CAAAACTCAC

CCTCTTCCCC

CGTGGTGGTG

CGTGGAGGTG

TGTGGTCAGC

CAAGGTCTCC

GCAGCCCCGA

CCAGGTCAGC 179 201217526 2761 2821 2881 2941 3001

CTGACCTGCC GGGCAGCCGG TTCCTCTACA TGCTCCGTGA CCGGGTAAAT

TGGTCAAAGG CTTCTATCCC AGCGACATCG CCGTGGAGTG GGAGAGCAAT AGAACAACTA CAAGACCACG CCTCCCGTGT TGGACTCCGA CGGCTCCTTC GCAAGCTCAC CGTGGACAAG AGCAGGTGGC AGCAGGGGAA CGTCTTCTCA TGCATGAGGC TCTGCACAAC CACTACACGC AGAAGAGCCT CTCCCTGTCT GA FVII-060氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯示，且凝血酶

1 WSQALRLLC 61 sFeeareifk

121 THKDDQLICV 181 KRNASKPQGR 241 FLFPPKPKDT 301 RWSVLTVLH 361 NQVSLTCLVK 421 NVFSCSVMHE 4 81 GSALR_PRWG 541 WRNLIAVLGE 601 LCLPERTFSE 661 PNITEYMFCA 721 SQYIEWLQKL 781 TCPPCPAPEL 841 HNAKTKPREE 901 EPQVYTLPPS 961 FLYSKLTVDK 切割位元點以虛

LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH 'dm^tklfw'i SYSDGDQCAS NENGGCEQYC SDHTGTKRSC GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS

LMISRTPEVT CVWDVSHED QDWLNGKEYK CKVSNKALPA GFYPSDIAVE WESNGQPENN ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GAWGGKVCP KGECPWQVLL HDLSEHDGDE QSRRVAQVII RTLAFVRFSL VSGWGQLLDR GYSDGSKDSC KGDSGGPHAT MRSEPRPGVL LRAPFPGGGG

LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS QYNSTYRWS VLTVLHQDWL RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SRWQQGNVFS CSVMHEALHN 線下劃線顯示。

GVLHRRRRAN AFLEELRPGS

SPCQNGGSCK DQLQSYICrc RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP

PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PIEKTISKAK GQPREPQVYT YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL GSGGG6SGG6 GS6GGGSGGG LVNGAQLCGG TLINTIWVVS PSTYVPGTTN HDIALLRLHQ GATALELMVL NVPRLMTQDC HYRGTWYLTG IVSWGQGCAT SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG

LERECKEEQC LPAFEGRNCE YPCGKIPILE APELLGGPSV PREEQYNSTY LPPSRDELTK TVDKSRWQQG GSGGGGSGGG AAHCFDKIKN PWLTDHWP LQQSRKVGDS VGHFGVYTRV SGGGGSDKTH

RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF HYTQKSLSLS PGK*

FVII-061 DNA 序歹IJ

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT

61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC

121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC

181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT

241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG

301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG

361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC

421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA

541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC

601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCC

661 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGAGG ACCGTCAGTC

721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA

781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC

841 GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC

901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG

961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA

1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG

1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG

1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC

1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG

1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC

1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA

1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT

1441 GGTTCAGCCC TGCGGCCCCG GGTGGTGGGC GGCGCCATTG TGGGGGGCAA GGTGTGCCCC

1501 AAAGGGGAGT GTCCATGGCA GGTCCTGTTG TTGGTGAATG GAGCTCAGTT GTGTGGGGGG

1561 ACCCTGATCA ACACCATCTG GGTGGTCTCC GCGGCCCACT GTTTCGACAA AATCAAGAAC

1621 TGGAGGAACC TGATCGCGGT GCTGGGCGAG CACGACCTCA GCGAGCACGA CGGGGATGAG

1681 CAGAGCCGGC GGGTGGCGCA GGTCATCATC CCCAGCACGT ACGTCCCGGG CACCACCAAC

1741 CACGACATCG CGCTGCTCCG CCTGCACCAG CCCGTGGTCC TCACTGACCA TGTGGTGCCC

1801 CTCTGCCTGC CCGAACGGAC GTTCTCTGAG AGGACGCTGG CCTTCGTGCG CTTCTCATTG

-180- 201217526

1861 GTCAGCGGCT GGGGCCAGCT GCTGGACCGT GGCGCCACGG CCCTGGAGCT CATGGTCCTC 1921 AACGTGCCCC GGCTGATGAC CCAGGACTGC CTGCAGCAGT CACGGAAGGT GGGAGACTCC 1981 CCAAATATCA CGGAGTACAT GTTCTGTGCC GGCTACTCGG ATGGCAGCAA GGACTCCTGC 2041 AAGGGGGACA GTGGAGGCCC ACATGCCACC CACTACCGGG GCACGTGGTA CCTGACGGGC 2101 ATCGTCAGCT GGGGCCAGGG CTGCGCAACC GTGGGCCACT TTGGGGTGTA CACCAGGGTC 2161 TCCCAGTACA TCGAGTGGCT GCAAAAGCTC ATGCGCTCAG AGCCACGCCC AGGAGTCCTC 2221 CTGCGAGCCC CATTTCCCGG TGGCGGTGGC TCCGGCGGAG GTGGGTCCGG TGGCGGCGGA 2281 TCAGGTGGGG GTGGATCAGG CGGTGGAGGT TCCGGTGGCG GGGGATCAGA CAAAACTCAC 2341 ACATGCCCAC CGTGCCCAGC ACCTGAACTC CTGGGAGGAC CGTCAGTCTT CCTCTTCCCC 2401 CCAAAACCCA AGGACACCCT CATGATCTCC CGGACCCCTG AGGTCACATG CGTGGTGGTG 2461 GACGTGAGCC ACGAAGACCC TGAGGTCAAG TTCAACTGGT ACGTGGACGG CGTGGAGGTG 2521 CATAATGCCA AGACAAAGCC GCGGGAGGAG CAGTACAACA GCACGTACCG TGTGGTCAGC 2581 GTCCTCACCG TCCTGCACCA GGACTGGCTG AATGGCAAGG AGTACAAGTG CAAGGTCTCC 2641 AACAAAGCCC TCCCAGCCCC CATCGAGAAA ACCATCTCCA AAGCCAAAGG GCAGCCCCGA 2701 GAACCACAGG TGTACACCCT GCCCCCATCC CGGGATGAGC TGACCAAGAA CCAGGTCAGC 2761 CTGACCTGCC TGGTCAAAGG CTTCTATCCC AGCGACATCG CCGTGGAGTG GGAGAGCAAT 2821 GGGCAGCCGG AGAACAACTA CAAGACCACG CCTCCCGTGT TGGACTCCGA CGGCTCCTTC 2881 TTCCTCTACA GCAAGCTCAC CGTGGACAAG AGCAGGTGGC AGCAGGGGAA CGTCTTCTCA 2941 TGCTCCGTGA TGCATGAGGC TCTGCACAAC CACTACACGC AGAAGAGCCT CTCCCTGTCT 3001 CCGGGTAAAT GA FVII-061氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接F VII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯示，且凝血酶切割位元點以虛線下劃線顯示。

1 取雙⑷碟幽AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK dqlqsyicfc lpafegrnce

121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE

181 KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV

241 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY

301 RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK

361 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG

421 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG GSGGGGSGGG

481 GSALR_PRWG GAIVGGKVCP KGECPWQVLL LVNGAQLCGG TLINTIWWS AAHCFDKIKN

541 WRiiiTWLGE HDLSEHDGDE QSRRVAQVII PSTYVPGTTN HDIALLRLHQ PWLTDHWP

601 LCLPERTFSE RTLAFVRFSL VSGWGQLLDR GATALELMVL NVPRLMTQDC LQQSRKVGDS

661 PNITEYMFCA GYSDGSKDSC KGDSGGPHAT HYRGTWYLTG IVSWGQGCAT VGHFGVYTRV

721 SQYIEWLQKL MRSEPRPGVL LRAPFPGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSDKTH

781 TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV

841 HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR

901 EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF 961 FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK* FVII-062 DNA 序歹ij

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT 61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC 121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC 181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT 241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG 301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG 361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC 421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA 481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA 541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC 601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCA 661 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGCGG ACCGTCAGTC 721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA 781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC 841 GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC 901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG -181 201217526

961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA 1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG 1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG 1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC 1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG 1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC 1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA 1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT 1441 GGTTCAGGTG GTGGAGGATC CATTGTGGGG GGCAAGGTGT GCCCCAAAGG GGAGTGTCCA 1501 TGGCAGGTCC TGTTGTTGGT GAATGGAGCT CAGTTGTGTG GGGGGACCCT GATCAACACC 1561 ATCTGGGTGG TCTCCGCGGC CCACTGTTTC GACAAAATCA AGAACTGGAG GAACCTGATC 1621 GCGGTGCTGG GCGAGCACGA CCTCAGCGAG CACGACGGGG ATGAGCAGAG CCGGCGGGTG 1681 GCGCAGGTCA TCATCCCCAG CACGTACGTC CCGGGCACCA CCAACCACGA CATCGCGCTG 1741 CTCCGCCTGC ACCAGCCCGT GGTCCTCACT GACCATGTGG TGCCCCTCTG CCTGCCCGAA 1801 CGGACGTTCT CTGAGAGGAC GCTGGCCTTC GTGCGCTTCT CATTGGTCAG CGGCTGGGGC 1861 CAGCTGCTGG ACCGTGGCGC CACGGCCCTG GAGCTCATGG TCCTCAACGT GCCCCGGCTG 1921 ATGACCCAGG ACTGCCTGCA GCAGTCACGG AAGGTGGGAG ACTCCCCAAA TATCACGGAG 1981 TACATGTTCT GTGCCGGCTA CTCGGATGGC AGCMGGACT CCTGCAAGGG GGACAGTGGA 2041 GGCCCACATG CCACCCACTA CCGGGGCACG TGGTACCTGA CGGGCATCGT CAGCTGGGGC 2101 CAGGGCTGCG CAACCGTGGG CCACTTTGGG GTGTACACCA GGGTCTCCCA GTACATCGAG 2161 TGGCTGCAAA AGCTCATGCG CTCAGAGCCA CGCCCAGGAG TCCTCCTGCG AGCCCCATTT 2221 CCCGGTGGCG GTGGCTCCGG CGGAGGTGGG TCCGGTGGCG GCGGATCAGG TGGGGGTGGA 2281 TCAGGCGGTG GAGGTTCCGG TGGCGGGGGA TCAGAC/^AAA CTCACACATG CCCACCGTGC 2341 CCAGCACCTG AACTCCTGGG AGGACCGTCA GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC 2401 ACCCTCATGA TCTCCCGGAC CCCTGAGGTC ACATGCGTGG TGGTGGACGT GAGCCACGAA 2461 GACCCTGAGG TCAAGTTCAA CTGGTACGTG GACGGCGTGG AGGTGCATAA TGCCAAGACA 2521 AAGCCGCGGG AGGAGCAGTA CAACAGCACG TACCGTGTGG TCAGCGTCCT CACCGTCCTG 2581 CACCAGGACT GGCTGAATGG CAAGGAGTAC AAGTGCAAGG TCTCCAACAA AGCCCTCCCA 2641 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAGCC AAAGGGCAGC CCCGAGAACC ACAGGTGTAC 2701 ACCCTGCCCC CATCCCGGGA TGAGCTGACC AAGAACCAGG TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC 2761 AAAGGCTTCT ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GAGTGGGAGA GCAATGGGCA GCCGGAGAAC 2821 AACTACAAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC TCCGACGGCT CCTTCTTCCT CTACAGCAAG 2881 CTCACCGTGG ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG GGGAACGTCT TCTCATGCTC CGTGATGCAT 2941 GAGGCTCTGC ACAACCACTA CACGCAGAAG AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG TAAATGA FVII-0 62 氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，鏈或重鏈與Fc區的接頭區重鏈的接頭區域以粗體顯

前肽爲雙下劃線，連接FVIIa輕域爲下劃線，且連接Fc與FVIIa 示

1 iWSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

61 SraE ARE IFK ' DM^TKLFW Ϊ SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE

121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE

181 KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV

241 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY

301 RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK

361 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG

421 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSG666SGGG 6SG6GGSGG6 6SG6GGSGGG

481 GSGGGGSIVG GKVCPKGECP WQVLLLVNGA QLCGGTLINT IWWSAAHCF DKIKNWRNLI

541 AVLGEHDLSE HDGDEQSRRV AQVIIPSTYV PGTTNHDIAL LRLHQPWLT DHWPLCLPE

601 RTFSERTLAF VRFSLVSGWG QLLDRGATAL ELMVLNVPRL MTQDCLQQSR KVGDSPNITE

661 YMFCAGYSDG SKDSCKGDSG GPHATHYRGT WYLTGIVSWG QGCATVGHFG VYTRVSQYIE

721 WLQKLMRSEP RPGVLLRAPF PGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC

781 PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCWVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT

841 KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY

901 TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK 961 LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK*

FVII-090 DNA序歹IJ

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT 61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC

-182- 201217526

121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC

181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT

241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG

301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG

361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC

421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA

541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC

601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCA

661 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGCGG ACCGTCAGTC

721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA

781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC

841 GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC

901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG

961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA

1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG

1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG

1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC

1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG

1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC

1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA

1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT

1441 GGTTCAGCCC TGCGGCCCCG GATTGTGGGG GGCAAGGTGT GCCCCAAAGG GGAGTGTCCA

1501 TGGCAGGTCC TGTTGTTGGT GAATGGAGCT CAGTTGTGTG GGGGGACCCT GATCAACACC

1561 ATCTGGGTGG TCTCCGCGGC CCACTGTTTC GACAAAATCA AGAACTGGAG GAACCTGATC

1621 GCGGTGCTGG GCGAGCACGA CCTCAGCGAG CACGACGGGG ATGAGCAGAG CCGGCGGGTG

1681 GCGCAGGTCA TCATCCCCAG CACGTACGTC CCGGGCACCA CCAACCACGA CATCGCGCTG

1741 CTCCGCCTGC ACCAGCCCGT GGTCCTCACT GACCATGTGG TGCCCCTCTG CCTGCCCGAA

1801 CGGACGTTCT CTGAGAGGAC GCTGGCCTTC GTGCGCTTCT CATTGGTCAG CGGCTGGGGC

1861 CAGCTGCTGG ACCGTGGCGC CACGGCCCTG GAGCTCATGG TCCTCAACGT GCCCCGGCTG

1921 ATGACCCAGG ACTGCCTGCA GCAGTCACGG AAGGTGGGAG ACTCCCCAAA TATCACGGAG

1981 TACATGTTCT GTGCCGGCTA CTCGGATGGC AGCAAGGACT CCTGCAAGGG GGACAGTGGA

2041 GGCCCACATG CCACCCACTA CCGGGGCACG TGGTACCTGA CGGGCATCGT CAGCTGGGGC

2101 CAGGGCTGCG CAACCGTGGG CCACTTTGGG GTGTACACCA GGGTCTCCCA GTACATCGAG

2161 TGGCTGCAAA AGCTCATGCG CTCAGAGCCA CGCCCAGGAG TCCTCCTGCG AGCCCCATTT

2221 CCCGGTGGCG GTGGCTCCGG CGGAGGTGGG TCCGGTGGCG GCGGATCAGG TGGGGGTGGA

2281 TCAGGCGGTG GAGGTTCCGG TGGCGGGGGA TCAGACAAAA CTCACACATG CCCACCGTGC

2341 CCAGCACCTG AACTCCTGGG AGGACCGTCA GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC

2401 ACCCTCATGA TCTCCCGGAC CCCTGAGGTC ACATGCGTGG TGGTGGACGT GAGCCACGAA

2461 GACCCTGAGG TCAAGTTCAA CTGGTACGTG GACGGCGTGG AGGTGCATAA TGCCAAGACA

2521 AAGCCGCGGG AGGAGCAGTA CAACAGCACG TACCGTGTGG TCAGCGTCCT CACCGTCCTG

2581 CACCAGGACT GGCTGAATGG CAAGGAGTAC AAGTGCAAGG TCTCCAACAA AGCCCTCCCA

2641 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAGCC AAAGGGCAGC CCCGAGAACC ACAGGTGTAC

2701 ACCCTGCCCC CATCCCGGGA TGAGCTGACC AAGAACCAGG TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC

2761 AAAGGCTTCT ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GAGTGGGAGA GCAATGGGCA GCCGGAGAAC

2821 AACTACAAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC TCCGACGGCT CCTTCTTCCT CTACAGCAAG

2881 CTCACCGTGG ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG GGGAACGTCT TCTCATGCTC CGTGATGCAT

2941 GAGGCTCTGC ACAACCACTA CACGCAGAAG AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG TAAATGA FVII-090氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯示，且凝血酶切割位元點以虛線下劃線顯示。 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601

AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN

^SQALRLLC sf^arei'fk'

THKDDQLICV

KRNASKPQGR

FLFPPKPKDT

RWSVLTVLH

NQVSLTCLVK

NVFSCSVMHE

GSALRPRIVG

AvfGYH"bLSE

RTFSERTLAF

LLLGLQGCLA daertkl'fwi

NENGGCEQYC

GGGGSGGGGS

LMISRTPEVT

QDWLNGKEYK

GFYPSDIAVE

ALHNHYTQKS

GKVCPKGECP

HDGDEQSRRV

VRFSLVSGWG

SYSDGDQCAS

SDHTGTKRSC

GGGGSGGGGS

CVVVDVSHED

CKVSNKALPA

WESNGQPENN

LSLSPGKGGG

WQVLLLVNGA

AQVIIPSTYV

QLLDRGATAL

SPCQNGGSCK

RCHEGYSLLA

GGGGSGGGGS

PEVKFNWYVD

PIEKTISKAK

YKTTPPVLDS

GSGGG6SGGG

QLCGGTLINT

PGTTNHDIAL

ELMVLNVPRL

AFLEELRPGS

DQLQSYICFC

DGVSCTPTVE

DKTHTCPPCP

GVEVHNAKTK

GQPREPQVYT

DGSFFLYSKL

GSGGGGSGGG

IWWSAAHCF

LRLHQPWLT

MTQDCLQQSR

LERECKEEQC

LPAFEGRNCE

YPCGKIPILE

APELLGGPSV

PREEQYNSTY

LPPSRDELTK

TVDKSRWQQG

GSGGGGSGGG

DKIKNWRNLI

DHWPLCLPE

KVGDSPNITE ifi -183- 201217526

YMFCAGYSDG

WLQKLMRSEP

PAPELLGGPS

KPREEQYNST

TLPPSRDELT

LTVDKSRWQQ

SKDSCKGDSG

RPGVLLRAPF

VFLFPPKPKD

YRWSVLTVL

KNQVSLTCLV

GNVFSCSVMH

GPHATHYRGT

PGGGGSGGGG

TLMISRTPEV

HQDWLNGKEY

KGFYPSDIAV

EALHNHYTQK

WYLTGIVSWG

SGGGGSGGGG

TCVWDVSHE

KCKVSNKALP

EWESNGQPEN SLSLSPGK*

QGCATVGHFG

SGGGGSGGGG

DPEVKFNWYV

APIEKTISKA

NYKTTPPVLD

VYTRVSQYIE

^DKTHTCPPC

DGVEVHNAKT

KGQPREPQVY

SDGSFFLYSK FVII- 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941

100 DNA序列 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA TCTTACAGTG ATGGGGACCA GACCAGCTCC AGTCCTATAT ACGCACAAGG ATGACCAGCT AGTGACCACA CGGGCACCAA GACGGGGTGT CCTGCACACC AAAAGAAATG CCAGCAAACC GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GACAAAACTC ACACATGCCC TTCCTCTTCC CCCCAAAACC TGCGTGGTGG TGGACGTGAG GGCGTGGAGG TGCATAATGC CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC TGCAAGGTCT CCAACAAAGC GGGCAGCCCC GAGAACCACA AACCAGGTCA GCCTGACCTG TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GACGGCTCCT TCTTCCTCTA AACGTCTTCT CATGCTCCGT CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA

GCGCAGGTCA TCATCCCCAG CTCCGCCTGC ACCAGCCCGT CGGACGTTCT CTGAGAGGAC CAGCTGCTGG ACCGTGGCGC ATGACCCAGG ACTGCGAGGC GGCTACTCGG ATGGCAGCAA CACTACCGGG GCACGTGGTA

CGGACCCCTG AGGTCACATG TTCAACTGGT ACGTGGACGG CAGTACAACA GCACGTACCG AATGGCAAGG AGTACAAGTG ACCATCTCCA AAGCCAAAGG CGGGATGAGC TGACCAAGAA

GGTTCCGGTG

GGTTCAGCCC

TGGCAGGTCC

ATCTGGGTGG

GCGGTGCTGG

GTGGGCCACT

ATGCGCTCAG

TCCGGCGGAG

TCCGGTGGCG

CTGGGAGGAC

AGCGACATCG

CCTCCCGTGT

AGCAGGTGGC

CACTACACGC

GCGGGGGATC

TGCGGCCCCG

TGTTGTTGGT

TCTCCGCGGC

GCGAGCACGA

TTGGGGTGTA

AGCCACGCCC

GTGGGTCCGG

GGGGATCAGA

CGTCAGTCTT

CCGTGGAGTG

TGGACTCCGA

AGCAGGGGAA

AGAAGAGCCT

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CACAGTTGAA

CCAAGGCCGA

GGGTGGATCA

ACCGTGCCCA

CAAGGACACC

CCACGAAGAC

CAAGACAAAG

CGTCCTGCAC

CCTCCCAGCC

GGTGTACACC

CCTGGTCAAA

GGAGAACAAC

CAGCAAGCTC

GATGCATGAG

AGGTGGCGGC

CGGCGGTGGA

GATTGTGGGG

GAATGGAGCT

CCACTGTTTC

CCTCAGCGAG

CACGTACGTC

GGTCCTCACT

GCTGGCCTTC

CACGGCCCTG

CAGCTACCCC

GGACTCCTGC

CCTGACGGGC

CACCAGGGTC

AGGAGTCCTC

TGGCGGCGGA

CAAAACTCAC

CCTCTTCCCC

CGTGGTGGTG

CGTGGAGGTG

TGTGGTCAGC

CAAGGTCTCC

GCAGCCCCGA

CCAGGTCAGC

GGAGAGCAAT

CGGCTCCTTC

CGTCTTCTCA

CTCCCTGTCT

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CGGTGCCACG

TATCCATGTG

GGTGGCGGTG

GGCGGTGGAG

GCTCCGGAAC

CTCATGATCT

CCTGAGGTCA

CCGCGGGAGG

CAGGACTGGC

CCCATCGAGA

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GCTCTGCACA

GGATCAGGTG

GGTTCCGGTG

GGCAAGGTGT

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CCGGGCACCA

GACCATGTGG

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GAGCTCATGG

GGCAAGATCA

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CCAAAACCCA

GACGTGAGCC

CATAATGCCA

GTCCTCACCG

AACAAAGCCC

GAACCACAGG

CTGACCTGCC

GGGCAGCCGG

TTCCTCTACA

TGCTCCGTGA

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GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

TCGAGGGCCG

GCGGCTGTGA

AGGGGTACTC

GAAAAATACC

GCTCCGGCGG

GTTCCGGTGG

TCCTGGGAGG

CCCGGACCCC

AGTTCAACTG

AGCAGTACAA

TGAATGGCAA

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CCCGGGATGA

CCAGCGACAT

CGCCTCCCGT

AGAGCAGGTG

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GGGGTGGATC

GCCCCAAAGG

GGGGGACCCT

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ATGAGCAGAG

CCAACCACGA

TGCCCCTCTG

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GTGGAGGCCC

GGGGCCAGGG

TCGAGTGGCT

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CGTGCCCAGC

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AGACAAAGCC

TCCTGCACCA

TCCCAGCCCC

TGTACACCCT

TGGTCAAAGG

AGAACAACTA

GCAAGCTCAC

TGCATGAGGC

GA

CTGCCTGGCT GCGCGCCAAC GGAGCAGTGC GTTCTGGATT CTCCTGCAAG GAACTGTGAG GCAGTACTGC TCTGCTGGCA TATTCTAGAA AGGTGGGTCC CGGGGGATCC ACCGTCAGTC TGAGGTCACA GTACGTGGAC CAGCACGTAC GGAGTACAAG CAAAGCCAAA GCTGACCAAG CGCCGTGGAG GTTGGACTCC GCAGCAGGGG GCAGAAGAGC AGGCGGTGGA AGGAGGAGGT GGAGTGTCCA GATCAACACC GAACCTGATC CCGGCGGGTG CATCGCGCTG CCTGCCCGAA CGGCTGGGGC GCCCCGGCTG GTTCTGTGCC ACATGCCACC CTGCGCAACC GCAAAAGCTC TGGCGGTGGC CGGTGGAGGT ACCTGAACTC CATGATCTCC TGAGGTCAAG GCGGGAGGAG GGACTGGCTG CATCGAGAAA GCCCCCATCC CTTCTATCCC CAAGACCACG CGTGGACAAG TCTGCACAAC FVII-100氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示 -184- 201217526 肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯示，凝血酶切割位元點以虛線下劃線顯示，且170環區域爲波浪下劃線。

1 msQALRLLC,LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 έ·涵ώ·έϊ€ίΓ*0ώΐί^·£ϊΐίϊ SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV 241 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 301 RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK 361 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 421 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSGGGGSGG6 GSGGGGSG66 GSGGGGSGGG 481 GSALRPRIVG GKVCPKGECP WQVLLLVNGA QLCGGTLINT IWWSAAHCF DKIKNWRNLI 541 AVLGEHDLSE HDGDEQSRRV AQVIIPSTYV PGTTNHDIAL LRLHQPWLT DHWPLCLPE 601 RTFSERTLAF VRFSLVSGWG QLLDRGATAL ELMVLNVPRL MTQDCEASYP GKITEYMFCA 661 GYSDGSKDSC KGDSGGPHAT HYRGTWYLTG IVSWGQGCAT VGHFGVYTRV SQYIEWLQKL 721 MRSEPRPGVL LRAPFPGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSDKTH TCPPCPAPEL 781 LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE 841 QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS 901 RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK 961 SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK*

FVII-1 15 DNA序歹IJ

1 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT

61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC

121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC

181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT

241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG

301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG

361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC

421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA

541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA GGTGGCGGTG GCTCCGGCGG AGGTGGGTCC

601 GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCA

661 GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA GCTCCGGAAC TCCTGGGCGG ACCGTCAGTC

721 TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA

781 TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC

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901 CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG

961 TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA

1021 GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GCTGACCAAG

1081 AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG

1141 TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC

1201 GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC ACCGTCGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG

1261 AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC

1321 CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA AGGTGGCGGC GGATCAGGTG GGGGTGGATC AGGCGGTGGA

1381 GGTTCCGGTG GCGGGGGATC CGGCGGTGGA GGTTCCGGTG GGGGTGGATC AGGAGGAGGT

1441 GGTTCAGCCC TGCGGCCCCG GATTGTGGGG GGCAAGGACT GCCCCAAAGG GGAGTGTCCA

1501 TGGCAGGTCC TGTTGTTGGT GAATGGAGCT CAGTTGTGTG GGGGGACCCT GATCAACACC

1561 ATCTGGGTGG TCTCCGCGGC CCACTGTTTC GACAAAATCA AGAACTGGAG GAACCTGATC

1621 GCGGTGCTGG GCGAGCACGA CCTCAGCGAG CACGACGGGG ATGAGCAGAG CCGGCGGGTG

1681 GCGCAGGTCA TCATCCCCAG CACGTACGTC CCGGGCACCA CCAACCACGA CATCGCGCTG

1741 CTCCGCCTGC ACCAGCCCGT GGTCCTCACT GACCATGTGG TGCCCCTCTG CCTGCCCGAA

1801 CGGACGTTCT CTGAGAGGAC GCTGGCCTTC GTGCGCTTCT CATTGGTCAG CGGCTGGGGC

1861 CAGCTGCTGG ACCGTGGCGC CACGGCCCTG GTACTCCAAG TCCTCAACGT GCCCCGGCTG

1921 ATGACCCAGG ACTGCCTGCA GCAGTCACGG AAGGTGGGAG ACTCCCCAAA TATCACGGAG

1981 TACATGTTCT GTGCCGGCTA CTCGGATGGC AGCAAGGACT CCTGCAAGGG GGACAGTGGA

2041 GGCCCACATG CCACCCACTA CCGGGGCACG TGGTACCTGA CGGGCATCGT CAGCTGGGGC

2101 CAGGGCTGCG CAACCGTGGG CCACTTTGGG GTGTACACCA GGGTCTCCCA GTACATCGAG -185- 201217526

2161 TGGCTGCAAA AGCTCATGCG CTCAGAGCCA CGCCCAGGAG TCCTCCTGCG AGCCCCATTT 2221 CCCGGTGGCG GTGGCTCCGG CGGAGGTGGG TCCGGTGGCG GCGGATCAGG TGGGGGTGGA 2281 TCAGGCGGTG GAGGTTCCGG TGGCGGGGGA TCAGACAAAA CTCACACATG CCCACCGTGC 2341 CCAGCACCTG AACTCCTGGG AGGACCGTCA GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC 2401 ACCCTCATGA TCTCCCGGAC CCCTGAGGTC ACATGCGTGG TGGTGGACGT GAGCCACGAA 2461 GACCCTGAGG TCAAGTTCAA CTGGTACGTG GACGGCGTGG AGGTGCATAA TGCCAAGACA 2521 AAGCCGCGGG AGGAGCAGTA CAACAGCACG TACCGTGTGG TCAGCGTCCT CACCGTCCTG 2581 CACCAGGACT GGCTGAATGG CAAGGAGTAC AAGTGCAAGG TCTCCAACAA AGCCCTCCCA 2641 GCCCCCATCG AGAAAACCAT CTCCAAAGCC AAAGGGCAGC CCCGAGAACC ACAGGTGTAC 2701 ACCCTGCCCC CATCCCGGGA TGAGCTGACC AAGAACCAGG TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC 2761 AAAGGCTTCT ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GAGTGGGAGA GCAATGGGCA GCCGGAGAAC 2821 AACTACAAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC TCCGACGGCT CCTTCTTCCT CTACAGCAAG 2881 CTCACCGTGG ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG GGGAACGTCT TCTCATGCTC CGTGATGCAT 2941 GAGGCTCTGC ACAACCACTA CACGCAGAAG AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG TAAATGA FVII-1 15氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII輕鏈或重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接Fc與凝血酶切割位元點的接頭區域以粗體顯示，凝血酶切割位元點以虛線下劃線顯示，FVIIa中的三個點突變（V158D、E296V和M298Q)爲粗體且下劃線。 1 IWSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 SFEEi^EIFK 'DMWKLrai" SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV 241 FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CWVDVSHED PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY 301 RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK 361 NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG 421 NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK6GG GS6GG6SGG6 GSG6GGS6G6 6SGGGGS6G6 481 GSALRPRIVG GKDCPKGECP WQVLLLVNGA QLCGGTLINT IWWSAAHCF DKIKNWRNLI 541 AVLGEHDLSE HDGDEQSRRV AQVIXPSTYV PGTTNHDIAL LRLHQPWLT DHVVPLCLPE 601 RTFSERTLAF VRFSLVSGWG QLLDRGATAL VLQVLNVPRL MTQDCLQQSR KVGDSPNITE 661 YMFCAGYSDG SKDSCKGDSG GPHATHYRGT WYLTGIVSWG QGCATVGHFG VYTRVSQYIE 721 WLQKLMRSEP RPGVLLRAPF PGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC 781 PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCWVDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT 841 KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA KGQPREPQVY 901 TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK 961 LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK* FVII-1 i 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 18 DNA序列

ATGGTCTCCC

GCAGTCTTCG

GCGTTCCTGG

TCCTTCGAGG

TCTTACAGTG

GACCAGCTCC

ACGCACAAGG

AGTGACCACA

GACGGGGTGT

AAAAGAAATG

TGCCCCAAAG

GGGGGGACCC

AAGAACTGGA

GATGAGCAGA

ACCAACCACG

GTGCCCCTCT

TCATTGGTCA

GTCCTCAACG

GACTCCCCAA

AGGCCCTCAG

TAACCCAGGA

AGGAGCTGCG

AGGCCCGGGA

ATGGGGACCA

AGTCCTATAT

ATGACCAGCT

CGGGCACCAA

CCTGCACACC

CCAGCAAACC

GGGAGTGTCC

TGATCAACAC

GGAACCTGAT

GCCGGCGGGT

ACATCGCGCT

GCCTGCCCGA

GCGGCTGGGG

TGCCCCGGCT

ATATCACGGA

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CACAGTTGAA

CCAAGGCGCC

ATGGCAGGTC

CATCTGGGTG

CGCGGTGCTG

GGCGCAGGTC

GCTCCGCCTG

ACGGACGTTC

CCAGCTGCTG

GATGACCCAG

GTACATGTTC

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CGGTGCCACG

TATCCATGTG

CTGCGGCCCC

CTGTTGTTGG

GTCTCCGCGG

GGCGAGCACG

ATCATCCCCA

CACCAGCCCG

TCTGAGAGGA

GACCGTGGCG

GACTGCCTGC

TGTGCCGGCT

GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

TCGAGGGCCG

GCGGCTGTGA

AGGGGTACTC

GAAAAATACC

GGATTGTGGG

TGAATGGAGC

CCCACTGTTT

ACCTCAGCGA

GCACGTACGT

TGGTCCTCAC

CGCTGGCCTT

CCACGGCCCT

AGCAGTCACG

ACTCGGATGG

CTGCCTGGCT

GCGCGCCAAC

GGAGCAGTGC

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG

GAACTGTGAG

GCAGTACTGC

TCTGCTGGCA

TATTCTAGAA

GGGCAAGGTG

TCAGTTGTGT

CGACAAAATC

GCACGACGGG

CCCGGGCACC

TGACCATGTG

CGTGCGCTTC

GGAGCTCATG

GAAGGTGGGA

CAGCAAGGAC -186- 201217526 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821

TCCTGCAAGG

ACGGGCATCG

AGGGTCTCCC

GTCCTCCTGC

GGCGGATCAG

ACTCACACAT

TTCCCCCCAA

GTGGTGGACG

GAGGTGCATA

GTCAGCGTCC

GTCTCCAACA

CCCCGAGAAC

GTCAGCCTGA

AGCAATGGGC

TCCTTCTTCC

TTCTCATGCT

CTGTCTCCGG

GGTGGCGGGG

GGAGGACCGT

ACCCCTGAGG

AACTGGTACG

TACAACAGCA

GGCAAGGAGT

ATCTCCAAAG

GATGAGCTGA

GACATCGCCG

CCCGTGTTGG

AGGTGGCAGC

TACACGCAGA

GGGACAGTGG

TCAGCTGGGG

AGTACATCGA

GAGCCCCATT

GTGGGGGTGG

GCCCACCGTG

AACCCAAGGA

TGAGCCACGA

ATGCCAAGAC

TCACCGTCCT

AAGCCCTCCC

CACAGGTGTA

CCTGCCTGGT

AGCCGGAGAA

TCTACAGCAA

CCGTGATGCA

GTAAAGGTGG

GATCAGACAA

CAGTCTTCCT

TCACATGCGT

TGGACGGCGT

CGTACCGTGT

ACAAGTGCAA

CCAAAGGGCA

CCAAGAACCA

TGGAGTGGGA

ACTCCGACGG

AGGGGAACGT

AGAGCCTCTC

AGGCCCACAT

CCAGGGCTGC

GTGGCTGCAA

TCCCGGTGGC

ATCAGGCGGT

CCCAGCTCCG

CACCCTCATG

AGACCCTGAG

AAAGCCGCGG

GCACCAGGAC

AGCCCCCATC

CACCCTGCCC

CAAAGGCTTC

CAACTACAAG

GCTCACCGTG

TGAGGCTCTG

CGGCGGATCA

AACTCACACA

CTTCCCCCCA

GGTGGTGGAC

GGAGGTGCAT

GGTCAGCGTC

GGTCTCCAAC

GCCCCGAGAA

GGTCAGCCTG

GAGCAATGGG

CTCCTTCTTC

CTTCTCATGC

CCTGTCTCCG

GCCACCCACT

GCAACCGTGG

AAGCTCATGC

GGTGGCTCCG

GGAGGTTCCG

GAACTCCTGG

ATCTCCCGGA

GTCAAGTTCA

GAGGAGCAGT

TGGCTGAATG

GAGAAAACCA

CCATCCCGGG

TATCCCAGCG

ACCACGCCTC

GACAAGAGCA

CACAACCACT

GGTGGGGGTG

TGCCCACCGT

AAACCCAAGG

GTGAGCCACG

AATGCCAAGA

CTCACCGTCC

AAAGCCCTCC

CCACAGGTGT

ACCTGCCTGG

CAGCCGGAGA

CTCTACAGCA

TCCGTGATGC

GGTAAATGA

ACCGGGGCAC

GCCACTTTGG

GCTCAGAGCC

GCGGAGGTGG

GTGGCGGGGG

GCGGACCGTC

CCCCTGAGGT

ACTGGTACGT

ACAACAGCAC

GCAAGGAGTA

TCTCCAAAGC

ATGAGCTGAC

ACATCGCCGT

CCGTGTTGGA

GGTGGCAGCA

ACACGCAGAA

GATCAGGCGG

GCCCAGCACC

ACACCCTCAT

AAGACCCTGA

CAAAGCCGCG

TGCACCAGGA

CAGCCCCCAT

ACACCCTGCC

TCAAAGGCTT

ACAACTACAA

AGCTCACCGT

ATGAGGCTCT

GTGGTACCTG

GGTGTACACC

ACGCCCAGGA

GTCCGGTGGC

ATCCGACAAA

AGTCTTCCTC

CACATGCGTG

GGACGGCGTG

GTACCGTGTG

CAAGTGCAAG

CAAAGGGCAG

CAAGAACCAG

GGAGTGGGAG

CTCCGACGGC

GGGGAACGTC

GAGCCTCTCC

TGGAGGTTCC

TGAACTCCTG

GATCTCCCGG

GGTCAAGTTC

GGAGGAGCAG

CTGGCTGAAT

CGAGAAAACC

CCCATCCCGC

CTATCCCAGC

GACCACGCCT

GGACAAGAGC

GCACAACCAC FVII-1 18氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，凝血酶切割位點以虛線下劃線顯示，連接 FVII重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，且連接Fc區的接頭

區域以粗體顯 1 tWSQALRLLC^ 61 SFEEAREIFK 121 THKDDQLICV 181 KRNASKPQGA 241 KNWRNLIAVL' 301 VPLCLPERTF 361 DSPNITEYMF 421 RVSQYIEWLQ 481 THTCPPCPAP 541 EVHNAKTKPR 601 PREPQVYTLP 661 SFFLYSKLTV 721 GGGGSDKTHT 781 NWYVDGVEVH 841 ISKAKGQPRE 901 PVLDSDGSFF

AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN 不 °

LLLGLQGCLA *bAEWKLF¥'l

NENGGCEQYC

LRPRIVGGKV "gehdlsehdg

SERTLAFVRF

CAGYSDGSKD

KLMRSEPRPG

ELLGGPSVFL

EEQYNSTYRV

PSRDELTKNQ

DKSRWQQGNV

CPPCPAPELL

NAKTKPREEQ

PQVYTLPPSR

LYSKLTVDKS

SYSDGDQCAS

SDHTGTKRSC

CPKGECPWQV

DEQSRRVAQV

SLVSGWGQLL

SCKGDSGGPH

VLLRAPFPGG FPPKPKDTLM~

VSVLTVLHQD

VSLTCLVKGF

FSCSVMHEAL

GGPSVFLFPP

YNSTYRWSV

DELTKNQVSL

RWQQGNVFSC

SPCQNGGSCK

RCHEGYSLLA

LLLVNGAQLC

IIPSTYVPGT

DRGATALELM

ATHYRGTWYL

GGSGGGGSGG

ISRTPEVTCV

WLNGKEYKCK

YPSDIAVEWE

HNHYTQKSLS

KPKDTLMISR

LTVLHQDWLN

TCLVKGFYPS

SVMHEALHNH

AFLEELRPGS

DQLQSYICFC

DGVSCTPTVE

GGTLINTIWV

TNHDIALLRL

VLNVPRLMTQ

TGIVSWGQGC

GGSGGGGSGG

VVDVSHEDPE

VSNKALPAPI

SNGQPENNYK

LSPGKGGGGS

TPEVTCVWD

GKEYKCKVSN

DIAVEWESNG

YTQKSLSLSP

LERECKEEQC

LPAFEGRNCE

YPCGKIPILE

VSAAHCFDKI

HQPWLTDHV

DCLQQSRKVG

ATVGHFGVYT

GGSGGGGSDK

VKFNWYVDGV

EKTISKAKGQ

TTPPVLDSDG

GGGGSGGGGS

VSHEDPEVKF

KALPAPIEKT

QPENNYKTTP GK*

V F 1 1 1 1 1 1 1 6 2 8 4 0 6 2 112 3 3 4

1 19 DNA

ATGGTCTCCC

GCAGTCTTCG

GCGTTCCTGG

TCCTTCGAGG

TCTTACAGTG

GACCAGCTCC

ACGCACAAGG

AGTGACCACA 序列

AGGCCCTCAG

TAACCCAGGA

AGGAGCTGCG

AGGCCCGGGA

ATGGGGACCA

AGTCCTATAT

ATGACCAGCT

CGGGCACCAA

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CGGTGCCACG

GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

TCGAGGGCCG

GCGGCTGTGA

AGGGGTACTC

CTGCCTGGCT

GCGCGCCAAC

GGAGCAGTGC

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG

GAACTGTGAG

GCAGTACTGC

TCTGCTGGCA -187 201217526

481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTCTAGAA 541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCGGA GGAGGTGGTT CAGCCCTGCG GCCCCGGATT 601 GTGGGGGGCA AGGTGTGCCC CAAAGGGGAG TGTCCATGGC AGGTCCTGTT GTTGGTGAAT 661 GGAGCTCAGT TGTGTGGGGG GACCCTGATC AACACCATCT GGGTGGTCTC CGCGGCCCAC 721 TGTTTCGACA 7VAATCAAGAA CTGGAGGAAC CTGATCGCGG TGCTGGGCGA GCACGACCTC 781 AGCGAGCACG ACGGGGATGA GCAGAGCCGG CGGGTGGCGC AGGTCATCAT CCCCAGCACG 841 TACGTCCCGG GCACCACCAA CCACGACATC GCGCTGCTCC GCCTGCACCA GCCCGTGGTC 901 CTCACTGACC ATGTGGTGCC CCTCTGCCTG CCCGAACGGA CGTTCTCTGA GAGGACGCTG 961 GCCTTCGTGC GCTTCTCATT GGTCAGCGGC TGGGGCCAGC TGCTGGACCG TGGCGCCACG 1021 GCCCTGGAGC TCATGGTCCT CAACGTGCCC CGGCTGATGA CCCAGGACTG CCTGCAGCAG 1081 TCACGGAAGG TGGGAGACTC CCCAAATATC ACGGAGTACA TGTTCTGTGC CGGCTACTCG 1141 GATGGCAGCA AGGACTCCTG CAAGGGGGAC AGTGGAGGCC CACATGCCAC CCACTACCGG 1201 GGCACGTGGT ACCTGACGGG CATCGTCAGC TGGGGCCAGG GCTGCGCAAC CGTGGGCCAC 1261 TTTGGGGTGT ACACCAGGGT CTCCCAGTAC ATCGAGTGGC TGCAAAAGCT CATGCGCTCA 1321 GAGCCACGCC CAGGAGTCCT CCTGCGAGCC CCATTTCCCG GTGGCGGTGG CTCCGGCGGA 1381 GGTGGGTCCG GTGGCGGCGG ATCAGGTGGG GGTGGATCAG GCGGTGGAGG TTCCGGTGGC 1441 GGGGGATCCG ACAAAACTCA CACATGCCCA CCGTGCCCAG CTCCGGAACT CCTGGGCGGA 1501 CCGTCAGTCT TCCTCTTCCC CCCAAAACCC AAGGACACCC TCATGATCTC CCGGACCCCT 1561 GAGGTCACAT GCGTGGTGGT GGACGTGAGC CACGAAGACC CTGAGGTCAA GTTCAACTGG 1621 TACGTGGACG GCGTGGAGGT GCATAATGCC AAGACAAAGC CGCGGGAGGA GCAGTACAAC 1681 AGCACGTACC GTGTGGTCAG CGTCCTCACC GTCCTGCACC AGGACTGGCT GAATGGCAAG 1741 GAGTACAAGT GCAAGGTCTC CAACAAAGCC CTCCCAGCCC CCATCGAGAA AACCATCTCC 1801 AAAGCCAAAG GGCAGCCCCG AGAACCACAG GTGTACACCC TGCCCCCATC CCGGGATGAG 1861 CTGACCAAGA ACCAGGTCAG CCTGACCTGC CTGGTCAAAG GCTTCTATCC CAGCGACATC 1921 GCCGTGGAGT GGGAGAGCAA TGGGCAGCCG GAGAACAACT ACAAGACCAC GCCTCCCGTG 1981 TTGGACTCCG ACGGCTCCTT CTTCCTCTAC AGCAAGCTCA CCGTGGACAA GAGCAGGTGG 2041 CAGCAGGGGA ACGTCTTCTC ATGCTCCGTG ATGCATGAGG CTCTGCACAA CCACTACACG 2101 CAGAAGAGCC TCTCCCTGTC TCCGGGTAAA GGTGGCGGCG GATCAGGTGG GGGTGGATCA 2161 GGCGGTGGAG GTTCCGGTGG CGGGGGATCA GACAAAACTC ACACATGCCC ACCGTGCCCA 2221 GCACCTGAAC TCCTGGGAGG ACCGTCAGTC TTCCTCTTCC CCCCAAAACC CAAGGACACC 2281 CTCATGATCT CCCGGACCCC TGAGGTCACA TGCGTGGTGG TGGACGTGAG CCACGAAGAC 2341 CCTGAGGTCA AGTTCAACTG GTACGTGGAC GGCGTGGAGG TGCATAATGC CAAGACAAAG 2401 CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGCACGTAC CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC 2461 CAGGACTGGC TGAATGGCAA GGAGTACAAG TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC 2521 CCCATCGAGA AAACCATCTC CAAAGCCAAA GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC 2581 CTGCCCCCAT CCCGCGATGA GCTGACCAAG AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA 2641 GGCTTCTATC CCAGCGACAT CGCCGTGGAG TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC 2701 TACAAGACCA CGCCTCCCGT GTTGGACTCC GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC 2761 ACCGTGGACA AGAGCAGGTG GCAGCAGGGG AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG 2821 GCTCTGCACA ACCACTACAC GCAGAAGAGC CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA ATGA FVII-l 19氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，具有GGGS接頭的凝血酶切割位點以虛線下劃線顯示，連接FVII重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，且連接Fc區的接頭區域以粗體顯示。

1 MVSQALRLLC LLLGLQGCLA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

61 SreEAREIFK 'b^RTOLFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE

121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE

181 KRNASKPQGG_GGGSALJ\PRI VGGKVCPKGE CPWQVLLLVN GAQLCGGTLI NTIWWSAAH 241 CFDKIKNWRiTEf^lTGliSbL SEHDGDEQSR RVAQVIIPST YVPGTTNHDI ALLRLHQPW 301 LTDHWPLCL PERTFSERTL AFVRFSLVSG WGQLLDRGAT ALELMVLNVP RLMTQDCLQQ

361 SRKVGDSPNI TEYMFCAGYS DGSKDSCKGD SGGPHATHYR GTWYLTGIVS WGQGCATVGH

421 FGVYTRVSQY IEWLQKLMRS EPRPGVLLRA PFPGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG

481 GGSDKTHTCP PCPAPELLGG PSVFLFPPKP KDTLMISRTP EVTCVWDVS HEDPEVKFNW

541 YVDGVEVHNA KTKPREEQYN STYRWSVLT VLHQDWLNGK EYKCKVSNKA LPAPIEKTIS

601 KAKGQPREPQ VYTLPPSRDE LTKNQVSLTC LVKGFYPSDI AVEWESNGQP ENNYKTTPPV

661 LDSDGSFFLY SKLTVDKSRW QQGNVFSCSV MHEALHNHYT QKSLSLSPGK GGGGSGGGGS

721 GGGGSGGGGS DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CVWDVSHED

781 PEVKFNWYVD GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RVVSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA

841 PIEKTISKAK GQPREPQVYT LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN 901 YKTTPPVLDS DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGK*

•188- 201217526 FVII-127 DNA序列

1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821

ATGGTCTCCC GCAGTCTTCG GCGTTCCTGG TCCTTCGAGG TCTTACAGTG GACCAGCTCC ACGCACAAGG AGTGACCACA GACGGGGTGT AAAAGAAATG TGCCCCAAAG GGGGGGACCC AAGAACTGGA GATGAGCAGA ACCAACCACG GTGCCCCTCT TCATTGGTCA GTCCTCAACG ACGGAGTACA AGTGGAGGCC TGGGGCCAGG ATCGAGTGGC CCATTTCCCG GGTGGATCAG CCGTGCCCAG AAGGACACCC CACGAAGACC AAGACAAAGC GTCCTGCACC CTCCCAGCCC GTGTACACCC CTGGTCAAAG GAGAACAACT AGCAAGCTCA ATGCATGAGG GGTGGCGGCG GACAAAACTC TTCCTCTTCC TGCGTGGTGG GGCGTGGAGG CGTGTGGTCA TGCAAGGTCT GGGCAGCCCC AACCAGGTCA TGGGAGAGCA GACGGCTCCT AACGTCTTCT CTCTCCCTGT

AGGCCCTCAG TAACCCAGGA AGGAGCTGCG AGGCCCGGGA ATGGGGACCA AGTCCTATAT ATGACCAGCT CGGGCACCAA CCTGCACACC CCAGCAAACC GGGAGTGTCC TGATCAACAC GGAACCTGAT GCCGGCGGGT ACATCGCGCT GCCTGCCCGA GCGGCTGGGG TGCCCCGGCT TGTTCTGTGC CACATGCCAC GCTGCGCAAC TGCAAAAGCT GTGGCGGTGG GCGGTGGAGG CTCCGGAACT TCATGATCTC CTGAGGTCAA CGCGGGAGGA AGGACTGGCT CCATCGAGAA TGCCCCCATC GCTTCTATCC ACAAGACCAC CCGTGGACAA CTCTGCACAA GATCAGGTGG ACACATGCCC CCCCAAAACC TGGACGTGAG TGCATAATGC GCGTCCTCAC CCAACAAAGC GAGAACCACA GCCTGACCTG ATGGGCAGCC TCTTCCTCTA CATGCTCCGT CTCCGGGTAA

GCTCCTCTGC GGAAGCCCAC GCCGGGCTCC GATCTTCAAG GTGTGCCTCA CTGCTTCTGC GATCTGTGTG GCGCTCCTGT CACAGTTGAA CCAAGGCGCC ATGGCAGGTC CATCTGGGTG CGCGGTGCTG GGCGCAGGTC GCTCCGCCTG ACGGACGTTC CCAGCTGCTG GATGACCCAG CGGCTACTCG CCACTACCGG CGTGGGCCAC CATGCGCTCA CTCCGGCGGA TTCCGGTGGC CCTGGGCGGA CCGGACCCCT GTTCAACTGG GCAGTACAAC GAATGGCAAG AACCATCTCC CCGGGATGAG CAGCGACATC GCCTCCCGTG GAGCAGGTGG CCACTACACG GGGTGGATCA ACCGTGCCCA CAAGGACACC CCACGAAGAC CAAGACAAAG CGTCCTGCAC CCTCCCAGCC GGTGTACACC CCTGGTCAAA GGAGAACAAC CAGCAAGCTC GATGCATGAG ATGA

CTTCTGCTTG GGCGTCCTGC CTGGAGAGGG GACGCGGAGA AGTCCATGCC CTCCCTGCCT AACGAGAACG CGGTGCCACG TATCCATGTG CTGCGGCCCC CTGTTGTTGG GTCTCCGCGG GGCGAGCACG ATCATCCCCA CACCAGCCCG TCTGAGAGGA GACCGTGGCG GACTGCGAGG GATGGCAGCA GGCACGTGGT TTTGGGGTGT GAGCCACGCC GGTGGGTCCG GGGGGATCAG CCGTCAGTCT GAGGTCACAT TACGTGGACG AGCACGTACC GAGTACAAGT AAAGCCAAAG CTGACCAAGA GCCGTGGAGT TTGGACTCCG CAGCAGGGGA CAGAAGAGCC GGCGGTGGAG GCACCTGAAC CTCATGATCT CCTGAGGTCA CCGCGGGAGG CAGGACTGGC CCCATCGAGA CTGCCCCCAT GGCTTCTATC TACAAGACCA ACCGTGGACA GCTCTGCACA

GGCTTCAGGG ACCGGCGCCG AGTGCAAGGA GGACGAAGCT AGAATGGGGG TCGAGGGCCG GCGGCTGTGA AGGGGTACTC GAAAAATACC GGATTGTGGG TGAATGGAGC CCCACTGTTT ACCTCAGCGA GCACGTACGT TGGTCCTCAC CGCTGGCCTT CCACGGCCCT CCAGCTACCC AGGACTCCTG ACCTGACGGG ACACCAGGGT CAGGAGTCCT GTGGCGGCGG ACAAAACTCA TCCTCTTCCC GCGTGGTGGT GCGTGGAGGT GTGTGGTCAG GCAAGGTCTC GGCAGCCCCG ACCAGGTCAG GGGAGAGCAA ACGGCTCCTT ACGTCTTCTC TCTCCCTGTC GTTCCGGTGG TCCTGGGAGG CCCGGACCCC AGTTCAACTG AGCAGTACAA TGAATGGCAA AAACCATCTC CCCGCGATGA CCAGCGACAT CGCCTCCCGT AGAGCAGGTG ACCACTACAC

CTGCCTGGCT GCGCGCCAAC GGAGCAGTGC GTTCTGGATT CTCCTGCAAG GAACTGTGAG GCAGTACTGC TCTGCTGGCA TATTCTAGAA GGGCAAGGTG TCAGTTGTGT CGACAAAATC GCACGACGGG CCCGGGCACC TGACCATGTG CGTGCGCTTC GGAGCTCATG CGGCAAGATC CAAGGGGGAC CATCGTCAGC CTCCCAGTAC CCTGCGAGCC ATCAGGTGGG CACATGCCCA CCCAAAACCC GGACGTGAGC GCATAATGCC CGTCCTCACC CAACAAAGCC AGAACCACAG CCTGACCTGC TGGGCAGCCG CTTCCTCTAC ATGCTCCGTG TCCGGGTAAA CGGGGGATCA ACCGTCAGTC TGAGGTCACA GTACGTGGAC CAGCACGTAC GGAGTACAAG CAAAGCCAAA GCTGACCAAG CGCCGTGGAG GTTGGACTCC GCAGCAGGGG GCAGAAGAGC

FVII-127氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，凝血酶切割位點以虛線下劃線顯示，胰蛋白酶170環區域爲波浪下劃線，連接F VII重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，且連接Fc區的接頭區域以粗體顯示。 1 AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 SraEAREIFK Di^WKLFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGA_LRPRIVGGKV CPKGECPWQV LLLVNGAQLC GGTLINTIWV VSAAHCFDKI 241 KNWRNLIAVL GEHDLSEHDG DEQSRRVAQV IIPSTYVPGT TNHDIALLRL HQPWLTDHV 301 VPLCLPERTF SERTLAFVRF SLVSGWGQLL DRGATALELM VLNVPRLMTQ DCEASYPGKI 361 TEYMFCAGYS DGSKDSCKGD SGGPHATHYR GTWYLTGIVS WGQGCATVGH FGVYTRVSQY 421 IEWLQKLMRS EPRPGVLLRA PFPGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSGGGGSGG GGSDKTHTCP -189- 201217526 481 541 601 661 721 781 841 901

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ACGCACAAGG ATGACCAGCT AGTGACCACA CGGGCACCAA GACGGGGTGT CCTGCACACC

GGCTGGGGCC AGCTGCTGGA CCCCGGCTGA TGACCCAGGA ATCACGGAGT ACATGTTCTG GACAGTGGAG GCCCACATGC

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CTTCTGCTTG

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CTGCGCCCGG

CGTGACCGTG 刖且 FVII-125氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示肽爲雙下劃線，連接FVII與AP3的接頭區域爲粗體 AP3 scFv爲斜體的。

1 IWSQMjRLL^.. AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 SFEEAREIFK DAERTKLFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR 241 NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC 301 LPERTFSERT LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN 361 ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ 421 YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGBDIVMTQ 481 AAPSVPVTPG ESVSISCRSS RSLLHSNGNT YLCWFLQRPG QSPQLLIYRM SNLASGVPDR 541 FSGSGSGTAF TLRISRVEAE DVGVYYCMQH LEYPFTFGSG TKLEIKRGGG GSGGGGSGGG 601 GSQVQLQQSG AELVRPGTSV KISCKASGYT FTNYWLGWVK QRPGHGLEWI GDIYPGGGYN 661 KYNENFKGKA TLTADTSSST AYMQLSSLTS EDSAVYFCAR EYGNYDYAMD SWGQGTSVTV 721 SS* 190- 201217526 FVII-067 DNA序歹ij

X ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC 61 GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC 121 GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC 181 TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG 241 TCTTACAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA 301 GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC 361 ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG 421 AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTCCTGT 481 GACGGGGTGT CCTGCACACC CACAGTTGAA 541 AAAAGAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA 601 GAGTGTCCAT GGCAGGTCCT GTTGTTGGTG 661 ATCAACACCA TCTGGGTGGT CTCCGCGGCC 721 AACCTGATCG CGGTGCTGGG CGAGCACGAC 781 CGGCGGGTGG CGCAGGTCAT CATCCCCAGC 841 ATCGCGCTGC TCCGCCTGCA CCAGCCCGTG 901 CTGCCCGAAC GGACGTTCTC TGAGAGGACG 961 GGCTGGGGCC AGCTGCTGGA CCGTGGCGCC 1021 CCCCGGCTGA TGACCCAGGA CTGCCTGCAG 1081 ATCACGGAGT ACATGTTCTG TGCCGGCTAC 1141 GACAGTGGAG GCCCACATGC CACCCACTAC 1201 AGCTGGGGCC AGGGCTGCGC AACCGTGGGC 1261 TACATCGAGT GGCTGCAAAA GCTCATGCGC 1321 GCCCCATTTC CCGGTGGCGG TGGCTCCGGC 1381 GGGGGTGGAT CAGGCGGTGG AGGTTCCGGT 1441 CCACCGTGCC CAGCTCCGGA ACTCCTGGGC 1501 CCCAAGGACA CCCTCATGAT CTCCCGGACC 1561 AGCCACGAAG ACCCTGAGGT CAAGTTCAAC 1621 GCCAAGACAA AGCCGCGGGA GGAGCAGTAC 1681 ACCGTCCTGC ACCAGGACTG GCTGAATGGC 1741 GCCCTCCCAG CCCCCATCGA GAAAACCATC 1801 CAGGTGTACA CCCTGCCCCC ATCCCGGGAT 1861 TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA TCCCAGCGAC 1921 CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACGCCTCCC 1981 TACAGCAAGC TCACCGTGGA CAAGAGCAGG 2041 GTGATGCATG AGGCTCTGCA CAACCACTAC 2101 AAAGGTGGCG GCGGATCAGG TGGGGGTGGA 2161 TCAGACAAAA CTCACACATG CCCACCGTGC 2221 GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC 2281 ACATGCGTGG TGGTGGACGT GAGCCACGAA 2341 GACGGCGTGG AGGTGCATAA TGCCAAGACA 2401 TACCGTGTGG TCAGCGTCCT CACCGTCCTG 2461 AAGTGCAAGG TCTCCAACAA 2521 AAAGGGCAGC CCCGAGAACC 2581 AAGAACCAGG TCAG( 2641 GAGTGGGAGA GCAAT( 2701 TCCGACGGCT CCTTCTTCCT 2761 GGGAACGTCT TCTCATGCTC 2821 AGCCTCTCCC TGTCTCCGGG 2881 GGCGGATCAG GTGGGGGTGG ATCAGGCGGT 2941 GTGCAGCTGC AGGAGTCTGG GGGAGGCTTG 3001 TGTGCAGCCT CTGGATTCAT GTTTAGCAGG 3061 GGGAAGGGGC CAGAGTGGGT CTCAGGTATT 3121 GACTCCGTGA AGGGCCGGTT CACCGTCTCC 3181 CAAATGAACA GCCTGAGAGC CGAGGACACG 3241 TACACCAGCC GGAGCGACGT GCCCGACCAG 3301 CTGGTCACCG TCTCCTCAGG GAGTGCATCC 3361 GAAGCACGCG TATCTGAACT GACTCAGGAC 3421 GTCAGGATCA CATGCCAAGG AGACAGCCTC 3481 AAGCCAGGAC AGGCCCCTAC TCTTGTCATC 3541 CCAGACCGAT TCTCTGCCTC CAGCTCAGGA 3601 CAGGCGGAAG ATGAGGCTGA CTATTACTGC 3661 GTGTTCGGCG GCGGCACCAA GCTGACCGTC 3721 ACTCTGTTCC CGCCCTCTTC TGCGGCCTGA

3CCTGAC \TGGGCA

AGCCCTCCCA ACAGGTGTAC CTGCCTGGTC GCCGGAGAAC CTACAGCAAG CGTGATGCAT TAAAGGTGGC

CTTCTGCTTG GGCGTCCTGC CTGGAGAGGG GACGCGGAGA AGTCCATGCC CTCCCTGCCT AACGAGAACG CGGTGCCACG TATCCATGTG ATTGTGGGGG AATGGAGCTC CACTGTTTCG CTCAGCGAGC ACGTACGTCC GTCCTCACTG CTGGCCTTCG ACGGCCCTGG CAGTCACGGA TCGGATGGCA CGGGGCACGT CACTTTGGGG TCAGAGCCAC GGAGGTGGGT GGCGGGGGAT GGACCGTCAG CCTGAGGTCA TGGTACGTGG AACAGCACGT AAGGAGTACA TCCAAAGCCA GAGCTGACCA ATCGCCGTGG GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA TCAGGCGGTG CCAGCACCTG ACCCTCATGA GACCCTGAGG AAGCCGCGGG CACCAGGACT GCCCCCATCG ACCCTGCCCC AAAGGCTTCT AACTACAAGA CTCACCGTCG GAGGCTCTGC GGTGGCTCCG GGAGGTTCCG GTACAGCCTG TATGCCATGA AGTGGTAGTG AGAGACAATT GCTGTATATT ACCAGCTTCG GCCCCAAAGC CCTGC AGAAA( TATGGTTTAA AACACAGCTT CTGCTGTACT CTACGTCAGC

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\GGA \GCT

：TGGCT 3CCAAC

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3CTGGCA rCTAGAA

XGGGT 3GGGGA

GGGCGCCAC CCAGGGAAC FVII-067氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVIIa與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fc區的接頭爲波浪下劃線，且連接Fc區與SCE5的 -191 - 201217526 接頭以粗體顯示。

1 . hhli<P^Q.QQhh AVFVTQEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC

61 SFEEAREIFK DAERTKLFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR 241 NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC 301 LPERTFSERT IAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN 361 ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ 421 YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR APFPGGGGSG GGGSGGGG5G GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC 481 PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN 541 AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP 601 QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL 661 YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY TQKSLSLSPG K5GGQ£C1Q.Q.G_^C?SSGSGGQ.Q 721 SDKTHTCPPC PAPELLGGPS VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVVVDVSHE DPEVKFNWYV .781 DGVEVHNAKT KPREEQYNST YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APIEKTISKA 841 KGQPREPQVY TLPPSRDELT KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD 901 SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGKGG GGSGGGGSGG 961 GGSGGGGSGG GGSGGGGSAQ VQLQESGGGL VQPGGSLRLS CAASGFMFSR YAMSWVRQAP 1021 GKGPEWVSGI SGSGGSTYYA DSVKGRFTVS RDNSKNTLYL QMNSLRAEDT AVYYCARGAT 1081 YTSRSDVPDQ TSFDYWGQGT LVTVSSGSAS APKLEEGEFS EARVSELTQD PAVSVALGQT 1141 VRITCQGDSL RNFYASWYQQ KPGQAPTLVI YGLSKRPSGI PDRFSASSSG NTASLTITGA 1201 QAEDEADYYC LLYYGGGQQG VFGGGTKLTV LRQPKAAPSV TLFPPSSAA*

F VII-094 DNA 序歹 IJ 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221

AAAAGAi GAGTGTC

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ATGGTCTCCC GCAGTCTTCG GCGTTCCTGG TCCTTCGAGG TCTTACAGTG GACCAGCTCC ACGCACAAGG AGTGACCACA GACGGGGTGT 3AAATG TCCAT ATCAACACCA AACCTGATCG CGGCGGGTGG ATCGCGCTGC CTGCCCGAAC GGCTGGGGCC CCCCGGCTGA ATCACGGAGT GACAGTGGAG AGCTGGGGCC TACATCGAGT GCCCCATTTC TCAGGTGGGG CTGCAGGAGT GCCTCTGGAT GGGCCAGAGT GTGAAGGGCC AACAGCCTGA AGCCGGAGCG ACCGTCTCCT CGCGTATCTG ATCACATGCC GGACAGGCCC CGATTCTCTG GAAGATGAGG GGCGGCGGCA TTCCCGCCCT

AGGCCCTCAG TAACCCAGGA AGGAGCTGCG AGGCCCGGGA ATGGGGACCA AGTCCTATAT ATGACCAGCT CGGGCACCAA CCTGCACACC CCAGCAAACC GGCAGGTCCT TCTGGGTGGT CGGTGCTGGG CGCAGGTCAT TCCGCCTGCA GGACGTTCTC AGCTGCTGGA TGACCCAGGA ACATGTTCTG GCCCACATGC AGGGCTGCGC GGCTGCAAAA CCGATATCGG .TCAGG 丨GGAGG TCATGTTTAG GGGTCTCAGG GGTTCACCGT GAGCCGAGGA ACGTGCCCGA CAGGGAGTGC AACTGACTCA AAGGAGACAG CTACTCTTGT CCTCCAGCTC CTGACTATTA CCAAGCTGAC CTTCTGCGGC

GCTCCTCTGC

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GACAG GCAGi FVII-094氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII與SCE5的接頭區域爲下劃線。

1 MVSQALRLLC.. LLLGLQ.Q.QLA AVFVTQEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 SFEEAREIFK DAERTKLFWI SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGR IVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR

•192- 201217526 1111111X1 406284062 233445667

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APFPDIGGGG

ASGFMFSRYA

NSLRAEDTAV

RVSELTQDPA

RFSASSSGNT FPPSSAA*

TYVPGTTNHD

TALELMVLNV

RGTWYLTGIV

SGGGGSGGGG

MSWVRQAPGK

YYCARGATYT

VSVALGQTVR

ASLTITGAQA

IALLRLHQPV

PRLMTQDCLQ

SWGQGCATVG

SGGGGSGGGG

GPEWVSGISG

SRSDVPDQTS

ITCQGDSLRN

EDEADYYCLL

VLTDHWPLC

QSRKVGDSPN

HFGVYTRVSQ

SGGGGSAOVQ

SGGSTYYADS

FDYWGQGTLV

FYASWYQQKP

YYGGGQQGVF FVII-028 DNA 序列 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481

AGGTGG GCAAGG

ATGGTCTCCC

GCGGAAGTGC

GTCTCCTGCA

GCCCCTGGAC

TATGCACAGA

TACATGGAGC

CGTGCTTTGT

ACCCTGGTCA

GAATTTTCAG

CCAGGACAGA

TGGTACCAGC

CCCTCAGGGA

ATCAGCAGGG

AGTGATCATG

GCCCCCTCGG

TCTTACAGTG

GACCAGCTCC

ACGCACAAGG

AGTGACCACA

GACGGGGTGT

AAAAGAAATG

GAGTGTCCAT

ATCAACACCA

AACCTGATCG

CGGCGGGTGG

ATCGCGCTGC

CTGCCCGAAC

GGCTGGGGCC

CCCCGGCTGA

ATCACGGAGT

GACAGTGGAG

AGCTGGGGCC

TACATCGAGT

GCCCCATTTC

GGGGGTGGAT

CCACCGTGCC

CCCAAGGACA

AGCCACGAAG

GCCAAGACAA

ACCGTCCTGC

GCCCTCCCAG

CAGGTGTACA

TGCCTGGTCA

CCGGAGAACA

TACAGCAAGC

GTGATGCATG

AAAGGTGGCG

TCCGACAAAA

GTCTTCCTCT

ACATGCGTGG

GACGGCGTGG

TACCGTGTGG

AAGTGCAAGG

AAAGGGCAGC

AAGAACCAGG

GAGTGGGAGA

TCCGACGGCT

GGGAACGTCT

AGCCTCTCCC

AGGCCCTCAG

AGCTGGTGCA

AGGCTTCTGG

AAGGGCTTGA

AGTTTCAGGG

TGAGCAGGCT

ATAACCGGAA

CCGTCTCCTC

AAGCACGCGT

CGGCCAGGAT

AGAAGCCAGG

TCCCTGAGCG

TCGAAGCCGG

TGGTATTCGG

TCACTCTGTT

ATGGGGACCA

AGTCCTATAT

ATGACCAGCT

CGGGCACCAA

CCTGCACACC

CCAGCAAACC

GGCAGGTCCT

TCTGGGTGGT

CGGTGCTGGG

CGCAGGTCAT

TCCGCCTGCA

GGACGTTCTC

AGCTGCTGGA

TGACCCAGGA

ACATGTTCTG

GCCCACATGC

AGGGCTGCGC

GGCTGCAAAA

CCGGTGGCGG

CAGGCGGTGG

CAGCTCCGGA

CCCTCATGAT

ACCCTGAGGT

AGCCGCGGGA

ACCAGGACTG

CCCCCATCGA

CCCTGCCCCC

AAGGCTTCTA

ACTACAAGAC

TCACCGTGGA

AGGCTCTGCA

GCGGATCAGG

CTCACACATG

TCCCCCCAAA

TGGTGGACGT

AGGTGCATAA

TCAGCGTCCT

TCTCCAACAA

CCCGAGAACC

TCAGCCTGAC

GCAATGGGCA

CCTTCTTCCT

TCTCATGCTC

TGTCTCCGGG

GCTCCTCTGC

GTCTGGAGCT

ATACACCTTC

GTGGATGGGA

CTGGGTCACC

GAGATCTGAC

CGACCGGTCC

AGGGAGTGCA

ACAGGCTGTG

TACCTGTGGG

CCAGGCCCCT

ATTCTCTGGC

GGATGAGGCC

CGGAGGGACC

CCCGCCGTCC

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CACAGTTGAA

CCAAGGCCGA

GTTGTTGGTG

CTCCGCGGCC

CGAGCACGAC

CATCCCCAGC

CCAGCCCGTG

TGAGAGGACG

CCGTGGCGCC

CTGCCTGCAG

TGCCGGCTAC

CACCCACTAC

AACCGTGGGC

GCTCATGCGC

TGGCTCCGGC

AGGTTCCGGT

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CTCCCGGACC

CAAGTTCAAC

GGAGCAGTAC

GCTGAATGGC

GAAAACCATC

ATCCCGGGAT

TCCCAGCGAC

CACGCCTCCC

CAAGAGCAGG

CAACCACTAC

TGGGGGTGGA

CCCACCGTGC

ACCCAAGGAC

GAGCCACGAA

TGCCAAGACA

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AGCCCTCCCA

ACAGGTGTAC

CTGCCTGGTC

GCCGGAGAAC

CTACAGCAAG

CGTGATGCAT

TAAATGA

CTTCTGCTTG

GAGGTGAATA

ACCGGCTACT

TGGATCAACC

ATGACCAGGG

GACACGGCCG

CCCAACTGGT

TCCGCCCCAA

CTGACTCAGC

GGAAACAACA

GTGCTGGTCG

TCCAACTCTG

GACTATTACT

AAGCTGACCG

GCGGCCGCTA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CGGTGCCACG

TATCCATGTG

ATTGTGGGGG

AATGGAGCTC

CACTGTTTCG

CTCAGCGAGC

ACGTACGTCC

GTCCTCACTG

CTGGCCTTCG

ACGGCCCTGG

CAGTCACGGA

TCGGATGGCA

CGGGGCACGT

CACTTTGGGG

TCAGAGCCAC

GGAGGTGGGT

GGCGGGGGAT

GGACCGTCAG

CCTGAGGTCA

TGGTACGTGG

AACAGCACGT

AAGGAGTACA

TCCAAAGCCA

GAGCTGACCA

ATCGCCGTGG

GTGTTGGACT

TGGCAGCAGG

ACGCAGAAGA

TCAGGCGGTG

CCAGCACCTG

ACCCTCATGA

GACCCTGAGG

AAGCCGCGGG

CACCAGGACT

GCCCCCATCG

ACCCTGCCCC

AAAGGCTTCT

AACTACAAGA

CTCACCGTGG

GAGGCTCTGC

GGCTTCAGGG AGCCTGGGGC ATATGCACTG CTAACAGTGG ACACGTCCAT TGTATTACTG TCGACCCCTG CCCTTAAACT CGCCCTCGGT TTGGAAGTAA TCTATGATGA GGAACATGGC GTCAGGTGTG TCCTAGGTCA GGACGAAGCT AGAATGGGGG TCGAGGGCCG GCGGCTGTGA AGGGGTACTC GAAAAATACC GCAAGGTGTG AGTTGTGTGG ACAAAATCAA ACGACGGGGA CGGGCACCAC ACCATGTGGT TGCGCTTCTC AGCTCATGGT GGAGA 1GACTC GGTACCTGAC TGTACACCAG GCCCAGGAGT CCGGTGGCGG CCGACAAAAC TCTTCCTCTT CATGCGTGGT ACGGCGTGGA ACCGTGTGGT AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC GGAACGTCTT GCCTCTCCCT GAGGTTCCGG AACTCCTGGG TCTCCCGGAC TCAAGTTCAA AGGAGCAGTA GGCTGAATGG AGAAAACCAT CATCCCGCGA ATCCCAGCGA CCACGCCTCC ACAAGAGCAG ACMCCACTA

CTGCCTGGCT

CTCAGTGAAG

GGTGCGACAG

TGGCACAAAC

CAGCACCGCC

TGCGAGAGGC

GGGCCAGGGA

TGAAGAAGGT

GTCAGTGGCC

AAGTGTGCAG

TAGCGACCGG

CACCCTGACC

GGATAGTAGT

GCCCAAGGCT

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG

GAACTGTGAG

GCAGTACTGC

TCTGCTGGCA

TATTCTAGAA

CCCCAAAGGG

GGGGACCCTG

GAACTGGAGG

TGAGCAGAGC

CAACCACGAC

GCCCCTCTGC

ATTGGTCAGC

CCTCAACGTG

CTCCCCAAAT

CTGCAAGGGG

GGGCATCGTC

GGTCTCCCAG

CCTCCTGCGA

CGGATCAGGT

TCACACATGC

CCCCCCAAAA

GGTGGACGTG

GGTGCATAAT

CAGCGTCCTC

CTCCAACAAA

CCGAGAACCA

CAGCCTGACC

CAATGGGCAG

CTTCTTCCTC

CTCATGCTCC

GTCTCCGGGT

TGGCGGGGGA

AGGACCGTCA

CCCTGAGGTC

CTGGTACGTG

CAACAGCACG

CAAGGAGTAC

CTCCAAAGCC

TGAGCTGACC

CATCGCCGTG

CGTGTTGGAC

GTGGCAGCAG

CACGCAGAAG FVII-02 8氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，連 -193- 201217526 接FVII與Fc區的接頭區域爲下劃線，連接兩個Fes位點的接頭以粗體顯示，且MB 9爲斜體的。

1 MSQAiiR^5..IjLLQmQ.CLA AEVQLVQSGA EVNKPGASVK VSCKASGYTF TGYYMHWVRQ 61 APGQGLEWMG WINPNSGGTN YAQKFQGWVT MTRDTSISTA YMELSRLRSD DTAVYYCARG 121 RALYNRNDRS PmFDPWGQG TLVTVSSGSA SAPTLKLEEG EFSEARVQAV LTQPPSVSVA 181 PGQTARITCG GNNIGSKSVQ WYQQKPGQAP VLWYDDSDR PSGIPERFSG SNSGNMATLT 241 ISRVEAGDEA DYYCQVWDSS SDHWFGGGT KLTVLGQPKA APSVTLFPPS AAARTKLFWI 301 SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE THKDDQLICV NENGGCEQYC 361 SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE KRNASKPQGR IVGGKVCPKG 421 ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR NLIAVLGEHD LSEHDGDEQS 481 RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC LPERTFSERT LAFVRFSLVS 541 GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN ITEYMFCAGY SDGSKDSCKG

601 DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ YIEWLQKLMR SEPRPGVLLR

661 APFPGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK 721 PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRWSVL 781 TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT 841 CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS 901 VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KGGGGSGGGG SGGGGSGGGG SDKTHTCPPC PAPELLGGPS 961 VFLFPPKPKD TLMISRTPEV TCVWDVSHE DPEVKFNWYV DGVEVHNAKT KPREEQYNST 1021 YRWSVLTVL HQDWLNGKEY KCKVSNKALP APXEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT 1081 KNQVSLTCLV KGFYPSDIAV EWESNGQPEN NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ 1141 GNVFSCSVMH EALHNHYTQK SLSLSPGK* FVII-039 DNA序列 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701

ATGGTCTCCC GCAGTCTTCG GCGTTCCTGG TCCTTCGAGG TCTTACAGTG GACCAGCTCC ACGCACAAGG AGTGACCACA GACGGGGTGT AAAAGAAATG GGCAAGGTGT CAGTTGTGTG GACAAAATCA ：GGGG 3CACCA GACCATGTGG GTGCGCTTCT GAGCTCATGG AAGGTGGGAG AGCAAGGACT TGGTACCTGA GTGTACACCA CGCCCAGGAG TCCGGTGGCG TCCGACAAAA GTCTTCCTCT ACATGCGTGG GACGGCGTGG TACCGTGTGG AAGr AAAC AAGAACCAGG GAGTGGGAGA TCCGACGGCT GGGAACGTCT AGCCTCTCCC GGAGGTTCCG GAACTCCTGG ATCTCCCGGA GTCAAGTTCA GAGGAGCAGT TGGCTGAATG GAGAAAACCA CCATCCCGCG TATCCCAGCG ACCACGCCTC CACGACG CCGGGCi

3TGCAAGG \GGGCAGC

AGGCCCTCAG TAACCCAGGA AGGAGCTGCG AGGCCCGGGA ATGGGGACCA AGTCCTATAT ATGACCAGCT CGGGCACCAA CCTGCACACC CCAGCAAACC GCCCCAAAGG GGGGGACCCT AGAACTGGAG ATGAGCAGAG CCAACCACGA TGCCCCTCTG CATTGGTCAG TCCTCAACGT ACTCCCCAAA CCTGCAAGGG CGGGCATCGT GGGTCTCCCA TCCTCCTGCG GCGGATCAGG CTCACACATG TCCCCCCAAA TGGTGGACGT AGGTGCATAA TCAGCGTCCT TCTCCAACAA CCCGAGAACC TCAGCCTGAC GCAATGGGCA CCTTCTTCCT TCTCATGCTC TGTCTCCGGG GTGGCGGGGG GAGGACCGTC CCCCTGAGGT ACTGGTACGT ACAACAGCAC GCAAGGAGTA TCTCCAAAGC ATGAGCTGAC ACATCGCCGT CCGTGTTGGA

GCTCCTCTGC CTTCTGCTTG GGCTTCAGGG CTGCCTGGCT GGAAGCCCAC GGCGTCCTGC ACCGGCGCCG GCGCGCCAAC GCCGGGCTCC CTGGAGAGGG AGTGCAAGGA GGAGCAGTGC GATCTTCAAG GACGCGGAGA GGACGAAGCT GTTCTGGATT GTGTGCCTCA AGTCCATGCC AGAATGGGGG CTCCTGCAAG CTGCTTCTGC CTCCCTGCCT TCGAGGGCCG GAACTGTGAG GATCTGTGTG AACGAGAACG GCGGCTGTGA GCAGTACTGC GCGCTCCTGT CGGTGCCACG AGGGGTACTC TCTGCTGGCA CACAGTTGAA TATCCATGTG GAAAAATACC TATTC CCAAGGCCGA GGCGGAGGAG ACTTCACTCG GGTTG1 GGAGTGTCCA TGGCAGGTCC TGTTGTTGGT GAATGGAGCT GATCAACACC ATCTGGGTGG TCTCCGCGGC CCACTGTTTC GAACCTGATC GCGGTGCTGG GCGAGCACGA CCTCAGCGAG CCGGCGGGTG GCGCAGGTCA TCATCCCCAG CACGTACGTC CATCGCGCTG CTCCGCCTGC ACCAGCCCGT GGTCCTCACT CCTGCCCGAA CGGACGTTCT CTGAGAGGAC GCTGGCCTTC CGGCTGGGGC CAGCTGCTGG ACCGTGGCGC CACGGCCCTG GCCCCGGCTG ATGACCCAGG ACTGCCTGCA GCAGTCACGG TATCACGGAG TACATGTTCT GTGCCGGCTA CTCGGATGGC GGACAGTGGA GGCCCACATG CCACCCACTA CCGGGGCACG CAGCTGGGGC CAGGGCTGCG CAACCGTGGG CCACTTTGGG GTACATCGAG TGGCTGCAAA AGCTCATGCG CTCAGAGCCA AGCCCCATTT CCCGGTGGCG GTGGCTCCGG CGGAGGTGGG TGGGGGTGGA TCAGGCGGTG GAGGTTCCGG TGGCGGGGGA CCCACCGTGC CCAGCTCCGG AACTCCTGGG ACCCAAGGAC ACCCTCATGA TCTCCCGGAC GAGCCACGAA GACCCTGAGG TCAAGTTCAA TGCCAAGACA AAGCCGCGGG AGGAGCAGTA CACCGTCCTG CACCAGGACT GGCTGAATGG AGCCCTCCCA GCCCCCATCG AGAAAACCAT ACAGGTGTAC ACCCTGCCCC CATCCCGGGA TGAGCTGACC CTGCCTGGTC AAAGGCTTCT ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GCCGGAGAAC AACTACAAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC CTACAGCAAG CTCACCGTGG ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG TGCAT GAGGCTCTGC ACAACCACTA CACGCAGAAG iGTGGC GGCGGATCAG GTGGGGGTGG ATCAGGCGGT ATCAGACAAA ACTCACACAT GCCCACCGTG CCCAGCACCT AGTCTTCCTC TTCCCCCCAA AACCCAAGGA CACCCTCATG CACATGCGTG GTGGTGGACG TGAGCCACGA AGACCCTGAG GGACGGCGTG GAGGTGCATA ATGCCAAGAC AAAGCCGCGG GTACCGTGTG GTCAGCGTCC TCACCGTCCT GCACCAGGAC CAAGTGCAAG GTCTCCAACA AAGCCCTCCC AGCCCCCATC CAAAGGGCAG CCCCGAGAAC CACAGGTGTA CACCCTGCCC CAAGAACCAG GTCAGCCTGA CCTGCCTGGT CAAAGGCTTC GGAGTGGGAG AGCAATGGGC AGCCGGAGAA CAACTACAAG CTCCGACGGC TCCTTCTTCC TCTACAGCAA GCTCACCGTG

rCTAGAA rGTGGGG

CGGACCGTCA CCCTGAGGTC CTGGTACGTG CAACAGCACG CAAGGAGTAC CTCCAAAGCC

CGTGA1 TAAAGG

S -194- 201217526

2761 GACAAGAGCA GGTGGCAGCA GGGGAACGTC TTCTCATGCT CCGTGATGCA TGAGGCTCTG 2821 CACAACCACT ACACGCAGAA GAGCCTCTCC CTGTCTCCGG GTAAATGA ，連接的接頭 FVII-03 9氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯肽爲雙下劃線，FXIa切割位元點以虛線下劃線顯示 FVII重鏈與Fc區的接頭區域爲下劃線，且連接Fc區區域以粗體顯示。

1 M.YSQALRUL.C. 61 SFEEAREIFK 121 THKDDQLICV 181 KRNASKPQGR 241 DKIKNWRNLI 301 DHWPLCLPE 361 KVGDSPNITE 421 VYTRVSQYIE 481 旦DKTHTCPPC 541 DGVEVHNAKT 601 KGQPREPQVY 661 SDGSFFLYSK 721 GGS6GGGSDK 781 VKFNWYVDGV 841 EKTISKAKGQ 901 TTPPVLDSDG

DAERTKLFWI NENGGCEQYC yvG SE RTFSERTLAF YMFCAGYSDG WLQKLMRSEP PAPELLGGPS KPREEQYNST TLPPSRDELT LTVDKSRWQQ THTCPPCPAP EVHNAKTKPR PREPQVYTLP SFFLYSKLTV

AVPVTQEEAH GVLHRRPRAW

GQ(iQE.TRVV AVLGEHDLS

SYSDGDQCAS SDHTGTKRSC GKVCPKGECP HDGDEQSRRV VRFSLVSGWG SKDSCKGDSG RPGVLLRAPF VFLFPPKPKD YRWSVLTVL KNQVSLTCLV GNVFSCSVMH ELLGGPSVFL EEQYNSTYRV PSRDELTKNQ DKSRWQQGNV

SPCQNGGSCK RCHEGYSLLA WQVLLLVNGA AQVIIPSTYV QLLDRGATAL GPHATHYRGT PGGGGSGGGG

AFLEELRPGS DQLQSYICFC DGVSCTPTVE QLCGGTLINT PGTTNHDIAL ELMVLNVPRL WYLTGIVSWG SGGQGSGGGG

LERECKEEQC LPAFEGRNCE YPCGKIPILE IWWSAAHCF LRLHQPWLT MTQDCLQQSR QGCATVGHFG SGGGGSGGGG

TLMISRTPEV HQDWLNGKEY KGFYPSDIAV EALHNHYTQK FPPKPKDTLM VSVLTVLHQD VSLTCLVKGF FSCSVMHEAL

TCVWDVSHE KCKVSNKALP EWESNGQPEN SLSLSPGKGG ISRTPEVTCV WLNGKEYKCK YPSDIAVEWE HNHYTQKSLS DPEVKFNWYV APIEKTISKA NYKTTPPVLD GGSGGGGSG6 WDVSHEDPE VSNKALPAPI SNGQPENNYK LSPGK* FVII-040 DNA序列

1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461

ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG TCCTTCGAGG AGGCCCGGGA TCTTACAGTG ATGGGGACCA GACCAGCTCC AGTCCTATAT ACGCACAAGG ATGACCAGCT AGTGACCACA CGGGCACCAA GACGGGGTGT CCTGCACACC AAAAGAAATG CCAGCAAACC AAGGTGTGCC CCAAAGGGGA ITGAT

3TGGCGGCG \CAAAACTC

TGCAAG GGGCAG

\G6GGGA rCGTCAG

TATCCATGTG GAAAAATACC GGAGGAGACT TCACTCGGGT CAGGTCCTGT TGTTGGTGAA TGGGTGGTCT CCGCGGCCCA GTGCTGGGCG AGCACGACCT CAGGTCATCA TCCCCAGCAC CGCCTGCACC AGCCCGTGGT ACGTTCTCTG AGAGGACGCT CTGCTGGACC GTGGCGCCAC ACCCAGGACT GCCTGCAGCA ATGTTCTGTG CCGGCTACTC CCACATGCCA CCCACTACCG GGCTGCGCAA CCGTGGGCCA

CCTGAGGTCA AGTTCAACTG CCGCGGGAGG AGCAGTACAA CAGGACTGGC TGAATGGCAA CCCATCGAGA AAACCATCTC CTGCCCCCAT CCCGGGATGA GGCTTCTATC CCAGCGACAT TACAAGACCA CGCCTCCCGT ACCGTGGACA AGAGCAGGTG GCTCTGCACA ACCA( GGATCAGGTG GGGGTt CACACATGCC CACCGTGCCC CCCCCAAAAC CCAAGGACAC GTGGACGTGA GCCACGAAGA GTGCATAATG CCAAGACAAA AGCGTCCTCA CCGTCCTGCA TCCAACAAAG CCCTCCCAGC

TTGTGTGGGG

AAAATCAAGA

GACGGGGATG 3CACCACCA CATGTGGTGC CGCTTCTCAT CTCATGGTCC GTGGGAGACT AAGGACTCCT TACCTGACGG TACACCAGGG CCAGGAGTCC GGf GA1

TTCCTCTTCC TGCGTGGTGG GGCGTGGAGG CGTGTGGTCA lGGTCT iGCCCC AACCAGGTCA TGGGAGAGCA GACGGCTCCT AACGTCTTCT CTCTCCCTGT GGTTCCGGTG CTCCTGGGAG TCCCGGACCC AAGTTCAACT GAGCAGTACA CTGAATGGCA

GGACCC ACTGGA(

AGCAGAGCCG ACCACGACAT CCCTCTGCCT TGGTCAGCGG TCAACGTGCC CCCCAAATAT GCAAGC GCAT< TCTCCCAGTA TCCTGCGAGC GATCAGGTGG ACACATGCCC CCCCAAAACC TGGACGTGAG TGCATAATGC GCGTCCTCAC CCAACAAAGC GAGAACCACA GCCTGACCTG ATGGGCAGCC TCTTCCTCTA CATGCTCCGT CTCCGGGTAA GCGGGGGATC GACCGTCAGT CTGAGGTCAC GGTACGTGGA ACAGCACGTA AGGAGTACAA

GCTCCTCTGC

GGAAGCCCAC

GCCGGGCTCC

GATCTTCAAG

GTGTGCCTCA

CTGCTTCTGC

GATCTGTGTG

GCGCTCCTGT

CACAGTTGAA

CCAAGGCGGC

GTGTCCATGG

CAACACCATC

CCTGATCGCG

GCGGGTGGCG

CGCGCTGCTC

GCCCGAACGG

CTGGGGCCAG

CCGGCTGATG

CACGGAGTAC

CAGTGGAGGC

CTGGGGCCAG

CATCGAGTGG

CCCATTTCCC

GGGTGGATCA

ACCGTGCCCA

CAAGGACACC

CCACGAAGAC

CAAGACAAAG

CGTCCTGCAC

CCTCCCAGCC

GGTGTACACC

CCTGGTCAAA

GGAGAACAAC

CAGCAAGCTC

GATGCATGAG

AGGTGGCGGC

AGACAAAACT

CTTCCTCTTC

ATGCGTGGTG

CGGCGTGGAG

CCGTGTGGTC

GTGCAAGGTC

CTTCTGCTTG

GGCGTCCTGC

CTGGAGAGGG

GACGCGGAGA

AGTCCATGCC

CTCCCTGCCT

AACGAGAACG

CTGCAAAAGC

GGTGGCGGTG

GGCGGTGGAG

GCTCCGGAAC

CTCATGATCT

GGCTTCAGGG

ACCGGCGCCG

AGTGCAAGGA

GGACGAAGCT

AGAATGGGGG

TCGAGGGCCG

GCGGCTGTGA \GGGGTP. 3ΆΆΆΆΑΊ

TCATGCGCTC

GCTCCGGCGG

GTTCCGGTGG

TCCTGGGCGG

CCCGGACCCC \CTACAC

3TGGATC

CTGCCTGGCT

GCGCGCCAAC

GGAGCAGTGC

GTTCTGGATT

CTCCTGCAAG

GAACTGTGAG

GCAGTACTGC

TCTGCTGGCA

TATTCTAGAA

TGTGGGGGGC

TGGAGCTCAG

CTGTTTCGAC

CAGCGAGCAC

GTACGTCCCG

CCTCACTGAC

GGCCTTCGTG

GGCCCTGGAG

GTCACGGAAG

GGATGGCAGC

GGGCACGTGG

CTTTGGGGTG

AGAGCCACGC

AGGTGGGTCC

CGGGGGATCC

ACCGTCAGTC

TGAGGTCACA

GTACGTGGAC

CAGCACGTAC

GGAGTACAAG

CAAAGCCAAA

GCTGACCAAG

CGCCGTGGAG

GTTGGACTCC

GCAGCAGGGG

GCAGAAGAGC

AGGCGGTGGA

AGCACCTGAA

CCTCATGATC

CCCTGAGGTC

GCCGCGGGAG

CCAGGACTGG

CCCCATCGAG -195 201217526 2521 2581 2641 2701 2761 2821

AAAACCATCT TCCCGCGATG CCCAGCGACA ACGCCTCCCG AAGAGCAGGT AACCACTACA

：CAAAGCC ^GCTGACC

C( AG( TCGCCGTGGA TGTTGGACTC GGCAGCAGGG CGCAGAAGAG

AGGGCAGCCC GAACCAGGTC GTGGGAGAGC CGACGGCTCC GAACGTCTTC CCTCTCCCTG

CGAGAACCAC AGCCTGACCT AATGGGCAGC TTCTTCCTCT TCATGCTCCG TCTCCGGGTA

AGGTGTACAC GCCTC CGGAC ACAG< TGATGCATGA AATGA

rGGTCAA \GAACAA 3CAAGCT

CCTGCCCCCA AGGCTTCTAT CTACAAGACC CACCGTGGAC GGCTCTGCAC FVII-040氨基酸序列肽爲雙下劃線，FXIa切割 FVII重鏈與Fc區的接頭區。信號序列以點位元點以虛線下域爲下劃線，且下劃劃線連接線顯顯示 F c I品示，前，連接的接頭區域以粗體顯示。 1 rW.SQMiRLLC..LLLGL<iQ.CIiA AVFVTOEEAH GVLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC 61 έ^ΈΕ^Είΐκ bi^RiKLFiii SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRIJCE 121 THKDDQLICV NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE 181 KRNASKPQGG_GGDFTRVVGG KVCPKGECPW QVLLLVNGAQ LCGGTLINTI WWSAAHCFD 241 KIKNWRNLIA VLGEHDLSEH DGDEQSRRVA QVIIPSTYVP GTTNHDIALL RUiQPWLTD 301 HWPLCLPER TFSERTLAFV RFSLVSGWGQ LLDRGATALE LMVLNVPRLM TQDCLQQSRK 361 VGDSPNITEY MFCAGYSDGS KDSCKGDSGG PHATHYRGTW YLTGIVSWGQ GCATVGHFGV 421 YTRVSQYIEW LQKLMRSEPR PGVLLRAPFP GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS 481 DKTHTCPPCP APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT CWVDVSHED PEVKFNWYVD 541 GVEVHNAKTK PREEQYNSTY RWSVLTVLH QDWLNGKEYK CKVSNKALPA PIEKTISKAK 601 GQPREPQVYT LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE WESNGQPENN YKTTPPVLDS 661 DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS LSLSPGKGGG GSGGGGSGGG 721 GSGGGGSDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMX SRTPEVTCW VDVSHEDPEV 781 KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRW SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV SNKALPAPIE 841 KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES NGQPENNYKT 901 TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL SPGK* FIX-042 DNA序歹ij 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221

TCATCACCA' TTTTAAAATJ

T

CTGCCTTTTA CATTGAGTAT TTGATTACAT GTACTGTGGG TATTTGGATT TTTGCTAAAA

ATGCAGCGCG TGAACATGAT CATGGCAGAA TCACCAGGCC GGATATCTAC TCAGTGCTGA ATGTACAGGT TTGTTTCCTT GCTTGCCTTT TAGATATAGA AATATCTGAT GCTGTCTTCT TCACTAAATT GATTTGACAG CAATATTGAA GAGTCTAACA GCCAGCACGC AGGTTGGTAA AACATCACAG ATTTTGGCTC CATGCCCTAA AGAGAAATTG GCTTTCAGAT AAAAACAAAG ACTTTCTTAA GAGATGTAAA ATTTTCATGA TGTTTTCTTT CTAAAGAATT ATTCTTTTAC ATTTCAGTTT TTCTTGATCA TGAAAACGCC AACAAAATTC TGAATCGGCC AAAGAGGTAT AATTCAGGTA AATTGGAAGA GTTTGTTCAA GGGAATCTAG AGAGAGAATG TATGGAAGAA AAGTGTAGTT TTGAAGAAGC ACGAGAAGTT TTTGAAAACA CTGAAAGAAC AACTGAATTT TGGAAGCAGT ATGTTGATGG AGATCAGTGT GAGTCCAATC CATGTTTAAA TGGCGGCAGT TGCAAGGATG ACATTAATTC CTATGAATGT TGGTGTCCCT

TTGGA1 GCGAG< ATCGACTTGC TTTCTGTTTC ATGTAAATTC TTAATGACTT

VTTTGA 3CAGTT

AGGAAAGAAC TGTGAATTAG ATGTAACATG TAACATTAAG AATGGCAGAT TTGTAAAAAT AGTGCTGATA ACAAGGTGGT TTGCTCCTGT ACTGAGGGAT CCAG AAGTCCTGTG AACCAGCAGT GCCATTTCCA TGTGGAAGAG .CTTCT AAGCTCACCC GTGCTGAGAC TGTTTTTCCT GATGTGGACT TACTGAAGCT GAAACCATTT TGGATAACAT CACTCAAAGC ACCCAATCAT CACTCGGGTT GTTGGTGGAG AAGATGCCAA ACCAGGTCAA

AGAAAAC ACAAACT

TTCO AGGTTGTTTT GAATGGTAAA GTTGATGCAT TCTGTGGAGG CTCTATCGTT AATG, TGCTGCCCAC TGTGTTGAAA CTGGTGTTAA AATTACAGTT GTCGCAGGTG TGAGGAGACA GAACATACAG AGCAAAAGCG AAATGTGATT CGAATTATTC CTACAATGCA GCTATTAATA AGTACAACCA TGACATTGCC CTTCTGGAAC CTTAGTGCTA AACAGCTACG TTACACCTAT TTGCATTGCT GACAAGGAAT ACACGAACAT CTTCCTCAAA TTTGGATCTG GCTATGTAAG TGGCTGGGGA AGAGTCTTCC ACAAAGGGAG ATCAGCTTTA GTTCTTCAGT ACCTTAGAGT TCCACTTGTT GACCGAGCCA CATGTCTTCG ATCTACAAAG TTCACCATCT ATAACAACAT GTTCTGTGCT GGCTTCCATG STAG AGATTCATGT CAAGGAGATA GTGGGGGACC CCATGTTACT GAAGTGGAAG CTTAACTGGA ATTATTAGCT GGGGTGAAGA GTGTGCAATG AAAGGCAAAT TACCAAGGTG TCCCGGTATG TCAACTGGAT TAAGGAAAAA ACAAAGCTCA GGACCG

GGATTGTAAC AACATAATAT CTCACCACAA TGGACGAACC

AAGGAGG1 GGACCAGTTT ATGGAATATA CTGACAAAAC TCTTCCTCTT CATGCGTGGT

TCACACATGC CCACCGTGCC CAGCTCCGGA ACTCCTGGGC

CCCCCCAAAA CCCAAGGACA CCCTCATGAT GGTGGACGTG AGCCACGAAG ACCCTGAGGT ACGGCGTGGA GGTGCATAAT GCCAAGACAA AGCCGCGGGA ACCGTGTGGT CAGCGTCCTC ACCGTCCTGC ACCAGGACTG

AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC

CTC( CCGAC CAGCCTGACC CAATGGGCAG CTTCTTCCTC

ZCAACAAA 3AGAACCA

GCCCTCCCAG CAGGTGTACA

CCCCCATCGA CCCTGCCCCC

：CTTGGC IAAAAAT

：CGTCAG

CTCCCGGACC CCTGAGGTCA CAAGTTCAAC TGGTACGTGG GGAGCAGTAC AACAGCACGT ,TGGC AAGGAGTACA .CCATC TCCAAAGCCA ATCCCGGGAT GAGCTGACCA

GCTGAAl GAAAACC

TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA TCCCAGCGAC ATCGCCGTGG CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACGCCTCCC GTGTTGGACT TACAGCAAGC TCACCGTGGA CAAGAGCAGG TGGCAGCAGG -196- 201217526 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061

GGAACGTCTT GCCTCTCCCT GAGGTTCCGG AACTCCTGGG TCTCCCGGAC TCAAGTTCAA AGGAGCAGTA \TGG \CCAT CATCCCGCGA ATCCCAGCGA CCACGCCTCC ACAAGAGCAG ACAACCACTA

GGCTGAAT AGAAAACC

CTCATGCTCC GTCTCCGGGT TGGCGGGGGA AGGACCGTCA CCCTGAGGTC CTGGTACGTG CAACAGCACG CAAGGAGTAC CTCCAAAGCC TGAGCTGACC CATCG( CGTGr GTGGCAGCAG CACGCAGAAG

:GCCGTG 3TTGGAC

GTGATGCATG AAAGGTGGCG TCAGACAAAA GTCTTCCTCT ACATGCGTGG GACGGCGTGG TACCGTGTGG AAGTGCAAGG AAAGGGCAGC AAGAACCAGG GAGTGGGAGA TCCGACGGCT GGGAACGTCT AGCCTCTCCC AGGCTCTGCA GCGGATCAGG CTCACACATG TCCCCCCAAA TGGTGGACGT AGGTGCATAA TCAGCGTCCT TCTCCAACAA CCCGAGAACC TCAG«

CAACCACTAC TGGGGGTGGA CCCACCGTGC ACCCAAGGAC lGCCACGAA 丨CCAAGACA CACCGTCCTG AGCCCTCCCA ACAGGTGTAC CTGCCTGGTC GCC( CTACAGCAAG CGTGATGCAT TAAATGA

GAG TGC

ACGCAGAAGA TCAGGCGGTG CCAGCACCTG ACCCTCATGA GACCCTGAGG AAGCCGCGGG CACCAGGACT GCCCCCATCG ACCCTGCCCC AAAGGCTTCT AACTi CTCACCGTGG GAGGCTCTGC CCTGAC CTGCCTGGTC AAAGGCTO .TGGGCA GCCGGAGAAC AACTACAA(

CCTTCTTCCT TCTCATGCTC TGTCTCCGGG FVII-042氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，且連接Fc區的接頭區域爲下劃線 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901

ERECMEEKCS FGFEGKNCEL VSVSQTSKLT QWLNGKVDA PHHNYNAAIN HKGRSALVLQ GTSFLTGIIS VFLFPPKPKD YRWSVLTVL KNQVSLTCLV GNVFSCSVMH ELLGGPSVFL EEQYNSTYRV PSRDELTKNQ DKSRWQQGNV FIX-068 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101

.SPSLITICLIi GYLLSAECTV FEE^EVFEN TERTTEFWKQ DVTCNIKNGR CEQFCKNSAD RAETVFPDVD YVNSTEAETI FCGGSIVNEK W工VTAAHCVE KYNHDIALLE LDEPLVLNSY YLRVPLVDRA TCLRSTKFTI WGEECAMKGK YGIYTKVSRY TLMISRTPEV TCVWDVSHE HQDWLNGKEY KCKVSNKALP

KGFYPSDIAV EALHNHYTQK FPPKPKDTLM [QD ：GF FSCSVMHEAL

VSVLTVLHC VSLTCLVKG

EWESNGQPEN SLSLSPGKGG ISRTPEVTCV WLNGKEYKCK YPSDIAVEWE HNHYTQKSLS FLDHENANKI LNRPKRYNSG KLEEFVQGNL YVDGDQCESN PCLNGGSCKD DINSYECWCP INQKSC EPAVPFPCGR RWGG EHNIEETEHT YTNIFLKFGS EGGRDSCQGD TDKTHTCPPC DGVEVHNAKT APIEKTISKA KGQPREPQVY TLPPSRDELT NYKTTPPVLD SDGSFFLYSK LTVDKSRWQQ GGSGGGGSGG GGSGGGGSDK THTCPPCPAP WDVSHEDPE VKFNWYVDGV EVHNAKTKPR VSNKALPAPI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV LSPGK*

NKWCSCTEG LDNITQSTQS TGVKITWAG VTPICIADKE YNNMFCAGFH VNWIKEKTKL DPEVKFNWYV

YRLAEK FNDFTF

EDAKPGQFPW EQKRNVIRII GYVSGWGRVF SGGPHVTEVE PAPELLGGPS KPREEQYNST DNA序列 'GAAl 'CAG'

ATGCAGCGCG GGATATCTAC GCTTGCCTTT GATTTGACAG AACATCACAG

TGAACATGAT CATGGCAGAA TCAGTGCTGA ATGTACAGGT TAGATATAGA AATATCTGAT CAATATTGAA GAGTCTAACA

TCACCAGGCC TTGTTTCCTT GCTGTCTTCT GCCAGCACGC TCATCACCAT CTGCCTTTTA TTTTAAAATA CATTGAGTAT TCACTAAATT TTGATTACAT AGGTTGGTAA GTAC1

ATTTTGGCTC CATGCCCTAA AGAGAAATTG AAAAACAAAG ACTTTCTTAA GAGATGTAAA ATTTTCATGA CTAAAGAATT ATTCTTTTAC ATTTCAGTTT TTCTTGATCA TGAATCGGCC AAAGAGGTAT AATTCAGGTA AATTGGAAGA TATGGAAGAA AAGTGTAGTT TTGAAGAAGC AACTGAATTT TGGAAGCAGT ATGTTGATGG TGGCGGCAGT TGCAAGGATG ACATTAATTC \C TGTGAATTAG ATGTAACATG AGTGCTGATA ACAAGGTGGT AGAAAACCAG AAGTCCTGTG AACCAGCAGT ACAAACTTCT AAGCTCACCC GTGCTGAGAC TACTGAAGCT GAAACCATTT TGGATAACAT CACTCGGGTT GTTGGTGGAG AAGATGCCAA GAATGGTAAA GTTGATGCAT TCTGTGGAGG TGCTGCCCAC TGTGTTGAAA CTGGTGTTAA TGAGGAGACA GAACATACAG AGCAAAAGCG CTCACCACAA CTACAATGCA GCTATTAATA AGTACAACCA TGGACGAACC CTTAGTGCTA AACAGCTACG TTACACCTAT ACACGAACAT CTTCCTCAAA TTTGGATCTG GCTATGTAAG ACAAAGGGAG ATCAGCTTTA GTTCTTCAGT ACCTTAGAGT CATGTCTTCG ATCTACAAAG TTCACCATCT ATAACAACAT AAGGAGGTAG AGATTCATGT CAAGGAGATA GTGGGGGACC GGACCAGTTT CTTAACTGGA ATTATTAGCT ATGGAATATA TACCAAGGTG TCCCGGTATG CTGACAAAAC TCACACATGC CCACCGTGCC CCCCCCAAAA CCCAAGGACA GGTGGACGTG AGCCACGAAG ACCCTGAGGT GGTGCATAAT GCCAAGACAA AGCCGCGGGA CAGCGTCCTC ACCGTCCTGC ACCAGGACTG CTCCAACAAA GCCCTCCCAG CCCCCATCGA CCGAGAACCA CAGGTGTACA CCCTGCCCCC CAGCCTGACC TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA

AGAGAGAATG CTGAAAGAAC CATGTTTAAA TTGGATTTGA GCGAGCAGTT ATCGACTTGC TTTCTGTTTC ATGTAAATTC TTAATGACTT AGGTTGTTTT GGATTGTAAC AACATAATAT AGGAAAGAAC TTGTAAAAA1

GCTTTCAGAT TGTTTTCTTT TGAAAACGCC GTTTGTTCAA ACGAGAAGTT AGATCAGTGT CTATGAATGT TAACATTAAG TTGCTCCTGT GCCATTTCCA TGTTTTTCCT CACTCAAAGC ACCAGGTCAA

TATI TTTGC AACAAAATTC TCTAG AAACA GAGTCCAATC TGGTGTCCCT AATGGCAGAT ACTGAGGGAT TGTGGAAGAG GATGTGGACT ACCCAATCAT TTCCCTTGGC

TCTTCCTCTT CATGCGTGGT ACGGCGTGGA ACCGTGTGGT AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT

GGGGTGAAGA TCAACTGGAT CAGCTCCGGA CCCTCATGAT

CTCTATCGTT AATGAAAAAT AATTACAGTT GTCGCAGGTG AAATGTGATT CGAATTATTC TGACATTGCC CTTCTGGAAC TTGCATTGCT GACAAGGAAT TGGCTGGGGA AGAGTCTTCC TCCACTTGTT GACCGAGCCA GTTCTGTGCT GGCTTCCATG CCATGTTACT GAAGTGGAAG GTGTGCAATG AAAGGCAAAT TAAGGAAAAA ACAAAGCTCA ACTCCTGGGC GGACCGTCAG CTCCCGGACC CCTGAGGTCA CAAGTTCAAC TGGTACGTGG GGAGCAGTAC AACAGCACGT GCTGAATGGC AAGGAGTACA GAAAACCATC TCCAAAGCCA ATCCCGGGAT GAGCTGACCA TCCCAGCGAC ATCGCCGTGG -197 201217526 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 3781 3841 3901 3961 4021 CTGACC GCCGTGGAi TTGGACTC( CAI CA<

CCGGAGAACA TACAGCAAGC GTGATGCATG AAACGGCGCC TCCGGTGGCG AAGAGGGCGC CTGAGACTCT CGCCAGGCTC ACATACTACG ACGCTGTATC CGGGGCGCCA GGCCAGGGAA GGTGAATTTT TTGGGACAGA TGGTACCAGC CCCTCAGGGA ATCACTGGGG GGCCAGCAGG GCCCCCTCGG GGTGGGTCCG GGGGGATCAG CCGTCAGTCT GAGGTCACAT TACGTGGACG AGCACGTACC GAGTACAAGT AAAGCCAAAG

‘GT CG .GCAGGGGA .GAAGAGCC

AGAACC CCTGAC GGGGGAG ATGTTTi

AGTGGGAGAG

CCGACGGCTC

GGAACGTCTT

GCCTCTCCCT

GTGGATCAGG

GTGGATCAAG

TGGTACAGCC

GGTATGCCAT

TTAGTGGTAG

CCAGAGACAA

CGGCTGTATA

AGACCAGCTT

CCGCCCCAAA

ACCCTGCTGT

TCAGAAACTT

TCTATGGTTT

GAAACACAGC

GCCTGCTGTA

TCCTACGTCA

GTGGCGGTGG

GCGGTGGAGG

CACCGGAACT

TCATGATCTC

CTGAGGTCAA

CGCGGGAGGA

AGGACTGGCT

CCATCGAGAA

TGCCCCCATC

GCTTCTATCC

ACAAGACCAC

CCGTGGACAA

CTCTGCACAA

CAATGGGCAG

CTTCTTCCTC

CTCATGCTCC

GTCTCCGGGT

CGGTGGAGGT

GAAGAGGAGG

TGGGGGGTCC

GAGCTGGGTC

TGGTGGTAGT

TTCCAAGAAC

TTACTGCGCC

CGACTACTGG

GCTTGAAGAA

GTCTGTGGCC

TTATGCAAGC

AAGTAAAAGG

TTCCTTGACC

CTACGGCGGC

GCCCAAGGCT

CTCCGGCGGA

TTCCGGTGGC

CCTGGGCGGA

CCGGACCCCT

GTTCAACTGG

GCAGTACAAC

GAATGGCAAG

AACCATCTCC

CCGCGATGAG

CAGCGACATC

GCCTCCCGTG

GAGCAGGTGG

CCACTACACG

ACTACAAGAC

TCACCGTCGA

AGGCTCTGCA

GCCGGAGCGG

GGGGATCCGG

AGGTGCAGCT

CCTGTGCAGC

CAGGGAAGGG

CAGACTCCGT

TGCAAATGAA

CCTACACCAG

CCCTGGTCAC

CAGAAGCACG

CAGTCAGGAT

AGAAGCCAGG

TCCCAGACCG

CTCAGGCGGA

GCGTGTTCGG

TCACTCTGTT

GTGGCGGCGG

ACAAAACTCA

TCCTCTTCCC

GCGTGGTGGT

GCGTGGAGGT

GTGTGGTCAG

GCAAGGTCTC

GGCAGCCCCG

ACCAGGTCAG

GGGAGAGCAA

ACGGCTCCTT

ACGTCTTCTC

TCTCCCTGTC

CACGCCTCCC CAAGAGCAGG CAACCACTAC TGGCGGCGGA CGGTGGAGGT GCAGGAGTCT CTCTGGATTC GCCAGAGTGG GAAGGGCCGG CAGCCTGAGA CCGGAGCGAC CGTCTCCTCA CGTATCTGAA CACATGCCAA ACAGGCCCCT ATTCTCTGCC AGATGAGGCT CGGCGGCACC CCCGCCCTCT ATCAGGTGGG CACATGCCCA CCCAAAACCC GGACGTGAGC GCATAATGCC CGTCCTCACC CAACAAAGCC CCACAG ‘CCTGC TGGGCAGCCG CTTCCTCTAC ATGCTCCGTG TCCGGGTAAA

GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA TCAGGTGGGG TCCGGTGGGG IAGGCT 'AGCA GTCTCAGGTA TTCACCGTCT GCCGAGGACA GTGCCCGACC GGGAGTGCAT CTGACTCAGG GGAGACAGCC ACTCTTGTCA TCCAGCTCAG GACTATTACT AAGCTGACCG TCTGCGGCCG GGTGGATCAG CCGTGCCCAG AAGGACACCC CACGAAGACC AAGACAAAGC GTCCTGCACC CTCCCAGCCC GTGTACACCC CTGGTCAAAG GAGAACAACT AGCAAGCTCA ATGCATGAGG TGA FVII-068氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示肽爲雙下劃線，連接SCE5與Fc區的接頭區域爲下劃線具有前蛋白轉化酶加工位點的接頭以粗體顯示。，刖，且 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201

ERECMEEKCS FGFEGKNCEL VSVSQTSKLT QWLNGKVDA PHHNYNAAIN HKGRSALVLQ GTSFLTGIIS VFLFPPKPKD YRWSVLTVL KNQVSLTCLV GNVFSCSVMH GGSRKRRKRA ISGSGGSTYY QTSFDYWGQG LRNFYASWYQ CLLYYGGGQQ GGGGSGGGGS PEVKFNWYVD PIEKTISKAK YKTTPPVLDS

FEEAREVFEN TERTTEFWKQ DVTCNIKNGR CEQFCKNSAD RAETVFPDVD YVNSTEAETI FCGGSIVNEK WIVTAAHCVE KYNHDIALLE LDEPLVLNSY YLRVPLVDRA TCLRSTKFTI WGEECAMKGK YGIYTKVSRY TLMISRTPEV TCVWDVSHE

FLnHENANKT L.NRPKRYNSG

HQDWLNGKEY KGFYPSDIAV EALHNHYTQK QVQLQESGGG ADSVKGRFTV TLVTVSSGSA QKPGQAPTLV

KCKVSNKALP EWESNGQPEN SLSLSPGKRR LVQPGGSLRL SRDNSKNTLY SAPKLEEGEF IYGLSKRPSG

GVFGGGTKLT VLRQPKAAPS DKTHTCPPCP APELLGGPSV GVEVHNAKTK PREEQYNSTY GQPREPQVYT LPPSRDELTK DGSFFLYSKL TVDKSRWQQG

YVDGDQCESN NKWCSCTEG LDNITQSTQS TGVKITWAG VTPICIADKE YNNMFCAGFH VNWIKEKTKL DPEVKFNWYV APIEKTISKA NYKTTPPVLD RRi Si LQMNSLRAED SEARVSELTQ IPDRFSASSS VTLFPPSSAA FLFPPKPKDT RWSVLTVLH NQVSLTCLVK NVFSCSVMHE

