JP2016208941A - Method of inhibiting decrease in microalgae culture rate at water temperature higher than optimal temperature - Google Patents

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Takumi Yamada
巧 山田
重男 小川
Shigeo Ogawa
重男 小川
晃洋 鴻野
Akihiro Kono
晃洋 鴻野
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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To inhibit decrease in microalgae culture rate when a water temperature is higher than optimal conditions.SOLUTION: When microalgae are cultured at a water temperature higher than its optimal temperature, a nutrient salt concentration of a culture medium and it pH are controlled to inhibit decrease in culture rate.SELECTED DRAWING: Figure 1

Description

本発明は、微細藻類の培養方法に関する。詳細には、微細藻類の至適温度より高い水温で培養する場合に、培地の栄養塩濃度およびpHを調整して、培養速度の低下を抑制させた微細藻類の培養方法に関する。   The present invention relates to a method for culturing microalgae. More specifically, the present invention relates to a method for culturing microalgae in which, when culturing at a water temperature higher than the optimum temperature of microalgae, the nutrient salt concentration and pH of the medium are adjusted to suppress a decrease in culture rate.

二酸化炭素は,地球温暖化の原因となる温室効果ガスの一つとして排出量削減が課題とされている。二酸化炭素を削減する手段として、植物の光合成を利用する方法がある。植物の中でも,特に微細藻類は陸生植物と比較して高い増殖力を有するため,有望な二酸化炭素の削減手段として注目されている(特許文献1等参照)。例えば、油成分を内部で生成し蓄積する微細藻類を用いて、発電所や工場で二酸化炭素の排出量を抑えながら燃料を合成するプロセスが検討されているほか、微細藻類の光合成を利用した二酸化炭素有効利用装置が提案されている(特許文献2等参照)。   Carbon dioxide is one of the greenhouse gases that cause global warming. As a means for reducing carbon dioxide, there is a method using photosynthesis of plants. Among plants, microalgae in particular are attracting attention as a promising means for reducing carbon dioxide because they have a higher growth potential than terrestrial plants (see Patent Document 1, etc.). For example, a process for synthesizing fuel while suppressing carbon dioxide emissions at power plants and factories using microalgae that generates and accumulates oil components internally is being studied, as well as carbon dioxide using photosynthesis of microalgae. An effective carbon utilization device has been proposed (see Patent Document 2).

二酸化炭素の固定に用いられる微細藻類には淡水性のものと海産性のものがある。海産性の藻類では、たとえばクロロコッカムリトラーレのように高濃度の二酸化炭素でも培養可能で、かつ脂質を生成するものがある(非特許文献1等参照)。二酸化炭素の耐性が高いと燃料電池などの高濃度二酸化炭素を排出する装置からの直接導入が可能となるばかりか、その濃度では生存できない他の微生物のコンタミネーションを避けることができるという利点がある。   Microalgae used for carbon dioxide fixation include freshwater and marine ones. Some marine algae can be cultured even with a high concentration of carbon dioxide, such as chlorococcum litorale, and produce lipids (see Non-Patent Document 1, etc.). High resistance to carbon dioxide not only enables direct introduction from a device that emits high concentration carbon dioxide, such as fuel cells, but also has the advantage of avoiding contamination of other microorganisms that cannot survive at that concentration .

特開平7−313141号公報JP-A-7-313141 国際公開第2006/109588号International Publication No. 2006/109588 特開2015−2683号公報Japanese Patent Laying-Open No. 2015-2683

M.Ota et.al., Bioresource Technology 100 (2009) 5237-5242M.Ota et.al., Bioresource Technology 100 (2009) 5237-5242

微細藻類の培養速度は大きければ大きいほど二酸化炭素固定量あるいは脂肪酸生産量を増加させることができる。しかしながら培養速度は水温に大きな影響を受けることが知られている。   The greater the culture rate of microalgae, the greater the amount of carbon dioxide fixed or the amount of fatty acid produced. However, it is known that the culture rate is greatly affected by the water temperature.

