JP2009216519A - Micro-reaction vessel for blood examination - Google Patents

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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a micro-reaction vessel for blood examination can more accurate examination by removing a non-specific reaction in the blood examination. <P>SOLUTION: This micro-reaction vessel for the blood examination includes a lower storage part having inert particles and an antibody, and an upper storage part into which a specimen is injected. The upper storage part includes an opening part, and a leukocyte removing filter between the opening part and the lower storage part. <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は血液検査用マイクロ反応容器に関する。   The present invention relates to a micro reaction container for blood test.

近年、血液検査などの生体検査を行う手段として、カラムやマイクロチューブを利用した遠心凝集法が使用されている。例えば、特許文献1では、10〜200μmのポリマー粒子やガラス粒子に代表される不活性粒子を細長いマイクロ反応容器に充填し、遠心によって効率良く赤血球の凝集物と非凝集物を区別できる反応容器を開示している。また、特許文献2では、ガラスビーズを用いた同様の反応容器が開示されている。何れの方法も、不活性粒子が充填された細長いマイクロ反応容器が板状のプラスチック板に複数個埋め込まれたような形状を有し、マイクロ反応容器を垂直方向に立てた状態で使用する。   In recent years, centrifugal agglutination methods using columns and microtubes have been used as means for performing biological tests such as blood tests. For example, in Patent Document 1, an inactive particle typified by 10 to 200 μm polymer particles or glass particles is filled in an elongated micro reaction vessel, and a reaction vessel capable of efficiently distinguishing erythrocyte aggregates and non-aggregates by centrifugation is provided. Disclosure. Patent Document 2 discloses a similar reaction vessel using glass beads. Each method has a shape in which a plurality of elongated microreaction containers filled with inert particles are embedded in a plate-like plastic plate, and is used in a state where the microreaction containers are set up in a vertical direction.

分析に際しては、垂直に立てたマイクロ反応容器の上部開口から液体試料を注入するが、開口部はロート状になっていて反応槽として使用される。不活性粒子層の上部に反応用の抗体が含まれており、試料と抗体とを反応させた後、遠心分離を行う。反応により凝集物が生じた場合は、凝集物が不活性粒子層により捕捉されて陽性像を形成する。凝集物が生じなかった場合は、注入された試料は不活性粒子層を通過してカラム底部に移動し陰性像を形成する。このように不活性粒子により凝集物を捕捉することによって、赤血球の洗浄(B/F分離)を行うことなく簡便に試験することができる。   In the analysis, a liquid sample is injected from an upper opening of a vertically arranged micro reaction vessel, and the opening has a funnel shape and is used as a reaction vessel. The reaction antibody is contained in the upper part of the inert particle layer, and the sample is reacted with the antibody, and then centrifuged. When an aggregate is generated by the reaction, the aggregate is captured by the inert particle layer to form a positive image. If no aggregate is formed, the injected sample passes through the inert particle layer and moves to the bottom of the column to form a negative image. By capturing the aggregates with the inert particles in this way, it is possible to easily test without washing the red blood cells (B / F separation).

しかしながら、従来のマイクロ反応容器による血液検査では、不活性粒子の上層部に不純物が残存したり、部分凝集が生じたりするなど、非特異反応が起こり、正確な検査ができないことがあった。
特公平8−7215号公報 欧州特許第725276号公報
However, in a conventional blood test using a microreaction container, non-specific reactions such as impurities remaining in the upper layer of inert particles or partial agglomeration may occur, and accurate testing may not be possible.
Japanese Patent Publication No.8-7215 European Patent No. 725276

上記問題に鑑み、本発明は、血液検査における非特異反応を排除し、より正確な検査を可能にする、血液検査用マイクロ反応容器を提供することを目的とする。   In view of the above problems, an object of the present invention is to provide a micro reaction container for blood test that eliminates non-specific reaction in blood test and enables more accurate test.

