MX2008000201A - Inhibidores de cisteina proteasa. - Google Patents

Abstract

Se describe un compuesto de formula (II) (ver formula) en donde uno de R1 y R2 es halo y el otro es H o halo; R36 es alquilo de 1 a 5 atomos de carbono de cadena lineal o ramificada, opcionalmente fluorado, o -CH2-CR5-cicloalquilo de 3 a 4 atomos de carbono; R4 es H; R5 es H, alquilo de 1 a 2 atomos de carbono, haloalquilo de 1 a 2 atomos de carbono, hidroxilo, Oalquilo de 1 a 2 atomos de carbono, fluoro; R6 es un carbociclo o heterociclo monociclico o biciclico estable opcionalmente sustituid, en donde el o cada anillo tiene 4, 5 o 6 atomos del anillo y 0 a 3 heteroatomos seleccionados de S, O y N; Rb es haloalquilo; Rc es H o alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; y sales, hidratos o N-ocidos farmaceuticamente aceptables de los mismo, que tiene utilidad ene l tratamiento de los trastornos caracterizados por la expresion o activacion inapropiada de catepsina K, tal como osteoporosis, osteoartritis, artritis reumatoide o metastasis osea.

Description

INHIBIDORES DE CISTEINA PROTEASA Campo de la Invención Esta invención se refiere a inhibidores de cisteína proteasas, especialmente a los de la superfamilia de la papaína. La invención proporciona compuestos de novedad útiles en la profilaxis o tratamiento de trastornos originados del desbalance de las proteasas fisiológicas tal como catepsina K. Antecedentes de la Invención La superfamilia de la papaína de las cisteína proteasas, se distribuye ampliamente en diversas especies que incluyen mamíferos, invertebrados, protozoarios, plantas y bacterias. Un número de enzimas de catepsina mamífera, incluyendo las catepsinas B, F, H, K, L, O y S, se han atribuido a esta superfamilia, y la regulación inadecuada de su actividad ha estado implicada en un número de trastornos metabólicos que incluyen la artritis, distrofia muscular, inflamación, glomerulonefritis e invasión tumoral. Las enzimas de tipo catepsina patogénica incluyen las gingipainas bacterianas, falcipainas de la malaria I, II, III y siguientes y cisteína proteasas de Pneumocystis carinii, Trypanosoma cruzei y brucei, Crithidia fusiculata, Schistosoma spp. La regulación inapropiada de catepsina K ha estado implicada en un número de trastornos que incluyen osteoporosis, enfermedades gingivales tal como gingivitis y periodontitis, enfermedad de Paget, hipercalcemia de enfermedad ósea metabólica y maligna . En vista de sus niveles elevados de condroclastos del liquido sinovial osteoartrítico, la catepsina K está implicada en las enfermedades caracterizadas por la degradación excesiva del cartílago o matriz, tal como osteoartritis y artritis reumatoide. Las células neoplásticas metastásicas expresan comúnmente altos niveles de enzimas proteolíticas que degradan la matriz circundante y la inh ibición de catepsina K puede así ayudar a tratar las neoplasias. La Solicitud de Patente I nternacional No. WO02057270 describe los compuestos de fórmula I : donde UVWXY corresponde ampliamente a P3 y P2 de los inhibidores de cisteína proteasa de dipéptido, Z es inter alia O , S , metileno o -N R-, R1 es alquilo, alquilarilo, etc. y P1 y Q1 son cada uno metileno, sustituido opcionalmente con varias cadenas de carbono y grupos cíclicos. Se discute que los compuestos son útiles para el tratamiento de infecciones protozoarias tal como tripanosomas. No hay una descripción específica de los ¡soésteres de haloalquilo del enlace amida P2/P3. Ahora hemos descubierto que la introducción de un átomo de halógeno en una posición de anillo particular en combinación con la halogenación del enlace P3/P2 produce los inhibidores potentes de catepsina K. Breve Descripción de la Invención De acuerdo a la invención, hay compuestos proporcionados de fórmula II. en donde uno de R1 y R2 es halo y el otro es H o halo; R3 es una cadena lineal o ramificada de 1 a 5 átomos de carbono, opcionalmente fluorada, alquilo o cicloquilo de 3 a a4 átomos de carbono-CH2CR5; R4 es H; R5 es H, alquilo de 1 a 2 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 2 átomos de carbono, hidroxilo, Oalquilo de 1 a 2 átomos de carbono, fluoro; R6 es un carbociclo o hetorociclo monocíclico o bicíclico estable opcionalmente sustituido, en donde éste o cada anillo tiene 4, 5 ó 6 átomos de anillo y 0 a 3 heteroátomos seleccionados de S, O y N y en donde los sustituyentes opcionales comprenden 1 a 3 miembros seleccionados de R7; R7 se selecciona independientemente de halo, oxo, nitrilo, nitro, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -XNRdRe, -XNReR8, -NReXR8, NH2CO-, X-R8, X-O-R8, O-X-R8, X-C(=O)R8, X-(C = O)NRdR8, X-NReC( = O)R8, X-NHSOmR8, X-S(=O)mR8, X-C(=O)OR8, X-NReC(=O)OR8; R8 es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tiopiranilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridin ilo , pirimidinilo, pirazinilo, ¡ndolilo, fenilo, cualquiera de los cuales está sustituido opcionalmente con hasta 3 miembros seleccionados de R9; R9 se selecciona independientemente de hidroxi, XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-R10, ciano, -S(=O)mRe, carboxi, oxo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono, carbamoilo; R10 es cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tiopiranilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridínilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, fenilo, cualquiera de los cuales está sustituido con alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo, hidroxi, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono; X es independientemente un enlace o alquileno de 1 a 4 átomos de carbono; Ra es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o CH3C(=O); Rb es haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono; Rc es H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; Rd es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o CH3C(=O); Re es independientemente H, alquiío de 1 a 4 átomos de carbono; o Rd y Re junto con el átomo N al cual se unen, forman anillo de morfolina, piperidina, piperazina o pirrolidina sustituido opcionalmente con R9; m es independientemente 0.1 ó 2; o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o N-óxido de la misma.

De ninguna manera se desea unir por la teoría, o atribución de los modos de unión tentativos para las variables específicas, P1, P2 y P3 según lo utilizado en la presente se proporcionan solamente para conveniencia y tienen sus significados convencionales y denotan las porciones del inhibidor que se cree llena los subsitios S1, S2 y S3 respectivamente de la enzima, donde S1 es adyacente el sitio de división y S3 está alejado del sitio de división.

Preferiblemente la estereoquímica del grupo P1 es según lo representado en la siguiente estructura parcial: Preferiblemente el halógeno de R1 y/o R2 es clorina y más preferiblemente flúor. Se prefiere actualmente que R2 es halo, especialmente flúor y R1 es H , pero la invención abarca los compuestos en donde R1 es halo, especialmente F y R2 es H o R1 y R2 son cada uno F. Será apreciado que el grupo P 1 puede existir en formas alternativas, tal como y la invención abarca todas las tales formas alternativas. Preferiblemente la estereoquímica del grupo P2 corresponde a un L-aminoácido según lo representado en la siguiente estructura parcial: pero la invención también abarca los isómeros D. La invención también incluye todos los isómeros y enantiómeros en otros centros quirales .

Los grupos actualmente preferidos P2 incluyen aquellos en donde R4 es H y en donde R3 es iso-butilo u homo-t-butilo, que son -C H2C(CH3)3, según lo mostrado abajo: Otras modalidades de R » 3 c ? <uando D R4 es H, incluyen aquellos con estructura parcial: donde R5 es según lo definido arriba. Convenientemente, R5 es H , así define u na cadena lateral de ciclobutilmetilo en P2. Los valores representativos para R5 incluyen metilo, hidroxilo, fluorometilo, difluorometilo o trifluorometilo: Por consig uiente, los valores favorecidos de la cadena lateral de P2 incluyen , particularmente los que reflejan un aminoácido L.

Los grupos de P2 actualmente preferidos incluyen Actualmente se prefiere que Ra representado en la fórmula II sea H. Los grupos haloalquilo preferidos para Rb incluyen halometilo tal como fluorometilo, difluorometilo y preferiblemente trifluorometilo. Comúnmente Rc es H y R6 es un sistema de anillo separado según lo mostrado en la estructura parcial: donde está R6 para el propósito de ilustración se ejemplifica con un fenilo sustituido y Rb es triflourometilo. Preferiblemente el compuesto de la invención comprende una alta pureza enantiomérica, tal como más del 80%, preferiblemente más del 95% tal como más del 97% de la estereoconfiguración S en Rb del haloalquilo que contiene carbono. La siguiente estructura parcial representa un S-enantiómero común con Rb como trifluorometilo y Rc como H.

Regresando ahora a la fórmula II, R6 es comúnmente un anillo monocíclico con 5 o especialmente 6 átomos de anillo, o una estructura de anillo bicíclico que comprende un anillo de 6 miembros fusionado a un anillo de 4, 5 ó 6 miembros. Los grupos comunes R6 incluyen heterociclos saturados o no saturados o carbociclos saturados o no saturados, cualquiera de los cuales se sustituyen opcionalmente según lo descrito anteriormente. Las variantes ilustrativas incluyen el cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, fenilo, bencilo, tetrahidronaftilo, indenilo, indanilo, heterociclilo tal como de azepanilo, azocanilo, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tiopiranilo, furanilo, tetrahidrofuranilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidínilo, pirazinilo, piridazinilo, tetrazolilo, pirazolilo, indolilo, benzofuranilo, benzotienilo, benzimidazolilo, benztiazolilo, benzoxazolilo, benzisoxazolilo, quinolinilo, tetrahidroquinolinilo, isoquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, quinazolinilo, tetrahidroquinazolinilo y quinoxalinilo, cualquiera de los cuales se pueden sustituir según lo descrito anteriormente. El heterociclo saturado así incluye los radicales tal como pirrolinilo, pirrolidinilo, pirazolinilo, pirazolidinílo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piranilo, tiopiranilo, piperazinilo, indolinilo, azetidinilo, tetrahidropiranilo, tetrahidrotiopiranilo, tetrahidrofuranilo, hexahidropirimidinilo, hexahidropiridazinilo, 1,4,5,6-tetrahidropirimidinilamina, dihidro-oxazolil-oxazolilo, 1,2-tiazinil-1 ,1 -dióxido, 1 ,2,6-tiad iazinani 1-1 ,1 -dióxido, iso tiazol id inil-1,1-dióxido e imidazolidinil-2,4-diona, mientras que el heterociclo no saturado incluye los radicales tal como furanílo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirazolilo, isoxazolilo, isotiazolilo, oxadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, piridinilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolizinilo, indolilo, isoindolilo. En cada caso el heterociclo se puede condensar con un anillo fenilo para formar un sistema de anillo bicíclico. Los grupos R6 monocíclicos preferidos incluyen piridilo sustituido, pirimidilo sustituido, fenilo sustituido, fenilo particularmente sustituido con un grupo cíclico tal como pirrolidina-1-ilo, piperidina-1-ilo, 4-metilpiperidin-1-ilo, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-1-ilo, morfolin-4-ilo, 4-metilpiperazin-1-ilo, 2-morfolin-4-il-etilamino, 2-morfolin-4-il-etiloxi, 1 -pirid-2-ilmetilamino, piperazin-1-ilo, piper?d-4-ilo o N-piperazinilo, N-sustituido con Ra o piperidin-1-ilo que está sustituido 4 veces con -NRaRb. Un R6 fenilo se sustituye convenientemente en la posición 3 ó 4 (para o meta), por ejemplo con tal grupo cíclico.

Los sustituyentes cíclicos alternativos para un R monocíclico (tal como fenilo) incluyen los grupos arilo tal como fenilo o un grupo heteroarilo de 5 ó 6 miembros tal como tiofeno, furilo, triazol, tiazol, diazol, pirazol o pirrolidina. Los sustituyentes cíclicos favorecidos en este contexto incluyen tiazol-2-ilo, pirid-3-ilo y especialmente pirid-2-ilo, tien-2-ilo o tiazol-5-il. Este sustituto cíclico (es decir, R7) está comúnmente enlazado a tales especies R6 (es decir, X es un enlace), pero también puede por ejemplo comprender un separador amina tal como -NH-, -N(Me), -CH NH, -CH2N(Me)-, un separador de alquilo de 1 a 3 átomos de carbono tal como CH2- o un separador alquiloxí de 1 a 3 átomos de carbono tal como etiloxi. Cualquiera de los sustituyentes cíclicos para R6 en el párrafo anterior, se pueden sustituir según lo descrito anteriormente con R10. Por ejemplo un grupo R7 heterociclo tal como tiazolilo, se puede sustituir con alquilo de 1 a 4 átomos de carbono tal como metilo. Preferiblemente, cualquiera de los sustituyentes cíclicos para R6 en los dos párrafos anteriores se pueden sustituir por sí mismos con un grupo cíclico (es decir, R7 comprende un radical R9) comúnmente un grupo heterocíclico saturado tal como piperidina, piperazina o morfolina, cuyo grupo cíclico saturado se sustituye opcionalmente, por ejemplo con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, fluoro, diflouro, alquiloxi de 1 a 3 átomos de carbono o alquiloxi de 1 a 3 átomos de carbono-alquilo de 1 a 3 átomos de carbono. Según lo proporcionado en la definición de R7, este grupo cíclico saturado (es decir, R9) se puede separar del grupo R6 por X (por ejemplo alquilo de 1 a 3 átomos de carbono), amina (por ejemplo -NH-), amida, sulfamida, etc., pero comúnmente se enlaza directamente o vía metileno. Los grupos representativos R9 de acuerdo al párrafo anterior incluyen los heterociclos tal como pirrolidina-1-ilo, piperidina-1-ilo, 4-metilpiperidin-1-ilo, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-1-ilo, morfolin-4-ilo, 4-metilpiperazin-1-ilo, 2-morfolin-4-il-etilam¡no, 2-morfolin-4-il-etilox¡, 1-pirid-2-ilmetilamino, píperazin-1-ilo, piperid-4-ilo o N-piperazinílo, N-sustituidos con Ra o piperidin-1-ilo que está sustituido 4 veces con NRaRb. Los sustituyentes R9 actualmente preferidos incluyen piperazin-4-ilo sustituidos 4 veces, tal como 4-metil-piperazin-4-ilo o 4-metiloxietil-piperazin-4-ilo, piperid-1-ilmetilo que está sustituido opcionalmente 4 veces con fluoro o diflouro o morfolinilmetilo. Los sustituyentes alternativos preferidos para R6 monocíclico (tal como fenilo) incluyen -NRaRb, -CH2NRaRb, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono lineal o ramificado o -O-R9. Los sustituyentes alternativos preferidos para R6 monocíclico (tal como fenilo) incluyen a grupos que incluyen radicales no básicos, tal como halo, hidroxilo, carboxi, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alquiloxi de 1 a 4 átomos de carbono, y los de fórmula: -S( = O)malq uiIo de 1 a 4 átomos de carbono , S(=O)mcicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, o un grupo cicloalquilo sustituido con carbamoilo con la estructura parcial: donde Rg es H , alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono o ciclopropilo, Rh es H , alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; o Rg y Rh junto con el átomo de N al cual se unen definen la pirrolidina, morfolina, piperídina, piperazina o N-metilpiperazina. Los grupos representativos R6 incluyen : Además los grupos R representativos incluyen donde Rq y Rq' se seleccionan independientemente de H , alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono o j untos definen un anillo no saturado de 5-7 miembros, tal como piperidina, piperazina o morfolina, q ue se pueden a su vez sustituir con los grupos que corresponden a R10, particularmente alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, fluoro o difluoro.

Los grupos bicíclicos representativos para R6 incluyen naftilenilo, especialmente naftilen-2-il; benzo[1 ,3]dioxolilo, especialmente benzo[1 ,3]dioxol-5-ilo, benzofuranilo, especialmente benzofuran-2-ilo, y especialmente benzofuranilo sustituido con alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono , más especialmente 5-(terc-butiléster del ácido 2-piperazin-4-carboxílico)benzofuran-2-ilo, 5-(2-morfolino-4-il-ethoxi)~ benzofu ran-2-ilo, 5-(2-piperazin-1 -il-etoxi)benzofuran-2-ilo, 5-(2-ciclohexil-etoxi)-benzofuran-2-ilo; 7-metoxi-benzofuran-2-ilo, 5-metoxi-benzofuran-2-ilo, 5,6-dimetoxi-benzofuran-2-ilo, especialmente benzofuranilo sustituido con halógeno, más especialmente 5-fluoro-benzofuran-2-ilo, 5,6-difluoro-benzofuran-2-ilo, especialmente benzofuranilo sustituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, muy especialmente 3-metil-benzofuran-2-il; benzo[b]tiofenilo, especialmente benzo[bitiofen-2-il; especialmente benzo[b]tiofenil sustituido con alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono], más especialmente 5,6-dimetoxi-benzo[b]tiofen-2-ilo, quinolinilo, especialmente quinolin-2-ilo, quinolin-3-ilo, quinolin-4-ilo, qúinolin-6-ilo, y quinolin-S-il; quinoxalinilo, especialmente quinoxalin-2-il; 1 ,8-nafthiridinilo, especialmente 1 ,8-nafthiridin-2-ilo; indolilo, especialmente indol-2-ilo, especialmente indol-6-ilo, indol-5-ilo, especialmente indolilo sustituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, más especialmente N-metilindol-2-ilo; furo[3,2-b]piridinilo, especialmente furo[3,2-b]piridin-2-ilo, y furo[3,2-b]piridinilo sustituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, especialmente 3-metil-furo[3,2-b]piridin-2-ilo; tieno[3,2-b]tiofeno, especialmente tieno[3,2-b]tiofene-2-ilo, más especialmente tieno[3,2-b]tiofene-2-ilo sustituido con alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, más especialmente 5-terc-butil-3-metiltieno[3,2-b]tiofen-2-ilo. Los grupos R6 favorecidos incluyen los anillos bicíclicos tal como naftilo, quinoloilo, benzofuranilo, benzotienilo, indolilo e indolinilo, particularmente donde el enlace está en la posición 2 del anillo. Los sustituyentes favorecidos para un grupo R6 bicíclico incluyen pirrolidina-1-ilo, piperidina-1-ilo, 4-metilpiperidin-1-ilo, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-1-ilo, morfolin-4-ilo, 4-metilpiperazin-1-ilo, 2-morfolin-4-il-etilamino, 2-morfolin-4-il-etiloxi, 1-pirid-2-ilmetilamíno, piperazin-1-ilo, piperid-4-ilo o N-piperazinilo, N-sustituidos con Ra o piperidin-1-ilo que está sustituido 4 veces con -N RaRb. Especialmente los sustituyentes preferidos, particularmente en combinación con benzofuranilo , incluyen 2-morfolin-4-il-etiloxi y N-metil-piperidin-4-iloxi y los definidos posteriormente. U n grupo R6 bicíclico actualmente favorecido está opcionalmente sustituido con benzotiazol o benzofurilo o benzoxazolilo, incluyendo aquellos en donde el sustituyente es -O R9 o N RbR9. Por ejemplo, los grupos R6 favorecidos incluyen benzofur-2-ilo , sin sustituir o sustituido en la posición 3 con alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, tal como metilo o haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono tal como trifluorometilo y/o sustituido en la posición 5 con un heterociclo saturado tal como piperidina, piperazína o morfolina, que está sustituido opcionalmente con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono y/o está separado del benzofurilo por oxi, metiloxi o etiloxi. Particularmente los grupos R6 benzofurilo favorecidos así incluyen : Regresando a la fórmula II en general: X es comúnmente metileno o especialmente un enlace. El alquilo de 1 a n átomos de carbono, donde n es 4, por sí solo o dentro de las expresiones del compuesto tal como alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, incluye metilo, etilo, n-propilo, ¡so-propilo, n-butilo, iso-butilo, sec-butilo, t-butilo, ciclopropilo, metilciclopropilo y similares, ampliado de una manera similar para otros valores de n. Por ejemplo alquilo de 5 átomos de carbono incluye homo-t-butilo (-CH2C(CH3)3). El halógeno o halo incluye bromo, cloro y especialmente fluoro.

