JP2007536314A

JP2007536314A - 1,4O-linked saccharose derivative for stabilizing antibody or antibody derivative

Info

Publication number: JP2007536314A
Application number: JP2007512008A
Authority: JP
Inventors: リハルトフュールヘル; シュテファンバサラブ; ペーターズカロリーネベヒトルト; ヴォルフガンクフリース; パトリックガリデル; ファデムレヒトトルシュテンシュルツ
Original assignee: ベーリンガーインゲルハイムファルマゲゼルシャフトミットベシュレンクテルハフツングウントコンパニーコマンディトゲゼルシャフト
Priority date: 2004-05-10
Filing date: 2005-05-04
Publication date: 2007-12-13
Also published as: WO2005112996A1; EP1784215A1; CA2565019A1; WO2005112996B1; TW200605905A; DE102004022927A1; KR20070057086A

Abstract

本発明は、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末又は凍結乾燥粉末などの粉末状組成物であって、抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上とを含む組成物に関する。好ましくは、ラクトスクロース又はグルコシルスクロースとマルトシルスクロースとの混合物を含む組成物である。 The present invention is preferably a powdered composition such as, for example, a spray-dried powder or a freeze-dried powder, which comprises an antibody or antibody derivative, 1,4 O-linked D-gal-saccharose (lactosucrose), 1, One or more 1,4 O-linked saccharose derivatives selected from 4 O-linked D-glu-saccharose (glucosyl sucrose) or 1,4 O-linked glu-glu-saccharose (maltosyl sucrose) It is related with the composition containing. Preferably, it is a composition containing a mixture of lactosucrose or glucosyl sucrose and maltosyl sucrose.

Description

Detailed Description of the Invention

（発明の分野）
本発明は、医薬有効成分として抗体又は抗体誘導体を含む医薬組成物、主に粉末医薬組成物を製造するための、新規なオリゴ糖／オリゴ糖混合物の使用に関する。粉末は、噴霧乾燥又は凍結乾燥による製造が好ましい。とりわけ、本発明は、抗体を含有する前記粉末及びその製造方法に関する。
（背景）
水溶液に処方した活性物質／活性物質調剤は幾分不安定になりやすく、結果、有効性又はバイオアクティビティの低下及び毒性又は不相溶性の上昇を引き起こすことがある。このことは従来からの医薬品だけでなく、ペプチド含有有効成分又はタンパク質含有有効成分にもあてはまる。医薬有効成分の安定化には、それ自体の構造を修飾すること（内的）又は適切なアジュバントの添加（外的）が好影響を及ぼす。
医薬有効成分の従来からの外的安定化方法は、好適なアジュバントを適用することである。有効成分を安定化させるためのアジュバントは、糖及びポリオール、アミノ酸、アミン、塩、ポリマー、界面活性剤類に大別することができる。 (Field of Invention)
The present invention relates to the use of a novel oligosaccharide / oligosaccharide mixture for the production of a pharmaceutical composition comprising an antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient, mainly a powder pharmaceutical composition. The powder is preferably produced by spray drying or freeze drying. In particular, the present invention relates to the powder containing the antibody and a method for producing the same.
(background)
Active substances / active substance formulations formulated in aqueous solutions can be somewhat unstable and can result in reduced efficacy or bioactivity and increased toxicity or incompatibility. This applies not only to conventional pharmaceuticals but also to peptide-containing active ingredients or protein-containing active ingredients. Modification of its own structure (internal) or addition of an appropriate adjuvant (external) has a positive effect on the stabilization of the active pharmaceutical ingredient.
A conventional external stabilization method for pharmaceutically active ingredients is to apply a suitable adjuvant. Adjuvants for stabilizing active ingredients can be broadly divided into sugars and polyols, amino acids, amines, salts, polymers, and surfactants.

糖及びポリオール類は不特定安定化剤として使用することが多い。生物学的活性物質に対する安定化効果は、主に「優先的排除（preferential exclusion）」によるものである（Xie及びTimasheff著（1997）、Biophysical Chemistry、64(1-3)、25-43；Xie及びTimasheff著（1997）、Protein Science、6(1)、211-221；Timasheff著（1998）、Advances in protein chemistry、51、355-432）。糖類を選択する際、生物学的活性物質には還元糖を避けるのが一般的である。非還元糖としてサッカロースやトレハロースの使用が好ましい。好適なアジュバントの例として他には、グルコース、ソルビトール、グリセロール（Boctor及びMehta著（1992）Journal of Pharmacy and Pharmacology、44 (7)、600-3；Timasheff著（1993）Annual review of biophysics and biomolecular structure、22、67-97；Chang等（1993）Pharmaceutical Research、10(10)、1478-83）及びマンニトール（Hermann等（1996）Pharmaceutical Biotechnology、9（Formulation, Characterization, and Stability of Protein Drugs）、303-328；Chang等（1996）Pharmaceutical Research、13(5)、756-761）が挙げられる。さらに、医薬的活性物質、主に、例えば抗体等のようなタンパク質類には、広範なポリマー類が安定化効果を及ぼすことが知られている。過去においてヒト血清アルブミン（ＨＡＳ）が多用されていたのは、実際のところ、安定化特性及び凝集抑制特性が非常に優れているという特徴を有するからであるが、血液によって運ばれる病原体による潜在的な汚染という理由から適していないことがわかってきた。すでに公知のポリマーのなかでは、ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン（ＨＰ−β−ＣＤ）が特に適している。それは、完全に安全な方法で非経口で使えるからである。この他、高分子量デキストラン（18〜82kD）、ＰＶＰ、ヘパリン、ゼラチンタイプＡ及びＢ、ヒドロキシエチルデンプン（ＨＥＳ）、ヘパリン、硫酸デキストラン、ポリリン酸、ポリ-Ｌ‐グルタミン酸、ポリ-Ｌ‐リジンが挙げられる。 Sugars and polyols are often used as unspecified stabilizers. The stabilizing effect on biologically active substances is mainly due to "preferential exclusion" (Xie and Timasheff (1997), Biophysical Chemistry, 64 (1-3), 25-43; Xie And Timasheff (1997), Protein Science, 6 (1), 211-221; Timasheff (1998), Advances in protein chemistry, 51, 355-432). When selecting sugars, it is common to avoid reducing sugars for biologically active substances. Use of saccharose or trehalose is preferred as the non-reducing sugar. Other examples of suitable adjuvants include glucose, sorbitol, glycerol (Boctor and Mehta (1992) Journal of Pharmacy and Pharmacology, 44 (7), 600-3; Timasheff (1993) Annual review of biophysics and biomolecular structure 22, 67-97; Chang et al. (1993) Pharmaceutical Research, 10 (10), 1478-83) and mannitol (Hermann et al. (1996) Pharmaceutical Biotechnology, 9 (Formulation, Characterization, and Stability of Protein Drugs), 303- 328; Chang et al. (1996) Pharmaceutical Research, 13 (5), 756-761). Furthermore, it is known that a wide range of polymers have a stabilizing effect on pharmaceutically active substances, mainly proteins such as antibodies. Human serum albumin (HAS) has been heavily used in the past because, in fact, it has the characteristics of excellent stability and anti-aggregation properties, but is potentially due to pathogens carried by blood. It has been found that it is not suitable for the reason of heavy contamination. Of the already known polymers, hydroxypropyl-β-cyclodextrin (HP-β-CD) is particularly suitable. This is because it can be used parenterally in a completely safe manner. Other examples include high molecular weight dextran (18 to 82 kD), PVP, heparin, gelatin types A and B, hydroxyethyl starch (HES), heparin, dextran sulfate, polyphosphoric acid, poly-L-glutamic acid, and poly-L-lysine. It is done.

糖及びポリオール類とならび、アミノ酸も単独又は他のアジュバントと共に安定化剤として使用することができる。アミノ酸は主にタンパク質の安定化に使用される。例えば、10mMリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ7.0）でのrhKGFの凝集は、ヒスチジン、グリシン、アスパラギン酸ナトリウム（Na-Asp）、グルタメート及び塩酸リジン（Lys-HCl）を５％のマンニトールと組合せて抑えることができる（Zhang等（1995）「Biochemistry」34 (27)、 8631-41）。アミノ酸とプロピレングリコールを組合せることにより、例えば、rhCNTFの構造的安定性が向上する（Dix等（1995）「Pharmaceutical Research (Supplement)」12、97頁）。リジンとアルギニンはIL-1Rの熱安定性を向上させる（Tm-増加）が、一方では、グリシンとアラニンは不安定化作用を有する（Remmele等（1998）「Pharmaceutical Research」15(2)、200-208）。
医薬的活性物質の安定性は、さらに、様々な乾燥工程によって向上させることができる。しかしながら、大概、乾燥工程も、活性物質の安定性を維持し乾燥粉体の特性を向上させることを目的としたアジュバントの存在下で進行する。安定化に影響する乾燥工程の決定的要因は、非晶質なマトリックス中で活性物質を固定化することである。非晶質な状態は、粘度を上昇させ、分子運動性を低下させ、反応性を低くする。そのため、有利なアジュバントとは、活性物質を埋め込むマトリックスとして、可能な限り高いガラス転移温度を有する非晶質マトリックスを形成できなければならない。したがって、アジュバントの選択は、特に、その安定化性能により決まる。さらに、アジュバントの医薬的許容性や粒子形成への影響力、分散性及び流動性といった他の要因も重要な役割を果たし、特に噴霧乾燥の場合はなおさらのことである。 Along with sugars and polyols, amino acids can be used as stabilizers alone or in combination with other adjuvants. Amino acids are mainly used for protein stabilization. For example, rhKGF aggregation in 10 mM sodium phosphate buffer (pH 7.0) can be achieved by combining histidine, glycine, sodium aspartate (Na-Asp), glutamate and lysine hydrochloride (Lys-HCl) with 5% mannitol. (Zhang et al. (1995) “Biochemistry” 34 (27), 8631-41). By combining an amino acid and propylene glycol, for example, the structural stability of rhCNTF is improved (Dix et al. (1995) “Pharmaceutical Research (Supplement)” 12, page 97). Lysine and arginine improve the thermal stability of IL-1R (Tm-increase), while glycine and alanine have a destabilizing effect (Remmele et al. (1998) “Pharmaceutical Research” 15 (2), 200 -208).
The stability of the pharmaceutically active substance can be further improved by various drying processes. However, in general, the drying process also proceeds in the presence of an adjuvant aimed at maintaining the stability of the active substance and improving the properties of the dry powder. A decisive factor of the drying process that affects stabilization is the immobilization of the active substance in an amorphous matrix. The amorphous state increases the viscosity, decreases the molecular mobility, and decreases the reactivity. Therefore, an advantageous adjuvant must be able to form an amorphous matrix with the highest possible glass transition temperature as a matrix in which the active substance is embedded. Therefore, the choice of adjuvant depends in particular on its stabilizing performance. In addition, other factors such as adjuvant pharmacological tolerance, particle formation impact, dispersibility and fluidity play an important role, especially in the case of spray drying.

ペプチド／タンパク質含有医薬有効成分の化学的及び物理的安定性を向上させるには、噴霧乾燥が特に好適であることがわかっている（(Maa等（1998）「Pharmaceutical Research」15(5)、768-775)。特に、肺疾患の治療分野では、噴霧乾燥の利用が増大している（米国特許第5,626,874号、米国特許第5,972,388号、Broadhead等（1994）「J. Pharm. Pharmacol.」46(6)、458-467）。それは、全身性疾患の治療において吸入器での投与も実行可能な選択肢の１つであることが示されているからである（ＷＯ99/07340）。前提条件となるのは、粉体の平均粒径が１〜10μｍ、好ましくは１〜7.5μｍの範囲にあることで、肺のより奥深い部分に到達し、血流にのることができる。例えばＤＥ-Ａ-1792207には、該当する噴霧乾燥粒子の製造が記載されている。前記粉体の製造については、数多くの方法がある（ＷＯ95/31479、ＷＯ96/09814、ＷＯ96/32096、ＷＯ96/32149、ＷＯ97/41833、ＷＯ97/44013、ＷＯ98/16205、ＷＯ98/31346、ＷＯ99/66903、ＷＯ00/10541、ＷＯ01/13893、Maa等（1998）同上、Vidgren等（1987）「Int. J. Pharmaceutics」35、139-144、Niven等（1994）「Pharmaceutical Research」11(8)、1101-1109）。
糖類及びそのアルコール類もアジュバントとして適しているが（例えば、トレハロース、ラクトース、サッカロース又はマンニトール）、同様に様々なポリマー類も適している（Maa等（1997）「Pharm. Development and Technology」2(3)、213-223；Maa等（1998）同上；論文Adler（1998）エアランゲン大学；Costantino等（1998）「J. Pharm. Sci.」87(11)、1406-1411）。しかしながら、使用されている主なアジュバントにはそれぞれ短所がある。例えば、トレハロースやマンニトールは、添加により噴霧乾燥製剤の流動性を低下させる（C. Bosquillon等（2001）「Journal of Controlled Release」70(3)、329-339）。また、マンニトールは、含有量が20質量％をこえるとさらに再結晶化傾向があり（Costantino等（1998）同上）、安定化効果が急激に減衰する。ラクトースはよく使用されるアジュバントであり、噴霧乾燥製剤の流動性を改善する（C. Bosquillon等（2001）同上）が、とりわけペプチド活性物質含有／タンパク質含有有効成分の処方中に問題が発生する。それは、ラクトースはその還元特性によりペプチド／タンパク質とマイラード反応を起こし不安定化を伴う可能性があるからである。 Spray drying has been found to be particularly suitable for improving the chemical and physical stability of peptide / protein containing pharmaceutical active ingredients ((Maa et al. (1998) “Pharmaceutical Research” 15 (5), 768). In particular, the use of spray drying is increasing in the field of treatment of pulmonary diseases (US Pat. No. 5,626,874, US Pat. No. 5,972,388, Broadhead et al. (1994) “J. Pharm. Pharmacol.” 46 ( 6), 458-467) because it has been shown that inhaler administration is also a viable option in the treatment of systemic diseases (WO99 / 07340). Because the average particle size of the powder is in the range of 1 to 10 μm, preferably 1 to 7.5 μm, it can reach the deeper part of the lungs and enter the bloodstream, for example DE-A- The manufacture of the corresponding spray-dried particles is described in 1792207. (WO95 / 31479, WO96 / 09814, WO96 / 32096, WO96 / 32149, WO97 / 41833, WO97 / 44013, WO98 / 16205, WO98 / 31346, WO99 / 66903, WO00 / 10541, WO01 / 13893, Maa (1998) Ibid., Vidgren et al. (1987) “Int. J. Pharmaceutics” 35, 139-144, Niven et al. (1994) “Pharmaceutical Research” 11 (8), 1101-1109).
Sugars and their alcohols are also suitable as adjuvants (eg trehalose, lactose, saccharose or mannitol), but various polymers are also suitable (Maa et al. (1997) “Pharm. Development and Technology” 2 (3). ), 213-223; Maa et al. (1998) ibid .; paper Adler (1998) Erlangen University; Costantino et al. (1998) “J. Pharm. Sci.” 87 (11), 1406-1411). However, each major adjuvant used has its disadvantages. For example, trehalose and mannitol decrease the fluidity of spray-dried preparations when added (C. Bosquillon et al. (2001) “Journal of Controlled Release” 70 (3), 329-339). In addition, when the content of mannitol exceeds 20% by mass, there is a tendency to recrystallize (Costantino et al. (1998) same as above), and the stabilizing effect is rapidly attenuated. Lactose is a commonly used adjuvant and improves the fluidity of spray-dried formulations (C. Bosquillon et al. (2001) ibid), but problems arise especially during formulation of peptide active / protein-containing active ingredients. This is because lactose may undergo a Maillard reaction with the peptide / protein due to its reducing properties and may be destabilized.

安定化剤を添加せずに抗体を噴霧乾燥すると、脱水、熱及び剪断により固有の第２の構造が定期的に発現し、その結果としてバイオアクティビティーが劇的に損なわれる。既に内側を向いていた抗体の疎水性部分が逆戻りして外側を向く。これは、噴霧乾燥工程中に生じる水滴と周囲の空気との疎水性界面において進行する。さらに加えて、抗体は水性相内で凝集し二量体又はより高次な凝集体を形成する。こうした凝集は不可逆性であることが多い。さらに、タンパク質を噴霧する際の高温は重大なパラメータとなる。高エネルギーを使うことで、ペプチド結合が不安定化し、抗体が変性する可能性がある。さらに、粉体の保存期間中にも噴霧乾燥抗体は凝集体を形成する。この場合は、粉体中の残留水分がとりわけ悪影響を及ぼす。タンパク質の凝集体は、生物学的活性が減退もしくは喪失し、抗原性が強まるという特徴を有する。
マルトシルスクロース及びグルコシルスクロースならびにラクトスクロースを主成分とするカップリングシュガーと呼ばれる多糖類が、食品分野で利用されている。これらは、アスパルテームのような甘味剤とともに増量剤や分散剤として、またチューインガムのほのかな甘味成分として、トレハロースシロップが結晶化しないように安定化させるために、またはいわゆるＮＤＯ（難消化性オリゴ糖類）として使用されている。アスパラギルペプチドの甘味特性の向上と安定化、又は、バラスト（ballast）と甘味剤とを含む飲料系における甘味／酸味の関係の向上と安定化については公知である（米国特許第2003/0059511、ＥＰ1223175、ＤＥ19953727）。さらに、米国特許第5,489,577号及びＥＰ0630651から、治療用タンパク質と油脂基剤とから調製される懸濁液を安定化させるためのオリゴ糖の使用が公知である。開示には、疎水性の半固体のかたまりと一緒に混合及び混練する際に、前もってオリゴ糖と混合しておかないと、前記タンパク質はその活性を失うおそれがあると記載されている。保存期間にわたり、親水性混合物又は粉体における安定化の潜在能力については何も言及されていない。 Spray drying the antibody without the addition of stabilizers regularly develops an inherent second structure due to dehydration, heat and shear, resulting in a dramatic loss of bioactivity. The hydrophobic part of the antibody that was already facing inward is reversed and faces outward. This proceeds at the hydrophobic interface between the water droplets and the surrounding air that occur during the spray drying process. In addition, antibodies aggregate in the aqueous phase to form dimers or higher order aggregates. Such aggregation is often irreversible. Furthermore, the high temperature at which the protein is sprayed is a critical parameter. The use of high energy can destabilize peptide bonds and denature antibodies. Furthermore, the spray-dried antibody forms aggregates even during the storage period of the powder. In this case, residual moisture in the powder has a particularly adverse effect. Protein aggregates are characterized by reduced or lost biological activity and increased antigenicity.
A polysaccharide called coupling sugar mainly composed of maltosyl sucrose, glucosyl sucrose and lactosucrose is used in the food field. These are used as a bulking agent and dispersing agent together with a sweetener such as aspartame, as a subtle sweetening component of chewing gum, to stabilize trehalose syrup from crystallizing, or so-called NDO (non-digestible oligosaccharide) It is used as Improvements and stabilization of the sweetness properties of asparagyl peptides, or improvement and stabilization of the sweetness / acidity relationship in beverage systems containing ballasts and sweeteners are known (US 2003/0059511, EP1223175, DE19953727). Furthermore, from US Pat. No. 5,489,577 and EP 0630651, the use of oligosaccharides for stabilizing suspensions prepared from therapeutic proteins and oil bases is known. The disclosure states that when mixed and kneaded with a hydrophobic semi-solid mass, the protein may lose its activity if not previously mixed with the oligosaccharide. There is no mention of stabilization potential in the hydrophilic mixture or powder over the storage period.

本発明の目的は、医薬製剤を製造するための新規なアジュバントを提案することである。該製剤は、特に長期にわたる優れた安定性という特徴を有するはずである。
さらなる本発明の目的は、乾燥医薬製剤製造用の新規なアジュバントを提供することである。該粉末状医薬製剤は、長期安定性に優れていること、さらに可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
さらに別の本発明の目的は、ペプチド含有／タンパク質含有医薬製剤を製造するための新規なアジュバントを提供することであり、とりわけこれらの製剤が噴霧乾燥で製造される場合である。該ペプチド含有／タンパク質含有医薬製剤は長期安定性と、可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
また、本発明のさらに別な目的は、治療用抗体又は抗体誘導体を処方するための新規なアジュバントを提供することであり、特にこれらが噴霧乾燥で製造される場合である。該抗体含有医薬製剤も、長期安定性と、可能であれば吸入性という特徴を有するであろう。
さらに別の本発明の目的は、吸入器による投与用の医薬製剤を提供することで、剤形が、乾燥粉末、噴射剤含有定量エアロゾル、又は、噴射剤を含まない吸入溶液のいずれかである。
本発明の基礎となる前記目的は、以下の記載により、また、特許クレームに示すもの／方法により達成される。 The object of the present invention is to propose a novel adjuvant for the production of pharmaceutical preparations. The formulation should have the characteristics of excellent stability, especially over time.
A further object of the present invention is to provide a novel adjuvant for the production of dry pharmaceutical formulations. The powdered pharmaceutical preparation will have the characteristics of excellent long-term stability and, if possible, inhalability.
Yet another object of the present invention is to provide new adjuvants for preparing peptide-containing / protein-containing pharmaceutical formulations, especially when these formulations are manufactured by spray drying. The peptide-containing / protein-containing pharmaceutical formulation will have the characteristics of long-term stability and possibly inhalation.
Yet another object of the present invention is to provide novel adjuvants for formulating therapeutic antibodies or antibody derivatives, especially when they are produced by spray drying. The antibody-containing pharmaceutical formulation will also have long-term stability and possibly inhalation characteristics.
Yet another object of the present invention is to provide a pharmaceutical formulation for administration by an inhaler so that the dosage form is either a dry powder, a propellant-containing metered dose aerosol, or a propellant-free inhalation solution .
The above object on which the present invention is based is achieved by the following description and by the ones / methods indicated in the patent claims.

（発明の概要）
本発明は、１種の抗体又は１種の抗体誘導体と、1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型glu-glu-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上とを含む組成物に関する。グルコシルスクロースとマルトシルスクロースを含む組成物が好ましい組成物である。
ラクトスクロースという用語は下記の構造式を有する分子を意味する。 (Summary of Invention)
The present invention relates to one antibody or one antibody derivative and 1,4 O-linked D-gal-saccharose (lactosucrose), 1,4 O-linked D-glu-saccharose (glucosyl sucrose) or The present invention relates to a composition comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative selected from 1,4 O-linked glu-glu-saccharose (maltosyl sucrose). A composition comprising glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is a preferred composition.
The term lactosucrose means a molecule having the following structural formula:

また、本発明に関しては、グルコシルスクロースは下記の構造式を有する分子を意味するものと解釈される。 Also, in the context of the present invention, glucosyl sucrose is taken to mean a molecule having the following structural formula:

また、マルトシルスクロースという用語は、下記の構造式を有する分子を意味する。 The term maltosyl sucrose means a molecule having the following structural formula.

本発明のさらなる実施形態によると、当該組成物は、抗体又は抗体誘導体と1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類の１種以上をさらに含むもので、単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が好ましい。さらに、グリコシルスクロース及びマルトシルスクロースの組成物と、１種の抗体又は抗体誘導体とを一緒にして作製した組成物が本発明に対応することは既に記載したが、好ましくは単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類が一緒であると好ましい。
そこで、特に本発明による組成物としては、（ａ）25〜99.99質量％、好ましくは80〜90質量％（組成物の乾燥質量基準）の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１種の抗体又は１種の抗体誘導体を好ましくは0.01〜75質量％（組成物の乾燥質量基準）の濃度で含み、糖／糖混合物と抗体又は抗体誘導体との質量パーセントの合計が最大100質量％となる組成物である。
組成物は水性組成物、固体又は半固体組成物であってもよい。特に好ましいのは固体の組成物で、好ましくは粉末状の組成物である。驚くべきことに、前記の抗体を含有する粉末組成物は、（ｉ）非晶質構造を形成し、（ii）ガラス転移温度が40℃より高く、（iii）再結晶化傾向が低いということがわかった。このことは、噴霧乾燥粉末にとくにあてはまる。 According to a further embodiment of the present invention, the composition further comprises one or more of a monosaccharide, a disaccharide and / or a polysaccharide together with an antibody or antibody derivative and a 1,4 O-linked saccharose derivative, Use of monosaccharides and / or disaccharides is preferred. Furthermore, although it has already been described that a composition prepared by combining a composition of glycosyl sucrose and maltosyl sucrose and a single antibody or antibody derivative corresponds to the present invention, monosaccharides, disaccharides and It is preferred if the polysaccharides are together.
Therefore, in particular, the composition according to the present invention includes (a) 25 to 99.99% by mass, preferably 80 to 90% by mass (based on the dry mass of the composition) of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or A sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative and a concentration of (b) one antibody or one antibody derivative, preferably 0.01-75% by weight (based on the dry weight of the composition) In which the sum of the mass percentages of the sugar / sugar mixture and the antibody or antibody derivative is up to 100% by mass.
The composition may be an aqueous composition, a solid or semi-solid composition. Particularly preferred is a solid composition, preferably a powdery composition. Surprisingly, the powder composition containing the antibody described above (i) forms an amorphous structure, (ii) has a glass transition temperature higher than 40 ° C., and (iii) has a low tendency to recrystallize. I understood. This is especially true for spray-dried powders.

本発明の組成物、とりわけ粉末状組成物は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物に加えて、例えば、アミノ酸、ペプチド、タンパク質及び他の糖類等といった付加的アジュバントを含有してもよい。少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、１種の抗体又は抗体誘導体に加え、さらに、少なくとも１種のアミノ酸、少なくとも１種のペプチド、好ましくはジペプチドもしくはトリペプチド及び／又は１種の塩を含む組成物が特に有用である。好ましい実施形態の１つによると、本発明は、好ましくは粉末状組成物、例えば、噴霧乾燥粉末であって、乾燥質量基準で（ａ）25〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）付加的アジュバントとして１〜39.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、（ｃ）少なくとも0.01質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む粉末状組成物に関する。付加的アジュバントとして好ましいのは、アミノ酸のイソロイシン又はペプチド、好ましくは少なくとも１個のイソロイシン基を有するジペプチドもしくはトリペプチドを指す。具体的な実施形態の１つとして、本発明は、例えば噴霧乾燥粉末等の組成物であって、乾燥質量基準で（ａ）およそ60〜80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ10〜19.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸、好ましくはイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜30質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物に関する。また別の実施形態としては、本発明は、組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末等の粉末状組成物であって、乾燥質量基準で（ａ）およそ60〜80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）およそ１〜19.99質量％のペプチド、好ましくはイソロイシン含有ペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ジペプチド又はトリペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシンと、（ｃ）およそ0.01〜39質量％の１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物に関する。この組成の粉末は、イソロイシン又はイソロイシン含有トリペプチドと一緒に混合することにより、とりわけ良好な流動特性を示す。該噴霧乾燥粉末は、さらに吸入可能粒子の割合が非常に高い。さらに、該粉末は加工安定性及び保存安定性において非常に優れている。 The composition according to the invention, in particular the powder composition, in addition to a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, for example, Additional adjuvants such as amino acids, peptides, proteins and other sugars may be included. In addition to at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, one antibody or antibody derivative, and at least one amino acid Particularly useful are compositions comprising at least one peptide, preferably a dipeptide or tripeptide and / or one salt. According to one preferred embodiment, the present invention is preferably a powdered composition, for example a spray-dried powder, wherein (a) 25 to 90% by weight of at least one 1,4 O based on dry weight. A sugar mixture comprising a conjugated saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, and (b) 1 to 39.99% by weight of at least one amino acid and / or at least one kind as an additional adjuvant It relates to a powdery composition comprising a peptide and (c) at least 0.01% by weight of one antibody or antibody derivative. Preferred as an additional adjuvant refers to the amino acid isoleucine or peptide, preferably a dipeptide or tripeptide having at least one isoleucine group. In one specific embodiment, the present invention is a composition, such as a spray-dried powder, wherein (a) approximately 60-80% by weight of at least one 1,4 O-bond based on dry weight. Type saccharose derivative or a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, (b) approximately 10-19.99% by weight of at least one amino acid, preferably isoleucine, and (c) approximately 0.01- It relates to a composition comprising 30% by weight of one antibody or antibody derivative. In another embodiment, the present invention provides a composition, preferably a powdered composition such as, for example, a spray-dried powder, wherein (a) approximately 60-80% by weight of at least one A sugar mixture comprising a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative; and (b) approximately 1-19.99% by weight of a peptide, preferably an isoleucine-containing peptide, particularly preferably It relates to a composition comprising an isoleucine-containing dipeptide or tripeptide, more preferably triisoleucine, and (c) approximately 0.01 to 39% by weight of one antibody or antibody derivative. Powders of this composition exhibit particularly good flow properties when mixed together with isoleucine or isoleucine-containing tripeptides. The spray-dried powder also has a very high proportion of inhalable particles. Furthermore, the powder is very excellent in processing stability and storage stability.

別の実施形態によると、本発明は、前記粉末状組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末であって、（ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種もしくは前記記載の組合せ、又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の抗体又は抗体誘導体とを含有する粉末状組成物であって、これにより、前記粉末のガラス転移温度が40℃より高く、好ましくは45℃より高く、さらに好ましくは50℃より高く、特に好ましくは55℃より高く、きわめて好ましくは60℃より高い粉末状組成物に関する。一般に、本発明の前記粉末の最高ガラス転移温度は約96〜110℃である。個々のケースでは、この値がさらに高くてもよい。粉末において、添加するアジュバント画分、とりわけ1,4 O-結合型サッカロース誘導体画分又は誘導体混合物画分が、前記ガラス転移温度を主として決定する。
別の実施形態によると、本発明は、抗体又は抗体誘導体を含む吸入器による投与用の医薬組成物に関するもので、本発明による本願記載の粉末状組成物の１種を含む医薬組成物ならびに前記記載の粉末状組成物の１種で構成される医薬組成物である。これに関して、本発明の粉末を噴射剤を含む定量エアロゾルとして、又は噴射剤を含まない吸入溶液として含有する医薬組成物が好ましい。前記医薬組成物の製造に使用する本発明の粉末、好ましくは噴霧乾燥によって製造される粉末は、さらに別の実施形態によると、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が10μｍ未満、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、とりわけ好ましくは0.5〜5.0μｍの吸入可能粒子の画分が高いという特徴を有する。
さらに、本発明は、前記記載の本発明による組成物、好ましくは粉末状組成物の製造、例えば、噴霧乾燥粉末の製造方法を提案するもので、（ａ）１種以上の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）少なくとも１種の抗体又は抗体誘導体とを含む水性組成物を調製し、粉末状組成物の場合は、適切な条件下、例えば噴霧することを特徴とする製造方法である。 According to another embodiment, the present invention provides the powdered composition, preferably a spray-dried powder, comprising (a) one of the 1,4 O-linked saccharose derivatives or a combination as described above, or at least one A powdery composition comprising a sugar mixture comprising a seed 1,4 O-linked saccharose derivative and (b) at least one antibody or antibody derivative, whereby the glass transition temperature of said powder is It relates to a powdery composition above 40 ° C., preferably above 45 ° C., more preferably above 50 ° C., particularly preferably above 55 ° C., very particularly preferably above 60 ° C. Generally, the maximum glass transition temperature of the powder of the present invention is about 96-110 ° C. In individual cases this value may be higher. In the powder, the added adjuvant fraction, especially the 1,4 O-linked saccharose derivative fraction or derivative mixture fraction, mainly determines the glass transition temperature.
According to another embodiment, the present invention relates to a pharmaceutical composition for administration by an inhaler comprising an antibody or antibody derivative, comprising a pharmaceutical composition comprising one of the powdered compositions described herein according to the present invention, as well as said A pharmaceutical composition comprising one of the described powdery compositions. In this regard, pharmaceutical compositions containing the powder of the invention as a metered aerosol containing a propellant or as an inhalation solution without a propellant are preferred. According to yet another embodiment, the powder of the present invention used for the preparation of the pharmaceutical composition, preferably a powder produced by spray drying, has an aerodynamic particle size (MMAD) of less than 10 μm, preferably 0.5 to It is characterized by a high fraction of inhalable particles of 7.5 μm, more preferably 0.5 to 5.5 μm, particularly preferably 0.5 to 5.0 μm.
Furthermore, the present invention proposes a method for producing a composition according to the invention as described above, preferably a powdered composition, for example a method for producing a spray-dried powder, comprising (a) one or more 1,4 O- Preparing an aqueous composition comprising a saccharide mixture comprising a conjugated saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative; and (b) at least one antibody or antibody derivative; In some cases, the production method is characterized by spraying under appropriate conditions.

（発明の詳細な説明）
定義：
本発明の明細書の範囲で使用する用語及び名称は、以下に定義する意味を有する。特に指示のない限り、質量及び質量パーセントのデータは、組成物の乾燥質量又は溶液／懸濁液の固形分にそれぞれ関する。「含んでいる」「含む」という概括的実施形態は、「〜で構成される」というより具体的な実施形態を包含する。「単数」及び「複数」は、なんら限定することなく使用する。
「1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物」という表現は、（ｉ）本願明細書に記載の式の１つを有する1,4 O-結合型サッカロース誘導体、（ii）その混合物で、好ましくはマルトシルスクロースとグルコシルスクロースの混合物、（iii）前記記載の式のいずれか１つを有する少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体と、他の糖との混合物で、好ましくは、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとの混合物、あるいは、グルコシル及び／又はマルトシルスクロース、サッカロース、フルクトース及びグルコースとの混合物、（iv）少なくとも55質量％のラクトスクロースと、最大25質量％のラクトースと、最大10質量％のサッカロースとの混合物、（ｖ）少なくとも88質量％のラクトスクロースと、最大10質量％のラクトース及びサッカロースとの混合物、（vi）25質量％のグルコシル及び／又はマルトシルスクロースと、48〜56質量％のサッカロースと、10質量％以下のグルコース及びフルクトースとの混合物、（vii）それぞれ18質量％のグルコシルスクロース及びマルトシルスクロースと、11〜15質量％のサッカロースと、５〜９質量％のグルコースとの混合物、（viii）「乳果オリゴ（登録商標）LS40L」（LS40Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55L」（LS55Lと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）、「カップリングシュガー（登録商標）」もしくは「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物である。 (Detailed description of the invention)
Definition:
The terms and names used in the specification of the present invention have the meanings defined below. Unless otherwise indicated, weight and weight percent data relate to the dry weight of the composition or the solid content of the solution / suspension, respectively. General embodiments “comprising” and “including” encompass more specific embodiments “consisting of”. “Single” and “multiple” are used without any limitation.
The expression “a 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative” refers to (i) having one of the formulas described herein, 1, A 4 O-linked saccharose derivative, (ii) a mixture thereof, preferably a mixture of maltosyl sucrose and glucosyl sucrose, (iii) at least one 1,4 O-bond having any one of the formulas described above Type sucrose derivatives and other sugars, preferably a mixture of lactosucrose and lactose and saccharose, or a mixture of glucosyl and / or maltosyl sucrose, saccharose, fructose and glucose, (iv) at least 55 A mixture of mass% lactosucrose, maximum 25 mass% lactose and maximum 10 mass% saccharose, (v) at least 88 quality % Of lactosucrose and a mixture of up to 10% by weight lactose and saccharose, (vi) 25% by weight glucosyl and / or maltosyl sucrose, 48-56% by weight saccharose, 10% by weight or less glucose and A mixture with fructose, (vii) a mixture of 18% by weight glucosyl sucrose and maltosyl sucrose, respectively 11-15% by weight saccharose and 5-9% by weight glucose, (viii) "milk oligo (registered) (Trademark) LS40L "(abbreviated as LS40L)," milk oligo (registered trademark) LS55L "(abbreviated as LS55L)," milk oligo (registered trademark) LS55P "(abbreviated as LS55P)," milk oligo (registered trademark) " LS90P "(abbreviated as LS90P)," Coupling Sugar (registered trademark) "or" Coupling Sugar S (registered trademark) "(Hayashibara Shoji, Japan) The

「組成物」は、少なくとも２種の出発物質を含む液体、半固体又は固体の混合物を意味する。
「医薬的に許容されるアジュバント」という用語は、本発明の範囲における調剤中で任意に含有させることができるアジュバントを指す。例えば、アジュバントは、対象者又は対象者の肺に後から著しい毒性副作用を及ぼすことなく肺への投与が可能なものである。
「医薬的に許容される塩」とは、例えば以下の塩が含まれるが、これらに限定されるものではない。無機酸の塩、例えば、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化物及び硝酸塩。さらに、有機酸の塩として、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩及びステアリン酸塩、ならびにエストレート、グルセプテート及びラクトビオネート塩が挙げられる。
「医薬的に許容されるカチオン」という用語は例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム及びアンモニウム（置換アンモニウムを含む）などが例示できるが、これらに限定されるものではない。 “Composition” means a liquid, semi-solid or solid mixture comprising at least two starting materials.
The term “pharmaceutically acceptable adjuvant” refers to an adjuvant that can optionally be included in a formulation within the scope of the present invention. For example, an adjuvant is one that can be administered to the lung without subsequent significant toxic side effects on the subject or the subject's lung.
Examples of the “pharmaceutically acceptable salt” include, but are not limited to, the following salts. Salts of inorganic acids such as hydrochlorides, sulfates, phosphates, diphosphates, bromides and nitrates. Furthermore, as salts of organic acids, malate, maleate, fumarate, tartrate, succinate, ethyl succinate, citrate, acetate, lactate, methanesulfonate, benzoate, Examples include ascorbate, paratoluene sulfonate, palmoate, salicylate and stearate, and estrate, glucoceptate and lactobionate salts.
Examples of the term “pharmaceutically acceptable cation” include, but are not limited to, lithium, sodium, potassium, calcium, aluminum and ammonium (including substituted ammonium).

