RU2705344C1

RU2705344C1 - Method for breast cancer screening and predisposition to it

Info

Publication number: RU2705344C1
Application number: RU2019107398A
Authority: RU
Inventors: Дмитрий Константинович Чебанов; Леонид Наумович Фишер; Ольга Алексеевна Фишер; Александр Андреевич Абрамов; Надежда Сергеевна Татевосова
Original assignee: Ольга Алексеевна Фишер
Priority date: 2019-03-15
Filing date: 2019-03-15
Publication date: 2019-11-06

Abstract

FIELD: medicine.

SUBSTANCE: invention refers to medicine, namely to oncology, and can be used for screening of breast cancer and predisposition to it. A mammography and an ultrasonography are performed. That is combined with radiothermometric examination of the mammary glands and separating a micro-RNA panel from biological fluids containing miR-199a, miR-222, let-7a, miR-196a, miR-106a, miR-21, miR-137, miR-155.

EFFECT: method enables to isolate a group of breast pathologies from the mass of dyshormonal diseases of the mammary glands, which in the foreseeable future will turn into cancer, due to combined use of radio thermometry and a micro-RNA panel.

1 cl, 1 dwg, 2 tbl, 1 ex

Description

Одной из ведущих онкологических нозологий в настоящее время является рак молочной железы. Данная патология занимает ведущие позиции по числу заболевших и по числу умерших. Решением данной проблемы является проведение научно обоснованного скрининга, которые представляют собой комплекс диагностических и лечебных мероприятий, направленных на раннее выявление онкопатологии молочных желез. Большим шагом вперед является создание шкалы BI-RADS, которая систематизировала все состояния молочной железы и оценила все изменения с позиции риска злокачественной трансформации ткани молочной железы.One of the leading oncological nosologies at present is breast cancer. This pathology occupies a leading position in the number of cases and the number of deaths. The solution to this problem is the conduct of evidence-based screening, which is a set of diagnostic and therapeutic measures aimed at early detection of breast cancer. A big step forward is the creation of the BI-RADS scale, which systematized all the conditions of the mammary gland and evaluated all the changes from the standpoint of the risk of malignant transformation of the breast tissue.

BI-RADS 0 - оценка является неполной. Используется при скрининге рака молочной железы, когда необходимы дополнительные исследования (повторный вызов)BI-RADS 0 - assessment is incomplete. Used for breast cancer screening when additional studies are needed (recall)

BI-RADS 1 - отрицательный результат (нет данных, подтверждающих наличие узлового образования). Диффузные измененияBI-RADS 1 - negative result (no data confirming the presence of nodular formation). Diffuse changes

BI-RADS-2 - Доброкачественные изменения, нет признаков злокачественного роста. Выявляются доброкачественные объемные образования, доброкачественные кальцинатыBI-RADS-2 - Benign changes, no signs of malignant growth. Benign volumetric formations, benign calcifications are detected

BI-RADS-3 - вероятно доброкачественные изменения - требуется короткий интервал контроля (6 мес). Вероятность злокачественного процесса менее 2%. По истечении 6 месяцев контрольное исследование однозначно решит вопрос о доброкачественности или злокачественности процессаBI-RADS-3 - probably benign changes - a short monitoring interval (6 months) is required. The probability of a malignant process is less than 2%. After 6 months, the control study will unequivocally solve the issue of benign or malignant process

BI-RADS-4 - Изменения, подозрительные на злокачественность. Вероятность злокачественного процесса от 2 до 95%, рекомендуется биопсия. Направление в онкологическое учреждениеBI-RADS-4 - Changes suspected of malignancy. The probability of a malignant process is from 2 to 95%, a biopsy is recommended. Referral to an oncological institution

BI-RADS-5 - Злокачественные изменения. Вероятность более 95%, рекомендуется биопсия. Направление в онкологическое учреждениеBI-RADS-5 - Malignant changes. The probability is more than 95%, a biopsy is recommended. Referral to an oncological institution

BI-RADS-6 - гистологически верифицированный рак молочной железы (Г.П Корженкова, 2016)BI-RADS-6 - histologically verified breast cancer (G.P. Korzhenkova, 2016)

