JPS58501125A - 安定な水性治療性インシユリン製剤及びその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 安定な水性治療性インシーリン製剤及びその製造方法この発明は、体外的及び体 内的使用のだめの輸送可能な装置を包含する、インシーリン分配装置の使用にと って適当な、水性媒体中の新規で安定な治療性インシーリン製剤に関する。

インシーリン依存性糖尿病に関連して発生する併発症のｔｌとんどけ、血液中の グルコース含量の制御が不十分なことが原因であると一般に考えられている（テ ホプロトスキー、　Ｄｉａｂ＠ｔｏｌｏｇｉｍ＋　１５　＋　１４３−１５２（ １９７８））。従来のインシュリン治療では、インシーリンを糖尿病患者に１日 当シ１回ないし３回注射することによって投与している。その結果、血液中のイ ンシーリン及びグルコース含量が変動する。これに対し、非塘尿病患者は、血流 中に分泌されるインシーリンを、必要な量だけすい臓から定常的に受け取ってい る。

従って、このところ、上述の問題を解決するインシーリン分配装置の開発に努力 が払われてきた。しかしながら、もしこのような装置が体内的又は体外的にヒト に用いられるとすると、インシーリン裏剤は注射用の展剤の場合よシも装置の貯 蔵容器に貯えられているときの方が、温度及び運動の点においてはるかに劣った 貯蔵条件下で貯えられることになる。以前から知られているインシュリン製剤は 、４℃で静置貯蔵されることを意図している。これに対し、インシュリン分配装 置の貯蔵容器中では、インシュリン製剤は長期間３０〜３７℃の温度下で貯えら れ、さらにこの間がなシの運動を余儀なくされる。

溶液中のインシュリンは、水溶液と空気との界面を包含する疎水性界面に吸着さ れることが知られている（ウェイセンベルトら、Ｄｉａｂ＊ｔ＠ｓ１７．７６６ （１９６８）。

このように吸着されたインシーリンは変性することがあシ、また凝集することも ある。そして、これらの変性インシュリン凝集物は界面から離脱し、沈降して溶 液中に十分に高濃度の沈殿を生成する。これらの過程は、温度を高め、運動を激 しくさせることによって加速される。

従って、放出装置に従来の溶解インシーリン製剤を用いていると、装置の供給チ ー−プ、弁及びフィルターがしばしば徐々に沈殿インシュリン塊によって閉塞さ れ、そしてこれによってインシュリンの血流中への所望の極めて精密な投与が妨 げられることは明らかである。凝集に関するこれらの問題は、Ｗ、Ｄ、ラフイー ドら、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉｍ　１９　、１−９　（１９８０）で極めて詳細 に議論されてお夛、ここでは、凝集の傾向は、温度、イオンの種類及び濃度、声 値、二酸化炭素及び他のガスの存在、並びに他の因子にょシ左右されることが報 告されている。

従来のインシュリン展剤においては、貯蔵容器を有する装置内に長期間貯えられ た後に血流に到達したインシュリンの品質は、通常の条件下で貯えられ、使用さ れるものの品質よシも有意に劣っていることが発見された。このこともまた、分 配装置の貯蔵容器中に貯えられる間に起こる凝集及び／又は変性インシュリンの 生成の故に理屏し得る。

このように１分配装置と従来のインシュリン製剤とを組み合わせることによって 上述の問題を解決することは不可能である。

ガンマーク出願１８５１／８０．参照ヨーロ、パ出願１８６０９、はインシーリ ン溶液を包含する、抗変性性水性タンノ９り質溶液に関している。ここでは、上 記問題を、鎖状の基本構造を有し、若干疎水性の領域と、若干親水性の領域を交 互に有し、好ましくは式％式％（１） で表わされるホモポリマー、コポリマー又はブロックポリマーである界面活性剤 を溶液に加えることによって解決しようとしている。上式において、孔は式（２ ）又は（３）で表わされる結合がランダム順序にｎ個つながった鎖を表わし、ｎ は２〜８０、好ましくは８〜４５を表わす。

