DE10157128A1 - Detecting bacterial and viral contamination, comprises using a combination of pyrolytic dissociation, capillary separation and ion mobility spectroscopy to produce a representative signature of contamination - Google Patents

Detecting bacterial and viral contamination, comprises using a combination of pyrolytic dissociation, capillary separation and ion mobility spectroscopy to produce a representative signature of contamination

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Abstract

Detecting bacterial contamination, comprising using a combination of pyrolytic dissociation, capillary separation and ion mobility spectroscopy to produce a representative signature of the contamination, is new.

Description

Aufgabenstellungtask

Sporen werden von einigen Gram-positiven Bakterien in Reaktion auf bestimmte Reize gebildet. Sporen stellen aufgrund ihrer Konstitution langlebige Bioobjekte dar. Diese ermöglichen das Überleben einer Spezies selbst unter widrigen Bedingungen, stellen jedoch als pathogene Bakterien für die Gesundheit der Menschen eine dauerhafte Gefahrenquelle dar. Spores are triggered by some Gram-positive bacteria in response certain stimuli formed. Spurs pose due to their constitution long-lived bio-objects. These allow the survival of a species Even under adverse conditions, however, pose as pathogenic bacteria for the health of humans is a permanent source of danger.

Die konventionelle mikrobiologische Diagnostik im Labor ist schwierig und erfolgt über Aktivierung, Anzüchtung und Anfärbeverfahren. Diese Methoden sind personal- und zeitaufwendig, kostenintensiv und unterliegen einer subjektiven Beurteilung. Ein neues Echtzeitverfahren soll hierzu für den schnellen Nachweis von Sporen ermöglichen. Conventional microbiological diagnostics in the laboratory is difficult and takes place via activation, cultivation and staining procedure. These methods are labor-intensive and time-consuming, cost-intensive and subject to one subjective assessment. A new real-time method is intended for this purpose allow rapid detection of spores.

Stand der TechnikState of the art

Sporen stellen eine langzeitstabile und erneut reaktivierbare biologische Erscheinungsform der Keimzellen definierter Mikroorganismen dar. Nach dem Ursprung wird in bakterielle oder nichtbakterielle Sporen unterschieden. Extreme Umweltbedingungen oder andere ungünstige Verhältnisse (fehlende Nährstoffe, Anhäufung von Stoffwechselprodukten) stellen die Ursache für die Bildung bakterieller Sporen dar. Auf Basis von Veränderungen im Metabolismus, der Stoffumwandlung durch Verwertung von Depotsubstanzen wird als sporenspezifische Substanz vermehrt Dipicolinsäure synthetisiert. Die Reduktion des zellulären Wassergehaltes, die Bildung langlebiger chemischer Substanzen und durch physikalische Prozesse verändert sich die morphologische Struktur der Keimzelle. Polyterpene bzw. Polypeptide stellen u. a. den Hauptbestandteil der Zellwandsubstanzen von Sporen dar. Die multischichtige Umhüllung der Spore kann bis zu 50% der Trockenmasse betragen. Reife Endosporen lassen keine Stoffwechselaktivität erkennen und verfügen über einen hohen Grad von Resistenz gegenüber thermischer, chemischer oder strahlungsbedingter Exposition. Für eine Keimung der Sporen ist nicht nur die Quellung durch Wasser essentiell sondern häufig auch eine Lichtinduktion erforderlich. Spores provide a long-term stable and reactivatable biological Manifestation of germ cells of defined microorganisms Origin is distinguished into bacterial or non-bacterial spores. Extreme environmental conditions or other unfavorable conditions (missing Nutrients, accumulation of metabolic products) are the cause of the Formation of bacterial spores. Based on changes in the Metabolism, the metabolism by utilization of depot substances As a sporic substance, dipicolinic acid is increasingly synthesized. The Reduction of cellular water content, the formation of more durable chemical Substances and physical processes are changing morphological structure of the germ cell. Polyterpenes or polypeptides provide u. a. the main constituent of the cell wall substances of spores multi-layered covering of the spore can amount to up to 50% of the dry matter. Mature endospores show no metabolic activity and feature over a high degree of resistance to thermal, chemical or radiation exposure. For germination of the spores is not only the Swelling by water is essential but often also a light induction required.