В настоящее время ведущим диагностическим методом скрининга является сочетание маммографии и (в меньшей степени) ультразвукового исследования молочных желез. Преимущества маммографии выражаются в том, что эта методика позволяет визуализировать все проявления известных разновидностей непальпируемых новообразований (скопление микрокальцинатов размером от 50 мкм, локальная тяжистая перестройка структуры, рак внутри протока. Высокое разрешение обеспечивает дифференциальную уточненную диагностику заболеваний молочной железы. Маммография позволяет определить характер роста опухоли (моно- или мультицентрический), степень распространенности процесса. Недостатком маммографии связан с дозовой нагрузкой - от 0,15 м3в до 1.0 м3в) является невозможность определения узловых образований менее 3 мм - предел метода. Данный метод так же неэффективен при высокой рентгенологической плотности. Высокая рентгенологическая плотность уменьшает эффективность метода на 50%-100%. (Каприн А.Д., Рожкова Н.И., 2019). Ультразвуковое обследование молочной железы позволяет компенсировать недостатки маммографии и в комплексном применении повышает уточненную диагностику до 95%, но невозможность использовать данный метод изолированно в плане скрининга оставляет ряд нерешенных проблем. Главной проблемой является то, что у вышеописанных методик есть предел метода - минимальный размер выявляемого образования составляет 3 мм. Учитывая тот факт, что 1 мм опухолевой массы содержит 100 миллионов онкологических клеток, можно говорить о ранней клинической, но поздней биологической патологии. Поэтому даже сочетание этих методов не решает проблему выявления агрессивных форм рака молочной железы малых размеров, которые и приводят к ранней смертности.Currently, the leading diagnostic screening method is a combination of mammography and (to a lesser extent) mammary ultrasound. The advantages of mammography are that this technique allows you to visualize all the manifestations of known varieties of non-palpable neoplasms (an accumulation of microcalcinates from 50 microns in size, local heavy structural restructuring, cancer within the duct. High resolution provides a differential, accurate diagnosis of breast diseases. Mammography allows you to determine the nature of tumor growth (mono- or multicentric), the degree of prevalence of the process.The disadvantage of mammography is associated with dose load - from 0.15 m3v to 1.0 m3v) is the impossibility of determining nodal formations less than 3 mm - the limit of the method. This method is also ineffective at high x-ray density. High x-ray density reduces the effectiveness of the method by 50% -100%. (Kaprin A.D., Rozhkova N.I., 2019). Ultrasound examination of the mammary gland allows you to compensate for the shortcomings of mammography and, in complex use, increases the specified diagnosis to 95%, but the inability to use this method in isolation in terms of screening leaves a number of unresolved problems. The main problem is that the above methods have a method limit - the minimum size of the detected formation is 3 mm. Given the fact that 1 mm of the tumor mass contains 100 million cancer cells, we can talk about early clinical, but late biological pathology. Therefore, even a combination of these methods does not solve the problem of detecting aggressive forms of breast cancer of small sizes, which lead to early mortality.

Выделяют несколько механизмов активации пролиферативной активности эпителиальных клеток при предопухолевой активности эпителиальных клеток при предопухолевых состояниях молочной железы. Первый механизм активации связан с воспалительными цитокинами (интерлейкин-1, фактор некроза опухоли), которые активизируют ядерный фактор транскрипции, определяющий активное клеточной деление. Постоянная низкодозовая продукция фактора некроза опухоли стимулирует активность циклооксигеназы 2-типа - основного фермента биосинтеза простагландина Е2, которые в свою очередь поддерживают высокую экспрессию EGF, FGF, VEGF, IGF.There are several mechanisms of activation of the proliferative activity of epithelial cells in pre-tumor activity of epithelial cells in pre-tumor conditions of the mammary gland. The first activation mechanism is associated with inflammatory cytokines (interleukin-1, tumor necrosis factor), which activate the nuclear transcription factor, which determines active cell division. The constant low-dose production of tumor necrosis factor stimulates the activity of type 2 cyclooxygenase, the main prostaglandin E2 biosynthesis enzyme, which in turn supports high expression of EGF, FGF, VEGF, IGF.

Другой механизм стимуляции пролиферации эпителия осуществляется многочисленными факторами роста (EGF, FGF, VEGF, IGF)Another mechanism for stimulating epithelial proliferation is provided by numerous growth factors (EGF, FGF, VEGF, IGF)

Третий путь стимуляции пролиферации - взаимодействие стероидных гормонов с соответствующими рецепторами приводит к активации транскрипции с увеличением пролиферативной активности. Важно отметить, что риск развития онкологической трансформации ткани молочной железы положительно коррелирует с образованием очаговых пролифератов. Так при наличии более 3 фокусов атипии рак развивался в 47% случаев, а при наличии 1 фокуса только 25% наблюдений.The third way to stimulate proliferation is the interaction of steroid hormones with corresponding receptors leads to the activation of transcription with an increase in proliferative activity. It is important to note that the risk of developing oncological transformation of breast tissue positively correlates with the formation of focal proliferates. So, in the presence of more than 3 foci of atypia, cancer developed in 47% of cases, and in the presence of 1 focus only 25% of cases.

