RU2010028C1 - Method of skin integument regeneration in critically burnt patients - Google Patents
Method of skin integument regeneration in critically burnt patients Download PDFInfo
- Publication number
- RU2010028C1 RU2010028C1 SU4954512A RU2010028C1 RU 2010028 C1 RU2010028 C1 RU 2010028C1 SU 4954512 A SU4954512 A SU 4954512A RU 2010028 C1 RU2010028 C1 RU 2010028C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- keratinocytes
- skin
- cells
- wound
- microcarriers
- Prior art date
Links
Landscapes
- Materials For Medical Uses (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии термической травмы, и может быть использовано при лечении обширных глубоких ожогов. The invention relates to medicine, namely to surgery for thermal injury, and can be used in the treatment of extensive deep burns.
Известны способы восстановления кожного покрова у тяжелообожженных. Одним из них является способ восстановления кожного покрова, включающий нанесение на раневую поверхность культуры кератиноцитов в виде суспензии клеток (Khalfan H. , Aziz Hamza A. , Saeed T. et al. Novel method of skin substitution in plastic surgery. // Burns-1989. v. 15, n. 5-p. 335-337). Известен также способ восстановления кожного покрова, заключающийся в трансплантации многослойного клеточного пласта аутологичных кератиноцитов на рану (Gallico G. G. , O'Connor N. E. , Compton C. C. et al. Permanent coverage of large burn wounds with autologous cultured human epithelium. // N. Engl. J. Med. -1984- v. 311, n8-p488-451). Кроме этого, известен способ восстановления кожного покрова посредством сложного комплекса, состоящего из синтетической подложки из коллагена, на которой находится пласт аутологичных кератиноцитов (патент США N 88/08303, кл. А 61 К 37/00). Общими недостатками указанных способов являются высокая сложность и трудоемкость технологии, сравнительно низкая эффективность им высокая стоимость. Known methods of restoring the skin in seriously burned. One of them is a method of restoring the skin, including applying keratinocytes in the form of a suspension of cells to the wound surface of the culture (Khalfan H., Aziz Hamza A., Saeed T. et al. Novel method of skin substitution in plastic surgery. // Burns-1989 . v. 15, n. 5-p. 335-337). There is also a method of restoring the skin, which consists in transplanting a multilayer cell layer of autologous keratinocytes into a wound (Gallico GG, O'Connor NE, Compton CC et al. Permanent coverage of large burn wounds with autologous cultured human epithelium. // N. Engl. J Med. -1984-v. 311, n8-p488-451). In addition, there is a method of restoring the skin through a complex complex consisting of a synthetic collagen substrate on which is a layer of autologous keratinocytes (US patent N 88/08303, CL A 61 K 37/00). Common disadvantages of these methods are the high complexity and complexity of the technology, their relatively low efficiency and high cost.
Наиболее близким к заявленному по технической сущности является способ восстановления кожного покрова у тяжелообожженных посредством трансплантации культуры аутологичных кератиноцитов в виде суспензии клеток (Khalfan H. , Aziz Hamza A. , Saeed T. et al. Novel method of skin substitution in plastic surgery. Burns - 1989. - v. 15, n. 5-p 335-337). Согласно этому способу, кератиноциты из биоптата кожи обожженного получают посредством обработки последней коллагеназой, после чего осуществляют культивирование клеток на подложке во флаконах с плоским дном. После достижения конфлюентности культуры клеток (примерно на 7-e сутки), осуществляют пересев клеток, для чего клеточный пласт обрабатывают смесью трипсина и ЭДТА и пересевают в новые флаконы в виде суспензии, и далее выращивают вторичную культуру кератиноцитов. На 14-е сутки, после достижения конфлюентности пассируемой культуры клеток, последняя подвергается воздействию раствора трипсина, что приводит к образованию суспензии из единичных клеток - кератиноцитов, которые собирают центрифугированием при 600 об/мин в течение 10 мин и ресуспендируют в стерильной пробирке в бессывороточной среде, далее выдерживают в термостате при 37,0оС с содержанием в атмосфере 5% СО2 в течение 20 мин. После этого культура клеток готова к трансплантации. Суспензию клеток распределяют по поверхности ран. Сверху раны покрывают стерильным неадгезивным покрытием.Closest to the claimed technical essence is a method of restoring the skin of seriously burned by transplanting a culture of