WO2023016346A1 - 含内酰胺桥的多肽化合物 - Google Patents

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WO2023016346A1
WO2023016346A1 PCT/CN2022/110304 CN2022110304W WO2023016346A1 WO 2023016346 A1 WO2023016346 A1 WO 2023016346A1 CN 2022110304 W CN2022110304 W CN 2022110304W WO 2023016346 A1 WO2023016346 A1 WO 2023016346A1
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flows out
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潘志祥
贺海鹰
江志赶
陈曙辉
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Medshine Discovery Inc
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Medshine Discovery Inc
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/605—Glucagons

Definitions

  • the present invention provides the polypeptide (SEQ ID NO:9) of the sequence shown in formula (I),
  • the polypeptide of the present invention has strong agonistic activity on GLP-1R/GCG.
  • the terms “enriched in an isomer”, “enriched in an isomer”, “enriched in an enantiomer” or “enantiomerically enriched” refer to one of the isomers or enantiomers
  • the content of the enantiomer is less than 100%, and the content of the isomer or enantiomer is greater than or equal to 60%, or greater than or equal to 70%, or greater than or equal to 80%, or greater than or equal to 90%, or greater than or equal to 95%, or Greater than or equal to 96%, or greater than or equal to 97%, or greater than or equal to 98%, or greater than or equal to 99%, or greater than or equal to 99.5%, or greater than or equal to 99.6%, or greater than or equal to 99.7%, or greater than or equal to 99.8%, or greater than or equal to 99.9%.
  • the terms “isomer excess” or “enantiomeric excess” refer to the difference between the relative percentages of two isomers or two enantiomers. For example, if the content of one isomer or enantiomer is 90% and the other isomer or enantiomer is 10%, then the isomer or enantiomeric excess (ee value) is 80% .
  • a diastereoisomeric salt is formed with an appropriate optically active acid or base, and then a diastereomeric salt is formed by a conventional method known in the art. Diastereomeric resolution is performed and the pure enantiomers are recovered. Furthermore, the separation of enantiomers and diastereomers is usually accomplished by the use of chromatography using chiral stationary phases, optionally in combination with chemical derivatization methods (e.g. amines to amino groups formate).
  • the compounds of the present invention may contain unnatural proportions of atomic isotopes at one or more of the atoms that constitute the compounds.
  • compounds may be labeled with radioactive isotopes such as tritium ( 3 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C).
  • radioactive isotopes such as tritium ( 3 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C).
  • heavy hydrogen can be used to replace hydrogen to form deuterated drugs.
  • the bond formed by deuterium and carbon is stronger than the bond formed by ordinary hydrogen and carbon.
  • deuterated drugs can reduce toxic side effects and increase drug stability. , enhance the efficacy, prolong the biological half-life of drugs and other advantages. All changes in isotopic composition of the compounds of the invention, whether radioactive or not, are included within the scope of the invention.
  • any one or more sites of the group can be linked to other groups through chemical bonds.
  • connection method of the chemical bond is not positioned, and there is an H atom at the connectable site, when the chemical bond is connected, the number of H atoms at the site will decrease correspondingly with the number of chemical bonds connected to become the corresponding valence group.
  • the chemical bonds that the site connects with other groups can use straight solid line bonds Straight dotted key or tilde express.
  • the structure of the compounds of the present invention can be confirmed by conventional methods known to those skilled in the art. If the present invention involves the absolute configuration of the compound, the absolute configuration can be confirmed by conventional technical means in the art. For example, in single crystal X-ray diffraction (SXRD), the cultured single crystal is collected with a Bruker D8 venture diffractometer to collect diffraction intensity data, the light source is CuK ⁇ radiation, and the scanning method is: After scanning and collecting relevant data, the absolute configuration can be confirmed by further analyzing the crystal structure by direct method (Shelxs97).
  • SXRD single crystal X-ray diffraction
  • the solvent used in the present invention is commercially available.
  • the polypeptide WX002 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4544.2, and the measured value was 4544.4.
  • the polypeptide WX003 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4544.2, and the measured value was 4544.1.
  • the polypeptide WX005 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4544.2, and the measured value was 4544.4.
  • the polypeptide WX007 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4544.2, and the measured value was 4543.8.
  • the polypeptide WX008 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4544.2, and the measured value was 4544.4.
  • the polypeptide WX011 was obtained.
  • the molecular weight of the polypeptide was confirmed by ESI-MS, the calculated value was 4508.2, and the measured value was 4508.1.
  • Example 1 In vitro GLP-1R/GCGR agonistic activity test
  • the compound to be tested is diluted 4 times at 10 points, the initial concentration is 30 ⁇ M, and Bravo completes the dilution
  • the compound of the present invention has strong agonistic activity on GLP-1R/GCGR.
  • test compounds The degree of binding of test compounds to human/mouse plasma albumin was studied.
  • Matrix preparation On the day of the experiment, the plasma was thawed in cold water and centrifuged at 3220rpm for 5min to remove all blood clots. The pH of the resulting plasma was measured and adjusted to 7.4 ⁇ 0.1 using 1% phosphoric acid or 1N sodium hydroxide as needed.
