JPS6054324A - 抗ウイルス剤の製造方法 - Google Patents
抗ウイルス剤の製造方法Info
- Publication number
- JPS6054324A JPS6054324A JP58162084A JP16208483A JPS6054324A JP S6054324 A JPS6054324 A JP S6054324A JP 58162084 A JP58162084 A JP 58162084A JP 16208483 A JP16208483 A JP 16208483A JP S6054324 A JPS6054324 A JP S6054324A
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- JP
- Japan
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- mycelia
- culture
- cane molasses
- antiviral agent
- blackstrap
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- Granted
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、甘蔗廃糖蜜を担子菌類によって処理する抗ウ
ィルス剤の製造方法に関する。
ィルス剤の製造方法に関する。
ウィルスが濾過性病原体であること、リケッチアより小
さく２０〜６０ミリミクロンでウィルス以外の生物に寄
生し、生細胞内でのみ増殖することはよく知られている
ところであり、またこれが病原体となるものは動物にお
いて日本脳炎、インフルエンザ、肝炎等があり、また植
物においてはタバコモザイクウィルス（ＴＭＶ）、キュ
ウリモザイクウィルス（ＣＭＶ）等が典型である。
さく２０〜６０ミリミクロンでウィルス以外の生物に寄
生し、生細胞内でのみ増殖することはよく知られている
ところであり、またこれが病原体となるものは動物にお
いて日本脳炎、インフルエンザ、肝炎等があり、また植
物においてはタバコモザイクウィルス（ＴＭＶ）、キュ
ウリモザイクウィルス（ＣＭＶ）等が典型である。
ところで、本発明者らは先にバガス等の固体培地または
液体培地に稚苗などの担子菌を植菌し。
液体培地に稚苗などの担子菌を植菌し。
これら菌糸体と培地との混合物（菌糸体培養物）から得
られる多糖及びサイトカイニン系の活性物質を有効成分
とする抗ウィルス剤を開発した（例えば特開昭５５−１
５７５１７号参照）。
られる多糖及びサイトカイニン系の活性物質を有効成分
とする抗ウィルス剤を開発した（例えば特開昭５５−１
５７５１７号参照）。
また１本発明者らは菌糸体の代謝産物や培地成分の部分
分解物に注目し、さらに研究、実験を行なった結果、バ
ガス等の植物細胞壁成分それ自体にも抗ウイルス効果が
あることを見出し、抗ウィルス剤を開発した（例えば特
開昭５７−１．０６６２４号参照）。すなわち、植物細
胞壁のヘミセルロースを構成するキシログルカンやアラ
ビノキシラン等のへテログリカンが抗ウィルス活性を有
するものと考えられる。
分解物に注目し、さらに研究、実験を行なった結果、バ
ガス等の植物細胞壁成分それ自体にも抗ウイルス効果が
あることを見出し、抗ウィルス剤を開発した（例えば特
開昭５７−１．０６６２４号参照）。すなわち、植物細
胞壁のヘミセルロースを構成するキシログルカンやアラ
ビノキシラン等のへテログリカンが抗ウィルス活性を有
するものと考えられる。
そして、本発明者らはより容易に入手でき、かつ安価な
抗ウィルス剤を開発するため、鋭意研究した結果、驚く
べきことに甘蔗廃糖蜜が優れた抗ウィルス活性を有する
ことを見出し、これを農園芸作物のウィルス病抑制方法
として本出願と同時に別途特許出願した。
抗ウィルス剤を開発するため、鋭意研究した結果、驚く
べきことに甘蔗廃糖蜜が優れた抗ウィルス活性を有する
ことを見出し、これを農園芸作物のウィルス病抑制方法
として本出願と同時に別途特許出願した。
