IT201800010305A1 - PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF WHEAT-BASED FOODS INTENDED FOR CELIACS OR SUBJECTS WITH GLUTEN SENSITIVITY - Google Patents

PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF WHEAT-BASED FOODS INTENDED FOR CELIACS OR SUBJECTS WITH GLUTEN SENSITIVITY Download PDF

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Description

PROCEDIMENTO PER LA PREPARAZIONE DI ALIMENTI A BASE DI FARINA PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF FLOUR BASED FOODS

DI GRANO DESTINATI A SOGGETTI CELIACI O AFFETTI DA GLUTEN OF WHEAT INTENDED FOR COELIACS OR SUBJECTS WITH GLUTEN

SENSITIVITY SENSITIVITY

Descrizione Description

Campo di applicazione Field of application

La presente invenzione è generalmente applicabile al campo del trattamento e preparazione di alimenti ed ha particolarmente per oggetto un nuovo procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farine comuni, destinati a soggetti affetti da celiachia conclamata o sensibilità al glutine (gluten sensitivity). The present invention is generally applicable to the field of food processing and preparation and particularly relates to a new process for the preparation of semi-finished food products based on common flours, intended for subjects suffering from overt celiac disease or gluten sensitivity.

Stato della Tecnica State of the art

E’ noto che il glutine è un componente presente nella gran parte delle farine alimentari, ed in particolare in quelle di maggiore diffusione quali le farine di frumento, che, all’atto della digestione, è elaborato da diversi enzimi che ne permettono la corretta idrolisi. A livello intestinale è presente un enzima, la trans-glutaminasi (Tg-asi) che si coniuga alle proteine del glutine rendendole, in particolari condizioni, antigeniche. In particolare, nei soggetti affetti da celiachia la presenza della gliadina, una delle proteine che compone il glutine, causa una reazione patologica ed infiammatoria a causa dell’insorgere della reazione immunitaria conseguente. Tuttavia, alcuni soggetti non celiaci, in seguito alla protratta e/o abbondante ingestione di glutine, possono sviluppare sintomi in buona parte sovrapponibili a quelli della celiachia e della sidrome da colon irritabile (gonfiore, sonnolenza, diarrea, stipsi, dolori addominali, cefalea, depressione, ecc) pur non presentando il quadro clinico proprio della malattia (atrofia dei villi intestinali, risposta autoimmune dell’organismo). It is known that gluten is a component present in most of the food flours, and in particular in those of greater diffusion such as wheat flours, which, upon digestion, is processed by various enzymes that allow correct hydrolysis. . In the intestine there is an enzyme, trans-glutaminase (Tg-asi) which is combined with gluten proteins making them, in particular conditions, antigenic. In particular, in people with celiac disease, the presence of gliadin, one of the proteins that make up gluten, causes a pathological and inflammatory reaction due to the onset of the consequent immune reaction. However, some non-celiac subjects, following the prolonged and / or abundant ingestion of gluten, may develop symptoms largely overlapping with those of celiac disease and irritable bowel syndrome (swelling, sleepiness, diarrhea, constipation, abdominal pain, headache, depression, etc.) although it does not present the clinical picture of the disease (atrophy of the intestinal villi, autoimmune response of the organism).

Per tali motivi, l’industria alimentare ha provato a sviluppare una serie di prodotti alimentari appositamente studiati per soggetti celiaci e che fossero quindi privi di glutine. For these reasons, the food industry has tried to develop a series of food products specially designed for celiac subjects and which were therefore gluten-free.

In particolare, sono stati formulati diversi prodotti che prevedono la sostituzione delle farine contenenti glutine con altre farine vegetali, quali farine di mais, riso, grano saraceno e similari (quinoa, miglio, teff, etc…), prive dei geni codificanti le proteine del glutine, ovvero tale da poterle ritenere gluten-free. In particular, various products have been formulated that provide for the replacement of gluten-containing flours with other vegetable flours, such as corn, rice, buckwheat and similar flours (quinoa, millet, teff, etc ...), devoid of the genes encoding the proteins of the gluten, i.e. such that they can be considered gluten-free.

Altre soluzioni prevedono, invece, la formulazione di prodotti a partire da farine di grano bio-ingegnerizzato al fine della mancata espressione delle proteine del glutine. Other solutions, on the other hand, provide for the formulation of products starting from bio-engineered wheat flours in order to prevent the expression of gluten proteins.

Questo ha fatto si che per la produzione di alimenti gluten-free, fossero richiesti accorgimenti particolari in fase di progettazione dei siti produttivi, delle modalità di approvvigionamento, dei processi di lavorazione. This meant that for the production of gluten-free foods, special precautions were required in the design phase of the production sites, of the procurement methods, of the manufacturing processes.

Inoltre, l’utilizzo di farine deglutinate o prive di glutine all’origine, causa evidenti difetti qualitativi riscontrabili nel prodotto finito. Infatti, il prodotto finito, classificabile come gluten-free, presenta un aspetto mediocre ed un sapore altrettanto scadente, andando a compromettere la qualità di vita dei soggetti affetti da celiachia. In addition, the use of swallowed or gluten-free flours at the origin causes obvious quality defects that can be found in the finished product. In fact, the finished product, classifiable as gluten-free, has a mediocre appearance and an equally poor taste, compromising the quality of life of people with celiac disease.

La produzione di farine deglutinate, a partire da organismi geneticamente modificati per non esprimere il pool genico, responsabile della sintesi di gliadine e glutenine (componenti principali del glutine), risulta estremamente costosa e laboriosa. The production of swallowed flours, starting from genetically modified organisms so as not to express the gene pool, responsible for the synthesis of gliadins and glutenins (main components of gluten), is extremely expensive and laborious.

