JPH10236971A - Activated vitamin d enriched composition added with high amino acid component - Google Patents

Activated vitamin d enriched composition added with high amino acid component

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JPH10236971A
JPH10236971A JP9332548A JP33254897A JPH10236971A JP H10236971 A JPH10236971 A JP H10236971A JP 9332548 A JP9332548 A JP 9332548A JP 33254897 A JP33254897 A JP 33254897A JP H10236971 A JPH10236971 A JP H10236971A
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JP
Japan
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vitamin
added
mushrooms
homogenate
amino acid
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JP9332548A
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Japanese (ja)
Inventor
Hiromichi Hayashi
宏道 林
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SHIRATORI SEIYAKU KK
Shiratori Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
SHIRATORI SEIYAKU KK
Shiratori Pharmaceutical Co Ltd
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Publication date
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain the subject composition capable of allowing a person to effectively ingest vitamin D by adding the homogenate of liver and kidney of poultry and fishes to a pulverized material of mushrooms, and stirring the pulverized material with the added homogenate at a specific temperature. SOLUTION: The objective composition is obtained by adding the homogenate of liver and kidney of poultry and fishes to a pulverized material of mushrooms (preferably Auricularia auricula), and stirring the pulverized material with the added homogenate at 25-40 deg.C, preferably 37 deg.C. Preferably, the mushrooms are pulverized to 10-100μm by a pulverizer, irradiated by ultraviolet rays of 295nm by a high-pressure mercury-vapor lamp for 10sec to 1min while shaking and stirring the pulverized mushroom, thereafter heated at 90-110 deg.C for 30min to 1hr, air-cooled and mixed with the homogenates. A freshwater eel is preferable as the poultry and the fishes. A mixing weight ratio of the mushrooms to the homogenates is preferably (1:1) to (1:5). When the homogenates are added, 5-10wt.% powder of Cinnamomi Cortex based on the weight of the mushrooms is preferably added thereto. Further, the stirring time is preferably 30-60min.

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【0001】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は、ビタミンDを効率
良く摂取することができる高アミノ酸付加活性型ビタミ
ンD強化組成物に関する。
BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition capable of efficiently ingesting vitamin D.

【0002】[0002]

【従来の技術】高齢化社会を迎え、高齢女性のQOL向
上の為に骨粗鬆症の予防が社会問題になってきている。
その重要な予防手段の一つに、成長期に骨量を高め、将
来の骨粗鬆症による骨折を長期的に予防することがあ
る。骨量は遺伝的要因にもよるが、環境要因の重要な要
素として思春期の栄養摂取と運動習慣が挙げられる。
2. Description of the Related Art In an aging society, prevention of osteoporosis has become a social problem in order to improve QOL of elderly women.
One of the important preventive measures is to increase bone mass during the growth period and to prevent future osteoporotic fractures in the long term. Bone mass depends on genetic factors, but important factors in environmental factors include pubertal nutrition and exercise habits.

【0003】思春期の栄養摂取のうちカルシウムの重要
性については、Am. J. Clin. Nutr., 52, 878-880(199
0) や、N. Engl. J. Med., 327, 82-87(1992)等さまざ
まな報告がなされている。今日、カルシウム摂取に対す
る関心は高まっており、特に成長期の女性にとってカル
シウム摂取の重要性が認識され、種々の食品や飲料に無
機カルシウム塩が添加されるようになっている。しかし
ながら、カルシウムの腸管からの吸収にあたっては結合
蛋白質の存在が必須であるため、無機カルシウムを多量
に服用しても、充分吸収されることはない。
The importance of calcium in adolescent nutrition is described in Am. J. Clin. Nutr., 52, 878-880 (199).
0) and N. Engl. J. Med., 327, 82-87 (1992). Today, interest in calcium intake is increasing, and the importance of calcium intake is recognized, especially for growing women, and inorganic calcium salts are being added to various foods and beverages. However, since absorption of calcium from the intestinal tract requires the presence of a binding protein, even if a large amount of inorganic calcium is taken, it is not sufficiently absorbed.

【0004】平成5年度四訂日本食品標準成分表が30
年ぶりに改訂され、加えられたビタミンD成分表をもと
に466名の女子高校生を対象になされた研究(ビタミ
ン、第70巻第7号、第309〜315頁、1996
年)によれば、カルシウムの充足率は約1/5以下であ
ったのに対しビタミンDのそれは約2/3以下であっ
た。そして、骨塩量との相関を見たとき、カルシウム摂
取量よりもビタミンD摂取量の方が重要な要因であるこ
とが明らかとなった。従って、骨粗鬆症等の予防のた
め、骨量を高めるには、ビタミンDの摂取が極めて有効
である。
[0004] In 1993, the Fourth Edition Japanese Food Standard Composition Table was 30
A study conducted on 466 female high school students based on the added vitamin D ingredient table revised for the first time in a year (Vitamin, Vol. 70, No. 7, pp. 309-315, 1996)
), Calcium sufficiency was about 1/5 or less, whereas that of vitamin D was about 2/3 or less. And when the correlation with the amount of bone mineral was observed, it became clear that vitamin D intake was a more important factor than calcium intake. Therefore, in order to increase bone mass for prevention of osteoporosis and the like, vitamin D intake is extremely effective.

