RU2561596C2 - Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid - Google Patents
Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid Download PDFInfo
- Publication number
- RU2561596C2 RU2561596C2 RU2013156012/15A RU2013156012A RU2561596C2 RU 2561596 C2 RU2561596 C2 RU 2561596C2 RU 2013156012/15 A RU2013156012/15 A RU 2013156012/15A RU 2013156012 A RU2013156012 A RU 2013156012A RU 2561596 C2 RU2561596 C2 RU 2561596C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- immunoglobulin
- caprylic acid
- solution
- temperature
- virus
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к процессу получения препаратов из плазмы крови, а именно к способу очистки растворов иммуноглобулинов (ИГ) IgG для внутривенного и внутримышечного введения, получаемых методом спиртового фракционирования, от примеси каприловой кислоты (КК), применяемой на стадии инактивации вирусов.The invention relates to a process for producing preparations from blood plasma, and in particular to a method for purifying solutions of IgG immunoglobulins (IG) for intravenous and intramuscular administration, obtained by the method of alcohol fractionation, from an admixture of caprylic acid (CC) used at the stage of virus inactivation.
Изобретение позволяет усовершенствовать технологии получения безопасных вирусинактивированных растворов ИГ с низким остаточным содержанием КК при высоком выходе конечного продукта, с сохраненными физико-химическими свойствами и специфической активностью с использованием простого технического приема.The invention allows to improve the technology for producing safe virus-inactivated IG solutions with a low residual CC content with a high yield of the final product, with preserved physicochemical properties and specific activity using a simple technique.
Традиционные схемы спиртового фракционирования и его модификации [1, 2] существенно снижают риск вирусных трансмиссий, но не гарантируют полную инактивацию вирусов [3, 4, 5, 6, 7]. Поэтому для гарантии вирусной безопасности препараты ИГ получают с применением дополнительных стадий обработки [8, 9], направленных на инактивацию и/или удаление вирусов и не оказывающих неблагоприятного воздействия на качество, безопасность продукта и не вызывающих снижения выхода ИГ. Одним из таких способов является каприлатная обработка.Traditional schemes of alcohol fractionation and its modification [1, 2] significantly reduce the risk of viral transmissions, but do not guarantee complete inactivation of viruses [3, 4, 5, 6, 7]. Therefore, to guarantee viral safety, IG preparations are obtained using additional processing steps [8, 9], aimed at inactivating and / or removing viruses and not adversely affecting the quality, safety of the product and not causing a decrease in IG output. One such method is caprylate treatment.
Преимуществами каприлатной обработки [10, 11, 12, 13, 14, 15] относительно других способов инактивации вирусов являются простота исполнения, легкость встраивания в технологию, экологичность, сохранение показателей активности антител и высокая скорость инактивации вирусов. Кроме того, присутствие стабилизаторов иммуноглобулинов в растворе, таких как ПЭГ [16], аминокислоты, моносахара, олигосахара, сахароспирты, не мешают процессу инактивации вирусов [17]. В качестве вируцидного реагента обычно используют КК или каприлат натрия (КН) в конечной концентрации в растворе иммуноглобулина от 6 до 100 мМ [10, 11], при температуре от 15°C до 26°C [12, 13], pH от 4,0 до 6,0 [12, 13, 14], времени воздействия не менее 30 минут [15].The advantages of caprilate processing [10, 11, 12, 13, 14, 15] relative to other methods of virus inactivation are ease of execution, ease of incorporation into the technology, environmental friendliness, preservation of antibody activity indicators and high virus inactivation rate. In addition, the presence of immunoglobulin stabilizers in solution, such as PEG [16], amino acids, monosugar, oligosugar, sugar alcohols, do not interfere with the process of inactivation of viruses [17]. As a virucidal reagent, KK or sodium caprylate (KH) is usually used in a final concentration in an immunoglobulin solution of 6 to 100 mM [10, 11], at a temperature of 15 ° C to 26 ° C [12, 13],
При инактивации вирусов с помощью любых химических реагентов возникает серьезная проблема максимального удаления последних из растворов с сохранением выхода и активности препарата. Превышение допустимого остаточного содержания вирусинактивирующих реагентов в препарате может приводить к серьезным нежелательным последствиям. Присутствие значительных остаточных количеств КК в препаратах может оказывать негативное воздействие на физико-химические свойства и функциональную активность антител, но, что более важно, на безопасность препарата. Так, внутривенное введение КК кроликам может ингибировать реактивность тромбоцитов [18], что может нести опасность при состояниях связанных с кровотечением. Кроме того, ИГ с остаточным содержанием КК около 125 мкг/мл имеет более высокие уровни титров анти-A, анти-B антител [19], что повышает вероятность снижения содержания гемоглобина, эритроцитов [20]. Поэтому получение препаратов ИГ с минимальным остаточным содержанием КК, более низким, чем в существующих препаратах ИГ, является актуальной задачей.When viruses are inactivated using any chemical reagents, a serious problem arises of maximal removal of the latter from solutions while maintaining the yield and activity of the drug. Exceeding the permissible residual content of virus-activating reagents in the preparation can lead to serious undesirable consequences. The presence of significant residual amounts of CC in the preparations can have a negative effect on the physicochemical properties and functional activity of antibodies, but, more importantly, on the safety of the drug. Thus, intravenous administration of QA to rabbits can inhibit platelet reactivity [18], which can be dangerous in cases associated with bleeding. In addition, IG with a residual CC content of about 125 μg / ml has higher titers of anti-A, anti-B antibodies [19], which increases the likelihood of a decrease in the content of hemoglobin and red blood cells [20]. Therefore, obtaining IG preparations with a minimum residual CC content lower than in existing IG preparations is an urgent task.
Известны различные методы удаления КК из растворов ИГ: многостадийная последовательная обработка - фосфат кальция, ультрафильтрация, порошковый активированный уголь при нормальных условиях (комнатная температура и нейтральное значение pH), хроматография на ДЭАЭ-сефадексе А50 [21]; комбинированное использование ацетата кальция, диафильтрация против 10 объемов буфера, хроматография [22]; диафильтрация и 1-2-кратная анионообменная хроматография [23]; полиэтиленгликоль, аэросил/диатомит и анионообменная хроматография [24]; осаждение сульфатом аммония и гель-хроматография на S-300 [25]; 1-2-кратная хроматография [26, 27, 28]; осаждение сульфатом аммония [29]; одиночная хроматография [30]; диализ [31, 32].Various methods are known for removing CC from IG solutions: multistage sequential treatment — calcium phosphate, ultrafiltration, activated carbon powder under normal conditions (room temperature and neutral pH), chromatography on DEAE-Sephadex A50 [21]; combined use of calcium acetate, diafiltration against 10 volumes of buffer, chromatography [22]; diafiltration and 1-2-fold anion-exchange chromatography [23]; polyethylene glycol, aerosil / diatomite and anion exchange chromatography [24]; ammonium sulfate precipitation and gel chromatography on S-300 [25]; 1-2-fold chromatography [26, 27, 28]; ammonium sulfate precipitation [29]; single chromatography [30]; dialysis [31, 32].