La necessità di eliminare il glutine normalmente presente nelle farine standard richiede, inoltre, accorgimenti particolari che necessitano di opportune modifiche degli impianti di produzione, sia in fase progettuale, che nella realizzazione, al fine di evitare contaminazioni. Non da ultimo, l’assenza di glutine e la conseguente eliminazione della maglia glutinica, che conferisce la giusta elasticità agli impasti, degrada le proprietà reologiche e di lavorabilità del prodotto e richiede fasi di lavorazione complesse dal punto di vista tecnico. The need to eliminate the gluten normally present in standard flours also requires special precautions that require appropriate modifications of the production plants, both in the design phase and in the construction, in order to avoid contamination. Last but not least, the absence of gluten and the consequent elimination of the gluten mesh, which gives the dough the right elasticity, degrades the rheological and workability properties of the product and requires complex processing steps from a technical point of view.

Ne consegue che i prodotti finiti, oltre ad essere poveri da un punto di vista organolettico e di scarso sapore, sono anche relativamente costosi. It follows that the finished products, in addition to being poor from an organoleptic point of view and of poor taste, are also relatively expensive.

In ultimo, i prodotti privi di glutine, a causa dell’abbondanza di farine amidacee, presentano svantaggi evidenti per il loro indice glicemico estremamente alto. Questo risulta, per il celiaco, in un quadro clinico di costante iperglicemia. Finally, gluten-free products, due to the abundance of starchy flours, have obvious disadvantages due to their extremely high glycemic index. This results, for the celiac, in a clinical picture of constant hyperglycemia.

Per superare tali inconvenienti, sono state proposte alcune soluzioni in cui si è provato a neutralizzare il glutine utilizzando la trans-glutaminasi microbica (mT-ase), insieme ad un cofattore enzimatico di laboratorio a base dell’aminoacido lisina (K), con il fine di andare a neutralizzare i siti antigenici delle proteine del glutine, e precisamente le sequenze QXP responsabili dell’attivazione della risposta immune in caso di celiachia. In particolare, è noto l’uso del reagente chimico denominato lisina-metil-estere (K-Me), prodotto di sintesi dal costo piuttosto elevato, che ha permesso di ottenere dei risultati accettabili ma economicamente sfavorevoli. To overcome these drawbacks, some solutions have been proposed in which it has been tried to neutralize gluten using microbial trans-glutaminase (mT-ase), together with a laboratory enzymatic cofactor based on the amino acid lysine (K), with the in order to neutralize the antigenic sites of gluten proteins, and precisely the QXP sequences responsible for the activation of the immune response in case of celiac disease. In particular, the use of the chemical reagent called lysine-methyl-ester (K-Me) is known, a synthetic product with a rather high cost, which has made it possible to obtain acceptable but economically unfavorable results.

L’uso della mTG-ase è peraltro noto, senza il cofattore lisina (K), nel campo alimentare, in combinazione con farine a base di glutine, per la produzione di impasti, allo scopo di migliorarne le caratteristiche reologiche e tecnologiche, nonchè il grado complessivo di organoletticità. Esempi di tali soluzioni sono descritte ad esempio in EP0963704, EP0938845, US2010316764, US2002061344, US 5279839, EP 2548443. The use of mTG-ase is also known, without the lysine (K) cofactor, in the food field, in combination with gluten-based flours, for the production of doughs, in order to improve the rheological and technological characteristics, as well as the overall degree of organolepticity. Examples of such solutions are described for example in EP0963704, EP0938845, US2010316764, US2002061344, US 5279839, EP 2548443.

Tuttavia, è noto che l’uso della TG-asi in assenza di una fonte di lisina non consente di ottenere l’effetto di neutralizzazione del glutine e, pertanto, le soluzioni sopra citate non sono idonee alla realizzazione di alimenti adatti a persone affette da celiachia o da altri disturbi o patologie connesse all'assunzione del glutine. However, it is known that the use of TG-asi in the absence of a source of lysine does not allow to obtain the gluten neutralization effect and, therefore, the solutions mentioned above are not suitable for making foods suitable for people with celiac disease or other disorders or diseases related to gluten intake.

Da WO99056698 è invece noto un metodo per il trattamento della celiachia che prevede l’uso della lisina, o di un suo derivato o di altre ammine semplici quali metilammina, etilammina, putrescina, spermidina e spermina, come co-substrati della mTG-ase, per un sequestro molecolare di specifiche porzioni sia delle gliadine che delle glutenine, per la deamidazione di un residuo di glutammina dentro le loro sequenze. From WO99056698, on the other hand, a method for the treatment of celiac disease is known which provides for the use of lysine, or its derivative or other simple amines such as methylamine, ethylamine, putrescine, spermidine and spermine, as co-substrates of mTG-ase, for a molecular sequestration of specific portions of both gliadins and glutenins, for the deamidation of a glutamine residue within their sequences.

In tale documento si ritiene che sia esclusivamente la deamidazione di specifiche glutammine ad innescare la risposta immunitaria dei soggetti celiaci. In this document it is believed that it is only the deamidation of specific glutamines that triggers the immune response of celiac subjects.

Tuttavia, ad oggi non è noto se la risposta antigenica al glutine possa essere mediata, oltre che dalle sequenze note come certamente celiacogene, anche da altre sequenze presenti all’interno della gliadina, cosicché tale soluzione non permette di inattivare tutte le sequenze del tipo QXP presenti nella gliadina, per annullare ogni rischio connesso con l’ingestione del glutine, ma si concentra esclusivamente su sequenze note certamente celiacogene. However, to date it is not known whether the antigenic response to gluten can be mediated, in addition to the sequences known as certainly celiacogenic, also by other sequences present within the gliadin, so that this solution does not allow to inactivate all the sequences of the QXP type. present in gliadin, to eliminate any risk associated with the ingestion of gluten, but concentrates exclusively on known sequences that are certainly celiacogenic.