【0005】ビタミンDはクル病治癒因子として有効で
あり、食品又は動物の餌に紫外線を照射すると抗クル病
成分が出来ることが知られている。1924年Steenboc
kは油脂、バター、牛乳などの食物に紫外線を照射して
抗クル病活性を増加させる方法で特許を得ている。そし
て同じ頃、米国コロンビア大学のHessは紫外線照射によ
って活性化されるプロビタミンDがエルゴステロールで
あることを明らかにし、精製したビタミンをビタミンD
2と名づけ、同じ時期英国リバプール大学のAskewによっ
て単離されたカルシフェロールと命名された。その後、
7−デヒドロコレステロールを紫外線照射する時新しく
生成するビタミンがビタミンD3と命名された。
[0005] Vitamin D is effective as a healing factor for wilt disease, and it is known that irradiation of food or animal feed with ultraviolet rays produces an anti- wirl component. 1924 Steenboc
k is patented for irradiating foods such as fats and oils, butter and milk with ultraviolet light to increase anti-kulosis activity. Around the same time, Hess at Columbia University in the United States revealed that provitamin D, activated by ultraviolet radiation, was ergosterol, and converted the purified vitamin to vitamin D.
2 and was named calciferol isolated at the same time by Askew of the University of Liverpool, UK. afterwards,
The 7-dehydrocholesterol vitamins generate a new time to ultraviolet radiation was named vitamin D 3.

【0006】哺乳動物においては、ビタミンD2とビタ
ミンD3は全く同様の挙動をするため、一般にビタミン
Dと記載されており、本発明においてもビタミンDと総
称する。また、国際保健機構(WHO)ではビタミンD
3を国際標準物質とし結晶ビタミンD3の0.025μg
を1国際単位と呼んでいる。
[0006] In mammals, vitamin D 2 and vitamin D 3 behave exactly the same, and are generally described as vitamin D, and are collectively referred to as vitamin D in the present invention. In addition, the International Health Organization (WHO)
3 as an international standard substance and 0.025 μg of crystalline vitamin D 3
Is called one international unit.

【0007】一方、きのこ類は、ビタミンD、プロビタ
ミンDの含有量が高いことが知られている。しかしなが
ら、これらのうち、プロビタミンDは体内への吸収に際
しては直ちに他の誘導体に変換され、皮膚での紫外線照
射によるプロビタミンDからビタミンDへの変換量は極
めて僅かであり(小林ら,J. Nutr. Sci. Vitaminol.,
38, 15(1992))、単にきのこ類を摂取しても、ビタミン
Dを十分に吸収することはできなかった。
On the other hand, mushrooms are known to have high contents of vitamin D and provitamin D. However, among these, provitamin D is immediately converted to other derivatives upon absorption into the body, and the amount of conversion of provitamin D to vitamin D by ultraviolet irradiation on the skin is extremely small (Kobayashi et al., J. Am. Nutr. Sci. Vitaminol.,
38, 15 (1992)), it was not possible to sufficiently absorb vitamin D by simply ingesting mushrooms.

【0008】[0008]

【発明が解決しようとする課題】従って、本発明の目的
は、ビタミンDを効率良く摂取することができる活性型
ビタミンD強化組成物を提供することにある。
SUMMARY OF THE INVENTION Accordingly, an object of the present invention is to provide an active vitamin D enriched composition that can efficiently ingest vitamin D.

【0009】[0009]

【課題を解決するための手段】かかる実情において、本
発明者は鋭意研究を行った結果、きのこ類を粉砕し、こ
れに家禽類等の肝臓及び腎臓のホモジネートを加えて攪
拌することにより、ビタミンDを効率良く摂取できる高
アミノ酸付加活性型ビタミンD強化組成物が得られるこ
とを見出し、本発明を完成した。
Under such circumstances, the present inventors have conducted intensive studies and as a result, crushed mushrooms, added a homogenate of liver and kidney of poultry and the like, and stirred to obtain vitamins. The present inventors have found that a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition that can efficiently ingest D can be obtained, and completed the present invention.

