BRPI0807023A2

BRPI0807023A2 - Composto de tiazol como ligante de ppard e produto farmacêutico, cosmético e alimento saudável dele composto

Info

Publication number: BRPI0807023A2
Application number: BRPI0807023-7A2A
Authority: BR
Inventors: Heonjoong Kang; Jae-Young Ko; Hoo-Sang Hwang
Original assignee: Seoul Nat Univ Ind Foundation
Priority date: 2007-01-08
Filing date: 2008-01-08
Publication date: 2014-04-22
Also published as: US8236831B2; KR20080065234A; US20100041723A1; RU2009130367A; CN101605769A; EP2104666A4; US20120197024A1; JP2010515724A; EP2104666A1; RU2444518C2; WO2008084962A1; US8431715B2; KR100954237B1; JP5367584B2

Description

"COMPOSTO DE TIAZOL COMO LIGANTE DE PPARÔ E PRODUTO FARMACÊUTICO, COSMÉTICO E ALIMENTO SAUDÁVEL DELE COMPOSTO".

Campo da Técnica

A presente invenção refere-se ao composto de tiazol representado pela

Fórmula 1 como ligante PPARô (Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma δ) que pode ser utilizado para o tratamento de obesidade, hiperlipidemia, arteriosclerose, diabete, demência, mal de Alzheimer e de Parkinson e utilizado para o fortalecimento de músculos ou melhoria da memória e uma composição

io farmacêutica, composição cosmética, alimento saudável, bebida saudável, aditivo alimentar e ração animal que o contém.

[Fórmula 1]

15

Antecedentes da Técnica

Dentre os receptores nucleares, sabe-se que PPAR (Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma) possui três subtipos, que são PPARa, PPARy e PPARÔ (Nature, 1990, 347, págs. 645-650, Proc. NatL Acad. ScL U. S. A., 1994, 91, 20 págs. 7335-7359). PPARa, PPARy e PPARô possuem funções específicas de tecido in vivo e diferentes regiões de expressão. PPARa é expresso principalmente no coração, rim, músculos do esqueleto e intestino grosso em seres humanos (Mol. Pharmacol. 1998, 53, págs. 14-22, ToxicoL Lett. 1999, 110, págs. 119-127, J. Biol. Chem. 1998, 273, págs. 16710-16714) e é envolvido na β-oxidação de peroxissoma 25 e mitocôndrias {Biol. CelL 1993, 77, págs. 67-76, J. Biol. Chem. 1997, 272, págs. 27307-27312). PPARy é expresso no músculo do esqueleto em um nível baixo, mas é principalmente expresso no tecido de adipose para induzir a diferenciação entre adipócitos e armazenar energia na forma de gordura e está envolvido na regulagem homeostática de insulina e glicose (Moll. Cell. 1999, 4, págs. 585-594, págs. 597- 609, págs. 611-617). PPARô é preservado evolutivamente em mamíferos que incluem seres humanos e vertebrados, incluindo roedores e ascídia do mar. Os estudos anteriores confirmaram que PPARô desempenha um papel importante na 5 expressão das células reprodutoras (Genes Dev. 1999, 13, págs. 1561-1574) e possui funções fisiológicas de células neuronais diferenciadoras (J. Chem. Neuroanat.

2000, 19, págs. 225-232) no sistema nervoso central (CNS) e cura de feridas com efeito anti-inflamatório (Genes Dev. 2001, 15, págs. 3263-3277, Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 2003, 100, págs. 6295-6296). Estudos recentes também confirmaram io que PPARô está envolvido na diferenciação de adipócitos e metabolismo de lipídios {Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 2002, 99, págs. 303-308, Mol. Cell. Biol. 2000, 20, págs. 5119-5128). PPARÔ ativa, por exemplo, a expressão de gene principal envolvido na β-oxidação em catabolismo de ácidos graxos e proteínas desacopladoras (UCPs), o gene envolvido no metabolismo de energia, que tem 15 como efeito o aumento da obesidade QNature 2000, 406, págs. 415-418, Cell 2003, 113, págs. 159-170). A ativação de PPARô aumenta o nível de HDL (Lipoproteína de Alta Densidade), melhora diabete do tipo 2 sem alterações de peso {Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 2001, 98, págs. 5306-5311, 2003, 100, págs. 15924-15929, 2006, 103, págs. 3444-3449) e favorece o tratamento de arteriosclerose inibindo o gene 20 associado à arteriosclerose (Science, 2003, 302, págs. 453-457). Ligante de PPARô pode, portanto, ser desenvolvido na forma de uma droga para o tratamento de doenças metabólicas, tais como obesidade, diabete, hiperlipidemia e arteriosclerose.

PPARô regula a biossíntese das mitocôndrias. Quando PPARô foi sobre-expresso artificialmente nos músculos de ratos, a biossíntese de mitocôndrias 25 aumentou e fibra muscular do Tipo I aumentou significativamente, além do aumento de β oxidase de ácidos graxos. O tempo de condução constante e a distância aumentaram respectivamente, portanto, em 67% e 92%, em comparação com ratos do tipo selvagem {PLoS Biology, 2004, 2: e294). O aumento da biossíntese de mitocôndrias possui um efeito positivo sobre a melhoria das funções cerebrais. 30 Caso a mitocôndria em células cerebrais seja destruída por tensão oxidativa, a memória é significativamente reduzida {Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 2002, 99, págs. 2356-2361). Demência, mal de Alzheimer e de Parkinson são as doenças degenerativas representativas, que demonstram redução significativa do aprendizado e da memória. O agente de proliferação das mitocôndrias de acordo com a presente 5 invenção não apenas contribui para o aprimoramento da memória, portanto, mas pode também ser desenvolvido como um agente terapêutico para mal de Alzheimer e de Parkinson.

Os ligantes de PPARô sintéticos desenvolvidos até aqui possuem menos seletividade, em comparação com outros ligantes de PPARa e PPARy. O io ligante seletivo precoce foi L-631033, desenvolvido por Merk {J. SteroidBiochem. Mol. Biol. 1997, 63, págs. 1-8), que foi produzido por meio da introdução de um grupo funcional que é capaz de fixar cadeia lateral com base na sua morfologia de ácidos graxos naturais. A mesma equipe de pesquisa relatou posteriormente o ligante mais eficaz L-165041 {J. Med. Chem. 1996, 39, págs. 2629-2654), no qual o 15 composto conhecido como agonista de leucotrieno está funcionando para ativar PPARô humano. Este composto exibiu grande seletividade para hPPARÔ, que é de dez vezes a seletividade para PPARa ou PPARy. A EC50 do composto foi de 530 nM. Outros ligantes L-796449 e L-783483 possuem afinidade aprimorada (EC50 7,9 nM), mas possuem pouca seletividade para outros subtipos de hPPAR.

A Glaxo-Smith-Kline relatou GW2433 {Chem. Biol. 1997, 4, págs.