Анализ данных трех путей дает основание предположить о последовательно-параллельном развитии этих путей с выраженной аутокринной стимуляцией. То есть, если первый путь активируется и доходит до определенного уровня, то становится выраженным второй путь и уже начинается активация третьего (гормонального) пути). Ставится следующий вопрос: в какой период и при каких изменениях в ткани молочной железы начинаются те предраковые изменения, которые приведут к развитию рака молочной железы.An analysis of these three pathways suggests a sequentially parallel development of these pathways with pronounced autocrine stimulation. That is, if the first pathway is activated and reaches a certain level, then the second pathway becomes pronounced and the activation of the third (hormonal) pathway already begins). The following question is posed: in what period and at what changes in breast tissue those precancerous lesions begin that will lead to the development of breast cancer.

Анализ всех вышеописанных путей пролиферации тканей молочных желез позволяет отметить одно общее свойство: повышение температуры при активации пролиферативных процессов. Выявление роста температуры ткани молочной железы, оценка ее динамики позволяет находить те «зоны риска», в которых появляются неопластические изменения. Наилучшей технологией для измерения внутренней и поверхностной температуры ткани молочной железы является методика радиотермометрии (РТМ) (Веснин С.Г., 2000).An analysis of all the above-described pathways for the proliferation of mammary gland tissues allows us to note one common property: an increase in temperature upon activation of proliferative processes. The identification of the increase in the temperature of the breast tissue, the assessment of its dynamics allows us to find those “risk zones” in which neoplastic changes appear. The best technology for measuring the internal and surface temperature of breast tissue is the method of radiothermometry (RTM) (Vesnin S.G., 2000).

Данная технология основана на том, что все ткани человека обладают собственным электромагнитным излучением. Интенсивность излучения положительно коррелирует с температурой. Чем более выражена пролиферативная активность ткани, тем выше температура ткани. Данное теоретическое положение было обосновано французским ученым Готерье. Используя радиотермометрический комплекс, он провел исследование у 500 пациенток из Франции. Контрольной группой являлись пациентки из Великобритании, которым проводилось исследование по стандартной диагностической программе (ММГ+УЗИ молочных желез). В результате 10-летней работы было выявлено, что число диагностированных раков молочной железы во Франции в несколько раз превосходило выявленных раков молочной железы в Великобритании. Вместе с тем в ходе многочисленных научных исследований было установлено, что повышение температуры может быть не только при раке, но и при различных воспалительных заболеваниях молочной железы. Дифференциальная диагностика воспалительных и злокачественных заболеваний молочной железы крайне затруднительна.This technology is based on the fact that all human tissues have their own electromagnetic radiation. The radiation intensity positively correlates with temperature. The more pronounced the proliferative activity of the tissue, the higher the temperature of the tissue. This theoretical position was substantiated by the French scientist Gautier. Using a radiothermometric complex, he conducted a study in 500 patients from France. The control group consisted of patients from the United Kingdom, who were tested according to the standard diagnostic program (MMG + ultrasound of the mammary glands). As a result of 10 years of work, it was revealed that the number of diagnosed breast cancers in France was several times higher than the detected breast cancers in the UK. However, in the course of numerous scientific studies, it was found that an increase in temperature can be not only in cancer, but also in various inflammatory diseases of the breast. Differential diagnosis of inflammatory and malignant diseases of the mammary gland is extremely difficult.

С целью решения данной проблемы мы обратили внимание на следующие факты. Известно, что некоторые формы ФКМ ассоциированы с повышенным риском развития рака молочной железы в будущем (Degnim A.C., Dupont WD, Radisky D.C., Cancer. 2016 Oct: 122 (19): 2971-8. Соответственно, оптимизация диагностики и тактики ведения женщин с ДЗМЖ является частью стратегии снижения заболеваемости РМЖIn order to solve this problem, we drew attention to the following facts. It is known that some forms of FCM are associated with an increased risk of developing breast cancer in the future (Degnim AC, Dupont WD, Radisky DC, Cancer. 2016 Oct: 122 (19): 2971-8. Accordingly, the optimization of diagnosis and management of women with DZMZh is part of a strategy to reduce breast cancer

В.А. Хайленко (2018) установил, что основные мутации, приводящие к раку молочной железы, накапливаются в предраковом состоянии. Исследование мутаций в генах ТР53, PIK3CA, NCOA2, ABL2, PDE4DIP, AHNAK, RUNX1 показало, что вся «злокачественность» возникла уже в предраковом состоянии, до развития способности к инвазии. Это дало основание к изучению микро-РНК как предиктора неопластической трансформации ткани молочной железы. (К.А. Гришина, В.А. Хайленко, 2018) Наше внимание привлек такой класс биологических молекул как микро-РНК.V.A. Khailenko (2018) found that the main mutations leading to breast cancer accumulate in a precancerous state. The study of mutations in the TP53, PIK3CA, NCOA2, ABL2, PDE4DIP, AHNAK, RUNX1 genes showed that all “malignancy” arose in a precancerous state, before the development of invasion ability. This gave rise to the study of micro-RNA as a predictor of neoplastic transformation of breast tissue. (K.A. Grishina, V.A. Khailenko, 2018) Our attention was drawn to such a class of biological molecules as micro-RNA.