【0010】すなわち、本発明は、きのこ類の粉砕物に
家禽類又は魚類の肝臓及び腎臓のホモジネートを加え、
25〜40℃で攪拌することにより得られる高アミノ酸
付加活性型ビタミンD強化組成物を提供するものであ
る。
That is, the present invention relates to a method of adding a poultry or fish liver and kidney homogenate to a crushed mushroom,
It is intended to provide a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition obtained by stirring at 25 to 40 ° C.

【0011】[0011]

【発明の実施の形態】本発明で用いられるきのこ類とし
ては、食用されるものであれば特に制限されないが、例
えばキクラゲ、しいたけ、まつたけ、まいたけ、ひらた
け、はつたけ、こうたけ、しめじ、えのきだけ、マッシ
ュルーム等が挙げられ、特にビタミンDの含有量が高い
ことから、キクラゲが好ましい。これらのきのこ類は、
そのまま又は乾燥したものを使用することができる。
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION The mushrooms used in the present invention are not particularly limited as long as they are edible. For example, mushrooms, mushrooms, matsutake, maitake, hiratake, hattake, kotake, shimeji, Mushrooms and the like can be mentioned only as enoki, and especially jellyfish is preferable because of its high content of vitamin D. These mushrooms,
As such or dried one can be used.

【0012】本発明においては、まずきのこ類の粉砕物
を得る。粉砕方法は特に制限されないが、例えばスタン
プミル、ハンマミル等の粉砕機を用いるのが好ましく、
これらを用いて5〜1000μm、特に10〜100μ
mの微粒子に粉砕するのが好ましい。
In the present invention, first, a crushed product of mushrooms is obtained. The crushing method is not particularly limited, for example, it is preferable to use a crusher such as a stamp mill, a hammer mill,
Using these, 5-1000 μm, especially 10-100 μm
It is preferable to grind the fine particles into m fine particles.

【0013】このようにして粉砕したきのこ類は、この
まま、肝臓等のホモジネートと混合することもできる
が、含有されているプロビタミンDをビタミンDに変換
するため、紫外線照射をするのが好ましい。紫外線照射
は、きのこ類の粉体を振とう攪拌しながら、5秒〜30
分、特に好ましくは10秒〜1分間、高圧水銀灯による
紫外線照射、特に295nmの紫外線照射を行うのが好ま
しく、その際には、振とうにより微粉末が舞い上がるの
を防ぐ目的で、水を噴霧して湿らせておいても良い。紫
外線照射後、80〜120℃、特に好ましくは90〜1
10℃で15分〜6時間、特に30分〜1時間加温する
のが好ましく、これにより、プロビタミンDとビタミン
Dの異性化反応を起こし、平衡状態に達することができ
る。なお、加温後には、放冷してから次の工程を行うの
が好ましい。
The mushrooms thus pulverized can be mixed with a homogenate such as a liver as it is, but it is preferable to irradiate ultraviolet rays to convert the contained provitamin D into vitamin D. The ultraviolet irradiation is performed for 5 seconds to 30 while shaking and stirring the mushroom powder.
It is preferable to perform ultraviolet irradiation with a high-pressure mercury lamp, particularly preferably 295 nm, for 10 minutes to 1 minute, in which case water is sprayed for the purpose of preventing fine powder from flying up by shaking. It may be moistened. After irradiation with ultraviolet light, 80 to 120 ° C, particularly preferably 90 to 1
It is preferable to heat at 10 ° C. for 15 minutes to 6 hours, particularly 30 minutes to 1 hour, whereby an isomerization reaction of provitamin D and vitamin D can be caused to reach an equilibrium state. After the heating, it is preferable that the next step is carried out after cooling.

【0014】次に、きのこ類の粉砕物を家禽類又は魚類
の肝臓及び腎臓のホモジネートと混合する。ここで家禽
類としては牛、豚、鶏等が挙げられ、魚類としては、淡
水産ウナギ、コイ、フナ、マス等が挙げられる。これら
のうち、特に淡水産ウナギが好ましい。ホモジネート
は、これらの肝臓及び腎臓を2〜10倍量、好ましくは
3倍量程度の適当な緩衝液、例えばリン酸緩衝液(pH
7.4)、クエン酸緩衝液(pH5.4)等に加え、ホモ
ジナイザー等を用いて懸濁させることにより製造するこ
とができる。きのこ類とホモジネートとの混合割合は、
重量比で1:0.5〜1:9、特に1:1〜1:5が好
ましい。
Next, the crushed mushrooms are mixed with poultry or fish liver and kidney homogenates. Here, poultry includes cows, pigs, chickens and the like, and fish include freshwater eels, carp, crucian carp, trout and the like. Of these, freshwater eels are particularly preferred. The homogenate can be used to prepare these livers and kidneys in 2 to 10 times, preferably about 3 times, a suitable buffer, for example, a phosphate buffer (pH
7.4), citrate buffer (pH 5.4) and the like, and then suspended using a homogenizer or the like. The mixing ratio of mushrooms and homogenate is
The weight ratio is preferably from 1: 0.5 to 1: 9, particularly preferably from 1: 1 to 1: 5.

