ITTO20131085A1 - PLANT HEALTH PRODUCT AND METHOD FOR OBTAINING THIS PHYTOSANITARY PRODUCT - Google Patents
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Description
"Prodotto fitosanitario e metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario " "Plant protection product and method for obtaining said plant protection product"
DESCRIZIONE DESCRIPTION
Settore tecnico dell'invenzione Technical sector of the invention
La presente invenzione si riferisce ad un prodotto fitosanitario. The present invention refers to a plant protection product.
In particolare essa si riferisce ad un prodotto fitosanitario per la cura e/o la prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali. La presente invenzione si riferisce anche ad un metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario. In particular, it refers to a plant protection product for the treatment and / or prevention of attacks by biological agents on crops and other plant species. The present invention also refers to a method for obtaining said plant protection product.
Arte nota Known art
La presente invenzione si inquadra nel settore concernente la lotta agli agenti biologici infettanti e si riferisce ad un prodotto fitosanitario per la cura e/o la prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali, in particolare per prevenire o eliminare malattie telluriche provocate da batteri e/o funghi. The present invention is part of the sector concerning the fight against infectious biological agents and refers to a phytosanitary product for the treatment and / or prevention of attacks by biological agents on crops and other plant species, in particular to prevent or eliminate diseases telluric caused by bacteria and / or fungi.
Negli ultimi decenni, la difesa delle colture agrarie ha richiesto un crescente uso di prodotti fitosanitari (o agrofarmaci) di sintesi, molto spesso con contenimento solo parziale dei fitopatogeni a causa dell'insorgenza di biotipi resistenti. Ciò ha comportato un incremento del numero dei trattamenti con conseguenze dannose per l'ambiente, i consumatori e gli operatori del settore. In recent decades, the defense of agricultural crops has required an increasing use of synthetic phytosanitary products (or pesticides), very often with only partial containment of phytopathogens due to the onset of resistant biotypes. This has led to an increase in the number of treatments with harmful consequences for the environment, consumers and operators in the sector.
Tale consapevolezza ha provocato un maggiore interesse ad utilizzare prodotti fitosanitari meno tossici e più rispettosi per l'ambiente. This awareness has led to a greater interest in using less toxic and more environmentally friendly plant protection products.
I sistemi di difesa da attacchi da parte di agenti biologici per ridurre l'uso dei prodotti fitosanitari di sintesi sono essenzialmente quattro: There are essentially four defense systems against attacks by biological agents to reduce the use of synthetic plant protection products:
1) contenimento dei patogeni col minor numero di interventi possibile (cosiddetta "difesa guidata"); 1) containment of pathogens with the least possible number of interventions (so-called "guided defense");
2) integrazione della lotta con prodotti di sintesi con altri mezzi fisici ed agronomici (cosiddetta "difesa integrata"); 2) integration of the struggle with synthetic products with other physical and agronomic means (so-called "integrated defense");
3) sostituzione della lotta con prodotti di sintesi con agenti quali virus, batteri e funghi parassiti (cosiddetta "difesa biologica"); e 3) replacement of the fight with synthetic products with agents such as viruses, bacteria and parasitic fungi (so-called "biological defense"); And
4) sostituzione della lotta con prodotti di sintesi con prodotti di origine vegetale (cosiddetta "difesa con prodotti naturali"). 4) replacement of the struggle with synthetic products with products of plant origin (so-called "defense with natural products").
Con particolare riferimento alla lotta contro i patogeni tellurici, tecniche per disinfettare i terreni con prodotti di origine vegetali come sovescio e interramento di ammendanti e residui vegetali a base di brassicacee sono da tempo usati contro detti patogeni. With particular reference to the fight against telluric pathogens, techniques for disinfecting soils with products of vegetable origin such as green manure and burial of soil improvers and vegetable residues based on brassicas have long been used against these pathogens.
Esempi di piante bioattive usate per il contenimento delle malattie provocate da patogeni tellurici comprendono Brassica carinata, Eruca sativa e Brassica verna (in particolare per il contenimento di Sclerotinia sclerotiorum e Sclerotinia minor, due fitopatogeni della rizosfera); Brassica juncea (in particolare per contenere le infezione del batterio del pomodoro Ralstonia solancearum); Sinapis alba, Raphanus sativus, Sorgum sudanese e Allium ampeloprasum (per contenere le infezioni delle carote da Rhizoctonia solani e Rhizoctonia fragariae). Examples of bioactive plants used for the containment of diseases caused by telluric pathogens include Brassica carinata, Eruca sativa and Brassica verna (in particular for the containment of Sclerotinia sclerotiorum and Sclerotinia minor, two phytopathogens of the rhizosphere); Brassica juncea (in particular to contain the infection of the tomato bacterium Ralstonia solancearum); Sinapis alba, Raphanus sativus, Sudanese Sorgum and Allium ampeloprasum (to contain Rhizoctonia solani and Rhizoctonia fragariae carrot infections).