Haloalquilo significa un grupo alquilo según lo definido anteriormente donde por lo menos un átomo de carbono contiene 1 a 3 átomos de halógeno, preferiblemente átomos de flúor. Los grupos haloalquilo representativos incluyen fluorometilo, difluorometilo, trifluorometilo, 2-fluoroetilo, 2,2-difluoretilo, 2,2,2-trifluoretilo y similares. Los compuestos favorecidos de la invención incluyen las permutaciones formadas por la selección independiente de un miembro P3, P2 y P1 de cada una de las tablas A, B y C: Tabla A: grupos P1 Tabla B: grupos P2 Tabla C: grupos P3 Los aspectos adicionales de la invención incluyen una composición farmacéutica que comprende un compuesto según lo definido anteriormente y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable para el mismo. Un aspecto adicional de la invención es el uso de un compuesto según lo definido anteriormente en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de los trastornos mediados por la catepsina K, tal como: osteoporosis, enfermedades gingivales tal como gingivitis y periodontitis, Enfermedad de Paget, hipercalcemia de la enfermedad ósea metabólica maligna enfermedades caracterizadas por la degradación excesiva del cartílago o matriz, tal como osteoartritis y artritis reumatoide, cánceres óseos incluyendo neoplasia, dolor. Se cree que la invención tiene una utilidad particular contra la osteoporosis, osteoartritis, artritis reumatoide y/o metástasis ósea. Los compuestos de la invención pueden formar sales que forman un aspecto adicional de la invención. Las sales farmacéuticamente aceptables apropiadas de los compuestos de fórmula II incluyen las sales de ácidos orgánicos, especialmente ácidos carboxílicos, incluyendo pero sin limitarse a acetato, trifluoroacetato, lactato, gluconato, citrato, tartrato, maleato, malato, pantotenato, isetionato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, butirato, digluconato, ciclopentanato, glucoheptanato, glicerofosfato, oxalato, heptanoato, hexanoato, fumarato, nicotinato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, proprionato, tartrato, lactobionato, pivolato, camforato, undecanoato y succinato, ácidos sulfónicos orgánicos tal como metansulfonato, etansulfonato, sulfonate de 2-hidroxietano, camforsulfonato, 2-naftalensulfonato, bencensulfonato, p-clorobencenesulfonato y p-toluensulfonato; y ácidos inorgánicos tal como clorhidrato, hidrobromuro, hidroyoduro, sulfato, bisulfato, hemisulfato, tiocianato, persulfato, ácidos fosfórico y sulfónico. Los compuestos de fórmula II pueden en algunos casos aislarse como el hidrato. Los hidratos son preparados comúnmente por recristalización de una mezcla de solvente acuosa/orgánica usando solventes orgánicos tal como dioxina, tetrahidrofuran o metanol. Los N-óxidos de los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar por los métodos conocidos por los expertos de la técnica. Por ejemplo, los N-óxidos se pueden preparar tratando una forma sin oxidar del compuesto de fórmula (I) con un agente oxidante (por ejemplo, ácido trifluoroperacético, ácido permaleico, ácido perbenzoico, ácido peracético, ácido meta-cloroperoxibenzoico, o similares) en un solvente orgánico inerte conveniente (por ejemplo, un hidrocarburo halogenado tal como diclorometano) a aproximadamente 0°C. Alternativamente, los N-óxidos de los compuestos de fórmula (I) se puede preparar a partir del N-óxido de un material de inicio apropiado. Los compuestos de fórmula (I) en forma sin oxidar se pueden preparar a partir de los N-óxidos de los compuestos de fórmula (I) mediante el tratamiento con un agente de reducción (por ejemplo, azufre, dióxido de azufre, trifenilfosfina, borohidruro de litio, borohidruro de sodio, bicloruro de fósforo, tribromuro, o similares) en un solvente orgánico inerte conveniente (por ejemplo, acetonitrilo, etanol, dioxano acuoso, o similares) de 0 a 80°C. Los compuestos de fórmula (II) se pueden preparar como sus estereoisómeros individuales haciendo reaccionar una mezcla racémica del compuesto con un agente de resolución ópticamente activo para formar un par de compuestos diastereoisoméricos, separando los diastereómeros y recuperando el enantiómero ópticamente puro. Mientras que la resolución de los enantiómeros se puede realizar usando los derivados diasteroméricos covalentes de los compuestos de fórmula (I), se prefieren los complejos desasociables (por ejemplo, cristalino; sales diastereoisoméricas). Los diastereómeros tienen propiedades físicas distintas (por ejemplo, puntos de fusión, puntos de fusión, solubilidades, reactividad, etc.) y se pueden separar fácilmente aprovechando estas diferencias. Los diastereómeros se pueden separar por cromatografía, por ejemplo CLAR o, preferiblemente, por técnicas de separación/resolución basadas en las diferencias de solubilidad. El enantiómero ópticamente puro entonces es recuperado, junto con el agente de resolución, por cualquier medio práctico que no dé lugar a la racemización. Una descripción más detallada de las técnicas aplicables a la resolución de los estereoisómeros de los compuestos a partir de su mezcla racémica, se puede encontrar en Jean Jacques Andre Collet, Samuel H. Wilen, Enantiomers, Racemates y Resolutions, John Wiley & Sons, Inc. (1981). Será apreciado que la invención abarque los profármacos, solvatos, complejos y otras formas que liberen un compuesto de fórmula II in vivo. Mientras que es posible que el agente activo sea administrado solo, es preferible presentarlo como parte de una formulación farmacéutica. Tal formulación comprenderá el agente activo definido anteriormente junto con uno o más portadores/excipientes aceptables y opcionalmente otros ingredientes terapéuticos. Los portadores deben aceptables en el sentido de ser compatibles con los otros ingredientes de la formulación y de no ser perjudiciales para el receptor. Las formulaciones incluyen las convenientes para la administración rectal, nasal, tópica (incluyendo bucal y sublingual), vaginal o parenteral, (incluyendo subcutánea, intramuscular, intravenosa e intradérmica), pero preferiblemente la formulación es una formulación administrada oralmente. Las formulaciones se pueden presentar convenientemente en forma de dosificación unitaria, por ejemplo tabletas y cápsulas de liberación sostenida, y se pueden preparar por cualquier método bien conocido en la técnica de la farmacia. Tales métodos incluyen la etapa de tener en asociación el agente activo definido anteriormente con el portador. En general, las formulaciones están preparadas teniéndolas uniforme e íntimamente en asociación el agente activo con los portadores líquidos o portadores sólidos divididos finalmente o ambos, y después en caso de ser necesario se forma el producto. La invención abarca los métodos para preparar una composición farmacéutica que comprende tener un compuesto de fórmula II o su sal farmacéuticamente aceptable en combinación o asociación con un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable. Si la fabricación de las formulaciones farmacéuticas implica mezclar íntimamente los excipientes farmacéuticos y el ingrediente activo en forma de sal, entonces se prefiere frecuentemente utilizar los excipientes que son de naturaleza no básica, es decir ácidos o neutrales. Las formulaciones para la administración oral en la presente invención se pueden presentar como unidades discretas tal como cápsulas, sobres o tabletas cada uno contiene una cantidad predeterminada del agente activo; como un polvo o granulos; como una solución o suspensión del agente activo en un líquido acuoso o líquido no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite/agua o emulsión líquida agua/aceite y como un bolo, etc.

Con respecto a las composiciones para la administración oral (por ejemplo tabletas y cápsulas), el término portador conveniente incluye vehículos tal como excipientes comunes por ejemplo agentes de unión, por ejemplo jarabe, acacia, gelatina, sorbitol, tragacanto, polivinilpirrolidona (povidona), metilcelulosa, etilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, hidroxipropilmetilcelulosa, sucrosa y almidón; rellenos y portadores, por ejemplo almidón de maíz, gelatina, lactosa, sucrosa, celulosa microcristalina, caolina, manitol, fosfato de dicálcico, cloruro de sodio y ácido algínico; y lubricantes tal como estearato de magnesio, estearato de sodio y otros estearatos metálicos, ácido esteárico de estearato de glicerol, fluido de silicón, talco, ceras, aceites y sílice coloidal. Las sustancias saborizantes tal como hierbabuena, aceite de gaulteria, saborizante de cereza o similares también se pueden utilizar. Se puede desear agregar un agente colorante para hacer a la forma de dosificación fácilmente identificable. Las tabletas también se pueden recubrir por métodos bien conocidos en la técnica. Una tableta se puede hacer por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes aditivos. Las tabletas comprimidas se pueden preparar comprimiendo en una máquina conveniente al agente activo en una forma libre tal como un polvo o granulos, mezclados opcionalmente con un aglutinador, lubricante, diluyente inerte, conservador, tensioactivo o agente de dispersión. Las tabletas moldeadas se pueden elaborar moldeando en una máquina conveniente a una mezcla del compuesto pulverizado humedecido con un diluyente líquido inerte. Las tabletas opcionalmente se pueden recubrir o marcar y se pueden formular para proporcionar la liberación lenta o controlada del agente activo. Otras formulaciones convenientes para la administración oral incluyen las grageas que comprenden el agente activo en una base saborizada, generalmente sucrosa y acacia o tragacanto; las pastillas comprenden el agente activo en una base inerte tal como gelatina y glicerína, o sucrosa y acacia; y los enjuagues comprenden el agente activo en un portador líquido conveniente.

La dosificación apropiada para los compuestos o formulaciones de la invención dependerá de la indicación y del paciente y es determinada fácilmente por ensayos convencionales con animales. Las dosificaciones que proporcionan (para la inhibición de las proteasas fisiológicas de la superfamilia de la papaína) las concentraciones intracelulares 0.01-100 µM, más preferiblemente 0.01-10 µM, tal como 0.1-25 µM, son comúnmente deseables y realizables. Los compuestos de la invención son preparados por una variedad de químicas de solución y de fase sólida. Los compuestos son preparados comúnmente como módulos de constitución que reflejan los radicales P1, P2 y P3 del inhibidor del producto final. Sin desear de ninguna manera unir por la teoría, o atribución de los modos de unión tentativos para las variables específicas, los conceptos teóricos P1, P2 y P3 según lo utilizado en la presente se proporcionan solamente por conveniencia y tienen sustancialmente sus significados convencionales de Schlecter y Berger y denotan las porciones del inhibidor que se cree que llena los subsitios S1, S2, y S3 respectivamente de la enzima, donde S1 es adyacente al sitio de división y S3 está lejos del sitio de división. Los compuestos definidos por la fórmula I tienen el propósito de estar dentro del alcance de la invención, sin importar el modo de unión. En general el módulo de P1 será un 6-fluoro-3-oxo-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol protegido con N, P2 será un aminoácido protegido con N, mientras que P3 comúnmente comprende un grupo de cobertura tal como un radical heteroaroilo o aroilo sustituido ligado a P2 vía el enlace de carbono sustituido con Rb-haloalquilo. Los módulos individuales protegidos convenientemente se pueden preparar primero y después unirse juntos es decir P2 + P1?P2-P1. Alternativomente, los precursores de los módulos se pueden unir juntos y modificarse en una fase posterior de la síntesis de la secuencia del inhibidor. Los módulos adicionales, los precursores de los módulos o fragmentos más grandes prefabricados de la estructura deseada, entonces se pueden unir a la cadena de crecimiento, por ejemplo R3-E-P2*+P1?R3-E-P2-P1 o R3-E*+P2-P1?R3-E-P2-P1, donde * denota una forma activada.

La formación de un enlace péptido, es decir la unión se puede realizar usando los procedimientos de unión estándares tal como el método de azida, método de anhídrido de ácido carboxílico-carbónico mezclado (cloroformiato de isobutilo), método de carbodiimida (diciclohexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida, o carbodiimida soluble en agua), método de éster activo (éster de pnitrofenilo, éster de ¡mido N-hidroxisuccínico), método K del reactivo Woodward, método de carbonildiimidazol, métodos con reactivos de fósforo o métodos de reducción por oxidación. Algunos de estos métodos (especialmente el método de carbodiimida) se pueden mejorar agregando 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Estas reacciones de unión se pueden realizar en la solución (fase líquida) o fase sólida. Más explícitamente, la etapa de unión implica la unión deshidratante de un carboxilo libre de un reactivo con el grupo amino libre del otro reactivo en presencia de un agente de unión para formar un enlace amida de unión. Las descripciones de tales agentes de unión se encuentran en libros de texto generales de química de péptidos, por ejemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2nd rev ed., Springer-Verlag, Berlín, Alemania, (1993) de aquí en adelante referido simplemente como Bodanszky, cuyo contenido es incorporado en este medio por referencia. Los ejemplos de agentes de unión convenientes son N,N'-diciclohexilcarbodiimida, 1-hidroxibenzotriazol en presencia de N,N'-diciclohexilcarbodiimida o N-etil-N'-[(3-dimetilamino)propil]carbodiimida. Un agente de unión práctico y útil es el hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)tris-(dimetilamino)fosfonio, por sí mismo o en presencia de 1-hidroxibenzotriazol o 4-DMAP. Otro agente de unión práctico y útil es tetrafluoroborato de 2-(1 H-benzotriazol-1-¡l)-N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible comercialmente. Aún otro agente de unión práctico y útil es hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotrizol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio disponible comercialmente. La reacción de unión se conduce en un solvente inerte, por ejemplo diclorometano, acetonitrilo o dimetilformamida. Un exceso de amina terciaria, por ejemplo diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-metilpirrolidina o 4-DMAP se agrega para mantener la mezcla de reacción a un pH de aproximadamente de 8. La temperatura de reacción oscila generalmente entre 0°C y 50°C y el tiempo de reacción oscila generalmente entre 15 minutos y 24 h. Los grupos funcionales de los aminoácidos no naturales constituyentes generalmente se deben proteger durante las reacciones de unión para evitar la formación de enlaces indeseados. Los grupos de protección que se pueden utilizar se enumeran en Greene, "Protective Groups ¡n Organic Chemistry", John Wiley & Sons, New York (1981) y "The Peptides: Analysis, Synthesis, Biology", Vol. 3, Academic Press, New York (1981), de aquí en adelante referidos simplemente como Greene, cuyas descripciones se incorporan en este medio por referencia. El grupo alfa-carboxilo del residuo de la terminal C se protege generalmente como un éster que se puede dividir para proporcionar el ácido carboxílico. Los grupos de protección que se pueden utilizar incluyen 1) los alquilésteres tal como metilo, trimeti Isililo y t-butilo, 2) aralquilésteres tal como bencilo y bencilo sustituido, o 3) esteres que se pueden dividir por medios base moderados o reductores moderados tal como tricloroetilo y esteres de fenacílo. El grupo alfa-amino de cada aminoácido que se unirá está comúnmente protegido con N. Cualquier grupo de protección conocido en la técnica se puede utilizar. Los ejemplos de tales grupos incluyen: 1) grupos acilo tal como formilo, trifluoroacetilo, ftalilo, y p-toluensulfonilo; 2) grupos carbamato aromáticos tal como benciloxicarbonilo (Cbz o Z) y benciloxicarbonilos sustituidos, y 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); 3) grupos carbamato alifáticos tal como tercbutiloxicarbonilo (Boc), etoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo, y aliloxicarbonilo; 4) grupos alquilo carbamato cíclicos tal como ciclopentiloxicarbonilo y adamantiloxicarbonilo; 5) grupos alquilo tal como trifenilmetilo y bencilo; 6) trialqu ilsililo tal como trimeti Isililo; y 7) grupos que contienen tiol tal como andditiasuccinoilo de asfeniltiocarbonilo. El grupo de protección alfa-amino preferido es Boc o Fmoc. Muchos derivados de aminoácidos protegidos convenientemente para la síntesis de péptidos están disponibles comercialmente.

El grupo de protección alfa-amino comúnmente se divide antes de la siguiente etapa de unión. Cuando se utiliza el grupo Boc, los métodos de elección son ácido trifluoroacético, puro o en diclorometano, o HCl en dioxano o en acetato etilo. La sal de amonio resultante entonces se neutraliza antes de la unión o in situ con soluciones básicas tal como amortiguadores acuosos, o aminas terciarias en diclorometano o acetonitrilo o dimetilformamida. Cuando se utiliza el grupo Fmoc, los reactivo de elección son piperidina o piperidina sustituida en dimetilformamida, pero se puede utilizar cualquier amina secundaria. La desprotección se realiza a una temperatura entre 0°C y temperatura ambiente generalmente 20-22°C. Cualquiera de los aminoácidos naturales o no naturales que tienen funcionalidades de la cadena lateral serán protegidos comúnmente durante la preparación del péptido usando cualquiera de los grupos descritos anteriormente. Los expertos en la técnica apreciarán que la selección y uso de los grupos de protección apropiados para estas funcionalidades de la cadena lateral dependan del aminoácido y de la presencia de otros grupos de protección en el péptido. En la selección de tales grupos de protección es deseable que el grupo no se elimine durante la desprotección y la unión del grupo alfa-amino. Por ejemplo, cuando se utiliza Boc como el grupo de protección alfa-amino, son convenientes los siguientes grupos de protección de la cadena lateral: los radicales de p-toluensulfonilo (tosilo) se pueden utilizar para proteger la cadena lateral amino de los aminoácidos tal como Lys y Arg; los radicales de acetamidometilo, bencilo (Bn), o terc-butilsulfonilo se pueden utilizar para proteger la cadena lateral que contiene sulfuro de la cisteína; los benciléteres (Bn) se pueden utilizar para proteger las cadenas laterales que contienen hidroxi de la serina, treonina o hidroxiprolina; y los bencilésteres se pueden utilizar para proteger las cadenas laterales que contienen carboxi del ácido aspártico y ácido glutámico. Cuando se elige Fmoc para la protección de la alfa-amina, generalmente son aceptables los grupos de protección basados tere-butilo. Por ejemplo, Boc se puede utilizar para la lisina y arginina, el terc-butiléter para la serina, treonina y hidroxiprolina, y el terc-butiléster para el ácido aspártico y ácido glutámico. El radical de trifenilmetilo (trifilo) se puede usar para proteger la cadena lateral que contiene sulfuro de la cisteína. Una vez que se termine la secuencia del inhibidor se elimina cualquier grupo de protección de cualquier manera dictada por la elección de los grupos de protección. Estos procedimientos son bien conocidos por los expertos en la técnica. La primera etapa en una síntesis de compuestos de la fórmula general II es comúnmente la preparación en la solución de un módulo P1 funcionalizado. Se puede utilizar una diferente nomenclatura de los compuestos de acuerdo a la presente invención. Por conveniencia, la nomenclatura del carbohidrato será utilizada generalmente en la presente. U n esquema de reacción común hacia un grupo P 1 bicíclico comienza con el cierre del anillo de un intermediario convenientemente protegido que esta disponible en 4 etapas a partir de 1 ,2:5,6-di-O-isopropilidene-D-alofuranosa, descrito por Mayer zum Reckendorf, Chem . Ber. 101 (1968) , 3802-3807, proporcionado un precursor de la estereoq uímica de 3S,4R. 1 3 Esquema de reacción 1. a) H2, Pd/C, metanol, b) bencilcloroformiato, piridina, diclorometano En el esquema de reacción 1 el grupo azida del derivado 1 es reducido por ejemplo por hidrogenación catal ítica usando paladio en carbón u otros catalizadores convenientes, en un solvente conveniente tal como un alcohol , similar al etanol o metanol en la amina libre. El nitrógeno n ucleofílico obtenido reacciona espontánea, u opcionalmente en presencia de una base conveniente tal como trietilamina o acetato de sodio , con la posición C-6 q ue forma un 5,5-biciclo. El grupo saliente en C-6 no está limitado a los esteres de sulfonato, pero también otros grupos salientes tal como halógeno se podrían utilizar a través de la síntesis de los compuestos de acuerdo a la presente invención .