【0015】また、この際に、更にゲンノショウコ末又
は桂皮末を添加すると、活性型ビタミンDをより収率良
く、かつ安定に得ることができ好ましい。このうち、桂
皮末が特に好ましい。ゲンノショウコ末又は桂皮末は、
きのこ類の重量に対して1〜30重量%、特に5〜10
重量%添加するのが好ましい。
[0015] At this time, it is preferable to further add a ginger powder or a cinnamon powder, because active vitamin D can be obtained in a higher yield and more stably. Of these, cinnamon powder is particularly preferred. Gennoshoko powder or cinnamon powder,
1 to 30% by weight, especially 5 to 10% by weight based on the weight of mushrooms
It is preferred to add by weight.

【0016】次に、この混合物を25〜40℃、好まし
くは30〜38℃、特に好ましくは37℃程度で10〜
120分、特に好ましくは30〜60分攪拌しながらイ
ンキュベートすることにより、高アミノ酸付加活性型ビ
タミンD強化組成物を得ることができる。
Next, the mixture is heated at 25 to 40 ° C., preferably 30 to 38 ° C., particularly preferably at about 37 ° C.
By incubating with stirring for 120 minutes, particularly preferably 30 to 60 minutes, a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition can be obtained.

【0017】このようにして得られる本発明の高アミノ
酸付加活性型ビタミンD強化組成物は、そのまま、ある
いは各種添加剤等とともに常法により錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、散剤等の形態として、食品用又は医薬用に
供することができる。ここで、各種添加剤としては、製
剤学上許容されている薬学担体であれば特に制限され
ず、例えば乳糖、白糖、デンプン、リン酸カルシウム、
結晶セルロース等の賦型剤;デンプン、カルボキシメチ
ルセルロース、無水乳糖等の結合剤;デンプン等の崩壊
剤;デンプン、タルク、ステアリン酸カルシウム等の滑
沢剤;その他矯味剤、矯臭剤、着色剤、香料等が挙げら
れる。
The thus obtained high amino acid-added active vitamin D enriched composition of the present invention can be used as it is or in the form of tablets, capsules, granules, powders, etc., in a conventional manner together with various additives. Or for medical use. Here, the various additives are not particularly limited as long as they are pharmaceutically acceptable pharmaceutical carriers. For example, lactose, sucrose, starch, calcium phosphate,
Excipients such as crystalline cellulose; binders such as starch, carboxymethylcellulose, anhydrous lactose; disintegrators such as starch; lubricants such as starch, talc, calcium stearate; other flavoring agents, flavoring agents, coloring agents, fragrances, etc. Is mentioned.

【0018】本発明の高アミノ酸付加活性型ビタミンD
強化組成物は、25−ヒドロキシビタミンD、24,2
5−ジヒドロキシビタミンD及び1α,25−ジヒドロ
キシビタミンDを含む活性型ビタミンD強化組成物であ
る。また、肝臓等のホモジネートと混合することによ
り、バリン、ロイシン、トレオニン、メチオニン、トリ
プトファン等の必須アミノ酸及びこれらからなるオリゴ
ペプチド等を多量に含有しており、消化管内での吸収が
増強され、骨量を高めることができるものである。特に
ゲンノショウコ末又は桂皮末を添加して製造された組成
物中の活性型ビタミンDは活性が高くかつ安定である。
Highly amino acid-added active vitamin D of the present invention
The fortifying composition comprises 25-hydroxyvitamin D, 24,2
It is an active vitamin D enriched composition containing 5-dihydroxyvitamin D and 1α, 25-dihydroxyvitamin D. In addition, by mixing with a homogenate such as liver, it contains a large amount of essential amino acids such as valine, leucine, threonine, methionine, and tryptophan, and oligopeptides thereof, and the like. The amount can be increased. In particular, active vitamin D in a composition prepared by adding genoshoko powder or cinnamon powder has high activity and is stable.

【0019】[0019]

【発明の効果】本発明の高アミノ酸付加活性型ビタミン
D強化組成物は、生体内での吸収がスムーズに起こる活
性型ビタミンDを含有するため、ビタミンDを効率良く
摂取することができ、骨塩量の増強に極めて有用であ
る。
Industrial Applicability The high-amino acid-added active vitamin D enriched composition of the present invention contains active vitamin D, which is absorbed smoothly in a living body. It is extremely useful for increasing the amount of salt.

