RU2758064C1 - Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens - Google Patents

Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens Download PDF

Info

Publication number
RU2758064C1
RU2758064C1 RU2020135614A RU2020135614A RU2758064C1 RU 2758064 C1 RU2758064 C1 RU 2758064C1 RU 2020135614 A RU2020135614 A RU 2020135614A RU 2020135614 A RU2020135614 A RU 2020135614A RU 2758064 C1 RU2758064 C1 RU 2758064C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
donor
chimerism
antigens
recipient
abo
Prior art date
Application number
RU2020135614A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Анна Васильевна Йовдий
Елена Владимировна Бутина
Елена Александровна Попонина
Наталья Александровна Зорина
Наталья Викторовна Минаева
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства"
Priority to RU2020135614A priority Critical patent/RU2758064C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2758064C1 publication Critical patent/RU2758064C1/en

Links

Images

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6804Nucleic acid analysis using immunogens
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12QMEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844Nucleic acid amplification reactions
    • GPHYSICS
    • G01MEASURING; TESTING
    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing

Abstract

FIELD: medicine.
SUBSTANCE: described is a method for evaluating the erythrocyte chimerism in the course of study of ABO antigens, including forming an identifier scale for the percentage of donor chimerism, typing the ABO antigens of the donor and recipient erythrocytes, determining the informative antigens, monitoring the erythrocyte chimerism after transplantation of allogenic hematopoietic stem cells. The claimed method is characterised by the fact that the results of the ABO testing of the recipient are compared with the identifier scale, wherein agglutination in a gel column is used as a detecting method; the presence of donor chimerism is diagnosed if erythrocytes carrying donor ABO antigens are detected in the recipient; the absence of donor chimerism is diagnosed if erythrocytes expressing donor ABO antigens are absent in the recipient.
EFFECT: invention expands the range of methods for evaluating the state of the hematopoietic system of the patient after allogenic hematopoietic stem cell transplantation, monitoring the dynamics of growth of donor chimerism, establishing partial red cell aplasia of the bone marrow, which is necessary for planning and correcting the accompanying therapy of the patient.
1 cl, 4 dwg, 3 tbl, 2 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, в частности к онкогематологии и может быть использовано для оценки динамики прироста донорских эритроцитов после трансплантации костного мозга и/или гемопоэтических стволовых клеток (ГСК) от неидентичного по системе АВО донора. Определение количества эритроцитов, имеющих фенотип донора, осуществляется методом агглютинации в геле путем сравнения относительного количества эритроцитов, экспрессирующих и неэкспрессирующих информативный антиген, со шкалой-идентификатором донорского химеризма.The invention relates to medicine, in particular to hematology oncology and can be used to assess the dynamics of the increase in donor erythrocytes after transplantation of bone marrow and / or hematopoietic stem cells (HSC) from a donor that is not identical in the ABO system. Determination of the number of erythrocytes with the donor phenotype is carried out by the method of agglutination in a gel by comparing the relative number of erythrocytes expressing and non-expressing an informative antigen with the donor chimerism identifier scale.

Цель изобретения - разработка способа оценки посттрансплантационного химеризма при анализе экспрессии антигенов эритроцитов А и В.The purpose of the invention is to develop a method for assessing post-transplant chimerism when analyzing the expression of erythrocyte antigens A and B.

Аллогенная трансплантация гемопоэтических стволовых клеток (аллоТГСК) - один из эффективных методов лечения тяжелых гематологических и онкологических заболеваний системы крови, а также ряда наследственных болезней. Результативность терапии доказана у пациентов с острыми лейкозами, хроническим миелолейкозом, злокачественными лимфомами, первичными иммунодефицитами [1, 2]. Потенциальный успех аллоТГСК, приводящий к долгосрочной выживаемости больных, зависит от функциональной активности гемопоэтических стволовых клеток и развития посттрансплантационных осложнений - отторжения трансплантата, реакции «трансплантат против хозяина», парциальной красноклеточной аплазии, рецидива основного заболевания, инфекционных осложнений [3, 4, 5]. Мониторинг приживления ГСК необходим для планирования сопроводительной терапии. Показателем, отражающим работу донорской кроветворной ткани, является посттрансплантационный химеризм. Существует ряд методов отслеживания донорского химеризма.Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (alloHSCT) is one of the effective methods of treating severe hematological and oncological diseases of the blood system, as well as a number of hereditary diseases. The effectiveness of therapy has been proven in patients with acute leukemia, chronic myeloid leukemia, malignant lymphomas, primary immunodeficiencies [1, 2]. The potential success of alloHSCT, leading to long-term survival of patients, depends on the functional activity of hematopoietic stem cells and the development of post-transplant complications - graft rejection, graft versus host reaction, partial red cell aplasia, recurrence of the underlying disease, infectious complications [3, 4, 5]. Monitoring of HSC engraftment is essential for planning concomitant therapy. An indicator reflecting the work of donor hematopoietic tissue is post-transplant chimerism. There are a number of methods for tracking donor chimerism.