Однако известные методы удаления КК имеют существенные недостатки. Так, обработка порошковым активированным углем при нормальных условиях pH и температуры приводит к снижению выхода и агрегации ИГ, а также требует проведения дополнительных стадий по удалению угля, включающих центрифугирование и/или фильтрацию [21], при 1-2-кратной хроматографии происходит снижение выхода ИГ как минимум на 10% [26, 27, 28], при осаждении сульфатом аммония выход снижается до 68% [29], диализ является нетехнологичным и неэффективным методом, так как разделение осуществляется только по молекулярным весам и к тому же существует вероятность накопления пирогена [31, 32].However, known methods for the removal of QC have significant disadvantages. Thus, treatment with powdered activated carbon under normal conditions of pH and temperature leads to a decrease in the yield and aggregation of IG, and also requires additional steps to remove coal, including centrifugation and / or filtration [21], with a 1-2-fold chromatography, a decrease in yield IG is at least 10% [26, 27, 28], when precipitated with ammonium sulfate, the yield decreases to 68% [29], dialysis is a low-tech and inefficient method, since separation is carried out only by molecular weights and, moreover, pyrogen accumulation [31, 32].
Известен также метод многократной хроматографической очистки, который позволяет снизить остаточное содержание КК до 216 мкг/мл в препаратах Gamunex (Talecris) [33] и Gammaked (Kedrion Biopharma, INC.) [34], но при этом также наблюдается значительное снижение выхода ИГ до 18% [35].A multiple chromatographic purification method is also known, which allows one to reduce the residual CC content to 216 μg / ml in the preparations Gamunex (Talecris) [33] and Gammaked (Kedrion Biopharma, INC.) [34], but a significant decrease in the yield of IG to 18% [35].
Таким образом, все известные способы, во-первых, не позволяют удалить КК из растворов ИГ ниже 125 мкг/мл, в лучшем случае ниже 40 мкг/мл [36], во-вторых, они обычно многостадийные и сопровождаются значительным снижением выхода ИГ (от 10 до 40%), увеличением длительности технологического процесса и затрат. Поэтому актуальным является поиск альтернативных - более эффективных, экономичных, «быстрых» методов удаления КК из растворов ИГ.Thus, all known methods, firstly, do not allow KK to be removed from IG solutions below 125 μg / ml, at best below 40 μg / ml [36], and secondly, they are usually multi-stage and are accompanied by a significant decrease in IG yield ( from 10 to 40%), an increase in the duration of the process and costs. Therefore, it is relevant to search for alternative - more effective, economical, “fast” methods for removing CC from IG solutions.
В качестве прототипа настоящего изобретения выбран метод, позволяющий получать раствор ИГ с наиболее низким остаточным содержанием КК от 40 до 50 мкг/мл [36]. Вирусинактивирующую обработку КК иммуноглобулин-содержащей фракции проводят при pH 4,7÷6,0 и температуре 15÷37°C, концентрации КК 6÷100 мМ, ионной силе 0,15 М. Удаление КК осуществляется на трех стадиях при физиологичной концентрации соли и pH не ниже 4,7: а) центрифугирование с получением супернатанта; б) ультрафильтрация на установке 100 КДа и менее; в) осветляющая фильтрация на фильтре BC0025L60SP03A (0,5 мк, картридж фирмы 3М Cuno), иногда с дополнительным центрифугированием. Данный способ позволяет получать растворы ИГ с высокой электрофоретической чистотой более 95% и с низким остаточным содержанием КК от 40 до 50 мкг/мл или от 9,25 до 11,56 мкмоль/г белка с учетом конечной концентрации белка в растворе 30 г/л. Однако удаление КК требует проведения, по крайней мере, двух различных стадий ультрафильтрации и осветляющей фильтрации, при этом стадия ультрафильтрации длительна, так как требует многократных циклов диафильтрации, что несет опасность пирогенизации продукта и сопровождается значительными потерями по белку, поэтому наблюдается довольно низкий выход ИГ 50÷60% с допустимым содержанием агрегатов до 3%.As a prototype of the present invention, a method is selected that allows to obtain an IG solution with the lowest residual CC content of 40 to 50 μg / ml [36]. Virus-inactivating treatment of KK immunoglobulin-containing fractions is carried out at pH 4.7 ÷ 6.0 and temperature 15 ÷ 37 ° C, concentration KK 6 ÷ 100 mm, ionic strength 0.15 M. Removal of KK is carried out in three stages with physiological salt concentration and pH not lower than 4.7: a) centrifugation to obtain a supernatant; b) ultrafiltration on the installation of 100 KDa or less; c) clarification filtration on a BC0025L60SP03A filter (0.5 micron, 3M Cuno cartridge), sometimes with additional centrifugation. This method allows to obtain IG solutions with a high electrophoretic purity of more than 95% and with a low residual content of CC from 40 to 50 μg / ml or from 9.25 to 11.56 μmol / g of protein, taking into account the final protein concentration in the solution of 30 g / l . However, the removal of CC requires at least two different stages of ultrafiltration and clarifying filtration, while the ultrafiltration stage is long, since it requires multiple diafiltration cycles, which carries the risk of pyrogenization of the product and is accompanied by significant protein losses, therefore, a fairly low yield of IG 50 ÷ 60% with a permissible aggregate content of up to 3%.
Задачей заявленного изобретения является усовершенствование технологии получения безопасных вирусинактивированных растворов ИГ с низким остаточным содержанием КК, с сохраненными физико-химическими свойствами, специфической активностью и высоким выходом ИГ.The objective of the claimed invention is to improve the technology for safe virus-activated IG solutions with a low residual content of CC, with preserved physicochemical properties, specific activity and high yield of IG.
Технический результат предлагаемого изобретения заключается в разработке способа максимального удаления вирусинактивирующего реагента КК при высоком выходе ИГ, с сохранением физико-химических свойств и специфической активности.The technical result of the invention consists in the development of a method for the maximum removal of the virus-inactivating reagent KK with a high yield of IG, while maintaining physical and chemical properties and specific activity.