「アミノ酸」という用語は、少なくとも１個のアミノ基と少なくとも１個のカルボキシル基とを含む化合物を意味する。通常、カルボキシル基に対してアミノ基はα‐位置にあるが、分子中の構成が他のものも考えられる。また、アミノ酸は、例えば、アミノ基、カルボキサミド基、カルボキシル基、イミダゾール基、チオ基等の他の官能基を含有していてもよい。天然アミノ酸、合成アミノ酸で、ラセミ体又は立体異性の関係が様々な光学活性を有するもの（Ｄ体もしくはＬ体）が使用される。例えば、イソロイシンならびにＤ−イソロイシン、Ｌ−イソロイシン、ラセミ体のイソロイシン及び２つの鏡像異性体の比率の異なるものが含まれる。
「生物学的高分子」という用語は、ペプチド、タンパク質、脂肪、脂肪酸又は核酸を意味する。
「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語の定義は、２〜100個のアミノ酸基で構成されるアミノ酸高分子である。「ペプチド」又は「ポリペプチド」という用語は、匿名として用いられることもあり、ホモペプチドとヘテロペプチドの両方を含む。即ち、同一のアミノ酸基又は異なるアミノ酸基で構成されるアミノ酸高分子が含まれる。したがって、「ジペプチド」はペプチド結合による２個のアミノ酸で構成されており、「トリペプチド」はペプチド結合による３個のアミノ酸で構成される。本願明細書で使用する「タンパク質」という用語は、100個を超えるアミノ酸基を有するアミノ酸高分子である。
「類似物」という用語は、ペプチド／タンパク質において、１個又は多数のアミノ酸が置換されたもの、削除されたもの（例えば、断片）、付け足されたもの（例えば、Ｃ−又はＮ−末端を延長した誘導体）、さもなければ、固有の（生来の）シーケンスに対して変性されたものを意味する。また、例えば、糖類、ポリエチレングリコール等を用いて、固有のタンパク質から誘導体を調製することも可能である。類似物は、固有の合成していないタンパク質のバイオアクティビティーの少なくとも10、20、30又は40％、好ましくは少なくとも50、60又は70％、とりわけ好ましくは少なくとも80、90、95、100％、あるいは100％を超えることが好ましい。 The term “amino acid” means a compound comprising at least one amino group and at least one carboxyl group. Usually, the amino group is in the α-position relative to the carboxyl group, but other configurations in the molecule are possible. In addition, the amino acid may contain other functional groups such as an amino group, a carboxamide group, a carboxyl group, an imidazole group, and a thio group. Natural amino acids and synthetic amino acids that are racemic or have stereochemical isomerism having various optical activities (D-form or L-form) are used. For example, isoleucine and D-isoleucine, L-isoleucine, racemic isoleucine and those with different ratios of the two enantiomers are included.
The term “biological macromolecule” means a peptide, protein, fat, fatty acid or nucleic acid.
The definition of the term “peptide” or “polypeptide” is an amino acid polymer composed of 2 to 100 amino acid groups. The term “peptide” or “polypeptide” is sometimes used anonymously and includes both homopeptides and heteropeptides. That is, amino acid polymers composed of the same amino acid group or different amino acid groups are included. Therefore, “dipeptide” is composed of two amino acids by peptide bonds, and “tripeptide” is composed of three amino acids by peptide bonds. As used herein, the term “protein” is an amino acid polymer having more than 100 amino acid groups.
The term “analog” refers to a peptide / protein that has one or more amino acid substitutions, deletions (eg, fragments), or additions (eg, C- or N-terminal). Extended derivative), otherwise denatured with respect to the unique (natural) sequence. It is also possible to prepare a derivative from a specific protein using, for example, saccharides, polyethylene glycol and the like. Analogs are at least 10, 20, 30 or 40%, preferably at least 50, 60 or 70%, particularly preferably at least 80, 90, 95, 100%, or 100% of the bioactivity of the native unsynthesized protein. % Is preferably exceeded.

「オリゴ糖」又は「多糖」という用語は、少なくとも３個の単量体糖分子で構成される多糖を意味する。
「タンパク質のみの調剤」という用語は、１種以上の抗体又は抗体誘導体からなる粉末であって、さらに任意で好適な緩衝剤（通常、乾燥粉末の質量に対して０〜15質量％）を含んでもよい粉末を意味する。粉末は本質的には他のアジュバントを含有しない。即ち、含有させることができる他のアジュバントの含有量は乾燥粉末の質量に対して１質量％未満である。
「噴霧乾燥粉末調剤」又は「乾燥粉末調剤」という表記は、通常、残留水分が約10質量％未満、好ましくは７質量％未満、さらに好ましくは５質量％未満、特に好ましくは３質量％未満の粉末調剤を意味する。残留水分は、噴霧乾燥、真空乾燥又は凍結乾燥の条件が一定、かつアジュバントが同一であれば、その粉末調剤中の医薬有効成分の種類と含有量によってほぼ決まる。
「非晶質」という用語は、結晶部位が10％未満、好ましくは７％未満、さらに好ましくは５％未満、特に好ましくは４、３、２又は１％未満である粉末調剤を意味する。
「吸入可能な」という用語は、粉末が肺への投与に適していることを意味する。吸入可能粉末は吸入器を用いて分散、吸入させることができ、吸入によって粒子が肺に到達し、必要に応じて肺胞を介して全身に作用を発現させる。吸入可能な粒子は、例えば平均粒径（ＭＭＤ＝体積中央径）が0.4〜10μｍ、通常0.5〜5.0μｍ、好ましくは１〜３μｍ、及び／又は、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）が0.5〜10μｍ、好ましくは0.5〜7.5μｍ、さらに好ましくは0.5〜5.5μｍ、より好ましくは１〜５μｍ、とりわけ好ましくは１〜4.5μｍである。 The term “oligosaccharide” or “polysaccharide” means a polysaccharide composed of at least three monomeric sugar molecules.
The term “protein-only preparation” is a powder consisting of one or more antibodies or antibody derivatives, optionally further including a suitable buffer (usually 0-15% by weight relative to the weight of the dry powder). May mean powder. The powder is essentially free of other adjuvants. That is, the content of other adjuvants that can be contained is less than 1% by mass relative to the mass of the dry powder.
The notation "spray dry powder preparation" or "dry powder preparation" usually means that the residual moisture is less than about 10% by weight, preferably less than 7% by weight, more preferably less than 5% by weight, particularly preferably less than 3% by weight. Means powder preparation. If the conditions of spray drying, vacuum drying or freeze drying are constant and the adjuvant is the same, the residual water content is almost determined by the type and content of the active pharmaceutical ingredient in the powder preparation.
The term “amorphous” means a powder formulation with less than 10% crystal sites, preferably less than 7%, more preferably less than 5%, particularly preferably less than 4, 3, 2 or 1%.
The term “inhalable” means that the powder is suitable for pulmonary administration. The inhalable powder can be dispersed and inhaled using an inhaler, and the particles reach the lungs by inhalation, and if necessary, the whole body acts through the alveoli. The inhalable particles have, for example, an average particle size (MMD = volume median diameter) of 0.4 to 10 μm, usually 0.5 to 5.0 μm, preferably 1 to 3 μm, and / or an aerodynamic particle size (MMAD) of 0.5 to The thickness is 10 μm, preferably 0.5 to 7.5 μm, more preferably 0.5 to 5.5 μm, more preferably 1 to 5 μm, and particularly preferably 1 to 4.5 μm.

「体積中央径」又は「ＭＭＤ」が平均粒径分布を特徴づける単位であるのは、本発明の粉末が通常、多分散系だからである。この結果は、総処理量の全体積分布の50％における粒径として表される。ＭＭＤ値は、例えば、レーザー回折法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）によって求めることができるが、従来からの他の方法も使用できる（例えば、電子顕微鏡検査法、遠心沈降法等）。
「空気動力学的粒径（＝ＭＭＡＤ）」という用語は、空気動力学的粒径が通常小さい粉体粒子の50％の空気動力学的粒径を指す。不明確な場合は、本願記載の方法（これについては「実施例」のセクションの「方法」を参照）が、ＭＭＡＤを求めるための参考の方法となる。
「細粒分」（ＦＰＦ）という用語は、ＭＭＡＤが５μｍ以下の粒径を有する粒子からなる吸入可能な粉末部分を指す。分散が良好な粉末において、ＦＰＦは20％より多く、好ましくは30％より多く、特に好ましくは40％より多く、さらに好ましくは50％より多く、格別に好ましくは55％より多い。明細書中に使用の「カットオフ粒径」という用語は、ＦＰＦを求める際に考慮する径を指す。カットオフ粒径が５μｍでＦＰＦが30％（ＦＰＦ₅）という場合、粉末中の全粒子の少なくとも30％が体積平均空気動力学的粒径５μｍ未満の粒子であることを意味する。
「噴霧溶液」という用語は、医薬有効成分を少なくとも１種のアジュバントと共に溶解／懸濁した水溶液又は懸濁液を意味する。
「飛行時間」という用語は標準的測定方法に使用される名称で、「実施例」の項でより詳細に説明する。飛行時間の測定時に、ＭＭＡＤ及びＦＰＦは同時に測定される（これについては「実施例」の項の「方法」を参照）。
「界面活性」物質は、その物質が溶解されている溶液の表面張力を減少させることができる。表面活性は、例えば、Lecomte du Nouy（Bauer、Fromming、Fuhrer、第６版）で提案されているテンシオメーター法を用いて測定される。 The “volume median diameter” or “MMD” is a unit characterizing the average particle size distribution because the powder of the present invention is usually a polydisperse system. This result is expressed as the particle size at 50% of the total volume distribution of the total throughput. MMD values can be determined, for example, by laser diffraction (see “Methods” in the “Examples” section for this), but other conventional methods can also be used (eg, electron microscopy, Centrifugal sedimentation method).
The term “aerodynamic particle size (= MMAD)” refers to an aerodynamic particle size of 50% of powder particles, which typically have a small aerodynamic particle size. If unclear, the method described in this application (see “Methods” in the “Examples” section for this) is a reference method for determining MMAD.
The term “fine fraction” (FPF) refers to an inhalable powder portion consisting of particles having a MMAD particle size of 5 μm or less. In a well-dispersed powder, the FPF is more than 20%, preferably more than 30%, particularly preferably more than 40%, more preferably more than 50% and particularly preferably more than 55%. As used herein, the term “cut-off particle size” refers to the diameter to be considered when determining the FPF. When the cutoff particle size is 5 μm and the FPF is 30% (FPF ₅ ), it means that at least 30% of all particles in the powder are particles having a volume average aerodynamic particle size of less than 5 μm.
The term “spray solution” means an aqueous solution or suspension in which a pharmaceutically active ingredient is dissolved / suspended with at least one adjuvant.
The term “time of flight” is the name used for standard measurement methods and is described in more detail in the “Examples” section. When measuring the time of flight, MMAD and FPF are measured simultaneously (see “Method” in the “Examples” section).
A “surfactant” material can reduce the surface tension of the solution in which the material is dissolved. Surface activity is measured, for example, using the tensiometer method proposed by Lecomte du Nouy (Bauer, Fromming, Fuhrer, 6th edition).

本発明の組成物：
本発明は、ａ）医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と、ｂ）1,4 O-結合型D-gal-サッカロース（ラクトスクロース）、1,4 O-結合型D-glu-サッカロース（グルコシルスクロース）又は1,4 O-結合型gul-gul-サッカロース（マルトシルスクロース）から選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体の１種以上を含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末組成物に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、前記組成物は、抗体又は抗体誘導体及び1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、さらに１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むが、粉末製造工程において単糖類及び／又はニ糖類の添加利用が特に好ましい。したがって、ラクトスクロースとラクトースとサッカロースとを含む組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に含まれるが、組成物中の糖分全体に対してラクトスクロース分が40質量％以上、好ましくは55質量％以上、さらに88質量％以上が好ましい。好適な実施形態の１つによると、本発明の組成物は、医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体とともに、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）と呼ばれる、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物を含有する。別の好ましい実施形態によると、本発明の組成物は、医薬有効成分とともに、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）と呼ばれる、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトースとサッカロースとを含む糖混合物を含有する。 Composition of the invention:
The present invention relates to a) one antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient, and b) 1,4 O-linked D-gal-saccharose (lactosucrose), 1,4 O-linked D-glu- Composition comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative selected from saccharose (glucosyl sucrose) or 1,4 O-linked gul-gul-saccharose (maltosyl sucrose), preferably, for example, spray It relates to a powder composition such as a dry powder.
According to a further embodiment of the present invention, the composition further comprises one or more monosaccharides, disaccharides and / or polysaccharides together with the antibody or antibody derivative and 1,4 O-linked saccharose derivative, The use of monosaccharides and / or disaccharides is particularly preferred in the production process. Accordingly, a composition containing lactosucrose, lactose and saccharose, preferably a powdery composition such as spray-dried powder, is also included in the present invention, but the lactosucrose content is 40% by mass with respect to the total sugar content in the composition. Above, preferably 55% by mass or more, more preferably 88% by mass or more. According to one of the preferred embodiments, the composition of the present invention is prepared with “milk oligo (registered trademark) LS55P” (Hayashibara Shoji Co., Ltd., Japan) together with one antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient. A sugar mixture comprising at least 55% lactosucrose, a maximum of 25% lactose and a maximum of 10% saccharose, abbreviated LS55P). According to another preferred embodiment, the composition of the present invention, together with a pharmaceutically active ingredient, is at least 88% of “Hayashi Oligo® LS90P” (abbreviated LS90P) from Hayashibara Shoji Co., Ltd. (Japan). Contains a sugar mixture comprising lactosucrose and up to 10% by weight lactose and saccharose.

抗体又は抗体誘導体とグルコシル及びマルトシルスクロースとの組合せで構成される組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が本発明に合致することは既に示したが、これもまた、別の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を一緒に含むとよい。したがって、本発明には、抗体又は抗体誘導体とともに、グルコシル及びマルトシルスクロース、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースとの混合物を含有する前記組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が包含され、この場合、組成物中の糖分全体に対してグルコシル及びマルトシルスクロース分が25質量％以上であると好ましい。さらに別の実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースのそれぞれの比率は、組成物中の糖分全体に対して少なくとも18質量％である。別の好適な実施形態によると、本発明の組成物、好ましくは粉末状組成物は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体のほかに、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガー（登録商標）」と呼ばれる糖混合物で、グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースをそれぞれ少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコース及びフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含有する糖混合物を含む。さらにまた本発明は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体に加えて、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガーＳ（登録商標）」と呼ばれる糖混合物で、グルコシル及びマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコース及びフルクトースを10質量％以下含む組成物、好ましくは粉末状組成物に関する。 It has already been shown that a composition composed of a combination of an antibody or antibody derivative and glucosyl and maltosyl sucrose, preferably a powdered composition such as, for example, a spray-dried powder, is consistent with the present invention. Another monosaccharide, disaccharide and / or polysaccharide may be included together. Accordingly, the present invention includes a composition, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder, containing an antibody or antibody derivative together with a mixture of glucosyl and maltosyl sucrose, saccharose, glucose and / or fructose. In this case, the glucosyl and maltosyl sucrose content is preferably 25% by mass or more based on the total sugar content in the composition. According to yet another embodiment, the ratio of each of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 18% by weight relative to the total sugar content in the composition. According to another preferred embodiment, the composition of the present invention, preferably a powdery composition, contains “Coupling Sugar” (registered by Hayashibara Shoji Co., Ltd.) in addition to an antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient. And a sugar mixture containing at least 18% by weight of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose, 11-15% by weight of saccharose, and 5-9% by weight of glucose and fructose, respectively. Furthermore, the present invention provides a sugar mixture called “Coupling Sugar S (registered trademark)” of Hayashibara Shoji Co., Ltd. (Japan) in addition to an antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient, and contains at least glucosyl and maltosyl sucrose. The present invention relates to a composition containing 25% by mass, 48 to 56% by mass of saccharose, and 10% by mass or less of glucose and fructose, preferably a powdery composition.

組成物の乾燥質量に対する1,4 O-結合型サッカロース誘導体分又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が25〜99.99質量％、好ましくは40〜99質量％、より好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは60〜90質量％で、例えば、25、25.1、25.2、25.3、---25.7、25.8、25.9等；26、27、28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、---78、79、80等；81、82、83、---88、89、90等；91、92、93、---98等、99、99.1、99.2、99.3、---99.8、99.9等；99.91、99.92、99.93、---99.98、99.99質量％となる組成物、好ましくは噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が特に有用であることがわかった。LS55P又はLS90Pの使用に関しては、60〜90質量％が特に有利であることがわかった。組成物が例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に言及する場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、粉末状組成物が少なくとも部分的に非晶質状態、好ましくは完全な非晶質状態になるように選択するとよい。1,4 O-結合型サッカロース誘導体の割合又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の割合は、60質量％より少なくすることもできる。この場合は、粉末を適量の別の安定化効果を有するアジュバントと混合するとよい。この安定化効果を有するアジュバントの例については本願明細書中別のところに記載する。 25 to 99.99% by mass, preferably 40 to 99% by mass of a 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative based on the dry mass of the composition, More preferably, it is 60-99 mass%, More preferably, it is 60-90 mass%, for example, 25, 25.1, 25.2, 25.3, --25.7, 25.8, 25.9 etc .; 26, 27, 28, 29, 30 etc .; 31, 32, 33, --38, 39, 40 etc .; 41, 42, 43, --48, 49, 50 etc .; 51, 52, 53, --58, 59, 60 etc .; 61, 62, 63, --68, 69, 70, etc .; 71, 72, 73, --78, 79, 80, etc .; 81, 82, 83, --88, 89, 90, etc .; 91, 92, 93, --- 98, etc., 99, 99.1, 99.2, 99.3, --- 99.8, 99.9, etc .; 99.91, 99.92, 99.93, --- 99.98, 99.99% by weight, preferably spray-dried powder Have been found to be particularly useful. For the use of LS55P or LS90P, 60-90% by weight has been found to be particularly advantageous. Where the composition refers to a powdered composition such as a spray-dried powder, the proportion of 1,4 O-linked saccharose derivative or the proportion of sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative May be selected such that the powdered composition is at least partially in an amorphous state, preferably in a completely amorphous state. The proportion of 1,4 O-linked saccharose derivative or the proportion of sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative can also be less than 60% by weight. In this case, the powder may be mixed with an appropriate amount of another adjuvant having a stabilizing effect. Examples of adjuvants having this stabilizing effect are described elsewhere herein.

本発明の組成物の乾燥質量における抗体又は抗体誘導体の割合は、一般に、0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜50質量％、さらに好ましくは0.33〜50質量％、特に好ましくは0.33〜40質量％である。また別の好ましい実施形態によると、本発明の組成物の固形分における抗体又は抗体誘導体の割合は0.33〜35質量％、好ましくは0.33〜30質量％である。したがって、その割合は例えば、0.01、0.02、0.03、---0.08、0.09等；0.1、0.2、0.3、---0.8、0.9等；１、２、３、---８、９、10等；21、22、23、---28、29、30等；31、32、33、---38、39、40等；41、42、43、---48、49、50等；51、52、53、---58、59、60等；61、62、63、---68、69、70等；71、72、73、74、74.1、74.2、74.3、---74.8、74.9等；74.91、74.92、74.93、---74.98、74.99、75質量％である。
そのため、本発明の組成物は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の医薬有効成分（抗体又は抗体誘導体）に対する比率が、例えば、25/75、26/74、27/73、28/72、29/71、30/70、31/69、32/68、33/67、34/66、35/65、36/64、37/63、38/62、39/61、40/60、41/59、42/58、43/57、44/56、45/55、46/54、47/53、48/52、49/51、50/50、51/49、52/48、53/47、54/46、55/45、56/44、57/43、58/42、59/41、60/40、61/39、62/38、63/37、64/36、65/35、66/34、67/33、68/32、69/31、70/30、71/29、72/28、73/27、74/26、75/25、76/24、77/23、78/22、79/21、80/20、81/19、82/18、83/17、84/16、85/15、86/14、87/13、88/12、89/11、90/10、91/9、92/8、93/7、94/6、95/5、96/4、97/3、98/2、99/1、99.1/0.9、99.2/0.8、99.3/0.7、99.4/0.6、99.5/0.5、99.6/0.4、99.66/0.33、99.7/0.3、99.8/0.2、99.9/0.1、99.99/0.01質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物である。前記組成物が１種以上の付加的アジュバントを含む場合は、ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体分もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分、ｂ）抗体又は抗体誘導体分、又はｃ）その両方を相応に減らし、それによって、本発明の組成物の乾燥質量に対して、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が、60質量％から90質量％の範囲内のいずれかの値をとると好ましい。 The ratio of the antibody or antibody derivative in the dry mass of the composition of the present invention is generally from 0.01 to 75 mass%, preferably from 0.01 to 50 mass%, more preferably from 0.33 to 50 mass%, particularly preferably from 0.33 to 40 mass%. It is. According to another preferred embodiment, the ratio of the antibody or antibody derivative in the solid content of the composition of the present invention is 0.33 to 35% by mass, preferably 0.33 to 30% by mass. Therefore, the ratio is, for example, 0.01, 0.02, 0.03, --0.08, 0.09, etc .; 0.1, 0.2, 0.3, --- 0.8, 0.9, etc .; 1, 2, 3, --8, 9, 10, etc. 21, 22, 23, --28, 29, 30 etc .; 31, 32, 33, --38, 39, 40 etc .; 41, 42, 43, --48, 49, 50 etc .; 51 , 52, 53, --58, 59, 60, etc .; 61, 62, 63, --68, 69, 70, etc .; 71, 72, 73, 74, 74.1, 74.2, 74.3, --- 74.8, 74.9, etc .; 74.91, 74.92, 74.93, --- 74.98, 74.99, 75% by mass.
Therefore, the composition of the present invention has a ratio of a saccharide mixture containing a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative to a pharmaceutically active ingredient (antibody or antibody derivative), For example, 25/75, 26/74, 27/73, 28/72, 29/71, 30/70, 31/69, 32/68, 33/67, 34/66, 35/65, 36/64, 37/63, 38/62, 39/61, 40/60, 41/59, 42/58, 43/57, 44/56, 45/55, 46/54, 47/53, 48/52, 49 / 51, 50/50, 51/49, 52/48, 53/47, 54/46, 55/45, 56/44, 57/43, 58/42, 59/41, 60/40, 61/39, 62/38, 63/37, 64/36, 65/35, 66/34, 67/33, 68/32, 69/31, 70/30, 71/29, 72/28, 73/27, 74 / 26, 75/25, 76/24, 77/23, 78/22, 79/21, 80/20, 81/19, 82/18, 83/17, 84/16, 85/15, 86/14, 87/13, 88/12, 89/11, 90/10, 91/9, 92/8, 93/7, 94/6, 95/5, 96/4, 97/3, 98/2, 99 / 1, 99.1 / 0.9, 99.2 / 0.8, 99.3 / 0.7, 99.4 / 0.6, 99.5 / 0.5, 99.6 / 0.4, 99.66 / 0.33, 99.7 / 0.3, 99.8 / 0.2, 99.9 / 0.1, 99.99 / 0.01 mass% , Preferably, for example, powdered compositions such as spray-dried powder. If the composition comprises one or more additional adjuvants, a) a 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, b) Antibody or antibody derivative fraction, or c) both are correspondingly reduced so that 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O--, relative to the dry mass of the composition of the invention. The sugar mixture containing the bound saccharose derivative preferably takes any value within the range of 60% to 90% by weight.

本発明における医薬有効成分は抗体又は抗体誘導体である。その例としては、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体及び単鎖抗体とならび、その断片で、例えばFab、Fab'、F(ab')₂、Fc及びFc'断片、抗体の軽いL鎖と重いH鎖、それらによる定常領域、可変領域又は超可変領域、ならびにFd及びFv断片、少なくとも抗体断片又は少なくとも二重鎖抗体もしくは単鎖抗体の断片を含む融合タンパク質（Chamov等（1999）「Antibody Fusion Proteins」Wiley-Liss社）が挙げられる。抗体はヒト抗体又はヒト以外の抗体でもよい。ヒト抗体において公知である以下のクラス、IgA、IgD、IgE、IgG及びIgMは、さらにそれぞれサブクラス、例えば、IgA1、IgA2、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4等を有する。また、ヒト化抗体やキメラ抗体も含まれる。なかでも、CD4、CD20又はCD44等の様々な表面抗原、あるいは、例えば、IL2、IL4又はIL5等の様々なサイトカイニン等に対抗する抗体を含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末などの粉末状組成物が特に治療上重要であり、そのため本発明の主題となる。他の例としては、特異抗体クラスに対抗する抗体（例えば、抗IgE抗体）又はウイルスタンパク質に対抗する抗体（例えば、抗-RSV抗体、抗-CMV抗体等）が挙げられる。
抗原結合フラグメント又はFab断片は、両方の鎖の可変領域を有し、この可変領域は隣接する定常領域によって保持されている。別の抗体断片がF(ab')₂断片で、これはペプシンによるタンパク分解により産生させることができる。遺伝子クローン化を用いて、重いＨ鎖の可変領域（VH）と軽いＬ鎖の可変領域（VL）のみから構成される短い抗体断片を産生させることもできる。これはFv断片（＝可変領域断片）と呼ばれている。この抗体断片は、単鎖Fv断片（scFv）とも言われる。scFv断片の例は公知であり記述もある（例えば、Huston等（1988）Proc. Natl. Acad. Sci. USA、16、5879ff参照）。 The active pharmaceutical ingredient in the present invention is an antibody or antibody derivative. Examples include monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, multispecific antibodies, and single chain antibodies, and fragments thereof, such as Fab, Fab ′, F (ab ′) ₂ , Fc and Fc ′ fragments, and light L chains of antibodies. And heavy chains, constant regions, variable regions or hypervariable regions thereof, and Fd and Fv fragments, at least antibody fragments or at least double-chain or single-chain antibody fragments (Chamov et al. (1999) “Antibody” Fusion Proteins ”Wiley-Liss). The antibody may be a human antibody or a non-human antibody. The following classes known in human antibodies, IgA, IgD, IgE, IgG and IgM, further have subclasses, for example, IgA1, IgA2, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 and the like. Also included are humanized antibodies and chimeric antibodies. Among them, a composition containing various surface antigens such as CD4, CD20 or CD44, or antibodies against various cytokinins such as IL2, IL4 or IL5, preferably in a powder form such as a spray-dried powder. The composition is of particular therapeutic importance and is therefore the subject of the present invention. Other examples include antibodies against specific antibody classes (eg, anti-IgE antibodies) or antibodies against viral proteins (eg, anti-RSV antibodies, anti-CMV antibodies, etc.).
An antigen-binding fragment or Fab fragment has the variable regions of both chains, which are held by adjacent constant regions. Another antibody fragment is the F (ab ′) ₂ fragment, which can be produced by proteolysis with pepsin. Gene cloning can also be used to produce short antibody fragments consisting only of the heavy heavy chain variable region (VH) and light light chain variable region (VL). This is called an Fv fragment (= variable region fragment). This antibody fragment is also referred to as a single chain Fv fragment (scFv). Examples of scFv fragments are known and described (see, eg, Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 16, 5879ff).

過去、多重結合のscFv誘導体、例えば二重特異性抗体（diabody）、三重特異性抗体（tribody）、五重特異性抗体（pentabody）等を産生させるために様々な方法が開発されてきた。２価の同質ニ量体scFv誘導体を当業者は「二重特異性抗体」と呼んでいる。scFv分子中のペプチドリンカーを５〜10個のアミノ酸に短くすると、VH及びVL鎖が重なり合って同質ニ量体を形成する。さらに、ジスルフィド結合を導入することにより二重特異性抗体を安定化させることができる。二重特異性抗体の例については、文献、例えばPerisic等（1994）Structure、2、1217ffに見ることができる。２価の同質ニ量体scFv誘導体は、この分野の当業者により、「ミニ抗体（minibody）」とも言われている。これは、二量体化領域として、抗体なかでも好ましくはIgG、とりわけIgG1のCH3領域を有する融合タンパク質で構成される。これもまたIgGのヒンジ領域及びリンカー領域を介してscFv断片を結合する。このような「ミニ抗体」の例については、Hu等（1996）「Cancer Res.」56、3055ffに記載されている。３価の同質三量体scFv誘導体は、当業者により「三重特異性抗体」と呼ばれている（Kortt等（1997）「Protein Engineering」10、423ff）。リンカーシーケンスを用いずにVH-VLを直接融合させることで、三量体が形成される。 In the past, various methods have been developed to produce multi-binding scFv derivatives, such as bispecific antibodies, trispecific antibodies, pentaspecific antibodies and the like. Bivalent homodimeric scFv derivatives are referred to by those skilled in the art as “bispecific antibodies”. When the peptide linker in the scFv molecule is shortened to 5-10 amino acids, the VH and VL chains overlap to form a homogeneous dimer. Furthermore, bispecific antibodies can be stabilized by introducing disulfide bonds. Examples of bispecific antibodies can be found in the literature, eg Perisic et al. (1994) Structure, 2, 1217ff. Divalent homodimeric scFv derivatives are also referred to as “minibodies” by those skilled in the art. This is preferably composed of a fusion protein having a CH3 region of IgG, particularly IgG1, among antibodies, as a dimerization region. This also binds the scFv fragment via the IgG hinge and linker regions. Examples of such “mini-antibodies” are described in Hu et al. (1996) “Cancer Res.” 56, 3055ff. Trivalent homotrimeric scFv derivatives are called “trispecific antibodies” by those skilled in the art (Kortt et al. (1997) “Protein Engineering” 10, 423ff). Trimers are formed by direct fusion of VH-VL without using a linker sequence.

当業者が「ミニ抗体」と呼ぶ、２価、３価又は５価の構造を有する断片は、scFv断片の誘導体でもある。この場合、ニ量体、三量体又は五量体コイルドコイル構造を用いて多量体化を行う（Pack, P.等（1993）「Biotechnology」11、1271ff；Lovejoy, B.等（1993）「Science」259、1288ff；Pack, P.等（1995）「J. Mol. Biol.」246、28ff）。
本発明の特に好ましい実施形態は、抗体クラスのタンパク質、より具体的には、抗体Gタイプ１に関する。これは、95％のヒト抗体と５％のネズミ抗体を有するヒト化モノクローナル抗体である。この抗体の分子量は約148キロダルトン（kDa）であり、２本の軽い鎖と２本の重い鎖からなり、合計で４本のジスルフィド結合を有する。
さらに別の実施形態によると、本発明は、組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であって、組成物の乾燥質量中、少なくとも50質量％、好ましくは50〜99.99質量％、特に好ましくは60〜90質量％の糖と、40質量％までの医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含むことを特徴とし、それによって、ラクトスクロース、マルトシルスクロース及び／又はグルコシルスクロース分が、本発明の組成物の乾燥質量に対して少なくとも20質量％になり、かつ、質量パーセンテージの合計が最大で100質量％となる組成物に関する。この分野の当業者であれば、該当する組成物、好ましくは例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造することは可能である。即ち、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が90質量％となる場合は、当業者は、本発明の組成物の総固形分に対して最大10質量％の抗体又は抗体誘導体を混合できることがわかっているということである。 Fragments having a bivalent, trivalent or pentavalent structure, referred to by those skilled in the art as “miniantibodies” are also derivatives of scFv fragments. In this case, multimerization is performed using a dimer, trimer or pentamer coiled coil structure (Pack, P. et al. (1993) “Biotechnology” 11, 1271ff; Lovejoy, B. et al. (1993) “Science 259, 1288ff; Pack, P. et al. (1995) “J. Mol. Biol.” 246, 28ff).
A particularly preferred embodiment of the present invention relates to antibody class proteins, more specifically antibody G type 1. This is a humanized monoclonal antibody with 95% human antibody and 5% murine antibody. The molecular weight of this antibody is about 148 kilodaltons (kDa), consisting of two light chains and two heavy chains, with a total of four disulfide bonds.
According to yet another embodiment, the present invention is a composition, preferably a powdered composition, such as a spray-dried powder, which is at least 50% by weight, preferably 50-99.99% by weight in the dry weight of the composition. %, Particularly preferably 60-90% by weight of sugar and up to 40% by weight of an antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient, whereby lactosucrose, maltosyl sucrose and / or glucosyl sucrose content Relates to a composition which is at least 20% by weight, based on the dry weight of the composition of the invention, and whose sum of weight percentages is at most 100% by weight. A person skilled in the art is able to produce a corresponding composition, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder. That is, when the sugar mixture containing 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative is 90% by mass, the person skilled in the art will know the total amount of the composition of the present invention. It is known that up to 10% by mass of antibody or antibody derivative can be mixed with respect to the solid content.

