WO2022250100A1 - Ｃｏｖｉｄ－１９治療薬及びｃｏｖｉｄ－１９治療薬の製造のための化合物の使用 - Google Patents

Ｃｏｖｉｄ－１９治療薬及びｃｏｖｉｄ－１９治療薬の製造のための化合物の使用 Download PDF

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正徳 池田
緑 武田
佳洲 李
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    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses

Definitions

  • the present invention relates to COVID-19 therapeutics and the use of compounds for the manufacture of COVID-19 therapeutics.
  • COVID-19 coronavirus infection caused by the new coronavirus (SARS-CoV-2) that causes severe acute respiratory syndrome (SARS) has become a global pandemic. COVID-19 has become an urgent problem to be overcome because it has a great impact not only on medical problems but also on the economy, culture and lifestyle.
  • SARS-CoV-2 new coronavirus
  • SARS-CoV-2 severe acute respiratory syndrome
  • Non-Patent Document 1 includes quantitative evaluation of phosphorylation and protein amount due to SARS-CoV-2 infection in order to elucidate the mechanism of viral pathogenicity, and profiles such as changes in phosphorylation that disrupt kinases and pathways. Promising compounds for the treatment of COVID-19 are being investigated based on.
  • COVID-19 is prevalent worldwide, and there is a need for new safe COVID-19 therapeutics that are safe and effective for the target population.
  • the present invention has been made in view of the above circumstances, and aims to provide a COVID-19 therapeutic drug having high safety and efficacy and a use of a compound for the production of a COVID-19 therapeutic drug. .
  • the COVID-19 therapeutic agent according to the first aspect of the present invention is A compound selected from the group consisting of LY2090314, afresertib, talarozole, navitoclax and pharmacologically acceptable salts thereof.
  • the compound is is LY2090314; You can do it.
  • the use according to the second aspect of the invention is Use of a compound selected from the group consisting of LY2090314, afresertib, talarozole, navitoclax and pharmacologically acceptable salts thereof for the manufacture of a COVID-19 therapeutic.
  • the COVID-19 therapeutic drug according to the present invention has high safety and efficacy.
  • FIG. 4 shows remdesivir concentration response of replicon RNA replication levels.
  • FIG. 4 shows cell viability to remdesivir.
  • FIG. 10 shows the responsiveness of replicon RNA replication levels to the concentration of LY2090314.
  • FIG. 4 shows cell viability for LY2090314.
  • FIG. 4 shows the responsiveness of replicon RNA replication levels to the concentration of afresertib.
  • FIG. 10 shows cell viability for afresertib.
  • FIG. 4 shows the response of the replication level of replicon RNA to the concentration of talarozole.
  • FIG. 4 shows cell viability to talarozole.
  • FIG. 4 shows the response of replicon RNA replication levels to the concentration of navitoclax.
  • FIG. 3 shows cell viability against navitoclax.
  • FIG. 4 shows the responsiveness of the replication level of replicon RNA to the concentration of sotrastaurin.
  • FIG. 4 shows cell viability for sotrastaurine.
  • FIG. 11 shows the responsiveness of replicon RNA replication levels to the concentration of LY2228820.
  • FIG. 4 shows cell viability for LY2228820.
  • the COVID-19 therapeutic agent according to this embodiment includes a compound selected from the group consisting of LY2090314, afresertib, talarozole, navitoclax and pharmacologically acceptable salts thereof.
  • LY2090314, afresertib, talarozole and navitoclax are all safety-confirmed compounds in Phase 1 clinical trials.
  • LY2090314 (CAS number: 603288-22-8) is a glycogen synthase kinase-3 (GSK-3) inhibitor.
  • GSK-3 glycogen synthase kinase-3
  • Afressertib (CAS number: 1047644-62-1) is a protein kinase A (PKA) inhibitor and Akt inhibitor.
  • PKA protein kinase A
  • Akt protein kinase A
  • Talarozole (CAS number: 201410-53-9) is a cytochrome P450 inhibitor. Clinical trials of talarozole for acne and psoriasis have been conducted. The structure of talarozole is shown below.
  • Navitoclax (CAS number: 923564-51-6) is a BCL-2 family inhibitor. Clinical trials have been conducted with navitoclax for lymphoma and leukemia. The structure of navitoclax is shown below.
  • the above compound contained as an active ingredient in the therapeutic agent for COVID-19 is pharmacologically equivalent to LY2090314, afresertib, talarozole or navitoclax as long as it exhibits antiviral activity against SARS-CoV-2. It may be an acceptable salt. Salts are not particularly limited, and examples include alkali metal salts such as lithium salts, sodium salts and potassium salts, alkaline earth metal salts such as magnesium salts and calcium salts, hydrochlorides, hydrobromides, sulfates, and nitrates.
  • inorganic acid salts such as oxalates and phosphates, as well as acetates, propionates, hexanoates, cyclopentanepropionates, glycolates, pyruvates, lactates, malonates, succinates , malate, fumarate, tartrate, citrate, benzoate, o-(4-hydroxybenzoyl)benzoate, cinnamate, mandelate, methanesulfonate, ethanesulfonate, 1,2-ethanedisulfonate, 2-hydroxyethanesulfonate, benzenesulfonate, p-chlorobenzenesulfonate, 2-naphthalenesulfonate, p-toluenesulfonate, camphorsulfonate, 4- Methylbicyclo[2.2.2]oct-2-ene-1-carboxylate, glucoheptanoate, 3-
  • the COVID-19 therapeutic agent may contain, as active ingredients, multiple types of compounds selected from the group consisting of LY2090314, afresertib, talarozole, navitoclax, and pharmacologically acceptable salts thereof.
