JP2002069443A - Antioxidant and cosmetic containing the antioxidant - Google Patents
Antioxidant and cosmetic containing the antioxidantInfo
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Abstract
Description
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は抗酸化剤、殊に微細
藻類の抽出物である抗酸化剤及び該抗酸化剤を含有する
化粧料に係る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to an antioxidant, particularly to an antioxidant which is an extract of microalgae and a cosmetic containing the antioxidant.
【０００２】[0002]
【従来の技術】有効成分又は基材として油脂を配合した
種々の化粧料が従来から存在する。これらの化粧料にお
いては空気、熱及び紫外線により油脂が酸化され、経時
的に内容物が変敗する可能性がある。ヒトの表皮にも不
飽和脂肪酸等の酸化され易い物質が存在しており、これ
らの酸化により生じた過酸化物は各種の皮膚疾患や皮膚
の老化に影響を与えるものと云われている。このような
酸化を防止するために、ジブチルヒドロキシトルエン
(BHT) やブチルヒドロキシアニソール (BHA) 等の合成
抗酸化剤又は dl-α-トコフェロールや L-アスコルビン
酸 (ビタミン C) 等の天然抗酸化剤が用いられている。2. Description of the Related Art Various cosmetics containing an oil or fat as an active ingredient or a base material have conventionally existed. In these cosmetics, fats and oils are oxidized by air, heat, and ultraviolet rays, and the contents may degrade with time. Substances that are easily oxidized, such as unsaturated fatty acids, also exist in human epidermis, and peroxides generated by these oxidations are said to affect various skin diseases and skin aging. To prevent such oxidation, dibutylhydroxytoluene
Synthetic antioxidants such as (BHT) and butylhydroxyanisole (BHA) or natural antioxidants such as dl-α-tocopherol and L-ascorbic acid (vitamin C) have been used.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題乃至発明の目的】上記の
合成抗酸化剤は安全性に課題があり、最近は使用が控え
られる傾向がある。一方、上記の天然抗酸化剤は合成抗
酸化剤と比較する場合に抗酸化作用が大きく劣り、添加
量も制限を受ける。SUMMARY OF THE INVENTION The above-mentioned synthetic antioxidants have a problem in safety, and their use tends to be refrained recently. On the other hand, the above-mentioned natural antioxidants are much inferior in antioxidant activity as compared with synthetic antioxidants, and the amount added is also limited.
【０００４】従って、本発明の目的は天然物由来であっ
て安全性に優れており、従来報告されていない微細藻類
の抽出物である抗酸化剤及び該抗酸化剤を含有している
化粧料を提供することにある。[0004] Accordingly, an object of the present invention is to provide an antioxidant which is an extract of microalgae which is derived from a natural product and is excellent in safety, and which has not been reported so far, and a cosmetic containing the antioxidant. Is to provide.
【０００５】[0005]
【課題を解決し目的を達成するための手段】本発明者等
は、上記の課題を解決し目的を達成するために種々の微
細藻類について鋭意検討を重ねた結果、藍藻綱 (Cyanop
hyceae) ネンジュモ目 (Nostocales) のノーストック属
(Nostoc) 又はアファ二ゾメノン属 (Aphanizomenon)
及びユレモ目 (Oscillatoriales) のオシラトリア属 (O
scillatoria) 又はスピルリナ属 (Spirulina)、紅藻綱
(Rhodophyceae) チノリモ目 (Porphyridiales) のポル
フィリディウム属 (Porphyridium) 又はロドソルス属
(Rhodosorus)、緑藻綱(Chlorophyceae) クロロコックム
目 (Chlorococcales) のクロレラ属 (Chlorella) 及び
オオヒゲマワリ目 (Volvocales) のデュナリエラ属 (Du
naliella) 及びホシミドロ目 (Zygnematales) のミカヅ
キモ属 (Closteriumu)、ハプト藻綱 (Haptophyceae) イ
ソクリシス目 (Isochrysidales) のプリュウロクリシス
属 (Pleurochrysis) 及びプリムネシウム目 (Prymnesid
ales) のフェオキィスティス属 (Phaeocystis) 及びユ
ーグレナ藻綱 (Euglenophyceae) ユーグレナ目 (Euglen
ales) のユーグレナ属 (Euglena) に属する微細藻類の
抽出物が抗酸化作用を有し、該抽出物を天然抗酸化剤で
あるビタミン C 及びビタミン E の少なくとも一方に添
加すると抗酸化効果が相乗的に向上することを見い出し
て本発明を完成するに至った。Means for Solving the Problems and Achieving the Object The present inventors have conducted intensive studies on various microalgae in order to solve the above problems and achieve the object.
hyceae) Genus Norstock of Nostocales
(Nostoc) or Aphanizomenon
And Oscillatoriales (Oscillatoriales)
scillatoria) or Spirulina, Red algae
(Rhodophyceae) Porphyridium or Rhodosols of the order Porphyridiales
(Rhodosorus), Chlorophyceae (Chlorophyceae) Chlorococcales (Chlorella), and Chryophocera (Volvocales) Dunaliella (Du)
naliella) and Phyurochrysis (Pyurochrysis) of the order Haptophyceae (Isochrysidales) and Pleurochrysis (Prymnesid) of the order Haptophyceae (Isochrysidales)
ales) of the genus Phaeocystis and Euglenoids (Euglenophyceae)
ales) of the microalgae belonging to the genus Euglena have an antioxidant effect, and the antioxidant effect is synergistic when the extract is added to at least one of the natural antioxidants vitamin C and vitamin E. It was found that the present invention was improved, and the present invention was completed.
【０００６】ノーストック属に属する藻類としては N.
flagelliforme、N. commune、N.linckia、N. muscorum
及び N. verrucosum を例示することができ、アファ二
ゾメノン属に属する藻類としては A. flos-aquae を例
示することができ、オシラトリア属に属する藻類として
は O. neglecta、O. chalybea 及び O. curvicepsを例
示することができ、スピルリナ属に属する藻類としては
S. platensis、S.major、S. maxima 及び S. subsalsa
を例示することができ、ポリフィリディウム属に属す
る藻類としては P. purpureum 及び P. aerugineum を
例示することができ、ロドソルス属に属する藻類として
は R. marinus、R. maculata 及び R.violacea を例示
することができ、クロレラ属に属する藻類としては C.
pvrenoidosa、C. fusca、C. vurgaris、C. saccharophi
la、C. ellipsoidea、S. fusca及び S. actus を例示す
ることができ、デュナリエラ属に属する藻類としてはD.
salina 及び D. tertiolecta を例示することができ、
ミカヅキモ属に属する藻類としては C. ehrenbergii、
C. acerosum 及び C. moniliferum を例示することがで
き、プリュウロクリシス属に属する藻類としては P. ca
rterae 及び P.haptonemafera を例示することができ、
フェオキィスティス属に属する藻類としては P. pouche
tii を例示することができ、ユーグレナ属に属する藻類
としては E. gracilis を例示することができる。[0006] Algae belonging to the genus Norstock include N.
flagelliforme, N. commune, N. linckia, N. muscorum
And N. verrucosum, A. flos-aquae as an algae belonging to the genus Aphanizomenone, and O. neglecta, O. chalybea, and O. curviceps as the algae belonging to the genus Oshiratoria. And examples of algae belonging to the genus Spirulina
S. platensis, S. major, S. maxima and S. subsalsa
P. purpureum and P. aerugineum can be exemplified as algae belonging to the genus Porphyridium, and R. marinus, R. maculata and R. violacea can be exemplified as algae belonging to the genus Rhodosols. Examples of the algae belonging to the genus Chlorella include C.
pvrenoidosa, C. fusca, C. vurgaris, C. saccharophi
la., C. ellipsoidea, S. fusca and S. actus.Examples of algae belonging to the genus Dunaliella include D.
salina and D. tertiolecta,
Algae belonging to the genus Mikazukimo include C. ehrenbergii,
Examples are C. acerosum and C. moniliferum, and P. ca
rterae and P.haptonemafera,
Algae belonging to the genus Pheokissis include P. pouche
tii can be exemplified, and E. gracilis can be exemplified as an algae belonging to the genus Euglena.
【０００７】微細藻類は培養により増殖させて使用する
のが好ましい。藻類は光合成を行って自らのエネルギー
としているために、培養は光照射の下に藻類培養用の培
地を用い、通常の培養方法により行うことができる。但
し、藻類によって培養方法が若干異なるために最適条件
を設定する必要がある。既述の藻類の内で代表的なもの
について具体的な培養条件を述べれば下記の通りであ
る。The microalgae are preferably used after being propagated by culture. Since algae perform photosynthesis to generate their own energy, the culture can be performed by a normal culture method using a medium for algae culture under light irradiation. However, it is necessary to set optimal conditions because the culture method is slightly different depending on the algae. Specific culture conditions for representative ones of the algae described above are as follows.
【０００８】培養方法 1 : O. neglecta 及び N. flage
lliforme の培養培地は淡水性藍藻類を培養する場合に
用いられているものであれば格別な制限はなく、例えば
Modified Detmer medium を用いることができる。即
ち、蒸留水 1000ml に対して KNO3 1g、MgSO4・7H2O 25
0mg、K2HPO4 250mg、NaCl 100mg 及び CaCl2・2H2O10mg
を添加した溶液を調製し、該溶液に FeSO4・7H2O 2.0g
/ｌを含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/
l、MnSO4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO
4・5H2O 7.9mg/l 及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有
する微量元素混合溶液 1ml を添加した後に、pH を 9.0
に調整したものが培地として使用される。O. neglecta
の培養は細胞濃度が 0.05 - 0.1g/l となるように上記
の培地に接種し、2 リットル容のガラス製扁平フラスコ
を用いて行われる。培養期間は7 - 10 日間が適当であ
り、培養は炭酸ガスを 5% 濃度となるように混合した空
気を適当な通気手段により導入する好気的条件下におい
て且つ植物育成用蛍光灯を光源として照度を 142 - 284
μmolm-2s-1 (光合成有効量子束密度) に設定し、連続
光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 20 - 25℃
であり、23℃ 付近が望ましい。N. flagelliforme は陸
生であり液体培地を用いる培養は困難であるために、上
記の培地に寒天を 1.5 重量% 添加した培地を用いる。
即ち、蒸留水 1000ml に対して KNO3 1g、MgSO4・7H2O
250mg、K2HPO4 250mg、NaCl 100mg及びCaCl2・2H2O 10m
g を添加した溶液を調製し、該溶液に FeSO4・7H2O 2.0
g/ｌを含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/
l、MnSO4・7H2O250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4
・5H2O 7.9mg/l 及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有す
る微量元素混合溶液 1ml を添加した後に、pH を 9.0
に調整し、これに寒天を 15g/l の割合で添加したもの
が培地として使用される。この寒天培地をシャーレ (90
mmφ x 15mm) に約 10ml 流し込み、固まった処に N. f
lagelliforme を接種して培養する。尚、この藻類は他
の藻類と比較して増殖速度が遅いために、培養は20 - 3
0 日間継続して行う必要がある。培養は明期16 時間及
び暗期 8時間のサイクルとし、植物育成用蛍光灯を光源
として照度を 14.2 - 28.4μmolm-2s-1 の条件に設定す
るのが好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であり、23℃
付近が望ましい。Culturing method 1: O. neglecta and N. flage
The culture medium of lliforme is not particularly limited as long as it is used for culturing freshwater cyanobacteria.
Modified Detmer medium can be used. That is, 1 g of KNO 3 and MgSO 4 .7H 2 O 25 per 1000 ml of distilled water
0mg, K 2 HPO 4 250mg, NaCl 100mg and CaCl 2 · 2H 2 O10mg
To prepare a solution which was added, FeSO 4 · 7H 2 O 2.0g to the solution
a metal ion solution 1ml containing / l, H 3 BO 3 286mg /
l, MnSO 4 · 7H 2 O 250mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO
4 · 5H 2 O 7.9mg / l and after addition of trace element mixture solution 1ml containing Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l, a pH 9.0
The medium adjusted to is used as a culture medium. O. neglecta
Is inoculated into the above medium so that the cell concentration becomes 0.05-0.1 g / l, and is performed using a 2 liter flat glass flask. The cultivation period is preferably 7 to 10 days, and the cultivation is performed under aerobic conditions in which air mixed with carbon dioxide at a concentration of 5% is introduced by appropriate ventilation means, and using a fluorescent light for plant growth as a light source. Illuminance 142-284
It is preferably set to μmolm −2 s −1 (photosynthetic effective quantum flux density) and performed under continuous light irradiation. Culture temperature is 20-25 ℃
And around 23 ° C is desirable. Since N. flagelliforme is terrestrial and difficult to culture using a liquid medium, a medium containing 1.5% by weight of agar added to the above medium is used.
That, KNO 3 1 g against distilled water 1000ml, MgSO 4 · 7H 2 O
250mg, K 2 HPO 4 250mg, NaCl 100mg and CaCl 2 · 2H 2 O 10m
adding solution of g is prepared, FeSO 4 · 7H 2 O 2.0 the solution
g / l of a metal ion solution containing 1 ml of H 3 BO 3 286 mg /
l, MnSO 4 · 7H 2 O250mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4
· 5H 2 O 7.9mg / l after the addition of the trace element mixture solution 1ml containing and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l, a pH 9.0
And agar added to it at a rate of 15 g / l is used as the culture medium. Place the agar in a Petri dish (90
(mmφ x 15mm) about 10ml.
Inoculate lagelliforme and culture. Since this algae has a slower growth rate than other algae, cultivation is performed for 20-3
Must be done continuously for 0 days. The culture is preferably performed in a cycle of 16 hours in the light period and 8 hours in the dark period, and the illuminance is preferably set to 14.2 to 28.4 μmolm −2 s −1 using a fluorescent lamp for growing plants as a light source. The culture temperature is 20-25 ℃, 23 ℃
Near is desirable.
【０００９】培養方法 2 : S. plantensis の培養培地
は一般的な淡水性藍藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば SOT medium
を用いることができる。即ち、蒸留水 1000ml に対し
て NaNO3 2.5g、K2SO4 1.0g、K2HPO4 500mg、NaCl 1.0
g、MgSO4・7H2O 200mg、CaCl2・2H2O 40mg、FeSO4・7H2
O 10mg、Na2EDTA・2H2O 80mg 及び NaHCO3 を添加した
溶液を調製し、該溶液にH3BO3 286mg/l、MnSO4・7H2O 2
50mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O7.9mg/l
及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有する微量元素混合
溶液 1ml を添加したものが培地として使用される。S.
platensis の培養は細胞濃度が 0.05 - 0.1g/l となる
ように上記の培地に接種し、2 リットル容のガラス製扁
平フラスコを用いて行われる。培養期間は 7 - 10 日間
が適当であり、培養は炭酸ガスを 5% 濃度となるように
混合した空気を適当な通気手段により導入する好気的条
件下において且つ植物育成用蛍光灯を光源として照度を
142 - 284μmolm-2s-1 に設定し、連続光照射下で行う
のが好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であり、23℃付
近が望ましい。Culture method 2: The culture medium of S. plantensis is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater cyanobacteria. For example, SOT medium
Can be used. That is, for 1000 ml of distilled water, NaNO 3 2.5 g, K 2 SO 4 1.0 g, K 2 HPO 4 500 mg, NaCl 1.0
g, MgSO 4 · 7H 2 O 200mg, CaCl 2 · 2H 2 O 40mg, FeSO 4 · 7H 2
A solution was prepared by adding 10 mg of O, 80 mg of Na 2 EDTA.2H 2 O and NaHCO 3, and adding 286 mg / l of H 3 BO 3 and MnSO 4 .7H 2 O 2
50mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O7.9mg / l
And that the addition of trace element mixture solution 1ml containing Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l is used as a medium. S.
The culture of platensis is performed by inoculating the above medium so that the cell concentration becomes 0.05-0.1 g / l, and using a 2 liter glass flat flask. The cultivation period is preferably 7 to 10 days, and the cultivation is performed under aerobic conditions in which air mixed with carbon dioxide at a concentration of 5% is introduced by appropriate ventilation means, and using a fluorescent light for plant growth as a light source. The illuminance
It is preferable to set to 142 to 284 μmolm −2 s −1 and perform the irradiation under continuous light irradiation. The culture temperature is 20-25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１０】培養方法 3 : P. purpureum の培養培地は
一般的な海産性紅藻類を培養する場合に用いられている
ものであれば格別な制限はなく、例えば新鮮な濾過海水
1000ml に対して KNO3 1.0g、KH2PO4 70mg、FeCl3・6H2
O 2.8mg 及びNa2EDTA 19mgを添加した溶液を調製し、該
溶液にZnSO4・7H2O 40mg/l、H3BO3 600mg/l、CaCl2・2H
2O 2.0mg/l、CuSO4・5H2O 58.6mg/l、MnCl2・4H2O 629m
g/l、l 及び (NH4)6Mo7O2 ・4H2O 370mg/l を含有する
微量元素混合溶液 1ml を添加したものが培地として使
用される。該培地にP. purpureum の細胞数が 10 - 20
x 104 cells/mlとなるように接種し、2 リットル容のガ
ラス製扁平フラスコを用いて培養した。培養期間は 5 -
7 日間が適当であり、培養は空気を適当な通気手段に
より導入する好気的条件下において且つ植物育成用蛍光
灯を光源として照度を 85.2 - 113.6μmolm-2s-1 に設
定し、連続光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 2
0 -25℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culture method 3: The culture medium of P. purpureum is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine red algae. For example, fresh filtered seawater
KNO 3 1.0g, KH 2 PO 4 70mg respect 1000ml, FeCl 3 · 6H 2
O 2.8 mg, and Na 2 EDTA 19 mg was prepared by solution added, ZnSO 4 · 7H 2 O 40mg / l to the solution, H 3 BO 3 600mg / l , CaCl 2 · 2H
2 O 2.0mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O 58.6mg / l, MnCl 2 · 4H 2 O 629m
A medium containing 1 ml of a trace element mixed solution containing g / l, l and 370 mg / l of (NH 4 ) 6 Mo 7 O 2 .4H 2 O is used as a medium. P. purpureum contains 10-20 cells in the medium.
