CN101855229A - 作为gsk-3抑制剂的螺环状氨基喹诺酮 - Google Patents

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福田恭通
河野靖
李蓓
冈田恭子
中村凌子
野村正宽
濑户茂树
凯特琳·扎德宁斯
汤本和宏
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Abstract

本发明提供了具有式I的螺环状氨基喹诺酮及包含该化合物的组合物。本发明提供的所述化合物和组合物可用于预防、改善或治疗GSK-3介导的疾病。在式(I)中：X1为O或NR8；A为键或取代或未取代的C1-C2亚烃基，其中所述取代基当存在时选自1至4个Q2基团；其中Q2为烷基或卤代烷基；p为0或1；而q为0至2的整数。

Description

作为GSK-3抑制剂的螺环状氨基喹诺酮
优先权主张
本申请主张Cociorva等人于2007年9月12日提交的美国临时申请60/993,545的优先权。上述申请的披露内容被全文引入作为参考。
技术领域
本发明提供了治疗GSK-3介导的疾病的化合物、组合物和方法。本发明提供的化合物为作为GSK-3抑制剂的螺环状氨基喹诺酮。
背景技术
糖原合成酶激酶(GSK-3)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，具有由不同基因编码的α和β异构体[Coghlan等人，Chemistry & Biology，7，793-803(2000)以及Kim和Kimmel，Curr.Opinion Genetics Dev.，10，508-514(2000)]。GSK-3已经与各种疾病相关联，包括糖尿病、阿耳茨海默氏病、CNS紊乱如躁狂抑郁性紊乱和神经退行性疾病以及心肌肥厚[参见，例如，WO 99/65897；WO 00/38675；和Haq等人，J.Cell Biol.(2000)151，117]。这些疾病可源于或者可导致GSK-3参与的特定细胞信号转导途径的异常运行。
已发现GSK-3可磷酸化一系列调节蛋白并调整这些调节蛋白的活性。这包括糖原合成酶(其为碳源合成所需的速率限制性酶)、微管相关蛋白Tau、基因转录因子β-连珠蛋白、翻译起始因子elF-2B以及ATP柠檬酸裂解酶、洋虫胶、热休克因子-1、c-Jun、c-myc、c-myb、CREB和CEPBα。这些多样化的靶标使GSK-3与细胞代谢、增殖、分化和发育的许多方面相关联。
GSK-3的小分子抑制剂已有报道[WO 99/65897(Chiron)和WO 00/38675(SmithKline Beecham)]，然而，仍然需要寻找更有效治疗GSK-3介导的疾病的治疗剂。
发明概述
本发明提供了由式(I)表示的化合物：
Figure GPA00001134722500021
或其药学上可接受的衍生物，其中
R2为氢或低级烷基；
R3为氢、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；
R3a为OH、烷氧基或NHR3b；
R3b为氢、NH2、OH或低级烷基；
R5a和R5b各自独立地为氢、低级烷基或芳烷基，其任选地被1至3个各自独立地选自Q0基团的取代基取代；
其中Q0为卤素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；
R6为卤素；
在每种情况下，Ra和X3独立地选自如下的(i)或(ii)：
(i)Ra为氢或低级烷基；且
X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基、取代或未取代的3-6元环亚烃基或取代或未取代的3-6元杂亚环基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；或者
(ii)Ra和X3与它们键合的氮原子一起可形成5至7元饱和或不饱和的环，该环中任选地含有一个或多个O或S原子或者一个或多个额外的N原子；
Rb为-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)r-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；
Y1为键、O或NR7b；
Y2为键或O；
n为0或1；
r为0至2的整数；
R7为烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7a为氢、烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7a任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7b为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基或稠合杂环基芳基，其中R7b任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
其中Q1为卤素、羟基、氧、硫代、氰基、硝基、叠氮基、巯基、甲酰基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、环烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳烷基硫代、杂芳烷基硫代、烷基亚硫酰基、环烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、杂芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、杂芳烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳烷基磺酰基、烷氧基磺酰基、芳氧基磺酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羟基磺酰基；
X1为O或NR8；
R8为氢或低级烷基；
X2为CH2、O、NR1或S；
R1为氢或低级烷基；
A为键或取代或未取代的C1-C2亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；
其中Q2为烷基或卤代烷基；
p为0或1；
q为0至2的整数。
本发明还提供了包含式(I)的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物。
本发明还提供了通过施用本发明提供的化合物和组合物治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的一种或多种症状的方法。
发明详述
A.定义
除非另行指明，此处所用的技术和科学术语的含义等同于本领域普通技术人员的普遍理解。所有的专利、申请、公开的申请以及其它出版物均在此全文引用作为参考。对于此处一个术语存在多个定义的情况，除非另行指明，应采用本节所用定义。
此处所用的术语烷基、烷氧基、羰基等的含义等同于本领域技术人员的通常理解。
此处所用的烷基碳链，如非指明，包含1至20个碳、1至16个碳或1至6个碳，且为直连或带支链。在特定的实施方案中，烷基碳链包含1至6个碳。此处示例性的烷基基团包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基、正丁基、仲丁基、叔丁基、异戊基、新戊基、叔戊基、异己基。此处所用的低级烷基指具有约1个碳至约6个碳的碳链。
此处所用的烯基碳链，如非指明，包含2至20个碳、2至16个碳或2至6个碳，且为直连或带支链。在特定的实施方案中，烯基碳链包含2至6个碳。在特定的实施方案中，包含2至20个碳原子的烯基碳链带有1至8个双键，而在特定的实施方案中，包含2至16个碳的烯基碳链带有1至5个双键。在特定的实施方案中，2-6个碳的烯基碳链包含1-2个双键。此处示例性的烯基基团包括但不限于乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、异丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1，3-丁二烯基。此处所用的低级烯基指具有约2个碳至约6个碳的碳链。
此处所用的炔基碳链，如非指明，包含2至20个碳、2至16个碳或2至6个碳，且为直连或带支链。在特定的实施方案中，炔基碳链包含2至6个碳。在特定的实施方案中，包含2至20个碳原子的炔基碳链带有1至8个三键，而在特定的实施方案中，包含2至16个碳的炔基碳链带有1至5个三键。在特定的实施方案中，2-6个碳的炔基碳链包含1-2个三键。此处示例性的炔基包括但不限于乙炔基、1-丙炔基和2-丙炔基。此处所用的低级炔基指具有约2个碳至约6个碳的碳链。
此处所用的“烷氧基”包含1至20个碳、1至16个碳或1至6个碳，且为直连或带支链。在特定的实施方案中，烷氧基碳链包含1至6个碳。此处示例性的烷氧基基团包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、异戊氧基、正戊氧基、新戊氧基、异己氧基。
此处所用的“芳烷基”指其中一个氢原子被芳基取代的烷基基团。
此处所用的“卤代基”、“卤素”、或“卤化物“指F、Cl、Br或I。
此处所用的“芳基”指包含6至19个碳原子的芳香族单环或多环基团。芳基基团包括但不限于例如芴基、取代的芴基、苯基、取代的苯基、萘基和取代的萘基等基团。
此处所用的“环烷基”在特定的实施方案中指具有3至10个碳原子，在其它实施方案中指具有3至6个碳原子的饱和的单或多环状环系统；环烯基和环炔基指分别包括至少一个双键和至少一个三键的单或多环状换系统。在特定的实施方案中，环烯基和环炔基基团可包含3至10个碳原子，对于环烯基基团，在进一步的实施方案中，可包含4至7个碳原子，而环炔基基团在进一步的实施方案中可包含8至10个碳原子。该环烷基、环烯基和环炔基环系统可由一个环或者两个或多个环组成，这些环可以融合、桥接或螺旋连接的方式连接在一起。
此处所用的“杂环基”在一个实施方案中指3至约10元、在另一实施方案中指4至7元、在进一步的实施方案中指5至6元的单环或多环状非芳香族环系统，其中该环系统中一个或多个、在特定实施方案中1个至3个原子为杂原子，即，非碳元素，包括但不限于氮、氧或硫。在该杂原子为氮的实施方案中，该氮任选地被烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、环烷基、杂环基、环烷基烷基、杂环基烷基、酰基、氨基羰基、烷氧基羰基、胍基取代，或者该氮可被季铵化以形成铵基团，其中所述取代基选自上述取代基。
此处所用的“杂芳基”在特定实施方案中指约5至约15元的单环或多环状芳香族环系统，其中该环系统中的一个或多个原子、在一个实施方案中1个至3个原子为杂原子，即，非碳的元素，包括但不限于氮、氧或硫。该杂芳基基团可以可选地稠合至苯环。杂芳基基团包括但不限于呋喃基、咪唑基、嘧啶基、四唑基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-甲基吡咯基、喹啉基和异喹啉基。
此处所用的“稠合杂环基芳基”指与杂环基基团稠合的芳基。在一个实施方案中，稠合杂环基芳基中杂环基包含了约5-6个环原子而其芳基为苯基。稠合杂环基芳基可通过该环系统的任意原子键合。代表性稠合杂环基芳基基团包括1，3-苯并二氧戊环-4-基、1，3-苯并二氧戊环-5-基、1，3-苯并二氧戊环-6-基、1，3-苯并二氧戊环-7-基、4-二氢吲哚基、5-二氢吲哚基、6-二氢吲哚基和7-二氢吲哚基。
此处所用的“稠合芳基杂环基”指与芳基基团稠合的稠合杂环基。在一个实施方案中，稠合芳基杂环基中的芳基为苯基而杂环基包含了约5-6个环原子。稠合芳基杂环基可通过该环系统的任意原子键合。代表性的稠合芳基杂环基基团包括1-二氢吲哚基、2-二氢吲哚基、3-二氢吲哚基、1，2，3，4-四氢喹啉-1-基、1，2，3，4-四氢喹啉-2-基、1，2，3，4-四氢喹啉-3-基和1，2，3，4-四氢喹啉-4-基。
此处所用的“卤代烷基”指其中一个或多个氢原子被卤素取代的烷基基团。此处所用的“低级卤代烷基”指其中一个或多个氢原子被卤素取代的低级烷基基团。这样的基团包括但不限于氯甲基、三氟甲基和1-氯-2-氟乙基。
此处所用的“杂芳烷基”指其中一个氢原子被杂芳基取代的烷基基团。
此处所用的“卤代烷氧基”指RO-，其中R为卤代烷基基团。
此处所用的“环烷氧基”指RO-，其中R为环烷基基团。
此处所用的“芳氧基”指RO-，其中R为芳基。
此处所用的“杂芳氧基”指RO-，其中R为杂芳基。
此处所用的“杂环氧基”指RO-，其中R为杂环基。
此处所用的“芳烷氧基”指RO-，其中R为芳烷基。
此处所用的“杂芳烷氧基”指RO-，其中R为杂芳烷基。
此处所用的“烷基羰基”指RCO-，其中R为烷基基团。
此处所用的“芳基羰基”指RCO-，其中R为芳基。
此处所用的“杂芳基羰基”指RCO-，其中R为杂芳基。
此处所用的“烷氧基羰基”指RCO-，其中R为烷氧基基团。
此处所用的“芳氧基羰基”指RCO-，其中R为芳氧基。
此处所用的“芳烷氧基羰基”指RCO-，其中R为芳烷氧基。
此处所用的“未取代的或取代的氨基羰基”指-C(O)NR′R，其中R′和R独立地为氢、烷基芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基。
此处所用的“烷基羰氧基”指-OC(O)R，其中R为烷基。
此处所用的“芳基羰氧基”指-OC(O)R，其中R为芳基。
此处所用的“芳烷基羰氧基”指-OC(O)R，其中R为芳烷基。
此处所用的“烷氧基羰氧基”指-OC(O)OR，其中R为烷基。
此处所用的“芳氧基羰氧基”指-OC(O)OR，其中R为芳基。
此处所用的“芳烷氧基羰氧基”指-OC(O)OR，其中R为芳烷基。
此处所用的“未取代的或取代的氨基羰氧基”指-OC(O)NR′R，其中R′和R独立地为氢、烷基芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基。
此处所用的“未取代的或取代的氨基”指-NR′R，其中R′和R独立地为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基或杂芳烷基磺酰基.
此处所用的“烷基硫代”指-SR，其中R为烷基。
此处所用的“环烷基硫代”指-SR，其中R为环烷基。
此处所用的“芳基硫代”指-SR，其中R为芳基。
此处所用的“杂芳基硫代”指-SR，其中R为杂芳基。
此处所用的“芳烷基硫代”指-SR，其中R为芳烷基。
此处所用的“杂芳烷基硫代”指-SR，其中R为杂芳烷基。
此处所用的“烷基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为烷基。
此处所用的“环烷基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为环烷基。
此处所用的“芳基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为芳基。
此处所用的“杂芳基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为杂芳基。
此处所用的“芳烷基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为芳烷基。
此处所用的“杂芳烷基亚硫酰基”指-S(O)R，其中R为杂芳烷基。
此处所用的“烷基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为烷基。
此处所用的“环烷基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为环烷基。
此处所用的“芳基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为芳基。
此处所用的“杂芳基磺酰”指-S(O)2R，其中R为杂芳基。
此处所用的“芳烷基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为芳烷基。
此处所用的“杂芳烷基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为杂芳烷基。
此处所用的“烷氧基磺酰基”指-S(O)2R，其中R为烷氧基。
此处所用的“未取代的或取代的氨基磺酰基”指-S(O)2NR′R，其中R′和R独立地为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基或杂芳烷基。
此处所用的化合物的药学上可接受的衍生物包括盐、酯、烯醇醚、烯醇酯、乙缩醛、缩酮、原酸酯、半缩醛、半缩酮、酸、碱、溶剂化物、水合物或其前药。该种衍生物可由本领域的技术人员通过已知用于该种衍生化的方法简单地制备。所生成的化合物可被施用至动物或人，而没有实质性的毒性作用，且具有药学活性或者为前药。药学上可接受的盐包括但不限于胺盐，例如但不限于N，N′-二苄乙烯二胺，氯普鲁卡因，胆碱，氨，二乙醇胺和其它羟基烷基胺，乙二胺，N-甲葡胺，普鲁卡因，N-苄基苯乙胺，1-对-氯苄基-2-吡咯烷-1′-基甲基苯并咪唑，二乙胺和其它烷基胺，哌嗪和三(羟甲基)氨基甲烷；碱金属盐，例如但不限于锂，钾和钠；碱土金属盐，例如但不限于钡，钙和镁；过度金属盐，例如但不限于锌；以及无机盐，例如但不限于，磷酸氢钠和磷酸氢二钠；还包括但不限于无机酸的盐，例如但不限于盐酸盐和硫酸盐；以及有机酸的盐，例如但不限于醋酸盐，乳酸盐，苹果酸盐，酒石酸盐，柠檬酸盐，抗坏血酸盐，琥珀酸盐，酪酸盐，戊酸盐，甲磺酸盐和延胡索酸盐。药学上可接受的酯包括但不限于酸性基团(包括但不限于羧酸、磷酸、次膦酸、磺酸、亚磺酸和硼酸)的烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和环烷基酯。药学上可接受的烯醇醚包括但不限于式C＝C(OR)的衍生物，其中R为氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和环烷基。药学上可接受的烯醇酯包括但不限于式C＝C(OC(O)R)的衍生物，其中R为氢、烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基和环烷基。药学上可接受的溶剂化物和水合物为化合物与一个或多个溶剂或水分子，或者1至约100个，或1至约10个，或者1至约2、3或4个溶剂或水分子的络合物。
应当理解，本发明提供的化合物可具有手性中心。这种手性中心可以是(R)或(S)构型，或者为其混合物。因此，本发明提供的化合物可以是对映体纯的，或立体异构纯或非对映体混合物。
此处所用的基本纯的表示表现为足够的同质性，其不含可通过本领域技术人员用于评估杂质的标准分析方法如薄层层析法(TLC)、凝胶电泳、高效液相层析(HPLC)、核磁共振(NMR)和质谱(MS)等容易测得的杂质，或者该其使得进一步纯化不能可检测地改变该物质的物理和化学属性，例如酶催化活性和生物活性。纯化所述化合物以生成基本化学纯的化合物的方法已为本领域技术人员所知。然而，基本化学纯的化合物可以是立体异构体的混合物。在这种情况下，进一步的纯化可能提高该化合物的特定活性。本发明意在包括所有该种可能的异构体，以及它们的外消旋和光学纯形式。光学活性(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可采用手性合成原料或手性试剂制备或者通过常规技术(如反相HPLC)拆分。当此处所述的化合物包含烯烃双键或其它几何不对称中心时，除非另行指明，该化合物意在同时包括E和Z几何异构体。类似的，也意在包括所有互变异构形式。
此处所用IC50的指特定测试化合物在测试应答的测定中实现最大应答的50％抑制时的数量、浓度或剂量。
此处所用的EC50指可引发由特定测试化合物诱导、引起或增强的特定剂量依赖性应答的最大量50％的该特定测试化合物的剂量、浓度或数量。
此处所用的治疗指使得疾病或病症的一种或多种症状得以改善或以其它方式被有益地改变的任意方式。治疗还包括此处组合物的任意药学用途，例如用以治疗糖尿病。
此处所用的通过施用特定化合物或药物组合物改善特定病症的症状指任何与该化合物或组合物的施用相关的减轻，无论这种减轻是永久或暂时的，持续或是短暂的。
此处所用的术语“预防”指防止特定疾病或紊乱在曾患有该病或紊乱的患者体内复发和/或延长患有该疾病或紊乱的患者的缓解期。
此处所用的术语“GSK-3介导的疾病”或“GSK-3介导的病症”指GSK-3参与作用的任意疾病或其它有害的病症或状态。该种疾病或病症包括但不限于糖尿病、与糖尿病相关的病症、慢性神经退化性病症包括痴呆如阿耳茨海默氏病、帕金森氏症、进行性核上性麻痹、亚急性硬化性全脑炎帕金森氏综合征、脑炎后帕金森氏综合征、拳击手脑炎、关岛帕金森症-失智复合症、皮克氏病、皮层基底节变性、额颞痴呆、亨丁顿氏舞蹈症、AIDS相关的痴呆、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、神经外伤性疾病例如急性中风、癫痫、情感障碍如抑郁症、精神分裂症和双向性精神障碍、类风湿性关节炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、败血病、胰癌、卵巢癌和骨质疏松症。
B.化合物
本发明提供了式(I)的化合物：
或其药学上可接受的衍生物，其中
R2为氢或低级烷基；
R3为氢、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；
R3a为OH、烷氧基或NHR3b；
R3b为氢、NH2、OH或低级烷基；
R5a和R5b各自独立地为氢、低级烷基或芳烷基，其任选地被1至3个各自独立地选自Q0基团的取代基取代；
其中Q0为卤素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；
R6为卤素；
在每种情况下，Ra和X3独立地选自如下的(i)或(ii)：
(i)Ra为氢或低级烷基；且
X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基、取代或未取代的3-6元环亚烃基或取代或未取代的3-6元杂亚环基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；或者
(ii)Ra和X3与它们键合的氮原子一起可形成5至7元饱和或不饱和的环，该环中任选地含有一个或多个O或S原子或者一个或多个额外的N原子；
Rb为-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)1-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；
Y1为键、O或NR7b；
Y2为键或O；
n为0或1；
1为0至2的整数；
R7为烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7a为氢、烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7a任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7b为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基或稠合杂环基芳基，其中R7b任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
其中Q1为卤素、羟基、氧、硫代、氰基、硝基、叠氮基、巯基、甲酰基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、环烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳烷基硫代、杂芳烷基硫代、烷基亚硫酰基、环烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、杂芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、杂芳烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳烷基磺酰基、烷氧基磺酰基、芳氧基磺酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羟基磺酰基；
X1为O或NR8；
R8为氢或低级烷基；
X2为CH2、O、NR1或S；
R1为氢或低级烷基；
A为键或取代或未取代的C1-C2亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；
其中Q2为烷基或卤代烷基；
p为0或1；且
q为0至2的整数。
在一个实施方案中，R5a和R5b各自为氢。
在一个实施方案中，R2为氢。
在另一个实施方案中，X1是O。
在另一个实施方案中，Y1是键。
在另一实施方案中，R3为CN。
在另一实施方案中，R3为C(O)R3a。
在另一实施方案中，R3为C(NH)NHOH。
在另一实施方案中，R3为5-四唑基。
在一个实施方案中，R3a为OH。
在一个实施方案中，X1为O而R2为氢。
在另一个实施方案中，Ra是氢。
在一个实施方案中，X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团，其中Q2为烷基或卤代烷基。
在另一实施方案中，A为取代或未取代的C1-C2亚烃基。
在另一实施方案中，A被1至4个Q2基团所取代，其中Q2为烷基或卤代烷基；且p为0。
在一个实施方案中，X2为CH2。
在另一个实施方案中，X2是O。
在另一实施方案中，A为CH2；p为0且q为2。
在另一个实施方案中，X1是O。
在特定的实施方案中，R6为F。
在特定的实施方案中，该化合物具有式(Ia)：
或其药学上可接受的衍生物，其中
R3为氢、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；
R3a为OH、烷氧基或NHR3b；
R3b为氢、NH2、OH或低级烷基；
R5a和R5b各自独立地为氢或低级烷基；
R6为卤素；
在每种情况下，Ra和X3独立地选自如下的(i)或(ii)：
(i)Ra为氢或低级烷基；且
X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基、取代或未取代的3-6元环亚烃基或取代或未取代的3-6元杂亚环基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；或者
(ii)Ra和X3与它们键合的氮原子一起可形成5至7元饱和或不饱和的环，该环中任选地含有一个或多个O或S原子或者一个或多个额外的N原子；
Rb为-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)r-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；
Y1为键、O或NR7b；
Y2为键或O；
n为0或1；
r为0至2的整数；
R7为烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7a为氢、烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7a任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7b为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基或稠合杂环基芳基，其中R7b任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
其中Q1为卤素、羟基、氧、硫代、氰基、硝基、叠氮基、巯基、甲酰基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、环烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳烷基硫代、杂芳烷基硫代、烷基亚硫酰基、环烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、杂芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、杂芳烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳烷基磺酰基、烷氧基磺酰基、芳氧基磺酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羟基磺酰基；且
Q2为烷基或卤代烷基。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R5a和R5b为氢。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R3为CN。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R3为C(O)R3a。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R3为C(NH)NHOH。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R3为5-四唑基。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中R3a为OH。
在一个实施方案中，该化合物具有式(Ia)，其中Ra为氢。
在特定的实施方案中，该化合物具有式(Ib)：
Figure GPA00001134722500181
或其药学上可接受的衍生物，其中R6为卤素；n为1-3；X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团，Q2为烷基或卤代烷基；和其他变量如本文别处所述。
在特定的实施方案中，该化合物具有式(Ic)：
Figure GPA00001134722500182
或其药学上可接受的衍生物，其中n为1-3；X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团，Q2为烷基或卤代烷基；和其他变量如本文别处所述。
在特定的实施方案中，该化合物具有式(Id)：
Figure GPA00001134722500183
或其药学上可接受的衍生物，其中X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团，Q2为烷基或卤代烷基；R3为CN、C(O)OH、C(O)NH2、C(NH)NHOH或5-四唑基；和其他变量如本文别处所述。
在特定的实施方案中，本发明提供的化合物显示了在无细胞GSK3激酶测定中对GSK3不超过约20μM，在一个实施方案中不超过约10μM、不超过约5μM或不超过1μM的IC50。在一个实施方案中，本发明提供的化合物显示了与至少一种其它类型的激酶相比对GSK3具有选择性的抑制活性。
在特定的实施方案中，本发明提供的GKS3抑制剂基本没有抗菌活性或具有极低的抗菌活性。该抗菌活性可通过本领域已知的估算受试化合物的最小抑制浓度(MIC)的方法进行测定(例如，E.Coli and/or S.aureus，Clinical andLaboratory Standards Institute.Methods for Dilution Antimicrobial SusceptibilityTests for Bacteria That Grow Aerobically；Approved Standard-Sixth Edition：CLSIdocument M7-A4.CLSI，Wayne，PA.(2003))。
C.化合物的制备
本发明提供的化合物可通过如下所示的本领域技术人员已知的方法和类似于此处实施例章节中所述的如下方法及这些方法的常规改变进行制备。
Kyorin Pharmaceutical Co.，Ltd.，日本未审查专利公布S62-252772，
Ube Industries，Ltd.，日本未审查的专利公布S63-264439，
BayerAG，日本未审查的专利公布H1-268679，
Ihara Chemical Industry Co.，Ltd.，日本未审查的专利公布H10-70584，
Daiichi Seiyaku Co.，Ltd.，日本未审查的专利公布S59-1489，
Tokyo Tanabe Co.，Ltd.，日本未审查的专利公布S62-53987，
F.Hoffinann-La Roche Ltd.，日本未审查的专利公布S63-132891，H。
Koga等人，J.Med.Chem.，1980，23，1358，
Y.Yoshida等人，Synlett，2003，2139，
I.Hayakawa等人，Chem.Pharm.Bull，1984，32，4907，
S.Atarashi等人，Chem.Pharm.Bull.，1987，35，1986，
S.Atarashi等人，J.Heterocyclic Chem.，1991，28，329，
H.Egawa等人，Chem.Pharm.Bull，1986，34，4098，
L.A.Mitscher等人，J.Med.Chem.，1987，30，2283，
G.B.Mullen等人，J.Med.Chem.，1988，31，1694，
J.S.Kiely等人，J.Med.Chem.，1988，31，2004，
H.Ishikawa等人，Chem.Pharm.Bull，1989，37，2103，
V.D.Parikh等人，J.Heterocyclic Chem.，1988，25，1567，
H.Ishikawa等人，Chem.Pharm.Bull，1990，38，2459，
P.Remuzon等人，J.Med.Chem.，1991，34，29，
D.J.Augeri等人，J.Heterocyclic Chem.，1990，27，1509，
T.Okada等人，J.Heterocyclic Chem.，1991，28，1067，
D.T.W.Chu等人，J.Heterocyclic Chem.，1987，24，453，以及
S.L.Dax等人，J.Org.Chem.，1992，57，744。
J.S.Kiely等人，J.Heterocyclic Chem.，1989，26，1675。
M.Fujita等人，Chem.Pharm.Bull，1996，44，987。
由本发明的通式(1)代表的化合物可通过合成1或常规方法的组合进行制备。
合成1
其中X1a为X1或N-PG1(PG1为保护基团)，而A、R2、R3、R5a、R5b、R6、Ra、Rb、X1、X2、X3、p和q如上所述。
保护基团PG1代表酰基基团(例如乙酰基基团)、低级烷氧基羰基基团(例如叔丁氧基羰基基团)、芳氧基羰基基团(例如，任选地具有取代基的苯甲氧基羰基基团)、芳烷基基团(例如苄基基团和对甲氧基苄基基团)或者甲硅烷基基团(例如三甲基甲硅烷基基团和叔丁基二甲基甲硅烷基基团)。
当通式(2)中的X1a代表X1时，可采用碱(例如三乙胺、吡啶、异丙基乙胺和1，8-二氮杂双环十一炔)于合适的溶剂中(例如，N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、N-甲基吡咯烷酮、甲苯、乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇或其混合物)或者在无溶剂下在室温至180℃下持续1-48小时进行通式(2)和通式(3)向通式(1)的转化(即，流程1-A)。
当通式(2)中的X1a代表了时N-PG1，从通式(2)和通式(3)向通式(1)的转化(即，流程1-A)可在上述流程之后采用一般脱保护方法实现(例如Protecting Groups in Organic Synthesis(John Wily和Sons(1999)中所述的方法)。
在由本发明的通式(1)代表的化合物中，由通式(Ib)或(Ic)代表的化合物也可通过合成2制备。
合成2
其中A、Ra、Rb、R2、R3b、R5a、R5b、R6、X1、X2、X3、p和q如上所述。
可采用氰化物盐(例如氰化钾和氰化钠)于合适的溶剂中(例如，N，N-二甲基甲酰胺和二甲亚砜)在室温至180℃下持续1-72小时进行通式(Ia)向通式(Ib)的转化(即，流程2-A)
可替代地，可在合适的溶剂(例如二苯醚、均三甲基苯、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、甲苯、乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇、乙酸或其混合物)中在室温至250℃下持续1-72小时进行上述转化。该反应可在酸(例如氢氯酸)或铜盐(例如氯化铜)缺失或存在下进行。
由通式(1a)向通式(1c)的转化(即，流程2-B)可按照如下进行：通式(1a)首先与亚硫酰氯、亚硫酰溴、乙酸酐、氯甲酸乙酯、氯甲酸甲酯等在合适的溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或其混合物)中于-15℃至室温下反应5分钟至3小时。这将羧基基团转化为反应活性衍生化基团。该反应可在碱(例如吡啶和三乙胺)的存在下进行。然后，将该反应产物与通式(4)在碱(例如吡啶和三乙胺)存在下在合适的溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或其混合物)中在0℃至100℃的温度下反应30分钟至24小时。
可替代地，所述转化可按如下进行：将通式(1a)与通式(4)通过使用缩合剂(例如二环己基碳二亚胺、3-(3-二甲氨基丙基)-1-乙基碳二亚胺氯化物、氰基膦酸二乙酯、二苯基磷酰叠氮化物和羰基二咪唑)在合适的溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃或其混合物)中于0℃至50℃的温度下反应1-24小时。该反应可在碱(例如吡啶、三乙胺和N-甲基吗啡)的存在或缺失下进行。
在由本发明的通式(1)代表的化合物中，由通式(1d)、(1e)或(1f)代表的化合物也可通过合成3制备。
合成3
Figure GPA00001134722500231
其中A、Ra、Rb、R2、R5a、R5b、R6、X1、X2、X3、p和q如上所述。
由通式(1ca)至通式(1d)的转化(即，流程3-A)可按如下进行：将通式(1ca)与脱羟基剂(例如三氟乙酸酐和三氯氧磷)在碱(吡啶和三乙胺)的存在下于合适的溶剂(例如二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃及其混合物)中在0℃至50℃的温度下反应1-24小时。反应后，该反应产物可根据需要以碱(例如碳酸钾、氢氧化钠和NH硅胶)处理。
由通式(1d)向通式(1e)的转化(即，流程3-B)可采用叠氮化物(例如叠氮化钠和三甲硅烷基叠氮化物)于合适的溶剂(例如2-丙醇、水及其混合物)中在锌盐(例如氯化锌和溴化锌)的存在下在室温至50℃下进行1-24小时。
通式(1d)向通式(1f)的转化(即，流程3-C)可采用羟胺在合适的溶剂(例如乙醇、甲醇、N，N-二甲基甲酰胺、四氢呋喃或其混合物)中在0℃至回流温度下进行1-24小时。该反应可在碱(例如重碳酸钾、碳酸钠、吡啶和三乙胺)的存在或缺失下进行。
在合成1中，由通式(2)代表的化合物可通过合成4生成。
合成4
Figure GPA00001134722500241
其中A、R2、R3、R5a、R5b、R6、X1a、X2、p和q如上所述。
通式(5)和通式(6)至通式(7)的转化(即，流程4-A)可按如下进行：将通式(5)与乙酸酐和邻酸酯(例如邻甲酸乙酯和邻乙酸乙酯)的混合物在100℃至150℃下反应1-8小时，然后将反应产物与通式(6)在合适的溶剂(例如甲苯、四氢呋喃、甲醇、乙醇、叔丁醇或其混合物)中在室温下反应1-24小时。该反应可在碱(碳酸钾、碳酸钠、t-BuOK、t-BuONa、三乙胺和吡啶)的存在或缺失下进行。
由通式(7)至通式(8)的转化(即，流程4-B)可采用碱(例如氢化钾、氢化钠、碳酸钾、碳酸钠、t-BuOK和t-BuONa)或氟化物盐(例如氟化钾和氟化钠)于合适的溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、四氢呋喃或其混合物)中在0℃至150℃下进行1-24小时。
由通式(8)至通式(2)的转化(即，流程4-C)可在碱(例如三乙胺、吡啶、异丙基乙胺和1，8-二氮杂双环十一炔)的存在下于合适的溶剂(例如N，N-二甲基先按、二甲亚砜、甲苯、乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇或其混合物)中或无溶剂状态下在室温至180℃下进行1-24小时。
在通式(2)代表的化合物中，由通式(2a)代表的化合物也可通过合成5制备。
合成5
其中A、R2、R3、R6、X1a、X2、p和q如上所述。
由通式(10)和通式(6)至通式(11)的转化(即，流程5-A)可通过与流程4-A类似的方法进行。
由通式(11)至通式(12)的转化(即，流程5-B)可通过与流程4-B类似的方法进行。
由通式(12)至通式(13)的转化(即，流程5-C)可通过一般硝化例如在浓缩的硫酸中使用硝化试剂(例如硝酸钾、硝酸钠和硝酸)的反应进行。该反应可在0℃至50℃进行1-8小时。
由通式(13)至通式(2a)的转化(即，流程5-D)可采用金属(例如还原铁、锡和锌)在酸(例如氢氯酸和乙酸)的存在下于合适的溶剂(例如四氢呋喃、甲醇、乙醇、水或其混合物)中或在无溶剂状态下在室温至120℃下进行1-48小时。
可替代地，可通过采用金属催化剂(例如披钯碳、披铂活性炭、氧化的铂和兰尼镍)于合适的溶剂(例如甲醇、乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、乙酸及其混合物)中在室温至80℃下氢化1-24小时进行该转化。该反应可在常压至0.5Mpa的氢气氛围中进行。
此外，可通过采用连二亚硫酸钠在合适的溶剂(例如水、甲醇、乙醇、四氢呋喃或其混合物)中在室温至100℃下还原1-24小时进行转化。
在合成4或合成5中，通式(15)、(16)、(17)和(18)的化合物也可通过合成6制备。
合成6
Figure GPA00001134722500261
其中R5为氢、NO2或R5aR5bN-，而A、Ra、Rb、R2、R6、X1a、X2、p和q如上所述。
由通式(14)至通式(15)的转化(即，流程6-A)可通过与流程2-B类似的方法进行。
由通式(15)至通式(16)的转化(即，流程6-B)可通过与流程3-A类似的方法进行。
由通式(16)至通式(17)的转化(即，流程6-C)可通过与流程3-B类似的方法进行。
由通式(16)至通式(18)的转化(即，流程6-D)可通过与流程3-C类似的方法进行。
在合成5中通式(13)代表的化合物中，由通式(13b)代表的化合物也可通过合成7制备。
合成7
Figure GPA00001134722500271