Speziell zur Gefahrenabwehr ist eine dauerhafte Überwachung sensitiver Bereiche unabdingbar, da ein hohes Gefährdungspotential gegeben ist. Zum Nachweis luftgetragener Kontaminationen müssen i. d. R. zeitaufwendige, mikrobiologischer Untersuchungen durchgeführt werden. Especially for security, permanent surveillance is more sensitive Areas indispensable, since there is a high risk potential. To the Proof of airborne contaminations must i. d. R. time consuming, microbiological investigations.

In der Anforderung an die neue Technologie soll neben einer tragbaren Apparatur auch eine einfache Handhabung sichergestellt sein. Derzeit sind Methoden zur direkten Detektion ohne Zeitverlust zwischen Probenahme und Messergebnis nicht bekannt. Als Verfahren werden neben einfachen Transmissions- und Reflektionsmessungen, Pyrolyse mit Gaschromatographischer Trennung und IMS-Detektion, Massenspektroskopische Verfahren wie MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight spectrometry), auto/fluoreszenzoptische Verfahren, molekularbiologische Methoden (ELISA, enzyme-linked immunosorbent assays und auf PCR (Polymerase chain reaction)) beruhende Verfahren angegeben. Verfahren die zur Charakterisierung als Parameter lediglich die Partikelverteilung anhand von Durchmesser und Partikelform verwenden haben sich für die Analyse und den Nachweis aus komplexen Bioaerosolen nicht bewährt. Alle diese Verfahren bedingen einen hohen apparativen Aufwand und verlangen vom Anwender detailliertes Spezialwissen oder weisen eine zu geringe Sensitivität und Selektivität auf. Eine direkte Messung ohne größeren Zeitverlust ist somit nicht möglich. Dies hat für eine korrekte Diagnosestellung und Einleitung entsprechender Gegenmaßnahmen fatale Folgen. In the request for the new technology should be in addition to a portable Apparatus also be easy to use. Currently are Methods for direct detection without loss of time between sampling and Measurement result unknown. As a method, besides simple Transmission and reflection measurements, pyrolysis with Gas chromatographic separation and IMS detection, Mass spectroscopic methods such as MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption / ionization-time of flight spectrometry), auto / fluorescence optical Method, molecular biological methods (ELISA, enzyme-linked immunosorbent assays and based on PCR (Polymerase Chain Reaction)) Method specified. Method of characterization as a parameter only the particle distribution based on diameter and particle shape Use for analysis and proof of complex Bioaerosols not proven. All these methods require a high expenditure on equipment and require the user detailed specialized knowledge or have too low sensitivity and selectivity. A direct one Measurement without major loss of time is therefore not possible. This has for one correct diagnosis and initiation of appropriate countermeasures fatal consequences.

Erfindungsgemäße LösungInventive solution

Erfindungsgemäß sollen Beispielhaft anhand der Sporen der Gattung Bacillus thuringiensis und Bacillus anthraics die Charakterisierung in luftgetragenen Bio/Aerosolen mittels verschiedener Messprinzipien, die alle erfindungsgegenständlich sind, erfolgen. According to the invention by way of example with reference to the spores of the genus Bacillus thuringiensis and Bacillus anthraics characterization in airborne Bio / aerosols using different measuring principles, all erfindungsgegenständlich, take place.