Указанный результат достигается следующим образом: обработку растворов ИГ проводят КК в концентрации 6÷100 мМ, при pH 3,9÷4,6, ионной силе не более 0,03 М, температуре 15÷37°C и перемешивании от 0,5 до 2 ч, а очистку от примеси вирусинактивирующего реагента проводят путем фильтрации через угольный фильтр при температуре 5÷15°C, ионной силе не более 0,03 М и pH 3,9÷4,6. Полученный раствор ИГ содержит КК не более 20 мкг/мл или 2,77 мкмоль/г белка с учетом конечной концентрации белка в растворе 50 г/л, агрегатов не более 1%, выход иммуноглобулина составляет не менее 98%.The specified result is achieved as follows: treatment of IG solutions is carried out by CC in a concentration of 6 ÷ 100 mm, at pH 3.9 ÷ 4.6, ionic strength not more than 0.03 M, temperature 15 ÷ 37 ° C and stirring from 0.5 to 2 hours, and purification from the admixture of the virus-activating reagent is carried out by filtration through a charcoal filter at a temperature of 5-15 ° C, an ionic strength of not more than 0.03 M and a pH of 3.9 ÷ 4.6. The resulting IG solution contains CC no more than 20 μg / ml or 2.77 μmol / g protein, taking into account the final protein concentration in the solution of 50 g / l, aggregates no more than 1%, the yield of immunoglobulin is at least 98%.
В отличие от прототипа вирусинактивирующая обработка КК иммуноглобулин-содержащей фракции проводится при pH 3,9÷4,6 и низкой ионной силе - не более 0,03 М, удаление КК из растворов ИГ осуществляется в одну стадию фильтрации через угольный фильтр при pH 3,9÷4,6, температуре 5÷15°C и ионной силе не более 0,03 М. Выбранное значение pH раствора ИГ 3,9÷4,6 оптимально как с учетом эффективности сорбции КК при максимальном переводе в неионизированную (молекулярную) плохо растворимую в воде форму, которая увеличивается с постепенным снижением pH, в особенности ниже константы диссоциации рКа=4,895 [37], так и увеличения диссоциации связанной с ИГ КК (усиление отталкивания одноименно заряженных ионов с увеличением заряда). Фильтрация вирусинактивированного раствора ИГ при pH ниже 3,9 или выше 4,6 приводит к агрегации и димеризации, снижению эффективности удаления КК и выхода ИГ, а также возрастанию АКА.In contrast to the prototype, the virus-inactivating treatment of KK of an immunoglobulin-containing fraction is carried out at a pH of 3.9 ÷ 4.6 and a low ionic strength of not more than 0.03 M, the removal of KK from IG solutions is carried out in one stage of filtration through a carbon filter at
Удаление КК из растворов ИГ при температуре 5÷15°C и низкой ионной силе не более 0,03 М создает благоприятные условия для сорбции КК, предупреждения агрегации, димеризации и возрастания АКА, а также повышения выхода ИГ. Для лучшего задерживания КК на угольном фильтре необходимо, чтобы температура раствора иммуноглобулина была более низкой, чем температура плавления КК, равная 16,5°C [38], но выше температуры 0÷4°C, так как при температуре, близкой к температуре замерзания раствора, снижается массообмен, повышается вязкость и, соответственно, снижается эффективность удаления КК.Removal of CC from IG solutions at a temperature of 5–15 ° C and low ionic strength of not more than 0.03 M creates favorable conditions for the adsorption of CC, prevention of aggregation, dimerization, and increase in AKA, as well as an increase in the yield of IG. For better retention of CCs on a carbon filter, it is necessary that the temperature of the immunoglobulin solution be lower than the melting temperature of CCs, equal to 16.5 ° C [38], but higher than 0 ÷ 4 ° C, since at a temperature close to freezing temperature solution, the mass transfer decreases, the viscosity increases and, accordingly, the efficiency of KK removal decreases.
Отличительные признаки заявленного изобретения позволяют получить раствор ИГ с минимальным содержанием КК - не более 20 мкг/мл, с низким содержанием агрегатов - не более 1%, увеличить выход ИГ - не менее 98%, а также сократить длительность процесса удаления КК.Distinctive features of the claimed invention make it possible to obtain an IG solution with a minimum CC content of not more than 20 μg / ml, with a low aggregate content of not more than 1%, increase the IG yield of not less than 98%, and also reduce the duration of the CC removal process.
Согласно настоящему изобретению в качестве исходного материала для обработки используются фракции, содержащие иммуноглобулины классов G, А, М, очищенные от других плазменных белков путем дополнительной стадии спиртового осаждения и/или диа/ультрафильтрации и/или хроматографической очистки. Конкретными возможными примерами таких фракций являются: центрифугат III (Б) или фракция II (паста иммуноглобулина G), комплексный иммуноглобулиновый препарат из фракции III, моноклональные и рекомбинантные антитела, полученные любым известным способом.According to the present invention, fractions containing immunoglobulins of classes G, A, M purified from other plasma proteins by an additional step of alcohol deposition and / or dia / ultrafiltration and / or chromatographic purification are used as starting material for processing. Specific possible examples of such fractions are: centrifugate III (B) or fraction II (immunoglobulin paste G), a complex immunoglobulin preparation from fraction III, monoclonal and recombinant antibodies obtained by any known method.
При этом можно использовать как свежевыделенные фракции, так и замороженные при низких температурах, предварительно растворив их в апирогенной воде (воде для инъекций) или подходящем буферном растворе с ионной силой не более 0,03 М. При необходимости раствор ИГ подвергается ультрафильтрации/диафильтрации для удаления этанола, снижения ионной силы до не более 0,03 М, доведения концентрации белка до 1,0÷12,5%. Перед добавлением КК температура раствора ИГ понижается до 0÷4°C. Обработка КК проводится в концентрации, достаточной для создания вирусинактивирующей дозы реагента в растворе 6÷100 мМ, при концентрации белка в растворе 1,0÷12,5%, pH 3,9÷4,6, ионной силе не более 0,03 М и температуре 15÷37°C и перемешивании в течение 0,5÷2 ч, а очистка от примеси вирусинактивирующего реагента проводится путем фильтрации через угольный фильтр марок ZetaCarbon (Cuno) - R53S(LP), R54S(LP), R55S(LP) или AKS (Pall) - AKS 5, AKS 6 при температуре 5÷15°C, ионной силе не более 0,03 М и pH 3,9÷4,6. В таблице 1 представлены результаты сравнения различных типов фильтров для удаления каприловой кислоты из полуфабриката внутривенного иммуноглобулина после стадии каприлатной вирусной инактивации. Из приведенных данных видно, что не угольные фильтры не обеспечивают эффективное удаление КК. Далее в зависимости от готовой формы препарата (жидкая, сухая; внутривенная, внутримышечная) осуществляется доведение значения pH, осмолярности, концентрации стабилизаторов до требуемых значений. При необходимости снижения антикомплементарной активности (АКА) используется любой известный способ.In this case, both freshly isolated fractions and frozen at low temperatures can be used, having previously dissolved them in pyrogen-free water (water for injection) or a suitable buffer solution with an ionic strength of not more than 0.03 M. If necessary, the IG solution is subjected to ultrafiltration / diafiltration to remove ethanol, reducing ionic strength to not more than 0.03 M, bringing the protein concentration to 1.0 ÷ 12.5%. Before the addition of CC, the temperature of the IG solution decreases to 0 ÷ 4 ° C. QA processing is carried out in a concentration sufficient to create a virus-inactivating dose of the reagent in a solution of 6 ÷ 100 mM, with a protein concentration of 1.0 ÷ 12.5% in a solution, pH 3.9 ÷ 4.6, and an ionic strength of not more than 0.03 M and a temperature of 15 ÷ 37 ° C and stirring for 0.5 ÷ 2 hours, and purification from the impurity of the virus-activating reagent is carried out by filtration through a carbon filter of the brands ZetaCarbon (Cuno) - R53S (LP), R54S (LP), R55S (LP) or AKS (Pall) - AKS 5, AKS 6 at a temperature of 5 ÷ 15 ° C, ionic strength not more than 0.03 M and a pH of 3.9 ÷ 4.6. Table 1 presents the results of a comparison of various types of filters to remove caprylic acid from a semi-finished product of intravenous immunoglobulin after the caprilate virus inactivation stage. From the above data it is seen that non-carbon filters do not provide effective removal of CC. Further, depending on the finished form of the drug (liquid, dry; intravenous, intramuscular), the pH, osmolarity, and the concentration of stabilizers are adjusted to the required values. If necessary, reduce anti-complementary activity (AKA) using any known method.