The cells were inoculated at a concentration of 10 4 cells / ml and cultured in a 2 liter flat glass flask. Culture period is 5-
7 days is appropriate, culture is performed under aerobic conditions in which air is introduced by an appropriate aeration means, and the illuminance is set to 85.2-113.6 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source. Preferably, it is performed under irradiation. Culture temperature is 2
0 -25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１１】培養方法 4 : R. marinus の培養培地は一
般的な海産性紅藻類を培養する場合に用いられているも
のであれば格別な制限はなく、例えば Modified Koch m
ediumを用いることができる。即ち、新鮮な濾過海水100
0ml に対して KNO30.75g、KH 2PO4 25mg、MgSO4・7H2O 2
0mg クエン酸アンモニウム鉄 2.5mg及び二トリロ三酢酸
10mg を添加することにより調製することができる。培
養はR. marinus の細胞数が 5 - 7 x 104 cells/ml と
なるように接種し、2 リットル容のガラス製扁平フラス
コを用いて行われる。培養期間は 7 - 10 日間が適当で
あり、培養は空気を適当な通気手段により導入する好気
的条件下において且つ植物育成用蛍光灯を光源として照
度を 85.2 - 113.6μmolm-2s-1 に設定し、連続光照射
下で行うのが好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であ
り、23℃ 付近が望ましい。Culturing method 4: The culture medium for R. marinus is
It is used when cultivating common marine red algae
There are no special restrictions, such as Modified Koch m
edium can be used. That is, fresh filtered seawater 100
KNO for 0mlThree0.75g, KH TwoPOFour 25mg, MgSOFour・ 7HTwoO 2
0mg iron ammonium citrate 2.5mg and ditrilotriacetic acid
It can be prepared by adding 10 mg. Culture
No. of cells of R. marinus is 5-7 x 10Four cells / ml and
And inoculate into a 2 liter glass flat flask.
This is performed using a button. A suitable culture period is 7-10 days.
Yes, culture is aerobic with air being introduced by appropriate aeration means
Under fluorescent conditions and using a plant growing fluorescent lamp as the light source
Degree 85.2-113.6 μmolm-2s-1 Set to, continuous light irradiation
It is preferably performed under The culture temperature is 20-25 ℃
Around 23 ° C.
【００１２】培養方法 5 : C. pyrenoidosa の培養培地
は一般的な淡水性緑藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば MC mediumを
用いることができる。即ち、蒸留水1000ml に対して KN
O3 1.25g、MgSO4・7H2O 1.25g 及び KH2PO4 1.25g を添
加した溶液を調製し、該溶液に FeSO4・7H2O 2.0g/ｌを
含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/l、MnSO
4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O
7.9mg/l 及びNa2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有する微量
元素混合溶液 1ml を添加したものが培地として使用さ
れる。尚、培養は既述の培養方法 2 に準じて行うこと
ができる。Culture method 5: The culture medium of C. pyrenoidosa is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater green algae. For example, MC medium can be used. That is, KN for 1000 ml of distilled water
O 3 1.25g, MgSO 4 · 7H 2 the O 1.25 g and KH 2 PO 4 1.25 g solution was added to prepare a metal ion solution 1ml containing FeSO 4 · 7H 2 O 2.0g / l to the solution, H 3 BO 3 286mg / l, MnSO
4 · 7H 2 O 250mg / l , ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O
That the addition of trace element mixture solution 1ml containing 7.9 mg / l and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l is used as a medium. The culture can be performed according to the culture method 2 described above.
【００１３】培養方法 6 : D. salina の培養培地は一
般的な海産性緑藻類を培養する場合に用いられているも
のであれば格別な制限はないが、塩濃度は 2M に設定す
る。即ち、新鮮な濾過海水1000ml に対して NaCl 116.8
g、KNO3 80mg、MgSO4 ・7H20 1.23g、KH2PO4 30mg 及び Na
HCO3 420mg を添加した溶液を調製し、該溶液にCuSO4・
5H2O 19.6mg/l、ZnSO4・7H2O 44mg/l、CoCl2・6H2O 20m
g/l、MnCl2・4H2O 360mg/l、Na2MoO4 ・2H2O 12.6mg/l
及び Fe-EDA 10g/l を含有する微量元素混合溶液 1ml
を添加したものが培地として使用される。尚、培養は既
述の培養方法 2に準じて行うことができる。Culture method 6: The culture medium of D. salina is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine green algae, but the salt concentration is set to 2M. That is, NaCl 116.8 for 1000 ml of fresh filtered seawater
g, KNO 3 80mg, MgSO 4 · 7H 2 0 1.23g, KH 2 PO 4 30mg and Na
Prepare a solution to which 420 mg of HCO 3 was added, and add CuSO 4
5H 2 O 19.6mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 44mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 20m
g / l, MnCl 2 · 4H 2 O 360mg / l, Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 12.6mg / l
1ml trace element mixed solution containing 10g / l of Fe-EDA and Fe-EDA
Is used as a medium. The culturing can be performed according to the culturing method 2 described above.
【００１４】培養方法 7 : C. ehrenbergii の培養培地
は一般的な淡水性緑藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば C medium
を用いることができる。即ち、蒸留水 1000ml に対して
Ca(NO3)2.・4H2O 0.15g、KNO3 0.1g、MgSO4・7H2O 0.0
4g、β-Na2 glycerophysphate 0.05g 及び Tris hydrok
isirumethyl aminomethane 0.5g を添加した溶液を調製
し、該溶液にFeCl3・6H2O 196mg/l、MnCl2・4H2O 36mg/
l、ZnCl2 10.5mg/l、CoCl2・6H2O 4mg/l、Na2MoO4・2H2
O 2.5mg/l 及び Na2-EDA 1g/l を含有する微量元素混合
溶液 1mlとチアミン塩酸塩 10mg/l、シアノコバラミン
0.1mg/l 及びビオチン 0.1mg/lを含有するビタミン混合
溶液 1ml を添加した後に、pH を 7.5 に調整したもの
が培地として使用される。培養は C. shrenbergii の細
胞数が 100 - 200 cells/ml となるように上記の培地に
接種し、500ml容角型培養を用いて行われる。培養期間
は 10 - 14 日間が適当であり、植物育成用蛍光灯を光
源として照度を 20- 60μmolm-2s-1 に設定し、明期 16
時間及び暗期 8 時間のサイクルが好ましい。培養温度
は 22 - 25℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culturing method 7: The culture medium of C. ehrenbergii is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater green algae.
Can be used. That is, for 1000 ml of distilled water
Ca (NO 3) 2. · 4H 2 O 0.15g, KNO 3 0.1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.0
4g, β-Na 2 glycerophysphate 0.05g and Tris hydrok
isirumethyl aminomethane 0.5g The solution was prepared adding, FeCl the solution 3 · 6H 2 O 196mg / l , MnCl 2 · 4H 2 O 36mg /
l, ZnCl 2 10.5mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 4mg / l, Na 2 MoO 4 · 2H 2
1 ml of a trace element mixed solution containing O 2.5 mg / l and Na 2 -EDA 1 g / l, thiamine hydrochloride 10 mg / l, cyanocobalamin
After adding 1 ml of a mixed vitamin solution containing 0.1 mg / l and 0.1 mg / l of biotin, the pH adjusted to 7.5 is used as a medium. Culture is performed by inoculating the above medium so that the cell number of C. shrenbergii becomes 100-200 cells / ml, and using a 500 ml square culture. The appropriate culture period is 10 to 14 days, and the illuminance is set to 20-60 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source.
A cycle of 8 hours and dark period is preferred. The cultivation temperature is 22-25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１５】培養方法 8 : P. carterae 及び P. pouch
etii の培養培地は一般的な海産性ハプト藻類を培養す
る場合に用いられているものであれば格別な制限はな
く、例えば Eppley's mediumを用いることができる。即
ち、新鮮な濾過海水1000ml に対して KNO3 50.5mg 及び
KH2PO4 8.7mg を添加した溶液に、CuSO4・5H2O 19.6m
g/l、ZnSO4・5H2O 44mg/l、CoCl2・6H2O 20mg/l、MnCl2
・4H2O 360mg/l、Na2MoO4 ・2H2O 12.6mg/l 及び Fe-ED
A 10g/l を含有する微量元素混合溶液 1ml を添加し、
次いでチアミン塩酸塩 200mg/l、ビオチン 1mg/l 及び
シアノコバラミン0.2mg/l を含有するビタミン混合溶液
1ml を添加することにより培地を調製する。培養はP.
carterae 及び P. pouchetii の細胞数が 10 - 20 x 10
5 cells/ml となるように接種し、2 リットル容のガラ
ス製扁平フラスコを用いて行われる。培養期間は 5 - 7
日間が適当であり、培養は空気を適当な通気手段によ
り導入する好気的条件下において且つ植物育成用蛍光灯
を光源として照度を 85.2 -142μmolm-2s-1 に設定し、
連続光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 20 -25
℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culture method 8: P. carterae and P. pouch
The culture medium of etii is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine haptoalgae. For example, Eppley's medium can be used. That is, 50.5 mg of KNO 3 and 1000 ml of fresh filtered seawater
To a solution containing 8.7 mg of KH 2 PO 4 , add CuSO 4・ 5H 2 O 19.6 m
g / l, ZnSO 4 · 5H 2 O 44mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 20mg / l, MnCl 2
・ 4H 2 O 360mg / l, Na 2 MoO 4・ 2H 2 O 12.6mg / l and Fe-ED
A 1 ml of a trace element mixed solution containing 10 g / l of A is added,
Then a vitamin mixed solution containing thiamine hydrochloride 200 mg / l, biotin 1 mg / l and cyanocobalamin 0.2 mg / l
Prepare the medium by adding 1 ml. Culture is P.
Carterae and P. pouchetii cell counts of 10-20 x 10
The cells are inoculated at 5 cells / ml and performed using a 2 liter flat glass flask. Culture period is 5-7
The days are appropriate, the culture is performed under aerobic conditions in which air is introduced by an appropriate aeration means, and the illuminance is set to 85.2 -142 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source,
It is preferable to carry out under continuous light irradiation. Culture temperature is 20-25
° C, preferably around 23 ° C.
【００１６】培養方法 9 : E. gracilis の培養培地は
一般的なユーグレナ藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば Hutner Eug
lenamedium を用いることができる。即ち、蒸留水 1000
ml に対して KH2PO4 20mgMgSO4・7H2O 25mg、酢酸ナト
リウム 400mg、クエン酸カリウム40mg、ポリペプトン 6
00mg、酵母エキス 400mg、ビタミン B12 0.5μg 及び
チアミン塩酸塩 0.4mg を添加した溶液を調製し、該溶
液にH3BO3 286mg/l、MnSO4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2
O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O 7.9mg/l 及びNa2MoO4・2H2O
2.0mg/l を含有する微量元素混合溶液 1ml を添加した
ものが培地として使用される。培養は既述の培養方法 2
に準じて行われる。Culturing method 9: The culture medium of E. gracilis is not particularly limited as long as it is used for culturing general Euglena algae.
lenamedium can be used. That is, distilled water 1000
KH 2 PO 4 20 mg MgSO 4・ 7H 2 O 25 mg, sodium acetate 400 mg, potassium citrate 40 mg, polypeptone 6 per ml
00mg, yeast extract 400mg, vitamin B 12 0.5μg and
A solution to which 0.4 mg of thiamine hydrochloride was added was prepared, and 286 mg / l of H 3 BO 3 , 250 mg / l of MnSO 4 .7H 2 O, and ZnSO 4 .7H 2 were added to the solution.
O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O 7.9mg / l and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O
The medium to which 1 ml of a trace element mixed solution containing 2.0 mg / l is added is used as a culture medium. Culture is performed using the culture method 2 described above.
It is performed according to.
【００１７】抽出溶媒としては水、エタノール、メタノ
ール、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコー
ル、アセトン、グリセリン、ポリプロピレングリコール
等の単独溶液又は混合溶液を用いることができる。抽出
は室温下でも加熱下においても実施することができる。
本発明による抗酸化剤は溶媒を含有する抽出物の状態で
あっても、例えば凍結乾燥等の手段により溶媒を除去し
た状態であっても差し支えはない。例えば、抗酸化性物
質は下記の要領により微細藻類から抽出される。 (1) 培養した藻体を収穫し、藻体濃度が 1 - 70% とな
るように水を添加し、室温 - 90℃ の温度において約 1
- 24 時間抽出し、次いで濾過した後に凍結乾燥させ
る。(2) 藻体濃度が 1 - 70% となるように 10 - 100%
エタノールを添加し、室温 - 90℃ において約 1 - 24
時間抽出し、次いで濾過し、必要に応じて凍結乾燥させ
る。(3) 藻体濃度が 1 - 70% となるように 1 - 70% 1,
3-ブチレングリコールを添加し、室温 - 90℃ の温度に
おいて 1 - 96 時間抽出し、次いで濾過した後に凍結乾
燥させる。本発明において使用される微細藻類の何れか
らも抗酸化性物質を抽出することができる。従って、1
種類又は複数種類の微細藻類を用いて抽出を行うことも
でき、又本発明による抗酸化剤は個々の微細藻類抽出物
の混合物であることもできる。As the extraction solvent, a single solution or a mixed solution of water, ethanol, methanol, 1,3-butylene glycol, propylene glycol, acetone, glycerin, polypropylene glycol and the like can be used. The extraction can be performed at room temperature or under heating.
The antioxidant according to the present invention may be in a state of an extract containing a solvent or in a state where the solvent is removed by means such as freeze-drying. For example, antioxidants are extracted from microalgae as follows. (1) Harvest the cultured alga bodies, add water so that the algal body concentration is 1-70%, and add about 1 at room temperature-90 ° C.
-Extract for 24 hours, then freeze-dry after filtering. (2) 10-100% so that the algal body concentration is 1-70%
Add ethanol and add about 1-24 at room temperature-90 ° C
Extract for a time, then filter and freeze-dry as needed. (3) 1-70% 1, so that the algal body concentration is 1-70%
Add 3-butylene glycol, extract for 1-96 hours at room temperature -90 ° C, then lyophilize after filtration. Antioxidants can be extracted from any of the microalgae used in the present invention. Therefore, 1
The extraction can be carried out using one or more microalgae, and the antioxidant according to the invention can also be a mixture of individual microalgal extracts.
【００１８】本発明による化粧料は微細藻類抽出物の他
に、例えば保湿剤及び添加物を含有していることができ
る。保湿剤としては例えばグリセリン、プロピレングリ
コール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、マル
チトール、1,3-ブチレングリコールを例示することがで
きる。添加剤としては海藻エキスがあり、その原料とし
ては褐藻綱、紅藻綱及び緑藻綱の藻類がある。The cosmetic according to the present invention may contain, for example, a humectant and additives in addition to the microalgae extract. Examples of the humectant include glycerin, propylene glycol, polyethylene glycol, sorbitol, maltitol, and 1,3-butylene glycol. As an additive, there is a seaweed extract, and as a raw material, there are algae of the brown alga, red algae and green algae.
【００１９】これらの藻類の内で、褐藻綱に属する藻類
としてはシオミドロ目のシオミドロ属、ヒンクシア属、
カギシオミドロ属、フェルドマンニア属、アキネポスト
ラ属、ゴノネマ属、イソブドウ属、キタシオミドロ属、
ピラエラ属及びナンカシオミドロ属、イソガワラ目のマ
ツモ属、イソガワラモドキ属、ニセイソガワラ属、クロ
ハンモン属、キンイロハンモン属、イソガワラ属、メソ
スポラ属及び二セイソノカワ属、ウスバオオギ目のウス
ラザキ属、クロガシラ目のクロガシラ属、スファセルラ
属、カラシザキ属、エゾカシラザキ属及びクラドステフ
ス属、ティロプテリス目のティロプテリス属、ハプロス
ポラ属及びファエオシフォニエルラ属、アミジグサ目の
アミジグサ属、ニセアミジ属、サナダグサ属、ジガミグ
サ属、フタエオオギ属、ヤレオオギ属、ハイオオギ属、
ウミウチワ属、コモングサ属及びスコレスビエラ属、ナ
ガマツモ目のコンプソネマ属、ヘカトネマ属、アスコキ
ルクス属、ムカシシオミドロ属、ナミマクラ属、ソメワ
ケグサ属、レプトネマテルラ属、ネバリモ属、シワノカ
ワ属、ナガマツモ属、ニセフトモズク属、カラフトモズ
ク属、キツネノオ属、クロモ属、クロモズク属、イシモ
ズク属、フトモズク属、モズク属、ヒモマクラ属及びニ
セモズク属、ウイキョウモ目のコモンブクロ属、イワシ
ゲ属、キタイワシゲ属、コンブモドキ属、エゾフクロ
属、ニセカヤモ属、ウイキョウモ属、シソシゲモ属、コ
ブノヒゲ属及びヨコジマノリ属、カヤモノリ目のムラチ
ドリ属、フクロノリ属、カゴメノリ属、セイヨウハバノ
リ属、カヤモノリ属及びモサクダフクロ属、ケヤリ目の
イチメガサ属、ウミボックス属及びケヤリ属、ウルシグ
サ目のウルシグサ属、コンブ目のニセツルモ属、ツルモ
属、コンブ属、トロロコンブ属、ミスジコンブ属、アナ
メ属、スジメ属、ネコアシコンブ属、クロシオメ属、ア
ラメ属、カジメ属、アントクメ属、オオウキモ属、チガ
イソ属及びワカメ属、ノテイア目のノテイア属、アスコ
セイラ目のアスコセイラ属、ドゥルヴィラエア目のドゥ
ルヴィルラエア属、ヒバマタ目のヒバマタ属、エゾイシ
ゲ属、ヒジキ属、ホンダワラ属、ラッパモク属、スギモ
ク属、ヤバネモク属、ジョロモク属、ウガノモク属及び
ホルモシーラ属等がある。Among these algae, as the algae belonging to the class of the brown algae, the genus Phylum spp.