  • the COVID-19 therapeutic drug according to the present embodiment is manufactured by a known method, and contains % by weight, 0.001-99.6% by weight, 0.01-99.5% by weight, 0.1-99% by weight, 0.5-60% by weight, 1-50% by weight or 1-20% by weight including the above compounds of A COVID-19 therapeutic agent may be a solid or liquid formulation.
  • the COVID-19 therapeutic drug may contain any pharmacologically acceptable ingredient in addition to the above compounds.
  • Optional ingredients include, for example, carriers, excipients, lubricants, binders, disintegrants, solvents, solubilizers, suspending agents, tonicity agents, buffers and soothing agents. Additives such as preservatives, antioxidants, coloring agents and sweetening agents may also be incorporated into the COVID-19 therapeutic if desired.
  • the dosage of the COVID-19 therapeutic drug according to this embodiment is appropriately determined according to the sex, age, weight, symptoms, etc. of the subject.
  • the COVID-19 therapeutic agent is administered such that the compound is in an effective amount.
  • An effective amount is the amount of compound necessary to obtain the desired result, which is to suppress the proliferation of SARS-CoV-2, or to delay, inhibit, prevent, or reverse the progression of symptoms due to infection with SARS-CoV-2. or the amount necessary to bring about healing.
  • the dosage of the COVID-19 therapeutic agent is, for example, 0.01 mg/kg to 1000 mg/kg, preferably 0.1 mg/kg to 200 mg/kg, more preferably 0.2 mg/kg to 20 mg/kg; It can be administered in one or more divided doses per day.
  • the COVID-19 therapeutic agent is administered 1 to 4 times per day.
  • the COVID-19 therapeutic may be administered at different dosing frequencies, such as daily, every other day, once a week, every other week and once a month. Amounts outside the above ranges can also be used, if desired.
  • COVID-19 therapeutics may be administered, for example, parenterally or orally.
  • parenteral administration intravenous injection, subcutaneous injection, intraperitoneal injection, intramuscular injection, transdermal administration, nasal administration, pulmonary administration, enteral administration, transmucosal administration, and the like may be used.
  • COVID-19 therapeutics may be administered via an infusion.
  • COVID-19 therapeutic agent can be formulated in any form.
  • COVID-19 therapeutic agents include tablets such as dragees, buccal tablets, coated tablets and chewable tablets, lozenges, pills, powders and capsules including soft capsules, granules, suspensions, emulsions and dry syrups. It may be a syrup containing and a liquid such as an elixir.
  • COVID-19 therapeutic agents may be injections, inhalants, transdermal absorption tapes, aerosols, suppositories, and the like.
  • the COVID-19 therapeutic drug will be administered to any subject as long as the subject is infected with SARS-CoV-2.
  • the COVID-19 therapeutic agent is preferably administered to vertebrates, more preferably mammals. Mammals include, for example, humans, chimpanzees and other primates, pigs and horses, as well as birds such as ducks and chickens.
  • a particularly preferred administration subject is a human.
  • the COVID-19 therapeutic agent according to the present embodiment is administered to subjects in whom SARS-CoV-2 is detected for the purpose of preventing the onset of symptoms during the period without clear symptoms or the incubation period after infection.
  • the above compounds contained in the COVID-19 therapeutic agent according to this embodiment have been confirmed to be safe in humans. Indeed, as shown in the examples below, the CC50 (50% cytotoxic concentration) of the compounds was well above the EC50 (50% effective concentration). Therefore, the COVID-19 therapeutic agent according to this embodiment has high antiviral activity and high safety.
  • LY2090314, afresertib, and navitoclax have been reported to have maximum blood concentrations (C max ) in humans exceeding the EC 50 of each. But it works.
  • Also provided in another embodiment is the use of the above compounds for the manufacture of a COVID-19 therapeutic.
  • methods of treating, ameliorating or preventing COVID-19 are provided. The method includes administering the compound to the subject.
  • Also provided in another embodiment is a compound as described above for use in the treatment of COVID-19.
  • BsaI (-) vector The restriction enzyme BsaI site (ggtctc) in the ampicillin resistant gene of pUC19 was transfected into "gAtctc" using QuickChange mutagenesis (manufactured by Stratagene) to construct a BsaI-deficient plasmid pUC19b.
  • FIG. 1(A) shows the genome organization of SARS-CoV-2.
  • the genome of SARS-CoV-2 consists of nonstructural regions including nonstructural protein gene 1a (ORF1a) and nonstructural protein gene 1b (ORF1b), S gene, ORF3a, E gene, M gene, ORF6, ORF7a, ORF7b, and a structural region containing ORF8, the N gene and ORF10.
  • ORF1a nonstructural protein gene 1a
  • ORF1b nonstructural protein gene 1b
  • the replicon DNA (hereinafter referred to as "SC2R") according to this example is a DNA construct constructed based on the nucleotide sequence of the genome of SARS-CoV-2.
  • the nucleotide sequence of SC2R is shown in SEQ ID NO:2.
  • a viral replicon maintains a nonstructural region and lacks a structural region, so that it does not have infectivity but propagates autonomously.
  • the structure of SC2R is shown in FIG. 1(B).
