RU2131217C1

RU2131217C1 - Method for diagnosing gastrointestinal food allergy

Info

Publication number: RU2131217C1
Application number: RU94041112A
Authority: RU
Inventors: О.А. Субботина; И.И. Балаболкин; Л.И. Аруин; С.Т. Пелех; А.А. Шарков
Original assignee: Субботина Ольга Александровна; Балаболкин Иван Иванович; Аруин Леонид Иосифович; Пелех Сергей Тихонович; Шарков Андрей Александрович; Научно-исследовательский институт педиатрии Российской академии медицинских наук
Priority date: 1994-11-09
Filing date: 1994-11-09
Publication date: 1999-06-10
Also published as: RU94041112A

Abstract

FIELD: medicine. SUBSTANCE: method involves taking samples of jejunum mucosa, dying the bioplate and counting the number of degranulated and undegranulated fat cells. The degranulated-to-undegranulated cell number ratio is determined. The ratio being grown up, gastrointestinal form of food allergy is considered to be the case. EFFECT: enhanced accuracy of food allergy diagnosis. 3 tbl

Description

Область техники. Изобретение, относящееся к медицине, может быть использовано как в аллергологии, так и в гастроэнтерологии; представляет собой способ диагностики гастроинтестинальной пищевой аллергии и способ оценки эффективности лечения. The field of technology. The invention relating to medicine can be used both in allergology and in gastroenterology; is a method for diagnosing gastrointestinal food allergies and a method for evaluating the effectiveness of treatment.

Уровень техники. Известен способ /1, 4/ диагностики пищевой аллергии, заключающийся в определении уровня общего IgE и специфических E антител в сыворотке крови, повышение которых доказывает наличие аллергического заболевания у больного. Однако IgE антитела бывают повышенными при аллергических заболеваниях, сопровождающихся поражением кожи, легких и желудочно-кишечного тракта. Кроме того, повышение уровня общего IgE в сыворотке крови обнаруживается лишь у 80% обследуемых больных пищевой аллергией, а специфические IgE антитела - у 71% больных. Это связано с тем, что в сыворотке крови обнаруживаются только циркулирующие в крови антитела, в то время как большая их часть находится в органе "мишени" /1/. The prior art. The known method / 1, 4 / diagnosis of food allergies, which consists in determining the level of total IgE and specific E antibodies in blood serum, the increase of which proves the presence of an allergic disease in a patient. However, IgE antibodies are elevated in allergic diseases, accompanied by damage to the skin, lungs and gastrointestinal tract. In addition, an increase in the level of total IgE in serum is found only in 80% of the examined patients with food allergies, and specific IgE antibodies in 71% of patients. This is due to the fact that only antibodies circulating in the blood are found in the blood serum, while most of them are located in the target organ / 1 /.

Прототипом настоящего изобретения является нанесение аллергена на слизистую оболочку тощей кишки больным, страдающим пищевой аллергией, и определение морфологических показателей /эозинофилов, межэпителиальных лимфоцитов, тучных клеток/ до и после нанесения аллергенов. /2, 4/. The prototype of the present invention is the application of an allergen to the mucous membrane of the jejunum of patients suffering from food allergies, and the determination of morphological parameters / eosinophils, interepithelial lymphocytes, mast cells / before and after application of allergens. / 2, 4 /.

Недостатком данного метода является то, что при нанесении 1 мл водного раствора аллергена на слизистую оболочку кишки или желудка, развиваются не только местные /отек, петехии, гиперемия/, но и общие реакции на аллерген, такие как шок, бронхоспазм, крапивница и т.д. /2, 4/. Поэтому данный метод небезопасен для здоровья обследуемых больных. The disadvantage of this method is that when applying 1 ml of an aqueous solution of the allergen to the mucous membrane of the intestine or stomach, not only local (edema, petechiae, hyperemia) develops, but also general reactions to the allergen, such as shock, bronchospasm, urticaria, etc. d. / 2, 4 /. Therefore, this method is unsafe for the health of the examined patients.

Сущность заявленного способа состоит в том, что в отличие от известного вводится новый диагностический критерий - коэффициент дегрануляции тучных клеток, позволяющий снизить дозу диагностикума в 10 раз и предотвратить развитие возможных осложнений, угрожаемых жизни больного. The essence of the claimed method lies in the fact that, in contrast to the known method, a new diagnostic criterion is introduced - a mast cell degranulation coefficient, which allows to reduce the diagnosticum dose by 10 times and prevent the development of possible complications that threaten the patient’s life.