%RSGGG6SGG 3CAASGFMFS

PCLNGGSCKD YRIAENQKSC FNDFTRWGG EHNIEETEHT YTNIFLKFGS EGGRDSCQGD TDKTHTCPPC DGVEVHNAKT KGQPREPQVY SDGSFFLYSK GGS6GGGSGG RYAMSWVRQA TAVYYCARGA DPAVSVALGQ GNTASLTITG GGGGSGGGGS

KLEEFVQGNL DINSYECWCP EPAVPFPCGR EDAKPGQFPW EQKRNVIRII GYVSGWGRVF SGGPHVTEVE PAPELLGGPS KPREEQYNST TLPPSRDELT LTVDKSRWQQ GGSGGGGSG6 PGKGPEWVSG TYTSRSDVPD TVRITCQGDS AQAEDEADYY GGGGSGGGGS

LMISRTPEVT QDWLNGKEYK GFYPSDIAVE ALHNHYTQKS CVWDVSHED CKVSNKALPA WESNGQPENN LSLSPGK* FIX-08 8 DNA序列 61 121 181 241 301 361 421 481 541

ATGCAGCGCG

GGATATCTAC

GCTTGCCTTT

GATTTGACAG

AACATCACAG

AAAAACAAAG

CTAAAGAATT

TGAATCGGCC

AGAGAGAATG

CTGAAAGAAC

TGAACATGAT

TCAGTGCTGA

TAGATATAGA

CAATATTGAA

ATTTTGGCTC

ACTTTCTTAA

ATTCTTTTAC

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TATGGAAGAA

AACTGAATTT

CATGGCAGAA

ATGTACAGGT

AATATCTGAT

GAGTCTAACA

CATGCCCTAA

GAGATGTAAA

ATTTCAGTTT

AATTCAGGTA

AAGTGTAGTT

TGGAAGCAGT

TCACCAGGCC

TTGTTTCCTT

GCTGTCTTCT

GCCAGCACGC

AGAGAAATTG

ATTTTCATGA

TTCTTGATCA

AATTGGAAGA

TTGAAGAAGC

ATGTTGATGG

TCATCACCAT

TTTTAAAATA

TCACTAAATT

AGGTTGGTAA

GCTTTCAGAT

TGTTTTCTTT

TGAAAACGCC

GTTTGTTCAA

ACGAGAAGTT

AGATCAGTGT

CTGCCTTTTA

CATTGAGTAT

TTGATTACAT

GTACTGTGGG

TATTTGGATT

TTTGCTAAAA

AACAAAATTC

GGGAATCTAG

TTTGAAAACA

GAGTCCAATC -198- 201217526 111111111111111111111111111111111111111111111111111111111 062840628406284062840628406284062840628406284062840628406 667789900122334556678899011223445567788900112334456677899 11111111111111111222222222222222233333333333333333

CATGTTTAAA TGGCGGCAGT TGCAAGGATG ACATTAATTC CTATGAATGT TTGGATTTGA AGGAAAGAAC TGTGAATTAG ATGTAACATG TAACATTAAG GCGAGCAGTT TTGTAAAAAT AGTGCTGATA ACAAGGTGGT TTGCTCCTGT ATCGACTTGC AGAAAACCAG AAGTCCTGTG AACCAGCAGT GCCATTTCCA

TTTCTGTTTC ATGTAAATTC TTAATGACTT AGGTTGTTTT GGATTGTAAC AACATAATAT

ACAAACTTCT TACTGAAGCT CACT( GAATGC TGCTGCCCAC

TGGTGTCCCT AATGGCAGAT ACTGAGGGAT TGTGGAAGAG GATGTGGACT ACCCAATCAT TTCCCTTGGC AATGAAAAAT GTCGCAGGTG CGAATTATTC CTTCTGGAAC GACAAGGAAT AGAGTCTTCC GACCGAGCCA GGCTTCCATG GAAGTGGAAG AAAGGCAAAT ACAAAGCTCA GGACCGTCAG CCTGAGGTCA TGGTACGTGG AACAGCACGT AAGGAGTACA TCCAAAGCCA GAGCTGACCA ATCGCCGTGG GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA TCAGGCGGTG CCAGCACCTG ACCCTCATGA GACCCTGAGG AAGCCGCGGG CACCAGGACT GCCCCCATCG ACCCTGCCCC AAAGGCTTCT AACTACAAGA CTCACCGTCG GAGGCTCTGC GGTGGCTCCG GGAGGTTCCG GTACAGCCTG TATGCCATGA AGTGGTAGTG AGAGACAATT GCTGTATATT ACCAGCTTCG GCCCCAAAGC CCTGCTGTGT AGAAACTTTT TATGGTTTAA AACACAGCTT CTGCTGTACT CTACGTCAGC .CCC GTGCTGAGAC TGTT1 AAGCTCAi GAAACCAr

TTTCCT ,TTT TGGATAACAT CACTCAAAGC GTTGGTGGAG AAGATGCCAA ACCAGGTCAA GTTGATGCAT TCTGTGGAGG CTCTATCGTT TGTGTTGAAA CTGGTGTTAA AATTACAGTT TGAGGAGACA GAACATACAG AGCAAAAGCG AAATGTGATT CTACAATGCA GCTATTAATA AGTACAACCA TGACATTGCC CTTAGTGCTA AACAGCTACG TTACACCTAT TTGCATTGCT CTTCCTCAAA TTTGGATCTG GCTATGTAAG TGGCTGGGGA ATCAGCTTTA GTTCTTCAGT ACCTTAGAGT CATGTCTTCG ATCTACAAAG TTCACCATCT ATAACAACAT AAGGAGGTAG AGATTCATGT CAAGGAGATA GTGGGGGACC GGACCAGTTT CTTAACTGGA ATTATTAGCT GGGGTGAAGA ATGGAATATA TACCAAGGTG TCCCGGTATG TCAACTGGAT TAAGGAAAAA CTGACAAAAC TCACACATGC CCACCGTGCC CAGCTCCGGA ACTCCTGGGC CCCAAGGACA CCCTCATGAT CTCCO AGCCACGAAG ACCCTGAGGT CAAGf GCCAAGACAA AGCCGCGGGA GGAGCAGTAC ACCGTCCTGC ACCAGGACTG GCTGAATGGC GCCCTCCCAG CCCCCATCGA GAAAACCATC CAGGTGTACA CCCTGCCCCC ATCCCGGGAT TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA TCCCAGCGAC CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACGCCTCCC TACAGCAAGC TCACCGTGGA CAAGAGCAGG GTGATGCATG AGGCTCTGCA CAACCACTAC AAAGGTGGCG GCGGATCAGG TGGGGGTGGA TCAGACAAAA CTCACACATG CCCACCGTGC

CTCACCACAA TGGACGAACC ACACGAACAT ACAAAGGGAG rCGGGTT ΓΘΘΤΑΑΑ

TCCACTTGTT GTTCTGTGCT CCATGTTACT GTGTGCAATG

TCTTCCTCTT CCCCCCAAAA CATGCGTGGT GGTGGACGTG ACGGCGTGGA GGTGCATAAT ACCGTGTGGT CAGCGTCCTC

AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC GGAACGTCTT GCCTCTCCCT GAGGTTCCGG

CTCCAACAAA CCGAGAACCA CAGCCTGACC CAATGGGCAG CTTCTTCCTC CTCATGCTCC GTCTCCGGGT TGGCGGGGGA

：CGGACC 3TTCAAC

AACTCCTGGG AGGACCGTCA GTCTTCCTCT TCCCCCCAAA ACCCAAGGAC

TGGTGGACGT GAGCCACGAA AGGTGCATAA TGCCAAGACA TCAGCGTCCT CACCGTCCTG TCTCCAACAA AGCCCTCCCA CCCGAGAACC ACAGGTGTAC TCAGCCTGAC CTGCCTGGTC GCAATGGGCA GCCGGAGAAC CCTTCTTCCT CTACAGCAAG

TCTCCCGGAC CCCTGAGGTC ACATGCGTGG TCAAGTTCAA CTGGTACGTG GACGGCGTGG AGGAGCAGTA CAACAGCACG TACCGTGTGG GGCTGAATGG CAAGGAGTAC AAGTGCAAGG AGAAAACCAT CTCCAAAGCC AAAGGGCAGC CATCCCGCGA TGAGCTGACC AAGAACCAGG ATCCCAGCGA CATCGCCGTG GAGTGGGAGA CCACGCCTCC CGTGTTGGAC TCCGACGGCT ACAAGAGCAG GTGGCAGCAG GGGAACGTCT ACAACCACTA CACGCAGAAG AGCCTCTCCC GCGGAGGTGG GTCCGGTGGC GGCGGATCAG GTGGCGGGGG ATCAGCGCAG GTGCAGCTGC AGGAGTCTGG GGGGGTCCCT GAGACTCTCC TGTGCAGCCT CTGGATTCAT CCAGGCTCCA GGGAAGGGGC CAGAGTGGGT ATACTACGCA GACTCCGTGA AGGGCCGGTT GCTGTATCTG CAAATGAACA GCCTGAGAGC GGGCGCCACC TACACCAGCC GGAGCGACGT GCCCGACCAG CCAGGGAACC CTGGTCACCG TCTCCTCAGG GAGTGCATCC TGAATTTTCA GAAGCACGCG TATCTGAACT GACTCAGGAC GGGACAGACA GTCAGGATCA CATGCCAAGG AGACAGCCTC GTACCAGCAG AAGCCAGGAC AGGCCCCTAC TCTTGTCATC CTCAGGGATC CCAGACCGAT TCTCTGCCTC CAGCTCAGGA CACTGGGGCT CAGGCGGAAG ATGAGGCTGA CTATTACTGC CCAGCAGGGC GTGTTCGGCG GCGGCACCAA GCTGACCGTC CCCCTCGGTC ACTCTGTTCC CGCCCTCTTC TGCGGCCTGA

TCTCATGCTC TGTCTCCGGG GTGGGGGTGG

GCTGGGTCCG GTGGTAGTAC CCAAGAACAC ACTGCGCCCG ACTACTGGGG TTGAAGAAGG CTGTGGCCTT \GCTG \GGCC CCTTGACCAT ACGGCGGCGG CCAAGGCTGC

ATGCAAG GTAAAAG

CGTGATGCAT TAAAGGTGGC ATCAGGCGGT GGGAGGCTTG GTTTAGCAGG CTCAGGTATT CACCGTCTCC CGAGGACACG FIX- 08 8氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接兩個Fc區的接頭區域爲下劃線，且連接Fc區與SCE5的接頭爲粗體。

1 MQBVMI.MAE. 61 EREOTEEKCS 121 FGFEGKNCEL 181 VSVSQTSKLT 241 QWLNGKVDA 301 ΡΗΗΝΥΝΑΑΙΝ 361 HKGRSALVLQ 421 GTSFLTGIIS 481 VFLFPPKPKD 541 YRWSVLTVL 601 KNQVSLTCLV 661 GNVFSCSVMH 721 ELLGGPSVFL

.SPG.IiI.TI.CLL. FEEAREVFEN DVTCNIKNGR RAETVPPDVD FCGGSIVNEK KYNHDIALLE YLRVPLVDRA WGEECAMKGK TLMISRTPEV HQDWLNGKEY KGFYPSDIAV EALHNHYTQK FPPKPKDTLM

GYLLSAECTV TERTTEFWKQ CEQFCKNSAD YVNSTEAETI WIVTAAHCVE LDEPLVLNSY TCLRSTKFTI YGIYTKVSRY IVSHE KALP EWESNGQPEN SLSLSPGKGG ISRTPEVTCV

TCVWD^ KCKVSNK

FLDHEWANKI LNRPKRYNSG

YVDGDQCESN NKWCSCTEG LDNITQSTQS TGVKIIWAG VTPICIADKE YNNMFCAGFH VNWIKEKTKL DPEVKFNWYV APIEKTISKA NYKTTPPVLD GGSGGGGSGG

PCLNGGSCKD YRLAENQKSC FNDFTRWGG EHNIEETEHT YTNIFLKFGS EGGRDSCQGD TDKTHTCPPC DGVEVHNAKT KGQPREPQVY SDGSFFLYSK DK WDVSHEDPE VKl SGGGGSD：：FNWYVDG,

KLEEFVQGNL DINSYECWCP EPAVPFPCGR EDAKPGQFPW EQKRNVIRII GYVSGWGRVF SGGPHVTEVE PAPELLGGPS KPREEQYNST TLPPSRDELT LTVDKSRWQQ THTCPPCPAP EVHNAKTKPR -199 201217526 781 EEQYNSTYRV VSVLTVLHQD WLNGKEYKCK VSNKALPAPI EKTISKAKGQ PREPQVYTLP 841 PSRDELTKNQ VSLTCLVKGF YPSDIAVEWE SNGQPENNYK TTPPVLDSDG SFFLYSKLTV 901 DKSRWQQGNV FSCSVMHEAL HNHYTQKSLS LSPGKGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS 961 GGGGSAQVQL QESGGGLVQP GGSLRLSCAA SGFMFSRYAM SWVRQAPGKG PEWVSGISGS 1021 GGSTYYADSV KGRFTVSRDN SKNTLYLQMN SLRAEDTAVY YCARGATYTS RSDVPDQTSF 1081 DYWGQGTLVT VSSGSASAPK LEEGEFSEAR VSELTQDPAV SVALGQTVRI TCQGDSLRNF 1141 YASWYQQKPG QAPTLVIYGL SKRPSGIPDR FSASSSGNTA SLTITGAQAE DEADYYCLLY 1201 YGGGQQGVFG GGTKLTVLRQ PKAAPSVTLF PPSSAA*

FIX-089 DNA序歹[J 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241

ATGCAGCGCG GGATATCTAC GCTTGCCTTT GATTTGACAG AACATCACAG AAAAACAAAG CTAAAGAATT TGAATCGGCC AGAGAGAATG CTGAAAGAAC CATGTTTAAA TTGGATTTGA ^GCAGTT \CTTGC TTTCTGTTTC ATGTAAATTC TTAATGACTT AGGTTGTTTT GGATTGTAAC AACATAATAT CTCACCA TGGACG ACACGAACAT ACAAAGGGAG CATGTCTTCG AAGGAGGTAG GGACCAGTTT ATGGAATATA CTGACAAAAC TCTTCCTCTT CATGCGTGGT ACGGCGTGGA ACCGTGTGGT AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC GGAACGTCTT GCCTCTCCCT GTGGATCCGG CCGAGCGGAT GTGGCGGCGG ACAAAACTCA TCCTCTTCCC GCGTGGTGGT GCGTGGAGGT GTGTGGTCAG GCAAGGTCTC GGCAGCCCCG ACCAGGTCAG GGGAGAGCAA ACGGCTCCTT ACGTCTTCTC TCTCCCTGTC

GCGAGC ATCGAC

^ACAA 3AACC

TGAACATGAT TCAGTGCTGA TAGATATAGA CAATATTGAA ATTTTGGCTC ACTTTCTTAA ATTCTTTTAC AAAGAGGTAT TATGGAAGAA AACTGAATTT TGGCGGCAGT AGGAAAGAAC TTGTAAAAAT AGAAAACCAG ACAAACTTCT TACTGAAGCT CACTCGGGTT GAATGGTAAA TGCTGCCCAC TGAGGAGACA CTACAATGCA CTTAGTGCTA CTTCCTCAAA ATCAGCTTTA ATCTACAAAG AGATTCATGT CTTAACTGGA TACCAAGGTG TCACACATGC CCCCCCAAAA GGTGGACGTG GGTGCATAAT CAGCGTCCTC CTCCAACAAA CCGAGAACCA CAGCCTGACC CAATGGGCAG CTTCTTCCTC CTCATGCTCC GTCTCCGGGT CGGGGGCGGA GGCCCTGCAC ATCAGGTGGG CACATGCCCA CCCAAAACCC GGACGTGAGC GCATAATGCC CGTCCTCACC CAACAAAGCC AGAACCACAG CCTGACCTGC TGGGCAGCCG CTTCCTCTAC ATGCTCCGTG TCCGGGTAAA

CATGGCAGAA ATGTACAGGT AATATCTGAT GAGTCTAACA CATGCCCTAA GAGATGTAAA ATTTCAGTTT AATTCAGGTA AAGTGTAGTT TGGAAGCAGT TGCAAGGATG TGTGAATTAG AGTGCTGATA AAGTCCTGTG AAGCTCACCC GAAACCATTT GTTGGTGGAG GTTGATGCAT TGTGTTGAAA GAACATACAG GCTATTAATA AACAGCTACG TTTGGATCTG GTTCTTCAGT TTCACCATCT CAAGGAGATA ATTATTAGCT TCCCGGTATG CCACCGTGCC CCCAAGGACA AGCCACGAAG GCCAAGACAA ACCGTCCTGC GCCCTCCCAG CAGGTGTACA TGCCTGGTCA CCGGAGAACA TACAGCAAGC GTGATGCATG AAAGGCGGTG TCCGGTGGCG AACCTGTGCG GGTGGATCAG CCGTGCCCAG AAGGACACCC CACGAAGACC AAGACAAAGC GTCCTGCACC CTCCCAGCCC GTGTACACCC CTGGTCAAAG GAGAACAACT AGCAAGCTCA ATGCATGAGG TGA

TCACCAGGCC TTGTTTCCTT GCTGTCTTCT GCCAGCACGC AGAGAAATTG ATTTTCATGA TTCTTGATCA AATTGGAAGA TTGAAGAAGC ATGTTGATGG ACATTAATTC ATGTAACATG ACAAGGTGGT AACCAGCAGT GTGCTGAGAC TGGATAACAT AAGATGCCAA TCTGTGGAGG CTGGTGTTAA .GCG CCA TTACACCTAT GCTATGTAAG ACCTTAGAGT ATAACAACAT GTGGGGGACC GGGGTGAAGA TCAACTGGAT CAGCTCCGGA CCCTCATGAT ACCCTGAGGT AGCCGCGGGA ACCAGGACTG CCCCCATCGA CCCTGCCCCC AAGGCTTCTA ACTACAAGAC TCACCGTCGA AGGCTCTGCA GCGGTTCAGG GAGGGTCAGG GTGGCGGTGG GCGGTGGAGG CACCGGAACT TCATGATCTC CTGAGGTCAA CGCGGGAGGA AGGACTGGCT CCATCGAGAA TGCCCCCATC GCTTCTATCC ACAAGACCAC CCGTGGACAA CTCTGCACAA

AGCAAAAG AGTACAAC

TCATCACCAT TTTTAAAATA TCACTAAATT AGGTTGGTAA GCTTTCAGAT TGTTTTCTTT TGAAAACGCC GTTTGTTCAA ACGAGAAGTT AGATCAGTGT CTATGAATGT TAACATTAAG TTGCTCCTGT GCCATTTCCA TGTTTTTCCT CACTCAAAGC ACCAGGTCAA CTCTATCGTT AATTACAGTT AAATGTGATT TGACATTGCC TTGCATTGCT TGGCTGGGGA TCCACTTGTT GTTCTGTGCT CCATGTTACT GTGTGCAATG TAAGGAAAAA ACTCCTGGGA CTCCCGGACC CAAGTTCAAC GGAGCAGTAC GCTGAATGGC GAAAACCATC ATCCCGGGAT TCCCAGCGAC CACGCCTCCC CAAGAGCAGG CAACCACTAC TGGAGGAGGG CGGTGGCGGA CTCCGGCGGA TTCCGGTGGC CCTGGGCGGA CCGGACCCCT GTTCAACTGG GCAGTACAAC GAATGGCAAG AACCATCTCC CCGGGATGAG CAGCGACATC GCCTCCCGTG GAGCAGGTGG CCACTACACG

CTGCCTTTTA CATTGAGTAT TTGATTACAT GTACTGTGGG TATTTGGATT TTTGCTAAAA AACAAAATTC GGGAATCTAG TTTGAAAACA GAGTCCAATC TGGTGTCCCT AATGGCAGAT ACTGAGGGAT TGTGGAAGAG GATGTGGACT ACCCAATCAT TTCCCTTGGC AATGAAAAAT GTCGCAGGTG CGAATTATTC CTTCTGGAAC GACAAGGAAT AGAGTCTTCC GACCGAGCCA GGCTTCCATG GAAGTGGAAG AAAGGCAAAT ACAAAGCTCA GGACCGTCAG CCTGAGGTCA TGGTACGTGG AACAGCACGT AAGGAGTACA TCCAAAGCCA GAGCTGACCA ATCGCCGTGG GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA TCAGGCGGTG TCAGCCTGCA GGTGGGTCCG GGGGGATCCG CCGTCAGTCT GAGGTCACAT TACGTGGACG AGCACGTACC GAGTACAAGT AAAGCCAAAG CTGACCAAGA GCCGTGGAGT TTGGACTCCG CAGCAGGGGA CAGAAGAGCC

FIX-08 9氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接〇S 1與Fc區的接頭區域爲下劃線，且 QS1肽是斜體的。

S -200- 201217526 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961

mnymimE. ERECMEEKCS FGFEGKNCEL VSVSQTSKLT QWLNGKVDA PHHNYNAAIN HKGRSALVLQ GTSFLTGIIS VFLFPPKPKD YRWSVLTVL KNQVSLTCLV GNVFSCSVMH TERMALHNLC FLFPPKPKDT RWSVLTVLH NQVSLTCLVK NVFSCSVMHE SEGLITICLL. FEE/iiE'vFEN DVTCNIKNGR RAETVFPDVD FCGGSIVNEK KYNHDIALLE |RA KGK TLMISRTPEV HQDWLNGKEY KGFYPSDIAV EALHNHYTQK GGGGSGGGG5

YLRVPLVDF WGEECAMKG

GYLLSAECTV TERTTEFWKQ CEQFCKNSAD YVNSTEAETI WIVTAAHCVE LDEPLVLNSY TCLRSTKFTI YGIYTKVSRY TCVWDVSHE KCKVSNKALP EWESNGQPEN SLSLSPGKGG GGGGSGGGGS

FLDHENANKI LNRPKRYN5G

YVDGDQCESN NKWCSCTEG LDNITQSTQS TGVKITWAG VTPICIADKE YNNMFCAGFH VNWIKEKTKL DPEVKFNWYV APIEKTISKA NYKTTPPVLD QGSGGGGSGG

GGGGSGGGGS

PCLNGGSCKD YRLAENQKSC FNDFTRWGG EHNIEETEHT YTNIFLKFGS EGGRDSCQGD TDKTHTCPPC DGVEVHNAKT KGQPREPQVY SDGSFFLYSK GGSGGGGSGG

KLEEFVQGNL DINSYECWCP EPAVPFPCGR EDAKPGQFPW EQKRNVIRII GYVSGWGRVF SGGPHVTEVE PAPELLGGPS KPREEQYNST TLPPSRDELT LTVDKSRWQQ GGSGGGGSAC

LMISRTPEVT QDWLNGKEYK GFYPSDIAVE ALHNHYTQKS CVWDVSHED CKVSNKALPA WESNGQPENN LSLSPGK*

PEVKFNWYVD PIEKTISKAK YKTTPPVLDS

DKTHTCPPCP GVEVHNAKTK GQPREPQVYT DGSFFLYSKL

APELLGGPSV PREEQYNSTY LPPSRDELTK TVDKSRWQQG

FIX-090 DNA序歹IJ

1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581

ATGCAGCGCG TGAACATGAT CATGGCAGAA GGATATCTAC TCAGTGCTGA ATGTACAGGT GCTTGCCTTT TAGATATAGA AATATCTGAT GATTTGACAG CAATATTGAA GAGTCTAACA AACATCACAG ATTTTGGCTC CATGCCCTAA AAAAACAAAG ACTTTCTTAA GAGATGTAAA CTAAAGAATT ATTCTTTTAC ATTTCAGTTT TGAATCGGCC AAAGAGGTAT AATTCAGGTA AGAGAGAATG TATGGAAGAA AAGTGTAGTT CTGAAAGAAC AACTGAATTT TGGAAGCAGT CATGTTTAAA TGGCGGCAGT TGCAAGGATG TTGGATTTGA AGGAAAGAAC TGTGAATTAG GCGAGCAGTT TTGTAAAAAT AGTGCTGATA ATCGACTTGC AGAAAACCAG AAGTCCTGTG TTTCTGTTTC ACAAACTTCT AAGCTCACCC ATGTAAATTC TACTGAAGCT GAAACCATTT CACTCGGGTT GTTGGTGGAG GAATGGTAAA GTTGATGCAT TGCTGCCCAC TGTGTTGAAA TGAGGAGACA GAACATACAG CTACAATGCA GCTATTAATA CTTAGTGCTA AACAGCTACG CTTCCTCAAA TTTGGATCTG ACAAAGGGAG ATCAGCTTTA GTTCTTCAGT CATGTCTTCG ATCTACAAAG TTCACCATCT AAGGAGGTAG AGATTCATGT CAAGGAGATA GGACCAGTTT CTTAACTGGA ATTATTAGCT ATGGAATATA TACCAAGGTG TCCCGGTATG CTGGTGGCGG TGGCTCCGGC GGAGGTGGGT CAGGCGGTGG AGGTTCCGGT GGCGGGGGAT GAGGCTTGGT ACAGCCTGGG GGGTCCCTGA TTAGCAGGTA TGCCATGAGC TGGGTCCGCC CAGGTATTAG TGGTAGTGGT GGTAGTACAT CCGTCTCCAG AGACAATTCC AAGAACACGC AGGACACGGC TGTATATTAC TGCGCCCGGG CCGACCAGAC CAGCTTCGAC TACTGGGGCC GTGCATCCGC CCCAAAGCTT GAAGAAGGTG CTCAGGACCC TGCTGTGTCT GTGGCCTTGG ACAGCCTCAG AAACTTTTAT GCAAGCTGGT TTGTCATCTA TGGTTTAAGT AAAAGGCCCT GCTCAGGAAA CACAGCTTCC TTGACCATCA ATTACTGCCT GCTGTACTAC GGCGGCGGCC TGACCGTCCT ACGTCAGCCC AAGGCTGCCC CGGCCTGA

TTAATGACTT AGGTTGTTTT GGATl AACAT CTCACC TGGACGi ACACGAACAT TCACCAGGCC TTGTTTCCTT GCTGTCTTCT GCCAGCACGC AGAGAAATTG ATTTTCATGA TTCTTGATCA AATTGGAAGA TTGAAGAAGC ATGTTGATGG ACATTAATTC ATGTAACATG IGTGGT IT GTGCTGAGAC TGGATAACAT AAGi TCT(

ACAAGGTGGr AACCAGCAGr JCTGAGAi iATAACA1： iATGCCAA 'GTGGAGG

TCATCACCAT TTTTAAAATA TCACr AGGT. GCTTTCAGAT TGTTTTCTTT TGAAAACGCC GTTTGTTCAA ACGAGAAGTT AGATCAGTGT CTATGAATGT TAACATTAAG TTGCTCCTGT GCCATTTCCA TGTTTTTCCT CACTCAAAGC ACCAGGTCAA CTCTATCGTT

：TAAATT rTGGTAA

rTGTAAC VTAATAT ：CACAA ：GAACC

CTGGTGTTAA AATTACAGTT AGCAAAAGCG AAATGTGATT AGTACAACCA TGACATTGCC TTACACCTAT TTGCATTGCT

GCTATGTAAG ACCTTAGAGT ATAACAACAT GTGGGGGACC GGGGTGAAGA TCAACTGGAT CCGGTGGCGG CAGCGCAGGT GACTCTCCTG AGGCTCCAGG

TGGCTGGGGA TCCACTTGTT GTTCTGTGCT CCATGTTACT GTGTGCAATG TAAGGAAAAA CGGATCAGGT GCAGCTGCAG TGCAGCCTCT GAAGGGGCCA ACTACGCAGA CTCCGTGAAG TGTATCTGCA AATGAACAGC GCGCCACCTA CACCAGCCGG AGGGAACCCT GGTCACCGTC AATTTTCAGA AGCACGCGTA GACAGACAGT CAGGATCACA ACCAGCAGAA GCCAGGACAG CAGGGATCCC AGACCGATTC CTGGGGCTCA GGCGGAAGAT AGCAGGGCGT GTTCGGCGGC CCTCGGTCAC TCTGTTCCCX3

CTGCCTTTTA CATTGAGTAT TTGATTACAT GTACTGTGGG TATTTGGATT TTTGCTAAAA AACAAAATTC GGGAATCTAG TTTGAAAACA GAGTCCAATC TGGTGTCCCT AATGGCAGAT ACTGAGGGAT TGTGGAAGAG GATGTGGACT ACCCAATCAT TTCCCTTGGC AATGAAAAAT GTCGCAGGTG CGAATTATTC CTTCTOGAAC GACAAGGAAT AGAGTCTTCC GACCGAGCCA GGCTTCCATG GAAGTGGAAG AAAGGCAAAT ACAAAGCTCA GGGGGTGGAT GAGTCTGGGG GGATTCATGT GAGTGGGTCT GGCCGGTTCA CTGAGAGCCG AGCGACGTGC TCCTCAGGGA TCTGAACTGA TGCCAAGGAG GCCCCTACTC TCTGCCTCCA GAGGCTGACT GGCACCAAGC CCCTCTTCTG FIX-90氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽

爲雙下劃線，且連接FIX與SCE5的接頭區域爲下劃線 1 MORVNMIMAE SPGLITICLL GYLLSAECTV FLDHENANKI LNRPKRYNSG KLEEFVQGNL 61 ERECMEEKCS FEEMEVFEN TERTTEFWKQ YVDGDQCESN PCLNGGSCKD DINSYECWCP 121 FGFEGKNCEL DVTCNIKNGR CEQFCKNSAD NKWCSCTEG YRLAENQKSC EPAVPFPCGR 181 VSVSQTSKLT RAETVFPDVD YVNSTEAETI LDNITQSTQS FNDFTRWGG EDAKPGQFPW 241 QWLNGKVDA FCGGSIVNEK WIVTAAHCVE TGVKITWAG EHNIEETEHT EQKRNVIRII -201· 201217526 301 361 421 481 541 601 661 721

PHHNYNAAIN KYNHDIALLE HKGRSALVLQ YLRVPLVDRA GTSFLTGIIS WGEECAMKGK SGGGGSGGGG SAOVOLOESG SGISGSGGST YYADSVKGRF PDQTSFDYWG QGTLVTVSSG DSLRNFYASW YQQKPGQAPT YYCLLYYGGG QQGVFGGGTK

LDEPLVLNSY VTPICIADKE TCLRSTKFTI YNNMFCAGFH YGIYTKVSRY VNWIKEKTKL GGLVQPGGSL RLSCAASGFM TVSRDNSKNT LYLQMNSLRA SASAPKLEEG EFSEARVSEL LVIYGLSKRP SGIPDRFSAS LTVLRQPKAA PSVTLFPPSS YTNIFLKFGS GYVSGWGRVF EGGRDSCQGD SGGPHVTEVE TGGGGSGGGG SGGGGSGGGG FSRYAMSWVR QAPGKGPEWV EDTAVYYCAR GATYTSRSDV TQDPAVSVAL GQTVRITCQG SSGNTASLTI TGAQAEDEAD AA*

FVII-088 DNA序歹IJ 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 ATGGTCTCCC AGGCCCTCAG GCTCCTCTGC GCAGTCTTCG TAACCCAGGA GGAAGCCCAC GCGTTCCTGG AGGAGCTGCG GCCGGGCTCC TCGAGG AGGCCCGGGA GATCTTCAAG \CAGTG ATGGGGACCA GTGTGCCTCA GACCAGCTCC AGTCCTATAT CTGCTTCTGC ACGCACAAGG ATGACCAGCT GATCTGTGTG AGTGACCACA CGGGCACCAA GCGCTC'

TCCTTC TCTTAC \CGGGGTGT CCTGCACACC CACAG' AAAAG^ GAGTG1

'CCTGT 1TTGAA

^GAAATG CCAGCAAACC CCAAGGCCGA JTCCAT GGCAGGTCCT GTTGTTGGTG ATCAACACCA TCTGGGTGGT CTCCGCGGCC AACCTGATCG CGGTGCTGGG CGAGCACGAC CGGCGGGTGG CGCAGGTCAT CATCCCCAGC ATCGCGCTGC TCCGCCTGCA CCAGCCCGTG CTGCCCGAAC GGACGTTCTC TGAGAGGACG GGCTGGGGCC AGCTGCTGGA CCGTGGCGCC CCCCGGCTGA TGACCCAGGA CTGCCTGCAG ATCACGGAGT ACATGTTCTG TGCCGGCTAC GACAGTGGAG GCCCACATGC CACCCACTAC AGCTGGGGCC AGGGCTGCGC AACCGTGGGC TACATCGAGT GGCTGCAAAA GCTCATGCGC GCCCCATTTC CCGGTGGCGG TGGCTCCGGC GGGGGTGGAT CAGGCGGTGG AGGTTCCGGT CCACCGTGCC CAGCTCCGGA ACTCCTGGGA CCCAAGGACA CCCTCATGAT CTCCCGGACC AGCCACGAAG ACCCTGAGGT CAAGTTCAAC GCCAAGACAA AGCCGCGGGA GGAGCAGTAC ACCGTCCTGC ACCAGGACTG GCTGAATGGC GCCCTCCCAG CCCCCATCGA GAAAACCATC CAGGTGTACA CCCTGCCCCC ATCCCGGGAT TGCCTGGTCA AAGGCTTCTA TCCCAGCGAC CCGGAGAACA ACTACAAGAC CACGCCTCCC TACAGCAAGC TCACCGTCGA GTGATGCATG AGGCTCTGCA ；CGG ：CGG AAGAGGGACA TCGTGATGAC GTGAGCATCA GCTGCCGGAG iTTCC TGCAGCGGCC CGGCCAGAGC ：CAGCG GCGTGCCCGA CCGGTTCAGC CGGATCAGCC GGGTGGAGGC CGAGGACGTG TACCCCTTCA CCTTCGGCAG CGGCACCAAG GGCGGCGGCG GCAGCGGCGG CGGCGGCAGC CTGGTGCGGC CCGGCACCAG CGTGAAGATC AACTACTGGC TGGGCTGGGT GAAGCAGCGG ATCTACCCCG GCGGCGGCTA CAACAAGTAC ACCGCCGACA CCAGCAGCAG CACCGCCTAC AGCGCCGTGT ACTTCTGCGC CCGGGAGTAC GGCCAGGGCA CCAGCGTGAC CGTGAGCAGC GATCAGGTGG GGGTGGATCA ACACATGCCC ACCGTGCCCA CCCCAAAACC CAAGGACACC TGGACGTGAG CCACGAAGAC TGCATAATGC CAAGACAAAG CGTGTGGTCA GCGTCCTCAC CGTCCTGCAC TGCAAGGTCT CCAACAAAGC CCTCCCAGCC GGGCAGCCCC GAGAACCACA GGTGTACACC AACCAGGTCA GCCTGACCTG CCTGGTCAAA TGGGAGAGCA ATGGGCAGCC GGAGAACAAC GACGGCTCCT TCTTCCTCTA CAGCAAGCTC AACGTCTTCT CATGCTCCGT GATGCATGAG CTCTCCCTGT CTCCGGGTAA ATGA AAACGGCGCC GCCGGAGC TCCGGTGGCG GGGGATCC AAGAGGG GTGAGCi TGCTGG1 CTGGCCi

CAAGAGCAGG CAACCACTAC TGGCGGCGGA CGGTGGAGGT CCAGGCCGCC CAGCCGGAGC

3TGGCGGCG \CAAAACTC

GGl GAC TTCCTCTTCC TGCGTGGTGG GGCGTGGAGG

CTTCTGCTTG GGCGTCCTGC CTGGAGAGGG GACGCGGAGA AGTCCATGCC CTCCCTGCCT AACGAGAACG CGGTGCCACG TATCCATGTG ATTGTGGGGG AATGGAGCTC CACTGTTTCG CTCAGCGAGC ACGTACGTCC GTCCTCACTG CTGGCCTTCG ACGGCCCTGG CAGTCACGGA TCGGATGGCA CGGGGCACGT CACTTTGGGG TCAGAGCCAC GGAGGTGGGT GGCGGGGGAT GGACCGTCAG CCTGAGGTCA TGGTACGTGG AACAGCACGT AAGGAGTACA TCCAAAGCCA GAGCTGACCA ATCGCCGTGG GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA TCAGGTGGGG TCCGGTGGGG CCCAGCGTGC CTGCTGCACA CCCCAGCTGC GGCAGCGGCA GGCGTGTACT CA GC AGCTGCAAGG CCCGGCCACG AACGAGAACT ATGCAGCTGA GGCAACTACG GGTGGCGGTG GGCGGTGGAG GCACCGi CTCAT' CCTGAGGTCA CCGCGGGAGG CAGGACTGGC CCCATCGAGA CTGCCCCCAT GGCTTCTATC TACAAGACCA ACCGTGGACA GCTCTGCACA

rGGAGATC \GGTGCAG

：GGAAC rGATCT

GGCTTCAGGG ACCGGCGCCG AGTGCAAGGA GGACGAAGCT AGAATGGGGG TCGAGGGCCG GCGGCTGTGA AGGGGTACTC GAAAAATACC GCAAGGTGTG AGTTGTGTGG ACAAAAT ACGACGGGGA CGGGCACCAC ACCATGTGGT TGCGCTTCTC AGCTCATGGT AGGTGGGAGA GCAAGGACTC GGTACCTGAC TGTACACCAG GCCCAGGAGT CCGGTGGCGG CCGACAAAAC TCTTCCTCTT CATGCGTGGT ACGGCGTGGA ACCGTGTGGT AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC GGAACGTCTT GCCTCTCCCT GTGGATCAGG GTGGATCAAG CCCC ；CAA TGATCTACCG GCGGCACCGC ACTGCATGCA AGCGGGGCGG TGCAGCAGAG CCAGCGGCTA GCCTGGAGTG TCAAGGGCAA GCAGCCTGAC ACTACGCCAT GCTCCGGCGG GTTCCGGTGG TCCTGGGCGG CCCGGACCCC AGTTCAACTG AGCAGTACAA TGAATGGCAA AAACCATCTC CCCGGGATGA CCAGCGACAT CGCCTCCCGT AGAGCAGGTG ACCACTACAC

CCGTGACC GCAACGGC

CTGCCTGGCT GCGCGCCAAC GGAGCAGTGC GTTCTGGATT CTCCTGCAAG GAACTGTGAG GCAGTACTGC TCTGCTGGCA TATTCTAGAA CCCCAAAGGG GGGGACCCTG TGGAGG TGAGCAGAGC CAACCACGAC GCCCCTCTGC ATTGGTCAGC CCTCAACGTG CTCCCCAAAT CTGCAAGGGG GGGCATCGTC GGTCTCCCAG CCTCCTGCGA CGGATCAGGT TCACACATGC CCCCCCAAAA GGTGGACGTG GGTGCATAAT CAGCGTCCTC CTCCAACAAA CCGAGAACCA CAGCCTGACC CAATGGGCAG CTTCTTCCTC CTCATGCTCC GTCTCCGGGT CGGTGGAGGT GAAGAGGAGG CGGCGAGAGC CACCTACCTG GATGAGCAAC CTTCACCCTG GCACCTGGAG CGGCGGCAGC CGGCGCCGAG CACCTTCACC GATCGGCGAC GGCCACCCTG CAGCGAGGAC GGACAGCTGG AGGTGGGTCC CGGGGGATCA ACCGTCAGTC TGAGGTCACA GTACGTGGAC CAGCACGTAC GGAGTACAAG CAAAGCCAAA GCTGACCAAG CGCCGTGGAG GTTGGACTCC GCAGCAGGGG GCAGAAGAGC

s -202- 201217526 FVII-08 8氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，前肽爲雙下劃線，連接FVII或AP3與Fc區的接頭區域爲下劃線，AP3 scFv是斜體的，且具有前蛋白轉化酶加工位點的接頭以粗體顯示

1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201

MV^QALRLLC SFEE^EIFK THKDDQLICV KRNASKPQGR NLIAVLGEHD LPERTFSERT ITEYMFCAGY YIEWLQKLMR PPCPAPELLG AKTKPREEQY QVYTLPPSRD YSKLTVDKSR SGGGGSGGGG CWFLQRPGQS YPFTFGSGTK NYWLGWVKQR SAVYFCAREY DKTHTCPPCP GVEVHNAKTK GQPREPQVYT DGSFFLYSKL

AVFVTOEEAH C3VLHRRRRAN AFLEELRPGS LERECKEEQC DAERTKLFW'l SYSDGDQCAS SPCQNGGSCK DQLQSYICFC LPAFEGRNCE NENGGCEQYC SDHTGTKRSC RCHEGYSLLA DGVSCTPTVE YPCGKIPILE XVGGKVCPKG ECPWQVLLLV NGAQLCGGTL INTIWWSAA HCFDKIKNWR LSEHDGDEQS RRVAQVIIPS TYVPGTTNHD IALLRLHQPV VLTDHWPLC LAFVRFSLVS GWGQLLDRGA TALELMVLNV PRLMTQDCLQ QSRKVGDSPN SDGSKDSCKG DSGGPHATHY RGTWYLTGIV SWGQGCATVG HFGVYTRVSQ SEPRPGVLLR APFPGGGG5G GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC GPSVFLFPPK PKDTLMISRT PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN TVLHQDWLNG KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP CLVKGFYPSD IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL VMHEALHNHY TQKSLSLSPG KRRRRSGGGG SGGGGSGGGG YRDIVMTQAA PSVPVTPGES VSISCRSSRS LLHSNGNTTL PQLLIYRMSN LASGVPDRFS GSGSGTAFTL RISRVEAEDV GVYYCMQHLE LEIKRGGGGS GGGGSGGGGS QVQLQQSGAE LVRPGTSVKI SCKASGYTFT PGHGLEWIGD IYPGGGYNKY NENFKGKATL TADTSSSTAY MQLSSLTSED GNYDYAMDSW GQGTSVTVSS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS GGGGSGGGGS NSTYRWSVL ELTKNQVSLT WQQGNVFSCS SGGG6SR：

IKRR

APELLGGPSV FLFPPKPKDT LMISRTPEVT PREEQYNSTY RWSVLTVLH QDWLNGKEYK LPPSRDELTK NQVSLTCLVK GFYPSDIAVE TVDKSRWQQG NVFSCSVMHE ALHNHYTQKS CVWDVSHED CKVSNKALPA WESNGQPENN LSLSPGK*

PEVKFNWYVD PIEKTISKAK YKTTPPVLDS

FVIII- 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281

041 DNA序列 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG GGTGAGCTGC CTGTGGACGC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA GCTAAGCCAA GGCCACCCTG

TTTGATGAAG GGAAAAGTTG GCTGCATCTG CTCGGGCCTG CTGCCAGGTC TGATTGGATG ACCACTCCTG AAGTGCACTC CGCCAGGCGT CCTTGGAAAT GACCTTGGAC AGTTTCTACT GCTTATGTCA AAGTAGACAG GAAGCGGAAG ACTATGATGA GATGACAACT CTCCTTCCTT TGGGTACATT ACATTGCTGC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTACAAAA AAGTCCGATT ATTCAGCATG AATCAGGAAT TTGATTATAT TTAAGAATCA GATGTCCGTC CTTTGTATTC CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ACTAAATCAG ATCCTCGGTG GATCTAGCTT CAGGACTCAT AGAGGAAACC AGATAATGTC AACCGAAGCT GGTACCTCAC CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC ATTGGAGCAC AGACTGACTT ATGGTCTATG AAGACACACT ATGGAAAACC CAGGTCTATG ATGACCGCCT TACTGAAGGT AGTTATGAAG ATATTTCAGC TTCTCTCAAA ACCCACCAGT GTCCAAl TAAAAG^

TGAAG AAGTC

rGCTCAAAC ：CAACATGA

GATACAGTGG

GGTGTATCCT

GAGAAAGAAG

AAAGAGAATG

GTGGACCTGG

GGGAGTCTGG

TCATTACACT ACTGGAAAGC ATGATAAAGT tTGGC lGACTT CCAAGGAAAA

CTGCTTCTTT TGCAGTGGAA AAGATTTCCT GACTCTGTTT GATGGGTCTG TAAGAACATG TTCTGAGGGA CTTCCCTGGT CTCTGACCCA GAATTCAGGC GACACAGACC GCACTCAGAA GCCTAAAATG CCACAGGAAA AATATTCCTC CTCGCCAATA GTTTTGTCAT CTGTCCAGAG TGATCTTACT TATCCAAATT iGAGGAG 'CAATAT TATGGCATAC CTTGGGACCT AGCAAGCAGA AAGGAGATTA ATTCAAATAT CCTGACCCGC TGGCCCTCTC AGACAAGAGG AGAGAATATA CCAAGCCTCC AGTTTGTTTG CCTTTCTGTC CACCCTATTC GATTCTGGGG TTCTAGTTGT ATACTTGCTG CTTGAAACGC

CTGTGCCTTT

CTGTCATGGG

CCTAGAGTGC

GTAGAATTCA

CTAGGTCCTA

GCTTCCCATC

GCTGAATATG

GGAAGCCATA

CTGTGCCTTA

CTCATTGGAG

TTGCACAAAT

ACAAAGAACT

CACACAGTCA

TCAGTCTATT

GAAGGTCACA

ACTTTCCTTA

ATCTCTTCCC

GAACCCCAAC

GATTCTGAAA

CGCTCAGTTG

GACTGGGACT

TTGAACAATG

ACAGATGAAA

TTACTTTATG

CCATATAACA

CCAAAAGGTG

AAATGGACAG

TATTACTCTA

CTCATCTGCT

AATGTCATCC

CAACGCTTTC

AACATCATGC

CATGAGGTGG

TTCTTCTCTG

CCATTCTCAG

TGCCACAACT

GACAAGAACA

AGTAAAAACA

CATCAACGGG TGCGATTCTG ACTATATGCA CAAAATCTTT CGGATCACCT CCATCCAGGC CTGTCAGTCT ATGATCAGAC CATATGTCTG CCTACTCATA CCCTACTAGT TTATACTACT CCTTGATGCA ATGGTTATGT GGCATGTGAT CATTTCTTGT CTG( AC(

TACGAATGAA

TGGATGTGGT

CCAAGAAGCA

ATGCTCCCTT

GCCCTCAGCG

CCTTTAAGAC

GGGAAGTTGG

TCTACCCTCA

TAAAACATTT

TGACTGTAGA

GTTTCGTTAA

ACAAAGAATC

TGTTTTCTGT

TCCCCAATCC

ACAGCATCAA

CATACTGGTA

GATATACCTT

GAGAAACTGT

CAGACTTTCG

CTGGTGATTA

ATGCCATTGA

AAATAACTCG

CTTTAGTGCC

AAGTGATCTC

TCCATTCAAC

TTTCAACATC

TGAGGTTTAT

TCATGCTGTT

CAGTCAAAGG

GCAGGTCCTG

TCTTTCTCAT

ATGTAGAGAA

TTTTGCTGTA

GGATAGGGAT

AAACAGGTCT

TGGAATGGGC

GAGGAACCAT

ACTCTTGATG

TGGCATGGAA

AAATAATGAA

CAGGTTTGAT

TCCTAAAACT

AGTCCTCGCC

GATTGGTAGG

TCGTGAAGCT

AGACACACTG

CGGAATCACT

GAAGGATTTT

AGATGGGCCA

TATGGAGAGA

TGTAGATCAA

ATTTGATGAG

AGCTGGAGTG

TGGCTATGTT

CATTCTAAGC

CAAACACAAA

CTTCATGTCG

GAACAGAGGC

TTACGAGGAC

ACCAAGAAGC

TACTACTCTT -203- 201217526 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 3781 3841 3901 3961 4021 4081 4141 4201 4261 4321 4381 4441 4501 4561 4621 4681 4741 4801 4861 4921 4981 5041 5101 5161 5221 5281 5341 5401 5461 5521 5581 5641 5701 5761

CAGTCAGATC GATTTTGACA CGACACTATT CATGTTCTAA CAGGAATTTA TTGGGACTCC AGAAATCAGG CAGAGGCAAG TTTTGGAAAG GCTTATTTCT CTGGTCTGCC TTTGCTCTGT GAAAGAAACT TATCGCTTCC CAGGATCAAA ATTCATTTCA TACAATCTCT TGGCGGGTGG GTGTACAGCA CAGATTACAG TCCGGATCAA TTGGCACCAA CTCTACATCT CGAGGAAATT AAACACAATA TATAGCATTC ATGCCATTGG TTTACCAATA AGTAATGCCT AAGACAATGA TATGTGAAGG CAGAATGGCA TCTCTAGACC CAGATTGCCC CACACATGCC CCCCCAAAAC GTGGACGTGA GTGCATAATG AGCGTCCTCA \CAAAG \CCAC AGCCTGACCT AATGGGCAGC TTCTTCCTCT TCATGCTCCG TCTCCGGGTA GGCGGGGGAT GGACCGTCAG CCTGAGGTCA TGGTACGTGG AACAGCACGT AAGGAGTACA TCCAAAGCCA GAGCTGACCA ATCGCCGTGG GTGTTGGACT TGGCAGCAGG ACGCAGAAGA

TCCAACi CGAGAAC

AAGAGGAAAT TTTATGATGA TTATTGCTGC GAAACAGGGC CTGATGGCTC TGGGGCCATA CCTCTCGTCC GAGCAGAACC TGCAACATCA CTGATGTTGA ACACTAACAC TTTTCACCAT GCAGGGCTCC ATGCAATCAA GGATTCGATG GTGGACATGT ATCCAGGTGT AATGCCTTAT ATAAGTGTCA CTTCAGGACA TCAATGCCTG TGATTATTCA CTCAGTTTAT CCACTGGAAC TTTTTAACCC GCAGCACTCT GAATGGAGAG TGTTTGCCAC GGAGACCTCA AAGTCACAGG AGTTCCTCAT AAGTAAAGGT CACCGTTACT TGAGGATGGA CACCGTGCCC CCAAGGACAC GCCACGAAGA CCAAGACAAA CCGTCCTGCA CCCTCCCAGC AGGTGTACAC GCCTGGTCAA CGGAGAACAA ACAGCAAGCT TGATGCATGA AAGGTGGCGG CAGACAAAAC TCTTCCTCTT CATGCGTGGT ACGGCGTGGA ACCGTGTGGT AGTGCAAGGT AAGGGCAGCC AGAACCAGGT AGTGGGAGAG CCGACGGCTC GGAACGTCTT GCCTCTCCCT

TGACTATGAT GGATGAAAAT AGTGGAGAGG TCAGAGTGGC CTTTACTCAG TATAAGAGCA CTATTCCTTC TAGAAAAAAC TATGGCACCC CCTGGAAAAA ACTGAACCCT CTTTGATGAG CTGCAATATC TGGCTACATA GTATCTGCTC GTTCACTGTA TTTTGAGACA TGGCGAGCAT GACTCCCCTG ATATGGACAG GAGCACCAAG CGGCATCAAG CATCATGTAT CTTAATGGTC TCCAATTATT TCGCATGGAG TAAAGCAATA CTGGTCTCCT GGTGAATAAT AGTAACTACT CTCCAGCAGT TTTTCAGGGA GACTCGCTAC GGTTCTGGGC AGCTCCAGAA CCTCATGATC CCCTGAGGTC GCCGCGGGAG CCAGGACTGG CCCCATCGAG CCTGCCCCCA AGGCTTCTAT CTACAAGACC CACCGTGGAC GGCTCTGCAC CGGATCAGGT TCACACATGC CCCCCCAAAA GGTGGACGTG GGTGCATAAT CAGCGTCCTC CTC CCGAi CAGCCTGACC CAATGGGCAG CTTCTTCCTC CTCATGCTCC GTCTCCGGGT

：CAACAAA 3AGAACCA

GATACCATAT CAGAGCCCCC CTCTGGGATT AGTGTCCCTC CCCTTATACC GAAGTTGAAG TATTCTAGCC TTTGTCAAGC ACTAAAGATG GATGTGCACT GCTCATGGGA ACCAAAAGCT CAGATGGAAG ATGGATACAC AGCATGGGCA CGAAAAAAAG GTGGAAATGT CTACATGCTG GGAATGGCTT TGGGCCCCAA GAGCCCTTTT ACCCAGGGTG AGTCTTGATG TTCTTTGGCA GCTCGATACA TTGATGGGCT TCAGATGCAC TCAAAAGCTC CCAAAAGAGT CAGGGAGTAA CAAGATGGCC AATCAAGACT CTTCGAATTC TGCGAGGCAC CTCCTGGGCG TCCCGGACCC AAGTTCAACT GAGCAGTACA CTGAATGGCA AAAACCATCT TCCCGGGATG CCCAGCGACA ACGCCTCCCG AAGAGCAGGT AACCACTACA GGGGGTGGAT CCACCGTGCC CCCAAGGACA AGCCACGAAG GCCAAGACAA ACCGTCCTGC GCCCTCCCAG CAGGTGTACA TGCCTGGTCA CCGGAGAACA TACAGCAAGC GTGATGCATG AAATGA

CAGTTGAAAT GCAGCTTTCA ATGGGATGAG AGTTCAAGAA GTGGAGAACT ATAATATCAT TTATTTCTTA CTAATGAAAC AGTTTGACTG CAGGCCTGAT GACAAGTGAC GGTACTTCAC ATCCCACTTT TACCTGGCTT GCAATGAAAA AGGAGTATAA TACCATCCAA GGATGAGCAC CTGGACACAT AGCTGGCCAG CTTGGATCAA CCCGTCAGAA GGAAGAAGTG ATGTGGATTC TCCGTTTGCA GTGATTTAAA AGATTACTGC GACTTCACCT GGCTGCAAGT AATCTCTGCT ATCAGTGGAC CCTTCACACC ACCCCCAGAG AGGACCTCTA GACCGTCAGT CTGAGGTCAC GGTACGTGGA ACAGCACGTA AGGAGTACAA CCAAAGCCAA AGCTGACCAA TCGCCGTGGA TGTTGGACTC GGCAGCAGGG CGCAGAAGAG CAGGCGGTGG CAGCACCTGA CCCTCATGAT ACCCTGAGGT AGCCGCGGGA ACCAGGACTG CCCCCATCGA CCCTGCCCCC AAGGCTTCTA ACTACAAGAC TCACCGTGGA AGGCTCTGCA

SAAGGi 3AAAAC

GAAGi AAAGi TAGCTCCCCA AGTTGTTTTC AAATGAACAT GGTAACTTTC TGAGGAAGAT CAAAACTTAC CAAAGCCTGG TGGACCCCTT AGTACAGGAA TGAAAATATG TAAAGAGAAT AGTAATGGCT CATCCATTCT AATGGCACTG AGCTGGAATT ACTTTTTCTG TAGAGATTTT ACTTCATTAT GGTGGATCTG GTTCTCCAGC GCAGACTTAT ATCTGGGATA CCCAACTCAT TAGTTGCAGC TTCATCCTAC CCAAGGGAGG GGACTTCCAG TACCAGCATG TCTCTTTTTT TGTGGTGAAC TTGGGTGCAC CGACAAAACT CTTCCTCTTC ATGCGTGGTG CGGCGTGGAG CCGTGTGGTC GTGCAAGGTC AGGGCAGCCC GAACCAGGTC GTGGGAGAGC CGACGGCTCC GAACGTCTTC CCTCTCCCTG AGGTTCCGGT ACTCCTGGGA CTCCCGGACC CAAGTTCAAC GGAGCAGTAC GCTGAATGGC GAAAACCATC ATCCCGCGAT TCCCAGCGAC CACGCCTCCC CAAGAGCAGG CAACCACTAC

FVIII-041氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，且連接Fc區的接頭區域爲下劃線。 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841

MQIELSTCFF TSVVYKKTLF GVSYWKASEG VDLVKDLNSG AASARAWPKM RQASLEISPI EAEDYDDDLT PDDRSYKSQY LIIFKNQASR TKSDPRCLTR NRSWYLTENI IGAQTDFLSV MTALLKVSSC QSDQEEIDYD HVLRNRAQSG

LCLLRFgFSA ΫΕΪΐόϋϋι AEYDDQTSQR LIGALLVCRE HTVNGYVNRS TFLTAQTLLM DSEMDWRFD LNNGPQRIGR PYNIYPHGIT YYSSFVNMER QRFLPNPAGV FFSGYTFKHK DKNTGDYYED DTISVEMKKE SVPQFKKWF

TRRYYLGAVE AKPRPPWMGL EKEDDKVFPG GSLAKEKTQT LPGLIGCHRK DLGQFLLFCH DDNSPSFIQI KYKKVRFMAY DVRPLYSRRL DLASGLIGPL QLEDPEFQAS MVYEDTLTLF SYEDISAYLL DFDIYDEDEN QEFTDGSFTQ

LSWDYMQSDL LGPTIQAEVY GSHTYVWQVL· LHKFILLFAV SVYWHVIGMG ISSHQHDGME RSVAKKHPKT TDETFKTREA PKGVKHLKDF LICYKESVDQ NIMHSINGYV PFSGETVFMS SKNNAIEPRS QSPRSFQKKT PLYRGELNEH

GELPVDARFP DTWITLKNM KENGPMASDP FDEGKSWHSE TTPEVHSIFL AYVKVDSCPE WVHYIAAEEE IQHESGILGP PILPGEIFKY RGNQIMSDKR FDSLQLSVCL MENPGLWILG FSQNPPVLKR RHYFIAAVER LGLLGPYIRA