  • SC2R has the non-structural region of SARS-CoV-2 and has no genes contained in the structural region except the N gene.
  • SC2R consists of cytomegalovirus (CMV) promoter, ORF1a, ORF1b, secretory luciferase gene (sNLuc), N gene, poly A region (pA), hepatitis delta virus ribozyme gene (Rz ) and bovine growth hormone poly A signal (BGH).
  • CMV cytomegalovirus
  • ORF1a ORF1a
  • ORF1b secretory luciferase gene
  • N gene N gene
  • pA poly A region
  • Rz hepatitis delta virus ribozyme gene
  • BGH bovine growth hormone poly A signal
  • the N gene has the function of improving the replication level of genomic RNA.
  • SC2R is transcribed into RNA (replicon RNA) in cells, translated, and replicated. Duplicated SC2R can be quantified through the activity of sNLuc.
  • Neo is a drug resistance gene as a marker gene.
  • pA contributes to transcript stability.
  • Rz is required for excision by self-cleavage after replication. BGH terminates transcription.
  • SC2R was synthesized by artificial synthesis without using a natural virus as a template, by the golden gate method using type IIS restriction enzyme, as follows.
  • Ggacc was used to synonymously replace the base sequence corresponding to the BsaI site (gagacc) from 17972nd to 17977th from the 5' end of the base sequence shown in SEQ ID NO: 1.
  • 2446 bp F4 10590 to 13379 2790 bp F5, 13376 to 15877 2502 bp F6, 15874 to 18708 2835 bp F7, 18705 to 21114 2410 bp F8, 21111 to 23288 2178 bp F8, 2178 bp 21111 to 23288 2278 bp at position ⁇ 25562 was designated as F10. It was designed so that the nucleotide sequence of the BsaI site was added to both ends of each fragment so that SC2R could be seamlessly incorporated into the BAC vector.
  • a BsaI site was introduced at the 5' and 3' ends of each of the 10 fragments.
  • F1-4 and F6-10 were introduced into pUC19b (pUC19b/SC2R-F1, F2, F3, F4, F6, F7, F8, F9, F10).
  • F5 was introduced into the pCC1-4k vector (pCC1-4k/SC2R-F5).
  • PCR fragments A and B containing BsaI inside EcoRI and BamHI were prepared.
  • PCR fragment A was performed using the HRP gene shown in SEQ ID NO: 4 as a template and a forward primer (SEQ ID NO: 5) and a reverse primer (SEQ ID NO: 6).
  • the nucleotide sequence of PCR fragment A is shown in SEQ ID NO:7.
  • PCR was performed using the HRP gene shown in SEQ ID NO: 4 as a template and a forward primer (SEQ ID NO: 8) and a reverse primer (SEQ ID NO: 9).
  • the nucleotide sequence of PCR fragment B is shown in SEQ ID NO:10.
  • PCR fragment C containing BsaI inside HindIII and BamHI was prepared.
  • PCR was performed using the HRP gene shown in SEQ ID NO: 4 as a template and a forward primer (SEQ ID NO: 11) and a reverse primer (SEQ ID NO: 12).
  • the nucleotide sequence of PCR fragment C is shown in SEQ ID NO:13.
  • pHSG298 was cleaved with EcoRI and BamHI, and PCR fragment A was ligated to construct pHSG298c vector A. Further, pHSG298 was cleaved with EcoRI and BamHI, and PCR fragment B was ligated to construct pHSG298c vector B. pCC1-4k was cleaved with HindIII and BamHI and PCR fragment C was ligated to construct pCC1-4kc vector.
  • the cured cell line has a higher level of HCV RNA replication than the parent HuH-7 cell line (Masanori Ikeda, et al., ⁇ Efficient replication of a full-length hepatitis C virus genome, strain O,''). in cell culture, and development of a luciferase reporter system,” Biochem Biophys Res Commun., 2005, 329(4):1350-9).
  • HuH-7.6c cells were seeded in a 6-well plate at 1 ⁇ 10 5 cells/well, and the next day, 1 ⁇ g of pSMART BACbc/SC2R was transfected using Fugene HD reagent and introduced into the cells. After 24 hours, cells were detached using trypsin and seeded in 24-well plates at 3 x 104 cells/well. After an additional 24 hours, compounds were added to the indicated concentrations. After culturing for 48 hours, the culture supernatant was collected and luciferase activity was measured using the Nano-Glo Luciferase Assay System.
  • HuH-7.6c cells were seeded in 96-well plates at 5 ⁇ 10 3 cells. Twenty-four hours after the initiation of culture, remdesivir was added to the cells to a predetermined concentration. After culturing for 48 hours, 10 ⁇ l of Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System (manufactured by Takara Bio Inc.) was added to the medium, cultured at 37° C. for 2 hours, and absorbance at 450 nm was measured using a microplate reader.
  • Premix WST-1 Cell Proliferation Assay System manufactured by Takara Bio Inc.
  • FIG. 2 shows the luciferase activity when remdesivir was added. Remdesivir concentration-dependently decreased luciferase activity, indicating that SC2R replication was suppressed by remdesivir.
  • the EC50 for remdesivir was 16.4 nM. Inhibition of SC2R replication by the positive control remdesivir could be evaluated, confirming that the SC2R assay can identify compounds with anti-SARS-CoV-2 activity. Cell viability versus remdesivir concentration is shown in FIG. CC50 was 1.13 ⁇ M.