Non da ultimo, il procedimento descritto (WO99056698) è attuato agendo direttamente sulle farine e non su intermedi di produzione, ossia sugli impasti, con conseguente ricaduta in termini di costi più elevati per il prodotto finale. Last but not least, the process described (WO99056698) is carried out by acting directly on the flours and not on production intermediates, that is, on the doughs, with a consequent impact in terms of higher costs for the final product.

WO2008053310 descrive, a sua volta, un metodo di trattamento di farine alimentari, per il loro utilizzo da parte di soggetti celiaci, che prevede l’uso della Tg-asi come mezzo di mascheramento del glutine, anche in questo caso agendo direttamente sulle farine ma attraverso transamidazione. WO2008053310 describes, in turn, a method of treating food flours, for their use by celiac subjects, which provides for the use of Tg-asi as a means of masking gluten, also in this case acting directly on the flours but through transamidation.

Il substrato mascherante del glutine è un derivato della lisina, precisamente un estere di questo amminoacido con un alcol primario a uno, due, tre o quattro atomi di carbonio o, eventualmente, un derivato peptidico della lisina o un'altra ammina primaria e quindi sempre attraverso trattamenti chimici relativamente complessi, riportando di conseguenza le problematiche tecnologiche e di costo già indicate sopra. The gluten masking substrate is a derivative of lysine, namely an ester of this amino acid with a primary alcohol with one, two, three or four carbon atoms or, possibly, a peptide derivative of lysine or another primary amine and therefore always through relatively complex chemical treatments, consequently reporting the technological and cost problems already indicated above.

Anche in questo caso, poi, il processo è sempre applicato ad una farina e non direttamente sul semilavorato intermedio. Also in this case, then, the process is always applied to a flour and not directly on the intermediate semi-finished product.

Presentazione dell’invenzione Presentation of the invention

Scopo dell’invenzione è quello di superare gli inconvenienti sopra riscontrati, mettendo a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che sia particolarmente efficiente e relativamente economico. The purpose of the invention is to overcome the drawbacks encountered above by providing a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour that is particularly efficient and relatively cheap.

Uno scopo particolare è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free a partire da una qualsiasi farina vegetale contenente glutine e senza che sia necessario ricorrere a farine bio-ingegnerizzate per non esprimere il glutine. A particular purpose is to provide a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free starting from any vegetable flour containing gluten and without that it is necessary to use bio-engineered flours in order not to express gluten.

Uno scopo particolare è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free, agendo direttamente in fase di impasto delle materie prime e senza che sia necessario utilizzare farine speciali. A particular purpose is to provide a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free, acting directly in the mixing phase of the raw materials and without the need to use special flours.

Uno scopo ulteriore è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free, utilizzando componenti naturali e normalmente utilizzabili all'interno di prodotti da forno. A further object is to provide a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free, using natural components and normally usable within bakery products.

Ancora altro scopo particolare è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free, che siano diretti a soddisfare non solo le esigenze dei soggetti affetti da celiachia, ma anche di coloro che presentano dei sintomi connessi all’ingestione del glutine (es. gluten sensitivity). Still another particular object is to provide a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free, which are aimed at satisfying not only the requirements of subjects with celiac disease, but also of those who have symptoms related to gluten ingestion (eg gluten sensitivity).

Ancora altro scopo particolare è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free, che permetta di avere prodotti comparabili ai prodotti tradizionali sia per le caratteristiche organolettiche e reologiche, che per gusto e qualità. Still another particular object is to provide a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free, which allows to have products comparable to traditional products. both for the organoleptic and rheological characteristics, and for taste and quality.

Non ultimo scopo dell'invenzione è quello di mettere a disposizione un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento , che consenta di ottenere prodotti a basso contenuto di glutine o classificabili come gluten-free, che possa essere implementato in impianti industriali di tipo tradizionale senza che sia necessario apportare modifiche sostanziali agli stessi, ma che preveda solo l'inserimento di attrezzature ausiliarie di semplice realizzo e facile uso. Not the least object of the invention is to provide a process for the preparation of semi-finished food products based on wheat flour, which allows to obtain products with a low gluten content or classifiable as gluten-free, which can be implemented in plants traditional industrial types without the need to make substantial changes to them, but which only provides for the insertion of auxiliary equipment that is simple to make and easy to use.

Tali scopi, nonché altri che appariranno più chiari in seguito, sono ottenuti grazie ad un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina di frumento che, in accordo alla rivendicazione 1, comprenda: These purposes, as well as others that will become clearer later, are achieved thanks to a process for the preparation of semifinished food products based on wheat flour which, according to claim 1, comprises:

a) una fase di predisposizione di una quantità predeterminata di una o più farine vegetali contenenti glutine; a) a step of preparing a predetermined quantity of one or more vegetable flours containing gluten;

b) la miscelazione di detta farina vegetale con un altro qualsiasi ingrediente naturale ricco di lisina per ottenere una miscela; b) mixing said vegetable flour with any other natural ingredient rich in lysine to obtain a mixture;

c) l’aggiunta e la miscelazione di un ulteriore ingrediente ad attività transglutaminasica (mTG-ase) c) the addition and mixing of an additional ingredient with transglutaminase activity (mTG-ase)

d) l’aggiunta di acqua, per la realizzazione di un impasto semilavorato a base di detta miscela, per attivare l’azione neutralizzante dei siti antigenici QXP del glutine. d) the addition of water, to make a semi-finished mixture based on this mixture, to activate the neutralizing action of the gluten QXP antigenic sites.

in cui dette fasi b) e c) di miscelazione possono essere condotte a secco o in fase acquosa mediante pre-miscelazione degli ingredienti in acqua, nonché, in cui detta fonte di lisina è scelta tra i seguenti gruppi: in which said mixing steps b) and c) can be carried out dry or in aqueous phase by pre-mixing the ingredients in water, as well as, in which said source of lysine is selected from the following groups:

a) un lisato biologico o cellulare ottenuto mediante trattamenti meccanici o fisici di prodotti naturali ed aggiunto direttamente in detto impasto semilavorato. a) a biological or cellular lysate obtained by mechanical or physical treatments of natural products and added directly to said semi-finished mixture.

b) una farina vegetale ricca ab origine di lisina, quale farina di soia, farina di leguminose, farina di grano saraceno, farina di quinoa, farina di frutta a guscio; c) una sostanza proteica ricca di lisina derivata da alimenti e sottoprodotti del latte e delle uova. b) a vegetable flour rich in lysine ab origins, such as soy flour, legume flour, buckwheat flour, quinoa flour, nut flour; c) a lysine-rich protein substance derived from food and milk and egg by-products.