PRVPKSFPFN ASHPVSLHAV LCLTYSYLSH TKNSLMQDRD EGHTFLVRNH EPQLRMK DWDYAE LLYGEVGDTL KWTVTVEDGP NVILFSVFDE HEVAYWYILS CHNSDFRNRG HQREITRTTL LWDYGMSSSP EVEDNIMVTF

^MKNNE \PLVLA

-204- 201217526 901 RNQASRPYSF YSSLISYEED QRQGAEPRKN FVKPNETKTY FWKVQHHMAP TKDEFDCKAW 961 AYFSDVDLEK DVHSGLIGPL LVCHTNTLNP AHGRQVTVQE FALFFTIFDE TKSWYFTENM 1021 ERNCRAPCNI QMEDPTFKEN YRFHAINGYI MDTLPGLVMA QDQRXRWYLL SMGSNENIHS 1081 IHFSGHVFTV RKKEEYKMAL YNLYPGVFET VEMLPSKAGI WRVECLIGEH LHAGMSTLFL 1141 VYSNKCQTPL GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL 1201 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV FFGNVDSSGI 1261 KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS MPLGMESKAI SDAQITASSY 1321 FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM 1381 YVKEFLISSS QDGHQWTLFF QNGKVKVFQG NQDSFTPWN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH 1441 QIALRMEVLG CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCW 1501 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRW SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV 1561 SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES 1621 NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL 1681 SPGKGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSDKTHTC PPCPAPELLG GPSVFLFPPK PKDTLMISRT 1741 PEVTCVWDV SHEDPEVKFN WYVDGVEVHN AKTKPREEQY NSTYRWSVL TVLHQDWLNG 1801 KEYKCKVSNK ALPAPIEKTI SKAKGQPREP QVYTLPPSRD ELTKNQVSLT CLVKGFYPSD 1861 IAVEWESNGQ PENNYKTTPP VLDSDGSFFL YSKLTVDKSR WQQGNVFSCS VMHEALHNHY 1921 TQKSLSLSPG K*

V F

_108 DNA序列 ATGCAAATAG AGCTCTCCAC ACCAGAAGAT ACTACCTGGG GGTGAGCTGC CTGTGGACGC ACCTCAGTCG TGTACAAAAA GCTAAGCCAA GGCCACCCTG GATACAGTGG TCATTACACT GGTGTATCCT ACTGGAAAGC GAGAAAGAAG ATGATAAAGT AAAGAGAATG GTCCAATGGC I 1111111111X11111111X1 -062840 62840628406284 112334456677899

0 0 12 1 1 1 X 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241

GTGGACCTGG GGGAGTCTGG TTTGATGAAG GCTGCATCTG CTGCCAGGTC ACCACTCCTG CGCCAGGCGT GACCTTGGAC

TAAAAGACTT CCAAGGAAAA GGAAAAGTTG CTCGGGCCTG TGATTGGATG AAGTGCACTC CCTTGGAAAT AGTTTCTACT

GCTTATGTCA AAGTAGACAG GAAGCGGAAG ACTATGATGA GATGACAACT CTCCTTCCTT TGGGTACATT ACATTGCTGC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTACAAAA AAGTCCGATT ATTCAGCATG AAT( TTGATTATAT TTAA( GATGTCCGTC CTTTGTATTC CCAATTCTGC CAGGAGAAAT ACTAAATCAG ATCCTCGGTG GATCTAGCTT CAGGACTCAT AGAGGAAACC AGATAATGTC AACCGAAGCT GGTACCTCAC CAGCTTGAGG ATCCAGAGTT TTTGATAGTT TGCAGTTGTC ATTGGAGCAC AGACTGACTT ATGGTCTATG AAGACACACT ATGGAAAACC CAGGTCTATG ATGACCGCCT TACTGAAGGT AGTTATGAAG ATATTTCAGC TTCTCTCAAA ACCCACCAGT CAGTCAGATC AAGAGGAAAT GATTTTGACA TTTATGATGA CGACACTATT TTATTGCTGC CATGTTCTAA GAAACAGGGC CAGGAATTTA CTGATGGCTC

rCAGGAAT \AGAATCA

TTGGGACTCC AGAAATCAGG CAGAGGCAAG TTTTGGAAAG GCTTATTTCT

TGGGGCCATA CCTCTCGTCC GAGCAGAACC TGCAACATCA CTGATGTTGA

CTGGTCTGCC ACACTAACAC TTTGCTCTGT TTTTCACCAT GAAAGAAACT GCAGGGCTCC TATCGCTTCC ATGCAATCAA CAGGATCAAA GGATTCGATG ATTCATTTCA GTGGACATGT

CTGCTTCTTT TGCAGTGGAA AAGATTTCCT GACTCTGTTT GATGGGTCTG TAAGAACATG TTCTGAGGGA CTTCCCTGGT CTCTGACCCA GAATTCAGGC GACACAGACC GCAi GCCT, CCACAGGAAA AATATTCCTC CTCGC' GTTTTi CTGTCCAGAG TGATCTTACT TATCCAAATT TGAAGAGGAG AAGTCAATAT TATGGCATAC CTTGGGACCT AGCAAGCAGA AAGGAGATTA ATTCAAATAT CCTGACCCGC TGGCCCTCTC AGACAAGAGG AGAGAATATA •GCCTCC TGTTTG CCTTTCTGTC CACCCTATTC GATTCTGGGG TTCTAGTTGT ATACTTGCTG CTTGAAACGC TGACTATGAT GGATGAAAAT AGTGGAGAGG TCAGAGTGGC CTTTACTCAG TATAAGAGCA CTATTCCTTC TAGAAAAAAC TATGGCACCC CCTGGAAAAA ACTGAACCCT CTTTGATGAG CTGCAATATC TGGCTACATA GTATCTGCTC GTTCACTGTA

：CAATA rGTCAT

CCAAG AGTTI

CTGTGCCTTT CTGTCATGGG CCTAGAGTGC GTAGAATTCA CTAGGTCCTA GCTTCCCATC GCTGAATATG GGAAGCCATA CTGTGCCTTA CTCATTGGAG TTGCACAAAT •CT CACACAGTCA TCAGTCTATT GAAGGTCACA ACTTTCCTTA ATCTCTTCCC GAACCCCAAC GATTCTGAAA CGCTCAGTTG GACTGGGACT TTGAA< ACAGATi TTACTTTATG CCATATAACA CCAAAAGGTG AAATGGACAG TATTACTCTA CTCATCTGCT AATGTCATCC CAACGCTTTC AACATCATGC CATGAGGTGG TTCTTCTCTG •G .CT GACAAGAACA AGTi CAT! GATACCATAT CAGAGCCCCC CTCTGGGATT AGTGTCCCTC CCCTTATACC GAAGTTGAAG TATTCTAGCC TTTGTCAAGC ACTAAAGATG GATGTGCACT GCTCATGGGA ACCAAAAGCT CAGATGGAAG ATGGATACAC AGCATGGGCA CGAAAAAAAG

ICAATG VTGAAA

CCATTCTCAC TGCCACAAC: ^AGAACJ 'AAAAACA 'CAACGGG

TGCGATTCTG CTTTAGTGCC ACTATATGCA AAGTGATCTC lTCTTT TCCATTCAAC TCACCT TTTCAACATC CCATCCAGGC TGAGGTTTAT CTGTCAGTCT TCATGCTGTT ATGATCAGAC CAGTCAAAGG CATATGTCTG GCAGGTCCTG CCTACTCATA TCTTTCTCAT CCCTACTAGT ATGTAGAGAA TTATACTACT ITTTGCTGTA GGATAGGGAT vrcr iGC ：CAT ACTCTTGATG TGGCATGGAA TACGAATGAA AAATAATGAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT CCAAGAAGCA TCCTAAAACT ATGCTCCCTT AGTCCTCGCC GCCCTCAGCG GATTGGTAGG CCTTTAAGAC TCGTGAAGCT GGGAAGTTGG AGACACACTG TCTACCCTCA CGGAATCACT TAAAACATTT GAAGGATTTT TGACTGTAGA AGATGGGCCA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA ACAAAGAATC TGTAGATCAA TGTTTTCTGT ATTTGATGAG TCCCCAATCC AGCTGGAGTG ACAGCATCAA TGGCTATGTT CATACTGGTA CATTCTAAGC GATATACCTT CAAACACAAA GAGAAACTGT CTTCATGTCG CAGACTTTCG GAACAGAGGC CTGGTGATTA TTACGAGGAC ATGCCATTGA ACCAAGAAGC AAATAACTCG TACTACTCTT CAGTTGAAAT GAAGAAGGAA GCAGCTTTCA AAAGAAAACA

CAAAA1 CGGATC

CCTTGATGCA ATGGTTATGT GGCATGTGAT CATTTCTTGT CTGCTCAAAC ACCAACATGA AAACAGGTC TGGAATGGG GAGGAACCi

3GATGAG rCAAGAA

ATGGC AGTTC GTGGAGAACT ATAATATCAT TTATTTCTTA CTAATGAAAC AGTTTGACTG CAGGCCTGAT GACAAGTGAC GGTACTTCAC ATCCCACTTT TACCTGGCTT GCAATGAAAA AGGAGTATAA

TAGCTCCCCA AGTTGTTTTC AAATGAACAT GGTAACTTTC TGAGGAAGAT CAAAACTTAC CAAAGCCTGG TGGACCCCTT AGTACAGGAA TGAAAATATG TAAAGAGAAT AGTAATGGCT CATCCATTCT AATGGCACTG -205- 201217526 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 3781 3841 3901 3961 4021 4081 4141 4201 4261 4321 4381 4441 4501 4561 4621 4681 4741 4801 4861 4921 4981 5041 5101 5161 5221 5281 5341 5401 5461 5521 5581 5641 5701 5761 5821 5881 5941 6001 6061 6121 6181 6241 6301 6361 6421 6481 6541 6601 6661 6721

rAATGCCT 3ACAATGA

\CATGCC ：CAAAAC

rGGAAC rAACCC

\CAAGTG ：CAAAGG

AACAAAC GAACCAC TACAATCTCT TGGCGGGTGG GTGTACAGCA CAGATTACAG TCCGGATCAA TTGGCACCAA CTCTACATCT CGAGGAAATT AAACACAATA TATAGCATTC ATGCCATTGG TTTACCAATA AGT, AAGAI TATGTGAAGG CAGAATGGCA TCTCTAGACC CAGATTGCCC CACAi ccco

GTGGACGTGA

GTGCATAATG

AGCGTCCTCA

TCCAACAAAG

CGAGAACCAC

AGCCTGACCT

AATGGGCAGC

TTCTTCCTCT

TCATGCTCCG

TCTCCGGGTA

GGTGGAGGTT

AAGAGGAGGA

GGGGGGTCCC

AGCTGGGTCC

GGTGGTAGTA

TCCAAGAACA

TACTGCGCCC

GACTACTGGG

CTTGAAGAAG

TCTGTGGCCT

TATGCAAGCT

AGTAAAAGGC

TCCTTGACCA

TACGGCGGCG

CCCAAGGCTG

TCCGGCGGAG

TCCGGTGGCG

CTGGGCGGAC

CGGACCCCTG

TTCAACTGGT

CAGTACAACA

AATGGCAAGG

ACCATCTCCA

CGGGATGAGC

AGCGACATCG

CCTCCCGTGT

AGCAGGTGGC

CACTACACGC ATCCAGGTGT AATGCCTTAT ATAAGTGTCA CTTCAGGACA TCAATGCCTG TGATTATTCA CTCAGTTTAT CCACTGl TTTTT, GCAGCACTCT GAATGGAGAG TGTTTGCCAC GGAGACCTCA AAGTCACAGG AGTTCCTCAT AAGTAAAGGT CACCGTTACT TGAGGATGGA CACCGTGCCC CCAAGGACAC GCCACGAAGA CCAAGACAAA CCGTCCTGCA CCCTCCCAGC AGGTGTACAC GCCTGGTCAA CGGAGAACAA ACAGCAAGCT TGATGCATGA AACGGCGCCG CCGGTGGCGG AGAGGGCGCA TGAGACTCTC GCCAGGCTCC CATACTACGC CGCTGTATCT GGGGCGCCAC GCCAGGGAAC GTGAATTTTC TGGGACAGAC GGTACCAGCA CCTCAGGGAT TCACTGGGGC GCCAGCAGGG CCCCCTCGGT GTGGGTCCGG GGGGATCAGA CGTCAGTCTT AGGTCACATG ACGTGGACGG GCACGTACCG AGTA(

AAGO TGACCAAGAA CCGTGGAGTG TGGACTCCGA AGCAGGGGAA AGAAGAGCCT

TTTTGAGACA

TGGCGAGCAT

GACTCCCCTG

ATATGGACAG

GAGCACCAAG

CGGCATCAAG

CATCATGTAT

CTTAATGGTC

TCCAATTATT

TCGCATGGAG

TAAAGCAATA

CTGGTCTCCT

GGTGAATAAT

AGTAACTACT

CTCCAGCAGT

TTTTCAGGGA

GACTCGCTAC

GGTTCTGGGC

AGCACCTGAA

CCTCATGATC

CCCTGAGGTC

GCCGCGGGAG

CCAGGACTGG

CCCCATCGAG

CCTGCCCCCA

AGGCTTCTAT

CTACAAGACC

CACCGTCGAC

GGCTCTGCAC

CCGGAGCGGT

GGGATCCGGC

GGTGCAGCTG

CTGTGCAGCC

AGGGAAGGGG

AGACTCCGTG

GCAAATGAAC

CTACACCAGC

CCTGGTCACC

AGAAGCACGC

AGTCAGGATC

GAAGCCAGGA

CCCAGACCGA

TCAGGCGGAA

CGTGTTCGGC

CACTCTGTTC

TGGCGGCGGA

CAAAACTCAC

CCTCTTCCCC

CGTGGTGGTG

CGTGGAGGTG

TGTGGTCAGC

CAAGGTCTCC

GCAGCCCCGA

CCAGGTCAGC

GGAGAGCAAT

CGGCTCCTTC

CGTCTTCTCA

CTCCCTGTCT

GTGGAAATGT CTACATGCTG GGAATGGCTT TGGGCCCCAA GAGCCCTTTT ACCCAGGGTG AGTCTTGATG TTCTTTGGCA GCTCGATACA TTGATGGGCT TCAGATGCAC TCAAAAGCTC CCAAAAGAGT CAGGGAGTAA CAAGATGGCC AATCAAGACT CTTCGAATTC TGCGAGGCAC CTCCTGGGAG TCCCGGACCC AAGTTCAACT GAGCAGTACA CTGAATGGCA AAAACCATCT TCCCGCGATG CCCAGCGACA ACGCCTCCCG AAGAGCAGGT AACCACTACA GGCGGCGGAT GGTGGAGGTT CAGGAGTCTG TCTGGATTCA CCAGAGTGGG AAGGGCCGGT AGCCTGAGAG CGGAGCGACG GTCTCCTCAG GTATCTGAAC ACATGCCAAG CAGGCCCCTA TTCTCTGCCT GATGAGGCTG GGCGGCACCA CCGCCCTCTT TCAGGTGGGG ACATGCCCAC CCAAAACCCA GACGTGAGCC CATAATGCCA GTCCTCACCG ‘GCCC ‘CAGG CTGACCTGCC GGGCAGCCGG TTCCTCTACA TGCTCCGTGA CCGGGTAAAT

TACCATCCAA

GGATGAGCAC

CTGGACACAT

AGCTGGCCAG

CTTGGATCAA

CCCGTCAGAA

GGAAGAAGTG

ATGTGGATTC

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GGCTGCAAGT

AATCTCTGCT

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CCTTCACACC

ACCCCCAGAG

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GACCGTCAGT

CTGAGGTCAC

GGTACGTGGA

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TCGCCGTGGA

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GGCAGCAGGG

CGCAGAAGAG

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CCGAGGACAC

TGCCCGACCA

GGAGTGCATC

TGACTCAGGA

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TGTACACCCT

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AGAACAACTA

GCAAGCTCAC

TGCATGAGGC

GA

AGCTGGAATT ACTTTTTCTG TAGAGATTTT ACTTCATTAT GGTGGATCTG GTTCTCCAGC GCAGACTTAT ATCTGGGATA CCCAACTCAT TAGTTGCAGC TTCATCCTAC CCAAGGGAGG GGACTTCCAG TACCAGCATG TCTCTTTTTT TGTGGTGAAC TTGGGTGCAC CGACAAAACT CTTCCTCTTC ATGCGTGGTG CGGCGTGGAG CCGTGTGGTC GTGCAAGGTC AGGGCAGCCC GAACCAGGTC GTGGGAGAGC CGACGGCTCC GAACGTCTTC CCTCTCCCTG TGGATCAGGC TGGATCAAGG GGTACAGCCT GTATGCCATG TAGTGGTAGT CAGAGACAAT GGCTGTATAT GACCAGCTTC CGCCCCAAAG CCCTGCTGTG CAGAAACTTT CTATGGTTTA AAACACAGCT CCTGCTGTAC CCTACGTCAG TGGCG CGGTG ACCGGAACTC 'GATCTCC .GGTCAAG GCGGGAGGAG GGACTGGCTG CATCGAGAAA GCCCCCATCC CTTCTATCCC CAAGACCACG CGTGGACAAG TCTGCACAAC

3GGTGGC rGGAGGT

CATG TGAG

下劃線顯示，連有前蛋白轉化酶 FVIII-108氨基酸序列。信號序列以點接SCE5與Fc區的接頭區域爲下劃線，且具加工位點的接頭以粗體顯示。 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661

MQIEL§T.C.FF. TSVVYKKTLF GVSYWKASEG VDLVKDLNSG AASARAWPKM RQASLEISPI EAEDYDDDLT PDDRSYKSQY LIXFKNQASR TKSDPRCLTR NRSWYLTENI IGAQTDFLSV

VEFTDHLFNI AEYDDQTSQR LIGALLVCRE HTVNGYVNRS TFLTAQTLLM DSEMDWRFD LNNGPQRIGR PYNIYPHGIT YYSSFVNMER QRFLPNPAGV FFSGYTFKHK

TRRYYLGAVE AKPRPPWMGL EKEDDKVFPG GSLAKEKTQT LPGLIGCHRK DLGQFLLFCH DDNSPSFIQI KYKKVRFMAY DVRPLYSRRL DLASGLIGPL QLEDPEFQAS MVYEDTLTLF

LSWDYMQSDL LGPTIQAEVY GSHTYVWQVL LHKFILLFAV SVYWHVIGMG ISSHQHDGME RSVAKKHPKT TDETFKTREA PKGVKHLKDF LICYKESVDQ NIMHSINGYV PFSGETVFMS

GELPVDARFP DTWIr KENGPf FDEGKSWHSE TTPEVHSIFL AYVKVDSCPE WVHYIAAEEE IQHESGILGP PILPGEIFKY RGNQIMSDKR FDSLQLSVCL MENPGLWILG

ITLKNM PMASDP

PRVPKSFPFN ASHPVSLHAV LCLTYSYLSH TKNSLMQDRD EGHTFLVRNH EPQLRMKNNE DWDYAPLVLA LLYGEVGDTL KWTVTVEDGP NVILFSVFDE HEVAYWYILS CHNSDFRNRG

-206· 201217526

721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 21612221

MTALLKVSSC QSDQEEIDYD HVLRNRAQSG RNQASRPYSF AYFSDVDLEK ERNCRAPCNI IHFSGHVFTV VYSNKCQTPL LAPMIIHGIK UFNPPII ^FATWSP YVKEFLISSS QIALRMEVLG VDVSHEDPEV SNKALPAPIE NGQPENNYKT SPGKRRRRSG GGSLRLSCAA

KHNIE FTNMF

DKNTGDYYED DTISVEMKKE SVPQFKKWF YSSLISYEED DVHSGLIGPL QMEDPTFKEN RKKEEYKMAL GMASGHIRDF TQGARQKFSS ARYIRLHPTH SKARLHLQGR QDGHQWTLFF CEAQDLYDKT KFNWYVDGVE KTISKAKGQP TPPVLDSDGS GGGSGGGGSG SGFMFSRYAM

SKNTLYLQMN SLRAEDTAVY LEEGEFSEAR VSELTQDPAV SKRPSGIPDR FSASSSGNTA PKAAPSVTLF PPSSAAGGGG

SYEDISAYLL DFDIYDEDEN QEFTDGSFTQ QRQGAEPRKN LVCHTNTLNP YRFHAINGYI YNLYPGVFET QITASGQYGQ LYISQFIIMY YSIRSTLRME SNAWRPQVNN QNGKVKVFQG HTCPPCPAPE VHNAKTKPRE REPQVYTLPP FFLYSKLTVD GGGSGGGGSG SWVRQAPGKG YCARGATYTS SVALGQTVRI SLTITGAQAE SGGGGSGGGG

SKNNAIEPRS QSPRSFQKKT PLYRGELNEH FVKPNETKTY AHGRQVTVQE MDTLPGLVMA VEMLPSKAGI WAPKLARLHY SLDGKKWQTY LMGCDLNSCS PKEWLQVDFQ NQDSFTPWN LLGGPSVFLF EQYNSTYRW SRDELTKNQV KSRWQQGNVF 6GGSGGGGSR PEWVSGISGS RSDVPDQTSF TCQGDSLRNF DEADYYCLLY SGGGGSGGGG

FSQNPPVLKR RHYFIAAVER LGLLGPYIRA FWKVQHHMAP FALFFTIFDE QDQRIRWYLL WRVECLIGEH SGSINAWSTK RGNSTGTLMV MPLGMESKAI KTMKVTGVTT SLDPPLLTRY PPKPKDTLMI SVLTVLHQDW SLTCLVKGFY SCSVMHEALH 丨VQL iSV KRRKRAQVC GGSTYYAD5

HQREITRTTL LWDYGMSSSP EVEDNIMVTF TKDEFDCKAW TKSWYFTENM SMGSNENIHS LHAGMSTLFL EPFSWIKVDL FFGNVDSSGI SDAQITASSY QGVKSLLTSM LRIHPQSWVH SRTPEVTCW LNGKEYKCKV PSDIAVEWES NHYTQKSLSL QESGGGLVQP KGRFTVSRDN

DYWGQGTLVT VSSGSASAPK YASWYQQKPG QAPTLVIYGL YGGGQQGVFG GGTKLTVLRQ SGGGGSDKTH TCPPCPAPEL LGGPSVFLFP PKPKDTLMIS RTPEVTCVW DVSHEDPEVK FNWYVDGVEV HNAKTKPREE QYNSTYRWS VLTVLHQDWL NGKEYKCKVS NKALPAPIEK TISKAKGQPR EPQVYTLPPS RDELTKNQVS LTCLVKGFYP SDIAVEWESN GQPENNYKTT PPVLDSDGSF FLYSKLTVDK SRWQQGNVFS CSVMHEALHN HYTQKSLSLS PGK*

pSYN-FVIII-049 DNA序歹IJ

61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 1141 1201 1261 1321 1381 1441 1501 1561 1621 1681 1741 1801 1861 1921 1981 2041 2101 2161 2221 2281 2341 2401 2461 2521 2581

ATGCAAATAG ACCAGAAGAT GGTGAGCTGC ACCTCAGTCG GCTAAGCCAA GATACAGTGG GGTGTATCCT GAGAAAGAAG AAAGAGAATG GTGGACCTGG GGGAGTCTGG TTTGATGAAG GCTGCATCTG CTGCCAGGTC ACCACTCCTG CGCCAGGCGT

AGCTCTCCAC ACTACCTGGG CTGTGGACGC TGTACAAAAA GGCCACCCTG TCATTACACT ACTGGAAAGC ATC GTCC TAAAAGACTT

rGATAAAGT rCCAATGGC \GACTT ^GAAAA \AGTTG

CTGCTTCTTT TGCAGTGGAA AAGATTTCCT GACTCTGTTT GATGGGTCTG TAAGAACATG TTCTGAGGGA CTTCCCTGGT CTCTGACCCA GAATTCAGGC GACACAGACC GCACTCAGAA

CTGTGCCTTT CTGTCATGGG CCTAGAGTGC GTAGAATTCA CTAGGTCCTA GCTTCCCATC GCTGAATATG GGAAGCCATA CTGTGCCTTA CTCATTGGAG TTGCACAAAT ACAAAGAACT

CTCGGGCCTG TGATTGGATG AAG' CCT， GACCTTGGAC AGTTTCTACT GCTTATGTCA AAGTAGACAG GAAGCGGAAG ACTATGATGA GATGACAACT CTCCTTCCTT TGGGTACATT ACATTGCTGC CCCGATGACA GAAGTTATAA AAGTCAATAT AAGTACAAAA AAGTCCGATT TATGGCATAC ATTCAGCATG AATCAGGAAT CTTGGGACCT TTGATTATAT TTAAGAATCA AGCAAGCAGA CGTC CTTTGTATTC AAGGAGATTA CTGC CAGGAGAAAT ATTCAAATAT ACTAAATCAG ATCCTCGGTG CCTGACCCGC GATCTAGCTT CAGGACTCAT TGGCCCTCTC AGAGGAAACC AGATAATGTC AGACAAGAGG CT GGTACCTCAC AGAGAATATA ATCCAGAGTT CCAAGCCTCC TGCAGTTGTC AGTTTGTTTG AGACTGACTT CCTTTCTGTC AAGACACACT CACC< CAGGTCTATG GATT( TACTGAAGGT TTCTAGTTGT ATATTTCAGC ATACTTGCTG ACCCACCAGT CTTGAAACGC AAGAGGAAAT TGACTATGAT TTTATGATGA GGATGAAAAT TTATTGCTGC AGTGGAGAGG GAAACAGGGC TCAGAGTGGC CTGATGGCTC CTTTACTCAG

3TGCACTC rTGGAAAT

GCCTAAAATG CCACAGGAAA AATATTCCTC CTCGCCAATA GTTTTGTCAT CTGTCCAGAG TGATCTTACT TATCCAAATT TGAAGAGGAG

GATGTCC CCAATTC

CCGAAGC CAGCTTGAGG TTTGATAGTT ATTGGAGCAC ATGGTCTATG ATGGAAAACC ATGACCGCCT AGTTATGAAG TTCTCTCAAA CAGTCAGATC GATTTTGACA CGACACTATT CATGTTCTAA CAGGAATTTA

：CTATTC rCTGGGG

TGCGATTCTG CTTTAGTGCC ACTATATGCA AAGTGATCTC CAAAATCTTT TCCATTCAAC CGGATCACCT TTTCAACATC CCATCCAGGC TGAGGTTTAT CTGTCAGTCT TCATGCTGTT ATGATCAGAC CAGTCAAAGG CATATGTCTG GCAGGTCCTG CCTACTCATA TCTTTCTCAT CCCTACTAGT ATGTAGAGAA TTATACTACT TTTTGCTGTA CCTTGATGCA GGATAGGGAT CACACAGTCA ATGGTTATGT AAACAGGTCT TCAGTCTATT GGCATGTGAT TGGAATGGGC GAAGGTCACA CATTTCTTGT GAGGAACCAT CTGCTCAAAC ACTCTTGATG ACCAACATGA TGGCATGGAA TACGAATGAA AAATAATGAA TGGATGTGGT CAGGTTTGAT CCAAGAAGCA TCCTAAAACT ATGCTCCCTT AGTCCTCGCC GCCCTCAGCG GATTGGTAGG ‘GCT ‘CTG TCTACCCTCA CGGAATCACT TAAAACATTT GAAGGATTTT TGACTGTAGA AGATGGGCCA GTTTCGTTAA TATGGAGAGA ACAAAGAATC TGTAGATCAA TGTTTTCTGT ATTTGATGAG TCCCCAATCC AGCTGGAGTG ACAGCATCAA TGGCTATGTT CATACTGGTA CATTCTAAGC GATATACCTT CAAACACAAA GAGAAACTGT CTTCATGTCG CAGACTTTCG GAACAGAGGC CTGGTGATTA TTACGAGGAC ATGCCATTGA ACCAAGAAGC AAATAACTCG TACTACTCTT CAGTTGAAAT GAAGAAGGAA GCAGCTTTCA AAAGAAAACA ATGGGATGAG TAGCTCCCCA AGTGTCCCTC AGTTCAAGAA AGTTGTTTTC CCCTTATACC GTGGAGAACT AAATGAACAT

ACTTTCCTTA ATCTCTTCCC GAACC GATTC CGCTC GACTC TTGAACAATG ACAGATGAAA TTACTTTATG CCATATAACA CCAAAAGGTG AAATGGACAG TATTACTCTA CTCATCTGCT AATGTCATCC CAACGCTTTC AACATCATGC CATGAGGTGG TTCTTCTCTG CCATTCTCAG TGCCACAACT

：CCCAAC rCTGAAA rCAGTTG rGGGACT

：GGG GATACCATAT CAGAGCCCCC CTCTGGGATT

CCTTTAAGAC TCGTGAAG GGGAAGTTGG AGACACAC -207- 201217526 2641 2701 2761 2821 2881 2941 3001 3061 3121 3181 3241 3301 3361 3421 3481 3541 3601 3661 3721 3781 3841 3901 3961 4021 4081 4141 4201 4261 4321 4381 4441 4501 4561 4621 4681 4741 4801 4861 4921 4981 5041 5101 5161 5221 5281 5341 5401 5461 5521 5581 5641 5701 5761 5821

rCCAACAAAG ：GAGAACCAC

：TGGAAC ETAACCC TTGGGACTCC AGAAATCAGG CAGAGGCAAG TTTTGGAAAG GCTTATTTCT CTGGTCTGCC TTTGCTCTGT GAAAGAAACT TATCGCTTCC CAGGATCAAA ATTCATTTCA TACAATCTCT TGGCGGGTGG GTGTACAGCA CAGATTACAG TCCGGATCAA TTGGCACCAA CTCTACATCT CGAGGAAATT AAACACAATA TATAGCATTC ATGCCATTGG TTTACCAATA AGTAATGCCT AAGACAATGA TATGTGAAGG CAGAATGGCA TCTCTAGACC CAGATTGCCC CACACATGCC CCCCCAAAAC GTGGACGTGA GTGCATAATG AGCGTCCTCA TO C(

AGCCTGACCT

AATGGGCAGC

TTCTTCCTCT

TCATGCTCCG

TCTCCGGGTA

GGTGGAGGTT

AAGAGGAGGA

GGCGGACCGT

ACCCCTGAGG

AACTGGTACG

TACAACAGCA

GGCAAGGAGT

ATCTCCAAAG

GATGAGCTGA

GACATCGCCG

CCCGTGTTGG

AGGTGGCAGC

TACACGCAGA TGGGGCCATA CCTCTCGTCC GAGCAGAACC TGCAACATCA CTGATGTTGA ACACTAACAC TTTTCACCAT GCAGGGCTCC ATGCAATCAA GGATTCGATG GTGGACATGT ATCCAGGTGT AATGCCTTAT ATAAGTGTCA CTTCAGGACA TCAATGCCTG TGATTATTCA CTCAGTTTAT CCAC'

TTTTT GCAGCACTCT GAATGGAGAG TGTTTGCCAC GGAGACCTCA AAGTCACAGG AGTTCCTCAT AAGTAAAGGT CACCGTTACT TGAGGATGGA CACCGTGCCC CCAAGGACAC GCCACGAAGA CCAAGACAAA CCGTCCTGCA CCCTCCCAGC AGGTGTACAC GCCTGGTCAA CGGAGAACAA ACAGCAAGCT TGATGCATGA AACGGCGCCG CCGGTGGCGG AGAGGGACAA CAGTCTTCCT TCACATGCGT TGGACGGCGT CGTACCGTGT ACAAGTGCAA CCAAAGGGCA CCAAGAACCA TGGAGTGGGA ACTCCGACGG AGGGGAACGT AGAGCCTCTC

TATAAGAGCA

CTATTCCTTC

TAGAAAAAAC

TATGGCACCC

CCTGGAAAAA

ACTGAACCCT

CTTTGATGAG

CTGCAATATC

TGGCTACATA

GTATCTGCTC

GTTCACTGTA

TTTTGAGACA

TGGCGAGCAT

GACTCCCCTG

ATATGGACAG

GAGCACCAAG

CGGCATCAAG

CATCATGTAT

CTTAATGGTC

TCCAATTATT

TCGCATGGAG

TAAAGCAATA

CTGGTCTCCT

GGTGAATAAT

AGTAACTACT

CTCCAGCAGT

TTTTCAGGGA

GACTCGCTAC

GGTTCTGGGC

AGCACCTGAA

CCTCATGATC

CCCTGAGGTC

GCCGCGGGAG

CCAGGACTGG

CCCCATCGAG

CCTGCCCCCA

AGGCTTCTAT

CTACAAGACC

CACCGTCGAC

GGCTCTGCAC

CCGGAGCGGT

GGGATCCGGC

AACTCACACA

CTTCCCCCCA

GGTGGTGGAC

GGAGGTGCAT

GGTCAGCGTC

GGTCTCCAAC

GCCCCGAGAA

GGTCAGCCTG

GAGCAATGGG

CTCCTTCTTC

CTTCTCATGC

CCTGTCTCCG

GAAGTTGAAG

TATTCTAGCC

TTTGTCAAGC

ACTAAAGATG

GATGTGCACT

GCTCATGGGA

ACCAAAAGCT

CAGATGGAAG

ATGGATACAC

AGCATGGGCA

CGAAAAAAAG

GTGGAAATGT

CTACATGCTG

GGAATGGCTT

TGGGCCCCAA

GAGCCCTTTT

ACCCAGGGTG

AGTCTTGATG

TTCTTTGGCA

GCTCGATACA

TTGATGGGCT

TCAGATGCAC

TCAAAAGCTC

CCAAAAGAGT

CAGGGAGTAA

CAAGATGGCC

AATCAAGACT

CTTCGAATTC

TGCGAGGCAC

CTCCTGGGAG

TCCCGGACCC

AAGTTCAACT

GAGCAGTACA

CTGAATGGCA

AAAACCATCT

TCCCGCGATG

CCCAGCGACA

ACGCCTCCCG

AAGAGCAGGT

AACCACTACA

GGCGGCGGAT

GGTGGAGGTT

TGCCCACCGT

AAACCCAAGG

GTGAGCCACG

AATGCCAAGA

CTCACCGTCC

AAAGCCCTCC

CCACAGGTGT

ACCTGCCTGG

CAGCCGGAGA

CTCTACAGCA

TCCGTGATGC

GGTAAATGA

ATAATATCAT

TTATTTCTTA

CTAATGAAAC

AGTTTGACTG

CAGGCCTGAT

GACAAGTGAC

GGTACTTCAC

ATCCCACTTT

TACCTGGCTT

GCAATGAAAA

AGGAGTATAA

TACCATCCAA

GGATGAGCAC

CTGGACACAT

AGCTGGCCAG

CTTGGATCAA

CCCGTCAGAA

GGAAGAAGTG

ATGTGGATTC

TCCGTTTGCA

GTGATTTAAA

AGATTACTGC

GACTTCACCT

GGCTGCAAGT

AATCTCTGCT

ATCAGTGGAC

CCTTCACACC

ACCCCCAGAG

AGGACCTCTA

GACCGTCAGT

CTGAGGTCAC

GGTACGTGGA

ACAGCACGTA

AGGAGTACAA

CCAAAGCCAA

AGCTGACCAA

TCGCCGTGGA

TGTTGGACTC

GGCAGCAGGG

CGCAGAAGAG

CAGGTGGGGG

CCGGTGGGGG

GCCCAGCTCC

ACACCCTCAT

AAGACCCTGA

CAAAGCCGCG

TGCACCAGGA

CAGCCCCCAT

ACACCCTGCC

TCAAAGGCTT

ACAACTACAA

AGCTCACCGT

ATGAGGCTCT

GGTAACTTTC

TGAGGAAGAT

CAAAACTTAC

CAAAGCCTGG

TGGACCCCTT

AGTACAGGAA

TGAAAATATG

TAAAGAGAAT

AGTAATGGCT

CATCCATTCT

AATGGCACTG

AGCTGGAATT

ACTTTTTCTG

TAGAGATTTT

ACTTCATTAT

GGTGGATCTG

GTTCTCCAGC

GCAGACTTAT

ATCTGGGATA

CCCAACTCAT

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TGTGGTGAAC

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CGACAAAACT

CTTCCTCTTC

ATGCGTGGTG

CGGCGTGGAG

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CGACGGCTCC

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TGGATCAGGC

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AGAACTCCTG

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GGTCAAGTTC

GGAGGAGCAG

CTGGCTGAAT

CGAGAAAACC

CCCATCCCGG

CTATCCCAGC

GACCACGCCT

GGACAAGAGC

GCACAACCAC

FVIII-049氨基酸序列。信號序列以點下劃線顯示，且具有前蛋白轉化酶加工位點的接頭以粗體顯示。 1 61 121 181 241 301 361 421 481 541 601 661 721 781 841 901 961 1021 1081 腿關工啦-

TSVVYKKTLF

GVSYWKASEG

VDLVKDLNSG

AASARAWPKM

RQASLEISPI

EAEDYDDDLT

PDDRSYKSQY

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TKSDPRCLTR

NRSWYLTENI

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MTALLKVSSC

QSDQEEIDYD

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KYKKVRFMAY

DVRPLYSRRL

DLASGLIGPL

QLEDPEFQAS

MVYEDTLTLF

SYEDISAYLL

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QRQGAEPRKN

LVCHTNTLNP

YRFHAINGYI

YNLYPGVFET

LSWDYMQSDL LGPTIQAEVY GSHTYVWQVL LHKFILLFAV SVYWHVIGMG 工SSHQHDGME RSVAKKHPKT TDETFKTREA PKGVKHLKDF LICYKESVDQ NIMHSINGYV PFSGETVFMS SKNNAIEPRS QSPRSFQKKT PLYRGELNEH FVKPNETKTY AHGRQVTVQE MDTLPGLVMA VEMLPSKAGI

GELPVDARFP

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S -208- 201217526

1141 VYSNKCQTPL GMASGHIRDF QITASGQYGQ WAPKLARLHY SGSINAWSTK EPFSWIKVDL 1201 LAPMIIHGIK TQGARQKFSS LYISQFIIMY SLDGKKWQTY RGNSTGTLMV FFGNVDSSGI 1261 KHNIFNPPII ARYIRLHPTH YSIRSTLRME LMGCDLNSCS MPLGMESKAI SDAQITASSY 1321 FTNMFATWSP SKARLHLQGR SNAWRPQVNN PKEWLQVDFQ KTMKVTGVTT QGVKSLLTSM 1381 YVKEFLISSS QDGHQWTLFF QNGKVKVFQG NQDSFTPWN SLDPPLLTRY LRIHPQSWVH 1441 QIALRMEVLG CEAQDLYDKT HTCPPCPAPE LLGGPSVFLF PPKPKDTLMI SRTPEVTCW 1501 VDVSHEDPEV KFNWYVDGVE VHNAKTKPRE EQYNSTYRW SVLTVLHQDW LNGKEYKCKV 1561 SNKALPAPIE KTISKAKGQP REPQVYTLPP SRDELTKNQV SLTCLVKGFY PSDIAVEWES 1621 NGQPENNYKT TPPVLDSDGS FFLYSKLTVD KSRWQQGNVF SCSVMHEALH NHYTQKSLSL 1681 SPGKRRRRSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSG GGGSGGGGSR KRRKRDKTHT CPPCPAPELL 1741 GGPSVFLFPP KPKDTLMISR TPEVTCWVD VSHEDPEVKF NWYVDGVEVH NAKTKPREEQ 1801 YNSTYRWSV LTVLHQDWLN GKEYKCKVSN KALPAPIEKT ISKAKGQPRE PQVYTLPPSR 1861 DELTKNQVSL TCLVKGFYPS DIAVEWESNG QPENNYKTTP PVLDSDGSFF LYSKLTVDKS 1921 RWQQGNVFSC SVMHEALHNH YTQKSLSLSP GK* -209- 201217526 序列表 <110> 5 <120> <130> 10 <150〉 <151> <150〉 •15 <151> <150> <151> 20 <150 <151〉 <150> <151> 25 <150> <151> ^ <150> W30 <151> <160> J ·薩拉斯 R ·彼得斯 A ·比通蒂嵌合凝血因數

SGG-896PC US 61/363,186 2010-07-09 US 61/363,183 2010- 07-09 US 61/442,029 2010-02-11 US 61/442,150 2010-02-11 US 61/442,055 2010-02-11 US 61/467,880 2011- 03-25 US 61/491,762 2011-05-31 149 <170> Patentln version 3.5 35 <210> 1 <211> 50 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220> <223>合成肽 201217526 <220> <221 > misc 一 feature <222> (6)..(50) 5 <223> ’’GlyGlyGlyGlySer”中的任意基團可以存在或不存在 <400> 1

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 10 1 5 10

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 20 25 30 15

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 35 40 45 20

Gly Ser 50 25 <210> 2 <211> 30 <212> PRT <213> 人工序列 30 <220> <223>合成肽 <400> 2 35 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 40 20 25 30 <210> 3 201217526 <211> 20 <212> PRT <213>人工序列 5 <220〉 <223>合成肽 <400> 3 10 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10

Gly Gly Gly Ser 20

<210〉 4 <211> 9 20 <212> PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成肽 25 <400> 4

Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe Thr Arg 1 5 30 <210〉 5 <211> 10 <212> PRT 35 <213> 人工序列 <220 <223>合成肽 40 <400〉 5 201217526

Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg 1 5 10 5 <210〉 6 <211> 10 <212> PRT <213> 人工序列 10 <220> <223>合成肽 <400> 6 15 Asp Phe Leu Ala Glu Gly Gly Gly Val Arg 1 5 10 <210> 7 20 <211> 7 <212> PRT <213> 人工序列 <220〉 25 <223>合成肽 <400〉 7

Thr Thr Lys lie Lys Pro Arg 30 1 5

<210〉 8 <211> 10 35 <212> PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成肽 40 <400〉 8 4 201217526

Ala Leu Arg Pro Arg Val Val Gly Gly Ala 1 5 10 5 <210> 9 <211> 4 <212> PRT <213>人工序列 10 <220 <223>合成肽

15

Glu Leu Leu Gly 1 20 <210 10 <211> 11 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220〉 <223>合成肽馨 <400> 10 30 Pro Lys Asn Ser Ser Met lie Ser Asn Thr Pro 1 5 10 <210> 11 35 <211> 7 <212> PRT <213> 人工序列 <220〉 40 <223>合成肽 201217526 <400> 11

His Gin Ser Leu Gly Thr Gin 1 5 5 <210> 12 <211> 8 <212> PRT 10 <213> 人工序列 <220> <223>合成肽 15 <400〉12

His Gin Asn Leu Ser Asp Gly Lys 1 5 20 <210> 13 <211> 8 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220> <223>合成肽 <400> 13 30

His Gin Asn lie Ser Asp Gly Lys 1 5 35 <210> 14 <211> 8 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220> <223>合成肽 201217526 <400> 14

Val lie Ser Ser His Leu Gly Gin 1 5

<210> 15 <211> 10 10 <212〉PRT <213> 人工序列 <220>

<223>合成肽 <400> 15

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 1 5 <210> 16 <211> 5 <212> PRT 25 <213> 人工序列 <220>

<223>合成肽 30 <400〉 16

Cys Pro Pro Cys Pro 1 5 <210> 17 <211> 8 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220> <223>合成肽 201217526 <400> 17

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 1 5

<210> 18 <211> 12 10 <212> PRT <213> 人工序列 <220>

<223>合成肽 15 <400〉 18

Glu Leu Lys Thr Pro Leu Gly Asp Thr Thr His Thr 1 5 10 20 <210> 19 <211> 50 <212> PRT 25 <213> 人工序列 <220>

<223>合成肽 30 <400> 19

Cys Pro Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys 15 10 15 35

Pro Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro 20 25 30 40 Arg Cys Pro Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg 35 40 45 s 8 201217526

Cys Pro 50 <210> 20 <211> 8 <212> PRT <213> 人工序列 10 <220> <223>合成肽

<400〉 20

Ala Pro GIu Leu Leu Gly Gly Pro 1 5 20 <210> 21 <211> 7 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220> <223>合成肽

<400> 21 30 Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro 1 5 <210> 22 35 <211> 5 <212> PRT <213>人工序列 <220〉 40 <223>合成肽 9 201217526 <400> 22

Cys Pro Ser Cys Pro 1 5 <210> 23 <211> 8 <212> PRT 10 <213> 人工序列 <220> <223>合成肽

15 <400 23

Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro 1 5 20 <210〉 24 <211〉 15 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220> <223>合成肽

<400> 24 30

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 15 10 15 35 <210〉25 <211〉 31 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220 <223> 合成狀

S 10 201217526 <220> 5 <221 > misc—feature <222> (2)..(31) <223> nGly Gly Gly Gly Ser"中的任意基團可以存在或不存在 <400> 25 10 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser

20 25 30

<210> 26 <211> 12 20 <212> PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成肽 25 <400〉 26

Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn <210> 27 <211> 7 <212> PRT 35 <213>人工序列 <220> <223>合成肽 40 <400 27

Glu Ala Ser Tyr Pro Gly Lys 201217526 1 5 <210> 28 5 <211> 5 <212> PRT <213> 人工序列 <220〉 10 <223>合成肽 <220〉 <221> misc—feature 15 <223> GLA結構域在Ν·末端處和在殘基3與4之間 <220〉 <221 > misc_feature <222> (1)..(4) 20 <223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸 <400 28

Xaa Xaa Xaa Xaa Cys 25 1 5

<210> 29 <211〉4 30 <212〉PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成肽 35 <220〉 <221 > misc_feature <222> ⑵..(2) 40 <223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸 12 <220> 201217526 <221> misc_feature <222> (3)..(3) <223> Xaa 是 Lys 或 Arg 5 <400> 29

Arg Xaa Xaa Arg 1 10 <210> 30 <211> 15 <212> PRT <213> 人工序列 ·15 <220 <223>合成肽 <400> 30 20

Glu Pro Lys Ser Cys Asp Thr Pro Pro Pro Cys Pro Arg Cys Pro 15 10 15 25 <210> 31 <211> 17 <212> PRT <213> 人工序列

30 <220 <223>合成肽 <400> 31 35 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 15 10 15

Gly 13 40 201217526 <210〉 32 <211> 10 <212> PRT <213> 人工序列 5 <220> <223>合成肽 <400> 32 10

Gly Gly Gly Ser Ser Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10

15 <210> 33 <211> 10 <212> PRT <213> 人工序列 20 <220> <223>合成肽 <400 33 25 lie Gly Lys Thr lie Ser Lys Lys Ala Lys 1 5 10

<210> 34 30 <211> 25 <212> PRT <213> 人工序列 <220> 35 <223>合成肽 <400> 34

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 40 1 5 10 15 14

201217526

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Ala Ser 20 25 <210> 35 <211> 7 <212〉PRT <213>人工序列 <220> <223>合成肽 <400> 35

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 20 <210> 36 <211> 101 <212> DNA <213>人工序列 25 <220> <223>合成引物

30 <400> 36 catcggatcc cccgccaccg gaacctccac cgcctgatcc acccccacct gatccgccgc caccgctccg gcggcgccgt ttacccggag acagggagag g 60 101 <210〉 37 35 <211> 5 <212〉PRT <213> 人工序列 <220〉 40 <223>合成肽 <400> 37 15 201217526

Arg Arg Arg Arg Ser 1 5 <210> 38 <211> 6 <212> PRT <213> 人工序列 10 <220〉 <223>合成肽 <400> 38 15

Arg Lys Arg Arg Lys Arg 1 5 20 <210 39 <211> 37 <212> DNA <213> 人工序列 25 <220> <223>合成引物 <400> 39 37 agtcaagctt gtcgactccg gaactcctgg gcggacc 30 <210> 40 <211> 86 <212〉DNA 35 <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 40 <400 40 catcggatcc cccgccaccg gaacctccac cgcctgatcc acccccacct gatccgccgc 60 86 cacctttacc cggagacagg gagagg 16 201217526

<210> 41 <211〉 35 5 <212〉DNA <213>人工序列 <220〉 <223>合成引物 10 <400〉 41 cagtcttgat cagacaaaac tcacacatgc ccacc 35 15 <210> 42 <211> 34 <212> DNA <213> 人工序列 20 <220 <223>合成引物 <400> 42 34 40 actgacgaat tctcatttac ccggagacag ggag 25

<210> 43 <211〉 40 <212> DNA 馨3〇 <213>人工序列 <220> <223>合成引物 35 <400> 43 cgacaagctt gccgccacca tggtctccca ggccctcagg <210> 44 40 <211> 156 <212> DNA <213> 人工序列 17 <220> 201217526 <223>合成引物 <400> 44 aggagttccg gagctgggca cggtgggcat gtgtgagttt tgtcggatcc cccgccaccg 5 gaacctccac cgcctgatcc acccccacct gatccgccgc caccggaccc acctccgccg gagccaccgc caccgggaaa tggggctcgc aggagg 10 <210〉 45 <211〉 41 <212> PRT <213> 人工序列 15 <220〉 <223>合成肽 <400> 45 20

Arg Arg Arg Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 1 5 10 25 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 20 25 30

Gly Gly Ser Arg Lys Arg Arg Lys Arg 30 35 40

<210〉 46 <211> 20 35 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成引物 40 <400> 46 gggaatgtca acaggcaggg 201217526 <210> 47 <211〉 21 <212> DNA 5 <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 10 <400> 47 cttggctttc tctccacagg c <210> 48 15 <211> 61 <212> DNA <213> 人工序列 <220> 20 <223>合成引物 <400> 48 cgactccgga gctgggcacg gtgggcatgt gtgagttttg tcgggaaatg gggctcgcag 25 g <210> 49 <211> 20

030 <212〉DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成引物 35 <400> 49 catccccagc acgtacgtcc 40 <210> 50 <211> 132 <212〉DNA <213>人工序列 201217526 <220〉 <223>合成引物 <400> 50 5 gggcatgtgt gagttttgtc tgatcccccg ccaccggaac ctccaccgcc tgatccaccc ccacctgatc cgccgccacc ggacccacct ccgccggagc caccgccacc gggaaatggg gctcgcagga gg 10 <210〉 51 <211> 23 <212> DNA 15 <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 20 <400> 51 gacaaaactc acacatgccc acc <210〉 52 25 <211> 23 <212〉DNA <213> 人工序列 <220> 30 <223>合成引物 <400> 52 gcagaattct catttacccg gag 35 <210〉 53 <211〉 152 <212> DNA <213> 人工序列 40 <220> <223>合成引物 <400> 53 201217526 gagttccgga gctgggcacg gtgggcatgt gtgagttttg tctgatcccc cgccaccgga acctccaccg cctgatccac ccccacctga tccgccgcca ccggacccac ctccgccgga 5 gccaccgcca cctcggcctt ggggtttgct gg

<210> 54 <211〉 82 10 <212〉DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成引物

<400〉 54 cagtctggat ccggcggtgg aggttccggt gggggtggat caaggaagag gaggaagagg attgtggggg gcaaggtgtg cc 20 <210> 55 <211> 37 <212> DNA 25 <213> 人工序列 <220> <223>合成引物馨 30 <400> 55 atgtctgaat tctcatttac ccggagacag ggagagg <210> 56 35 <211> 10 <212〉PRT <213> 人工序列 <220> 40 <223>合成肽 <400> 56 201217526

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 5 <210〉 57 <211〉5 <212> PRT <213> 人工序列 10 <220> <223>合成肽 <400> 57 15 Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 <210〉 58 20 <211> 102 <212> DNA <213> 人工序列 <220> 25 <223>合成引物 <400 58 actgacaagc ttgccgccac catggagaca gacacactcc tgctatgggt actgctgctc 60 30 tgggttccag gttccactgg tattgtgggg ggcaaggtgt gc 102

<210〉 59 <211> 36 35 <212〉DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 40 <400> 59 actgacgcgg ccgcgccgcc accatggtct cccagg 22 36 201217526 <210〉 60 <211> 35 <212> DNA 5 <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 10 <400 60 actgacctcg agttatcggc cttggggttt gctgg 35 <210> 61 15 <211> 118 <212> DNA <213> 人工序列 <220> 20 <223>合成引物 <400> 61 ractgacgga tcccccgcca ccggaacctc caccgcctga tccaccccca cctgatccgc 60 25 cgccaccgga cccacctccg ccggagccac cgccacctcg gccttggggt ttgctggc 118 <210 62 <211> 35

^30 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 35 <400> 62 actgacgcgg ccgcgccgcc accatggaga cagac 40 <210> 63 <211> 36 <212> DNA <213> 人工序列 23 35 201217526 <220> <223>合成引物 <400> 63 5 actgacctcg agttagggaa atggggctcg caggag

<210> 64 <211> 30 10 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成引物 15 <400 64 agctctcgag tcatttaccc ggagacaggg 20 <210> 65 <211> 10 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220> <223>合成肽 <400> 65 30 Gly Gly Gly Gly Ser Ala Leu Arg Pro Arg 1 5 <210〉 66 35 <211> 1272 <212> PRT <213> 人工序列 <220> 40 <223>合成構建體:FVII-027氨基酸序列 <400> 66 201217526

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 5 Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 10 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 •15

Ala Arg Glu He Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 20

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 25 Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie ^30 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 35

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 25 40 201217526

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190 5 Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 10 210 215 220 240

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 15

Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255 20

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270 25 Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp He Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 30 290 295 300 320

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 35

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 26 40 201217526

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365 5 Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380 400

Pro His Ala TIar His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 10 385 390 395

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 •15

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430 20

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 25 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 480

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 35

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 27 40 201217526

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540 5 Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 545 550 555 560

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 10 565 570 575

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 15

Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605 20

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 610 615 620 25 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 625 630 635 640

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 30 645 650 655

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670 35

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Arg Arg Arg 690 695 700 28 201217526

Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720 5 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 725 730 735

Arg Lys Arg Arg Lys Arg Ala Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala 10 740 745 750

Glu Val Asn Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser 755 760 765 參15

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro 770 775 780 20

Gly Gin Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly 785 790 795 800 25 Thr Asn Tyr Ala Gin Lys Phe Gin Gly Trp Val Thr Met Thr Arg Asp 805 810 815

Thr Ser lie Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp ^P30 820 825 830

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Ala Leu Tyr Asn Arg 835 840 845 35

Asn Asp Arg Ser Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gin Gly Thr Leu 850 855 860

Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Lys Leu Glu 865 870 875 880 29 40 201217526

Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Gin Ala Val Leu Thr Gin Pro 885 890 895 5 Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gin Thr Ala Arg lie Thr Cys Gly 900 905 910

Gly Asn Asn lie Gly Ser Lys Ser Val Gin Trp Tyr Gin Gin Lys Pro 10 915 920 925

Gly Gin Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser 930 935 940 15 960

Gly lie Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Met Ala Thr 945 950 955 20

Leu Thr lie Ser Arg Val Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys 965 970 975 25 Gin Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr 980 985 990

Lys Leu Thr Val Leu Gly Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu 30 995 1000 1005

Phe Pro Pro Ser Ala Ala Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 1010 1015 1020 35

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 1025 1030 1035

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 1040 1045 1050 30 40 201217526

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 1055 1060

Phe Leu Phe 1065 5 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 1070 1075

Thr Pro Glu 1080

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 10 1085 1090

Pro Glu Val 1095

Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 1100 1105

Asn Ala Lys 1110

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 1115 1120 20 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 1130 1135

Arg Val Val 1125

Gly Lys Glu 1140 25 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 1145 1150

Pro lie Glu 1155

Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 4^30 1160 1165

Pro Gin Val 1170

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 1175 1180 35 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 1190 1195

Asn Gin Val 1185

Asp lie Ala 1200

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn 1205 1210

Tyr Lys Thr 1215 31 40 201217526

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 1220 1225 1230 5 Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 1235 1240 1245

SerCys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin 10 1250 1255 1260

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1265 1270

15 <210〉67 <211〉3819 <212〉DN A 20 <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-027的DNA序列 25 <400> 67 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120

30 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 35 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 40 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 600 s 32 201217526 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 5 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 10 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg •15 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 20 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 25 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ^^30 ccaccgtgcc cagclccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 35 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 40 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 33 201217526 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 5 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaacggcgcc gccggagcgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt 2160 10 tccggtggcg ggggatccgg cggtggaggt tccggtgggg gtggatcaag gaagaggagg 2220 aagagggcgg aagtgcagct ggtgcagtct ggagctgagg tgaataagcc tggggcctca 2280 gtgaaggtct cctgcaaggc ttctggatac accttcaccg gctactatat gcactgggtg 2340 15 cgacaggccc ctggacaagg gcttgagtgg atgggatgga tcaaccctaa cagtggtggc 2400 acaaactatg cacagaagtt tcagggctgg gtcaccatga ccagggacac gtccatcagc 2460 20 accgcctaca tggagctgag caggctgaga tctgacgaca cggccgtgta ttactgtgcg 2520 agaggccgtg ctttgtataa ccggaacgac cggtccccca actggttcga cccctggggc 2580 cagggaaccc tggtcaccgt ctcctcaggg agtgcatccg ccccaaccct taagcttgaa 2640 25 gaaggtgaat tctcagaagc acgcgtacag gctgtgctga ctcagccgcc ctcggtgtca 2700 gtggccccag gacagacggc caggattacc tgtgggggaa acaacattgg aagtaaaagt 2760 30 gtgcagtggt accagcagaa gccaggccag gcccctgtgc tggtcgtcta tgatgatagc 2820 gaccggccct cagggatccc tgagcgattc tctggctcca actctgggaa catggccacc 2880 ctgaccatca gcagggtcga agccggggat gaggccgact attactgtca ggtgtgggat 2940 35 agtagtagtg atcatgtggt attcggcgga gggaccaagc tgaccgtcct aggtcagccc 3000 aaggctgccc cctcggtcac tctgttcccg ccgtccgcgg ccgctggtgg cggtggctcc 3060 40 ggcggaggtg ggtccggtgg cggcggatca ggtgggggtg gatcaggcgg tggaggttcc 3120 jggtggcgggg gatcagacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 3180 ggaggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 3240 34 201217526 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 3300 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 3360 5 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 3420 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 3480 10 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgc 3540 gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 3600 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 3660