  • the SC2R assay was used to screen compounds with anti-SARS-CoV-2 activity.
  • 350 compounds from the MedChemexpress Phase II drop library were evaluated in the SARS-CoV-2 replicon assay.
  • Compounds included in the library are compounds whose molecular targets to act on are known and whose safety has been confirmed in Phase 1 clinical trials.
  • FIG. 4 shows luciferase activity and cell viability when LY2090314 was added, respectively.
  • Figures 6 and 7 show the luciferase activity and cell viability when afresertib was added, respectively.
  • Figures 8 and 9 show the luciferase activity and cell viability when talarozole was added, respectively.
  • Figures 10 and 11 show the luciferase activity and cell viability when navitoclax was added, respectively.
  • Figures 12 and 13 show the luciferase activity and cell viability when sotrastaurine was added, respectively.
  • Figures 14 and 15 show luciferase activity and cell viability when LY2228820 was added, respectively.
  • the present invention is useful for treating COVID-19.

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Abstract

ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物を含む。

Description

ＣＯＶＩＤ－１９治療薬及びＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のための化合物の使用
　本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬及びＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のための化合物の使用に関する。
　重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）を引き起こす新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）感染による新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）は世界でパンデミックとなっている。ＣＯＶＩＤ－１９は、医療上の問題のみならず経済、文化及び生活様式等にも大きな影響を及ぼすため、緊急に克服すべき課題となっている。
　ＣＯＶＩＤ－１９に対してワクチンの臨床応用が進んでいる。しかし、ワクチンの有効性を低減させる変異株もすでに出現している。このような現状を打破するためには、ワクチンに加えて安全な治療薬の開発が重要である。
　非特許文献１には、ウイルス病原性の機序を解明するためにＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染によるリン酸化及びタンパク質の量の定量的な評価、並びにキナーゼ及びパスウェイを乱すリン酸化の変化等のプロファイルに基づいて、ＣＯＶＩＤ－１９の治療に有望な化合物が検討されている。
Ｍｅｈｄｉ　Ｂｏｕｈａｄｄｏｕ，外７７名，「Ｔｈｅ　Ｇｌｏｂａｌ　Ｐｈｏｓｐｈｏｒｙｌａｔｉｏｎ　Ｌａｎｄｓｃａｐｅ　ｏｆ　ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ」，２０２０年，Ｃｅｌｌ，１８２，６８５－７１２
　ＣＯＶＩＤ－１９は世界的に流行しており、投与対象に対して安全かつ有効な新規の安全なＣＯＶＩＤ－１９治療薬が必要とされている。
　本発明は上述の事情に鑑みてなされたものであり、高い安全性及び有効性を有するＣＯＶＩＤ－１９治療薬及びＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のための化合物の使用を提供することを目的とする。
　本発明の第１の観点に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、
　ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物を含む。
　前記化合物は、
　ＬＹ２０９０３１４である、
　こととしてもよい。
　本発明の第２の観点に係る使用は、
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のためのＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用である。
　本発明に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、高い安全性及び有効性を有する。
（Ａ）はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムの構成を示す図である。（Ｂ）は実施例に係るレプリコンＤＮＡの構成を示す図である。（Ｃ）は（Ｂ）に示すレプリコンＤＮＡを複数に分割したフラグメントＦ１～Ｆ１０を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのレムデシビル濃度応答性を示す図である。 レムデシビルに対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのＬＹ２０９０３１４の濃度に対する応答性を示す図である。 ＬＹ２０９０３１４に対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのアフレセルチブの濃度に対する応答性を示す図である。 アフレセルチブに対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのタラロゾールの濃度に対する応答性を示す図である。 タラロゾールに対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのナビトクラックスの濃度に対する応答性を示す図である。 ナビトクラックスに対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのソトラスタウリンの濃度に対する応答性を示す図である。 ソトラスタウリンに対する細胞生存率を示す図である。 レプリコンＲＮＡの複製レベルのＬＹ２２２８８２０の濃度に対する応答性を示す図である。 ＬＹ２２２８８２０に対する細胞生存率を示す図である。