Известны способы оценки присутствия в организме различных клеточных линий на основании генетических маркеров. К ним относятся цитогенетический и FISH-анализ, которые могут применяться для определения химеризма только в тех ситуациях, когда донор и реципиент разного пола или пациент имеет хромосомные особенности. Такие ограничения приводят к редкому использованию данных методов [1, 6, 8].Known methods for assessing the presence in the body of various cell lines on the basis of genetic markers. These include cytogenetic and FISH analysis, which can be used to determine chimerism only in situations where the donor and recipient are of different sexes or the patient has chromosomal characteristics. Such restrictions lead to the rare use of these methods [1, 6, 8].

Известен способ оценки донорского химеризма, основанный на выявлении индивидуальных отличий в структуре ДНК с применением ПЦР в реальном времени. В настоящее время для определения химеризма у больных после аллоТГСК данный метод считается наиболее востребованным, так как обладает возможностью ранней диагностики химеризма [7, 8]. Недостатком исследования структур ДНК является невозможность оценки функциональной состоятельности эритроидного ростка кроветворения и диагностики парциальной красноклеточной аплазии - тяжелого осложнения ТГСК.A known method for assessing donor chimerism, based on identifying individual differences in the structure of DNA using real-time PCR. Currently, for the determination of chimerism in patients after alloHSCT, this method is considered the most popular, since it has the ability to early diagnosis of chimerism [7, 8]. The disadvantage of studying DNA structures is the impossibility of assessing the functional viability of the erythroid hematopoietic lineage and diagnosing partial red cell aplasia, a severe complication of HSCT.

Наиболее близким к предполагаемому изобретению является модифицированный микрометод дифференциальной агглютинации по Эшби, оценивающий количество эритроцитов в крови реципиента, экспрессирующих донорские антигены, с помощью камеры Горяева [9]. Данное исследование позволяет оценить работу эритроцитарного ростка донорского костного мозга, диагностировать парциальную красноклеточную аплазию. Недостатком этого метода является отсутствие автоматизации, необходимость дополнительных манипуляций, выходящих за рамки стандартных иммуногематологических исследований.Closest to the proposed invention is a modified Ashby differential agglutination micromethod, which estimates the number of erythrocytes in the blood of a recipient expressing donor antigens using a Goryaev camera [9]. This study makes it possible to evaluate the work of the erythrocyte lineage of the donor bone marrow, to diagnose partial red cell aplasia. The disadvantage of this method is the lack of automation, the need for additional manipulations that go beyond the scope of standard immunohematological studies.

Техническим результатом заявляемого изобретения является создание способа диагностики донорского химеризма при исследовании антигенов системы АВО методом агглютинации в геле с моноклональными антителами анти-А, анти-В. Технология анализа экспрессии антигенов позволяет определить относительное количество эритроцитов, имеющих происхождение из донорского ростка кроветворения, отследить динамику прироста донорского химеризма после трансплантации ГСК, установить парциальную красноклеточную аплазию костного мозга. Преимущества данного метода заключаются в высокой скорости исполнения и использовании стандартных иммуногематологических методов исследования.The technical result of the claimed invention is the creation of a method for the diagnosis of donor chimerism in the study of antigens of the ABO system by agglutination in a gel with monoclonal antibodies anti-A, anti-B. The technology for analyzing the expression of antigens makes it possible to determine the relative number of erythrocytes originating from the donor hematopoietic germ, to track the dynamics of the increase in donor chimerism after HSC transplantation, and to establish partial red cell aplasia of the bone marrow. The advantages of this method are the high speed of execution and the use of standard immunohematological research methods.