其中R3aa为烷氧基，X为卤素，而A、R2、R5、R6、X1a、X2、p和q如上所述。
由通式(13a)和通式(19)至通式(20)的转化(即，流程7-A)可在合适的溶剂(例如四氢呋喃、二乙醚或其混合物)中在-78℃至0℃的温度下进行1-24小时。该转化可在铜盐(例如碘化铜和氯化铜)缺失或存在下进行。
通式(20)向通式(13b)的转化(即，流程7-B)可采用二氧化锰在合适的溶剂(例如二氯甲烷、氯仿、甲苯、乙醇或其混合物)中在室温至130℃下进行1-120小时。
可替代地，所述转化可采用醌化合物(例如二氯二氰基-对-苯醌和四氯苯醌)在室温至130℃下进行1-24小时。
在合成5中通式(13)代表的化合物中，由通式(13d)代表的化合物可通过合成8制备。
合成8
Figure GPA00001134722500281
其中A、R2、R3、X1a、X2、p和q如上所述。
由通式(13c)向通式(21)的转化(即，流程8-A)可采用碳酸铵在合适的溶剂(例如N，N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙醇、甲醇、水或其混合物)中在室温至-78℃下进行1-72小时。
由通式(21)至通式(13d)的转化(即，流程8-B)可采用亚硝酸酯(例如，亚硝酸叔丁酯、亚硝酸戊酯、亚硝酸异戊酯)在铜盐(例如氯化铜和溴化铜)存在下在合适的溶剂如乙腈中在0℃至100℃下进行1-48小时。
可替代地，所述转化可按如下进行：将通式(21)与亚硝酸盐(例如亚硝酸钾和亚硝酸钠)在酸(例如氢氯酸、硫酸和乙酸)存在下在合适的溶剂(例如，四氢呋喃、1，4-二噁烷、H2O或其混合物)中在0℃至室温下反应5分钟至1小时，然后，用铜盐(例如氯化铜和溴化铜)在合适的溶剂(例如，例如，四氢呋喃、1，4-二噁烷、H2O或其混合物)中在0℃-100℃下处理该反应产物1-48小时。
在合成1-8中，具有代表N-PG1的取代基X1a的化合物可通过常规方法如Protecting Groups in Organic Synthesis(John Wily and Sons(1999))中所述的方法转化为取代基X1a为NH的化合物。
在合成1-8中，具有代表芳烷基基团(其任选地具有取代基)的取代基R5a和/或R5b的化合物可通过常规方法，例如，通过采用酸(例如氢氯酸和三氟乙酸)、无机碱(例如碳酸钾和氢氧化钠)、有机碱(例如肼)、季铵盐(例如四丁基氟化铵)和金属(例如披钯碳)的催化还原转化为取代基R5a和/或R5b为H的化合物。
在合成1-8中，具有代表烷氧基羰基基团的取代基R3的化合物可通过常规方法，例如无溶剂反应或在合适的溶剂(例如甲醇、乙醇、四氢呋喃、水或其混合物)在碱(例如氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钾和碳酸钠)或酸(例如硫酸、氢氯酸和乙酸)存在下在室温至120℃下反应1-48小时转化为取代基R3为COOH的化合物。
由通式(1)表示的化合物的光学异构体可通过前述合成1-8或常规方法的组合采用光学活性起始原料制备。
可替代地，这些光学异构体可由通式(1)代表的外消旋体通过采用光学活性酸或碱的分步结晶或采用手性支持物的色谱制备得到。
以下显示了化合物制备的某些示例性反应图解：
合成9
Figure GPA00001134722500301
合成10
Figure GPA00001134722500302
在一个实施方案中，合成9的产物为8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(吡啶-2-基氨基)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(8)，如合成11所示。
合成11
Figure GPA00001134722500311
D.药物组合物
本发明提供的药物组合物包含治疗活性量的一种或多种此处所述的可用于预防、治疗或改善GSK-3介导的疾病的一种或多种症状的化合物。
本发明提供的化合物的药物组合物可全身或局部或口服或肠胃外施用，例如直肠、皮下、肌肉内、静脉或经皮施用。
所述组合物包含一种或多种本发明提供的化合物。所述化合物可被配制成适当的药物制剂，例如用于口服施用的溶液、悬浮液、片剂、分散片剂、丸剂、胶囊、颗粒、粉末、细微粉末、注射剂、缓释制剂或酏剂，或者用于肠胃外施用的无菌溶液或悬浮液，以及配制为透皮贴剂制剂和干粉吸入器。在特定的实施方案中，本发明提供的组合物可根据常规药物制备技术通过添加常规赋形剂、填充剂、结合剂、崩解剂、涂层剂、糖衣剂、PH调节剂、助溶剂或者水性或非水性溶剂进行制备。一般而言，上文所述的抗体通过本领域公知的技术和程序(例如，参见Ansel Introduction to Pharmaceutical DosageForms，Seventh Edition 1999)被配制成为药物组合物。
在所述组合物中，有效量的一种或多种化合物或其药学上可接受的衍生物与适当的药物载体或溶媒相混合。如上所述，所述化合物可在配制前被衍生为相应的盐、酯、烯醇醚或酯、碱、溶剂化物、水合物或前药。所述化合物在所述组合物中的浓度能够在施用时有效递送能够治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的一种或多种症状的量。
所述组合物通常被配制为可进行单剂量施用。为了配制组合物，可将一定重量百分比的化合物以使所治疗的疾病被减轻或改善的有效浓度溶解、悬浮、分散或以其它方式混合在选定的溶媒中。适用于施用本发明提供的化合物的药物载体包括本领域技术人员已知的适于特定施用模式的任意载体或溶媒。
此外，所述化合物可配制为所述组合物中的单一药物活性成分，或者可联合其它活性成分。包含靶向组织的脂质体(例如，靶向肿瘤的脂质体)的脂质体悬浮液也可被用作药学上可接受的载体。这些可通过本领域技术人员已知的方法进行制备。例如，脂质体制剂可参照本领域已知的方法进行制备。简单而言，可通过在烧瓶中干燥蛋磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(摩尔比7∶3)形成如多层囊泡(MLV)等脂质体。添加不含二价阳离子的磷酸盐缓冲液(PBS)中的本发明化合物溶液，然后振荡烧瓶直至脂质膜被分散。洗涤所得的囊泡以去除未封装的化合物，离心成为圆球，然后重悬浮于PBS。
所述活性化合物以足以显示治疗有用效果、且不对所治疗患者产生不想要的副作用的有效量包含在药学上可接受的载体中。所述治疗有效量浓度可通过在此处所述的体外和体内系统中测试化合物，然后从其外推为人用剂量进行经验确定。
在所述药物组合物中的活性化合物的浓度将取决于所述活性化合物的吸收、失活和排泄速率，所述化合物的物理化学特性，给药方案，施用量以及本领域技术人员已知的其它因素。例如，所述递送的量足以改善GSK-介导的疾病的一种或多种症状。
在特定的实施方案中，治疗有效的剂量应当形成约0.1ng/ml至约50-100μg/ml的活性成分血清浓度。在一个实施方案中，所述药物组合物提供了约0.001mg至约2000mg化合物/公斤体重/天的剂量。可制备药物单位剂形式以提供每个剂量单位形式约1mg至约1000mg，在特定的实施方案中，从约10mg至约500mg的必要活性成分或必要成分组合。
所述活性成分可立即施用，或者可被分为一定量的更小剂量，从而以一定的时间间隔施用。应理解：确切的剂量和治疗时间与待治疗疾病相关联，并可通过已知的测试方案凭经验确定，或者可从体内或体外测试数据推断得到。应注意浓度和剂量值也可随着待缓和的疾病的严重性而有所变化。应当进一步理解：对于任何特定的个体，应根据个体需求和施用或管理施用所述组合物的人员的专业判断随时间调整具体的剂量方案，且本发明提供的浓度范围仅作为示例，无意对所主张的组合物的范围或实施构成限制。
药学上可接受的衍生物包括酸、碱、烯醇醚或酯、盐、酯、水合物、溶剂化物和前药形式。可通过选择衍生物使得其药物代谢动力学属性优于相应的中性化合物。
因此，有效量的此处所述的一种或多种所述化合物或其药学上可接受的衍生物与适当的用于全身、表面或局部施用的药物载体或溶媒混合以形成药物组合物。所包含的化合物的量能够有效治疗或预防激酶介导的，包括但不限于GSK-3介导的疾病，或者改善其一种或多种症状。活性化合物在所述组合物中的浓度将取决于该活性化合物的吸收、失活和排泄速率，给药方案，施用量，具体的制剂以及本领域技术人员已知的其它因素。
所述化合物预期以适当的途径施用，包括，口服、肠胃外、直肠、表面和局部施用。对于口服施用，可配制胶囊和片剂。所述组合物呈液态、半液态或固态形式，并可配制为适于各种施用途径的形式。
用于肠胃外、皮肤内、皮下或表面应用的溶液或悬浮液可包括如下任意成分：无菌稀释剂，例如注射用水，盐溶液，不挥发性油，聚乙二醇，甘油，丙二醇，二甲基乙酰胺或其它合成溶剂；抗菌剂，例如苯甲醇和甲基对羟苯甲酸酯；抗氧化剂，例如抗坏血酸和亚硫酸氢钠；螯合剂，例如乙二胺四乙酸(EDTA)；缓冲液，例如醋酸盐，柠檬酸盐和磷酸盐；以及调节张力的药剂，例如氯化钠或右旋糖。肠胃外制剂可装入由玻璃、塑料或其它适当材料制成的安瓿、一次性注射器或者单或多剂量的小瓶中。
例如，当化合物显示溶解性不足时，可使用增溶化合物的方法。这种方法已为本领域技术人员所知，并包括但不限于使用共溶剂，例如二甲亚砜(DMSO)，使用表面活性剂，例如
Figure GPA00001134722500341
或者溶解于碳酸氢钠水溶液。
在混合或添加所述化合物时，所得的混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等。所得混合物的形式取决于多种因素，包括目标施用模式以及该化合物在所选载体或溶媒中的可溶性。有效浓度足以改善待治疗的疾病、紊乱或病症的症状，并可通过经验确定。
所述药物组合物可作为包含适当量所述化合物或其药学上可接受的衍生物的单位剂型(例如，片剂、胶囊、丸剂、粉末、颗粒、无菌肠胃外溶液或悬浮液、和口服溶液或悬浮液、以及油水乳液)施用至人和动物。所述治疗活性化合物及其衍生物被配制为单位剂型或多重剂型进行施用。此处所用的单位剂型指本领域已知的适用于人和动物个体并单独包装的物理分散单元。每个单位剂量包含了足以形成所需治疗效果的预定量的所述治疗活性化合物，以及所需的药物载体、溶媒或稀释剂。单位剂型的示例包括安瓿和注射器以及单独包装的片剂和胶囊。单位剂型可分成若干份施用，或者施用多个单位剂型。多重剂型是包装在单独容器中的多个相同的单位剂型，并以分离的单位剂型施用。示例性的多重剂型包括小瓶，片剂或胶囊的瓶子或品脱或加仑瓶。因此，多重剂型是不被分离包装的多个单位剂型。
还可制备缓释制剂。缓释制剂的适当示例包括，含有本发明提供的所述化合物的固体疏水聚合物的半透过性基质，其中所述基质为固定形状的物品，例如，膜或微胶囊。缓释基质的示例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟乙基-甲基丙烯酸甲酯)，或聚(乙烯醇))、聚乳酸、L-谷氨酸和乙基-L-谷氨酸盐的共聚物、非降解乙烯-醋酸乙烯酯、可降解乳酸-羟基乙酸共聚物如LUPRONDEPOTTM(由乳酸-羟基乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林组成的可注射微球)和多聚-D-(-)-3-羟丁酸。乙烯-醋酸乙烯酯和乳酸-羟基乙酸等聚合物能够在100天以上释放分子，特定的水凝胶可在更短的时间内释放蛋白。当包于胶囊内的化合物在身体内长时间存留时，它们可能由于暴露在37℃的潮湿环境下而变性或聚集，从而导致生物活性的丧失及其结构的可能改变。可根据所涉及的作用机制设计合理的稳定化策略。例如，如果据发现所述聚集机制是通过硫-二硫化物交换形成分子间S-S键，则可通过修饰硫氢基残基，从酸性溶液冻干，控制含水量，使用适当的添加剂，和形成特定的聚合物基质组合物实现稳定化。
可制备包含0.005％至100％的活性成分，其余为无毒性载体的剂型或组合物。对于口服施用，可通过加入任意常用的赋形剂(例如，药物级甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、纤维素衍生物、明胶、琼脂、果胶、阿拉伯胶、橄榄油、芝麻油、可可脂、乙二醇、交联羧甲基纤维素钠、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁或糖精钠)形成药学上可接受的非毒性组合物。这种组合物包括溶液、悬浮液、片剂、胶囊、粉剂和缓释剂型，例如，但不限于，植入物和微胶囊化的递送系统，以及可生物降解的生物相容性聚合物，例如胶原蛋白、乙烯醋酸乙烯酯、聚酸酐、聚乙醇酸、聚原酸酯、聚乳酸及其它。制备这些组合物的方法已为本领域技术人员所知。组合物可包含约0.001％-100％的活性成分，在特定的实施方案中，包含约0.1-85％或约75-95％的活性成分。
所述活性化合物或药学上可接受的衍生物可与防止该化合物被身体迅速清除的载体(例如延时配方或涂层)一起制备。
所述组合物可包含其它活性化合物以获得所需的属性组合。为治疗或预防目的，本发明提供的所述化合物或此处所述其药学上可接受的衍生物还可与另一本领域已知对此处涉及的一种或多种疾病或医学病症(例如，GSK-3介导的疾病)有治疗价值的药理试剂一起有益地施用。应理解，这种联合疗法构成了本发明提供的所述组合物和治疗方法的另一方面。
本发明提供的无乳糖组合物可包含本领域公知的以及如在美国药典(USP)SP(XXI)/NF(XVI)中列举的赋形剂。一般而言，无乳糖组合物包含药上学相容且药学上可接受的量的活性成分、结合剂/填充剂以及润滑剂。示例性的无乳糖剂型包含活性成分、微晶纤维素、预胶化淀粉以及硬脂酸镁。
本发明进一步包括包含本发明提供的化合物的无水药物组合物和剂型。例如，添加水(例如，5％)是制药领域广泛采用的一种模拟长期贮存以测定如保质期或制剂长期稳定性等特性的方法。例如，参见Jens T.Carstensen，DrugStability：Principles & Practice，2d.Ed.，Marcel Dekker，NY，NY，1995，第379-80页。实际上，水和热可加速一些化合物的分解。因此，水的作用对制剂可能具有非常重要的影响，因为在制剂的生产、处理、包装、贮存、运输以及使用中常遇到水分和/或湿气。
此处所述的无水药物组合物和剂型可采用无水或低含水量的成分并在低水分或低湿度条件下制备。在特定的实施方案中，包含了乳糖和至少一种具有伯胺或仲胺的活性成分的药物组合物和剂型在生产、包装和/或贮存过程中在遇到水分和/或湿气时可以是无水的。
无水药物组合物的制备和贮存应当保持其无水性质。相应的，在特定的实施方案中，可以使用本领域已知的防水材料包装无水组合物从而使之包含在适当的制剂试剂盒中。合适包装的示例包括但不限于密封箔、塑胶、单位剂量容器(例如，小药水瓶)、泡罩包装以及条状包装。
口服剂型
口服药物剂型可以是固体、凝胶或液体。固体剂型为片剂、胶囊、颗粒和散装粉剂。口服片剂的类型包括压缩的、可咀嚼的片剂以及包被有肠溶衣、糖衣或膜的片剂。胶囊可以是硬胶囊或软凝胶胶囊，而颗粒和粉末可以非泡腾或泡腾形式提供，并混合其它本领域技术人员已知的成分。
在特定的实施方案中，所述制剂为固体剂型，例如胶囊或片剂。所述片剂、丸剂、胶囊、锭剂等可包含如下任意成分或性质类似的化合物：结合剂、稀释剂、崩解剂、润滑剂、助流剂、甜味剂以及调味剂。
结合剂的示例包括微晶纤维素、黄芪树胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆、明胶溶液、蔗糖和淀粉糊。润滑剂包括滑石、淀粉、硬脂酸镁或钙、石松子和硬脂酸。稀释剂包括，例如，乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露醇和磷酸二钙。助流剂包括但不限于胶体二氧化硅。崩解剂包括交联羧甲基纤维素钠、淀粉乙醇酸钠、褐藻酸、玉米淀粉、马铃著淀粉、膨润土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素。着色剂包括，例如，任意批准的水溶性FD和C染料，其混合物；以及悬浮在水合氧化铝中的水不溶的FD和C染料。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人工甜味剂(如糖精)和任何数量的喷雾干燥调味料。调味剂包括从水果等植物中提取的天然调味料，以及能产生快感的合成化合物的混合物，例如，但不仅限于，薄荷和水杨酸甲酯。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯，山梨糖醇酐单油酸酯，二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂酸醚。肠溶衣包括脂肪酸、脂肪、蜡、虫胶、氨化虫胶和醋酸纤维素邻苯二甲酸酯。膜覆层包括羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和醋酸纤维素邻苯二甲酸。
当需要口服施用时，所述化合物可提供于在胃内的酸性环境中对其进行保护的组合物中。例如，所述组合物可配制在能在胃中保持完整性，并在肠中释放所述活性化合物的肠溶衣中。所述组合物联合解酸剂或其它该类成分进行配制。
当所述剂量单位形式为胶囊时，除了上述类型的物质外，它可包含液体载体(例如脂肪油)。此外，剂量单位形式可包含各种可改变该剂量单位的物理形式的其它物质，例如，糖衣和其它肠溶剂。所述化合物还可作为酏剂、悬浮液、糖浆、糯米纸囊剂、喷洒剂(sprinkle)、口香糖等施用。糖浆中除了所述活性化合物外可包含作为甜味剂的蔗糖和某些防腐剂、染料以及着色剂和调味剂。
所述活性物质还可与其它不损害所需作用的活性物质混合，或者与补充该所需作用的物质(例如解酸剂、H2阻断剂和利尿剂)相混合。所述活性成分为此处所述的化合物或其药学上可接受的衍生物。可包含更高浓度，最高为质量比约98％的所述活性成分。
包含在片剂中的药学上可接受的载体为结合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂以及润湿剂。肠溶片剂由于肠溶衣而能抵御胃酸的作用，并在中性或碱性的肠内溶解或崩解。糖衣片为压缩片剂，其中应用了不同层的药学上可接受的物质。包膜片为压缩片剂，其上包被了聚合物或其它适用的覆层。复压片为采用前述药学上可接受的物质通过一个以上压缩循环压制的片剂。着色剂也可用于上述剂型。调味剂和甜味剂可用于压缩片、糖衣片、复压片和咀嚼片。调味和甜味剂可特别用于咀嚼片和锭剂的形成。
液体口服剂型包括水溶液、乳液、悬浮液、溶液和/或从非泡腾颗粒复原的悬浮液以及从泡腾颗粒复原的泡腾制剂。水溶液包括，例如，酏剂和糖浆。乳液或者为水包油型，或者为油包水型。
酏剂为透明、甜味的水醇制剂。用于酏剂的药学上可接受的载体包括溶剂。糖浆为糖(例如，蔗糖)的浓缩水溶液，并可包含防腐剂。乳液是一种两相体系，其中一种液体以细小颗粒形式完全分散在另一种液体中。用于乳液的药学上可接受的载体为非水性液体、乳化剂和防腐剂。悬浮液使用药学上可接受的悬浮剂和防腐剂。用于将复原为液体口服剂型的非泡腾颗粒的药学上可接受的物质包括稀释剂、甜味剂和润湿剂。用于将复原为液体口服剂型的泡腾颗粒的药学上可接受的物质包括有机酸和二氧化碳源。着色剂和调味剂可用于上述所有剂型。
溶剂包括甘油、山梨醇、乙醇和糖浆。防腐剂的示例包括甘油、尼泊金甲酯和丙酯、苯甲酸、苯甲酸钠和乙醇。用于乳液的非水性液体的示例包括矿物油和棉花籽油。乳化剂的示例包括明胶、阿拉伯树胶、斑脱土，以及表面活性剂，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐单油酸酯。悬浮剂包括羧甲基纤维素钠、胶质、黄芪胶、硅酸镁铝以及阿拉伯树胶。稀释剂包括乳糖和蔗糖。甜味剂包括蔗糖、糖浆、甘油和人工甜味剂如糖精。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、山梨糖醇酐单油酸酯、二甘醇单月桂酸酯和聚氧乙烯月桂酸醚。有机酸包括柠檬酸和酒石酸。二氧化碳源包括重碳酸钠和碳酸钠。着色剂包括任意批准的水溶性FD和C染料，及其混合物。调味剂包括从水果等植物中提取的天然调味料，以及能产生愉快味觉的合成化合物的混合物。
对于固体剂型，所述含于例如碳酸丙烯、植物油或甘油三酸酯中的溶液或悬浮液可装填在凝胶胶囊中。这种溶液及其制备和胶囊化披露于美国专利4,328,245；4,409,239和4,410,545。对于液体剂型，所述液体(例如，含于聚乙二醇)可被足量的药学上可接受的液体载体(例如，水)稀释，从而易于定量施用。
可替代地，液体或半固体口服制剂可通过将所述活性化合物或盐溶解或分散在植物油、甘油、甘油三酸酯、丙二醇酯(例如碳酸丙二酯)和其它这类载体中，并将这些溶液或悬浮液包封于硬或软凝胶胶囊壳中得到制备。其它有用的制剂包括但不限于包含本发明提供的化合物，二烷基化单或聚亚烷基二醇，包括但不限于1.2，2-二甲氧基甲烷、二甘醇二甲醚、三甘醇二甲醚、四甘醇二甲醚、聚乙二醇-350-二甲醚、聚乙二醇-550-二甲醚、聚乙二醇-750-二甲醚，其中350、550和750指该聚乙二醇的大约平均分子量，以及一种或多种抗氧化剂，例如二丁基羟基甲苯(BHT)、二丁基羟基茴香醚(BHA)、没食子酸丙酯、维生素E、对苯二酚、羟基香豆素、乙醇胺，卵磷脂、脑磷脂、抗坏血酸、苹果酸、山梨糖醇、磷酸、硫二丙酸及其酯类、和二硫代氨基甲酸盐的制剂。
其它的制剂包括但不限于包含药学上可接受的缩醛的水醇溶液。在这类制剂中所用的醇为具有一个或多个羟基基团的任意药学上可接受的水混溶溶剂，包括但不限于丙二醇和乙醇。缩醛包括但不限于低级烷基醛(例如乙醛二乙缩醛)的二(低级烷基)缩醛。
在所有的实施方案中，片剂和胶囊制剂可参照本领域技术人员的已知技术进行包被，从而改变或维持所述活性成分的溶解。因此，例如，它们可以用常规的可肠内消化的包衣(例如水杨酸苯酯，蜡和醋酸纤维素邻苯二甲酸)进行包被。
可注射物、溶液和乳液
本发明也预期肠胃外施用，其一般特征为通过皮下、肌肉或静脉注射。可注射物可制备为常规形式，可以是液体溶液或悬浮液，适于在注射前配制为溶液或悬浮液的固体形式，或者作为乳液。适用的赋形剂为，例如，水、盐水、右旋糖、甘油或乙醇。此外，根据需要，待施用的所述药物组合物还可包含微量的无毒性辅助物质，例如润湿或乳化剂、pH缓冲剂、稳定剂、助溶剂、以及其它该类药剂，例如，醋酸钠、山梨醇单月桂酸酯、油酸三乙醇胺以及环式糊精。此处还预期通过缓慢释放或持续释放系统从而维持恒定剂量水平的灌输。简单而言，本发明提供的化合物被分散在固相内部基质(solidinner matrix)，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯酸甲酯、塑化或未塑化聚氯乙烯、塑化尼龙、塑化聚乙醇对苯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、碳酸盐岩有机硅共聚物、亲水聚合物例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶、胶原蛋白、交联聚乙烯醇和部分交联水解聚醋酸乙烯酯中，该固相内部基质被不溶于体液的外部聚合物膜(如聚乙烯、聚丙烯、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯与醋酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离子聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶、环氧氯丙烷橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物、以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物)所包围。所述化合物在释放速率控制步骤中扩散通过所述外部聚合物膜。在这类肠胃外组合物中包含的活性化合物的比例高度依赖于它的特性性质，以及该化合物的活性和个体需求。
所述组合物的肠胃外施用包括静脉、皮下和肌肉施用。肠胃外施用的制剂包括易于注射的无菌溶液、无菌干燥可溶性产品(例如冻干粉)、易于在使用前与溶剂混合的制剂(例如可皮下注射片剂)、易于注射的无菌悬浮液、易于在使用前与溶媒混合的无菌干燥可溶性产品以及无菌乳液。所述溶液可以是水性溶液或非性水溶液。
在静脉施用时，适用的载体包括生理盐水或磷酸缓冲盐(PBS)，以及包含增厚剂和助溶剂(例如，葡萄糖、聚乙二醇和聚丙二醇及其混合物)的溶液。
用于肠胃外制剂的药学上可接受的载体包括水性溶媒、非水性溶媒、抗菌剂、等张剂、缓冲液、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮剂和分散剂、乳化剂、掩蔽剂或螯合剂、以及其它药学上可接受的物质。
水性溶媒的示例包括氯化钠注射液、林格注射液、等渗右旋糖注射液、无菌注射用水、右旋糖和乳酸盐林格注射液。非水性肠胃外溶媒包括植物来源的不挥发性油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。应向包含苯酚或甲酚、汞制剂、苯甲醇、氯丁醇、甲基和丙基对羟基苯甲酸酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苄索氯铵的包装于多剂量容器的肠胃外制剂添加抑菌或抑真菌浓度的抗菌剂。等张剂包括氯化钠和右旋糖。缓冲液包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮和分散剂包括羧甲基纤维素钠，羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯酮。乳化剂包括聚山梨醇酯80(
Figure GPA00001134722500431
80)。金属离子的掩蔽和螯合剂包括EDTA。药学上可接受的载体还包括用于水混容性溶媒的乙醇、聚乙二醇和丙二醇；以及用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。
可调节所述药学活性化合物的浓度，使得注射提供可生成所需药理作用的有效量。如本领域所知，确切剂量取决于该患者或动物年龄、体重和状况。
单位剂量的肠胃外制剂包装于安瓿、小瓶或带有针头的注射器中。如本领域已知和实践，所有的肠胃外施用的制剂应当被灭菌。
举例而言，静脉或动脉输注包含活性化合物的无菌水溶液是有效的施用模式。另一实施方案是包含活性物质的无菌水性或油性溶液或悬浮液，根据需要注射以生成所需的药理活性。
可注射物设计用于局部或全身施用。一般地，治疗有效剂量经配制包含针对待治疗组织的至少约0.1％w/w至约90％w/w或更高，例如超过1％w/w的活性化合物浓度。该活性成分可一次施用，或者可被分为一定量的更小剂量，从而以一定的时间间隔施用。应理解：确切的剂量和治疗时间与待治疗组织的功能相关联，并可通过已知的测试方案凭经验测定或可从体内或体外测试数据推断得到。应注意浓度和剂量值也可随着待治疗个体的年龄而有所变化。应当进一步理解：对于任何特定的个体，应根据个体需求和施用或管理施用所述组合物的人员的专业判断随时间调整具体的剂量方案，且本发明提供的浓度范围仅作为示例，无意对所主张的剂型的范围或实施构成限制。
所述化合物可以被微粒化或其它适当的形式被悬浮，或者可被衍生化以生成更为易溶的活性产物或生成前药。所得混合物的形式取决于多种因素，包括目标施用模式以及该化合物在所选载体或溶媒中的可溶性。该有效浓度足以改善疾病的症状，并可通过经验确定。
冻干粉
此处还感兴趣的是冻干粉，其可复原为溶液、乳液和其它混合物进行施用。它们还可被复原并配制为固体或凝胶。
所述无菌冻干粉可通过将本发明提供的化合物或其药学上可接受的衍生物溶解于适当的溶剂后制备。所述溶剂可包含增强稳定性的赋形剂或所述粉末或由所述粉末制备的复原溶液的药理成分。可使用的赋形剂包括但不限于右旋糖、山梨醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它适当的药剂。所述溶剂还可包含缓冲液，例如柠檬酸盐、磷酸钠或钾或者本领域技术人员已知的其它所述类缓冲液，在一个实施方案中，所述缓冲液约为中性pH。对所述溶液进行无菌过滤后，在本领域技术人员已知的标准条件下进行冻干，以提供所需的剂型。一般而言，所得的溶液将被分配到小瓶中进行冻干。每个小瓶将包含单独剂量(即，10-1000mg或100-500mg)或多重剂量的所述化合物。所述冻干粉将被贮存在适当的条件下，例如约4℃下或室温下。
以注射用水复原所述冻干粉提供了用于肠胃外施用的剂型。为进行复原，可在每毫升无菌水或其它合适的载体中添加约1-50mg、约5-35mg、或约9-30mg的冻干粉。确切的量取决于所选的化合物。所述数量可通过经验确定。
表面施用
可按照描述制备表面施用混合物，以进行局部和全身施用。所得混合物可以是溶液、悬浮液、乳液等，并被配制成乳膏、凝胶、软膏、乳剂、溶液、酏剂、涂剂、悬浮液、酊剂、膏剂、泡沫剂、气雾剂、灌洗剂、喷雾剂、栓剂、绷带，皮肤贴剂或任意其它适于表面施用的剂型。
所述化合物或其药学上可接受的衍生物可被配制成气雾剂以进行表面应用，例如吸入(例如，参见美国专利4,044,126、4,414,209和4,364,923，其描述了传递可用于治疗炎性疾病(特别是哮喘)的类固醇的气雾剂)。用于向呼吸道施用的所述类剂型可作为用于喷雾器的气雾剂或溶液，或者作为吸入的微细粉末，其可单独使用或与乳糖等惰性载体混合。在这个情况下，所述剂型的颗粒将具有小于50微米或小于10微米的直径。
所述化合物可配制成表面应用，例如以凝胶、乳膏和涂剂的形式表面应用于(例如眼中的)皮肤和粘膜，并应用于眼部或脑池内或椎管内。在透皮递送和向眼部或粘膜施用，或者吸入疗法中可考虑表面施用。也可施用活性化合物单独的或其与其它药学上可接受的赋形剂联合的鼻部溶液。
这些溶液，特别是针对眼部使用的溶液，可用适当的盐配制为pH约5-7的0.01％-10％等张溶液。
用于其它施用途径的组合物
本发明还预期其它施用途径，例如表面应用、透皮贴剂以及直肠施用。
举例来说，用于直肠施用的药物剂型为用于全身作用的直肠栓剂、胶囊和片剂。此处所用的直肠栓剂指用于插入直肠的固体，其在体温下溶化或软化，从而释放一种或多种药理或治疗活性成分。用于直肠栓剂的药学上可接受的物质为基质或溶媒以及提高熔点的药剂。基质的示例包括可可脂(可可油)，甘油-明胶，carbowax(聚乙二醇)和脂肪酸的单、双和甘油三酸脂的适当混合物。可使用各种基质的组合。用于提高栓剂熔点的药剂包括鲸蜡和蜡。直肠栓剂可通过压缩法或通过制模进行制备。直肠栓剂的示例性重量为约2至3克。
用于直肠施用的片剂和胶囊可采用相同的药学上可接受的物质，通过口服施用制剂相同的方法进行制备。
缓释组合物
本发明提供的活性成分可通过本领域普通技术人员公知的控释方式或递送装置施用。其示例包括但不限于披露于美国专利3,845,770、3,916,899、3,536,809、3,598,123、和4,008,719、5,674,533、5,059,595、5,591,767、5,120,548、5,073,543、5,639,476、5,354,556、5,639,480、5,733,566、5,739,108、5,891,474、5,922,356、5,972,891、5,980,945、5,993,855、6,045,830、6,087,324、6,113,943、6,197,350、6,248,363、6,264,970、6,267,981、6,376,461，6,419,961、6,589,548、6,613,358、6,699,500以及6,740,634的内容，其内容分别在此引用作为参考。所述剂型可通过使用如羟丙基甲基纤维素、其它聚合物质、凝胶、渗透膜、渗透系统、多层涂层、微颗粒、脂质体、微球体或其组合以不同比例提供所需的释放曲线从而用于提供一种或多种活性成分的缓释或控释。本领域技术人员已知的适用控释剂型(包括此处所述的剂型)可容易地选择用于本发明提供的活性成分。
所有的控释药物产品的共同目标为较其非控释对照改进药物疗法。在一个实施方案中，一种优化设计的控释制剂在药物治疗中的使用特征为通过最小量的药物治愈或在最短的时间内控制症状。在特定的实施方案中，控释制剂的优点包括延长药物的活性、减少用药频率以及提高患者适应性。此外，控释制剂可用于影响作用发生的时间以及其它特征，例如药物的血液水平以及从而影响副作用(例如，不良作用)的发生。
大多控释制剂被设计成最初释放能够迅速产生所需疗效的药物(活性成分)量，然后逐渐并且持续释放另一药物量以在更长时间内维持这种治疗或预防效果的水平。为在体内维持这种药物的恒定水平，所述药物应当从所述剂型中以一定速率释放从而能够取代被代谢或从体内排泄的药物量。活性成分的控释可受到各种条件刺激，包括但不限于pH、温度、酶、水或其它生理条件或化合物。
在一些实施方案中，所述药剂可通过静脉输注、植入性渗透泵、透皮贴剂、脂质体或其它施用模式进行施用。在一个实施方案中，可使用泵(例如，参见CRC Crit.Ref.Biomed.Eng.14：201(1987)；Buchwald等人，Surgery 88：507(1980)；Saudek等人，N.Engl.J.Med.321：574(1989))。在另一实施方案中，可施用聚合材料。在另一实施方案中，控释系统可被放置在治疗靶标附近，即，从而仅需要全身剂量的一部分(例如，参见Goodson，Medical Applicationsof Controlled Release，vol.2，第115-138页(1984)。
在部分实施方案中，控释装置被导入个体体内不适当免疫激活或肿瘤位点的附近。其它控释系统在Langer(Science 249：1527-1533(1990))的综述中被讨论。所述活性成分被分散在固相内部基质(solid inner matrix)，例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚丁基丙烯酸甲酯、塑化或未塑化聚氯乙烯、塑化尼龙、塑化聚乙醇对苯，天然橡胶，聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯醋酸乙烯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、碳酸盐岩有机硅共聚物、亲水聚合物例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶、胶原蛋白、交联聚乙烯醇和部分交联水解聚醋酸乙烯酯中，该固相内部基质被不溶于体液的外部聚合物膜(如聚乙烯、聚丙烯、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯与醋酸乙烯酯共聚物、偏二氯乙烯、乙烯和丙烯、离子聚对苯二甲酸乙二醇酯、丁基橡胶、环氧氯丙烷橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/醋酸乙烯/乙烯醇三聚物、以及乙烯/乙烯氧基醇共聚物)所包围。然后所述活性成分在释放速率控制步骤中扩散通过所述外部聚合物膜。在这类肠胃外组合物中包含的活性成分的比例高度依赖于它的特殊性质，以及个体需求。
靶向剂型
本发明提供的化合物或其药学上可接受的衍生物还可配制为靶向待治疗个体的身体的特定组织、受体或其它区域。许多这类靶向方法已为本领域技术人员公知。所有这种靶向方法均预期用于本发明的组合物。靶向方法的非限制性示例可参见，例如，美国专利6,316,652、6,274,552、6,271,359、6,253,872、6,139,865、6,131,570、6,120,751、6,071,495、6,060,082、6,048,736、6,039,975、6,004,534、5,985,307、5,972,366、5,900,252、5,840,674、5,759,542和5,709,874。
在一个实施方案中，包含组织靶向脂质体(例如，肿瘤靶向脂质体)的脂质体悬浮液也可被用作药学上可接受的载体。这些可通过本领域技术人员已知的方法进行制备。例如，脂质体制剂可参照美国专利4,522,811所述进行制备。简单而言，可通过在烧瓶中干燥蛋磷脂酰胆碱和脑磷脂酰丝氨酸(摩尔比7∶3)形成如多层囊泡(MLV)等脂质体。添加含于缺乏二价阳离子的磷酸盐缓冲液(PBS)中的本发明化合物的溶液，然后振荡烧瓶直至脂质膜分散。洗涤所得囊泡以去除未封装的化合物，离心称为圆球，然后重悬浮于PBS。
制造物品
所述化合物或其药学上可接受的衍生物可被包装为包括包装材料、本发明提供的化合物或其药学上可接受的衍生物(其可用于治疗、预防或改善与激酶活性，包括但不限于GSK-3活性相关的一种或多种症状)，以及说明所述化合物或其药学上可接受的衍生物可用于治疗、预防活改善激酶介导的疾病的一种或多种症状(包括但不限于GSK-3介导的疾病)标签的制造物品。
本发明提供的物品包括包装材料。用于包装药物产品的包装材料已为本领域技术人员公知。例如，参见美国专利5,323,907、5,052,558和5,033,252。药物包装材料的示例包括但不限于泡罩包装、瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶以及适用于选定剂型及目标施用和治疗模式的任意包装材料。本发明包括本发明化合物和组合物的多种剂型。
E.治疗方法
本发明还提供了所述化合物和组合物的使用方法。所述方法同时包括所述化合物和组合物的体外和体内使用。
在一些实施方案中，本发明提供了通过施用本发明化合物和组合物抑制GSK-3作用的方法。在一个实施方案中，所述方法包括将GSK-3与本发明提供的化合物接触。
F.化合物活性的评估
本发明提供的化合物的GSK3抑制活性可采用此处所述的实验以及本领域普通技术人员公知的实验简单地检测。
用于鉴定GSK3特异性抑制剂的示例性方法包括无细胞和基于细胞的GSK3激酶实验。无细胞GSK3激酶实验检测通过与多肽GSK3直接相互作用来发挥功能的抑制剂，而基于细胞的GSK3激酶实验即可以检测通过与GSK3本身直接相互作用来发挥功能的抑制剂也可以检测通过干扰GSK3表达或者干扰生成成熟活性GSK3所需的翻译后加工来发挥功能的抑制剂。美国申请20050054663描述了示例性的无细胞和基于细胞的GSK3激酶实验。此处所用的示例性实验简述如下：
在30℃下20mM MOPS，pH 7.0(10mM乙酸镁、0.2mM EDTA、2mMEGTA、30mM氯化镁、62.5μM磷酸-糖原合成酶肽-2、5μM ATP、10mMβ-磷酸甘油、1mM原钒酸钠和1mM二硫苏糖醇)中存在或不存在不同浓度化合物的条件下，孵育10-25ng重组全长人GSK3β(Upstate)1小时。然后进行KinaseGlo萤光素酶反应。
激酶反应完成后，添加等体积的KinaseGlo萤光素酶试剂(Promega)，在5-10分钟内用发光板读取器读取发光。化合物活性表达为相对于最大剂量下观察到的最大抑制的抑制百分比，然后使用曲线拟合软件(GraphPad Prizm)计算IC50值。
实施例
实施例1：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸
1A)3-[1-(羟甲基)环戊氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
将3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(3.17g，12mmol)、乙酸酐(3.34mL，3.6g，30mmol)和原甲酸三乙酯(3.00mL，2.6g，18mmol)的搅拌溶液在130℃下加热1.5小时。将该混合物真空浓缩并高真空干燥3小时。将粗产物溶解于EtOH(15mL)，并冷却至0℃，然后极为缓慢地添加1-氨基-1-环戊烷甲醇(1.01g，8.8mmol)。1.5小时后，蒸发去除溶剂以得到成为黄色油的标题化合物(3.1g粗产物)，其可不经进一步纯化用于下一步骤。
1B)9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500511
向3-[1-(羟甲基)环戊氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸酯(570mg，1.46mmol)的THF(10mL)溶液在冰冷下添加KOH(164mg，2.93mmol)的碎片。1.5小时后添加更多的KOH(80mg，1.42mmol)，然后将反应混合物升温至室温并搅拌过夜。用0.5N HCl酸化该反应混合物至pH2。过滤收集白色沉淀物以得到可用于下一步骤的粗制标题化合物(454mg，1.3mmol，89％)。
1C)9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500512
将9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(13.2g，38mmol)在乙酸/水/H2SO4(8∶6∶1v/v，75mL)混合物中的溶液回流加热2小时。将该反应混合物注入冰水。形成沉淀物并通过过滤收集，用水洗涤，然后干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(10.5g，32.7mmol，86％)。
1D)9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500521
将9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(1.8g，5.6mmol)在浓H2SO4(10mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(736mg，7.29mmol)分批处理。0℃下搅拌1小时后，将反应混合物注入500mL冰水中，过滤所得的沉淀物，并用冰水洗涤。干燥所得的固体得到成为淡黄色固体的标题化合物(1.8g，88％)。
1E)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500522
将9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(3.9g，0.01mmol)的乙醇/乙酸(1∶1，v/v，100mL)溶液在大气压下10％Pd/C(390mg)上80℃下氢化18小时。然后添加200mL DMF，加热该反应混合物至澄清。在Celite过滤去除催化剂，将其用热DMF洗涤两次，将合并的滤出液真空干燥得到标题化合物(2.85g，73％)，其作为粗品用于下一步骤。
1F)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500531
将8′-氨基-9′10′-二氟-7′-氧螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(500mg，1.37mmol)和N-(2-吡啶基)-1，2-乙二胺(226mg，1.64mmol)以及19μL三乙胺在DMSO(5mL)中的溶液90℃下搅拌24小时。将反应混合物注入水中，过滤收集形成的沉淀物。使粗制产品通过硅胶柱(CH2Cl2/CH3OH 10∶1v/v)，然后从二乙醚重结晶得到成为黄色固体的标题化合物(284mg，42％)。MS(EP)m/z：454(M++1)。(计算得到C23H24FN5O4，453.18)。