さらに、本発明の組成物、とりわけ、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物は、他のアジュバントである、例えばアミノ酸、ペプチド、非生物学的ポリマーもしくは生物学的ポリマー及び／又は１種以上の糖を含んでもよい。他の従来からのアジュバントとしては、例えば、脂質、脂肪酸、脂肪酸エステル、ステロイド（例：コレステロール）又はキレート剤（例：EDTA）ならびに様々なカチオン（上記参照）が挙げられる。噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造する際に特に好ましいのは、ガラス転移温度が高いアジュバントで、例えば、ガラス転移温度が40℃を超えるもの、好ましくは45℃を超えるもの、より好ましくは50℃を超えるもの、あるいは55℃を超えるものが好ましい。好適なアジュバントの一覧は、例えば、Kippe (Eds.)「Handbook of Pharmaceutical Excipients」３版（2000）に記載されている。
タンパク質含有アジュバントの好適なものとしては、例えば、アルブミン（ヒト由来又は組換え型）、ゼラチン、カゼイン、ヘモグロビン等が挙げられる。糖は、好ましくは単糖、ニ糖、オリゴ糖又は多糖類、あるいはそれらの組合せであることが好ましい。単糖類の例としては、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、D-マンノース、ソルボース等がある。本発明での好適なニ糖類には、例えば、ラクトース、サッカロース、トレハロース、セロビオース等がある。ラフィノース、メレチトース、デキストリン、デンプン等がオリゴ糖や多糖類として特に好適である。糖アルコールのなかでも、マンニトール、キシリトール、マルチトール、ガラクチトール、アラビニトール、アドニトール、ラクチトール、ソルビトール（グルシトール）、ピラノシルソルビトール、イノシトール、ミオイノシトール等が好適なアジュバントとして考察される。好ましいアミノ酸としては、例えば、アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタメート、アスパラギン、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、シトルリン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニンメチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニウムアセテート（＝ベタイン）等が挙げられる。緩衝剤として作用するアミノ酸（例えばグリシン又はヒスチジン）及び／又は分散剤として作用するアミノ酸の使用が好ましい。後者のグループには、特に、実質的に疎水性であるアミノ酸、例えばロイシン、バリン、イソロイシン、トリプトファン、アラニン、メチオニン、フェニルアラニン、チロシン、ヒスチジン又はプロリン等が挙げられる。 Furthermore, the compositions of the present invention, in particular powdered compositions such as spray-dried powders, are other adjuvants such as amino acids, peptides, non-biological or biological polymers and / or one or more. It may contain sugar. Other conventional adjuvants include, for example, lipids, fatty acids, fatty acid esters, steroids (eg cholesterol) or chelating agents (eg EDTA) and various cations (see above). Particularly preferred when preparing powdered compositions such as spray-dried powders are adjuvants with a high glass transition temperature, for example those with a glass transition temperature above 40 ° C, preferably above 45 ° C, more preferably Is preferably higher than 50 ° C or higher than 55 ° C. A list of suitable adjuvants is described, for example, in Kippe (Eds.) “Handbook of Pharmaceutical Excipients” 3rd edition (2000).
Suitable examples of the protein-containing adjuvant include albumin (human-derived or recombinant type), gelatin, casein, hemoglobin and the like. The sugar is preferably a monosaccharide, disaccharide, oligosaccharide or polysaccharide, or a combination thereof. Examples of monosaccharides include fructose, maltose, galactose, glucose, D-mannose, sorbose and the like. Suitable disaccharides in the present invention include, for example, lactose, saccharose, trehalose, cellobiose and the like. Raffinose, meletitose, dextrin, starch and the like are particularly suitable as oligosaccharides and polysaccharides. Among sugar alcohols, mannitol, xylitol, maltitol, galactitol, arabinitol, adonitol, lactitol, sorbitol (glucitol), pyranosyl sorbitol, inositol, myo-inositol and the like are considered as suitable adjuvants. Preferred amino acids include, for example, alanine, glycine, arginine, histidine, glutamate, asparagine, cysteine, leucine, lysine, isoleucine, valine, tryptophan, methionine, phenylalanine, tyrosine, citrulline, L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester (= Aspartame), trimethylammonium acetate (= betaine) and the like. Preference is given to the use of amino acids which act as buffering agents (for example glycine or histidine) and / or amino acids which act as dispersing agents. The latter group includes in particular amino acids that are substantially hydrophobic, such as leucine, valine, isoleucine, tryptophan, alanine, methionine, phenylalanine, tyrosine, histidine or proline.

本発明の範囲において、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と共に、アミノ酸を使用すること、とりわけイソロイシン又はシトルリン、特に好ましくはイソロイシンを使用することが有利であることがわかったが、その濃度は、好ましくは１〜19.99質量％、特に好ましくは５〜19.99質量％、さらに10〜19.99質量％、より好ましくは12〜19.99質量％である。しかしながら、この比率は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分、あるいは抗体又は抗体誘導体分を相応に下げるならば、40質量％まで増やすことができるが、粉末の固形分は100質量％を超えないようにする。
他のアジュバントとして、実質的に疎水性であるアミノ酸基を１つ以上含むジペプチド、トリペプチド、オリゴペプチド又はポリペプチドを用いることも特に有用である。なかでも、20個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましく、さらには15個までのアミノ酸を有するペプチド、またさらには、12個までのアミノ酸を有するペプチド、さらに11個までのもの、さらには10個までのもの、また、９個までのアミノ酸を有するペプチド、８個までのもの、さらには、７個までのもの、また７個、６個、５個、４個又は３個までのアミノ酸を有するペプチドが好ましい。この場合、安定化のために使用するペプチドは、医薬有効成分と同時に一致することはない。 Within the scope of the present invention, the use of amino acids with 1,4 O-linked saccharose derivatives or sugar mixtures comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, in particular isoleucine or citrulline, particularly preferably isoleucine. However, the concentration is preferably 1 to 19.99% by weight, particularly preferably 5 to 19.99% by weight, further 10 to 19.99% by weight, more preferably 12 to 19.99% by weight. It is. However, this ratio can be 40 masses if the 1,4 O-linked saccharose derivative or the sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or the antibody or antibody derivative is reduced accordingly. %, But the solid content of the powder should not exceed 100% by weight.
It is also particularly useful to use a dipeptide, tripeptide, oligopeptide or polypeptide that contains one or more amino acid groups that are substantially hydrophobic as other adjuvants. Of these, peptides having up to 20 amino acids are preferred, peptides having up to 15 amino acids, and peptides having up to 12 amino acids, up to 11 more, and even up to 10 And peptides with up to 9 amino acids, up to 8 and even up to 7, and peptides with up to 7, 6, 5, 4 or 3 amino acids Is preferred. In this case, the peptide used for stabilization does not coincide with the active pharmaceutical ingredient.

トリペプチドの好適な例として、例えば下記のトリペプチドの１種以上が挙げられる。Leu-Leu-Gly、Leu-Leu-Ala、Leu-Leu-Val、Leu-Leu-Leu、Leu-Leu-Met、Leu-Leu-Pro、Leu-Leu-Phe、Leu-Leu-Trp、Leu-Leu-Ser、Leu-Leu-Thr、Leu-Leu-Cys、Leu-Leu-Tyr、Leu-Leu-Asp、Leu-Leu-Glu、Leu-Leu-Lys、Leu-Leu-Arg、Leu-Leu-His、Leu-Gly-Leu、Leu-Ala-Leu、Leu-Val-Leu、Leu-Met-Leu、Leu-Pro-Leu、Leu-Phe-Leu、Leu-Trp-Leu、Leu-Ser-Leu、Leu-Thr-Leu、Leu-Cys-Leu、Leu-Try-Leu、Leu-Asp-Leu、Leu-Glu-Leu、Leu-Lys-Leu、Leu-Arg-Leu及びLeu-His-Leu。一般式Ile-X-X；X-Ile-X；X-X-Ileで表されるトリペプチドの使用は特に有利であることがわかった（式中、Ｘは以下のアミノ酸の１つであればよい：アラニン、グリシン、アルギニン、ヒスチジン、グルタミン酸、グルタミン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、ロイシン、リジン、イソロイシン（Ile）、バリン、トリプトファン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、チロシン、L-アスパルチル-L-フェニルアラニン-メチルエステル（＝アスパルテーム）、トリメチルアンモニウムアセテート。式（Ile）₂-X、例えば、Ile-Ile-X、Ile-X-IIe又はX-IIe-Ileで表される対応のトリペプチドが特に好ましい（式中、Ｘはここでも前記列挙したアミノ酸のいずれか１つであればよい）。例えば、下記のペプチドがここでは挙げられる： Ile-Ile-Gly、Ile-Ile-Ala、Ile-Ile-Val、Ile-Ile-Ile、Ile-Ile-Met、Ile-Ile-Pro、Ile-Ile-Phe、Ile-Ile-Trp、Ile-Ile-Ser、Ile-Ile-Thr、Ile-Ile-Cys、Ile-Ile-Tyr、Ile-Ile-Asp、Ile-Ile-Glu、Ile-Ile-Lys、Ile-Ile-Arg、Ile-Ile-His、Ile-Gly-Ile、Ile-Ala-Ile、Ile-Val-Ile、Ile-Met-Ile、Ile-Pro-Ile、Ile-Phe-Ile、Ile-Trp-Ile、Ile-Ser-Ile、Ile-Thr-Ile、Ile-Cys-Ile、Ile-Try-Ile、Ile-Asp-Ile、Ile-Glu-Ile、Ile-Lys-Ile、Ile-Arg-Ile、Ile-His-Ile。なかでも有利なのは、Ile-Ile-Ileの使用である。 Preferable examples of tripeptides include one or more of the following tripeptides. Leu-Leu-Gly, Leu-Leu-Ala, Leu-Leu-Val, Leu-Leu-Leu, Leu-Leu-Met, Leu-Leu-Pro, Leu-Leu-Phe, Leu-Leu-Trp, Leu- Leu-Ser, Leu-Leu-Thr, Leu-Leu-Cys, Leu-Leu-Tyr, Leu-Leu-Asp, Leu-Leu-Glu, Leu-Leu-Lys, Leu-Leu-Arg, Leu-Leu- His, Leu-Gly-Leu, Leu-Ala-Leu, Leu-Val-Leu, Leu-Met-Leu, Leu-Pro-Leu, Leu-Phe-Leu, Leu-Trp-Leu, Leu-Ser-Leu, Leu-Thr-Leu, Leu-Cys-Leu, Leu-Try-Leu, Leu-Asp-Leu, Leu-Glu-Leu, Leu-Lys-Leu, Leu-Arg-Leu and Leu-His-Leu. The use of a tripeptide represented by the general formula Ile-XX; X-Ile-X; XX-Ile has proved particularly advantageous (wherein X can be one of the following amino acids: alanine , Glycine, arginine, histidine, glutamic acid, glutamine, asparagine, aspartic acid, cysteine, leucine, lysine, isoleucine (Ile), valine, tryptophan, methionine, phenylalanine, proline, serine, threonine, tyrosine, L-aspartyl-L-phenylalanine -Methyl esters (= aspartame), trimethylammonium acetate, the corresponding tripeptides of the formula (Ile) ₂ -X, for example Ile-Ile-X, Ile-X-IIe or X-IIe-Ile are particularly preferred (Wherein X can again be any one of the amino acids listed above.) For example, the following peptides are listed here: Ile-Ile-Gly, Ile-Ile-Ala, Ile-Ile-Val, Ile-Ile-Ile, Ile-Ile-Met, Ile-Ile-Pro, Ile-Ile-Phe, Ile-Ile-Trp, Ile-Ile-Ser, Ile-Ile-Thr, Ile-Ile-Cys, Ile-Ile-Tyr, Ile-Ile-Asp, Ile-Ile-Glu, Ile-Ile-Lys, Ile-Ile-Arg, Ile- Ile-His, Ile-Gly-Ile, Ile-Ala-Ile, Ile-Val-Ile, Ile-Met-Ile, Ile-Pro-Ile, Ile-Phe-Ile, Ile-Trp-Ile, Ile-Ser- Ile, Ile-Thr-Ile, Ile-Cys-Ile, Ile-Try-Ile, Ile-Asp-Ile, Ile-Glu-Ile, Ile-Lys-Ile, Ile-Arg-Ile, Ile-His-Ile. Of particular advantage is the use of Ile-Ile-Ile.

好適なポリマーとしては、例えば、既にアジュバントとして記載したポリマー、ポリビニルピロリドン、セルロース誘導体（例として、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル又はヒドロキシプロピルエチルセルロース等）、高分子の糖類（例として、フィコール（ficoll））、デンプン類（例として、ヒドロキシエチルデンプン又はヒドロキシプロピルデンプン等）、例えばシクロデキストリン等のデキストリン類（例として、2-ヒドロキシプロピル-β-シクロデキストリン、スルホブチルエーテル-β-シクロデキストリン）、ポリエチレン、グリコール類及び／又はペクチン類が挙げられる。
塩の場合は、例えば、塩化物、硫酸塩、リン酸塩、ニリン酸塩、臭化水素酸塩及び／又は硝酸塩等の無機塩が挙げられる。さらに、本発明の粉末は、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、アスコルビン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、パモ酸塩（palmoate）、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、エストレート、グルセプテート及びラクトビオネート塩等の有機塩を含有してもよい。前記塩は医薬的に許容できるカチオン、例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、リチウム又はアンモニウム等を同時に含んでいてもよい。抗体又は抗体誘導体を安定化する際、前記カチオンを使用することが特に好ましいことがわかった。
そのため、さらに別の実施形態の１つによると、本発明は、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物である組成物であって、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と共に、医薬的に適応可能なアジュバント１種以上及び／又は塩１種以上を含む組成物に関する。アジュバントとしては、例えば、アミノ酸、ペプチド及びその塩、糖類、ポリオール類、有機酸の塩及び／又は前記記載のポリマーなどがよい。 Suitable polymers include, for example, polymers already described as adjuvants, polyvinylpyrrolidone, cellulose derivatives (eg, hydroxymethyl, hydroxyethyl or hydroxypropylethylcellulose), high molecular sugars (eg, ficoll), Starches (eg, hydroxyethyl starch or hydroxypropyl starch), for example, dextrins such as cyclodextrin (eg, 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin, sulfobutyl ether-β-cyclodextrin), polyethylene, glycols And / or pectin.
In the case of a salt, for example, inorganic salts such as chloride, sulfate, phosphate, diphosphate, hydrobromide and / or nitrate can be mentioned. Further, the powder of the present invention is malate, maleate, fumarate, tartrate, succinate, ethyl succinate, citrate, acetate, lactate, methanesulfonate, benzoate, Organic salts such as ascorbate, p-toluenesulfonate, pamoate, salicylate, stearate, estrate, glucoceptate and lactobionate may be contained. The salt may simultaneously contain a pharmaceutically acceptable cation, such as sodium, potassium, calcium, aluminum, lithium or ammonium. It has been found that it is particularly preferable to use the cation when stabilizing an antibody or antibody derivative.
Thus, according to one further embodiment, the present invention is preferably a composition that is a powdered composition, such as a spray-dried powder, for example, a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least Contains one or more pharmaceutically applicable adjuvants and / or one or more salts together with a sugar mixture containing one 1,4 O-linked saccharose derivative and one antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient Relates to the composition. As the adjuvant, for example, amino acids, peptides and salts thereof, saccharides, polyols, salts of organic acids and / or the above-mentioned polymers are preferable.

本発明の別の実施形態は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及び医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と共に、付加的アジュバントとして１種以上のアミノ酸、好ましくは１種のアミノ酸を含む組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に関する。これに関して、本発明は、その乾燥質量に対してａ）少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、（ｂ）１〜19.99質量％のアミノ酸と、（ｃ）0.01〜74質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体とを含み、その質量比の合計が100質量％となる組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物に関する。好ましい実施形態では、前記組成物の乾燥質量に対して、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が少なくとも60質量％、好ましくは70〜90質量％である。該当する調剤の１つとしては、アミノ酸分が好ましくは１〜19.99質量％で、抗体又は抗体誘導体分が0.01〜39質量％であると好ましい。 Another embodiment of the present invention is a 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative and one antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient. Relates to a composition comprising one or more amino acids, preferably one amino acid, as an additional adjuvant, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder. In this regard, the present invention relates to a) at least 25% by weight, preferably 50 to 90% by weight, particularly preferably 60 to 90% by weight of 1,4 O-linked saccharose derivatives or at least A sugar mixture containing one kind of 1,4 O-linked saccharose derivative, (b) 1 to 19.99% by mass of amino acid, and (c) 0.01 to 74% by mass of an antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient. And a composition having a total mass ratio of 100% by mass, preferably a powdery composition such as a spray-dried powder. In a preferred embodiment, the sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, based on the dry mass of the composition, is at least 60% by mass, preferably Is 70-90 mass%. As one of the corresponding preparations, the amino acid content is preferably 1 to 19.99% by mass, and the antibody or antibody derivative content is preferably 0.01 to 39% by mass.

そこで、別の実施形態によると、本発明は、例えば、80％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体もしくは少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のアミノ酸と／１質量％の抗体又は抗体誘導体を含有する、比率（80/19/1）の組成物、好ましくは、噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物、あるいは、(80/18/2)、(80/17/13)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/20/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/20/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)又は(60/11/29)で含む組成物、あるいは、これらで構成される組成物に関する。アミノ酸分は一定で、抗体又は抗体誘導体分を20質量％から0.01質量％まで減らすのであれば、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らすのであれば、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、---89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％にまで増やすことができ、組成物の乾燥質量に対してそれぞれの成分の質量比の合計を00質量％とする。付加的アジュバント又は塩をさらに添加することにより、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、アミノ酸／ペプチド及び／又は抗体又は抗体誘導体医薬有効成分の比率を相応に調整／減少させ、それぞれの成分の質量比が全体で100質量％になるようにする。 Thus, according to another embodiment, the present invention relates to a sugar mixture comprising, for example, 80% 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative / 19% by weight A ratio (80/19/1) composition, preferably a powdered composition such as spray-dried powder, containing amino acids and 1% by weight antibody or antibody derivative, or (80/18/2) , (80/17/13), (80/16/4), (80/15/5), (80/14/6), (80/13/7), (80/12/8), ( 80/11/9), (80/10/10), (70/20/10), (70/19/11), (70/18/12), (70/17/13), (70 / 16/14), (70/15/15), (70/14/16), (70/13/17), (70/12/18), (70/11/19), (70/10 / 20), (60/20/20), (60/19/21), (60/18/22), (60/17/23), (60/16/24), (60/15/25) , (60/14/26), (60/13/27), (60/12/28) or (60/11/29), or a composition composed of these. If the amino acid content is constant and the antibody or antibody derivative content is reduced from 20% by mass to 0.01% by mass, for example, 9.99, --9.9, 9.8, 9.7, --9.3, 9.2, 9.1, --- 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, --- 0.9, 0.8, 0.7, --0.66, --0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2, 0.1, 0.09, 0.08 , 0.07, 0.06, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01% by weight, correspondingly contain 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative For example, 80.01, --- 80.1, 80.2, 80.3, --- 80.8, 80.9, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, --- 89.1, 89.2, 89.3, --- 89.33, --- 89.4, 89.5, 89.6, 89.7, 89.8, 89.9, --- 89.91, 89.92, 89.93, --- 89.97, 89.98, 89.99% by weight, composition The total mass ratio of the respective components with respect to the dry mass of is set to 00 mass%. By further adding an additional adjuvant or salt, a sugar mixture comprising a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, and an amino acid / peptide and / or antibody or antibody The ratio of the derivative pharmaceutically active ingredient is adjusted / reduced accordingly, so that the mass ratio of each component is 100% by mass as a whole.

添加するアミノ酸がイソロイシンの場合、別の実施形態によると、（ａ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が少なくとも25質量％、好ましくは50〜90質量％、特に好ましくは60〜90質量％、（ｂ）イソロイシン分が１〜19.99質量％、（ｃ）医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体分、好ましくはペプチド／タンパク質が少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01から最大で74質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が、本発明に対応する。好ましくは、イソロイシン分が、本発明の組成物の全固形分中、５〜19.99質量％、さらに好ましくは10〜19.99質量％となる。これも、それぞれの成分の質量パーセントの合計が最大100質量％となる。また、本発明によると、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合／10質量％のアミノ酸又はペプチド／10質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/10/10)、あるいは、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)、(71/19/10)、(70/20/10)の組成であり、抗体又は抗体誘導体分を10質量％から0.01質量％に減らすこともでき、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量分合計を最大100質量％とする。そのため、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のイソロイシン／１質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/17)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)。付加的アジュバント又は塩をさらに添加する場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、イソロイシン及び／又は抗体もしくは抗体誘導体分を相応に調整し、各成分の質量を全体で100質量％とする。 When the amino acid to be added is isoleucine, according to another embodiment, the ratio of the sugar mixture containing (a) 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative is at least 25 % By weight, preferably 50 to 90% by weight, particularly preferably 60 to 90% by weight, (b) 1 to 19.99% by weight of isoleucine, (c) antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient, preferably peptide / Compositions with at least 0.01% by weight of protein, preferably 0.01 to a maximum of 74% by weight, preferably a powdered composition such as, for example, a spray-dried powder, correspond to the present invention. Preferably, the isoleucine content is 5 to 19.99% by mass, more preferably 10 to 19.99% by mass, based on the total solid content of the composition of the present invention. Again, the sum of the weight percentages of the components is up to 100% by weight. Also according to the present invention, a composition having the following composition, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder, also conforms to the present invention. 80% by weight of 1,4 O-linked saccharose derivative or sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative / 10% amino acid or peptide / 10% by weight antibody or antibody derivative, , (80/10/10) or (79/11/10), (78/12/10), (77/13/10), (76/14/10), (75/15/10) , (74/16/10), (73/17/10), (72/18/10), (71/19/10), (70/20/10) Can be reduced from 10% to 0.01% by weight, for example, 9.99, --9.9, 9.8, 9.7, --9.3, 9.2, 9.1, --9, 8, 7, 6, 5, 4 , 3, 2, 1, --0.9, 0.8, 0.7, --0.66, --0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2, 0.1, 0.09, 0.08, 0.07, 0.06, 0.05, 0.04, 0.03, 0.02, 0.01% by weight, and accordingly, a sugar mixture containing a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, for example, 80.01, --- 80.1, 80.2, 80.3, --- 80.8, 80.9, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, --- 89.1, 89.2, 89.3, --- 89.33, 89.4, 89.5, 89.6, 89.7, 89.8, 89.9, --- 89.91, 89.92, 89.93 , --89.97, 89.98, 89.99% by mass, and the total mass of each component relative to the dry mass of the composition is 100% by mass at maximum. Therefore, a composition having the following composition, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder, is also consistent with the present invention. 80% by weight of a 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative / 19% by weight isoleucine / 1% by weight antibody or antibody derivative, ie ( 80/19/1), or (80/18/2), (80/17/3), (80/16/4), (80/15/5), (80/14/6), ( 80/13/7), (80/12/8), (80/11/9), (80/10/10), (70/19/11), (70/18/12), (70 / 17/13), (70/16/14), (70/15/15), (70/14/16), (70/13/17), (70/12/18), (70/11 / 19), (70/10/20), (60/19/21), (60/18/22), (60/17/23), (60/16/24), (60/15/25) , (60/14/26), (60/13/27), (60/12/28), (60/11/29), (60/10/30). When additional adjuvants or salts are further added, 1,4 O-linked saccharose derivatives or sugar mixtures containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, isoleucine and / or antibody or antibody derivative To make the mass of each component 100% by mass as a whole.

本発明の別の実施形態は、医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を、ペプチド、タンパク質又はそれらの混合物として含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を安定化させるための、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物及びペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチドの使用に関する。本願明細書では、本発明の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物を製造するの際に、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と一緒に使用することができる数多くのトリペプチドが記載されている。特別の実施形態としては、ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチドが、少なくとも１個、好ましくは２個のイソロイシン基を含むもので、特に有用な実施形態では、３個のイソロイシンからなるトリペプチドである。 Another embodiment of the present invention stabilizes a composition comprising an antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient as a peptide, protein or mixture thereof, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder. For the use of saccharide mixtures and peptides, preferably dipeptides or tripeptides comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. In the context of the present application, in preparing a composition according to the invention, preferably a powdered composition such as, for example, a spray-dried powder, a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O -A number of tripeptides have been described that can be used with sugar mixtures containing conjugated saccharose derivatives. In a particular embodiment, the peptide, preferably a dipeptide or a tripeptide, contains at least one, preferably two isoleucine groups, and in a particularly useful embodiment is a tripeptide consisting of three isoleucines. .

これに関連して、（ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が少なくとも25質量％、好ましくは60〜99質量％、特に好ましくは60〜90質量％、（ｂ）ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド分が１〜19.99質量％、（ｃ）抗体又は抗体誘導体分が0.01質量％から最大で74質量％を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が本発明に合致するとみなされる。この場合も、個々の固形分の合計が100質量％を超えてはいけない。組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物で、以下の組成を有するものが本発明に合致する。89質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／１質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、さらに好ましくはイソロイシン含有トリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシン／10質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(89/1/10)、あるいは、(88/2/10)、(87/3/10)、(86/4/10)、(85/5/10)、(84/6/10)、(83/7/10)、(82/8/10)、(81/9/10)、(80/10/10)、(79/11/10)、(78/12/10)、(77/13/10)、(76/14/10)、(75/15/10)、(74/16/10)、(73/17/10)、(72/18/10)又は(71/19/10)で、抗体又は抗体誘導体分を10質量％から0.01質量％まで減らすことができ、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1、---0.9、0.8、0.7、---0.66、---0.6、0.5、0.4、0.3、0.2、0.1、0.09、0.08、0.07、0.06、0.05、0.04、0.03、0.02、0.01質量％に減らし、それに応じて1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を、例えば、80.01、---80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、89、---89.1、89.2、89.3、---89.33、89.4、89.5、89.6、89.7、89.8、89.9、---89.91、89.92、89.93、---89.97、89.98、89.99質量％に増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量合計が最大100質量％になるようにする。そこで、以下の組成を有する組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物も本発明に合致する。80質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物／19質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシン／１質量％の抗体又は抗体誘導体、即ち、(80/19/1)、あるいは、(80/18/2)、(80/17/3)、(80/16/4)、(80/15/5)、(80/14/6)、(80/13/7)、(80/12/8)、(80/11/9)、(80/10/10)、(70/19/11)、(70/18/12)、(70/17/13)、(70/16/14)、(70/15/15)、(70/14/16)、(70/13/7)、(70/12/18)、(70/11/19)、(70/10/20)、(60/19/21)、(60/18/22)、(60/17/23)、(60/16/24)、(60/15/25)、(60/14/26)、(60/13/27)、(60/12/28)、(60/11/29)、(60/10/30)で、ペプチド（ジペプチド、トリペプチド、イソロイシン含有ペプチド、トリペプチド、ジペプチド又はトリイソロイシン）分も10質量％から１質量％に減らすこともでき、例えば、9.99、---9.9、9.8、9.7、---9.3、9.2、9.1、---9、8、7、6、5、4、3、2、1.9、1.8、1.7、---1.66、---1.6、1.5、1.4、1.3、1.2、1.1、１質量％まで減らすことができ、それに応じて抗体又は抗体誘導体分を、例えば、30.1、30.2、30.3、---30.8、30.9、31、32、33、34、35、36、37、38、38.1、38.2、38.3、---38.33、---38.4、38.5、38.6、38.7、38.8、38.9、---39質量％まで増やすことができ、組成物の乾燥質量に対する各成分の質量比合計を最大100質量％とする。ペプチド（ジペプチド、トリペプチド、イソロイシン含有ペプチド、トリペプチド、ジペプチド又はトリイソロイシン）分を本願明細書に示したように10質量％から１質量％に下げると、粉末における1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分を上げることもできる。例えば、有効成分の抗体又は抗体誘導体を10質量％で一定にして、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80.1、80.2、80.3、---80.8、80.9、81、82、83、84、85、86、87、88、88.1、88.2、88.3、---88.33、---88.4、88.5、88.6、88.7、88.8、88.9又は89質量％の組成物を製造することができる。 In this context, (a) at least 25% by weight, preferably 60% by weight of a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. -99% by mass, particularly preferably 60-90% by mass, (b) peptide, preferably dipeptide or tripeptide, particularly preferably isoleucine-containing peptide content 1 to 19.99% by mass, (c) antibody or antibody derivative content 0.01 Compositions having a mass% up to 74% by mass, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder, are considered to be consistent with the present invention. Again, the total solid content should not exceed 100% by weight. Compositions, preferably powdered compositions such as spray-dried powders, having the following composition are consistent with the present invention. A sugar mixture comprising 89% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative / 1% by weight peptide, preferably a dipeptide or tripeptide, Preferably an isoleucine-containing tripeptide, particularly preferably triisoleucine / 10% by weight antibody or antibody derivative, ie (89/1/10) or (88/2/10), (87/3/10), (86/4/10), (85/5/10), (84/6/10), (83/7/10), (82/8/10), (81/9/10), (80 / 10/10), (79/11/10), (78/12/10), (77/13/10), (76/14/10), (75/15/10), (74/16 / 10), (73/17/10), (72/18/10) or (71/19/10), the antibody or antibody derivative content can be reduced from 10% by mass to 0.01% by mass, for example, 9.99, --9.9, 9.8, 9.7, --9.3, 9.2, 9.1, --9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, ---- 0.9, 0.8, 0.7, --- 0.66, --- 0.6, 0.5, 0.4, 0.3, 0.2, 0.1, 0.09, 0.08, 0.07, 0.06, 0.05, 0.04, Reduced to 0.03, 0.02, 0.01% by weight and correspondingly a sugar mixture comprising a 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, eg 80.01, --- 80.1, 80.2, 80.3, --- 80.8, 80.9, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, --- 89.1, 89.2, 89.3, --- 89.33, 89.4, 89.5, 89.6 89.7, 89.8, 89.9, --- 89.91, 89.92, 89.93, --- 89.97, 89.98, 89.99% by mass, and the total mass of each component with respect to the dry mass of the composition is up to 100% by mass Like that. Therefore, a composition having the following composition, preferably a powdery composition such as a spray-dried powder, also conforms to the present invention. 80% by weight of a saccharide mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative / 19% by weight peptide, preferably a dipeptide or tripeptide, in particular Preferably an isoleucine-containing peptide, more preferably triisoleucine / 1% by weight antibody or antibody derivative, ie (80/19/1) or (80/18/2), (80/17/3), ( 80/16/4), (80/15/5), (80/14/6), (80/13/7), (80/12/8), (80/11/9), (80 / 10/10), (70/19/11), (70/18/12), (70/17/13), (70/16/14), (70/15/15), (70/14 / 16), (70/13/7), (70/12/18), (70/11/19), (70/10/20), (60/19/21), (60/18/22) , (60/17/23), (60/16/24), (60/15/25), (60/14/26), (60/13/27), (60/12/28), ( 60/11/29), (60/10/30), 10 peptides (dipeptide, tripeptide, isoleucine-containing peptide, tripeptide, dipeptide or triisoleucine) % To 1% by mass, for example, 9.99, --9.9, 9.8, 9.7, --9.3, 9.2, 9.1, --9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1.9, 1.8, 1.7, --- 1.66, --- 1.6, 1.5, 1.4, 1.3, 1.2, 1.1, 1% by weight, and correspondingly the antibody or antibody derivative content, for example 30.1 , 30.2, 30.3, --30.8, 30.9, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 38.1, 38.2, 38.3, --- 38.33, --- 38.4, 38.5, 38.6, 38.7, It can be increased to 38.8, 38.9, --39 mass%, and the total mass ratio of each component to the dry mass of the composition is 100 mass% at maximum. When the peptide (dipeptide, tripeptide, isoleucine-containing peptide, tripeptide, dipeptide or triisoleucine) content is reduced from 10% by mass to 1% by mass as shown in the present specification, 1,4 O-linked saccharose in powder The sugar mixture containing the derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative can also be increased. For example, the active ingredient antibody or antibody derivative is made constant at 10% by mass, and the sugar mixture containing 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative is 80.1, 80.2 , 80.3, --- 80.8, 80.9, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 88.1, 88.2, 88.3, --- 88.33, --- 88.4, 88.5, 88.6, 88.7, 88.8, 88.9 or 89% by weight of the composition can be produced.

とりわけ好ましい組成物としては、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が60〜80質量％、（ｂ）ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリペプチド、さらにはトリイソロイシン分が10〜19.99質量％、ｃ）抗体又は抗体誘導体が0.01〜最大30質量％の組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であることがわかった。
さらに、本発明の別の実施形態によると、組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物は、さらに、Tween 20、40、60、80、Brij35、Pluronic F88及びPluronic F127等のような界面活性物質が含んでいてもよい。これらの物質は、0.01〜0.1質量％濃度で使用することが好ましい。少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物をアジュバントとして含有し、さらにTween 20を界面活性物質として濃度0.01〜0.1質量％で含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物が特に好ましい。
更なる実施形態によると、本発明の粉末状組成物の粒子は、ＭＭＤが１〜10μｍ、好ましくは１〜５μｍである。
別の実施形態では、本発明は、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とを含む組成物、好ましくは、例えば噴霧乾燥粉末のような粉末状組成物であって、前記粉末状組成物のガラス転移温度が40℃より高いことを特徴とする組成物に関する。通常、本発明の粉末の最高ガラス転移温度は、およそ96〜110℃である。しかしながら、個々のケースに応じて、この値はさらに高くてもよい。
さらに、本発明は、本願明細書に記載の組成物の少なくとも１種を含む医薬組成物に関する。 Particularly preferred compositions are: a) 60-80% by weight of a sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, (b A) a peptide, preferably a dipeptide or a tripeptide, particularly preferably an isoleucine-containing peptide, more preferably a tripeptide, further a triisoleucine content of 10 to 19.99% by mass; Product, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder.
Furthermore, according to another embodiment of the present invention, the composition, preferably a powdered composition, such as a spray-dried powder, is further used in Tween 20, 40, 60, 80, Brij 35, Pluronic F88 and Pluronic F127, etc. Such a surface active substance may be contained. These substances are preferably used at a concentration of 0.01 to 0.1% by mass. Contains at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or a sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative as an adjuvant, and further has a concentration of 0.01 to 0.1 mass using Tween 20 as a surfactant A composition comprising%, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder is particularly preferred.
According to a further embodiment, the particles of the powdery composition according to the invention have an MMD of 1-10 μm, preferably 1-5 μm.
In another embodiment, the present invention provides a) a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, and b) one A composition comprising an antibody or an antibody derivative thereof, preferably a powdered composition such as a spray-dried powder, wherein the glassy transition temperature of the powdered composition is higher than 40 ° C. About. Usually, the maximum glass transition temperature of the powder of the present invention is approximately 96-110 ° C. However, this value may be higher depending on the individual case.
Furthermore, the present invention relates to a pharmaceutical composition comprising at least one of the compositions described herein.

本発明の組成物の製造：
本発明の組成物は、ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とを含む、液体、半固体又は固体の組成物である。特に好ましいのは固体の粉末状組成物で、例えば、水溶液又は懸濁液を凍結乾燥又は噴霧乾燥により作製した固体の粉末状組成物である。水溶液又は懸濁液は、該当する成分（例えば、1,4 O-結合型サッカロース誘導体と抗体等）を好適な溶媒中に混合又は懸濁させて得ることができる。それぞれの物質は乾燥状態で溶媒に添加して、溶解、懸濁させることもできる。半固体状製剤も好適である。半固体製剤は、単一又は複合基剤で構成され、その中に、本発明によるａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）抗体又は抗体誘導体とが溶解又は分散されている。1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、抗体又は抗体誘導体とは、個々に基剤に添加することができる。あるいは、前記記載のように、記載した好適な方法で作製した粉末中に添加することもできる。製剤は、さらに、防腐剤、酸化防止剤、安定化剤、乳化剤、増粘剤、浸透促進剤等の適したアジュバント又は他のアジュバントを含有してもよい。好適な半固体状基剤としては、疎水性軟膏、水吸収性軟膏、親水性軟膏、親油性クリーム、親水性クリーム、親油性ゲル、親水性ゲル、ペースト及びコーティング用ペーストが挙げられるが、これらに限定されるものではない。 Production of the composition of the invention:
The composition of the present invention comprises: a) a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative; and b) one antibody or A liquid, semi-solid or solid composition comprising an antibody derivative. Particularly preferred are solid powder compositions, for example, solid powder compositions prepared by freeze drying or spray drying an aqueous solution or suspension. The aqueous solution or suspension can be obtained by mixing or suspending the corresponding components (for example, 1,4 O-linked saccharose derivative and antibody) in a suitable solvent. Each substance can be added to a solvent in a dry state to be dissolved and suspended. Semi-solid formulations are also suitable. Semi-solid preparations are composed of a single or complex base in which a) at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose according to the invention. The sugar mixture containing the derivative and b) the antibody or antibody derivative are dissolved or dispersed. The sugar mixture containing the 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative and the antibody or antibody derivative can be individually added to the base. Alternatively, as described above, it can also be added to the powder made by the preferred method described. The formulations may further contain suitable or other adjuvants such as preservatives, antioxidants, stabilizers, emulsifiers, thickeners, penetration enhancers and the like. Suitable semi-solid bases include hydrophobic ointments, water-absorbing ointments, hydrophilic ointments, lipophilic creams, hydrophilic creams, lipophilic gels, hydrophilic gels, pastes and coating pastes. It is not limited to.