909-918), o ativador de PPARa, que é um ligante do tipo Y que possui uma estrutura similar à estrutura de cristal do bolso ligante de PPARô. Ao contrário dos ligantes convencionais conhecidos até aqui, este ligante possui estrutura do tipo Y que contém anel de benzeno, que favorece a união espacial ao bolso ligante de 25 PPARô. Este ligante é, entretanto, um ligante ativo duplo que também possui atividade para hPPARa, o que sugere que a seletividade a PPARô é reduzida. O ligante seletivo de PPARô GW501516 (ácido [2-metil-4-[[[4-metil-2-[4- (trifluorometil)fenil]-l,3-tiazol-5-il]metil]sulfanil]fenóxi]acético), recentemente desenvolvido pela GlaxoSmithKline, exibe efeito fisiológico muito melhor que 30 qualquer outro ligante desenvolvido anteriormente {Proc. Natl. Acad. Sei. U. S. A. 2001, 98, págs. 5306-5311).

OH

GW501516

O GW501516 possui excelente afinidade (1 a 10 nM) para PPARô e

também excelente seletividade para PPARa ou PPARy, que é de pelo menos mil vezes a seletividade de ligantes anteriores.

até o momento resultou apenas, entretanto, de 30 a 40% do total de bolsos de união de ligantes.

WO 2001/00603, depositada pelo grupo Glaxo, descreve o composto io representado pela fórmula A a seguir que contém o GW501516 como um ativador seletivo de PPARô. Esse relatório descritivo inclui apenas, entretanto, uma parte dos resultados de teste de GW501516 utilizando modelo Rhesus.

CH2CH3).

O composto de tiazol representado pela fórmula B como ativador seletivo de PPARô foi descrito em WO 2002/62774 depositada pelo grupo Glaxo.

formula B

WO 2003/072100, depositada pela Eli Lilly, descreve uma composição farmacêutica para regulagem seletiva de PPARô que contém o composto representado pela fórmula C a seguir.

A atividade de PPARô induzida por todos os ligantes desenvolvidos

R1

formula A

(em que R5 é CF3 ou F, R” é H, CH3 ou Cl e R’” é H, CH3 ou sm F3C

,0

OH

formula C

Problema da Técnica

O relatório descritivo declara apenas, entretanto, que a composição foi

preparada e que é produzida na forma de racemato, não como um isômero ótico que

espectrometria de massa do racemato produzido, o que é confirmado por meio de

seletividade para PPARô dentre compostos racêmicos do derivado de tiazol descrito em WO 2003/072100. O objeto da presente invenção é, portanto, o de fornecer o composto oticoativo que possui alta seletividade para PPARô e uma composição farmacêutica, uma composição cosmética funcional e uma composição de alimento 15 saudável e ração animal que contém o composto oticoativo do derivado de tiazol. Descrição da Invenção

A presente invenção refere-se ao composto de tiazol representado pela Fórmula 1 como ligante PPARô (Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma ô) que pode ser utilizado para o tratamento de obesidade, hiperlipidemia, arteriosclerose, 20 diabete, demência, mal de Alzheimer e de Parkinson e para o fortalecimento de músculos ou melhoria da memória e uma composição farmacêutica, composição cosmética, composição de alimento saudável e ração animal que o contém.

[Fórmula 1]

compreende dois tipos. O documento descreve apenas valor M++1 de

NMR H e age como um ativador seletivo de PPARô, mas não menciona o efeito farmacológico como um ativador seletivo de PPARô.

Solução Técnica

10

Os inventores do presente prepararam um composto oticoativo que possui

OH WO 2003/072100 descreve o composto de tiazol representado pela Fórmula C. O documento descreve apenas, entretanto, valor M++1 de espectrometria

como um ativador seletivo de PPARô, mas não menciona o efeito farmacológico como um ativador seletivo de PPARô.

ío representado pela Fórmula 1, o isômero ótico ativo do composto racêmico da Fórmula C, possui alta atividade seletiva para PPARô, mas o isômero de forma S representado pela Fórmula 2 exibe atividade significativamente reduzida para

Desta forma, o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção é considerado uma invenção seletiva de WO 2003/072100.

O composto representado pela Fórmula 1 da presente invenção pode ser preparado por meio da fórmula de reação 1 a seguir:

Fórmula de Reação 1

de massa do racemato produzido, o que é confirmado por meio de NMR 1FI e age

formula C

O composto da fórmula C acima contém um carbono quiral e, portanto, existem seus estereoisômeros.

A presente invenção confirmou que o isômero de forma R

PPARÔ.

[Fórmula 2]

15 , // W [process Α-2] χι_(/ γ OMgX -----------·►' ■—('

4

A

[process Α-1]

// \\

OH

Li—>—OMgX1 5

[process Α]

[process Α-4]

=\ /sV^X3 Ν"

ρ3°Λ /)~^ - L

y

F3CWT^S^0H

[process Β]

[process C]

10

Λ //

S^>0R1

[process E]

[process F]

O [process G] /^X /S

OH

13

(em que R é um grupo protetor de fenol, que pode ser alquila CrC4 inferior, alila, alquilsilila, alquilarilsilila ou tetra-hidropiranila; R2 é um grupo protetor de ácido carboxílico que contém alquila CrC4 ou alila; X1 é um átomo de

2 3

bromo ou átomo de iodo; XeX são independentemente um átomo de cloro, átomo de bromo, átomo de iodo ou grupo residual que possui reatividade com substituição nucleofílica). É descrito em detalhes a seguir o método de preparação de acordo com a presente invenção. As descrições a seguir não podem limitar, entretanto, o escopo nem o espírito da presente invenção.

Processo A — Preparação do composto representado pela fórmula 8 Para preparar o composto representado pela Fórmula 8, 4-halo-2-

metilfenol, o composto representado pela Fórmula 3, foi tratado com reagente Grignard para proteger o grupo fenol, sem um processo de separação independente, reagiu com um reagente metálico orgânico e S em etapas e finalmente reagiu com o composto representado pela Fórmula 7. Este processo possui quatro etapas de io subreação realizadas em seqüência.

As etapas de subreação são descritas em detalhes a seguir.

Processo A-1: O solvente anidrido utilizado neste processo é selecionado a partir do grupo que consiste de solventes isolados, tais como dietiléter, tetra-hidrofuran, hexano e heptano, e solventes misturados que 15 compreendem pelo menos dois destes solventes. É de maior preferência selecionar dietiléter, tetra-hidrofuran ou o solvente misturado que compreende dietiléter e tetra- hidrofuran como o solvente anidrido.

O reagente Grignard utilizado no presente pode ser selecionado a partir do grupo que consiste de metila, etila, rc-propila, wo-propila, «-butila, cloreto de seobutilmagnésio (R2MgCl) e brometo de alquilmagnésio (R2MgBr). Dentre estes, é de preferência superior cloreto de wo-propilmagnésio ((CIi3)2CHMgCl).

A temperatura de reação depende de um solvente, mas é geralmente definida em -20 a 40 0C e, preferencialmente, em 0 0C à temperatura ambiente (25 °C). O tempo de reação depende da temperatura de reação e um solvente, mas geralmente é de dez a sessenta minutos e, preferencialmente, de dez a trinta minutos.

Processo A-2 e Processo A-3: O reagente metálico orgânico utilizado para substituição de halogênio e lítio pode ser selecionado a partir do grupo que consiste de n-butil lítio, sec-butil lítio e terc-butil lítio. Dentre estes compostos, terc-butil lítio é de preferência superior. Prefere-se S com partículas finas, que são adicionadas diretamente em

um solvente.

