RU2300516C2 - Phenoxycarboxylic acid compounds and compositions for delivery of active substances - Google Patents
Phenoxycarboxylic acid compounds and compositions for delivery of active substances Download PDFInfo
- Publication number
- RU2300516C2 RU2300516C2 RU2002114698/04A RU2002114698A RU2300516C2 RU 2300516 C2 RU2300516 C2 RU 2300516C2 RU 2002114698/04 A RU2002114698/04 A RU 2002114698/04A RU 2002114698 A RU2002114698 A RU 2002114698A RU 2300516 C2 RU2300516 C2 RU 2300516C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- communication
- antigens
- active substance
- thirty
- compound
- Prior art date
Links
- 0 Cc(c(*)c1*)c(C)c(*)c1OC Chemical compound Cc(c(*)c1*)c(C)c(*)c1OC 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
Область техникиTechnical field
Настоящее изобретение относится к соединениям феноксикарбоновой кислоты, предназначенным для доставки активных веществ, таких как биологически или химически активные вещества, к тканям-мишеням. Указанные соединения пригодны для образования нековалентных смесей с активными веществами, предназначенными для перорального, внутрикишечного, легочного и других способов введения лекарственных средств животным. Данное изобретение относится также к способам получения и введения таких композиций.The present invention relates to phenoxycarboxylic acid compounds intended for the delivery of active substances, such as biologically or chemically active substances, to target tissues. These compounds are suitable for the formation of non-covalent mixtures with active substances intended for oral, intestinal, pulmonary and other methods of administering drugs to animals. The present invention also relates to methods for the preparation and administration of such compositions.
Предпосылки изобретенияBACKGROUND OF THE INVENTION
Применение известных средств доставки активных веществ к тканям часто ограничено биологическими, химическими и физическими барьерами. Указанные барьеры обычно создаются средой, в которой производится доставка, средой, окружающей ткани-мишени, куда осуществляется доставка, и/или самими тканями-мишенями. Биологически и химически активные вещества особенно чувствительны к таким барьерам.The use of known means for delivering active substances to tissues is often limited by biological, chemical and physical barriers. These barriers are usually created by the medium in which the delivery is made, by the medium surrounding the target tissue to which the delivery takes place, and / or by the target tissues themselves. Biologically and chemically active substances are especially sensitive to such barriers.
В организме животного существуют различные барьеры, препятствующие проникновению биологически и химически активных фармакологических и лекарственных средств. В качестве примеров физических барьеров можно привести кожу, двойные липидные слои и оболочки различных органов, которые являются относительно непроницаемыми для некоторых активных веществ, но должны быть преодолены на пути к мишеням, таким как сердечно-сосудистая система. Химические барьеры включают, но не ограничиваются ими, разные значения рН в желудочно-кишечном тракте (GI) и расщепляющие ферменты.In the animal’s body there are various barriers that prevent the penetration of biologically and chemically active pharmacological and medicinal products. Examples of physical barriers include skin, double lipid layers and membranes of various organs, which are relatively impervious to certain active substances, but must be overcome on the way to targets, such as the cardiovascular system. Chemical barriers include, but are not limited to, different pH values in the gastrointestinal tract (GI) and degrading enzymes.
Преодоление указанных барьеров особенно важно при создании пероральных систем доставки лекарственных средств. Пероральное введение многих биологически или химически активных веществ является предпочтительным способом введения лекарственных средств животным, если ему не препятствуют биологические, химические и физические барьеры. К многочисленным средствам, которые обычно непригодны для перорального введения, относятся биологически или химически активные пептиды, такие как кальцитонин и инсулин; полисахариды и, в частности, мукополисахариды, включающие, но не ограничивающиеся ими, гепарин; гепариноподобные вещества; антибиотики и другие органические вещества. Указанные средства быстро становятся неэффективными или разрушаются в желудочно-кишечном тракте под действием кислотного гидролиза, ферментов и тому подобное. Кроме того, всасыванию могут препятствовать размер и структура макромолекулярных лекарственных средств.Overcoming these barriers is especially important when creating oral drug delivery systems. The oral administration of many biologically or chemically active substances is the preferred method of administering drugs to animals if they are not impeded by biological, chemical and physical barriers. Numerous agents that are generally unsuitable for oral administration include biologically or chemically active peptides such as calcitonin and insulin; polysaccharides and, in particular, mucopolysaccharides, including but not limited to heparin; heparin-like substances; antibiotics and other organic substances. These agents quickly become ineffective or are destroyed in the gastrointestinal tract by acid hydrolysis, enzymes, and the like. In addition, the size and structure of macromolecular drugs can inhibit absorption.
Нестойкие фармацевтические средства ранее вводили вместе с адъювантами (например, резорцинами и неионогенными поверхностно-активными веществами, такими как полиоксиэтилен-олеиловый эфир и н-гексадецилполиэтиленовый эфир), позволяющими искусственно улучшить проницаемость стенок кишечника, а также с ингибиторами ферментов (например, ингибиторы трипсина поджелудочной железы, диизопропил-фторфосфат (DFF) и тразилол), позволяющими ингибировать ферментативное расщепление. В качестве систем доставки, инсулина и гепарина используют также липосомы. Однако спектр действия таких систем доставки лекарственных средств весьма ограничен по следующим причинам: (1) необходимость использовать адъюванты или ингибиторы в токсических количествах; (2) отсутствие приемлемых низкомолекулярных активных веществ; (3) плохая стабильность и недостаточный срок годности; (4) сложность изготовления; (5) неспособность таких систем защитить активное вещество; (6) неблагоприятное изменение активного вещества под действием системы; или (7) неспособность таких систем стимулировать всасывание активного вещества.Unstable pharmaceuticals have previously been administered with adjuvants (e.g., resorcinol and nonionic surfactants such as polyoxyethylene-oleyl ether and n-hexadecyl-polyethylene ether) to artificially improve intestinal wall permeability, as well as with enzyme inhibitors (e.g. trypsin inhibitors under trypsin inhibitors glands, diisopropyl fluorophosphate (DFF) and trasylol), which inhibit enzymatic cleavage. Liposomes are also used as delivery systems, insulin and heparin. However, the spectrum of action of such drug delivery systems is very limited for the following reasons: (1) the need to use adjuvants or inhibitors in toxic amounts; (2) the absence of acceptable low molecular weight active substances; (3) poor stability and insufficient shelf life; (4) manufacturing complexity; (5) the inability of such systems to protect the active substance; (6) an adverse change in the active substance under the action of the system; or (7) the inability of such systems to stimulate absorption of the active substance.
Для доставки фармацевтических средств недавно было предложено использовать белковые микросферы. См., например, патенты США №№ 5401516, 5443841 и заменяющий патент 35862. Кроме того, для доставки лекарственных средств используют некоторые модифицированные аминокислоты. См., например, патенты США №№ 5629020, 5643957, 5766633, 5776888 и 5866536.Protein microspheres have recently been proposed for the delivery of pharmaceuticals. See, for example, US Pat. Nos. 5,401,516, 5,443,841 and the substitute patent 35,862. In addition, some modified amino acids are used for drug delivery. See, for example, US patents Nos. 5629020, 5643957, 5766633, 5776888 and 5866536.
Однако по-прежнему существует потребность в простых и дешевых системах доставки лекарственных средств, которые можно легко изготовить и которые обеспечивают доставку широкого спектра активных веществ при различных способах введения.However, there remains a need for simple and cheap drug delivery systems that can be easily manufactured and which deliver a wide range of active substances with various modes of administration.
Краткое изложение существа изобретенияSummary of the invention
Настоящее изобретение относится к соединениям, облегчающим доставку активных веществ, и/или композициям для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, а также к применению вышеуказанных соединений для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного. Соединения для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного согласно настоящему изобретению включают соединения нижеследующей формулы:The present invention relates to compounds that facilitate the delivery of active substances and / or compositions for the delivery of active substances to the body tissues of an animal in need thereof, as well as to the use of the above compounds for delivery of active substances to the body tissues of an animal in need thereof. Compounds for delivering active substances to body tissues of an animal in need thereof according to the present invention include compounds of the following formula:
Где:Where:
* Термин «napa-Ph» означает парафенилен.and their pharmaceutically acceptable salts.
* The term "napa-Ph" means paraphenylene.
Более предпочтительные соединения без ограничения включают соединения №№5, 7, 11, 12, 43 и 75.More preferred compounds, without limitation, include compounds Nos. 5, 7, 11, 12, 43 and 75.
Данное изобретение относится также к композиции, предназначенной для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, которая содержит по меньшей мере одно из ниже приведенных соединений, и по меньшей мере одно активное вещество. В частности, указанное композиция содержит по меньшей мере одно из соединений формулыThis invention also relates to a composition intended for the delivery of active substances to the tissues of the body of an animal in need thereof, which contains at least one of the compounds below and at least one active substance. In particular, said composition contains at least one of the compounds of the formula
выбранное из группы, включающей:selected from the group including:
и их фармацевтически приемлемые соли.and their pharmaceutically acceptable salts.
Указанные композиции доставляют активные вещества в выбранные биологические системы, обеспечивая более высокую или улучшенную биологическую доступность активного вещества по сравнению с введением активного вещества без соединения доставляющего агента. Предпочтительным соединением для применения в вышеуказанной композиции являются соединения №11, 12, 43, 47 и 75 и их фармацевтически приемлемые соли.These compositions deliver active substances to selected biological systems, providing a higher or improved bioavailability of the active substance compared to the administration of the active substance without a delivery agent compound. The preferred compound for use in the above composition are compounds No. 11, 12, 43, 47 and 75 and their pharmaceutically acceptable salts.
Настоящее изобретение относится также к стандартным (унифицированным) лекарственным формам, содержащим указанные композиции. Стандартная (унифицированная) лекарственная форма может быть жидкой или твердой, такой как таблетка, капсула или частицы, включая порошок или саше.The present invention also relates to unit dosage forms containing said compositions. The unit dosage form can be liquid or solid, such as a tablet, capsule or particles, including powder or sachet.
Другой вариант реализации изобретения относится к способу введения активного вещества нуждающемуся в этом животному в виде композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение доставляющего агента вышеуказанной формулы, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и активное вещество. Предпочтительные способы введения включают пероральный, внутрикишечный и легочный способы.Another embodiment of the invention relates to a method for administering an active substance to an animal in need thereof in the form of a composition comprising at least one delivery agent compound of the above formula, including compounds excluded by the specified conditions and the active substance. Preferred routes of administration include oral, intestinal, and pulmonary methods.
Другой вариант реализации изобретения относится к способу лечения заболевания или достижения требуемого физиологического эффекта у животного в результате введения композиции по настоящему изобретению.Another embodiment of the invention relates to a method for treating a disease or achieving the desired physiological effect in an animal by administering a composition of the present invention.
Другой вариант реализации изобретения относится к способу получения композиции по настоящему изобретению путем смешивания по меньшей мере одного соединения доставляющего агента вышеуказанной формулы, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и по меньшей мере одного активного вещества.Another embodiment of the invention relates to a method for producing a composition of the present invention by mixing at least one compound of a delivery agent of the above formula, including compounds excluded by the specified conditions, and at least one active substance.
Еще один вариант реализации настоящего изобретения относится к применению соединения для доставки активных веществ к тканям организма нуждающегося в этом животного, где указанное соединение, имеет следующую формулуAnother embodiment of the present invention relates to the use of a compound for delivering active substances to the tissues of the body of an animal in need thereof, where said compound has the following formula
и выбрано из группы, включающей:and selected from the group including:
и их фармацевтически приемлемые соли.and their pharmaceutically acceptable salts.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯDETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
Соединения доставляющих агентовDelivery Agent Compounds
Термины «алкил» и «алкенил» в используемом здесь значении означают соответственно алкильные и алкенильные заместители с линейной и разветвленной цепью.The terms “alkyl” and “alkenyl” as used herein mean respectively straight and branched chain alkyl and alkenyl substituents.
Соединения доставляющих агентов могут представлять собой карбоновую кислоту или ее соли. Приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, органические и неорганические соли, например соли щелочных металлов, таких как натрий, калий и литий; соли щелочно-земельных металлов, таких как магний, кальций или барий; соли аммония; основные аминокислоты, такие как лизин или аргинин; и органические амины, такие как диметиламин или пиридин. Предпочтительными солями являются соли натрия. Указанные соли могут быть одно- или многовалентными солями, такими как мононатриевые и динатриевые соли. Предпочтительной динатриевой солью является данатриевая соль соединения 47. Данные соли могут быть также сольватами, включая сольваты этанола, и гидратами.The delivery agent compounds may be carboxylic acid or its salts. Suitable salts include, but are not limited to, organic and inorganic salts, for example, alkali metal salts such as sodium, potassium and lithium; alkaline earth metal salts such as magnesium, calcium or barium; ammonium salts; basic amino acids such as lysine or arginine; and organic amines such as dimethylamine or pyridine. Preferred salts are sodium salts. Said salts may be mono- or multivalent salts, such as monosodium and disodium salts. A preferred disodium salt is the disodium salt of compound 47. These salts can also be solvates, including ethanol solvates, and hydrates.
Соли соединений доставляющих агентов по настоящему изобретению можно получить способами, известными в данной области. Например, натриевые соли можно получить, растворяя соединение доставляющего агента в этаноле и добавляя водный раствор гидроксида натрия.Salts of the compounds of the delivery agents of the present invention can be obtained by methods known in the art. For example, sodium salts can be prepared by dissolving the delivery agent compound in ethanol and adding an aqueous solution of sodium hydroxide.
Соединение доставляющего агента можно очистить перекристаллизацией или фракционированием на одном или нескольких твердых хроматографических носителях, используемых отдельно или соединенных последовательно. Приемлемые системы растворителей для перекристаллизации включают, но не ограничиваются ими, ацетонитрил, метанол и тетрагидрофуран. Фракционирование может быть выполнено на приемлемом хроматографическом носителе, таком как оксид алюминия, используя смеси метанол/н-пропанол в качестве подвижной фазы; хроматографией с обращенной фазой, используя смеси трифторуксусная кислота/ацетонитрил в качестве подвижной фазы; и ионообменной хроматографией, используя воду или приемлемый буфер в качестве подвижной фазы. При выполнении анионообменной хроматографии предпочтительно используют градиент 0-500 мМ хлорида натрия.The delivery agent compound can be purified by recrystallization or fractionation on one or more solid chromatographic supports used alone or in series. Suitable solvent systems for recrystallization include, but are not limited to, acetonitrile, methanol, and tetrahydrofuran. Fractionation can be performed on an acceptable chromatographic support, such as alumina, using methanol / n-propanol mixtures as the mobile phase; reverse phase chromatography using trifluoroacetic acid / acetonitrile mixtures as the mobile phase; and ion exchange chromatography using water or an acceptable buffer as the mobile phase. When performing anion exchange chromatography, a gradient of 0-500 mM sodium chloride is preferably used.
Активные веществаActive substances
Активными веществами, пригодными для использования в настоящем изобретении, являются биологически и химически активные вещества, которые включают, но не ограничиваются ими, пестициды, фармакологические и лекарственные средства.Active substances suitable for use in the present invention are biologically and chemically active substances, which include, but are not limited to, pesticides, pharmacological and medicinal products.
Например, биологически или химически активные вещества, пригодные для использования в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются ими, белки; полипептиды; пептиды; гормоны; полисахариды и, в частности, смеси мукополисахаридов; углеводы; липиды; небольшие полярные органические молекулы (то есть полярные органические молекулы с молекулярной массой 500 Дальтон или менее); другие органические соединения; и, в частности, соединения, которые сами по себе не способны (или способны лишь частично) проникать сквозь оболочку желудочно-кишечного тракта и/или подвержены химическому расщеплению кислотами и ферментами в желудочно-кишечном тракте; либо комбинации указанных веществ.For example, biologically or chemically active substances suitable for use in the present invention include, but are not limited to, proteins; polypeptides; peptides; hormones polysaccharides and, in particular, mixtures of mucopolysaccharides; carbohydrates; lipids; small polar organic molecules (i.e., polar organic molecules with a molecular weight of 500 Daltons or less); other organic compounds; and, in particular, compounds that alone are not able (or only partially able) to penetrate the membrane of the gastrointestinal tract and / or are chemically degraded by acids and enzymes in the gastrointestinal tract; or combinations of these substances.
Другие примеры включают, но не ограничиваются ими, синтетические, природные или рекомбинантные источники нижеследующих соединений, таких как гормоны роста, включая гормоны роста человека (hGH), рекомбинантные гормоны роста человека (rhGH), бычьи гормоны роста и гормоны роста свиней; гормоны, стимулирующие выделение гормона роста; интерфероны, включая α, β и γ; интерлейкин-1; интерлейкин-2; инсулин, включая инсулин свиней, бычий инсулин, инсулин человека и рекомбинантный инсулин человека, необязательно имеющий противоионы цинка, натрия, кальция и аммония; инсулиноподобный фактор роста, включая IGF-1; гепарин, включая нефракционированный гепарин, гепариноподобные вещества, дерматаны, хондроитины, низкомолекулярный гепарин, очень низкомолекулярный гепарин и ультранизкомолекулярный гепарин; кальцитонин, включая кальцитонин лосося, угря, свиньи и человека; эритропоэтин; естественный фактор предсердия; антигены; моноклональные антитела; соматостатин; ингибиторы протеазы; адренокортикотропин; гормон, стимулирующий выделение гонадотропина; окситоцин; гормон, стимулирующий выделение лютеинизирующего гормона; фолликулостимулирующий гормон; глюкоцереброзидазу; тромбопоэтин; филграстим; простагландины; циклоспорин; вазопрессин; кромолиннатрий (натрий- или динатрийхромогликат); ванкомицин; десферриоксамин (DFO); бисфосфонаты, включая алендронат, тилудронат, этидронат, клодронат, памидронат, олпадронат и инкадронат; паращитовидный гормон (РТН), включая его фрагменты; противомикробные средства, включая антибиотики, антибактериальные средства и противогрибковые средства; витамины; аналоги, фрагменты, миметики или модифицированные полиэтиленгликолем (PEG) производные указанных соединений; или любые их комбинации. Неограничивающие примеры антибиотиков включают воздействующие на грамположительные бактерии, бактерицидные, липопептидные и циклические пептидные антибиотики, такие как даптомицин и его аналоги.Other examples include, but are not limited to, synthetic, natural, or recombinant sources of the following compounds, such as growth hormones, including human growth hormones (hGH), recombinant human growth hormones (rhGH), bovine growth hormones, and pig growth hormones; growth hormone stimulating hormones; interferons, including α, β and γ; interleukin-1; interleukin-2; insulin, including pig insulin, bovine insulin, human insulin and recombinant human insulin, optionally having counterions of zinc, sodium, calcium and ammonium; insulin-like growth factor, including IGF-1; heparin, including unfractionated heparin, heparin-like substances, dermatans, chondroitins, low molecular weight heparin, very low molecular weight heparin, and ultra low molecular weight heparin; calcitonin, including salmon, eel, pig, and human calcitonin; erythropoietin; natural atrial factor; antigens; monoclonal antibodies; somatostatin; protease inhibitors; adrenocorticotropin; hormone that stimulates the release of gonadotropin; oxytocin; hormone that stimulates the release of luteinizing hormone; follicle-stimulating hormone; glucocerebrosidase; thrombopoietin; filgrastim; prostaglandins; cyclosporine; vasopressin; cromolinosodium (sodium or disodium chromoglycate); vancomycin; desferrioxamine (DFO); bisphosphonates, including alendronate, tiludronate, etidronate, clodronate, pamidronate, olpadronate and incadronate; parathyroid hormone (PTH), including its fragments; antimicrobial agents, including antibiotics, antibacterial agents and antifungal agents; vitamins analogues, fragments, mimetics or modified with polyethylene glycol (PEG) derivatives of these compounds; or any combination thereof. Non-limiting examples of antibiotics include Gram-positive bacteria, bactericidal, lipopeptide and cyclic peptide antibiotics such as daptomycin and its analogues.
Предпочтительным активным веществом является даптомицин. Даптомицин описан в публикации Baltz, Biotechnology of Antibiotics, 2nd Ed., ed, W.R. Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Даптомицин представляет собой циклический липопептидный антибиотик, который может быть получен ферментацией Streptomyces roseosporus. Даптомицин является членом семейства антибиотиков фактора А-21978С0 S. roseosporus и имеет н-деканоильную боковую цепь, связанную цепью из трех аминокислот с N-концевым триптофаном циклического пептида, состоящего из 10 аминокислот. В настоящее время указанное соединение используется в различных составах для лечения серьезных инфекций, вызываемых бактериями, которые включают, но не ограничиваются ими, устойчивые к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) и устойчивые к ванкомицину энтерококки (VRE). Способы синтеза даптомицина описаны в патентах США №№ 32333, 32455, 5800157, 4885243, 32310, 32311, 4537717, 4482487 и 4524135.A preferred active ingredient is daptomycin. Daptomycin is described in Baltz, Biotechnology of Antibiotics, 2 nd Ed., Ed, WR Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Daptomycin is a cyclic lipopeptide antibiotic that can be obtained by fermentation of Streptomyces roseosporus. Daptomycin is a member of the antibiotic family of factor A-21978C 0 S. roseosporus and has an n-decanoyl side chain linked by a chain of three amino acids to the N-terminal tryptophan of a cyclic peptide of 10 amino acids. Currently, the compound is used in various formulations for the treatment of serious infections caused by bacteria, which include, but are not limited to, methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) and vancomycin-resistant enterococci (VRE). Methods for the synthesis of daptomycin are described in US patent No. 32333, 32455, 5800157, 4885243, 32310, 32311, 4537717, 4482487 and 4524135.
Системы доставки активного вещества к тканямTissue delivery systems
Композиция по настоящему изобретению содержит одно или несколько соединений доставляющих агентов по данному изобретению, включая соединения, исключенные оговоренными условиями, и одно или несколько активных веществ. Соединение доставляющего агента и активное вещество обычно смешивают до введения, получая таким образом предназначенную для введения композицию.The composition of the present invention contains one or more compounds of the delivery agents of this invention, including compounds excluded by the specified conditions, and one or more active substances. The delivery agent compound and the active substance are usually mixed prior to administration, thereby obtaining a composition intended for administration.
Предпочтительные комбинации соединений доставляющих агентов и активных веществ включают, но не ограничиваются ими, соединение 12 и кальцитонин, в частности кальцитонин лосося; соединение 12 и гепарин; соединение 5 и кальцитонин, в частности кальцитонин лосося; любое из соединений 7, 11 и 43 и даптомицин; соединение 7 и кромолин, в частности кромолиннатрий; и соединение 47 и гормон роста человека.Preferred combinations of compounds of delivery agents and active substances include, but are not limited to, compound 12 and calcitonin, in particular salmon calcitonin; compound 12 and heparin; compound 5 and calcitonin, in particular salmon calcitonin; any of compounds 7, 11 and 43 and daptomycin; compound 7 and cromolyn, in particular cromolyn sodium; and compound 47 and human growth hormone.
Предназначенные для введения композиции могут быть жидкостями. В качестве растворяющей среды можно использовать воду (например, для кальцитонина лосося, паращитовидного гормона и эритропоэтина), 25% водный раствор пропиленгликоля (например, для гепарина) и фосфатный буфер (например, для rhGH). Еще одним растворителем является полиэтиленгликоль. Лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с раствором активного вещества непосредственно перед введением. Альтернативно, раствор соединения доставляющего агента (или активного вещества) можно смешивать с активным веществом (или соединением доставляющего агента) в твердой форме. Соединение доставляющего агента и активное вещество можно также смешивать в виде сухих порошков. Соединение доставляющего агента и активное вещество можно смешивать в процессе изготовления лекарственного средства.The compositions intended for administration may be liquids. Water can be used as a solvent (for example, for salmon calcitonin, parathyroid hormone and erythropoietin), 25% aqueous propylene glycol solution (for heparin, for example), and phosphate buffer (for rhGH, for example). Another solvent is polyethylene glycol. Medicinal solutions are prepared by mixing a solution of a compound of a delivery agent with a solution of the active substance immediately before administration. Alternatively, a solution of the compound of the delivery agent (or active substance) can be mixed with the active substance (or compound of the delivery agent) in solid form. The delivery agent compound and the active substance can also be mixed in the form of dry powders. The delivery agent compound and the active substance can be mixed in the manufacturing process of the drug.
Лекарственные растворы могут необязательно содержать добавки, такие как соли фосфатного буфера, лимонную кислоту, гликоли или другие диспергаторы. В указанный раствор можно вводить стабилизирующие добавки, предпочтительно в концентрации от 0,1 до 20% (мас./об.).Medicinal solutions may optionally contain additives, such as salts of phosphate buffer, citric acid, glycols, or other dispersants. Stabilizing additives can be added to said solution, preferably in a concentration of 0.1 to 20% (w / v).
Предназначенные для введения композиции альтернативно могут быть получены в твердой форме, такой как таблетка, капсула или частицы, например порошок или саше. Твердые лекарственные формы можно получить, смешивая твердое соединение доставляющего агента с твердым активным веществом. Альтернативно, твердое вещество можно получить из раствора соединения доставляющего агента и активного вещества способами, известными в данной области, такими как сушка вымораживанием (лиофилизация), осаждение, кристаллизация и диспергирование в твердом состоянии.The compositions intended for administration may alternatively be prepared in solid form, such as a tablet, capsule or particles, for example, powder or sachet. Solid dosage forms can be obtained by mixing a solid compound of a delivery agent with a solid active substance. Alternatively, a solid can be obtained from a solution of a compound of a delivery agent and an active substance by methods known in the art, such as freeze-drying (lyophilization), precipitation, crystallization and solid dispersion.
Предназначенные для введения композиции по настоящему изобретению могут также включать один или несколько ингибиторов ферментов. Указанные ингибиторы ферментов включают, но не ограничиваются ими, такие соединения, как актинонин или эпиактинонин и их производные. Другие ингибиторы ферментов включают, но не ограничиваются ими, апротинин (тразилол) и ингибитор Боумана-Бирка.Intended for administration, the compositions of the present invention may also include one or more enzyme inhibitors. Said enzyme inhibitors include, but are not limited to, compounds such as actinonin or epiactinonin and their derivatives. Other enzyme inhibitors include, but are not limited to, aprotinin (trazylol) and a Bowman-Birk inhibitor.
Количество активного вещества в предназначенной для введения композиции по настоящему изобретению должно обеспечивать эффективное воздействие конкретного активного вещества на ткань-мишень. Количество активного вещества в указанных композициях обычно является фармакологически, биологически, терапевтически или химически эффективным количеством. Однако фактическое количество может быть меньше указанного количества при использовании данной композиции для изготовления стандартной лекарственной формы, так как такая лекарственная форма может содержать несколько композиций соединения доставляющего агента/активного вещества или разделенную дозу фармакологически, биологически, терапевтически или химически эффективного количества. В данном случае общее эффективное количество вводят в виде кумулятивных (суммарных) доз, содержащих эффективное количество активного вещества.The amount of active substance in the composition to be administered according to the present invention should provide an effective effect of the specific active substance on the target tissue. The amount of active substance in said compositions is usually a pharmacologically, biologically, therapeutically or chemically effective amount. However, the actual amount may be less than the specified amount when using this composition for the manufacture of a standard dosage form, as such a dosage form may contain several compositions of the compounds of the delivery agent / active substance or a divided dose of a pharmacologically, biologically, therapeutically or chemically effective amount. In this case, the total effective amount is administered in the form of cumulative (total) doses containing an effective amount of the active substance.
Общее количество активного вещества можно определить способами, известными специалистам в данной области. Однако благодаря тому что композиции по данному изобретению обеспечивают более эффективную доставку активных веществ, чем композиции, содержащие только активное вещество, нуждающемуся субъекту можно вводить более низкие дозы биологически или химически активных веществ по сравнению с ранее использовавшимися лекарственными формами или системами доставки лекарственного средства при достижении таких же уровней в крови и/или аналогичного лечебного действия.The total amount of active substance can be determined by methods known to specialists in this field. However, due to the fact that the compositions of this invention provide a more efficient delivery of active substances than compositions containing only the active substance, lower doses of biologically or chemically active substances can be administered to a needy subject compared to previously used dosage forms or drug delivery systems when such same blood levels and / or a similar therapeutic effect.