例えば、先の水溶液又は懸濁液を乾燥させて作製する固体状粉末組成物もとりわけ好ましい。公知の乾燥方法としては、とりわけ凍結乾燥、噴霧乾燥、真空乾燥、赤外線乾燥又はマイクロ波乾燥が挙げられる。好適な方法の説明の１つとして、例えば、Willmannの発表（論文、2000、Dr. Hut Verlag、ドイツ、ミュンヘン ISBN 3-89963-027-0）に記載があり、この内容を引用により本願明細書の記載に含むものとする。ａ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分と、ｂ）１種の抗体又は抗体誘導体とで構成される粉末状組成物は、噴霧乾燥又は凍結乾燥によって製造したものがとりわけ安定していることがわかった。
本発明の乾燥粉末の製造：
また、本発明は、上記で詳細に説明した乾燥粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末の製造方法を提供する。噴霧乾燥方法は、ａ）医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体と、ｂ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とを含む噴霧用溶液／懸濁液を、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）で、好ましくは温度186℃未満／96℃未満で、また、好ましくは温度186℃／96℃〜60℃／40℃で、例えば、180〜150℃／95〜80℃で噴霧することを特徴とする。本発明の方法は、「実施例」のセクションで多数の実施例を基に、より詳細に説明する。
基本的には、本発明の粉末は、抗体又は抗体誘導体を、それらの溶解条件に応じて水溶液に溶解することによって製造することができる。通常、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９の緩衝液が用いられる。吸入可能な粉末を調製するには、ｐＨ４〜7.8の水溶液が特に有利である。十分な溶解度を確保するには、溶液のｐＨ値を抗体又は抗体誘導体のｐＨ値より低くするとよい。水溶液にはさらに、例えばアセトン、アルコール等のような水溶性有機溶媒を付加的に含有させてもよい。メタノール、エタノール又はプロパノール（ｎ-プロパノールもしくはイソプロパノール）等の低級アルコール類が特に好適である。このような混合溶媒系は、通常、水溶性有機溶媒を10〜20容量％含む。乾燥用溶液中の固形分は、通常、0.01〜20質量％、好ましくは0.05〜10質量％、特に好ましくは0.1〜５質量％となる。本発明の範囲では、噴霧乾燥粉末は、固形分10質量％、3.33質量％又は2.00質量％の水溶液を基に、ならびに、凍結乾燥粉末は、固形分10質量％の水溶液を基に作製した。 For example, a solid powder composition prepared by drying the aqueous solution or suspension is particularly preferable. Known drying methods include inter alia freeze drying, spray drying, vacuum drying, infrared drying or microwave drying. One suitable method is described in, for example, Willmann's presentation (2000, Dr. Hut Verlag, Munich, ISBN 3-89963-027-0), which is incorporated herein by reference. It shall be included in the description. a) a sugar mixture containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative; and b) one antibody or antibody derivative. Powdered compositions have been found to be particularly stable when produced by spray drying or freeze drying.
Production of the dry powder of the present invention:
The present invention also provides a process for producing the dry powder, preferably spray-dried powder, described in detail above. The spray-drying method comprises: a) an antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient; and b) a sugar containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. The spray solution / suspension containing the mixture at a temperature of less than 200 ° C./120° C. (inlet temperature / outlet temperature), preferably less than 186 ° C./96° C., and preferably at a temperature of 186 ° C. / Spraying is performed at 96 ° C to 60 ° C / 40 ° C, for example, at 180 to 150 ° C / 95 to 80 ° C. The method of the invention is described in more detail on the basis of a number of examples in the "Examples" section.
Basically, the powder of the present invention can be produced by dissolving an antibody or antibody derivative in an aqueous solution according to their dissolution conditions. Usually, a buffer solution having a pH of 3 to 11, preferably 3.5 to 9 is used. For preparing inhalable powders, aqueous solutions with a pH of 4 to 7.8 are particularly advantageous. In order to ensure sufficient solubility, the pH value of the solution may be lower than the pH value of the antibody or antibody derivative. The aqueous solution may further contain a water-soluble organic solvent such as acetone or alcohol. Particularly suitable are lower alcohols such as methanol, ethanol or propanol (n-propanol or isopropanol). Such a mixed solvent system usually contains 10 to 20% by volume of a water-soluble organic solvent. The solid content in the drying solution is usually 0.01 to 20% by mass, preferably 0.05 to 10% by mass, and particularly preferably 0.1 to 5% by mass. In the scope of the present invention, the spray-dried powder was prepared based on an aqueous solution having a solid content of 10 mass%, 3.33 mass% or 2.00 mass%, and the lyophilized powder was prepared based on an aqueous solution having a solid content of 10 mass%.

例えば上記記載したようなアジュバント又は好適なアジュバントの混合物は、通常、第２の容器中で、非常に純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の適当な緩衝液を用いて溶解し、第２工程で抗体又は抗体誘導体を含む有効成分溶液と一緒に混合する。その後、この溶液／懸濁液を、極めて純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜7.8の好適な緩衝液を用いて、必要とされる固形分になるよう調整する。
そこで、本発明は、粉末の製造方法であって、
ａ）抗体又は抗体誘導体を水溶液／懸濁液に溶解し、
ｂ）化合物ラクトスクロース、グルコシルスクロースもしくはマルトシルスクロースから選択される1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上、又は、これらの1,4 O-結合型サッカロース誘導体の少なくとも１種を含有する糖混合物を水溶液／懸濁液に溶解／懸濁し、
ｃ）抗体又は抗体誘導体と、1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とが異なる溶液／懸濁液に溶解／懸濁している場合は、それらを混合し、
ｄ）1,4 O-結合型サッカロース誘導体１種以上と抗体又は抗体誘導体とを含む溶液／懸濁液を乾燥させることを特徴とする製造方法に関する。
乾燥工程が噴霧乾燥の場合、ｄ）の乾燥が、温度200℃未満／120℃未満（入口温度／出口温度）、好ましくは温度60℃／40℃から温度186℃／96℃の範囲で前記溶液／懸濁液を噴霧して行うことを特徴とする。 For example, an adjuvant as described above or a mixture of suitable adjuvants is usually in a second container, very pure water or pH 3-11, preferably pH 3.5-9, particularly preferably pH 4.0- Dissolve in 7.8 appropriate buffer and mix with active ingredient solution containing antibody or antibody derivative in the second step. This solution / suspension is then added to the required solids with very pure water or a suitable buffer of pH 3-11, preferably pH 3.5-9, particularly preferably pH 4.0-7.8. Adjust to minutes.
Therefore, the present invention is a method for producing a powder,
a) Dissolve the antibody or antibody derivative in an aqueous solution / suspension,
b) One or more 1,4 O-linked saccharose derivatives selected from the compounds lactosucrose, glucosyl sucrose or maltosyl sucrose, or a sugar containing at least one of these 1,4 O-linked saccharose derivatives Dissolving / suspending the mixture in an aqueous solution / suspension;
c) The antibody or antibody derivative and the sugar mixture containing the 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative are dissolved / suspended in different solutions / suspensions. If you mix them,
d) A production method comprising drying a solution / suspension containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative and an antibody or antibody derivative.
When the drying step is spray drying, the solution of d) is dried at a temperature of less than 200 ° C./120° C. (inlet temperature / outlet temperature), preferably in the range of 60 ° C./40° C. to 186 ° C./96° C. / It is characterized by spraying the suspension.

1,4 O-結合型サッカロース誘導体は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の一部を形成していてもよい。好適な糖混合物の例については、「定義」のセクションでより詳細に記載されている。この場合、糖混合物は、1,4 O-結合型サッカロース誘導体とともに、１種以上の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類を含むことができるが、粉末製造上から単糖類及び／又はニ糖類を添加して使うことが好ましい。本発明の範囲では、例えば、ラクトスクロース、ラクトース及びサッカロースの糖混合物の使用が可能であり、組成物の糖分全体に対するラクトスクロース分が40質量％以上、好ましくは55質量％以上、特には88質量％以上が好ましい。好ましい糖混合物としては、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」（LS55Pと略記）と呼ばれ、少なくとも55％のラクトスクロースと、最大で25質量％のラクトースと最大で10質量％のサッカロースとを含む糖混合物である。別の好ましい実施形態によると、株式会社林原商事（日本）の「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」（LS90Pと略記）と呼ばれ、少なくとも88％のラクトスクロースと、最大で10質量％のラクトース及びサッカロースとを含む糖混合物である。グルコシルスクロース及びマルトシルスクロースの組成物で構成される糖混合物も、好ましくは、他の単糖類、ニ糖類及び／又は多糖類と一緒に使用するとよい。また、本発明で好適な糖分子とは、結局、グルコシルスクロースとマルトシルスクロース、サッカロース、グルコース及び／又はフルクトースで構成される糖分子で、組成物中の糖分全体に対してグルコシルスクロースとマルトシルスクロースが25質量％以上であることが好ましい。さらに好ましい実施形態によると、グルコシルスクロースとマルトシルスクロースそれぞれの含有量は、糖分全体に対して少なくとも18質量％である。また別の好ましい実施形態では、使用する糖混合物が、グルコシル及びマルトシルスクロースをそれぞれ少なくとも18質量％、サッカロースを11〜15質量％、グルコースとフルクトースをそれぞれ５〜９質量％含む、株式会社林原商事（日本）の「カップリングシュガー（登録商標）」である。また、本発明では、グルコシル及び／又はマルトシルスクロースを少なくとも25質量％、サッカロースを48〜56質量％、グルコース及びフルクトースを10質量％以下含む、「カップリングシュガーＳ（登録商標）」（株式会社林原商事、日本）と呼ばれる糖混合物も好適である。 The 1,4 O-linked saccharose derivative may form part of a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. Examples of suitable sugar mixtures are described in more detail in the “Definitions” section. In this case, the sugar mixture may contain one or more monosaccharides, disaccharides and / or polysaccharides together with the 1,4 O-linked saccharose derivative. It is preferable to add and use. In the scope of the present invention, for example, a sugar mixture of lactosucrose, lactose and saccharose can be used, and the lactosucrose content with respect to the total sugar content of the composition is 40% by mass or more, preferably 55% by mass or more, particularly 88% by mass. % Or more is preferable. A preferred sugar mixture is called “Fruit Oligo (registered trademark) LS55P” (abbreviated as LS55P) from Hayashibara Shoji Co., Ltd. (Japan), at least 55% lactosucrose, and up to 25% by weight lactose and max. A sugar mixture containing 10% by mass of saccharose. According to another preferred embodiment called Hayashibara Corporation (Japan) “Fruit Oligo® LS90P” (abbreviated LS90P), at least 88% lactosucrose and up to 10% by weight lactose And a sucrose mixture. A sugar mixture composed of a composition of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is also preferably used with other monosaccharides, disaccharides and / or polysaccharides. In addition, the sugar molecule suitable in the present invention is a sugar molecule composed of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose, saccharose, glucose and / or fructose, and glucosyl sucrose and maltosyl with respect to the total sugar content in the composition. It is preferable that sucrose is 25 mass% or more. According to a further preferred embodiment, the content of each of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 18% by weight with respect to the total sugar content. In another preferred embodiment, the sugar mixture used comprises at least 18% by weight of glucosyl and maltosyl sucrose, 11-15% by weight of saccharose, and 5-9% by weight of glucose and fructose, respectively. (Japan) “Coupling Sugar (registered trademark)”. Further, in the present invention, “Coupling Sugar S (registered trademark)” (Co., Ltd.) containing at least 25% by mass of glucosyl and / or maltosyl sucrose, 48 to 56% by mass of saccharose, and 10% by mass or less of glucose and fructose. A sugar mixture called Hayashibara Shoji, Japan) is also suitable.

乾燥させる溶液／懸濁液中の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物のアジュバント含有量は、乾燥させる溶液又は懸濁液の固形分に対して25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％、さらに好ましくは60〜90質量％である。抗体又は抗体誘導体という医薬有効成分濃度は、乾燥させる溶液又は懸濁液の固形分に対して通常0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜40質量％、特に好ましくは0.01〜30質量％である。この分野の当業者であれば、前記記載の本発明の粉末組成を基に、乾燥用溶液／懸濁液を作製することは可能であり、乾燥後、とりわけ噴霧後、当該粉末組成物となる。
また本発明は、前記記載の乾燥粉末の製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液の固形分が、25〜99.99質量％、好ましくは60〜99質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物を含有することを特徴とする製造方法に関する。別の推奨実施形態によると、本発明は前記製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液の固形分中に0.01〜75質量％、好ましくは0.01〜30質量％、特に好ましくは0.33〜30質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含むことを特徴とする方法に関する。
本発明のさらなる実施形態によると、固形分の、（ａ）少なくとも25質量％、例えば、25〜99.99質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）少なくとも0.01質量％、好ましくは0.01〜75質量％が医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体である、乾燥用溶液／懸濁液を製造し、乾燥、とりわけ噴霧するものであって、質量パーセントの合計が最大100質量％となる。好ましい実施形態の１つによると、固形分の、（ａ）少なくとも60質量％、好ましくは60〜90質量％が少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物であり、（ｂ）0.01〜40質量％が抗体又は抗体誘導体である乾燥用溶液／懸濁液を製造、乾燥、好ましくは噴霧するものであって、溶液又は懸濁液の質量パーセントの合計が噴霧溶液／噴霧懸濁液の固形分に対して最大で100質量％となる。 The adjuvant content of the sugar mixture comprising 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative in the solution / suspension to be dried is It is 25-99.99 mass% with respect to solid content, Preferably it is 60-99 mass%, More preferably, it is 60-90 mass%. The concentration of the pharmaceutically active ingredient called antibody or antibody derivative is usually 0.01 to 75% by mass, preferably 0.01 to 40% by mass, particularly preferably 0.01 to 30% by mass, based on the solid content of the solution or suspension to be dried. A person skilled in the art can prepare a solution / suspension for drying on the basis of the powder composition of the present invention described above, and after drying, in particular after spraying, the powder composition is obtained. .
The present invention also relates to a method for producing a dry powder as described above, wherein the solid content of the drying solution / suspension is 25 to 99.99% by mass, preferably 60 to 99% by mass of at least one 1,4. The present invention relates to a production method comprising a sugar mixture containing an O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. According to another preferred embodiment, the present invention is a process as described above, wherein the solid content of the drying solution / suspension is 0.01 to 75% by weight, preferably 0.01 to 30% by weight, particularly preferably 0.33 to 30%. It is related with the method characterized by including the antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient of the mass%.
According to a further embodiment of the invention, the solids, (a) at least 25% by weight, for example 25-99.99% by weight, are at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 Producing a solution / suspension for drying, which is a sugar mixture comprising an O-linked saccharose derivative and (b) at least 0.01% by weight, preferably 0.01-75% by weight, is an antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient And drying, in particular spraying, the sum of the weight percentages being up to 100% by weight. According to one preferred embodiment, (a) at least 60% by weight, preferably 60-90% by weight of the solids is at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 A sugar mixture containing an O-linked saccharose derivative, and (b) a solution / suspension for drying in which 0.01 to 40% by mass of the antibody or antibody derivative is produced, dried, preferably sprayed, Alternatively, the sum of the weight percentages of the suspension is up to 100% by weight with respect to the solid content of the spray solution / spray suspension.

さらに、前記記載の本発明の粉末によっては、別の実施形態では、本発明の乾燥用溶液／懸濁液がさらに医薬的に適用可能なアジュバント１種以上の及び／又は塩１種以上を含む。アジュバントは、主に、アミノ酸、ペプチドもしくはその塩、糖類、ポリオール、有機酸の塩及び／又はポリマーである。
乾燥させる溶液／懸濁液が、ａ）医薬有効成分としての１種の抗体又は抗体誘導体と、ｂ）少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と共に、好ましくは、ｃ）他のアジュバントとしての１種以上のアミノ酸及び／又はペプチド又はタンパク質を含むのが好ましい。そこで、本発明は、乾燥粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末の製造方法であって、乾燥用溶液／懸濁液が、その固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは少なくとも60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物と、ｂ）１〜19.99質量％の少なくとも１種のアミノ酸及び／又は少なくとも１種のペプチドと、ｃ）0.01〜74質量％の抗体又は抗体誘導体とを含むことを特徴とする製造方法に関する。医薬的に適用可能な塩、ペプチド及びアミノ酸をはじめとする好適なアジュバントの例は、本願明細書の「本発明の粉末」のセクションに記載されている。この分野の当業者であれば、前記粉末を製造し、固形分の合計が最大100質量％となるように質量分を調整することは可能であろう。抗体又は抗体誘導体分（全固形分に対して）が例えば10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80質量％である場合、当業者であれば、最大で10質量％のアミノ酸を乾燥用溶液／懸濁液に添加できることがわかる。 Furthermore, depending on the powder of the invention described above, in another embodiment, the drying solution / suspension of the invention further comprises one or more pharmaceutically applicable adjuvants and / or one or more salts. . Adjuvants are mainly amino acids, peptides or salts thereof, sugars, polyols, salts of organic acids and / or polymers.
The solution / suspension to be dried comprises a) one antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient, and b) at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-. Along with a sugar mixture comprising a conjugated saccharose derivative, it is preferred to include c) one or more amino acids and / or peptides or proteins as other adjuvants. Thus, the present invention is a process for producing a dry powder, preferably a spray-dried powder, wherein the drying solution / suspension is a) at least 25% by weight, preferably at least 60-90, based on its solids content. A sugar mixture comprising, by weight, at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, and b) 1 to 19.99% by weight of at least one amino acid and The present invention relates to a production method comprising: at least one peptide; and c) 0.01 to 74% by mass of an antibody or antibody derivative. Examples of suitable adjuvants, including pharmaceutically applicable salts, peptides and amino acids, are described in the “Inventive Powder” section of this application. One skilled in the art will be able to produce the powder and adjust the mass so that the total solids is up to 100% by weight. The antibody or antibody derivative content (based on the total solid content) is, for example, 10% by mass, and at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative If the sugar mixture content is 80% by weight, the skilled person knows that a maximum of 10% by weight of amino acids can be added to the drying solution / suspension.

さらに好ましい実施形態によると、乾燥用溶液／懸濁液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とともに、付加的アジュバントとしてイソロイシンをさらに含む。乾燥用溶液／懸濁液の固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、ｂ）１〜19.99質量％のイソロイシン、及びｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含む乾燥用溶液／懸濁液が有利であると考えられる。この場合、抗体又は抗体誘導体分は、0.01質量％から最大で74質量％が好ましく、これによって固形分の合計を最大100％とする。この分野の当業者であれば、該当する粉末を好ましくは噴霧乾燥によって製造し、固形分の合計が最大100質量％になるように質量分を調整することは可能であろう。抗体又は抗体誘導体分が（全固形分に対して）例えば10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物分が80質量％になる場合、当業者であれば、乾燥用溶液／懸濁液にイソロイシンを最大で10質量％添加できることがわかる。 According to a further preferred embodiment, the drying solution / suspension is added together with a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. Further includes isoleucine as a functional adjuvant. Based on the solids of the drying solution / suspension, a) at least 25% by weight, preferably 60-90% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 Preference is given to a drying solution / suspension comprising a sugar mixture comprising an O-linked saccharose derivative, b) 1-19.99% by weight of isoleucine, and c) at least 0.01% by weight of the antibody or antibody derivative as a pharmaceutical active ingredient. It is believed that there is. In this case, the content of the antibody or antibody derivative is preferably from 0.01% by mass to 74% by mass at maximum, so that the total solid content is 100% at maximum. A person skilled in the art will be able to produce the corresponding powder, preferably by spray drying, and adjust the mass so that the total solids is up to 100% by weight. The amount of the antibody or antibody derivative is, for example, 10% by mass (based on the total solid content), and at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative When the sugar mixture content is 80% by mass, those skilled in the art will know that isoleucine can be added up to 10% by mass to the drying solution / suspension.

別の実施形態によると、乾燥用溶液／懸濁液は、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物とともに、１種以上のトリペプチド、特に好ましくはトリイソロイシンを含む。溶液／懸濁液の固形分を基準に、ａ）少なくとも25質量％、好ましくは60〜98.99質量％、特に好ましくは60〜90質量％の少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物、ｂ）１〜19.99質量％のペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、さらに好ましくはトリイソロイシン、ｃ）少なくとも0.01質量％の医薬有効成分としての抗体又は抗体誘導体を含み、それによって、固形分の合計が最大で100質量％となる溶液／懸濁液が有利だと考えられる。この場合、抗体又は抗体誘導体分が0.01質量％から最大で74質量％が好ましい。この分野の当業者であれば、該当する粉末を製造し、その固形分の合計が最大で100質量％となるように質量比率を調整することができよう。抗体又は抗体誘導体の比率が（全固形分に対して）10質量％で、かつ、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体又は少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体を含む糖混合物の比率が80質量％となる場合、当業者であれば、ペプチド、好ましくはジペプチド又はトリペプチド、特に好ましくはイソロイシン含有ペプチド、とりわけトリイソロイシンを、最大で10質量％乾燥用溶液又は懸濁液に添加可能であることがわかる。
既に記したように、乾燥、好ましくは噴霧に供する溶液をｐＨ３〜11、好ましくは3.5〜９、特に好ましくは4.0〜7.8で製造及び噴霧すると有利である。好適な緩衝剤系は当業者には公知である。一般に、無機塩又は有機塩を緩衝剤系として利用することが、とりわけ有利であることがわかっている。 According to another embodiment, the drying solution / suspension is combined with a sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative. It contains more than one tripeptide, particularly preferably triisoleucine. Based on the solids content of the solution / suspension, a) at least 25% by weight, preferably 60-98.99% by weight, particularly preferably 60-90% by weight, of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or A sugar mixture comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, b) 1 to 19.99% by weight of a peptide, preferably a dipeptide or a tripeptide, particularly preferably an isoleucine-containing peptide, more preferably a triisoleucine, c) A solution / suspension that contains at least 0.01% by weight of the antibody or antibody derivative as a pharmaceutically active ingredient, so that the total solids up to 100% by weight is considered advantageous. In this case, the antibody or antibody derivative content is preferably 0.01% by mass to 74% by mass at maximum. A person skilled in the art will be able to produce the corresponding powder and adjust the mass ratio so that the total solid content is at most 100% by mass. The ratio of the antibody or antibody derivative is 10% by mass (relative to the total solid content), and at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative When the ratio of the sugar mixture to be contained is 80% by weight, the person skilled in the art will be able to obtain peptides, preferably dipeptides or tripeptides, particularly preferably isoleucine-containing peptides, in particular triisoleucine, up to 10% by weight drying solution or suspension. It can be seen that it can be added to the suspension.
As already mentioned, it is advantageous to produce and spray the solution to be dried, preferably sprayed, at a pH of 3-11, preferably 3.5-9, particularly preferably 4.0-7.8. Suitable buffer systems are known to those skilled in the art. In general, it has proven particularly advantageous to utilize inorganic or organic salts as buffer systems.

通常、抗体又は抗体誘導体に対する最適なアジュバント及びタンパク質含量は、実験的に求める。本発明の好ましい調剤には、分散性や流動性といった粉末特性を改善し、凝集体の抑制を維持するために、付加的アジュバントが含有されるとよい。
噴霧乾燥
噴霧乾燥は、従来の噴霧乾燥器、例えば、ニロ社（ソーボー（Soeborg）、デンマーク）、Buchi Labortechnik社（フラウィル、スイス）等が製造した装置で行われる。噴霧乾燥の最適条件はそれぞれ処方によって異なるので、実験的に求めればよい。通常、使用するガスは空気であるが、窒素又はアルゴン等のような不活性ガスも好適である。さらに、噴霧乾燥温度、即ち、入口温度及び出口温度を意味するが、これらの温度は使用する有効成分の温度に対する反応性にしたがって、また、それぞれのケースで使用する安定化剤に応じて決められる。入口温度は通常50〜200℃、一方、出口温度は通常30〜150℃である。本発明の範囲においては、入口温度は約170〜185℃、出口温度は80〜100℃で操作を行った。しかしながら、安定化剤含有量に応じて、入口温度は200℃まで、好ましくは60〜185℃、出口温度は120℃まで、好ましくは40〜105℃にすることができる。噴霧は、通常、およそ20〜150psi、好ましくは約30〜又は40〜100psi、例えば、約30、40、50、60、70、80、90又は100psiの圧力で行う。 Usually, the optimal adjuvant and protein content for an antibody or antibody derivative will be determined experimentally. Preferred formulations of the present invention may contain additional adjuvants in order to improve powder properties such as dispersibility and flowability and maintain aggregate suppression.
Spray drying Spray drying is carried out in an apparatus manufactured by conventional spray dryers, such as Niro (Soeborg, Denmark), Buchi Labortechnik (Furawill, Switzerland) and the like. Since the optimum conditions for spray drying differ depending on the formulation, they may be obtained experimentally. Usually, the gas used is air, but an inert gas such as nitrogen or argon is also suitable. Furthermore, it means the spray drying temperature, i.e. the inlet and outlet temperatures, which are determined according to the reactivity of the active ingredient used to the temperature and according to the stabilizer used in each case. . The inlet temperature is usually 50-200 ° C, while the outlet temperature is usually 30-150 ° C. In the scope of the present invention, the operation was performed at an inlet temperature of about 170-185 ° C and an outlet temperature of 80-100 ° C. However, depending on the stabilizer content, the inlet temperature can be up to 200 ° C, preferably 60-185 ° C and the outlet temperature can be up to 120 ° C, preferably 40-105 ° C. Nebulization is usually performed at a pressure of approximately 20-150 psi, preferably about 30- or 40-100 psi, for example about 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 or 100 psi.

噴霧乾燥器ビュッヒB290（Buchi B290）の場合、液体供給量は通常0.1〜100ml／分、好ましくは0.1〜30ml／分で、例えば約３ml／分である。これに関連して、アスピレータ流量は20〜40m³／時、好ましくは30〜40m³／時、例えば38.3m³／時であり、霧化速度は0.3〜2.5m³／時、好ましくは約0.67m³／時、1.05m³／時、1.74m³／時が特に適切であることがわかった。
噴霧乾燥した抗体又は抗体誘導体製剤に、任意であるが第２のゆるやかな乾燥（後乾燥）を施してもよい。その目的は調剤を規定の残留含水量にすることで、好ましくは２質量％未満にすることで、これにより、有効成分の安定性とともに粉末特性であるガラス転移温度、流動性及び分散性等を改善する。後乾燥工程の条件は、抗体又は抗体誘導体の凝集が著しく増加しないように決めなければならない。噴霧乾燥有効成分製剤は、好ましくは乾燥条件下（低い相対湿度のもと）で製造、さらに加工及び保存されることが好ましい。噴霧乾燥後の初期残留含水量が比較的高くても、後乾燥工程によって粉末中の水分を一層減少させることが可能である。驚くべきことに、製造及び保存条件が最適でないとしても、好適な調剤においては、本発明の対象であるアジュバントによってタンパク質が非常に良好に安定化する。 In the case of a spray dryer Buchi B290 (Buchi B290), the liquid feed rate is usually 0.1-100 ml / min, preferably 0.1-30 ml / min, for example about 3 ml / min. In this connection, aspirator flow rate 20 to 40 m ³ / time, preferably 30 to 40 m ³ / time, and for example 38.3m ³ / time, atomization rate 0.3~2.5m ³ / time, preferably about 0.67 It was found that m ³ / hour, 1.05 m ³ / hour, and 1.74 m ³ / hour are particularly suitable.
The spray dried antibody or antibody derivative formulation may optionally be subjected to a second gentle drying (post-drying). Its purpose is to make the preparation a specified residual water content, preferably less than 2% by mass, thereby improving the stability of the active ingredient and the glass transition temperature, fluidity, dispersibility, etc., which are powder properties. Improve. The conditions for the post-drying step must be determined so that the aggregation of the antibody or antibody derivative does not increase significantly. Spray-dried active ingredient formulations are preferably manufactured, further processed and stored under dry conditions (under low relative humidity). Even if the initial residual water content after spray drying is relatively high, the water content in the powder can be further reduced by the post-drying step. Surprisingly, even in suboptimal manufacturing and storage conditions, in a suitable formulation, the protein is very well stabilized by the adjuvant that is the subject of the present invention.

凍結乾燥
水溶液の凍結乾燥は、Essig及びOschmannの「Lyophilisation」（学会発表、シュトゥットガルト、1993）に記載の説明に沿って行うことができる。治療用有効成分及び抗体又は抗体誘導体は、通常、水溶液又は懸濁液状態で凍結乾燥を行う。好適な濃度やｐＨ値に考慮しなければならない。好ましい製剤においては、最初に抗体又は抗体誘導体を好適な緩衝系水溶液に溶解する。タンパク質含有溶液のｐＨ値は通常３〜11、好ましくは3.5〜９、特に好ましくは4.0〜８である。溶液のｐＨ値は、抗体／抗体誘導体の等電点より低いか高い値に設定しなければならない。第２の容器では、アジュバント又は好適なアジュバントの混合物を、非常に純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜8.5の適当な緩衝液に溶解し、第２の工程でタンパク質溶液と一緒に混合する。最後に、極めて純度の高い水又はｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ3.5〜９、特に好ましくはｐＨ4.0〜8.5の好適な緩衝液を用いて、溶液が必要とされる固形分になるよう調整する。総固形分が0.1〜30質量％であることが適当であり、好ましくは0.5〜20質量％、特に好ましくは0.75〜15.0質量％である。
その後、従来からの市販の凍結乾燥器、例えば、Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen社の凍結乾燥器Christ LPC-16/NT Epsilon 2-12 D型等で溶液の凍結乾燥を行う。生成物は、タンパク質含有粉末又はケークで、さらなる処理の前に、適当な工程でサイズを小さくして、多分散系粉末にする。 Freeze-drying Freeze-drying of aqueous solutions can be carried out according to the description in Essig and Oschmann's “Lyophilisation” (conference presentation, Stuttgart, 1993). The therapeutic active ingredient and the antibody or antibody derivative are usually lyophilized in an aqueous solution or suspension. A suitable concentration and pH value must be taken into account. In a preferred formulation, the antibody or antibody derivative is first dissolved in a suitable aqueous buffer solution. The pH value of the protein-containing solution is usually from 3 to 11, preferably from 3.5 to 9, particularly preferably from 4.0 to 8. The pH value of the solution must be set below or above the isoelectric point of the antibody / antibody derivative. In the second container, the adjuvant or a mixture of suitable adjuvants is dissolved in very pure water or a suitable buffer of pH 3-11, preferably pH 3.5-9, particularly preferably pH 4.0-8.5. In the second step, mix with the protein solution. Finally, adjust the solution to the required solids with very pure water or a suitable buffer of pH 3-11, preferably pH 3.5-9, particularly preferably pH 4.0-8.5. To do. The total solid content is suitably from 0.1 to 30% by mass, preferably from 0.5 to 20% by mass, particularly preferably from 0.75 to 15.0% by mass.
Thereafter, the solution is freeze-dried using a conventional commercially available freeze-dryer, for example, Christ LPC-16 / NT Epsilon 2-12 D type freeze-dryer manufactured by Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen. The product is a protein-containing powder or cake that is reduced in size by an appropriate step to a polydisperse powder before further processing.

凍結乾燥器内の温度は実験的に最適化するが、通常は-70〜+100℃、好ましくは-50〜+40℃の範囲である。凍結乾燥器内の圧力パラメータは、10*e-5〜1013mbarが好ましい。凍結乾燥したタンパク質製剤は、その粒度の低減後、第２の穏やかな乾燥（後乾燥）を施すことが好ましい。その目的は製剤中の残留含水量を２質量％未満に均一に保つことで、それによって抗体の安定性とともに粉末特性であるガラス転移温度、流動性及び分散性等を改善するためである。後乾燥工程の条件は、タンパク質の凝集が著しく増加しないように決めなければならない。
噴霧乾燥した乾燥粉末調剤の特性
本発明の範囲で製造した乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは６質量％未満である。特に好ましくは、噴霧乾燥による乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は５質量％未満で、特に好ましくは３質量％未満、0.2〜2.0質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填及び保存期間中の調剤の安定性は向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤はとりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、粉末は、大気中の水分を中に入れないブリスターパックのような容器で保存する。驚いたことに、本発明の粉末の調剤のうち選ばれたいくつかでは、相対湿度43％で１ヶ月間開放状態で保存しても、タンパク質の安定性と吸入性の両方の面で安定した状態を保っていることがわかった。 The temperature in the lyophilizer is optimized experimentally, but is usually in the range of -70 to + 100 ° C, preferably -50 to + 40 ° C. The pressure parameter in the lyophilizer is preferably 10 * e-5 to 1013 mbar. The lyophilized protein preparation is preferably subjected to a second gentle drying (post-drying) after reducing its particle size. The purpose is to keep the residual water content in the formulation uniformly below 2% by weight, thereby improving the stability of the antibody as well as the glass transition temperature, fluidity and dispersibility, which are powder properties. The conditions of the post-drying step must be determined so that the protein aggregation does not increase significantly.
Properties of the spray-dried dry powder formulation The residual water content of the dry protein powder formulation produced within the scope of the present invention is less than 15% by weight, usually less than 10% by weight, preferably less than 6% by weight. Particularly preferably, the residual water content of the dry protein powder preparation by spray drying is less than 5% by weight, particularly preferably less than 3% by weight, most preferably 0.2 to 2.0% by weight. The lower the residual water content, the better the stability of the formulation during filling and storage. Furthermore, the dry protein powder formulation of the present invention is particularly hygroscopic. That is, the formulation has a tendency to absorb ambient moisture. In order to prevent this, the powder is usually stored in a container such as a blister pack that does not contain atmospheric moisture. Surprisingly, some of the powder formulations of the present invention were stable in terms of both protein stability and inhalation, even when stored open for 1 month at 43% relative humidity. I found out that it was in a state.

本願明細書で記載したアジュバントによる安定化効果で、噴霧乾燥中及び保存中のタンパク質を過度の負荷から保護することができる。アジュバントなしで噴霧乾燥したタンパク質のみの調剤は、かなりの凝集体を形成する。熱、剪断応力及び空気と水との界面での変性といったプロセス依存の要因により、凝集は噴霧乾燥時（凝集体：約6.6％まで）及びその後の後乾燥時（凝集体：約5.8％まで）に起こる。保存中は、タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、大量の凝集をひきおこす（凝集体：約11.8〜約18.9％）。
タンパク質のみの調剤と比較して、本発明の好適な噴霧乾燥調剤は、噴霧乾燥後の凝集体の形成を抑えるとともに、様々な保存条件のもとでも凝集体の形成を非常に低いレベルに保つことができる。噴霧乾燥及びそれに続く真空乾燥で、好ましい調剤での凝集体の形成は約0.5〜約1.8％にとどまるが、それに対して、タンパク質のみの調剤の場合は約4.0％の凝集体含有率である。とりわけ厳しい保存条件下（40℃、相対温度75％）の強制的保存安定性の場合、タンパク質のみの調剤（凝集体：約18.2〜18.9％）やアジュバントとしてトレハロースを用いた類似の参照用調剤に対して、本発明の好適な調剤は、凝集体含有率約1.0〜約13.1％という優位性を明示する。この優位性は実施例４に示す調剤との比較で特に顕著となる。噴霧溶液にトリイソロイシンを添加することにより、粉末の空気力学特性が著しく向上する。驚くべきことに、少なくとも１種の1,4 O-結合型サッカロース誘導体、好ましくはラクトスクロースとトリイソロイシン、とりわけLS55PとトリイソロイシンやLS90Pとトリイソロイシンを含む組合せの場合のみ、タンパク質を凝集体形成から保護することができる（凝集体：0.7〜4.4％のみ）。ＷＯ01/32144記載のトリイソロイシンとラフィノースとの組合せ（凝集体：12.6％）又はヒドロキシエチルデンプンとの組合せ（凝集体：約18.6％）だけでなく、従来技術で優れた安定化剤として記載されているトレハロースの場合も、トリイソロイシンとの組合せでは特に厳しい条件下ではタンパク質凝集体形成を防ぐことができない。LS55P-トリイソロイシン調剤及びLS90P-トリイソロイシン調剤も、サッカロース-トリイソロイシン調剤（凝集体：5.6％）やサッカロース-ラクトース-トリイソロイシン調剤（凝集体：8.8％）と比べると明らかに優れている。さらに驚くべきことは、LS55Pにはサッカロースとともにラクトースも25％まで含有されているということである。還元糖であるラクトースがタンパク質の安定性に及ぼすマイナスの影響が、LS55Pの場合、1,4 O-結合型サッカロース誘導体のラクトスクロースにより過分に補われているケースであることが明らかである。調剤の糖分においてラクトスクロースの割合が高いほど、タンパク質安定性にとって非常に有利になる（LS90P調剤参照）。 The stabilizing effect of the adjuvant described herein can protect the protein during spray drying and storage from excessive loading. Protein-only formulations spray dried without adjuvant form considerable aggregates. Due to process-dependent factors such as heat, shear stress and air-water interface denaturation, agglomeration is during spray drying (aggregates: up to about 6.6%) and then after drying (aggregates: up to about 5.8%) To happen. During storage, there is no hydrate shell to stabilize the protein, causing a large amount of aggregation (aggregates: about 11.8 to about 18.9%).
Compared to protein-only formulations, the preferred spray-dried formulations of the present invention suppress the formation of aggregates after spray drying and keep the formation of aggregates at a very low level even under various storage conditions be able to. With spray drying followed by vacuum drying, the formation of aggregates in the preferred formulation remains at about 0.5 to about 1.8%, whereas the protein-only formulation has an aggregate content of about 4.0%. For forced storage stability, especially under harsh storage conditions (40 ° C, relative temperature 75%), for protein-only preparations (aggregates: approx. 18.2 to 18.9%) and similar reference preparations using trehalose as an adjuvant In contrast, preferred formulations of the present invention demonstrate an advantage of aggregate content of about 1.0 to about 13.1%. This superiority is particularly remarkable in comparison with the preparation shown in Example 4. By adding triisoleucine to the spray solution, the aerodynamic properties of the powder are significantly improved. Surprisingly, at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, preferably lactosucrose and triisoleucine, in particular LS55P and triisoleucine or LS90P and triisoleucine only in combination Can be protected (aggregates: only 0.7-4.4%). It is described not only as a combination of triisoleucine and raffinose described in WO01 / 32144 (aggregate: 12.6%) or a combination with hydroxyethyl starch (aggregate: about 18.6%) but also as an excellent stabilizer in the prior art. Even in the case of trehalose, the combination with triisoleucine cannot prevent the formation of protein aggregates under particularly severe conditions. LS55P-triisoleucine preparation and LS90P-triisoleucine preparation are also clearly superior to saccharose-triisoleucine preparation (aggregate: 5.6%) and saccharose-lactose-triisoleucine preparation (aggregate: 8.8%). Even more surprising is that LS55P contains up to 25% lactose along with saccharose. In the case of LS55P, the negative effect of lactose, which is a reducing sugar, on protein stability is clearly a case where it is excessively compensated by lactosucrose, a 1,4 O-linked saccharose derivative. The higher the proportion of lactosucrose in the saccharide content of the formulation, the greater the advantage for protein stability (see LS90P formulation).

調剤を、著しく不安定化させる条件下で比較的短い期間（１週間、40℃、相対湿度75％）保存した際に、混合されているタンパク質に対して既に顕著な安定化効果を及ぼしているのであれば、かなり穏やかな標準的保存条件のもとで長期間（１年間、乾燥状態、約25℃）にわたる保存であっても、タンパク質は安定化される。
平衡化（equilibration）の後、乾燥状態、40℃で４週間保存（平衡化保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.4〜3.2％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約11.8％）と比較すると顕著である。
真空乾燥の後、乾燥状態、40℃で４週間保存（真空乾燥保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は、凝集体含有率が低い（約1.1〜2.1％）という特徴を示すが、これはタンパク質だけの粉末（凝集体含有率：約13.2％）と比較すると顕著である。
細粒分が約35％の、LS55P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）とによる調剤の場合、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満である。 The preparation already exerts a significant stabilizing effect on the mixed protein when stored for a relatively short period of time (1 week, 40 ° C., 75% relative humidity) under conditions that significantly destabilize it. If so, the protein is stabilized even when stored over extended periods of time (1 year, dry, about 25 ° C.) under fairly mild standard storage conditions.
After equilibration, the powder formulation containing LS55P and coupling sugar has a low agglomerate content (approximately 1.4-3.2%) when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks (equilibrium storage stability) This is remarkable when compared with a protein-only powder (aggregate content: about 11.8%).
After vacuum drying, when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks (vacuum drying storage stability), powder preparations containing LS55P and coupling sugar have the feature of low aggregate content (about 1.1-2.1%) As shown, this is significant when compared to protein-only powder (aggregate content: about 13.2%).
In the case of a preparation with LS55P (80%), isoleucine (10%) and IgG1 (10%) with a fine particle content of about 35%, vacuum drying is performed and then filling in a nitrogen atmosphere. When stored at 8 ° C, 25 ° C and 40 ° C for 3 months, the aggregate content is less than 1.9%.

LS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）の調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.9μｍで細粒分が約58.3％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃で３ヶ月間保存すると、凝集体含有率は1.9％未満で、また、乾燥状態、40℃で保存すると（３ヶ月安定性）、凝集体含有率2.6％未満を示す。 A formulation of LS55P (80%), triisoleucine (10%) and IgG1 (10%), with a MMAD of about 3.9μm after spray drying and a fine fraction of about 58.3%, nitrogen after vacuum drying When filled in an atmosphere and stored for 3 months at 2-8 ° C. and 25 ° C. in a dry state, the aggregate content is less than 1.9%, and when stored in a dry state at 40 ° C. (3-month stability), The aggregate content is less than 2.6%.

さらに、前記のLS55P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤は、相対湿度が約43％で温度25℃での１ヶ月間の開放状態の保存（１ヶ月開放状態安定性）後も、ＭＭＡＤがほぼ同じくらい低く（約3.8μｍ）、同じように細粒分が高い（約59.6％）状態で、凝集体含有率は低いままだった（約1.3％）。
LS90P（90％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約3.8μｍ、ＭＭＤが約2.8μｍで、細粒分が約24％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は1.2％未満及び2.2％未満を示す。
LS90P（80％）とイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後の細粒分が約28％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は0.9％未満及び1.1％未満を示す。
LS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤で、噴霧乾燥後のＭＭＡＤが約4.8μｍ、細粒分が約53.2％の調剤は、真空乾燥を行った後に窒素雰囲気下で充填し、乾燥状態で２〜８℃、25℃、40℃で１ヶ月及び３ヶ月間保存すると（１ヶ月安定性及び３ヶ月安定性）、それぞれ凝集体含有率は1.0％未満及び2.3％未満を示す。 Furthermore, the LS55P (80%), triisoleucine (10%), and IgG1 (10%) preparations described above are stored in an open state for one month at a temperature of 25 ° C. and a relative humidity of about 43% (one month). Even after the stability in the open state, the MMAD was almost as low (about 3.8 μm), and the fines content was high (about 59.6%), and the aggregate content remained low (about 1.3%). .
The formulation of LS90P (90%) and IgG1 (10%), MMAD after spray drying is about 3.8μm, MMD is about 2.8μm, and the fine particle content is about 24%, after vacuum drying When filled in a nitrogen atmosphere and stored in the dry state at 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C for 1 month and 3 months (1 month stability and 3 month stability), the aggregate content is less than 1.2% respectively. And less than 2.2%.
A formulation of LS90P (80%), isoleucine (10%) and IgG1 (10%) with a fine granule content of about 28% after spray drying is filled in a nitrogen atmosphere after vacuum drying. When stored in the dry state at 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C for 1 month and 3 months (1 month stability and 3 month stability), the aggregate content is less than 0.9% and less than 1.1%, respectively.
A formulation of LS90P (80%), triisoleucine (10%) and IgG1 (10%), with a MMAD of about 4.8μm after spray drying and a fine particle content of about 53.2%, after vacuum drying When filled in a nitrogen atmosphere and stored in the dry state at 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C for 1 month and 3 months (1 month stability and 3 month stability), the aggregate content is less than 1.0% respectively. And less than 2.3%.

さらに、前記記載のLS90P（80％）とトリイソロイシン（10％）とIgG1（10％）との調剤の様々な種類においては、相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月間開放状態で保存すると（１ヶ月及び３ヶ月開放状態安定性）、約0.5％未満と約0.8％未満の低い凝集体含有率を示す。噴霧乾燥後、ＭＭＡＤは3.9〜3.3μｍ、細粒分は約55.6〜58.9％である。相対湿度43％、温度25℃での１ヶ月開放保存後、前記調剤のＭＭＡＤは低く（約4.1〜3.5μｍ）、細粒分は高い（約62.3〜67.3％）。
噴霧乾燥条件を変えることで、平均粒径（ＭＭＤ）が好ましくは20μｍ未満、さらに好ましくは10μｍ未満の粉末を製造することができる。特に好ましい実施形態によると、本発明の粒子の平均粒径は7.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満である。平均粒径が４μｍ未満の粒子が特に好ましく、さらに、3.5μｍ未満は一層好ましい。平均粒径が0.1〜５μｍ、好ましくは0.2〜４μｍの粒子を製造することもできる。別の実施形態では、前記粒子をラクトースのような粒径が少なくとも40μｍの非呼吸用粒子と混合する。この割合は、好ましくは少なくとも15％が好ましく、より好ましくは少なくとも20％、さらに好ましくは少なくとも30％、さらにより好ましくは少なくとも40％、特に好ましくは少なくとも50％又は60％である。 Furthermore, the various types of LS90P (80%), triisoleucine (10%) and IgG1 (10%) preparations described above are open for 1 and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C. When stored in state (1 month and 3 months open state stability), it exhibits a low aggregate content of less than about 0.5% and less than about 0.8%. After spray drying, the MMAD is 3.9-3.3 μm and the fines content is about 55.6-58.9%. After one month of open storage at 43% relative humidity and 25 ° C., the MMAD of the preparation is low (about 4.1-3.5 μm) and the fines are high (about 62.3-67.3%).
By changing the spray drying conditions, it is possible to produce a powder having an average particle size (MMD) of preferably less than 20 μm, more preferably less than 10 μm. According to a particularly preferred embodiment, the average particle size of the particles according to the invention is less than 7.5 μm, preferably less than 5 μm. Particles having an average particle size of less than 4 μm are particularly preferable, and more preferably less than 3.5 μm. It is also possible to produce particles having an average particle size of 0.1 to 5 μm, preferably 0.2 to 4 μm. In another embodiment, the particles are mixed with non-respirable particles having a particle size of at least 40 μm, such as lactose. This proportion is preferably at least 15%, more preferably at least 20%, even more preferably at least 30%, even more preferably at least 40%, particularly preferably at least 50% or 60%.

平均粒径（ＭＭＤ＝体積中央径）とともに、空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）によって吸入性はおおかた決まる。好ましくは、本発明の粒子のＭＭＡＤは10μｍ未満で、より好ましくは7.5μｍ未満である。ＭＭＡＤが5.5μｍ未満、好ましくは５μｍ未満、さらに好ましくは4.5μｍ未満の粒子からなる粉末が特に有利である。実施例に記載の粉末は、噴霧乾燥条件を最適化することと、本発明のアジュバントの選択と濃度を適切にすることを組み合わせて、前記粒径を有する粉末に製造することができる。特に、アミノ酸及び／又はトリペプチドを添加すると粒子特性が改善され、ＭＭＡＤが7.5μｍ未満、好ましくは5.5μｍ未満の吸入可能粒子の割合を増やすことになる。イソロイシンやトリイソロイシンの添加により、ＦＰＦが28％を超える、好ましくは40％を超える、さらに好ましくは50％を超える、より一層好ましくは55％を超える吸入可能粉末を製造することができる（実施例参照）。
さらに、本発明の粉末は、ガラス転移温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、さらに好ましくは少なくとも55℃、より一層好ましくは少なくとも60℃という特徴を有する。特に好ましい粉末のガラス転移温度は少なくとも65℃である。通常、本発明の粉末のガラス転移温度は40〜110℃になる。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは噴霧乾燥粉末であって、それによってガラス転移温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上になる粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス転移温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上である。 Inhalability is largely determined by the aerodynamic particle size (MMAD) as well as the average particle size (MMD = volume median diameter). Preferably, the MMAD of the particles of the invention is less than 10 μm, more preferably less than 7.5 μm. Particularly advantageous are powders consisting of particles having an MMAD of less than 5.5 μm, preferably less than 5 μm, more preferably less than 4.5 μm. The powders described in the examples can be produced into powders having the above particle sizes by combining spray drying conditions with appropriate selection and concentration of the adjuvant of the present invention. In particular, the addition of amino acids and / or tripeptides improves the particle properties and increases the proportion of inhalable particles with an MMAD of less than 7.5 μm, preferably less than 5.5 μm. With the addition of isoleucine or triisoleucine, inhalable powders with an FPF of more than 28%, preferably more than 40%, more preferably more than 50%, even more preferably more than 55% can be produced (Examples) reference).
Furthermore, the powders of the invention are characterized by a glass transition temperature of at least 40 ° C., preferably at least 50 ° C., more preferably at least 55 ° C., even more preferably at least 60 ° C. Particularly preferred powders have a glass transition temperature of at least 65 ° C. Usually, the glass transition temperature of the powder of the present invention is 40 to 110 ° C. Accordingly, the present invention is a powder, preferably a spray-dried powder, comprising a pharmaceutically active ingredient and LS90P, LS55P, coupling sugar or coupling sugar S, whereby a glass transition temperature of 40 ° C. or higher, preferably 45 It relates to a powder that is ˜60 ° C. or higher. According to a further preferred embodiment, the glass transition temperature is 55 ° C. or higher, preferably 55-60 ° C. or higher.

噴霧乾燥粉末の使用
本発明の粉末は医薬品の製造に適しており、好ましくは、吸入性医薬品の製造に適している。
凍結乾燥粉末：
別の方法として、凍結乾燥とその後の微粉砕によって粉末を製造することもできる（実施例参照）。本願明細書に記載の実施例においては、微粉砕は、凍結乾燥用バイアル中でスパチュラを使い、可能な限り簡単な方法で行った。自明であるが、アトリションミル、ボールミル、ロッドミル、モルタルミル、エアジェットミル等の適したミル又は他の好適な方法によっても凍結乾燥物を微粉砕することができる（Bauer、Fromming, Fuhrer、６版参照）。
凍結乾燥、微粉砕した乾燥粉末調剤の特性：
本発明の範囲内で作製される乾燥タンパク質粉末調剤の残留含水量は、15質量％未満、通常は10質量％未満、好ましくは５質量％未満である。凍結乾燥によるタンパク質粉末調剤の残留含水量も３質量％未満であると好ましく、２質量％未満であると特に好ましく、0.2〜1.5質量％の残留含水量が最も好ましい。残留含水量が低いほど、充填及び保存期間中の調剤の安定性が向上する。さらに、本発明の乾燥タンパク質粉末調剤は、とりわけ吸湿性を示す。即ち、この調剤は周囲の水分を吸収する傾向を有する。これを防ぐために、通常、大気中の水分を中に入れない容器、例えばブリスターパックなどで粉末を保存する。 Use of spray-dried powders The powders of the invention are suitable for the manufacture of pharmaceuticals, preferably for the manufacture of inhalable pharmaceuticals.
Freeze-dried powder:
Alternatively, the powder can be produced by lyophilization followed by pulverization (see Examples). In the examples described herein, milling was performed in the simplest possible manner using a spatula in a freeze-drying vial. Obviously, the lyophilizate can also be pulverized by suitable mills such as attrition mills, ball mills, rod mills, mortar mills, air jet mills or other suitable methods (Bauer, Fromming, Fuhrer, 6 Version).
Characteristics of freeze-dried and finely pulverized dry powder formulations:
The residual water content of the dry protein powder preparation made within the scope of the present invention is less than 15% by weight, usually less than 10% by weight, preferably less than 5% by weight. The residual water content of the protein powder preparation by lyophilization is also preferably less than 3% by weight, particularly preferably less than 2% by weight, and most preferably a residual water content of 0.2 to 1.5% by weight. The lower the residual water content, the better the stability of the formulation during filling and storage. Furthermore, the dry protein powder formulation of the present invention is particularly hygroscopic. That is, the formulation has a tendency to absorb ambient moisture. In order to prevent this, the powder is usually stored in a container that does not contain atmospheric moisture, such as a blister pack.

本願明細書で記載したアジュバントの安定化効果により、凍結乾燥中及び保存期間中の過酷なストレスからタンパク質を保護することができる。アジュバントなしで凍結乾燥させたタンパク質のみの調剤は、かなりの凝集体を形成する。熱、剪断応力及び空気と水との界面での変性といったプロセス依存の要因により、凍結乾燥中に凝集が起こる（凝集体：約2.1％まで）。保存期間中、タンパク質を安定化させるための水和物の殻がないため、大量の凝集体が形成される（凝集体：20.5％）。
タンパク質のみの調剤と比べると、本発明の好適な凍結乾燥調剤では、凍結乾燥後の凝集体の形成を抑え、かつ、保存条件が様々であっても凝集体含有率を非常に低いレベルに保つことができる。凍結乾燥、微粉砕を施した凍結乾燥物は、とりわけ厳しい保存条件（40℃、相対温度75％）の「強制的保存安定性」において、タンパク質のみの調剤（凝集体含有率：約14.5％）やアジュバントとしてマンニトールを含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約34.0％）に比べて、凝集体含有率が約1.2〜約1.5％という明瞭な優位性を示す。
特に不安定化させる条件のもとで比較的短い保存期間中（１週間、40℃、相対湿度75％）に、混合されているタンパク質に対して顕著な安定化効果が既にみられる調剤であれば、かなり穏やかな標準的保存条件のもとであれば、長期間（例えば１年間、乾燥状態、約25℃）にわたりタンパク質を安定化させる。 The stabilizing effects of the adjuvants described herein can protect proteins from harsh stresses during lyophilization and storage. Protein-only preparations lyophilized without adjuvants form significant aggregates. Aggregation occurs during lyophilization (aggregates: up to about 2.1%) due to process dependent factors such as heat, shear stress and denaturation at the air / water interface. During storage, a large amount of aggregates are formed because there is no hydrate shell to stabilize the protein (aggregates: 20.5%).
Compared to protein-only preparations, the preferred lyophilized preparation of the present invention suppresses the formation of aggregates after lyophilization and keeps the aggregate content at a very low level even under various storage conditions be able to. The freeze-dried and pulverized freeze-dried product is a protein-only preparation (aggregate content: about 14.5%), especially under “forced storage stability” under severe storage conditions (40 ° C, relative temperature 75%). Compared to a similar reference preparation (aggregate content: about 34.0%) containing mannitol as an adjuvant or the adjuvant, the aggregate content shows a clear advantage of about 1.2 to about 1.5%.
Especially in preparations that already have a significant stabilizing effect on the mixed protein during a relatively short storage period (1 week, 40 ° C., 75% relative humidity) under destabilizing conditions. For example, under fairly mild standard storage conditions, the protein is stabilized over a long period of time (eg, 1 year, dry, about 25 ° C.).

凍結乾燥、微粉砕、平衡化（equilibration）を行い、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（平衡化保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約2.6％及び約4.6％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約15.3％）やマンニトールをアジュバントとして含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約11.6％）と比較すると顕著である。
凍結乾燥、微粉砕後、真空乾燥を行い、40℃かつ乾燥状態で４週間保存（真空乾燥保存安定性）すると、LS55Pやカップリングシュガーを含む粉末調剤は凝集体含有率が低い（約1.2％及び約1.5％）という特徴を示すが、これは、タンパク質のみの粉末（凝集体含有率：約14.5％）やマンニトールをアジュバントとして含む類似の参照用調剤（凝集体含有率：約6.2％）と比較すると顕著である。
本発明の粉末はさらに、ガラス転移温度が少なくとも40℃、好ましくは少なくとも50℃、より好ましくは少なくとも55℃という特徴を有する。本発明の粉末のガラス転移温度は通常40〜110℃であるが、個々のケースにおいてこの値を超えてもよい。したがって、本発明は、医薬有効成分と、LS90P、LS55P、カップリングシュガー又はカップリングシュガーＳとを含む粉末、好ましくは凍結乾燥微粉砕粉末であって、そのガラス転移温度が40℃以上、好ましくは45〜60℃以上になる粉末に関する。さらに好ましい実施形態によると、ガラス転移温度は55℃以上、好ましくは55〜60℃以上、又は110℃までである。 When freeze-dried, pulverized, equilibrated, and stored at 40 ° C for 4 weeks in a dry state (equilibrated storage stability), powder formulations containing LS55P and coupling sugar have low aggregate content (approximately 2.6% and about 4.6%), which is a protein-only powder (aggregate content: about 15.3%) and similar reference preparations containing mannitol as an adjuvant (aggregate content: about 11.6%) ) Is remarkable.
When freeze-dried, finely pulverized, vacuum-dried and stored for 4 weeks at 40 ° C in a dry state (vacuum-dried storage stability), the powder formulation containing LS55P and coupling sugar has a low aggregate content (approximately 1.2%) And about 1.5%), which is a protein-only powder (aggregate content: about 14.5%) and a similar reference preparation (aggregate content: about 6.2%) containing mannitol as an adjuvant. It is remarkable when compared.
The powder according to the invention is further characterized by a glass transition temperature of at least 40 ° C., preferably at least 50 ° C., more preferably at least 55 ° C. The glass transition temperature of the powders according to the invention is usually between 40 and 110 ° C., but this value may be exceeded in individual cases. Therefore, the present invention is a powder, preferably freeze-dried finely pulverized powder, containing a pharmaceutically active ingredient and LS90P, LS55P, coupling sugar or coupling sugar S, and has a glass transition temperature of 40 ° C. or higher, preferably It relates to a powder that becomes 45-60 ° C or higher. According to a further preferred embodiment, the glass transition temperature is 55 ° C or higher, preferably 55-60 ° C or higher, or up to 110 ° C.

乾燥粉末の使用
本発明の粉末は医薬品の製造に適しており、好ましくは、吸入性医薬品の製造に適している。
本発明の粉末の送達：
本発明の噴霧乾燥粉末製剤は、基本的には、いわゆる乾燥粉末吸入器等を用いて乾燥粉末のまま直接投与するか、あるいは、エアロゾル状態に再構成してからいわゆる噴霧器を用いて投与することができる。この場合、本発明の吸入粉末は、従来技術から公知の吸入器を用いて投与できる。
本発明による吸入粉末は、例えば、ＵＳ4,570,630Ａに記載されているような計量チャンバーによって保存容器から一回分の投与量を放出する吸入器を用いて、あるいは、ＤＥ3625685Ａに記載されているような他の装置を使って投与することができる。本発明の吸入粉末は、例えばＷＯ94/28958に記載されているような吸入器で使用されるカプセルに充填すること（いわゆるインハレット(inhalettes)の形成)が好ましい。
この他の好適な吸入器の例は、例えば、米国特許第5,458,135号、米国特許第5,785,049号又はＷＯ01/00263に記載されている。好適な吸入器は、ＷＯ97/41031、米国特許第3,906,950号及び米国特許第4,013,075号からも公知である。乾燥粉末調剤用の分散式吸入器は、他にも、ＥＰ129985、ＥＰ472598、ＥＰ467172及び米国特許第5,522,385号に記載されている。
本発明の吸入粉末は、例えば、公知の「タービュヘイラー（Turbuhaler）（登録商標）」（アストラゼネカＬＰ製）という手段で、あるいは、例えばＥＰ237507Ａに開示されているような吸入器を用いて投与することができる。この他の好適な吸入器としては、「ロタヘイラー（Rotahaler）（登録商標）」又は「ディスカス（Discus）（登録商標）」（ともにグラクソスミスクライン社製）、「スピロス（Spiros）(商標）インヘイラー」（Dura Pharmaceuticals社製）及び「スピンヘイラー（Spinhaler）（登録商標）」（フィスコン社製）が挙げられる。 Use of dry powders The powders of the present invention are suitable for the manufacture of pharmaceuticals, preferably for the manufacture of inhalable pharmaceuticals.
Delivery of the powder of the invention:
The spray-dried powder formulation of the present invention is basically administered directly as a dry powder using a so-called dry powder inhaler or the like, or is reconstituted into an aerosol state and then administered using a so-called nebulizer. Can do. In this case, the inhalation powder according to the invention can be administered using inhalers known from the prior art.
Inhalation powders according to the invention are used, for example, with an inhaler that releases a single dose from a storage container by means of a metering chamber as described in US 4,570,630A, or as described in DE 3625685A It can be administered using other devices. The inhalable powder according to the invention is preferably filled into capsules used in inhalers as described, for example, in WO 94/28958 (formation of so-called inhalettes).
Examples of other suitable inhalers are described, for example, in US Pat. No. 5,458,135, US Pat. No. 5,785,049 or WO 01/00263. Suitable inhalers are also known from WO 97/41031, US Pat. No. 3,906,950 and US Pat. No. 4,013,075. Other dispersive inhalers for dry powder formulations are described in EP129985, EP472598, EP467172 and US Pat. No. 5,522,385.
The inhalable powder of the present invention is administered, for example, by means of the known “Turbuhaler (registered trademark)” (manufactured by AstraZeneca LP) or using an inhaler such as disclosed in EP237507A, for example. Can do. Other suitable inhalers include “Rotahaler (registered trademark)” or “Discus (registered trademark)” (both manufactured by GlaxoSmithKline), “Spiros (registered trademark) Inhaler” (Dura Pharmaceuticals) and "Spinhaler (registered trademark)" (Fiscon).

図２４に、インハレット状態の本発明の医薬品組成物を投与するための特に好ましい吸入器を示す。カプセルから粉末状医薬品を吸入するためのこの吸入器（「ハンディヘラー」）は、２個の窓２を含むハウジング１と、空気導入口が設けられ、スクリーンハウジング４で固定されたスクリーン５を備えたデッキ３と、デッキ３に連結し、２本のとがったピン７を備え、バネ８に対して可動するトリガー９を有する吸入チャンバー６と、軸１０を介してハウジング１、デッキ３及びキャップ１１と蝶番式に取り付けられているマウスピース１２と、流動抵抗を調整するための空気孔１３とによって特徴づけられる。
前記記載の好ましい投与として、本発明の吸入粉末をカプセルに充填する場合（インハレット）、充填量はカプセル１個につき１〜30mgが適当である。
また、本発明の吸入粉末は、噴射剤を含有する又は含有しない吸入用エアロゾルとして投与することもできる。このためには、加圧で融解可能な溶媒又は溶媒混合物に本発明の粉末を懸濁させるか、あるいは、水溶液に溶かす。好適な懸濁液又は溶液はこの分野で公知である。例えば、ｐＨ３〜11、好ましくはｐＨ４〜９の生理溶液に溶かして再構成するのが有利である。ｐＨ5.5〜7.8の水溶液に溶かすことが特に有利である。本発明の粉末を溶かすための噴射剤を含む懸濁液又は溶液は、さらに、安定剤、乳化剤、界面活性物質又は水溶性有機溶媒という状態の他のアジュバントをさらに含んでもよい。適切な物質は当業者には既知であり、例えば、Bauer、Textbook of Pharmaceutical Technology、Wissenschaft、Verlagsgesellschaft GmbH、シュトットガルト、178-184；Adler、1998「Journal of Pharmaceutical Sciences」88(2)、199-208に記載されている。本発明の粉末を懸濁又は溶かして調製した前記吸入用エアロゾルも本発明の目的である。 FIG. 24 shows a particularly preferred inhaler for administering the pharmaceutical composition of the invention in inhalette state. This inhaler (“handy heller”) for inhaling a powdered pharmaceutical from a capsule comprises a housing 1 including two windows 2 and a screen 5 provided with an air inlet and fixed by a screen housing 4. Deck 3, connected to deck 3, provided with two pointed pins 7, suction chamber 6 having trigger 9 movable with respect to spring 8, housing 1, deck 3 and cap 11 via shaft 10. And a mouthpiece 12 attached in a hinged manner and an air hole 13 for adjusting the flow resistance.
As a preferable administration described above, when the inhalable powder of the present invention is filled into capsules (inhalet), the filling amount is suitably 1 to 30 mg per capsule.
The inhalation powder of the present invention can also be administered as an inhalation aerosol containing or not containing a propellant. For this purpose, the powder according to the invention is suspended in a solvent or solvent mixture which can be melted under pressure, or dissolved in an aqueous solution. Suitable suspensions or solutions are known in the art. For example, it is advantageous to reconstitute by dissolving in a physiological solution of pH 3-11, preferably pH 4-9. It is particularly advantageous to dissolve in an aqueous solution of pH 5.5 to 7.8. The suspension or solution containing the propellant for dissolving the powder of the present invention may further contain other adjuvants in the form of stabilizers, emulsifiers, surfactants or water-soluble organic solvents. Suitable materials are known to those skilled in the art, for example, Bauer, Textbook of Pharmaceutical Technology, Wissenschaft, Verlagsgesellschaft GmbH, Stuttgart, 178-184; Adler, 1998 “Journal of Pharmaceutical Sciences” 88 (2), 199- 208. The inhalable aerosol prepared by suspending or dissolving the powder of the present invention is also an object of the present invention.

本発明の吸入エアロゾルの調製に使用する噴射剤は、この分野で公知である。ｎ−プロパン、ｎ−ブタン又はイソブタン等の炭化水素化合物、及び、メタン、エタン、プロパン、ブタン、シクロプロパン又はシクロブタンの好ましくは塩素化誘導体及びフッ素化誘導体等のハロゲン化炭化水素化合物を含む群から、適当な噴射剤を選択する。上記噴射剤は単独で、又はその混合物として使用できる。特に好ましい噴射剤は、ＴＧ１１、ＴＧ１２、ＴＧ１３４ａ（1,1,1,2-テトラフルオロエタン）、ＴＧ２２７（1,1,1,2,3,3,3-ヘプタフルオロプロパン）及びこれらの混合物から選択されるハロゲン化アルカン誘導体であり、この中でもＴＧ１３４ａ、ＴＧ２２７及びその混合物の噴射剤が好ましい。
本発明による噴射剤含有吸入エアロゾルは、有効成分を５質量％まで含んでいるとよい。本発明のエアロゾルは医薬有効成分を、例えば、0.002〜５質量％、0.01〜３質量％、0.015〜２質量％、0.1〜２質量％、0.5〜２質量％又は0.5〜１質量％含有する。本発明の粉末を対象として溶かすことにより適切な量の溶媒で、該当する有効成分濃度を有する吸入用エアロゾルを調製することができる。 Propellants for use in preparing the inhaled aerosols of the present invention are known in the art. From the group comprising hydrocarbon compounds such as n-propane, n-butane or isobutane and preferably halogenated hydrocarbon compounds such as chlorinated and fluorinated derivatives of methane, ethane, propane, butane, cyclopropane or cyclobutane Select an appropriate propellant. The propellants can be used alone or as a mixture thereof. Particularly preferred propellants are TG11, TG12, TG134a (1,1,1,2-tetrafluoroethane), TG227 (1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropane) and mixtures thereof. Among these, halogenated alkane derivatives are selected, and among them, TG134a, TG227 and a mixture thereof are preferable.
The propellant-containing inhalation aerosol according to the present invention may contain up to 5% by mass of an active ingredient. The aerosol of the present invention contains a pharmaceutically active ingredient, for example, 0.002 to 5% by mass, 0.01 to 3% by mass, 0.015 to 2% by mass, 0.1 to 2% by mass, 0.5 to 2% by mass, or 0.5 to 1% by mass. By dissolving the powder of the present invention as a target, an aerosol for inhalation having an appropriate active ingredient concentration can be prepared with an appropriate amount of solvent.

前述の本発明による噴射剤含有吸入用エアロゾルは、従来の技術において公知である吸入器(定量噴霧吸入器（ＭＤＩ））を用いて投与することもできる。吸入器「ベントリン（登録商標）」（ベントリンファーマシー社）、あるいは米国特許5,32,094号又は米国特許第5,672,581号記載の吸入器を参照できる。従って、本発明の別の態様としては、噴射剤含有エアロゾルを投与するのに適した１種以上の吸入器と組み合わせた、前記記載の噴射剤含有エアロゾル状態の医薬品に関する。更に、本発明は、本発明による前記の噴射剤含有エアロゾルを収容することを特徴とする吸入器に関するものである。
さらに、本発明は、好適な吸入器で使用するための適切なバルブが設けられていることによって使用でき、かつ、本発明による上記噴射剤含有吸入エアロゾルを収容する、カートリッジに関する。好適なカートリッジ、さらには本発明による噴射剤含有吸入エアロゾルをカートリッジに充填する方法については、従来技術から公知である。 The aforementioned propellant-containing inhalation aerosol according to the present invention can also be administered using an inhaler (metered dose inhaler (MDI)) known in the prior art. Reference may be made to the inhaler “Ventolin®” (Bentolin Pharmacy) or the inhaler described in US Pat. No. 5,32,094 or US Pat. No. 5,672,581. Accordingly, another aspect of the invention relates to a propellant-containing aerosol pharmaceutical as described above in combination with one or more inhalers suitable for administering a propellant-containing aerosol. Furthermore, the present invention relates to an inhaler characterized by containing the propellant-containing aerosol according to the present invention.
Furthermore, the invention relates to a cartridge which can be used by being provided with a suitable valve for use with a suitable inhaler and which contains the propellant-containing inhalation aerosol according to the invention. Suitable cartridges, as well as methods for filling cartridges with the propellant-containing inhalation aerosol according to the invention are known from the prior art.