A temperatura de reação depende de um solvente, mas é geralmente definida em -78 a 25 °C. A temperatura de reação para substituição de halogênio e 5 metal é preferencialmente de -75 0C e a temperatura para introdução de S é de -75 0C à temperatura ambiente (25 °C). A reação de substituição de halogênio e metal leva de dez a trinta minutos e a reação de introdução de S leva de trinta a noventa minutos.

Processo A-4: 5-Halogênio metil-4-metil-2[4-

(trifluorometil)fenil]tiazol, o composto representado pela Fórmula 7 utilizado neste processo, foi preparado por meio do método conhecido (WO 03/106442). O halogênio do composto representado pela Fórmula 7 é selecionado a partir do grupo que consiste de cloro, bromo e iodo. Dentre estes, cloro é o de preferência superior.

A temperatura de reação depende de um solvente, mas é geralmente definida em -78 a 25 0C e, preferencialmente, em OalO °C. O tempo de reação é geralmente de dez a 120 minutos e, preferencialmente, de dez a sessenta minutos.

Processo B - Preparação do composto representado pela Fórmula 9

Para preparar o composto representado pela Fórmula 9, o composto representado pela Fórmula 8 é preferencialmente reagido com o composto geralmente utilizado como grupo protetor fenol na presença de base.

O solvente polar aprótico utilizado neste processo é selecionado a partir do grupo que consiste de AyV-dimetilformamida, A^N-dimetilacetamida, silfóxido de dimetila, acetonitrila, acetona, acetato de etila, tetracloreto de carbono, clorofórmio e diclorometano. O éter do presente pode ser selecionado a partir do 25 grupo que consiste de tetra-hidrofuran, dioxano, dimetoxietano, dietilenoglicoldimetil éter e trietilenoglicoldimetil éter. O hidrocarboneto aromático é exemplificado por benzeno, tolueno e xileno. Como um solvente do presente, o solvente polar aprótico é preferido e, particularmente, são de maior preferência N,N- dimetilformamida, clorofórmio ou diclorometano. A base do presente é amina, incluindo piridina, trietilamina, imidazol e N,Af-dimetilaminopiridina. Para a reação de grupo protetor eterificado por alquila ou alila, são utilizadas bases tais como hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato de sódio e carbonato de potássio. Particularmente, são de maior preferência imidazol e carbonato de potássio.

Haleto de alquilsilila ou haleto de alquilarilsilila é utilizado como o grupo protetor silila e 3,4-di-hidro-2//-pirano é utilizado como o grupo protetor de tetra-hidropiranila.

A temperatura de reação depende de um solvente, mas é geralmente definida em -10 a 80 0C e, de maior preferência, em 0 0C à temperatura ambiente (25 0C). O tempo de reação depende da temperatura de reação e de um solvente, mas geralmente leva de uma hora a um dia. E de maior preferência terminar a reação em até quatro horas.

Processo C - Preparação do composto representado pela Fórmula 10 Para preparar o composto representado pela Fórmula 10, próton α de

tioéter do composto representado pela Fórmula 9 é tratado com um álcali forte para gerar um nucleófilo, que reage com vários eletrófílos.

O solvente anidrido utilizado neste processo é selecionado a partir do grupo que consiste de solventes isolados, tais como dietiléter, tetra-hidrofuran, 20 hexano e heptano, e solventes misturados que compreendem pelo menos dois destes solventes. E de maior preferência selecionar dietiléter, tetra-hidrofuran ou o solvente misturado que compreende dietiléter e tetra-hidrofuran como o solvente anidrido.

O álcali forte utilizado para a extração de prótons α é selecionado a partir do grupo que consiste de terc-butóxido de potássio (t-BuOK), di-isopropil amida de lítio (LDA), «-butil lítio, sec-butil lítio e terc-butil lítio e, dentre estes compostos, di-isopropil amida de lítio (LDA) é de preferência superior.

O eletrófilo reagido com o nucleófilo de tioéter é haleto de benzila.

A temperatura de reação depende de um solvente, mas é geralmente de -78 a 25 °C. E de maior preferência realizar a reação de extração de prótons α na presença de um álcali forte a -75 °C, em que é adicionado um eletrófilo. Em seguida, a temperatura é elevada lentamente à temperatura ambiente (25 °C). O tempo de reação difere entre cada etapa de reação. A extração de prótons α por um álcali forte leva, por exemplo, de dez a trinta minutos e a reação com eletrófilo leva de trinta a noventa minutos.

Processo D - Preparação do composto representado pela Fórmula 11

O composto representado pela Fórmula 11 é obtido por meio de eliminação do grupo protetor de fenol do composto representado pela Fórmula 10.

O solvente polar utilizado neste processo é selecionado a partir do io grupo que consiste de AyV-dimetilformamida, A^V-dimetilacetamida, silfóxido de dimetila, acetonitrila, acetona, acetato de etila, tetracloreto de carbono, clorofórmio e diclorometano. O éter do presente pode ser selecionado a partir do grupo que consiste de tetra-hidrofuran, dioxano, dimetoxietano e dietilenoglicoldimetil éter. O álcool pode ser metanol ou etanol. O hidrocarboneto aromático é exemplificado por 15 benzeno, tolueno e xileno. Como um solvente do presente, o solvente polar é preferido e, particularmente, é de maior preferência tetra-hidrofuran.

Para eliminar o grupo protetor fenol, particularmente para eliminar grupo protetor metil, etil, terc-butil, benzil ou alil éter, utiliza-se iodeto de trimetilsilila, sal de sódio de álcool etanotioico, iodeto de lítio, haleto de alumínio, 20 haleto de boro ou ácido Lewis tal como ácido trifluoroacético e, para eliminar o grupo protetor silila tal como trimetilsilila, ferc-butildifenilsilila, tri-isopropilsilila e terc-butildimetililila, utiliza-se fluoreto tal como tetrabutilamonioflúor (Bu4N+F'), ácido de halogênio (ácido fluorídrico, ácido clorídrico, ácido bromídrico ou ácido iodídrico) ou fluoreto de potássio. Prefere-se a utilização de fluoreto para eliminar o 25 grupo protetor silila e, de maior preferência, utiliza-se fluoreto de tetrabutilamônio.

A temperatura de reação depende de um método e de um solvente, mas é geralmente de 0 a 120 0C e, preferencialmente, de 10 a 25 °C. O tempo de reação depende da temperatura de reação, mas geralmente leva de trinta minutos a um dia. E de maior preferência terminar a reação em até duas horas.

Processo E - Preparação do composto representado pela Fórmula 12 O composto é preparado por meio de separação do isômero R representado pela Fórmula 12 e um outro, isômero S, do composto racêmico da Fórmula 11. Esta separação é realizada por meio de HPLC utilizando uma coluna de fase normal quiral. Neste momento, o solvente é o solvente misturado que compreende solventes não polares, tais como hexano, heptano e pentano, e solventes polares, tais como etanol e álcool isopropílico.

Processo F - Preparação do composto representado pela Fórmula 13

Para preparar o composto representado pela Fórmula 13, o composto representado pela Fórmula 12 reage preferencialmente com alquil éster de halogenioacetato ou alil éster de halogenioacetato na presença de base.

O alquil éster de halogenioacetato ou alil éster de halogenioacetato é o composto geral que pode ser obtido facilmente. O halogênio no presente é exemplificado por átomo de cloro, átomo de bromo e átomo de iodo. Preferencialmente, utiliza-se metil éster de bromoacetato, alil éster de bromoacetato ou etil éster de bromoacetato como o alquil éster de halogenioacetato ou alil éster de halogenioacetato.

O solvente utilizado neste processo pode ser um único solvente solúvel selecionado a partir do grupo que consiste de Af,Af-dimetilformamida, N.N- dimetilacetamida, sulfóxido de dimetila, acetonitrila, acetona, etanol e metanol, ou uma mistura de solventes preparada por meio da mistura destes solventes com 1 a 10% de água. O solvente de preferência superior é uma mistura de solventes preparada por meio da mistura de acetona ou sulfóxido de dimetila com 1 a 5% de água.

A base utilizada neste processo não é limitada, desde que não apresente má influência sobre a reação, independentemente de ser forte ou fraca, o que é exemplificado por hidreto de metal álcali, tal como hidreto de sódio e hidreto de lítio, hidreto de metal alcalinoterroso tal como hidreto de potássio, hidróxido de metal álcali tal como hidróxido de sódio e hidróxido de potássio e carbonato de metal álcali, tal como carbonato de lítio, carbonato de potássio, bicarbonato de potássio e carbonato de césio. Dentre estes compostos, prefere-se carbonato de metal álcali e é de maior preferência carbonato de potássio.

A temperatura de reação não é limitada, mas é de até o ponto de ebulição de um solvente. Alta temperatura não é preferida, entretanto, para inibir as reações colaterais. A temperatura de reação preferível é de 0 a 60 °C. O tempo de reação depende da temperatura de reação, mas geralmente é de trinta minutos a um dia e, preferencialmente, de trinta a noventa minutos.

Processo G - Preparação do composto representado pela Fórmula 1

O composto representado pela Fórmula 1 é preparado a partir do io composto representado pela Fórmula 13 por meio da hidrólise de éster de ácido carboxílico do composto na solução misturada de sal inorgânico solúvel e álcool ou sais são preparados a partir de alil éster na presença de um catalisador de paládio.

O solvente utilizado neste processo é um solvente solúvel que pode ser misturado com água, tal como álcool, como metanol e etanol. O sal inorgânico 15 utilizado neste processo é uma solução aquosa preparada por meio da mistura de hidróxido de metal álcali, tal como hidróxido de lítio, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio, com água na concentração de 0,1 a 3 N, considerando o tipo de sal álcali de ácido carboxílico. O ácido utilizado para obter o composto representado pela fórmula 13 como uma forma de ácido carboxílico é 20 preferencialmente uma solução aquosa de ácido acético ou solução aquosa de 0,1 a

3 N ácido clorídrico.

A reação é preferencialmente realizada sob baixa temperatura, a fim de inibir reações colaterais, que é geralmente de 0 0C à temperatura ambiente. O tempo de reação depende da temperatura de reação, mas geralmente é de dez minutos a três horas e, de maior preferência, de trinta minutos a uma hora.

O sal farmaceuticamente aceitável do composto representado pela Fórmula 1 é preparado por meio da substituição com sal alil éster do composto representado pela Fórmula 13 utilizando catalisador paládio tetraquistrifenilfosfina e sal metálico de acordo com a fórmula de reação 2. O solvente utilizado neste processo é selecionado a partir do grupo que consiste de clorofórmio, tetracloreto de carbono, diclorometano, tetra-hidrofuran e acetato de etila. O catalisador utilizado neste processo é paládio tetraquistrifenilfosfina. O sal para a substituição de sal é 2- etil hexanoato de potássio ou 2-etil hexanoato de sódio.

seus solvatos e sais, que pode ser utilizado eficientemente como uma composição ativadora de Receptor Ativado por Proliferador de Peroxissoma δ (PPARô). Precisamente, o composto representado pela Fórmula 1 de acordo com a presente invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser muito eficazes como uma composição farmacêutica para o tratamento e prevenção de arteriosclerose ou hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (HDL); para o tratamento e prevenção de diabete; para o tratamento e prevenção de obesidade; para o fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; para o tratamento e prevenção de demência ou mal de Parkinson; e uma composição para suplementos alimentares saudáveis, bebidas saudáveis, aditivos alimentares e rações animais. O composto representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção podem ser utilizados para a composição cosmética funcional para a prevenção e melhoria de obesidade e para a composição cosmética funcional, para fortalecimento dos músculos e aumento da resistência. A composição cosmética funcional para fortalecimento dos músculos e aumento da resistência pode ser formulada como um unguento, loção, creme ou gel a ser aplicado sobre a parte do corpo antes ou depois do exercício e pode ser utilizada por longo prazo para causar o efeito desejado. O composto representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção podem ser formulados como unguento e aplicados

Fórmula de Reação 2

5

O composto que contém S resultante representado pela Fórmula 1 é um material muito importante como ligante de proteína PPARô.

A presente invenção inclui o composto representado pela Fórmula 1, sobre a parte do corpo para evitar ou tratar diabete ou úlcera do pé de diabéticos, denominada úlcera diabética.

A presente invenção também fornece uma composição ativadora de receptor ativado por proliferador de peroxissoma (PPAR) que contém o composto de tiazol representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis como um ingrediente ativo.

O sal farmaceuticamente aceitável do presente inclui todos os sais que são capazes de formar sais com ácido carboxílico do composto da fórmula 1 e íons de metais álcali e íons de metais alcalinoterrosos, que são exemplificados por Li+, io Na+, K+, Ca2+ etc.

A dose eficaz do composto representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a presente invenção pode ser determinada de acordo com o tipo de composto, método de administração, objeto alvo e doença alvo, mas é determinada com base no padrão médico convencional. A dose preferida do composto representado pela fórmula 1 é de 1 a 100 mg/kg (peso do corpo)/dia. A frequência de administração pode ser de uma ou várias vezes ao dia dentro da dosagem diária permitida. A composição de acordo com a presente invenção pode ser administrada oral ou parenteralmente e ser utilizada em formas gerais de formulação farmacêutica. A composição de acordo com a presente invenção pode ser formulada, por exemplo, na forma de pastilhas, pós, xaropes secos, pastilhas mastigáveis, grânulos, cápsulas, cápsulas moles, pílulas, bebidas, sublinguais etc. As pastilhas de acordo com a presente invenção podem ser administradas a pacientes por meio de um método ou trajeto que forneça a dose eficaz da pastilha com biodisponibilidade, que é a via oral. Além disso, o método ou trajeto de administração pode ser determinado de acordo com as características, estágios da doença alvo e outras condições. Quando a composição de acordo com a presente invenção for formada como pastilhas, ela pode incluir adicionalmente um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis. O conteúdo e as características do excipiente podem ser determinados pela solubilidade e propriedades químicas da pastilha selecionada, trajeto de administração e prática farmacêutica padrão. O composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção pode ser adicionado a suplementos alimentares saudáveis ou bebidas saudáveis para a prevenção ou melhoria de hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (HDL); para a prevenção e melhoria de diabete; para a prevenção e melhoria da obesidade; para fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; para a prevenção e melhoria de demência ou mal de Parkinson. Neste ponto, o conteúdo do composto nas bebidas e alimentos saudáveis pode ser ajustado de acordo com o propósito e aplicação. Além dos ingredientes mencionados acima, o composto representado pela Fórmula 1 de io acordo com a presente invenção pode incluir uma série de nutrientes, vitaminas, sais minerais (eletrólitos), aromas que incluem aromas naturais e aromas sintéticos, agentes corantes e extensores (queijo, chocolate etc.), ácido péctico e seus sais, ácido algínico e seus sais, ácido orgânico, amplificadores da viscosidade coloidais protetores, reguladores do pH, estabilizantes, antissépticos, glicerina, álcoois, carbonatadores que são utilizados para adição a soda etc.

Melhor Forma

Realizações práticas e atualmente preferidas da presente invenção são ilustradas conforme exibido nos Exemplos a seguir.

Apreciar-se-á, entretanto, que os técnicos no assunto, mediante consideração do presente relatório descritivo, podem realizar modificações e aprimoramentos dentro do espírito e escopo da presente invenção.

Exemplo 1 - Preparação do composto da Fórmula 8 (Processo A)

500 mg (2,14 mmol) de 4-iodo-2-metilfenol foram dissolvidos em 20 ml de tetra-hidrofuran anidro na presença de nitrogênio e, naquele momento, a 25 temperatura foi mantida em 0 °C. 1,1 ml de cloreto de isopropilmagnésio (2 M. solução em éter, 2,16 mmol) foram lentamente adicionados, seguidos por reação por dez minutos. A solução de reação foi resfriada a -78 °C, quando 2,77 ml de terc- butil lítio (1,7 M, solução em heptano, 4,70 mmol) foram adicionados lentamente. Após reação por vinte minutos, foram lentamente adicionados 69 mg de S (2,14 30 mmol), seguidos por reação adicional até que a temperatura do reagente atingisse 15 °C. Quarenta minutos mais tarde, 624 mg (2,14 mmol) de 5-clorometil-4-metil-2- [(4-trifluorometil)fenil]-tiazol representado pela Fórmula 7 foram dissolvidos em 2 ml de THF anidro, que foi adicionado lentamente à mesma temperatura. Após mais uma hora de reação, a reação foi encerrada por meio da adição de 20 ml de solução 5 de cloreto de amônio. A camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de magnésio. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna de sílica gel (hexano/acetato de etila = 3/1, v/v) para gerar 78 mg (rendimento: 86%) do composto alvo.

NMR 1H (300 MHz, CDCl3) δ 7,96 (d, 2H, J= 8,1 Hz), 7,65 (d, 2H, J

= 8,3 Hz), 7,19 (d, IH, J= 1,5 Hz), 7,01 (dd, IH, J= 8,2, 2,0 Hz), 6,62 (d, IH, J =

8.2 IIz), 5,86 (brs, IH), 4,07 (s, 2H), 2,19 (s, 3H), 2,12 (s, 3H).

NMR 13C (75,5 MHz, CDCl3) δ 163,9, 155,5, 151,7, 137,4, 136,9,

133,5, 131,9 (q, J = 32,6 Hz), 131,7, 126,8, 126,3, (q, J = 3,9 Hz), 125,8, 123,8, 115,7,33,2,16,2,14,8.

Exemplo 2 - Preparação do composto da Fórmula 9 (R1=I-BufCH^Si, Processo B) 500 mg (1,26 mmol) do composto 8 e 171 mg (2,52 mmol) de imidazol foram completamente dissolvidos em 5 ml de dimetilformamida. 209 mg (1,38 mmol) de cloreto de ferc-butildimetilsilila foram adicionados lentamente, seguidos por agitação à temperatura ambiente por quatro horas. Ao término da reação, o solvente orgânico foi extraído utilizando solução de cloreto de amônio e acetato de etila. A umidade da camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna de sílica gel (hexano/acetato de etila = 10/1, v/v) para gerar 610 mg (rendimento: 95%) do composto alvo.

NMR 1H (300 MHz, CDCl3): 7,97 (d, 2H, J= 8,1 Hz), 7,65 (d, 2H, J =

8.2 Hz), 7,19 (d, IH, J= 1,9 Hz) 7,07 (m, IH), 6,69 (d, IH, J= 8,3 Hz), 4,11 (s, 2H), 2,21 (s, 3H), 2,11 (s, 3H), 1,01 (s, 9H), 0,21 (s, 6H), NMR 13C (75,5 MHz, CDCl3): δ 163,2, 154,7, 151,5, 137,1, 136,6, 133,3, 132,4, 131,7, 131,2, 131,0, 130,2, 129,2, 126,6, 126,1, 126,06, 126,01, 125,9, 124,9, 119,4, 32,8, 25,9, 18,5, 16,9, 15,0, -4,0.

Exemplo 3 - Preparação do composto da Fórmula 10 (R^t-BuÇCHVbSK Processo

Q

300 mg (0,59 mmol) do composto (R1=I-Bu(CH3)2-) da Fórmula 9

preparados no Exemplo 2 foram dissolvidos em 5 ml de tetra-hidrofuran anidro na presença de nitrogênio e a temperatura foi reduzida para -78 0C. 619 μΐ (2,0 M, solução em éter, 1,24 mmol) de di-isopropil amida de lítio foram lentamente adicionados, seguidos por reação por dez minutos. Em seguida, foram adicionados ío 77 μΐ (0,65 mmol) de brometo de benzila à solução de reação, seguidos por agitação por trinta minutos à mesma temperatura (-78 0C). A reação foi encerrada por meio da adição de 5 ml de solução de cloreto de amônio. A umidade da camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna de 15 sílica gel (hexano/acetato de etila = 10/1, v/v) para gerar 265 mg (rendimento: 75%) do composto alvo.

NMR 1H (300 MHz, CDCl3): δ 7,97 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,65 (d, 2H, J = 8,2Hz), 7,03-7,26 (m, 7H) 6,63 (d, IH, J = 8,3 Hz), 4,51 (dd, IH, J= 9,8, 5,3 Hz), 3,37 (dd, IH, J= 9,8, 5,3 Hz), 3,05 (dd, IH, J= 13,6, 9,9 Fiz), 2,10 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 0,98 (s, 9H), 0,18 (s, 6H). NMR 13C (75 MHz, CDCl3): δ 163,5, 155,1, 151,8,

138.4, 137,7, 136,5, 133,5, 130,3, 129,3, 128,9, 127,2, 126,8, 126,7, 126,2, 126,1,

124.5, 119,4,49,2,44,4,26,1, 18,7, 17,1, 15,1,-3,81,-3,84.

Exemplo 4 - Preparação do composto da Fórmula 11 (Processo D)

200 mg (0,33 mmol) do composto (R1=I-Bu(CH3)2Si-) da Fórmula 10 preparados no Exemplo 3 foram dissolvidos em 5 ml de tetra-hidrofuran anidro na presença de nitrogênio. 660 μΐ (0,66 mmol) de fluoreto de tetrabutilamônio, solução

I M em tetra-hidrofuran, foram adicionados lentamente à temperatura ambiente, seguidos por agitação por uma hora. Ao término da reação, a camada orgânica foi separada por meio da adição de acetato de etila e água. A umidade da camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna de sílica gel (hexano/acetato de etila = 5/1, v/v) para gerar 146 mg (rendimento: 91%) do composto alvo.

NMR 1H (500 MHz, CDCl3): δ 7,92 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,50 (s, IH), 7,59 (d, 2H, J= 8,2Hz), 7,07-7,22 (m, 6H), 6,85(m, IH), 6,44 (d, IH, J= 8,2 Hz), 4,47 (dd, IH,J = 9,7, 5,4 Hz), 3,39 (dd, IH,J = 13,8, 5,4 Hz), 3,06 (dd, IH,J =

13,8, 9,8 Hz), 2,12 (s, 3H), 1,73 (s, 3H). NMR 13C (125 MHz, CDCl3): δ 164,1,

155,7, 151,2, 138,0, 137,9, 137,0, 136,4, 133,8, 131,8, 131,5, 129,0, 128,6, 127,2,

127,0, 126,6, 126,14, 126,11, 125,7, 125,0, 122,9, 122,7, 115,2, 60,8, 49,1, 43,7, 21,2, 15,9, 14,3, 14,2.

Exemplo 5 - Preparação do composto da Fórmula 12 (Processo E)

90 mg do composto da Fórmula 11 preparado no Exemplo 4 seguiu para coluna HPLC quiral semipreparada (Chiralpack AD-H) para gerar 45 mg do composto alvo representado pela Fórmula 12 em forma R e 45 mg do seu isômero correspondente em forma S.

Fase móvel: hexano/álcool isopropílico: 90/10 Velocidade de fluxo: 3 ml/min Exemplo 6 - Preparação do composto da Fórmula 13 (Processo F)

20 mg (0.04 mmol) do composto da Fórmula 12 preparado no 20 Exemplo 5 foram bem misturados com 10 ml de acetona contendo 5% de água e 127 mg (0,9 mmol, 2,3 equivalentes) de carbonato de potássio à temperatura ambiente. Foram adicionados 67 μΐ (0,6 mmol, 1,5 equivalentes) de etil éster de acetato de bromo, seguido por agitação vigorosa por quatro horas. Ao término da reação, o solvente orgânico foi extraído utilizando solução de cloreto de sódio e acetato de 25 etila, que foi seca sobre sulfato de magnésio para eliminar a umidade da camada orgânica. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna de sílica gel (hexano/acetato de etila = 5/1, v/v) para gerar 22 mg (rendimento: 95%) do composto alvo da Fórmula 13. NMR 1H (300 MHz5 CDCl3): 7,98 (d, 2Η, J = 8,1 Hz), 7,65 (d, 2H, J =

8,3 ΙΊζ), 7,06-7,27 (m, 7H), 6,55 (d, IH, J= 8,4 Hz), 4,59 (s, 2H), 4,53 (dd, IH, J =

9.7, 5,3 Hz), 4,22 (q, 2H, J= 7,1 Hz), 3,37 (dd, IH, J= 13,7, 5,3 Hz), 3,17 (m, IH) 2,20 (s, 3H), 1,83 (s, 3H), 1,26 (t, 3H, J= 1,2 Hz). NMR 13C (75 MHz, CDCl3):

169,1, 163,6, 156,9, 151,8, 138,3, 137,4, 137,3, 136,4, 133,4, 129,3, 128,9, 128,6,

127.2, 126,8, 126,3, 126,2, 126,1, 125,1, 111,8, 65,9, 61,7, 49,1, 44,4, 16,5, 15,1,

14,5.

Exemplo 7 - Preparação do composto da Fórmula 1 (Processo G)

20 mg (0,03 mmol) do composto da Fórmula 13 preparado no io Exemplo 6 foram bem misturados com 15 ml de etanol, aos quais foram adicionados 15 μΐ de 3 N solução de hidróxido de sódio. Após agitação à temperatura ambiente por vinte minutos, o pH da mistura de reação foi ajustado em 2,0 por meio de 2 N HCl. Realizou-se destilação a vácuo para eliminar etanol em cerca de 80%. O solvente orgânico foi extraído utilizando solução de cloreto de sódio e acetato de 15 etila. Após a filtragem, o solvente foi destilado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por meio de cromatografia de coluna LH-20 para gerar 16 mg (rendimento: 98%) do composto alvo da Fórmula 1.

NMR 1H (500 MHz, CDCl3): δ 7,92 (d, 2H, J= 8,2 Hz), 7,50 (s, IH), 7,59 (d, 2H, J= 8,2Hz), 7,07-7,22 (m, 6H), 6,85(m, IH), 6,44 (d, IH, J= 8,2 Hz), 4,47 (dd, IH,J = 9,7, 5,4 Hz), 3,39 (dd, IH, J= 13,8, 5,4 Hz), 3,06 (dd, IH, J =

13,8, 9,8 Hz), 2,12 (s, 3H), 1,73 (s, 3H). NMR 13C (125 MHz, CDCl3): δ 164,1,

155.7, 151,2, 138,0, 137,9, 137,0, 136,4, 133,8, 131,8, 131,5, 129,0, 128,6, 127,2,

127,0, 126,6, 126,14, 126,11, 125,7, 125,0, 122,9, 122,7, 115,2, 60,8, 49,1, 43,7,

21.2, 15,9, 14,3, 14,2.

Exemplo Experimental 1 - Teste de atividade e citotoxicidade

As atividades de PPARô do composto de forma R representado pela Fórmula 1 de acordo com a presente invenção e do composto de forma S representado pela Fórmula 2 foram medidas por meio do teste de transfecção. Além disso, foi examinada a seletividade para subtipos de PPAR, PPARa e PPARy. A citotoxicidade foi testada por meio de teste de MTT e a toxicidade e a atividade in vivo foram pesquisadas por meio de experimentação animal utilizando camundongos.

Teste de transfecção

Foram utilizadas células CV-I neste teste. As células foram inoculadas em uma placa com 96 cavidades contendo DMEM suplementado com 10% FBS, DPS (com lipídios retirados) e 1% penicilina/estreptomicina e cultivadas em um incubador de CO2 a 5% e 37 °C. O experimento foi realizado de acordo com as etapas de inoculação, transfecção, tratamento de amostras e confirmação. Particularmente, células CV-I foram inoculadas em uma placa com 96 cavidades io (5000 células/cavidade), seguidas por transfecção 24 horas mais tarde. DNA de plasmídeo de PPARs de comprimento total, DNA relator que confirma atividade de PPARs devido à sua atividade de luciferase, DNA de β-galactosidase que fornece informações sobre a eficiência de transfecção e reagente de transfecção foram utilizados para a transfecção. Os compostos da Fórmula 1 e da Fórmula 2 foram dissolvidos em sulfóxido de dimetila (DMSO) e tratados para as células por meios em concentrações diferentes. Após o cultivo das células no incubador por 24 horas, as células foram lisadas utilizando tampão de lise. A atividade de luciferase e a atividade de β-galactosidase foram medidas com luminômetro e um leitor de microplacas. Os valores obtidos de luciferase foram modificados pelos valores de β-galactosidase. Foi elaborado um gráfico com esses valores e foi calculada a EC50. Tabela 1

compound ECsoinM) PPARô PPARa PPARy f3cOínv^°m° formula 1 0.6 ia ia OH X) formula 2 5.1 ia ia OH Conforme exibido na Tabela 1, o composto representado pela fórmula

1 de acordo com a presente invenção é altamente seletivo para PPARô. O composto de tiazol da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção demonstrou seletividade cem mil vezes mais alta a PPARa e PPARy. EC5O do composto da Fórmula 1 para PPARô foi de 0,6 nM e EC50 do composto da Fórmula 2 para PPARô foi de 5,1 nM.

O isômero R, composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção, exibiu atividade dez vezes mais forte que o isômero S, composto da Fórmula 2. Os resultados acima indicam que o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção possui alta seletividade. io Teste de MTT

Foi realizado o teste de MTT para testar a citotoxicidade dos compostos de acordo com a presente invenção. MTT é uma substância amarela solúvel em água, mas, quando é introduzida em uma célula viva, ela se torna um cristal insolúvel púrpura por meio de desidrogenase em mitocôndrias. A 15 citotoxicidade pode ser confirmada medindo-se OD550 após a dissolução de MTT em sulfóxido de dimetila. O experimento foi realizado conforme segue.

Células CV-I foram inoculadas em uma placa com 96 cavidades (5000 células por cavidade). As células foram cultivadas em um incubador de CO2 a 5% a 37 0C por 24 horas e tratadas com os compostos da Fórmula 1 e da Fórmula 2 sob concentrações diferentes. Em seguida, as células foram cultivadas novamente por

24 horas, às quais adicionou-se reagente MTT. Após cultivo por quinze minutos, os cristais púrpura gerados foram dissolvidos em sulfóxido de dimetila. A densidade ótica foi medida com um leitor de microplacas para confirmar a citotoxicidade. Como resultado, confirmou-se que o composto representado pela Fórmula 1 de 25 acordo com a presente invenção e o composto representado pela Fórmula 2, seu isômero ótico, não possuem citotoxicidade, mesmo sob concentração de cem mil vezes o valor EC50.

Teste de Toxicidade

Foram realizados testes de toxicidade aguda e toxicidade reprodutiva utilizando camundongos para avaliar a toxicidade do composto de acordo com a presente invenção. O composto da Fórmula 1 foi administrado oralmente a camundongos ICR após seis semanas na dosagem de 50 mg/kg, 300 mg/kg e 2000 mg/kg, seguido por observação da toxicidade por quatorze dias. Como resultado, não ocorreu nenhuma morte segundo a admnistração do composto da Fórmula 1, 5 mesmo com a concentração mais alta de 2000 mg/kg, e também não foram observadas alterações significativas do peso e da ingestão de alimentos. Os resultados da autópsia não exibiram sinais anormais. O resultado do teste de toxicidade reprodutiva utilizando camundongos C57BL/6 também foi consistente com o acima, ou seja, não se observou toxicidade causada pelo composto da 10 Fórmula 1. Após a administração oral do composto à fêmea de camundongo prenha, foram pesquisados o ganho de peso e a velocidade de crescimento do feto. Como resultado, não foi observada nenhuma diferença significativa segundo a administração e nenhuma alteração do desenvolvimento ósseo e assuntos relacionados à doença.

Teste com animais

Efeito inibidor da obesidade

Um teste com animais utilizando camundongos foi realizado para confirmar o efeito in vivo do composto de acordo com a presente invenção. Foram utilizados camundongos C57BL/6 (SLC Co.) em quatorze semanas. Para induzir a 20 obesidade, foram fornecidas alimentações que contêm 35% de gordura. Ao fornecer-se essas alimentações com alto teor de gordura por 35 dias, foram administrados oralmente veículo, GW501516 (10 mg/kg/dia) e o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção (10 mg/kg/dia). Como resultado, apenas 26,5% do grupo tratado com GW501516 e 23,1% do grupo tratado com o 25 composto de acordo com a presente invenção exibiram aumento de peso, em comparação com o grupo tratado com veículo (58,9%), que sofreu um aumento de cerca de 1A em comparação com o grupo tratado com veículo. Confirmou-se, portanto, que o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção possui forte efeito inibidor da obesidade, com muito mais excelência que GW501516.

Efeito de melhoria da diabete Realizou-se GTT (teste de tolerância à glicose) para confirmar o efeito aprimorador da diabete do composto de acordo com a presente invenção. Glicose (1,5 g/kg) foi administrada por via intra-abdominal aos camundongos previamente tratados oralmente com amostras por 78 dias. A glicose do sangue foi medida de hora em hora. O nível de glicose no sangue em jejum foi mais baixo no grupo tratado com o composto de acordo com a presente invenção que no grupo tratado com veículo ou GW501516. O grupo tratado com o composto de acordo com a presente invenção exibiu rápida redução da glicose no sangue em vinte a quarenta minutos e a liberação de glicose em cem minutos. Neste meio tempo, o nível de ío glicose no sangue não foi recuperado para o normal no grupo tratado com veículo mesmo após 120 minutos. O grupo tratado com GW501516 exibiu nível mais baixo de glicose no sangue que o grupo tratado com veículo, mas o nível de glicose no sangue não se recuperou para o normal. Os resultados acima indicam que o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção apresentou excelente efeito de melhoria da diabete.

Efeito de melhoria da hiperlipidemia

Um teste com animais in vivo utilizando camundongos C57BL/6 (SLC Co.) com seis semanas foi realizado para confirmar o efeito de melhoria da hiperlipidemia do composto de acordo com a presente invenção. Os animais 20 receberam administração oral de 10 mg/kg/dia do composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção e GW501516 mediante alimentação com rações com alto teor de gordura. Seis semanas mais tarde, foi retirado sangue das veias orbitais. O soro foi separado e o nível de HDL do sangue foi medido por meio de um método bioquímico. Como resultado, o nível de HDL aumentou em 36,3% no grupo tratado 25 com GW501516, em comparação com o controle. O nível de FIDL aumentou em 44,6% no grupo tratado com o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção. Os resultados acima indicam que o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção aumenta o HDL do sangue mais eficientemente que GW501516.

Efeito inibidor da arteriosclerose Realizou-se teste com animais in vivo utilizando camundongos ApoE- /-, que é um modelo animal para arteriosclerose, para confirmar o efeito inibidor da arteriosclerose do composto de acordo com a presente invenção. Os animais receberam administração oral de 2 mg/kg/dia do composto da Fórmula 1 de acordo 5 com a presente invenção mediante alimentação com rações com alto teor de gordura e alto teor de colesterol (20% de gordura, 1,25% de colesterol; dieta AIN-93G). Vinte e oito dias depois, realizou-se mancha de placas ao longo de toda a artéria utilizando Sudan IV para investigar o efeito inibidor da arteriosclerose do composto por meio de comparação dos resultados entre grupos experimentais e controle. 10 Como resultado, inibiu-se 30% da arteriosclerose em camundongos ApoE-/- tratados com o composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção, em comparação com o controle.

Efeito aprimorador da função muscular e do fortalecimento da resistência muscular.

Foi realizado um teste com animal para confirmar o fortalecimento da

resistência muscular e o efeito aprimorador da função muscular da composição de acordo com a presente invenção. A maior parte dos músculos é gerada no estágio de desenvolvimento. Desta forma, o composto da Fórmula 1 (10 mg/kg/dia) foi administrado oralmente a fêmeas de camundongo prenhas no período de gravidez ou 20 lactação ou em ambos, gravidez e lactação. O ganho de peso e a taxa de crescimento não foram muito diferentes entre os fetos do grupo controle e do grupo em tratamento. Foram observados músculos após a remoção da pele. Como resultado, os músculos do grupo em tratamento eram vermelhos, ao contrário do controle. Foram realizadas manchas de ATPase e imunomanchas. Como resultado, 25 a fibra de músculo do tipo I aumentou no grupo tratado com o composto da Fórmula I. O efeito das alterações da fibra muscular no aprimoramento da resistência e da função muscular foi pesquisado utilizando o teste de esteira. Como resultado, o tempo de condução foi muito maior no grupo tratado com o composto da Fórmula 1.

Tabela 2 - Resultados do teste de resistência muscular

Taxa de aumento (grupo em gravidez lactação gravidez + lactação tratamento/ grupo tempo compr. tempo compr. tempo compr. controle) grupo de 2,3 2,4 2,1 2,2 2,9 vezes 3,0 vezes tratamento vezes vezes vezes vezes Ao administrar-se o composto de acordo com a presente invenção a adultos, também foram aprimoradas a resistência muscular e a função muscular. Particularmente, o composto da Fórmula 1 foi administrado oralmente a 5 camundongos C57BL/6 após dez semanas sob concentração de 10 mg/kg, durante as quais os camundongos foram forçados a exercitar-se. O exercício foi realizado com esteira por trinta minutos uma vez por dia por trinta dias, precisamente à velocidade de 2 m/min pelos primeiros cinco minutos, 5 m/min por cinco minutos, 8 m/min por cinco minutos e 20 m/min pelos últimos cinco minutos. Ao final, o efeito de io aprimoramento da resistência muscular e da função muscular foi testado utilizando esteira. Como resultado, o tempo (1,5 vezes) e a distância (1,6 vezes) de exercício foram todos aumentados no grupo tratado com o composto de acordo com a presente invenção, em comparação com o controle.

Aprimoramento da memória Realizou-se um teste com animais para pesquisar o efeito terapêutico

do composto de acordo com a presente invenção sobre a demência e o mal de Parkinson com base no seu efeito aprimorador da memória. Para confirmar o efeito do composto de acordo com a presente invenção no período de desenvolvimento do cérebro, o composto foi administrado oralmente a fêmeas de camundongo prenhas 20 sob concentração de 10 mg/kg nos períodos de gravidez e lactação. Foi realizado o teste de piscina Morris para detectar qualquer alteração das funções cerebrais do grupo em tratamento e do grupo controle. Como resultado, o tempo médio gasto para encontrar a plataforma foi muito mais curto no grupo tratado com o composto da Fórmula 1, em comparação com o grupo controle; precisamente, o grupo em 25 tratamento gastou 6,8 segundos para encontrar a plataforma e o grupo controle gastou 24,2 segundos, em média, o que sugere que o composto da Fórmula 1 apresentou um excelente efeito de aprimoramento da memória.

O efeito terapêutico do composto de acordo com a presente invenção sobre a demência e o mal de Parkinson com base no seu efeito aprimorador da memória foi pesquisado utilizando modelo animal de doença cerebral (camundongos C57BL/6 com dez semanas). Em primeiro lugar, injetou-se LPS no cérebro do camundongo para construir um modelo animal de doença cerebral. Os 5 camundongos foram divididos em quatro grupos de acordo com a administração e o exercício. O exercício foi realizado com esteira à velocidade de 2 m/min pelos primeiros cinco minutos, 5 m/min por cinco minutos, 8 m/min por cinco minutos e 20 m/min pelos últimos cinco minutos. Ao final, foi realizado o teste de piscina Morris. Os resultados encontram-se resumidos na Tabela 3. Como resultado, o 10 efeito terapêutico do composto da Fórmula 1 de acordo com a presente invenção sobre a demência e o mal de Parkinson por meio de aprimoramento da memória pelo composto e exercício foi confirmado no modelo animal de doença cerebral.

Tabela 3 - Resultados de teste de piscina

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Grupo de ex] perimento Resultados do teste de piscina grupo controle Exercício (X) 36 segundos Exercício (O) 29 segundos grupo de tratamento Exercício (X) 25 segundos Exercício (O) 13 segundos Aplicação industrial

O composto derivado de tiazol de acordo com a presente invenção como um ligante de PPARô, que possui significados seletivos a partir das invenções 20 anteriores, pode ser utilizado eficientemente como uma composição farmacêutica para o tratamento e prevenção de arteriosclerose ou hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (FIDL); para o tratamento e prevenção de diabete; para o tratamento e prevenção de obesidade; para o fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; para o tratamento e prevenção de 25 demência ou mal de Parkinson; e uma composição para suplementos alimentares saudáveis, bebidas saudáveis, aditivos alimentares, cosméticos funcionais e rações animais.

Claims

1. Composto de tiazol caracterizado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis. [Fórmula 1] <formula>formula see original document page 29</formula>

2. Composição farmacêutica para a prevenção e tratamento de arteriosclerose ou hiperlipidemia caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

3. Composição farmacêutica para aumentar o nível de lipoproteína de alta densidade (HDL) caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

4. Composição farmacêutica para a prevenção e tratamento de diabete caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

5. Composição farmacêutica para a prevenção e tratamento de obesidade caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

6. Composição farmacêutica para fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

7. Composição farmacêutica para a melhoria da memória ou para a prevenção e tratamento de demência ou mal de Alzheimer ou de Parkinson caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

8. Adjuvante alimentar saudável ou bebida saudável caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

9. Adjuvante alimentar saudável ou bebida saudável de acordo com a reivindicação8 é caracterizado pelo fato de que o adjuvante alimentar saudável ou bebida saudável é utilizada para a prevenção e melhoria de arterioesclerose ou hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (HDL); para a prevenção e melhoria de diabete; para a prevenção e melhoria da obesidade; para fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; e para a prevenção e melhoria de demência ou mal de Alzheimer ou de Parkinson.

10. Aditivo alimentar caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela Fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

11. Aditivo alimentar de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o aditivo alimentar é utilizado para a prevenção e melhoria de arteriosclerose ou hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (HDL); para a prevenção e melhoria de diabete; para a prevenção e melhoria da obesidade; para fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; e para a prevenção e melhoria de demência ou mal de Alzheimer ou de Parkinson.

12. Composição de ração animal caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

13. Composição de ração animal de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que a composição de ração animal é utilizado para a prevenção e melhoria de arteriosclerose ou hiperlipidemia; para aumento da lipoproteína de alta densidade (HDL); para a prevenção e melhoria de diabete; para a prevenção e melhoria da obesidade; para fortalecimento dos músculos ou aumento da resistência; para melhoria da memória; e para a prevenção e melhoria de demência ou mal de Alzheimer ou de Parkinson.

14. Composição cosmética funcional caracterizado por conter o composto de tiazol representado pela fórmula 1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.

15. Composição cosmética funcional de acordo com a reivindicação 14, caracterizado em que a composição cosmética funcional é utilizada para a prevenção e melhoria de obesidade e para o fortalecimento dos músculos e aumento da resistência.

16. Composição ativadora de receptor ativado caracterizado por proliferador de peroxissoma δ (PPARô) que contém o composto de tiazol representado pela fórmula1 ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis conforme definido na reivindicação 1 como um ingrediente ativo.