Описываемые соединения доставляющих агентов облегчают доставку биологически и химически активных веществ, в частности, при пероральном, назальном, подъязычном, интрадуоденальном, подкожном, трансбуккальном, внутрикишечном, ректальном, вагинальном, слизистом, легочном, чрескожном, внутрикожном, парентеральном, внутривенном, внутримышечном и глазном введении, а также преодоление гематоэнцефалического барьера.The described compounds of the delivery agents facilitate the delivery of biologically and chemically active substances, in particular, for oral, nasal, sublingual, intraduodenal, subcutaneous, buccal, intraintestinal, rectal, vaginal, mucous, pulmonary, percutaneous, intradermal, parenteral, intravenous, intramuscular , as well as overcoming the blood-brain barrier.
Стандартные (унифицированные) лекарственные формы могут также содержать используемые отдельно или в комбинации наполнители, разбавители, дезинтеграторы, смазывающие вещества, пластификаторы, красители, ароматизаторы, маскирующие вкус вещества, сахара, подслащивающие вещества, соли и растворители, включающие, но не ограничивающиеся ими, воду, 1,2-пропандиол, этанол, оливковое масло или любые их комбинации.Unit dosage forms may also contain excipients, diluents, disintegrants, lubricants, plasticizers, colorants, flavoring agents, masking agents, sugars, sweeteners, salts and solvents, including, but not limited to, water that are used separately or in combination , 1,2-propanediol, ethanol, olive oil, or any combination thereof.
Соединения и композиции по настоящему изобретению пригодны для введения биологически или химически активных веществ любым животным, включая, но не ограничиваясь ими, птиц, таких как куры; млекопитающих, таких как грызуны, крупный рогатый скот, свиньи, собаки, кошки, приматы и, в частности, человек; а также насекомых.The compounds and compositions of the present invention are suitable for the administration of biologically or chemically active substances to any animals, including, but not limited to birds, such as chickens; mammals such as rodents, cattle, pigs, dogs, cats, primates, and in particular humans; as well as insects.
Указанная система является особенно пригодной для введения таких химически или биологически активных веществ, которые в противном случае были бы разрушены или стали менее эффективными под действием условий, существующих в организме животного, прежде чем активное вещество достигнет участка действия (то есть участка, где должно происходить высвобождение активного вещества из композиции, используемой для его доставки). Соединения и композиции по настоящему изобретению пригодны для перорального введения активных веществ, которые обычно не предназначены для такого способа введения или требуют более эффективной доставки.The system is particularly suitable for administering chemically or biologically active substances that would otherwise be destroyed or become less effective under the conditions existing in the animal’s body before the active substance reaches the site of action (i.e., the site where the release should take place) active substance from the composition used for its delivery). The compounds and compositions of the present invention are suitable for oral administration of active substances that are usually not intended for such a route of administration or require more effective delivery.
Композиции, содержащие указанные соединения и активные вещества, обеспечивают эффективную доставку активных веществ к выбранным биологическим системам и более высокую или лучшую биологическую доступность активного вещества по сравнению с введением данного активного вещества без доставляющего агента. Действие лекарственного средства можно улучшить, доставляя большее количество активного вещества в течение определенного периода времени или доставляя активное вещество в требуемый период времени (то есть осуществляя более быструю или медленную доставку) или через определенный период времени (то есть осуществляя пролонгированную доставку).Compositions containing these compounds and active substances provide an effective delivery of active substances to selected biological systems and a higher or better bioavailability of the active substance compared to the administration of this active substance without a delivery agent. The effect of the drug can be improved by delivering a larger amount of the active substance over a certain period of time or delivering the active substance in the desired period of time (i.e., delivering faster or slower delivery) or after a certain period of time (i.e., delivering longer delivery).
Другой вариант осуществления изобретения относится к способу лечения или профилактики заболевания, а также достижения требуемого физиологического действия, указанного в нижеследующей таблице, благодаря введению животному композиции по настоящему изобретению. Специальные показания для использования активных веществ представлены в справочнике Physicians′ Desk Reference (54th Ed., 2000, Medical Economics Company, Inc., Montvale, NJ), который включен в данное описание изобретения в качестве ссылки. Активные вещества, приведенные в нижеследующей таблице, включают их аналоги, фрагменты, миметики и производные, модифицированные полиэтиленгликолем.Another embodiment of the invention relates to a method for treating or preventing a disease, as well as achieving the desired physiological effect indicated in the following table, by administering to the animal the composition of the present invention. Special indications for the use of active substances are provided in the Physicians' Desk Reference (54 th Ed., 2000, Medical Economics Company, Inc., Montvale, NJ), which is incorporated herein by reference. The active substances shown in the following table include their analogues, fragments, mimetics and derivatives modified with polyethylene glycol.
Один вариант осуществления настоящего изобретения относится, например, к способу лечения субъекта, страдающего или подверженного диабету, путем введения инсулина и по меньшей мере одного из соединений доставляющих агентов по настоящему изобретению.One embodiment of the present invention relates, for example, to a method for treating a subject suffering from or susceptible to diabetes by administering insulin and at least one of the compounds of the delivering agents of the present invention.
После введения лекарственного препарата активное вещество, присутствующее в композиции или стандартной унифицированной лекарственной форме, всасывается в систему кровообращения. Биологическую доступность активного вещества можно легко оценить, определяя известную фармакологическую активность в крови, например увеличение времени свертывания крови, вызываемое гепарином, или уменьшение уровней кальция в крови, вызываемое кальцитонином. Альтернативно, можно произвести прямое измерение уровней активного вещества в крови.After administration of the drug, the active substance present in the composition or unit dosage form is absorbed into the circulatory system. The bioavailability of the active substance can be easily assessed by determining known pharmacological activity in the blood, for example, an increase in blood coagulation time caused by heparin, or a decrease in blood calcium levels caused by calcitonin. Alternatively, a direct measurement of active substance levels in the blood can be performed.
Описание предпочтительных вариантов осуществления изобретенияDescription of preferred embodiments of the invention
Приведенные ниже примеры иллюстрируют данное изобретение, не ограничивая его объем. Все части являются массовыми частями, за исключением особо оговоренных случаев.The following examples illustrate the invention without limiting its scope. All parts are mass parts, except where otherwise indicated.
Нижеследующие соединения анализируют спектроскопией протонного ядерного магнитного резонанса (1Н ЯМР), которую выполняют при помощи спектрометра Брукера 300 МГц, используя в качестве растворителя диметилсульфоксид (ДМСО-d6), за исключением особо оговоренных случаев.The following compounds are analyzed by proton nuclear magnetic resonance spectroscopy ( 1 H NMR), which is performed using a 300 MHz Brucker spectrometer using dimethyl sulfoxide (DMSO-d 6 ) as a solvent, unless otherwise indicated.
Пример 1. Получение соединенийExample 1. Obtaining compounds
Получение соединения 1Getting connection 1
Гидроксид калия (8,82 г, 157,2 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и переносят в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 60 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 5,35 г (39,3 ммоль) 2′-гидроксиацетофенона. Смесь перемешивают еще 15 минут и добавляют 5,39 г (25,1 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно четырех часов. К коричневой реакционной смеси добавляют дистиллированную воду (200 мл) и полученный раствор охлаждают до 0°С. Затем добавляют концентрированный водный раствор соляной кислоты до достижения рН раствора около 5. Образовавшееся твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 3,59 г (52,9%) светло-коричневого порошка. Температура плавления: 170,5-172,0°С. Анализ сжиганием: %С: 71,10 (вычислено), 70,81 (найдено); %Н: 5,22 (вычислено), 5,25 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 13,0, с, 1Н; 8,00-7,97, д, 2Н; 7,64-7,59, м, 3Н; 7,55-7,49, дт, 1Н; 7,25-7,22, д, 1Н; 7,07-7,01, дт, 1Н; 5,33, с, 2Н; 2,54, с, ЗН.Potassium hydroxide (8.82 g, 157.2 mmol) is ground in a mortar to a powder state and transferred to a 125 ml Erlenmeyer flask containing 60 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred for 5 minutes, after which 5.35 g (39.3 mmol) of 2′-hydroxyacetophenone was added. The mixture was stirred for another 15 minutes and 5.39 g (25.1 mmol) of 4- (bromomethyl) benzoic acid was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for about four hours. Distilled water (200 ml) was added to the brown reaction mixture, and the resulting solution was cooled to 0 ° C. Then a concentrated aqueous hydrochloric acid solution was added until the solution reached a pH of about 5. The resulting solid was collected by filtration and recrystallized from ethanol: water (50:50) to obtain 3.59 g (52.9%) of a light brown powder. Melting point: 170.5-172.0 ° C. Combustion analysis:% C: 71.10 (calculated), 70.81 (found); % H: 5.22 (calculated), 5.25 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.0, s, 1H; 8.00-7.97, d, 2H; 7.64-7.59, m, 3H; 7.55-7.49, dt, 1H; 7.25-7.22, d, 1H; 7.07-7.01, dt, 1H; 5.33, s, 2H; 2.54, s, ZN.
Соединения 63, 62 и 64 получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 63, 62 and 64 are prepared as described above using the appropriate starting materials.
Соединение 63. Температура плавления: 91-94°С. Анализ сжиганием: %С: 69,62 (вычислено), 69,91 (найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,28 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,0, д, 2Н; 4,0, т, 2Н; 3,0, kb, 2H; 2,2, т, 2Н; δ 1,7, п, 2H; 1,5, п, 2H; 1,35, м, 6Н; 1,05, т, 3Н.Compound 63. Melting point: 91-94 ° C. Combustion analysis:% C: 69.62 (calculated), 69.91 (found); % H: 8.53 (calculated), 8.28 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 7.9, d, 2H; 7.0, d, 2H; 4.0, t, 2H; 3.0, kb, 2H; 2.2, t, 2H; δ 1.7, p, 2H; 1.5, p, 2H; 1.35, m, 6H; 1.05, t, 3H.
Соединение 62. Температура плавления: 125-129°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 68,91 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2H; 7,02, д, 2H; 4,01, т, 2H; 2,52, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,7, п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,38, м, 6Н.Compound 62. Melting point: 125-129 ° C. Combustion analysis:% C: 69.04 (calculated), 68.91 (found); % H: 7.97 (calculated), 8.04 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 7.9, d, 2H; 7.02, d, 2H; 4.01, t, 2H; 2.52, s, 3H; 2.23, t, 2H; 1.7, p, 2H; 1.5, p, 2H; 1.38, m, 6H.
Соединение 64. Температура плавления: 62-65°С. Анализ сжиганием: %С: 69,06 (вычислено), 69,32 (найдено); %Н: 7,91 (вычислено), 7,97 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,5, д, 1Н; 7,4, м, 2Н; 7,19, дд, 1Н; 4,02, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т, 2Н; 1,7, п, 2Н; 1,5, п, 2Н; 1,3, м, 6Н.Compound 64. Melting point: 62-65 ° C. Combustion analysis:% C: 69.06 (calculated), 69.32 (found); % H: 7.91 (calculated), 7.97 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.5, d, 1H; 7.4, m, 2H; 7.19, dd, 1H; 4.02, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.2, t, 2H; 1.7, p, 2H; 1.5, p, 2H; 1.3, m, 6H.
Соединения 66 и 52 также получают аналогично способу получения соединения 1, заменяя 2′-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 66 (фенол) и 52 (салициламид).Compounds 66 and 52 are also prepared analogously to the preparation of compound 1, replacing 2′-hydroxyacetophenone with the compound indicated in parentheses: 66 (phenol) and 52 (salicylamide).
Соединение 66. Температура плавления: 219-221°С. Анализ сжиганием: %С: 73,67 (вычислено), 73,70 (найдено); %Н: 5,30 (вычислено), 5,22 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,57, д, 2Н; 7,30, м, 2Н; 7,01, м, 2Н; 6,95, м, 1Н; 5,19, с, 2Н.Compound 66. Melting point: 219-221 ° C. Combustion analysis:% C: 73.67 (calculated), 73.70 (found); % H: 5.30 (calculated), 5.22 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.0, s, 1H; 7.97, d, 2H; 7.57, d, 2H; 7.30, m, 2H; 7.01, m, 2H; 6.95, m, 1H; 5.19, s, 2H.
Соединение 52. Температура плавления: 242-243°С. Анализ сжиганием: %С: 66,08 (вычислено), 65,74 (найдено); %Н: 4,86 (вычислено), 4,79 (найдено); %N: 5,14 (вычислено), 4,78 (найдено) 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 13,0, с, 1Н; 7,97, д, 2Н; 7,75, дд, 1Н; 7,64, шир.с, 1Н; 7,62, д, 2Н; 7,56, шир.с, 1Н; 7,44, дт, 1Н; 7,17, д, 1Н; 7,03, т, 1Н; 5,35, с, 2Н.Compound 52. Melting point: 242-243 ° C. Combustion analysis:% C: 66.08 (calculated), 65.74 (found); % H: 4.86 (calculated), 4.79 (found); % N: 5.14 (calculated), 4.78 (found) 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.0, s, 1H; 7.97, d, 2H; 7.75, dd, 1H; 7.64, broad s, 1H; 7.62, d, 2H; 7.56, broad s, 1H; 7.44, dt, 1H; 7.17, d, 1H; 7.03, t, 1H; 5.35, s, 2H.
Получение соединения 2Preparation of Compound 2
Гидроксид калия (9,88 г, 176 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и переносят в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 80 мл диметилсульфоксида и 5,54 г (50,3 ммоль) катехина. Полученную смесь перемешивают в течение 45 минут, слегка нагревая до 35°С. Темную смесь обрабатывают раствором 6,94 г (40,7 ммоль) 4-(хлорметил)бензойной кислоты и 30 мл диметилсульфоксида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 17 часов. Смесь подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты, что вызывает образование твердого вещества. Твердое вещество собирают фильтрованием. Полученный продукт перекристаллизовывают из смеси этилацетат/метил трет-бутиловый эфир/гексаны и подвергают флэш-хроматографии с использованием в качестве элюента смеси 70% гексанов/этилацетат/1% уксусной кислоты, получая соединение 2 в виде белого твердого вещества (1,10 г) (выход 11%). Температура плавления: 196-198°С. Анализ сжиганием: %С: 68,85 (вычислено), 68,60 (найдено); %Н: 4,95 (вычислено), 4,82 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,96, с, 1H; 9,03, с, 1H; 7,97, д, 2Н; 7,61, д, 2Н; 6,95, дд, 1Н; 6,83, дд, 1Н; 6,78, тд, 1H; 6,70, дт, 1H; 5,18, с, 2Н.Potassium hydroxide (9.88 g, 176 mmol) is ground to a powder in a mortar and transferred to a 125 ml Erlenmeyer flask containing 80 ml of dimethyl sulfoxide and 5.54 g (50.3 mmol) of catechin. The resulting mixture was stirred for 45 minutes, slightly warming to 35 ° C. The dark mixture was treated with a solution of 6.94 g (40.7 mmol) of 4- (chloromethyl) benzoic acid and 30 ml of dimethyl sulfoxide. The reaction mixture was stirred at room temperature for about 17 hours. The mixture is acidified with 4% aqueous hydrochloric acid, which causes the formation of a solid. The solid is collected by filtration. The resulting product was recrystallized from ethyl acetate / methyl tert-butyl ether / hexanes and flash chromatographed using 70% hexanes / ethyl acetate / 1% acetic acid as an eluent to give compound 2 as a white solid (1.10 g) (yield 11%). Melting point: 196-198 ° C. Combustion analysis:% C: 68.85 (calculated), 68.60 (found); % H: 4.95 (calculated), 4.82 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.96, s, 1H; 9.03, s, 1H; 7.97, d, 2H; 7.61, d, 2H; 6.95, dd, 1H; 6.83, dd, 1H; 6.78, td, 1H; 6.70, dt, 1H; 5.18, s, 2H.
Соединения 79 и 59 получают аналогично способу получения соединения 2.Compounds 79 and 59 were obtained analogously to the method for producing compound 2.
Соединение 79. Температура плавления: 176-178°С. Анализ сжиганием: %С: 65,69 (вычислено), 65,53 (найдено); %Н: 5,15 (вычислено), 5,00 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 13,0, шир.с, 1H; 8,7, шир.с, 1H; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1H; 6,75, м, 2Н; 6,7, м, 1H; 5,9, шир.с, 1H; 5,0, м, 1H; 4,1, дд, 1H; 3,85, дд, 1H.Compound 79. Melting point: 176-178 ° C. Combustion analysis:% C: 65.69 (calculated), 65.53 (found); % H: 5.15 (calculated), 5.00 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.0, broad s, 1H; 8.7, broad s, 1H; 7.9, d, 2H; 7.6, d, 2H; 6.9, d, 1H; 6.75, m, 2H; 6.7, m, 1H; 5.9, bs, 1H; 5.0, m, 1H; 4.1, dd, 1H; 3.85, dd, 1H.
Соединение 59. Температура плавления: 164-167°С. Анализ сжиганием: %С: 70,31 (вычислено), 70,18 (найдено); %Н: 4,72 (вычислено), 4,83 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 13,0, шир.с, 1Н; 10,5, с, 1Н; 8,7, шир.с, 1Н; 7,9, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 6,9, д, 1Н; 6,75, м, 2Н; 6,7, м, 1Н; 5,9, шир.с, 1Н; 5,0, м, 1Н; 4,1, дд, 1Н; 3,85, дд, 1Н.Compound 59. Melting point: 164-167 ° C. Combustion analysis:% C: 70.31 (calculated), 70.18 (found); % H: 4.72 (calculated), 4.83 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 13.0, broad s, 1H; 10.5, s, 1H; 8.7, broad s, 1H; 7.9, d, 2H; 7.6, d, 2H; 6.9, d, 1H; 6.75, m, 2H; 6.7, m, 1H; 5.9, broad s, 1H; 5.0, m, 1H; 4.1, dd, 1H; 3.85, dd, 1H.
Получение соединения 3Preparation of Compound 3
Соединение 3 предоставлено фирмой Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH).Compound 3 provided by Lancaster Synthesis Inc. (Windham, NH).
Получение соединения 6Preparation of Compound 6
В 200 мл круглодонную колбу помещают 11,2 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида калия и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут. Добавляют 2-бензилоксифенол (10 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 7-бромгептаноат (14,6 мл, 1,5 экв.). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа.In a 200 ml round bottom flask was placed 11.2 g (4 equiv.) Of powdered potassium hydroxide and 100 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred at room temperature for 5 minutes. 2-Benzyloxyphenol (10 g, 1 equiv.) Was added, followed by the addition of ethyl 7-bromoheptanoate (14.6 ml, 1.5 equiv.) Immediately. The resulting solution was stirred at room temperature for 1 hour.
Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и экстрагируют 5×100 мл метиленхлорида. Объединенные органические слои промывают водой и насыщенным раствором соли (по 20 мл) и концентрируют. Полученную жидкость растворяют в 125 мл водного метанола. Добавляют твердый гидроксид натрия (3 экв., 3,7 г) и полученный раствор нагревают до 80°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и выпаривают метанол. Водный слой экстрагируют 150 мл простого эфира и подкисляют до рН ~ 2 концентрированным водным раствором соляной кислоты. Водный слой экстрагируют этилацетатом (2×300 мл), фильтруют и сушат, получая 19 г (2-бензилоксифенил)- 7-оксигептановой кислоты.The reaction mixture was poured into 200 ml of distilled water and extracted with 5 × 100 ml of methylene chloride. The combined organic layers were washed with water and brine (20 ml each) and concentrated. The resulting liquid was dissolved in 125 ml of aqueous methanol. Solid sodium hydroxide (3 eq., 3.7 g) was added and the resulting solution was heated to 80 ° C for 2 hours. The reaction mixture was cooled to room temperature and methanol was evaporated. The aqueous layer was extracted with 150 ml of ether and acidified to pH ~ 2 with a concentrated aqueous solution of hydrochloric acid. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate (2 × 300 ml), filtered and dried, yielding 19 g of (2-benzyloxyphenyl) -7-hydroxyheptanoic acid.
Получают суспензию (2-бензилоксифенил)-7-оксигептановой кислоты (19 г, 58 ммоль), 150 мл этилового спирта и 150 мг палладиевой черни и помещают в автоклав Парра. В реакторе повышают давление до 7 атм (100 фунтов/кв.дюйм), подавая водород. Смесь перемешивают при 50°С в течение 17 часов. Палладий отфильтровывают и фильтрат концентрируют, получая продукт в виде бледно-желтого твердого вещества. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны, и получают 5 г (42%) (2-гидроксифенил)-7-оксигептановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 47-50°С. Анализ сжиганием: %С: 65,53 (вычислено), 65,12 (найдено); %Н: 7,61 (вычислено), 7,82 (найдено). МС (EI): 238 (вычислено), 238 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,89-6,86, м, 1Н; 6,80-6,87, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,72-1,67, м, 2Н; 1,55-1,25, м, 6Н.A suspension of (2-benzyloxyphenyl) -7-hydroxyheptanoic acid (19 g, 58 mmol), 150 ml of ethyl alcohol and 150 mg of palladium black was obtained and placed in a Parr autoclave. The reactor is pressurized to 7 atm (100 psi) by supplying hydrogen. The mixture was stirred at 50 ° C for 17 hours. The palladium was filtered off and the filtrate was concentrated to give the product as a pale yellow solid. The crude material was purified by silica gel chromatography using 30-60% ethyl acetate / hexanes as eluent to give 5 g (42%) of (2-hydroxyphenyl) -7-hydroxyheptanoic acid as an off-white solid. Melting point: 47-50 ° C. Combustion analysis:% C: 65.53 (calculated), 65.12 (found); % H: 7.61 (calculated), 7.82 (found). MS (EI): 238 (calculated), 238 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.8, s, 1H; 6.89-6.86, m, 1H; 6.80-6.87, m, 3H; 3.94, t, 2H; 2.21, t, 2H; 1.72-1.67, m, 2H; 1.55-1.25, m, 6H.
Получение соединения 7Getting connection 7
В 200 мл круглодонную колбу помещают 22,9 г (3 экв.) только что измельченного гидроксида калия и 100 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при 25°С в течение 5 минут. Добавляют катехин (15 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 8-бромоктаноат (34,2 г, 1 экв). Темно-коричневый раствор перемешивают при 25°С в течение 2 часов.In a 200 ml round bottom flask was placed 22.9 g (3 equiv.) Of freshly ground potassium hydroxide and 100 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred at 25 ° C for 5 minutes. Catechin (15 g, 1 equiv) was added, followed by ethyl 8-bromoctanoate (34.2 g, 1 equiv) was added immediately. The dark brown solution was stirred at 25 ° C for 2 hours.
Добавляют дистиллированную воду (100 мл) и полученный раствор нагревают до 85°С в течение 2 часов. Смесь охлаждают, подкисляют до рН ~2 концентрированным водным раствором соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические слои сушат над сульфатом магния, фильтруют и выпаривают растворитель. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны. Требуемый продукт собирают и сушат, получая 6,6 г (19%) 8-(2-гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 60-64°С. Анализ сжиганием: %С; 66,65 (вычислено), 66,65 (найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,10 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,90-6,86, м, 1Н; 6,80-6,76, м, 3Н; 3,92, т, 2Н; 2,21, т, 2Н; 1,75-1,66, м, 2Н; 1,56-1,29, м, 8Н.Distilled water (100 ml) was added and the resulting solution was heated to 85 ° C for 2 hours. The mixture is cooled, acidified to pH ~ 2 with a concentrated aqueous solution of hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate (2 × 300 ml). The combined organic layers were dried over magnesium sulfate, filtered and the solvent was evaporated. The crude material is purified by silica gel chromatography using a mixture of 30-60% ethyl acetate / hexanes as eluent. The desired product is collected and dried, yielding 6.6 g (19%) of 8- (2-hydroxyphenoxy) octanoic acid as an off-white solid. Melting point: 60-64 ° C. Burn analysis:% C; 66.65 (calculated), 66.65 (found); % H: 7.99 (calculated), 8.10 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.8, s, 1H; 6.90-6.86, m, 1H; 6.80-6.76, m, 3H; 3.92, t, 2H; 2.21, t, 2H; 1.75-1.66, m, 2H; 1.56-1.29, m, 8H.
Соединения 4, 35, 38, 92 и 98 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 4, 35, 38, 92 and 98 are also prepared as described above using the appropriate starting materials.
Соединение 4. Температура плавления: 64-66°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22 (вычислено), 61,32 (найдено); %Н: 6,16 (вычислено), 6,27 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,1, с, 1Н; 8,75, с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,81-6,68, м, 3Н; 3,98, т, 2Н; 2,51, т, 2Н; 1,98-1,89, м, 2Н.Compound 4. Melting point: 64-66 ° C. Combustion analysis:% C: 61.22 (calculated), 61.32 (found); % H: 6.16 (calculated), 6.27 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.1, s, 1H; 8.75, s, 1H; 6.90-6.87, m, 1H; 6.81-6.68, m, 3H; 3.98, t, 2H; 2.51, t, 2H; 1.98-1.89, m, 2H.
Соединение 35. Температура плавления: 77-80°С. Анализ сжиганием: %С: 67,65 (вычислено), 67,40 (найдено); %Н: 8,33 (вычислено), 8,37 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 11,9, с, 1Н; 6,96-6,85, м, 4Н; 3,94, т, 2Н; 3,74, с, 3Н; 2,23, т, 2Н; 1,72-1,65, м, 2Н; 1,53-1,48, м, 2Н; 1,39-1,29, м, 6Н.Compound 35. Melting point: 77-80 ° C. Combustion analysis:% C: 67.65 (calculated), 67.40 (found); % H: 8.33 (calculated), 8.37 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 11.9, s, 1H; 6.96-6.85, m, 4H; 3.94, t, 2H; 3.74, s, 3H; 2.23, t, 2H; 1.72-1.65, m, 2H; 1.53-1.48, m, 2H; 1.39-1.29, m, 6H.
Соединение 38. Температура плавления: 75-76°С. Анализ сжиганием: %С: 65,29 (вычислено), 65,42 (найдено); %Н: 7,53 (вычислено), 7,47 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 11,9, с, 1Н; 7,35, т, 1Н; 6,56, дд, 2Н; 4,04, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,27, т, 2Н; 1,79-1,70, м, 2Н; 1,55-1,48, м, 2Н; 1,45-1,37, м, 2Н; 1,32-1,14, м, 4Н.Compound 38. Melting point: 75-76 ° C. Combustion analysis:% C: 65.29 (calculated), 65.42 (found); % H: 7.53 (calculated), 7.47 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 11.9, s, 1H; 7.35, t, 1H; 6.56, dd, 2H; 4.04, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.27, t, 2H; 1.79-1.70, m, 2H; 1.55-1.48, m, 2H; 1.45-1.37, m, 2H; 1.32-1.14, m, 4H.
Соединение 92. Температура плавления: 107-108°С. Анализ сжиганием: %С: 63,89 (вычислено), 63,98 (найдено); %Н: 7,74 (вычислено), 7,72 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 2Н; 6,95, м, 2Н; 6,85, м, 2Н; 3,9, т, 4Н; 3,0, кв, 2H; 2,2, т, 4Н; 6 1,7, п, 4Н; 1,55, п, 4Н; 5 1,4, п, 4Н.Compound 92. Melting point: 107-108 ° C. Combustion analysis:% C: 63.89 (calculated), 63.98 (found); % H: 7.74 (calculated), 7.72 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 2H; 6.95, m, 2H; 6.85, m, 2H; 3.9, t, 4H; 3.0 q, 2H; 2.2, t, 4H; 6 1.7, p, 4H; 1.55, p, 4H; 5 1.4, p, 4H.
Соединение 98. Температура плавления: 75-77°С. Анализ сжиганием: %С: 63,16 (вычислено), 62,81 (найдено); %Н: 8,01 (вычислено), 8,17 (найдено); %N: 3,2 (вычислено), 3,05 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 2H; 7,60, с, 1Н; 7,45, с, 1Н; 7,03-7,21, м, ЗН; 3,9, м, 4Н; 2,14, т, 4Н; 1,61, м, 4Н; 1,22-1,55, м, 16Н.Compound 98. Melting point: 75-77 ° C. Combustion analysis:% C: 63.16 (calculated), 62.81 (found); % H: 8.01 (calculated), 8.17 (found); % N: 3.2 (calculated), 3.05 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 2H; 7.60, s, 1H; 7.45, s, 1H; 7.03-7.21, m, 3H; 3.9, m, 4H; 2.14, t, 4H; 1.61, m, 4H; 1.22-1.55, m, 16H.