また、本発明の粉末は、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液に再構成することもできる。該噴射剤を含有しない吸入溶液は、例えば水性溶媒又はアルコール系溶媒、好ましくはエタノール性溶媒を含有するが、必要に応じてエタノール性溶媒と水性溶媒とを混合してもよい。水性溶媒／エタノール性溶媒との混合物の場合、水に対するエタノールの相対的割合は限定されないが、上限はエタノール70容量％までが好ましく、特に60容量％までが好ましい。残りの容量％を水にする。本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液は、補助溶剤及び／又は前記記載のような他のアジュバントと混合してもよい。例えば、ヒドロキシル基又は他の極性基を含む補助溶剤で、例えばアルコール類、特にイソプロピルアルコール、グリコール類、特にプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、グリコールエーテル、グリセロール、ポリオキシエチレンアルコール類及びポリオキシエチレン脂肪酸類等を使うことができる。本件では、アジュバント及び添加剤は、それ自体は活性物質ではないが、薬理学的に好適な溶媒中で１種以上の活性物質と共に処方することができ、活性物質を含む調剤の特性を改善することができる、薬理学的に許容される任意の物質を意味すると解される。これらの物質は、一般に、又は、求める治療において、顕著な薬理的作用を持たないか、少なくとも望ましくない薬理作用を有していないことが好ましい。アジュバント及び添加剤としては、例えば、大豆レシチン、オレイン酸、ポリソルベート等のソルビタンエステル類、ポリビニルピロリドンなどの界面活性剤、他の安定剤、錯化剤、医薬製剤最終製品の使用可能期間を保証又は延長する酸化防止剤及び／又は防腐剤とともに、香味付与剤、ビタミン類及び／又は公知の他の添加剤が挙げられる。また、添加剤には、例えば塩化ナトリウム等の薬理学的に無害な塩が等張剤として含まれる。好ましいアジュバントとしては、例えば、ｐＨ値の調整に使用していなければアスコルビン酸、さらにはビタミンＡ、ビタミンＥ、トコフェロール及び類似のビタミン類又は人体組織内で産生するプロビタミン類等の酸化防止剤が挙げられる。防腐剤を使用して細菌による汚染から該処方物を保護することができる。この分野で公知の防腐剤が適しており、特に従来技術において公知の濃度の塩化セチルピリジニウム、塩化ベンザルコニウム又は安息香酸もしくは安息香酸ナトリウム等の安息香酸塩である。上記防腐剤は、好ましくは50mg/100mlまで、特に好ましくは５〜20mg/100mlの範囲の濃度で含有されることが好ましい。従って、本発明は、本発明による粉末を再構成することにより調製した噴射剤を含有しない吸入エアロゾルに関する。 The powder of the present invention can also be reconstituted into an inhalation solution or suspension containing no propellant. The inhalation solution not containing the propellant contains, for example, an aqueous solvent or an alcohol solvent, preferably an ethanol solvent, but an ethanol solvent and an aqueous solvent may be mixed as necessary. In the case of a mixture of an aqueous solvent / ethanolic solvent, the relative ratio of ethanol to water is not limited, but the upper limit is preferably up to 70% by volume of ethanol, particularly preferably up to 60% by volume. Make the remaining volume% water. The propellant-free inhalation solution according to the invention may be mixed with cosolvents and / or other adjuvants as described above. For example, co-solvents containing hydroxyl groups or other polar groups such as alcohols, in particular isopropyl alcohol, glycols, in particular propylene glycol, polyethylene glycol, polypropylene glycol, glycol ether, glycerol, polyoxyethylene alcohols and polyoxyethylene Fatty acids can be used. In this case, adjuvants and additives are not active substances per se, but can be formulated with one or more active substances in a pharmacologically suitable solvent, improving the properties of formulations containing active substances It is understood to mean any pharmacologically acceptable substance that can be. These substances generally preferably have no significant pharmacological action or at least no undesirable pharmacological action in the desired treatment. Adjuvants and additives include, for example, soy lecithin, oleic acid, sorbitan esters such as polysorbate, surfactants such as polyvinyl pyrrolidone, other stabilizers, complexing agents, guaranteeing the usable period of the final product of pharmaceutical preparations or Along with antioxidants and / or preservatives that extend, flavoring agents, vitamins and / or other known additives may be mentioned. Additives also include pharmacologically harmless salts such as sodium chloride as isotonic agents. Preferred adjuvants include, for example, antioxidants such as ascorbic acid, vitamin A, vitamin E, tocopherol and similar vitamins or provitamins produced in human tissues if not used for adjusting the pH value. Can be mentioned. Preservatives can be used to protect the formulation from bacterial contamination. Preservatives known in this field are suitable, in particular cetylpyridinium chloride, benzalkonium chloride or benzoates such as benzoic acid or sodium benzoate, known in the prior art. The preservative is preferably contained in a concentration of up to 50 mg / 100 ml, particularly preferably in the range of 5 to 20 mg / 100 ml. The invention therefore relates to an inhalation aerosol containing no propellant prepared by reconstituting a powder according to the invention.

本発明の噴射剤を含有しない吸入溶液の投与には、特に、治療に必要な投与量の液体調剤少量を数秒間以内で霧状にして吸入器での使用に適した治療用エアロゾルを生成することができるタイプの吸入器がとりわけ好適である。本発明の範囲においては、100μL未満、好ましくは50μL未満、より好ましくは10〜30μLの量の有効成分溶液を、１回のストロークで霧化し、平均粒径が20μm未満、好ましくは10μm未満のエアロゾルを形成することができ、エアロゾルの吸入可能な部分が治療上の有効量に相当するように形成することのできる噴霧器が好ましい。
吸入器での投与用の液状医薬品の定量を噴射剤無しで投与するタイプの装置については、例えば国際特許出願ＷＯ91/14468及びＷＯ97/12687（特に図６ａ及び図６ｂ参照）に詳しく記載されている。
本発明の範囲において、ＷＯ97/12687の該当する図６ａ及び図６ｂならびに明細書中の関連箇所を含み、本発明に特別に引用するものである。また、本出願に記載の噴霧器（装置）は、「Respimat（登録商標）」（ベーリンガーインゲルハイムファーマ社）という名称でも知られている。この装置は円筒形に近い形状で、長さ９cm未満〜15cm及び幅２〜４cmの取り扱い易いサイズであることから、患者は常に携行することができる。噴霧器は、高圧下で小さなノズルから所定量の医薬品調剤を噴霧して吸入可能なエアロゾルを生成するものである。
好ましい噴霧器は、上部ハウジング部と、ポンプハウジングと、ノズルと、ブロック引張り機構と、バネハウジングと、バネと、保存容器から基本的に構成され、 For the administration of the propellant-free inhalation solution according to the invention, in particular, a small amount of liquid preparation of the dose required for treatment is atomized within a few seconds to produce a therapeutic aerosol suitable for use in an inhaler. A type of inhaler that can be used is particularly suitable. Within the scope of the present invention, an active ingredient solution of less than 100 μL, preferably less than 50 μL, more preferably 10-30 μL is atomized in a single stroke and has an average particle size of less than 20 μm, preferably less than 10 μm. A nebulizer that can be formed such that the inhalable portion of the aerosol represents a therapeutically effective amount is preferred.
Devices of the type that dispense liquid medicines for administration in an inhaler without a propellant are described in detail, for example, in international patent applications WO 91/14468 and WO 97/12687 (see in particular FIGS. 6a and 6b). .
In the scope of the present invention, it is specifically referred to the present invention, including the corresponding FIGS. 6a and 6b of WO 97/12687 and the relevant parts in the description. The sprayer (apparatus) described in the present application is also known by the name “Respimat (registered trademark)” (Boehringer Ingelheim Pharma). Since this device has a shape close to a cylindrical shape and is easy to handle with a length of less than 9 cm to 15 cm and a width of 2 to 4 cm, the patient can always carry it. A nebulizer sprays a predetermined amount of a pharmaceutical preparation from a small nozzle under high pressure to generate an inhalable aerosol.
A preferred sprayer basically consists of an upper housing part, a pump housing, a nozzle, a block pulling mechanism, a spring housing, a spring and a storage container.

− 上部ハウジング部の所定の位置に固定され、その一端にはノズル又はノズル装置を備えたノズル本体を搭載するポンプハウジング、
− バルブ本体を備えた中空ピストン、
− 内部で中空ピストンが所定位置に固定され、上部ハウジング部に配置された動力取り出しフランジ、
− 上部ハウジング部に配置されたブロック引張り機構、
− 内部にバネを収容し、ピボット軸受けによって上部ハウジング部に回動可能に取り付けられているバネハウジング、
− バネハウジング上に軸方向に挿入されている下部ハウジング部、とによって特徴づけられる。
バルブ本体を備えた中空ピストンは、ＷＯ97/12687に開示の装置に対応する。中空ピストンは、ポンプハウジングのシリンダ内に一部が突き出ており、シリンダ内を軸方向に移動可能である。本発明の範囲において、図１乃至図４、特に図３及び明細書の関連部分を引用する。バルブ本体を備えた中空ピストンは、バネの作動時に高圧がかかる端部において５〜60Mpa（約50〜600bar）、好ましくは10〜60Mpa（約100〜600bar）の圧力を流体、即ち定量の有効成分溶液に対してかける。10〜50μLの量が好ましい。一ストロークにつき、特に好ましくは10〜20μLで、15μLがとりわけ好ましい。 A pump housing which is fixed in place on the upper housing part and carries a nozzle body with a nozzle or nozzle device at one end thereof;
-A hollow piston with a valve body,
-A power take-off flange located inside the upper housing part, with the hollow piston fixed in place inside,
-A block pulling mechanism arranged in the upper housing part,
-A spring housing which houses a spring inside and is pivotally attached to the upper housing part by means of a pivot bearing;
-Characterized by a lower housing part inserted axially on the spring housing.
A hollow piston with a valve body corresponds to the device disclosed in WO 97/12687. The hollow piston partially protrudes into the cylinder of the pump housing, and can move in the cylinder in the axial direction. Within the scope of the present invention, reference is made to FIGS. 1 to 4, in particular FIG. 3 and relevant parts of the specification. The hollow piston with valve body is a fluid, i.e. the active ingredient for quantitative determination, at the end where high pressure is applied when the spring is activated, at a pressure of 5-60 Mpa (about 50-600 bar), preferably 10-60 Mpa (about 100-600 bar). Apply to solution. An amount of 10-50 μL is preferred. It is particularly preferably 10 to 20 μL per stroke, and 15 μL is particularly preferable.

バルブ本体は、好ましくは中空ピストン端部に配置され、ノズル本体の方に向く。
ノズル本体内のノズルは微細構造を有することが好ましく、即ち、マイクロテクノロジーによって作製されたものであることが好ましい。微細構造を有するノズル本体については、例えばＷＯ94/07607に開示されており、そこの開示されている内容、特に図１及びその関連説明について本願明細書に引用する。ノズル本体は、例えば、互いに強固に結合した２枚のガラス製及び／又はシリコン製シートからなり、２枚のうちの少なくとも１枚には、１本以上の微細構造により作製された溝があり、この溝によってノズル入口側がノズル出口側と連結している。ノズル出口側には、深さ２〜10μmで幅５〜15μm、好ましくは深さが4.5〜6.5μmで、長さが７〜９μmの少なくとも１個の円形および非円形開口部がある。ノズル開口部が複数個、好ましくは２個ある場合、ノズル本体内におけるノズルの噴射方向は互いに平行に延びてもよいし、あるいはノズル開口方向に互いに対して傾斜している。出口側に少なくとも２つのノズル開口部を有するノズル本体において、噴射方向は、20〜160°の角度で互いに対して傾いていてもよい。角度は、好ましくは60〜150°が好ましく、特に好ましくは80〜100°の角度である。ノズル開口部は、好ましくは10〜200μm、より好ましくは10〜100μm、特に好ましくは30〜70μmの間隔をおいて配置される。50μmの間隔が最も好ましい。
したがって、噴射方向はノズル開口部近傍で収束する。 The valve body is preferably arranged at the end of the hollow piston and faces towards the nozzle body.
The nozzles in the nozzle body preferably have a fine structure, i.e. are produced by microtechnology. A nozzle body having a fine structure is disclosed in, for example, WO94 / 07607, and the contents disclosed therein, in particular, FIG. 1 and the related description are cited in this specification. The nozzle body is composed of, for example, two glass and / or silicon sheets that are firmly bonded to each other, and at least one of the two sheets has a groove formed by one or more microstructures, This groove connects the nozzle inlet side with the nozzle outlet side. On the nozzle exit side, there is at least one circular and non-circular opening having a depth of 2 to 10 μm and a width of 5 to 15 μm, preferably a depth of 4.5 to 6.5 μm and a length of 7 to 9 μm. When there are a plurality of nozzle openings, preferably two, the nozzle injection directions in the nozzle body may extend parallel to each other, or are inclined with respect to each other in the nozzle opening direction. In a nozzle body having at least two nozzle openings on the outlet side, the injection directions may be inclined with respect to each other at an angle of 20 to 160 °. The angle is preferably 60 to 150 °, particularly preferably 80 to 100 °. The nozzle openings are preferably arranged at an interval of 10 to 200 μm, more preferably 10 to 100 μm, particularly preferably 30 to 70 μm. A spacing of 50 μm is most preferred.
Therefore, the injection direction converges near the nozzle opening.

液状医薬品調剤は、入口圧力600barまで、好ましくは200〜300barでノズル本体に突き当たり、ノズル開口部を通って霧化され吸入可能なエアロゾルになる。エアロゾルの好ましい粒径または液滴径は20μmまで、好ましくは３〜10μmである。
ブロック引張り機構は、力学的エネルギーを保存するためのバネ、好ましくは円筒状のネジ型圧縮バネを備える。このバネは弾性部材として動力取り出しフランジに作用するが、フランジの移動はブロック部材の位置によって決まる。この動力取り出しフランジの移動は、上端止め及び下端止め（stop）によって正確に定められている。上部ハウジング部が下部ハウジング部内のバネハウジングと反対に回転する際に発生する外部トルクによって、力を伝達する装置、例えば螺旋状スラストギア等を用いてバネが引っ張られるのが好ましい。この場合、上部ハウジング部及び動力取り出しフランジは、一条又は多条Ｖギアと組み込む。
絡まりのあるブロック表面を有するブロック部材は、動力取り出しフランジの回りにリング状に配置されている。ブロック部材は、例えば、固有の径方向に弾性変形するプラスチック製又は金属製のリングで構成される。このリングは、噴霧器の軸に対して直角をなす面に配置される。バネが引っ張られた後、ブロック部材のブロック面は動力取り出しフランジ通路内に滑動し、バネが緩まないようにする。ブロック部材はボタンによって作動する。この作動ボタンはブロック部材に接続又は連結している。ブロック引張り機構を作動させるには、作動ボタンをリング平面に対して平行に、好ましくは噴霧器内に移動させ、変形性リングをリング面において変形させる。ブロック引張り機構の設計詳細はＷＯ97/20590に記載されている。 The liquid pharmaceutical preparation hits the nozzle body at an inlet pressure of up to 600 bar, preferably 200-300 bar, and atomizes through the nozzle opening into an inhalable aerosol. The preferred particle size or droplet size of the aerosol is up to 20 μm, preferably 3-10 μm.
The block tensioning mechanism comprises a spring, preferably a cylindrical threaded compression spring, for storing mechanical energy. This spring acts as an elastic member on the power take-out flange, but the movement of the flange is determined by the position of the block member. The movement of the power take-off flange is precisely determined by the upper end stop and the lower end stop (stop). It is preferable that the spring is pulled by using an external torque generated when the upper housing portion rotates in the direction opposite to the spring housing in the lower housing portion, for example, using a device that transmits force, such as a helical thrust gear. In this case, the upper housing part and the power take-out flange are incorporated with a single or multi-strip V gear.
The block member having the block surface with the entanglement is arranged in a ring shape around the power take-out flange. The block member is formed of, for example, a plastic or metal ring that is elastically deformed in a specific radial direction. This ring is arranged in a plane perpendicular to the atomizer axis. After the spring is pulled, the block surface of the block member slides into the power take-off flange passage, preventing the spring from loosening. The blocking member is actuated by a button. This actuating button is connected or connected to the block member. To activate the block pulling mechanism, the actuation button is moved parallel to the ring plane, preferably into the sprayer, causing the deformable ring to deform at the ring surface. Details of the design of the block pulling mechanism are described in WO 97/20590.

下部ハウジングは、軸方向にバネハウジング上に滑り動かされ、軸受、スピンドル駆動装置及び流体貯蔵容器を収容する。
噴霧器を作動させている間、上部ハウジング部が下部ハウジング部と反対に回転し、それによって下部ハウジング部がバネハウジングを一緒に回転させる。結果として、バネは螺旋状スラストギアによって圧縮、引っ張られ、ブロック機構が自動的に嵌合する。回転角は360度分の整数度、例えば180度が好ましい。バネに張力がかかると同時に、上部ハウジング部における動力取り出し部が所定の距離だけ移動し、中空ピストンがポンプハウジング内のシリンダ内部に引き戻され、それによって、流体の一部が貯蔵容器から吸い出され、ノズル前方の高圧スペースに送りこまれる。
必要に応じて、噴霧する流体を収容する取替え可能な複数個の貯蔵容器を噴霧器に連続的に挿入して使用してもよい。貯蔵容器には本発明の水性エアロゾル調剤が収容される。
噴霧工程は作動ボタンを軽く押すことにより開始される。この場合、ブロック機構により駆動部用の通路が開けられる。バネに張力が負荷され、ポンプハウジングのシリンダ内にピストンが滑動する。流体は噴霧器のノズルから霧状態で放出される。
設計上の更なる詳細については、ＰＣＴ出願ＷＯ97/12683及びＷＯ97/20590に公開されており、これらの内容を本願明細書に引用する。 The lower housing is slid axially on the spring housing and houses the bearing, spindle drive and fluid reservoir.
While operating the sprayer, the upper housing part rotates opposite the lower housing part, which causes the lower housing part to rotate the spring housing together. As a result, the spring is compressed and pulled by the helical thrust gear, and the block mechanism is automatically fitted. The rotation angle is preferably an integer degree of 360 degrees, for example, 180 degrees. At the same time as the spring is tensioned, the power take-off in the upper housing part moves by a predetermined distance, and the hollow piston is pulled back into the cylinder inside the pump housing, so that part of the fluid is sucked out of the storage container. , Sent to the high pressure space in front of the nozzle.
If necessary, a plurality of replaceable storage containers containing the fluid to be sprayed may be inserted into the sprayer continuously and used. The storage container contains the aqueous aerosol preparation of the present invention.
The spraying process is started by lightly pressing the activation button. In this case, the passage for the drive unit is opened by the block mechanism. Tension is applied to the spring and the piston slides into the cylinder of the pump housing. The fluid is discharged in a fog state from the nozzle of the sprayer.
Further design details are published in PCT applications WO 97/12683 and WO 97/20590, the contents of which are hereby incorporated by reference.

噴霧器の構成部品は、その機能に適合する材料で作製される。噴霧器のハウジング、さらには機能上許されるならば他の部品も同様にプラスチック製が好ましく、例えば射出成型によって製造される。医療用途であるため、生理学的に安全な材料が用いられる。
ＷＯ97/12687の図６ａ／図６ｂは、その関連説明とともに再度本願明細書に引用されるもので、対応の噴霧器（「Respimat（登録商標）」）を示す。この噴霧器は、本発明による噴射剤を含まない吸入エアロゾルの投与にとりわけ適している。
ＷＯ97/12687の図６ａは、バネが引っ張られた状態の噴霧器の長手方向断面図であり、一方、ＷＯ97/12687の図６ｂは、バネが緩んだ状態の噴霧器の長手方向断面図である。上部ハウジング部（５１）はポンプハウジング（５２）を収容し、その端部には噴霧器ノズル用のホルダ（５３）が取付けられている。このホルダにはノズル本体（５４）及びフィルタ（５５）が配置されている。ブロック引張り機構の動力取り出しフランジ（５６）内に固定された中空ピストン（５７）は、ポンプハウジングのシリンダ内にその一部が突き出ている。中空ピストンは、その端部においてバルブ本体（５８）を担持する。中空ピストンは、シール（５９）によって封止されている。バネが緩んだときに、動力取り出しフランジを保持する止め（６０）が上部ハウジング部の中に設けられる。バネが引っ張られたときに、動力取り出しフランジを保持する止め（６１）が駆動フランジ上に設けられる。バネが引っ張られた後、ブロック部材（６２）は、上部ハウジング部内で止め（６１）と支持体（６３）との間を滑動する。作動ボタン（６４）はブロック部材に連結している。上部ハウジング部は、マウスピース（６５）で終端しており、マウスピースは差込み可能な保護キャップ（６６）により閉じられている。圧縮バネ（６８）を備えたバネハウジング（６７）は、バネ式の爪（６９）及びピボット軸受けによって上部ハウジング部に回動自在に取付けられている。下部ハウジング部（７０）は摺動してバネハウジングの上にかぶせられる。バネハウジング内部には、噴霧する流体（７２）用の取替え可能な貯蔵容器（７１）が配置される。貯蔵容器はストッパ（７３）で封止され、このストッパを通過して中空ピストンは貯蔵容器内に突き出し、その端部が流体中に浸漬される（有効成分溶液の供給）。機械的カウンタ用のスピンドル（７４）は、バネハウジングの外側に取付けられている。上部ハウジング部に面したスピンドルの端部には、駆動ピニオン（７５）が存在する。スライダ（７６）がスピンドル上に配置されている。 The nebulizer components are made of a material that is compatible with its function. The nebulizer housing and, if functionally permitted, other parts are likewise preferably made of plastic, for example by injection molding. Because of medical use, physiologically safe materials are used.
FIG. 6a / b of WO 97/12687, which is cited here again with its associated description, shows a corresponding nebulizer (“Respimat®”). This nebulizer is particularly suitable for the administration of a propellant-free inhalation aerosol according to the invention.
FIG. 6a of WO 97/12687 is a longitudinal section of the sprayer with the spring pulled, while FIG. 6b of WO 97/12687 is a longitudinal section of the sprayer with the spring relaxed. The upper housing part (51) accommodates the pump housing (52), and a holder (53) for the sprayer nozzle is attached to the end part. In this holder, a nozzle body (54) and a filter (55) are arranged. A part of the hollow piston (57) fixed in the power take-out flange (56) of the block pulling mechanism protrudes into the cylinder of the pump housing. The hollow piston carries a valve body (58) at its end. The hollow piston is sealed by a seal (59). A stop (60) is provided in the upper housing part that holds the power take-off flange when the spring is loosened. A stop (61) is provided on the drive flange that holds the power take-off flange when the spring is pulled. After the spring is pulled, the block member (62) slides between the stop (61) and the support (63) in the upper housing part. The actuating button (64) is connected to the block member. The upper housing part terminates with a mouthpiece (65), which is closed by a pluggable protective cap (66). A spring housing (67) including a compression spring (68) is rotatably attached to the upper housing portion by a spring-type claw (69) and a pivot bearing. The lower housing part (70) slides over the spring housing. Inside the spring housing is a replaceable storage container (71) for the fluid (72) to be sprayed. The storage container is sealed with a stopper (73), and through this stopper, the hollow piston protrudes into the storage container, and its end is immersed in the fluid (supply of the active ingredient solution). A mechanical counter spindle (74) is mounted on the outside of the spring housing. There is a drive pinion (75) at the end of the spindle facing the upper housing part. A slider (76) is disposed on the spindle.

本発明の調剤を、前記記載の方法（「Respimat（登録商標）」）を用いて噴霧する場合、吸入器の全作動（ストローク）の少なくとも97％、好ましくは少なくとも98％の段階で送達される質量が、許容範囲最大25％、好ましくは20％を有する規定量に相当するとよい。ストローク１回あたり、規定質量として調剤５〜30mg、特に好ましくは５〜20mgが放出されることが好ましい。
上記以外の吸入器、例えば、ジェット流吸入器又は他の据え置き型噴霧器等を使って、本発明の調剤を噴霧化してもよい。
したがって、本発明の更なる態様は、上記のような噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、この調剤の投与に適した装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」と組み合わせた、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品に関する。好ましくは、本発明は、本発明の粉末の１種を含有する、噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液であって、「Respimat（登録商標）」という名称で公知の装置と組み合わせた吸入溶液又は懸濁液に関する。さらに本発明は、前記吸入用の装置、好ましくは「Respimat（登録商標）」であって、前記記載の噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液を収容していることを特徴とする、前記吸入用装置に関する。
本願明細書で前記記載の本発明による粉末１種を含有するの吸入溶液を、特有の市販可能な形態にしているものが、好ましいことに本発明と合致する。 When the formulation of the present invention is nebulized using the method described above (“Respimat®”), it is delivered at a stage that is at least 97%, preferably at least 98% of the total actuation (stroke) of the inhaler The mass may correspond to a defined amount having an acceptable range up to 25%, preferably 20%. It is preferable that 5 to 30 mg, particularly preferably 5 to 20 mg of the preparation is released as a specified mass per one stroke.
The preparation of the present invention may be nebulized using an inhaler other than the above, for example, a jet flow inhaler or other stationary atomizer.
Accordingly, a further aspect of the present invention is a medicament in the form of an inhalation solution or suspension which does not contain a propellant as described above and is suitable for administration of this preparation, preferably “Respimat®”. Inhalable solution or suspension containing no propellant in combination with Preferably, the present invention is a propellant-free inhalation solution or suspension containing one of the powders of the present invention, inhalation in combination with a device known under the name “Respimat®” It relates to a solution or suspension. Furthermore, the present invention is an inhalation device, preferably “Respimat®”, characterized in that it contains an inhalation solution or suspension containing no propellant as described above, The present invention relates to an inhalation device.
It is preferably consistent with the present invention that the inhalation solution containing one of the powders according to the present invention as described herein above is in a unique commercially available form.

本発明による噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液は、「Respimat（登録商標）」で投与するために上記記載のごとく想定した溶液及び懸濁液とともに、濃縮物又は直ぐに使用できる無菌吸入溶液又は懸濁液として使用することもできる。直ぐに使用可能な調剤は、例えば等張性の調理用食塩水を添加することによって濃縮物から調製できる。無菌の直ぐに使用できる製剤は、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いて吸入性エアロゾルを生成する動力駆動型の据付タイプ又は持運び可能な噴霧器を使用して投与することができる。
したがって、本発明の別の態様は、前記記載のような噴射剤を含有しない吸入溶液又は懸濁液状態の医薬品であって、これを投与するのに適した装置と組み合わせて濃縮物又は直ぐに使用可能な無菌調剤として使用される医薬品であって、該装置が、ベンチュリの原理又は他の原理にしたがって超音波又は圧縮空気を用いて吸入性エアロゾルを生成する、動力駆動式の据付型又は持運び可能な噴霧器を指すことを特徴とする。
吸入器内の再構成したエアロゾルを投与するのに適した噴霧器として、他には「AERx（商標）」（Aradigm社）、「Ultravent（登録商標）」（Mallinkrodt社）及び「Aconll（登録商標）」（Maquest Medical Products社）が挙げられる。 The propellant-free inhalation solution or suspension according to the present invention is a concentrate or a ready-to-use aseptic inhalation solution together with the solution and suspension envisaged as described above for administration in “Respimat®” Alternatively, it can be used as a suspension. Ready-to-use preparations can be prepared from the concentrate, for example by adding isotonic cooking saline. Sterile ready-to-use formulations should be administered using a power-driven installation type or portable nebulizer that produces inhalable aerosols using ultrasound or compressed air according to the Venturi principle or other principles Can do.
Accordingly, another aspect of the present invention is a medicament in the form of an inhalation solution or suspension that does not contain a propellant as described above and is used in a concentrate or immediately in combination with a device suitable for administering it. A medicinal product used as a possible sterile preparation, wherein the device produces an inhalable aerosol using ultrasound or compressed air according to the Venturi principle or other principles It points to the possible atomizer.
Other nebulizers suitable for administering the reconstituted aerosol in the inhaler include “AERx ™” (Aradigm), “Ultravent ™” (Mallinkrodt) and “Aconll ™”. (Maquest Medical Products).

（実施形態例）
（材料と方法）
材料
IgG1として、ベーリンガーインゲルハイム社（ドイツ）の分子量約148kDaのヒト化単クローン抗体を使用した。この抗体はマウス抗体由来であり、マウス抗体の相補性決定領域をヒト抗体構造に移したものである。ヒト抗体分95％とマウス抗体分５％のキメラ抗体が産生された。この抗体はマウスの骨髄腫細胞株で発現した。十字流精密濾過（tangential flow microfiltration）で細胞を取り除き、細胞が除かれた溶液をクロマトグラフィーの様々な方法で精製する。さらに、ヌクレアーゼ処理、低ｐＨ値での処理及びナノ濾過の工程を行う。抗体含有バルク溶液は、緩衝剤として25mMヒスチジンと1.6mMグリシンを含み、この溶液を、ダイアフィルトレーションにより約100mg/mlまで濃縮して噴霧乾燥用溶液を調製した。噴霧溶液を調製するためのバルクには、凝集体が0.4〜0.8％含まれていた。最終製品としての薬剤は２〜８℃で少なくとも２年間は保存することができる。「乳果オリゴ（登録商標）LS55P」、「乳果オリゴ（登録商標）LS90P」、「カップリングシュガー（登録商標）」及び「カップリングシュガーＳ（登録商標）」は株式会社林原商事（日本）から入手した。サッカロース、ラクトース、マンニトール、ラフィノース、ヒドロキシエチルデンプン及びＬ−イソロイシンは、シグマアルドリッチケミカル社（ドイツ）から入手した。トレハロースはゲオルグ・ブロイヤー社（ドイツ）から調達した。トリイソロイシンはIris Biotech社（ドイツ）から入手した。卵白リゾチーム（135500U/mg）は、SERVA Electrophoresis社（ドイツ）から入手した。合成の鮭カルシトニン（カルシトニン）はBiotrend Chemikalien社（ドイツ）から入手した。 (Example embodiment)
(Materials and methods)
material
As IgG1, a humanized monoclonal antibody having a molecular weight of about 148 kDa from Boehringer Ingelheim (Germany) was used. This antibody is derived from a mouse antibody, and the complementarity determining region of the mouse antibody is transferred to a human antibody structure. A chimeric antibody with 95% human antibody and 5% mouse antibody was produced. This antibody was expressed in a mouse myeloma cell line. Cells are removed by tangential flow microfiltration and the depleted solution is purified by various chromatographic methods. Furthermore, a nuclease treatment, a treatment at a low pH value, and a nanofiltration step are performed. The antibody-containing bulk solution contained 25 mM histidine and 1.6 mM glycine as buffers, and this solution was concentrated to about 100 mg / ml by diafiltration to prepare a spray drying solution. The bulk for preparing the spray solution contained 0.4-0.8% aggregates. The final drug product can be stored at 2-8 ° C. for at least 2 years. "Fruit Oligo (registered trademark) LS55P", "Wolf Oligo (registered trademark) LS90P", "Coupling Sugar (registered trademark)" and "Coupling Sugar S (registered trademark)" are Hayashibara Corporation (Japan) Obtained from Saccharose, lactose, mannitol, raffinose, hydroxyethyl starch and L-isoleucine were obtained from Sigma-Aldrich Chemical Company (Germany). Trehalose was procured from Georg Breuer (Germany). Triisoleucine was obtained from Iris Biotech (Germany). Egg white lysozyme (135500 U / mg) was obtained from SERVA Electrophoresis (Germany). Synthetic salmon calcitonin (calcitonin) was obtained from Biotrend Chemikalien (Germany).

ビュッヒＢ−２９０による噴霧乾燥
ビュッヒラボテクニック社製のビュッヒミニスプレードライヤーB-290を用いて噴霧乾燥を行った。基本的には、「Spray Drying Handbook」（５版）、K. Masters、John Wiley and Sons社、NY、NY（1991）に記載の説明にしたがって調剤の噴霧乾燥を行った。
このスプレードライヤーは、加熱系、フィルター、アスピレータ、乾燥系、サイクロン、入口温度及び出口温度を測定する温度センサー及び回収容器で構成されている。蠕動ポンプを用いて噴霧用溶液を２流体ノズル（two-substance nozzle）にくみ上げる。ノズルでは、圧縮空気を用いて溶液を霧化して小滴とする。温めた空気を使って噴霧塔で乾燥を行うが、この温めた空気はアスピレータを使って連続的な流入法で噴霧塔に吸引する。サイクロンを通過させた後、生成物を回収容器に回収する。
２種の異なるサイクロンを使用した。
− サイクロンＩ：ビュッヒサイクロン（シリアルナンバー4189）
− サイクロンII：ビュッヒ高性能サイクロン（シリアルナンバー46369）
噴霧した溶液の固形分は、50〜600ml中10％（質量／容積）、3.33％、2.00％であった。入口温度はおよそ170〜185℃、液体供給速度は約３〜3.33ml／分、アスピレータ流量は約36.8〜38.3m³／時、噴霧空気流量は約0.67m³／時、1.05m³／時及び1.74m³／時で、その結果、出口温度は約80〜95℃になった。 Spray drying with Büch B-290 Spray drying was carried out using a Büch Mini Spray Dryer B-290 manufactured by Büch Lab Technics. Basically, the formulations were spray dried according to the description in “Spray Drying Handbook” (5th edition), K. Masters, John Wiley and Sons, NY, NY (1991).
This spray dryer includes a heating system, a filter, an aspirator, a drying system, a cyclone, a temperature sensor for measuring an inlet temperature and an outlet temperature, and a recovery container. Using a peristaltic pump, pump the spray solution into a two-substance nozzle. In the nozzle, the solution is atomized into small droplets using compressed air. Drying is performed in the spray tower using warm air, and this warm air is sucked into the spray tower by a continuous inflow method using an aspirator. After passing the cyclone, the product is collected in a collection container.
Two different cyclones were used.
-Cyclone I: Büch Cyclone (serial number 4189)
-Cyclone II: Büch high performance cyclone (serial number 46369)
The solid content of the sprayed solution was 10% (mass / volume), 3.33%, 2.00% in 50-600 ml. The inlet temperature is about one hundred seventy to one hundred eighty-five ° C., liquid feed rate of about 3～3.33Ml / min, about 36.8~38.3m ³ / when the aspirator flow rate, atomizing air flow rate of about 0.67 m ³ / time, 1.05 m ³ / h and At 1.74 m ³ / hr, the resulting outlet temperature was about 80-95 ° C.

凍結乾燥
凍結乾燥は、Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen社製の凍結乾燥機Christ LPC-16/NT Epsilon 2-12 D型を使って行った。この凍結乾燥機は、乾燥室、昇華した溶媒を分離する凝縮器、真空形成用ポンプ及び電気系統で構成されている。コントロール表面温度と乾燥室の真空を介して、乾燥の調整を行う。
凍結乾燥用溶液の固形分は５％（質量／容積）であった。溶液を２Ｒバイアルに0.5mlずつ小分けにして、ねじ式凍結乾燥ストッパー（threaded freeze drying stoppers）で凍結乾燥器に入れた。最初は、-40℃ｘ30分で溶液を凍結させた。引き続き、0.11mbarで乾燥の主工程を３段階にわけて行った。第１段階が-40℃ｘ30時間、その次が-30℃ｘ８時間、最後が-16℃ｘ８時間である。その次の工程は後乾燥で、これは20℃ｘ20時間で0.001mbarで行った。最終工程として、最初に挿入しておいただけの凍結乾燥ストッパーでバイアルを自動的に封止した。こうして得られた凍結乾燥物は、バイアルの中にあるスパチュラで微粉化された。 Freeze-drying Freeze-drying was carried out using a freeze-dryer Christ LPC-16 / NT Epsilon 2-12 D manufactured by Martin Christ Gefriertrocknungsanlagen. This freeze dryer is composed of a drying chamber, a condenser for separating the sublimated solvent, a vacuum forming pump, and an electric system. The drying is adjusted through the control surface temperature and the drying chamber vacuum.
The solid content of the lyophilization solution was 5% (mass / volume). The solution was aliquoted 0.5 ml into 2R vials and placed in a lyophilizer with threaded freeze drying stoppers. Initially, the solution was frozen at −40 ° C. × 30 minutes. Subsequently, the main process of drying at 0.11 mbar was divided into three stages. The first stage is −40 ° C. × 30 hours, the next is −30 ° C. × 8 hours, and the last is −16 ° C. × 8 hours. The next step was post-drying, which was performed at 20 ° C. × 20 hours at 0.001 mbar. As a final step, the vial was automatically sealed with the lyophilization stopper that had been inserted first. The lyophilizate thus obtained was micronized with a spatula in a vial.