Erfindungsgemäß erfolgt nach der Probenvorbereitung ein Probenaufschluss. Bestandteil des Aufschlussmechanismus ist die photothermische Pyrolyse unter Verwendung geeigneter Vorrichtungen. Als Vorrichtung wird eine Kapillare verwendet. Diese Hohlfaser/Kapillare besteht z. B. aus Saphirmaterial. Neben der Funktion innerhalb des Aufschlussmechanismus erfolgt synchron die Verwendung für einen Trennungsmechanismus. Im bevorzugten Ausführungsbeispiel ist der Durchmesser und die Größe der Saphirkapillare der spezifischen Messaufgabe angepasst. Eine Belegung der inneren Oberfläche u/o. eine Dotierung mit geeigneten Materialien ist in Weiterführung des Erfindungsgedankens vorgesehen. According to the invention, a sample digestion takes place after sample preparation. Part of the digestion mechanism is photothermal pyrolysis using suitable devices. As a device is a Capillary used. This hollow fiber / capillary consists z. B. off Sapphire material. In addition to the function within the digestion mechanism Synchronous use for a separation mechanism. in the preferred embodiment is the diameter and size of the Sapphire capillary adapted to the specific measuring task. An assignment of the inner surface u / o. a doping with suitable materials is in Continuation of the inventive concept provided.

In dem bevorzugten Ausführungsbeispiel kommt es innerhalb der Hohlkapillare aufgrund von Diffusion und Konvektion zu Auftrennungseffekten an der modifizierten Kapillarinnenwand, welches eine gezieltere Detektion ermöglicht. In the preferred embodiment, it comes within the Hollow capillary due to diffusion and convection too Separation effects on the modified Kapillarinnenwand, which a more targeted detection allows.

Erfindungsgemäß erfolgt die Pyrolyse durch Interaktion der u. a. mit Sporen belasteten Gasphase mit einem Laserstrahl definierter Leistungseigenschaften und Wellenlängen. In dem bevorzugten Ausführungsbeispiel wird als Laser z. B. ein CO2-Laser verwendet. Die Ankopplung der Energie erfolgt durch Strahlungsabsorption im Wellenlängenbereich von ca. 9-11 µm. Für den Energietransfer werden organische Verbindungen der Sporen in-situ genutzt. In Fortführung des Erfindungsgedanken eignen sich für die Anwendung auch andere Laser im Spektralbereich 0,15 µm-15 µm. According to the invention, the pyrolysis takes place by interaction of the gas phase, which is loaded, inter alia, with spores, with a laser beam of defined power properties and wavelengths. In the preferred embodiment is used as a laser z. B. a CO 2 laser used. The coupling of the energy is carried out by radiation absorption in the wavelength range of about 9-11 microns. For the energy transfer organic compounds of the spores are used in-situ. In continuation of the inventive idea, other lasers in the spectral range of 0.15 μm-15 μm are also suitable for the application.

In einem weiterem Ausführungsbeispiel erfolgt die Pyrolyse der Sporen an katalytischen Oberflächen wie z. B. thermisch aufgeheizten Platinnetzen; Bevorzugt jedoch oder katalytisch dotierten/beschichteten Kapillaren und Kapillarbündeln. Überraschenderweise hat sich gezeigt, dass bei der pyrolytischen Zersetzung des u. a. mit Sporen kontaminierten Aerosols charakteristische Fragmente der beispielhaft genannten Sporen entstehen. In dem bevorzugten Ausführungsbeispiel werden diese volatilen Komponenten messtechnisch spezifisch nachgewiesen, wobei in einem erfindungswesentlichen Schritt ein Ionen-Drift-Sensor nach dem Stand der Technik verwendet wurde. In einem weiteren erfindungswesentlichen Schritt erfolgte der Nachweis dieser Pyrolysefragmente mit laserspektroskopischen Methoden. In Weiterführung des Erfindungsgedankens wurden derartige Kapillaren/Kapillarbündel mit Methoden der Sol-Gel-Technik beschichtet und überraschenderweise konnten mit speziellen stabilen molekularen Sensitizern über Fluoreszenzanregung oder Quenchingschritte Bestandteile der Sporen unmittelbar nachwiesen werden. In Weiterführung des Erfindungsgedanken ist im Vorfeld zur effektiven Kondensation partikulärer Bestandteile des Aerosols - d. h. Konzentrierung - durch die Zugabe von Gase wie z. B. von Wasserdampf auf Oberflächen vorgesehen. In a further embodiment, the pyrolysis of the spores takes place catalytic surfaces such. B. thermally heated platinum networks; Preferably, however, or catalytically doped / coated capillaries and Capillary bundles. Surprisingly, it has been shown that at the pyrolytic decomposition of the u. a. spores contaminated aerosols characteristic fragments of the exemplified spores arise. In In the preferred embodiment, these are volatile components metrologically specifically detected, wherein in one Essential to the invention step an ion drift sensor according to the prior Technique was used. In a further inventive step the detection of these pyrolysis fragments was carried out with laser spectroscopy Methods. In continuation of the inventive idea were such Capillaries / capillary bundles coated with methods of sol-gel technique and Surprisingly, with special stable molecular sensitizers via fluorescence excitation or quenching steps components of the spores be immediately demonstrated. In continuation of the inventive idea leading up to the effective condensation of particulate aerosol components - d. H. Concentration - by the addition of gases such. B. from Water vapor provided on surfaces.