autologous keratinocytes in the form of a suspension of cells (Khalfan H., Aziz Hamza A., Saeed T. et al. Novel method of skin substitution in plastic surgery. Burns - 1989. - v. 15, n. 5-p 335-337). According to this method, keratinocytes from a biopsy specimen of calcined skin are obtained by treatment with the latter collagenase, after which cells are cultured on a substrate in flat-bottomed vials. After reaching the confluence of the cell culture (approximately on the 7th day), the cells are reseeded, for which the cell layer is treated with a mixture of trypsin and EDTA and reseeded in new vials in the form of a suspension, and then a secondary keratinocyte culture is grown. On the 14th day, after the confluence of the passivated cell culture is achieved, the latter is exposed to trypsin solution, which leads to the formation of a suspension of single cells - keratinocytes, which are collected by centrifugation at 600 rpm for 10 min and resuspended in a sterile tube in serum-free medium , then kept in a thermostat at 37.0 about With the content in the atmosphere of 5% CO 2 for 20 minutes After this, the cell culture is ready for transplantation. The cell suspension is distributed over the surface of the wounds. Top wounds are covered with a sterile non-adhesive coating.
Недостатками указанного способа являются сравнительно низкая эффективность, высокая сложность технологии и стоимости лечения. Это обусловлено, в частности, необходимостью выращивания кератиноцитов в культуральных флаконах с плоским дном, при этом площадь формирующегося клеточного пласта определяется размерами используемой посуды. Для увеличения количества клеток необходимо осуществить пересев, что достигается обработкой клеточного пласта раствором трипсина и ЭДТА с последующим ресуспендированием и центрифугированием, в результате чего клетки повреждаются, жизнеспособность их снижается. В целом процедура выращивания и подготовки клеточной культуры к пластике ран многоэтапна и сложна, требует наличия специального оборудования, больших количеств дорогостоящих импортных реактивов, сред, сывороток и посуды, в силу этого не может использоваться широко. Кроме того, выделение и выращивание эпидермальных кератиноцитов занимает, как минимум, 10-14 суток, что ограничивает использование метода для закрытия ран после некрэктомии. Сложным является распределение взвеси кератиноцитов по поверхности ран и контроль равномерности ее распределения, т. к. клетки не видны невооруженному глазу. Метод требует идеального состояния раны перед трансплантацией, в связи с чем необходима постоянная связь между группами, осуществляющими культивирование и готовящими раны к пластине, что в определенной степени ограничивает возможности (временные) по пластическому закрытию ран. The disadvantages of this method are the relatively low efficiency, high complexity of the technology and the cost of treatment. This is due, in particular, to the need to grow keratinocytes in culture bottles with a flat bottom, while the area of the forming cell layer is determined by the size of the dishes used. To increase the number of cells, it is necessary to reseed, which is achieved by treating the cell layer with a solution of trypsin and EDTA, followed by resuspension and centrifugation, as a result of which the cells are damaged, their viability decreases. In general, the procedure for growing and preparing a cell culture for plastic surgery of wounds is multi-stage and complex, requires special equipment, large quantities of expensive imported reagents, media, serums and dishes, and therefore cannot be used widely. In addition, the isolation and cultivation of epidermal keratinocytes takes at least 10-14 days, which limits the use of the method for closing wounds after necrectomy. Complex is the distribution of suspended keratinocytes over the surface of the wounds and the control of the uniformity of its distribution, because the cells are not visible to the naked eye. The method requires an ideal state of the wound before transplantation, and therefore a constant connection is necessary between the groups that cultivate and prepare the wounds for the plate, which to some extent limits the possibilities (temporary) for plastic closure of the wounds.
Целью изобретения является упрощение технологии, повышение эффективности и снижение стоимости лечения. The aim of the invention is to simplify technology, increase efficiency and reduce the cost of treatment.