La reducción del resid uo azida a una amina también se podría realizar por otros métodos conocidos de la literatura, tal como tratar el derivado de azida con una trialquil- o triaril-fosfina seguido por la hid rólisis del derivado imina formado. Después del cierre del anillo, la amina se puede proteger con N mediante un grupo de protección conveniente tal como un carbamato , similar al carbamato de bencilo del compuesto 3 o cualq uier otro grupo de protección similar que no se divida normalmente con ácido . Los grupos de protección convenientes que se pueden encontrar en : Protective groups in organic chemistry, 3ra edición , 1999, Theodora W. Greene y Peter G . M . Wuts (Wiley & Sons) . Para un biciclo de 3R,4S se puede utilizar un método similar in iciando a partir de 3-azido-3-deox¡-1 ,2 :5,6-di-O-isopropiliden-D-gulofuranosa que se puede preparar seg ún lo descrito en Tetrahedron Asymmetry, 10 (1999) 1855-1859. Este intermediario entonces se puede tratar según lo descrito en el esquema de reacción 2.

Cbz 6 Esquema de reacción 2. a) ácido acético acuoso, b) cloruro de p-toluensulfonilo, piridina, DCM, c) H2, Pd/C, metanol, d) bencilcloroformato, piridina, diclorometano.

El compuesto 4 se puede tratar con un ácido suave, tal como ácido acético diluido o similar, que puede hidrolizar selectivamente 5,6-acetal del compuesto 4, para obtener un diol. El alcohol primario se puede hacer reaccionar selectivamente con un cloruro de alquil- o aril-sulfonilo similar al cloruro de p-toluensulfonilo para dar el compuesto 5. El grupo azida del derivado 5 es reducido por ejemplo por hidrogenación catalítica usando el paladio en carbón u otros catalizadores convenientes, en un solvente conveniente tal como alcohol, como etanol o metanol a amina libre. El nitrógeno nucleofílico obtenido reacciona espontánea, u opcionalmente en presencia de una base conveniente tal como el trietilamina o acetato de sodio, con la posición C-6 formando un 5,5-biciclo que se puede proteger con N con un grupo de protección conveniente tal como su carbamato de bencilo (Cbz) para proporcionar el compuesto 6.

Alternativamente 3-azido-3-deoxi-1 ,2:5,6-di-O-isopropiliden-D-idofuranosa (Bull. Chem. Soc. Japón, 57, 7(1984), 237-241) podría ser un material de inicio conveniente para el biciclo de 3R,4S de acuerdo al esquema de reacción 3.

Esquema de reacción 3. a) ácido acético acuoso, b) cloruro de p-toluensulfonilo, piridina, DCM, c) H2, Pd/C, metanol, b) bencilcloroformiato, piridina, diclorometano. El compuesto 6 se puede tratar con un ácido suave, tal como ácido acético diluido o similar, que puede hidrolizar selectivamente el 5,6-acetaI del compuesto 6, para obtener un diol. El alcohol primario se puede hacer reaccionar selectivamente con un cloruro de alquil- o aril-sulfonilo similar al cloruro de p-toluensulfonilo para dar el compuesto 7. El grupo de azida del derivado 7 es reducido por ejemplo por hidrogenación catalítica usando el paladio en el carbón u otros catalizadores convenientes, en un solvente conveniente tal como un alcohol, como etanol o metanol en amina libre. El nitrógeno nucleofílico obtenido reacciona espontánea, u opcionalmente en presencia de una base conveniente tal como trietilamina o acetato de sodio, con la posición C-6 formando un 5,5-biciclo que se puede proteger con N con un grupo de protección conveniente tal como su carbamato bencilo (Cbz) para dar el compuesto 8. El cierre del anillo no se limita a los sustratos mostrados anteriormente pero también se podría aplicar a los derivados según lo representado en el esquema de reacción 4.

Esquema de reacción 4. a) reducción de azida a una amina seguida por el cierre del anillo, b) protección de la amina. Rx en el esquema de reacción 4 se puede elegir de metilo, trifluorometilo, p-metilfenilo o residuos similares presentes en los alquilsulfonilhaluros disponibles fácilmente, preferiblemente un Rx crudo conveniente para la reacción regioselectiva en el alcohol primario de un diol según lo descrito en Chem. Ber. 101 (1968), 3802-3807. R1' y R2' son R1 y R2 según lo definido. Pg podría ser un grupo de protección conveniente tal como un carbamato, similar al carbamato de bencilo o cualquier grupo de protección similar que normalmente no se divida con ácido.

Los sustratos adicionales para la reacción de cierre de anillo podían ser los compuestos representados en el esquema de reacción 5.

Esquema de reacción 5. a) reducción de azida a una amina seguida por el cierre del anillo, b) protección de la amina (opcional). Rx en el esquema de reacción 5 se puede elegir de metilo, trifluorometilo, p-metilfenilo o residuos similares presentes en los alquilsulfonilhaluros disponibles fácilmente, preferiblemente un Rx crudo conveniente para la reacción regioselectiva en el alcohol primario de un diol según lo descrito en Chem. Ber. 101 (1968), 3802-3807. R1' y R2' son R1 y R2 según lo definido anteriormente. Ry puede ser hidrógeno o un grupo protector hidroxilo, preferiblemente un grupo protector de tipo éter.

Preferiblemente Ry es hidrógeno. PG podría ser un grupo protegido con N conveniente tal como un carbamato, para los derivados en el esquema de reacción 5, Ry es comúnmente hidrógeno. Otras metodologías para obtener un 5,5-biciclo son descritas por G. Lin y Z. Shi, Tetrahedron, 53, 4, 1369-1382, 1997. La modificación adicional del compuesto 5,5-bicíclico obtenido en el esquema de reacción 1 se describe en el esquema de reacción 6.

Esquema de reacción 6. a) bromuro de bencilo, hidruro de sodio, DMF. b) BF3-Et2O, Et3SiH, DCM. c) H2, Pd/C, Boc2O, 1:1 EtOAc-EtOH. d) piridina, anhídrido acético, e) H2, Pd/C, EtOAc El compuesto 9 es protegido con un grupo de protección estable de ácido conveniente tal como metiléter sustituido, en detalle un benciléter, tratando el mono-ol 9 con una base tal como hidruro de sodio o hidróxido de sodio en un solvente aprótico tal como N,N-dimetilformamida (DMF) en presencia del agente alquilante deseado tal como haluro de bencilo, en particular bromuro de bencilo. El material obtenido entonces se puede reducir al compuesto 10 de acuerdo a los métodos descritos por G. J. Ewing y M . J . Robins, Org. Lett. 1 , 4, 1999, 635-636, o por referencias en el mismo. Preferiblemente la reducción se realiza con exceso de eterato de trifluoruro de boro en presencia de un agente de reducción tal como trialquilsilano, en particular con exceso de trietilsilano en un solvente no prótico conveniente tal como diclorometano. La hidrogenación catalítica del compuesto 10 usando por ejemplo paladio en carbón en un solvente conveniente o mezcla del solvente tal como acetato de etilo-etanol en una atmósfera de hidrógeno, en presencia de dicarbonato de di-terc-butilo seguida por el tratamiento del producto con anh ídrido acético en piridina, proporciona el intermediario 1 1 . Por la hidrogenación catalítica repetida, según lo descrito anteriormente, se obtienen mono-ol 12. U n flú or se puede introd ucir en el compuesto 1 2 , y el comp uesto bicícl ico entonces se desprotege con N de acuerdo al esq uema de reacción 7.

Esquema de reacción 7. a) Deoxo-Fluor®, diclorometano. b) metóxido metanólico de sodio, c) 1:1 diclorometano-ácido trifluoroacético.

El compuesto 13 se puede tratar con un agente fluorante tal como [trifluoruro de bis-(2-metoxiet¡l)aminoazufre] (Deoxo-Fluor®) o con agentes fluorantes similares tal como trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST) que proporciona el producto 14 con la inversión de la configuración en C-5. El compuesto 14 entonces se desacetila por el tratamiento por ejemplo con metóxido de sodio metanólico, o cualquier solución alcalina similar con una base inorgánica tal como hidróxido de sodio o carbonato de sodio, seguido por la desprotección con N usando las condiciones acidas tal como soluciones de diclorometano-ácido trifluoroacético u otros métodos que se podrían encontrar en: Protective Groups in Organic Chemistry, 3ra edición, 1999, Theodora W. Greene y Peter G. M. Wuts (Wiley & Sons).

Alternativamente el flúor epimérico se puede obtener tratando el derivado 9 anterior de acuerdo al esquema de reacción 8.

Esquema de reacción 8. a) diisopropilazodicarboxilato, ácido benzoico, PPh3, THF. b). metóxido de sodio metanólico. c) bromuro de bencilo, hidruro de sodio, DMF. d) BF3-Et2O, Et3S¡H, diclorometano. e) H2, Pd/C, Boc2O, 1:1 EtOAc-EtOH. f) piridina, anhídrido acético, g) H2, Pd/C, EtOAc. h) Deoxo-Fluor®, diclorometano. i), metóxido de sodio metanólico. j) 1:1 ácido trifluoroacético de diclorometano. La inversión de la configuración en C-5 se puede lograr haciendo reaccionando el compuesto 16 bajo las condiciones Mitsunobo que proporcionan un éster de benzoato. La hidrólisis del éster con metóxido de sodio metanólico seguida por el tratamiento de mono-ol con bromuro de bencilo proporciona el epímero 17 protegido con bencilo. Las etapas de reacción d-j en el esquema de reacción 8 son según lo descrito en los esquemas de reacción 6 y 7.

Una ruta adicional a un "derivado difluoro" en donde R1 y R2 son fluoro, se muestra en el esquema de reacción 9.

BocHN OH BocHN /QH 29 30 Esquema de reacción 9. a) bromuro bencilo, hidrup o de sodio, DMF. b) Et3SiH, BF3.Et2O o trifluorometansulfonato de trimetilsililo, DCM. c) H2, Pd/C, Boc2O, EtOAc-EtOH. d) cloruro de benzoilo, piridina, DCM. e) H2, Pd/C, EtOAc. f) Bu2SnO, tolueno, reflujo, g) bromuro de bencilo, fluoruro de cesio, DMF. h) periodinano Dess-Martin. i) Deoxo-Fluor® o trifluoruro de dietilaminoazufre, DCM. j). metóxido de sodio metanólico, k) H2, Pd/C, EtOAc. I) cloruro de p-toluensulfonil o, piridina, DCM. m) DCM, ácido trifluoroacético, n) trietilamina, diclorometano. La síntesis del módulo P1 se puede iniciar a partir del compuesto 21 (3-azido-3-deoxi-1 ,2-O-isopropiliden-D-allofuranosa) que es descrito por Mayer zum Reckendorf, Chem. Ber. 101 (1968), 3802-3807. El tratamiento del compuesto 21 con un agente bencílante similar al bromuro de bencilo o cloruro de bencilo en presencia de una base, tal como hidruro de sodio o hidróxido de sodio en un solvente polar aprótico, tal como N,N-dimetilformamida, proporciona el derivado 22. El compuesto 22 entonces se trata con silano de trialquilo, tal como silano de trietilo, con un exceso de un ácido de Lewis tal como eterato de trifluoruro de boro o trifluorometansulfonato de trimetilsililo, en un solvente aprótico tal como diclorometano. La azida resultante entonces se puede reducir selectivamente por hidrogenación catalítica usando por ejemplo paladio en carbón en presencia de carbonato de di-terc-butilo para obtener el compuesto 23. Alternativamente la azida se podría reducir con otros métodos conocidos en literatura tal como trifenilfosfina-agua, seguido por la protección que proporciona un carbamato conveniente. Para evitar problemas con la regioselectividad en las siguientes etapas, el compuesto 23 se podría tratar con un agente acilante tal como un cloruro de acilo o anhídrido de ácido, tal como cloruro de benzoilo, en una base orgánica pura tal como piridina o trietilamina, o en una mezcla de un solvente aprótico tal como diclorometano y una base para dar el compuesto 24. La hidrogenación catalítica del compuesto 24 según lo descrito anteriormente da el diol 25. La bencilación selectiva en el alcohol primario del compuesto 25 se puede lograr por varios métodos conocidos en la literatura. En el esquema de reacción 9 el diol se somete a reflujo con óxido de dibutilo de estaño en un solvente conveniente tal como tolueno para formar un acetal de estaño. El acetal de estaño entonces se puede hacer reaccionar con un exceso pequeño de bromuro de bencilo y fluoruro de cesio en DMF que da el compuesto deseado 26. La oxidación de 26 con un agente oxidante conveniente tal como periodinano Dess-Martin en diclorometano convierte el alcohol secundario al compuesto 27 de ceto conveniente para convertirlo en difluoruro 28. Esto se puede lograr tratando el compuesto 27 con exceso de un agente fluorante tal como Deoxo-Fluor®, o con trifluoruro de dietilaminoazufre (DAST), en un solvente aprótico tal como diclorometano o 1 ,2-dicloroetano. El éster de benzoato del compuesto 28 se puede dividir con álcali tal como metóxido de sodio metanólico, seguido por la desbencilación usando la hidrogenación catalítica para obtener el diol 29. La introducción selectiva de un éster de sulfonato en alcohol primario se puede lograr tratando el compuesto 29 con un exceso pequeño de cloruro de alquil- o aril-sulfonilo en presencia de una base tal como piridina en solvente conveniente tal como diclorometano, agregando el agente sulfonante a temperatura reducida y aumentándola lentamente hasta temperatura ambiente, lo cual proporciona el mono-ol 30. El tratamiento del compuesto 30 bajo condiciones acidas tal como mezclas de diclormetano-ácido trifluoroacético , libera la amina, y tratar el producto con una base tal como trietilamina promueve el cierre del anillo interno lo cual proporciona el módulo 31 . Las rutas alternativas a 5,5-biciclos se muestran en los esquemas de reacción 10 y 1 1 .

Esquema de reacción 10. a) agente fluorante, b) reducción de amina o desprotección con N , seg uida opcionalmente por la protección con N . c) agente de reducción . En el esquema de reacción 10 un derivado tal como el compuesto 32 (disponible según lo descrito anteriormente o con métodos bien conocidos en la técnica) con los sustituyentes en C-3 y C-4 en la relación cis, Lg es un grupo saliente tal como halógeno o un éster de sulfonato, y con R igual a una azida o a un nitrógeno protegido con un grupo de protección con N conveniente, se puede tratar con un agente fluorante tal como el mencionado anteriormente , produciendo así el compuesto 33. Durante la liberación de la amina enmascarada con la reducción de azida o por un método conven iente de desprotección , la amina podría realizar un ataque intramolecular en C-6 produciendo un 5,5-biciclo con la estructura 34, que opcionalmente pod ría protegerse con N (Pg = grupo de protección o hidrógeno). La reducción de C-1 con un agente de red ucción conveniente tal como el descrito anteriormente o con un agente de reducción similar, proporcionaría el módulo 35. En el esquema de reacción 1 1 se representa una ruta alternativa a un difluoro-5,5-biciclo .

Esquema de reacción 11. a) oxidación , b) agente fluorante, c) reducción de azida o desprotección con N , seg uida opcionalmente por la protección con N . d) agente de red ucción . En el esquema de reacción 1 1 , el compuesto 36 (disponible seg ún lo descrito anteriormente o con los métodos bien conocidos en la técnica) con los sustituyentes en C-3 y C-4 en la relación cis, Lg es un grupo saliente tal como halógeno o un éster de sulfonato, y con R igual a una azida o a un nitrógeno protegido con un g rupo de protección conveniente, se puede oxidar con una reacción de tipo Swem u otros métodos convenientes que puedan dar el compuesto 37. El tratamiento del compuesto 37 de acuerdo al esquema de reacción 11 con un exceso de agente fluorante tal como el mencionado anteriormente, da el compuesto 38. Durante la liberación de la amina enmascarada de 38 con la reducción de azida o por un método conveniente de desprotección, la amina podría realizar un ataque intramolecular en C-6 produciendo un 5,5-biciclo con la estructura 39, que opcionalmente podría protegerse con N (Pg = grupo de protección o hidrógeno). La reducción de C-1 con un agente de reducción conveniente tal como el descrito anteriormente o con un agente de reducción similar, da el módulo 40. Una ruta conveniente a los compuestos, en donde R1 o R2 es un halógeno tal como cloro, se representa en el esquema de reacción 12.

Esquema de reacción 12. a) Cloruro de tionilo, b) metóxido de sodio metanólico. c) 1:1 diclorometano-ácido trifluoroacético, d) cloruro de tionilo, piridina El módulo P1 es alargado comúnmente con el aminoácido P2 natural o no natural (o el módulo P3+P2) por químicas convencionales de solución o fase sólida, tal como las representadas o ejemplificadas posteriormente, o descritas en los documentos WO00/69855 o WO02/057270. Los grupos P2 y P3 están disponibles comercialmente como enantiómeros o se pueden disolver nuevamente a partir del racemato o se pueden obtener usando las transformaciones químicas simples conocidas por el experto en la técnica. Por ejemplo, el ácido 4-(metilo-piperazina-1 -M)-benzoico se puede obtener usando la química Buchwaid (S. L. Buchwaid y J. P. Wolfe, Journal of Organic Chemestry, 2000, 65, 1 144) y elaborase posteriormente. Otros núcleos P3 tal como ácido 4-(1 -piperidin-4-il)-benzoico están preparados a partir de 1 -(4-fenil-piperidina-1 -il)-etanona usando una reacción de acilación de Friedel-Crafts y se elaboran posteriormente usando las transformaciones químicas estándares conocidas por el experto en la técnica. Alternativamente, otros radicales P3, tal como ácido 5-[2-(4-morfolinil)etoxi]-2-benzofuran-2-carboxílico, están preparados usando las reacciones de Mitsunobu en fase sólida según lo detallado por L. S. Richter y T. R. Gadek en Tetrahedron Lett., 1994, 35, 4705. 1. desprotección con N 2. Alquilación (u otra adición del grupo de finalización R6-haloaquilo Esquema de reacción 13. Alargamiento común de cetona cíclica Alternativamente el módulo P 1 al igual que el hidroxilo se puede alargar y oxidar posteriormente según lo mostrado en el esquema de reacción 14. desprotección Esquema de reacción 14. alargamiento común de un mód ulo P 1 hidroxilado La parte final P3 es alargada comúnmente por la reacción de un compuesto intermediario de la fórmula haloalquilo R6 / LG Rc donde R6 y Rc son según lo defin ido anteriormente y LG es un grupo saliente convencional tal como trifluorometansu lfonato, y similares, con el módulo P1 /P2 desprotegido con N mostrado anteriormente. La reacción se realiza en un solvente orgánico conveniente, incluyendo pero sin limitarse a, los solventes orgánicos halogenados tal como cloruro de metileno, 1 ,2-dibromoetano, y similares, solventes etéreos tal como dietiléter, tetrahidrofuran , acetonitrilo , o solventes aromáticos tal como benceno, tolueno, xileno, y similares, o mezclas de los mismos y opcionalmente en presencia de una base orgánica o inorgánica. Preferiblemente, la base orgánica es trietilamina , piridina , N-metilmorfolina, colidina , diisopropiletilamina, y similares. Preferiblemente, la base inorgánica es carbonato de cesio, carbonato de sodio, bicarbonato de sodio, y similares. La reacción se realiza opcionalmente en presencia de un elemento deshidratador tal como tamices moleculares . Preferiblemente, la reacción se realiza a temperatura ambiente. El intermediario se puede preparar por métodos bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, un compuesto donde R6 es fenilo o 4-fluorofenilo, Rb es trifluorometilo, y Rc es hidrógeno, se puede preparar fácilmente a partir de 2 ,2,2-trifluoroacetofenona disponible comercialmente o 2 ,2,2 ,4'-tetrafluoroacetofona respectivamente, red uciendo el grupo ceto a un grupo alcohólico por el agente de reducción conveniente tal como borohidruro de sodio, hidruro de aluminio de litio, y similares. El solvente usado depende del tipo de agente de reducción. Por ejemplo, cuando se utiliza el borohidruro de sodio la reacción se realiza en un solvente orgánico alcohólico tal como metanol, etanol, y similares. Cuando se utiliza el hidruro de aluminio de litio la reacción se realiza en un solvente etéreo tal como tetrahidrofuran, y similares. La reacción de 2,2,2-trifluoro-1-feniletanol o 2,2,2-trifluoro-1-(4-fluorofenil)etanol con anhídrido tríflico proporciona el compuesto deseado. El intermediario enriquecido de manera quiral se puede obtener por la reducción de la acetofenona halogenada correspondiente con un agente de reducción conveniente tal como catecolborano o complejo de BH3-DMS en presencia de un catalizador conveniente tal como (catalizador de CBS A o (R) o (A o (R)-a-difenil-2-pirrolidina-metanol en presencia de BBN. De una manera correspondiente, el intermediario de la fórmula: haloalquilo R6 / LG Rc se puede hacer reaccionar con el módulo P2 protegido con carboxi, que es desprotegido y alargado posteriormente con el módulo P1 según lo descrito en la presente.

Alternativamente el intermediario descrito anteriormente se hace reaccionar: LG es un grupo saliente conveniente tal como trifluorometansulfonato, y PG es un grupo de protección hidroxilo conveniente tal como trialquilsililo, y similares, bajo las condiciones de reacción descritas anteriormente. La hidroxietilamida protegida con O resultante se oxida al ácido carboxílico correspondiente y se une al módulo P1 según lo descrito posteriormente. Los grupos de protección hidroxilo conveniente y las condiciones de reacción para colocarlos y removerlos se pueden encontrar en Greene, T.W.; y Wuts, P. G. M. Protecting Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc. 1999. La hidroxietilamina P2 se puede preparar a partir de los aminoácidos naturales y artificiales correspondientes por métodos bien conocidos en la técnica. Algunos de tales procedimientos se describen en la Publicación de Solicitud PCT No. WO 03/075836, cuya descripción es incorporada en la presente por referencia en su totalidad. Alternativamente los compuestos en donde E es -CRbRc-, se pueden preparar por la reacción de un compuesto de la fórmula O R6 Rb donde R6 está un grupo cíclico según lo definido anteriormente y Rb es halometilo, preferiblemente trifluorometilo con el módulo P2 protegido con carboxi desprotegido con N o el mód u lo P 1 /P2 presentado anteriormente bajo cond iciones reductoras de reacción de aminación . La reacción se realiza en presencia de un agente deshidratante conveniente tal como TiCI4, sulfato de magnesio , trifluoroacetato de isopropilo, en presencia de una base tal como diisopropiletilamina, piridina, y similares y en un solvente orgánico conveniente tal como cloruro de metileno para dar una imina . La imina se reduce con un agente de red ucción conven iente tal como borohidruro de sodio, cianoborohidruro de sodio, y similares en un solvente orgánico conveniente tal como metanol , etanol, y similares. Alternativamente los compuestos en donde E es -CRbRc-, se pueden preparar por la reacción del haloalquilaldehído con una amina según lo mostrado abajo: fórmula ll R5, R5', R6 y Rb son seg ún lo definido anteriormente. La condensación del haloalquilaldeh ído con una aminoetanol (preparado reduciendo el aminoácido alfa correspondiente 5/5' con un agente de reducción conveniente tal como hidruro de aluminio de litio, y similares bajo condiciones bien conocidas en la técnica), utilizando el aparato Dean Stark se proporciona la amina cíclica representada que durante la reacción con un reactivo de Grignard de fórmula R6MgX (donde X es halo) o un reactivo de organolitio de fórmula R6Lil, proporciona la hidroxietilamida representada. La oxidación de la hidroxietilamida con un agente de oxidación conveniente tal como el reactivo de oxidación Jones o H5IO6/Cr?3, y similares, entonces proporciona el módulo P3/P2 que está alargado en la terminal C con el módulo P1 y se oxida según sea necesario. Según lo descrito anteriormente, el alargamiento se realiza comúnmente en presencia de un agente de unión conveniente por ejemplo hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitrispirrolidinofosfonio (PiBOP), hexafluorofosfato de O-benzotriazol-1-il-N,N,N',N'-tetrametil-uronio (HBTU), hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-1 ,1 ,3,3-tetrametil-uronio (HATU), hidrocloruro de 1-(3-dimetilaminopropi!)-3-etilcarbodiimida (EDC), o carbodiimida de 1 ,3-diciclohexilo (DCC), opcionalmente en presencia de 1-hidroxibenzotriazol (HOBT), y una base tal como N'N-diisopropiletilamina, trietilamina, N-metilmorfolina, y similares. La reacción se realiza comúnmente a 20 a 30°C, preferiblemente a aproximadamente 25°C, y requiere 2 a 24 h para que se complete. Los solventes de reacción convenientes son solventes orgánicos inertes tal como solventes orgánicos halogenados (por ejemplo, cloruro de metileno, cloroformo, y similares), acetonitrilo, N,N-dimetilformamida, solventes etéreos tal como tetrahidrofuran, dioxano, y similares. Alternativamente, la etapa de unión de alargamiento anterior se puede realizar primero convirtiendo el módulo P3/P2 en un derivado de ácido activo tal como éster de succinimida y en seguida se hace reaccionar con la amina P1. La reacción requiere comúnmente 2 a 3 h para terminar. Las condiciones utilizadas en esta reacción dependen de la naturaleza del derivado de ácido activo. Por ejemplo, si es un derivado de cloruro de ácido de 4, la reacción se realiza en presencia de una base conveniente (por ejemplo trietilamina, diisopropiletilamina, piridina, y similares). Los solventes de reacción convenientes son solventes orgánicos polares tal como acetonitrilo, N,N-dimetilformamida, diclorometano, o cualquier mezcla conveniente de los mismos. El método anterior también se puede utilizar para preparar los compuestos donde Rc es distinto de hidrógeno, utilizando el procedimiento descrito anteriormente, pero sustituyendo R6COH con una cetona de la fórmula R6RbCO y después tratando la amina cíclica resultante con RcLi/RcMgX, seguida por la oxidación para dar el ácido libre. El ácido libre entonces se condensa bajo las condiciones descritas anteriormente.

Será evidente para el experto en la técnica, que los compuestos en donde E es CRbRc, también se pueden preparar como sigue: En particular la protección con convencional del aminoetanol descrito anteriormente seguida por la reacción con haloalquilhemiacetal proporciona, el compuesto de haloalquilimina representado, que se trata con un compuesto orgánico de litio de fórmula R6Li donde R6 es según lo definido anteriormente. La eliminación del grupo de protección de oxígeno proporciona la hidroxietilamida descrita en el esquema de reacción anterior en el cual de la manera correspondiente se oxida al ácido carboxílico y se alarga con el módulo P1. Los grupos de protección de oxígeno convenientes y las condiciones de reacción para ponerlos encendido y retirarlos se pueden encontrar en Greene, T.W.; y Wuts, P. G. M.; Protecting Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc. 1999. Alternativamente, un compuesto en donde E es CRbRc y R6 es arilo o heteroarilo, se puede preparar según lo ilustrado abajo: En particular el hemiacetal de haloalquilo descrito anteriormente se hacer reaccionar con el módulo P2 protegido para producir el intermediario 2-(1-hidroximetilamino)acetato representado. La reacción se realiza en presencia de una cantidad catal ítica de u n ácido tal como ácido p-tol uens u lfón ico y en u n solvente de hid rocarburo aromático tal como tol uen o , ben ceno, y similares. El tratam iento del intermed iario 2-(1 -hidroximetilamino)acetato con R6H bajo condiciones de reacción Friedel-Crafts/BF3-EtT2O proporciona el mód ulo P3/P2 protegido con carboxi q ue se alarga seg ún lo descrito a nteriormente. Similarmente , el haloalquil hemiacetal se puede hacer reaccionar con el mód u lo P2/P 1 , y oxidar a la cetona , seg ún sea necesario . El término "grupo de protección con N" o "protegido con N" según lo utilizado en la presente se refiere a los grupos con el propósito de proteger la terminal N de un aminoácido o péptido o con el propósito de proteger un grupo amino contra las reacciones indeseables durante los procedimientos sintéticos. Se describen los grupos de protección con N usados comúnmente en Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis" (John Wiley & Sons, New York, 1981 ), que se incorpora en este medio por referencia. Los grupos de protección con N incluyen los grupos acilo tal como formilo, acetilo, propionilo, pivaloilo, t-butilacetilo, 2-cloroacetilo, 2-bromoacetilo, trifluoracetilo, tricloroacetilo, ftalilo, O-nitrofenoxiacetilo, a-clorobutirilo, benzoilo, 4-clorobenzoilo, 4-bromobenzoilo, 4-nitrobenzoilo, y similares; grupos sulfonilo tal como bencensulfonilo, p-toluensulfonilo, y similares, grupos de formación de carbamato tal como benciloxicarbonilo, p-clorobenciloxicarbonilo, p-metoxibenciloxicarbonilo, p-nitrobenciloxicarbonilo, 2-nitrobenciloxicarbonilo, p-bromobenciloxicarbonilo, 3,4-dimetoxibenciloxicarbonilo, 4-metoxibenciloxicarbonilo, 2-nitro-4,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, 3,4,5-trimetoxibenciloxicarbonilo, 1 -(p-bifenilil)-l -metiletoxicarbonilo, a,a-dimetil-3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo, benzhidriloxicarbonilo, t-butoxicarbonilo, diisopropilmetoxicarbonilo, isopropiloxicarbonilo, etoxicarbonilo, metoxicarbonilo, aliloxicarbonilo, 2,2,2-tricloroetoxicarbonilo, fenoxicarbonilo, 4-nitrofenoxicarbonilo, fluorenil-9-metoxicarbonilo, ciclopentiloxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo, feniltiocarbonilo, y sim ilares ; grupos alqu ilo tal como bencilo, trifenilmetilo, benciloximetilo y similares; y grupos sililo tal como trimetilsililo y similares. Los grupos de protección con N favorecidos incluyen formilo, acetilo, benzoilo, pivaloilo, t-butilacetilo, fenilsulfonilo, bencilo, t-butoxicarbonilo (BOC) y benciloxicarbonilo (Cbz). Los grupos de protección hidroxi y/o carboxi también se revisan ampliamente en Greene ibid y incluyen éteres tal como metilo, metiléteres sustituidos tal como metoximetilo, metiltiometilo, benciloximetilo, t-butoximetilo, 2-metoxietoximetilo y similares, sililéteres tal como trimetilsililo (TMS), t-butildimetilsililo (TBDMS), tribencilsililo, trifenilsililo, t-butildifenilsililo, trisopropilsililo y similares, etiléteres sustituidos tal como 1 -etoximetilo, 1-metil-1 -metoxietilo, t-butilo, alilo, bencilo, p-metoxibencilo, dipehenilmetilo, trifenilmetilo y similares, grupos aralquilo tal como trifilo, y pixilo (derivados de 9-hidroxi-9-fenilxanteno, especialmente cloruro). Los grupos de protección éster hidroxi incluyen esteres tal como formiato, bencilformiato, cloroacetato, metoxiacetato, fenoxiacetato, pivaloato, adamantoato, mesitoato, benzoato y similares. Los grupos de protección carbonato hidroxi incluyen metilvinilo, alilo, cinamilo, bencilo y similares. Descripción Detallada de las Modalidades de la Invención Ahora serán descritas varias modalidades de la invención solamente por ilustración con referencia a los siguientes ejemplos. Ejemplo 1 Construcción del módulo P1 Etapa a) Una mezcla de 54 (5.2 g, 13.U mmol), paiadio-en-carbono (10%, Acros, 0.66 g) en metanol, fue hidrogenada a presión positiva ligera. El hidrógeno fue cambiado 3 veces durante un periodo de 1 h, después de la conversión completa indicada por TLC (petróleo éter-acetato de etilo 7:3 y diclorometano-metanol 9:1 , manchando con molibdato de amonio-sulfato de cerio) del material de inicio en una mancha activa distinta de UV mayor que colorea AMC, y algunas manchas móviles más grandes más diluidas (diclorometano-metanol 9:1 ). La mezcla de reacción después fue filtrada a través de Celite y concentrada, lo cual proporciono el compuesto crudo 55.

A una suspensión del residuo en diclorometano (60 mi) y píridina (3.2 mi, 40 mmol) a 0°C, se agregó bencilcloroformiato (0.93 mi, 6.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 h después de que se agregó piridina adicional (3 mi) y bencilcloroformiato (0.8 mi) a 0°C. La mezcla de reacción entonces se agitó a temperatura ambiente durante la noche, entonces se diluyó con diclorometano (100 mi), lavó sucesivamente con 1 M ácido sulfúrico acuoso (2 x 50 mi) y 1 M acuoso carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (1 x 50 mi), entonces se secó (sodio sulfato), filtró y concentró en sílice. La cromatografía instantánea (diámetro: 4 cm, YMC-gel: 50 g, eluyente de empaquetamiento: acetato de etilo en éter de petróleo 1:4) del residuo usando acetato de etilo en éter de petróleo 1:4 (350 mi), 2:3 (250 mi), 1:1 (250 mi), 3:2 (250 mi) y 3:1 (150 mi), proporcionó el compuesto 56 como un jarabe espumoso (2.71 g, 8.1 mmol, 62% durante las 2 etapas) después se seco al vacio durante la noche. datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, 1.33, 1.52 (2 s, 6H, C(CH3)2), 2.34 (2 d, 1 H, -OH), 3.04 (m, 1 H, H-6a), 3.97 (m, 1 H, H-6b), 4.19 (m, 1 H, H-5), 4.33 (m, 1 H, H-3), 4.68, 4.84 (2 d, 1 H, H-2), 4.79 (t, 1 H, H-4), 5.08-5.24 (m, 2H, CH2Ph), 5.86 (br s, 1 H, H-1), 7.30-7.42 (m, 5H, Ar-H).

Etapa b) A una suspensión agitada de hidruro de sodio (60% en aceite mineral, Aldrich, 0.34 g, 8.4 mmol) y del compuesto 56 (2.17 g, 6.47 mmol) en dimetilformamida (30 mi), se agregó bromuro de bencilo (0.81 mmol, 6.8 mmol) durante 5 minutos. Después de agitarse 1 h (TLC: acetato de etilo en éter de petróleo 2:3), metanol (aproximadamente 2 mi), se agregó para eliminar el exceso de reactivo, entonces se dividió inmediatamente entre acetato de etilo (180 mi) y agua (150 mi). La orgánica capa se lavó con agua (3 x 100 mi), entonces se secó (sodio sulfato), filtró y concentró en sílice. La cromatografía instantánea (diámetro: 4 cm, YMC-gel: 40 g, eluyente de empaquetamiento: acetato de etilo en éter de petróleo 1:4) del residuo usando acetato de etilo en éter de petróleo 1:4 (100 mi), 3:7 (250 mi) y 2:3 (250 mi), proporcionó un jarabe incoloro (2.7 g, 6.35 mmol, 98%) después secó al vacío durante la noche. datos de RMN (400 MHz, CDCI3): H, 1.31 (s, 3H, C(CH3)(CH3)), 1.51 (d, 3H, C(CH3)(CH3)), 3.29 (m, 1 H, H-6a), 3.78-3.96 (m, 2H, H-5 y H-6b), 4.22 (dd, 1 H, H-3), 4.64, 4.84 (2 M, 4H, H-2, H-4 y CH2Ph), 5.07-5.22 (m, 1 H, CH2Ph), 5.94 (m, 1 H, H-1), 7.28-7.39 (m, 10H, Ar-H).

Etapa c) A una solución agitada del compuesto 7 (2.635 g, 6.19 mmol) en diclorometano (28 mi) y silano de trietilo (9.9 mi, 61.9 mmol) a 0°C, se agregó éterato de borontrifluoruro (7.9 mi, 61.9 mmol) en una porción. La mezcla de reacción entonces se agitó a ta durante 24 h (TLC: éter de petróleo-acetato de etilo 4:1 y acetato de etilo-tolueno 3:2), después 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (40 mi) y un poco de carbonato de hidrógeno de sodio sólido se agregó cuidadosamente hasta que se detuvo el burbujeo. La mezcla resultante se dividió entre diclorometano (100 mi) y agua (100 mi). La capa orgánica se lavó con 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (1 x 100 mi) y salmuera (1 x 100 mi), entonces se secó (sodio sulfato), filtró y concentró en sílice. La cromatografía instantánea (diámetro: 4 cm, YMC-gel: 48 g, eluyente de empaquetamiento: acetato de etilo-tolueno 3:2) del residuo usando acetato de etilo en tolueno 3:2 (750 mi) proporcionó un jarabe duro incoloro (1.38 g, 3.74 mmol, 60%) de aproximadamente 85-90% de pureza de acuerdo a TLC. LR-EM: Calculado para C2?H24NO5: 370.2. Encontrado: 370.0 [M + H]. Etapa d) A una mezcla de compuesto 58 (1.38 g, 3.74 mmol), paladio en carbono (Acros, 10%, 0.12 g) y di-terc-butil-dicarbonato (0.82 g, 3.7 mmol) en acetato de etilo (50 mi) se hidrogenó a sobrepresión ligera. El hidrógeno se cambió 2 veces durante un periodo de 1 h y la reacción se monitoreó por CL-EM. Después de 1 h, se agregó paladio adicional en carbono (0.1 g) y la mezcla de reacción se trató con hidrógeno durante 1 hora adicional. La mezcla de reacción entonces se filtró a través de Celite y se concentró. El residuo se trató con 2:1 piridina-anhídrido acético (18 mi) durante la noche, y entonces se concentró. El residuo se disolvió nuevamente en diclorometano (60 mi) y se lavó sucesivamente con 1M ácido sulfúrico acuoso (2 x 40 mi) y 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (1 x 40 mi), y después se secó (sulfato de sodio) filtró y concentró. La cromatografía instantánea (diámetro: 3 cm, YMC-gel: 20 g, eluyente de empaquetamiento: acetato de etilo en tolueno 1:4) del residuo (disuelto en tolueno-acetato de etilo 4:1) usando acetato de etilo en tolueno 1:4 (200 mi) y 1:3 (150 mi) proporcionó un jarabe incoloro (1.13 g, 3.0 mmol, 80%) después se secó al vacío durante la noche. datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, 1.45 (s, 9H, C(CH3)3), 2.08 (s, 3H, COCH3), 3.10 (m, 1 H, H-6a), 3.74-3.99 (m, 3H, H-1a, H-5 y H-6b), 4.11 (m, 1 H, H-1 b), 4.16-4.74 (m, 4H H-3, H-4 y CH2Ph), 5.31 (m, 1 H, H-2), 7.28-7.40 (m, 5H, Ar-H). Etapa e) Una mezcla del compuesto 60 (1.08 g, 2.86 mmol) y paladio en carbono (10%, 0.15 g) en acetato de etilo (30 mi) se hidrogenó a sobrepresión ligera durante 2 h (TLC: tolueno-acetato de etilo 4:1 y 1:1), entonces se filtró a través Celite y concentró. La mezcla se concentró a partir de diclorometano (3 x 10 mi), entonces disolvió en diclorometano y se agregó a la solución trifluoruro de bis-(2-metoxietil)aminoazufre (50% en THF, 2.12 mi, 2 eq.) a 0°C. Después de agitarse a ta otra noche se agregó trifluoruro de bis(2-metoxietil)aminoazufre (50% en THF, 2 mi) y la mezcla de reacción se agitó a ta durante otra noche (TLC: tolueno-acetato de etilo 1:1 , manchado con ninhidrina), entonces se agregó cuidadosamente 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso hasta que se detuvo el burbujeo. La mezcla resultante se diluyó con diclorometano (50 mi), y la capa orgánica se lavó una vez con 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (40 mi), después se secó (sulfato de sodio), filtró y concentró. La cromatografía instantánea (diámetro: 3 cm, Silica: 25 g, eluyente de empaquetamiento: tolueno-acetato de etilo 4:1) del residuo (disuelto en tolueno-acetato de etilo 4:1) usando tolueno-acetato de etilo 4:1 proporcionó el compuesto 62 (0.49 g, 1.7 mmol, 59%) como un jarabe incoloro después se secó al vacío durante la noche. Parte del material de inicio y del intermediario de azufre se pudó recuperar de la mezcla de reacción. LR-EM: Calculado para C9H13FNO5: 234.1. Encontrado: 234.0 [M+2H-t-butil]. Ejemplo 2 Elargamiento con un P2 común Etapa a) H A una solución del compuesto 62 (0.49 g, 1.7 mmol) en metanol (9.5 mi) se agregó 0.5 M metóxido de sodio metanólico (1 mi), entonces se agitó a ta durante 30 min (TLC: tolueno-acetato de etilo 3:2, manchado con ninhidrina). Dowex W X 8 lavado con metanol (50-100 malla, forma H+) se agregó cuidadosamente (se monitoreó el pH by paper pH) se agregó hasta que fue neutral, entonces la mezcla se filtró y concentró. El residuo se disolvió en diclorometano y se agregó ácido trifluoroacético a 0°C. La mezcla de reacción entonces se agitó a ta durante 55 min (TLC: diclorometano-metanol 9:1, manchado con ninhidrina), entonces se concentró. La cromatografía en columna (diámetro: 2 cm, sílice: 15 g, eluyente de empaquetamiento: diclorometano-metanol 95:5) del residuo (disuelto en diclorometano-metanol 95:5) usando metanol en diclorometano 5:95 (150 mi), 7:93 (100 mi) y 1:9 (200 mi) proporcionó un jarabe duro que se cristalizó en reposo (0.39 g, 1.50 mmol, 88%). datos de RMN (400 MHz, DMSO-d6): H, 3.34, 3.44 (2 dd, 1 H, H-6a), 3.60-3.70 (m, 2H, H-1a y H-6b), 3.89 (dd, 1 H, H-1 b), 4.15 (d, 1 H, H-3), 4.51 (br s, 1 H, H-2), 4.76 (dd, 1 H, H-4), 5.26 (dd, 2JH,F = 48.3 Hz, H-5). Etapa b) A una solución agitada del compuesto 64 (0.34 g, 1.30 mmol), hidrocloruro de N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (0.28 g, 1.43 mmol), hidrato de 1-hidroxibenzotriazol (0.22 g) y monohidrato de N-(terc-butoxicarbonil)-1-leucina (0.34 g, 1.37 mmol) en DMF (10 mi), se agregó trietilamina (0.54 mi, 3.9 mmol), entonces se agitó a ta durante 24 h. La mezcla de reacción se divisió entre 10% ácido cítrico acuoso (30 mi) y acetato de etilo (10 mi). La capa de agua se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mi), entonces las capas orgánicas se combinaron, y lavaron sucesivamente con agua (1 x 20 mi) y 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (3 x 20 mi), después se secaron (sulfato de sodio), filtraron y concentraron en sílice. La cromatografía instantánea con acetato de etilo en éter de petróleo (40-60%, elusión con gradiente por etapas) del residuo, proporcionó 15 (0.35 g, 0.98 mmol, 75%) como un sólido amorfo incoloro. LR-EM: Calculado para C13H22FN2O5: 305.1. Encontrado: 305.1 [M + 2H-t-butil]. Ejemplo 3 Oxidación de la cetona P1 Este ejemplo muestra la oxidación de un compuesto modelo P3+P2 + P1 hidroxilado A una solución agitada del compuesto 66 (0.10 g, 0.25 mmol) en diclorometano (4 mi) a ta se agregó periodinano Dess-Martin (0.12 g, 0.28 mmol). Después de agitarse durante 90 minutos la mezcla de reacción se diluyó con diclorometano (10 mi), lavó con 1:1 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso-10% sodiotiosulfato acuoso (4 x 10 mi), entonces se secó (sulfato de sodio), filtró y concentró en sílice. La cromatografía instantánea con acetato de etilo en éter de petróleo (50-60%, elusión con gradiente por etapas) del residuo proporcionó 67 (0.072 g, 0.18 mmol, 71%) como una espuma incolora. El compuesto 67 se obtuvo como una mezcla de isómeros geométricos (rotámeros) y sus hidratos.

LR-EM: Calculado para C21H2 FN2O5: 403.2. Encontrado: 403.0 [M + H]. Una muestra de RMN de las cetoformas de 67 se obtuvo como sigue; 5 mg de compuesto 67 (mezcla de isómeros geométricos y formas de hidrato con la relación: hidrato/ceto 6:4) se disolvió en DMSO-d6, entonces se calentó hasta 100°C en el aparato de RMN y entonces se dejo llegar a 50°C durante lo cual el RMN indicó solamente las cantidades restantes de las formas de hidrato y la relación de los rotámeros fue de 2:1. datos de RMN (500 MHz, DMSO-d6, 50°C): 1H, 0.90-1.04 (m, 4 x CH3, formas mayores y menores), 1.39-1.82 (m, 2 x CH2C(CH3)2 y 2 x CH2C(CH3)2, formas mayores y menores), 3.56 ( , H-6a, menor), 3.82 (m, H-6A, mayor), 3.97-4.25 (m, 4 x H-1 , formas mayores y menores y H-6b, menor), 4.37 (dd, H-6b, mayor), 4.62 (d, H-3, menor), 4.79 (m, H, mayor), 4.84 (d, H-3, mayor), 4.94 (m, H-4, mayor), 5.12 (m, H-4, menor), 5.15-5.34 (m, H-5 mayor y H-5 menor, H menor, JH,F mayor= 49.1 Hz, JH,F menor = 49.4 Hz), 7.35 (t, 1 H, Ar-H), 7.47 (t, 1 H, Ar-H), 7.57-7.70 (m, 2H, Ar-H), 7.78 (d, 1 H, Ar-H), 8.18 (d, -NH, menor), 8.70 (d, -NH, mayor).

Ejemplo 4 Un Epíemro P1 Alternativo Etapa a) A una solución agitada del compuesto (60) (1.58 g, 4.19 mmol) en metanol (20 mi) se agregó una solución de 0.5 M metóxido de sodio en metanol (5 mi) a temperatura ambiente, entonces se agitó durante 40 min. La mezcla de reacción entonces se neutralizó con Dowex 50 WX 8 (H+-forma), filtró, se agregó trietilamina hasta aligerar el alcalino, entonces se concentró y se concentró a partir del tolueno (2 x 20 mi). A una solución agitada del residuo e imidazol (0.43g, 6.28mmol) en DMF (10ml) a 0°C, se agregó terc-butildimetilclorosilano (0.76 g, 5.02 mmol), después se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción entonces de diluyó con acetato de etilo (100 mi), lavó sucesivamente con 10% ácido cítrico acuoso (3 x 50 mi) y 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (3 x 5Oml), se secó (sulfato de sodio), filtró y concentró en sílice. La cromatografía en columna (elusión con gradiente por etapas, acetato de etilo en tolueno, 5-20%) del residuo proporcionó el intermediario completamente protegido como un jarabe (1.86g). Una mezcla de paladio en carbón (Aldrich 10%, 0.28g) y el intermediario obtenido anteriormente (1.80 g, 4.00 mmol) en acetato de etilo (40 mi) se hidrogenó a sobrepresión ligera durante 1 h, entonces se filtró a través celite y concentró. El material se cristalizó durante el secado al vacío para proporcionar 72 como agujas (1.34g, 90%). datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, delta 0.14 (m, 6H, Si(CH3)2), 0.90 (m, 9H, SiC(CH3)3), 1.48 (m, 9H, C(CH3)3), 2.53 (m, 1 H, OH), 2.78 (dd, 1 H, -H-6A), 3.67-4.05 (m, 3H, H-1A, H-1 B y H-6B), 4.05-4.21 (m, 2H, H-3 y H-5), 4.35-4.50 (2 brs, 1 H, H-2), 4.57 (m, 1 H, H-4). Etapa b) A una solución agitada de (72) (1.068g, 2.97mmol), ácido benzoico (0.50 g, 4.46 mmol) y trifenilfosfina (1.17 g, 4.46 mmol) en THF (15 mi) a 0°C, se agregó gota a gota una solución de azodicarboxilato de diisopropilo (0.88 mi, 4.46 mmol) en THF (5 mi) durante 20 minutos. La mezcla de reacción entonces se agitó a temperatura ambiente durante la noche, después se concentró en sílice. La cromatografía instantánea del residuo usando éter de petróleo-acetato de etilo 9:1 como eluyente, proporcionó un jarabe incoloro (1.34 g, 97%). datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, delta 0.08-0.21 (m, 6H, Si(CH3)2), 0.90 (s, 9H, SiC(CH3)3), 1.42-1.56 (m, 9H, C(CH3)3), 3.48 (m, 1 H, H-6A), 3.70-4.01 (m, 3H, H-1A, H-1 B, H-6B menor y mayor), 4.21 , 4.30 (2d, 1 H, H-3), 4.44, 4.56 (2 brs, 1 H, H-2), 4.72 (m, 1 H, H-4), 5.34 (d, 1 H, H-5), 7.45 (t, 2H, Ar-H), 7.58 (t, 1 H1 Ar-H), 8.00 (d, 2H1 Ar-H).

Etapa c) A una solución agitada de (73) (1.34 g, 2.89 mmol) en metanol (6 mi), se agregó una solución de 0.5 M metóxido de sodio en metanol (6 mi) a temperatura ambiente, después se agitó durante 15 min. La mezcla de reacción entonces se neutralizó con Dowex 50 WX 8 (H+-forma) y filtró. La solución obtenida se agregó a una solución obtendia similarmente como al forma de inicio (II) anterior (0.187 g, 0.40 mmol), después se concentró.

La cromatografía instantánea del residuo usando tolueno-acetato de etilo 3:2 como eluyente proporcionó 74 como un jarabe incoloro que se cristalizó durante el secado al vacío (1.091 g, 92%). datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, delta 0.06-0.20 (m, 6H, Si(CH3)2), 0.89 (s, 9H, SiC(CH3)3), 1.42-1.54 (m, 9H, C(CH3)3), 2.03 (brs, 1 H, OH), 3.28 (dd, 1 H, H-6A), 3.53-3.79 (m, 3H, H-1A, H-1 B, H-6B), 4.19 y 4.34-4.56 (2 m, 4H, H-2, H-3, H-4 y H-5). Etapa d) A una solución agitada de (74) (0.428 g , 1 .19 mmol) en diclorometano (1 0 mi) en un matraz recubierto con Teflon se agregó Deoxofluor (50% en THF, 0.53 mi) a temperatura ambiente resultante a una temperatura ligeramente aumentada. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 72 h , entonces se diluyó con diclorometano (20 mi) , lavó con 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (2 x 20 mi) , secó (sulfato de sodio) , filtró y concentró en sílice. La cromatografía instantánea del residuo usando éter de petróleo-acetato de etilo 9: 1 como eluyente proporcionó (IV) como un acetie incoloro (0.1 18 g , 27%) . datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, delta 0.08-0.20 (m, 6H, Si(CH3)2), 0.89 (s, 9H, SiC(CH3)3), 1 .42-1 .53 (m, 9H, C(CH3)3), 3.26 y 3.36 (2 dd, 1 H, H-6A), 3.64 (m, 1 H, H-1A), 3.73-4.04 (m, 3H, H-1 B, H-6B), 4.20 (dd, 1 H, H-3*), 4.40, 4.51 (2 s, 1 H, H-2), 4.69 (m, 1 H, H-4*) 4.86, 4.98 (2 brs, 1 H, H-5). *Se prodria intercambiar. Etapa e) A una solución agitada de (75) (0.229 g, 0.63 mmol) en THF (8 mi) se agregó 1 M fluoruro de tetrabutilamonio en THF (0.70 mi), entonces se agitó a temperatura ambiente durante 40 min. La mezcla de reacción se entonces se concentró en sílice. La cromatografía en columna del residuo usando tolueno-acetato de etilo 1:1 como eluyente proporcionó 75 como un jarabe duro incoloro (0.150 g, 96%). datos de RMN (400 MHz, CDCI3): 1H, delta 1.40.53 (m, 9H, C(CH3)3), 2.70 (d, 0.3H, OH-menor), 3.26-3.46 (m, 1.7H, H-6A y OH-mayor), 3.75-4.04 (m, 3H, H-1 A, H-1 B y H-6B), 4.29, 4.34 (2d, 1 H, H-3* menor y mayor), 4.43, 4.50 (2 brs, 1 H, H-2 menor y mayor), 4.74 (m, 1 H, H-4*), 4.89, 5.02 (2 brs, 1 H, H-5). Etapa f) A una solución de (75) (0.099 g, 0.40 mmol) en diclorometano (2 mi) a 0°C, se agregó ácido trifluoroacético (2 mi), entonces se agitó a temperatura ambiente durante 35 min, después se concentró y se concentró a partir de tolueno (3 x 5 mi). A una suspensión del residuo, hidrato de 1-hidroxibenzotrazol (0.067 g, 0.44 mmol), N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida x HCl (0.084 g, 0.44 mmol) y monohidrato de N-(terc-Butoxicarbonil)-1-leucina (0.105 g, 0.42 mmol) en DMF (4 mi) se agregó trietilamina (0.17 mi, 1.2 mmol), entonces se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La reacción entonces se concentró en la mitad de volumen, se diluyó con acetato de etilo (25 mi), lavó sucesivamente con 10% ácido cítrico acuoso (3 x 15 mi), y 1 M carbonato de hidrógeno de sodio acuoso (3 x 15 mi), secó (sulfato de sodio), filtró y concentró. La cromatografía en columna del residuo usando acetato de etilo-tolueno 3:2 proporcionó (76) como un jarabe duro incoloro (0.137 g, 95%). datos de RMN (400 MHz, CDCI3, señales seleccionadas): 1H, delta 0.89.01 (m, 6H, C(CH)2), 4.98, 5.07 (2 dd, 1 H, H-5 mayor y H-5 menor). LR-EM: Calculado para C17H30FN2O5: 361.2.

Encontrado: 361.1 [M + H]. LR-EM: Calculado para CH21H26FN2Os: 405.2. Encontrado: 405.1 [M + H]. El modulo P2-P1 se une a un grupo de finalización haloalquilado y el grupo hidroxi P1 se oxida a la cetona según lo mostrado en el compuesto modelo anterior. Ejemplo 5 Nuevo Módulo P2 PCC DCM *(+)-1,2-bis(2S,5S)-dietilfosfonolanbenceno (ciclooctadien)rodio (I) trif I ato Etilester del ácido 1-metil-ciclobutanecarboxílico 1 se preparó a partir de ciclobutanecarboxilato de etilo por el método descrito en en J. Am. Chem. Soc, Vol..103 No.2 1981 436-442. Etiléster del ácido 1-metil-ciclobutanecarboxílico 1 (1 eq) se agitó bajo una atmósfera de nitrógeno a 0°C en THF anhidro. A esta solución se agregó en porciones hidruro de aluminio de litio (1.5 eq) y la suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 3 hours. La mezcla de reacción se enfrió en hielo, trató con 1 M HCl (acuso) y agitó a 0°C durnate 20 minutos. La solución se hizo pasar a través de una almohadilla de de celite y el filtrado se extrajo en dietiléter. Las fases orgánicas se secaron sobre MgSO4, filtraron y concentrron in vacuo para dar (1-metil-ciclobutil)-metanol, 2. Clorocromato de piridinio (1.25 eq) y el mismo peso de celite se colocaron en una suspensión en diclorometano anhidro. A esto se agregó gota a gota una solución del compuesto 2 (1 eq) en anhidro diclorometano y la mezcla heterogénea resultante se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla de reacción se hizo pasar a través una almohadilla de sílice, se eluyó con 19:1 isohexanos: acetato de etilo para dar 1-metilciclobutanecarboxaldehído, 3. El compuesto 3 (1 eq) se disolvió con agitación en diclorometano anhidro, y a éste se agregó trimetiléster de Boc- fosfoglicina (0.5eq) y 1 ,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (1.2 eq). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. La mezcla de reacción se dividió entre diclorometano y sucesivamente 1M HCl (aq), NaHCO3 saturado (acusos) y NaCI saturado (acuoso). La capa orgánica se secó sobre MgSO4, filtró y concentró in vacuo. El aceite resultante se purificó por cromatografía instantánea en columna, eluyendo con 1% metanol en diclorometano para dar metiléster del ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3-(1-metil-ciclobutil)-acrílico, 4. El compuesto 4 se disolvió en metanol anhidro y desgasificó con nitrógeno. Se agregó (+)-1,2-bis (2S,5S)-dietílfosfonolanbenceno (ciclooctadien)rodio (l)triflato y la desgasificación continuó durante 10 minutos adicionales. La reacción se agitó bajo una atmósfera de nitrógeno (4 bar) durante 48 horas. La solución se concentró, in vacuo y purificó por cromatografía intantánea, eluyendo con diclorometano, para dar metiléster del ácido 2S-terc-butoxicarbonilamino-3-(1-metil-ciclobutil)-propiónico, 5. Tiempo de retención de CLAR 5.88 min (monitoreado a 215 y 254 nm) CLAR usa la columna Synergy Max RP 80 µm 50x4.6 mm, 10?90% de gradiente de 6 min de la solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 2 ml/min.

EM [M + H]+ 272.08 (20%) [M-Boc+H]+ 172.06 (100%) Ionización por electrospray, eluyendo con acetonitrilo/amortiguador de formiato de amonio. 1H RMN (400 MHz, CDCI3. 4.83.79 (1H, m) 4.33-4.27 (1H, m) 3.71 (3H, s) 1.98-1.62 (8H, m) 1.42 (9H, s) 1.22 (3H, s). Ejemplo 6 Ácido (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2.2.2-trifluoro-etiÍamino]-4-metil-pentanoico.

El compuesto de título se preparó según lo mostrado en Li, C. S. y col. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 76, 1985. Ejemplo 7 (S)-4-isobutil-2'trifluorometil-oxazolidina El compuesto de título se preparó según lo mostrado en Ishii, A. y col. Synlett 1997, 1381.

Ejemplo 8 [(S)-1-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butil]-[2,2,2-trifluoro-eth-(E)-iliden]-amina El compuesto de título se preparó seg ún lo mostrado en Li, C . S. y col. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 76, 1 985. Ejemplo 9 (3R)3aR, 6Sf 6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium; cloruro El compuesto de título se preparó por la desprotección del mód ulo del Ejemplo 1 y por el tratamiento con ácido clorhídrico. Ejemplo 10 (S)-2-[1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etiiaminol-4-metil-pentan-1-ol A una solución agitada de 1 ,4-dibromobenceno (1 .79 g , 7.61 mmol) en TH F seco (5 mis) bajo N2 a -78°C se agregó gota a gota 1 .6M butillitio en hexanos (4.5 mis, 7.61 mmol). La solución resultante se agitó durante a 20 minutos adicinales a -78°C después de lo cual una solución de (S)-4-isobutil-2-trifluorometiI- oxazolidina (0.5 g , 2.54 mmol) en TH F seco (5 mis) se agregó gota a gota a la solución de arillitio. La agitación continúa d u rante 1 hora adicional a -78°C . La mezcla de reacción se enfrió rápidamente con 5 mis de 2M solución de ácido clorhídrico y la mezcla se dejo calentar a temperatura ambiente. La solución se basificó con 10 mis de hidróxido de sodio y la solución resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 30 mis) y las fraccione orgánicas combinadas se secaron (MgSO ) y concentraron in vacuo. El prod ucto se purificó por cromatografía instantánea en columna (acetato de etilo:iso-hexano 1 :4) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (0.620 g , 53%) que es una mezcla 2: 1 de diasterisómeros. EM M + H 355, Tiempo de Retención 4.9 & 5.1 mins 10-90 MeC N :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12, columna i.d. 50mm * 4.6mm Ejemplo 11 (S)-4-metil-2-[2,2,2-trifluoro-1-(4'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ol A una solución agitada de (S)-2-[1 -(4-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentan-1 -ol (0.1 g , 0.28 mmol) en DM F (5 mis) se agregó ácido (4-metansulfonilfenil)boronico (0.067 g , 0.34 mmol) , solución de carbonato de sodio (0.090 g, 0.85 mmol en 5 mis de agua) y cloruro de [1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio(ll) 1 : 1 complejo con CH2Cl2 (0.023 g , 0.03 mmol) . La solución resultante se calentó a 80°C durante 60 min utos. La mezcla de reacción se dejo enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con C H2C I2 (20 mis) . Los ógan icos se separaron , secaron (MgSO4) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano.acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el prod ucto de título como un sólido de color amarillo (0.087 g , 53%) que es una mezcla 2: 1 de diasterisómeros. Tiempo de Retención 4.2 & 4.3 mins 10-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12, columna i.d. 50mm * 4.6mm Ejemplo 12 Ácido (S)-4~metil-2-r(S)-2,2,2-trif I uoro-1-(4'-m etansulf oni I-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoic & ácido (S)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-m etansulf onil-bif enil-4-il)-etilamino]-pentanoico A una suspensión agitada de ácido periódico (5.7 g , 4.19 mmol) en acetonitrilo (55 mis) se agregó óxido de cromio(VI) (1 1 mgs, 0.01 1 mmol) y agua (0.25 mis) . La suspensión resultante se agitó varias horas a temperatura ambiente y después enfrió a 0°C en un baño de agua y se agregó gota a gota (S)-4-metil-2-[2,2, 2-trif luoro- -(4'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ol (1.8 g, 4.19 mmol) en 10 mis de acetonitrilo, la agitación continuó a 0°C durante 30 minutos adicionales. La reacción se vertió en una solución de Na2HPO4 acidificada (12.0 g en 200 mis de agua adjustda a pH 3 con HCl concentrado) y después se extrajo con dietiléter (3 x 100 mis), los extractos orgánicos combinados se lavaron consecutivamente con salmuera (1 x 100 mis), solución de sulfito de hidrógeno de sodio (1 x 100 mis) y salmuera (1 x 100 mis). El extracto orgánico se secó (Na2SO4) y concentró para dar el producto de título como un aceite de color amarillo (1.3 g, 53%) que es una mezcla 2:1 de diasterisómeros. Tiempo de Retención 4.2 & 4.4 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50mm *4.6mm.

La mezcla diastereomérica de los productos se purificó adicionalmente por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10><150 mm, 30?90% gradiente de 15 min de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18ml/min] para producir los dos diasteroisómeros separados del compuesto de título como un sólido de color blanco a una relación 2:1, ácido (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4,-metansulfonil-bifenil-4-il)-et¡lam¡no]-pentanoico (0.192 g) M + H 444, ácido (S)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metansulfonil-bifenil-4-¡l)-etilamino]-pentanoico (0.120 g) M + H 444.

Ejemplo 13 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro~furo[3.2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-trifluoro-1~(4'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona A una solución agitada de (3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-h idroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium; cloruro (0.05 g , 0.30 mmol) en CH2CI2 (2 mis) y ácido (S)-4-metiI-2-[(R)-2 ,2,2-trifluoro-1 -(4'-metansulfon¡l-b¡fenil-4-¡l)-etilamino]-pentanoico (0.120 g, 0.27 mmol) se agregó carbodiimida de diciciohexilo (0.12 g , 0.54 mmol) y diisopropiletilamina (0.047 mis, 0.27 mmol) . La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 60 min utos. La reacción entonces se filtró a través Celite y después los orgánicos se lavaron con 2M HCl (1 x 2 mis) , NaHCO3 (1 x 2 mis) , secaron (MgSO4) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 25-100% gradiente) para prod ucir el producto de título como una espuma de color blanco (0.061 g , 39%) , M + H 573, Tiempo de Retención 5.8 mins 10-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12, columna i .d . 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 13A (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-bJpirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1 -(4' -metansulf onil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona A una solución agitada de (3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium; cloruro (0.08 g, 0.47 mmol) en CH2CI2 (2 mis) y ácido (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trif!uoro-1-(4'-metansu!fonil-bifenil-4-il)-et¡lamino]-pentanoico (0.19 g, 0.43 mmol) se agregó carbodiimida de diciciohexilo (0.18 g, 0.86 mmol) y diisopropiletilamina (0.074 mis, 0.43 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 60 minutos. La reacción entonces se filtró a través Celite y entonces los orgánicos se lavaron con 2M HCl (1 x 2 mis), NaHCO3 saturado (1x 2 mis), secaon (MgSO4) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 25-100% gradiente) para producir el producto de título como una espuma de color blanco (0.072 g, 29%), M + H 573, Tiempo de Retención 5.8 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 14 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1~(4'-m etansulf oni l-bif en i l-4-il)-eti lamín o]-pentanoi}-tetrah id ro-furo[3.2-b]pirrol-3-ona A una solución agitada de (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro- 3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.072 g, 0.13 mmol) en CH2CI2 (5 mis) se agregó periodinano Dess Martin (0.11 g, 0.25 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se diluyó con CH2CI2 (20 mis), lavó con NaHCO3 saturado (2 x 10 mis), secó (MgSO4) y concentró in vacuo. El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI2 10 µm, columna 10x150mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para producir el compuesto de título como un sólido de color blanco (0.038 g, 52%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 571, M + H2O + H 589. Tiempo de Retención 5.5 & 5.9 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50mm * 4.6mm Ejemplo 15 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-{(S)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-m etansulf onil-bifenil-4-il)- etil aminoj-pentanoi l}t-etr ahí dr o-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1- ((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirroI-4-il)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.061 g, 0.11 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10><150mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título (0.021 g, 34%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 571, M + H2O + H 589. Tiempo de Retención 5.3 & 5.8 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa de C12, column i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 16 (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona A una solución agitada de (3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium; cloruro (2.250 g, 12.25 mmol) en DMF (40 mis) y ácido (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico (4.1 g, 11.14 mmol) se agregó HATU (5.08 g, 13.36 mmol) y diisopropiletilamina (5.8 mis, 33.41 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche entonces se concentró in vacuo. El residuo entonces se dispersó en agua (50 mis) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 150 mis). Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con solución de bicarbonato de sodio saturado (1 x 100 mis), y se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (2.95 g, 53%) EM M + H 497, Tiempo de Retención 5.8 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 17 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3.2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-trif I uoro-1-(3'-m etansulf onil-bifenil-4-il)-etil amino j-pentan-1 -ona A una solución agitada de (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona (0.1 g, 0.20 mmol) en DMF (1 mi) se agregó ácido (3-metansulfonilo fenil)boronico (0.044 g, 0.22 mmol), 2M solución de carbonato de sodio (1 mi) y complex 1:1 de cloruro de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio(ll) con CH2CI2 (0.016 g, 0.02 mmol). La solución resultante se selló en un tubo y se calentó en un microondas a 160°C durante 5 minutos. La mezcla de reacción se dejo enfriar a temperatura ambiente y se diluyó con CH2CI2:H2O (1:1,10 mis). Los orgánicos se separaron, secaron (MgSO ) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano: acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (0.048 g, 42%). EM M + H 573. Tiempo de Retención 5.4 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 18 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2)2-trifluoro-1-(3'-m etansulf onil-bi fenil -4-il)-etilamin o]-pentanoi l}-etrahidr o-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hídroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2 ,2-tr¡fluoro-1 -(3'-metansulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0.048 g, 0.1 1 mmol) . El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano: acetato de etilo, 5-66% g radiente) para dar el compuesto de título (0.013 g , 29%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 571 , M + H2O + H 589. Tiempo de Retención 4.2 & 4.7 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 19 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-bjpirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4,-fluoro-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(4-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1 - ona (0.15 g , 0.30 mmol) y ácido 4-fluorofenilo-boronico. El producto se pu rificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para prod ucir el producto de título como un aceite (0.069 g , 45%). EM M + H 51 3. Tiempo de Retención 5.6 mins 30-90 MeCN .0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i.d . 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 20 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2>2,2-trifluoro-1-(4'-fluoro-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2 ,2-trifluoro-1 -(4'-fluoro-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0.069 g, 0.13 mmol) . El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C 12 10 µm columna 10x150mm , 30?90% 1 5 min gradient de solución B (solución A = 0.1 % TFA en agua y solución B = 1 0% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.036 g , 34%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 51 1 , M + H2O + H 529. Tiempo de Retención 5.5 & 6.0 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 21 4'-((S)-2,2,2-trifluoro-1-[(S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro~furo[3,2-b]pirrol-4-carbonil)-3-metil-b útil ami no]-etil)-bifeni I -4- carbo nitrito La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(4-bromo-fenil)-2 ,2 ,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fl uoro-3- h id roxi -hexah i dro-furo[3,2-b]pirrol-4-il) -4- metil-pen tan-l ona (0.15 g, 0.30 mmol) y ácido 4-ciano-fenil-boronico . El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como u n aceite (0.054 g , 35%) . EM M + H 513. Tiempo de Retención 5.2 mins 30-90 MeCN :0.05% TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 22 4'-{(S)-2,2í2-trifluoro-1-[(S)-1-((3aS.6S.6aS)-6-fluoro-3-oxo-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carbonil)-3-metil-butilamino]-etil}-bifenil-4-carbonitrilo La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a 4'-{(S)-2,2,2-trifluoro-1 -[(S)-1 -((3aS ,6S ,6aS)-6-f!uoro-3-oxo-hexahidro-furo[3,2-b]pirrole-4-carbonil)-3-metil-butilamino]-etil}-bifenil-4-carbonitrilo (0.054 g , 0.13 mmol). El prod ucto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI2 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1 % TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 1 8 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.026 g , 34%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 51 8, M + H2O + H 536. Tiempo de Retención 5.1 & 5.6 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12, columna i.d . 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 23 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2)2)2-trifluoro-1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona La técn ica del Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1 -ona (0.15 g , 0.30 mmol) y ácido 4-trifluorofenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso- hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite (0.086 g, 51 %). EM M + H 563. Tiempo de Retención 5.9 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d . 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 24 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4~metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4 '-t rif luoro metil -b i fenil -4-il)-etilam i noj-pentanoi l}-tetrahid ro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técn ica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3 ,2-b]pirrol-4-il)-4-met¡l-2-[(S)-2 ,2 ,2-trifluoro-1 -(4*-trifluorometil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0.086 g , 0.15 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1 % TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.056 g , 66%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 561 , M + H2O + H 579. Tiempo de Retención 6.0 & 6.5 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d . 50 mm * 4.6 mm .

Ejemplo 25 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(2'-fluoro-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1 -ona (0.13 g , 0.26 mmol) en dimetilétepetanol (1 : 1 , 1 mi) y ácido 2-fluorofenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-héxano:acetato de etilo , 5-66% g radiente) para prod ucir el producto de título como un aceite (0.05 g , 38%) . EM M + H 513. Tiempo de Retención 5.4 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i .d . 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 26 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(2 '-fluoro-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(2'-fluoro-bifenil-4-il)-etiIam¡no]-pentan-1-ona (0.05 g, 0.10 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI2 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.036 g, 72%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 511, M + H2O + H 529. Tiempo de Retención 5.5 & 6.0 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 27 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4,-metilsulfanil-bifenil-4-il)-etílamino]-pentan-1'?na La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona (0.13 g, 0.26 mmol) en dimetíléter:etanol (1:1,1 mi) y ácido 4-metiltiofenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite (0.07 g, 50%). EM M + H 541. Tiempo de Retención 5.8 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 28 (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1~(4'-metilsulfanil-bif nil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1- ((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metilsulfanil-bifenil-4-¡l)-etilamino]-pentan-1-ona (0.07 g, 0.13 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.007 g, 10%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 539, M + H2O + H 557. Tiempo de Retención 5.7 & 6.3 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 29 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2)2-trifluoro-1-(4'-meti Isulfóxido-b i fenil -4-il) -etil a mino J-pen taño il}-etrahid ro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1- ((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4,-metilsulfanil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.07 g, 0.13 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.027 g, 39%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 555, M + H2O + H 573. Tiempo de Retención 3.9 & 4.5 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 30 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metoxi-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(4-bromo-fenil)-2 ,2,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-f luoro-3-h id roxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-meti I-pe n tan-l ona (0.13 g , 0.26 mmol) en dimetiléter.etanol (1 : 1 , 1 mi) y ácido 4-metoxifenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite (0.049 g , 36%) . EM M + H 525. Tiempo de Retención 5.6 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 31 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metoxi-bif nil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2 ,2-trifluoro-1 -(4'-metoxi-bifen¡l-4-il)- etilamino]-pentan-1-ona (0.049 g, 0.09 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.033 g, 68%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 523, M + H2O + H 541. Tiempo de Retención 5.3 & 5.9 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 32 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-bjpirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4,-metil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona La técnica descrita en el Ejemplo 17 se aplicó a (S)-2-[(S)~ 1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-f I uoro-3- hidroxi- hexah id ro-f uro [3,2-b]pirrol-4-il) -4- etil-pen tan-lona (0.13 g, 0.26 mmol) en dimetilétepetanol (1:1,1 mi) y ácido 4-metilfenilo-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceite (0.051 g, 38%). EM M + H 509. Tiempo de Retención 5.8 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 33 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahi ro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-met¡l-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.05 g, 0.10 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.033 g, 66%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 507, M + H2O + H 525. Tiempo de Retención 5.8 & 6.4 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 34 [(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etill-[(S)-1-(terc-butH-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butill-amina A una solución a itadar de 1 ,3-dibr romobenceno (9.1 g, 38.53 mmol) en THF seco (100 mis) bajo N2 a -78°C se agregó gota a gota 1.6M butillitio en hexanos (24.1 mis, 38.53 mmol). La solución resultante se agitó durante 20 minutos adicionales a -78°C después de lo cual una solución solución de [(S)-1-(terc-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-met¡l-butil]-[2,2,2-tr¡fluoro-eth-(E)-iliden]-amina (4.0 g, 12.84 mmol) en THF seco (10 mis) se agregó gota a gota a la solución de arillitio. La agitación continuó durante 1 hora adicional a -78°C. La mezcla de reacción se enfrió rápidamente con 50 mis de 2M de solución de ácido clorhídrico y la mezcla se dejo calentar a temperatura ambiente. La solución se basificó con 100 mis de hidróxido de sodio y la solución resultante se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mis) y las fracciones orgánicas combinadas se secaron (MgSO ) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por en columan C18 de fase inversa (H2O:MeCN, 50-100% Gradiente) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (2.55 g, 42%) EM M + H 468, Tiempo de Retención 8.3 mins 50-97 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i .d . 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 35 (S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4-meti pentan-1-ol A una solución agitada de [(S)-1 -(3-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etil]-[(S)-1 -(terf-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butil]-amina (2.55 g , 5.4 mmol) en metanol (60 mis) se agregó ácido clorh ídrico concentrado (1 mi) y calentó durante 18 horas a 0°C. La reacción se dejo enfriar y concentró in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 1 -33% Gradiente) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (1 .57 g , 82%) . EM M + H 354. Tiempo de Retención 4.1 mins 30-97 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d. 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 36 Ácido (S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico A una suspensión agitada de ácido periódico (1 1 .5 g, 50.82 mmol) en acetonitrilo (100 mis) se agregó óxido de cromio(VI) (23 mg, 0.023 mmol) y agua (0.25 mis). La suspensión resultante se agitó durante varias horas a temperatura ambiente y entonces se enfrió a 0°C en un baño de hielo y (S)-2-[(S)-1 -(3-bromo-fenil)~ 2 ,2 ,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentan-1 -ol (1 .5 g , 4.19 mmol) se agregó gota a gota en 10 mis de acetonitrilo, la agitación contin uó a 0°C durante 30 minutos adicionales. La reacción se vertió en una solución de Na2H PO4 acidificada (12.0 g en 200 mis de ag ua adjustada a pH 3 con HCl concentrado) y después se extrajo con dietiléter (3 x 1 00 mis) , los extractos orgánicos combinados se lavaron consecutivamente con salmuera (1 x 100 mis), solución de sulfito de hidrógeno de sodio (1 x 100 mis) y salmuera (1 x 1 00 mis) . El extracto orgán ico se secó (Na2SO ) y concentró para dar el producto de título como un aceite de color amarillo (1 .3 g , 85%) EM M + H 368, Tiempo de Retención 5.0 mins 30-97 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12 , columna i.d . 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 37 (S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2¡2-trifluoro-etilam¡no]-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona A una solución agitada de (3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3- hid roxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium ; cloruro (0.71 g, 3.88 mmol) en DMF (10 mis) y ácido (S)-2-[(S)-1 -(3-bromo-fenil)-2 ,2,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico (1 .3 g , 3.53 mmol) se agregó HATU (1 .6 g , 4.24 mmol) y diisopropiletilamina (1 .8 mis, 10.59 mmol) . La solución resultante se. agitó a temperatura ambiente durante la noche entonces concentró in vacuo. El residuo entonces se dispersó en agua (50 mis) y extrajo con acetato de etilo (2 x 150 mis) . Las fracciones orgánicas combinadas se lavaron con solución de bicarbonato de sodio saturado (1 x 100 mis) , y secaron sobre sulfato de magnesio y concentraron . El prod ucto se purificó por cromatografía en columna C 1 8 de fase inversa (H2O:acetonitrilo, 30-90% gradiente) para producir el producto de título como un aceite de color amarillo (0.96 g , 55%) EM M + H 497, Tiempo de Retención 4.7 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d . 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 38 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-bJpirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1'?na A una solución agitada de (S)-2-[(S)-1 -(3-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi- hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona (0.15 g, 0.30 mmol) en dimetiléter:etanol (1:1,1 mi) se agregó ácido 4-metilsulfonilfenilo-boronico (0.044 g, 0.22 mmol), 2M solución de carbonato de sodio (1 mi) y tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) soportado por polímero (0.15 g, 0.015 mmol). La solución resultante se sello en un tubo y se calentó en un microondas a 160°C durante 5 minutos. La mezcla de reacción se dejo enfriar a temperatura ambiente y diluyó con CH2Cl2:H2O (1:1,10 mis) y se filtró. Los orgánicos se separaron, secaron (MgSO )) y concentraron in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el producto de título como un aceita claro (0.071 g, 48%). EM M + H 509. Tiempo de Retención 5.5 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 39 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-metil-bifenil-3-il)-etilamino]- pentan-1-ona (0.072 g, 0.14 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.033 g, 46%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 507, M + H2O + H 525. Tiempo de Retención 5.9 & 6.6 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 40 (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-trifluoro-1 -(4'-m etansulf onil-b¡ f enil -3-il) -etil aminoj-pentan-1 -ona La técnica descrita en el Ejemplo 38 se aplicó a (S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metii-pentan-1-ona (0.15 g, 0.30 mmol) y ácido 4-metilsulfonilfenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-100% Gradient) para producir el producto de título como un aceite (0.07 g, 41%). EM M + H 573. Tiempo de Retención 4.3 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 41 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'- etansulf onil-bif enil-3-il)-etil aminoj-pentan oilj-tetrahid ro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técn ica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1 -(4'-metansulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0.07 g , 0.12 mmol) . El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C 12 10 µm col umna 10x150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1 % TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.027 g , 39%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 571 , M + H2O + H 589. Tiempo de Retención 5.2 & 5.4 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i.d. 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 42 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b jpirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-trif I uoro-1-(3'-metansulf onil-bif en i l-3-il)-eti lamín oj-pentan-1 -ona La técnica descrita en el Ejemplo 38 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(3-bromo-fenil)-2 ,2 ,2-t;ifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hid roxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1 -ona (0.15 g , 0.30 mmol) y ácido 3-metilsulfonilfenil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-100% gradiente) para producir el prod ucto de título como un aceite (0.1 g , 60%) . EM M + H 573. Tiempo de Retención 4.4 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i .d . 50 mm * 4.6 mm.