本発明によれば、血液検査用マイクロ反応容器であって、不活性粒子及び抗体を備える下部収容部、及び、検体が注入される上部収容部を具備し、該上部収容部は開口部と、該開口部と前記下部収容部との間に白血球除去フィルターを具備することを特徴とする、血液検査用マイクロ反応容器が提供される。一つの態様において、前記白血球除去フィルターは取り外し可能に反応容器に装着される。一つの態様において、前記白血球除去フィルターは、フィルター担持体に担持されて前記反応容器に装着される。   According to the present invention, it is a micro reaction container for blood test, comprising a lower housing part provided with inert particles and an antibody, and an upper housing part into which a specimen is injected, the upper housing part having an opening, A micro reaction container for blood test is provided, comprising a leukocyte removal filter between the opening and the lower housing. In one embodiment, the leukocyte removal filter is detachably attached to the reaction container. In one embodiment, the leukocyte removal filter is carried on a filter carrier and attached to the reaction vessel.

一つの態様において、前記開口部は密封シールによって密封されており、前記フィルター担持体は該密封シールと同時に剥離可能に装着される。   In one embodiment, the opening is sealed with a hermetic seal, and the filter carrier is detachably mounted simultaneously with the hermetic seal.

一つの態様において、前記不活性粒子は、ポリマー、ゲル、ガラスビーズ、シリカ、デキストラン、及びゼラチン粒子から成る群より選択される。   In one embodiment, the inert particles are selected from the group consisting of polymers, gels, glass beads, silica, dextran, and gelatin particles.

さらなる態様において、遠心分離に供し得る支持体に固定されていることを特徴とする上記血液検査用マイクロ反応容器が提供される。一つの態様において、前記支持体と一体に形成されたことを特徴とする上記血液検査用マイクロ反応容器が提供される。一つの態様において前記支持体は平板なカード形状である。   In a further aspect, there is provided the above micro reaction container for blood test, which is fixed to a support that can be subjected to centrifugation. In one embodiment, the micro reaction container for blood test is provided, which is formed integrally with the support. In one embodiment, the support has a flat card shape.

本発明の他の側面から、上記の血液検査用マイクロ反応容器を複数具備する血液検査用カードが提供される。   From another aspect of the present invention, there is provided a blood test card comprising a plurality of the above micro test containers for blood test.

また、本発明のさらに他の側面から、血液検査用マイクロ反応容器に装着される、白血球除去フィルターを担持したフィルター担持体が提供される。   According to still another aspect of the present invention, there is provided a filter carrier that carries a leukocyte removal filter that is attached to a blood reaction microreaction container.

本発明の血液検査用マイクロ反応容器によれば、血液検査における非特異反応が排除され、より正確な検査を簡便に実施することが可能である。   According to the micro reaction container for blood test of the present invention, non-specific reaction in the blood test is eliminated, and a more accurate test can be easily performed.

遠心凝集法を利用したマイクロ反応容器による血液検査においては、反応像が不鮮明となり、陽性像・陰性像の判定が困難である場合があった。本発明者らは、反応像の判別を困難にする原因の一つとして非特異反応の発生を検討し、鋭意研究の結果、この非特異反応が検体中に混入している白血球に起因するものであることを見出した。従来、血液検査の検体は、血清、血漿、赤血球であり、全血からこれらを単離する際に洗浄等が行われる。このとき、検体から白血球も除去されているはずであった。よって、カラムを使った検査において白血球の混入が問題視されたことはこれまでになかった。   In a blood test using a micro reaction container using the centrifugal agglutination method, a reaction image becomes unclear and it may be difficult to determine a positive image or a negative image. The present inventors examined the occurrence of a non-specific reaction as one of the causes that make it difficult to discriminate the reaction image, and as a result of intensive studies, this non-specific reaction is caused by leukocytes mixed in the specimen. I found out. Conventionally, specimens for blood tests are serum, plasma, and red blood cells, and washing or the like is performed when these are isolated from whole blood. At this time, white blood cells should have been removed from the specimen. Thus, there has never been a problem with leukocyte contamination in a test using a column.

しかしながら、マイクロ反応容器に添加する検体中に白血球成分が含まれていると、遠心分離しても不活性粒子の上層部に白血球が残存する場合があり、また、白血球が赤血球を巻き込んだまま上層部にとどまる可能性もある。これによって反応像が不明確になると考えられる。   However, if the sample added to the micro reaction vessel contains a leukocyte component, leukocytes may remain in the upper layer of the inactive particles even after centrifugation. There is also the possibility of staying in the department. This is thought to make the reaction image unclear.