•1S cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 3720 aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 3780 20 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 3819

<210 68 <211> 577 25 <212〉DNA <213> 人工序列 <220> <223> 合成構建體:Genscript-FVn-027-1 的 DNA 序列 ⑩30 <400> 68 gaagagcctc tccctgtctc cgggtaaacg gcgccgccgg agcggtggcg gcggatcagg 60 tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tccggcggtg gaggttccgg 120 35 tgggggtgga tcaaggaaga ggaggaagag ggcggaagtg cagctggtgc agtctggagc 180 tgaggtgaat aagcctgggg cctcagtgaa ggtctcctgc aaggcttctg gatacacctt 240 40 caccggctac tatatgcact gggtgcgaca ggcccctgga caagggcttg agtggatggg 300 atggatcaac cctaacagtg gtggcacaaa ctatgcacag aagtttcagg gctgggtcac 360 catgaccagg gacacgtcca tcagcaccgc ctacatggag ctgagcaggc tgagatctga 420 35 577 201217526 480 540 cgacacggcc gtgtattact gtgcgagagg ccgtgctttg tataaccgga acgaccggtc ccccaactgg ttcgacccct ggggccaggg aaccctggtc accgtctcct cagggagtgc 5 atccgcccca acccttaagc ttgaagaagg tgaattc 10 15 20 25 30 35 <210〉 69 <211> 1179 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 <223> 合成構建體:Genscript-FVII-026-2 的 DNA 序列 <400> 69 gaattctcag aagcacgcgt acaggctgtg ctgactcagc cgccctcggt gtcagtggcc 60 ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcag 120 tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct gtgctggtcg tctatgatga tagcgaccgg 180 ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg ggaacatggc caccctgacc 240 atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt 300 agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggtca gcccaaggct 360 gccccctcgg tcactctgtt cccgccgtcc gcggccgctg gtggcggtgg ctccggcgga 420 ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc 480 gggggatcag acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag cacctgaact cctgggagga 540 ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct 600 gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 660 tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac 720 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag 780 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc 840 36 40 201217526 aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgcgatgag 900 ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc 960 5 gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg 1020 ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg 1080 10 cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg 1140 cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tgagaattc 1179 ^15 <210 70 <211> 1250 <212> PRT <213>人工序列 20 <220> <223>合成構建體:FVII-037氨基酸序列. <400〉 70 25 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val ^30 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 35

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 37 40 201217526

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 5 Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu His Lys Asp Asp Gin Leu lie Cys 10 115 120 125

Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr Gly 130 135 140 15

Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala Asp 145 150 155 160 20

Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie Pro 165 170 175 25 He Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val Gly 180 185 190

Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu 30 195 200 205

Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp 210 215 220 35

Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn 225 230 235 240

Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp 245 250 255 38 201217526

Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val 260 265 270 5 Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro 275 280 285

Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr 10 290 295 300 320

Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly 305 310 315 #15

Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val 325 330 335 20

Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg 340 345 350 25 Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly 355 360 365

Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro 4^30 370 375 380 400

His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser 385 390 395 35

Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg 405 410 415

Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro 420 425 430 a 39 40 201217526

Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser 435 440 445 5 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 450 455 460 480

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 10 465 470 475

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 485 490 495 15

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 500 505 510 20

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 515 520 525 25 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 530 535 540 560

Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 30 545 550 555

Val Leu His Gin Asp Tip Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 565 570 575 35

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala 580 585 590

Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 595 600 605 40 40 640 201217526

Asp Glu Leu ITir Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 610 615 620 5 Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Tip Glu Ser Asn Gly Gin Pro 625 630 635

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 10 645 650 655

Phe Phe Leu T>t Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin 660 665 670 •5

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 675 680 685 20

Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly 690 695 700 720 25 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 705 710 715

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly b〇 725 730 735

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 740 745 750 35 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 755 760 765

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 770 775 780 41 201217526

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 785 790 795 800 5 Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 805 810 815

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie 10 820 825 830

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 835 840 845

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 850 855 860

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 865 870 875 880 25 Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 885 890 895

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 30 900 905 910 φ

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 915 920 925 35

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser 930 935 940

Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 945 950 955 960

42 40 201217526

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 965 970 975 5 Ser Ala Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val Asn Lys Pro 980 985 990

Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 10 995 1000 1005

Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin Gly Leu 1010 1015 1020 •15

Glu Trp Met Gly Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn Tyr 1025 1030 1035 20

Ala Gin Lys Phe Gin Gly Trp Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser 1040 1045 1050 25 lie Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp 1055 1060 1065

Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Ala Leu Tyr Asn Arg ^30 1070 1075 1080

Asn Asp Arg Ser Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gin Gly Thr 1085 1090 1095 35

Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Lys 1100 1105 1110

Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Gin Ala Val Leu 1115 1120 1125 43 40 201217526

Thr Gin Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Gin 1130 1135

Thr Ala Arg 1140 5 lie Thr Cys Gly Gly Asn Asn lie Gly Ser Lys Ser 1145 1150

Val Gin Trp 1155

Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Val Leu Val 10 1160 1165

Val Tyr Asp 1170

Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly lie Pro Glu Arg Phe 1175 1180 15 Asn Ser Gly Asn Met Ala Thr Leu Thr lie Ser Arg 1190 1195 20 Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Val Trp Asp 1205 1210

Ser Gly Ser 1185

Val Glu Ala 1200

Ser Ser Ser 1215

Val Leu Gly 1230 25 Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr 1220 1225

Pro Ser Ala 1245

Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro 30 1235 1240

Ala Ala 1250 35 <210> 71 <211> 3756 <212> DNA 40 <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FIX-037的DNA序列 44 120 60 201217526 <400〉 71 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 5 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 10 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc •15 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 20 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 25 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac ^^30 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 35 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 40 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 45 1320 201217526 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 1380 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc 1440 5 ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 1500 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg 1560 10 agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 1620 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 1680 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 1740 15 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 1800 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 20 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 25 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga 2160 30 tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca 2220 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 2280 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 2340 35 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 2400 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 2460 40 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 2520 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc 2580 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 2640

46 201217526 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag 5 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggtggctccg gcggaggtgg gtccggtggc 10 ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt ggaggttccg gtggcggggg atcagcggaa gtgcagctgg tgcagtctgg agctgaggtg aataagcctg gggcctcagt gaaggtctcc tgcaaggctt ctggatacac cttcaccggc tactatatgc actgggtgcg acaggcccct •15 ggacaagggc ttgagtggat gggatggatc aaccctaaca gtggtggcac aaactatgca cagaagtttc agggctgggt caccatgacc agggacacgt ccatcagcac cgcctacatg 20 gagctgagca ggctgagatc tgacgacacg gccgtgtatt actgtgcgag aggccgtgct ttgtataacc ggaacgaccg gtcccccaac tggttcgacc cctggggcca gggaaccctg gtcaccgtct cctcagggag tgcatccgcc ccaaccctta agcttgaaga aggtgaattt 25 tcagaagcac gcgtacaggc tgtgctgact cagccgccct cggtgtcagt ggccccagga cagacggcca ggattacctg tgggggaaac aacattggaa gtaaaagtgt gcagtggtac ^^30 cagcagaagc caggccaggc ccctgtgctg gtcgtctatg atgatagcga ccggccctca gggatccctg agcgattctc tggctccaac tctgggaaca tggccaccct gaccatcagc agggtcgaag ccggggatga ggccgactat tactgtcagg tgtgggatag tagtagtgat 35 catgtggtat tcggcggagg gaccaagctg accgtcctag gtcagcccaa ggctgccccc tcggtcactc tgttcccgcc gtccgcggcc gcttga 40 <210〉 72 <211> 1174 <212> PRT <213> 人工序列 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3756 47 201217526 <220> <223>合成構建體:FVII-053氨基酸序列 5 <400〉 72

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 10

Gly Cys Leu Ala Ala Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val 20 25 30

15 Asn Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 35 40 45

Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin 20 50 55 60

Gly Leu Glu Tip Met Gly Trp lie Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn 65 70 75 80

Tyr Ala Gin Lys Phe Gin Gly Trp Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser 85 90 95

lie Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr 100 105 110 35 Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Ala Leu Tyr Asn Arg Asn Asp 115 120 125

Arg Ser Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 40 130 135 140

Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Lys Leu Glu Glu Gly 145 150 155 160

48 201217526 GIu Phe Ser Glu Ala Arg Val Gin Ala Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser 165 170 175 5

Val Ser Val Ala Pro Gly Gin Thr Ala Arg lie Thr Cys Gly Gly Asn 180 185 190 10

Asn He Gly Ser Lys Ser Val Gin Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin 195 200 205 ^^15 Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly lie 胃 210 215 220 240

Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Met Ala Thr Leu Thr 20 225 230 235 lie Ser Arg Val Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Val 245 250 255 25

Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 260 265 270 #30

Thr Val Leu Gly Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro 275 280 285 35 Pro Ser Ala Ala Ala Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie Ser Tyr Ser Asp 290 295 300

Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly Gly Ser Cys Lys 40 305 310 315

Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro Ala Phe Glu Gly 325 330 335 49 320 201217526

Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie Cys Val Asn Glu 340 345 350

Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr Gly Thr Lys Arg 355 360 365

Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala Asp Gly Val Ser 370 375 380 15 Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie Pro lie Leu Glu 385 390 395 400

Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Arg Lys Arg Arg Lys Arg 20 405 410 415 lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val 420 425 430 25

Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn 435 440 445 30

Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn 450 455 460 35 Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His 465 470 475 480

Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser 40 485 490 495

Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu 500 505 510 50 201217526

His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro 515 520 525

Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu 530 535 540 560

Val Ser Gly Τφ Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu 545 550 555 ^^15 Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin 胃 565 570 575

Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe 20 580 585 590

Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser 595 600 605 25

Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly 610 615 620 •3〇 640 lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val 625 630 635 35 Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg 645 650 655

Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly 40 660 665 670

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 675 680 685 51 201217526

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 690 695 700

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 705 710 715 720

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 725 730 735 15 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 740 745 750

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 20 755 760 765

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 770 775 780 25

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 785 790 795 800 30 815

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 805 810 35 Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 820 825 830

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 40 835 840 845

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 850 855 860 52 880 201217526

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 865 870 875

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 885 890 895 10

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 900 905 910

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 915 920 925

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 20 930 935 940 960

Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 945 950 955

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 965 970 975 贏30

Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 980 985 990 35 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 995 1000 1005

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 40 1010 1015 1020

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin 1025 1030 1035 53 201217526

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val SerAsn Lys 1040 1045 1050

Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 1055 1060 1065

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 1070 1075 1080 15 Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 1085 1090 1095 20

PheTyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 1100 1105 1110

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 1115 1120 1125 25

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 1130 1135 1140

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 1145 1150 1155 35 Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1160 1165 1170

Lys 40 <210> 73 <211> 3525 54 201217526 10 15

20 25 •3〇 35 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-053的DNA序列 <400> 73 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcggaagtgc agctggtgca gtctggagct gaggtgaata agcctggggc ctcagtgaag 120 gtctcctgca aggcttctgg atacaccttc accggctact atatgcactg ggtgcgacag 180 gcccctggac aagggcttga gtggatggga tggatcaacc ctaacagtgg tggcacaaac 240 tatgcacaga agtttcaggg ctgggtcacc atgaccaggg acacgtccat cagcaccgcc 300 tacatggagc tgagcaggct gagatctgac gacacggccg tgtattactg tgcgagaggc 360 cgtgctttgt ataaccggaa cgaccggtcc cccaactggt tcgacccctg gggccaggga 420 accctggtca ccgtctcctc agggagtgca tccgccccaa cccttaaact tgaagaaggt 480 gaattttcag aagcacgcgt acaggctgtg ctgactcagc cgccctcggt gtcagtggcc 540 ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcag 600 tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct gtgctggtcg tctatgatga tagcgaccgg 660 ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg ggaacatggc caccctgacc 720 atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt 780 agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggtca gcccaaggct 840 gccccctcgg tcactctgtt cccgccgtcc gcggccgcta ggacgaagct gttctggatt 900 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 960 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 1020 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 1080 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 1140 55 40 1260 201217526 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga aggaagagga ggaagaggat tgtggggggc 5 aaggtgtgcc ccaaagggga gtgtccatgg caggtcctgt tgttggtgaa tggagctcag ttgtgtgggg ggaccctgat caacaccatc tgggtggtct ccgcggccca ctgtttcgac 10 aaaatcaaga actggaggaa cctgatcgcg gtgctgggcg agcacgacct cagcgagcac gacggggatg agcagagccg gcgggtggcg caggtcatca tccccagcac gtacgtcccg ggcaccacca accacgacat cgcgctgctc cgcctgcacc agcccgtggt cctcactgac 15 catgtggtgc ccctctgcct gcccgaacgg acgttctctg agaggacgct ggccttcgtg cgcttctcat tggtcagcgg ctggggccag ctgctggacc gtggcgccac ggccctggag 20 ctcatggtcc tcaacgtgcc ccggctgatg acccaggact gcctgcagca gtcacggaag gtgggagact ccccaaatat cacggagtac atgttctgtg ccggctactc ggatggcagc aaggactcct gcaaggggga cagtggaggc ccacatgcca cccactaccg gggcacgtgg 25 tacctgacgg gcatcgtcag ctggggccag ggctgcgcaa ccgtgggcca ctttggggtg tacaccaggg tctcccagta catcgagtgg ctgcaaaagc tcatgcgctc agagccacgc 30 ccaggagtcc tcctgcgagc cccatttccc ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggcgg accgtcagtc 35 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 40 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctc“c cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1200 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 56 201217526 5

20 25 •3〇 35 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga ggttccggtg gcgggggatc cgacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctgggag gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgcgatg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatga 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3525 <210> 74 40 <211> 982 <212> PRT <213>人工序列 57 <220> 201217526 <223>合成構建體:FVII-044氨基酸序列 <400> 74 5 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu GIu Ala His Gly Val 10 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu GIu GIu Leu Arg Pro 35 40 45 15

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 25 Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 30 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys GIu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 35

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 58 201217526

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 5 Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 10 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 15 240

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 20

Asn Leu He Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255 25 Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie He Pro Ser Thr Tyr 260 265 270

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin .30 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 35

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335 59 320 201217526

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 5 Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr GIu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 10 370 375 380 400

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 15

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 20

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430 25 Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 30 450 455 460 480

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 35

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510 60 40 201217526

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 5 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540 560

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 10 545 550 555

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 15

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 20

Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605 25 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 610 615 620 640

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin ^30 625 630 635

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 35

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685 61 40 201217526

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly 690 695 700 5 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 10 725 730 735

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 740 745 750 15

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 755 760 765 20

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 770 775 780 25 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 785 790 795 800

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 30 805 810 815

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 820 825 830 35 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 835 840 845

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 850 855 860 62 40 201217526

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 865 870 875 880 5 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 885 890 895

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 10 900 905 910

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 915 920 925 15

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 930 935 940 20

Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 945 950 955 960 25 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg Trp Ala Leu 965 970 975

His Asn Leu Cys Gly Gly ^30 980

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20 25 • 30 35 ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttctlcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 65 40 201217526 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2820 agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt 2880 5 ggaggttccg gtggcggggg atcagcctgc accgagcggt gggccctgca caacctgtgc 2940 ggcgggtga 2949 10 <210> 76 <211> 982 <212> PRT <213> 人工序列 15

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Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 5 Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125

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Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 35

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 68 40 480 201217526

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460 5 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475

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I

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 20

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Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys ,30 565 570 575

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 35

Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605

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Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 625 630 635 640 5 Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 10 660 665 670

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685 15

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720 25 Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 725 730 735

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 30 740 745 750

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 755 760 765 35

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Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 785 790 795 800 70 40 201217526

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Tip Leu Asn 805 810 815 5 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 820 825 830 lie Glu Lys Tlir lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 10 835 840 845

Val Tyr Thr Lt;u Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 850 855 860 15

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 865 870 875 880

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 885 890 895 25 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 900 905 910

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val k30 915 920 925

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 930 935 940 35

Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 945 950 955 960

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg Met Ala Leu 965 970 975 71 201217526

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20 25 •3〇 35 ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1020 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 1080 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 1140 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 1200 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag 1260 tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 1320 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 1380 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc 1440 ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 1500 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg 1560 agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 1620 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 1680 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 1740 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 1800 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga 2160 tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca 2220 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 2280 73 40 201217526 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 2340 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 2400 5 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 2460 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 2520 10 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc 2580 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 2640 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 2700 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag 2760 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2820 20 agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt 2880 ggaggttccg gtggcggggg atcagcctgc accgagcgga tggccctgca caacctgtgc 2940 15 ggcgggtga 2949 25 30 <210〉 78 <211〉982 <212> PRT <213>人工序列 <220> <223>合成構建逋:FVII-046氨基酸序列 35 <400 78

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 74 201217526

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 5 Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

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Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala ^30 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 35

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205 75 40 201217526

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 240

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Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285 20

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 25 Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 320

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 30 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 35

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn He Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380 76 400 201217526

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 5 Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 10 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 15

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460 20 480

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 25 Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495

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Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540

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Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 25 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 30 675 680 685

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 725 730 735 78 40 201217526

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 740 745 750 5 Met lie Ser Axg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 755 760 765

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 10 770 775 780

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 785 790 795 800 15

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 805 810 815 20

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 820 825 830 25 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 835 840 845

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val ^30 850 855 860

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 865 870 875 880

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 885 890 895

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 900 905 910 79 40 201217526

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 915 920 925 5 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 930 935 940

Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 10 945 950 955 960

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg Asp Ala Leu 965 970 975 15

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30 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcticaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 35 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 40 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 80 600 540201217526 5 10

20 25

35 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 81 40 201217526 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 5 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 10 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga 2160 tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca 2220 15 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 2280 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 2340 20 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 2400 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 2460 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 2520 25 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc 2580 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 2640 30 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 2700 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag 2760 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2820 35 agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt 2880 ggaggttccg gtggcggggg atcagcctgc accgagcggg acgccctgca caacctgtgc 2940 40 ggcgggtga 2949 <210> 80 <211> 1000

82 201217526 <212> PRT <213> 人工序列 <220〉 5 <223>合成構建體:FVIH)47氨基酸序列 <400> 80

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Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30

Leu His Arg Airg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 20

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 25 Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 80 65 70 75

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly ^30 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 35

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 83 40 201217526

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 5 Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 10 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205 15

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84 40 201217526

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335 5 Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 10 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380

400

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 20

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 25 Arg Val Ser Glri Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly ^30 435 440 445

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460 35

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 85 480 40 201217526

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510 5 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 10 530 535 540

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 545 550 555 560 15

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 20

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 25 Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 10 705 710 715

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg 725 730 735 15 丨

Trp Ala Leu His Asn Leu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 740 745 750

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 755 760 765 25 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 770 775 780 800

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro ,30 785 790 795

Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 805 810 815 35

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 820 825 830

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 835 840 845 87 201217526

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin 850 855 860

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 865 870 875

Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro 10 885 890

Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 900 905 910 15

Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 915 920 925 20

Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr 930 935 940 25 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 945 950 955

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 30 965 970

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 980 985 990

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 1000 <210> 81 <211> 3003 <212> DNA <213> 人工序列 35 201217526 5 10

20 25

35 <220> <223>合成構建體:FVII-047的DNA序列 <400> 81 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 600 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg 660 atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 720 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 780 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 840 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 900 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc 960 ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1020 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 1080 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 1140 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 1200 89 40 201217526 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag 1260 tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 1320 5 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 1380 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc 1440 10 ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 1500 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg 1560 agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 1620 15

gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 1680 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 1740 20 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 1800 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 25 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040

30 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg gtggatccgg cgggggcgga 2160 tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca ccgagcggtg ggccctgcac 2220 35 aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg 2280 ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg acaaaactca cacatgccca 2340 40 ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc 2400 aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc 2460 cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc 2520 90 201217526 aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc 2580 gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc 2640 5 ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag 2700 gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc 2760 10 ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg 2820 gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac 2880 agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg 2940 •15 3003 atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 3000 tga 20 <210> 82 <211〉7 <212> PRT <213> 人工序列 25 <220〉 <223>合成構建體：合成肽 <400> 82 •30

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Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro 1 5 5 <210 84 <211〉1000 <212> PRT <213> 人工序列 10 <220〉 <223>合成構建體:FVII-048氨基酸序列. <400> 84 15 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 25

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 80

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 35 Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 40 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 92 201217526

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 160

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 15 Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 1 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 20 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 25 240

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 ,30

Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255 35 Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 40 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 93 320 201217526

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 5

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335 10

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 15 Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 20 370 375 380 400

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 25

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 30

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430 35 Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 40 450 455 460

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 94 480 201217526

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 5

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510 10

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 15 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 9 530 535 540 560

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 20 545 550 555

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Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605 35 Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 610 615 620

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 40 625 630 635

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 95 640 201217526

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly 690 695 700 15 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg 20 725 730 735

Met Ala Leu His Asn Leu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 740 745 750 25

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 755 760 765 30

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 770 775 780 35 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 785 790 795 800

Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 40 805 810 815

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 820 825 830 96 201217526

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 835 840 845 5

Tyr Asn Ser Tlir Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin 850 855 860 10

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 865 870 875 880 15 Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro φ 885 890 895

Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 20 900 905 910

Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 915 920 925 25

Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr 930 935 940

30

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 945 950 955 960 35 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 965 970 975

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 40 980 985 990

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 1000 97 201217526 5 10 15 20 25 30 35 <210> 85 <211> 3003 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-048的DNA序列 <400> 85 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 600 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg 660 atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 720 aaccigatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 780 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 840 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 900 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc 960 ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1020

98 40 1080201217526 5 10

20 25 ⑩30 35 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg gtggatccgg cgggggcgga tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca ccgagcggat ggccctgcac aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg acaaaactca cacatgccca 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 99 40 201217526 ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc 2400 aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc 2460 5 cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc 2520 aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc 2580 10 gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc 2640 ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag 2700 gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc 2760 15 ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg 2820 gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac 2880 20 agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg 2940 atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 3000 tga 25 <210> 86 <211> 1000 <212〉PRT 30 <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-049氨基酸序列 35 <400〉 86

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 3003

100 40 201217526

Leu His Arg Asg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 5 Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 10 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 20

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 2 5 Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala ^30 145 150 155' 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 35

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205 101 40 201217526

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 . 240

Asn Leu lie Ala Val Leu Gly GIu His Asp Leu Ser GIu His Asp Gly 10 245 250 255

Asp GIu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270 15

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285 20

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro GIu Arg 290 295 300 25 Thr Phe Ser GIu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 320

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu GIu Leu Met 30 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 35

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr GIu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380 102 400 201217526

Pro His Ala Ήιτ His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 5 Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 10 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 •l5

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu ^30 500 505 510

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 35

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 545 550 555 103 560 40 201217526

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 5 Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590

Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 10 595 600 605

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 610 615 620

15

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 30 675 680 685

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Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 720

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys Thr Glu Arg 725 730 735

104 40 201217526

Asp Ala Leu His Asn Leu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 740 745 750 5 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 755 760 765

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 10 770 775 780

Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 785 790 795 800 •15

Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 805 810 815 20

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 820 825 830 25 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 835 840 845

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin ^30 850 855 860

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 865 870 875 880 35

Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro 885 890 895

Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 900 905 910 105 40 201217526

Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 915 920 925 5 Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro GIu Asn Asn Tyr 930 935 940

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 10 945 950 955 960

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 965 970 975 15

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 980 985 990 20

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 1000 25 30 35 <210〉 87 <211> 3003 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 合成構建體:FVII-049的DNA序列 <400> 87 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 40 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 106 201217526 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 5 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 10 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc • 15 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 20 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 25 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 30 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 35 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 40 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 107 201217526 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 5 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 10 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 15 aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg gtggatccgg cgggggcgga tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca ccgagcggga cgccctgcac 20 aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc 25 aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc 30 aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag 35 gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg 40 gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 108 201217526 tga 3003 5 <210〉88 <211> 948 <212〉PRT <213> 人工序列 10 <220〉 <223>合成構建體:FVII-011氨基酸序列 <400> 88

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 25

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 35 Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 40 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 109 201217526

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 15 Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg He Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 20 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 25

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 240

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 40 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300

S 110 320 201217526

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335 10

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 15 Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 9 355 360 365

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 25

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 • 30

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 40 450 455 460

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 in 480 201217526

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510 10

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525

15 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 20 545 550 555 560

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 25

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590

30

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 40 625 630 635 640

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 112 201217526

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685 10

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Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 740 745 750 25

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 755 760 765

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Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 820 825 830 113 201217526 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 835 840 845

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 850 855 860

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 865 870 875 880

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Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 20 900 905 910

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 915 920 925 25

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 930 935 940

Ser Pro Gly Lys 945 35 <210> 89 <211> 2847 <212> DNA <213> 人工序列 40 <220> <223>合成構建體:FVII-011的DNA序列 <400> 89 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 114 201217526 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 5 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 10 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca •15 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 20 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 25 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ^^30 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 35 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 40 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 115 1380 1500 201217526 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 5 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 10 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 15 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 20 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 25 aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca 30 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 35 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 40 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 1440 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 116 201217526 2847 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 2760 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2820 agcctctccc tgtctccggg taaatga <210> 90 10 <211> 1457 <212> PRT <213> 人工序列 <220>

15 <223>合成構建體:B結構域缺失的FVIII氨基酸序列 <400> 90

Met Gin lie Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 20 1 5 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser 20 25 30 25

Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg 35 40 45

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 50 55 60 35 Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lie 65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lie Gin 40 85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lie Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser 100 105 110 117 201217526

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gin Thr Ser Gin Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140 160

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gin Val Leu 145 150 155 15 Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser 165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lie 20 180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr 195 200 205 25

Gin Thr Leu His Lys Phe lie Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220 30 240

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gin Asp Arg Asp 225 230 235 35 Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu He Gly Cys His Arg Lys Ser Val 40 260 265 270

Tyr Trp His Val lie Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lie 275 280 285 118 201217526

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gin Ala Ser 290 295 300 5 320

Leu Glu lie Ser Pro lie Thr Phe Leu Thr Ala Gin Thr Leu Leu Met 305 310 315 10

Asp Leu Gly Gin Phe Leu Leu Phe Cys His lie Ser Ser His Gin His 325 330 335 15 Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro 9 340 345 350

Gin Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 20 355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser 370 375 380 25 400

Pro Ser Phe lie Gin lie Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 385 390 395

Trp Val His Tyr lie Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410 415 35 Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gin Tyr Leu Asn 420 425 430

Asn Gly Pro Gin Arg lie Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 40 435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala lie Gin His Glu 450 455 460 119 480 201217526

Ser Gly lie Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 465 470 475

Leu lie lie Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn He Tyr Pro 485 490 495 10

His Gly lie Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys 500 505 510 15 Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lie Leu Pro Gly Glu lie Phe 515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 20 530 535 540 560

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 545 550 555 25

Asp Leu Ala Ser Gly Leu lie Gly Pro Leu Leu lie Cys Tyr Lys Glu 565 570 575 30

Ser Val Asp Gin Arg Gly Asn Gin lie Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 580 585 590 35 lie Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu 595 600 605

Asn lie Gin Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gin Leu Glu Asp 40 610 615 620

Pro Glu Phe Gin Ala Ser Asn He Met His Ser lie Asn Gly Tyr Val 625 630 635 120 640 201217526

Phe Asp Ser Leu Gin Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 645 650 655

Tyr lie Leu Ser lie Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670 10

Ser Gly Tyr Thi1 Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr 675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 690 695 700 720

Gly Leu Trp lie Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 20 705 710 715

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 725 730 735 25

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp He Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750 • 30

Asn Asn Ala lie Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gin Asn Pro Pro Val Leu 755 760 765 35 Lys Arg His Gin Arg Glu lie Thr Arg Thr Thr Leu Gin Ser Asp Gin 770 775 780

Glu Glu lie Asp Tyr Asp Asp Thr lie Ser Val Glu Met Lys Lys Glu 40 785 790 795

Asp Phe Asp lie Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gin Ser Pro Arg Ser Phe 805 810 815 121 800 201217526

Gin Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe He Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp 820 825 830

Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gin 835 840 845

Ser Gly Ser Val Pro Gin Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 850 855 860 15 Asp Gly Ser Phe Thr Gin Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His 865 870 875 880

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr lie Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn lie 20 885 890 895

Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser 900 905 910 25

Ser Leu lie Ser Tyr Glu Glu Asp Gin Axg Gin Gly Ala Glu Pro Arg 915 920 925

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val 930 935 940 35 Gin His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp 945 950 955 960

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu 40 965 970 975 lie Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His 980 985 990

S 122 201217526

Gly Arg Gin Val Thr Val Gin Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lie Phe 995 1000 1005

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn 1010 1015 1020 10

Cys Arg Ala Pro Cys Asn lie Gin Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys 1025 1030 1035 ^^15 Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala lie Asn Gly Tyr lie Met Asp Thr W 1040 1045 1050

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gin Asp Gin Arg lie Arg Trp Tyr 20 1055 1060 1065

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn lie His Ser lie His Phe 1070 1075 1080 25

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met 1085 1090 1095

30

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met 1100 1105 1110 35 Leu Pro Ser Lys Ala Gly He Trp Arg Val Glu Cys Leu lie Gly 1115 1120 1125

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser 40 1130 1135 1140

Asn Lys Cys Gin Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His lie Arg 1145 1150 1155 123 201217526

Asp Phe Gin lie Thr Ala Ser Gly Gin Tyr Gly Gin Trp Ala Pro 1160 1165 1170

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser lie Asn Ala Trp Ser 1175 1180 1185

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp lie Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro 1190 1195 1200 15 Met lie lie His Gly lie Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe 1205 1210 1215

Ser Ser Leu Tyr lie Ser Gin Phe He lie Met Tyr Ser Leu Asp 20 1220 1225 1230

Gly Lys Lys Trp Gin Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu 1235 1240 1245 25

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly lie Lys His Asn 1250 1255 1260 30 lie Phe Asn Pro Pro lie lie Ala Arg Tyr lie Arg Leu His Pro 1265 1270 1275 35 Thr His Tyr Ser lie Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly 1280 1285 1290

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys 1295 1300 1305

Ala lie Ser Asp Ala Gin lie Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn 1310 1315 1320 124 201217526

Met Phe Ala rrhr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gin 1325 1330 1335 5

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gin Val Asn Asn Pro Lys Glu 1340 1345 1350 10

Trp Leu Gin Val Asp Phe Gin Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val 1355 1360 1365 15 Thr Thr Gin Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys W 1370 1375 1380

Glu Phe Leu He Ser Ser Ser Gin Asp Gly His Gin Trp Thr Leu 20 1385 1390 1395

Phe Phe Gin Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gin Gly Asn Gin Asp 1400 1405 1410 25

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr 1415 1420 1425

Arg Tyr Leu Arg He His Pro Gin Ser Trp Val His Gin He Ala 1430 1435 1440 35 Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gin Asp Leu Tyr 1445 1450 1455 <210> 91 40 <211> 2351 <212> PRT <213>人工序列 125 <220〉 201217526 <223>合成構建體:全長FVIII氨基酸序列 <400〉 91 5 Met Gin lie GIu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 15 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser 10 20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg 35 40 45

15

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lie 65 70 75 80 25 Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lie Gin 85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lie Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser 30 100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 115 120 125 35

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gin Thr Ser Gin Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gin Val Leu 145 150 155 160

126 40 201217526

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser 165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lie 180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr 10 195 200 205

Gin Thr Leu His Lys Phe lie Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220 •15 240

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gin Asp Arg Asp 225 230 235 20

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255 25 Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu lie Gly Cys His Arg Lys Ser Val 260 265 270

Tyr Trp His Val lie Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lie • 30 275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gin Ala Ser 290 295 300 35

Leu Glu lie Ser Pro lie Thr Phe Leu Thr Ala Gin Thr Leu Leu Met 305 310 315

Asp Leu Gly Glu Phe Leu Leu Phe Cys His He Ser Ser His Gin His 325 330 335 127 320 40 201217526

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro GIu GIu Pro 340 345 350 5 Gin Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser 10 370 375 380

Pro Ser Phe lie Gin lie Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 385 390 395 400

Trp Val His Tyr lie Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410 415 20

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gin Tyr Leu Asn 420 425 430 25 Asn Gly Pro Gin Arg lie Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 435 440 445

Ala Tyr Thr Asp GIu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala lie Gin His Glu 30 450 455 460

Ser Gly lie Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 465 470 475 480

Leu lie lie Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn lie Tyr Pro 485 490 495

His Gly lie Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys 500 505 510

128 40 201217526

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lie Leu Pro Gly Glu lie Phe 515 520 525 5 Lys Tyr Lys Τφ Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 530 535 540 560

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 10 545 550 555

Asp Leu Ala Ser Gly Leu lie Gly Pro Leu Leu lie Cys Tyr Lys Glu 565 570 575

Ser Val Asp Gin Arg Gly Asn Gin lie Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 580 585 590 20 lie Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu 595 600 605 25 Asn lie Gin Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gin Leu Glu Asp 610 615 620 640

Pro Glu Phe Gin Ala Ser Asn lie Met His Ser lie Asn Gly Tyr Val ^30 625 630 635

Phe Asp Ser Leu Gin Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 645 650 655 35

Tyr lie Leu Ser lie Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr 675 680 685 129 40 201217526

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 690 695 700 5 Gly Leu Trp lie Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 705 710 715 720

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 10 725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp lie Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750 15

Asn Asn Ala lie Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gin Asn Ser Arg His Pro 755 760 765 20

Ser Thr Arg Gin Lys Gin Phe Asn Ala Thr Thr lie Pro Glu Asn Asp 770 775 780 25 lie Glu Lys Thr Asp Pro Trp Phe Ala His Arg Thr Pro Met Pro Lys 785 790 795 800 lie Gin Asn Val Ser Ser Ser Asp Leu Leu Met Leu Leu Arg Gin Ser 30 805 810 815

Pro Thr Pro His Gly Leu Ser Leu Ser Asp Leu Gin Glu Ala Lys Tyr 820 825 830 35

Glu Thr Phe Ser Asp Asp Pro Ser Pro Gly Ala lie Asp Ser Asn Asn 835 840 845

Ser Leu Ser Glu Met Thr His Phe Arg Pro Gin Leu His His Ser Gly 850 855 860

130 201217526

Asp Met Val Phe Thr Pro Glu Ser Gly Leu Gin Leu Arg Leu Asn Glu 865 870 875 880 5 Lys Leu Gly Tlir Thr Ala Ala Thr Glu Leu Lys Lys Leu Asp Phe Lys 885 890 895

Val Ser Ser Thr Ser Asn Asn Leu lie Ser Thr lie Pro Ser Asp Asn 10 900 905 910

Leu Ala Ala Gly Thr Asp Asn Thr Ser Ser Leu Gly Pro Pro Ser Met 915 920 925

Pro Val His Tyr Asp Ser Gin Leu Asp Thr Thr Leu Phe Gly Lys Lys 930 935 940

Ser Ser Pro Leu Thr Glu Ser Gly Gly Pro Leu Ser Leu Ser Glu Glu 945 950 955 960 25 Asn Asn Asp Ser Lys Leu Leu Glu Ser Gly Leu Met Asn Ser Gin Glu 965 970 975

Ser Ser Trp Gly Lys Asn Val Ser Ser Thr Glu Ser Gly Arg Leu Phe ^30 980 985 990

Lys Gly Lys Arg Ala His Gly Pro Ala Leu Leu Thr Lys Asp Asn Ala 995 1000 1005 35

Leu Phe Lys Val Ser lie Ser Leu Leu Lys Thr Asn Lys Thr Ser 1010 1015 1020

Asn Asn Ser Ala Thr Asn Arg Lys Thr His lie Asp Gly Pro Ser 1025 1030 1035 131 40 201217526

Leu Leu lie Glu Asn Ser Pro Ser Val Trp Gin Asn lie Leu Glu 1040 1045 1050 5 Ser Asp Thr Glu Phe Lys Lys Val Thr Pro Leu lie His Asp Arg 1055 1060 1065

Met Leu Met Asp Lys Asn Ala Thr Ala Leu Arg Leu Asn His Met 10 1070 1075 1080

Ser Asn Lys Thr Thr Ser Ser Lys Asn Met Glu Met Val Gin Gin 1085 1090 1095 15

Lys Lys Glu Gly Pro lie Pro Pro Asp Ala Gin Asn Pro Asp Met 1100 1105 1110 20

Ser Phe Phe Lys Met Leu Phe Leu Pro Glu Ser Ala Arg Trp lie 1115 1120 1125 25 Gin Arg Thr His Gly Lys Asn Ser Leu Asn Ser Gly Gin Gly Pro 1130 1135 1140

Ser Pro Lys Gin Leu Val Ser Leu Gly Pro Glu Lys Ser Val Glu 30 1145 1150 1155

Gly Gin Asn Phe Leu Ser Glu Lys Asn Lys Val Val Val Gly Lys 1160 1165 1170 35

Gly Glu Phe Thr Lys Asp Val Gly Leu Lys Glu Met Val Phe Pro 1175 1180 1185

Ser Ser Arg Asn Leu Phe Leu Thr Asn Leu Asp Asn Leu His Glu 1190 1195 1200 132 40 201217526

Asn Asn Thr His Asn Gin Glu Lys Lys lie Gin Glu Glu lie Glu 1205 1210 1215 5 Lys Lys Glu Thr Leu He Gin Glu Asn Val Val Leu Pro Gin lie 1220 1225 1230

His Thr Val Thr Gly Thr Lys Asn Phe Met Lys Asn Leu Phe Leu 10 1235 1240 1245

Leu Ser Thr Arg Gin Asn Val Glu Gly Ser Tyr Asp Gly Ala Tyr 1250 1255 1260

•1S

Ala Pro Val Leu Gin Asp Phe Arg Ser Leu Asn Asp Ser Thr Asn 1265 1270 1275 20

Arg Thr Lys Lys His Thr Ala His Phe Ser Lys Lys Gly Glu Glu 1280 1285 1290 25 Glu Asn Leu Glu Gly Leu Gly Asn Gin Thr Lys Gin lie Val Glu 1295 1300 1305

Lys Tyr Ala Cys Thr Thr Arg lie Ser Pro Asn Thr Ser Gin Gin • 30 1310 1315 1320

Asn Phe Val Thr Gin Arg Ser Lys Arg Ala Leu Lys Gin Phe Arg 1325 1330 1335 35

Leu Pro Leu Glu Glu Thr Glu Leu Glu Lys Arg lie lie Val Asp 1340 1345 1350

Asp Thr Ser Thr Gin Trp Ser Lys Asn Met Lys His Leu Thr Pro 1355 1360 1365 133 40 201217526

Ser Thr Leu Thr Gin lie Asp Tyr Asn Glu Lys Glu Lys Gly Ala 1370 1375 1380 5 lie Thr Gin Ser Pro Leu Ser Asp Cys Leu Thr Arg Ser His Ser 1385 1390 1395 lie Pro Gin Ala Asn Arg Ser Pro Leu Pro lie Ala Lys Val Ser 10 1400 1405 1410

SerPhe Pro Ser lie Arg Pro lie Tyr Leu Thr Arg Val Leu Phe 1415 1420 1425 15

Gin Asp Asn Ser Ser His Leu Pro Ala Ala Ser Tyr Arg Lys Lys 1430 1435 1440 20

Asp Ser Gly Val Gin Glu Ser Ser His Phe Leu Gin Gly Ala Lys 1445 1450 1455 25 Lys Asn Asn Leu Ser Leu Ala lie Leu Thr Leu Glu Met Thr Gly 1460 1465 1470

Asp Gin Arg Glu Val Gly Ser Leu Gly Thr Ser Ala Thr Asn Ser 30 1475 1480 1485

Val Thr Tyr Lys Lys Val Glu Asn Thr Val Leu Pro Lys Pro Asp 1490 1495 1500 35

Leu Pro Lys Thr Ser Gly Lys Val Glu Leu Leu Pro Lys Val His 1505 1510 1515 lie Tyr Gin Lys Asp Leu Phe Pro Thr Glu Thr Ser Asn Gly Ser 1520 1525 1530 134 201217526

Pro Gly His Leu Asp Leu Val Glu Gly Ser Leu Leu Gin Gly Thr 1535 1540 1545 5 Glu Gly Ala lie Lys Trp Asn Glu Ala Asn Arg Pro Gly Lys Val 1550 1555 1560

Pro Phe Leu Arg Val Ala Thr Glu Ser Ser Ala Lys Thr Pro Ser 10 1565 1570 1575

Lys Leu Leu Asp Pro Leu Ala Trp Asp Asn His Tyr Gly Thr Gin 1580 1585 1590 15 lie Pro Lys Glu Glu Trp Lys Ser Gin Glu Lys Ser Pro Glu Lys 1595 1600 1605 20

Thr Ala Phe Lys Lys Lys Asp Thr lie Leu Ser Leu Asn Ala Cys 1610 1615 1620 25 Glu Ser Asn His Ala lie Ala Ala lie Asn Glu Gly Gin Asn Lys 1625 1630 1635

Pro Glu lie Glu Val Thr Trp Ala Lys Gin Gly Arg Thr Glu Arg ^30 1640 1645 1650

Leu Cys Ser Gin Asn Pro Pro Val Leu Lys Arg His Gin Arg Glu 1655 1660 1665 35 lie Thr Arg Thr Thr Leu Gin Ser Asp Gin Glu Glu lie Asp Tyr 1670 1675 1680

Asp Asp Thr He Ser Val Glu Met Lys Lys Glu Asp Phe Asp lie 1685 1690 1695 135 201217526

Tyr Asp Glu Asp GIu Asn Gin Ser Pro Arg Ser Phe Gin Lys Lys 1700 1705 1710 5 Thr Arg His Tyr Phe lie Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp Asp Tyr 1715 1720 1725

Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gin Ser 10 1730 1735 1740

Gly Ser Val Pro Gin Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 1745 1750 1755 15

Asp Gly Ser Phe Thr Gin Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu 1760 1765 1770

His Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr He Arg Ala Glu Val Glu Asp 1775 1780 1785 25 Asn lie Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser 1790 1795 1800

Phe Tyr Ser Ser Leu lie Ser Tyr Glu Glu Asp Gin Arg Gin Gly 30 1805 1810 1815

Ala Glu Pro Arg Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr 1820 1825 1830 35

Tyr Phe Trp Lys Val Gin His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu 1835 1840 1845

Phe Asp Cys Lys Ala Trp Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu 1850 1855 1860

S 136 201217526

Lys Asp Val His Ser Gly Leu lie Gly Pro Leu Leu Val Cys His 1865 1870 1875 5 Thr Asn Thr I^u Asn Pro Ala His Gly Arg Gin Val Thr Val Gin 1880 1885 1890

Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lie Phe Asp Glu Thr Lys Ser Trp 10 1895 1900 1905

Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn Cys Arg Ala Pro Cys Asn 1910 1915 1920 •15 lie Gin Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys Glu Asn Tyr Arg Phe His 1925 1930 1935 20

Ala lie Asn Gly Tyr lie Met Asp Thr Leu Pro Gly Leu Val Met 1940 1945 1950 25 Ala Gin Asp Gin Arg lie Arg Trp Tyr Leu Leu Ser Met Gly Ser 1955 1960 1965

Asn Glu Asn He His Ser lie His Phe Ser Gly His Val Phe Thr ^30 1970 1975 1980

Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met Ala Leu Tyr Asa Leu Tyr 1985 1990 1995 35

Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met Leu Pro Ser Lys Ala Gly 2000 2005 2010 lie Trp Arg Val Glu Cys Leu lie Gly Glu His Leu His Ala Gly 2015 2020 2025 137 40 201217526

Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser Asn Lys Cys Gin Thr Pro 2030 2035 2040 5 Leu Gly Met Ala Ser Gly His lie Arg Asp Phe Gin lie Thr Ala 2045 2050 2055

Ser Gly Gin Tyr Gly Gin Trp Ala Pro Lys Leu Ala Arg Leu His 10 2060 2065 2070

Tyr Ser Gly Ser lie Asn Ala Trp Ser Thr Lys Glu Pro Phe Ser 2075 2080 2085 15

Trp lie Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro Met lie lie His Gly lie 2090 2095 2100 20

Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe Ser Ser Leu Tyr lie Ser 2105 2110 2115 25 Gin Phe lie lie Met Tyr Ser Leu Asp Gly Lys Lys Trp Gin Thr 2120 2125 2130

Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu Met Val Phe Phe Gly Asn 30 2135 2140 2145

Val Asp Ser Ser Gly lie Lys His Asn lie Phe Asn Pro Pro He 2150 2155 2160 35 lie Ala Arg Tyr lie Arg Leu His Pro Thr His Tyr Ser lie Arg 2165 2170 2175

Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly Cys Asp Leu Asn Ser Cys 2180 2185 2190 138 40 201217526

Ser Met Pro Leu Gly Met Glu SerLys Ala lie Ser Asp Ala Gin 2195 2200 2205 5 lie Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn Met Phe Ala Thr Trp Ser 2210 2215 2220

Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gin Gly Arg Ser Asn Ala Trp 10 2225 2230 2235

Arg Pro Gin Val Asn Asn Pro Lys Glu Trp Leu Gin Val Asp Phe 2240 2245 2250

Gin Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val Thr Thr Gin Gly Val Lys 2255 2260 2265 20

Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys Glu Phe Leu He Ser Ser 2270 2275 2280 25 Ser Gin Asp Gly His Gin Trp Thr Leu Phe Phe Gin Asn Gly Lys 2285 2290 2295

Val Lys Val Phe Gin Gly Asn Gin Asp Ser Phe Thr Pro Val Val ^30 2300 2305 2310

Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr Arg Tyr Leu Arg lie His 2315 2320 2325

Pro Gin Ser Tip Val His Gin lie Ala Leu Arg Met Glu Val Leu 2330 2335 2340

Gly Cys Glu Ala Gin Asp Leu Tyr 2345 2350 139 40 201217526 <210> 92 <211> 461 <212〉PRT <213> 人工序列 5 <220> <223>合成構建體:FIX氨基酸序列 <400〉 92 10

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala Glu Ser Pro Gly Leu lie Thr 15 10 15

15 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30

Asp His Glu Asn Ala Asn Lys lie Leu Asn Arg Pro Lys Arg Tyr Asn 20 35 40 45

Ser Gly Lys Leu Glu Glu Phe Val Gin Gly Asn Leu Glu Arg Glu Cys 50 55 60 25

Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 65 70 75 80

30

Thr Glu Arg Thr Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 85 90 95 35 Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp He 100 105 110

Asn Ser Tyr Glu Cys Trp Cys Pro Phe Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys 40 115 120 125

Glu Leu Asp Val Thr Cys Asn lie Lys Asn Gly Arg Cys Glu Gin Phe 130 135 140 140 160 201217526

Cys Lys Asn Ser Ala Asp Asn Lys Val Val Cys Ser Cys Thr Glu Gly 145 150 155

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 165 170 175 10

Pro Cys Gly Arg Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190 15 Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr Glu Ala Glu W 195 200 205

Thr He Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 20 210 215 220 240

Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Trp 225 230 235

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 245 250 255

Val Asn Glu Lys Trp lie Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 260 265 270 35 Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285

His Thr Glu Gin Lys Arg Asn Val lie Arg lie lie Pro His His Asn 40 290 295 300

Tyr Asn Ala Ala He Asn Lys Tyr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Glu 305 310 315 141 320 335 201217526

Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 325 330

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn lie Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 340 345 350 10

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365

15 Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380

Ser Thr Lys Phe Thr lie Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 20 385 390 395 400

Glu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 405 410 415 25

Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie lie Ser Trp Gly 420 425 430

30

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 435 440 445 35 Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys Glu Lys Thr Lys Leu Thr 450 455 460 <210〉 93 40 <211> 1384 <212〉DNA <213> 人工序列 142 <220〉 60 201217526 <223>合成構建體:FIX的DNA序列 <400> 93 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta 5 ggatatctac tcagtgctga atgtacagtt tttcttgatc atgaaaacgc acaaaattct gaatcggcca aagaggtata attcaggtaa attggaagag tttgttcaag ggaatctaga 10 gagagaatgt atggaagaaa agtgtagttt tgaagaagca cgagaagttt ttgaaaacac tgaaagaaca actgaatttt ggaagcagta tgttgatgga gatcagtgtg agtccaatcc atgtttaaat ggcggcagtt gcaaggatga cattaattcc tatgaatgtt ggtgtccctt •15 tggatttgaa ggaaagaact gtgaattaga tgtaacatgt aacattaaga atggcagatg cgagcagttt tgtaaaaata gtgctgataa caaggtggtt tgctcctgta ctgagggata 20 tcgacttgca gaaaaccaga agtcctgtga accagcagtg ccatttccat gtggaagagt ttctgtttca caaacttcta agctcacccg tgctgagact gtttttcctg atgtggacta tgtaaattct actgaagctg aaaccatttt ggataacatc actcaaagca cccaatcatt 25 taatgacttc actcgggttg ttggtggaga agatgccaaa ccaggtcaat tcccttggca ggttgttttg aatggtaaag ttgatgcatt ctgtggaggc tctatcgtta atgaaaaatg 30 gattgtaact gctgccxact gtgttgaaac tggtgttaaa attacagttg tcgcaggtga acataatatt gaggagacag aacatacaga gcaaaagcga aatgtgattc gaattattcc tcaccacaac tacaatgcag ctattaataa gtacaaccat gacattgccc ttctggaact 35 ggacgaaccc ttagtgctaa acagctacgt tacacctatt tgcattgctg acaaggaata cacgaacatc ttcctcaaat ttggatctgg ctatgtaagt ggctggggaa gagtcttcca 40 caaagggaga tcagctttag ttcttcagta ccttagagtt ccacttgttg accgagccac atgtcttcga tctacaaagt tcaccatcta taacaacatg ttctgtgctg gcttccatga aggaggtaga gattcatgtc aaggagatag tgggggaccc catgttactg aagtggaagg 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 143 1260 1384 201217526 gaccagtttc ttaactggaa ttattagctg gggtgaagag tgtgcaatga aaggcaaata 1320 tggaatatat accaaggtat cccggtatgt caactggatt aaggaaaaaa caaagctcac 1380 5 ttga <210> 94 10 <211> 488 <212> PRT <213> 人工序列 <220> 15 <223>合成構建體:FX氨基酸序列 <400> 94

Met Gly Arg Pro Leu His Leu Val Leu Leu Ser Ala Ser Leu Ala Gly 20 1 5 10 15

Leu Leu Leu Leu Gly Glu Ser Leu Phe lie Arg Arg Glu Gin Ala Asn 20 25 30 25

Asn lie Leu Ala Arg Val Thr Arg Ala Asn Ser Phe Leu Glu Glu Met 35 40 45 30

Lys Lys Gly His Leu Glu Arg Glu Cys Met Glu Glu Thr Cys Ser Tyr 50 55 60 35 Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asp Ser Asp Lys Thr Asn Glu Phe 65 70 75 80

Trp Asn Lys Tyr Lys Asp Gly Asp Gin Cys Glu Thr Ser Pro Cys Gin 40 85 90 95

Asn Gin Gly Lys Cys Lys Asp Gly Leu Gly Glu Tyr Thr Cys Thr Cys 100 105 110 144 201217526

Leu Glu Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys Glu Leu Phe Thr Arg Lys Leu 115 120 125 5

Cys Ser Leu Asp Asn Gly Asp Cys Asp Gin Phe Cys His Glu Glu Gin 130 135 140 160

Asn Ser Val Val Cys Ser Cys Ala Arg Gly Tyr Thr Leu Ala Asp Asn 145 150 155 15 Gly Lys Ala Cys lie Pro Thr Gly Pro Tyr Pro Cys Gly Lys Gin Thr 9 165 170 175

Leu Glu Arg Arg Lys Arg Ser Val Ala Gin Ala Thr Ser Ser Ser Gly 20 180 185 190

Glu Ala Pro Asp Ser lie Thr Trp Lys Pro Tyr Asp Ala Ala Asp Leu 195 200 205 25

Asp Pro Thr Glu Asn Pro Phe Asp Leu Leu Asp Phe Asn Gin Thr Gin 210 215 220 •30 240

Pro Glu Arg Gly Asp Asn Asn Leu Thr Arg lie Val Gly Gly Gin Glu 225 230 235 35 Cys Lys Asp Gly Glu Cys Pro Trp Gin Ala Leu Leu lie Asn Glu Glu 245 . 250 255

Asn Glu Gly Phe Cys Gly Gly Thr lie Leu Ser Glu Phe Tyr lie Leu 40 260 265 270

Thr Ala Ala His Cys Leu Tyr Gin Ala Lys Arg Phe Lys Val Arg Val 275 280 285 145 201217526

Gly Asp Arg Asn Thr Glu Gin Glu GIu Gly Gly GIu Ala Val His Glu 290 295 300 320

Val Glu Val Val lie Lys His Asn Arg Phe Thr Lys Glu Thr Tyr Asp 305 310 315

Phe Asp He Ala Val Leu Arg Leu Lys Thr Pro lie Thr Phe Arg Met 325 330 335 15 Asn Val Ala Pro Ala Cys Leu Pro Glu Arg Asp Trp Ala Glu Ser Thr 340 345 350

Leu Met Thr Gin Lys Thr Gly lie Val Ser Gly Phe Gly Arg Thr His 20 355 360 365

Glu Lys Gly Arg Gin Ser Thr Arg Leu Lys Met Leu Glu Val Pro Tyr 370 375 380 25 400

Val Asp Arg Asn Ser Cys Lys Leu Ser Ser Ser Phe lie lie Thr Gin 385 390 395 30

Asn Met Phe Cys Ala Gly Tyr Asp Thr Lys Gin Glu Asp Ala Cys Gin 405 410 415 35 Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val Thr Arg Phe Lys Asp Thr Tyr Phe 420 425 430

Val Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Glu Gly Cys Ala Arg Lys Gly Lys 40 435 440 445

Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Thr Ala Phe Leu Lys Trp lie Asp Arg 450 455 460 146 480 480

201217526

Ser Met Lys Tlu* Arg Gly Leu Pro Lys Ala Lys Ser His Ala Pro Glu 465 470 475 5

Val lie Thr Ser Ser Pro Leu Lys 485 10 <210〉 95 <211> 1467 <212〉DNA <213> 人工序列 15 <223>合成構建體:FX的DNA序列 <400 95 20 atggggcgcc cactgcacct cgtcctgctc agtgcctccc tggctggcct cctgctgctc ggggaaagtc tgttcatccg cagggagcag gccaacaaca tcctggcgag ggtcacgagg gccaattcct ttcttgaaga gatgaagaaa ggacacctcg aaagagagtg catggaagag 25 acctgctcat acgaagaggc ccgcgaggtc tttgaggaca gcgacaagac gaatgaattc tggaataaat acaaagatgg cgaccagtgt gagaccagtc cttgccagaa ccagggcaaa ^^30 tgtaaagacg gcctcgggga atacacctgc acctgtttag aaggattcga aggcaaaaac tgtgaattat tcacacggaa gctctgcagc ctggacaacg gggactgtga ccagttctgc cacgaggaac agaactctgt ggtgtgctcc tgcgcccgcg ggtacaccct ggctgacaac 35 ggcaaggcct gcattcccac agggccctac ccctgtggga aacagaccct ggaacgcagg aagaggtcag tggcccaggc caccagcagc agcggggagg cccctgacag catcacatgg 40 aagccatatg atgcagccga cctggacccc accgagaacc ccttcgacct gcttgacttc aaccagacgc agcctgagag gggcgacaac aacctcacca ggatcgtggg aggccaggaa tgcaaggacg gggagtgtcc ctggcaggcc ctgctcatca atgaggaaaa cgagggtttc 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 147 720 780 900 201217526 tgtggtggaa ccattctgag cgagttctac atcctaacgg cagcccactg tctctaccaa 840 5 10 15 20 25 gccaagagat tcaaggtgag ggtaggggac cggaacacgg agcaggagga gggcggtgag gcggtgcacg aggtggaggt ggtcatcaag cacaaccggt tcacaaagga gacctatgac ttcgacatcg ccgtgctccg gctcaagacc cccatcacct tccgcatgaa cgtggcgcct gcctgcctcc ccgagcgtga ctgggccgag tccacgctga tgacgcagaa gacggggatt gtgagcggct tcgggcgcac ccacgagaag ggccggcagt ccaccaggct caagatgctg gaggtgccct acgtggaccg caacagctgc aagctgtcca gcagcttcat catcacccag aacatgttct gtgccggcta cgacaccaag caggaggatg cctgccaggg ggacagcggg ggcccgcacg tcacccgctt caaggacacc tacttcgtga caggcatcgt cagctgggga gagggctgtg cccgtaaggg gaagtacggg atctacacca aggtcaccgc cttcctcaag tggatcgaca ggtccatgaa aaccaggggc ttgcccaagg ccaagagcca tgccccggag gtcataacgt cctctccatt aaagtga 9601020 1080 11401200 1260 1320 1380 1440 1467 <210> 96 <211> 3813 <212〉DNA 30 <213> 人工序列

<220> <223>合成構建體：FVII-066的DNA序列 35 <400> 96 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 40 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 148 360201217526 5 10

