JPH05331187A - Tripeptide, its production and endothelin antagonist - Google Patents
Tripeptide, its production and endothelin antagonistInfo
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- JPH05331187A JPH05331187A JP4162203A JP16220392A JPH05331187A JP H05331187 A JPH05331187 A JP H05331187A JP 4162203 A JP4162203 A JP 4162203A JP 16220392 A JP16220392 A JP 16220392A JP H05331187 A JPH05331187 A JP H05331187A
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、エンドセリン受容体の
拮抗剤として有用な新規なトリペプチド、このトリペプ
チドの製造方法、及びこのトリペプチドを有効成分とし
て含有するエンドセリン拮抗剤に関する。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a novel tripeptide useful as an antagonist for an endothelin receptor, a method for producing this tripeptide, and an endothelin antagonist containing this tripeptide as an active ingredient.
【０００２】[0002]
【従来の技術】１９８０年の内皮依存性血管拡張反応の
発見以来、血管緊張の調節機構に於ける血管内皮の役割
が重要視されており、１９８２年頃からは種々の刺激に
対する内皮依存性収縮反応或は収縮増強も報告されてい
る。最近、ブタ大動脈内皮細胞の培養上清中に遊離され
る強力なペプチド性血管収縮因子の単離、精製並びに構
造決定がなされ、これは２１個のアミノ酸からなるペプ
チドでありエンドセリン（ＥＴ）と呼ばれている［M.Ya
nagisawa et al.,Nature,332,411-415(1988)] 。その
後、ヒトのエンドセリンも同じアミノ酸配列であること
がわかっている［Y.Itoh et al.,FEBS lett.,231,440-4
44(1988)］。Since the discovery of the endothelium-dependent vasodilation response in 1980, the role of the vascular endothelium in the regulation mechanism of vascular tone has been emphasized, and from about 1982, endothelium-dependent contraction response to various stimuli. Alternatively, enhanced contraction has been reported. Recently, a strong peptide vasoconstrictor released in the culture supernatant of porcine aortic endothelial cells has been isolated, purified, and structurally determined. It is a 21-amino acid peptide called endothelin (ET). [M.Ya
nagisawa et al., Nature, 332, 411-415 (1988)]. Later, it was found that human endothelin has the same amino acid sequence [Y. Itoh et al., FEBS lett., 231,440-4].
44 (1988)].
【０００３】エンドセリンとしては、ＥＴ−１、ＥＴ−
２及びＥＴ−３の三種が見出されており、その受容体も
各ＥＴに対する結合親和性の違いから、ＥＴ−１に選択
的なＥＴA 受容体、ＥＴ−１及びＥＴ−３に非選択的な
ＥＴB 受容体の二種が見出されている。血管平滑筋細胞
上に偏在するＥＴA 受容体にエンドセリンが作用すると
血管を強力に収縮させる。As endothelin, ET-1, ET-
2 and ET-3 have been found, and their receptors are also ET-1 selective ET A receptors and ET-1 and ET-3 non-selective due to the difference in binding affinity for each ET. two kinds of specific ET B receptors have been found. When endothelin acts on the ET A receptor ubiquitously distributed on vascular smooth muscle cells, it strongly contracts blood vessels.
【０００４】ＥＴ−１により引き起こされる血管の収縮
反応を抑制する物質として、幾つかの化合物が知られて
いる。例えば、本特許出願人はＮ−ペンタノイルトリプ
トファンについて特許出願しており（特開平３−２５１
５６２号公報参照）、また、New Current ３（９）１９
９２年４月１０日号４〜５頁には、（Ｒ）２−［（Ｒ）
−２−［（Ｓ）−２−［［１−（ヘキサヒドロ−１Ｈ−
アゼピニル）］カルボニル］アミノ−４−メチルペンタ
ノイル］アミノ−３−［３−（１−メチル−１Ｈ−イン
ドリル）］プロピオニル］アミノ−３−（２−ピリジ
ル）プロピオン酸がＥＴA 受容体の拮抗剤であることが
記載されている。Several compounds are known as substances that suppress the contractile reaction of blood vessels caused by ET-1. For example, the present applicant has applied for a patent for N-pentanoyltryptophan (Japanese Patent Laid-Open No. 3-251).
562), and New Current 3 (9) 19.
April 10, 1992, pp. 4-5, (R) 2-[(R)
-2-[(S) -2-[[1- (hexahydro-1H-
Azepinyl)] carbonyl] amino-4-methylpentanoyl] amino-3- [3- (1-methyl-1H-indolyl)] propionyl] amino-3- (2-pyridyl) propionic acid antagonizes ET A receptors It is described as an agent.
【０００５】[0005]
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ＥＴ
−１により引き起こされる血管の収縮反応を抑制し、高
血圧症、気管支喘息、腎不全、くも膜下出血後の脳卒中
発作等の治療剤として有用である新規なトリペプチド、
及びその製造方法、並びにそれを含有するエンドセリン
拮抗剤を提供することにある。The object of the present invention is to provide ET
A novel tripeptide that suppresses the vasoconstriction reaction caused by -1, and is useful as a therapeutic agent for hypertension, bronchial asthma, renal failure, stroke attack after subarachnoid hemorrhage, etc.,
And a method for producing the same, and an endothelin antagonist containing the same.
【０００６】[0006]
【課題を解決するための手段】本発明は、一般式
（Ｉ）：The present invention has the general formula (I):
【０００７】[0007]
【化９】 [Chemical 9]
【０００８】［式中、Ａは、下記式（ａ）：[Where A is the following formula (a):
【０００９】[0009]
【化１０】 [Chemical 10]
【００１０】（式中、ｍは４〜７の整数であり、メチレ
ン基の１〜３個が、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ1 −（但
し、Ｒ1 は水素原子、−ＣＨＯ基又は炭素数１〜６のア
ルキル基を表す）又は−ＣＯ−で示される基で置換され
ていてもよく、又はエチレン基がベンゼン環と縮合して
いてもよい）で示される基を表し、Ｂは、−ＣＯ−、−
ＣＳ−又は−ＳＯ2 −で示される基を表し、Ｄは、−Ｎ
Ｒ2 −（但し、Ｒ2 は水素原子又は炭素数１〜６のアル
キル基を表す）で示される基を表し、又は、Ａ−Ｂ−Ｄ
−でフタルイミド基を表し、Ｅは、−ＣＨＲ3 −（但
し、Ｒ3 は、アリール基又は芳香族複素環基で置換され
ていてもよい炭素数１〜５のアルキル基、又は硫黄原子
含有複素環基を表す）で示される基を表し、Ｆは、下記
式：(In the formula, m is an integer of 4 to 7, and 1 to 3 of the methylene groups are --O--, --S--, --NR 1- (wherein R 1 is a hydrogen atom or a --CHO group. Or an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms) or a group represented by -CO-, or an ethylene group may be condensed with a benzene ring). Is -CO-,-
CS- or -SO 2 - represents a group represented by, D is, -N
R 2 - (where, R 2 represents an alkyl group having 1 to 6 carbon hydrogen atom or a C) represents a group represented by or, A-B-D
Represents a phthalimido group, E represents —CHR 3 — (wherein R 3 is an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms which may be substituted with an aryl group or an aromatic heterocyclic group, or a sulfur atom-containing heterocyclic group). Represents a ring group), and F is a group represented by the following formula:
【００１１】[0011]
【化１１】 [Chemical 11]
【００１２】（式中、Ｒ4 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭
素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基
を有するフェニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ5
（式中、Ｒ5 は炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数
１〜４のアルキレン基を有するフェニルアルキル基を表
す）で表される基である）で示される基を表し、Ｇは、
下記式：(In the formula, R 4 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 5
(In the formula, R 5 represents a phenylalkyl group having an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms), and G represents ,
The following formula:
【００１３】[0013]
【化１２】 [Chemical formula 12]
【００１４】（式中、Ｒ6 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭
素数１〜６のアルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基
を有するフェニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ8
（式中、Ｒ8 は炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数
１〜４のアルキレン基を有するフェニルアルキル基を表
す）で表される基であり、Ｒ7 は水素原子、炭素数１〜
６のアルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基を有し且
つ１〜３個のフェニル基を有するアラルキル基、炭素数
２〜６のアルコキシアルキル基又は式−（ＣＨ2 )qＯ−
Ｒ9 （式中、ｑは１〜３の整数であり、Ｒ9 は炭素数１
〜４のアルキレン基を有するフェニルアルキル基であ
る）で示される基を表し、Ｑは水素原子、アルカリ金属
原子、炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４の
アルキレン基を有するフェニルアルキル基を表す］で表
されるトリペプチドである。(In the formula, R 6 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 8
(In the formula, R 8 represents an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms), and R 7 is a hydrogen atom or 1 carbon atom. ~
6 alkyl groups, aralkyl groups and having a 1-3 phenyl groups having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, 2 to 6 carbon atoms alkoxyalkyl group or the formula - (CH 2) q O-
R 9 (In the formula, q is an integer of 1 to 3, and R 9 has 1 carbon atom.
Is a phenylalkyl group having an alkylene group of 4 to 4), and Q is phenyl having a hydrogen atom, an alkali metal atom, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, or an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms. Represents an alkyl group].
【００１５】他の本発明は、上記一般式（Ｉ）で表され
るトリペプチドを製造する方法であって、それぞれ保護
基を有していてもよいフラグメントであるＡ−Ｂ−Ｚ
（但し、Ｚはヒドロキシル基又はハロゲン原子であ
る）、Ｈ−Ｄ−Ｅ−ＣＯＯＨ、Ｈ−Ｆ−ＯＨ及びＨ−Ｇ
−ＯＱ（これらのフラグメントはその反応性誘導体であ
ってもよい）を、一般式（Ｉ）で表されるトリペプチド
になるように任意の順序で縮合させるか、或は上記の四
種のフラグメントの二種又は三種を任意の組み合わせで
予め縮合して得た化合物と、残りのフラグメントの二種
（予め縮合しておいてもよい）又は一種とを縮合させ、
所望により保護基を脱離させることからなる製造方法で
ある。Another aspect of the present invention is a method for producing the tripeptide represented by the above general formula (I), wherein each of the fragments AB-Z is a fragment optionally having a protecting group.
(However, Z is a hydroxyl group or a halogen atom), HDE-COOH, HF-OH and HG.
-OQ (these fragments may be reactive derivatives thereof) are condensed in any order to give the tripeptides of general formula (I), or the four fragments And a compound obtained by pre-condensing two or three kinds of the above in any combination with two kinds (may be pre-condensed) or one of the remaining fragments,
It is a production method which comprises removing a protecting group if desired.
【００１６】更に他の本発明は、上記一般式（Ｉ）で表
されるトリペプチドを有効成分として含有することを特
徴とするエンドセリン拮抗剤である。Still another aspect of the present invention is an endothelin antagonist characterized by containing the tripeptide represented by the above general formula (I) as an active ingredient.
【００１７】本発明の好適な態様は下記の通りである。 （１）一般式（Ｉ）に於いて、Ａが下記式：The preferred embodiments of the present invention are as follows. (1) In the general formula (I), A is the following formula:
【００１８】[0018]
【化１３】 [Chemical 13]
【００１９】（式中、Ｒ1 は水素原子、−ＣＨＯ基、又
は炭素数１〜４のアルキル基である）で示される基を表
し、Ｂが−ＣＯ−で示される基を表し、Ｄが−ＮＨ−で
示される基を表し、Ｅが−ＣＨＲ3 −（但し、Ｒ3 は、
炭素数１〜５のアルキル基を表す）で示される基を表
し、Ｆ、Ｇ及びＱが一般式（Ｉ）に於いて定義した通り
であることを特徴とする、上記の一般式（Ｉ）で表され
るトリペプチド。(Wherein R 1 is a hydrogen atom, a --CHO group, or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms), B is a group represented by --CO--, and D is a group represented by --CO--. Represents a group represented by —NH—, E is —CHR 3 — (wherein R 3 is
A C 1 to C 5 alkyl group), wherein F, G and Q are as defined in formula (I). The tripeptide represented by.
【００２０】本発明の前記一般式（Ｉ）で表される化合
物は、一般式（Ｉ）から明らかなようにＤ−Ｅ−ＣＯで
示されるα−アミノ酸単位、Ｆで示されるα−アミノ酸
単位及びＧで示されるα−アミノ酸単位からなるトリペ
プチドであり、一般式（Ｉ）に於けるＧで示されるα−
アミノ酸単位の構造が、前記New Current ３（９）１９
９２年４月１０日号４〜５頁に記載されている化合物と
は全く異なるトリペプチドである。The compound of the present invention represented by the general formula (I) is an α-amino acid unit represented by DE-CO and an α-amino acid unit represented by F, as is apparent from the general formula (I). And a tripeptide consisting of an α-amino acid unit represented by G, which is represented by G in the general formula (I).
The structure of the amino acid unit is as described in New Current 3 (9) 19.
It is a tripeptide completely different from the compounds described on April 10, 1992, pages 4 to 5.
【００２１】一般式（Ｉ）に於いて、Ａは、下記式In the general formula (I), A is the following formula
【００２２】[0022]
【化１４】 [Chemical 14]
【００２３】（式中、Ｒ1 は水素原子、−ＣＨＯ基、又
は炭素数１〜４のアルキル基（例えば、メチル、エチ
ル、プロピル、ブチル等）である）で示される基である
ことが好ましい。(In the formula, R 1 is preferably a hydrogen atom, a --CHO group, or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms (eg, methyl, ethyl, propyl, butyl, etc.)). ..
【００２４】一般式（Ｉ）に於いて、Ｂは−ＣＯ−で示
される基であることが好ましく、Ｄは−ＮＨ−で示され
る基であることが好ましい。In the general formula (I), B is preferably a group represented by --CO-- and D is preferably a group represented by --NH--.