【0020】[0020]

【実施例】次に、実施例を挙げて本発明を更に説明する
が、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
EXAMPLES Next, the present invention will be further described with reference to examples, but the present invention is not limited to these examples.

【0021】実施例1 市販の乾燥キクラゲを粉砕機(ミルサー、イワタニ I
FM−150)で粉砕し、ふるいの目106μmを通過
して粉体を集めて100g秤量する。30cm×50cmの
広さの金属製バットに広げ、水を噴霧して湿らせ、30
分間放置して膨潤させた後、振とう攪拌しながら高圧水
銀ランプによる紫外線を5〜30秒間まんべんなく均等
に照射する。紫外線照射後ビーカーに移して油浴上で加
熱し、100℃で30分間加熱する。放冷後、予め用意
しておいた牛の肝臓及び腎臓のホモジネート液300g
を加える。ホモジネート液は各々50gの新鮮な牛の肝
臓及び腎臓に氷冷下3倍量のホモジネート液(0.19
Mシュークロース、1.87mM酢酸マグネシウムを含有
するpH7.4リン酸緩衝液)を加え、ホモジナイザーを
用いて調製する。これに粉砕機で粉末化したゲンノショ
ウコ末10gを加え、37℃で90分間攪拌しながらイ
ンキュベートする。ロータリーエバポレーターにて濃縮
し、窒素を吹き付けながら蒸発乾固させ、高アミノ酸付
加活性型ビタミンD強化組成物を得た。
Example 1 A commercially available dry jellyfish was crushed with a pulverizer (Mircer, Iwatani I).
FM-150), and the mixture was passed through a sieve having a sieve of 106 µm to collect the powder, and weighed 100 g. Spread it on a metal vat 30cm x 50cm wide, spray it with water and moisten it.
After leaving to swell for minutes, the mixture is evenly and uniformly irradiated with ultraviolet light from a high-pressure mercury lamp for 5 to 30 seconds while shaking and stirring. After irradiation with ultraviolet rays, the mixture is transferred to a beaker, heated on an oil bath, and heated at 100 ° C. for 30 minutes. After cooling, 300 g of a beef liver and kidney homogenate prepared in advance
Add. The homogenate solution was added to 50 g of fresh bovine liver and kidney under ice cooling in a volume 3 times the volume of the homogenate solution (0.19).
M sucrose, pH 7.4 phosphate buffer containing 1.87 mM magnesium acetate) is added, and the mixture is prepared using a homogenizer. To this is added 10 g of ginger powder powdered with a pulverizer, and the mixture is incubated at 37 ° C. with stirring for 90 minutes. The mixture was concentrated by a rotary evaporator and evaporated to dryness while blowing nitrogen to obtain a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition.

【0022】実施例2 市販の乾燥キクラゲを粉砕機(ミルサー、イワタニ I
FM−150)で粉砕し、ふるいの目106μmを通過
した粉体を集めて100g秤量する。これに、予め用意
しておいた牛の腎臓及び肝臓のホモジネート液200g
を加える。ホモジネート液は各々50gの新鮮な牛の肝
臓及び腎臓に、氷冷下3倍量のホモジネート液(0.1
9Mシュークロース、1.87mM塩化マグネシウムを含
有するpH7.4リン酸緩衝液)を加え、ホモジナイザー
を用いて調製する。これに粉砕機で粉末化したゲンノシ
ョウコ末10gを加え、37℃で90分間攪拌しながら
インキュベートする。ロータリーエバポレーターにて濃
縮し、窒素を吹き付けながら蒸発乾固させ、高アミノ酸
付加活性型ビタミンD強化組成物を得た。
Example 2 A commercially available dry jellyfish was crushed with a pulverizer (Mircer, Iwatani I).
FM-150), and the powder having passed through a sieve mesh of 106 μm is collected and weighed to 100 g. 200 g of a homogenate solution of beef kidney and liver prepared in advance
Add. The homogenate solution was added to 50 g of fresh bovine liver and kidney, respectively, under ice-cooling to a three-fold amount of the homogenate solution (0.1 g).
9M sucrose, pH 7.4 phosphate buffer containing 1.87 mM magnesium chloride) is added, and the mixture is prepared using a homogenizer. To this is added 10 g of ginger powder powdered with a pulverizer, and the mixture is incubated at 37 ° C. with stirring for 90 minutes. The mixture was concentrated by a rotary evaporator and evaporated to dryness while blowing nitrogen to obtain a highly amino acid-added active vitamin D enriched composition.

