CN108310031A - 一种人参果总皂苷原料药、制剂、制备方法、及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于中药原料药加工领域，具体涉及一种人参果总皂苷原料药、制剂、制备方法、及其应用。该人参果总皂苷原料药的收率达到0.8％以上，提取效率高。该人参果总皂苷原料药中的人参总皂苷(以人参皂苷Re计)含量在90％以上，能够应用于制备抗抑郁和/或抗心绞痛和/或抗疲劳的药物。上述制备方法包括大孔树脂吸附、洗脱、浓缩、喷雾干燥步骤。本发明的制备方法的各个步骤和参数之间密切配合、协同作用，尤其是在大孔树脂的吸附和洗脱过程中采用了合理的参数，共同提高了产品的性能和功效。

Description

一种人参果总皂苷原料药、制剂、制备方法、及其应用

技术领域

本发明属于中药制药领域，具体涉及一种人参果总皂苷原料药、制剂、制备方法、及其应用。

背景技术

人参果为五加科植物人参(拉丁学名Panax ginseng C.A.Mey.)的果实。从成熟的新鲜人参果提取得到的人参果总皂苷的活性成分包括：皂苷、人参多糖、挥发油、氨基酸和多肽等几大类。具有提高机体免疫力、抗衰老、促进学习与记忆功能、解毒、抗菌等多种生理作用，对心血管疾病、骨质疏松、肿瘤、炎症以及消化道溃疡等疾病具有良好功效。但是，现有技术中，以人参或西洋参鲜果浆为原料的人参果总皂苷的提取工艺中，得到的有效成分含量较少，无法达到80％以上。

药物治疗是中度以上抑郁发作的主要治疗措施。目前临床上一线的抗抑郁药主要包括5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRI，代表药物氟西汀、帕罗西汀、舍曲林、氟伏沙明、西酞普兰和艾司西酞普兰)、5-羟色胺和去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI，代表药物文拉法辛和度洛西汀)、去甲肾上腺素和特异性5-羟色胺能抗抑郁药(NaSSA，代表药物米氮平)等。但是，上述药物易产生药物依赖性及其他副作用，使应用受到一定限制。

所以目前的科研和实践中，需要一种提高有效成分的人参果总皂苷提取方法，制备得到的人参果总皂苷原料药具备有效的抗抑郁、抗心绞痛、抗疲劳的功能。

发明内容

本发明提供一种人参果总皂苷原料药、制剂、制备方法、及其应用。该人参果总皂苷原料药中的人参总皂苷(以人参皂苷Re计)含量在90％以上，能够应用于制备抗抑郁和/或抗心绞痛的和/或抗疲劳药物。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种人参果总皂苷原料药，所述人参果总皂苷原料药中，以人参皂苷Re计，人参总皂苷的质量百分含量大于等于90％。

所述人参果总皂苷原料药的制备方法包括以下步骤：

大孔树脂吸附步骤：将人参果提取液进行吸附处理至饱和，得到吸附后的大孔树脂；冲洗步骤：对所述吸附后的大孔树脂进行冲洗处理至无色，得到冲洗后的大孔树脂；所述冲洗处理中，采用2-3倍树脂体积的纯化水，流速为2-3Bv/h；洗脱步骤：将所述冲洗后的大孔树脂进行洗脱处理，得到洗脱液；所述洗脱处理中，采用的洗脱剂为体积百分比为50-95％，优选为65％的乙醇溶液；所述洗脱剂的流速为0.5-2Bv/h，优选为1Bv/h；浓缩步骤：将所述洗脱液进行浓缩处理，得到60℃时相对密度为1.10-1.13的浸膏；喷雾干燥步骤：将所述浸膏进行喷雾干燥处理，得到所述人参果总皂苷原料药。

作为优选的实施方式，所述大孔树脂吸附步骤之前，还包括以下步骤：

浸泡步骤：向人参果实的果浆或超声提取物中加入纯化水进行浸泡处理，得到上清液和沉淀物，其中，所述人参果实的果浆或超声提取物与所述纯净水的质量比为(1-3)：(1-3)，优选为1：1；所述浸泡处理的时间为不小于3h，优选为3.5h，温度为10-30℃，优选为20℃；第一次过滤步骤：将所述上清液进行第一次过滤处理，得到第一滤液和滤渣，所述第一滤液作为所述人参果提取液的部分或全部；所述第一次过滤处理中，采用80-150目，优选100目的滤网进行过滤。

作为优选的实施方式，所述第一次过滤步骤之后，还包括以下步骤：

提取步骤：将所述沉淀物和滤渣合并，进行煎煮提取处理，得到提取液；

第二次过滤步骤：将所述提取液进行第二次过滤处理，得到第二滤液，所述第二滤液作为所述人参果提取液的部分；优选地，所述第二次过滤处理采用板框过滤。

作为优选的实施方式，所述提取步骤中，所述煎煮提取处理的次数为1-4次；每次煎煮提取处理后均保留药液，并向上一次煎煮提取后得到药渣中加入纯化水继续煎煮；每次煎煮提取加入纯化水的质量为固形物的1-3倍；每次煎煮提取的时间为1-3小时；优选地，所述煎煮提取处理的次数为2次；第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的质量的3倍，煎煮时间为2小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的质量的2倍，煎煮时间为1.5小时。

作为优选的实施方式，所述浸泡步骤之前，还包括超声提取步骤：对人参果的果浆进行超声处理，得到超声提取混合物；所述超声处理中，将所述果浆和无水乙醇按照质量比1：(1-5)，优选为1：3混合，在室温下超声提取5-10min，优选为8min，所述超声提取的功率为75-350W，优选为220-350W，频率为20-60KHz，优选为25-45KHz，得到超声提取混合物。

作为优选的实施方式，所述大孔树脂吸附步骤中，所述人参果提取液：为所述第一滤液和第二滤液合并后得到的混合滤液；或：仅为所述第一滤液；或：分别为所述第一滤液、所述第二滤液。

包含所述人参果总皂苷原料药，或所述制备方法得到的人参果总皂苷原料药的制剂的剂型包括：口服及肠胃外给药形式的各种剂型。

作为优选的实施方式，所述剂型选自片剂、胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸；水针、冻干粉针、无菌粉针、输液；优选地，所述片剂的制备方法中采用薄膜包衣处理。

所述人参果总皂苷原料药，或所述制备方法得到的人参果总皂苷原料药，所述制剂的应用：在制备治疗和/或预防抑郁症、和/或治疗和/或预防心绞痛、和/或治疗和/或预防易疲劳症药物中的应用。