Ｙは酸素又はイミノ基を表わし、Ｒ１は水素、メチル基又はエチル基を表わし、 Ｒは同一でも異なっていてもよいが、鎖結合Ｘのうち少なくとも半分にはメチル 基又はエチル基が存在していなければならず、Ｒ及びＲは独立に水素又は有機基 、好ましくは炭素数１ないし２０のアルキル基、炭素数２ないし２０のカルボキ シアルキル基、又は炭素数１ないし１０のアルキル基を含むアルキルフェニル基 を表わすが、Ｙがイミノを表わすときはＲは炭素数１ないし２０のアルキル基の みを表わす。鎖の疎水性基がより大きな疎水性面によく結合するので、これらの 界面活性剤は界面を「飽和」させる。しかしながら、溶解されたタン・やり質の 疎水性領域は極めて小さな面を提供するのみであるので界面活性剤は結合せず、 また同様な理由により、溶液中に遊離の界面活性要素が存在する限シ、タン・母 り質は疎水性面に結合できない。例１〜６でつくられたタンパク質溶液が、上記 出願に記載された、例えば安定性のような諸性質を有することは否定しない。し かし、インシーリン溶液に関しては、その発明は分配装置内で用いられるインシ ュリン製剤にまつわる上述した問題を解決しないことは明らかである。例７〜１ ３（インシュリン）では、例１〜６の場合のような安定性が何ら報告されていな いことに気がつく。後述のように、例１１を再現すると、振盪試験において不十 分な耐性が見られる。

チル型の非イオン界面活性剤のうち狭い範囲のものが極めて低濃度に存在すると ・、水性媒体中のインシュリンが昇温下で空気の存在下で動かされたときに起こ る変性及び凝集が効果的に妨げられることが発見された。

従って、この発明は、インシュリン分配装置に用いるのに特に有用な安定な水性 治療性インシュリン製剤に関し、これは水性媒体の声が６．５ないし９であシ、 一般式（４）で示されるポリオキシエチレンアルキルエーテルを含有する点で唯 一のものである。

Ｒ−０−（ＣＨ２−ＣＨ２−０）ｎ−Ｈ（４）ただし、Ｒは直鎖状又は分枝状の 、飽和又は不飽和Ｃ８−Ｃｌ３アルキル基、ｎは２ないし２５の整数を示す。

式（４）のうち特に好ましい化合物は、ＲがＣｌ２−ＣＩ！アルキル基、好まし くはラウリル基又はトリデシル基である。なぜなら、これらは安定性が最も大き いからである。式（４）の化合物においてａは好ましくは４ないし２３の整数で あシ、さらに好ましくは６ないし１５である。

これらのポリオキシエチレンアルキルエーテルは、水性媒体中のインシュリン製 剤中で：２　ｐｐｍ以上の濃度で有効である。２ないし１００　ｐｐｍの濃度に おける効果が以下に記載されているが、これらの化合物は、１００ないし３　ｏ 　ｏ　ｐｐｍ又はそれ以上、例えば１１０００ｐｐのような高濃度でも活性であ る。個々の場合における最も適当な濃度は試験によって決めることができ、最適 濃度は化合物の種類、媒体中のインシーリン及び他の成分の濃度、並びに投与及 び製剤の態様に依存する１上述の化合物は、西ドイツ公開特許公報２９１７５３ ５に従った、インシーリンの変性及び界面への吸着を防止する非イオン界面活性 剤を表わす一般式に含まれる。

この発明の化合物は、渦該西ドイツ出願に基づく優先権主張を伴うヨーロッ・々 特許出願１８６０９の明細書において詳細に記載されていないし、実施例におい て調べられてもいない。ヨーロラー４％許出Ｍ　１８６０９では、活性化合物が 上述の式１のものに限定されている。この発明に用いられる型の化合物は、ヨー ロッ・母特許庁によって、西ドイツ公告特許公報２６２０４８３の議論に関連し て、ヨーロッパ特許出願１８６０９の操作において防御効果を持たないものとし て特徴ずけられている。

この明細書は、特に経鼻投与に適した、安定なインシュリン水溶液に関する。こ の溶液はｐＨ２，５〜４．７であシ、９〜２２のＨＬＢ値を持つｌ又は２以上の 非イオン界面活性剤及び／又は２００ないし７５００の分子量を有するポリエチ レングリコールを、酸性−領域においてよく知られたインシュリンのデアミゾ− ジョン（ｄａａｍｉｄａｔｉｏｎ）を妨げ、ダル形成及び沈殿化を妨げることに よって貯蔵可能期間を改善するための安定剤として含む。界面活性剤の含量は通 常０．１ないし２０重量％、好ましくは０．５ないし１０重量％である。

０．１−未満の含量は・、不十分である。

有用な非イオン化合物の例は多数の型のものを包含し、例えばポリエキシエチレ ンと水素化ヒマシ油との化合物、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル％ポリオキ シエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエ ーテル、ポリオキシエチレンーポリオキシゾロピレンアルキルエーテル及びｊ［ に式４のポリオキシエチレンアルキルエーテル（もっとも、ＲはＣ４−０１８を 表わし、ｎは３ないし６０）を包含する。