20 25

30 35 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 149 40 201217526 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 1680 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 1740 5 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 1800 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 10 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 15 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 aaacggcgcc gccggagcgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt 2160 20 tccggtggcg ggggatccgg cggtggaggt tccggtgggg gtggatcaag gaagaggagg 2220 aagagggcgc aggtgcagct gcaggagtct gggggaggct tggtacagcc tggggggtcc 2280 ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc atgtttagca ggtatgccat gagctgggtc 2340 25 cgccaggctc cagggaaggg gccagagtgg gtctcaggta ttagtggtag tggtggtagt 2400 acatactacg cagactccgt gaagggccgg ttcaccgtct ccagagacaa ttccaagaac 2460 30 acgctgtatc tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca cggctgtata ttactgcgcc 2520 cggggcgcca cctacaccag ccggagcgac gtgcccgacc agaccagctt cgactactgg 2580 ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca gggagtgcat ccgccccaaa gcttgaagaa 2640 35 ggtgaatttt cagaagcacg cgtatctgaa ctgactcagg accctgctgt gtctgtggcc 2700 ttgggacaga cagtcaggat cacatgccaa ggagacagcc tcagaaactt ttatgcaagc 2760 40 tggtaccagc agaagccagg acaggcccct actcttgtca tctatggttt aagtaaaagg 2820 ccctcaggga tcccagaccg attctctgcc tccagctcag gaaacacagc ttccttgacc 2880 atcactgggg ctcaggcgga agatgaggct gactattact gcctgctgta ctacggcggc 2940 150 201217526 5 10 ·15 20 25 •30 ggccagcagg gcgtgttcgg cggcggcacc aagctgaccg tcctacgtca gcccaaggct gccccctcgg tcactctgtt cccgccctct tctgcggccg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatcag acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3813 <210> 97 <211> 1270 35 <212> PRT <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-066氨基酸序列 40 <400〉 97

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 151 201217526

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 15 Ala Arg Glu He Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 20 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 25

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 35 Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 40 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190 152 201217526

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205 5

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 10 240

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 15 Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly W 245 250 255

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 20 260 265 270

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285 25

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 30 320

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 35 Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 40 340 345 350

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365 153 400 201217526

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 15 Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 20 435 440 445

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460 25

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 480

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 35 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 40 515 520 525

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540 154 560 201217526

Pro Arg Glu GIu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 545 550 555 5

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 10

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 ^^15 Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 9 595 600 605

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 20 610 615 620 640

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 625 630 635 25

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 30

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670 35 Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Arg Arg Arg 40 690 695 700

Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 155 720 201217526

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 725 730 735

Arg Lys Arg Arg Lys Arg Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Gly 740 745 750 10

Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser 755 760 765

15 Gly Phe Met Phe Ser Arg Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro 770 775 780

Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser 20 785 790 795 800

Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp 805 810 815 25

Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu 820 825 830

30

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Thr Tyr Thr Ser Arg 835 840 845 35 Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr 850 855 860

Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Lys Leu Glu Glu 40 865 870 875 880

Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro Ala 885 890 895 S. 156 201217526

Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp 900 905 910

Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin 915 920 925

Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu Ser Lys Arg Pro Ser Gly lie 930 935 940 15 Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr 960 1 945 950 955 lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Leu 20 965 970 975

Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin Gin Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 980 985 990 25

Thr Val Leu Arg Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro 995 1000 1005 k30

Pro Ser Ser Ala Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1010 1015 1020 35 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1025 1030 1035

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro 40 1040 1045 1050

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 1055 1060 1065 157 201217526

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 1070 1075 1080

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 1085 1090 1095 10

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 1100 1105 1110

15 Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val 1115 1120 1125

Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 20 1130 1135 1140

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 1145 1150 1155 25 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 1160 1165 1170

30

Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu 1175 1180 1185 35 Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 1190 1195 1200

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 40 1205 1210 1215

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu 1220 1225 1230

158 201217526

Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 1235 1240 1245

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 1250 1255 1260

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1265 1270

20 25 <210> 98 <211> 3012 <212〉DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-057的DNA序列 <400> 98 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 30 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 35 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 40 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 600 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc 660 159 201217526 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggagg accgtcagtc 720 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780 5 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900 10 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 1080 15

aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 1200 20 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtcgaca agagcaggtg gcagcagggg 1260 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 1380 25 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt 1440 ggttcaagcg tgagccagac cagcaagctg acccggattg tggggggcaa ggtgtgcccc 1500

30 aaaggggagt gtccatggca ggtcctgttg ttggtgaatg gagctcagtt gtgtgggggg 1560 accctgatca acaccatctg ggtggtctcc gcggcccact gtttcgacaa aatcaagaac 1620 tggaggaacc tgatcgcggt gctgggcgag cacgacctca gcgagcacga cggggatgag 1680 35 cagagccggc gggtggcgca ggtcatcatc cccagcacgt acgtcccggg caccaccaac 1740 cacgacatcg cgctgctccg cctgcaccag cccgtggtcc tcactgacca tgtggtgccc 1800 40 ctctgcctgc ccgaacggac gttctctgag aggacgctgg ccttcgtgcg cttctcattg 1860 gtcagcggct ggggccagct gctggaccgt ggcgccacgg ccctggagct catggtcctc 1920 aacgtgcccc ggctgatgac ccaggactgc ctgcagcagt cacggaaggt gggagactcc 1980

S 160 201217526 10 • 5 20 25

35 ccaaatatca cggagtacat gttctgtgcc ggctactcgg atggcagcaa ggactcctgc 2040 aagggggaca gtggaggccc acatgccacc cactaccggg gcacgtggta cctgacgggc 2100 atcgtcagct ggggccaggg ctgcgcaacc gtgggccact ttggggtgta caccagggtc 2160 tcccagtaca tcgagtggct gcaaaagctc atgcgctcag agccacgccc aggagtcctc 2220 ctgcgagccc catttcccgg tggcggtggc tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga 2280 tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatcaga caaaactcac 2340 acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc ctgggaggac cgtcagtctt cctcttcccc 2400 ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg 2460 gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 2520 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 2580 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 2640 aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 2700 gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc 2760 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 2820 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgt tggactccga cggctccttc 2880 ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 2940 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 3000 ccgggtaaat ga 3012 <210 99 40 <211> 1003 <212> PRT <213>人工序列 161 <220〉 201217526 <223>合成構建體:FVII-057氨基酸序列 <400> 99 5 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 10 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45

15

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 30 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 35

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 162 40 201217526

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 5 Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 10 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220 •15 240

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 20

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255 25 Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys •30 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 35

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335 163 320 40 201217526

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 5 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 10 370 375 380

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 20

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 25 His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 30 450 455 460

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475 480

Gly Ser Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg lie Val Gly Gly 485 490 495

Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val 500 505 510

164 40 201217526

Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val 515 520 525 5 Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu 530 535 540 560 lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu 10 545 550 555

Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val He lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro 565 570 575 •15

Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val 580 585 590 20

Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe 595 600 605 25 Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp 610 615 620 640

Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu ^30 625 630 635

Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys 645 650 655 35

Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr 660 665 670

Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His 675 680 685 165 40 201217526

Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly He Val Ser Trp 690 695 700 5 Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val 705 710 715 720

Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg 10 725 730 735

Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly 740 745 750 15

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 755 760 765 20

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 770 775 780 25 Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 785 790 795 800

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 30 805 810 815

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 820 825 830 35

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 835 840 845

Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 850 855 860 166 40 880 201217526

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 865 870 875 5 Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys 885 890 895

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 10 900 905 910

Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 915 920 925

Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 930 935 940 960

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 945 950 955 25 Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly 965 970 975

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr •30 980 985 990

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20 25 •30 35 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 1380 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt 1440 ggttcagact tcctggccga gggcggcggc gtgcggattg tggggggcaa ggtgtgcccc 1500 aaaggggagt gtccatggca ggtcctgttg ttggtgaatg gagctcagtt gtgtgggggg 1560 accctgatca acaccatctg ggtggtctcc gcggcccact gtttcgacaa aatcaagaac 1620 tggaggaacc tgatcgcggt gctgggcgag cacgacctca gcgagcacga cggggatgag 1680 cagagccggc gggtggcgca ggtcatcatc cccagcacgt acgtcccggg caccaccaac 1740 cacgacatcg cgctgctccg cctgcaccag cccgtggtcc tcactgacca tgtggtgccc 1800 ctctgcctgc ccgaacggac gttctctgag aggacgctgg ccttcgtgcg cttctcattg 1860 gtcagcggct ggggccagct gctggaccgt ggcgccacgg ccctggagct catggtcctc 1920 aacgtgcccc ggctgatgac ccaggactgc ctgcagcagt cacggaaggt gggagactcc 1980 ccaaatatca cggagtacat gttctgtgcc ggctactcgg atggcagcaa ggactcctgc 2040 aagggggaca gtggaggccc acatgccacc cactaccggg gcacgtggta cctgacgggc 2100 atcgtcagct ggggccaggg ctgcgcaacc gtgggccact ttggggtgta caccagggtc 2160 tcccagtaca tcgagtggct gcaaaagctc atgcgctcag agccacgccc aggagtcctc 2220 ctgcgagccc catttcccgg tggcggtggc tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga 2280 tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatcaga caaaactcac 2340 acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc ctgggaggac cgtcagtctt cctcttcccc 2400 ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg 2460 gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 2520 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 2580 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 2640 169 40 201217526 aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 2700 gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc 2760 5 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 2820 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgt tggactccga cggctccttc 2880 10 ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 2940 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 3000 3012 ccgggtaaat ga 15 <210〉 101 <211> 1003 <212> PRT 20 <213>人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-058氨基酸序列 25 <400> 101

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 30

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu GIu Ala His Gly Val 20 25 30 35 Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 40 50 55 60

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Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 5

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 10

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 15 Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr W 130 135 140 160

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 20 145 150 155

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 25

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190 • 30

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 195 200 205 35 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 40 225 230 235

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255 171 240 201217526

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His GIu Asp Pro Glu 260 265 270

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 15 Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 20 325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 25

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 35 Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 40 405 410 415

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 172 201217526

His Asn His Tyi* Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445 5

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460 480

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475 15 Gly Ser Asp Phe Leu Ala Glu Gly Gly Gly Val Arg lie Val Gly Gly W 485 490 495

Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val 20 500 505 510

Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val 515 520 525 25

Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu 530 535 540

lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu 545 550 555 560 35 Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro 565 570 575

Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val 40 580 585 590

Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe 595 600 605 173 201217526

Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp 610 615 620

Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu 625 '630 635 640

Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys 645 650 655 15 Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr 660 665 670

Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His 20 675 680 685

Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp 690 695 700 25

Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val 705 710 715 720 30

Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg 725 730 735 35 Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly 740 745 750

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 40 755 760 765

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 770 775 780 174 800 201217526

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 785 790 795 5

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 805 810 815 10

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 820 825 830 15 Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 9 835 840 845

Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 20 850 855 860 880

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 865 870 875

Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys 885 890 895

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 900 905 910 35 Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 915 920 925

Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 40 930 935 940

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 945 950 955 175 960 201217526

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly 965 970 975

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 980 985 990

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 1000 15 <210> 102 <211> 3003 <212> DNA <213> 人工序列 20 <220> <223> 合成構建體:FVII-059的DNA序列 <400> 102 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 25 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 30 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 35 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 40 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 600 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc 660 176 780 201217526 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggagg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 5 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 10 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag •15 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 20 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtcgaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 25 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt ggttcaacca ccaagatcaa gccccggatt gtggggggca aggtgtgccc caaaggggag ^^30 tgtccatggc aggtcctgtt gttggtgaat ggagctcagt tgtgtggggg gaccctgatc aacaccatct gggtggtctc cgcggcccac tgtttcgaca aaatcaagaa ctggaggaac ctgatcgcgg tgctgggcga gcacgacctc agcgagcacg acggggatga gcagagccgg 35 cgggtggcgc aggtcatcat ccccagcacg tacgtcccgg gcaccaccaa ccacgacatc gcgctgctcc gcctgcacca gcccgtggtc ctcactgacc atgtggtgcc cctctgcctg 40 cccgaacgga cgttctctga gaggacgctg gccttcgtgc gcttctcatt ggtcagcggc tggggccagc tgctggaccg tggcgccacg gccctggagc tcatggtcct caacgtgccc cggctgatga cccaggactg cctgcagcag tcacggaagg tgggagactc cccaaatatc 720 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 177 201217526 acggagtaca tgttctgtgc cggctactcg gatggcagca aggactcctg caagggggac 2040 agtggaggcc cacatgccac ccactaccgg ggcacgtggt acctgacggg catcgtcagc 2100 5 tggggccagg gctgcgcaac cgtgggccac tttggggtgt acaccagggt ctcccagtac 2160 atcgagtggc tgcaaaagct catgcgctca gagccacgcc caggagtcct cctgcgagcc 2220 10 ccatttcccg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg 2280 ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatcag acaaaactca cacatgccca 2340 ccgtgcccag cacctgaact cctgggagga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc 2400 15 aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc 2460 cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc 2520 20 aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc 2580 gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc 2640 ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag 2700 25 gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc 2760 ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg 2820 30 gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac 2880 agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg 2940 atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa 3000 35 3003 tga <210> 103 40 <211> 1000 <212> PRT <213>人工序列 178 <220> 201217526 <223>合成構建體:FVII-059氨基酸序列 <400> 103 5 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 10 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 •15

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 20

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro ^30 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 35

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 179 40 201217526

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 10 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220 15

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240 20

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 30 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 35

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335 180 201217526

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 10 370 375 380 400

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 20

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly ^30 450 455 460 480

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475

Gly Ser Thr Thr Lys lie Lys Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Val Cys 485 490 495

Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala 500 505 510 181 40 201217526

Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala 515 520 525 5 Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val 530 535 540

Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp GIu Gin Ser Arg 10 545 550 555 560

Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr 565 570 575

Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr 580 585 590 20

Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg 595 600 605 25 Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu 610 615 620

Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro 30 625 630 635 640

Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp 645 650 655 35

Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly 660 665 670

Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His 675 680 685

S 182 40 720 201217526

Tyr Arg Gly Tlir Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly 690 695 700 5 Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr 705 710 715 lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val 10 725 730 735

Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 740 745 750 •15

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 755 760 765 20

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 770 775 780 800 25 Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 785 790 795

Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val i30 805 810 815

Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 820 825 830 35

Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin 835 840 845

Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin 850 855 860 183 201217526

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 865 870 875 5 Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro 885 890

Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 10 900 905 910

Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 915 920 925 15

Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr 930 935 940 20

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 945 950 955 25 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 965 970

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 30 980 985 990

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Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 20 145 150 155

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Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 25

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Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp He Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 400 35 Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 40 405 410 415

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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460 480

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475 15 Gly Ser Ala Leu Arg Pro Arg Val Val Gly Gly Ala Val Val Gly Gly 485 490 495

Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val 20 500 505 510

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Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu 530 535 540 30 560 lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu 545 550 555 35 Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val He lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro 565 570 575

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Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His 20 675 680 685

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 770 775 780 191 201217526

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30

Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 40 930 935 940

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 945 950 955 960

192 201217526

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly 965 970 975

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 980 985 990 10

20 25

30 35

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20 25

35 ccaaatatca cggagtacat gttctgtgcc ggctactcgg atggcagcaa ggactcctgc 2040 aagggggaca gtggaggccc acatgccacc cactaccggg gcacgtggta cctgacgggc 2100 atcgtcagct ggggccaggg ctgcgcaacc gtgggccact ttggggtgta caccagggtc 2160 tcccagtaca tcgagtggct gcaaaagctc atgcgctcag agccacgccc aggagtcctc 2220 ctgcgagccc catttcccgg tggcggtggc tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga 2280 tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatcaga caaaactcac 2340 acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc ctgggaggac cgtcagtctt cctcttcccc 2400 ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg 2460 gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg 2520 cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc 2580 gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc 2640 aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa accatctcca aagccaaagg gcagccccga 2700 gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc 2760 ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat 2820 gggcagccgg agaacaacta caagaccacg cctcccgtgt tggactccga cggctccttc 2880 ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca 2940 tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac cactacacgc agaagagcct ctccctgtct 3000 ccgggtaaat ga 3012 <210> 107 40 <211> 1003 <212〉PRT <213> 人工序列 195 <220〉 201217526 <223>合成構建體:FVII-061氨基酸序列 <400> 107 5 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

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Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu GIu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

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Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 30 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 35

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 196 40 201217526

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 10 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220 15 240

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 20

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys ,30 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 35

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335 197 320 201217526

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 10 370 375 380

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Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475 480

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Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val 500 505 510

198 40 201217526

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Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr ^30 980 985 990

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35 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt ggttcaggtg gtggaggatc cattgtgggg ggcaaggtgt gccccaaagg ggagtgtcca tggcaggtcc tgttgttggt gaatggagct cagttgtgtg gggggaccct gatcaacacc atctgggtgg tctccgcggc ccactgtttc gacaaaatca agaactggag gaacctgatc gcggtgctgg gcgagcacga cctcagcgag cacgacgggg atgagcagag ccggcgggtg gcgcaggtca tcatccccag cacgtacgtc ccgggcacca ccaaccacga catcgcgctg ctccgcctgc accagcccgt ggtcctcact gaccatgtgg tgcccctctg cctgcccgaa cggacgttct ctgagaggac gctggccttc gtgcgcttct cattggtcag cggctggggc cagctgctgg accgtggcgc cacggccctg gagctcatgg tcctcaacgt gccccggctg atgacccagg actgcctgca gcagtcacgg aaggtgggag actccccaaa tatcacggag tacatgttct gtgccggcta ctcggatggc agcaaggact cctgcaaggg ggacagtgga ggcccacatg ccacccacta ccggggcacg tggtacctga cgggcatcgt cagctggggc cagggctgcg caaccgtggg ccactttggg gtgtacacca gggtctccca gtacatcgag tggctgcaaa agctcatgcg ctcagagcca cgcccaggag tcctcctgcg agccccattt cccggtggcg gtggctccgg cggaggtggg tccggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 203 40 201217526 gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac 2700 accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 2760 5 aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac 2820 aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 2880 10 ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat 2940 gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 2997 15 <210〉109 <211> 998 <212> PRT <213> 人工序列 20 <220> <223>合成構建體:FVII-062氨基酸序列 <400> 109 25 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 30 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 35

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 204 40 201217526

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 10 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 15

160

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 20

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 25 Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly ^3() 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220 35

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255 205 240 40 201217526

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 5 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 10 290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335 20

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 25 Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 30 370 375 380

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395 400 35

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430

S 206 40 201217526

His Asn His T>t Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445 5 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 10 465 470 475 480

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys 485 490 495 15

Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu 500 505 510 20 Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr He Trp Val Val Ser Ala Ala His 515 520 525 25 Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly 530 535 540

Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val ^30 545 550 555 560

Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His 565 570 575 35

Asp lie Ala Leu I^eu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His 580 585 590

Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu 595 600 605 207 40 640 201217526

Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp 610 615 620 5 Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu 625 630 635

Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro 10 645 650 655

Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys 660 665 670 15

Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg 675 680 685 20

Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala 690 695 700 720 25 Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu 705 710 715

Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu 30 725 730 735

Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 740 745 750 35

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 755 760 765

Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 770 775 780 208 40 800 201217526

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 785 790 795 5 Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 805 810 815

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 10 820 825 830

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 835 840 845 15

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 850 855 860 20 880

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 865 870 875 25 Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 885 890 895

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn ^30 900 905 910

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 915 920 925 35

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 930 935 940

Thr Pro Pro Val I^u Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 945 950 955 209 960 40 201217526

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 965 970 975 5 Ser Val Met His GIu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 980 985 990 10 15 20 25 30 35

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 <210> 110 <211> 2997 <212> DNA <213>人工序列 <220> <223> 合成構建體:FVII-090的DNA序列 <400〉 110 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 600 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatca 660 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggcgg accgtcagtc 720 210 40 201217526 5 10

20 25 籲30 35 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 1080 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 1200 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtcgaca agagcaggtg gcagcagggg 1260 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 1380 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt 1440 ggttcagccc tgcggccccg gattgtgggg ggcaaggtgt gccccaaagg ggagtgtcca 1500 tggcaggtcc tgttgttggt gaatggagct cagttgtgtg gggggaccct gatcaacacc 1560 atctgggtgg tctccgcggc ccactgtttc gacaaaatca agaactggag gaacctgatc 1620 gcggtgctgg gcgagcacga cctcagcgag cacgacgggg atgagcagag ccggcgggtg 1680 gcgcaggtca tcatccccag cacgtacgtc ccgggcacca ccaaccacga catcgcgctg 1740 ctccgcctgc accagcccgt ggtcctcact gaccatgtgg tgcccctctg cctgcccgaa 1800 cggacgttct ctgagaggac gctggccttc gtgcgcttct cattggtcag cggctggggc 1860 cagctgctgg accgtggcgc cacggccctg gagctcatgg tcctcaacgt gccccggctg 1920 atgacccagg actgcctgca gcagtcacgg aaggtgggag actccccaaa tatcacggag 1980 tacatgttct gtgccggcta ctcggatggc agcaaggact cctgcaaggg ggacagtgga 2040 211 40 201217526 ggcccacatg ccacccacta ccggggcacg tggtacctga cgggcatcgt cagctggggc cagggctgcg caaccgtggg ccactttggg gtgtacacca gggtctccca gtacatcgag 5 ' tggctgcaaa agctcatgcg ctcagagcca cgcccaggag tcctcctgcg agccccattt cccggtggcg gtggctccgg cggaggtggg tccggtggcg gcggatcagg tgggggtgga 10 tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa 15 gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg 20 caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc 25 aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag 30 ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 2997 35 <210> 111 <211> 998 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220> <223> 合成構建* <400> 111 212 201217526

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 10 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 15

80

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 20

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie •30 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 35

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys He 165 170 175 213 40 201217526

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190 5 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 10 210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255 20

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 25 Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285

Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 30 290 295 300

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 305 310 315 320

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 214 40 201217526

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 5 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 400

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 10 385 390 395

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 15

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 20

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445 25 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460 480

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly ^30 465 470 475

Gly Ser Ala Leu Arg Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys 485 490 495 35

Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu 500 505 510

Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His 515 520 525 215 40 201217526

Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly 530 535 540 5 Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val 545 550 555 560

Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His 10 565 570 575

Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His 580 585 590 15

Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu 595 600 605 20

Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp 610 615 620 25 Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu 625 630 635 640

Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro 30 645 650 655

Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys 660 665 670 35

Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg 675 680 685

Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly He Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala 690 695 700 216 201217526

Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu 705 710 715 720

Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu 725 730 735

Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 10 740 745 750

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 755 760 765 15

Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 770 775 780 20

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 785 790 795 800 25 Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 805 810 815

Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly •30 820 825 830

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 835 840 845 35

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 850 855 860

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 865 870 875 880 217 40 201217526

Ala Pro lie GIu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 885 890 895 5 Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 900 905 910

Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 10 915 920 925

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 930 935 940 15

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 945 950 955 960 20

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 965 970 975 25 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 980 985 990

Ser Leu Ser Pro Gly Lys 30 995

<210 112 <211〉2982 35 <212〉DNA <213> 人工序列 <220〉 <223> 合成構建體:FVII-100的DNA序列 <400> 112 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 218 201217526 5 10

20 25

30 35 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 600 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc 660 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggagg accgtcagtc 720 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 780 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 840 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 900 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 960 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1020 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 1080 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1140 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 1200 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtcgaca agagcaggtg gcagcagggg 1260 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 1320 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 1380 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt 1440 219 40 201217526 ggttcagccc tgcggccccg gattgtgggg ggcaaggtgt gccccaaagg ggagtgtcca 1500 tggcaggtcc tgttgttggt gaatggagct cagttgtgtg gggggaccct gatcaacacc 1560 5 atctgggtgg tctccgcggc ccactgtttc gacaaaatca agaactggag gaacctgatc 1620 gcggtgctgg gcgagcacga cctcagcgag cacgacgggg atgagcagag ccggcgggtg 1680 10 gcgcaggtca tcatccccag cacgtacgtc ccgggcacca ccaaccacga catcgcgctg 1740 ctccgcctgc accagcccgt ggtcctcact gaccatgtgg tgcccctctg cctgcccgaa 1800 cggacgttct ctgagaggac gctggccttc gtgcgcttct cattggtcag cggctggggc 1860 15 cagctgctgg accgtggcgc cacggccctg gagctcatgg tcctcaacgt gccccggctg 1920 atgacccagg actgcgaggc cagctacccc ggcaagatca cggagtacat gttctgtgcc 1980 20 ggctactcgg atggcagcaa ggactcctgc aagggggaca gtggaggccc acatgccacc 2040 cactaccggg gcacgtggta cctgacgggc atcgtcagct ggggccaggg ctgcgcaacc 2100 gtgggccact ttggggtgta caccagggtc tcccagtaca tcgagtggct gcaaaagctc 2160 25 atgcgctcag agccacgccc aggagtcctc ctgcgagccc catttcccgg tggcggtggc 2220 tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt 2280 30 tccggtggcg ggggatcaga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc acctgaactc 2340 ctgggaggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 2400 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 2460 35 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 2520 cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 2580 40 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 2640 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 2700 cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 2760 220 201217526 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 2820 cctcccgtgt tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 2880 5 agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac 2940 cactacacgc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaat ga 2982 10 <210〉 113 <211> 993 <212> PRT <213> 人工序列

<223>合成構建體:FVII-100氨基酸序列 <400〉 113 20

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro •30 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 35

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 221 40 201217526

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 10 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 20

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190 25 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 195 200 205

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 30 210 215 220

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 225 230 235 240

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270

222 40 201217526

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 5 Thr Lys Pro Aig Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 320

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys 10 305 310 315

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325 330 335 15

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350 20

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 25 Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 400

Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser ^30 385 390 395

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 405 410 415 35

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445 223 40 201217526

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460 5 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475 480

Gly Ser Ala Leu Arg Pro Arg He Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys 10 485 490 495

Gly GIu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu 500 505 510 15

Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His 515 520 525 20

Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly 530 535 540 25 Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val 545 550 555 560

Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His 30 565 570 575

Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His 580 585 590 35

Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu 595 600 605

Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp 610 615 620 224 640 201217526

Arg Gly Ala Tlir Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu 625 630 635 5 Met Thr Gin Α：φ Cys Glu Ala Ser Tyr Pro Gly Lys lie Thr Glu Tyr 645 650 655

Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly 10 660 665 670

Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu 675 680 685 15

Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe 690 695 700 20 720

Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu 705 710 715 25 Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro 725 730 735

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 740 745 750

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys 755 760 765 35

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 770 775 780

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser 785 790 795 225 800 201217526

Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 805 810 815 5 Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn 820 825 830

Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 10 835 840 845

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 850 855 860 15

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 865 870 875 880 20

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr 885 890 895 25 Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr 900 905 910

Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu 30 915 920 925

Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 930 935 940 35

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 945 950 955 960

Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 965 970 975 226 40 201217526

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 980 985 990 5 Lys <210〉 114 10 <211> 2997 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 15 <223>合成構建體:FVII-115的DNA序列

<400〉 114 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 20 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 25 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag ^^30 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca . · gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 35 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatca 40 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggcgg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 227 840 960 201217526 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 5 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 10 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtcgaca agagcaggtg gcagcagggg 15 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga 20 ggttccggtg gcgggggatc cggcggtgga ggttccggtg ggggtggatc aggaggaggt ggttcagccc tgcggccccg gattgtgggg ggcaaggact gccccaaagg ggagtgtcca tggcaggtcc tgttgttggt gaatggagct cagttgtgtg gggggaccct gatcaacacc 25 atctgggtgg tctccgcggc ccactgtttc gacaaaatca agaactggag gaacctgatc gcggtgctgg gcgagcacga cctcagcgag cacgacgggg atgagcagag ccggcgggtg 30 gcgcaggtca tcatccccag cacgtacgtc ccgggcacca ccaaccacga catcgcgctg ctccgcctgc accagcccgt ggtcctcact gaccatgtgg tgcccctctg cctgcccgaa cggacgttct ctgagaggac gctggccttc gtgcgcttct cattggtcag cggctggggc 35 cagctgctgg accgtggcgc cacggccctg gtactccaag tcctcaacgt gccccggctg atgacccagg actgcctgca gcagtcacgg aaggtgggag actccccaaa tatcacggag 40 tacatgttct gtgccggcta ctcggatggc agcaaggact cctgcaaggg ggacagtgga ggcccacatg ccacccacta ccggggcacg tggtacctga cgggcatcgt cagctggggc cagggctgcg caaccgtggg ccactttggg gtgtacacca gggtctccca gtacatcgag 900 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 228 201217526 5

20 25 tggctgcaaa agctcatgcg ctcagagcca cgcccaggag tcctcctgcg agccccattt cccggtggcg gtggctccgg cggaggtggg tccggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 2997

35 <210> 115 <211> 998 <212〉PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-115氨基酸序列 <400> 115 40 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 1 5 10 229 201217526

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin GIu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 5 Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 10 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 20

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 25 Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 30 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 35

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190

230 40 201217526

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 195 200 205 5 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His 210 215 220 240

Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val 10 225 230 235

Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr 245 250 255 15

Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu 260 265 270 20

Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys 275 280 285 25 Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 290 295 300 320

Val Leu Thr Val Leu iiis Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys ^30 305 310 315 335

Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie 325. 330 35

Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro 340 345 350

Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu 355 360 365 231 40 400 201217526

Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val GIu Trp Glu Ser Asn 370 375 380 5 Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser 385 390 395

Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 10 405 410 415

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 420 425 430 15

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly 435 440 445 20

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 450 455 460 480 25 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 465 470 475

Gly Ser Ala Leu Arg Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Asp Cys Pro Lys 30 485 490 495

Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu 500 505 510 35

Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His 515 520 525

Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly 530 535 540 232 40 560 201217526

Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val 545 550 555 5 Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His 565 570 575

Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His 10 580 585 590

Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu 595 600 605 15

Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp 610 615 620 20 640

Arg Gly Ala Thr Ala Leu Val Leu Gin Val Leu Asn Val Pro Arg Leu 625 630 635 25 Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro 645 650 655

Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys ^30 660 665 670

Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg 675 680 685 35

Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala 690 695 700

Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu 705 710 715 233 720 40 201217526

Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu 725 730 735 5 Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 740 745 750

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 10 755 760 765

Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 770 775 780 15

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 785 790 795 800 20

Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 805 810 815 25 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 820 825 830

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 30 835 840 845

Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 850 855 860 35

Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 865 870 875 880

Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 885 890 895

234 40 201217526

Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 900 905 910 5 Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 915 920 925

Ala Val Glu Tip Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 10 930 935 940

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 945 950 955 960 15

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys 965 970 975 20

Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu 980 985 990 25 Ser Leu Ser Pro Gly Lys 995 <210> 116 ^30 <211> 2859

™ <212> DNA <213>人工序列 <220> 35 <223>合成構建體:FVII-118的DNA序列 <400> 116 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 40 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 235 201217526 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 5 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 10 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggcgcc ctgcggcccc ggattgtggg gggcaaggtg tgccccaaag gggagtgtcc atggcaggtc ctgttgttgg tgaatggagc tcagttgtgt 15 ggggggaccc tgatcaacac catctgggtg gtctccgcgg cccactgttt cgacaaaatc aagaactgga ggaacctgat cgcggtgctg ggcgagcacg acctcagcga gcacgacggg 20 gatgagcaga gccggcgggt ggcgcaggtc atcatcccca gcacgtacgt cccgggcacc accaaccacg acatcgcgct gctccgcctg caccagcccg tggtcctcac tgaccatgtg gtgcccctct gcctgcccga acggacgttc tctgagagga cgctggcctt cgtgcgcttc 25 tcattggtca gcggctgggg ccagctgctg gaccgtggcg ccacggccct ggagctcatg gtcctcaacg tgccccggct gatgacccag gactgcctgc agcagtcacg gaaggtggga 30 gactccccaa atatcacgga gtacatgttc tgtgccggct actcggatgg cagcaaggac tcctgcaagg gggacagtgg aggcccacat gccacccact accggggcac gtggtacctg acgggcatcg tcagctgggg ccagggctgc gcaaccgtgg gccactttgg ggtgtacacc 35 agggtctccc agtacatcga gtggctgcaa aagctcatgc gctcagagcc acgcccagga gtcctcctgc gagccccatt tcccggtggc ggtggctccg gcggaggtgg gtccggtggc 40 ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt ggaggttccg gtggcggggg atccgacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagctccg gaactcctgg gcggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 236 201217526 gtggtggacg tgagccacga agaccctgag gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg 1620 gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg 5 1680 gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag 1740 gtctccaaca aagccctccc agcccccatc gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag 1800 10 ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc ccatcccggg atgagctgac caagaaccag 1860 gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag 1920 agcaatgggc agccggagaa caactacaag accacgcctc ccgtgttgga ctccgacggc 15 1980 tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc 2040 ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc 2100 20 ctgtctccgg gtaaaggtgg cggcggatca ggtgggggtg gatcaggcgg tggaggttcc 2160 ggtggcgggg gatcagacaa aactcacaca tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg 2220 ggaggaccgt cagtcttcct cttcccccca aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg 25 2280 acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc 2340 aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag 2400 ^^30 tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat 2460 ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc 2520 atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgc 35 2580 gatgagctga ccaagaacca ggtcagcctg acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc 2640 gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg cagccggaga acaactacaa gaccacgcct 2700 40 cccgtgttgg actccgacgg ctccttcttc ctctacagca agctcaccgt ggacaagagc 2760 aggggaacgt cttctcatgc tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac 2820 tacacgcaga agagcctctc cctgtctccg ggtaaatga 2859 237 201217526 <210> 117

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Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 20

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 25 Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 80

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 30 65 70 75

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Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 238 40 160 201217526

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 10 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Ala Leu Arg 180 185 190 15

I

Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp 195 200 205 20

Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu 210 215 220 240 25 lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie 225 230 235

Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser k30 245 250 255

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Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu 275 280 285

Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys 290 295 300 239 201217526

Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe 305 310 315 320 5 Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala 325 330 335

Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys 10 340 345 350

Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr 355 360 365 15

Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly 370 375 380

Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu 385 390 395 400 25 Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe 405 410 415

Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu 30 420 425 430

Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro 435 440 445 35

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 450 455 460

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys 465 470 475 480

240 201217526

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Arg Thr Pro Gl u Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 10 515 520 525

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Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val 545 550 555 20

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu 565 570 575 25 Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 580 585 590

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr k30 595 600 605

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Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu 645 650 655 241 640 201217526

Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys 660 665 670 5 Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu 675 680 685

Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 10 690 695 700 720

Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 705 710 715 15

Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 725 730 735 20

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Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 30 770 775 780 800

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Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 820 825 830 242 40 201217526

Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro 835 840 845 5 Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 850 855 860

Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 10 865 870 875 880

Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr 885 890 895 15

Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 900 905 910 20

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 915 920 925 25 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 930 935 940

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys ^30 945 950

<210〉 118 <211> 2874 35 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-119的DNA序列 <400> 118 60 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 243 201217526 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 5 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 10 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 15

aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggcgga ggaggtggtt cagccctgcg gccccggatt 600 gtggggggca aggtgtgccc caaaggggag tgtccatggc aggtcctgtt gttggtgaat 660 20 ggagctcagt tgtgtggggg gaccctgatc aacaccatct gggtggtctc cgcggcccac 720 tgtttcgaca aaatcaagaa ctggaggaac ctgatcgcgg tgctgggcga gcacgacctc 780 agcgagcacg acggggatga gcagagccgg cgggtggcgc aggtcatcat ccccagcacg 840 25 tacgtcccgg gcaccaccaa ccacgacatc gcgctgctcc gcctgcacca gcccgtggtc 900 ctcactgacc atgtggtgcc cctctgcctg cccgaacgga cgttctctga gaggacgctg 960

30 gccttcgtgc gcttctcatt ggtcagcggc tggggccagc tgctggaccg tggcgccacg 1020 gccctggagc tcatggtcct caacgtgccc cggctgatga cccaggactg cctgcagcag 1080 tcacggaagg tgggagactc cccaaatatc acggagtaca tgttctgtgc cggctactcg 1140 35 gatggcagca aggactcctg caagggggac agtggaggcc cacatgccac ccactaccgg 1200 ggcacgtggt acctgacggg catcgtcagc tggggccagg gctgcgcaac cgtgggccac 1260 40 tttggggtgt acaccagggt ctcccagtac atcgagtggc tgcaaaagct catgcgctca 1320 gagccacgcc caggagtcct cctgcgagcc ccatttcccg gtggcggtgg ctccggcgga 1380 ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc 1440

244 1500201217526 5 10

20 25

35 gggggatccg acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag ctccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatca gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggagg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgcgatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 245 40 201217526 accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag 2820 gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa atga 2874 <210> 119 <211〉 957 <212> PRT 10 <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-119氨基酸序列 15 <400> 119

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Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu GIu Ala His Gly Val 20 25 30 25 Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu GIu GIu Leu Arg Pro 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu GIu 30 50 55 60

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Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 246 40 201217526

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 5 Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 160

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 10 145 150 155

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 15

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Gly Gly Gly 180 185 190 20

Gly Ser Ala Leu ^\rg Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys 195 200 205 25 Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu 210 215 220 240

Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His ^30 225 230 235

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Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His 275 280 285 247 40 201217526

Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His 290 295 300 5 Val Val Pro Leu Cys Leu Pro GIu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu 305 310 315 320

Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp 10 325 330 335

Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu 340 345 350 15

Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro 355 360 365 20

Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys 370 375 380 25 Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg 385 390 395 400

Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala 30 405 410 415

Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu 420 425 430 35

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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 465 470 475 5 Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 485 490 495

Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 10 500 505 510

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Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 530 535 540 20 560

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Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 705 710 715 720 20

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Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 30 755 760 765

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Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 900 905 910 25 Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 915 920 925

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 930 935 940

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 945 950 955 <210〉 120 <211> 2844 <212〉DNA 40 <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-127的DNA序列 251 120 60 201217526 <400> 120 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 5 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 10 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 15 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 20 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggcgcc ctgcggcccc ggattgtggg gggcaaggtg tgccccaaag gggagtgtcc atggcaggtc ctgttgttgg tgaatggagc tcagttgtgt ggggggaccc tgatcaacac catctgggtg gtctccgcgg cccactgttt cgacaaaatc 25 aagaactgga ggaacctgat cgcggtgctg ggcgagcacg acctcagcga gcacgacggg gatgagcaga gccggcgggt ggcgcaggtc atcatcccca gcacgtacgt cccgggcacc 30 accaaccacg acatcgcgct gctccgcctg caccagcccg tggtcctcac tgaccatgtg gtgcccctct gcctgcccga acggacgttc tctgagagga cgctggcctt cgtgcgcttc tcattggtca gcggctgggg ccagctgctg gaccgtggcg ccacggccct ggagctcatg 35 gtcctcaacg tgccccggct gatgacccag gactgcgagg ccagctaccc cggcaagatc acggagtaca tgttctgtgc cggctactcg gatggcagca aggactcctg caagggggac 40 agtggaggcc cacatgccac ccactaccgg ggcacgtggt acctgacggg catcgtcagc tggggccagg gctgcgcaac cgtgggccac tttggggtgt acaccagggt ctcccagtac atcgagtggc tgcaaaagct catgcgctca gagccacgcc caggagtcct cctgcgagcc 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 252 1320 1380201217526 5

20 25

35 ccatttcccg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatcag acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag ctccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatca gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcacctgaac tcctgggagg accgtcagtc ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgcgatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 253 40 201217526 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 2700 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 2760 5 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 2820 ctctccctgt ctccgggtaa atga 2844 10 <210> 121 <211> 947 <212〉PRT <213> 人工序列 15

<220〉 <223>合成構建體:FVII-127氨基酸序列 <400> 121 20

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 30 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 35

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 254 40 201217526

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 20

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Ala Leu Arg 180 185 190 25 Pro Arg lie Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp 195 200 205

Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu •30 210 215 220 240 lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie 225 230 235

Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser 245 250 255

Glu His Asp Gly Asp Glu Gb Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie 260 265 270 255 40 201217526

Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu 275 280 285

Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys 290 295 300

Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe 10 305 310 315 320

Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala 325 330 335 15

Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys 340 345 350 20

Glu Ala Ser Tyr Pro Gly Lys lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly 355 360 365 25 Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro 370 375 380 400

His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser 30 385 390 395

Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg 405 410 415 35

Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro 420 425 430

Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser 435 440 445 s 256 480 201217526

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 450 455 460 5 Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 465 470 475

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 10 485 490 495

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 500 505 510 15

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 515 520 525 20

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 530 535 540 560 25 Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 545 550 555

Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 30 565 570 575

Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala 580 585 590 35

Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 595 600 605

Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 610 615 620 257 201217526

Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro 625 630 635 640 5 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 645 650 655

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin 10 660 665 670

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 675 680 685 15

Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly 690 695 700

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 705 710 715 720 25 Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 725 730 735

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 30 740 745 750 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 755 760 765 35

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 770 775 780

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 785 790 795 800

258 40 201217526

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly 805 810 815 5 Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie 820 825 830

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 10 835 840 845

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 850 855 860 15

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 865 870 875 880 20

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 885 890 895 25 Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 900 905 910

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gb Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met ^30 915 920 925 '

His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser 930 935 940 35

Pro Gly Lys 945 <210〉 122 <211> 2169 <212〉DNA <213>人工序列 259 201217526 <220〉 <223>合成構建體:FVII-125的DNA序列 5 <400> 122 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 10 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 15

gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 20 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 600 25 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg 660 atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 720 30 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 780 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 840 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 900 35 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc 960 ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1020 40 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 1080 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 1140 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 1200

S 260 201217526 5 10

20 25 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag 1260 tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 1320 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 1380 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacatcgt gatgacccag 1440 gccgccccca gcgtgcccgt gacccccggc gagagcgtga gcatcagctg ccggagcagc 1500 cggagcctgc tgcacagcaa cggcaacacc tacctgtgct ggttcctgca gcggcccggc 1560 cagagccccc agctgctgat ctaccggatg agcaacctgg ccagcggcgt gcccgaccgg 1620 ttcagcggca gcggcagcgg caccgccttc accctgcgga tcagccgggt ggaggccgag 1680 gacgtgggcg tgtactactg catgcagcac ctggagtacc ccttcacctt cggcagcggc 1740 accaagctgg agatcaagcg gggcggcggc ggcagcggcg gcggcggcag cggcggcggc 1800 ggcagccagg tgcagctgca gcagagcggc gccgagctgg tgcggcccgg caccagcgtg 1860 aagatcagct gcaaggccag cggctacacc ttcaccaact actggctggg ctgggtgaag 1920 cagcggcccg gccacggcct ggagtggatc ggcgacatct accccggcgg cggctacaac 1980 aagtacaacg agaacttcaa gggcaaggcc accctgaccg ccgacaccag cagcagcacc 2040 gcctacatgc agctgagcag cctgaccagc gaggacagcg ccgtgtactt ctgcgcccgg 2100 gagtacggca actacgacta cgccatggac agctggggcc agggcaccag cgtgaccgtg 2160 agcagctga 2169 35 <210〉 123 <211> 722 <212> PRT 40 <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVII-125氨基酸序列 261 201217526 <400〉 123

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 1.5 10 15 5

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 10

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 15 Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 20 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95 25

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 30

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 35 Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 40 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 262 201217526

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Tip Gin Val Leu Leu 195 200 205 10

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 15

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 240

Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 20 245 250 255

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270 25

Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 320 35 Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 40 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 263 201217526

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr GIu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 400 15 Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr

405 410 415

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 20 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 25

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp lie Val Met Thr Gin 465 470 475 480 35 Ala Ala Pro Ser Val Pro Val Thr Pro Gly Glu Ser Val Ser lie Ser 485 490 495

Cys Arg Ser Ser Arg Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu 40 500 505 510

Cys Trp Phe Leu Gin Arg Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr 515 520 525 s 264 201217526

Arg Met Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser 530 535 540 5 560

Gly Ser Gly Thr Ala Phe Thr Leu Arg He Ser Arg Val Glu Ala Glu 545 550 555 10

Asp Val Gly Val Tyr Tyr Cys Met Gin His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr 565 570 575 15

Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Gly Gly Gly Gly Ser 580 585 590

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gin Val Gin Leu Gin Gin 20 595 600 605

Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys lie Ser Cys 610 615 620 25 640

Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys 625 630 635

Gin Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp lie Gly Asp lie Tyr Pro Gly 645 650 655 35 Gly Gly Tyr Asn Lys Tyr Asn Glu Asn Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu 660 665 670

Thr Ala Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gin Leu Ser Ser Leu 40 675 680 685

Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Tyr Gly Asn 690 695 700 265 201217526

Tyr Asp Tyr Ala Met Asp Ser Trp Gly Gin Gly Thr Ser Val Thr Val 705 710 715 720 5

Ser Ser 10 <210〉 124 <211> 3750 <212> DNA <213> 人工序列 15 <220〉 <223>合成構建體:FVII-067的DNA序列 <400〉 124 20 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 25 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 30 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 35 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 600 40 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg 660 atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 720 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 780

266 201217526 5 10 15

20 25

35 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 840 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 900 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc 960 ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1020 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 1080 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 1140 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 1200 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag 1260 tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 1320 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 1380 gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc 1440 ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa 1500 cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg 1560 agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat 1620 gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc 1680 accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa 1740 gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca 1800 caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 1860 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 267 40 201217526 aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga 2160 tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca 2220 5 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 2280 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 2340 10 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 2400 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 2460 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 2520 15 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc 2580 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 2640 20 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 2700 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg acaagagcag gtggcagcag 2760 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2820 25 agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggtggctccg gcggaggtgg gtccggtggc 2880 ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt ggaggttccg gtggcggggg atcagcgcag 2940 30 gtgcagctgc aggagtctgg gggaggcttg gtacagcctg gggggtccct gagactctcc 3000 tgtgcagcct ctggattcat gtttagcagg tatgccatga gctgggtccg ccaggctcca 3060 gggaaggggc cagagtgggt ctcaggtatt agtggtagtg gtggtagtac atactacgca 3120 35 gactccgtga agggccggtt caccgtctcc agagacaatt ccaagaacac gctgtatctg 3180 caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtatatt actgcgcccg gggcgccacc 3240 40 tacaccagcc ggagcgacgt gcccgaccag accagcttcg actactgggg ccagggaacc 3300 ctggtcaccg tctcctcagg gagtgcatcc gccccaaagc ttgaagaagg tgaattttca 3360 gaagcacgcg tatctgaact gactcaggac cctgctgtgt ctgtggcctt gggacagaca 3420 268 201217526 gtcaggatca catgccaagg agacagcctc agaaactttt atgcaagctg gtaccagcag 3480 5 10 aagccaggac aggcccctac tcttgtcatc tatggtttaa gtaaaaggcc ctcagggatc ccagaccgat tctctgcctc cagctcagga aacacagctt ccttgaccat cactggggct caggcggaag atgaggctga ctattactgc ctgctgtact acggcggcgg ccagcagggc gtgttcggcg gcggcaccaa gctgaccgtc ctacgtcagc ccaaggctgc cccctcggtc actctgttcc cgccctcttc tgcggcctga 3540 3600 3660 3720 3750

15 <210〉 125 <211> 1249 <212> PRT <213> 人工序列 20 <220> <223> 合成構建體:FVII-067氨基酸序列 <400〉 125 25 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 30 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 35

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 269 40 201217526

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 10 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 15 160

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 20

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 25 Pro He Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 30 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220 35

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235

Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255 270 240 40 201217526

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270 5 Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 10 290 295 300 320

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 15

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335 20

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 25 Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 30 370 375 380

400

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415

Arg Val Ser Gin Tyr He Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430 271 40 201217526

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 435 440 445 5 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 10 465 470 475 480

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 15

Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510 20

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 515 520 525 25 Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 30 545 550 555 560

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 35

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590

Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605 272 40 640 201217526

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 610 615 620 5 Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 625 630 635

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 10 645 650 655

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670 15

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685 20

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly 690 695 700 720 25 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 30 725 730 735

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 740 745 750 35

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 755 760 765

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 770 775 780 273 880

201217526

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 785 790 795 800 5 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 805 810 815

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 10 820 825 830 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 835 840 845 15

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 850 855 860 20

Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 865 870 875 25 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 885 890 895

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 30 900 905 910

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 915 920 925 35

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 930 935 940

Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 945 950 955 960 274 201217526

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 965 970 975 5 Gly Ser Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin 980 985 990

Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe 10 995 1000 1005

Ser Arg Tyr Ala Met Ser Trp Val Axg Gin Ala Pro Gly Lys Gly 1010 1015 1020 15

Pro Glu Trp Val Ser Gly lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr 1025 1030 1035 20

Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn 1040 1045 1050 25 Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu 1055 1060 1065

Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Thr Tyr Thr Ser 30 1070 1075 1080

Arg Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gin 1085 1090 1095 35

Gly Thr Leu Val Thr Val Ser SerGly SerAla Ser Ala Pro Lys 1100 1105 1110

Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu Leu Thr 1115 1120 1125 275 201217526

Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg lie 1130 1135 1140 5 Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr 1145 1150 1155

Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu 10 1160 1165 1170

Ser Lys Arg Pro Ser Gly He Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser 1175 1180 1185 15

Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu 1190 1195 1200 20

Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin 1205 1210 1215 25 Gin Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gin 1220 1225 1230

Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Ala 30 1235 1240 1245

Ala 35 <210> 126 <211> 2244 <212> DNA 40 <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-094的DNA序列 276 120 60201217526 5 10 15

20 25

35 <400> 126 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 277 1320 40 1380201217526 5 10 15 20 25 30 gccccatttc ccgatatcgg tggcggtggc tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatcagc gcaggtgcag ctgcaggagt ctgggggagg cttggtacag cctggggggt ccctgagact ctcctgtgca gcctctggat tcatgtttag caggtatgcc atgagctggg tccgccaggc tccagggaag gggccagagt gggtctcagg tattagtggt agtggtggta gtacatacta cgcagactcc gtgaagggcc ggttcaccgt ctccagagac aattccaaga acacgctgta tctgcaaatg aacagcctga gagccgagga cacggctgta tattactgcg cccggggcgc cacctacacc agccggagcg acgtgcccga ccagaccagc ttcgactact ggggccaggg aaccctggtc accgtctcct cagggagtgc atccgcccca aagcttgaag aaggtgaatt ttcagaagca cgcgtatctg aactgactca ggaccctgct gtgtctgtgg ccttgggaca gacagtcagg atcacatgcc aaggagacag cctcagaaac ttttatgcaa gctggtacca gcagaagcca ggacaggccc ctactcttgt catctatggt ttaagtaaaa ggccctcagg gatcccagac cgattctctg cctccagctc aggaaacaca gcttccttga ccatcactgg ggctcaggcg gaagatgagg ctgactatta ctgcctgctg tactacggcg gcggccagca gggcgtgttc ggcggcggca ccaagctgac cgtcctacgt cagcccaagg ctgccccctc ggtcactctg ttcccgccct cttctgcggc ctga 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2244 35 <210> 127 <211> 747 <212> PRT <213> 人工序列 40 <220> <223>合成構建體:FVII-094氨基酸序列 <400> 127 278 201217526

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 10 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 15

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 20

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu He 30 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 35

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 279 40 201217526

Pro He Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg He Val 180 185 190 5 Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg 225 230 235 15

Asn Leu He Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255 20

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 260 265 270 25 Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 35

Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser 340 345 350 280 40 201217526

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 10 385 390 395

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 15

Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430 20

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Asp lie Gly Gly 435 440 445 25 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 450 455 460

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Val Gin 30 465 470 475 480

Leu Gin Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg 485 490 495 35

Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe Ser Arg Tyr Ala Met Ser 500 505 510

Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly lie 515 520 525 281 40 201217526

Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg 530 535 540 5 Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met 545 550 555 560

Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly 10 565 570 575

Ala Thr Tyr Thr Ser Arg Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp 580 585 590 15

Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser 595 600 605 20

Ala Pro Lys Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu 610 615 620 25 Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg 625 630 635 640 lie Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr 30 645 650 655

Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu Ser 660 665 670 35

Lys Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser Ser Gly 675 680 685

Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala 690 695 700 282 201217526

Asp Tyr Tyr Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin Gin Gly Val Phe 705 710 715 720 5 Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gin Pro Lys Ala Ala Pro 725 730 735

Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Ala Ala 10 740 745 15 <210> 128 <211> 3507 <212> DNA <213> 人工序列 <220 20 <223>合成構建體:FVII-028的DNA序列 <400> 128 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 25 gcggaagtgc agctggtgca gtctggagct gaggtgaata agcctggggc ctcagtgaag 120 gtctcctgca aggcttctgg atacaccttc accggctact atatgcactg ggtgcgacag 180 gcccctggac aagggcttga gtggatggga tggatcaacc ctaacagtgg tggcacaaac 240 30 tatgcacaga agtttcaggg ctgggtcacc atgaccaggg acacgtccat cagcaccgcc 300

I tacatggagc tgagcaggct gagatctgac gacacggccg tgtattactg tgcgagaggc 360 cgtgctttgt ataaccggaa cgaccggtcc cccaactggt tcgacccctg gggccaggga 420 35 accctggtca ccgtctcctc agggagtgca tccgccccaa cccttaaact tgaagaaggt 480 gaattttcag aagcacgcgt acaggctgtg ctgactcagc cgccctcggt gtcagtggcc 540 40 ccaggacaga cggccaggat tacctgtggg ggaaacaaca ttggaagtaa aagtgtgcag 600 tggtaccagc agaagccagg ccaggcccct gtgctggtcg tctatgatga tagcgaccgg 660 ccctcaggga tccctgagcg attctctggc tccaactctg ggaacatggc caccctgacc 720 283 201217526 atcagcaggg tcgaagccgg ggatgaggcc gactattact gtcaggtgtg ggatagtagt 780 agtgatcatg tggtattcgg cggagggacc aagctgaccg tcctaggtca gcccaaggct 840 5 gccccctcgg tcactctgtt cccgccgtcc gcggccgcta ggacgaagct gttctggatt 900 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 960 10 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 1020 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 1080 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 1140 15

gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 1200 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg 1260 20 gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg 1320 atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg 1380 aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc 1440 25 cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac 1500 atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc 1560 30 ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc 1620

ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg 1680 ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat 1740 35 atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg 1800 gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc 1860 40 agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag 1920 tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga 1980 gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt 2040 s 284 201217526 5 10 15

20 25

30 35 gggggiggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga tccgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 285 40 201217526 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 3420 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 3480 5 agcctctccc tgtctccggg taaatga 3507 <210〉 129 10 <211> 1168 <212> PRT <213> 人工序列 <220> 15 <223>合成構建體:FVII-028氨基酸序列

<400> 129

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 20 1 5 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Ala Glu Val 20 25 30 25

Asn Lys Pro Gly Ala Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr 35 40 45 30

Thr Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Gin 50 55 60 35 Gly Leu Glu Trp Met Gly Trp He Asn Pro Asn Ser Gly Gly Thr Asn 65 70 75 80

Tyr Ala Gin Lys Phe Gin Gly Trp Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser 40 85 90 95 lie Ser Thr Ala Tyr Met Glu Leu Ser Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr 100 105 110 s 286 201217526

Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Arg Ala Leu Tyr Asn Arg Asn Asp 115 120 125 5

Arg Ser Pro Asn Trp Phe Asp Pro Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 130 135 140 160

Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Lys Leu Glu GIu Gly 145 150 155 15 Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Gin Ala Val Leu Thr Gin Pro Pro Ser

Val Ser Val Ala Pro Gly Gin Thr Ala Arg lie Thr Cys Gly Gly Asn 20 180 185 190

Asn He Gly Ser Lys Ser Val Gin Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin 195 200 205 25

Ala Pro Val Leu Val Val Tyr Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly lie 210 215 220

Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser Asn Ser Gly Asn Met Ala Thr Leu Thr 225 230 235 240 35 lie Ser Arg Val Glu Ala Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gin Val 245 250 255

Trp Asp Ser Ser Ser Asp His Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 40 260 265 270

Thr Val Leu Gly Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro 275 280 285 287 201217526

Pro Ser Ala Ala Ala Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie Ser Tyr Ser Asp 290 295 300

Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly Gly Ser Cys Lys 305 310 315 320

Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro Ala Phe Glu Gly 325 330 335 15 Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu He Cys Val Asn Glu 340 345 350

Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr Gly Thr Lys Arg 20 355 360 365

Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala Asp Gly Val Ser 370 375 380 25

Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie Pro lie Leu Glu 385 390 395 400 30 415

Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val Gly Gly Lys Val 405 410 35 Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly 420 425 430

Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser 40 435 440 445

Ala Ala His Cys Phe Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala 450 455 460

S 480 201217526

Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser 465 470 475

Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr 485 490 495

Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu 500 505 510 15 Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu 515 520 525

Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin 20 530 535 540 560

Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val 545 550 555 25

Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly 565 570 575

Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp 580 585 590 35 Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr 595 600 605

His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin 40 610 615 620

Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin 625 630 635 289 640 201217526

Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly 645 650 655

Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 660 665 670 10

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 675 680 685 15 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro

690 695 700

Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys 20 705 710 715 720

Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val 725 730 735 25

Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr 740 745 750 30

Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu 755 760 765 35 Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His 770 775 780

Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 40 785 790 795 800

Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin 805 810 815 290 201217526

Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu 820 825 830

Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro 835 840 845

Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn 850 855 860 880 15 Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu 865 870 875

Tyr Ser Lys Leu rrhr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val 20 885 890 895

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin 900 905 910 25

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 915 920 925

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr 930 935 940 960 35 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 945 950 955

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 40 965 970 975

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 980 985 990 291 201217526 GIu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 995 1000 1005

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asa Ser Thr Tyr Arg Val 1010 1015 1020

Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys 1025 1030 1035 15 Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie 1040 1045 1050

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 20 1055 1060 1065

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin 1070 1075 1080 25

Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie 1085 1090 1095

Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 1100 1105 1110 35 Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 1115 1120 1125

Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val 40 1130 1135 1140

Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 1145 1150 1155 292 201217526 5 10 15

