JP2010527230A - Method for producing fermented propolis - Google Patents

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ジン イ,ヨン
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Abstract

本発明は、発酵プロポリスとその生産方法を提供するものであって、前記発酵プロポリスは、エタノールを含有する溶媒でプロポリス原塊を抽出し、可溶部の0.1〜10倍の量の結晶セルロースを添加し、粉末プロポリス抽出物を生産し、該抽出物では前記プロポリス抽出物が乾燥によって被覆され、重量比で1〜20倍の水を前記粉末に添加し、低温殺菌し、酵母、バチルス(桿菌)、ラクトバチルス(乳酸桿菌)、アスペルギルス、アセトバクター(酢酸菌)などの細菌を接種し、次いでその生成物を発酵させることによって生産される。The present invention provides a fermented propolis and a method for producing the same, wherein the fermented propolis extracts a propolis bulk with a solvent containing ethanol, and is 0.1 to 10 times as many crystals as the soluble part. Cellulose is added to produce a powder propolis extract, in which the propolis extract is coated by drying, 1 to 20 times the weight ratio of water is added to the powder, pasteurized, yeast, bacillus (Bacilli), Lactobacillus (Lactobacillus), Aspergillus, Acetobacter (Acetobacteria), and the like, and then the product is produced by fermentation.

Description

プロポリスの主成分はフラボノイドである。プロポリスは採取する木の種類によって異なるが、黄色から薄緑色を呈する。プロポリスに含まれるケイ皮酸及びクマル酸は独特の香りを有する。プロポリスの成分はその50%以上が樹脂であり、これはフラボノイドの強い吸湿性と、高粘性とに寄与する。プロポリスが優れた機能性成分を含むことは古くから信じられており、各種疾病の治癒に利用されてきた。プロポリスは、ハチが外敵の進入を防ぐため、ハチの巣の隙間を埋めて強化するのに用いられる物質である。木から採取される樹脂と、ワックスと、プロポリスに含まれている各種酵素を含むハチの唾液とは、強い抗菌性、抗ウィルス性、及び耐虫性を有していることが知られている。   The main component of propolis is flavonoids. Propolis varies from yellow to light green, depending on the type of tree collected. Cinnamic acid and coumaric acid contained in propolis have a unique aroma. More than 50% of the components of propolis are resin, which contributes to the strong hygroscopicity and high viscosity of flavonoids. It has long been believed that propolis contains excellent functional ingredients and has been used to cure various diseases. Propolis is a substance used by bees to fill and strengthen bee nests in order to prevent foreign enemies from entering. It is known that bee saliva containing resin collected from wood, wax, and various enzymes contained in propolis has strong antibacterial, antiviral, and insect resistance. .

一般に、プロポリスは、ハチの巣から採取したプロポリス原塊の溶解成分から得られ、水または水性混合物によって抽出される。エタノール抽出物の場合、その中に多量のエタノールを含有することから、高齢者や子供の摂取に限界があり、微生物によって発酵させることもできない。エタノールの濃度が高すぎるため、微生物が増殖できない。これを水溶性にするために、プロポリス原塊に含まれる水溶性成分が極めて少ない。プロポリス抽出物に含まれる樹脂成分が水溶性でないため、前記抽出物が水で希釈されると非相溶性樹脂凝集部を形成することから、発酵をこの状況で進行させることができない。プロポリスをエタノール抽出物として摂取する場合、樹脂状物質が口中に溶出して歯に付着し、極めて不都合である。前記プロポリスが水に溶解される場合、非相溶性樹脂は不溶化して容器の外壁に付着してしまう。このような問題のため、前記プロポリス成分の摂取に限界があった。このような限界を回避するために、多くの研究者らが水溶性プロポリスの開発を試みてきたが、これまで注目に値する結果は報告されていない。水溶化プロポリス抽出物が調製されているという報告はいくつかなされているが、それらの事例では放射性照射を利用している。プロポリスをその効能のために摂取する癌患者には放射能自体が有害であり得る。単純な水抽出物の場合、その収率は著しく低く、有用な生理活性成分を有する樹脂が水に不溶性である。樹脂を抽出物に含むことができない場合、その抽出物の生理活性は低下してしまう。   Generally, propolis is obtained from dissolved components of propolis bulk taken from beehives and extracted with water or an aqueous mixture. In the case of an ethanol extract, since it contains a large amount of ethanol, there is a limit to the intake of elderly people and children, and it cannot be fermented by microorganisms. Microorganisms cannot grow because the ethanol concentration is too high. In order to make this water-soluble, there are very few water-soluble components contained in the propolis bulk. Since the resin component contained in the propolis extract is not water-soluble, if the extract is diluted with water, it forms an incompatible resin agglomerated part, so that fermentation cannot proceed in this situation. When ingesting propolis as an ethanol extract, the resinous substance dissolves in the mouth and adheres to the teeth, which is extremely inconvenient. When the propolis is dissolved in water, the incompatible resin becomes insoluble and adheres to the outer wall of the container. Due to such problems, there was a limit to the intake of the propolis component. To circumvent such limitations, many researchers have attempted to develop water-soluble propolis, but no remarkable results have been reported so far. There have been several reports that water-soluble propolis extracts have been prepared, but in these cases radioactive radiation is used. Radioactivity itself can be detrimental to cancer patients who take propolis for its efficacy. In the case of a simple water extract, the yield is remarkably low, and resins with useful bioactive ingredients are insoluble in water. When the resin cannot be contained in the extract, the physiological activity of the extract is reduced.

このような抽出物は微生物を用いる発酵に適用できない。エタノール抽出物の場合、エタノールのために発酵を進行させることができない。水抽出物の場合、発酵には、高分子量物質を分解して生理活性を有する物質を作製することによって微生物増殖時に生産されるさまざまな酵素や細菌の生理作用を必要とすることから、樹脂が除去されると、発酵によって生理活性を高めるという概念を適用できない。   Such an extract cannot be applied to fermentation using microorganisms. In the case of an ethanol extract, fermentation cannot proceed due to ethanol. In the case of water extract, since fermentation requires the physiological action of various enzymes and bacteria produced during microbial growth by degrading high molecular weight substances to produce substances having physiological activity, Once removed, the concept of enhancing physiological activity by fermentation cannot be applied.

本発明は、基本的に非水相溶性であるプロポリス抽出物を水中に浮遊させることによって、菌株を発酵させて前記プロポリス抽出物を発酵させることができる環境を提供する方法である。基本的な技術は、前記プロポリス抽出物を微粒非相溶性粉末に浸透させ、乾燥し、水上に浮遊させて、前記浮遊させたプロポリス抽出物の微生物によってその発酵を可能にする技術である。その発酵を可能にする基本的技術は、プロポリス抽出物を非相溶性物質に浸透させ、乾燥させて微小な粉末を作り、その粉末化したプロポリス抽出物を水上に懸濁させ、さらに、細菌を接種することによってその発酵を進行させる技術である。前記背景技術は、水の存在下で前記発酵菌株を発酵の対象物に比較的に大きな表面積で接触させることによって、前記抽出物が水に非相溶性である場合でさえも発酵を可能にする。   The present invention is a method for providing an environment in which a propolis extract that is basically insoluble in water is suspended in water, thereby fermenting a strain and fermenting the propolis extract. The basic technique is a technique in which the propolis extract is infiltrated into a finely incompatible powder, dried, floated on water and allowed to ferment by the microorganisms of the suspended propolis extract. The basic technology that allows the fermentation is to infiltrate the propolis extract into incompatible materials, dry it to make a fine powder, suspend the powdered propolis extract in water, It is a technique that advances the fermentation by inoculation. The background art allows fermentation even when the extract is incompatible with water by contacting the fermentation strain with a relatively large surface area in the presence of water. .

本発明の目的は、菌株を発酵させて非水相溶性プロポリス抽出物粉末を発酵させることによって発酵プロポリス抽出物を提供することにある。そして、プロポリス抽出物に含有される高分子量物質を発酵によって分解し、低分子量化し、水溶性発酵プロポリスの生産を可能にすることにある。水中において当初は非相溶性のプロポリスを発酵させることが本発明で解決しようとする主な課題である。   An object of the present invention is to provide a fermented propolis extract by fermenting a strain and fermenting a non-aqueous compatible propolis extract powder. And it is in decomposing | disassembling the high molecular weight substance contained in a propolis extract by fermentation, making it low molecular weight, and enabling production of water-soluble fermentation propolis. Fermenting initially incompatible propolis in water is the main problem to be solved by the present invention.

水不溶性の物質の発酵は通常固形分発酵によって達成される。このタイプの発酵は穀類の発酵に適用できる。しかしながら、プロポリス抽出物は非水相溶性であるのみならず、粒子状でなく、塊や粘液状で存在する。したがって、菌株の接種による発酵を効果的に進行させることはできない。この問題を解消し、前記プロポリス抽出物を微粒粉末として水中で懸濁させるには、プロポリス抽出物を非相溶性微結晶性セルロースに吸着させればよい。前記抽出物が乾燥し、粒子状に粉末化されている場合は、塊状で樹脂状のプロポリス抽出物を微結晶性セルロースを用いて微粒粉末に吸着させる。前記抽出物が水中に懸濁されている場合は、前記微粒粉末によって作られる比較的に大きな表面積が、前記固形分発酵の場合同様に前記接種菌株によるより効率的な発酵を可能にする。   Fermentation of water insoluble materials is usually achieved by solid state fermentation. This type of fermentation can be applied to cereal fermentation. However, propolis extract is not only non-aqueous compatible, but also present in a lump or mucus rather than in particulate form. Therefore, the fermentation by the inoculation of the strain cannot proceed effectively. In order to solve this problem and suspend the propolis extract as fine powder in water, the propolis extract may be adsorbed on incompatible microcrystalline cellulose. When the extract is dried and pulverized into particles, the blocky and resinous propolis extract is adsorbed onto the fine powder using microcrystalline cellulose. When the extract is suspended in water, the relatively large surface area created by the fine powder allows more efficient fermentation by the inoculum as in the solid state fermentation.

本発明は、微結晶性セルロースを用いて非水相溶性プロポリス抽出物から微粒粉末を作り、それを水中に懸濁させ、しかも、それに発酵細菌を接種することによって発酵プロポリス抽出物を提供する。これにより、元来発酵不可能なプロポリスを発酵可能とし、さらに、プロポリスに含まれる一部の物質を代謝によって新しい有用な物質に転換する。特に、アレルギー誘発物質であるアレルゲンが除去されるので、プロポリスに対してアレルギーを持つ者でさえもプロポリス生成物を摂取してその健康を増進することができる。   The present invention provides a fermented propolis extract by making a fine powder from a non-aqueous compatible propolis extract using microcrystalline cellulose, suspending it in water and inoculating it with fermenting bacteria. As a result, the propolis which cannot be fermented originally can be fermented, and a part of the substance contained in the propolis is converted into a new useful substance by metabolism. In particular, since allergens, which are allergens, are removed, even those who are allergic to propolis can ingest the propolis product to improve its health.

本発明は以下のようないくつかの工程に分割することができる。   The present invention can be divided into several steps as follows.

(1)抽出、ろ過、蒸発、及び乾燥を行うことにより粉末プロポリス抽出物を作る工程と、(2)(1)の工程で得られた生成物を水中で懸濁し、細菌を接種し、さらに、発酵と増殖を行う工程と、(3)発酵工程で溶媒として用いた水を除去することによって生成物を粉末化するか、または水、エタノール、またはそれらの混合物を添加して抽出物を作り、最終プロポリス抽出物を得る工程。   (1) making a powder propolis extract by extraction, filtration, evaporation and drying; (2) suspending the product obtained in the step (1) in water, inoculating bacteria; (3) pulverizing the product by removing water used as a solvent in the fermentation process, or adding water, ethanol, or a mixture thereof to make an extract. And obtaining the final propolis extract.

前記抽出物を粉末化する工程では、エタノールを50〜100%(v/v:体積比)の濃度、プロポリス重量の2〜10倍の量で添加してエタノール希釈プロポリスを作り、その生成物を20〜80℃にて1〜24時間攪拌して、その有用成分を抽出する。次いで、得られた生成物をろ過するか、または遠心分離して無用の不溶性成分を除去し、清澄な抽出物を得る。エタノールの最適濃度は70〜95%(v/v:体積比)である。添加する溶媒の量は天然プロポリス重量の2〜10倍であるが、同溶媒の最適添加量は天然プロポリス重量の3〜5倍である。抽出後の固形分の量はプロポリス原塊の原産地、採取時期、及び含水量によって異なるが、通常20〜50%(w/w:重量比)の範囲である。抽出時の温度は20〜80℃でよいが、適正温度は40〜70℃である。抽出効率に関連する要素である抽出時間は1〜24時間に設定た。結果として得られる抽出物を真空蒸発させて、その固形粉末の濃度を10〜30%(w/w:重量比)とし、さらに、10℃以下に冷却して抽出中に溶媒に溶解したワックスを除去した。   In the step of powdering the extract, ethanol is added at a concentration of 50 to 100% (v / v: volume ratio) and 2 to 10 times the weight of propolis to make an ethanol diluted propolis, and the product is The useful components are extracted by stirring at 20 to 80 ° C. for 1 to 24 hours. The resulting product is then filtered or centrifuged to remove unwanted insoluble components and a clear extract is obtained. The optimal concentration of ethanol is 70-95% (v / v: volume ratio). The amount of solvent to be added is 2 to 10 times the weight of natural propolis, but the optimum amount of the solvent is 3 to 5 times the weight of natural propolis. The amount of solid content after extraction varies depending on the origin of the propolis bulk, the collection time, and the water content, but is usually in the range of 20 to 50% (w / w: weight ratio). The temperature at the time of extraction may be 20 to 80 ° C, but the appropriate temperature is 40 to 70 ° C. The extraction time, which is an element related to the extraction efficiency, was set to 1 to 24 hours. The resulting extract is evaporated in vacuo to a solid powder concentration of 10-30% (w / w: weight ratio) and further cooled to 10 ° C. or lower to dissolve the wax dissolved in the solvent during extraction. Removed.

結果として得られたプロポリス抽出物に固形分重量の0.1〜10倍の量のセルロースを添加した後、真空乾燥させて微粒粉末を作った。この微粒粉末は、その上にプロポリス抽出物を拡散させてセルロースに吸着させるためのものである。本発明では、デキストリンは容易に水に溶解してしまうため、添加物として適当ではない。デキストリンの場合、粉末化特性を得ることが非常に困難であり、水中に懸濁して細菌を接種することもできない。でんぷんの場合も、水に溶解しやすく、発酵させるための低温殺菌時に水に溶解してしまうため、プロポリス抽出物を効果的に拡散させることができない。この観点で、セルロースはでんぷん、デキストリン、及び食品の原材料を粉末化するために使用されるラクトースから差別化される。   Cellulose in an amount of 0.1 to 10 times the solid content was added to the resulting propolis extract, and then vacuum-dried to produce a fine powder. This fine powder is for diffusing the propolis extract on it and adsorbing it to cellulose. In the present invention, dextrin is easily dissolved in water and is not suitable as an additive. In the case of dextrin, it is very difficult to obtain powdered properties, and it cannot be suspended in water and inoculated with bacteria. Also in the case of starch, it is easy to dissolve in water and dissolves in water at the time of pasteurization for fermentation, so the propolis extract cannot be effectively diffused. In this regard, cellulose is differentiated from starch, dextrin, and lactose used to powder food ingredients.

発酵生成物は水中でプロポリス抽出物粉末を5〜50%(w/v:重量体積比)の濃度で添加し、低温殺菌を行い、細菌を接種し、さらにその細菌を増殖させて生産する。前記生成物は用いる接種細菌に応じて独特な特性を持ち得る。接種細菌としては、酵母、細菌、及びカビを使用できる。酵母の中では、サッカロミセス属に含まれる酵母を使用できる。細菌の中では、バチルス(桿菌)種、アセトバクター(酢酸菌)種、及び乳酸桿菌種 を使用できる。カビの中では、コウジカビ種を発酵に使用できる。食品に使用され、前記プロポリス抽出物粉末が懸濁されている液中で増殖できるものであれば全て発酵に使用することができる。発酵プロポリス抽出物は水、酒精及びエタノール、またはその混合液のような溶媒で再抽出して得ることもできる。   The fermentation product is produced by adding propolis extract powder in water at a concentration of 5 to 50% (w / v: weight / volume ratio), pasteurizing, inoculating the bacteria, and further proliferating the bacteria. The product may have unique properties depending on the inoculum used. As the inoculated bacteria, yeast, bacteria, and molds can be used. Among yeasts, yeasts included in the genus Saccharomyces can be used. Among bacteria, Bacillus species, Acetobacter species, and Lactobacillus species can be used. Among molds, Aspergillus species can be used for fermentation. Anything can be used for fermentation as long as it can be used in food and can grow in a liquid in which the propolis extract powder is suspended. The fermented propolis extract can also be obtained by re-extraction with a solvent such as water, alcohol and ethanol, or a mixture thereof.

発明の実施態様
本発明の基本概念は、以下のような工程によってより良いプロポリス配合物と発酵プロポリスとを作ることにある。
Embodiments of the Invention The basic concept of the present invention is to make a better propolis blend and fermented propolis by the following steps.

プロポリス抽出物を酒精または希釈酒精を用いて製造する。粉末化させるためにセルロースを添加し、真空乾燥によってエタノールを除去する。得られた生成物を水中で5〜50%(w/v:重量体積比)の比で懸濁させた後、細菌、カビ、酵母などの食用に用いられる細菌を前記粉末懸濁水に適量添加し、一定の温度と湿度で前記細菌を増殖させる。増殖細菌の生理代謝によって、多様な薬理成分と非相溶性高分子量物質とが分解されるか、または新しい成分に転換されて、より良いプロポリス配合物と発酵プロポリスが生産される。   Propolis extract is produced using spirits or diluted spirits. Add cellulose to powder and remove ethanol by vacuum drying. After suspending the obtained product in water at a ratio of 5 to 50% (w / v: weight to volume ratio), an appropriate amount of bacteria used for food such as bacteria, mold, yeast, etc. is added to the powder suspension water. The bacteria are grown at a constant temperature and humidity. Depending on the physiological metabolism of the growing bacteria, various pharmacological components and incompatible high molecular weight substances are degraded or converted into new components to produce better propolis formulations and fermented propolis.

以下に本発明を詳細に説明する。   The present invention is described in detail below.

本発明は以下のように分割できる。   The present invention can be divided as follows.

抽出、ろ過、蒸発、及び乾燥させることによってプロポリス抽出物を生産する。粉末を水中に懸濁し、細菌を接種・増殖させる。溶媒として使用した水を除去することによって得られた生成物を粉末化させるか、または水、酒精、もしくはその混合物を添加することによって抽出物を製造することにより最終発酵プロポリスを製造する。   Propolis extract is produced by extraction, filtration, evaporation, and drying. Suspend the powder in water and inoculate and grow bacteria. The final fermented propolis is produced by pulverizing the product obtained by removing the water used as solvent or by producing the extract by adding water, spirits, or mixtures thereof.

前記抽出物を粉末化させる工程では、先ずプロポリスをエタノールまたは水で希釈する。エタノールの場合、50〜100%(v/v:体積比)濃度のエタノールをプロポリス重量の2〜10倍の量で添加する。20〜80℃にて1〜24時間撹拌することによって抽出した後、有用成分を溶解させ、不溶性の無用の物質をろ過または遠心分離によって除去して澄んだエキスを得る。エタノールの濃度を50〜100%(v/v:体積比)に設定する理由は、エタノールの濃度が50%(v/v:体積比)未満になるとタンニンや樹脂などの不溶性物質の抽出が著しく低下するためである。エタノールの最適濃度は70〜95%(v/v:体積比)である。溶媒の添加量はプロポリス重量の2〜10倍である。抽出効率を最大化するか、または抽出溶媒の量を最小化するかという目的に応じて調整することができる。溶媒の量が増えるほど、抽出効率は高くなり、抽出時間を短縮することができる。溶媒の量がプロポリス重量の2倍未満の場合、抽出効率の著しい低下は避けられず、ろ過も非常に困難になる。溶媒の量がプロポリス重量の10倍を超えると、理論的には問題ないが、過剰な溶媒は全工程の効率を低下させるきらいがある。従って、最適な溶媒の量はプロポリス重量の3〜5倍であり、場合によっては、プロポリス重量の1〜5倍の溶媒を添加することによって第2次抽出を行って第1次抽出後に残留したケーキをろ過することもできる。プロポリス原塊から得られる固形分の量は、天然プロポリスの原産地、採取時期、及び含水量によって異なるが、通常20〜50%(w/w:重量比)の範囲である。天然プロポリスには、採取時に花粉や粉塵などの異物が含まれことがある。清澄な抽出物を得るには、異物をフィルター除去する必要があるが、花粉は可食なので残存させてもよい。ろ過時には主に土壌や粉塵を除去する必要がある。抽出時の温度は20〜80℃である。温度が低すぎる場合は抽出に要する時間が長くなりする。温度が80℃以上になる場合には、生理活性成分があまりに高い温度でその活性を失うこともあり得る。適切な抽出温度は、抽出時間と抽出効率を考慮すると40〜70℃である。この温度範囲では、生理活性成分の活性消失を最小化し、抽出効率を最大化することができる。抽出効率関連要素の抽出時間は1〜24時間と設定する。抽出時間が短すぎる場合、抽出物の品質が低下する。抽出時間が24時間を超える場合、その抽出効率はさらに高くなるが、生産性が低下して経済的でない。抽出物のみを生産できる場合には、抽出時間、溶媒の量、または抽出温度が生成物の品質や本発明の適用の決定要因にならない。得られた抽出物を真空蒸発して固形粉末の濃度を10〜30%(w/w:重量比)にさせ、次いで10℃未満の温度に冷却してプロポリス原塊の抽出時に溶解したワックスを除去する。ワックスはプロポリス原塊に含有され、抽出段階で抽出さる。その抽出物を一部抽出して溶媒の量を減少させ冷却する場合、ワックスは薄茶色または白色の沈澱として析出する。それをろ過して除去すると、ワックスなしのプロポリス抽出物を得ることができる。ワックスを除去する理由は、ワックスは熱によって容易に液状化するためである。セルロースの添加時、加熱、及び溶媒の除去過程でプロポリスは30〜70℃の温度範囲で処理される。この条件下でワックスが残留していると、粘着性のワックスはプロポリスの粉末化を困難とする原因となる。   In the step of powdering the extract, first, propolis is diluted with ethanol or water. In the case of ethanol, 50 to 100% (v / v: volume ratio) ethanol is added in an amount 2 to 10 times the weight of propolis. After extraction by stirring at 20 to 80 ° C. for 1 to 24 hours, useful components are dissolved, and insoluble useless substances are removed by filtration or centrifugation to obtain a clear extract. The reason why the ethanol concentration is set to 50 to 100% (v / v: volume ratio) is that extraction of insoluble substances such as tannin and resin is remarkable when the ethanol concentration is less than 50% (v / v: volume ratio). It is because it falls. The optimal concentration of ethanol is 70-95% (v / v: volume ratio). The amount of solvent added is 2 to 10 times the weight of propolis. It can be adjusted according to the purpose of maximizing extraction efficiency or minimizing the amount of extraction solvent. As the amount of the solvent increases, the extraction efficiency increases and the extraction time can be shortened. When the amount of the solvent is less than twice the weight of propolis, a significant decrease in extraction efficiency is inevitable, and filtration becomes very difficult. If the amount of solvent exceeds 10 times the weight of propolis, there is no problem in theory, but excess solvent tends to decrease the efficiency of the whole process. Therefore, the optimal amount of solvent is 3-5 times the weight of propolis, and in some cases, the secondary extraction was performed by adding 1-5 times the weight of propolis and remained after the first extraction. The cake can also be filtered. The amount of solids obtained from the propolis bulk is usually in the range of 20 to 50% (w / w: weight ratio), although it depends on the origin of the natural propolis, the time of collection, and the water content. Natural propolis may contain foreign substances such as pollen and dust at the time of collection. To obtain a clear extract, it is necessary to filter out foreign substances, but pollen may be left because it is edible. It is necessary to remove mainly soil and dust during filtration. The temperature during extraction is 20 to 80 ° C. If the temperature is too low, the time required for extraction becomes longer. When the temperature is 80 ° C. or higher, the physiologically active ingredient may lose its activity at a too high temperature. A suitable extraction temperature is 40 to 70 ° C. in consideration of extraction time and extraction efficiency. In this temperature range, the loss of activity of the physiologically active ingredient can be minimized and the extraction efficiency can be maximized. The extraction time for extraction efficiency-related elements is set to 1 to 24 hours. If the extraction time is too short, the quality of the extract is reduced. When the extraction time exceeds 24 hours, the extraction efficiency is further increased, but the productivity is lowered and it is not economical. Where only the extract can be produced, the extraction time, the amount of solvent, or the extraction temperature is not a determinant of product quality or application of the present invention. The resulting extract is evaporated in vacuo to a solid powder concentration of 10-30% (w / w: weight ratio), then cooled to a temperature below 10 ° C. to dissolve the wax dissolved during the extraction of the propolis bulk. Remove. The wax is contained in the propolis bulk and is extracted at the extraction stage. When the extract is partially extracted to reduce the amount of solvent and cool, the wax precipitates as a light brown or white precipitate. If it is removed by filtration, a propolis extract without wax can be obtained. The reason for removing the wax is that the wax is easily liquefied by heat. During the addition of cellulose, the propolis is treated in the temperature range of 30-70 ° C. during the heating and solvent removal process. If the wax remains under these conditions, the sticky wax causes difficulty in pulverizing the propolis.

プロポリスが被覆されて微結晶性セルロース(MCC)に吸着するような微粒粉末を作るには、抽出物固形分の0.1〜10倍の量のセルロースを添加・攪拌し、次いで真空乾燥させる。ここで、セルロースはほとんどの樹木、植物の木質部、及び茎を形成する非相溶性物質である。通常、おがくず状のセルロースを使用できるが、より微小な粉末を作るには、微結晶性セルロース(MCC)を使用する方が良い。おがくずタイプの場合、その原木は松の木、カシの木、朝鮮五葉松の木であってもよく、微小であればあるほどよい。また、セルロースは、セルロースおがくずを添加し、真空乾燥によって溶媒を除去し、さらに粉砕機で粉砕した後に微粒粉末にすることもできる。容易に入手できる結晶セルロースは微結晶化セルロースであり、MCC(微結晶性セルロース)とも略して呼ばれ、主に食品や医薬品の添加物として使用され、水またはエタノールには溶解しない。加えて、デキストリンやでんぷんを添加物として使用することもできるが、デキストリンの場合、高温で水に溶解しやすく、水中で懸濁して細菌を接種して発酵させることができないため、添加物として機能できず粉末形態をなすことはできない。でんぷんの場合も、水に容易に溶解するため、プロポリス抽出物を効率的に懸濁することができない。従って、本発明の最適添加物は水溶解性が全くないセルロースである。これが、本発明の中心となる考えであり、食品の粉末化に添加物として一般的に使用されてきたでんぷん、デキストリン、及びラクトースとの主な差別化点である。   In order to make a fine powder coated with propolis and adsorbed to microcrystalline cellulose (MCC), 0.1 to 10 times as much cellulose as the solid content of the extract is added and stirred, and then vacuum dried. Here, cellulose is an incompatible material that forms the xylem of most trees, plants, and stems. Normally, sawdust cellulose can be used, but it is better to use microcrystalline cellulose (MCC) in order to make a finer powder. In the case of sawdust type, the log may be a pine tree, an oak tree, or a Korean five-leaf pine tree, and the smaller the better. Cellulose can also be made into a fine powder after adding cellulose sawdust, removing the solvent by vacuum drying, and further pulverizing with a pulverizer. Crystalline cellulose that is readily available is microcrystalline cellulose, also abbreviated as MCC (microcrystalline cellulose), which is mainly used as an additive for foods and pharmaceuticals and does not dissolve in water or ethanol. In addition, dextrin and starch can also be used as an additive, but in the case of dextrin, it is easy to dissolve in water at high temperatures and cannot function as an additive because it cannot be suspended in water and inoculated with bacteria. It cannot be made into powder form. Also in the case of starch, since it dissolves easily in water, the propolis extract cannot be suspended efficiently. Therefore, the optimum additive of the present invention is cellulose which has no water solubility. This is the central idea of the present invention and is the main differentiating point from starch, dextrin, and lactose that have been commonly used as additives in powdered foods.

エタノールが完全に除去されているプロポリス抽出物粉末を水中で懸濁して細菌の接種によって発酵させるか、またはプロポリス抽出物を発酵済みの液中で懸濁して追加発酵させる。プロポリス抽出物粉末を水に5〜50%(w/v:重量体積比)の濃度比で添加した後、低温殺菌し、細菌を接種する。細菌が増殖すると、接種した細菌に応じて独特の発酵生成物が得られる。発酵させるために接種する微生物としては酵母、細菌、カビを使用することができる。酵母の中では、サッカロミセス属に含まれる酵母を使用できる。細菌の中では、バチルス(桿菌)種、アセトバクター(酢酸菌)種、及び乳酸桿菌種を使用できる。カビの中では、コウジカビ種を発酵に使用できる。食品用に適し、プロポリス抽出物粉末が拡散されている液中で増殖できるものであれば全て発酵に使用することができる。酵母の有用な品質は、容易に増殖することと、一般食品で広範に利用されていることと、その多様性により豊富な選択が可能であることにある。多くの場合、エタノールが発酵の副産物として生産され、酢酸または他の有機酸に酸化させると、その発酵液のpHを低下させるので、酸性条件下で溶解する有用な物質を多く抽出することができる。また、微生物の大きさは細菌に比べて相対的に大きいので、酵母を液体状態で容易にろ過することができる。代表的に用いられる酵母は、シゾサッカロミセス属のシゾサッカロミセス・ポンベとシゾサッカロミセス・オクトスポロンス(octosporons)、ハンセニアスポラ属、サッカロミコデス属、サッカロミセス属のサッカロミセス・セレビシエ(出芽酵母)、サッカロミセス・サケ(清酒酵母)、サッカロミセス・エリプソイデウス、サッカロミセス・フォルモセンシス、サッカロミセス・カールスベルゲンシス(ビール酵母)、サッカロミセス・パストリアヌス、サッカロミセス・ディアスタティカス(糖化酵母)、サッカロミセス・ロウキシイ(醤油醸造酵母)、サッカロミセス・コレアヌス、ピキア属、ハンゼヌラ属、デバリオミケス属、リポマイセス属(油脂酵母)、クルイベロマイセス属のクルイベロマイセス・ラクティス、クルイベロマイセス・フラジリス、クリプトコッカス属、トルロプシス属、クロエケラ属、カンジダ属のカンジダ・ユティリス(油脂資化性酵母)、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・リポリチカ、カンジダ・グイリエルモンディ、カンジダ・ロブスタ、カンジダ・アルビカンス、ロドトルラ属、及びトリコスポロン属などである。   The propolis extract powder from which ethanol has been completely removed is suspended in water and fermented by bacterial inoculation, or the propolis extract is suspended in the fermented liquor and boosted. Propolis extract powder is added to water at a concentration ratio of 5-50% (w / v: weight volume ratio), then pasteurized and inoculated with bacteria. As bacteria grow, unique fermentation products are obtained depending on the inoculated bacteria. As microorganisms inoculated for fermentation, yeast, bacteria, and molds can be used. Among yeasts, yeasts included in the genus Saccharomyces can be used. Among bacteria, Bacillus species, Acetobacter species, and Lactobacillus species can be used. Among molds, Aspergillus species can be used for fermentation. Anything suitable for food and capable of growing in a liquid in which propolis extract powder is diffused can be used for fermentation. The useful quality of yeast is that it grows easily, is widely used in general foods, and allows for a wide selection due to its diversity. In many cases, ethanol is produced as a by-product of fermentation and when oxidized to acetic acid or other organic acids will lower the pH of the fermentation broth, many useful substances that dissolve under acidic conditions can be extracted. . Moreover, since the size of microorganisms is relatively larger than that of bacteria, yeast can be easily filtered in a liquid state. The yeasts typically used are Schizosaccharomyces genus Schizosaccharomyces pombe and Schizosaccharomyces octosporons, Hansenia spora, Saccharomycodes, Saccharomyces saccharomyces cerevisiae (budding yeast), (Sake yeast), Saccharomyces ellipsoidus, Saccharomyces formosensis, Saccharomyces carlsbergensis (beer yeast), Saccharomyces pastorianus, Saccharomyces diastaticus (saccharified yeast), Saccharomyces rouxii (soy sauce brewing yeast), Saccharomyces Choleanus, Pichia genus, Hansenula genus, Debariomyces genus, Lipomyces genus (oil-fat yeast), Kluyveromyces genus Kluyveromyces lactis Kluyveromyces fragilis, Cryptococcus genus, Torlopsis genus, Chloequera spp. These include Candida albicans, Rhodotorula, and Trichosporon.

乳酸桿菌は、腸内細菌(腸管微生物叢)を変化させることによって腸内を浄化し、有用な有機酸を生産することで広く知られている。乳酸桿菌の中では、ラクトバチルス(乳酸桿菌)属のラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・アシドフィルス(好酸性乳酸菌)、ラクトバチルスSNUL、ビフィドバクテリウム属、レンサ球菌属のサーモフィラス種(高度好熱菌)、ロイコノストック属、及びペディオコッカス属を使用できる。アセトバクター(酢酸菌)は、発酵によって有機酸を生産する代表的な菌で、酢の生産、酒の発酵などに広く利用されている。適用可能なアセトバクター(酢酸菌)は、アセトバクター・シュチェンバチ(schuetzenbachii)、アセトバクター・アセンダンス、アセトバクター・ゲンゲナム(gengenum)、アセトバクター・メソキシダンス(mesoxydans)、アセトバクター・メラノゲナム(melanoogenum)、アセトバクター・サブオキシダンス、アセトバクター・アセチなどである。バチルス属細菌は稲わらに存在し、韓国では発酵大豆、豆ペーストおよび唐辛子中に多く用いられる。有用なバチルス(桿菌)は、枯草菌、納豆菌、セレウス菌、及び巨大菌などの豆ペースト発酵に関与することで知られているバチルス属に含まれる細菌である。カビの中では、コウジカビが有用であり、アスペルギルス属のニガー(黒コウジカビ)が代表的である。   Lactobacillus is widely known for purifying the intestines by producing enteric bacteria (intestinal microbiota) and producing useful organic acids. Among the Lactobacilli, Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus (acidophilic lactic acid bacteria), Lactobacillus SNUL, Bifidobacterium, and Streptococcus thermophilus species (highly thermophilic bacteria) ), Leuconostoc genus, and Pediococcus genus. Acetobacter (acetic acid bacterium) is a typical bacterium that produces organic acids by fermentation, and is widely used for vinegar production, sake fermentation, and the like. Applicable acetobacters are acetobacter schuenbachii, acetobacter ascendance, acetobacter gengenum, acetobacter mesoxydans, acetobacter melanogenenum, aceto These include Bacter suboxydance and Acetobacter aceti. Bacillus bacteria are present in rice straw, and in Korea, they are often used in fermented soybeans, bean paste and chili. Useful Bacillus is a bacterium contained in the genus Bacillus known to be involved in bean paste fermentation such as Bacillus subtilis, Bacillus natto, Bacillus cereus, and Giant fungus. Among molds, Aspergillus is useful, and Aspergillus niger (black Aspergillus) is representative.

上記の細菌を、水中で懸濁され低温殺菌された本発明のプロポリスに接種すると、接種された細菌の種類に応じた品質で発酵プロポリス抽出物が生産される。プロポリス粉末を発酵させるにあたって、一部の菌体の増殖はプロポリスに含まれた物質によって制限される。この場合、その菌体を予め培養して一定の濃度にまで増殖させ、次いでプロポリス粉末をその中で懸濁させる場合、このように再培養することによってプロポリス発酵物を生産できる。この場合、プロポリス粉末の懸濁がその菌体の増殖を停止しないことから、高濃度の菌体によって迅速な発酵を行うことができる。それは有用な菌体を用いることに非常に役立つが、同時にプロポリス抽出物の増殖は通常非常に緩慢になる。   When the above bacteria are inoculated into the propolis of the present invention suspended in water and pasteurized, a fermented propolis extract is produced with a quality according to the type of the inoculated bacteria. In fermenting propolis powder, the growth of some cells is limited by the substances contained in the propolis. In this case, when the cells are cultured in advance and grown to a certain concentration, and then the propolis powder is suspended therein, the propolis fermentation product can be produced by re-culturing in this way. In this case, since the suspension of the propolis powder does not stop the growth of the cells, rapid fermentation can be performed with a high concentration of cells. It is very useful for using useful cells, but at the same time the growth of propolis extract is usually very slow.

以下、本発明の内容を詳細に説明するが、本発明の範囲は下記の実施例によって限定されるものではない。   The contents of the present invention will be described in detail below, but the scope of the present invention is not limited by the following examples.

実施例(1)プロポリス抽出物粉末の生産
4,000mlのエタノールを1,000gのプロポリス原塊に添加し、50℃にて5時間撹拌することによってプロポリスを抽出する。得られた抽出物をろ過し、2,000mlのエタノールを残留する固形分に再度添加して再度抽出・ろ過する。その結果、合計5,600mlの抽出物を生産する。得られた抽出物を4,500mlになるまで真空蒸発させ、そのエキスを5℃に冷却することによって抽出液を生産してミツロウ(ワックス)沈殿物を除去する。この抽出液中の固形分含有量は540gであり、プロポリス原塊からの抽出効率は54%(w/w:重量比)であった。540gのMCC(微結晶性セルロース)を生成物に添加し、真空下で蒸発させることによって溶媒を除去した。ほとんどの溶媒が除去された時点で、その生成物を採取してコンベクションオーブン内で50℃にて完全乾燥させ、最終的に1,050gのプロポリス抽出物粉末を生産した。
Example (1) Production of Propolis Extract Powder 4,000 ml of ethanol is added to 1,000 g of propolis bulk and stirred at 50 ° C. for 5 hours to extract propolis. The obtained extract is filtered, and 2,000 ml of ethanol is added again to the remaining solid, followed by extraction and filtration again. As a result, a total of 5,600 ml of extract is produced. The resulting extract is evaporated in vacuo to 4,500 ml and the extract is cooled to 5 ° C. to produce an extract and remove beeswax (wax) precipitate. The solid content in this extract was 540 g, and the extraction efficiency from the propolis bulk was 54% (w / w: weight ratio). 540 g of MCC (microcrystalline cellulose) was added to the product and the solvent was removed by evaporation under vacuum. When most of the solvent was removed, the product was collected and completely dried at 50 ° C. in a convection oven, finally producing 1,050 g of propolis extract powder.

実施例(2)発酵プロポリス抽出物粉末の生産
上記の実施例(1)で生産したプロポリス抽出物粉末を粉砕し、60メッシュのステンレスふるいで選別し、ふるいを通過した微粉末のみを採取し、発酵に用いた。
Example (2) Production of Fermented Propolis Extract Powder The propolis extract powder produced in Example (1) above was pulverized and screened with a 60 mesh stainless steel sieve, and only the fine powder that passed through the sieve was collected. Used for fermentation.

30gのプロポリス抽出物を300mlの水に添加し、混合した。得られた混合物を70℃にて3時間放置して低温殺菌した。その生成物に、予め調製した酵母の一種であるサッカロミセス・セレビシエ(出芽酵母)を添加し、150rpmで遠心し、37℃にて2日間インキュベートした。その結果、前記酵母の濃度は接種時の65倍に増加し、フラボノイドの含有量は全国食品工業所定の方法で測定したところ、21%増加していた。これは前記酵母が増殖するにつれて配糖体の形態で存在していたフラボノイド配糖体の糖質が除去され、その結果としてフラボノイドの含有量が増加したためと考察された。プロポリスの強臭は薄れ、その酸味が増加し、それを測定したところ、酸性度は25%増加していた。   30 g of propolis extract was added to 300 ml of water and mixed. The resulting mixture was left to pasteurize at 70 ° C. for 3 hours. Saccharomyces cerevisiae (budding yeast), a kind of yeast prepared in advance, was added to the product, centrifuged at 150 rpm, and incubated at 37 ° C. for 2 days. As a result, the concentration of the yeast increased 65 times that at the time of inoculation, and the flavonoid content was increased by 21% as measured by the method prescribed by the national food industry. This was considered to be because the flavonoid glycoside carbohydrates present in the form of glycosides were removed as the yeast grew, resulting in an increase in the content of flavonoids. The strong odor of propolis faded, its acidity increased, and when measured, the acidity increased by 25%.

実施例(3)
上記の実施例(2)のように、30gの培養液を調製し、それに5%(w/v:重量体積比)のグルコースを添加してその発酵性を増加させた。枯草菌を接種し、それを39℃にて40時間培養した。その結果、発酵終了時の菌体の量は発酵初期の72倍に増加した。
Example (3)
As in Example (2) above, 30 g of a culture solution was prepared, and 5% (w / v: weight / volume ratio) of glucose was added thereto to increase its fermentability. Bacillus subtilis was inoculated and cultured at 39 ° C. for 40 hours. As a result, the amount of bacterial cells at the end of the fermentation increased 72 times compared to the initial stage of the fermentation.

実施例(4)
上記の実施例(2)のように培養液を調製し、それに10%のグルコースを添加してその発酵性を増加させた。ラクトバチルス・アシドフィルス(好酸性乳酸菌)を接種し、それを35℃にて60時間培養した。その結果、菌体の量は65倍増加し、酸性度は18%低下した。
Example (4)
A culture solution was prepared as in Example (2) above, and 10% glucose was added thereto to increase its fermentability. Lactobacillus acidophilus (acidophilic lactic acid bacterium) was inoculated and cultured at 35 ° C. for 60 hours. As a result, the amount of bacterial cells increased 65 times, and the acidity decreased by 18%.

実施例(5)
上記の実施例(2)のように培養液を調製し、アスペルギルス・ニガー(黒コウジカビ)を接種し、30℃にて4日間培養した。その結果、菌体の量は32倍増加し、全国食品工業所定のプロテアーゼ・アミラーゼの分析法を行ったところ、プロテアーゼおよびアミラーゼの活性を確認した。この結果から、前記菌体が増殖するにつれて有用な酵素が生産されることを見出した。
Example (5)
A culture solution was prepared as in Example (2) above, inoculated with Aspergillus niger (black koji mold), and cultured at 30 ° C. for 4 days. As a result, the amount of bacterial cells increased 32 times, and when the analysis method for protease amylase prescribed by the national food industry was conducted, the activity of protease and amylase was confirmed. From this result, it was found that useful enzymes are produced as the cells grow.

実施例(6)
上記の実施例(2)のように培養液を調製し、種菌としてアセトバクター・アセチを接種し、30℃にて3日間培養した。その結果、菌体の量は60倍増加し、酸性度は60%低下して非常に酸味が強くなった。
Example (6)
A culture solution was prepared as in Example (2) above, Acetobacter aceti was inoculated as an inoculum, and cultured at 30 ° C. for 3 days. As a result, the amount of bacterial cells increased 60 times, the acidity decreased by 60%, and the acidity became very strong.

実施例(7)
上記の実施例(6)で生産した発酵物質に100%の水を添加して全体積を2倍にし、その生成物を70℃にて5時間抽出し、ろ過して無用の物質を除去した。得られた生成物を真空蒸発して固形分含有量を25%(w/v:重量体積比)にすることによって、水溶性プロポリス抽出物を生産した。
Example (7)
100% water was added to the fermented material produced in Example (6) above to double the total volume, and the product was extracted at 70 ° C. for 5 hours and filtered to remove unwanted material. . A water-soluble propolis extract was produced by evaporating the resulting product in vacuo to a solids content of 25% (w / v: weight to volume ratio).

実施例(8)
上記の実施例(1)で調製した100gのプロポリス抽出物粉末に100%の水を添加し、それを80℃にて30分加熱して低温殺菌した。サッカロミセス・サケ(清酒酵母)とアスペルギルス・ニガー(黒コウジカビ)とを接種し、30℃にて3日間培養した。凍結乾燥後、93gの発酵プロポリス粉末93gを得た。
Example (8)
100% of water was added to 100 g of propolis extract powder prepared in the above Example (1), and it was pasteurized by heating at 80 ° C. for 30 minutes. Saccharomyces salmon (sake yeast) and Aspergillus niger (black koji mold) were inoculated and cultured at 30 ° C. for 3 days. After lyophilization, 93 g of fermented propolis powder 93 g was obtained.

実施例(9)
上記の実施例(1)で調製した100gのプロポリス抽出物粉末に200gの水を添加し、それを80℃にて30分間加熱して低温殺菌した。それに納豆菌と枯草菌とを接種し、40℃にて3日間培養した。凍結乾燥後、89gの発酵プロポリス粉末を得た。
Example (9)
200 g of water was added to 100 g of propolis extract powder prepared in the above Example (1), and it was pasteurized by heating at 80 ° C. for 30 minutes. It was inoculated with Bacillus natto and Bacillus subtilis and cultured at 40 ° C. for 3 days. After lyophilization, 89 g of fermented propolis powder was obtained.

実施例(10)
上記の実施例(8)で調製した50gの発酵プロポリス粉末に抽出溶媒として250mlの70%(v/v:体積比)酒精を添加した。それを60℃にて5時間抽出してろ過することによって不溶性物質を除去した。その生産した抽出物を真空蒸発して液状の発酵プロポリス中の固形分含有量を25%(w/v:重量体積比)にすることによって溶媒を除去した。
Example (10)
250 ml of 70% (v / v: volume ratio) sake was added as an extraction solvent to 50 g of the fermented propolis powder prepared in Example (8) above. It was extracted at 60 ° C. for 5 hours and filtered to remove insoluble material. The extract was vacuum evaporated to remove the solvent by bringing the solid content in the liquid fermentation propolis to 25% (w / v: weight to volume ratio).

実施例(11)
上記の実施例(1)で調製した100gのプロポリス抽出物粉末に200g水を添加し、それを80℃にて30分加熱して低温殺菌し、それに納豆菌を接種し、40℃にて2日間培養した。アセトバクター・アセチを接種し、1日間培養後、凍結乾燥させて78gの発酵プロポリス粉末を作った。
Example (11)
200 g of water is added to 100 g of the propolis extract powder prepared in the above Example (1), heated at 80 ° C. for 30 minutes, pasteurized, inoculated with Bacillus natto, and 2 at 40 ° C. Cultured for days. Acetobacter aceti was inoculated, cultured for 1 day, and lyophilized to produce 78 g of fermented propolis powder.

実施例(12)
本発明で用いた菌株中、セレウス菌を前記プロポリス抽出物粉末が懸濁されている培養液中で増殖させることは一般的に不可能であった。その理由は、そのカビ(真菌)の増殖がプロポリスに含まれる一部の成分によって制限されるためである。従って、この場合には、1%(w/v:重量体積比)の大豆抽出物を500mlの前記抽出物に添加し、次いで、本発明の発酵プロポリスを生産するため、前記細菌を接種し、それを発酵させて菌体の濃度を80倍を超えて増加させた。上記の実施例(1)で生産した100gのプロポリス抽出物粉末を添加し、懸濁させた時点で、本発明の発酵プロポリスを生産するために40℃にて1日間増殖させた。その発酵完了後に水を除去して最終的に108gの発酵プロポリス粉末を生産した。
Example (12)
Of the strains used in the present invention, it was generally impossible to grow Bacillus cereus in a culture solution in which the propolis extract powder was suspended. The reason is that the growth of the mold (fungus) is limited by some components contained in the propolis. Thus, in this case, 1% (w / v: weight to volume ratio) of soy extract is added to 500 ml of the extract and then inoculated with the bacteria to produce the fermented propolis of the invention, It was fermented to increase the cell concentration by over 80 times. When 100 g of propolis extract powder produced in Example (1) above was added and suspended, it was grown for 1 day at 40 ° C. to produce the fermented propolis of the present invention. After completion of the fermentation, water was removed to finally produce 108 g of fermented propolis powder.

本発明は発酵プロポリスの製造方法を提供するものである。プロポリス抽出物を本発明の方法によって発酵させる場合、プロポリス抽出物に含有される樹脂に起因する摂取限定問題を解消すると同時に、発酵により高分子量物質を低分子量物質に分解することによって水溶性プロポリス抽出物の生産を可能にした。これはプロポリス抽出物中に含有されたエタノールを子供が摂取するという問題を解消した。また、これは老齢者のプロポリス抽出物や粉末の摂取問題も解消できる。従って、さまざまな薬理効果を持つプロポリスを、発酵生成物の形態で開発することができ、プロポリス生成物を摂取する全ての人々に役立てることがでる。それは公衆衛生に大きく貢献し、市販される場合には市場で非常に高い評価を受け、その結果、企業の売上げ高増大に寄与するであろう。   The present invention provides a method for producing fermented propolis. When propolis extract is fermented by the method of the present invention, the problem of limitation of intake due to the resin contained in propolis extract is solved, and at the same time, water-soluble propolis extraction is performed by decomposing high molecular weight substance into low molecular weight substance by fermentation. It enabled the production of things. This solved the problem of children taking ethanol contained in the propolis extract. This also eliminates the problem of ingesting propolis extract and powder by the elderly. Therefore, propolis having various pharmacological effects can be developed in the form of fermentation products, which can be useful to all people who consume the propolis products. It will greatly contribute to public health and will receive a very high reputation in the market when it is marketed, and as a result, it will contribute to increased sales for the company.

シーケンスリスト(配列表)
なし
Sequence list (sequence table)
None

Claims (14)

a)エタノールまたは希釈エタノールを含有する溶媒でプロポリス原塊を抽出して抽出物を生産する工程と、
b)抽出物を冷却することによって固形分として沈殿したワックスを除去して、ワックス除去プロポリス抽出物を製造する工程と、
c)非水溶性セルロースを添加物として添加し、粉末プロポリスを生成するように乾燥させる工程と、
d)粉末プロポリスを水で懸濁し、その混合液中で微生物を接種し、発酵を進行させて発酵プロポリスを作る工程と、
を含む発酵プロポリス抽出物の製造方法。
a) extracting the propolis bulk with a solvent containing ethanol or diluted ethanol to produce an extract;
b) removing the precipitated wax as a solid by cooling the extract to produce a wax-removed propolis extract;
c) adding water-insoluble cellulose as an additive and drying to produce powdered propolis;
d) suspending powdered propolis with water, inoculating microorganisms in the mixed solution, and proceeding fermentation to make fermented propolis;
A method for producing a fermented propolis extract.
a)において、エタノールの濃度が50〜100%(v/v:体積比)であり、溶媒の量がプロポリス原塊の重量の2〜10倍である、請求項1に記載の方法。   The method according to claim 1, wherein in a), the concentration of ethanol is 50 to 100% (v / v: volume ratio), and the amount of solvent is 2 to 10 times the weight of the propolis bulk. c)において、前記セルロース粉末が添加物として前記抽出物中の固形分の重量の0.1〜10倍の量で使用される、請求項1に記載の方法。   The method according to claim 1, wherein, in c), the cellulose powder is used as an additive in an amount of 0.1 to 10 times the weight of the solid content in the extract. d)において、接種される微生物が、酵母、バチルス(桿菌)、ラクトバチルス(乳酸桿菌)、アセトバクター(酢酸菌)、カビからなる群から選ばれる一つ以上の菌である、請求項1に記載の方法。   In d), the inoculated microorganism is one or more bacteria selected from the group consisting of yeast, Bacillus (Bacilli), Lactobacillus (Lactobacillus), Acetobacter (Acetic acid bacteria), and Mold. The method described. d)において、水で懸濁して発酵させる時点で、粉末プロポリス抽出物の濃度が5〜50%(w/v:重量体積比)である、請求項1に記載の方法。   The method according to claim 1, wherein in d), the concentration of the powdered propolis extract is 5 to 50% (w / v: weight / volume ratio) at the time of suspending in water and fermenting. シゾサッカロミセス・ポンベ、シゾサッカロミセス・オクトスポロンス(octosporons)、ハンセニアスポラ属、サッカロミコデス属、サッカロミセス属のサッカロミセス・セレビシエ(出芽酵母)、サッカロミセス・サケ(清酒酵母)、サッカロミセス・エリプソイデウス、サッカロミセス・フォルモセンシス、サッカロミセス・カールスベルゲンシス(ビール酵母)、サッカロミセス・パストリアヌス(pastorianus)、サッカロミセス・ディアスタティカス(糖化酵母)、サッカロミセス・ロウキシイ(醤油醸造酵母)、サッカロミセス・コレアヌス、ピキア属、ハンゼヌラ属、デバリオミケス属、リポマイセス属(油脂酵母)、クルイベロマイセス属のクルイベロマイセス・ラクティス、クルイベロマイセス・フラジリス、クリプトコッカス属、トルロプシス属、クロエケラ属、カンジダ属のカンジダ・ユティリス(油脂資化性酵母)、カンジダ・トロピカリス、カンジダ・リポリチカ、カンジダ・グイリエルモンディ(guilliermondii)、カンジダ・ロブスタ、カンジダ・アルビカンス、ロドトルラ属、およびトリコスポロン属からなる群から選択される一種以上の酵母を用いることを特徴とする請求項4に記載の方法。   Schizosaccharomyces pombe, Schizosaccharomyces octosporons, Hansenia spora, Saccharomyces genus, Saccharomyces cerevisiae (budding yeast), Saccharomyces salmon (sake yeast), Saccharomyces eryspodium Formosensis, Saccharomyces carlsbergensis (beer yeast), Saccharomyces pastorianus (pastorianus), Saccharomyces diastaticus (saccharified yeast), Saccharomyces rouxii (soy sauce brewing yeast), Saccharomyces coleanus, Pichia genus, Hansenula genus Genus, Lipomyces genus (greasy yeast), Kluyveromyces lactis, Kluyveromyces Candida utilis (oil and fat assimilating yeast), Candida tropicalis, Candida ripolitica, Candida guilliermondii, Candida robusta, Candida robusta The method according to claim 4, wherein one or more yeasts selected from the group consisting of albicans, Rhodotorula, and Trichosporon are used. ラクトバチルス(乳酸桿菌)属のラクトバチルス・カゼイ(乳酸桿菌)、ラクトバチルス・アシドフィルス(好酸性乳酸菌)、ラクトバチルス・SNUL、ビフィドバクテリウム属、レンサ球菌属のサーモフィラス種(高度好熱菌)、ロイコノストック属、およびペディオコッカス属からなる群から選択される一種以上のラクトバチルス(乳酸桿菌)が使用される、請求項4に記載の方法。   Lactobacillus casei (Lactobacillus), Lactobacillus acidophilus (acidophilic lactic acid bacteria), Lactobacillus SNUL, Bifidobacterium, Streptococcus thermophilus species (highly thermophilic) The method according to claim 4, wherein one or more lactobacilli (Lactobacillus) selected from the group consisting of genus, Leuconostoc and Pediococcus are used. アセトバクター・シュチェンバチ(schuetzenbachii)、アセトバクター・アセンダンス、アセトバクター・ゲンゲナム(gengenum)、アセトバクター・メソキシダンス(mesoxydans)、アセトバクター・メラノゲナム(melanoogenum)、アセトバクター・サブオキシダンス、およびアセトバクター・アセチからなる群から選択される一種以上のアセトバクターが使用される、請求項4に記載の方法。   Acetobacter schchenbachii, Acetobacter ascendance, Acetobacter gengenum, Acetobacter methoxydans, Acetobacter melanogenenum, Acetobacter suboxydance, and Acetobacter acetobacter The method according to claim 4, wherein one or more Acetobacter selected from the group consisting of is used. 枯草菌、納豆菌、セレウス菌、巨大菌からなる群から選択される一種以上のバチルス属細菌が使用される、請求項4に記載の方法。   The method according to claim 4, wherein one or more bacteria belonging to the genus Bacillus selected from the group consisting of Bacillus subtilis, Bacillus natto, Bacillus cereus and Giant fungus are used. コウジカビ属から選択される一種以上のカビが使用される、請求項4に記載の方法。   The method according to claim 4, wherein one or more molds selected from the genus Aspergillus are used. 1つ以上のおがくずと結晶セルロースが添加物として使用される、請求項1に記載の方法。   The process according to claim 1, wherein one or more sawdust and crystalline cellulose are used as additives. 請求項1に記載の方法によって生産される発酵プロポリス組成物。   A fermented propolis composition produced by the method of claim 1. 請求項12に記載の発酵プロポリスを主成分として含有する食品組成物。   A food composition comprising the fermented propolis according to claim 12 as a main component. 水、エタノール及びその混合物のうちの一つを用いて請求項1に記載の発酵物質を抽出することによって生産される抽出物。   An extract produced by extracting the fermented material of claim 1 using one of water, ethanol and mixtures thereof.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013220398A (en) * 2012-04-18 2013-10-28 Hitachi Zosen Corp Method for suppressing bacteria proliferation in ethanol fermentation of kitchen waste
KR101615143B1 (en) * 2014-01-14 2016-04-26 윤석호 Fermented feed additives using propolis and a method of manufacturing
KR20160052820A (en) * 2014-10-08 2016-05-13 제이앤팜유한책임회사 Production method and its composition for fermentation of propolis, Lepidium melenii Walpers and Angelica gigas N.

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101138684B1 (en) 2010-02-08 2012-04-19 서범구 Method for culturing effective microorganisms and food using the same
KR101357649B1 (en) 2011-06-15 2014-02-05 서범구 Fermented garlic using EM and ginseng and manufacturing method thereof
KR101305259B1 (en) 2011-10-13 2013-09-06 한국과학기술원 Method of manufacturing mixed micro-organisms
KR101661495B1 (en) 2015-10-13 2016-09-30 유니크바이오텍 주식회사 The method of Eco-friendly alcohol-free, water-soluble propolis using natural honey
US20240058261A1 (en) * 2020-12-18 2024-02-22 Lg Household & Health Care Ltd. Anti-aging composition comprising fermented propolis

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07298833A (en) * 1994-05-10 1995-11-14 Hayashibara Biochem Lab Inc Fermented product containing propolis extract, its production and use
JP2001161290A (en) * 1999-11-15 2001-06-19 Gyobun Go Composition containing propolis essence extracted with supercritical carbon dioxide
JP2003000161A (en) * 2001-06-20 2003-01-07 Fancl Corp Power composition of propolis extract and method for producing the same

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3049380A1 (en) * 1980-12-29 1982-07-08 Rudolf 8034 Germering Schanze METHOD FOR PRODUCING A CONCENTRATE CONTAINING A BEE PRODUCT, CONCENTRATE CONTAINING BEE PRODUCT AND ITS USE
KR20000056792A (en) * 1999-02-26 2000-09-15 강덕영 The process for the preparation of propolis extracts
KR20030021604A (en) * 2001-09-07 2003-03-15 김원진 Propolis Extract Soju
US6953574B2 (en) * 2002-06-21 2005-10-11 Technology Commercialization, Inc. Method for producing a fermented hydrolyzed medium containing microorganisms

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07298833A (en) * 1994-05-10 1995-11-14 Hayashibara Biochem Lab Inc Fermented product containing propolis extract, its production and use
JP2001161290A (en) * 1999-11-15 2001-06-19 Gyobun Go Composition containing propolis essence extracted with supercritical carbon dioxide
JP2003000161A (en) * 2001-06-20 2003-01-07 Fancl Corp Power composition of propolis extract and method for producing the same

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JPN6013012285; Natural Medicines, 2003年, 第57巻, 35ページ *
JPN6013012289; J Agric Food Chem., 2002年, 第50巻, 4777-4782ページ *
JPN6013012292; Liebigs Ann Chem., 1989年, 第1989巻, 1123-1126ページ *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013220398A (en) * 2012-04-18 2013-10-28 Hitachi Zosen Corp Method for suppressing bacteria proliferation in ethanol fermentation of kitchen waste
KR101615143B1 (en) * 2014-01-14 2016-04-26 윤석호 Fermented feed additives using propolis and a method of manufacturing
KR20160052820A (en) * 2014-10-08 2016-05-13 제이앤팜유한책임회사 Production method and its composition for fermentation of propolis, Lepidium melenii Walpers and Angelica gigas N.
KR101713304B1 (en) 2014-10-08 2017-03-07 제이앤팜유한책임회사 Production method and its composition for fermentation of propolis, Lepidium melenii Walpers and Angelica gigas N.

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