ヨー口、・母特許出願１８６０９で用いられた化合物の振盪試験における不十分 な安定化効果に気付いた当業者が、酸性溶液中のインシュリンのデアミデーシ叢 ンに対する安定剤として知られている化合物を試験するよう導びかれることはな いという事実を別にしても、当業者が、特にこの発明によって提案された精密に 狭い範囲の化合物が有効であることを予言することはできなかった。構造的に極 めて類似した式％式％（５） （ただし、Ｒ１及びｎは式４と同じ）で表わされるエステルが、振盪試験におい て安定剤として不活性であることはよシ驚くべきことである。

媒体中のＺｎ含量は、無水インシュリンの重量に対して０ないし５チ、好ましく は０ないし１％、さらに好ましくは０．３ないし１％である。もつとも、ポリオ キシエチレンアルキルエーテルの特に良い効果は、溶解インシュリン中のＺｎ含 量が０．６ないし０．９％のときに得られる。−値は、上述のように６．５ない し９．０、好ましくは６．５ないし８．０、さらに好ましくは７．０ないし８． ０である。インシュリン濃度は１５００　ＩＵ／ｄ以下であってもよい。

この発明によると、上述した用途のための水性インシュリン製剤は、次の一般的 手順によってつくるこ誘導体を、例えばＨＣＬ溶液を添加するとともに水に溶解 する。Ｚｎ含量は、水中１ｃ、Ｚｎ塩の溶液を加えることによって調節する。得 られた溶液を、フェノール、ｍ−クレゾール又はｐ−メチルヒドロキシベンゾエ ートのような保存剤；グルコース、グリセロール又は塩化すトリウムのような等 張剤；及び特定の声を維持するための、酢酸塩又はリン酸ナトリウムのような緩 衝液を含む溶液と混合する。−は、例えばＮａＯＨ溶液又はＨｃｔ溶液によシ所 望の値に調整する。最後に、水に溶かした安定化ポリオキシエチレンアルキルエ ーテルを加える。

あるいは、緩衝液、等張剤、保存剤及び安定化化合物を含む溶液にインシーリン を直接溶かし、その後Ｚｎ含量と−を調整してもよい。

これらの工程の順序は任意的であり、異なる方法に変更することも可能である。

例えば、安定化ポリマーは、インシュリンの精製工程において加えてもよい。

このように、この発明は、インシュリンを含む水性媒体を、式 ％式％（４） （ただしＲ及びｎは上述のとお勺）で表わされるポリオキシエチレンアルキルエ ーテルと混合し、そしてもし必要ならば声を６．５ないし９に調整し、所望なら ば媒体の残シの成−分を加え、及び／又はインシーリン濃度を調整して最終的な 製剤を提供することからなるこの発明のインシーリン製剤の製造方法にも関する 。

この発明を次の雲糞例によってさらに完全に例示する。

氾 ０．４％Ｚｎを含み、Ｚｏｏ、０ＯＯＩＵに相当する結晶ブタインシーリンを３ ．３コのＩＮ　ＨＣｌを用いて４００ｍ１の水に溶かした。１プ当シ２゜２０■ のＺ　ｎＣＬ２を含むＺ　ｎＣｔ２溶液を１０ゴ加えた。次に、３．０ｇのｍ− クレゾール、１６．０！！の無水グリセロール及び２．３７３ｇのＮａ２）ｔＰ ０４・２Ｈ２０を含む溶液５００ゴを加えた。かきまぜた後、Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨ によって−を７．３に調整した。１％のポリオキシエチレン−２３−ラウリルエ ーテル（ｉｏ。

ｐｐｍの濃度に相当する）を含む溶液を１０１ｎｌ加え、水を加えて１ｔにし、 溶液を滅菌ろ過した。

水平に置いたガラスびん３／４の溶液を、空気の存在下で３７℃で８０回／分で ６９９時間以上定常的に振盪した後でも製剤は透明で物理的及び化学的変化が見 られなかった。