Tuttavia, i risultati nel terreno del sovescio o dell'interramento di prodotti vegetali ricchi di sostanze bioattive derivanti dalle specie sopra descritte, sono stati spesso contradditori e di limitata efficacia. However, the results in the soil of green manuring or burying plant products rich in bioactive substances deriving from the species described above have often been contradictory and of limited effectiveness.
Secondo quanto rilevato dagli studi del Richiedente, il principale problema dell'interramento di matrici vegetali in generale ed in particolar modo di quelle derivanti dalle brassicacee sta nella rapida degradazione delle sostanze bioattive presenti in dette piante (isotiocianati). According to the findings of the Applicant's studies, the main problem of the burial of plant matrices in general and in particular of those deriving from brassicas lies in the rapid degradation of the bioactive substances present in said plants (isothiocyanates).
Tali sostanze sono in grado di inibire i patogeni presenti nella rizosfera nel breve periodo, ma successivamente, una volta degradati, la loro azione si esaurisce permettendo così ai patogeni sopravvissuti di moltiplicarsi rapidamente, anche grazie alla notevole sostanza organica immessa con la matrice vegetale (farina pellettizata, parti di piante triturate, e così via.). These substances are able to inhibit the pathogens present in the rhizosphere in the short term, but subsequently, once degraded, their action is exhausted thus allowing the surviving pathogens to multiply rapidly, also thanks to the considerable organic substance introduced with the vegetable matrix (flour pelletized, shredded plant parts, and so on.).
Scopo principale della presente invenzione è quello di superare gli inconvenienti della tecnica nota, fornendo un prodotto fitosanitario in grado di agire efficacemente e per un tempo prolungato per la prevenzione e/o la cura di attacchi alle colture e ad altre specie vegetali da parte di agenti biologici. The main purpose of the present invention is to overcome the drawbacks of the known art, providing a phytosanitary product capable of acting effectively and for a prolonged time for the prevention and / or treatment of attacks on crops and other plant species by agents biological.
In particolare, scopo della presente invenzione è quello di fornire un prodotto fitosanitario in grado di prevenire e/o contenere efficacemente e per un tempo prolungato le malattie provocate dai patogeni della rizosfera, cioè della porzione di suolo che circonda le radici delle piante. In particular, the object of the present invention is to provide a phytosanitary product capable of preventing and / or containing effectively and for a prolonged time the diseases caused by the pathogens of the rhizosphere, that is, of the portion of soil that surrounds the roots of plants.
Scopo ulteriore della presente invenzione è quello di fornire un prodotto fitosanitario a impatto ambientale basso o nullo e innocuo per uomini ed animali domestici. A further object of the present invention is to provide a plant protection product with low or zero environmental impact and harmless for humans and pets.
Questi ed altri scopi sono raggiunti dal prodotto fitosanitario come rivendicato nelle unite rivendicazioni. Esposizione sintetica dell'invenzione These and other purposes are achieved by the plant protection product as claimed in the attached claims. Brief description of the invention
Nello stato dell'arte, l'utilizzo di estratti di Punica granatum (melograno) è noto con riferimento ai settori della cosmesi, degli integratori alimentari e della medicina. In tali settori l'attenzione è principalmente incentrata su estratti dal succo di Punica granatum. In the state of the art, the use of Punica granatum (pomegranate) extracts is known with reference to the fields of cosmetics, food supplements and medicine. In these sectors, the focus is mainly on extracts from Punica granatum juice.
Non sono note dello stato dell'arte applicazioni di estratti di Punica granatum al settore dei fitosanitari. There are no known applications of Punica granatum extracts to the phytosanitary sector of the state of the art.
Ora, il Richiedente ha sorprendentemente constatato che estratti di Punica granatum si rivelano estremamente efficaci nella cura e nella prevenzione di attacchi da parte di agenti biologici a colture e altre specie vegetali. Now, the Applicant has surprisingly found that Punica granatum extracts prove to be extremely effective in the treatment and prevention of attacks by biological agents on crops and other plant species.
In particolare, il Richiedente ha riscontrato che un prodotto fitosanitario contenente un estratto di Punica granatum è efficace per inibire l'azione di numerosi patogeni tellurici, fra i quali ad esempio il Fusarium oxysporum, responsabile della fusariosi, una delle principali malattie telluriche. In particular, the Applicant has found that a plant protection product containing an extract of Punica granatum is effective for inhibiting the action of numerous telluric pathogens, including for example Fusarium oxysporum, responsible for fusarium disease, one of the main telluric diseases.