Vantaggiosamente, i microrganismi o altre fonti di lisina potranno essere sottoposti, a discrezione, ad un trattamento di sonicazione a freddo o altri trattamenti meccanici, quali centrifugazione od omogeneizzazione che non richiedono la modifica degli impianti ma solo l'aggiunta di apparecchiature ausiliarie di semplice concezione e facile uso, così da non contribuire in maniera significativa all'incremento dei costi generali. Inoltre, l'utilizzo di trattamenti meccanici quali centrifugazione od omogeneizzazione consentiranno di fornire almeno parzialmente l'elemento ad attività trans-glutaminasica, potendo anche evitare la predisposizione in fase di impasto di un'ulteriore fonte di mTG-ase di origine batterica. Forme vantaggiose di esecuzione del procedimento sono ottenute in accordo alle rivendicazioni dipendenti. Advantageously, the microorganisms or other sources of lysine can be subjected, at discretion, to a cold sonication treatment or other mechanical treatments, such as centrifugation or homogenization that do not require the modification of the systems but only the addition of simple auxiliary equipment. and easy to use, so as not to contribute significantly to the increase in overhead costs. Furthermore, the use of mechanical treatments such as centrifugation or homogenization will make it possible to at least partially supply the element with trans-glutaminase activity, also being able to avoid the predisposition during the mixing phase of a further source of mTG-ase of bacterial origin. Advantageous embodiments of the method are obtained in accordance with the dependent claims.

Grazie a questa combinazione di caratteristiche, l'apporto di lisina necessario ad attivare l'azione della mTG-ase sarà eseguito direttamente in fase di impasto delle materie prime e senza il bisogno di ricorrere a farine bio-ingegnerizzate. Si potrà ricorrere, di conseguenza, a materie prime facilmente disponibili e quindi più economiche e che manterranno inalterate le caratteristiche reologiche, al fine di consentire la lavorabilità del prodotto. Thanks to this combination of characteristics, the supply of lysine necessary to activate the action of the mTG-ase will be performed directly in the mixing phase of the raw materials and without the need to resort to bio-engineered flours. Consequently, it will be possible to use raw materials that are easily available and therefore cheaper and that will keep the rheological characteristics unaltered, in order to allow the workability of the product.

Infatti, la maglia glutinica della farina non risulterà alterata e quindi l'impasto ottenuto dalla lavorazione del semilavorato presenterà elasticità e resistenza ottimali a permetterne la lavorazione in impianti tradizionali. In fact, the gluten mesh of the flour will not be altered and therefore the dough obtained from the processing of the semi-finished product will have optimal elasticity and resistance to allow it to be processed in traditional plants.

Breve descrizione dei disegni Brief description of the drawings

Ulteriori caratteristiche e vantaggi del procedimento secondo l’invenzione risulteranno maggiormente evidenti alla luce della descrizione dettagliata di alcune loro forme di realizzazione preferite ma non esclusive di un procedimento secondo l’invenzione, illustrate a titolo di esempio non limitativo con l'ausilio delle unite tavole di disegno in cui: Further characteristics and advantages of the process according to the invention will become more evident in the light of the detailed description of some of their preferred but not exclusive embodiments of a process according to the invention, illustrated by way of non-limiting example with the aid of the accompanying tables drawing in which:

la FIG. 1 è uno schema a blocchi di una prima forma preferita di esecuzione del procedimento; FIG. 1 is a block diagram of a first preferred embodiment of the method;

la FIG. 2 è uno schema a blocchi di una seconda forma preferita di esecuzione del procedimento. FIG. 2 is a block diagram of a second preferred embodiment of the method.

Descrizione dettagliata di alcuni esempi di realizzazione preferiti Con riferimento alle figure citate, è illustrato un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina, il quale potrà essere opportunamente lavorato in una o più ulteriori fasi successive al fine di ottenere prodotti da forno o altri prodotti alimentari quali pasta o similari, dedicati all’alimentazione di individui affetti da celiachia o da varie condizioni legate all’ingestione di glutine (es. gluten-sensitivity). Le fasi di trattamento finale del semilavorato, come porzionatura, conservazione, cottura, imballaggio, surgelazione e tutte le fasi necessarie per avere un prodotto adatto al consumo non sono descritte in quanto non limitative dell'ambito di tutela della presente invenzione. Detailed description of some preferred embodiments With reference to the aforementioned figures, a process for the preparation of semifinished food products based on flour is illustrated, which can be suitably processed in one or more further successive steps in order to obtain baked goods or other food products such as pasta or similar, dedicated to the nutrition of individuals suffering from celiac disease or various conditions linked to the ingestion of gluten (eg gluten-sensitivity). The stages of final treatment of the semi-finished product, such as portioning, storage, cooking, packaging, freezing and all the steps necessary to have a product suitable for consumption are not described as they do not limit the scope of protection of the present invention.