【００２５】一般式（Ｉ）に於いて、Ｅは下記式In the general formula (I), E is the following formula
【００２６】[0026]
【化１５】 [Chemical 15]
【００２７】で示される基であることが好ましく、特
に、下記式It is preferably a group represented by
【００２８】[0028]
【化１６】 [Chemical 16]
【００２９】で示される基であることが好ましい。A group represented by is preferable.
【００３０】一般式（Ｉ）に於いて、Ｆで示される基の
うち、Ｒ4 が水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜４のア
ルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル
等）、ベンジル基等の基である前記（ｆ−１）又は（ｆ
−２）で示される基が好ましい。In the general formula (I), R 4 is a hydrogen atom, a --CHO group, or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms (eg, methyl, ethyl, propyl, butyl, etc.). Or (f-1) which is a group such as a benzyl group or (f-1)
The group represented by -2) is preferable.
【００３１】一般式（Ｉ）に於いて、Ｇで示される基の
うち、Ｒ6 が水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜４のア
ルキル基（例えば、メチル、エチル、プロピル、ブチル
等）、ベンジル等の基である前記（ｇ−１）又は（ｇ−
２）で示される基、及びＲ7が水素原子、ベンジルオキ
シメチル基、ベンズヒドリル基、トリチル基等の基であ
る（ｇ−３）で示される基が好ましい。In the general formula (I), among the groups represented by G, R 6 is a hydrogen atom, a —CHO group, or an alkyl group having 1 to 4 carbon atoms (eg, methyl, ethyl, propyl, butyl, etc.). Or (g-) which is a group such as benzyl, benzyl and the like.
The group represented by 2) and the group represented by (g-3) in which R 7 is a hydrogen atom, a benzyloxymethyl group, a benzhydryl group, a trityl group or the like are preferable.
【００３２】本発明のトリペプチドは、一般式（Ｉ）に
於いてＤ−Ｅ−ＣＯで示されるα−アミノ酸単位がＬ型
であり、Ｆで示されるアミノ酸単位及びＧで示されるア
ミノ酸単位が共にＤ型であるトリペプチドであることが
好ましい。In the tripeptide of the present invention, the α-amino acid unit represented by DECO in the general formula (I) is L-type, the amino acid unit represented by F and the amino acid unit represented by G are Both are preferably D-type tripeptides.
【００３３】本明細書に於いて、アミノ酸、ペプチド、
保護基、溶媒等は当該技術分野で慣用されている略号、
或いは、ＩＵＰＡＣ−ＩＵＢの命名委員会で採用された
略号を使用している。例えば下記の略号が使用される。
また、アミノ酸の表記に於いて特記しない場合アミノ酸
はＬ型を意味するものとする。In the present specification, amino acids, peptides,
Protecting groups, solvents and the like are abbreviations commonly used in the art,
Alternatively, the abbreviations adopted by the IUPAC-IUB naming committee are used. For example, the following abbreviations are used.
In the notation of amino acids, amino acids mean the L-form unless otherwise specified.
【００３４】EDTA：エチレンジアミンテトラ酢酸 EGTA：エチレングリコールビス（２−アミノエチルエー
テル）テトラ酢酸 PMSF：フェニルメチルスルホニルフルオリド Leu ：Ｌ−ロイシン Trp ：Ｌ−トリプトファン D-Trp ：Ｄ−トリプトファン His ：Ｌ−ヒスチジン D-His ：Ｄ−ヒスチジン Bzl ：ベンジル DMAP：４−ジメチルアミノピリジン WSC・HCl ：１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロ
ピル）カルボジイミド塩酸塩 HOBt：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール TsOH：パラトルエンスルホン酸 Pd-C：パラジウム−炭素 THF ：テトラヒドロフランEDTA: ethylenediaminetetraacetic acid EGTA: ethyleneglycolbis (2-aminoethylether) tetraacetic acid PMSF: phenylmethylsulfonyl fluoride Leu: L-leucine Trp: L-tryptophan D-Trp: D-tryptophan His: L- Histidine D-His: D-histidine Bzl: benzyl DMAP: 4-dimethylaminopyridine WSC.HCl: 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride HOBt: 1-hydroxybenzotriazole TsOH: paratoluene sulfone Acid Pd-C: Palladium-carbon THF: Tetrahydrofuran
【００３５】本発明のトリペプチドは、他の本発明の製
造方法により製造することができる。本発明の製造方法
に於いて、原料として使用するＡ−Ｂ−Ｚ（但し、Ｚは
ヒドロキシル基又はハロゲン原子、好ましくは、塩素で
ある）、Ｈ−Ｄ−Ｅ−ＣＯＯＨ、Ｈ−Ｆ−ＯＨ及びＨ−
Ｇ−ＯＱの各フラグメントは、そのままでもよく、必要
に応じて反応に関与しないカルボキシル基、アミノ基等
に保護基を有するものであってもよい。この保護基とし
ては下記の基を例示することができる。The tripeptide of the present invention can be produced by another production method of the present invention. In the production method of the present invention, A-B-Z (where Z is a hydroxyl group or a halogen atom, preferably chlorine), H-D-E-COOH, H-F-OH used as a raw material in the production method of the present invention. And H-
Each fragment of G-OQ may be as it is, or may have a protecting group on a carboxyl group, an amino group or the like that does not participate in the reaction, if necessary. The following groups can be illustrated as this protecting group.
【００３６】カルボキシル基の保護基としては、例え
ば、メチル、エチル、ベンジル、ｐ−ニトロベンジル、
ｔ−ブチル、シクロヘキシル等のエステルを挙げること
ができる。Examples of the protecting group for the carboxyl group include methyl, ethyl, benzyl, p-nitrobenzyl,
Esters such as t-butyl and cyclohexyl can be mentioned.
【００３７】アミノ基の保護基としては、例えば、ベン
ジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカルボニル基、
イソボルニルオキシカルボニル基、９−フルオレニルメ
チルオキシカルボニル基等を挙げることができる。Examples of the amino group-protecting group include benzyloxycarbonyl group, t-butoxycarbonyl group,
Examples thereof include an isobornyloxycarbonyl group and a 9-fluorenylmethyloxycarbonyl group.
【００３８】インドール基の保護基としては、例えば、
ホルミル基、ベンジルオキシカルボニル基、２，４−ジ
クロロベンジルオキシカルボニル基、２，２，２−トリ
クロロエトキシカルボニル基、４−メトキシ−２，３，
６−トリメチルベンゼンスルホニル基、２，４，６−ト
リメトキシベンゼンスルホニル基、メシチレン−２−ス
ルホニル基等を挙げることができる。The protecting group for the indole group is, for example,
Formyl group, benzyloxycarbonyl group, 2,4-dichlorobenzyloxycarbonyl group, 2,2,2-trichloroethoxycarbonyl group, 4-methoxy-2,3
Examples thereof include a 6-trimethylbenzenesulfonyl group, a 2,4,6-trimethoxybenzenesulfonyl group and a mesitylene-2-sulfonyl group.
【００３９】イミダゾール基の保護基としては、ベンジ
ル基、２−ニトロベンジル基、フェナシル基、ベンジル
オキシメチル基、ベンズヒドリル基、２，２，２−トリ
フルオロ−１−ベンジルオキシカルボニルアミノエチル
基、２，２，２−トリフルオロ−１−ｔ−ブトキシカル
ボニルアミノエチル基、２，４−ジニトロフェニル基、
２，４，６−トリニトロフェニル基、トリチル基、（４
−ピリジル）ジフェニルメチル基、ピペリジノカルボニ
ル基、ベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブトキシカル
ボニル基、アダマンチルオキシカルボニル基、４−トル
エンスルホニル基、４−メトキシベンゼンスルホニル
基、９−フルオレニルメトキシカルボニル基、ｔ−ブト
キシメチル基等を挙げることができる。Examples of the protecting group for the imidazole group include benzyl group, 2-nitrobenzyl group, phenacyl group, benzyloxymethyl group, benzhydryl group, 2,2,2-trifluoro-1-benzyloxycarbonylaminoethyl group, 2 , 2,2-trifluoro-1-t-butoxycarbonylaminoethyl group, 2,4-dinitrophenyl group,
2,4,6-trinitrophenyl group, trityl group, (4
-Pyridyl) diphenylmethyl group, piperidinocarbonyl group, benzyloxycarbonyl group, t-butoxycarbonyl group, adamantyloxycarbonyl group, 4-toluenesulfonyl group, 4-methoxybenzenesulfonyl group, 9-fluorenylmethoxycarbonyl group , T-butoxymethyl group and the like.
【００４０】本発明の製造方法に於いて、ペプチド結合
を形成するための縮合方法として、アジド法、酸クロラ
イド法、酸無水物法、混合酸無水物法、Ｎ，Ｎ′−ジシ
クロヘキシルカルボジイミド法、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘ
キシルカルボジイミド−アディティブ法、活性エステル
法、カルボニルジイミダゾール法、酸化還元法、ウッド
ワード試薬Ｋを用いる方法等が挙げられる。In the production method of the present invention, as a condensation method for forming a peptide bond, an azide method, an acid chloride method, an acid anhydride method, a mixed acid anhydride method, an N, N'-dicyclohexylcarbodiimide method, Examples thereof include N, N'-dicyclohexylcarbodiimide-additive method, active ester method, carbonyldiimidazole method, redox method, method using Woodward reagent K, and the like.
【００４１】また、縮合反応を行なう前に、それ自体公
知の手段により、反応に関与するカルボキシル基、アミ
ノ基等をその反応性誘導体とし活性化してもよい。Before carrying out the condensation reaction, the carboxyl group, amino group, etc. involved in the reaction may be activated as a reactive derivative thereof by a means known per se.
【００４２】カルボキシル基の反応性誘導体としては、
例えば、対応する酸無水物、アジド、活性エステル［ア
ルコール（例、ペンタクロロフェノール、２，４−ジニ
トロフェノール、シアノメチルアルコール、ｐ−ニトロ
フェノール、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，
３−ジカルボキシイミド、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミ
ド、Ｎ−ヒドロキシフタルイミド、１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール）とのエステル］等が挙げられる。アミ
ノ基の反応性誘導体としては、例えば、対応する燐酸ア
ミドが挙げられる。As the reactive derivative of the carboxyl group,
For example, the corresponding acid anhydride, azide, active ester [alcohol (eg, pentachlorophenol, 2,4-dinitrophenol, cyanomethyl alcohol, p-nitrophenol, N-hydroxy-5-norbornene-2,
3-dicarboximide, N-hydroxysuccinimide, N-hydroxyphthalimide, ester with 1-hydroxybenzotriazole), and the like. Reactive derivatives of amino groups include, for example, the corresponding phosphoric acid amides.
【００４３】反応は、液相法によっても固相法によって
も行うことができるが、通常溶媒中で液相で行うことが
好ましく、例えば、クロロホルム、ジクロルメタン、酢
酸エチル、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、ジメチルス
ルホキシド、ピリジン、ジオキサン、テトラヒドロフラ
ン、水、メタノール等の溶媒、又は、これらの混合物中
で行なうことができる。The reaction can be carried out by a liquid phase method or a solid phase method, but it is usually preferable to carry out the reaction in a liquid phase in a solvent, for example, chloroform, dichloromethane, ethyl acetate, N, N-dimethylformamide, It can be carried out in a solvent such as dimethyl sulfoxide, pyridine, dioxane, tetrahydrofuran, water, methanol, or a mixture thereof.
【００４４】反応温度は、一般に使用される約−３０℃
〜約５０℃の範囲で行なうことができる。The reaction temperature is generally about -30 ° C.
Can be carried out in the range of about 50 ° C.
【００４５】本発明の製造方法に於いて保護基を脱離さ
せる場合には、使用する保護基の種類によって異なる
が、ペプチド結合に影響を与えず、保護基が除かれるよ
うにすることが必要である。When removing the protecting group in the production method of the present invention, it is necessary to remove the protecting group without affecting the peptide bond, although it depends on the kind of the protecting group used. Is.
【００４６】保護基の脱離方法としては、例えば、ギ
酸、塩化水素、臭化水素、無水フッ化水素、メタンスル
ホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ
酢酸、又は、これらの混合物等による酸処理が挙げられ
るが、この他に、液体アンモニア中ナトリウム、パラジ
ウム炭素による還元等も挙げられる。上記酸処理による
脱保護基反応に於いては、アニソール、フェノール、チ
オアニソールの如きカチオン捕捉剤の添加が有効であ
る。Examples of the method for removing the protective group include acid treatment with formic acid, hydrogen chloride, hydrogen bromide, anhydrous hydrogen fluoride, methanesulfonic acid, trifluoromethanesulfonic acid, trifluoroacetic acid, or a mixture thereof. Other examples include reduction with sodium in liquid ammonia and palladium on carbon. In the deprotection group reaction by the acid treatment, it is effective to add a cation scavenger such as anisole, phenol or thioanisole.
【００４７】このようにして製造された本発明のトリペ
プチドは、反応終了後、それ自体公知のペプチドの分離
手段、例えば、抽出、分配、再沈殿、再結晶、カラムク
ロマトグラフィー等によって収得することができる。After completion of the reaction, the tripeptide of the present invention thus produced may be obtained by means of peptide separation known per se, such as extraction, distribution, reprecipitation, recrystallization, column chromatography and the like. You can
【００４８】また、本発明のトリペプチドは、それ自体
公知の方法により、カルボン酸エステル又は、それらの
薬理学的に許容され得る塩にすることができる。Further, the tripeptide of the present invention can be converted into a carboxylic acid ester or a pharmacologically acceptable salt thereof by a method known per se.