Vantaggiosamente, l'estratto della presente invenzione è un prodotto innocuo per uomini ed animali domestici, facilmente confezionabile e trasportabile ed a basso o nullo impatto ambientale. Advantageously, the extract of the present invention is a harmless product for humans and pets, easily packable and transportable and with low or zero environmental impact.
In una forma preferita di realizzazione della presente invenzione, il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione contiene un estratto di epicarpo (buccia) di Punica granatum. In a preferred embodiment of the present invention, the plant protection product according to the invention contains an extract of the epicarp (peel) of Punica granatum.
In una forma particolarmente preferita di realizzazione della presente invenzione, il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione contiene un estratto di epicarpo di Punica granatum fino a 3 mm di spessore. In a particularly preferred embodiment of the present invention, the plant protection product according to the invention contains an epicarp extract of Punica granatum up to 3 mm thick.
Infatti, ancora più sorprendentemente, il Richiedente ha trovato che estratti dell'epicarpo di Punica granatum si rivelano particolarmente efficaci nella lotta ai patogeni tellurici. In fact, even more surprisingly, the Applicant has found that extracts of the epicarp of Punica granatum are particularly effective in the fight against telluric pathogens.
Tale sorprendente efficacia è da imputarsi all'elevata concentrazione nell'epicarpo di Punica granatum di polifenoli come antocianidine, tannini, acido ellagico e, soprattutto, punicalagina, che si è rivelata la molecola di gran lunga più interessante per la sua intensa attività citotossica. This surprising effectiveness is due to the high concentration in the epicarp of Punica granatum of polyphenols such as anthocyanidins, tannins, ellagic acid and, above all, punicalagin, which proved to be by far the most interesting molecule due to its intense cytotoxic activity.
In questa forma preferita di realizzazione dell'invenzione il contenuto medio di punicalagina è compreso tra 100 e 500 mg per grammo di buccia di Punica granatum. In this preferred embodiment of the invention, the average content of punicalagin is between 100 and 500 mg per gram of Punica granatum peel.
Vantaggiosamente, in questa forma preferita di realizzazione la materia prima per il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione - cioè le bucce di melograno - è ottenibile dagli scarti di lavorazione delle industrie produttrici di succhi di frutta, il che rende i costi di produzione del prodotto secondo l'invenzione particolarmente ridotti. Advantageously, in this preferred embodiment, the raw material for the plant protection product according to the invention - i.e. the pomegranate peels - can be obtained from the processing waste of the fruit juice producers, which makes the production costs of the product according to the invention particularly reduced.
Ulteriori studi del Richiedente hanno dimostrato che l'efficacia del suddetto estratto di Punica granatum o di epicarpo di Punica granatum è sensibilmente incrementata quando tale estratto è ottenuto mediante uno specifico processo di estrazione che combina l'uso di uno o più solventi e un trattamento a ultrasuoni e che consente in tal modo di concentrare maggiormente le sostanze bioattive. Further studies by the Applicant have shown that the effectiveness of the aforementioned Punica granatum extract or Punica granatum epicarp is significantly increased when this extract is obtained by means of a specific extraction process that combines the use of one or more solvents and a treatment to ultrasound and thus allows to concentrate more bioactive substances.
Lista delle Figure List of Figures
Figura 1 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione della concentrazione di detto estratto. Figure 1 is a graph showing the effectiveness of Punica granatum extract in the inhibition of Fusarium oxysporum as a function of the concentration of said extract.
Figura 2 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione del solvente utilizzato per la sua estrazione. Figure 2 is a graph showing the effectiveness of Punica granatum extract in the inhibition of Fusarium oxysporum as a function of the solvent used for its extraction.
Figura 3 è un grafico che mostra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum nella inibizione di Fusarium oxysporum in funzione del processo utilizzato per la sua estrazione. Figure 3 is a graph showing the effectiveness of Punica granatum extract in the inhibition of Fusarium oxysporum as a function of the process used for its extraction.
Figura 4 è un grafico che mette a confronto l'efficacia dell'estratto di Punica granatum e della farina di Brassica carinata nella inibizione di Fusarium oxysporum. Figure 4 is a graph comparing the efficacy of Punica granatum extract and Brassica carinata flour in the inhibition of Fusarium oxysporum.
Descrizione dettagliata dell'invenzione Detailed description of the invention
La presente invenzione riguarda un prodotto fitosanitario contenente un estratto di Punica granatum. The present invention relates to a plant protection product containing an extract of Punica granatum.
In una forma particolarmente preferita dell'invenzione detto prodotto fitosanitario contiene un estratto di epicarpo di Punica granatum. In a particularly preferred form of the invention said plant protection product contains an epicarp extract of Punica granatum.
La presente invenzione riguarda anche un metodo per l'ottenimento di detto prodotto fitosanitario che prevede un particolare processo di estrazione per l'ottenimento del suddetto estratto di Punica granatum. The present invention also relates to a method for obtaining said phytosanitary product which provides for a particular extraction process for obtaining the aforementioned Punica granatum extract.
Nel seguito vengono forniti, a titolo di esempio non limitativo, risultati di prove sperimentali ed esempi di applicazione dell'invenzione, al fine di evidenziarne l'efficacia nella lotta ad agenti biologici, ed in particolare a patogeni tellurici. In the following, by way of non-limiting example, the results of experimental tests and examples of application of the invention are provided, in order to highlight its effectiveness in the fight against biological agents, and in particular telluric pathogens.
1. Efficacia dell'estratto di Punica granatum nell'inibizione di Fusarium oxysporum 1. Effectiveness of Punica granatum extract in inhibiting Fusarium oxysporum
Con riferimento alla Figura 1, è illustrata l'efficacia di un estratto di Punica granatum nell'inibire la crescita del fungo tellurico Fusarium oxysporum. With reference to Figure 1, the efficacy of a Punica granatum extract in inhibiting the growth of the telluric fungus Fusarium oxysporum is illustrated.
L'estratto di Punica granatum è stato messo su piastre Petri in un substrato PDA (Potato - Dextrose - Agar) a diverse concentrazioni: 0,5%, 1%, 1,5% e 2%. Punica granatum extract was placed on Petri dishes in a PDA substrate (Potato - Dextrose - Agar) at different concentrations: 0.5%, 1%, 1.5% and 2%.
Una ulteriore piastra Petri conteneva unicamente PDA, senza alcun estratto di Punica granatum (controllo). An additional Petri dish contained only PDA, without any Punica granatum extract (control).
Un tassello di 5mm di diametro di inoculo è stato preso da una colonia di Fusarium oxysporum in crescita attiva e posto al centro di ogni piastra. A partire dal terzo giorno è stata misurata la crescita radiale del fungo. A 5mm diameter inoculum piece was taken from an actively growing colony of Fusarium oxysporum and placed in the center of each plate. From the third day, the radial growth of the fungus was measured.
I risultati ottenuti mostrano che anche a basse concentrazioni (0,5%) la crescita radiale del fungo risultava significativamente ridotta. The results obtained show that even at low concentrations (0.5%) the radial growth of the fungus was significantly reduced.
Tali risultati hanno inoltre mostrato un chiaro "effetto dose" dell'estratto, in quanto l'effetto di inibizione della crescita radiale del fungo cresceva sensibilmente al crescere della concentrazione di estratto ed era massimo alla concentrazione del 2%. These results also showed a clear "dose effect" of the extract, since the radial growth inhibition effect of the mushroom increased significantly with the increase in the concentration of the extract and was maximum at a concentration of 2%.
2. Metodo per l'ottenimento dell'estratto di Punica granatum Il metodo innovativo di ottenimento dell'estratto di Punica granatum è stato messo a punto a seguito di prove sperimentali che hanno riguardato: 2. Method for obtaining Punica granatum extract The innovative method for obtaining Punica granatum extract was developed following experimental tests concerning:
- l'efficacia di diversi tipi di solvente testati; - the effectiveness of different types of solvent tested;
- l'effetto degli ultrasuoni sulla concentrazione delle molecole bioattive nell'estratto suddetto. - the effect of ultrasound on the concentration of bioactive molecules in the aforementioned extract.
Nella prima prova, si è andati ad analizzare se i solventi usati per l'estrazione potevano influire sull'efficacia dell'estratto stesso. In the first test, it was analyzed whether the solvents used for the extraction could affect the effectiveness of the extract itself.
L'estratto di Punica granatum alla medesima concentrazione ma ottenuto utilizzando solventi diversi - metanolo, etanolo, acqua, miscela acqua / metanolo / etanolo, propanolo - è stato messo su piastre Petri in un substrato PDA (Potato - Dextrose - Agar). Punica granatum extract at the same concentration but obtained using different solvents - methanol, ethanol, water, water / methanol / ethanol, propanol mixture - was placed on Petri dishes in a PDA substrate (Potato - Dextrose - Agar).
Una ulteriore piastra Petri conteneva unicamente PDA, senza alcun estratto di Punica granatum (controllo). An additional Petri dish contained only PDA, without any Punica granatum extract (control).
Un tassello di 5mm di diametro di inoculo è stato preso da una colonia di A 5mm diameter inoculum piece was taken from a colony of
Fusarium oxysporum in crescita attiva e posto al centro di ogni piastra. A partire dal terzo giorno è stata misurata la crescita radiale del fungo. Fusarium oxysporum actively growing and placed in the center of each plate. From the third day, the radial growth of the fungus was measured.
I risultati ottenuti sono illustrati in Figura 2. Tali risultati mostrano che gli estratti ottenuti utilizzando solventi diversi non mostrano differenze significative. Solo il propanolo sembra essere leggermente meno efficace. The results obtained are illustrated in Figure 2. These results show that the extracts obtained using different solvents do not show significant differences. Only propanol appears to be slightly less effective.
Nella seconda prova si è verificato l'effetto degli ultrasuoni sulle molecole bioattive, ed in particolare sulla concentrazione della punicalagina, ritenuta la molecola maggiormente responsabile della bioattività dell'estratto di Punica granatum. Questa prova era basata sull'idea che un sonicatore fosse in grado di rompere le cellule del tessuto vegetale e far liberare i soluti nell'estratto. In the second test, the effect of ultrasounds on bioactive molecules was verified, and in particular on the concentration of punicalagin, considered the molecule most responsible for the bioactivity of Punica granatum extract. This evidence was based on the idea that a sonicator was able to break down the cells of the plant tissue and release the solutes in the extract.
Un estratto di Punica granatum trattato con un sonicatore e un estratto di pari caratteristiche non trattato con il sonicatore sono stati sottoposti ad analisi cromatografica. I risultati hanno mostrato che il rapporto tra l'area dei picchi della punicalagina nell'estratto trattato col sonicatore e quella nell'estratto non trattato col sonicatore e superiore a 2, il che fa presupporre che nell'estratto trattato con il sonicatore, la punicalagina sia presente in una concentrazione maggiore An extract of Punica granatum treated with a sonicator and an extract of the same characteristics not treated with the sonicator were subjected to chromatographic analysis. The results showed that the ratio between the area of the punicalagin peaks in the sonicator-treated extract and that in the sonicator-untreated extract is greater than 2, which suggests that in the sonicator-treated extract, punicalagin is present in a higher concentration
Sulla base degli esiti delle prove summenzionate, nelle sue linee più generali il processo di estrazione di Punica granatum del metodo per l'ottenimento di un prodotto fitosanitario secondo l'invenzione comprende almeno le fasi di: On the basis of the results of the aforementioned tests, in its most general lines the extraction process of Punica granatum of the method for obtaining a plant protection product according to the invention comprises at least the steps of:
- miscelare Punica granatum con un solvente; - mix Punica granatum with a solvent;
- eseguire un trattamento con ultrasuoni; - perform an ultrasound treatment;
- eliminare i residui vegetali; - eliminate plant residues;
- eliminare il solvente. - eliminate the solvent.
L'estratto così ottenuto può essere congelato e poi liofilizzato per il successivo utilizzo. The extract thus obtained can be frozen and then lyophilized for subsequent use.
In una forma preferita di realizzazione dell'invenzione, in cui si intende ottenere un estratto di epicarpo di Punica granatum, il processo prevede una fase preliminare in cui i frutti di Punica granatum sono sbucciati e l'epicarpo (buccia) è selezionata e triturata in piccoli pezzi. In a preferred embodiment of the invention, in which it is intended to obtain an extract of the epicarp of Punica granatum, the process involves a preliminary step in which the fruits of Punica granatum are peeled and the epicarp (peel) is selected and crushed in little pieces.
Detto processo può inoltre comprendere opzionalmente prima della congelamento: Said process can also optionally include before freezing:
- una fase di sterilizzazione; - a sterilization phase;
- una fase di purificazione mediante estrazione in fase solida. - a purification step by solid phase extraction.
Una ulteriore prova su piastre Petri è stata effettuata per testare l'efficacia del processo di estrazione sopra descritto. A further test on Petri dishes was carried out to test the effectiveness of the extraction process described above.
Per effettuare tale prova, detto processo di estrazione è stato realizzato utilizzando i seguenti parametri: To carry out this test, said extraction process was carried out using the following parameters:
- il frutto di Punica granatum è stato sbucciato e l'epicarpo è stato selezionato e triturato in piccoli pezzi; - sono stati aggiunti alcol etilico nella proporzione di 0,5/1 e acqua nella proporzione di 5/1 dell'epicarpo di Punica granatum; - the fruit of Punica granatum was peeled and the epicarp was selected and shredded into small pieces; - ethyl alcohol in the proportion of 0.5 / 1 and water in the proportion of 5/1 of the epicarp of Punica granatum were added;
- solventi ed epicarpo sono stati mescolati per 24 ore con un agitatore a piastra riscaldata (temperatura di circa 30-40 °C); - solvents and epicarp were mixed for 24 hours with a heated plate stirrer (temperature of about 30-40 ° C);
- è stato eseguito un trattamento con ultrasuoni per 10 minuti a 60 ampere; - ultrasound treatment was performed for 10 minutes at 60 amps;
- il prodotto è stato nuovamente mescolato in agitatore per circa 2 ore; - the product was mixed again in a stirrer for about 2 hours;
- i residui vegetali sono stati eliminati con centrifugazione a 4000 - 5000 giri/min per 10 min; - vegetable residues were eliminated by centrifugation at 4000 - 5000 rpm for 10 min;
- il solvente è stato eliminato con un evaporatore a rotazione; - the solvent was removed with a rotary evaporator;
- l'estratto è stato poi sterilizzato con un filtro a 0,45 µm; - the extract was then sterilized with a 0.45 µm filter;
- l'estratto è stato purificato mediante estrazione in fase solida eluendo con acetonitrile; - the extract was purified by solid phase extraction eluting with acetonitrile;
- l'acetonitrile è stato eliminato con un evaporatore centrifugo; - acetonitrile was removed with a centrifugal evaporator;
- l'estratto ottenuto è stato congelato a -80 °C; - the extract obtained was frozen at -80 ° C;
- il prodotto congelato è stato poi liofilizzato con un liofilizzatore. - the frozen product was then lyophilized with a lyophilizer.
I risultati ottenuti sulle piastre Petri e illustrati in Figura 3 mostrano che l'estratto di Punica granatum ottenuto con il processo di estrazione secondo l'invenzione è in grado di ridurre la crescita fungina dell'80%, molto superiore al 39% dell'effetto inibitorio ottenuto senza utilizzare il suddetto processo estrattivo. The results obtained on the Petri dishes and illustrated in Figure 3 show that the Punica granatum extract obtained with the extraction process according to the invention is able to reduce fungal growth by 80%, much higher than 39% of the effect. inhibitory obtained without using the aforementioned extraction process.
3. Efficacia dell'estratto di Punica granatum su semi di pomodoro 3. Effectiveness of Punica granatum extract on tomato seeds
È stato valutato l'effetto fitotossico dell'estratto di Punica granatum su semi di pomodoro adagiati su carta bibula in contenitori Petri. The phytotoxic effect of Punica granatum extract on tomato seeds placed on bibulous paper in Petri dishes was evaluated.
La Tabella 1 mostra la variazione della lunghezza della radichetta neoformata in funzione della concentrazione di detto estratto dopo 8 giorni di osservazione. Table 1 shows the variation in the length of the newly formed radicle as a function of the concentration of said extract after 8 days of observation.
La Tabella 2 mostra la percentuale di germinazione dei semi in funzione della concentrazione di detto estratto dopo 8 giorni di osservazione. Table 2 shows the percentage of seed germination as a function of the concentration of said extract after 8 days of observation.
Tabella 1 Table 1
Concentrazione dell'estratto Lunghezza della radichetta di Punica granatum (mm) Concentration of the extract Length of Punica granatum radicle (mm)
0 (controllo) 6,41 0 (control) 6.41
0,25% 3,05 0.25% 3.05
0,75% 1,51 0.75% 1.51
1,5% 0,55 1.5% 0.55
2,5% 0,24 2.5% 0.24
Tabella2 Table2
Concentrazione dell'estratto Germinazione dei semi (%) di Punica granatum Concentration of the extract Germination of seeds (%) of Punica granatum
0 (controllo) 90 0 (control) 90
0,25% 100 0.25% 100
0,75% 100 0.75% 100
1,5% 75 1.5% 75
2,5% 45 2.5% 45
I dati ottenuti hanno evidenziato l' effetto fitotossico dell'estratto di Punica granatum. The data obtained highlighted the phytotoxic effect of Punica granatum extract.
I dati ottenuti hanno anche evidenziato che a basse dosi l'estratto di Punica granatum potrebbe avere un effetto stimolante sulla germinazione, che poi diventa reprimente a dosi più elevate. The data obtained also showed that at low doses the Punica granatum extract could have a stimulating effect on germination, which then becomes repressive at higher doses.
4. Efficacia dell'estratto di Punica granatum sui batteri Clavibacter michiganensis subsp michiganensis (Cmm) del pomodoro, Pseudomonas syringae pv. aclinidiae (Psa) dell'actinidia e Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi (Pss) dell'olivo. 4. Efficacy of Punica granatum extract on tomato Clavibacter michiganensis subsp michiganensis (Cmm) bacteria, Pseudomonas syringae pv. aclinidiae (Psa) of actinidia and Pseudomonas savastanoi pv. savastanoi (Pss) of the olive tree.
Le prove sono state condotte in vitro su piastre Petri, utilizzando estratto di Punica granatum a concentrazioni di 0,5% e 1%. The tests were carried out in vitro on Petri dishes, using Punica granatum extract at concentrations of 0.5% and 1%.
Una sospensione di batteri e acqua sterile (1 ml) è stata miscelata a 45 °C con 3 ml di LB (Luria Broth) e sovrapposta a LB medium. Dopo aver raffreddato le piastre sono stati praticati dei buchi (diametro 5 mm) i quali sono poi stati riempiti con estratto di Punica granatum e con acqua (controllo). Le piastre sono state poi incubate e dopo 24 h è stato misurato il diametro di inibizione. A suspension of bacteria and sterile water (1 ml) was mixed at 45 ° C with 3 ml of LB (Luria Broth) and superimposed on LB medium. After cooling the plates, holes (diameter 5 mm) were made which were then filled with Punica granatum extract and water (control). The plates were then incubated and after 24 h the diameter of inhibition was measured.
Anche in questo caso i risultati hanno dimostrato che l'estratto di Punica granatum ha avuto una buona attività antibatterica. Ad esempio, in Cmm l'estratto di Punica granatum ha fatto registrare una zona di inibizione che in alcuni casi ha superato i 40 mm. Again, the results showed that Punica granatum extract had good antibacterial activity. For example, in Cmm the Punica granatum extract showed a zone of inhibition that in some cases exceeded 40 mm.
5. Prova comparativa fra l'estratto di Punica granatum e la farina di Brassica Carinata nell'inibizione di Fusarium oxysporum 5. Comparative test between Punica granatum extract and Brassica Carinata flour in the inhibition of Fusarium oxysporum
La Figura 4 mostra un confronto fra l'efficacia dell'estratto di Punica granatum e quella della farina di Brassica carinata (ricca di glucosinolati), attualmente usata per la "biofumigazioni" dei terreni: nei rilievi eseguiti al 3°, 6° e 9° giorno la crescita micellare in entrambi i casi è stata statisticamente più bassa di quella osservata nel controllo; al 3° e 6° giorno i valori di efficacia dei due agrofarmaci nei confronti di Fusarium oxysporum non erano statisticamente differenti; tuttavia al 9° giorno la crescita micellare nel caso dell'estratto di Punica granatum è stata di 19,83 mm, statisticamente più bassa di quella osservata nel caso di Brassica carinata (27 mm). Figure 4 shows a comparison between the effectiveness of Punica granatum extract and that of Brassica carinata flour (rich in glucosinolates), currently used for the "biofumigation" of the soils: in the surveys carried out at the 3rd, 6th and 9th Day day the micellar growth in both cases was statistically lower than that observed in the control; on the 3rd and 6th day the efficacy values of the two pesticides against Fusarium oxysporum were not statistically different; however, on the 9th day the micellar growth in the case of Punica granatum extract was 19.83 mm, statistically lower than that observed in the case of Brassica carinata (27 mm).
Questa prova comparativa dimostra la minore degradabilità dell'estratto di Punica granatum rispetto a Brassica carinata. This comparative test demonstrates the lower degradability of Punica granatum extract compared to Brassica carinata.
Una bassa degradabilità delle sostanze bioattive utilizzate è molto importante perché permette una maggiore persistenza nel terreno e una azione inibente nei confronti dei patogeni presenti nel suolo più prolungata nel tempo, proteggendo così la pianta da rapidi ripopolamenti dei patogeni tellurici. A low degradability of the bioactive substances used is very important because it allows a greater persistence in the soil and a longer inhibitory action against the pathogens present in the soil, thus protecting the plant from rapid repopulation of telluric pathogens.
Questo si spiega per il fatto che rispetto ad altre sostanze biologicamente attive, la punicalagina contenuta nell'estratto di Punica granatum ha un peso molecolare più elevato, quindi maggiore stabilità e più efficacia nel contenimento dei patogeni. This is explained by the fact that compared to other biologically active substances, the punicalagin contained in the extract of Punica granatum has a higher molecular weight, therefore greater stability and more efficacy in containing pathogens.
6. Prova in vivo in serra su vasetti contenenti terreno precedentemente infettato con Fusarium oxysporum. 6. In vivo test in greenhouse on jars containing soil previously infected with Fusarium oxysporum.
Nella prova in vivo è stata utilizzata una dose di estratto di Punica granatum pari a 0,5%somministrata con trattamenti ogni 7 giorni. In the in vivo test, a 0.5% dose of Punica granatum extract was used, administered with treatments every 7 days.