In Fig. 1 è illustrata una prima modalità di esecuzione dell'invenzione che comprende essenzialmente una fase a) di predisposizione di una quantità predeterminata di una farina vegetale contenente glutine ovvero di una miscela di farine vegetali, almeno una delle quali contenente glutine, in proporzioni e quantità variabili in funzione della ricetta. Fig. 1 illustrates a first method of carrying out the invention which essentially comprises a step a) of preparing a predetermined quantity of a vegetable flour containing gluten or a mixture of vegetable flours, at least one of which containing gluten, in proportions and variable quantities according to the recipe.

Alla farina o miscela di farine sono successivamente aggiunti (fase a0) ulteriori ingredienti ed in particolare una o più fasi solide e/o liquide al fine di realizzare un impasto semilavorato (fase b). Further ingredients and in particular one or more solid and / or liquid phases are subsequently added to the flour or mixture of flours (phase a0) in order to obtain a semi-finished dough (phase b).

Anche in questo caso, naturalmente, la scelta degli altri componenti potrà essere fortemente variabile in funzione del prodotto da ottenere. Also in this case, of course, the choice of the other components may be highly variable depending on the product to be obtained.

All'impasto sarà quindi addizionato (fase c) un elemento ad attività trans-glutaminasica, che potrà essere aggiunto direttamente all'impasto oppure introdotto unitamente agli altri ingredienti. L'elemento ad attività trans-glutaminasica potrà essere di origine batterica. An element with trans-glutaminase activity will then be added to the dough (phase c), which can be added directly to the dough or introduced together with the other ingredients. The element with trans-glutaminase activity may be of bacterial origin.

Il semilavorato è quindi addizionato (fase d) con almeno una fonte di lisina atta a cooperare con l’elemento ad attività trans-glutaminasica per neutralizzare i siti antigenici QXP del glutine mediante trans-amidazione ed ottenere un prodotto adatto al consumo da parte di soggetti affetti da celiachia o altre patologie o disagi correlati al consumo di glutine. The semi-finished product is then added (phase d) with at least one source of lysine suitable to cooperate with the element having trans-glutaminase activity to neutralize the antigenic QXP sites of gluten by trans-amidation and obtain a product suitable for consumption by subjects suffering from celiac disease or other diseases or discomforts related to the consumption of gluten.

La fonte di lisina, ovvero una o più delle fonti di lisina previste, potrà essere: The source of lysine, or one or more of the provided lysine sources, may be:

a) un lisato biologico o cellulare ottenuto da trattamento, con metodi meccanici o fisici, di un organismo contenente lisina, quali microrganismi di origine fungina o cloroficee (microalghe verdi), con specifico riferimento ai ceppi non considerati patogeni per l'uomo, anche producenti nisina, (a titolo esemplificativo ma NON esaustivo: Saccharomyces spp., Schizosaccharomyces spp., Saccharomycopsis spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Pediococcus spp., Bifidobacterium spp., Ruminococcus spp., Selenomonas spp., Glucobacter spp., Chlamydomonas spp., Chlorella spp., Chlorobium spp., Chlorococcum spp., Spirulina spp., Volvox spp., Spyrogyra spp., Cytophaga spp., Rhodobacter spp., Rhodopseudomonas spp., Rhodospirillum spp., Rhodomicrobium spp., Desulfovibrium spp., Flavobacterium spp., Desulfuromonas spp., Thiobacillus spp., Paracoccus spp., Sorangium spp., Rhizobium spp., Agrobacterium spp.); tale estratto o lisato potrà essere aggiunto tal quale o come surnatante o come residuo secco. a) a biological or cellular lysate obtained from the treatment, with mechanical or physical methods, of an organism containing lysine, such as microorganisms of fungal or chlorophytic origin (green microalgae), with specific reference to strains not considered pathogenic for humans, even producing nisin, (by way of example but NOT exhaustively: Saccharomyces spp., Schizosaccharomyces spp., Saccharomycopsis spp., Lactobacillus spp., Leuconostoc spp., Pediococcus spp., Bifidobacterium spp., Ruminocacteren sppomon spp. Chlamydomonas spp., Chlorella spp., Chlorobium spp., Chlorococcum spp., Spirulina spp., Volvox spp., Spyrogyra spp., Cytophaga spp., Rhodobacter spp., Rhodopseudomonas spp., Rhodospirillum spp., Rhodomicrobium spp. ., Flavobacterium spp., Desulfuromonas spp., Thiobacillus spp., Paracoccus spp., Sorangium spp., Rhizobium spp., Agrobacterium spp.); this extract or lysate can be added as it is or as a supernatant or as a dry residue.

Una delle fonti di lisina previste, inoltre, potrà comprendere l’aggiunta di: Furthermore, one of the sources of lysine provided may include the addition of:

a) una farina vegetale ricca ab origine di lisina (a titolo esemplificativo ma NON esaustivo: farina di soia, farina di leguminose, farina di grano saraceno, farina di quinoa, farina di frutta a guscio, etc…); a) a vegetable flour rich in lysine abigine (by way of example but NOT exhaustive: soy flour, legume flour, buckwheat flour, quinoa flour, nut flour, etc…);

b) una sostanza proteica ricca di lisina (es. estratto, o frazione) derivata da alimenti e sottoprodotti del latte e delle uova. b) a protein substance rich in lysine (eg extract, or fraction) derived from foods and by-products of milk and eggs.

c) Nisina (E234), sia esogena, che naturalmente prodotta da ceppi batterici non patogeni (es. Lactobacillus spp.) c) Nisin (E234), both exogenous and naturally produced by non-pathogenic bacterial strains (eg Lactobacillus spp.)

Nell'esempio della Fig. 1, il microrganismo opportunamente predisposto (fase e0) è sottoposto ad un trattamento di sonicazione a freddo (fase e) atto a realizzare la lisi della parete cellulare per la generazione del lisato cellulare, che garantirà l’apporto di lisina necessario al funzionamento della mTG-ase nella sua azione di mascheramento dei siti antigenici QXP del glutine. In the example of Fig. 1, the suitably predisposed microorganism (phase e0) is subjected to a cold sonication treatment (phase e) aimed at carrying out the lysis of the cell wall for the generation of the cell lysate, which will guarantee the supply of lysine necessary for the functioning of mTG-ase in its masking action of the QXP antigenic sites of gluten.