微細藻類の種類により至適温度は異なるが、至適温度より低温あるいは高温での培養は、培養速度が著しく減少する。そのため、培養速度を高いレベルで維持するには水温の制御が必要となるが、光合成に必要な光源を太陽光で賄う屋外培養においては水温の制御には大きなエネルギーが必要となる。そこで、水温制御を必要とせず、かつ培養速度の低下を抑制する培養方法が求められる。   Although the optimum temperature varies depending on the type of microalgae, the cultivation rate is significantly reduced when culturing at a temperature lower or higher than the optimum temperature. Therefore, in order to maintain the culture speed at a high level, it is necessary to control the water temperature. However, in outdoor culture where the light source necessary for photosynthesis is covered by sunlight, a large amount of energy is required to control the water temperature. Therefore, there is a need for a culture method that does not require water temperature control and suppresses a decrease in culture speed.

本発明に係る培養方法はクロロコッカムリトラーレなどの微細藻類の培地の栄養塩濃度およびpHを調整することで、至適温度より高い水温での培養において培養速度の低下を抑制する方法を提供することにある。   The culture method according to the present invention provides a method for suppressing a decrease in culture rate in culture at a water temperature higher than the optimum temperature by adjusting the nutrient salt concentration and pH of a medium of microalgae such as chlorococcum litorale. There is.

上記記載の微細藻類の培養方法によれば、至適温度より高い水温において培養速度の低下をある程度抑制することが可能となる。そのため、太陽光を光源として屋外で培養する場合に、特に夏場の水温冷却のための大きな電力を使用することなく培養することが可能となる。   According to the above-described method for culturing microalgae, it is possible to suppress a decrease in the culture rate to some extent at a water temperature higher than the optimum temperature. Therefore, when cultivating outdoors using sunlight as a light source, it is possible to perform culturing without using large power for cooling the water temperature particularly in summer.

水温27℃における増殖速度の培地栄養塩濃度依存性Dependence of growth rate on medium nutrient concentration at a water temperature of 27 ° C 水温27℃における増殖速度の培地pH依存性(栄養塩濃度10倍の場合)Medium pH dependence of growth rate at 27 ° C (when nutrient concentration is 10 times) 水温27℃およびpH8における増殖速度の培地栄養塩濃度依存性Dependence of growth rate on medium nutrient concentration at water temperature of 27 ° C and pH8

本発明は、微細藻類の至適温度より高い水温で培養する場合に、培地の栄養塩濃度およびpHを調整して、培養速度の低下を抑制させた微細藻類の培養方法に関する。以下、本発明の好適な実施形態について詳細に説明する。なお、以下に示す実施形態は、本発明の単なる一例であって、当業者であれば、適宜設計変更可能である。   The present invention relates to a method for culturing microalgae in which, when culturing at a water temperature higher than the optimum temperature for microalgae, the nutrient salt concentration and pH of the medium are adjusted to suppress a decrease in culture rate. Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail. The following embodiment is merely an example of the present invention, and those skilled in the art can change the design as appropriate.

(微細藻類)
本発明に用いることのできる微細藻類は、脂肪酸を藻体内に蓄積することができるものである。
(Microalgae)
The microalgae that can be used in the present invention are those capable of accumulating fatty acids in the algae.

本発明において、「藻類」とは、光合成を行う生物のうち、陸上植物(コケ植物、シダ植物、種子植物)を除いたものの総称であり、「微細藻類」とは、人の肉眼では、その個々の存在が識別できないような微小な藻類をさす。微細藻類の分類としては、二酸化炭素を吸収し、脂肪酸を藻体内に蓄積することができるものであれば特に制限はなく、原核生物および真核生物のいずれであってもよい。   In the present invention, “algae” is a general term for organisms that perform photosynthesis, excluding terrestrial plants (moss plant, fern plant, seed plant), and “microalgae” A small algae whose individual existence cannot be identified. The classification of microalgae is not particularly limited as long as it can absorb carbon dioxide and accumulate fatty acids in the algae, and may be either prokaryotic or eukaryotic.

本発明において、微細藻類は淡水性藻類および海洋性藻類のいずれも用いることができるが、海水で培養可能な海洋性藻類が好ましい。また、本発明の方法に用いられる微細藻類は、二酸化炭素耐性が強いものが好ましい。   In the present invention, both freshwater algae and marine algae can be used as the microalgae, but marine algae that can be cultured in seawater are preferred. Further, the microalgae used in the method of the present invention is preferably one having strong carbon dioxide resistance.

本発明の一実施態様において、本発明の方法に用いられる微細藻類は緑色植物門に属する。好ましくは、緑藻網、プラシノ藻網、トレボウクシア藻網に属する藻類およびこれらの組み合わせの群から選択される。本発明の方法に用いられる微細藻類は、より好ましくはトレボウクシア藻網に属する藻類であり、さらに好ましくはクロロコッカムリトラーレ(Chlorococcum littorale)である。   In one embodiment of the present invention, the microalgae used in the method of the present invention belong to the green plant phylum. Preferably, it is selected from the group of algae belonging to the green alga net, the plasino alga net, the trevoxia algae net, and combinations thereof. The microalgae used in the method of the present invention is more preferably an algae belonging to the Trevoxia algae network, and more preferably a Chlorococcum littorale.

本発明の一実施態様において、微細藻類は、このなる微細藻類の種の混合物であってもよい。他の実施態様では、微細藻類は、単一の微細藻類の種であってもよい。さらに、本発明の方法に用いることのできる微細藻類には、野生型、変異型(天然または誘導されたもの)または遺伝子改変された微細藻類が含まれるが、これらに限定されない。   In one embodiment of the present invention, the microalgae may be a mixture of such microalgae species. In other embodiments, the microalgae may be a single microalgal species. Furthermore, the microalgae that can be used in the method of the present invention include, but are not limited to, wild type, mutant type (natural or derived) or genetically modified microalgae.

(培養方法)
本発明の微細藻類の培養は、以下のような条件下、微細藻類の培養方法として一般的に知られている方法を用いることができる。例えば、トレボウクシア藻網に属する微細藻類を培養できる公知の方法を用いることができる。具体的には、これに限定されないが、液体培地を入れた偏平フラスコ等の培養容器に該微細藻類を接種して、藻体が沈殿しない程度に緩やかに攪拌しながら光照射下で通気培養することにより行うことができる。また、太陽光を光源として、屋外貯水池で培養してもよい。
(Culture method)
For the culture of the microalgae of the present invention, a method generally known as a microalgae culture method can be used under the following conditions. For example, a known method capable of culturing microalgae belonging to Trevoxia algae can be used. Specifically, but not limited to this, inoculate the microalgae into a culture vessel such as a flat flask containing a liquid medium, and perform aeration culture under light irradiation while gently stirring to such an extent that algal bodies do not settle. Can be done. Moreover, you may culture | cultivate in an outdoor reservoir using sunlight as a light source.

(温度)
本発明において、培養温度は当該微細藻類が生育するのに適した公知の培養温度(至適温度)より高い。好ましくは至適温度を超え至適温度より10℃高い温度までの温度域で培養され、より好ましくは至適温度を超え至適温度より5℃高い温度までの温度域で培養される。例えば、クロロコッカムリトラーレを培養する場合、至適温度は22℃であるから、22℃<T≦32℃の範囲で培養するのが好ましい。
(temperature)
In the present invention, the culture temperature is higher than a known culture temperature (optimum temperature) suitable for growing the microalgae. Preferably, the cells are cultured in a temperature range exceeding the optimum temperature and 10 ° C higher than the optimum temperature, and more preferably cultured in a temperature range exceeding the optimum temperature and 5 ° C higher than the optimum temperature. For example, when culturing chlorococcum litorale, the optimum temperature is 22 ° C., and therefore it is preferable to culture in the range of 22 ° C. <T ≦ 32 ° C.

(塩濃度)
本発明に用いられる液体培地としては、当該微細藻類を培養できる液体培地として公知のものを希釈した溶液を使用できる。例えば、海洋性微細藻類を用いる場合には、天然海水および/または人工海水を希釈した溶液を培地として用いることができる。人工海水は、天然海水に含まれる塩類を模した塩類である。該人工海水の所定量を蒸留水に溶解することで、天然海水を模した海水成分をもつ水溶液を作製することができる。
(Salt concentration)
As the liquid medium used in the present invention, a solution obtained by diluting a known medium as a liquid medium capable of culturing the microalgae can be used. For example, when marine microalgae are used, a solution obtained by diluting natural seawater and / or artificial seawater can be used as the medium. Artificial seawater is a salt that mimics the salt contained in natural seawater. By dissolving a predetermined amount of the artificial seawater in distilled water, an aqueous solution having seawater components simulating natural seawater can be produced.

本願発明に用いることのできる培地として、ダイゴIMK培地、f/2培地、ESM培地、L1培地、MNK培地等を挙げることができる。これらのうち、f/2培地、ESM培地、ダイゴIMK培地が好ましく、ESM培地、ダイゴIMK培地がより好ましく、ダイゴIMK培地がさらに好ましい。   Examples of the medium that can be used in the present invention include Daigo IMK medium, f / 2 medium, ESM medium, L1 medium, and MNK medium. Of these, f / 2 medium, ESM medium, and Daigo IMK medium are preferred, ESM medium and Daigo IMK medium are more preferred, and Daigo IMK medium is even more preferred.

本発明は、さらに栄養塩を添加し、栄養塩濃度を通常使用される培地中の濃度よりも高くして培養する。本発明において、栄養塩とは窒素、リン、および/またはケイ素を含む塩をいう。栄養塩の例には、硝酸ナトリウム(NaNO3)、塩化アンモニウム(NH4Cl)、リン酸ナトリウム(Na2HPO4)、リン酸カリウム(K2HPO4)が含まれる。 In the present invention, a nutrient salt is further added, and the nutrient salt concentration is higher than that in a medium usually used for cultivation. In the present invention, the nutrient salt refers to a salt containing nitrogen, phosphorus and / or silicon. Examples of nutrient salts include sodium nitrate (NaNO 3 ), ammonium chloride (NH 4 Cl), sodium phosphate (Na 2 HPO 4 ), and potassium phosphate (K 2 HPO 4 ).

本発明の培地中の栄養塩濃度は、通常使用される培地中の濃度の2〜20倍である。すなわち、通常の海産微細藻用培地に含まれる栄養塩濃度を100部とした場合、本発明の培地は200部〜2000部の栄養塩濃度を有する。より具体的には、通常培地中の硝酸ナトリウム塩濃度が0.2g/Lであった場合、本願発明の培地は硝酸ナトリウムを0.4g/L〜4g/Lの濃度で含有してもよい。   The nutrient salt concentration in the medium of the present invention is 2 to 20 times the concentration in the medium usually used. That is, when the nutrient salt concentration contained in a normal marine microalgae medium is 100 parts, the medium of the present invention has a nutrient salt concentration of 200 parts to 2000 parts. More specifically, when the sodium nitrate salt concentration in the normal medium is 0.2 g / L, the medium of the present invention may contain sodium nitrate at a concentration of 0.4 g / L to 4 g / L. .

例えば、培地中における窒素の含有量は、好ましくは、窒素原子当量で50mg/L以上、より好ましくは150mg/L以上である。また、培地中に含まれるリンの含有量は、好ましくはリン原子当量で2mg/L以上、より好ましくは5mg/L以上である。   For example, the nitrogen content in the medium is preferably 50 mg / L or more, more preferably 150 mg / L or more in terms of nitrogen atom equivalent. The content of phosphorus contained in the medium is preferably 2 mg / L or more, more preferably 5 mg / L or more in terms of phosphorus atom equivalent.

(pH)
本発明の培養方法は、pH6〜8を有する液体培地を用いて行われる。液体培地のpHが6より低くなると、培養速度が低下する。また、pHが8以上では炭酸カルシウムなどの塩が析出し、培地が白濁化するため、培養に適さない。
(PH)
The culture method of the present invention is performed using a liquid medium having a pH of 6-8. When the pH of the liquid medium is lower than 6, the culture rate decreases. On the other hand, when the pH is 8 or more, a salt such as calcium carbonate precipitates and the medium becomes cloudy, which is not suitable for culture.

一方、栄養塩濃度が高度に上昇すると、培地のpHは酸性に傾くため、栄養塩濃度による培養速度への寄与を相殺するおそれがある。例えば、栄養塩濃度が通常使用される培地の濃度の20倍を超えると、pHは5.5を下回る。   On the other hand, if the nutrient salt concentration rises to a high level, the pH of the medium tends to be acidic, which may offset the contribution of the nutrient salt concentration to the culture rate. For example, when the nutrient concentration exceeds 20 times the concentration of a commonly used medium, the pH falls below 5.5.

そこで本発明者らは、後述するように、栄養塩濃度が高い場合でもpHを中性から弱アルカリ性に調整することで培養速度の低下を抑制できることを、さらに見出した(図2および図3参照)。pHの調整は、培養の阻害をするものでなければ任意の塩基性物質の添加により行うことができる。例えば、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムを用いてpHを調整してもよい。   Thus, as described later, the present inventors have further found that a decrease in culture rate can be suppressed by adjusting the pH from neutral to weakly alkaline even when the nutrient concentration is high (see FIGS. 2 and 3). ). The pH can be adjusted by adding any basic substance as long as it does not inhibit the culture. For example, the pH may be adjusted using sodium hydroxide or potassium hydroxide.

塩基性物質を添加しない場合、栄養塩濃度は通常使用される培地の濃度の2〜10倍であることが好ましい。例えば、窒素原子当量で50mg/L〜350mg/L、リン原子当量で2mg/L〜10mg/Lであってもよい。   When a basic substance is not added, the nutrient salt concentration is preferably 2 to 10 times the concentration of a commonly used medium. For example, the nitrogen atom equivalent may be 50 mg / L to 350 mg / L, and the phosphorus atom equivalent may be 2 mg / L to 10 mg / L.

一方、塩基性物質を添加して液体培地のpHを7〜8に調整した場合には、栄養塩濃度は、通常の培地に使用される濃度の2〜20倍であってもよい。例えば、窒素原子当量で50mg/L〜700mg/L、リン原子当量で2mg/L〜20mg/Lであってもよい。   On the other hand, when the pH of the liquid medium is adjusted to 7 to 8 by adding a basic substance, the nutrient concentration may be 2 to 20 times the concentration used for a normal medium. For example, the nitrogen atom equivalent may be 50 mg / L to 700 mg / L, and the phosphorus atom equivalent may be 2 mg / L to 20 mg / L.

(通気環境)
一実施態様において、本発明の培養方法は、該液体培地に当該微細藻類が生育するのに適した公知の通気量で通気を行うことができる。例えば、10mL/分〜500mL/分で通気することができる。好ましくは50mL/分〜300mL/分で通気することができる。本発明の方法において、液体培地は、好ましくは5%〜20%の二酸化炭素を含む気体で通気される。より好ましくは、5%の二酸化炭素を含む気体で通気される。
(Ventilation environment)
In one embodiment, the culture method of the present invention can be aerated at a known aeration rate suitable for growing the microalgae on the liquid medium. For example, aeration can be performed at 10 mL / min to 500 mL / min. Preferably, aeration can be performed at 50 mL / min to 300 mL / min. In the method of the present invention, the liquid medium is preferably aerated with a gas containing 5% to 20% carbon dioxide. More preferably, it is vented with a gas containing 5% carbon dioxide.

(光照射条件)
本発明において、光照射条件は、当該微細藻類の種類および液体培地中の藻体濃度によって適宜調整することができる。例えば、50μmol/m2/s〜500μmol/m2/sの範囲の光強度で行うことができる。光源には、これらに限定されないが、太陽光、蛍光灯、およびLEDを用いることができる。また、光照射は、連続照射および明暗サイクルを有する照射のいずれであってもよい。
(Light irradiation conditions)
In this invention, light irradiation conditions can be suitably adjusted with the kind of the said micro algae and the algal body density | concentration in a liquid culture medium. For example, it is possible to perform the light intensity in the range of 50μmol / m 2 / s~500μmol / m 2 / s. Although not limited to these as a light source, sunlight, a fluorescent lamp, and LED can be used. Further, the light irradiation may be either continuous irradiation or irradiation having a light / dark cycle.

[実施例]
以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
[Example]
EXAMPLES Hereinafter, although this invention is demonstrated more concretely based on an Example, this invention is not limited to a following example.

(実施例1)
下記のとおり調整した培地を用いて、クロロコッカムリトラーレの培養を10日間行った。培養条件は温度27℃、光強度170μmol/m2/s、通気ガス流量100mL/分とした。通気ガス組成は二酸化炭素5%、窒素95%とした。
Example 1
Using a medium prepared as described below, chlorococcum litorale was cultured for 10 days. The culture conditions were a temperature of 27 ° C., a light intensity of 170 μmol / m 2 / s, and an aeration gas flow rate of 100 mL / min. The aeration gas composition was 5% carbon dioxide and 95% nitrogen.

培地には日本製薬(株)のダイゴ人工海水SPおよびダイゴIMK培地の混合溶液を用いた。ダイゴ人工海水SPは、20727mg/Lの塩化ナトリウムを含む海水成分の無機塩を含有する人工海水である(表1)。一方、ダイゴIMK培地は、表2に記載の濃度で窒素やリンなどの栄養塩を含む培地である。   A mixed solution of Daigo artificial seawater SP and Daigo IMK medium of Nippon Pharmaceutical Co., Ltd. was used as the medium. Daigo artificial seawater SP is artificial seawater containing inorganic salts of seawater components including 20727 mg / L of sodium chloride (Table 1). On the other hand, the Daigo IMK medium is a medium containing nutrients such as nitrogen and phosphorus at the concentrations shown in Table 2.

ダイゴ人工海水SP由来の無機塩濃度を一定にしたまま、ダイゴIMK培地由来の栄養塩の濃度を増加して、培地を調整した。ダイゴIMK培地由来の栄養塩濃度は1倍(以下、通常濃度という)、2倍、5倍、および10倍に調整した。通常濃度における培地中の窒素含有量は窒素原子当量で33.6mg/L、リン含有量はリン原子当量で1.15mg/Lであった。増殖特性はシグモイド型の一般的な特性を示し、濃度1倍〜10倍までは大きな変化は認められなかった。   With the inorganic salt concentration derived from the Daigo artificial seawater SP kept constant, the concentration of nutrient salt derived from the Daigo IMK medium was increased to adjust the medium. The nutrient salt concentration derived from Daigo IMK medium was adjusted to 1 time (hereinafter referred to as normal concentration), 2 times, 5 times, and 10 times. The nitrogen content in the medium at a normal concentration was 33.6 mg / L in terms of nitrogen atom equivalent, and the phosphorus content was 1.15 mg / L in terms of phosphorus atom equivalent. Proliferation characteristics showed general characteristics of sigmoid type, and no significant change was observed up to a concentration of 1 to 10 times.

次いで、各培地について、特許文献3に記載の方法を用いて培養前後の溶液中の細胞濃度を測定し、比培養速度を求めた。結果を図1に示す。   Next, for each medium, the cell concentration in the solution before and after the culture was measured using the method described in Patent Document 3, and the specific culture rate was determined. The results are shown in FIG.

クロロコッカムリトラーレは、至適温度である22℃で培養すると、比増殖速度が0.1程度であることが分かっている。図1のとおり、至適温度よりも5℃高い27℃において栄養塩濃度が通常濃度(1倍)の培地を用いて培養した場合には、培養速度の指標となる比増殖速度は至適温度の半分以下となった。   It has been found that chlorococcum litorale has a specific growth rate of about 0.1 when cultured at an optimum temperature of 22 ° C. As shown in FIG. 1, when culturing using a medium having a normal nutrient concentration (1 time) at 27 ° C., which is 5 ° C. higher than the optimum temperature, the specific growth rate as an index of the culture rate is the optimum temperature. It became less than half of.

一方、栄養塩濃度が上昇するに従い、比増殖速度の値は上昇し、培養温度27℃であっても培養速度の低下を抑制できることが明らかとなった。   On the other hand, as the nutrient concentration increased, the value of the specific growth rate increased, and it was revealed that the decrease in the culture rate can be suppressed even at a culture temperature of 27 ° C.

(実施例2)
実施例1の濃度10倍の培地を用い、さらにpHを水酸化ナトリウムで調整して、pH6(無調整)、pH7、およびpH8の培地を調整した。これらの培地を用い、pH以外、実施例1と同様の培養条件で培養を行った。結果を図2に示す。
(Example 2)
A medium having a concentration of 10 times that of Example 1 was used, and pH was adjusted with sodium hydroxide to adjust pH 6 (no adjustment), pH 7 and pH 8 medium. Using these media, culturing was performed under the same culture conditions as in Example 1 except for pH. The results are shown in FIG.

図2のとおり、栄養塩濃度が10倍の場合では、培地のpHが中性から弱アルカリ性になるにつれて、比培養速度が上昇することが確認された。   As shown in FIG. 2, when the nutrient concentration was 10 times, it was confirmed that the specific culture rate increased as the pH of the medium changed from neutral to weakly alkaline.