Ｘ線回折法（広角Ｘ線回折（ＷＡＸＳ））
乾燥後の試料の結晶化度を求めるために、Ｘ線回折計XRD3000TT（ザイフェルト社製（アヒレンスバーグ、ドイツ））を用いて、温度22℃に調整したチャンバー内で試料を調べた。Ｘ線管Ｃｕアノード、波長λ＝0.15418mmのCu-Kα線（ニッケル一次フィルタ）を、アノード電圧40kV及び電流強さ30mAにして操作した。試料皿を装置内に置いた後、試料を５〜40°の範囲にわたり各角度の測定時間を２秒にして走査速度２θ＝0.05°で測定した。
SC1000VデテクタにScanX-Rayflexアプリケーション、バージョン3.07デバイスXRD3000（Scan）とRayflexバージョン2.1、1996（analysis）を用いて、粉末ディフラクトグラムを記録した。
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）
ａ）IgG1タンパク質凝集体
再構成した粉末中のIgG1タンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1090で行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK3000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される緩衝液を脱水し、85％オルトリン酸でｐＨ6.8に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーション（Chemstation）を用いてクロマトグラムの評価を行った。 X-ray diffraction (Wide-angle X-ray diffraction (WAXS))
In order to determine the crystallinity of the sample after drying, the sample was examined in a chamber adjusted to a temperature of 22 ° C. using an X-ray diffractometer XRD3000TT (manufactured by Seifert (Achelensburg, Germany)). An X-ray tube Cu anode, a Cu—Kα ray (nickel primary filter) with a wavelength λ = 0.15418 mm was operated at an anode voltage of 40 kV and a current intensity of 30 mA. After placing the sample pan in the apparatus, the sample was measured at a scanning speed of 2θ = 0.05 ° over a range of 5 to 40 ° with a measurement time of each angle being 2 seconds.
Powder diffractograms were recorded on a SC1000V detector using the ScanX-Rayflex application, version 3.07 device XRD3000 (Scan) and Rayflex versions 2.1 and 1996 (analysis).
Size exclusion chromatography (SEC-HPLC)
a) IgG1 protein aggregates To quantify IgG1 protein aggregates in the reconstituted powder, SEC-HPLC was performed. SEC-HPLC was performed on Agilent's HP1090. A TSK3000SWXL column (300 x 7.8 mm) from Tosoh BioCep (Tosoh Bioscience, Stuttgart, Germany) was used for separation. As a fluid, a buffer solution composed of 0.1 M disodium hydrogenphosphate dihydrate and 0.1 M sodium sulfate was dehydrated and adjusted to pH 6.8 with 85% orthophosphoric acid. The amount of sample loaded was 25 μl at a protein concentration of 2-10 mg / ml. Protein was detected at 280 nm using an Agilent diode array detector. Chromatograms were evaluated using Agilent's software HP Chemstation.

ｂ）カルシトニンタンパク質凝集体
再構成した粉末中のカルシトニンタンパク質凝集体を定量化するために、SEC-HPLCを行った。SEC-HPLCはアジレント社のHP1100で行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.25硫酸ナトリウムで構成される、ｐＨ値がおよそ６の緩衝液を用いた（Windisch等、1997）。あるいは、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.1M硫酸ナトリウムで構成される脱水した緩衝液で、85％オルトリン酸でｐＨ6.8に調整したものを使うこともできる。投入した試料の量は、タンパク質濃度0.5〜２mg/mlで20μｌであった。アジレント社製ＵＶ検知器を用いて、210nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーションを用いてクロマトグラムを評価した。
ｃ）リゾチーム残留モノマー含有量
再構成したリゾチーム調剤中のリゾチーム残留モノマー含有量を定量化するために、改造したSEC-HPLC（van de Weert、2000）を行った。トーソー・バイオセップ（トーソー・バイオサイエンス、シュトットガルト、ドイツ）のTSK2000SWXLカラム（300 x 7.8mm）を分離用として用いた。流体として、0.1Mリン酸水素ニナトリウムニ水和物と0.2M塩化ナトリウムで構成される緩衝液を、85％オルトリン酸でｐＨ7.0に調整した。投入した試料の量は、タンパク質濃度２〜10mg/mlで25μｌであった。アジレント社製ダイオードアレイ検知器を用いて、280nmでタンパク質を検出した。アジレント社製のソフトウェアＨＰケムステーションを用いてクロマトグラムの評価を行った。 b) Calcitonin protein aggregates SEC-HPLC was performed to quantify calcitonin protein aggregates in the reconstituted powder. SEC-HPLC was performed on Agilent HP1100. A TSK2000SWXL column (300 x 7.8 mm) from Tosoh BioCep (Tosoh Bioscience, Stuttgart, Germany) was used for separation. As the fluid, a buffer solution composed of 0.25 sodium sulfate and having a pH value of approximately 6 was used (Windisch et al., 1997). Alternatively, a dehydrated buffer composed of 0.1 M disodium hydrogenphosphate dihydrate and 0.1 M sodium sulfate, adjusted to pH 6.8 with 85% orthophosphoric acid, can be used. The amount of sample loaded was 20 μl at a protein concentration of 0.5-2 mg / ml. Protein was detected at 210 nm using an Agilent UV detector. Chromatograms were evaluated using an Agilent software HP ChemStation.
c) Lysozyme residual monomer content A modified SEC-HPLC (van de Weert, 2000) was performed to quantify the lysozyme residual monomer content in the reconstituted lysozyme preparation. A TSK2000SWXL column (300 x 7.8 mm) from Tosoh BioCep (Tosoh Bioscience, Stuttgart, Germany) was used for separation. As a fluid, a buffer composed of 0.1M disodium hydrogenphosphate dihydrate and 0.2M sodium chloride was adjusted to pH 7.0 with 85% orthophosphoric acid. The amount of sample loaded was 25 μl at a protein concentration of 2-10 mg / ml. Protein was detected at 280 nm using an Agilent diode array detector. Chromatograms were evaluated using a software HP ChemStation manufactured by Agilent.

調剤の評価として、残留可溶性モノマーを下記の方法で定量化した。濃度2.5mg/ml、5.0mg/ml及び10mg/mlのリゾチーム標準溶液を使って、最初に検量線を得た。その後、評価した標準溶液の相当するリゾチーム濃度との相関からモノマーピークのＡＵＣを考察した。
評価した様々なリゾチーム調剤における残留モノマー含有量は、検量線を基にして算出した。調剤の残留モノマー含有量が高くなるほどタンパク質安定性は向上する。
粒径の測定（ＭＭＤ）
体積平均径（ＭＭＤ）又は平均粒径は、Sympatech社製（クラウスタール-ツェラーフェルト、ドイツ）のSympatech Helosを用いて測定した。測定原理は、ヘリウムネオンレーザーを用いたレーザー回折に基づく。１〜３mgの粉末を空気圧２barで分散させ、フーリエレンズ（50mm）の手前でレーザー平行光を通過させた。フラウンホーファーモデルを用いて粒径分布を評価した。１種の粉末について２回の測定を行った。 As an evaluation of the preparation, the residual soluble monomer was quantified by the following method. Calibration curves were first obtained using lysozyme standard solutions at concentrations of 2.5 mg / ml, 5.0 mg / ml and 10 mg / ml. Thereafter, the AUC of the monomer peak was considered from the correlation with the corresponding lysozyme concentration of the evaluated standard solution.
The residual monomer content in the various lysozyme preparations evaluated was calculated based on a calibration curve. The higher the residual monomer content of the formulation, the better the protein stability.
Particle size measurement (MMD)
Volume average diameter (MMD) or average particle diameter was measured using Sympatech Helos from Sympatech (Klaustal-Zellerfeld, Germany). The measurement principle is based on laser diffraction using a helium neon laser. 1 to 3 mg of powder was dispersed at an air pressure of 2 bar, and laser parallel light was passed in front of a Fourier lens (50 mm). The particle size distribution was evaluated using the Fraunhofer model. Two measurements were performed on one type of powder.

空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び細粒分（ＦＰＦ）
12〜18mgの粉末をハードゼラチンカプセル（サイズ３号）にそれぞれ充填し、ハンディヘラー（ベーリンガーインゲルハイム社の粉末吸入器）に導入したものを測定に使用した。アダプターを使ってハンディヘラーをＵＳＰ／ＥＰインパクターインレットののど部に接続した。流速39.0リットル/分、吸入時間6.15秒で粉末を導入した。空気処理量は外部コントロールパネルで調整した。それぞれの粉末について、少なくとも３個のカプセルを測定した。
インパクターインレット3306と組み合わせてTSI社（米国、ミネソタ州）のAPS3321を同時に使い、粒子の飛行時間を求めることにより空気動力学的粒径（体積平均空気動力学的粒径、ＭＭＡＤ）を、また、シングルステージインパクター（流速39リットル／分で有効カットオフ粒径5.0μｍ）により細粒分（ＦＰＦ）を求めた。粉末は、ＥＰ／ＵＳＰ準拠ののど部又は試料誘導ポートをとおり細い毛管へ移動するが、ここで、等速サンプリングできる条件で、飛行時間の測定をするために粉末量の0.2％を採取する。飛行時間は、毛管２本のレーザー光線を通り抜けることで測定するが、このレーザー光線は光の壁として特定の距離の飛行時間を検出する。得られた結果は数値的分布であり、これをさらに体積分布に変換し、体積平均空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）に変換する。
毛管を通った粉末母集団のうちの99.8％がシングルステージインパクターで分離される。5.0μｍよりも大きい画分が、体積慣性（mass inertia）の結果としてインパクター内の衝突面上で分離する。細粒分（ＦＰＦ）は空気の流れに従い、最終的にはデプスフィルター中で分離する。細粒分は重量測定で求める。使用した粉末の総量、即ち、カプセル１個あたりの秤量した粉末に対するフィルター中で分取した粉末画分から細粒分を算出する。 Aerodynamic particle size (MMAD) and fine fraction (FPF)
12-18 mg of powder was filled in hard gelatin capsules (size 3) and introduced into Handy Heller (Boehringer Ingelheim's powder inhaler) for measurement. An adapter was used to connect the handy heller to the USP / EP impactor inlet throat. The powder was introduced at a flow rate of 39.0 liters / minute and an inhalation time of 6.15 seconds. The air throughput was adjusted with an external control panel. At least 3 capsules were measured for each powder.
Using the APS3321 from TSI (Minnesota, USA) in combination with the impactor inlet 3306, the aerodynamic particle size (volume average aerodynamic particle size, MMAD) The fine particle fraction (FPF) was determined by a single stage impactor (flow rate 39 liters / min and effective cut-off particle size 5.0 μm). The powder moves through the EP / USP compliant throat or sample guide port to a thin capillary tube, where 0.2% of the powder amount is taken for time-of-flight measurement under conditions that allow constant velocity sampling. The time of flight is measured by passing through two capillary laser beams, which detect the time of flight at a specific distance as a wall of light. The result obtained is a numerical distribution, which is further converted into a volume distribution and converted into a volume average aerodynamic particle size (MMAD).
99.8% of the powder population that passed through the capillaries is separated with a single stage impactor. Fractions larger than 5.0 μm separate on the impact surface in the impactor as a result of mass inertia. Fine fraction (FPF) follows the flow of air and is finally separated in a depth filter. The fine particle content is determined by weight measurement. The fine particle fraction is calculated from the total amount of powder used, that is, the powder fraction fractionated in the filter with respect to the weighed powder per capsule.

残留水分量
乾燥後の製品の残留含水量を、電量滴定で求めた（703滴定レベルのメトローム737KF電量計（メトローム社、ドイツ））。残留含水量を求めるのに、粉末をメタノール（ハイドラナール−乾燥メタノール、VWR/Merck Eurolab社製）に溶解又は分散させた。メトローム電量計の測定溶液（ハイドラナール−クーロマット液、VWR/Merck Eurolab社）を、測定開始時に調整した。即ち、測定溶液を滴定して含水量ゼロにした。試料を滴定セルに注入して測定した。
安定性の測定
粉末又は粉末に含まれるタンパク質の噴霧乾燥後の様々な安定性を調べた。製剤の安定性を測定するために、タンパク質凝集体のパーセンテージを測定単位で定めた。タンパク質だけの製剤、類似のトレハロース製剤、類似のラフィノース製剤、類似のサッカロース製剤、類似のサッカロース−ラクトース製剤又は類似のヒドロキシエチルデンプン製剤を参照用として、本発明に記載の革新的なアジュバンドと部分的に比較した。凝集体は、ＵＶ検出（ＤＡＤ）を用いて有効なサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＨＰＬＣ）で分析した。このため、前処理をした粉末を、まず最初に純水（ｐＨ６〜８）に溶かした。
− 強制的保存安定性：選択した製剤について、温度約40℃、相対湿度約75％において（40℃、75％ＲＨ）開放したガラスバイアルに入れ、開放状態で１週間保存した後の安定性を調べた。 Residual water content The residual water content of the dried product was determined by coulometric titration (703 titration level Metrohm 737KF coulometer (Metrohm, Germany)). In order to determine the residual water content, the powder was dissolved or dispersed in methanol (hydranal-dry methanol, manufactured by VWR / Merck Eurolab). The measurement solution of the Metrohm coulometer (Hydranal-Coulomat solution, VWR / Merck Eurolab) was adjusted at the start of measurement. That is, the measurement solution was titrated to make the water content zero. The sample was injected into the titration cell and measured.
Stability measurements Various stability after spray drying of the powder or protein contained in the powder was investigated. To measure the stability of the formulation, the percentage of protein aggregates was determined in units of measure. Innovative adjuvants and parts according to the present invention for reference only with protein-only formulations, similar trehalose formulations, similar raffinose formulations, similar saccharose formulations, similar saccharose-lactose formulations or similar hydroxyethyl starch formulations Compared. Aggregates were analyzed by effective size exclusion chromatography (SEC-HPLC) using UV detection (DAD). For this reason, the pretreated powder was first dissolved in pure water (pH 6-8).
-Forced storage stability: The stability of the selected formulation after storage for 1 week in an open glass vial at a temperature of about 40 ° C and a relative humidity of about 75% (40 ° C, 75% RH). Examined.

− 平衡化（equilibrated）保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約22℃、相対湿度50〜55％において開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（平衡化）。その後、ガラスバイアルを前記規定の条件下で封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後に安定性を調べた。
− 真空乾燥保存安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、温度約30℃、約0.15mbarでMemmert社製（ドイツ）の真空乾燥キャビネット内で開放したガラスバイアルに入れて１日保存した（真空乾燥）。その後、ガラスバイアルを真空乾燥キャビネットから取り出し、封止、ビード処理を行い、約40℃の乾燥状態で４週間保存した後の安定性を調べた。
− ３ヶ月安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルにいれて真空乾燥させた（上記参照）。窒素雰囲気下でガラスバイアルを封止、ビード処理し、３つの異なる温度、２〜８℃、25℃、40℃で保存した。１ヵ月後の粉末の安定性を調べた。
− ３ヶ月開放状態安定性：噴霧乾燥後の製剤を選択し、開放したガラスバイアルに入れて温度25℃、相対湿度約29％及び／又は43％でそれぞれ保存した。１ヶ月及び３ヵ月後の粉末の安定性を調べた。このうち幾つかの製剤については、粒子の飛行時間の測定により粉末の空気動力学的性能を求めた（前記参照）。 -Equilibrated storage stability: The formulation after spray drying was selected and stored for one day in an open glass vial at a temperature of about 22 ° C and a relative humidity of 50-55% (equilibration). Thereafter, the glass vial was sealed under the specified conditions, subjected to bead treatment, and stored in a dry state at about 40 ° C. for 4 weeks, and then the stability was examined.
-Vacuum drying storage stability: The formulation after spray drying was selected and stored for one day in a glass vial opened in a vacuum drying cabinet of Memmert (Germany) at a temperature of about 30 ° C and about 0.15 mbar (vacuum) Dry). Thereafter, the glass vial was taken out of the vacuum drying cabinet, sealed and beaded, and examined for stability after being stored in a dry state at about 40 ° C. for 4 weeks.
-3 month stability: The formulation after spray drying was selected and placed in an open glass vial and vacuum dried (see above). Glass vials were sealed and beaded under a nitrogen atmosphere and stored at three different temperatures, 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C. The stability of the powder after one month was examined.
-3 month open state stability: The formulations after spray drying were selected and stored in open glass vials at a temperature of 25 ° C and a relative humidity of about 29% and / or 43%, respectively. The stability of the powder after 1 month and 3 months was examined. For some of these formulations, the aerodynamic performance of the powder was determined by measuring the time of flight of the particles (see above).

実施例１
10％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で100mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は50mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約18.9％と18.2％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.8％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.2％であった。 Example 1
Spray drying of 10% (w / v) IgG1 formulation Pure IgG1 (see “Materials” section) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer was added to 100 mg / min with demineralized water (pH about 7.5). The mixture was diluted to ml and spray-dried as described above using Cyclone I with a spray air volume of about 0.67 m ³ / hour without any other adjuvant. The amount of solution was 50 ml. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state with a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solutions prepared by dissolving the powder was about 18.9% and 18.2%, respectively.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 11.8%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 13.2%.

3.33％(w/v)IgG1製剤の噴霧乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を脱塩水（ｐＨ約7.5）で33mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを入れずに、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥を行った。溶液の量は150mlであった。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約16.3％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約4.5％と約4.4％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約7.4％と約7.1％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約13.3％と約18.1％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.5％と約6.6％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約5.6％と約7.0％であった。 3.33% (w / v) spray drying of IgG1 formulation 33 mg of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer in demineralized water (pH about 7.5) The solution was spray-dried as described above using Cyclone I with a spray air volume of about 0.67 m ³ / hour without dilution with other adjuvants. The amount of solution was 150 ml. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 16.3%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.5% and about 4.4%, respectively.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the agglomerate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 7.4% and about 7.1%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 13.3% and about 18.1%, respectively.
When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C., the aggregate content of the solutions prepared by dissolving the powder was about 5.5% and about 6.6%, respectively.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C, the aggregate content of the solutions prepared by dissolving the powder was about 5.6% and about 7.0%, respectively.

９％(w/v)トレハロース及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのトレハロースを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。 Spray drying 9% (w / v) trehalose and 1% (w / v) IgG1-containing formulations
4.5 g of trehalose was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 12.6%.

3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.0％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約0.9％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.3％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.1％と約2.2％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して23.6％であった。 Spray drying of a formulation containing 3.00% (w / v) LS90P and 0.33% (w / v) IgG1
4.5 g of LS90P was dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.0%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.6% and about 0.9%, respectively.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the agglomerate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.8% and about 1.3%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.1% and about 2.2%, respectively.
The MMD of the powder was determined as described above.
The MMD of the powder after spray drying was 2.8 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 3.8 μm, and the FPF was 23.6% based on the powder capsule mass.

9.9％(w/v)LS55P及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.950gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.7％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.7％であった。 Spray drying 9.9% (w / v) LS55P and 0.1% (w / v) IgG1-containing formulations
4.950 g of LS55P was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 0.518 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.55 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 9.9% (w / v) adjuvant or matrix and 0.1% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.7%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.7%.

９％(w/v)LS55P及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.5gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。 Spray-drying a formulation containing 9% (w / v) LS55P and 1% (w / v) IgG1
4.5 g of LS55P was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.3%.
-After equilibration for 1 day, when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.8%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored for 4 weeks in a dry state at 40 ° C, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.4%.

６％(w/v)LS55P及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.0％であった。 Spray drying 6% (w / v) LS55P and 4% (w / v) IgG1-containing formulations
3.0 g of LS55P was dissolved in about 15 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 19.45 ml of pure IgG1 (see “Materials” section) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 6% (w / v) adjuvant or matrix and 4% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.0%.

４％(w/v)LS55P及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.0gのLS55Pを約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.9％であった。 Spray drying a formulation containing 4% (w / v) LS55P and 6% (w / v) IgG1
2.0 g of LS55P was dissolved in about 15 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 29.18 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer, dilute with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 4% (w / v) adjuvant or matrix and 6% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 6.9%.

2.5％(w/v)LS55P及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.25gのLS55Pを約10mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.1％であった。 Spray drying of formulations containing 2.5% (w / v) LS55P and 7.5% (w / v) IgG1
1.25 g of LS55P was dissolved in about 10 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 38.84 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.55 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 2.5% (w / v) adjuvant or matrix and 7.5% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.9%.
-After vacuum drying for 1 day, it was stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks. The aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 6.1%.

1.0％(w/v)LS55P及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.50gのLS55Pを約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.0％であった。 Spray drying of 1.0% (w / v) LS55P and 9.0% (w / v) IgG1-containing preparations
0.50 g of LS55P was dissolved in about 5 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 41.43 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.55 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 1.0% (w / v) adjuvant or matrix and 9.0% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 10.8%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 8.0%.

0.5％(w/v)LS55P及び9.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.25gのLS55Pを約2.5mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約46.21mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約0.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.7％であった。 Spray-drying a preparation containing 0.5% (w / v) LS55P and 9.5% (w / v) IgG1
0.25 g of LS55P was dissolved in about 2.5 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 46.21 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 0.5% (w / v) adjuvant or matrix and 9.5% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 13.7%.

3.00％(w/v)LS55P及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS55Pを約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約3.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して15.9％であった。 Spray drying of formulations containing 3.00% (w / v) LS55P and 0.33% (w / v) IgG1
9.0 g of LS55P was dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The resulting solution contains about 3.0% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and using Cyclone II, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.0%.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 2.9 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 4.3 μm, and the FPF was 15.9% with respect to the powder capsule mass.

9.9％(w/v)カップリングシュガー及び0.1％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.290gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.950gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約0.518mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約9.9％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.1％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約14.9％であった。 Spray drying 9.9% (w / v) coupling sugar and 0.1% (w / v) IgG1-containing formulations
6.290 g of coupling sugar-containing syrup (corresponding to 4.950 g of coupling sugar) was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 0.518 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.55 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 9.9% (w / v) adjuvant or matrix and 0.1% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 14.9%.

９％(w/v)カップリングシュガー及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.71gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.2％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。 Spray drying 9% (w / v) coupling sugar and 1% (w / v) IgG1-containing formulations
5.71 g of coupling sugar-containing syrup (corresponding to 4.5 g of coupling sugar) was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.9%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.2%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.1%.

６％(w/v)カップリングシュガー及び４％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
3.81gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー3.0gに相当）を約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約19.45mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約６％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと４％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量を約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.0％であった。 Spray drying 6% (w / v) coupling sugar and 4% (w / v) IgG1-containing formulations
3.81 g of coupling sugar-containing syrup (corresponding to 3.0 g of coupling sugar) was dissolved in about 25 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 19.45 ml of pure IgG1 (see “Materials” section) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 6% (w / v) adjuvant or matrix and 4% (w / v) protein, and using Cyclone I, the amount of sprayed air is about 0.67 m ³ / hour. And spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.0%.

４％(w/v)カップリングシュガー及び６％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
2.54gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー2.0gに相当）を約15mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約xmg/mlの約29.18mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約４％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと６％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約9.9％であった。 Spray drying a formulation containing 4% (w / v) coupling sugar and 6% (w / v) IgG1
A syrup containing 2.54 g of coupling sugar (corresponding to 2.0 g of coupling sugar) was dissolved in about 15 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 29.18 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about xmg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer, dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 4% (w / v) adjuvant or matrix and 6% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 9.9%.

2.5％(w/v)カップリングシュガー及び7.5％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.59gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.250gに相当）を約８mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約38.84mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約2.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと7.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約10.8％であった。 Spray drying of 2.5% (w / v) coupling sugar and 7.5% (w / v) IgG1-containing preparations
A syrup containing 1.59 g of coupling sugar (corresponding to 1.250 g of coupling sugar) was dissolved in about 8 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 38.84 ml of pure IgG1 (see “Materials” section) at a concentration of about 96.56 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The resulting solution contains about 2.5% (w / v) adjuvant or matrix and 7.5% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 10.8%.

1.0％(w/v)カップリングシュガー及び9.0％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
0.653gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー0.50gに相当）を約５mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.56mg/mlの約41.43mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約1.0％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと9.0％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約13.1％であった。 Spray drying of 1.0% (w / v) coupling sugar and 9.0% (w / v) IgG1-containing preparations
0.653 g of coupling sugar-containing syrup (corresponding to 0.50 g of coupling sugar) was dissolved in about 5 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, about 41.43 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.56 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 50 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 1.0% (w / v) adjuvant or matrix and 9.0% (w / v) protein, and using Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 13.1%.

９％(w/v)カップリングシュガーＳ及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.86gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.5gに相当）を約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.4％であった。 Spray drying of a formulation containing 9% (w / v) coupling sugar S and 1% (w / v) IgG1
5.86 g of coupling sugar S-containing syrup (corresponding to 4.5 g of coupling sugar S) was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.4%.

実施例２
８％(w/v)トレハロース、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのトレハロース及び0.5gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約22.2％であった。 Example 2
Spray drying of a formulation containing 8% (w / v) trehalose, 1% (w / v) L-isoleucine and 1% (w / v) IgG1
4.0 g trehalose and 0.5 g L-isoleucine were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 22.2%.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約0.7％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.1％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.6％と約1.1％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは7.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して28.1％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) L-isoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
4.0 g of LS90P and 0.50 g of L-isoleucine were dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and with a cyclone II, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.7%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.7% and about 1.0%, respectively.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.8% and about 1.1%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.6% and about 1.1%, respectively.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 7.3 μm, and the FPF was 28.1% based on the powder capsule mass.

８％(w/v)LS55P、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.00gのLS55P及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。 Spray-drying a formulation containing 8% (w / v) LS55P, 1% (w / v) L-isoleucine and 1% (w / v) IgG1
4.00 g LS55P and 0.50 g L-isoleucine were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.5%.
-After equilibration for 1 day, when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.8%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored for 4 weeks in a dry state at 40 ° C, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.8%.

2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.7mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.6％と約1.8％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して34.7％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) LS55P, 0.33% (w / v) L-isoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.0 g LS55P and 1 g L-isoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, about 9.7 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.9%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.6%.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the agglomerate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.6% and about 1.8%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.6% and about 1.8%, respectively.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 4.9 μm, and the FPF was 34.7% with respect to the powder capsule mass.

８％(w/v)カップリングシュガー、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.08gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.1％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.1％であった。 Spray drying of a formulation containing 8% (w / v) coupling sugar, 1% (w / v) L-isoleucine and 1% (w / v) IgG1
A syrup containing 5.08 g of coupling sugar (corresponding to 4.0 g of coupling sugar) and 0.50 g of L-isoleucine were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 7.1%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.5%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.1%.

８％(w/v)カップリングシュガーＳ、１％(w/v)Ｌ−イソロイシン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
5.21gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ4.0gに相当）及び0.50gのＬ−イソロイシンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.8％であった。 Spray drying of a formulation containing 8% (w / v) coupling sugar S, 1% (w / v) L-isoleucine and 1% (w / v) IgG1
5.21 g coupling sugar S-containing syrup (corresponding to coupling sugar S 4.0 g) and 0.50 g L-isoleucine were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 6.8%.

実施例３
３％(w/v)トレハロース、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのトレハロース及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.6mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.9％であった。 Example 3
Spray drying of a formulation containing 3% (w / v) trehalose, 6% (w / v) L-citrulline and 1% (w / v) IgG1
1.50 g trehalose and 3.00 g L-citrulline were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.6 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 50 ml. did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.9%.

３％(w/v)LS55P、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.50gのLS55P及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.9％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.8％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。 Spray drying of a formulation containing 3% (w / v) LS55P, 6% (w / v) L-citrulline and 1% (w / v) IgG1
1.50 g of LS55P and 3.00 g of L-citrulline were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.9%.
-After equilibration for 1 day, when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.8%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored for 4 weeks in a dry state at 40 ° C, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.3%.

３％(w/v)カップリングシュガー、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.91gのカップリングシュガー含有シロップ（カップリングシュガー1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.4％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.3％であった。 Spray drying of a formulation containing 3% (w / v) coupling sugar, 6% (w / v) L-citrulline and 1% (w / v) IgG1
1.91 g of coupling sugar-containing syrup (corresponding to 1.5 g of coupling sugar) and 3.00 g of L-citrulline were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.9%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.4%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored for 4 weeks in a dry state at 40 ° C, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.3%.

３％(w/v)カップリングシュガーＳ、６％(w/v)Ｌ−シトルリン及び１％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
1.95gのカップリングシュガーＳ含有シロップ（カップリングシュガーＳ1.5gに相当）及び3.00gのＬ−シトルリンを、超音波浴中、約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの約4.60mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し50mlにした。こうして得られた溶液には約９％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと１％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンＩを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.1％であった。 Spray drying of a formulation containing 3% (w / v) coupling sugar S, 6% (w / v) L-citrulline and 1% (w / v) IgG1
1.95 g of coupling sugar S-containing syrup (corresponding to 1.5 g of coupling sugar S) and 3.00 g of L-citrulline were dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 4.60 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute to 50 ml with demineralized water (pH about 7.5). did. The solution thus obtained contains about 9% (w / v) adjuvant or matrix and 1% (w / v) protein, and with Cyclone I, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.1%.

実施例４
2.66％(w/v)トレハロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのトレハロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約96.55mg/mlの約12.30mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約26.7％であった。 Example 4
Spray drying a formulation containing 2.66% (w / v) trehalose, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.0 g trehalose and 1 g triisoleucine were dissolved in about 280 ml demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 12.30 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 96.55 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer and dilute with demineralized water (pH about 7.5). 300ml. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 26.7%.

2.66％(w/v)ラフィノース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのラフィノース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) raffinose, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.0 g raffinose and 1 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, about 4.87 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 12.6%.

2.66％(w/v)ヒドロキシエチルデンプン（HES）、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのＨＥＳ及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約80℃で攪拌しながら約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.87mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を先に冷却しておいた濁った溶液に添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約18.6％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約11.9％と約15.4％であった。 Spray drying a formulation containing 2.66% (w / v) hydroxyethyl starch (HES), 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.0 g of HES and 1 g of triisoleucine were dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) with stirring at about 80 ° C. in an ultrasonic bath. Next, about 4.87 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 is added to the previously cooled cloudy solution, Diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 150 ml. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 18.6%.
-When stored for 1 month and 3 months in an open state at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 11.9% and about 15.4%.

2.00％(w/v)サッカロース、0.66％(w/v)ラクトース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
6.0gのサッカロース、2.0gのラクトース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約8.8％であった。 Spray drying a formulation containing 2.00% (w / v) sucrose, 0.66% (w / v) lactose, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
6.0 g saccharose, 2.0 g lactose and 1 g triisoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 8.8%.

2.66％(w/v)サッカロース、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのサッカロース及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.6％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) saccharose, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.0 g saccharose and 1 g triisoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.6%.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.3％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約1.0％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.4％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約2.2％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.7％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃の開放状態で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して53.2％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
4.0 g LS90P and 0.50 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and with a cyclone II, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.3%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.7% and about 1.0%, respectively.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.8% and about 1.4%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.9% and about 2.2%, respectively.
-When stored for 1 month and 3 months in an open state at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C, the aggregate contents of the solutions prepared by dissolving the powder were about 0.4% and about 0.7%, respectively.
-When stored for 1 month and 3 months in an open state at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C, the aggregate contents of the solutions prepared by dissolving the powder were about 0.5% and about 0.6%, respectively.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 4.7 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 4.8 μm, and the FPF was 53.2% with respect to the powder capsule mass.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.05m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.0％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
4.0 g LS90P and 0.50 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and using Cyclone II, the amount of air sprayed is about 1.05m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.2%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.5% and about 0.6%, respectively. It was.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.7%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 2.7 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 3.6 μm, and the FPF was 58.0% based on the powder capsule mass.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約1.74m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.9％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
4.0 g LS90P and 0.50 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and using Cyclone II, the amount of air sprayed is about 1.74m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.5% and about 0.6%, respectively. It was.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.8%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
The MMD of the powder after spray drying was 2.6 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 3.3 μm, and the FPF was 58.9% based on the powder capsule mass.

1.60％(w/v)LS90P、0.20％(w/v)トリイソロイシン及び0.20％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.0gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、約220mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し250mlにした。こうして得られた溶液には約1.80％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.20％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.2％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.7％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して55.6％であった。 Spray drying of a formulation containing 1.60% (w / v) LS90P, 0.20% (w / v) triisoleucine and 0.20% (w / v) IgG1
4.0 g LS90P and 0.50 g triisoleucine were dissolved in about 220 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials” section) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 250 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 1.80% (w / v) adjuvant or matrix and 0.20% (w / v) protein, and using Cyclone II with an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.2%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.5%, respectively. It was.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.7% and about 0.7%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 3.2 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 3.9 µm, and the FPF was 55.6% based on the powder capsule mass.

2.833％(w/v)LS90P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.25gのLS90P及び0.25gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.5％だった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.8μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは5.2μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して45.7％であった。 Spray drying of 2.833% (w / v) LS90P, 0.166% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1-containing preparations
4.25 g LS90P and 0.25 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and with a cyclone II, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.5%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.5%, respectively. It was.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.6%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 4.8 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 5.2 μm, and the FPF was 45.7% with respect to the powder capsule mass.

2.9166％(w/v)LS90P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
4.375gのLS90P及び0.125gのトリイソロイシンを、約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約4.864mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液には約3.00％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。
− 相対湿度約29％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.4％と約0.5％だった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.5％と約0.6％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは4.2μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは6.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して39.6％であった。 Spray drying of 2.9166% (w / v) LS90P, 0.0833% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1-containing preparations
4.375 g LS90P and 0.125 g triisoleucine were dissolved in about 140 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, about 4.864 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer is added, diluted with demineralized water (pH about 7.5) and 150 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3.00% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein, and with a cyclone II, the spray air volume is about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.2%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 29% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.4% and about 0.5%, respectively. It was.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.5% and about 0.6%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 4.2 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 6.1 μm, and the FPF was 39.6% based on the powder capsule mass.

2.66％(w/v)LS55P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS55P及び１gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.1％であった。
− ２〜８℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.8％と約1.5％であった。
− 25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.9％と約1.5％であった。
− 40℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約2.6％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.0％と約1.0％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは3.4μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.3％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、ＭＭＡＤは3.8μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.6％であった。 2.66% (w / v) LS55P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1-containing formulation spray dried
8.0 g of LS55P and 1 g of triisoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.1%.
-When stored at 2-8 ° C for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.8% and about 1.5%, respectively.
When stored at −25 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the agglomerate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 0.9% and about 1.5%, respectively.
When stored at −40 ° C. for 1 month and 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.3% and about 2.6%, respectively.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.0% and about 1.0%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
The MMD of the powder after spray drying was 3.4 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 3.9 μm, and the FPF was 58.3% relative to the powder capsule mass.
-When stored for 1 month at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the MMAD was 3.8 µm and the FPF was 59.6% based on the powder capsule mass.

2.833％(w/v)LS55P、0.166％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.5gのLS55P及び0.5gのトリイソロイシンを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.4％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約1.3％と約1.5％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。 Spray drying of 2.833% (w / v) LS55P, 0.166% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1-containing preparations
8.5 g of LS55P and 0.5 g of triisoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.4%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.3% and about 1.5%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 2.9 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 4.4 μm, and the FPF was 58.6% based on the powder capsule mass.

2.9166％(w/v)LS55P、0.0833％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)IgG1含有製剤の噴霧乾燥
8.75gのLS55P及び0.25gのトリイソロイシンを、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約102.8mg/mlの約9.73mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液には約３％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.33％(w/v)のタンパク質が含まれており、サイクロンIIを使って噴霧空気量約0.67m³/時間で前記記載のようにして噴霧乾燥させた。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.4％であった。
− 相対湿度約43％、温度25℃で１ヶ月及び３ヶ月保存したところ（３ヶ月開放状態安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率はそれぞれ約0.7％と約0.8％だった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＤは2.9μｍであった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。
− 噴霧乾燥後の粉末のＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。 Spray drying of a formulation containing 2.9166% (w / v) LS55P, 0.0833% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) IgG1
8.75 g LS55P and 0.25 g triisoleucine were dissolved in about 280 ml demineralized water (pH about 7.5). Next, add about 9.73 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 102.8 mg / ml formulated in glycine-histidine buffer at pH 6 and dilute with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. I made it. The solution thus obtained contains about 3% (w / v) adjuvant or matrix and 0.33% (w / v) protein and is sprayed with cyclone II at an air volume of about 0.67 m ³ / hour. Spray dried as described above. The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.4%.
-When stored for 1 month and 3 months at a relative humidity of about 43% and a temperature of 25 ° C (3-month open state stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder is about 0.7% and about 0.8%, respectively. It was.
The MMD of the powder was determined as described above.
-The MMD of the powder after spray drying was 2.9 μm.
The powder MMAD and FPF were determined as described above.
-The MMAD of the powder after spray drying was 4.4 μm, and the FPF was 58.6% based on the powder capsule mass.