Processo di preparazione del lisato Lysate preparation process

Il lisato è ottenuto per azione di metodi fisici o meccanici per un tempo variabile sulla coltura di microrganismi immersa in una bacinella d’acqua fredda, avente funzione di raffreddare il mezzo. The lysate is obtained by the action of physical or mechanical methods for a variable time on the culture of microorganisms immersed in a basin of cold water, which has the function of cooling the medium.

La fase e) di sonicazione è seguita da una fase f) di centrifugazione necessaria a separare (fase g) il surnatante dal sedimento solido che potrà essere raccolto separatamente (fase h) ed eventualmente rimosso (fase i), mentre il surnatante o lo stesso residuo saranno introdotti nell'impasto (fase d). The sonication phase e) is followed by a centrifugation phase f) necessary to separate (phase g) the supernatant from the solid sediment which can be collected separately (phase h) and possibly removed (phase i), while the supernatant or the same residue will be introduced into the dough (phase d).

L'insieme di fasi di trattamento meccanico dei microorganismi potranno essere eseguite contestualmente alla fase di preparazione dell'impasto oppure prima della stessa. The set of steps of mechanical treatment of the microorganisms can be performed at the same time as the preparation of the mixture or before it.

In quest'ultimo caso sarà opportuno prevedere una fase di raffreddamento del lisato ad una temperatura inferiore a 0ºC, preferibilmente prossima a -20ºC, per impedire reazioni di idrolisi, ed il lisato sarà mantenuto raffreddato fino alla sua aggiunta nel semilavorato o impasto. In the latter case it will be advisable to provide for a cooling phase of the lysate at a temperature below 0ºC, preferably close to -20ºC, to prevent hydrolysis reactions, and the lysate will be kept cooled until it is added to the semi-finished product or mixture.

Prima dell'inserimento della fonte di lisina nell'impasto la stessa potrà essere addizionata (fase j) mediante ulteriori coadiuvanti quale una fonte di papaina purificata e cristallizzata come enzima singolo o come enzima ricombinato per poterne sfruttare la capacità transamidasica attraverso la variazione del pH del mezzo, nel range di valori compreso tra 5,7 e 7,5 ed in particolare la sua capacità ad idrolizzare le proteine del surnatante derivato dal trattamento meccanico e favorirne la reazione con la transglutaminasi contenuta nel sedimento. Before inserting the source of lysine into the dough, it can be added (step j) by means of additional adjuvants such as a source of papain purified and crystallized as a single enzyme or as a recombined enzyme in order to exploit its transamidase capacity through the variation of the pH of the medium, in the range of values between 5.7 and 7.5 and in particular its ability to hydrolyze the proteins of the supernatant derived from the mechanical treatment and favor its reaction with the transglutaminase contained in the sediment.

Un ulteriore additivo potrà essere costituto da una fonte di almeno uno tra l’enzima 1,3beta-glucanasi, e l’enzima chitinasi di classe II e III, ad esempio succo fresco di papaya o qualsiasi natura o specie a base di papaya, al fine di liberare l'attività transglutaminasica (PNG-asi) della frazione centrifugata della parete cellulare del microrganismo, in seguito alla degradazione della parete cellulare promossa da tali enzimi. A further additive may consist of a source of at least one of the 1,3beta-glucanase enzyme, and the enzyme chitinase of class II and III, for example fresh papaya juice or any nature or species based on papaya, al in order to release the transglutaminase activity (PNG-asi) of the centrifuged fraction of the cell wall of the microorganism, following the degradation of the cell wall promoted by these enzymes.

Ulteriori additivi per il lisato potranno essere agenti riducenti non tossici scelti nel gruppo comprendente acido sorbico, acido benzoico, sodio metabisolfito, potassio metabisolfito, calcio metabisolfito, acido ascorbico, acido citrico, acido tartarico, L-cisteina, L-cisteina cloridrato, L-cisteina cloridrato monoidrato, ed agenti similari atti a riattivare l’attività PNG-asica della parete cellulare del microrganismo. Further additives for the lysate may be non-toxic reducing agents selected from the group comprising sorbic acid, benzoic acid, sodium metabisulfite, potassium metabisulfite, calcium metabisulfite, ascorbic acid, citric acid, tartaric acid, L-cysteine, L-cysteine hydrochloride, L- cysteine hydrochloride monohydrate, and similar agents designed to reactivate the PNG-asic activity of the cell wall of the microorganism.

L'impasto così ottenuto sarà sottoposto ad una o più fasi accessorie successive, quali una fase k) di sosta per un tempo predeterminato, ad esempio di 60 minuti, un fase l) di reimpasto con eventuale aggiunta di lievito (fase l0), una eventuale fase m) di lievitazione nel caso in cui il semilavorato sia destinato alla produzione di prodotti da forno, una fase n) di porzionatura, e ulteriori fasi o) di cottura o altro procedimento di conservazione volto ad ottenere il prodotto P pronto al consumo e/o alla vendita. The mixture thus obtained will be subjected to one or more subsequent accessory phases, such as a phase k) of rest for a predetermined time, for example 60 minutes, a phase l) of re-kneading with the possible addition of yeast (phase l0), a possible leavening phase m) in the event that the semi-finished product is intended for the production of bakery products, a portion n) phase, and further cooking phases o) or other preservation process aimed at obtaining the product P ready for consumption and / or to the sale.