Альтернативное получение соединения 7Alternative preparation of compound 7
В 500 мл колбу Эрленмейера помещают 28 г (4 экв.) порошкообразного гидроксида калия и 400 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 минут. Добавляют 2-бензилоксифенол (25 г, 1 экв.), после чего сразу же добавляют этил 8-бромоктаноат (37,6 г, 1,2 экв.). Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов.In a 500 ml Erlenmeyer flask, 28 g (4 equiv.) Of powdered potassium hydroxide and 400 ml of dimethyl sulfoxide are placed. The resulting mixture was stirred at room temperature for 5 minutes. 2-Benzyloxyphenol (25 g, 1 equiv.) Was added, followed by immediate addition of ethyl 8-bromoctanoate (37.6 g, 1.2 equiv.). The resulting solution was stirred at room temperature for 2 hours.
Реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды и нагревают до 80°С в течение 3 часов. Затем смесь подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до рН около 2. Образуется осадок не совсем белого твердого вещества. Образовавшееся твердое вещество выделяют вакуумным фильтрованием и сушат в течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Полученное вещество этерифицируют, подвергая сырую кислоту взаимодействию с 1 л метанола и 5 мл серной кислоты, и нагревают до 80°С в течение ночи. Смесь охлаждают и трижды экстрагируют 400 мл этилацетата, сушат над сульфатом магния, фильтруют и упаривают, получая сложный метиловый эфир с количественным выходом.The reaction mixture was poured into 200 ml of distilled water and heated to 80 ° C for 3 hours. The mixture is then acidified with a concentrated aqueous solution of hydrochloric acid to a pH of about 2. A precipitate of an off-white solid is formed. The resulting solid was isolated by vacuum filtration and dried overnight at room temperature in vacuo. The resulting material was esterified by reacting the crude acid with 1 L of methanol and 5 ml of sulfuric acid, and heated to 80 ° C. overnight. The mixture was cooled and extracted three times with 400 ml of ethyl acetate, dried over magnesium sulfate, filtered and evaporated to give a methyl ester in quantitative yield.
Сырой сложный эфир растворяют в 150 мл этанола и смешивают с 1 г 10% палладия на активированном угле. Полученную смесь помещают в автоклав Парра. В реакторе повышают давление до 14 атм (200 фунтов/кв.дюйм), подавая водород. Гетерогенную смесь перемешивают при 50°С в течение 18 часов. Палладий отфильтровывают и фильтрат концентрируют, получая дебензилированный продукт.The crude ester is dissolved in 150 ml of ethanol and mixed with 1 g of 10% palladium on activated carbon. The resulting mixture was placed in a Parra autoclave. The reactor is pressurized to 14 atm (200 psi) by supplying hydrogen. The heterogeneous mixture is stirred at 50 ° C for 18 hours. The palladium was filtered off and the filtrate was concentrated to give a debenzylated product.
Сложный метиловый эфир омыляют, используя 10 г гидроксида натрия, 400 мл метанола и 50 мл воды. Раствор нагревают до 80°С в течение одного часа и перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Метанол выпаривают. Добавляют еще 100 мл воды и водный слой подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до рН 2. Водную фазу экстрагируют этилацетатом (3×300 мл), сушат и упаривают, получая целевое вещество. Сырое вещество очищают хроматографией на силикагеле, используя в качестве элюента смесь 30-60% этилацетат/гексаны, и получают 22,24 г (71%) 8-(2-гидроксифенокси)октановой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества. Температура плавления: 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено), 66,98 (найдено); %Н: 7,99 (вычислено), 8,22 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 8,8, с, 1Н; 6,90-6,87, м, 1Н; 6,80-6,67, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,73, п, 2Н; 1,53-1,29, м, 8Н.The methyl ester is saponified using 10 g of sodium hydroxide, 400 ml of methanol and 50 ml of water. The solution was heated to 80 ° C. for one hour and stirred at room temperature overnight. The methanol is evaporated. An additional 100 ml of water was added and the aqueous layer was acidified with a concentrated aqueous hydrochloric acid solution to pH 2. The aqueous phase was extracted with ethyl acetate (3 × 300 ml), dried and evaporated to obtain the target substance. The crude material was purified by silica gel chromatography using 30-60% ethyl acetate / hexanes as eluent to give 22.24 g (71%) of 8- (2-hydroxyphenoxy) octanoic acid as an off-white solid. Melting point: 65-68 ° C. Combustion analysis:% C: 66.65 (calculated), 66.98 (found); % H: 7.99 (calculated), 8.22 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.8, s, 1H; 6.90-6.87, m, 1H; 6.80-6.67, m, 3H; 3.94, t, 2H; 2.23, t, 2H; 1.73, p, 2H; 1.53-1.29, m, 8H.
Соединения 5, 8 и 72 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 5, 8, and 72 are also prepared as described above using the appropriate starting materials.
Соединение 5. Температура плавления: 51-53°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27 (вычислено), 64,26 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,00 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1Н; 8,80, шир.с, 1Н; 6,90-6,85, м, 1Н; 6,80-6,68, м, 3Н; 3,94, т, 2Н; 2,26, т, 2Н; 1,76-1,67, м, 2Н; 1,61-1,52, м, 2Н; 1,48-1,40, м, 2Н.Compound 5. Melting point: 51-53 ° C. Combustion analysis:% C: 64.27 (calculated), 64.26 (found); % H: 7.19 (calculated), 7.00 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 8.80, broad s, 1H; 6.90-6.85, m, 1H; 6.80-6.68, m, 3H; 3.94, t, 2H; 2.26, t, 2H; 1.76-1.67, m, 2H; 1.61-1.52, m, 2H; 1.48-1.40, m, 2H.
Соединение 8. Температура плавления: 54-57°С. Анализ сжиганием: %С: 68,55 (вычислено), 68,78 (найдено); %Н: 8,63 (вычислено), 8,43 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 8,8, шир.с, 1Н; 6,92-6,89, м, 1Н; 6,82-6,71, м, 3Н; 3,96, т, 2Н; 2,24, т, 2Н; 1,75-1,68, м, 2Н; 1,54-1,39, м, 4Н; 1,30, шир.с, 8Н.Compound 8. Melting point: 54-57 ° C. Combustion analysis:% C: 68.55 (calculated), 68.78 (found); % H: 8.63 (calculated), 8.43 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.8, broad s, 1H; 6.92-6.89, m, 1H; 6.82-6.71, m, 3H; 3.96, t, 2H; 2.24, t, 2H; 1.75-1.68, m, 2H; 1.54-1.39, m, 4H; 1.30, br s, 8H.
Соединение 72. Температура плавления: 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 69,36 (вычислено), 69,12 (найдено); %Н: 8,90 (вычислено), 8,89 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 6,88-6,85, м, 1H; 6,80-6,66, м, 3Н; 3,93, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,74-1,65, м, 2Н; 1,50-1,35, м, 4Н; 1,25, шир.с, 10Н.Compound 72. Melting point: 58-60 ° C. Combustion analysis:% C: 69.36 (calculated), 69.12 (found); % H: 8.90 (calculated), 8.89 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 6.88-6.85, m, 1H; 6.80-6.66, m, 3H; 3.93, t, 2H; 2.20, t, 2H; 1.74-1.65, m, 2H; 1.50-1.35, m, 4H; 1.25, broad s, 10H.
Получение соединения 12Preparation of Compound 12
Гидроксид калия (10,72 г, 191,1 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и помещают в 250 мл круглодонную колбу, содержащую 80 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 6,47 г (47,5 ммоль) 2-гидроксиацетофенона и 24,04 г (95,7 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа. Оранжевую реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды, затем пять раз экстрагируют 300 мл (всего) метиленхлорида. Органические слои промывают двумя 50 мл порциями воды, затем концентрируют, получая ярко-желтую жидкость.Potassium hydroxide (10.72 g, 191.1 mmol) is ground in a mortar to a powder state and placed in a 250 ml round bottom flask containing 80 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred for 5 minutes, after which 6.47 g (47.5 mmol) of 2-hydroxyacetophenone and 24.04 g (95.7 mmol) of ethyl 8-bromoctanoate were added. The reaction mixture was stirred at room temperature for one hour. The orange reaction mixture was poured into 200 ml of distilled water, then extracted five times with 300 ml (total) of methylene chloride. The organic layers were washed with two 50 ml portions of water, then concentrated to give a bright yellow liquid.
Полученную жидкость растворяют в 25 мл диоксана. Добавляют водный раствор гидроксида натрия (1 н. раствор, 20 мл) и полученную жидкость перемешивают и нагревают (65°С) в течение двух часов. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, подкисляют до рН 1 концентрированным водным раствором соляной кислоты, затем экстрагируют двумя 100 мл порциями этилацетата. Органический слой концентрируют, получая ярко-желтое масло. Масло кристаллизуют смесью метанол:вода (1:1), затем перекристаллизовывают один раз смесью метанол:вода (1:1) и еще один раз смесью метиленхлорид:гексаны (1:4), получая 5,70 г (43,1%) твердого вещества от бледно-желтого до не совсем белого цвета. Температура плавления: 71,5-73,5°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 68,77 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 8,04 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,57, дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.The resulting liquid was dissolved in 25 ml of dioxane. An aqueous solution of sodium hydroxide (1N solution, 20 ml) was added and the resulting liquid was stirred and heated (65 ° C) for two hours. The reaction mixture was cooled to 0 ° C, acidified to pH 1 with a concentrated aqueous hydrochloric acid solution, then extracted with two 100 ml portions of ethyl acetate. The organic layer was concentrated to give a bright yellow oil. The oil was crystallized with methanol: water (1: 1), then recrystallized once with methanol: water (1: 1) and once more with methylene chloride: hexanes (1: 4) to obtain 5.70 g (43.1%) solids from pale yellow to off-white. Melting point: 71.5-73.5 ° C. Combustion analysis:% C: 69.04 (calculated), 68.77 (found); % H: 7.97 (calculated), 8.04 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.57, dd, 1H; 7.52, dt, 1H; 7.15, d, 1H; 7.00, dt, 1H; 4.09, t, 2H; 2.52, s, 3H; 2.20, t, 2H; 1.78, p, 2H; 1.46, m, 4H; 1.32, m, 4H.
Соединения 9, 10, 11 и 71 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 9, 10, 11 and 71 are also prepared as described above using the appropriate starting materials.
Соединение 9. Температура плавления: 94,5-9°С. Анализ сжиганием: %С: 64,85 (вычислено), 64,81 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,30 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 12,0 (с, 1Н), 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,15, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,45, т, 2Н; 2,0, п, 2Н.Compound 9. Melting point: 94.5-9 ° C. Combustion analysis:% C: 64.85 (calculated), 64.81 (found); % H: 6.35 (calculated), 6.30 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.0 (s, 1H), 7.58, dd, 1H; 7.5, dt, 1H; 7.15, dd, 1H; 7.0, dt, 1H; 4.15, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.45, t, 2H; 2.0, p, 2H.
Соединение 10. Температура плавления: 76-77°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 65,83 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,76 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,3, т, 2Н; 1,8, дп, 2Н; 1,6, дп, 2Н.Compound 10. Melting point: 76-77 ° C. Combustion analysis:% C: 66.09 (calculated), 65.83 (found); % H: 6.83 (calculated), 6.76 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.58, dd, 1H; 7.5, dt, 1H; 7.15, dd, 1H; 7.0, dt, 1H; 4.1, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.3, t, 2H; 1.8, dp, 2H; 1.6, dp, 2H.
Соединение 11. Температура плавления: 44-4°С. Анализ сжиганием: %С: 67,18 (вычислено), 67,32 (найдено); %Н: 7,25 (вычислено), 7,26 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,58, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,25, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,6, п, 2Н; 1,45, п, 2Н.Compound 11. Melting point: 44-4 ° C. Combustion analysis:% C: 67.18 (calculated), 67.32 (found); % H: 7.25 (calculated), 7.26 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.58, dd, 1H; 7.5, dt, 1H; 7.15, d, 1H; 7.0, t, 1H; 4.1, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.25, t, 2H; 1.8, p, 2H; 1.6, p, 2H; 1.45, p, 2H.
Соединение 71. Температура плавления: 62-63°С. Анализ сжиганием: %С: 61,76 (вычислено), 61,69 (найдено); %Н; 6,66 (вычислено), 6,59 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1Н; 7,13-7,30, м, 2Н; 6,94-7,02, м, 1Н; 3,98-4,02, т, 2Н; 2,17-2,22, т, 2Н; 1,65-1,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.Compound 71. Melting point: 62-63 ° C. Combustion analysis:% C: 61.76 (calculated), 61.69 (found); % H; 6.66 (calculated), 6.59 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 7.13-7.30, m, 2H; 6.94-7.02, m, 1H; 3.98-4.02, t, 2H; 2.17-2.22, t, 2H; 1.65-1.72, m, 2H; 1.28-1.52, m, 8H.
Приведенные ниже соединения также получают вышеописанным способом, заменяя 2′-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 18 (2-пропенилфенол), 20 (2-нитрофенол), 24 (2-ацетамидофенол), 26-29 (2-гидроксипропиофенон), 32 (метилсалицилат) и 39 (6-метокси-2-гидроксиацетофенон). Соединения 18 и 20 далее очищают колоночной хроматографией, используя в качестве элюента 50% этилацетат в гексанах.The following compounds are also prepared as described above by replacing 2′-hydroxyacetophenone with the compound indicated in parentheses: 18 (2-propenylphenol), 20 (2-nitrophenol), 24 (2-acetamidophenol), 26-29 (2-hydroxypropiophenone), 32 ( methyl salicylate) and 39 (6-methoxy-2-hydroxyacetophenone). Compounds 18 and 20 were further purified by column chromatography using 50% ethyl acetate in hexanes as eluent.
Соединение 18. Температура плавления: 79-81°С. Анализ сжиганием: %С: 73,88 (вычислено), 73,85 (найдено); %Н: 8,75 (вычислено), 8,77 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,38-7,41, дд, 1Н; 7,13-7,18, м, 1Н; 6,93-6,95, д, 1Н; 6,84-6,89, т, 1Н; 6,59-6,65, дд, 1Н; 6,21-6,28, м, 1Н; 3,94-3,98, т, 2Н; 2,18-2,23, т, 2Н; 1,83-1,86, дд, 2Н; 1,69-1,78, м, 2Н; 1,31-1,53, м, 9Н.Compound 18. Melting point: 79-81 ° C. Combustion analysis:% C: 73.88 (calculated), 73.85 (found); % H: 8.75 (calculated), 8.77 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.38-7.41, dd, 1H; 7.13-7.18, m, 1H; 6.93-6.95, d, 1H; 6.84-6.89, t, 1H; 6.59-6.65, dd, 1H; 6.21-6.28, m, 1H; 3.94-3.98, t, 2H; 2.18-2.23, t, 2H; 1.83-1.86, dd, 2H; 1.69-1.78, m, 2H; 1.31-1.53, m, 9H.
Соединение 20. Температура плавления: 81-88°С. Анализ сжиганием: %С: 59,78 (вычислено), 59,66 (найдено); %Н; 6,81 (вычислено), 6,96 (найдено); %N: 4,98 (вычислено), 4,69 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,82-7,85, дд, 1Н; 7,60-7,65, м, 1Н; 7,33-7,36, дд, 1Н; 7,06-7,11, м, 1Н; 4,12-4,16, т, 2Н; 2,15-2,27, т, 2Н; 1,66-1,75, м, 2Н; 1,28-1,54, м, 8Н.Compound 20. Melting point: 81-88 ° C. Combustion analysis:% C: 59.78 (calculated), 59.66 (found); % H; 6.81 (calculated), 6.96 (found); % N: 4.98 (calculated), 4.69 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.82-7.85, dd, 1H; 7.60-7.65, m, 1H; 7.33-7.36, dd, 1H; 7.06-7.11, m, 1H; 4.12-4.16, t, 2H; 2.15-2.27, t, 2H; 1.66-1.75, m, 2H; 1.28-1.54, m, 8H.
Соединение 24. Температура плавления: 110-111°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51 (вычислено), 65,47 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 7,73 (найдено); %N: 4,77 (вычислено), 4,65 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 8,9, с, 1Н; 7,8, д, 1Н; 7,08-6,99, м, 2Н; 6,89-6,84, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 2,07, с, 3Н; 1,75, п, 2Н; 1,56-1,30, м, 8Н.Compound 24. Melting point: 110-111 ° C. Burn analysis:% C: 65.51 (calculated), 65.47 (found); % H: 7.90 (calculated), 7.73 (found); % N: 4.77 (calculated), 4.65 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.9, s, 1H; 7.8, d, 1H; 7.08-6.99, m, 2H; 6.89-6.84, m, 1H; 3.99, t, 2H; 2.20, t, 2H; 2.07 s, 3H; 1.75, p, 2H; 1.56-1.30, m, 8H.
Соединение 26. Температура плавления: 70-71,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 65,92 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,67 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,15, с, 1Н; 7,56-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 7,00, т, 1Н; 4,10, т, 2Н; 2,92, кв, 2Н; 2,42, т, 2Н; 2,00, п, 2Н; 1,05, т, 3Н.Compound 26. Melting point: 70-71.5 ° C. Combustion analysis:% C: 66.09 (calculated), 65.92 (found); % H: 6.83 (calculated), 6.67 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.15, s, 1H; 7.56-7.45, m, 2H; 7.12, d, 1H; 7.00, t, 1H; 4.10, t, 2H; 2.92, q, 2H; 2.42, t, 2H; 2.00, p, 2H; 1.05, t, 3H.
Соединение 27. Температура плавления: 68-69,5°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16 (вычислено), 68,40 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,60 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н; 2,24, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,47, м, 2Н; 1,05, т, 3Н.Compound 27. Melting point: 68-69.5 ° C. Combustion analysis:% C: 68.16 (calculated), 68.40 (found); % H: 7.63 (calculated), 7.60 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.54-7.46, m, 2H; 7.13, d, 1H; 6.99, t, 1H; 4.08, t, 2H; 2.93, q, 2H; 2.24, t, 2H; 1.77, p, 2H; 1.47, m, 2H; 1.05, t, 3H.
Соединение 28. Температура плавления: 85-86°С. Анализ сжиганием: %С: 69,84 (вычислено), 69,59 (найдено); %Н: 8,27 (вычислено), 7,98 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,54-7,46, м, 2Н; 7,13, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,08, т, 2Н; 2,93, кв, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,74, п, 2Н; 1,52-1,30, м, 8Н; 1,05, т, 3Н.Compound 28. Melting point: 85-86 ° C. Combustion analysis:% C: 69.84 (calculated), 69.59 (found); % H: 8.27 (calculated), 7.98 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.54-7.46, m, 2H; 7.13, d, 1H; 6.99, t, 1H; 4.08, t, 2H; 2.93, q, 2H; 2.20, t, 2H; 1.74, p, 2H; 1.52-1.30, m, 8H; 1.05, t, 3H.
Соединение 29. Температура плавления: 67-69°С. Анализ сжиганием: %С: 71,22 (вычислено), 71,06 (найдено); %Н: 8,81 (вычислено), 9,02 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,54-7,45, м, 2Н; 7,12, д, 1Н; 6,99, т, 1Н; 4,06, т, 2Н; 2,93, кв, 2H; 2,18, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,51-1,36, м, 12Н; 1,05, т, 3Н.Compound 29. Melting point: 67-69 ° C. Combustion analysis:% C: 71.22 (calculated), 71.06 (found); % H: 8.81 (calculated), 9.02 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.54-7.45, m, 2H; 7.12, d, 1H; 6.99, t, 1H; 4.06, t, 2H; 2.93, q, 2H; 2.18, t, 2H; 1.76, p, 2H; 1.51-1.36, m, 12H; 1.05, t, 3H.
Соединение 32. Температура плавления: 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 64,27 (вычислено), 63,96 (найдено); %Н: 7,19 (вычислено), 7,40 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,2, шир.с, 2H; 7,59, дд, 1Н; 7,45, дт, 1Н; 7,09, д, 1Н; 6,97, т, 1Н; 4,00, т, 2H; 2,20, т, 2H; 1,70, п, 2H; 1,54-1,27, м, 8Н.Compound 32. Melting point: 89-92 ° C. Combustion analysis:% C: 64.27 (calculated), 63.96 (found); % H: 7.19 (calculated), 7.40 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.2, broad s, 2H; 7.59, dd, 1H; 7.45, dt, 1H; 7.09, d, 1H; 6.97, t, 1H; 4.00, t, 2H; 2.20, t, 2H; 1.70, p, 2H; 1.54-1.27, m, 8H.
Соединение 39. Температура плавления: 69-70,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,35 (вычислено), 65,39 (найдено); %Н: 7,89 (вычислено), 7,80 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 7,27, т, 1Н; 6,67, д, 2H; 3,95, т, 2H; 3,73, с, 3Н; 2,34, с, 3Н; 2,18, т, 2H; 1,63, п, 2H; 1,49, п, 2H; 1,40-1,27, м, 6Н.Compound 39. Melting point: 69-70.5 ° C. Combustion analysis:% C: 65.35 (calculated), 65.39 (found); % H: 7.89 (calculated), 7.80 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 7.27, t, 1H; 6.67, d, 2H; 3.95, t, 2H; 3.73, s, 3H; 2.34, s, 3H; 2.18, t, 2H; 1.63, p, 2H; 1.49, p, 2H; 1.40-1.27, m, 6H.
Соединения 19, 21, 22 и 23 также получают вышеописанным способом, за исключением того, что используют один эквивалент соответствующего алкилирующего агента и два эквивалента гидроксида калия и промежуточные сложные эфиры очищают жидкостной хроматографией среднего давления (MPLC), используя в качестве подвижной фазы этилацетат и гексаны. Используют следующие составы растворителей: 19 и 21 (20% этилацетат ) и 22 и 23 (10% этилацетат).Compounds 19, 21, 22, and 23 were also prepared as described above, except that one equivalent of the corresponding alkylating agent and two equivalents of potassium hydroxide were used and the intermediate esters were purified by medium pressure liquid chromatography (MPLC) using ethyl acetate and hexanes as the mobile phase. . The following solvent compositions are used: 19 and 21 (20% ethyl acetate) and 22 and 23 (10% ethyl acetate).
Соединение 19. Температура плавления: 58-59°С. Анализ сжиганием: %С: 66,91 (вычислено), 66,73 (найдено); %Н: 8,42 (вычислено), 8,01 (найдено); %N: 5,57 (вычислено), 5,27 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 6,74-6,78, д, 1Н; 6,60-6,68, м, 2H; 6,46-6,52, м, 1Н; 3,88-3,93, т, 2H; 2,17-2,22, т, 2H; 1,66-1,76, м, 2H; 1,30-1,56, м, 8Н.Compound 19. Melting point: 58-59 ° C. Combustion analysis:% C: 66.91 (calculated), 66.73 (found); % H: 8.42 (calculated), 8.01 (found); % N: 5.57 (calculated), 5.27 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 6.74-6.78, d, 1H; 6.60-6.68, m, 2H; 6.46-6.52, m, 1H; 3.88-3.93, t, 2H; 2.17-2.22, t, 2H; 1.66-1.76, m, 2H; 1.30-1.56, m, 8H.
Соединение 21. Температура плавления: 115-117°С. Анализ сжиганием: %С: 63,14 (вычислено), 62,05 (найдено); %Н: 7,23 (вычислено), 7,11 (найдено); %N: 6,69 (вычислено), 6,37 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 6,74-6,77, дд, 1Н; 6,60-6,68, м, 2Н; 6,46-6,52, м, 1Н; 3,90-3,94, т, 2Н; 2,26-2,31, т, 2Н; 1,63-1,78, м, 4Н.Compound 21. Melting point: 115-117 ° C. Combustion analysis:% C: 63.14 (calculated), 62.05 (found); % H: 7.23 (calculated), 7.11 (found); % N: 6.69 (calculated), 6.37 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 6.74-6.77, dd, 1H; 6.60-6.68, m, 2H; 6.46-6.52, m, 1H; 3.90-3.94, t, 2H; 2.26-2.31, t, 2H; 1.63-1.78, m, 4H.
Соединение 22. Температура плавления: 69-71°С. Анализ сжиганием: %С: 58,84 (вычислено), 58,84 (найдено); %Н: 7,05 (вычислено), 7,08 (найдено); %N: 4,90 (вычислено), 4,83 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 6,72-6,74, д, 1Н; 6,62-6,63, д, 1Н; 6,44-6,48, дд, 1Н; 5,0, с, 2Н; 3,87-3,91, т, 2Н; 2,17-2,22, т, 2Н; 1,65-1,72, м, 2Н; 1,28-1,52, м, 8Н.Compound 22. Melting point: 69-71 ° C. Combustion analysis:% C: 58.84 (calculated), 58.84 (found); % H: 7.05 (calculated), 7.08 (found); % N: 4.90 (calculated), 4.83 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 6.72-6.74, d, 1H; 6.62-6.63, d, 1H; 6.44-6.48, dd, 1H; 5.0 s, 2H; 3.87-3.91, t, 2H; 2.17-2.22, t, 2H; 1.65-1.72, m, 2H; 1.28-1.52, m, 8H.
Соединение 23. Температура плавления: 80-81°С. Анализ сжиганием: %С: 54,22 (вычислено), 54,15 (найдено); %Н: 5,79 (вычислено), 5,74 (найдено); %N: 5,75 (вычислено), 5,66 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 6,72-6,75, д, 1Н; 6,62-6,63, д, 1Н; 6,45-6,49, дд, 1Н; 5,0, шир.с, 2Н; 3,89-3,39, т, 2Н; 2,25-2,30, т, 2Н; 1,63-1,75, м, 4Н.Compound 23. Melting point: 80-81 ° C. Combustion analysis:% C: 54.22 (calculated), 54.15 (found); % H: 5.79 (calculated), 5.74 (found); % N: 5.75 (calculated), 5.66 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 6.72-6.75, d, 1H; 6.62-6.63, d, 1H; 6.45-6.49, dd, 1H; 5.0, broad s, 2H; 3.89-3.39, t, 2H; 2.25-2.30, t, 2H; 1.63-1.75, m, 4H.
Получение соединения 77Getting connection 77
Соединение 77 в форме свободной кислоты получают аналогично общему способу получения соединения 12, используя соответствующие исходные вещества. Свободную кислоту соединения 77 (10,4 г, 38,43 ммоль) растворяют в этаноле (83,0 мл). Добавляют 10,0 н. водный раствор гидроксида натрия (3,80 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно 2 часов. Этанол выпаривают, получая гелеобразный мокрый остаток. Полученный остаток растворяют в деионизированной воде (200 мл) и экстрагируют этилацетатом (2×100 мл). Остаточный этилацетат удаляют, продувая реактор азотом. Водный раствор лиофилизуют, получая белый порошок (6,50 г, 22,1 ммоль, выход 58%). Температура плавления: >230°С с разложением. МС (FAB) (положительная), m/z 295,2 (М + Н)+ 317,2 (М + Na)+. 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 7,09-7,15, м, 3Н; 4,05-4,09, т, 2Н; 1,81-1,86, т, 2Н; 1,58-1,68, м, 2Н; 1,22-1,44, м, 8Н.Compound 77 in the free acid form is prepared analogously to the general method for the preparation of compound 12 using the corresponding starting materials. The free acid of compound 77 (10.4 g, 38.43 mmol) was dissolved in ethanol (83.0 ml). Add 10.0 n. aqueous sodium hydroxide (3.80 ml) and the mixture was stirred at room temperature for about 2 hours. Ethanol was evaporated to give a gel-like wet residue. The resulting residue was dissolved in deionized water (200 ml) and extracted with ethyl acetate (2 × 100 ml). Residual ethyl acetate is removed by purging the reactor with nitrogen. The aqueous solution was lyophilized to give a white powder (6.50 g, 22.1 mmol, 58% yield). Melting point:> 230 ° C with decomposition. MS (FAB) (positive), m / z 295.2 (M + H) + 317.2 (M + Na) + . 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 7.09-7.15, m, 3H; 4.05-4.09, t, 2H; 1.81-1.86, t, 2H; 1.58-1.68, m, 2H; 1.22-1.44, m, 8H.