Erfindungsgemäß erfolgt die Detektion der Laserpyrolyseprodukte mittels eines höchstempfindlichen Ionen-Drift-Detektors der Firma I. U. T./Berlin. Merkmal des Detektors/Sensors sind die Ionisierung der volatiblen chemischen Pyrolyseprodukte mittels Tritium. Des weiteren Ermöglicht die kapazitive Beschleunigungsstrecke für die Ionen in der Gasphase bei Normaldruck eine höchstsensitive Erfassung. Über chemometrische Auswerteprogramme erfolgte die Zuordnung der erfassten spektroskopischen Daten. Eine der in Fortführung des Erfindungsgedanken nachzuweisenden Leitkomponenten aus der pyrolytischen Zersetzung der Sporen (Taxonomie) sind u. a. Fragmente und/oder Reaktionsprodukte von bio-organischen Verbindungen (hochmolekulare Terpene, Picolinsäure und Lipide sowie deren Kondensations- und Reaktionsprodukte). According to the detection of the laser pyrolysis by means of a highly sensitive ion drift detector of the company I. U. T./Berlin. Characteristics of the detector / sensor are the ionization of the volatile chemical Pyrolysis products using tritium. Furthermore, allows the capacitive Acceleration path for the ions in the gas phase at normal pressure a highly sensitive detection. About chemometric evaluation programs took place the assignment of the acquired spectroscopic data. One in continuation of the inventive concept to be detected Leitkomponenten from the pyrolytic decomposition of spores (taxonomy) are u. a. fragments and / or reaction products of bio-organic compounds (high molecular weight terpenes, picolinic acid and lipids and their Condensation and reaction products).

Erfindungsrelevant ist des weiteren die Gewährleistung der Temperaturstabilität im Bezug auf konstante Pyrolysebedingungen in Hinsicht auf die Reproduzierbarkeit des Verfahrens. Im bevorzugten Ausführungsbeispiel ist mit Blick auf Arbeitshygiene und Desinfektion die Gewährleistung der vollständigen Eliminierung bakterieller pathogener Erreger oder luftgetragener Sporen u. a. in der Hohlfaser/Kapillararray durch den Reinigungseffekt eines hochenergetischen Laserstrahls gegeben. Further relevant to the invention is the guarantee of Temperature stability with respect to constant pyrolysis conditions in terms on the reproducibility of the process. In the preferred Embodiment is with regard to work hygiene and disinfection the Ensuring complete elimination of bacterial pathogens or airborne spores u. a. in the hollow fiber / capillary array through the Cleaning effect of a high-energy laser beam given.