In Fig. 2 è illustrata una seconda modalità di esecuzione del procedimento che si differenzia dal quella descritta in precedenza essenzialmente per il fatto che la fase e) di sonicazione della fonte di lisina è sostituita da un trattamento meccanico di centrifugazione, ad esempio mediante omogeneizzatore meccanico a pistone, al fine di liberare la lisina utile alla reazione enzimatica e di fornire, altresì, la componente di parete ad attività trans-glutaminasica, in sostituzione della supplementazione esterna di trans-glutaminasi di origine batterica, o in aggiunta parziale della quota di transglutaminasi esterna stessa. Fig. 2 illustrates a second method of carrying out the process which differs from the one described above essentially in that step e) of sonication of the lysine source is replaced by a mechanical centrifugation treatment, for example by means of a mechanical homogenizer piston, in order to release the lysine useful for the enzymatic reaction and also to supply the component of the wall with trans-glutaminase activity, in place of the external supplementation of trans-glutaminase of bacterial origin, or in partial addition of the share of transglutaminase external itself.

Il trattamento del surnatante con papaina ha il compito di idrolizzare le proteine del surnatante rendendole più facilmente disponibili alla reazione della mTG-ase contenuta, invece, nel sedimento che, pertanto, sarà opportunamente introdotto anch'esso nell'impasto. Da quanto sopra esposto appare chiaro che il procedimento secondo l'invenzione raggiunge gli scopi preposti. The treatment of the supernatant with papain has the task of hydrolyzing the proteins of the supernatant making them more easily available to the reaction of the mTG-ase contained, instead, in the sediment which, therefore, will also be suitably introduced into the mixture. From the foregoing it is clear that the process according to the invention achieves the intended purposes.

Il procedimento sopra descritto è suscettibile di numerose modifiche e varianti. Tutti i particolari potranno essere sostituiti da altri elementi tecnicamente equivalenti, ed i materiali potranno essere diversi a seconda delle esigenze, senza uscire dall'ambito dell’invenzione. The process described above is susceptible of numerous modifications and variations. All the details can be replaced by other technically equivalent elements, and the materials can be different according to the needs, without departing from the scope of the invention.

Anche se il procedimento è stato descritto con particolare riferimento alle figure allegate, i numeri di riferimento usati nella descrizione e nelle rivendicazioni sono utilizzati per migliorare l'intelligenza dell’invenzione e non costituiscono alcuna limitazione all'ambito di tutela rivendicato. Although the process has been described with particular reference to the attached figures, the reference numbers used in the description and in the claims are used to improve the intelligence of the invention and do not constitute any limitation to the scope of protection claimed.

Claims (1)