(実施例3)
pHを水酸化ナトリウムで8に調整し、栄養塩濃度を1倍(通常濃度)、10倍および20倍に調整した培地を用いた以外は実施例1と同様に培養を行った。結果を図3に示す。
Example 3
The culture was carried out in the same manner as in Example 1 except that a medium in which the pH was adjusted to 8 with sodium hydroxide and the nutrient concentration was adjusted to 1 time (normal concentration), 10 times and 20 times was used. The results are shown in FIG.

栄養塩濃度が20倍の培地に水酸化ナトリウムを添加しない場合、pHは5.4となり、培養が進行しなかった。しかしながら、図3のとおり、pHを8に調整した場合には通常の栄養塩濃度(1倍)に比べ、培養速度の低下を抑制する効果があることが認められた。   When sodium hydroxide was not added to the medium having a nutrient salt concentration of 20 times, the pH was 5.4 and the culture did not proceed. However, as shown in FIG. 3, when the pH was adjusted to 8, it was recognized that there was an effect of suppressing a decrease in the culture rate as compared with a normal nutrient salt concentration (1 time).

以上のことから、本発明は、微細藻類の至適温度より高い水温で培養する場合に、培地の栄養塩濃度およびpHを調整することによって、培養速度の低下を抑制させることができることが示された。   From the above, it is shown that the present invention can suppress a decrease in the culture rate by adjusting the nutrient salt concentration and pH of the medium when culturing at a water temperature higher than the optimum temperature of microalgae. It was.

Claims (7)

微細藻類の培養において、
前記微細藻類の至適温度より高い温度において、
窒素原子当量で50mg/L以上およびリン原子当量で2mg/L以上の濃度の栄養塩を含む培地で行う培養方法。
In the culture of microalgae,
At a temperature higher than the optimum temperature of the microalgae,
A culture method performed in a medium containing a nutrient salt having a concentration of 50 mg / L or more in terms of nitrogen atom equivalent and 2 mg / L or more in terms of phosphorus atom equivalent.
前記培地が7未満のpHを有し、窒素原子当量で50mg/L〜350mg/L、リン原子当量で2mg/L〜10mg/Lの栄養塩を含むことを特徴とする請求項1に記載の培養方法。   2. The medium according to claim 1, wherein the medium has a pH of less than 7 and contains nutrient salts of 50 mg / L to 350 mg / L in terms of nitrogen atom equivalent and 2 mg / L to 10 mg / L in terms of phosphorus atom equivalent. Culture method. 前記培地が7〜8のpHを有し、窒素原子当量で50mg/L〜700mg/L、リン原子当量で2mg/L〜20mg/Lの栄養塩を含むことを特徴とする請求項1に記載の培養方法。   2. The medium according to claim 1, wherein the medium has a pH of 7 to 8 and contains nutrient salts of 50 mg / L to 700 mg / L in terms of nitrogen atom equivalent and 2 mg / L to 20 mg / L in terms of phosphorus atom equivalent. Culture method. 前記微細藻類の至適温度を超え前記至適温度より10℃高い温度までの温度域で行うことを特徴とする請求項1〜3のいずれか一項に記載の培養方法。   The culturing method according to any one of claims 1 to 3, wherein the culturing method is performed in a temperature range that exceeds an optimum temperature of the microalgae and is 10 ° C higher than the optimum temperature. 前記微細藻類は、緑藻網、プラシノ藻網、トレボウクシア藻網に属する藻類およびこれらの組み合わせの群から選択されることを特徴とする請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。   The method according to any one of claims 1 to 4, wherein the microalgae is selected from the group of algae belonging to a green alga net, a plasino alga net, a trevoxia algae net, and combinations thereof. 前記微細藻類は、トレボウクシア藻網に属する請求項5に記載の方法。   The method according to claim 5, wherein the microalgae belong to the Trevoxia algae network. 前記微細藻類は、クロロコッカムリトラーレである請求項6に記載の方法。   The method according to claim 6, wherein the microalgae is chlorococcum litorale.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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JP2019217468A (en) * 2018-06-21 2019-12-26 サイエンスシード株式会社 Organic matter processing system

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