实施例2：8-氨基-9-氟-10-(2-(4-甲基喹啉-2-基氨基)-乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
将8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(13mg，0.04mmol)、N1-(4-甲基喹啉-2-基)乙烷-1，2-二胺(10mg，0.05mmol)和11μL三乙胺在DMSO(0.3mL)中的溶液在90℃下搅拌72小时。冷却该反应混合物并冻干过夜。将粗产物投入CH2Cl2，通过制备TLC纯化得到成为黄色固体的8-氨基-9-氟-10-(2-(4-甲基喹啉-2-基氨基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(0.8mg，4％)。MS(EP)m/z：518(M++1)。(计算得到C28H28FN5O4，517.21)。
实施例3：10-(3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500541
将8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(13mg，0.04mmol)、3-(-1H-1，2，4-三唑-1-基)丙-1-胺(5mg，0.04mmol)和5.5μL三乙胺在DMSO(0.3mL)中的溶液在90℃下搅拌24小时。冷却该反应混合物并冻干过夜。将粗产物投入ACN，并通过制备HPLC纯化得到成为黄色固体的10-(3-(1H-1，2，4-三唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(3.2mg，18％)。MS(EP)m/z：443(M++1)。(计算得到C21H23FN6O4，442.18)。
实施例4：8-氨基-9-氟-10-(3-(4-氟苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500542
8-氨基-9-氟-10-(3-(4-氟苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环-[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：470(M++1)。(计算得到C25H25F2N3O4，469.18)。
实施例5：8-氨基-10-(3-(3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)-丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500551
8-氨基-10-(3-(3，4-二氢喹啉-1(2H)-基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环-[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：507(M++1)。(计算得到C28H31FN4O4，506.23)。
实施例6：8-氨基-10-(4-(4-氯苯基)丁-2-基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500552
8-氨基-10-(4-(4-氯苯基)丁-2-基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：500(M++1)。(计算得到C26H27ClFN3O4，499.17)。
实施例7：8-氨基-9-氟-10-(3-(呋喃-2-氨甲酰)-丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500561
8-氨基-9-氟-10-(3-(呋喃-2-氨甲酰)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：485(M++1)。(计算得到C24H25FN4O6，484.18)。
实施例8：8-氨基-10-(3-(金刚烷氨甲酰)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500562
8-氨基-10-(3-(金刚烷氨甲酰)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：553(M++1)。(计算得到C30H37FN4O5，552.27)。
实施例9：8-氨基-9-氟-10-(2-(4-氟苯氧基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500563
8-氨基-9-氟-10-(2-(4-氟苯氧基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：472(M++1)。(计算得到C24H23F2N3O5，471.16)。
实施例10：8-氨基-10-(2-(4-氯-3-甲基苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500571
8-氨基-10-(2-(4-氯-3-甲基苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：502(M++1)。(计算得到C25H25ClFN3O5，501.15)。
实施例11：10-(2-(1H-吲哚-3-基硫)乙氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500572
10-(2-(1H-吲哚-3-基硫)乙氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：509(M++1)。(计算得到C26H25FN4O4S，508.16)。
实施例12：8-氨基-10-(2-(4-氯苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3-1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500581
8-氨基-10-(2-(4-氯苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：487.9(M++1)。(计算得到C24H23ClFN3O5，487.13)。
实施例13：8-氨基-10-(2-(2，4-二氯苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500582
8-氨基-10-(2-(2，4-二氯苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：521.9(M++1)。(计算得到C24H22Cl2FN3O5，521.09)。
实施例14：8-氨基-10-(3-(3，4-二甲氧基苯基)丙基氨基)-9-氟-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500591
8-氨基-10-(3-(3，4-二甲氧基苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：512(M++1)。(计算得到C27H30FN3O6，511.21)。
实施例15：8-氨基-10-(2-(2，6-二甲基喹啉-4-基氨基)-乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500592
8-氨基-10-(2-(2，6-二甲基喹啉-4-基氨基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：532(M++1)。(计算得到C29H30FN5O4，531.23)。
实施例16：8-氨基-9-氟-10-(2-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基硫)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500601
8-氨基-9-氟-10-(2-(3-甲基-1H-1，2，4-三唑-5-基硫)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：474.9(M++1)。(计算得到C21H23FN6O4S，474.15)。
实施例17：8-氨基-10-(2-(4-环己基苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500602
8-氨基-10-(2-(4-环己基苯氧基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：536(M++1)。(计算得到C30H34FN3O5，535.25)。
实施例18：8-氨基-9-氟-10-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基硫)-乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500611
8-氨基-9-氟-10-(2-(1-甲基-1H-咪唑-2-基硫)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：474(M++1)。(计算得到C22H24FN5O4S，473.15)。
实施例19：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(哌啶-1-基磺酰基)-乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500612
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(哌啶-1-基磺酰基)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：509(M++1)。(计算得到C23H29FN4O6S，508.18)。
实施例20：8-氨基-10-(2-(1，1-二氧-1H-1λ-6-苯并[d]异噻唑-3-基氨基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500621
8-氨基-10-(2-(1，1-二氧-1H-1λ-6-苯并[d]异噻唑-3-基氨基)乙氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]-噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：541.9(M++1)。(计算得到C25H24FN5O6S，541.14)。
实施例21：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(1-苯基-1H-四唑-5-基硫)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(1-苯基-1H-四唑-5-基硫)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：538(M++1)。(计算得到C25H24FN7O4S，537.16)。
实施例22：10-(3-(1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-羟基丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500631
10-(3-(1H-苯并[d]咪唑-1-基)-2-羟基丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环-[[1，4]噁嗪-[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：508.0(M++1)。(计算得到C26H26FN5O5，507.19)。
实施例23：8-氨基-10-(3-(乙基(苯基)氨基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3)4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500632
8-氨基-10-(3-(乙基(苯基)氨基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：495(M++1)。(计算得到C27H31FN4O4，494.23)。
实施例24：8-氨基-9-氟-10-(2-(二氢吲哚-1-基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500641
8-氨基-9-氟-10-(2-(二氢吲哚-1-基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：479(M++1)。(计算得到C26H27FN4O4，478.20)。
实施例25：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(对甲苯氧基)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500642
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(2-(对甲苯氧基)乙氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：468(M++1)。(计算得到C25H26FN3O5，467.19)。
实施例26：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：453(M++1)。(计算得到C24H25FN4O4，452.19)。
实施例27：8-氨基-10-(3-(2-氯苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500652
8-氨基-10-(3-(2-氯苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：486(M++1)。(计算得到C25H25ClFN3O4，485.15)。
实施例28：8-氨基-9-氟-10-(3-(4-甲氧基苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500653
8-氨基-9-氟-10-(3-(4-甲氧基苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：482(M++1)。(计算得到C26H28FN3O5，481.20)。
实施例29：8-氨基-10-(3-(3，4-二乙氧基苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500661
8-氨基-10-(3-(3，4-二乙氧基苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：540(M++1)。(计算得到C29H34FN3O6，539.24)。
实施例30：8-氨基-9-氟-10-(2-(2-甲基喹啉-4-基氨基)-乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500662
8-氨基-9-氟-10-(2-(2-甲基喹啉-4-基氨基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：518(M++1)。(计算得到C28H28FN5O4，517.21)。
实施例31：8-氨基-10-(4-(2-氯苯基)丁-2-基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
8-氨基-10-(4-(2-氯苯基)丁-2-基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环-[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：500(M++1)。(计算得到C26H27ClFN3O4，499.17)。
实施例32：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500672
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：484(M++1)。(计算得到C25H30FN5O4，483.23)。
实施例33：8-氨基-9-氟-10-(3-(3-甲氧基苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500681
8-氨基-9-氟-10-(3-(3-甲氧基苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：482(M++1)。(计算得到C26H28FN3O5，481.20)。
实施例34：8-氨基-9-氟-10-(2-(4-甲氧基苯氧基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500682
8-氨基-9-氟-10-(2-(4-甲氧基苯氧基)乙氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。MS(EP)m/z：484(M++1)。(计算得到C25H26FN3O6，483.18)。
实施例35：
8-氨基-9-氟-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-6-1H-四唑-5-基)螺环-[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-7(2H)-酮盐酸化物
35A)9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-氨甲酰的制备。
Figure GPA00001134722500691
将9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸(3g，8.2mmol)悬浮于SOCl2(25ml)，回流3小时，直至得到澄清溶液。反应完成后，真空去除SOCl2。用二噁烷稀释剩余的固体，并在冰浴中冷却。在剧烈搅拌下小心添加浓NH4OH溶液。形成沉淀物，通过过滤采集，并用水洗涤。将固体真空干燥得到2.2g(75％产率)的标题化合物。该化合物不经进一步纯化用于下一步骤。
35B)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-氨甲酰的制备。
Figure GPA00001134722500692
向9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-氨甲酰(1g，2.7mmol)的水/甲醇混合物(1∶1v/v，30mL)的悬浮液中添加连二亚硫酸钠(Na2S2O4，3.75g，22mmol)。将该悬浮液回流5小时，直至所有的起始原料消失。完成后，将反应混合物冷却至室温，并添加50ml水。20分钟后，通过过滤收集浅黄色固体，并用水洗涤。真空干燥固体得到660mg(73％产率)的标题化合物，其可不经进一步纯化用于下一步骤。
35C)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-腈的制备。
Figure GPA00001134722500701
向8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-氨甲酰(1g，2.9mmol)和三乙胺(2mL，10mmol.)在DCM(20ml)中的冷溶液中逐滴添加POCl3(780μl，8.7mmol.)，并在0℃下额外搅拌5小时。形成深色的混合物。反应完全后，真空去除DCM，并用水洗涤该残留物数次。将固体真空干燥得到540mg(58.7％产率)的标题化合物。该产物除了在DMF和DMSO外都非常易溶，并可不经进一步纯化用于下一步骤。
35D)8-氨基-9，10-二氟-6-(1H-四唑-5-基)螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-7(2H)-酮的制备。
向腈8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-腈(180mg，0.56mmol)在异丙醇和水(1∶1v/v，15ml)中的混合物中添加80mg叠氮化钠(1.14mmole)和170mg氯化锌(1.14mmole)。将混合物加热至110℃达18小时。过滤收集沉淀物并用水洗涤。将固体真空干燥得到135mg(67％产率)的标题化合物。该化合物不经进一步纯化用于下一步骤。
35E)8-氨基-9-氟-10-(3-(吡啶-2-基)-丙基氨基)-6-1H-四唑-5-基)螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-7(2H)-酮盐酸化物的制备。
Figure GPA00001134722500711
MS(EP)m/z：477.5(M+1)。(计算得到C24H25FN8O2，476.51)。
化合物36-42可由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-腈或8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸采用与上述实施例所述类似的合成步骤制备得到。
实施例36：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-腈盐酸化物。
Figure GPA00001134722500712
MS(EP)m/z：434.4(M+1)。(计算得到C24H24FN5O2，433.48)。
实施例37：10-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-腈盐酸化物的制备。
Figure GPA00001134722500721
MS(EP)m/z：423.4(M+1)。(计算得到C22H23FN6O2，422.46)。
实施例38：8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(1，3，5-三甲基-1H-吡唑-4-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-腈盐酸化物。
Figure GPA00001134722500722
MS(EP)m/z：465.5(M+1)。(计算得到C25H29FN6O2，464.54)。
实施例39：8-氨基-9-氟-10-(3-(4-氟苯基)-3-(4-甲氧基苯基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500723
MS(EP)m/z：576.6(M+1)。(计算得到C32H31F2N3O5，575.6)。
实施例40：8-氨基-10-(3-(4-氯苯基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500731
MS(EP)m/z：486.9(M+1)。(计算得到C25H25ClFN3O4，485.94)。
实施例41：8-氨基-10-(3-(3，5-二甲基-1H-吡唑-1-基)丙基氨基)-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500732
MS(EP)m/z：470.5(M+1)。(计算得到C24H28FN5O4，469.51)。
实施例42：8-氨基-9-氟-10-(3-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)丙基氨基)-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722500733
MS(EP)m/z：456(M+1)。(计算得到C23H26FN5O4，455.48)。
实施例43：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(1-咪唑)丙基]螺环[环戊烷-1，3′-(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-甲脒
43A)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-甲脒的制备。
Figure GPA00001134722500741
向8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[1，4]噁嗪-[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-腈(400mg，1.26mmol)在5ml乙醇/二甲基甲酰胺(50∶50，v∶v)中的溶液中添加氢氧化铵(260mg，3.78mmol)和碳酸钾(521mg，3.78mmol)。将反应混合物加热至回流达3小时，然后冷却至室温。滤走未溶解的无机物质，真空浓缩滤出液得到固体物质，将其重悬浮于甲醇(50mL)中，过滤，用甲醇洗涤，并真空干燥得到成为黄色固体的标题化合物(200mg，45％产率)。MS(EP)m/z：351(M+1)。(计算得到C16H16F2N4O3，350.12)。
43B)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(1-咪唑基)-丙基]螺环[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-甲脒的制备。
Figure GPA00001134722500742
该标题化合物可参照上文步骤由8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环戊烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-甲脒制备得到。MS(EP)m/z：426.4(M+1)。(计算得到C19H20FN9O2，425.42)。
实施例44：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(吡啶-2-基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，3(2H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸
44A)3-[1-(羟甲基)环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500751
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2.00g，7.57mmol)、Ac2O(4.29mL，45.4mmol)和原甲酸三乙酯(2.51mL，15.1mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。将粗产物溶解于甲苯(30mL)，并在冰冷下添加(1-氨基环丁基)甲醇(1.04g，7.57mmol)在甲苯(5mL)中的悬浮液、三乙胺(1.06mL，7.57mmol)。将混合物在室温下搅拌18小时，并真空浓缩得到粗产物。通过柱层析(己烷∶EtOAc 10∶1→1∶1)纯化该粗产物得到成为白色固体的标题化合物(1.57g，55％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.95-1.11(3H，m)，1.85-1.90(1H，m)，1.91-2.07(2H，m)，2.17-2.26(2H，m)，2.27-2.36(2H，m)，3.80-3.83(2H，m)，4.00-4.10(2H，m)，6.95-7.13(1H，m)，8.17-8.22(1H，m)，9.87-11.36(1H，m).ESIMS(+)：376[M+H]+。
44B)9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500752
在氩气氛围下，将3-[1-(羟甲基)环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(1.52g，4.05mmol)的DMF(10mL)溶液添加至冰冷的含于油的60％NaH(356mg，8.91mmol)在DMF(10mL)中的悬浮液中。将反应混合物搅拌4小时，并注入冰水中。用AcOEt萃取产物，用MgSO4干燥并通过柱层析(己烷∶EtOAc 2∶1→AcOEt)纯化该粗产物以得到成为白色固体的标题化合物(604mg，44％)。Mp 255-256℃.1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.91-2.07(2H，m)，2.16-2.22(2H，m)，2.65-2.76(2H，m)，4.24(2H，q，J-7.3Hz)，4.62(2H，s)，7.62(1H，dd，J＝10.4，7.9Hz)，8.80(1H，s).ESIMS(+)：336[M+H]+。
44C)9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500761
将9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(580mg，1.73mmol)在浓H2SO4(7mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(245mg，2.42mmol)分批处理。将反应混合物在0℃下搅拌1小时，并注入冰水中。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(600mg，91％)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.30(3H，t，J＝7.3Hz)，1.93-2.09(2H，m)，2.16-2.25(2H，m)，2.73-2.80(2H，m)，4.26(2H，q，J＝7.3Hz)，4.69(2H，s)，8.87(1H，s).ESIMS(+)：381[M+H]+。
44D)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500771
将9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(580mg，1.53mmol)在DMF(30mL)中的溶液在50℃氢气氛围下用10％Pd/C(60mg)处理3小时。用Celite过滤除去催化剂，并将滤出液注入冰水中。搅拌1小时后过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(468mg，88％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.92-2.02(2H，m)，2.10-2.19(2H，m)，2.61-2.69(2H，m)，4.23(2H，q，J＝7.3Hz)，4.39(2H，s)，7.38(2H，brs)，8.65(1H，brs).ESIMS(+)：351[M+H]+。
44E)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500772
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(440mg，1.26mmol)在AcOH-H2O-H2SO4(2∶1∶0.3v/v，9.9mL)混合物中的溶液在100℃下加热3小时。将反应混合物注入冰水，并搅拌。30分钟后，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为黄色固体的该标题化合物(384mg，94％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.94-2.03(2H，m)，2.14-2.20(2H，m)，2.69-2.77(2H，m)，4.44(2H，s)，7.32(2H，brs)，8.91(1H，s)，14.67(1H，s)。ESIMS(+)：323[M+H]+。
44F)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500781
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(360mg，1.12mmol)、N-2-吡啶yl-1，2-乙二胺(230mg，1.68mmol)和三乙胺(0.234mL，1.68mmol)在DMSO(5mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物注入冰水，并搅拌30分钟。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，悬浮于EtOH(10mL)，并回流搅拌1小时。将悬浮液冷却至室温，过滤收集所得的沉淀物，并干燥得到成为白色固体的标题化合物(459mg，93％)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.91-2.03(2H，m)，2.08-2.17(2H，m)，2.61-2.69(2H，m)，3.44-3.48(2H，m)，3.58-3.66(2H，m)，6.35-6.40(1H，m)，6.45-6.49(2H，m)，6.71(1H，t，J＝5.5Hz)，6.88(2H，brs，7.35(1H，td，J＝6.7，1.8Hz)，7.97(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.71(1H，s)，15.30(1H，s).HRESIMS(+)：440.17267(-0.74mmu)。
实施例45：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基)螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de]苯并氧氮杂卓]-6′-羧酸
45A)3-[[1-(羟甲基)环戊基]-甲氨基]-2-(3，4，5，6-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
将3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(7.93g，30.0mmol)、Ac2O(17.0mL，180mmol)和原甲酸三乙酯(10.0mL，60.1mmol)的溶液在120℃下加热3小、时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。将粗产物溶解于无水甲苯(120mL)中，并在0℃下缓慢添加[1-(氨甲基)-环丙基]]甲醇(3.04g，30.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，蒸发去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 1∶1)纯化该粗产物得到成为淡黄色固体的标题化合物(10.5g，94％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.50-0.70(4H，m)，0.97，1.10(各t，J＝7.3Hz，总3H)，1.66(1H，t，J＝4.9Hz)，3.47(2H，d，J＝6.1Hz)，3.56(2H，d，J＝4.9Hz)，4.01-4.09(2H m)，6.96-7.13(1H，m)，8.06-8.12(1H，m)，9.71，11.1(各br，总1H).ESIMS(+)：375[M+H]。
45B)10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500792
将NaH(2.29g，57.3mmol，60％；含于油中)的DMF(110mL)溶液冷却至0℃，并用含于DMF(15mL)的3-[[1-(羟甲基)环戊基]甲氨基]-2-(3，4，5，6-四氟苯甲酰基)氨基丙烯酸乙酯(9.76g，26.0mmol)逐滴处理。将反应混合物在室温下搅拌1小时，然后在85℃下搅拌1小时。将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物并用水洗涤。将所得的固体溶解于100mL EtOH-CH2Cl2(2∶1)并过滤。将滤出液浓缩至70mL，过滤收集所得的沉淀物，用EtOH洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(6.73g，77％)。1H-NMR(400MHz CDCl3)δ0.65(2H，t，J＝6.1Hz)，0.82(2H，t，J＝6.1Hz)，1.41(3H，t，J＝7.3Hz)，4.21(2H，s)，4.35(2H，s)，4.39(2H，q，J＝7.3Hz)，8.05(1H，dd，J＝10.4，8.6Hz)，8.25(1H，s).ESIMS(+)：335[M+H]+。
45C)9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环-[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500801
10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3，-ef]-苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯可通过对本文别处所示的步骤的常规修改制备得到。将10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3，-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.50g，4.47mmol)在浓H2SO4(15mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(633mg，6.26mmol)分批处理。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入100mL冰水中，过滤所得的沉淀物。以DMF重结晶所得的固体，用EtOH洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(651mg，38％)。1H-NMR(400MHZ，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.76-2.00(2H，m)，2.15-2.25(2H，m)，2.27-2.40(2H，m)，4.23(2H，q，J＝7.3Hz)，4.53(2H，s)，8.69(1H，s).ESIMS(+)：381[M+H]+。
45D)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500811
将9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧-螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(450mg，1.15mmol)和10％Pd/C(40.5mg)的DMF(20mL)溶液在氢气气氛下(0.3MPa)于50℃下搅拌3小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。将所得的固体溶解于EtOH-CH2Cl2(1∶5)并过滤。除去CH2Cl2，过滤所得的沉淀物，用EtOH洗涤，并干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(270mg，67％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.74-1.96(2H，m)，2.02-2.13(2H，m)，2.14-2.25(2H，m)，4.20(2H，q，J＝7.3Hz)，4.33(2H，s)，7.33(2H，brs)，8.43(1H，s).ESIMS(+)：350[M+H]+。
45E)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500812
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(247mg，0.705mmol)和1M NaOH水溶液(3.5mL)的EtOH(3.5mL)溶液在50℃下搅拌1.5小时。去除溶剂，并将残留物溶解在水中。将溶液用2M HCl酸化至pH 7，过滤所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(216mg，95％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.73-1.97(2H，m)，2.04-2.27(4H，m)，4.50(2H，s)，7.25(2H，brs)，8.76(1H，s)，14.67(1H，s).ESIMS(+)：322[M+H]+。
45F)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500821
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[环丁烷-1，2′(3′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(200mg，0.621mmol)、三乙胺(0.130mL，0.933mmol)和N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(128mg，0.933mmol)在DMSO(4mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物注入冰水，过滤所得的沉淀物，用乙醇洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(223mg，82％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.30-1.50(2H，m)，1.53-1.73(1H，m)，3.01-3.12(2H，m)，3.19-3.30(2H，m)，3.94(2H，s)，5.65(1H，brs)，6.01-6.12(2H，m)，6.29(1H，t，J＝5.5Hz)，6.43(2H，brs)，6.90-7.01(1H，m)，7.52-7.60(1H，m)，8.13(1H，s)，14.90(1H，s).HRESIMS(+)：440.17258(计算得到C22H23FN5O4，440.17341)。