Задачей изобретения является повышение точности диагностики пищевой аллергии с исключением общих реакций организма на введение аллергена. The objective of the invention is to improve the accuracy of diagnosis of food allergies with the exception of the general reactions of the body to the introduction of an allergen.

Изменение коэффициента дегрануляции до и после нанесения аллергена в контрольной группе и в группе больных гастроинтестинальной пищевой аллергией показано в табл. 1 (I - контрольная группа, n = 8, Iа - коэффициент дегрануляции тучных клеток до нанесения аллергена, Iб - после разведения 1:10; II - группа больных гастроинтестинальной пищевой аллергией, n = 14, IIa - коэффициент дегрануляции тучных клеток до и IIб - после нанесения аллергена, разведение 1:10). The change in the degranulation coefficient before and after application of the allergen in the control group and in the group of patients with gastrointestinal food allergy is shown in Table. 1 (I - control group, n = 8, Ia - mast cell degranulation coefficient before allergen application, Ib - after 1:10 dilution; II - gastrointestinal food allergy patient group, n = 14, IIa - mast cell degranulation coefficient before and IIb - after applying the allergen, dilution 1:10).

Общее количество тучных клеток до и после нанесения аллергена у больных гастроинтестинальной пищевой аллергией в мм² приведено в табл.2 (I - больной К., 10 лет, диагноз: пищевая гастроинтестинальная аллергия, хронический гастродуоденит, распространенный нейродермит, Ia - общее количество тучных клеток до и Iб - после нанесения аллергена; II - больная Г., 9 лет, диагноз: пищевая гастроинтестинальная аллергия, хронический гастродуоденит, реактивный панкреатит, распространенный нейродермит, бронхиальная астма, среднетяжелое течение, IIa - общее количество тучных клеток до и IIб - после нанесения аллергена в мм²; III - больная В., 14 лет, диагноз: пищевая гастроинтестинальная аллергия, хронический гастродуоденит, распространенный нейродермит, синдром вторичной малабсорбции, IIIa - общее количество тучных клеток до и IIIб - после нанесения аллергена).The total number of mast cells before and after application of the allergen in patients with gastrointestinal food allergy in mm ^{2 is} given in Table 2 (I - patient K., 10 years old, diagnosis: food gastrointestinal allergy, chronic gastroduodenitis, common neurodermatitis, Ia - total number of mast cells before and IB - after applying the allergen; II - patient G., 9 years old, diagnosis: food gastrointestinal allergy, chronic gastroduodenitis, reactive pancreatitis, common neurodermatitis, bronchial asthma, moderate course, IIa - total GUSTs mast cells before and IIb - after application of the allergen in mm ^2; III - patient V., 14 years old, diagnosis: gastrointestinal food allergy, chronic gastroduodenitis, neurodermatitis common secondary malabsorption syndrome, IIIa - the total number of mast cells before and IIIb - after applying an allergen).

Коэффициент дегрануляции тучных клеток до и после нанесения аллергена у больных гастроинтестинальной пищевой аллергией данв табл.3 (те же больные, коэффициент дегрануляции тучных клеток до - Ia, IIa, IIIa - и после - Iб, IIб, IIIб - нанесения аллергена). The mast cell degranulation coefficient before and after application of the allergen in patients with gastrointestinal food allergy is given in Table 3 (the same patients, the mast cell degranulation coefficient before - Ia, IIa, IIIa - and after - Ib, IIb, IIIb - application of the allergen).

Сведения, подтверждающие эффективность изобретения. Information confirming the effectiveness of the invention.

Результаты проведенного исследования показали, что из второй группы детей больных гастроинтестинальной пищевой аллергией лишь у 5 /43,25%/ отмечено увеличение числа тучных клеток, у 2 /13,5 %/ показатель оставался без изменения, а у 5 /43,25%/ зарегистрировано понижение их числа. В то время как коэффициент дегрануляции достоверно увеличился у всех обследованных больных, в контрольной группе не замечено достоверных изменений общего числа и коэффициента дегрануляции тучных клеток /таблица 1/. В таблицах 2 и 3 приведены конкретные примеры изменения общего числа и коэффициента дегрануляции тучных клеток у трех больных. Во время исследования на нанесение аллергена каких-либо местных или общих реакций не отмечалось ни в первой, ни во второй группах. The results of the study showed that of the second group of children with gastrointestinal food allergies, only 5 / 43.25% / showed an increase in the number of mast cells, 2 / 13.5% / the indicator remained unchanged, and 5 / 43.25% / registered decrease in their number. While the degranulation coefficient significantly increased in all examined patients, no significant changes in the total number and mast cell degranulation coefficient were observed in the control group / table 1 /. Tables 2 and 3 give specific examples of changes in the total number and mast cell degranulation coefficient in three patients. During the allergen application study, no local or general reactions were observed in either the first or second groups.