Для достижения поставленной цели в соответствии с аналогом [9] проводят типирование антигенов АВО донора и реципиента и выявляют различия экспрессии антигенов, позволяющие дифференцировать эритроциты, происходящие из ростков кроветворения донора и реципиента. В отличие от прототипа, в котором проводится подсчет количества связанных с антиэритроцитарными антителами клеток в камере Горяева с последующим расчетом % эритроцитов донора, в предлагаемом способе осуществляется анализ донорского химеризма на основании сопоставления результатов АВО-тестирования в гелевой карте со шкалой-идентификатором. Анализ химеризма проводится методом агглютинации в геле.To achieve this goal, in accordance with the analogue [9], the ABO antigens of the donor and the recipient are typed and the differences in the expression of antigens are identified, which make it possible to differentiate erythrocytes originating from the hematopoietic germs of the donor and the recipient. Unlike the prototype, in which the number of cells associated with anti-erythrocyte antibodies is counted in the Goryaev chamber with the subsequent calculation of the% of donor erythrocytes, the proposed method analyzes donor chimerism based on comparing the results of ABO testing in a gel card with an identifier scale. The analysis of chimerism is carried out by the method of agglutination in a gel.

В процессе проведения патентно-информационного поиска не выявлено источников, порочащих новизну предполагаемого изобретения.In the course of the patent information search, no sources discrediting the novelty of the proposed invention have been identified.

Заявляемое изобретение разработано в лаборатории иммуногематологии ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России в соответствии с планом научно-исследовательской работы.The claimed invention was developed in the laboratory of immunohematology of FGBUN KNIIGiPK FMBA of Russia in accordance with the research plan.

Способ осуществляется следующим образом.The method is carried out as follows.

Этап 1. Создают шкалу-идентификатор процента донорского химеризма. С этой целью эритроциты из образцов крови доноров О, А и В трижды отмывают от плазмы в физиологическом растворе и ресуспензируют в растворе низкой ионной силы в соотношении 1:1. Перемешивают на вортексе. Маркируют пробирки с ЭДТА от 1 до 12. В соответствии с таблицей 1 в пробирки вносят заданный объем взвеси эритроцитов О и А группы (или О и В группы, в зависимости от установленного информативного маркера). Полученную смесь эритроцитов из каждой пробирки вносят в гелевые карты с соответствующими по специфичности моноклональными антителами. Центрифугируют и фотодокументируют результат. Формируют шкалу-идентификатор, отражающий различное процентное соотношение эритроцитов О и А (или О и В) в образце (рисунок 1, 2, 3, 4).Step 1. Create a scale identifying the percentage of donor chimerism. For this purpose, erythrocytes from blood samples of donors O, A and B are washed three times from plasma in physiological saline and resuspended in a solution of low ionic strength in a 1: 1 ratio. Mix on a vortex. Tubes with EDTA from 1 to 12 are labeled. In accordance with Table 1, a predetermined volume of suspension of erythrocytes of O and A groups (or O and B groups, depending on the established informative marker) is added to the tubes. The resulting mixture of erythrocytes from each tube is introduced into gel cards with monoclonal antibodies corresponding in specificity. Centrifuge and photograph the result. An identifier scale is formed, reflecting the different percentage of red blood cells O and A (or O and B) in the sample (Figure 1, 2, 3, 4).

Этап 2. До трансплантации ГСК проводят типирование антигенов АВО эритроцитов донора и реципиента. Определяют информативные антигены, позволяющие установить различия эритроцитов донора и реципиента по системе АВО. Антиген считается информативным, если он выявлен в фенотипе реципиента и отсутствует в фенотипе донора или наоборот. Прогнозируют вектор донорского химеризма - появление или исчезновение эритроцитов, экспрессирующих информативный антиген.Stage 2. Before HSC transplantation, typing of ABO antigens of donor and recipient erythrocytes is performed. Determine informative antigens that allow to establish the differences between donor and recipient erythrocytes according to the ABO system. An antigen is considered informative if it is detected in the phenotype of the recipient and is absent in the phenotype of the donor, or vice versa. The vector of donor chimerism is predicted - the appearance or disappearance of erythrocytes expressing an informative antigen.