Выделение микроРНК по следующей методике: в образец добавляют 5 мкМ протеиназы К, инкубируют при 56 градусов Цельсия в течение 1 часа, затем используют колонки Exigon, для очистки микроРНК-образец наносят на колонку, после чего проводят центрифугирование при 2000 g на центрифуге Epprndorf 5104, затем колонку 3 раза промывают промывочным буфером, после каждого промывания проводят центрифугирование при 2000 g на центрифуге Eppendorf 5104, потом на колонку наносятся 20 мкл безнуклеазной воды. Колонку оставляют на 10 минут при комнатной температуре, а потом центрифугируют при 3000 g на центрифуге Eppendorf 5104, после чего проводят реакцию обратной транскрипции при помощи обратной транскриптазы (Exigon), для этого к 8 мкл образца добавляют 8 мкл реагента и инкубируют в течение 1 часа при температуре 60 градусов цельсия, после чего реакцию останавливают нагреванием до 95 градусов цельсия в течение 5 минут. Затем проводят полимеразную цепную реакцию с детекцией в реальном времени на приборе 7500Applied Biosystems, с праймерами на следующие микро РНК: has-miR-199а-3р, has-miR-222-3р, hsa-let-7a-5p, микро PHК-196a-2, has-miR-106a-5р, hsa-miR-21-5p, hsa-miR-137, hsa-miR - 155 результаты анализируют при помощи компьютерной программы GenEx qPCR software и оформляют в виде таблицы (см. фиг. 1 - распределение микроРНК, выделенной из ватного зонда с биологической жидкостью, с ФКМ и РМЖ) Концентрация представлена как log с основанием 2 копий микро РНК в микролитре.Isolation of miRNAs by the following method: 5 μM proteinase K is added to the sample, incubated at 56 degrees Celsius for 1 hour, then Exigon columns are used, the miRNA sample is applied to the column to be purified, then centrifuged at 2000 g using an Epprndorf 5104 centrifuge, then the column is washed 3 times with washing buffer, after each washing centrifugation is carried out at 2000 g in an Eppendorf 5104 centrifuge, then 20 μl of non-nucleated water are applied to the column. The column is left for 10 minutes at room temperature, and then centrifuged at 3000 g on an Eppendorf 5104 centrifuge, after which a reverse transcription reaction is performed using reverse transcriptase (Exigon), for this, 8 μl of reagent is added to an 8 μl sample and incubated for 1 hour at a temperature of 60 degrees Celsius, after which the reaction is stopped by heating to 95 degrees Celsius for 5 minutes. Then a polymerase chain reaction is carried out with real-time detection on a 7500Applied Biosystems instrument, with primers for the following micro RNAs: has-miR-199a-3p, has-miR-222-3p, hsa-let-7a-5p, micro PHK-196a -2, has-miR-106a-5p, hsa-miR-21-5p, hsa-miR-137, hsa-miR - 155 the results are analyzed using the GenEx qPCR software and formatted as a table (see Fig. 1 - distribution of microRNA isolated from a cotton probe with biological fluid, with PCM and breast cancer) The concentration is presented as log with the base of 2 copies of micro RNA in a microliter.

Превышение нормы на 1,5-2 единицы - это незначительное повышение, на 2-5 - повышение, на 5 и более - значительное повышение.Exceeding the norm by 1.5-2 units is a slight increase, by 2-5 - an increase, by 5 or more - a significant increase.