Spirogyra, Feldmannia, Achinepora, Gononema, Isovine, Spirogyra,
Piraella spp. And Nankashimidoro spp., Isogawara spp., Isogawara spp., Niseisogawara spp., Kurohanmon spp., Kinirohanmon spp., Isogawara spp., Mesospora spp. And Niseisonokawa spp., Usubaogi spp. Genus Sphacellula, Genus Karashizaki, Genus Ezokashirazaki and Cladostefus, Genus Tilopteris from the order Tyropteris, Genus Haplospora and Genus Phaeocifonielra, Genus Amisigisa, Genus Amidacei, Genus Genus, Genus genus, Rhinoceros ,
Genus Genus, Common genus and Scolesviera, Compsonema spp. Genus, chromogen, kuromozuku, genus genus, futomozu genus, mozuku genus, genus genus genus and nisemozuku, genus genus genus, sardine genus, black eagle genus, kombomodo genus, genus genus, nisekayamo, genus genus Genus Betula and Lactarius genus, Murchidori genus, Fukuronori genus, Kagomenori genus, Cyperacea genus, Kayamonoli genus and Mosakudafukuro genus, Cypridina spp. Genus Cux and Callarius, Urushigusa of the order Urushigusa, Pseudomonaceae of the order Kombu, Genus Kombu, Genus Trolocomb, Missiscombe, Aname, Genus Eriophyllus, Necoasicomb, Kuroshiome, Alame, Genus genus, Antokume , Genus genus, genus genus and genus genus, genus Notiaia, genus Ascoceira, genus Ascoceira, genus Druvirlaea, genus Hibamata, genus Ezoishige, hijiki, genus Hondara, Rappamoc , Genus genus, genus genus, genus genus, genus genus, and genus Hormoshela.
【００２０】紅藻綱に属する藻類としてはオオイシソウ
目のオオイシソウ属、オオイシソウモドキ属、ウシケノ
リ目のウシケノリ属及びアマノリ属、イギス目のイギス
属、エゴノリ属、ソゾ属及びフジマツモ属、ノコギリシ
バ属、スギノリ目のオゴノリ属、キリンサイ属、ツノマ
タ属及びイボノリ属、カクレイト目のカクレイト属、リ
ュウモンソウ属及びエツキイワノカワ属、テングサ目の
テングサ属、カギノリ目のカギノリ属、カギケノリ属及
びタマイタダキ属、ウミゾウメン目のウミゾウメン属、
コナハダ属、カサマツ属、ガラガラ属及びチスジノリ属
等がある。Algae belonging to the class of the red algae include the genus Apiaceae, Opiacea spp., The genus Oxacea, and the genus Apocynaceae, the genus Eggis, the genus Egonori, the genus Sophia, and the genus Sawmillina, Suginogi Ogonoli of the order, Giraffes of the eye, Genus genus and Ibonori of the genus, Kakurite of the Kakureito, Ryumonsou and Echiniwanoka, Genus of the Proboscis, Genus of the genus Kaginori, Genus of the genus Odonata and the genus of the family Rhacodon
The genera include the genus Konahada, the genus Pinus, the rattle and the genus Tisinori.
【００２１】緑藻綱に属する藻類としてはオオヒゲマワ
リ目のアストレフォメラ属、プラキオモナス属、カルテ
リア属、クラミドモナス属、ユードリナ属、ゴニウム
属、パンドリナ属、プレオドリナ属及びボルボックス
属、ヨツメモ目のアステロコックス属、カエトペルティ
ス属、カラキオクロリス属、ホルモティーラ属、ホルモ
ティロプシス属、ナウトコックス属、スキゾクラミス属
及びヨツメモ属、クロロコックム目のカラキオシフォン
属、クロロコックム属、アミミドロ属ネオクロリス属、
クンショウモ属、トレボウクシア属及びスケネデスムス
属、クロロサルキ目のクロロサルキナ属、テトラキステ
ィス属、ボロディネルロプロシス属、アクシロスファエ
ラ属、ボロディネルラ属及びクロロギブス属、ヒビミド
ロ目のスティココックス属、ラフィドネマ属、ホルミデ
ィエルラ属、ミクロポロプシス属、ゲミネルラ属、ラフ
ィドネモプシス属、ラディオフィルム属、ビネクレアリ
ア属、ヒビミドロ属及びミクロスポラ属、ヨコワミドロ
目のヨコワミドロ属及びアトラクトモルファ属、カエト
フェラ目のカエトフェラ属、コレオカエテ属、ドラパル
ナルデリア属、エントクラディア属、フリッチェルラ
属、ミクロタムニオン属、スティゲオクロニウム属及び
カエトスファエリディウム属、スミレモ目のスミレモ
属、フィコペルティス属及びケファレウロス属、サヤミ
ドリ目のブルボカエテ属、エドクラディウム属及びサヤ
ミドリ属、アオサ目のかプサアオノリ属、ペルクルサリ
ア属、ヒメアオノリ属、アオノリ属、アオサ属、ヒトエ
グサ属、カワノリ属及びスキゾメリス属、シオグサ目の
ウキオリソウ属、ジュズモ属、シオグサ属、アミモヨウ
属、オオアミハ属、フシマダラ属及びヒラシオグサ属、
モツレグサ目のアクロシフオニア属、モツレグサ属及び
シリオミドロ属、ミドリゲ目のマガタマモ属、アオモグ
サ属、タンポヤリ属、ミドリゲ属、キッコウグサ属、ア
ミハ属、バロニア属及びオオバロニア属、イワズタ目の
ハウチワ属、ハネモ属，イワズタ属、マユハキモ属，ミ
ル属ツユノイト属、サボテングサ属、ぺルキルルス属及
びニセハモネ属、カサノリ目のカサノリ属、バトフォラ
属、ミズタマ属及びウスガサネ属，ホシミドロ目のネト
リウム属ヒゲオリ属，アオミドロ属，ホシミドロ属、ツ
ヅミモ属及びチリモ属等がある。Algae belonging to the class of the green algae include Astrefomela, Plachiomonas, Carteria, Chlamydomonas, Eudriina, Gonium, Pandrina, Pleodorina and Volvox, Asterococcus of the order of the genus Orthoptera Genus Topertis, genus Calachiochloris, genus Formotilla, genus Formotyroptis, genus Nautocox, genus Schizochlamis and sarcophaga, genus Calachiocifonaceae of the order Chlorococcus, genus Chlorococcum, genus Amamidro neochloris,
Genus Genus, Trevouxia and Skenedesmus, Chlorosarcina of the order Chlorophyx, Tetracystis, Borodinerloprosis, Axilosfaera, Borodinerula and Chlorogibs, Sticocox of the order Hibimidoro, Rafidonema, Hormidiera Genus, Micropolopsis, Geminerula, Raffidnemopsis, Radiofilm, Vinecharia, Hibimidro and Microspora, Yokowamidoro and Atractomorpha of the order Yokomidoro, Kaetofera of the order Cetofera, Coleokaete, Dorapar Genus Nardelia, Genus Entcladodia, Fritchellula, Microtamunion, Stigeocuronium and Caetosphaeridium, Sumiremo Sumiremo, Phycopertis And the genus Kephaleuros, the genus Bourokaethe of the order Symidridae, the genus Edcladeum and the genus Sayamidri, the order of the order Aosa or the genus Persarusaria, the genus Aeonori, the genus Aonori, the genus Aousa, the genus Genus, the genus Genus and the genus Lepidoptera Genus, Lymnaea genus, Amylonia genus, Pleurotus spp.
Acrosiphonia spp., Mothregus spp. And Shiromidro spp., Echinacea spp., Amogusa spp., Tampoyari spp., Midride sp., Lymphaea spp., Amiha spp., Baronia spp., Hauchiwa spp. Genus, genus genus genus, genus milliaceae, genus Cactus, genus Perquillus and genus genus, genus Casanori, genus Batfora, genus Mizutama and genus Utsugane, genus Netrium, genus Aomidro, Hoshimidro genus And genus Chirimo.
【００２２】本発明による化粧料は既述の微細藻類の抽
出物である抗酸化剤を含有しているものであり、化粧品
又は医薬部外品となされる。剤型に格別の制限はなく、
例えば洗顔用石鹸、ボディーシャンプー、洗髪用シャン
プー、リンス、浴用剤、乳液、クリーム、ローション、
美顔パック、化粧水、軟膏等の形態であることができ
る。The cosmetic according to the present invention contains an antioxidant, which is an extract of the aforementioned microalgae, and is used as cosmetics or quasi-drugs. There are no special restrictions on the dosage form,
For example, face wash soap, body shampoo, hair wash shampoo, rinse, bath agent, emulsion, cream, lotion,
It can be in the form of a facial pack, lotion, ointment or the like.
【００２３】[0023]
【発明の実施の形態】次に製造例、試験例及び処方例に
関連して本発明を更に詳細に且つ具体的に説明する。製造例 1 各種微細藻類の乾燥物 100g に対して水を 1000g 添加
し、室温 (25℃) の条件下で 1 時間抽出し、次いで濾
過し、濾液を凍結乾燥することにより抽出物を得た。抽
出物の収量は後記の表 1 に示されている通りであっ
た。Next, the present invention will be described in more detail and specifically with reference to Production Examples, Test Examples and Formulation Examples. Production Example 1 1000 g of water was added to 100 g of dried microalgae, extracted for 1 hour at room temperature (25 ° C.), filtered, and the filtrate was freeze-dried to obtain an extract. The yield of the extract was as shown in Table 1 below.
【００２４】製造例 2 各種微細藻類の乾燥物 100g に対してエタノールを 100
0g 添加し、室温 (25℃) の条件下で 1 時間抽出し、次
いで濾過し、濾液を減圧下にて濃縮し、更に凍結乾燥す
ることにより抽出物を得た。これらの場合の抽出物の収
量は下記の表1 に示されている。 Production Example 2 100 g of ethanol was added to 100 g of dried microalgae.
0 g was added, the mixture was extracted at room temperature (25 ° C.) for 1 hour, then filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure, and further lyophilized to obtain an extract. The extract yields in these cases are shown in Table 1 below.
【００２５】[0025]
【表１】 [Table 1]
【００２６】試験例 1 (抗酸化活性試験) 250μM DPPH エタノール溶液 1ml に 100mM Tris-HCl
緩衝液 (pH 7.4) 800μl を添加し撹拌する。次いで製
造例 1 及び 2 により得られた各種微細藻類の抽出物溶
液 200μl を添加して撹拌し、暗所において室温で 20
分間放置した後に吸光度を測定する。更に、ビタミン C
に製造例 1 により得られた微細藻類の水抽出物を 0.1
0mg 又はビタミン E に製造例 2 により得られた微細藻
類のエタノール抽出物 0.10mg を添加して DPPH ラジカ
ルの濃度を測定した。ラジカルの消去率は次式により求
めた。尚、コントロール区とは微細藻類抽出物無添加区
を意味する。 ラジカル消去率 (%) = 100 - (O.D. 517nm 試験区)/(O.
D. 517nm コントロール区) x 100 Test Example 1 (Antioxidant activity test) 100 mM Tris-HCl was added to 1 ml of 250 μM DPPH ethanol solution.
Add 800 μl of buffer (pH 7.4) and stir. Next, 200 μl of the extract solution of various microalgae obtained in Production Examples 1 and 2 was added, and the mixture was stirred.
After standing for a minute, the absorbance is measured. In addition, vitamin C
The aqueous extract of microalgae obtained in Production Example 1 was
0 mg or 0.10 mg of ethanol extract of microalgae obtained in Production Example 2 was added to 0 mg or vitamin E, and the concentration of DPPH radical was measured. The radical scavenging rate was determined by the following equation. In addition, a control section means a microalgae extract-free section. Radical scavenging rate (%) = 100-(OD 517 nm test group) / (O.
D. 517nm control) x 100
【００２７】50% ラジカル消去率濃度 (IC50) を算出し
た結果は下記の表 2 に示されている通りであり、藍藻
綱ネンジュモ目の N. flagelliforme 及び A. flos-aqu
ae、ユレモ目の O. neglecta 及び S. platensis、紅藻
綱チノリモ目の P. purpureum 及び R. marinus、緑藻
綱クロロコックム目の C. puvenoidosa 及びオオヒゲマ
ワリ目の D. salina 及びホシミドロ目の C. ehrenberg
ii、ハプト藻綱イソクリシス目の P. carterae 及びプ
リムネシウム目の P. poucetii、ユーグレナ藻綱ユーグ
レナ目のE. gracilis の抽出物に抗酸化作用が認められ
た。The results of calculating the 50% radical scavenging rate concentration (IC 50 ) are as shown in Table 2 below, and include N. flagelliforme and A. flos-aqu
ae, O. neglecta and S. platensis of the order Euremo, P. purpureum and R. marinus of the order Rhinophyceae Chinorimo, C. puvenoidosa of the order Chlorococceum Chlorococcus and D. salina of the order Oyster sunflower and C. ehrenberg of the order Hoshimidoro.
ii. Antioxidant activity was found in extracts of P. carterae of the order Haptophyceae, P. poucetii of the order Plimnesium, and E. gracilis of the order Euglena Algae.
【００２８】[0028]
【表２】 [Table 2]
【００２９】更に、ビタミン C に微細藻類の水抽出物
を又はビタミン E に微細藻類のエタノール抽出物を添
加してビタミン C 又はビタミン E の 50% ラジカル消
去率濃度 (IC50) を算出した結果は下記の表 3 に示さ
れている通りであり、微細藻類の抽出物を添加したこと
により相乗的に強い抗酸化作用の発現することが判明し
た。Furthermore, the results of calculating the 50% radical scavenging rate concentration (IC 50 ) of vitamin C or vitamin E by adding a water extract of microalgae to vitamin C or an ethanol extract of microalgae to vitamin E are shown below. As shown in Table 3 below, it was found that the addition of the microalgal extract exhibited a synergistically strong antioxidant effect.
【００３０】[0030]
【表３】 [Table 3]
【００３１】試験例 2 (酸化抑制試験) 100mg/ml のスクアレン 5% SDS 乳化溶液 0.5ml と 10m
g/ml の製造例 1 及び2 により得られた各種微細藻類抽
出物溶液 0.5ml をφ 15mm x 60mm の透明石英ガラス試
験管に導入し、太陽光 (UV 量 : 500KJ/m2) を照射した
後に、チオバルビチール酸化を行い、微細藻類の酸化抑
制率を次式により算出した。 酸化抑制率 (%) = {1 - (A - C)/(B - D)} x 100 A : 太陽光を照射した場合の微細藻類抽出物含有試料の
TBA 値、 B : 太陽光を照射した場合の微細藻類抽出物不含試料の
TBA 値、 C : 太陽光未照射における微細藻類抽出物含有試料の T
BA 値及び D : 太陽光未照射における微細藻類抽出物不含試料の T
BA 値 Test Example 2 (oxidation inhibition test) 100 mg / ml squalene 5% SDS emulsified solution 0.5 ml and 10 m
g / ml of the various microalgae extract solution 0.5ml obtained in Production Example 1 and 2 were introduced into a transparent quartz glass tube of phi 15 mm x 60 mm, sunlight (UV amount: 500 kJ / m 2) was irradiated Thereafter, thiobarbitil oxidation was performed, and the oxidation inhibition rate of the microalgae was calculated by the following equation. Oxidation inhibition rate (%) = {1-(A-C) / (B-D)} x 100 A: of the sample containing microalgae extract when exposed to sunlight
TBA value, B: Samples without microalgae extract when exposed to sunlight
TBA value, C: T of sample containing microalgae extract without sunlight
BA value and D: T of sample without microalgae extract without sunlight
BA value
【００３２】結果は下記の表 4 に示されている通りで
あり、藍藻綱ネンジュモ目の N. flagelliforme 及び
A. flos-aquae、ユレモ目の O. neglecta 及び S. plat
ensis、紅藻綱チノリモ目の P. purpureum 及び R. mar
inus、緑藻綱クロロコックム目の C. puvenoidosa 及び
オオヒゲマワリ目の D. salina 及びホシミドロ目のC.
ehrenbergii、ハプト藻綱イソクリシス目の P. cartera
e 及びプリムネシウム目の P. poucetii、ユーグレナ藻
綱ユーグレナ目の E. gracilis の抽出物が高い酸化抑
制率を示した。The results are as shown in Table 4 below, where N. flagelliforme and C.