Этап 3. После трансплантации ГСК исследование гемопоэтического химеризма проводят с 21 дня каждую неделю до +50 дня и далее по показаниям. Выполняют стандартное иммуногематологическое определение АВО-принадлежности крови реципиента. Анализируют процентное соотношение эритроцитов, экспрессирующих и не экспрессирующих информативные антигены. Оценку количественных значений химеризма осуществляют путем визуального сравнения результата исследования со шкалой-идентификатором процента донорского химеризма.Stage 3. After HSC transplantation, the study of hematopoietic chimerism is carried out from 21 days every week to +50 days and further as indicated. A standard immunohematological determination of the ABO-belonging of the recipient's blood is performed. Analyze the percentage of erythrocytes expressing and not expressing informative antigens. Evaluation of the quantitative values of chimerism is carried out by visual comparison of the test result with the scale-identifier of the percentage of donor chimerism.

Представленные ниже клинические примеры подтверждают возможность использования заявляемого способа при оценке эритроцитарного химеризма после аллоТГСК.The clinical examples presented below confirm the possibility of using the proposed method in assessing erythrocyte chimerism after alloHSCT.

Пример 1Example 1

Пациент Г., 31 год с диагнозом: Острый лимфобластный лейкоз. Группа крови A ccDEE К- Cw-, анти-В антитела IgM - 1:8, IgG - не выявлены. Донор ГСК HLA-идентичный сиблинг с группой крови В ccDEe Κ- Cw-, анти-А антитела IgM - 1:32, IgG - не выявлены. Информативными были признаны антигены А и В, предполагалось появление клеток, экспрессирующих антиген В (B↑) и исчезновение эритроцитов, несущих антиген A (A↓) после трансплантации. АллоТГСК выполнена 26.07.2019. Трансфузионная тактика предусматривала трансфузии отмытых облученных эритроцитов О ccDEEK-. Исследования эритроцитарного химеризма выполнены на 17, 48, 67, 81, 102, 130, 360 дни после пересадки (таблица 2). Донорский химеризм 5% зарегистрирован на +17 день. Донорский химеризм 100% по антигену А установлен на +102 день, по антигену В - на +130 день. При обследовании через 1 год после трансплантации подтверждена полная ремиссия заболевания, донорский эритроцитарный химеризм - 100%. Больной ведет полноценную жизнь хорошего качества.Patient G., 31 years old with a diagnosis of Acute lymphoblastic leukemia. Blood group A ccDEE К- Cw-, anti-B antibodies IgM - 1: 8, IgG - not detected. HSC donor HLA-identical sibling with blood group B ccDEe Κ- Cw-, anti-A IgM antibodies - 1:32, IgG - not detected. The A and B antigens were recognized as informative, the appearance of cells expressing the B antigen (B ↑) and the disappearance of erythrocytes carrying the A antigen (A ↓) after transplantation were assumed. AlloHSC was performed on July 26, 2019. Transfusion tactics included the transfusion of washed irradiated erythrocytes O ccDEEK-. Erythrocyte chimerism studies were performed at 17, 48, 67, 81, 102, 130, 360 days after transplantation (Table 2). Donor chimerism 5% was registered on +17 day. Donor chimerism of 100% for antigen A was set at +102 day, for antigen B - at +130 day. Examination 1 year after transplantation confirmed complete remission of the disease, donor erythrocyte chimerism - 100%. The patient leads a fulfilling life of good quality.