Альтернативное получение соединения 12Alternative preparation of compound 12
Гидроксид калия (43,28 г, 771,3 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния, затем помещают в 500 мл колбу Эрленмейера, содержащую 250 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 15 минут, после чего добавляют 27,47 г (201,8 ммоль) 2-гидроксиацетофенона с последующим немедленным добавлением 50,7 г (201,9 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Мутную густую оранжевую реакционную смесь выливают в 150 мл дистиллированной воды и перемешивают, пока раствор не становится прозрачным (примерно 15 минут).Potassium hydroxide (43.28 g, 771.3 mmol) is ground in a mortar to a powder state, then placed in a 500 ml Erlenmeyer flask containing 250 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred for 15 minutes, after which 27.47 g (201.8 mmol) of 2-hydroxyacetophenone was added, followed by immediate addition of 50.7 g (201.9 mmol) of ethyl 8-bromoctanoate. The reaction mixture was stirred at room temperature for three hours. The cloudy, thick orange reaction mixture was poured into 150 ml of distilled water and stirred until the solution became clear (about 15 minutes).
Прозрачный оранжевый раствор охлаждают до 0°С на ледяной бане, затем подкисляют концентрированным водным раствором соляной кислоты до образования твердого вещества (рН=7). Твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 38,08 г (67,8%) желтого твердого вещества. Температура плавления: 72-73°С. Анализ сжиганием: %С: 69,04 (вычислено), 69,10 (найдено); %Н: 7,97 (вычислено), 7,99 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,57, дд, 1Н; 7,52, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,00, дт, 1Н; 4,09, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,46, м, 4Н; 1,32, м, 4Н.The clear orange solution is cooled to 0 ° C in an ice bath, then acidified with a concentrated aqueous hydrochloric acid solution to form a solid (pH = 7). The solid was collected by filtration and recrystallized from ethanol: water (50:50) to obtain 38.08 g (67.8%) of a yellow solid. Melting point: 72-73 ° C. Combustion analysis:% C: 69.04 (calculated), 69.10 (found); % H: 7.97 (calculated), 7.99 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.57, dd, 1H; 7.52, dt, 1H; 7.15, d, 1H; 7.00, dt, 1H; 4.09, t, 2H; 2.52, s, 3H; 2.20, t, 2H; 1.78, p, 2H; 1.46, m, 4H; 1.32, m, 4H.
Соединение 54 получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества. Нижеследующие соединения также получают указанным способом, заменяя 2′-гидроксиацетофенон указанным в скобках соединением: 55 (2-гидрокси-5-метоксиацетофенон), 56 (2-гидрокси-4-метокси-ацетофенон) и 58 (2-гидрокси-5-метилацетофенон).Compound 54 was prepared as described above using the appropriate starting materials. The following compounds are also prepared by the indicated method, replacing 2′-hydroxyacetophenone with the compound indicated in parentheses: 55 (2-hydroxy-5-methoxyacetophenone), 56 (2-hydroxy-4-methoxyacetophenone) and 58 (2-hydroxy-5-methylacetophenone )
Соединение 54. Температура плавления: 71-73,5°С. Анализ сжиганием для C18H26О4·0,068Н2О: %С: 70,28 (вычислено), 69,98 (найдено); %Н: 8,56 (вычислено), 8,16 (найдено). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 11,8, с, 1Н; 7,55, дд, 1Н; 7,5, дт, 1Н; 7,15, д, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 4,1, т, 2Н; 2,55, с, 3Н; 2,2, т, 2Н; 1,8, п, 2Н; 1,5, м, 2Н; 1,3, м, 10Н.Compound 54. Melting point: 71-73.5 ° C. Combustion analysis for C 18 H 26 O 4 · 0.068 H 2 O:% C: 70.28 (calculated), 69.98 (found); % H: 8.56 (calculated), 8.16 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 11.8, s, 1H; 7.55, dd, 1H; 7.5, dt, 1H; 7.15, d, 1H; 7.0, dt, 1H; 4.1, t, 2H; 2.55, s, 3H; 2.2, t, 2H; 1.8, p, 2H; 1.5, m, 2H; 1.3, m, 10H.
Соединение 55. Температура плавления: 120,5-121,5°С. Анализ сжиганием: %С: 66,21 (вычислено), 66,00 (найдено); %Н: 7,84 (вычислено), 7,54 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,1, м, 3Н; 4,03, т, 2Н; 3,72, с, 3Н; 2,54, с, 3Н; 2,20, кв, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,53-1,30, м, 8Н.Compound 55. Melting point: 120.5-121.5 ° C. Combustion analysis:% C: 66.21 (calculated), 66.00 (found); % H: 7.84 (calculated), 7.54 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.1, m, 3H; 4.03, t, 2H; 3.72, s, 3H; 2.54, s, 3H; 2.20, qt, 2H; 1.76, p, 2H; 1.53-1.30, m, 8H.
Соединение 56. Температура плавления: 106-107,5°С. Анализ сжиганием: %С: 65,87 (вычислено), 65,76 (найдено); %Н: 7,86 (вычислено), 7,57 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 7,65, д, 1Н; 6,61-6,55, м, 2Н; 4,08, т, 2Н; 3,82, с, 3Н; 2,49, с, 3Н; 2,19, кв, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.Compound 56. Melting point: 106-107.5 ° C. Combustion analysis:% C: 65.87 (calculated), 65.76 (found); % H: 7.86 (calculated), 7.57 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 7.65, d, 1H; 6.61-6.55, m, 2H; 4.08, t, 2H; 3.82, s, 3H; 2.49, s, 3H; 2.19 q, 2H; 1.78, p, 2H; 1.54-1.29, m, 8H.
Соединение 58. Температура плавления: 121-123°С. Анализ сжиганием: %С: 68,16 (вычислено), 67,88 (найдено); %Н: 7,63 (вычислено), 7,65 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,37, м, 1Н; 7,30, м, 1Н; 7,04, д, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,52, с, 3Н; 2,24, м, 5Н; 1,76, п, 2Н; 1,59-1,41, м, 4Н.Compound 58. Melting point: 121-123 ° C. Combustion analysis:% C: 68.16 (calculated), 67.88 (found); % H: 7.63 (calculated), 7.65 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.37, m, 1H; 7.30, m, 1H; 7.04, d, 1H; 4.04, t, 2H; 2.52, s, 3H; 2.24, m, 5H; 1.76, p, 2H; 1.59-1.41, m, 4H.
Получение соединения 13Getting connection 13
Соединение 13 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).Compound 13 provided by Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).
Получение соединения 15Getting connection 15
Гидроксид калия (28,60 г, 0,511 моль) измельчают в ступке и помещают в 500 мл кругло донную колбу, содержащую диметилсульфоксид (215 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут. К смеси добавляют фенол (12,00 г, 0,1277 моль). Затем сразу же добавляют этил 6-бромгексаноат (22,70 мл, 0,1277 моль). Смесь перемешивают в течение примерно 3 часов и выливают в 500 мл воды. Реакционную смесь нагревают при 90°С в течение 1,5 часов, после чего нагревание прекращают. Затем смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется осадок белого твердого вещества. Белое твердое вещество выделяют вакуумным фильтрованием и сушат в течение ночи при комнатной температуре в вакууме. Получают 25,09 г (выход 94,5%) продукта. Температура плавления: 64-67°С. Анализ сжиганием: %С: 69,23 (вычислено), 68,84 (найдено); %Н: 7,69 (вычислено), 7,78 (найдено); %N: 0,00 (вычислено), <0,02 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, AMCO-d6): δ 11,95, с, 1Н; δ 7,27, м, 2Н; δ 6,90, м, 3Н; 3,93, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,50, п, 2Н; 1,30, м, 6Н.Potassium hydroxide (28.60 g, 0.511 mol) is ground in a mortar and placed in a 500 ml round bottom flask containing dimethyl sulfoxide (215 ml). The resulting mixture was stirred for 5 minutes. Phenol (12.00 g, 0.1277 mol) was added to the mixture. Then ethyl 6-bromohexanoate (22.70 ml, 0.1277 mol) was immediately added. The mixture was stirred for about 3 hours and poured into 500 ml of water. The reaction mixture is heated at 90 ° C for 1.5 hours, after which the heating is stopped. The mixture was then stirred overnight at room temperature. The reaction mixture is acidified with 2 N. an aqueous solution of hydrochloric acid, resulting in a precipitate of a white solid. A white solid was isolated by vacuum filtration and dried overnight at room temperature in vacuo. 25.09 g (yield 94.5%) of the product are obtained. Melting point: 64-67 ° C. Combustion analysis:% C: 69.23 (calculated), 68.84 (found); % H: 7.69 (calculated), 7.78 (found); % N: 0.00 (calculated), <0.02 (found). 1 H NMR (300 MHz, AMCO-d 6 ): δ 11.95, s, 1H; δ 7.27, m, 2H; δ 6.90, m, 3H; 3.93, t, 2H; 2.20, t, 2H; 1.70, p, 2H; 1.50, p, 2H; 1.30, m, 6H.
Соединения 14, 16, 76, 75 и 68 также получают вышеописанным способом, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 14, 16, 76, 75 and 68 are also prepared as described above using the appropriate starting materials.
Соединение 14. Температура плавления: 57-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,49 (найдено); %Н: 6,67 (вычислено), 6,56 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 12,2, (с, 1Н), 7,25 (м, 2Н), 6,90 (м, 3Н), 3,95 (т, 2Н), 2,35 (т, 2Н), 1,90 (п, 2Н).Compound 14. Melting point: 57-60 ° C. Combustion analysis:% C: 66.67 (calculated), 66.49 (found); % H: 6.67 (calculated), 6.56 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.2, (s, 1H), 7.25 (m, 2H), 6.90 (m, 3H), 3.95 (t, 2H) 2.35 (t, 2H); 1.90 (p, 2H).
Соединение 16. Температура плавления: 72-75°С. Анализ сжиганием: %С: 72,73 (вычислено), 72,45 (найдено); %Н: 9,09 (вычислено), 8,92 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,24, т, 2Н; 6,88, м, 3Н; 3,89, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,35, м, 4Н; 1,21, м, 8Н.Compound 16. Melting point: 72-75 ° C. Combustion analysis:% C: 72.73 (calculated), 72.45 (found); % H: 9.09 (calculated), 8.92 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.24, t, 2H; 6.88, m, 3H; 3.89, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.35, m, 4H; 1.21, m, 8H.
Соединение 75. Температура плавления: 55-57°С. Анализ сжиганием: %С: 62,26 (вычислено), 61,93 (найдено); %Н: 6,17 (вычислено), 5,89 (найдено); %F: 8,95 (вычислено), 9,11 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 7,25-7,10, м, 3Н; 6,95-6,83, м, 1Н; 4,05, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,77-1,62, м, 4Н.Compound 75. Melting point: 55-57 ° C. Combustion analysis:% C: 62.26 (calculated), 61.93 (found); % H: 6.17 (calculated), 5.89 (found); % F: 8.95 (calculated), 9.11 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 7.25-7.10, m, 3H; 6.95-6.83, m, 1H; 4.05, t, 2H; 2.31, t, 2H; 1.77-1.62, m, 4H.
Соединение 76. Температура плавления: 65-67°С. Анализ сжиганием: %С: 54,96 (вычислено), 54,62 (найдено); %Н: 5,0 (вычислено), 4,97 (найдено); %F: 21,73 (вычислено), 21,73 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,61, д, 2Н; 7,26, шир.д, 1Н; 7,10, шир.т, 1Н; 4,12, т, 2Н; 2,31, т, 2Н; 1,80-1,61, м, 4Н.Compound 76. Melting point: 65-67 ° C. Combustion analysis:% C: 54.96 (calculated), 54.62 (found); % H: 5.0 (calculated), 4.97 (found); % F: 21.73 (calculated), 21.73 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.61, d, 2H; 7.26, broad d, 1H; 7.10, broad t, 1H; 4.12, t, 2H; 2.31, t, 2H; 1.80-1.61, m, 4H.
Соединение 68. Температура плавления: 67-68°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11 (вычислено), 61,77 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 6,94 (найдено); %Cl: 13,09 (вычислено), 13,05 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,32, т, 1Н; 7,00-6,95, м, 2Н; 6,91-6,88, м, 1Н; 3,99, т, 2Н; 2,23, т, 2Н; 1,78, п, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45-1,30, м, 6Н.Compound 68. Melting point: 67-68 ° C. Combustion analysis:% C: 62.11 (calculated), 61.77 (found); % H: 7.07 (calculated), 6.94 (found); % Cl: 13.09 (calculated), 13.05 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.32, t, 1H; 7.00-6.95, m, 2H; 6.91-6.88, m, 1H; 3.99, t, 2H; 2.23, t, 2H; 1.78, p, 2H; 1.62, p, 2H; 1.45-1.30, m, 6H.
Получение соединения 17Getting connection 17
Соединение 17 предоставлено фирмой Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).Compound 17 provided by Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI).
Получение соединения 25Getting connection 25
В 250 мл круглодонную колбу поочередно помещают 5,57 г (33,9 ммоль) 2-гидроксикоричной кислоты, 80 мл метанола и 6 капель концентрированной серной кислоты. Полученный прозрачный раствор нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 6 часов и оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Растворитель удаляют в вакууме и получают липкое белое твердое вещество. Полученное твердое вещество растворяют в 80 мл этилацетата и промывают тремя 40 мл порциями 10% водного раствора бикарбоната натрия, одной 40 мл порцией воды и двумя 25 мл порциями насыщенного раствора соли. Органический слой концентрируют в вакууме, получая 5,51 г (91,4%) метил 2-гидроксициннамата в виде белого твердого вещества.5.57 g (33.9 mmol) of 2-hydroxycinnamic acid, 80 ml of methanol and 6 drops of concentrated sulfuric acid are alternately placed in a 250 ml round-bottom flask. The resulting clear solution was heated at reflux for 6 hours and allowed to cool to room temperature. The solvent was removed in vacuo to give a sticky white solid. The resulting solid was dissolved in 80 ml of ethyl acetate and washed with three 40 ml portions of a 10% aqueous sodium bicarbonate solution, one 40 ml portion of water and two 25 ml portions of a saturated salt solution. The organic layer was concentrated in vacuo to give 5.51 g (91.4%) of methyl 2-hydroxycinnamate as a white solid.
Гидроксид калия (7,63 г, 136,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния, затем помещают в 125 мл колбу Эрленмейера, содержащую 75 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 10 минут, после чего добавляют 5,49 г (30,8 ммоль) метил 2-гидроксициннамата и 7,81 г (31,1 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение примерно пяти часов, после чего добавляют 50 мл дистиллированной воды. Желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, затем промывают двумя 80 мл порциями этилацетата. Водный слой охлаждают до 0°С. Добавляют концентрированный водный раствор соляной кислоты до достижения рН раствора, равного примерно 5. Полученное твердое вещество собирают фильтрованием и перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 4,31 г (45,7%) белого порошка. Температура плавления: 148-150°С. Анализ сжиганием: %С: 66,65 (вычислено), 66,59 (найдено); %Н: 7,24 (вычислено), 7,24 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 2Н; 6 7,86, с; 7,81, с, 1Н; 7,67-7,63, дд, 1Н; 7,39-7,33, дт, 1Н; 7,07-7,04, д, 1Н; 6,98-6,93, т, 1Н; 6,55, с; 6,50, с, 1Н; 4,04, т, 2Н; 2,19, т, 2Н; 1,76, п, 2Н; 1,50, м, 2Н; 1,43-1,28, м, 6Н.Potassium hydroxide (7.63 g, 136.0 mmol) is ground in a mortar to a powder state, then placed in a 125 ml Erlenmeyer flask containing 75 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred for 10 minutes, after which 5.49 g (30.8 mmol) of methyl 2-hydroxycinnamate and 7.81 g (31.1 mmol) of ethyl 8-bromoctanoate were added. The reaction mixture was stirred at room temperature for about five hours, after which 50 ml of distilled water was added. The yellow solution was stirred at room temperature overnight, then washed with two 80 ml portions of ethyl acetate. The aqueous layer is cooled to 0 ° C. A concentrated aqueous hydrochloric acid solution was added until the solution reached a pH of about 5. The resulting solid was collected by filtration and recrystallized from ethanol: water (50:50) to obtain 4.31 g (45.7%) of a white powder. Melting point: 148-150 ° C. Combustion analysis:% C: 66.65 (calculated), 66.59 (found); % H: 7.24 (calculated), 7.24 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 2H; 6 7.86 s; 7.81, s, 1H; 7.67-7.63, dd, 1H; 7.39-7.33, dt, 1H; 7.07-7.04, d, 1H; 6.98-6.93, t, 1H; 6.55 s; 6.50, s, 1H; 4.04, t, 2H; 2.19, t, 2H; 1.76, p, 2H; 1.50, m, 2H; 1.43-1.28, m, 6H.
Получение соединения 30Preparation of Compound 30
Салициламид (5,3 г, 0,03875 моль) помещают в одногорлую круглодонную колбу, содержащую (15,0 г, 0,03875 моль) этил 8-бромоктаноат. К полученной смеси одной порцией добавляют карбонат калия (6,43 г, 0,0465 моль), используя 35 мл ацетона в качестве растворителя. Реакционную смесь нагревают в течение примерно 4 часов. Затем нагревание прекращают, реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и перемешивают в течение выходных дней в конце недели. Реакцию прекращают, когда данные ВЭЖХ указывают на наличие одного пика, соответствующего времени удерживания, равному 6,44 минуты. Реакционную смесь подвергают вакуумному фильтрованию и лепешку на фильтре промывают ацетоном. Фильтрат концентрируют в вакууме, чтобы удалить избыток растворителя (ацетона).Salicylamide (5.3 g, 0.03875 mol) was placed in a one-necked round-bottom flask containing (15.0 g, 0.03875 mol) ethyl 8-bromoctanoate. To the resulting mixture, potassium carbonate (6.43 g, 0.0465 mol) was added in one portion using 35 ml of acetone as solvent. The reaction mixture is heated for about 4 hours. Then the heating is stopped, the reaction mixture is cooled to room temperature and stirred over the weekend at the end of the week. The reaction is stopped when the HPLC data indicate the presence of one peak corresponding to a retention time of 6.44 minutes. The reaction mixture was subjected to vacuum filtration and the filter cake was washed with acetone. The filtrate was concentrated in vacuo to remove excess solvent (acetone).
Твердые вещества перемешивают в гексанах в течение нескольких часов, фильтруют, выделяют и сушат под вакуумом в течение ночи. Твердые вещества (10,93 г, 0,0439 моль) перемешивают в 1,5 экв. 2 н. раствора гидроксида натрия (32 мл, 0,0658 моль). Реакционную смесь нагревают и перемешивают до окончания реакции в соответствии с данными ВЭЖХ. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Реактор помещают на водно-ледяную баню и подкисляют суспензию 2 н. водным раствором соляной кислоты. Твердые вещества выделяют вакуумным фильтрованием и лепешку на фильтре промывают водой. Твердые вещества сушат в вакууме в течение ночи, затем переносят в колбу Эрленмейера и перекристаллизовывают, используя смесь этанол/вода. Твердые вещества выпадают в осадок в течение ночи, после чего их отделяют и сушат, получая 8,08 г 8-(2-карбоксамидофенокси)каприловой кислоты. Температура плавления: 114-116°С. Анализ сжиганием: %С: 64,51 (вычислено), 64,50 (найдено); %Н: 7,52 (вычислено), 7,55 (найдено); %N: 5,02 (вычислено), 4,86 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,82, дд, 1Н; 7,55, шир.с, 2Н; 7,45, дт, 1Н; 7,12, д, 1Н; 7,01, т, 1Н; 4,10, т, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,54-1,29, м, 8Н.The solids were stirred in hexanes for several hours, filtered, isolated and dried in vacuo overnight. Solids (10.93 g, 0.0439 mol) are stirred at 1.5 eq. 2 n. sodium hydroxide solution (32 ml, 0.0658 mol). The reaction mixture is heated and stirred until completion of the reaction in accordance with HPLC data. The reaction mixture was cooled to room temperature. The reactor is placed in a water-ice bath and the suspension is acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid. The solids were isolated by vacuum filtration and the filter cake was washed with water. The solids were dried in vacuo overnight, then transferred to an Erlenmeyer flask and recrystallized using ethanol / water. The solids precipitated overnight, after which they were separated and dried, yielding 8.08 g of 8- (2-carboxamidophenoxy) caprylic acid. Melting point: 114-116 ° C. Combustion analysis:% C: 64.51 (calculated), 64.50 (found); % H: 7.52 (calculated), 7.55 (found); % N: 5.02 (calculated), 4.86 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.82, dd, 1H; 7.55, broad s, 2H; 7.45, dt, 1H; 7.12, d, 1H; 7.01, t, 1H; 4.10, t, 2H; 2.20, t, 2H; 1.77, p, 2H; 1.54-1.29, m, 8H.
Получение соединения 33Getting connection 33
Получение N-этилсалициламида. Диметилацетамид (50 мл) и карзалам (10,00 г, 0,0613 моль) помещают в круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, конденсатором с водяным охлаждением и магнитной мешалкой. Добавляют карбонат натрия (6,50 г, 0,0613 моль) и иодэтан (4,38 мл, 0,0548 моль) и начинают нагревать реакционную смесь. Смесь нагревают при 80°С в течение 16 часов, после чего нагревание прекращают и реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Затем реакционную смесь фильтруют через воронку из спекшегося стекла и собирают фильтрат. К фильтрату добавляют воду до осаждения белого твердого вещества. Твердое вещество выделяют фильтрованием и переносят в колбу Эрленмейера, содержащую 2 н. водный раствор гидроксида натрия (200 мл). Полученную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение примерно 1 часа и перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты, в результате выделяется желтое масло. Реакционную смесь дважды экстрагируют 200 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои дважды промывают 200 мл порциями деионизированной воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. N-этилсалициламид выделяют в виде желтого масла, которое сушат в течение ночи в вакууме и получают в количестве 7,93 г.Obtaining N-ethylsalicylamide. Dimethylacetamide (50 ml) and Karzalam (10.00 g, 0.0613 mol) are placed in a round bottom flask equipped with a nitrogen purge device, a water-cooled condenser and a magnetic stirrer. Sodium carbonate (6.50 g, 0.0613 mol) and iodoethane (4.38 ml, 0.0548 mol) were added and the reaction mixture was heated. The mixture was heated at 80 ° C. for 16 hours, after which the heating was stopped and the reaction mixture was allowed to cool to room temperature. Then the reaction mixture is filtered through a sintered glass funnel and the filtrate is collected. Water was added to the filtrate until a white solid precipitated. The solid is isolated by filtration and transferred to an Erlenmeyer flask containing 2 N. aqueous sodium hydroxide solution (200 ml). The resulting mixture was heated at the boiling point under reflux for about 1 hour and stirred overnight at room temperature. The mixture is acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid, resulting in yellow oil. The reaction mixture was extracted twice with 200 ml portions of ethyl acetate. The combined ethyl acetate layers were washed twice with 200 ml portions of deionized water, dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. N-ethyl salicylamide was isolated as a yellow oil, which was dried overnight in vacuo to give 7.93 g.
Получение О-ацетил-N-этилсалициламида. Полученный выше N-этилсалициламид (7,93 г, 0,0481 моль) и метиленхлорид (100 мл) помещают в круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, капельной воронкой и магнитной мешалкой. Полученный раствор охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют триэтиламин (14,71 мл, 0,1057 моль). Ацетилхлорид (3,76 г, 0,0529 моль) помещают в капельную воронку и по каплям медленно добавляют к реакционной смеси в течение примерно 10 минут. Через 1 час водно-ледяную баню удаляют и реакционную смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры в течение ночи. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном (100 мл) и экстрагируют сначала 100 мл 2 н. водного раствора соляной кислоты и затем двумя 100 мл порциями деионизированной воды. Метиленхлоридный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное масло очищают элюированием через колонку с силикагелем. В качестве элюента используют смесь гексан:этилацетат (60:40) и собирают 75 мл фракции. Фракции, содержащие требуемый О-ацетил-N-этилсалициламид, объединяют и концентрируют в вакууме, получая 4,28 г продукта в виде желтого масла.Obtaining O-acetyl-N-ethylsalicylamide. The N-ethyl salicylamide (7.93 g, 0.0481 mol) obtained above and methylene chloride (100 ml) were placed in a round bottom flask equipped with a nitrogen purge device, a dropping funnel and a magnetic stirrer. The resulting solution was cooled in an ice-water bath and triethylamine (14.71 ml, 0.1057 mol) was added. Acetyl chloride (3.76 g, 0.0529 mol) was placed in a dropping funnel and slowly added dropwise to the reaction mixture over about 10 minutes. After 1 hour, the ice-water bath was removed and the reaction mixture was allowed to warm to room temperature overnight. The reaction mixture was diluted with dichloromethane (100 ml) and extracted first with 100 ml of 2 N. aqueous hydrochloric acid and then with two 100 ml portions of deionized water. The methylene chloride layer was dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. The resulting oil was purified by elution through a silica gel column. A hexane: ethyl acetate mixture (60:40) was used as eluent, and 75 ml of the fraction was collected. Fractions containing the desired O-acetyl-N-ethyl salicylamide were combined and concentrated in vacuo to give 4.28 g of the product as a yellow oil.
Получение 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Вышеуказанный O-ацетил-N-этилсалициламид (4,28 г, 0,0207 моль) и диметилформамид (75 мл) помещают в 250 мл круглодонную колбу, оснащенную устройством для продувки азотом, капельной воронкой и магнитной мешалкой. Полученную смесь охлаждают на водно-ледяной бане. После перемешивания смеси в течение примерно 10 минут добавляют гидрид натрия (0,76 г, 0,0316 моль), после чего по каплям добавляют раствор этил 8-бромоктаноата (7,78 г, 0,0310 моль) в диметилформамиде (25 мл) в течение 25 минут. Затем водно-ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют деионизированную воду (75 мл) и экстрагируют тремя 75 мл порциями дихлорметана. Объединенные дихлорметановые слои промывают тремя 75 мл порциями деионизированной воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натрия (2 н. раствор, 200 мл), нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение примерно 2 часов и оставляют охлаждаться до комнатной температуры в течение ночи. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагируют тремя 100 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают тремя 100 мл порциями деионизированной воды и затем тремя 100 мл порциями насыщенного раствора соли. Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное масло кристаллизуют из смеси этилацетат:гексан (30:70), получая 3,24 г требуемого продукта 8-(2-(N-этилбензамид)окси)октановой кислоты. Температура плавления: 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,18 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,26 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 7,93, д, 1H; 7,75, дд, 1Н; 7,40, тд, 1H; 7,10, д, 1H; 6,98, тд, 1H; 4,00, м, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,71, п, 2Н; 1,25, м, 8Н; 1,10, д, 6Н.Preparation of 8- (2- (N-ethylbenzamide) oxy) octanoic acid. The above O-acetyl-N-ethylsalicylamide (4.28 g, 0.0207 mol) and dimethylformamide (75 ml) are placed in a 250 ml round bottom flask equipped with a nitrogen purge device, a dropping funnel and a magnetic stirrer. The resulting mixture was cooled in an ice-water bath. After the mixture was stirred for about 10 minutes, sodium hydride (0.76 g, 0.0316 mol) was added, after which a solution of ethyl 8-bromoctanoate (7.78 g, 0.0310 mol) in dimethylformamide (25 ml) was added dropwise. for 25 minutes. Then the ice-water bath was removed and the reaction mixture was stirred overnight at room temperature. Deionized water (75 ml) was added to the reaction mixture and extracted with three 75 ml portions of dichloromethane. The combined dichloromethane layers were washed with three 75 ml portions of deionized water, dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. The resulting brown oil was taken up in an aqueous sodium hydroxide solution (2N solution, 200 ml), heated at reflux for about 2 hours and allowed to cool to room temperature overnight. The mixture is acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid and extracted with three 100 ml portions of ethyl acetate. The combined ethyl acetate layers were washed with three 100 ml portions of deionized water and then with three 100 ml portions of brine. The ethyl acetate layer was dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. The resulting oil was crystallized from ethyl acetate: hexane (30:70) to give 3.24 g of the desired product 8- (2- (N-ethylbenzamide) oxy) octanoic acid. Melting point: 94-95 ° C. Combustion analysis:% C: 67.29 (calculated), 67.18 (found); % H: 8.41 (calculated), 8.55 (found); % N: 4.36 (calculated), 4.26 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 7.93, d, 1H; 7.75, dd, 1H; 7.40, td, 1H; 7.10, d, 1H; 6.98, td, 1H; 4.00, m, 3H; 2.15, t, 2H; 1.71, p, 2H; 1.25, m, 8H; 1.10, d, 6H.