A. flos-aquae, O. neglecta and S. plat
ensis, P. purpureum and R. mar
inus, C. puvenoidosa of the order Chlorococcus chlorophyllum, D. salina of the order Ophia terrestris, and C. scleroptera.
ehrenbergii, P. cartera of the order Haptophyceae isocrisis
e and the extracts of P. poucetii of the order Plimnesium and E. gracilis of the order Euglena Algae showed high oxidation inhibition rates.
【００３３】[0033]
【表４】 [Table 4]
【００３４】処方例 1 (洗顔用石鹸) 下記の成分 1 - 4 及び 5 - 12 を 70℃ に加温し、成
分 1 - 4 に成分 5 - 11 を添加して鹸化させ、次いで
撹拌しながら注型し、冷却することにより所望の洗顔用
石鹸を調製した。 成 分 重量% (1) ステアリン酸 8.0 (2) パルミチン酸 5.0 (3) ミリスチン酸 6.0 (4) グリセリン 8.0 (5) 椰子油脂肪酸次エタノールアミド 1.0 (6) セタノール 1.5 (7) ビタミンE 0.05 (8) ラウリル硫酸ナトリウム 3.0 (9) 水酸化カリウム 0.2 (10) 防腐剤 適量 (11) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (12) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 1 (Facial cleansing soap) The following components 1-4 and 5-12 were heated to 70 ° C., and components 5-11 were added to components 1-4, saponified, and then poured with stirring. The desired facial cleansing soap was prepared by molding and cooling. Component weight% (1) Stearic acid 8.0 (2) Palmitic acid 5.0 (3) Myristic acid 6.0 (4) Glycerin 8.0 (5) Coconut oil fatty acid lower ethanolamide 1.0 (6) Cetanol 1.5 (7) Vitamin E 0.05 (8 ) Sodium lauryl sulfate 3.0 (9) Potassium hydroxide 0.2 (10) Preservatives appropriate amount (11) Norstock ethanol extract 0.5 (12) Purified water balance (total amount is 100.0)
【００３５】処方例 2 (ローション) 下記の成分 1 - 8 を加温して溶解し、撹拌しながら冷
却することにより均一になして所望のローションを調製
した。 成 分 重量% (1) モノラウリン酸ポリオキシエチレングリコール (20) 1.0 (2) ビタミン E 0.05 (3) 1,3-ブチレングリコール 3.0 (4) ソルビトール 3.5 (5) エタノール 15.0 (6) 防腐剤 適量 (7) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (8) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 2 (Lotion) The following components 1-8 were dissolved by heating, and the mixture was cooled with stirring to obtain a desired lotion. Component weight% (1) Polyoxyethylene glycol monolaurate (20) 1.0 (2) Vitamin E 0.05 (3) 1,3-butylene glycol 3.0 (4) Sorbitol 3.5 (5) Ethanol 15.0 (6) Preservative 7) Norstock ethanol extract 0.5 (8) Remaining purified water (total amount is 100.0)
【００３６】処方例 1 (クリーム) 下記の成分 1 - 6 及び 7 - 9 を 80℃ に加温して固形
物を溶解させた後に、成分 6 - 9 を成分 1 - 5 に添加
し撹拌することにより乳化させ、次いで撹拌しながら冷
却することにより所望のクリームを調製した。 成 分 重量% (1) ステアリン酸 5.0 (2) セタノール 2.0 (3) ワセリン 10.0 (4) ビタミンE 0.05 (5) 自己乳化型ステアリン酸モノグリセリド 2 5 (6) モノステアリン酸ポリオキシエチレン (20) ソルビタン 1.0 (7) グリセリン 8.02 (8) 防腐剤 適量 (9) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (10) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 1 (Cream) After heating the following ingredients 1-6 and 7-9 to 80 ° C. to dissolve the solids, add ingredient 6-9 to ingredient 1-5 and stir. And then cooled with stirring to prepare the desired cream. Component weight% (1) Stearic acid 5.0 (2) Cetanol 2.0 (3) Vaseline 10.0 (4) Vitamin E 0.05 (5) Self-emulsifying stearic acid monoglyceride 2 5 (6) Polyoxyethylene monostearate (20) Sorbitan 1.0 (7) Glycerin 8.02 (8) Preservative appropriate amount (9) Norstock ethanol extract 0.5 (10) Purified water balance (total amount is 100.0)
【００３７】[0037]
【発明の効果】本発明による抗酸化剤は天然物である微
細藻類の抽出物であり、従って使用安全性が高い。この
抗酸化剤と天然の抗酸化剤であるビタミン C や E と併
用すると抗酸化性が相乗的に向上する。上記の抗酸化剤
を含有している本発明による化粧料は紫外線による皮膚
の炎症やニキビの予防等に好適である。The antioxidant according to the present invention is an extract of microalgae, which is a natural product, and is therefore highly safe to use. When this antioxidant is used in combination with natural antioxidants such as vitamins C and E, the antioxidant properties are synergistically improved. The cosmetic containing the above-mentioned antioxidant according to the present invention is suitable for preventing skin inflammation and acne caused by ultraviolet rays.
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【手続補正書】[Procedure amendment]
【提出日】平成１２年９月１１日（２０００．９．１
１）[Submission date] September 11, 2000 (2009.1.
1)
【手続補正１】[Procedure amendment 1]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】全文[Correction target item name] Full text
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【書類名】 明細書[Document Name] Statement
【発明の名称】 抗酸化剤及び該抗酸化剤を含有する化
粧料Title of the Invention Antioxidant and cosmetic containing the antioxidant
【特許請求の範囲】[Claims]
【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
【０００１】[0001]
【発明の属する技術分野】本発明は抗酸化剤、殊に微細
藻類の抽出物である抗酸化剤及び該抗酸化剤を含有する
化粧料に係る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to an antioxidant, particularly to an antioxidant which is an extract of microalgae and a cosmetic containing the antioxidant.
【０００２】[0002]
【従来の技術】有効成分又は基材として油脂を配合した
種々の化粧料が従来から存在する。これらの化粧料にお
いては空気、熱及び紫外線により油脂が酸化され、経時
的に内容物が変敗する可能性がある。ヒトの表皮にも不
飽和脂肪酸等の酸化され易い物質が存在しており、これ
らの酸化により生じた過酸化物は各種の皮膚疾患や皮膚
の老化に影響を与えるものと云われている。このような
酸化を防止するために、ジブチルヒドロキシトルエン
(BHT) やブチルヒドロキシアニソール (BHA) 等の合成
抗酸化剤又は dl-α-トコフェロールや L-アスコルビン
酸 (ビタミン C) 等の天然抗酸化剤が用いられている。2. Description of the Related Art Various cosmetics containing an oil or fat as an active ingredient or a base material have conventionally existed. In these cosmetics, fats and oils are oxidized by air, heat, and ultraviolet rays, and the contents may degrade with time. Substances that are easily oxidized, such as unsaturated fatty acids, also exist in human epidermis, and peroxides generated by these oxidations are said to affect various skin diseases and skin aging. To prevent such oxidation, dibutylhydroxytoluene
Synthetic antioxidants such as (BHT) and butylhydroxyanisole (BHA) or natural antioxidants such as dl-α-tocopherol and L-ascorbic acid (vitamin C) have been used.
【０００３】[0003]
【発明が解決しようとする課題乃至発明の目的】上記の
合成抗酸化剤は安全性に課題があり、最近は使用が控え
られる傾向がある。一方、上記の天然抗酸化剤は合成抗
酸化剤と比較する場合に抗酸化作用が大きく劣り、添加
量も制限を受ける。SUMMARY OF THE INVENTION The above-mentioned synthetic antioxidants have a problem in safety, and their use tends to be refrained recently. On the other hand, the above-mentioned natural antioxidants are much inferior in antioxidant activity as compared with synthetic antioxidants, and the amount added is also limited.
【０００４】従って、本発明の目的は天然物由来であっ
て安全性に優れており、従来報告されていない微細藻類
の抽出物である抗酸化剤及び該抗酸化剤を含有している
化粧料を提供することにある。[0004] Accordingly, an object of the present invention is to provide an antioxidant which is an extract of microalgae which is derived from a natural product and is excellent in safety, and which has not been reported so far, and a cosmetic containing the antioxidant. Is to provide.
【０００５】[0005]
【課題を解決し目的を達成するための手段】本発明者等
は、上記の課題を解決し目的を達成するために種々の微
細藻類について鋭意検討を重ねた結果、藍藻綱 (Cyanop
hyceae) ネンジュモ目 (Nostocales) のノーストック属
(Nostoc) 又はアファ二ゾメノン属 (Aphanizomenon)
及びユレモ目(Oscillatoriales) のオシラトリア属 (Os
cillatoria)又はスピルリナ属 (Spirulina)、紅藻綱 (R
hodophyceae) チノリモ目 (Porphyridiales) のポルフ
ィリディウム属 (Porphyridium) 又はロドソルス属 (Rh
odosorus)、緑藻綱 (Chlorophyceae) クロロコックム目
(Chlorococcales) のクロレラ属 (Chlorella)及びオオ
ヒゲマワリ目 (Volvocales) のデュナリエラ属 (Dunali
ella) 及びホシミドロ目 (Zygnematales) のミカヅキモ
属 (Closteriumu)、ハプト藻綱 (Haptophyceae) イソク
リシス目 (Isochrysidales) のプリュウロクリシス属
(Pleurochrysis) 及びプリムネシウム目 (Prymnesidale
s) のフェオキィスティス属(Phaeocystis) 及びユーグ
レナ藻綱 (Euglenophyceae) ユーグレナ目 (Euglenale
s)のユーグレナ属 (Euglena) に属する微細藻類の抽出
物が抗酸化作用を有し、該抽出物を天然抗酸化剤である
ビタミン C 及びビタミン E の少なくとも一方に添加す
ると抗酸化効果が相乗的に向上することを見い出して本
発明を完成するに至った。Means for Solving the Problems and Achieving the Object The present inventors have conducted intensive studies on various microalgae in order to solve the above problems and achieve the object.
hyceae ) Nostock of the order Nostocales
( Nostoc ) or Aphanizomenon
And Oscillatoriales of the order Oscillatoriales
cillatoria) or Spirulina (Spirulina), Benimotsuna (R
Pol Philippines di Umm genus hodophyceae) Chinorimo eyes (Porphyridiales) (Porphyridium) or Rodosorusu genus (Rh
odosorus ), Chlorophyceae ( Chlorophyceae )
Dunaliella species of the genus Chlorella (Chlorococcales) (Chlorella) and Oohigemawari eyes (Volvocales) (Dunali
ella ) and of the order Zygnematales ( Closteriumu ), Haptophyceae ( Haptophyceae ) and Prurichrysis of the order Isochrysidales
(Pleurochrysis) and Purimuneshiumu eyes (Prymnesidale
Feo Kyi stay scan the genus s) (Phaeocystis) and Euglena Motsuna (Euglenophyceae) Euglena eyes (Euglenale
s ), an extract of microalgae belonging to the genus Euglena ( Euglena ) has an antioxidant effect, and the antioxidant effect is synergistic when the extract is added to at least one of vitamin C and vitamin E, which are natural antioxidants. It was found that the present invention was improved, and the present invention was completed.
【０００６】ノーストック属に属する藻類としては N.
flagelliforme、N. commune、N.linckia、N. muscorum
及び N. verrucosum を例示することができ、アファ二
ゾメノン属に属する藻類としては A. flos-aquae を例
示することができ、オシラトリア属に属する藻類として
は O. neglecta、O. chalybea 及び O. curvicepsを例
示することができ、スピルリナ属に属する藻類としては
S. platensis、S.major、S. maxima 及び S. subsalsa
を例示することができ、ポリフィリディウム属に属す
る藻類としては P. purpureum 及び P. aerugineum を
例示することができ、ロドソルス属に属する藻類として
は R. marinus、R. maculata 及び R.violacea を例示
することができ、クロレラ属に属する藻類としては C.
pvrenoidosa、C.fusca、C. vurgaris、C. saccharophil
a、C. ellipsoidea、S. fusca及び S. actus を例示す
ることができ、デュナリエラ属に属する藻類としてはD.
salina 及び D. tertiolecta を例示することができ、
ミカヅキモ属に属する藻類としては C. ehrenbergii、
C. acerosum 及び C. moniliferum を例示することがで
き、プリュウロクリシス属に属する藻類としては P. ca
rterae 及び P.haptonemafera を例示することができ、
フェオキィスティス属に属する藻類としては P. pouche
tii を例示することができ、ユーグレナ属に属する藻類
としては E. gracilis を例示することができる。Algae belonging to the genus Norstock are N.
flagelliforme , N. commune , N. linckia , N. muscorum
And N. verrucosum ; examples of algae belonging to the genus Aphanizomenone include A. flos-aquae ; examples of algae belonging to the genus Oshiratoria include O. neglecta , O. chalybea, and O. curviceps And examples of algae belonging to the genus Spirulina
S. platensis , S. major , S. maxima and S. subsalsa
Can be exemplified, as the algae belonging to poly Philippines di um genus can be exemplified P. Purpureum and P. Aerugineum, R. Marinus as algae belonging to Rodosorusu genus, the R. Maculata and R. Violacea Examples of the algae belonging to the genus Chlorella include C.
pvrenoidosa , C. fusca , C. vurgaris , C. saccharophil
a , C. ellipsoidea , S. fusca and S. actus, and D. algal belonging to the genus Dunaliella.
salina and D. tertiolecta can be exemplified,
C. ehrenbergii , algae belonging to the genus Mikazukimo,
C. acerosum and C. moniliferum can be exemplified, and P. ca
rterae and P. haptonemafera can be exemplified,
P. pouche is an algae belonging to the genus Pheokissis
tii can be exemplified, and E. gracilis can be exemplified as an algae belonging to the genus Euglena.
【０００７】微細藻類は培養により増殖させて使用する
のが好ましい。藻類は光合成を行って自らのエネルギー
としているために、培養は光照射の下に藻類培養用の培
地を用い、通常の培養方法により行うことができる。但
し、藻類によって培養方法が若干異なるために最適条件
を設定する必要がある。既述の藻類の内で代表的なもの
について具体的な培養条件を述べれば下記の通りであ
る。The microalgae are preferably used after being propagated by culture. Since algae perform photosynthesis to generate their own energy, the culture can be performed by a normal culture method using a medium for algae culture under light irradiation. However, it is necessary to set optimal conditions because the culture method is slightly different depending on the algae. Specific culture conditions for representative ones of the algae described above are as follows.
【０００８】培養方法 1 : O. neglecta 及び N. flage
lliforme の培養培地は淡水性藍藻類を培養する場合に
用いられているものであれば格別な制限はなく、例えば
Modified Detmer medium を用いることができる。即
ち、蒸留水 1000ml に対してKNO3 1g、MgSO4・7H2O 250
mg、K2HPO4 250mg、NaCl 100mg 及び CaCl2・2H2O 10mg
を添加した溶液を調製し、該溶液に FeSO4・7H2O 2.0g
/ｌを含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/
l、MnSO4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO
4・5H2O 7.9mg/l 及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有
する微量元素混合溶液 1ml を添加した後に、pH を 9.0
に調整したものが培地として使用される。O. neglecta
の培養は細胞濃度が 0.05 - 0.1g/l となるように上記
の培地に接種し、2 リットル容のガラス製扁平フラスコ
を用いて行われる。培養期間は 7 - 10 日間が適当であ
り、培養は炭酸ガスを 5% 濃度となるように混合した空
気を適当な通気手段により導入する好気的条件下におい
て且つ植物育成用蛍光灯を光源として照度を 142 - 284
μmolm-2s-1 (光合成有効量子束密度) に設定し、連続
光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 20 - 25℃で
あり、23℃ 付近が望ましい。N. flagelliforme は陸生
であり液体培地を用いる培養は困難であるために、上記
の培地に寒天を 1.5 重量% 添加した培地を用いる。即
ち、蒸留水 1000ml に対して KNO3 1g、MgSO4・7H2O 25
0mg、K2HPO4 250mg、NaCl 100mg 及びCaCl2・2H2O 10mg
を添加した溶液を調製し、該溶液にFeSO4・7H2O 2.0g/
ｌを含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/l、
MnSO4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4・
5H2O 7.9mg/l 及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有する
微量元素混合溶液 1ml を添加した後に、pH を 9.0 に
調整し、これに寒天を 15g/l の割合で添加したものが
培地として使用される。この寒天培地をシャーレ (90mm
φ x 15mm) に約 10ml 流し込み、固まった処にN. flag
elliforme を接種して培養する。尚、この藻類は他の藻
類と比較して増殖速度が遅いために、培養は20 - 30 日
間継続して行う必要がある。培養は明期16 時間及び暗
期 8時間のサイクルとし、植物育成用蛍光灯を光源とし
て照度を14.2 - 28.4μmolm-2s-1 の条件に設定するの
が好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であり、23℃ 付近
が望ましい。Culture method 1: O. neglecta and N. flage
lliforme culture medium is not particularly limited as long as it is used when culturing freshwater cyanobacteria, for example,
Modified Detmer medium can be used. That, KNO 3 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 250 against distilled water 1000ml
mg, K 2 HPO 4 250 mg, NaCl 100 mg and CaCl 2・ 2H 2 O 10 mg
To prepare a solution which was added, FeSO 4 · 7H 2 O 2.0g to the solution
a metal ion solution 1ml containing / l, H 3 BO 3 286mg /
l, MnSO 4 · 7H 2 O 250mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO
4 · 5H 2 O 7.9mg / l and after addition of trace element mixture solution 1ml containing Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l, a pH 9.0
The medium adjusted to is used as a culture medium. O. neglecta
Is inoculated into the above medium so that the cell concentration becomes 0.05-0.1 g / l, and is performed using a 2 liter flat glass flask. The cultivation period is preferably 7 to 10 days, and the cultivation is performed under aerobic conditions in which air mixed with carbon dioxide at a concentration of 5% is introduced by appropriate ventilation means, and using a fluorescent light for plant growth as a light source. Illuminance 142-284
It is preferably set to μmolm −2 s −1 (photosynthetic effective quantum flux density) and performed under continuous light irradiation. The cultivation temperature is 20-25 ° C, preferably around 23 ° C. Since N. flagelliforme is terrestrial and difficult to culture using a liquid medium, a medium containing 1.5% by weight of agar added to the above medium is used. That is, 1 g of KNO 3 and MgSO 4 .7H 2 O 25 per 1000 ml of distilled water
0mg, K 2 HPO 4 250mg, NaCl 100mg and CaCl 2 · 2H 2 O 10mg
Solution was prepared adding, to the solution FeSO 4 · 7H 2 O 2.0g /
a metal ion solution 1ml containing l, H 3 BO 3 286mg / l,
MnSO 4 · 7H 2 O 250mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4 ·
After addition of trace element mixture solution 1ml containing 5H 2 O 7.9mg / l and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l, the pH was adjusted to 9.0, to which agar at a rate of 15 g / l The added one is used as a medium. Transfer the agar medium to a Petri dish (90 mm
about 10 ml into the tube, and N. flag
Inoculate elliforme and culture. Since the growth rate of this algae is lower than that of other algae, it is necessary to continuously culture the algae for 20 to 30 days. The culture is preferably performed in a cycle of 16 hours in the light period and 8 hours in the dark period, and the illuminance is preferably set to 14.2 to 28.4 μmolm −2 s −1 using a fluorescent lamp for growing plants as a light source. The cultivation temperature is 20-25 ° C, preferably around 23 ° C.
【０００９】培養方法 2 : S. plantensis の培養培地
は一般的な淡水性藍藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば SOT medium
を用いることができる。即ち、蒸留水 1000ml に対し
て NaNO3 2.5g、K2SO4 1.0g、K2HPO4 500mg、NaCl 1.0
g、MgSO4・7H2O 200mg、CaCl2・2H2O 40mg、FeSO4・7H2
O 10mg、Na2EDTA・2H2O 80mg 及び NaHCO3 を添加した
溶液を調製し、該溶液にH3BO3 286mg/l、MnSO4・7H2O 2
50mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O7.9mg/l
及び Na2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有する微量元素混合
溶液 1ml を添加したものが培地として使用される。S.
platensis の培養は細胞濃度が 0.05 - 0.1g/l となる
ように上記の培地に接種し、2 リットル容のガラス製扁
平フラスコを用いて行われる。培養期間は 7 - 10 日間
が適当であり、培養は炭酸ガスを 5% 濃度となるように
混合した空気を適当な通気手段により導入する好気的条
件下において且つ植物育成用蛍光灯を光源として照度を
142 - 284μmolm-2s-1 に設定し、連続光照射下で行う
のが好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であり、23℃付
近が望ましい。Culture method 2: The culture medium of S. plantensis is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater cyanobacteria. For example, SOT medium
Can be used. That is, for 1000 ml of distilled water, NaNO 3 2.5 g, K 2 SO 4 1.0 g, K 2 HPO 4 500 mg, NaCl 1.0
g, MgSO 4 · 7H 2 O 200mg, CaCl 2 · 2H 2 O 40mg, FeSO 4 · 7H 2
A solution was prepared by adding 10 mg of O, 80 mg of Na 2 EDTA.2H 2 O and NaHCO 3, and adding 286 mg / l of H 3 BO 3 and MnSO 4 .7H 2 O 2
50mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O7.9mg / l
And that the addition of trace element mixture solution 1ml containing Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l is used as a medium. S.
The culture of platensis is performed by inoculating the above medium so that the cell concentration becomes 0.05-0.1 g / l, and using a 2 liter glass flat flask. The cultivation period is preferably 7 to 10 days, and the cultivation is performed under aerobic conditions in which air mixed with carbon dioxide at a concentration of 5% is introduced by appropriate ventilation means, and using a fluorescent light for plant growth as a light source. The illuminance
It is preferable to set to 142 to 284 μmolm −2 s −1 and perform the irradiation under continuous light irradiation. The culture temperature is 20-25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１０】培養方法 3 : P. purpureum の培養培地は
一般的な海産性紅藻類を培養する場合に用いられている
ものであれば格別な制限はなく、例えば新鮮な濾過海水
1000ml に対して KNO3 1.0g、KH2PO4 70mg、FeCl3・6H2
O 2.8mg 及びNa2EDTA 19mgを添加した溶液を調製し、該
溶液にZnSO4・7H2O 40mg/l、H3BO3 600mg/l、CaCl2・2H
2O 2.0mg/l、CuSO4・5H2O 58.6mg/l、MnCl2・4H2O 629m
g/l、l 及び (NH4)6Mo7O2 ・4H2O 370mg/l を含有する
微量元素混合溶液 1ml を添加したものが培地として使
用される。該培地にP. purpureum の細胞数が 10 - 20
x 104 cells/mlとなるように接種し、2 リットル容のガ
ラス製扁平フラスコを用いて培養した。培養期間は 5 -
7 日間が適当であり、培養は空気を適当な通気手段に
より導入する好気的条件下において且つ植物育成用蛍光
灯を光源として照度を 85.2 - 113.6μmolm-2s-1 に設
定し、連続光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 2
0 -25℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culture method 3: The culture medium of P. purpureum is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine red algae. For example, fresh filtered seawater
KNO 3 1.0g, KH 2 PO 4 70mg respect 1000ml, FeCl 3 · 6H 2
O 2.8 mg, and Na 2 EDTA 19 mg was prepared by solution added, ZnSO 4 · 7H 2 O 40mg / l to the solution, H 3 BO 3 600mg / l , CaCl 2 · 2H
2 O 2.0mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O 58.6mg / l, MnCl 2 · 4H 2 O 629m
A medium containing 1 ml of a trace element mixed solution containing g / l, l and 370 mg / l of (NH 4 ) 6 Mo 7 O 2 .4H 2 O is used as a medium. P. purpureum contains 10-20 cells in the medium .
The cells were inoculated at a concentration of 10 4 cells / ml and cultured in a 2 liter flat glass flask. Culture period is 5-
7 days is appropriate, culture is performed under aerobic conditions in which air is introduced by an appropriate aeration means, and the illuminance is set to 85.2-113.6 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source. Preferably, it is performed under irradiation. Culture temperature is 2
0 -25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１１】培養方法 4 : R. marinus の培養培地は一
般的な海産性紅藻類を培養する場合に用いられているも
のであれば格別な制限はなく、例えば Modified Koch m
ediumを用いることができる。即ち、新鮮な濾過海水100
0ml に対して KNO30.75g、KH 2PO4 25mg、MgSO4・7H2O 2
0mg クエン酸アンモニウム鉄 2.5mg及び二トリロ三酢酸
10mg を添加することにより調製することができる。培
養はR. marinus の細胞数が 5 - 7 x 104 cells/ml と
なるように接種し、2 リットル容のガラス製扁平フラス
コを用いて行われる。培養期間は 7 - 10 日間が適当で
あり、培養は空気を適当な通気手段により導入する好気
的条件下において且つ植物育成用蛍光灯を光源として照
度を 85.2 - 113.6μmolm-2s-1 に設定し、連続光照射
下で行うのが好ましい。培養温度は 20 - 25℃ であ
り、23℃ 付近が望ましい。Culturing method 4:R.marinus Culture medium
It is used when cultivating common marine red algae
There are no special restrictions, such as Modified Koch m
edium can be used. That is, fresh filtered seawater 100
KNO for 0mlThree0.75g, KH TwoPOFour 25mg, MgSOFour・ 7HTwoO 2
0mg iron ammonium citrate 2.5mg and ditrilotriacetic acid
It can be prepared by adding 10 mg. Culture
EducationR.marinus 5-7 x 10 cellsFour cells / ml and
And inoculate into a 2 liter glass flat flask.
This is performed using a button. A suitable culture period is 7-10 days.
Yes, culture is aerobic with air being introduced by appropriate aeration means
Under fluorescent conditions and using a plant growing fluorescent lamp as the light source
Degree 85.2-113.6 μmolm-2s-1 Set to, continuous light irradiation
It is preferably performed under The culture temperature is 20-25 ℃
Around 23 ° C.
【００１２】培養方法 5 : C. pyrenoidosa の培養培地
は一般的な淡水性緑藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば MC mediumを
用いることができる。即ち、蒸留水1000ml に対して KN
O3 1.25g、MgSO4・7H2O 1.25g 及び KH2PO4 1.25g を添
加した溶液を調製し、該溶液に FeSO4・7H2O 2.0g/ｌを
含有する金属イオン溶液 1ml と、H3BO3 286mg/l、MnSO
4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O
7.9mg/l 及びNa2MoO4・2H2O 2.1mg/l を含有する微量
元素混合溶液 1ml を添加したものが培地として使用さ
れる。尚、培養は既述の培養方法 2 に準じて行うこと
ができる。Culturing method 5: The culture medium of C. pyrenoidosa is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater green algae. For example, MC medium can be used. That is, KN for 1000 ml of distilled water
O 3 1.25g, MgSO 4 · 7H 2 the O 1.25 g and KH 2 PO 4 1.25 g solution was added to prepare a metal ion solution 1ml containing FeSO 4 · 7H 2 O 2.0g / l to the solution, H 3 BO 3 286mg / l, MnSO
4 · 7H 2 O 250mg / l , ZnSO 4 · 7H 2 O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O
That the addition of trace element mixture solution 1ml containing 7.9 mg / l and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 2.1mg / l is used as a medium. The culture can be performed according to the culture method 2 described above.
【００１３】培養方法 6 : D. salina の培養培地は一
般的な海産性緑藻類を培養する場合に用いられているも
のであれば格別な制限はないが、塩濃度は 2M に設定す
る。即ち、新鮮な濾過海水1000ml に対して NaCl 116.8
g、KNO3 80mg、MgSO4 ・7H20 1.23g、KH2PO4 30mg 及び Na
HCO3 420mg を添加した溶液を調製し、該溶液にCuSO4・
5H2O 19.6mg/l、ZnSO4・7H2O 44mg/l、CoCl2・6H2O 20m
g/l、MnCl2・4H2O 360mg/l、Na2MoO4 ・2H2O 12.6mg/l
及び Fe-EDA 10g/l を含有する微量元素混合溶液 1ml
を添加したものが培地として使用される。尚、培養は既
述の培養方法 2に準じて行うことができる。Culture method 6: The culture medium of D. salina is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine green algae, but the salt concentration is set to 2M. That is, NaCl 116.8 for 1000 ml of fresh filtered seawater
g, KNO 3 80mg, MgSO 4 · 7H 2 0 1.23g, KH 2 PO 4 30mg and Na
Prepare a solution to which 420 mg of HCO 3 was added, and add CuSO 4
5H 2 O 19.6mg / l, ZnSO 4 · 7H 2 O 44mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 20m
g / l, MnCl 2 · 4H 2 O 360mg / l, Na 2 MoO 4 · 2H 2 O 12.6mg / l
1ml trace element mixed solution containing 10g / l of Fe-EDA and Fe-EDA
Is used as a medium. The culturing can be performed according to the culturing method 2 described above.
【００１４】培養方法 7 : C. ehrenbergii の培養培地
は一般的な淡水性緑藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば C medium
を用いることができる。即ち、蒸留水 1000ml に対して
Ca(NO3)2.・4H2O 0.15g、KNO3 0.1g、MgSO4・7H2O 0.0
4g、β-Na2 glycerophysphate 0.05g 及び Tris hydrok
isirumethyl aminomethane 0.5g を添加した溶液を調製
し、該溶液にFeCl3・6H2O 196mg/l、MnCl2・4H2O 36mg/
l、ZnCl2 10.5mg/l、CoCl2・6H2O 4mg/l、Na2MoO4・2H2
O 2.5mg/l 及び Na2-EDA 1g/l を含有する微量元素混合
溶液 1mlとチアミン塩酸塩 10mg/l、シアノコバラミン
0.1mg/l 及びビオチン 0.1mg/lを含有するビタミン混合
溶液 1ml を添加した後に、pH を 7.5 に調整したもの
が培地として使用される。培養は C. shrenbergii の細
胞数が 100 - 200 cells/ml となるように上記の培地に
接種し、500ml容角型培養を用いて行われる。培養期間
は 10 - 14 日間が適当であり、植物育成用蛍光灯を光
源として照度を20 - 60μmolm-2s-1 に設定し、明期 16
時間及び暗期 8 時間のサイクルが好ましい。培養温度
は 22 - 25℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culture method 7: The culture medium of C. ehrenbergii is not particularly limited as long as it is used for culturing general freshwater green algae.
Can be used. That is, for 1000 ml of distilled water
Ca (NO 3) 2. · 4H 2 O 0.15g, KNO 3 0.1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.0
4g, β-Na 2 glycerophysphate 0.05g and Tris hydrok
isirumethyl aminomethane 0.5g The solution was prepared adding, FeCl the solution 3 · 6H 2 O 196mg / l , MnCl 2 · 4H 2 O 36mg /
l, ZnCl 2 10.5mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 4mg / l, Na 2 MoO 4 · 2H 2
1 ml of a trace element mixed solution containing O 2.5 mg / l and Na 2 -EDA 1 g / l, thiamine hydrochloride 10 mg / l, cyanocobalamin
After adding 1 ml of a mixed vitamin solution containing 0.1 mg / l and 0.1 mg / l of biotin, the pH adjusted to 7.5 is used as a medium. Culture is performed by inoculating the above medium so that the number of cells of C. shrenbergii becomes 100-200 cells / ml, and using a 500 ml square culture. An appropriate culture period is 10 to 14 days, and the illuminance is set to 20 to 60 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source.
A cycle of 8 hours and dark period is preferred. The cultivation temperature is 22-25 ° C, preferably around 23 ° C.
【００１５】培養方法 8 : P. carterae 及び P. pouch
etii の培養培地は一般的な海産性ハプト藻類を培養す
る場合に用いられているものであれば格別な制限はな
く、例えば Eppley's mediumを用いることができる。即
ち、新鮮な濾過海水1000ml に対して KNO3 50.5mg 及び
KH2PO4 8.7mg を添加した溶液に、CuSO4・5H2O 19.6m
g/l、ZnSO4・5H2O 44mg/l、CoCl2・6H2O 20mg/l、MnCl2
・4H2O 360mg/l、Na2MoO4 ・2H2O 12.6mg/l 及び Fe-ED
A 10g/l を含有する微量元素混合溶液 1ml を添加し、
次いでチアミン塩酸塩 200mg/l、ビオチン 1mg/l 及び
シアノコバラミン0.2mg/l を含有するビタミン混合溶液
1ml を添加することにより培地を調製する。培養はP.
carterae 及び P. pouchetii の細胞数が 10 - 20 x 10
5 cells/ml となるように接種し、2 リットル容のガラ
ス製扁平フラスコを用いて行われる。培養期間は 5 - 7
日間が適当であり、培養は空気を適当な通気手段によ
り導入する好気的条件下において且つ植物育成用蛍光灯
を光源として照度を 85.2 -142μmolm-2s-1 に設定し、
連続光照射下で行うのが好ましい。培養温度は 20 -25
℃ であり、23℃ 付近が望ましい。Culture method 8: P. carterae and P. pouch
The culture medium of etii is not particularly limited as long as it is used for culturing general marine haptoalgae . For example, Eppley's medium can be used. That is, 50.5 mg of KNO 3 and 1000 ml of fresh filtered seawater
To a solution containing 8.7 mg of KH 2 PO 4 , add CuSO 4・ 5H 2 O 19.6 m
g / l, ZnSO 4 · 5H 2 O 44mg / l, CoCl 2 · 6H 2 O 20mg / l, MnCl 2
・ 4H 2 O 360mg / l, Na 2 MoO 4・ 2H 2 O 12.6mg / l and Fe-ED
A 1 ml of a trace element mixed solution containing 10 g / l of A is added,
Then a vitamin mixed solution containing thiamine hydrochloride 200 mg / l, biotin 1 mg / l and cyanocobalamin 0.2 mg / l
Prepare the medium by adding 1 ml. Culture is P.
carterae and P. pouchetii cells 10-20 x 10
The cells are inoculated at 5 cells / ml and performed using a 2 liter flat glass flask. Culture period is 5-7
The days are appropriate, the culture is performed under aerobic conditions in which air is introduced by an appropriate aeration means, and the illuminance is set to 85.2 -142 μmolm -2 s -1 using a fluorescent light for plant growth as a light source,
It is preferable to carry out under continuous light irradiation. Culture temperature is 20-25
° C, preferably around 23 ° C.
【００１６】培養方法 9 : E. gracilis の培養培地は
一般的なユーグレナ藻類を培養する場合に用いられてい
るものであれば格別な制限はなく、例えば Hutner Eug
lenamedium を用いることができる。即ち、蒸留水 1000
ml に対して KH2PO4 20mgMgSO4・7H2O 25mg、酢酸ナト
リウム 400mg、クエン酸カリウム40mg、ポリペプトン 6
00mg、酵母エキス 400mg、ビタミン B12 0.5μg 及び
チアミン塩酸塩 0.4mg を添加した溶液を調製し、該溶
液にH3BO3 286mg/l、MnSO4・7H2O 250mg/l、ZnSO4・7H2
O 22.2mg/l、CuSO4・5H2O 7.9mg/l 及びNa2MoO4・2H2O
2.0mg/l を含有する微量元素混合溶液 1ml を添加した
ものが培地として使用される。培養は既述の培養方法 2
に準じて行われる。Culture method 9: The culture medium of E. gracilis is not particularly limited as long as it is used for culturing general Euglena algae.
lenamedium can be used. That is, distilled water 1000
KH 2 PO 4 20 mg MgSO 4・ 7H 2 O 25 mg, sodium acetate 400 mg, potassium citrate 40 mg, polypeptone 6 per ml
00mg, yeast extract 400mg, vitamin B 12 0.5μg and
A solution to which 0.4 mg of thiamine hydrochloride was added was prepared, and 286 mg / l of H 3 BO 3 , 250 mg / l of MnSO 4 .7H 2 O, and ZnSO 4 .7H 2 were added to the solution.
O 22.2mg / l, CuSO 4 · 5H 2 O 7.9mg / l and Na 2 MoO 4 · 2H 2 O
The medium to which 1 ml of a trace element mixed solution containing 2.0 mg / l is added is used as a culture medium. Culture is performed using the culture method 2 described above.
It is performed according to.
【００１７】抽出溶媒としては水、エタノール、メタノ
ール、1,3-ブチレングリコール、プロピレングリコー
ル、アセトン、グリセリン、ポリプロピレングリコール
等の単独溶液又は混合溶液を用いることができる。抽出
は室温下でも加熱下においても実施することができる。
本発明による抗酸化剤は溶媒を含有する抽出物の状態で
あっても、例えば凍結乾燥等の手段により溶媒を除去し
た状態であっても差し支えはない。例えば、抗酸化性物
質は下記の要領により微細藻類から抽出される。 (1) 培養した藻体を収穫し、藻体濃度が 1 - 70% とな
るように水を添加し、室温 - 90℃ の温度において約 1
- 24 時間抽出し、次いで濾過した後に凍結乾燥させ
る。(2) 藻体濃度が 1 - 70% となるように 10 - 100%
エタノールを添加し、室温 - 90℃ において約 1 - 24
時間抽出し、次いで濾過し、必要に応じて凍結乾燥させ
る。(3) 藻体濃度が 1 - 70% となるように 1 - 70% 1,
3-ブチレングリコールを添加し、室温 - 90℃ の温度に
おいて 1 - 96 時間抽出し、次いで濾過した後に凍結乾
燥させる。本発明において使用される微細藻類の何れか
らも抗酸化性物質を抽出することができる。従って、1
種類又は複数種類の微細藻類を用いて抽出を行うことも
でき、又本発明による抗酸化剤は個々の微細藻類抽出物
の混合物であることもできる。As the extraction solvent, a single solution or a mixed solution of water, ethanol, methanol, 1,3-butylene glycol, propylene glycol, acetone, glycerin, polypropylene glycol and the like can be used. The extraction can be performed at room temperature or under heating.
The antioxidant according to the present invention may be in a state of an extract containing a solvent or in a state where the solvent is removed by means such as freeze-drying. For example, antioxidants are extracted from microalgae as follows. (1) Harvest the cultured alga bodies, add water so that the algal body concentration is 1-70%, and add about 1 at room temperature-90 ° C.
-Extract for 24 hours, then freeze-dry after filtering. (2) 10-100% so that the algal body concentration is 1-70%
Add ethanol and add about 1-24 at room temperature-90 ° C
Extract for a time, then filter and freeze-dry as needed. (3) 1-70% 1, so that the algal body concentration is 1-70%
Add 3-butylene glycol, extract for 1-96 hours at room temperature -90 ° C, then lyophilize after filtration. Antioxidants can be extracted from any of the microalgae used in the present invention. Therefore, 1
The extraction can be carried out using one or more microalgae, and the antioxidant according to the invention can also be a mixture of individual microalgal extracts.
【００１８】本発明による化粧料は微細藻類抽出物の他
に、例えば保湿剤及び添加物を含有していることができ
る。保湿剤としては例えばグリセリン、プロピレングリ
コール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、マル
チトール、1,3-ブチレングリコールを例示することがで
きる。添加剤としては海藻エキスがあり、その原料とし
ては褐藻綱、紅藻綱及び緑藻綱の藻類がある。The cosmetic according to the present invention may contain, for example, a humectant and additives in addition to the microalgae extract. Examples of the humectant include glycerin, propylene glycol, polyethylene glycol, sorbitol, maltitol, and 1,3-butylene glycol. As an additive, there is a seaweed extract, and as a raw material, there are algae of the brown alga, red algae and green algae.
【００１９】これらの藻類の内で、褐藻綱に属する藻類
としてはシオミドロ目のシオミドロ属、ヒンクシア属、
カギシオミドロ属、フェルドマンニア属、アキネポスト
ラ属、ゴノネマ属、イソブドウ属、キタシオミドロ属、
ピラエラ属及びナンカシオミドロ属、イソガワラ目のマ
ツモ属、イソガワラモドキ属、ニセイソガワラ属、クロ
ハンモン属、キンイロハンモン属、イソガワラ属、メソ
スポラ属及び二セイソノカワ属、ウスバオオギ目のウス
ラザキ属、クロガシラ目のクロガシラ属、スファセルラ
属、カラシザキ属、エゾカシラザキ属及びクラドステフ
ス属、ティロプテリス目のティロプテリス属、ハプロス
ポラ属及びファエオシフォニエルラ属、アミジグサ目の
アミジグサ属、ニセアミジ属、サナダグサ属、ジガミグ
サ属、フタエオオギ属、ヤレオオギ属、ハイオオギ属、
ウミウチワ属、コモングサ属及びスコレスビエラ属、ナ
ガマツモ目のコンプソネマ属、ヘカトネマ属、アスコキ
ルクス属、ムカシシオミドロ属、ナミマクラ属、ソメワ
ケグサ属、レプトネマテルラ属、ネバリモ属、シワノカ
ワ属、ナガマツモ属、ニセフトモズク属、カラフトモズ
ク属、キツネノオ属、クロモ属、クロモズク属、イシモ
ズク属、フトモズク属、モズク属、ヒモマクラ属及びニ
セモズク属、ウイキョウモ目のコモンブクロ属、イワシ
ゲ属、キタイワシゲ属、コンブモドキ属、エゾフクロ
属、ニセカヤモ属、ウイキョウモ属、シソシゲモ属、コ
ブノヒゲ属及びヨコジマノリ属、カヤモノリ目のムラチ
ドリ属、フクロノリ属、カゴメノリ属、セイヨウハバノ
リ属、カヤモノリ属及びモサクダフクロ属、ケヤリ目の
イチメガサ属、ウミボックス属及びケヤリ属、ウルシグ
サ目のウルシグサ属、コンブ目のニセツルモ属、ツルモ
属、コンブ属、トロロコンブ属、ミスジコンブ属、アナ
メ属、スジメ属、ネコアシコンブ属、クロシオメ属、ア
ラメ属、カジメ属、アントクメ属、オオウキモ属、チガ
イソ属及びワカメ属、ノテイア目のノテイア属、アスコ
セイラ目のアスコセイラ属、ドゥルヴィラエア目のドゥ
ルヴィルラエア属、ヒバマタ目のヒバマタ属、エゾイシ
ゲ属、ヒジキ属、ホンダワラ属、ラッパモク属、スギモ
ク属、ヤバネモク属、ジョロモク属、ウガノモク属及び
ホルモシーラ属等がある。Among these algae, as the algae belonging to the class of the brown algae, the genus Phylum spp.
Spirogyra, Feldmannia, Achinepora, Gononema, Isovine, Spirogyra,
Piraella spp. And Nankashimidoro spp., Isogawara spp., Isogawara spp., Niseisogawara spp., Kurohanmon spp., Kinirohanmon spp., Isogawara spp., Mesospora spp. And Niseisonokawa spp., Usubaogi spp. Genus Sphacellula, Genus Karashizaki, Genus Ezokashirazaki and Cladostefus, Genus Tilopteris from the order Tyropteris, Genus Haplospora and Genus Phaeocifonielra, Genus Amisigisa, Genus Amidacei, Genus Genus, Genus genus, Rhinoceros ,
Genus Genus, Common genus and Scolesviera, Compsonema spp. Genus, chromogen, kuromozuku, genus genus, futomozu genus, mozuku genus, genus genus genus and nisemozuku, genus genus genus, sardine genus, black eagle genus, kombomodo genus, genus genus, nisekayamo, genus genus Genus Betula and Lactarius genus, Murchidori genus, Fukuronori genus, Kagomenori genus, Cyperacea genus, Kayamonoli genus and Mosakudafukuro genus, Cypridina spp. Genus Cux and Callarius, Urushigusa of the order Urushigusa, Pseudomonaceae of the order Kombu, Genus Kombu, Genus Trolocomb, Missiscombe, Aname, Genus Eriophyllus, Necoasicomb, Kuroshiome, Alame, Genus genus, Antokume , Genus genus, genus genus and genus genus, genus Notiaia, genus Ascoceira, genus Ascoceira, genus Druvirlaea, genus Hibamata, genus Ezoishige, hijiki, genus Hondara, Rappamoc , Genus genus, genus genus, genus genus, genus genus, and genus Hormoshela.
【００２０】紅藻綱に属する藻類としてはオオイシソウ
目のオオイシソウ属、オオイシソウモドキ属、ウシケノ
リ目のウシケノリ属及びアマノリ属、イギス目のイギス
属、エゴノリ属、ソゾ属及びフジマツモ属、ノコギリシ
バ属、スギノリ目のオゴノリ属、キリンサイ属、ツノマ
タ属及びイボノリ属、カクレイト目のカクレイト属、リ
ュウモンソウ属及びエツキイワノカワ属、テングサ目の
テングサ属、カギノリ目のカギノリ属、カギケノリ属及
びタマイタダキ属、ウミゾウメン目のウミゾウメン属、
コナハダ属、カサマツ属、ガラガラ属及びチスジノリ属
等がある。Algae belonging to the class of the red algae include the genus Apiaceae, Opiacea spp., The genus Oxacea, and the genus Apocynaceae, the genus Eggis, the genus Egonori, the genus Sophia, and the genus Sawmillina, Suginogi Ogonoli of the order, Giraffes of the eye, Genus genus and Ibonori of the genus, Kakurite of the Kakureito, Ryumonsou and Echiniwanoka, Genus of the Proboscis, Genus of the genus Kaginori, Genus of the genus Odonata and the genus of the family Rhacodon
The genera include the genus Konahada, the genus Pinus, the rattle and the genus Tisinori.
【００２１】緑藻綱に属する藻類としてはオオヒゲマワ
リ目のアストレフォメラ属、プラキオモナス属、カルテ
リア属、クラミドモナス属、ユードリナ属、ゴニウム
属、パンドリナ属、プレオドリナ属及びボルボックス
属、ヨツメモ目のアステロコックス属、カエトペルティ
ス属、カラキオクロリス属、ホルモティーラ属、ホルモ
ティロプシス属、ナウトコックス属、スキゾクラミス属
及びヨツメモ属、クロロコックム目のカラキオシフォン
属、クロロコックム属、アミミドロ属ネオクロリス属、
クンショウモ属、トレボウクシア属及びスケネデスムス
属、クロロサルキ目のクロロサルキナ属、テトラキステ
ィス属、ボロディネルロプロシス属、アクシロスファエ
ラ属、ボロディネルラ属及びクロロギブス属、ヒビミド
ロ目のスティココックス属、ラフィドネマ属、ホルミデ
ィエルラ属、ミクロポロプシス属、ゲミネルラ属、ラフ
ィドネモプシス属、ラディオフィルム属、ビネクレアリ
ア属、ヒビミドロ属及びミクロスポラ属、ヨコワミドロ
目のヨコワミドロ属及びアトラクトモルファ属、カエト
フェラ目のカエトフェラ属、コレオカエテ属、ドラパル
ナルデリア属、エントクラディア属、フリッチェルラ
属、ミクロタムニオン属、スティゲオクロニウム属及び
カエトスファエリディウム属、スミレモ目のスミレモ
属、フィコペルティス属及びケファレウロス属、サヤミ
ドリ目のブルボカエテ属、エドクラディウム属及びサヤ
ミドリ属、アオサ目のかプサアオノリ属、ペルクルサリ
ア属、ヒメアオノリ属、アオノリ属、アオサ属、ヒトエ
グサ属、カワノリ属及びスキゾメリス属、シオグサ目の
ウキオリソウ属、ジュズモ属、シオグサ属、アミモヨウ
属、オオアミハ属、フシマダラ属及びヒラシオグサ属、
モツレグサ目のアクロシフオニア属、モツレグサ属及び
シリオミドロ属、ミドリゲ目のマガタマモ属、アオモグ
サ属、タンポヤリ属、ミドリゲ属、キッコウグサ属、ア
ミハ属、バロニア属及びオオバロニア属、イワズタ目の
ハウチワ属、ハネモ属，イワズタ属、マユハキモ属，ミ
ル属ツユノイト属、サボテングサ属、ぺルキルルス属及
びニセハモネ属、カサノリ目のカサノリ属、バトフォラ
属、ミズタマ属及びウスガサネ属，ホシミドロ目のネト
リウム属ヒゲオリ属，アオミドロ属，ホシミドロ属、ツ
ヅミモ属及びチリモ属等がある。Algae belonging to the class of the green algae include Astrefomela, Plachiomonas, Carteria, Chlamydomonas, Eudriina, Gonium, Pandrina, Pleodorina and Volvox, Asterococcus of the order of the genus Orthoptera Genus Topertis, genus Calachiochloris, genus Formotilla, genus Formotyroptis, genus Nautocox, genus Schizochlamis and sarcophaga, genus Calachiocifonaceae of the order Chlorococcus, genus Chlorococcum, genus Amamidro neochloris,
Genus Genus, Trevouxia and Skenedesmus, Chlorosarcina of the order Chlorophyx, Tetracystis, Borodinerloprosis, Axilosfaera, Borodinerula and Chlorogibs, Sticocox of the order Hibimidoro, Rafidonema, Hormidiera Genus, Micropolopsis, Geminerula, Raffidnemopsis, Radiofilm, Vinecharia, Hibimidro and Microspora, Yokowamidoro and Atractomorpha of the order Yokomidoro, Kaetofera of the order Cetofera, Coleokaete, Dorapar Genus Nardelia, Genus Entcladodia, Fritchellula, Microtamunion, Stigeocuronium and Caetosphaeridium, Sumiremo Sumiremo, Phycopertis And the genus Kephaleuros, the genus Bourokaethe of the order Symidridae, the genus Edcladeum and the genus Sayamidri, the order of the order Aosa or the genus Persarusaria, the genus Aeonori, the genus Aonori, the genus Aousa, the genus Genus, the genus Genus and the genus Lepidoptera Genus, Lymnaea genus, Amylonia genus, Pleurotus spp.
Acrosiphonia spp., Mothregus spp. And Shiromidro spp., Echinacea spp., Amogusa spp., Tampoyari spp., Midride sp., Lymphaea spp., Amiha spp., Baronia spp., Hauchiwa spp. Genus, genus genus genus, genus milliaceae, genus Cactus, genus Perquillus and genus genus, genus Casanori, genus Batfora, genus Mizutama and genus Utsugane, genus Netrium, genus Aomidro, Hoshimidro genus And genus Chirimo.
【００２２】本発明による化粧料は既述の微細藻類の抽
出物である抗酸化剤を含有しているものであり、化粧品
又は医薬部外品となされる。剤型に格別の制限はなく、
例えば洗顔用石鹸、ボディーシャンプー、洗髪用シャン
プー、リンス、浴用剤、乳液、クリーム、ローション、
美顔パック、化粧水、軟膏等の形態であることができ
る。The cosmetic according to the present invention contains an antioxidant, which is an extract of the aforementioned microalgae, and is used as cosmetics or quasi-drugs. There are no special restrictions on the dosage form,
For example, face wash soap, body shampoo, hair wash shampoo, rinse, bath agent, emulsion, cream, lotion,
It can be in the form of a facial pack, lotion, ointment or the like.
【００２３】[0023]
【発明の実施の形態】次に製造例、試験例及び処方例に
関連して本発明を更に詳細に且つ具体的に説明する。製造例 1 各種微細藻類の乾燥物 100g に対して水を 1000g 添加
し、室温 (25℃) の条件下で 1 時間抽出し、次いで濾
過し、濾液を凍結乾燥することにより抽出物を得た。抽
出物の収量は後記の表 1 に示されている通りであっ
た。Next, the present invention will be described in more detail and specifically with reference to Production Examples, Test Examples and Formulation Examples. Production Example 1 1000 g of water was added to 100 g of dried microalgae, extracted for 1 hour at room temperature (25 ° C.), filtered, and the filtrate was freeze-dried to obtain an extract. The yield of the extract was as shown in Table 1 below.
【００２４】製造例 2 各種微細藻類の乾燥物 100g に対してエタノールを 100
0g 添加し、室温 (25℃) の条件下で 1 時間抽出し、次
いで濾過し、濾液を減圧下にて濃縮し、更に凍結乾燥す
ることにより抽出物を得た。これらの場合の抽出物の収
量は下記の表1 に示されている。 Production Example 2 100 g of ethanol was added to 100 g of dried microalgae.
0 g was added, the mixture was extracted at room temperature (25 ° C.) for 1 hour, then filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure, and further lyophilized to obtain an extract. The extract yields in these cases are shown in Table 1 below.
【００２５】[0025]
【表１】 [Table 1]
【００２６】試験例 1 (抗酸化活性試験) 250μM DPPH エタノール溶液 1ml に 100mM Tris-HCl
緩衝液 (pH 7.4) 800μl を添加し撹拌する。次いで製
造例 1 及び 2 により得られた各種微細藻類の抽出物溶
液 200μl を添加して撹拌し、暗所において室温で 20
分間放置した後に吸光度を測定する。更に、ビタミン C
に製造例 1 により得られた微細藻類の水抽出物を 0.1
0mg 又はビタミン E に製造例 2 により得られた微細藻
類のエタノール抽出物 0.10mg を添加して DPPH ラジカ
ルの濃度を測定した。ラジカルの消去率は次式により求
めた。尚、コントロール区とは微細藻類抽出物無添加区
を意味する。 ラジカル消去率 (%) = 100 - (O.D. 517nm 試験区)/(O.
D. 517nm コントロール区) x 100 Test Example 1 (Antioxidant activity test) 100 mM Tris-HCl was added to 1 ml of 250 μM DPPH ethanol solution.
Add 800 μl of buffer (pH 7.4) and stir. Next, 200 μl of the extract solution of various microalgae obtained in Production Examples 1 and 2 was added, and the mixture was stirred.
After standing for a minute, the absorbance is measured. In addition, vitamin C
The aqueous extract of microalgae obtained in Production Example 1 was
0 mg or 0.10 mg of ethanol extract of microalgae obtained in Production Example 2 was added to 0 mg or vitamin E, and the concentration of DPPH radical was measured. The radical scavenging rate was determined by the following equation. In addition, a control section means a microalgae extract-free section. Radical scavenging rate (%) = 100-(OD 517 nm test group) / (O.
D. 517nm control) x 100
【００２７】50% ラジカル消去率濃度 (IC50) を算出し
た結果は下記の表 2 に示されている通りであり、藍藻
綱ネンジュモ目の N. flagelliforme 及び A. flos-aqu
ae、ユレモ目の O. neglecta 及び S. platensis、紅藻
綱チノリモ目の P. purpureum 及び R. marinus、緑藻
綱クロロコックム目の C. puvenoidosa 及びオオヒゲマ
ワリ目の D. salina 及びホシミドロ目の C. ehrenberg
ii、ハプト藻綱イソクリシス目の P. carterae 及びプ
リムネシウム目の P. poucetii、ユーグレナ藻綱ユーグ
レナ目のE. gracilis の抽出物に抗酸化作用が認められ
た。The results of calculating the 50% radical scavenging rate concentration (IC 50 ) are as shown in Table 2 below, wherein N. flagelliforme and A. flos-aqu
ae, Yuremo th O. neglecta and S. platensis, Benimotsuna Chinorimo th P. purpureum and R. marinus, green algae rope chlorococcales of C. puvenoidosa and Oohigemawari th D. salina and Hoshimidoro th C. Ehrenberg
ii, haptoglobulin Motsuna Isochrysis th P. Carterae and Purimuneshiumu th P. poucetii, the antioxidant in E. gracilis extracts of Euglena Motsuna Euglena eyes was observed.
【００２８】[0028]
【表２】 [Table 2]
【００２９】更に、ビタミン C に微細藻類の水抽出物
を又はビタミン E に微細藻類のエタノール抽出物を添
加してビタミン C 又はビタミン E の 50% ラジカル消
去率濃度 (IC50) を算出した結果は下記の表 3 に示さ
れている通りであり、微細藻類の抽出物を添加したこと
により相乗的に強い抗酸化作用の発現することが判明し
た。Furthermore, the results of calculating the 50% radical scavenging rate concentration (IC 50 ) of vitamin C or vitamin E by adding a water extract of microalgae to vitamin C or an ethanol extract of microalgae to vitamin E are shown below. As shown in Table 3 below, it was found that the addition of the microalgal extract exhibited a synergistically strong antioxidant effect.
【００３０】[0030]
【表３】 [Table 3]
【００３１】試験例 2 (酸化抑制試験) 100mg/ml のスクアレン 5% SDS 乳化溶液 0.5ml と 10m
g/ml の製造例 1 及び2 により得られた各種微細藻類抽
出物溶液 0.5ml をφ 15mm x 60mm の透明石英ガラス試
験管に導入し、太陽光 (UV 量 : 500KJ/m2) を照射した
後に、チオバルビチール酸化を行い、微細藻類の酸化抑
制率を次式により算出した。 酸化抑制率 (%) = {1 - (A - C)/(B - D)} x 100 A : 太陽光を照射した場合の微細藻類抽出物含有試料の
TBA 値、 B : 太陽光を照射した場合の微細藻類抽出物不含試料の
TBA 値、 C : 太陽光未照射における微細藻類抽出物含有試料の T
BA 値及び D : 太陽光未照射における微細藻類抽出物不含試料の T
BA 値 Test Example 2 (oxidation inhibition test) 100 mg / ml squalene 5% SDS emulsified solution 0.5 ml and 10 m
g / ml of the various microalgae extract solution 0.5ml obtained in Production Example 1 and 2 were introduced into a transparent quartz glass tube of phi 15 mm x 60 mm, sunlight (UV amount: 500 kJ / m 2) was irradiated Thereafter, thiobarbitil oxidation was performed, and the oxidation inhibition rate of the microalgae was calculated by the following equation. Oxidation inhibition rate (%) = {1-(A-C) / (B-D)} x 100 A: of the sample containing microalgae extract when exposed to sunlight
TBA value, B: Samples without microalgae extract when exposed to sunlight
TBA value, C: T of sample containing microalgae extract without sunlight
BA value and D: T of sample without microalgae extract without sunlight
BA value
【００３２】結果は下記の表 4 に示されている通りで
あり、藍藻綱ネンジュモ目の N. flagelliforme 及び
A. flos-aquae、ユレモ目の O. neglecta 及び S. plat
ensis、紅藻綱チノリモ目の P. purpureum 及び R. mar
inus、緑藻綱クロロコックム目の C. puvenoidosa 及び
オオヒゲマワリ目の D. salina 及びホシミドロ目のC.
ehrenbergii、ハプト藻綱イソクリシス目の P. cartera
e 及びプリムネシウム目の P. poucetii、ユーグレナ藻
綱ユーグレナ目の E. gracilis の抽出物が高い酸化抑
制率を示した。The results are as shown in Table 4 below, where N. flagelliforme and
A. flos-aquae , O. neglecta and S. plat
ensis , P. purpureum and R. mar
inus, green algae rope chlorococcales of C. puvenoidosa and Oohigemawari th D. salina and Hoshimidoro th C.
ehrenbergii , P. cartera of the Haptophyceae isocrisis
e and extracts of P. poucetii of the order Plimnesium and E. gracilis of the order Euglena Algae showed high oxidation inhibition rates.
【００３３】[0033]
【表４】 [Table 4]
【００３４】処方例 1 (洗顔用石鹸) 下記の成分 1 - 4 及び 5 - 12 を 70℃ に加温し、成
分 1 - 4 に成分 5 - 11 を添加して鹸化させ、次いで
撹拌しながら注型し、冷却することにより所望の洗顔用
石鹸を調製した。 成 分 重量% (1) ステアリン酸 8.0 (2) パルミチン酸 5.0 (3) ミリスチン酸 6.0 (4) グリセリン 8.0 (5) 椰子油脂肪酸次エタノールアミド 1.0 (6) セタノール 1.5 (7) ビタミンE 0.05 (8) ラウリル硫酸ナトリウム 3.0 (9) 水酸化カリウム 0.2 (10) 防腐剤 適量 (11) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (12) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 1 (Facial cleansing soap) The following components 1-4 and 5-12 were heated to 70 ° C., and components 5-11 were added to components 1-4, saponified, and then poured with stirring. The desired facial cleansing soap was prepared by molding and cooling. Component weight% (1) Stearic acid 8.0 (2) Palmitic acid 5.0 (3) Myristic acid 6.0 (4) Glycerin 8.0 (5) Coconut oil fatty acid lower ethanolamide 1.0 (6) Cetanol 1.5 (7) Vitamin E 0.05 (8 ) Sodium lauryl sulfate 3.0 (9) Potassium hydroxide 0.2 (10) Preservatives appropriate amount (11) Norstock ethanol extract 0.5 (12) Purified water balance (total amount is 100.0)
【００３５】処方例 2 (ローション) 下記の成分 1 - 8 を加温して溶解し、撹拌しながら冷
却することにより均一になして所望のローションを調製
した。 成 分 重量% (1) モノラウリン酸ポリオキシエチレングリコール (20) 1.0 (2) ビタミン E 0.05 (3) 1,3-ブチレングリコール 3.0 (4) ソルビトール 3.5 (5) エタノール 15.0 (6) 防腐剤 適量 (7) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (8) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 2 (Lotion) The following components 1-8 were dissolved by heating, and the mixture was cooled with stirring to obtain a desired lotion. Component weight% (1) Polyoxyethylene glycol monolaurate (20) 1.0 (2) Vitamin E 0.05 (3) 1,3-butylene glycol 3.0 (4) Sorbitol 3.5 (5) Ethanol 15.0 (6) Preservative 7) Norstock ethanol extract 0.5 (8) Remaining purified water (total amount is 100.0)
【００３６】処方例 1 (クリーム) 下記の成分 1 - 6 及び 7 - 9 を 80℃ に加温して固形
物を溶解させた後に、成分 6 - 9 を成分 1 - 5 に添加
し撹拌することにより乳化させ、次いで撹拌しながら冷
却することにより所望のクリームを調製した。 成 分 重量% (1) ステアリン酸 5.0 (2) セタノール 2.0 (3) ワセリン 10.0 (4) ビタミンE 0.05 (5) 自己乳化型ステアリン酸モノグリセリド 2 5 (6) モノステアリン酸ポリオキシエチレン (20) ソルビタン 1.0 (7) グリセリン 8.02 (8) 防腐剤 適量 (9) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (10) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 1 (Cream) After heating the following ingredients 1-6 and 7-9 to 80 ° C. to dissolve the solids, add ingredient 6-9 to ingredient 1-5 and stir. And then cooled with stirring to prepare the desired cream. Component weight% (1) Stearic acid 5.0 (2) Cetanol 2.0 (3) Vaseline 10.0 (4) Vitamin E 0.05 (5) Self-emulsifying stearic acid monoglyceride 2 5 (6) Polyoxyethylene monostearate (20) Sorbitan 1.0 (7) Glycerin 8.02 (8) Preservative appropriate amount (9) Norstock ethanol extract 0.5 (10) Purified water balance (total amount is 100.0)
【００３７】[0037]
【発明の効果】本発明による抗酸化剤は天然物である微
細藻類の抽出物であり、従って使用安全性が高い。この
抗酸化剤と天然の抗酸化剤であるビタミン C や E と併
用すると抗酸化性が相乗的に向上する。上記の抗酸化剤
を含有している本発明による化粧料は紫外線による皮膚
の炎症やニキビの予防等に好適である。 ─────────────────────────────────────────────────────
The antioxidant according to the present invention is an extract of microalgae, which is a natural product, and is therefore highly safe to use. When this antioxidant is used in combination with natural antioxidants such as vitamins C and E, the antioxidant properties are synergistically improved. The cosmetic containing the above-mentioned antioxidant according to the present invention is suitable for preventing skin inflammation and acne caused by ultraviolet rays. ────────────────────────────────────────────────── ───
【手続補正書】[Procedure amendment]
【提出日】平成１２年９月２８日（２０００．９．２
８）[Submission date] September 28, 2000 (2009.2)
8)
【手続補正１】[Procedure amendment 1]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】請求項１[Correction target item name] Claim 1
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【手続補正２】[Procedure amendment 2]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】請求項２[Correction target item name] Claim 2
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【手続補正３】[Procedure amendment 3]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】０００５[Correction target item name] 0005
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【０００５】[0005]
【課題を解決し目的を達成するための手段】本発明者等
は、上記の課題を解決し目的を達成するために種々の微
細藻類について鋭意検討を重ねた結果、藍藻綱 (Cyanop
hyceae) ネンジュモ目 (Nostocales) のノーストック属
(Nostoc) 又はアファニゾメノン属 (Aphanizomenon)
及びユレモ目(Oscillatoriales) のオシラトリア属 (Os
cillatoria)又はスピルリナ属 (Spirulina)、紅藻綱 (R
hodophyceae) チノリモ目 (Porphyridiales) のポルフ
ィリディウム属 (Porphyridium) 又はロドソルス属 (Rh
odosorus)、緑藻綱 (Chlorophyceae) クロロコックム目
(Chlorococcales) のクロレラ属 (Chlorella)及びオオ
ヒゲマワリ目 (Volvocales) のデュナリエラ属 (Dunali
ella) 及びホシミドロ目 (Zygnematales) のミカヅキモ
属 (Closteriumu)、ハプト藻綱 (Haptophyceae) イソク
リシス目 (Isochrysidales) のプリュウロクリシス属
(Pleurochrysis) 及びプリムネシウム目 (Prymnesidale
s) のフェオキィスティス属(Phaeocystis) 及びユーグ
レナ藻綱 (Euglenophyceae) ユーグレナ目 (Euglenale
s)のユーグレナ属 (Euglena) に属する微細藻類の抽出
物が抗酸化作用を有し、該抽出物を天然抗酸化剤である
ビタミン C 及びビタミン E の少なくとも一方に添加す
ると抗酸化効果が相乗的に向上することを見い出して本
発明を完成するに至った。Means for Solving the Problems and Achieving the Object The present inventors have conducted intensive studies on various microalgae in order to solve the above problems and achieve the object.
hyceae ) Nostock of the order Nostocales
(Nostoc) or Africa Anizo Menon genus (Aphanizomenon)
And Oscillatoriales of the order Oscillatoriales
cillatoria) or Spirulina (Spirulina), Benimotsuna (R
Pol Philippines di Umm genus hodophyceae) Chinorimo eyes (Porphyridiales) (Porphyridium) or Rodosorusu genus (Rh
odosorus ), Chlorophyceae ( Chlorophyceae )
Dunaliella species of the genus Chlorella (Chlorococcales) (Chlorella) and Oohigemawari eyes (Volvocales) (Dunali
ella ) and of the order Zygnematales ( Closteriumu ), Haptophyceae ( Haptophyceae ) and Prurichrysis of the order Isochrysidales
(Pleurochrysis) and Purimuneshiumu eyes (Prymnesidale
Feo Kyi stay scan the genus s) (Phaeocystis) and Euglena Motsuna (Euglenophyceae) Euglena eyes (Euglenale
s ), an extract of microalgae belonging to the genus Euglena ( Euglena ) has an antioxidant effect, and the antioxidant effect is synergistic when the extract is added to at least one of vitamin C and vitamin E, which are natural antioxidants. It was found that the present invention was improved, and the present invention was completed.