そこで本発明では、遠心凝集法を利用したマイクロ反応容器に、検体中の白血球成分を取り除くための機能を備えることによって、より正確な検査を行うことが可能な血液検査用マイクロ反応容器を提供する。これによれば、白血球を除去するための操作を別途行うことなく、検体中の白血球を簡便に除去することが可能である。   Therefore, the present invention provides a micro reaction container for blood test that can perform a more accurate test by providing a micro reaction container using a centrifugal agglutination method with a function for removing leukocyte components in a specimen. . According to this, it is possible to easily remove leukocytes in a specimen without separately performing an operation for removing leukocytes.

図1は、本発明の血液検査用マイクロ反応容器の一態様を示す断面図である。本発明のマイクロ反応容器1は、不活性粒子2及び抗体を備える下部収容部3、及び、検体及び任意に試薬が注入される上部収容部5を具備し、該上部収容部は開口部と、該開口部と前記下部収容部との間に白血球除去フィルター7を備える。開口部は使用時まで密封されていることが好ましく、例えば剥離可能な密封シール9によって密封される。使用時にはこの密封シール9を剥がして検体を添加する。密封シールにはアルミシールが好適に用いられるがこれに限定されない。   FIG. 1 is a cross-sectional view showing an embodiment of a micro reaction container for blood test according to the present invention. The microreaction container 1 of the present invention comprises a lower housing part 3 comprising inert particles 2 and antibodies, and an upper housing part 5 into which a specimen and optionally a reagent are injected, the upper housing part comprising an opening, A leukocyte removal filter 7 is provided between the opening and the lower housing. The opening is preferably sealed until it is in use, for example sealed by a peelable seal 9. At the time of use, the sealing seal 9 is peeled off and the specimen is added. An aluminum seal is preferably used as the hermetic seal, but is not limited thereto.

本発明のマイクロ反応容器1は、垂直方向に細長く、遠心分離に供して凝集反応像が観察し得る形状であれば任意の形状であってよく、その大きさも検体に依存して選択することが可能である。   The microreaction container 1 of the present invention may be any shape as long as it is elongated in the vertical direction and can be subjected to centrifugation and the agglutination reaction image can be observed, and the size can also be selected depending on the specimen. Is possible.

下部収容部3には、凝集反応像を形成させるための不活性粒子2が充填される。不活性粒子2は、ポリマー、セファデックスゲル、ポリアクリルアミドゲルのようなゲル、ガラスビーズ、シリカ、デキストラン、及びゼラチン粒子など適切な粒子を選択して用いることができる。   The lower container 3 is filled with inert particles 2 for forming an agglutination reaction image. The inert particles 2 can be selected from suitable particles such as polymers, gels such as Sephadex gel and polyacrylamide gel, glass beads, silica, dextran, and gelatin particles.

不活性粒子2の上層部には、反応のための抗体が含まれる。検体が赤血球の場合は、この抗体と赤血球とが反応し、陽性の場合は凝集物を形成する。例えば血液型おもて試験の場合には、抗A、抗B、抗D抗体がそれぞれ別個の反応容器に予め添加されている。検体が抗体の場合は、検体と共にさらに試薬(赤血球)が添加され、陽性の場合は検体、試薬、抗体が凝集物を形成する。検体及び任意に試薬を投入した後、遠心分離に供することにより、反応後の凝集物又は非凝集物が、充填された不活性粒子を通して沈降する。反応が陽性である場合は、凝集物が不活性粒子上層に留まり、陽性像を形成する。反対に、反応が陰性である場合は、凝集物が生じず、検体は反応容器の底部に沈降し、陰性像を形成する。   The upper layer portion of the inert particles 2 contains an antibody for reaction. When the specimen is erythrocytes, this antibody reacts with erythrocytes, and when positive, aggregates are formed. For example, in the case of a blood type test, anti-A, anti-B and anti-D antibodies are added in advance to separate reaction containers. When the sample is an antibody, a reagent (red blood cells) is further added together with the sample. When the sample is positive, the sample, reagent, and antibody form an aggregate. The sample and optionally the reagent are added, and then subjected to centrifugation, whereby the aggregate or non-aggregate after the reaction settles through the filled inert particles. If the reaction is positive, the aggregate remains in the upper layer of the inert particles and forms a positive image. On the other hand, if the reaction is negative, no agglomerates are formed and the specimen settles at the bottom of the reaction vessel, forming a negative image.