  • Dilution step of the test compound The test compound was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO) to prepare stock solutions with concentrations of 10 mM and 2 mM, respectively.
  • a 40 ⁇ M working solution was prepared by diluting 2 ⁇ L of the stock solution (2 mM) with 98 ⁇ L of DMSO.
  • a 400 ⁇ M working solution of the control compound was prepared by diluting 10 ⁇ L of the stock solution with 240 ⁇ L DMSO.
  • the working solution of the compound (5 ⁇ L) was mixed with the blank matrix (995 ⁇ L) at a ratio of 1:200 to prepare the loading matrix.
  • test samples an additional matrix-containing sample was transferred to a separate 96-well plate (sample incubation plate) and incubated at 37° C. for 4 h.
  • NA means that plasma protein binding is too high, no free drug can be detected under normal plasma protein concentration.
  • the compound of the present invention has a very high plasma protein binding degree.
  • test compound solution 100 ⁇ M solution was prepared by diluting with DMSO.
  • test compound solution 100 ⁇ M
  • blank control plasma 98 ⁇ L
  • the sample was centrifuged at 4000 rpm for 20 min, and 100 ⁇ L of supernatant was taken from each well for LC-MS/MS analysis.
  • the compound of the present invention has excellent plasma stability.
  • Test compound Dilute the 10mM stock solution with DMSO to prepare a 1mM intermediate solution;
  • Test compound Dilute the 1mM intermediate solution with DMSO to prepare a 50 ⁇ M dosing solution;
  • the sample was centrifuged at 4000 rpm for 10 min, and 100 ⁇ L of supernatant was taken from each well onto the plate. Samples were shaken at 800 rpm for about 10 min before submitting for LC-MS/MS testing.
  • the compound of the present invention is less stable in kidney homogenate than in plasma, and it is speculated that kidney is a possible metabolic organ.
  • the pharmacokinetic characteristics of the compounds in rodents after subcutaneous injection were tested according to the standard protocol.
  • the candidate compounds were made into clear solutions and given to mice for subcutaneous injection (SC, 10 nmol/kg).
  • Whole blood was collected, plasma was prepared, drug concentration was analyzed by LC-MS/MS method, and pharmacokinetic parameters were calculated by Phoenix WinNonlin software.
  • the compounds of the present invention have excellent pharmacokinetic properties in mice.
  • the mammalian pharmacokinetic characteristics of the compound after subcutaneous injection were tested according to the standard protocol.
  • the candidate compound was formulated into a clear solution and given to cynomolgus monkeys for single subcutaneous injection (SC, 4nmol/kg).
  • Whole blood was collected, plasma was prepared, drug concentration was analyzed by LC-MS/MS method, and pharmacokinetic parameters were calculated by Phoenix WinNonlin software.
  • the compound of the present invention has excellent monkey pharmacokinetic properties.
  • DIO mice arrive at the WuXi AppTec facility, they are kept in an animal breeding room with strictly controlled environmental conditions.
  • the temperature in the breeding room is maintained at 20-24°C and the humidity is maintained at 30-70%.
  • the temperature and humidity in the feeding room were monitored in real time by a thermo-hygrometer, and the temperature and humidity were recorded twice a day (once in the morning and once in the afternoon).
  • the daylighting in the animal breeding room is controlled by an electronic timing lighting system, and the lights are turned on for 12 hours and turned off for 12 hours every day (turn on at 7:00 in the morning and turn off at 19:00 in the afternoon).
  • the animals were kept in single cages, and toys were provided for each cage.
  • the animals had free access to food (feed for growth/breeding of rats and mice) and drinking water.
  • Each group of animals was subcutaneously injected with the vehicle and the compound to be tested (10 nmol/kg), the administration time: 9:30 in the morning, the administration frequency was once every three days, and the administration cycle was 22 days.
  • the compounds of the present invention exhibit excellent weight loss efficacy in DIO mice.
  • Neonatal mice were subcutaneously injected with STZ (200ug/mouse) within 48 hours of birth, and after 4 weeks of breastfeeding, animals with fasting blood glucose >12mmol/L were selected to be fed with HFD for 6 consecutive weeks, and finally the NASH model was established. Another 8 animals were selected without STZ injection and HFD feeding (normal control group).
  • STZ 200ug/mouse
  • Dosing regimen start administration after one week of HFD feeding, set the day of the first administration as Day 1, and then perform subcutaneous injection every two days for 5 consecutive weeks.
  • the compound of the present invention can significantly improve the NAS score in the STZ-NASH mouse model.

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Abstract

一类含内酰胺桥的多肽化合物，及其在制备治疗相关病症的药物中的应用，具体公开了式(I)所示序列的多肽。 HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLEGG PSSG (I)

Description

含内酰胺桥的多肽化合物
本申请要求申请日为2021/8/10的中国专利申请202110914496.3、申请日为2021/09/16的中国专利申请202111087339.6的优先权。本申请引用上述中国专利申请的全文。
技术领域
本发明涉及一类含内酰胺桥的多肽化合物，及其在制备治疗相关病症的药物中的应用，具体涉及式(I)所示序列的多肽。
背景技术
胰高血糖素样肽1(GLP-1)是由肠道L细胞分泌的激素，它可以通过抑制食欲，减少摄食，并通过增加能量消耗，促进棕色脂肪产热降低体重。除此之外，GLP-1R激动剂如索马鲁肽，利拉鲁肽等上市药物展示了非常优异的降糖及减重效果,并在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)等疾病中展现了疗效。由于世界上肥胖及二型糖尿病人群的快速增长，目前仍需要开发药效更优的药物。其中，在GLP-1R激动活性基础上引入胰高血糖素受体(GCGR)的激动活性是一个非常有前景的策略。
胰高血糖素(GCG)是由胰腺分泌的，与GCGR结合产生生理功能的激素。胰高血糖素通过增加糖异生及糖原分解的方式促进血糖的升高。另外，GCG还可以减少肝脏脂肪组织中的脂肪酸合成，促进脂肪的分解。结合GLP-1R激动剂降低血糖，抑制食欲的药理作用，GLP-1R/GCGR双重激动剂有希望通过改善患者的新陈代谢实现优异降糖，减重的治疗目的，在相关疾病中展现药效。
发明内容
本发明提供了式(I)所示序列的多肽(SEQ ID NO:9)，
HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLEGG PSSG
(I)
其具有以下修饰：
1)上述第17、20、24或28位的氨基酸有且只有一个替换为K 0；和
2)上述(I)所示序列的0-2个天然氨基酸被替换；和
3)i和i+3位置的氨基酸之间或j和j+4位置的氨基酸之间形成内酰胺桥，其中i为18，其中j为17、20或24；
其中，
Aib的结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000001
K 0选自被X 0取代的K，其表示赖氨酸侧链上的氨基与X 0相连；
X 0选自
Figure PCTCN2022110304-appb-000002
n为8、9或10。
在本发明的一些方案中，上述式(I)所示序列的多肽，
HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLEGG PSSG
(I)
其具有以下修饰：
1)上述第17、20、24或28位的氨基酸有且只有一个替换为K 0；
2)上述(I)所示序列的0-1个天然氨基酸被替换；
3)i和i+3位置的氨基酸之间或j和j+4位置的氨基酸之间形成内酰胺桥，其中i为18，其中j为17、20或24；
其中，
Aib的结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000003
K 0选自被X 0取代的K，其表示赖氨酸侧链上的氨基与X 0相连；
X 0选自
Figure PCTCN2022110304-appb-000004
n为8、9或10。
在本发明的一些方案中，上述的多肽，其序列如下SEQ ID NO:1-8，
SEQ ID NO:1：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVEW LLEGG PSSG；
SEQ ID NO:2：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVK 0W LLEGG PSSG；
SEQ ID NO:3：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLK 0GG PSSG；
SEQ ID NO:4：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK 0EFVEW LLKGG PSSG；
SEQ ID NO:5：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVEW LLKGG PSSG；
SEQ ID NO:6：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK 0EFVKW LLEGG PSSG；
SEQ ID NO:7：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVKW LLEGG PSSG；
SEQ ID NO:8：HAibQGT FTSDY SKα-MeLLD EKKAK 0EFVEW LLKGG PSSG；
i和i+3位置的氨基酸之间或j和j+4位置的的氨基酸之间形成内酰胺桥，其中i为18，其中j为17、20或24；
Aib和K 0如权利要求所定义，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述第34位的氨基酸C-末端酰胺化，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述n为9，其他变量如本发明所定义。
在本发明的一些方案中，上述X 0选自
Figure PCTCN2022110304-appb-000005
其他变量如本发明所定义。
本发明还有一些方案由上述变量任意组合而来。
本发明还提供了下式所示多肽，
Figure PCTCN2022110304-appb-000006
Figure PCTCN2022110304-appb-000007
Figure PCTCN2022110304-appb-000008
Figure PCTCN2022110304-appb-000009
本发明还提供上述多肽化合物在制备治疗减重和NASH的药物上的应用。
技术效果
本发明的多肽对GLP-1R/GCG具有很强的激动活性。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物接触的方式获得碱加成盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物接触的方式获得酸加成盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
“氨基酸”是指天然存在的和合成的氨基酸，以及起到与天然存在的氨基酸类似的作用的氨基酸类似物和氨基酸模拟物。天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的那些氨基酸，以及后来修饰的那些氨基酸，例如，羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和O-磷酸丝氨酸。氨基酸类似物是指具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构(例如与氢、羧基基团、氨基基团和R基团结合的α碳)的化合物，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜、甲硫氨酸甲基锍。这样的类似 物可以具有修饰的R基团(例如，正亮氨酸)或修饰的肽骨架，但保留与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构。氨基酸模拟物是指其结构不同于一般的氨基酸化学结构，但起到与天然存在的氨基酸相似的作用的化学化合物。
文所述的A或Ala表示丙氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000010
R或Arg表示精氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000011
N或Asn表示天冬酰胺，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000012
D或Asp表示天冬氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000013
C或Cys表示半胱氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000014
Q或Gln表示谷氨酰胺，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000015
E或Glu表示谷氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000016
G或Gly表示甘氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000017
H或His表示组氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000018
I或Ile表示异亮氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000019
L或Leu表示亮氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000020
α-MeL或α-MeLeu表示α-甲基亮氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000021
K或Lys表示赖氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000022
M或Met表示甲硫氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000023
F或Phe表示苯丙氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000024
P或Pro表示脯氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000025
S或Ser表示丝氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000026
T或Thr表示苏氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000027
W或Trp表 示色氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000028
Y或Tyr表示酪氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000029
V或Val表示缬氨酸，结构为
Figure PCTCN2022110304-appb-000030
Fmoc-AEEA-OH表示
Figure PCTCN2022110304-appb-000031
术语“治疗”包括抑制、减缓、停止或逆转现有症状或病患的进展或严重程度。
除非另有说明，术语“异构体”意在包括几何异构体、顺反异构体、立体异构体、对映异构体、旋光异构体、非对映异构体和互变异构体。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
除非另有说明，术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
除非另有说明，术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。
除非另有说明，术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。
除非另有说明，“(+)”表示右旋，“(-)”表示左旋，“(±)”表示外消旋。
除非另有说明，用楔形实线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000032
和楔形虚线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000033
表示一个立体中心的绝对构型，用直形实线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000034
和直形虚线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000035
表示立体中心的相对构型，用波浪线
Figure PCTCN2022110304-appb-000036
表示楔形实线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000037
或楔形虚线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000038
或用波浪线
Figure PCTCN2022110304-appb-000039
表示直形实线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000040
或直形虚线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000041
除非另有说明，术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一种异构体或对映体的含量小于100％，并且，该异构体或对映体的含量大于等于60％，或者大于等于70％，或者大于等于80％，或者大于等于90％，或者大于等于95％，或者大于等于96％，或者大于等于97％，或者大于等于98％，或者大于等于99％，或者大于 等于99.5％，或者大于等于99.6％，或者大于等于99.7％，或者大于等于99.8％，或者大于等于99.9％。
除非另有说明，术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。例如，其中一种异构体或对映体的含量为90％，另一种异构体或对映体的含量为10％，则异构体或对映体过量(ee值)为80％。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚( 3H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。又例如，可用重氢取代氢形成氘代药物，氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固，相比于未氘化药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。
当所列举的连接基团没有指明其连接方向，其连接方向是任意的，例如，
Figure PCTCN2022110304-appb-000042
中连接基团L为-M-W-，此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成
Figure PCTCN2022110304-appb-000043
也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成
Figure PCTCN2022110304-appb-000044
所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
除非另有规定，当某一基团具有一个或多个可连接位点时，该基团的任意一个或多个位点可以通过化学键与其他基团相连。当该化学键的连接方式是不定位的，且可连接位点存在H原子时，则连接化学键时，该位点的H原子的个数会随所连接化学键的个数而对应减少变成 相应价数的基团。所述位点与其他基团连接的化学键可以用直形实线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000045
直形虚线键
Figure PCTCN2022110304-appb-000046
或波浪线
Figure PCTCN2022110304-appb-000047
表示。例如-OCH 3中的直形实线键表示通过该基团中的氧原子与其他基团相连；
Figure PCTCN2022110304-appb-000048
中的直形虚线键表示通过该基团中的氮原子的两端与其他基团相连；
Figure PCTCN2022110304-appb-000049
中的波浪线表示通过该苯基基团中的1和2位碳原子与其他基团相连。
除非另有规定，术语“修饰”是指氨基酸的添加、替换和缺失。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法来确认结构，如果本发明涉及化合物的绝对构型，则该绝对构型可以通过本领域常规技术手段予以确证。例如单晶X射线衍射法(SXRD)，把培养出的单晶用Bruker D8 venture衍射仪收集衍射强度数据，光源为CuKα辐射，扫描方式：
Figure PCTCN2022110304-appb-000050
扫描，收集相关数据后，进一步采用直接法(Shelxs97)解析晶体结构，便可以确证绝对构型。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。
本发明采用下述缩略词：aq代表水；eq代表当量、等量；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DMSO代表二甲亚砜；MeOH代表甲醇；BOC代表叔丁氧羰基是一种胺保护基团；r.t.代表室温；O/N代表过夜；THF代表四氢呋喃；Boc 2O代表二叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIEA代表二异丙基乙基胺；DMF代表N,N-二甲基甲酰胺；HBTU代表苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；HATU代表2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；PhSiH 3代表苯硅烷；Pd(PPh 3) 4代表四三苯基膦钯。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
实施例1
Figure PCTCN2022110304-appb-000051
1.称取0.74g 4-(2’,4’-二甲氧基苯基-芴甲氧羰基-氨甲基)-苯氧基乙酰氨基-甲基二苯甲胺树脂Rink Amide MBHA Resin(替代度Sub＝0.28mmol/g)，加入到反应柱中，再加入DMF(20mL)至反应柱氮气鼓气体2h，排废，直至没有液体流出，加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。
2.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
3.氨基酸的偶联
3.1 Fmoc-Gly-OH的偶联
1.称取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
2.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
3.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.2 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.3 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(50mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.4 Fmoc-Pro-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Pro-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.5 Fmoc-Gly-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。四氯苯醌检测，树脂绿色。
2.称取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，四氯苯醌检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.6 Fmoc-Gly-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.7 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.8 Fmoc-Leu-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.9 Fmoc-Leu-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.10 Fmoc-Trp(Boc)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Trp(Boc)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.11 Fmoc-Glu(OAll)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Glu(OAll)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.12 Fmoc-Val-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Val-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.13 Fmoc-Phe-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Phe-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.14 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.15 Fmoc-Lys(Alloc)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Lys(Alloc)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.16 Fmoc-Ala-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Ala-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.17 Fmoc-Lys(Boc)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Lys(Boc)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.18 Fmoc-Lys(Dde)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Lys(Dde)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.19 Fmoc-Glu(OtBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Glu(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.20 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.21 Fmoc-Leu-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Leu-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反 应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.22 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Tyr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.23 Fmoc-Lys(Boc)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Lys(Boc)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.24 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.25 Fmoc-Tyr(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Tyr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.26 Fmoc-Asp(OtBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Asp(OtBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.27 Fmoc-Ser(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Ser(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应2h，茚三酮检测，树脂蓝色。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.28 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应2h，茚三酮测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.29 Fmoc-Phe-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Phe-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.30 Fmoc-Thr(tBu)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Thr(tBu)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.31 Fmoc-Gly-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2. 2.称取Fmoc-Gly-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.32 Fmoc-Gln(Trt)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Gln(Trt)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.33 Fmoc-Aib-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Aib-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.34 Boc-His(Trt)-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。四氯苯醌检测，树脂绿色。
2.称取Boc-His(Trt)-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HATU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应2h，四氯苯醌检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出
3.35脱Alloc和OAll
1.加入PhSiH 3(20.0eq)和DCM(8mL)至反应柱中，氮气鼓起后加入Pd(PPh 3) 4(0.2eq)，氮气鼓起20min，反应二次，排废，直至没有液体流出。
2.用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.36酰胺关环
1.加入DIEA(3.00eq)补加10mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待溶解后加入HATU(1.5eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
2.在25℃的环境中反应0.5h，用DMF洗涤5次(30mL每次)，每次1m in，排废，直至没有液体流出。
3.重复上述1.2操作，再关环一次。茚三酮检测，树脂无色透明。
4.用DMF洗涤5次(30mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.37脱Dde
1.加入3％的水合肼/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起15mim，排废，加入DMF(20mL)洗涤5次每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
3.38 Fmoc-AEEA-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-AEEA-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.0 0eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.39 Fmoc-AEEA-OH的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-AEEA-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
3.40 Fmoc-Glu-OtBu的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取Fmoc-Glu-OtBu-OH(3.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(6.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(2.85eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
Figure PCTCN2022110304-appb-000052
3.41 C20DA的偶联
1.加入20％的哌啶/DMF(20mL)至反应柱中，氮气鼓起20min，排废，直至没有液体流出。加入DMF(20mL)洗涤5次，每次1min，排废，直至没有液体流出。茚三酮检测，树脂蓝色。
2.称取C20DA(2.0eq)加入到上述树脂中，加入DIEA(4.00eq)补加5mL DMF至反应柱中，鼓氮气，待氨基酸溶解后加入HBTU(1.90eq)。调节好氮气使树脂均匀鼓起。
3.在25℃的环境中反应0.5h，茚三酮检测，树脂无色透明。
4.抽掉反应液，用DMF洗涤5次(20mL每次)，每次1min，排废，直至没有液体流出。
5.用MeOH(20mL)收缩树脂，每次3min，排废，直至没有液体流出，将树脂倒出干燥，备用。
i.切割及粗肽干燥
按如下体积配置切割液
Figure PCTCN2022110304-appb-000053
将干燥后的肽树脂加入到配好的切割液中，在摇床震荡2.5h，过滤，滤液加入到10倍体积冰异丙醚中，离心，再用异丙醚洗涤3次。在真空干燥2h得到粗肽，纯化。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4545.1，实测值为4545.0。
实施例2
Figure PCTCN2022110304-appb-000054
参考WX001的合成，得到多肽WX002。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.4。
实施例3
Figure PCTCN2022110304-appb-000055
参考WX001的合成，得到多肽WX003。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.1。
实施例4
Figure PCTCN2022110304-appb-000056
参考WX001的合成，得到多肽WX004。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.4。
实施例5
Figure PCTCN2022110304-appb-000057
参考WX001的合成，得到多肽WX005。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.4。
实施例6
Figure PCTCN2022110304-appb-000058
参考WX001的合成，得到多肽WX006。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.1。
实施例7
Figure PCTCN2022110304-appb-000059
参考WX001的合成，得到多肽WX007。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4543.8。
实施例8
Figure PCTCN2022110304-appb-000060
参考WX001的合成，得到多肽WX008。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.4。
实施例9
Figure PCTCN2022110304-appb-000061
参考WX001的合成，得到多肽WX009。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4544.7。
实施例10
Figure PCTCN2022110304-appb-000062
参考WX001的合成，得到多肽WX010。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4544.2，实测值为4543.8。
实施例11
Figure PCTCN2022110304-appb-000063
参考WX001的合成，得到多肽WX011。多肽分子量经ESI-MS进行确认，计算值为4508.2，实测值为4508.1。
生物测试数据
实施例1：体外GLP-1R/GCGR激动活性测试
A：主要材料：
1)细胞株
该细胞株由上海药明康德构建。详情见下表1。
表1细胞株信息
靶点 宿主细胞 克隆
GLP-1R HEK293 N/A
GCGR HEK293 N/A
2)试剂与耗材
详情见下表2。
表2试剂与耗材信息
名称 批次. 货号 厂家
cAMP检测盒 29F 62AM4PEJ Cisbio
1M HEPES 2120919 15630-106 Invitrogen
Hanks平衡盐溶液(HBSS) 2185775 14025 Invitrogen
人血清白蛋白(HSA) SLCF7301 A1653-10G 西格玛
酪蛋白 SLCC9458 C4765-10mL 西格玛
3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX) STBF6061V I5879-5G 西格玛
ECHO qualified 384孔板 0006433672 PP-0200 Labcyte
OptiPlate-384 8210-19481 6007299 珀金埃尔默
3)仪器
详情见下表3。
表3仪器信息
名称 型号 厂家
EnVision envision2014 珀金埃尔默
Vi-cell counter Vi-CELL TM XR Cell Viability Analyzer 贝克曼
Bravo Bravo V11 安捷伦
ECHO ECHO 555 Labcyte
Centrifuge Allegra TM 25R Centrifuge 贝克曼
B.方法
Ⅰ)实验材料：详情见下表4和表5。
表4实验缓冲液信息
Figure PCTCN2022110304-appb-000064
Figure PCTCN2022110304-appb-000065
表5检测试剂制备信息
试剂 储存浓度 体积 终浓度
细胞裂解液 1x 9.5mL ≈1x
D2-cAMP溶液 40x 250μL 1x
cAMP-抗体溶液 40x 250μL 1x
Ⅱ)实验方法
a)制备化合物板：
待测化合物做10个点4倍稀释，起始浓度为30μM，Bravo完成稀释
b)转移化合物：
1)使用Echo转移100nL化合物至OptiPlate-384plate。
2)将OptiPlate-384plate在1000rpm离心5秒。
c)细胞悬液的制备
1)将一支GLP-1R/GCGR细胞冻存管迅速置于37℃温水中解冻。
2)将细胞悬液转移至Transfer15mL离心管中，用10ml HBSS轻柔冲洗。
3)将离心管在1000rpm室温离心1分钟。
4)弃去上清。
5)轻柔打散底部细胞并再用10mL HBSS轻柔冲洗，离心沉降细胞，最后用实验缓冲液重悬细胞。
6)利用Vi-cell测量细胞密度与活度。
7)用实验缓冲液将GLP-1R/GCGR细胞浓度稀释至2.0*10 5/mL。
8)在OptiPlate-384plate中转入100nL稀释好的细胞悬液。
9)室温孵育30分钟。
d)加入检测试剂：
1)在OptiPlate-384plate空孔中加入10μL 800nM梯度稀释好的cAMP标准品。
2)加入10μL cAMP检测试剂。
3)用TopSeal-A film覆盖OptiPlate-384plate，室温孵育60分钟。
揭去TopSeal-A,在EnVision读数。
C实验结果
实验结果如表6所示。
表6体外GLP-1R/GCGR激动活性测试结果
Figure PCTCN2022110304-appb-000066
结论：本发明化合物对GLP-1R/GCGR具有很强的激动活性。
实验例2：血浆蛋白结合度测试(PPB)
A.实验目的
研究受试化合物与人/小鼠血浆白蛋白的结合度。
B.实验操作
1.基质准备：实验当天，将血浆在冷水中解冻，并以3220rpm的速度离心5min，以去除所有血块。测量得到的血浆的pH值，并根据需要使用1％的磷酸或1N的氢氧化钠将其pH调整到7.4±0.1。
2.测试化合物的稀释步骤：测试化合物溶解在二甲基亚砜(DMSO)中，以制备浓度分别为10mM和2mM的原液。用98μL DMSO稀释2μL原液(2mM)，制得40μM的工作溶液。用240μL DMSO稀释10μL原液，制得400μM对照化合物的工作溶液。将化合物的工作溶液(5μL)与空白基质(995μL)按1:200的比例混合均匀以制备负载基质。
3.分析步骤
3.1将等量的30μL负载基质(n＝2)转移至样品采集板，制备待测时间0(T0)样品用于残留测定。样品立即与相应的空白缓冲液进行匹配，最终体积为60μL，每孔中血浆与缓冲液的体积比为1:1。然后，测试化合物的T0样品分别加入60μL的4％H 3PO 4的H 2O和480μL含有内标物的终止液。然后将它们与其他样品一起储存在2-8℃下等待进一步处理。
3.2将剩余的血浆样品放在37±1℃的二氧化碳培养箱预培养30min。准备无蛋白样品(F样 品)，负载基质的样品(230μL)都被转移到聚碳酸酯管(n＝2)中，并在37℃和155000×g(35000rpm)条件下超速离心4h。
3.3为了制备T样品(测试样品)，额外一份含基质样品转移到单独的96孔板(样品培育板)上，并在37℃下培育4h。
3.4离心结束后，从上清液第二层(上层以下)取30μL的无蛋白样品和30μL的T样品转移到新的样品收集板中。每个样品与相应的空白缓冲液或基质混合，最终体积为60μL，基质:缓冲液体积比1:1。在所有样品加入60μL 4％的H 3PO 4水溶液和480μL的终止溶液(含内标)。混合物在转速4000rpm下离心20min，取各样品上清液100μL进行LC-MS/MS分析。
C.实验结果
实验结果如表7所示。
表7 PPB测试结果
Figure PCTCN2022110304-appb-000067
注：NA表示血浆蛋白结合度过高，在正常血浆蛋白浓度下未检出游离药物。
结论：本发明化合物具有极高的血浆蛋白结合度。
实验例3：血浆稳定性测试(PLS)
A.实验目的
研究受试化合物在正常小鼠血浆中的稳定性。
B.实验操作
1.实验前，将凝结的冷冻血浆置于37℃的水浴锅中解冻。血浆4000rpm离心5min，如有血块，清除血块，将pH值调到7.4±0.1。
2.测试化合物溶液的制备：用DMSO稀释制得100μM的溶液。
3. 98μL的空白对照血浆加入2μL的测试化合物溶液(100μM)，使得两者混合溶液的最终浓度达到2μM,将其置于37℃水浴条件下培养。
4.在每个时间点(0、10、30、60和120min)分别加入100μL H 3PO 4溶液和800μL终止溶液(200ng/mL甲糖宁和200ng/mL拉贝洛尔100％的甲醇溶液)来沉淀蛋白并充分混合。
