SU1718766A1

SU1718766A1 - Method for preserving the blood erythrocytes

Info

Publication number: SU1718766A1
Application number: SU904806438A
Authority: SU
Inventors: Ася Ивановна Ионова; Наталия Витальевна Минеева; Кира Николаевна Климова
Original assignee: Ленинградский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови
Priority date: 1990-01-30
Filing date: 1990-01-30
Publication date: 1992-03-15

Abstract

Изобретение относитс к консервированию клеток крови, в частности эритроцитов дл изосерологических исследований. Целью изобретени вл етс упрощение способа путем исключени энергоемких операций. Эритромассу получают открытым способом, в том числе из крови, вз той без стабилизирующего раствора, клетки отмывают несколько раз 0,9%-ным раствором хлористого натри и осуществл ют консервирование в растворе, содержащем, в мас.%: сорбит 4,0 ±1,0; глюкозу 0,6± 0,05; N32HP04 -12Н20 0,2; этиловый спирт 96% 9,4± 0,4; левомицетин 0,05± 0,01, воду би- дистиллированную до 100. При сохранении специфических свойств клеток предлагаемый способ позвол ет исключить операцию стерилизации в автоклаве и операцию отсасывани плазмы со стабилизирующим раствором и разлива эритроцитов с помощью стерильных систем и герметичного укупори- вани . 1 табл. ЈThe invention relates to the preservation of blood cells, in particular, red blood cells for isoserological studies. The aim of the invention is to simplify the process by eliminating energy-intensive operations. Erythromass is obtained by an open method, including from blood taken without a stabilizing solution, the cells are washed several times with 0.9% sodium chloride solution and preserved in a solution containing, in wt.%: Sorbitol 4.0 ± 1 , 0; glucose 0,6 ± 0,05; N32HP04 -12H20 0.2; ethyl alcohol 96% 9.4 ± 0.4; chloramphenicol 0.05 ± 0.01, bi-distilled water up to 100. While maintaining the specific properties of the cells, the proposed method eliminates sterilization in the autoclave and the operation of suctioning the plasma with stabilizing solution and spilling of erythrocytes using sterile systems and sealing. 1 tab. J

Description

Изобретение относитс к консервированию клеток крови, а именно эритроцитов дл изосерологических исследований (малыми дозами).This invention relates to the preservation of blood cells, namely, erythrocytes for isoserological studies (in small doses).

Цель изобретени - упрощение способа за счет исключени энергоемких операций.The purpose of the invention is to simplify the process by eliminating energy-intensive operations.

Поставленна цель достигаетс тем, что эритромассу получают открытым способом, в том числе из крови, вз той без стабилизирующего раствора, клетки отмывают четырехкратно 0,9%-ным раствором хлористого натри , а консервирование осуществл ют в растворе, дополнительно содержащем салициловую кислоту.This goal is achieved by the fact that erythromass is obtained by an open method, including from blood taken without a stabilizing solution, cells are washed four times with 0.9% sodium chloride solution, and preservation is carried out in a solution that additionally contains salicylic acid.

Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.

Взвесь эритроцитов третьей фракции, полученную из пробирки с кровью человекаThe suspension of erythrocytes of the third fraction obtained from a test tube with human blood

не.позднее суток с момента вз ти , отмывают стерильным физиологическим раствором IMaCI в соотношении 1-5 не менее 4 раз с осаждением центрифугированием в режиме 1000 об./мин в течение 3 мин. После последнего отмывани тщательно удал ют надосадочную жидкость, и в пробирку с эритроцитами добавл ют консервирующий раствор следующего состава, в г: сорбит 4,0± 1,0; глюкоза 0,6 0,05; N32HP04 -12Н20 0,02; КНаРОз 0,09; этиловый спирт 96% 9,4 ± 0,4; левомицетин 0,05± 0,01; салицилова кислота 0,04± 0.005; бидистиллиро- ванна вода до 100. рН раствора 6,8-6,9, в объемном соотношении эритромасса - консервирующий раствор, равном 1:1. После маркировки пробирку с взвесью консервированных эритроцитов закрывают с по00not later than 24 hours from the moment of taking, wash with sterile saline IMaCI in a ratio of 1-5 at least 4 times with sedimentation by centrifugation at 1000 rpm for 3 minutes. After the last wash, the supernatant is carefully removed, and a preservative solution of the following composition is added to a tube with red blood cells, in g: sorbitol 4.0 ± 1.0; glucose 0.6 0.05; N32HP04 -12H20 0.02; KNARO 0.09; ethyl alcohol 96% 9.4 ± 0.4; chloramphenicol 0.05 ± 0.01; salicylic acid 0.04 ± 0.005; bidistilled water up to 100. The pH of the solution is 6.8–6.9, in a volume ratio of erythromass — a preservative solution equal to 1: 1. After marking the tube with a suspension of preserved erythrocytes is closed with p00

VJVj

OsOs

оabout

мощью фольги или лейкопластыр и хран т в холодильнике при +4°С. Перед употреблением в пробирку добавл ют физиологический раствор NaCI в количестве, в 5-6 раз превышающем объем взвеси эритроцитов. Затем эритроциты 2 раза отмывают в течение 3 мин с осаждением посредством центрифугировани в режиме 1000 об/мин.by foil or adhesive plaster and stored in a refrigerator at + 4 ° C. Before use, physiological NaCI solution is added to the tube in an amount that is 5-6 times higher than the volume of erythrocyte suspension. Then, erythrocytes are washed 2 times for 3 minutes with sedimentation by centrifuging at 1000 rpm.

Агглютинабельные свойства эритроцитов (титр), консервированных предложенным и известным способами после 8-недельного хранени представлены в таблице ,The agglutinable properties of erythrocytes (titer) preserved by the proposed and known methods after 8 weeks storage are presented in the table,

Использование данного способа позвол ет исключить операцию стерилизации приготовленного консервирующего раствора в автоклаве, операцию отсасывани плазмы и разлива эритроцитов с применением специального оборудовани с помощью стерильных систем и герметичного укупоривани .The use of this method makes it possible to exclude the operation of sterilization of the prepared preservative solution in the autoclave, the operation of plasma suction and red cell spill using special equipment using sterile systems and hermetic closure.

Claims

Invention Formula

A method of preserving red blood cells for isoserological studies by treating erythromass with a solution containing sorbitol, glucose, ethyl alcohol, chloramphenicol and sodium is disubstituted

potassium monobasic phosphate, differing in the fact that, in order to simplify the process by eliminating energy-intensive operations, erythromas are taken from blood without a stabilizing solution, cells are washed many times with 0.9% sodium chloride solution, and at pH 6.8-6.9 in solution, additionally containing salicylic acid, in the following ratio of ingredients, wt.%:

five

0

five

0

Sorbitol Glucose Ethyl alcohol 96% Levomitsetin Sodium

potassium phosphate monosubstituted Potassium phosphate monosubstituted Salitsilova

acid Double-distilled water

4.0 ± 1.0 0.6 ± 0.05

9.4 ± 0.4 0.05 ± 0.01

0.2

0.09

0.04 ± 0.005 to 100