反応結果は目視により判別することも可能であるが、自動読み取り装置を用いて判別することも可能である。 The reaction result can be discriminated visually, but can also be discriminated using an automatic reading device.

上部収容部5は、開口部から投与された検体や試薬を収容し、反応するための空間を提供する。本発明ではこの上部収容部5に白血球除去フィルターが備えられる。白血球除去フィルターは、白血球含有製剤から白血球を除去するためのフィルターであり、従来公知のものを使用することができる。   The upper accommodating portion 5 accommodates a sample or reagent administered from the opening and provides a space for reacting. In the present invention, the upper housing part 5 is provided with a leukocyte removal filter. The leukocyte removal filter is a filter for removing leukocytes from the leukocyte-containing preparation, and conventionally known ones can be used.

図1に示すように、白血球除去フィルター7は、密封シール9と上記不活性粒子2との間の任意の位置に備えることができる。但し、フィルター上部に検体や試薬を収容できる空間を確保することが必要である。白血球除去フィルター7を不活性粒子2と接触するように配置することも可能である。   As shown in FIG. 1, the leukocyte removal filter 7 can be provided at any position between the hermetic seal 9 and the inert particles 2. However, it is necessary to secure a space in the upper part of the filter that can store the specimen and the reagent. It is also possible to arrange the leukocyte removal filter 7 in contact with the inert particles 2.

投与された検体は、白血球除去フィルター7の上部に留まり、遠心分離によって白血球除去フィルター7を通過して不活性粒子2上に移行する。このとき検体から白血球が除去される。フィルター7を通過した検体はそのまま不活性粒子2上の抗体と反応して沈降し、反応像を形成する。   The administered specimen remains on top of the leukocyte removal filter 7, passes through the leukocyte removal filter 7 by centrifugation, and moves onto the inactive particles 2. At this time, white blood cells are removed from the specimen. The specimen that has passed through the filter 7 reacts with the antibody on the inactive particles 2 as it is and settles to form a reaction image.

図2は、本発明の他の態様を示す断面図である。本態様では、白血球除去フィルター7が取り外し可能に装着される。例えば検体が微量な場合や、検体中に白血球が完全に含まれていないことが確認されている場合など、白血球除去フィルター7を使用する必要がない場合には、白血球除去フィルター7を取り外して試験することが可能である。   FIG. 2 is a cross-sectional view showing another embodiment of the present invention. In this aspect, the leukocyte removal filter 7 is detachably mounted. For example, when it is not necessary to use the leukocyte removal filter 7 such as when the amount of the sample is very small or when it is confirmed that the leukocyte is not completely contained in the sample, the leukocyte removal filter 7 is removed and the test is performed. Is possible.

白血球除去フィルター7は、図2に示すようにフィルター担持体11に担持させて反応容器に装着される。一つの実施形態において、フィルター担持体11は、図3に示すように、反応容器中に嵌合する筒状体11aと、反応容器開口部においてフィルター担持体11を支える固定部11bとから構成され、その底部にフィルター7が備えられる。   As shown in FIG. 2, the leukocyte removal filter 7 is carried on a filter carrier 11 and attached to a reaction vessel. In one embodiment, as shown in FIG. 3, the filter carrier 11 includes a cylindrical body 11a that fits in the reaction vessel, and a fixing portion 11b that supports the filter carrier 11 at the reaction vessel opening. The filter 7 is provided at the bottom.

白血球除去フィルター7を使用しない場合には、このフィルター担持体11を取り外すことによって白血球除去フィルターを簡便に取り外すことができる。マイクロ反応容器1は、このフィルター担持体11が装着された状態で密封シール9によって密封され、密封シール9を剥離する際に、フィルター担持体11を同時に剥離することによって取り外すことが可能である。   When the leukocyte removal filter 7 is not used, the leukocyte removal filter can be easily removed by removing the filter carrier 11. The micro reaction vessel 1 is sealed by a sealing seal 9 in a state where the filter carrier 11 is mounted. When the sealing seal 9 is peeled off, the micro reaction container 1 can be removed by peeling the filter carrier 11 simultaneously.

さらに本発明の他の態様において、マイクロ反応容器は遠心分離に供し得る支持体に固定される。一つの実施形態において、該支持体には複数のマイクロ反応容器が固定化される。例えば、カートリッジにマイクロ反応容器を装着して使用してもよい。カートリッジに装着する場合は、反応像の読み取りの便宜のために、マイクロ反応容器が一列に配置されることが好ましく、直線状又は円柱状に配置されるカートリッジが好適に用いられる。   In yet another embodiment of the present invention, the microreaction vessel is fixed to a support that can be subjected to centrifugation. In one embodiment, a plurality of micro reaction vessels are immobilized on the support. For example, the cartridge may be used with a micro reaction vessel. In the case of mounting on a cartridge, for the convenience of reading the reaction image, it is preferable that the micro reaction containers are arranged in a row, and a cartridge arranged in a linear or cylindrical shape is preferably used.

一つの実施形態において、支持体とマイクロ反応容器は一体に形成される。好ましい態様において、該支持体は平板なカード形状に形成され、血液検査用カードとして提供されることができる。支持体が平板なカード形状である場合には、試験後にカード本体を複写機によりコピーし、判定結果の長期保存が可能である。   In one embodiment, the support and the micro reaction vessel are integrally formed. In a preferred embodiment, the support is formed in a flat card shape and can be provided as a blood test card. When the support has a flat card shape, the card body can be copied by a copying machine after the test, and the determination result can be stored for a long time.

図4は、血液検査用カード20の一実施形態を示す図である。該カード20にはフィルター担持体15が装着されており、その上から密封シール13により密封されている。使用の際には、密封シール13を剥離して検体をそれぞれの反応容器1に添加する。図5にフィルター担持体15の模式図を示す。図5aは断面図であり、図5bは平面図である。フィルター担持体15は、カードに備えられた全てのマイクロ反応容器のためのフィルターを一体として備えて形成されることができる。白血球除去フィルターを使用しない場合には、フィルター担持体15を密封シール13と共に剥離することができ、簡便にフィルターを取り外すことが可能である。   FIG. 4 is a diagram showing an embodiment of the blood test card 20. A filter carrier 15 is mounted on the card 20 and is sealed with a hermetic seal 13 from above. In use, the sealing seal 13 is peeled off and the specimen is added to each reaction vessel 1. FIG. 5 shows a schematic diagram of the filter carrier 15. 5a is a cross-sectional view and FIG. 5b is a plan view. The filter carrier 15 can be formed integrally with filters for all the micro reaction vessels provided on the card. When the leukocyte removal filter is not used, the filter carrier 15 can be peeled off together with the hermetic seal 13, and the filter can be easily removed.

以上記載したように、本発明の血液検査用マイクロ反応容器によれば、白血球を除去するための操作を別途行うことなく検体中の白血球を除去することができ、簡便に非特異反応を低減させて正確な検査を実施することが可能である。白血球除去フィルター及びフィルター担持体は、上記実施形態に限定されず、反応容器に依存して適切な形状とすることができる。   As described above, according to the micro reaction container for blood test of the present invention, it is possible to remove white blood cells in a specimen without separately performing an operation for removing white blood cells, thereby easily reducing non-specific reactions. It is possible to conduct an accurate inspection. The leukocyte removal filter and the filter carrier are not limited to the above-described embodiment, and can have an appropriate shape depending on the reaction container.