Соединения 31 и 34 также получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.Compounds 31 and 34 are also prepared as described above using the appropriate starting material.
Соединение 31. Температура плавления: 91,5-94°С. Анализ сжиганием: %С: 65,51 (вычислено), 65,35 (найдено); %Н: 7,90 (вычислено), 8,03 (найдено); %N: 4,77 (вычислено), 4,46 (найдено). 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1H; 8,02, шир.д, 1H; 7,72, дд, 1H; 7,42, дт, 1H; 7,11, д, 1H; 7,00, т, 1H; 4,08, т, 2Н; 2,80, д, 3Н; 2,20, т, 2Н; 1,77, п, 2Н; 1,53-1,25, м, 8Н.Compound 31. Melting point: 91.5-94 ° C. Combustion analysis:% C: 65.51 (calculated), 65.35 (found); % H: 7.90 (calculated), 8.03 (found); % N: 4.77 (calculated), 4.46 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.02, broad d, 1H; 7.72, dd, 1H; 7.42, dt, 1H; 7.11, d, 1H; 7.00, t, 1H; 4.08, t, 2H; 2.80, d, 3H; 2.20, t, 2H; 1.77, p, 2H; 1.53-1.25, m, 8H.
Соединение 34. Температура плавления: 94-95°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,18 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,55 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,26 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0 (с, 1H), 7,93 (д, 1H), 7,75 (дд, 1H), 7,40 (тд, 1H), 7,10 (д, 1H), 6,98 (тд, 1H), 4,00 (м, 3Н), 2,15 (т, 2Н), 1,71 (п, 2Н), 1,25 (м, 8Н), 1,10 (д, 6Н).Compound 34. Melting point: 94-95 ° C. Combustion analysis:% C: 67.29 (calculated), 67.18 (found); % H: 8.41 (calculated), 8.55 (found); % N: 4.36 (calculated), 4.26 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.40 (td, 1H), 7.10 (d, 1H), 6.98 (td, 1H), 4.00 (m, 3H), 2.15 (t, 2H), 1.71 (s, 2H), 1.25 (m, 8H) 1.10 (d, 6H).
Получение соединения 36Getting connection 36
В 250 мл круглодонную колбу, оснащенную конденсатором, помещают 5,00 г (17,4 ммоль) соединения 12 и 170 мл этанола. Колбу продувают азотом. Борогидрид натрия (1,15 г, 30,4 ммоль) добавляют тремя порциями к прозрачному желтому раствору соединения 12. Реакционную смесь перемешивают в течение двух часов и проверяют окончание реакции по ВЭЖХ. Добавляют еще 0,38 г (10,0 ммоль) борогидрида натрия и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь гасят добавлением 30 мл 10% водного раствора бикарбоната натрия, затем фильтруют через подушку из целита. Фильтрат концентрируют в вакууме, получая бледно-желтый гель. Полученный гель перемешивают в 60 мл 1 н. водного раствора гидроксида натрия в течение двух часов, охлаждают до 0°С, затем подкисляют до рН=1 концентрированным водным раствором соляной кислоты. Водный слой экстрагируют четырьмя 30 мл порциями этилацетата. Объединенные органические слои сушат над сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая 2,46 г (48,8%) продукта в виде прозрачного вязкого желтого масла. Анализ сжиганием: %С: 67,51 (вычислено), 67,16 (найдено); %Н: 8,67 (вычислено), 8,56 (найдено). (Следует отметить, что при выполнении анализа сжиганием использовано 0,176 моль Н2О (исходя из значения KF) и 0,068 моль этилацетата (как показано в ЯМР). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 7,45-7,42, дд, 1Н; 7,18-7,12, дт, 1Н; 6,93-6,88, т, 2Н; 5,03-4,97, 1Н; 3,99-3,91, м, 2Н; 2,20, т, 2Н; 1,72, п, 2Н; 1,51, м, 2Н; 1,39-1,30, м, 6Н; 1,27-1,25, д, 3Н.In a 250 ml round bottom flask equipped with a condenser, 5.00 g (17.4 mmol) of compound 12 and 170 ml of ethanol are placed. The flask is purged with nitrogen. Sodium borohydride (1.15 g, 30.4 mmol) was added in three portions to a clear yellow solution of compound 12. The reaction mixture was stirred for two hours and the completion of the reaction was checked by HPLC. An additional 0.38 g (10.0 mmol) of sodium borohydride was added and the reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was quenched by adding 30 ml of a 10% aqueous sodium bicarbonate solution, then filtered through a pad of celite. The filtrate was concentrated in vacuo to give a pale yellow gel. The resulting gel was stirred in 60 ml of 1 N. an aqueous solution of sodium hydroxide for two hours, cooled to 0 ° C, then acidified to pH = 1 with a concentrated aqueous solution of hydrochloric acid. The aqueous layer was extracted with four 30 ml portions of ethyl acetate. The combined organic layers were dried over sodium sulfate and concentrated in vacuo to give 2.46 g (48.8%) of the product as a clear, viscous yellow oil. Combustion analysis:% C: 67.51 (calculated), 67.16 (found); % H: 8.67 (calculated), 8.56 (found). (It should be noted that during the analysis by burning, 0.176 mol of H 2 O was used (based on the KF value) and 0.068 mol of ethyl acetate (as shown in NMR). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 7.45- 7.42, dd, 1H; 7.18-7.12, dt, 1H; 6.93-6.88, t, 2H; 5.03-4.97, 1H; 3.99-3.91, m, 2H; 2.20, t, 2H; 1.72, p, 2H; 1.51, m, 2H; 1.39-1.30, m, 6H; 1.27-1.25, d, 3H.
Получение соединения 37Getting connection 37
Раствор 10,0 мл (11,31 г, 83,1 ммоль) 2′-гидрокси-ацетофенона и 50 мл тетрагидрофурана помещают на ледяную баню и обрабатывают 120,0 мл (168,0 ммоль) 1,4 М раствора метиллития в тетрагидрофуране, который добавляют по каплям в течение 30 минут. Реакционная смесь сначала мутнеет и затем становится прозрачной. После перемешивания в течение 18 часов раствор подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты. Слои разделяют. Органическую фазу промывают 30 мл насыщенного раствора соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Получают в общей сложности 12,05 г 2-(диметилгидрокси-метил)фенола.A solution of 10.0 ml (11.31 g, 83.1 mmol) of 2′-hydroxy-acetophenone and 50 ml of tetrahydrofuran was placed in an ice bath and treated with 120.0 ml (168.0 mmol) of a 1.4 M solution of methyl lithium in tetrahydrofuran which is added dropwise over 30 minutes. The reaction mixture first becomes cloudy and then becomes transparent. After stirring for 18 hours, the solution was acidified with a 4% aqueous hydrochloric acid solution. The layers are separated. The organic phase is washed with 30 ml of brine, dried over sodium sulfate and concentrated. A total of 12.05 g of 2- (dimethylhydroxymethyl) phenol is obtained.
Получают раствор 6,77 г (44,5 ммоль) 2-(диметилгидрокси-метил) фенола и 50 мл диметилсульфоксида и обрабатывают его 9,90 г (176 ммоль) только что измельченного гидроксида калия. Светло-зеленый раствор перемешивают в течение 20 минут и добавляют 9,85 г (45,8 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты и 0,40 г (2,67 ммоль) иодида натрия. Густую суспензию перемешивают в течение 4 часов, после чего добавляют еще 1,66 г (7,72 ммоль) 4-(бромметил)бензойной кислоты. Реакционную смесь перемешивают еще 2 часа и обрабатывают 50 мл воды. После перемешивания в течение 20 часов раствор подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется твердое вещество, которое выделяют фильтрованием. Твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанол/вода, получая 5,8 г продукта. Температура плавления: 171-172°С. Анализ сжиганием: %С: 71,31 (вычислено), 71,28 (найдено); %Н: 6,34 (вычислено), 6,14 (найдено). 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6): δ 13,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,7, дд, 1Н; 7,6, д, 2Н; 7,2, дт, 1Н; 7,1, д, 1Н; 7,0, т, 1Н; 5,25, с, 2Н; 5,0, с, 1Н; 1,55, с, 6Н.A solution of 6.77 g (44.5 mmol) of 2- (dimethylhydroxymethyl) phenol and 50 ml of dimethyl sulfoxide is obtained and 9.90 g (176 mmol) of freshly ground potassium hydroxide are treated. The light green solution was stirred for 20 minutes and 9.85 g (45.8 mmol) of 4- (bromomethyl) benzoic acid and 0.40 g (2.67 mmol) of sodium iodide were added. The thick suspension was stirred for 4 hours, after which a further 1.66 g (7.72 mmol) of 4- (bromomethyl) benzoic acid was added. The reaction mixture was stirred for another 2 hours and treated with 50 ml of water. After stirring for 20 hours, the solution was acidified with a 4% aqueous hydrochloric acid solution, whereby a solid formed which was isolated by filtration. The solid was recrystallized from ethanol / water to give 5.8 g of product. Melting point: 171-172 ° C. Combustion analysis:% C: 71.31 (calculated), 71.28 (found); % H: 6.34 (calculated), 6.14 (found). 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ): δ 13.0, s, 1H; 8.0, d, 2H; 7.7, dd, 1H; 7.6, d, 2H; 7.2, dt, 1H; 7.1, d, 1H; 7.0, t, 1H; 5.25, s, 2H; 5.0 s, 1H; 1.55, s, 6H.
Получение соединения 67Preparation of Compound 67
Раствор 50,1 г (455 ммоль) гидрохинона, 15,52 г (91,0 ммоль) α-хлор-п-толуиловой кислоты, 1 г (6,7 ммоль) иодида натрия, 75 мл (750 ммоль) 10 н. водного раствора гидроксида натрия и 300 мл воды нагревают до 70°С в течение 24 часов в атмосфере азота. Охлажденную реакционную смесь подкисляют 20% водным раствором соляной кислоты, в результате чего образуется коричневое твердое вещество. Полученное твердое вещество выделяют фильтрованием. Затем твердое вещество поглощают этилацетатом. Нерастворившееся твердое вещество отфильтровывают. Фильтрат промывают насыщенным раствором соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Остаток кристаллизуют из смеси этанол/вода, получая 8,1 г соединения 67, температура плавления >230°С. Анализ сжиганием: %С; 68,85 (вычислено), 68,44 (найдено); %Н: 4,95 (вычислено), 4,93 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 9,0, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,5, д, 2Н; 6,8, д, 2Н; 6,7, д, 2Н; 5,1, с, 2Н.A solution of 50.1 g (455 mmol) of hydroquinone, 15.52 g (91.0 mmol) of α-chloro-p-toluic acid, 1 g (6.7 mmol) of sodium iodide, 75 ml (750 mmol) of 10 N. an aqueous solution of sodium hydroxide and 300 ml of water are heated to 70 ° C for 24 hours in a nitrogen atmosphere. The cooled reaction mixture is acidified with a 20% aqueous hydrochloric acid solution, resulting in a brown solid. The resulting solid was isolated by filtration. The solid is then taken up in ethyl acetate. The insoluble solid is filtered off. The filtrate was washed with brine, dried over sodium sulfate and concentrated. The residue was crystallized from ethanol / water to give 8.1 g of compound 67, melting point> 230 ° C. Burn analysis:% C; 68.85 (calculated), 68.44 (found); % H: 4.95 (calculated), 4.93 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 9.0, s, 1H; 8.0, d, 2H; 7.5, d, 2H; 6.8, d, 2H; 6.7, d, 2H; 5.1, s, 2H.
Соединения 78 и 73 получают аналогично способу получения соединения 67, используя соответствующие исходные вещества.Compounds 78 and 73 were prepared analogously to the process for preparing compound 67 using the corresponding starting materials.
Соединение 78. Температура плавления: 178-181°С. Анализ сжиганием: %С: 64,01 (вычислено), 63,95 (найдено); %Н: 4,22 (вычислено), 4,25 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 8,0, д, 2Н; 7,6, д, 2Н; 7,45, дд, 1Н; 7,3, дт, 1Н; 7,2, дд, 1Н; 7,0, дт, 1Н; 5,3, с, 2Н.Compound 78. Melting point: 178-181 ° C. Analysis by burning:% C: 64.01 (calculated), 63.95 (found); % H: 4.22 (calculated), 4.25 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 8.0, d, 2H; 7.6, d, 2H; 7.45, dd, 1H; 7.3, dt, 1H; 7.2, dd, 1H; 7.0, dt, 1H; 5.3, s, 2H.
Соединение 73. Температура плавления: 63-65°С. Анализ сжиганием: %С: 62,11 (вычислено), 62,02 (найдено); %Н: 7,07 (вычислено), 7,04 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1H; 7,4, дд, 1Н; 7,3, дт, 1H; 7,1, дд, 1Н; 6,95, дт, 1Н; 4,0, т, 2Н; 2,2, т, 2Н; 1,75, п, 2Н; 1,5, м, 4Н; δ 1,35, м, 4Н.Compound 73. Melting point: 63-65 ° C. Combustion analysis:% C: 62.11 (calculated), 62.02 (found); % H: 7.07 (calculated), 7.04 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 7.4, dd, 1H; 7.3, dt, 1H; 7.1, dd, 1H; 6.95, dt, 1H; 4.0, t, 2H; 2.2, t, 2H; 1.75, p, 2H; 1.5, m, 4H; δ 1.35, m, 4H.
Получение соединения 60Preparation of Compound 60
Раствор 3,0 мл (3,44 г, 28,2 ммоль) салицилальдегида, 5,05 мл (6,33 г, 28,4 ммоль) этил 6-бромгексаноата и 50 мл этанола обрабатывают 5,07 г (36,7 ммоль) карбоната калия. Суспензию нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. Через 20 часов реакционную смесь охлаждают до 25°С, фильтруют через подушку из целита и концентрируют. Остаток промывают гексанами и поглощают этанолом и 10 мл 2 н. водного раствора гидроксида натрия. Через 6 часов этанол отгоняют. Смесь подкисляют 4% водным раствором соляной кислоты и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу промывают 30 мл насыщенного раствора соли, сушат над сульфатом натрия и концентрируют. Полученный продукт перекристаллизовывают из смеси этанол/вода, получая 3,0 г соединения 60 в виде коричневого твердого вещества. Температура плавления: 58-60°С. Анализ сжиганием: %С: 66,09 (вычислено), 61,39 (найдено); %Н: 6,83 (вычислено), 6,98 (найдено). МС 236 (М+ пик). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1H; 10,4, с, 1H; 7,7, дд, 1H; 7,65, дт, 1H; 7,2, д, 1H; 7,05, 1,5, м, 2Н.A solution of 3.0 ml (3.44 g, 28.2 mmol) of salicylaldehyde, 5.05 ml (6.33 g, 28.4 mmol) of ethyl 6-bromohexanoate and 50 ml of ethanol is treated with 5.07 g (36.7 mmol) potassium carbonate. The suspension is heated at the boiling temperature under reflux. After 20 hours, the reaction mixture was cooled to 25 ° C, filtered through a pad of celite and concentrated. The residue was washed with hexanes and taken up in ethanol and 10 ml of 2N. an aqueous solution of sodium hydroxide. After 6 hours, ethanol was distilled off. The mixture was acidified with 4% aqueous hydrochloric acid and extracted with ethyl acetate. The organic phase is washed with 30 ml of brine, dried over sodium sulfate and concentrated. The resulting product was recrystallized from ethanol / water to give 3.0 g of compound 60 as a brown solid. Melting point: 58-60 ° C. Combustion analysis:% C: 66.09 (calculated), 61.39 (found); % H: 6.83 (calculated), 6.98 (found). MS 236 (M + peak). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 10.4, s, 1H; 7.7, dd, 1H; 7.65, dt, 1H; 7.2, d, 1H; 7.05, 1.5, m, 2H.
Соединение 61 получают аналогично способу получения соединения 60, используя соответствующие исходные вещества. Температура плавления: 59-62°С. Анализ сжиганием: %С: 68,18 (вычислено), 67,59 (найдено); %Н: 7,57 (вычислено), 7,63 (найдено). МС 264 (M+ пик). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, шир.с, 1H; 10,4, с, 1Н; 8,0, д, 2Н; 7,75, дд, 1Н; 7,65, дт, 1Н; 7,65, д, 2Н; 7,3, д, 1H; 7,1, т, 1H; 5,4, с, 2Н.Compound 61 was prepared analogously to the method for producing compound 60 using the corresponding starting materials. Melting point: 59-62 ° C. Combustion analysis:% C: 68.18 (calculated), 67.59 (found); % H: 7.57 (calculated), 7.63 (found). MS 264 (M + peak). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, broad s, 1H; 10.4, s, 1H; 8.0, d, 2H; 7.75, dd, 1H; 7.65, dt, 1H; 7.65, d, 2H; 7.3, d, 1H; 7.1, t, 1H; 5.4, s, 2H.
Получение соединения 51Getting connection 51
Карзалам (30,00 г, 0,1840 моль), иодметан (10,23 мл, 0,1643 моль), карбонат натрия (19,51 г, 0,1840 моль) и диметилформамид (150 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при 80°С. Затем реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и собирают белое твердое вещество. Полученное вещество промывают водой, после чего оставшееся твердое вещество переносят в 250 мл круглодонную колбу. К фильтрату, полученному первоначальным фильтрованием, добавляют воду, в результате чего происходит осаждение белого твердого вещества. Полученное вещество объединяют с твердым веществом, находящимся в 250 мл колбе, и добавляют 2 н. водный раствор гидроксида натрия (150 мл). Смесь нагревают в течение одного часа, после чего нагревание прекращают и реакционную смесь оставляют охлаждаться в течение ночи. Белое твердое вещество, выпавшее в осадок в течение ночи, выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 21,52 г N-метилсалициламида.Karzalam (30.00 g, 0.1840 mol), iodomethane (10.23 ml, 0.1643 mol), sodium carbonate (19.51 g, 0.1840 mol) and dimethylformamide (150 ml) are placed in a 500 ml round bottom flask. The reaction mixture is heated overnight at 80 ° C. Then the reaction mixture was cooled to room temperature, filtered and a white solid was collected. The resulting material was washed with water, after which the remaining solid was transferred to a 250 ml round bottom flask. Water was added to the filtrate obtained by initial filtration, whereby a white solid precipitated. The resulting material was combined with a solid in a 250 ml flask, and 2N was added. aqueous sodium hydroxide solution (150 ml). The mixture was heated for one hour, after which the heating was stopped and the reaction mixture was allowed to cool overnight. A white solid precipitated overnight was isolated by filtration and dried in vacuo. 21.52 g of N-methylsalicylamide are obtained.
N-метилсалициламид (21,52 г, 0,1425 моль) и метиленхлорид (300 мл) помещают в литровую круглодонную колбу. Колбу охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют триэтиламин (43,62 мл, 0,3135 моль). Затем по каплям добавляют ацетилхлорид в течение пяти минут. Баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. К реакционной смеси добавляют метиленхлорид (300 мл). Смесь промывают двумя 300 мл порциями 1 н. водного раствора соляной кислоты и затем тремя 300 мл порциями деионизированной воды. Раствор в метиленхлориде сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая оранжевое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из смеси этилацетат:гексан (70:30). Получают 12,15 г О-ацетил, N-метилсалициламида.N-methyl salicylamide (21.52 g, 0.1425 mol) and methylene chloride (300 ml) are placed in a liter round bottom flask. The flask was cooled in an ice-water bath and triethylamine (43.62 ml, 0.3135 mol) was added. Then acetyl chloride was added dropwise over five minutes. The bath was removed and the reaction mixture was stirred overnight at room temperature. Methylene chloride (300 ml) was added to the reaction mixture. The mixture is washed with two 300 ml portions of 1 N. aqueous hydrochloric acid and then three 300 ml portions of deionized water. The methylene chloride solution was dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo to give an orange solid, which was recrystallized from ethyl acetate: hexane (70:30). 12.15 g of O-acetyl, N-methylsalicylamide are obtained.
О-ацетил, N-метилсалициламид (17,74 г, 0,919 моль), полученный вышеописанным способом, переносят в литровую круглодонную колбу, содержащую диметилформамид (300 мл). Колбу охлаждают на водно-ледяной бане и добавляют гидрид натрия (3,38 г, 0,1406 моль). Метил 8-бромдеканоат (36,54 г, 0,1379 моль) растворяют в дополнительной порции диметилформамида (100 мл) и полученный раствор по каплям добавляют к реакционной смеси в течение 25 минут. После перемешивания в течение примерно получаса ледяную баню удаляют и реакционную смесь продолжают перемешивать еще три дня при комнатной температуре. Добавляют воду (300 мл) и смесь экстрагируют двумя 250 мл порциями метиленхлорида. Объединенные метиленхлоридные слои трижды промывают 150 мл порциями воды, сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая коричневое масло. Полученное масло поглощают 2 н. водным раствором гидроксида натрия (200 мл) и нагревают в течение 45 минут. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре добавляют еще 200 мл 2 н. водного раствора гидроксида натрия и реакционную смесь нагревают, пока она не становится прозрачной. После охлаждения реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагируют тремя 250 мл порциями этилацетата. Объединенные этилацетатные слои промывают тремя 250 мл порциями воды и затем тремя 250 мл порциями насыщенного раствора соли. Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая желтовато-коричневое твердое вещество, которое перекристаллизовывают из смеси этилацетат:гексан (30:70). Продукт выделяют в виде белого твердого вещества с выходом, равным 26,30 г. Данные анализа соединения 51: Температура плавления: 81-84°С. Анализ сжиганием: %С: 67,29 (вычислено), 67,17 (найдено); %Н: 8,41 (вычислено), 8,70 (найдено); %N: 4,36 (вычислено), 4,36 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,00, с, 1Н; 7,98, д, 1Н; 7,70-7,75, дд, 1Н; 7,39-7,48, дт, 1Н; 7,09-7,15, д, 1Н; 6,95-7,05, тд, 1Н; 4,05, т, 2Н; 2,75, д, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,70, п, 2Н; 1,20-1,55, м, 12Н.O-acetyl, N-methylsalicylamide (17.74 g, 0.919 mol), obtained as described above, is transferred to a liter round bottom flask containing dimethylformamide (300 ml). The flask was cooled in an ice-water bath and sodium hydride (3.38 g, 0.1406 mol) was added. Methyl 8-bromodecanoate (36.54 g, 0.1379 mol) was dissolved in an additional portion of dimethylformamide (100 ml) and the resulting solution was added dropwise to the reaction mixture over 25 minutes. After stirring for about half an hour, the ice bath was removed and the reaction mixture was continued to stir for another three days at room temperature. Water (300 ml) was added and the mixture was extracted with two 250 ml portions of methylene chloride. The combined methylene chloride layers were washed three times with 150 ml portions of water, dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo to give a brown oil. The resulting oil absorb 2 N. aqueous sodium hydroxide solution (200 ml) and heated for 45 minutes. After stirring overnight at room temperature, another 200 ml of 2N was added. an aqueous solution of sodium hydroxide and the reaction mixture is heated until it becomes transparent. After cooling, the reaction mixture was acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid and extracted with three 250 ml portions of ethyl acetate. The combined ethyl acetate layers were washed with three 250 ml portions of water and then three 250 ml portions of brine. The ethyl acetate layer was dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo to give a tan solid, which was recrystallized from ethyl acetate: hexane (30:70). The product was isolated as a white solid with a yield of 26.30 g. Analysis data of compound 51: Melting point: 81-84 ° C. Combustion analysis:% C: 67.29 (calculated), 67.17 (found); % H: 8.41 (calculated), 8.70 (found); % N: 4.36 (calculated), 4.36 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.00, s, 1H; 7.98, d, 1H; 7.70-7.75, dd, 1H; 7.39-7.48, dt, 1H; 7.09-7.15, d, 1H; 6.95-7.05, td, 1H; 4.05, t, 2H; 2.75, d, 3H; 2.15, t, 2H; 1.70, p, 2H; 1.20-1.55, m, 12H.
Получение соединения 65Getting connection 65
Гидроксид калия (28,60 г, 0,511 моль) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Добавляют диметилсульфоксид (215 мл) и начинают перемешивать смесь. После перемешивания в течение примерно 35 минут, добавляют фенол (12,00 г, 0,1277 моль) и этил 8-бромоктаноат (32,04 г, 0,1277 моль). Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 часов и добавляют 500 мл деионизированной воды. Смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное белое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме в течение ночи. Получают 27,74 г 8-феноксиоктановой кислоты. Данные анализа соединения 65: Температура плавления: 65-68°С. Анализ сжиганием: %С: 71,19 (вычислено), 70,98 (найдено); %Н: 8,47 (вычислено), 8,70 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 11,95, с, 1Н; 7,23-7,31, м, 2Н; 6,87-6,95, м, 3Н; 3,90, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,22-1,45, м, 6Н.Potassium hydroxide (28.60 g, 0.511 mol) was placed in a 500 ml round bottom flask. Dimethyl sulfoxide (215 ml) was added and the mixture was stirred. After stirring for about 35 minutes, phenol (12.00 g, 0.1277 mol) and ethyl 8-bromoctanoate (32.04 g, 0.1277 mol) are added. The resulting mixture was stirred at room temperature for 3 hours and 500 ml of deionized water was added. The mixture is heated at the boiling temperature under reflux. The reaction mixture was cooled to room temperature and acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid. The resulting white solid was isolated by filtration and dried in vacuo overnight. Obtain 27.74 g of 8-phenoxyoctanoic acid. Analysis data of compound 65: Melting point: 65-68 ° C. Combustion analysis:% C: 71.19 (calculated), 70.98 (found); % H: 8.47 (calculated), 8.70 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 11.95, s, 1H; 7.23-7.31, m, 2H; 6.87-6.95, m, 3H; 3.90, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.62, p, 2H; 1.45, p, 2H; 1.22-1.45, m, 6H.
Получение соединения 43Getting connection 43
Гидроксид калия (2,62 г, 0,0467 моль) и диметилсульфоксид (90 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу в атмосфере азота. После перемешивания в течение 5 минут добавляют монобензоат резорцина (10,0 г, 0,0467 моль) и этил 8-бромоктаноат (11,73 г, 0,0467 моль). После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре к полученной смеси добавляют дополнительную порцию гидроксида калия (2,62 г, 0,0467 моль) для завершения реакции. После перемешивания в течение дополнительных 5,5 часов к смеси добавляют воду (200 мл) и экстрагируют тремя порциями дихлорметана (100 мл порции). Объединенные дихлорметановые порции сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло с запахом диметилсульфоксида поглощают водой. Затем смесь экстрагируют тремя порциями этилацетата (100 мл порции). Объединенные этилацетатные слои промывают тремя порциями воды (100 мл порции). Этилацетатный слой сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме. Полученное коричневое масло поглощают водным раствором гидроксида натрия (2 н. раствор, 100 мл). Затем добавляют тетрагидрофуран (50 мл) и смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение 2 часов, после чего нагревание прекращают. Тетрагидрофуран удаляют в вакууме и реакционную смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество несколько раз промывают водой с температурой 40-50°С и затем перекристаллизовывают из смеси вода:этанол (80:20). Полученное желтовато-коричневое твердое вещество сначала перекристаллизовывают из смеси гексан:этилацетат (90:10) и затем добавляют в кипящую воду. Этиловый спирт добавляют до тех пор, пока смесь не становится прозрачной. Во время охлаждения осаждается желтовато-коричневое твердое вещество, которое выделяют фильтрованием. Полученный продукт сушат в вакууме и выделяют с выходом 5,96 г. Данные анализа соединения 43: Температура плавления = 89-91°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,68 (найдено); %Н: 7,94 (вычислено), 7,92 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,23, м, 6Н.Potassium hydroxide (2.62 g, 0.0467 mol) and dimethyl sulfoxide (90 ml) are placed in a 500 ml round bottom flask under a nitrogen atmosphere. After stirring for 5 minutes, resorcinol monobenzoate (10.0 g, 0.0467 mol) and ethyl 8-bromoctanoate (11.73 g, 0.0467 mol) are added. After stirring overnight at room temperature, an additional portion of potassium hydroxide (2.62 g, 0.0467 mol) was added to the resulting mixture to complete the reaction. After stirring for an additional 5.5 hours, water (200 ml) was added to the mixture and extracted with three portions of dichloromethane (100 ml portion). The combined dichloromethane portions were dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. The resulting brown oil with the smell of dimethyl sulfoxide is absorbed by water. The mixture was then extracted with three portions of ethyl acetate (100 ml portion). The combined ethyl acetate layers were washed with three portions of water (100 ml portion). The ethyl acetate layer was dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo. The resulting brown oil is taken up in an aqueous solution of sodium hydroxide (2N solution, 100 ml). Then tetrahydrofuran (50 ml) was added and the mixture was heated at the boiling point under reflux for 2 hours, after which the heating was stopped. Tetrahydrofuran was removed in vacuo and the reaction mixture was acidified with 2N. aqueous hydrochloric acid. The resulting tan solid was washed several times with water at a temperature of 40-50 ° C and then recrystallized from a mixture of water: ethanol (80:20). The resulting tan solid was first recrystallized from hexane: ethyl acetate (90:10) and then added to boiling water. Ethyl alcohol is added until the mixture becomes clear. During cooling, a tan solid precipitates, which is isolated by filtration. The resulting product was dried in vacuo and isolated in 5.96 g yield. Analysis data for compound 43: Melting point = 89-91 ° C. Combustion analysis:% C: 66.67 (calculated), 66.68 (found); % H: 7.94 (calculated), 7.92 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 9.3, s, 1H; 7.00, t, 1H; 6.29, m, 3H; 3.84, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.62, p, 2H; 1.45, p, 2H; 1.23, m, 6H.