【0023】このようにして得られた反応物の100分
の1相当量を100mlのコルベンに移し、塩化メチレ
ン:メタノール(1:1)混合液100mlを2回に分け
て加えて抽出する。ロータリーエバポレーターを用いて
40℃以下の温度で減圧下濃縮し、最終的に窒素を吹き
付けて固化する。予め一晩クロロホルム/ノルマルヘキ
サン65:35混合液にて膨潤させておいたセファデッ
クスL20(ファルマシア社製)をリザーバー付きの内
径12mm、長さ17cmのガラスカラムに高さ10cmの位
置まで詰め、少量(1〜2ml)のクロロホルム/ノルマ
ルヘキサン65:35の混合液に懸濁させた固化物を加
えてクロマトグラフィーにて分画する。ほぼ10mlのク
ロロホルム/ノルマルヘキサン65:35展開液を流し
終わるころ、25−ヒドロキシビタミンDが流出した。
これより150mlの展開液で流出させると24,25−
ジヒドロキシビタミンD及び1α,25−ジヒドロビタ
ミンDが流出した。なお、正確に各ビタミンDの分画を
得たいときは、トリチウムラベル化した各ビタミンD誘
導体を流し、その放射能から流出位置を確認しておくこ
とが好ましい。
One hundredth of the reaction product thus obtained is transferred to a 100 ml Kolben, and 100 ml of a methylene chloride: methanol (1: 1) mixed solution is added in two portions and extracted. The mixture is concentrated under reduced pressure at a temperature of 40 ° C. or lower using a rotary evaporator, and finally solidified by blowing nitrogen. Sephadex L20 (manufactured by Pharmacia), which had been swollen overnight with a chloroform / normal hexane 65:35 mixed solution, was packed in a glass column with an inner diameter of 12 mm and a length of 17 cm with a reservoir to a height of 10 cm and a small amount. (1-2 ml) of the solidified product suspended in a mixed solution of chloroform / normal hexane 65:35 was added thereto, and fractionated by chromatography. At the end of the flow of approximately 10 ml of a developing solution of chloroform / normal hexane 65:35, 25-hydroxyvitamin D was discharged.
It is 24,25-
Dihydroxyvitamin D and 1α, 25-dihydrovitamin D eluted. When it is desired to accurately obtain a fraction of each vitamin D, it is preferable to flow each tritium-labeled vitamin D derivative and confirm the outflow position from its radioactivity.

【0024】このようにして得られた流出液をロータリ
ーエバポレーターを用いて濃縮し、窒素を吹き付け蒸発
乾固させた後、1mlのエチルアルコールに再溶解させ
る。25−ヒドロキシビタミンD及び24,25−ジヒ
ドロキシビタミンDの含量はラットの血清を用いたコン
ペティティブ・バインディング・アッセイを用いて、又
1α,25−ジヒドロキシビタミンDの含量は牛の胸腺
から取り出したリセプターを用いてのリセプター・アッ
セイをそれぞれのトリチウムラベル化合物を用いて確認
した。なお、25−ヒドロキシビタミンD及び24,2
5−ジヒドロキシビタミンDのアッセイには、エチルア
ルコール液0.1mlをデュプリケートで、1α,25−
ジヒドロキシビタミンDのアッセイには、0.3mlをデ
ュプリケートで行った。このようにして得られた放射活
性は、競合反応である為、活性型ビタミンDが入ってい
ない0ブランクと比較すると常にカウント数が低くなる
ことによって確認した。
The effluent thus obtained is concentrated using a rotary evaporator, and is evaporated to dryness by blowing nitrogen, and then redissolved in 1 ml of ethyl alcohol. The content of 25-hydroxyvitamin D and 24,25-dihydroxyvitamin D was determined using a competitive binding assay using rat serum, and the content of 1α, 25-dihydroxyvitamin D was determined using a receptor extracted from bovine thymus. The receptor assay used was confirmed using the respective tritium labeled compound. In addition, 25-hydroxyvitamin D and 24,2
For the assay of 5-dihydroxyvitamin D, 0.1 ml of ethyl alcohol solution was used in duplicate, and 1α, 25-
For the assay of dihydroxyvitamin D, 0.3 ml was performed in duplicate. Since the radioactivity thus obtained was a competitive reaction, it was confirmed that the count number was always lower than that of the blank containing no active vitamin D.

【0025】実施例3 ゲンノショウコ末を桂皮末に代える以外は実施例1と同
様にして高アミノ酸付加活性型ビタミンD強化組成物を
得た。
Example 3 A highly amino acid-added active vitamin D enriched composition was obtained in the same manner as in Example 1 except that genoshoko powder was replaced by cinnamon powder.