Пример 2Example 2

Пациентка П., 46 лет с диагнозом острый миелоцитарный лейкоз. Группа крови О CcDee К- Cw- (анти-А IgM - 1:8, IgG - 1:4). Донор ГСК родственный идентичный по системе HLA - A ccdee К- Cw-. Информативным признан антиген А, который экспрессировался на донорских эритроцитах и не экспрессировался на клетках реципиента. Предполагалось отслеживать появление клеток, имеющих в фенотипе антиген А (А↑). Аллогенная трансплантация ГСК выполнена 18.12.2019. При необходимости трансфузий эритроцитов переливались отмытые облученные эритроциты О ccdee К- Cw-. В течение 200 дней после ТГСК у реципиента не выявлялись эритроциты с фенотипом донора (таблица 3). Установлен диагноз: красноклеточная аплазия после аллогенной родственной совместимой ТГСК, ремиссия на основании трепанобиопсии +50 день после ТГСК. Скорректирована терапия. В течение 6 месяцев после трансплантации у пациентки наблюдалось постепенное снижение титров антиэритроцитарных анти-А антител. 06.07.20 (+201 день) было зафиксировано появление эритроцитов, характерных для донора ГСК, и последующее быстрое нарастание донорского химеризма. Анти-А антитела не выявлены. При обращении пациентки на +271 день после ТГСК выявлено 80% посттрансплантационных донорских эритроцитов. Пациентка активна, чувствует себя хорошо.Patient P., 46 years old, diagnosed with acute myelocytic leukemia. Blood group O CcDee K-Cw- (anti-A IgM - 1: 8, IgG - 1: 4). HSC related donor, identical in the HLA system - A ccdee K-Cw-. Antigen A, which was expressed on donor erythrocytes and was not expressed on the cells of the recipient, was recognized as informative. It was supposed to track the appearance of cells with antigen A (A ↑) in the phenotype. Allogeneic HSC transplantation was performed on December 18, 2019. If necessary, erythrocyte transfusions were transfused washed irradiated erythrocytes O ccdee K-Cw-. Within 200 days after HSCT, no erythrocytes with the donor phenotype were detected in the recipient (Table 3). Diagnosed with red cell aplasia after allogeneic related compatible HSCT, remission based on trepanobiopsy +50 days after HSCT. Therapy has been adjusted. Within 6 months after transplantation, the patient showed a gradual decrease in anti-erythrocyte anti-A antibody titers. On July 6, 20 (+201 days), the appearance of erythrocytes characteristic of the HSC donor was recorded, followed by a rapid increase in donor chimerism. Anti-A antibodies were not detected. When the patient applied for +271 days after HSCT, 80% of post-transplant donor erythrocytes were detected. The patient is active and feels well.

Список литературыBibliography

1. Блау О.В. Химеризм после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. // Клиническая онкогематология 2013; 6(1): 34-39.1. Blau OV Chimerism after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. // Clinical hematology oncology 2013; 6 (1): 34-39.

2. Лавритенко В.А., Майренко Ю.Е., Березовская Е.Ю. и др. Становление донорского химеризма у пациентов с первичными иммунодефицитами после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток. // Клиническая онкогематология 2018; 13(2): 82-92.2. Lavritenko V.A., Mayrenko Yu.E., Berezovskaya E.Yu. et al. Formation of donor chimerism in patients with primary immunodeficiency after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. // Clinical hematology oncology 2018; 13 (2): 82-92.

3. Lion F., Watzinger S., Preuner Η. et al. The EuroChimerism concept for a standardized approach to chimerism analysis after allogeneic stem cell transplantation// Leukemia, 2012, 26(8): 1821-1828.3. Lion F., Watzinger S., Preuner A. et al. The EuroChimerism concept for a standardized approach to chimerism analysis after allogeneic stem cell transplantation // Leukemia, 2012, 26 (8): 1821-1828.

4. Schäfer S.H., Finke J. Mismatched unrelated alternative donors for hematological malignancies. Semin Hematol 2016; 53 (2): 77-81.4. Schäfer S.H., Finke J. Mismatched unrelated alternative donors for hematological malignancies. Semin Hematol 2016; 53 (2): 77-81.

5. Менделеева Л.П., Мишин Η.Ε., Клясова Γ.Α., Любимова Л.С. и др. Инфекции в течение первых 100 дней после трансплантации гемопоэтических клеток. // Гематология и трансфузиология 2007; 52 (4):8-15.5. Mendeleeva LP, Mishin Η.Ε., Klyasova Γ.Α., Lyubimova L.S. et al. Infections during the first 100 days after hematopoietic cell transplantation. // Hematology and Transfusiology 2007; 52 (4): 8-15.