实施例46：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
46A)3-[1-(2-羟乙基)环丙基氨基]-2-(2，3，4，5，-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500831
将3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(3.09g，11.7mmol)、Ac2O(6.7mL，70.9mmol)和原甲酸三乙酯(3.90mL，23.5mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。将粗产物溶解于无水甲苯(40mL)中，并在0℃下极为缓慢地添加(1-氨基-环丙基)-乙醇(1.82g，11.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5小时，并用甲苯稀释。用水、盐水洗涤该有机层，并干燥。蒸发去除溶剂，并通过柱层析(己烷∶EtOAc 2∶1→1∶1)纯化粗产物得到成为黄色油的标题化合物(2.99g，68％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.85-0.92(2H，m)，0.94-1.11(5H，m)，1.85-1.91(2H，m)，3.85-3.89(2H，m)，3.99-4.09(2H，m)，6.95-7.13(1H，m)，8.19(1H，d，J＝14.1Hz)，9.84，11.2(各d，J＝13.4Hz，总1H).EIMS(+)375[M]+。
46B)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500832
将NaH(617mg，15.4mmol，60％；含于油中)的DMF(30mL)溶液冷却至0℃，并用含于DMF(4mL)的3-[1-(2-羟乙基)环丙基氨基]-2-(2，3，4，5，-四氟苯甲酰基)丙基氨基丙烯酸乙酯(2.63g，7.01mmol)逐滴处理。将反应混合物室温搅拌1小时，并在80℃下继续搅拌1小时。将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物并用水洗涤。将所得的固体溶解于100mL EtOH并过滤。将滤出液浓缩至50mL，过滤收集所得的沉淀物，用EtOH洗涤并干燥得到成为淡褐色固体的标题化合物(1.43g，61％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.03(2H，br)，1.18(2H，br)，1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，2.03-2.73(2H，br)，4.21(2H，q，J-7.3Hz)，7.66(1H，dd，J＝10.4，7.9Hz)，8.51(1H，s).EIMS(+)335[M]+。
46C)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500841
将10′，11′-三氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.2g，3.58mmol)在浓H2SO4(15mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(510mg，5.04mmol)分批处理。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物。用EtOH洗涤所得的固体，干燥得到成为褐色固体的标题化合物(554mg，41％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.02(2H，br)，1.10-1.27(5H，m)，1.91-2.86(2H，br)，4.21(2H，q，J＝7.3Hz)，4.61(2H，br)，4.52(2H，br)，8.58(1H，s).EIMS(+)380[M]+.HREIMS(+)380.0856(计算得到C17H14F2N2O6，380.0820)。
46D)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500851
将10′，11′-二氟2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环-[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(500mg，1,31mmol)和10％Pd/C(100mg)的DMF(30mL)溶液在氢气气氛下于50℃下搅拌1.5小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。将所得的固体溶解于CH2Cl2和EtOH(3∶1，65mL)并过滤。除去CH2Cl2，过滤分离所得的沉淀物，用EtOH洗涤，并干燥得到成为浅褐色固体的标题化合物(355mg，77％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.99(2H，br)，1.13(2H，br)，1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，1.64-2.91(2H，br)，4.18(2H，q，J＝7.3Hz)54.35(2H，br)，7.46(2H，br)，8.35(1H，s).EIMS(+)350[M]+。
46E)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500852
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丙烷-1，4′.[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(320mg，0.913mmol)含于AcOH-H2O-H2SO4(6∶4∶1v/v，5.3mL)的溶液回流加热1小时。将该反应混合物注入冰水，并过滤收集该沉淀物，用水洗涤，得到标题化合物。1H-NMR(400MHz DMSO，)δ0.63-1.55(4H，br)，1.90-3.11(2H，br)，3，78-4.96(2H，br)，7.40(2H，s)，8.64(1H，s)，14.5(1H，s).EIMS(+)322[M]+。
46F)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500861
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧-螺环[环丙烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3，-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(150mg，0.465mmol)、三乙胺(0.100mL，0.717mmol)和N-2-(吡啶基)-1，2-乙二胺(95.5mg，0.696mmol)在DMSO(2mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物并用乙醇洗涤。将所得的固体溶解于DMF并过滤。将滤出液注入水中，过滤所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为深黄色固体的标题化合物(95.6mg，47％)。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ0.81-1.50(4H，m)，3.40-3.51(2H，m)，3.55-3.66(2H，m)，3.80-4.60(4H，m)，6.32(1H，brs)，6.40-6.50(2H，m)，6.70(1H，t，J＝5.5Hz)，9.97(2H，brs)，7.30-7.40(1H，m)，7.90-8.00(1H，m)，15.14(1H，s).HRESIMS(+)：440.17315(计算得到C22H22FN5O4，440.17340)。
实施例47：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
47A)(1-羟基环丁基)-乙酸乙酯的制备
Figure GPA00001134722500862
通过注射器将三甲基氯硅烷(1.14mL，8.92mmmol)添加至锌粉(7.97g，0.122mol)在无水Et2O(200mL)的悬浮液中。将混合物在室温下搅拌15分钟。将该混合物加热至回流，去除热源，添加溴乙酸乙酯(10.3mL，92.9mmol)，该添加的速率使得该醚溶液略微沸腾。将该混合物回流一小时，然后再在室温下搅拌一小时。添加在醚(30mL)中的环戊酮(6.00g，75.9mmol)溶液，同时通过间歇冷却将混合物的温度保持在19-20℃。室温下搅拌一小时后，将混合物注入冰冻的25％氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2CO3干燥合并的相。过滤并蒸发溶剂，得到成为无色油的标题化合物(6.50g，54％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.47-1.64(1H，m)，1.76-1.87(1H，m)，1.93-2.06(2H，m)，2.12-2.22(2H，m)，2.67(2H，s)，3.70(1H，s)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)。
47B)(1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酸乙酯的制备。
在室温下将H2SO4(2.20mL，41.3mmol)缓慢加入1-羟基环丁基乙酸乙酯(6.45g，40.8mmol)和苄腈(40mL，0.392mol)的混合物中。将混合物室温搅拌1小时，并在80℃下继续搅拌1小时。在冰水浴中冷却该混合物，添加2N NaOH溶液，直至混合物达到pH＝7。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝5∶1)得到成为无色固体的标题化合物(5.40g，51％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.22(3H，t，J＝7.3Hz)，1.84-2.07(2H，m)，2.22-2.32(2H，m)，2.44-2.55(2H，m)，3.05(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.3Hz)，6.73(1H，s)，7.39-7.52(3H，m)，7.72-7.79(2H，m)。
47C)2-[1-(苄基氨基)环丁基]乙醇的制备。
Figure GPA00001134722500881
将LiAlH4(3.88g，0.102mol)在室温下添加至1-(苯甲酰基氨基)-环丁基乙酸乙酯(5.30g，20.3mmol)的THF(100mL)溶液。将混合物搅拌1小时，然后再回流一小时。将混合物在冰水浴中冷却，加入数滴水，再将该混合物静置过夜。用乙酸乙酯稀释该混合物，用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。蒸馏该残留物得到成为无色油的标题化合物(2.53g，61％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.69-1.86(2H，m)，1.88(2H，t，J＝5.5Hz)，1.92-2.09(4H，m)，3.73(2H，s)，3.87(2H，t，J＝5.5Hz)，7.22-7.35(5H，m)。
47D)2-[1-氨基环丁基]乙醇的制备。
Figure GPA00001134722500882
将10％Pd-C(500mg)加入2-[1-(苄基氨基)环丁基]乙醇(4.00g，19.5mmol)的EtOH(100mL)溶液，将该混合物在0.5Mpa H2气氛下室温搅拌6小时。过滤该混合物，并真空浓缩滤出液。蒸馏该残留物得到成为无色油的标题化合物(1.65g，73％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.60-1.72(2H，m)，1.75(2H，t，J＝5.5Hz)，1.77-1.87(2H，m)，2.03-2.13(2H，m)，3.81(2H，q，J＝5.5Hz)。
47E)3-[1-(2-羟乙基)环丁氨基-]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500891
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸酯(3.67g，13.9mmol)、Ac2O(7.89mL，83.5mmol)和原甲酸三乙酯(4.63mL，27.8mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。在0℃下向该混合物在无水甲苯(50mL)中的溶液缓慢添加含于无水甲苯(20mL)的1-氨基-1-(2-羟乙基)环丁烷(1.60g，13.9mmol)。将所得混合物在室温下搅拌2小时，蒸发去除溶剂。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝1∶1)得到成为浅黄色固体的标题化合物(3.30g，61％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(0.6H，t，J＝7.3Hz)，1.09(2.4H，t，J＝7.3Hz)，1.85-2.03(12H，m)，2.06-2.13(2H，m)，2.20-2.30(2H，m)，2.32-2.43(2H，m)，3.82-3.88(2H，m)，4.02(0.4H，q，J＝7.3Hz)，4.07(1.6H，q，J＝7.3Hz)，6.94-7.03(0.2H，m)，7.05-7.13(0.8H，m)，8.23-8.30(1H，m)，10.05-10.17(0.2H，m)，11.36-11.50(0.8H，m)。
47F)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500892
向3-[1-(2-羟乙基)环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(2.80g，7.19mmol)的DMF(30mL)溶液添加NaH(350mg，8.75mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟，然后再在80℃下加热30分钟。在0℃下向该混合物中分批添加水，过滤分离所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为无色固体的标题化合物(655mg，26％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.67-1.79(1H，m)，1.91-2.04(1H，m)，2.42-2.53(4H，m)，2.67(2H，t，J＝6.7Hz)，4.24(2H，q，J＝7.3Hz)，4.55(2H，t，J＝6.7Hz)，7.72(1H，dd，J＝10.4和7.9Hz)，8.41(1H，s)。
47G)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500901
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧-螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(925mg，2.65mmol)在浓H2SO4(11mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(363mg，3.59mmol)分批处理。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入冰水中，合并过滤所得的沉淀物并用水洗涤。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(822mg，79％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.68-1.78(1H，m)，1.90-2.03(1H，m)，2.40-2.58(4H，m)，2.69(2H，t，J＝6.7Hz)，4.24(2H，q，J＝7.3Hz)，4.63(2H，t，J＝6.7Hz)，8.44(1H，s)。
47H)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-2′，3′二氢-9′-硝基-8′-氧-螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(770mg，1.95mmol)的DMF(70mL)溶液在氢气气氛下于50℃下用10％Pd/C(200mg)处理1小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为无色固体的标题化合物(559mg，79％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.65-1.77(1H，m)，1.87-2.01(1H，m)，2.35-2.62(6H，m)，4.21(2H，q，J＝7.3Hz)，4.31-4.42(2H，bit)，7.40-7.60(2H，brs)，8.23(1H，s)。
47I)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500911
将2N NaOH(7.0mL，14.0mmol)在室温下加入9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(513mg，1.41mmol)在EtOH(14mL)中的混合物，并将混合物在50℃下加热3小时。将2N HCl(7.0mL)和水加入该反应混合物。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为无色固体的标题化合物(427mg，90％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.64-1.77(1H，m)，1.89-2.02(1H，m)，2.56-2.70(2H5br)，4.30-4.50(2H，br)，7.35-7.52(2H，brs)，8.47(1H，s)，14.60(1H，s)。
47J)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500912
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(186mg，0.553mmol)、N2-吡啶基-1，2-乙二胺(115mg，0.838mmol)和三乙胺(117μL)在DMSO(2.5mL)中的溶液在120℃下搅拌4小时。在0℃下将反应混合物分批添加至冰水，并向该混合物添加2N HCl(3滴)。过滤分离所得的沉淀物，用EtOH洗涤，并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(165mg，66％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)51.61-1.74(1H，m)，1.84-2.00(1H，m)，2.30-2.65(6H，m)，3.40-3.50(2H，m)，3.52-3.62(2H，m)，4.10-4.33(2H，br)，6.20-6.30(1H，m)，6.42-6.51(2H，m)，6.69(1H，t，J＝5.5Hz)，6.90-7.08(2H，br)，7.32-7.40(1H，m)，7.97(1H，dd，J＝4.3和1.2Hz)，8.26(1H，s)，15.23(1H，s).HRESIMS(+)454.18677(计算得到C23H25FN5O4，454.18906)。
实施例48：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
48A)3-[1-(2-羟乙基)环戊氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500921
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(20.3g，76.8mmol)、Ac2O(44.0mL，0.465mol)和原甲酸三乙酯(25.6mL，0.154mol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物，并在高真空下干燥。在0℃下将含于无水甲苯(50mL)的1-氨基-1-(2-羟乙基)环戊烷(9.94g，76.9mmol)缓慢添加至该混合物在无水甲苯(200mL)中的溶液。将所得混合物在室温下搅拌2小时。蒸发去除溶剂。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝2∶1)得到成为无色固体的标题化合物(23.2g，75％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(0.6H，t，J＝7.3Hz)，1.09(2.4H，t，J＝7.3Hz)，1.48-1.54(1H，m)，1.74-1.90(6H，m)，1.97-2.06(4H，m)，3.78-3.85(2H，m)，3.98-4.10(2H，m)，6.95-7.12(1H，m)，8.17-8.24(1H，m)，9.81-9.94(0.3H，m)，11.20-11.35(0.7H，m)。
48B)6，7，8-三氟-1，4-二氢-1-[1-(2-羟乙基)环戊基]-4-氧-3-喹啉羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500931
向3-[1-(2-羟乙基)-环戊氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(22.7g，56.3mmol)在THF(200mL)中的冰冻溶液中添加NaH(3.60g，90.0mmol)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。在0℃下向该混合物分批添加水。用乙酸乙酯提取所得的混合物，并真空浓缩合并的有机萃取物。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝2∶1)得到成为无色固体的标题化合物(14.1g，65％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.53-1.75(4H，m)，2.10-2.26(4H，m)，2.31-2.44(2H，m)，4.23(2H，q，J＝7.3Hz)，4.55-4.60(1H，m)，7.99-8.07(1H，m)，8.80(1H，s)。
48C)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500941
向6，7，8-三氟-1，4-二氢-1-[1-(2-羟乙基)环戊基]-4-氧-3-喹啉羧酸乙酯(3.84g，10.0mmol)的DMF(40mL)溶液添加NaH(480mg，12.0mmol)，并将该混合物在80℃下加热30分钟。在0℃下用水分批处理该混合物。用乙酸乙酯提取所得的混合物，并真空浓缩合并的萃取物。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝2∶1)得到成为无色固体的标题化合物(1.12g，31％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.42(3H，t，J＝7.3Hz)，1.52-1.64(2H，m)，1.75-1.88(2H，m)，2.11-2.21(2H，m)，2.27-2.37(2H，m)，2.47(2H，t，J＝6.7Hz)，4.39(2H，q，J＝7.3Hz)，4.47(2H，t，J＝6.7Hz)，7.98(1H，dd，J＝9.8和7.9Hz)，8.67(1H，s)。
48D)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(50.0g，0.138mmol)在浓H2SO4(1mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(20.0mg，0.199mmol)分批处理。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物注入冰水中，过滤合并所得的沉淀物，用水洗涤并溶解于CH2Cl2-MeOH(5∶1v/v)。真空浓缩合并的萃取物。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(26.0mg，46％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.37(3H，t，J＝7.3Hz)，1.52-1.66(2H，m)，1.78-1.90(2H，m)，2.15-2.30(4H，m)，2.50(2H，t，J＝6.7Hz)，4.36(2H，q，J＝7.3Hz)，4.55(2H，t，J＝6.7Hz)，8.69(1H，s)。
48E)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500951
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(2.00g，4.90mmol)的DMF(120mL)溶液在氢气气氛下于50℃下用10％Pd/C(400mg)处理1.5小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(527mg，28％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.37-1.50(2H，m)，1.65-1.77(2H，m)，2.06-2.25(4H，m)，2.36(2H，t，J＝6.7Hz)，4.20(2H，q，J＝7.3Hz)，4.30(2H，t，J＝6.7Hz)，7.53(2H，brs)，8.47(1H，s)。
48F)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500952
将2N NaOH(6.5mL，13.0mmol)在室温下加入到9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(482mg，1.27mmol)在EtOH(13mL)中的混合物中，并将混合物在50℃下加热3小时。将2N HCl(6.5mL)和水加入该反应混合物。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为无色固体的标题化合物(425mg，96％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.35-1.52(2H，m)，1.65-1.75(2H，m)，2.10-2.30(4H，m)，2.43(2H，t，J＝6.7Hz)，4.34(2H，t，J＝6.7Hz)，7.50(2H，brs)，8.67(1H，s)，14.5(1H，brs)。
48G)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722500961
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环戊烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(200mg，0.571mmol)和N-(2-吡啶基)-1，2-乙二胺(118mg，0.860mmol)在DMSO(2.5mL)中的溶液在100℃下搅拌4小时。在0℃下向该反应混合物分批添加冰水，过滤分离所得的沉淀物，并依次用水、iPr2O和EtOH洗涤。干燥所得的沉淀物以得到成为淡黄色固体的该标题化合物(185mg，69％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.34-1.49(2H，m)，1.60-1.75(2H，m)，2.03-2.23(4H，m)，2.34(2H，t，J＝6.7Hz)，3.40-3.55(2H，m)，3.55-3.64(2H，m)，4.17(2H，t，J-6.7Hz)，6.25-6.33(1H，br)，6.43-6.51(2H，m)，6.69(1H，t，J＝5.5Hz)，7.06(2H，br)，7.35(1H，ddd，J＝6.7，6.7和1.8Hz)，8.86(1H，dd，J＝4.9和1.2Hz)，8.49(1H，s)，15.1(1H，brs).HRESIMS(+)4678.20118(计算得到C24H27FN5O4，468.20471)。
实施例49：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]-螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
49A)2-(1-羟基环丁基)丙酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500971
通过注射器将三甲基氯硅烷(950μL，7.43mmmol)添加至锌粉(6.65g，0.102mol)在无水Et2O(170mL)的悬浮液中。将混合物在室温下搅拌15分钟，加热至回流，去除热源，以使醚轻微沸腾的速率添加2-溴丙酸乙酯(10.1mL，77.8mmol)。加热至回流1小时后，将混合物在室温下搅拌1小时。添加在Et2O(10mL)中的环丁酮(5.00g，63.2mmol)溶液，同时通过间歇冷却将混合物的温度保持在19-20℃。室温下搅拌1小时后，将混合物注入冰冻的25％氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2CO3干燥合并的有机相，浓缩，得到成为无色油的标题化合物(12.9g，100％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.21(3H，d，J＝6.8Hz)，1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.51-1.64(1H，m)，1.80-1.90(1H，m)，1.96-2.17(4H，m)，2.70(1H，q，J＝7.3Hz)，3.44(1H，s)，4.18(2H，qd，J＝7.3和1.2Hz)。
49B)2-[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]-丙酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722500972
在室温下将H2SO4(3.90mL，73.2mmol)缓慢加入2-(1-羟基环丁基)丙酸乙酯(12.5g，72.6mmol)和苄腈(75mL)的混合物中。将混合物在室温下搅拌1小时，然后在80℃下搅拌1小时。在冰水浴中冷却该混合物，添加2N NaOH溶液，直至混合物达到pH＝7。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝5∶1)得到成为淡黄色固体的标题化合物(9.24g，46％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，1.30(3H，d，J＝7.3Hz)，1.73-1.87(1H，m)，1.98-2.09(2H，m)，2.21-2.32(1H，m)，2.53-2.63(1H，m)，2.84-2.94(1H，m)，3.11(1H，q，J＝7.3Hz)，4.08-4.20(2H，m)，6.88(1H，brs)，7.40-7.52(3H，m)，7.75-7.80(2H，m)。
49C)2-[1-(苄基氨基)环丁基]丙醇的制备。
将LiAlH4(6.30g，0.166mol)添加至2-[1-(苯甲酰基氨基)-环丁基]丙酸乙酯(9.07g，32.9mmol)的THF(160mL)溶液中并将该混合物在室温下搅拌1小时，然后回流1小时。用冰水浴冷却该混合物，并加入数滴水。用乙酸乙酯稀释该混合物，用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。蒸馏该残留物得到成为淡黄色油的标题化合物(6.92g，96％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.00(3H，d，J＝6.7Hz)，1.66-1.77(1H，m)，1.81-1.97(2H，m)，2.02-2.10(1H，m)，2.10-2.24(3J，m)，3.59(1H，dd，J＝11.0和7.9Hz)，3.71(1H，d，J＝11.6Hz)，3.74(1H，dd，J＝11.0和3.7Hz)，3.89(1H，d，J＝11.6Hz)，7.23-7.36(5H，m)。
49D)2-(1-氨基环丁基)丙醇的制备。
将10％Pd-C(700mg)加入到2-[1-(苄基氨基)环丁基]丙醇(6.81g，31.1mmol)的EtOH(150mL)溶液中，将该混合物在5kgf/cm2H2气氛下室温搅拌6小时。过滤该混合物，并真空浓缩滤出液。蒸馏该残留物得到成为无色油的标题化合物(2.96g，74％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(3H，d，J＝7.3Hz)，1.63-1.74(3H，m)，1.78-1.94(2H，m)，2.10-2.28(2H，m)，3.50(1H，dd，J＝11.0和4.3Hz)，3.91(1H，dd，J＝11.0和3.1Hz)。
49E)3-[1-(1-羟基-2-丙基)-环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸酯(6.13g，23.2mmol)、Ac2O(13.2mL，0.140mol)和原甲酸三乙酯(7.80mL，46.8mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。在0℃下向无水甲苯(100mL)中的残留物混合物缓慢添加含于无水甲苯(40mL)的2-(1-氨基环丁基)丙醇(3.00g，23.2mmol)。将该混合物在室温下搅拌2小时，蒸发去除溶剂。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝1∶1)得到成为无色固体的标题化合物(6.23g，67％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.95(0.6H，t，J＝7.3Hz)，0.97(3H，d，J＝7.3Hz)，1.09(2.4H，t，J＝7.3Hz)，1.54(1H，t，J＝4.9Hz)，1.85-2.15(3H，m)，2.19-2.50(4H，m)，3.62-3.75(2H，m)，4.02(0.2H，q，J＝7.3Hz)，4.07(0.8H，q，J＝7.3Hz)，6.97-7.13(1H，m)，8.24(0.8H，d，J＝15.3Hz)，8.25(0.2H，d，J＝15.3Hz)，10.03(0.2H，d，J＝14.1Hz)，11.40(0.8H，d，J＝14.1Hz)。
49F)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501001
在0℃下将NaH(40mg)添加至3-[1-(1-羟基-2-丙基)-环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(404mg，1.00mmol)的DMF(4mL)溶液。在0℃下搅拌一小时后再添加NaH(40mg)。将混合物在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌1小时，并在70℃下搅拌1小时。在0℃下向该混合物中分批添加水，过滤分离所得的沉淀物，用乙酸乙酯洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(289mg，80％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.93(3H，d，J＝6.1Hz)，1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.66-1.77(1H，m)，1.85-2.00(1H，m)，2.35(1H，q，J＝10.4Hz)，2.53-2.69(3H，m)，2.96-3.05(1H，m)，3.82(1H，t，J＝11.6Hz)，4.24(2H，qd，J＝7.3和2.4Hz)，4.77(1H，dd，J＝12.9和8.9Hz)，7.73(1H，dd，J＝10.4和8.6Hz)，8.25(1H，s)。
49G)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
在0℃下用固体KNO3(377mg，3.73mmol)分批处理在浓H2SO4(12mL)中的10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.00g，2.75mmol)溶液。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入冰水中，合并过滤所得的沉淀物并用水洗涤。从DMF(20mL)重结晶所得的固体，得到成为黄色固体的标题化合物(923mg，82％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.94(3H，d，J＝6.1Hz)，1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.67-1.78(1H，m)，1.83-1.98(1H，m)，2.40-2.64(4H，m)，2.92-3.05(1H，m)，3.98(1H，t，J＝11.6Hz)，4.24(2H，t，J＝7.3Hz)，4.80(1H，dd，J＝11.6和7.9Hz)，8.25(1H，s)。
49H)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501011
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(900mg，2.20mmol)的DMF(55mL)溶液在氢气气氛下于50℃下用10％Pd/C(180mg)处理3小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。用EtOH洗涤残留物，过滤收集并干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(756mg，91％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.89(3H，brs)，1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.65-1.77(1H，m)，1.80-1.95(1H，m)，2.30-2.67(4H，m)，2.82-2.94(1H，m)，3.52-3.66(1H，m)，4.15-4.28(2H，m)，4.58-4.70(1H，m)，7.40-7.65(2H，br)，8.05(1H，s)。
49I)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
将2N NaOH(10.0mL)在室温下加入9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(720mg，1.90mmol)在EtOH(20mL)中的混合物，并将混合物在50℃下加热3小时。将2N HCl(10.0mL)和水加入该反应混合物。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(654mg，98％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.90(3H，d，J＝5.5Hz)，1.64-1.76(1H，m)，1.81-1.96(1H，m)，2.35-2.72(4H，m)，2.88-3.02(1H，m)，3.64(1H，t，J＝11.6Hz)，4.60-4.75(1H，m)，7.46(2H，brs)，8.26(1H，s)，14.60(1H，brs)。
49J)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]-螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501022