Поставленная цель достигается тем, что кератиноциты высевают на коллагеновые микроносители и культивируют в роллерных бутылях или иных биотехнических системах в течение 1-7 суток, после чего суспензию микроносителей с прикрепленными к ним клетками наносят на рану и покрывают неадгезивной антисептической повязкой на 6-7 дней, после чего проводят лечение с традиционно используемыми препаратами для местного лечения. Для восстановления кожного покрова могут использоваться аутологичные кератиноциты, а также аллогенные клетки (для лечения глубоких дермальных ожогов III степени) и микст-культуры. This goal is achieved by the fact that keratinocytes are plated on collagen microcarriers and cultured in roller bottles or other biotechnological systems for 1-7 days, after which a suspension of microcarriers with cells attached to them is applied to the wound and covered with a non-adhesive antiseptic dressing for 6-7 days, then they treat with traditionally used drugs for local treatment. Autologous keratinocytes, as well as allogeneic cells (for the treatment of deep dermal burns of the third degree) and mixed cultures can be used to restore the skin.
Использование для культивирования кератиноцитов микроносителей из коллагена, выполняющих роль подложки и находящихся во вращающихся роллерных бутылях или иных биотехнических системах, а также нанесение на рану взвеси микроносителей с прикрепленными к ним кератиноцитами свидетельствует о соответствии заявляемого решения критерию "новизна". The use of collagen microcarriers for the cultivation of keratinocytes, which act as a substrate and are located in rotating roller bottles or other biotechnological systems, as well as the application of microcarriers with suspected keratinocytes to the wound, confirming the claimed solution meets the “novelty” criterion.
Использование иной техники подготовки клеток кожи к трансплантации и нанесение на рану комплекса, состоящего из микроносителя с прикрепленными к нему кератиноцитами, а также исключение процедуры обработки клеток ферментами и ЭДТА с последующим их центрифугированием и ресуспендированием позволяет ускорить процесс подготовки клеток к трансплантации и облегчить технологию. Использование совокупности настоящих признаков в их функциональном единстве для достижения поставленной задачи свидетельствует о соответствии решения критерию "существенные отличия". Using a different technique for preparing skin cells for transplantation and applying to the wound a complex consisting of a microcarrier with keratinocytes attached to it, as well as eliminating the procedure for treating cells with enzymes and EDTA with their subsequent centrifugation and resuspension, accelerates the process of preparing cells for transplantation and facilitates the technology. The use of the totality of these features in their functional unity to achieve the assigned task indicates that the solution meets the criterion of "significant differences".
Использование данных признаков предложения позволяет получить новый положительный эффект - упростить технологию подготовки кератиноцитов к трансплантации и ее осуществления, а именно отказаться от культивирования клеток на подложке, которой является дно культуральных флаконов, избежать необходимости производить через каждые 7-10 дней культивирования (по мере достижения конфлюентности культуры), пересев клеток в новые культуральные флаконы, исключить необходимость обрабатывать клетки растворами ферментов и ЭДТА с последующим центрифугированием и ресуспендированием, несколько упростить процедуpу переноса клеток на раневую поверхность, т. к. взвесь микроносителей видна невооруженному глазу и отсутствует необходимость в концентрации клеток перед их трансплантацией. Использование технологии культивирования в роллерных вращающихся бутылях или иных биотехнических системах на микроносителях из коллагена позволяет полностью отказаться от использования дорогостоящей импортной посуды, а также снизить расход культуральных сред, сывороток и ростовых добавок. За счет исключения необходимости осуществлять пересев клеток, для чего в способе - прототипе клеточную культуру обрабатывают растворами трипсина и ЭДТА с последующим центрифугированием, предотвращается возможность повреждения клеток и нарушения их жизнеспособности, а также достигается сокращение сроков подготовки культуры к трансплантации, т. е. повышается эффективность лечения. Using these features of the proposal allows you to get a new positive effect - to simplify the technology of preparing keratinocytes for transplantation and its implementation, namely, to abandon the cultivation of cells on a substrate, which is the bottom of the culture bottles, to avoid the need to produce every 7-10 days of cultivation (as confluence is achieved culture), reseeding cells in new culture bottles, eliminate the need to treat cells with solutions of enzymes and EDTA with subsequent centri ugirovaniem and resuspension, somewhat simplified protsedupu transfer cells to the wound area, ie. k. a slurry of microcarriers is visible to the naked eye and there is no need for a cell concentration prior to transplant. The use of cultivation technology in roller rotating bottles or other biotechnological systems on collagen microcarriers allows you to completely abandon the use of expensive imported dishes, as well as reduce the consumption of culture media, serums and growth additives. Due to the elimination of the need to carry out cell reseeding, for which, in the prototype method, the cell culture is treated with trypsin and EDTA solutions with subsequent centrifugation, the possibility of cell damage and impaired cell viability is prevented, and the time required to prepare the culture for transplantation is reduced, i.e., the efficiency is increased treatment.