Rivendicazioni 1. Un procedimento per la preparazione di semilavorati alimentari a base di farina, comprendente le seguenti fasi: a) predisposizione di una quantità predeterminata di una o più farine vegetali di cui almeno una farina contenente glutine; b) realizzazione di una miscela a base di detta farina vegetale insieme con un elemento ad attività transglutaminasica ed una fonte di lisina di origine batterica, fungina, vegetale e/o animale, in cui detta miscela è in fase solida oppure liquida; c) composizione di un impasto mediante aggiunta d’acqua; 2. Procedimento secondo la rivendicazione 1, caratterizzato dal fatto che l’elemento contenente lisina è un lisato ottenuto con metodi fisici o meccanici oppure un componente naturale da miscelare in polvere. 3. Procedimento secondo la rivendicazione 2, caratterizzato dal fatto che detto microrganismo è scelto nel gruppo comprendente Saccharomyces spp.; Schizosaccharomyces spp.; Saccharomycopsis spp.; Lactobacillus spp.; Leuconostoc spp.; Pediococcus spp; Bifidobacterium spp.; Ruminococcus spp.; Selenomonas spp.; Glucobacter spp.; Chlamydomonas spp.; Chlorella spp.; Chlorobium spp.; Chlorococcum spp.; Spirulina spp.; Volvox spp.; Spyrogyra spp.; Cytophaga spp.; Rhodobacter spp.; Rhodopseudomonas spp.; Rhodospirillum spp.; Rhodomicrobium spp.; Desulfovibrium spp.; Flavobacterium spp.; Desulfuromonas spp.; Thiobacillus spp.; Paracoccus spp.; Sorangium spp.; Rhizobium spp.; Agrobacterium spp. 4. Procedimento secondo la rivendicazione 2, caratterizzato dal fatto che detto componente in polvere è scelto tra: a) una farina vegetale ricca ab origine di lisina, quale farina di soia, farina di leguminose, farina di grano saraceno, farina di quinoa, farina di frutta a guscio e similari; b) una sostanza proteica ricca di lisina, eventualmente in forma di estratto, derivata da alimenti e sottoprodotti del latte e delle uova; c) Nisina (E234), sia esogena che naturalmente prodotta da ceppi batterici non patogeni, quali Lactobacillus spp. 5. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che detta fonte di lisina è scelta tra: a) composti ed elementi contenenti e/o producenti nisina, quali ceppi non patogeni di Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Ruminococcus spp, Bacillus spp., Carnobacterium spp., Halobacterium spp., Actinoplanes spp., Kluyveromyces spp., Leuconostoc spp. e Lactobacillus spp. b) una farina vegetale ricca ab origine di lisina, quali farina di soia, farina di leguminose, farina di grano saraceno, farina di quinoa, farina di frutta a guscio e similari; c) una sostanza proteica ricca di lisina, eventualmente in forma di estratto, derivata da alimenti e sottoprodotti del latte e delle uova. d) Nisina (E234), sia esogena che naturalmente prodotta da ceppi batterici non patogeni, quali Lactobacillus spp. 6. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che detto microrganismo è sottoposto ad un trattamento fisico o meccanico atto a realizzare la lisi della cellula per la generazione di un lisato cellulare, realizzato anche mediante una fase di raffreddamento del lisato ad una temperatura inferiore a 0ºC, preferibilmente prossima a -20ºC per impedire reazioni di idrolisi, detta fase essendo eseguita fino all’aggiunta del lisato nel semilavorato. 7. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che detta fonte di lisina è sottoposta ad un trattamento meccanico di centrifugazione od omogeneizzazione, atto a fornire almeno parzialmente detto elemento ad attività trans-glutaminasica, o utilizzato tal quale in fase solida o liquida. 8. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto che detto elemento ad attività trans-glutaminasica è almeno parzialmente di origine batterica. 9. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto di prevedere una fase di aggiunta di una fonte di papaina purificata e cristallizzata come enzima singolo, atta ad idrolizzare le proteine del surnatante derivato dal trattamento meccanico, favorendone la reazione con la transglutaminasi contenuta nel sedimento e/o una fase di aggiunta di una fonte di almeno uno tra l’enzima 1,3-betaglucanasi, e l’enzima chitinasi di classe II e III, per liberare l'attività transglutaminasica della frazione centrifugata della parete cellulare di detto microrganismo fungino, sotto forma di succo fresco o di qualsiasi natura o specie a base di papaya. 10. Procedimento secondo una qualsiasi delle rivendicazioni precedenti, caratterizzato dal fatto di comprendere una fase di aggiunta al lisato di agenti riducenti non tossici scelti nel gruppo comprendente acido sorbico, acido benzoico, sodio metabisolfito, potassio metabisolfito, calcio metabisolfito, acido ascorbico, acido citrico, acido tartarico, L-cisteina, L-cisteina cloridrato, L-cisteina cloridrato monoidrato, ed agenti similari atti a riattivare l’attività PNG-asica della parete cellulare del microrganismo. Claims 1. A process for the preparation of flour-based semi-finished food products, comprising the following steps: a) preparation of a predetermined quantity of one or more vegetable flours, of which at least one flour containing gluten; b) making a mixture based on said vegetable flour together with an element with transglutaminase activity and a source of lysine of bacterial, fungal, vegetable and / or animal origin, in which said mixture is in the solid or liquid phase; c) composition of a mixture by adding water; 2. Process according to claim 1, characterized by the fact that the element containing lysine is a lysate obtained by physical or mechanical methods or a natural component to be mixed into powder. 3. Process according to claim 2, characterized in that said microorganism is selected from the group comprising Saccharomyces spp .; Schizosaccharomyces spp .; Saccharomycopsis spp .; Lactobacillus spp .; Leuconostoc spp .; Pediococcus spp; Bifidobacterium spp .; Ruminococcus spp .; Selenomonas spp .; Glucobacter spp .; Chlamydomonas spp .; Chlorella spp .; Chlorobium spp .; Chlorococcum spp .; Spirulina spp .; Volvox spp .; Spyrogyra spp .; Cytophaga spp .; Rhodobacter spp .; Rhodopseudomonas spp .; Rhodospirillum spp .; Rhodomicrobium spp .; Desulfovibrium spp .; Flavobacterium spp .; Desulfuromonas spp .; Thiobacillus spp .; Paracoccus spp .; Sorangium spp .; Rhizobium spp .; Agrobacterium spp. 4. Process according to claim 2, characterized in that said powder component is selected from: a) a vegetable flour rich in lysine ab origins, such as soy flour, legume flour, buckwheat flour, quinoa flour, nut meal and the like; b) a protein substance rich in lysine, possibly in the form of an extract, derived from food and milk and egg by-products; c) Nisin (E234), both exogenous and naturally produced by non-pathogenic bacterial strains, such as Lactobacillus spp. 5. Process according to any one of the preceding claims, characterized in that said source of lysine is chosen from: a) compounds and elements containing and / or producing nisin, such as non-pathogenic strains of Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Ruminococcus spp, Bacillus spp., Carnobacterium spp., Halobacterium spp., Actinoplanes spp., Kluyveromycon spp. . and Lactobacillus spp. b) a vegetable flour rich in lysine ab origins, such as soy flour, legume flour, buckwheat flour, quinoa flour, nut flour and the like; c) a protein substance rich in lysine, possibly in the form of an extract, derived from foods and by-products of milk and eggs. d) Nisin (E234), both exogenous and naturally produced by non-pathogenic bacterial strains, such as Lactobacillus spp. 6. Process according to any one of the preceding claims, characterized in that said microorganism is subjected to a physical or mechanical treatment suitable for carrying out the lysis of the cell for the generation of a cellular lysate, also carried out by means of a cooling step of the lysate to a temperature below 0ºC, preferably close to -20ºC to prevent hydrolysis reactions, said phase being carried out until the addition of the lysate in the semi-finished product. 7. Process according to any one of the preceding claims, characterized by the fact that said source of lysine is subjected to a mechanical centrifugation or homogenization treatment, capable of providing at least partially said element with trans-glutaminase activity, or used as such in the solid phase or liquid. 8. Process according to any one of the preceding claims, characterized in that said element with trans-glutaminase activity is at least partially of bacterial origin. 9. Process according to any one of the preceding claims, characterized by the fact of providing a step of adding a source of papain purified and crystallized as a single enzyme, suitable for hydrolyzing the proteins of the supernatant derived from the mechanical treatment, favoring its reaction with the transglutaminase contained in the sediment and / or a step of adding a source of at least one of the enzyme 1,3-beta-glucanase, and the enzyme chitinase of class II and III, to release the transglutaminase activity of the centrifuged fraction of the cell wall of said fungal microorganism, in the form of fresh juice or of any papaya-based nature or species. 10. Process according to any one of the preceding claims, characterized in that it comprises a step for adding to the lysate of non-toxic reducing agents selected from the group comprising sorbic acid, benzoic acid, sodium metabisulfite, potassium metabisulfite, calcium metabisulfite, ascorbic acid, citric acid , tartaric acid, L-cysteine, L-cysteine hydrochloride, L-cysteine hydrochloride monohydrate, and similar agents designed to reactivate the PNG-asic activity of the cell wall of the microorganism.
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