JP6364842B2 - Cancer cell capturing device, treatment liquid kit, and method for producing treatment liquid kit - Google Patents

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Description

本発明は、転移がんの検査又は抗がんの評価に用いるために血液中に侵入したがん細胞をフィルタにより捕捉するためのがん細胞捕捉装置、それに用いる処理液キット及び処理液キットの製造方法に関する。   The present invention relates to a cancer cell capturing apparatus for capturing cancer cells that have entered the blood with a filter for use in testing for metastatic cancer or anticancer evaluation, and a treatment liquid kit and a treatment liquid kit used therefor It relates to a manufacturing method.

「悪性腫瘍」とも呼ばれるがんは進行した場合生体の生命維持に重大な支障をきたすため、治療方法について種々検討されている。がん患者の治療方針を決める際の目安になるものとして、がんの転移の有無がある。転移はがん細胞が血管中に侵入し、血液に乗って体中に広がって他の臓器にがん細胞が移り住むことによる。したがって、血中のがん細胞の有無及びその量の測定は、がんの転移予測をするに際して重要な情報となる。   Cancers, also called “malignant tumors”, have seriously hindered the life support of living organisms when they progress, and various treatment methods have been studied. There is the presence or absence of cancer metastasis as a guideline when deciding the treatment policy for cancer patients. Metastasis is caused by cancer cells invading blood vessels, riding on blood, spreading throughout the body, and cancer cells moving to other organs. Therefore, the measurement of the presence and amount of cancer cells in the blood is important information for predicting cancer metastasis.

転移を引き起こす血液中のがん細胞を捕える従来技術としては、例えば、特許文献1に示すように、血液中のがん細胞をフィルタで捕獲する方法が知られている。特許文献1では、リソグラフィ技術を用いたフィルタの製造方法と、フィルタを収納したセルユニットの形状と、血液及び処理液を流す流路の構造とが示されている。特許文献1記載の方法によれば、フィルタを収納したセルユニットにがん細胞を含んだ血液を流すことでフィルタを通過しない細胞がフィルタ上で回収される。そして、フィルタ上に存在する細胞は染色によりがん細胞と同定される。
また、特許文献2には、種々の試薬チャージにおいても柔軟な取り扱いを可能にする試薬取り扱い手段を見出すことを目的として、複数の試薬容器が一体に成形された連結装置によって直接互いに結合されていることによって形成されているモジュラー式試薬カートリッジが開示されている。
As a conventional technique for capturing cancer cells in blood that causes metastasis, for example, as shown in Patent Document 1, a method of capturing cancer cells in blood with a filter is known. Patent Document 1 discloses a method for manufacturing a filter using a lithography technique, the shape of a cell unit that houses the filter, and the structure of a flow path for flowing blood and processing liquid. According to the method described in Patent Document 1, cells that do not pass through the filter are collected on the filter by flowing blood containing cancer cells through the cell unit containing the filter. The cells present on the filter are identified as cancer cells by staining.
In Patent Document 2, a plurality of reagent containers are directly connected to each other by a integrally formed connecting device for the purpose of finding a reagent handling means that allows flexible handling even in various reagent charges. A modular reagent cartridge is disclosed.

米国特許公開第2011/0053152号明細書US Patent Publication No. 2011/0053152 特表平11−515106号公報Japanese National Patent Publication No. 11-515106

フィルタによって捕捉したがん細胞を評価するためには、がん細胞と同程度の大きさを有し、がん細胞と一緒にフィルタ上に残っている白血球をがん細胞と共に染色して顕微鏡観察を行い、がん細胞と白血球を見分ける必要がある。フィルタによってがん細胞を捕捉し染色するプロセスでは、複数種類の処理液を用いて各種の処理が行われる。複数種類の処理液を用いた処理の一例としては、以下の処理が挙げられる。すなわち、最初に流路全体を洗浄液で洗浄する第1の洗浄処理、続いて被検液をフィルタに通してがん細胞を捕捉する捕捉処理、続いて洗浄液でフィルタを洗浄する第2の洗浄処理、続いて固定液を用いてがん細胞を腐敗等から保護する固定化処理、続いて固定液を洗い流す第3の洗浄処理、続いてフィルタ上に捕捉されたがん細胞内部に染色液が浸透できるよう透過液を用いてがん細胞の細胞膜を溶解する透過処理、続いて透過液を洗い流す第4の洗浄処理、続いて染色液を用いてフィルタ上に捕捉されたがん細胞を染色する染色処理、染色液を洗い流す第5の洗浄処理である。これらの処理が行われた後に、顕微鏡による観察が行われる。   To evaluate the cancer cells captured by the filter, the white blood cells that have the same size as the cancer cells and remain on the filter together with the cancer cells are stained with the cancer cells and observed under a microscope. To distinguish between cancer cells and white blood cells. In the process of capturing and staining cancer cells with a filter, various types of processing are performed using a plurality of types of processing solutions. The following process is mentioned as an example of the process using several types of process liquid. That is, a first cleaning process for first cleaning the entire flow path with a cleaning liquid, followed by a capturing process for capturing the cancer cells by passing the test liquid through the filter, and a second cleaning process for subsequently cleaning the filter with the cleaning liquid Subsequently, an immobilization treatment that protects cancer cells from spoilage using a fixing solution, followed by a third washing treatment for washing out the fixing solution, followed by penetration of the staining solution into the cancer cells captured on the filter A permeation treatment that dissolves the cell membrane of cancer cells using a permeation solution, followed by a fourth washing treatment for washing out the permeation solution, followed by staining that stains cancer cells captured on the filter using a staining solution. This is a fifth cleaning process in which the process and the staining solution are washed away. After these processes are performed, observation with a microscope is performed.

このように、がん細胞を観察するためには、それまでに行わなければならない作業が多く、煩雑である。また、上記のように複数処理を行う際に市販の処理液を用いた場合、同じ種類の処理液であってもメーカの違い及び他の処理液との組み合わせ等によってその効果が異なることがある。このため、十分な再現性が得られない可能性がある。   Thus, in order to observe a cancer cell, there are many operations that must be performed so far, which is complicated. In addition, when a commercially available processing solution is used when performing a plurality of treatments as described above, the effect may vary depending on the manufacturer and the combination with other processing solutions, even if the same type of processing solution is used. . For this reason, sufficient reproducibility may not be obtained.

本発明は上記を鑑みてなされたものであり、がん細胞の捕捉に係る作業効率の向上と共に再現性の向上が図られたがん細胞捕捉装置、それに用いる処理液キット及び処理液キットの製造方法を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of the above, and a cancer cell trapping device improved in work efficiency for capturing cancer cells and improved in reproducibility, a treatment liquid kit used therefor, and a production of the treatment liquid kit It aims to provide a method.

上記目的を達成するため、本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、十分に再現性が確認された処理液を各々容器に封入し一体的に連結した処理液キットにすることが再現性の担保及び作業性の向上に非常に有益であることを見出した。さらに、現在のところ染色液は高価であり、室温での長期保存が困難であることに鑑みれば、がん細胞の捕捉に係る数回の検査でほぼ使い切れる量とすることにより、これらの問題をクリアできることを見出した。即ち、本発明に係る処理液キットは、被検液中のがん細胞をフィルタにより捕捉するがん細胞捕捉装置に用いられ、がん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液がそれぞれ封入された複数の処理液容器と、複数の処理液容器を一体的に連結する連結手段と、を備える処理液キットであって、処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、複数の処理液容器に対して封入される前記処理液の封入量は、染色液が他の処理液と同じタイミング又は他の処理液よりも早くになくなるようにそれぞれ設定されることを特徴とする。   In order to achieve the above object, the inventors of the present invention have made reproducibility to make a processing solution kit in which processing solutions whose reproducibility has been sufficiently confirmed are enclosed in a container and integrally connected as a result of intensive studies. It was found to be very useful for improving security and workability. Furthermore, in view of the fact that the staining solution is currently expensive and difficult to store at room temperature for a long period of time, these problems can be solved by making the amount almost useable in several tests related to the capture of cancer cells. I found that I can clear. That is, the treatment liquid kit according to the present invention is used in a cancer cell capturing device that captures cancer cells in a test solution with a filter, and is used for a series of processes for capturing and observing cancer cells. A treatment liquid kit comprising a plurality of treatment liquid containers each enclosing a plurality of kinds of treatment liquids, and a connecting means for integrally connecting the plurality of treatment liquid containers, wherein the treatment liquid stains cancer cells The amount of the processing liquid enclosed in the plurality of processing liquid containers is set so that the staining liquid disappears at the same timing as the other processing liquid or earlier than the other processing liquid. It is characterized by that.

また、上記の処理液キットにおいて、処理液容器に対する染色液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、複数の処理液容器のうち染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定される態様とすることができる。   Further, in the above processing solution kit, the amount of staining solution enclosed in the processing solution container is set based on m times (m is a natural number) the amount of staining solution required for performing a series of processing once. The amount of other processing liquids that are different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers that are different from the processing liquid container in which the staining liquid is enclosed is necessary when performing a series of processes once. It can be set as the aspect set so that it may become m times or more of each process liquid.

また、本発明に係るがん細胞捕捉装置は、被検液が収容された被検液容器と、被検液を通過させることで被検液中のがん細胞を捕捉する貫通孔が主面に設けられたフィルタと、フィルタ上にがん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液がそれぞれ封入された複数の処理液容器と、被検液容器及び複数の処理液容器のそれぞれとフィルタの主面の一方側とを接続する流路と、を備えたがん細胞捕捉装置であって、複数の処理液容器は連結手段により一体的に連結された処理液キットを構成し、処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、複数の処理液容器に対して封入される処理液の封入量は、染色液が他の処理液と同じタイミング又は他の処理液よりも早くになくなるようにそれぞれ設定されることを特徴とする。   Further, the cancer cell capturing device according to the present invention has a test liquid container containing a test liquid and a through-hole that captures cancer cells in the test liquid by passing the test liquid. A plurality of treatment liquid containers each containing a plurality of kinds of treatment liquids used in a series of treatments for capturing and observing cancer cells on the filter, a test liquid container, and a plurality of treatment liquid containers Each of the treatment liquid containers and a flow path that connects one side of the main surface of the filter, wherein the plurality of treatment liquid containers are integrally connected by a connecting means. The treatment liquid contains a staining liquid that stains cancer cells, and the amount of treatment liquid enclosed in a plurality of treatment liquid containers is equal to the timing at which the staining liquid is the same as other treatment liquids or It is set so that it disappears earlier than other processing liquids. To.

また、上記のがん細胞捕捉装置において、処理液容器に対する染色液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、複数の処理液容器のうち染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定されることを特徴とする。     Further, in the above-described cancer cell capturing apparatus, the amount of staining liquid enclosed in the processing liquid container is set based on m times (m is a natural number) the amount of staining liquid necessary for performing a series of processes once. The amount of the other processing liquid different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers different from the processing liquid container in which the staining liquid is enclosed among the plurality of processing liquid containers is determined when performing a series of processes once. It is set so that it may become m times or more of each process liquid required for this.

上記の処理液キット及びがん細胞捕捉装置によれば、がん細胞をフィルタ上に捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数の処理液が封入された処理液容器が連結手段により一体的に連結され、処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、複数の処理液容器に対して封入される処理液の封入量は、染色液が他の処理液と同じタイミング又は他の処理液よりも早くになくなるようにそれぞれ設定されることによって、処理液の交換のタイミングを最小限に抑えることができるので、作業性が向上する。複数の処理液容器に対して封入される各処理液は、なるべく同じタイミングで全量使用されることが好ましいが、染色液以外の処理液は、染色液に比べ比較的廉価なので、染色液がなくなるときに多少残っていてもよい。この場合には、残っている処理液は使わずに新しい処理液キットに交換することで、作業性を向上させることができる。   According to the treatment liquid kit and the cancer cell capture device, the treatment liquid container in which a plurality of treatment liquids used for a series of treatments for capturing and observing cancer cells on a filter is enclosed by the connecting means. The treatment liquid includes a staining liquid that stains cancer cells, and the amount of the processing liquid enclosed in the plurality of processing liquid containers is the same as the timing at which the staining liquid is the same as other processing liquids or By setting each so as to disappear earlier than the other processing liquids, the timing of replacement of the processing liquid can be minimized, so that workability is improved. It is preferable to use all the processing liquids sealed in a plurality of processing liquid containers at the same timing as much as possible. However, since the processing liquids other than the staining liquid are relatively inexpensive compared to the staining liquid, the staining liquid is eliminated. Sometimes some may remain. In this case, workability can be improved by replacing the remaining processing solution with a new processing solution kit without using it.

また、上記の処理液キット及びがん細胞捕捉装置において、処理液容器に対する染色液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、処理液容器に対する他の処理液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定されることによって、各処理液を個別に準備する場合と比較して、染色液を含む各処理液の交換を一括して行えるので、作業効率が向上する。さらに、一連の処理に用いられる処理液を処理液キットとして揃えてがん細胞の捕捉及び観察に繰り返し使用することで、がん細胞の捕捉及び観察における再現性を向上させることができる。また、がん細胞の捕捉及び観察に用いられる処理液をキット化することによって各処理液のロット差を極力なくして再現性を向上することができる。   In the treatment liquid kit and the cancer cell capturing apparatus, the amount of the staining liquid enclosed in the treatment liquid container is m times (m is a natural number) the amount of the staining liquid necessary for performing a series of treatments once. The amount of the other treatment liquid enclosed in the treatment liquid container is set to be m times or more of each treatment liquid required when performing a series of treatments once. Compared with the case of preparing individually, each processing solution including the staining solution can be exchanged at once, so that the work efficiency is improved. Furthermore, reproducibility in capturing and observing cancer cells can be improved by arranging treatment liquids used for a series of treatments as a treatment liquid kit and repeatedly using them for capturing and observing cancer cells. In addition, by preparing a treatment solution used for capturing and observing cancer cells as a kit, reproducibility can be improved by minimizing the lot difference between treatment solutions.

ここで、「一連の処理」とは、処理液キットをがん細胞捕捉装置にセットしてから一被検液をフィルタに通液してフィルタ上に捕捉したがん細胞等を観察するまでの間に行われる1ルーチン分の処理のことである。具体的には、最初に流路全体を洗浄液で洗浄する第1の洗浄処理、続いて被検液をフィルタに通してがん細胞を捕捉する捕捉処理、続いて洗浄液でフィルタを洗浄する第2の洗浄処理、続いて固定液を用いてがん細胞を腐敗等から保護する固定化処理、続いて固定液を洗い流す第3の洗浄処理、続いてフィルタ上に捕捉されたがん細胞内部に染色液が浸透できるよう透過液を用いてがん細胞の細胞膜を溶解する透過処理、続いて透過液を洗い流す第4の洗浄処理、続いて染色液を用いてフィルタ上に捕捉されたがん細胞を染色する染色処理、染色液を洗い流す第5の洗浄処理までが挙げられる。   Here, “a series of treatments” refers to the period from setting the treatment solution kit to the cancer cell capture device to observing cancer cells captured on the filter by passing one test solution through the filter. This is a process for one routine performed in the meantime. Specifically, a first cleaning process in which the entire flow path is first cleaned with a cleaning liquid, a capturing process in which a test solution is passed through a filter to capture cancer cells, and a filter is subsequently cleaned with a cleaning liquid. Washing treatment, followed by immobilization treatment that protects cancer cells from spoilage using a fixing solution, followed by a third washing treatment for washing out the fixing solution, followed by staining inside the cancer cells captured on the filter Permeation treatment that dissolves the cell membrane of cancer cells using the permeate so that the liquid can permeate, followed by a fourth washing treatment that rinses the permeate, followed by the cancer cells captured on the filter using the staining solution The dyeing process for dyeing and the fifth washing process for washing away the dyeing solution are included.

「一体的」とは、「一つのものとして取扱える程度に」という意味である。また、「一連の処理を行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定する」とは、染色液の量を、1回分の染色液量×m倍+αとすることである。ここで、αを決定する要素としては、(A)m回の処理を終えた後に染色液の処理液容器に残留する処理液量、及び、(B)m回の処理を終えた後に処理液容器から選択バルブに至るまでの流路に残留する処理液量が挙げられる。また、「一連の処理を行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定する」とは、各処理液の量を、1回分の処理液量×m倍+βとすることである。ここで、βを決定する要素としては、上記(A)、(B)に係る処理液量に加えて、(C)非定常作業等によって追加で発生する洗浄作業等に用いられる洗浄液量などが挙げられる。具体的には、(A)に基づく処理液量は、封入量の5体積%程度である。また、(B)に基づく処理液量は、処理液容器から選択バルブまでの流路体積である。処理中、処理液を流路内に滞留させておくことで巻き込みによる気泡の混入を防ぐことができる。また、(C)に基づく洗浄液量は必要量を適宜見積もって充填することができ、例えば5回処理分程度の洗浄液量とすることができる。   “Integral” means “to the extent that it can be handled as one”. In addition, “set based on m times (m is a natural number) of the amount of staining solution necessary for performing a series of treatments” means that the amount of staining solution is a single amount of staining solution × m times + α. It is to be. Here, as factors for determining α, (A) the amount of the processing liquid remaining in the processing liquid container of the staining liquid after finishing m times of processing, and (B) the processing liquid after finishing processing of m times The amount of processing liquid remaining in the flow path from the container to the selection valve can be mentioned. In addition, “setting to be m times or more of each processing solution necessary for performing a series of processing” means that the amount of each processing solution is set to one processing liquid amount × m times + β. is there. Here, as factors determining β, in addition to the amount of processing liquid according to (A) and (B) above, (C) the amount of cleaning liquid used for additional cleaning work caused by unsteady work, etc. Can be mentioned. Specifically, the amount of the treatment liquid based on (A) is about 5% by volume of the enclosed amount. Further, the amount of the processing liquid based on (B) is a flow path volume from the processing liquid container to the selection valve. During processing, the processing liquid is retained in the flow path, thereby preventing bubbles from being mixed due to entrainment. In addition, the amount of the cleaning liquid based on (C) can be appropriately estimated and filled, and for example, the amount of the cleaning liquid can be about 5 treatments.

即ち、染色液の封入量は以下の式(1)によって表すことができる。
染色液の封入量=(1回分の染色液量)×m+(A)に基づく染色液量+(B)に基づく染色液量・・・式(1)
That is, the amount of staining liquid enclosed can be expressed by the following equation (1).
Enclosed amount of staining solution = (amount of staining solution for one time) × m + amount of staining solution based on (A) + amount of staining solution based on (B) Formula (1)

また、他の処理液の封入量は以下の式(2)、(3)によって表すことができる。
固定液又は透過液の封入量=(1回分の処理液量)×m+(A)に基づく処理液量+(B)に基づく処理液量 ・・・式(2)
洗浄液の封入量=(1回分の処理液量)×m+(A)に基づく処理液量+(B)に基づく処理液量+(C)に基づく処理液量 ・・・式(3)
In addition, the amount of other treatment liquid enclosed can be expressed by the following equations (2) and (3).
Enclosed amount of fixative or permeate = (Amount of treatment liquid for one batch) × m + Amount of treatment liquid based on (A) + Amount of treatment liquid based on (B) (2)
Enclosed amount of cleaning liquid = (processing liquid amount for one time) × m + processing liquid volume based on (A) + processing liquid volume based on (B) + processing liquid volume based on (C) Formula (3)

ここで、染色液はがん細胞又は白血球に特有の抗原と反応する抗体に蛍光色素を標識したもので、室温では長時間の保存ができない。したがって、処理液容器に対する染色液の封入量を、一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定することとし、他の処理液容器に対する他の処理液の封入量を一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定することによって、各処理液容器の交換のタイミングを容易に合わせることができ、処理液キットとして交換することによって処理液容器を個々に交換するのではなく、一度に交換できるので、作業効率を著しく向上できる。   Here, the staining solution is obtained by labeling an antibody that reacts with an antigen specific to cancer cells or leukocytes with a fluorescent dye, and cannot be stored at room temperature for a long time. Therefore, the amount of staining solution enclosed in the processing solution container is set based on m times the amount of staining solution required when performing a series of processing once (m is a natural number), By setting the amount of other processing liquids to be m times or more of each processing liquid required when performing a series of processing once, the timing of replacement of each processing liquid container can be easily adjusted. By exchanging the treatment solution as a treatment solution kit, the treatment solution containers can be exchanged at a time rather than individually, so that the working efficiency can be remarkably improved.

ここで、処理液容器の内壁の底部は、上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状であると、処理液容器の内部の処理液の量が少なくなった場合に、底部の中央に溜まるので、封入された処理液をより余すことなく使用することができ、より好ましい。   Here, the bottom of the inner wall of the processing liquid container has a tapered shape in which the cross-sectional area decreases from the top to the bottom, and when the amount of processing liquid inside the processing liquid container decreases, Since it accumulates, the enclosed processing liquid can be used without leaving more, and it is more preferable.

また、処理液容器の内壁の横断面が円形状であると、処理液容器の内部の処理液が内壁に付着して残る可能性を低減できるので、より好ましい。   Further, it is more preferable that the cross section of the inner wall of the processing liquid container is circular, because the possibility that the processing liquid inside the processing liquid container remains attached to the inner wall can be reduced.

また、連結手段は、複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐ蓋部材であると、作業性向上の効果に優れるので、より好ましい。   Further, it is more preferable that the connecting means is a lid member that integrally closes the openings of the plurality of processing liquid containers, since the effect of improving workability is excellent.

また、連結手段は、各処理液容器を個別に脱着可能な連結部材から構成されると、冷蔵保存が必要な染色液の入った処理液容器のみを他の処理液容器と離して使用前に冷蔵保存することができ、作業性に優れるので、より好ましい。   In addition, when the connecting means is constituted by a connecting member that can be detached from each processing solution container, only the processing solution container containing the staining solution that needs to be refrigerated is separated from other processing solution containers before use. It is more preferable because it can be stored in a refrigerator and is excellent in workability.

また、自キットを特定する識別子をさらに備えると、処理液キットの開封後の時間管理及び残量管理が容易となり、より好ましい。   Further, it is more preferable to further include an identifier for identifying the own kit, because it becomes easy to manage the time and the remaining amount after opening the treatment liquid kit.

また、本発明に係る処理液キットの製造方法は、被検液中のがん細胞をフィルタにより捕捉するがん細胞捕捉装置に用いられる処理液キットの製造方法であって、がん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液のための複数の処理液容器を準備する工程と、複数の処理液容器のそれぞれに対して処理液を封入する工程と、複数の処理液容器を連結手段によって一体的に連結する工程と、を有し、処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、複数の処理液容器に対して封入される処理液の封入量は、染色液が他の処理液と同じタイミング又は他の処理液よりも早くになくなるようにそれぞれ設定されることを特徴とする。   The method for producing a treatment liquid kit according to the present invention is a method for producing a treatment liquid kit used in a cancer cell capture device for capturing cancer cells in a test solution with a filter, and captures cancer cells. Preparing a plurality of treatment liquid containers for a plurality of types of treatment liquids used in a series of treatments for observation, enclosing a treatment liquid in each of the plurality of treatment liquid containers, and a plurality of A step of integrally connecting the processing liquid containers by a connecting means, and the processing liquid contains a staining liquid that stains cancer cells and encloses the processing liquid sealed in a plurality of processing liquid containers The amount is set such that the staining liquid is set at the same timing as other processing liquids or earlier than the other processing liquids.

また、上記の処理液キットの製造方法において、処理液容器に対する染色液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、複数の処理液容器のうち染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定されることを特徴とする。     Further, in the above-described method for manufacturing a treatment solution kit, the amount of staining solution enclosed in the treatment solution container is set based on m times (m is a natural number) the amount of staining solution required for performing a series of treatments once. Of the plurality of processing liquid containers, the amount of the other processing liquid different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers different from the processing liquid container in which the staining liquid is enclosed is performed once as a series of processes. It is set so that it may become m times or more of each processing liquid required at the time.