20 25 •3〇 35

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1160 1165 <210> 130 <211> 2868 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FVII-039的DNA序列 <400> 130 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcclatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga ggcggaggag acttcactcg ggttgtgggg 600 ggcaaggtgt gccccaaagg ggagtgtcca tggcaggtcc tgttgttggt gaatggagct 660 cagttgtgtg gggggaccct gatcaacacc atctgggtgg tctccgcggc ccactgtttc 720 gacaaaatca agaactggag gaacctgatc gcggtgctgg gcgagcacga cctcagcgag 780 cacgacgggg atgagcagag ccggcgggtg gcgcaggtca tcatccccag cacgtacgtc 840 ccgggcacca ccaaccacga catcgcgctg ctccgcctgc accagcccgt ggtcctcact 900 293 40 201217526 gaccatgtgg tgcccctctg cctgcccgaa cggacgttct ctgagaggac gctggccttc 960 gtgcgcttct cattggtcag cggctggggc cagctgctgg accgtggcgc cacggccctg 1020 5 gagctcatgg tcctcaacgt gccccggctg atgacccagg actgcctgca gcagtcacgg 1080 aaggtgggag actccccaaa tatcacggag tacatgttct gtgccggcta ctcggatggc 1140 10 agcaaggact cctgcaaggg ggacagtgga ggcccacatg ccacccacta ccggggcacg 1200 tggtacctga cgggcatcgt cagctggggc cagggctgcg caaccgtggg ccactttggg 1260 gtgtacacca gggtctccca gtacatcgag tggctgcaaa agctcatgcg ctcagagcca 1320 15

cgcccaggag tcctcctgcg agccccattt cccggtggcg gtggctccgg cggaggtggg 1380 tccggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg gaggttccgg tggcggggga 1440 20 tccgacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagctccgg aactcctggg cggaccgtca 1500 gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga tctcccggac ccctgaggtc 1560 acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg tcaagttcaa ctggtacgtg 1620 25 gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg aggagcagta caacagcacg 1680 taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact ggctgaatgg caaggagtac 1740

30 aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg agaaaaccat ctccaaagcc 1800 aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc catcccggga tgagctgacc 1860 aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct atcccagcga catcgccgtg 1920 35 gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga ccacgcctcc cgtgttggac 1980 tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg acaagagcag gtggcagcag 2040 40 gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc acaaccacta cacgcagaag 2100 agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt 2160 ggaggttccg gtggcggggg atcagacaaa actcacacat gcccaccgtg cccagcacct 2220 s 294 201217526 gaactcctgg gaggaccgtc agtcttcctc ttccccccaa aacccaagga caccctcatg 2280 atctcccgga cccctgaggt cacatgcgtg gtggtggacg tgagccacga agaccctgag 2340 gtcaagttca actggtacgt ggacggcgtg gaggtgcata atgccaagac aaagccgcgg 2400 10

20 gaggagcagt acaacagcac gtaccgtgtg gtcagcgtcc tcaccgtcct gcaccaggac 2460 tggctgaatg gcaaggagta caagtgcaag gtctccaaca aagccctccc agcccccatc 2520 gagaaaacca tctccaaagc caaagggcag ccccgagaac cacaggtgta caccctgccc 2580 ccatcccgcg atgagctgac caagaaccag gtcagcctga cctgcctggt caaaggcttc 2640 tatcccagcg acatcgccgt ggagtgggag agcaatgggc agccggagaa caactacaag 2700 accacgcctc ccgtgttgga ctccgacggc tccttcttcc tctacagcaa gctcaccgtg 2760 gacaagagca ggtggcagca ggggaacgtc ttctcatgct ccgtgatgca tgaggctctg 2820 cacaaccact acacgcagaa gagcctctcc ctgtctccgg gtaaatga 2868 25 <210> 131 <211> 955 <212> PRT <213> 人工序列

<220〉 <223>合成構建體:FVII-039氨基酸序列 <400> 131 35 Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 40 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 295 201217526

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 10

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 85 90 95

15 Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 20 115 120 125

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 25

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 30

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175 35 Pro He Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg Gly Gly 180 185 190

Gly Asp Phe Thr Arg Val Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu 40 195 200 205

Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly 210 215 220

S 296 240 201217526

Gly Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe 225 230 235

Asp Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu He Ala Val Leu Gly Glu His 245 250 255 10

Asp Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin 260 265 270 15

Val lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie 275 280 285

Ala Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val 20 290 295 300 320

Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe 305 310 315

Val Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly 325 330 335 •30

Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr 340 345 350 35 Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn He 355 360 365

Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser 40 370 375 380

Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr 385 390 395 297 400 201217526

Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val 405 410 415

Gly His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu 420 425 430

Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala 435 440 445 15 Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 450 455 460

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 20 465 470 475 480

Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu 485 490 495 25

Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 500 505 510 30

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 515 520 525 35 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 530 535 540

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr 40 545 550 555 560

Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 565 570 575 298 201217526

Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 580 585 590 lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin 595 600 605 10

Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val 610 615 620 640 15 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 625 630 635

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 20 645 650 655

Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 660 665 670 25

Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 675 680 685

Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu 690 695 700 720 35 Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 705 710 715

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 40 725 730 735

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 740 745 750 299 201217526

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 755 760 765 5

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 770 775 780 10

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 785 790 795 800 15 Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val

805 810 815

Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 20 820 825 830

Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys 835 840 845 25

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 850 855 860

Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 865 870 875 880 35 Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 885 890 895

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 40 900 905 910

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly 915 920 925

S 300 201217526

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 930 935 940 10

20 25 •3〇 35

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 945 950 955 <210〉 132 <211> 2865 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223> 合成構建體:FVII-040的DNA序列 <400> 132 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggcggc ggaggagact tcactcgggt tgtggggggc aaggtgtgcc ccaaagggga gtgtccatgg caggtcctgt tgttggtgaa tggagctcag 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 ttgtgtgggg ggaccctgat caacaccatc tgggtggtct ccgcggccca ctgtttcgac 720 aaaatcaaga actggaggaa cctgatcgcg gtgctgggcg agcacgacct cagcgagcac 780 301 40 201217526 gacggggatg agcagagccg gcgggtggcg caggtcatca tccccagcac gtacgtcccg 840 ggcaccacca accacgacat cgcgctgctc cgcctgcacc agcccgtggt cctcactgac 900 5 catgtggtgc ccctctgcct gcccgaacgg acgttctctg agaggacgct ggccttcgtg 960 cgcttctcat tggtcagcgg ctggggccag ctgctggacc gtggcgccac ggccctggag 1020 10 ctcatggtcc tcaacgtgcc ccggctgatg acccaggact gcctgcagca gtcacggaag 1080 gtgggagact ccccaaatat cacggagtac atgttctgtg ccggctactc ggatggcagc 1140 aaggactcct gcaaggggga cagtggaggc ccacatgcca cccactaccg gggcacgtgg 1200 15 tacctgacgg gcatcgtcag ctggggccag ggctgcgcaa ccgtgggcca ctttggggtg 1260 tacaccaggg tctcccagta catcgagtgg ctgcaaaagc tcatgcgctc agagccacgc 1320 20 ccaggagtcc tcctgcgagc cccatttccc ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 1380 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatcc 1440 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gctccggaac tcctgggcgg accgtcagtc 1500 25 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 1560 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac 1620 30 ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac 1680 cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag 1740 tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa 1800 35 gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag 1860 aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag 1920 40 tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc 1980 gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg 2040 aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc 2100

s 302 201217526 5

20 25 ctctccctgt ctccgggtaa aggtggcggc ggatcaggtg ggggtggatc aggcggtgga ggttccggtg gcgggggatc agacaaaact cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctgggag gaccgtcagt cttcctcttc cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgcgatg agctgaccaa gaaccaggtc agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aatga 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2865 <210> 133 ▲ 30 <211> 954 W <212> PRT <213> 人工序列 <220> 35 <223>合成構建體：FVIMJ40氨基酸序列 <400> 133

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 40 1 5 10

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30 303 201217526

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu GIu Glu Leu Arg Pro 35 40 45

Gly Ser Leu Glu Arg GIu Cys Lys Glu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60

Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80 15 Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 20 100 105 110

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys GIu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 25

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140

Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160 35 Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Gly Gly Gly 40 180 185 190

Asp Phe Thr Arg Val Val Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly GIu Cys 195 200 205 304 201217526

Pro Trp Gin Val Leu Leu Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly 210 , 215 220 240

Thr Leu lie Asn Thr lie Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp 225 230 235

Lys lie Lys Asn Trp Arg Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp 245 250 255 15 Leu Ser Glu His Asp Gly Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val 260 265 270 lie lie Pro Ser Thr Tyr Val Pro Gly Thr Thr Asn His Asp lie Ala 20 275 280 285

Leu Leu Arg Leu His Gin Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro 290 295 300 25 320

Leu Cys Leu Pro Glu Arg Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val 305 310 315

Arg Phe Ser Leu Val Ser Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala 325 330 335 33 Thr Ala Leu Glu Leu Met Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin 340 345 350

Asp Cys Leu Gin Gin Ser Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr 40 355 360 365

Glu Tyr Met Phe Cys Ala Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys 370 375 380 305 201217526

Lys Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp 385 390 395 400

Tyr Leu Thr Gly lie Val Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly 405 410 415 10

His Phe Gly Val Tyr Thr Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin 420 425 430

15 Lys Leu Met Arg Ser Glu Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro 435 440 445

Phe Pro Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 20 450 455 460

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 465 470 475 480 25

Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 485 490 495

30

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 500 505 510 35 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 515 520 525

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val 40 530 535 540

His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 545 550 555 560 306 201217526

Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Tip Leu Asn Gly 565 570 575 5

Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro He 580 585 590 10

Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val 595 600 605

Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 610 615 620 640

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu 20 625 630 635

Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro 645 650 655 25

Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val 660 665 670 •30

Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met 675 680 685 35 His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser 690 695 700

Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 40 705 710 715

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 725 730 735 307 720 201217526

Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 740 745 750

Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 755 760 765

Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 770 775 780 15 Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu 785 790 795 800

Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 20 805 810 815

His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 820 825 830 25

Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 835 840 845 30

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 850 855 860 35 Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 865 870 875 880

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn 40 885 890 895

Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 900 905 910 s 201217526

Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn 915 920 925

Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 930 935 940

Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 945 950

<210> 134 <211> 3107 <212> DNA <213> 人工序列 20 25

35 <220> <223>合成構建體:FIX-042的DNA序列 <400〉 134 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta 60 ggatatctac tcagtgctga atgtacaggt ttgtttcctt ttttaaaata cattgagtat 120 gcttgccttt tagatataga aatatctgat gctgtcttct tcactaaatt ttgattacat 180 gatttgacag caatattgaa gagtctaaca gccagcacgc aggttggtaa gtactgtggg 240 aacatcacag attttggctc catgccctaa agagaaattg gctttcagat tatttggatt 300 aaaaacaaag actttcttaa gagatgtaaa attttcatga tgttttcttt tttgctaaaa 360 ctaaagaatt attcttttac atttcagttt ttcttgatca tgaaaacgcc aacaaaattc 420 tgaatcggcc aaagaggtat aattcaggta aattggaaga gtttgttcaa gggaatctag 480 40 agagagaatg tatggaagaa aagtgtagtt ttgaagaagc acgagaagtt tttgaaaaca 540 ctgaaagaac aactgaattt tggaagcagt atgttgatgg agatcagtgt gagtccaatc 600 catgtttaaa tggcggcagt tgcaaggatg acattaattc ctatgaatgt tggtgtccct 660 309 201217526 ttggatttga aggaaagaac tgtgaattag atgtaacatg taacattaag aatggcagat 720 gcgagcagtt ttgtaaaaat agtgctgata acaaggtggt ttgctcctgt actgagggat 780 5 atcgacttgc agaaaaccag aagtcctgtg aaccagcagt gccatttcca tgtggaagag 840 tttctgtttc acaaacttct aagctcaccc gtgctgagac tgtttttcct gatgtggact 900 10 atgtaaattc tactgaagct gaaaccattt tggataacat cactcaaagc acccaatcat 960 ttaatgactt cactcgggtt gttggtggag aagatgccaa accaggtcaa ttcccttggc 1020 aggttgtttt gaatggtaaa gttgatgcat tctgtggagg ctctatcgtt aatgaaaaat 1080 15

ggattgtaac tgctgcccac tgtgttgaaa ctggtgttaa aattacagtt gtcgcaggtg 1140 aacataatat tgaggagaca gaacatacag agcaaaagcg aaatgtgatt cgaattatic 1200 20 ctcaccacaa ctacaatgca gctattaata agtacaacca tgacattgcc cttctggaac 1260 tggacgaacc cttagtgcta aacagctacg ttacacctat ttgcattgct gacaaggaat 1320 acacgaacat cttcctcaaa tttggatctg gctatgtaag tggctgggga agagtcttcc 1380 25 acaaagggag atcagcttta gttcttcagt accttagagt tccacttgtt gaccgagcca 1440 catgtcttcg atctacaaag ttcaccatct ataacaacat gttctgtgct ggcttccatg 1500

30 aaggaggtag agattcatgt caaggagata gtgggggacc ccatgttact gaagtggaag 1560 ggaccagttt cttaactgga attattagct ggggtgaaga gtgtgcaatg aaaggcaaat 1620 atggaatata taccaaggtg tcccggtatg tcaactggat taaggaaaaa acaaagctca 1680 35 ctgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag 1740 tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca 1800 40 catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg 1860 acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt 1920 accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca 1980

S 310 201217526 5

20 25

30 35 agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca 2040 aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca 2100 agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg 2160 agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact 2220 ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg 2280 ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga 2340 gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg 2400 gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg 2460 aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga 2520 tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg 2580 tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg 2640 aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact 2700 ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg 2760 agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc 2820 catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct 2880 atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga 2940 ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtgg 3000 acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc 3060 acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaatga 3107 <210〉 135 <211> 935 <212> PRT <213>人工序列 311 201217526 <220〉 <223>合成構建體:FIX-042氨基酸序列 5 <400> 135

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala Glu Ser Pro Gly Leu lie Thr 1 5 10 15 10 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30

15 Asp His Glu Asn Ala Asn Lys lie Leu Asn Arg Pro Lys Arg Tyr Asn 35 40 45

Ser Gly Lys Leu Glu Glu Phe Val Gin Gly Asn Leu Glu Arg Glu Cys 20 50 55 60

Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 65 70 75 80

Thr Glu Arg Thr Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 85 90 95

30

Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp He 100 105 110 35 Asn Ser Tyr Glu Cys Trp Cys Pro Phe Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys 115 120 125

Glu Leu Asp Val Thr Cys Asn lie Lys Asn Gly Arg Cys Glu Gin Phe 40 130 135 140

Cys Lys Asn Ser Ala Asp Asn Lys Val Val Cys Ser Cys Thr Glu Gly 145 150 155 160 s 312 201217526

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 165 170 175 5

Pro Cys Gly Arg Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190 10

Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr Glu Ala Glu 195 200 205

Thr lie Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 210 215 220 240

Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Tip 20 225 230 235

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 245 250 255 25

Val Asn Glu Lys Trp He Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 260 265 270 • 30

Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285 35 His Thr Glu Gin Lys Arg Asn Val lie Arg lie lie Pro His His Asn 290 295 300

Tyr Asn Ala Ala lie Asn Lys Tyr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Glu 40 305 310 315

Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 325 330 335 313 320 201217526

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn lie Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 340 345 350

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365

Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380 】5 Ser Thr Lys Phe Thr He Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 385 390 395 400

Glu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 20 405 410 415

Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie He Ser Trp Gly 420 425 430 25

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 435 440 445 30

Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys G]u Lys Thr Lys Leu Thr Asp Lys Thr 450 455 460 35 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 465 470 475 480

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 40 485 490 495

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 500 505 510 314 201217526

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 515 520 525 5

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 530 535 540 560

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 545 550 555

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 565 570 575 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 20 580 585 590

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 595 600 605 25

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 610 615 620 ▲ 30 640

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 625 630 635 35 Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 645 650 655

Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 40 660 665 670

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 675 680 685 315 201217526

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 690 695 700 5 720

Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 705 710 715 10

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 725 730 735 15 Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 740 745 750

Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 20 755 760 765

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 770 775 780 25 800

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 785 790 795 30

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 805 810 815 35 Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 820 825 830

Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 40 835 840 845

Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 850 855 860 316 201217526 lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 865 870 875 880

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 885 890 895 10

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser 900 905 910

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 915 920 925

Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 20 930 935 <210〉 136

<211> 4073 25 <212> DNA <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FIX-068的DNA序列 •30 <400> 136 60 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta ggatatctac tcagtgctga atgtacaggt ttgtttcctt ttttaaaata cattgagtat 120 35 gcttgccttt tagatataga aatatctgat gctgtcttct tcactaaatt ttgattacat 180 gatttgacag caatattgaa gagtctaaca gccagcacgc aggttggtaa gtactgtggg 240 40 aacatcacag attttggctc catgccctaa agagaaattg gctttcagat tatttggatt 300 aaaaacaaag actttcttaa gagatgtaaa attttcatga tgttttcttt tttgctaaaa 360 ctaaagaatt attcttttac atttcagttt ttcttgatca tgaaaacgcc aacaaaattc 420 317 201217526 tgaatcggcc aaagaggtat aattcaggta aattggaaga gtttgttcaa gggaatctag 480 agagagaatg tatggaagaa aagtgtagtt ttgaagaagc acgagaagtt tttgaaaaca 540 5 ctgaaagaac aactgaattt tggaagcagt atgttgatgg agatcagtgt gagtccaatc 600 catgtttaaa tggcggcagt tgcaaggatg acattaattc ctatgaatgt tggtgtccct 660 10 ttggatttga aggaaagaac tgtgaattag atgtaacatg taacattaag aatggcagat 720 gcgagcagtt ttgtaaaaat agtgctgata acaaggtggt ttgctcctgt actgagggat 780 atcgacttgc agaaaaccag aagtcctgtg aaccagcagt gccatttcca tgtggaagag 840 15 tttctgtttc acaaacttct aagctcaccc gtgctgagac tgtttttcct gatgtggact 900 atgtaaattc tactgaagct gaaaccattt tggataacat cactcaaagc acccaatcat 960 20 ttaatgactt cactcgggtt gttggtggag aagatgccaa accaggtcaa ttcccttggc 1020 aggttgtttt gaatggtaaa gttgatgcat tctgtggagg ctctatcgtt aatgaaaaat 1080 ggattgtaac tgctgcccac tgtgttgaaa ctggtgttaa aattacagtt gtcgcaggtg 1140 25 aacataatat tgaggagaca gaacatacag agcaaaagcg aaatgtgatt cgaattattc 1200 ctcaccacaa ctacaatgca gctattaata agtacaacca tgacattgcc cttctggaac 1260 30 tggacgaacc cttagtgcta aacagctacg ttacacctat ttgcattgct gacaaggaat 1320 acacgaacat cttcctcaaa tttggatctg gctatgtaag tggctgggga agagtcttcc 1380 acaaagggag atcagcttta gttcttcagt accttagagt tccacttgtt gaccgagcca 1440 35 catgtcttcg atctacaaag ttcaccatct ataacaacat gttctgtgct ggcttccatg 1500 aaggaggtag agattcatgt caaggagata gtgggggacc ccatgttact gaagtggaag 1560 40 ggaccagttt cttaactgga attattagct ggggtgaaga gtgtgcaatg aaaggcaaat 1620 atggaatata taccaaggtg tcccggtatg tcaactggat taaggaaaaa acaaagctca 1680 ctgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag 1740

S 318 201217526 5 10

20 25

35 tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca 1800 catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg 1860 acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt 1920 accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca 1980 agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca 2040 aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca 2100 agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg 2160 agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact 2220 ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg 2280 ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga 2340 gcctctccct gtctccgggt aaacggcgcc gccggagcgg tggcggcgga tcaggtgggg 2400 gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatccgg cggtggaggt tccggtgggg 2460 gtggatcaag gaagaggagg aagagggcgc aggtgcagct gcaggagtct gggggaggct 2520 tggtacagcc tggggggtcc ctgagactct cctgtgcagc ctctggattc atgtttagca 2580 ggtatgccat gagctgggtc cgccaggctc cagggaaggg gccagagtgg gtctcaggta 2640 ttagtggtag tggtggtagt acatactacg cagactccgt gaagggccgg ttcaccgtct 2700 ccagagacaa ttccaagaac acgctgtatc tgcaaatgaa cagcctgaga gccgaggaca 2760 cggctgtata ttactgcgcc cggggcgcca cctacaccag ccggagcgac gtgcccgacc 2820 agaccagctt cgactactgg ggccagggaa ccctggtcac cgtctcctca gggagtgcat 2880 ccgccccaaa gcttgaagaa ggtgaatttt cagaagcacg cgtatctgaa ctgactcagg 2940 accctgctgt gtctgtggcc ttgggacaga cagtcaggat cacatgccaa ggagacagcc 3000 tcagaaactt ttatgcaagc tggtaccagc agaagccagg acaggcccct actcttgtca 3060 319 40 201217526 tctatggttt aagtaaaagg ccctcaggga tcccagaccg attctctgcc tccagctcag 3120 gaaacacagc ttccttgacc atcactgggg ctcaggcgga agatgaggct gactattact 3180 5 gcctgctgta ctacggcggc ggccagcagg gcgtgttcgg cggcggcacc aagctgaccg 3240 tcctacgtca gcccaaggct gccccctcgg tcactctgtt cccgccctct tctgcggccg 3300 10 gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag 3360 gcggtggagg ttccggtggc gggggatcag acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag 3420 caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc 3480 15 tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc 3540 ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc 3600 20 cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc 3660 aggactggct gaatggcaag gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc 3720 ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc 3780 25 tgcccccatc ccgcgatgag ctgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag 3840 gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact 3900 30 acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg acggctcctt cttcctctac agcaagctca 3960 ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg 4020 ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc tctccctgtc tccgggtaaa tga 4073 35 <210> 137 <211> 1257 <212〉PRT 40 <213>人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FIX-068氨基酸序列

S 320 201217526 <400> 137

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala Glu Ser Pro Gly Leu lie Thr 15 10 15 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30 10

Asp His Glu Asn Ala Asn Lys lie Leu Asn Arg Pro Lys Arg Tyr Asn 35 40 45 15 Ser Gly Lys Leu Glu Glu Phe Val Gin Gly Asn Leu Glu Arg Glu Cys

Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 20 65 70 75 80

Thr Glu Arg Thi* Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 85 90 95 25

Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp lie 100 105 110 •30

Asn Ser Tyr Glu Cys Trp Cys Pro Phe Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys 115 120 125 35 Glu Leu Asp Val Thr Cys Asn lie Lys Asn Gly Arg Cys Glu Gin Phe 130 135 140

Cys Lys Asn Ser Ala Asp Asn Lys Val Val Cys Ser Cys Thr Glu Gly 40 145 150 155 160

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 165 170 175 321 201217526

Pro Cys Gly Arg Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190

Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr GIu Ala Glu 195 200 205

Thr lie Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 210 215 220 15 Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Trp 240 225 230 235

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 20 245 250 255

Val Asn Glu Lys Trp lie Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 260 265 270 25

Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285 30

His Thr Glu Gin Lys Arg Asn Val lie Arg lie lie Pro His His Asn 290 295 300 320 35 Tyr Asn Ala Ala lie Asn Lys Tyr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Glu 305 310 315

Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 40 325 330 335

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn He Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 340 345 350 322 201217526

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365 5

Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380 10 400

Ser Thr Lys Phe Thr lie Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 385 390 395

Glu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 405 410 415

Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie lie Ser Trp Gly 20 420 425 430

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 435 440 445 25

Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys Glu Lys Thr Lys Leu Thr Asp Lys Thr 450 455 460

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 465 470 475 480 35 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 485 490 495

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 40 500 505 510

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 515 520 525 323 201217526

Lys Thr Lys Pro Arg Glu GIu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 530 535 540

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 545 550 555 560 10

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 565 570 575 15 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu

580 585 590

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 20 595 600 605

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 610 615 620 25

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 625 630 635 640

30

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 645 650 655 35 Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 660 665 670

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 40 675 680 685

Arg Arg Arg Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 690 695 700 s 324 720 201217526

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 705 710 715

Gly Gly Ser Arg Lys Arg Arg Lys Arg Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu 725 730 735 10

Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys 740 745 750

Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe Ser Arg Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg 755 760 765

Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly lie Ser Gly Ser 20 770 775 780 800

Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val 785 790 795

Ser Arg Asp Asri Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu 805 810 815 • 30

Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Thr Tyr 820 825 830 35 Thr Ser Arg Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr Trp Gly 835 840 845

Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Lys 40 850 855 860

Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu Leu Thr Gin 865 870 875 325 880 201217526

Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg He Thr Cys 885 890 895

Gin Gly Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin Gin Lys 900 905 910

Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu Ser Lys Arg Pro 915 920 925 15 Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala 930 935 940

Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr 20 945 950 955 960

Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin Gin Gly Val Phe Gly Gly Gly 965 970 975 25

Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr 980 985 990 30

Leu Phe Pro Pro Ser Ser Ala Ala Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 995 1000 1005 35 Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 1010 1015 1020

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 40 1025 1030 1035

Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 1040 1045 1050 s 326 201217526

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 1055 1060 5 Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp 1070 1075 10 Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His 1085 1090

Thr Pro Glu 1065

Pro Glu Val 1080

Asn Ala Lys 1095

Thr Lys Pro Aig Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr 1100 1105

Arg Val Val 1110

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn 20 1115 1120

Gly Lys Glu 1125

Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala 1130 1135 25 Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu 1145 1150 ▲ 30 Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 1160 1165

Pro lie Glu 1140

Pro Gin Val 1155

Asn Gin Val 1170 35 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 1175 1180

Asp lie Ala 1185

Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn 40 1190 1195

Tyr Lys Thr 1200

Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 1205 1210

Leu Tyr Ser 1215 327 201217526

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe 1220 1225 1230

Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin 1235 1240 1245

Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1250 1255 15 <210〉138 <211> 4010 <212> DNA <213> 人工序列 20 <220> <223>合成構建體:FIX-088的DNA序列 <400〉 138 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta

25 ggatatctac tcagtgctga atgtacaggt ttgtttcctt ttttaaaata cattgagtat 120 gcttgccttt tagatataga aatatctgat gctgtcttct tcactaaatt ttgattacat 180 30 gatttgacag caatattgaa gagtctaaca gccagcacgc aggttggtaa gtactgtggg 240

aacatcacag attttggctc catgccctaa agagaaattg gctttcagat tatttggatt 300 aaaaacaaag actttcttaa gagatgtaaa attttcatga tgttttcttt tttgctaaaa 360 ctaaagaatt attcttttac atttcagttt ttcttgatca tgaaaacgcc aacaaaattc 420 tgaatcggcc aaagaggtat aattcaggta aattggaaga gtttgttcaa gggaatctag 480 40 agagagaatg tatggaagaa aagtgtagtt ttgaagaagc acgagaagtt tttgaaaaca 540 35 ctgaaagaac aactgaattt tggaagcagt atgttgatgg agatcagtgt gagtccaatc 600 catgtttaaa tggcggcagt tgcaaggatg acattaattc ctatgaatgt tggtgtccct 660 s 328 201217526 ttggatttga aggaaagaac tgtgaattag atgtaacatg taacattaag aatggcagat 720 gcgagcagtt ttgtaaaaat agtgctgata acaaggtggt ttgctcctgt actgagggat J atcgacttgc agaaaaccag aagtcctgtg aaccagcagt gccatttcca tgtggaagag 840 10

20 25

35 tttctgtttc acaaacttct aagctcaccc gtgctgagac tgtttttcct gatgtggact 900 atgtaaattc tactgaagct gaaaccattt tggataacat cactcaaagc acccaatcat 960 ttaatgactt cactcgggtt gttggtggag aagatgccaa accaggtcaa ttcccttggc 1020 aggttgtttt gaatggtaaa gttgatgcat tctgtggagg ctctatcgtt aatgaaaaat 1080 ggattgtaac tgctgcccac tgtgttgaaa ctggtgttaa aattacagtt gtcgcaggtg 1140 aacataatat tgaggagaca gaacatacag agcaaaagcg aaatgtgatt cgaattattc 1200 ctcaccacaa ctacaatgca gctattaata agtacaacca tgacattgcc cttctggaac 1260 tggacgaacc cttagtgcta aacagctacg ttacacctat ttgcattgct gacaaggaat 1320 acacgaacat cttcctcaaa tttggatctg gctatgtaag tggctgggga agagtcttcc 1380 acaaagggag atcagcttta gttcttcagt accttagagt tccacttgtt gaccgagcca 1440 catgtcttcg atctacaaag ttcaccatct ataacaacat gttctgtgct ggcttccatg 1500 aaggaggtag agattcatgt caaggagata gtgggggacc ccatgttact gaagtggaag 1560 ggaccagttt cttaactgga attattagct ggggtgaaga gtgtgcaatg aaaggcaaat 1620 atggaatata taccaaggtg tcccggtatg tcaactggat taaggaaaaa acaaagctca 1680 ctgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctgggc ggaccgtcag 1740 tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca 1800 catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg 1860 acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt 1920 accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca 1980 329 40 201217526 agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca 2040 aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca 2100 5 agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg 2160 agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact 2220 10 ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg 2280 ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga 2340 gcctctccct gtctccgggt aaaggtggcg gcggatcagg tgggggtgga tcaggcggtg 2400 15

gaggttccgg tggcggggga tcagacaaaa ctcacacatg cccaccgtgc ccagcacctg 2460 aactcctggg aggaccgtca gtcttcctct tccccccaaa acccaaggac accctcatga 2520 20 tctcccggac ccctgaggtc acatgcgtgg tggtggacgt gagccacgaa gaccctgagg 2580 tcaagttcaa ctggtacgtg gacggcgtgg aggtgcataa tgccaagaca aagccgcggg 2640 aggagcagta caacagcacg taccgtgtgg tcagcgtcct caccgtcctg caccaggact 2700 25 ggctgaatgg caaggagtac aagtgcaagg tctccaacaa agccctccca gcccccatcg 2760 agaaaaccat ctccaaagcc aaagggcagc cccgagaacc acaggtgtac accctgcccc 2820

30 catcccgcga tgagctgacc aagaaccagg tcagcctgac ctgcctggtc aaaggcttct 2880 atcccagcga catcgccgtg gagtgggaga gcaatgggca gccggagaac aactacaaga 2940 ccacgcctcc cgtgttggac tccgacggct ccttcttcct ctacagcaag ctcaccgtcg 3000 35 acaagagcag gtggcagcag gggaacgtct tctcatgctc cgtgatgcat gaggctctgc 3060 acaaccacta cacgcagaag agcctctccc tgtctccggg taaaggtggc ggtggctccg 3120 40 gcggaggtgg gtccggtggc ggcggatcag gtgggggtgg atcaggcggt ggaggttccg 3180 gtggcggggg atcagcgcag gtgcagctgc aggagtctgg gggaggcttg gtacagcctg 3240 gggggtccct gagactctcc tgtgcagcct ctggattcat gtttagcagg tatgccatga 3300 330 15

201217526 gctgggtccg ccaggctcca gggaaggggc cagagtgggt ctcaggtatt agtggtagtg gtggtagtac atactacgca gactccgtga agggccggtt caccgtctcc agagacaatt 5 ccaagaacac gctgtatctg caaatgaaca gcctgagagc cgaggacacg gctgtatatt actgcgcccg gggcgccacc tacaccagcc ggagcgacgt gcccgaccag accagcttcg 10 actactgggg ccagggaacc ctggtcaccg tctcctcagg gagtgcatcc gccccaaagc ttgaagaagg tgaattttca gaagcacgcg tatctgaact gactcaggac cctgctgtgt ctgtggcctt gggacagaca gtcaggatca catgccaagg agacagcctc agaaactttt atgcaagctg gtaccagcag aagccaggac aggcccctac tcttgtcatc tatggtttaa gtaaaaggcc ctcagggatc ccagaccgat tctctgcctc cagctcagga aacacagctt 20 ccttgaccat cactggggct caggcggaag atgaggctga ctattactgc ctgctgtact acggcggcgg ccagcagggc gtgttcggcg gcggcaccaa gctgaccgtc ctacgtcagc ccaaggctgc cccctcggtc actctgttcc cgccctcttc tgcggcctga 25

<210> 139 <211> 1236 <212> PRT ▲ 30 <213>人工序列 • <220〉 <223>合成構建鱧:FIX-088氨基酸序列 35 <400> 139

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala Glu Ser Pro Gly Leu lie Thr 1 5 10 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 3900 3960 4010 331 40 201217526

Asp His GIu Asn Ala Asn Lys lie Leu Asn Arg Pro Lys Arg Tyr Asn 35 40 45 5 Ser Gly Lys Leu Glu Glu Phe Val Gin Gly Asn Leu Glu Arg GIu Cys 50 55 60

Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 10 65 70 75 80

Thr Glu Arg Thr Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 85 90 95 15

Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp lie 100 105 110 20

Asn Ser Tyr Glu Cys Trp Cys Pro Phe Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys 115 120 125 25 Glu Leu Asp Val Thr Cys Asn lie Lys Asn Gly Arg Cys GIu Gin Phe 130 135 140

Cys Lys Asn Ser Ala Asp Asn Lys Val Val Cys Ser Cys Thr Glu Gly 30 145 150 155 160

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 165 170 175 35

Pro Cys Gly Arg Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190

Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr Glu Ala GIu 195 200 205 s 332 40 240 201217526

Thr lie Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 210 215 220 5 Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Trp 225 230 235

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 10 245 250 255

Val Asn Glu Lys Trp lie Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 260 265 270 15

Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285 20

His Thr Glu Gin Lys Arg Asn Val lie Arg He lie Pro His His Asn 290 295 300 25 Tyr Asn Ala Ala lie Asn Lys Tyr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Glu 320 305 310 315

Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 30 325 330 335

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn lie Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 340 345 350 35

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365

Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380 333 201217526

Ser Thr Lys Phe Thr lie Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 385 390 395 400 5 GIu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 405 410 415

Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie lie Ser Trp Gly 10 420 425 430

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 435 440 445 15

Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys Glu Lys Thr Lys Leu Thr Asp Lys Thr 450 455 460

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 465 470 475 480 25 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 485 490 495

Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 30 500 505 510

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 515 520 525 35

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 530 535 540

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 545 550 555 560 s 334 40 201217526

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 565 570 575 5 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu .580 585 590

Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 10 595 600 605

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 610 615 620 15

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 625 630 635 640 20

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 645 650 655 25 Arg Tip Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 660 665 670

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys ^30 675 680 685

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 690 695 700 35

Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro 705 710 715

Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 725 730 735 335 720 40 201217526

Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 740 745 750 5 Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp 755 760 765

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 10 770 775 780

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 785 790 795 800

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 805 810 815 20

Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 820 825 830 25 Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys 835 840 845

Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 30 850 855 860 lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 865 870 875 880

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 885 890 895

Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser 900 905 910 s 336 40 201217526

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 915 920 925 5 Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 930 935 940 960

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 10 945 950 955

Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Val Gin Leu Gin Glu Ser Gly Gly Gly 965 970 975 15

Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly 930 985 990 20

Phe Met Phe Ser Arg Tyr Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly 995 1000 1005 25 Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser 1010 1015 1020

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Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg 1040 1045 1050 35

Ala Glu Asp Tlir Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Thr Tyr 1055 1060 1065

Thr Ser Arg Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr Trp 1070 1075 1080 337 201217526

Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala 1085 1090 1095 5 Pro Lys Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu 1100 1105 1110

Leu Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val 10 1115 1120 1125

Arg lie Thr Cys Gin Gly Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser 1130 1135 1140 15

Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr 1145 1150 1155 20

Gly Leu Ser Lys Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Ala 1160 1165 1170 25 Ser Ser Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin 1175 1180 1185

Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly 30 1190 1195 1200

Gly Gin Gin Gly Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu 1205 1210 1215 35

Arg Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser 1220 1225 1230

Ser Ala Ala 1235 s 338 40 201217526 10

20 25

35 <210> 140 <211> 3263 <212> DNA <213〉人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FIX-089的DNA序列 <400〉 140 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta ggatatctac tcagtgctga atgtacaggt ttgtttcctt ttttaaaata cattgagtat gcttgccttt tagatataga aatatctgat gctgtcttct tcactaaatt ttgattacat gatttgacag caatattgaa gagtctaaca gccagcacgc aggttggtaa gtactgtggg aacatcacag attttggctc catgccctaa agagaaattg gctttcagat tatttggatt aaaaacaaag actttcttaa gagatgtaaa attttcatga tgttttcttt tttgctaaaa ctaaagaatt attcttttac atttcagttt ttcttgatca tgaaaacgcc aacaaaattc tgaatcggcc aaagaggtat aattcaggta aattggaaga gtttgttcaa gggaatctag agagagaatg tatggaagaa aagtgtagtt ttgaagaagc acgagaagtt tttgaaaaca ctgaaagaac aactgaattt tggaagcagt atgttgatgg agatcagtgt gagtccaatc catgtttaaa tggcggcagt tgcaaggatg acattaattc ctatgaatgt tggtgtccct ttggatttga aggaaagaac tgtgaattag atgtaacatg taacattaag aatggcagat gcgagcagtt ttgtaaaaat agtgctgata acaaggtggt ttgctcctgt actgagggat atcgacttgc agaaaaccag aagtcctgtg aaccagcagt gccatttcca tgtggaagag tttctgtttc acaaacttct aagctcaccc gtgctgagac tgtttttcct gatgtggact atgtaaattc tactgaagct gaaaccattt tggataacat cactcaaagc acccaatcat ttaatgactt cactcgggtt gttggtggag aagatgccaa accaggtcaa ttcccttggc aggttgtttt gaatggtaaa gttgatgcat tctgtggagg ctctatcgtt aatgaaaaat 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 900 960 1020 339 1080 40 201217526 ggattgtaac tgctgcccac tgtgttgaaa ctggtgttaa aattacagtt gtcgcaggtg 1140 aacataatat tgaggagaca gaacatacag agcaaaagcg aaatgtgatt cgaattattc 1200 5 ctcaccacaa ctacaatgca gctattaata agtacaacca tgacattgcc cttctggaac 1260 tggacgaacc cttagtgcta aacagctacg ttacacctat ttgcattgct gacaaggaat 1320 10 acacgaacat cttcctcaaa tttggatctg gctatgtaag tggctgggga agagtcttcc 1380 acaaagggag atcagcttta gttcttcagt accttagagt tccacttgtt gaccgagcca 1440 catgtcttcg atctacaaag ttcaccatct ataacaacat gttctgtgct ggcttccatg 1500 15 aaggaggtag agattcatgt caaggagata gtgggggacc ccatgttact gaagtggaag 1560 ggaccagttt cttaactgga attattagct ggggtgaaga gtgtgcaatg aaaggcaaat 1620 20 atggaatata taccaaggtg tcccggtatg tcaactggat taaggaaaaa acaaagctca 1680 ctgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag 1740 tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca 1800 25 catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg 1860 acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt 1920 30 accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca 1980 agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca 2040 aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca 2100 35 agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg 2160 agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact 2220 40 ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg 2280 ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga 2340 gcctctccct gtctccgggt aaaggcggtg gcggttcagg tggaggaggg tcaggcggtg 2400 340 201217526 5 10

20 25 gtggatccgg cgggggcgga tccggtggcg gagggtcagg cggtggcgga tcagcctgca 2460 ccgagcggat ggccctgcac aacctgtgcg gtggcggtgg ctccggcgga ggtgggtccg 2520 gtggcggcgg atcaggtggg ggtggatcag gcggtggagg ttccggtggc gggggatccg 2580 acaaaactca cacatgccca ccgtgcccag caccggaact cctgggcgga ccgtcagtct 2640 tcctcttccc cccaaaaccc aaggacaccc tcatgatctc ccggacccct gaggtcacat 2700 gcgtggtggt ggacgtgagc cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg 2760 gcgtggaggt gcataatgcc aagacaaagc cgcgggagga gcagtacaac agcacgtacc 2820 gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgcacc aggactggct gaatggcaag gagtacaagt 2880 gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagccc ccatcgagaa aaccatctcc aaagccaaag 2940 ggcagccccg agaaccacag gtgtacaccc tgcccccatc ccgggatgag ctgaccaaga 3000 accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagcgacatc gccgtggagt 3060 gggagagcaa tgggcagccg gagaacaact acaagaccac gcctcccgtg ttggactccg 3120 acggctcctt cttcctctac agcaagctca ccgtggacaa gagcaggtgg cagcagggga 3180 acgtcttctc atgctccgtg atgcatgagg ctctgcacaa ccactacacg cagaagagcc 3240 30 tctccctgtc tccgggtaaa tga 3263 <210> 141 <211> 987 35 <212〉PRT <213> 人工序列 <220> <223>合成構建體:FIX-089氨基酸序列 40 <400> 141

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala Glu Ser Pro Gly Leu lie Thr 15 10 15 341 201217526 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30

Asp His Glu Asn Ala Asn Lys lie Leu Asn Arg Pro Lys Arg Tyr Asn 35 40 45

Ser Gly Lys Leu Glu Glu Phe Val Gin Gly Asn Leu Glu Arg Glu Cys 50 55 60 15 Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 65 70 75 80

Thr Glu Arg Thr Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 20 85 90 95

Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp He 100 105 110 25

Asn Ser Tyr Glu Cys Trp Cys Pro Phe Gly Phe Glu Gly Lys Asn Cys 115 120 125 30

Glu Leu Asp Val Thr Cys Asn lie Lys Asn Gly Arg Cys Glu Gin Phe 130 135 140 35 Cys Lys Asn Ser Ala Asp Asn Lys Val Val Cys Ser Cys Thr Glu Gly 145 150 155 160

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 40 165 170 175

Pro Cys Gly Arg Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190 s 342 201217526

Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr Glu Ala Glu 195 200 205 5

Thr lie Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 210 215 220 240

Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Trp 225 230 235

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 245 250 255

Val Asn Glu Lys Trp lie Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 20 260 265 270

Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285 25

His Thr Glu Gin Lys Arg Asn Val lie Arg lie lie Pro His His Asn 290 295 300 赢30 320

Tyr Asn Ala Ala lie Asn Lys Tyr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Glu 305 310 315 35 Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 325 330 335

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn lie Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 40 340 345 350

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365 343 201217526

Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380

Ser Thr Lys Phe Thr lie Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 385 390 395 400

Glu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 405 410 415 15 Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie lie Ser Trp Gly 420 425 430

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 20 435 440 445

Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys Glu Lys Thr Lys Leu Thr Asp Lys Thr 450 455 460 25

His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser 465 470 475 480 30

Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg 485 490 495 35 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 500 505 510

Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 40 515 520 525

Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 530 535 540 344 560 201217526

Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 545 550 555 5

Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr 565 570 575 lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu 580 585 590 15 Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys 595 600 605

Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser 20 610 615 620 640

Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp 625 630 635 25

Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser 645 650 655 30

Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 660 665 670 35 Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 675 680 685

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly 40 690 695 700

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Cys 705 710 715 345 720 201217526

Thr Glu Arg Met Ala Leu His Asn Leu Cys Gly Gly Gly Gly Ser Gly 725 730 735

Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 740 745 750 10 .

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro 755 760 765

15 Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Va】Phe Leu Phe Pro 770 775 780

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr 20 785 790 795 800

Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn 805 810 815 25

Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg 820 825 830

30

Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val 835 840 845 35 Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser 850 855 860

Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys 40 865 870 875 880

Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 885 890 895

346 201217526

Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 900 905 910

Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 915 920 925 10

Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe 930 935 940

Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly 945 950 955 960

Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr 20 965 970 975

Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 980 985 25 <210> 142

35 <211> 2588 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:for FIX-090的DNA序列 <400〉 142 60 atgcagcgcg tgaacatgat catggcagaa tcaccaggcc tcatcaccat ctgcctttta ggatatctac tcagtgctga atgtacaggt ttgtttcctt ttttaaaata cattgagtat 120 40 gcttgccttt tagatataga aatatctgat gctgtcttct tcactaaatt ttgattacat 180 gatttgacag caatattgaa gagtctaaca gccagcacgc aggttggtaa gtactgtggg 240 aacatcacag attttggctc catgccctaa agagaaattg gctttcagat tatttggatt 300 347 201217526 aaaaacaaag actttcttaa gagatgtaaa attttcatga tgttttcttt tttgctaaaa 360 ctaaagaatt attcttttac atttcagttt ttcttgatca tgaaaacgcc aacaaaattc 420 5 •tgaatcggcc aaagaggtat aattcaggta aattggaaga gtttgttcaa gggaatctag 480 agagagaatg tatggaagaa aagtgtagtt ttgaagaagc acgagaagtt tttgaaaaca 540 10 ctgaaagaac aactgaattt tggaagcagt atgttgatgg agatcagtgt gagtccaatc 600 catgtttaaa tggcggcagt tgcaaggatg acattaattc ctatgaatgt tggtgtccct 660 ttggatttga aggaaagaac tgtgaattag atgtaacatg taacattaag aatggcagat 720 15

gcgagcagtt ttgtaaaaat agtgctgata acaaggtggt ttgctcctgt actgagggat 780 atcgacttgc agaaaaccag aagtcctgtg aaccagcagt gccatttcca tgtggaagag 840 20 tttctgtttc acaaacttct aagctcaccc gtgctgagac tgtttttcct gatgtggact 900 atgtaaattc tactgaagct gaaaccattt tggataacat cactcaaagc acccaatcat 960 ttaatgactt cactcgggtt gttggtggag aagatgccaa accaggtcaa ttcccttggc 1020 25 aggttgtttt gaatggtaaa gttgatgcat tctgtggagg ctctatcgtt aatgaaaaat 1080 ggattgtaac tgctgcccac tgtgttgaaa ctggtgttaa aattacagtt gtcgcaggtg 1140

30 aacataatat tgaggagaca gaacatacag agcaaaagcg aaatgtgatt cgaattattc 1200 ctcaccacaa ctacaatgca gctattaata agtacaacca tgacattgcc cttctggaac 1260 tggacgaacc cttagtgcta aacagctacg ttacacctat ttgcattgct gacaaggaat 1320 35 acacgaacat cttcctcaaa tttggatctg gctatgtaag tggctgggga agagtcttcc 1380 acaaagggag atcagcttta gttcttcagt accttagagt tccacttgtt gaccgagcca 1440 40 catgtcttcg atctacaaag ttcaccatct ataacaacat gttctgtgct ggcttccatg 1500 aaggaggtag agattcatgt caaggagata gtgggggacc ccatgttact gaagtggaag 1560 ggaccagttt cttaactgga attattagct ggggtgaaga gtgtgcaatg aaaggcaaat 1620

348 201217526 10

20 25

atggaatata taccaaggtg tcccggtatg tcaactggat taaggaaaaa acaaagctca 1680 ctggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat 1740 caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat cagcgcaggt gcagctgcag gagtctgggg 1800 gaggcttggt acagcctggg gggtccctga gactctcctg tgcagcctct ggattcatgt 1860 ttagcaggta tgccatgagc tgggtccgcc aggctccagg gaaggggcca gagtgggtct 1920 caggtattag tggtagtggt ggtagtacat actacgcaga ctccgtgaag ggccggttca 1980 ccgtctccag agacaattcc aagaacacgc tgtatctgca aatgaacagc ctgagagccg 2040 aggacacggc tgtatattac tgcgcccggg gcgccaccta caccagccgg agcgacgtgc 2100 ccgaccagac cagcttcgac tactggggcc agggaaccct ggtcaccgtc tcctcaggga 2160 gtgcatccgc cccaaagctt gaagaaggtg aattttcaga agcacgcgta tctgaactga 2220 ctcaggaccc tgctgtgtct gtggccttgg gacagacagt caggatcaca tgccaaggag 2280 acagcctcag aaacttttat gcaagctggt accagcagaa gccaggacag gcccctactc 2340 ttgtcatcta tggtttaagt aaaaggccct cagggatccc agaccgattc tctgcctcca 2400 gctcaggaaa cacagcttcc ttgaccatca ctggggctca ggcggaagat gaggctgact 2460 attactgcct gctgtactac ggcggcggcc agcagggcgt gttcggcggc ggcaccaagc 2520 tgaccgtcct acgtcagccc aaggctgccc cctcggtcac tctgttcccg ccctcttctg 2580 cggcctga 2588 35 <210> 143 <211> 762 <212〉PRT 40 <213> 人工序列 <220〉<223>合成構建體:FIX-90氨基酸序列 349 201217526 <400> 143

Met Gin Arg Val Asn Met lie Met Ala GIu Ser Pro Gly Leu lie Thr 15 10 15 lie Cys Leu Leu Gly Tyr Leu Leu Ser Ala Glu Cys Thr Val Phe Leu 20 25 30 10

Met Glu Glu Lys Cys Ser Phe Glu Glu Ala Arg Glu Val Phe Glu Asn 20 65 70 75 80

Thr Glu Arg Thr Thr Glu Phe Trp Lys Gin Tyr Val Asp Gly Asp Gin 85 90 95 25

Cys Glu Ser Asn Pro Cys Leu Asn Gly Gly Ser Cys Lys Asp Asp lie 100 105 110

30

Tyr Arg Leu Ala Glu Asn Gin Lys Ser Cys Glu Pro Ala Val Pro Phe 165 170 175 s 350 201217526

Pro Cys Gly Ai*g Val Ser Val Ser Gin Thr Ser Lys Leu Thr Arg Ala 180 185 190 5

Glu Thr Val Phe Pro Asp Val Asp Tyr Val Asn Ser Thr Glu Ala Glu 195 200 205 10

Thr lie Leu Asp Asn lie Thr Gin Ser Thr Gin Ser Phe Asn Asp Phe 210 215 220

Thr Arg Val Val Gly Gly Glu Asp Ala Lys Pro Gly Gin Phe Pro Trp 225 230 235 240

Gin Val Val Leu Asn Gly Lys Val Asp Ala Phe Cys Gly Gly Ser lie 20 245 250 255

Val Asn Glu Lys Trp He Val Thr Ala Ala His Cys Val Glu Thr Gly 260 265 270 25

Val Lys lie Thr Val Val Ala Gly Glu His Asn lie Glu Glu Thr Glu 275 280 285 • 30

Leu Asp Glu Pro Leu Val Leu Asn Ser Tyr Val Thr Pro lie Cys lie 40 325 330 335

Ala Asp Lys Glu Tyr Thr Asn lie Phe Leu Lys Phe Gly Ser Gly Tyr 340 345 350 351 201217526

Val Ser Gly Trp Gly Arg Val Phe His Lys Gly Arg Ser Ala Leu Val 355 360 365

Leu Gin Tyr Leu Arg Val Pro Leu Val Asp Arg Ala Thr Cys Leu Arg 370 375 380

Ser Thr Lys Phe Thr lie Tyr Asn Asn Met Phe Cys Ala Gly Phe His 385 390 395 400 15 GIu Gly Gly Arg Asp Ser Cys Gin Gly Asp Ser Gly Gly Pro His Val 405 410 415

Thr Glu Val Glu Gly Thr Ser Phe Leu Thr Gly lie lie Ser Trp Gly 20 420 425 430

Glu Glu Cys Ala Met Lys Gly Lys Tyr Gly lie Tyr Thr Lys Val Ser 435 440 445 25

Arg Tyr Val Asn Trp lie Lys Glu Lys Thr Lys Leu Thr Gly Gly Gly 450 455 460 30

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 465 470 475 480 35 Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Ala Gin Val Gin Leu 485 490 495

Gin Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu 40 500 505 510

Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe Ser Arg Tyr Ala Met Ser Trp 515 520 525 352 201217526

Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp Val Ser Gly lie Ser 530 535 540 560

Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe 545 550 555

Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn 565 570 575 15 Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala 580 585 590

Thr Tyr Thr Ser Arg Ser Asp Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr 20 595 600 605

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala 610 615 620 25 640

Pro Lys Leu Glu Glu Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu Leu 625 630 635

Thr Gin Asp Pro Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg lie 645 650 655 35 Thr Cys Gin Gl)^ Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin 660 665 670

Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu Ser Lys 40 675 680 685

Arg Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser Ser Gly Asn 690 695 700 353 201217526

Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala Glu Asp Glu Ala Asp 705 710 715 720

Tyr Tyr Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin Gin Gly Val Phe Gly 725 730 735 10

Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gin Pro Lys Ala Ala Pro Ser 740 745 750

15 Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Ala Ala 755 760 <210> 144 20 <211> 3744 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 25 <223> 合成構建體:FVII-088的DNA序列 <4〇〇> 144 atggtctccc aggccctcag gctcctctgc cttctgcttg ggcttcaggg ctgcctggct 60

30 gcagtcttcg taacccagga ggaagcccac ggcgtcctgc accggcgccg gcgcgccaac 120 gcgttcctgg aggagctgcg gccgggctcc ctggagaggg agtgcaagga ggagcagtgc 180 tccttcgagg aggcccggga gatcttcaag gacgcggaga ggacgaagct gttctggatt 240 35 tcttacagtg atggggacca gtgtgcctca agtccatgcc agaatggggg ctcctgcaag 300 gaccagctcc agtcctatat ctgcttctgc ctccctgcct tcgagggccg gaactgtgag 360 40 acgcacaagg atgaccagct gatctgtgtg aacgagaacg gcggctgtga gcagtactgc 420 agtgaccaca cgggcaccaa gcgctcctgt cggtgccacg aggggtactc tctgctggca 480 gacggggtgt cctgcacacc cacagttgaa tatccatgtg gaaaaatacc tattctagaa 540

S 354 600201217526 5 10

20 25

35 aaaagaaatg ccagcaaacc ccaaggccga attgtggggg gcaaggtgtg ccccaaaggg gagtgtccat ggcaggtcct gttgttggtg aatggagctc agttgtgtgg ggggaccctg atcaacacca tctgggtggt ctccgcggcc cactgtttcg acaaaatcaa gaactggagg aacctgatcg cggtgctggg cgagcacgac ctcagcgagc acgacgggga tgagcagagc cggcgggtgg cgcaggtcat catccccagc acgtacgtcc cgggcaccac caaccacgac atcgcgctgc tccgcctgca ccagcccgtg gtcctcactg accatgtggt gcccctctgc ctgcccgaac ggacgttctc tgagaggacg ctggccttcg tgcgcttctc attggtcagc ggctggggcc agctgctgga ccgtggcgcc acggccctgg agctcatggt cctcaacgtg ccccggctga tgacccagga ctgcctgcag cagtcacgga aggtgggaga ctccccaaat atcacggagt acatgttctg tgccggctac tcggatggca gcaaggactc ctgcaagggg gacagtggag gcccacatgc cacccactac cggggcacgt ggtacctgac gggcatcgtc agctggggcc agggctgcgc aaccgtgggc cactttgggg tgtacaccag ggtctcccag tacatcgagt ggctgcaaaa gctcatgcgc tcagagccac gcccaggagt cctcctgcga gccccatttc ccggtggcgg tggctccggc ggaggtgggt ccggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt ggcgggggat ccgacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagctccgga actcctggga ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgggat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc 660 720 780 840 900 960 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 355 40 201217526 tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag 1920 ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc 1980 5 tacagcaagc tcaccgtcga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc 2040 gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt 2100 10 aaacggcgcc gccggagcgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt 2160 tccggtggcg ggggatccgg cggtggaggt tccggtgggg gtggatcaag gaagaggagg 2220 aagagggaca tcgtgatgac ccaggccgcc cccagcgtgc ccgtgacccc cggcgagagc 2280 15

gtgagcatca gctgccggag cagccggagc ctgctgcaca gcaacggcaa cacctacctg 2340 tgctggttcc tgcagcggcc cggccagagc ccccagctgc tgatctaccg gatgagcaac 2400 20 ctggccagcg gcgtgcccga ccggttcagc ggcagcggca gcggcaccgc cttcaccctg 2460 cggatcagcc gggtggaggc cgaggacgtg ggcgtgtact actgcatgca gcacctggag 2520 taccccttca ccttcggcag cggcaccaag ctggagatca agcggggcgg cggcggcagc 2580 25 ggcggcggcg gcagcggcgg cggcggcagc caggtgcagc tgcagcagag cggcgccgag 2640 ctggtgcggc ccggcaccag cgtgaagatc agctgcaagg ccagcggcta caccttcacc 2700

30 aactactggc tgggctgggt gaagcagcgg cccggccacg gcctggagtg gatcggcgac 2760 atctaccccg gcggcggcta caacaagtac aacgagaact tcaagggcaa ggccaccctg 2820 accgccgaca ccagcagcag caccgcctac atgcagctga gcagcctgac cagcgaggac 2880 35 agcgccgtgt acttctgcgc ccgggagtac ggcaactacg actacgccat ggacagctgg 2940 ggccagggca ccagcgtgac cgtgagcagc ggtggcggtg gctccggcgg aggtgggtcc 3000 40 ggtggcggcg gatcaggtgg gggtggatca ggcggtggag gttccggtgg cgggggatca 3060 gacaaaactc acacatgccc accgtgccca gcaccggaac tcctgggcgg accgtcagtc 3120 ttcctcttcc ccccaaaacc caaggacacc ctcatgatct cccggacccc tgaggtcaca 3180 356 201217526 5

20 tgcgtggtgg tggacgtgag ccacgaagac cctgaggtca agttcaactg gtacgtggac ggcgtggagg tgcataatgc caagacaaag ccgcgggagg agcagtacaa cagcacgtac cgtgtggtca gcgtcctcac cgtcctgcac caggactggc tgaatggcaa ggagtacaag tgcaaggtct ccaacaaagc cctcccagcc cccatcgaga aaaccatctc caaagccaaa gggcagcccc gagaaccaca ggtgtacacc ctgcccccat cccgggatga gctgaccaag aaccaggtca gcctgacctg cctggtcaaa ggcttctatc ccagcgacat cgccgtggag tgggagagca atgggcagcc ggagaacaac tacaagacca cgcctcccgt gttggactcc gacggctcct tcttcctcta cagcaagctc accgtggaca agagcaggtg gcagcagggg aacgtcttct catgctccgt gatgcatgag gctctgcaca accactacac gcagaagagc ctctccctgt ctccgggtaa atga 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3744 <210> 145 <211> 1247 25 <212> PRT <213> 人工序列

<220〉 <223>合成構建體:FVII-088氨基酸序列 <400> 145

Met Val Ser Gin Ala Leu Arg Leu Leu Cys Leu Leu Leu Gly Leu Gin 15 10 15 35

Gly Cys Leu Ala Ala Val Phe Val Thr Gin Glu Glu Ala His Gly Val 20 25 30

Leu His Arg Arg Arg Arg Ala Asn Ala Phe Leu Glu Glu Leu Arg Pro 35 40 45 357 40 201217526

Gly Ser Leu Glu Arg Glu Cys Lys GIu Glu Gin Cys Ser Phe Glu Glu 50 55 60 5 Ala Arg Glu lie Phe Lys Asp Ala Glu Arg Thr Lys Leu Phe Trp lie 65 70 75 80

Ser Tyr Ser Asp Gly Asp Gin Cys Ala Ser Ser Pro Cys Gin Asn Gly 10 85 90 95

Gly Ser Cys Lys Asp Gin Leu Gin Ser Tyr lie Cys Phe Cys Leu Pro 100 105 110 15

Ala Phe Glu Gly Arg Asn Cys Glu Thr His Lys Asp Asp Gin Leu lie 115 120 125 20

Cys Val Asn Glu Asn Gly Gly Cys Glu Gin Tyr Cys Ser Asp His Thr 130 135 140 25 Gly Thr Lys Arg Ser Cys Arg Cys His Glu Gly Tyr Ser Leu Leu Ala 145 150 155 160

Asp Gly Val Ser Cys Thr Pro Thr Val Glu Tyr Pro Cys Gly Lys lie 30 165 170 175

Pro lie Leu Glu Lys Arg Asn Ala Ser Lys Pro Gin Gly Arg lie Val 180 185 190 35

Gly Gly Lys Val Cys Pro Lys Gly Glu Cys Pro Trp Gin Val Leu Leu 195 200 205

Leu Val Asn Gly Ala Gin Leu Cys Gly Gly Thr Leu lie Asn Thr lie 210 215 220

358 240 201217526

Trp Val Val Ser Ala Ala His Cys Phe Asp Lys He Lys Asn Trp Arg 225 230 235 5 Asn Leu lie Ala Val Leu Gly Glu His Asp Leu Ser Glu His Asp Gly 245 250 255

Asp Glu Gin Ser Arg Arg Val Ala Gin Val lie lie Pro Ser Thr Tyr 10 260 265 270

Val Pro Gly Thi* Thr Asn His Asp lie Ala Leu Leu Arg Leu His Gin 275 280 285 15

Pro Val Val Leu Thr Asp His Val Val Pro Leu Cys Leu Pro Glu Arg 290 295 300 20 320

Thr Phe Ser Glu Arg Thr Leu Ala Phe Val Arg Phe Ser Leu Val Ser 305 310 315 25 Gly Trp Gly Gin Leu Leu Asp Arg Gly Ala Thr Ala Leu Glu Leu Met 325 330 335

Val Leu Asn Val Pro Arg Leu Met Thr Gin Asp Cys Leu Gin Gin Ser ^30 340 345 350

Arg Lys Val Gly Asp Ser Pro Asn lie Thr Glu Tyr Met Phe Cys Ala 355 360 365 35

Gly Tyr Ser Asp Gly Ser Lys Asp Ser Cys Lys Gly Asp Ser Gly Gly 370 375 380

Pro His Ala Thr His Tyr Arg Gly Thr Trp Tyr Leu Thr Gly lie Val 385 390 395 359 400 40 201217526

Ser Trp Gly Gin Gly Cys Ala Thr Val Gly His Phe Gly Val Tyr Thr 405 410 415 5 Arg Val Ser Gin Tyr lie Glu Trp Leu Gin Lys Leu Met Arg Ser Glu 420 425 430

Pro Arg Pro Gly Val Leu Leu Arg Ala Pro Phe Pro Gly Gly Gly Gly 10 435 440 445

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 450 455 460 15

Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys 465 470 475 480 20

Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu 485 490 495 25 Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu 500 505 510

Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 30 515 520 525

Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys 530 535 540 35

Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu 545 550 555 560

Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys 565 570 575 360 201217526

Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys 580 585 590 5 Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser 595 600 605

Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys 10 610 615 620 640

Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 625 630 635 15

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 645 650 655 20

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin 660 665 670 25 Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn 675 680 685

His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys Arg Arg Arg ^30 690 695 700 720

Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 705 710 715 . 35

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 725 730 735

Arg Lys Arg Arg Lys Arg Asp lie Val Met Thr Gin Ala Ala Pro Ser 740 745 750 361 40 201217526

Val Pro Val Thr Pro Gly Glu Ser Val Ser lie Ser Cys Arg Ser Ser 755 760 765 5 Arg Ser Leu Leu His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Cys Tip Phe Leu 770 775 780

Gin Arg Pro Gly Gin Ser Pro Gin Leu Leu lie Tyr Arg Met Ser Asn 10 785 790 795 800

Leu Ala Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr 805 810 815 15

Ala Phe Thr Leu Arg lie Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val 820 825 830 20

Tyr Tyr Cys Met Gin His Leu Glu Tyr Pro Phe Thr Phe Gly Ser Gly 835 840 845 25 Thr Lys Leu Glu lie Lys Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 850 855 860

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gin Val Gin Leu Gin Gin Ser Gly Ala Glu 30 865 870 875 880 895

Leu Val Arg Pro Gly Thr Ser Val Lys lie Ser Cys Lys Ala Ser Gly 885 890 35

Tyr Thr Phe Thr Asn Tyr Trp Leu Gly Trp Val Lys Gin Arg Pro Gly 900 905 910

His Gly Leu Glu Trp lie Gly Asp lie Tyr Pro Gly Gly Gly Tyr Asn 915 920 925

362 40 960 201217526

Lys Tyr Asn Glu Asn Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Thr 930 935 940 5 Ser Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gin Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp 945 950 955

Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Arg Glu Tyr Gly Asn Tyr Asp Tyr Ala 10 965 970 975

Met Asp Ser Trp Gly Gin Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Gly Gly 980 985 990 15

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly 995 1000 1005 20

Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr 1010 1015 1020 25 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro 1025 1030 1035

Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie ,30 1040 1045 1050

Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His 1055 1060 1065 35

Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 1070 1075 1080

Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser 1085 1090 1095 363 201217526

Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp 1100 1105 1110 5 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu 1115 1120 1125

Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr He Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro 10 1130 1135 1140

Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu 1145 1150 1155 15

Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 1160 1165 1170 20

Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu 1175 1180 1185 25 Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 1190 1195 1200

Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Tip Gin 30 1205 1210 1215

Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 1220 1225 1230 35

Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1235 1240 1245 40 <210> 146 <211> 5796 <212> DNA <213> 人工序列 364 201217526 5

20 25 • 30 35 <220> <223> 合成構建體:FVIII-041的DNA序列 <400> 146 atgcaaatag agclctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc 60 accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc 120 ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac 180 acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc 240 gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat 300 gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt 360 ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg 420 gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg 480 aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat 540 gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa 600 gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta 660 tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat 720 gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct 780 ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc 840 accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 900 cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960 gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020 gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080 gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140 gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200 365 40 201217526 tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 5 aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 10 ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 15 actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 20 agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 25 tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 30 atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 35 agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc ttctctcaaa acccaccagt cttgaaacgc catcaacggg aaataactcg tactactctt 40 cagtcagatc aagaggaaat tgactatgat gataccatat cagttgaaat gaagaaggaa gattttgaca tttatgatga ggatgaaaat cagagccccc gcagctttca aaagaaaaca cgacactatt ttattgctgc agtggagagg ctctgggatt atgggatgag tagctcccca 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 366 201217526 5 10

20 25

35 catgttctaa gaaacagggc tcagagtggc agtgtccctc agttcaagaa agttgttttc caggaattta ctgatggctc ctttactcag cccttatacc gtggagaact aaatgaacat ttgggactcc tggggccata tataagagca gaagttgaag ataatatcat ggtaactttc agaaatcagg cctctcgtcc ctattccttc tattctagcc ttatttctta tgaggaagat cagaggcaag gagcagaacc tagaaaaaac tttgtcaagc ctaatgaaac caaaacttac ttttggaaag tgcaacatca tatggcaccc actaaagatg agtttgactg caaagcctgg gcttatttct ctgatgttga cctggaaaaa gatgtgcact caggcctgat tggacccctt ctggtctgcc acactaacac actgaaccct gctcatggga gacaagtgac agtacaggaa tttgctctgt ttttcaccat ctttgatgag accaaaagct ggtacttcac tgaaaatatg gaaagaaact gcagggctcc ctgcaatatc cagatggaag atcccacttt taaagagaat tatcgcttcc atgcaatcaa tggctacata atggatacac tacctggctt agtaatggct caggatcaaa ggattcgatg gtatctgctc agcatgggca gcaatgaaaa catccattct attcatttca gtggacatgt gttcactgta cgaaaaaaag aggagtataa aatggcactg tacaatctct atccaggtgt ttttgagaca gtggaaatgt taccatccaa agctggaatt tggcgggtgg aatgccttat tggcgagcat ctacatgctg ggatgagcac actttttctg gtgtacagca ataagtgtca gactcccctg ggaatggctt ctggacacat tagagatttt cagattacag cttcaggaca atatggacag tgggccccaa agctggccag acttcattat tccggatcaa tcaatgcctg gagcaccaag gagccctttt cttggatcaa ggtggatctg ttggcaccaa tgattattca cggcatcaag acccagggtg cccgtcagaa gttctccagc ctctacatct ctcagtttat catcatgtat agtcttgatg ggaagaagtg gcagacttat cgaggaaatt ccactggaac cttaatggtc ttctttggca atgtggattc atctgggata aaacacaata tttttaaccc tccaattatt gctcgataca tccgtttgca cccaactcat 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 367 40 201217526 tatagcattc gcagcactct tcgcatggag ttgatgggct gtgatttaaa tagttgcagc 3900 atgccattgg gaatggagag taaagcaata tcagatgcac agattactgc ttcatcctac 3960 5 tttaccaata tgtttgccac ctggtctcct tcaaaagctc gacttcacct ccaagggagg 4020 agtaatgcct ggagacctca ggtgaataat ccaaaagagt ggctgcaagt ggacttccag 4080 10 aagacaatga aagtcacagg agtaactact cagggagtaa aatctctgct taccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctcat ctccagcagt caagatggcc atcagtggac tctctttttt 4200 cagaatggca aagtaaaggt ttttcaggga aatcaagact ccttcacacc tgtggtgaac 4260 15 tctctagacc caccgttact gactcgctac cttcgaattc acccccagag ttgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggttctgggc tgcgaggcac aggacctcta cgacaaaact 4380 20 cacacatgcc caccgtgccc agctccagaa ctcctgggcg gaccgtcagt cttcctcttc 4440 cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg 4500 gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 4560 25 gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc 4620 agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc 4680 30 tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 4740 cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgggatg agctgaccaa gaaccaggtc 4800 agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 4860 35 aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc 4920 ttcttcctct acagcaagct caccgtggac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc 4980 40 tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg 5040 tctccgggta aaggtggcgg cggatcaggt gggggtggat caggcggtgg aggttccggt 5100 ggcgggggat cagacaaaac tcacacatgc ccaccgtgcc cagcacctga actcctggga 5160

368 201217526 10

20 ggaccgtcag tcttcctctt ccccccaaaa cccaaggaca ccctcatgat ctcccggacc cctgaggtca catgcgtggt ggtggacgtg agccacgaag accctgaggt caagttcaac tggtacgtgg acggcgtgga ggtgcataat gccaagacaa agccgcggga ggagcagtac aacagcacgt accgtgtggt cagcgtcctc accgtcctgc accaggactg gctgaatggc aaggagtaca agtgcaaggt ctccaacaaa gccctcccag cccccatcga gaaaaccatc tccaaagcca aagggcagcc ccgagaacca caggtgtaca ccctgccccc atcccgcgat gagctgacca agaaccaggt cagcctgacc tgcctggtca aaggcttcta tcccagcgac atcgccgtgg agtgggagag caatgggcag ccggagaaca actacaagac cacgcctccc gtgttggact ccgacggctc cttcttcctc tacagcaagc tcaccgtgga caagagcagg tggcagcagg ggaacgtctt ctcatgctcc gtgatgcatg aggctctgca caaccactac acgcagaaga gcctctccct gtctccgggt aaatga 5220 5280 5340 5400 5460 5520 5580 5640 5700 5760 5796 25 <210> 147 <211> 1931 <212> PRT <213> 人工序列 •30 <220> <223>合成構建體:FVIII-041氨基酸序列 <400〉 147 35 Met Gin lie Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 15 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser 40 20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg 35 40 45 369 201217526

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 50 55 60

Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lie 65 70 75 80 10

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lie Gin 85 90 95 15 Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lie Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser

100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 20 115 120 125

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gin Thr Ser Gin Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140 25

Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gin Val Leu 145 150 155 160

30

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser 165 170 175 35 Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lie 180 185 190

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr 40 195 200 205

Gin Thr Leu His Lys Phe lie Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220 370 240 201217526

Lys Ser Trp His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gin Asp Arg Asp 225 230 235 5

Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255 10

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu lie Gly Cys His Arg Lys Ser Val 260 265 270 15 Tyr Trp His Val lie Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lie ^ 275 280 285

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gin Ala Ser 20 290 295 300 320

Leu Glu lie Ser Pro lie Thr Phe Leu Thr Ala Gin Thr Leu Leu Met 305 310 315 25

Asp Leu Gly Gin Phe Leu Leu Phe Cys His lie Ser Ser His Gin His 325 330 335 • 30

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro 340 345 350 35 Gin Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 355 360 365

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser 40 370 375 380

Pro Ser Phe lie Gin lie Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 385 390 395 371 400 415 201217526

Trp Val His Tyr He Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410

Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gin Tyr Leu Asn 420 425 430 10

Asn Gly Pro Gin Arg lie Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 435 440 445 15 Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala He Gin His Glu 450 455 460

Ser Gly lie Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 20 465 470 475 480 495

Leu lie lie Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn lie Tyr Pro 485 490 25

His Gly lie Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys 500 505 510 30

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lie Leu Pro Gly Glu lie Phe 515 520 525 35 Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 530 535 540

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 40 545 550 555 560

Asp Leu Ala Ser Gly Leu He Gly Pro Leu Leu lie Cys Tyr Lys Glu 565 570 575 372 201217526

Ser Val Asp Gin Arg Gly Asn Gin lie Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 580 585 590 lie Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Gk 595 600 605

Asn lie Gin Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gin Leu Glu Asp 610 615 620 15 Pro Glu Phe Gin Ala Ser Asn He Met His Ser lie Asn Gly Tyr Val 640 625 630 635

Phe Asp Ser Leu Gin Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 20 645 650 655

Tyr lie Leu Ser lie Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670 25

Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr 675 680 685 ,30

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 690 695 700 720 35 Gly Leu Trp lie Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 705 710 715

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 40 725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp lie Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750 373 201217526

Asn Asn Ala lie Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gin Asn Pro Pro Val Leu 755 760 765

Lys Arg His Gin Arg Glu lie Thr Arg Thr Thr Leu Gin Ser Asp Gin 770 775 780 10

Glu Glu lie Asp Tyr Asp Asp Thr lie Ser Val Glu Met Lys Lys Glu 785 790 795 800 15 Asp Phe Asp He Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gin Ser Pro Arg Ser Phe 805 810 815

Gin Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe lie Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp 20 820 825 830

Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Va】Leu Arg Asn Arg Ala G】n 835 840 845 25

Ser Gly Ser Val Pro Gin Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 850 855 860

Asp Gly Ser Phe Thr Gin Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His 865 870 875 880 35 Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr lie Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn lie 885 890 895

Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser 40 900 905 910

Ser Leu lie Ser Tyr Glu Glu Asp Gin Arg Gin Gly Ala Glu Pro Arg 915 920 925 374 201217526

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val 930 935 940 5 960

Gin His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp 945 950 955 10

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu 965 970 975 15 lie Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His 9 980 985 990

Gly Arg Gin Val Thr Val Gin Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lie Phe 20 995 1000 1005

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn 1010 1015 1020 25

Cys Arg Ala Pro Cys Asn lie Gin Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys 1025 1030 1035

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala lie Asn Gly Tyr lie Met Asp Thr 1040 1045 1050 35 Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gin Asp Gin Arg lie Arg Trp Tyr 1055 1060 1065

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn He His Ser lie His Phe 40 1070 1075 1080

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met 1085 1090 1095 375 201217526

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met 1100 1105 1110 5

Leu Pro Ser Lys Ala Gly lie Trp Arg Val Glu Cys Leu lie Gly 1115 1120 1125 10

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser 1130 1135 1140 15 Asn Lys Cys Gin Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His lie Arg 1145 1150 1155

Asp Phe Gin lie Thr Ala Ser Gly Gin Tyr Gly Gin Trp Ala Pro 20 1160 1165 1170

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser lie Asn Ala Trp Ser 1175 1180 1185 25

Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp lie Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro 1190 1195 1200 30

Met lie lie His Gly lie Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe 1205 1210 1215 35 Ser Ser Leu Tyr lie Ser Gin Phe lie lie Met Tyr Ser Leu Asp 1220 1225 1230

Gly Lys Lys Trp Gin Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu 40 1235 1240 1245

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly lie Lys His Asn 1250 1255 1260 376 201217526 lie Phe Asn Pro Pro lie lie Ala Arg Tyr lie Arg Leu His Pro 1265 1270 1275 5

Thr His Tyr Ser lie Arg Ser Thr Leu Arg Met Glu Leu Met Gly 1280 1285 1290 10

CysAsp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met GluSerLys 1295 1300 1305 15 Ala lie Ser Asp Ala Gin lie Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn φ 1310 1315 1320

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gin 20 1325 1330 1335

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gin Val Asn Asn Pro Lys Glu 1340 1345 1350 25

Trp Leu Gin Val Asp Phe Gin Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val 1355 1360 1365 • 30

Thr Thr Gin Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys 1370 1375 1380 35 Glu Phe Leu He Ser Ser Ser Gin Asp Gly His Gin Trp Thr Leu 1385 1390 1395

Phe Phe Gin Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gin Gly Asn Gin Asp 40 1400 1405 1410

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr 1415 1420 1425 377 201217526

Arg Tyr Leu Arg lie His Pro Gin Ser Trp Val His Gin lie Ala 1430 1435 1440

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gin Asp Leu Tyr Asp 1445 1450 1455

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 1460 1465 1470 15 Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 1475 1480 1485

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 20 1490 1495 1500

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 1505 1510 1515 25

Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 1520 1525 1530

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin 1535 1540 1545 35 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 1550 1555 1560

Ala Leu Pro Ala Pro He Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 40 1565 1570 1575

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 1580 1585 1590 s 378 201217526

Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 1595 1600 1605 5

PheTyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 1610 1615 1620 10

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 1625 1630 1635 15 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 9 1640 1645 1650

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 20 1655 1660 1665

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1670 1675 1680 25

Lys Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1685 1690 1695 •30

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 1700 1705 1710 35 Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro 1715 1720 1725

Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val 40 1730 1735 1740

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys 1745 1750 1755 379 201217526

PheAsn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn AlaLysThr 1760 1765 1770 5

Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser 1775 1780 1785 10

Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 1790 1795 1800 15 Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys 1805 1810 1815 φ

Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr 20 1820 1825 1830

Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser 1835 1840 1845 25

Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val 1850 1855 1860

30

Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr 1865 1870 1875 35 Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 1880 1885 1890

Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser 40 1895 1900 1905

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys 1910 1915 1920 s 380 201217526 5

20 25

30 35

Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 1925 1930 <210> 148 <211> 6762 <212> DNA <213> 人工序列 <220〉 <223>合成構建體:FVIII-108的DNA序列 <4〇〇> 148 atgcaaatag agctctccac ctgcttcttt ctgtgccttt tgcgattctg ctttagtgcc accagaagat actacctggg tgcagtggaa ctgtcatggg actatatgca aagtgatctc ggtgagctgc ctgtggacgc aagatttcct cctagagtgc caaaatcttt tccattcaac acctcagtcg tgtacaaaaa gactctgttt gtagaattca cggatcacct tttcaacatc gctaagccaa ggccaccctg gatgggtctg ctaggtccta ccatccaggc tgaggtttat gatacagtgg tcattacact taagaacatg gcttcccatc ctgtcagtct tcatgctgtt ggtgtatcct actggaaagc ttctgaggga gctgaatatg atgatcagac cagtcaaagg gagaaagaag atgataaagt cttccctggt ggaagccata catatgtctg gcaggtcctg aaagagaatg gtccaatggc ctctgaccca ctgtgcctta cctactcata tctttctcat gtggacctgg taaaagactt gaattcaggc ctcattggag ccctactagt atgtagagaa gggagtctgg ccaaggaaaa gacacagacc ttgcacaaat ttatactact ttttgctgta tttgatgaag ggaaaagttg gcactcagaa acaaagaact ccttgatgca ggatagggat gctgcatctg ctcgggcctg gcctaaaatg cacacagtca atggttatgt aaacaggtct ctgccaggtc tgattggatg ccacaggaaa tcagtctatt ggcatgtgat tggaatgggc accactcctg aagtgcactc aatattcctc gaaggtcaca catttcttgt gaggaaccat 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 381 900 40 201217526 cgccaggcgt ccttggaaat ctcgccaata actttcctta ctgctcaaac actcttgatg 960 gaccttggac agtttctact gttttgtcat atctcttccc accaacatga tggcatggaa 1020 5 gcttatgtca aagtagacag ctgtccagag gaaccccaac tacgaatgaa aaataatgaa 1080 gaagcggaag actatgatga tgatcttact gattctgaaa tggatgtggt caggtttgat 1140 10 gatgacaact ctccttcctt tatccaaatt cgctcagttg ccaagaagca tcctaaaact 1200 tgggtacatt acattgctgc tgaagaggag gactgggact atgctccctt agtcctcgcc 1260 cccgatgaca gaagttataa aagtcaatat ttgaacaatg gccctcagcg gattggtagg 1320 15 aagtacaaaa aagtccgatt tatggcatac acagatgaaa cctttaagac tcgtgaagct 1380 attcagcatg aatcaggaat cttgggacct ttactttatg gggaagttgg agacacactg 1440 20 ttgattatat ttaagaatca agcaagcaga ccatataaca tctaccctca cggaatcact 1500 gatgtccgtc ctttgtattc aaggagatta ccaaaaggtg taaaacattt gaaggatttt 1560 ccaattctgc caggagaaat attcaaatat aaatggacag tgactgtaga agatgggcca 1620 25 actaaatcag atcctcggtg cctgacccgc tattactcta gtttcgttaa tatggagaga 1680 gatctagctt caggactcat tggccctctc ctcatctgct acaaagaatc tgtagatcaa 1740 30 agaggaaacc agataatgtc agacaagagg aatgtcatcc tgttttctgt atttgatgag 1800 aaccgaagct ggtacctcac agagaatata caacgctttc tccccaatcc agctggagtg 1860 cagcttgagg atccagagtt ccaagcctcc aacatcatgc acagcatcaa tggctatgtt 1920 35 tttgatagtt tgcagttgtc agtttgtttg catgaggtgg catactggta cattctaagc 1980 attggagcac agactgactt cctttctgtc ttcttctctg gatatacctt caaacacaaa 2040 40 atggtctatg aagacacact caccctattc ccattctcag gagaaactgt cttcatgtcg 2100 atggaaaacc caggtctatg gattctgggg tgccacaact cagactttcg gaacagaggc 2160 atgaccgcct tactgaaggt ttctagttgt gacaagaaca ctggtgatta ttacgaggac 2220 382 201217526 agttatgaag atatttcagc atacttgctg agtaaaaaca atgccattga accaagaagc 2280 ttctctcaaa acccaccagt cttgaaacgc catcaacggg aaataactcg tactactctt 2340 5 cagtcagatc aagaggaaat tgactatgat gataccatat cagttgaaat gaagaaggaa 2400 gattttgaca tttatgatga ggatgaaaat cagagccccc gcagctttca aaagaaaaca 2460 10 cgacactatt ttattgctgc agtggagagg ctctgggatt atgggatgag tagctcccca 2520 catgttctaa gaaacagggc tcagagtggc agtgtccctc agttcaagaa agttgttttc 2580 caggaattta ctgatggctc ctttactcag cccttatacc gtggagaact aaatgaacat 2640 • 15 ttgggactcc tggggccata tataagagca gaagttgaag ataatatcat ggtaactttc 2700 agaaatcagg cctctcgtcc ctattccttc tattctagcc ttatttctta tgaggaagat 2760 20 cagaggcaag gagcagaacc tagaaaaaac tttgtcaagc ctaatgaaac caaaacttac 2820 ttttggaaag tgcaacatca tatggcaccc actaaagatg agtttgactg caaagcctgg 2880 gcttatttct ctgatgttga cctggaaaaa gatgtgcact caggcctgat tggacccctt 2940 25 ctggtctgcc acactaacac actgaaccct gctcatggga gacaagtgac agtacaggaa 3000 tttgctctgt ttttcaccat ctttgatgag accaaaagct ggtacttcac tgaaaatatg 3060 φ30 gaaagaaact gcagggctcc ctgcaatatc cagatggaag atcccacttt taaagagaat 3120 tatcgcttcc atgcaatcaa tggctacata atggatacac tacctggctt agtaatggct 3180 caggatcaaa ggattcgatg gtatctgctc agcatgggca gcaatgaaaa catccattct 3240 35 attcatttca gtggacatgt gttcactgta cgaaaaaaag aggagtataa aatggcactg 3300 tacaatctct atccaggtgt ttttgagaca gtggaaatgt taccatccaa agctggaatt 3360 40 tggcgggtgg aatgccttat tggcgagcat ctacatgctg ggatgagcac actttttctg 3420 gtgtacagca ataagtgtca gactcccctg ggaatggctt ctggacacat tagagatttt 3480 cagattacag cttcaggaca atatggacag tgggccccaa agctggccag acttcattat 3540 383 201217526 tccggatcaa tcaatgcctg gagcaccaag gagccctttt cttggatcaa ggtggatctg 3600 ttggcaccaa tgattattca cggcatcaag acccagggtg cccgtcagaa gttctccagc 3660 5 ctctacatct ctcagtttat catcatgtat agtcttgatg ggaagaagtg gcagacttat 3720 cgaggaaatt ccactggaac cttaatggtc ttctttggca atgtggattc atctgggata 3780 10 aaacacaata tttttaaccc tccaattatt gctcgataca tccgtttgca cccaactcat 3840 tatagcattc gcagcactct tcgcatggag ttgatgggct gtgatttaaa tagttgcagc 3900 atgccattgg gaatggagag taaagcaata tcagatgcac agattactgc ttcatcctac 3960 15 tttaccaata tgtttgccac ctggtctcct tcaaaagctc gacttcacct ccaagggagg 4020 agtaatgcct ggagacctca ggtgaataat ccaaaagagt ggctgcaagt ggacttccag 4080 20 aagacaatga aagtcacagg agtaactact cagggagtaa aatctctgct taccagcatg 4140 tatgtgaagg agttcctcat ctccagcagt caagatggcc atcagtggac tctctttttt 4200 cagaatggca aagtaaaggt ttttcaggga aatcaagact ccttcacacc tgtggtgaac 4260 25 tctctagacc caccgttact gactcgctac cttcgaattc acccccagag ttgggtgcac 4320 cagattgccc tgaggatgga ggttctgggc tgcgaggcac aggacctcta cgacaaaact 4380 30 cacacatgcc caccgtgccc agcacctgaa ctcctgggag gaccgtcagt cttcctcttc 4440 cccccaaaac ccaaggacac cctcatgatc tcccggaccc ctgaggtcac atgcgtggtg 4500 gtggacgtga gccacgaaga ccctgaggtc aagttcaact ggtacgtgga cggcgtggag 4560 35 gtgcataatg ccaagacaaa gccgcgggag gagcagtaca acagcacgta ccgtgtggtc 4620 agcgtcctca ccgtcctgca ccaggactgg ctgaatggca aggagtacaa gtgcaaggtc 4680 40 tccaacaaag ccctcccagc ccccatcgag aaaaccatct ccaaagccaa agggcagccc 4740 cgagaaccac aggtgtacac cctgccccca tcccgcgatg agctgaccaa gaaccaggtc 4800 agcctgacct gcctggtcaa aggcttctat cccagcgaca tcgccgtgga gtgggagagc 4860 384 201217526 5 10

20 25

35 aatgggcagc cggagaacaa ctacaagacc acgcctcccg tgttggactc cgacggctcc ttcttcctct acagcaagct caccgtcgac aagagcaggt ggcagcaggg gaacgtcttc tcatgctccg tgatgcatga ggctctgcac aaccactaca cgcagaagag cctctccctg tctccgggta aacggcgccg ccggagcggt ggcggcggat eaggtggggg tggatcaggc ggtggaggtt ccggtggcgg gggatccggc ggtggaggtt ccggtggggg tggatcaagg aagaggagga agagggcgca ggtgcagctg caggagtctg ggggaggctt ggtacagcct ggggggtccc tgagactctc ctgtgcagcc tctggattca tgtttagcag gtatgccatg agctgggtcc gccaggctcc agggaagggg ccagagtggg tctcaggtat tagtggtagt ggtggtagta catactacgc agactccgtg aagggccggt tcaccgtctc cagagacaat tccaagaaca cgctgtatct gcaaatgaac agcctgagag ccgaggacac ggctgtatat tactgcgccc ggggcgccac ctacaccagc cggagcgacg tgcccgacca gaccagcttc gactactggg gccagggaac cctggtcacc gtctcctcag ggagtgcatc cgccccaaag cttgaagaag gtgaattttc agaagcacgc gtatctgaac tgactcagga ccctgctgtg tctgtggcct tgggacagac agtcaggatc acatgccaag gagacagcct cagaaacttt tatgcaagct ggtaccagca gaagccagga caggccccta ctcttgtcat ctatggttta agtaaaaggc cctcagggat cccagaccga ttctctgcct ccagctcagg aaacacagct tccttgacca tcactggggc tcaggcggaa gatgaggctg actattactg cctgctgtac tacggcggcg gccagcaggg cgtgttcggc ggcggcacca agctgaccgt cctacgtcag cccaaggctg ccccctcggt cactctgttc ccgccctctt ctgcggccgg tggcggtggc tccggcggag gtgggtccgg tggcggcgga tcaggtgggg gtggatcagg cggtggaggt tccggtggcg ggggatcaga caaaactcac acatgcccac cgtgcccagc accggaactc ctgggcggac cgtcagtctt cctcttcccc ccaaaaccca aggacaccct catgatctcc 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 5340 5400 5460 5520 5580 5640 5700 5760 5820 5880 5940 6000 6060 6120 6180 385 40 201217526 cggacccctg aggtcacatg cgtggtggtg gacgtgagcc acgaagaccc tgaggtcaag 6240 ttcaactggt acgtggacgg cgtggaggtg cataatgcca agacaaagcc gcgggaggag 6300 5 cagtacaaca gcacgtaccg tgtggtcagc gtcctcaccg tcctgcacca ggactggctg 6360 aatggcaagg agtacaagtg caaggtctcc aacaaagccc tcccagcccc catcgagaaa 6420 10 accatctcca aagccaaagg gcagccccga gaaccacagg tgtacaccct gcccccatcc 6480 cgggatgagc tgaccaagaa ccaggtcagc ctgacctgcc tggtcaaagg cttctatccc 6540 agcgacatcg ccgtggagtg ggagagcaat gggcagccgg agaacaacta caagaccacg 6600 15 cctcccgtgt tggactccga cggctccttc ttcctctaca gcaagctcac cgtggacaag 6660 agcaggtggc agcaggggaa cgtcttctca tgctccgtga tgcatgaggc tctgcacaac 6720 20 cactacacgc agaagagcct ctccctgtct ccgggtaaat ga 6762 <210> 149 25 30

<211> 2253 <212> PRT <213> 人工序列 <220>

<223>合成構建體:FVIII-108氨基酸序列 <400> 149

Met Gin lie Glu Leu Ser Thr Cys Phe Phe Leu Cys Leu Leu Arg Phe 15 10 15

Cys Phe Ser Ala Thr Arg Arg Tyr Tyr Leu Gly Ala Val Glu Leu Ser 20 25 30

Trp Asp Tyr Met Gin Ser Asp Leu Gly Glu Leu Pro Val Asp Ala Arg 35 40 45

S 386 40 201217526

Phe Pro Pro Arg Val Pro Lys Ser Phe Pro Phe Asn Thr Ser Val Val 50 55 60 5 Tyr Lys Lys Thr Leu Phe Val Glu Phe Thr Asp His Leu Phe Asn lie 65 70 75 80

Ala Lys Pro Arg Pro Pro Trp Met Gly Leu Leu Gly Pro Thr lie Gin 10 85 90 95

Ala Glu Val Tyr Asp Thr Val Val lie Thr Leu Lys Asn Met Ala Ser 100 105 110

His Pro Val Ser Leu His Ala Val Gly Val Ser Tyr Trp Lys Ala Ser 115 120 125 20

Glu Gly Ala Glu Tyr Asp Asp Gin Thr Ser Gin Arg Glu Lys Glu Asp 130 135 140 25 Asp Lys Val Phe Pro Gly Gly Ser His Thr Tyr Val Trp Gin Val Leu 145 150 155 160

Lys Glu Asn Gly Pro Met Ala Ser Asp Pro Leu Cys Leu Thr Tyr Ser

165 170 175

Tyr Leu Ser His Val Asp Leu Val Lys Asp Leu Asn Ser Gly Leu lie 180 185 190 35

Gly Ala Leu Leu Val Cys Arg Glu Gly Ser Leu Ala Lys Glu Lys Thr 195 200 205

Gin Thr Leu His Lys Phe lie Leu Leu Phe Ala Val Phe Asp Glu Gly 210 215 220 387 40 201217526

Lys Ser Τφ His Ser Glu Thr Lys Asn Ser Leu Met Gin Asp Arg Asp 225 230 235 240 5 Ala Ala Ser Ala Arg Ala Trp Pro Lys Met His Thr Val Asn Gly Tyr 245 250 255

Val Asn Arg Ser Leu Pro Gly Leu lie Gly Cys His Arg Lys Ser Val 10 260 265 270

Tyr Trp His Val He Gly Met Gly Thr Thr Pro Glu Val His Ser lie 275 280 285 15

Phe Leu Glu Gly His Thr Phe Leu Val Arg Asn His Arg Gin Ala Ser 290 295 300

Leu Glu lie Ser Pro lie Thr Phe Leu Thr Ala Gin Thr Leu Leu Met 305 310 315 320 25 Asp Leu Gly Gin Phe Leu Leu Phe Cys His lie Ser Ser His Gin His 325 330 335

Asp Gly Met Glu Ala Tyr Val Lys Val Asp Ser Cys Pro Glu Glu Pro 30 340 345 350

Gin Leu Arg Met Lys Asn Asn Glu Glu Ala Glu Asp Tyr Asp Asp Asp 355 360 365 35

Leu Thr Asp Ser Glu Met Asp Val Val Arg Phe Asp Asp Asp Asn Ser 370 375 380

Pro Ser Phe lie Gin lie Arg Ser Val Ala Lys Lys His Pro Lys Thr 385 390 395 400 s 388 40 201217526

Trp Val His Tyr lie Ala Ala Glu Glu Glu Asp Trp Asp Tyr Ala Pro 405 410 415 5 Leu Val Leu Ala Pro Asp Asp Arg Ser Tyr Lys Ser Gin Tyr Leu Asn 420 425 430

Asn Gly Pro Gin Arg lie Gly Arg Lys Tyr Lys Lys Val Arg Phe Met 10 435 440 445

Ala Tyr Thr Asp Glu Thr Phe Lys Thr Arg Glu Ala lie Gin His Glu 450 455 460 1.5

480

Ser Gly lie Leu Gly Pro Leu Leu Tyr Gly Glu Val Gly Asp Thr Leu 465 470 475 20

Leu lie lie Phe Lys Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Asn lie Tyr Pro 485 490 495 25 His Gly lie Thr Asp Val Arg Pro Leu Tyr Ser Arg Arg Leu Pro Lys 500 505 510

Gly Val Lys His Leu Lys Asp Phe Pro lie Leu Pro Gly Glu lie Phe •30 515 520 525

Lys Tyr Lys Trp Thr Val Thr Val Glu Asp Gly Pro Thr Lys Ser Asp 530 535 540 35

Pro Arg Cys Leu Thr Arg Tyr Tyr Ser Ser Phe Val Asn Met Glu Arg 545 550 555

Asp Leu Ala Ser Gly Leu lie Gly Pro Leu Leu lie Cys Tyr Lys Glu 565 570 575 389 560 40 201217526

Ser Val Asp Gin Arg Gly Asn Gin lie Met Ser Asp Lys Arg Asn Val 580 585 590 5 lie Leu Phe Ser Val Phe Asp Glu Asn Arg Ser Trp Tyr Leu Thr Glu 595 600 605

Asn lie Gin Arg Phe Leu Pro Asn Pro Ala Gly Val Gin Leu Glu Asp 10 610 615 620

Pro Glu Phe Gin Ala Ser Asn He Met His Ser lie Asn Gly Tyr Val 625 630 635 640

Phe Asp Ser Leu Gin Leu Ser Val Cys Leu His Glu Val Ala Tyr Trp 645 650 655 20

Tyr lie Leu Ser lie Gly Ala Gin Thr Asp Phe Leu Ser Val Phe Phe 660 665 670 25 Ser Gly Tyr Thr Phe Lys His Lys Met Val Tyr Glu Asp Thr Leu Thr 675 680 685

Leu Phe Pro Phe Ser Gly Glu Thr Val Phe Met Ser Met Glu Asn Pro 30 690 695 700

Gly Leu Trp lie Leu Gly Cys His Asn Ser Asp Phe Arg Asn Arg Gly 705 710 715 720 35

Met Thr Ala Leu Leu Lys Val Ser Ser Cys Asp Lys Asn Thr Gly Asp 725 730 735

Tyr Tyr Glu Asp Ser Tyr Glu Asp lie Ser Ala Tyr Leu Leu Ser Lys 740 745 750 s 390 40 201217526

Asn Asn Ala lie Glu Pro Arg Ser Phe Ser Gin Asn Pro Pro Val Leu 755 760 765 5 Lys Arg His Gin Arg Glu lie Thr Arg Thr Thr Leu Gin Ser Asp Gin 770 775 780 800

Glu Glu He Asp Tyr Asp Asp Thr lie Ser Val Glu Met Lys Lys Glu 10 785 790 795

Asp Phe Asp lie Tyr Asp Glu Asp Glu Asn Gin Ser Pro Arg Ser Phe 805 810 815

Gin Lys Lys Thr Arg His Tyr Phe lie Ala Ala Val Glu Arg Leu Trp 820 825 830 20

Asp Tyr Gly Met Ser Ser Ser Pro His Val Leu Arg Asn Arg Ala Gin 835 840 845 25 Ser Gly Ser Val Pro Gin Phe Lys Lys Val Val Phe Gin Glu Phe Thr 850 855 860 880

Asp Gly Ser Phe Thr Gin Pro Leu Tyr Arg Gly Glu Leu Asn Glu His ^30 865 870 875

Leu Gly Leu Leu Gly Pro Tyr lie Arg Ala Glu Val Glu Asp Asn lie 885 890 895 35

Met Val Thr Phe Arg Asn Gin Ala Ser Arg Pro Tyr Ser Phe Tyr Ser 900 905 910

Ser Leu lie Ser Tyr Glu Glu Asp Gin Arg Gin Gly Ala Glu Pro Arg 915 920 925 391 40 201217526

Lys Asn Phe Val Lys Pro Asn Glu Thr Lys Thr Tyr Phe Trp Lys Val 930 935 940 5 Gin His His Met Ala Pro Thr Lys Asp Glu Phe Asp Cys Lys Ala Trp 945 950 955 960

Ala Tyr Phe Ser Asp Val Asp Leu Glu Lys Asp Val His Ser Gly Leu 10 965 970 975 lie Gly Pro Leu Leu Val Cys His Thr Asn Thr Leu Asn Pro Ala His 980 985 990 15

Gly Arg Gin Val Thr Val Gin Glu Phe Ala Leu Phe Phe Thr lie Phe 995 1000 1005 20

Asp Glu Thr Lys Ser Trp Tyr Phe Thr Glu Asn Met Glu Arg Asn 1010 1015 1020 25 Cys Arg Ala Pro Cys Asn lie Gin Met Glu Asp Pro Thr Phe Lys 1025 1030 1035

Glu Asn Tyr Arg Phe His Ala lie Asn Gly Tyr lie Met Asp Thr 30 1040 1045 1050

Leu Pro Gly Leu Val Met Ala Gin Asp Gin Arg He Arg Trp Tyr 1055 1060 1065 35

Leu Leu Ser Met Gly Ser Asn Glu Asn lie His Ser lie His Phe 1070 1075 1080

Ser Gly His Val Phe Thr Val Arg Lys Lys Glu Glu Tyr Lys Met 1085 1090 1095

S 392 201217526

Ala Leu Tyr Asn Leu Tyr Pro Gly Val Phe Glu Thr Val Glu Met 1100 1105 1110 5 Leu Pro Ser Lys Ala Gly lie Trp Arg Val Glu Cys Leu lie Gly 1115 1120 1125

Glu His Leu His Ala Gly Met Ser Thr Leu Phe Leu Val Tyr Ser 10 1130 1135 1140

Asn Lys Cys Gin Thr Pro Leu Gly Met Ala Ser Gly His lie Arg 1145 1150 1155 •15

Asp Phe Gin lie Thr Ala Ser Gly Gin Tyr Gly Gin Trp Ala Pro 1160 1165 1170 20

Lys Leu Ala Arg Leu His Tyr Ser Gly Ser lie Asn Ala Trp Ser 1175 1180 1185 25 Thr Lys Glu Pro Phe Ser Trp lie Lys Val Asp Leu Leu Ala Pro 1190 1195 1200

Met lie lie His Gly lie Lys Thr Gin Gly Ala Arg Gin Lys Phe ^30 1205 1210 1215

Ser Ser Leu Tyr lie Ser Gin Phe lie lie Met Tyr Ser Leu Asp 1220 1225 1230 35

Gly Lys Lys Trp Gin Thr Tyr Arg Gly Asn Ser Thr Gly Thr Leu 1235 1240 1245

Met Val Phe Phe Gly Asn Val Asp Ser Ser Gly lie Lys His Asn 1250 1255 1260 393 40 201217526 lie Phe Asn Pro Pro lie lie Ala Arg Tyr lie Arg Leu His Pro 1265 1270 1275 5 ThrHis Tyr Ser lie Arg Ser Thr Leu Arg Met GIu LeuMetGly 1280 1285 1290

Cys Asp Leu Asn Ser Cys Ser Met Pro Leu Gly Met Glu Ser Lys 10 1295 1300 1305

Ala He Ser Asp Ala Gin lie Thr Ala Ser Ser Tyr Phe Thr Asn 1310 1315 1320 15

Met Phe Ala Thr Trp Ser Pro Ser Lys Ala Arg Leu His Leu Gin 1325 1330 1335 20

Gly Arg Ser Asn Ala Trp Arg Pro Gin Val Asn Asn Pro Lys Glu 1340 1345 1350 25 Trp Leu Gin Val Asp Phe Gin Lys Thr Met Lys Val Thr Gly Val 1355 1360 1365

Thr Thr Gin Gly Val Lys Ser Leu Leu Thr Ser Met Tyr Val Lys 30 1370 1375 1380

Glu Phe Leu lie Ser Ser Ser Gin Asp Gly His Gin Trp Thr Leu 1385 1390 1395 35

Phe Phe Gin Asn Gly Lys Val Lys Val Phe Gin Gly Asn Gin Asp 1400 1405 1410

Ser Phe Thr Pro Val Val Asn Ser Leu Asp Pro Pro Leu Leu Thr 1415 1420 1425

S 394 40 201217526

Arg Tyr Leu Arg lie His Pro Gin Ser Trp Val His Gin lie Ala 1430 1435 1440

Leu Arg Met Glu Val Leu Gly Cys Glu Ala Gin Asp Leu Tyr Asp 1445 1450 1455

Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly 10 1460 1465 1470

Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 1475 1480 1485 •15

Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val 1490 1495 1500 20

Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 1505 1510 1515 25 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr 1520 1525 1530

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin •30 1535 1540 1545

Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys 1550 1555 1560 35

Ala Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly 1565 1570 1575

Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp 1580 1585 1590 395 40 201217526

Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 1595 1600 1605 5 Phe Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin 1610 1615 1620

Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 10 1625 1630 1635

Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg 1640 1645 1650 15

Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala 1655 1660 1665 20

Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1670 1675 1680 25 Lys Arg Arg Arg Arg Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1685 1690 1695 30

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 1700 1705 1710

Ser Gly Gly Gly Gly Ser Arg Lys Arg Arg Lys Arg Ala Gin Val 1715 1720 1725 35

Gin Leu Gin Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly Ser 1730 1735 1740

Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Met Phe Ser Arg Tyr 1745 1750 1755 396 201217526

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Pro Glu Trp 1760 1765 1770 .5 Val Ser Gly lie Ser Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp 1775 1780 1785

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn 10 1790 1795 1800

Thr Leu Tyr Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala 1805 1810 1815 15

Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Ala Thr Tyr Thr Ser Arg Ser Asp 1820 1825 1830 20

Val Pro Asp Gin Thr Ser Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 1835 1840 1845 25 Val Thr Val Ser Ser Gly Ser Ala Ser Ala Pro Lys Leu Glu Glu 1850 1855 1860

Gly Glu Phe Ser Glu Ala Arg Val Ser Glu Leu Thr Gin Asp Pro k30 1865 1870 1875

Ala Val Ser Val Ala Leu Gly Gin Thr Val Arg lie Thr Cys Gin 1880 1885 1890 35

Gly Asp Ser Leu Arg Asn Phe Tyr Ala Ser Trp Tyr Gin Gin Lys 1895 1900 1905

Pro Gly Gin Ala Pro Thr Leu Val lie Tyr Gly Leu Ser Lys Arg 1910 1915 1920 397 201217526

Pro Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser Ala Ser Ser Ser Gly Asn 1925 1930 1935 5 Thr Ala Ser Leu Thr lie Thr Gly Ala Gin Ala GIu Asp Glu Ala 1940 1945 1950

Asp Tyr Tyr Cys Leu Leu Tyr Tyr Gly Gly Gly Gin Gin Gly Val 10 1955 1960 1965

Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Arg Gin Pro Lys Ala 1970 1975 1980 15

Ala Pro Ser Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Ala Ala Gly Gly 1985 1990 1995 20

Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly 2000 2005 2010 25 Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys 2015 2020 2025

Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro GIu Leu Leu Gly Gly 30 2030 2035 2040

Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met 2045 2050 2055 35 lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 2060 2065 2070

His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val 2075 2080 2085

S 398 201217526

Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn 2090 2095 2100 5 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 2105 2110 2115

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 10 2120 2125 2130

Leu Pro Ala Pro lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin 2135 2140 2145 15

Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu 2150 2155 2160 20

Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe 2165 2170 2175 25 Tyr Pro Ser Asp lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro 2180 2185 2190

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly 30 2195 2200 2205

Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 2210 2215 2220 35

Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu 2225 2230 2235

His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 2240 2245 2250 399 40 201217526

Claims

201217526 七、申請專利範圍： 1·—種嵌合凝血因數，其包含選自FVII、FIX和FX的凝血因數和與血小板結合的耙向部分及非必要地凝血因@ 與靶向部分之間的間隔部分。 2.根據請求項1所述之嵌合凝血因數，其包含式a B C 表示的結構，其中A爲凝血因數；其中B爲間隔部分；且其中C爲至少一個與血小板結合的耙向部分。 φ 3.根據請求項2所述之嵌合凝血因數，其包含由氣基端至羧基端的結構，由選自AB C和C B A的式表示。 4·根據請求項1所述之嵌合凝血因數，其中存在血小板時’所述嵌合凝血因數顯示出相比於缺少至少一個靶向部分的合適的對照組的增加的凝血酶生成。 5·根據請求項1所述之嵌合凝血因數，還包含支架部分和非必要地第二間隔部分。 6.根據請求項5所述之嵌合凝血因數，還包含〇和e， # 其中D爲間隔部分；且E爲支架部分，且其中嵌合凝血因數包含由氨基端至羧基端的結構，由選自A B C D E、A D E B C、E D AB C ' C B AD E、E D C B A和 C B E D A 的式表示。 7. 根據請求項6所述之嵌合凝血因數，其中e爲包含第 —Fc部分F1和第二Fc部分”的二聚體Fc區。 8. 根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數作爲置於兩個Fc部分之間包含可切割scFc (^“为接頭的多肽表達’其中cscFc接頭與至少一個引起CSCFC多肽 201217526 接頭切割的酶切位點相鄰》 9.根據請求項8所述之嵌合凝血因數，其中所述 6 C F ς 接頭與至少一個引起cscFc接頭切割的酶切位點相鄰。 1〇·根據請求項9所述之嵌合凝血因數，其中所述至少 —個酶切位點爲細胞內加工位點。 1 1 .根據請求項9所述之嵌合凝血因數，其中所述多& 接頭兩側爲兩個酶切位點，所述酶切位點由相同的或不_ 的酶識別。 12. 根據請求項9所述之嵌合凝血因數，其中所述多耽接頭的長度爲約10個至約50個氨基酸。 13. 根據請求項9所述之嵌合凝血因數，其中所述多耽接頭的長度爲約20個至約30個氨基酸。 14. 根據請求項9所述之嵌合凝血因數，其中所述多肽接頭包含甘氨酸/絲氨酸肽。 15. 根據請求項14所述之嵌合凝血因數，其中所述甘氨酸/絲氨酸肽的式爲（Gly4 Ser)n或Ser(Gly4 Ser)n，其中„ 爲選自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的正整數。 16. 根據請求項15所述之嵌合凝血因數，其中所述 (Gly4 Ser)n接頭選自（Gly4 Ser)6、Ser(Gly4 Ser)6、（Gly4 Ser)4和 Ser(Gly4 Ser)4。 17. 根據請求項8所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數包含兩條多肽鏈。 18. 根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述嵌合凝血因數具有以下結構，其選自：通過間隔部分A與F1連 S 201217526 接且C與F2連接；通過間隔部分A與！?！連接且通過間隔部分C與F2連接；八與？1連接且通過間隔部分（：與1?2連接；通過間隔部分A與F1連接且通過間隔部分C.F2連接。 19·根據請求項18所述之嵌合凝血因數，其包括兩條多肽’其中第一條多肽包含部分A B F1、A B FI、A B F1 、A B FI D C且第二條多狀包含部分c F2、C D F2、F2 D C、F2 D C:，其中所述兩條多肽鏈形成Fc區❶ 20. 根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分與至少一個FC區多肽鏈融合。 21. 根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分直接與F1和F2的至少一個融合。 22·根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分通過間隔部分與F1和F2的至少一個融合。 23. 根據請求項7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分通過可切割接頭與F1和F2的至少一個融合。 24. 根據請求項1所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選自抗體分子、抗體分子的抗原結合片段、scFv分子、受體的受體結合部分、肽。 25. 根據請求項1、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分與休眠血小板結合。 26. 根據請求項1、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選擇性地與活化的血小板結合。 27. 根據請求項25所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選擇性地與靶標結合，所述靶標選自GPIba、GPVI -3- 201217526 和GPIIb/IIIa非活性形式。 8·根據ηΒ求項26所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選擇性地與靶標結合，所述靶標選自Gp_iia的 GMP-33、LAMP-1、LAMP-2、活性形式、P選擇蛋白 CD40L和 LOX-1。 29.根據請求項25所述之嵌合凝血因數，其中所述耙向部分與GPIb複合物結合。 3〇·根據請求項25所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分是選自PS4、〇si和〇S2的肽。 31.根據請求項25所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分包含來自抗體的抗體可變區，其選自SCE5、MB9和 AP3。 32. 根據請求項丨、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是因數VII。 33. 根據請求項丨、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是VII的高特異性活性變體。 3 4.根據請求項丨、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是因數IX。 35. 根據請求項1、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是因數IX的高特異性活性變體。 36. 根據請求項1、2、5或7所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是因數X。 37. 根據請求項1、3、4或5所述之嵌合凝血因數’其中所述凝血因數是因數X的高特異性活性變體。 201217526 38. 根據請求項8所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數以活性形式由細胞分泌。 39. 根據請求項1所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數在體內啓動。 40. 根據請求項39所述之嵌合凝血因數，其中所述嵌合凝血因數包含非天然地存在於凝血因數的異源酶切位點〇 φ 41.根據請求項40所述之嵌合凝血因數，其中所述酶切位點與凝血因數重鏈部分的氨基端基因融合。 42. 根據請求項5所述之嵌合凝血因數，其中所述支架部分是蛋白質分子，其增加增強的凝血因數的流體動力學半徑。 43. 根據請求項42所述之嵌合凝血因數，其中所述支架部分，如果存在，選自白蛋白和XTEN®。 44·—種包含 FVII的多肽，其中FVII包含由凝血級聯 φ 的組分啓動的異源酶切位點。 45. 根據請求項44所述之多肽，其中所述多肽包含支架部分和非必要地間隔部分。 46. 根據請求項45所述之嵌合凝血因數，其中所述支架部分是包含第~Fc部分F1和第二Fc部分F2的二聚體Fc區〇 4 7.根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數包含兩條多肽鏈。 48.根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其中嵌合凝 -5- 201217526 血因數具有以下結構，其選自：凝血因數通過間隔部分與第一Fc部分連接；凝血因數通過間隔部分與第二Fc部分連接；凝血因數直接與！：〗連接；且凝血因數直接與F2連接。 49.根據請求項47所述之嵌合凝血因數，還包含靶向部分C。 5 0.根據請求項47所述之嵌合凝血因數，其中嵌合凝血因數被合成爲包含cscFc接頭的單個多肽鏈。 51·根據請求項49所述之嵌合凝血因數，其中所述 cscFc接頭與至少—個引起cscFc多肽接頭切割的酶切位點相鄰。 52·根據請求項50所述之嵌合凝血因數，其中所述至少一個酶切位點爲細胞內加工位點。 53.根據請求項5〇所述之嵌合凝血因數，其中所述 cscFc接頭兩側具有兩個酶切位點，所述酶切位點由相同的或不同的酶識別。 5 4.根據請求項49所述之嵌合凝血因數，其中所述 cscFc接頭的長度爲約10個至約50個氨基酸。 55. 根據請求項49所述之嵌合凝血因數，其中所述 cscFc接頭的長度爲約20個至約30個氨基酸。 56. 根據請求項w所述之嵌合凝血因數，其中所述 cscFc接頭包含甘氨酸/絲氨酸肽。 57. 根據請求項56所述之嵌合凝血因數，其中所述甘氨酸/絲氨酸肽的式爲（Gly4Ser)n或Ser(Gly4Ser)n，其中n 爲選自1、2、3、4、5、6、7、8、9和10的正整數。 S -6 - 201217526 5 8 .根據請求項5 6所述之嵌合凝血因數，其中所述 (Gly4 Ser)n接頭選自（G1 y4 Ser)6、S er(G1 y4 Ser)6、（G1 y4 Ser)4和 Ser(Gly4 Ser)4。 5 9.根據請求項45所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數是因數VII的高特異性活性變體。 60.根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其中非天然存在於凝血因數的異源酶切位點在血塊形成的位點被切割〇 61·根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其中所述切割位點選自因數XIa切割位點、因數Xa切割位點和凝血酶切割位點。 62. 根據請求項59所述之嵌合凝血因數，其中所述酶切位點與凝血因數重鏈部分的氨基端基因融合。 63. 根據請求項48所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分與休眠血小板結合》 64. 根據請求項48所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選擇性地與活化的血小板結合。 65. 根據請求項63所述之嵌合凝血因數，其中所述靶向部分選擇性地與靶標結合，所述靶標選自GPIba、GPVI 和GPIIb/IIIa非活性形式。 66. 根據請求項64所述之嵌合凝血因數，其中靶向部分選擇性地與靶標結合，所述靶標選自GPIIb/IIIa的活性形式、P選擇蛋白、GMP-33、LAMP-1、LAMP-2、CD40L 和 L Ο X 1 〇 201217526 67·根據請求項64所述之嵌合凝血因數，其中所述支架部分是蛋白質分子，其增加增強的凝血因數的流體動力學半徑。 68. 根據請求項67所述之嵌合凝血因數，其中支架部分’如果存在，選自白蛋白和XTEN®。 69. 根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其包括由氨基端至羧基端部分的線性序列，其選自A B C、C B A、A BCDE、ADEBC、E DAB C、C BAD E、E D C B A、 C B E D A’其中A爲啓動的凝血因數，B不存在或爲接頭 ’ C爲靶向部分，〇不存在或爲接頭，且E爲支架部分。 70. 根據請求項44所述之嵌合凝血因數，其中所述凝血因數包含凝血因數的輕鏈和重鏈且每個輕鏈和重鏈表達爲不同的多肽鏈。 71· —種核酸分子，其編碼根據請求項1、2、5、7、 44、45、45和58中任一項所述之嵌合凝血因數。 72. 根據請求項71所述之核酸分子，其中所述核酸分子存在于載體中。 73. 根據請求項72所述之載體，其中所述載體還包括編碼酶的核苷酸序列，所述酶切割至少一個酶切位點。 74. —個包含根據請求項72所述之表達載體的宿主細胞。 75. —個包含根據請求項72所述之表達載體的宿主細胞，其中所述宿主細胞表達能夠細胞內加工的酶。 76. 根據請求項75所述之宿主細胞，其中所述酶對於 S -8 - 201217526 細胞是內源性的。 77. 根據請求項75所述之宿主細胞’其中所述酶對於細胞是異源性的。 78. —種製備嵌合凝血因數的方法，其包含在培養基中培養根據請求項7 6或7 7所述之宿主細胞並從培養基中回收增強的凝血因數。 79. —種包含兩天多肽鏈的加工的、’異源二聚體多肽 φ ，其中所述加工的、異源二聚體多肽通過細胞中表達根據 .請求項78所述之載體而製作，所述載體在細胞培養基中培養，並從培養基中分離成熟的、異源二聚體多肽。 8 0· —種組合物，其包含根據請求項1、2、5、7、44 、45、48和58中任一項所述之嵌合凝血因數及藥學上可接受的載體》 81.—種組合物，其包含根據請求項71所述之核酸分子和藥學上可接受的載體。 φ 82·—種改善受試者體內止血的方法，包含施用根據請求項8 0或8 1所述之組合物。 -9-