　本発明に係る実施の形態について図面を参照して説明する。なお、本発明は下記の実施の形態及び図面によって限定されるものではない。なお、下記の実施の形態において、“有する”、“含む”又は“含有する”といった表現は、“からなる”又は“から構成される”という意味も包含する。
　（実施の形態）
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物を含む。ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール及びナビトクラックスは、いずれも臨床試験の第１相試験で安全性が確認された化合物である。
　ＬＹ２０９０３１４（ＣＡＳ番号：６０３２８８－２２－８）はグリコーゲン合成酵素キナーゼ－３（ｇｌｙｃｏｇｅｎ　ｓｙｎｔｈａｓｅ　ｋｉｎａｓｅ　３；ＧＳＫ－３）阻害剤である。急性骨髄性白血病に対するＬＹ２０９０３１４の臨床試験が行われた。ＬＹ２０９０３１４の構造を下記に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
　アフレセルチブ（Ａｆｕｒｅｓｅｒｔｉｂ、ＣＡＳ番号：１０４７６４４－６２－１）はプロテインキナーゼＡ（ｐｒｏｔｅｉｎ　ｋｉｎａｓｅ　Ａ；ＰＫＡ）阻害剤及びＡｋｔ阻害剤である。前立腺癌に対するアフレセルチブの臨床試験が行われた。アフレセルチブの構造を下記に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
　タラロゾール（Ｔａｌａｒｏｚｏｌｅ、ＣＡＳ番号：２０１４１０－５３－９）はチトクロームＰ４５０阻害剤である。にきび及び乾癬に対するタラロゾールの臨床試験が行われた。タラロゾールの構造を下記に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
　ナビトクラックス（Ｎａｖｉｔｏｃｌａｘ、ＣＡＳ番号：９２３５６４－５１－６）はＢＣＬ－２ファミリー阻害剤である。リンパ腫及び白血病に対するナビトクラックスの臨床試験が行われた。ナビトクラックスの構造を下記に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬に有効成分として含まれる上記化合物は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対して抗ウイルス活性を示す限り、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール又はナビトクラックスの薬理学的に許容される塩であってもよい。塩は特に限定されず、例えば、リチウム塩、ナトリウム塩及びカリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩及びカルシウム塩等のアルカリ土類金属塩等、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩及びリン酸塩等の無機酸塩、並びに酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、グリコール酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、リンゴ酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、ｏ－（４－ヒドロキシベンゾイル）安息香酸塩、桂皮酸塩、マンデル酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、１，２－エタンジスルホン酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－クロロベンゼンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、４－メチルビシクロ［２．２．２］オクト－２－エン－１－カルボン酸塩、グルコヘプタン酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、トリメチル酢酸塩、第三級ブチル酢酸塩、ラウリル硫酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、及びムコン酸塩等の有機酸塩等である。なお、抗ウイルス活性とは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染性、増殖能又は免疫回避能を低下させる活性を意味する。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される複数種類の化合物を有効成分として含有してもよい。
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、既知の方法で製造され、有効成分として０．０００００１～９９．９重量％、０．００００１～９９．８重量％、０．０００１～９９．７重量％、０．００１～９９．６重量％、０．０１～９９．５重量％、０．１～９９重量％、０．５～６０重量％、１～５０重量％又は１～２０重量％の上記化合物を含む。ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、固形製剤であっても、液状製剤であってもよい。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は上記化合物に加え、薬理学的に許容される任意の成分を含んでもよい。任意の成分は、例えば、担体、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤及び無痛化剤等である。また、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤及び甘味剤等の添加物がＣＯＶＩＤ－１９治療薬に配合されてもよい。
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬の投与量は、投与対象の性別、年齢、体重及び症状等によって適宜決定される。当該ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、上記化合物が有効量となるように投与される。有効量とは、所望の結果を得るために必要な化合物の量であり、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の増殖の抑制、あるいはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の感染による症状の進行の遅延、阻害、予防、逆転又は治癒をもたらすのに必要な量である。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の投与量は、例えば、０．０１ｍｇ／ｋｇ～１０００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは０．１ｍｇ／ｋｇ～２００ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは０．２ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇであり、１日に１回、又はそれ以上に分割して投与することができる。ＣＯＶＩＤ－１９治療薬を分割して投与する場合、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、１日に１～４回投与される。また、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、毎日、隔日、１週間に１回、隔週及び１ヶ月に１回等の様々な投与頻度で投与してもよい。なお、必要に応じて、上記の範囲外の量を用いることもできる。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の投与経路は特に限定されない。ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、例えば非経口で投与されてもよいし、経口で投与されてもよい。非経口投与の場合、静脈注射、皮下注射、腹腔内注射、筋肉内注射、経皮投与、経鼻投与、経肺投与、経腸投与及び経粘膜投与等であってもよい。ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、点滴を介して投与されてもよい。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、任意の形態の製剤とすることができる。経口投与の場合、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、糖衣錠、バッカル錠、コーティング錠及びチュアブル錠等の錠剤、トローチ剤、丸剤、散剤及びソフトカプセルを含むカプセル剤、顆粒剤、懸濁剤、乳剤及びドライシロップを含むシロップ剤、並びにエリキシル剤等の液剤であってもよい。非経口投与の場合、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、注射剤、吸入剤、経皮吸収テープ、エアゾール剤及び坐剤等であってもよい。
　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が感染する対象であれば、任意の対象に投与される。例えば、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の投与対象は、脊椎動物が好ましく、哺乳類動物がより好ましい。哺乳類動物としては、例えば、ヒト、チンパンジー及びその他の霊長類、ブタ及びウマに加え、カモ及びニワトリ等の鳥類等が挙げられる。特に好ましい投与対象はヒトである。
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が検出された対象に対して、明確な症状がない期間、あるいは感染後の潜伏期間に症状の発症を予防する目的で投与されてもよい。
　本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬に含まれる上記の化合物は、ヒトでの安全性が確認されている。実際に下記実施例に示されるように、上記化合物のＣＣ５０（５０％細胞毒性濃度）はＥＣ５０（５０％有効濃度）よりも十分に高かった。よって、本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は高い抗ウイルス活性と高い安全性とを有する。
　なお、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ及びナビトクラックスのヒトで報告されている最高血中濃度（Ｃｍａｘ）は、それぞれのＥＣ５０を超えているため、本実施の形態に係るＣＯＶＩＤ－１９治療薬は臨床上でも有効である。
　また、他の実施の形態では、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のための上記化合物の使用が提供される。別の実施の形態では、ＣＯＶＩＤ－１９を治療、改善又は予防する方法が提供される。当該方法は、上記化合物を対象に投与する工程を含む。
　また、他の実施の形態では、ＣＯＶＩＤ－１９の治療における使用のための上記化合物が提供される。
　以下の実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。
　（ＢｓａＩ（－）ベクターの作製）
　ｐＵＣ１９のアンピシリン耐性遺伝子内にある制限酵素ＢｓａＩサイト（ｇｇｔｃｔｃ）をＱｕｉｃｋＣｈａｎｇｅ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ社製）を用いて、“ｇＡｔｃｔｃ”になるよう遺伝子導入を行い、ＢｓａＩ欠損プラスミドｐＵＣ１９ｂを構築した。
　ｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣのｓｏｐＢ遺伝子内にある制限酵素ＢｓａＩサイト（ｇｇｔｃｔｃ）をＱｕｉｃｋＣｈａｎｇｅ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓを用いて、“ｇＡｔｃｔｃ”になるよう遺伝子導入を行い、ＢｓａＩ欠損プラスミドｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂを構築した。
　（人工遺伝子の設計）
　図１（Ａ）はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムの構成を示す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムは、非構造蛋白遺伝子１ａ（ＯＲＦ１ａ）及び非構造蛋白遺伝子１ｂ（ＯＲＦ１ｂ）を含む非構造領域と、Ｓ遺伝子、ＯＲＦ３ａ、Ｅ遺伝子、Ｍ遺伝子、ＯＲＦ６、ＯＲＦ７ａ、ＯＲＦ７ｂ、ＯＲＦ８、Ｎ遺伝子及びＯＲＦ１０を含む構造領域と、を有する。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムの５’末端及び３’末端には、それぞれ非翻訳領域（５’ＵＴＲ及び３’ＵＴＲ）がある。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムの塩基配列（ＮＣＢＩ　Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　Ｓｅｑｕｅｎｃｅ：ＮＣ＿０４５５１２）は配列番号１に例示される。
　本実施例に係るレプリコンＤＮＡ（以下、“ＳＣ２Ｒ”とする）は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のゲノムの塩基配列に基づいて構築されるＤＮＡ構築物である。ＳＣ２Ｒの塩基配列は配列番号２に示される。一般にウイルスのレプリコンは、非構造領域を維持し、構造領域を欠くため、感染性を有していないが自律増殖する。ＳＣ２Ｒの構成を図１（Ｂ）に示す。ＳＣ２Ｒは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の非構造領域を有し、Ｎ遺伝子を除く構造領域に含まれる遺伝子を有していない。詳細には、ＳＣ２Ｒは、５’末端側からサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ＯＲＦ１ａ、ＯＲＦ１ｂ、分泌型ルシフェラーゼ遺伝子（ｓＮＬｕｃ）、Ｎ遺伝子、ポリＡ領域（ｐＡ）、肝炎デルタウィルスのリボザイム遺伝子（Ｒｚ）及びウシ成長ホルモンポリＡシグナル（ＢＧＨ）を有する。
　Ｎ遺伝子はゲノムＲＮＡの複製レベルを向上させる機能を有する。ＳＣ２Ｒは、細胞内でＲＮＡ（レプリコンＲＮＡ）に転写されたうえで、翻訳され、複製される。ｓＮＬｕｃの活性を介して複製されたＳＣ２Ｒを定量することができる。Ｎｅｏは、マーカー遺伝子としての薬剤耐性遺伝子である。ｐＡは転写産物の安定性に寄与する。Ｒｚは複製後の自己切断による切り出しに必要である。ＢＧＨは転写を終結させる。
　ＳＣ２Ｒを、天然ウイルスを鋳型として使用しない人工合成により、タイプＩＩＳ型制限酵素を用いるゴールデンゲート法で以下のように合成した。
　ＳＣ２Ｒの非構造領域では、配列番号１に示す塩基配列の５’末端から１７９７２番目から１７９７７番目までのＢｓａＩサイト（ｇａｇａｃｃ）に相当する塩基配列を同義置換するために、“ｇＧｇａｃｃ”とした。
　ＢｓａＩサイトを欠失させたＳＣ２Ｒ（２５５６２ｂｐ）を図１（Ｃ）に示すように２～３ｋｂの１０個のフラグメントＦ１～Ｆ１０に分けて人工遺伝子を合成した。詳細には、配列番号２に示すＳＣ２Ｒの塩基配列の５’末端から１～２７３５番目の２７３５ｂｐをＦ１、２７３２～５３６０番目の２８２９ｂｐをＦ２、５３５７～８１５１番目の２７９５ｂｐをＦ３、８１４８～１０５９３番目の２４４６ｂｐをＦ４、１０５９０～１３３７９番目の２７９０ｂｐをＦ５、１３３７６～１５８７７番目の２５０２ｂｐをＦ６、１５８７４～１８７０８番目の２８３５ｂｐをＦ７、１８７０５～２１１１４番目の２４１０ｂｐをＦ８、２１１１１～２３２８８番目の２１７８ｂｐをＦ９、２３２８５～２５５６２番目の２２７８ｂｐをＦ１０とした。各フラグメントの両端にＢｓａＩサイトの塩基配列を付加して、シームレスにＳＣ２ＲをＢＡＣベクターに組込むことができるように設計した。
　（人工遺伝子の合成）
　１０個のフラグメントそれぞれの５’末端と３’末端にＢｓａＩサイトを導入した。Ｆ１～４とＦ６～１０はｐＵＣ１９ｂに導入した（ｐＵＣ１９ｂ／ＳＣ２Ｒ－Ｆ１，Ｆ２，Ｆ３，Ｆ４，Ｆ６，Ｆ７，Ｆ８，Ｆ９，Ｆ１０）。Ｆ５はｐＣＣ１－４ｋベクターに導入した（ｐＣＣ１－４ｋ／ＳＣ２Ｒ－Ｆ５）。
　（クローニングベクターｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂｃの作製）
　人工的に合成したマルチクローニングサイトが導入されたｐＵＣ５７　ＮｏｔＩ－ＢｓａＩｃ－ＢｓａＩ－ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄＩＩＩ－ＢａｍＨＩ－ＸｈｏＩ－ＡｖｒＩＩを制限酵素ＮｏｔＩとＡｖｒＩＩで切断し、配列番号３に示す９５５ｂｐの人工遺伝子を得た。ｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂのＮｏｔＩ－ＡｖｒＩＩサイトに人工遺伝子をライゲーションして、ｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂｃを作製した。
　（クローニングベクターｐＨＳＧ２９８ｃ及びｐＣＣ１－４ｋｃの作製）
　ｐＨＳＧ２９８ベクターにＢｓａＩサイトを導入するため、ＥｃｏＲＩとＢａｍＨＩの内側にＢｓａＩを含むＰＣＲフラグメントＡ及びＢを作製した。ＰＣＲフラグメントＡの作製では、配列番号４に示すＨＲＰ遺伝子を鋳型として、フォワードプライマー（配列番号５）及びリバースプライマー（配列番号６）を用いてＰＣＲを行った。ＰＣＲフラグメントＡの塩基配列を配列番号７に示す。ＰＣＲフラグメントＢの作製では、配列番号４に示すＨＲＰ遺伝子を鋳型として、フォワードプライマー（配列番号８）及びリバースプライマー（配列番号９）を用いてＰＣＲを行った。ＰＣＲフラグメントＢの塩基配列を配列番号１０に示す。
　また、ｐＣＣ１－４ｋベクターにＢｓａＩサイトを導入するため、ＨｉｎｄＩＩＩとＢａｍＨＩの内側にＢｓａＩを含むＰＣＲフラグメントＣを作製した。ＰＣＲフラグメントＣの作製では、配列番号４に示すＨＲＰ遺伝子を鋳型として、フォワードプライマー（配列番号１１）及びリバースプライマー（配列番号１２）を用いてＰＣＲを行った。ＰＣＲフラグメントＣの塩基配列を配列番号１３に示す。
　ｐＨＳＧ２９８をＥｃｏＲＩとＢａｍＨＩで切断し、ＰＣＲフラグメントＡをライゲーションして、ｐＨＳＧ２９８ｃベクターＡを構築した。また、ｐＨＳＧ２９８をＥｃｏＲＩとＢａｍＨＩで切断し、ＰＣＲフラグメントＢをライゲーションして、ｐＨＳＧ２９８ｃベクターＢを構築した。ｐＣＣ１－４ｋをＨｉｎｄＩＩＩとＢａｍＨＩで切断し、ＰＣＲフラグメントＣをライゲーションして、ｐＣＣ１－４ｋｃベクターを構築した。
　（中間フラグメントｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ１２３、ｐＣＣ１－４ｋｃ／Ｆ４５６及びｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ７－１０の作製）
　ｐＵＣ１９ｂ／Ｆ１，Ｆ２，Ｆ３，Ｆ４，Ｆ６，Ｆ７，Ｆ８，Ｆ９，Ｆ１０及びｐＣＣ１－４ｋ／Ｆ５をそれぞれＢｓａＩで切断した。Ｆ１、Ｆ２及びＦ３をｐＨＳＧ２９８ｃベクターＡに導入し、ｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ１２３とした。Ｆ４、Ｆ５及びＦ６をｐＣＣ１－４ｋｃベクターに導入し、ｐＣＣ１－４ｋｃ／Ｆ４５６とした。Ｆ７、Ｆ８、Ｆ９及びＦ１０をｐＨＳＧ２９８ｃベクターＢに導入し、ｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ７－１０とした。
　（ＳＣ２Ｒベクターの作製）
　ｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ１２３、ｐＣＣ１－４ｋｃ／Ｆ４５６及びｐＨＳＧ２９８ｃ／Ｆ７－１０をＢｓａＩで切断し、各フラグメントをｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂｃのＢｓａＩ－ＢｓａＩサイトにライゲーションした。ライゲーション後、エレクトロポレーション法にてＢＡＣ－Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　Ｒｅｐｌｉｃａｔｏｒ　ｖ２．０　Ｅｌｅｃｔｒｏｃｏｍｐｅｔｅｎｔ　Ｃｅｌｌｓ（Ｌｕｃｉｇｅｎ社製）に導入しクローニングを行った。以上により、ｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂｃ／ＳＣ２Ｒを得た。