実施例５
本発明による別の粉末の製造
3.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
５gのリゾチームを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約35.3％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.2μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.0μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して70.4％であった。 Example 5
Production of another powder according to the invention
Spray Drying of 3.33% (w / v) Lysozyme-Containing Formulation 5 g of lysozyme was dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 150 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
Residual monomer content was determined by the method described above. After forced storage, the residual monomer content of the solution prepared by dissolving the powder was about 35.3%. The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 3.2 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 4.0 μm, and FPF was 70.4% based on the powder capsule mass.

3.00％(w/v)LS90P及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
9.0gのLS90Pを、超音波浴中、約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約62.1％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは4.0μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.7μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して24.7％であった。 Spray drying of formulations containing 3.00% (w / v) LS90P and 0.33% (w / v) lysozyme
9.0 g of LS90P was dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, 1 g of lysozyme was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
Residual monomer content was determined by the method described above. After forced storage, the residual monomer content of the solution prepared by dissolving the powder was about 62.1%. The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 4.0 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. The MMAD was 3.7 μm, and the FPF was 24.7% based on the powder capsule mass.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液をサイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率は前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは3.9μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.1μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して29.0％であった。 Spray drying of formulations containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) isoleucine and 0.33% (w / v) lysozyme
8.0 g of LS90P and 1 g of isoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, 1 g of lysozyme was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
The residual monomer content was determined by the method described above. After forced storage, the residual monomer content of the solution prepared by dissolving the powder was about 47.9%. The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 3.9 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 4.1 μm and FPF was 29.0% with respect to the powder capsule mass.

2.66％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.33％(w/v)リゾチーム含有製剤の噴霧乾燥
8.0gのLS90Pと１gのトリイソロイシンとを、超音波浴中約280mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、１ｇのリゾチームを添加し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して300mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
残留モノマー含有率を前記記載の方法で求めた。強制的保存の後、粉末を溶かして調製した溶液の残留モノマー含有率は約47.9％であった。粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.7μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.6μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して58.6％であった。 Spray drying of formulations containing 2.66% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.33% (w / v) lysozyme
8.0 g of LS90P and 1 g of triisoleucine were dissolved in about 280 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, 1 g of lysozyme was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 300 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
Residual monomer content was determined by the method described above. After forced storage, the residual monomer content of the solution prepared by dissolving the powder was about 47.9%. The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 2.7 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 3.6 μm, and FPF was 58.6% based on the powder capsule mass.

3.33％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
１gのカルシトニンを約25mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解し、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し30mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
− ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.1％であった。
− 25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.9％であった。
− 40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約7.4％であった。
粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.9μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して59.0％であった。 Spray Drying of 3.33% (w / v) Calcitonin Containing Formula 1 g calcitonin was dissolved in about 25 ml of demineralized water (pH about 7.5) and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 30 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
The aggregate content was determined by the method described above.
-When stored at 2-8 ° C for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.1%.
When stored at −25 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.9%.
When stored at −40 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 7.4%.
The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 3.9 μm, and FPF was 59.0% with respect to the powder capsule mass.

3.166％(w/v)LS90P及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.750gのLS90Pを約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
− ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
− 25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
− 40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.6μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.3μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して47.3％であった。 3. Spray drying of formulations containing 166% (w / v) LS90P and 0.166% (w / v) calcitonin
4.750 g of LS90P was dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, 0.250 g of calcitonin was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 150 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
The aggregate content was determined by the method described above.
-When stored at 2-8 ° C for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.6%.
When stored at −25 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.9%.
When stored at −40 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.6%.
The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 2.6 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 4.3 μm, and FPF was 47.3% based on the powder capsule mass.

2.833％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)イソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
− ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
− 25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
− 40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.8μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは4.4μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して49.2％であった。 Spray drying of formulations containing 2.833% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) isoleucine and 0.166% (w / v) calcitonin
4.250 g LS90P and 0.50 g isoleucine were dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, 0.250 g of calcitonin was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 150 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
The aggregate content was determined by the method described above.
-When stored at 2-8 ° C for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.3%.
When stored at −25 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.6%.
When stored at −40 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.6%.
The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 2.8 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 4.4 μm, and FPF was 49.2% based on the powder capsule mass.

2.866％(w/v)LS90P、0.33％(w/v)トリイソロイシン及び0.166％(w/v)カルシトニン含有製剤の噴霧乾燥
4.250gのLS90P及び0.50gのトリイソロイシンを、超音波浴中で約140mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、0.250gのカルシトニンを添加し脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈し150mlにした。こうして得られた溶液を、サイクロンIIを使って前記記載のようにして噴霧乾燥させた。
凝集体含有率を前記記載の方法で求めた。
− ２〜８℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.3％であった。
− 25℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.6％であった。
− 40℃で３ヶ月保存したところ（３ヶ月安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約3.9％であった。
粉末のＭＭＤを前記記載のようにして求めた。粉末のＭＭＤは2.5μｍであった。粉末のＭＭＡＤ及びＦＰＦを前記記載のようにして求めた。ＭＭＡＤは3.5μｍ、ＦＰＦは粉末カプセル質量に対して60.4％であった。 Spray drying of 2.866% (w / v) LS90P, 0.33% (w / v) triisoleucine and 0.166% (w / v) calcitonin
4.250 g of LS90P and 0.50 g of triisoleucine were dissolved in about 140 ml of demineralized water (pH about 7.5) in an ultrasonic bath. Next, 0.250 g of calcitonin was added and diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 150 ml. The solution thus obtained was spray dried using Cyclone II as described above.
The aggregate content was determined by the method described above.
-When stored at 2-8 ° C for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.3%.
When stored at −25 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.6%.
When stored at −40 ° C. for 3 months (3-month stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 3.9%.
The MMD of the powder was determined as described above. The MMD of the powder was 2.5 μm. The powder MMAD and FPF were determined as described above. MMAD was 3.5 μm, and FPF was 60.4% based on the powder capsule mass.

実施例６
５％(w/v)IgG1調剤の凍結乾燥
ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で50mg/mlまで希釈し、他のアジュバントを加えずに凍結乾燥させた。凍結乾燥前の溶液の量は50mlで市販の２Ｒバイアルに分けておいた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。
凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約20.5％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約15.3％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約12.6％であった。 Example 6
Lyophilization of 5% (w / v) IgG1 preparation Pure IgG1 at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer (see “Materials” section) was added to 50 mg in demineralized water (pH about 7.5). Dilute to / ml and lyophilize without adding other adjuvants. The amount of the solution before lyophilization was 50 ml and was divided into commercially available 2R vials. As described above, lyophilized in 2R vials and further processed using a spatula.
The aggregate content was examined by the method described above.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 20.5%.
-After equilibration for 1 day, when stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 15.3%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored for 4 weeks in a dry state at 40 ° C, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 12.6%.

4.5％(w/v)マンニトール及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのマンニトールを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約34.0％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約11.6％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約6.2％であった。 Lyophilization of a formulation containing 4.5% (w / v) mannitol and 0.5% (w / v) IgG1
2.25 g of mannitol was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, 2.3 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer was diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 50 mg / ml. did. The solution thus obtained contains about 4.5% (w / v) adjuvant or matrix and 0.5% (w / v) protein, divided into commercially available 2R vials and lyophilized as described above. I let you. As described above, lyophilized in 2R vials and further processed using a spatula. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 34.0%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 11.6%.
-After vacuum drying for 1 day, it was stored in a dry state at 40 ° C for 4 weeks. The aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 6.2%.

4.5％(w/v)LS55P及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのLS55Pを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.5％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約2.6％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.2％であった。 Lyophilization of a formulation containing 4.5% (w / v) LS55P and 0.5% (w / v) IgG1
2.25 g of LS55P was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, 2.3 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer was diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 50 mg / ml. did. The solution thus obtained contains about 4.5% (w / v) adjuvant or matrix and 0.5% (w / v) protein, divided into commercially available 2R vials and lyophilized as described above. I let you. As described above, lyophilized in 2R vials and further processed using a spatula. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.5%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 2.6%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.2%.

4.5％(w/v)カップリングシュガー及び0.5％(w/v)IgG1含有製剤の凍結乾燥
2.25gのカップリングシュガーを約40mlの脱塩水（ｐＨ約7.5）に溶解した。次に、ｐＨ６のグリシン−ヒスチジン緩衝液に処方した濃度約109mg/mlの2.3mlの純粋なIgG1（「材料」の項参照）を、脱塩水（ｐＨ約7.5）で希釈して50mg/mlにした。こうして得られた溶液には約4.5％(w/v)のアジュバント又はマトリックスと0.5％(w/v)のタンパク質が含まれており、市販の２Ｒバイアルに分け、前記記載のようにして凍結乾燥させた。前記記載のように、２Ｒバイアル中で凍結乾燥させ、スパチュラを使ってさらに処理を行った。凝集体含有率は前記記載の方法で調べた。
下記の凝集体含有率は、保存安定性として求めた。
− 相対湿度75％、温度40℃の開放状態で１週間保存したところ（強制的保存安定性）、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約5.5％であった。
− １日平衡にした後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約4.6％であった。
− １日真空乾燥を行った後、40℃、乾燥状態で４週間保存したところ、粉末を溶かして調製した溶液の凝集体含有率は約1.5％であった。 Lyophilization of a formulation containing 4.5% (w / v) coupling sugar and 0.5% (w / v) IgG1
2.25 g of coupling sugar was dissolved in about 40 ml of demineralized water (pH about 7.5). Next, 2.3 ml of pure IgG1 (see “Materials”) at a concentration of about 109 mg / ml formulated in pH 6 glycine-histidine buffer was diluted with demineralized water (pH about 7.5) to 50 mg / ml. did. The solution thus obtained contains about 4.5% (w / v) adjuvant or matrix and 0.5% (w / v) protein, divided into commercially available 2R vials and lyophilized as described above. I let you. As described above, lyophilized in 2R vials and further processed using a spatula. The aggregate content was examined by the method described above.
The following aggregate content rate was calculated | required as storage stability.
-When stored for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C (forced storage stability), the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 5.5%.
-After equilibration for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 4.6%.
-After vacuum drying for 1 day, when stored at 40 ° C in a dry state for 4 weeks, the aggregate content of the solution prepared by dissolving the powder was about 1.5%.

明細書中に記載のパーセントのデータはすべて溶液中の固形分濃度（質量／質量）を指す。下記記載の図面の説明文は、すべて噴霧乾燥や微粉化を伴う凍結乾燥によって得られる粉末の組成比（質量／質量）を指している。さらに、図面説明文によると、溶液中の総固形分濃度（総固形分＝ＴＳ）がパーセント（質量／質量）で規定されている。図８の説明では、カップリングシュガーをＣＳと略記している。図１８、図１９、図２０及び図２１の説明では、トリイソロイシンをIle3と略記している。さらに、図１５、図１６、図１７、図１８、図１９、図２０及び図２１では、ビュッヒ社（Buchi）のB-290に設定した噴霧乾燥工程中の霧化速度（ＡＡＦ＝噴霧空気流量）が指定されている。その数値４０は、実際の流量約0.67m³/時間に相当し、数値５０は、実際の流量約1.05m³/時間に相当し、数値６０は、実際の流量約1.74m³/時間に相当する。他のすべての図面では、霧化速度４０が実際の流量約0.67m³/時間に対応している。 All percentage data stated in the specification refer to the solids concentration (mass / mass) in the solution. The legends of the drawings described below all refer to the composition ratio (mass / mass) of the powder obtained by freeze-drying with spray drying or micronization. Furthermore, according to the drawing legend, the total solid content concentration (total solid content = TS) in the solution is defined as a percentage (mass / mass). In the description of FIG. 8, the coupling sugar is abbreviated as CS. In the description of FIGS. 18, 19, 20 and 21, triisoleucine is abbreviated as Ile3. Further, in FIGS. 15, 16, 17, 18, 19, 20 and 21, the atomization rate (AAF = spray air flow rate) during the spray drying process set for Buchi B-290 of Buchi. ) Is specified. Its numerical value 40 corresponds to the actual flow rate of about 0.67 m ³ / time, number 50 corresponds to the actual flow rate of about 1.05 m ³ / time, number 60, corresponding to the actual flow rate of about 1.74 ³ / time To do. In all other drawings, the atomization speed 40 corresponds to an actual flow rate of about 0.67 m ³ / hour.

凍結乾燥を行い、微粉化後に相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。The aggregate content after reconstitution after freeze-drying and storage for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. after pulverization (restricted storage stability). a) 4.5% LS55P and 0.5% IgG, b) 4.5% coupling sugar and 0.5% IgG, c) 5.0% IgG, d) 4.5% mannitol and 0.5% IgG The aqueous solution containing each minute was lyophilized. The powder containing LS55P and the powder containing coupling sugar are characterized by low agglomerates.

凍結乾燥を行い、微粉化、平衡化（equilibration）後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（平衡化（equilibrated）保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。It shows freeze-dried, micronized, equilibration, and then stored for 4 weeks in a dry state at a temperature of 40 ° C. (equilibrated storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 4.5% LS55P and 0.5% IgG, b) 4.5% coupling sugar and 0.5% IgG, c) 5.0% IgG, d) 4.5% mannitol and 0.5% IgG The aqueous solution containing each minute was lyophilized. The powder containing LS55P and the powder containing coupling sugar are characterized by low agglomerates.

凍結乾燥を行い、微粉化、真空乾燥後、温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）4.5％のLS55P分及び0.5％のIgG分、ｂ）4.5％のカップリングシュガー分及び0.5％のIgG分、ｃ）5.0％のIgG分、ｄ）4.5％のマンニトール分及び0.5％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を凍結乾燥した。LS55Pを含む粉末とカップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。Freeze-dried, finely divided, vacuum dried, stored in a dry state at a temperature of 40 ° C. for 4 weeks (vacuum dry storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 4.5% LS55P and 0.5% IgG, b) 4.5% coupling sugar and 0.5% IgG, c) 5.0% IgG, d) 4.5% mannitol and 0.5% IgG The aqueous solution containing each minute was lyophilized. The powder containing LS55P and the powder containing coupling sugar are characterized by low agglomerates.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）９％のカップリングシュガーＳ分及び１％のIgG分、ｄ）９％のトレハロース分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 9% LS55P and 1% IgG, b) 9% coupling sugar and 1% IgG, c) 9% coupling sugar S and 1% IgG, d) 9 The aqueous solution containing 1% trehalose and 1% IgG, and e) 10% IgG, respectively, was spray dried. The powder containing LS55P, and the powder containing coupling sugar and the powder containing coupling sugar S are characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）８％のカップリングシュガーＳ分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｄ）８％のトレハロース分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 8% LS55P, 1% isoleucine and 1% IgG, b) 8% coupling sugar, 1% isoleucine and 1% IgG, c) 8% coupling sugar An aqueous solution containing S, 1% isoleucine and 1% IgG, d) 8% trehalose, 1% isoleucine and 1% IgG, and e) 10% IgG was spray dried. . The powder containing LS55P, and the powder containing coupling sugar and the powder containing coupling sugar S are characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｂ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガーＳ分、16％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｄ）３％のトレハロース分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分、ｅ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末、ならびにカップリングシュガーを含む粉末とカップリングシュガーＳを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 3% LS55P, 6% citrulline and 1% IgG, b) 3% coupling sugar, 6% citrulline and 1% IgG, c) 3% coupling sugar An aqueous solution containing S, 16% citrulline and 1% IgG, d) 3% trehalose, 6% citrulline and 1% IgG, and e) 10% IgG was spray dried. . The powder containing LS55P, and the powder containing coupling sugar and the powder containing coupling sugar S are characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）６％のLS55P分及び４％のIgG分、ｄ）４％のLS55P分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｆ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｇ）0.5％のLS55P分及び9.5％のIgG分、ｈ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 9.9% LS55P and 0.1% IgG, b) 9% LS55P and 1% IgG, c) 6% LS55P and 4% IgG, d) 4% LS55P and 6% IgG, e) 2.5% LS55P and 7.5% IgG, f) 9% LS55P and 1% IgG, g) 0.5% LS55P and 9.5% IgG, h) Aqueous solutions each containing 10% IgG were spray dried. The powder containing LS55P is characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のカップリングシュガー分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｃ）６％のカップリングシュガー分及び４％のIgG分、ｄ）４％のカップリングシュガー分及び６％のIgG分、ｅ）2.5％のカップリングシュガー分及び7.5％のIgG分、ｆ）１％のカップリングシュガー分及び９％のIgG分、ｇ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 9.9% coupling sugar and 0.1% IgG, b) 9% coupling sugar and 1% IgG, c) 6% coupling sugar and 4% IgG, d) 4% coupling sugar and 6% IgG, e) 2.5% coupling sugar and 7.5% IgG, f) 1% coupling sugar and 9% IgG, g) 10% The aqueous solution containing each of the IgG components was spray-dried. The powder containing LS55P is characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS55P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS55P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS55P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。LS55Pを含む粉末の総固形分に対して、トリイソロイシン分が０％から10％に増えると、タンパク質凝集体は著しく減少する。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 3.00% LS55P and 0.33% IgG, b) 2.9166% LS55P, 0.0833% triisoleucine and 0.33% IgG, c) 2.833% LS55P, 0.166% triisoleucine and An aqueous solution containing 0.33% IgG, d) 2.66% LS55P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG was spray dried. The powder containing LS55P is characterized by low agglomeration content. When the triisoleucine content is increased from 0% to 10% of the total solid content of the powder containing LS55P, the protein aggregates are significantly reduced.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末は凝集分が低いことを特徴とする。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 3.00% LS90P and 0.33% IgG, b) 2.9166% LS90P, 0.0833% triisoleucine and 0.33% IgG, c) 2.833% LS90P, 0.166% triisoleucine and An aqueous solution containing 0.33% IgG, d) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG was spray dried. LS90P-containing powder is characterized by low agglomeration.

噴霧乾燥を行い、相対湿度75％及び温度40℃の開放状態で１週間保存し（強制的保存安定性）、再構成後の凝集体含有率を示す。ａ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のサッカロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.00％のサッカロース分、0.66％のラクトース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のラフィノース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）2.66％のヒドロキシエチルデンプン（HES）分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｇ）2.66％のトレハロース分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS90P含有粉末及びLS55P含有粉末は、特に現状技術としてのラフィノースやヒドロキシエチルデンプン（HES）と比較すると凝集分が著しく低い。Spray drying is carried out for 1 week in an open state at a relative humidity of 75% and a temperature of 40 ° C. (forced storage stability), and shows the aggregate content after reconstitution. a) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, b) 2.66% LS55P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, c) 2.66% sucrose. 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, d) 2.00% saccharose, 0.66% lactose, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, e) 2.66% raffinose, 0.33% Triisoleucine and 0.33% IgG, f) 2.66% hydroxyethyl starch (HES), 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, g) 2.66% trehalose, 0.33% triisoleucine And aqueous solutions containing 0.33% and 0.33% IgG, respectively, were spray dried. The LS90P-containing powder and the LS55P-containing powder have a remarkably low agglomeration content as compared with raffinose and hydroxyethyl starch (HES) as the current state of the art.

噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）９％のカップリングシュガー分及び１％のIgG分、ｂ）８％のカップリングシュガー分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｃ）３％のカップリングシュガー分、６％のシトルリン及び１％のIgG分、ｄ）10％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。カップリングシュガーを含む粉末は、凝集分が低いことを特徴とする。The agglomerate content after reconstitution after spray-drying and after vacuum drying and storage in a dry state at a temperature of 40 ° C. for 4 weeks (vacuum drying storage stability) is shown. a) 9% coupling sugar and 1% IgG, b) 8% coupling sugar, 1% isoleucine and 1% IgG, c) 3% coupling sugar, 6% Of citrulline and 1% IgG and d) an aqueous solution containing 10% IgG respectively. Powders containing coupling sugar are characterized by low agglomerates.

噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度40℃の乾燥状態で４週間保存し（真空乾燥保存安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）9.9％のLS55P分及び0.1％のIgG分、ｂ）９％のLS55P分及び１％のIgG分、ｃ）2.5％のLS55P分及び7.5％のIgG分、ｄ）１％のLS55P分及び９％のIgG分、ｅ）10％のIgG分、ｆ）８％のLS55P分、１％のイソロイシン分及び１％のIgG分、ｇ）３％のLS55P分、６％のシトルリン分及び１％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。LS55Pを含む粉末は凝集分が低いことを特徴とする。The agglomerate content after reconstitution after spray-drying and after vacuum drying and storage in a dry state at a temperature of 40 ° C. for 4 weeks (vacuum drying storage stability) is shown. a) 9.9% LS55P and 0.1% IgG, b) 9% LS55P and 1% IgG, c) 2.5% LS55P and 7.5% IgG, d) 1% LS55P and 9% IgG, e) 10% IgG, f) 8% LS55P, 1% isoleucine and 1% IgG, g) 3% LS55P, 6% citrulline and 1% The aqueous solution containing each of the IgG components was spray-dried. The powder containing LS55P is characterized by low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度２〜８℃、25℃、40℃の乾燥状態で１ヶ月又は３ヶ月保存し（１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.00％のLS90P分及び0.33％のIgG分、ｂ）2.66％のLS55P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｄ）2.66％のLS55P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分、ｆ）3.33％のIgG分をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末及びLS55Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。After spray drying, after vacuum drying, store in a dry state at temperatures of 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C for 1 month or 3 months (1 month or 3 months stability), and aggregate content after reconstitution Show. a) 3.00% LS90P and 0.33% IgG, b) 2.66% LS55P, 0.33% isoleucine and 0.33% IgG, c) 2.66% LS90P, 0.33% isoleucine and 0.33% D) 2.66% LS55P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, e) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG, f) 3.33% The aqueous solution containing each of the IgG components was spray-dried. After storage for 3 months, the powder containing LS90P and the powder containing LS55P are characterized by a particularly low agglomeration content.

噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に温度25℃で相対湿度29％と43％の開放状態でそれぞれ１ヶ月又は３ヶ月乾燥状態で保存し（開放状態の１ヶ月又は３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）2.9166％のLS90P分、0.0833％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｂ）2.833％のLS90P分、0.166％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｃ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｄ）1.60％のLS90P分、0.20％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）、ｅ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値５０）、ｆ）2.66％のLS90P分、0.33％のトリイソロイシン分及び0.33％のIgG分（ＡＡＦ値６０）、ｇ）3.33％のIgG分（ＡＡＦ値４０）をそれぞれ含む水溶液を噴霧乾燥した。３ヶ月の保存後、LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。After spray drying, after vacuum drying, store in a dry state at a temperature of 25 ° C and a relative humidity of 29% and 43% for 1 month or 3 months, respectively (stable for 1 month or 3 months in the open state) and reconstituted The aggregate content rate after is shown. a) 2.9166% LS90P, 0.0833% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF value 40), b) 2.833% LS90P, 0.166% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF 40) ), C) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF value 40), d) 1.60% LS90P, 0.20% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF) Values 40), e) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF value 50), f) 2.66% LS90P, 0.33% triisoleucine and 0.33% IgG (AAF value 60), g) An aqueous solution containing 3.33% IgG content (AAF value 40) was spray-dried. After 3 months of storage, the powder containing LS90P is characterized by a particularly low agglomeration content.

種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約35％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。Figure 2 shows fine particle fraction (FPF) for various powders excluding particles with a particle size less than 5 [mu] m. An aqueous solution containing LS55P and IgG1 or an aqueous solution containing LS55P, isoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The FPF of the powder containing isoleucine is about 35%, but the FPF of the powder containing no isoleucine is only about 16%.

種々の粉末に関し、粒径５μｍ未満の粒子を除いた細かい粒子の分画（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。イソロイシン含有粉末のＦＰＦは約28％であるが、イソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約23％にとどまっている。Figure 2 shows fine particle fraction (FPF) for various powders excluding particles with a particle size less than 5 [mu] m. An aqueous solution containing LS90P and IgG1 or an aqueous solution containing LS90P, isoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The FPF of the powder containing isoleucine is about 28%, but the FPF of the powder not containing isoleucine is only about 23%.

様々な粉末におけるカットオフ粒径５μｍ未満の細粒分（ＦＰＦ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは50又は58％を超えるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約16％にとどまっている。Fig. 2 shows fines fraction (FPF) with a cut-off particle size of less than 5 m in various powders. An aqueous solution containing LS55P and IgG1 or an aqueous solution containing LS55P, triisoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The FPF of the triisoleucine-containing powder exceeds 50 or 58%, but the FPF of the powder not containing triisoleucine is only about 16%.

様々な粉末における空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）及び体積中央径（ＭＭＤ）を示す。LS55PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS55PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、５μｍ未満であり、ＭＭＤは3.5μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシンのＭＭＡＤ及びＭＭＤへの影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。The aerodynamic particle size (MMAD) and volume median diameter (MMD) are shown for various powders. An aqueous solution containing LS55P and IgG1 or an aqueous solution containing LS55P, triisoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The MMAD of any powder is less than 5 μm and the MMD is less than 3.5 μm. The effect of triisoleucine on MMAD and MMD when the total solids concentration and spray parameters are constant can be seen from the figure. If the triisoleucine content is 10% relative to the total solid content in the formulation, the MMAD is significantly reduced.

様々な粉末におけるカットオフ粒径５μｍ未満の細粒分（ＦＰＦ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。トリイソロイシン含有粉末のＦＰＦは約40〜約59％であるが、トリイソロイシンを含まない粉末のＦＰＦは約24％にとどまっている。Fig. 2 shows fines fraction (FPF) with a cut-off particle size of less than 5 m in various powders. An aqueous solution containing LS90P and IgG1 or an aqueous solution containing LS90P, triisoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The FPF of the triisoleucine-containing powder is about 40 to about 59%, but the FPF of the powder not containing triisoleucine is only about 24%.

様々な粉末における体積中央径（ＭＭＤ）及び空気動力学的粒径（ＭＭＡＤ）を示す。LS90PとIgG1とを含んだ水溶液又はLS90PとトリイソロイシンとIgG1とを含んだ水溶液を噴霧乾燥させて、粉末を製造した。溶液の調製及び噴霧については、実施例の項で記載のようにして行った。いずれの粉末のＭＭＡＤも、6.5μｍ未満であり、ＭＭＤは５μｍ未満である。総固形分濃度及び噴霧パラメータが一定の場合の、トリイソロイシン分のＭＭＡＤ及びＭＭＤに対する影響が図からわかる。調剤中の総固形分に対してトリイソロイシン分が10％であると、ＭＭＡＤを著しく減少する。固形分が減少し（例えば、ＴＳ２％）かつ噴霧圧力が上昇（ＡＡＦ値、50又は60）すると、ＭＭＤが著しく低下する。Figure 2 shows the volume median diameter (MMD) and aerodynamic particle size (MMAD) for various powders. An aqueous solution containing LS90P and IgG1 or an aqueous solution containing LS90P, triisoleucine and IgG1 was spray-dried to produce a powder. Solution preparation and spraying were performed as described in the Examples section. The MMAD of any powder is less than 6.5 μm and the MMD is less than 5 μm. The effect of triisoleucine content on MMAD and MMD when the total solid content concentration and spray parameters are constant can be seen from the figure. If the triisoleucine content is 10% relative to the total solid content in the formulation, the MMAD is significantly reduced. As the solid content decreases (eg, TS 2%) and the spray pressure increases (AAF value, 50 or 60), the MMD decreases significantly.

噴霧乾燥を行い、強制的保存後に再構成したものの残留モノマー含有率を示す。ａ）リゾチーム3.33質量％、ｂ）リゾチーム0.33質量％及びLS90P 3.0質量％、ｃ）リゾチーム0.33質量％、イソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％、ｄ）リゾチーム0.33質量％、トリイソロイシン0.33質量％及びLS90P 2.66質量％をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90P含有粉末は残留モノマー含有率が高いことが顕著である。The residual monomer content is shown after reconstitution after forced drying and after forced storage. a) Lysozyme 3.33% by mass, b) Lysozyme 0.33% by mass and LS90P 3.0% by mass, c) Lysozyme 0.33% by mass, isoleucine 0.33% by mass and LS90P 2.66% by mass, d) Lysozyme 0.33% by mass, triisoleucine 0.33% by mass and LS90P An aqueous solution containing 2.66% by mass was sprayed. It is remarkable that the LS90P-containing powder has a high residual monomer content.

噴霧乾燥を行い、真空乾燥後に乾燥状態かつ温度２〜８℃、25℃、40℃で３ヶ月保存し（３ヶ月安定性）、再構成した後の凝集体含有率を示す。ａ）3.33質量％のカルシトニン、ｂ）0.166質量％のカルシトニン及び3.166質量％のLS90P分、ｃ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分、ｄ）0.166質量％のカルシトニン、0.33質量％のトリイソロイシン分及び2.833質量％のLS90P分をそれぞれ含む水溶液を噴霧した。LS90Pを含む粉末は凝集分がとりわけ低いことを特徴とする。It shows the agglomerate content after spray drying, after vacuum drying and after drying for 3 months (3-month stability) at temperatures of 2-8 ° C, 25 ° C, 40 ° C. a) 3.33% by weight calcitonin, b) 0.166% by weight calcitonin and 3.166% by weight LS90P, c) 0.166% by weight calcitonin, 0.33% by weight isoleucine and 2.833% by weight LS90P, d) 0.166% by weight Of calcitonin, 0.33% by mass of triisoleucine and 2.833% by mass of LS90P were sprayed. The powder containing LS90P is characterized by a particularly low agglomeration content.

乾燥粉末調剤の投与用吸入器を示す。1 shows an inhaler for administration of a dry powder formulation.

Claims

At least one antibody or one antibody derivative and 1,4 O-linked D-gal-saccharose (lactosucrose), 1,4 O-linked D-glu-saccharose (glucosyl sucrose) or 1,4 A composition comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative selected from O-linked glu-glu-saccharose (maltosyl sucrose).

The composition according to claim 1, wherein the composition contains lactosucrose as a 1,4 O-linked saccharose derivative.

The composition according to claim 2, wherein the composition further comprises one or more of monosaccharide, disaccharide and / or polysaccharide.

The composition according to claim 3, further comprising lactose and saccharose.

The composition according to any one of claims 2 to 4, wherein the lactosucrose content is at least 55% by mass with respect to the sugar contained in the composition.

The composition of claim 1, wherein the composition comprises a mixture of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose.

The composition according to claim 6, wherein the composition further comprises one or more monosaccharides, disaccharides and / or polysaccharides.

The composition according to claim 7, wherein the composition further comprises fructose, glucose and / or saccharose.

The composition according to any one of claims 6 to 8, wherein the total amount of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 25% by mass with respect to the sugar content contained in the composition.

The composition according to claim 9, wherein each of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 18% by mass with respect to the sugar contained in the composition.

The sugar content containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative is 25 to 99.99% by mass of the dry mass of the composition. Composition.

The amount of the antibody or antibody derivative is 0.01 to 75% by mass of the dry mass of the composition, and the total of mass percent is a maximum of 100% by mass. The composition as described.

The composition comprises 60-90% by weight sugar on a dry weight basis and up to 40% by weight antibody or antibody derivative, whereby lactosucrose, maltosyl sucrose and / or glucosyl sucrose content is dried on the composition 13. Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that it is at least 20% by weight with respect to the weight and the sum of the weight percentages is at most 100% by weight.

14. Composition according to any one of the preceding claims, characterized in that it comprises one or more pharmaceutically compatible adjuvants and / or one or more salts.

The composition according to claim 14, wherein the adjuvant is an amino acid or a peptide.

The composition according to claim 15, wherein the amino acid is isoleucine.

The composition according to claim 15, wherein the peptide is a dipeptide or a tripeptide.

The composition according to claim 15, wherein the peptide is an isoleucine-containing peptide.

The composition according to claim 17 or 18, wherein the peptide is diisoleucine or triisoleucine.

A sugar mixture comprising 60 to 99% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative on a dry weight basis; The composition according to claim 16, comprising 40% by mass of isoleucine.

A sugar mixture comprising 60 to 99% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative on a dry weight basis; The composition according to any one of claims 17 to 20, comprising 40% by mass of a peptide.

The composition according to any one of claims 1 to 21, wherein the composition is an aqueous solution, a semi-solid preparation or a powder.

The powder according to claim 22, wherein the MMD of the particles in the powder is 1 to 10 µm.

The powder according to claim 22 or 23, wherein the MMAD of the particles in the powder is 1 to 5 µm.

A method for producing a powder according to any one of claims 22 to 24, comprising:
a) Dissolve / suspend antibody or antibody derivative in aqueous solution / suspension,
b) A sugar containing at least one 1,4 O-linked saccharose derivative selected from lactosucrose, glucosyl sucrose or maltosyl sucrose, or at least one of these 1,4 O-linked saccharose derivatives Dissolving / suspending the mixture in an aqueous solution / suspension;
c) The antibody or antibody derivative and the sugar mixture containing the 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative are dissolved / suspended in different solutions / suspensions. If you mix them,
d) A method for producing a powder, comprising drying a solution / suspension containing an antibody or antibody derivative and one or more of 1,4 O-linked saccharose derivatives.

26. The method of claim 25, wherein the drying step is freeze drying or spray drying.

27. The method according to claim 25 or 26, wherein the 1,4 O-linked saccharose derivative is lactosucrose.

28. The method of claim 27, wherein the solution or suspension further comprises one or more of monosaccharides, disaccharides or polysaccharides.

30. The method of claim 28, wherein the drying solution further comprises lactose and saccharose.

30. A method according to any one of claims 27 to 29, wherein the lactosucrose content is at least 55% by weight of the sugar present in the drying solution.

27. The method according to claim 25 or 26, wherein the 1,4 O-linked saccharose derivative is a mixture of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose.

32. The method of claim 31, wherein the drying solution further comprises one or more of monosaccharides, disaccharides or polysaccharides.

33. A method according to claim 31 or 32, wherein the drying solution comprises fructose, saccharose and / or glucose.

34. The method according to any one of claims 31 to 33, wherein the sum of glucosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 25% by weight of the sugar present in the drying solution.

35. The method of claim 34, wherein each of the glycosyl sucrose and maltosyl sucrose is at least 18% by weight of the sugar present in the drying solution.

36. The saccharide comprising at least one 1,4 O-linked saccharose derivative is 25 to 99.99% by mass based on the dry mass of the drying solution. the method of.

37. The composition of claims 26 to 36, wherein the antibody or antibody derivative content is 0.01 to 75% by weight based on the dry weight of the drying solution, whereby the sum of the weight percentages is up to 100% by weight. The method of any one of Claims.

38. A method according to any one of claims 26 to 37, wherein the drying solution comprises one or more pharmaceutically compatible adjuvants and / or one or more salts.

38. The method of claim 36, wherein the adjuvant is an amino acid or a peptide.

40. The method of claim 39, wherein the amino acid is isoleucine.

37. The method of claim 36, wherein the peptide is a dipeptide or a tripeptide.

40. The method of claim 39, wherein the peptide is an isoleucine-containing peptide.

43. The method of claim 41 or 42, wherein the peptide is triisoleucine.

A sugar mixture containing 60 to 90% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, 41. A method according to claim 39 or 40, characterized in that it comprises 19.99% by weight of amino acids and the sum of the weight percentages is at most 100% by weight.

A sugar mixture containing 60 to 90% by weight of at least one 1,4 O-linked saccharose derivative or at least one 1,4 O-linked saccharose derivative, 43. The method according to any one of claims 40 to 42, comprising 19.99% by weight peptide.

Use of the powder according to any one of claims 22 to 24 for the manufacture of a medicament.

Use of a spray-dried powder according to claim 23 or 24 for the manufacture of an inhaled medicament.