CN102408415B - 一种芒果苷的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物化学领域，公开了一种芒果苷的制备方法。本发明所述芒果苷的制备方法为以芒果树果实、芒果叶、芒果树皮和知母根茎为原料用醇和水的混合溶液提取，过滤，滤液浓缩，所得浓缩液用有机溶剂萃取，然后取萃取水相结晶，用丙酮和水的混合溶液重结晶，即得芒果苷。本发明所述芒果苷的制备方法不使用大孔树脂纯化，避免了树脂前处理、吸附和洗脱过程，缩短了生产周期，提高了转移率，并且减少了有机溶剂的使用量，节约了生产成本，降低了对环境的污染。采用本发明所述芒果苷的制备方法制备的芒果苷纯度高，不含苯类有机溶剂，安全性高。

Description

一种芒果苷的制备方法

技术领域

本发明涉及药物化学领域，具体的说是涉及一种芒果苷的制备方法。

背景技术

芒果苷(mangiferin)，又称芒果素，莞知母宁，分子式为C₁₉H₁₈O₁₁，分子量422，CAS号为：4773-96-0，化学结构式为：

芒果苷主要存在于漆树科植物芒果树(Mangifera indica L.)的果实、叶、树皮，百合科植物知母(Anemarrhena asphodeloids Bge.)的根茎、地上部分，扁桃树(Mangifera perisciformis)的叶、果实中。

现代药理学研究表明，芒果苷具有抗氧化，抗肿瘤，神经保护、抗炎，退热，镇痛，抗寄生虫等重要生理活性(廖洪利、苏春丽等，芒果苷药理研究新进展，药学实践杂志，2008，26(3)：161～162)。目前国内已有芒果止咳胶囊、芒果止咳片、银花芒果胶囊、银花芒果片制剂上市等，而其中有效成分为芒果苷。

目前公开的芒果苷提取纯化方法多为水提醇沉，醇提大孔树脂纯化方法，如专利CN100475830C“高纯度芒果苷制备方法”、专利CN101759689A“一种芒果苷的制备方法”和专利CN101429222A“提取芒果苷的一种方法”均采用大孔树脂纯化。然而采用大孔树脂纯化方法，树脂用前需要处理，纯化需经过吸附和洗脱过程，生产周期长。在用大孔树脂进行纯化洗脱时，由于物理吸附的原因，也容易造成一部分样品死吸附，而导致转移率降低。另外采用大孔树脂纯化洗脱液体积较大，溶剂回收时间长，增加了生产成本，并且溶剂回收产生较多的废液，对环保造成一定的负担。此外由于大孔树脂的使用，增加了引入苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烃类、二乙基苯类等有机残留溶剂的风险，对产品的安全性造成了一定的影响。

发明内容

有鉴于此，本发明目的是提供一种生产周期短、转移率高的芒果苷的制备方法。

为实现本发明的目的，本发明采用如下技术方案：

一种芒果苷的制备方法，包括：

步骤1：含芒果苷的原料用醇和水的混合溶液提取，过滤，滤液浓缩；

步骤2：取步骤1所得浓缩液用有机溶剂萃取，取萃取水相浓缩、结晶；

步骤3：取步骤2所得晶体用丙酮和水的混合溶液重结晶，即得芒果苷。

芒果苷主要存在于漆树科植物芒果树的果实、叶、树皮，百合科植物知母的根茎、地上部分和扁桃树的叶、果实中，因此芒果的果实、叶、树皮、知母的根茎和地上部分等材料均可以作为提取芒果苷的原料。在我国芒果芒果广泛分布于台湾、广东、广西、云南、海南等省、自治区，资源丰富，原料易得，价格低廉，因此，优选芒果树果实、芒果叶、芒果树皮和知母根茎作为制备芒果苷的原料。

芒果苷略溶于甲醇、乙醇、水、可溶于热稀甲醇、热稀乙醇，不溶于非极性溶剂。根据芒果苷即溶于水又溶于乙醇的性质，而大部分杂质可能在水中和乙醇中的溶解度不同，所以采用醇与水的混合溶液提取。

其中，作为优选，所述醇与水的混合溶液为1～3个碳原子的链烷醇与水的混合溶液。

更优选地是，所述1～3个碳原子的链烷醇与水的混合溶液为1～3个碳原子的链烷醇与水的体积比8∶2～7∶3的混合溶液。

由于芒果苷提取液中含有大量的脂溶性杂质，提取结束后首先把过滤收集的滤液浓缩，使溶液中溶剂蒸发溶液浓度增大，然后加入有机溶剂进行萃取，除去叶绿素等脂溶性杂质。

其中，作为优选，所述浓缩为浓缩滤液至60℃下相对密度为1.13～1.15。

作为优选，步骤2所述有机溶剂萃取所用有机溶剂与浓缩液体积比为1∶1～3∶1。

更优选地是，所述有机溶剂为甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或其中任意二者的混合溶剂。

芒果苷溶于水，萃取后芒果苷主要分布于水相中，因此收集萃取水相结晶。

其中，作为优选，步骤2所述结晶为取萃取后的水相浓缩至60℃下相对密度为1.20～1.25，然后调pH值至1～3，静置。其中，可以选用盐酸、硫酸和磷酸等无机酸调节pH值。

本发明所述芒果苷的制备方法步骤3进一步对步骤2所得晶体进行精制，采用丙酮与水的混合溶剂进行重结晶，制得芒果苷成品。所述丙酮与水的混合溶液为丙酮与水的体积比5∶5～7∶3的混合溶液。

其中，作为优选，所述重结晶为步骤2所得晶体用体积比5∶5～7∶3的丙酮与水的混合溶液溶解，结晶。

作为优选，本发明所述芒果苷的制备方法，步骤2还包括依次用水和丙酮洗涤晶体。所述用水洗涤为加入纯化水洗涤结晶所得晶体，抽滤除去溶于水的杂质，所述用丙酮洗涤为加入丙酮洗涤，抽滤除去溶于丙酮的杂质。

其中，作为优选，所述纯化水加入量为每1g含芒果苷的原料加入0.5mL纯化水，所述丙酮加入量为每1g含芒果苷的原料加入1mL丙酮。

本发明所述芒果苷的制备方法，还包括对水和丙酮洗涤后晶体进行干燥，制得芒果苷粗品。其中作为优选，所述干燥为60℃干燥2～4小时。

本发明所述芒果苷的制备方法，步骤3还包括对丙酮和水的混合溶液重结晶所得晶体进行干燥。

在本发明具体实施方式中，本发明所述芒果苷的制备方法具体为取芒果树果实、芒果叶、芒果树皮和知母根茎等原料用体积比8∶2～7∶3的1～3个碳原子的链烷醇与水的混合溶液提取，过滤，滤液浓缩至相对密度为1.13～1.15。加入浓缩液1～3倍体积的有机溶剂萃取，萃取后的水相浓缩至相对密度为1.20～1.25，调pH值至1～3，静置结晶。所得晶体依次用水和丙酮洗涤，60℃干燥2～4小时制得芒果苷粗品。用体积比5∶5～7∶3的丙酮与水的混合溶液在40℃～60℃下溶解芒果苷粗品，每1g芒果苷粗品加入80～100mL丙酮与水的混合溶液。然后加入芒果苷粗品10倍重量的活性炭脱色，过滤除去活性炭后，滤液浓缩至与芒果苷粗品质量体积比为1∶10(g/mL)，静置析晶，干燥制得芒果苷成品。

本发明所述芒果苷的制备方法不使用大孔树脂纯化，避免了树脂前处理、吸附和洗脱过程，缩短了生产周期，提高了转移率，并且减少了有机溶剂的使用量，节约了生产成本，降低了对环境污染。采用本发明所述芒果苷的制备方法制备的芒果苷纯度高，不含苯、甲苯、二甲苯等不符合《中国药典》规定的有机溶剂，安全性高。

具体实施方式

本发明实施例公开了一种芒果苷的制备方法。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明提供的一种芒果苷的制备方法进行详细说明。

实施例1：本发明所述芒果苷的制备方法制备芒果苷

芒果叶1Kg，干燥，粉碎为粗粉，加入甲醇与水体积比为8∶2的混合溶液10L提取2次，每次提取2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至1L体积，相对密度为ρ＝1.13(60℃)，加入1L乙酸乙酯萃取2次，水液继续减压回收至0.5L，相对密度为ρ＝1.20(60℃)，加入盐酸调pH值至1，静置析晶24小时。取析晶溶液离心，弃去上清液，沉淀加0.5L水洗涤1次，抽滤，滤饼用1L丙酮洗涤2次，抽滤，滤饼于60℃干燥2小时，得到芒果苷粗品38.2克。取粗品加3.8L丙酮与水体积比为5∶5的混合溶液，60℃溶解，加入3.8克活性炭，搅拌均匀，抽滤，滤液减压浓缩至0.38L，析晶12小时，抽滤，干燥即得芒果苷成品34.3克。

实施例2：本发明所述芒果苷的制备方法制备芒果苷

芒果叶1Kg，干燥，粉碎为粗粉，加入丙醇与水体积比为7∶3的混合溶液15L提取3次，每次提取1小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至1L体积，相对密度为ρ＝1.15(60℃)，加入乙酸丁酯3L萃取3次，水液继续减压回收至0.5L体积，相对密度为ρ＝1.23(60℃)，加入盐酸调pH值3，静置析晶12小时。取析晶溶液离心，弃去上清液，沉淀加0.5L水洗涤1次，抽滤，滤饼用1L丙酮洗涤3次，抽滤，滤饼于60℃干燥4小时，得到芒果苷粗品37.3克。取粗品加3.7L丙酮与水体积比为6∶4的混合溶液，40℃溶解，加入3.7克活性炭，搅拌均匀，抽滤，滤液减压浓缩至0.37L，析晶24小时，抽滤，干燥即得芒果苷成品33.5克。

实施例3：本发明所述芒果苷的制备方法制备芒果苷

芒果叶1Kg，干燥，粉碎为粗粉，加入乙醇与水体积比为8∶2的混合溶液10L提取3次，每次提取2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至1L体积，相对密度为ρ＝1.14(60℃)，加入甲酸乙酯与乙酸乙酯的混合溶剂1L萃取2次，水液继续减压回收至0.5L体积，相对密度为ρ＝1.25(60℃)，加入盐酸调pH值2，静置析晶18小时。取析晶溶液离心，弃去上清液，沉淀加0.5L水洗涤1次，抽滤，滤饼用1L丙酮洗涤2次，抽滤，滤饼于60℃干燥3小时，得到芒果苷粗品39.4克。取粗品加3.9L丙酮与水体积比为7∶3的混合溶液，60℃溶解，加入3.9克活性炭，搅拌均匀，抽滤，滤液减压浓缩至0.39L，析晶24小时，抽滤，干燥即得芒果苷成品34.8克。

实施例4：采用大孔树脂纯化法制备芒果苷

按照大孔树脂纯化法制备芒果苷，取芒果叶1Kg，干燥，粉碎为粗粉，加入甲醇与水体积比为8∶2的混合溶液10L提取2次，每次提取2小时，过滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味，上D101大孔树脂洗脱，分别以5倍柱体积的水、20％乙醇溶液、70％乙醇溶液洗脱，收集70％乙醇洗脱液，减压浓缩至无醇味，静置析晶，得到芒果苷粗品28.8克。取粗品加2.9L丙酮与水体积比为5∶5的混合溶液，60℃溶解，加入2.9克活性炭，搅拌均匀，抽滤，滤液减压浓缩至0.29L，析晶12小时，抽滤，干燥即得芒果苷成品25.9克。

实施例5：芒果苷含量比较试验

按照高效液相色谱法(2010年版《中国药典》一部附录VI D)测定芒果苷含量。以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以甲醇-0.2％磷酸溶液(30∶70)为流动相；检测波长为240nm。理论塔板数按芒果苷峰计算不得低于3000。

1、对照品溶液的制备

取芒果苷对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml中含25μg的溶液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取滤液，即得。

2、样品溶液的制备

取实施例1～4制备的芒果苷，分别精密称定，加50％甲醇制成每1ml中含25μg的溶液，用微孔滤膜(0.45μm)滤过，取滤液，即得。

3、测定法

分别精密吸取对照品溶液与样品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定芒果苷含量，并计算芒果苷的转移率，结果见表1。其中，转移率按下式计算：

转移率＝原料中芒果苷含量/成品中芒果苷含量×100％

表1  芒果苷含量比较试验

由表1结果可知，实施例1～3按照本发明所述制备方法制备的芒果苷成品芒果苷纯度均达到97％以上，并且芒果叶中芒果苷转移率也均达到77％以上，而按照大孔树脂纯化法制备芒果苷成品，芒果苷纯度仅为96.2％，总转移率仅有59％，表明本发明所述芒果苷的制备方法，芒果苷转移率高，制备的芒果苷纯度高。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims (1)

1.一种芒果苷的制备方法，包括：

步骤1：含芒果苷的原料用醇和水的混合溶液提取，过滤，滤液浓缩；

步骤2：取步骤1所得浓缩液用有机溶剂萃取，取萃取水相结晶；

步骤3：取步骤2所得晶体用丙酮和水的混合溶液重结晶，即得芒果苷；

所述醇和水的混合溶液为1～3个碳原子的链烷醇与水的混合溶液；

所述1～3个碳原子的链烷醇与水的混合溶液为1～3个碳原子的链烷醇与水的体积比8:2～7:3的混合溶液；

步骤1所述浓缩为浓缩滤液至相对密度为1.13～1.15；

所述有机溶剂与浓缩液体积比为1:1～3:1；

所述有机溶剂为甲酸乙酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或其中任意二者的混合溶剂；

步骤2所述结晶为萃取后的水相浓缩至相对密度为1.20～1.25，调pH值至1～3，静置；

步骤3所述丙酮与水的混合溶液为丙酮与水的体积比5:5～7:3的混合溶液；

所述重结晶为步骤2所得晶体用体积比5:5～7:3的丙酮与水的混合溶液溶解，结晶；

步骤2还包括依次用水和丙酮洗涤晶体。