Поставленная цель достигается тем, что на слизистую оболочку тощей кишки наносят разведение аллергена 1: 10 в количестве 1,0 мл и определяют количество дегранулированных и недегранулированных тучных клеток до и после аппликации аллергена и по коэффициенту дегрануляции тучных клеток судят об аллергической реакции на аллерген. This goal is achieved by the fact that a dilution of 1: 10 allergen in the amount of 1.0 ml is applied to the mucous membrane of the jejunum and the number of degranulated and non-granulated mast cells is determined before and after application of the allergen and the allergen reaction is judged by the mast cell degranulation coefficient.

Для определения количества тучных клеток кусочки слизистой оболочки тощей кишки фиксировали в растворе Карнуа, окрашивали 0,5% толуидиновым синим при pH 0,5 в течение 30 минут /3/. To determine the number of mast cells, pieces of the jejunum mucosa were fixed in Carnoy's solution, stained with 0.5% toluidine blue at pH 0.5 for 30 minutes / 3 /.

Нами исследовано 44 биоптата слизистой оболочки тощей кишки. Контрольную группу составили 8 человек, которые не страдали аллергическими заболеваниями и у которых в процессе гастроэнтерологического обследования со стороны желудочно-кишечного тракта изменений не обнаружено. Вторая группа - больные дети (14 человек), страдающие пищевой аллергией к белкам коровьего молока, заболевание было подтверждено данными анамнеза, кожными тестами /прик-тест/ и повышенным содержанием IgE антител. We studied 44 biopsy samples of the jejunum mucosa. The control group consisted of 8 people who did not suffer from allergic diseases and who did not find any changes in the gastrointestinal tract during the gastroenterological examination. The second group - sick children (14 people), suffering from food allergies to cow's milk proteins, the disease was confirmed by anamnesis, skin tests / prik-test / and an increased content of IgE antibodies.

Во время эндоскопического исследования бралась биопсия тощей кишки до и после нанесения аллергена в количестве 1,0, содержащего 1000 PNU белка коровьего молока. В биоптатах тощей кишки определялось общее количество тучных клеток из них количество дегранулированных и недегранулированных клеток в 1 мм², а по их соотношению определялся коэффициент дегрануляции тучных клеток.During an endoscopic examination, a biopsy of the jejunum was taken before and after application of the allergen in an amount of 1.0 containing 1000 PNU of cow's milk protein. In biopsies of the jejunum, the total number of mast cells was determined, of which the number of degranulated and non-granulated cells was 1 mm ² , and the ratio of mast cell degranulation was determined by their ratio.

Список литературы
1. Воронцов И. М., Маталыгина О.А. Болезни, связанные с пищевой сенсибилизацией у детей. Л., 1986.List of references
1. Vorontsov I. M., Matalygina O.A. Diseases associated with food sensitization in children. L., 1986.

2. Субботина О.А. Аллергические реакции к белкам злаков. Автореф. дис. канд. мед. наук, 1991. 2. Subbotina O.A. Allergic reactions to cereal proteins. Abstract. dis. Cand. honey. Sciences, 1991.

3. Eneback L. Mast cells in rat gastrointestinal mucosa // Acta Pathol. Microbiol. Icund. - 1966. - vol. 66 - p. 289 - 306. 3. Eneback L. mast cells in rat gastrointestinal mucosa // Acta Pathol. Microbiol. Icund. - 1966. - vol. 66 - p. 289 - 306.

4. Reimann H.I., Ring I., Ultsch B., Wendt P. Iutragastral provocation under endoscopie contral (IPEC) in food allergy: mast cells and histamine changes in gastric mucosa // Clinical Allergy, 1985, vol. 15, p. 195 - 202. 4. Reimann H.I., Ring I., Ultsch B., Wendt P. Iutragastral provocation under endoscopie contral (IPEC) in food allergy: mast cells and histamine changes in gastric mucosa // Clinical Allergy, 1985, vol. 15, p. 195 - 202.

Claims

A method for the diagnosis of gastrointestinal food allergy by biopsy of the jejunum mucosa, staining of the biopsy specimen and cell counting, characterized in that the biopsy specimen is stained with toluidine blue, counting the number of degranulated and non-granulated mast cells, determining the ratio of the number of degranulated to non-granulated and setting the ratio of degranulated to non-granulated normal a form of food allergy.