さらに、本発明の他の側面から、血液検査用マイクロ反応容器に装着される、白血球除去フィルターを担持したフィルター担持体が提供される。これにより、通常用いられる血液検査用マイクロ反応容器に、白血球除去機能を付与することが可能である。   Furthermore, from another aspect of the present invention, there is provided a filter carrier carrying a leukocyte removal filter attached to a micro reaction container for blood test. Thereby, it is possible to give a leukocyte removal function to a commonly used micro reaction container for blood test.

マイクロ反応容器の一態様を示す模式図。The schematic diagram which shows the one aspect | mode of a micro reaction container. マイクロ反応容器の他の態様を示す模式図。The schematic diagram which shows the other aspect of a micro reaction container. 白血球除去フィルター担持体の一実施形態を示す模式図。The schematic diagram which shows one Embodiment of a leukocyte removal filter carrier. 血液検査用カードの一実施形態を示す模式図。The schematic diagram which shows one Embodiment of the card | curd for blood tests. 血液検査用カードのためのフィルター担持体を示す模式図。The schematic diagram which shows the filter carrier for the card | curd for blood tests.

符号の説明Explanation of symbols

1…マイクロ反応容器、2…不活性粒子、3…下部収容部、5…上部収容部、7…白血球除去フィルター、9、13…密封シール、11…フィルター担持体、20…血液検査用カード。   DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 ... Micro reaction container, 2 ... Inactive particle, 3 ... Lower accommodating part, 5 ... Upper accommodating part, 7 ... Leukocyte removal filter, 9, 13 ... Sealing seal, 11 ... Filter carrier, 20 ... Card for blood test.

Claims (10)

血液検査用マイクロ反応容器であって、
不活性粒子及び抗体を備える下部収容部、及び、検体が注入される上部収容部を具備し、該上部収容部は開口部と、該開口部と前記下部収容部との間に白血球除去フィルターを具備することを特徴とする、血液検査用マイクロ反応容器。
A micro reaction vessel for blood testing,
A lower container containing inert particles and an antibody, and an upper container into which the specimen is injected, the upper container having an opening, and a leukocyte removal filter between the opening and the lower container. A microreaction container for blood testing, comprising:
前記白血球除去フィルターが取り外し可能に装着されていることを特徴とする、請求項1に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction container for blood test according to claim 1, wherein the leukocyte removal filter is detachably mounted. 前記白血球除去フィルターがフィルター担持体に担持されて前記反応容器に装着されていることを特徴とする、請求項1又は2に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The blood reaction microreaction container according to claim 1 or 2, wherein the leukocyte removal filter is carried on a filter carrier and attached to the reaction container. 前記開口部が密封シールによって密封されており、前記フィルター担持体が該密封シールと同時に剥離可能であることを特徴とする、請求項3に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction container for blood test according to claim 3, wherein the opening is sealed with a hermetic seal, and the filter carrier can be peeled off simultaneously with the hermetic seal. 前記不活性粒子が、ポリマー、ゲル、ガラスビーズ、シリカ、デキストラン、及びゼラチン粒子から成る群より選択される、請求項1〜4の何れか一項に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction vessel for blood test according to any one of claims 1 to 4, wherein the inert particles are selected from the group consisting of polymers, gels, glass beads, silica, dextran, and gelatin particles. 遠心分離に供し得る支持体に固定されていることを特徴とする、請求項1〜5の何れか一項に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction container for blood test according to any one of claims 1 to 5, wherein the micro reaction container is fixed to a support that can be subjected to centrifugation. 前記支持体と一体に形成されたことを特徴とする、請求項6に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction container for blood test according to claim 6, wherein the micro reaction container is formed integrally with the support. 前記支持体が平板なカード形状であることを特徴とする、請求項6又は7に記載の血液検査用マイクロ反応容器。   The micro reaction container for blood test according to claim 6 or 7, wherein the support has a flat card shape. 請求項1〜5のいずれか一項に記載の血液検査用マイクロ反応容器を複数具備する血液検査用カード。   A card for blood test comprising a plurality of micro reaction containers for blood test according to any one of claims 1 to 5. 血液検査用マイクロ反応容器に装着される、白血球除去フィルターを担持したフィルター担持体。   A filter carrier carrying a leukocyte removal filter, which is attached to a micro reaction container for blood test.
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