相比现有技术，本发明的有益效果为：

1、本发明的制备方法的各个步骤和参数之间密切配合、协同作用，尤其是在大孔树脂的吸附和洗脱过程中采用了合理的参数，共同提高了产品的性能和功效。

2、本发明的制备方法制备的原料药，其人参总皂苷(以人参皂苷Re计)含量在90％以上。

3、本发明的制备方法制备的原料药，应用于片剂制剂时可满足片剂的质量标准YBZ14982009中含量限度的要求，达到标示量的90-130％。

4、本发明的收率可达到0.8％以上。

5、本发明在片剂的制备中，采用薄膜包衣而不采用现有技术中的糖衣，是因为：更适用于糖尿病患者服用，包衣时间缩短，单片的重量减轻利于吞服。

6、本发明的原料药可以应用于制备抗抑郁药物、抗心绞痛、抗疲劳的药物，起到良好的药效，并可以避免现有的相关药物(尤其是西药)对人体的负面影响。

具体实施方式

第一方面，本发明提供一种人参果总皂苷原料药，该人参果总皂苷原料药中，以人参皂苷Re计，人参总皂苷的质量百分含量为90％以上(可以为90.5％、92％、95％、97％、99％中的任意值或任意二者之间的范围)；收率[(人参果总皂苷原料药的质量/新鲜的人参果实的质量)×100％]可达到0.8％以上(可以为0.85％、0.88％、0.90％、0.93％、0.95％、0.97％中的任意值或任意二者之间的范围)。

第二方面，本发明提供一种人参果总皂苷原料药制剂，该人参果总皂苷原料药制剂被制成临床上任何可接受的剂型。该剂型包括口服及肠胃外给药形式的各种剂型；该剂型选自片剂、胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸；水针、冻干粉针、无菌粉针。本发明的制备方法得到的原料药，应用于片剂制剂时可满足片剂的质量标准YBZ14982009中含量限度的要求，达到标示量的90-130％(可以为90％、92％、95％、100％、105％、110％、115％、120％、125％、130％中的任意值或任意二者之间的范围)。

第三方面，本发明提供一种人参果总皂苷原料药的制备方法，包括如下步骤：

步骤一、采集：于秋季采集新鲜的人参果实，洗净，分离出果肉。

上述分离方式为：将洗净的人参果使用自来水浸泡2-4天(优选为3天)后，果肉位于容器上层，种子位于容器下层，通过过滤得到果肉。

步骤二、匀浆：将上述果肉用打浆机进行匀浆处理，得到果浆。

作为优选的实施方式，先将上述果浆进行超声处理，以使人参果实的有效成分进一步溶出细胞外，再进行之后的浸泡处理。上述超声处理中，将上述果浆和无水乙醇按照质量比1：(1-5)(优选为1：3)混合，在室温下超声提取5-10min(优选为8min)，该超声提取的功率为75-350W(优选为220-350W)，频率为20-60KHz(优选为25-45KHz)得到超声提取混合物。如果超声频率过高会破坏人参果实中的有效成分，反而导致后期人参果总皂苷收率和纯度明显下降；如果超声频率过低则起不到提高收率和纯度的作用。示例性地，上述果浆和无水乙醇的质量比可以为1：1、1：3、1：4、1：5中的任意值或任意二者之间的范围；上述超声时间可以为5min、6min、7min、7.5min、8min、9min、10min中的任意值或任意二者之间的范围，上述超声提取的功率可以为75W、100W、150W、200W、250W、300W、350W中的任意值或任意二者之间的范围，上述超声频率可以为20KHz、25KHz、30KHz、35KHz、40KHz、45KHz、50KHz、55KHz、60KHz中的任意值或任意二者之间的范围。

步骤三、浸泡：向上述果浆或超声提取混合物中加入纯化水进行浸泡处理，时间为不小于3h，优选为3.5h，纯化水的温度为10-30℃(优选为20℃)，得到上清液和沉淀物。

上述果浆或超声提取混合物与纯化水的质量比为(1-3)：(1：3)，优选为1：1。

示例性地，上述果浆或超声提取混合物与纯化水的质量比可以为1：1.5、1：2、1：2.5、1：3、1.5：1、2：1、2.5：1、3：1中任意值，上述浸泡时间可以为3h、4h、5h、6h、7h、8h、10h中的任意值或任意二者之间的范围，上述纯化水的温度可以为10℃、15℃、20℃、25℃、30℃中的任意值或任意二者之间的范围。

步骤四、第一次过滤：吸取上述上清液，再将上清液进行第一次过滤处理，采用80-150目(可以为80目、90目、110目、120目、130目、140目、150目中的任意值或任意二者之间的范围)，优选100目的滤网进行过滤处理，得到第一滤液和滤渣。作为优选的实施方式，收集上述沉淀物和滤渣，进行煎煮提取处理，得到提取液；再将上述提取液进行第二次过滤处理，得到第二滤液。如此操作的目的是使人参果实的有效成分(包括人参皂苷Re)充分地被提取出来，有利于提高人参总皂苷原料药的收率。

上述煎煮提取处理的次数为1-4次，优选为2次，每次均保留药液，并向上一次得到药渣中加入纯化水继续煎煮；每次煎煮加入纯化水的质量为固形物(第一次煎煮处理时的固形物为上述沉淀物和滤渣，第一次煎煮处理之后的每次煎煮处理的固形物为上一次煎煮处理得到的药渣)的1-3倍(可以为1、2、3倍中任意值或任意二者之间的范围)，每次煎煮时间为1-3小时(可以为1h、1.5h、2h、2.5h、3h中任意值或任意二者之间的范围)；最后一次煎煮后，将每次煎煮得到的药液合并作为提取液。优选地，第一次煎煮提取处理加入纯化水的质量为固形物的3倍，煎煮时间为2小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的质量为固形物的2倍，煎煮时间为1.5小时。

上述第二次过滤的方式优选板框过滤处理得到滤液；也可以于3000-5000rpm离心处理5-20min(优选为4000rpm，10min)，保留上清液作为滤液；再将滤液室温冷却至50℃以下，得到第二滤液。

示例性地，上述离心速度可以为3000rpm、3500rpm、4500rpm、5000rpm中的任意值或任意二者之间的范围，时间可以为5min、12min、15min、18min、20min中的任意值或任意二者之间的范围，上述第二滤液的温度可以为40℃、35℃、30℃、25℃、20℃中的任意值或任意二者之间的范围。