本発明は上記の発明をさらに追求した結果、完成された
ものである。
ものである。
すなわち１本発明は１を蔗廃糖蜜を主成分とする培地に
担子菌類に属する食用茸の菌糸体を接種して深部培養す
るようにした抗ウィルス剤の製造方法である。
担子菌類に属する食用茸の菌糸体を接種して深部培養す
るようにした抗ウィルス剤の製造方法である。
甘蔗廃糖蜜は、砂糖きびを原料として砂糖を製造する過
程において、経済的な見地から砂糖の回収をすることが
できない最後に残った暗黒色、粘稠な糖蜜である。この
甘蔗廃糖蜜は、極めて安価に得られ、従来よりアルコー
ル発酵、グルタミンシシ褌酵などの培地成分として一般
的に使用されている。しかしながら、かかる従来技術に
おいては、甘蔗廃糖蜜を単に微生物の栄養源として使用
しているにすぎず、甘蔗廃糖蜜自体の有する特殊な活性
に着目１〜で使用した例はない。
程において、経済的な見地から砂糖の回収をすることが
できない最後に残った暗黒色、粘稠な糖蜜である。この
甘蔗廃糖蜜は、極めて安価に得られ、従来よりアルコー
ル発酵、グルタミンシシ褌酵などの培地成分として一般
的に使用されている。しかしながら、かかる従来技術に
おいては、甘蔗廃糖蜜を単に微生物の栄養源として使用
しているにすぎず、甘蔗廃糖蜜自体の有する特殊な活性
に着目１〜で使用した例はない。
前述したように、バガス等の植物細胞壁ヘミセルロース
の構成成分であるキシログルカン、アラビノキシラン等
のへテログリカンｄ゛抗ウィルス活性を有することが確
認されている。ところで、砂糖の製造過程において砂糖
きびを圧搾して搾汁を得る際にこれらのへテログリカン
が搾汁中に混入し、１ｆ蔗廃糖蜜中に残存している。し
たがって。
の構成成分であるキシログルカン、アラビノキシラン等
のへテログリカンｄ゛抗ウィルス活性を有することが確
認されている。ところで、砂糖の製造過程において砂糖
きびを圧搾して搾汁を得る際にこれらのへテログリカン
が搾汁中に混入し、１ｆ蔗廃糖蜜中に残存している。し
たがって。
甘蔗廃糖蜜中には多量のへテログリカンが含才れており
、これらの成分が抗ウィルス活性の発現に寄与している
ものと考えられる。
、これらの成分が抗ウィルス活性の発現に寄与している
ものと考えられる。
本発明は、甘蔗廃糖蜜を担子菌類で処理することによっ
て、甘蔗廃糖蜜の有する抗ウィルス活性をより高めるよ
うにしたものである。すなわち。
て、甘蔗廃糖蜜の有する抗ウィルス活性をより高めるよ
うにしたものである。すなわち。
甘蔗廃糖蜜を主成分とする培地に担子菌類に属する食用
茸の菌糸体を接種して深部培養すると、菌糸体より菌体
外酵素としてセルラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−ガ
ラクトシダーゼ等多くのカルボバイトラーゼが産生され
、これらの菌体外酵素により、甘蔗廃糖蜜中に含まれる
ヘテログリカンが部分分解される。その結果、ヘテログ
リカンが有する活性基がより多く露出し、抗ウィルス活
性がより高められるものと考えられる。
茸の菌糸体を接種して深部培養すると、菌糸体より菌体
外酵素としてセルラーゼ、α−グルコシダーゼ、β−ガ
ラクトシダーゼ等多くのカルボバイトラーゼが産生され
、これらの菌体外酵素により、甘蔗廃糖蜜中に含まれる
ヘテログリカンが部分分解される。その結果、ヘテログ
リカンが有する活性基がより多く露出し、抗ウィルス活
性がより高められるものと考えられる。
本発明において使用する培地としては、甘蔗廃糖蜜を水
等で希釈した液体培地が好ましい。この液体培地には、
菌糸体の増殖を助けるため、ペプトン、イースト等の他
の成分を補助的に添加１〜てもよい。また、甘蔗廃糖蜜
の使用に際し、蒸気吹込み等を行なって肪質物質や金属
類を沈澱除去する等の前処理を行なうことが好ましい。
等で希釈した液体培地が好ましい。この液体培地には、
菌糸体の増殖を助けるため、ペプトン、イースト等の他
の成分を補助的に添加１〜てもよい。また、甘蔗廃糖蜜
の使用に際し、蒸気吹込み等を行なって肪質物質や金属
類を沈澱除去する等の前処理を行なうことが好ましい。
調整した液体培地は、オートクレーブ等に入れて滅菌処