6. Fehse В., Chuchlovin Α., Kuhcke К. et al. Real-time quantitative Y chromosome-specific PCR (QYCS-PCR) for monitoring hematopoietic chimerism after sex-mismatched allogeneic stem cell transplantatoin// J. Hematother. Cell Res., 2001, 10(3): 419-425.6. Fehse B., Chuchlovin A., Kuhcke K. et al. Real-time quantitative Y chromosome-specific PCR (QYCS-PCR) for monitoring hematopoietic chimerism after sex-mismatched allogeneic stem cell transplantatoin // J. Hematother. Cell Res. 2001,10 (3): 419-425.

7. Bader P., Niethammer D., Willasch Α., Kreyenberg H., Klingebiel T. How and when should we monitor chimerism after allogeneic stem cell transplantation? Bone Marrow Transplant. 2005; 35(2): 107-19.7. Bader P., Niethammer D., Willasch Α., Kreyenberg H., Klingebiel T. How and when should we monitor chimerism after allogeneic stem cell transplantation? Bone Marrow Transplant. 2005; 35 (2): 107-19.

8. Лавриненко Β.Α., Савицкая Т.В., Волочник Ε.В. и др. Количественный анализ химеризма после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток молекулярно-генетическими методами // Онкогематология 2014; 9(2): 29-36.8. Lavrinenko Β.Α., Savitskaya TV, Volochnik Ε.V. et al. Quantitative analysis of chimerism after allogeneic transplantation of hematopoietic stem cells by molecular genetic methods // Oncohematology 2014; 9 (2): 29-36.

9. Порешина Л.П. Эритроцитарный химеризм при аллогенной близкородственной трансплантации костного мозга // Автореферат дис... док. Биол. наук. - М., 2004. - 35 с.9. Poreshina L.P. Erythrocytic chimerism in allogeneic closely related bone marrow transplantation // Abstract of dis ... doc. Biol. sciences. - M., 2004 .-- 35 p.

Figure 00000001
Figure 00000001

Figure 00000002
Figure 00000002

Figure 00000003
Figure 00000003

Claims (1)

Способ оценки эритроцитарного химеризма при исследовании антигенов АВО, включающий формирование шкалы-идентификатора процента донорского химеризма, типирование антигенов АВО эритроцитов донора и реципиента, определение информативных антигенов, мониторинг эритроцитарного химеризма после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток, отличающийся тем, что производится сопоставление результатов АВО-тестирования реципиента со шкалой-идентификатором, причем в качестве детектирующего метода используют агглютинацию в гелевой колонке; наличие донорского химеризма диагностируют при обнаружении у реципиента эритроцитов, несущих антигены АВО донора; отсутствие донорского химеризма - при отсутствии у реципиента эритроцитов, экспрессирующих АВО антигены донора.A method for assessing erythrocyte chimerism in the study of ABO antigens, including the formation of a scale-identifier of the percentage of donor chimerism, typing of ABO antigens of donor and recipient erythrocytes, determination of informative antigens, monitoring of erythrocyte chimerism after transplantation of allogeneic hematopoietic stem cells, which differs in that ABO a recipient with an identifier scale, moreover, agglutination in a gel column is used as a detection method; the presence of donor chimerism is diagnosed when erythrocytes carrying the donor's ABO antigens are found in the recipient; absence of donor chimerism - in the absence of erythrocytes in the recipient expressing the donor's ABO antigens.
RU2020135614A 2020-10-28 2020-10-28 Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens RU2758064C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020135614A RU2758064C1 (en) 2020-10-28 2020-10-28 Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2020135614A RU2758064C1 (en) 2020-10-28 2020-10-28 Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2758064C1 true RU2758064C1 (en) 2021-10-26

Family

ID=78289580

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2020135614A RU2758064C1 (en) 2020-10-28 2020-10-28 Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2758064C1 (en)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2193197C1 (en) * 2001-07-20 2002-11-20 Башкирский государственный медицинский университет Method for estimating biological compatibility of erythrocytic mass of donated and recipient's blood
RU2667006C1 (en) * 2017-06-07 2018-09-13 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" Method for determining posttransplantation chimerism in analysis of point mutations of base substitution in genes f2, f5, f7, f13, fgb, itga2, itgb3, pai-1
RU2667127C1 (en) * 2017-06-28 2018-09-14 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" Method for determining hematopoietic chimerism in the study of single nucleotide polymorphisms of genes mther: 677, mther: 1298, mtr: 2756, mtrr: 66