【手続補正４】[Procedure amendment 4]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】０００６[Correction target item name] 0006
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【０００６】ノーストック属に属する藻類としては N.
flagelliforme、N. commune、N.linckia、N. muscorum
及び N. verrucosum を例示することができ、アファニ
ゾメノン属に属する藻類としては A. flos-aquae を例
示することができ、オシラトリア属に属する藻類として
は O. neglecta、O. chalybea 及び O. curvicepsを例
示することができ、スピルリナ属に属する藻類としては
S. platensis、S.major、S. maxima 及び S. subsalsa
を例示することができ、ポリフィリディウム属に属す
る藻類としては P. purpureum 及び P. aerugineum を
例示することができ、ロドソルス属に属する藻類として
は R. marinus、R. maculata 及び R.violacea を例示
することができ、クロレラ属に属する藻類としては C.
pvrenoidosa、C.fusca、C. vurgaris、C. saccharophil
a、C. ellipsoidea、S. fusca及び S. actus を例示す
ることができ、デュナリエラ属に属する藻類としては
D. salina 及び D. tertiolecta を例示することがで
き、ミカヅキモ属に属する藻類としては C. ehrenbergi
i、C. acerosum 及び C. moniliferum を例示すること
ができ、プリュウロクリシス属に属する藻類としては
P. carterae 及び P.haptonemafera を例示することが
でき、フェオキィスティス属に属する藻類としては P.
pouchetii を例示することができ、ユーグレナ属に属す
る藻類としては E. gracilis を例示することができ
る。Algae belonging to the genus Norstock are N.
flagelliforme , N. commune , N. linckia , N. muscorum
And N. Verrucosum can be exemplified, Africa § two
The algae belonging to the zone Menon genus A. Flos-aquae can be exemplified, as the algae belonging to the Oscillatoria spp O. Neglecta, O. Chalybea and O. Curviceps can be exemplified, algae belonging to the genus Spirulina as
S. platensis , S. major , S. maxima and S. subsalsa
Can be exemplified, as the algae belonging to poly Philippines di um genus can be exemplified P. Purpureum and P. Aerugineum, R. Marinus as algae belonging to Rodosorusu genus, the R. Maculata and R. Violacea Examples of the algae belonging to the genus Chlorella include C.
pvrenoidosa , C. fusca , C. vurgaris , C. saccharophil
a , C. ellipsoidea , S. fusca and S. actus can be mentioned as examples of algae belonging to the genus Dunaliella
D. salina and D. tertiolecta can be exemplified, and C. ehrenbergi
i , C. acerosum and C. moniliferum can be exemplified, and as the algae belonging to the genus Prurichrysis,
P. Carterae and P. Haptonemafera can be exemplified, as the algae belonging to pheomelanin Qiao Constitution scan genus P.
pouchetii can be exemplified, and E. gracilis can be exemplified as algae belonging to the genus Euglena.
【手続補正５】[Procedure amendment 5]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】００１９[Correction target item name] 0019
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【００１９】これらの藻類の内で、褐藻綱に属する藻類
としてはシオミドロ目のシオミドロ属、ヒンクシア属、
カギシオミドロ属、フェルドマンニア属、アキネポスト
ラ属、ゴノネマ属、イソブドウ属、キタシオミドロ属、
ピラエラ属及びナンカシオミドロ属、イソガワラ目のマ
ツモ属、イソガワラモドキ属、ニセイソガワラ属、クロ
ハンモン属、キンイロハンモン属、イソガワラ属、メソ
スポラ属及びニセイソノカワ属、ウスバオオギ目のウス
ラザキ属、クロガシラ目のクロガシラ属、スファセルラ
属、カラシザキ属、エゾカシラザキ属及びクラドステフ
ス属、ティロプテリス目のティロプテリス属、ハプロス
ポラ属及びファエオシフォニエルラ属、アミジグサ目の
アミジグサ属、ニセアミジ属、サナダグサ属、ジガミグ
サ属、フタエオオギ属、ヤレオオギ属、ハイオオギ属、
ウミウチワ属、コモングサ属及びスコレスビエラ属、ナ
ガマツモ目のコンプソネマ属、ヘカトネマ属、アスコキ
ルクス属、ムカシシオミドロ属、ナミマクラ属、ソメワ
ケグサ属、レプトネマテルラ属、ネバリモ属、シワノカ
ワ属、ナガマツモ属、ニセフトモズク属、カラフトモズ
ク属、キツネノオ属、クロモ属、クロモズク属、イシモ
ズク属、フトモズク属、モズク属、ヒモマクラ属及びニ
セモズク属、ウイキョウモ目のコモンブクロ属、イワシ
ゲ属、キタイワシゲ属、コンブモドキ属、エゾフクロ
属、ニセカヤモ属、ウイキョウモ属、シソシゲモ属、コ
ブノヒゲ属及びヨコジマノリ属、カヤモノリ目のムラチ
ドリ属、フクロノリ属、カゴメノリ属、セイヨウハバノ
リ属、カヤモノリ属及びモサクダフクロ属、ケヤリ目の
イチメガサ属、ウミボックス属及びケヤリ属、ウルシグ
サ目のウルシグサ属、コンブ目のニセツルモ属、ツルモ
属、コンブ属、トロロコンブ属、ミスジコンブ属、アナ
メ属、スジメ属、ネコアシコンブ属、クロシオメ属、ア
ラメ属、カジメ属、アントクメ属、オオウキモ属、チガ
イソ属及びワカメ属、ノテイア目のノテイア属、アスコ
セイラ目のアスコセイラ属、ドゥルヴィラエア目のドゥ
ルヴィルラエア属、ヒバマタ目のヒバマタ属、エゾイシ
ゲ属、ヒジキ属、ホンダワラ属、ラッパモク属、スギモ
ク属、ヤバネモク属、ジョロモク属、ウガノモク属及び
ホルモシーラ属等がある。Among these algae, as the algae belonging to the class of the brown algae, the genus Phylum spp.
Spirogyra, Feldmannia, Achinepora, Gononema, Isovine, Spirogyra,
Piraera genus and Nankashiomidoro genus, Isogawara eyes of Matsumo genus Isogawaramodoki genus Niseisogawara genus Kurohanmon genus Kin'irohanmon genus Isogawara genus, Mesosupora Shoku及beauty false Isonokawa genus, Usubaoogi eyes of Usurazaki genus Kurogashira genus Kurogashira eyes , Sfacellula, Karashizaki, Ezokashirazaki and Cladostehus, Tylopteris of the order Tylopteris, Haprospora and Phaeosiphonielra, Amidigsa of the order Amidigsa, Genus Genus, Sanadagusa, Genus spp. Genus,
Genus Genus, Common genus and Scolesviera, Compsonema spp. Genus, chromogen, kuromozuku, genus genus, futomozu genus, mozuku genus, genus genus genus and nisemozuku, genus genus genus, sardine genus, black eagle genus, kombomodo genus, genus genus, nisekayamo, genus genus Genus Betula and Lactarius genus, Murchidori genus, Fukuronori genus, Kagomenori genus, Cyperacea genus, Kayamonoli genus and Mosakudafukuro genus, Cypridina spp. Genus Cux and Callarius, Urushigusa of the order Urushigusa, Pseudomonaceae of the order Kombu, Genus Kombu, Genus Trolocomb, Missiscombe, Aname, Genus Eriophyllus, Necoasicomb, Kuroshiome, Alame, Genus genus, Antokume , Genus genus, genus genus and genus genus, genus Notiaia, genus Ascoceira, genus Ascoceira, genus Druvirlaea, genus Hibamata, genus Ezoishige, hijiki, genus Hondara, Rappamoc , Genus genus, genus genus, genus genus, genus genus, and genus Hormoshela.
【手続補正６】[Procedure amendment 6]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】００２１[Correction target item name] 0021
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【００２１】緑藻綱に属する藻類としてはオオヒゲマワ
リ目のアストレフォメラ属、プラキオモナス属、カルテ
リア属、クラミドモナス属、ユードリナ属、ゴニウム
属、パンドリナ属、プレオドリナ属及びボルボックス
属、ヨツメモ目のアステロコックス属、カエトペルティ
ス属、カラキオクロリス属、ホルモティーラ属、ホルモ
ティロプシス属、ナウトコックス属、スキゾクラミス属
及びヨツメモ属、クロロコックム目のカラキオシフォン
属、クロロコックム属、アミミドロ属ネオクロリス属、
クンショウモ属、トレボウクシア属及びスケネデスムス
属、クロロサルキ目のクロロサルキナ属、テトラキステ
ィス属、ボロディネルロプロシス属、アクシロスファエ
ラ属、ボロディネルラ属及びクロロギブス属、ヒビミド
ロ目のスティココックス属、ラフィドネマ属、ホルミデ
ィエルラ属、ミクロポロプシス属、ゲミネルラ属、ラフ
ィドネモプシス属、ラディオフィルム属、ビネクレアリ
ア属、ヒビミドロ属及びミクロスポラ属、ヨコワミドロ
目のヨコワミドロ属及びアトラクトモルファ属、カエト
フェラ目のカエトフェラ属、コレオカエテ属、ドラパル
ナルデリア属、エントクラディア属、フリッチェルラ
属、ミクロタムニオン属、スティゲオクロニウム属及び
カエトスファエリディウム属、スミレモ目のスミレモ
属、フィコペルティス属及びケファレウロス属、サヤミ
ドリ目のブルボカエテ属、エドクラディウム属及びサヤ
ミドリ属、アオサ目のカプサアオノリ属、ペルクルサリ
ア属、ヒメアオノリ属、アオノリ属、アオサ属、ヒトエ
グサ属、カワノリ属及びスキゾメリス属、シオグサ目の
ウキオリソウ属、ジュズモ属、シオグサ属、アミモヨウ
属、オオアミハ属、フシマダラ属及びヒラシオグサ属、
モツレグサ目のアクロシフオニア属、モツレグサ属及び
シリオミドロ属、ミドリゲ目のマガタマモ属、アオモグ
サ属、タンポヤリ属、ミドリゲ属、キッコウグサ属、ア
ミハ属、バロニア属及びオオバロニア属、イワズタ目の
ハウチワ属、ハネモ属、イワズタ属、マユハキモ属、ミ
ル属、ツユノイト属、サボテングサ属、ぺルキルルス属
及びニセハモネ属、カサノリ目のカサノリ属、バトフォ
ラ属、ミズタマ属及びウスガサネ属、ホシミドロ目のネ
トリウム属、ヒゲオリ属、アオミドロ属、ホシミドロ
属、ツヅミモ属及びチリモ属等がある。Algae belonging to the class of the green algae include Astrefomela, Plachiomonas, Carteria, Chlamydomonas, Eudriina, Gonium, Pandrina, Pleodorina and Volvox, Asterococcus of the order of the genus Orthoptera Genus Topertis, genus Calachiochloris, genus Formotilla, genus Formotyroptis, genus Nautocox, genus Schizochlamis and sarcophaga, genus Calachiocifonaceae of the order Chlorococcus, genus Chlorococcum, genus Amamidro neochloris,
Genus Genus, Trevouxia and Skenedesmus, Chlorosarcina of the order Chlorophyx, Tetracystis, Borodinerloprosis, Axilosfaera, Borodinerula and Chlorogibs, Sticocox of the order Hibimidoro, Rafidonema, Hormidiera Genus, Micropolopsis, Geminerula, Raffidnemopsis, Radiofilm, Vinecharia, Hibimidro and Microspora, Yokowamidoro and Atractomorpha of the order Yokomidoro, Kaetofera of the order Cetofera, Coleokaete, Dorapar Genus Nardelia, Genus Entcladodia, Fritchellula, Microtamunion, Stigeocuronium and Caetosphaeridium, Sumiremo Sumiremo, Phycopertis And Kefareurosu genus, Sayamidori eyes of Burubokaete genus, Edokuradiumu genus and Sayamidori genus Ulva eyes of Kapu Saaonori genus Perukurusaria genus Himeaonori spp., Enteromorpha spp., Ulva spp., Hitoegusa genus Kawanori genus and Sukizomerisu genus Cladophora eyes of Ukiorisou genus, Genus genus, genus genus, genus genus, genus genus, genus Fushimadara and genus Broadbill,
Motsuregusa eyes of Akuroshifuonia genus, Motsuregusa genus and Shiriomidoro genus, Midorige eyes of Magatamamo genus Aomogusa genus Tanpoyari genus Midorige genus Kikkougusa genus, the shear genus Baronia genus and Oobaronia genus, Iwazuta eyes of Hauchiwa genus Hanemo genus, Lee Wazuta genus Mayuhakimo genus codium, Tsu Yunoito genus Sabotengusa genus Bae Rukirurusu genus and Nisehamone genus acetabularia acetabulum th acetabularia, Batofora genus polka genus and Usugasane genus, e Shimidoro th Netoriumu genus, human Geori genus Spirogyra spp , ho Shimidoro genus, there is a Tsudzumimo genus and desmid the genus, and the like.
【手続補正７】[Procedure amendment 7]
【補正対象書類名】明細書[Document name to be amended] Statement
【補正対象項目名】００３４[Correction target item name] 0034
【補正方法】変更[Correction method] Change
【補正内容】[Correction contents]
【００３４】処方例 1 (洗顔用石鹸) 下記の成分 1 - 4 及び 5 - 12 を 70℃ に加温し、成
分 1 - 4 に成分 5 - 11 を添加して鹸化させ、次いで
撹拌しながら注型し、冷却することにより所望の洗顔用
石鹸を調製した。 成 分 重量% (1) ステアリン酸 8.0 (2) パルミチン酸 5.0 (3) ミリスチン酸 6.0 (4) グリセリン 8.0 (5) 椰子油脂肪酸ジエタノールアミド 1.0 (6) セタノール 1.5 (7) ビタミンE 0.05 (8) ラウリル硫酸ナトリウム 3.0 (9) 水酸化カリウム 0.2 (10) 防腐剤 適量 (11) ノーストックのエタノール抽出物 0.5 (12) 精製水 残部 (全体量を 100.0 とする) Formulation Example 1 (Facial cleansing soap) The following components 1-4 and 5-12 were heated to 70 ° C., and components 5-11 were added to components 1-4, saponified, and then poured with stirring. The desired facial cleansing soap was prepared by molding and cooling. Ingredient wt% (1) Stearic acid 8.0 (2) palmitic acid 5.0 (3) Myristic acid 6.0 (4) Glycerin 8.0 (5) coconut oil fatty acid diethyl ethanol amide 1.0 (6) Cetanol 1.5 (7) Vitamin E 0.05 ( 8) Sodium lauryl sulfate 3.0 (9) Potassium hydroxide 0.2 (10) Preservatives appropriate amount (11) Norstock ethanol extract 0.5 (12) Purified water balance (total amount is 100.0)
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 山口 祐司 岐阜県岐阜市曙町４−15 ＭＡＣ総合研究 所 内 (72)発明者 竹中 裕行 岐阜県岐阜市曙町４−15 ＭＡＣ総合研究 所 内 Ｆターム(参考） 4C083 AA111 AA112 AB032 AC012 AC072 AC102 AC122 AC132 AC242 AC422 AC442 AC642 AC792 AD662 BB47 DD21 DD27 DD31 EE12 EE13 EE14 4H025 AA82 AA83 AC05 BA01 BA04 ──────────────────────────────────────────────────続 き Continuing from the front page (72) Inventor Yuji Yamaguchi 4-15 Akebonocho, Gifu City, Gifu Prefecture MAC Research Institute (72) Inventor Hiroyuki Takenaka 4-15 Akebonocho, Gifu City, Gifu Prefecture MAC Research Institute F-term ( Reference) 4C083 AA111 AA112 AB032 AC012 AC072 AC102 AC122 AC132 AC242 AC422 AC442 AC642 AC792 AD662 BB47 DD21 DD27 DD31 EE12 EE13 EE14 4H025 AA82 AA83 AC05 BA01 BA04
Claims (4)
(Nostocales) のノーストック属 (Nostoc) 又はアファ
二ゾメノン属 (Aphanizomenon) 及びユレモ目(Oscillat
oriales) のオシラトリア属 (Oscillatoria) 又はスピ
ルリナ属(Spirulina)、紅藻綱 (Rhodophyceae) チノリ
モ目 (Porphyridiales) のポルフィリディウム属 (Porp
hyridium) 又はロドソルス属 (Rhodosorus)、緑藻綱 (C
hlorophyceae) クロロコックム目 (Chlorococcales) の
クロレラ属 (Chlorella)及びオオヒゲマワリ目 (Volvoc
ales) のデュナリエラ属 (Dunaliella) 及びホシミドロ
目 (Zygnematales) のミカヅキモ属 (Closteriumu)、ハ
プト藻綱 (Haptophyceae) イソクリシス目 (Isochrysid
ales) のプリュウロクリシス属 (Pleurochrysis) 及び
プリムネシウム目 (Prymnesidales) のフェオキィステ
ィス属 (Phaeocystis) 及びユーグレナ藻綱 (Euglenoph
yceae) ユーグレナ目 (Euglenales)のユーグレナ属 (Eu
glena) に属する微細藻類の抽出物を少なくとも 1 種類
含有していることを特徴とする、抗酸化剤。[Claim 1] Cyanobacteria (Cyanophyceae)
(Nostocales) of the genus Nostoc or Aphanizomenon and the order Oscillat
oriales) of Oscillatoria or Spirulina, Rhodophyceae, Porphyridiales of the order Porphyridiales
hyridium) or Rhodosorus, green alga (C
hlorophyceae) Chlorococcales and Chlorococcales (Volvoc)
ales) of the genus Dunaliella and Zygnematales of the genus Closteriumu, Haptophyceae (Haptophyceae) and Isochrysid (Isochrysid)
ales) of the genus Pleurochrysis and of the order Prymnesidales (Phaeocystis) and Euglenophora (Euglenoph.
yceae) Euglena (Euglenales)
glena), which comprises at least one extract of microalgae belonging to the group.
ングリコール、プロピレングリコール、アセトン、グリ
セリン、ポリプロピレングリコールの単独溶液又は混合
溶液により抽出された抽出物であることを特徴とする、
請求項 1 に記載の抗酸化剤。2. An extract extracted with a single solution or a mixed solution of water, ethanol, methanol 1,3-butylene glycol, propylene glycol, acetone, glycerin, and polypropylene glycol,
The antioxidant according to claim 1.
も一方を更に含有していることを特徴とする、請求項 1
に記載の抗酸化剤。3. The method according to claim 1, further comprising at least one of vitamin C and vitamin E.
An antioxidant according to the above.
いることを特徴とする、化粧料。4. A cosmetic comprising the antioxidant according to claim 1.
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