Соединения 44, 45, 74 и 46 получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.Compounds 44, 45, 74, and 46 were prepared as described above using the appropriate starting material.
Соединение 44. Температура плавления: 89-92°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57 (вычислено), 68,71 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,58 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 11,9, с, 1Н; 9,2, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,30, п, 2Н; 1,23, м, 8Н.Compound 44. Melting point: 89-92 ° C. Combustion analysis:% C: 68.57 (calculated), 68.71 (found); % H: 8.57 (calculated), 8.58 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 11.9, s, 1H; 9.2, s, 1H; 7.00, t, 1H; 6.29, m, 3H; 3.84, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.62, p, 2H; 1.30, p, 2H; 1.23, m, 8H.
Соединение 45. Температура плавления: 98-99,5°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29 (вычислено), 64,06 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,12 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,00, т, 1Н; 6,29, м, 3Н; 3,84, т, 2Н; 2,17, т, 2Н; 1,62, п, 2Н; 1,49, п, 2Н; 1,35, м, 2Н.Compound 45. Melting point: 98-99.5 ° C. Combustion analysis:% C: 64.29 (calculated), 64.06 (found); % H: 7.14 (calculated), 7.12 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 9.3, s, 1H; 7.00, t, 1H; 6.29, m, 3H; 3.84, t, 2H; 2.17, t, 2H; 1.62, p, 2H; 1.49, p, 2H; 1.35, m, 2H.
Соединение 74. Температура плавления: 126-128°С. Анализ сжиганием: %С: 56,57 (вычислено), 56,72 (найдено); %Н: 6,39 (вычислено), 6,66 (найдено); %N: 4,71 (вычислено), 4,32 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 11,7, с, 1Н; 10,4, с, 1Н; 7,75-7,8, дд, 1Н; 7,68-7,73, д, 1Н; 6,92-6,99, д, 1Н; 4,00, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,67, п, 2Н; 1,22-1,55, м, 8Н.Compound 74. Melting point: 126-128 ° C. Combustion analysis:% C: 56.57 (calculated), 56.72 (found); % H: 6.39 (calculated), 6.66 (found); % N: 4.71 (calculated), 4.32 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 11.7, s, 1H; 10.4, s, 1H; 7.75-7.8, dd, 1H; 7.68-7.73, d, 1H; 6.92-6.99, d, 1H; 4.00, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.67, p, 2H; 1.22-1.55, m, 8H.
Соединение 46. Температура плавления: 93-95°С. Анализ сжиганием: %С: 61,22 (вычислено), 61,20 (найдено); %Н: 6,12 (вычислено), 6,02 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 9,3, с, 1Н; 7,01, т, 1Н; 6,30, м, 3Н; 3,86, т, 2Н; 2,35, т, 2Н; 1,85, п, 2Н.Compound 46. Melting point: 93-95 ° C. Combustion analysis:% C: 61.22 (calculated), 61.20 (found); % H: 6.12 (calculated), 6.02 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 9.3, s, 1H; 7.01, t, 1H; 6.30, m, 3H; 3.86, t, 2H; 2.35, t, 2H; 1.85, p, 2H.
Получение соединения 47Getting connection 47
Гидроксид калия (11,20 г, 200,0 ммоль) измельчают в ступке до порошкообразного состояния и помещают в 0,5 л круглодонную колбу, содержащую 90 мл диметилсульфоксида. Полученную смесь перемешивают в течение 5 минут, после чего добавляют 10,00 г (50,0 ммоль) 4-бензилоксифенола с последующим немедленным добавлением 12,55 г (50,0 ммоль) этил 8-бромоктаноата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение двух с половиной часов. Затем реакционную смесь выливают в 200 мл дистиллированной воды. Смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником. После окончания реакции реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Смесь подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты и образовавшееся твердое вещество выделяют фильтрованием. Твердое вещество сушат в вакууме в течение ночи. Получают 17,96 г (4-бензилоксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Полученное вещество используют на следующей стадии без очистки.Potassium hydroxide (11.20 g, 200.0 mmol) is ground in a mortar to a powder state and placed in a 0.5 L round-bottom flask containing 90 ml of dimethyl sulfoxide. The resulting mixture was stirred for 5 minutes, after which 10.00 g (50.0 mmol) of 4-benzyloxyphenol was added, followed by the immediate addition of 12.55 g (50.0 mmol) of ethyl 8-bromoctanoate. The reaction mixture was stirred at room temperature for two and a half hours. Then the reaction mixture was poured into 200 ml of distilled water. The mixture is heated at the boiling temperature under reflux. After completion of the reaction, the reaction mixture was allowed to cool to room temperature. The mixture is acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid and the resulting solid are isolated by filtration. The solid was dried in vacuo overnight. 17.96 g of (4-benzyloxyphenyl) -8-hydroxyoctanoic acid are obtained. The resulting substance is used in the next step without purification.
(4-Бензилоксифенил)-8-оксиоктановую кислоту помещают в 0,5 л круглодонную колбу, содержащую 120 мл этилового спирта. Реакционную смесь барботируют азотом в течение 15 минут и добавляют 10% палладий на активированном угле. Затем в колбе создают вакуум и поверх колбы помещают баллон с водородом так, чтобы содержимое колбы находилось в атмосфере водорода. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре и затем фильтруют через целит. Этиловый спирт удаляют в вакууме, получая белое твердое вещество, которое сначала перекристаллизовывают из смеси этиловый спирт:вода (90:10) и затем растворяют в 2 н. водном растворе гидроксида натрия. Смесь фильтруют и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Образовавшееся белое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 2,12 г (4-гидроксифенил)-8-оксиоктановой кислоты. Данные анализа соединения 47. Температура плавления: 97-100°С. Анализ сжиганием: %С: 66,67 (вычислено), 66,43 (найдено); %Н: 7,94 (вычислено), 7,80 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1Н; 9,00, с, 1H; 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 6Н.(4-Benzyloxyphenyl) -8-hydroxyoctanoic acid is placed in a 0.5 L round-bottom flask containing 120 ml of ethyl alcohol. The reaction mixture was bubbled with nitrogen for 15 minutes and 10% palladium on activated carbon was added. Then a vacuum is created in the flask and a hydrogen cylinder is placed over the flask so that the contents of the flask are in a hydrogen atmosphere. The mixture was stirred overnight at room temperature and then filtered through celite. Ethyl alcohol was removed in vacuo to give a white solid, which was first recrystallized from ethyl alcohol: water (90:10) and then dissolved in 2N. aqueous solution of sodium hydroxide. The mixture is filtered and acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid. The resulting white solid was isolated by filtration and dried in vacuo. 2.12 g of (4-hydroxyphenyl) -8-hydroxyoctanoic acid are obtained. Analysis data for compound 47. Melting point: 97-100 ° C. Combustion analysis:% C: 66.67 (calculated), 66.43 (found); % H: 7.94 (calculated), 7.80 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 9.00, s, 1H; 6.63, m, 4H; 3.75, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.60, p, 2H; 1.45, p, 2H; 1.20, m, 6H.
Соединения 48, 49 и 50 получают вышеописанным способом, используя соответствующее исходное вещество.Compounds 48, 49, and 50 were prepared as described above using the appropriate starting material.
Соединение 48. Температура плавления: 99-100°С. Анализ сжиганием: %С: 68,57 (вычислено), 68,47 (найдено); %Н: 8,57 (вычислено), 8,67 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,20, м, 10Н.Compound 48. Melting point: 99-100 ° C. Combustion analysis:% C: 68.57 (calculated), 68.47 (found); % H: 8.57 (calculated), 8.67 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 6.63, m, 4H; 3.75, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.60, p, 2H; 1.45, p, 2H; 1.20, m, 10H.
Соединение 49. Температура плавления: 102-104°С. Анализ сжиганием: %С: 64,29 (вычислено), 64,53 (найдено); %Н: 7,14 (вычислено), 7,32 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 11,5, с, 1H; 8,5, с, 1H; 6,63, м, 4Н; 3,75, т, 2Н; 2,15, т, 2Н; 1,60, п, 2Н; 1,45, п, 2Н; 1,30, м, 2Н.Compound 49. Melting point: 102-104 ° C. Combustion analysis:% C: 64.29 (calculated), 64.53 (found); % H: 7.14 (calculated), 7.32 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 11.5, s, 1H; 8.5, s, 1H; 6.63, m, 4H; 3.75, t, 2H; 2.15, t, 2H; 1.60, p, 2H; 1.45, p, 2H; 1.30, m, 2H.
Соединение 50. Температура плавления: 117-120°С. Анализ сжиганием: %С: 58,43 (вычислено), 58,63 (найдено); %Н: 6,35 (вычислено), 6,40 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 12,0, с, 1H; 8,6, с, 1H; 6,62, м, 4Н; 3,80, т, 2Н; 2,50, т, 2Н; 1,80, п, 2Н.Compound 50. Melting point: 117-120 ° C. Combustion analysis:% C: 58.43 (calculated), 58.63 (found); % H: 6.35 (calculated), 6.40 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 12.0, s, 1H; 8.6, s, 1H; 6.62, m, 4H; 3.80, t, 2H; 2.50, t, 2H; 1.80, p, 2H.
Получение соединения 57Getting connection 57
2,5-Дигидироксиацетофенон (5,00 г, 0,0329 моль), бензил-бромид (3,72 мл, 0,031 моль), карбонат калия (4,31 г, 0,031 моль) и ацетон (150 мл) помещают в 500 мл круглодонную колбу. Реакционную смесь нагревают в течение ночи при температуре кипения с обратным холодильником и охлаждают до комнатной температуры. К холодной реакционной смеси добавляют деионизированную воду (150 мл) и трижды экстрагируют 100 мл порциями диэтилового эфира. Объединенные эфирные слои сушат сульфатом натрия и концентрируют в вакууме, получая темное твердое вещество. Темное твердое вещество перекристаллизовывают из смеси этанол:вода (50:50), получая 3,09 г 2-гидрокси-5-бензилоксиацетофенона в виде желтых игл.2,5-dihydroxyacetophenone (5.00 g, 0.0329 mol), benzyl bromide (3.72 ml, 0.031 mol), potassium carbonate (4.31 g, 0.031 mol) and acetone (150 ml) are placed in 500 ml round bottom flask. The reaction mixture was heated overnight at the boiling point under reflux and cooled to room temperature. Deionized water (150 ml) was added to the cold reaction mixture and extracted three times with 100 ml portions of diethyl ether. The combined ether layers were dried with sodium sulfate and concentrated in vacuo to give a dark solid. The dark solid was recrystallized from ethanol: water (50:50) to obtain 3.09 g of 2-hydroxy-5-benzyloxyacetophenone as yellow needles.
Гидроксид калия (11,11 г, 0,1983 моль) и диметил-сульфоксид (90 мл) помещают в 250 мл круглодонную колбу. Через 10 минут добавляют полученный выше 2-гидрокси-5-бензилоксиацетофенон (12,00 г, 0,0496 моль), затем этил 8-бромоктаноат (12,45 г, 0,496 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют деионизированную воду и реакционную смесь нагревают при температуре кипения с обратным холодильником в течение пяти часов. Затем реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры и подкисляют 2 н. водным раствором соляной кислоты. Полученное желтовато-коричневое твердое вещество выделяют фильтрованием и дважды промывают порциями деионизированной воды. После сушки в течение ночи в вакууме получают 16,75 г (4-бензилокси-2-ацетилфенил)-8-оксиоктановой кислоты.Potassium hydroxide (11.11 g, 0.1983 mol) and dimethyl sulfoxide (90 ml) are placed in a 250 ml round bottom flask. After 10 minutes, the 2-hydroxy-5-benzyloxyacetophenone obtained above (12.00 g, 0.0496 mol) is added, followed by ethyl 8-bromoctanoate (12.45 g, 0.496 mol). The reaction mixture was stirred overnight at room temperature. Deionized water was added and the reaction mixture was heated at reflux for five hours. Then the reaction mixture was allowed to cool to room temperature and acidified with 2 N. aqueous hydrochloric acid. The resulting tan solid was isolated by filtration and washed twice with portions of deionized water. After drying overnight in vacuo, 16.75 g of (4-benzyloxy-2-acetylphenyl) -8-hydroxyoctanoic acid are obtained.
(4-Бензилокси-2-ацетилфенил)-8-оксиактановую кислоту (16,75 г, 0,0435 моль) и этилацетат (85 мл) помещают в 300 мл реактор Парра. Добавляют 10% палладий на активированном угле (0,75 г), после чего реактор герметично закрывают, откачивают воздух и подают водород. Реактор нагревают при 50°С в течение ночи, открывают и добавляют еще 0,5 г 10% палладия на активированном угле. Реактор снова герметично закрывают, откачивают воздух и подают водород. Если реакционная смесь не изменяется, находясь в течение двух дней при комнатной температуре, реактор снова открывают и реакционную смесь фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме и остаток снова помещают в реактор Парра. Затем остаток поглощают этилацетатом и добавляют 10% палладий на активированном угле. Реактор герметично закрывают, откачивают воздух, подают водород и нагревают в течение ночи при 50°С. После охлаждения до комнатной температуры реактор открывают, палладий на активированном угле отфильтровывают и реакционную смесь концентрируют в вакууме. Образовавшееся желтое твердое вещество перекристаллизовывают из смеси вода:этиловый спирт (80:20). Желтое твердое вещество, полученное в результате перекристаллизации, поглощают кипящим гексаном. Затем добавляют этилацетат, пока не образуется прозрачный раствор, и смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры. Осажденное желтовато-коричневое твердое вещество выделяют фильтрованием и сушат в вакууме. Получают 6,23 г (4-гидрокси-2-ацетилфенил)-8-оксиактановой кислоты. Данные анализа соединения 57. Температура плавления: 112-115°С. Анализ сжиганием: %С: 65,31 (вычислено), 65,32 (найдено); %Н: 7,48 (вычислено), 7,39 (найдено). 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 6,88-7/02, м, 3Н; 3,92, т, 2Н; 2,49, с, 3Н; 2,15, т, 2Н; 1,69, п, 2Н; 1,20-1,59, м, 8Н.(4-Benzyloxy-2-acetylphenyl) -8-hydroxyactanoic acid (16.75 g, 0.0435 mol) and ethyl acetate (85 ml) were placed in a 300 ml Parr reactor. 10% palladium on activated carbon (0.75 g) is added, after which the reactor is sealed, the air is evacuated and hydrogen is supplied. The reactor was heated at 50 ° C. overnight, opened and another 0.5 g of 10% palladium on activated carbon was added. The reactor is again hermetically sealed, air is pumped out and hydrogen is supplied. If the reaction mixture does not change, being at room temperature for two days, the reactor is opened again and the reaction mixture is filtered. The filtrate was concentrated in vacuo and the residue was again placed in a Parr reactor. The residue is then taken up in ethyl acetate and 10% palladium on activated carbon is added. The reactor is sealed, the air is evacuated, hydrogen is supplied and heated overnight at 50 ° C. After cooling to room temperature, the reactor was opened, palladium on activated carbon was filtered off, and the reaction mixture was concentrated in vacuo. The resulting yellow solid was recrystallized from water: ethyl alcohol (80:20). The yellow solid obtained by recrystallization is taken up in boiling hexane. Ethyl acetate was then added until a clear solution formed, and the mixture was allowed to cool to room temperature. The precipitated tan solid was isolated by filtration and dried in vacuo. 6.23 g of (4-hydroxy-2-acetylphenyl) -8-hydroxyactanoic acid are obtained. Analysis data for compound 57. Melting point: 112-115 ° C. Combustion analysis:% C: 65.31 (calculated), 65.32 (found); % H: 7.48 (calculated), 7.39 (found). 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 6.88-7 / 02, m, 3H; 3.92, t, 2H; 2.49, s, 3H; 2.15, t, 2H; 1.69, p, 2H; 1.20-1.59, m, 8H.
Получение соединения 81Getting connection 81
Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-метилоктановой кислотыPreparation of 8- (4-benzyloxyphenoxy) -2-methyl-octanoic acid ethyl ester
Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 14,0 г этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,03778 моль, 1 экв.) помещают в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем добавляют 80 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества. Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К полученной смеси добавляют 19,84 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 4,70 мл иодметана (0,07556 моль, 2,0 экв). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 3 дней. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Полученный остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют в вакууме до образования остатка. Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6%). Данные ВЭЖХ показывают, что полученный продукт содержит небольшое количество исходного вещества вместе с некоторым количеством диметилированного побочного продукта. Промежуточный продукт не исследуют и используют без очистки на следующей стадии.The transfer of liquids is carried out in airless conditions. 14.0 g of 8- (4-benzyloxyphenoxy) octanoic acid ethyl ester (0.03778 mol, 1 equiv.) Was placed in a flame-dried 250 ml three-necked round-bottom flask equipped with a stirrer. Then add 80 ml of anhydrous THF. The mixture is stirred for 10 minutes or until the solid is completely dissolved. The mixture is cooled to -78 ° C in a bath with a mixture of dry ice with acetone. To the resulting mixture was added 19.84 ml of a 2 M solution of lithium diisopropylamide (0.03967 mol, 1.05 equiv.). Adding is done slowly, keeping the temperature below -60 ° C. When the addition is complete, the mixture is stirred for 2.0 hours at -78 ° C, after which 4.70 ml of iodomethane (0.07556 mol, 2.0 eq) are slowly quenched. During addition, do not allow the temperature to rise above -50 ° C. The reaction mixture was allowed to slowly warm to room temperature and stirred for 3 days. The precipitate was filtered off from the solution and the supernatant was concentrated in vacuo to a residue. The resulting residue was taken up in 60 ml of ethyl acetate and treated with saturated sodium bicarbonate solution (50 ml) and saturated NaCl solution (50 ml). The ethyl acetate layer was dried with 4.5 g of anhydrous sodium sulfate and filtered. The organic layer was concentrated in vacuo to a residue. The final product is obtained in the form of a golden oil with a crude product yield of 9.10 g (yield 62.6%). HPLC data show that the resulting product contains a small amount of the starting material along with some dimethylated by-product. The intermediate product is not investigated and used without purification in the next stage.
Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и H2, как описано в способе получения соединения 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 81.The specified compound is debenzylated with Pd / C and H 2 as described in the method for producing compound 47. The resulting product is hydrolyzed by the methods described for compound 47 to give compound 81.
Выход равен 67,85%. Продукт представляет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна 67-70°С. Элементный анализ: теоретические значения С=67,65%, Н=8,33%; найдено С=67,56%, Н=8,56%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=0 (1С, 177,477); CAr-O (2С, 151,467 и 151,015 м.д.); СAr-Н (4С, 115,617 и 115,209 м.д.); CH2-CH2-O (1C, 67,939 м.д.); СН-СН3 (1С, 38,689 м.д.); -CH2- (5C, 33,211, 28,769, 26,645, 25,451 м.д.); СН-СН3 (1C, 16,944 м.д.).The yield is 67.85%. The product is a white solid. Mp equal to 67-70 ° C. Elemental analysis: theoretical values C = 67.65%, H = 8.33%; Found C = 67.56%, H = 8.56%. Quantitative analysis of 13 C NMR (DMSO-d 6 ): C = 0 (1C, 177.477); C Ar- O (2C, 151.467 and 151.015 ppm); C Ar -H (4C, 115.617 and 115.209 ppm); CH 2 -CH 2 -O (1C, 67.939 ppm); CH-CH 3 (1C, 38.689 ppm); -CH 2 - (5C, 33.211, 28.769, 26.645, 25.451 ppm); CH-CH 3 (1C, 16.944 ppm).
Получение соединения 82Getting connection 82
Получение этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)-2-(пропен-2-ил)октановой кислотыPreparation of 8- (4-benzyloxyphenoxy) -2- (propen-2-yl) octanoic acid ethyl ester
Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 10,0 г этилового эфира 8-(4-бензилоксифенокси)октановой кислоты (0,02699 моль, 1 экв.) помещают в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Затем добавляют 100 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества.The transfer of liquids is carried out in airless conditions. 10.0 g of 8- (4-benzyloxyphenoxy) octanoic acid ethyl ester (0.02699 mol, 1 equiv.) Was placed in a flame-dried 250 ml three-necked round-bottom flask equipped with a stirrer. Then add 100 ml of anhydrous THF. The mixture is stirred for 10 minutes or until the solid is completely dissolved.
Смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси добавляют 24,0 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,0480 моль, 1,7 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2,0 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 5,0 мл аллилбромида (0,0577 моль, 2,13 экв.). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Полученный остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Затем этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют до образования масла и хроматографируют на силикагеле, используя смесь гексанов с этилацетатом (9:1). Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом, равным 7,0 г (выход 64,1%). Количественный анализ 13С ЯМР (CDCl3-d): С=O (1С, 175,462 М.д.); СBn (6С, 137,188, 128,36, 127,679, 127,298 м.д.); СAr-O (2С, 153,303 и 152,683 м.д.); СAr-Н (4С, 115,607 и 115,176 м.д.); =СН2 (1С, 116,484 м.д.); (СН2)Bn (1С, 70,439 м.д.); (CH2-CH2-O (1С, 68,242 м.д.); СН3-СН2-O (1С, 59,946 м.д.); СН-СН3 (1С, 45,147 м.д.); -СН2-СН= (1С, 36,404 м.д.); -СН2- (5С, 31,609, 29,121, 27,054, 25,745 м.д.); CH2-СН3 (1С, 14,221 м.д.).The mixture is cooled to -78 ° C in a bath with a mixture of dry ice with acetone. To the mixture was added 24.0 ml of a 2 M solution of lithium diisopropylamide (0.0480 mol, 1.7 equiv.). Adding is done slowly, keeping the temperature below -60 ° C. Upon completion of the addition, the mixture was stirred for 2.0 hours at −78 ° C., after which 5.0 ml of allyl bromide (0.0577 mol, 2.13 equiv.) Was slowly quenched. During addition, do not allow the temperature to rise above -50 ° C. The reaction mixture was allowed to slowly warm to room temperature and stirred for 16 hours. The precipitate was filtered off from the solution and the supernatant was concentrated in vacuo to a residue. The resulting residue was taken up in 60 ml of ethyl acetate and treated with saturated sodium bicarbonate solution (50 ml) and saturated NaCl solution (50 ml). Then, the ethyl acetate layer was dried with 4.5 g of anhydrous sodium sulfate and filtered. The organic layer was concentrated to an oil and chromatographed on silica gel using a mixture of hexanes and ethyl acetate (9: 1). The final product is obtained in the form of a golden oil with a yield of 7.0 g (yield 64.1%). Quantitative analysis of 13 C NMR (CDCl 3 -d): C = O (1C, 175.462 ppm); C Bn (6C, 137.188, 128.36, 127.679, 127.298 ppm); C Ar- O (2C, 153.303 and 152.683 ppm); C Ar -H (4C, 115.607 and 115.176 ppm); = CH 2 (1C, 116.484 ppm); (CH 2 ) Bn (1C, 70.439 ppm); (CH 2 —CH 2 —O (1C, 68.242 ppm); CH 3 —CH 2 —O (1C, 59.946 ppm); CH — CH 3 (1C, 45.147 ppm); - CH 2 -CH = (1C, 36,404 ppm); -CH 2 - (5C, 31,609, 29,121, 27,054, 25,745 ppm); CH 2 -CH 3 (1C, 14,221 ppm).
Указанное соединение дебензилируют при помощи Pd/C и Н2, как описано в способе получения соединения 47. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 82. Выход равен 67,66%. Продукт является белым твердым веществом. Т.пл. равна 98-100°С. Элементный анализ: теоретические значения С=69,36%, Н=8,90%, найдено С=69,33%, Н=8,96%. Количественный анализ 13С ЯМР (AMCO-d6): С=O (1С, 177,226); CAr-O (2С, 151,660 и 151,216 м.д.); СAr-Н (4С, 115/786 и 115,368 м.д.); CH2-CH2-O (1C, 67,908 м.д.); СН-СН2 (1С, 44,887 м.д.); -СН2- (5С, 34,341, 28,968, 27,071, 25,614 м.д.); CH-CH2 (1C, 32,060 м.д.); CH2-СН3 (1C, 20,312 м.д.); СН2-СН3 (1C, 14,007 м.д.).The specified compound is debenzylated with Pd / C and H 2 as described in the method for producing compound 47. The resulting product is hydrolyzed by the methods described for compound 47 to give compound 82. The yield is 67.66%. The product is a white solid. Mp equal to 98-100 ° C. Elemental analysis: theoretical values C = 69.36%, H = 8.90%, found C = 69.33%, H = 8.96%. Quantitative analysis of 13 C NMR (AMCO-d 6 ): C = O (1C, 177.226); C Ar- O (2C, 151.660 and 151.216 ppm); C Ar -H (4C, 115/786 and 115.368 ppm); CH 2 -CH 2 -O (1C, 67.908 ppm); CH-CH 2 (1C, 44.887 ppm); -CH 2 - (5C, 34.341, 28.968, 27.071, 25.614 ppm); CH-CH 2 (1C, 32.060 ppm); CH 2 -CH 3 (1C, 20.312 ppm); CH 2 -CH 3 (1C, 14.007 ppm).
Получение соединения 80Getting connection 80
Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)октановой кислотыPreparation of 8- (4-methoxyphenoxy) octanoic acid ethyl ester
В 500 мл трехгорлую круглодонную колбу помещают 14,90 г 4-метоксифенола (0,12 моль), 30,0 г 8-бромэтилоктаноата (0,1265 моль), 10,36 г карбоната калия (0,075 моль), 150 мл сухого ацетона и 2,5 мол.% иодида калия. Реакционную смесь помещают в атмосферу азота и нагревают с обратным холодильником в течение 2 дней. Гетерогенную смесь упаривают в вакууме до образования твердого остатка и смешивают с 600 мл используемых в равных частях воды и этилацетата. Две фазы разделяют и органический слой экстрагируют 3 н. раствором NaOH (3×150 мл). Органический слой еще раз экстрагируют насыщенным раствором NaCl. Затем органический слой сушат над безводным сульфатом магния и фильтруют. Затем органический раствор концентрируют до половины объема (~180 мл) и дополняют равным количеством гексана. Полученную смесь помещают на ночь в холодильник. Образовавшиеся кристаллы подвергают вакуумному фильтрованию и затем воздушной сушке. Продукт не анализируют и используют без очистки на следующих стадиях.14.90 g of 4-methoxyphenol (0.12 mol), 30.0 g of 8-bromoethyl octanoate (0.1265 mol), 10.36 g of potassium carbonate (0.075 mol), 150 ml of dry acetone are placed in a 500 ml three-necked round-bottom flask. and 2.5 mol% of potassium iodide. The reaction mixture was placed under nitrogen and heated under reflux for 2 days. The heterogeneous mixture is evaporated in vacuo until a solid residue is formed and mixed with 600 ml of water and ethyl acetate used in equal parts. The two phases are separated and the organic layer is extracted with 3 N. NaOH solution (3 × 150 ml). The organic layer was extracted again with saturated NaCl. Then the organic layer is dried over anhydrous magnesium sulfate and filtered. Then the organic solution is concentrated to half the volume (~ 180 ml) and supplemented with an equal amount of hexane. The resulting mixture was placed overnight in the refrigerator. The resulting crystals are subjected to vacuum filtration and then air drying. The product is not analyzed and used without purification in the following stages.