Ejemplo 43 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(3 '-metansulf onil-bif enil-3-il)-etilaminoj-pentanoil}-tetrah i dro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1 -((3R,3aR,6S ,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1 -(3'-metansulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0.1 g , 0.18 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C 12 10 µm columna 10x1 50 mm , 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1 % TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.051 g , 51 %) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 571 , M + H2O + H 589.

Tiempo de Retención 5.3 & 5.5 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C12, columna i.d . 50 mm * 4.6 mm .

Ejemplo 44 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(2 '-fluoro-bifenil-3-il) -etil aminoj-pentan-1 -ona La técnica descrita en el Ejemplo 38 se aplicó a (S)-2-[(S)-1 -(3-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-1 -((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1 -ona (0.15 g , 0.30 mmol) y ácido 2-fluorofenil-boronico. El producto se purificó por cromatog rafía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para producir el prod ucto de título como un aceite (0.1 1 g , 69%) . EM M + H 513. Tiempo de Retención 5.1 mins 30-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 45 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil~2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(2'-fluoro-bifenil-3-il)-etilaminoJ-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-b]pirro¡-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1- ((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-tr¡fluoro-1-(2'-fluoro-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.11 g, 0.21 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI2 10 µm columna 10x150 mm30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.054 g, 51%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 511, M + H2O + H 529. Tiempo de Retención 5.4 & 6.1 mins 30-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 46 (S)-1-((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(3-piridin-4-il-fenil) -etil aminoj-pentan-1 -ona La técnica descrita en el Ejemplo 38 se aplicó a (S)-2-[(S)- 1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-f I uoro-3- h ¡d roxi- hexah i dro-furo[3,2-b]pirrol-4-il) -4- meti I-pe n tan-lona (0.15 g, 0.30 mmol) y ácido 4-piridil-boronico. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (¡sohexano:acetato de etilo, 5-100% gradiente) para producir el producto de título como un aceite (0.071 g, 47%). EM M + H 496. Tiempo de Retención 3.7 mins 30-90 MeCN: 10 mM (NH3)2CO3 gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 47 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-trifluoro-1-(3-piridin-4-il-fenil)-etilamino]-pentanoil}-tetrahidro-furo[3,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-tpfluoro-1-(3-p¡ridin-4-il-fenil)-et¡ lamino]- pentan-1-ona (0.071 g, 0.14 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI210 µm columna 10x150 mm, 30-?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.008 g, 11%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 494, M + H2O + H 512. Tiempo de Retención 4.0 & 4.6 mins 30-90 MeCN: 10 mM (NH3)2CO3, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 48 1-(4-bromo-tiazol-2-il)-4-metil-piperazina El compuesto de título se preparó según lo mostrado en Palmer y col. J. Med. Chem.2005, 48, 7520-7534. Ejemplo 49 Benciléster del ácido (3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3.2-b]pirrol-4-carboxílico El compuesto de título se preparó por desprotección/protección convencional del módulo del Ejemplo 1.

Ejemplo 50 Isopropiléster del ácido (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilaminoJ-4-metil-pentanoico A una solución agitada de ácido (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico (1.80 g, 4.9 mmol) en alcohol isopropílico (100 mis), se agregó ácido sulfúrica concentrado (2 mis). La solución resultante se calentó a 80°C durante 4 horas. La mezcla de reacción se dejo enfriar, concentró in vacuo y el aceite resultante se dispersó en CH2CI2 (100 mis), se lavó con NaHCO3 saturado (2 x 50 mis), secó (MgSO4) y concentró in vacuo para producir el compuesto de título como un aceite de color café (1.77 g, 88%). EM M + H 412.

Tiempo de Retención 6.6 mins 30-97 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 51 Isopropiléster del ácido (S)-4-metil-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1-r4-(4.4.5.5-tetrametil-[1,2,3]dioxaborolan-2-il)-f enil l-eti lamín o)-pentanoico A una solución agitada de isopropiléster del ácido (S)-2-[(S)-1-(4- bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico (2.2 g, 5.36 mmol) en DMF (30 mi) se agregó bis(pinacolato)borano (2.0 g, 8.04 mmol), acetato de potasio (1 .6g 16.1 mmol) y complex 1 : 1 de cloruro de [1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferrocene]paladio(ll) con CH2CI2 (0.438 g, 0.54 mmol). La solución resultante se se selló en un tubo y calentó en un microondas a 160°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se dejo enfriar a temperatura ambiente y filtró a través de una columna corta de sílice con acetato de etilo (500 mis). La solución resultante se concentró in vacuo y el producto crudo se purificó por cromatografía en columna C1 8 de fase inversa (H2O:MeCN, 50-100% Gradiente) para producir el compuesto de título como un aceite de color cafe (0.920 g, 38%). EM M + H 458. Tiempo de Retención 4.6 mins 70-97 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 52 Isopropiléster del ácido (S)-4-metil-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1-(4- {2-(4-met¡l-piperazin-1-il)-tiazol-4-ilJ-fenil}-etilamino)-pentanoico A una solución agitada de isopropiléster del ácido (S)-4-metil-2- {(S)-2,2,2-trifluoro-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1 ,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-etilamino}-pentanoico (0.72 g, 1.57 mmol) en DMF:H2O (1 :1 , 20 mis) se agregó 1 -(4-bromo-tiazol-2-il)-4-metil-piperazina (0.5 g, 1.89 mmol), carbonato de sodio (0.2g 1.89 mmol) y complejo 1 :1 de cloruro de [1 , 1 '-bis(difenilfosfino)ferroceno]paladio(ll) con CH2CI2 (0.129 g, 0.16 mmol). La solución resultante se selló en un tubo y calentó en un microondas a 160°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se dejo enfriar y diluyó con CH2CI2 (100 mis). La fase orgánica se separó, secó (MgSO4) y concentró in vacuo. El producto cruso se purificó por cromatografía instantánea en columna (acetato de etilo:MeOH, 9:1 ) para producir el producto de título como un sólido de color rojo oscuro (0.150 g, 13%). EM M + H 513. Tiempo de Retención 4.0 mins 50-97 10mM (NH3)2CO3:MeCN gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d. 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 53 (S)-4-metil-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanoíco ácido; cloruro de hidrógeno A una mezcla agitada de 2M ácido clorhídrico y díoxano (1:1,10 mis) se agregó isopropiléster del ácido (S)-4-metil-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanoico (0.15 g, 0.29 mmol). La solución entonces se calentó durante 20 horas a 100°C y entonces se concentró in vacuo a sequedad para dar el compuesto de título como un sólido de color café oscuro (0.14 g, 98%) que se usó sin ninguna purificación adicional. EM M-H 469. Ejemplo 54 Benciléster del ácido (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3-oxo-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico A una solución agitada de benciléster del ácido (3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico (1.25 g, 4.44 mmol) en CH2CI2 (50 mis) se agregó periodinano Dess-Martin (2.1 g, 4.44 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió rápidamente con una mezcla de NaHCO3 saturado y 10% de solución de Na2S2Os (1:1,100 mis) y la fase orgánica se secó (MgSO4) y concentró in vacuo. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano.etilo acetato 1:1) para dar el compuesto de título como un aceite claro (1.15 g, 92%). EM M + H 280, TLC Rf 0.2 (iso-hexano:acetato de etilo 1:2). Ejemplo 55 Benciléster del ácido (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3.3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico A una solución agitada de benciléster del ácido (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3-oxo-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico (1.15 g, 4.1 mmol) en metanol (10 mis) se agregó ortoformiato de trimetilo (5 mis) y ácido p-toluensulfónico (0.02g). La solución resultante se agitó a 60°C durante 3 horas y después dejo enfriar y concentró in vacuo. El producto crudo se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 5-66% gradiente) para dar el compuesto de título como un aceite claro (1.07 g, 80%). EM M + H 326, TLC Rf 0.2 (iso-hexano-.acetato de etilo 1:4). Ejemplo 56 (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3.3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol Una solución de benciléster del ácido (3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3,3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico (0.07 g, 0.22 mmol) en metanol (10 mis) se hizo pasar a través de un cartucho que contienen 10% Pd/C (10 mg) en un hidrogenador H-Cube a un caudal de 1 ml/min . La solución resultante se concentró para dar el producto de título como un aceite claro (0.042 g , 99%) . EM M + H 192. Ejemplo 57 (S)-1-((3aS.6S.6aS)-6-fluoro-3,3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-((S)-2,2l2-trifluoro-1-(4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-tiazol-4-ilJ-fenil)-etilamino)-pentan-1-ona A una solución agitada de (3aS,6S ,6aS)-6-fluoro-3,3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol (0.084 g, 0.44 mmol) en DM F (10 mis) y ácido (S)-4-metil-2-((S)-2 ,2 ,2-trifluoro-1 -{4-[2-(4-metil-piperazin-1 -il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanoico; hidrógeno cloruro (0.14 g, 0.29 mmol) , se agregó HATU (0.17 g , 0.44 mmol) y diisopropiletilamina (0.15 mis, 0.88 mmol). La solución resultante se ag itó a temperatura ambiente durante la noche entonces y se concentró in vacuo. El residuo entonces se dispersó en CH2CI2 (20 mis) y se lavó con la solución de bicarbonato de sodio saturado (1 x 10 mis) , y se secó sobre sulfato de magnesio y concentró. El producto se purificó por cromatografía en columna C1 8 de fase inversa (H2? :acetonitrilo, 30-90%o gradiente) para producir el compuesto de título como un aceite de color café claro (0.39 g , 55%) EM M + H 644, Tiempo de Retención 4.7 mins 30-97 10 mM (NH3)2CO3: MeCN gradiente de 6 min , fase inversa C12 , columna i.d . 50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 58 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-[(S)-4-metil-2-((S)-2)2,2-trifluoro-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-1-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanoil]-tetrahidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona A una solución agitada de (S)-1 -((3aS,6S,6aS)-6-fluoro-3,3-dimetoxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1 -{4-[2-(4-metil-piperazin-1 -il)-tiazol-4-il]-fenil}-etiiamino)-pentan-1 -ona (0.04 g, 0.062 mmol) en ácido trifluoroacético (1 .8 mis) , se agregó agua (0.2 mis). La solución resultante se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con CH2CI2 (5 mis) y la mezcla de solvente se evaporó usando un fl ujo de gas de N2. El producto crudo entonces se redisolvió en CH2CI2 y neutralizó con 2M solución de Na2CO3 (1 mi) , la capa orgánica se separó y concentró in vacuo. El producto crudo se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi CI2 1 0 µm columna 10x150 mm , 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 10 mM (NH3)2CO3 en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) para dar el producto de título como un sólido de color blanco (0.01 g, 27%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 598, M + H2O + H 616. Tiempo de Retención 3.2 & 3.8 mins 30-97 10mM (NH3)2CO3: MeCN gradiente de 6 min , fase inversa C 12 , columna i .d . 50 mm * 4.6 mm . Ejemplo 59 Ácido (S)-2-[1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-trifluoro-etilamino]-4- etil-pentanoico A una suspensión agitada de ácido periódico ( 1 1 .6 g, 50.82 mmol) en acetonitrilo (1 00 mis) se agregó óxido de cromio(Vl) (23 mg , 0.023 mmol) y agua (0.5 mis) . La suspensión resultante se agitó varias horas a temperatura ambiente y entonces se enfrió a 0°C en un baño de hielo y se agregó gota a gota (S)-2-[1 -(4-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentan-1 -ol (1 .5 g , 4.23 mmol) en 10 mis de acetonitrilo, la agitación continuó a 0° C d urante 30 minutos adicionales. La reacción se vertió en una solución acidificada de Na2H PO4 (12.0 g en 200 mis de ag ua adjustada a pH 3 con HCl concentrado) y entonces se extrajo con dietiléter (3 x 100 mis) , los extractos orgánicos combinados se lavaron consecutivamente con salmuera (1 x 100 mis) , solución de sulfito de hidrógeno de sodio (1 x 100 mis) y salmuera (1 x 1 00 mis) . El extracto orgánico se secó (Na2SO4) y concentró para dar el compuesto de título como un aceite de color amarillo (1 .61 g , 97%) que es una mezcla 2: 1 de diasterisómeros. EM M + H 368. Tiempo de Retención 5.2 mins 10-90 MeCN :0.05%TFA, gradiente de 6 min , fase inversa C 12, columna i.d . 50mm * 4.6mm. Ejemplo 60 (S)-2-[1 -(4-bromo-f en il)-2,2,2-trif luoro-eti lamino j-1 -((3R.3aR.6S.6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-1-ona A una solución agitada de (3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-ium ; cloruro (0.09 g , 0.60 mmol) en CH2CI2 (2 mis) y ácido (S)-2-[1 -(4-bromo-fenil)-2,2 ,2-trifluoro-etilamino]-4-metil-pentanoico (0.2 g, 0.54 mmol) se agregó DCC (0.22 g , 1 .09 mmol) y diisopropiletilamina (0.1 mis, 0.54 mmol). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante la noche entonces se filtró a través de celtie y concentró in vacuo. El producto se purificó por cromatografía instantánea en columna (iso-hexano:acetato de etilo, 1:1) para producir el compuesto de título como un sólido de color amarillo (0.155, 58%>) EM M + H 497, Tiempo de Retención 5.8 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm. Ejemplo 61 (3aS.6S.6aS)-6-fluoro-4-{(S)-4-metil-2-[2,2,2-trifluoro-1-(3'-m etansulf Onil-bif 'en il-4-i l)-eti lamín o]-pentanoil)-tetrah id ro-furo[3 ,2-bjpirrol-3-ona La técnica descrita en el Ejemplo 14 se aplicó a (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-fluoro-3-hidroxi-hexahidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metU-2-[2, 2 ,2-trif luoro-1-(3'-metansulf onil-bif en il-4-il)-etilamino]-pentan-1-ona (0.120 g, 0.27 mmol). El producto se purificó por CLAR preparativa [Fenomenex Synergi C12 10 µm columna 10><150 mm, 30?90% 15 min gradiente de solución B (solución A = 0.1% TFA en agua y solución B = 10% A en acetonitrilo) a un caudal de 18 ml/min] para obtener el compuesto de título, sólido de color blanco (0.036 g, 34%) como una mezcla con su hidrato de cetona. EM M + H 495, M + H2O + H 513. Tiempo de Retención 5.9 & 6.4 mins 10-90 MeCN:0.05%TFA, gradiente de 6 min, fase inversa C12, columna i.d.50 mm * 4.6 mm.

Ejemplos Biológicos Determinación de la Actividad Catalítica y Proteolítica de la Catepsina K Los análisis convenientes para la catepsina K se realizan usando la enzima recombinante h umana, tal como la descrita en PDB. I D estándar BC01 6058; mRNA; HUM ; 1699 BP. DE catepsina K de homo sapiens (picnodisostosis) , mRNA (clon de cADN) MGC:23107 RX M EDLI N E; . RX P U B M ED ; 12477932. DR RZPD; I RALp962G1234. DR SWISS-PROT; P43235; La catepsina K recombinante se puede expresar en una variedad de sistemas de expresión disponibles comercialmente incluyendo E coli, Pich ia and Baculovirus Systems. La enzima purificada es activada por la eliminación de la prosecuencia por métodos convencionales. Las condiciones estándares del análisis para la determinación de las constantes cinéticas utilizan un sustrato de péptido fluorogénico, comúnmente H-D-Ala-Leu-Lys-AMC , y fueron determinadas en 100 mM Mes/Tris, pH 7.0 que contiene 1 mM EDTA y 1 0 mM 2-mercaptoetanol o 100 mM fosfato de Na, 1 mM EDTA, 0.1 % PEG4000 pH 6.5 o 100 mM acetato de Na, pH 5.5 que contiene 5 mM EDTA y 20 mM cisteína, en cada caso opcionalmente con 1 M DTT como estabilizador. La concentración de la enzima usada fue de 5 nM. La solución de sustrato base fue preparada a 10 mM en DMSO. Los análisis se realizaron a una concentración de sustrato fija de 60 µM y los estudios cinéticos detallados con dilusiones dobles del sustrato de 250 µM.

La concentración total de DMSO en el análisis fue mantenida por debajo del 3%. Todos los análisis fueron conducidos a temperatura ambiente. La fluorescencia del producto (excitación a 390 nm, emisión a 460 nm) fue monitoreada con un lector de placa fluorescente Labsystems Fluoroscan Ascent. Las curvas de progreso del producto fueron generadas durante 15 minutos después de la generación del producto de AMC. Determinación de la Catepsina S Ki El análisis utiliza la catepsina S humana expresada por baculovirus y el sustrato fluorescente boc-Val-Leu-Lys-AMC disponible de Bachem en un formato de placa de 384 pozos, en el cual 7 compuestos de prueba se pueden probar en paralelo con un control positivo que comprende un comparador del inhibidor de catepsina S conocido. Dilusiones del Sustrato 280 µl/pozo de 12.5% DMSO se agrega a las filas B - H de dos columnas de una placa de polipropileno de 96 pozos profundos. 70 µl/pozo del sustrato se agrega a la fila A. 2 x 250 µl/pozo del amortiguador de análisis (100 mM de fosfato de Na, 100 mM NaCI, pH 6.5) se agrega a la fila A, mezclada, y el doble diluido bajo la placa a la fila H. Dilusiones del Inhibidor. 100 µl/pozo del amortiguador de análisis se agrega a las columnas 2-5 y 7-12 de 4 filas de una placa de polipropileno de 96 pozos con fondo en forma de V. 200 µl/pozo del amortiguador de análisis se agrega a las columnas 1 y 6. El primer compuesto de prueba preparado en DMSO se agrega a la columna 1 de la fila superior, comúnmente a un volumen para proporcionar entre 10 y 30 veces el Kj aproximado determinado inicialmente. El Ki aproximado se calcula a partir de una ejecución preliminar en la cual 10 µl/pozo de 1 mM boc-VLK-AMC (1/10 dilusión de 10 mM base en DMSO diluido en amortiguador del análisis) se distribuye a las filas B a H y 20 µl/pozo a la fila A de una placa Microfluor™ de 96 pozos. 2 µl de cada compuesto de prueba de 10 mM se agrega a un pozo separado en la fila A, columnas 1-10. Se agregan 90 µl de amortiguador de análisis que contiene 1 mM DTT y 2 nM catepsina S en cada pozo de las filas B-H y 180 µl en la fila A. Se mezcla en la fila A usando una pipeta multicanal y un diluido doble en la fila G. Se mezcla en la fila H y se lee en el espectrofotómetro fluorescente. Las lecturas son datos Prism ajustados a la ecuación de inhibición competitiva, configurada a S = 100 µM y KM = 100 µM para obtener una estimación del K¡, hasta un máximo de 100 µM. El segundo compuesto de prueba se agrega a la columna 6 de la fila superior, el tercero a la columna 1 de la segunda fila, etc. Se agrega 1 µl del comparador a la columna 6 de la fila inferior. Se mezcla la columna 1 y el diluido doble en la columna 5. Se mezcle la columna 6 y el diluido doble en la columna 10. Usando una pipeta de 8 canales miltietapas fijada a 5 x 10 µl, se distribuyen 10 µl/pozo del sustrato a la placa de análisis de 384 pozos. Se distribuye la primera columna de la placa de dilusión de sustrato a todas las columnas de la placa de análisis iniciando con la fila A. La separación de la punta de la pipeta multicanales saltará correctamente las filas alternas. Se distribuye la segunda columna a todas las columnas iniciando con la fila B. Usando una pipeta de 12 canales multietapas fijada a 4 x 10 µl, se distribuye 10 ul/pozo del inhibidor a la placa de análisis de 384 pozos. Se distribuye la primera fila de la placa de dilusión de inhibidor para alternar las filas de la placa de análisis iniciando con A1. La separación de la punta de la pipeta multicanal saltará correctamente las columnas alternas. Similarmente, se distribuye la segunda, tercera y cuarta filas, para alternar las filas y las columnas iniciando con A2, B1 y B2 respectivamente. Se mezclan 20 mi de amortiguador de análisis y 20 µl de 1 M DTT. Se agrega suficiente catepsina S para dar 2 nM de concentración final. Usando un distribuidor tal como un Multidrop 384, se agrega 30 ul/pozo a todos los pozos de la placa de análisis y se lee en el espectrofotómetro fluorescente tal como un Ascent. Las lecturas fluorescentes, (longitudes de onda de excitación y emisión 390 nm y 460 nm respectivamente, se fijan usando los filtros de paso de bandas) reflejan el grado de división de la enzima del sustrato fluorescente, a pesar del inhibidor, son índices lineales ajustados para cada pozo. Los índices ajustados para todos los pozos para cada inhibidor se ajustan a la ecuación de inhibición competitiva usando SigmaPlot 2000 para determinar los valores V, Km y Ki. Catepsina L Ki El procedimiento anteriormente con las siguientes enmiendas se utiliza para la determinación de Ki para la catepsina L.

La enzima es catepsina L humana disponible comercialmente (por ejemplo Calbiochem). El sustrato es H-D-Val-Leu-Lys-AMC disponible de Bahcem. El amortiguador de análisis es 100 mM de acetato de sodio, 1 mM EDTA, pH 5.5). La base de DMSO (10 mM en 100% DMSO) se diluye a 10% en amortiguador de análisis. La enzima está preparada a una concentración de 5 nM en amortiguador de análisis más 1 mM ditiotreitol justo antes del uso. 2 µl de 10 mM de inhibidor elaborado en 100% DMSO se distribuyen en la fila A. 10 µl del 50 uM sustrato (= 1/200 dilusión de 10 mM base en DMSO, diluida en amortiguador de análisis).

Estudios de Inhibición Se analizan los inhibidores potenciales usando el análisis anterior con concentraciones variables del compuesto de prueba. Las reacciones fueron iniciadas por la adición de la enzima a las soluciones amortiguadas del sustrato y del inhibidor. Los valores K¡ fueron calculados de acuerdo a la ecuación 1 . donde v0 es la velocidad de reacción , V es la velocidad máxima, S es la concentración del sustrato con la constante Michaelis de KM, y / es la concentración del inhibidor. Los compuestos representativos de la invención fueron analizados para la potencia y selectividad de la catepsina K en los análisis anteriores. Observar que los datos de la catepsina L y S son micromolares, mientras que los compuestos así son potentes contra la catepsina K, cuyos resultados presentados son nanomolares.

Será evidente q ue los compuestos de la inven ción son m uy potentes contra la catepsina K pero también por lo menos 100 veces la selectividad contra las catepsinas L y S de cisteína proteasas relacionadas estrechamente. Adicionalmente, los compuestos comúnmente poseen buena permeabilidad (según lo medido posteriormente) y otras propiedades de DM PK. Permeabilidad Este ejemplo mide el transporte de inhibidores a través de las células del canal gastroentérico humano. El análisis utiliza las células Caco-2 bien conocidas con un número de pasajes entre 40 y 60. Transporte Apical a Basolateral Generalmente cada compuesto será probado en 2-4 pozos. Los pozos basolaterales y apicales contendrán 1 .5 mi y 0.4 mi de amortiguador de transporte (TB , por sus siglas en inglés) , respectivamente, y la concentración estándar de las sustancias probadas es de 10 µM . Además todas las soluciones y amortiguadores de prueba contendrán 1 % DMSO. Antes del experimento, las placas de transporte se recubren previamente con el medio de cultivo que contiene 10% suero durante 30 min utos para evitar la unión no específica al material plástico. Después de 21 a 28 días de cultivo en los soportes de filtro, las células están listas para los experimentos de permeabilidad . La placa de transporte No. 1 comprende 3 filas de 4 pozos cada una. La fila 1 es denotada como Lavado, fila 2 "30 minutos" y fila 3 "60 min utos". La placa de transporte No. 2 comprende 3 filas de 4 pozos, una fila 4 denotada como "90 minutos", fila 5 "120 minutos" y la fila restante está sin asignar. El medio de cultivo de los pozos apicales se elimina y los insertos se transfieren a una fila de lavado (No. 1) en una placa de transporte (placa No. 1) fuera de las 2 placas sin insertos, que ya se han preparado con 1.5 mi de amortiguador de transporte (HBSS, 25 mM HEPES, pH 7.4) en las filas 1 a 5. En el análisis A-?B, TB en el pozo basolateral también contiene 1% albúmina de suero bovino. Se agrega 0.5 mi de amortiguador de transporte (HBSS, 25 mM MES, pH 6.5) a los insertos y a las monocapas celulares equilibradas en el sistema del amortiguador de transporte durante 30 minutos a 37°C en un agitador de polimezcla. Después de equilibrar al sistema del amortiguador, el valor de la resistencia eléctrica transepitelial (TEER, por sus siglas en ingles) es medido en cada uno de los pozos por un instrumento con palillos EVOM. Los valores de TEER están generalmente entre 400 a 1000 O por pozo (depende del número de paso usado). El amortiguador de transporte (TB, pH 6.5) se elimina del lado apical y el inserto se transfiere a la fila de 30 minutos (No. 2) y se agrega 425 µl de TB nuevo (pH 6.5), incluyendo la sustancia de prueba al pozo apical (donador). Las placas se incuban en un agitador de polimezcla a 37°C con una velocidad de agitación baja de aproximadamente 150 a 300 rpm. Después de la incubación de 30 minutos en la fila 2, los rellenos serán movidos a los nuevos pozos basolaterales pre-calentados (receptor) cada 30 minutos; fila 3 (60 minutos), 4 (90 minutos) y 5 (120 minutos). 25 µl de muestras se tomaran de la solución apical después de ~2 minutos y al final del experimento. Estas muestras representan las muestras del donador al inicio y final del experimento. 300 µl serán tomados de los pozos basolaterales (receptor) en cada punto de tiempo programado y el valor posterior de TEER se mide al final del experimento. A todas las muestras recolectadas se agregara acetonitrilo a una concentración final de 50% en las muestras. Las muestras recolectadas serán almacenadas a -20°C hasta análisis por CLAR o CL-EM. Transporte Basolateral a Apical Generalmente cada compuesto será probado en 2-4 pozos.

Los pozos basolaterales y apicales contendrán 1.55 mi y 0.4 mi TB, respectivamente, y la concentración estándar de las sustancias probadas es de 10 µM. Además todas las soluciones y amortiguadores de prueba contendrán 1% DMSO. Antes del experimento, las placas de transporte se recubren previamente con el medio de cultivo que contiene 10% suero durante 30 minutos para evitar la unión no específica al material plástico. Después de 21 a 28 días de cultura en los soportes de filtro, las células están listas para los experimentos de permeabilidad. El medio de cultivo de los pozos apicales se elimina y los insertos se transfieren a una fila de lavado (No. 1 ) en una nueva placa sin insertos (placa de transporte). La placa del transporte comprende 3 filas de 4 pozos. La fila 1 es denotada como "lavado", y la fila 3 es la "fila experimental". La placa del transporte se ha preparado previamente con 1 .5 mi TB (pH 7.4) en la fila de lavado No . 1 y con 1 .55 mi TB (pH 7.4) , incluyendo la sustancia de prueba, en la fila experimental No. 3 (lado del donador). Se agrega 0.5 mi de amortiguador de transporte (H BSS , 25 mM MES , pH 6.5) a los insertos en la fila No. 1 y las monocapas celulares se equilibran en el sistema del amortiguador de transporte durante 30 minutos, 37°C en un agitador de polimezcla. Después de equilibrar al sistema del amortiguador, el valor de TEER es medido en cada pozo por un instrumento con palillos EVOM . El amortiguador de transporte (TB, pH 6.5) se elimina del lado apical y el inserto se transfiere a la fila 3 y se agrega 400 µl TB n uevo, pH 6.5 a los insertos. Después de 30 min utos, se eliminan 250 µl del pozo apical (receptor) y se remplazan por amortiguador de transporte nuevo . Después de lo anterior 250 µl de muestras se eliminaran y remplazaran por amortiguador de transporte n uevo cada 30 min utos hasta el final del experimento en 120 minutos, y finalmente un valor posterior de TEER se mide al final del experimento. Se tomaran 25 µl de muestras del compartimiento basolateral (donador) después de ~2 min utos y al final del experimento. Estas muestras representan las muestras del donador al inicio y final del experimento. Todo el acetonitrilo de las muestras recolectadas será agregado a una concentración final de 50% en las muestras. Las muestras recolectadas serán almacenadas a -20°C hasta que se realice el análisis por CLAR o CL-EM .

Cálculo Determinación de la fracción acumulativa absorbida, FAcum, contra el tiempo. FAcum se calcula de: Donde CR¡ es la concentración del receptor al final del intervalo i y CD¡ es la concentración del donador al principio del intervalo i. Se debe obtener una relación lineal .

La determinación de los coeficientes de permeabilidad (Papp, cm/s) se calcula de: donde k es la velocidad de transporte (min"1) definida como la inclinación obtenida por la regresión lineal de la fracción acum ulativa absorbida (FAcum) en función del tiempo (minuto) , VR es el volumen en la cámara del receptor (mi), y A es el área del filtro (cm2) .

Compuestos de Referencia Todas las referencias mencionadas en esta solicitud, incluyendo las Patentes y Solicitudes de Patente, son incorporadas en la presente por referencia al grado más completo posible. A través de la especificación y reivindicación siguientes, a menos que el contexto lo requiera de otra manera, se entenderá que la palabra 'comprende', y variaciones tal como 'comprendido' y 'que comprende', implican la inclusión de un número entero indicado, etapa, grupo de números enteros o grupo de etapas, pero no la exclusión de cualquier otro número entero, etapa, grupo de números enteros o grupo de etapas.

Claims (30)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula II en donde uno de R y R2 es halo y el otro es H o halo; R3 es una cadena lineal o ramificada de 1 a 5 átomos de carbono, opcionalmente fluorada, alquilo o cicloquilo de 3 a a4 átomos de carbono-CH2CR5; R4 es H; R5 es H, alquilo de 1 a 2 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 2 átomos de carbono, hidroxilo, Oalquilo de 1 a 2 átomos de carbono, fluoro; R6 es un carbociclo o hetorociclo monocíclico o bicíclico estable opcionalmente sustituido, en donde éste o cada anillo tiene 4, 5 ó 6 átomos de anillo y 0 a 3 heteroátomos seleccionados de S, O y N y en donde los sustituyentes opcionales comprenden 1 a 3 miembros seleccionados de R7; R7 se selecciona independientemente de halo, oxo, nitrilo, nitro, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -XNRdRe, -XNReR8, -NReXR8, NH2CO-, X-R8, X-O-R8, O-X-R8, X-C(=O)R8, X-(C = O)NRdR8, X-NReC( = O)R8, X-NHSOmR8, X-S(=O)mR8, X-C(=O)OR8, X-NReC(=O)OR8; R8 es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tiopiranilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, fenilo, cualquiera de los cuales está sustituido opcionalmente con hasta 3 miembros seleccionados de R9; R9 se selecciona independientemente de hidroxi, XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono- R10, ciano, -S(=O)mRe, carboxi, oxo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono, carbamoilo; R10 es cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tiopiranilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, fenilo, cualquiera de los cuales está sustituido con alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, halo, hidroxi, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, ciano, -S(=O)mRem, haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono; X es independientemente un enlace o alquileno de 1 a 4 átomos de carbono; Ra es independientemente H, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o CH3C( = O) ; Rb es haloalquilo de 1 a 4 átomos de carbono; Rc es H , alq uilo de 1 a 4 átomos de carbono junto con R6 y el átomo de carbono al cual se unen , forman un carbociclo o heterociclo según lo definido para R6; Rd es independientemente H , alquilo de 1 a 4 átomos de carbono o CH3C( = O) ; Re es independientemente H , alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; o Rd y Re junto con el átomo N al cual se unen , forman anillo de morfolina, piperidina , piperazina o pirrolidina sustituido opcionalmente con R9; m es independientemente 0.1 ó 2; o una sal farmacéuticamente aceptable, hidrato o N-óxido de la misma.

2. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1 , en donde la estereoqu ímica es seg ún lo representado en la siguiente estructura parcial:

3. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1 , en donde la estereoquímica está según lo representado en la siguiente estructura parcial: H R3 R5 O

4. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde Rb es trifluorometilo y la estereoquímica está según lo representado en la siguiente estructura parcial:

5. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde R2 es fluoro y R es H.

6. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde R3 es alquilo de cadena ramificada de 1 a 4 átomos de carbono.

7. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 6, en donde R3 es isobutilo.

8. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde Ra representado en fórmula es H.

9. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde R6 es fenilo sustituido.

10. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 9, en donde el sustituyente comprende -NRdRe, -CH2NRdRe, -NReR9, -NReXR9, alquilo lineal o ramificado de 1 a 4 átomos de carbono o -O-R9.

11. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 10, en donde el sustituyente comprende -NH-CH2fenilo, -NHCH2piridilo o -NH-fenilo, en donde cada anillo fenilo o piridilo se sustituye con alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, -NRaRb, -NRbR8 o -NRb-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-R8.

12. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 9, en donde el sustituyente comprende cicloalquilo de 3 a 6 átomos de carbono, pirrolidinilo, piperidinilo, morfolinilo, tiomorfolinilo, piperazinilo, indolinilo, piranilo, tiopiranilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, fenilo, cualquiera de los cuales se sustituye opcionalmente con R9.

13. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 12, en donde el sustituyente se selecciona de indolinilo, piranilo, tiopiranilo, pirrolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, piridinilo, pirimidinilo, pirazinilo, indolilo, cualquiera de los cuales se sustituye opcionalmente con R9.

14. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 13, en donde el sustituyente es tiazolilo, 5-metil-tiazolilo o tienilo, cualquiera de los cuales se sustituye opcionalmente con R9.

15. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 14, en donde el sustituyente es tiazol-4-ilo, 5-metiltiazol-4-ilo o tien-2-ilo, cualquiera de los cuales se sustituye opcionalmente con R9.

16. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 15, en donde tiazolilo, 5-metiltiazolilo o teinilo se sustituye con morfolinilo, morfolinilmetilo, piperidinilo, piperidinilmetilo, piperazinilo, piperazinilmetilo, cualquiera de los cuales se sustituye con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, fluoro, dífluoro o alquil de 1 a 3 átomos de carbono-O-alquilo de 1 a 3 átomos de carbono.

17. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 16, en donde el sustituyente de tiazolilo, 5-metiltiazolilo o tienilo es piperid-4-ilo que se sustituye con metilo, piperazinilo que está sustituido con N mediante alquilo de 1 a 3 átomos de carbono o metiloxietilo, o piperid-1-ilmetilo que está sin sustituir o sustituido con 4 con fluoro o di-fluoro.

18. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 10, en donde el sustituyente comprende un anillo de morfolina, piperidina o piperazina, sustituido opcionalmente con R9.

19. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 18, que comprende piperid-4-ilo o N-piperazinilo, sustituido con N con Ra o piperidin-1-ilo que está sustituido cuatro veces con -NRdRe.

20. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde R6 es benzotiazolilo, benzofuranilo, 3-metilbenzofuranilo o benzoxazolilo, cualquiera de los cuales se sustituye opcionalmente con un o dos de R7.

21. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 20, en donde tal sustituyente es -OR8, -OXR8, -NReR8 o -NReXR8.

22. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 21, en donde R8 es piperid-4-ilo, piperazin-1-ilo o piperidin-1-ilo o morfolino, cualquiera de los cuales se sustituye con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono.

23. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 22, en donde el sustituyente opcional de R6 es N-morfoliniletiloxi, N-morfolinilmetiloxi, N-metilpiperid-4-iloxi, o N-metilmorfolin-3-ilmetiloxi.

24. Un compuesto de acuerdo a la reivindicación 1, en donde el sustituyente opcional R9 se selecciona de hidroxi, XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe-alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-R10, ciano, carboxí, oxo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 4 átomos de carbono, alcanoilo de 1 a 4 átomos de carbono o carbamoilo.

25. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según lo definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24 y un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable para la misma.

26. Uso de un compuesto según lo definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de los trastornos caracterizados por la expresión o activación inapropiada de la catepsina K.

27. Uso de acuerdo a la reivindicación 26, en donde el trastorno se selecciona de: osteoporosis, enfermedades gingivales tal como gingivitis y periodontitis, Enfermedad de Paget, hipercalcemia de la enfermedad ósea metabólica maligna enfermedades caracterizadas por la degradación excesiva del cartílago o matriz, tal como osteoartritis y artritis reumatoide, cánceres óseos incluyendo neoplasia, dolor.

28. Un compuesto según lo definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24 para el uso como un medicamento .

29. Un compuesto según lo definido en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24 para el uso en el tratamiento o prevención de un trastorno caracterizado por la expresión o activación inapropiada de la catepsina K.

30. Un método para el tratamiento o prevención de un trastorno caracterizado por la expresión o activación inapropiada de la catepsina K, que comprende la administración de una cantidad segura y efectiva de un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24 a un sujeto en necesidad del mismo.