　（ＨｕＨ－７．６ｃ細胞の樹立）
　レポーター全長ＨＣＶ　ＲＮＡをエレクトロポレーションによりＨｕＨ－７細胞に導入後Ｇ４１８を添加するとＨＣＶ　ＲＮＡ複製レベルの高い細胞が選択されてコロニーを形成する。コロニーの中で最もＨＣＶ　ＲＮＡ複製レベルの高いクローン化細胞を細胞株として樹立したものがＯＲ６細胞株となる。次に、ＯＲ６細胞にＩＦＮを添加することでＨＣＶ　ＲＮＡを排除して治癒細胞株（ＨｕＨ－７．６ｃ細胞株）を樹立した。治癒細胞株は親株のＨｕＨ－７細胞株よりもＨＣＶ　ＲＮＡの複製レベルが高いことが知られている（Ｍａｓａｎｏｒｉ　Ｉｋｅｄａ、外５名、「Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｆｕｌｌ－ｌｅｎｇｔｈ　ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｃ　ｖｉｒｕｓ　ｇｅｎｏｍｅ，　ｓｔｒａｉｎ　Ｏ，ｉｎ　ｃｅｌｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ，ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ａ　ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　ｒｅｐｏｒｔｅｒ　ｓｙｓｔｅｍ」、Ｂｉｏｃｈｅｍ　Ｂｉｏｐｈｙｓ　Ｒｅｓ　Ｃｏｍｍｕｎ．、２００５年、３２９（４）：１３５０－９）。
　（ＳＣ２Ｒアッセイによる評価）
　ＨｕＨ－７．６ｃ細胞を６ウェルプレートに１×１０５細胞／ウェルになるように播種し、翌日ｐＳＭＡＲＴ　ＢＡＣｂｃ／ＳＣ２Ｒ　１μｇをＦｕｇｅｎｅ　ＨＤ試薬を用いてトランスフェクションし細胞に導入した。２４時間後、トリプシンを用いて細胞を剥離し、２４ウェルプレートに３×１０４細胞／ウェルになるように播種した。さらに２４時間後、化合物を所定の濃度になるように添加した。４８時間培養後、培養上清を採取し、Ｎａｎｏ－Ｇｌｏ　Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ　Ａｓｓａｙ　Ｓｙｓｔｅｍを用いてルシフェラーゼ活性を測定した。
　（細胞毒性の評価）
　ＨｕＨ－７．６ｃ細胞を、９６ウェルプレートに５×１０３個になるように播種した。培養開始から２４時間後に、レムデシビルを、所定の濃度になるように細胞に添加した。４８時間培養した後、Ｐｒｅｍｉｘ　ＷＳＴ－１　Ｃｅｌｌ　Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　Ａｓｓａｙ　Ｓｙｓｔｅｍ（タカラバイオ社製）１０μｌを培地に添加して、３７℃で２時間培養後、マイクロプレートリーダーを用いて４５０ｎｍの吸光度を測定した。
　（結果）
　レムデシビルを添加した場合のルシフェラーゼ活性を図２に示す。レムデシビルの濃度依存的にルシフェラーゼ活性が低下したため、レムデシビルによってＳＣ２Ｒの複製が抑制されたことが示された。レムデシビルのＥＣ５０は１６．４ｎＭであった。陽性対照であるレムデシビルによるＳＣ２Ｒの複製の抑制が評価できたことから、ＳＣ２Ｒアッセイで抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を有する化合物を同定できることが確かめられた。レムデシビルの濃度に対する細胞生存率を図３に示す。ＣＣ５０は１．１３μＭであった。
　ＳＣ２Ｒアッセイを用いて、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性を有する化合物をスクリーニングした。ＭｅｄＣｈｅｍｅｘｐｒｅｓｓ社のＰｈａｓｅ　ＩＩドロップライブラリの化合物３５０種類をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２レプリコンアッセイで評価した。当該ライブラリに含まれる化合物は、作用する分子標的が既知で、臨床試験における第１相試験で安全性が確認された化合物である。
　ＳＣ２Ｒアッセイにおけるルシフェラーゼ活性と細胞毒性の結果とから、ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス、ソトラスタウリン（Ｓｏｔｒａｓｔａｕｒｉｎ）及びＬＹ２２２８８２０からなる６種類の化合物をＣｏｖｉｄ－１９治療薬の候補として同定した。図４及び図５はそれぞれＬＹ２０９０３１４を添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。図６及び図７はそれぞれアフレセルチブを添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。図８及び図９はそれぞれタラロゾールを添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。
　図１０及び図１１はそれぞれナビトクラックスを添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。図１２及び図１３はそれぞれソトラスタウリンを添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。図１４及び図１５はそれぞれＬＹ２２２８８２０を添加した場合のルシフェラーゼ活性及び細胞生存率を示す。
　Ｃｏｖｉｄ－１９治療薬の候補のＥＣ５０、ＣＣ５０及び選択係数（ＳＩ＝ＣＣ５０／ＥＣ５０）を表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
　上述した実施の形態は、本発明を説明するためのものであり、本発明の範囲を限定するものではない。すなわち、本発明の範囲は、実施の形態ではなく、特許請求の範囲によって示される。そして、特許請求の範囲内及びそれと同等の発明の意義の範囲内で施される様々な変形が、本発明の範囲内とみなされる。
　本出願は、２０２１年５月２６日に出願された、日本国特許出願２０２１－０８８２２４号に基づく。本明細書中に日本国特許出願２０２１－０８８２２４号の明細書、特許請求の範囲、図面全体を参照として取り込むものとする。
　本発明はＣＯＶＩＤ－１９の治療に有用である。

Claims (3)

  1. 　ＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物を含む、
    　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬。
  2. 　前記化合物は、
    　ＬＹ２０９０３１４である、
    　請求項１に記載のＣＯＶＩＤ－１９治療薬。
  3. 　ＣＯＶＩＤ－１９治療薬の製造のためのＬＹ２０９０３１４、アフレセルチブ、タラロゾール、ナビトクラックス及びそれらの薬理学的に許容される塩からなる群から選択される化合物の使用。
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