【００４９】本発明の製造方法に於いて、原料として使
用する各フラグメントは、市販品として入手することが
できるか、又はそれ自体公知の合成方法により若しくは
公知の合成方法を参考にして当業者が容易に合成するこ
とができる。また二種又は三種のフラグメントの縮合物
も前記のようにして容易に製造することができる。In the production method of the present invention, each fragment used as a raw material can be obtained as a commercially available product, or can be prepared by a person skilled in the art by a known synthetic method or by referring to a known synthetic method. It can be easily synthesized. Also, a condensate of two or three kinds of fragments can be easily produced as described above.
【００５０】例えば、前記のＡ−Ｂ−Ｚのフラグメント
とＨ−Ｄ−Ｅ−ＣＯＯＨのフラグメントとの縮合物の一
つである、下記式（Ｘ−１）：For example, the following formula (X-1), which is one of the condensates of the above A-B-Z fragment and the H-D-E-COOH fragment:
【００５１】[0051]
【化１７】 [Chemical 17]
【００５２】（式中、ｍは４〜７の整数である）で表さ
れる化合物は、反応に関与しない溶媒の存在下で、下記
式：The compound represented by the formula (wherein, m is an integer of 4 to 7) has the following formula in the presence of a solvent that does not participate in the reaction:
【００５３】[0053]
【化１８】 [Chemical 18]
【００５４】（式中、ｍは４〜７の整数である）で表さ
れる環状アミンに、トリクロロメチルクロロホルメート
又はホスゲンを作用させて、下記式：Trichloromethylchloroformate or phosgene is allowed to act on the cyclic amine represented by the formula (wherein m is an integer of 4 to 7) to give the following formula:
【００５５】[0055]
【化１９】 [Chemical 19]
【００５６】で表される塩化カルバミルを合成し、これ
を反応に関与しない溶媒中で、カルボキシル基を保護し
たロイシンと反応させた後、カルボキシル基の保護基を
脱離させることにより合成することができる。また、上
記の式（Ｘ−１）で表される化合物は、上記の塩化カル
バミルとロイシンとを用いて、公知のショッテン−バウ
マン反応により合成することもできる。It is possible to synthesize carbamyl chloride represented by the following formula, by reacting this with a leucine having a protected carboxyl group in a solvent that does not participate in the reaction, and then removing the protective group of the carboxyl group. it can. The compound represented by the above formula (X-1) can also be synthesized by the known Schotten-Baumann reaction using the above carbamyl chloride and leucine.
【００５７】また、前記のＡ−Ｂ−Ｚのフラグメントと
Ｈ−Ｄ−Ｅ−ＣＯＯＨのフラグメントとの縮合物の一つ
である、下記式（Ｘ−２）：The following formula (X-2), which is one of the condensates of the above-mentioned A-B-Z fragment and H-D-E-COOH fragment:
【００５８】[0058]
【化２０】 [Chemical 20]
【００５９】（式中、ｍは４〜７の整数である）で表さ
れる化合物は、反応に関与しない溶媒の存在下で、下記
式：The compound represented by the formula (wherein, m is an integer of 4 to 7) has the following formula in the presence of a solvent that does not participate in the reaction:
【００６０】[0060]
【化２１】 [Chemical 21]
【００６１】（式中、ｍは４〜７の整数である）で表さ
れるスルホクロリドを、カルボキシル基を保護したロイ
シンと反応させた後、カルボキシル基の保護基を脱離さ
せることにより合成することができる。The sulfochloride represented by the formula (wherein m is an integer of 4 to 7) is reacted with leucine having a protected carboxyl group, and then the protecting group of the carboxyl group is eliminated to synthesize the compound. be able to.
【００６２】本発明のトリペプチドは、下記の試験結果
から明らかなように、エンドセリン受容体へのエンドセ
リンの結合に対して優れた阻害作用を有しており、ま
た、エンドセリンの血管収縮反応を抑制する作用が大き
いことから、優れたエンドセリン受容体拮抗剤である。As is clear from the following test results, the tripeptide of the present invention has an excellent inhibitory action on the binding of endothelin to the endothelin receptor, and suppresses the vasoconstriction reaction of endothelin. It is an excellent endothelin receptor antagonist because it has a large action.
【００６３】［エンドセリン受容体へのエンドセリン結
合阻害試験］新鮮なブタ大動脈から以下の方法により膜
画分を調製した。脂肪組織を除去し細切した血管組織
を、液体窒素中で凍結しワーリングブレンダーを用いて
粉末化した。ついで緩衝液［２５ｍＭヘペス、ｐＨ７．
４、０．２５Ｍ蔗糖、５ｍＭＥＤＴＡ・Ｎａ2 、１ｍＭ
ＥＧＴＡ、０．４ｍＭフェニルメチルスルホニルフル
オリド（ＰＭＳＦ）］中で、ホモジナイザー（YAMATO U
ltra-Dispercer）を用いて均一化した。ホモジネート
は、１，４７５×ｇおよび２，７００×ｇで各々１０分
間遠心分離し、その上清をさらに１０，５００×ｇで６
０分間遠心分離した。得られたペレットを緩衝液（２５
ｍＭヘペス、ｐＨ７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍ
Ｍ ＥＤＴＡ・Ｎａ2 、０．４ｍＭ ＰＭＳＦ、５μｇ
／ｍｌアプロチニン）にて１回洗浄し、０．２５ｍｇ／
ｍｌバシトラシンを加えた同緩衝液に再懸濁して−８０
℃で保存した。[Test for Inhibition of Endothelin Receptor Binding to Endothelin Receptor] A membrane fraction was prepared from fresh porcine aorta by the following method. Adipose tissue was removed and minced vascular tissue was frozen in liquid nitrogen and powdered using a Waring blender. Then buffer [25 mM Hepes, pH 7.
4, 0.25M sucrose, 5mM EDTA · Na 2 , 1mM
EGTA, 0.4 mM phenylmethylsulfonyl fluoride (PMSF)] in a homogenizer (YAMATO U
It was homogenized using a ltra-Dispercer). The homogenate was centrifuged at 1,475 xg and 2,700 xg for 10 minutes each and the supernatant was further centrifuged at 10,500 xg for 6 minutes.
Centrifuge for 0 minutes. The resulting pellet is buffered (25
mM Hepes, pH 7.4, 150 mM NaCl, 1 m
M EDTA.Na 2 , 0.4 mM PMSF, 5 μg
/ Ml aprotinin), washed once with 0.25 mg /
Resuspend in the same buffer plus ml bacitracin -80
Stored at ° C.
【００６４】膜標品（４０μｇ蛋白／assay ）は、［
125Ｉ］エンドセリン（１×１０-11Ｍ）（Amersham、比
活性７４ＴＢｑ／ミリモル）及び１×１０-7Ｍの被験物
質と共に、最終用量２５０μｌの緩衝液（５０ｍＭヘペ
ス、ｐＨ７．４、１５０ｍＭＮａＣｌ、５ｍＭ ＭｇＣ
ｌ2 、０．５ｍｇ／ｍｌバシトラシン、１ｍｇ／ｍｌウ
シ血清アルブミン）中で２５℃で９０分間インキュベー
トした。反応後、セルハーベスタ（Brandel M-48R ）を
用いて０．３％ポリエチレンイミンで処理したWhatmann
ＧＦ／Ｂフィルターにて吸引濾過した。フィルターは
３ｍｌの洗浄用緩衝液（２５ｍＭトリス・塩酸、ｐＨ
７．４、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭＭｇＣｌ2 ）で
３回洗浄し、フィルター上に捕捉した放射活性をガンマ
カウンター（アロカ ＡＲＣ−３０１Ｂ）にて測定し
た。The membrane preparation (40 μg protein / assay) was
125 I] Endothelin (1 × 10 −11 M) (Amersham, specific activity 74 TBq / mmol) and 1 × 10 −7 M test substance with a final dose of 250 μl of buffer (50 mM Hepes, pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM). MgC
( 12 , 0.5 mg / ml bacitracin, 1 mg / ml bovine serum albumin) for 90 minutes at 25 ° C. After reaction, Whatmann treated with 0.3% polyethyleneimine using a cell harvester (Brandel M-48R)
It was suction filtered with a GF / B filter. The filter is 3 ml of washing buffer (25 mM Tris / HCl, pH
It was washed 3 times with 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM MgCl 2 ) and the radioactivity captured on the filter was measured with a gamma counter (Aloka ARC-301B).
【００６５】被験物質の阻害率（Ａ）を次式により算出
した。 Ａ（％）＝１００−（Ｂ−Ｃ）／（Ｄ−Ｃ）×１００ 但し、Ｂ：被験物質１×１０-7Ｍ存在下の放射活性 Ｃ：１×１０-7Ｍのエンドセリン存在下の放射活性 Ｄ：１×１０-11 Ｍの［ 125Ｉ］エンドセリン単独によ
る放射活性The inhibition rate (A) of the test substance was calculated by the following formula. A (%) = 100− (B−C) / (D−C) × 100 However, B: radioactivity in the presence of the test substance 1 × 10 −7 M C: in the presence of 1 × 10 −7 M endothelin Radioactivity D: Radioactivity of 1 × 10 -11 M [ 125 I] endothelin alone
【００６６】被験物質として下記の実施例で得られた化
合物を使用したときの阻害率を表１に示す。Table 1 shows the inhibition rates when the compounds obtained in the following Examples were used as test substances.
【００６７】[0067]
【表１】 表１ 阻害率 ────────────────────── 化合物 １×１０-7Ｍ（％） ────────────────────── 実施例１ ８８ 実施例２ ５９ 実施例３ ３５ 実施例４ ６８ 実施例５ ４６ ────────────────────── [Table 1] Table 1 Inhibition rate ────────────────────── Compound 1 × 10 -7 M (%) ─────────── ──────────── Example 1 88 Example 2 59 Example 3 35 Example 4 68 Example 5 46 46 ─────────────────── ────
【００６８】［エンドセリンによる血管収縮への拮抗試
験］ウィスター系雄性ラットの肺動脈を摘出し、内皮細
胞を除去してリング標本を作成した。標本を混合ガス
（９５％Ｏ2 ＋５％ＣＯ2 ）を通気し、クレブス−リン
ゲル(Krebs-Ringer)液を満たした。オーガン−バス(org
an-bath)（３７℃）中に、０．５ｇの静止張力のもとに
懸垂させた。収縮反応は、force-displacementピックア
ップを用いて等尺性に記録した。本発明のトリペプチド
（被験物質）を予め適用しておき、その後エンドセリン
−１（２×１０-9Ｍ）を適用したときの収縮に対する作
用を測定した。[Antagonism test for vasoconstriction by endothelin] The pulmonary artery of male Wistar rats was excised and endothelial cells were removed to prepare a ring sample. The sample was aerated with mixed gas (95% O 2 + 5% CO 2 ) and filled with Krebs-Ringer solution. Organ-Bus (org
It was suspended in an-bath) (37 ° C.) under a static tension of 0.5 g. Contractile responses were recorded isometrically using a force-displacement pickup. The tripeptide of the present invention (test substance) was applied in advance, and then the effect on contraction when endothelin-1 (2 × 10 −9 M) was applied was measured.
【００６９】被験物質の収縮抑制率（Ｅ）は次式により
算出した。 Ｅ（％）＝（１−Ｆ／Ｇ）×１００ Ｆ：被験物質処置後のエンドセリン−１収縮率 Ｇ：エンドセリン−１の収縮率The contraction inhibition rate (E) of the test substance was calculated by the following formula. E (%) = (1−F / G) × 100 F: contraction rate of endothelin-1 after treatment with test substance G: contraction rate of endothelin-1
【００７０】被験物質として下記の実施例で得られた化
合物を使用したときのエンドセリン収縮抑制率を表２に
示す。Table 2 shows the endothelin contraction inhibition rate when the compounds obtained in the following examples were used as test substances.
【００７１】[0071]
【表２】 表２ エンドセリン収縮抑制率 ────────────────────────────── 化合物 抑制率 （濃度） ────────────────────────────── 実施例１ ４３％ （１０-7Ｍ） 実施例４ ２１％ （３×１０-6Ｍ） ────────────────────────────── [Table 2] Table 2 Endothelin contraction inhibition rate ────────────────────────────── Compound inhibition rate (concentration) ──── ────────────────────────── Example 1 43% (10 −7 M) Example 4 21% (3 × 10 −6 M) ──────────────────────────────
【００７２】上記の結果から明らかなように、本発明の
トリペプチドは優れたエンドセリン拮抗作用を有してい
るので、例えば、高血圧症、狭心症、心筋症、動脈硬
化、心筋梗塞、レイノー病、脳動脈痙攣、脳虚血、くも
膜下出血後の晩期脳痙攣などの脳卒中発作、気管支収縮
などの喘息、急性腎不全などの腎不全などの治療剤とし
て使用できる。As is clear from the above results, since the tripeptide of the present invention has an excellent endothelin antagonism, for example, hypertension, angina, cardiomyopathy, arteriosclerosis, myocardial infarction, Raynaud's disease It can be used as a therapeutic agent for cerebral artery spasm, cerebral ischemia, stroke attack such as late cerebral spasm after subarachnoid hemorrhage, asthma such as bronchoconstriction, and renal failure such as acute renal failure.
【００７３】本発明のトリペプチドは、公知の固体又は
液体賦形剤と混合して、非経口投与、経口投与及び外部
投与に適した医薬配合の形態で使用できる。投与形態と
しては、注射剤、吸入剤、シロップ剤、乳剤、散剤、カ
プセル剤、顆粒剤、錠剤、軟膏、坐剤などいずれの形態
であってもよい。この医薬配合には、使用形態に応じた
薬剤を調製するのに通常使用される、佐剤、安定剤、湿
潤剤、乳化剤、吸収促進剤、界面活性剤、増量剤、結合
剤、崩壊剤、滑沢剤等が含まれていてもよい。添加剤と
して、注射剤用の蒸留水、生理食塩水、リンゲル液、グ
ルコース、糖シロップ、ゼラチン、植物油、カカオバタ
ー、エチレングリコール、ヒドロキシプロピルセルロー
ス、ラクトース、蔗糖、コーンスターチ、ステアリン酸
マグネシウム、タルク等を使用できる。The tripeptide of the present invention can be used in the form of a pharmaceutical formulation suitable for parenteral administration, oral administration and external administration by mixing with a known solid or liquid excipient. The dosage form may be any of injections, inhalants, syrups, emulsions, powders, capsules, granules, tablets, ointments, suppositories, and the like. In this pharmaceutical formulation, adjuvants, stabilizers, wetting agents, emulsifiers, absorption enhancers, surfactants, bulking agents, binders, disintegrants, which are usually used for preparing a drug according to the form of use, Lubricants and the like may be included. Distilled water for injection, physiological saline, Ringer's solution, glucose, sugar syrup, gelatin, vegetable oil, cocoa butter, ethylene glycol, hydroxypropyl cellulose, lactose, sucrose, corn starch, magnesium stearate, talc, etc. are used as additives. it can.
【００７４】本発明のトリペプチドのエンドセリン拮抗
剤としての投与量は、投与方法、患者の症状の程度、患
者の年令、体重等によって異なるが、通常は、本発明の
トリペプチドの大人に対し経口投与する場合の１日投与
量は約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇ体重であり、非経口投
与する場合の１日投与量は約０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ
体重である。The dose of the tripeptide of the present invention as an endothelin antagonist varies depending on the administration method, the degree of symptoms of the patient, the age of the patient, the body weight, etc. The daily dose for oral administration is about 0.1 to 100 mg / kg body weight, and the daily dose for parenteral administration is about 0.01 to 10 mg / kg.
It's weight.
【００７５】[0075]
【実施例】次に、実施例により本発明を更に詳細に説明
する。EXAMPLES Next, the present invention will be described in more detail by way of examples.
【００７６】［実施例１］ Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメチレンイミノカルボニ
ル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプト
フィル］−Ｄ−トリプトファン ナトリウム塩の合成[0076] [Example 1] N-- Synthesis of [N-[N-(1-hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in formyl-D-tryptophyl]-D-tryptophan, sodium salt
【００７７】（１） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ
−トリプトファン ベンジルエステルの合成 Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ−トリプトファン３．
０４ｇ（１０．０ミリモル）を乾燥塩化メチレン４０ｍ
ｌに溶解し、これに４−ジメチルアミノピリジン（以
下、ＤＭＡＰと略記する）１２２ｍｇ（１．０ミリモ
ル）及びベンジルアルコール１．１９ｇ（１１．０ミリ
モル）を加えた。この溶液に、氷冷下、１−エチル−３
−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸
塩（以下、ＷＳＣ・ＨＣｌと略記する）２．１０ｇ（１
１．０ミリモル）を加え、室温で一晩撹拌した。反応液
を水洗後濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解し、この溶液
を１０％クエン酸、水、飽和重曹水、水、飽和食塩水の
順に洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥し
た後、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィーで精製（ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）するこ
とにより、標題化合物を白色結晶性粉末として定量的に
得た。(1) Nt-butoxycarbonyl-D
Synthesis of tryptophan benzyl ester Nt-butoxycarbonyl-D-tryptophan 3.
04 g (10.0 mmol) of dry methylene chloride 40 m
It was dissolved in 1 and 122 mg (1.0 mmol) of 4-dimethylaminopyridine (hereinafter abbreviated as DMAP) and 1.19 g (11.0 mmol) of benzyl alcohol were added. 1-Ethyl-3 was added to this solution under ice cooling.
-(3-Dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (hereinafter abbreviated as WSC.HCl) 2.10 g (1
(1.0 mmol) was added and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution was washed with water and concentrated, and the residue was dissolved in ethyl acetate. The solution was washed with 10% citric acid, water, saturated sodium hydrogen carbonate solution, water and saturated saline solution in this order, and then anhydrous sodium sulfate was added to dry the solution. , Concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography (hexane / ethyl acetate = 2/1) to quantitatively obtain the title compound as a white crystalline powder.
【００７８】（２） Ｄ−トリプトファン ベンジルエ
ステル塩酸塩の合成 上記（１）で得られたＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｄ
−トリプトファン ベンジルエステル（理論量:1０ミリ
モル）を９０％ギ酸６０ｍｌに溶解し、氷浴から室温に
戻しながら６時間撹拌した。ギ酸を減圧下留去し、残渣
に１Ｎ−塩酸／ジオキサン１０ｍｌを加え、室温で１５
分間撹拌した後、エーテルを加えて結晶化した。結晶を
濾取し、エーテルで洗浄し減圧乾燥することにより、標
題化合物を白色結晶性粉末として２．６８ｇ（収率：８
１．２％）得た。(2) Synthesis of D-tryptophan benzyl ester hydrochloride Nt-butoxycarbonyl-D obtained in (1) above
-Tryptophan benzyl ester (theoretical amount: 10 mmol) was dissolved in 60 ml of 90% formic acid and stirred for 6 hours while returning to room temperature from an ice bath. Formic acid was distilled off under reduced pressure, 1N-hydrochloric acid / dioxane (10 ml) was added to the residue, and the mixture was allowed to stand at room temperature for 15 minutes.
After stirring for a minute, ether was added to crystallize. The crystals were collected by filtration, washed with ether, and dried under reduced pressure to give the title compound as a white crystalline powder (2.68 g, yield: 8).
1.2%) was obtained.
【００７９】（３） Ｎ−（ヘキサメチレンイミノカル
ボニル）−Ｌ−ロイシン ベンジルエステルの合成 Ｌ−Ｌｅｕ−ＯＢｚｌ・ＴｓＯＨ６．７６ｇ（１７．２
ミリモル）を乾燥塩化メチレン５０ｍｌに溶解し、トリ
エチルアミン９．６ｍｌを加え、更にヘキサメチレンイ
ミノカルボニルクロライド２．７８ｇ（１７．２ミリモ
ル）を加え、３日間加熱還流した。反応液を濃縮し、残
渣に酢酸エチルを加え、不溶物を濾過により除き濾液を
濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
で精製することにより、標題化合物５．２９ｇ（収率：
８８．９％）を白色結晶性粉末として得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ） δ；0.9-1.0(6H,m), 1.
5-1.8(11H,m), 3.3-3.5(4H,m), 4.5-5.2(4H,m),7.3-7.4
(5H,m)(3) Synthesis of N- (hexamethyleneiminocarbonyl) -L-leucine benzyl ester L-Leu-OBzl.TsOH 6.76 g (17.2)
Was dissolved in 50 ml of dry methylene chloride, 9.6 ml of triethylamine was added, 2.78 g (17.2 mmol) of hexamethyleneiminocarbonyl chloride was further added, and the mixture was heated under reflux for 3 days. The reaction solution was concentrated, ethyl acetate was added to the residue, insoluble materials were removed by filtration, and the filtrate was concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography to give 5.29 g of the title compound (yield:
88.9%) was obtained as a white crystalline powder. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.9-1.0 (6H, m), 1.
5-1.8 (11H, m), 3.3-3.5 (4H, m), 4.5-5.2 (4H, m), 7.3-7.4
(5H, m)
【００８０】（４） Ｎ−（ヘキサメチレンイミノカル
ボニル）−Ｌ−ロイシンの合成 （３）で得られた化合物５．２９ｇ（１５．３ミリモ
ル）をＴＨＦ５０ｍｌに溶解し、１０％Ｐｄ−Ｃ３５ｍ
ｇを加え、水素雰囲気下で一夜攪拌した。反応液を濾過
し、濾液を濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、飽和
重曹水で抽出した。水層を分取し、これに１Ｎ−ＨＣｌ
を加えて酸性にし、酢酸エチルで再抽出した。有機層を
濃縮することにより、標題化合物５．２９ｇ（定量的収
率）を白色アモルファスとして得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ） δ；0.94-0.98(6H,m),
1.57-1.81(11H,m), 3.36-3.45(4H,m),4.33-4.38(1H,m),
4.74-4.76(1H,m)(4) Synthesis of N- (hexamethyleneiminocarbonyl) -L-leucine 5.29 g (15.3 mmol) of the compound obtained in (3) was dissolved in 50 ml of THF to obtain 10% Pd-C35m.
g was added, and the mixture was stirred overnight under a hydrogen atmosphere. The reaction solution was filtered and the filtrate was concentrated. The residue was dissolved in ethyl acetate and extracted with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate. The aqueous layer was separated and 1N-HCl was added to it.
Was added to acidify, and the mixture was re-extracted with ethyl acetate. The organic layer was concentrated to give 5.29 g (quantitative yield) of the title compound as a white amorphous. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.94-0.98 (6H, m),
1.57-1.81 (11H, m), 3.36-3.45 (4H, m), 4.33-4.38 (1H, m),
4.74-4.76 (1H, m)
【００８１】（５） Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ
in−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファ
ン ベンジルエステルの合成 上記（２）で得られたＤ−トリプトファン ベンジルエ
ステル塩酸塩１９８ｍｇ（０．６ミリモル）を乾燥塩化
メチレン５ｍｌに溶解し、これにＮ−ｔ−ブトキシカル
ボニル−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトファン１９９ｍ
ｇ（０．６ミリモル）、トリエチルアミン０．０８ｍｌ
（０．６ミリモル）、および１−ヒドロキシベンゾトリ
アゾール（以下、ＨＯＢｔと略記する）一水和物９２ｍ
ｇ（０．７ミリモル）を加え、氷浴上で撹拌した。更
に、ＷＳＣ・ＨＣｌ １２６ｍｇ（０．７ミリモル）を
加え、室温で一晩撹拌した。反応液を上記（１）の場合
と同様に処理することにより、標題化合物３６０ｍｇを
定量的に得た。(5) Nt-butoxycarbonyl-N
Synthesis of in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester 198 mg (0.6 mmol) of D-tryptophan benzyl ester hydrochloride obtained in the above (2) was dissolved in 5 ml of dry methylene chloride, and N- t- butoxycarbonyl -N in - formyl -D- tryptophan 199m
g (0.6 mmol), triethylamine 0.08 ml
(0.6 mmol), and 1-hydroxybenzotriazole (hereinafter abbreviated as HOBt) monohydrate 92 m
g (0.7 mmol) was added and the mixture was stirred on an ice bath. Further, 126 mg (0.7 mmol) of WSC.HCl was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution was treated in the same manner as in the above (1) to quantitatively obtain 360 mg of the title compound.
【００８２】（６） Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステルの合成 上記（５）で得られたＮ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ
in−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファ
ン ベンジルエステル（理論量：０．３ミリモル）を９
０％ギ酸６ｍｌに溶解し、室温で３時間撹拌した。反応
液を減圧下濃縮し、残渣を酢酸エチルに溶解し、飽和重
曹水で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た後濃縮し、得られた残渣をそのまま次の反応に用い
た。(6) Synthesis of N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester Nt-butoxycarbonyl-N obtained in (5) above
9% in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester (theoretical amount: 0.3 mmol)
It was dissolved in 6% of 0% formic acid and stirred at room temperature for 3 hours. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, the residue was dissolved in ethyl acetate and washed with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate. The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate and then concentrated, and the obtained residue was directly used in the next reaction.
【００８３】（７） Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメ
チレンイミノカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホ
ルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｄ−トリプトファン
ベンジルエステルの合成 上記（４）で得られたＮ−ヘキサメチレンイミノカルボ
ニル−Ｌ−ロイシン１１０ｍｇ（０．４３ミリモル）及
び上記（６）で得られたＮin−ホルミル−Ｄ−トリプト
フィル−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステル２２０
ｍｇ（０．４３ミリモル）を乾燥塩化メチレン１０ｍｌ
に溶解し、氷浴上で撹拌した。そこに、ＷＳＣ・ＨＣｌ
９０ｍｇ（０．４７ミリモル）を加え、室温で一晩撹
拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢酸エチルに溶解
し、水、１０％クエン酸、水、飽和重曹水、水、飽和食
塩水を用いて順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（クロロホルム）で精製し、標題化合物を淡黄色
結晶として１６５ｍｇ（収率：５１．６％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ） δ；0.78-0.82(6H,m),
1.2-1.7(11H,m), 2.9-3.4(8H,m), 4.6-4.9(3H,m),5.09
(2H,s), 6.4-8.7(20H,m) FAB MS(m/z);747(M+1)[0083] (7) N- [N- [N- (1- hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-tryptophan
Synthesis of benzyl ester 110 mg (0.43 mmol) of N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucine obtained in (4) above and N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan obtained in (6) above. Benzyl ester 220
mg (0.43 mmol) 10 ml of dry methylene chloride
, And stirred on an ice bath. WSC and HCl there
90 mg (0.47 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The solvent was evaporated under reduced pressure, the residue was dissolved in ethyl acetate, washed successively with water, 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was concentrated under reduced pressure and then purified by silica gel column chromatography (chloroform) to obtain 165 mg (yield: 51.6%) of the title compound as pale yellow crystals. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.78-0.82 (6H, m),
1.2-1.7 (11H, m), 2.9-3.4 (8H, m), 4.6-4.9 (3H, m), 5.09
(2H, s), 6.4-8.7 (20H, m) FAB MS (m / z); 747 (M + 1)
【００８４】（８） Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメ
チレンイミノカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホ
ルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｄ−トリプトファン
ナトリウム塩の合成 上記（７）で得られたＮ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメ
チレンイミノカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホ
ルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｄ−トリプトファン
ベンジルエステル１００ｍｇ（０．１３ミリモル）にメ
タノール８ｍｌと水４ｍｌを加え懸濁状態で撹拌した。
これに、１０％Ｐｄ−Ｃ１１ｍｇと重曹１１ｍｇを加
え、水素雰囲気下、室温で一晩撹拌した。反応液を濾過
して触媒を濾去し、メタノールと水の混合液で洗浄し
た。濾液と洗浄液を合わせて減圧濃縮し、残渣を凍結乾
燥することにより、標題化合物を白色アモルファスとし
て８８ｍｇ（定量的）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ）δ；0.77-0.81(6H,m), 1.3-
1.7(11H,m), 3.2-3.4(8H,m), 4.6-4.8(3H,m),6.9-9.0(1
1H,m) FAB MS(m/z);679(M+1)[0084] (8) N- [N- [N- (1- hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-tryptophan
Obtained in the above sodium salt (7) N- [N- [N- (1- hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-tryptophan
To 100 mg (0.13 mmol) of benzyl ester, 8 ml of methanol and 4 ml of water were added and stirred in a suspended state.
To this, 11 mg of 10% Pd-C and 11 mg of sodium bicarbonate were added, and the mixture was stirred overnight at room temperature under a hydrogen atmosphere. The reaction solution was filtered, the catalyst was filtered off, and the mixture was washed with a mixed solution of methanol and water. The filtrate and washings were combined and concentrated under reduced pressure, and the residue was freeze-dried to obtain 88 mg (quantitative) of the title compound as a white amorphous substance. 1 H NMR (CD 3 OD) δ; 0.77-0.81 (6H, m), 1.3-
1.7 (11H, m), 3.2-3.4 (8H, m), 4.6-4.8 (3H, m), 6.9-9.0 (1
1H, m) FAB MS (m / z); 679 (M + 1)
【００８５】［実施例２］ Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメチレンイミノカルボニ
ル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプト
フィル］−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジ
ンの合成[0085] [Example 2] N- [N- [N- ( 1- hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl -D- tryptophyl] -N im - benzyloxymethyl -D- histidine Synthesis of
【００８６】（１） Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン ベン
ジルエステルの合成 Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）−Ｎim−ベンジルオキ
シメチル−Ｄ−ヒスチジン・０．８Ｈ2 Ｏの１．９６ｇ
（５．０ミリモル）を塩化メチレン２１ｍｌに溶解し、
氷冷下、これに、ベンジルアルコール０．５４ｇ（５．
０ミリモル）、ＤＭＡＰ０．０５７ｇ（０．５ミリモ
ル）、及びＷＳＣ・ＨＣｌ １．０４ｇを加えて一日撹
拌した。溶媒を留去し、残渣を酢酸エチルに溶解し、
水、１０％クエン酸、水、飽和重曹水、水、飽和食塩水
の順で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムにて乾燥した。
溶媒を減圧留去し、標題化合物を飴状物として１．６５
ｇ（収率：７１％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ;1.40(9H,S), 3.0-3.3(2
H,m), 4.35(1H,d,J=12Hz), 4.39(1H,d,J=12Hz) 4.5-4.7(1H,m), 5.1-5.4(5H,m), 6.8-7.6(12H,m)(1) N- (t-butoxycarbonyl)
-N im - Synthesis of benzyloxymethyl -D- histidine benzyl ester N-(t-butoxycarbonyl) -N im - 1.96 g of benzyloxymethyl -D- histidine · 0.8H 2 O
(5.0 mmol) was dissolved in 21 ml of methylene chloride,
Under ice cooling, 0.54 g of benzyl alcohol (5.
0 mmol), 0.057 g (0.5 mmol) of DMAP, and 1.04 g of WSC.HCl were added and stirred for one day. The solvent was distilled off, the residue was dissolved in ethyl acetate,
The extract was washed with water, 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water, and saturated saline in this order, and dried over anhydrous sodium sulfate.
The solvent was distilled off under reduced pressure to give the title compound as a candy-like substance (1.65).
g (yield: 71%) was obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 1.40 (9H, S), 3.0-3.3 (2
H, m), 4.35 (1H, d, J = 12Hz), 4.39 (1H, d, J = 12Hz) 4.5-4.7 (1H, m), 5.1-5.4 (5H, m), 6.8-7.6 (12H, m)
【００８７】（２） Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ
−ヒスチジン ベンジルエステルの合成 上記（１）で得られたＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン ベン
ジルエステル１．６５ｇ（３．５ミリモル）を９０％ギ
酸３５ｍｌに溶解し、室温で一日撹拌した。溶媒を減圧
留去し、残渣をクロロホルム１００ｍｌに溶解し、飽和
重曹水、水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、標題化合物を
飴状物として１．２０ｇ（収率：９４％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ；1.69(2H,s), 2.9-3.2
(2H,m), 3.7-3.9(1H,m), 4.35(1H,d,J=12Hz),4.39(1H,
d,J=12Hz), 5.0-5.4(4H,m), 6.8-7.6(12H,m)(2) N im -benzyloxymethyl-D
-Synthesis of histidine benzyl ester N- (t-butoxycarbonyl) obtained in (1) above
1.65 g (3.5 mmol) of -N im -benzyloxymethyl-D-histidine benzyl ester was dissolved in 35 ml of 90% formic acid and stirred at room temperature for one day. The solvent was distilled off under reduced pressure, the residue was dissolved in 100 ml of chloroform, washed successively with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off under reduced pressure to obtain 1.20 g (yield: 94%) of the title compound as a candy. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 1.69 (2H, s), 2.9-3.2
(2H, m), 3.7-3.9 (1H, m), 4.35 (1H, d, J = 12Hz), 4.39 (1H,
d, J = 12Hz), 5.0-5.4 (4H, m), 6.8-7.6 (12H, m)
【００８８】（３） Ｎ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｎim−ベンジ
ルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン ベンジルエステルの
合成 上記（２）で得られたＮim−ベンジルオキシメチル−Ｄ
−ヒスチジン ベンジルエステル１．２０ｇ（３．３ミ
リモル）を塩化メチレン４０ｍｌに溶解し、これに、氷
冷撹拌下、Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−Ｎin−ホルミ
ル−Ｄ−トリプトファン１．０９ｇ（３．３ミリモ
ル）、及びＷＳＣ・ＨＣｌ０．６９ｇ（３．６ミリモ
ル）を加え、室温で一日撹拌した。反応液を１０％クエ
ン酸、水、飽和重曹水、水で順次洗浄した後、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した後、シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノ
ール＝１００／１）で精製し、標題化合物１．８３ｇ
（収率：８２％）を得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ) δ；1.40(9H,S), 3.0-3.2
(4H,m), 4.28(1H,d,J=12Hz),4.32(1H,d,J=12Hz),4.4-4.
6(1H,m), 4.86(1H,q,J=6Hz), 5.0〜5.2(4H,m), 5.24(1
H,s),6.6-9.0(19H,m) FAB MS(m/z);680(M+1)(3) N- (t-butoxycarbonyl)
-N in - formyl -D- tryptophyl -N im - Synthesis of benzyloxymethyl -D- histidine benzyl ester (2) obtained in N im - benzyloxymethyl -D
- dissolving histidine benzyl ester 1.20g of (3.3 mmol) in methylene chloride 40 ml, to this, with stirring under ice cooling, N-t-butoxycarbonyl -N in - formyl -D- tryptophan 1.09 g (3. (3 mmol) and WSC.HCl (0.69 g, 3.6 mmol) were added, and the mixture was stirred at room temperature for one day. The reaction mixture was washed successively with 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and water, and dried over anhydrous sodium sulfate. After the solvent was distilled off under reduced pressure, the residue was purified by silica gel column chromatography (chloroform / methanol = 100/1) to give 1.83 g of the title compound.
(Yield: 82%) was obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 1.40 (9H, S), 3.0-3.2
(4H, m), 4.28 (1H, d, J = 12Hz), 4.32 (1H, d, J = 12Hz), 4.4-4.
6 (1H, m), 4.86 (1H, q, J = 6Hz), 5.0 ~ 5.2 (4H, m), 5.24 (1
H, s), 6.6-9.0 (19H, m) FAB MS (m / z); 680 (M + 1)
【００８９】（４） Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン
ベンジルエステルの合成 上記（３）で得られたＮ−（ｔ−ブトキシカルボニル）
−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｎim−ベンジ
ルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン ベンジルエステル
１．７０ｇ（２．５ミリモル）を９０％ギ酸２５ｍｌに
溶解し、室温で一日撹拌した後、溶媒を減圧留去した。
残渣にクロロホルム１００ｍｌを加えて溶解し、飽和重
曹水、水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナト
リウムにて乾燥した。溶媒を留去し、標題化合物をアモ
ルファスとして１．３６ｇ（収率：９３．８％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ；1.62(2H,s), 2.7-3.3(4
H,m), 3.6-5.3(6H,m),6.6〜9.4(19H,m) FAB MS(m/z);580(M+1)(4) N in -formyl-D-tryptophyll-N im -benzyloxymethyl-D-histidine
Synthesis of benzyl ester N- (t-butoxycarbonyl) obtained in (3) above
1.70 g (2.5 mmol) of -N in -formyl-D-tryptophyll-N im -benzyloxymethyl-D-histidine benzyl ester was dissolved in 25% of 90% formic acid and stirred at room temperature for one day, and then the solvent was added. It was distilled off under reduced pressure.
Chloroform (100 ml) was added to the residue to dissolve it, and the residue was washed successively with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off to give 1.36 g (yield: 93.8%) of the title compound as an amorphous substance. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 1.62 (2H, s), 2.7-3.3 (4
H, m), 3.6-5.3 (6H, m), 6.6 ~ 9.4 (19H, m) FAB MS (m / z); 580 (M + 1)
【００９０】（５） Ｎ−ヘキサメチレンイミノカルボ
ニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｎim−ベンゾイルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン
ベンジルエステルの合成 上記（４）で得られたＮin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン
ベンゾイルエステル２０３ｍｇ（０．３５ミリモル）を
塩化メチレン５ｍｌに溶解し、氷冷撹拌下、これに、Ｎ
−ヘキサメチレンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシン９１
ｍｇ（０．３５ミリモル）、及びＷＳＣ・ＨＣｌ ６５
ｍｇ（０．３４ミリモル）を加え、室温で一晩撹拌し
た。反応溶液を水、１０％クエン酸、水、飽和重曹水、
水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝１００
／１）で精製し、標題化合物１０４ｍｇ（収率：３６．
４％) を得た 。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ）δ；0.7-0.9(6H,m), 1.2-1.
8(11H,m),3.0-3.5(8H,m), 4.0-4.1(1H,m),4.34(2H,s),
4.8-5.0(3H,m), 5.10(2H,s), 5.18(2H,s),6.6-9.0(20H,
m) FAB MS(m/z);818(M+1)(5) Synthesis of N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl-N in -formyl-D-tryptophyll-N im -benzoyloxymethyl-D-histidine benzyl ester N in obtained in (4) above. - formyl -D- tryptophyl -N im - benzyloxymethyl -D- histidine
203 mg (0.35 mmol) of benzoyl ester was dissolved in 5 ml of methylene chloride, and the solution was stirred under ice-cooling to give N.
-Hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucine 91
mg (0.35 mmol), and WSC.HCl 65
mg (0.34 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction solution is water, 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate,
The organic layer was washed with water and saturated saline solution in that order, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off, and the residue was subjected to silica gel column chromatography (chloroform / methanol = 100).
/ 1) and the title compound 104 mg (yield: 36.
4%) was obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.7-0.9 (6H, m), 1.2-1.
8 (11H, m), 3.0-3.5 (8H, m), 4.0-4.1 (1H, m), 4.34 (2H, s),
4.8-5.0 (3H, m), 5.10 (2H, s), 5.18 (2H, s), 6.6-9.0 (20H,
m) FAB MS (m / z); 818 (M + 1)
【００９１】（６） Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（１−ヘキサメ
チレンイミノカルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホ
ルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｎim−ベンジルオキシ
メチル−Ｄ−ヒスチジンの合成 上記（５）で得られたＮ−ヘキサメチレンイミノカルボ
ニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｎim−ベンジルオキシメチル−Ｄ−ヒスチジン
ベンジルエステル２０４ｍｇ（０．２５ミリモル）をメ
タノール５ｍｌに溶解し、これに、１０％Ｐｄ−Ｃ１３
ｍｇを加え、水素雰囲気下室温で一晩撹拌した。触媒を
濾過しメタノールで洗浄後、濾液と洗液を合わせて溶媒
を減圧留去した。残渣をエタノール／酢酸エチル＝１／
９の混合溶媒に溶解し、２．５％重曹水、水、１０％ク
エン酸、水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾
燥した。溶媒を留去し、粗結晶５０ｍｇ得た。これをエ
タノール−エーテルより再結晶し、淡褐色結晶３０ｍｇ
（収率：１６．５％）を得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤ3 ＯＤ）δ；0.7-1.0(6H,m),1.2-
1.8(11H,m), 2.7-3.6(8H,m), 4.0-5.7(7H,m),7.7-9.6(1
3H,m) FAB MS(m/z);728(M+1)[0091] (6) N- [N- [N- (1- hexamethyleneimino carbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl -D- tryptophyl] -N im - Synthesis of benzyloxymethyl -D- histidine obtained in the above (5) N-hexamethyleneimino carbonyl -L- leucyl -N in - formyl -D- tryptophyl -N im - benzyloxymethyl -D- histidine
204 mg (0.25 mmol) of benzyl ester was dissolved in 5 ml of methanol, to which 10% Pd-C13 was added.
mg was added, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere at room temperature overnight. After filtering the catalyst and washing with methanol, the filtrate and the washing liquid were combined and the solvent was distilled off under reduced pressure. The residue is ethanol / ethyl acetate = 1 /
It was dissolved in a mixed solvent of 9 and washed successively with 2.5% aqueous sodium hydrogen carbonate, water, 10% citric acid and water, and then dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off to obtain 50 mg of crude crystals. This was recrystallized from ethanol-ether to give 30 mg of light brown crystals.
(Yield: 16.5%) was obtained. 1 H NMR (CD 3 OD) δ; 0.7-1.0 (6H, m), 1.2-
1.8 (11H, m), 2.7-3.6 (8H, m), 4.0-5.7 (7H, m), 7.7-9.6 (1
3H, m) FAB MS (m / z); 728 (M + 1)
【００９２】［実施例３］ Ｎ−［Ｎ−（Ｎ−フタロイル−Ｌ−ロイシル）−Ｎin−
ホルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｄ−トリプトファン
ナトリウム塩の合成[0092] [Example 3] N- [N- (N- phthaloyl -L- leucyl) -N in -
Formyl-D-tryptophyll] -D-tryptophan sodium salt synthesis
【００９３】（１） Ｎ−フタロイル−Ｌ−ロイシンの
合成 無水フタル酸７．４１ｇ（５０ミリモル）、Ｌ−ロイシ
ン６．５６ｇ（５０ミリモル）、トルエン１００ｍｌ及
びトリエチルアミン０．７ｍｌの混合物を２時間加熱還
流した。溶媒を減圧留去し、残渣に水１００ｍｌと濃塩
酸２ｍｌを加えた。水層をエーテルで抽出し、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去することによ
り、標題化合物を白色結晶として１２．７１ｇ（収率：
９７．３％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ）δ；0.93(6H,d,J=7Hz),
1.3-2.6(3H,m), 4.9-5.1(1H,m), 7.6-7.9(4H,m),9.98(1
H,br s)(1) Synthesis of N-phthaloyl-L-leucine A mixture of 7.41 g (50 mmol) of phthalic anhydride, 6.56 g (50 mmol) of L-leucine, 100 ml of toluene and 0.7 ml of triethylamine was heated for 2 hours. Refluxed. The solvent was distilled off under reduced pressure, and 100 ml of water and 2 ml of concentrated hydrochloric acid were added to the residue. The aqueous layer was extracted with ether and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off under reduced pressure to obtain 12.71 g of the title compound as white crystals (yield:
97.3%) was obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.93 (6H, d, J = 7Hz),
1.3-2.6 (3H, m), 4.9-5.1 (1H, m), 7.6-7.9 (4H, m), 9.98 (1
H, br s)
【００９４】（２） Ｎ−［Ｎ−（Ｎ−フタロイル−Ｌ
−ロイシル）−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル］
−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステルの合成 前記実施例１の（６）と同様にして得られたＮin−ホル
ミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファン ベン
ジルエステル４１６ｍｇ（０．８２ミリモル）と上記
（１）で得られたＮ−フタロイル−Ｌ−ロイシン２１４
ｍｇ（０．８２ミリモル) を乾燥塩化メチレン２０ｍｌ
に溶解し氷冷した。そこにＷＳＣ・ＨＣｌ１７３ｍｇ
（０．９０ミリモル）を加え、室温で一晩撹拌した。溶
媒を減圧留去し、酢酸エチルに溶解した。これを水、１
０％クエン酸、水、飽和重曹水、水、飽和食塩水で順次
洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減
圧留去し、標題化合物を黄色結晶として５８０ｍｇ（収
率：９４．３％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3) δ；0.7-0.8(6H,m), 1.2-
2.1(3H,m), 2.9-3.3(4H,m), 4.6-4.7(3H,m),4.9-5.1(2
H,m), 7,0-8.5(22H,m), 10.86(1H,s) FAB MS(m/z);752(M+1)(2) N- [N- (N-phthaloyl-L
- leucyl) -N in - formyl -D- tryptophyl]
-D- obtained in the same manner as of tryptophan benzyl ester synthesis above in Example 1 (6) N in - formyl -D- tryptophyl -D- tryptophan benzyl ester 416 mg (0.82 mmol) and the (1) Obtained N-phthaloyl-L-leucine 214
mg (0.82 mmol) dry methylene chloride 20 ml
And then cooled with ice. WSC / HCl 173mg there
(0.90 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The solvent was distilled off under reduced pressure and the residue was dissolved in ethyl acetate. This is water, 1
The extract was washed successively with 0% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was evaporated under reduced pressure to give the title compound as yellow crystals (580 mg, yield: 94.3%). 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.7-0.8 (6H, m), 1.2-
2.1 (3H, m), 2.9-3.3 (4H, m), 4.6-4.7 (3H, m), 4.9-5.1 (2
H, m), 7,0-8.5 (22H, m), 10.86 (1H, s) FAB MS (m / z); 752 (M + 1)
【００９５】（３） Ｎ−［Ｎ−（Ｎ−フタロイル−Ｌ
−ロイシル）−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル］
−Ｄ−トリプトファン ナトリウム塩の合成 上記（２）で得られたＮ−［Ｎ−（Ｎ−フタロイル−Ｌ
−ロイシル）−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル］
−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステル１００ｍｇ
（０．１３ミリモル）に、メタノール７ｍｌと水３．５
ｍｌを加え、懸濁状態で撹拌した。そこに、１０％Ｐｄ
−Ｃ１ ２ｍｇと重曹１１ｍｇを加え、水素雰囲気下で
一晩撹拌した。反応溶液を濾過し、メタノールと水の混
合液で洗浄した。濾液と洗浄液を合わせて濃縮し、更に
凍結乾燥することにより、標題化合物を淡黄色アモルフ
ァスとして９１ｍｇ（定量的）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤ3 ＯＤ）δ；0.8-0.9(6H,m), 1.2-
2.2(3H,m), 2.9-3.3(4H,m), 4.5-4.8(3H,m),6.9-9.1(18
H,m) FAB MS(m/z);684(M+1)(3) N- [N- (N-phthaloyl-L
- leucyl) -N in - formyl -D- tryptophyl]
Synthesis of -D-tryptophan sodium salt N- [N- (N-phthaloyl-L obtained in (2) above.
- leucyl) -N in - formyl -D- tryptophyl]
-D-tryptophan benzyl ester 100 mg
(0.13 mmol), methanol 7 ml and water 3.5
ml was added and stirred in suspension. There 10% Pd
-C12 2 mg and sodium bicarbonate 11 mg were added, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere overnight. The reaction solution was filtered and washed with a mixed solution of methanol and water. The filtrate and washings were combined, concentrated, and freeze-dried to obtain 91 mg (quantitative) of the title compound as a pale yellow amorphous substance. 1 H NMR (CD 3 OD) δ; 0.8-0.9 (6H, m), 1.2-
2.2 (3H, m), 2.9-3.3 (4H, m), 4.5-4.8 (3H, m), 6.9-9.1 (18
H, m) FAB MS (m / z); 684 (M + 1)
【００９６】［実施例４］ Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（モルホリノカルボニル）−Ｌ−ロイ
シル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフィル］−Ｄ−
トリプトファン ナトリウム塩の合成[0096] [Example 4] N- [N- [N- (morpholinocarbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-
Synthesis of tryptophan sodium salt
【００９７】（１） Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（モルホリノカ
ルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−ト
リプトフィル］−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステ
ルの合成 モルホリノカルボニル ロイシン１２２ｍｇ（０．５ミ
リモル）及び前記実施例１の（６）で得られたＮin−ホ
ルミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファン ベ
ンジルエステル２５４ｍｇ（０．５ミリモル）を乾燥塩
化メチレン１０ｍｌに溶解し、氷浴上で撹拌した。そこ
にＷＳＣ・ＨＣｌ１０６ｍｇ（０．５５ミリモル）を加
え、室温で一晩撹拌した。溶媒を減圧留去し、残渣を酢
酸エチルに溶解した。これを水、１０％クエン酸、水、
飽和重曹水、水、飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去した後、シリ
カゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム）で精
製し、標題化合物を淡黄色結晶として２６５ｍｇ（収
率：７２．２％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−d6）δ；0.6-0.7(6H,m), 1.1-
1.2(3H,m), 2.8-3.3(4H,m), 3.1-3.3(4H,m),3.4-3.5(4
H,m), 3.9-4.7(3H,m), 4.9-5.0(2H,m), 6.4-8.5(15H,
m),10.85(1H,s) FAB MS(m/z);735(M+1)[0097] (1) N- [N- [N- ( morpholinocarbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-Synthesis moles of tryptophan benzyl ester morpholinocarbonyl leucine 122 mg (0.5 mmol ) And 254 mg (0.5 mmol) of N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester obtained in (6) of Example 1 above were dissolved in 10 ml of dry methylene chloride and stirred on an ice bath. .. 106 mg (0.55 mmol) of WSC.HCl was added thereto, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The solvent was distilled off under reduced pressure, and the residue was dissolved in ethyl acetate. This is water, 10% citric acid, water,
The extract was washed successively with saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. After evaporating the solvent under reduced pressure, the residue was purified by silica gel column chromatography (chloroform) to obtain 265 mg (yield: 72.2%) of the title compound as pale yellow crystals. 1 H NMR (DMSO- d6 ) δ; 0.6-0.7 (6H, m), 1.1-
1.2 (3H, m), 2.8-3.3 (4H, m), 3.1-3.3 (4H, m), 3.4-3.5 (4
H, m), 3.9-4.7 (3H, m), 4.9-5.0 (2H, m), 6.4-8.5 (15H,
m), 10.85 (1H, s) FAB MS (m / z); 735 (M + 1)
【００９８】（２） Ｎ−［Ｎ−［Ｎ−（モルホリノカ
ルボニル）−Ｌ−ロシシル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−ト
リプトフィル］−Ｄ−トリプトファン ナトリウム塩の
合成 上記（１）で得られたＮ−［Ｎ−［Ｎ−（モルホリノカ
ルボニル）−Ｌ−ロイシル］−Ｎin−ホルミル−Ｄ−ト
リプトフィル］−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステ
ル１５０ｍｇ（０．２０ミリモル）にメタノール１０ｍ
ｌと水５ｍｌを加え懸濁状態で撹拌した。これに、１０
％Ｐｄ−Ｃ１７ｍｇとＮａＨＣＯ3 １７ｍｇを加え、水
素雰囲気下室温で一晩撹拌した。触媒を濾去し、メタノ
ールと水の混合液で洗浄した。濾液と洗浄液を合わせて
減圧留去し、残渣を凍結乾燥することにより、標題化合
物を淡黄色アモルファスとして１３３ｍｇ（定量的）得
た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤ3 ＯＤ） δ；0.7-0.8(6H,m), 0.9-
1.3(3H,m), 2.8-3.3(4H,m), 3.3-3.6(8H,m),4.1-4.8(3
H,m), 6.9-9.0(11H,m) FAB MS(m/z);667(M+1)[0098] (2) N- [N- [N- ( morpholinocarbonyl) -L- Roshishiru] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-N obtained in the above tryptophan sodium salt (1) - [N- [N- (morpholinocarbonyl) -L- leucyl] -N in - formyl-D-tryptophyl]-D-tryptophan benzyl ester 150 mg (0.20 mmol) in methanol 10m
1 and 5 ml of water were added, and the mixture was stirred in a suspended state. To this
% Pd-C 17 mg and NaHCO 3 17 mg were added, and the mixture was stirred overnight at room temperature under a hydrogen atmosphere. The catalyst was filtered off and washed with a mixture of methanol and water. The filtrate and the washing solution were combined and evaporated under reduced pressure, and the residue was freeze-dried to obtain 133 mg (quantitative) of the title compound as a pale yellow amorphous substance. 1 H NMR (CD 3 OD) δ; 0.7-0.8 (6H, m), 0.9-
1.3 (3H, m), 2.8-3.3 (4H, m), 3.3-3.6 (8H, m), 4.1-4.8 (3
H, m), 6.9-9.0 (11H, m) FAB MS (m / z); 667 (M + 1)
【００９９】［実施例５］ ４−エチル−２，３−ジオキソピペラジン−１−カルボ
ニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホルミル−Ｄ−トリプトフ
ィル−Ｄ−トリプトファンの合成Example 5 Synthesis of 4-ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucyl-N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan
【０１００】（１） ４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシン ベンジルエ
ステルの合成 Ｌ−ロイシン ベンジルエステル・ｐ−トルエンスルホ
ン酸１．５７４ｇ（４．０ミリモル）を乾燥塩化メチレ
ン２０ｍｌに溶解し、これにトリエチルアミン１．１２
ｍｌ、及び４−エチル−２，３−ジオキソピペラジンカ
ルボニルクロライド０．９５６ｇ（純度８０％、４．０
ミリモル）を加えた。室温で２時間撹拌した後、有機層
を１０％クエン酸、水、飽和重曹水、水、飽和食塩水で
洗浄した。次いで、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後溶
媒を留去し、標題化合物を黄色油状物として、１．６４
６ｇ（定量的）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3) δ；0.9-1.0(6H,m), 1.22
(3H,t,J=7Hz), 1.6-1.8(3H,m), 3.5-3.7(4H,m),4.0-4.2
(2H,m), 4.5-4.6(1H,m), 5.18(2H,s), 7.35(5H,s),9.25
(1H,d,J=7Hz)(1) Synthesis of 4-ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucine benzyl ester L-leucine benzyl ester.1.574 g (4.0 mmol) of p-toluenesulfonic acid was added. Dissolve in 20 ml of dry methylene chloride and add triethylamine 1.12 to it.
ml and 4-ethyl-2,3-dioxopiperazinecarbonyl chloride 0.956 g (purity 80%, 4.0
Mmol) was added. After stirring at room temperature for 2 hours, the organic layer was washed with 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water, and saturated saline. Then, the organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate and the solvent was distilled off to give the title compound as a yellow oily substance (1.64).
6 g (quantitative) was obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.9-1.0 (6H, m), 1.22
(3H, t, J = 7Hz), 1.6-1.8 (3H, m), 3.5-3.7 (4H, m), 4.0-4.2
(2H, m), 4.5-4.6 (1H, m), 5.18 (2H, s), 7.35 (5H, s), 9.25
(1H, d, J = 7Hz)
【０１０１】（２） ４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシンの合成 上記（１）で得られた４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシン ベンジルエ
ステル１．５３ｇ（３．９ミリモル）をエタノール２０
ｍｌ及び水１０ｍｌに溶解し、これに１０％Ｐｄ−Ｃ１
６０ｍｇを加えた。水素雰囲気下、室温で３時間半撹拌
した後、触媒を濾過、溶媒を留去することにより、標題
化合物を白色粉末として１．２０８ｇ（定量的）得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ；0.9-1.0(6H,m), 1.23
(3H,t,J=7Hz), 1.6-1.8(3H,m), 3.5-3.7(4H,m),4.0-4.2
(2H,m), 4.5-4.6(1H,m), 9.23(1H,d,J=7Hz)(2) Synthesis of 4-ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucine 4-ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl obtained in the above (1) 1.53 g (3.9 mmol) of L-leucine benzyl ester was added to 20 parts of ethanol.
ml and 10 ml of water, 10% Pd-C1
60 mg was added. After stirring for 3 hours and a half at room temperature under a hydrogen atmosphere, the catalyst was filtered off and the solvent was distilled off to obtain 1.208 g (quantitative) of the title compound as a white powder. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.9-1.0 (6H, m), 1.23
(3H, t, J = 7Hz), 1.6-1.8 (3H, m), 3.5-3.7 (4H, m), 4.0-4.2
(2H, m), 4.5-4.6 (1H, m), 9.23 (1H, d, J = 7Hz)
【０１０２】（３） ４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホル
ミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファン ベン
ジルエステルの合成 前記実施例１の（６）で得られたＮin−ホルミル−Ｄ−
トリプトフィル−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステ
ル２５８ｍｇ（０．５１ミリモル）を塩化メチレン８ｍ
ｌに溶解し、これに上記（２）で得られた４−エチル−
２，３−ジオキソピペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロ
イシン１５２ｍｇ（０．５１ミリモル）、及びＷＳＣ・
ＨＣｌ１０７ｍｇ（０．５６ミリモル）を加え、室温で
一晩撹拌した。有機層を１０％クエン酸、水、飽和重曹
水、水、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィーで精製し、標題化合物を白色アモルフ
ァスとして１７０ｍｇ（収率：４２．４％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−d6）δ；0.6-0.7(6H,m), 1.
0-1.2(6H,m), 3.0-3.8(10H,m), 4.5-4.8(3H,m),4.9-5.1
(2H,m), 7.0-9.1(18H,m), 10.86(1H,s)(3) Synthesis of 4-ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucyl-N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester (6) of the above Example 1 N in -formyl-D-obtained in
258 mg (0.51 mmol) of tryptophyll-D-tryptophan benzyl ester was added to methylene chloride (8 m).
4-ethyl-obtained in (2) above.
152 mg (0.51 mmol) of 2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucine, and WSC.
HCl (107 mg, 0.56 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The organic layer was washed with 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate, water and saturated brine, and dried over anhydrous sodium sulfate. The solvent was distilled off, and the residue was purified by silica gel column chromatography to give the title compound as a white amorphous substance (170 mg, yield: 42.4%). 1 H NMR (DMSO- d6 ) δ; 0.6-0.7 (6H, m), 1.
0-1.2 (6H, m), 3.0-3.8 (10H, m), 4.5-4.8 (3H, m), 4.9-5.1
(2H, m), 7.0-9.1 (18H, m), 10.86 (1H, s)
【０１０３】（４） ４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホル
ミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファンの合成 上記（３）で得られた４−エチル−２，３−ジオキソピ
ペラジン−１−カルボニル−Ｌ−ロイシル−Ｎin−ホル
ミル−Ｄ−トリプトフィル−Ｄ−トリプトファン ベン
ジルエステル４８ｍｇ（０．０６ミリモル）をテトラヒ
ドロフラン３ｍｌに溶解し、これに１０％Ｐｄ−Ｃ５ｍ
ｇを加え、水素雰囲気下、室温で一晩撹拌した。触媒を
濾過、溶媒を留去することにより、標題化合物を白色結
晶性粉末として３９ｍｇ（収率：９１．７％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ＋ＣＤ3 ＯＤ） δ；0.7-
0.8(6H,m), 1.1-1.2(3H,m), 1.4-1.7(3H,m), 3.0-3.8(1
0H,m),4.1-4.2(1H,m), 4.7-4.9(2H,m), 6.7-7.7(13H,
m), 8.8-9.3(2H,m)(4) Synthesis of 4-Ethyl-2,3-dioxopiperazine-1-carbonyl-L-leucyl-N in -formyl-D-tryptophyll-D-tryptophan The 4-obtained in (3) above ethyl-2,3-dioxo-1-carbonyl -L- leucyl -N in - formyl -D- tryptophyl -D- tryptophan benzyl ester 48mg (0.06 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran 3 ml, which in 10% Pd-C5m
g, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere at room temperature overnight. The catalyst was filtered off and the solvent was distilled off to obtain 39 mg (yield: 91.7%) of the title compound as a white crystalline powder. 1 H NMR (CDCl 3 + CD 3 OD) δ; 0.7-
0.8 (6H, m), 1.1-1.2 (3H, m), 1.4-1.7 (3H, m), 3.0-3.8 (1
0H, m), 4.1-4.2 (1H, m), 4.7-4.9 (2H, m), 6.7-7.7 (13H,
m), 8.8-9.3 (2H, m)
【０１０４】［実施例６］ Ｎ−［（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキサメチレンイミノカル
ボニル−Ｌ−ロイシル）−１，２，３，４−テトラヒド
ロ−β−カルボリン−３−カルボニル］−Ｄ−トリプト
ファン ナトリウム塩の合成Example 6 N-[(3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carbonyl] -D -Synthesis of tryptophan sodium salt
【０１０５】（１） （３Ｒ）−１，２，３，４−テト
ラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン酸 ベンジル
エステル塩酸塩の合成 Ｄ−トリプトファン ベンジルエステル塩酸塩１３２２
ｍｇ（４．０ミリモル）をエタノール１５ｍｌに溶解
し、３５％ホルマリン３７８ｍｇ（４．０ミリモル）を
加え、室温で一晩攪拌した。析出した結晶を濾取し、エ
タノールで洗浄した後、減圧下、乾燥することにより、
標題化合物を白色結晶性粉末として、１．１１７ｇ（収
率：８１．５％）得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−d6 ) δ；3.0-3.1(2H,m),
4.41(2H,s), 4.69-4.73(1H,m), 7.0-7.5(9H,m),10.2(2
H,br s), 11.15(1H,s)(1) Synthesis of (3R) -1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid benzyl ester hydrochloride D-tryptophan benzyl ester hydrochloride 1322
mg (4.0 mmol) was dissolved in 15 ml of ethanol, 378 mg (4.0 mmol) of 35% formalin was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The precipitated crystals are collected by filtration, washed with ethanol, and then dried under reduced pressure,
1.117 g (yield: 81.5%) of the title compound was obtained as a white crystalline powder. 1 H NMR (DMSO- d6 ) δ; 3.0-3.1 (2H, m),
4.41 (2H, s), 4.69-4.73 (1H, m), 7.0-7.5 (9H, m), 10.2 (2
H, br s), 11.15 (1H, s)
【０１０６】（２） （３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキサメチ
レンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，２，３，
４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン酸
ベンジルエステルの合成 上記（１）で得られた（３Ｒ）−１，２，３，４−テト
ラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン酸 ベンジル
エステル塩酸塩２０６ｍｇ（０．６ミリモル）を乾燥塩
化メチレン２０ｍｌに溶解し、これに、Ｎ−ヘキサメチ
レンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシン１５４ｍｇ（０．
６ミリモル）、トリエチルアミン０．３４ｍｌ、及びＨ
ＯＢｔ一水和物３６８ｍｇを加え、氷浴上で１５分間攪
拌した。この溶液に、更にＷＳＣ・ＨＣｌ５０４ｍｇを
加え、室温で一晩攪拌した。溶液を水洗、濃縮後、酢酸
エチルに溶解した。有機層を１０％クエン酸、水、飽和
重曹水、水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムを加
えて乾燥した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラム
クロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール＝５０
／１）で精製することにより、標題化合物を白色アモル
ファスとして２６６ｍｇ（収率：８１．４％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3 ） δ；0.8-1.0(6H,m), 1.4-
1.6(11H,m), 3.0-3.5(6H,m), 4.5-5.8(6H,m),7.0-9.3(1
1H,m) FAB MS(m/z);545(M+1)(2) (3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,2,3,3
4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid
Synthesis of benzyl ester (3R) -1,2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid obtained in (1) above 206 mg (0.6 mmol) of benzyl ester hydrochloride was dried with 20 ml of methylene chloride. And dissolved in 154 mg of N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucine (0.
6 mmol), triethylamine 0.34 ml, and H
368 mg of OBt monohydrate was added, and the mixture was stirred on the ice bath for 15 minutes. To this solution, 504 mg of WSC.HCl was further added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. The solution was washed with water, concentrated, and then dissolved in ethyl acetate. The organic layer was washed successively with 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and water, and anhydrous sodium sulfate was added to dry the layer. The solvent was distilled off, and the residue was subjected to silica gel column chromatography (chloroform / methanol = 50).
/ 1) to obtain 266 mg (yield: 81.4%) of the title compound as a white amorphous substance. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.8-1.0 (6H, m), 1.4-
1.6 (11H, m), 3.0-3.5 (6H, m), 4.5-5.8 (6H, m), 7.0-9.3 (1
1H, m) FAB MS (m / z); 545 (M + 1)
【０１０７】（３） （３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキサメチ
レンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，２，３，
４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン酸の
合成上記（２）で得られた（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキサ
メチレンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，２，
３，４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン
酸 ベンジルエステル２６６ｍｇ（０．４９ミリモル）
をメタノール１０ｍｌに溶解し、これに、１０％Ｐｄ−
Ｃ２０ｍｇを加え、水素雰囲気下、室温で３時間撹拌し
た。触媒を除去し、濾液を減圧留去することにより、標
題化合物２１５ｍｇ（収率：９６．６％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ）δ；0.8-1.0(6H,m), 1.2-
1.7(11H,m), 2.9-3.5(6H,m), 4.4-4.6(2H,m),5.0-5.8(5
H,m), 7.0-9.1(5H,m)(3) (3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,2,3,3
Synthesis of 4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid (3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,2, obtained in (2) above.
3,4-Tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid benzyl ester 266 mg (0.49 mmol)
Was dissolved in 10 ml of methanol, and 10% Pd-
C20 mg was added, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere at room temperature for 3 hours. The catalyst was removed, and the filtrate was evaporated under reduced pressure to give the title compound (215 mg, yield: 96.6%). 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.8-1.0 (6H, m), 1.2-
1.7 (11H, m), 2.9-3.5 (6H, m), 4.4-4.6 (2H, m), 5.0-5.8 (5
H, m), 7.0-9.1 (5H, m)
【０１０８】（４） Ｎ−［（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキ
サメチレンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，
２，３，４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カル
ボニル］−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステルの合
成 上記（３）で得られた（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキサメチ
レンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，２，３，
４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カルボン酸２
１５ｍｇ（０．４７ミリモル）を乾燥塩化メチレン２０
ｍｌに溶解し、これに、Ｄ−トリプトファン ベンジル
エステル・塩酸塩１５５ｍｇ（０．４７ミリモル）、ト
リエチルアミン０．２７ｍｌ、及びＨＯＢｔ一水和物２
８８ｍｇ（０．５２ミリモル）を加え、氷浴上で１５分
間攪拌した。この溶液に、更にＷＳＣ・ＨＣｌ３９５ｍ
ｇ（０．５２ミリモル）を加え、室温で一晩攪拌した。
溶液を水洗、濃縮後、残渣を酢酸エチルに溶解した。有
機層を１０％クエン酸、水、飽和重曹水、水で順次洗浄
した後、無水硫酸ナトリウムを加えて乾燥した。溶媒を
留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
（クロロホルム／メタノール＝５０／１）で精製するこ
とにより、標題化合物を２２７ｍｇ（収率：６６．２
％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＣＤＣｌ3 ） δ；0.9-1.0(6H,m), 1.
4-1.7(11H,m), 2.7-2.8(1H,m), 3.2-3.3(6H,m),3.64(1
H,d,J=15Hz), 4.16(1H,d,J=5Hz), 4.34(1H,d,J=5Hz),4.
6-4.8(2H,m), 5.0-5.2(3H,m), 5.82(1H,d,J=4Hz), 6.38
(1H,s),6.9-7.6(14H,m), 7.69(1H,d,J=8Hz), 8.65(1H,
s),(4) N-[(3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,
Synthesis of 2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carbonyl] -D-tryptophan benzyl ester (3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) obtained in (3) above. -1, 2, 3,
4-Tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid 2
15 mg (0.47 mmol) of dry methylene chloride 20
It was dissolved in ml, and 155 mg (0.47 mmol) of D-tryptophan benzyl ester / hydrochloride, 0.27 ml of triethylamine, and HOBt monohydrate 2
88 mg (0.52 mmol) was added, and the mixture was stirred on the ice bath for 15 minutes. To this solution, WSC / HCl 395m
g (0.52 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight.