例２ ポリオキシエチレン−２３−２ウリルエーテルに代えてポリオキシエチレン−１ ０−ラウリルエーテルを用いたことを除き、例１と同じ操作を行なった。

例１と同じ性質の製剤が得られた。

剋」 ０．７′％のＺｎを含み、１００，０ＯＯＩＵに相当する結晶ブタインシュリン を３．３コのＩＮＨｃｔを用いて４００ゴの水に溶かした０次に、３．０．Ｆの ｍ−クレゾール、１６ｇの無水グリセロール及び２．３７３ｉＩのＮａ２ＨＰＯ ４’２Ｈ２０を含む溶液５００ｒＩＬｌを加えた。かきまぜた後、−をＩ　Ｎ　 ＮａＯＨによって７．３に調整した。１チのポリオキシエチレン−１５−トリデ シルエーテル（１０ｐｐｍの濃度に相当する）を含む溶液１ｍｌを加え、水を加 えて１ｔにし、溶液を滅菌ろ過した。

水平に置いたガラスびん３／４の溶液を、空気の存在下で３７℃で８０回／分で １０００時間以上定常的に振盪した後でも製剤は透明で物理的及び化学的変化が 見られなかった。

ｔ」 、／　ジオキシエチレン−６−トリデシルエーテルを、それぞれ２ｐｐｍ・５　 ｐＰ”　、１０　Ｐｐｆｎ　ｓ　２５　ｐｐｍ、５０ｐｐｍ、１００　ｐｐｍに 相当する濃度でインシーリンに加えたことを除き１例３と同じ操作を行なった。

溶液を例３と同様な振盪試験に付したが、１０００時間以上振盪してもすべて透 明で物理的、化学的変化が見られなかった。

５」」譲辷軟ｔつ ポリオキシエチレン−２３−ラウリルエーテルに代えて１００　ｐｐｍのポリオ キシエチレン−２０−セチルエーテル（Ｒ＝Ｃ４６）を加えることを除き、例１ と同じ操作を行なった。

例１と同様な振盪試験を行なったところ、安定性はわずかに１３７時間しか持続 しなかった。

例６（比較例） ポリオキシエチレン−２３−ラウリルエーテルに代えて１００　ｐｐｍのポリオ キシエチレン−９−ラウレートである「ノ／４′ルコールＬ−４」を加えたこと を除き、例１と同じ操作を行なった。溶液ははじめから濁っており、濁ったまま であった。

上述の例よシ、極めて類似したポリオキシアルキレンアルキルエステルが不活性 であることがわかる。

上述の振盪試験では、満足すべき安定化効果の定められた限界がなかつた。出願 人は、添加剤を含むポンプインシーリン展剤のだめの最低の内的基準として３０ ０時間を定めた。

これに徴すと、ＲがＣ４６である式４のポリオキシエチレンアルキルエーテルは 不満足であることがわかる。

２膓］し匹」− （ヨーロッパ出願１８６０９の再現） ０．６重量％のＺｎを含む結晶シタインシーリン（４０，０ＯＯＩＵ）を、３１ ＬｌのＩＮ塩酸の添加とともに２００ｍＡ！の水に溶かした。この溶液を、ＩＩ のバラヒドロキシ安、ｔ　香酸メチルエステル、１７１のグリセロール、１．４ ｙの酢酸ナトリウム・３Ｈ２０及び平均分子量１７５０の直鎖状ポリグロビレン グリコール１ｏ〜を含む溶液７００ゴと混合した。溶液の声を６．９ないし７． ４に調整した。水を加えて１．Ｏ２にし、溶液を滅菌ろ過した。

例１と同様な振盪試験を行なったところ、安定性はわずか２００時間しか持続し なかった。

補正書の＠訳文提出書（特許法第１８４条の７第１項）昭和５２年３月ノア日 特許庁長官　若　杉　和　夫　殿 １国際出願番号 ＰＣＴ／ＤＫ８２／′０００６８ ２、発明の名称 安定な水性治療性インシュリン製剤及びその製造方法３、特許出願人 住所　デンマーク国　ディ・ケイ−２８２０ケ８ントフテ、二−ルス。

ステーンセンスヴエノエイ、１ 住所　東京都港区虎ノ門１丁目２６番５号第１７森ビル５、補正書の提出年月日 ６、添付書類の目録 （１）補正書の写しく翻訳文） 請　求　の　範　囲 １、（補正後）水性媒体のｐＨが６．５ないし９であり、式 ％式％（４１ （ただしＲは直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和ｃｓ−〇、ｓアルキル基、ｎｔ ｉ２ないし２５の整数を示す）で表わされるポリオキシエチレンアルキルエーテ ルを１０００９９ｍ以下含むことを特徴とする、インシュリン分配装置における 使用に適した安定な水性治療性インシュリン製剤。