Получение этилового эфира 8-(4-метоксифенокси)-2-метил-октановой кислотыPreparation of 8- (4-methoxyphenoxy) -2-methyl-octanoic acid ethyl ester
Перенос жидкостей осуществляют в безвоздушных условиях. 14,0 г полученного выше соединения (0,03778 моль, 1 экв.) переносят в высушенную пламенем 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. Добавляют 80 мл безводного ТГФ. Смесь перемешивают в течение 10 минут или до полного растворения твердого вещества. Затем смесь охлаждают до -78°С на бане со смесью сухого льда с ацетоном. К смеси добавляют 19,84 мл 2 М раствора диизопропиламида лития (0,03967 моль, 1,05 экв.). Добавление производят медленно, поддерживая температуру ниже -60°С. Закончив добавление, смесь перемешивают в течение 2 часов при -78°С, после чего суспензию медленно гасят 4,70 мл иодметана (0,07556 моль, 2,0 экв.). Во время добавления не допускают повышения температуры выше -50°С. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивают в течение 16 часов. Из раствора отфильтровывают осадок и супернатант концентрируют в вакууме до образования остатка. Образовавшийся остаток поглощают 60 мл этилацетата и обрабатывают насыщенным раствором бикарбоната натрия (50 мл) и насыщенным раствором NaCl (50 мл). Этилацетатный слой сушат 4,5 г безводного сульфата натрия и фильтруют. Органический слой концентрируют в вакууме до образования остатка. Конечный продукт получают в виде золотистого масла с выходом сырого продукта, равным 9,10 г (выход 62,6 %). Данные ВЭЖХ показывают, что полученный продукт содержит небольшое количество исходного вещества вместе с некоторым количеством диметилированного побочного продукта. Промежуточный продукт не исследуют и используют без очистки на следующей стадии.The transfer of liquids is carried out in airless conditions. 14.0 g of the compound obtained above (0.03778 mol, 1 equiv.) Are transferred into a flame-dried 250 ml three-necked round bottom flask equipped with a stirrer. Add 80 ml of anhydrous THF. The mixture is stirred for 10 minutes or until the solid is completely dissolved. Then the mixture is cooled to -78 ° C in a bath with a mixture of dry ice with acetone. To the mixture was added 19.84 ml of a 2 M lithium diisopropylamide solution (0.03967 mol, 1.05 equiv.). Adding is done slowly, keeping the temperature below -60 ° C. When the addition is complete, the mixture is stirred for 2 hours at -78 ° C, after which 4.70 ml of iodomethane (0.07556 mol, 2.0 eq.) Are slowly quenched. During addition, do not allow the temperature to rise above -50 ° C. The reaction mixture was allowed to slowly warm to room temperature and stirred for 16 hours. The precipitate was filtered off from the solution and the supernatant was concentrated in vacuo to a residue. The resulting residue was taken up in 60 ml of ethyl acetate and treated with saturated sodium bicarbonate solution (50 ml) and saturated NaCl solution (50 ml). The ethyl acetate layer was dried with 4.5 g of anhydrous sodium sulfate and filtered. The organic layer was concentrated in vacuo to a residue. The final product is obtained in the form of a golden oil with a crude product yield of 9.10 g (yield 62.6%). HPLC data show that the resulting product contains a small amount of the starting material along with some dimethylated by-product. The intermediate product is not investigated and used without purification in the next stage.
Продукт получают в виде прозрачной жидкости, которую подвергают вакуумной перегонке при 140°С и давлении 1 мм Hg. Конечный выход после перегонки равен 55,38%.The product is obtained in the form of a clear liquid, which is subjected to vacuum distillation at 140 ° C and a pressure of 1 mm Hg. The final yield after distillation is 55.38%.
Количественный анализ 13С ЯМР (COCl3-d): C=O (1С, 176,508 м.д.); CAr-O (2С, 153,411 и 152,935 м.д.); СAr-Н (4С, 115,09 и 114,299 м.д.); СН2-СН2-O (1С, 68,186 м.д.); СН3-СН2-О (1С, 59,782); СН3О (1С, 55,339 м.д.); СН-СН3 (1С, 39,239 м.д.); -СН2- (5С, 33,465, 29,030, 26,888, 25,666 м.д.); СН-СН3 (1С, 16,835); СН2-СН3 (1С, 14,012 м.д.).Quantitative analysis of 13 C NMR (COCl 3 -d): C = O (1C, 176.508 ppm); C Ar- O (2C, 153.411 and 152.935 ppm); C Ar -H (4C, 115.09 and 114.299 ppm); CH 2 -CH 2 -O (1C, 68.186 ppm); CH 3 —CH 2 —O (1C, 59.782); CH 3 O (1C, 55.339 ppm); CH-CH 3 (1C, 39.239 ppm); -CH 2 - (5C, 33.465, 29.030, 26.888, 25.666 ppm); CH-CH 3 (1C, 16.835); CH 2 -CH 3 (1C, 14.012 ppm).
Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 80. Выход равен 82,3%. Продукт представляет собой не совсем белое твердое вещество. Т.пл. равна 71-73°С. Элементный анализ: теоретические значения С=68,55%, Н=8,63%; найдено С=68,04%, Н=8,65%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=O (1С, 177,668); CAr-O (2С, 153,243 и 152,773 м.д.); CAr-H (4С, 115,265 и 114,554 м.д.); СН2-СН2-O (1С, 67,818 м.д.); ОСН3 (1С, 55,305 м.д.); СН-СН3 (1С, 33,340 м.д.); -CH2- (5C, 33,340, 28,805, 26,742, 25,487 м.д.); СН-СН3 (1С, 17,075 м.д.)The resulting product is hydrolyzed by the methods described for compound 47 to give compound 80. The yield is 82.3%. The product is an off-white solid. Mp equal to 71-73 ° C. Elemental analysis: theoretical values C = 68.55%, H = 8.63%; Found C = 68.04%, H = 8.65%. Quantitative analysis of 13 C NMR (DMSO-d 6 ): C = O (1C, 177.668); C Ar- O (2C, 153.243 and 152.773 ppm); C Ar -H (4C, 115.265 and 114.554 ppm); CH 2 -CH 2 -O (1C, 67.818 ppm); OCH 3 (1C, 55.305 ppm); CH-CH 3 (1C, 33.340 ppm); -CH 2 - (5C, 33.340, 28.805, 26.742, 25.487 ppm); CH-CH 3 (1C, 17.075 ppm)
Получение соединения 69Getting connection 69
Этиловый эфир 8-(4-метоксифенокси)-2-метилоктановой кислоты получают вышеописанным способом. Полученный продукт гидролизуют способами, описанными для соединения 47, получая соединение 69.8- (4-Methoxyphenoxy) -2-methyl-octanoic acid ethyl ester was prepared as described above. The resulting product was hydrolyzed by the methods described for compound 47 to give compound 69.
Выход равен 74,6%. Продукт представляет собой белое твердое вещество. Т.пл. равна 96-97°С. Элементный анализ: теоретические значения С=67,65%, Н=8,33%, найдено С=67,74%, Н=8,44%. Количественный анализ 13С ЯМР (ДМСО-d6): С=O (1С, 174,628); CAr-O (2С, 153,291 и 152,798 м.д.); CAr-H (4С, 115,251 и 114,562 м.д.); СН2-СН2-О (1С, 67,844 м.д.); ОСН3 (1С, 55,301 м.д.); СН2-С=O (1C, 39,343 м.д.); -CH2- (5C, 33,747, 28,700, 25,545, 24,575 м.д.).The yield is 74.6%. The product is a white solid. Mp equal to 96-97 ° C. Elemental analysis: Theoretical values C = 67.65%, H = 8.33%, found C = 67.74%, H = 8.44%. Quantitative analysis of 13 C NMR (DMSO-d 6 ): C = O (1C, 174.628); C Ar- O (2C, 153.291 and 152.798 ppm); C Ar -H (4C, 115.251 and 114.562 ppm); CH 2 -CH 2 -O (1C, 67.844 ppm); OCH 3 (1C, 55.301 ppm); CH 2 -C = O (1C, 39.343 ppm); -CH 2 - (5C, 33.747, 28.700, 25.545, 24.575 ppm).
Получение соединения 88Getting connection 88
Смесь 6,525 г (40 ммоль) карзалама, 10,26 г (44 ммоль) 9-бром-1-нонанола и 5,30 г (50 ммоль) карбоната натрия в 30 мл N,N-диметилацетамида (ДМА) нагревают при 75-80°С в течение 3 часов. Данные ТСХ (элюент: этилацетат/гептан) свидетельствуют об окончании реакции. Реакционную смесь осторожно выливают в смесь воды со льдом. Образовавшееся белое твердое вещество перемешивают в течение 1 часа. Указанное вещество собирают на фильтре из спекшегося стекла, промывают водой, гексаном и сушат в вакууме, получая 9,80 г 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона (80%). К суспензии 6,11 г (20 ммоль) 3-(9-гидроксинонил)-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона в 10 мл N,N-диметилацетамида при комнатной температуре добавляют 20,4 мл (20,4 ммоль) раствора трет-бутоксида калия в ТГФ. Прозрачный коричневый раствор становится очень густым. Добавляют дополнительное количество ДМА (10 мл) и нагревают смесь при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 минут. Затем добавляют 0,664 г (4 ммоль) иодида калия, после чего по каплям добавляют 3,34 г (20 ммоль) этилбромацетата. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа, охлаждают примерно до 35°С и выливают в смесь воды со льдом. Образуется камедь. Супернатант сливают и добавляют свежую воду. Указанную процедуру повторяют дважды. Камедь растворяют в ТГФ. Раствор в ТГФ осторожно выливают в гексан. Образовавшееся твердое вещество собирают, промывают гексаном и сушат в вакууме. Масса требуемого продукта равна 2,36 г (35%). ВЭЖХ: 4,39 мин; Т.пл. 125-128°С. 1H ЯМР (ДМСО-d6): δ 1,25 (12Н, м), 1,37 (2Н, м), 1,53 (2Н, м), 3,28 (2Н, м), 3,36 (2Н, т), 4,85 (2Н, с), 7,07 (2Н, м), 7,45 (1Н, т), 7,88 (1Н, д), 8,70 (1Н, т). Элементный анализ: вычислено для C18H27NO5: С, 64,07; Н, 8,07; N, 4,15; найдено: С, 63,71; Н, 8,29; N, 4,31.A mixture of 6.525 g (40 mmol) of carzalam, 10.26 g (44 mmol) of 9-bromo-1-nonanol and 5.30 g (50 mmol) of sodium carbonate in 30 ml of N, N-dimethylacetamide (DMA) is heated at 75- 80 ° C for 3 hours. TLC data (eluent: ethyl acetate / heptane) indicate completion of the reaction. The reaction mixture was carefully poured into a mixture of ice water. The resulting white solid was stirred for 1 hour. The specified substance was collected on a sintered glass filter, washed with water, hexane and dried in vacuo to obtain 9.80 g of 3- (9-hydroxynonyl) -2H-1,3-benzoxazine-2,4 (3H) -dione (80% ) To a suspension of 6.11 g (20 mmol) of 3- (9-hydroxynonyl) -2H-1,3-benzoxazin-2,4 (3H) -dione in 10 ml of N, N-dimethylacetamide was added 20.4 ml at room temperature (20.4 mmol) solution of potassium tert-butoxide in THF. The clear brown solution becomes very thick. An additional amount of DMA (10 ml) was added and the mixture was heated at the boiling point under reflux for 5 minutes. Then, 0.664 g (4 mmol) of potassium iodide is added, after which 3.34 g (20 mmol) of ethyl bromoacetate are added dropwise. The reaction mixture was refluxed for 1 hour, cooled to about 35 ° C and poured into a mixture of ice water. Gum forms. The supernatant is drained and fresh water added. The specified procedure is repeated twice. Gum is dissolved in THF. The solution in THF is carefully poured into hexane. The resulting solid was collected, washed with hexane and dried in vacuo. The mass of the desired product is 2.36 g (35%). HPLC: 4.39 min; Mp 125-128 ° C. 1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ 1.25 (12H, m), 1.37 (2H, m), 1.53 (2H, m), 3.28 (2H, m), 3.36 (2H, t), 4.85 (2H, s), 7.07 (2H, m), 7.45 (1H, t), 7.88 (1H, d), 8.70 (1H, t) . Elemental analysis: calculated for C 18 H 27 NO 5 : C, 64.07; H, 8.07; N, 4.15; Found: C, 63.71; H, 8.29; N, 4.31.
Получение соединения 93Getting connection 93
Температура плавления: 57-59°С. Анализ сжиганием: %С: 72,69 (вычислено), 72,75 (найдено); %Н: 9,15 (вычислено), 9,44 (найдено).Melting point: 57-59 ° C. Combustion analysis:% C: 72.69 (calculated), 72.75 (found); % H: 9.15 (calculated), 9.44 (found).
Получение соединения 94Preparation of Compound 94
Температура плавления: 59-61°С. Анализ сжиганием: %С: 71,16 (вычислено), 71,08 (найдено); %Н: 8,53 (вычислено), 8,99 (найдено).Melting point: 59-61 ° C. Analysis by burning:% C: 71.16 (calculated), 71.08 (found); % H: 8.53 (calculated), 8.99 (found).
Получение соединения 95Preparation of Compound 95
Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Россия.This compound is provided by Contact Service Company, Moscow, Russia.
Получение соединения 96Preparation of Compound 96
Данное соединение предоставлено фирмой Contact Service Company, Москва, Россия.This compound is provided by Contact Service Company, Moscow, Russia.
Получение соединения 97Preparation of Compound 97
Данное соединение предоставлено фирмой Sigma Company of Milwaukee, WI.This compound is provided by Sigma Company of Milwaukee, WI.
Пример 2. Кальцитонин лосося (sCT) - пероральное введениеExample 2. Salmon calcitonin (sCT) - oral administration
Лекарственные композиции для перорального введения (РО), содержащие соединение доставляющего агента и кальцитонин лосося (sCT) в деионизированной воде, получают в соответствии с приведенной ниже таблицей 2. В частности, 450 мг соединения доставляющего агента добавляют к 2,0 мл воды. Обычно используют натриевую соль указанного соединения, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, для чего к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор) и разбавляют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7 (около 6,5- 8,5), добавляя NaOH или HCl. К полученному раствору добавляют 90 мкг sCT из исходного раствора sCT (раствор с концентрацией 2 мг/мл получают, добавляя к sCT 1000% фосфатного буфера с рН 4, после чего полученную смесь оставляют в покое примерно на 10-20 минут и периодически осторожно переворачивают). Затем добавляют воду, доводя общий объем до 3,0 мл (указанное количество может изменяться в зависимости от растворимости соединения доставляющего агента). Лекарственные растворы, содержащие соединения доставляющих агентов 3 и 15, необходимо дополнительно развести водой, причем для достижения требуемого количества соединения доставляющего агента и sCT вводимые конечные дозы соответственно должны быть равны 3 и 2 мл/кг. Конечные дозы соединения доставляющего агента, sCT и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 2.Dosage formulations for oral administration (PO) containing a delivery agent compound and salmon calcitonin (sCT) in deionized water are prepared in accordance with Table 2 below. In particular, 450 mg of a delivery agent compound is added to 2.0 ml of water. Usually, the sodium salt of the indicated compound is used, or the free acid is converted to the sodium salt, for which one equivalent of sodium hydroxide (1.0 N solution) is added to the stirred solution and diluted with water. The solution is subjected to vortex mixing, heated (about 37 ° C) and treated with ultrasound. The pH is adjusted to about 7 (about 6.5-8.5) by adding NaOH or HCl. To the resulting solution was added 90 μg sCT from the sCT stock solution (a solution with a concentration of 2 mg / ml was obtained by adding 1000% phosphate buffer with pH 4 to the sCT, after which the resulting mixture was left alone for about 10-20 minutes and periodically carefully turned over) . Water is then added, bringing the total volume to 3.0 ml (the indicated amount may vary depending on the solubility of the compound of the delivery agent). Medicinal solutions containing the compounds of the delivery agents 3 and 15 must be further diluted with water, and in order to achieve the required amount of the compounds of the delivery agent and sCT, the final doses to be administered should be 3 and 2 ml / kg, respectively. The final doses of the delivery agent compound, sCT and dose volumes are shown in Table 2 below.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration, a French Rusch 8 catheter 11 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 10, 20, 30, 60 и 90 минутам. Содержание sCT в сыворотке определяют при помощи тест-набора EIA (набор № EIAS-6003 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Результаты сравнивают с базовыми значениями, полученными в промежуток времени = 0. Результаты, полученные у животных в каждой экспериментальной группе, усредняют для каждого промежутка времени. Усредненные максимальные значения приведены в нижеследующей таблице 2.Blood samples are taken from the caudal artery at intervals of usually 0, 10, 20, 30, 60 and 90 minutes. Serum sCT levels were determined using an EIA test kit (kit No. EIAS-6003 from Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). The results are compared with the baseline values obtained in the time interval = 0. The results obtained in animals in each experimental group are averaged for each time interval. The average maximum values are shown in the following table 2.
Пример 3. Рекомбинантный гормон роста человека (rhGH) - пероральное введениеExample 3. Recombinant human growth hormone (rhGH) - oral administration
Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд, содержащие соединение доставляющего агента и rhGH, получают в фосфатном буфере, смешивая компоненты. Для получения раствора соединения доставляющего агента обычно используют натриевую соль указанного соединения либо свободную кислоту превращают в натриевую соль. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в фосфатном буфере, причем для получения натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с исходным раствором rhGH (раствор с концентрацией 15 мг rhGH/мл получают, смешивая в виде порошков 15 мг rhGH, 75 мг D-маннита, 15 мг глицина и 3,39 мг двухосновного фосфата натрия и разбавляя 2% глицерином), после чего полученный раствор разводят до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Показатель рН при необходимости доводят до 7-8,5. Конечные дозы соединений доставляющих агентов и rhGH приведены в нижеследующей таблице 3.Medicinal solutions for oral administration (PO) through a gastric tube containing the compound of the delivery agent and rhGH are prepared in phosphate buffer by mixing the components. To obtain a solution of a compound of a delivery agent, the sodium salt of said compound is usually used, or the free acid is converted to the sodium salt. A solution of the delivery agent compound is usually prepared in phosphate buffer, and one equivalent of sodium hydroxide (1.0 N solution) is added to the stirred solution to obtain the sodium salt. Final drug solutions are prepared by mixing a solution of the delivery agent compound with the rhGH stock solution (a solution with a concentration of 15 mg rhGH / ml is obtained by mixing in powder form 15 mg rhGH, 75 mg D-mannitol, 15 mg glycine and 3.39 mg dibasic sodium phosphate and diluting with 2% glycerol), after which the resulting solution was diluted to the required volume (usually 3.0 ml). The pH is adjusted to 7-8.5 if necessary. The final doses of the compounds of the delivery agents and rhGH are shown in the following table 3.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration, a French Rusch 8 catheter 11 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Объединяют пять проб, взятых в каждый промежуток времени (за исключением проб, для которых указано стандартное отклонение (SD) и стандартная ошибка (SE)). Количественное определение концентрации rhGH в сыворотке производят при помощи набора для иммуноанализа rhGH (набор № K1F4015 фирмы Genzyme Corporation Inc., Cambridge, MA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Максимальные концентрации для каждой группы приведены в нижеследующей таблице 3.Blood samples are taken from the caudal artery at intervals of usually equal to 15, 30, 45, 60 and 90 minutes. Five samples taken at each time interval are combined (with the exception of samples for which the standard deviation (SD) and standard error (SE) are indicated). Serum rhGH concentrations are quantified using the rhGH immunoassay kit (kit No. K1F4015 from Genzyme Corporation Inc., Cambridge, MA). The baseline values obtained in previous studies are almost zero. The maximum concentrations for each group are given in the following table 3.
Пример 4. Гепарин - Пероральное/внутрикишечное введениеExample 4. Heparin - Oral / Intestinal Administration
Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и гепариннатрий фармакопеи США (USP), получают в 25% водном растворе пропиленгликоля. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента или свободную кислоту превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Соединение доставляющего агента и гепарин (примерно 166-182 ед./мг (обычно 166,9 ед./мг)) смешивают в виде сухих порошков, подвергая их вихревому перемешиванию. Сухую смесь растворяют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликоля, подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7 (6,5-8,5) водным раствором NaOH (2 н. раствор). Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком, получая прозрачный раствор. Конечный объем доводят примерно до 3,0 мл. Конечные дозы соединения доставляющего агента, гепарина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 4.Medicinal solutions for oral administration (PO) through a gastric tube and / or intestinal administration (IC) containing a compound of a delivery agent and USP heparin sodium (USP) are prepared in a 25% aqueous propylene glycol solution. The sodium salt of the delivery agent compound is used or the free acid is converted to the sodium salt by adding one equivalent of sodium hydroxide. The compound of the delivery agent and heparin (about 166-182 units / mg (usually 166.9 units / mg)) are mixed in the form of dry powders, subjecting them to vortex mixing. The dry mixture is dissolved in a 25% (v / v) aqueous propylene glycol solution, vortexed and placed in an ultrasonic treatment device (about 37 ° C). The pH is adjusted to about 7 (6.5-8.5) with an aqueous solution of NaOH (2N solution). The drug solution is treated with ultrasound to obtain a clear solution. The final volume is adjusted to approximately 3.0 ml. The final doses of the compound of the delivery agent, heparin and the volume of doses are shown in the following table 4.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не кормят в течение 24 часов, после чего животных анестезируют, вводя им внутримышечно гидрохлорид кетамина (88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующего средства для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения (РО) через желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 275-350 g are not fed for 24 hours, after which the animals are anesthetized by intramuscular injection of ketamine hydrochloride (88 mg / kg) immediately before administration of the drug and, if necessary, re-administer the anesthetic to ensure necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration (PO) through a gastric tube, a 11 cm long Rusch 8 French catheter corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip is used. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The drug solution is delivered by pressing the syringe plunger. For intra-intestinal injection (IC), a French Rusch 8 catheter 7.5 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip. A catheter is inserted into the colon through the anus so that the tube is completely invisible. The drug solution is slowly fed into the colon, by pressing the plunger of the syringe.
Пробы цитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введения кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часа после введения лекарственного раствора. Всасывание гепарина определяют по увеличению времени свертывания крови, измеряемого с учетом времени появления частично активированного тромбопластина (АРТТ) в соответствии со способом, описанным Henry, J.B., Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Philadelphia, PA, W.B. Saunders (1979). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, равны примерно 20 секундам. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени, при этом наибольшие из указанных средних значений (т.е. усредненный максимум АРТТ) приведены в нижеследующей таблице 4.Citrate blood samples are taken by heart puncture, which is done after the administration of ketamine (88 mg / kg), usually 0.25, 0.5, 1.0 and 1.5 hours after administration of the drug solution. Heparin absorption is determined by the increase in blood coagulation time, measured taking into account the time of appearance of partially activated thromboplastin (ARTT) in accordance with the method described by Henry, J.B., Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, Philadelphia, PA, W.B. Saunders (1979). The baseline values obtained in previous studies are approximately 20 seconds. The results obtained in animals in each group are averaged for each time period, while the largest of the indicated average values (i.e., the average maximum of ARTT) are shown in Table 4 below.
Таблица 4. Гепарин пероральное/внутрикишечное введениеTable 4. Heparin oral / intestinal administration
Пример 5. Низкомолекулярный гепарин (LMWH) - пероральное/внутрикишечное введениеExample 5. Low molecular weight heparin (LMWH) - oral / intestinal administration
Лекарственные композиции для перорального введения (РО) и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и низкомолекулярный гепарин (LMWH), получают в 25% водном растворе пропиленгликоля. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента или свободную кислоту превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Соединение доставляющего агента и LMWH (парнапарин, 91 ед./мг, средняя молекулярная масса около 5000, фирмы Opocrin, Modena, Italy) (обычно 90-105 ед./мг, средняя молекулярная масса около 5000) смешивают в виде сухих порошков, подвергая их вихревому перемешиванию. Сухую смесь растворяют в 25% (об./об.) водном растворе пропиленгликоля, подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С) для получения прозрачного раствора. Показатель рН доводят примерно до 7 (6,5-8,5) 2 н. водным раствором NaOH. Лекарственный раствор обрабатывают ультразвуком, получая прозрачный раствор. Конечный объем доводят примерно до 3,0 мл. Конечные дозы соединения доставляющего агента, LMWH и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 5.Dosage formulations for oral administration (PO) and / or intestinal administration (IC) containing a delivery agent compound and low molecular weight heparin (LMWH) are prepared in a 25% aqueous propylene glycol solution. The sodium salt of the delivery agent compound is used or the free acid is converted to the sodium salt by adding one equivalent of sodium hydroxide. The compound of the delivery agent and LMWH (parnaparin, 91 units / mg, average molecular weight of about 5000, Opocrin, Modena, Italy) (typically 90-105 units / mg, average molecular weight of about 5000) are mixed in the form of dry powders, exposing their vortex mixing. The dry mixture is dissolved in a 25% (v / v) aqueous propylene glycol solution, vortexed and placed in an ultrasonic treatment device (about 37 ° C.) to obtain a clear solution. The pH is adjusted to approximately 7 (6.5-8.5) 2 N. aqueous NaOH solution. The drug solution is treated with ultrasound to obtain a clear solution. The final volume is adjusted to approximately 3.0 ml. The final doses of the compound of the delivery agent, LMWH and the volume of doses are shown in the following table 5.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 275-350 г не кормят в течение 24 часов, после чего животных анестезируют, вводя им внутримышечно гидрохлорид кетамина (88 мг/кг) непосредственно перед введением лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующего средства для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения (РО) через желудочный зонд используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 длиной 7,5 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Катетер вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 275-350 g are not fed for 24 hours, after which the animals are anesthetized by intramuscular injection of ketamine hydrochloride (88 mg / kg) immediately before administration of the drug and, if necessary, re-administer the anesthetic to ensure necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration (PO) through a gastric tube, a 11 cm long Rusch 8 French catheter corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip is used. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The drug solution is delivered by pressing the syringe plunger. For intra-intestinal injection (IC), a French Rusch 8 catheter 7.5 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip. A catheter is inserted into the colon through the anus so that the tube is completely invisible. The drug solution is slowly fed into the colon, by pressing the plunger of the syringe.
Пробы нитратной крови отбирают пункцией в сердце, которую делают после введения кетамина (88 мг/кг), обычно через 0,5, 1,0, 2,0, 3,0 и 4,0 часа после введения лекарственного раствора. Всасывание LMWH определяют по увеличению концентрации LMWH в плазме, измеряемой при помощи анти-Ха-анализа гепарина с использованием набора для тестирования антител к фактору Ха CHROMOSTRATETM (фирмы Organon Teknika Corporation, Durham, NC). Величины концентрации LMWH в плазме, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени и строят график средних значений концентрации LMWH в плазме в зависимости от времени. Усредненные максимальные значения концентрации LMWH в плазме приведены в нижеследующей таблице 5.Samples of nitrate blood are taken by puncture in the heart, which is done after the introduction of ketamine (88 mg / kg), usually after 0.5, 1.0, 2.0, 3.0 and 4.0 hours after administration of the drug solution. LMWH absorption is determined by an increase in plasma LMWH concentration measured using the anti-X a heparin-analysis using a set of test antibodies to factor Xa CHROMOSTRATE TM (firm Organon Teknika Corporation, Durham, NC) . Plasma LMWH concentration values obtained from animals in each group are averaged for each time interval and a graph of average plasma LMWH concentration values versus time is plotted. The averaged maximum plasma concentrations of LMWH are shown in Table 5 below.