步骤五、吸附：将人参果提取液进行大孔树脂柱吸附处理至饱和，得到吸附后的大孔树脂柱。

上述人参果提取液：可以为上述第一滤液和第二滤液合并后得到的混合滤液；也可以仅为第一滤液；也可以分别为第一滤液、第二滤液，即：将第一滤液直接进行大孔树脂吸附处理不与第二滤液合并，将第二滤液也直接进行大孔树脂吸附处理不与第一滤液合并，分别洗脱后得到洗脱液；合并第一滤液、第二滤液得到的洗脱液，再进行下一步的浓缩处理，如此可以节省用于储存第一滤液的储液罐。

上述吸附处理采用的大孔树脂选自D101、D4020、AB-8，优选为D101。上述人参果提取液上柱的方式可以正流上柱，也可以通过液压逆流上柱，后者更有利于去除混合滤液中的杂质。上述大孔树脂柱需要在使用前经过预处理，该预处理的方法为常规方法。

步骤六、冲洗：用2-3倍(可以为2倍、2.2倍、2.5倍、2.8倍、3倍中的任意值或任意二者之间的范围)树脂体积(Bv)的纯化水以流速2-3Bv/h快速对上述吸附后的的大孔树脂进行冲洗处理至无色，得到冲洗后的大孔树脂。

上述冲洗的流速要限定范围在2-3Bv/h，过快或过慢都会降低人参果总皂苷原料药的收率及人参皂苷(以人参皂苷Re计)的含量。

示例性地，上述冲洗的流速可以为2Bv/h、2.2Bv/h、2.5Bv/h、2.8Bv/h、3Bv/h中的任意值或任意二者之间的范围。

步骤七、洗脱：随后用洗脱剂对上述冲洗后的大孔树脂柱进行洗脱处理，直至洗脱下来的液体呈无色，得到洗脱液。

上述洗脱剂为体积百分比为50-95％，优选为65％的乙醇溶液；洗脱剂的流速为0.5-2Bv/h，优选为1Bv/h。

上述洗脱液上柱的方式可以为正流洗脱，也可以为逆流洗脱，前者更有利于将吸附在大孔树脂柱中的人参果总皂苷充分洗脱。上述洗脱的流速要限定范围在0.5-2Bv/h，过快或过慢都会降低人参果总皂苷原料药的收率及人参皂苷(以人参皂苷Re计)的含量。

步骤五和步骤六的目的为分离并纯化人参果实中的人参总皂苷。

示例性地，上述洗脱的流速可以为0.5Bv/h、0.8Bv/h、1Bv/h、1.2Bv/h、1.5Bv/h、1.8Bv/h、2Bv/h中的任意值或任意二者之间的范围。

步骤八、浓缩：对上述洗脱液进行浓缩处理，优选为减压浓缩，得到60℃时相对密度为1.10-1.13的浸膏(即：该浸膏在60℃时的密度与水在60度时的密度之比为1.10-1.13)。在上述浓缩处理中同时除去其中的乙醇并回收。

步骤九、喷雾干燥：将上述浸膏于进风温度为100-180℃(优选为140℃)，出风温度为50-100℃(优选为70℃)，压力为0.1-1.0MPa(优选为0.4MPa)的条件下进行喷雾干燥处理，得到人参果总皂苷粉末，即为人参果总皂苷原料药；并进行检验和分装，即得成品。

示例性地，上述进风温度可以为100℃、110℃、115℃、130℃、140℃、150℃、160℃、170℃、180℃中的任意值或任意二者之间的范围，出风温度可以为50℃、55℃、60℃、65℃、80℃、85℃、90℃、95℃、100℃中的任意值或任意二者之间的范围，压力可以为0.1MPa、0.2MPa、0.3MPa、0.5MPa、0.6MPa、0.7MPa、0.8MPa、0.9MPa、1.0MPa中的任意值或任意二者之间的范围。

上述人参果皂苷原料药可制备为片剂，制备方法包括：

步骤一、混合：将上述人参果皂苷原料药与辅料(优选为淀粉)按照质量比1：(1-10)(可以为1：1、1：2、1：3、1：4、1：4.5、1：6、1：7、1：8、1：9、1：10中的任意值或任意二者之间的范围)，优选1：5混合后，得到原辅料混合物。

步骤二、压片：将上述原辅料混合物经压制处理成素片。

步骤三、包衣：将上述素片经薄膜包衣处理，即得片剂；该片剂符合使用人参果总皂苷原料药制成的片剂的质量标准YBZ14982009的要求。

上述薄膜包衣的原料中，底衣层按质量份数比包括以下原料：底衣料5-15(可以为5、7.5、10、12.5、15质量份中的中的任意值或任意二者之间的范围)，95％乙醇溶液40-80(可以为40、50、60、70、80质量份中的中的任意值或任意二者之间的范围)，纯化水30-100(可以为30、40、50、60、70、80、90、100质量份中的中的任意值或任意二者之间的范围)，优选为底衣料9.7，95％乙醇溶液60，纯化水50；色衣层按质量份数比包括以下原料：色衣料9.7，95％乙醇溶液60，纯化水50。

上述薄膜包衣处理中，包衣液喷洒在素片表面的进风温度为60-80℃(可以为60℃、65℃、75℃、80℃中的中的任意值或任意二者之间的范围)，优选为70℃，排风温度为30-50℃(可以为30℃、35℃、40℃、48℃、50℃中的中的任意值或任意二者之间的范围)，优选为45℃；上述薄膜包衣处理的时间为8-10h(可以为8h、8.5h、9h、9.5h、10h中的中的任意值或任意二者之间的范围)。

本发明的片剂采用薄膜包衣而不采用现有技术中的糖衣，是因为：更适用于糖尿病患者服用，包衣时间缩短，单片的重量减轻至0.3g以下(可以为0.28g、0.25g、0.2g、0.18g、0.1g、0.05g中的中的任意值或任意二者之间的范围)，优选为0.15g，利于吞服。

上述制备方法中所用的设备均为常规设备，可以在市场购买得到；上述制备方法的全过程在药品GMP车间中进行。

第四方面，本发明提供一种人参果总皂苷原料药在制备治疗和/或预防抑郁症药物中的应用。本发明人参果总皂苷原料药及其制剂具有滋补强壮、延年益寿、抗疲劳、抗应激，抗乏氧的作用，可以用于头晕、疲劳、早衰与神经衰弱、内分泌失调等；尤其可以用于制备抗心绞痛的药物，体现其抗乏氧的功效，还可以用于制备抗抑郁的药物，体现其应激的功效；也可以用于制备抗疲劳的药物。

现有的抗心绞痛药物，包括：硝酸酯类和亚硝酸类、硝酸酯类和亚硝酸类，β－肾上腺素能受体阻滞剂类，钙拮抗剂类，这三类西药存在包括疲乏、精神抑制、胃肠道症状等副作用；如生脉饮等中成药制剂用于抗心绞痛则疗效十分有限。现有的抗抑郁药物，如盐酸氟西汀片，对神经系统具有无可避免的副作用：头痛、睡眠异常(如梦境反常、失眠、困倦)、头晕、厌食、疲乏、欣快、短暂的动作异常(如抽搐、共济失调、战栗、肌阵挛等)、痉挛发作及罕见的精神运动性不安/静坐不能。现有的抗疲劳药物，如咖啡因、牛磺酸等，存在着失眠、增加心脏负荷以及视力损伤等副作用，不易长期服用。而上述人参果皂苷原料药为天然植物果实的提取物，应用于制备抗心绞痛/抗抑郁/抗疲劳的药物时，既可以提高疗效，也可以避免传统药物对机体的不良影响。

实施例1

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法，包括如下步骤：

(1)采集：秋季采集新鲜的人参果实在自来水中浸泡3天后，过滤分离出果肉。

(2)匀浆：将上述果肉用打浆机处理为果浆。

(3)浸泡：抽取上述果浆，加入相同质量的20℃的纯化水冷浸3.5小时，得到上清液和沉淀物。

(4)第一次过滤：吸取上述上清液，再采用100目的滤网过滤，得到第一滤液和滤渣。

(5)提取：收集上述沉淀物和滤渣，煎煮提取处理2次：第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的3倍，时间为2小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的2倍，时间为1.5小时；之后合并两次得到的药液作为提取液。

(6)第二次过滤：将上述提取液采用板框过滤，滤液存放于储液罐中，室温冷却至30℃，得到第二滤液。

(7)吸附：将上述第一滤液和第二滤液合并后得混合滤液作为人参果提取液，进行D101大孔吸附树脂操作：混合滤液在液压下，液压逆流进入大孔树脂柱至饱和。

上述大孔树脂已经经过预处理，该预处理方式为：

装柱前清洗设备及管道，以防有害物对树脂的污染,并排净设备内的水；先于吸附柱内加入相当于装填树脂体积0.4～0.5倍的乙醇，然后将新树脂投入柱中，使其液面高出树脂层面约0.3m，浸泡24h；再用2倍树脂体积(2BV)的乙醇，以2BV/h的流速通过树脂层，并浸泡4～5h；继续用乙醇以2BV/h的流速通过树脂层,洗至流出液加两倍体积水不呈白色混浊,并且流出液在200～400nm范围除了乙醇本身吸收外无其它吸收为止，并且水以同样流速洗净乙醇；再用2BV的5％HCL溶液,以4～

6BV/h的流速通过树脂层,并浸泡2～4h,而后用水以同样流速洗至出水pH中性；再用2BV的5％NaOH溶液,以4～6BV/h的流速通过树脂层,并浸泡2～4h,而后用水以同样流速洗至出水pH中性；至此完成了上述大孔树脂柱的预处理工作。

(8)冲洗：吸附饱和后，用2.5倍树脂体积的纯化水，流速为2.5Bv/h快速冲洗树脂至无色。

(9)洗脱：随后以65％乙醇为洗脱剂，流速为1Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。上述大孔树脂柱的规格为直径60cm，直径4m，洗脱处理共使用了1.8吨乙醇溶液。

(10)浓缩：对上述洗脱液进行减压浓缩处理，得到相对密度为1.10-1.13(60℃)的浸膏。

(11)喷雾干燥：将上述浸膏在进风140℃，出风70℃，压力0.4Mpa的条件下喷雾干燥，制成人参果总皂苷原料药。再检验，分装，即得。

本实施的收率(步骤(11)人参果总皂苷原料药的重量/步骤(1)中新鲜的人参果实的重量)可达到0.88％。

将上述人参果总皂苷原料药制备为片剂，方法如下：

取上述人参果总皂苷原料药25g，加淀粉125g，混匀，制成颗粒，压制成1000片，包薄膜衣，即得。

上述薄膜包衣方法包括：

1、包薄膜衣材料：薄膜包衣预混料底衣料、薄膜包衣预混料色衣料、乙醇。

A取底衣料9.7kg、95％乙醇60kg、纯化水50kg，搅拌均匀，备用。

B取色衣料9.7kg、95％乙醇60kg、纯化水50kg，搅拌均匀，备用。

C实际配制过程中根据容器的容积按照以上比例进行相应调整。

2、包薄膜衣的操作步骤：

2.1操作前准备：

(1)将硅胶管装入蠕动泵，输入口与拌浆桶连接，输出口穿入包衣机旋转臂管孔内，与多嘴式滴管连接。滴管应安装在滚筒的中心位置。

(2)启动总电源。打开压缩空气总阀门，打开蒸汽膜阀送汽阀门，压力控制在0.4MPa。

(3)打开蒸汽进管弯路上的两冷凝水排水阀，将管路中冷凝水排空后关闭，再打开蒸汽进气阀。

(4)点动匀浆，排风、热风、蠕动泵，确认无异常即可投入生产。

2.2包薄膜衣的操作程序

(1)配浆：将计量好的溶剂倒入拌浆桶内，打开搅拌浆压缩空气送气阀，搅拌浆转动，使液体完全被搅动，以不飞溅液体为宜。将计量好的包衣料匀速投在拌浆桶内液面上，投料速度应使粉末迅速被搅入拌浆桶为宜。

(2)试枪：打开压缩空气送枪阀门，压力可设定在0.4MPa以上通气后，可检查喷枪是否正常喷气。

(3)加药、预热：打开视窗门，用不锈钢撮子将素片缓慢地加入高效包衣机中，设定转速为低速2转/分。点动匀浆启动，使包衣滚筒运转。点动排风按钮，启动排风机。按热风机启动，并设置加热温度50～80℃，(根据素片情况而定)，预热10分钟左右。预热结束后，停止排风、匀浆、热风。

(4)调整枪位：将喷枪放入滚筒内，使喷枪与片床的距离在300～400mm之间(注意：不得超过400mm)，喷枪头与片床保持垂直，三个枪头平衡。

(5)喷浆：喷雾调整：关闭物料调节阀门，打开压缩空气送枪阀，打开蠕动泵，逐渐打开调节阀，同时调整三个枪后面的顶针，使三个枪雾化状态一致。

(6)重新调整主机转速使滚筒转速5～7转/分，使滚筒能带动素片至上而下均匀、连续的翻滚为宜；重新调整进风温度70～80℃、排风温度45～55℃，使素片在受到喷雾时仍能保持预热时的温度；根据实际生产工艺需要调好滚筒压力(一般和预热时一样)。

(7)当进风温度达到70℃、排风温度达到45℃时，打开喷枪的压缩空气阀门，开动蠕动泵，使包衣液自动连续的以雾状喷洒在片芯表面，先喷底衣色，后喷有色衣层。

(8)随着素片表面衣层的逐渐形成，加厚、素片的硬度和耐磨性逐渐提高。主机的转速也可随之调高(适当的提速有利于素片更均匀翻滚，衣层更细致。但不宜过快以免素片表面被磨损，一般为开始时3～4转/分，中间时5～7转/分，最后时8～10转/分。

(9)包衣过程中，完成每层包衣后，要抽取一定量片子，检查片子的外观质量及增重情况，符合要求后，进行一下步操作。

(10)按内控标准0.15g×(1±7％)当薄膜衣片重达到0.140～0.160g时包衣结束，应关闭热风柜的加热器(吹冷风)，使包衣片翻滚冷却(一般20～30分钟)。

(11)关闭压缩空气总阀门，停止搅拌浆，停止蠕动泵，停热风机和排风机，停匀浆后，取出喷枪。

(12)将出料器安装在滚筒内，把药袋敞口置出料口处，按匀浆启动使滚筒转动2转/分，包衣片沿出料器自然落入药袋中。整个薄膜包衣过程即告结束(一般需8～10小时)。

2.3出料结束，拆下出料器，停止滚筒运动。将薄膜衣片于不锈钢盘中均匀平铺，置于不锈钢架上，送至晾片室，晾片4-8小时。晾片结束后，将薄膜衣片装入套有净料袋的不锈钢桶内，取样送检。称重，做好物料卡，标明：品名、批号、数量(净重)、生产日期、操作者，填写中间产品交接单，转入中间站或交接给下道工序。

实施例2

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(2)匀浆和步骤(3)之间增加了超声步骤，具体如下：

将步骤(2)得到的果浆和无水乙醇按照质量比1：3混合，在室温下超声提取8min，超声频率为30KHz，功率为220W，得到超声提取混合物。之后再将该超声混合物进行浸泡处理。

本实施的收率为0.93％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例3

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：未进行步骤(5)的提取处理、步骤(6)的第二次过滤处理，将步骤(4)得到的第一滤液作为人参果提取液进行步骤(7)的吸附处理。

本实施的收率为0.80％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例4

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：将步骤(4)得到的第一滤液、步骤(6)得到的第二滤液，分别直接进入大孔树脂柱进行步骤(7)的吸附处理、步骤(8)的冲洗处理、步骤(9)的洗脱处理，分别得到洗脱液，再将分别得到的洗脱液合并，进行步骤(10)的浓缩处理。

本实施的收率为0.86％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例5

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(7)的吸附处理中，人参果提取液正流上柱；步骤(9)的洗脱处理中，洗脱剂逆流上柱。

本实施的收率为0.86％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例6

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(6)过滤方式为离心处理，转速4000rpm，时间10min，保留上清液，再将上清液于室温冷却至30min，得到第二滤液。

本实施的收率为0.88％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例7

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法，包括如下步骤：

(1)采集：秋季采集新鲜的人参果实在自来水中浸泡3天后，过滤分离出果肉。

(2)匀浆：将上述果肉用打浆机处理为果浆。

(3)浸泡：抽取上述果浆，加入相同质量的10℃的纯化水冷浸8小时，得到上清液和沉淀物。

(4)第一次过滤：吸取上述上清液，再采用80目的滤网过滤，得到第一滤液和滤渣。

(5)提取：收集收集上述沉淀物和滤渣，煎煮提取处理2次：第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的2倍，时间为1.5小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的3倍，时间为3小时；之后合并两次得到的药液作为提取液。

(6)第二次过滤：将上述提取液采用板框过滤，滤液存放于储液罐中，室温冷却至30℃，得到第二滤液。

(7)吸附：将上述第一滤液和第二滤液合并后得混合滤液作为人参果提取液，进行D101大孔吸附树脂操作：混合滤液在液压下，液压逆流进入大孔树脂柱至饱和。上述大孔树脂已经经过预处理，其操作方式与实施例1相同。

(8)冲洗：用2倍树脂体积的纯化水，流速为3Bv/h快速冲洗树脂至无色。

(9)洗脱：随后以50％乙醇为洗脱剂，流速为2Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。上述大孔树脂柱的规格为直径60cm，直径4m，洗脱处理共使用了1.8吨乙醇溶液。

(10)浓缩：对上述洗脱液进行减压浓缩处理，得到相对密度为1.10-1.13(60℃)的浸膏。

(11)喷雾干燥：将上述浸膏在进风100℃，出风50℃，压力0.6Mpa的条件下喷雾干燥，制成人参果总皂苷原料药。再检验，分装，即得。

本实施的收率达到0.85％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例8

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法，包括如下步骤：

(1)采集：秋季采集新鲜的人参果实在自来水中浸泡3天后，过滤分离出果肉。

(2)匀浆：将上述果肉用打浆机处理为果浆。

(3)浸泡：抽取上述果浆，加入相同质量的30℃的纯化水冷浸3.5小时，得到上清液和沉淀物。

(4)第一次过滤：吸取上述上清液，再采用150目的滤网过滤，得到第一滤液和滤渣。

(5)提取：收集收集上述沉淀物和滤渣，煎煮提取处理2次：第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的1.5倍，时间为1小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的2.5倍，时间为1小时；之后合并两次得到的药液作为提取液。

(6)第二次过滤：将上述提取液采用板框过滤，滤液存放于储液罐中，室温冷却至30℃，得到第二滤液。

(7)吸附：将上述第一滤液和第二滤液合并后得混合滤液作为人参果提取液，进行D101大孔吸附树脂操作：混合滤液在液压下，液压逆流进入大孔树脂柱至饱和。上述大孔树脂已经经过预处理，其操作方式与实施例1相同。

(8)冲洗：用2.1倍树脂体积的纯化水，流速为2.8Bv/h快速冲洗树脂至无色。

(9)洗脱：随后以95％乙醇为洗脱剂，流速为0.5Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。上述大孔树脂柱的规格为直径60cm，直径4m，洗脱处理共使用了1.8吨乙醇溶液。

(10)浓缩：对上述洗脱液进行减压浓缩处理，得到相对密度为1.10-1.13(60℃)的浸膏。

(11)喷雾干燥：将上述浸膏在进风180℃，出风100℃，压力0.5Mpa的条件下喷雾干燥，制成人参果总皂苷原料药。再检验，分装，即得。

本实施的收率达到0.87％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例9

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法，包括如下步骤：

(1)采集：秋季采集新鲜的人参果实在自来水中浸泡3天后，过滤分离出果肉。

(2)匀浆：将上述果肉用打浆机处理为果浆。

(3)浸泡：抽取上述果浆，加入相同质量的25℃的纯化水冷浸5小时，得到上清液和沉淀物。

(4)第一次过滤：吸取上述上清液，再采用120目的滤网过滤，得到第一滤液和滤渣。

(5)提取：收集收集上述沉淀物和滤渣，煎煮提取处理2次：第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的2.5倍，时间为2.5小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的1.5倍，时间为2小时；之后合并两次得到的药液作为提取液。

(6)第二次过滤：将上述提取液采用板框过滤，滤液存放于储液罐中，室温冷却至30℃，得到第二滤液。

(7)吸附：将上述第一滤液和第二滤液合并后得混合滤液作为人参果提取液，进行D101大孔吸附树脂操作：混合滤液在液压下，液压逆流进入大孔树脂柱至饱和。上述大孔树脂已经经过预处理，其操作方式与实施例1相同。

(8)冲洗：用3倍树脂体积的纯化水，流速为2Bv/h快速冲洗树脂至无色。

(9)洗脱：随后以70％乙醇为洗脱剂，流速为1.5Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。上述大孔树脂柱的规格为直径60cm，直径4m，洗脱处理共使用了1.8吨乙醇溶液。

(10)浓缩：对上述洗脱液进行减压浓缩处理，得到相对密度为1.10-1.13(60℃)的浸膏。

(11)喷雾干燥：将上述浸膏在进风150℃，出风60℃，压力0.5Mpa的条件下喷雾干燥，制成人参果总皂苷原料药。再检验，分装，即得。

本实施的收率达到0.86％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例10

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(2)匀浆和步骤(3)之间增加了超声步骤，具体如下：

将步骤(2)得到的果浆和无水乙醇按照质量比1：3混合，在室温下超声提取8min，超声频率为45KHz，功率为350W，得到超声提取混合物。之后再将该超声混合物进行浸泡处理。

本实施的收率为0.92％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例11

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(2)匀浆和步骤(3)之间增加了超声步骤，具体如下：

将步骤(2)得到的果浆和无水乙醇按照质量比1：3混合，在室温下超声提取8min，超声频率为25KHz，功率为220W，得到超声提取混合物。之后再将该超声混合物进行浸泡处理。

本实施的收率为0.92％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例12

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(2)匀浆和步骤(3)之间增加了超声步骤，具体如下：

将步骤(2)得到的果浆和无水乙醇按照质量比1：3混合，在室温下超声提取8min，超声频率为55KHz，功率为220W，得到超声提取混合物。之后再将该超声混合物进行浸泡处理。

本实施的收率为0.90％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例13

本对比例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(8)的冲洗处理中，用2.5倍树脂体积的纯化水，流速为2.0Bv/h快速冲洗树脂至无色。

本实施的收率为0.87％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例14

本对比例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(8)的冲洗处理中，用2.5倍树脂体积的纯化水，流速为3.0Bv/h快速冲洗树脂至无色。

本实施的收率为0.87％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例15

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(9)的洗脱处理中，随后以65％乙醇为洗脱剂，流速为0.5Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。

本实施例的收率为0.87％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

实施例16

本实施例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(9)的洗脱处理中，随后以65％乙醇为洗脱剂，流速为2Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。

本实施例的收率为0.87％。

本实施例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

对比例1

本对比例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(8)的冲洗处理中，用2.5倍树脂体积的纯化水，流速为5Bv/h快速冲洗树脂至无色。

本对比例的收率为0.53％。

本对比例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

对比例2

本对比例的人参果总皂苷原料药的制备方法参见实施例1，与实施例1的区别在于：步骤(9)的洗脱处理中，随后以65％乙醇为洗脱剂，流速为5Bv/h正流洗脱大孔树脂吸附的人参果总皂苷有效成分，至无色，收集洗脱液。

本对比例的收率为0.55％。

本对比例的人参果总皂苷片剂的制备方法与实施例1相同。

检测例1：

本检测例是实施例1-16、对比例1、2的人参果总皂苷原料药的成分的检测方法，包括如下步骤：(1)取上述人参果总皂苷约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中。

再精密加甲醇25ml，浸渍30分钟，静置，精密吸取上清液1ml，加于已处理好的D101型大孔吸附树脂柱(内径1.5cm，长15cm)上，以水70ml洗脱，弃去水液。再用20％乙醇30ml洗脱，弃去20％乙醇洗脱液，继续用乙醇100ml洗脱，弃去初洗脱液20ml，收集续洗脱液浓缩至近干，加甲醇溶解并转移至10ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

(2)另取人参皂苷Re对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。

(3)精密吸取供试品溶液0.3ml，对照品溶液0.1ml，分别置具塞试管中，蒸干，各精密加新配制的5％香草醛-冰醋酸溶液0.5ml，70％硫酸(ml/ml)5ml，密塞，轻轻摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即冷却至室温，照紫外-可见分光光度法(《中国药典(2015版)》中通则0401)试验，在540nm波长处测定吸收度。

(4)另精密吸取纯化水0.3ml，蒸干，其余同上操作，并测定吸收度，供作校正值。

(5)自供试品溶液的吸收度减去校正值，计算，即得。

上述人参果总皂苷原料药含人参果总皂苷以人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₄)计算，百分比(％)见下表。

检测例2：

本检测例是实施例1-16、对比例1、2的人参果总皂苷原料药制成的片剂的成分的检测方法，包括如下步骤：

上述片剂的成分的检测方法参见测试例1的人参果总皂苷原料药的成分的检测方法，区别在于：步骤(1)中，取上述片剂20片，除去薄膜衣，精密称定，研细，取约0.52g，精密称定，置具塞锥形瓶中。之后的操作与实施例1相同。

上述片剂含人参果总皂苷以人参皂苷Re(C₄₈H₈₂O₁₄)计算，均符合使用人参果总皂苷原料药制成的片剂的质量标准要求，应为标示量的百分比(％)见下表。

检测例3：

本检测例是实施例1-2、7-9的人参果总皂苷原料药的抗抑郁药效学研究，包括如下步骤：

1、实验药物及动物

实验药物：将各个实施例的人参果总皂苷原料药用生理盐水配至

0.2g/ml溶液，10℃以下低温贮存，备用。对照药物：盐酸氟西汀片，以50ml重蒸水配成2mg/ml的药液，即为阳性对照组。

实验动物：健康昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22g。随机分为5组，每组12只，分别为空白对照组(生理盐水)；阳性对照组(盐酸氟西汀)；本发明药物大、中、小剂量组。灌胃(ig)给药，1次/d，连续14d。实验期间动物自由取食和饮水。

2、药效学评价

2.1分组及给药

表：实验动物分组及给药方案

组别	动物数	剂量
			空白对照组	12	0.1ml/kg
阳性对照组	12	5.0mg/kg
			本发明低剂量	12	0.5g/kg
本发明中剂量	12	1.0g/kg
			本发明高剂量	12	2.0g/kg

2.2小鼠悬尾实验：

将实验动物按表1分组及给药，连续灌胃14天。末次给药后1h，将小鼠尾部距末端约1cm处用夹子固定，使其倒吊于距地面15cm左右的横杆上，动物为克服不正常体位而挣扎活动，但活动一段时间后，出现间断性不动，显示失望状态，即为失望时间。观察6min，并用秒表记录后4min内小鼠的不动时间。

2.3小鼠强迫游泳实验：末次给药后1h进行实验。将小鼠放于直径约18cm，水深18cm，水温25℃的容器内，测定小鼠漂浮不动的时间(即小鼠在水中停止挣扎，或动物呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面)。观察6min，并用秒表记录后4min内小鼠的不动时间。

3、统计学分析

数据以均值±标准差的形式表示，组间比较用t检验。数据由SPSS软件处理，p<0.05具有显著性差异。

4、结果分析

4.1每个实施例的人参果总皂苷原料药对小鼠悬尾不动时间的影响。各组小鼠悬尾不动时间结果见下表。

表：每个实施例的人参果总皂苷原料药对小鼠悬尾实验不动时间的影响(x±s)

注：#与空白对照组比较p<0.01，*与阳性对照组比较p<0.05

由上表可知，每个实施例的人参果总皂苷原料药药液低中高剂量组与空白对照组和阳性对照组相比均具有有显著性差异。说明本发明比阳性对照组更能减少小鼠不动时间，显示出较强的抗抑郁作用。

4.2每个实施例的人参果总皂苷原料药对强迫游泳小鼠不动时间的影响

各组小鼠游泳不动时间结果见下表。

表：每个实施例或对比例的人参果总皂苷原料药对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响(x±s)

注：#与空白对照组比较p<0.01，*与阳性对照组比较p<0.05

由上表可知，上述实施例的人参果总皂苷原料药药液低中高剂量组与空白对照组和阳性对照组相比均具有有显著性差异。说明上述实施例的人参果总皂苷原料药与空白或阳性对照组比较均能不同程度的缩短强迫游泳小鼠的不动时间，显著由于阳性对照组。

小鼠悬尾实验和强迫游泳实验是行为药理实验中用于筛选和观察抗抑郁药物可靠的实验方法。强迫游泳实验是利用动物不能逃出恶劣环境，导致动物行为绝望的一种模型。实验时，将动物放在盛水的容器内强迫其游泳，动物最初的反应是游动，试图逃出，随之感到逃脱是不可能的，便不再挣扎和游动，仅将头部露出水面，肢体漂浮，维持一种不动状态，此中状态称为“行为绝望”。小鼠悬尾实验时，悬尾小鼠为克服倒悬体位，在实验初始表现为不停挣扎、扭动，希望能翻上来，但随之感到绝望，陷入一种不动状态。本发明实验结果显示，上述实施例的人参果总皂苷原料药可显著缩短悬尾实验和强迫游泳实验小鼠的不动时间，表明在小鼠行为绝望模型实验中具有很强的抗抑郁作用。

检测例4：

本检测例是实施例1-2、7-9的人参果总皂苷片剂的治疗心绞痛的临床研究，包括如下步骤：

1方法

1.1试验对象

男性123例，女性77例，年龄45-65岁，按1：1比例随机分为试验组与对照组。

1.2入选标准

西医诊断标准参照1979年国际心脏病学会及世界卫生组织临床命名标准化联合专题组报告“缺血性心脏病的命名及诊断标准”制定，中医诊断标准参照《中药新药治疗冠心病心绞痛的临床试验指导原则》(2002年版)，选冠心病心绞痛作为本次研究的观察证型。

1.3治疗方法

试验组：每个实施例的片剂，25mg/片。用法用量：每次l00mg，每日3次口服。

对照组：生脉颗粒，每袋l0g，由广西南宁市维威制药有限公司(国药准字Z45021885)提供。用法用量：每次l0g，一日3次，开水冲服。

两组在试验期间均禁止使用除硝酸甘油外其他治疗冠心病心绞痛的中西药物，28d为1个疗程。

1.4观察指标

两组患者分别在治疗后进行血尿常规、肝肾功能和常规心电图检查，观察心绞痛疗效、心绞痛发作次数和持续时间、心电图疗效比较。

1.5疗效判定指标

心绞痛症状疗效：①显效：症状消失或基本消失。②有效：疼痛发作次数、程度及持续时间有明显减轻。③无效：症状基本与治疗

前相同。

心绞痛发作次数和持续时间：①心绞痛发作次数：0分；每周发作≤1次。2分：每周发作2～6次。4分：每日发作1～3次。6分：每日发作4次以上。②心绞痛持续时间：0分：无。2分：每次疼痛持续≤5min。4分：每次疼痛持续5～l0min。6分：每次疼痛持续≥l0min。

心电图疗效：①显效：心电图恢复至“大致正常”或达到“正常心电图”。②有效：S-T段的降低，以治疗后回升0.05mV以上，但未达正常水平，在主要导联倒置T波改变变浅(达25％以上者)，或T波由平坦变为直立，房室或室内传导阻滞改善者。③无效：心电图基本与治疗前相同。试验前、后各查1次，病人有胸痛不适发作随时检查。