5.样品在转速4000rpm下离心20min，从每孔取100μL上清液进行LC-MS/MS分析。
C.实验结果
实验结果如表8所示。
表8血浆稳定性测试结果
化合物编号 WX007 WX011
PLS(人/小鼠)T 1/2(min) >289/>221 >289/>175
结论：本发明化合物具有优异的血浆稳定性。
实验例4：肾匀浆稳定性测试(BHS)
A.实验目的
研究受试化合物在正常小鼠肾匀浆中的稳定性。
B.实验操作
1.实验前，将冷冻肾匀浆放入37℃水浴中解冻。
2.测试化合物：用DMSO稀释10mM的原液，制备1mM的中间溶液；
3.测试化合物：用DMSO稀释1mM的中间溶液，制备50μM的加药溶液；
4.在每个时间点(0、10、30、60、120、180、240min)分别加入100μL的4％的H 3PO 4和800μL的终止液来沉淀蛋白并充分混合。
5.样品4000rpm离心10min，每孔取100μL上清液至板上。样品在800rpm下振荡约10min，然后提交LC-MS/MS测试。
C.实验结果
实验结果如表9所示。
表9肾匀浆稳定性测试结果
化合物编号 WX007 WX011
BHS(T 1/2(min)) 57.6 142.9
结论：本发明化合物在肾匀浆中稳定性相比血浆稳定性较差，推测肾为可能的代谢器官。
实验例5：化合物小鼠药代动力学评价
A.实验目的
测试化合物在C57BL/6小鼠体内药代动力学
B.实验操作
以标准方案测试化合物皮下注射给药后的啮齿类动物药代特征，实验中候选化合物配成澄清溶液，给予小鼠皮下注射给药(SC,10nmol/kg)。皮下注射溶媒为柠檬酸盐缓冲液(20mM,pH＝7)。收集全血，制备得到血浆，以LC-MS/MS方法分析药物浓度，并用Phoenix WinNonlin软件计算药代参数。
C.实验结果
实验结果如表10所示。
表10药代动力学测试结果
Figure PCTCN2022110304-appb-000068
结论：本发明化合物具有优异的小鼠药代动力学性质。
实验例6：化合物食蟹猴药代动力学评价
A.实验目的
测试化合物在食蟹猴体内药代动力学
B.实验操作
以标准方案测试化合物皮下注射给药后的哺乳类动物药代特征，实验中候选化合物配成澄清溶液，给予食蟹猴单次皮下注射给药(SC,4nmol/kg)。皮下注射溶媒为柠檬酸盐缓冲液(20mM,pH＝7)。收集全血，制备得到血浆，以LC-MS/MS方法分析药物浓度，并用Phoenix WinNonlin软件计算药代参数。
C.实验结果
实验结果如表11所示。
表11药代动力学测试结果
Figure PCTCN2022110304-appb-000069
结论：本发明化合物具有优异的猴药代动力学性质。
实验例7：在DIO小鼠中的药效研究-体内药效评价
A.实验目的
研究受试化合物在DIO小鼠中的减重作用
B.实验操作
1.DIO小鼠动物到达药明康德设施后，将其饲养于严格控制环境条件的动物饲养间中，饲养间的温度维持在20～24℃，湿度维持在30～70％。通过温湿度计对饲养间的温度和湿度进行实时监控，并且每天对温度和湿度记录两次(上午和下午各1次)。动物饲养间的采光由一个电子定时开灯系统来控制，每天开灯12小时关灯12小时(上午7:00开，下午19:00关)。实验过程中，动物单笼饲养，并给每个笼中提供玩具。实验过程中动物自由采食(大小鼠生长/繁殖饲料)和饮水。
2.对每组动物分别皮下注射溶媒和待测化合物(10nmol/kg)，给药时间：早上9:30，给药频率三天一次，给药周期为22天。
C.实验结果
实验结果如表12所示。
表12测试化合物在DIO小鼠中的药效
化合物编号 溶媒 WX001 WX007 WX011
Δ体重％(20天后与第1天相比) -5.5％ -5.1％ -28.9％ -29.9％
结论：本发明化合物在DIO小鼠中展现了优异的减重药效。
实施例8：STZ-NASH小鼠模型体内药效验证
A.实验目的
验证受试物在C57BL/6小鼠经STZ-HFD饲料诱导的NASH模型中的药效。
B.实验操作
建模方法：新生鼠在出生48小时内皮下注射STZ(200ug/只)，母乳喂养4周后挑选空腹血糖值>12mmol/L的动物连续6周HFD喂养，最终建立NASH模型。另挑选8只动物不进行STZ注射和HFD喂养(正常对照组)。
给药方案：HFD喂养一周后开始给药，设定首次给药当天为Day1，之后每隔两天进行皮下注射，连续给药5周。
实验终点检测：病理HE和SR染色。
C.实验结果
实验结果如表13所示。
表13 STZ-NASH模型终点动物病理指标
  模型溶媒对照组 WX007 WX011
脂肪变性评分 1.917 1 1.286
炎症评分 1.292 1.238 1.286
气球样变评分 0.667 0.143 0.19
NAS评分 3.875 2.381 2.762
纤维化(％) 1.08 1.11 0.99
结论：本发明化合物在STZ-NASH小鼠模型中可显著改善NAS评分。

Claims (7)

  1. 下式(I)所示序列的多肽，
    HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLEGG PSSG
    (I)
    其具有以下修饰：
    1)上述第17、20、24或28位的氨基酸有且只有一个替换为K 0；和
    2)上述(I)所示序列的0-2个天然氨基酸被替换；和
    3)i和i+3位置的氨基酸之间或j和j+4位置的氨基酸之间形成内酰胺桥，其中i为18，其中j为17、20或24；
    其中，
    Aib的结构为
    Figure PCTCN2022110304-appb-100001
    K 0选自被X 0取代的K，其表示赖氨酸侧链上的氨基与X 0相连；
    X 0选自
    Figure PCTCN2022110304-appb-100002
    n为8、9或10。
  2. 根据权利要求1所述的多肽，其序列如下SEQ ID NO:1-SEQ ID NO:8，
    SEQ ID NO:1：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVEW LLEGG PSSG；
    SEQ ID NO:2：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVK 0W LLEGG PSSG；
    SEQ ID NO:3：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK EFVEW LLK 0GG PSSG；
    SEQ ID NO:4：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK 0EFVEW LLKGG PSSG；
    SEQ ID NO:5：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVEW LLKGG PSSG；
    SEQ ID NO:6：HAibQGT FTSDY SKYLD EKKAK 0EFVKW LLEGG PSSG；
    SEQ ID NO:7：HAibQGT FTSDY SKYLD EK 0KAK EFVKW LLEGG PSSG；
    SEQ ID NO:8：HAibQGT FTSDY SKα-MeLLD EKKAK 0EFVEW LLKGG PSSG；
    i和i+3位置的氨基酸之间或j和j+4位置的的氨基酸之间形成内酰胺桥，其中i为18，其中j为17、20或24；
    Aib和K 0如权利要求1所定义。
  3. 根据权利要求1或2所述的多肽，其中，第34位的氨基酸C-末端酰胺化。
  4. 根据权利要求1或2所述的多肽，其中，n为9。
  5. 根据权利要求1或2所述的多肽，其中，X 0选自
    Figure PCTCN2022110304-appb-100003
  6. 下式所示多肽，
    Figure PCTCN2022110304-appb-100004
    Figure PCTCN2022110304-appb-100005
    Figure PCTCN2022110304-appb-100006
  7. 根据权利要求1～6任意一项所述的多肽化合物在制备治疗减重和NASH的药物上的应用。
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