理する。
理する。
本発明において使用する担子菌類に属する食用茸として
は１例えば椎茸、ヒラタケ、エノキタケ、なめこ、しめ
じ等が挙げられるが、培養の容易さ及び抗ウィルス活性
の点から椎茸を使用するのが最も好ましい。
は１例えば椎茸、ヒラタケ、エノキタケ、なめこ、しめ
じ等が挙げられるが、培養の容易さ及び抗ウィルス活性
の点から椎茸を使用するのが最も好ましい。
次にこれらの食用茸の菌糸体を前記の液体培地に接種し
て深部培養する。この場合、菌糸体はあらかじめ前培養
してから接種してもよい。培養は、振盪培養あるいは通
気培養により、１５〜３０℃の温度条件下で１０日間前
後行なうのが適当で゛ある。これによって、菌糸体は充
分に増殖し、多種類の菌体外酵素を産生１〜で培地成分
を資化させる。
て深部培養する。この場合、菌糸体はあらかじめ前培養
してから接種してもよい。培養は、振盪培養あるいは通
気培養により、１５〜３０℃の温度条件下で１０日間前
後行なうのが適当で゛ある。これによって、菌糸体は充
分に増殖し、多種類の菌体外酵素を産生１〜で培地成分
を資化させる。
すなわち、多種類のカルボバイトラーゼによって甘蔗廃
糖蜜中に含まれるヘテログリカンを部分分解し、活性基
を露出させる。
糖蜜中に含まれるヘテログリカンを部分分解し、活性基
を露出させる。
培養終了後、培養物を濾過あるいは遠心分離して、菌糸
体と培養液とを分離する。菌糸体を除去した培養液はエ
バポレータ、濾過膜等によって適宜濃度に濃縮し、除菌
フィルター等を通して液状の抗ウィルス剤とすることが
できる。あるいは。
体と培養液とを分離する。菌糸体を除去した培養液はエ
バポレータ、濾過膜等によって適宜濃度に濃縮し、除菌
フィルター等を通して液状の抗ウィルス剤とすることが
できる。あるいは。
菌糸体を除去した培養液を適宜濃度に濃縮し、凍結乾燥
などして粉末状の抗ウィルス剤を製造することもできる
。
などして粉末状の抗ウィルス剤を製造することもできる
。
なお、本発明において、菌糸体を除去した培養液をセフ
ァデックス、ＤＥＡＥセルローズ等にカケて、さらに有
効な成分を分離精製するようにしてもよい。また、本発
明は、甘蔗廃糖蜜の有する抗ウィルス活性に着目して成
されたものではあるが。
ァデックス、ＤＥＡＥセルローズ等にカケて、さらに有
効な成分を分離精製するようにしてもよい。また、本発
明は、甘蔗廃糖蜜の有する抗ウィルス活性に着目して成
されたものではあるが。
食用茸の菌糸体自体が有する抗ウィルス活性も期待され
、場合によっては菌糸体をホモジナイズあるいは自己消
化させ、菌糸体成分をも含有する抗ウィルス剤を製造す
るようにしてもよい。
、場合によっては菌糸体をホモジナイズあるいは自己消
化させ、菌糸体成分をも含有する抗ウィルス剤を製造す
るようにしてもよい。
以下１本発明の詳細な説明する。
実施例１
蒸気吹込みを行なった甘蔗廃糖蜜を水によって希釈し培
養液とした。この培養液をオートクレーブに入れて常法
に従って滅菌し、椎茸の菌糸体を接種し、２５℃の恒温
室にて通気培養を行々つだ。
養液とした。この培養液をオートクレーブに入れて常法
に従って滅菌し、椎茸の菌糸体を接種し、２５℃の恒温
室にて通気培養を行々つだ。
１０日間培養ｊ７た後、培養物を濾過し７て菌糸体を除
去１２．培養濾液をエバポレータにて濃縮した後、凍結
乾燥して褐色粉末を得た。この褐色粉末のラット経口投
与によるＬＤ５ｏｌｄ： １８．５９７ｋｇであった。
去１２．培養濾液をエバポレータにて濃縮した後、凍結
乾燥して褐色粉末を得た。この褐色粉末のラット経口投
与によるＬＤ５ｏｌｄ： １８．５９７ｋｇであった。
次にこの褐色粉末を用いて抗ウィルス活性の試験を行な
った。
った。
（１） タバコモザイクウィルス（ＴＭＶ）検定植物と
してニコチアナ・グルチノーサ（Ｎ、 ｇｌｕｔｉｎｏ
ｓａ ）を使用（７だ。」１記褐色粉末を種々の濃度に
希釈し、この希釈液にＴＭＶの２０００倍希釈液を混合
し、生葉に接種した。また、対照生葉にＴＭＶの希釈液
のみを接種した。そして、試験区と対照区の局部病斑数
を測定１〜．試験区の対照区に対する局部病斑形成阻止
率をめた。結果を第１表に示す。
してニコチアナ・グルチノーサ（Ｎ、 ｇｌｕｔｉｎｏ
ｓａ ）を使用（７だ。」１記褐色粉末を種々の濃度に
希釈し、この希釈液にＴＭＶの２０００倍希釈液を混合
し、生葉に接種した。また、対照生葉にＴＭＶの希釈液
のみを接種した。そして、試験区と対照区の局部病斑数
を測定１〜．試験区の対照区に対する局部病斑形成阻止
率をめた。結果を第１表に示す。
第１表
上表から明らかなように、褐色粉末は低濃度で優れた抗
ウィルス活性を有する。
ウィルス活性を有する。
（２） インフルエンザウィルス
豚の腎臓細胞を宿主細胞として増殖したインフルエンザ
Ａ２型を、各種濃度の褐色粉末を添加した培地に接種し
、２日間、３７℃にて細胞培養した後、ニワ） ＩＪ赤
赤面凝集価を調べた。結果を第２表に示す。
Ａ２型を、各種濃度の褐色粉末を添加した培地に接種し
、２日間、３７℃にて細胞培養した後、ニワ） ＩＪ赤
赤面凝集価を調べた。結果を第２表に示す。
第２表
上表より明らかなように、褐色粉末はインフルエンザウ
ィルスに対しても低濃度で優れた抗ウィルス活性を有す
る。
ィルスに対しても低濃度で優れた抗ウィルス活性を有す
る。
（３）Ｂ型肝炎ウィルス
肝生検の結果、活動型慢性Ｂ型肝炎と診断された３４才
の男性について１日６７の褐色粉末の経口投与を行なっ
た。その結果、投与前のＧＯＴ値は７７９．ＧＰＴ値は
８３８であったが、投与を始めて二週間目より急に低下
１２，１ケ月目にはＧＯＴ値７．ＧＰＴ値２２と正常に
なった。また、投与前のＨＢｅ抗原は５．６ 、 Ｔ（
Ｂｅ抗体は６．０であったが、投与を始めて１ケ月目に
血清転換 （５ｅｒｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ）を起とし％ ２ケ
月目にはＨＢｅ抗原０．４−、 ＨＢｅ抗体７３となっ
た。
の男性について１日６７の褐色粉末の経口投与を行なっ
た。その結果、投与前のＧＯＴ値は７７９．ＧＰＴ値は
８３８であったが、投与を始めて二週間目より急に低下
１２，１ケ月目にはＧＯＴ値７．ＧＰＴ値２２と正常に
なった。また、投与前のＨＢｅ抗原は５．６ 、 Ｔ（
Ｂｅ抗体は６．０であったが、投与を始めて１ケ月目に
血清転換 （５ｅｒｏｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ ）を起とし％ ２ケ
月目にはＨＢｅ抗原０．４−、 ＨＢｅ抗体７３となっ
た。
実施例２
エノキタケの菌糸体を用いて実施例１と同様に褐色粉末
を作製した。この褐色粉末のラット経口投与によるＬＤ
５ｏは１７．４９７ｋｇであった。
を作製した。この褐色粉末のラット経口投与によるＬＤ
５ｏは１７．４９７ｋｇであった。
この褐色粉末を用いて抗ウィルス活性の試験を行なった
。
。
（１）タバコモザイクウィルス（ＴＭＶ）検定植物とし
てニコチアナ・グルチノーサ（Ｎ、 ｇｌｕｔｉｎｏｓ
ａ ）を使用した。上記褐色粉末を種々の濃度に希釈し
、この希釈液にＴＭＶの２０００倍希釈液を混合し、生
葉に接種した。まだ、対照生葉にＴＭＶの希釈液のみを
接種した。そして、試験区と対照区の局部病斑数を測定
し、試験区の対照区に対する局部病斑形成阻止率をめた
。結果を第３表に示す。
てニコチアナ・グルチノーサ（Ｎ、 ｇｌｕｔｉｎｏｓ
ａ ）を使用した。上記褐色粉末を種々の濃度に希釈し
、この希釈液にＴＭＶの２０００倍希釈液を混合し、生
葉に接種した。まだ、対照生葉にＴＭＶの希釈液のみを
接種した。そして、試験区と対照区の局部病斑数を測定
し、試験区の対照区に対する局部病斑形成阻止率をめた
。結果を第３表に示す。
第３表
上表から抗ウィルス活性は明らかである。
（２＋ インフルエンサウイルス
豚の腎臓細胞を宿主細胞として増殖したインフルエンザ
Ａ２型を、各種濃度の褐色粉末を添加した培地に接秤し
、２日間、３７℃にて細胞培養１゜た後、ニワトリ赤血
球凝集価を調べた。結果を第４表に示す。
Ａ２型を、各種濃度の褐色粉末を添加した培地に接秤し
、２日間、３７℃にて細胞培養１゜た後、ニワトリ赤血
球凝集価を調べた。結果を第４表に示す。
（１１）
第４表
上表から抗ウィルス活性は明らかである。
以上説明したように１本発明によれば甘蔗廃糖蜜という
極めて入手し易く、かつ、安価な原料を用いて、高い活
性を有する抗ウィルス剤を製造することができる。また
、液体培地を用いることができるので、培養後、菌糸体
を除去して容易に抗ウィルス活性を有する培養液を得る
ことができ、有効成分の抽出等の操作が大幅に簡略化さ
れ、工業的規模での製造に適している。さらに、甘蔗廃
糖蜜は極めて安全な物質であり、かつ、この甘蔗廃糖蜜
に作用させる食用茸の菌糸体も毒性がまったくないもの
であるため、得られた抗ウィルス剤（１り は毒性、副作用の点で全く問題が生じない。
極めて入手し易く、かつ、安価な原料を用いて、高い活
性を有する抗ウィルス剤を製造することができる。また
、液体培地を用いることができるので、培養後、菌糸体
を除去して容易に抗ウィルス活性を有する培養液を得る
ことができ、有効成分の抽出等の操作が大幅に簡略化さ
れ、工業的規模での製造に適している。さらに、甘蔗廃
糖蜜は極めて安全な物質であり、かつ、この甘蔗廃糖蜜
に作用させる食用茸の菌糸体も毒性がまったくないもの
であるため、得られた抗ウィルス剤（１り は毒性、副作用の点で全く問題が生じない。
特許出願人 野１１１食菌工業株式会社代理人 弁理士
松井 茂
松井 茂
Claims (1)
- 甘蔗廃糖蜜を主成分とする培地に担子菌類に属する食用
茸の菌糸体を接種して深部培養することを特徴とする抗
ウィルス剤の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58162084A JPS6054324A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | 抗ウイルス剤の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58162084A JPS6054324A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | 抗ウイルス剤の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6054324A true JPS6054324A (ja) | 1985-03-28 |
| JPS6237015B2 JPS6237015B2 (ja) | 1987-08-10 |
Family
ID=15747776
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58162084A Granted JPS6054324A (ja) | 1983-09-05 | 1983-09-05 | 抗ウイルス剤の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6054324A (ja) |
Cited By (15)
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|---|---|---|---|---|
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| KR100424608B1 (ko) * | 2001-06-13 | 2004-03-27 | 주식회사 경기유지 | 고품질의 버섯을 저비용으로 다수확하기 위한 버섯증수개량제 조성물 |
| KR100424607B1 (ko) * | 2001-06-12 | 2004-03-27 | 주식회사 경기유지 | 옥수수 배아박 또는 ｃｍｓ를 함유하는 버섯 배양배지조성물 |
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-
1983
- 1983-09-05 JP JP58162084A patent/JPS6054324A/ja active Granted
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