KR102303845B1 - Multilayer spheroid culture apparatus - Google Patents

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KR102303845B1 KR1020190126950A KR20190126950A KR102303845B1 KR 102303845 B1 KR102303845 B1 KR 102303845B1 KR 1020190126950 A KR1020190126950 A KR 1020190126950A KR 20190126950 A KR20190126950 A KR 20190126950A KR 102303845 B1 KR102303845 B1 KR 102303845B1
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Abstract

본 발명에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치는, 내부에 공급유로가 형성된 메인공급부와, 상기 공급유로에 세포를 주입하는 세포주입부와, 상기 공급유로에 상기 세포의 배양을 위한 배지를 주입하는 배지주입부를 포함하는 공급관 어셈블리 및 상기 공급유로와 연통되도록 상하 방향으로 형성된 낙하유로와, 상기 낙하유로의 하부에 구비되어 상기 낙하유로를 통해 중력 방향으로 유동된 세포 및 배지가 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭을 형성하도록 하는 드롭형성부를 포함하는 행잉드롭 배양유닛을 포함한다.The multi-layer spheroid culture apparatus according to the present invention includes a main supply unit having a supply passage formed therein, a cell injection unit for injecting cells into the supply passage, and a medium for injecting a medium for culturing the cells into the supply passage. A supply pipe assembly including an injection unit and a fall flow path formed in the vertical direction to communicate with the supply flow path, and cells and medium provided under the falling flow path and flowing in the gravity direction through the falling flow path in the form of water droplets due to surface tension and a hanging drop culture unit including a drop forming unit configured to form a hanging drop.

Description

멀티 레이어 스페로이드 배양장치 {MULTILAYER SPHEROID CULTURE APPARATUS}Multi-layer spheroid culture apparatus {MULTILAYER SPHEROID CULTURE APPARATUS}

본 발명은 스페로이드 배양장치에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 다양한 층으로 구성된 스페로이드를 배양할 수 있도록 하는 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 관한 것이다.The present invention relates to a spheroid culture apparatus, and more particularly, to a multi-layer spheroid culture apparatus capable of culturing spheroids composed of various layers.

세포 배양이란 개체로부터 분리된 세포를 개체 밖에서 배양시키는 기술로서, 이와 같은 세포 배양은 개체의 체내와 유사하게 조성된 배양 환경을 일관되게 유지하는 것이 핵심적인 사항이다.Cell culture is a technique for culturing cells isolated from an individual outside an individual. In such cell culture, it is essential to consistently maintain a cultured environment similar to that of an individual's body.

이러한 핵심적인 사항에 대하여, 오늘날 기술이 발전함에 따라 다양한 세포 배양 방식들이 제시되고 있다.With respect to these key points, various cell culture methods have been proposed as technology advances today.

이 중 전통적으로 사용되는 세포 배양 방식의 경우, 2차원 방향으로 얇게 퍼진 단층세포를 배양하는 방식을 가지고 있으나, 이는 세포가 본래 체내에서 갖는 특이적인 기능을 장시간 유지할 수 없게 되는 문제가 있다.Among these, the traditionally used cell culture method has a method of culturing single-layered cells spread thinly in a two-dimensional direction, but this has a problem in that the specific function that the cell originally has in the body cannot be maintained for a long time.

따라서 최근에는 생체 내와 동등한 기능을 갖는 3차원 조직인 스페로이드의 배양이 주목을 받고 있으며, 현재 다양한 3차원 스페로이드 배양 기술이 개발되고 있다.Therefore, in recent years, the culture of spheroids, which are three-dimensional tissues having the same function as in vivo, has been attracting attention, and various three-dimensional spheroid culture techniques are currently being developed.

한편, 피부 혹은 고형암 등의 생체조직은 명확히 구분되는 다양한 세포층으로 이루어진 구조이므로, 이들을 대상으로 하는 약물(예컨대, 피부의 경우 화장품)의 효과는 타겟 세포층에 도달하기 전, 조우하는 다양한 세포층의 구조적 특징이 반영된 모델에서 판정되어야 한다.On the other hand, since biological tissue such as skin or solid cancer is a structure composed of various cell layers that are clearly distinguished, the effects of drugs targeting them (eg, cosmetics in the case of skin) are the structural characteristics of various cell layers encountered before reaching the target cell layer. It should be judged from this reflected model.

즉 멀티 레이어 스페로이드 배양물의 주된 사용목적이 약물 효과 판정이라는 측면에서, 다양한 조건을 동시에 수용할 수 있도록 하는 대량화 및 자동화 시스템의 개발이 요구되는 상황이다.That is, in terms of drug effect determination, the main purpose of multi-layer spheroid culture is to develop a mass-production and automation system that can accommodate various conditions at the same time.

다만 현재까지는 스페로이드 배양물이 단일 세포 혹은 여러 세포가 혼합된 형태로 사용되고 있으며, 세포 간 층이 명확하게 분리된 구조는 보고된 바가 없다.However, until now, the spheroid culture has been used in the form of a single cell or a mixture of several cells, and a structure in which the intercellular layer is clearly separated has not been reported.

이에, 전술한 바와 같은 문제를 해결하고, 개발이 요구되는 상황에 맞는 기술을 본 발명을 통해 제시하고자 한다.Accordingly, it is intended to solve the above-described problems and propose a technology suitable for a situation requiring development through the present invention.

한국공개특허 제10-2017-0034241호Korean Patent Publication No. 10-2017-0034241

본 발명은 상술한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 발명으로서, 다양한 층으로 구성된 멀티 레이어 스페로이드를 구성할 수 있도록 함에 따라 인체 조직과 유사한 스페로이드를 배양할 수 있도록 하기 위한 목적을 가진다.The present invention has been devised to solve the problems of the prior art described above, and has an object to enable culturing of spheroids similar to human tissue by making it possible to configure multi-layer spheroids composed of various layers.

또한 이와 같은 멀티 레이어 스페로이드의 배양시스템을 구축하여, 대량화 및 자동화가 가능하도록 하기 위한 목적을 가진다.In addition, by constructing a culture system of such multi-layer spheroids, it has the purpose of enabling mass production and automation.

본 발명의 과제들은 이상에서 언급한 과제들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.The problems of the present invention are not limited to the problems mentioned above, and other problems not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

상기한 목적을 달성하기 위한 본 발명의 멀티 레이어 스페로이드 배양장치는, 내부에 공급유로가 형성된 메인공급부와, 상기 공급유로에 세포를 주입하는 세포주입부와, 상기 공급유로에 상기 세포의 배양을 위한 배지를 주입하는 배지주입부를 포함하는 공급관 어셈블리 및 상기 공급유로와 연통되도록 상하 방향으로 형성된 낙하유로와, 상기 낙하유로의 하부에 구비되어 상기 낙하유로를 통해 중력 방향으로 유동된 세포 및 배지가 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭을 형성하도록 하는 드롭형성부를 포함하는 행잉드롭 배양유닛을 포함한다.The multi-layer spheroid culture apparatus of the present invention for achieving the above object, a main supply part having a supply passage formed therein, a cell injection part for injecting cells into the supply passage, and culturing the cells in the supply passage A supply pipe assembly including a medium injection unit for injecting a medium for injection and a falling flow path formed in a vertical direction to communicate with the supply flow path, the cells and medium provided under the falling flow path and flowing in the gravity direction through the falling flow path surface and a hanging drop culturing unit including a drop forming unit configured to form a hanging drop in the form of a droplet by tension.

여기서 상기 행잉드롭 배양유닛은, 상기 낙하유로와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 공기의 유동경로를 형성하는 공기순환유로를 더 포함할 수 있다.Here, the hanging drop culture unit may further include an air circulation passage extending to communicate the fall passage and the outside with each other to form a flow passage of air.

또한 상기 공기순환유로는, 상기 낙하유로와 나란히 형성되고, 외부와 연통되는 외부연통부, 상기 외부연통부의 하단과 상기 낙하유로를 서로 연결하는 제1연결순환부 및 상기 제1연결순환부보다 높은 위치에서 상기 외부연통부의 소정 지점과 상기 낙하유로를 서로 연결하는 제2연결순환부를 포함할 수 있다.In addition, the air circulation flow path is formed side by side with the fall flow path, and an external communication part communicating with the outside, a first connection circulation part connecting the lower end of the external communication part and the falling flow path with each other, and the first connection circulation part higher than the first connection circulation part It may include a second connection circulation part for connecting a predetermined point of the external communication part and the fall flow path at a location.

한편 상기 행잉드롭 배양유닛은, 상기 낙하유로와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 상기 낙하유로에 수용된 배지의 배출경로를 형성하는 배지배출유로를 더 포함할 수 있다.Meanwhile, the hanging drop culture unit may further include a medium discharge path extending to communicate the falling flow path and the outside with each other to form a discharge path of the medium accommodated in the falling flow path.

또한 상기 배지배출유로는 상기 드롭형성부의 상단에 인접하여 상기 낙하유로에 연결될 수 있다.In addition, the medium discharge passage may be connected to the drop passage adjacent to the upper end of the drop forming part.

그리고 상기 행잉드롭 배양유닛은, 상기 낙하유로 내에 구비되어, 상기 낙하유로를 통해 유동되는 세포 및 배지가 상기 낙하유로의 내벽 측으로 이동하여 흘러내리도록 유도하는 완충부재를 더 포함할 수 있다.And the hanging drop culture unit may further include a buffer member provided in the falling flow path to induce the cells and medium flowing through the falling flow path to move toward the inner wall of the falling flow path and flow down.

또한 상기 완충부재는 상기 낙하유로의 횡단면 중심부에 구비되는 완충부 및 상기 완충부의 둘레로부터 상기 낙하유로의 내벽 측으로 연장되어 상기 완충부를 고정시키는 고정부를 포함할 수 있다.In addition, the buffer member may include a buffer portion provided in the center of the cross-section of the fall flow passage, and a fixing portion extending from the periphery of the buffer portion toward the inner wall of the fall passage to fix the buffer portion.

이때 상기 완충부는 상부에서 하부로 갈수록 단면적이 점차 증가하는 형태로 형성될 수 있다.At this time, the buffer part may be formed in a form in which the cross-sectional area gradually increases from the upper part to the lower part.

한편 상기 공급관 어셈블리는, 상기 공급유로에 공기를 주입하는 공기주입부를 더 포함할 수 있다.Meanwhile, the supply pipe assembly may further include an air injection unit for injecting air into the supply passage.

그리고 상기 세포주입부 및 상기 배지주입부는 상기 메인공급부의 동일 지점에 연결될 수 있다.And the cell injection unit and the medium injection unit may be connected to the same point of the main supply unit.

또한 상기 공급관 어셈블리는, 상기 메인공급부와 상기 행잉드롭 배양유닛을 서로 연결하도록 구비되어, 상기 메인공급부를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 낙하유로 측으로 낙하시키는 분배부를 더 포함할 수 있다.In addition, the supply pipe assembly may further include a distribution unit provided to connect the main supply unit and the hanging drop culture unit to each other, and for dropping the cells and medium flowing through the main supply unit to the drop path side.

더불어 상기 행잉드롭 배양유닛은 복수 개가 구비되며, 상기 분배부는 상기 행잉드롭 배양유닛 각각에 대응되도록 복수 개가 구비되어, 상기 메인공급부를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 행잉드롭 배양유닛 각각에 분배하도록 형성될 수 있다.In addition, a plurality of the hanging drop culture units are provided, and a plurality of the distribution units are provided to correspond to each of the hanging drop culture units, so that the cells and medium flowing through the main supply unit are distributed to each of the hanging drop culture units. can be

그리고 본 발명은 상기 행잉드롭 배양유닛의 하부에 구비되어, 상기 드롭형성부로부터 낙하하는 행잉드롭을 받는 웰 플레이트유닛을 더 포함할 수 있다.In addition, the present invention may further include a well plate unit provided under the hanging drop culture unit to receive a hanging drop falling from the drop forming unit.

상기한 과제를 해결하기 위한 본 발명의 멀티 레이어 스페로이드 배양장치는, 인체조직과 유사한 멀티 레이어 스페로이드를 구성 가능하다는 장점을 가진다.The multi-layer spheroid culture apparatus of the present invention for solving the above problems has the advantage that it is possible to construct a multi-layer spheroid similar to human tissue.

또한 본 발명은 멀티 레이어의 스페로이드를 한 단위의 유닛 상에서 구성할 수 있다는 장점이 있다.In addition, the present invention has the advantage that a multi-layer spheroid can be configured on a unit of one unit.

더불어 본 발명은 배양장치를 시스템화하는 것이 가능하여, 대량생산 및 배양 자동화를 가능하도록 하는 장점이 있다.In addition, the present invention has the advantage that it is possible to systematize the culture apparatus, enabling mass production and culture automation.

본 발명의 효과들은 이상에서 언급한 효과들로 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 효과들은 청구범위의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.Effects of the present invention are not limited to the effects mentioned above, and other effects not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the description of the claims.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치의 모습을 나타낸 도면;
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛 및 웰 플레이트유닛의 모습을 나타낸 도면;
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 시린지(Syringe)를 통해 세포 및 배지를 주입하는 모습을 나타낸 도면;
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛에 행잉드롭이 형성된 모습을 나타낸 도면;
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛의 공기순환유로를 통해 공기를 배출시키는 모습을 나타낸 도면;
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛의 공기순환유로 및 배지배출유로를 통해 낙하유로에 수용된 배지를 배출시키는 모습을 나타낸 도면; 및
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛을 통해 멀티 레이어 스페로이드를 형성하는 과정을 나타낸 도면이다.1 is a view showing the appearance of a multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention;
2 is a view showing the appearance of a hanging drop culture unit and a well plate unit in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention;
Figure 3 is a view showing the state of injecting cells and medium through a syringe (Syringe) in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention;
4 is a view showing a state in which a hanging drop is formed in the hanging drop culture unit in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention;
5 is a view showing a state in which air is discharged through the air circulation passage of the hanging drop culture unit in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention;
Figure 6 is a view showing a state of discharging the medium accommodated in the drop flow path through the air circulation flow path and the medium discharge flow path of the hanging drop culture unit in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention; and
7 is a view showing a process of forming a multi-layer spheroid through a hanging drop culture unit in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention.

이하 본 발명의 목적이 구체적으로 실현될 수 있는 본 발명의 바람직한 실시예를 첨부된 도면을 참조하여 설명한다. 본 실시예를 설명함에 있어서, 동일 구성에 대해서는 동일 명칭 및 동일 부호가 사용되며 이에 따른 부가적인 설명은 생략하기로 한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention in which the object of the present invention can be specifically realized will be described with reference to the accompanying drawings. In describing the present embodiment, the same names and the same reference numerals are used for the same components, and an additional description thereof will be omitted.

도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치의 모습을 나타낸 도면이며, 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛(100) 및 웰 플레이트유닛(200)의 모습을 나타낸 도면이다.1 is a view showing the appearance of a multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention, Figure 2 is a multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention, a hanging drop culture unit 100 ) and a diagram showing the state of the well plate unit 200 .

도 1 및 도 2에 도시된 바와 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치는 공급관 어셈블리(5)와, 행잉드롭 배양유닛(100)과, 웰 플레이트유닛(200)을 포함한다.1 and 2, the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention includes a supply tube assembly 5, a hanging drop culture unit 100, and a well plate unit 200. do.

상기 공급관 어셈블리(5)는 세포 및 배지를 상기 행잉드롭 배양유닛(100)에 공급하기 위한 구성요소이다.The supply pipe assembly 5 is a component for supplying cells and a medium to the hanging drop culture unit 100 .

본 실시예에서 상기 공급관 어셈블리(5)는 내부에 공급유로가 형성된 메인공급부(10)와, 상기 공급유로에 세포를 주입하는 세포주입부(20a)와, 상기 공급유로에 상기 세포의 배양을 위한 배지를 주입하는 배지주입부(20b)와, 상기 공급유로에 공기를 주입하는 공기주입부(30)를 포함하는 형태를 가진다.In this embodiment, the supply pipe assembly 5 includes a main supply unit 10 having a supply passage formed therein, a cell injection unit 20a for injecting cells into the supply passage, and a cell in the supply passage for culturing the cells. It has a form including a medium injection unit 20b for injecting a medium, and an air injection unit 30 for injecting air into the supply passage.

이때 본 실시예의 경우, 상기 공기주입부(30)는 상기 메인공급부(10)의 일단부에 연결된 형태를 가지며, 상기 세포주입부(20a) 및 상기 배지주입부(20b)는 상기 메인공급부(10)의 중간부 동일 지점에 서로 반대 방향으로 연결된 형태를 가진다.At this time, in the present embodiment, the air injection unit 30 is connected to one end of the main supply unit 10 , and the cell injection unit 20a and the medium injection unit 20b are the main supply unit 10 . ) at the same point in the middle of each other in opposite directions.

그리고 상기 세포주입부(20a), 상기 배지주입부(20b)와 상기 메인공급부(10)의 연결 지점에는 제1밸브(25)가 구비되며, 상기 공기주입부(30)와 상기 메인공급부(10)와의 연결 지점에는 제2밸브(35)가 구비되어, 각각의 물질에 대한 주입 경로의 개폐 여부, 개도량 등을 조절하도록 할 수 있다.And a first valve 25 is provided at a connection point between the cell injection unit 20a, the medium injection unit 20b, and the main supply unit 10, and the air injection unit 30 and the main supply unit 10 ) and a second valve 35 is provided at the connection point to control whether the injection path for each material is opened or closed, the amount of opening, and the like.

따라서 세포 및 배지를 상기 메인공급부(10)에 주입할 경우에는, 도 3에 도시된 바와 같이 세포가 수용된 세포용 시린지(5a)와, 배지가 수용된 배지용 시린지(5b)를 각각 상기 세포주입부(20a) 및 상기 배지주입부(20b)에 연결시키고, 상기 제1밸브(25)를 원하는 개도량으로 조절한 뒤 상기 세포용 시린지(5a) 및 상기 배지용 시린지(5b)의 피스톤을 천천히 이동시켜 세포 및 배지를 주입할 수 있다.Therefore, when the cells and the medium are injected into the main supply unit 10, as shown in FIG. 3, a syringe for cells (5a) in which the cells are accommodated and a syringe (5b) for a medium in which the medium is accommodated are applied to the cell injection unit, respectively. (20a) and the medium injection unit (20b), the first valve 25 is adjusted to a desired opening degree, and then the pistons of the syringe for cells (5a) and the syringe for medium (5b) are slowly moved cells and media can be injected.

그리고 이와 함께 제2밸브(25)의 개도량을 조절하고, 상기 공기주입부(30)로부터 공기를 주입함에 따라, 상기 메인공급부(10)의 공급유로에 주입된 세포 및 배지를 공기의 압력에 의해 타단부 측으로 유동시킬 수 있다.In addition, by controlling the opening amount of the second valve 25 and injecting air from the air injection unit 30, the cells and medium injected into the supply passage of the main supply unit 10 are subjected to the pressure of the air. It can flow to the other end side by

더불어 본 실시예의 경우 상기 메인공급부(10)는 상기 세포주입부(20a), 상기 배지주입부(20b) 및 상기 공기주입부(30)가 연결되는 제1공급관(10a)과, 상기 제1공급관(10b)의 타단부에 결합되는 제2공급관(10b)을 포함할 수 있다. 상기 제2공급관(10b)은 타단에서 중력 방향으로 하향되는 형태로 형성된 형태를 가진다.In addition, in this embodiment, the main supply unit 10 includes a first supply pipe 10a to which the cell injection unit 20a, the medium injection unit 20b, and the air injection unit 30 are connected, and the first supply pipe. It may include a second supply pipe (10b) coupled to the other end of (10b). The second supply pipe 10b has a shape formed in a downward direction from the other end in the direction of gravity.

또한 상기 공급관 어셈블리(5)는, 상기 메인공급부(10)와 상기 행잉드롭 배양유닛(100)을 서로 연결하도록 구비되는 분배부(15)를 더 포함할 수 있다. 본 실시예에서 상기 분배부(15)는 상기 메인공급부(10)를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 행잉드롭 배양유닛(100)의 후술할 낙하유로(120) 측으로 낙하시키기 위한 구성요소로서, 상기 메인공급부(10)의 제2공급관(10b)의 타단으로부터 분지되는 형태를 가진다.In addition, the supply pipe assembly 5 may further include a distribution unit 15 provided to connect the main supply unit 10 and the hanging drop culture unit 100 to each other. In this embodiment, the distribution unit 15 is a component for dropping the cells and medium flowing through the main supply unit 10 toward the drop path 120 to be described later of the hanging drop culture unit 100, and the It has a branched form from the other end of the second supply pipe (10b) of the main supply unit (10).

특히 본 실시예의 경우 상기 행잉드롭 배양유닛(100)은 복수 개가 커버플레이트(50)에 장착된 상태로 구비되며, 상기 분배부(15)는 상기 행잉드롭 배양유닛(100) 각각에 대응되도록 복수 개가 구비되어, 상기 메인공급부(10)를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 행잉드롭 배양유닛(100) 각각에 분배하도록 형성된다.In particular, in the present embodiment, a plurality of the hanging drop culture unit 100 is provided in a state mounted on the cover plate 50, and the distribution unit 15 is provided with a plurality of pieces to correspond to each of the hanging drop culture unit 100. It is provided so as to distribute the cells and the medium flowing through the main supply unit 10 to each of the hanging drop culture units 100 .

다만, 본 실시예와 달리 상기 행잉드롭 배양유닛(100) 및 상기 분배부(15)는 하나만이 구비될 수도 있음은 물론이다.However, unlike this embodiment, of course, only one of the hanging drop culture unit 100 and the distribution unit 15 may be provided.

상기 행잉드롭 배양유닛(100)은 상기 분배부(15)의 하부에 구비되어 세포 및 배지를 전달받아 3차원 배양이 이루어지도록 하는 구성요소이다.The hanging drop culture unit 100 is a component provided at the lower portion of the distribution unit 15 to receive cells and a medium so that three-dimensional culture is performed.

도 2 및 도 4에 도시된 바와 같이, 본 실시예에서 상기 행잉드롭 배양유닛(100)은 상기 메인공급부(10)의 공급유로와 연통되도록 상하 방향으로 형성된 낙하유로(120)와, 상기 낙하유로(120)의 하부에 구비되어 상기 낙하유로(120)를 통해 중력 방향으로 유동된 세포 및 배지가 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭(B)을 형성하도록 하는 드롭형성부(130)를 포함한다.As shown in FIGS. 2 and 4 , in this embodiment, the hanging drop culturing unit 100 has a falling flow path 120 formed in the vertical direction to communicate with the supply flow path of the main supply unit 10 , and the falling flow path It is provided at the lower part of the 120 and includes a drop forming unit 130 that allows the cells and medium flowing in the direction of gravity through the fall flow path 120 to form a water droplet-shaped hanging drop (B) by surface tension. .

특히 상기 낙하유로(120)는 전체적으로 동일한 직경을 가지도록 형성되며, 상기 드롭형성부(130)는 상부에서 하부로 갈수록 그 직경이 점차 증가하여 구체의 일부 형상에 대응되는 형태를 가지도록 형성된다. 이에 따라 상기 낙하유로(120)를 통해 상기 드롭형성부(130) 측으로 유동된 세포-배지 혼합액은, 상기 드롭형성부(130)에서 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭(B)을 형성하게 된다.In particular, the fall flow path 120 is formed to have the same diameter as a whole, and the drop forming part 130 is formed to have a shape corresponding to a partial shape of a sphere by gradually increasing its diameter from the top to the bottom. Accordingly, the cell-medium mixed solution flowing toward the drop forming unit 130 through the drop flow path 120 forms a water droplet-shaped hanging drop (B) by surface tension in the drop forming unit 130 . .

즉 상기 행잉드롭(B)은 세포-배지 혼합액이 상기 드롭형성부(130)에 지속적으로 유입됨에 따라 물방울 형태로 맺힌 상태로 점차 성장하게 되며, 행잉드롭(B) 내부에는 혼합액에 포함된 세포에 의해 스페로이드(S)가 형성된다.That is, the hanging drop (B) gradually grows in the form of water droplets as the cell-medium mixture continuously flows into the drop forming unit 130, and inside the hanging drop (B), the cells contained in the mixture By the spheroid (S) is formed.

이와 같은 행잉드롭(B)은 성장하여 일정 무게 이상이 되었을 경우 또는 전술한 공기주입부(30)를 통해 공기를 특정 압력 이상으로 주입한 경우 등과 같은 상황에서 상기 드롭형성부(130)로부터 이탈되어 후술할 웰 플레이트유닛(200)에 낙하하게 된다.Such a hanging drop (B) is separated from the drop forming unit 130 in situations such as when it grows to a certain weight or more, or when air is injected above a specific pressure through the air injection unit 30 described above. It falls on the well plate unit 200 which will be described later.

그리고 본 실시예에서 상기 행잉드롭 배양유닛(100)은, 공기순환유로(140) 및 배지배출유로(160)를 더 포함할 수 있다.And in this embodiment, the hanging drop culture unit 100 may further include an air circulation passage 140 and a medium discharge passage 160 .

상기 공기순환유로(140)는 상기 낙하유로(120)와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 공기의 유동경로를 형성하는 구성요소로서, 상기 낙하유로(120)와 나란히 형성되고, 외부와 연통되는 외부연통부(142)와, 상기 외부연통부(142)의 하단과 상기 낙하유로(120)를 서로 연결하는 제1연결순환부(144)와, 상기 제1연결순환부(144)보다 높은 위치에서 상기 외부연통부(142)의 소정 지점과 상기 낙하유로(120)를 서로 연결하는 제2연결순환부(146)를 포함한다.The air circulation passage 140 is a component that extends to communicate the fall passage 120 and the outside with each other to form a flow path of air. At a position higher than the communication part 142, the first connection circulation part 144 connecting the lower end of the external communication part 142 and the fall flow path 120 to each other, and the first connection circulation part 144 and a second connection circulation unit 146 connecting a predetermined point of the external communication unit 142 and the fall flow path 120 to each other.

이와 같은 상기 공기순환유로(140)는 도 5에 도시된 바와 같이, 상기 낙하유로(120) - 제1연결순환부(144) - 외부연통부(142)로 이어지는 공기의 배출 경로를 형성하게 된다. 이에 따라 공기주입부(30)에 의해 주입된 공기는 세포 및 배지를 밀어 이동시킨 뒤 상기와 같은 공기의 배출 경로를 통해 외부로 배출될 수 있다.As shown in FIG. 5 , the air circulation passage 140 forms an air discharge path leading to the fall passage 120 - the first connection circulation part 144 - the external communication part 142. . Accordingly, the air injected by the air injection unit 30 may be discharged to the outside through the air discharging path as described above after the cells and the medium are pushed and moved.

이와 같이 상기 공기순환유로(140)를 통해 공기의 배출 경로를 형성하는 것은, 상기 낙하유로(120) 및 상기 드롭형성부(130)에 수용되어 있는 세포-배지 혼합액이 공기의 압력에 의해 목표 시점보다 빠르게 낙하하여 이탈되는 것을 방지하기 위한 것이다.In this way, the formation of the air discharge path through the air circulation path 140 means that the cell-medium mixture accommodated in the drop path 120 and the drop forming unit 130 is at a target time by the pressure of the air. This is to prevent it from falling off more quickly.

상기 배지배출유로(150)는 상기 낙하유로(120)와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 상기 낙하유로(120)에 수용된 배지의 배출경로를 형성하는 구성요소이다.The medium discharge passage 150 is a component that extends to communicate the fall passage 120 and the outside with each other to form a discharge path of the medium accommodated in the fall passage 120 .

본 실시예에서 상기 배지배출유로(150)는 일측이 상기 드롭형성부(130)의 상단에 인접하여 상기 낙하유로(120)에 연결되며, 타측은 상기 행잉드롭 배양유닛(100)의 외측으로 돌출된 배출부(160)의 내측으로 연장된다. 이때 복수의 행잉드롭 배양유닛(100)에 형성된 각 배출부(160)는 별도의 흡입펌프와 연결되는 펌프연결부(60, 도 1)와 연결될 수 있다.In this embodiment, the medium discharge flow path 150 has one side adjacent to the upper end of the drop forming part 130 and connected to the drop flow path 120 , and the other side protrudes to the outside of the hanging drop culture unit 100 . It extends to the inside of the exhaust unit 160 . In this case, each discharge unit 160 formed in the plurality of hanging drop culture units 100 may be connected to a pump connection unit 60 ( FIG. 1 ) connected to a separate suction pump.

따라서 본 실시예의 경우 도 6에 도시된 바와 같이, 상기 공기순환유로(140)의 외부연통부(142) - 제2연결순환부(146) - 배지배출유로(150)로 이어지는 배지의 배출 경로를 형성하게 되며, 상기 흡입펌프의 흡입력을 통해 상기 낙하유로(120)에 수용된 배지를 외부로 배출시킬 수 있다.Therefore, in this embodiment, as shown in FIG. 6 , the discharge path of the medium leading to the external communication unit 142 of the air circulation passage 140 - the second connection circulation unit 146 - the medium discharge passage 150 is is formed, and the medium accommodated in the fall flow path 120 may be discharged to the outside through the suction power of the suction pump.

이와 같이 하는 이유는, 낙하유로(120)에 수용된 배지를 외부로 배출시켜 세포-배지 혼합액이 상기 드롭형성부(130)에만 잔류하도록 하여 행잉드롭(B) 형태를 이루도록 하기 위한 것이다.The reason for doing this is to discharge the medium accommodated in the drop passage 120 to the outside so that the cell-medium mixture remains only in the drop forming unit 130 to form a hanging drop (B).

그리고 본 실시예에서 상기 행잉드롭 배양유닛(100)은, 상기 낙하유로(120) 내에 구비되어, 상기 낙하유로(120)를 통해 유동되는 세포-배지 혼합액이 상기 낙하유로(120)의 내벽 측으로 이동하여 흘러내리도록 유도하는 완충부재(170)를 더 포함한다.And in this embodiment, the hanging drop culture unit 100 is provided in the falling flow path 120, and the cell-medium mixed solution flowing through the falling flow path 120 moves toward the inner wall side of the falling flow path 120. It further includes a buffer member 170 for guiding it to flow down.

즉 상기 완충부재(170)는 상기 낙하유로(120)를 통해 유동되는 세포-배지 혼합액이 이미 형성된 행잉드롭(B) 위로 직접적으로 떨어져 큰 낙하에너지를 가하는 것을 방지하기 위한 것으로서, 세포-배지 혼합액의 낙하 속도를 저감시키는 동시에 세포-배지 혼합액이 상기 낙하유로(120)의 내벽을 통해 흘러내리도록 함에 따라 낙하에너지를 최소화할 수 있도록 한다.That is, the buffer member 170 is to prevent the cell-medium mixed solution flowing through the falling flow path 120 from directly falling onto the already formed hanging drop (B) and applying a large drop energy, and the cell-medium mixed solution As the falling speed is reduced and the cell-medium mixed solution flows down through the inner wall of the falling flow path 120 , the falling energy can be minimized.

특히 본 실시예에서 상기 완충부재(170)는, 상기 낙하유로(120)의 횡단면 중심부에 구비되는 완충부(172)와, 상기 완충부(172)의 둘레로부터 상기 낙하유로(120)의 내벽 측으로 연장되어 상기 완충부(172)를 고정시키는 고정부(174)를 포함한다.In particular, in this embodiment, the buffer member 170 includes a buffer part 172 provided in the center of the cross-section of the fall flow path 120 , and from the circumference of the buffer part 172 to the inner wall side of the fall flow path 120 . It extends and includes a fixing portion 174 for fixing the buffer portion (172).

그리고 본 실시예의 경우 상기 고정부(174)는 총 4개가 구비되며, 상기 완충부(172)에 의해 상기 낙하유로(120)의 내벽 측으로 이동한 세포-배지 혼합액은 서로 인접한 고정부(174) 사이에 형성된 공간을 통해 하부로 이동하게 된다.And in the case of this embodiment, a total of four fixing parts 174 are provided, and the cell-medium mixed solution moved to the inner wall side of the fall flow path 120 by the buffer part 172 is between the fixing parts 174 adjacent to each other. It moves downward through the space formed in the

또한 상기 완충부(172)는, 상부에서 하부로 갈수록 단면적이 점차 증가하는 형태로 형성될 수 있다. 본 실시예에서 상기 완충부(172)는 원추형을 가지는 것으로 하였으며, 이와 같이 하는 이유는 상기 완충부(172)로 낙하한 세포-배지 혼합액이 방사형으로 고르게 분산되도록 하기 위한 것이다.In addition, the buffer portion 172 may be formed in a form in which the cross-sectional area gradually increases from the top to the bottom. In this embodiment, the buffer unit 172 is assumed to have a conical shape, and the reason for doing this is to ensure that the cell-medium mixture that has fallen into the buffer unit 172 is radially and evenly distributed.

한편 본 발명은 상기 행잉드롭 배양유닛(100)의 하부에 구비되어, 상기 드롭형성부(130)로부터 낙하하는 행잉드롭(B)을 받는 웰 플레이트유닛(200)을 더 포함할 수 있다.Meanwhile, the present invention may further include a well plate unit 200 provided under the hanging drop culture unit 100 to receive the hanging drop B falling from the drop forming unit 130 .

다시 도 2를 참조하면, 본 실시예에서 상기 웰 플레이트유닛(200)은 상기 행잉드롭(B)이 직접적으로 낙하하는 바닥을 형성하는 베이스부(210)와, 상기 베이스부(210)의 둘레로부터 상측으로 연장되어 상기 행잉드롭 배양유닛(100)의 측면 일부 둘레를 감싸는 측벽부(220)를 포함하는 형태를 가진다.Referring back to FIG. 2 , in this embodiment, the well plate unit 200 includes a base portion 210 forming a floor on which the hanging drop B directly falls, and a base portion 210 from the periphery of the base portion 210 . It extends upward and has a shape including a side wall part 220 surrounding a part of a side surface of the hanging drop culture unit 100 .

이때 상기 베이스부(210) 상에는, 내측에 포집공간을 형성하되, 제1방향이 개구되어 닫히지 않은 곡선 형태로 형성되는 제1스페로이드가드(230)와, 상기 제1 스페로이드가드(230)의 둘레 일부를 감싸는 형태로 형성되되, 상기 제1방향과 반대 방향인 제2방향으로 개구되어 닫히지 않은 곡선 형태로 형성되는 제2스페로이드가드(240)가 구비될 수 있다.At this time, on the base part 210, a collecting space is formed on the inside, and the first spheroid guard 230 is formed in a curved shape that is not closed by opening in the first direction, and the first spheroid guard 230 of the A second spheroid guard 240 formed in a shape that surrounds a part of the circumference is formed in a curved shape that is not closed by being opened in a second direction opposite to the first direction.

상기 제1스페로이드가드(230) 및 상기 제2스페로이드가드(240)는 이와 같이 서로 반대 방향의 개구를 형성함에 따라, 상기 베이스부(210)에 낙하한 행잉드롭(B)에 포함된 스페로이드가 외측으로 이탈되지 않도록 하는 동시에, 액체 형태인 배지는 외부로 용이하게 배출시킬 수 있도록 할 수 있다.As the first spheroid guard 230 and the second spheroid guard 240 form openings in opposite directions as described above, the spheroids included in the hanging drop (B) falling on the base part 210 are While preventing the roids from leaving the outside, the medium in liquid form can be easily discharged to the outside.

이상으로 본 발명의 일 실시예에 따른 티 레이어 스페로이드 배양장치의 각 구성요소에 대해 자세히 설명하였으며, 이하에서는 이를 통해 멀티 레이어 스페로이드를 형성하는 과정에 대해 설명하도록 한다.As described above, each component of the T-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention has been described in detail. Hereinafter, a process of forming a multi-layer spheroid through this will be described.

도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 멀티 레이어 스페로이드 배양장치에 있어서, 행잉드롭 배양유닛(100)을 통해 멀티 레이어 스페로이드를 형성하는 과정을 나타낸 도면이다.7 is a view showing a process of forming a multi-layer spheroid through the hanging drop culture unit 100 in the multi-layer spheroid culture apparatus according to an embodiment of the present invention.

먼저, 전술한 세포주입부(20a) 및 배지주입부(20b)를 통해 1차 주입용 세포와 배지를 메인공급부(10)의 공급유로에 주입한 후, 공기주입부(30)를 통해 공기를 주입하여 1차 세포-배지 혼합액을 각 행잉드롭 배양유닛(100) 측으로 이동시킨다.First, the cells and medium for primary injection are injected into the supply passage of the main supply unit 10 through the cell injection unit 20a and the medium injection unit 20b described above, and then air is supplied through the air injection unit 30 . By injection, the primary cell-medium mixture is moved to each hanging drop culture unit 100 side.

시간이 지남에 따라 도 7의 좌측에 도시된 바와 같이, 행잉드롭 배양유닛(100)의 드롭형성부(130)에 1차 행잉드롭(B1)이 형성되며, 1차 행잉드롭(B1)을 구성하는 1차 세포-배지 혼합액 외의 나머지 1차 세포-배지 혼합액은 낙하유로(120)에 수용된 상태를 가진다.As time goes by, as shown on the left side of FIG. 7 , the first hanging drop B 1 is formed in the drop forming unit 130 of the hanging drop culture unit 100 , and the first hanging drop B 1 ) The remaining primary cell-medium mixture other than the primary cell-medium mixture constituting the .

이후 도 6 부분에서 설명한 바와 같이, 흡입펌프를 구동시켜 외부연통부(142) - 제2연결순환부(146) - 배지배출유로(150)로 이어지는 배지의 배출 경로를 통해 상기 낙하유로(120)에 수용된 배지를 외부로 배출시킨다. 이에 따라 1차 세포-배지 혼합액은 상기 드롭형성부(130)에만 행잉드롭(B1) 형태로 잔류하게 된다.Thereafter, as described in FIG. 6 , the fall flow path 120 through the medium discharge path leading to the external communication unit 142 - the second connection circulation unit 146 - the medium discharge path 150 by driving the suction pump. Discharge the medium accommodated in the outside. Accordingly, the primary cell-medium mixture remains in the form of a hanging drop (B 1 ) only in the drop forming unit 130 .

다음으로, 다시 세포주입부(20a) 및 배지주입부(20b)를 통해 2차 주입용 세포와 배지를 메인공급부(10)의 공급유로에 주입한 후, 공기주입부(30)를 통해 공기를 주입하여 2차 세포-배지 혼합액을 각 행잉드롭 배양유닛(100) 측으로 이동시킨다.Next, after injecting the cells and medium for secondary injection into the supply passage of the main supply unit 10 again through the cell injection unit 20a and the medium injection unit 20b, air is supplied through the air injection unit 30 By injection, the secondary cell-medium mixture is moved to each hanging drop culture unit 100 side.

따라서 도 7의 중앙에 도시된 바와 같이, 행잉드롭 배양유닛(100)의 드롭형성부(130)에 형성된 1차 행잉드롭(B1)의 상부로 2차 세포-배지 혼합액(B2)이 모여 낙하유로(120)에 수용된 상태를 가지게 된다.Therefore, as shown in the center of FIG. 7 , the secondary cell-medium mixture (B 2 ) is collected on the upper part of the primary hanging drop (B 1 ) formed in the drop forming unit 130 of the hanging drop culture unit 100 . It has a state accommodated in the fall flow path (120).

이후 시간이 지남에 따라, 도 7의 우측에 도시된 바와 같이 드롭형성부(130)에 형성된 1차 행잉드롭(B1)은 상부의 2차 세포-배지 혼합액(B2)과 혼합되어 점차 희석되며, 2차 세포-배지 혼합액(B2)이 지속적으로 공급됨에 따라 최종적으로는 1차 행잉드롭(B1)이 대부분 제거되어 2차 세포-배지 혼합액(B2)에 의해 대체된다. 즉 이와 같은 상태에서는 드롭형성부(130)에 2차 행잉드롭(B2)이 형성된 상태를 가진다. Then, as time goes by, the first hanging drop (B 1 ) formed in the drop forming unit 130 as shown on the right side of FIG. 7 is mixed with the upper secondary cell-medium mixture (B 2 ) and gradually diluted and, as the secondary cell-medium mixture (B 2 ) is continuously supplied, eventually the primary hanging drop (B 1 ) is mostly removed and replaced by the secondary cell-medium mixture (B 2 ). That is, in this state, the secondary hanging drop B 2 is formed in the drop forming unit 130 .

그리고 위와 같은 과정을 복수 회 반복함에 따라, 멀티 레이어를 가지는 스페로이드를 구성할 수 있게 된다.And by repeating the above process a plurality of times, it is possible to configure a spheroid having a multi-layer.

이상과 같이 본 발명에 따른 바람직한 실시예를 살펴보았으며, 앞서 설명된 실시예 이외에도 본 발명이 그 취지나 범주에서 벗어남이 없이 다른 특정 형태로 구체화될 수 있다는 사실은 해당 기술에 통상의 지식을 가진 이들에게는 자명한 것이다. 그러므로, 상술된 실시예는 제한적인 것이 아니라 예시적인 것으로 여겨져야 하고, 이에 따라 본 발명은 상술한 설명에 한정되지 않고 첨부된 청구항의 범주 및 그 동등 범위 내에서 변경될 수도 있다.As described above, preferred embodiments according to the present invention have been described, and the fact that the present invention can be embodied in other specific forms without departing from the spirit or scope of the present invention in addition to the above-described embodiments is one of ordinary skill in the art. It is obvious to them. Therefore, the above-described embodiments are to be regarded as illustrative rather than restrictive, and accordingly, the present invention is not limited to the above description, but may be modified within the scope of the appended claims and their equivalents.

5: 공급관 어셈블리
10: 메인공급부
15: 분배부
20a: 세포주입부
20b: 배지주입부
30: 공기주입부
100: 행잉드롭 배양유닛
120: 낙하유로
130: 드롭형성부
140: 공기순환유로
150: 배지배출유로
170: 완충부재
200: 웰 플레이트유닛
210: 베이스부
220: 측벽부
230: 제1스페로이드가드
240: 제2스페로이드가드5: Supply pipe assembly
10: main supply
15: distribution unit
20a: cell injection unit
20b: medium injection unit
30: air inlet
100: hanging drop culture unit
120: fall flow path
130: drop forming part
140: air circulation path
150: medium discharge path
170: buffer member
200: well plate unit
210: base part
220: side wall
230: first spheroid guard
240: second spheroid guard

Claims (13)

내부에 공급유로가 형성된 메인공급부와, 상기 공급유로에 세포를 주입하는 세포주입부와, 상기 공급유로에 상기 세포의 배양을 위한 배지를 주입하는 배지주입부를 포함하는 공급관 어셈블리; 및
상기 공급유로와 연통되도록 상하 방향으로 형성된 낙하유로와, 상기 낙하유로의 하부에 구비되어 상기 낙하유로를 통해 중력 방향으로 유동된 세포 및 배지가 표면장력에 의해 물방울 형태의 행잉드롭을 형성하도록 하는 드롭형성부를 포함하는 행잉드롭 배양유닛; 을 포함하며,
상기 행잉드롭 배양유닛은,
상기 낙하유로와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 상기 낙하유로에 수용된 배지의 배출경로를 형성하는 배지배출유로를 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
a supply pipe assembly comprising a main supply unit having a supply passage formed therein, a cell injection unit for injecting cells into the supply passage, and a medium injection unit for injecting a medium for culturing the cells into the supply passage; and
A drop flow path formed in the vertical direction to communicate with the supply flow path, and a drop provided at the lower portion of the falling flow path to form a hanging drop in the form of a water droplet by surface tension of cells and medium flowing in the gravity direction through the falling flow path Hanging drop culture unit including a forming unit; includes,
The hanging drop culture unit,
Further comprising a medium discharge flow path extending to communicate with each other the fall flow path and the outside to form a discharge path of the medium accommodated in the falling flow path,
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 행잉드롭 배양유닛은,
상기 낙하유로와 외부를 서로 연통시키도록 연장되어 공기의 유동경로를 형성하는 공기순환유로를 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The hanging drop culture unit,
Further comprising an air circulation flow path extending to communicate the fall flow path and the outside with each other to form a flow path of air,
Multi-layer spheroid incubator.
 제2항에 있어서,
상기 공기순환유로는,
상기 낙하유로와 나란히 형성되고, 외부와 연통되는 외부연통부;
상기 외부연통부의 하단과 상기 낙하유로를 서로 연결하는 제1연결순환부; 및
상기 제1연결순환부보다 높은 위치에서 상기 외부연통부의 소정 지점과 상기 낙하유로를 서로 연결하는 제2연결순환부;를 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
3. The method of claim 2,
The air circulation flow path,
an external communication part formed side by side with the fall flow path and communicating with the outside;
a first connection circulation unit connecting the lower end of the external communication unit and the fall flow path to each other; and
A second connection circulation part for connecting a predetermined point of the external communication part and the fall flow path to each other at a position higher than the first connection circulation part; including,
Multi-layer spheroid incubator.
 삭제delete 제1항에 있어서,
상기 배지배출유로는,
상기 드롭형성부의 상단에 인접하여 상기 낙하유로에 연결되는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The medium discharge flow path,
Adjacent to the upper end of the drop forming part and connected to the fall flow path,
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 행잉드롭 배양유닛은,
상기 낙하유로 내에 구비되어, 상기 낙하유로를 통해 유동되는 세포 및 배지가 상기 낙하유로의 내벽 측으로 이동하여 흘러내리도록 유도하는 완충부재를 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The hanging drop culture unit,
Further comprising a buffer member provided in the falling flow path to induce the cells and medium flowing through the falling flow path to flow toward the inner wall of the falling flow path,
Multi-layer spheroid incubator.
 제6항에 있어서,
상기 완충부재는,
상기 낙하유로의 횡단면 중심부에 구비되는 완충부; 및
상기 완충부의 둘레로부터 상기 낙하유로의 내벽 측으로 연장되어 상기 완충부를 고정시키는 고정부;를 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
7. The method of claim 6,
The buffer member,
a buffer provided in the center of the cross-section of the fall flow path; and
Containing; including;
Multi-layer spheroid incubator.
 제7항에 있어서,
상기 완충부는,
상부에서 하부로 갈수록 단면적이 점차 증가하는 형태로 형성되는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
8. The method of claim 7,
The buffer unit,
It is formed in a shape that the cross-sectional area gradually increases from the upper part to the lower part,
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 공급관 어셈블리는,
상기 공급유로에 공기를 주입하는 공기주입부를 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The supply pipe assembly,
Further comprising an air injection unit for injecting air into the supply passage,
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 세포주입부 및 상기 배지주입부는,
상기 메인공급부의 동일 지점에 연결되는
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The cell injection unit and the medium injection unit,
connected to the same point of the main supply
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 공급관 어셈블리는,
상기 메인공급부와 상기 행잉드롭 배양유닛을 서로 연결하도록 구비되어, 상기 메인공급부를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 낙하유로 측으로 낙하시키는 분배부를 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
According to claim 1,
The supply pipe assembly,
It is provided to connect the main supply unit and the hanging drop culture unit to each other, further comprising a distribution unit for dropping the cells and medium flowing through the main supply unit to the falling flow path side,
Multi-layer spheroid incubator.
 제11항에 있어서,
상기 행잉드롭 배양유닛은 복수 개가 구비되며,
상기 분배부는 상기 행잉드롭 배양유닛 각각에 대응되도록 복수 개가 구비되어, 상기 메인공급부를 통해 유동되는 세포 및 배지를 상기 행잉드롭 배양유닛 각각에 분배하도록 형성되는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.
12. The method of claim 11,
The hanging drop culture unit is provided in plurality,
A plurality of the distribution units are provided to correspond to each of the hanging drop culture units, and are formed to distribute the cells and medium flowing through the main supply unit to each of the hanging drop culture units.
Multi-layer spheroid incubator.
 제1항에 있어서,
상기 행잉드롭 배양유닛의 하부에 구비되어, 상기 드롭형성부로부터 낙하하는 행잉드롭을 받는 웰 플레이트유닛을 더 포함하는,
멀티 레이어 스페로이드 배양장치.According to claim 1,
Further comprising a well plate unit provided under the hanging drop culture unit to receive a hanging drop falling from the drop forming unit,
Multi-layer spheroid incubator.
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