The solution was washed with water and concentrated, and the residue was dissolved in ethyl acetate. The organic layer was washed successively with 10% citric acid, water, saturated aqueous sodium hydrogen carbonate and water, and anhydrous sodium sulfate was added to dry the layer. The solvent was distilled off, and the residue was purified by silica gel column chromatography (chloroform / methanol = 50/1) to give 227 mg of the title compound (yield: 66.2).
%) Obtained. 1 H NMR (CDCl 3 ) δ; 0.9-1.0 (6H, m), 1.
4-1.7 (11H, m), 2.7-2.8 (1H, m), 3.2-3.3 (6H, m), 3.64 (1
H, d, J = 15Hz), 4.16 (1H, d, J = 5Hz), 4.34 (1H, d, J = 5Hz), 4.
6-4.8 (2H, m), 5.0-5.2 (3H, m), 5.82 (1H, d, J = 4Hz), 6.38
(1H, s), 6.9-7.6 (14H, m), 7.69 (1H, d, J = 8Hz), 8.65 (1H,
s),
【０１０９】（５） Ｎ−［（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキ
サメチレンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，
２，３，４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カル
ボニル］−Ｄ−トリプトファン ナトリウム塩の合成 上記（４）で得られたＮ−［（３Ｒ）−２−（Ｎ−ヘキ
サメチレンイミノカルボニル−Ｌ−ロイシル）−１，
２，３，４−テトラヒドロ−β−カルボリン−３−カル
ボニル］−Ｄ−トリプトファン ベンジルエステル７３
ｍｇ（０．１ミリモル）をメタノール２０ｍｌに溶解
し、これに、水４ｍｌ、重曹８．４ｍｇ（０．１ミリモ
ル）、及び１０％Ｐｄ−Ｃ１０ｍｇを加え、水素雰囲気
下室温で４時間攪拌した。触媒を除去し、濾液を減圧留
去することにより、標題化合物を白色結晶性粉末として
６４ｍｇ（収率：９９％) 得た。1 Ｈ ＮＭＲ （ＤＭＳＯ−d6）δ；0.7-0.9(6H,m), 1.
3-1.7(11H,m), 2.5-3.4(8H,m), 4.1-5.6(5H,m),6.51(1
H,d,J=6Hz), 6.8-7.5(9H,m), 7.93(1H,d,J=6Hz),10.7-1
0.9(2H,m) FAB MS(m/z);663(M+1),685(M+Na)(5) N-[(3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L-leucyl) -1,
Synthesis of 2,3,4-tetrahydro-β-carboline-3-carbonyl] -D-tryptophan sodium salt N-[(3R) -2- (N-hexamethyleneiminocarbonyl-L obtained in (4) above. -Leucyl) -1,
2,3,4-Tetrahydro-β-carboline-3-carbonyl] -D-tryptophan benzyl ester 73
mg (0.1 mmol) was dissolved in 20 ml of methanol, 4 ml of water, 8.4 mg (0.1 mmol) of sodium bicarbonate and 10 mg of 10% Pd-C were added thereto, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere at room temperature for 4 hours. The catalyst was removed, and the filtrate was evaporated under reduced pressure to give the title compound as a white crystalline powder (64 mg, yield: 99%). 1 H NMR (DMSO- d6 ) δ; 0.7-0.9 (6H, m), 1.
3-1.7 (11H, m), 2.5-3.4 (8H, m), 4.1-5.6 (5H, m), 6.51 (1
H, d, J = 6Hz), 6.8-7.5 (9H, m), 7.93 (1H, d, J = 6Hz), 10.7-1
0.9 (2H, m) FAB MS (m / z); 663 (M + 1), 685 (M + Na)
【０１１０】[0110]
【発明の効果】本発明のトリペプチドは、新規なトリペ
プチドであって優れたエンドセリン拮抗作用を有する物
質である。INDUSTRIAL APPLICABILITY The tripeptide of the present invention is a novel tripeptide and a substance having an excellent endothelin antagonism.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＣＵ Ｃ０７Ｋ 1/02 1/06 ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. 5 Identification code Internal reference number FI Technical display area A61K 37/02 ACU C07K 1/02 1/06
Claims (3)
個が、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ1 −（但し、Ｒ1 は水素
原子、−ＣＨＯ基又は炭素数１〜６のアルキル基を表
す）又は−ＣＯ−で示される基で置換されていてもよ
く、又はエチレン基がベンゼン環と縮合していてもよ
い）で示される基を表し、Ｂは、−ＣＯ−、−ＣＳ−又
は−ＳＯ2 −で示される基を表し、Ｄは、−ＮＲ2 −
（但し、Ｒ2 は水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基
を表す）で示される基を表し、又は、Ａ−Ｂ−Ｄ−でフ
タルイミド基を表し、Ｅは、−ＣＨＲ3 −（但し、Ｒ3
は、アリール基又は芳香族複素環基で置換されていても
よい炭素数１〜５のアルキル基、又は硫黄原子含有複素
環基を表す）で示される基を表し、Ｆは、下記式： 【化３】 （式中、Ｒ4 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜６の
アルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基を有するフェ
ニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ5 （式中、Ｒ5 は
炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基を表す）で表される
基である）で示される基を表し、Ｇは、下記式： 【化４】 （式中、Ｒ6 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜６の
アルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基を有するフェ
ニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ8 （式中、Ｒ8 は
炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基を表す）で表される
基であり、Ｒ7 は水素原子、炭素数１〜６のアルキル
基、炭素数１〜４のアルキレン基を有し且つ１〜３個の
フェニル基を有するアラルキル基、炭素数２〜６のアル
コキシアルキル基又は式−（ＣＨ2 )qＯ−Ｒ9 （式中、
ｑは１〜３の整数であり、Ｒ9 は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基である）で示される
基を表し、Ｑは水素原子、アルカリ金属原子、炭素数１
〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキレン基を
有するフェニルアルキル基を表す］で表されるトリペプ
チド。1. A compound represented by the general formula (I): [Wherein A is the following formula (a): (In the formula, m is an integer of 4 to 7 and is 1 to 3 of the methylene group.
Number is, -O -, - S -, - NR 1 - ( where, R 1 represents a hydrogen atom, a -CHO group, or an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms) is substituted by or -CO- in a group represented by Or an ethylene group may be condensed with a benzene ring), B represents a group represented by —CO—, —CS— or —SO 2 —, and D represents , -NR 2-
(However, R 2 represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms), or A-B-D- represents a phthalimido group, and E represents —CHR 3 — (however, , R 3
Represents an aryl group or an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms which may be substituted with an aromatic heterocyclic group, or a sulfur atom-containing heterocyclic group, and F represents the following formula: Chemical 3] (In the formula, R 4 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 5 (wherein, R 5 is Which represents a phenylalkyl group having an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms or an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms), and G is a group represented by the following formula: ] (In the formula, R 6 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 8 (wherein, R 8 is A group represented by a C1-6 alkyl group or a phenylalkyl group having a C1-4 alkylene group), R 7 is a hydrogen atom, a C1-6 alkyl group, or a carbon An aralkyl group having an alkylene group of 1 to 4 and 1 to 3 phenyl groups, an alkoxyalkyl group of 2 to 6 carbon atoms or a formula — (CH 2 ) q O—R 9 (wherein
q is an integer of 1 to 3, R 9 is a group represented by a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, and Q is a hydrogen atom, an alkali metal atom, or 1 carbon atom.
Represents a phenylalkyl group having an alkyl group having 6 to 6 or an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms].
個が、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ1 −（但し、Ｒ1 は水素
原子、−ＣＨＯ基又は炭素数１〜６のアルキル基を表
す）又は−ＣＯ−で示される基で置換されていてもよ
く、又はエチレン基がベンゼン環と縮合していてもよ
い）で示される基を表し、Ｂは、−ＣＯ−、−ＣＳ−又
は−ＳＯ2 −で示される基を表し、Ｄは、−ＮＲ2 −
（但し、Ｒ2 は水素原子又は炭素数１〜６のアルキル基
を表す）で示される基を表し、又は、Ａ−Ｂ−Ｄ−でフ
タルイミド基を表し、Ｅは、−ＣＨＲ3 −（但し、Ｒ3
は、アリール基又は芳香族複素環基で置換されていても
よい炭素数１〜５のアルキル基、又は硫黄原子含有複素
環基を表す）で示される基を表し、Ｆは、下記式： 【化７】 （式中、Ｒ4 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜６の
アルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基を有するフェ
ニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ5 （式中、Ｒ5 は
炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基を表す）で表される
基である）で示される基を表し、Ｇは、下記式： 【化８】 （式中、Ｒ6 は水素原子、−ＣＨＯ基、炭素数１〜６の
アルキル基、炭素数１〜４のアルキレン基を有するフェ
ニルアルキル基、又は、式−ＣＯＯＲ8 （式中、Ｒ8 は
炭素数１〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基を表す）で表される
基であり、Ｒ7 は水素原子、炭素数１〜６のアルキル
基、炭素数１〜４のアルキレン基を有し且つ１〜３個の
フェニル基を有するアラルキル基、炭素数２〜６のアル
コキシアルキル基又は式−（ＣＨ2 )qＯ−Ｒ9 （式中、
ｑは１〜３の整数であり、Ｒ9 は炭素数１〜４のアルキ
レン基を有するフェニルアルキル基である）で示される
基を表し、Ｑは水素原子、アルカリ金属原子、炭素数１
〜６のアルキル基、又は炭素数１〜４のアルキレン基を
有するフェニルアルキル基を表す］で表されるトリペプ
チドを製造する方法であって、それぞれ保護基を有して
いてもよいフラグメントであるＡ−Ｂ−Ｚ（但し、Ｚは
ヒドロキシル基又はハロゲン原子である）、Ｈ−Ｄ−Ｅ
−ＣＯＯＨ、Ｈ−Ｆ−ＯＨ及びＨ−Ｇ−ＯＱ（これらの
フラグメントはその反応性誘導体であってもよい）を、
一般式（Ｉ）で表されるトリペプチドになるように任意
の順序で縮合させるか、或は上記の四種のフラグメント
の二種又は三種を任意の組み合わせで予め縮合して得た
化合物と、残りのフラグメントの二種（予め縮合してお
いてもよい）又は一種とを縮合させ、所望により保護基
を脱離させることからなる製造方法。2. General formula (I): [Wherein A is the following formula (a): (In the formula, m is an integer of 4 to 7 and is 1 to 3 of the methylene group.
Number is, -O -, - S -, - NR 1 - ( where, R 1 represents a hydrogen atom, a -CHO group, or an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms) is substituted by or -CO- in a group represented by Or an ethylene group may be condensed with a benzene ring), B represents a group represented by —CO—, —CS— or —SO 2 —, and D represents , -NR 2-
(However, R 2 represents a hydrogen atom or an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms), or A-B-D- represents a phthalimido group, and E represents —CHR 3 — (however, , R 3
Represents an aryl group or an alkyl group having 1 to 5 carbon atoms which may be substituted with an aromatic heterocyclic group, or a sulfur atom-containing heterocyclic group, and F represents the following formula: Chemical 7] (In the formula, R 4 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 5 (wherein, R 5 is Represents a phenylalkyl group having a C1-6 alkyl group or a C1-4 alkylene group), and G is a group represented by the following formula: ] (In the formula, R 6 is a hydrogen atom, a —CHO group, an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, or a formula —COOR 8 (wherein, R 8 is A group represented by a C1-6 alkyl group or a phenylalkyl group having a C1-4 alkylene group), R 7 is a hydrogen atom, a C1-6 alkyl group, or a carbon An aralkyl group having an alkylene group of 1 to 4 and 1 to 3 phenyl groups, an alkoxyalkyl group of 2 to 6 carbon atoms or a formula — (CH 2 ) q O—R 9 (wherein
q is an integer of 1 to 3, R 9 is a group represented by a phenylalkyl group having an alkylene group having 1 to 4 carbon atoms, and Q is a hydrogen atom, an alkali metal atom, or 1 carbon atom.
Represents a phenylalkyl group having an alkyl group having from 6 to 6 or an alkylene group having from 1 to 4 carbon atoms], and is a fragment which may have a protecting group. A-B-Z (provided that Z is a hydroxyl group or a halogen atom), H-D-E
-COOH, H-F-OH and H-G-OQ (these fragments may be their reactive derivatives),
A compound obtained by condensing in any order so as to obtain the tripeptide represented by the general formula (I), or a compound obtained by pre-condensing two or three kinds of the above-mentioned four kinds of fragments in any combination; A production method comprising condensing two kinds (which may be condensed in advance) or one kind of the remaining fragments and removing a protecting group if desired.
分として含有することを特徴とするエンドセリン拮抗
剤。3. An endothelin antagonist comprising the tripeptide according to claim 1 as an active ingredient.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4162203A JPH05331187A (en) | 1992-05-28 | 1992-05-28 | Tripeptide, its production and endothelin antagonist |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4162203A JPH05331187A (en) | 1992-05-28 | 1992-05-28 | Tripeptide, its production and endothelin antagonist |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05331187A true JPH05331187A (en) | 1993-12-14 |
Family
ID=15749939
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4162203A Withdrawn JPH05331187A (en) | 1992-05-28 | 1992-05-28 | Tripeptide, its production and endothelin antagonist |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05331187A (en) |
-
1992
- 1992-05-28 JP JP4162203A patent/JPH05331187A/en not_active Withdrawn
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 19990803 |