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-3′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(300mg，0.856mmol)、N-2-(吡啶基)-1，2-乙二胺(177mg，1.29mmol)和三乙胺(180μL)在DMSO(4mL)中的溶液在120℃下搅拌5小时。在0℃下向该反应混合物分批加入冰水，并用CH2Cl2萃取该混合物。用无水Na2SO4干燥该合并的有机萃取物，过滤，并真空浓缩。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色无定形固体的标题化合物(177mg，44％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ0.86(3H，d，J＝5.5Hz)，1.62-1.73(1H，m)，1.79-1.93(1H，m)，2.25-2.38(1H，m)，2.38-2.64(3H，m)，2.80-2.93(1H，m)，3.27-3.50(3H，m)，3.52-3.14(2H，m)，4.50-4.60(1H，m)，6.28(1H，brs)，6.42-6.52(2H，m)，6.69(1H，t，J＝5.5Hz)，7.01(2H，brs)，7.32-7.40(1H，m)，7.96(1H，dd，J＝4.9和1.2Hz)，8.07(1H，s)，15.24(1H，s).HRESIMS(+)468.20923(计算得到C24H27FN5O4，468.20471)。
实施例50：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
50A)1-[(苯甲酰基氨基)环丁基]乙醛的制备。
在-78℃下于30分钟内将DIBAL(40.0mL，1M甲苯溶液)逐滴加入到搅拌中的[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酸乙酯(6.86g，26.3mmol)的THF(130mL)溶液中。在-78℃下搅拌6小时后，在-78℃下于30分钟内向该混合物逐滴添加MeOH(10mL)。然后向该混合物添加饱和NH4Cl(20mL)水溶液，在室温下将混合物搅拌1小时。用Et2O萃取该混合物，用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。对残留物快速层析(己烷∶AcOEt＝2∶1)得到成为无色固体的标题化合物(1.82g，32％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.87-2.07(2H，m)，2.25-2.34(2H，m)，2.36-2.45(2H，m)，3.28(2H，s)，6.57(1H，brs)，7.39-7.45(2H，m)，7.46-7.53(1H，m)，7.70-7.76(2H，m)，9.79(1H，s)。
50B)1-[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]-2-丙醇的制备。
Figure GPA00001134722501041
在-0℃下将甲基氯化镁(14.0mL，3M THF溶液)加入到搅拌中的[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙醛(2.82g，13.0mmol)的THF(30mL)溶液中，并将该混合物在室温下搅拌5小时。在0℃下将饱和NH4Cl(10mL)水溶液加入该混合物，并用乙酸乙酯萃取所得的混合物。用无水Na2SO4干燥该合并的有机萃取物，过滤，并真空浓缩。对残留物快速层析(己烷∶AcOEt＝2∶1)得到成为无色油的标题化合物(2.65g，87％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.25(3H，d，J＝6.1Hz)，1.77-2.12(5H，m)，2.28-2.40(1H，m)，2.52(1H，q，J＝10.4Hz)，2.75-2.85(1H，m)，3.26(1H，d，J＝3.7Hz)，3.97-4.07(1H，m)，6.91(1H，brs)，7.39-7.46(2H，m)，7.46-7.53(1H，m)，7.75-7.82(2H，m)。
50C)1-[1-(苄基氨基)环丁基]-2-丙醇的制备。
Figure GPA00001134722501042
将LiAlH4(1.20g，31.6mol)在室温下添加至1-[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]丙醇(2.64g，11.3mmol)的THF(40mL)溶液。将混合物在室温下搅拌1小时，并回流30分钟。用冰水浴冷却该混合物，并加入数滴水。然后用乙酸乙酯稀释该混合物，用无水Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。快速层析(AcOEt)该残留物得到成为无色油的标题化合物(2.25g，91％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.21(3H，d，J＝6.1Hz)，1.63(1H，dd，J＝13.7和2.4Hz)，1.73-1.90(5H，m)，2.04-2.13(1H，m)，2.18-2.27(1H，m)，3.59(1H，d，J＝11.6Hz)，3.81(1H，d，J＝11.6Hz)，4.07-4.16(1H，m)，7.22-7.35(5H，m)。
50D)1-(1-氨基环丁基)-2-丙醇的制备。
将10％Pd-C(300mg)加入到1-[1-(苄基氨基)环丁基]-2-丙醇(2.24g，10.2mmol)的EtOH(50mL)溶液中，将该混合物在5kgf/cm2H2气氛下室温搅拌10小时。过滤该混合物，并真空浓缩滤出液。蒸馏该残留物得到成为淡黄色油的标题化合物(1.24g，94％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.17(3H，d，J＝6.1Hz)，1.43(1H，ddd，J＝14.7，10.4和1.2Hz)，1.61-1.69(1H，m)，1.72(1H，dd，J＝14.7和1.8Hz)，1.75-1.90(3H，m)，1.93-2.03(1H，m)，2.12-2.20(1H，m)，4.00-4.08(1H，m)。
50F)3-[1-(2-羟基丙基)环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2.45g，9.27mmol)、Ac2O(5.30mL，56.1mmol)和原甲酸三乙酯(3.10mL，18.6mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。在0℃下将含于无水甲苯(10mL)的1-[1-氨基环丁基]-2-丙醇(1.20g，9.29mmol)缓慢添加至残留物在无水甲苯(30mL)中的混合物，并在室温下搅拌2小时。蒸发去除溶剂。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝1∶1)得到成为浅黄色固体的标题化合物(3.10g，83％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.95(0.6H，t，J＝7.3Hz)，1.09(2.4H，t，J＝7.3Hz)，1.29(3H，d，J＝6.1Hz)，1.51(1H，brs)，1.83-2.05(4H，m)，2.18-2.35(3H，m)，2.41-2.53(1H，m)，3.95-4.15(3H，m)，6.96-7.13(1H，m)，8.27(0.8H，d，J＝14.7Hz)，8.31(0.2H，d，J＝14.7Hz)，10.30(0.2H，d，J＝13.4Hz)，11.56(0.8H，d，J＝13.4Hz)。
50G)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501061
在0℃下将NaH(40mg)添加至3-[1-(2-羟基1丙基)环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(404mg，1.00mmol)的DMF(4mL)溶液。在0℃下搅拌1小时后添加NaH(40mg)。将混合物在0℃下搅拌1小时，在室温下搅拌1小时，并在80℃下搅拌1小时。在0℃下向该混合物中分批添加水，过滤分离所得的沉淀物，依次用水和iPr2O洗涤并干燥得到成为无色固体的标题化合物(244mg，67％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.43(3H，d，J＝6.1Hz)，1.72(1H，q，J＝10.4Hz)，1.90-2.04(1H，m)，2.24(1H，q，J＝10.4Hz)，2.34-2.43(1H，m)，2.53-2.74(4H，m)，4.24(2H，q，J＝7.3Hz)，4.48-4.58(1H，m)，7.72(1H，qd，J＝10.4和7.9Hz)，8.40(1H，s)。
50H)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-9′-硝基-8氧-螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(182mg，0.501mmol)在浓H2SO4(2mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(72.0mg，0.712mmol)分批处理。在0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入冰水，过滤分离所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(190mg，93％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.45(3H，d，J＝6.1Hz)，1.61-1.77(1H，m)，1.90-2.03(1H，m)，2.29-2.48(3H，m)，2.57-2.72(3H，m)，4.24(2H，q，J＝7.3Hz)，4.62-4.73(1H，m)，8.43(1H，s)。
50I)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501072
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.13g，2.77mmol)的DMF(70mL)溶液在氢气气氛下于50℃下用10％Pd/C(230mg)处理2小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。用EtOH洗涤残留物，过滤收集并干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(824mg，79％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.36(3H，d，J＝6.1Hz)，1.70(1H，q，J＝10.4Hz)，1.86-2.00(1H，m)，2.25(1H，q，J＝10.4Hz)，2.30-2.39(1H，m)，2.42-2.63(4H，m)，4.14-4.27(2H，m)，4.27-4.37(1H，m)，7.49(2H，brs)，8.22(1H，s)。
50J)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501081
将2N NaOH(10.0mL)在室温下加入到9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(768mg，2.03mmol)在EtOH(20mL)中的混合物中，并将混合物在50℃下加热3小时。将2N HCl(10.0mL)和水加入该反应混合物。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(703mg，99％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.37(3H，d，J＝6.1Hz)，1.70(1H，q，J＝11.0Hz)，1.88-2.02(1H，m)，2.31(1H，q，J＝11.0Hz)，2.37-2.69(5H，m)，4.30-4.42(1H，m)，7.43(1H，brs)，8.47(1H，s)，14.61(1H，brs)。
50K)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501082
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2，3′-二氢-2′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(351mg，1.00mmol)、N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(210mg，1.53mmol)和三乙胺(0.22mL)的DMSO(5mL)溶液在120℃下搅拌5小时。在0℃下向该反应混合物分批加入冰水，并用CH2Cl2萃取该混合物。用无水Na2SO4干燥该合并的萃取物，过滤，并真空浓缩。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色无定形固体的标题化合物(278mg，59％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(3H，d，J＝6.1Hz)，1.67(1H，q，J＝10.4Hz)，1.84-1.99(1H，m)，2.21(1H，q，J＝10.4Hz)，2.30-2.40(1H，m)，2.40-2.62(4H，m)，3.40-3.50(2H，m)，3.53-3.67(2H，m)，4.08-4.20(1H，m)，5.91(1H，brs)，6.42-6.50(2H，m)，6.65(1H，t，J＝5.5Hz)，7.00(2H，brs)，7.32-7.38(1H，m)，7.94(1H，dd，J＝4.9和1.2Hz)，8.25(1H，s)，15.24(1H，s).HRESIMS(+)467.20453(计算得到C24H27FN5O4，468.20471)。
实施例51：
9′-氨基-10′-氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
51A)5-[[1-(羟甲基)环丁基]-甲基氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501091
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(2.80g，10.6mmol)、Ac2O(6.01mL，63.6mmol)和原甲酸三乙酯(3.53mL，21.2mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。将粗产物溶解于甲苯(30mL)，并在冰冷下添加[1-(氨甲基)环丁基]]甲醇盐酸化物(1.60g，10.6mmol)在甲苯(20mL)中的悬浮液和三乙胺(1.48mL，10.6mmol)。将混合物在室温下搅拌6小时，并真空浓缩得到粗产物。通过柱层析(己烷∶EtOAc 10∶1→2∶1)纯化该粗产物得到成为白色固体的标题化合物(1.88g，46％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.95-1.12(3H，m)，1.66-1.69(1H，m)，1.81-1.91(4H，m)，1.94-2.03(2H，m)，3.57(2H，d，J＝6.7Hz)，3.72(2H，d，J＝4.3Hz)，4.00-4.10(2H，m)，6.96-7.12(1H，m)，8.09-8.15(1H，m)，9.65-11.15(1H，m)。
51B)10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501101
在氩气氛围和冰冷下，将5-[[1-(羟甲基)环丁基]甲氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(1.88g，4.83mmol)的DMF(10mL)溶液添加至含于油的60％NaH(424mg，10.6mmol)在DMF(15mL)中的悬浮液中。将反应混合物室温搅拌1小时，并在90℃下继续搅拌1小时。将混合物注入冰水，真空过滤收集所得的沉淀物，用乙醇和水洗涤以得到成为淡黄色固体的标题化合物(1.41g，84％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.80-2.09(6H，m)，4.24(2H，q，J＝7.3Hz)，4.43(2H，s)，4.61(2H，s)，7.73(1H，dd，J＝10.4，7.9Hz)，8.74(1H，s).EIMS(+)：349[M]+。
51C)10′，11′-二氟-9′-硝基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10，11-二氟-8-氧螺环[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]-吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7-羧酸乙酯(1.29g，3.69mmol)在浓H2SO4(15mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(523mg，5.17mmol)分批处理。在0℃下搅拌3小时后，将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物，用水洗涤，并悬浮于热EtOH中。将反应混合物回流搅拌1小时，冷却至室温并过滤收集该沉淀物以得到成为浅黄色固体的标题化合物(1.20g，82％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J-7.3Hz)，1.80-1.88(1H，m)，1.92-2.00(2H，m)，2.02-2.09(3H，m)，4.23(2H，q，J＝7.3Hz)，4.51(2H，s)，4.61(2H，s)，8.81(1H，s).ESIMS(+)：395[M+H]+。
51D)9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，3′(4′H)[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.18g，2.99mmol)在DMF(60mL)中的溶液在50℃氢气氛围(0.35MPa)下用10％Pd/C(120mg)处理7小时。通过Celite过滤去除催化剂，并向滤出液中添加硅胶(50g)。将混合物搅拌30分钟，过滤去除硅胶，并真空去除溶剂。用EtOH洗涤沉淀物，干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(320mg，29％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.76-2.04(6H，m)，4.17-4.26(4H，m)，4.51(2H，s)，7.57(2H，brs)，8.52(1H，s).ESIMS(+)：365[M+H]+。
51E)9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环-[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
将9′-氨基-10，11′-二氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，3′-(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(300mg，0.823mmol)在AcOH-H2O-H2SO4(2∶1∶0.3v/v，6.6mL)混合物中的溶液在100℃下加热2小时。将反应混合物注入冰水，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为褐色固体的标题化合物(242mg，87％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.76-2.07(6H，m)，4.27(2H，s)，4.69(2H，s)，7.48(2H，brs)，8.92(1H，s)，14.63(1H，s)。ESIMS(+)：337[M+H]+。
51F)9′-氨基-10′-氟-8′-氧-11-[2-(吡啶-2-基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501122
将9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丁烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(220mg，0.654mmol)、N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(135mg，0.981mmol)和三乙胺(0.137mL，0.981mmol)在DMSO(5mL)中的溶液在100℃下搅拌5小时。用Celite过滤除去沉淀物，向滤出液中添加水，过滤收集所得的沉淀物，用EtOH洗涤并干燥得到成为淡褐色固体的标题化合物(197mg，66％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.73-1.87(3H，m)，1.91-2.06(3H，m)，3.43-3.47(2H，m)，3.53-3.60(2H，m)，4.02(2H，s)，4.55(2H，s)，6.25-6.32(1H，m)，6.45-6.49(2H，m)，6.65-6.73(1H，m)，7.02(2H，brs)，7.35(1H，td，J＝6.7，1.8Hz)，7.95(1H，dd，J＝5.5，1.2Hz)，8.65(1H，s)，15.25(1H，s).HRESIMS(+)：454.18998(+0.93mmu)。
实施例52：
9′-氨基-10′-氟-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
52A)3-[[1-(羟甲基)环丙基]-甲基氨基]-2-(五氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501131
将3-氧-3-(五氟苯基)丙酸乙酯(7.01g，24.8mmol)、Ac2O(14.0mL，148mmol)和原甲酸三乙酯(8.25mL，49.6mmol)的溶液在120℃下加热2小时。真空浓缩该混合物并真空干燥。将粗产物溶解于无水甲苯(120mL)中，并在0℃下极为缓慢地添加[1-(氨甲基)-环丙基]]甲醇(2.51g，24.8mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3小时，蒸发去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 2∶1)纯化该粗产物得到成为淡黄色固体的标题化合物(7.30g，75％)。Mp.74.5-76.0℃。1H-NMR(400MHZ，CDCl3)δ0.57-0.63(4H，m)，1.12(3H，t，J＝7.3Hz)，1.62(2H，t，J＝5.5Hz)，3.50(2H，d，J＝5.5Hz)，3.98-4.17(2H，m)，8.17(1H，d，J＝5.5Hz)，11.22(1H，brs).EIMS(+)393[M]+.计算得到C17H16F5NO4：C，51.80；H，3.90；N，3.56.实际测得：C，51.91；H，4.10；N，3.56。
52B)9′，10，11′-三氟-8′-氧螺环-[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501141
将NaH(920mg，23.0mmol，60％含于油中)的DMF(50mL)溶液冷却至0℃，并用含于DMF(10mL)的3-[[1-(羟甲基)环丙基]甲氨基]-2-(五氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(4.10g，10.4mmol)逐滴处理。将反应混合物在室温下搅拌4小时，并在80℃下搅拌1小时。然后将反应混合物注入冰水中，过滤所得的沉淀物并用水洗涤。将所得的固体溶解于100mLEtOH-CH2Cl2(2∶1)并过滤。将滤出液浓缩至30mL，过滤收集所得的沉淀物，用EtOH洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(2.45g，67％)。M.p.209-211℃。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ0.56(2H，t，J＝6.1Hz)，0.77(2H，t，J＝6.1Hz)，1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，4.20(2H，s)，4.21(2H，q，J＝7.3Hz)，4.49(2H，s).EIMS(+)353[M]+。
52C)10′，11′-二氟-9′-(2，4-二甲氧基苄基氨基)-8′-氧螺环[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将9′，10′，11′-三氟-8′-氧螺环[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.51g，4.27mmol)、三乙胺(0.890mL，6.34mmol)和2，4-二甲氧基苄胺(0.635mL，4.29mmol)的甲苯(30mL)溶液在90℃下搅拌6小时。将反应混合物注入水，并以EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，用无水Na2SO4干燥，去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 2∶3)纯化该粗产物得到成为黄色固体的标题化合物(1.48g，69％)。
M.p.131-132℃.1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.58(2H，t，J＝5.5Hz)，0.75(2H，t，J＝5.5Hz)，1.36(3H，t，J-7.3Hz)，3.78(3H，s)，3.82(3H，s)，4.03(2H，s)，4.26(2H，brs)，4.35(2H，q，J＝7.3Hz)，4.59(2H，dd，J＝6.1，3.0Hz)，6.37-6.46(2H，m)，7.23(1H，d，J＝7.9Hz)，8.01(1H，s)，10.48(1H，brs).EIMS(+)500[M]+。
52D)9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环-[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501152
将10′，11′-二氟-9′-(2，4-二甲氧基苄基氨基)-8′-氧螺环-[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.42g，2.84mmol)的三氟乙酸(30mL)溶液在室温下搅拌15分钟。用CH2Cl2稀释反应混合物，并用饱和NaHCO3、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥。去除溶剂，将所得的固体溶解于DMF并过滤。将滤出液注入水中，过滤所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(835mg，84％)。M.p.278-279℃。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ0.50(2H，dd，J＝6.1，4.8Hz)，0.71(2H，dd，J＝6.1，4.8Hz)，1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，4.03(2H，s)，4.17(2H，q，J＝7.3Hz)，4.44(2H，s)，7.68(2H，brs)，8.32(1H，s).ESIMS(+)：351[M+H]。
52E)9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环-[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丙烷-1，3′-(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]7′-羧酸乙酯(830mg，2.37mmol)和1M NaOH的EtOH(20mL)溶液在室温下搅拌3分钟。去除溶剂，并将残留物溶解在水中。将溶液用2MHCl酸化至pH 7，过滤所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(757mg，99％)。1H-NMR 400MHz，DMSO)δ0.51(2H，dd，J＝6.1，4.8Hz)，0.73(2H，dd，J＝6.1，4.8Hz)，4.07(2H，s)，4.62(2H，s)，7.58(2H，brs)，8.67(1H，s)，14.66(1H，s).ESIMS(+)：323[M+H]。
52F)9′-氨基-10′-氟-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丙烷-1，3′(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501171
将9′-氨基-10′，11′-二氟-8′-氧螺环[环丙烷-1，3′-(4′H)-[2H，8H]吡啶并[1，2，3-ef]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙基乙基酯(505mg，1.57mmol)、三乙胺(0.320mL，2.30mmol)和N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(322mg，2.35mmol)在DMSO(8mL)中的溶液在100℃下搅拌3小时。将反应混合物注入冰水，过滤所得的沉淀物，用乙醇洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(595mg，86％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO)δ0.39(2H，t，J＝6.1Hz)，0.68(2H，t，J＝6.1Hz)，3.40-3.50(2H，m)，3.52-3.64(2H，m)，3.86(2H，s)，4.48(2H，brs)，6.28(1H，brs)，6.40-6.50(2H，m)，6.66(1H，t，J＝5.5Hz)，7.09(2H，brs)，7.34(1H，td，J＝6.7，1.8Hz)，7.90-7.98(1H，m)，7.90-8.00(1H，m)，8.43(1H，s)，15.26(1H，s).ESIMS(+)：440[M+H]+。
实施例53：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸
53A)(1-羟基环丁基)乙酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501172
通过注射器将三甲基氯硅烷(1.14mL，8.92mmmol)添加至锌粉(7.97g，0.122mol)在无水Et2O(200mL)的悬浮液中。将混合物在室温下搅拌15分钟，加热至回流，去除热源，以使醚轻微沸腾的速率添加溴乙酸乙酯(10.3mL，92.9mmol)。加热至回流1小时后，将混合物在室温下搅拌1小时。添加在醚(30mL)中的环戊酮(6.00g，75.9mmol)溶液，同时通过间歇冷却将混合物的温度保持在19-20℃。室温下搅拌1小时后，将混合物注入冰冻的25％氨水中(400mL)。用醚萃取水相，用K2CO3干燥合并的有机相，蒸发溶剂得到成为无色油的标题化合物(6.50g，54％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.29(3H，t，J＝7.3Hz)，1.47-1.64(1H，m)，1.76-1.87(1H，m)，1.93-2.06(2H，m)，2.12-2.22(2H，m)，2.67(2H，s)，3.70(1H，s)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)。
53B)[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501181
在室温下将H2SO4(2.20mL，41.3mmol)缓慢加入(1-羟基环丁基)乙酸乙酯(6.45g，40.8mmol)和苄腈(40mL，0.392mol)的混合物中。将混合物室温搅拌1小时，并在80℃下继续搅拌1小时。在冰水浴中冷却该混合物，添加2N NaOH溶液，直至溶液达到pH＝7。用乙酸乙酯萃取该混合物，用无水Na2SO4干燥合并的有机萃取物，过滤并真空浓缩。对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝5∶1)得到成为无色固体的标题化合物(5.40g，51％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.22(3H，t，J＝7.3Hz)，1.84-2.07(2H，m)，2.22-2.32(2H，m)，2.44-2.55(2H，m)，3.05(2H，s)，4.11(2H，q，J＝7.3Hz)，6.73(1H，s)，7.39-7.52(3H，m)，7.72-7.79(2H，m)。
53C)[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酸的制备。
Figure GPA00001134722501182
在室温下将3N KOH(10mL，30mmol)添加至1-(苯甲酰基氨基)-环丁基乙酸乙酯(3.87g，14.8mmol)的EtOH(30mL)溶液，并将混合物搅拌1小时。真空浓缩该反应混合物，并添加6N HCl(5.0mL)。过滤收集所得的沉淀物，用水和二异丙醚洗涤，并干燥得到成为无色固体的标题化合物(3.15g，91％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.76-1.89(2H，m)，2.16-2.26(2H，m)，2.28-2.40(2H，m)，2.90(2H，s)，7.43(2H，t，J＝6.7Hz)，7.50(1H，t，J＝6.7Hz)，7.83(2H，d，J＝6.7Hz)，8.45(1H，s)，12.00(1H，brs)。
53D)[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酰胺的制备。
Figure GPA00001134722501191
将[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酸(1.00g，4.29mmol)和亚硫酰氯(3.20mL，43.9mmol)的混合物在室温下搅拌1小时。真空浓缩该混合物。向冰水浴中冷却的残留物在THF(30mL)的混合物中添加25％氨水(30mL)。将混合物在室温下搅拌1小时。用AcOEt-MeOH(3∶1v/v)稀释该混合物并用水洗涤。用无水Na2SO4干燥有机相，过滤，并真空浓缩得到成为无色固体的标题化合物(925mg，93％)。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.75-1.87(2H，m)，2.14-2.23(2H，m)，2.37-2.47(2H，m)，2.70(2H，s)，6.80(1H，s)，7.29(1H，s)，7.43(2H，t，J＝6.7Hz)，7.50(1H，t，J＝6.7Hz)，7.82(2H，d，J＝6.7Hz)，8.39(1H，s)。
53E)2-[1-(苄基氨基)环丁基]乙胺的制备。
Figure GPA00001134722501192
在室温下30分钟内将LiAlH4(570mg，15.0mmol)分批加入到[1-(苯甲酰基氨基)环丁基]乙酰胺(687mg，3.00mmol)的THF(30mL)溶液中，并将该混合物加热回流5小时。将混合物在冰水浴中冷却，加入含水THF和数滴水，再将该混合物静置过夜。用Celite过滤该混合物，以无水Na2SO4干燥该溶液。真空浓缩该溶液得到成为淡黄色油的标题化合物(609mg，99％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.65-1.80(2H，m)，1.82(2H，t，J＝7.3Hz)，1.86-2.02(4H，m)，2.82(2H，t，J＝7.3Hz)，3.65(2H，s)，7.20-7.38(5H，m)。
53F)2-[1-(苄基氨基)环丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺的制备。
Figure GPA00001134722501201
将BoC2O(230mg，1.05mmol)加入到冰水浴中的2-[1-(苄基氨基)环丁基]乙胺(205mg，1.00mmol)的THF(1mL)溶液中。在冰水浴中将混合物搅拌30分钟。真空浓缩该混合物，对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝2∶1)得到成为无色固体的标题化合物(164mg，54％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.36(9H，s)，1.60-1.84(6H，m)，1.84-1.94(2H，m)，2.92-3.04(2H，m)，3.53(2H，s)，6.83(1H，t，J＝5.5Hz)，7.21(1H，t，J＝7.3Hz)，7.29(2H，t，J＝7.3Hz)，7.35(2H，d J＝7.3Hz)。
53G)2-(1-氨基环丁基)-N-(叔丁氧基羰基)乙胺的制备。
向2-[1-(苄基氨基)环丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺(117mg，0.384mmol)的EtOH(5mL)溶液添加10％Pd-C(35mg)，并将混合物在5kgf/cm2H2气体下和室温下搅拌5小时。过滤该混合物，并真空浓缩该滤出液。蒸馏该残留物得到成为无色固体的标题化合物(76.0mg，92％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.37(9H，s)，1.49-1.58(2H，m)，1.62-1.77(4H，m)，1.82-1.91(2H，m)，2.92-3.01(2H，m)，6.78(1H，t，J＝5.5Hz)。
53H)3-[1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(5.28g，20.0mmol)、Ac2O(11.4mL，0.121mol)和原甲酸三乙酯(6.66mL，40.0mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。在0℃下将含于无水甲苯(30mL)的2-[1-(苄基氨基)环丁基]-N-(叔丁氧基羰基)乙胺(4.29g，20.0mmol)缓慢添加至该残留物在无水甲苯(70mL)中的混合物中，并在室温下搅拌1小时。蒸发去除溶剂，对残留物快速层析(AcOEt∶己烷＝2∶1)得到成为淡黄色油的标题化合物(9.10g，93％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(0.7H，t，J＝7.3Hz)，1.10(2.3H，t，J＝7.3Hz)，1.43(9H，s)，1.90-2.07(4H，m)，2.17-2.38(4H，m)，3.12-3.23(2H，m)，4.00-4.15(2H，m)，4.53-4.65(1H，br)，6.95-7.03(0.7H，m)，7.05-7.13(0.3H，m)，8.13(1H，d，J＝14.1Hz)，9.88(0.3H，d，J＝13.5Hz)，11.29(0.7H3d，J＝13.5Hz).HRMS(ESI+)对C18H19F4NO4[M+H]+：计算得到，489.20126；实际测得489.20200。
53I)1′-(叔丁氧基羰基)-10′，11′-二氟-10′，11′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501221
将3-[1-[2-(叔丁氧基羰基氨基)乙基]环丁氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯(500mg，1.02mmol)的DMF(5mL)溶液在冰水浴中冷却。添加NaH(82.0mg，2.05mmol)，将混合物搅拌30分钟，然后室温下搅拌2小时。将混合物冷却至0℃，向该混合物中分批添加水。过滤合并所得的沉淀物，依次用水和二异丙醚洗涤，并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(312mg，68％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-de)δ1.28(3H，t，J＝7.3Hz)，1.42(5H，s)，1.54(4H，s)，1.67-1.80(1H，m)，1.80-1.95(1H，m)，2.10-2.22(1H，m)，2.22-2.37(2H，m)，2.40-2.56(1H，m)，2.65-2.80(2H，m)，4.17-4.37(3H，m)，7.93-8.01(1H，m)，8.47(0.44H，s)，8.51(0.56H，s)。
53J)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501222
将1′-(叔丁氧基羰基)-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯(5.50g，12.3mmol)在浓H2SO4(60mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(1.37g，13.6mmol)分批处理。在0℃下搅拌1小时后，将反应混合物注入冰水中，合并过滤所得的沉淀物并用水洗涤。对残留物快速层析(CH2Cl2-AcOEt＝1∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(3.28g，68％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，1.63-1.75(1H，m)，1.85-1.98(1H，m)，2.35-2.57(6H，m)，3.47-3.55(2H，m)，4.22(2H，q，J＝7.3Hz)，6.96-7.02(1H，m)，8.32(1H，s)。
53K)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501231
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯(1.23g，3.13mmol)的DMF(77mL)溶液在氢气气氛下于50℃下用10％Pd/C(250mg)处理1小时。用Celite过滤除去催化剂，并真空浓缩滤出液。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝2∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(1.00g，88％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.25(3H，X，J＝7.3Hz)，1.62-1.73(1H，m)，1.82-1.96(1H，m)，2.24-2.41(4H，m)，2.45-2.60(2H，m)，3.27-3.38(2H，m)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)，5.28-5.34(1H，m)，7.10(2H，brs)，8.12(1H，s)。
53L)9′-氨基-10，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501232
将2N NaOH(7.0mL，14.0mmol)在室温下加入到9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]-苯并二氮卓]-7′-羧酸乙酯(515mg，1.41mmol)在EtOH(15mL)中的混合物中，并将混合物在50℃下加热3小时。将2N HCl(7.0mL)和水加入该反应混合物。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(397mg，83％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.61-1.73(1H，m)，1.82-1.97(1H，m)，2.30-2.44(4H，m)，2.55-2.69(2H，m)，3.25-3.50(2H，m)，5.53-5.59(1H，br)，7.03(2H，brs)，8.35(1H，s)，14.75(1H，s)。
53M)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501241
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′氧-螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并二氮卓]-7′-羧酸(300mg，0.895mmol)、N2-吡啶基-1，2-乙二胺(185mg，1.35mmol)和三乙胺(0.23mL)在DMSO(4mL)中的溶液在120℃下搅拌5小时。向该反应混合物分批加入冰水，并用CH2CH2萃取该混合物。用无水Na2SO4干燥有机层，过滤，并真空浓缩。对残留物快速层析(CH2Cl2-MeOH＝10∶1)得到成为黄色固体的标题化合物(259mg，64％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.58-1.70(1H，m)，1.78-1.92(1H，m)，2.21-2.38(4H，m)，2.43-2.60(2H，m)，3.19-3.37(2H，m)，3.37-3.51(4H，m)，4.50(1H，t，J＝5.5Hz)，5.50-5.58(1H，br)，6.42-6.51(2H，m)，6.65(1H，t，J＝5.5Hz)，6.82(2H，brs)，7.36(1H，td，J＝6.7和1.8Hz)，7.95(1H，dd，J＝4.9和1.2Hz)，8.18(1H，s)，15.28(1H，s).HRESIMS(+)453.20466(计算得到C23H26FN6O，453.20504)。
实施例54：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸。
54A)[3-(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺-3-基]甲醇的制备。
Figure GPA00001134722501251
向1-(叔丁氧基羰基氨基)环戊烷羧酸(6.57g，28.4mmol)的THF(60mL)溶液中室温下添加LiAlH4(2.89g，61.0mol)。搅拌5小时后，将反应混合物注入冰水冰搅拌30分钟。向该混合物添加AcOEt，并搅拌30分钟。过滤该混合物并用AcOEt萃取滤出液。用水和盐水洗涤萃取混合物，用MgSO4干燥，并真空浓缩。通过柱层析(己烷∶AcOEt 1∶1)纯化残留物得到成为无色固体的[3-(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺-3-基]甲醇(2.82g，46％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.36(9H，s)，1.84-1.91(1H，m)，1.93-2.02(1H，m)，3.46(2H，d，J＝5.5Hz)，3.59-3.62(1H，d，J＝8.6Hz)，3.66-3.70(3H，m)，4.83(1H，t，J＝5.5Hz)，6.78(1H，brs)。
54B)(3-氨基草脲胺-3-基)甲醇盐酸化物的制备。
将[3-(叔丁氧基羰基氨基)草脲胺-3-基]甲醇(2.50g，11.5mmol)的4M HCl-二噁烷(30mL)溶液室温搅拌2小时。真空浓缩该混合物，并干燥得到成为淡褐色油的(3-氨基草脲胺-3-基)甲醇盐酸化物(2.17g，定量)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.89-2.01(2H，m)，3.51-3.58(2H，m)，3.66(2H，s)，3.71-3.76(1H，m)，3.86-3.92(1H，m)，8.33(3H，brs)。
54C)3-[3-[1-(羟甲基)]草脲胺基氨基]-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501261
将2，3，4，5-四氟苯甲酰基乙酸乙酯(3.04g，11.5mmol)、Ac2O(6.52mL，69.0mmol)和原甲酸三乙酯(3.83mL，23.0mmol)的溶液在120℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥。将粗产物溶解于EtOH(50mL)，并添加(3-氨基草脲胺-3-基)甲醇盐酸化物(2.17g，11.5mmol)和三乙胺(1.92mL，13.8mmol)。在室温下搅拌17小时后，真空浓缩该混合物得到粗产物。通过柱层析(己烷∶EtOAc 4∶1→1∶2)纯化该粗产物得到成为黄色油的3-[3-[1-(羟甲基)草脲胺基氨基]--(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)丙烯酸酯(4.18g，93％)。1H-NMR(400MHz，DMSO)δ0.87(3H x 1/4，t，J＝7.3Hz)，0.99(3H x 3/4，t，J＝7.3Hz)，2.09-2.14(2H，m)，3.56-3.74(3H，m)，3.78-3.97(5H，m)，5.50(1H x 1/4，t，J＝5.5Hz)，5.54(1H x 3/4，t，J＝5.5Hz)，7.33-7.46(1H，m)，8.20-8.27(1H，m)，9.88(1Hx 1/4，d，J＝14.7Hz)，11.27(1H x 3/4，d，J＝14.7Hz)。
54D)9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′-2′H]-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501262
在氩气气氛下和冰冷下向3-[3-[1-(羟甲基)草脲胺基氨基]-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)-丙烯酸酯(3.94g，10.6mmol)的DMF(50mL)溶液中添加含于油的60％NaH(892mg，22.3mmol)。60℃下搅拌5小时后，将反应混合物注入冰水，过滤收集所得的沉淀物，用水和EtOH洗涤，并干燥得到成为无色固体的9′，10′-二氟-7′-氧螺环-草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(2.93g，79％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，2.38-2.42(2H，m)，3.78(1H，d，J＝10.4Hz)，3.92-3.98(1H，m)，4.09-4.14(1H，m)，4.20-4.25(3H，m)，4.57(1H，d，J＝11.6Hz)，4.65(1H，d，J＝11.6Hz)，7.67(1H，dd，J＝10.4，8.6Hz)，8.50(1H，s)。
54E)9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环-[草脲胺-33′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
将9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(2.90g，8.26mmol)在浓H2SO4(40mL)中的溶液在0℃下用固体KNO3(1.17g，11.6mmol)分批处理。0℃下搅拌2小时后，将反应混合物注入冰水，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为无色固体的9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并-[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(3.20g，98％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.26(3H，t，J＝7.3Hz)，2.41-2.46(2H，m)，3.78(1H，d，J＝10.4Hz)，3.92-3.98(1H，m)，4.09-4.14(1H，m)，4.21-4.29(3H，m)，4.62(1H，d，J＝11.6Hz)，4.72(1H，d，J＝11.6Hz)，8.53(1H，s)。
54F)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环-[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯的制备。
将9′，10′-二氟-8′-硝基-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(3.15g，7.95mmol)和铁(2.66mg，47.7mmol)在AcOH(40mL)中的混合物在90℃下搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩后，添加DMF，并用Celite过滤该混合物。将滤出液注入水中，过滤收集所得的沉淀物并干燥得到成为无色固体的8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(1.54g，53％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.25(3H，t，J-7.3Hz)，2.29-2.38(2H，m)，3.72(1H，d，J＝11.0Hz)，3.90-3.96(1H，m)，4.06-4.11(1H，m)，4.15(1H，d，J＝11.0Hz)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)，4.32(1H，d，J＝11.0Hz)，4.41(1H，d，J＝11.0Hz)，7.42(2H，brs)，8.34(1H，s)。
54G)8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501282
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸乙酯(1.51g，4.12mmol)在AcOH-H2O-H2SO4(2∶1∶0.3v/v，26.4mL)混合物中的溶液在100℃下加热2小时。将反应混合物注入冰水并搅拌。30分钟后，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(1.32g，95％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ2.38-2.44(2H，m)，3.76(1H，d，J＝11.0Hz)，3.91-3.97(1H，m)，4.09-4.14(1H，m)，4.25(1H，d，J＝11.0Hz)，4.38(1H，d，J＝11.0Hz)，4.50(1H，d，J＝11.0Hz)，7.36(2H，brs)，8.59(1H，s)，14.62(1H，s)。
54H)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)丙基氨基]螺环[草脲胺-13′(2H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501291
将8′-氨基-9′，10′-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(300mg，0.887mmol)、3-(2-吡啶基)丙胺(181mg，1.33mmol)和三乙胺(0.185mL，1.33mmol)在DMSO(4mL)中的溶液在100℃下搅拌6小时。向该反应混合物添加水和饱和NH4Cl溶液至pH＜4，并搅拌30分钟。过滤收集所得的沉淀物，用水和EtOH洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)丙基氨基]螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(373mg，93％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.90-1.98(2H，m)，2.26-2.39(2H，m)，2.77(2H，t，J＝7.3Hz)，3.42-3.51(2H，m)，3.73(1H，d，J＝10.4Hz)，3.91-3.97(1H，m)，4.07-4.13(1H，m)，4.16(1H，d，J＝10.4Hz)，4.24(1H，d，J＝11.0Hz)，4.35(1H，d，J＝11.0Hz)，6.01-6.10(1H5m)，6.92(2H，brs)，7.18(1H，dd，J＝6.7，5.5Hz)，7.24(1H，d，J＝7.9Hz)，7.67(1H，td，J＝7.3，1.8Hz)，8.42(1H，s)，8.45(1H，d，J＝4.3Hz)，15.27(1H，s).HRESIMS(+)455.17350(计算得到C23H23FN4O5，455.17307)。
实施例55-81：
通过采用上述步骤可制备实施例55-81的化合物：
Figure GPA00001134722501301
Figure GPA00001134722501302
Figure GPA00001134722501311
Figure GPA00001134722501312
Figure GPA00001134722501313
Figure GPA00001134722501321
Figure GPA00001134722501331
Figure GPA00001134722501341
实施例82：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]。
Figure GPA00001134722501342
将9′-氨基-10′-氟-2，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)-乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(300mg，0.662mmol)和氰化钠(325mg，6.63mmol)在无水DMSO(6mL)中的混合物在120℃下搅拌3小时。冷却后，将反应混合物注入水(100mL)，并以EtOAc萃取。用水和盐水洗涤萃取混合物，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过柱层析(Chromatorex NH-DM2035(Fuji Sylysia CHemical Co.，Ltd.)EtOAc)纯化该残留物得到成为黄色固体的标题化合物(197mg，72％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.60-1.72(1H，m)，1.80-1.93(1H，m)，2.28-2.44(6H，m)，3.39(2H，q，J＝5.5Hz)，3.45-3.53(2H，m)，4.10-4.19(2H，m)，5.55(1H，td，J＝6.1，2.4Hz)，5.64(1H，d，J＝7.9Hz)，6.42-6.47(2H，m)，6.61(1H，t，J＝5.5Hz)，7.01(2H5brs)，7.31-7.36(1H，m)，7.44(1H，d，J＝7.9Hz)，7.94(1H，dd，J＝4..9，1.2Hz)..HRESIMS(+)：410.19901(计算得到C22H25FN5O2，410.19923)。
实施例83-85：
以下化合物可按上述制备9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]的相同方式进行制备。该化合物参照实施例82的步骤制备：
Figure GPA00001134722501351
Figure GPA00001134722501352
实施例86：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基-氨基)-乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-氨甲酰。
Figure GPA00001134722501361
在0℃下将三乙胺(0.14mL，1.00mmol)和氯甲酸乙酯(0.076mL，0.795mmol)添加至9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)-乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(300mg，0.662mmol)的DMF(5mL)溶液中。0℃下搅拌1.5小时后，添加25％NH3水溶液(5mL)。将混合物在室温下搅拌6小时。将反应混合物注入水(200mL)，并以EtOAc萃取。用水和盐水洗涤混合物，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过柱层析(CH2Cl2MeOH 50∶1)纯化该残留物得到成为黄色固体的标题化合物(270mg，90％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.62-1.73(1H，m)，1.90(1H，q，J＝9.2Hz)，2.28-2.47(6H，m)，3.42(2H，q，J＝5.5Hz)，3.49-3.57(2H，m)，4.11-4.25(2H，m)，5.85-5.89(1H，m)，6.42-6.49(2H，m)，6.64(1H，t，J＝5.5Hz)，7.08(2H，brs)，7.26(1H，d，J＝4.9Hz)，7.31-7.37(1H，m)，7.95(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.26(1H，s)，9.13(1H，d，J＝4.9Hz).HRESIMS(+)：453.20594(计算得到C23H26FN6O3，453.20504)。
实施例87：8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-氨甲酰。
该标题化合物可参照实施例86的步骤由实施例54的化合物制备得到。
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.88-1.96(2H，m)，2.18-2.25(1H5m)，2.30-2.37(1H，m)，2.76(2H，t，J＝7.3Hz)，3.37-3.47(2H，m)，3.72(1H，d，J＝10.4Hz)，3.91-3.96(1H，m)，4.05-4.12(2H，m)，4.21(1H，d，J＝11.6Hz)，4.29(1H，d，J＝11.6Hz)，5.62-5.69(1H，m)，7.01(2H，brs)，7.17(1H，dd，J＝6.7，5.5Hz)57.23(1H，d，J＝7.9Hz)，7.33(1H，d，J＝4.3Hz)，7.67(1H5td，J＝7.3，1.8Hz)，8.45(1H，d，J＝4.3Hz)，8.48(1H，s)，9.18(1H，d，J＝4.9Hz)。
实施例88：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-碳酰肼。
Figure GPA00001134722501371
在0℃下将三乙胺(0.185mL，1.33mmol)和氯甲酸乙酯(0.100mL，1.04mmol)添加至9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基-氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(400mg，0.882mmol)的DMF(6mL)溶液。0℃下搅拌1.5小时后，添加一水合肼(4mL)。将混合物在室温下搅拌6小时。将反应混合物注入水(100mL)中，过滤收集该固体，并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(369mg，89％)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.63-1.73(1H，m)，1.83-1.97(1H，m)，2.26-2.55(6H，m)，3.42(2H，q，J＝6.1Hz)，3.49-3.57(2H，m)，4.12-4.25(2H，m)，4.47(2H，d，J＝4.3Hz)，5.87(1H，td，J＝6.1，1.8Hz)，6.42-6.48(2H，m)，6.64(1H，t，J＝5.5Hz)，7.07(2H，brs)，7.31-7.37(1H，m)，7.95(1H，dd，J＝5.5，1.2Hz)，8.23(1H，s)，10.47(1H，s).HRESIMS(+)：468.2143(计算得到C23H27FN7O3，468.2159)。
实施例89：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-碳氧肟酸。
Figure GPA00001134722501381
在0℃下将三乙胺(0.185mL，1.33mmol)和氯甲酸乙酯(0.100mL，1.04mmol)添加至9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(400mg，0.882mmol)的DMF(6mL)溶液。0℃下搅拌1.5小时后，添加50％NH2OH水溶液(3mL)。将混合物在室温下搅拌6小时，并注入水(60mL)中。过滤收集所得的固体并干燥。从MeOH重结晶该残留物得到成为黄色固体的标题化合物(135mg，33％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.62-1.73(1H，m)，1.84-1.97(1H，m)，2.28-2.56(6H，m)，3.42(2H，q，J＝6.1Hz)，3.50-3.57(2H，m)，4.12-4.26(2H，m)，5.87-5.93(1H，m)，6.42-6.48(2H，m)，6.64(1H，t，J＝5.5Hz)，7.05(2H，brs)，7.32-7.36(1H，m)，7.95(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.22(1H，s)，9.02(1H，d，J＝1.8Hz)，11.54(1H，d，J＝1.8Hz)..HRESIMS(+)：469.2036(计算得到C23H26FN6O4，469.2000)。
实施例90：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-N-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-氨甲酰。
在0℃下将三乙胺(0.185mL，1.33mmol)和氯甲酸乙酯(0.100mL，1.04mmol)添加至9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(400mg，0.882mmol)的DMF(6mL)溶液。在0℃下搅拌1.5小时后，添加含于THF(4mL)的2M甲胺。将混合物在室温下搅拌6小时。将反应混合物注入水(60mL)，并以EtOAc萃取。用水和盐水洗涤萃取混合物，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过柱层析(CH2Cl2 MeOH 20∶1)纯化该残留物得到成为黄色固体的标题化合物(370mg，90％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.62-1.73(1H，m)，1.84-1.97(1H，m)，2.28-2.48(6H，m)，3.41(3H，d，J＝4.9Hz)，2.79(2H，q，J＝5.5Hz)，3.49-3.56(2H，m)，4.12-4.24(2H，m)，5.85(1H，td，J＝5.5，2.4Hz)，6.42-6.48(2H，m)，6.61-6.66(1H，m)，7.07(2H，brs)，7.31-7.36(1H，m)，7.94(1H，dd，J＝4.9，1.8Hz)，8.25(1H，s)，9.64(1H，q，J＝4.9Hz).HRESIMS(+)：467.2182(计算得到C23H28FN6O3，467.2207)。
实施例91：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-腈。
91A)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-氨甲酰的制备。
Figure GPA00001134722501391
将三乙胺(2.50mL，17.9mmol)和氯甲酸乙酯(1.36mL，14.2mmol)添加至9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(4.00g，11.9mmol)的DMF(200mL)溶液。在0℃下搅拌2小时后，添加25％NH3水溶液(7mL)，然后将混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物注入水中(1.5L)，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为褐色固体的标题化合物(3.23g，81％)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.64-1.76(1H，m)，1.87-2.00(1H，m)，2.35-2.48(4H，m)，2.53-2.64(2H，m)，4.30-4.42(2H，m)，7.33-7.68(3H，m)，8.44(1H，s)，8.94(1H，d，J＝4.3Hz).ESIMS(+)：336[M+H]+。
91B)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓-7′-腈的制备。
Figure GPA00001134722501401
在0℃下将三乙胺(4.38mL，31.4mmol)和三氟乙酸酐(2.68mL，19.3mmol)的CH2Cl2(30mL)溶液添加至9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-氨甲酰(1.70g，5.06mmol)在CH2Cl2(120mL)中的悬浮液中。在0℃下搅拌1小时后，用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤该反应混合物，用Na2SO4干燥，并真空浓缩。通过柱层析(Chromatorex NH-DM2035(Fuji Sylysia CHemical Co.，Ltd.)己烷∶CH2Cl2 1∶1)纯化该残留物得到成为无色固体的标题化合物(1.12g，70％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-de)δ1.62-1.73(1H，m)，1.83-1.96(1H，m)，2.35-2.57(6H，m)，4.32-4.42(2H，m)，7.48(2H，brs )，8.41(1H，s).ESIMS(+)：318[M+H]+。
91C)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-腈的制备。
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-腈(830mg，2.62mmol)、N2-(吡啶基)-1，2-乙二胺(718mg，5.23mmol)和三乙胺(0.730mL，0.330mmol)在DMSO(16mL)中的溶液在60℃下搅拌10小时。冷却后，将反应混合物注入冰水(150mL)。过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥。通过柱层析(Chromatorex NH-DM2035(Fuji Sylysia CHemical Co.，Ltd.)己烷∶CH2Cl21∶2→CH2Cl2→CH2Cl2∶MeOH100∶1)所得的固体得到成为褐色固体的标题化合物(860mg)。再次通过柱层析(CH2Cl2∶MeOH 30∶1)纯化该固体得到成为黄色固体的标题化合物(500mg，44％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.58-1.72(1H，m)，1.80-1.92(1H，m)，2.30-2.47(6H，m)，3.41(2H，q，J＝6.1Hz)，3.48-3.56(2H，m)，4.13-4.24(2H，m)，5.93-6.01(1H，m)，6.42-6.48(2H，m)，6.65(1H，t，J＝6.1Hz)，7.05(2H，brs)，7.31-7.37(1H，m)，7.94(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.16(1H，s).HRESIMS(+)：435.19403(计算得到C23H24FN6O2，435.19443)。
实施例92：8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈。
Figure GPA00001134722501412
将8′-氨基-9′-二氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)丙基氨基]-螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-氨甲酰(165mg，0.364mmol)、POCl3(167mg，1.09mmol)和三乙胺(0.254mL，1.82mmol)在CH2Cl2(2mL)中的混合物在室温下搅拌10小时。向该反应混合物添加饱和NaHCO3水溶液至pH＞7，并用AcOEt萃取。用盐水洗涤有机层，用Na2SO4干燥，并真空去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 1∶1→EtOAc→EtOAc∶MeOH 10∶1)纯化该粗产物得到成为黄色固体的8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(2-吡啶基)-丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈(42.4mg，27％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.88-1.95(2H，m)，2.17-2.25(1H，m)，2.35-2.42(1H，m)，2.75(2H，t，J＝7.3Hz)，3.38-3.46(2H5m)，3.70(1H，d，J-10.4Hz)，3.89(1H，td，J＝8.6，5.5Hz)，3.97(1H，d，J＝10.4Hz)，4.13-4.19(1H，m)，4.22(1H，d，J＝11.6Hz)，4.24(1H，d，J＝11.6Hz)，5.73-5.80(1H，m)，6.99(2H，brs)，7.18(1H，dd，J＝6.7，5.5Hz)，7.23(1H，d，J＝7.9Hz)，7.67(1H，td，J＝7.3，1.8Hz)，8.23(1H，s)，8.45(1H，d，J＝4.3Hz).HRESIMS(+)436.17877(计算得到C23H22FN5O3，436.17849)。
实施例93：9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[3-(1-咪唑基)丙基氨基]螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并-[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-腈。
Figure GPA00001134722501421
该标题化合物可采用与上述实施例中所述类似的步骤由9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-腈制备得到。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.80-2.04(2H，m)，2.06-2.13(1H，m)，2.38-2.55(6H，m)，3.44(2H，dq，J＝2.4，6.7Hz)，4.06(2H，t，J＝6.7Hz)，4.31-4.40(2H，m)，4.46(1H，td，J＝6.7，1.8Hz)，6.50(2H，brs)，6.93(1H，t，J＝1.2Hz)，7.09(1H，t，J＝1.2Hz)，7.49(1H，s)，7.65(1H，s).HRESIMS(+)：423.19445(计算得到C23H23FN6O2，423.19448)。
实施例94：
9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸。
94A)10′，11′-二氟-2′，3′，6′，7-四氢-6′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501431
将含于THF(10.8mL，32.4mmol)的3M甲基氯化镁在氩气气氛下和-78℃下添加至搅拌中的10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(3.88g，9.84mmol)和碘化亚铜(562mg，2.95mmol)在THF(200mL)中的混合物。将反应混合物在室温下搅拌24小时，并注入水(1L)中。添加浓HCl(50mL)至pH＜1，并将混合物搅拌30分钟。用AcOEt萃取粗产物，用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥并真空去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 20∶1→5∶1)纯化该粗产物得到成为黄色固体的标题化合物(1.71g，42％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.09(3H，d，J＝6.1Hz)，1.27(3H，t，J＝7.3Hz)，1.60-1.69(1H，m)，1.72-1.83(1H，m)，1.94-2.15(4H，m)，2.24-2.35(1H，m)，2.51-2.57(1H，m)，4.28(2H，q，J＝7.3Hz)，4.39-4.50(2H，m)，4.58-4.63(1H，m)，11.64(1H，s)。
94B)10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-2′，3′，6′，7′-四氢-6′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.50g，3.66mmol)和二氧化锰(32.0g，366mmol)在CH2Cl2(40mL)中的混合物在室温下搅拌40小时。通过Celite过滤该混合物，并真空浓缩滤出液。通过柱层析(己烷∶EtOAc 2∶1→1∶2)纯化该粗产物得到成为淡黄色固体的标题化合物(168mg，11％)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，1.59-1.67(1H，m)，1.81-1.88(1H，m)，2.08-2.18(1H，m)，2.27(3H，s)，2.34-2.54(4H，m)，2.80-2.92(1H，m)，4.20-4.27(2H，m)，4.63-4.83(2H，m)。
94C)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-9′-硝基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(160mg，0.392mmol)和铁(146mg，2.35mmol)在AcOH(4mL)中的混合物在90℃下搅拌3小时。真空浓缩该反应混合物，并添加1M HCl水溶液(5.0mL)。用AcOEt萃取粗产物，依次用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥并真空去除溶剂。干燥残留物得到成为淡黄色无定形固体的标题化合物(146mg，98％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.24(3H，t，J＝7.3Hz)，1.58-1.65(1H，m)，1.75-1.87(1H，m)，1.93-2.05(1H，m)，2.16(3H，s)，2.22-2.34(2H，m)，2.37-2.46(1H，m)，2.51-2.60(1H，m)，2.68-2.80(1H，m)，4.18-4.24(2H，m)，4.26-4.36(1H，m)，4.53-4.64(1H，m)，7.23(2H，brs)。
94D)9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501451
将9′-氨基-10′，H′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(136mg，0.359mmol)和1MNaOH水溶液(1.4mL)在EtOH(1.4mL)中的混合物回流搅拌5小时。真空浓缩该反应混合物，将残留物溶解于水，添加2M HCl水溶液至pH＜3。真空过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(110mg，87％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.53-1.61(1H，m)，1.77-1.85(1H，m)，1.97-2.05(1H，m)，2.28-2.40(3H，m)，2.52-2.58(1H，m)，2.60(3H，s)，2.76-2.84(1H，m)，4.38(1H，td，J-12.2，4.3Hz)，4.62(1H，dd，J＝12.2，6.7Hz)，7.27(2H，brs)，15.18(1H，brs)。
94E)9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
将9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(100mg，0.285mmol)、N-(2-吡啶基)-1，2-乙二胺(58.7mg，0.428mmol)和三乙胺(0.0597mL，0.428mmol)在DMSO(3mL)中的溶液在100℃下搅拌5小时。在反应混合物注入饱和NH4Cl水溶液之后，用CH2Cl2萃取该粗产物，用盐水洗涤，用MgSO4干燥并真空去除该溶剂。通过薄层层析(EtOAc∶MeOH 20∶1)纯化该粗产物得到成为黄色固体的标题化合物(70.3mg，53％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.49-1.59(1H，m)，1.72-1.79(1H，m)，1.85-1.92(1H，m)，2.23-2.32(2H，m)，2.37-2.45(2H，m)，2.57(3H，s)，2.66-2.75(1H，m)，3.40-3.47(2H，m)，3.51-3.62(2H，m)，4.19(1H，td，J＝12.2，3.7Hz)，4.49(1H，dd，J＝12.2，6.7Hz)，6.10-6.16(1H，m)，6.43-6.49(2H，m)，6.64-6.70(1H，m)，6.88(2H，brs)，7.34(1H，t，J＝6.7Hz)，7.95-7.96(1H，m)，16.08(1H，brs).HRESIMS(+)：468.20454(计算得到C24H26FN5O4，468.2047)。
实施例95：
9′-氨基-10′-氯-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸
95A)10′-氨基-11′-氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501461
将10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(5.00g，12.7mmol)和(NH4)2CO3(11.0g，114mmol)在DMF(50mL)中的混合物在90℃下搅拌21小时。将反应混合物注入冰水，真空过滤收集所得的沉淀物，依次用热AcOEt和热EtOH洗涤并干燥得到成为黄色固体的标题化合物(2.51g，50％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.24(3H，t，J＝7.3Hz)，1.65-1.76(1H，m)，1.88-2.00(1H，m)，2.41-2.46(4H，m)，2.60-2.63(2H，m)，4.19(2H，q，J＝7.3Hz)，4.47-4.50(2H，m)，6.07(2H，brs)，8.26(1H，s)。
95B)10′-氯-11′-氟-2′，3，-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501471
将10′-氨基-11′-氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(2.51g，6.41mmol)加入到亚硝酸叔丁酯(1.14mL，9.62mmol)和氯化铜(II)(1.81g，12.8mmol)在CH3CN(64mL)中的混合物中，将该混合物在室温下搅拌20小时。将反应混合物注入水(300mL)中，添加浓HCl(50mL)至pH＜1，过滤收集所得的沉淀物，用热EtOH洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的标题化合物(2.17g，82％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.25(3H，t，J＝7.3Hz)，1.67-1.75(1H，m)，1.92-1.99(1H，m)，2.41-2.53(4H，m)，2.66-2.69(2H，m)，4.22(2H，q，J＝7.3Hz)，4.60-4.63(2H，m)，8.42(1H，s)。
95C)9′-氨基-10′-氯-11′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯的制备。
Figure GPA00001134722501481
将10′-氯-11′-氟-2′，3′-二氢-9′-硝基-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(2.17g，5.28mmol)和铁(1.97g，31.7mmol)在AcOH(50mL)中的混合物在90℃下搅拌5小时。真空浓缩该反应混合物，将残留物溶解于AcOEt并搅拌30分钟。以Celite过滤除去所得沉淀物。依次用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤滤出液，用MgSO4干燥并真空去除溶剂。用热EtOH洗涤粗产物得到成为淡黄色固体的标题化合物(1.03g，51％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.25(3H，t，J-7.3Hz)，1.65-1.75(1H，m)，1.89-1.96(1H，m)，2.38-2.47(4H，m)，2.52-2.59(2H，m)，4.20(2H，q，J＝7.3Hz)，4.30-4.41(2H，m)，7.33-7.55(2H，m)，8.23(1H，s)。
95D)9′-氨基-10′-氯-11′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501482
将9′-氨基-10′-氯-11′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸乙酯(1.03g，2.70mmol)在AcOH-H2O-H2SO4(2∶1∶0.3v/v，6.6mL)混合物中的溶液在100℃下加热2小时。添加冰水，并将混合物搅拌30分钟。真空过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤，并干燥得到成为无色固体的标题化合物(908mg，95％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.65-1.74(2H，m)，1.88-1.99(2H，m)，2.40-2.69(4H，m)，4.25-4.51(2H，m)，7.73(2H，brs)，8.49(1H，s)，14.56(1H，s)。
95E)9′-氨基-10′-氯-2′，3′-二氢-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸的制备。
Figure GPA00001134722501491
将9′-氨基-10′-氯-11′-氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(900mg，2.55mmol)、N-2-吡啶基-1，2-乙二胺(525mg，3.83mmol)和三乙胺(0.534mL，3.83mmol)在DMSO(10mL)中的溶液在100℃下搅拌7小时。向该反应混合物添加饱和NH4Cl水溶液至pH＜3，真空过滤收集所得的沉淀物并用水洗涤。通过薄层层析(CH2Cl2∶MeOH 50∶1)纯化该粗产物得到成为黄色固体的标题化合物(565mg，47％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.64-1.72(1H，m)，1.86-1.98(1H，m)，2.32-2.66(6H，m)，3.40-3.44(2H，m)，3.62-3.66(2H，m)，3.94-4.53(2H，m)，6.00(1H，t，J＝5.5Hz)，6.44-6.47(2H，m)，6.66(1H，t，J＝5.5Hz)，7.07-7.63(3H，m)，7.94(1H，dd，J＝5.5，1.2Hz)，8.29(1H，s)，15.15(1H，s).HRESIMS(+)：470.15831(计算得到C23H24ClN5O4，470.1595)。
实施例96-98：
化合物96-98可采用与上文实施例中所述类似的合成步骤由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]-喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸或9′-氨基-10′，11′-二氟-2′，3′-二氢-8′-氧螺环-[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，4]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸制备得到。
实施例96：10-(3-(1H-咪唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-羧酸。
Figure GPA00001134722501501
MS(EP)m/z：442.0(M+1)。(计算得到C22H24FN5O4，441.18)。
实施例97：9-氨基-10-氟-8-氧-11-(3-(吡啶-2-基氨基)-吡咯烷-1-基)-3，8-二氢-2H-螺环[[1，4]氧氮杂卓[2，3，4-ij]喹啉-4，1′-环丁烷]-7-羧酸。
Figure GPA00001134722501502
1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)61.59-1.73(1H，m)，1.81-1.97(2H，m)，2.05-2.19(1H，m)，2.47-2.51(6H，m)，3.42-3.53(1H，m)，3.85-3.97(3H，m)，4.11-4.29(3H，m)，6.44-6.51(2H，m)，6.75(1H，d，J＝6.1Hz)，6.94(2H，brs)，7.32-7.39(1H，m)，7.96(1H，dd，J＝6.1，1.2Hz)，8.26(1H，s)，15.13(1H，brs).HRESIMS(+)：480.20547(计算得到C25H27FN5O4，480.20471)。
实施例98：8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-(3-(吡啶-2-基氨基)吡咯烷-1-基)-2′，7′-二氢-1′H-螺环[环戊烷-1，3′-吡啶并[3，2，1-ij]喹啉]-6′-羧酸。
Figure GPA00001134722501503
1H-NMR(400MHz，DMSO-de)δ1.72-2.04(9H，m)，2.08-2.19(1H，m)，3.50-3.58(1H，m)，3.71-3.80(1H，m)，3.81-3.90(1H，m)，3.95-4.02(1H，m)，4.08(2H，s)，4.33-4.42(1H，m).6.44-6.51(2H，m)，6.76(1H，d，J＝6.1Hz)，6.88(2H，brs)，7.32-7.38(1H，m)，7.97(2H，dd，J＝4.9，1.2Hz)，8.38(1H，s)，15.19(1H，s).HRESIMS(+)：480.20378(计算得到C25H27FN5O4，480.20471)。
实施例99：9-氨基-10-氟-6-甲基-11-(2-(吡啶-2-基氨基)-乙氨基)-2H-螺环[[1，4]氧氮杂卓[2，3，4-ij]喹啉-4，1′-环丁烷]-8(3H)-酮。
Figure GPA00001134722501511
将9′-氨基-10′-氟-2′，3′-二氢-6′-甲基-8′-氧-11′-[2-(2-吡啶基氨基)乙氨基]螺环[环丁烷-1，4′-[4H，8H]吡啶并[1，2，3-ef][1，5]苯并氧氮杂卓]-7′-羧酸(42.7mg，0.0913mmol)和氰化钠(46.1mg，0.913mmol)在无水DMSO(2mL)中的混合物在150℃下搅拌8小时。冷却后，将反应混合物注入NaHCO3饱和水溶液，并以EtOAc萃取。用盐水洗涤萃取混合物，用MgSO4干燥，并真空浓缩。通过制备TLC(Silicagel 60(Merck Co.，Ltd.)EtOAc∶MeOH 10∶1)纯化该残留物以得到成为黄色固体的标题化合物(20.8mg，54％)。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.52-1.60(1H，m)，1.73-1.79(1H，m)，2.10(3H，s)，3.27-3.33(6H，m)，3.37-3.41(2H，m)，3.43-3.51(2H，m)，3.96-4.53(2H，m)，5.41-5.47(1H，m)，5.57(1H，s)，6.42-6.47(2H，m)，6.60(1H，t，J＝5.5Hz)，6.84(2H，brs)，7.33(1H，dd，J＝6.7，1.8Hz)，7.93-7.95(1H，m).HRESIMS(+)：424.21446(计算得到C23H26FN5O2，424.21488)。
实施例100：
8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(4，6-双三氟吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈。
100A)3-(4，6-双三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸叔丁酯的制备。
Figure GPA00001134722501521
向搅拌中的烯丙基氨基甲酸叔丁酯(1.95g，12.4mmol)的THF(12mL)溶液在氩气气氛和室温下添加0.5mol/L 9-硼双环[3.3.1]壬烷(29.8mL，14.9mmol)。室温下搅拌4小时后，向该反应混合物添加2-溴-4，6-双三氟甲基吡啶(3.65g，12.4mmol)的DMF(12mL)溶液、Pd(OAc)2(278mg，1.24mmol)、DPPF(859mg，1.55mmol)和K2CO3(2.92g，21.1mmol)，并在室温下搅拌7小时。向该反应混合物添加水，并用EtOAc萃取粗产物，用盐水洗涤，用NaSO4干燥并真空去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 10∶1→2∶1)纯化该粗产物得到成为无色固体的叔丁基3-(4，6-双三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸酯(3.41g，74％)。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.44(9H，s)，1.96-2.03(2H5m)，2.98-3.02(2H，m)，3.20-3.25(2H，m)，4.71(1H，brs)，7.59(1H，s)，7.72(1H，s).CIMS(+)373[M+H]+。
100B)3-(4，6-双三氟吡啶-2-基)丙胺的制备。
Figure GPA00001134722501522
将3-(4，6-双三氟甲基吡啶-2-基)丙基氨基甲酸叔丁酯(3.10g，8.33mmol)在含于EtOAc(20mL)的4mol/L氯化氢的溶液中室温搅拌30分钟。真空去除溶剂形成沉淀物，添加1mol/L NaOH水溶液碱化，并用EtOAc萃取该粗产物，用盐水洗涤，用NaSO4干燥并真空去除溶剂。干燥沉淀物得到成为黄色油的3-(4，6-双三氟吡啶-2-基)丙胺(2.26g，定量)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.54(2H，brs)，1.73-1.80(2H，m)，2.56(2H，t，J＝6.7Hz)，2.96(2H，t，J＝7.9Hz)，8.06(1H，s)，8.09(1H，s).CIMS(+)273[M+H]+。
100C)8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-氨甲酰的制备。
Figure GPA00001134722501531
将8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-羧酸(1.00g，2.96mmol)、氯甲酸乙酯(0.312mL，3.26mmol)和三乙胺(0.495mL，3.55mmol)在DMF(15mL)中的溶液在氩气气氛下冰冷搅拌2小时。向反应混合物添加25％NH3(1mL)水溶液并室温搅拌2小时。向该反应混合物添加水并用EtOAc萃取该粗产物，用盐水洗涤，用NaSO4干燥并真空去除溶剂。将沉淀物干燥得到成为淡黄色固体的8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-氨甲酰(186mg，81％)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.25-2.32(1H，m)，2.35-2.42(1H，m)，3.74(1H，d，J＝11.0Hz)，3.91-3.97(1H，m)，4.06-4.12(1H，m)，4.16(1H，d，J＝11.0Hz)，4.34(1H，d，J＝11.6Hz)，4.45(1H，d，J-11.6Hz)，7.41(2H，brs )，7.54(1H，d，J＝4.3Hz)，8.63(1H，s)，8.98(1H，d，J＝4.3Hz)。
100D)8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈的制备。
Figure GPA00001134722501541
向搅拌中的8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-氨甲酰(860mg，2.55mmol)和三乙胺(1.78mL，12.8mmol)的CH2Cl2(26mL)溶液在冰冷下添加磷酰氯(1.17g，7.65mmol)，并在室温下搅拌5小时。真空去除溶剂并向粗产物添加MeOH-H2O(1∶2，50mL)。搅拌30分钟后，过滤收集所得的沉淀物，用水洗涤并干燥得到成为淡黄色固体的8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈(683mg，84％)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.22-2.29(1H，m)，2.42-2.46(1H，m)，3.72(1H，d，J＝10.4Hz)，3.88(1H，td，J＝8.6，6.1Hz)，4.05(1H，d，J＝10.4Hz)，4.16-4.22(1H，m)，4.37(1H，d，J＝11.6Hz)，4.38(1H，d，J＝11.6Hz)，7.40(2H，brs)，8.46(1H，s)。
100E)8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(4，6-双三氟吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈的制备。
Figure GPA00001134722501542
将8′-氨基-9′，10-二氟-7′-氧螺环[草脲胺-3，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈(320mg，1.00mmol)、3-(4，6-双三氟甲基吡啶-2-基)丙胺(408mg，1.50mmol)和三乙胺(0.210mL，1.50mmol)在DMSO(5mL)中的溶液在100℃下搅拌6小时，然后在120℃下搅拌2小时。向反应混合物添加饱和NH4Cl水溶液至中和，用EtOAc萃取粗产物，用盐水洗涤，用NaSO4干燥，并真空去除溶剂。通过柱层析(己烷∶EtOAc 5∶1→1∶1)纯化该粗产物得到成为淡黄色固体的8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(4，6-双三氟吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈(387mg，68％)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.95-2.02(2H，m)，2.17-2.24(1H，m)，2.35-2.42(1H，m)，2.99(2H，t，J＝7.6Hz)，3.40-3.49(2H，m)，3.69(1H，d，J＝10.4Hz)，3.88(1H，td，J＝9.2，5.5Hz)，3.96(1H，d，J＝10.4Hz)，4.14-4.20(1H，m)，4.21(1H，d，J＝11.0Hz)，4.24(1H，d，J＝11.0Hz)，5.71-5.81(1H，m)，6.97(2H，brs)，8.07(1H，s)，8.10(1H，s)，8.24(1H，s)。
HRESIMS(+)572.15292(计算得到C25H21F7N5O3)。
实施例101-108：
通过采用上述步骤可制备实施例101-108的化合物：
Figure GPA00001134722501561
Figure GPA00001134722501562
Figure GPA00001134722501571
实施例109和110：
(+)-8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈和
(-)-8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈。
Figure GPA00001134722501572
通过采用Chiralpak IA柱
Figure GPA00001134722501573
并以流速为9mL/min的MeCN作为洗脱液(1小时)的制备性HPLC分离外消旋8′-氨基-9′-氟-7′-氧-10′-[3-(吡啶-2-基)丙基氨基]螺环[草脲胺-1，3′(2′H)-[7H]吡啶并[1，2，3-de][1，4]苯并噁嗪]-6′-腈(250mg)。UV检测器设置为254nm，注射环体积为5mL，注射量为34-36mg(含于MeCN溶液)。
实施例109；102mg，＞99％纯度，含＞99％e.e.(Chiralpak IA柱
Figure GPA00001134722501581
Figure GPA00001134722501582
MeCN，1mL/min，Rt＝13.6min)，[α]D 25+10.2(c 1.00，CHCl3)实施例110；107mg，＞99％纯度，含＞99％e.e.(Chiralpak IA柱
Figure GPA00001134722501583
MeCN，1mL/min，Rt＝34.35min)，[α]D 25-7.9(c 1.00，CHCl3)
实施例111-114：
a)3-(1-(羟乙基)环丙基氨基)-2-(2，3，4，5-四氟苯甲酰基)-丙烯酸乙酯
Figure GPA00001134722501584
将搅拌中的3-氧-3-(2，3，4，5-四氟苯基)丙酸乙酯(10.0g，37.8mmol)、乙酸酐(50mL)和原甲酸三乙酯(10.0mL，56.7mmol)的溶液在130℃下加热3小时。真空浓缩该混合物并高真空干燥5小时。将粗产物溶解于DCM(50mL)，然后在室温下逐滴添加1-氨基-1-环丙基甲醇(3.9g，45.3mmol)。1.5小时后，蒸发去除溶剂以得到成为黄色固体的标题化合物(9g)，其可不经进一步纯化用于下一步骤。MS(EP)m/z：362(M++1)。(计算得到C16H15F4NO4，361.29)
b)9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-羧酸乙酯
Figure GPA00001134722501585
将3-(1-(羟甲基)环丙基氨基)-2-(2，3，4，5-四氟-苯甲酰基)丙烯酸乙酯(300mg，0.83mmol)、K2CO3粉末(344mg，2.49mmol)和3ml无水DMF的混合物在CEMDiscover微波炉中200℃加热10分钟。然后将样品快速冷却至室温，得到深褐色液体。蒸发去除DMF得到黑色固体。将该固体溶解于50ml乙酸乙酯，并用10ml水洗涤两次。用Na2SO4干燥有机层得到成为浅黄色固体的标题化合物，其可不经进一步纯化用于下一步骤(133mg，0.415mmol)。MS(EP)m/z：322(M++1)。(计算得到C16H13F2NO4，321.28)
c)9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉--3，1′-环丙烷]-6-羧酸
Figure GPA00001134722501591
向9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-羧酸乙酯(1.3g，4mmol)在EtOH/水(50∶50v/v，55mL)中的溶液中添加K2CO3粉末(1.65g，12mmol)，将混合物回流加热2小时。去除溶剂至干燥。用2N乙酸将剩余的固体酸化至pH6。形成沉淀物并通过过滤收集，用水洗涤，然后干燥得到成为浅黄色固体的标题化合物(0.656g，2.24mmol)。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.29(2H，t)，1.8(2H，t)，4.56(2H，s)，7.84(1H，m)，8.51(1H，s)，14.3(1H，b).MS(EP)m/z：294(M++1)。(计算得到C14H9F2NO4，293.22)
d)9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-羧酸
Figure GPA00001134722501601
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-羧酸制备得到。MS(EP)m/z：339(M++1)。(计算得到Ci4H8F2N2O6，338.22)
e)9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-氨甲酰
Figure GPA00001134722501602
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-羧酸制备得到。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.32(2H，t)，1.7(2H，t)，4.58(2H，s)，7.66(1H，b)，8.46(1H，s)，8.59(1H，b).MS(EP)m/z：338(M++1)。(计算得到C14H9F2N3O5，337.24)。
f)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-氨甲酰
Figure GPA00001134722501603
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由9，10-二氟-8-硝基-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-氨甲酰制备得到。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.17(2H，t)，1.55(2H，t)，4.26(2H，s)，7.30(2H，b)，8.26(1H，s).MS(EP)m/z：308(M++1)。(计算得到C14H11F2N3O3，307.25)。
g)8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环丙烷]-6-氨甲酰制备得到。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ1.18(2H，t)，1.77(2H，t)，4.31(2H，s)，7.41(2H，b)，8.51(1H，s).MS(EP)m/z：290(M++1)。(计算得到C4H9F2N3O2，289.24)。
实施例111：
10-(3-(1H-吡唑-1-基)丙基氨基)-8-氨基-9-氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈
Figure GPA00001134722501612
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈和吡唑丙胺制备得到。1H-NMR(400MHz，DMSOd6)δ1.16(2H，t)，1.58(2H，t)，1.99(2H，m)，3.65(2H，m)，4.16(2H，s)，4.26(2H，m)，6.29(1H，s)，7.49(1H，s)，7.63(1H，s)，8.04(1H，s).MS(EP)m/z：395(M++1)。(计算得到C20H19FN6O2，394.40)。
实施例112：
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-3-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈
Figure GPA00001134722501621
将8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪-[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈(150mg，0.52mmol)、3-(吡啶-3-基)丙-1-胺(176mg，1.3mmol)和三乙胺(108μL，1.3mmol)的DMSO(3mL)溶液在120℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却并浓缩。将粗产物投入乙腈并通过制备性HPLC纯化得到成为黄色固体的该标题化合物(52.9mg)。MS(EP)m/z：406.2(M++1)。(计算得到C22H2OFN5O2，405.42).1H NMR(400MHz，D2O)δ1.20(2H，t)，1.50(2H，t)，2.00(2H，m，)，2.94(2H，m，)，3.51(2H，m)，4.14(2H，s)，7.86(1H，m)，8.03(1H，m)，8.41(1H，m)，8.52(1H，m)，8.58(1H，s)
实施例113：
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-2-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈
Figure GPA00001134722501631
将8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[[1，4]噁嗪-[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环丙烷]-6-腈(320mg，1.1mmol)、3-(吡啶-2-基)丙-1-胺(270mg，2mmol)和三乙胺(221μL，2.7mmol)的DMSO(8mL)溶液在120℃下搅拌15小时。将反应混合物分批加入水中，并用乙酸乙酯萃取。使用硫酸钠干燥有机层并真空浓缩。通过柱层析(乙酸乙酯至乙酸乙酯-MeOH 10∶1)纯化该干残留物得到成为黄色固体的标题化合物(76.9mg)。MS(EP)m/z：406.2(M++1)。(计算得到C22H2OFN5O2，405.42).1H NMR(400MHz，CD3OD)δ1.15(2H，t)，1.59(2H，t)，2.03(2H，t)，2.88(2H，t)，3.54(2H，m)，4.15(2H，s)，7.23(1H，m)，7.33(1H，m)，7.74(1H，m)，8.04(1H，s)，8.42(1H，m)
实施例114：
8-氨基-9-氟-7-氧-10-(3-(吡啶-4-基)丙基氨基)-2，7-二氢螺环[[1，4]-噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1′-环戊烷]-6-腈
该标题化合物可采用与上文实施例所述类似的合成步骤由8-氨基-9，10-二氟-7-氧-2，7-二氢螺环[1，4]噁嗪[2，3，4-ij]喹啉-3，1-环戊烷]-6-腈制备得到。
Figure GPA00001134722501632
MS(EP)m/z：434.2(M+1)。(计算得到C24H24FN5O2，433.49).1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.69(d，J＝6.5Hz，2H)，8.35(s，IH)，7.74(d，J＝6.2Hz，2H)，5.74(s，IH)，4.03(s，2H)，3.42-3.37(m，2H)，2.86-2.82(m，2H)，1.92-1.90(m，2H)，1.88-1.82(m，4H)，1.71-1.65(m，4H)
在Hep G2细胞中的糖原合成活性
Hep G2细胞由Japanese Collection of Research Bioresources得到，并在标准培养基(低糖Dulbecco改良的Eagle培养基(DMEM)，其含有10％胎牛血清，添加了100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素)中，在潮湿和5％CO2气氛下37℃生长。该Hep G2细胞以含1mM EDTA的0.25％胰蛋白酶溶液收获，并以1×105细胞/微孔接种在12孔板上。培养3天后，用磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤该细胞一次，并用添加了100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的无血清低糖DMEM孵育。培养3小时后，向该无血清低糖DMEM中添加不同浓度的本发明提供的化合物和2.5μCi/mL D-[2-3H]葡萄糖(PerkinElmer，Boston，MA，USA)。还使用DMSO(0.3％，终浓度)溶媒对照。每个微孔中反应介质的总体积为1.0mL无血清低糖DMEM。37℃下孵育3小时后，吸出该介质，用PBS洗涤细胞两次，添加含有0.4mg/mL载体糖原的0.25mL 1N KOH。37℃下孵育30分钟后，向每个微孔添加0.25mL 48.8％(w/v)KOH以溶解细胞。95℃下孵育30分钟后，向细胞溶解物添加1.5mL 95％(v/v)乙醇。总糖原在-20℃下沉淀过夜。通过4℃下19,000×g离心30分钟回收糖原沉淀物。将沉淀物用1mL 70％(v/v)乙醇洗涤一次，并重悬浮于0.5mL水中。通过液体闪烁记数器(Packard Instrument Co.，Meriden，CT，USA)评估结合在糖原中的[3H]葡萄糖。
动物研究：口服葡萄糖耐量试验
雄性Crlj：CD1(ICR)小鼠由Charles River Laboratries Japan(YokOHama，日本)获得。所有的小鼠以标准饮食(Clea Japan，日本东京)喂养并任意饮水。在研究中遵守了所有针对动物管理和使用的制度准则。将测试化合物悬浮于0.3％羧甲基-纤维素钠盐(CMC-Na；Sigma，St.Louis，MO)中。禁食15-17小时后，向7周大的ICR小鼠口服施用所述测试化合物(3、10、30、100或300mg/kg)或溶媒(0.3％CMC-Na)。测试化合物处理后30分钟口服给用葡萄糖溶液(5g/kg)。在测试化合物处理前以及葡萄糖负荷后0、0.5、1和2小时后采用含EDTA·2K的毛细管从尾静脉采集血液样本。将血液样本2,500xg离心5分钟，将分离的血浆置于冰上，并在当天进行分析。血浆葡萄糖水平采用葡萄糖C II-测试(Wako Pure Chemical Industries，日本大阪)进行测定。将葡萄糖负荷后0.5和1小时的血浆葡萄糖水平的总和与溶媒处理比较，其结果以下降百分比表示。
在表1和2中，对GSK3β的IC50(nM)表示如下：A＜15；B＝16-60；C＝61-150；D＞150；ND＝无数据。
表1.示例性化合物及其活性。
Figure GPA00001134722501661
Figure GPA00001134722501671
Figure GPA00001134722501681
Figure GPA00001134722501691
Figure GPA00001134722501701
Figure GPA00001134722501731
Figure GPA00001134722501751
Figure GPA00001134722501761
Figure GPA00001134722501771
Figure GPA00001134722501781
Figure GPA00001134722501791
Figure GPA00001134722501801
表2.示例性化合物及其活性。
Figure GPA00001134722501811
犬呕吐研究
雄性比格犬由Japan Laboratory Animals Inc.(日本东京)获得。以标准饮食(Oriental Yeast，日本东京)喂养。任意进水。将测试化合物溶解于二甲亚砜(100mg/mL)，然后用50％聚乙二醇400稀释得到1、3和10mg/mL的浓度。经头静脉向犬静脉给用该化合物(0.1、0.3和1mg/kg，0.1mL/kg)。在给用后0.17、0.5、1、2和4小时从相对的头静脉采集血液样本至含EDTA-2K的真空管(VENOJECT II，Terumo，日本东京)并置于冰上。通过离心(2200xg，10min，4℃)分离血浆样本并在-20℃下贮存。将此血浆样本与2体积的含有内标的甲醇和乙腈(1∶1，v/v)混合物混合，并13400×g离心3分钟。用15％乙腈将上清液稀释20倍，将10-μL等份注入LC/MS/MS系统。在Waters Alliance 2795Separations Module(Waters Corp.，MA)上进行HPLC分离。以采用正离子对在MRM模式中具有电喷雾电离界面的Micromass Quattro Ultima Pt(Waters Corp.)测定质谱。
本研究中测试了如下化合物：
Figure GPA00001134722501821
在一些实施方案中，所述测试化合物显示了0.5-1小时范围内的T1/2。在一些实施方案中，所述测试化合物显示了3-7μm范围内的C10min。在一些实施方案中，在用所述测试化合物处理的犬中检查到了呕吐。
以上所述实施例的目的仅在于进行示范，本领域的技术人员采用不超出常规的试验将可以认识到、或能够确定具体化合物的许多等同物、材料和方法。所有这些等同都被认为涵盖在所主张的主题范围内且包含在所附权利要求书中。

Claims (36)

1.式(I)的化合物：
Figure FPA00001134722400011
或其药学上可接受的衍生物，其中
R2为氢或低级烷基；
R3为氢、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；
R3a为OH、烷氧基或NHR3b；
R3b为氢、NH2、OH或低级烷基；
R5a和R5b各自独立地为氢、低级烷基或芳烷基，其任选地被1至3个各自独立地选自Q0基团的取代基取代；其中Q0为卤素、氰基、硝基、NH2、烷基或烷氧基；
R6为卤素；
在每种情况下，Ra和X3独立地选自如下的(i)或(ii)：
(i)Ra为氢或低级烷基；且
X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基、取代或未取代的3-6元环亚烃基或取代或未取代的3-6元杂亚环基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；或者
(ii)Ra和X3与它们键合的氮原子一起可形成5至7元饱和或不饱和的环，该环任选地含有一个或多个O或S原子或者一个或多个额外的N原子；
Rb为-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)r-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；
Y1为键、O或NR7b；
Y2为键或O；
n为0或1；
r为0至2的整数；
R7为烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7任选地被1至5个取代基所取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7a为氢、烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7a任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7b为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基或稠合杂环基芳基，其中R7b任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
其中Q1为卤素、羟基、氧、硫代、氰基、硝基、叠氮基、巯基、甲酰基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、环烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳烷基硫代、杂芳烷基硫代、烷基亚硫酰基、环烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、杂芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、杂芳烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳烷基磺酰基、烷氧基磺酰基、芳氧基磺酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羟基磺酰基；
X1为O或NR8；
R8为氢或低级烷基；
X2为CH2、O、NR1或S；
R1为氢或低级烷基；
A为键或取代或未取代的C1-C2亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；
其中Q2为烷基或卤代烷基；
p为0或1；且
q为0至2的整数。
2.如权利要求1所述的化合物，其中R5a和R5b为氢。
3.如权利要求1或2所述的化合物，其中R2为氢。
4.如权利要求1-3任意一项所述的化合物，其中X1为O。
5.如权利要求1-4任意一项所述的化合物，其中Y1为键。
6.如权利要求1-5任意一项所述的化合物，其中R3为CN。
7.如权利要求1-5任意一项所述的化合物，其中R3为C(O)R3a。
8.如权利要求1-5任意一项所述的化合物，其中R3为C(NH)NHOH。
9.如权利要求1-5任意一项所述的化合物，其中R3为5-四唑基。
10.如权利要求7所述的化合物，其中R3a为OH。
11.如权利要求2所述的化合物，其中X1为O而R2为氢。
12.如权利要求1-11任意一项所述的化合物，其中Ra为氢。
13.如权利要求1-12任意一项所述的化合物，其中X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团，其中Q2为烷基或卤代烷基。
14.如权利要求1-13任意一项所述的化合物，其中A为取代或未取代的C1-C2亚烃基。
15.如权利要求14所述的化合物，其中A被1至4个Q2基团所取代，其中Q2为烷基或卤代烷基；且p为0。
16.如权利要求1-15任意一项所述的化合物，其中X2为CH2。
17.如权利要求1-15任意一项所述的化合物，其中X2为O。
18.如权利要求16所述的化合物，其中A为CH2；p为0而q为2。
19.如权利要求16所述的化合物，其中X1为O。
20.如权利要求1-19任意一项所述的化合物，其中R6为F。
21.如权利要求1所述的化合物，其具有式(Ia)：
Figure FPA00001134722400051
或其药学上可接受的衍生物，其中
R3为氢、CN、C(O)R3a、C(NH)NHOH或5-四唑基；
R3a为OH、烷氧基或NHR3b；
R3b为氢、NH2、OH或低级烷基；
R5a和R5b各自独立地为氢或低级烷基；
R6为卤素；
在每种情况下，Ra和X3独立地选自如下的(i)或(ii)：
(i)Ra为氢或低级烷基；且
X3为取代或未取代的C1-C3亚烃基、取代或未取代的3-6元环亚烃基或取代或未取代的3-6元杂亚环基，其中该取代基当存在时选自1至4个Q2基团；或
(ii)Ra和X3与它们键合的氮原子一起可形成5至7元饱和或不饱和的环，该环中任选地含有一个或多个O或S原子或者一个或多个额外的N原子；
Rb为-(CHR7a)nR7、-NR7bR7、-OR7、-S(O)l-R7、-NR7bCOY1R7或-Y2CONR7bR7；
Y1为键、O或NR7b；
Y2为键或O；
n为0或1；
l为0至2的整数；
R7为烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7a为氢、烷基、芳基、环烷基、杂环基、杂芳基、稠合杂环基芳基或稠合芳基杂环基，其中R7a任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
R7b为氢、烷基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基或稠合杂环基芳基，其中R7b任选地被1至5个取代基取代，每个取代基独立地选自Q1基团；
其中Q1为卤素、羟基、氧，硫代、氰基、硝基、叠氮基、巯基、甲酰基、羟基羰基、羟基羰基烷基、烷基、卤代烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂芳烷基、烷氧基、卤代烷氧基、环烷氧基、杂环氧基、芳氧基、杂芳氧基、芳烷氧基、杂芳烷氧基、烷基羰基、芳基羰基、杂芳基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、芳烷氧基羰基、未取代的或取代的氨基羰基、烷基羰氧基、芳基羰氧基、芳烷基羰氧基、烷氧基羰氧基、芳氧基羰氧基、芳烷氧基羰氧基、未取代的或取代的氨基羰氧基、未取代的或取代的氨基、烷基硫代、环烷基硫代、芳基硫代、杂芳基硫代、芳烷基硫代、杂芳烷基硫代、烷基亚硫酰基、环烷基亚硫酰基、芳基亚硫酰基、杂芳基亚硫酰基、芳烷基亚硫酰基、杂芳烷基亚硫酰基、烷基磺酰基、环烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、芳烷基磺酰基、杂芳烷基磺酰基、烷氧基磺酰基、芳氧基磺酰基、未取代的或取代的氨基磺酰基或羟基磺酰基；且
Q2为烷基或卤代烷基。
22.如权利要求21所述的化合物，其中R5a和R5b为氢。
23.如权利要求21或22所述的化合物，其中R3为CN。
24.如权利要求21或22所述的化合物，其中R3为C(O)R3a。
25.如权利要求21或22所述的化合物，其中R3为C(NH)NHOH。
26.如权利要求21或22所述的化合物，其中R3为5-四唑基。
27.如权利要求24所述的化合物，其中R3a为OH。
28.如权利要求21-27任意一项所述的化合物，其中Ra为氢。
29.一种化合物，其选自
Figure FPA00001134722400081
Figure FPA00001134722400091
Figure FPA00001134722400111
Figure FPA00001134722400121
Figure FPA00001134722400131
30.一种化合物，其选自
Figure FPA00001134722400141
31.包含如权利要求1-30任意一项所述化合物及药学上可接受的载体的药物组合物。
32.用于治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的方法，其包括施用如权利要求1-30任意一项所述的化合物。
33.如权利要求32所述的方法，其中所述GSK-3介导的疾病为糖尿病、与糖尿病相关的病症、阿耳茨海默氏病、帕金森氏症、进行性核上性麻痹、亚急性硬化性全脑炎帕金森氏综合征、脑炎后帕金森氏综合征、拳击手脑炎、关岛帕金森症-失智复合症、皮克氏病、皮层基底节变性、额颞痴呆、亨丁顿氏舞蹈症、AIDS相关的痴呆、肌萎缩性侧索硬化、多发性硬化、神经外伤性疾病、抑郁症、双相情感性精神障碍、类风湿性关节炎、炎症性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、败血病、胰癌、卵巢癌或骨质疏松症。
34.如权利要求1-30任意一项所述的化合物，其用于治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病。
35.如权利要求1-30任意一项所述的化合物在制备用于治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的药物中的用途。
36.一种制造物品，其包含包装材料，包含在该包转材料中的可用于治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的权利要求1-30任意一项所述的化合物或其药学上可接受的衍生物，以及说明该化合物或其药学上可接受的衍生物被用于治疗、预防或改善GSK-3介导的疾病的标签。
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CN (2) CN101855229A (zh)
BR (1) BRPI0816814B1 (zh)
CA (1) CA2699152C (zh)
HK (1) HK1163060A1 (zh)
MX (1) MX2010002662A (zh)
WO (1) WO2009035684A1 (zh)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2371800T3 (es) * 2007-09-11 2012-01-10 Kyorin Pharmaceutical Co.,Ltd. Cianoaminoquinolonas como inhibidores de gsk-3.
BRPI0816814B1 (pt) 2007-09-12 2021-08-31 Kyorin Pharmaceutical Co. Ltd Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
DE102008035552A1 (de) * 2008-07-30 2010-02-04 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Substituierte Pyridine und ihre Verwendung
WO2010104205A1 (en) * 2009-03-11 2010-09-16 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 7-cycloalkylaminoquinolones as gsk-3 inhibitors
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
AU2011289407B2 (en) 2010-08-11 2015-06-18 Philadelphia Health & Education Corporation Novel D3 dopamine receptor agonists to treat dyskinesia in Parkinson's disease
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2760862B1 (en) 2011-09-27 2015-10-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
JP6334529B2 (ja) 2012-08-07 2018-05-30 バジリア ファルマスーチカ アーゲーＢａｓｉｌｅａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａ ＡＧ イサブコナゾールまたはラブコナゾールの製造方法
US20220133740A1 (en) 2019-02-08 2022-05-05 Frequency Therapeutics, Inc. Valproic acid compounds and wnt agonists for treating ear disorders

Family Cites Families (120)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES206819A1 (es) 1952-12-17 1953-06-01 Moreno Rodriguez Juan Maquina punzadora perfeccionada de taladro multiple
US3536809A (en) 1969-02-17 1970-10-27 Alza Corp Medication method
US3598123A (en) 1969-04-01 1971-08-10 Alza Corp Bandage for administering drugs
GB1429184A (en) 1972-04-20 1976-03-24 Allen & Hanburys Ltd Physically anti-inflammatory steroids for use in aerosols
US4044126A (en) 1972-04-20 1977-08-23 Allen & Hanburys Limited Steroidal aerosol compositions and process for the preparation thereof
US3845770A (en) 1972-06-05 1974-11-05 Alza Corp Osmatic dispensing device for releasing beneficial agent
US3916899A (en) 1973-04-25 1975-11-04 Alza Corp Osmotic dispensing device with maximum and minimum sizes for the passageway
US4008719A (en) 1976-02-02 1977-02-22 Alza Corporation Osmotic system having laminar arrangement for programming delivery of active agent
US4328245A (en) 1981-02-13 1982-05-04 Syntex (U.S.A.) Inc. Carbonate diester solutions of PGE-type compounds
US4410545A (en) 1981-02-13 1983-10-18 Syntex (U.S.A.) Inc. Carbonate diester solutions of PGE-type compounds
US4409239A (en) 1982-01-21 1983-10-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Propylene glycol diester solutions of PGE-type compounds
JPS591489A (ja) 1982-06-29 1984-01-06 Dai Ichi Seiyaku Co Ltd ピリドベンゾオキサジン誘導体
US4822801A (en) 1984-07-20 1989-04-18 Warner-Lambert Company 4-oxo-1,4-dihydroquinoline-3-carboxylic acid derivative as antibacterial agents
KR890002631B1 (ko) 1984-10-04 1989-07-21 몬산토 캄파니 생물학적으로 활성인 소마토트로핀을 지속적으로 유리하는 조성물
IE58110B1 (en) 1984-10-30 1993-07-14 Elan Corp Plc Controlled release powder and process for its preparation
JPS6253987A (ja) 1985-05-24 1987-03-09 Tokyo Tanabe Co Ltd ベンゾ〔ｉｊ〕キノリジン−２−カルボン酸化合物、その製造法及びそれを有効成分とする抗菌剤
DE3522406A1 (de) 1985-06-22 1987-01-02 Bayer Ag Verfahren zur herstellung von 1,8-verbrueckten 4-chinolon-3-carbonsaeuren
DE3522405A1 (de) 1985-06-22 1987-01-02 Bayer Ag 1,8-verbrueckte 4-chinolon-3-carbonsaeuren, verfahren zu ihrer herstellung sowie diese enthaltende arzneimittel und ihre verwendung zur herstellung von arzneimitteln
US4772706A (en) 1986-01-13 1988-09-20 Warner-Lambert Company Process for quinoline-3-carboxylic acid antibacterial agents
JPH089597B2 (ja) 1986-01-21 1996-01-31 杏林製薬株式会社 選択毒性に優れた８‐アルコキシキノロンカルボン酸およびその塩並びにその製造方法
JPS62198685A (ja) 1986-02-26 1987-09-02 Kyorin Pharmaceut Co Ltd キノロンカルボン酸誘導体及びその製造方法
ZW16387A1 (en) 1986-09-12 1988-05-25 Hoffmann La Roche Tricyclic compounds
JPH0696545B2 (ja) 1986-12-08 1994-11-30 宇部興産株式会社 ３，５，６−トリフルオロ−４−ヒドロキシフタル酸の製造法
US5033252A (en) 1987-12-23 1991-07-23 Entravision, Inc. Method of packaging and sterilizing a pharmaceutical product
US5052558A (en) 1987-12-23 1991-10-01 Entravision, Inc. Packaged pharmaceutical product
JPH0228178A (ja) 1988-04-23 1990-01-30 Toyama Chem Co Ltd 新規なピリドンカルボン酸誘導体およびその塩並びにそれらの製造法
US5073543A (en) 1988-07-21 1991-12-17 G. D. Searle & Co. Controlled release formulations of trophic factors in ganglioside-lipsome vehicle
US5612059A (en) 1988-08-30 1997-03-18 Pfizer Inc. Use of asymmetric membranes in delivery devices
CA2001203C (en) 1988-10-24 2001-02-13 Thomas P. Demuth, Jr. Novel antimicrobial dithiocarbamoyl quinolones
IT1229203B (it) 1989-03-22 1991-07-25 Bioresearch Spa Impiego di acido 5 metiltetraidrofolico, di acido 5 formiltetraidrofolico e dei loro sali farmaceuticamente accettabili per la preparazione di composizioni farmaceutiche in forma a rilascio controllato attive nella terapia dei disturbi mentali organici e composizioni farmaceutiche relative.
US5153203A (en) 1989-03-30 1992-10-06 Wakunaga Seiyaku Kabushiki Kaisha Quinolone derivatives and salts thereof, preparation processes thereof, and antibacterial agents containing the same
PH30995A (en) 1989-07-07 1997-12-23 Novartis Inc Sustained release formulations of water soluble peptides.
JP2884094B2 (ja) 1989-10-20 1999-04-19 富山化学工業株式会社 新規なピリドンカルボン酸またはその塩の可溶化法
US5120548A (en) 1989-11-07 1992-06-09 Merck & Co., Inc. Swelling modulated polymeric drug delivery device
US5585112A (en) 1989-12-22 1996-12-17 Imarx Pharmaceutical Corp. Method of preparing gas and gaseous precursor-filled microspheres
IT1246382B (it) 1990-04-17 1994-11-18 Eurand Int Metodo per la cessione mirata e controllata di farmaci nell'intestino e particolarmente nel colon
US5733566A (en) 1990-05-15 1998-03-31 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Controlled release of antiparasitic agents in animals
FR2663336B1 (fr) 1990-06-18 1992-09-04 Adir Nouveaux derives peptidiques, leur procede de preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5543390A (en) 1990-11-01 1996-08-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University Covalent microparticle-drug conjugates for biological targeting
US5580578A (en) 1992-01-27 1996-12-03 Euro-Celtique, S.A. Controlled release formulations coated with aqueous dispersions of acrylic polymers
NO304832B1 (no) * 1992-05-27 1999-02-22 Ube Industries Aminokinolonderivater samt middel mot HIV
US5323907A (en) 1992-06-23 1994-06-28 Multi-Comp, Inc. Child resistant package assembly for dispensing pharmaceutical medications
TW333456B (en) 1992-12-07 1998-06-11 Takeda Pharm Ind Co Ltd A pharmaceutical composition of sustained-release preparation the invention relates to a pharmaceutical composition of sustained-release preparation which comprises a physiologically active peptide.
US5591767A (en) 1993-01-25 1997-01-07 Pharmetrix Corporation Liquid reservoir transdermal patch for the administration of ketorolac
US5430152A (en) 1993-02-16 1995-07-04 Hoechst Celanese Corporation Method for preparing quinoline carboxylic acids and derivatives thereof
US6274552B1 (en) 1993-03-18 2001-08-14 Cytimmune Sciences, Inc. Composition and method for delivery of biologically-active factors
US5985307A (en) 1993-04-14 1999-11-16 Emory University Device and method for non-occlusive localized drug delivery
US5523092A (en) 1993-04-14 1996-06-04 Emory University Device for local drug delivery and methods for using the same
US6087324A (en) 1993-06-24 2000-07-11 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
US6004534A (en) 1993-07-23 1999-12-21 Massachusetts Institute Of Technology Targeted polymerized liposomes for improved drug delivery
IT1270594B (it) 1994-07-07 1997-05-07 Recordati Chem Pharm Composizione farmaceutica a rilascio controllato di moguisteina in sospensione liquida
US5759542A (en) 1994-08-05 1998-06-02 New England Deaconess Hospital Corporation Compositions and methods for the delivery of drugs by platelets for the treatment of cardiovascular and other diseases
US5660854A (en) 1994-11-28 1997-08-26 Haynes; Duncan H Drug releasing surgical implant or dressing material
US6316652B1 (en) 1995-06-06 2001-11-13 Kosta Steliou Drug mitochondrial targeting agents
US5798119A (en) 1995-06-13 1998-08-25 S. C. Johnson & Son, Inc. Osmotic-delivery devices having vapor-permeable coatings
EP0835101B1 (en) 1995-06-27 2004-06-09 Takeda Chemical Industries, Ltd. Method of producing sustained-release preparation
TW448055B (en) 1995-09-04 2001-08-01 Takeda Chemical Industries Ltd Method of production of sustained-release preparation
JP2909418B2 (ja) 1995-09-18 1999-06-23 株式会社資生堂 薬物の遅延放出型マイクロスフイア
US6039975A (en) 1995-10-17 2000-03-21 Hoffman-La Roche Inc. Colon targeted delivery system
US5980945A (en) 1996-01-16 1999-11-09 Societe De Conseils De Recherches Et D'applications Scientifique S.A. Sustained release drug formulations
BR9707003A (pt) 1996-01-17 1999-07-20 Novo Nordisk As Composto processos para preparar o mesmo para tratamento ou de prevenção de doenças do sistema endócrino e para a manufatura de medicamento coposção farmacêutica e utilização de um composto
TW345603B (en) 1996-05-29 1998-11-21 Gmundner Fertigteile Gmbh A noise control device for tracks
US6264970B1 (en) 1996-06-26 2001-07-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained-release preparation
US6419961B1 (en) 1996-08-29 2002-07-16 Takeda Chemical Industries, Ltd. Sustained release microcapsules of a bioactive substance and a biodegradable polymer
BRPI9711437B8 (pt) 1996-08-30 2021-05-25 Novo Nordisk As derivados de glp-1
WO1998014179A1 (en) 1996-10-01 1998-04-09 Cima Labs Inc. Taste-masked microcapsule compositions and methods of manufacture
CA2217134A1 (en) 1996-10-09 1998-04-09 Sumitomo Pharmaceuticals Co., Ltd. Sustained release formulation
DE69730093T2 (de) 1996-10-31 2006-07-20 Takeda Pharmaceutical Co. Ltd. Zubereitung mit verzögerter Freisetzung
US6131570A (en) 1998-06-30 2000-10-17 Aradigm Corporation Temperature controlling device for aerosol drug delivery
WO1998023592A1 (fr) 1996-11-28 1998-06-04 Wakunaga Pharmaceutical Co., Ltd. Nouveaux derives d'acide pyridonecarboxylique ou leurs sels, et medicaments contenant ceux-ci en tant que principe actif
US6197350B1 (en) 1996-12-20 2001-03-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Method of producing a sustained-release preparation
IL142649A (en) 1996-12-31 2004-12-15 Reddy Research Foundation Azole derivatives
US5891474A (en) 1997-01-29 1999-04-06 Poli Industria Chimica, S.P.A. Time-specific controlled release dosage formulations and method of preparing same
US6120751A (en) 1997-03-21 2000-09-19 Imarx Pharmaceutical Corp. Charged lipids and uses for the same
US6060082A (en) 1997-04-18 2000-05-09 Massachusetts Institute Of Technology Polymerized liposomes targeted to M cells and useful for oral or mucosal drug delivery
DE19726167B4 (de) 1997-06-20 2008-01-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulin, Verfahren zu seiner Herstellung und es enthaltende pharmazeutische Zubereitung
EP1000066A1 (en) 1997-07-16 2000-05-17 Novo Nordisk A/S Fused 1,2,4-thiadiazine derivatives, their preparation and use
CO4970713A1 (es) 1997-09-19 2000-11-07 Sanofi Synthelabo Derivados de carboxamidotiazoles, su preparacion, composiciones farmaceuticas que los contienen
CN1055927C (zh) 1997-11-18 2000-08-30 中国科学院上海药物研究所 左旋氧氟沙星类似物的合成及其用途
TR200002059T2 (tr) 1998-01-16 2001-01-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Devamlı salınan bileşim, üretim yöntemi ve kullanımı.
US6350458B1 (en) 1998-02-10 2002-02-26 Generex Pharmaceuticals Incorporated Mixed micellar drug deliver system and method of preparation
US6613358B2 (en) 1998-03-18 2003-09-02 Theodore W. Randolph Sustained-release composition including amorphous polymer
US6048736A (en) 1998-04-29 2000-04-11 Kosak; Kenneth M. Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs
KR19990085365A (ko) 1998-05-16 1999-12-06 허영섭 지속적으로 약물 조절방출이 가능한 생분해성 고분자 미립구 및그 제조방법
US6221897B1 (en) 1998-06-10 2001-04-24 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Benzothiepine 1,1-dioxide derivatives, a process for their preparation, pharmaceuticals comprising these compounds, and their use
JP4533534B2 (ja) 1998-06-19 2010-09-01 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド グリコーゲンシンターゼキナーゼ３のインヒビター
DE19845405C2 (de) 1998-10-02 2000-07-13 Aventis Pharma Gmbh Arylsubstituierte Propanolaminderivate und deren Verwendung
GB9828640D0 (en) 1998-12-23 1999-02-17 Smithkline Beecham Plc Novel method and compounds
GB9900416D0 (en) 1999-01-08 1999-02-24 Alizyme Therapeutics Ltd Inhibitors
US6248363B1 (en) 1999-11-23 2001-06-19 Lipocine, Inc. Solid carriers for improved delivery of active ingredients in pharmaceutical compositions
US6271359B1 (en) 1999-04-14 2001-08-07 Musc Foundation For Research Development Tissue-specific and pathogen-specific toxic agents and ribozymes
AU3956900A (en) 1999-04-16 2000-11-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Substituted imidazoles, their preparation and use
CA2371271A1 (en) 1999-04-30 2000-11-09 Neurogen Corporation 9h-pyrimido[4,5-b]indole derivatives: crf1 specific ligands
GB9911863D0 (en) 1999-05-21 1999-07-21 Knoll Ag Therapeutic agents
CA2376919C (en) 1999-06-18 2008-11-04 Merck & Co., Inc. Arylthiazolidinedione and aryloxazolidinedione derivatives
ES2203498T3 (es) 1999-07-29 2004-04-16 Eli Lilly And Company Benzofurilpiperazinas: agonistas de receptor 5-ht2c de la serotonina.
EE200200095A (et) 1999-09-01 2003-04-15 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Sulfonüülkarboksamiidi derivaadid, nende kasutamine, ravim ja nende valmistamismeetod
SE9904108D0 (sv) 1999-11-15 1999-11-15 New Pharma Research Ab Nya föreningar
US6825353B2 (en) 2000-02-25 2004-11-30 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Process for producing quinolonecarboxylic acids and intermediates thereof
DK1277736T3 (da) 2000-04-28 2007-10-01 Asahi Kasei Pharma Corp Hidtil ukendte bicykliske forbindelser
AU5959201A (en) 2000-05-11 2001-11-20 Bristol Myers Squibb Co Tetrahydroisoquinoline analogs useful as growth hormone secretagogues
AU2001264977B2 (en) 2000-05-30 2005-04-14 Merck & Co., Inc. Melanocortin receptor agonists
PT1299395E (pt) 2000-07-12 2005-01-31 Upjohn Co Oxazinoquinolonas uteis para o tratamento de infeccoes provocadas por virus
ATE306134T1 (de) 2000-07-21 2005-10-15 Phoenix Contact Gmbh & Co Überspannungsschutzeinrichtung
EP1305048A2 (en) 2000-08-01 2003-05-02 Wockhardt Limited Inhibitors of cellular efflux pumps of microbes
JP2004507502A (ja) 2000-08-30 2004-03-11 ファイザー・プロダクツ・インク 成長ホルモン分泌促進物質のための徐放性製剤
SE0101675D0 (sv) 2001-05-11 2001-05-11 Astrazeneca Ab Novel composition
US20040186131A1 (en) 2002-08-30 2004-09-23 Wathen Michael W Method of preventing or treating atherosclerosis or restenosis
US20040132764A1 (en) 2002-10-23 2004-07-08 Morphochem Aktiengesellschaft Fuer Kombinatorische Chemie Antibiotics for the treatment of infections in acidic environments
WO2004089930A1 (en) 2003-04-02 2004-10-21 Imclone Systems Incorporated 4-fluoroquinolone derivatives and their use as kinase inhibitors
JP4805139B2 (ja) 2003-04-30 2011-11-02 モルホケム アクツィエンゲゼルシャフト フューア コンビナートリッシュ ヒェミー 炭疽および他の感染を治療するためのオキサゾリジノン‐キノリンハイブリッド抗生物質の使用
ATE446951T1 (de) 2003-06-10 2009-11-15 Biondi Ricardo Miguel Verwendung einer verbingung gemäss formel i zur herstellung einer pharmazeutischen zubereitung
US7276608B2 (en) 2003-07-11 2007-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroquinoline derivatives as cannabinoid receptor modulators
EP1650192A4 (en) 2003-07-24 2007-03-21 Astellas Pharma Inc QUINOLONE DERIVATIVE OR SALT THEREOF
WO2005039485A2 (en) 2003-08-13 2005-05-06 Chiron Corporation Gsk-3 inhibitors and uses thereof
CN1183115C (zh) 2003-09-19 2005-01-05 中国医学科学院医药生物技术研究所 5-氨基-8-甲氧基喹诺酮羧酸类衍生物及其制法
US7402674B2 (en) 2004-01-31 2008-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh, 7-Phenylamino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
ES2427247T3 (es) 2006-03-13 2013-10-30 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. Aminoquinolonas como inhibidores de GSK-3
BRPI0816814B1 (pt) 2007-09-12 2021-08-31 Kyorin Pharmaceutical Co. Ltd Composto, composição farmacêutica e uso de um composto
WO2010104205A1 (en) 2009-03-11 2010-09-16 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 7-cycloalkylaminoquinolones as gsk-3 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
EP2203459A1 (en) 2010-07-07
US20140005184A1 (en) 2014-01-02
US20110034436A1 (en) 2011-02-10
BRPI0816814B1 (pt) 2021-08-31
HK1163060A1 (zh) 2012-09-07
AU2008299862A1 (en) 2009-03-19
CN102344457A (zh) 2012-02-08
US8476261B2 (en) 2013-07-02
KR101597841B1 (ko) 2016-02-26
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