【0026】参考例1 ビタミンD欠乏ニワトリの作り方:生まれて間もない白
色レグホンを以下の人工合成餌を与えてビタミンD欠乏
ニワトリに育てた。 ビタミンフリーカゼイン、240g;塩酸シスチン、3
g;スークロース、560g;ゲラチン、100g;塩
化コリン、2.3g;綿実油、50g;燐酸水素カルシ
ウム、5.6g;燐酸二水素カリウム、15.5g;炭
酸カルシウム、22.9g;塩化ナトリウム、8g;微
量混合塩、6.6g;ビタミン混合物、2.1gをよく
混合する。 微量の混合塩の組成:硫酸マグネシウム(7水和塩)、
745g;硫酸マンガン、365g;沃素酸カリ、7.
7g;硫酸銅(5水和塩)、2.2g;酸化亜鉛、5.
1g;モリブデン酸ナトリウム(2水和塩)、2.9
g;亜セレン酸ナトリウム、0.18g;クエン酸鉄
(6水和塩)0.2gをよく混合する。 ビタミン混合物の組成:塩酸チアミン、2.85g;リ
ビフラビン、4.28g;パントテンサンカルシウム
9.5g;ニコチンアミド、23.7g;ピリドキシ
ン、3.8g;ビオチン、0.14g;イノチトール、
475g;葉酸、0.95g;ビタミンB12、0.01
g;スークロース477.78gをよく混合する。更に
油溶性ビタミンをヒヨコ/1週間当り、β−カロチン、
100μg;α−トコフェロール、900μg;2−メ
チル−1,4−ナフトキノン、120μgを綿実油に希
釈して上記餌に加える。油溶性ビタミンは酸化されやす
いので1週間ごとに加え、ビタミンを添加した余分な餌
は冷蔵庫の中で保管する。上記の餌と水を自由に取らせ
て2〜3週間飼育すると典型的なビタミンD欠乏症を呈
したニワトリが得られる。このようにして出来たビタミ
ンD欠乏ニワトリを4週間後より実験に供する。
Reference Example 1 How to make a vitamin D deficient chicken: A newborn white leghorn was raised on a vitamin D deficient chicken by feeding the following artificial synthetic diet. Vitamin-free casein, 240 g; cystine hydrochloride, 3
sucrose, 560 g; gelatin, 100 g; choline chloride, 2.3 g; cottonseed oil, 50 g; calcium hydrogen phosphate, 5.6 g; potassium dihydrogen phosphate, 15.5 g; calcium carbonate, 22.9 g; sodium chloride, 8 g; Mix 6.6 g of trace mixed salt; 2.1 g of vitamin mixture well. Composition of trace amounts of mixed salts: magnesium sulfate (heptahydrate),
745 g; manganese sulfate, 365 g; potassium iodate,
7 g; copper sulfate (pentahydrate), 2.2 g; zinc oxide;
1 g; sodium molybdate (dihydrate salt), 2.9
g; sodium selenite, 0.18 g; 0.2 g of iron citrate (hexahydrate). Composition of vitamin mixture: thiamine hydrochloride, 2.85 g; ribiflavin, 4.28 g; pantothenate calcium 9.5 g; nicotinamide, 23.7 g; pyridoxine, 3.8 g; biotin, 0.14 g;
475 g; folic acid, 0.95 g; vitamin B 12 , 0.01
g; 477.78 g of sucrose is mixed well. In addition, chicks / weekly oil-soluble vitamins, β-carotene,
100 μg; α-tocopherol, 900 μg; 2-methyl-1,4-naphthoquinone, 120 μg, diluted in cottonseed oil and added to the diet. Oil-soluble vitamins are susceptible to oxidation and should be added weekly, and extra food supplemented with vitamins should be stored in the refrigerator. The above diet and water are available ad libitum and bred for 2-3 weeks to give chickens with typical vitamin D deficiency. The vitamin D-deficient chickens thus obtained are subjected to experiments 4 weeks later.

【0027】参考例2 ビタミンD欠乏ラットの作り方:離乳後直ちにビタミン
D欠乏食を与え、3〜4週間飼育することによってビタ
ミンD欠乏ラットを作った。ビタミンD欠乏食は米国ウ
イスコンシン州マヂィソンのHoltzman社より購入した。
この餌には0.47%のカルシウムと0.3%のリンが
含有されている。
Reference Example 2 Preparation of vitamin D deficient rat: A vitamin D deficient rat was prepared by feeding a vitamin D deficient diet immediately after weaning and breeding for 3 to 4 weeks. Vitamin D deficient diet was purchased from Holtzman, Inc. of Madison, Wisconsin, USA.
This diet contains 0.47% calcium and 0.3% phosphorus.