２、式４においてＲがＣｔｔ−Ｃ１１アルキル基である化合物を含むことを特徴 とする請求の範囲第１項記載のインシュリン製剤。

３、式４においてｎが４ないし２３、特に６ないし１５の整数である化合物を含 むことを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項記載のインシュリン製剤。

４、水性媒体はヒト若しくは動物のインシュリン又はそれらの誘導体を含み、所 望により等張剤、保存剤、緩衝液等の通常の添加剤を含み、さらに任意的に、製 剤の効果を加速し又は長びかせる成分を含むことを特徴とする請求の範囲第１項 ないし第３項のいずれかに記載のインシュリン製剤。

５、ヒト又は動物のインシュリンを１５００　ＩＵ／、４以下の濃度に含むこと を特徴とする請求の範囲第１項５ ないし第４項のいずれかに記載のインシュリン製剤。

６、式４の化合物を少なくと４２　ｐｐｍ含むことを特徴とする請求の範囲第１ 項ないし第５項のいずれかに記載のインシュリン製剤。

７、（補正後）インシュリンを含む水性媒体を、式１式％（４ （ただし、Ｒ及びｎは請求の範囲第１項で定義したとおり） で表わ・される１　０００　ｐｐｍ以下のポリオキシエチレンアルキルエーテル と混合し、必要ならば媒体のｐＨを６６５ないし９に調整し、所望ならば媒体の 残シの成分を加え及び／又はインシュリン濃度を調節して最終的な製剤を提供す ることを特徴とする請求の範囲ｔｓ１項記載のインシュリン製剤の製造方法。

８、式４においてＲがＣｔｔ−ｃ＋ｓアルキル基を表わす化合物を加えることを 特徴とする請求の範Ｓ第７項記載の方法。

９、式４においてｎが４ないし２３、特に６ないし１５である化合物を加えるこ とを特徴とする請求の範囲第７項又は第８項記載の方法。

１０、式４の化合物を少なくとも２２９ｍ加えることを特徴とする請求の範囲第 ７項ないし第９項のいずれかに記載の方法。

国際調査報告

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １．　水性媒体の声が６．５ないし９であシ、式％式％（４） （ただしＲは直鎖状又は分枝状の飽和又は不飽和Ｃ８−Ｃｌ３アルキル基、ａは ２ないし２５の整数を示す）で表わされるポリオキシエチレンアルキルエーテル を含むことを特徴とする、インシーリン分配装置における使用に適した安定な水 性治療性インシュリン製剤。 ２、式４においてＲがＣ１２”−０１３アルキル基である化合物を含むことを特 徴とする請求の範囲第１項記載のインシーリン製剤。 ３、式４においてｎが４ないし２３、特に６ないし１５の整数である化合物を含 むことを特徴とする請求の範囲第１項又は第２項記載のインシュリン製剤。 ４、水性媒体はヒト若しくは動物のインシュリン又はそれらの誘導体を含み、所 望によシ等張剤、保存剤、緩衝液等の通常の添加剤を含み、さらに任意的に、製 剤の効果を加速し又は長びかせる成分を含むことを特徴とする請求の範囲第１項 ないし第３項のいずれかに記載のインシュリン製剤。 ５、ヒト又は動物のインシーリンを１５００　ＩＵ／ｄ以下の濃度に含むことを 特徴とする請求の範囲第１項ないし第４項のいずれかに記載のインシュリン製剤 。 ６、式４の化合物を少なくとも２　ｐＰｆｎ含むことを特徴とする請求の範囲第 １項ないし第５項のいずれかに記載のインシーリン製剤。 ７、インシーリンを含む水性媒体を、式％式％（４） （ただし、Ｒ及びｎは請求の範囲第１項で定義したとおシ） で表わされるポリオキシエチレンアルキルエーテルと混合し、必要ならば媒体の −を６．５ないし９に調整し、所望ならば媒体の残シの成分を加え友び／又はイ ンシュリン濃度を調節して最終的な製剤を提供することを特徴とする請求の範囲 第１項記載のインシーリン製剤の製造方法。 ８、式４においてＲが０１□−０１３アルキル基を表わす化合物を加えることを 特徴とする請求の範囲第７項記載の方法。 ９、式４においてｎが４ないし２３、特に６ないし１５である化合物を加えるこ とを特徴とする請求の範囲第７項又は第８項記載の方法。 １０、式４の化合物を少なくとも２　ｐｐｍ加えることを特徴とする請求の範囲 第７項ないし第９項のいずれかに記載の方法。