Im Bio/Aerosol sind zeitgleich diverse bakterielle Mikroorganismen der Umgebungsluft (Belastung mit Pilzen, Pollen etc.) enthalten, deren Konzentration/Volumen konnte überraschenderweise infolge einer Vorreinigung zugunsten des Analyten reduziert werden. Neben der prinzipiellen Detektion einer Belastung der Raum/Umgebungsluft ist Gegenstand der Erfindung die direkte Kontrolle in der Ausatemluft kontaminierter und nicht-kontaminierter Personen (Alveolar positive/negativ) gegenüber einer Hintergrundbelastung. In bio / aerosol are simultaneously various bacterial microorganisms of Ambient air (contamination with fungi, pollen, etc.), whose Concentration / volume was surprisingly due to a Pre-cleaning can be reduced in favor of the analyte. In addition to the principle detection of a load of the room / ambient air is The invention relates to direct control in the exhaled air contaminated and non-contaminated persons (alveolar positive / negative) against a background load.

In Fortführung des Erfindungsgedanken ist in einem zusätzlichen erfindungsrelevanten Verfahrensschritt die Aufkonzentrierung der Sporenpyrolyseprodukte zum Zwecke der Detektion vorgesehen. In continuation of the idea of the invention is in an additional Invention-relevant process step, the concentration of the Spore pyrolysis products intended for the purpose of detection.

In dem bevorzugten Ausführungsbeispiel erfolgt die Stoffstromführung im Gegenstrom zur Laserstrahleinkopplung, in Weiterführung des Erfindungsgedankens sind weitere technische Lösungen vorgesehen. In the preferred embodiment, the material flow guide takes place in Countercurrent to Laserstrahleinkopplung, in continuation of the According to the invention further technical solutions are provided.

Im Fortführung des Erfindungsgedanken ist ebenso eine Detektion von Kontaminationen mit viralen Erregern, den Bakteriophagen - wobei Viren aus DNA/RNA-Anteilen und einer Proteinhülle bestehen - Beispielhaft anhand von Pockenviren durchgeführt, möglich. In continuation of the inventive concept is also a detection of Contaminations with viral pathogens, the bacteriophages - where viruses out DNA / RNA portions and a protein shell consist - by way of example of Pox viruses performed, possible.

Die Erfindung ist in den Abb. 1-7 erläutert: The invention is illustrated in Figs. 1-7:

Abb. 1 Kapillare/Hohlfaser und Kapillarbündel/array Fig. 1 Capillary / hollow fiber and capillary bundle / array

Abb. 2 Laserstrahlführung und Stoffstrom erfolgt in gleicher Richtung (Gleichstromverfahren). Vorrichtung mit einer Kapillare oder Kapillarbündel Fig. 2 Laser beam guidance and material flow in the same direction (DC method). Device with a capillary or capillary bundle

Abb. 3 Laserstrahlführung und Stoffstrom in gleicher Richtung (Gleichstromverfahren). Vorrichtung mit Einzelkapillare (6.), der Laserstrahl wird seitlich eingekoppelt (3.), externe Laserleistungsmessung (4.b), nach Pyrolyse in 6. erfolgt die IMS- Detektion (8). Fig. 3 Laser beam guidance and material flow in the same direction (DC method). Device with single capillary (6.), the laser beam is coupled in laterally (3.), external laser power measurement (4.b), after pyrolysis in 6. the IMS detection ( 8 ) takes place.

Abb. 4 Laserstrahlführung und Stoffstrom in gleicher Richtung (Gleichstromverfahren). Vorrichtung mit Kapillarbündel/array (6.), der Laserstrahl wird seitlich eingekoppelt (3.), externe Laserleistungsmessung (4.b), nach synchroner Pyrolyse in 6. erfolgt die IMS-Detektion (8). Fig. 4 Laser beam guidance and material flow in the same direction (DC method). Device with capillary bundle / array (6.), the laser beam is coupled in laterally (3.), external laser power measurement (4.b), after synchronous pyrolysis in 6. the IMS detection ( 8 ) takes place.

Abb. 5 Laserstrahlführung und Stoffstrom in gleicher Richtung (Gleichstromverfahren). Vorrichtung mit Kapillarbündel/array (6.), der Laserstrahl wird seitlich eingekoppelt (3.), externe Laserleistungsmessung (4.b), nach Pyrolyse in der ersten Kapillare, werden unterschiedlich dotierte Kapillaren zur Auftrennung verwendet, dann erfolgt die IMS-Detektion (8). Fig. 5 Laser beam guidance and material flow in the same direction (DC method). Device with Kapillarbündel / array (6.), the laser beam is coupled laterally (3.), external laser power measurement (4.b), after pyrolysis in the first capillary, differently doped capillaries are used for separation, then the IMS detection ( 8 ).

Abb. 6 Laserstrahlführung und Stoffstrom in gleicher Richtung (Gleichstromverfahren).Vorrichtung mit austauschbaren, individuell dotierten Einzelkapillaren (6.), durch Dreh- oder in Form einer Verschiebeeinheit kann die Position der Kapillaren verändert werden. Der Laserstrahl wird seitlich eingekoppelt (3.), externe Laserleistungsmessung (4.b), nach Pyrolyse in 6. erfolgt die separate IMS-Detektion (8) für jede Einzelkapillare. Fig. 6 Laser beam guidance and material flow in the same direction (DC method). Device with exchangeable, individually doped single capillaries (6), by rotation or in the form of a displacement unit, the position of the capillaries can be changed. The laser beam is injected laterally (3.), external laser power measurement (4.b), after pyrolysis in 6. the separate IMS detection ( 8 ) is performed for each single capillary.

Abb. 7 Laserstrahlführung und Stoffstrom in entgegengesetzter Richtung (Gegenstromverfahren). Vorrichtung mit austauschbaren, individuell dotierten Einzelkapillaren (6.), durch Dreh- oder in Form einer Verschiebeeinheit kann die Position der Kapillaren verändert werden. Der Laserstrahl wird seitlich eingekoppelt (3.), externe Laserleistungsmessung (4.b), nach Pyrolyse in 6. erfolgt die separate IMS-Detektion (8) für jede Einzelkapillare. Fig. 7 Laser beam guidance and material flow in opposite direction (countercurrent process). Device with exchangeable, individually doped Einzelkapillaren (6.), by rotation or in the form of a displacement unit, the position of the capillaries can be changed. The laser beam is injected laterally (3.), external laser power measurement (4.b), after pyrolysis in 6. the separate IMS detection ( 8 ) is performed for each single capillary.

Claims (34)

1. Verfahren und Vorrichtung zum Schnelltest auf bakterielle Kontaminanten dadurch gekennzeichnet, dass durch eine Kombination von pyrolytischem Aufschluß, Kapillartrennungsverfahren und Ionen-Mobilitäts-Spektrometrie eine biochemische repräsentative Signatur der bakteriellen Kontamination gemessen wird. 1. A method and apparatus for rapid test for bacterial contaminants, characterized in that a biochemical representative signature of the bacterial contamination is measured by a combination of pyrolytic digestion, capillary separation method and ion mobility spectrometry. 2. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass Laserstrahlung im spektralen Bereich von 0,15-15 µm zur Pyrolyse verwendet wird. 2. Method and device according to FIG. 1, characterized in that Laser radiation in the spectral range of 0.15-15 μm for pyrolysis is used. 3. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass in dem bevorzugten Ausführungsbeispiel ein CO2-Laser verwendet wird. 3. The method and apparatus according to 1, characterized in that in the preferred embodiment, a CO 2 laser is used. 4. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass ein Excimer-Laser (Xenonchlorid 308 nm) eingesetzt wird. 4. Method and device according to FIG. 1, characterized in that an excimer laser (xenon chloride 308 nm) is used. 5. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass ein innertes Platinnetz zur inneren Pyrolyse verwendet wird. 5. Method and device according to 1, characterized in that an internal platinum network is used for internal pyrolysis. 6. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass die schnelle Aufheizung des Probenvolumen mit einen Laser erfolgt. 6. Method and device according to FIG. 1, characterized in that the rapid heating of the sample volume with a laser takes place. 7. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass ein Einkopplungselement in Verbindung mit dem Ionen-Drift-Sensor steht. 7. Method and device according to FIG. 1, characterized in that a coupling element is in communication with the ion drift sensor. 8. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass in dem Einkopplungselement eine Trennstruktur enthalten ist. 8. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that in the coupling element, a separation structure is included. 9. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass zur Laserstrahlführung eine beschichtete Kapillare verwendet wird. 9. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that For laser beam guidance, a coated capillary is used. 10. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass der pyrolytische Aufschluss innerhalb der Kapillare erfolgt. 10. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that the pyrolytic digestion takes place within the capillary. 11. Verfahren und Vorrichtung nach 1, dadurch gekennzeichnet, dass die Pyrolyse bakterieller Kontaminanten vor der Ionisierung erfolgt. 11. Method and device according to 1, characterized in that pyrolysis of bacterial contaminants occurs prior to ionization. 12. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass ein besonderes Kopplungsglied zur Laserstrahlführung eingesetzt wird. 12. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that a special coupling member for laser beam guidance is used. 13. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass in dem bevorzugten Ausführungsbeispiel die Stoffstromführung entgegengesetzt zur Laserstrahlrichtung erfolgt. 13. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that in the preferred embodiment, the material flow guide takes place opposite to the laser beam direction. 14. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass ein konstanter Luftstrom über die Kopplungsstrecke geführt wird. 14. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that a constant air flow over the coupling path is performed. 15. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass eine Hohlfaser/Kapillare deren innere Oberfläche modifiziert und der Messaufgabe angepasst werden kann genutzt wird. 15. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that a hollow fiber / capillary whose inner surface is modified and the Measuring task can be adjusted. 16. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die Hohlfaser/Kapillare(n) aus Saphirmaterial sind. 16. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that the hollow fiber / capillary (s) are made of sapphire material. 17. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass ein Kapillarbündel Anwendung findet. 17. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that a capillary bundle finds application. 18. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die Hohlfaser/Kapillare(n) in ihrer geometrischen Form der spezifischen Messaufgabe angepasst werden. 18. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that the hollow fiber / capillary (s) in their geometric shape of the specific Measuring task to be adjusted. 19. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass für die Gesamtlänge der Hohlfaser/Kapillare(n) eine Temperaturstabilität durch die Laserpyrolyse erzielt wird. 19. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that for the total length of the hollow fiber / capillary (s) a temperature stability by the laser pyrolysis is achieved. 20. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die Pyrolyse in einer Kapillare erfolgt und die verbliebenen Kapillaren des Kapillarbündel - gleich oder unterschiedlich beschichtet oder in Teil- Segmenten - für die Trennung Anwendung finden. 20. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that the pyrolysis takes place in a capillary and the remaining capillaries of the Capillary bundles - coated in the same way or differently or in part Segments - find application for separation. 21. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass Hohlfaser/Kapillarbündel als Auftrennungseinheit dienen. 21. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that Hollow fiber / Kapillarbündel serve as a separation unit. 22. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die innere Oberfläche der Hohlfaser/Kapillare(n) durch Dotierung/Belegung aktiviert wird. 22. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that the inner surface of the hollow fiber / capillary (s) by doping / assignment is activated. 23. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass durch eine aktivierte Oberfläche der Hohlfaser/Kapillare(n) Trennungseffekte verzielt werden. 23. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that by an activated surface of the hollow fiber / capillary (s) separation effects be targeted. 24. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass ein Kapillarbündel im Sinne einer Revolverschaltung - wobei auch andere technische Lösung erfindungsgemäß sind - über ein Kopplungsglied in dem bevorzugten Ausführungsbeispiel mit der Möglichkeit der separaten externen Leistungsmessung mit dem Sensor gekoppelt ist. 24. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that a capillary bundle in the sense of a Revolverschaltung - where others technical solution according to the invention - via a coupling member in the preferred embodiment with the possibility of separate external Power measurement is coupled to the sensor. 25. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die Reinigung der Hohlfaser/Kapillare(n) durch den Laserstrahl erzielt wird. 25. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that the cleaning of the hollow fiber / capillary (s) is achieved by the laser beam. 26. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass eine Anreicherung von Kontaminanten durch geeignete Filtersysteme erreicht wird. 26. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that Accumulation of contaminants achieved by suitable filter systems becomes. 27. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass die Anreicherung von Kontaminationspyrolyseprodukte eine Steigerung der höchstsensitiven Detektion ermöglicht. 27. Method and device according to FIGS. 1 and 2-6, characterized in that the accumulation of contaminated pyrolysis products an increase in highly sensitive detection possible. 28. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6 und 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass ein höchstempfindlicher Ionen-Drift-Sensor der Firma I. U. T. zur Detektion verwendet wird. 28. Method and device according to 1, 2-6 and 7-27, characterized in that a highly sensitive ion drift sensor of the company I. U. T. for detection is used. 29. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6 und 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass Gase für eine Kondensation partikulärer Bestandteile aus der Umgebungsluft genutzt wird. 29. Method and device according to 1, 2-6 and 7-27, characterized in that Gases for condensation of particulate matter from the ambient air is being used. 30. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6 und 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass als Gas zur Kondensation Wasserdampf Anwendung findet. 30. Method and device according to 1, 2-6 and 7-27, characterized in that as gas for condensation water vapor application finds. 31. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6, 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass ein inertes Gas zur Pyrolyse hinzugesetzt wird. 31. Method and device according to 1, 2-6, 7-27, characterized in that an inert gas is added to the pyrolysis. 32. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6, 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass ein gasförmiger Reaktant hinzugeführt wird. 32. Method and device according to 1, 2-6, 7-27, characterized in that a gaseous reactant is added. 33. Verfahren und Vorrichtung nach 1, 2-6, 7-27, dadurch gekennzeichnet, dass als Kopplungselement eine Miniaturisierung der Detektoreinheit als IMS-Chip im Rahmen der Mikrosystemtechnik angestrebt wird. 33. Method and device according to 1, 2-6, 7-27, characterized in that as a coupling element miniaturization of the detector unit as an IMS chip in the context of microsystems technology is sought. 34. Verfahren und Vorrichtung nach 1 und 2-6, dadurch gekennzeichnet, dass als Kontaminaten Bakteriophagen z. B. Pockenviren in dem gasförmigen Stoffstrom nachweisbar sind. 34. Method and device according to 1 and 2-6, characterized in that as contaminants bacteriophages z. B. poxviruses in the gaseous Material flow are detectable.
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1718772A2 (en) * 2004-02-26 2006-11-08 Brigham Young University Catalytic production of biomarkers from biological materials
DE102008003190A1 (en) * 2008-01-04 2009-08-27 Bundesanstalt für Materialforschung und -Prüfung (BAM) Detecting mold fungus infestation spot, comprises measuring typical markers of molds i.e. its metabolic products, and operating high resolution portable ion mobility spectrometer into suspicion room analysis of room air on the spot
CN113686605A (en) * 2021-08-16 2021-11-23 北京林业大学 Pollen tube ultrathin slice and preparation method thereof

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1718772A2 (en) * 2004-02-26 2006-11-08 Brigham Young University Catalytic production of biomarkers from biological materials
EP1718772A4 (en) * 2004-02-26 2008-06-25 Univ Brigham Young Catalytic production of biomarkers from biological materials
DE102008003190A1 (en) * 2008-01-04 2009-08-27 Bundesanstalt für Materialforschung und -Prüfung (BAM) Detecting mold fungus infestation spot, comprises measuring typical markers of molds i.e. its metabolic products, and operating high resolution portable ion mobility spectrometer into suspicion room analysis of room air on the spot
CN113686605A (en) * 2021-08-16 2021-11-23 北京林业大学 Pollen tube ultrathin slice and preparation method thereof
CN113686605B (en) * 2021-08-16 2023-07-07 北京林业大学 Ultrathin pollen tube slice and preparation method thereof

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