【0028】試験例1 4週令のビタミンD欠乏ニワトリに、実施例1又は3で
得られた高アミノ酸付加活性型ビタミンD強化組成物を
1重量%添加した餌を自由に食べさせた。その結果、4
〜5日後から特に1週間後には足のふらつきがなくな
り、毛並みも改善され、ビタミンD欠乏症状から脱し始
めた。
Test Example 1 Four-week-old vitamin D-deficient chickens were allowed to freely eat a diet containing 1% by weight of the highly amino acid-added active vitamin D enriched composition obtained in Example 1 or 3. As a result, 4
After about 5 days, especially after one week, the foot was no longer wandering, the coat was improved, and she began to escape from the vitamin D deficiency symptom.

【0029】試験例2 5週令のビタミンD欠乏ラットを5匹ずつ2群に分け、
A群には実施例1で得られた高アミノ酸付加活性型ビタ
ミンD強化組成物を1重量%添加した餌を、B群にはビ
タミンD欠乏食を与え続けた。2週間後の血中カルシウ
ム濃度をOCPC法で測定したところ、表1に示すよう
に、A群のラットは一例を除いて正常値(4.3〜5.
2)に戻っていたが、B群は低カルシウム値症のままで
あった。また、実施例3で得られた高アミノ酸付加活性
型ビタミンD強化組成物を1重量%添加した餌を与えた
場合も、血中カルシウム濃度は正常値に戻った。
Test Example 2 Five-week-old vitamin D-deficient rats were divided into two groups of five rats.
Group A was continuously fed a diet containing 1% by weight of the highly amino acid-added vitamin D enriched composition obtained in Example 1, and group B was continuously fed a vitamin D-deficient diet. Two weeks later, the blood calcium concentration was measured by the OCPC method. As shown in Table 1, the rats in Group A showed normal values (4.3 to 5.
Returning to 2), group B remained hypocalcemic. Also, when a diet containing 1% by weight of the high amino acid-added active vitamin D enriched composition obtained in Example 3 was given, the blood calcium concentration returned to a normal value.

【0030】[0030]

【表1】 [Table 1]

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 FI A61K 31/59 A61K 31/59 35/23 35/23 35/407 35/407 // A61K 31/195 31/195 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (51) Int.Cl. 6 Identification code FI A61K 31/59 A61K 31/59 35/23 35/23 35/407 35/407 // A61K 31/195 31/195

Claims (6)

【特許請求の範囲】[Claims] 【請求項1】 きのこ類の粉砕物に家禽類又は魚類の肝
臓及び腎臓のホモジネートを加え、25〜40℃で攪拌
することにより得られる高アミノ酸付加活性型ビタミン
D強化組成物。
1. A highly amino acid-added active vitamin D enriched composition obtained by adding a homogenate of poultry or fish liver and kidney to a crushed product of mushrooms and stirring at 25 to 40 ° C.
【請求項2】 きのこ類の粉砕物に紫外線照射した後、
加温、放冷し、次いでこれに家禽類又は魚類の肝臓及び
腎臓のホモジネートを加え、25〜40℃で攪拌するこ
とにより得られる高アミノ酸付加活性型ビタミンD強化
組成物。
2. After irradiating the crushed mushrooms with ultraviolet light,
A highly amino acid-added active vitamin D enriched composition obtained by heating, allowing to cool, then adding a homogenate of poultry or fish liver and kidney thereto and stirring at 25 to 40 ° C.
【請求項3】 家禽類又は魚類の肝臓及び腎臓のホモジ
ネートとともに、ゲンノショウコ末又は桂皮末を加える
請求項1又は2記載の高アミノ酸付加活性型ビタミンD
強化組成物。
3. The highly amino acid-added active vitamin D according to claim 1 or 2, wherein a ginger powder or a cinnamon powder is added together with a liver and kidney homogenate of poultry or fish.
Reinforcement composition.
【請求項4】 きのこ類がキクラゲである請求項1〜3
のいずれか1項記載の高アミノ酸付加活性型ビタミンD
強化組成物。
4. The mushroom is a jellyfish.
Highly amino acid-added active vitamin D according to any one of the above.
Reinforcement composition.
【請求項5】 家禽類又は魚類が、淡水産ウナギである
請求項1〜4のいずれか1項記載の高アミノ酸付加活性
型ビタミンD強化組成物。
5. The composition according to claim 1, wherein the poultry or fish is a freshwater eel.
【請求項6】 食品用又は医薬用である請求項1〜5の
いずれか1項記載の高アミノ酸付加活性型ビタミンD強
化組成物。
6. The high amino acid addition active vitamin D enriched composition according to any one of claims 1 to 5, which is for food or medicine.
JP9332548A 1996-12-24 1997-12-03 Activated vitamin d enriched composition added with high amino acid component Pending JPH10236971A (en)

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