Пример 6. Параддитовидный гормон (РТН 1-34) - пероральное/внутрикишечное введениеExample 6. Paraditic hormone (PTH 1-34) - oral / intestinal administration
Лекарственные растворы для перорального введения (РО) через желудочный зонд и/или внутрикишечного введения (IC), содержащие соединение доставляющего агента и остатки 1-34 паращитовидного гормона человека (РТН), получают в деионизированной воде. Для получения раствора соединения доставляющего агента используют натриевую соль указанного соединения, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в воде, для чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Конечные лекарственные растворы получают, смешивая раствор соединения доставляющего агента с исходным раствором РТН (обычно в воде в концентрации 5 мг РТН/мл) и разбавляя его до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Показатель рН при необходимости доводят примерно до 7-8,5. Конечные дозы соединения доставляющего агента, РТН и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 6.Medicinal solutions for oral administration (PO) through a gastric tube and / or intestinal administration (IC) containing a delivery agent compound and residues 1-34 of human parathyroid hormone (PTH) are prepared in deionized water. To obtain a solution of the compound of the delivery agent, use the sodium salt of the specified compound, or the free acid is converted into the sodium salt. A solution of the compound of the delivery agent is usually obtained in water, for which, upon receipt of the sodium salt, one equivalent of sodium hydroxide (1.0 N solution) is added to the stirred solution. Final drug solutions are prepared by mixing a solution of the delivery agent compound with a stock PTH solution (usually in water at a concentration of 5 mg PTH / ml) and diluting it to the required volume (usually 3.0 ml). The pH, if necessary, is adjusted to about 7-8.5. The final doses of the compound of the delivery agent, PTH and dose volumes are shown in the following table 6.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения через желудочный зонд (РО) используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца. Для внутрикишечного введения (IC) используют французский катетер Rusch 8 или 6 длиной 7,5 см, соответствующий шприцу с концом в виде пипетки Эппендорфа. Шприц заполняют лекарственным раствором, подавая раствор через трубку катетера. Катетер вытирают досуха. На конец трубки наносят гель K-J, избегая соприкосновения с отверстием трубки, после чего трубку вводят в ободочную кишку через анальное отверстие так, чтобы трубка была совершенно не видна. Лекарственный раствор медленно подают в ободочную кишку, нажимая на поршень шприца, после чего катетер удаляют.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration through a gastric tube (PO), a French Rusch 8 catheter 11 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette tip. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger. For intra-intestinal (IC) administration, a French Rusch 8 or 6 catheter 7.5 cm long is used, corresponding to a syringe with an end in the form of an Eppendorf pipette. The syringe is filled with a drug solution, feeding the solution through a catheter tube. The catheter is wiped dry. K-J gel is applied to the end of the tube, avoiding contact with the tube opening, after which the tube is inserted into the colon through the anus so that the tube is completely invisible. The drug solution is slowly fed into the colon, pressing the plunger of the syringe, after which the catheter is removed.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам при пероральном введении и 0, 10, 20, 30, 60 и 90 минутам при внутрикишечном введении. Количественное определение концентрации РТН в сыворотке производят при помощи набора для радиоиммуноанализа РТН (набор № RIK 6101 фирмы Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени. Максимальные значения средних концентраций (то есть усредненные максимальные концентрации РТН в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 6.Blood samples are taken from the caudal artery at intervals of usually 0, 15, 30, 45, 60, and 90 minutes when administered orally and 0, 10, 20, 30, 60, and 90 minutes when administered intradermally. Serum PTH concentrations are quantitated using a PTH radioimmunoassay kit (kit No. RIK 6101 from Peninsula Laboratories, Inc., San Carlos, CA). The baseline values obtained in previous studies are almost zero. The results obtained in animals in each group are averaged for each period of time. The maximum mean concentrations (i.e., the average maximum serum PTH concentrations) are shown in Table 6 below.
Пример 7. Интерферон - пероральное введениеExample 7. Interferon - oral administration
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента и интерферон человека (IFN), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Раствор соединения доставляющего агента обычно получают в воде, для чего при получении натриевой соли к перемешиваемому раствору добавляют один эквивалент гидроксида натрия (1,0 н. раствор). Затем смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7,0-8,5 водным раствором NaOH. Смесь подвергают вихревому перемешиванию, получая однородную суспензию или раствор, при необходимости обрабатывают ультразвуком и нагревают. В случае необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и рН вновь доводят примерно до 7,0-8,5. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с исходным раствором IFN (в концентрации примерно от 22,0 до 27,5 мг/мл в физиологическом растворе с фосфатным буфером) и разводят до требуемого объема (обычно 3,0 мл). Конечные дозы соединения доставляющего агента, IFN и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 7.Medicinal solutions containing a compound of a delivery agent and human interferon (IFN) are prepared in deionized water. The free acid of the delivery agent compound is converted to the sodium salt by adding one equivalent of sodium hydroxide. A solution of the compound of the delivery agent is usually obtained in water, for which, upon receipt of the sodium salt, one equivalent of sodium hydroxide (1.0 N solution) is added to the stirred solution. Then the mixture is subjected to vortex mixing and placed in an ultrasonic treatment device (about 37 ° C). The pH is adjusted to about 7.0-8.5 with an aqueous solution of NaOH. The mixture is subjected to vortex mixing, obtaining a homogeneous suspension or solution, if necessary, treated with ultrasound and heated. If necessary, additional NaOH is added to achieve uniform solubility and the pH is again adjusted to about 7.0-8.5. A solution of the compound of the delivery agent is mixed with the initial IFN solution (at a concentration of about 22.0 to 27.5 mg / ml in physiological saline with phosphate buffer) and diluted to the desired volume (usually 3.0 ml). The final doses of the delivery agent compound, IFN and dose volumes are shown in the following table 7.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For this purpose, a French Rusch 8 catheter with a length of 11 cm is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette end. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0, 15, 30, 45, 60 и 90 минутам. Количественное определение концентрации IFN в сыворотке производят при помощи набора для иммуноанализа альфа-IFN человека Cytoscreen (№ в каталоге КНС4012 фирмы Biosource International, Camarilio, CA). Базовые значения, полученные в предшествующих исследованиях, практически равны нулю. Результаты, полученные у животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени. Максимальные значения средних концентраций (то есть усредненные максимальные концентрации IFN в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 7.Blood samples are taken from the caudal artery at intervals of usually 0, 15, 30, 45, 60 and 90 minutes. Serum IFN concentration was quantitated using the Cytoscreen human alpha-IFN immunoassay kit (catalog number KHC4012 from Biosource International, Camarilio, CA). The baseline values obtained in previous studies are almost zero. The results obtained in animals in each group are averaged for each period of time. The maximum mean concentrations (i.e., the averaged maximum serum IFN concentrations) are shown in Table 7 below.
Пример 8. Инсулин - пероральное введениеExample 8. Insulin - oral administration
Композиции для перорального введения (РО), содержащие соединение доставляющего агента и инсулин человека с противоионами цинка (минимум 26 ед./мг, фирмы Calbiochem - Novabiochem Corp., La Jolla, CA), получают в деионизированной воде. Обычно, 500 мг соединения доставляющего агента добавляют к 1,5 мл воды. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, для чего к полученному раствору при перемешивании добавляют один эквивалент гидроксида натрия. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7-8,5, добавляя NaOH или HCl. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и показатель рН повторно доводят примерно до 7-8,5. Затем добавляют воду до общего объема около 2,4 мл и подвергают раствор вихревому перемешиванию. К полученному раствору добавляют примерно 1,25 мг инсулина из исходного раствора инсулина (раствор с концентрацией 15 мг/мл получают из 0,5409 г инсулина и 18 мл деионизированной воды, доводя рН до 8,15 при помощи HCl и NaOH, причем для получения прозрачного раствора используют 40 мл концентрированной HCl, 25 мл 10 н. раствора NaOH и 50 мл 1 н. раствора NaOH) и подвергают вихревому перемешиванию. Конечные дозы соединения доставляющего агента, инсулина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 8.Compositions for oral administration (PO) containing a combination of a delivery agent and human insulin with zinc counterions (minimum 26 u / mg, Calbiochem - Novabiochem Corp., La Jolla, Calif.) Are prepared in deionized water. Typically, 500 mg of a delivery agent compound is added to 1.5 ml of water. The free acid of the compound of the delivery agent is converted into the sodium salt, for which one equivalent of sodium hydroxide is added to the resulting solution with stirring. The solution is subjected to vortex mixing, then heated (about 37 ° C) and treated with ultrasound. The pH is adjusted to about 7-8.5 by adding NaOH or HCl. If necessary, additional NaOH is added to achieve uniform solubility, and the pH is re-adjusted to about 7-8.5. Then add water to a total volume of about 2.4 ml and subject the solution to vortex mixing. About 1.25 mg of insulin from the initial insulin solution is added to the resulting solution (a solution with a concentration of 15 mg / ml is obtained from 0.5409 g of insulin and 18 ml of deionized water, adjusting the pH to 8.15 with HCl and NaOH, moreover, to obtain a clear solution is used 40 ml of concentrated HCl, 25 ml of 10 N. NaOH solution and 50 ml of 1 N. NaOH solution) and is subjected to vortex mixing. The final doses of the compound of the delivery agent, insulin and the volume of doses are shown in the following table 8.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для перорального введения лекарственного средства используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For oral administration of the drug, a French Rusch 8 catheter 11 cm long is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette end. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 15, 30, 60, 120 и 180 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определяют при помощи тест-набора для анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа вносят изменения для оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе. Концентрации инсулина человека в сыворотке (мкед./мл) измеряют для каждого промежутка времени у каждого из пяти животных в каждой экспериментальной группе. Пять значений для каждого промежутка времени усредняют и строят график концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. (В предшествующих экспериментах не были обнаружены измеряемые концентрации инсулина человека после перорального введения одного инсулина человека). Максимальные значения (пики) и величины площади под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 8.Blood samples are taken from the caudal artery at intervals of usually equal to 15, 30, 60, 120 and 180 minutes. Serum insulin levels are determined using an ELISA insulin assay kit (kit No. DSL-10-1600 from Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), with changes to the standard analysis procedure to optimize the sensitivity and linear range of the standard a curve showing the volumes and concentrations of samples used in this analysis. Human serum insulin concentrations (mced / ml) are measured for each time period in each of the five animals in each experimental group. Five values for each time interval are averaged and a graph of serum insulin concentration versus time is plotted. (In previous experiments, measurable concentrations of human insulin were not detected after oral administration of human insulin alone). The maximum values (peaks) and area under the curve (AUC) are shown in table 8 below.
Пример 9. Инсулин - легочное введениеExample 9. Insulin - pulmonary administration
Лекарственные композиции, содержащие соединение доставляющего агента и инсулин человека, получают в воде. В частности, к 1,5 мг соединения доставляющего агента добавляют деионизированную воду, доводя объем до 1,0 мл, и подвергают раствор вихревому перемешиванию. Используют натриевую соль соединения доставляющего агента, либо свободную кислоту превращают в натриевую соль, для чего к полученному раствору при перемешивании добавляют один эквивалент гидроксида натрия (10 н. раствор) и разбавляют водой. Раствор подвергают вихревому перемешиванию, затем нагревают (около 37°С) и обрабатывают ультразвуком. Показатель рН доводят примерно до 7,0-8,5, добавляя NaOH или HCl. К полученному раствору добавляют 75 мкл исходного раствора инсулина человека (2 мг/мл). (Исходный раствор получают следующим образом. К 0,02 г инсулина добавляют 3 мл раствора HCl с рН 3,0 в деионизированной воде. Показатель рН полученного раствора понижают до 3,0 (примерно 2,6), добавляя HCl и NaOH, пока раствор не становится прозрачным. Затем показатель рН повышают до 7,6, используя NaOH и HCl. Конечный объем доводят до 10 мл деионизированной водой с рН 7,5. Конечный рН равен 7,59). Затем добавляют воду до достижения общего объема, равного 2,0 мл, после чего сосуд с раствором несколько раз осторожно переворачивают. Конечные дозы соединения доставляющего агента, инсулина и объемы дозы приведены в нижеследующей таблице 9.Medicinal compositions containing a compound of a delivery agent and human insulin are prepared in water. In particular, deionized water is added to 1.5 mg of the delivery agent compound, bringing the volume to 1.0 ml, and the solution is vortexed. The sodium salt of the compound of the delivery agent is used, or the free acid is converted to the sodium salt, for which one equivalent of sodium hydroxide (10 N solution) is added to the resulting solution with stirring and diluted with water. The solution is subjected to vortex mixing, then heated (about 37 ° C) and treated with ultrasound. The pH is adjusted to about 7.0-8.5 by adding NaOH or HCl. To the resulting solution was added 75 μl of a stock solution of human insulin (2 mg / ml). (Stock solution is prepared as follows. To 0.02 g of insulin, add 3 ml of a solution of HCl with a pH of 3.0 in deionized water. The pH of the resulting solution is reduced to 3.0 (about 2.6) by adding HCl and NaOH, while the solution does not become transparent. Then the pH is increased to 7.6 using NaOH and HCl. The final volume is adjusted to 10 ml with deionized water with a pH of 7.5. The final pH is 7.59). Then water is added until a total volume of 2.0 ml is reached, after which the vessel with the solution is carefully turned over several times. The final doses of the compound of the delivery agent, insulin and dose volumes are shown in the following table 9.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего им вводят кетамин (44 мг/кг) и хлорпромазин (3,0 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза (используют такое же количество кетамина и 1,5 мг/кг хлорпромазина). Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Контрольной группе из пяти животных вводят только инсулин. Трахеальный инстиллятор для грызунов, оснащенный лампой (фирмы Perm Century, Inc., Pittsburgh, PA), заполняют лекарственным раствором и вводят в горло так, чтобы игла вошла в трахею (с визуальной проверкой). Подачу лекарственного раствора осуществляют нажатием на поршень.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are given ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (3.0 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia (use the same amount of ketamine and 1.5 mg / kg of chlorpromazine). An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. A control group of five animals was administered only insulin. A tracheal installer for rodents equipped with a lamp (Perm Century, Inc., Pittsburgh, PA) is filled with a drug solution and inserted into the throat so that the needle enters the trachea (with visual inspection). The supply of the drug solution is carried out by pressing the piston.
Пробы крови отбирают у всех животных из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 5, 15, 30, 60 и 120 минутам. Уровни инсулина в сыворотке определяют при помощи тест-набора для анализа инсулина методом ELISA (набор № DSL-10-1600 фирмы Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), причем в стандартную процедуру анализа вносят изменения для оптимизации чувствительности и линейного диапазона стандартной кривой, отображающей объемы и концентрации проб, используемых в данном анализе. Концентрации инсулина в сыворотке (мкед./мл) измеряют для каждого промежутка времени у каждого из пяти животных в каждой экспериментальной группе. Пять значений для каждого промежутка времени усредняют и строят график концентрации инсулина в сыворотке в зависимости от времени. Ниже приведены соотношения площадей под кривой (AUC) для экспериментальной группы и контрольной группы. В нижеследующей таблице приведены также соотношения максимальных концентраций инсулина в сыворотке (Cmax) для экспериментальной группы и контрольной группы.Blood samples are taken from all animals from the caudal artery at intervals of usually equal to 5, 15, 30, 60 and 120 minutes. Serum insulin levels are determined using an ELISA insulin assay kit (kit No. DSL-10-1600 from Diagnostic Systems Laboratories, Inc., Webster, TX), with changes to the standard analysis procedure to optimize the sensitivity and linear range of the standard a curve showing the volumes and concentrations of samples used in this analysis. Serum insulin concentrations (mced / ml) are measured for each time period in each of the five animals in each experimental group. Five values for each time interval are averaged and a graph of serum insulin concentration versus time is plotted. Below are the ratios of the areas under the curve (AUC) for the experimental group and the control group. The following table also shows the ratios of the maximum serum insulin concentrations (Cmax) for the experimental group and the control group.
Пример 10. Кромолин - пероральное введениеExample 10. Cromoline - oral administration
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента (полученного по примеру 1) и динатриевую соль кромолина (кромолин) (фирмы Sigma Chemical Co., St. Louis, МО), получают в деионизированной воде. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7-7,5 водным раствором NaOH. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком и нагревание. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с кромолином из исходного раствора (175 мг кромолина/мл в деионизированной воде, показатель рН при необходимости доводят примерно до 7,0, добавляя NaOH или HCl, после чего исходный раствор хранят в замороженном виде завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и нагревают примерно до 30°С). Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком и нагревание. Показатель рН доводят примерно до 7-8 водным раствором NaOH. Затем раствор разбавляют водой до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использования хранят завернутым в фольгу. Конечные дозы соединения доставляющего агента и кромолина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 10.Medicinal solutions containing a compound of a delivery agent (prepared according to Example 1) and cromolin disodium salt (cromolin) (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO) are prepared in deionized water. The free acid of the delivery agent compound is converted to the sodium salt by adding one equivalent of sodium hydroxide. The resulting mixture is subjected to vortex mixing and placed in a device for ultrasonic treatment (about 37 ° C). The pH is adjusted to about 7-7.5 with an aqueous solution of NaOH. If necessary, additional NaOH is added to achieve uniform solubility and the pH is re-adjusted. The mixture is subjected to vortex mixing to obtain a homogeneous solution, if necessary, performing sonication and heating. The solution of the compound of the delivery agent is mixed with cromoline from the initial solution (175 mg of cromolin / ml in deionized water, the pH value is adjusted to about 7.0, if necessary, adding NaOH or HCl, after which the initial solution is stored frozen wrapped in foil, before use thawed and heated to approximately 30 ° C). The mixture is subjected to vortex mixing to obtain a homogeneous solution, if necessary, performing sonication and heating. The pH is adjusted to about 7-8 with an aqueous solution of NaOH. The solution is then diluted with water to the required volume (usually 2.0 ml) and concentration and stored wrapped in foil until use. The final doses of the compound of the delivery agent and cromolin and the volume of doses are shown in the following table 10.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are anesthetized with ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For this purpose, a French Rusch 8 catheter with a length of 11 cm is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette end. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы крови отбирают из хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 1,0 и 1,5 часам. Концентрации кромолина в сыворотке измеряют при помощи ВЭЖХ. Образцы получают следующим образом: 100 мкл сыворотки помещают вместе с 100 мкл 3 н. раствора HCl и 300 мкл этилацетата в пробирку Эппендорфа. Содержимое пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. 200 мкл этилацетатного слоя переносят в пробирку Эппендорфа, содержащую 67 мкл 0,1 М раствора фосфатного буфера. Содержимое пробирки подвергают вихревому перемешиванию в течение 10 минут и затем центрифугируют в течение 10 минут со скоростью 10000 оборотов/мин. Слой фосфатного буфера переносят в пробирку для ВЭЖХ и вводят в колонку для ВЭЖХ (колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2 мм Keystone Exsil Amino, 5 мкм, 100 
Результаты, полученные для животных в каждой группе, усредняют для каждого промежутка времени, при этом наибольшие средние значения (т.е. усредненный максимум концентрации кромолина в сыворотке) приведены в нижеследующей таблице 10.The results obtained for animals in each group are averaged for each period of time, with the highest average values (i.e., the average maximum concentration of cromoline in serum) are given in Table 10 below.
Таблица 10. Кромолин - пероральное введениеTable 10. Cromoline - oral administration
Пример 11. Даптомицин - пероральное введениеExample 11. Daptomycin - oral administration
Лекарственные растворы, содержащие соединение доставляющего агента и даптомицин (Cubist Pharmaceuticals, Cambridge, МА.), получают в 0,9% изотоническом растворе. Для получения раствора соединения доставляющего агента или используют натриевую соль указанного соединения, или свободную кислоту превращают в его натриевую соль. Свободную кислоту соединения доставляющего агента превращают в натриевую соль, добавляя один эквивалент гидроксида натрия. Полученную смесь подвергают вихревому перемешиванию и помещают в устройство для ультразвуковой обработки (около 37°С). Показатель рН доводят примерно до 7,0-7,5 водным раствором HCl или NaOH. При необходимости добавляют дополнительное количество NaOH для достижения однородной растворимости и повторно регулируют показатель рН. Смесь подвергают вихревому перемешиванию для получения однородного раствора, при необходимости производя обработку ультразвуком. Раствор соединения доставляющего агента смешивают с даптомицином из исходного раствора (200 мг даптомицина/мл в 0,9% изотоническом растворе, и при необходимости показатель рН доводят до 6,0-7,0 с помощью NaOH или HCl). Исходный раствор хранят в замороженном виде (-20°С) завернутым в фольгу, перед использованием размораживают и постепенно нагревают примерно до 25°С. Смесь доставляющего агента и даптомицина подвергают вихревому перемешиванию при низкой скорости, получая однородный раствор. Показатель рН доводят примерно до 7,0-7,5 водным раствором NaOH. Раствор разводят 0,9% изотоническим раствором до требуемого объема (обычно 2,0 мл) и концентрации и до использования хранят завернутым в фольгу. Конечные дозы соединения доставляющего агента, даптомицина и объемы доз приведены в нижеследующей таблице 11.Medicinal solutions containing the compound of the delivery agent and daptomycin (Cubist Pharmaceuticals, Cambridge, MA.), Receive in 0.9% isotonic solution. To obtain a solution of the compound of the delivery agent, either the sodium salt of the compound is used, or the free acid is converted into its sodium salt. The free acid of the delivery agent compound is converted to the sodium salt by adding one equivalent of sodium hydroxide. The resulting mixture is subjected to vortex mixing and placed in a device for ultrasonic treatment (about 37 ° C). The pH is adjusted to about 7.0-7.5 with an aqueous solution of HCl or NaOH. If necessary, additional NaOH is added to achieve uniform solubility and the pH is re-adjusted. The mixture is subjected to vortex mixing to obtain a homogeneous solution, if necessary, processing with ultrasound. A solution of the delivery agent compound is mixed with daptomycin from the stock solution (200 mg of daptomycin / ml in 0.9% isotonic solution, and if necessary, the pH is adjusted to 6.0-7.0 with NaOH or HCl). The initial solution is stored frozen (-20 ° C) wrapped in foil, thawed before use and gradually heated to about 25 ° C. The mixture of the delivery agent and daptomycin is subjected to vortex mixing at low speed, obtaining a homogeneous solution. The pH is adjusted to about 7.0-7.5 with an aqueous solution of NaOH. The solution was diluted with a 0.9% isotonic solution to the required volume (usually 2.0 ml) and concentration and stored wrapped in foil until use. The final doses of the compound of the delivery agent, daptomycin and dose volumes are shown in the following table 11.
Обычно используют описанные ниже методики определения требуемой дозы и отбора проб. Самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела 200-250 г не кормят в течение 24 часов, после чего их анестезируют кетамином (44 мг/кг) и хлорпромазином (1,5 мг/кг) за 15 минут до введения лекарственного средства и при необходимости производят повторное введение анестезирующих средств для обеспечения необходимой степени наркоза. Экспериментальной группе из пяти животных вводят один из лекарственных растворов. Для этой цели используют французский катетер Rusch 8 длиной 11 см, соответствующий 1 мл шприцу с концом в виде пипетки. Шприц заполняют лекарственным раствором, пропуская раствор через катетер, который затем вытирают досуха. Катетер вводят в пищевод, оставляя перед резцами конец трубки длиной 1 см. Подачу раствора осуществляют нажатием на поршень шприца.Typically, the procedures described below for determining the required dose and sampling are used. Male Sprague-Dawley rats weighing 200-250 g are not fed for 24 hours, after which they are anesthetized with ketamine (44 mg / kg) and chlorpromazine (1.5 mg / kg) 15 minutes before drug administration and, if necessary re-administer anesthetics to provide the necessary degree of anesthesia. An experimental group of five animals was administered one of the drug solutions. For this purpose, a French Rusch 8 catheter with a length of 11 cm is used, corresponding to a 1 ml syringe with a pipette end. The syringe is filled with a drug solution by passing the solution through a catheter, which is then wiped dry. A catheter is inserted into the esophagus, leaving a 1 cm long tube end in front of the incisors. The solution is supplied by pressing the syringe plunger.
Пробы гепаринизированной крови крыс отбирают из вентральной хвостовой артерии через промежутки времени, равные обычно 0,25, 0,5, 0,75, 1,0, 2,0 и 4,0 часам, после введения лекарственного раствора и хранят на льду. Пробы крови центрифугируют со скоростью 11500 оборотов/мин в течение 4 минут при 4°С, получая плазму (супернатант), которую хранят при -70°С. Концентрации даптомицина в плазме измеряют при помощи изократической ВЭЖХ с обращенной фазой, выдерживая образцы во время анализа при температуре 4°С. Базовые значения, полученные при исследовании чистой плазмы, равны нулю.Samples of rat heparinized blood were taken from the ventral caudal artery at intervals of usually equal to 0.25, 0.5, 0.75, 1.0, 2.0, and 4.0 hours after the administration of the drug solution and stored on ice. Blood samples are centrifuged at a speed of 11500 rpm for 4 minutes at 4 ° C, obtaining a plasma (supernatant), which is stored at -70 ° C. Plasma daptomycin concentrations were measured by reverse phase isocratic HPLC, maintaining the samples during analysis at 4 ° C. The basic values obtained in the study of pure plasma are zero.
Значения концентрации даптомицина в крови, полученные у животных в каждой экспериментальной группе, усредняют для каждого промежутка времени. Усредненные максимальные значения концентрации даптомицина (Сmax) и площади, соответствующие уровню даптомицина, под кривой (AUC) приведены в нижеследующей таблице 11.The values of the concentration of daptomycin in the blood obtained from animals in each experimental group are averaged for each period of time. The average maximum values of the concentration of daptomycin (C max ) and the area corresponding to the level of daptomycin under the curve (AUC) are shown in the following table 11.
Таблица 11. Даптомицин - пероральное введениеTable 11. Daptomycin - oral administration
* AUC = Общая AUC (0 → ∞)* AUC = Total AUC (0 → ∞)
Приведенные выше патенты, заявки на патент, методы испытания и публикации полностью включены в данное описание изобретения в качестве ссылки.The above patents, patent applications, test methods and publications are fully incorporated into this description by reference.
Из приведенного выше подробного описания изобретения специалистам в данной области должны быть очевидны многие модификации настоящего изобретения. Все подобные модификации входят в объем прилагаемой формулы изобретения.From the above detailed description of the invention, many modifications of the present invention should be apparent to those skilled in the art. All such modifications are included in the scope of the attached claims.
Claims (23)
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US16380699P | 1999-11-05 | 1999-11-05 | |
| US60/163,806 | 1999-11-05 | ||
| US23183600P | 2000-09-06 | 2000-09-06 | |
| US60/231,836 | 2000-09-06 | ||
| US60/237,233 | 2000-10-02 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002114698A RU2002114698A (en) | 2003-11-27 |
| RU2300516C2 true RU2300516C2 (en) | 2007-06-10 |
Family
ID=36607617
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002114698/04A RU2300516C2 (en) | 1999-11-05 | 2000-11-06 | Phenoxycarboxylic acid compounds and compositions for delivery of active substances |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2300516C2 (en) |
-
2000
- 2000-11-06 RU RU2002114698/04A patent/RU2300516C2/en not_active Application Discontinuation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| CASSEBAUM H. «Radiopaque media based on iodinated phenoxy fatty acids» CHEMICAL ABSTRACTS, 1964, vol 56, p.7191. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2002114698A (en) | 2003-11-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU783157B2 (en) | Phenoxy carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents | |
| US7951971B1 (en) | Phenoxy carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents | |
| US7977506B2 (en) | Compounds and compositions for delivering active agents | |
| EP1317419B1 (en) | Cyanophenoxy carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents | |
| US6900344B2 (en) | Method of preparing alkylated salicylamides via a dicarboxylate intermediate | |
| US7138546B2 (en) | Compounds and compositions for delivering active agents | |
| US7495030B2 (en) | (5-(2-hydroxy-4-chlorobenzoyl) aminovaleric acid and salts thereof and compositions containing the same for delivering active agents | |
| KR20030083725A (en) | Compositions for delivering bisphosphonates | |
| EP1448509B1 (en) | Method of preparing phenoxy alkanoic acids and salts thereof via a dicarboxylate intermediate | |
| RU2300516C2 (en) | Phenoxycarboxylic acid compounds and compositions for delivery of active substances | |
| US7279597B1 (en) | Phenyl amine carboxylic acid compounds and compositions for delivering active agents |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20060310 |
|
| FZ9A | Application not withdrawn (correction of the notice of withdrawal) |
Effective date: 20060608 |