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2193197C1 (en) * 2001-07-20 2002-11-20 Башкирский государственный медицинский университет Method for estimating biological compatibility of erythrocytic mass of donated and recipient's blood
RU2667006C1 (en) * 2017-06-07 2018-09-13 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" Method for determining posttransplantation chimerism in analysis of point mutations of base substitution in genes f2, f5, f7, f13, fgb, itga2, itgb3, pai-1
RU2667127C1 (en) * 2017-06-28 2018-09-14 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства" Method for determining hematopoietic chimerism in the study of single nucleotide polymorphisms of genes mther: 677, mther: 1298, mtr: 2756, mtrr: 66

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Mehdi Alizadeh et al. Quantitative assessment of hematopoietic chimerism after bone marrow transplantation by real-time quantitative polymerase chain reaction. Blood, 2002, 99(12) p. 4618-4625. doi: 10.1182/blood.v99.12.4618. *
Mehdi Alizadeh et al. Quantitative assessment of hematopoietic chimerism after bone marrow transplantation by real-time quantitative polymerase chain reaction. Blood, 2002, 99(12) p. 4618-4625. doi: 10.1182/blood.v99.12.4618. R.L. Niece A Differential Hemolysis Technique Using a Coulter Counter to Assay Erythrocyte Chimerism. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 1968, 128(1), p. 36-38. doi: 10.3181/00379727-128-32936. *
R.L. Niece A Differential Hemolysis Technique Using a Coulter Counter to Assay Erythrocyte Chimerism. Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine, 1968, 128(1), p. 36-38. doi: 10.3181/00379727-128-32936. *

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Grisendi et al. Detection of microparticles from human red blood cells by multiparametric flow cytometry
CN101027557B (en) Whole blood preparation for cytometric analysis of cell signaling pathways
EP0266194A2 (en) Viable cell labelling
DK2923208T3 (en) Methods for determining the risk of acute graft-versus-host disease
Gjurich et al. Flow cytometric analysis of immune cells within murine aorta
CN101484586A (en) Methods and reagents for detecting susceptibility to graft versus host disease or transplant related mortality
Petsiou et al. A modified flow cytometry method for objective estimation of human CD4+ regulatory T cells (CD4+ Tregs) in peripheral blood, via CD4/CD25/CD45RO/FoxP3 labeling
US20100203058A1 (en) Diagnostics and therapeutics based on circulating progenitor cells
RU2758064C1 (en) Method for determining posttransplantation chimerism in course of study of abo system erythrocyte antigens
JP2007105037A (en) Test for stem cell transplantation utilizing chimerism
Anandarajan et al. Correlation of academic scores with blood group among first MBBS medical students
Lazarski et al. Flow-based analysis of cell division identifies highly active populations within plasma products during mixed lymphocyte cultures
Rimac et al. Role of flow cytometry in evaluation of the cellular therapy products used in haematopoietic stem cell transplantation
Chesney et al. Clinical utility of flow cytometry in the study of erythropoiesis and nonclonal red cell disorders
RU2761100C1 (en) Method for determining the level of post-transplant chimerism by assessing the expression of rhesus and kell antigens in gel cards
Greve et al. Flow cytometry in transfusion medicine: development, strategies and applications
JP2553606B2 (en) Method for separating and using density-specific blood cells
Ruscher et al. Intravenous labeling and analysis of the content of thymic perivascular spaces
Wada et al. Method of separation and concentration of fetal nucleated red blood cells in maternal blood and its application to fetal diagnosis
JP7368678B1 (en) Methods for measuring the relative abundance of specific cell subpopulations in a CD4+ T cell population
RU2581925C2 (en) Method for assessing allogenic immune response in short-term mixed mononuclear culture of unrelated donors
RU2770284C1 (en) Method for determining circulating tumor cells in patients with breast cancer
US20160223557A1 (en) Method of isolating circulating tumor cells
ES2428920T3 (en) Flow cytometry procedure for the determination of the total number of leukocytes and the number of thrombocytes, as well as for the differentiation of leukocytes in bird blood samples
Solders MAIT cells in placental tissues and their reconstitution following allogeneic hematopoietic stem cell transplantation