Микро-РНК представляют собой «глобальные переключатели генома», регулирующие множественные метаболические пути и образование белковых продуктов. Доказано, что ряд микро-РНК имеют онкогенное действие, к которым относят микро-РНК-21, 155, 182, 10b, 27а, 9. Микро РНК 21 является одной из наиболее известных и изученных микроРНК в разных видах опухолей. Ее экспрессия резко повышена при РМЖ, что связывают с ростом опухоли, метастазами и плохим прогнозом течения заболевания. Гиперэкспрессия микроРНК-155 часто встречается в ткани опухоли молочной железы и негативно влияет на выживаемость и хемочувствительность (через ген FOXO3a) опухолевых клеток, в то время как пониженная экспрессия miR-155 может усилить клеточную хемочувствительность и апоптоз.Micro-RNAs are “global genome switches” that regulate multiple metabolic pathways and the formation of protein products. It has been proven that a number of micro-RNAs have an oncogenic effect, which includes micro-RNA-21, 155, 182, 10b, 27a, 9. Micro-RNA 21 is one of the most famous and studied miRNAs in different types of tumors. Its expression is sharply increased in breast cancer, which is associated with tumor growth, metastases and a poor prognosis of the course of the disease. Overexpression of miRNA-155 is often found in breast tumor tissue and adversely affects the survival and chemosensitivity (via the FOXO3a gene) of tumor cells, while decreased miR-155 expression can enhance cell chemosensitivity and apoptosis.

Уровни некоторых микро-РНК изучены при доброкачественной патологии. По данным J. Chan, экспрессия MiR-21 вызывает блокирование генов, связанных с апоптозом. MiR-221/222 относят к онкогенным микро-РНК, сверхэкспрессия которых в разных типах опухолей приводит к усилению клеточной пролиферации, ингибированию апоптоза, индукции ангиогенеза. Подавление и низкий уровень экспрессии MiR 221/222 в опухолях молочной железы коррелирует с положительным статусом эстрогеновых рецепторов и более благоприятным прогнозом заболевания.Levels of some micro-RNAs have been studied in benign pathology. According to J. Chan, expression of MiR-21 causes blocking of apoptosis-related genes. MiR-221/222 is classified as oncogenic micro-RNA, overexpression of which in different types of tumors leads to increased cell proliferation, inhibition of apoptosis, and the induction of angiogenesis. Suppression and low expression of MiR 221/222 in breast tumors correlate with a positive status of estrogen receptors and a more favorable prognosis of the disease.

Активность MiR-155 необходима для поддержания нормального функционирования клеток, увеличение экспрессии данной микро-РНК отмечено при аутоиммунных заболеваниях и при различных формах рака. Кроме того, данная микро-РНК ассоциируется с эстроген - позитивным статусом опухоли и потенциально может служить диагностическим маркером.The activity of MiR-155 is necessary to maintain the normal functioning of cells, an increase in the expression of this micro-RNA is noted in autoimmune diseases and in various forms of cancer. In addition, this micro-RNA is associated with estrogen - a positive tumor status and can potentially serve as a diagnostic marker.

По данным ряда авторов (Чебанов Д.К., Михайлова И.Н., Абрамов А.А., Воробьева Н.С., 2016) MiR-205 индуцирует апоптоз и тормозит рост и инвазию клеток опухоли, а также является супрессором онкогенеза. Данная работа является аналогом нашего изобретенияAccording to several authors (Chebanov D.K., Mikhailova I.N., Abramov A.A., Vorobyova N.S., 2016) MiR-205 induces apoptosis and inhibits the growth and invasion of tumor cells, and is also a suppressor of oncogenesis. This work is an analogue of our invention.

Прототипом нашей работы является диссертация В.В. Козлова, в которой изучено несколько микро-РНК у пациенток с диагнозом: фиброаденома молочной железы. Изучались: Микро-РНК 21, 155, 221, 222, 205. Автором отмечено десятикратное увеличение микроРНК, индуцирующих апоптоз и клеточный рост. В отличии от данной работы, мы увеличили платформу исследуемых микро-РНК включив в нее микро РНК 108, -137, -199, роль которых отражается прежде всего в индикации противоопухолевых возможностей организма, что позволяет проводить более информативный анализ резистентности организма к опухолевой агрессии, что повышает диагностическую ценность скрининговых исследований по выявлению рака молочной железы.The prototype of our work is the dissertation of V.V. Kozlova, in which several micro-RNAs were studied in patients with a diagnosis of breast fibroadenoma. The following were studied: Micro-RNA 21, 155, 221, 222, 205. The author noted a ten-fold increase in microRNAs inducing apoptosis and cell growth. In contrast to this work, we increased the platform of the studied micro-RNAs by including micro RNAs 108, -137, -199, the role of which is reflected primarily in the indication of the antitumor capabilities of the body, which allows for a more informative analysis of the body's resistance to tumor aggression, which increases the diagnostic value of screening for breast cancer.

Резидентом Сколково лабораторией Онкоюнайт - ген. Директор Чебанов Д.К. совместно с кафедрой превентологии Российской Академии Медико-Социальной Реабилитации к.м.н. Фишер Л.Н., и к.м.н. Фишер О.А разработана панель для определения микро-РНК для оценки риска развития рака молочной железы:Skolkovo resident onkoyunait laboratory - gene. Director Chebanov D.K. Together with the Department of Preventology of the Russian Academy of Medical and Social Rehabilitation, Ph.D. Fisher L.N., and candidate of medical sciences Fisher O.A. developed a panel for determining micro-RNA to assess the risk of developing breast cancer:

1 has-miR-199a-3p - ответственен за метастазирование. Стимуляция ангиогенеза через сверхэкспрессию АроЕ - повышение в опухоли1 has-miR-199a-3p - responsible for metastasis. Stimulation of angiogenesis through overexpression of ApoE - increase in the tumor

2. hsa-miR-222-3p - супрессор, усиление пролиферации, а так же дифференцировка и блокада апоптоза в клетках - повышение при риске2. hsa-miR-222-3p - suppressor, increased proliferation, as well as differentiation and block of apoptosis in cells - increased risk

3. has-let-7a-5p - увеличение уровня интегрина В-3 - ассоциирован с ФНО - контроль пролиферации - снижен при риске заболевания3. has-let-7a-5p - increased integrin B-3 level - associated with TNF - proliferation control - reduced at risk of disease

4. микро-РНК-196ф-2 - защитный фактор. Снижение роста и пролиферации, контроль миграции и инвазии - снижает риск опухоли4. micro-RNA-196f-2 is a protective factor. Decreased growth and proliferation, control of migration and invasion - reduces the risk of tumor

5. has-miR-106a-5p - индуцирует апоптоз, снижает пролиферацию - снижен при опухоли5. has-miR-106a-5p - induces apoptosis, reduces proliferation - reduced with a tumor

6. hsa-miR-21-5p - активация PI-3K7 Akt пути - пролиферация и выживание клеток - повышается при риске6. hsa-miR-21-5p - activation of the PI-3K7 Akt pathway - cell proliferation and survival - increased at risk

7. has-miR-21-137 - пролиферация, апоптоз - снижен при заболевании7. has-miR-21-137 - proliferation, apoptosis - reduced with disease

8. has-miR-155 - снижение уровня таурина, повышение влияния оксидативного стресса - повышен при дефиците таурина.8. has-miR-155 - a decrease in taurine levels, an increase in the effect of oxidative stress - increased with taurine deficiency.

9. miR-199а-5р - биомаркер, связанный с данной микро-РНК, подавлял подавляющую опухоль роль в раке молочной железе.9. miR-199a-5p, a biomarker associated with this micro-RNA, suppressed the tumor-inhibiting role in breast cancer.

Таким образом, совместное использование радиотермометрии и панели вышеперечисленных микро-РНК позволяет выделить из массы дисгормональных заболеваний молочных желез группу тех патологий молочной железы, которая в обозримом будущем перейдет в рак. Это позволяет назначать разработанный на кафедре превентологии индивидуальный онкопрофилактический комплекс, добиваясь регресса предопухолевой патологии.Thus, the joint use of radiothermometry and a panel of the above micro-RNAs makes it possible to isolate from the mass of dishormonal diseases of the mammary glands a group of those pathologies of the mammary gland that in the foreseeable future will turn into cancer. This allows us to appoint an individual cancer prevention complex developed at the Department of Preventology, achieving regression of pre-tumor pathology.

Описание методики:Description of the technique:

В настоящее время при прохождении скрининга рака молочной железы пациентке в возрасте 39-65 лет проводится осмотр молочных желез и маммография. С целью уточнения диагноза проводится ультразвуковое исследование молочных желез. Если пациентка по шкале BI-RADS относится к группе 4, 5, 6, пациентка направляется на дообследование в онкологический диспансер. Если пациентка по данным обследования относится к 1 или 2 группе по данной шкале, то она наблюдается у гинеколога. Если пациентка относится к 3 группы шкалы BI-RADS, то так как данная группа относится к риску развития рака молочной железы с вероятностью менее 2%, требуются дополнительные диагностические мероприятия, так как нельзя исключить наличие агрессивной формы рака молочной железы, который за 6 месяцев будет бурно прогрессировать, а именно данная агрессивная форма рака молочной железы сопровождается повышенным метастазированием и смертностью. С целью решения данной проблемы нами предложена следующая методика:At the time of screening for breast cancer, a patient aged 39-65 years is undergoing breast examination and mammography. In order to clarify the diagnosis, an ultrasound examination of the mammary glands is performed. If the patient on the BI-RADS scale belongs to group 4, 5, 6, the patient is sent for further examination at the oncology clinic. If the patient according to the survey belongs to group 1 or 2 on this scale, then she is observed by a gynecologist. If the patient belongs to group 3 of the BI-RADS scale, then since this group refers to the risk of developing breast cancer with a probability of less than 2%, additional diagnostic measures are required, since the presence of an aggressive form of breast cancer, which will be over 6 months, cannot be ruled out to progress rapidly, namely, this aggressive form of breast cancer is accompanied by increased metastasis and mortality. In order to solve this problem, we proposed the following methodology:

1 этап: проведение радиотермометрического исследования. Проведение данного исследования у пациентки проводится по общепринятой методике С.Г Веснин (1998). Измеряется температура в блоке глубиной до 7 см и поверхностной температуры. Признаком риска развития рака молочной железы является очаговая термоасимметрия молочных желез. Расчет по алгоритму В.И Видюкова позволяет выделить группу пациенток, у которых высокий риск развития рака молочной железы. По алгоритму В.И Видюкова установлено наличие 3 групп пациенток: высчитывается 2 коэффициента. Если 1 коэффициент менее 2, а второй менее 2.5, то риск развития рака молочной железы составляет около 15%. Если один коэффициент более 2, а второй менее 2.5, или наоборот то риск развития рака молочной железы составляет 60%. Если 1 коэффициент составляет более 2, а второй более 2,5, то риск развития рака молочной железы более 85%.Stage 1: conducting radiothermometric studies. This study in a patient is carried out according to the generally accepted method S.G. Vesnin (1998). The temperature in the block is measured to a depth of 7 cm and surface temperature. A sign of the risk of developing breast cancer is focal thermal asymmetry of the mammary glands. The calculation according to the algorithm of V.I.Vidyukov allows us to identify a group of patients who have a high risk of developing breast cancer. According to the algorithm of V.I. Vidyukov, the presence of 3 groups of patients was established: 2 coefficients are calculated. If 1 coefficient is less than 2, and the second is less than 2.5, then the risk of developing breast cancer is about 15%. If one coefficient is more than 2, and the second is less than 2.5, or vice versa, then the risk of developing breast cancer is 60%. If 1 coefficient is more than 2, and the second is more than 2.5, then the risk of developing breast cancer is more than 85%.

2 этап: с целью уточнения диагноза у пациенток из группы риска берется на анализ выделения из соска молочной железы, пунктат кисты молочной железы или пунктат из очага молочной железы, слюна и проводится исследование панели микро-РНК: mir-199а, miR-222, miR-196a, mir-106a, miR-21, miR-137, miR-155. Данное дополнительное уточняющее обследование позволяет повысить эффективность скрининговых мероприятий по выявлению ранних форм рака молочной железы.Stage 2: in order to clarify the diagnosis, patients at risk are taken to analyze the discharge from the nipple of the breast, punctate of the breast cyst or punctate from the focus of the mammary gland, saliva and a study of the panel of micro-RNA: mir-199a, miR-222, miR -196a, mir-106a, miR-21, miR-137, miR-155. This additional qualifying examination improves the effectiveness of screening measures to detect early forms of breast cancer.

Пример №1 Пациентка П, 1957 года рождения обратилась с жалобами на скудные выделения из соска правой молочной железы в апреле 2018 года. При ММГ - картина выраженного аденоза, высокая рентгенологическая плотность breast density 5 При проведении УЗИ молочных желез без узловых образований, обнаружено множество микрокист диаметром 4-5 мм. Проведено радиотермометрическое обследование молочных желез. Установлено, что 1 коэффициент равнялся 1,7 (норма до 2), 2 коэффициент 1.9 (норма 2.5). С целью уточнение диагноза назначено определение микро-РНК. Приводим полученные результаты:Example No. 1 Patient P, born in 1957, complained of scanty discharge from the right breast in the nipple in April 2018. With MMG, there is a picture of severe adenosis, high x-ray density of breast density 5. During ultrasound of the mammary glands without nodular formations, many microcysts with a diameter of 4-5 mm were found. A radiothermometric examination of the mammary glands was performed. It was established that 1 coefficient was 1.7 (the norm is up to 2), 2 coefficient 1.9 (the norm is 2.5). In order to clarify the diagnosis, the definition of micro-RNA was assigned. We give the results obtained:

По шкале риска -0- популяционный риск, 0-3 - небольшое повышение; 4-7 - значительное повышение; 7-10 - существенный риск заболеванияOn a scale of risk -0- population risk, 0-3 - a slight increase; 4-7 - a significant increase; 7-10 - significant risk of disease

Исходя из полученных данных шкалы риск развития рака молочной железы незначительно повышен - 3Based on the data from the scale, the risk of developing breast cancer is slightly increased - 3

Через 6 месяцев пациентка обратилась на контрольный осмотр с жалобами на появление узлового образования в правой молочной железе примерно 2 см, увеличение подмышечных л/узлов справа. ММГ - в правой молочной железе в в/нар квадранте определяется узловое полициклическое образование 2 см в диаметре, наличие сгруппированных микрокальцинатов. УЗИ молочных желез - в правой молочной железе в в/наружном квадранте гипоэхогенное образование неправильной формы 2 см, в правой подмышечной области увеличенные узлы до 2,5 см. проведение радиотермометрического исследования показало, что первый коэффициент составлял 2,45; второй коэффициент 3.2 (это соответствует вероятному развитию рака молочной железы более 85% контрольное измерение микро-РНК дало следующие результатыAfter 6 months, the patient turned for a follow-up examination with complaints about the appearance of nodular formation in the right mammary gland about 2 cm, an increase in axillary l / nodes on the right. MMG - in the right mammary gland in the iv quadrant, a polycyclic nodular formation of 2 cm in diameter is determined, the presence of grouped microcalcifications. Ultrasound of the mammary glands - in the right mammary gland in the in / outer quadrant, hypoechoic formation of irregular shape of 2 cm, enlarged nodes in the right axillary region up to 2.5 cm. The radiothermometric study showed that the first coefficient was 2.45; second coefficient 3.2 (this corresponds to the probable development of breast cancer of more than 85%; a control measurement of micro-RNA gave the following results

В результате коэффициент по определению микро-РНК составлял 7, что характерно для высокого риска развития рака молочной железы. Проведенное гистологическое исследование подтвердило наличие инвазивной карциномы.As a result, the coefficient for determining micro-RNA was 7, which is typical for a high risk of developing breast cancer. A histological examination confirmed the presence of invasive carcinoma.

Список литературыBibliography

1. Degnim А.С., Dupont W.D., Radisky D.С. et al. Extent of atypical hyperplasia stratifies breast cancer risk in 2 independent cohorts of women. Cancer. 2016 Oct: 122 (19); 2971-8.1. Degnim A.S., Dupont W. D., Radisky D. C. et al. Extent of atypical hyperplasia stratifies breast cancer risk in 2 independent cohorts of women. Cancer 2016 Oct: 122 (19); 2971-8.

2. Мастопатии под ред. А.Д Каприна, Н.И. Рожковой, Москва изд. группа «Гэотар-Медиа» 2019.2. Mastopathy, ed. A.D.Kaprina, N.I. Rozhkova, Moscow ed. Geotar-Media Group 2019.

3. К.А. Гришина, В.А. Хайленко. Роль микро-РНК в развитии рака молочной железы и их потециал в качестве биомаркеров этого заболевания, Опухоли женской репродуктивной системы, №3-2018, с. 40-45.3. K.A. Grishina, V.A. Haylenko. The role of micro-RNA in the development of breast cancer and their potential as biomarkers of this disease, Tumors of the female reproductive system, No. 3-2018, p. 40-45.

4. Д.К. Чебанов, И.Н. Михайлова, А.А. Абрамов, Н.С. Воробьева. Диагностика и прогноз течения рака молочной железы на основе профиля экспрессии микро-РНК опухолевых экзосом, Онкогинекология №2-2016, с. 4-12; - аналог.4. D.K. Chebanov, I.N. Mikhailova, A.A. Abramov, N.S. Vorobyov. Diagnosis and prognosis of the course of breast cancer based on the profile of the expression of micro-RNA of tumor exosomes, Oncogynecology No. 2-2016, p. 4-12; - analogue.

5. Козлов В.В. Роль молекулярных маркеров в диагностике и лечении рака молочной железы, Автореферат дисс. на соискание ученой степени к.м.н., Новосибирск 2014 – прототип.5. Kozlov VV The role of molecular markers in the diagnosis and treatment of breast cancer, Abstract Diss. for the degree of candidate of medical sciences, Novosibirsk 2014 - prototype.

6. Рожкова Н.И., Каприн А.Д. Профилактика - приоритет клинической маммологии. М.: СИМК, 2015. 185 с.6. Rozhkova N.I., Kaprin A.D. Prevention is the priority of clinical mammology. M .: SIMK, 2015.185 s.

7. Г.П. Корженкова. Опухоли женской репродуктивной системы 2016; том 2; с. 3-9.7. G.P. Korzhenkova. Tumors of the female reproductive system 2016; volume 2; from. 3-9.

Claims

A method for screening and predisposition of breast cancer, including mammography and ultrasound, characterized in that they additionally conduct a radiothermometric study of the mammary glands and isolate a panel of micro-RNA from biological fluids, including miR-199a, miR-222, let-7a, miR- 196a, miR-106a, miR-21, miR-137, miR-155.