DD207579A1 - METHOD FOR THE QUANTITATIVE DETERMINATION OF THE ORIGINAL BZW. TOTAL NITROGEN CONTENT IN ALL PROTEIN SUPPLEMENTS AND AMMONIA CONTENT IN ORGANIC MATERIAL - Google Patents
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Abstract
Es wird eine Methode zur Bestimmung des Eiweiss-Gehaltes in allen Proteintraegern empfohlen, die aufgrund der Empfindlichkeit und der Reproduzierbarkeit kleinste Substanzmengen erfordert und dementsprechend eine wesentliche Einsparung an Energie, Chemikalien und Zeit zur Folge hat. Gleichzeitig wird eine Methode zur Bestimmung des Ammoniak-Gehaltes in Futtermitteln, Lebensmitteln und Koerperfluessigkeiten vorgeschlagen, die eine wesentliche Vereinfachung der bisher gebraeuchlichen Untersuchungstechnik darstellt.A method for determining the protein content in all protein carriers is recommended, which requires the smallest amount of substance due to the sensitivity and the reproducibility and accordingly results in a significant saving in energy, chemicals and time. At the same time, a method for the determination of the ammonia content in feed, food and body fluids is proposed, which represents a substantial simplification of the previously used examination technique.
Description
Verfahren zur quantitativen Bestimmung des Eiweiß- bzw. Gesamtstickstoff -Gehaltes in allen Proteinträgern sowie des Ammoniak-Gehaltes in organischem MaterialMethod for the quantitative determination of the protein or total nitrogen content in all protein carriers and of the ammonia content in organic material
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur quantitativen Bestimmung des Eiweiß-Gehaltes bzw. des Gehaltes an Gesamtstickstoff in allen Eiweißträgern (Futtermittel,'Lebensmittel, Körperflüssigkeiten, Skelett-, Biosehlamm- und Kotproben) sowie des Ammoniak-Gehaltes in Futtermitteln, Lebensmitteln, Körperflüssigkeiten und Wasser,, >The invention relates to a method for the quantitative determination of the protein content or the content of total nitrogen in all protein carriers (feed, food, body fluids, skeletal, Biosehlamm- and faeces samples) and the ammonia content in feed, food, body fluids and water ,,>
Zur Bestimmung des Eiweiß-Gehaltes im organischen Material werden hauptsächlich Methoden eingesetzt, die auf der Umwandlung des in den Bausteinen der Eiweiße enthaltenen Stickstoffsberuhen. Der in den Aminosäuren enthaltene Stickstoff wird in Ammoniak umgewandelte Der ermittelte Ammoniak-Gehalt kann mit einem empirischen Faktor in Eiweiß umgerechnet werden. Methoden zur direkten Bestimmung des Eiweiß-Gehaltes konnten sich bisher nicht durchsetzen, weil sie den Anforderungen der Routineuntersuchung nicht genügen und nicht universell einsetzbar sind# The determination of the protein content in the organic material mainly uses methods based on the conversion of the nitrogen contained in the building blocks of the proteins. The nitrogen contained in the amino acids is converted into ammonia. The determined ammonia content can be converted into protein with an empirical factor. Methods for the direct determination of the protein content could not prevail so far, because they do not meet the requirements of the routine examination and are not universally applicable #
Die zur Bestimmung des Eiweiß-Gehaltes in Futtermitteln, Lebensmitteln, Körperflüssigkeiten und anderem biologischen Material, angewandten Methoden erfordern aufgrund hoher bzw. relativThe methods used to determine the protein content in feed, food, body fluids and other biological material, require due to high or relatively
13.!ViAi 19 82*00936013.! ViAi 19 82 * 009360
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hoher Probeneinwaagen große Mengen an Energie, Zeit und einen gewissen apparativen Aufwand· Außerdem entstehen größere Mengen aggressiever Säuredämpfe, die sich ungünstig auf die Laboreinrichtungen und die Laboratmosphäre,auswirken. Es gibt im wesentlichen 3 Verfahren, die z#Zt· zur Bestimmung des Eiweiß-Gehaltes in den o.g„ Substraten routinemäßig ein- > gesetzt werden· Es sind dies die Bestimmungsmethode nach Kjeldahl, die'Indophenolblau-Reaktion nach dem Kjeldahl-Aufschluß und die Bestimmungsmethode nach dem Farbstoff-Bindungsprinzip. Die Methode nach Kjeldahl erfordert durch die· große Probenmenge eine erhebliche Menge an Energie für den Aufschluß und führt durch Entwicklung großer- Säuredampf-Mengen zur Beeinträchtigung der Laboreinrichtungen und der Laborluft· ' Die übrigen Verfahren erfordern noch relativ hohe Probeneinwaagen, dementsprechend auch einen größeren Energieaufwand und einen gewissen apparativen'Aufwand«high sample weights large amounts of energy, time and a certain amount of equipment · In addition, larger amounts aggressiever acid vapors, which adversely affect the laboratory facilities and the laboratory atmosphere, arise. There are essentially three methods, the z # · Zt for determining the protein content in the above-mentioned "substrates set routinely mono-> · These are the determination method by the Kjeldahl method, die'Indophenolblau reaction according to the Kjeldahl digestion and Determination method according to the dye-binding principle. The method according to Kjeldahl requires by the large amount of sample a significant amount of energy for the digestion and leads by development of large amounts of acidic acid to the deterioration of the laboratory equipment and the laboratory air. The remaining methods still require relatively high Probeneinwaagen, accordingly also a greater expenditure of energy and a certain amount of equipment
Ziel der Erfindung ist es, durch den Einsatz eines Reagenzes, welches sehr empfindlich und unter bestimmten'Bedingungen analytisch exakt auf Ammoniak reagiert, kleinste Ammoniak-Konzentrationen quantitativ zu erfassen, um daraus den Eiweiß-Gehalt zu berechnen· 'The aim of the invention is to quantitatively detect the smallest possible ammonia concentrations by using a reagent which reacts very sensitively and under certain conditions analytically to ammonia, in order to calculate the protein content from it.
Durch den Einsatz kleinster Pr-obemengen wird es möglich, den Aufwand an Energie, Zeit und Chemikalien sowie den apparativen Aufwand drastisch einzuschränken·The use of very small quantities makes it possible to drastically reduce the expenditure of energy, time and chemicals as well as the expenditure on equipment.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Analysenverfahren für alle zu analysierenden Protein träger sowie für ammoniak- . haltige Substrate und Flüssigkeiten zu entwickeln, damit durch eine minimale Probeneinwaage eine erhebliche Einsparung an Energie, Zeit und apparativem Aufwand, besonders bei großen Serien, der in hohem Maße anfallenden Routineuntersuchungen von Futter- und Lebensmittelproben erreicht werden kann·The invention is based on the object, an analytical method for all analyzed protein carrier and for ammonia. to develop containing substrates and liquids in order to achieve a considerable saving in energy, time and equipment expenditure, especially in the case of large series, of the extensive routine testing of feed and food samples by a minimum sample balance.
ia-MA1198.2*009.360ia MA1198.2 * 009360
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Darlegung des Wesens der Erfindung; Explanation of the essence of the invention ;
Erfindungsgemäß "wird diese Aufgabe dadurch gelöst, daß das Untersuchungsmaterial bei der Protein-Bestimmung je Probe mit 0,j? ml konz. Schwefelsäure im Reagenzglas erhitzt, anschließe! mit 0,2 bis 0,5 ml Wasserstoffperoxid (30 %ig) versetzt und durch weiteres kurzzeitiges Erhitzen aufgeschlossen wird«, Naci dem Verdünnen der aufgeschlossenen Probe wird ein aliquoter Teil mit 0,1 ml Dikaliumtetragodomerkurat-Lösung (gesättigt) •versetzt. Die Extinktion der Lösung wird bei vorzugsweise 415r in einer 1 cm Küvette gegen Aqua bidest. gemessen« Die vorgeschlagene Bestimmungsmethode ermöglicht die schnelle und exaki: Bestimmung des Ammoniak-Gehaltes bzw. des Gesamtstickstoff-Gehaltes, aus dem der Proteingehalt einfach berechnet werden karAccording to the invention, this object is achieved by heating the test material in the test tube with 0.j ml of concentrated sulfuric acid in the test tube, adding 0.2 to 0.5 ml of hydrogen peroxide (30% strength) and by diluting the digested sample, 0.1 ml of dipotassium tetragodomercurate solution (saturated) is added to an aliquot, and the absorbance of the solution is measured preferably at 415r in a 1 cm cuvette against double-distilled water «The proposed method of determination allows fast and exaki: determination of ammonia content or total nitrogen content, from which the protein content can be calculated easily kar
Ausführungsbeispiele ' Exemplary embodiments
Das erfindungsgemäße Verfahren wird anhand folgender Beispiele naher erklärt.The process according to the invention will be explained in more detail with reference to the following examples.
100 mg einer auf trockenem Wege 1:10 verdünnten Probe werden i einem Reagenzglas mit 0,5 ml konz. Schwefelsäure versetzt. Das Glas wird in eine der Bohrungen des Heizblocks gesetzt, der sä auf einem Laborkocher befindet» Nach dem Auftreten der ersten Säuredämpfe wird abgekühlt und anschließend setzt .man 0,3 ml Wasserstoffperoxid (30 %ig) hinzu. Das Erhitzen wird so lange fortgesetzt, bis die Probe farblos ist.100 mg of a diluted sample in the dry way 1:10 conc i a test tube with 0.5 ml. Sulfuric acid added. The glass is placed in one of the boreholes of the heating block, which is placed on a laboratory cooker. »After the first acid vapors have appeared, they are cooled and then .3 ml hydrogen peroxide (30%) is added. The heating is continued until the sample is colorless.
Die so aufgeschlossene Probe wird in einen 100 ml Maßkolben ge spült und der Kolben mit entionisierten Wasser auf 100 ml aufgefüllt.The so-digested sample is rinsed ge in a 100 ml volumetric flask and the flask filled with deionized water to 100 ml.
2 ml der so verdünnten Probe werden mit 0,1 ml Reagenz (Dikali umtetrajodomerkurat,- Überstand der gesättigten Lösung) Versetz Die Extinktion kann nach 10 min bei 415 am gegen Aqua bidest. in einer 1 cm Küvette gemessen werden.Dissolve 2 ml of the sample thus diluted with 0.1 ml reagent (Dikali umtetrajodomerkurat, - supernatant of the saturated solution). Displacement The absorbance can after 10 min at 415 am against double-distilled water. be measured in a 1 cm cuvette.
Anhand einer Eichkurve wird der Ammoniak-Gehalt ermittelt, aus dem sich der Eiweiß- bzw. Protein-Gehalt durch Multiplikation mit einem gegebenen Faktor errechnen läßt.Based on a calibration curve, the ammonia content is determined from which the protein or protein content can be calculated by multiplying by a given factor.
iaiAAI1:982*0ti9-36-0'iaiAAI1 : 982 * 0ti9-36-0 '
1 ml Pansensaft wird in einel 100 ml Maßkolben gespült und mit entionisierten Wasser auf 100 ml aufgefüllt. Ein aliquoter Teil (2 ml) wind nach dem Zentrifugieren mit 0,1 ml Reagenz versetzt· Die Extinktion wird 10 min danach vorzugsweise bei 415 am gegen Aqua bidest· gemessen, *1 ml of rumen juice is rinsed in a 100 ml volumetric flask and made up to 100 ml with deionized water. An aliquot (2 ml) of wind is added after centrifuging with 0.1 ml of reagent. The extinction is measured 10 min. Thereafter, preferably at 415 ml. Against double-distilled water, *
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DD23888282A DD207579A1 (en) | 1982-04-12 | 1982-04-12 | METHOD FOR THE QUANTITATIVE DETERMINATION OF THE ORIGINAL BZW. TOTAL NITROGEN CONTENT IN ALL PROTEIN SUPPLEMENTS AND AMMONIA CONTENT IN ORGANIC MATERIAL |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1994004916A1 (en) * | 1992-08-14 | 1994-03-03 | Cambridge Research & Innovation Limited | Apparatus for the detection of volatile amines |
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1982
- 1982-04-12 DD DD23888282A patent/DD207579A1/en unknown
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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WO1994004916A1 (en) * | 1992-08-14 | 1994-03-03 | Cambridge Research & Innovation Limited | Apparatus for the detection of volatile amines |
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