I risultati di questa prova in vivo sono riportati nella Tabella 3. The results of this in vivo test are shown in Table 3.
Tabella 3 Table 3
Tesi Dose Altezza Lunghezza Peso fresco pianta (cm) radice (cm) pianta (g) Piante non inoculate == 22,0a 17,25a 3,9a non trattate Thesis Dose Height Length Fresh plant weight (cm) root (cm) plant (g) Uninoculated plants == 22,0a 17,25a 3,9a untreated
Piante inoculate == 7,7b 5,0b 0,8b non trattate Inoculated plants == 7,7b 5,0b 0,8b untreated
Piante inoculate 0,5% 17,0a 16,0a 3,2a trattate Inoculated plants 0.5% 17.0a 16.0a 3.2a treated
Tali risultati evidenziano come nelle piantine non inoculate con Fusarium oxysporum si sono registrati valori statisticamente simili a quelli delle piantine inoculate con Fusarium oxysporum e trattate con l’estratto di Punica granatum. These results show that in the seedlings not inoculated with Fusarium oxysporum, values statistically similar to those of the seedlings inoculated with Fusarium oxysporum and treated with Punica granatum extract were recorded.
Al contrario, i valori relativi alle piantine inoculate con Fusarium oxysporum e non trattate con l’estratto di Punica granatum i valori sono statisticamente diversi, e in misura sensibile. On the contrary, the values relating to the seedlings inoculated with Fusarium oxysporum and not treated with Punica granatum extract, the values are statistically different, and to a significant extent.
7. Applicabilità industriale 7. Industrial applicability
Il prodotto fitosanitario oggetto della presente invenzione si inserisce nel settore degli agrofarmaci naturali. The phytosanitary product object of the present invention is part of the sector of natural pesticides.
Nel caso di utilizzo del solo epicarpo di Punica granatum i costi di produzione possono essere particolarmente contenuti poiché le bucce di melograno potrebbero essere ottenute dagli scarti di lavorazione delle industrie che producono succhi di frutta. In the case of using only the epicarp of Punica granatum, the production costs can be particularly low since the pomegranate peels could be obtained from the processing waste of the industries that produce fruit juices.
Il prodotto fitosanitario secondo l'invenzione può essere costituito unicamente da estratto di Punica granatum (o di epicarpo di Punica granatum), oppure contenere anche altri componenti adiuvanti. The plant protection product according to the invention can consist solely of Punica granatum extract (or Punica granatum epicarp), or also contain other adjuvant components.
Esso può essere realizzato in capsule rivestite da una pellicola idrosolubile. Vantaggiosamente è possibile ipotizzare pellicole idrosolubili con spessori differenziati, in modo che il rilascio delle sostanze bioattive sia graduale. It can be made in capsules coated with a water-soluble film. Advantageously, it is possible to hypothesize water-soluble films with different thicknesses, so that the release of the bioactive substances is gradual.
In alternativa, il prodotto secondo l'invenzione può essere sciolto in acqua prima dell'uso e poi versato nel terreno. Esso può essere somministrato prima della semina o dopo la messa in atto della coltura, distribuendo il prodotto attorno alle piante. Alternatively, the product according to the invention can be dissolved in water before use and then poured into the ground. It can be administered before sowing or after the implementation of the crop, distributing the product around the plants.
È evidente da quanto sopra descritto che l'invenzione raggiunge gli scopi sopra prefissati, in quanto fornisce un prodotto fitosanitario che presenta una maggior efficacia, una minore degradabilità ed una maggiore persistenza nel terreno rispetto ad agrofarmaci di origine naturale di tipo noto. It is evident from what has been described above that the invention achieves the aforementioned aims, since it provides a phytosanitary product which has greater efficacy, less degradability and greater persistence in the soil compared to known types of natural origin agropharmaceuticals.
È inoltre evidente che quanto sopra è stato descritto a titolo esemplificativo e non limitativo e che numerose modifiche e varianti che rientrano nell'ambito della presente invenzione come definito dalle unite rivendicazioni sono alla portata del tecnico del settore. It is also evident that the above has been described by way of non-limiting example and that numerous modifications and variations that fall within the scope of the present invention as defined by the appended claims are within the reach of those skilled in the art.
Claims (10)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT001085A ITTO20131085A1 (en) | 2013-12-30 | 2013-12-30 | PLANT HEALTH PRODUCT AND METHOD FOR OBTAINING THIS PHYTOSANITARY PRODUCT |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT001085A ITTO20131085A1 (en) | 2013-12-30 | 2013-12-30 | PLANT HEALTH PRODUCT AND METHOD FOR OBTAINING THIS PHYTOSANITARY PRODUCT |
Publications (1)
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