Как видно из представленных данных (табл. 2, рис. 1, 2), использование предлагаемого способа, в отличие от способа-прототипа, позволяет получать препарат без образования агрегатов - не более 1,0%, тогда как в прототипе до 3,0%, и практически без изменения молекулярного состава, а также без снижения выхода - выход не менее 98%. При получении иммуноглобулинов по заявленному способу не выявлено ухудшения физико-химических и биологических свойств препаратов, снижения концентрации антибактериальных и противовирусных антител (табл. 3). Эффективность очистки, рассчитанная по остаточному содержанию КК (не более 20 мкг/мл) (Рис. 3, 4), составляет более 99% (табл. 1).As can be seen from the data presented (table. 2, Fig. 1, 2), the use of the proposed method, in contrast to the prototype method, allows to obtain the drug without the formation of aggregates - not more than 1.0%, whereas in the prototype up to 3.0 %, and practically without changing the molecular composition, as well as without reducing the yield, the yield is not less than 98%. Upon receipt of immunoglobulins according to the claimed method, there was no deterioration in the physicochemical and biological properties of the preparations, no decrease in the concentration of antibacterial and antiviral antibodies (Table 3). The cleaning efficiency calculated by the residual content of CC (not more than 20 μg / ml) (Fig. 3, 4) is more than 99% (Table 1).
Контроль полуфабриката и готового препарата иммуноглобулина для внутривенного введения проводится по следующим методикам.The control of the semi-finished product and the finished preparation of immunoglobulin for intravenous administration is carried out according to the following methods.
Электрофоретическая однородность определяется методом электрофореза на пленках из ацетата целлюлозы по ФС 42-3874-99, с. 20. Молекулярные параметры - методом гельфильтрации по ФС 42-3874-99, с. 28. Антикомплементарная активность контролируется по МУК 3.3.2.1063-010. Содержание анти-А и анти-В иммунных изогемагглютининов определяется модифицированным методом непрямой гемагглютинации согласно требованиям Европейской Фармакопеи 2010, 7.0, монография 0918. Натрия хлорид - по ФС 42-3874-99, с. 59. Глицин - по МУК 4.1/4.2.588-96, с. 114. Количественное содержание мальтозы и глюкозы определяется специфическими ферментативными наборами: Maltose/Sucrose/D-Glucose («BOEHRINGER MANNHEIM/R-BIOPHARM AG», Германия) или ENZYTEC D-Glucose, Enzytec Maltose («SCIL Diagnostics GmbH, Германия). Определение пирогенности проводится согласно требованиям Европейской Фармакопеи 2010, 7.0, монография 0918. Осмолярность определяется криоскопическим методом на миллиосмометре-криоскопе термоэлектрическом МТ-4. Статистическая обработка результатов проводится с использованием компьютерных программ «Excel 4.0» и «Statistica 5.7». Определение содержания КК проводится методом газовой хроматографии согласно известному методу (Hans J.Т.F. Nelis, Marc F. Lefevere, etc. Chromatographic determination of N-acetyl-DL-tryptophan and octanoic acid in human albumin solutions. Journal of Chromatography, №333, 1985, p.381-387) в нашей модификации. Пробоподготовка состоит из этапов осаждения белка, метилирования и экстракции. К 500 мкл образца с содержанием белка 2,5%, содержащего 20% ацетонитрила, добавляется в два этапа 1 М соляная кислота. Затем проводится экстракция 5 мл гексана, с последующим отделением и высушиванием органической фазы. К сухому остатку добавляется 5% серная кислота в метаноле в объеме 200 мкл и проводится стадия метилирования в течение 10 ч при температуре 50°C. После этого к образцам приливается ледяная вода в объеме 100 мкл и гексан в объеме 400 мкл. Анализируется органическая фаза. Газохроматографический анализ выполняется на газовом хроматографе GC-2010. Используется капиллярная колонка НР-5, 30 м × 0,32 мм с толщиной пленки 0,25 мкм, фирмы Hewlett-Packard (№19091-60312). Предел обнаружения метода составляет 6,25 мкг/мл. Коэффициент корреляции - не менее 0,99.Electrophoretic homogeneity is determined by electrophoresis on cellulose acetate films according to FS 42-3874-99, p. 20. Molecular parameters - gel filtration method according to FS 42-3874-99, p. 28. Anti-complementary activity is controlled by MUK 3.3.2.1063-010. The content of anti-A and anti-B immune isohemagglutinins is determined by the modified method of indirect hemagglutination according to the requirements of European Pharmacopoeia 2010, 7.0, monograph 0918. Sodium chloride - according to FS 42-3874-99, p. 59. Glycine - according to MUK 4.1 / 4.2.588-96, p. 114. The quantitative content of maltose and glucose is determined by specific enzyme kits: Maltose / Sucrose / D-Glucose (BOEHRINGER MANNHEIM / R-BIOPHARM AG, Germany) or ENZYTEC D-Glucose, Enzytec Maltose (SCIL Diagnostics GmbH, Germany). Pyrogenicity determination is carried out according to the requirements of the European Pharmacopoeia 2010, 7.0, monograph 0918. Osmolarity is determined by the cryoscopic method on a thermoelectric MT-4 milliosmometer-cryoscope. Statistical processing of the results is carried out using the computer programs Excel 4.0 and Statistica 5.7. Determination of KK content is carried out by gas chromatography according to the well-known method (Hans J.T. F. Nelis, Marc F. Lefevere, etc. Chromatographic determination of N-acetyl-DL-tryptophan and octanoic acid in human albumin solutions. Journal of Chromatography, No. 333, 1985, p. 381-387) in our modification. Sample preparation consists of the steps of protein precipitation, methylation and extraction. To 500 μl of a sample containing 2.5% protein containing 20% acetonitrile, 1 M hydrochloric acid is added in two steps. Then, extraction is carried out with 5 ml of hexane, followed by separation and drying of the organic phase. To the dry residue, 5% sulfuric acid in methanol is added in a volume of 200 μl and a methylation step is carried out for 10 hours at a temperature of 50 ° C. After that, ice water in a volume of 100 μl and hexane in a volume of 400 μl are added to the samples. The organic phase is analyzed. Gas chromatographic analysis is performed on a gas chromatograph GC-2010. Used capillary column HP-5, 30 m × 0.32 mm with a film thickness of 0.25 μm, the company Hewlett-Packard (No. 19091-60312). The detection limit of the method is 6.25 μg / ml. The correlation coefficient is not less than 0.99.