1.6统计学方法

计量资料采用t检验，计数资料采用X²检验。

2结果

2.1心绞痛疗效比较

见下表。每个实施例的两组治疗后心绞痛症状有明显缓解，每个实施例的组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表：用药后心绞痛疗效评价例(％)

2.2心绞痛发作次数和持续时间比较

见表。每个实施例的两组治疗前后心绞痛发作次数、持续时间比较差异有高度统计学意义<0.01)，每个实施例的组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3两组患者心电图疗效比较

见表。各个实施例的两组治疗前后心电图改变均有明显疗效，每个实施例的两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。

由此可知，上述实施例的人参果总皂苷片剂对于心绞痛的疗效均强于生脉颗粒，对于心绞痛症状的改善具有良好的疗效。

检测例5：

本检测例是实施例1-2、7-9的人参果总皂苷原料药的抗疲劳药效学研究。

1、实验药物及动物

实验药物：将各个实施例的人参果总皂苷原料药用生理盐水配至0.1g/ml溶液，10℃以下低温贮存，备用。

实验动物：健康昆明种小鼠，雌雄兼用，体重18～22g。随机分为2组，每组12只，分别为：空白对照组(生理盐水)，实验组(各个实施例人参果总皂苷原料药的溶液)。

2、给药量

实验组的小鼠口灌胃人参果总皂苷原料药溶液(0.1g/ml)剂量为0.2ml/只，对照组的小鼠口灌胃生理盐水0.2ml/只，每天1次，连续给药7天。

3、小鼠负重游泳实验

小鼠连续灌胃给药7天后，在小鼠尾部绑与铅粒(铅粒与小鼠体重的重量比1:10)依次将各组小鼠置于负重游泳测试仪中，水深25cm，水温25±2℃，测定各组小鼠游泳力竭的时间，并记录，结果见下表。

组别	力竭时间(s)
		对照组	150.3±15.50
实施例1	350.45±50.89**
		实施例2	382.72±49.51**
实施例7	358.46±47.35**
		实施例8	349.37±43.64**
实施例9	356.19±47.34**

**与空白组比P＜0.01

上述各个实施例与对照组对相比有及其显著性差异，本发明的人参果总皂苷原料能够提高小鼠耐抗疲劳能力。

Claims (10)

1.一种人参果总皂苷原料药，其特征在于：所述人参果总皂苷原料药中，以人参皂苷Re计，人参总皂苷的质量百分含量大于等于90％。

2.权利要求1所述人参果总皂苷原料药的制备方法，其特征在于：所述制备方法包括以下步骤：

大孔树脂吸附步骤：将人参果提取液进行吸附处理至饱和，得到吸附后的大孔树脂；

冲洗步骤：对所述吸附后的大孔树脂进行冲洗处理至无色，得到冲洗后的大孔树脂；所述冲洗处理中，采用2-3倍树脂体积的纯化水，流速为2-3Bv/h；

洗脱步骤：将所述冲洗后的大孔树脂进行洗脱处理，得到洗脱液；所述洗脱处理中，采用的洗脱剂为体积百分比为50-95％，优选为65％的乙醇溶液；所述洗脱剂的流速为0.5-2Bv/h，优选为1Bv/h；

浓缩步骤：将所述洗脱液进行浓缩处理，得到60℃时相对密度为1.10-1.13的浸膏；

喷雾干燥步骤：将所述浸膏进行喷雾干燥处理，得到所述人参果总皂苷原料药。

3.根据权利要求2所述制备方法，其特征在于：所述大孔树脂吸附步骤之前，还包括以下步骤：

浸泡步骤：向人参果实的果浆或超声提取物中加入纯化水进行浸泡处理，得到上清液和沉淀物，其中，所述人参果实的果浆或超声提取物与所述纯净水的质量比为(1-3)：(1-3)，优选为1：1；所述浸泡处理的时间为不小于3h，优选为3.5h，温度为10-30℃，优选为20℃；

第一次过滤步骤：将所述上清液进行第一次过滤处理，得到第一滤液和滤渣，所述第一滤液作为所述人参果提取液的部分或全部；所述第一次过滤处理中，采用80-150目，优选100目的滤网进行过滤。

4.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于：所述第一次过滤步骤之后，还包括以下步骤：

提取步骤：将所述沉淀物和滤渣合并，进行煎煮提取处理，得到提取液；

第二次过滤步骤：将所述提取液进行第二次过滤处理，得到第二滤液，所述第二滤液作为所述人参果提取液的部分；优选地，所述第二次过滤处理采用板框过滤。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：

所述提取步骤中，所述煎煮提取处理的次数为1-4次；每次煎煮提取处理后均保留药液，并向上一次煎煮提取后得到药渣中加入纯化水继续煎煮；每次煎煮提取加入纯化水的质量为固形物的1-3倍；每次煎煮提取的时间为1-3小时；

优选地，所述煎煮提取处理的次数为2次；第一次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的质量的3倍，煎煮时间为2小时；第二次煎煮提取处理加入纯化水的量为固形物的质量的2倍，煎煮时间为1.5小时。

6.根据权利要求3所述制备方法，其特征在于：

所述浸泡步骤之前，还包括超声提取步骤：

对人参果的果浆进行超声处理，得到超声提取混合物；所述超声处理中，将所述果浆和无水乙醇按照质量比1：(1-5)，优选为1：3混合，在室温下超声提取5-10min，优选为8min，所述超声提取的功率为75-350W，优选为220-350W，频率为20-60KHz，优选为25-45KHz，得到超声提取混合物。

7.根据权利要求2至6中任一项所述制备方法，其特征在于：

所述大孔树脂吸附步骤中，所述人参果提取液：为所述第一滤液和第二滤液合并后得到的混合滤液；

或：仅为所述第一滤液；

或：分别为所述第一滤液、所述第二滤液。

8.包含权利要求1所述人参果总皂苷原料药，或权利要求2-7中任一项所述制备方法得到的人参果总皂苷原料药的制剂，其特征在于：所述制剂的剂型包括：口服及肠胃外给药形式的各种剂型。

9.根据权利要求8所述制剂，其特征在于：所述剂型选自片剂、胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸；水针、冻干粉针、无菌粉针、输液；优选地，所述片剂的制备方法中采用薄膜包衣处理。

10.权利要求1所述人参果总皂苷原料药，或权利要求2-7中任一项所述制备方法得到的人参果总皂苷原料药，或权利要求8或9所述制剂的应用，其特征在于：所述应用为在制备治疗和/或预防抑郁症、和/或治疗和/或预防心绞痛、和/或治疗和/或预防易疲劳症药物中的应用。