Следовательно, заявленное техническое решение соответствует критерию изобретения "положительный эффект". Therefore, the claimed technical solution meets the criteria of the invention "positive effect".
П р и м е р. 1. Способ апробирован и реализован при выполнении пластики гранулирующих ран у крысы посредством пересадки культуры аутологичных кератиноцитов на микроносителях. Протокол опыта N 154, крыса N 1, самец. PRI me R. 1. The method has been tested and implemented when performing plasty of granulating wounds in rats by transplanting a culture of autologous keratinocytes on microcarriers. Test report N 154, rat N 1, male.
15.06.1990 г. на спине у крысы Вистар массой 150 г под анестезией гексеналом вырезан кусочек кожи с подкожно-жировой клетчаткой до фасции площадью 2 см2. В края раны для предотвращения ретракции краев раны вшито ригидное кольцо из тефлона. В течение трех суток лечение ран осуществляли посредством ежедневных перевязок с растворами антисептиков (хлоpгексидина и 4% борной кислоты). В течение этого же времени осуществляли культивирование кератиноцитов, выделенных из удаленного кусочка кожи в роллерных бутылях в среде DMEM и F12 (в соотношении 1: 1) с 10% эмбриональной телячьей сывороткой и эпидермальным фактором роста (10 нг/мл), а также с буфером HEPES 20 мМ. При осмотре раны 18.06.90 г отмечено наличие тонкого слоя розовых мелкозернистых грануляцией, выраженный отпечаток "сетки" на ране, отсутствие воспалительных явлений и высокая адгезивность раны.06/15/1990, on the back of a Wistar rat weighing 150 g under anesthesia with hexenal, a piece of skin with subcutaneous fat was cut to a fascia of 2 cm 2 . A rigid ring of Teflon is sewn into the edges of the wound to prevent retraction of the edges of the wound. For three days, wound treatment was carried out by daily dressings with solutions of antiseptics (chlorhexidine and 4% boric acid). During the same time, the cultivation of keratinocytes isolated from a removed piece of skin in roller bottles in DMEM and F12 medium (1: 1 ratio) with 10% fetal calf serum and epidermal growth factor (10 ng / ml), as well as buffer HEPES 20 mM. When examining the wound 06/18/90 g noted the presence of a thin layer of pink fine-grained granulation, a pronounced imprint of the "mesh" on the wound, the absence of inflammatory phenomena and high adhesiveness of the wound.
Суспензия микроносителей с прикрепленным к ним кератиноцитами осаждена и нанесена на поверхность раны. Рану накрыли парафинизированной повязкой "Paranett". Первую перевязку осуществляли через 7 дней. После удаления всех слоев повязок на дне раны имеется тонкий нежный вновь образовавшийся эпителий. Взят биоптат неокожи на гистологическое исследование. При изучении морфологической структуры восстановленного кожного покрова выявлено наличие нескольких слоев кератиноцитов, клетки различной формы, рогового слоя нет, межклеточные связи выражены слабо. A suspension of microcarriers with keratinocytes attached to them is deposited and deposited on the surface of the wound. The wound was covered with a Paranett paraffin dressing. The first ligation was performed after 7 days. After removing all layers of dressings at the bottom of the wound, there is a thin, delicate, newly formed epithelium. A biopsy specimen was taken for histological examination. When studying the morphological structure of the restored skin, the presence of several layers of keratinocytes, cells of various shapes, no stratum corneum, the intercellular connections are weakly expressed.
Оставшаяся часть микроносителей с кератиноцитами трансплантировали на дремальный эквивалент (коллагеновый гель с фибробластами). На следующий день при исследовании в фазовом контрасте обнаружено, что кератиноциты мигрируют с поверхности микроносителя и распространяются на гелевую подложку. Таким же образом происходит миграция кератиноцитов с микроносителей и на гранулирующую рану. The rest of the microcarriers with keratinocytes were transplanted onto the dremal equivalent (collagen gel with fibroblasts). The next day, when studying in phase contrast, it was found that keratinocytes migrate from the surface of the microcarrier and spread to the gel substrate. In the same way, keratinocytes migrate from microcarriers to a granulating wound.
П р и м е р 2. Больной С-в Н. Ф, , 1958 г. р. , история болезни N 32588 находился на лечении в клинике термических поражений ВМедА им. С. М. Кирова с 9. IV. 1991 г по 25. IV. 1991 г. по поводу: Ожог горячей водой 20% (0,2% ) п-IIIб. ст. туловища, верхних конечностей. Травму получил в быту - при купании под душем внезапно пошла горячая вода. За медицинской помощью обратился спустя 18 ч. Произведена катетеризация левой подключичной вены, начата инфузионная терапия по схеме ожогового шока I степени тяжести. Больной помещен на кровать "Клинитрон". С левого плеча под местной инфильтрационной анестезией скальпелем срезан полнослойный кожный трансплантат площадью 1 см2, который помещен во флакон с культуральной средой DMEM c антибиотиками. Выделение и культивирование кератиноцитов начато 10. IV. 1991 г. Посредством обработки кожи коллагеназой выделены кератиноциты, часть из которых (большая) пpедназначена для выращивания клеточных пластов на подложке во флаконах, а другая - внесена в роллерную бутыль с культуральной средой следующего состава: DMEMи F 12 (1: 1) с 10% эмбриональной телячьей сывороткой, с добавлением 10 нг/мл эпидермального фактора роста и 5 мкг/мл инсулина в присутствии HEPES 20 мМ. В культуральную среду добавлена взвесь микроносителей, сделанных из коллагена, имеющих сферическую форму и размеры от 60 до 200 мкм. Культивирование осуществляли при температуре 37,0оС при вращении бутыли со скоростью 1,8 об/мин в течение 5 сут. 15.04.91 г. культивирование прекращено, взвесь из микроносителей с прикрепленными к ним кератиноцитами осаждена на дно бутыли, которая доставлена в ВМедА.PRI me R 2. Patient S. in N. F, born in 1958 , medical history N 32588 was under treatment in the clinic of thermal lesions S. M. Kirova since 9. IV. 1991 to 25. IV. 1991 about: Hot water burn 20% (0.2%) p-IIIb. Art. torso, upper limbs. He was injured in everyday life - when bathing in the shower, hot water suddenly started. Seeking medical help after 18 hours. Catheterization of the left subclavian vein was performed, infusion therapy was started according to the scheme of burn shock of the first degree of severity. The patient is placed on the Clinitron bed. From the left shoulder, under local infiltration anesthesia, a 1 cm 2 full-layer skin graft was cut with a scalpel and placed in a vial with antibiotic DMEM culture medium. Isolation and cultivation of keratinocytes started 10. IV. 1991 By treating the skin with collagenase, keratinocytes were isolated, some of which (large) were used to grow cell layers on a substrate in vials, and the other was introduced into a roller bottle with a culture medium of the following composition: DMEM and F 12 (1: 1) with 10% fetal calf serum supplemented with 10 ng / ml epidermal growth factor and 5 μg / ml insulin in the presence of 20 mM HEPES. A suspension of microcarriers made of collagen having a spherical shape and sizes from 60 to 200 microns was added to the culture medium. Cultivation was carried out at a temperature of 37.0 about With the rotation of the bottle at a speed of 1.8 rpm for 5 days. 04/15/91, the cultivation was stopped, a suspension of microcarriers with attached keratinocytes was deposited on the bottom of the bottle, which was delivered to VMedA.
16.04.91 под общей анестезией произведено иссечение ожогового струпа в пределах жизнеспособных тканей до уровня подкожно-жировой клетчатки на участки в области большой грудной мышцы, где имелись несомненные признаки глубокого поражения на площади 20 см2. После тщательно выполненного гемостаза микроносители перенесены на рану и закрыты парафинизированной повязкой "Paranett". Сверху наложены асептические повязки. Первая перевязка - на 6-е стуки, когда удалены марлевые повязки до последнего слоя (кроме "Paranett"). В ячейках последней виден молодой, нежный, неокрепший эпидермис. Через сутки удалена повязка "Paranett". Участки кожи, восстановленные посредством трансплантации кератиноцитов на микроносителе по своему внешнему виду не отличались от таковых, восстановленных посредством трансплантации расщепленных кожных трансплантатов. В последующем перевязки проводили с использованием мази левосин.04.16.91 under general anesthesia, a burn scab was excised within viable tissues to the level of subcutaneous fat in areas in the region of the pectoralis major muscle, where there were undoubted signs of deep damage on an area of 20 cm 2 . After carefully performed hemostasis, the microcarriers were transferred to the wound and covered with a Paranett paraffinized dressing. Aseptic dressings are applied from above. The first dressing is on the 6th knock, when gauze dressings are removed to the last layer (except for "Paranett"). In the cells of the latter, a young, tender, fragile epidermis is visible. A day later, the "Paranett" dressing was removed. The skin areas reconstructed by keratinocyte transplantation on a microcarrier did not differ in appearance from those reconstructed by transplantation of split skin grafts. Subsequent dressings were performed using levosin ointment.
После отторжения тонкого струпа на остальных участках тела выяснилось, что поражение - на уровне дермы, и под воздействием местного консервативного лечения произошла эпителизация ожоговых ран. В связи с этим трансплантация клеточного пласта клеток не проводилась. After rejection of a thin scab in other parts of the body, it turned out that the lesion was at the level of the dermis, and epithelization of burn wounds occurred under the influence of local conservative treatment. In this regard, transplantation of the cell layer of cells was not performed.
Таким образом, трансплантация культуры кератиноцитов была выполнена спустя 8 суток после получения травмы или спустя 5,5 суток после начала культивирования. Кератиноциты прижили после пересадки на свежеиссеченную до подкожно-жировой клетчатки рану. За это время клетки, выращиваемые посредством традиционной техники, успели только сформировать конфлюентную культуру. Thus, keratinocyte culture transplantation was performed 8 days after injury or 5.5 days after the start of cultivation. Keratinocytes survived after transplantation onto a freshly cut wound to the subcutaneous fat. During this time, cells grown using traditional techniques only managed to form a confluent culture.
Больной выписан из клиники 25.04.1991 г, в удовлетворительном состоянии с восстановленным кожным покровом. The patient was discharged from the clinic 04/25/1991 g, in satisfactory condition with restored skin.
Помимо приведенного клинического примера кожный покров посредством трансплантации аутологичных кератиноцитов восстановлен на ограниченной по площади ране у 2-х больных. Кроме того, двум больным осуществили трансплантацию культуры на микроносителях аллогенных кератиноцитов. In addition to the given clinical example, the skin was restored through autologous keratinocyte transplantation on a limited wound in 2 patients. In addition, two patients underwent a culture transplant on microcarriers of allogeneic keratinocytes.
Ожидаемый эффект от внедрения в практику лечения предлагаемого способа восстановления кожного покрова представляется весьма значительным и связан с сокращением сроков лечения пострадавших, получением возможности лечения критических и сверхкритических ожогов, а также уменьшением расходов медикаментозных препаратов на лечение. (56) Burns, 1989, N 15, п. 5, с. 335-337. The expected effect of introducing into practice the treatment of the proposed method for restoration of the skin appears to be very significant and is associated with a reduction in the treatment time for victims, the possibility of treating critical and supercritical burns, as well as a decrease in the cost of medications for treatment. (56) Burns, 1989, N 15, p. 5, p. 335-337.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4954512 RU2010028C1 (en) | 1991-06-28 | 1991-06-28 | Method of skin integument regeneration in critically burnt patients |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU4954512 RU2010028C1 (en) | 1991-06-28 | 1991-06-28 | Method of skin integument regeneration in critically burnt patients |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2010028C1 true RU2010028C1 (en) | 1994-03-30 |
Family
ID=21584039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU4954512 RU2010028C1 (en) | 1991-06-28 | 1991-06-28 | Method of skin integument regeneration in critically burnt patients |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2010028C1 (en) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996012510A1 (en) * | 1994-10-25 | 1996-05-02 | Boehringer Mannheim Gmbh | Biomaterial containing epithelial cells and use thereof as a transplant |
| EP0975226A4 (en) * | 1997-04-16 | 2000-11-08 | Univ Michigan Technology Manag | Cell-coated supports |
-
1991
- 1991-06-28 RU SU4954512 patent/RU2010028C1/en active
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996012510A1 (en) * | 1994-10-25 | 1996-05-02 | Boehringer Mannheim Gmbh | Biomaterial containing epithelial cells and use thereof as a transplant |
| EP0975226A4 (en) * | 1997-04-16 | 2000-11-08 | Univ Michigan Technology Manag | Cell-coated supports |
| US6890552B2 (en) | 1997-04-16 | 2005-05-10 | Regents Of The University Of Michigan | Manufacturing therapeutic enclosures |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2123683C (en) | New cultures of keratinocytes, process for their preparation and their use as wound healing substances | |
| Ronfard et al. | Use of human keratinocytes cultured on fibrin glue in the treatment of burn wounds | |
| ES2345767T3 (en) | KERATINOCITS USED AS A BIOLOGICALLY ACTIVE SUBSTANCE FOR WOUND TREATMENT. | |
| JPH0747043B2 (en) | Synthetic living skin equivalent | |
| JPH11503946A (en) | Artificial skin containing a biocompatible substance based on a hyaluronic acid derivative as a support | |
| JPH0223191B2 (en) | ||
| JPH02174848A (en) | Cuticle sheet;and production, storage and usage thereof | |
| Kangesu et al. | A porcine model using skin graft chambers for studies on cultured keratinocytes | |
| CN108057116A (en) | Application of the stem cell composition in skin injury medicine | |
| KR20090011957A (en) | Co-culture method of skin cells and cell therapy composition using the same | |
| CN105477626A (en) | Mixed stem cell-based medicinal product and preparation method thereof | |
| JP2002526204A (en) | Artificial dermis structure using neutralized chitosan sponge or neutralized chitosan / collagen mixed sponge | |
| CN107683148B (en) | Skin reconstruction method | |
| JP2002504412A (en) | Live chimera skin replacement | |
| US20030202965A1 (en) | Methods and compositions for the preparation of cell transplants | |
| JP3738273B2 (en) | Improved keratinocyte culture and use thereof | |
| CN102172337B (en) | Tissue engineering skin with sebaceous gland-like structure and preparation method thereof | |
| CN108066750A (en) | Stem cell and its secretion are used to treat the new application of skin burn | |
| US6585969B1 (en) | Non-viable keratinocyte cell composition or lysate for promoting wound healing | |
| RU2010028C1 (en) | Method of skin integument regeneration in critically burnt patients | |
| CN108350420A (en) | The method for cultivating cell | |
| CA1294875C (en) | Epidermal cell extracts and method to enhance wound healing and regenerate epidermis | |
| RU2148970C1 (en) | Method for repairing skin cover | |
| CN108057131A (en) | A kind of novel agent box containing stem cell | |
| US20220290107A1 (en) | Method for producing cultured tissue, and preparation for external application |