このような製造方法で得られる処理液キットは、各処理液を個別に準備する場合と比較して、染色液を含む各処理液の交換を一括して行えるので、作業効率が向上する。さらに、一連の処理に用いられる処理液を処理液キットとして揃えてがん細胞の捕捉及び観察に繰り返し使用することで、がん細胞の捕捉及び観察における再現性を向上させることができる。   Since the treatment liquid kit obtained by such a manufacturing method can exchange the treatment liquids including the staining liquid in a lump compared with the case where the treatment liquids are individually prepared, the working efficiency is improved. Furthermore, reproducibility in capturing and observing cancer cells can be improved by arranging treatment liquids used for a series of treatments as a treatment liquid kit and repeatedly using them for capturing and observing cancer cells.

ここで、連結手段は、複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐ蓋部材であって、蓋部材によって複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐことで、処理液を封入する工程と、複数の処理液容器を一体的に連結する工程と、を同時に行うことで、処理液の封入と複数の処理液容器の連結とを一度に行うことができ、より少ない工程で処理液キットの製造を行うことができる。   Here, the connecting means is a lid member that integrally closes the openings of the plurality of treatment liquid containers, and the process liquid is sealed by integrally closing the openings of the plurality of treatment liquid containers with the lid member. , By simultaneously performing the step of integrally connecting a plurality of processing liquid containers, it is possible to perform the sealing of the processing liquid and the connection of the plurality of processing liquid containers at a time, and the number of processing liquid kits can be reduced with fewer steps. Manufacturing can be performed.

本発明によれば、がん細胞の捕捉に係る作業効率の向上と共に再現性の向上が図られたがん細胞捕捉装置、それに用いる処理液キット及び処理液キットの製造方法が提供される。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the cancer cell capture apparatus improved in the reproducibility with the improvement of the working efficiency which concerns on the capture | acquisition of a cancer cell, the processing liquid kit used for it, and the manufacturing method of a processing liquid kit are provided.

第1実施形態に係るがん細胞捕捉装置の構成を説明する図である。It is a figure explaining the composition of the cancer cell capture device concerning a 1st embodiment. 図2(A)は第1実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図2(B)は図2(A)のIIB−IIB線の断面図である。FIG. 2A is a perspective view illustrating the configuration of the treatment liquid kit according to the first embodiment, and FIG. 2B is a cross-sectional view taken along the line IIB-IIB in FIG. 第2実施形態に係る処理液キットを説明する断面図である。It is sectional drawing explaining the process liquid kit which concerns on 2nd Embodiment. 図4(A)は、第3実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図4(B)は、図4(A)のIVB−IVB線の断面図である。FIG. 4A is a perspective view illustrating the configuration of the treatment liquid kit according to the third embodiment, and FIG. 4B is a cross-sectional view taken along the line IVB-IVB in FIG. 図5(A)は、第4実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図5(B)は、第4実施形態に係る処理液キットの上面図である。FIG. 5A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the fourth embodiment, and FIG. 5B is a top view of the processing liquid kit according to the fourth embodiment. 第5実施形態に係る処理液キットを説明する断面図である。It is sectional drawing explaining the processing liquid kit which concerns on 5th Embodiment. 図7(A)は、第6実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図7(B)は、第6実施形態に係る処理液キットの上面図である。FIG. 7A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the sixth embodiment, and FIG. 7B is a top view of the processing liquid kit according to the sixth embodiment. 図8(A)は、第7実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図8(B)は、第7実施形態に係る処理液キットの上面図である。FIG. 8A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the seventh embodiment, and FIG. 8B is a top view of the processing liquid kit according to the seventh embodiment. 処理液キットの変形例について説明する図である。It is a figure explaining the modification of a process liquid kit.

以下、添付図面を参照して、本発明の好適な実施形態を詳細に説明するが、本発明は、以下の実施形態に限定されるものではなく、その要旨の範囲内で種々変形して実施できる。なお、図面の説明においては同一要素には同一符号を付し、重複する説明を省略する。   The preferred embodiments of the present invention will be described below in detail with reference to the accompanying drawings. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and various modifications may be made within the scope of the invention. it can. In the description of the drawings, the same elements are denoted by the same reference numerals, and redundant description is omitted.

(第1実施形態−がん細胞捕捉装置)
図1は第1実施形態に係るがん細胞捕捉装置の構成を説明する図である。がん細胞捕捉装置は、被検液となる血液をフィルタによってろ過することで血液中に含まれるがん細胞を捕捉する装置である。また、フィルタにより捕捉されたがん細胞について、染色液等の処理液を用いて染色することで、がん細胞の特定及びがん細胞の個体数のカウント等が行われる。
(First Embodiment-Cancer Cell Capture Device)
FIG. 1 is a diagram illustrating a configuration of a cancer cell capturing device according to the first embodiment. A cancer cell capturing device is a device that captures cancer cells contained in blood by filtering blood as a test solution using a filter. In addition, the cancer cells captured by the filter are stained using a treatment solution such as a staining solution, thereby identifying the cancer cells and counting the number of individual cancer cells.

図1に示すように、がん細胞捕捉装置100は、がん細胞を捕捉するためのフィルタ1が内部に設けられたフィルタユニット2、フィルタユニット2に対して処理液(試薬)を供給するための軟質チューブからなる流路3、フィルタユニット2に対して被検液(血液)を供給するための軟質チューブからなる流路4が設けられている。流路3の上流側には、複数の処理液容器5を含んで構成される処理液キット6が接続されている。複数の処理液容器には、染色等の処理を施すための処理液(試薬)が入れられている。処理液容器5に投入される処理液としては、染色液、洗浄液、透過液、固定液等が挙げられる。処理液の詳細については後述する。これらの複数の処理液容器5に対してはそれぞれ軟質チューブからなる流路7が挿入されて個別の流路を形成している。そして、これらの流路が選択バルブ8に対して接続されていて、選択バルブ8を回転させることにより流路3に対して接続する処理液が収容された処理液容器5が選択される。   As shown in FIG. 1, the cancer cell capturing device 100 supplies a processing liquid (reagent) to the filter unit 2 in which a filter 1 for capturing cancer cells is provided, and the filter unit 2. A flow path 3 made of a soft tube and a flow path 4 made of a soft tube for supplying a test liquid (blood) to the filter unit 2 are provided. A processing liquid kit 6 including a plurality of processing liquid containers 5 is connected to the upstream side of the flow path 3. A plurality of processing liquid containers contain processing liquids (reagents) for performing processing such as staining. Examples of the processing liquid charged into the processing liquid container 5 include a staining liquid, a cleaning liquid, a permeating liquid, and a fixing liquid. Details of the treatment liquid will be described later. A flow path 7 made of a soft tube is inserted into each of the plurality of processing liquid containers 5 to form individual flow paths. These flow paths are connected to the selection valve 8, and the processing liquid container 5 containing the processing liquid connected to the flow path 3 is selected by rotating the selection valve 8.

フィルタユニット2に対して接続する流路4には、内部に被検液としてがん細胞を含む疑いのある血液が納められた血液容器10(被検液容器)が接続されている。フィルタユニット2に対しては、処理液及び血液を同時に供給するのではなくいずれか一方を供給する構成となっているが、処理液及び血液のうちいずれの液体を供給するかの制御は流路3、4のそれぞれに対して取り付けられたバルブ12、13によって切り替えられる。例えば、血液をフィルタユニット2に対して供給する場合は、バルブ12を閉とし、バルブ13を開とする。バルブ12、13としては、軟質チューブを加圧変形させてその流れを遮断するピンチバルブ等を用いることができる。   Connected to the flow path 4 connected to the filter unit 2 is a blood container 10 (test liquid container) in which blood suspected of containing cancer cells is contained as a test liquid. The filter unit 2 is configured to supply either one of the processing liquid and the blood instead of supplying the processing liquid and the blood at the same time. It is switched by valves 12 and 13 attached to 3 and 4 respectively. For example, when supplying blood to the filter unit 2, the valve 12 is closed and the valve 13 is opened. As the valves 12 and 13, pinch valves or the like for blocking the flow by pressurizing and deforming the soft tube can be used.

また、フィルタユニット2に対して処理液及び血液のうちのいずれかの液体を供給する場合、フィルタユニット2の下流に設けられたポンプ14によって吸引することで液体の供給が行われる。ポンプ14は回転数変化により流路中の液体の流速を変えることが可能な構造となっている。ポンプ14としては、例えば軟質チューブに対する加圧による蠕動点を順次移動させる蠕動ポンプ(ペリスタルティックポンプ)を用いることができる。ポンプ14の駆動により、処理液、血液等の液体は流路3又は流路4の内部をフィルタユニット2に向かう方向に流れフィルタユニット2に供給される。そして、フィルタユニット2のフィルタ1を通過した液体は、流路15を経て廃液タンク16に流れ込む構造となっている。これらの構造により、血液中のがん細胞がフィルタユニット2内の流路上に設けられたフィルタ1によって捕捉されると共に、染色液によりがん細胞が染色される。   Further, when any one of the processing liquid and the blood is supplied to the filter unit 2, the liquid is supplied by being sucked by the pump 14 provided downstream of the filter unit 2. The pump 14 has a structure capable of changing the flow rate of the liquid in the flow path by changing the rotation speed. As the pump 14, for example, a peristaltic pump (peristaltic pump) that sequentially moves a peristaltic point by pressurizing the soft tube can be used. By driving the pump 14, liquids such as processing liquid and blood flow in the direction toward the filter unit 2 through the flow path 3 or the flow path 4 and are supplied to the filter unit 2. The liquid that has passed through the filter 1 of the filter unit 2 is structured to flow into the waste liquid tank 16 through the flow path 15. With these structures, cancer cells in the blood are captured by the filter 1 provided on the flow path in the filter unit 2, and the cancer cells are stained with the staining solution.

フィルタユニット2には、厚さ方向に複数の貫通孔1Aが主面に形成されたフィルタ1が内部に収容されている。フィルタ1は、例えば金属、ポリマ等からなる。フィルタユニット2のフィルタ1より上流側には、軟質チューブで形成された流路3に接続される流路3Aと、流路4に接続される流路4Aとが形成される。また、流路3A、4Aが形成された側とは逆側のフィルタ1の下流側には、フィルタ1の貫通孔1Aを通過した液体を外部に排出するための流路15Aが設けられる。フィルタ1の貫通孔1Aは、捕捉目標となるがん細胞が通過できない程度の大きさとされていて、貫通孔1Aを血液が通過する際、がん細胞がフィルタ1上に捕捉される。   The filter unit 2 accommodates therein a filter 1 having a plurality of through holes 1A formed in the main surface in the thickness direction. The filter 1 is made of, for example, metal or polymer. On the upstream side of the filter 1 of the filter unit 2, a flow path 3 </ b> A connected to the flow path 3 formed of a soft tube and a flow path 4 </ b> A connected to the flow path 4 are formed. Further, on the downstream side of the filter 1 on the side opposite to the side where the flow paths 3A, 4A are formed, a flow path 15A for discharging the liquid that has passed through the through hole 1A of the filter 1 to the outside is provided. The through-hole 1A of the filter 1 is sized so that the cancer cells that are the capture target cannot pass through, and the cancer cells are captured on the filter 1 when blood passes through the through-hole 1A.

ここで、フィルタ1上には、がん細胞以外にフィルタ1を通過できなかった白血球等の血球成分の一部が残存しており、これらの血球成分とがん細胞を染色によって染め分けてがん細胞を検出する。捕捉したがん細胞を検出するための洗浄及び染色は、血液のフィルタリングが終了した後、流路3Aに接続されるチューブの流路3から染色液、洗浄液、透過液及び固定液を供給することで行われる。この作業によって、フィルタ1を用いたがん細胞の捕捉及び処理液による染色が行われ、その後、フィルタ1上のがん細胞の同定及びがん細胞数の数量計測等が行われる。   Here, a part of blood cell components such as leukocytes that could not pass through the filter 1 other than the cancer cells remain on the filter 1, and these blood cell components and cancer cells are dyed separately by staining. Detect cells. In the washing and staining for detecting the captured cancer cells, after the blood filtering is completed, a staining solution, a washing solution, a permeating solution, and a fixing solution are supplied from the channel 3 of the tube connected to the channel 3A. Done in By this operation, the cancer cells are captured using the filter 1 and stained with the treatment liquid, and then the cancer cells on the filter 1 are identified and the number of cancer cells is measured.

(第1実施形態−処理液キット)
次に、図2を参照しながら、処理液キットについて説明する。図2(A)は処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図2(B)は図2(A)のうち流路7及び吸引ノズル71を除く処理液キットのIIB−IIB線の断面図である。なお、以下の実施形態で説明する処理液キット6では、処理液容器5Aには洗浄液が封入され、処理液容器5Bには固定液が封入され、処理液容器5Cには透過液が封入され、処理液容器5Dには染色液が封入されている構成について説明する。
(First embodiment-treatment liquid kit)
Next, the treatment liquid kit will be described with reference to FIG. 2A is a perspective view illustrating the configuration of the treatment liquid kit, and FIG. 2B is a cross-sectional view taken along the line IIB-IIB of the treatment liquid kit excluding the flow path 7 and the suction nozzle 71 in FIG. It is sectional drawing. In the processing liquid kit 6 described in the following embodiment, a cleaning liquid is sealed in the processing liquid container 5A, a fixing liquid is sealed in the processing liquid container 5B, and a permeating liquid is sealed in the processing liquid container 5C. A configuration in which the staining liquid is sealed in the processing liquid container 5D will be described.

ここで、血液中のがん細胞の捕捉作業後のがん細胞の同定及びがん細胞の数量計測等に係る処理において用いられる処理液についての概略を説明する。洗浄液は、前工程で使用した薬液の残留分の洗浄又は除去のために用いられる処理液である。洗浄液としては、例えばウシ血清アルブミンとエチレンジアミン四酢酸をリン酸緩衝生理食塩水に配合してpH7.4程度に調整した溶液等が挙げられる。また、固定液は、生物試料を自己分解又は腐敗による劣化から保護するための化学処理を行うための処理液である。固定液としては、例えばパラホルムアルデヒドをリン酸緩衝生理食塩水に1〜4質量%配合した溶液等が挙げられる。また、透過液は、フィルタ上に捕捉されたがん細胞の細胞膜を溶解して、例えば色素及び染色液等が高分子物質を透過できるようにするための処理液である。透過液としては、例えばポリオキシエチレン(10)オクチルフェニルエーテルをリン酸緩衝生理食塩水に配合した溶液等が挙げられる。染色液は、対象となる抗原と反応する抗体に対して蛍光色素を標識するための処理液である。染色液としては、例えば2’−(4−エトキシフェニル)−5−(4−メチル−1−ピペラジニル)―2,5’−bi−1Hベンズイミダゾールの三塩酸塩水溶液、ヒト白血球抗原及びサイトケラチン(Cytokeratin)の混合液をリン酸緩衝生理食塩水で希釈した溶液等が挙げられる。これらの処理液ががん細胞の捕捉及び観察に係る処理に用いられる。   Here, the outline about the processing liquid used in the process which concerns on the identification of the cancer cell after the capture | acquisition operation | work of the cancer cell in blood, the quantity measurement of a cancer cell, etc. is demonstrated. The cleaning liquid is a processing liquid used for cleaning or removing the remaining amount of the chemical liquid used in the previous step. Examples of the washing liquid include a solution prepared by mixing bovine serum albumin and ethylenediaminetetraacetic acid in phosphate buffered saline to adjust the pH to about 7.4. The fixing solution is a treatment solution for performing a chemical treatment for protecting a biological sample from degradation due to self-degradation or spoilage. Examples of the fixing solution include a solution in which paraformaldehyde is mixed in 1 to 4% by mass in phosphate buffered saline. The permeation liquid is a treatment liquid for dissolving the cell membrane of cancer cells captured on the filter so that, for example, a dye and a staining liquid can permeate the polymer substance. Examples of the permeated liquid include a solution in which polyoxyethylene (10) octylphenyl ether is mixed with phosphate buffered saline. The staining liquid is a treatment liquid for labeling a fluorescent dye with respect to an antibody that reacts with a target antigen. Examples of the staining solution include 2 ′-(4-ethoxyphenyl) -5- (4-methyl-1-piperazinyl) -2,5′-bi-1H benzimidazole trihydrochloride aqueous solution, human leukocyte antigen and cytokeratin. And a solution obtained by diluting a mixed solution of (Cytokeratin) with phosphate buffered saline. These treatment liquids are used for treatment relating to capture and observation of cancer cells.

図2に戻り、処理液キット6に含まれる処理液容器5A〜5Dは、それぞれ例えば樹脂材料から構成される。処理液容器5A〜5Dは、それぞれ横断面が円形であり、処理液が収容される収容部51を備えると共に、収容部51の開口に上端部から外方へ延びるフランジ部52を備えている。そして、処理液容器5A〜5Dのそれぞれのフランジ部52の上面側が蓋部材として機能する薄板55の下面側と接着している。薄板55としては、例えばシリコーン樹脂等の樹脂膜、アルミ箔等の金属箔、シリコーン樹脂、ポリオレフィン樹脂等の樹脂膜にアルミニウムをコーティングしたものなどが好ましい。処理液容器5A〜5Dとしては、樹脂、ガラスが好ましく、特にポリオレフィン樹脂等が耐薬品性と取扱性に優れ、より好ましい。このような構成を備えることにより、複数の処理液容器5A〜5Dの開口が、薄板55により一体的に塞がれると共に、処理液容器5A〜5Dが連結される。すなわち、薄板55は、処理液容器5A〜5Dを一体的に連結する連結手段となる。これにより、複数の処理液容器5A〜5Dが処理液キット6として一体化される。   Returning to FIG. 2, the treatment liquid containers 5 </ b> A to 5 </ b> D included in the treatment liquid kit 6 are each made of, for example, a resin material. Each of the processing liquid containers 5A to 5D has a circular cross section and includes a storage part 51 in which the processing liquid is stored. The processing liquid containers 5A to 5D include a flange part 52 that extends outward from the upper end at the opening of the storage part 51. And the upper surface side of each flange part 52 of process liquid container 5A-5D is adhere | attached on the lower surface side of the thin plate 55 which functions as a cover member. The thin plate 55 is preferably, for example, a resin film such as a silicone resin, a metal foil such as an aluminum foil, or a resin film such as a silicone resin or a polyolefin resin coated with aluminum. As the treatment liquid containers 5A to 5D, resins and glass are preferable, and polyolefin resins and the like are particularly preferable because they are excellent in chemical resistance and handleability. By providing such a configuration, the openings of the plurality of processing liquid containers 5A to 5D are integrally closed by the thin plate 55, and the processing liquid containers 5A to 5D are connected. That is, the thin plate 55 serves as a connection unit that integrally connects the treatment liquid containers 5A to 5D. Thereby, the plurality of processing liquid containers 5 </ b> A to 5 </ b> D are integrated as the processing liquid kit 6.

処理液キット6の処理液容器5Dは、がん細胞を染色する染色液が封入される容器を含み、複数の処理液容器5Dに対して封入される処理液の封入量は、染色液が他の処理液と同じタイミング又は他の処理液よりも早くになくなるようにそれぞれ設定されている。ここで「なくなる」とは、処理液容器5D内の残量が1回の処理に必要な液量未満になることを意味する。   The treatment liquid container 5D of the treatment liquid kit 6 includes a container in which a staining liquid for staining cancer cells is enclosed, and the amount of treatment liquid enclosed in the plurality of treatment liquid containers 5D is different from the staining liquid. Are set so as to disappear at the same timing as the other processing liquid or earlier than the other processing liquid. Here, “eliminates” means that the remaining amount in the processing liquid container 5D becomes less than the amount of liquid necessary for one process.

より好ましい態様としては、処理液キット6の処理液容器5Dには、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理を1回行うために必要な量のm倍(mは自然数)に基づいて設定された量の染色液が収容されている。また、処理液容器5A〜5Cには、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理を1回行うために必要な量のm倍以上となるように設定された量の処理液が収容されている。   As a more preferred embodiment, the treatment liquid container 5D of the treatment liquid kit 6 is based on m times (m is a natural number) of the amount necessary to perform a series of treatments related to capturing and observing cancer cells once. A set amount of staining solution is contained. The treatment liquid containers 5A to 5C contain an amount of treatment liquid that is set to be m times or more of the amount necessary to perform a series of treatments for capturing and observing cancer cells once. ing.

1回の処理における処理液の容量比は、例えば、洗浄液(5A):固定液(5B):透過液(5C):染色液(5D)=5:1:2:1である。各処理液の容量比は、例えばがん細胞捕捉装置の構成(フィルタの大きさ、流路の長さ等)等に基づいて決定される。   The volume ratio of the processing liquid in one process is, for example, cleaning liquid (5A): fixing liquid (5B): permeating liquid (5C): staining liquid (5D) = 5: 1: 2: 1. The volume ratio of each treatment solution is determined based on, for example, the configuration of the cancer cell capturing device (filter size, flow path length, etc.) and the like.

また、1つの処理液キット6を用いて行われる一連の処理の回数を特定する「m」としては、例えば10が挙げられる。この「m」は、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理1回分に要する標準時間又は染色液の保存期限等に応じて適宜設定することができる。   Further, “m” for specifying the number of times of a series of processing performed using one processing liquid kit 6 includes, for example, 10. This “m” can be appropriately set according to the standard time required for one series of treatments for capturing and observing cancer cells, the storage period of the staining solution, or the like.

ここでm=10としたときに上記の式(1)〜式(3)に基づいて算出した各処理液の封入量を表1に例示する。なお、処理液容器から選択バルブまでの流路の容積は約0.3mL(流路の内径φ1mm、長さ350mm)とした。また、10回の処理を終えた後に染色液の処理液容器に残留する処理液量は、封入量の5体積%とした。   Table 1 exemplifies the amount of each treatment liquid enclosed when m = 10 and calculated based on the above equations (1) to (3). The volume of the flow path from the treatment liquid container to the selection valve was about 0.3 mL (flow path inner diameter φ1 mm, length 350 mm). Further, the amount of the processing liquid remaining in the processing liquid container of the staining liquid after 10 times of processing was 5% by volume of the enclosed amount.

Figure 0006364842
Figure 0006364842

なお、ここでは1回の処理における処理液の容量比を洗浄液(5A):固定液(5B):透過液(5C):染色液(5D)=5:1:2:1とした場合に基づいて算出したが、固定液、透過液及び染色液の封入量がほぼ同じになるように処理液の濃度を適宜調整して用いてもよい。また、上記のm=10に関して、一連の処理の回数は、昼夜通して処理を実施したとしても1日に実施可能な処理回数が10回程度であることに基づく。将来、技術が進歩して処理可能な回数が増えれば、mを増やすこともできる。 Here, based on the case where the volume ratio of the treatment liquid in one treatment is set to wash liquid (5A): fixing liquid (5B): permeate liquid (5C): staining liquid (5D) = 5: 1: 2: 1. However, the concentration of the treatment liquid may be appropriately adjusted so that the amount of the fixing liquid, the permeation liquid, and the staining liquid is approximately the same. Further, regarding m = 10, the number of series of processes is based on the fact that the number of processes that can be performed per day is about 10 even if the processes are performed day and night. In the future, m can be increased if the number of times of processing increases as the technology advances.

このような態様とすることによって、各処理液容器の交換のタイミングを容易に合わせることができ、処理液キットとして交換することによって個々に交換するのではなく、一度に交換できるので、作業効率を著しく向上できる点で好ましい。   By adopting such an embodiment, it is possible to easily adjust the timing of replacement of each processing liquid container, and it is possible to replace the processing liquid kit at once instead of replacing it individually as a processing liquid kit. It is preferable in that it can be remarkably improved.

また、処理液キット6の処理液容器5A〜5Dのように、横断面が円形状である場合、内壁において角部が形成されない。したがって、処理液容器5A〜5Dでは、内壁の角部に処理液が溜まることを回避することができる。   Further, when the cross section is circular like the treatment liquid containers 5A to 5D of the treatment liquid kit 6, corners are not formed on the inner wall. Therefore, in the processing liquid containers 5A to 5D, it is possible to avoid the processing liquid from being collected at the corners of the inner wall.

上記の処理液キット6は、以下の方法で製造される。まず、複数種類の処理液のための複数の処理液容器5A〜5Dを準備する。続いて、これらの複数の処理液容器5A〜5Dのそれぞれに対して処理液を投入する。処理液キット6の場合は、洗浄液が処理液容器5Aに投入され、固定液が処理液容器5Bに投入され、透過液が処理液容器5Cに投入され、染色液が処理液容器5Dに投入された後に、蓋部材である薄板55によって、その処理液容器5A〜5Dを塞ぐことで、処理液が処理液容器5A〜5Dに封入される。同時に、これらの処理液容器5A〜5Dは、薄板55によって一体的に連結される。これにより処理液キット6が形成される。このように、薄板55によって処理液容器5A〜5Dを塞ぐことと処理液容器5A〜5Dを連結することとを同時に行う場合、処理液の封入と複数の処理液容器の連結とを一度に行うことができ、より少ない工程で処理液キットの製造を行うことができる。   The treatment liquid kit 6 is manufactured by the following method. First, a plurality of processing liquid containers 5A to 5D for a plurality of types of processing liquids are prepared. Subsequently, the processing liquid is introduced into each of the plurality of processing liquid containers 5A to 5D. In the case of the processing liquid kit 6, the cleaning liquid is charged into the processing liquid container 5A, the fixing liquid is charged into the processing liquid container 5B, the permeated liquid is charged into the processing liquid container 5C, and the staining liquid is charged into the processing liquid container 5D. After that, the processing liquid containers 5A to 5D are closed by the thin plate 55 which is a lid member, so that the processing liquid is sealed in the processing liquid containers 5A to 5D. At the same time, these processing liquid containers 5 </ b> A to 5 </ b> D are integrally connected by the thin plate 55. Thereby, the treatment liquid kit 6 is formed. As described above, when the processing liquid containers 5A to 5D are closed by the thin plate 55 and the processing liquid containers 5A to 5D are connected at the same time, the processing liquid is sealed and the plurality of processing liquid containers are connected at a time. The processing solution kit can be manufactured with fewer steps.

そして、処理液キット6を使用する際には、図2(A)に示すように、流路7に接続する吸引ノズル71が薄板55を突き抜けて挿入される。これにより処理液容器5A〜5Dが開封され、吸引ノズル71により内部の処理液がそれぞれフィルタユニット2へ供給可能となる。なお、図2(A)において、説明のために流路7及び吸引ノズル71が描かれているが、これらは本発明の処理液キットには含まれない。   Then, when the treatment liquid kit 6 is used, the suction nozzle 71 connected to the flow path 7 is inserted through the thin plate 55 as shown in FIG. As a result, the treatment liquid containers 5 </ b> A to 5 </ b> D are opened, and the internal treatment liquid can be supplied to the filter unit 2 by the suction nozzle 71. In FIG. 2A, the flow path 7 and the suction nozzle 71 are illustrated for the purpose of explanation, but these are not included in the treatment liquid kit of the present invention.

また、がん細胞の捕捉に係る一連の処理が上記で設定したm回終わると、処理液キットを交換することで処理液容器5A〜5Dを全て一回の操作でまとめて交換することができるので、作業性に非常に優れ、好ましい。脱気処理等の前処理を行う必要がある場合には、処理液キット6が一体的に連結されていることにより処理液をまとめて脱気処理することができるので、好ましい。   Moreover, when the series of processes related to the capture of cancer cells is completed m times as set forth above, the treatment liquid containers 5A to 5D can be exchanged all at once by exchanging the treatment liquid kit. Therefore, it is excellent in workability and preferable. In the case where it is necessary to perform a pretreatment such as a degassing treatment, it is preferable that the treatment liquid kit 6 is integrally connected so that the treatment liquid can be collectively degassed.

このように、本実施形態に係るがん細胞捕捉装置100における処理液キット6では、がん細胞を観察するための一連の処理に用いられる複数の処理液が封入された処理液容器5A〜5Dが連結手段である薄板55により一体的に連結されている。処理液キット6がこのような構成を有することで、各処理液を個別に購入して準備する場合と比較して、前処理等の作業を一度に行うことができ、作業効率が向上する。さらに、一連の処理に用いられる処理液を処理液キット6として揃えてがん細胞の捕捉及び観察に使用することで、がん細胞の捕捉及び観察における再現性を向上することができる。   Thus, in the treatment liquid kit 6 in the cancer cell capturing device 100 according to this embodiment, the treatment liquid containers 5A to 5D in which a plurality of treatment liquids used for a series of treatments for observing cancer cells are enclosed. Are integrally connected by a thin plate 55 which is a connecting means. Since the treatment liquid kit 6 has such a configuration, work such as pretreatment can be performed at a time as compared with a case where each treatment liquid is purchased and prepared individually, and work efficiency is improved. Furthermore, reproducibility in capturing and observing cancer cells can be improved by arranging the processing solution used for a series of processing as the processing solution kit 6 and using it for capturing and observing cancer cells.

以下、第2〜第8実施形態について説明する。第2〜第8実施形態に係る処理液キットは、全て第1実施形態に示すがん細胞捕捉装置100において使用することができるので、以下の実施形態では処理液キットに係る構成についてのみ説明する。また、第1実施形態で説明した処理液キット6と同様の方法で製造されている処理液キットについては、製造方法に係る説明を省略する。   Hereinafter, the second to eighth embodiments will be described. Since all the treatment liquid kits according to the second to eighth embodiments can be used in the cancer cell capturing apparatus 100 shown in the first embodiment, only the configuration related to the treatment liquid kit will be described in the following embodiments. . Moreover, about the process liquid kit manufactured by the method similar to the process liquid kit 6 demonstrated in 1st Embodiment, the description which concerns on a manufacturing method is abbreviate | omitted.

(第2実施形態)
図3は、第2実施形態に係る処理液キットを説明する断面図である。図3に示す処理液キット6Aは、4つの処理液容器5Iが薄板55により一体的に連結されたものである。薄板55が連結手段として機能する点は、第1実施形態の処理液キット6と同様である。第2実施形態に係る処理液キット6Aが第1実施形態の処理液キット6と相違する点は、4つの処理液容器5Iの底部の形状である。
(Second Embodiment)
FIG. 3 is a cross-sectional view illustrating a treatment liquid kit according to the second embodiment. The processing liquid kit 6A shown in FIG. 3 is obtained by integrally connecting four processing liquid containers 5I with thin plates 55. The point that the thin plate 55 functions as a connecting means is the same as the processing liquid kit 6 of the first embodiment. The difference between the processing liquid kit 6A according to the second embodiment and the processing liquid kit 6 of the first embodiment is the shape of the bottoms of the four processing liquid containers 5I.

具体的には、処理液容器5Iは、内壁57Aに接続する環状の第1の底部57Bと、周囲が第1の底部57Bによって囲まれて第1の底部57Bよりも下側に設けられた凹型状の第2の底部57Cとによって形成される。このとき、流路7と接続する吸引ノズル71は、その先端が第1の底部57Bよりも下方に挿入されている。また、処理液容器5I内の処理液のうち吸引ノズル71の先端71Aが到達する位置よりも上方の処理液を吸引することができ、先端71Aよりも低い位置の処理液L1は吸引されずに処理液容器5I内に残留する。これによって、吸引ノズル71中に誤って気泡が混入することを防止できるので、好ましい。ここで、m回処理後の処理液容器に残存する処理液量を第1の底部57Bよりも下側に設けられた凹型状の第2の底部57Cの容積に設定すると、吸引ノズル71への気泡の混入をより確実に防止できるので好ましい。   Specifically, the processing liquid container 5I has an annular first bottom portion 57B connected to the inner wall 57A, and a concave shape surrounded by the first bottom portion 57B and provided below the first bottom portion 57B. And a second bottom 57C. At this time, the tip of the suction nozzle 71 connected to the flow path 7 is inserted below the first bottom 57B. Further, of the processing liquid in the processing liquid container 5I, the processing liquid above the position where the tip 71A of the suction nozzle 71 reaches can be sucked, and the processing liquid L1 at a position lower than the tip 71A is not sucked. It remains in the processing liquid container 5I. This is preferable because air bubbles can be prevented from being mixed in the suction nozzle 71 by mistake. Here, when the amount of the processing liquid remaining in the processing liquid container after m times of processing is set to the volume of the concave second bottom portion 57C provided below the first bottom portion 57B, This is preferable because it is possible to more reliably prevent bubbles from being mixed.

処理液キット6Aでは、処理液容器5Iの底部が第1の底部57Bと第2の底部57Cとの2段階の底部を有している。これにより、処理液の残液が底部に集まりやすくなり、吸引ノズル71の先端71Aを第1の底部57Bよりも下方とした場合に、底部に残留する処理液L1の量をより少なくすることができ、処理液容器5I内の処理液の無駄を減らし効率よく使用することができる。   In the treatment liquid kit 6A, the bottom of the treatment liquid container 5I has a two-stage bottom part including a first bottom part 57B and a second bottom part 57C. As a result, the residual liquid of the processing liquid easily collects at the bottom, and when the tip 71A of the suction nozzle 71 is positioned below the first bottom 57B, the amount of the processing liquid L1 remaining at the bottom can be reduced. It is possible to reduce the waste of the processing liquid in the processing liquid container 5I and use it efficiently.

なお、図3において、説明のために流路7及び吸引ノズル71が描かれているが、これらは本発明の処理液キットには含まれない。   In FIG. 3, the flow path 7 and the suction nozzle 71 are illustrated for explanation, but these are not included in the treatment liquid kit of the present invention.

(第3実施形態)
図4(A)は、第3実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図4(B)は、図4(A)のIVB−IVB線の断面図である。図4に示す処理液キット6Bが第1実施形態の処理液キット6と相違する点は、4つの処理液容器5Jが1つの容器部材58により形成されている点である。
(Third embodiment)
FIG. 4A is a perspective view illustrating the configuration of the treatment liquid kit according to the third embodiment, and FIG. 4B is a cross-sectional view taken along the line IVB-IVB in FIG. The processing liquid kit 6B shown in FIG. 4 is different from the processing liquid kit 6 of the first embodiment in that four processing liquid containers 5J are formed by one container member 58.

処理液キット6Bでは、容器部材58に4つの凹部58Aが形成されることで、これらの凹部58Aが処理液容器5Jとして機能する。そして、処理液容器5Jのそれぞれに処理液を封入した後に、凹部58Aの上側端部から略平面状に延びる上面部58Bが薄板59の下面側と接着することで、処理液容器5Jとして機能する凹部58Aの開口が塞がれる。このような容器部材58は、例えば、樹脂材料を射出成型することで得ることができる。   In the processing liquid kit 6B, four concave portions 58A are formed in the container member 58, so that these concave portions 58A function as the processing liquid container 5J. Then, after the processing liquid is sealed in each of the processing liquid containers 5J, the upper surface part 58B extending in a substantially planar shape from the upper end of the recess 58A is bonded to the lower surface side of the thin plate 59, thereby functioning as the processing liquid container 5J. The opening of the recess 58A is closed. Such a container member 58 can be obtained, for example, by injection molding a resin material.

処理液キット6Bでは、薄板59だけではなく、容器部材58の上面部58Bについても複数の処理液容器5Jを一体的に連結する連結手段として機能する。このように、処理液容器5J側の部材の形状を変える構成としてもよい。なお、処理液容器5Jの側壁を隣の処理液容器と共有して、隣接する処理液容器5J同士が側壁を介して連結する構造とすると、処理液キットをよりコンパクトに収納できるので好ましい。   In the processing liquid kit 6B, not only the thin plate 59 but also the upper surface portion 58B of the container member 58 functions as a connecting unit that integrally connects the plurality of processing liquid containers 5J. Thus, it is good also as a structure which changes the shape of the member by the side of the process liquid container 5J. In addition, it is preferable that the side wall of the processing liquid container 5J is shared with the adjacent processing liquid container so that the adjacent processing liquid containers 5J are connected to each other through the side wall because the processing liquid kit can be stored more compactly.

(第4実施形態)
図5(A)は、第4実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図5(B)は、第4実施形態に係る処理液キットの上面図である。図5に示す処理液キット6Cは、4つの処理液容器5Kを連結する連結手段が、各処理液容器5Kを取り付けるための孔が設けられた枠部材76である点が第1実施形態に係る処理液キット6と相違する。本実施形態に係る処理液キット6Cは、処理液容器の開口を覆う蓋部材とは異なる部材によって処理液容器同士を連結する構成である。なお、4つの処理液容器5Kはそれぞれ蓋部材等によって上部の開口が塞がれるが、図示省略する。
(Fourth embodiment)
FIG. 5A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the fourth embodiment, and FIG. 5B is a top view of the processing liquid kit according to the fourth embodiment. The processing liquid kit 6C shown in FIG. 5 relates to the first embodiment in that the connecting means for connecting the four processing liquid containers 5K is a frame member 76 provided with holes for attaching the processing liquid containers 5K. Different from the treatment liquid kit 6. The processing liquid kit 6 </ b> C according to the present embodiment has a configuration in which the processing liquid containers are connected to each other by a member different from the lid member that covers the opening of the processing liquid container. Note that the upper openings of the four processing liquid containers 5K are respectively closed by lid members or the like, but the illustration is omitted.

枠部材76は、平板状をなし、処理液容器5Kを取り付けるための孔77がその厚さ方向に4つ形成されている。そして、これらの孔77に処理液容器5Kを挿入することで、4つの処理液容器5Kを一体的に連結している。なお、枠部材76の厚さ方向に処理液容器5Kが移動しないように、孔77の内部に弾性部材等の滑り止め部材又は接着剤等の固定部材を取り付けてもよい。   The frame member 76 has a flat plate shape, and four holes 77 for attaching the treatment liquid container 5K are formed in the thickness direction thereof. Then, the four processing liquid containers 5K are integrally connected by inserting the processing liquid containers 5K into these holes 77. In addition, a non-slip member such as an elastic member or a fixing member such as an adhesive may be attached to the inside of the hole 77 so that the processing liquid container 5K does not move in the thickness direction of the frame member 76.

上記の処理液キット6Cは、例えば以下の方法で製造される。まず、複数種類の処理液のための複数の処理液容器5Kを準備する。続いて、これらの4つの処理液容器5Kのそれぞれに対して処理液を投入する。その後、図示していない蓋部材によって、4つの処理液容器5Kのそれぞれを塞ぐことで、処理液が処理液容器5Kに封入される。その後、枠部材76に対してこれらの処理液容器5Kを取り付けることで、枠部材76によって一体的に連結される。これにより処理液キット6Cが形成される。なお、枠部材76を取り付けることで、4つの処理液容器5Kを先に連結し、その後に各処理液容器5Kに処理液を封入する構成としてもよい。   Said process liquid kit 6C is manufactured, for example with the following method. First, a plurality of processing liquid containers 5K for a plurality of types of processing liquids are prepared. Subsequently, the processing liquid is charged into each of these four processing liquid containers 5K. Thereafter, the processing liquid is sealed in the processing liquid container 5K by closing each of the four processing liquid containers 5K with a lid member (not shown). Thereafter, these processing liquid containers 5K are attached to the frame member 76 so as to be integrally connected by the frame member 76. Thereby, the treatment liquid kit 6C is formed. In addition, it is good also as a structure which connects the four process liquid containers 5K previously by attaching the frame member 76, and encloses a process liquid in each process liquid container 5K after that.

(第5実施形態)
図6は、第5実施形態に係る処理液キットを説明する断面図である。図6に示す処理液キット6Dは、4つの処理液容器5Pが、薄板55により一体的に連結されたものである。第5実施形態に係る処理液キット6Dが第1実施形態の処理液キット6と相違する点は、4つの処理液容器5Pの底部の形状である。
(Fifth embodiment)
FIG. 6 is a cross-sectional view illustrating a treatment liquid kit according to the fifth embodiment. The processing liquid kit 6D shown in FIG. 6 is obtained by integrally connecting four processing liquid containers 5P with thin plates 55. The difference between the processing liquid kit 6D according to the fifth embodiment and the processing liquid kit 6 according to the first embodiment is the shape of the bottom of the four processing liquid containers 5P.

具体的には、処理液容器5Pの底部57Dは、上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状となっている。このとき、流路7と接続する吸引ノズル71は、その先端がテーパー状の底部57Dのうち側壁57Eと接続する周縁部57Fよりも下方に挿入されている。ここで、処理液容器5P内の処理液のうち吸引ノズル71の先端71Aが到達する位置よりも上方の処理液を吸引することができ、先端71Aよりも低い位置の処理液L2は吸引されずに処理液容器5P内に残留する。これによって、吸引ノズル71中に誤って気泡が混入することを防止できるので、好ましい。   Specifically, the bottom 57D of the processing liquid container 5P has a tapered shape in which the cross-sectional area decreases from the top to the bottom. At this time, the suction nozzle 71 connected to the flow path 7 is inserted below the peripheral edge 57F connected to the side wall 57E in the bottom 57D having a tapered shape. Here, of the processing liquid in the processing liquid container 5P, the processing liquid above the position where the tip 71A of the suction nozzle 71 reaches can be sucked, and the processing liquid L2 at a position lower than the tip 71A is not sucked. In the processing liquid container 5P. This is preferable because air bubbles can be prevented from being mixed in the suction nozzle 71 by mistake.

このように、処理液キット6Dでは、処理液容器5Pの底部57Dが、上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状となっていることで、処理液の残液が底部に集まりやすくなり、吸引ノズル71の先端71Aを底部57Dの周縁部57Fよりも下方とした場合に、底部に残留する処理液L2の量をより少なくすることができる。したがって、処理液キット6Dでは、処理液容器5P内の処理液の無駄を減らし効率よく使用することができる。処理液容器5Pにおける処理液の容量を見積もる際に底部に残留する処理液L2の量は各処理液の封入量の5体積%程度を見積もればよい。なお、図6において、説明のために流路7及び吸引ノズル71が描かれているが、これらは本発明の処理液キットには含まれない。   In this way, in the processing liquid kit 6D, the bottom 57D of the processing liquid container 5P is tapered so that the cross-sectional area decreases from the top to the bottom, so that the residual liquid of the processing liquid easily collects at the bottom. When the tip 71A of the suction nozzle 71 is positioned below the peripheral edge 57F of the bottom 57D, the amount of the processing liquid L2 remaining on the bottom can be reduced. Therefore, in the treatment liquid kit 6D, waste of the treatment liquid in the treatment liquid container 5P can be reduced and used efficiently. When estimating the volume of the processing liquid in the processing liquid container 5P, the amount of the processing liquid L2 remaining at the bottom may be estimated to be about 5% by volume of the amount of each processing liquid enclosed. In FIG. 6, the flow path 7 and the suction nozzle 71 are illustrated for explanation, but these are not included in the treatment liquid kit of the present invention.

(第6実施形態)
図7(A)は、第6実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図7(B)は、第6実施形態に係る処理液キットの上面図である。図7に示す処理液キット6Eは、4つの処理液容器5L〜5Oを連結する連結手段が、連結手段ごと個別に脱着可能で容器上面ではなく、容器の外壁に設けられ、処理液容器が環状に配列している点で、第1実施形態に係る処理液キット6と相違する。なお、処理液容器5L〜5Oはそれぞれ蓋部材等によって上部の開口が塞がれるが、図示省略する。
(Sixth embodiment)
FIG. 7A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the sixth embodiment, and FIG. 7B is a top view of the processing liquid kit according to the sixth embodiment. In the processing liquid kit 6E shown in FIG. 7, the connecting means for connecting the four processing liquid containers 5L to 5O is detachable individually for each connecting means, and is provided not on the top surface of the container but on the outer wall of the container. Is different from the treatment liquid kit 6 according to the first embodiment. Although the upper openings of the processing liquid containers 5L to 5O are respectively closed by lid members or the like, they are not shown.

処理液キット6Eでは、4つの処理液容器5L〜5Oは、それぞれ有底筒状であるが、底部が上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状であってもよい。又は図3の処理液容器5Iのように複数段階の底部を有する構造としてもよい。そして、処理液容器5Lの外壁には連結部材81が取り付けられ、処理液容器5Mの外壁には連結部材82が取り付けられ、処理液容器5Nの外壁には連結部材83が取り付けられ、処理液容器5Oの外壁には連結部材84が取り付けられている。連結部材81〜84は各々処理液容器5L〜5Oとの連結部及び互いの連結部材と嵌合するための凹と凸の嵌合部を備えており、互いに凸の嵌合部と凹の嵌合部が嵌合し合って処理液キット6Eを組み立てることができる。なお、図7(A)及び図7(B)では、処理液キット6Eの構成を分かりやすくするために、連結部材81〜84については一点鎖線で示している。   In the treatment liquid kit 6E, each of the four treatment liquid containers 5L to 5O has a bottomed cylindrical shape, but may have a tapered shape in which the cross-sectional area decreases from the bottom toward the bottom. Or it is good also as a structure which has a multi-stage bottom part like the process liquid container 5I of FIG. A connecting member 81 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5L, a connecting member 82 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5M, and a connecting member 83 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5N. A connecting member 84 is attached to the outer wall of 5O. Each of the connecting members 81 to 84 includes a connecting portion with the processing liquid containers 5L to 5O and a concave and convex fitting portion for fitting with each other's connecting member. The processing portion kit 6E can be assembled by fitting the joint portions together. 7A and 7B, the connecting members 81 to 84 are indicated by alternate long and short dash lines in order to make the configuration of the treatment liquid kit 6E easier to understand.

連結部材81〜84の各連結部はそれぞれ各処理液容器の外周の1/4以上にかかるようにして処理液容器を把持することができる。処理液容器5L〜5Oは各容器の開口に上端部から外方へ延びるフランジ部52L〜52Oを備えており、連結部材81〜84はフランジ部52L〜52Oで係止することができる。処理液キット6Eは各処理液容器5L〜5Oを何度でも個別に脱着することが可能であり、また、連結部材81〜84を何度でも個別に脱着することが可能であるが、処理液キット6Eを組み立てた際には、一体となって処理液キットを一つのものとして扱うことができる。   Each connection part of the connection members 81-84 can hold | grip a process liquid container so that it may each cover 1/4 or more of the outer periphery of each process liquid container. The processing liquid containers 5L to 5O are provided with flange portions 52L to 52O extending outward from the upper end portions at the openings of the respective containers, and the connecting members 81 to 84 can be locked by the flange portions 52L to 52O. The processing liquid kit 6E can detach the processing liquid containers 5L to 5O individually as many times as possible, and can detach the connecting members 81 to 84 as many times as possible. When the kit 6E is assembled, the treatment liquid kit can be handled as a single unit.

連結部材81の凹の嵌合部81Bと連結部材82の凸の嵌合部82Aとが互いに嵌合して第1の接続部を形成し、同様に、連結部材82の凹の嵌合部82Bと連結部材83の凸の嵌合部83Aとが互いに嵌合して第2の接続部を形成し、同様に、連結部材83の凹の嵌合部83Bと連結部材84の凸の嵌合部84Aとが互いに嵌合して第3の接続部を形成し、同様に、連結部材84の凹の嵌合部84Bと連結部材81の凸の嵌合部81Aとが互いに嵌合して第4の接続部を形成した状態で、処理液キット6Eを組み立てることができる。   The concave fitting portion 81B of the connecting member 81 and the convex fitting portion 82A of the connecting member 82 are fitted together to form a first connecting portion, and similarly, the concave fitting portion 82B of the connecting member 82 is formed. And the convex fitting part 83A of the connecting member 83 are fitted together to form a second connecting part, and similarly, the concave fitting part 83B of the connecting member 83 and the convex fitting part of the connecting member 84 84A is fitted to each other to form a third connecting portion, and similarly, the concave fitting portion 84B of the connecting member 84 and the convex fitting portion 81A of the connecting member 81 are fitted to each other to form a fourth. The processing liquid kit 6E can be assembled in a state in which the connecting portion is formed.

上記の処理液キット6Eは、例えば、以下の方法で作製される。まず、複数種類の処理液のための複数の処理液容器5L〜5Oを準備する。複数の処理液容器5L〜5Oには、それぞれ連結部材81〜84が取り付けられている構成とする。続いて、これらの4つの処理液容器5L〜5Oのそれぞれに対して処理液を投入する。その後、図示していない蓋部材によって、4つの処理液容器5L〜5Oのそれぞれを塞ぐことで、処理液が処理液容器5L〜5Oに封入される。その後、連結部材81〜84をそれぞれ連結することで、連結部材81〜84によって処理液容器5L〜5Oが一体的に連結される。これにより処理液キット6Eが形成される。なお、処理液を封入した後の4つの処理液容器5L〜5Oに対して連結部材81〜84を取り付ける構成としてもよい。   The treatment liquid kit 6E is produced by the following method, for example. First, a plurality of processing liquid containers 5L to 5O for a plurality of types of processing liquids are prepared. It is set as the structure by which the connection members 81-84 are attached to the some process liquid containers 5L-5O, respectively. Subsequently, the processing liquid is introduced into each of the four processing liquid containers 5L to 5O. Thereafter, the processing liquid is sealed in the processing liquid containers 5L to 5O by closing each of the four processing liquid containers 5L to 5O with a lid member (not shown). Then, the process liquid containers 5L-5O are integrally connected by the connection members 81-84 by connecting the connection members 81-84, respectively. Thereby, the treatment liquid kit 6E is formed. In addition, it is good also as a structure which attaches the connection members 81-84 with respect to the four process liquid containers 5L-5O after enclosing a process liquid.

また、予め処理液容器5L〜5Oを連結部材81〜84に取り付け、連結部材81〜84を連結した後に処理液を投入して図示していない蓋部材で塞いで封入し、処理液キット6Eを形成してもよい。   Further, the processing liquid containers 5L to 5O are attached to the connecting members 81 to 84 in advance, and after connecting the connecting members 81 to 84, the processing liquid is charged and sealed with a lid member (not shown), and the processing liquid kit 6E is installed. It may be formed.

このように、複数の処理液容器5L〜5Oを一体的に連結する連結手段は、蓋部材とは異なる部材とすることもできる。また、本実施形態で示したように、複数の連結部材81〜84を組み合わせることで連結手段として機能する構成であってもよい。このような連結部材によって処理液容器が連結されることによって、例えば、室温で長時間保存できない染色液が封入された処理液容器を他の処理液容器と分けて使用直前まで冷蔵保存しておくことが可能になり、好ましい。また、何れかの処理液容器において充填不良等の不良があっても、不良のあった処理液容器のみを嵌め換えることによって良品の処理液キットとすることができ、処理液キット全体を不良として扱わずに済むので、好ましい。   Thus, the connection means for integrally connecting the plurality of treatment liquid containers 5L to 5O can be a member different from the lid member. Moreover, as shown in this embodiment, the structure which functions as a connection means by combining the some connection members 81-84 may be sufficient. By connecting the processing liquid container with such a connecting member, for example, the processing liquid container in which the staining liquid that cannot be stored at room temperature for a long time is enclosed is separated from other processing liquid containers and stored refrigerated until just before use. Is possible and preferred. Moreover, even if there is a defect such as a filling failure in any of the treatment liquid containers, it is possible to make a non-defective treatment liquid kit by replacing only the defective treatment liquid container, and the entire treatment liquid kit is regarded as defective. It is preferable because it does not need to be handled.

(第7実施形態)
図8(A)は、第7実施形態に係る処理液キットの構成を説明する斜視図であり、図8(B)は、第7実施形態に係る処理液キットの上面図である。図8に示す処理液キット6Fは、4つの処理液容器5L〜5Oを連結する連結手段が、処理液容器を1列に配置するように連結する構成となっている点で、第6実施形態に係る処理液キット6Eと相違する。なお、処理液容器5L〜5Oはそれぞれ蓋部材等によって上部の開口が塞がれるが、図示省略する。
(Seventh embodiment)
FIG. 8A is a perspective view illustrating the configuration of the processing liquid kit according to the seventh embodiment, and FIG. 8B is a top view of the processing liquid kit according to the seventh embodiment. The processing liquid kit 6F shown in FIG. 8 is the sixth embodiment in that the connecting means for connecting the four processing liquid containers 5L to 5O is connected so that the processing liquid containers are arranged in one row. This is different from the processing solution kit 6E according to FIG. Although the upper openings of the processing liquid containers 5L to 5O are respectively closed by lid members or the like, they are not shown.

処理液キット6Fでは、4つの処理液容器5L〜5Oは、それぞれ有底筒状であるが、底部が上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状であってもよい。又は図3の処理液容器5Iのように複数段階の底部を有する構造としてもよい。そして、処理液容器5Lの外壁には連結部材85が取り付けられ、処理液容器5Mの外壁には連結部材86が取り付けられ、処理液容器5Nの外壁には連結部材87が取り付けられ、処理液容器5Oの外壁には連結部材88が取り付けられている。連結部材85〜88は各々処理液容器5L〜5Oとの連結部及び互いの連結部材と嵌合するための凹と凸の嵌合部を備えており、互いに凸の嵌合部と凹の嵌合部が嵌合し合って処理液キット6Fを組み立てることができる。処理液キット6Fは各処理液容器5L〜5Oを何度でも個別に脱着することが可能であり、また、連結部材85〜88を何度でも個別に脱着することが可能であるが、処理液キット6Fを組み立てた際には、一体となって処理液キットを一つのものとして扱うことができる。   In the treatment liquid kit 6F, each of the four treatment liquid containers 5L to 5O has a bottomed cylindrical shape, but may have a tapered shape in which the cross-sectional area decreases from the bottom toward the bottom. Or it is good also as a structure which has a multi-stage bottom part like the process liquid container 5I of FIG. A connecting member 85 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5L, a connecting member 86 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5M, and a connecting member 87 is attached to the outer wall of the processing liquid container 5N. A connecting member 88 is attached to the outer wall of 5O. Each of the connecting members 85 to 88 includes a connecting portion with the processing liquid containers 5L to 5O and a concave and convex fitting portion for fitting with each other's connecting member. The treatment part kit 6F can be assembled by fitting the joints together. The treatment liquid kit 6F can detach the treatment liquid containers 5L to 5O individually as many times as possible, and can detach the connecting members 85 to 88 as many times as possible. When the kit 6F is assembled, the treatment liquid kit can be handled as a single unit.

連結部材85の凸の嵌合部85Aと連結部材86の凹の嵌合部86Bとが互いに嵌合して第1の接続部を形成し、同様に、連結部材86の凸の嵌合部86Aと連結部材87の凹の嵌合部87Bとが互いに嵌合して第2の接続部を形成し、同様に、連結部材87の凸の嵌合部87Aと連結部材88の凹の嵌合部88Bとが互いに嵌合して第3の接続部を形成した状態で、処理液キット6Fを組み立てることができる。なおここで、連結部材85の凹の嵌合部85B及び連結部材88の凸の嵌合部88Aはさらに連結する必要が生じた場合のための嵌合部である。   The convex fitting portion 85A of the connecting member 85 and the concave fitting portion 86B of the connecting member 86 are fitted together to form a first connecting portion, and similarly, the convex fitting portion 86A of the connecting member 86. And the concave fitting portion 87B of the connecting member 87 are fitted together to form a second connecting portion, and similarly, the convex fitting portion 87A of the connecting member 87 and the concave fitting portion of the connecting member 88 The treatment liquid kit 6F can be assembled in a state where the 88B and the third connection portion are formed by fitting with each other. Here, the concave fitting portion 85B of the connecting member 85 and the convex fitting portion 88A of the connecting member 88 are fitting portions for cases where further connection is required.

上記の処理液キット6Fは、例えば、以下の方法で作製される。まず、複数種類の処理液のための複数の処理液容器5L〜5Oを準備する。複数の処理液容器5L〜5Oには、それぞれ連結部材85〜88が取り付けられている構成とする。続いて、これらの4つの処理液容器5L〜5Oのそれぞれに対して処理液を投入する。その後、図示していない蓋部材によって、4つの処理液容器5L〜5Oのそれぞれを塞ぐことで、処理液が処理液容器5L〜5Oに封入される。その後、連結部材85〜88をそれぞれ連結することで、連結部材85〜88によって処理液容器5L〜5Oが一体的に連結される。これにより処理液キット6Fが形成される。なお、処理液を封入した後の4つの処理液容器5L〜5Oに対して連結部材85〜88を取り付ける構成としてもよい。   The treatment liquid kit 6F is produced by the following method, for example. First, a plurality of processing liquid containers 5L to 5O for a plurality of types of processing liquids are prepared. It is set as the structure by which the connection members 85-88 are attached to the some process liquid containers 5L-5O, respectively. Subsequently, the processing liquid is introduced into each of the four processing liquid containers 5L to 5O. Thereafter, the processing liquid is sealed in the processing liquid containers 5L to 5O by closing each of the four processing liquid containers 5L to 5O with a lid member (not shown). Then, the process liquid containers 5L-5O are integrally connected by the connection members 85-88 by connecting the connection members 85-88, respectively. Thereby, the treatment liquid kit 6F is formed. In addition, it is good also as a structure which attaches the connection members 85-88 with respect to the four process liquid containers 5L-5O after enclosing a process liquid.

また、予め処理液容器5L〜5Oを連結部材85〜88に取り付け、連結部材85〜88を連結した後に処理液を投入して図示していない蓋部材で塞いで封入し、処理液キット6Fを形成してもよい。   Further, the processing liquid containers 5L to 5O are attached to the connecting members 85 to 88 in advance, and after connecting the connecting members 85 to 88, the processing liquid is charged and sealed with a lid member (not shown) to seal the processing liquid kit 6F. It may be formed.

このように、複数の処理液容器5L〜5Oを一体的に連結する連結手段は、蓋部材とは異なる部材とすることもできる。また、本実施形態で示したように、複数の連結部材85〜88を組み合わせることで連結手段として機能する構成であってもよい。このような連結部材によって処理液容器が連結されることによって、例えば、室温で長時間保存できない染色液が封入された処理液容器を他の処理液容器と分けて使用直前まで冷蔵保存しておくことが可能になり、好ましい。また、何れかの処理液容器において充填不良等の不良があっても、不良のあった処理液容器のみを嵌め換えることによって良品の処理液キットとすることができ、処理液キット全体を不良として扱わずに済むので、好ましい。   Thus, the connection means for integrally connecting the plurality of treatment liquid containers 5L to 5O can be a member different from the lid member. Moreover, as shown in this embodiment, the structure which functions as a connection means by combining the some connection members 85-88 may be sufficient. By connecting the processing liquid container with such a connecting member, for example, the processing liquid container in which the staining liquid that cannot be stored at room temperature for a long time is enclosed is separated from other processing liquid containers and stored refrigerated until just before use. Is possible and preferred. Moreover, even if there is a defect such as a filling failure in any of the treatment liquid containers, it is possible to make a non-defective treatment liquid kit by replacing only the defective treatment liquid container, and the entire treatment liquid kit is regarded as defective. It is preferable because it does not need to be handled.

(変形例)
以上、本発明に係る処理液キット及びがん細胞捕捉装置の実施形態について説明したが、本発明に係る処理液キット及びがん細胞捕捉装置は種々の変更を行うことができる。
(Modification)
Although the embodiments of the treatment liquid kit and the cancer cell capturing device according to the present invention have been described above, various modifications can be made to the treatment liquid kit and the cancer cell capturing device according to the present invention.

例えば、図9に示すように、処理液キット6に対して、各キットを区別し自キットを特定するための識別子98を備える構成としてもよい。図9では、識別子98として、バーコードを備えた構成について示している。このように、識別子98を各キットに付与することで、処理液キット6を特定することができる。そしてこのような構成の結果、例えば、処理液キット6の使用期限管理ができ、さらに、例えば、処理液キット6内の処理液の種類及び量等を管理することも可能である。また、処理液キット6の識別子98を読み取る装置をがん細胞捕捉装置が備える構成とし、識別子98の読み取りによりプロセス管理を行う構成とすることもできる。   For example, as shown in FIG. 9, it is good also as a structure provided with the identifier 98 for distinguishing each kit with respect to the process liquid kit 6, and specifying an own kit. In FIG. 9, a configuration including a barcode as the identifier 98 is shown. In this manner, the treatment liquid kit 6 can be specified by assigning the identifier 98 to each kit. As a result of such a configuration, for example, the expiration date of the treatment liquid kit 6 can be managed, and further, for example, the type and amount of the treatment liquid in the treatment liquid kit 6 can be managed. Further, the apparatus for reading the identifier 98 of the treatment liquid kit 6 may be configured to be included in the cancer cell capturing apparatus, and the process management may be performed by reading the identifier 98.

また、上記実施形態では、がん細胞の捕捉に係る一連の処理において、4種類の処理液が用いられる構成について説明したが、処理液の数はがん細胞の捕捉に係る工程に応じて適宜変更される。また、工程数又は処理液数に応じて、がん細胞捕捉装置100における吸引ノズル71及び吸引ノズル71に接続される流路7の数も適宜変更される。また、例えば、5種類の処理液が用いられる構成である場合、図7の連結部材は5片に脱着可能な構造を採用することができ、適宜変更して用いることができる。   Moreover, in the said embodiment, although the structure using four types of process liquids was demonstrated in the series of processes which concern on capture | acquisition of a cancer cell, the number of process liquids is suitably set according to the process which concerns on capture | acquisition of a cancer cell. Be changed. In addition, the number of suction nozzles 71 and the number of flow paths 7 connected to the suction nozzles 71 in the cancer cell capturing device 100 are appropriately changed according to the number of steps or the number of treatment liquids. Further, for example, in the case of a configuration in which five types of processing liquids are used, the connecting member in FIG. 7 can adopt a structure that can be attached to and detached from five pieces, and can be used with appropriate modifications.

また、がん細胞を捕捉するためのフィルタ1が収容されたフィルタユニット2の構成は適宜変更することができる。また、連結手段は、上記実施形態の構成に限定されない。   Moreover, the structure of the filter unit 2 in which the filter 1 for capturing cancer cells is accommodated can be appropriately changed. Moreover, a connection means is not limited to the structure of the said embodiment.

1…フィルタ、2…フィルタユニット、3、4、7…流路、5(5A〜5O)…処理液容器、6、6A〜6F…処理液キット、8…選択バルブ、10…被検液容器、55、59…薄板(蓋部材)、71…吸引ノズル、100…がん細胞捕捉装置。   DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Filter, 2 ... Filter unit 3, 4, 7 ... Flow path, 5 (5A-5O) ... Processing liquid container, 6, 6A-6F ... Processing liquid kit, 8 ... Selection valve, 10 ... Test liquid container 55, 59 ... thin plate (lid member), 71 ... suction nozzle, 100 ... cancer cell trapping device.

Claims (14)

被検液中のがん細胞をフィルタにより捕捉するがん細胞捕捉装置に用いられ、前記がん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液がそれぞれ封入された複数の処理液容器と、
前記複数の処理液容器を一体的に連結する連結手段と、
を備える処理液キットであって、
前記処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、
前記複数の処理液容器のうちの一の処理液容器に対する前記染色液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、前記複数の処理液容器のうち前記染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定され、
前記mは、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理1回分に要する標準時間又は前記染色液の保存期限に応じて設定される処理液キット。
Used in a cancer cell capturing device that captures cancer cells in a test solution with a filter, each of which contains a plurality of types of treatment liquids used for a series of processes for capturing and observing the cancer cells. A plurality of processing liquid containers;
Connection means for integrally connecting the plurality of treatment liquid containers;
A treatment liquid kit comprising:
The treatment liquid contains a staining liquid for staining cancer cells,
The amount of the staining liquid enclosed in one of the plurality of processing liquid containers is based on m times (m is a natural number) the amount of staining liquid required for performing the series of processes once. The set amount of the other processing liquid different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers different from the processing liquid container in which the staining liquid is sealed among the plurality of processing liquid containers is the series of processes. Is set to be m times or more of each processing solution required when performing once,
The m is a treatment liquid kit that is set according to a standard time required for one series of treatments for capturing and observing cancer cells or a storage period of the staining liquid.
前記処理液容器の内壁の底部は、上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状である請求項1に記載の処理液キット。 The processing liquid kit according to claim 1, wherein the bottom portion of the inner wall of the processing liquid container has a tapered shape in which a cross-sectional area decreases from the upper side to the lower side. 前記処理液容器の内壁の横断面が円形状である請求項1又は2に記載の処理液キット。 The processing liquid kit according to claim 1 or 2 , wherein a cross section of the inner wall of the processing liquid container is circular. 前記連結手段は、前記複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐ蓋部材である請求項1〜のいずれか一項に記載の処理液キット。 It said connecting means, the processing solution kit according to any one of claims 1 to 3 openings of the plurality of processing liquid container is a lid member for closing integrally. 前記連結手段は、各処理液容器を個別に脱着可能な連結部材から構成される請求項1〜4のいずれか一項に記載の処理液キット。   The processing liquid kit according to any one of claims 1 to 4, wherein the connecting means includes a connecting member capable of individually attaching and detaching each processing liquid container. 自キットを特定する識別子をさらに備える請求項1〜のいずれか一項に記載の処理液キット。 The treatment liquid kit according to any one of claims 1 to 5 , further comprising an identifier for identifying the self-kit. 被検液が収容された被検液容器と、
前記被検液を通過させることで前記被検液中のがん細胞を捕捉する貫通孔が主面に設けられたフィルタと、
前記フィルタ上に前記がん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液がそれぞれ封入された複数の処理液容器と、
前記被検液容器及び前記複数の処理液容器のそれぞれと前記フィルタの主面の一方側とを接続する流路と、
を備えたがん細胞捕捉装置であって、
前記複数の処理液容器は連結手段により一体的に連結された処理液キットを構成し、
前記処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、
前記複数の処理液容器のうちの一の処理液容器に対する前記染色液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、前記複数の処理液容器のうち前記染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定され、
前記mは、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理1回分に要する標準時間又は前記染色液の保存期限に応じて設定されるがん細胞捕捉装置。
A test solution container containing the test solution;
A filter provided with a through-hole on the main surface for capturing cancer cells in the test liquid by passing the test liquid;
A plurality of treatment liquid containers each enclosing a plurality of kinds of treatment liquids used in a series of processes for capturing and observing the cancer cells on the filter;
A flow path connecting each of the test liquid container and the plurality of processing liquid containers and one side of the main surface of the filter;
A cancer cell capturing device comprising:
The plurality of processing liquid containers constitute a processing liquid kit integrally connected by a connecting means,
The treatment liquid contains a staining liquid for staining cancer cells,
The amount of the staining liquid enclosed in one of the plurality of processing liquid containers is based on m times (m is a natural number) the amount of staining liquid required for performing the series of processes once. The set amount of the other processing liquid different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers different from the processing liquid container in which the staining liquid is sealed among the plurality of processing liquid containers is the series of processes. Is set to be m times or more of each processing solution required when performing once,
The m is a cancer cell capturing device set in accordance with a standard time required for one series of processes related to capturing and observing cancer cells or a storage period of the staining solution .
前記処理液容器の内壁の底部は、上方から下方に向けて断面積が小さくなるテーパー状である請求項に記載のがん細胞捕捉装置。 The cancer cell capturing apparatus according to claim 7 , wherein a bottom portion of the inner wall of the treatment liquid container has a tapered shape in which a cross-sectional area decreases from the upper side to the lower side. 前記処理液容器の内壁の横断面が円形状である請求項7又は8に記載のがん細胞捕捉装置。 The cancer cell capturing device according to claim 7 or 8 , wherein the inner wall of the treatment liquid container has a circular cross section. 前記連結手段は、前記複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐ蓋部材である請求項7〜9のいずれか一項に記載のがん細胞捕捉装置。 The cancer cell capturing apparatus according to any one of claims 7 to 9 , wherein the connecting means is a lid member that integrally closes the openings of the plurality of treatment liquid containers. 前記連結手段は、各処理液容器を個別に脱着可能な連結部材から構成される請求項7〜10のいずれか一項に記載のがん細胞捕捉装置。 The cancer cell capturing apparatus according to any one of claims 7 to 10 , wherein the connection means is configured by a connection member that can detach and attach each processing solution container individually. 自キットを特定する識別子を前記処理液キットにさらに備える請求項7〜11のいずれか一項に記載のがん細胞捕捉装置。 The cancer cell capturing device according to any one of claims 7 to 11 , further comprising an identifier for identifying the own kit in the treatment liquid kit. 被検液中のがん細胞をフィルタにより捕捉するがん細胞捕捉装置に用いられる処理液キットの製造方法であって、
前記がん細胞を捕捉して観察するための一連の処理に用いられる複数種類の処理液のための複数の処理液容器を準備する工程と、
前記複数の処理液容器のそれぞれに対して処理液を封入する工程と、
前記複数の処理液容器を連結手段によって一体的に連結する工程と、
を有し、
前記処理液は、がん細胞を染色する染色液を含み、
前記複数の処理液容器のうちの一の処理液容器に対する前記染色液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な染色液の量のm倍(mは自然数)に基づいて設定され、前記複数の処理液容器のうち前記染色液が封入された処理液容器とは異なる他の処理液容器のそれぞれに対する染色液とは異なる他の処理液の封入量は、前記一連の処理を1回行う際に必要な各処理液のm倍以上となるように設定され、
前記mは、がん細胞の捕捉及び観察に係る一連の処理1回分に要する標準時間又は前記染色液の保存期限に応じて設定される処理液キットの製造方法。
A method for producing a treatment liquid kit for use in a cancer cell capturing device for capturing cancer cells in a test liquid with a filter,
Preparing a plurality of treatment liquid containers for a plurality of kinds of treatment liquids used in a series of treatments for capturing and observing the cancer cells;
Enclosing a treatment liquid in each of the plurality of treatment liquid containers;
Connecting the plurality of processing liquid containers integrally by a connecting means;
Have
The treatment liquid contains a staining liquid for staining cancer cells,
The amount of the staining liquid enclosed in one of the plurality of processing liquid containers is based on m times (m is a natural number) the amount of staining liquid required for performing the series of processes once. The set amount of the other processing liquid different from the staining liquid for each of the other processing liquid containers different from the processing liquid container in which the staining liquid is sealed among the plurality of processing liquid containers is the series of processes. Is set to be m times or more of each processing solution required when performing once,
Said m is the manufacturing method of the process liquid kit set according to the standard time required for one series of processes concerning capture and observation of a cancer cell, or the shelf life of the said dyeing | staining liquid.
前記連結手段は、前記複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐ蓋部材であって、
前記蓋部材によって前記複数の処理液容器の開口を一体的に塞ぐことで、前記処理液を封入する工程と、前記複数の処理液容器を一体的に連結する工程と、を同時に行う請求項13記載の処理液キットの製造方法。
The connecting means is a lid member that integrally closes the openings of the plurality of processing liquid containers,
The cover an opening of the plurality of processing liquid container by closing integrally by a member, a step of sealing the treatment solution, according to claim 13 for the step, at the same time integrally connecting the plurality of processing liquid container The manufacturing method of the processing liquid kit of description.
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