Пример 1Example 1
Выделение иммуноглобулина проводят этанольным методом фракционирования по методу Кона 6. Полученный фильтрат Б (III по Кону) подвергают ультрафильтрации при ионной силе не более 0,015 и значении pH 4,0, с последующей диафильтрацией против воды дистиллированной с величиной pH 3,8. Затем в полуфабрикат иммуноглобулина с концентрацией белка 7,0% и температурой 0÷4°C и pH 4,0 при постоянном перемешивании вводят КК капельно до концентрации 0,3%, постепенно подогревают раствор до 20°C и проводят инкубацию при температуре 20°C и значении pH 3,9 в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Затем снижают температуру до 5°C и проводят фильтрацию через угольный фильтр AKS 5. Затем полуфабрикат иммуноглобулина для снижения АКА обрабатывают пепсином в дозе 1:10-6 в присутствии 2% мальтозы. После удаления пепсина фильтрацией через угольный фильтр AKS 5 доводят осмолярность ВВИГ до значения 270÷400 мОсм/кг с использованием вспомогательных веществ: 0,0-0,7% натрия хлорида, и/или мальтозы, и/или пролина, и/или гистидина, и/или глюкозы, и/или глицина. В готовом препарате устанавливают значение pH 5,0÷7,5, содержание белка 4,5÷10,5%. Конечный препарат ВВИГ получают в жидкой или сухой форме.Isolation of immunoglobulin is carried out using the Cohn method of ethanol fractionation 6. The obtained filtrate B (Cohn III) is subjected to ultrafiltration at an ionic strength of not more than 0.015 and a pH value of 4.0, followed by diafiltration against distilled water with a pH value of 3.8. Then, in a semi-finished product of immunoglobulin with a protein concentration of 7.0% and a temperature of 0 ÷ 4 ° C and pH 4.0 with constant stirring, QC is added dropwise to a concentration of 0.3%, the solution is gradually heated to 20 ° C and incubation is carried out at a temperature of 20 ° C and a pH of 3.9 for 1 hour with constant stirring. Then the temperature is reduced to 5 ° C and filtration is carried out through an
Пример 2Example 2
Выделение иммуноглобулина проводят этанольным методом фракционирования по методу Кона 6. Полученный осадок В (II по Кону) подвергают ультрафильтрации при ионной силе 0 и значении pH 4,5, с последующей диафильтрацией против воды дистиллированной с величиной pH 3,9 и фильтрацией через угольный фильтр AKS 5. Затем в полуфабрикат иммуноглобулина с концентрацией белка 12,0% и температурой 0÷4°C и pH 4,4 вводят КК до концентрации 1,4%, подогревают раствор до 20°C и проводят инкубацию при температуре 20°C и значении pH 4,15 в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Затем снижают температуру до 10°C и проводят фильтрацию через угольный фильтр AKS 5. После чего в готовый препарат вводят глицин и натрия хлорид, устанавливают значение pH 6,5-7,5, содержание белка 9,5-10,5% и получают иммуноглобулин для внутримышечного/подкожного введения.The isolation of immunoglobulin is carried out using the Cohn method of ethanol fractionation 6. The resulting precipitate B (Cohn II) is ultrafiltered at an ionic strength of 0 and a pH value of 4.5, followed by diafiltration against distilled water with a pH value of 3.9 and filtration through an
Пример 3Example 3
5 кг пасты комплексного иммуноглобулинового препарата, полученной в результате спиртового фракционирования фракции III [40] и состоящей в основном из смеси иммуноглобулинов G, А, М, растворяют в водном растворе глицина (концентрация около 3%), pH 4,25 до концентрации белка 7,5%, ионная сила 0,03. Нерастворившиеся белки отделяют от иммуноглобулина осветляющей и стерилизующей фильтрацией. К раствору добавляют КК до концентрации 0,8%, постепенно подогревают раствор до 20°C и проводят инкубацию при температуре 20°C и значении pH 4,6 в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Затем снижают температуру до 15°C и проводят фильтрацию через угольный фильтр AKS 5. После проводят осветляющую и стерилизующую фильтрацию, розлив препарата во флаконы и лиофилизацию.5 kg of complex immunoglobulin preparation paste obtained by alcohol fractionation of fraction III [40] and consisting mainly of a mixture of immunoglobulins G, A, M, is dissolved in an aqueous solution of glycine (concentration of about 3%), pH 4.25 to a protein concentration of 7 , 5%, ionic strength 0.03. Insoluble proteins are separated from immunoglobulin by clarifying and sterilizing filtration. KK is added to the solution to a concentration of 0.8%, the solution is gradually heated to 20 ° C and incubation is carried out at a temperature of 20 ° C and a pH value of 4.6 for 1 h with constant stirring. Then the temperature is reduced to 15 ° C and filtration is carried out through an
Пример 4Example 4
Раствор моноклональных антител с концентрацией белка 50 г/л, очищенный согласно методу [41], подвергается ультрафильтрации/диафильтрации для снижения ионной силы до 0,025 М и pH до 4,0. Затем в раствор моноклональных антител с температурой 0÷4°C и pH 4,0 при постоянном перемешивании вводят КК капельно до концентрации 0,1%, постепенно подогревают раствор до 20°C и проводят инкубацию при температуре 20°C и значении pH 3,9 в течение 1 ч при постоянном перемешивании. После этого снижают температуру до 5°C и проводят фильтрацию через угольный фильтр AKS 5. Далее вирусинактивированные моноклональные антитела переводятся в конечную лекарственную форму с физиологичными значениями pH и осмолярности.A solution of monoclonal antibodies with a protein concentration of 50 g / l, purified according to method [41], is subjected to ultrafiltration / diafiltration to reduce ionic strength to 0.025 M and pH to 4.0. Then, in a solution of monoclonal antibodies with a temperature of 0 ÷ 4 ° C and pH 4.0 with constant stirring, QC is added dropwise to a concentration of 0.1%, the solution is gradually heated to 20 ° C and incubation is carried out at a temperature of 20 ° C and a pH value of 3, 9 for 1 h with constant stirring. After that, reduce the temperature to 5 ° C and carry out filtration through an
Таким образом, на основании полученных данных можно сделать вывод, что разработанная технология получения растворов иммуноглобулинов позволяет получать вирусобезопасные препараты с сохраненными физико-химическими и биологическими свойствами, а также специфической активностью. Высокая эффективность очистки достигается простыми технологическими приемами. Очистка проводится без использования дорогостоящих хроматографических сорбентов и ультрафильтрационного оборудования, благодаря чему упрощается технология получения вирусобезопасных препаратов и повышается экономичность и выход.Thus, on the basis of the data obtained, it can be concluded that the developed technology for the preparation of immunoglobulin solutions allows one to obtain virus-safe preparations with preserved physicochemical and biological properties, as well as specific activity. High cleaning efficiency is achieved by simple technological methods. The purification is carried out without the use of expensive chromatographic sorbents and ultrafiltration equipment, which simplifies the technology for producing virus-safe preparations and increases the efficiency and yield.
ЛитератураLiterature
1. Cohn E.J., Strong W.L., Mulford D.J., Ashworth J.N., Melin M., Taylor H.L. Preparation and Properties of Serum and Plasma Proteins. IV. A system for the separation into fractions of the protein and lipoprotein components of biological tissues and fluids // J. Am Chem Soc. - 1946. - №68. - P.459-475.1. Cohn E.J., Strong W.L., Mulford D.J., Ashworth J.N., Melin M., Taylor H.L. Preparation and Properties of Serum and Plasma Proteins. IV. A system for the separation into fractions of the protein and lipoprotein components of biological tissues and fluids // J. Am Chem Soc. - 1946. - No. 68. - P.459-475.
2. Oncley J.L., Melin M, Richert D.A., Cameron J.W., Gross P.M. Preparation and properties of serum and plasma proteins. XIX. The separation of the antibodies, isoagglutinins, prothrombin, plasminogen and β1-lipoprotein into subfractions of human plasma // J. Am Chem Soc-1949. - №71. - P.541-550.2. Oncley JL, Melin M, Richert DA, Cameron JW, Gross PM Preparation and properties of serum and plasma proteins. XIX. The separation of the antibodies, isoagglutinins, prothrombin, plasminogen and β 1 -lipoprotein into subfractions of human plasma // J. Am Chem Soc-1949. - No. 71. - P.541-550.
3. Ochs H.D., Fischer S.H., Virant F.S., Lee M.L., Kingdon H.S., Wedgwood R.J. Non-A, non-B hepatitis and Intravenous Immunoglobulin // Lancet. - 1985 - №1. - P.404-405.3. Ochs H. D., Fischer S. H., Virant F. S., Lee M. L., Kingdon H. S., Wedgwood R. J. Non-A, non-B hepatitis and Intravenous Immunoglobulin // Lancet. - 1985 - No. 1. - P.404-405.
4. Ochs H.D., Fischer S.H., Virant F.S., Lee M.L., Mankarious S., Kingdon H.S., Wedgwood R.J. Non-A, non-B hepatitis after intravenous gammaglobulin // Lancet. - 1986. №1. - P.322-323.4. Ochs H. D., Fischer S. H., Virant F. S., Lee M. L., Mankarious S., Kingdon H. S., Wedgwood R. J. Non-A, non-B hepatitis after intravenous gammaglobulin // Lancet. - 1986. No. 1. - P.322-323.
5. Webster A.D.B., Lever A.M.L. Non-A, non-B hepatitis after intravenous gammaglobilin // Lancet. - 1986 - №1 - P.322.5. Webster A.D.B., Lever A.M.L. Non-A, non-B hepatitis after intravenous gammaglobilin // Lancet. - 1986 - No. 1 - P.322.
6. Williams P.E., Yap P.L., Gillon J, Crawford R.J., Galea G., Cuthbertson B. Non-A, non-B hepatitis transmission by intravenous immunoglobulin // Lancet. - 1988. - II - P.501.6. Williams P.E., Yap P.L., Gillon J, Crawford R.J., Galea G., Cuthbertson B. Non-A, non-B hepatitis transmission by intravenous immunoglobulin // Lancet. - 1988. - II - P.501.
7. Pizani G., Cristiano K., Wirz M., Bisso G., Beneduce F., Morace G., Rapicetta M., Gentili G. Prevalence of TT virus in plasma pools and blood products // Br. J. Haemotol. - 1999. - №106 (2) - P. 431-435.7. Pizani G., Cristiano K., Wirz M., Bisso G., Beneduce F., Morace G., Rapicetta M., Gentili G. Prevalence of TT virus in plasma pools and blood products // Br. J. Haemotol. - 1999. - No. 106 (2) - P. 431-435.
8. Burnouf T, Radosevich M. Reducing the risk of infection from plasma products: specific preventative strategies // Blood Rev. - 2000. - №14 - P.94-110.8. Burnouf T, Radosevich M. Reducing the risk of infection from plasma products: specific preventative strategies // Blood Rev. - 2000. - No. 14 - P.94-110.
9. WHO: Guidelines on viral inactivation and removal procedures intended to assure the viral safety of human blood plasma products. - Geneva - 2003 (www.WHO.intlbloodproducts).9. WHO: Guidelines on viral inactivation and removal procedures intended to assure the viral safety of human blood plasma products. - Geneva - 2003 (www.WHO.intlbloodproducts).
10. Korneyeva M, Hotta J, Lebing W, Rosenthal RS, Franks L, Petteway SR Jr. Enveloped virus inactivation by caprylate: a robust alternative to solvent-detergent treatment in plasma derived intermediates // Biologicals. - 2002, Jun. - №30 (2) - P.153-62.10. Korneyeva M, Hotta J, Lebing W, Rosenthal RS, Franks L, Petteway SR Jr. Enveloped virus inactivation by caprylate: a robust alternative to solvent-detergent treatment in plasma derived intermediates // Biologicals. - 2002, Jun. - No. 30 (2) - P.153-62.
11. Lundblad J.I. and Seng R.I. Inactivation of Lipid-Enveloped Viruses in Proteins by Caprylate // Vox Sang. - 1991. - №60 (2) - P.75-81.11. Lundblad J.I. and Seng R.I. Inactivation of Lipid-Enveloped Viruses in Proteins by Caprylate // Vox Sang. - 1991. - No. 60 (2) - P.75-81.
12. WO 1998024485 (A1). Inactivation of viruses by incubation with caprylate. - Publ. 1998-06-11.12. WO 1998024485 (A1). Inactivation of viruses by incubation with caprylate. - Publ. 1998-06-11.
13. Dichtelmuller H, Rudnick D, Kloft M. Inactivation of lipid enveloped viruses by octanoic acid treatment of immunoglobulin solution // Biologicals. - 2002. - №30. - P.135-42.13. Dichtelmuller H, Rudnick D, Kloft M. Inactivation of lipid enveloped viruses by octanoic acid treatment of immunoglobulin solution // Biologicals. - 2002. - No. 30. - P.135-42.
14. US 4939176 (A). Viral inactivation process. - Publ. 1990-07-03.14. US 4939176 (A). Viral inactivation process. - Publ. 1990-07-03.
15. US 5886154 (A). Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies. - Publ. 1999-03-23.15. US 5886154 (A). Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies. - Publ. 1999-03-23.
16. Parkkinen J, Rahola A, von Bonsdorff L, Tölö H, Törmä E. A modified caprylic acid method for manufacturing immunoglobulin G from human plasma with high yield and efficient virus clearance // Vox Sang. - 2006 Feb. - №90 (2). - P.97-104.16. Parkkinen J, Rahola A, von Bonsdorff L, Tölö H, Törmä E. A modified caprylic acid method for manufacturing immunoglobulin G from human plasma with high yield and efficient virus clearance // Vox Sang. - 2006 Feb. - No. 90 (2). - P.97-104.
17. US 4446134 (A). Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor VIII. - Publ. 1984-05-01.17. US 4446134 (A). Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor VIII. - Publ. 1984-05-01.
18. Tangen O, Wallenbeck IA, Bergqvist D. Platelet reactivity ex vivo and in vivo after acute and chronic treatment with sodium caprylate // Scand J Clin Lab Invest. - 1975 Jan. - №35 (1). - P.19-23.18. Tangen O, Wallenbeck IA, Bergqvist D. Platelet reactivity ex vivo and in vivo after acute and chronic treatment with sodium caprylate // Scand J Clin Lab Invest. - 1975 Jan. - No. 35 (1). - P. 19-23.
19. Lebing W., Remington К.M., Schreiner C. & Paul H.-I. Properties of a new intravenous immunoglobulin (IGIV-C, 10%) produced by virus inactivation with caprylate and column chromatography // Vox Sanguinis. - 2003. - №84. - P.193-201.19. Lebing W., Remington K.M., Schreiner C. & Paul H.-I. Properties of a new intravenous immunoglobulin (IGIV-C, 10%) produced by virus inactivation with caprylate and column chromatography // Vox Sanguinis. - 2003. - No. 84. - P.193-201.
20. Ballow M., Berger M., Bonilla F.A. Pharmacokinetics and tolerability of a new intravenous immunoglobulin preparation, IGIV-C, 10% (Gamunexтм, 10%) // Vox Sanguinis. - 2003. - №84. - P.202-210.20. Ballow M., Berger M., Bonilla FA Pharmacokinetics and tolerability of a new intravenous immunoglobulin preparation, IGIV-C, 10% (Gamunex tm , 10%) // Vox Sanguinis. - 2003. - No. 84. - P.202-210.
21. US 5075425 (A). Process for the preparation of a pharmaceutical which contains IgG, IgA and IgM and can be administered intravenously. - Publ. 1991-12-24.21. US 5075425 (A). Process for the preparation of a pharmaceutical which contains IgG, IgA and IgM and can be administered intravenously. - Publ. 1991-12-24.
22. US 5164487 (A). Manufacturing intravenous tolerable immunoglobulin-G preparation. - Publ. 1992-11-17.22. US 5164487 (A). Manufacturing intravenous tolerable immunoglobulin-G preparation. - Publ. 1992-11-17.
23. WO 2005082937 (A2). A method of providing a purified, virus safe antibody preparation. - Publ. 2005-09-09.23. WO 2005082937 (A2). A method of providing a purified, virus safe antibody preparation. - Publ. 2005-09-09.
24. WO 2005073252 (A1). Process for the manufacture of virus safe immunoglobulin. - Publ. 2005-08-11.24. WO 2005073252 (A1). Process for the manufacture of virus safe immunoglobulin. - Publ. 2005-08-11.
25. Perosa F, Carbone R, Ferrone S, Dammacco F. Purification of human immunoglobulins by sequential precipitation with caprylic acid and ammonium sulphate // J Immunol Methods. - 1990 Mar 27. - №128 (1) - P.9-16.25. Perosa F, Carbone R, Ferrone S, Dammacco F. Purification of human immunoglobulins by sequential precipitation with caprylic acid and ammonium sulphate // J Immunol Methods. - 1990 Mar 27. - No. 128 (1) - P.9-16.
26. US 4164495 (A). Method of recovering immunoglobulin using a polyol and an alkanoic acid. - Publ. 1979-08-14.26. US 4,164,495 (A). Method of recovering immunoglobulin using a polyol and an alkanoic acid. - Publ. 1979-08-14.
27. EP 0374625 (A2). Viral inactivation process. - Publ. 1990-06-2.27. EP 0374625 (A2). Viral inactivation process. - Publ. 1990-06-2.
28. EP 0893450 (A1). Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of IgG. - Publ. 1999-01-27.28. EP 0893450 (A1). Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of IgG. - Publ. 1999-01-27.
29. WO 2006064373 (A2). Methods of purifying immunoglobulins. - Publ. 2006-06-22.29. WO 2006064373 (A2). Methods of purifying immunoglobulins. - Publ. 2006-06-22.
30. US 4164495 (A), Method of recovering immunoglobulin using a polyol and an alkanoic acid. - Publ. 1979-08-14.30. US 4164495 (A), Method of recovering immunoglobulin using a polyol and an alkanoic acid. - Publ. 1979-08-14.
31. RU 2108794 (С1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 1998-04-20.31. RU 2108794 (C1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 1998-04-20.
32. RU 2111001 (C1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 1998-05-20.32. RU 2111001 (C1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 1998-05-20.
33. Product monograph №133225. Gamunex. - Date of approval. May 13, 2010. - P.1-42.33. Product monograph No. 133225. Gamunex - Date of approval. May 13, 2010 .-- P.1-42.
34. Highlights of prescribing information 08940330. Gammaked, immune globulin injection (human) 10% caprilate/chromatography purified. - 2011, June. - P.1-3.34. Highlights of prescribing information 08940330. Gammaked, immune globulin injection (human) 10% caprilate / chromatography purified. - 2011, June. - P.1-3.
35. Trejo SR, Hotta JA, Lebing W, Stenland C, Storms RE, Lee DC, Li H, Petteway S, Remington KM. Evaluation of virus and prion reduction in a new intravenous immunoglobulin manufacturing process // Vox Sang. - 2003, Apr. - №84 (3). - P.176-87.35. Trejo SR, Hotta JA, Lebing W, Stenland C, Storms RE, Lee DC, Li H, Petteway S, Remington KM. Evaluation of virus and prion reduction in a new intravenous immunoglobulin manufacturing process // Vox Sang. - 2003, Apr. - No. 84 (3). - P.176-87.
36. EP 2399613 (A1). Fractionation of plasma using caprylic acid. - Publ. 2011-12-28.36. EP 2399613 (A1). Fractionation of plasma using caprylic acid. - Publ. 2011-12-28.
37. Dean, J.A. Handbook of Organic Chemistry. - New York, NY: McGraw-Hill Book Co., 1987. - P.8-45.37. Dean, J.A. Handbook of Organic Chemistry. - New York, NY: McGraw-Hill Book Co., 1987. - P.8-45.
38. Lide, D.R. CRC Handbook of Chemistry and Physics. - Boca Raton, FL: CRC Press, Taylor & Francis, 2005. - P.3-404.38. Lide, D.R. CRC Handbook of Chemistry and Physics. - Boca Raton, FL: CRC Press, Taylor & Francis, 2005 .-- P.3-404.
39. Фармакопейная статья предприятия №42-0493-06. «Иммуновенин» (Иммуноглобулин человека нормальный), лиофилизат для приготовления раствора для внутривенного введения. ФГУП «НПО «Микроген» Минздрава России. - Введ. 07.04.09. - 1-13.39. Pharmacopoeia article of the enterprise No. 42-0493-06. "Immunovenin" (normal human immunoglobulin), lyophilisate for the preparation of a solution for intravenous administration. FSUE NPO Microgen of the Ministry of Health of Russia. - Enter. 04/07/09. - 1-13.
40. RU 2199343 (C1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 2003-02-27.40. RU 2199343 (C1). Method of immunoglobulin preparation preparing. - Publ. 2003-02-27.
41. WO 2013075740 (A1). Antibody purification method. - Publ. 2013-05-30.41. WO 2013075740 (A1). Antibody purification method. - Publ. 2013-05-30.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013156012/15A RU2561596C2 (en) | 2013-12-18 | 2013-12-18 | Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2013156012/15A RU2561596C2 (en) | 2013-12-18 | 2013-12-18 | Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2013156012A RU2013156012A (en) | 2015-06-27 |
| RU2561596C2 true RU2561596C2 (en) | 2015-08-27 |
Family
ID=53497054
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2013156012/15A RU2561596C2 (en) | 2013-12-18 | 2013-12-18 | Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2561596C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005073252A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-11 | Suomen Punainen Risti Veripalvelu | Process for the manufacture of virus safe immunoglobulin |
| WO2005082937A2 (en) * | 2004-02-27 | 2005-09-09 | Octapharma Ag | A method of providing a purified, virus safe antibody preparation |
| EP2399613A1 (en) * | 2010-06-22 | 2011-12-28 | Research Foundation For Medical Devices | Fractionation of plasma using caprylic acid |
-
2013
- 2013-12-18 RU RU2013156012/15A patent/RU2561596C2/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005073252A1 (en) * | 2004-01-30 | 2005-08-11 | Suomen Punainen Risti Veripalvelu | Process for the manufacture of virus safe immunoglobulin |
| WO2005082937A2 (en) * | 2004-02-27 | 2005-09-09 | Octapharma Ag | A method of providing a purified, virus safe antibody preparation |
| EP2399613A1 (en) * | 2010-06-22 | 2011-12-28 | Research Foundation For Medical Devices | Fractionation of plasma using caprylic acid |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| H. DICHTELMULLER et al. Inactivation of Lipid Enveloped Viruses by Octanoic Acid Treatment of Immunoglobulin Solution. Biologicals (2002) 30, PP. 135"142. W. LEBING et al. Properties of a new intravenous immunoglobulin (IGIV-C, 10%) produced by virus inactivation with caprylate and column chromatography. Vox Sanguinis (2003) 84, PP.193"201. A. BUCHACHER, G. IBERER. Purification of intravenous immunoglobulin G from human plasma " aspects of yield and virus safety. Biotechnol. J. 2006, 1, 148"163. A. F. S. A. HABEEB, R. D. FRANCIS. Preparation of Human Immunoglobulin by Caprylic Acid Precipitation. Preparative Biochemistry. Vol. 14, Iss. 1, 1984, PP. 1-17 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2013156012A (en) | 2015-06-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10954290B2 (en) | IgG, IgA and IgM antibody preparations, method of making and method of use in treatment | |
| KR100501263B1 (en) | Process for producing immunoglobulins for intravenous administration and other immunoglobulin products | |
| US10414816B2 (en) | Method for purifying immunoglobulin | |
| JP2002517516A (en) | Methods for producing immunoglobulins and other immunoglobulin products for intravenous administration | |
| CA3080108C (en) | Improved method for purification of immunoglobulin | |
| JP7073333B2 (en) | Process for preparing an immunoglobulin composition | |
| US5075425A (en) | Process for the preparation of a pharmaceutical which contains igg, iga and igm and can be administered intravenously | |
| TWI610937B (en) | Method for reducing the thromboembolic potential of a plasma-derived immunoglobulin composition | |
| JPH0365327B2 (en) | ||
| RU2561596C2 (en) | Method for producing virus-inactivated immunoglobulin solutions low in residual caprylic acid | |
| Burnouf | What can be learned in the snake antivenom field from the developments in human plasma derived products? | |
| AU2016231646B2 (en) | Method for the preparation of immunoglobulins | |
| RU2708394C2 (en) | Method of producing immunoglobulins | |
| Burnouf | Preprint of a manuscript published in Toxicon | |
| TW202400621A (en) | Methods of preparing cohn pool concentrate from blood plasma through ultrafiltration | |
| RU2404250C1 (en) | Human immunoglobulin preparation against cytomegalovirus for intravenous introduction and method of its obtaining | |
| EA045585B1 (en) | METHOD FOR OBTAINING IMMUNOGLOBULIN PREPARATION FROM PLASMA WITH LOW CONTENT OF C-1 INHIBITOR | |
| JPH07103045B2 (en) | Method for heat treatment of non-chemically modified γ-globulin | |
| NZ724670A (en) | Method for the preparation of immunoglobulins | |
| NZ724670B2 (en) | Method for the preparation of immunoglobulins |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |