WO2024112120A1 - 신규한 c-MET 단백질 리간드를 포함하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 - Google Patents
신규한 c-MET 단백질 리간드를 포함하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2024112120A1 WO2024112120A1 PCT/KR2023/018997 KR2023018997W WO2024112120A1 WO 2024112120 A1 WO2024112120 A1 WO 2024112120A1 KR 2023018997 W KR2023018997 W KR 2023018997W WO 2024112120 A1 WO2024112120 A1 WO 2024112120A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- methyl
- group
- pyrimidin
- mmol
- reaction
- Prior art date
Links
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title description 4
- 102000008022 Proto-Oncogene Proteins c-met Human genes 0.000 title description 2
- 108010089836 Proto-Oncogene Proteins c-met Proteins 0.000 title description 2
- 239000001064 degrader Substances 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 164
- -1 nitro, amino, carbonyl Chemical group 0.000 claims description 115
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 90
- JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N benzonitrile Chemical compound N#CC1=CC=CC=C1 JFDZBHWFFUWGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 72
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 39
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 37
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 37
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 25
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 24
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 24
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 20
- 125000006165 cyclic alkyl group Chemical group 0.000 claims description 20
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N diethylenediamine Natural products C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 20
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 17
- 125000002088 tosyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1C([H])([H])[H])S(*)(=O)=O 0.000 claims description 16
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 15
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- KNCYXPMJDCCGSJ-UHFFFAOYSA-N piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C1CCCC(=O)N1 KNCYXPMJDCCGSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 150000002431 hydrogen Chemical group 0.000 claims description 14
- 102000006275 Ubiquitin-Protein Ligases Human genes 0.000 claims description 13
- 108010083111 Ubiquitin-Protein Ligases Proteins 0.000 claims description 13
- 125000004191 (C1-C6) alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 12
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 9
- 125000000246 pyrimidin-2-yl group Chemical group [H]C1=NC(*)=NC([H])=C1[H] 0.000 claims description 9
- 125000000229 (C1-C4)alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 8
- 125000004194 piperazin-1-yl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])N(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 8
- 125000004193 piperazinyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 7
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical compound C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 5
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 claims description 3
- 125000006414 CCl Chemical group ClC* 0.000 claims description 2
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 claims description 2
- HONIICLYMWZJFZ-UHFFFAOYSA-N azetidine Chemical compound C1CNC1 HONIICLYMWZJFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 2
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 claims description 2
- 150000003852 triazoles Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims 6
- JZOQPJAGEQMHHJ-UHFFFAOYSA-N 3-[6-oxo-1-[[3-(5-piperazin-1-ylpyrimidin-2-yl)phenyl]methyl]pyridazin-3-yl]benzonitrile Chemical compound O=C1C=CC(C=2C=C(C=CC=2)C#N)=NN1CC(C=1)=CC=CC=1C(N=C1)=NC=C1N1CCNCC1 JZOQPJAGEQMHHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 claims 1
- ADFZLPGRVAAKGS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-[2-[3-[[3-(3-cyanophenyl)-6-oxopyridazin-1-yl]methyl]phenyl]pyrimidin-5-yl]piperazine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCN1C1=CN=C(C=2C=C(CN3C(C=CC(=N3)C=3C=C(C=CC=3)C#N)=O)C=CC=2)N=C1 ADFZLPGRVAAKGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 291
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 208
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 148
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 134
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 122
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 118
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 72
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 63
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 50
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 33
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 30
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 28
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 27
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 25
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 24
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 23
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 20
- 238000003820 Medium-pressure liquid chromatography Methods 0.000 description 19
- FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M sodium iodide Chemical compound [Na+].[I-] FVAUCKIRQBBSSJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 17
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 17
- RYSICGXZRVMXDP-UHFFFAOYSA-N 3-bromopiperidine-2,6-dione Chemical compound BrC1CCC(=O)NC1=O RYSICGXZRVMXDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 15
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 108010026668 snake venom protein C activator Proteins 0.000 description 13
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 12
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N lithium diisopropylamide Chemical compound [Li+].CC(C)[N-]C(C)C ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 10
- 125000004528 pyrimidin-5-yl group Chemical group N1=CN=CC(=C1)* 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N N-bromosuccinimide Chemical compound BrN1C(=O)CCC1=O PCLIMKBDDGJMGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- LFTLOKWAGJYHHR-UHFFFAOYSA-N N-methylmorpholine N-oxide Chemical compound CN1(=O)CCOCC1 LFTLOKWAGJYHHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- RFIOZSIHFNEKFF-UHFFFAOYSA-M piperazine-1-carboxylate Chemical compound [O-]C(=O)N1CCNCC1 RFIOZSIHFNEKFF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 235000011181 potassium carbonates Nutrition 0.000 description 9
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 9
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 8
- 150000004682 monohydrates Chemical class 0.000 description 8
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 8
- CXNIUSPIQKWYAI-UHFFFAOYSA-N xantphos Chemical compound C=12OC3=C(P(C=4C=CC=CC=4)C=4C=CC=CC=4)C=CC=C3C(C)(C)C2=CC=CC=1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXNIUSPIQKWYAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- UKAGCKAFYUMOSL-UHFFFAOYSA-N 3-(6-fluoro-1-oxophthalazin-2-yl)piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C(CCC1N2N=CC(C=C(C=C3)F)=C3C2=O)NC1=O UKAGCKAFYUMOSL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N Sodium methoxide Chemical compound [Na+].[O-]C WQDUMFSSJAZKTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CWNKMHIETKEBCA-UHFFFAOYSA-N alpha-Ethylaminohexanophenone Chemical compound CCCCC(NCC)C(=O)C1=CC=CC=C1 CWNKMHIETKEBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 6
- 235000009518 sodium iodide Nutrition 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- RXJKFRMDXUJTEX-UHFFFAOYSA-N triethylphosphine Chemical compound CCP(CC)CC RXJKFRMDXUJTEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RUBQQRMAWLSCCJ-UHFFFAOYSA-N 1,2-difluoro-4-nitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1 RUBQQRMAWLSCCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- KLAAXTKTDRQPOF-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-2-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(F)C=C1C=O KLAAXTKTDRQPOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OHOASKMOTVHBHO-UHFFFAOYSA-N 6-fluoro-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C=2C1=CC(F)=CC=2 OHOASKMOTVHBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N Benzoylperoxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(=O)OOC(=O)C1=CC=CC=C1 OMPJBNCRMGITSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000004567 azetidin-3-yl group Chemical group N1CC(C1)* 0.000 description 5
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 5
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- CWXPZXBSDSIRCS-UHFFFAOYSA-N tert-butyl piperazine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCNCC1 CWXPZXBSDSIRCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 4
- ZQFCTCYDRQFPBU-UHFFFAOYSA-N methyl 4-fluoro-2-methylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(F)C=C1C ZQFCTCYDRQFPBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 4
- AHYMHWXQRWRBKT-UHFFFAOYSA-N tepotinib Chemical class C1CN(C)CCC1COC1=CN=C(C=2C=C(CN3C(C=CC(=N3)C=3C=C(C=CC=3)C#N)=O)C=CC=2)N=C1 AHYMHWXQRWRBKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MTWBTUNOFMRCID-UHFFFAOYSA-N 8-nitro-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C2=C1C=CC=C2[N+](=O)[O-] MTWBTUNOFMRCID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- XOFCAUZSCFNYSO-UHFFFAOYSA-N CC(C1=C(C(OC)=O)C(F)=CC=C1)=O Chemical compound CC(C1=C(C(OC)=O)C(F)=CC=C1)=O XOFCAUZSCFNYSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KSKRVYOIYRPHGT-UHFFFAOYSA-N CC(C1=CC(F)=CC=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O Chemical compound CC(C1=CC(F)=CC=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O KSKRVYOIYRPHGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- YDHFVCLWZDITRG-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N(C(C2=C3)=O)N=CC2=CC=C3F)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N(C(C2=C3)=O)N=CC2=CC=C3F)NC1=O YDHFVCLWZDITRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JNKSRHZNCUWRLX-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N2N=CC3=CC(N4CCNCC4)=CC=C3C2=O)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N2N=CC3=CC(N4CCNCC4)=CC=C3C2=O)NC1=O JNKSRHZNCUWRLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 3
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 3
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- DUIPYOPGRUSBRC-UHFFFAOYSA-N [O-][N+](C(C=CC=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=C1C2=O)=O Chemical compound [O-][N+](C(C=CC=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=C1C2=O)=O DUIPYOPGRUSBRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000005605 benzo group Chemical group 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 3
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 3
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 3
- IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N hydrazine hydrate Chemical compound O.NN IKDUDTNKRLTJSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- PKAUVIXBZJUYRV-UHFFFAOYSA-N methane;hydroiodide Chemical compound C.I PKAUVIXBZJUYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- DAYFMDZWYCRYEJ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-4-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(F)C=C1CBr DAYFMDZWYCRYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEYSJOCJFUIKGA-UHFFFAOYSA-N methyl 3-fluoro-2-formylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(F)=C1C=O WEYSJOCJFUIKGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 3
- 229940049964 oleate Drugs 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 3
- 125000004482 piperidin-4-yl group Chemical group N1CCC(CC1)* 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N sodium tert-butoxide Chemical compound [Na+].CC(C)(C)[O-] MFRIHAYPQRLWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]piperazin-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)N1CCN(CC1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 WZFUQSJFWNHZHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RZOVYRIKIOBYOY-UHFFFAOYSA-N 2-acetyl-6-fluorobenzoic acid Chemical compound CC(=O)C1=CC=CC(F)=C1C(O)=O RZOVYRIKIOBYOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UUESLKYWZWGMBV-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-6-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=C(F)C=CC=C1C=O UUESLKYWZWGMBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YIZSVEAVNICESG-UHFFFAOYSA-N 2-formyl-3-methoxybenzoic acid Chemical compound COC1=CC=CC(C(O)=O)=C1C=O YIZSVEAVNICESG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XGXMPDKOOQQSDX-UHFFFAOYSA-N 2-formyl-3-nitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1C=O XGXMPDKOOQQSDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YIXWDMDQFINFSJ-UHFFFAOYSA-N 2-formyl-6-nitrobenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=C(C=O)C=CC=C1[N+]([O-])=O YIXWDMDQFINFSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FEHZCVCLZIEZMU-UHFFFAOYSA-N 3-(3-fluoro-4-piperazin-1-ylanilino)piperidine-2,6-dione Chemical compound O=C(CCC1NC(C=C2)=CC(F)=C2N2CCNCC2)NC1=O FEHZCVCLZIEZMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- INFIYPRKBSENAH-UHFFFAOYSA-N 3-(6-oxo-1h-pyridazin-3-yl)benzonitrile Chemical compound N1C(=O)C=CC(C=2C=C(C=CC=2)C#N)=N1 INFIYPRKBSENAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JJJVNKHHFHSRSN-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-2-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(F)=C1C=O JJJVNKHHFHSRSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 4-toluenesulfonyl chloride Chemical compound CC1=CC=C(S(Cl)(=O)=O)C=C1 YYROPELSRYBVMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HJPAMEIHXKSDRO-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-3-hydroxy-3h-2-benzofuran-1-one Chemical compound C1=C(Br)C=C2C(O)OC(=O)C2=C1 HJPAMEIHXKSDRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZRTCSMCEKXQYMJ-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-2-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(F)=CC=C1C=O ZRTCSMCEKXQYMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IVXVXXMAGMCKHN-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C2=C1C(F)=CC=C2 IVXVXXMAGMCKHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLRLAGROIFHK-UHFFFAOYSA-N 5-methoxy-2H-phthalazin-1-one Chemical compound COC1=CC=CC2=C1C=NNC2=O CURLRLAGROIFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QMONLZVJOOMKRW-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C=2C1=CC(Br)=CC=2 QMONLZVJOOMKRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QDIFSAJTLJORDC-UHFFFAOYSA-N 7-fluoro-2H-phthalazin-1-one Chemical compound FC1=CC=C2C=NNC(C2=C1)=O QDIFSAJTLJORDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CXOKUCQMCZWKAI-UHFFFAOYSA-N 8-fluoro-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C2=C1C=CC=C2F CXOKUCQMCZWKAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MGYVYCBCAMKBGW-UHFFFAOYSA-N 8-fluoro-4-methyl-2H-phthalazin-1-one Chemical compound C1=C2C(C)=NNC(=O)C2=C(F)C=C1 MGYVYCBCAMKBGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVXXRDMLBFIIET-UHFFFAOYSA-N CC(C)(C)OC(=O)N1CCN(CC1)C2=CC3=C(C=C2)C(=O)N(N=C3)C4CCC(=O)NC4=O Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CCN(CC1)C2=CC3=C(C=C2)C(=O)N(N=C3)C4CCC(=O)NC4=O HVXXRDMLBFIIET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- STWYWCCTGGOSII-UHFFFAOYSA-N CC(C1=CC=CC(F)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O Chemical compound CC(C1=CC=CC(F)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O STWYWCCTGGOSII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ROGHKBBBZIYIBX-UHFFFAOYSA-N COC1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1 Chemical compound COC1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1 ROGHKBBBZIYIBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RYBPUUDKEYVKLD-UHFFFAOYSA-N NC1=CC(=C(C=C1)N1CCC(CC1)CN1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)F Chemical compound NC1=CC(=C(C=C1)N1CCC(CC1)CN1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)F RYBPUUDKEYVKLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NRSIPBGEUYCNTO-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N2N=CC3=CC(Br)=CC=C3C2=O)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N2N=CC3=CC(Br)=CC=C3C2=O)NC1=O NRSIPBGEUYCNTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MPQFORDNZCBYAG-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N2N=CC3=CC=CC(F)=C3C2=O)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N2N=CC3=CC=CC(F)=C3C2=O)NC1=O MPQFORDNZCBYAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- XQRNGXDRRSYYQI-UHFFFAOYSA-N [O-][N+](C1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1)=O Chemical compound [O-][N+](C1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1)=O XQRNGXDRRSYYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 2
- HGXJOXHYPGNVNK-UHFFFAOYSA-N butane;ethenoxyethane;tin Chemical compound CCCC[Sn](CCCC)(CCCC)C(=C)OCC HGXJOXHYPGNVNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000012263 liquid product Substances 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- JZULUDYJULULLS-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-3-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(F)=C1CBr JZULUDYJULULLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HYLGKOGJOVGRNN-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-3-methoxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(OC)=C1CBr HYLGKOGJOVGRNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FCGIVHSBEKGQMZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-3-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1CBr FCGIVHSBEKGQMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWSNENBHAODEGV-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-5-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(F)=CC=C1CBr MWSNENBHAODEGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZUDNSKMFGSEPFB-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-6-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(F)C=CC=C1CBr ZUDNSKMFGSEPFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SJJJFLXTGHEZJB-UHFFFAOYSA-N methyl 2-(bromomethyl)-6-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(CBr)C=CC=C1[N+]([O-])=O SJJJFLXTGHEZJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBIQGBVFPVWBMG-UHFFFAOYSA-N methyl 2-fluoro-6-formylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(F)C=CC=C1C=O YBIQGBVFPVWBMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CTCSAWGFOPOVEU-UHFFFAOYSA-N methyl 2-fluoro-6-methylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(C)C=CC=C1F CTCSAWGFOPOVEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYOVYUCEBCOYSM-UHFFFAOYSA-N methyl 2-formyl-3-methoxybenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(OC)=C1C=O PYOVYUCEBCOYSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XIWMWGMBRVWHAF-UHFFFAOYSA-N methyl 2-formyl-3-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1C=O XIWMWGMBRVWHAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UFSGWOAUSVQOQB-UHFFFAOYSA-N methyl 2-formyl-6-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(C=O)C=CC=C1[N+]([O-])=O UFSGWOAUSVQOQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CRZGFIMLHZTLGT-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-3-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1C CRZGFIMLHZTLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XPVBLOOMFDNJTH-UHFFFAOYSA-N methyl 2-methyl-6-nitrobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=C(C)C=CC=C1[N+]([O-])=O XPVBLOOMFDNJTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZNIXEVSMQRBBEM-UHFFFAOYSA-N methyl 3-fluoro-2-methylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(F)=C1C ZNIXEVSMQRBBEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HWHQBDHZTPRDFN-UHFFFAOYSA-N methyl 4-fluoro-2-formylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(F)C=C1C=O HWHQBDHZTPRDFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZWXXLYOYCZGTE-UHFFFAOYSA-N methyl 5-fluoro-2-formylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(F)=CC=C1C=O OZWXXLYOYCZGTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VXFMZNALKZLCBN-UHFFFAOYSA-N methyl 5-fluoro-2-methylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC(F)=CC=C1C VXFMZNALKZLCBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- STUHQDIOZQUPGP-UHFFFAOYSA-N morpholin-4-ium-4-carboxylate Chemical compound OC(=O)N1CCOCC1 STUHQDIOZQUPGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004573 morpholin-4-yl group Chemical group N1(CCOCC1)* 0.000 description 2
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 2
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XCRBXWCUXJNEFX-UHFFFAOYSA-N peroxybenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC=C1 XCRBXWCUXJNEFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DNUTZBZXLPWRJG-UHFFFAOYSA-M piperidine-1-carboxylate Chemical compound [O-]C(=O)N1CCCCC1 DNUTZBZXLPWRJG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N propan-2-yl (ne)-n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)\N=N\C(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N succinimide Chemical compound O=C1CCC(=O)N1 KZNICNPSHKQLFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- YOLVWCABLVHASL-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(2-fluoro-4-nitrophenyl)piperazine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCN1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1F YOLVWCABLVHASL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IULXQAJBODFBAK-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(4-amino-2-fluorophenyl)piperazine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCN1C1=CC=C(N)C=C1F IULXQAJBODFBAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUQQDZRMHHUAKX-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-[4-[(2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino]-2-fluorophenyl]piperazine-1-carboxylate Chemical compound O=C1NC(CCC1NC1=CC(=C(C=C1)N1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C)F)=O OUQQDZRMHHUAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- QOWBXWFYRXSBAS-UHFFFAOYSA-N (2,4-dimethoxyphenyl)methanamine Chemical compound COC1=CC=C(CN)C(OC)=C1 QOWBXWFYRXSBAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVMNSAIKFPWDQG-UHFFFAOYSA-N 1-tert-butylpiperazine Chemical compound CC(C)(C)N1CCNCC1 PVMNSAIKFPWDQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CCXSGQZMYLXTOI-UHFFFAOYSA-N 13506-76-8 Chemical compound CC1=CC=CC([N+]([O-])=O)=C1C(O)=O CCXSGQZMYLXTOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YPQAFWHSMWWPLX-UHFFFAOYSA-N 1975-50-4 Chemical compound CC1=C(C(O)=O)C=CC=C1[N+]([O-])=O YPQAFWHSMWWPLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WELNSIYTQJSNRP-UHFFFAOYSA-N 2-fluoro-6-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=CC=CC(F)=C1C(O)=O WELNSIYTQJSNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XHFBFJMIBLNOOH-UHFFFAOYSA-N 3-(phenylmethoxymethyl)azetidine Chemical compound C1NCC1COCC1=CC=CC=C1 XHFBFJMIBLNOOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YVANVRAPWVIVTP-UHFFFAOYSA-N 3-[6-oxo-1-[[3-[5-(2-piperazin-1-ylethoxy)pyrimidin-2-yl]phenyl]methyl]pyridazin-3-yl]benzonitrile Chemical compound O=C1C=CC(C=2C=C(C=CC=2)C#N)=NN1CC(C=1)=CC=CC=1C(N=C1)=NC=C1OCCN1CCNCC1 YVANVRAPWVIVTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMKZAIHFVHJGPV-UHFFFAOYSA-N 3-fluoro-2-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=C(F)C=CC=C1C(O)=O XMKZAIHFVHJGPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KDXOONIQRUZGSY-UHFFFAOYSA-N 4-fluoro-2-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=CC(F)=CC=C1C(O)=O KDXOONIQRUZGSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IUSPXLCLQIZFHL-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-3h-2-benzofuran-1-one Chemical compound BrC1=CC=C2C(=O)OCC2=C1 IUSPXLCLQIZFHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVBLXLBINTYFPR-UHFFFAOYSA-N 5-fluoro-2-methylbenzoic acid Chemical compound CC1=CC=C(F)C=C1C(O)=O JVBLXLBINTYFPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZDRVCGZEWGFKSV-UHFFFAOYSA-N 5-nitro-2h-phthalazin-1-one Chemical compound C1=NNC(=O)C2=C1C([N+](=O)[O-])=CC=C2 ZDRVCGZEWGFKSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 6-(4-aminophenyl)sulfonylpyridin-3-amine Chemical compound C1=CC(N)=CC=C1S(=O)(=O)C1=CC=C(N)C=N1 XVMSFILGAMDHEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZAIFHULBGXAKX-VAWYXSNFSA-N AIBN Substances N#CC(C)(C)\N=N\C(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-VAWYXSNFSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical class [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOYPBDXGUQMQPM-UHFFFAOYSA-N CC(C)(C)OC(N(CC1)CCN1C1=CC=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=C1)=O Chemical compound CC(C)(C)OC(N(CC1)CCN1C1=CC=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=C1)=O ZOYPBDXGUQMQPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QEBZQGFMJGEXTK-UHFFFAOYSA-N CC(C1=CC=CC(N)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O Chemical compound CC(C1=CC=CC(N)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O QEBZQGFMJGEXTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WLVOMPYHRMKTHY-UHFFFAOYSA-N CC(C1=CC=CC(NCC(C=CC(OC)=C2)=C2OC)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O Chemical compound CC(C1=CC=CC(NCC(C=CC(OC)=C2)=C2OC)=C11)=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C1=O WLVOMPYHRMKTHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWGDGLLWDCQPEO-UHFFFAOYSA-N COC(C=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=CC=C1C2=O Chemical compound COC(C=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=CC=C1C2=O FWGDGLLWDCQPEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DWVINJAEQAFBMT-UHFFFAOYSA-N COC(C=CC=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=C1C2=O Chemical compound COC(C=CC=C1C=NN2C(CCC(N3)=O)C3=O)=C1C2=O DWVINJAEQAFBMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IVBHVCKQOVNAJV-UHFFFAOYSA-N COC1=CC=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=C1 Chemical compound COC1=CC=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=C1 IVBHVCKQOVNAJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- UCJHGTYGYLGPRB-UHFFFAOYSA-N FC1=C(C=CC(=C1)[N+](=O)[O-])N1CCC(CC1)CN1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C Chemical compound FC1=C(C=CC(=C1)[N+](=O)[O-])N1CCC(CC1)CN1CCN(CC1)C(=O)OC(C)(C)C UCJHGTYGYLGPRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 101000835998 Homo sapiens SRA stem-loop-interacting RNA-binding protein, mitochondrial Proteins 0.000 description 1
- HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N Lithium ion Chemical compound [Li+] HBBGRARXTFLTSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNRGKBZNUDZIBB-UHFFFAOYSA-N NC1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1 Chemical compound NC1=C(C=NN(C(CCC(N2)=O)C2=O)C2=O)C2=CC=C1 NNRGKBZNUDZIBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JIXVNCBEYMEIEL-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N(C(C2=CC=C3)=O)N=CC2=C3F)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N(C(C2=CC=C3)=O)N=CC2=C3F)NC1=O JIXVNCBEYMEIEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZWTUBLANUCDYAN-UHFFFAOYSA-N O=C(CCC1N2N=CC(C=CC(N3CCNCC3)=C3)=C3C2=O)NC1=O Chemical compound O=C(CCC1N2N=CC(C=CC(N3CCNCC3)=C3)=C3C2=O)NC1=O ZWTUBLANUCDYAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005922 Phosphane Substances 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012083 RIPA buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 102100025491 SRA stem-loop-interacting RNA-binding protein, mitochondrial Human genes 0.000 description 1
- HGTDLKXUWVKLQX-UHFFFAOYSA-N [3-(hydroxymethyl)phenyl]boronic acid Chemical compound OCC1=CC=CC(B(O)O)=C1 HGTDLKXUWVKLQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000001028 anti-proliverative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- KVVMXWRFYAGASO-UHFFFAOYSA-N azetidine-1-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)N1CCC1 KVVMXWRFYAGASO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004305 biphenyl Substances 0.000 description 1
- ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N boronic acid Chemical compound OBO ZADPBFCGQRWHPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N diisopropylamine Chemical compound CC(C)NC(C)C UAOMVDZJSHZZME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000027721 electron transport chain Effects 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M lithium;hydroxide;hydrate Chemical compound [Li+].O.[OH-] GLXDVVHUTZTUQK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N meldrum's acid Chemical compound CC1(C)OC(=O)CC(=O)O1 GXHFUVWIGNLZSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JENBPOJAZCPSEW-UHFFFAOYSA-N methyl 2-bromo-4-fluorobenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(F)C=C1Br JENBPOJAZCPSEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VVQORCPXLODREB-UHFFFAOYSA-N methyl 3-methoxy-2-methylbenzoate Chemical compound COC(=O)C1=CC=CC(OC)=C1C VVQORCPXLODREB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VUQUOGPMUUJORT-UHFFFAOYSA-N methyl 4-methylbenzenesulfonate Chemical compound COS(=O)(=O)C1=CC=C(C)C=C1 VUQUOGPMUUJORT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 1
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 1
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 1
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N oxomethyl Chemical group O=[CH] CFHIDWOYWUOIHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- UCUUFSAXZMGPGH-UHFFFAOYSA-N penta-1,4-dien-3-one Chemical compound C=CC(=O)C=C UCUUFSAXZMGPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910000064 phosphane Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015320 potassium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 238000011865 proteolysis targeting chimera technique Methods 0.000 description 1
- 229940124823 proteolysis targeting chimeric molecule Drugs 0.000 description 1
- 230000004063 proteosomal degradation Effects 0.000 description 1
- 239000012264 purified product Substances 0.000 description 1
- 125000002206 pyridazin-3-yl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)N=N1 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- JUVIOZPCNVVQFO-HBGVWJBISA-N rotenone Chemical compound O([C@H](CC1=C2O3)C(C)=C)C1=CC=C2C(=O)[C@@H]1[C@H]3COC2=C1C=C(OC)C(OC)=C2 JUVIOZPCNVVQFO-HBGVWJBISA-N 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 1
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 229960002317 succinimide Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- GJMPUOWMDZXVAD-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 3-(piperazin-1-ylmethyl)azetidine-1-carboxylate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)N1CC(C1)CN2CCNCC2 GJMPUOWMDZXVAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UYZVZLYOXDJHPR-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(piperazin-1-ylmethyl)piperidine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCC1CN1CCNCC1 UYZVZLYOXDJHPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RBPAAJAFRFIUEJ-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 4-(piperidin-4-ylmethyl)piperazine-1-carboxylate Chemical compound C1CN(C(=O)OC(C)(C)C)CCN1CC1CCNCC1 RBPAAJAFRFIUEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UOFFCPRGVVQWTL-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[4-(bromomethyl)phenyl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC1=CC=C(CBr)C=C1 UOFFCPRGVVQWTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKBGHFXEMZZLFY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-[5-(bromomethyl)pyridin-2-yl]carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC1=CC=C(CBr)C=N1 JKBGHFXEMZZLFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
- A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
- A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
- C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
- C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
- C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D487/04—Ortho-condensed systems
Definitions
- the present invention relates to a new Protac compound that binds to cMET protein and a pharmaceutical composition containing the same.
- PROTAC is a heterodimeric molecule in which the ligand of the target protein and the ligand that binds to E3 ligase are connected through a linker.
- ProTac binds to both proteins simultaneously, bringing the target protein very close to the E3 ligase, which allows the E3 ligase to recognize the target protein as a substrate, causing polyubiquitination and subsequent proteasomal degradation. Since specific proteins can be effectively removed from cells using this principle, Protac can not only be used as a chemical probe to study the function of target proteins, but also has high potential as a treatment for diseases.
- TPD Thieted Protein Degradation
- a new target protein binding moiety that binds to the cMET protein was prepared, a new E3 ligase binding moiety was prepared, and the new E3 ligase binding moiety and the new cMET protein target binding moiety were connected through a linker. Tak was completed.
- the present invention is intended to provide Protac, in which a novel E3 ligase binding moiety and a novel cMET protein target binding moiety are linked through a linker, and a pharmaceutical composition containing the same.
- the present invention provides a TPD compound represented by the following formula (1):
- the E3 ligase binding moiety (E) is a compound represented by the following formula (2):
- the cMET target protein binding moiety (P) is a compound represented by any one of the following formulas 3 to 7,
- p is an integer of 0 or 1:
- Q 1 to Q 4 are each independently CF, C-Cl, CH, CX or N, provided that at least one of Q 1 to Q 4 is CX,
- Y is hydrogen, halogen, or straight-chain, branched-chain or cyclic alkyloxy of C 1 to C 6 substituted or unsubstituted with halogen,
- R 1 is hydrogen, nitro, amino, carbonyl, straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl of C 1 to C 6 , or straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl of C 1 to C 6 substituted by halogen,
- R 2 and R 3 are each independently hydrogen, a t-butoxycarbonyl group, a benzyloxycarbonyl group, a tosyl group, or a substituted or unsubstituted C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group,
- R 4 is hydrogen, t-butoxycarbonyl group, or benzyloxycarbonyl group.
- one end of the linker (L) is (i) connected to the compound of Formula 1 by replacing X of the compound of Formula 2, or (ii) the nitrogen atom or oxygen atom of It can be linked to the compound of Formula 2 above.
- the other end of the linker (L) is (i) connected to the substituent R2, R3, or R4 of any one of the compounds in Formulas 3 to 7 and connected to the compound in any of Formulas 3 to 7, or (ii) It may be connected to the benzene ring of the structure of Formula 8 above.
- R 2 and R 3 are each independently a C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group substituted or unsubstituted with halogen or R 5 ;
- R 5 is (i) piperazine substituted or unsubstituted by t-butoxycarbonyl group, benzyloxycarbonyl group or tosyl group, (ii) benzyl, phenyl, pyridine or tow substituted or unsubstituted by R 6
- R 2 and R 3 are each independently a C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group substituted or unsubstituted with halogen or R 5 ;
- R 5 is (i) piperazine substituted or unsubstituted by a t-butoxycarbonyl group or benzyloxycarbonyl group, (ii) substituted or unsubstituted by R 6 by benzyl, phenyl, pyridine or tosyl group. or an unsubstituted C 1 to C 6 alkoxy group (where R 6 is a C 1 to C 4 alkoxy group, an amino group, or an amino group substituted with a t-butoxycarbonyl group or benzyloxycarbonyl group), or ( iii) It may be a hydroxy group.
- R 2 is hydrogen or a C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group
- R 3 is a straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group of C 1 to C 4 substituted or unsubstituted with R 5 ,
- R 5 is (i) piperazine, (ii) a C 1 to C 4 alkoxy group substituted or unsubstituted with benzyl, phenyl, or pyridine substituted or unsubstituted with R 6 (here, R 6 is C) 1 to C 4 alkoxy group or amino group), or (iii) a hydroxy group.
- R 7 is piperazine, piperidine, azetidine, benzene, triazole or pyrrolidine;
- n are each independently integers from 0 to 5.
- the linker (L) may have the following structure:
- n and n are each independently an integer from 0 to 5.
- the present invention relates to a compound of the following formula (3) or (4) or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
- R 2 and R 3 are each independently hydrogen, a t-butoxycarbonyl group, a benzyloxycarbonyl group, a tosyl group, or a substituted or unsubstituted C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group.
- R 2 and R 3 are each independently a C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group substituted or unsubstituted with halogen or R 5 ;
- R 5 is (i) piperazine substituted or unsubstituted by t-butoxycarbonyl group, benzyloxycarbonyl group or tosyl group, (ii) benzyl, phenyl, pyridine or tow substituted or unsubstituted by R 6
- R 2 and R 3 are each independently a C 1 to C 6 straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group substituted or unsubstituted with halogen or R 5 ;
- R 5 is (i) piperazine substituted or unsubstituted by a t-butoxycarbonyl group or benzyloxycarbonyl group, (ii) substituted or unsubstituted by R 6 by benzyl, phenyl, pyridine or tosyl group. or an unsubstituted C 1 to C 6 alkoxy group (where R 6 is a C 1 to C 4 alkoxy group, an amino group, or an amino group substituted with a t-butoxycarbonyl group or benzyloxycarbonyl group), or ( iii) It may be a hydroxy group.
- R 2 is hydrogen, or a straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group of C 1 to C 6 ,
- R 3 is a straight-chain, branched-chain or cyclic alkyl group of C 1 to C 4 substituted or unsubstituted with R 5 ,
- R 5 is (i) piperazine, (ii) a C 1 to C 4 alkoxy group substituted or unsubstituted with benzyl, phenyl, or pyridine substituted or unsubstituted with R 6 (here, R 6 is C) 1 to C 4 alkoxy group or amino group), or (iii) a hydroxy group.
- the present invention relates to a compound of any one of the following formulas 5 to 7 or a pharmaceutically acceptable salt thereof:
- R 4 is hydrogen, t-butoxycarbonyl group, or benzyloxycarbonyl group.
- compounds of Formulas 3 to 7 can also bind to cMET protein and exhibit anticancer effects. Accordingly, the present invention provides a pharmaceutical composition for treating cancer containing any one of the compounds of Formulas 1 to 7 above.
- the present invention relates to a Protac compound that binds to cMET protein. Since it can bind to and decompose cMET protein, it can be usefully used in the treatment or prevention of diseases related to cMET protein.
- the compound of the present invention has excellent anti-cancer effects and can also induce the decomposition of cMET protein, thereby showing a therapeutic effect on cMET and related diseases.
- Figure 1 is a schematic diagram of a Protac compound consisting of an E3 ligase binding moiety, a linker, and a target protein binding moiety.
- Protac according to the present invention may be a compound represented by Formula 1.
- E3 ligase binding moiety (E)-linker (L)-cMET target protein binding moiety (P)
- the basic skeleton of the E3 ligase binding moiety according to the present invention can be prepared through the reaction steps of Scheme 1 or Scheme 2 below:
- X is hydrogen, halogen, amino, nitro, hydroxy, piperazine group, or C 1 to C 4 alkoxy.
- R 1 substituents that can be bonded to carbon at Q 1 to Q 4 in the compound of Formula 1
- E3 ligase binding moiety compounds are prepared through examples.
- Example A-1 Compound Preparation (prepared according to Scheme 1)
- Example A-2 Compound manufacture of
- Example A-3 Compound manufacture of
- Example A-4 Compound manufacture of
- methyl 4-fluoro-2-methylbenzoate was prepared from 4-fluoro-2-methylbenzoic acid.
- Example A-6 Compound manufacture of
- methyl 5-fluoro-2-methylbenzoate was prepared from 5-fluoro-2-methylbenzoic acid.
- Example A-7 Compound Preparation (prepared according to Scheme 2)
- Tetrakis(triphenylphosphine) was added to a solution of methyl 2-acetyl-6-fluorobenzoate (1.12 g, 4.81 mmol) and tributyl(1-ethoxyvinyl)tin (1.91 g, 5.29 mmol) in toluene (20 ml).
- Example A-8 Compound manufacture of
- 6-Fluoro-1,2-dihydrophthalazin-1-one (100 mg, 0.36 mmol) and tert-butyl piperazine-1-carboxylate (81.2 mg, 0.36 mmol) were dissolved in NMP (1 mL) , DIPEA (5 equivalents) was added to the reaction mixture, and stirred at 120°C overnight.
- the reaction mixture was quenched with water, extracted with EA, and washed with saturated aqueous NH 4 Cl solution and brine solution. The organic layer was dried with MgSO 4 .
- the reaction mixture was loaded on silica and separated by MPLC (HX/EA 30% -> 50% for 10 min) to give an oil product (110 mg, 66% yield).
- tert-Butyl 4-[2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxo-1,2-dihydrophthalazin-6-yl]piperazine-1-carboxylate was prepared by DCM. (1ml) was dissolved in 20% TFA solution and reacted at room temperature for 2 hours. The reaction was quenched with saturated aqueous NaHCO 3 solution and extracted with EA. The organic layer was dried with MgSO 4 and evaporated. The reaction mixture was purified by MPLC (MC/ME Me 0 -> 10%). The product was obtained as a white solid (40 mg, 86% yield)
- (2S)-4-(5-bromopyrimidin-2-yl)-2((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-3a,4a-dihydro-1H-[1 ,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholine was synthesized, and the compounds of Examples B-1 to B-13 below were prepared using this intermediate.
- Example B-1 tert-Butyl (S)-3-((4-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2 ,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)ppiperazin-1-yl)methyl)azetidine-1-carboxylate
- Example B-2 (S)-4-(5-(4-(azetidin-3-ylmethyl)piperazin-1-yl)pyrimidin-2- ⁇ yl)-2-((5-(1 -methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholine
- Example B-3 (S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazine -1-yl)methyl)-4-(5-(4-((1-methylazetidin-3-yl)methyl)piperazin-1-yl)pyrimidin-2-yl)morpholine
- Example B-4 Benzyl (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3 ]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
- Example B-5 (S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazine -1-yl)methyl)-4-(5-(3-(piperazine-1-ylmethyl)azetidin-1-yl)pyrimidin-2-yl)morpholine
- Example B-6 (S)-4-(5-(3-((benzyloxy)methyl)azetidin-1-yl)pyrimidin-2-yl)-2-((5-(1-methyl -1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholine
- Example B-7 (S)-(1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[ 4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methanol
- Example B-8 (S)-(1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[ 4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl 4-methylbenzenesulfonate
- Example B-9 tert-Butyl (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2 ,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl)piperazine-1-carboxylate
- Example B-10 (S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazine -1-yl)methyl)-4-(5-(3-((4-methylpiperazin-1-yl)methyl)azetidin-1-yl)pyrimidin-2-yl)morpholine
- Example B-12 tert-Butyl (S)-(4-(((1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1 ,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methoxy)methyl)phenyl)carbamate
- Example B-13 tert-Butyl (S)-(5-(((1-(2-(2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[1 ,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methoxy)methyl)pyridin-2-yl )Carbamate
- Example C Preparation of cMET targeting ligand compounds based on tepotinib derivatives
- Example C-1 tert-Butyl (2R)-2-(((2-(3-((3-(3-cyanophenyl)-6-oxopyridazin-1(6H)-yl)methyl)phenyl ) pyrimidin-5-yl) oxy) methyl) morpholine-4-carboxylate
- Example C-3 t-Butyl 4-(2- ⁇ [2-(3- ⁇ [3-(3-cyanophenyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-1-yl] methyl ⁇ phenyl)pyrimidin-5-yl]oxy ⁇ ethyl)piperazine-1-carboxylate
- Example C-4 3-(6-oxo-1-(3-(5-(2-(piperazin-1-yl)ethoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-1,6-di Hydropyridazine-3-yl)benzonitrile
- Example C-6 3-(6-oxo-1-(3-(5-(piperazin-1-yl)pyrimidin-2-yl)benzyl)-1,6-dihydropyridazine-3- 1) Benzonitrile
- Example D-1 3-(6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-1H-[ 1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl)piperazin-1-yl) -1-oxophthalazine-2(1H)-yl)piperidine-2,6-dione
- Example D-2 3-(4-methyl-6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl) -1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl)piperazine- 1-yl)-1-oxophthalazine-2(1H)-yl)piperidine-2,6-dione
- Example D-3 3-((3-fluoro-4-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazole-4- 1)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl)pipe Razin-1-yl)phenyl)amino)piperidine-2,6-dione
- Example D-4 3-(4-methyl-6-(4-((1-((1-(2-((S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyrazole- 4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl)methyl )piperidin-4-yl)methyl)piperazin-1-yl)-1-oxophthalazin-2(1H)-yl)piperidine-2,6-dione
- Example D-5 3-((3-fluoro-4-(4-((4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-methyl-1H-pyra zol-4-yl)-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]pyrazin-1-yl)methyl)morpholino)pyrimidin-5-yl)azetidin-3-yl )methyl)piperazin-1-yl)methyl)piperidin-1-yl)phenyl)amino)piperidine-2,6-dione
- Example E-1 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methyl-1-oxo -1,2-dihydrophthalazine-6-yl)morpholin-2-yl)methoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazine-3- 1) Benzonitrile
- Example E-2 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxo-1,2 -dihydrophthalazin-6-yl)morpholin-2-yl)methoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazine-3-yl)benzonitrile
- Example E-3 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)-2-fluoro phenyl) morpholin-2-yl) methoxy) pyrimidin-2-yl) benzyl) -6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl) benzonitrile
- Example E-4 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1-oxo-1,2-di hydrophthalazin-6-yl)piperazin-1-yl)ethoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl)benzonitrile
- Example E-5 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-4-methyl-1-oxo-1 ,2-dihydrophthalazin-6-yl)piperazin-1-yl)ethoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl) Benzonitrile
- Example E-6 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)-2-fluorophenyl) piperazin-1-yl)ethoxy)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl)benzonitrile
- Example E-7 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)-2-fluorophenyl )azetidin-3-yl)methyl)piperazin-1-yl)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl)benzonitrile
- Example E-8 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-dioxopiperidin-3-yl)amino)-2-fluorophenyl )piperidin-4-yl)methyl)piperazin-1-yl)pyrimidin-2-yl)benzyl)-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-3-yl)benzonitrile
- Human gastric cancer cell lines MKN45 and SNU638 overexpressing c-MET were cultured in RPMI medium supplemented with 10% fetal bovine serum, penicillin (100U/ml), and streptomycin (100mg/ml), and c-MET exon 14 Deletion (exon 14 skipping) mutant human gastric cancer cell line Hs746T was cultured in DMEM medium.
- the human lung cancer cell line EBC-1 overexpressing c-MET was cultured in MEM medium supplemented with 10% fetal bovine serum, penicillin (100U/ml), and streptomycin (100mg/ml).
- the normal cell line WI-38 derived from human lung tissue was cultured in EMEM medium supplemented with 10% fetal bovine serum, penicillin (100U/ml), and streptomycin (100mg/ml).
- the compound synthesized according to the present invention was prepared as a 10 mM raw material solution dissolved in DMSO (dimethyl sulfoxide), and was sequentially diluted and treated.
- cells were distributed at a concentration of 2 ⁇ 105 cells/well in a 12 well plate, and the gastric cancer cell line samples were incubated for 24 hours. and lung cancer cell lines were treated for 48 hours.
- protein expression was measured using the Simple Western Automated Western Blot System Abby instrument using 3 ⁇ g of protein per sample. Proteins denatured by SDS and heat were separated by molecular weight and attached to a capillary, reacted with the primary antibody, anti-c-MET or anti-GAPDH antibody, and then with HRP-conjugated secondary antibody. After reaction, protein expression signal was analyzed using compass software.
- Protein expression was normalized based on the expression value of GAPDH, and the amount of protein expression in each sample was measured as a percentage (%) based on 100% samples treated with 0.1% DMSO vehicle, and DC 50 (the concentration of the compound at which 50% inhibition of protein expression is achieved) was calculated from the change in protein expression level.
- the Protac compound according to the present invention can be usefully used as an anticancer agent.
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
본 발명은 cMET 단백질에 결합하는 새로운 프로탁 화합물 및 이를 포함하는약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 cMET 단백질에 결합하는 프로탁 화합물에관한 것으로, cMET 단백질에 결합하여 이를 분해할 수 있으므로 cMET 단백질과 관련있는 질병의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 우수한 항암 효과를 가지며, 또한 cMET 단백질의 분해를 유도하여 cMET과 관련 질병에 대한 치료 효과를 나타낼 수 있다.
Description
본 발명은 cMET 단백질에 결합하는 새로운 프로탁 화합물 및 이를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다.
프로탁(PROTAC)은 표적 단백질의 리간드와 E3 리가아제에 결합하는 리간드가 링커를 통해 연결된 이종이량체 분자이다. 프로탁은 양쪽 단백질에 동시에 결합하여 표적단백질을 E3 리가아제에 매우 근접하게 접근하도록 해주며, 이를 통해 E3 리가아제는 표적단백질을 기질로 인식하여 폴리유비퀴틴화 및 후속 프로테아좀 분해를 유발한다. 이러한 원리를 이용하여 특정 단백질을 세포 내에서 효과적으로 제거할 수 있으므로, 프로탁은 표적단백질의 기능을 연구할 수 있는 화학적 탐침으로 사용될 수 있을 뿐 아니라 더 나아가 질병의 치료제로서의 높은 잠재성을 지니고 있다. 프로탁이라는 용어 대신에 TPD (표적 단백질 분해: Targeted Protein Degradation) 라는 용어가 사용되기도 한다.
본 발명에서는 cMET 단백질에 결합하는 새로운 표적 단백질 결합 모이어티를 제조하고 새로운 E3 리가아제 결합 모이어티를 제조하였으며, 새로운 E3 리가아제 결합 모이어티와 새로운 cMET 단백질 표적 결합 모이어티를 링커를 통해 연결한 프로탁을 완성하게 되었다.
본 발명은, 신규한 E3 리가아제 결합 모이어티와 신규한 cMET 단백질 표적 결합 모이어티를 링커를 통해 연결한 프로탁 및 이를 포함하는 약학 조성물을 제공하기 위한 것이다.
상기 기술적 과제를 달성하기 위하여, 본 발명은 하기 화학식 1로 표현되는 TPD 화합물을 제공한다:
하기 화학식 1로 표현되는 화합물:
[화학식 1]
cMET 표적 단백질 결합 모이어티(P)-{링커(L)}p-E3 리가아제 결합 모이어티(E)
상기 식에서,
E3 리가아제 결합 모이어티(E)는 하기 화학식 2로 표시되는 화합물이고
cMET 표적 단백질 결합 모이어티(P)는 하기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나로 표시되는 화합물이며,
p은 0 또는 1의 정수이다:
[화학식 2]
[화학식 3]
[화학식 4]
[화학식 5]
[화학식 6]
[화학식 7]
[화학식 8]
상기 식에서, X는 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 히드록시, C1 내지 C6의 직쇄 또는 분지쇄 알킬옥시, 또는 산소 또는 질소를 포함하는 4원 내지 8원의 헤테로사이클릭이고,
Q1 내지 Q4는 각각 독립적으로 C-F, C-Cl, C-H, C-X 또는 N이며, 단 Q1 내지 Q4 중 적어도 어느 하나는 C-X이며,
Y는 수소, 할로겐, 또는 할로겐으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬옥시이며,
R1은 수소, 니트로, 아미노, 카보닐, C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬, 또는 할로겐으로 치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬이고,
R2 및 R3은 각각 독립적으로 수소, t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기, 토실기, 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이고,
R4는 수소, t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기이다.
본 발명에서, 상기 링커(L)의 일단은 (i) 상기 화학식 2의 화합물의 X를 대체하여 상기 화학식 1의 화합물과 연결되거나 또는 (ii) 상기 화학식 2의 화합물의 X의 질소원자 또는 산소원자에 결합하여 상기 화학식 2의 화합물과 연결될 수 있다.
본 발명에서, 상기 링커(L)의 타단은 (i) 상기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나의 화합물의 치환기 R2, R3 또는 R4에 연결되어 상기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나의 화합물과 연결되거나, 또는 (ii) 상기 화학식 8의 구조의 벤젠 고리에 연결될 수 있다.
본 발명의 일 태양에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C6의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
본 발명의 또다른 태양에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
본 발명의 또다른 태양에서, R2는 수소, 또는 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
R3은 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐 또는 피리딘으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기 또는 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
본 발명에서, 상기 링커(L)는
-(CH2)m-R7-(CH2)n- 이거나
하기 구조식으로 이루어진 군으로부터 선택되는 구조식을 가질 수 있다.
상기 식에서, R7은 피페라진, 피페리딘, 아제티딘, 벤젠, 트리아졸 또는 피롤리딘이고,
m 및 n은 각각 독립적으로 0 내지 5 중 어느 하나의 정수이다.
또한, 본 발명에서, 상기 링커(L)는 하기 구조를 가질 수 있다:
상기 식에서, m 및 n은 각각 독립적으로 0 내지 5 중 어느 하나의 정수이다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 3 또는 4의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:
[화학식 3]
[화학식 4]
상기 식에서,
R2 및 R3은 각각 독립적으로 수소, t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기, 토실기, 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이다.
본 발명의 일 태양에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C6의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
또한, 본 발명의 일 태양에서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
또한, 본 발명의 일 태양에, R2는 수소, 또는 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
R3은 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,
여기에서, R5는 (i) 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐 또는 피리딘으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기 또는 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기일 수 있다.
또한, 본 발명은 하기 화학식 5 내지 7 중의 어느 하나의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다:
[화학식 5]
[화학식 6]
[화학식 7]
상기 식에서,
R4는 수소, t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기이다.
본 발명에 따른 상기 화학식 1의 TPD 화합물 뿐만 아니라, 화학식 3 내지 7의 화합물도 cMET 단백질에 결합하여 항암 효과를 나타낼 수 있다. 따라서, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 7 중 어느 하나의 화합물을 포함하는 암 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명은 cMET 단백질에 결합하는 프로탁 화합물에 관한 것으로서, cMET 단백질에 결합하여 이를 분해할 수 있으므로 cMET 단백질과 관련있는 질병의 치료 또는 예방에 유용하게 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 우수한 항암 효과를 가지며, 또한 cMET 단백질의 분해를 유도하여 cMET과 관련 질병에 대한 치료 효과를 나타낼 수 있다.
도 1은 E3 리가아제 결합 모이어티, 링커 및 표적 단백질 결합 모이어티로 이루어지는 프로탁 화합물의 모식도이다.
이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 본 발명은 여러가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 의해 본 발명이 한정되지 않는다.
본 명세서에서 사용한 용어는 단지 특정한 실시예를 설명하기 위하여 사용된 것으로, 본 발명을 한정하려는 의도가 아니다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함한다. 본 발명의 명세서에서 어떤 구성요소를 '포함' 한다는 것은 특별히 반대되는 기재가 없는 한, 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있다는 것을 의미한다.
본 발명에 따른 프로탁은 화학식 1로 표시되는 화합물일 수 있다.
[화학식 1]
E3 리가아제 결합 모이어티(E)-링커(L)-cMET 표적 단백질 결합 모이어티(P)
본 발명에 따른 E3 리가아제 결합 모이어티의 기본골격은 하기 반응식 1 또는 반응식 2의 반응 단계를 거쳐 제조할 수 있다:
[반응식 1]
[반응식 2]
상기 반응식 1 또는 2에서, X는 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 히드록시, 피페라진기 또는 C1 내지 C4의 알콕시이다. 다만, 설명의 편의를 위하여, 상기 반응식에서는 화학식 1의 화합물 중 Q1 내지 Q4에서 탄소에 결합될 수 있는 치환기의 표시를 생략하였고, R1 치환기 중에서는 수소 또는 메틸과 같이 간단한 치환기만을 대표적으로 표시하였다.
이하에서는, E3 리가아제 결합 모이어티 화합물의 구체적인 예를 실시예를 통하여 제조한다.
실시예 A: E3 리가아제 결합 모이어티 화합물의 제조
실시예 A-1: 화합물 
의 제조 (반응식 1에 준하여 제조함)
1-1) 메틸 2-메틸-6-니트로벤조에이트 제조
실온에서, 아세톤 (100ml) 중의 2-메틸-6-니트로벤조 산 (5g, 27.6 mmol) 용액에 K2CO3 (19.1g, 138 mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물에 요오드화 메탄 (19.6g, 138 mmol)을 가하고, 6시간 동안 60oC로 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 여과하고, 감압 하에서 농축하였다. 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (5.45g, 98%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [195.2].
1-2) 메틸 2-(브로모메틸)-6-니트로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (100ml) 중의 메틸 2-메틸-6-니트로벤조에이트 (5.39g, 27.6 mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (7.39g, 41.4mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (0.67g, 7.26mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (7.34g, 98%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [274.4].
1-3) 메틸 2-포르밀-6-니트로벤조에이트 제조
실온에서, DCM (30ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-6-니트로벤조에이트 (580mg, 2.12mmol) 용액에 NMO (N-메틸모르폴린 N-옥사이드) (561mg, 4.87mmol) 및 4Å 분자체를 순차적으로 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (10ml)로 세척하였다. DCM 층을 물(50ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다.(350mg, 79.07%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [210.0].
1-4) 2-포르밀-6-니트로벤조산 제조
실온에서, THF (10ml) 중의 메틸 2-포르밀-6-니트로벤조에이트 (2g, 9.56mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (1.15g, 47.8mmol) 수용액(10ml)을 가하였다. 2시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(1.50g, 80.3%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [195.2].
1-5) 8-니트로프탈라진-1(2H)-온 제조
실온에서, 메탄올 (10ml) 중의 2-포르밀-6-니트로벤조산 (1.2g, 6.15mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (417mg, 8.33mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 물(50ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(1g, 85.07%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [191.8].
1-6) 3-(8-니트로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
DMF (1ml) 중의 8-니트로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 (60mg, 0.314mmol) 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (90mg, 0.471mmol)과 K2CO3 (129mg, 0.942mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 5시간 동안 85℃로 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 물(5ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (5ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다(68mg, 71.7%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [302.6].
1-7) 3-(8-니트로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
메탄올 (5ml) 중의 3-(8-니트로-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 (25mg, 0.82mmol) 용액에 20mg의 10% Pd/C (습식) (5mg)을 가하고, 벌룬 내 수소 하에서 1시간 교반하였다. 고체를 여과하고, 여액을 감압 농축하여, 표제 화합물을 99% 수율로 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [272.3].
실시예 A-2: 화합물 
의 제조
2-1) 메틸 2-메틸-3-니트로벤조에이트 제조
실온에서, 아세톤 (100ml) 중의 2-메틸-3-니트로벤조 산 (5g, 27.6 mmol) 용액에 K2CO3 (19.1g, 138 mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물에 요오드화 메탄 (19.6g, 138 mmol)을 가하고, 6시간 동안 60℃로 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 여과하고, 감압 하에서 농축하였다. 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다.(5.45g, 98%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [195.3].
2-2) 메틸 2-(브로모메틸)-3-니트로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (100ml) 중의 메틸 2-메틸-3-니트로벤조에이트 (5.39g, 27.6 mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (7.39g, 41.4mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (0.67g, 7.26mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다.(7.34g, 98%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [274.4].
2-3) 메틸 2-포르밀-3-니트로벤조에이트 제조
실온에서, DCM (30ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-3-니트로벤조에이트 (580mg, 2.12mmol) 용액에 NMO (561mg, 4.87mmol) 및 4Å 분자체를 순차적으로 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (10ml)로 세척하였다. DCM 층을 물(50ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (350mg, 79.07%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [210.0].
2-4) 2-포르밀-3-니트로벤조산 제조
실온에서, THF (10ml) 중의 메틸 2-포르밀-3-니트로벤조에이트 (2g, 9.56mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (1.15g, 47.8mmol) 수용액(10ml)을 가하였다. 2시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(1.50g, 80.3%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [195.2].
2-5) 5-니트로프탈라진-1(2H)-온 제조
실온에서, 메탄올 (10ml) 중의 2-포르밀-3-니트로벤조산 (1.2g, 6.15mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (417mg, 8.33mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 물(50ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(1g, 85.07%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [191.8].
2-6) 3-(5-니트로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
DMF (1ml) 중의 5-니트로프탈라진-1(2H)-온 (60mg, 0.314mmol) 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (90mg, 0.471mmol)과 K2CO3 (129mg, 0.942mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 5시간 동안 85℃로 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 물(5ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (5ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다(68mg, 71.7%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [302.4].
2-7) 3-(5-아미노-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
메탄올 (5ml) 중의 3-(5-니트로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (25mg, 0.82mmol) 용액에 20mg의 10% Pd/C (습식) (5mg)을 가하고, 벌룬 내 수소 하에서 1시간 교반하였다. 고체를 여과하고, 여액을 감압 농축하여, 표제 화합물을 99% 수율로 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [272.3].
실시예 A-3: 화합물 
의 제조
3-1) 메틸 2-플루오로-6-메틸벤조에이트 제조
실온에서, 아세톤 (200ml) 중의 2-플루오로-6-메틸벤조 산 (10g, 64.9 mmol) 용액에 K2CO3 (44.8g, 324 mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물에 요오드화 메탄 (46g, 324 mmol)을 가하고, 6시간 동안 60oC로 가열하였다. 냉각 후, 반응물을 여과하고, 감암 하에서 농축하였다. 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (11.2g, 수율 103%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [168.3].
3-2) 메틸 2-(브로모메틸)-6-플루오로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (250ml) 중의 메틸 2-플루오로-6-메틸벤조에이트 (21.2g, 126 mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (24.7g, 139mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (1.53g, 6.30mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 16시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조(crude) 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (35g, 수율 112%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [245.9].
3-3) 메틸 2-플루오로-6-포르밀벤조에이트 제조
실온에서, DCM (280ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-6-플루오로벤조에이트 (35g, 142mmol) 용액에 NMO(24.9g, 212mmol)를 가하였다. 반응물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. DCM 층을 물(200ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (11.52g, 수율 45%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [183.1].
3-4) 2-플루오로-6-포르밀벤조산 제조
실온에서, THF (82ml) 중의 메틸 2-플루오로-6-포르밀벤조에이트 (11.5g, 63.2mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (7.57g, 180mmol) 수용액(41ml)을 가하였다. 4시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (100ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(10.4g, 97.8%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [168.8].
3-5) 8-플루오로프탈라진-1(2H)-온 제조
실온에서, 메탄올 (120ml) 중의 2-플루오로-6-포르밀벤조산 (10.4g, 61.9mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (3.72mg, 61.9mmol)을 가하고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 흰색 침전물을 여과하고, 메탄올로 세척하였다. 수득한 흰색 결정을 100ml의 에틸 아세테이트(EA)로 슬러리화하고, 여과하여 흰색 결정을 수득하였다(3.05g, 30%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [164.8].
3-6) 3-(8-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 DMF (5ml) 중의 8-플루오로프탈라진-1(2H)-온 (200mg, 1.22mmol) 용액에 NaH (60%, 53.6mg, 1.34mmol)을 가하고, 30분간 교반하였다. 이 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (468mg, 2.44mmol)을 가하고 6시간 동안 교반하였다. 물로 반응을 종결시키고, 에틸 아세테이트 (20ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다(70mg, 20.8%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [276.1].
실시예 A-4: 화합물 
의 제조
4-1) 메틸 5-플루오로-6-메틸벤조에이트 제조
실온에서, 메탄올 (60ml) 중의 3-플루오로-2-메틸벤조 산 (10g, 64.9 mmol) 용액에 황산 (2ml)을 가하였다. 80oC로 가열하고, 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 증발시키고, NaHCO3 및 에틸아세테이트(EA)로 추출하였다. MgSO4로 건조시켰다. 조 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (10.1g, 수율 92%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [168.3].
4-2) 메틸 2-(브로모메틸)-3-플루오로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (250ml) 중의 메틸 3-플루오로-2-메틸벤조에이트 (10g, 59.5mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (15.9g, 89.2mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (0.72g, 2.97mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 16시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (10.5g, 수율 71%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [245.9].
4-3) 메틸 3-플루오로-2-포르밀벤조에이트 제조
실온에서, DCM (200ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-3-플루오로벤조에이트 (10g, 40.5mmol) 용액에 NMO (10.4g, 89mmol), 4Å 분자체를 가하였다. 반응물을 4시간 동안 실온에서 교반하였다. DCM 층을 물(200ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다. (5.5g, 75%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [183.1].
4-4) 3-플루오로-2-포르밀벤조산 제조
실온에서, THF (68ml) 중의 메틸 3-플루오로-2-포르밀벤조에이트 (2.5g, 13.7mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 일수화물 (2.88g, 68.6mmol) 수용액(41ml)을 가하였다. 4시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (100ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(2.5g, 108%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [168.8].
4-5) 5-플루오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 제조
실온에서, THF:물=1:1 (70ml) 중의 3-플루오로-2-포르밀벤조산 (2.5g, 14.9mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (1.22mg, 16.4mmol)을 가하고, 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 pH 4로 산성화하고, 고체를 헥산으로 여과하였다. 진공 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다(1.3g, 53%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [165.3]
4-6) 3-(5-플루오로-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 DMF (10ml) 중의 5-플루오르-1,2-디하이드로로프탈라진-1-온 (300mg, 1.83mmol) 용액에 LDA (리튬 디이소프로필 아마이드, 2.19mmol)을 가하고, 30분간 교반하였다. 이 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (526mg, 2.74mmol)을 가하고 6시간 동안 80℃에서 교반하였다. 반응이 완료되면, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물(100ml)에 붓고, 6N HCl로 pH를 3~4로 조정하고, 그 후 에틸 아세테이트로 추출하고, 이를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 생성물을 헥산으로 재결정하고, 진공 건조하여, 표제 화합물을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [276.1].
실시예 A-5 : 화합물 
의 제조
5-1) 메틸 4-플루오로-6-메틸벤조에이트 제조
실시예 4-1의 제조방법에 준하여, 4-플루오로-2-메틸벤조산으로부터 메틸 4-플루오로-2-메틸벤조에이트를 제조하였다.
5-2) 메틸 2-(브로모메틸)-4-플루오로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (100ml) 중의 메틸 4-플루오로-2-메틸벤조에이트 (20g, 119mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (31.8g, 178mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (1.92g, 5.95mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 생성물을 MPLC (HX/EA EA 0 -> 5%)로 정제하였다(22g, 수율 75%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [248.4].
5-3) 메틸 3-플루오로-2-포르밀벤조에이트 제조
실온에서, DCM (100ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-4-플루오로벤조에이트 (22g, 89mmol) 용액에 NMO (15.6mg, 134mmol) 및 4Å 분자체를 순차적으로 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (50ml)로 세척하였다. DCM 층을 물(200ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (12g, 73.98%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [183.2].
5-4) 4-플루오로-2-포르밀벤조산 제조
실온에서, THF (50ml) 중의 메틸 4-플루오로-6-포르밀벤조에이트 (12g, 65.9mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (13.8g, 329mmol) 수용액(50ml)을 가하였다. 2시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(10g, 90.3%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [169.2].
5-5) 6-플루오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 제조
실온에서, 메탄올 (50ml) 중의 4-플루오로-2-포르밀벤조산 (6.78g, 40.3mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (2.02g, 40.3mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 물(150ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (150ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(5.5g, 83.07%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [165.3].
5-6) 3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 DMF (2ml) 중의 6-플루오르-1,2-디하이드로로프탈라진-1-온 (100mg, 0.609mmol) 용액에 소듐 2-메틸프로판-2-올레이트 (175mg, 0.914mmol)을 가하였다. 30분간 교반한 후, 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (90mg, 0.471mmol)을 반응 혼합물에 가하고 6시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물에 물(20ml)을 붓고, 에틸 아세테이트(20ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다(110mg, 65.5%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [276.6].
실시예 A-6 : 화합물 
의 제조
6-1) 메틸 4-플루오로-6-메틸벤조에이트 제조
실시예 4-1의 제조방법에 준하여, 5-플루오로-2-메틸벤조산으로부터 메틸 5-플루오로-2-메틸벤조에이트를 제조하였다.
6-2) 메틸 2-(브로모메틸)-5-플루오로벤조에이트 제조
실온에서, ClCH2CH2Cl (100ml) 중의 메틸 5-플루오로-2-메틸벤조에이트 (20g, 119mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (31.8g, 178mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (1.92g, 5.95mmol)을 순차적으로 가하였다. 반응물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은 색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 생성물을 MPLC (HX/EA EA 0 -> 5%)로 정제하였다(29g, 수율 98.8%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [248.4].
6-3) 메틸 5-플루오로-2-포르밀벤조에이트 제조
실온에서, DCM (100ml) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-5-플루오로벤조에이트 (29g, 117mmol) 용액에 NMO (20.6mg, 176mmol) 및 4Å 분자체를 순차적으로 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (50ml)로 세척하였다. DCM 층을 물(200ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (15g, 수율 70.16%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [183.2].
6-4) 5-플루오로-2-포르밀벤조산 제조
실온에서, THF (50ml) 중의 메틸 5-플루오로-2-포르밀벤조에이트 (15g, 82.3mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (17.3g, 412mmol) 수용액(50ml)을 가하였다. 2시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(12g, 86.67%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [169.2].
6-5) 7-플루오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 제조
실온에서, 메탄올 (50ml) 중의 5-플루오로-2-포르밀벤조산 (8.16g, 48.5mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (3.74g, 74.8mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 물(150ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (150ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다(6.5g, 81.59%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [165.3].
6-6) 3-(7-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 DMF (5ml) 중의 7-플루오르-1,2-디하이드로로프탈라진-1-온 (500mg, 3.05mmol) 용액에 소듐 2-메틸프로판-2-올레이트 (586mg, 6.09mmol)을 가하였다. 30분간 교반한 후, 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.05mg, 5.48mmol)을 반응 혼합물에 가하고 6시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 물(50ml)에 붓고, 에틸 아세테이트(50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다(300mg, 35.78%). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [276.6].
실시예 A-7 : 화합물 
의 제조 (반응식 2에 준하여 제조함)
7-1) 메틸 2-아세틸-6-플루오로벤조에이트 제조
톨루엔 (20ml) 중의 메틸 2-아세틸-6-플루오로벤조에이트 (1.12g, 4.81mmol) 및 트리부틸(1-에톡시비닐)주석 (1.91g, 5.29mmol) 용액에 테트라키스(트리페닐포스핀)-팔라듐(0) (557mg, 0.48mmol)을 가하고, 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 5ml의 1N-HCl을 가하고, 1시간 동안 교반하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 감암 하에 농축하였다. 잔사를 실리카 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 황색 오일로서 수득하였다. (820mg, 수율 87%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [196.8].
7-2) 2-아세틸-6-플루오로벤조 산 제조
THF (20ml) 및 물 (10ml) 중의 메틸 2-아세틸-6-플루오로벤조에이트 (810mg, 4.13mmol) 용액에 LiOH (494mg, 20.6mmol)을 가하고, 실온에서 20시간 동안 교반하였다. 용액을 1N-HCl로 산성화시켜 pH가 약 3이 되도록 하였다. 100ml EA를 가하고, 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하여 표제화합물을 수득하였다. (810mg 수율 108%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [183.1].
7-3) 8-플루오로-4-메틸프탈라진-1(2H)-온 제조
메탄올 (23ml) 중의 2-아세틸-6-플루오로벤조 산 (790mg, 4.34mmol) 용액에 히드라진 일수화물 (261mg, 5.20mmol)을 가하고, 16시간 동안 실온에서 교반하였다. 침전물을 여과하고, ACN (아세토니트릴)로 세척하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (612mg, 수율 79.2%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [179.1].
7-4) 3-(8-플루오로-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 THF(30 ml) 중의 8-플루오로-4-메틸프탈라진-1(2H)-온(534 mg, 3 mmol) 용액에 1M-리튬 디이소프로필아마이드 (Lithium diisopropylamide) (3.6 ml, 3.6 mmol)을 가하고, 20분간 교반하였다. 이 용액에 3-브로보피페리딘-2,6-디온(863 mg, 4.5 mmol)을 가하고 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 농축하여 건조시켰다. 물(10 ml)를 넣고 1시간 교반 후, 1N-HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 침전물을 여과하고, 물로 세척하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다(760 mg, 수율: 86.5 %). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [289.8].
실시예 A-8 : 화합물 
의 제조
8-1) 3-(8-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
NMP (N-메틸-피롤리돈) (1mL) 중의 3-(8-플루오로-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (0.104 mmol), 2,4-디메톡시벤질아민 (0.207 mmol) 및 DIPEA (N,N-디이소프로필에틸아민) (0.312 mmol) 용액을 120℃에서 2시간 동안 마이크로파로 자극시켰다. 반응 혼합물을 역상 크로마토그래피(C18, 물(0.1% FA) / ACN (0.1% FA), 구배)로 정제하여, 33mg의 흰색 고체를 수득하였다(33mg, 수율 72 %). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [437.0]
8-2) 3-(8-아미노-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
톨루엔 (0.7mL) 중의 3-(8-((2,4-디메톡시벤질)아미노)-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (14mg, 0.032mmol)에 0.3ml 의 TFA (트리플루오로아세트산)을 가하고, 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 역상 컬럼 크로마토그래피(C18, 물(0.1% FA) / ACN (0.1% FA), 구배)로 정제하여, 7.5 mg 의 흰색 고체를 수득하였다 (7.5mg, 수율 82 %). MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [287.0]
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.98 (s, 1H), 7.54 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.37 (brs, 2H), 6.95 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.88 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.62 (br dd, J = 5.3, 12.0 Hz, 1H), 3.0 - 2.82 (m, 1H), 2.66 - 2.52 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.11 - 2.02 (m, 1H)
실시예 A-9 : 화합물 
의 제조
9-1) tert-부틸 4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트의 제조
6-플로오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 (100mg, 0.36mmol) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (81.2mg, 0.36mmol)를 NMP (1mL)에 용해시키고, 반응 혼합물에 DIPEA (5당량)을 가하고, 120℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물의 반응을 물로 종료시키고, EA로 추출하고, NH4Cl 포화 수용액 및 브라인 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시켰다. 반응 혼합물을 실리카에 로딩하고, MPLC로 분리하여(HX/EA 30% -> 50% for 10 min), 오일 생성물을 수득하였다(110mg, 수율 66%).
9-2) 3-(1-옥소-6-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
tert-부틸 4-[2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일]피페라진-1-카복실레이트를 DCM (1ml) 중의 20% TFA 용액에 용해시키고, 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응을 NaHCO3 포화 수용액으로 종료시키고, EA로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 증발시켰다. 반응 혼합물을 MPLC (MC/ME Me 0 -> 10%)로 정제하였다. 흰색 고체의 생성물을 수득하였다 (40 mg, 수율 86%)
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.24 (s, 1 H) 8.02 (d, J=9.05 Hz, 1 H) 7.47 (dd, J=8.93, 2.57 Hz, 1 H) 7.31 (s, 0.5 H) 7.23 (d, J=2.45 Hz, 1 H) 7.13 (s, 0.5 H) 5.34 (dd, J=8.93, 4.52 Hz, 1 H) 3.28 - 3.44 (m, 6 H) 2.85 - 2.95 (m, 4 H) 2.30 - 2.40 (m, 1 H) 2.16 - 2.30 (m, 2 H)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [342.2].
실시예 A-10 : 화합물 
의 제조
10-1) tert-부틸 4-(3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트의 제조
3-(7-플루오로-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 (100mg, 0.36mmol) 및 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (81.2mg, 0.44mmol)를 NMP (1 mL)에 용해시키고, DIPEA (5 당량)를 반응 혼합물에 가하고, 120℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물의 반응을 물로 종료시키고, EA로 추출하고, NH4Cl 포화 수용액 및 브라인 용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 반응 혼합물을 실리카에 로딩하고, MPLC로 분리하여(HX/EA 30% -> 50% for 10 min), 오일로서 생성물을 수득하였다 (수율: 110mg, 66%).
10-2) 3-(1-옥소-7-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
tert-부틸 4-[3-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-옥소-3,4-디하이드로프탈라진-6-일]피페라진-1-카복실레이트(60mg, 0.14 mmol)을 DCM(1ml) 중의 20% TFA에 녹이고, 실온에서 2시간 동안 반응시켰다. 반응을 NaHCO3 포화 수용액으로 종료시키고, EA로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 증발시켰다. 반응 혼합물을 MPLC (MC/ME Me 0 -> 10%)로 정제하여, 생성물로서 흰색 고체를 수득하였다 (수율: 40 mg/ 86%).
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.21 - 8.29 (m, 1 H) 7.76 (d, J=8.80 Hz, 1 H) 7.58 (dd, J=8.93, 2.57 Hz, 1 H) 7.47 (d, J=2.45 Hz, 1 H) 7.28 (s, 0.5 H) 7.13 (s, 0.5 H) 5.34 - 5.44 (m, 1 H) 3.26 - 3.33 (m, 4 H) 2.81 - 2.91 (m, 3 H) 2.62 - 2.69 (m, 1 H) 2.55 - 2.62 (m, 1 H) 2.31 - 2.44 (m, 1 H) 2.15 - 2.31 (m, 2 H)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [342.2].
실시예 A-11: 3-(8-메톡시-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
화합물 
의 제조
3-(6-플루오로-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온(100mg, 0.36mmol)을 DMSO(1ml)에 녹이고, NaOMe(19.6mg, 0.36mmol)를 반응 혼합물에 가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. 유기 용매를 제거하고, EA 및 물로 추출하였다. 혼합물을 MPLC로 정제하고, 생성물을 흰색 고체로서 수득하였다(수율: 80mg / 76%).
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (br. s., 1 H) 8.40 (s, 1 H) 8.14 - 8.25 (m, 1 H) 7.42 - 7.49 (m, 2 H) 5.80 (dd, J=12.23, 5.38 Hz, 1 H) 3.94 (s, 3 H) 2.86 - 2.99 (m, 1 H) 2.52 - 2.67 (m, 2 H) 2.07 - 2.17 (m, 1 H)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [288.2].
실시예 A-12 : 3-(7-메톡시-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
화합물 
의 제조
3-(7-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온(100mg, 0.36mmol)을 DMSO(1ml) 중에 용해시키고, NaOMe(19.6mg, 0.36mmol)를 반응 혼합물에 가하였다. 반흥 혼합물을 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. 유기 용매를 제거하고, EA 및 물로 추출하였다. 혼합물을 MPLC로 정제하고, 생성물을 흰색 고체로서 수득하였다. (수율: 78mg / 75%)
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.01 - 11.11 (m, 1 H) 8.38 - 8.45 (m, 1 H) 7.90 - 7.96 (m, 1 H) 7.65 (d, J=2.69 Hz, 1 H) 7.56 (dd, J=8.68, 2.57 Hz, 1 H) 5.77 - 5.85 (m, 1 H) 3.93 - 3.98 (m, 3 H) 2.87 - 3.00 (m, 1 H) 2.53 - 2.70 (m, 2 H) 2.06 - 2.18 (m, 1 H)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [288.2].
실시예 A-13 : 3-(6-메톡시-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
화합물 
의 제조
3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온(100mg, 0.36mmol)을 DMSO(1ml) 중에 용해시키고, NaOMe(19.6mg, 0.36mmol)를 반응 혼합물에 가하였다. 반흥 혼합물을 실온에서 1시간 동안 반응시켰다. 유기 용매를 제거하고, EA 및 물로 추출하였다. 혼합물을 MPLC로 정제하고, 생성물을 흰색 고체로서 수득하였다. (수율: 80mg / 76%)
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.01 (s, 1 H) 8.32 (s, 1 H) 7.88 (t, J=8.01 Hz, 1 H) 7.40 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 7.44 (d, J=7.70 Hz, 1 H) 5.64 (dd, J=11.49, 4.52 Hz, 1 H) 3.90 (s, 3 H) 2.83 - 2.96 (m, 1 H) 2.52 - 2.66 (m, 2 H) 2.03 - 2.13 (m, 1 H)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [288.2].
실시예 A-14 : 3-(5-메톡시-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
화합물 
의 제조
14-1) 메틸 2-(브로모메틸)-3-메톡시벤조에이트의 제조
실온에서 ClCH2CH2Cl (250 ml) 중의 메틸 2-메틸-3-메톡시벤조에이트 (11.7 g, 64.9 mmol) 용액에 1-브로모피롤리딘-2,5-디온 (11.5 g, 64.94 mmol) 및 벤조일 벤젠카보퍼옥소에이트 (786 mg, 3.24 mmol) 를 순차적으로 가하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 가열 환류시켰다. 붉은색이 사라지는 시점이 반응 완료 시점이다. 냉각 후, 반응물을 물로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하였다. 조 생성물을 추가 정제없이 다음 반응에 사용하였다. (16.5 g, 98.2%) MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [259.4].
14-2) 메틸 2-포르밀-3-메톡시벤조에이트의 제조
DCM (300 mL) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-3-메톡시벤조에이트 (14.1 g, 54.1 mmol) 용액에 NMO (12.6 g, 108.1 mmol) 및 4Å 분자체 (50 g)을 실온에서 순차적으로 가하였다. 반응물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (100 mL)로 세척하였다. DCM 층을 물(250 mL)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다. (8.3 g, 80.01%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [195.0].
14-3) 2-포르밀-3-메톡시벤조 산의 제조
THF (100 mL) 중의 메틸 2-포르밀-3-메톡시벤조에이트 (6.5 g, 33.6 mmol) 용액에 H2O (100 mL) 중의 리튬(1+) 하이드록사이드 (2.4 g, 100.5 mmol)를 실온에서 가하였다. 2시간 동안 교반한 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 증발시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화하여 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트 (250 mL)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하여, 흰색 결정을 수득하였다. (11.2g, 82.6%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [199.2].
14-4) 5-메톡시프탈라진-1(2H)-온의 제조
MeOH (20 mL) 중의 2-포르밀-3-메톡시벤조 산 (8.2 g, 45.5 mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (10.3g, 342mmol)을 실온에서 가하였다. 2시간 동안 교반한 후, 반응물을 감압 농축하고, 물(50 ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (150 mL)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하여 흰색 결정을 수득하였다. (9.2g, 76.35%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [176.9].
14-5) 3-(5-메톡시-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
THF (250 mL) 중의 5-메톡시프탈라진-1(2H)-온 (5.1g, 28.9 mmol) 일부 현탁액에 1.0 M LDA (37.4 mL)를 0℃에서 적가하였다. 30분간 교반한 후, 3-브로모피페리딘-2,6-디온을 반응물에 일부분씩 가하였다. 반응물을 80℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응이 종료되면, 반응물을 실온으로 냉각하고, 물(100 ml)에 붓고, 6N HCl로 pH를 3~4로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 이를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 MPLC로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로서 수득하였다. (7.2g, 수율 86.5%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [288.3].
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.06 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.87-7.77 (m, 2H), 7.54-7.51 (m, 1H), 5.85 (m, 1H), 4.0 (s, 3H), 2.98 - 2.90 (m, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 2H), 2.14 - 2.09 (m, 1H).
실시예 A-15 : 3-(6-브로모-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
화합물 
의 제조
15-1) 5-브로모-3-하이드록시이소벤조푸란-1(3H)-온의 제조
200 ml 의 ClCH2CH2Cl 중의 5-브로모프탈라이드 (5.2 g, 24.4 mmol) 및 N-브로모숙신이미드 (5.6 g, 31.7 mmol) 혼합물에 AIBN (401 mg, 2.44 mmol)을 가하고, 8시간 동안 환류시켰다. 반응에 뒤이어 TLC를 진행하였다. 숙신이미드를 여과하고, 케이크를 ClCH2CH2Cl (50 mL)로 세척하였다. 용매를 진공에서 제거하여, 잔사 5.2g를 남기고, 여기에 50 ml 물을 가하였다. 혼합물을 4시간 동안 교반하면서 환류시키고, 혼합물을 냉각시키고, 생성물을 여과하고, 물로 중화 세척하고, 건조하여, 옅은 황백색의 결정을 수득하였다. (4.85g, 수율 86.7%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [229.6] and [230.5]
15-2) 6-브로모프탈라진-1(2H)-온의 제조
MeOH (50 mL) 중의 5-브로모-3-하이드록시-1,3-디하이드로-2-벤조푸란-1-온 (1.5g, 6.55 mmol) 용액에 NH2NH2 H2O (315 mg, 9.82 mmol)를 실온에서 가하고, 30분간 교반하였다. 반응을 5시간 동안 환류시켰다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 생성된 고체를 에틸 아세테이트로 분쇄(trituration)하여, 흰색 결정을 수득하였다. (1.31g, 5.82 mmol)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [226.3].
15-3) 3-(6-브로모-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온의 제조
THF (150 mL) 중의 6-브로모-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 (1.31g, 5.82mmol) 현탁액에 1.0 M LDA (7.33 mL)을 0℃에서 적가하였다. 30분간 교반한 후, 3-브로모피페리딘-2,6-디온을 반응물에 일부분씩 가하였다. 반응물을 80℃로 가열하고, 2시간 동안 교반하였다. 반응이 종료되면, 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물(100 ml)에 붓고, 6N HCl로 pH를 3~4로 조정하고, 에틸 아세테이트로 추출하고, 이를 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축하였다. 생성된 고체를 여과하고, 에틸 아세테이트로 세척하여, 흰색 결정을 수득하였다.(1.73g, 5.15 mmol)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [337.2].
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.08 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.18-8.16 (m, 1H), 8.06-8.04 (m, 1H), 5.84-5.80 (m, 1H), 2.93 - 2.90 (m, 1H), 2.65 - 2.54 (m, 2H), 2.15 - 2.12 (m, 1H).
실시예 A-16 : 3-(1-옥소-8-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 이염산염의 제조
화합물 
제조
16-1) 3-(1-옥소-8-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 이염산염의 제조
DMA(4 mL) 중의 3-(8-플루오로-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 (0.3g, 1.09 mmol) 용액에 tert-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (244 mg, 1.13 mmol) 및 에틸비스(프로판-2-일)아민 (423 mg, 3.24 mmol)을 순차적으로 가하였다. 혼합물을 120℃에서 5시간 교반하였다. 반응 혼합물을 물로 희석하고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 브라인 용액으로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 옅은 황백색의 오일을 수득하였다. (415 mg, 86.2%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [442.4]
16-2) 3-(1-옥소-8-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 이염산염의 제조
DMF (1 mL) 중의 8-니트로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온(60 mg, 0.314 mmol) 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온(90 mg, 0.471 mmol) 및 K2CO3 (129 mg, 0.942 mmol)를 순차적으로 가하였다. 반응을 85℃로 5시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 반응 혼합물을 물(5 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(5 mL)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트를 MgSO4 로 추출하고, 감압 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다. (68.0 mg, 수율 71.7%)
MS (ESI, m/z): [M+1]+ = [342.6].
[NMR] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ11.02 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.87-7.83 (m, 1H), 7.53-7.51 (m, 1H), 7.39-7.41 (m, 1H), 5.55 (m, 1H), 3.31-3.27 (br, 8H), 2.88 - 2.80 (m, 1H), 2.64 - 2.57 (m, 2H), 2.50 (br, 1H), 2.13 - 2.08(m, 1H).
실시예 B : ABN 유도체 기반의 cMET 표적 리간드 화합물의 제조
ABN base-cMET 표적 리간드 화합물을 제조하기 위하여 미국 등록특허 (US 9,403,831 B2)를 참고하여, 하기 화학식의 중간체 (S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2((6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린(☞ 상기 미국 특허에 맞추어 화학식명을 기재하였습니다)
(2S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3a,4a-디히드로-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린을 합성하고, 이 중간체를 이용하여 하기 실시예 B-1 내지 B-13의 화합물을 제조하였다.
[중간체 화학식]
실시예 B-1: tert-부틸 (S)-3-((4-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)p피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트
톨루엔(3.0ml) 중의 (2S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3a,4a-디히드로-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린 (100mg, 0.22 mmol) 및 t-부틸 3-[(피페라진-1-일)메틸]아제티딘-1-카복실레이트 (134mg, 0.53 mmol) 용액에 Pd2(dba)3 (60.1 mg, 0.07 mmol), Xantphos (38.1 mg, 0.07 mmol), NaOt-Bu(214 mg, 66 mmol)을 가하였다. 반응물을 3 시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, DCM으로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물 (70 mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 632.6.
실시예 B-2 : (S)-4-(5-(4-(아제티딘-3-일메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-ㅇ일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린
DCM 중의 t-부틸 3-[(4-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}피페라진-1-일)메틸]아제티딘-1-카복실레이트(70 mg, 0.11 mmol) 용액에 30% TFA를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(50mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 532.7.
실시예 B-3 : (S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(4-((1-메틸아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린
(2S)-4-(5-{4-[(아제티딘-3-일)메틸]피페라진-1-일}피리미딘-2-일)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린(14 mg, 0.026 mmol) 용액을 메탄올(1% 아세트산)(1 ml)에 용해시키고, 포름알데히드(3.95 mg, 0.13 mmol) 35% 수용액 및 NaBH4 (2.5 mg, 0.07 mmol 당량)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(50mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 546.7.
실시예 B-4 : 벤질 (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔 (3.0ml) 중의 (2S)-4-(5-브로모피리딘-2-일)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린(100 mg, 0.22 mmol) 및 벤질 4-[(아제티딘-3-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트(190 mg, 0.66 mmol) 용액에 Pd2(dba)3 (60.1 mg, 0.07 mmol) , Xantphos (38.1 mg, 0.07mmol), NaOt-Bu(214 mg, 66 mmol)를 가하였다. 반응물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, DCM으로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(65mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 666.6.
실시예 B-5 : (S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(3-(피페라진-1-yl메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린
MeOH(2ml) 중의 벤질 4-[(1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트(50 mg, 0.07 mmol) 용액에 Pd/C (10 wt%)를 가하였다. 반응물을 12시간 동안 상온에서 H2 가스 하에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 여과 및 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~10%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물 (15mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 532.6.
실시예 B-6 : (S)-4-(5-(3-((벤질옥시)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린
톨루엔(40ml) 중의 (2S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린(1.4g, 3.1 mmol) 및 3-[(벤질옥시)메틸]아제티딘 (0.98 g, 5.51 mmol) 용액에 Pd2(dba)3 (0.84 g, 0.92 mmol), Xantphos (0.53 g, 0.92 mmol), NaOt-Bu(0.89 g, 9.18mmol)를 가하였다. 반응물을 3시간 동안 90℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, DCM으로 추출하고 (2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(0.8g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 554.6.
실시예 B-7 : (S)-(1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메탄올
DCM(100 ml) 중의 (2S)-4-(5-{3-[(벤질옥시)메틸]아제티딘-1-일}피리미딘-2-일)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린(0.5 g, 0.91 mmol) 용액에 MsOH(25 ml)를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 0℃~상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MC/Me (0~10%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(0.3 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 464.5.
실시예 B-8 : (S)-(1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠술포네이트
DCM(5 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메탄올(160 mg, 0.36 mmol) 용액에 TEA(96.2 ul, 0.69 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물에 4-메틸벤젠-1-술포닐 클로라이드 (132 mg, 0.69 mmol)를 가하고, 3시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, DCM으로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 HX/EA (80->95%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(155mg)을 수득하였다. LC-MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 618.4.
실시예 B-9 : tert-부틸 (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-카복실레이트
ACN(1 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠-1-설포네이트(20 mg, 0.03 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트(13.4 mg, 0.09 mmol)) 및 소듐 아이오다이드(4.8 mg, 0.03 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻밤 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(10 mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 632.4.
실시예 B-10 : (S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린
메탄올(1% 아세트산)(1 ml) 중의 (2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}-4-(5-{3-[(피페라진-1-일)메틸]아제티딘-1-일}피리미딘-2-일)모르폴린(20 mg, 0.04 mmol) 용액에 H2O(3.95mg, 0.13 mmol) 중의 포름알데하이드 35% 및 NaBH4 (2.5 mg, 0.07 mmol)를 가하였다. 반응물을 1시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(15mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 546.7.
실시예 B-11 : (S)-4-(5-(3-(((4-메톡시벤질)옥시)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린
톨루엔(40 ml) 중의 (2S)-4-(5-브로모피리미딘-2-일)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린(1.0g, 2.2mmol), 3-{[(4-메톡시페닐)메톡시]메틸}아제티딘(0.7 g, 3.28 mmol) 용액에 Pd2(dba)3 (0.4 g, 0.44 mmol), Xantphos (0.26 g, 0.44 mmol), NaOt-Bu(0.54 g, 5.47 mmol)을 가하였다. 반응물을 3시간 동안 90 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, DCM으로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(0.85g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 584.6.
실시예 B-12 : tert-부틸 (S)-(4-(((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메톡시)메틸)페닐)카바메이트
THF(5 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메탄올(110 mg, 0.24 mmol) 용액에 소듐하이드라이드(40.0 mg, 1.66 mmol) 및 t-부틸 N-[4-(브로모메틸)페닐]카바메이트 (123 mg, 0.43 mmol)를 가하였다. 반응물을 3시간 동안 50℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, EA로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(100mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 670.5.
실시예 B-13 : tert-부틸 (S)-(5-(((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메톡시)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
THF(5 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메탄올(110 mg, 0.24 mmol) 용액에 소듐하이드라이드 (40.0 mg, 1.66mmol) 및 t-부틸 N-[5-(브로모메틸)피리딘-2-일]카바메이트(123 mg, 0.43 mmol)를 가하였다. 반응물을 3시간 동안 50 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고, EA로 추출하고(2 회), MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물(100mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 669.5.
실시예 C : 테포티닙 유도체 기반의 cMET 표적 리간드 화합물의 제조
실시예 C-1 : tert-부틸 (2R)-2-(((2-(3-((3-(3-cyano페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)옥시)메틸)모르폴린-4-카복실레이트
1-1) t-부틸 (2R)-2-[({2-[3-(하이드록시메틸)페닐]피리미딘-5-일}옥시)메틸]모르폴린-4-카복실레이트의 합성
질소 대기 조건에서, 1.4-디옥산 및 물 중의 t-부틸 2-{[(2-클로로피리미딘-5-일)옥시]메틸}모르폴린-4-카복실레이트 (6.51 g (19.7 mmol), [3-(하이드록시메틸)페닐]보로닉 산(6.51 g 19.7 mmol), Pd(PPh3)4 (1.13 g, 1mmol) 및 탄산칼륨(6.80 g, 49.2 mmol) 혼합 용액을 2시간 동안 80℃에서 교반하였다. 이후 반응액을 상온으로 냉각시키고 필터링한 후 디클로로메탄(100 mL * 3회)으로 추출하였다. 그 후, 유기층을 결합하고 염수(100 mL * 2회)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EA/Hex (50~100%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물(4.5 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 402.5.
1-2) t-부틸 (2R)-2-({[2-(3-{[3-(3-시아노페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]옥시}메틸)모르폴린-4-카복실레이트의 합성
t-부틸 (2R)-2-[({2-[3-(하이드록시메틸)페닐]피리미딘-5-일}옥시)메틸]모르폴린-4-카복실레이트 (3 g, 7.47 mmol) 및 3-(6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (1.47 g, 7.47 mmol)을 THF (50 ml)에 용해하였다. 혼합물에 트리페닐포스핀(2.35 g, 8.97 mmol)을 0℃에서 천천히 가하였다. 그 후, (E)-N-{[(프로판-2-일옥시)카르보닐]이미노}(프로판-2-일옥시)포름아마이드 (1.81g, 8.97mmol)를 적가하였다. 포름아마이드가 첨가되면서 즉시 녹색으로 변하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 상온에서 교반하였다(주황색으로 색 변화). 그 후, 반응 혼합물을 농축하고 (HX/EA EA 30%) 용액에 용해하였다. 트리에틸포스핀의 결정화를 돕기 위해 트리에틸포스핀 시드를 반응 혼합물에 첨가하였다. 그 후, 고체화된 트리에틸포스핀을 여과하고 액체 생성물을 농축시켰다. 잔사를 EA/Hex (30~50%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물(3.5 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 581.6.
실시예 C-2 :(S)-3-(1-(3-(5-(모르폴린-2-일메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
DCM 중의 t-부틸 (R)-2-(((2-(3-((3-(3-시아노페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메칠)페닐)피리딘-5-일)옥소_메틸)모르포린-4-카르복실레이트 (4.5g, 7.74mmol)용액에 30 % TFA를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물(3.11 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 481.5.
실시예 C-3 : t-부틸 4-(2-{[2-(3-{[3-(3-시아노페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]옥시}에틸)피페라진-1-카복실레이트
3-1) t-부틸 (2R)-2-[({2-[3-(하이드록시메틸)페닐]피리미딘-5-일}옥시)메틸]모르폴린-4-카복실레이트의 합성
질소 대기 조건에서, 1.4-디옥산 및 물 (4:1의 10 mL) 중의 t-부틸 4-{2-[(2-클로로피리미딘-5-일)옥시]에틸}피페라진-1-카복실레이트 (2.0 g, 5.8mmol), [3-(하이드록시메틸)페닐]보로닉 산 (0.87 g, 5.83 mmol), Pd(PPh3)4 (0.34g, 0.29mmol) 및 칼륨 카보네이트(potassium carbonate) (2.0g, 14.6mmol) 혼합 용액을 2시간 동안 80℃에서 교반하였다. 이후 반응액을 상온으로 냉각시키고, 필터링한 후, 디클로로메탄(100mL * 3회)으로 추출하였다. 그 후, 유기층을 결합하고, 염수(100mL * 2회)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 여과하고 농축하였다. 잔사를 EA/Hex (50~100%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물(1.8 g)을 수득하였다. MS(ESI, m/z): [M+H]+ = 415.5.
3-2) tert-부틸 4-(2-((2-(3-((3-(3-시아노페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)옥시)에틸)피페라진-1-카복실레이트
t-부틸 4-[2-({2-[3-(하이드록시메틸)페닐]피리미딘-5-일}옥시)에틸]피페라진-1-카복실레이트 (2.2g, 5.31mmol) 및 3-(6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (1.05g, 5.31mmol)을 THF (50 ml)에 용해하였다. 혼합물에 트리페닐포스핀(1.67 g, 6.37 mmol)을 천천히 가하였다. 그 후, (E)-N-{[(프로판-2-일옥시)카르보닐]이미노}(프로판-2-일옥시)포름아마이드 (1.05g, 6.37mmol)를 적가하였다. 포름아마이드가 첨가되면서 즉시 녹색으로 변하였다. 반응 혼합물을 3시간 동안 상온에서 교반하였다(주황색으로 색 변화). 그 후, 반응 혼합물을 농축하고 (HX/EA EA 30%) 용액에 용해하였다. 트리에틸포스핀의 결정화를 돕기 위해 트리에틸포스핀 시드를 반응 혼합물에 첨가하였다. 그 후, 고체화된 트리에틸포스핀을 여과하고 액체 생성물을 농축시켰다. 잔사를 EA/Hex (30~50%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물(3.1 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 594.7.
실시예 C-4 : 3-(6-옥소-1-(3-(5-(2-(피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
DCM 중의 t-부틸 4-(2-{[2-(3-{[3-(3-시아노페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]옥시}에틸)피페라진-1-카복실레이트 (1.5 g, 2.53mmol) 용액에 30 % TFA를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 상온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물(1.22 g)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 494.6.
실시예 C-5 : t-부틸 4-(2-(3-((3-(3-시아노페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)피페라진-1-카복실레이트
톨루엔 (3 mL) 중의 3-(1-{[3-(5-브로모피리미딘-2-일)페닐]메틸}-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (0.3g, 0.67mmol), t-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (0.17g, 0.67mmol), Pd2(dba)3 (19.4mg, 33.8μmol), Xantphos (39.1mg, 67.5μmol), Na-t-butoxide(162 mg, 1.69 mmol) 혼합물을 2시간 동안 100℃에서 마이크로파에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 EA/Hex (50~100%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (310 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [560.7].
실시예 C-6 : 3-(6-옥소-1-(3-(5-(피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
DCM 중의 t-부틸 4-(2-(3-((3-(3-시아노페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)피페라진-1-카복실레이트 (310mg, 0.50mmol) 용액에 30 % TFA를 가하였다. 반응물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후, 감압하에서 농축하고, 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다(250 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [460.6].
실시예 D : ABN 유도체 기반의 cMET 단백질을 표적으로 하는 프로탁의 제조
실시예 D-1 : 3-(6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
1-1) 4-플루오로-2-포르밀벤조에이트의 제조
실온에서, DCM (100 mL) 중의 메틸 2-(브로모메틸)-4-플루오로벤조에이트 (22.0 g, 89 mmol) 용액에 NMO (15.6 mg, 134 mmol) 및 4Å 분자체를 순차적으로 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 분자체를 여과하고, DCM (50ml)로 세척하였다. DCM 층을 물(200ml)로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 고체로서 수득하였다(12.0g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 183.2
1-2) 4-플루오로-2-포르밀벤조산의 제조
실온에서, THF (50 mL) 중의 메틸 4-플루오로-2-포르밀벤조에이트(12.0g, 65.9mmol) 용액에 리튬(+1) 하이드록사이드 (13.8g, 329mmol) 수용액(50ml)을 가하였다. 2시간 교반 후, 반응물을 감압 농축하여 THF를 건조시켰다. 0℃로 냉각시킨 후, 반응물을 1N HCl로 산성화시켜 pH를 4로 조정하였다. 반응물을 에틸 아세테이트(50ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다 (10.0 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 169.2.
1-3) 6-플루오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 제조
실온에서, 메탄올 (50 mL) 중의 4-플루오로-2-포르밀벤조산 (6.78g, 40.3mmol) 용액에 NH2NH2 일수화물 (2.02mg, 40.3mmol)을 가하였다. 30분간 교반 후, 반응물을 2시간 동안 80℃로 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 감압 농축하였다. 잔사를 물(150ml)에 붓고, 에틸 아세테이트 (150ml)로 2회 추출하 였다. 혼합한 에틸 아세테이트 층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켜, 흰색 결정을 수득하였다 (5.5g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 165.3.
1-4) 3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
0℃에서 DMF (2mL) 중의 6-플루오로-1,2-디하이드로프탈라진-1-온(100mg, 0.61mmol) 용액에 소듐 2-메틸프로판-2-올레이트(175 mg, 0.91 mmol)를 가하였다. 30분간 교반한 후, 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (90mg, 0.47mmol)을 반응 혼합물에 가하고, 6시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물에 물(20ml)을 붓고, 에틸 아세테이트(20ml)로 2회 추출하였다. 혼합한 에틸 아세테이트를 MgSO4 로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 흰색 결정으로 수득하였다 (110.0 mg, 65.6 %). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 276.6.
1-5) t-부틸 4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트 제조
NMP (3.0ml) 중의 3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (300 mg, 1.04 mmol) 및 t-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (386 mg, 2.07 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (4.0 equivalent)을 가하였다. 반응물을 48시간 동안 130 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다(350 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 442.4
1-6) 3-(1-옥소-6-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
DCM (30 ml) 중의 t-부틸 4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트 (300mg, 0.71mmol) 용액에 TFA (10 ml)를 가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (200 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 342.4
1-7) 3-(6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
ACN(1 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠-1-설포네이트(15 mg, 0.02 mmol) 및 3-[1-옥소-6-(피페라진-1-일)-1,2-디하이드로프탈라진-2-일]피페리딘-2,6-디온(12.4 mg, 0.03 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트 (10.1 mg, 0.07 mmol) 및 소듐 아이오다이드(4.73 mg, 0.032mmol)를 가하였다. 반응물을 하룻밤 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물 (10 mg)을 수득하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 787.9.
실시예 D-2 : 3-(4-메틸-6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
2-1) 메틸 2-아세틸-4-플루오로벤조에이트 제조
톨루엔 (150 ml) 중의 메틸 2-브로모-4-플루오로벤조에이트 (10g, 43.0mmol) 및 트리부틸(1-에톡시에테닐)스탄난(stannane) (17 g, 47.2 mmol) 용액에 트리페닐[트리스(트리페닐-λ-포스파닐)팔라디오]-λ-포스판 (4.98g, 4.3 mmol)을 가하였다. 반응물을 20시간 동안 100℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 THF 100ml에 용해시키고 2N HCl 40 ml를 가하였다. 반응물을 30분 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 HX/EA (0~80%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (7.5 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 457.4.
2-2) 6-플루오로-4-메틸-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 제조
메탄올 (500 mL) 중의 메틸 2-아세틸-4-플루오로벤조에이트(19g, 97.1mmol) 용액에 NH2NH2 수화물을 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 추가로 6시간 동안 85℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하고, 물 (100 mL)을 가하고 3시간 동안 교반한 후, 고체를 여과하고 진공 건조하여, 표제 화합물을 수득하였다 (15 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 179.2.
2-3) 3-(6-플루오로-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 제조
-20℃에서 THF (75 mL) 중의 비스(프로판-2-일)아민(7.27ml) 용액에 2.5M 헥산(20.6ml) 중의 부틸리튬을 가하였다. 반응물을 30분 동안 0℃에서 교반하였다. LDA 용액에 6-플루오로-4-메틸-1,2-디하이드로프탈라진-1-온 (7.65g)을 가하고 30분 동안 실온에서 교반하였다. 그 후, 같은 온도에서 3-브로모피페리딘-2,6-디온을 가하였다. 2시간 동안 환류하여 용매를 제거하고 물로 세척하였다. 고체를 여과하고 진공 건조하여 표제 화합물을 수득하였다 (7.9 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 290.2.
2-4) t-부틸 4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트 제조
NMP (3.0 ml) 중의 3-(6-플루오로-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-2-일)피페리딘-2,6-디온 (300 mg, 1.04 mmol) 및 t-부틸 피페라진-1-카복실레이트 (386 mg, 2.07 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (1.5ml 4.1mmol)을 가하였다. 반응물을 48시간 동안 130℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (350 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 456.4.
2-5) 3-(4-메틸-1-옥소-6-(피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
DCM (30 ml) 중의 t-부틸 4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-카복실레이트 (300mg, 0.71mmol) 용액에 TFA (10 ml)를 가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (200 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 356.4.
2-6) 33-(4-메틸-6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
ACN(1 ml) 중의 1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일l)메틸 4-메틸벤젠-1-설포네이트(15 mg, 0.02 mmol) 및 3-[4-메틸-1-옥소-6-(피페라진-1-일)-1,2-디하이드로프탈라진-2-일]피페리딘-2,6-디온 (11.2 mg, 0.03 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트 (10.1 mg, 0.073 mmol) 및 소듐 아이오다이드(4.73 mg, 0.03 mmol)를 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 교반하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (10 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 801.9.
실시예 D-3 : 3-((3-플루오로-4-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온
3-1) t-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페라진-1-카복실레이트 제조
DMF(100 mL) 중의 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (5 g, 31.4 mmol) 용액에 t-부틸 피페라진-1-카복실레이트(5.9 g, 31.4 mmol) 및 포타슘 카보네이트 (21.7 g, 157 mmol)를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. MgSO4로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 잔사를 헥산/에틸아세테이트 (0~30%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다 (10.2 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 326.3.
3-2) t-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트 제조
포화 NH4Cl/THF (1:1) (100 mL) 중의 t-부틸 4-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페라진-1-카복실레이트 (4.8 g, 14.8 mmol) 용액에 철 파우더 (16.5 g, 295 mmol)을 가하였다. 반응물을 2시간 동안 80 ℃에서 교반하고 추가 정제 없이 다음 과정에 사용하였다. ESI, m/z): [M+H]+ = 296.4.
3-3) t-부틸 4-{4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐}피페라진-1-카복실레이트 제조
t-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트 (1.5g, 5.1mmol) DMF (30 mL) 중의 t-부틸 4-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페라진-1-카복실레이트 (1.5 g, 5.1 mmol) 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.95 g, 10.2 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 85 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. 잔사를 헥산/에틸아세테이트 (0~100%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (2.1 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 407.5.
3-4) 3-{[3-플루오로-4-(피페라진-1-일)페닐]아미노}피페리딘-2,6-디온 제조
DCM 중의 t-부틸 4-{4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐}피페라진-1-카복실레이트 (20 mg, 49.2 μmol) 용액에 30 % TFA를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 교반하고 추가 정제 없이 다음 과정에 사용하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 307.3.
3-5) 3-((3-플루오로-4-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온
ACN(1 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠-1-설포네이트 (15 mg, 0.02 mmol) 및 3-{[3-플루오로-4-(피페라진-1-일)페닐]아미노}피페리딘-2,6-디온 (11.2 mg, 0.04 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트 (10.1 mg, 0.07 mmol) 및 소듐 아이오다이드 (4.73mg, 0.03mmol)를 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (10 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 752.9.
실시예 D-4 : 3-(4-메틸-6-(4-((1-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
4-1) t-부틸 4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카복실레이트 제조
NMP (2.0 ml) 중의 3-(6-플루오로-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (300 mg, 1.09 mmol) 및 t-부틸 4-(피페라진-1-일-메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (600 mg, 2.18 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (1ml, 4.35mmol)을 가하였다. 반응물을 48시간 동안 130 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (400 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 553.4.
4-2) 3-(4-메틸-1-옥소-6-(4-(피페리딘-4-일 메틸)피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 제조
DCM (30 ml) 중의 t-부틸 4-((4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-카복실레이트 (400 mg, 1.52 mmol) 용액에 TFA (10 ml)를 가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (400 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 453.4.
4-3) 33-(4-메틸-6-(4-((1-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온
ACN(1 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸 4-메틸 벤젠-1-설포네이트 (15 mg, 0.02 mmol) 및 3-(4-메틸-1-옥소-6-(4-(피페리딘-4-일 메틸)피페라진-1-일)프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (16.5 mg, 0.03 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트(10.1 mg, 0.073 mmol) 및 소듐 아이오다이드(4.73 mg, 0.03 mmol)를 가하였다. 반응 혼합물을 하룻 밤 동안 80℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (11 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 899.1.
실시예 D-5 : 3-((3-플루오로-4-(4-((4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온
5-1) t-부틸 4-{[1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페리딘-4-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트 제조
DMF(200 mL) 중의 t-부틸 4-[(피페리딘-4-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트 (10 g, 35.3 mmol) 용액에 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (5.61 g, 35.3 mmol) 및 포타슘 카보네이트 (24.4 g, 176 mmol)를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. MgSO4 로 건조시키고 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (11 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 423.5.
5-2) t-부틸 4-{[1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트 제조
포화 NH4Cl/THF (1:1) (200 mL) 중의 t-부틸 4-{[1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페리딘-4-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트 (11 g, 26 mmol) 용액에 철 파우더(29.5 g, 521 mmol)를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 정제하고 감압 하에서 농축하고, 추가 정제 없이 다음 과정에 사용하였다. MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 393.5.
5-3) t-부틸 4-[(1-{4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐}피페리딘-4-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트 제조
DMF (25 mL) 중의 t-부틸 4-{[1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일]메틸}피페라진-1-카복실레이트 (1.2 g, 3.1 mmol) 용액에 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (1.2 g, 6.1 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 85 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 2회 추출하였다. MgSO4로 건조시키고 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (1.3 g). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 504.6.
5-4) 3-[(3-플루오로-4-{4-[(피페라진-1-일)메틸]피페리딘-1-일}페닐)아미노]피페리딘-2,6-디온 제조
DCM 중의 t-부틸 4-[(1-{4-[(2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노]-2-플루오로페닐}피페리딘-4-일)메틸]피페라진-1-카복실레이트 (650 mg, 1.29 mmol) 용액에 30 % TFA 를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (5~10 %) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (485 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 404.5.
5-5) 3-((3-플루오로-4-(4-((4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온
ACN(1 ml) 중의 (1-{2-[(2S)-2-{[5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일]메틸}모르폴린-4-일]피리미딘-5-일}아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠-1-설포네이트(15 mg, 0.02 mmol) 및 3-[(3-플루오로-4-{4-[(피페라진-1-일)메틸]피페리딘-1-일}페닐)아미노]피페리딘-2,6-디온 (14.6 mg, 0.03 mmol) 용액에 포타슘 카보네이트 (10.1 mg, 0.073 mmol) 및 소듐 아이오다이드 (4.73 mg, 0.03 mmol)를 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 80 ℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/Me (0~3%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (12 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 850.1.
실시예 E : 테포티닙 유도체 기반의 cMET 단백질을 표적으로 하는 프로탁의 제조
실시예 E-1 : 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
NMP(2 ml) 중의 (R)-3-(1-(3-(5-(모르폴린-2-일메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (50 mg, 0.1 mmol) 및 3-(6-플루오로-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (29mg, 0.1mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (50 ul, 0.5 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 140 oC에서 교반하였다. 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4 로 건조하고 감압 하에서 농축하였다. 그 후, MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (48 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 750.8.
실시예 E-2 : 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일일)벤조니트릴
NMP(2 ml) 중의 (R)-3-(1-(3-(5-(모르폴린-2-일 메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (50 mg, 0.1 mmol) 및 3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (27 mg, 0.1 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (50 ul, 0.5 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 140℃에서 교반하였다. 반응물을 물에 붓고 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 결합하고, MgSO4 로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 그 후, MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (35 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 736.7.
실시예 E-3 : 3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
3-1) (R)-3-(1-(3-(5-((4-(2-플루오로-4-니트로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
아세토니트릴 (2 ml) 중의 (R)-3-(1-(3-(5-(모르폴린-2-일메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (180mg, 0.38mmol) 및 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (55.2 mg, 0.38 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (224 mg, 1.73 mmol)을 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물을 감압 하에서 농축한 후, 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (110 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 620.7.
3-2) (R)-3-(1-(3-(5-((4-(4-아미노-2-플루오로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
THF (2 ml) 중의, (R)-3-(1-(3-(5-((4-(2-플루오로-4-니트로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (110 mg, 0.18 mmol) 및 철 (187 mg, 3.34 mmol) 용액에 포화 NH4Cl 2ml를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 뒤 반응물을 정제한 다음, 이를 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 하에서 농축하고, 그 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (92 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 590.7.
3-3) 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
실온에서 DMF (1 ml) 중의 (R)-3-(1-(3-(5-((4-(4-아미노-2-플루오로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (80 mg, 0.14 mmol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (73.4mg, 0.38mmol) 용액에 NaHCO3 (88.1 mg, 0.64 mmol) 를 가하였다. 반응물을 16시간 동안 65℃에서 농축하였다. 반응물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~10%) MPLC 로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (65 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 701.7.
실시예 E-4 : 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
NMP(2 ml) 중의 3-(6-옥소-1-(3-(5-(2-(피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (50 mg, 0.1 mmol) 및 3-(6-플루오로-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (27 mg, 0.1 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (50 ul, 0.5 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 140℃에서 교반하였다. 반응물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 그 후, MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (38 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 749.8.
실시예 E-5 : 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
NMP(2 ml) 중의 3-(6-옥소-1-(3-(5-(2-(피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (50 mg, 0.1 mmol) 및 3-(6-플루오로-4-메틸-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온 (29 mg, 0.1 mmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (50 ul, 0.5 mmol)을 가하였다. 반응물을 하룻 밤 동안 140℃에서 교반하였다. 반응물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 그 후, MeOH/DCM (0~20%) 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (35 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 763.8.
실시예 E-6 : 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
6-1) 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
아세토니트릴 (2 ml) 중의 3-(6-옥소-1-(3-(5-(2-(피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (180 mg, 0.35 mmol) 및 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (55.2 mg, 0.35 μmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (224 mg, 1.73 mmol)을 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 감압 하에서 농축하고, 그 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (110 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 633.7.
6-2) 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
THF (2 ml) 중의 3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (110 mg, 0.18 mmol) 및 철 (187 mg, 3.34 mmol) 용액에 포화 NH4Cl 2ml를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 뒤, 반응물을 정제한 다음, 이를 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 하에서 농축하고, 그 후 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다 (92 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 603.7.
6-3) 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
실온에서 DMF 1 ml 중의 3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (80 mg, 0.14 mmol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (73.4 mg, 0.38 mmol) 용액에 NaHCO3 (88.1 mg, 0.64 mmol) 를 가하였다. 반응물을 16시간 동안 65℃에서 농축하였다. 반응물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO4 로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~10%) MPLC 로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (65 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 714.7
실시예 E-7 : 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
7-1) t-부틸 3-({4-[2-(3-{[3-(3-시나오페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]피페라진-1-일}메틸)아제티딘-1-카복실레이트 제조
톨루엔 (3 mL) 중의 3-(1-{[3-(5-브로모피리미딘-2-일)페닐]메틸}-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (0.3 g, 0.67 mmol), tert-부틸 3-[(피페라진-1-일)메틸]아제티딘-1-카복실레이트 (0.17 g, 0.67 mmol), Pd2(dba)3 (19.4 mg, 33.8 μmol) Xantphos (39.1 mg, 67.5 μmol), Na-t-butoxide(162 mg, 1.69 mmol) 혼합물을 2시간 동안 마이크로웨이브 하 100℃에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응 혼합물을 정제하고,감압 하에서 농축하였다. 잔사를 EA/Hex (50~100%) MPLC로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (310 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [619.7].
7-2) 3-(1-{[3-(5-{4-[(azetidin-3-일)메틸]피페라진-1-일}피리미딘-2-일)페닐]메틸}-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
DCM 중의 t-부틸 4-(2-{[2-(3-{[3-(3-시아노페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]옥시}에틸)피페라진-1-카복실레이트 (310mg, 0.50mmol) 용액에 30 % TFA를 가하였다. 반응물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 종료 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 DCM/MeOH (0~5%) 아민 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (270mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [519.6].
7-3) 3-[1-({3-[5-(4-{[1-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-3-일]메틸}피페라진-1-일)피리미딘-2-일]페닐}메틸)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일]벤조니트릴 제조
아세토니트릴 (2 ml) 중의 3-(1-{[3-(5-{4-[(아제티딘-3-일)메틸]피페라진-1-일}피리미딘-2-일)페닐]메틸}-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (180 mg, 347 μmol) 및 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (55.2 mg, 347 μmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (224 mg, 1.73 mmol)을 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물을 감압 하에서 농축하였다. 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (110mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [658.7].
7-4) 3-[1-({3-[5-(4-{[1-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일]메틸}피페라진-1-일)피리미딘-2-일]페닐}메틸)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일]벤조니트릴 제조
THF (2 ml) 중의 3-[1-({3-[5-(4-{[1-(2-플루오로-4-니트로페닐)아제티딘-3-일]메틸}피페라진-1-일)피리미딘-2-일]페닐}메틸)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일]벤조니트릴 (110 mg, 167 μmol) 및 철 (187 mg, 3.34 mmol) 용액에 포화 NH4Cl를 가하였다. 반응물을 2시간 동안 100℃에서 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물을 정제하고, 정제물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축한 다음, 잔사를 컬럼 크로마토그래피로 정제하고 표제 화합물을 수득하였다 (92 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = [628.7].
7-5) 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
실온에서 DMF 1 ml 중의 3-[1-({3-[5-(4-{[1-(4-아미노-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일]메틸}피페라진-1-일)피리미딘-2-일]페닐}메틸)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일]벤조니트릴 (80 mg, 127 umol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 (73.4 mg, 382 umol) 용액에 NaHCO3 (88.1 mg, 637 umol)를 가하였다. 반응물을 16시간 동안 65℃에서 교반하였다. 반응물을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하고, MgSO4로 건조하고, 감압 하에서 농축하였다. 잔사를 MeOH/DCM (0~10%) MPLC 로 정제하고, 표제 화합물을 수득하였다 (65 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 739.8.
실시예 E-8 : 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
8-1) 3-(6-옥소-1-(3-(5-(4-(피페리딘-4-일메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
톨루엔(10 ml) 중의 3-(1-{[3-(5-브로모피리미딘-2-일)페닐]메틸}-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (700 mg, 1.58 mmol) 및 tert-부틸 4-[(피페라진-1-일)메틸]피페리딘-1-카복실레이트 (491 mg, 1.73 mmol) 용액에 트리스(1,5-디페닐펜타-1,4-디엔-3-온) 디팔라듐 (144 mg, 158 μmol) 및 [5-(디페닐포스파닐)-9,9-디메틸-9H-크산텐-4-일]디페닐포스판 (91.2 mg, 158 μmol)을 가하고, 이어서 K2CO3 (528 mg, 3.94 mmol)를 가하였다. 반응물을 110℃에서 5시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 감압 하에 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, Boc 보호된 화합물을 수득하였다. 화합물을 디옥산(5 mL) 중의 4.0 M HCl 로 처리하고, 5시간 동안 교반하였다. 반응물을 감압 하에 농축하고, 기본 실리카 패드를 통과시켜, 표제 화합물을 수득하였다 (521 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 547.3.
8-2) 3-(1-(3-(5-(4-((1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
아세토니트릴 (2 ml) 중의 3-(6-옥소-1-{[3-(5-{4-[(피페리딘-4-일)메틸]피페라진-1-일}피리미딘-2-일)페닐]메틸}-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (100 mg, 183 μmol) 및 1,2-디플루오로-4-니트로벤젠 (29.1 mg, 1839 μmol) 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (47.3 mg, 366 μmol)를 가하였다. 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 감압 하에 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다 (110 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 686.7.
8-3) 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-아미노-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 제조
THF(2 ml) 중의 3-(1-(3-(5-(4-((1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴 (100 mg, 146 μmol) 및 철 (40.7 mg, 729 μmol) 용액에 2 mL 의 포화 NH4Cl을 가하였다. 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 여과하고, 여액을 물에 붓고, 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기층을 MgSO4로 건조시키고, 감압 하에 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다 (79 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 656.7.
8-4) 3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
아세토니트릴(2 ml) 중의 3-[1-({3-[5-(4-{[1-(2-플루오로-4-니트로페닐)피페리딘-4-일]메틸}피페라진-1-일)피리미딘-2-일]페닐}메틸)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일]벤조니트릴 (100 mg, 146 μmol) 및 3-브로모피페리딘-2,6-디온 용액에 에틸비스(프로판-2-일)아민 (47.3 mg, 366 μmol)을 가하였다. 반응물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각 후, 반응물을 감압 하에 농축하고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다 (110 mg). MS (ESI, m/z): [M+H]+ = 767.9.
1H NMR (500 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 10.72 (s, 1 H) 8.52 (s, 3 H) 8.32 (s, 2 H) 8.28 (s, 1 H) 8.18 (d, J=8.09 Hz, 1 H) 8.09 - 8.14 (m, 3 H) 7.87 (d, J=7.78 Hz, 1 H) 7.65 (t, J=7.93 Hz, 1 H) 7.36 - 7.40 (m, 2 H) 7.10 (d, J=9.61 Hz, 1 H) 6.76 (t, J=9.31 Hz, 1 H) 6.40 - 6.48 (m, 1 H) 6.35 (d, J=8.70 Hz, 1 H) 5.72 (d, J=7.78 Hz, 1 H) 5.37 (s, 3 H) 4.15 - 4.23 (m, 1 H) 2.99 - 3.09 (m, 2 H) 2.58 - 2.73 (m, 1 H) 2.48 - 2.53 (m, 3 H) 2.17 (br. s., 1 H) 1.96 - 2.06 (m, 1 H) 1.82 - 1.92 (m, 1 H) 1.68 - 1.79 (m, 3 H) 1.15 - 1.25 (m, 3 H) 1.11 (t, J=7.17 Hz, 1 H)
실험예 1 : 세포주 배양 및 화합물 처리
c-MET 과발현 인간 위암 세포주 MKN45 및 SNU638을 10 % 소 태아 혈청(fetal bovine serum), 페니실린 (100U/ml) 및 스트렙토마이신 (100mg/ml)을 첨가한 RPMI 배지에서 배양하고, c-MET 엑손 14 결손(exon 14 skipping) 돌연변이 인간 위암 세포주 Hs746T는 DMEM 배지에서 배양하였다. c-MET 과발현 인간 폐암 세포주 EBC-1은 10 % 소 태아 혈청, 페니실린 (100U/ml) 및 스트렙토마이신(100mg/ml)을 첨가한 MEM 배지에서 배양하였다. 인간 폐조직에서 유래한 정상세포주 WI-38은 10 % 소 태아 혈청, 페니실린 (100U/ml) 및 스트렙토마이신 (100mg/ml)을 첨가한 EMEM 배지에서 배양하였다.
본 발명에 따라 합성된 화합물은 DMSO (dimethyl sulfoxide)에 용해시킨 10 mM의 원료용액으로 준비하였으며, 순차적으로 희석하여 처리하였다.
실험예 2 : cMET 표적 리간드 화합물의 암세포 항증식 활성 평가
세포 성장에 대한 저해 활성을 관찰하기 위하여 세포들을 96 well plate에서 5,000 세포/well의 농도로 분주한 뒤, 다양한 농도로 준비된 본 발명의 화합물로 72 시간 동안 처리하였다. 세포의 생존율은, 미트콘드리아의 전자전달계에 존재하는 탈수소효소(dehydrogenase)와 반응하여 포르마잔(formazon)을 생성하는 WST-8 (water soluble tetrazolium salt) 시료를 well 당 10 ml 씩 첨가한 뒤, 2 시간 동안 배양하고, 450 nm에서 흡광도를 측정하여 얻은 값을 GraphicPad Prism 8.0 소프트웨어를 사용하여 계산하였다. IC50 값 (50 %의 세포 증식 억제를 달성하는 화합물의 농도)은 측정 결과의 평균값이다. 그 결과를 표 1 및 2에 나타내었다. 실험 결과에서 보여지는 바와 같이, 본 발명의 화합물들은 암세포의 증식을 억제하는 효과를 보였으며, 특히, c-MET을 효과적으로 분해하는 실시예는 다음과 같다.
[표 1]
ABN 유도체 기반의 cMET 표적 리간드 화합물의 IC50 값
A: IC50 100 nM 이하, B: IC50 1uM 이하, C: IC50 1 uM 초과
[표 2]
Tepotinib 유도체 기반의 cMET 표적 리간드 화합물의 IC50 값
A: IC50 100 nM 이하, B: IC50 1uM 이하, C: IC50 1 uM 초과
실험예 3 : cMET 단백질을 표적하는 프로탁의 c-MET 단백질 분해능 평가
세포에서 발현되는 c-MET에 대한 본 발명의 화합물의 분해능을 평가하기 위하여 세포들을 12 웰 플레이트(well plate)에서 2 × 105 세포/well의 농도로 분주한 뒤, 위암 세포주들은 시료를 24 시간 동안 처리하였고 폐암 세포주는 48시간 동안 처리하였다.
단백질 발현을 확인하기 위한 웨스턴 블롯 분석(western blotting assay)을 수행하기 위하여, 화합물이 처리된 세포에 프로테아제 억제제(protease inhibitor)가 첨가된 40 μL의 RIPA 버퍼(buffer)를 30분간 처리한 뒤, 얼음 위에서 스크래퍼를 이용하여 세포 용해물을 모으고, 4℃ 15,000 rpm에서 30분 동안 원심 분리하여, 단백질이 포함된 상층액을 얻었다.
이후, 각 샘플 당 3 μg의 단백질을 사용하여 Simple Western Automated Western Blot System Abby 기기를 이용하여 단백질 발현을 측정하였다. SDS와 열에 의해 변성된(denaturation) 단백질을 분자량 별로 분리하여 모세관(capillary)에 부착한 뒤, 1차 항체인 anti-c-MET 또는 anti-GAPDH 항체와 반응시키고, 이후 HRP-conjugated 2차 항체에 반응시킨 뒤, 단백질 발현 신호(signal)를 compass software로 분석하였다.
단백질의 발현은 GAPDH의 발현값을 기준으로 정규화 하였으며, 0.1% DMSO 담체(vehicle)를 처리한 샘플을 100% 기준으로 하여 각 샘플에서의 단백질 발현양을 백분율(%)로 측정하고, 화합물 처리에 의한 단백질 발현양의 변화로부터 DC50 (50 %의 단백질 발현 저해가 달성되는 화합물의 농도)를 계산하였다.
그 결과를 표 3 및 4에 나타냈다.
[표 3]
ABN 유도체 기반의 cMET 단백질을 표적하는 프로탁의 IC50 및 DC50 값
A: IC50 100 nM 이하, B: IC50 1uM 이하, C: IC50 1 uM 초과
[표 4]
Tepotinib 유도체 기반의 cMET 단백질을 표적하는 프로탁의 IC50 및 DC50 값
A: IC50 100 nM 이하, B: IC50 1uM 이하, C: IC50 1 uM 초과
본 발명에 따른 프로탁 화합물은 항암제로서 유용하게 사용될 수 있다.
Claims (17)
- 하기 화학식 1로 표현되는 화합물:[화학식 1]cMET 표적 단백질 결합 모이어티(P)-{링커(L)}p-E3 리가아제 결합 모이어티(E)상기 식에서,E3 리가아제 결합 모이어티(E)는 하기 화학식 2로 표시되는 화합물이고cMET 표적 단백질 결합 모이어티(P)는 하기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나로 표시되는 화합물이며,p은 0 또는 1의 정수이다:[화학식 2]
[화학식 3]
[화학식 4]
[화학식 5]
[화학식 6]
[화학식 7]
[화학식 8]
상기 식에서, X는 수소, 할로겐, 아미노, 니트로, 히드록시, C1 내지 C6의 직쇄 또는 분지쇄 알킬옥시, 또는 산소 또는 질소를 포함하는 4원 내지 8원의 헤테로사이클릭이고,Q1 내지 Q4는 각각 독립적으로 C-F, C-Cl, C-H, C-X 또는 N이며, 단 Q1 내지 Q4 중 적어도 어느 하나는 C-X이며,Y는 수소, 할로겐, 또는 할로겐으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬옥시이며,R1은 수소, 니트로, 아미노, 카보닐, C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬, 또는 할로겐으로 치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬이고,R2 및 R3은 각각 독립적으로 수소, t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기, 토실기, 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이고,R4는 수소, t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기이다. - 제1항에 있어서, 상기 링커(L)의 일단은(i) 상기 화학식 2의 화합물의 X를 대체하여 상기 화학식 1의 화합물과 연결되거나 또는(ii) 상기 화학식 2의 화합물의 X의 질소원자 또는 산소원자에 결합하여 상기 화학식 2의 화합물과 연결된 화합물.
- 제2항에 있어서, 상기 링커(L)의 타단은(i) 상기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나의 화합물의 치환기 R2, R3 또는 R4에 연결되어 상기 화학식 3 내지 7 중의 어느 하나의 화합물과 연결되거나, 또는(ii) 상기 화학식 8의 구조의 벤젠 고리에 연결된 화합물.
- 제1항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C6의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 제1항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 제1항에 있어서, R2는 수소, 또는 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,R3은 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐 또는 피리딘으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기 또는 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 제1항에 있어서, 상기 링커(L)는-(CH2)m-R7-(CH2)n- 이거나하기 구조식으로 이루어진 군으로부터 선택되는 구조를 갖는 화합물:
상기 식에서, R7은 피페라진, 피페리딘, 아제티딘, 벤젠, 트리아졸 또는 피롤리딘이고,m 및 n은 각각 독립적으로 0 내지 5 중 어느 하나의 정수이다. - 제1항에 있어서, 상기 링커(L)는 하기 구조를 갖는 화합물:
상기 식에서, m 및 n은 각각 독립적으로 0 내지 5 중 어느 하나의 정수이다. - 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:3-(6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온3-(4-메틸-6-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온3-((3-플루오로-4-(4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온3-(4-메틸-6-(4-((1-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)-1-옥소프탈라진-2(1H)-일)피페리딘-2,6-디온3-((3-플루오로-4-(4-((4-((1-(2-((S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)메틸)피페리딘-1-일)페닐)아미노)피페리딘-2,6-디온3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(((2R)-4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)모르폴린-2-일)메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(2-(4-(2-(2,6-디옥소피페리딘-3-일)-4-메틸-1-옥소-1,2-디하이드로프탈라진-6-일)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(2-(4-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴3-(1-(3-(5-(4-((1-(4-((2,6-디옥소피페리딘-3-일)아미노)-2-플루오로페닐)피페리딘-4-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴
- 하기 화학식 3 또는 4의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:[화학식 3]
[화학식 4]
상기 식에서,R2 및 R3은 각각 독립적으로 수소, t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기, 토실기, 또는 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이다. - 제10항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C6의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기, 벤질옥시카보닐기 또는 토실기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 제1항에 있어서, R2 및 R3은 각각 독립적으로 할로겐 또는 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환 또는 비치환된 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐, 피리딘 또는 토실기로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C6의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기, 아미노기 또는 t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기로 치환된 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 제1항에 있어서, R2는 수소, 또는 C1 내지 C6의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,R3은 R5로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 직쇄, 분지쇄 또는 사이클릭 알킬기이며,여기에서, R5는 (i) 피페라진, (ii) R6으로 치환 또는 비치환된 벤질, 페닐 또는 피리딘으로 치환 또는 비치환된 C1 내지 C4의 알콕시기(여기에서, R6은 C1 내지 C4의 알콕시기 또는 아미노기이다), 또는 (iii) 히드록시기인 화합물.
- 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:tert-부틸 (S)-3-((4-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)p피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-카복실레이트(S)-4-(5-(4-(아제티딘-3-일메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-ㅇ일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린(S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(4-((1-메틸아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린벤질 (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-카복실레이트(S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(3-(피페라진-1-yl메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린(S)-4-(5-(3-((벤질옥시)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린(S)-(1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메탄올(S)-(1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸 4-메틸벤젠술포네이트tert-부틸 (S)-4-((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메틸)피페라진-1-카복실레이트(S)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)-4-(5-(3-((4-메틸피페라진-1-일)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)모르폴린(S)-4-(5-(3-(((4-메톡시벤질)옥시)메틸)아제티딘-1-일)피리미딘-2-일)-2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴린tert-부틸 (S)-(4-(((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메톡시)메틸)페닐)카바메이트tert-부틸 (S)-(5-(((1-(2-(2-((5-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-1H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피라진-1-일)메틸)모르폴리노)피리미딘-5-일)아제티딘-3-일)메톡시)메틸)피리딘-2-일)카바메이트
- 하기 화학식 5 내지 7 중의 어느 하나의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:[화학식 5]
[화학식 6]
[화학식 7]
상기 식에서,R4는 수소, t-부톡시카보닐기 또는 벤질옥시카보닐기이다. - 하기 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염:tert-부틸 (2R)-2-(((2-(3-((3-(3-cyano페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)옥시)메틸)모르폴린-4-카복실레이트(S)-3-(1-(3-(5-(모르폴린-2-일메톡시)피리미딘-2-일)벤질)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴t-부틸 4-(2-{[2-(3-{[3-(3-시아노페닐)-6-옥소-1,6-디하이드로피리다진-1-일]메틸}페닐)피리미딘-5-일]옥시}에틸)피페라진-1-카복실레이트3-(6-옥소-1-(3-(5-(2-(피페라진-1-일)에톡시)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴t-부틸 4-(2-(3-((3-(3-시아노페닐)-6-옥소피리다진-1(6H)-일)메틸)페닐)피리미딘-5-일)피페라진-1-카복실레이트3-(6-옥소-1-(3-(5-(피페라진-1-일)피리미딘-2-일)벤질)-1,6-디하이드로피리다진-3-일)벤조니트릴의 제조
- 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따른 화합물을 포함하는 항암 조성물.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20220157345 | 2022-11-22 | ||
| KR10-2022-0157345 | 2022-11-22 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| WO2024112120A1 true WO2024112120A1 (ko) | 2024-05-30 |
Family
ID=91196349
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PCT/KR2023/018997 WO2024112120A1 (ko) | 2022-11-22 | 2023-11-22 | 신규한 c-MET 단백질 리간드를 포함하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR20240076745A (ko) |
| WO (1) | WO2024112120A1 (ko) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101553418B1 (ko) * | 2007-07-12 | 2015-09-15 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 피리다지논 유도체 |
| KR20190116315A (ko) * | 2017-01-31 | 2019-10-14 | 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 | 세레블론 리간드 및 이를 포함하는 이작용성 화합물 |
| KR20210122192A (ko) * | 2020-03-30 | 2021-10-08 | 주식회사 이노큐어테라퓨틱스 | 벤조티아졸 유도체 화합물 |
| WO2021205391A1 (zh) * | 2020-04-09 | 2021-10-14 | 嘉兴优博生物技术有限公司 | 靶向蛋白酶降解(ted)平台 |
| WO2021249534A1 (zh) * | 2020-06-12 | 2021-12-16 | 上海济煜医药科技有限公司 | 酞嗪酮类化合物及其制备方法和医药用途 |
| WO2022250350A1 (ko) * | 2021-05-26 | 2022-12-01 | 주식회사 이노큐어테라퓨틱스 | 피페리딘디온 유도체 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104703988B (zh) | 2013-09-30 | 2017-04-12 | 韩国化学研究院 | 新的三唑并吡嗪衍生物及其用途 |
-
2023
- 2023-11-22 WO PCT/KR2023/018997 patent/WO2024112120A1/ko unknown
- 2023-11-22 KR KR1020230163858A patent/KR20240076745A/ko unknown
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101553418B1 (ko) * | 2007-07-12 | 2015-09-15 | 메르크 파텐트 게엠베하 | 피리다지논 유도체 |
| KR20190116315A (ko) * | 2017-01-31 | 2019-10-14 | 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 | 세레블론 리간드 및 이를 포함하는 이작용성 화합물 |
| KR20210122192A (ko) * | 2020-03-30 | 2021-10-08 | 주식회사 이노큐어테라퓨틱스 | 벤조티아졸 유도체 화합물 |
| WO2021205391A1 (zh) * | 2020-04-09 | 2021-10-14 | 嘉兴优博生物技术有限公司 | 靶向蛋白酶降解(ted)平台 |
| WO2021249534A1 (zh) * | 2020-06-12 | 2021-12-16 | 上海济煜医药科技有限公司 | 酞嗪酮类化合物及其制备方法和医药用途 |
| WO2022250350A1 (ko) * | 2021-05-26 | 2022-12-01 | 주식회사 이노큐어테라퓨틱스 | 피페리딘디온 유도체 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20240076745A (ko) | 2024-05-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| WO2019190259A1 (ko) | 상피세포 성장인자 수용체 돌연변이 저해 효과를 갖는 신규 설폰아마이드 유도체 | |
| WO2022250350A1 (ko) | 피페리딘디온 유도체 | |
| WO2020171606A1 (ko) | 신규한 헤테로트리시클릭 유도체 화합물 및 이의 용도 | |
| WO2022250224A1 (ko) | 피페리딘디온 유도체 | |
| WO2014109530A1 (ko) | 2-(페닐에티닐)티에노[3,4-b]피라진 유도체 및 이를 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2023018155A1 (ko) | Shp2 단백질 분해활성을 갖는 화합물 및 이들의 의약 용도 | |
| WO2019074241A1 (ko) | 페닐아세틸렌 유도체를 포함하는 pd-1과 pd-l1의 상호작용 억제제 | |
| WO2012134188A2 (ko) | 신규한 옥사졸리디논 유도체 및 이를 함유하는 의약 조성물 | |
| WO2018021826A1 (ko) | 신규한 피리미딘-2,4-디아민 유도체 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2016006974A2 (en) | Novel triazolopyrimidinone or triazolopyridinone derivatives, and use thereof | |
| WO2021096112A1 (ko) | 피롤로피리미딘, 피롤로피리딘, 인다졸 화합물 유도체 및 이를 포함하는 치료용 약학 조성물 | |
| WO2024112120A1 (ko) | 신규한 c-MET 단백질 리간드를 포함하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 | |
| WO2018056621A1 (ko) | 신규한 이미다졸일 피리미딘 유도체, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| WO2022270987A1 (ko) | Aurka 선택적 분해 유도 화합물 | |
| WO2018139883A1 (ko) | 다중 표적 키나아제 저해제로서 융합피리미딘 유도체 | |
| WO2010032986A2 (ko) | 신규 5-(4-아미노페닐)-이소퀴놀린 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 raf 키나제의 과활성에 의해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| WO2022191664A1 (ko) | 암세포 성장 억제 효과를 나타내는 신규한 피리미딘 유도체 | |
| WO2022270881A1 (ko) | 단백질 키나아제 억제제로서의 신규한 화합물 | |
| WO2024112119A1 (ko) | cMET 단백질을 분해하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 | |
| WO2021112626A1 (ko) | 신규한 인디루빈 유도체 및 이의 용도 | |
| WO2024112122A1 (ko) | Brd 단백질을 분해하는 디그레이더 및 이를 포함하는 약학 조성물 | |
| WO2019198940A1 (ko) | 우수한 카이네이즈 저해 활성을 보이는 다양한 치환기를 갖는 피리미딘 유도체 | |
| WO2021080346A1 (ko) | 단백질 키나아제 저해 활성을 갖는 신규한 피리디닐트리아진 유도체 및 이를 포함하는 암의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물 | |
| WO2019098785A1 (ko) | 7-아미노-1h-인돌-5-카르복사미드 유도체 및 이의 용도 | |
| WO2021040422A1 (ko) | 단백질 키나아제 저해 활성을 갖는 신규한 피리미도[4,5-d]피리미딘-2-온 유도체 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 23895047 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |