WO2016206101A1 - Metallo-beta-lactamase inhibitors - Google Patents

Metallo-beta-lactamase inhibitors Download PDF

Info

Publication number
WO2016206101A1
WO2016206101A1 PCT/CN2015/082514 CN2015082514W WO2016206101A1 WO 2016206101 A1 WO2016206101 A1 WO 2016206101A1 CN 2015082514 W CN2015082514 W CN 2015082514W WO 2016206101 A1 WO2016206101 A1 WO 2016206101A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
optionally substituted
alkyl
mmol
ring
independently selected
Prior art date
Application number
PCT/CN2015/082514
Other languages
French (fr)
Inventor
Frank Bennett
Jinlong Jiang
Alexander Pasternak
Shuzhi DONG
Xin Gu
Jack D. Scott
Haiqun Tang
Zhiqiang Zhao
Yuhua Huang
David Hunter
Dexi YANG
Zhibo Zhang
Jianmin Fu
Yunfeng BAI
Zhixiang Zheng
Xu Zhang
Katherine Young
Li Xiao
Original Assignee
Merck Sharp & Dohme Corp.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Sharp & Dohme Corp. filed Critical Merck Sharp & Dohme Corp.
Priority to PCT/CN2015/082514 priority Critical patent/WO2016206101A1/en
Priority to US15/737,351 priority patent/US10221163B2/en
Priority to GEAP201614683A priority patent/GEP20207169B/en
Priority to ARP160101905A priority patent/AR105122A1/en
Priority to AU2016281710A priority patent/AU2016281710B2/en
Priority to CN201680049758.1A priority patent/CN107922394B/en
Priority to MDE20180446T priority patent/MD3313832T2/en
Priority to BR112017027719-0A priority patent/BR112017027719B1/en
Priority to HUE16734151A priority patent/HUE054410T2/en
Priority to TNP/2017/000509A priority patent/TN2017000509A1/en
Priority to CR20170605A priority patent/CR20170605A/en
Priority to PL16734151T priority patent/PL3313832T3/en
Priority to EA201890150A priority patent/EA032698B1/en
Priority to PE2017002827A priority patent/PE20180600A1/en
Priority to EP16734151.0A priority patent/EP3313832B1/en
Priority to RS20210436A priority patent/RS61696B1/en
Priority to KR1020187002095A priority patent/KR102089878B1/en
Priority to CA2990234A priority patent/CA2990234C/en
Priority to LTEP16734151.0T priority patent/LT3313832T/en
Priority to JP2017566836A priority patent/JP6409141B2/en
Priority to US15/737,334 priority patent/US10227331B2/en
Priority to TW105120065A priority patent/TWI715595B/en
Priority to PCT/US2016/039185 priority patent/WO2016210234A1/en
Priority to PCT/US2016/039156 priority patent/WO2016210215A1/en
Priority to MX2017016672A priority patent/MX2017016672A/en
Priority to PT167341510T priority patent/PT3313832T/en
Priority to DK16734151.0T priority patent/DK3313832T3/en
Priority to SI201631133T priority patent/SI3313832T1/en
Priority to EP16815358.3A priority patent/EP3313828B1/en
Priority to MA42244A priority patent/MA42244B1/en
Priority to ES16734151T priority patent/ES2865284T3/en
Priority to JOP/2016/0132A priority patent/JO3588B1/en
Publication of WO2016206101A1 publication Critical patent/WO2016206101A1/en
Priority to IL256265A priority patent/IL256265B/en
Priority to CL2017003325A priority patent/CL2017003325A1/en
Priority to SV2017005604A priority patent/SV2017005604A/en
Priority to PH12017502418A priority patent/PH12017502418A1/en
Priority to CONC2017/0013360A priority patent/CO2017013360A2/en
Priority to DO2017000310A priority patent/DOP2017000310A/en
Priority to ECIEPI20185828A priority patent/ECSP18005828A/en
Priority to JP2018042502A priority patent/JP6670333B2/en
Priority to US16/244,876 priority patent/US10544130B2/en
Priority to HRP20210481TT priority patent/HRP20210481T1/en
Priority to CY20211100376T priority patent/CY1124086T1/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4192—1,2,3-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/421—1,3-Oxazoles, e.g. pemoline, trimethadione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
    • A61K31/431—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems containing further heterocyclic rings, e.g. ticarcillin, azlocillin, oxacillin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
    • A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/08—Bridged systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • This invention relates to novel metallo- ⁇ -lactamase inhibitors and their uses.
  • Bacterial antibiotic resistance has become one of the most serious threats to modern health care. Infections caused by resistant bacteria frequently result in longer hospital stays, higher mortality and increased cost of treatment. See, e.g., Cohen, Science 1992, 257: 1051-1055. The need for new antibiotics will continue to escalate because bacteria have a remarkable ability to develop resistance to new agents rendering them quickly ineffective. See, e.g., Neu, Science 1992, 257: 1064-1073. The spread of antibiotic resistance has been referred to as a pandemic and that a solution to the growing public health threat will require an interdisciplinary approach. See, e.g., Anderson, Nature America 1999, 5: 147-149.
  • ⁇ -lactamases Resistance mediated by ⁇ -lactamases is a critical aspect at the core of the development of bacterial antibiotic resistance.
  • Clavulanic acid which is a metabolite of Streptomyces clavuligerus, and two semi-synthetic inhibitors, sulbactam and tazobactam, are currently available semi-synthetic or natural product ⁇ -lactamase inhibitors.
  • Synthetic ⁇ -lactamase inhibitors have also been described. See, U.S. Patent Nos. 5,698,577; 5,510,343; 6,472,406; Hubhelen et al., J. Med. Chem.
  • U.S. Patent Application Publication No. US 2003/0199541 A1 discloses certain azabicyclic compounds including certain 7-oxo-6-diazabicyclic [3.2.1] octane-2-carboxamides and their use as anti-bacterial agents.
  • U.S. Patent Application Publication No. US 2004/0157826 A1 discloses heterobicyclic compounds including certain diazepine carboxamide and diazepine carboxylate derivatives and their use as anti-bacterials and ⁇ -lactamase inhibitors.
  • International Patent Application Publication No. WO 2008/039420 A2 discloses 7-oxo-2, 6-diazabicyclo [3.2.0] heptane-6-sulfooxy-2-carboxamides and their use as ⁇ -lactamase inhibitors.
  • PCT/US15/011735 discloses substituted 1H-and 2H-tetrazol-5-yl sulfonamide compounds as metallo ⁇ -lactamase inhibitors.
  • the present invention is directed to substituted 1H-and 2H-tetrazol-5-yl sulfonamidecompoundsand related compounds which are metallo- ⁇ -lactamase inhibitors.
  • the compounds, and their pharmaceutically acceptable salts are useful, for example, in combination with ⁇ -lactam antibiotics, and optionally serine ⁇ -lactamase inhibitors, for the treatment of bacterial infections, particularly antibiotic-resistant bacterial infections. More particularly, the present invention includes compounds of Formula I:
  • X 1 is N or CH
  • X 2 is N or CH
  • Z is tetrazolyl, wherein Z is linked to the six-membered ring through a carbon to carbon bond;
  • R A is — (CH 2 ) 0-1 -AryA1; – (CH 2 ) 0-1 -HetA1; – (CH 2 ) 0-1 -C 4-6 cycloalkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from –NH 2 , -OH, and -F; or – (CH 2 ) 0-1 -C 4-6 cycloalkenyl optionally substituted with –NH 2 ;
  • R B is –SR 1 , –SOR 2 or –SO 2 R 3 ;
  • R 1 is HetB1, AryB1, or –CH 3 ;
  • R 2 is HetB1 or –CH 3 ;
  • C 1-6 alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NR a R b , –N + R a R b CH 3 , –OH, and cyclopropyl;
  • —NR a -C 1-6 alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1, 2, or 3substituentsindependently selected from –CF 3 , –CH (NH 2 ) C (O) NH 2 ;–C (O) NR a R b ; –C (O) OH; –NR a R b , –N + R a R b CH 3 ,–NHCH 2 CH 2 OCH 3 , –OR a , and –O (CH 2 ) 2-3 NH 2 ;
  • AryA1 is an aromatic ring system selected from:
  • HetA1 is dihydrothiopyranyl or tetrahydropyranyl
  • AryA2 is a 5-6-membered aromatic monocyclic ring with 1, 2 or 3 heteroatom ring atoms independently selected from N and S, or 4 N ring atoms, optionally substituted with – (CH 2 ) 0-1 NH 2 , –CH 2 OH, –COOH, or –CONH 2 ;
  • HetA2 is a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is optionally substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from C 1-6 alkyl, –CN, and oxo;
  • AryB1 is
  • R a and R b are independently H or C 1 -C 6 alkyl.
  • Compounds of Formula I inhibit metallo- ⁇ lactamases and can synergize the antibacterial effects of ⁇ lactam antibiotics (e.g., imipenem, ceftazidime, ceftolozane, and piperacillin) against microorganisms normally resistant to ⁇ lactam antibiotics as a result of the presence of the metallo- ⁇ lactamases.
  • ⁇ lactam antibiotics e.g., imipenem, ceftazidime, ceftolozane, and piperacillin
  • the compounds of the present invention are effective against metallo- ⁇ lactamases and their combination with a ⁇ -lactam antibiotic, such as imipenem, ceftazidime, ceftolozane, or piperacillin, can provide for effective treatment of bacterial infections caused by metallo- ⁇ lactamase producing microorganisms.
  • the present invention includes combinations of a compound of Formula I with a ⁇ -lactam antibiotic, and optionally a serine (Class A, C and D) ⁇ -lactamase inhibitor, suitable for use against metallo- ⁇ lactamase producing bacteria such as Pseudomonas spp. and Klebsiella spp.
  • the invention also includes compositions comprising a compound of Formula I or its pharmaceutically acceptable salt, and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the invention further includes methods for treating bacterial infections and inhibiting bacterial growth by use of a compound of Formula I or its salt or a combination or composition containing the compound or its salt.
  • the present invention includes compounds of Formula I, wherein the compounds are metallo- ⁇ -lactamase inhibitors suitable for use in combination with ⁇ -lactam antibiotics and class A, C, and D ⁇ -lactamase inhibitors for the treatment of bacterial infections.
  • the invention is based, in part, on the presence of a sulfur linker at the 6-position of the core ring.
  • a sulfur particularly as a sulfone or sulfonamide, at this position results in improved enzyme potency compared to when the linker is carbon and also provides improved activity on difficult to penetrate Pseudomonas bacterial strains.
  • the improved Pseudomonal activity is likely due to a decrease in efflux from the cells as a result of the sulfone or sulfonamide linker.
  • each variable including those of Formulas (I) and (Ia) , and the various embodiments thereof, each variable is selected independently of the others unless otherwise indicated.
  • the compound is a compound of formula (Ia) , or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • R A is AryA1; HetA1; C 4-6 cycloalkyl optionally substituted with –NH 2 ; or C 4-6 cycloalkenyl optionally substituted with –NH 2 ;
  • AryA1 is an aromatic ring system selected from:
  • AryB1 is
  • R a and R b are independently H or C 1 -C 6 alkyl; and the other groups are as provided in the general formula I above.
  • the compound is a compound of formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R A is AryA1, and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in the first embodiment.
  • the compound is a compound of Formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R B is –SO 2 R 3 , and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in the first or second embodiment.
  • the compound is a compound of Formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R a and R b are independently H or –CH 3 , and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through third embodiments.
  • the compound is a compound of formula below, or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • AryA1 is an aromatic ring system selected from:
  • C 1-6 alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NR a R b , –N + R a R b CH 3 , –OH, and cyclopropyl;
  • —NR a -C 1-6 alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1 or 2 substituentsindependently selected from –CF 3 , –CH (NH 2 ) C (O) NH 2 ; –C (O) NR a R b ; –C (O) OH;–NR a R b , –N + R a R b CH 3 , –OR a , and –O (CH 2 ) 1-2 NH 2 ;
  • R a and R b are H or –CH 3 , and the other groups are as provided in the general formula I or Ia above, or as in any of the first through fourth embodiments.
  • the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein AryA is 1) phenyl substituted with –NH 2 and –C (O) NHCH 2 CH 2 NH 2 ; 2) phenyl substituted with–C (O) NHCH 2 CH 2 NH 2 ; or 3) pyridinyl substituted with –NH 2 ; and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through fifth embodiments.
  • AryA is 1) phenyl substituted with –NH 2 and –C (O) NHCH 2 CH 2 NH 2 ; 2) phenyl substituted with–C (O) NHCH 2 CH 2 NH 2 ; or 3) pyridinyl substituted with –NH 2 ; and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through fifth embodiments.
  • the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, whereinAryA is 1) benzimidazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –CH 3 and – (CH 2 ) 0-1 NH 2 ; or 2) benzothiazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –CH 3 and – (CH 2 ) 0-1 NH 2 ; and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through sixth embodiments.
  • AryA is 1) benzimidazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –CH 3 and – (CH 2 ) 0-1 NH 2 ; or 2) benzothiazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –CH 3 and – (CH 2 ) 0-1 NH 2 ; and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through sixth embodiments.
  • the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R 3 is 1) –NH 2 , 2) C 1-3 aminoalkyl optionally substituted with –OH, 3) azetidinyl, 4) pyrrolidinyl optionally substituted with –CH 2 NH 2 , 5) –NH-C 2-3 aminoalkyl optionally substituted with –OH, or 6) —NH-pyrrolidinyl optionally substituted with 1 – (CH 2 ) 0-1 OH or 2 –CH 3 ; and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through seventh embodiments.
  • the compound of the invention is selected from the exemplary species depicted in Examples 1-530 shown below, and pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • the compound of the invention is selected from the exemplary species depicted in Examples 43, 70, 80, 92, 98, 107, 109, 160, 171, 187, 340, 353, 363, 364, 366, 425, 429, 434, 438, 446, 447, 453, 461, 472, 473, 482, 485, 486, 487, 489, 490, 491, 493, 512, 515 and 516 shown below, and pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • composition comprising an effective amount of a compound of Formula I as defined above, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • composition of (a) further comprising an effective amount of a ⁇ -lactam antibiotic and optionally further comprising an effective amount of a class A, class A and C, or class A, C, and D ⁇ -lactamase inhibitor.
  • composition of (b) wherein the ⁇ -lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, ceftolozane, and ceftazidime, and the class A, C and D ⁇ -lactamase inhibitor is selected from the group consisting of relebactam, avibactam, tazobactam, or CB-618.
  • the ⁇ -lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, az
  • composition of (a) further comprising effective amounts of a ⁇ -lactam antibiotic, a renal dehydropeptidase (DHP) inhibitor, and optionally, a class A, C and D ⁇ -lactamase inhibitor.
  • DHP renal dehydropeptidase
  • (k) The combination of (j) , wherein the ⁇ -lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, and ceftazidime.
  • the ⁇ -lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, and ceftazidime.
  • a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, optionally in combination with an effective amount of a ⁇ -lactam antibiotic.
  • a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in combination with effective amounts of a ⁇ -lactam antibiotic and a DHP inhibitor.
  • a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of the composition of (a) , (b) , (c) , (d) , (e) , (f) , (g) , (h) or (i) .
  • a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of the combination of (j) , (k) , (l) , (m) , (n) , (o) , (p) , or (q) .
  • the present invention also includes a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, (i) for use in, (ii) for use as a medicament for, or (iii) for use in the preparation (or manufacture) of a medicament for, inhibiting beta-lactamase activity or treating bacterial infection.
  • the compounds of the present invention can optionally be employed in combination with one or more ⁇ -lactam antibiotics, a class A, C, D serine ⁇ -lactamase inhibitor and/or one or more DHP inhibitors.
  • Additional embodiments of the invention include the pharmaceutical compositions, combinations and methods set forth in (a) - (v) above and the uses set forth in the preceding paragraph, wherein the compound of the present invention employed therein is a compound of one of the embodiments, sub-embodiments, classes or sub-classes described above.
  • the compound may optionally be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt in these embodiments.
  • the compound may optionally be used in the form of a prodrug that releases the active parent compound after dosing by intravenous or oral administration.
  • each embodiment may be combined with one or more other embodiments, to the extent that such a combination provides a stable compound or salt and is consistent with the description of the embodiments. It is further to be understood that the embodiments of compositions and methods provided as (a) through (v) above are understood to include all embodiments of the compounds and/or salts, including such embodiments as result from combinations of embodiments.
  • Additional embodiments of the present invention include each of the pharmaceutical compositions, combinations, methods and uses set forth in the preceding paragraphs, wherein the compound of the present invention or its salt employed therein is substantially pure.
  • metalo- ⁇ -lactamase inhibitor refers to a compound which is capable of inhibiting metallo- ⁇ -lactamase activity.
  • inhibiting metallo- ⁇ -lactamase activity means inhibiting the activity of a class Bmetallo- ⁇ -lactamase.
  • inhibition at a 50%inhibitory concentration is preferably achieved at or below about100 ⁇ g/mL, or at or below about 50 ⁇ g/mL, or at or below about 25 ⁇ g/mL.
  • class A” , "class B” , “class C” , and “class D” ⁇ -lactamases are understood by those skilled in the art and are described in S.G. Waley, ⁇ -lactamase: mechanisms of action, in The Chemistry of ⁇ -Lactams, M.I. Page, Ed.; Chapman and Hall, London, (1992) 198-228.
  • metallo- ⁇ -lactamase denotes a metalloprotein capable of inactivating a ⁇ -lactam antibiotic.
  • the ⁇ -lactamase can be an enzyme which catalyzes the hydrolysis of the ⁇ -lactam ring of a ⁇ -lactam antibiotic.
  • microbial metallo- ⁇ -lactamases can be, for example, a zinc metallo- ⁇ -lactamase.
  • ⁇ -Lactamases of interest include those disclosed in, e.g., S.G. Waley, ⁇ -lactamase: mechanisms of action, in The Chemistry of ⁇ -Lactams, M.I.
  • ⁇ -Lactamases of particular interest herein include a metallo- ⁇ -lactamases of Escherichia coli (such as New Delhi Metallo-b-lactamase, NDM) , Serratia marcescens (such as IMP) , Klebsiella spp. (such as Verona integron-encoded metallo- ⁇ -lactamase, VIM) ) and Pseudomonas spp (such asVerona integron-encoded metallo- ⁇ -lactamase, VIM) ) .
  • Additional metallo- ⁇ -lactamases of interest herein include SPM-, GIM-, SIM-, KHM-, AIM-, DIM-, SMB-, TMB-, and FIM-type enzymes.
  • antibiotic refers to a compound or composition which decreases the viability of a microorganism, or which inhibits the growth or proliferation of a microorganism.
  • the phrase "inhibits the growth or proliferation” means increasing the generation time (i.e., the time required for the bacterial cell to divide or for the population to double) by at least about 2-fold.
  • Preferred antibiotics are those which can increase the generation time by at least about 10-fold or more (e.g., at least about 100-fold or even indefinitely, as in total cell death) .
  • an antibiotic is further intended to include an antimicrobial, bacteriostatic, or bactericidal agent. Examples of antibiotics suitable for use with respect to the present invention include penicillins, cephalosporins and carbapenems.
  • ⁇ -lactam antibiotic refers to a compound with antibiotic properties that contains a ⁇ -lactam functionality.
  • Non-limiting examples of ⁇ -lactam antibiotics useful with respect to the invention include penicillins, cephalosporins, penems, carbapenems, and monobactams.
  • the term "about” when modifying the quantity (e.g., kg, L, or equivalents) of a substance or composition, or the value of a physical property, or the value of a parameter characterizing a process step (e.g., the temperature at which a process step is conducted) , or the like refers to variation in the numerical quantity that can occur, for example, through typical measuring, handling and sampling procedures involved in the preparation, characterization and/or use of the substance or composition; through inadvertent error in these procedures; through differences in the manufacture, source, or purity of the ingredients employed to make or use the compositions or carry out the procedures; and the like.
  • “about” can mean a variation of ⁇ 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, or 5.0 of the appropriate unit. In certain embodiments, “about” can mean a variation of ⁇ 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, or 20%.
  • Another embodiment of the present invention is a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as originally defined or as defined in any of the foregoing embodiments, sub-embodiments, aspects, classes or sub-classes, wherein the compound or its salt is in a substantially pure form.
  • substantially pure means suitably at least about 60 wt. %, typically at least about 70 wt. %, preferably at least about 80 wt. %, more preferably at least about 90 wt. % (e.g., from about 90 wt. %to about 99 wt. %) , even more preferably at least about 95 wt. % (e.g., from about 95 wt.
  • a product containing a compound of Formula I or its salt e.g., the product isolated from a reaction mixture affording the compound or salt
  • the level of purity of the compounds and salts can be determined using a standard method of analysis such as thin layer chromatography, gel electrophoresis, high performance liquid chromatography, and/or mass spectrometry. If more than one method of analysis is employed and the methods provide experimentally significant differences in the level of purity determined, then the method providing the highest level of purity governs.
  • a compound or salt of 100%purity is one which is free of detectable impurities as determined by a standard method of analysis.
  • Alkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof, unless the carbon chain is defined otherwise.
  • Other groups having the prefix “alk” such as alkoxy and alkanoyl, also may be linear or branched, or combinations thereof, unless the carbon chain is defined otherwise.
  • alkyl groups include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-and tert-butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl, nonyl, and the like.
  • Aminoalkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one amino group which may be terminal (-NH 2 ) or internal (-NH-) .
  • Hydroalkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one hydroxyl (-OH) group.
  • Diaminoalkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with two amino (-NH 2 ) groups.
  • Dihydroxyalkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with two hydroxyl (-OH) groups.
  • Hydroaminoalkyl means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one hydroxyl (-OH) group and one amino (-NH 2 ) group .
  • alkenyl means carbon chains which contain at least one carbon-carbon double bond, and which may be linear or branched, or combinations thereof, unless otherwise defined. Examples of alkenyl include vinyl, allyl, isopropenyl, pentenyl, hexenyl, heptenyl, 1-propenyl, 2-butenyl, 2-methyl-2-butenyl, and the like.
  • “Aromatic ring system” means monocyclic, bicyclic or tricyclic aromatic ring or ring system containing 5-14 ring atoms, wherein at least one of the rings is aromatic.
  • the term may be used to describe a carbocyclic ring fused to an aryl group.
  • a 5-7-membered cycloalkyl can be fused through two adjacent ring atoms to a 5-6-membered heteroaryl containing 1, 2, or 3 heteroatom ring atoms selected from N, O, and S.
  • a heteromonocyclic ring is fused through two ring atoms to a phenyl or 5-6-membered heteroaryl containing 1, 2, or 3 heteroatoms selected from N, O, and S.
  • the N can be in the form of quarternary amine.
  • a N ring atom can be in the form of an N-oxide.
  • Aryl means a monocyclic, bicyclic or tricyclic carbocyclic aromatic ring or ring system containing 5-14 carbon atoms, wherein at least one of the rings is aromatic.
  • aryl include phenyl and naphthyl. In one embodiment of the present invention, aryl is phenyl.
  • Cycloalkyl means a saturated monocyclic, bicyclic or bridged carbocyclic ring, having a specified number of carbon atoms.
  • Examples of cycloalkyl include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, indanyl, 1, 2, 3, 4-tetrahydronaphthyl and the like.
  • cycloalkyl is selected from: cyclopropane, cyclobutane, cyclopentane and cyclohexane.
  • Cycloalkenyl means a nonaromatic monocyclic or bicyclic carbocylic ring containing at least one double bond.
  • Examples of cycloalkenyl include cyclopropenyl, cyclobutenyl, cyclopentenyl, cyclohexenyl, cycloheptenyl, cyclooxtenyl and the like.
  • Cycloheteroalkyl or “heterocycloalkyl” means a saturated or partly unsaturated non-aromatic monocyclic, bicyclic or bridged carbocyclic ring or ring system containing at least one ring heteroatom selected from N, S (including SO and SO 2 ) and O.
  • the cycloheteroalkyl ring may be substituted on the ring carbons and/or the ring nitrogen (s) .
  • cycloheteroalkyl examples include tetrahydrofuran, piperazine, piperidine, morpholine, oxetane, tetrahydropyran, indolinyl, isoindolinyl, azabicyclooctane, hexahydrofuro [3, 2-b] furan, and 2, 3, 3a, 5, 6, 6a-hexahydrofuro [3, 2-b] furan.
  • the ring or ring system contains one or more N atoms, the N can be in the form of quarternary amine.
  • Heteroaryl means monocyclic, bicyclic or tricyclic ring or ring system containing 3-14 carbon atoms and containing at least one ring heteroatom selected from N, S (including SO and SO 2 ) and O, wherein at least one of the heteroatom containing rings is aromatic.
  • N can be in the form of quarternary amine.
  • heteroaryl examples include pyrrolyl, isoxazolyl, isothiazolyl, pyrazolyl, pyridyl, oxazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, thiazolyl, imidazolyl, triazolyl, tetrazolyl, furanyl, triazinyl, thienyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinyl, benzisoxazolyl, benzoxazolyl, benzothiazolyl, benzimidazolyl, benzopyrazolyl, benzofuranyl, benzothiophenyl (including S-oxide and dioxide) , benzotriazolyl, furo (2, 3-b) pyridyl, quinolyl, indolyl, isoquinolyl, quinazolinyl, dibenzofuranyl, and the like.
  • Halogen includes fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • the N atom may be optionally in the form of a quaternary amine having one or more appropriate additional substitutions.
  • any ring atom is specified as being optionally substituted with, or in a specified form, for example, S substituted with oxo groups, or N in the form of a N-oxide, this does not preclude the substitution of any ring atom with the other listed optional substituents when not substituted with oxo groups or in the form of a N-oxide.
  • any variable e.g., R 1 , R a , etc.
  • its definition on each occurrence is independent of its definition at every other occurrence.
  • combinations of substituents and/or variables are permissible only if such combinations result in stable compounds.
  • a squiggly line across a bond in a substituent variable represents the point of attachment.
  • substituted shall be deemed to include multiple degrees of substitution by a named substitutent. Where multiple substituent moieties are disclosed or claimed, the substituted compound can be independently substituted by one or more of the disclosed or claimed substituent moieties, singly or plurally. By independently substituted, it is meant that the (two or more) substituents can be the same or different.
  • the atoms may exhibit their natural isotopic abundances, or one or more of the atoms may be artificially enriched in a particular isotope having the same atomic number, but an atomic mass or mass number different from the atomic mass or mass number predominantly found in nature.
  • the present invention is meant to include all suitable isotopic variations of the compounds of formula I.
  • different isotopic forms of hydrogen (H) include protium ( 1 H) and deuterium ( 2 H or D) .
  • Protium is the predominant hydrogen isotope found in nature. Enriching for deuterium may afford certain therapeutic advantages, such as increasing in vivo half-life or reducing dosage requirements, or may provide a compound useful as a standard for characterization of biological samples.
  • Isotopically-enriched compounds within formula I can be prepared without undue experimentation by conventional techniques well known to those skilled in the art or by processes analogous to those described in the Schemes and Examples herein using appropriate isotopically-enriched reagents and/or intermediates.
  • any of the various cyclic rings and ring systems described herein may be attached to the rest of the compound at any ring atom (i.e., any carbon atom or any heteroatom) provided that a stable compound results.
  • a heteroaromatic ring described as containing from “1 to 4 heteroatoms” means the ring can contain 1, 2, 3 or 4 heteroatoms. It is also to be understood that any range cited herein includes within its scope all of the sub-ranges within that range.
  • a heterocyclic ring described as containing from “1 to 4 heteroatoms” is intended to include as aspects thereof, heterocyclic rings containing 2 to 4 heteroatoms, 3 or 4 heteroatoms, 1 to 3 heteroatoms, 2 or 3 heteroatoms, 1 or 2 heteroatoms, 1 heteroatom, 2 heteroatoms, 3 heteroatoms, and 4 heteroatoms.
  • C 1 -C 6 when used with a chain means that the chain can contain 1, 2, 3, 4, 5 or 6 carbon atoms. It also includes all ranges contained therein including C 1 -C 5 , C 1 -C 4 , C 1 -C 3 , C 1 -C 2 , C 2 -C 6 , C 3 -C 6 , C 4 -C 6 , C 5 -C 6 , and all other possible combinations.
  • a “stable” compound is a compound which can be prepared and isolated and whose structure and properties remain or can be caused to remain essentially unchanged for a period of time sufficient to allow use of the compound for the purposes described herein (e.g., therapeutic administration to a subject) .
  • the compounds of the present invention are limited to stable compounds embraced by Formula I.
  • the compounds of the present invention may have one or moreasymmetric centers. Accordingly, compounds of the invention can occur as mixtures of stereoisomers, or as individual diastereomers, or enantiomers. All isomeric forms of these compounds, whether individually or in mixtures, are within the scope of the present invention.
  • compound refers to the compound and, in certain embodiments, to the extent they are stable, any hydrate or solvate thereof.
  • a hydrate is the compound complexed with water
  • a solvate is the compound complexed with an organic solvent.
  • the compounds of the present invention can be employed in the form of pharmaceutically acceptable salts.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to a salt which possesses the effectiveness of the parent compound and which is not biologically or otherwise undesirable (e.g., is neither toxic nor otherwise deleterious to the recipient thereof) .
  • the present invention includes pharmaceutical compositions comprising a compound of Formula I of the present invention, optionally one or more other active components (e.g., a ⁇ -lactam antibiotic) , and a pharmaceutically acceptable carrier.
  • a pharmaceutically acceptable carrier will depend on the route of administration.
  • pharmaceutically acceptable is meant that the ingredients of the pharmaceutical composition must be compatible with each other, do not interfere with the effectiveness of the active ingredient (s) , and are not deleterious (e.g., toxic) to the recipient thereof.
  • compositions according to the invention may, in addition to the inhibitor, contain diluents, fillers, salts, buffers, stabilizers, solubilizers, and other materials well known in the art.
  • the present invention includes a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, optionally in combination with a ⁇ -lactam antibiotic and/or a DHP inhibitor.
  • subject or, alternatively, “patient”
  • patient refers to an animal, preferably a mammal, most preferably a human, who has been the object of treatment, observation or experiment.
  • administration and variants thereof (e.g., "administering" a compound) in reference to a compound of Formula I mean providing the compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, to the individual in need of treatment.
  • a compound or a salt thereof is provided in combination with one or more other active agents (e.g., a carbapenem antibiotic or a DHP inhibitor or both)
  • active agents e.g., a carbapenem antibiotic or a DHP inhibitor or both
  • “administration” and its variants are each understood to include provision of the compound or its salt and the other agents at the same time or at different times.
  • the agents of a combination are administered at the same time, they can be administered together in a single composition or they can be administered separately.
  • a "combination" of active agents can be a single composition containing all of the active agents or multiple compositions each containing one or more of the active agents.
  • a combination can be either a single composition comprising both agents or two separate compositions each comprising one of the agents; in the case of three active agents a combination can be either a single composition comprising all three agents, three separate compositions each comprising one of the agents, or two compositions one of which comprises two of the agents and the other comprises the third agent; and so forth.
  • compositions and combinations of the present invention are suitably administered in effective amounts.
  • effective amount means the amount of active compound sufficient to inhibit ⁇ -lactamase and thereby elicit the response being sought (i.e., an "inhibition effective amount” ) in a cell, tissue, system, animal or human.
  • the effective amount is a "therapeutically effective amount” for the alleviation of the symptoms of the disease or condition being treated (e.g., the healing of conditions associated with bacterial infection, and/or bacterial drug resistance) .
  • the effective amount is a "prophylactically effective amount” for prophylaxis of the symptoms of the disease or condition being prevented.
  • compositions of the present invention are suitably parenteral, oral, sublingual, transdermal, topical, intranasal, intratracheal, intraocular, or intrarectal, wherein the composition is suitably formulated for administration by the selected route using formulation methods well known in the art, including, for example, the methods for preparing and administering formulations described in chapters 39, 41, 42, 44 and 45 in Remington –The Science and Practice of Pharmacy, 21 st edition, 2006.
  • compounds of the invention are administered intravenously in a hospital setting.
  • administration is oral in the form of a tablet or capsule or the like.
  • a therapeutic composition When administered systemically, a therapeutic composition is for example, suitably administered at a sufficient dosage to attain a blood level of inhibitor of at least about 1 ⁇ g/mL, and in additional embodiment at least about 10 ⁇ g/mL, and at least about 25 ⁇ g/mL.
  • a blood level of inhibitor of at least about 1 ⁇ g/mL, and in additional embodiment at least about 10 ⁇ g/mL, and at least about 25 ⁇ g/mL.
  • concentrations for localized administration, much lower concentrations than this may be effective, and much higher concentrations may be tolerated.
  • Intravenous administration of a compound of the invention can be conducted by reconstituting a powdered form of the compound with an acceptable solvent.
  • suitable solvents include, for example, saline solutions (e.g., 0.9%Sodium Chloride Injection) and sterile water (e.g., Sterile Water for Injection, Bacteriostatic Water for Injection with methylparaben and propylparaben, or Bacteriostatic Water for Injection with 0.9%benzyl alcohol) .
  • the powdered form of the compound can be obtained by gamma-irradiation of the compound or by lyophilization of a solution of the compound, after which the powder can be stored (e.g., in a sealed vial) at or below room temperature until it is reconstituted.
  • the concentration of the compound in the reconstituted IV solution can be, for example, in a range of from about 0.1 mg/mL to about 20 mg/mL.
  • the present invention also includes a method for inhibiting bacterial growth which comprises administering to a bacterial cell culture, or to a bacterially infected cell culture, tissue, or organism, an inhibition effective amount of a compound of Formula I.
  • Additional embodiments of the invention include the bacterial growth inhibiting method just described, wherein the compound of the present invention employed therein is a compound of one of the embodiments, sub-embodiments or classes described above.
  • the compound may optionally be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt in these embodiments.
  • the method can involve administration of a compound of Formula I to an experimental cell culture in vitro to prevent the growth of ⁇ -lactam resistant bacteria.
  • the method can alternatively involve administration of a compound of Formula I to an animal, including a human, to prevent the growth of ⁇ -lactam resistant bacteria in vivo.
  • the compound of Formula I is typically co-administered with a ⁇ -lactam antibiotic.
  • Compounds of the invention can be employed for the treatment, prophylaxis or inhibition of bacterial growth or infections due to bacteria that are resistant to ⁇ -lactam antibiotics. More particularly, the bacteria can be metallo- ⁇ -lactamase positive strains that are highly resistant to ⁇ -lactam antibiotics.
  • the terms "slightly resistant” and “highly resistant” are well-understood by those of ordinary skill in the art (see, e.g., Payne et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38: 767-772 (1994) ; Hanaki et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 30: 11.20-11.26 (1995) ) .
  • bacterial strains which are highly resistant to imipenem are those against whichthe MIC of imipenem is >16 ⁇ g/mL, and bacterial strains which are slightly resistant to imipenemare those against which the MIC of imipenem is >4 ⁇ g/mL.
  • Compounds of the invention can be used in combination with antibiotic agents for the treatment of infections caused by Class B- ⁇ -lactamase producing strains, in addition to those infections which are subsumed within the antibacterial spectrum of the antibiotic agent.
  • class B-metallo- ⁇ -lactamase producing bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Citrobacter freundii, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Providencia rettgeri, and Acinetobacter baumannii.
  • a compound of Formula I in admixture or conjunction with a carbapenem, penicillin, cephalosporin, or other ⁇ -lactam antibiotic, or a prodrug thereof. It is advantageous to use a compound of Formula I in combination with one or more ⁇ -lactam antibiotics because of the class B ⁇ -lactamase inhibitory properties of the compounds. It is also advantageous to use a compound of Formula I in combination with one or more Class A, C, and D ⁇ -lactamase inhibitors to further limit ⁇ -lactam susceptability. As already noted, the compound of Formula I and the ⁇ -lactam antibiotic can be administered separately (at the same time or as different times) or in the form of a single composition containing both active ingredients.
  • Carbapenems, penicillins, cephalosporins and other ⁇ -lactam antibiotics suitable for use in the present invention include both those known to show instability to or to be otherwise susceptible to class B- ⁇ -lactamases.
  • a dehydropeptidase (DHP) inhibitor can also be combined.
  • DHP dehydropeptidase
  • Many carbapenems are susceptible to attack by a renal enzyme known as DHP. This attack or degradation may reduce the efficacy of the carbapenem antibacterial agent.
  • Inhibitors of DHP and their use with carbapenems are disclosed in, e.g., U.S. Patent Nos. 4,539,208; 4,616,038; 4,880,793; and 5,071,843.
  • a preferred DHP inhibitor is 7- (L-2-amino-2-carboxyethylthio) -2- (2, 2-dimethylcyclopropanecarboxamide) -2-heptenoic acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • Carbapenems suitable for co-administration with compounds of the present invention include imipenem, ertapenem, meropenem, biapenem, (4R, 5S, 6S) -3- [3S, 5S) -5- (3-carboxyphenyl-carbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid, (1S, 5R, 6S) -2- (4- (2- ( ( (carbamoylmethyl) -1, 4-diazoniabicyclo [2.2.2] oct-1-yl) -ethyl (1, 8-naphthosultam) methyl) -6- [1 (R) -hydroxyethyl] -1-methylcarbapen-2-em-3-carboxylate chloride, BMS181139 (
  • Penicillins suitable for co-administration with compounds of the present invention include benzylpenicillin, phenoxymethylpenicillin, carbenicillin, azidocillin, propicillin, ampicillin, amoxicillin, epicillin, ticarcillin, cyclacillin, pirbenicillin, azlocillin, mezlocillin, sulbenicillin, piperacillin, and other known penicillins.
  • the penicillins may be used in the form of pro-drugs thereof; for example as in vivo hydrolysable esters, for example the acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, ⁇ -ethoxycarbonyloxy-ethyl and phthalidyl esters of ampicillin, benzylpenicillin and amoxicillin; as aldehyde or ketone adducts of penicillins containing a 6- ⁇ -aminoacetamido side chain (for example hetacillin, metampicillin and analogous derivatives of amoxicillin) ; and as esters of carbenicillin and ticarcillin, for example the phenyl and indanyl ⁇ -esters.
  • esters for example the phenyl and indanyl ⁇ -esters.
  • Cephalosporins suitable for co-administration with compound of the present invention include cefatrizine, cephaloridine, cephalothin, cefazolin, cephalexin, cephacetrile, cephapirin, cephamandole nafate, cephradine, 4-hydroxycephalexin, cephaloglycin, cefoperazone, cefsulodin, ceftazidime, cefuroxime, cefmetazole, cefotaxime, ceftriaxone, and other known cephalosporins, all of which may be used in the form of pro-drugs thereof.
  • ⁇ -Lactam antibiotics other than penicillins and cephalosporins that may be co-administered with compounds of the present invention include aztreonam, latamoxef (MOXALACTAM) , and other known ⁇ -lactam antibiotics such as carbapenems like imipenem, ertapenem, meropenem or (4R, 5S, 6S) -3- [ (3S, 5S) -5- (3-carboxyphenylcarbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid, all of which may be used in the form of pro-drugs thereof.
  • aztreonam latamoxef
  • MOXALACTAM latamoxef
  • other known ⁇ -lactam antibiotics such as carba
  • the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem and (4R, 5S, 6S) -3- [ (3S, 5S) -5- (3-carboxyphenylcarbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid.
  • the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group of penicillins consisting of ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, and ticarcillin.
  • penicillins can optionally be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, for example their sodium salts.
  • Ampicillin or amoxicillin can alternatively be employed in the form of fine particles of the zwitterionic form (generally as ampicillin trihydrate or amoxicillin trihydrate) for use in an injectable or infusable suspension.
  • the penicillin co-administered with a compound of the present invention is amoxicillin, optionally in the form of its sodium salt or the trihydrate.
  • the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group of cephalosporins consisting of cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime, which are optionally used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, for example their sodium salts.
  • the compounds of the invention in combination with serine ⁇ -lactamase inhibitors (which can inhibit class A, C, D beta lactamases) in addition to ⁇ -lactam antiobiotics.
  • Serine ⁇ -lactamase inhibitors include but are not limited to avibactam, relebactam, tazobactam, and clavulanic acid.
  • the combination of the compound of the invention and the antibiotic can provide a synergistic effect.
  • the terms "synergistic effect” and “synergy” indicate that the effect produced when two or more drugs are co-administered is greater than would be predicted based on the effect produced when the compounds are administered individually. While not wishing to be bound by theory, it is believed that the compounds of the present invention are ⁇ -lactamase inhibitors that act to prevent degradation of ⁇ -lactam antibiotics, thereby enhancing their efficacy and producing a synergistic effect.
  • ether petroleum ether
  • Ph phenyl
  • PMB p-Methoxybenzyl
  • PPh 3 precatalyst generation 2 Chloro (triphenylphosphine) [2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) ;
  • RBF round bottom flask;
  • tBuXPhos precatalyst generation 3 [ (2-Di-tert-butylphosphino-2′, 4′, 6′-triisopropyl-1, 1′-biphenyl) -2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) methanesulfonate;
  • TEA triethylamine;
  • TFA trifluoroacetic acid;
  • THF tetrahydrofuran;
  • TLC thin layer chromatography;
  • TMS trimethylsilane;
  • TMSN 3 azidotrimethylsilane;
  • XPhos-Pd-2G or XPHOS Pd G2 precatalyst or Xphos precatalyst generation 2 Chloro (2-dicyclohexylphosphino-2
  • the compounds of the present invention can be readily prepared according to the following reaction schemes and examples, or modifications thereof, using readily available starting materials, reagents and conventional synthesis procedures. In these reactions, it is also possible to make use of variants which are themselves known to those of ordinary skill in this art, but are not mentioned in greater detail. Furthermore, other methods for preparing compounds of the invention will be readily apparent to the person of ordinary skill in the art in light of the following reaction schemes and examples. Unless otherwise indicated, all variables are as defined above.
  • Metal mediated coupling for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents affords intermediates 5a and 5b.
  • Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFAin the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IB.
  • a carbocation scavenger such as anisole or triethylsilane
  • intermediates 2a and 2b may be subjected to metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents to give intermediates 4a and 4b.
  • Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IA.
  • a carbocation scavenger such as anisole or triethylsilane
  • the organoboronate, organotin, organozinc, or organocopper reagent contains an acid labile protecting group (like tert-butoxycarbonyl) concurrent removal of this protecting group occurs in the final acidic removal of the PMB groups.
  • This can be done in one step, or in stepwise fashion by treatment with TFA at room temperature to remove a group such as tert-butoxycarbonyl, then heating with TFA and anisole or thioanisole to remove the PMB group.
  • sulfides 4a and 4b may be treated with 1 equivalent of an oxidizing agent such as meta-chloroperoxybenzoic acid to give sulfoxides 6a and 6b.
  • an oxidizing agent such as meta-chloroperoxybenzoic acid
  • final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IC.
  • the PMB protected tetrazole positional isomers1a and 1b may be separated by chromatography and each individual isomer may be used in place of the isomer mixture with similar results.
  • the sulfides may be oxidized, for example by using meta-chloroperoxybenzoic acid, to give sulfones 5a and 5b.
  • sulfides 4a and 4b may be carried on to make compounds IA and IC, and sulfones 5a and 5b may be progressed to compounds IB.
  • analogs IB may also be prepared from boronic acid or boronic ester precursors.
  • Intermediates 3a and 3b may be converted to the corresponding boronic acids and boronic esters in a number of ways, for example, by coupling with 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) or other similar reagents using palladium catalysis.This affords the boronic esters 8a and 8b or their corresponding boronic acids (not shown) .
  • the boronic esters or boronic acids may be coupled with halide or triflate reagents to provide intermediates 5a and 5b, which can be deprotected as previously described in Scheme I to afford analogs IB.
  • Sulfonamide compounds of the current invention, ID may be prepared according to general Scheme IV.
  • bromide intermediates 1a and 1b may be selectively reacted at the bromo position with 2 (trimethylsilyl) enthanethiol in the presence of a base (such as cesium carbonate) to afford sulfides 9a and 9b.
  • Oxidation, for example by using meta-chloroperoxybenzoic acid gives sulfones 10a and 10b.
  • Treatment with tetrabutylammonium fluoride (TBAF) gives the coreesponding sulfinic acids 11a and 11b.
  • TBAF tetrabutylammonium fluoride
  • the sulfinic acids may be converted to the corresponding sulfonyl chlorides in a variety of ways, for example by treatment with N-chlorosuccinimide.
  • Treatment of the resulting sulfonyl chlorides 12a and 12b with an amine in the presence of a base such as triethyl amine affords the sulfonamides 13a and 13b.
  • sulfinic acids 11a and 11b may be directly converted in one pot to the sulfonamides 13a and 13b by reaction with N-chlorosuccinimide in the presence of the amine reactant.
  • sulfonamide compounds ID may be prepared according to Scheme V.
  • iodo intermediates 10a and 10b are subjected to metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents to give intermediates 15a and 15b.
  • R’ contains active NH groups, these may be protected as tert-butoxycarbamates using Boc anhydride and a base such as 4-dimethylaminopyridine, affording 16a and 16b.
  • Conversion of the trimethylsilylethane sulfones to the corresponding sulfonyl chlorides can be accomplished in two steps (as described in Scheme IV) to give 18a and 18b. Coupling of the sulfonyl chlorides with amines can then be accomplished in the presence of a base (such as trimethylamine) , giving 19a and 19b.
  • Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds ID.
  • intermediates 19a and 19b contain an acid labile protecting group (like tert-butoxycarbonyl)
  • an acid labile protecting group like tert-butoxycarbonyl
  • concurrent removal of this protecting group occurs in the final acidic removal of the PMB groups. This can be done in one step, or in stepwise fashion by treatment with TFA at room temperature to remove a group such as tert-butoxycarbonyl, then heating with TFA and anisole or thioanisole to remove the PMB group.
  • Intermediates 1a and 1b can be prepared according to Scheme VI.
  • commercially available aryl fluoride 20 can be converted to the carboxylic acid 21 by treatment with LDA, followed by dry ice.
  • the carboxylic acid functionality can be transformed to the corresponding nitrile 22 in numerous ways known in the art.
  • One approach involves conversion to the acid chloride, for example using oxalyl chloride, followed by treatment with ammonium hydroxide to afford the carboxamide, and finally, dehydration, for example using trichloro-1, 3, 5-triazine, to give the nitrile 22.
  • Nucleophilic aromatic substitution of the fluoride using benzyl mercaptan and a base such as sodium hydride provides the sulfide 23.
  • the nitrile present in 23 can be converted to the tetrazole 24 using one of several methods, for example by treatment with trimethylsilyl azide and dibutyltin oxide. Conversion of the benzyl sulfide to the sulfonyl chloride can be accomplished in several ways, for example, by treatment with NCS in acetic acid. Treatment with ammonium hydroxide then affords the sulfonamide 25.
  • Concommittant protection of the tetrazole and sulfonamide to afford positional isomer mixture 1a and 1b can be achieved by treatment with excess of para-methoxybenzyl chloride in the presence of a base, such as potassium carbonate, and NaI and tetrabutyl ammonium chloride as catalysts.
  • a base such as potassium carbonate, and NaI and tetrabutyl ammonium chloride as catalysts.
  • 1a and 1b are used as a mixture of regioisomers, but the isomers can optionally be separated and used individually in the same way.
  • the mixture of regioisomers or the individual regioisomers may be used interchangeably (occasionally only one isomer is shown for the sake of simplicity) .
  • 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • the resulting solution was stirred for 90 min at -78°C.
  • the reaction mixture was then poured into 1.5 L of dry ice.
  • the resulting mixture was concentrated under vacuum.
  • the residue was diluted with 2000 mL of aq. sodium hydroxide (4M) , then washed with 2x800 mL of ether.
  • the aq. solution was adjusted to pH 2 with HCl (2M) , then extracted with 3x800 mL of ethyl acetate.
  • the organic layers were combined, washed with 3x500 mL of water, dried and concentrated under vacuum to afford the title compound.
  • Step E 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
  • Step F 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
  • the aqueous layer was adjusted to pH 3 with HCl (2M) , then extracted with 2x1 L of ethyl acetate. The organic layers were combined, washed with 2x1 L of water, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to provide the title compound.
  • Step G 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole and 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazole
  • Step H 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
  • Step I 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • the pH value of the solution was adjusted to 2-3 with hydrogen chloride (1 mmol/L) .
  • the resulting solution was extracted with 4x 1000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum.
  • the crude product was purified by re-crystallization from Hexane.
  • Step E 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
  • Step F 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
  • Step G 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
  • Step H 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide
  • the resulting solution was stirred for 2 hr at 0-25°C in an ice/salt bath (slowly warming to RT) .
  • the reaction progress was monitored by LCMS.
  • the resulting mixture was concentrated under vacuum.
  • the resulting solution was diluted with 500 mL of ether. After stirring for 30 min, the solids were collected by filtration to afford the title compound.
  • Step I 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide
  • 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1- sulfonamide 105 g, 244.17 mmol, 1.00 equiv
  • chloroform 1050 mL
  • potassium carbonate 168.9 g, 1.22 mol, 5.00 equiv
  • water 525 mL
  • NaI 11 g, 0.30 equiv
  • tetrabutyl (chloro) amine (20.4 g, 73.40 mmol, 0.30 equiv)
  • 1- (chloromethyl) -4-methoxybenzene 230 g, 1.47 mol, 6.00 equiv) .
  • the resulting solution was stirred overnight at 50°C in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was extracted with 2x1000 mL of dichloromethane and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compounds.
  • REFERENCE EXAMPLE 2 can be used as the mixture of para-methoxylbenzyl tetrazole regioisomers.
  • the two regioisomers may be separated and each can be used as described below in the same fashion.
  • both regioisomers are explicitly used; however, in other cases, for the sake of simplicity, only one regioisomer is shown. It should be understood that in these cases the mixture of regioisomers was, in fact, typically used.
  • the title compound is commercially available (CAS No. 134464-79-2) from Synnovator, Inc. Alternatively, it may be prepared as follows:
  • the title compound is commercially available (CAS No. 941585-25-7) from, for example, Synnovator, Inc.. Alternatively, it may be prepared as follows:
  • Step A synthesis of tert-butyl 3- (acetylthio) azetidine-1-carboxylate
  • Step B synthesis of tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate
  • Step A tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) piperidine-1-carboxylate
  • Step B tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) piperidine-1-carboxylate
  • Step A tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate
  • Step B tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-y
  • the resulting mixture was concentrated under vacuum.
  • the resulting solution was diluted with 10000 mL of 4N sodium hydroxide.
  • the resulting solution was extracted with 3x3000 mL of ether and the aqueous layers combined.
  • the pH value of the solution was adjusted to 2-3 with hydrogen chloride (1 mol/L) .
  • the resulting solution was extracted with 5x3000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined.
  • the resulting mixture was washed with 2x3000 mL of Brine.
  • the mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum.
  • the crude product was re-crystallized from Hexane: EA in the ratio of 100: 1 to afford the title compound.
  • Step G 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
  • the resulting solution was stirred for 1 hr at 20°C in a water/ice bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 6000 mL of water/ice. The resulting solution was extracted with 5x1500 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 3x1000 mL of sodium bicarbonate aq and 3x1000 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified by re-crystallization from ether to afford the title compound.
  • Step H 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
  • Step I 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
  • the resulting mixture was concentrated under vacuum.
  • the resulting solution was diluted with 2000 mL of EA.
  • the resulting mixture was washed with 2x1000 mL of water and 2x1000 mL of Brine.
  • the mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compound.
  • Step J 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide
  • the resulting solution was diluted with 500 mL of H 2 O.
  • the resulting solution was extracted with 3x500 mL of ethyl acetate and the aqueous layers combined.
  • the pH value of the solution was adjusted to 1-2 with hydrogen chloride (6 mol/L) .
  • the solids were collected by filtration to give a part of product.
  • the filtrate was extracted with 2x500 mL of ethyl acetate and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to give the title compound.
  • Step K 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide
  • 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide 400 g, 930.19 mmol, 1.00 equiv
  • chloroform 4000 mL
  • water 2000 mL
  • potassium carbonate 643.3 g, 4.65 mol, 5.00 equiv
  • NaI 42 g, 0.30 equiv
  • tetrabutylazanium chloride 77.84 g, 280.08 mmol, 0.30 equiv
  • PMBCl 873.3 g, 6.00 equiv
  • the resulting solution was stirred overnight at 50°C in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was extracted with 1500 mL of dichloromethane and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 1) to afford the title compound.
  • Step L tert-butyl N- [2- [ (2- [bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] sulfamoyl] -4-iodo-3- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] phenyl) sulfanyl] ethyl] carbamate
  • the resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting solution was diluted with 3000 mL of ether. The resulting mixture was washed with 2 x1500 mL of brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compound.
  • Step M tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
  • the resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS.
  • the resulting solution was diluted with 5000 mL of ether.
  • the resulting mixture was washed with 2x2000 mL of 0.5N sodium hydroxide and 2x1500 mL of Brine.
  • the mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum.
  • the residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 2) to give the title compound.
  • the resulting solution was stirred overnight at 80°C in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was diluted with 50 mL of EA. The solids were filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compounds.
  • Step A Synthesis of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (2- (trimethylsilyl) ethylthio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide
  • Step B 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (2- (trimethylsilyl) ethylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
  • Step C 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid
  • Step D 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride
  • Step A 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide
  • Step B 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
  • Step C tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate
  • Step D 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid
  • Step E tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (chlorosulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate
  • tert-butyl (R) -3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate and tert-butyl (R) -3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate
  • the reaction was kept at 25°C for 30 min. The mixture was concentrated under vacuum. The residue was diluted with EA (3 x 20 mL) , and washed with brine (3 x 20 mL) , dried over and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum.
  • Step A tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -4-hydroxypiperidine-1-carboxylate
  • Step B 4- (4-bromophenyl) -1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine
  • Step C tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate
  • Step D tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate
  • Step E tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate
  • Step A 8-bromo-1H-benzo [d] [1, 3] oxazine-2, 4-dione
  • Step B 2-amino-8-bromoquinazolin-4 (3H) -one
  • Step C (2-amino-4-oxo-3, 4-dihydroquinazolin-8-yl) boronic acid
  • Step A N- ( (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) carbamothioyl) benzamide
  • Step B 1- (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) thiourea
  • N- ( (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) carbamothioyl) benzamide (5.0 g, 12.4 mmol) was added to 1 N aqueous sodium hydroxide (50 ml, 12.5 mmol) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80°C for 1hr. The reaction mixture was poured onto ice/hydrochloric acid (6M, 30 mL) and stirred for 10 mins. The pH was adjusted to 10 with conc. ammoniumhydroxide solution, then the resulting precipitate was filtered and washed with water (10 mL) and dried.
  • Step C 4-bromo-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-2-amine
  • Step D (2-amino-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
  • Step A N- (4-bromo-2-methylphenylcarbamothioyl) benzamide
  • Step B N- (7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-yl) benzamidene
  • Step C 7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-amine
  • Step D 2-amino-4-methylbenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid
  • Step A N- ( (2-bromo-5-methylphenyl) carbamothioyl) benzamide
  • Step B 1- (2-bromo-5-methylphenyl) thiourea
  • Step C 4-bromo-7-methylbenzo [d] thiazol-2-amine
  • Step D (2-amino-7-methylbenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
  • Step B 2-aminobenzo [d] oxazol-7-ylboronic acid
  • the reaction mixture was concentrated under reduced pressureand then the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C 18 , 19 x 150mm; mobile phase: water (0.05%TFA) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B%: 10%-20%) ; Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid.
  • Step A 4-bromobenzo [d] oxazol-2-amine
  • Step B 2-aminobenzo [d] oxazol-4-ylboronic acid
  • the reaction mixture was allowed to cool to 20°C, quenched with water (200 mL) and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EA in PE (50%) to afford the crude product.
  • Step B 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine
  • Step C 6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine
  • Step A N- (6-aminopyridin-2-yl) acetamide
  • acetic anhydride (2.1 ml, 27.5 mmol) in 20 mL THF was added dropwise to a stirred mixture of pyridine-2, 6-diamine (3.00 g, 27.5 mmol) and triethylamine (2.78 g, 27.5 mmol) in THF (40 ml) at 0°C. After the reaction mixture was stirred at room temperature overnight, it was diluted with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 10mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered.
  • Step B N- (6- ( ( (2, 2-dimethyl-4, 6-dioxo-1, 3-dioxan-5-ylidene) methyl) amino) pyridin-2-yl) acetamide
  • Step C N- (5-hydroxy-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide
  • N- (6- ( ( (2, 2-dimethyl-4, 6-dioxo-1, 3-dioxan-5-ylidene) methyl) amino) pyridin-2-yl) acetamide (6.00 g, 19.65 mmol) was added slowly to a bottle of oxydibenzene (60 ml, 19.65 mmol) at 250°C. The reaction mixture was stirred at 250°C for 15 min. After the resulting mixture was cooled to room temperature, ethoxyethane (100 mL) was added and some solid precipitated out. The solids were collected to give the title compound as a solid.
  • Step D N- (5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide
  • Step F 7-amino-1, 8-naphthyridin-4-ylboronic acid
  • potassium acetate 26.30 mg, 0.268 mmol
  • dichlorobis tricyclohexylphosphine
  • 5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-amine 30.0 mg, 0.134 mmol
  • 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (0.10 g, 0.402 mmol) in dioxane (2 mL) at room temperature.
  • the reaction mixture was stirred at 80°C for 2 hr under nitrogen.
  • the solid was filtered out.
  • the filtrate was concentratedand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18, 19 x 150mm; mobile phase: water (0.05%TFA) and acetonitrile (hold 34%acetonitrile for 8 min, hold 100%for 2 min, down to 34%in 2 min) ; Detector, UV 220 and 254 nm.
  • the collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid.
  • Step B N- (2-bromobenzyl) -2, 2-diethoxyacetimidamide
  • Step D 8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) isoquinolin-3-amine
  • Step C 3-Fluoro-6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine and (2, 3-diamino-4-fluorophenyl) boronic acid
  • Step B N- ( (3-bromophenyl) carbamothioyl) benzamide
  • Step C 1- (3-bromophenyl) thiourea
  • N- ( (3-bromophenyl) carbamothioyl) benzamide 10 g, 29.8 mmol
  • the pH was adjusted to 10 with conc. ammonia solution with the resulting precipitate filtered and washed with water (10 mL) and dried.
  • Step D 7-bromobenzo [d] thiazol-2-amine
  • Step E (2-aminobenzo [d] thiazol-7-yl) boronic acid
  • REFERENCE EXAMPLES 29-32 in the Table immediately below were prepared in an analagous fashion as described for 2-aminobenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid (REFERENCE EXAMPLE 28, Method B) starting from the aryl bromides starting materials (SM) indicated.
  • Step B synthesis of (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid
  • Potassium acetate (83 g, 849 mmol) was added to a stirred mixture of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (128 g, 566 mmol) , 7-bromo-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (60 g, 283 mmol) and chloro (triphenylphospine) [2- (2'-amino-1, 1'-biphenyl) ] palladium (II) (16.20 g, 28.3 mmol) in dioxane (1500 ml) at room temperature under Ar condition.
  • Step A Synthesis of tert-butyl 3- (4-bromophenyl) azetidine-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of tert-butyl 3- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) azetidine-1-carboxylate
  • Step C Synthesis of tert-butyl 3- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-4-yl) azetidine-1-carboxylate
  • tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate and tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate
  • Step A (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
  • Step B 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
  • Step B tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
  • the BrettPhos precatalyst generation 3 (49 mg, 0.054 mmol) was added and the nitrogen continued for another 5 min. The tube was sealed and heated at 85°C overnight. After cooling, the reaction mixture was filtered through a pad of celite and the solid was thoroughly washed with ethyl acetate. The filtrate was washed with 1N aq. HCl, and brine, then dried (MgSO 4 ) and the volatiles was removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0 to 100%EtOAc/hexanes as eluent to give the title product. LC/MS [M+1] + : 1033.34.
  • 6-Bromopyridin-2-amine (274 mg, 1.584 mmol) and 2-chloroacetaldehyde (178 mg, 2.268 mmol) were dissolved in EtOH (2 mL) .
  • the mixture was heated at 60°C for 12 hr.
  • LC-MS showed the formation of the desired product, but there was still starting material remaining.
  • Additional 170 mg of the 2-chloroacetaldehyde was added and the reaction was heated at 60°C for 12 hr.
  • LC-MS showed the reaction was completed. After cooling to room temperature, the reaction was concentrated. To the resulting residue was added ether, and the solids that precipitated out was collected to give 5-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine.
  • LC/MS [M+H] + 197.1, 199.1.
  • the intermediate was dissolved in 50 mL of anhydrous ethanol, followed by addition of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (7.86 g, 34.8 mmol) , potassium acetate (3.41 g, 34.8 mmol) , PCy3 Pd G2 (2.054 g, 3.48 mmol) and anhydrous ethanol (50 ml) .
  • This mixture was degassed for 20 min, and then was heated at 80°C for 18 hr.
  • Racemic tert-butyl 3-amino-3- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate was separated into individual enantiomers A and B via SFC (Column: AD-H 50x250 mm, UV detection: 210 nm, Solvent: 25%EtOH (with 0.2 %DIPA) in CO 2 , Flow 230 g CO 2 /min 120 bar) . Absolute stereochemistry was not confirmed for the two pure enantiomers. Both enantiomers were useful for preparing metallo- ⁇ -lactamase inhibitors.
  • Racemictert-butyl 6-amino-2-azabicyclo [2.2.1] heptane-2-carboxylate was separated into individual enantiomers A and B via SFC (Column: AD-H 50x250 mm, UV detection: 210 nm, Solvent: 15%EtOH (with 0.2 %DIPA) in CO 2 , Flow 230 g CO 2 /min 120 bar) . Absolute stereochemistry was not confirmed for the two pure enantiomers. Both enantiomers were useful for preparing metallo- ⁇ -lactamase inhibitors.
  • Step A tert-butyl 3- (methanesulfonyloxy) azetidine-1-carboxylate
  • Step B tert-butyl 3-cyanoazetidine-1-carboxylate
  • Step C tert-butyl 3- (5-bromopyridin-2-yl) -3-cyanoazetidine-1-carboxylate
  • Step D tert-butyl 3-cyano-3- [5- (tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-yl] azetidine-1-carboxylate
  • Step A 1- (5-bromo-2-fluorophenyl) -2, 2, 2-trifluoroethanone
  • Step B 5-bromo-3- (trifluoromethyl) -1H-indazole
  • Step C 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -3- (trifluoromethyl) -1H-indazole
  • Step A 4- (4-bromothiazol-2-yl) morpholine
  • Step B 4- [4- [trifluoro (potassio) - ⁇ [5] -boranyl] thiophen-2-yl] morpholine
  • Step A methyl 4- (3-bromophenyl) -4-oxobutanoate
  • Step B 5- (3-bromophenyl) pyrrolidin-2-one
  • Step C 5- (3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) pyrrolidin-2-one
  • Step A 4-bromo-2- (pyrrolidin-1-yl) -1, 3-thiazole
  • Step B 2- (pyrrolidin-1-yl) -4- (trifluoro- ⁇ [4] -boranyl) -1, 3-thiazole potassium
  • Step A 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step B tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) azetidine-1-carboxylate.
  • Step C 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
  • Step D 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
  • the product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 ⁇ M; Mobile Phase A: water/0.05%NH 4 HCO 3 , Mobile Phase B: ACN; Flow rate: 20 mL/min; Gradient: 35%B to 55%B in 8 min; 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid.
  • Step A 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzenamine
  • Step B 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine
  • Step C 2', 3'-diamino-4-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide.
  • Step D 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • the resulting mixture was stirred at 25°C for 16 hrunder a atmosphere of argon.
  • the reaction was quenched with aqueoussaturated sodium bicarbonate (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) .
  • the combined organic layers were washed with brine (2 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered.
  • the filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was recrystallized from DCM/EA/PE (10 mL/10 mL/50 mL) .
  • the solid was collected by filtration and dried in vacuum.
  • Step E tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) azetidine-1-carboxylate
  • Step F 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step G 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • the product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 ⁇ M;Mobile Phase A: water/0.05%NH 4 HCO 3 , Mobile Phase B: ACN; Flow rate: 20 mL/min; Gradient: 35%B to 55%B in 8 min; 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid.
  • Step A tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
  • Step B 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) benzenesulfonamide.
  • Step C 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step B 4- (Azetidin-3-ylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
  • Step B 4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
  • Examples 7-8 were prepared according to the general proceduresdescribed above for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -[1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE 4) and 4- (Azetidin-3-ylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE 5) , starting from REFERENCE EXAMPLE 45, tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl
  • Step B 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • the resulting mixture was degassed with nitrogen and stirred at 80°C for 16 hr under nitrogen. The reation was quenched with water (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organics were washed with brine (3 x200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum.
  • Step B tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
  • Step C tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfinyl) piperidine-1-carboxylate
  • Step D 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
  • Step B 3- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamo
  • Step B 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 3- ( (4- (6-aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (4- (6-aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (6-aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin
  • Step B 3- (6-Aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step B 3- (2-Amino-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-
  • the reaction mixture was heated at 80°C for 1 hr. After removing solvent, the rest of reagents were added, including tBuXPhos precatalyst generation 3 (94 mg, 0.118 mmol) , cesium carbonate (230 mg, 0.707 mmol) , and 7-chloro-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (51.4 mg, 0.283 mmol) .
  • the vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (1.26 mL) and water (0.32 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 40°C. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water.
  • Step B 3- (2-Amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
  • Step A tert-butyl 3- ( (4- (3-amino-1H-indazol-6-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (3-amino-1H-indazol-6-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
  • Step B 3- (3-Amino-1H-indazol-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)

Abstract

The present invention relates to compounds of formula I that are metallo-β-lactamase inhibitors, the synthesis of such compounds, and the use of such compounds for use with β-lactam antibiotics for overcoming resistance.

Description

METALLO-BETA-LACTAMASE INHIBITORS FIELD OF THE INVENTION
This invention relates to novel metallo-β-lactamase inhibitors and their uses. A preferred use of the metallo-β-lactamase inhibitorsis for reducing bacterial beta-lactam antibiotic resistance.
BACKGROUND OF THE INVENTION
Bacterial antibiotic resistance has become one of the most serious threats to modern health care. Infections caused by resistant bacteria frequently result in longer hospital stays, higher mortality and increased cost of treatment. See, e.g., Cohen, Science 1992, 257: 1051-1055. The need for new antibiotics will continue to escalate because bacteria have a remarkable ability to develop resistance to new agents rendering them quickly ineffective. See, e.g., Neu, Science 1992, 257: 1064-1073. The spread of antibiotic resistance has been referred to as a pandemic and that a solution to the growing public health threat will require an interdisciplinary approach. See, e.g., Anderson, Nature America 1999, 5: 147-149. See also Bush et al., Nature Reviews in Microbiology2011, 9: 894–896； Levy and Marshall, Nature Medicine 2004, 10: S122–S129； Livermore, Clinical Infectious Diseases 2003, 36: S11–S23； and Robertset al., Clinical Infectious Diseases 2009, 49: 1175–1184.
The present crisis has prompted various efforts to elucidate the mechanisms responsible for bacterial resistance. The widespread use of penicillins and cephalosporins has resulted in the emergence of β-lactamases, a family of bacterial enzymes that catalyze the hydrolysis of the β-lactam ring common to numerous presently used antibiotics. See, Coulton et al., Progress in Medicinal Chemistry 1994, 31: 297-349. This family of bacterial β-lactamases is further divided into four sub-families: A, C, and D which have a serine at the active site that catalyzes the hydrolysis of β-lactam antibiotics and a B family β-lactamases which are zinc metalloenzymes. Resistance mediated by β-lactamases is a critical aspect at the core of the development of bacterial antibiotic resistance. See, Dudley, Pharmacotherapy 1995, 15: 9S-14S. Clavulanic acid, which is a metabolite of Streptomyces clavuligerus, and two semi-synthetic inhibitors, sulbactam and tazobactam, are currently available semi-synthetic or natural product β-lactamase inhibitors. Synthetic β-lactamase inhibitors have also been described. See, U.S. Patent Nos. 5,698,577； 5,510,343； 6,472,406； Hubschwerlen et al., J. Med. Chem. 1998, 41: 3961； and Livermore et al., J. Med. Chem. 1997, 40: 335-343. Poole, Cell. Mol. Life Sci.  2004, 61: 2200-2223 provides a review of the resistance of bacterial pathogens to β-lactam antibiotics and approaches for overcoming resistance. For a review of inhibitors of metallo β-lactamases, seeFast and Sutton, Biochimica et Biophysica Acta –Proteins and Proteomics 2013, 1834 (8) : 1648-1659.
U.S. Patent Application Publication No. US 2003/0199541 A1 discloses certain azabicyclic compounds including certain 7-oxo-6-diazabicyclic [3.2.1] octane-2-carboxamides and their use as anti-bacterial agents. U.S. Patent Application Publication No. US 2004/0157826 A1 discloses heterobicyclic compounds including certain diazepine carboxamide and diazepine carboxylate derivatives and their use as anti-bacterials and β-lactamase inhibitors. International Patent Application Publication No. WO 2008/039420 A2 discloses 7-oxo-2, 6-diazabicyclo [3.2.0] heptane-6-sulfooxy-2-carboxamides and their use as β-lactamase inhibitors.
Zheng et al., in PLOS One 2013, 8 (5) , e62955, discloses substituted 2, 5-bis-tetrazolylmethyl-thiophenes and their use as β-lactamse inhibitors. Chinese Patent Application Publication No. CN103130686 A discloses N, N’ -diaryl-ureas and their use as inhibitors of metallo β-lactamases. Chinese Patent Application Publication No. CN103191091 A discloses substituted arylsulfonamides and their use as inhibitors of metallo β-lactamases.
U.S. Patent Nos. 4,786,311； 4,746,353； 4,838,925； European Patent Application Publication Nos. EP204513A2, EP244166A2, and Chinese Patent Application Publication No. CN1095549A disclose substituted 2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamides and their use as herbicides.
International Patent Application No. PCT/US15/011735 discloses substituted 1H-and 2H-tetrazol-5-yl sulfonamide compounds as metallo β-lactamase inhibitors.
SUMMARY OF THE INVENTION
The present invention is directed to substituted 1H-and 2H-tetrazol-5-yl sulfonamidecompoundsand related compounds which are metallo-β-lactamase inhibitors. The compounds, and their pharmaceutically acceptable salts, are useful, for example, in combination with β-lactam antibiotics, and optionally serine β-lactamase inhibitors, for the treatment of bacterial infections, particularly antibiotic-resistant bacterial infections. More particularly, the present invention includes compounds of Formula I:
Figure PCTCN2015082514-appb-000001
or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein
X1 is N or CH；
X2 is N or CH；
Z is tetrazolyl, wherein Z is linked to the six-membered ring through a carbon to carbon bond；
RA is – (CH2) 0-1-AryA1； – (CH2) 0-1-HetA1； – (CH2) 0-1-C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from –NH2, -OH, and -F； or – (CH2) 0-1-C4-6cycloalkenyl optionally substituted with –NH2；
RB is –SR1, –SOR2 or –SO2R3；
R1 is HetB1, AryB1, or –CH3；
R2 is HetB1 or –CH3；
R3 is
1) C1-6alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NRaRb, –N+RaRbCH3, –OH, and cyclopropyl；
2) C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –NRaRb, and –OH；
3) –NH2；
4) –NRa-C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1, 2, or 3substituentsindependently selected from –CF3, –CH (NH2) C (O) NH2；–C (O) NRaRb； –C (O) OH； –NRaRb, –N+RaRbCH3,–NHCH2CH2OCH3, –ORa, and –O (CH2) 2-3NH2；
5) –NRaC (O) C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1 or 2 substituentsindependently selected from –CF3, –C (O) NRaRb； –C (O) OH；
–NRaRb, –N+RaRbCH3, –NHCH2CH2OCH3, –ORa, and
–O(CH2) 2-3NH2；
6) –NRa (CH2) 0-1-C3-6cycloalkyl, wherein the C3-6cycloalkyl is optionally substituted with –CH2OH or –NH2；
7) –OH；
8) – (CH2) 0-2AryB1；
9) – (CH2) 0-2HetB1；
10) –NRa-C0-3alkyl-AryB1, wherein the C0-3alkyl is optionally substituted with –NH2； and
11) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ；
AryA1 is an aromatic ring system selected from:
1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0, 1, 2, or 3 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, Cl, –C1-6alkyl, –CN, –CH2OH, –C (O) NRaRb, –C (O) NH (CH2) 2-4NH2, –C (O) ORa, – (CH2) 0-3NHRa, – (CH2) 0-2NRaC (＝NH) NH2； –NRaC (O) CH3；–NRaSO2-C1-6alkyl, –NRaSO2-cyclopropyl, –ORa, oxo, –SO2Ra, –SO2NRaRb, –SO2NH-cyclopropyl, –AryA2, – (CH2) 0-1NRaAryA2, or –HetA2,
2) an8-to 10-membered bicyclic ring with 1, 2, 3 or 4 heteroatom ring atoms selected from N, O and S, wherein an S atom optionally has one or two oxo substituents and a N atom is optionally in the form of an N-oxide, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F； Cl；C1-6alkyl optionally substituted with –NRaRb； – (CH2) 0-1CF3；–CF2CH2NH2； –C (＝NH) NH2； –CN； –C (O) CF3； –C (O) NRaRb；–C (O) NHCH2C (O) ORa； –C (O) ORa； –NRaRb； –NHCH2SO3H；– (CH2) 0-1NHC (＝NH) NH2； –NHC (O) C1-6alkyl； –NHC (O) NH2；–NHC (O) ORa； –NHSO2CH3； –ORa； oxo； –SO2Ra, –CH2-phenyl-OCH3； and –HetA2；
HetA1 is dihydrothiopyranyl or tetrahydropyranyl；
AryA2 is a 5-6-membered aromatic monocyclic ring with 1, 2 or 3 heteroatom ring atoms independently selected from N and S, or 4 N ring atoms, optionally substituted with – (CH2) 0-1NH2, –CH2OH, –COOH, or –CONH2；
HetA2 is a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is optionally substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from C1-6alkyl, –CN, and oxo；
AryB1 is
1) a 5-6 membered monocyclic aromatic ring with 0, 1, 2, or 3 N ring atoms, optionally substituted with 1 substituent selected from –CF3, C1-6 alkyl, – (CH2) 0-1NH2and –OCH3； or
2) a 9-membered bicyclic ring with 2 N ring atoms；
HetB1 is
1) a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is optionally substituted with one or two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –CN, –C (O) C1-C6 alkyl, –C0-4alkyl-NRaRb, – (CH2) 0-1C (O) NRaRb, –C (O) NH-cyclopropyl, –C (O) ORa, –OH, oxo, and –SO2-C1-C6 alkyl； or
2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 to 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, optionally substituted with–C1-6alkyl, –CH2C3-6cycloalkyl, or –NH2, wherein the S is substituted with two oxo groups, wherein the rings in the bicyclic ring are bridged or spirocyclic, and wherein the C3-C6cycloalkyl is optionally substituted with–CH2OH；
HetB1’ is
1) a 4-6 membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein a N ring atom is optionally in the form of a quaternary amine, wherein the S is substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently  selected from F, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –C (O) ORa, – (CH2) 0-4NRaRb, –ORa, and oxo； or
2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and O, optionally substituted with –OH or –NH2, wherein the bicyclic ring is bridged or fused； and
Ra and Rb are independently H or C1-C6 alkyl.
Compounds of Formula I inhibit metallo-β lactamases and can synergize the antibacterial effects of β lactam antibiotics (e.g., imipenem, ceftazidime, ceftolozane, and piperacillin) against microorganisms normally resistant to β lactam antibiotics as a result of the presence of the metallo-β lactamases. The compounds of the present invention are effective against metallo-β lactamases and their combination with a β-lactam antibiotic, such as imipenem, ceftazidime, ceftolozane, or piperacillin, can provide for effective treatment of bacterial infections caused by metallo-β lactamase producing microorganisms. Accordingly, in certain embodiments, the present invention includes combinations of a compound of Formula I with a β-lactam antibiotic, and optionally a serine (Class A, C and D) β-lactamase inhibitor, suitable for use against metallo-β lactamase producing bacteria such as Pseudomonas spp. and Klebsiella spp. The invention also includes compositions comprising a compound of Formula I or its pharmaceutically acceptable salt, and a pharmaceutically acceptable carrier. The invention further includes methods for treating bacterial infections and inhibiting bacterial growth by use of a compound of Formula I or its salt or a combination or composition containing the compound or its salt.
Embodiments, sub-embodiments, aspects and features of the present invention are either further described in or will be apparent from the ensuing description, examples and appended claims.
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
As noted above, the present invention includes compounds of Formula I, wherein the compounds are metallo-β-lactamase inhibitors suitable for use in combination with β-lactam antibiotics and class A, C, and D β-lactamase inhibitors for the treatment of bacterial infections.
The invention is based, in part, on the presence of a sulfur linker at the 6-position of the core ring. The presence of a sulfur, particularly as a sulfone or sulfonamide, at this position results in improved enzyme potency compared to when the linker is carbon and also provides improved activity on difficult to penetrate Pseudomonas bacterial strains. The improved Pseudomonal activity is likely due to a decrease in efflux from the cells as a result of  the sulfone or sulfonamide linker.
In each of the various embodiments of the compounds of the invention described herein, each variable including those of Formulas (I) and (Ia) , and the various embodiments thereof, each variable is selected independently of the others unless otherwise indicated.
In each of the various embodiments of the compounds of the invention described herein, including those of Formulas (I) and (Ia) , and the various embodiments thereof and the compounds of the examples, such formulas and examples are intended to encompass all forms of the compounds such as, for example, any solvates, hydrates, stereoisomers, and tautomers of said compounds and of any pharmaceutically acceptable salts thereof.
In a first embodiment of the invention, the compound is a compound of formula (Ia) , or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
Figure PCTCN2015082514-appb-000002
wherein
RA is AryA1； HetA1； C4-6cycloalkyl optionally substituted with –NH2； or C4-6cycloalkenyl optionally substituted with –NH2；
R3 is
1) – (CH2) 0-2HetB1；
2) C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –NRaRb, –OH, and cyclopropyl；
3) C4-6cycloalkyl optionally substituted with –NH2；
4) –NRaRb；
5) –NRa-C1-6alkyl-NRaRb, wherein the C1-6alkyl is optionally substituted with 1 or 2 substituents selected from F, –CF3, –OH, and –OCH3；
6) –NH-C1-6hydroxyalkyl；
7) –NH (CH2) C (O) NRaRb；
8) –NHCH2CH (NH2) C (O) NH2；
9) –NHCH2CH (NH2) C (O) OH；
10) –NH (CH2) 2OCH3；
11) –NHCH2CH2OCH2CH2NH2；
12) –NHCH2-cyclopropyl, wherein the cyclopropyl is substituted with –CH2OH or –NH2；
13) –NH-cyclobutyl-NH2；
14) –OH；
15) –AryB1；
16) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ； and
17) –NRa-C0-2alkyl-AryB1, wherein the C0-2alkyl is optionally substituted with –NH2；
AryA1 is an aromatic ring system selected from:
1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0, 1, or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and S, substituted with 1 or 2 substituents independently selected from:
a) F,
b) –C1-C6 alkyl,
c) –CN,
d) –CH2OH,
e) –C (O) NRaRb,
f) –C (O) NH (CH2) 2-4NH2,
g) –C (O) ORa,
h) – (CH2) 0-1NHRa,
i) –NHC (＝NH) NH2；
j) –NHC (O) CH3；
k) –NRaSO2-C1-C6alkyl,
l) –NHSO2-cyclopropyl,
m) –ORa,
n) –SO2NRaRb,
o) –SO2NH-cyclopropyl,
p) –AryA2, or
q) –HetA2,
2) a 8-to 10-membered bicyclic ring with 1, 2, 3 or 4 heteroatom ring atoms selected from N, O and S, wherein an S atom optionally has one or two oxo substituents and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F,  C1-C6 alkyl, –CH2CF3, –CF2CH2NH2, –CF3, –C (＝NH) NH2, –CN, –C (O) CF3, –C (O) NRaRb, –C (O) NHCH2C (O) ORa, –C (O) ORa, – (CH2) 0-2NRaRb, –NHC (O) CH3, –NHC (O) NH2, –NHC (O) ORa, –NHCH2SO3H, –NHSO2CH3, –ORa, oxo, –CH2-phenyl-OCH3, and –HetA2；
AryB1 is
1) a 5-6 membered monocyclic aromatic ring with 0, 1, 2, or 3 N ring atoms, optionally substituted with 1 substituent selected from C1-C6 alkyl, –CF3, – (CH2) 0-1NH2, and –OCH3； or
2) a 9-membered bicyclic ring with 2 N ring atoms；
HetB1 is
1) a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is substituted with an oxo group, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from
a) F,
b) C1-C6 alkyl,
c) C1-C6 hydroxyalkyl,
d) –CN,
e) –C (O) CH3,
f) – (CH2) 0-1C (O) NRaRb,
g) –C (O) NH-cyclopropyl,
h) –C (O) ORa,
i) –C0-4alkyl-NRaRb,
j) –SO2-C1-C6 alkyl, and
k) oxo； or
2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 to 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, optionally substituted with C1-6alkyl, –CH2C3-C6cycloalkyl or –NH2, wherein the S is substituted with two oxo groups, wherein the rings in the bicyclic ring are bridged or spirocyclic, and wherein the C3-C6cycloalkyl is substituted with –CH2OH；
HetB1’ is
1) a 4-6 membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –NRaRb, –OH, C1-6alkoxy, –C (O) ORa, and oxo； or
2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and O, optionally substituted with –OH or –NH2, wherein the bicyclic ring is bridged or fused； and
Ra and Rb are independently H or C1-C6 alkyl； and the other groups are as provided in the general formula I above.
In a second embodiment of the invention, the compound is a compound of formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein RA is AryA1, and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in the first embodiment.
In a third embodiment of the invention, the compound is a compound of Formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein RB is –SO2R3, and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in the first or second embodiment.
In a fourth embodiment of the invention, the compound is a compound of Formula I or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein Ra and Rb are independently H or –CH3, and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through third embodiments.
In a fifth embodiment of the invention, the compound is a compound of formula below, or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
Figure PCTCN2015082514-appb-000003
wherein
AryA1 is an aromatic ring system selected from:
1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0 or 1 N ring atoms substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –C1-C6 alkyl, –CONH-C2-4alkyl-NH2, or –NHRa； or
2) a 9-membered bicyclic ring with 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, and – (CH2) 0-2NRaRb；
R3 is
1) C1-6alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NRaRb, –N+RaRbCH3, –OH, and cyclopropyl；
2) C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –NRaRb, –OH；
3) –NH2；
4) –NRa-C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1 or 2 substituentsindependently selected from –CF3, –CH (NH2) C (O) NH2； –C (O) NRaRb； –C (O) OH；–NRaRb, –N+RaRbCH3, –ORa, and –O (CH2) 1-2NH2；
5) –NRa (CH2) 0-1-C3-6cycloalkyl, wherein the C3-6cycloalkyl is optionally substituted with –CH2OH or –NH2；
6) –OH；
7) – (CH2) 0-2AryB1；
8) – (CH2) 0-2HetB1；
9) –NRa-C0-3alkyl-AryB1； and
10) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ； and
Ra and Rb are H or –CH3, and the other groups are as provided in the general formula I or Ia above, or as in any of the first through fourth embodiments.
In a sixth embodiment of the invention, the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein AryA is 1) phenyl substituted with –NH2 and –C (O) NHCH2CH2NH2； 2) phenyl substituted with–C (O) NHCH2CH2NH2； or 3) pyridinyl substituted with –NH2； and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through fifth embodiments.
In a seventh embodiment of the invention, the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, whereinAryA is 1) benzimidazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –CH3 and – (CH2) 0-1NH2； or 2) benzothiazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –CH3 and – (CH2) 0-1NH2； and the other groups are as provided in the general formula I  above, or as in any of the first through sixth embodiments.
In aneighth embodiment of the invention, the compound is a compound of formula I, or Ia, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R3 is 1) –NH2, 2) C1-3aminoalkyl optionally substituted with –OH, 3) azetidinyl, 4) pyrrolidinyl optionally substituted with –CH2NH2, 5) –NH-C2-3aminoalkyl optionally substituted with –OH, or 6) –NH-pyrrolidinyl optionally substituted with 1 – (CH2) 0-1OH or 2 –CH3； and the other groups are as provided in the general formula I above, or as in any of the first through seventh embodiments.
In another embodiment of the invention, the compound of the invention is selected from the exemplary species depicted in Examples 1-530 shown below, and pharmaceutically acceptable salts thereof.
In another embodiment of the invention, the compound of the invention is selected from the exemplary species depicted in Examples 43, 70, 80, 92, 98, 107, 109, 160, 171, 187, 340, 353, 363, 364, 366, 425, 429, 434, 438, 446, 447, 453, 461, 472, 473, 482, 485, 486, 487, 489, 490, 491, 493, 512, 515 and 516 shown below, and pharmaceutically acceptable salts thereof.
Other embodiments of the present invention include the following:
(a) A pharmaceutical composition comprising an effective amount of a compound of Formula I as defined above, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
(b) The pharmaceutical composition of (a) , further comprising an effective amount of a β-lactam antibiotic and optionally further comprising an effective amount of a class A, class A and C, or class A, C, and D β-lactamase inhibitor.
(c) The pharmaceutical composition of (b) , wherein the β-lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, ceftolozane, and ceftazidime, and the class A, C and D β-lactamase inhibitor is selected from the group consisting of relebactam, avibactam, tazobactam, or CB-618.
(d) The pharmaceutical composition of (b) , wherein the β-lactam antibiotic is imipenem.
(e) The pharmaceutical composition of (b) , wherein the β-lactam antibiotic is ceftazidime.
(f) The pharmaceutical composition of (b) , wherein the β-lactam antibiotic is ceftolozane.
(g) The pharmaceutical composition of (b) , wherein the β-lactam antibiotic is piperacillin.
(h) The pharmaceutical composition of (a) , further comprising effective amounts of a β-lactam antibiotic, a renal dehydropeptidase (DHP) inhibitor, and optionally, a class A, C and D β-lactamase inhibitor.
(i) The pharmaceutical composition of (h) , wherein the β-lactam antibiotic is imipenem, the DHP inhibitor is cilastatin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and the class A, C and D β-lactamase inhibitor is relebactam.
(j) A combination of effective amounts of a compound of Formula I as defined above, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a β-lactam antibiotic, and optionally, a class A, C and D β-lactamase inhibitor.
(k) The combination of (j) , wherein the β-lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, and ceftazidime.
(l) The combination of (j) , wherein the β-lactam antibiotic is imipenem and the class A, C, D β-lactamase inhibitor is relebactam.
(m) The combination of (j) , wherein the β-lactam antibiotic is ceftazidimeand the class A, C, D β-lactamase inhibitor is avibactam.
(n) The combination of (j) , wherein the β-lactam antibiotic is ceftolozaneand the class A, C, D β-lactamase inhibitor is avibactam or relebactam.
(o) The combination of (j) , wherein the β-lactam antibiotic is piperacillin.
(p) A combination of effective amounts of a compound of Formula I as defined above, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, a β-lactam antibiotic, a DHP inhibitor, and optionally a class A, C and D β-lactamase inhibitor.
(q) The combination of (p) , wherein the β-lactam antibiotic is imipenem, the DHP inhibitor is cilastatin or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and the class A, C and D β-lactamase inhibitor is relebactam.
(r) A method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, optionally in combination with an effective amount of a β-lactam antibiotic.
(s) A method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of  Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, in combination with effective amounts of a β-lactam antibiotic and a DHP inhibitor.
(t) A method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of the composition of (a) , (b) , (c) , (d) , (e) , (f) , (g) , (h) or (i) .
(u) A method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of the combination of (j) , (k) , (l) , (m) , (n) , (o) , (p) , or (q) .
(v) A method of treating a bacterial infection as set forth in (r) , (s) , (t) , or (u) wherein the bacterial infection is due to Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Escherichi spp. a, Morganella spp., Citrobacter spp., Serratia, spp. or Acintetobacter spp.
The present invention also includes a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, (i) for use in, (ii) for use as a medicament for, or (iii) for use in the preparation (or manufacture) of a medicament for, inhibiting beta-lactamase activity or treating bacterial infection. In these uses, the compounds of the present invention can optionally be employed in combination with one or more β-lactam antibiotics, a class A, C, D serine β-lactamase inhibitor and/or one or more DHP inhibitors.
Additional embodiments of the invention include the pharmaceutical compositions, combinations and methods set forth in (a) - (v) above and the uses set forth in the preceding paragraph, wherein the compound of the present invention employed therein is a compound of one of the embodiments, sub-embodiments, classes or sub-classes described above. The compound may optionally be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt in these embodiments. In addition, the compound may optionally be used in the form of a prodrug that releases the active parent compound after dosing by intravenous or oral administration.
In the embodiments of the compounds and salts provided above, it is to be understood that each embodiment may be combined with one or more other embodiments, to the extent that such a combination provides a stable compound or salt and is consistent with the description of the embodiments. It is further to be understood that the embodiments of compositions and methods provided as (a) through (v) above are understood to include all embodiments of the compounds and/or salts, including such embodiments as result from combinations of embodiments.
Additional embodiments of the present invention include each of the pharmaceutical compositions, combinations, methods and uses set forth in the preceding paragraphs, wherein the compound of the present invention or its salt employed therein is  substantially pure. With respect to a pharmaceutical composition comprising a compound of Formula I or its salt and a pharmaceutically acceptable carrier and optionally one or more excipients, it is understood that the term "substantially pure" is in reference to a compound of Formula I or its salt per se； i.e., the purity of the active ingredient in the composition.
The term “metallo-β-lactamase inhibitor" refers to a compound which is capable of inhibiting metallo-β-lactamase activity. As used herein, inhibiting metallo-β-lactamase activity means inhibiting the activity of a class Bmetallo-β-lactamase. For antimicrobial applications inhibition at a 50％inhibitory concentration is preferably achieved at or below about100 μg/mL, or at or below about 50 μg/mL, or at or below about 25 μg/mL. The terms "class A" , "class B" , "class C" , and "class D" β-lactamases are understood by those skilled in the art and are described in S.G. Waley, β-lactamase: mechanisms of action, in The Chemistry of β-Lactams, M.I. Page, Ed.； Chapman and Hall, London, (1992) 198-228.
The term "metallo-β-lactamase" denotes a metalloprotein capable of inactivating a β-lactam antibiotic. The β-lactamase can be an enzyme which catalyzes the hydrolysis of the β-lactam ring of a β-lactam antibiotic. Of particular interest herein are microbial metallo-β-lactamases. The metallo-β-lactamase can be, for example, a zinc metallo-β-lactamase. β-Lactamases of interest include those disclosed in, e.g., S.G. Waley, β-lactamase: mechanisms of action, in The Chemistry of β-Lactams, M.I. Page, Ed.； Chapman and Hall, London, (1992) 198-228. β-Lactamases of particular interest herein include a metallo-β-lactamases of Escherichia coli (such as New Delhi Metallo-b-lactamase, NDM) , Serratia marcescens (such as IMP) , Klebsiella spp. (such as Verona integron-encoded metallo-β-lactamase, VIM) ) and Pseudomonas spp (such asVerona integron-encoded metallo-β-lactamase, VIM) ) . Additional metallo-β-lactamases of interest herein include SPM-, GIM-, SIM-, KHM-, AIM-, DIM-, SMB-, TMB-, and FIM-type enzymes.
The term "antibiotic" refers to a compound or composition which decreases the viability of a microorganism, or which inhibits the growth or proliferation of a microorganism. The phrase "inhibits the growth or proliferation" means increasing the generation time (i.e., the time required for the bacterial cell to divide or for the population to double) by at least about 2-fold. Preferred antibiotics are those which can increase the generation time by at least about 10-fold or more (e.g., at least about 100-fold or even indefinitely, as in total cell death) . As used in this disclosure, an antibiotic is further intended to include an antimicrobial, bacteriostatic, or bactericidal agent. Examples of antibiotics suitable for use with respect to the present invention include penicillins, cephalosporins and carbapenems.
The term "β-lactam antibiotic" refers to a compound with antibiotic properties that contains a β-lactam functionality. Non-limiting examples of β-lactam antibiotics useful with respect to the invention include penicillins, cephalosporins, penems, carbapenems, and monobactams.
The term "about" , when modifying the quantity (e.g., kg, L, or equivalents) of a substance or composition, or the value of a physical property, or the value of a parameter characterizing a process step (e.g., the temperature at which a process step is conducted) , or the like refers to variation in the numerical quantity that can occur, for example, through typical measuring, handling and sampling procedures involved in the preparation, characterization and/or use of the substance or composition； through inadvertent error in these procedures； through differences in the manufacture, source, or purity of the ingredients employed to make or use the compositions or carry out the procedures； and the like. In certain embodiments, “about” can mean a variation of ± 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, or 5.0 of the appropriate unit. In certain embodiments, “about” can mean a variation of ± 1％, 2％, 3％, 4％, 5％, 10％, or 20％.
Another embodiment of the present invention is a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, as originally defined or as defined in any of the foregoing embodiments, sub-embodiments, aspects, classes or sub-classes, wherein the compound or its salt is in a substantially pure form. As used herein "substantially pure" means suitably at least about 60 wt. ％, typically at least about 70 wt. ％, preferably at least about 80 wt. ％, more preferably at least about 90 wt. ％ (e.g., from about 90 wt. ％to about 99 wt. ％) , even more preferably at least about 95 wt. ％ (e.g., from about 95 wt. ％to about 99 wt. ％, or from about 98 wt. ％to 100 wt. ％) , and most preferably at least about 99 wt. ％ (e.g., 100 wt. ％) of a product containing a compound of Formula I or its salt (e.g., the product isolated from a reaction mixture affording the compound or salt) consists of the compound or salt. The level of purity of the compounds and salts can be determined using a standard method of analysis such as thin layer chromatography, gel electrophoresis, high performance liquid chromatography, and/or mass spectrometry. If more than one method of analysis is employed and the methods provide experimentally significant differences in the level of purity determined, then the method providing the highest level of purity governs. A compound or salt of 100％purity is one which is free of detectable impurities as determined by a standard method of analysis.
Definitions:
"Alkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof, unless the carbon chain is defined otherwise. Other groups having the prefix "alk" , such as alkoxy and alkanoyl, also may be linear or branched, or combinations  thereof, unless the carbon chain is defined otherwise. Examples of alkyl groups include methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, sec-and tert-butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl, nonyl, and the like.
"Aminoalkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one amino group which may be terminal (-NH2) or internal (-NH-) .
"Hydroxyalkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one hydroxyl (-OH) group.
"Diaminoalkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with two amino (-NH2) groups.
"Dihydroxyalkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with two hydroxyl (-OH) groups.
"Hydroxyaminoalkyl” means saturated carbon chains which may be linear or branched or combinations thereof which are substituted with one hydroxyl (-OH) group and one amino (-NH2) group .
"Alkenyl" means carbon chains which contain at least one carbon-carbon double bond, and which may be linear or branched, or combinations thereof, unless otherwise defined. Examples of alkenyl include vinyl, allyl, isopropenyl, pentenyl, hexenyl, heptenyl, 1-propenyl, 2-butenyl, 2-methyl-2-butenyl, and the like.
“Aromatic ring system” means monocyclic, bicyclic or tricyclic aromatic ring or ring system containing 5-14 ring atoms, wherein at least one of the rings is aromatic. The term may be used to describe a carbocyclic ring fused to an aryl group. For example, a 5-7-membered cycloalkyl can be fused through two adjacent ring atoms to a 5-6-membered heteroaryl containing 1, 2, or 3 heteroatom ring atoms selected from N, O, and S. In other example, a heteromonocyclic ring is fused through two ring atoms to a phenyl or 5-6-membered heteroaryl containing 1, 2, or 3 heteroatoms selected from N, O, and S. In the case of a heteromonocyclic ring containing one or more N atoms, the N can be in the form of quarternary amine. In certain embodiments, a N ring atom can be in the form of an N-oxide.
"Aryl" means a monocyclic, bicyclic or tricyclic carbocyclic aromatic ring or ring system containing 5-14 carbon atoms, wherein at least one of the rings is aromatic. Examples of aryl include phenyl and naphthyl. In one embodiment of the present invention, aryl is phenyl.
"Cycloalkyl" means a saturated monocyclic, bicyclic or bridged carbocyclic ring, having a specified number of carbon atoms. Examples of cycloalkyl include cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, indanyl, 1, 2, 3, 4-tetrahydronaphthyl and the like. In one embodiment of the present invention, cycloalkyl is selected from: cyclopropane,  cyclobutane, cyclopentane and cyclohexane.
"Cycloalkenyl" means a nonaromatic monocyclic or bicyclic carbocylic ring containing at least one double bond. Examples of cycloalkenyl include cyclopropenyl, cyclobutenyl, cyclopentenyl, cyclohexenyl, cycloheptenyl, cyclooxtenyl and the like.
"Cycloheteroalkyl" or “heterocycloalkyl” means a saturated or partly unsaturated non-aromatic monocyclic, bicyclic or bridged carbocyclic ring or ring system containing at least one ring heteroatom selected from N, S (including SO and SO2) and O. The cycloheteroalkyl ring may be substituted on the ring carbons and/or the ring nitrogen (s) . Examples of cycloheteroalkyl include tetrahydrofuran, piperazine, piperidine, morpholine, oxetane, tetrahydropyran, indolinyl, isoindolinyl, azabicyclooctane, hexahydrofuro [3, 2-b] furan, and 2, 3, 3a, 5, 6, 6a-hexahydrofuro [3, 2-b] furan. Where the ring or ring system contains one or more N atoms, the N can be in the form of quarternary amine.
"Heteroaryl" means monocyclic, bicyclic or tricyclic ring or ring system containing 3-14 carbon atoms and containing at least one ring heteroatom selected from N, S (including SO and SO2) and O, wherein at least one of the heteroatom containing rings is aromatic. In the case of a heteroaryl ring system where one or more of the rings are saturated and contain one or more N atoms, the N can be in the form of quarternary amine. Examples of heteroaryl include pyrrolyl, isoxazolyl, isothiazolyl, pyrazolyl, pyridyl, oxazolyl, oxadiazolyl, thiadiazolyl, thiazolyl, imidazolyl, triazolyl, tetrazolyl, furanyl, triazinyl, thienyl, pyrimidyl, pyridazinyl, pyrazinyl, benzisoxazolyl, benzoxazolyl, benzothiazolyl, benzimidazolyl, benzopyrazolyl, benzofuranyl, benzothiophenyl (including S-oxide and dioxide) , benzotriazolyl, furo (2, 3-b) pyridyl, quinolyl, indolyl, isoquinolyl, quinazolinyl, dibenzofuranyl, and the like.
"Halogen" includes fluorine, chlorine, bromine and iodine.
Where any amine is present in the compound, the N atom may be optionally in the form of a quaternary amine having one or more appropriate additional substitutions.
When any ring atom is specified as being optionally substituted with, or in a specified form, for example, S substituted with oxo groups, or N in the form of a N-oxide, this does not preclude the substitution of any ring atom with the other listed optional substituents when not substituted with oxo groups or in the form of a N-oxide.
When any variable (e.g., R1, Ra, etc. ) occurs more than one time in any constituent or in formula I, its definition on each occurrence is independent of its definition at every other occurrence. Also, combinations of substituents and/or variables are permissible only if such combinations result in stable compounds. A squiggly line across a bond in a substituent  variable represents the point of attachment.
Under standard nomenclature used throughout this disclosure, the terminal portion of the designated side chain is described last, preceded by the adjacent functionality toward the point of attachment.
In choosing compounds of the present invention, one of ordinary skill in the art will recognize that the various substituents, i.e. R1, R2, etc., are to be chosen in conformity with well-known principles of chemical structure connectivity and stability.
The term "substituted" shall be deemed to include multiple degrees of substitution by a named substitutent. Where multiple substituent moieties are disclosed or claimed, the substituted compound can be independently substituted by one or more of the disclosed or claimed substituent moieties, singly or plurally. By independently substituted, it is meant that the (two or more) substituents can be the same or different.
In the compounds of formula I, the atoms may exhibit their natural isotopic abundances, or one or more of the atoms may be artificially enriched in a particular isotope having the same atomic number, but an atomic mass or mass number different from the atomic mass or mass number predominantly found in nature. The present invention is meant to include all suitable isotopic variations of the compounds of formula I. For example, different isotopic forms of hydrogen (H) include protium (1H) and deuterium (2H or D) . Protium is the predominant hydrogen isotope found in nature. Enriching for deuterium may afford certain therapeutic advantages, such as increasing in vivo half-life or reducing dosage requirements, or may provide a compound useful as a standard for characterization of biological samples. Isotopically-enriched compounds within formula I can be prepared without undue experimentation by conventional techniques well known to those skilled in the art or by processes analogous to those described in the Schemes and Examples herein using appropriate isotopically-enriched reagents and/or intermediates.
Unless expressly stated to the contrary in a particular context, any of the various cyclic rings and ring systems described herein may be attached to the rest of the compound at any ring atom (i.e., any carbon atom or any heteroatom) provided that a stable compound results.
Unless expressly stated to the contrary, all ranges cited herein are inclusive. For example, a heteroaromatic ring described as containing from "1 to 4 heteroatoms" means the ring can contain 1, 2, 3 or 4 heteroatoms. It is also to be understood that any range cited herein includes within its scope all of the sub-ranges within that range. Thus, for example, a heterocyclic ring described as containing from "1 to 4 heteroatoms" is intended to include as aspects thereof, heterocyclic rings containing 2 to 4 heteroatoms, 3 or 4 heteroatoms, 1 to 3  heteroatoms, 2 or 3 heteroatoms, 1 or 2 heteroatoms, 1 heteroatom, 2 heteroatoms, 3 heteroatoms, and 4 heteroatoms. Similarly, C1-C6 when used with a chain, for example an alkyl chain, means that the chain can contain 1, 2, 3, 4, 5 or 6 carbon atoms. It also includes all ranges contained therein including C1-C5, C1-C4, C1-C3, C1-C2, C2-C6, C3-C6, C4-C6, C5-C6, and all other possible combinations.
A "stable" compound is a compound which can be prepared and isolated and whose structure and properties remain or can be caused to remain essentially unchanged for a period of time sufficient to allow use of the compound for the purposes described herein (e.g., therapeutic administration to a subject) . The compounds of the present invention are limited to stable compounds embraced by Formula I.
The compounds of the present invention may have one or moreasymmetric centers. Accordingly, compounds of the invention can occur as mixtures of stereoisomers, or as individual diastereomers, or enantiomers. All isomeric forms of these compounds, whether individually or in mixtures, are within the scope of the present invention.
The term "compound" refers to the compound and, in certain embodiments, to the extent they are stable, any hydrate or solvate thereof. A hydrate is the compound complexed with water, and a solvate is the compound complexed with an organic solvent.
As indicated above, the compounds of the present invention can be employed in the form of pharmaceutically acceptable salts. The term "pharmaceutically acceptable salt" refers to a salt which possesses the effectiveness of the parent compound and which is not biologically or otherwise undesirable (e.g., is neither toxic nor otherwise deleterious to the recipient thereof) .
As set forth above, the present invention includes pharmaceutical compositions comprising a compound of Formula I of the present invention, optionally one or more other active components (e.g., a β-lactam antibiotic) , and a pharmaceutically acceptable carrier. The characteristics of the carrier will depend on the route of administration. By “pharmaceutically acceptable” is meant that the ingredients of the pharmaceutical composition must be compatible with each other, do not interfere with the effectiveness of the active ingredient (s) , and are not deleterious (e.g., toxic) to the recipient thereof. Thus, compositions according to the invention may, in addition to the inhibitor, contain diluents, fillers, salts, buffers, stabilizers, solubilizers, and other materials well known in the art.
Also as set forth above, the present invention includes a method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment a therapeutically effective amount of a compound of Formula I, or a pharmaceutically acceptable  salt thereof, optionally in combination with a β-lactam antibiotic and/or a DHP inhibitor. The term "subject" (or, alternatively, "patient" ) as used herein refers to an animal, preferably a mammal, most preferably a human, who has been the object of treatment, observation or experiment. The term "administration" and variants thereof (e.g., "administering" a compound) in reference to a compound of Formula I mean providing the compound, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, to the individual in need of treatment. When a compound or a salt thereof is provided in combination with one or more other active agents (e.g., a carbapenem antibiotic or a DHP inhibitor or both) , "administration" and its variants are each understood to include provision of the compound or its salt and the other agents at the same time or at different times. When the agents of a combination are administered at the same time, they can be administered together in a single composition or they can be administered separately. It is understood that a "combination" of active agents can be a single composition containing all of the active agents or multiple compositions each containing one or more of the active agents. In the case of two active agents a combination can be either a single composition comprising both agents or two separate compositions each comprising one of the agents； in the case of three active agents a combination can be either a single composition comprising all three agents, three separate compositions each comprising one of the agents, or two compositions one of which comprises two of the agents and the other comprises the third agent； and so forth.
The compositions and combinations of the present invention are suitably administered in effective amounts. The term “effective amount” means the amount of active compound sufficient to inhibit β-lactamase and thereby elicit the response being sought (i.e., an "inhibition effective amount" ) in a cell, tissue, system, animal or human. In one embodiment, the effective amount is a "therapeutically effective amount" for the alleviation of the symptoms of the disease or condition being treated (e.g., the healing of conditions associated with bacterial infection, and/or bacterial drug resistance) . In another embodiment, the effective amount is a "prophylactically effective amount" for prophylaxis of the symptoms of the disease or condition being prevented. When the active compound (i.e., active ingredient) is administered as the salt, references to the amount of active ingredient are to the free acid or free base form of the compound.
The administration of a composition of the present invention is suitably parenteral, oral, sublingual, transdermal, topical, intranasal, intratracheal, intraocular, or intrarectal, wherein the composition is suitably formulated for administration by the selected route using formulation methods well known in the art, including, for example, the methods for preparing and administering formulations described in chapters 39, 41, 42, 44 and 45 in Remington –The  Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2006. In one embodiment, compounds of the invention are administered intravenously in a hospital setting. In another embodiment, administration is oral in the form of a tablet or capsule or the like. When administered systemically, a therapeutic composition is for example, suitably administered at a sufficient dosage to attain a blood level of inhibitor of at least about 1 μg/mL, and in additional embodiment at least about 10 μg/mL, and at least about 25 μg/mL. For localized administration, much lower concentrations than this may be effective, and much higher concentrations may be tolerated.
Intravenous administration of a compound of the invention can be conducted by reconstituting a powdered form of the compound with an acceptable solvent. Suitable solvents include, for example, saline solutions (e.g., 0.9％Sodium Chloride Injection) and sterile water (e.g., Sterile Water for Injection, Bacteriostatic Water for Injection with methylparaben and propylparaben, or Bacteriostatic Water for Injection with 0.9％benzyl alcohol) . The powdered form of the compound can be obtained by gamma-irradiation of the compound or by lyophilization of a solution of the compound, after which the powder can be stored (e.g., in a sealed vial) at or below room temperature until it is reconstituted. The concentration of the compound in the reconstituted IV solution can be, for example, in a range of from about 0.1 mg/mL to about 20 mg/mL.
The present invention also includesa method for inhibiting bacterial growth which comprises administering to a bacterial cell culture, or to a bacterially infected cell culture, tissue, or organism, an inhibition effective amount of a compound of Formula I. Additional embodiments of the invention include the bacterial growth inhibiting method just described, wherein the compound of the present invention employed therein is a compound of one of the embodiments, sub-embodiments or classes described above. The compound may optionally be used in the form of a pharmaceutically acceptable salt in these embodiments. The method can involve administration of a compound of Formula I to an experimental cell culture in vitro to prevent the growth of β-lactam resistant bacteria. The method can alternatively involve administration of a compound of Formula I to an animal, including a human, to prevent the growth of β-lactam resistant bacteria in vivo. In these cases the compound of Formula I is typically co-administered with a β-lactam antibiotic.
Compounds of the invention can be employed for the treatment, prophylaxis or inhibition of bacterial growth or infections due to bacteria that are resistant to β-lactam antibiotics. More particularly, the bacteria can be metallo-β-lactamase positive strains that are highly resistant to β-lactam antibiotics. The terms "slightly resistant" and "highly resistant" are  well-understood by those of ordinary skill in the art (see, e.g., Payne et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38: 767-772 (1994) ； Hanaki et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 30: 11.20-11.26 (1995) ) . For the purposes of this invention, bacterial strains which are highly resistant to imipenem are those against whichthe MIC of imipenem is >16 μg/mL, and bacterial strains which are slightly resistant to imipenemare those against which the MIC of imipenem is >4 μg/mL.
Compounds of the invention can be used in combination with antibiotic agents for the treatment of infections caused by Class B-β-lactamase producing strains, in addition to those infections which are subsumed within the antibacterial spectrum of the antibiotic agent. Examples of class B-metallo-β-lactamase producing bacteria are Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Citrobacter freundii, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Providencia rettgeri, and Acinetobacter baumannii.
It is generally advantageous to use a compound of Formula I in admixture or conjunction with a carbapenem, penicillin, cephalosporin, or other β-lactam antibiotic, or a prodrug thereof. It is advantageous to use a compound of Formula I in combination with one or more β-lactam antibiotics because of the class B β-lactamase inhibitory properties of the compounds. It is also advantageous to use a compound of Formula I in combination with one or more Class A, C, and D β-lactamase inhibitors to further limit β-lactam susceptability. As already noted, the compound of Formula I and the β-lactam antibiotic can be administered separately (at the same time or as different times) or in the form of a single composition containing both active ingredients.
Carbapenems, penicillins, cephalosporins and other β-lactam antibiotics suitable for use in the present invention include both those known to show instability to or to be otherwise susceptible to class B-β-lactamases.
When the compounds of Formula I are combined with a carbapenem antibiotic, a dehydropeptidase (DHP) inhibitor can also be combined. Many carbapenems are susceptible to attack by a renal enzyme known as DHP. This attack or degradation may reduce the efficacy of the carbapenem antibacterial agent. Inhibitors of DHP and their use with carbapenems are disclosed in, e.g., U.S. Patent Nos. 4,539,208； 4,616,038； 4,880,793； and 5,071,843. A preferred DHP inhibitor is 7- (L-2-amino-2-carboxyethylthio) -2- (2, 2-dimethylcyclopropanecarboxamide) -2-heptenoic acid or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
Carbapenems suitable for co-administration with compounds of the present invention include imipenem, ertapenem, meropenem, biapenem, (4R, 5S, 6S) -3- [3S, 5S) -5- (3-carboxyphenyl-carbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid, (1S, 5R, 6S) -2- (4- (2- ( ( (carbamoylmethyl) -1, 4-diazoniabicyclo [2.2.2] oct-1-yl) -ethyl (1, 8-naphthosultam) methyl) -6- [1 (R) -hydroxyethyl] -1-methylcarbapen-2-em-3-carboxylate chloride, BMS181139 ( [4R- [4α, 5β, 6β (R*) ] ] -4- [2- [ (aminoiminomethyl) amino] ethyl] -3- [ (2-cyanoethyl) thio] -6- (1-hydroxyethyl) -7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid) , BO2727 ( [4R-3 [3S*, 5S* (R*) ] , 4α, 5β, 6β (R*) ] ] -6- (1-hydroxyethyl) -3- [ [5- [1-hydroxy-3- (methylamino) propyl] -3-pyrrolidinyl] thio] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid monohydrochloride) , E1010 ( (1R, 5S, 6S) -6- [1 (R) -hydroxymethyl] -2- [2 (S) - [1 (R) -hydroxy-1- [pyrrolidin-3 (R) -yl] methyl] pyrrolidin-4 (S) -ylsulfanyl] -1-methyl-1-carba-2-penem-3-carboxylic acid hydrochloride) and S4661 ( (1R, 5S, 6S) -2- [ (3S, 5S) -5- (sulfamoylaminomethyl) pyrrolidin-3-yl] thio-6- [ (1R) -1-hydroxyethyl] -1-methylcarbapen-2-em-3-carboxylic acid) , (1S, 5R, 6S) -1-methyl-2- {7- [4- (aminocarbonylmethyl) -1, 4-diazoniabicyclo (2.2.2) octan-1yl] -methyl-fluoren-9-on-3-yl} -6- (1R-hydroxyethyl) -carbapen-2-em-3 carboxylate chloride.
Penicillins suitable for co-administration with compounds of the present invention include benzylpenicillin, phenoxymethylpenicillin, carbenicillin, azidocillin, propicillin, ampicillin, amoxicillin, epicillin, ticarcillin, cyclacillin, pirbenicillin, azlocillin, mezlocillin, sulbenicillin, piperacillin, and other known penicillins. The penicillins may be used in the form of pro-drugs thereof； for example as in vivo hydrolysable esters, for example the acetoxymethyl, pivaloyloxymethyl, α-ethoxycarbonyloxy-ethyl and phthalidyl esters of ampicillin, benzylpenicillin and amoxicillin； as aldehyde or ketone adducts of penicillins containing a 6-α-aminoacetamido side chain (for example hetacillin, metampicillin and analogous derivatives of amoxicillin) ； and as esters of carbenicillin and ticarcillin, for example the phenyl and indanyl α-esters.
Cephalosporins suitable for co-administration with compound of the present invention include cefatrizine, cephaloridine, cephalothin, cefazolin, cephalexin, cephacetrile, cephapirin, cephamandole nafate, cephradine, 4-hydroxycephalexin, cephaloglycin, cefoperazone, cefsulodin, ceftazidime, cefuroxime, cefmetazole, cefotaxime, ceftriaxone, and other known cephalosporins, all of which may be used in the form of pro-drugs thereof.
β-Lactam antibiotics other than penicillins and cephalosporins that may be co-administered with compounds of the present invention include aztreonam, latamoxef (MOXALACTAM) , and other known β-lactam antibiotics such as carbapenems like imipenem,  ertapenem, meropenem or (4R, 5S, 6S) -3- [ (3S, 5S) -5- (3-carboxyphenylcarbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid, all of which may be used in the form of pro-drugs thereof.
In one embodiment, the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem and (4R, 5S, 6S) -3- [ (3S, 5S) -5- (3-carboxyphenylcarbamoyl) pyrrolidin-3-ylthio] -6- (1R) -1-hydroxyethyl] -4-methyl-7-oxo-1-azabicyclo [3.2.0] hept-2-ene-2-carboxylic acid.
In another embodiment, the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group of penicillins consisting of ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, and ticarcillin. Such penicillins can optionally be used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, for example their sodium salts. Ampicillin or amoxicillin can alternatively be employed in the form of fine particles of the zwitterionic form (generally as ampicillin trihydrate or amoxicillin trihydrate) for use in an injectable or infusable suspension. In an aspect of this embodiment, the penicillin co-administered with a compound of the present invention is amoxicillin, optionally in the form of its sodium salt or the trihydrate.
In another embodiment, the antibiotic co-administered with a compound of the present invention is selected from the group of cephalosporins consisting of cefotaxime, ceftriaxone and ceftazidime, which are optionally used in the form of their pharmaceutically acceptable salts, for example their sodium salts.
In certain embodiments of the invention, the compounds of the invention in combination with serine β-lactamase inhibitors (which can inhibit class A, C, D beta lactamases) in addition to β-lactam antiobiotics. Serine β-lactamase inhibitors include but are not limited to avibactam, relebactam, tazobactam, and clavulanic acid.
When co-administered with a β-lactam antibiotic, and optionally a β-lactamase inhibitor, the combination of the compound of the invention and the antibiotic can provide a synergistic effect. The terms "synergistic effect" and "synergy" indicate that the effect produced when two or more drugs are co-administered is greater than would be predicted based on the effect produced when the compounds are administered individually. While not wishing to be bound by theory, it is believed that the compounds of the present invention are β-lactamase inhibitors that act to prevent degradation of β-lactam antibiotics, thereby enhancing their efficacy and producing a synergistic effect.
Abbreviations employed herein include the following: AcOH ＝ acetic acid； ACN ＝MeCN＝ acetonitrile； BINAP ＝ (2, 2'-bis (diphenylphosphino) -1, 1'-binaphthyl) ； BLI ＝ β-lactamase  inhibitor； Bn ＝ benzyl； BOC (or Boc) ＝ tert-butyloxycarbonyl； Boc anhydride ＝ Boc2O＝ di-tert-butyl dicarbonate； BrettPhos precatalyst generation 3 ＝ [ (2-Di-cyclohexylphosphino-3, 6-dimethoxy-2′, 4′, 6′-triisopropyl-1, 1′-biphenyl) -2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) methanesulfonate； BPBD ＝ N, N′- {bis (pyridin-2-yl) benzylidene} butane-1, 4-diamine； CBZ (or Cbz) ＝ carbobenzoxy (alternatively, benzyloxycarbonyl) ； CH3CN ＝ acetonitrile； DCM ＝dichloromethane； DIBAL-H ＝ diisobutylaluminum hydride； DIEA ＝ N, N-Diisopropylethylamine； DIPEA ＝ diisopropylethylamine (or Hunig's base) ； DMA ＝dimethylacetamide； DMAP ＝ 4-dimethylaminopyridineor N, N-dimethylaminopyridine； DME ＝1, 2-dimethoxyethane； DMF ＝ N, N-dimethylformamide； DMSO ＝ dimethyl sulfoxide； EA ＝AcOEt ＝ EtOAc ＝ ethyl acetate； EDC ＝ 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide； Et ＝ethyl； EtOH ＝ ethanol； HATU ＝ (1- [Bis (dimethylamino) methylene] -1H-1, 2, 3-triazolo [4, 5-b] pyridinium 3-oxid hexafluorophosphate) ； hex ＝ hexane； HOAt ＝ 1-Hydroxy-7-azabenzotriazole； HPLC ＝ high-performance liquid chromatography； i-Pr ＝ isopropyl alcohol； KOAc ＝ potassium acetate； LCMS ＝ LC-MS ＝ liquid chromatography/mass spectrometry； LDA ＝ lithium di-isopropyl amide； mCPBA ＝ meta-chloroperoxybenzoic acid； Me ＝ methyl； MeCN ＝ acetonitrile； MeOH ＝ methanol； MIC ＝ minimum inhibitory concentration； MPLC ＝ mediumpressure liquid chromatography； Ms ＝ methanesulfonyl； MsCl ＝ methane sulfonyl chloride； n-BuLi ＝ n-butyllithium； NCS ＝ N-Chlorosuccinimide； NIS ＝ N-Iodosuccinimide； NMR ＝ nuclear magnetic resonance； PCy3 Pd G2 ＝ Chloro [ (tricyclohexylphosphine) -2- (2′-aminobiphenyl) ] palladium (II) ； Pd (dppf) Cl2 ＝ [1, 1′-Bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) ； PE ＝ Pet. ether ＝petroleum ether； Ph ＝ phenyl； PMB ＝ p-Methoxybenzyl； PPh3 precatalyst generation 2: Chloro (triphenylphosphine) [2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) ； RBF ＝ round bottom flask； RT ＝ rt ＝ r.t. ＝ room temperature； SFC ＝ supercritical fluid chromatography； SM ＝starting material； TBAF ＝ tetrabutylammonium fluoride； tBuXPhos precatalyst generation 3＝ [ (2-Di-tert-butylphosphino-2′, 4′, 6′-triisopropyl-1, 1′-biphenyl) -2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) methanesulfonate； TEA ＝ triethylamine； TFA ＝ trifluoroacetic acid； THF ＝tetrahydrofuran； TLC ＝ thin layer chromatography； TMS ＝ trimethylsilane； TMSN3 ＝azidotrimethylsilane； XPhos-Pd-2G or XPHOS Pd G2 precatalyst or Xphos precatalyst generation 2 ＝ Chloro (2-dicyclohexylphosphino-2′, 4′,  6′-triisopropyl-1, 1′-biphenyl) [2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) , X-Phos aminobiphenyl palladium chloride precatalyst.
The compounds of the present invention can be readily prepared according to the following reaction schemes and examples, or modifications thereof, using readily available starting materials, reagents and conventional synthesis procedures. In these reactions, it is also possible to make use of variants which are themselves known to those of ordinary skill in this art,  but are not mentioned in greater detail. Furthermore, other methods for preparing compounds of the invention will be readily apparent to the person of ordinary skill in the art in light of the following reaction schemes and examples. Unless otherwise indicated, all variables are as defined above.
Scheme I:
Figure PCTCN2015082514-appb-000004
One general method for the preparation of compounds of this invention is outlined in Scheme I. According to the Scheme, intermediates 1a and 1b (prepared as described in Scheme VI and in the examples below) can be reacted selectively at the bromo position with  alkyl, aryl or heteroaryl thiols in the presence of a base, for example cesium carbonate, to afford sulfides 2a and 2b. Oxidation of the sulfides using at least 2 equivalents of meta-chloroperoxybenzoic acid (m-CPBA) or by other oxidation conditions provides the sufones 3aand 3b. Metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents affords intermediates 5a and 5b. Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFAin the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IB. When the organoboronate, organotin, organozinc, or organocopper reagent contains an acid labile protecting group (like tert-butoxycarbonyl) concurrent removal of this protecting group occurs in the final acidic removal of the PMB groups. This can be done in one step, or in stepwise fashion by treatment with TFA at room temperature to remove a group such as tert-butoxycarbonyl, then heating with TFA and anisole or thioanisole to remove the PMB group. To access sulfide compounds IA, intermediates 2a and 2b may be subjected to metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents to give intermediates 4a and 4b. Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IA. Again, when the organoboronate, organotin, organozinc, or organocopper reagent contains an acid labile protecting group (like tert-butoxycarbonyl) concurrent removal of this protecting group occurs in the final acidic removal of the PMB groups. This can be done in one step, or in stepwise fashion by treatment with TFA at room temperature to remove a group such as tert-butoxycarbonyl, then heating with TFA and anisole or thioanisole to remove the PMB group. To access sulfoxide compounds IC, sulfides 4a and 4b may be treated with 1 equivalent of an oxidizing agent such as meta-chloroperoxybenzoic acid to give sulfoxides 6a and 6b. As previously described, final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds IC. The PMB protected tetrazole positional isomers1a and 1b may be separated by chromatography and each individual isomer may be used in place of the isomer mixture with similar results.
Scheme II:
Figure PCTCN2015082514-appb-000005
An alternative method for making compounds IA, IB, and IC is depicted in Scheme II. According to the Scheme, intermediates 1a and 1b are selectively coupled at the iodo position with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents using, for example, Palladium catalysis, to give intermediates 7a and 7b. These may then be reacted with alkyl, aryl or heteroaryl thiols, for example underpalladium catalysis conditions, to give sulfides4a and 4b. The sulfides may be oxidized, for example by using meta-chloroperoxybenzoic acid, to give sulfones 5a and 5b. As described in Scheme I, sulfides 4a and 4b may be carried on to make compounds IA and IC, and sulfones 5a and 5b may be progressed to compounds IB.
Scheme III:
Figure PCTCN2015082514-appb-000006
According to Scheme III, analogs IB may also be prepared from boronic acid or boronic ester precursors. Intermediates 3a and 3b may be converted to the corresponding boronic acids and boronic esters in a number of ways, for example, by coupling with 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) or other similar reagents using palladium catalysis.This affords the boronic esters 8a and 8b or their corresponding boronic acids (not shown) . The boronic esters or boronic acids may be coupled with halide or triflate reagents to provide intermediates 5a and 5b, which can be deprotected as previously described in Scheme I to afford analogs IB.
Scheme IV:
Figure PCTCN2015082514-appb-000007
Sulfonamide compounds of the current invention, ID, may be prepared according to general Scheme IV. According to the Scheme, bromide intermediates 1a and 1b may be selectively reacted at the bromo position with 2 (trimethylsilyl) enthanethiol in the presence of a base (such as cesium carbonate) to afford sulfides 9a and 9b. Oxidation, for example by using meta-chloroperoxybenzoic acid gives sulfones 10a and 10b. Treatment with tetrabutylammonium fluoride (TBAF) gives the coreesponding sulfinic acids 11a and 11b. The sulfinic acids may be converted to the corresponding sulfonyl chlorides in a variety of ways, for example by treatment with N-chlorosuccinimide. Treatment of the resulting sulfonyl chlorides 12a and 12b with an amine in the presence of a base such as triethyl amine affords the sulfonamides 13a and 13b. Alternatively, sulfinic acids 11a and 11b may be directly converted in one pot to the sulfonamides 13a and 13b by reaction with N-chlorosuccinimide in the presence of the amine reactant. Metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents affords intermediates 14a and 14b. As described in Scheme I, final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence  of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds ID.
Scheme V:
Figure PCTCN2015082514-appb-000008
Alternatively, sulfonamide compounds ID may be prepared according to Scheme V. According to the Scheme, iodo intermediates 10a and 10b are subjected to metal mediated coupling, for example using palladium catalysts, with alkyl, aryl, heteroaryl or vinyl boronic acids, boronic esters, organostannanes, organocopper or organo zinc reagents to give intermediates 15a and 15b. When R’ contains active NH groups, these may be protected as tert-butoxycarbamates using Boc anhydride and a base such as 4-dimethylaminopyridine, affording 16a and 16b. Conversion of the trimethylsilylethane sulfones to the corresponding sulfonyl chlorides can be accomplished in two steps (as described in Scheme IV) to give 18a and 18b. Coupling of the sulfonyl chlorides with amines can then be accomplished in the presence of a base (such as trimethylamine) , giving 19a and 19b. Final PMB protective group removal under acidic conditions such as by using TFA in the optional presence of a carbocation scavenger, such as anisole or triethylsilane, provides target compounds ID. Again, when intermediates 19a and 19b contain an acid labile protecting group (like tert-butoxycarbonyl) , concurrent removal of this protecting group occurs in the final acidic removal of the PMB groups. This can be done in one step, or in stepwise fashion by treatment with TFA at room temperature to remove a group such  as tert-butoxycarbonyl, then heating with TFA and anisole or thioanisole to remove the PMB group.
Scheme VI:
Figure PCTCN2015082514-appb-000009
Intermediates 1a and 1b can be prepared according to Scheme VI. According to the Scheme, commercially available aryl fluoride 20 can be converted to the carboxylic acid 21 by treatment with LDA, followed by dry ice. The carboxylic acid functionality can be transformed to the corresponding nitrile 22 in numerous ways known in the art. One approach involves conversion to the acid chloride, for example using oxalyl chloride, followed by treatment with ammonium hydroxide to afford the carboxamide, and finally, dehydration, for example using trichloro-1, 3, 5-triazine, to give the nitrile 22. Nucleophilic aromatic substitution of the fluoride using benzyl mercaptan and a base such as sodium hydride provides the sulfide 23. The nitrile present in 23 can be converted to the tetrazole 24 using one of several methods, for example by treatment with trimethylsilyl azide and dibutyltin oxide. Conversion of the benzyl sulfide to the sulfonyl chloride can be accomplished in several ways, for example, by treatment with NCS in acetic acid. Treatment with ammonium hydroxide then affords the sulfonamide 25. Concommittant protection of the tetrazole and sulfonamide to afford positional isomer mixture 1a and 1b can be achieved by treatment with excess of para-methoxybenzyl chloride in the presence of a base, such as potassium carbonate, and NaI and tetrabutyl ammonium chloride as catalysts. Typically 1a and 1b are used as a mixture of regioisomers, but the isomers can optionally be separated and used individually in the same way. In the examples below, it should  be understood that the mixture of regioisomers or the individual regioisomers may be used interchangeably (occasionally only one isomer is shown for the sake of simplicity) .
REFERENCE EXAMPLE 1
6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000010
Step A: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid
Into a 2000-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of (i-Pr) 2NH (40.4 g, 400.00 mmol, 1.20 equiv) in tetrahydrofuran (400 mL) . This was followed by the addition of n-butyl lithium (146 mL, 1.10 equiv) dropwise with stirring at -20℃ over 30 min. To this was added a solution of 1-bromo-2-fluoro-4-iodobenzene (100 g, 332.34 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (600 mL) dropwise with stirring at -78℃. The resulting solution was stirred for 90 min at -78℃. The reaction mixture was then poured into 1.5 L of dry ice. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The residue was diluted with 2000 mL of aq. sodium hydroxide (4M) , then washed with 2x800 mL of ether. The aq. solution was adjusted to pH 2 with HCl (2M) , then extracted with 3x800 mL of ethyl acetate. The organic layers were combined, washed with 3x500 mL of water, dried and concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step B: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl chloride
Into a 3000-mL round-bottom flask was placed 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid (235 g, 681.35 mmol, 1.00 equiv) and thionyl chloride (1175 mL) . The resulting solution was stirred for 2 hr at 80℃ in an oil bath. The resulting mixture was cooled and concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step C: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask was placed a solution of NH4OH (840 g) in tetrahydrofuran (2000 mL) . This was followed by the addition of a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl chloride (223 g, 614 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2460 mL) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 60 min at room  temperature. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The solids were collected by filtration to afford the title compound.
Step D: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask was placed a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide (223 g, 648 mmol, 1.00 equiv) in N, N-dimethylformamide (4460 mL) , trichloro-1, 3, 5-triazine (840 g, 4.56 mol, 7.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction mixture was poured into 10 L of aq. sodium bicarbonate. The solids were collected by filtration to afford the title compound.
Step E: 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of sodium hydride (14.8 g, 617 mmol, 1.20 equiv) in 1, 4-dioxane (1000 mL) . This was followed by the addition of a solution of phenylmethanethiol (38.1 g, 306.76 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (100 mL) dropwise with stirring at 0℃ over 20 min. To this was added a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile (100 g, 306.84 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (400 mL) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 60 min at room temperature and for an additional 60 min at 60℃. The reaction was then quenched by the addition of 750 mL of HCl (1M) . The resulting solution was diluted with 3 L of water, then extracted with 3x1 L of ethyl acetate. The organic layers were combined, dried and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column and eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1: 4) to afford the title compound.
Step F: 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask was placed a solution of 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile (54.0 g, 126 mmol, 1.00 equiv) in toluene (750 mL) , TMSN3 (43.4 g, 3.00 equiv) and dibutyltin oxide (6.3 g, 0.20 equiv) . The resulting solution was stirred for 48 hr at 105℃ in an oil bath. The reaction mixture was cooled to r.t. The resulting solution was diluted with 3 L of aq. sodium hydroxide, then extracted with ethyl acetate. The aqueous layer was adjusted to pH 3 with HCl (2M) , then extracted with 2x1 L of ethyl acetate. The organic layers were combined, washed with 2x1 L of water, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to provide the title compound.
Step G: 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole and 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazole
Into a 3000-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] - 1H-1, 2, 3, 4-tetrazole (84.4 g, 178 mmol, 1.00 equiv) in chloroform (700 mL) , a solution of potassium carbonate (49.0 g, 355 mmol, 2.00 equiv) in water (520 mL) , and tetrabutylammonium chloride (10.2 g, 0.20 equiv) . This was followed by the addition of para-methoxybenzyl chloride (42.2 g, 1.50 equiv) dropwise with stirring at 15℃. The resulting solution was stirred for 180 min at 50℃ in an oil bath. The reaction mixture was cooled to r.t. The resulting solution was diluted with 200 mL of water, then extracted with 2x200 mL of dichloromethane. The organic layers were combined, dried over sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column and eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1: 2) . This resulted in the title compound as a mixture of two isomers.
Step H: 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed mixture of 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole and 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazole (50.0 g, 84.3 mmol, 1.00 equiv, 60％) , dichloromethane (750 mL) , AcOH (12.7 g, 211 mmol, 2.50 equivalents) , and water (3.8 g, 2.5 equiv) . This was followed by the addition of SO2Cl2 (28.3 g, 2.50 equivalents) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 60 min at room temperature. The resulting mixture was concentrated under vacuum to afford the title compound isomer mixture.
Step I: 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride and 6-bromo-3-iodo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (isomer mixture, 50.0 g, 52.7 mmol, 1.00 equiv, 60％) in tetrahydrofuran (300 mL) and a solution of NH4OH (200 mL) in tetrahydrofuran (200 mL) .The resulting solution was stirred for 60 min at room temperature. The resulting solution was extracted with 3x150 mL of ethyl acetate. The organic layers were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified with Flash-Prep-HPLC under the following conditions: Column, C18 silica gel； mobile phase, H2O: MeCN ＝ 25 increasing to H2O: MeCN ＝ 55 within 30 min； Detector, UV 210 nm, to afford the  title compound. H-NMR (DMSO-d6, 300MHz, ppm) : δ 3.727-3.748 (3H, d) , 5.001-5.068 (0.78H, m) , 5.428-5.477 (0.75H, m) , 5.941 (0.5H, m) , 6.823-6.958 (2H, m) , 7.148-7.363 (2H, m) , 7.732-7.864 (1.6H, m) , 7.993-8.117 (3H, m) .
REFERENCE EXAMPLE 2
6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000011
Step A: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed bis (propan-2-yl) amine (121.2 g, 1.20 mol, 1.20 equiv) ,tetrahydrofuran (1000 mL) . This was followed by the addition of butyllithium (440 mL, 1.10equiv, 2.5 N) dropwise with stirring at -78℃ in 20 min. 60 min later, to this was added a solution of 1-bromo-2-fluoro-4-iodobenzene (300 g, 997 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2000 mL) dropwise with stirring at -78℃ in 30 min. The resulting solution was stirred for 2 hr at -78℃ in a liquid nitrogen bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by pouring into 5000 g of dry ice. After stirring for 2 hours, the resulting mixture was concentrated under vacuum. The residue was dissolved in 3000 mL of 4N sodium hydroxide. The resulting solution was extracted with 2x 1000 mL of ether and the aqueous layers combined. The pH value of the solution was adjusted to 2-3 with hydrogen chloride (1 mmol/L) . The resulting solution was extracted with 4x 1000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified by re-crystallization from Hexane.
Step B: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl
Into a 5000-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid (273 g, 791.52 mmol, 1.00 equiv) , tetrahydrofuran (2730 mL) , N, N-dimethylformamide (27.3 mL) . This was followed by the addition of (COCl) 2 (110.9 g, 1.10 equiv) dropwise with stirring at 20℃ in 20 min. The  resulting solution was stirred for 1 hr at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum.
Step C: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed NH4OH (1200 g) . This was followed by the addition of a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl chloride (280 g, 771 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2800 mL) dropwise with stirring at 0℃ in 30 min. The resulting solution was stirred for 1 hr at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The solids were collected by filtration, washed with H2O to afford the title compound.
Step D: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide (270 g, 785.07 mmol, 1.00 equiv) , N, N-dimethylformamide (5400 mL) . This was followed by the addition of trichloro-1, 3, 5-triazine (1014 g, 5.50 mol, 7.00 equiv) , in portions at 0℃. The resulting solution was stirred for 2 hr at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 15000 mL of sodium bicarbonate aq. The solids were collected by filtration to afford the title compound.
Step E: 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed sodium hydride (34 g, 852 mmol, 1.20 equiv, 60％) , 1, 4-dioxane (700 mL) . This was followed by the addition of a solution of phenylmethanethiol (88.7 g, 714.15 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (950 mL) dropwise with stirring at 10℃ in 15 min. 30 min later, to this was added a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile (230 g, 705.73 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (1800 mL) dropwise with stirring at 10℃. The resulting solution was stirred for 2 hr at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by pouring into 5000 mL of water/ice. The resulting solution was extracted with 5x1000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 2x1000 mL of water and 2x1000 mL of sodium bicarbonate and 2x1000 mL of sodium chloride. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified by re-crystallization from ether to afford the title compound.
Step F: 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask, was placed 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile (66 g, 153.45 mmol, 1.00 equiv) , toluene (660 mL) , azidotrimethylsilane (44.2 g, 383.65 mmol, 2.50 equiv) , dibutylstannanone (7.7 g, 30.93 mmol, 0.20 equiv) . The resulting solution was stirred for 48 hr at 105℃ in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column with tetrahydrofuran: PE (100: 1) to afford the title compound.
Step G: 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
Into a 2000-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole (115.6 g, 244.33 mmol, 1.00 equiv) , acetic acid (1156 mL) , water (115.6 mL) , NCS (81.74 g, 612.15 mmol, 2.50 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at room temperature in an ice/salt bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step H: 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed NH4OH (1180 mL) , tetrahydrofuran (290 mL) . This was followed by the addition of a solution of 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (118 g, 262.54 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (300 mL) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 2 hr at 0-25℃ in an ice/salt bath (slowly warming to RT) . The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The resulting solution was diluted with 500 mL of ether. After stirring for 30 min, the solids were collected by filtration to afford the title compound.
Step I: 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1- sulfonamide (105 g, 244.17 mmol, 1.00 equiv) , chloroform (1050 mL) , potassium carbonate (168.9 g, 1.22 mol, 5.00 equiv) , water (525 mL) , NaI (11 g, 0.30 equiv) , tetrabutyl (chloro) amine (20.4 g, 73.40 mmol, 0.30 equiv) , 1- (chloromethyl) -4-methoxybenzene (230 g, 1.47 mol, 6.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at 50℃ in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was extracted with 2x1000 mL of dichloromethane and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compounds.
LC-MS: (ES, m/z) : 790 [M+H] +
H-NMR: (300MHz, CDCl3, ppm) : δ7.956-7.928 (m, 0.5H) , 7.852-7.824 (m, 1H) , 7.656-7.612 (m, 1.5H) , 7.323-7.282 (m, 1.5H) , 7.195-7.224 (m, 2H) , 6.944-6.908 (m, 6H) , 6.822-6.760 (m, 9H) , 5.791 (m, 1H) , 5.570-5.521 (m, 1H) , 5.149-5.100 (m, 1H) , 4.769-4.718 (m, 2H) , 4.232-4.221 (m, 2H) , 3.900-3.848 (m, 2H) , 3.789-3.742 (m, 14H) .
Note that in the experimental procedures below the current REFERENCE EXAMPLE 2 can be used as the mixture of para-methoxylbenzyl tetrazole regioisomers. Alternatively, the two regioisomers may be separated and each can be used as described below in the same fashion. In some REFERENCE EXAMPLES and EXAMPLES below, both regioisomers are explicitly used； however, in other cases, for the sake of simplicity, only one regioisomer is shown. It should be understood that in these cases the mixture of regioisomers was, in fact, typically used.
REFERENCE EXAMPLE3
tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000012
The title compound is commercially available (CAS No. 134464-79-2) from Synnovator, Inc. Alternatively, it may be prepared as follows:
Into a 100 mL round bottom flask di-tert-butyl 4, 4'-disulfanediyldipiperidine-1-carboxylate (5.0 g, 11.57 mmol) was dissolved in AcOH (50 mL) , zinc (3.7 g, 57.85 mmol) . After the resulting mixture was stirred at 60℃ for 16 hr, it was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to give 3.8g, (76％yield) of tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate as white  solid. 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ3.82-3.78 (m, 2H) , 2.95-2.71 (m, 3H) , 2.63 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 1.90-1.87 (m, 2H) , 1.39 (s, 9H) , 1.37-1.32 (m, 2H) .
REFERENCE EXAMPLE4
tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000013
The title compound is commercially available (CAS No. 941585-25-7) from, for example, Synnovator, Inc.. Alternatively, it may be prepared as follows:
Step A: synthesis of tert-butyl 3- (acetylthio) azetidine-1-carboxylate
A solution of tert-butyl 3-iodoazetidine-1-carboxylate (10 g, 35.3 mmol) and potassium ethanethioate (16.14 g, 141 mmol) in DMF (60 ml) was stirred at 70℃ for 16 hr. The resulting mixture was quenched with water (80 mL) , diluted with water (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica-gel chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give8 g (98 ％yield) oftert-butyl 3- (acetylthio) azetidine-1-carboxylate as a red oil, which was used for the next reaction directly. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 4.40-4.35 (m, 2H) , 4.19-4.15 (m, 1H) , 3.84-3.80 (m, 2H) , 2.35 (s, 3H) , 1.45 (s, 9H) .
Step B: synthesis of tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate
Asolution of tert-butyl 3- (acetylthio) azetidine-1-carboxylate (8 g, 34.6 mmol) and NaOH (1.383 g, 34.6 mmol) in Methanol (50 ml) and water (5ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The pH value of the action solution was adjusted to 5 with hydrochloric acid (10％) , diluted with water (80 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 60 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give 5 g (76 ％yield) of tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate as a yellow solid. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 4.22-4.20 (m, 2H) , 3.69-3.64 (m, 3H) , 3.43-3.41 (m, 1H) , 1.37 (s, 9H) .
REFERENCE EXAMPLE 5
tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) piperidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000014
Step A: tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) piperidine-1-carboxylate
Sodium hydride (0.15 g, 3.80 mmol) was added to a stirredmixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.2 g, 1.5 mmol) and tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate (0.726 g, 3.34 mmol) in DMF (20 mL) at 0℃. After the resulting mixture was stirred at room temperature for 2 hr, it was quenched with saturated NH4Cl aqueous, and diluted with ethyl acetate (20 mL) . The mixture was separated, and the aqueous layer was extracted with ethyl acetate (3 x 40 mL) . The combined extracts were washed with brine, dried over anhydrous MgSO4, filtered and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (2 : 1) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C41H47IN6O7S2 [M + H] +: 927, found 927； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ7.94 (d, J ＝ 8.7Hz, 1H) , 7.30 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.22 (d, J ＝ 8.7 Hz, 2H) , 6.94-6.90 (m, 4H) , 6.81-6.72 (m, 6H) , 5.50 (d, J ＝ 14.4 Hz, 1H) , 5.13 (d, J ＝ 14.4 Hz, 1H) , 4.73 (d, J ＝ 15.6Hz, 2H) , 4.09-4.00 (m, 1H) , 3.89 (d, J ＝ 15.6 Hz, 2H) , 3.90-3.81 (m, 1H) , 3.78 (s, 9H) , 3.50-3.39 (m, 1H) , 3.11-2.89 (m, 2H) , 2.12-2.01 (m, 1H) , 1.85-1.56 (m, 3H) .
Step B: tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) piperidine-1-carboxylate
Into a 100 mL round bottom flask containing tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate (1.0 g, 1.079 mmol) dissolved in Dichloromethane (10 ml) , was added3-chlorobenzoperoxoic acid (0.745 g, 4.32 mmol) . The reaction mixture was stirred at rt overnight, and then partitioned between ethyl acetate (20 mL) and 10％aq. sodium thiosulfate (30 mL) . The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate  (50 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1 : 1) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C41H47IN6O9S2 [M + H] +: 959, found 959.
REFERENCE EXAMPLE 6
tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000015
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate
Sodium hydride (1.32 g, 32.9 mmol) ) was added to a stirred, cooled 0℃ mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (10g, 12.65 mmol) and tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate (5.27 g, 27.8 mmol) ) in DMF (42mL) and the mixture was stirred at room temperature for 2 hr. The mixture was quenched with NH4Cl solution, and diluted with EtOAc. The mixture was separated, and the aqueous layer was extracted with EtOAc. The combined extracts were washed with brine, dried over MgSO4, filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified with silica gel column chromatography using 0-100％EtOAc/hexanes as eluent to afford the title product. LC/MS [M+1] +: 900.03.
Step B: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4- methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate (10g, 11.13 mmol) in DCM (56 mL) was added m-CPBA (11.2 g, 50.1 mmol) . The reaction mixture was stirred at rt overnight, and then partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles were removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0 to 100％EtOAc in hexanes as eluent to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 931.99.
REFERENCE EXAMPLE 7
(3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000016
A mixture of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (2.0 g, 2.15 mmol) , 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (1.46 mg, 6.45 mmol) , PPh3 precatalyst generation 2 (184 mg, 0.322 mmol) and KOAc (633 mg, 6.45 mmol) in dioxane (8.6mL) was degassed with N2. The resulting mixture was heated at 80℃ for 6 hr. LCMS indicated complete coversion to boronic acid with a minor amount of des-I side product. After cooling to rt the mixture was filtered through celite, and rinsed with EtOAc. The filtrate was concentrated and the residue was purified by C18 reverse phase column chromatography (reverse phase ISCO 50 g HP C18 column) eluting with 0-100％MeCN/water (no acid additive) to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 850.01.
REFERENCE EXAMPLE8
(3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid and (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000017
tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate, tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate (980 mg, 1.090 mmol) , Ph3PPdG2 (94 mg, 0.164 mmol) , 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (739 mg, 3.27 mmol) , and potassium acetate (321 mg, 3.27 mmol) were placed in a reaction vial. Dioxane (5452 μl) was added. The reaction mixture was degassed for 20 min before it was heated at 80℃ for 48 hr. LC-MS showed the reaction did not go to completion. Another 50 mgs of catalyst was added, and the reaction was heated at 80℃ for 12 hr. The product was purified with reverse phase ESCO C18 column (86 g) , eluted with 0-100％CH3CN/water. The correct fractions were combined, concentrated and lypholized to give (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid and (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid. LC/MS [M+H] +: 817.7.
REFERENCE EXAMPLE 9
tert-butyl N- (2-sulfanylethyl) carbamate
Figure PCTCN2015082514-appb-000018
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 2-aminoethane-1-thiol (50 g, 648.10 mmol, 1.00 equiv) , dichloromethane (1000 mL) , di-tert-butyl dicarbonate (116 g, 531.51 mmol, 1.20 equiv) , and  TEA (134 g, 1.32 mol, 3.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 100 mL of water. The resulting mixture was washed with 2x500 mL of 0.5N hydrogen chloride and 2x500 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 8) to give the title compound.
REFERENCE EXAMPLE 10
tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Figure PCTCN2015082514-appb-000019
Step A: 2-fluoro-4-iodoaniline
Into a 20000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 2-fluoroaniline (1256 g, 11.30 mol, 1.00 equiv) , and CCl4 (12560 mL) . This was followed by the addition of NIS (3992.8 g, 17.75 mol, 2.00 equiv) , in portions. The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 5000 mL of water. The resulting mixture was washed with 3x2000 mL of H2O. The resulting mixture was washed with 3x2000 mL of brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 2) to afford the title compound.
Step B: 1-bromo-2-fluoro-4-iodobenzene
Into a 20000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 2-fluoro-4-iodoaniline (1000 g, 4.22 mol, 1.00 equiv) , water (1000 mL) , and HBr (5000 mL) . This was followed by the addition of a solution of NaNO3  (582 g, 2.00 equiv) in water (1900 mL) dropwise with stirring at 0℃. To this was added CuBr (901 g) at 0℃. The resulting solution was stirred for 4 hr at 0℃ in an ice/salt bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting solution was extracted with 4x2000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 3x2000 mL of water and 3x2000 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 7) to afford the title compound.
Step C: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid
Into a 20000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed LDA (2000 mL, 1.10 equiv) , and tetrahydrofuran (5000 mL) . This was followed by the addition of a solution of 1-bromo-2-fluoro-4-iodobenzene (1090 g, 3.62 mol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (5000 mL) dropwise with stirring. The resulting solution was stirred for 2 hr at -78℃ in a liquid nitrogen bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 20000 g of dry ice. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The resulting solution was diluted with 10000 mL of 4N sodium hydroxide. The resulting solution was extracted with 3x3000 mL of ether and the aqueous layers combined. The pH value of the solution was adjusted to 2-3 with hydrogen chloride (1 mol/L) . The resulting solution was extracted with 5x3000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 2x3000 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was re-crystallized from Hexane: EA in the ratio of 100: 1 to afford the title compound.
Step D: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl chloride
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoic acid (600 g, 1.74 mol, 1.00 equiv) , tetrahydrofuran (3000 mL) , and N, N-dimethylformamide (60 mL) . This was followed by the addition of (COCl) 2 (243.6 g, 1.10 equiv) dropwise with stirring at room temperature. The resulting solution was stirred for 1 hr at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step E: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide
Into a 20000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed tetrahydrofuran (3000 mL) , and NH4OH (3100 mL) . This was followed by the addition of a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzoyl chloride (620 g, 1.71 mol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2000 mL) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 1 hr at room temperature in an ice/salt bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The solids were collected by filtration, washed by water to give the title compound.
Step F: 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile
Into a 20000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzamide (1000 g, 2.91 mol, 1.00 equiv) , and N, N-dimethylformamide (8000 mL) . This was followed by the addition of trichloro-1, 3, 5-triazine (1070 g, 5.80 mol, 2.00 equiv) dropwise with stirring at 50℃. The resulting solution was stirred for 30 min at 60℃. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 40000 mL of Ice sodium bicarbonate. The solids were collected by filtration to provide the title compound.
Step G: 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 1, 4-dioxane (2000 mL) , and sodium hydride (62 g, 1.20 equiv) . This was followed by the addition of phenylmethanethiol (162 g, 1.30 mol, 1.01 equiv) dropwise with stirring. To this was added a solution of 3-bromo-2-fluoro-6-iodobenzonitrile (420 g, 1.29 mol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (4300 mL) dropwise with stirring at 10℃ in 1 hr. The resulting solution was stirred for 1 hr at 20℃ in a water/ice bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction was then quenched by the addition of 6000 mL of water/ice. The resulting solution was extracted with 5x1500 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 3x1000 mL of sodium bicarbonate aq and 3x1000 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified by re-crystallization from ether to afford the title compound.
Step H: 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodobenzonitrile (150 g, 348.76 mmol, 1.00 equiv) , toluene (1500 mL) , azidotrimethylsilane (100.5 g, 872.33 mmol, 2.50  equiv) , and dibutylstannanone (17.4 g, 69.90 mmol, 0.20 equiv) . The resulting solution was stirred for 48 hr at 107℃ in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to 40℃. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The crude product was re-crystallized from ether: EA in the ratio of 1: 1 to provide the title compound.
Step I: 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 5- [2- (benzylsulfanyl) -3-bromo-6-iodophenyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazole (100 g, 211.36 mmol, 1.00 equiv) , acetic acid (1000 mL) , and water (100 mL) . This was followed by the addition of NCS (70.7 g, 529.47 mmol, 2.50 equiv) , in portions. The resulting solution was stirred for 2 hr at room temperature in a water/ice bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The resulting solution was diluted with 2000 mL of EA. The resulting mixture was washed with 2x1000 mL of water and 2x1000 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step J: 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed NH4OH (850 mL) , tetrahydrofuran (100 mL) . This was followed by the addition of a solution of 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (85 g, 189.12 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (325 mL) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The resulting solution was diluted with 500 mL of H2O. The resulting solution was extracted with 3x500 mL of ethyl acetate and the aqueous layers combined. The pH value of the solution was adjusted to 1-2 with hydrogen chloride (6 mol/L) . The solids were collected by filtration to give a part of product. The filtrate was extracted with 2x500 mL of ethyl acetate and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to give the title compound.
Step K: 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 6-bromo-3-iodo-2- (1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonamide (400 g, 930.19 mmol, 1.00 equiv) , chloroform (4000 mL) , water (2000 mL) , potassium carbonate (643.3 g, 4.65 mol, 5.00 equiv) , NaI (42 g, 0.30 equiv) , tetrabutylazanium chloride (77.84 g, 280.08 mmol, 0.30 equiv) , and PMBCl (873.3 g, 6.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at 50℃ in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was extracted with 1500 mL of dichloromethane and the organic layers combined and dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 1) to afford the title compound.
Step L: tert-butyl N- [2- [ (2- [bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] sulfamoyl] -4-iodo-3- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] phenyl) sulfanyl] ethyl] carbamate
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide (175 g, 221.39 mmol, 1.00 equiv) , N, N-dimethylformamide (2100 mL) , tert-butyl N- (2-sulfanylethyl) carbamate (43 g, 242.58 mmol, 1.10 equiv) , and Cs2CO3 (215 g, 3.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting solution was diluted with 3000 mL of ether. The resulting mixture was washed with 2 x1500 mL of brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum to afford the title compound.
Step M: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed tert-butyl N- [2- [ (2- [bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] sulfamoyl] -4-iodo-3- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] phenyl) sulfanyl] ethyl] carbamate (103 g, 116.15 mmol, 1.00 equiv) , dichloromethane (1545 mL) , and m-CPBA (125.3 g, 726.08 mmol, 5.00 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The reaction progress was monitored by LCMS. The resulting solution was diluted with 5000 mL of ether. The resulting mixture was washed with 2x2000 mL  of 0.5N sodium hydroxide and 2x1500 mL of Brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 2) to give the title compound.
REFERENCE EXAMPLE 11
tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Figure PCTCN2015082514-appb-000020
Into a 100-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (10 g, 10.88 mmol, 1.00 equiv) , dixoane (30 mL) , 2- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinane (12.4 g, 54.90 mmol, 5.00 equiv) , CH3COOK (5.4 g, 55.02 mmol, 5.00 equiv) , and 9-chloro-9- (triphenyl-^5-phosphanyl) -8-aza-9-palladatricyclo [8.4.0.0^2, 7] tetradeca-1 (14) , 2, 4, 6, 10, 12-hexaene (320 mg, 0.56 mmol, 0.05 equiv) . The resulting solution was stirred overnight at 80℃ in an oil bath. The reaction progress was monitored by LCMS. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was diluted with 50 mL of EA. The solids were filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compounds. LC-MS: (ES, m/z) : 837 [M+H] +H-NMR (300MHz, CDCl3, ppm) : δ 7.121 (m, 1H) , 6.930-6.902 (m, 2H) , 6.756-6.694 (m, 4H) , 4.349 (m, 1H) , 3.952-3.900 (m, 2H) , 3.767-3.706 (m, 5H) , 3.652-3.602 (m, 14H) , 3.293-3.283 (m, 2H) , 1.401 (s, 9H) , 1.269-1.259 (m, 4H) .
REFERENCE EXAMPLE 12
2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride
Figure PCTCN2015082514-appb-000021
Step A : Synthesis of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (2- (trimethylsilyl) ethylthio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide
6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [1- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -1H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide, 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- [2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl] benzene-1-sulfonamide (500 mg, 0.633 mmol) , 2- (trimethylsilyl) ethanethiol (170 mg, 1.265 mmol) and Cs2CO3 (618 mg, 1.898 mmol) were combined in DMF (1.5 mL) . Then the mixture was stirred at r.t. for 5 hr. Then the mixture was poured onto ether (100 mL) with the organic layer collected and concentrated under vacuum to give the title compounds: LCMS (ESI) calc’ d for C36H42IN5O5S2Si [M + H] +: 844, found 844； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ4.71-4.40 (m, 1H) , 4.13-4.00 (m, 1H) , 3.83-3.67 (m, 1H) , 2.81-2.72 (m, 1H) , 2.32-2.21 (m, 2H) , 2.08-1.74 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B : 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (2- (trimethylsilyl) ethylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide (480 mg, 0.569 mmol) and m-CPBA (491 mg, 2.84 mmol) were combined in Dichloromethane (2 mL) . Then the mixture was stirred at r.t. for 4hr. The resulting mixture was poured onto ether (200 mL) . Then the mixture was washed with brine (150 mL) . Then the organic layers were collected, dried over anhydrous Na2SO4and concentrated under vacuum. The residue was then applied on a silica gel column with  EA/PE (1/3) to give the title compounds: LCMS (ESI) calc’ d for C36H42IN5O7S2Si [M + H] +: 876, found 876； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.62 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 8.26 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.90-7.88 (m, 1H) , 7.69-7.68 (m, 0.5H) , 7.56-7.53 (m, 0.5H) , 7.27-7.20 (m, 2H) , 6.91-6.79 (m, 12H) , 5.44-5.39 (m, 1H) , 5.20-5.15 (m, 1H) , 4.58-4.53 (m, 2H) , 3.98-3.79 (m, 2H) , 3.75-3.66 (m, 9H) , 2.50-2.48 (m, 2H) , 1.19-1.03 (m, 1H) , 0.83-0.82 (m, 1H) , 0.01 (s, 9H) .
Step C: 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid
A solution of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (1 g, 1.142 mmol) in Tetrahydrofuran (10 mL) was stirred with tetrabutylammonium fluoride (1.194 g, 4.57 mmol) at room temperature under N2 for 0.5 hr. LCMS showed the desired mass of 776. The mixture was diluted with ethyl acetate, washed with saturated KHSO4 aqueous, dried over MgSO4, and concentrated under vacuum to get the crude product as a yellow solid. The crude material was used directly for the next step: LCMS (ESI) calc’ d for C31H30IN5O7S2 [M + H] +: 776, found 776； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ4.87-4.60 (bs, 1H) , 4.36-4.21 (bs, 1H) , 3.96-3.90 (m, 1H) , 2.87-2.83 (m, 1H) , 2.46-2.29 (m, 2H) , 2.27 (d, J ＝ 1.2 Hz, 3H) , 1.95-1.91 (m, 1H) , 1.43 (s, 9H) .
Step D: 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride
2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (800 mg, 1.031 mmol) in Tetrahydrofuran (10 mL) was cooled to 0℃. 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (275 mg, 2.063 mmol) in Tetrahydrofuran (2 mL) was added over 5 min. The mixture was stirred at the same temperature for 30 min, and monitored by LCMS (asmall amount SM is still shown) , then diluted with ethyl acetate, washed with saturated NaHCO3 and brine, dried over MgSO4, and concentrated to get the crude product: LCMS (ESI) calc’ d for C31H29ClIN5O7S2 [M + H] +: 810, found 810.
REFERENCE EXAMPLE 13
tert-Butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (chlorosulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate 
Figure PCTCN2015082514-appb-000022
Step A: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide
A suspension of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (10 g, 12.65 mmol) , cesium carbonate (8.24 g, 25.3 mmol) and 2- (trimethylsilyl) ethanethiol (6.08 ml, 38.0 mmol) in DMF (100 ml) was stirred at rt overnight. The mixture was diluted with ether, washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) , and concentrated to give crude 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide which was used directly in the next step. LCMS [M+1] : 844.63.
Step B: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
The crude 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzenesulfonamide (10.5 g, 12.5 mmol) was dissolved in DCM (100 ml) , and cooled to 0℃. m-CPBA (10.92 g, 63.3 mmol) was added in portions. The mixture was stirred overnight. Precipitate was filtered off through a celite pad, and the filtrate was diluted with DCM (100 ml) , then washed with 1N NaOH and brine. The organic layer was dried and concentrated. The residue was purified by ISCO (120 g, 0-50％EtOAc in hexane, the 50％hexane) . LCMS [M+1] : 876.49.
Step C: tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate
To a mixture of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (7 g, 7.79 mmol) , di-tert-butyl dicarbonate (5.95 g, 27.3 mmol) and TEA (3.80 ml, 27.3 mmol) in DCM (80 ml) was added DMAP (0.952 g, 7.79 mmol) . The mixture was stirred at rt for 1 hr, diluted with ether, washed with KHSO4, saturated aqueous and brine. The organic layer was  dried over MgSO4 and concentrated. The crude material was purified by ISCO (120 g, 0-30％then 30％EtOAc in hexane) . LCMS [M+1] : 1098.56.
Step D: 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid
A solution of tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate (6.9 g, 6.28 mmol) in THF (100 mL) was stirred with tetrabutylammonium fluoride (25.1 mL, 25.1 mmol) at rt under N2 for 0.5 hr. The mixture was diluted with AcOEt, washed with KHSO4, saturated aqueous, then dried over MgSO4, and concentrated. The crude material was purified by ISCO (0-50％then 50％EtOH-EtOAc (1: 3) in hexane. LCMS [M+1] : 998.51.
Step E: tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (chlorosulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate
A mixture of sodium acetate (0.789 g, 9.62 mmol) , acetic acid (0.551 ml, 9.62 mmol) and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (3.2 g, 3.21 mmol) in THF (75 ml) was cooled to 0℃. NCS solid (0.856 g, 6.41 mmol) was added. The mixture was stirred at the same temperature for 30 min, diluted with Et2O, washed with KHSO4 and brine, then dried over MgSO4, and concentrated. The crude material was purified by ISCO 0-30％EtOAc then 30％EtOAc in hexane) . LCMS [M+1] : 1032.67. The isolated material also contained a small amount of mono-Boc compound. LCMS [M+1] : 932.57.
REFERENCE EXAMPLE 14
tert-butyl (R) -3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate and tert-butyl (R) -3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000023
To a solution of a mixture of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (0.46 g, 0.48 mmol) in tetrahydrofuran (10 mL) was added (R) -tert-butyl 3-aminopyrrolidine-1-carboxylate (90 mg, 0.48 mmol) at ambient temperature. The reaction was kept at 25℃ for 30 min. The mixture was concentrated under vacuum. The residue was diluted with EA (3 x 20 mL) , and washed with brine (3 x 20 mL) , dried over and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with ethyl acetate/petroleum ether (1 : 50 to 1 : 1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC40H46IN7O9S2: [M + 1] + 960 found 960； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.29-7.25 (m, 2H) , 6.83-6.69 (m, 10H) , 5.95 (brs, 1H) , 5.55-5.50 (m, 0.5H) , 5.24-5.19 (m, 0.5H) , 4.58-4.53 (m, 1H) , 4.05-3.81 (m, 5H) , 3.85 (s, 9H) , 3.48-3.35 (m, 4H) , 2.02-1.82 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) .
REFERENCE EXAMPLE 15
tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000024
Step A: tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -4-hydroxypiperidine-1-carboxylate
A solution of 1, 4-dibromobenzene (35.5 g, 150 mmol) in THF (250 mL) at -78℃ was treated with n-BuLi (2.5 M, 60 mL, 150 mmol) and stirred for 1hr, followed by N-Boc-4-piperidone (10.0 g, 50 mmol) in THF (20 mL) . After 1 hr the cooling bath was removed and the reaction mixture was stirred for 16 hr at 20℃. The mixture was diluted with saturated aqueous NH4Cl, extracted with ethyl acetate, and the combined organic layers were washed with 0.1N HCl, brine, dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated to get the crude product, which was purified by silica gel (PE: EA＝10: 1) to obtain the title compound. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ:7.48 (d, J1 ＝ 6.9 Hz, J2 ＝ 1.8 Hz, 2H) , 7.34 (d, J1 ＝ 6.9 Hz, J2 ＝ 1.8 Hz, 2H) , 4.02 (brs, 2H) , 3.21 (brt, J ＝ 12.3 Hz, 2H) , 1.91 (m, 2H) , 1.61 -1.71 (m, 3H) , 1.47 (s, 9H) .
Step B: 4- (4-bromophenyl) -1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine
The mixture of tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -4-hydroxypiperidine-1-carboxylate (2.0 g, 14 mmol) in acetic acid (1 mL) and concentrated HCl (10 mL) was heated at 100℃ for 16 hr. The reaction mixture was cooled down and washed with EA. The aqueous layer was basified by saturated NaHCO3 solution and the solid K2CO3 to pH 8. Then the mixture was extracted with EA, dried and concentrated to obtain the title compound. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.44 (d, J ＝ 8.7 Hz, 2H) , 7.24 (d, J ＝ 9.0 Hz, 2H) , 6.12 (s, 1H) , 4.70 (brs, 1H) , 3.51 (d, J ＝ 3.0 Hz, 2H) , 3.10 (t, J ＝ 5.7 Hz, 2H) , 2.42 (t, J ＝ 1.5 Hz, 2H) .
Step C: tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate
To an ice-cooled mixture of 4- (4-bromophenyl) -1, 2, 3, 6-tetrahydropyridine (1.3 g, 5.46 mmol) in 1, 4-dioxane (4 mL) and 1N NaOH (6 mL) was added a solution of Boc2O (1.2 g, 5.46 mmol) in 1, 4-dioxane (4 mL) and the mixture was stirred for 2hr at room temperature and concentrated to remove the dioxane, then extracted with EA. The combined organic layer was washed with 0.1 N HCl, water and brine, dried over anhydrous Na2SO4, and concentrated to obtain the title compound. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.43 (d, J ＝ 8.7 Hz, 2H) , 7.23 (d, J ＝8.4 Hz, 2H) , 6.04 (brs, 1H) , 4.06 -4.10 (m, 2H) , 3.62 (m, 2H) , 2.49 (m, 2H) , 1.48 (s, 9H) .
Step D: tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate
To the solution of tert-butyl 4- (4-bromophenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate (1.4 g, 4.1 mmol) in DMSO (30 mL) was added bis (pinacolato) -diboron (1.6 g, 6.2 mmol) , Pd (PPh3) 2Cl2 (0.35 g) and KOAc (1.2 g, 12.3 mmol) . The reaction mixture was heated at 100℃ for 16 hr under N2. The reaction mixture was cooled down and filtered, diluted with water (400 mL) , and extracted with DCM (200 mL × 3) . The combined organic phases were washed with water and brine, then dried and concentrated. The crude product was purified by silica gel to obtain the title compound. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.78 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.37 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.10 (s, 1H) , 4.08 (s, 2H) , 3.63 (m, 2H) , 2.54 (m, 2H) , 1.50 (s, 9H) , 1.36 (s, 12H) .
Step E: tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate
To the solution of tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) -5, 6-dihydropyridine-1 (2H) -carboxylate (6.0 g, 15.6 mmol) in methanol (150 mL) was added Pd/C (10 ％, 0.6 g) . The reaction mixture was stirred at room temperature under hydrogen gas for 16 hr. The Pd/C was filtered off and the filtrate was concentrated to obtain the title  compound. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 7.75 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.21 (d, J ＝ 6.9 Hz, 2H) ,4.25 (s, 2H) , 2.61-2.82 (m, 3H) , 1.60-1.83 (m, 4H) , 1.47 (s, 9H) , 1.33 (s, 12H) .
REFERENCE EXAMPLE 16
2-amino-4-oxo-3, 4-dihydroquinazolin-8-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000025
Step A: 8-bromo-1H-benzo [d] [1, 3] oxazine-2, 4-dione
Pyridine (2.20 g, 27.8 mmol) was added dropwise to a stirred solution of 2-amino-3-bromobenzoic acid (2.0g, 9.3 mmol) and bis (trichloromethyl) carbonate (3.30 g, 11.1 mmol) in acetonitrile (30 ml) /CH2Cl2 (10.0 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 2 hr at 55℃. The reaction mixture was quenched with water (30 mL) , then extracted with DCM (2x 30 mL) . The combined organic layers were washed withbrine (30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude title compound. The residue was used without further purification in the next step.
Step B: 2-amino-8-bromoquinazolin-4 (3H) -one
Cyanamide (0.35 g, 8.3 mmol) was added to a stirred mixture of 8-bromo-1H-benzo [d] [1, 3] oxazine-2, 4-dione (1.0g, 4.13 mmol) and potassium hydroxide (0.70 g, 12.4mmol) in DMF (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred for 3 hr at 100℃, and monitored by LCMS to obtain the desired product. Upon completion of the reaction, the mixture was cooled to temperature, HCl (1N, 13 ml) was added and the reactionconcentrated. The residue was purified by silica gel chromatography, and eluted with methanol/dichloromethane (1/20) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC8H6BrN3O3 [M + 1] +: 240/242, found 240/242. 1H NMR (400 MHz, DMSO, δ6 ) δ7.96 (dd, J＝8.0 Hz, 2H) , 7.85 (brs, 1H) , 7.60 (brs, 2H) , 7.14 (dd, J＝7.6 Hz, 1H) .
Step C: (2-amino-4-oxo-3, 4-dihydroquinazolin-8-yl) boronic acid
Potassium acetate (0.37g, 3.8 mmol) was added to a stirred mixture of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (0.34 g, 1.5mmol) , 2-amino-8-bromoquinazolin-4 (3H) -one (0.30g, 1.3 mmol) and chloro (triphenylphospine) [2- (2'-amino-1, 1'-bipenyl) ] palladium (II) (143 mg, 0.3mmol) in dioxane (15.0 ml) at room temperature under Ar condition. The reaction  mixture was stirred for 3 hr at 80℃, and concentrated. The product was purified by flash-MPLC with the following conditions: Column, C18, 120g； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C8H8BN3O3 [M + 1] +: 206, found 206
REFERENCE EXAMPLE 17
2-amino-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000026
Step A: N- ( (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) carbamothioyl) benzamide
To a solution of benzoyl isothiocyanate (3.85 g, 23.59 mmol) in acetone (50 mL) was added 2-bromo-5- (trifluoromethyl) aniline (5.66 g, 23.59 mmol) at 70℃ dropwise. Then the mixture was stirred at 70℃ for 0.5hr. The reaction mixture was poured onto ice/water (100 mL) . The resulting mixture was stirred for 10 min, andthe mixture was filtrated, then the filtrate cake was washed by water (10 mL) and dried under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C15H10BrF3N2OS [M + H] +: 403, 405 (1: 1) , found 403, 405 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.34 (s, 1H) , 8.06-7.99 (m, 2H) , 7.80-7.52 (m, 5H) .
Step B: 1- (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) thiourea
N- ( (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) carbamothioyl) benzamide (5.0 g, 12.4 mmol) was added to 1 N aqueous sodium hydroxide (50 ml, 12.5 mmol) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 1hr. The reaction mixture was poured onto ice/hydrochloric acid (6M, 30 mL) and stirred for 10 mins. The pH was adjusted to 10 with conc. ammoniumhydroxide solution, then the resulting precipitate was filtered and washed with water (10 mL) and dried. The crude solid was purified by column chromatography, eluting with a gradient (20％-50％) of ethyl acetate/petroleum ether, to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C8H6BrF3N2S [M + H] +: 299, 301 (1: 1) , found 299, 301 (1: 1) ； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ9.43 (s, 1H) , 8.21-8.01 (brs, 1H) , 8.08 (s, 1H) , 7.89 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.78-7.55 (brs, 1H) , 7.57 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) .
Step C: 4-bromo-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-2-amine 
Bromine (0.138 ml, 2.67 mmol) in acetic acid (1.000 ml) was added to a solution of 1- (2-bromo-5- (trifluoromethyl) phenyl) thiourea (200 mg, 0.669 mmol) in acetic acid (5 ml) . The reaction mixture was stirred at 110℃ overnight under nitrogen. The reaction mixture was cooled, then aqueous sodium sulfite (10％, 30 mL) was added and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The combined organic fractions were washed with brine (30 mL) , dried (Na2SO4) , filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (0-40％) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C8H4BrF3N2S [M + H] +: 297, 299 (1: 1) , found 297, 299 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.22 (brs, 2H) , 7.67 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) .
Step D: (2-amino-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
4-Bromo-7- (trifluoromethyl) benzo [d] thiazol-2-amine (700 mg, 2.356 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (2.99g, 11.78 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (519 mg, 0.707 mmol) and potassium acetate (694 mg, 7.07 mmol) were added to 1, 4-dioxane (12 ml) . The mixture was degassed 3 times with N2, and stirred at 80℃ for 16hr. The reaction mixture was filtrated； the filtrate was collected and concentrated under vacuum. Then the residue was applied on Flash with C18 silica gel column (MeOH/water 0-10％) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C8H6BF3N2O2S [M + H] +: 263, found 263； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 7.74 (d, J＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.43 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 18
2-amino-4-methylbenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000027
Step A: N- (4-bromo-2-methylphenylcarbamothioyl) benzamide
5-bromo-2-methylbenzenamine (10 g, 54 mmol) was added into the solution of benzoic cyanic thioanhydride (8.8 g, 54 mmol) in Acetone (100 ml) at ambient temperature and stirred at 80℃ for 1 hr. The raction solution was cooled and filtered. The filtrate was washed with EA and dried to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C15H13BrN2OS [M + H] +: 349, found 349, 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 12.30 (s, 1H) , 9.15 (s, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 2.0  Hz, 1H) , 7.90 (d, J ＝ 5.2 Hz, 2H) , 7.68-7.65 (m, 1H) , 7.58-7.54 (m, 2H) , 7.36 (dd, J ＝ 1.2 Hz, 1H) , 7.36 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 2.34 (s, 3H) .
Step B: N- (7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-yl) benzamidene
Br2 (4.20 ml, 82 mmol) in Chloroform (50 ml) was added in drops to a stirred solution of 1- (2-bromo-5-methylphenyl) thiourea (10 g, 29 mmol) in Chloroform (200 ml) in anice bath and then stirred at 80℃ for 4 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand washed with EA (100 ml) . The mixture was filtered and the filter cake was dried to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d forC15H11BrN2OS [M + H] +: 347, found 347, 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ8.10-8.02 (m, 2H) , 7.67-7.55 (m, 3H) , 7.42-7.34 (m, 1H) , 7.18-12 (m, 1H) , 2.69-2.63 (m, 3H) .
Step C: 7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-amine
A solution of N- (7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-yl) benzamide (5.1 g, 14 mmol) and NaOH (5.6 g, 140 mmol) in water (100 ml) and MeOH (100 ml) was stirred at rt for 1 hr. The reaction mixture was diluted with water (80 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 80 mL) . The combined organic layers were washed with water (1 x 30 mL) and brine (1 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d forC8H7BrN2S [M + H] +: 243, found 243, 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 7.83 (s, 2H) , 7.09 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.77 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 2.36 (s, 3H) .
Step D: 2-amino-4-methylbenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid
A solution of 7-bromo-4-methylbenzo [d] thiazol-2-amine (2.9 g, 14 mmol) , 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (2.79 g, 12.3 mmol) , 2nd PCy3 (0.972 g, 1.645 mmol) and potassium acetate (2.422 g, 24.7 mmol) in 1, 4-Dioxane (40 ml) was stirred at 80℃for 16 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the solid was dissolved with EA (3000 ml) . The solution was washed with water (15 ％NaOH) and the aqueous phase was adjusted to pH 3 with 2 M hydrochloric acid. The mixture was extracted with EA (3 x 1000 ml) and the organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C8H9BN2O2S [M + H] +: 209, found 209, 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 6.89 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 6.55 (d, J ＝7.2 Hz, 1H) , 1.73 (s, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 19
2-amino-7-methylbenzo [d] thiazol-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000028
Step A: N- ( (2-bromo-5-methylphenyl) carbamothioyl) benzamide
2-bromo-5-methylbenzenamine (10 g, 54 mmol) was added into the solution of benzoic cyanic thioanhydride (8.8 g, 54 mmol) in Acetone (100 ml) at ambient temperature and stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction solution was cooled and filtered. The filtrated was washed with EA and dried to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC15H13BrN2OS: [M + 1] + 349 found 349； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 12.54 (s, 1H) , 9.16 (s, 1H) , 8.06 (s, 1H) , 7.90 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.73-7.65 (m, 1H) , 7.60-7.54 (m, 3H) , 7.20 (dd, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 2.42 (s, 3H) .
Step B: 1- (2-bromo-5-methylphenyl) thiourea
A solution of N- ( (2-bromo-5-methylphenyl) carbamothioyl) benzamide (5 g, 14 mmol) and NaOH (5.6 g, 140 mmol) in water (100 ml) and MeOH (100 ml) was stirred at 80℃for 3 hr. The reaction mixture was diluted with water (80 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 80 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d forC8H9BrN2S: [M + 1] + 245 found 245； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 9.20 (s, 1H) , 7.94 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.50 (d, J ＝ 8.0 Hz, 2H) , 7.53 (s, 1H) , 6.99 (dd, J ＝ 1.2 Hz, 1H) , 2.26 (s, 3H) .
Step C: 4-bromo-7-methylbenzo [d] thiazol-2-amine
Br2 (4.20 ml, 82 mmol) in Chloroform (50 mL) was added in drops to a stirred solution of 1- (2-bromo-5-methylphenyl) thiourea (3.1 g, 13 mmol) in Chloroform (200 mL) in anice bath and then stirred at 80℃ for 4 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum and washed with EA (3 x 30 ml) . The mixture was filtered and the filter cake was dried to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC8H7BrN2S: [M + 1] + 243 found243； 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZ) : δ 7.81 (s, 2H) , 7.34 (d, J ＝ 10.8 Hz, 1H) , 6.77 (d, J ＝ 10.8 Hz, 1H) , 2.30 (s, 3H) .
Step D: (2-amino-7-methylbenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
A solution of 4-bromo-7-methylbenzo [d] thiazol-2-amine (2.0 g, 8.3 mmol) , 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (2.79 g, 12.3 mmol) , 2nd PCy3 (0.972 g, 1.645 mmol) and potassium acetate (2.422 g, 24.7 mmol) in 1, 4-Dioxane (40 ml) was stirred at 80℃ for 16 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the solid was dissolved with EA (300 ml) . The solution was washed with water (15 ％NaOH) and the aqueous phase was adjust to pH ＝ 3 with 2 M hydrochloric acid, and then extracted with EA (3 x 100 ml) . The organic layers were dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d forC8H9BN2O2S: [M + 1] + 209 found209； 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZ) : δ 7.84 (s, 2H) , 7.33 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.78 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 2.31 (s, 3H) .
REFERENCE EXAMPLE20
2-aminobenzo [d] oxazol-7-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000029
Step A: 7-bromobenzo [d] oxazol-2-amine
A mixture of 2-amino-6-bromophenol (5 g, 26.6 mmol) and cyanogen bromide (1.67 ml, 31.9 mmol) in Dichloromethane (25 ml) and MeOH (50 ml) was stirred at rt for 4 hr. The resulting mixture was quenched with aqueous sodium hydrogen carbonate (200 mL) , then diluted with water (200 mL) . The precipitated yellow solid was collected and dried under vacuumto give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C7H5BrN2O [M + H] +: 213, found 213； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ7.69 (s, 2H) , 7.19-7.10 (m, 2H) , 7.07-7.03 (m, 1H) .
Step B: 2-aminobenzo [d] oxazol-7-ylboronic acid
A mixture of 7-bromobenzo [d] oxazol-2-amine (1.00 g, 4.69 mmol) , 2nd Generation PCy3 precatalyst (0.554 g, 0.939 mmol) , bis (pinacolato) diboron (2.38 g, 9.39 mmol) and potassium acetate (0.921 g, 9.39 mmol) in 1, 4-Dioxane (4 mL) was stirred at 80℃ for 4 hr under nitrogen. The reaction mixture was concentrated under reduced pressureand then the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C18, 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B％: 10％-20％) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC7H7BN2O3: [M + 1] + 179, found : 179； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 8.32-8.29 (brs, 2H) , 7.38-7.33 (m, 1H) , 7.28-7.27 (m, 1H) , 7.18-7.12 (m, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE21
2-aminobenzo [d] oxazol-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000030
Step A: 4-bromobenzo [d] oxazol-2-amine
A mixture of 2-amino-3-bromophenol (5 g, 26.6 mmol) and cyanic bromide (1.673 ml, 31.9 mmol) in Dichloromethane (25 ml) and MeOH (50 ml) was stirred at ambient temperature for 4 hr. The resulting mixture was quenched with aqueous sodium hydrogen carbonate (500 mL) , diluted with water (20 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d forC7H5BrN2O: [M + 1] + 213, found : 213； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 7.70 (s, 2H) , 7.35 (s, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.30 (s, J ＝8.4 Hz, 1H) , 6.93-6.89 (m, 1H) .
Step B: 2-aminobenzo [d] oxazol-4-ylboronic acid
A solution of 4-bromobenzo [d] oxazol-2-amine (1.00 g, 4.69 mmol) , Pd (dppf) Cl2. CH2Cl2 (0.686 g, 0.939 mmol) , bis (nneopentylglycolato) diboron (1.060 g, 4.69 mmol) and potassium acetate (0.921 g, 9.39 mmol) in 1, 4-Dioxane (30 ml) was stirred at 80℃for 24 hr under nitrogen. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C18, 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B％: 10％-20％) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC7H7BN2O3: [M + 1] + 179, found : 179.
REFERENCE EXAMPLE22
6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000031
Step A: 2-nitro-4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline
Into a 500-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (25.70 g, 101.00 mmol) , 4-bromo-2-nitroaniline (20.00 g, 92.00 mmol) and potassium acetate (27.10 g, 276.00 mmol) in DMF (250 mL) . This was followed by the addition of PdOAc2 (0.62 g, 2.76 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 85℃ for 20 hrunder argon. The reaction mixture was allowed to cool to 20℃, quenched with water (200 mL) and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EA in PE (50％) to afford the crude product. The crude was recrystallized from PE/EA (200 mL/10 mL) , the solid was collected by filtration and dried over in vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C12H17BN2O4 [M + H] +: 265, found 265； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.26 (s, 1H) , 7.70 (s, 2H) , 7.55 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 1.27 (s, 12H) .
Step B: 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine
Into a 250-mL round-bottom flask, was placed a solution of 2-nitro-4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline (7.40 g, 25.20 mmol) in MeOH (50 mL) and DCM (50 mL) . This was followed by the addition of Pd/C (134 g, 126 mmol, wet 10％) at ambient temperature. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred under hydrogen for 16 hrat ambient temperature. The mixture was filtered. The filter cake was washed with DCM (3 x 10 mL) . The combined organic layers were concentrated under reduced pressure and purified by silica gel column chromatography, eluted with EA in PE (30％) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C12H19BN2O2 [M + H] +: 235, found 235； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ 7.23 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.17 (s, 1H) , 6.70 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 3.19 (br, 4H) , 1.32 (s, 12H) .
Step C: 6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine (2.00 g, 7.69 mmol) in MeOH (10 mL) . This was followed by the addition of cyanogen bromide (0.83 g, 7.69 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 0℃ for 2 hrunder argon. The reaction was quenched with aqueous saturated sodium bicarbonate (30 mL) and extracted with EA (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with brine (70 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced  pressureand the residue was recrystallized from DCM (100 mL) . The solid was collected by filtration and dried under reduced pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C13H18BN3O2 [M + H] +: 260, found 260； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 10.70 (br, 1H) , 7.40 (s, 1H) , 7.23 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.06 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.24 (s, 2H) , 1.23 (s, 12H) .
REFERENCE EXAMPLE23
7-amino-1, 8-naphthyridin-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000032
Step A: N- (6-aminopyridin-2-yl) acetamide
In a 100 mL three-necked round bottom flask, acetic anhydride (2.1 ml, 27.5 mmol) in 20 mL THF was added dropwise to a stirred mixture of pyridine-2, 6-diamine (3.00 g, 27.5 mmol) and triethylamine (2.78 g, 27.5 mmol) in THF (40 ml) at 0℃. After the reaction mixture was stirred at room temperature overnight, it was diluted with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 10mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (10/1) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C7H9N3O [M+1 ] +: 152 found: 152； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ7.38-7.32 (m, 1H) , 718 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 6.24 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 2.08 (s, 3H) .
Step B: N- (6- ( ( (2, 2-dimethyl-4, 6-dioxo-1, 3-dioxan-5-ylidene) methyl) amino) pyridin-2-yl) acetamide
In a 25 mL round bottom flask, 5- (methoxymethylene) -2, 2-dimethyl-1, 3-dioxane-4, 6-dione (6.06 g, 32.5 mmol) was added to a stirred mixture of N- (6-aminopyridin-2-yl) acetamide (4.10 g, 27.1 mmol) in EtOH (5 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at 80℃ for 3 hr, it was cooled down to room temperature and then concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C14H15N3O5 [M+1 ] +: 306, found: 306； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ11.18 (s, 1H) , 9.27 (d, J ＝4.2 Hz, 1H) , 8.06 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.90 (s, 1H) , 7.77-7.72 (m, 1H) , 6.73 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 2.26 (s, 3H) , 1.76 (s, 6H) .
Step C: N- (5-hydroxy-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide
In a 250 mL three-necked round bottom flask, N- (6- ( ( (2, 2-dimethyl-4, 6-dioxo-1, 3-dioxan-5-ylidene) methyl) amino) pyridin-2-yl) acetamide (6.00 g, 19.65 mmol) was added slowly to a bottle of oxydibenzene (60 ml, 19.65 mmol) at 250℃. The reaction mixture was stirred at 250℃ for 15 min. After the resulting mixture was cooled to room temperature, ethoxyethane (100 mL) was added and some solid precipitated out. The solids were collected to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C10H9N3O2 [M+1 ] +: 204, found: 204； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ11.60 (s, 1H) , 10.69 (s, 1H) , 8.37 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 8.05 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.80 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.02 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 2.16 (s, 3H) .
Step D: N- (5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide
In a 25 mLround bottom flask, phosphoryl tribromide (5.08 g, 17.7 mmol) was added to a stirred mixture of N- (5-hydroxy-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide (1.80 g, 8.86 mmol) in 1, 4-dioxane (150ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 70℃ for 2hr. The reaction was quenched with ice/water (20 mL) , pH was adjusted to 8 with sodium carbonate and then extracted with ethyl acetate (3 x20 mL) . The combined organic layers were dried over sodium sulfate. The solid was filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C10H8BrN3O [M+1 ] +: 266, 268, found: 266, 268； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ11.26 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 8.81 (s, 1H) , 8.57-8.49 (m, 2H) , 7.88 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 2.27 (s, 3H) .
Step E: 5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-amine
In a 25 mL round bottom flask, N- (5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-yl) acetamide (0.30 g, 1.127 mmol) was added to a stirred mixture of 10％sulfuric acid (2 ml, 1.127 mmol) at 80℃. After the resulting mixture was stirred at 80℃ for 15 min, sodium carbonate was added to pH ＝ 8 and then extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The organic layers were combined, dried over anhydrous sodium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C8H6BrN3 [M+1 ] +: 224, 226, found: 224, 226； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.50 (d, J ＝ 4.2 Hz, 1H) , 8.08 (d, J ＝6.6 Hz, 1H) , 7.48 (d, J ＝ 3.6 Hz, 1H) , 7.11 (s, 2H) , 6.93 (d, J ＝ 3.9 Hz, 1H) .
Step F: 7-amino-1, 8-naphthyridin-4-ylboronic acid
In a 50 mL three-necked round bottom flask, potassium acetate (26.30 mg, 0.268 mmol) was added to a stirred mixture of dichlorobis (tricyclohexylphosphine) palladium (9.88 mg, 0.013 mmol) , 5-bromo-1, 8-naphthyridin-2-amine (30.0 mg, 0.134 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (0.10 g, 0.402 mmol) in dioxane (2 mL) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The solid was filtered out. The filtrate was concentratedand the residue was purified by Prep-HPLC with the  following conditions: Column, Xbridge C18, 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (hold 34％acetonitrile for 8 min, hold 100％for 2 min, down to 34％in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C8H8BN3O2 [M+1 ] +: 190, found: 190； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.88 (s1H) , 8.74 (d, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 7.88 (t, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 7.48 (d, J ＝ 3.6 Hz, 1H) , 7.24-7.21 (m, 1H) , 6.88-6.81 (m, 1H) , 5.51 (brs, 2H) .
REFERENCE EXAMPLE24
(2-aminoquinolin-8-yl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000033
A solution of 8-bromoquinolin-2-amine (500 mg, 2.241 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (328 mg, 0.448 mmol) , bis (pinacolato) diboron (1138 mg, 4.48 mmol) and potassium acetate (440 mg, 4.48 mmol) in 1, 4-Dioxane (20 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The reaction mixture was filtered and the filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The crude was purified by column C18 eluting withCAN/0.05％TFA (15/85) . The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C9H9BN2O2 [M + H] +: 189, found 189； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.32 (d, J ＝ 9.6 Hz, 1H) , 8.20-8.10 (m, 1H) , 7.94 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.64 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.13 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) ,
REFERENCE EXAMPLE 25
8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) isoquinolin-3-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000034
Step A: methyl 2, 2-diethoxyacetimidate
Into a 100-mL round bottom flask was placed a solution of 2, 2-diethoxyacetonitrile (5.00 g, 38.83 mmol) and sodium methylate (30％in methanol, 1 mL) in methanol (30 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was degassed with nitrogen for  3 times and stirred at room temperature for 42 hr. The reaction was quenched with solid CO2and evaporated under vacuum. The residue was diluted with water (100 mL) and extracted with dichloromethane (3 x100 mL) . The combined organics were washed with brine (200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The solvent was evaporated under vacuum to yieldthe title compound: 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ7.89 (s, 1H) , 4.80 (s, 1H) , 3.81 (s, 3H) , 3.60-3.52 (m, 4H) , 1.29-1.22 (m, 6H) .
Step B: N- (2-bromobenzyl) -2, 2-diethoxyacetimidamide
To a stirred solution of (2-bromophenyl) methanamine (3.44g, 18.6 mmol) in methanol (40 mL) was added the solution of methyl 2, 2-diethoxyacetimidate (3.6 g, 22.4 mmol) under argon atmosphere atambient temperature, and the reaction was stirred for 3 hr. The mixture was evaporated under vacuum. The residue was diluted with dichloromethane (300 mL) and washed with brine (3 x200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The solvent was evaporated under vacuum to yieldthe title compound: 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : 7.56-7.53 (m, 1H) , 7.31-7.30 (m, 1H) , 7.27-7.26 (m, 1H) , 7.15-7.11 (m, 1H) , 4.93 (s, 2H) , 4.53 (s, 2H) , 3.67-3.52 (m, 4H) , 1.25-1.18 (m, 6H) .
Step C: 8-bromoisoquinolin-3-amine
To theN- (2-bromobenzyl) -2, 2-diethoxyacetimidamide (4.0g, 12.7 mmol) was added conc. H2SO4 (58 g, 0.57mmol) under argon atmosphere at 0℃ for 30 minand the reaction was stirred for 3 hr at80℃. The mixture was poured into ice waterand treated with 12 N NaOH at 0℃ until pH ＝ 12. The mixture was filtered and the filter cake was washed with water, and then dried. The crude productwas purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/2) . This resulted in the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C9H7BrN2 [M + H] +: 223, 225 (1: 1) , found 223, 225 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ9.17 (s, 1H) , 7.51-7.49 (m, 2H) , 7.34-7.22 (m, 1H) , 6.73 (s, 1H) .
Step D: 8- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) isoquinolin-3-amine
Into a 50-mL round bottom flask was placed a mixture of 8-bromoisoquinolin-3-amine (950 mg, 4.26 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (3.24 g, 12.78 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (312 mg, 0.426 mmol) , potassium acetate (1254 mg, 12.78 mmol) in 1, 4-dioxane (38 ml) at ambient temperature. The resulting mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃ for 5hr. The mixture was filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel Isolute Flash Si； 50 g prepacked, eluting with EA/PE (0-30％) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C15H19BN2O2 [M + H] +: 271, found 271； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) :  δ9.73 (s, 1H) , 7.88-7.86 (m, 1H) , 7.66-7.64 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.56-7.53 (m, 1H) , 6.83 (s, 1H) , 4.09-5.01 (brs, 2H) , 1.42-1.40 (m, 12H) .
REFERENCE EXAMPLE 26
5- (4, 4, 5, 5-Tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1, 7-naphthyridin-8-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000035
In a sealed tube, a mixture of chloro [di (1-adamantyl) -N-butylphosphine) 2- (2-aminobiphenyl) ] palladium (II) (0.060g, 0.09 mmol) , 4, 4, 4’ , 4’ , 5, 5, 5’ , 5’ -octamethyl-2, 2’ -bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (0.453 g, 1.79 mmol) , 5-bromo-1, 7-naphthyridin-8-amine (0.200 g, 0.89 mmol) and potassium acetate (0.263 g, 2.68 mmol) in DMA (4mL) was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through for a period of 10min. The tube was capped and the reaction mixture was heated to 85℃ overnight. After cooling, the mixture was filtered through celite and the filtrate partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, washed with brine, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by a 40g C-18 column eluting with a mixture of acetonitrile and water, giving the title compound. LC/MS [M+H] +: 272.31.
REFERENCE EXAMPLE 27
3-Fluoro-6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine and (2, 3-diamino-4-fluorophenyl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000036
Step A: 3-chloro-6-fluoro-2-nitroaniline
To a solution of 3-Chloro-2-nitroaniline (1g, 5.79 mmol) in Acetonitrile (20 mL) , was added accufluor (1-fluoro-4-hydroxy-1, 4-diazabicyclo [2.2.2] octane-1, 4-diium tetrafluoroborate； 3.73g, 11.59mmol) . The mixture was heated to 85℃ overnight under N2. After cooling, the solvent was removed under reduced pressure and the resulting residue was  purified by silica gel column chromatography using a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired product. [LC/MS [M+H] +: 191.28] 
Step B: 3-chloro-6-fluorobenzene-1, 2-diamine
To a solution of 3-chloro-6-fluoro-2-nitroaniline (350 mg, 1.84 mmol) in EtOAc (20 mL) was added Palladium on carbon (35mg) . The reaction mixture was shaked in a Parr bottle under 40 psi H2overnight. The reaction was stopped and the mixture was filtered through a celite pad. The filtrate was collected and the volatiles removed under reduced pressure. The resulting residue was purifiied by silica gel column chromatography using a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired product. [LC/MS [M+H] +: 161.23] 
Step C: 3-Fluoro-6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine and (2, 3-diamino-4-fluorophenyl) boronic acid
In a sealed tube, a mixture of Chloro [ (tricyclohexylphosphine) -2- (2′-aminobiphenyl) ] palladium (II) (0.032g, 0.06 mmol) , 4, 4, 4’ , 4’ , 5, 5, 5’ , 5’ -octamethyl-2, 2’ -bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (0.139g, 0.55mmol) , 3-chloro-6-fluorobenzene-1, 2-diamine (0.044g, 0.27mmol) and potassium acetate (0.081g, 0.82 mmol) in DMA (4mL) was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through for a period of 10min. The tube was capped and the reaction mixture was heated to 85℃ overnight. After cooling, the mixture was filtered through celite and the filtrate partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, washed with brine, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a gradient of EtOAc in hexanes as eluent togive the desired mixture of the ester [LC/MS [M+H] +: 253.30] and boronic acid LC/MS [M+H] +: 171.30.
REFERENCE EXAMPLE 28 (Method A)
2-aminobenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000037
Step A: benzoyl isothiocyanate
To a solution of ammonium thiocyanate (3.93 g, 51.6 mmol) in acetone (50 ml) was added benzoyl chloride (4 ml, 34.4 mmol) dropwisewith stirring at r.t.. Then the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. Then the reaction progress was monitored by LCMS. The sample  was quenched with methanol. The resulting mixture was used for next step without purification: LCMS (ESI) calc’ d for C9H9N1O2S [M + MeOH+H] +: 196, found 196.
Step B: N- ( (3-bromophenyl) carbamothioyl) benzamide
To the resulting mixture from Step Awas added 3-bromoaniline (3.5 mL, 32.1 mmol) at 70℃ dropwise. Then the mixture was stirred at 70℃ for 1hr. Then the mixture was poured onto ice/water (100 mL) . The mixture was stirred for 10 min. Then it was filtrated with the filtrate cake washed by water (10 mL) and dried under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C14H11BrN2O1S [M + H] +: 335, found 335； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : 12.59 (s, 1H) , 11.64 (s, 1H) , 8.01 (s, 1H) , 7.99-7.97 (d, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 7.67-7.60 (m, 2H) , 7.57-7.51 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 7.41-7.35 (t, J ＝ 7.8, 1H) .
Step C: 1- (3-bromophenyl) thiourea
To a solution of sodium hydroxide (10 g, 250 mmol) in water (100 ml) was added N- ( (3-bromophenyl) carbamothioyl) benzamide (10 g, 29.8 mmol) at 80℃. Then the mixture was stirred at 80℃ for 1hr under an atmosphere of nitrogen. Then the mixture was poured onto ice/hydrogen chloride (6M, 30 mL) and stirred for 10 mins. The pH was adjusted to 10 with conc. ammonia solution with the resulting precipitate filtered and washed with water (10 mL) and dried. The crude solid was purified by column chromatography, eluting with a gradient (20％-50％) of ethyl acetate/petrol ether, to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C7H7BrN2S [M +H] +: 231, 233 (1: 1) , found 231, 233 (1: 1) .
Step D: 7-bromobenzo [d] thiazol-2-amine
To a solution of 1- (3-bromophenyl) thiourea (4g, 17.31 mmol) in acetonitrile (350 ml) was added bromine (0.865 ml, 16.79 mmol) in acetic acid (17.50 ml) dropwise at 0℃. Then the mixture was stirred at r.t. under nitrogen. Then the mixture was stirred at r.t. for 48hr. Then the mixture was filtrated with the filtrate cake washed with ether (10 mL) and collected to give the crude product. The crude product was applied on Prep-HPLC (condition: X Select CSH Prep C18 OBD Column19*150mm 5μM, Phase A : water with 0.05％TFA, Phase B: MeOH； flow rate: 20； injection volume: 200 ul； Gradient: 30-100％of B； run time: 28 min. ) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C7H5BrN2S [M + H] +: 229, 231 (1 : 1) , found 229, 231 (1 : 1) ； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ7.81 (s, 2H) , 7.34-7.31 (dd, J ＝ 1.8 Hz, J ＝ 6.9 Hz, 2H) , 7.22-7.09 (m, 1H) .
Step E: (2-aminobenzo [d] thiazol-7-yl) boronic acid
Into a 100 mL round bottom flask was placed 7-bromobenzo [d] thiazol-2-amine (300 mg, 1.309 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (998 mg, 3.93 mmol) , potassium acetate (386 mg, 3.93 mmol) and Pd (dppf) Cl2 4 (77 mg, 0.131 mmol) in 1, 4- dioxane (12 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 timesand stirred at80 ℃ for 16h. The reaction mixture was filtrated with the filtrate collected and concentrate under vacuum. Then the residue was applied on Flash with C18 silica gel column (MeOH/water: MeOH 0-10％IN 40 min) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C7H7BN2O2S [M + H] +: 195, found 195； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ9.64 (s, 2H) , 8.93 (s, 2H) , 7.80-7.78 (d, J ＝7.5 Hz, 1H) , 7.59-7.56 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.50-7.40 (m, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 28 (Method B)
2-aminobenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000038
A mixture of 4-bromobenzo [d] thiazol-2-amine (commercially available or prepared as described above, 2000 mg, 8.73 mmol) and bispinacolatodiboron (6651 mg, 26.2 mmol) , potassium acetate (2570 mg, 26.2 mmol) and PCy3 Pd G2 (516 mg, 0.873 mmol) in dry dioxane (80 ml) was degassed, and heated at 80℃ for 48 hr. The mixture was concentrated, and the residue was dissolved in hydrochloric acid (2N, 100 mL) . The aqueous was washed with ethyl acetate (60 mL) , and concentrated. The residue was dissolved in methanol (50 ml) . The solid was filtered off and the filtrate was concentrated to give a solid which was directly used. LCMS (M+1) : 195.12.
The REFERENCE EXAMPLES 29-32 in the Table immediately below were prepared in an analagous fashion as described for 2-aminobenzo [d] thiazol-7-ylboronic acid (REFERENCE EXAMPLE 28, Method B) starting from the aryl bromides starting materials (SM) indicated.
Figure PCTCN2015082514-appb-000039
Figure PCTCN2015082514-appb-000040
REFERENCE EXAMPLE 33
Methyl 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzoate
Figure PCTCN2015082514-appb-000041
Amixture of methyl 2-amino-3-bromobenzoate (4.26 g, 18.5 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (14.1 g, 55.6 mmol) , PCy3PdG2 (1.093 g, 1.852 mmol) and potassiumacetate (5.45 g, 55.6 mmol) in dioxane (100 mL) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was filtered through a celite pad, and the filtrate was partitioned betweenhydrochloric acid (100 ml 2N) and EtOAc (100 ml) . The organic was separated, and the aqueous was extracted with EtOAc (2x80) . The combined organic layers were washed with brine, dried (MgSO4) , and concentrated. The residue was purified by ISCO (120 g, EtOH-EtOAc (1: 3) in hexane: 0-30％then 30％, then 70％) . LCMS: 277.98.
REFERENCE EXAMPLE 34
2-Nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline
Figure PCTCN2015082514-appb-000042
2-Nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline was made in the same way as that for methyl 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzoate starting from 3-bromo-2-nitroaniline. LCMS [M+1] : 265.14
REFERENCE EXAMPLE 35
(4, 5-diaminopyridin-3-yl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000043
To a 25 mL RBF was added 5-bromopyridine-3, 4-diamine (0.47 g, 2.5 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (1.905 g, 7.50 mmol) , chloro [ (tricyclohexylphosphine) -2- (2’ -aminobiphenyl) ] Pd (II) (0.295 g, 0.5 mmol) and potassium acetate (0.245 g, 2.5 mmol) in dioxane (25 ml) and the reaction mixture was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was filtered and to the filtrate was added 50 ml 2N HCl, followed by addition of 50 mL of EtOAc. The aqueous was separated and concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 10 ml of methanol. The inorganic salt was filtered off and the filtrate was concentrated. The crude solid was chromatographed over C18 column (80g, Acetonitrile in H2O 0-100％) to give the desired product (4, 5-diaminopyridin-3-yl) boronic acid. LCMS: 154.13.
REFERENCE EXAMPLE 36
(2, 3-diaminopyridin-4-yl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000044
To a 25 mL RBF was added 4-bromopyridine-2, 3-diamine (0.564 g, 3.0 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (2.285 g, 9.0 mmol) , chloro [ (tricyclohexylphosphine) -2- (2’ -aminobiphenyl) ] Pd (II) (0.354 g, 0.6 mmol) and potassium acetate (0.883 g, 9.0 mmol) in dioxane (25 ml) . The reaction mixture was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was filtered and to the filtrate was added 50 ml 2N HCl, followed by addition of 50 mL of EtOAc. The aqueous was separated and concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 10 ml of methanol. The inorganic salt was filtered off and the filtrate was concentrated. The crude solid was chromatographed over C18 column (80g, Acetonitrile in H2O 0-100％) to give the desired product (2, 3-diaminopyridin-4-yl) boronic acid. LCMS: 154.12.
REFERENCE EXAMPLE 37
6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzo [d] oxazol-2-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000045
In the reaction vessel 6-bromobenzo [d] oxazol-2-amine (500 mg, 2.347 mmol) and 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (1192 mg, 4.69 mmol) were combined, followed by 2nd Generation PCy3 precatalyst (277 mg, 0.469 mmol) and potassium acetate (691 mg, 7.04 mmol) . Then dry 1, 4-Dioxane (25 mL) was added to this flask. This mixture was degassed and then heated at 80℃ for 16 hr (monitored by LCMS until all SM was consumed) . LC-MS showed the desired mass. The solid was removed by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in 20 ml ethyl acetate, and extracted with 2N HCl (2x150 ml) . The aqueous was concentrated under reduced pressure. The crude material was applied onto silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 1) to get the product: LCMS (ESI) calc’ d for C13H17BN2O3 [M + H] +: 261, found 261； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ7.70 (s, 1H) , 7.66 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.33 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 5.89 (bs, 2H) , 1.35-1.37 (m, 12H) .
REFERENCE EXAMPLE 38
5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzo [d] oxazol-2-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000046
In the reaction vessel 5-bromobenzo [d] oxazol-2-amine (1g, 4.69 mmol) and 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (1.788 g, 7.04 mmol) were combined, followed by 2nd Generation PCy3 precatalyst (551 mg, 0.939 mmol) and potassium acetate (1.382 g, 14.08 mmol) . Then dry 1, 4-Dioxane (25 mL) was added to this flask. This mixture was degassed and then heated at 80℃ for 16 hr (monitored by LCMS until all SM was consumed) . LC-MS showed the desired mass. The solid was removed by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in 20 ml ethyl acetate, and extracted with 2N HCl (2x150 ml) . The aqueous was concentrated under reduced pressure. The crude material was applied onto silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C13H17BN2O3 [M + H] +: 261,  found 261； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ7.78 (s, 1H) , 7.55 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.28-7.26 (m, 1H) , 5.98 (bs, 2H) , 1.35-1.37 (m, 12H) .
REFERENCE EXAMPLE39 (Method A)
(2-Amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000047
A mixture of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (5.59g, 24.8 mmol) , KOAc (4.86g, 49.5 mmol) , and commercially available 4-bromo-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (3.50 g, 16.5 mmol) in dioxane (82 mL) was degassed with N2 before addition of chloro (triphenylphosphine) [2- (2′-amino-1, 1′-biphenyl) ] palladium (II) (945 mg, 1.65 mmol) . The resulting mixture was heated at 80℃ overnight under N2. After cooling to rt the reaction mixture was filtered through celite, and rinsed with MeOH. The filtrate was concentrated and the residue was purified by reverse phase column chromatography (ISCO 150 g HP C18 column) eluting with 0-100％MeCN/water (no acid additive) to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 178.38.
REFERENCE EXAMPLE 39 (Method B)
2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000048
Step A: 4-bromo-1H-benzo [d] imidazol-2-amine
Cyanic bromide (74.3 g, 702 mmol) was added batchwise to a stirred solution of commercially available 3-bromobenzene-1, 2-diamine (125 g, 668 mmol) in CH2Cl2 (500 ml) and followed by additional of MeOH (1500 ml) at 0℃. The reaction solution was stirred for 5 hr at room temperature, and then concentrated to removeDCM. The residue was poured into 3500 ml of conc. aq. Na2CO3, filtrated and washed with water (500ml) . The organic phase was dried over anhydrous Na2SO4, concentrated under reduced pressure to afford 110 g of 4-bromo-1H- benzo [d] imidazol-2-amine as a light yellow solid. LCMS (ESI) calc’ d for C7H6BrN3 [M + 1] +:  212/214, found 212/214； 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ 10.98 (brs, 1H) , 7.09 (dd, J＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.78-6.75 (m, 1H) , 6.43 (brs, 2H) .
Step B: synthesis of (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid
Potassium acetate (83 g, 849 mmol) was added to a stirred mixture of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (128 g, 566 mmol) , 7-bromo-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (60 g, 283 mmol) and chloro (triphenylphospine) [2- (2'-amino-1, 1'-biphenyl) ] palladium (II) (16.20 g, 28.3 mmol) in dioxane (1500 ml) at room temperature under Ar condition. The resulting mixture was stirred for 13 hr at 80℃, and then concentrated under reduced pressure. To the residue was added EA (3000 ml) and methanol (500 ml) , then the reaction mixture was stirred for 30 min and filtered. The organic layer was extracted with 1N NaOH (4 x 250 ml) , the aqueous layer was adjusted to pH ＝ 1 with 1N HCl. The aqueous layer was concentrated to 300 ml under vacuum andthen there was some solid precipitated out. The solid was collected and dried to give 60gof (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid as an off-white solid. LCMS (ESI) calc’ d for C7H8BN3O [M + 1] +: 178, found 178； 1H NMR (400 MHz, DMSO d6 ) δ12.61 (brs, 1H) , 11.47 (brs, 1H) , 8.24 (brs, 2H) , 7.46 (dd, J＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.22-7.18 (m, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 40
2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000049
Step A: 3-bromo-N-methyl-2-nitrobenzenamine
A solution of 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzene (10 g, 45.6 mmol) in NH2CH3 in THF (2 M, 100 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumto give 3-bromo-N-methyl-2-nitrobenzenamine. LCMS (ESI) calc’ d forC7H7BrN2O2 [M + 1] +: 231, found [M+1] : 231, 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) : 7.21-7.16 (m, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.76 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 2.94 (s, 3H) .
Step B: 3-bromo-N1-methylbenzene-1, 2-diamine
HCl (12 M) was added in drops into a stirred solution of 3-bromo-N-methyl-2-nitrobenzenamine (10.1 g, 44 mmol) and Zn dust (14 g, 0.2 mmol) in methanol (200 ml) at room temperature and stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was filtered and the filtrate was concentrated under vacuum to give 3-bromo-N1-methylbenzene-1, 2-diamine. LCMS (ESI) calc’ d forC7H9BrN2 [M + 1] +: 201, found [M+1] : 201, 1H NMR (DMSO, 400 MHZ) :  6.70 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.47 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.37 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 4.99 (s, 1H) , 4.62 (s, 2H) , 2.70 (s, 3H) .
Step C: 4-bromo-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine
A solution of 3-bromo-N1-methylbenzene-1, 2-diamine (3.2 g, 16 mmol) and BrCN (1.68 g, 16 mmol) in methanol (100 ml) was stirred at ambient temperature for 4 hr. The reaction mixture was poured into asaturated NaHCO3 solution and filtered. The filter cake was dried to give 4-bromo-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine. LCMS (ESI) calc’ d forC8H8BrN3 [M + 1] +: 226, found [M+1] : 226, 1H NMR (DMSO, 400 MHZ) : 7.14-7.11 (m, 2H) , 6.83-6.79 (m, 1H) , 6.71 (s, 1H) , 4.99 (s, 2H) , 3.49 (s, 3H) .
Step D: 2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid
A mixture of 4-bromo-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (3.5 g, 15.5 mmol) , bis (pinacolato) diboron (4.7 g, 18.6 mmol) and potassium acetate (4.5 g, 46.5 mmol) in 1, 4-Dioxane (100 ml) was stirred at 80℃ for 4 hr under nitrogen. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C18, 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B％: 10％-20％) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give 2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid. LCMS (ESI) calc’ d forC8H10BN3O2 [M + 1] +: 192, found [M+1] : 192.
REFERENCE EXAMPLE41
tert-butyl 3- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-4-yl) azetidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000050
Step A : Synthesis of tert-butyl 3- (4-bromophenyl) azetidine-1-carboxylate
To a stirred solution of (4-bromophenyl) boronic acid (2.13 g, 10.60 mmol) in 2-Propanol (20 mL) was added tert-butyl-3-iodoazetidine-1-carboxylate (2.00g, 7.06 mmol) at ambient temperature. To the mixture was added (1S, 2S) -2-aminocyclohexanol (0.08 g, 0.71 mmol) , nickel (II) iodide (0.22 g, 0.71 mmol) and sodium bis (trimethylsilyl) amide (7.06 mL, 1.0 mol/L) under nitrogen. After the resulting mixture was stirred for 30min at ambient temperature,  it was irradiated with microwave radiation at 80℃ for 1 hr. The reaction was quenched with water (25 mL) , extracted with EtOAc (3x150 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x100 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EtOAc/PE (1/10) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C14H18BrNO2 [M + H] +: 312, 314 (1: 1) , found 312, 314 (1: 1) ；
Step B: Synthesis of tert-butyl 3- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) azetidine-1-carboxylate
To a stirred mixture of 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (3.40 g, 13.45 mmol) and potassium acetate (3.30 g, 33.60 mmol) inDMF (35 mL) were added tert-butyl-3- (4-bromophenyl) azetidine-1-carboxylate (3.50 g, 11.20 mmol) and Pd (dppf) Cl2adductCH2Cl2 (0.92 g, 1.12 mmol) at ambient temperature under nitrogen. The resulting mixture was degassed for two times under nitrogen and then stirred at 110℃for 16 hr. The reaction was quenched with water (25 mL) and extracted with EtOAc (2 x150 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x100 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EtOAc/PE (1/10) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C20H30NO4 [M + H] +: 360, found 360；
Step C : Synthesis of tert-butyl 3- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-4-yl) azetidine-1-carboxylate
A degassed solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis - (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.60 g, 3.20 mmol) , tert-butyl 3- (4-(4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) azetidine-1-carboxylate (1.30 g, 3.50 mmol) , Na2CO3 (1.00 g, 9.50 mmol) and Pd (PPh3) 4 (0.37 g, 0.32 mmol) in 1, 4-dioxane (50 mL) and water (5 mL) was stirred at 80℃ for 16 hrunder nitrogen. The resulting mixture was cooleddown to ambient temperature and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EtOAC/PE (1/2) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C45H47N6O7S [M + H] +: 895, 897 (1: 1) , found 895, 897 (1:1) ； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 8.08-8.00 (m, 1H) , 7.43 (d, J＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.07 (d, J＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.02 (d, J＝ 8.8 Hz, 3H) , 6.88-6.80 (m, 9H) , 6.79-6.71 (m, 2H) , 5.19-5.15 (m, 1H) , 4.92-4.88 (m, 1H) , 4.82 (d, J＝ 9.2 Hz, 1H) , 4.34-4.30 (m, 2H) , 4.14-4.10 (m, 1H) , 3.99-3.91 (m, 2H) , 3.89-3.80 (m, 2H) , 3.78 (s, 9H) , 3.70-3.60 (m, 1H) , 1.49 (s, 9H) .
REFERENCE EXAMPLE42A and 42B
tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate and tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate
Figure PCTCN2015082514-appb-000051
A mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (6.0 g, 7.59mmol) , tert-butyl (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) cyclohex-3-en-1-yl) carbamate (2.94 g, 9.11 mmol) , and sodium carbonate (1.609 g, 15.18 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.877 g, 0.759 mmol) was placed in a reaction vial. Dioxane (21 ml) and water (3 ml) were added. The reaction vessel was sealed, degassed and heated at 80℃ overnight. After the reaction cooled to rt, the reaction mixture was extracted with EtOAc, washed with water and brine, then dried (MgSO4) and concentrated. The residue was purified by column chromatograph and eluted with EtOEt/hexane to give a mixtureof regioisomeric products A and B. LC/MS A: 861.68 [M+H] + and B, LCMS: 861.59 [M+H] +
REFERENCE EXAMPLE 43
3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000052
Step A: (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid
In a reaction vessel 4-bromobenzo [d] thiazol-2-amine (10 g, 43.6 mmol) and bispinacolatodiboron (33.3 g, 131 mmol) were combined, followed by addition of potassium acetate (12.85 g, 131 mmol) and PCy3 Pd G2 (2.58 g, 4.36 mmol) . Then dry dioxane (400 ml) was added to this flask. This mixture was degassed and then heated at 80℃ for 72 hr. The solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in EtOAc (400 mL) , and extracted with 2N HCl (2x150 ml) . The aqueous was concentrated under reduced pressure. The crude material was dissolved in 3: 1 CHCl3: i-PrOH, dried over MgSO4. The MgSO4 was filtered off and the filtrate was concentrated. The material was used without further purification. LC/MS [M+H] +: 195
Step B: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Starting with a solution of 6-bromo-3-iodo-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) tetrazolidin-5-yl) benzenesulfonamide (7.3 g, 9.24 mmol) and (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (1.971 g, 10.16 mmol) , the title compounds were prepared in an analogous fashion as described for 6-Bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide. LC/MS [M+H] +: 812, 814.
REFERENCE EXAMPLE 44
tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylateand tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000053
Step A: tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
A thick-wall flask was charged with tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate (4.04 g, 10.44 mmol) , 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (5.5 g, 6.96 mmol) , sodium carbonate (2.21 g, 20.87 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.40 g, 0.348 mmol) . The vial was degassed, sealed, and filled with dioxane (20.87 mL) and water (6.96 mL) . The resulting mixture was heated for 16 hr at 80℃. The reaction mixture was filtered over celite to removepalladium. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0-100％EtOAc/hexanes as mobile phase to give the title compound. LC/MS [M+2] +: 925.75.
Step B: tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate (123 mg, 0.65 mmol) , sodium 2-methylpropan-2-olate (57 mg, 0.60 mmol) and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate (500 mg, 0.54 mmol) in DME (5 mL) in a sealed (thick wall) tube was deoxygenated by bubbling nitrogen for a period of 15 min. The BrettPhos precatalyst generation 3 (49 mg, 0.054 mmol) was added and the nitrogen continued for another 5 min. The tube was sealed and heated at 85℃ overnight. After cooling, the reaction mixture was filtered through a pad of celite and the solid was thoroughly washed with ethyl acetate. The filtrate was washed with 1N aq. HCl, and brine, then dried (MgSO4) and the volatiles was removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0 to 100％EtOAc/hexanes as eluent to give the title product. LC/MS [M+1] +: 1033.34.
REFERENCE EXAMPLE 45
tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000054
The title compound was prepared in a similar fashion to that in REFERENCE EXAMPLE 44 (tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate) , immediately above, using commercially available 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) imidazo [1, 2-a] pyridine.
LC/MS [M+1] +: 890.18
REFERENCE EXAMPLE 46
8-Bromoimidazo [1, 2-a] pyridine
Figure PCTCN2015082514-appb-000055
3-Bromopyridin-2-amine (274 mg, 1.584 mmol) and 2-chloroacetaldehyde (178 mg, 2.268 mmol) were dissolved in EtOH (2 mL) . The mixture was heated at 80℃ for 1.5 hr. The reaction mixture was concentrated and the residue was purified by column chromatography (100％hexane to 65％EtOAc/Hexane, then 0-65％MeOH/EtOAc) to give the desired product. After concentration, the product was dissolved in 1/1 DCM/MeOH, and filtered to remove silica gel. The filtrates were concentrated to yield the pure product. LC/MS [M+H] +: 197.1, 199.1.
REFERENCE EXAMPLE 47
Ethyl 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000056
3-Bromopyridin-2-amine (500 mg, 2.89 mmol) and ethyl 3-bromo-2-oxopropanoate (820 mg, 4.20 mmol) were dissolved in EtOH (3 mL) . The mixture was heated at 80℃ for 12 hr. LC-MS showed the reaction was mostly completed. The reaction was concentrated to a minimal volumn of MeOH/EtOH, then ether was added. Solids that precipitated out were collected to give ethyl 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate. LC/MS [M+H] +: 269.6.
REFERENCE EXAMPLE 48
8-Bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000057
Ethyl 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate (100 mg, 0.372 mmol) was dissolved in 1 mL of 7N NH3 in MeOH. The mixture was heated at 60℃ for 12 hr. LC-MS showed the reaction was completed. The reaction mixure was concentrated to give the crude 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxamide, which was used without futher purification. LC/MS [M+H] +: 240.1, 242.1.
REFERENCE EXAMPLE49
5-Bromoimidazo [1, 2-a] pyridine
Figure PCTCN2015082514-appb-000058
6-Bromopyridin-2-amine (274 mg, 1.584 mmol) and 2-chloroacetaldehyde (178 mg, 2.268 mmol) were dissolved in EtOH (2 mL) . The mixture was heated at 60℃ for 12 hr. LC-MS showed the formation of the desired product, but there was still starting material remaining. Additional 170 mg of the 2-chloroacetaldehyde was added and the reaction was heated at 60℃ for 12 hr. LC-MS showed the reaction was completed. After cooling to room  temperature, the reaction was concentrated. To the resulting residue was added ether, and the solids that precipitated out was collected to give 5-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine. LC/MS [M+H] +: 197.1, 199.1.
REFERENCE EXAMPLE 50
7-bromo-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000059
To a 25 mL microwave tube was added a solution of 3-bromo-5- (trifluoromethyl) benzene-1, 2-diamine (0.510 g, 2.0 mmol) in 6 mL of methanol, followed by addition of cyanic bromide (0.254 g, 2.40 mmol) and 4 mL of water. The mixture was stirred for 16 hr. TLC showed most SM converted. The reaction mixture was heated at 80℃ for 1 hr and no SM was left. The solvent was removed via rotary evaporator and the residue was purified via column chromatography (ISCO RediSep gold column, 40g) using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to get theproduct 7-bromo-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine. LC-MS (M + H) +: 280.10.
REFERENCE EXAMPLE 51
2-amino-7-bromo-1H-benzo [d] imidazole-5-carbonitrile
Figure PCTCN2015082514-appb-000060
To a 25 mL microwave tube was added a solution of 3, 4-diamino-5-bromobenzonitrile (212 mg, 1.0 mmol) in 6 mL of methanol, followed by addition of cyanic bromide (127 mg, 1.20 mmol) and 4 mL of water. The mixture was stirred for 16hr. TLC shown most SM converted. The reaction mixture was heated at 80℃ for 1hr and no SM was left. The solvent was removed via rotavapor and the residue was purified via column chromatography (ISCO RediSep gold column, 40g) using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to get the product. LC-MS (M + H) +: 238.89.
REFERENCE EXAMPLE 52
7-bromo-5-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-2-amine
Figure PCTCN2015082514-appb-000061
To a 25 mL microwave tube was added a solution of 3-bromo-5-fluorobenzene-1, 2-diamine (0.410 g, 2.0 mmol) in 6 mL of methanol, followed by addition of cyanic bromide (0.254 g, 2.40 mmol) and 4 mL of water. The mixture was stirred for 16h. TLC shown most SM converted. The reaction mixture was heated at 80℃ for 1h and no SM left. The solvent was removed via rotavapor and the residue was purified via column chromatography (ISCO RediSep gold column, 40g) using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to give the product 7-bromo-5-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-2-amine. LC-MS [M+H] +: 230.08.
REFERENCE EXAMPLE 53
(2-amino-6-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid.
Figure PCTCN2015082514-appb-000062
To a 200 mL RBF was charged a solution of 3-bromo-5-fluorobenzene-1, 2-diamine (5 g, 24.39 mmol) in ethanol (100ml) , followed by addition of cyanic bromide (5.17 g, 48.8 mmol) . The reaction mixture was heated at 80℃ for overnight. The reaction mixture was cooled to rt, concentrated in vacuo, then was purified by column chromatography (ISCO, 80g, 0-20％MeOH in DCM) to give 4-bromo-6-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (4.2g, 18.26 mmol) . The intermediate was dissolved in 50 mL of anhydrous ethanol, followed by addition of 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (7.86 g, 34.8 mmol) , potassium acetate (3.41 g, 34.8 mmol) , PCy3 Pd G2 (2.054 g, 3.48 mmol) and anhydrous ethanol (50 ml) . This mixture was degassed for 20 min, and then was heated at 80℃ for 18 hr. The reaction mixture was acidified with 1.0 M HCl to ～ pH ＝ 4, then was washed with EtOAc. The crude was chromatographed over C18 column to give the desired product (2-amino-6-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid. LC/MS (M+H) +: 196.07.
REFERENCE EXAMPLES 54A and 54B
Figure PCTCN2015082514-appb-000063
Racemic tert-butyl 3-amino-3- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate was separated into individual enantiomers A and B via SFC (Column: AD-H 50x250 mm, UV detection: 210 nm, Solvent: 25％EtOH (with 0.2 ％DIPA) in CO2, Flow 230 g CO2/min 120 bar) . Absolute stereochemistry was not confirmed for the two pure enantiomers. Both enantiomers were useful for preparing metallo-β-lactamase inhibitors.
REFERENCE EXAMPLES 55A and 55B
Figure PCTCN2015082514-appb-000064
Racemictert-butyl 6-amino-2-azabicyclo [2.2.1] heptane-2-carboxylatewas separated into individual enantiomers A and B via SFC (Column: AD-H 50x250 mm, UV detection: 210 nm, Solvent: 15％EtOH (with 0.2 ％DIPA) in CO2, Flow 230 g CO2/min 120 bar) . Absolute stereochemistry was not confirmed for the two pure enantiomers. Both enantiomers were useful for preparing metallo-β-lactamase inhibitors.
REFERENCE EXAMPLE 56
tert-butyl 3-cyano-3- (5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-yl) azetidine-1-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000065
Step A: tert-butyl 3- (methanesulfonyloxy) azetidine-1-carboxylate
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of tert-butyl 3-hydroxyazetidine-1-carboxylate  (450 g, 2.60 mol, 1.00 equiv) in ethyl acetate (3000 mL) , TEA (315 g, 3.12 mol, 1.20 equiv) . This was followed by the addition of methanesulfonyl chloride (367 g, 1.10 equiv) dropwise with stirring at 0℃. The resulting solution was stirred for 120 min at 0℃. The solid was filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid.
Step B: tert-butyl 3-cyanoazetidine-1-carboxylate
Into a 5000-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of tert-butyl 3- (methanesulfonyloxy) azetidine-1-carboxylate (350 g, 1.39 mol, 1.00 equiv) in DMSO (2500 mL) . This was followed by the addition of NaCN (140 g, 2.86 mol, 2.00 equiv) in several batches. The resulting solution was stirred overnight at 140℃. The reaction mixture was cooled and then quenched by the addition of 3 L of aqueous Fe2SO4. The solid was filtered out. The filtrate was extracted with 3x2000 mL of ethyl acetate. The organic layers were combined, dried and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel columnand eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1: 3) to give the title compound as a solid.
Step C: tert-butyl 3- (5-bromopyridin-2-yl) -3-cyanoazetidine-1-carboxylate
Into a 500-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of LDA (1 M, 18 mL, 1.25 equiv) in tetrahydrofuran (100 mL) . This was followed by the addition of a solution of tert-butyl 3-cyanoazetidine-1-carboxylate (2.7 g, 14.8 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (100 mL) dropwise with stirring at -78℃ over 45 min. The reaction mixture was stirred for 45 min at -78℃, then a solution of 5-bromo-2-fluoropyridine (2.6 g, 14.77 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (100 mL) was added dropwise with stirring at -78℃ over 45 min. The resulting solution was stirred overnight at room temperature. The resulting solution was diluted with 200 mL of water, then extracted with 3x200 mL of ethyl acetate. The organic layers were combined, dried and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (20: 1-5: 1) to give the title compound as a solid.
Step D: tert-butyl 3-cyano-3- [5- (tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-yl] azetidine-1-carboxylate
Into a 5000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen was placed a solution of tert-butyl 3- (5-bromopyridin-2-yl) -3-cyanoazetidine-1-carboxylate (80 g, 236.55 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (2000 mL) , 4, 4, 4, 5, 5’ ctamethyl-2, 2’ i (1, 3, 2-dioxaborolane) (90.8 g, 357.48 mmol, 1.50 equiv) , Pd (dppf) Cl2  (3.5 g, 4.78 mmol, 0.02 equiv) , and potassium acetate (70 g, 714.29 mmol, 3.00 equiv) . After beingstirred overnight at 80℃, the reaction mixture was cooled to room temperature and diluted with 3000 mL of brine. The resulting solution was extracted with 3x1500 mL of ethyl acetate. The organic layers were combined, dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1； 7) to give the title compound as a solid. LC-MS (ES, m/z) : 386 [M+H] +. H-NMR (300MHz, DMSO-d6) : δ1.323 (s, 12H) , 1.413 (s, 9H) , 4.34 (d, 2H， J＝8.7Hz) , 4.44 (d, 2H， J＝8.7Hz) , 7.70 (d, 1H) , 8.13 (d, 1H) , 8.83 (d, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 57
5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -3- (trifluoromethyl) -1H-indazole
Figure PCTCN2015082514-appb-000066
Step A: 1- (5-bromo-2-fluorophenyl) -2, 2, 2-trifluoroethanone
Into a 10000-mL 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed a solution of diisopropylamine (280 g, 2.77 mol, 1.10 equiv) in tetrahydrofuran (4400 mL) . This was followed by the addition of butyllithium (1106 mL, 1.10 equiv) dropwise with stirring at -40℃ in 15 min. The mixture was stirred for 40 min at -50℃. To this was added 1-bromo-4-fluorobenzene (440 g, 2.51 mol, 1.00 equiv) at <-80℃ in 10 min. The mixture was stirred for 1 hr at -78℃. To the mixture was added ethyl 2, 2, 2-trifluoroacetate (392.8 g, 2.77 mol, 1.10 equiv) at -80℃ in 45 min. The resulting solution was stirred for 1.5 hr at -80℃. The reaction was then quenched by the addition of 2000 ml of sat. NH4Cl. The resulting solution was extracted with 2000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 2x2000 mL of sodium chloride (aq. ) . The mixture was dried over sodium sulfate and concentrated under vacuum. The crude product was purified by distillation under reduced pressure (10 mm Hg) and the fraction was collected at 70℃. This resulted in the title compound as an oil.
Step B: 5-bromo-3- (trifluoromethyl) -1H-indazole
Into a 10-L 4-necked round-bottom flask, was placed a solution of 1- (5-bromo-2-fluorophenyl) -2, 2, 2-trifluoroethanone (300 g, 1.11 mol, 1.00 equiv) in butan-1-ol (5500 mL) , and then NH2NH2. H2O (80％) (934 g, 14.94 mol, 18.00 equiv, 80％) was added. The resulting  solution was stirred for 5.5 hr at 110℃ in an oil bath. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was diluted with 3000 mL of H2O. The resulting solution was extracted with 4x3000 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 2x3000 mL of sodium chloride (aq. ) . The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with dichloromethane to afford the title compound as a solid.
Step C: 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -3- (trifluoromethyl) -1H-indazole
Into a 1000-mL 3-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed potassium acetate (66 g, 673.47 mmol, 3.00 equiv) , a solution of 5-bromo-3- (trifluoromethyl) -1H-indazole (60 g, 226.42 mmol, 1.00 equiv) in 1, 4-dioxane (600 mL) , 4, 4, 5, 5-tetramethyl-2- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1, 3, 2-dioxaborolane (86 g, 338.58 mmol, 1.50 equiv) . This was followed by the addition of Pd (dppf) Cl2 (24.8 g, 33.93 mmol, 0.15 equiv) at 60℃. The resulting solution was stirred overnight at 90℃. The reaction mixture was cooled to room temperature. The resulting solution was diluted with 600 mL of H2O. The resulting solution was extracted with 3x1200 mL of ethyl acetate and the organic layers combined. The resulting mixture was washed with 2x600 mL of brine. The mixture was dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column with dichloromethane. Then the crude was applied onto a silica gel column with PE～PE: EA (50: 1) to give the title compound as a solid. LC-MS (ES, m/z) : 313 [M+H] +H-NMR: (400MHz, CDCl3, ppm) δ1.383 (12H, s) 7.546 (1H, d, J＝8.8 Hz) 7.906 (1H, d, J＝8.4 Hz) , 8.385 (1H, s) 10.598 (1H, s) .
REFERENCE EXAMPLE 58
4- (4- (trifluoro-boranyl) thiazol-2-yl) morpholine, potassium salt
Figure PCTCN2015082514-appb-000067
Step A: 4- (4-bromothiazol-2-yl) morpholine
Into a 2000-mL 4-necked round-bottom flask, was placed a solution of 2, 4-dibromothiazole (150 g, 617.54 mmol, 1.00 equiv) in N, N-dimethylformamide (1000 mL) , morpholine (60 g, 688.86 mmol, 1.00 equiv) , and triethylamine (187 g, 1.85 mol, 3.00 equiv) . The resulting solution was stirred for 1 hr at 80℃ in an oil bath. The mixture was cooled to  room temperature. The resulting solution was diluted with 3000 mL of H2O. The solids were collected by filtration. The filter cake was washed with 3x1000 mL of water. The solid was dried in an oven to give the title compound as a solid.
Step B: 4- [4- [trifluoro (potassio) -^ [5] -boranyl] thiophen-2-yl] morpholine
Into a 3000-mL 4-necked round-bottom flask, was placed a solution of 4- (4-bromo-1, 3-thiazol-2-yl) morpholine (200 g, 802.80 mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2000 mL) , and tris (propan-2-yl) borate (226 g, 1.20 mol, 1.50 equiv) . This was followed by the addition of n-BuLi (2.5 M) (384 mL, 1.20 equiv) dropwise at -78℃. The mixture was stirred for 2 hr at this temperature. The resulting solution was warmed to room temperature naturally and stirred for 2 hr. To this was added Methanesulfonic acid (78.4 g, 815.73 mmol, 1.02 equiv) dropwise at 0℃. The mixture was stirred for 1 hr at room temperature. To the mixture was added H2O (100 ml) dropwise at 0℃ and stirred for 0.5 hr. Then, KFH2 (200 g, 3.33 mol, 4.14 equiv) was added and stirred overnight at room temperature. The resulting mixture was concentrated under vacuum. The crude product was purified by re-crystallization from acetone for several times to give the title compound as a solid. LC-MS: (ES, m/z) : 237 [M-K] -H-NMR: (DMSO, ppm) : δ6.39 (s, 1H) ， 3.68 (m， 4H) , 3.34 (m， 4H) .
REFERENCE EXAMPLE 59
5- (3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) pyrrolidin-2-one
Figure PCTCN2015082514-appb-000068
Step A: methyl 4- (3-bromophenyl) -4-oxobutanoate
To a solution of 4- (3-bromophenyl) -4-oxobutanoic acid (735 g, 2.9 mol) in MeOH (7 L) was added SOCl2 (511 g, 4.3 mol) at 0℃, then the mixture was stirred at room temperature overnight. After that time, most solvent was removed and the rest of the solvent was quenched by the addition of water. The aqueous layer was extracted with ethyl acetate, and the organic layer was washed with brine, dried over Na2SO4, then concentrated afford the title compound as an oil.
Step B: 5- (3-bromophenyl) pyrrolidin-2-one
To a solution of methyl 4- (3-bromophenyl) -4-oxobutanoate (600 g, 2.2 mol) in isopropyl alcohol (18 L) was added NH4OAc (1705 g, 22 mol) , NaBH3CN (697 g, 11.1 mol) ,
Figure PCTCN2015082514-appb-000069
Figure PCTCN2015082514-appb-000070
molecular sieves (746.7 g) at room temperature. Then the reaction mixture was stirred at 85℃  overnight. TLC (EA) showed the reaction was completed. The mixture was filtered through a celite pad, and the filtrate was concentrated to give the crude product. The crude product was washed with methyl-t-butyl-ethyl, then filtered and concentrated to give the title compound as a solid.
Step C: 5- (3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) pyrrolidin-2-one
To a solution of 5- (3-bromophenyl) pyrrolidin-2-one (100 g, 0.4 mol) in 1, 4-Dioxane (1.5 L) was added BPDB (155 g, 0.6 mol) , KOAc (122 g, 1.2 mol) , pd (dppf) 2Cl2 (10 g) at room temperature. The reaction mixture was degassed under vacuum and purged with N2 several times and then was warmed to 100℃ and stirred overnight. TLC (EA) showed the reaction was complete. The solvent was removed, and the crude product was chromatographed on silica gel (eluted with petroleum ether/EtOAc from 10/1 to 1/2) to give the title compound as a solid. LC-MS: m/z＝288 (M+1) ； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 1.29 (s, 12H) , 1.68-1.73 (m, 1H) , 2.20-2.24 (m, 2H) , 2.44-2.49 (m, 1H) , 4.66-4.70 (m, 1H) , 7.35-7.43 (m, 2H) , 7.57-7.61 (m, 2H) , 8.09 (s, 1H) .
REFERENCE EXAMPLE 60
potassium trifluoro (2- (pyrrolidin-1-yl) thiazol-4-yl) borate
Figure PCTCN2015082514-appb-000071
Step A: 4-bromo-2- (pyrrolidin-1-yl) -1, 3-thiazole
Into a 2 L 4-necked round-bottom flask, was placed a solution of 2, 4-dibromo-1, 3-thiazole (250 g, 1.03 mol, 1.00 equiv) in N, N-dimethylformamide (700 mL) , pyrrolidine (73 g, 1.03 mol, 1.00 equiv) , triethylamine (311.7 g, 3.08 mol, 3.00 equiv) . The resulting solution was stirred for 2 hr at 100℃ and then cooled to 30℃. The reaction mixture was then poured into 2 L of water/ice. The solid was collected by filtration. The filter cake was washed with 3x500 mL of water to give the title compound as a solid.
Step B: 2- (pyrrolidin-1-yl) -4- (trifluoro-^ [4] -boranyl) -1, 3-thiazole potassium
Into a 5-L 4-necked round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of nitrogen, was placed a solution of 4-bromo-2- (pyrrolidin-1-yl) -1, 3-thiazole (150 g, 643.42mmol, 1.00 equiv) in tetrahydrofuran (2500 mL) , B- (Oi-Pr) 3 (157.3 g, 1.30 equiv) . To the  reaction was added n-BuLi (349mL, 1.30 equiv, 2.4 M) dropwise with stirring at -78℃ in 140 min. The reaction mixture was stirred for 2 hr at -78℃ and stirred for 2 hr at 30℃. To this solution was added CH3SO3H (61.8 g, 1.00 equiv) dropwise with stirring at 0℃. The resulting mixture was stirred for 1 hr at room temperature and then water (150 mL) was added dropwise with stirring at 0℃ in 10 min. The solution was stirred for 0.5 hr at 30℃ and then KHF2 (211 g, 4.20 equiv) was added and stirred overnight at 30℃. The solid was collected by filtration. The crude product was dissolved in 500 mL of acetone. The resulting mixture was stirred at reflux for 30 min. The solid was filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum. The resulting mixture was washed with 5x100 mL of ethanol. The solid was collected by filtration. The crude product was dissolved in 110 mL of MeOH/water (10: 1) . The mixture was stirred at reflux for 1 hr. The solid was collected by filtration. This resulted in the title compound as a solid. LC-MS: (ES, m/z) : 221 [M] -H-NMR: (300 MHz, DMSO, ppm) : δ 6.407 (s, 1H) , 3.480～3.536 (m, 4H) , 1.966～2.031 (m, 4H) .
EXAMPLE 1
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000072
Step A : 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.63 g, 0.80 mmol) , 6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine (0.25 g, 0.96 mmol) and Pd (PPh3) 4 (0.14 g, 0.12 mmol) in dioxane (7 mL) . This was followed by the addition of Na2CO3 (0.26 g, 2.41 mmol) in water (1.5 mL) at ambient temperature. After the resulting mixture was stirred at 80℃ for 18 hrunder argon, it was cooled down to 20℃, quenched with water (50 mL) and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organics were washed with brine (2 x 50 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated in vacuo. The residue was purified by  silica gel column chromatography, eluted with EtOAc/PE (100/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C38H35BrN8O5S [M + H] +: 795, 797, found 795, 797.
Step B: tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) azetidine-1-carboxylate.
A mixture of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (400 mg, 0.503 mmol) , tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate (381 mg, 2.011 mmol) , Pd2 (dba) 3 (92 mg, 0.101 mmol) , DIEA (0.263 ml, 1.508 mmol) and XantPhos (58.2 mg, 0.101 mmol) in 1, 4-Dioxane (5 ml) was stirred at 150℃ for 1 hr in a microwave. The reaction mixture was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with DCM/MeOH (10/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC46H49N9O7S2 [M + H] +: 904, found 904.
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
A solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate (120 mg, 0.133 mmol) and TFA (1 ml, 12.98 mmol) in Dichloromethane (10 ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d forC33H33N9O4S2 [M + H] +: 684, found 684.
Step D: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (70 mg, 0.087 mmol) and TFA (8.36 ml, 109 mmol) in Dichloromethane (1 ml) were stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 35％B to 55％B in 8 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC17H17N9O2S2 [M + H] +: 444, found 444. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZδ7.42 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.04 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.77 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.63 (s, 1H) , 6.36 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) ,  5.99 (brs, 1H) , 4.30-4.11 (m, 1H) , 4.04-3.99 (m, 1H) , 3.71-3.63 (m, 1H) , 3.49-3.46 (m, 2H) . δ8.50 (d, J ＝ 4.2 Hz, 1H) , 8.08 (d, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 7.48 (d, J ＝ 3.6 Hz, 1H) , 7.11 (s, 2H) , 6.93 (d, J ＝ 3.9 Hz, 1H) .
EXAMPLE2
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000073
Step A: 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzenamine
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 3-bromo-2-nitroaniline (20.00 g, 92 mmol) in 1, 4-dioxane (300 mL) . This was followed by the addition of [1, 1'-bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) (3.37 g, 4.61 mmol) , potassium acetate (27.10 g, 276 mmol) and 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (35.10 g, 138 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 85℃ for 16 hrunder argon. The mixture was filtered out and the filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EA/PE (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C12H17BN2O4 [M + H] +: 265, found 265； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 7.35 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.79 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.74 (d, J ＝ 6.8 Hz, 1H) , 1.42 (s, 12H) .
Step B: 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine
Into a 250-mL round-bottom flask, was placed a solution of 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline (5.00 g, 18.93 mmol) in DCM (20 mL) and MeOH (20 mL) . This was followed by the addition of Pd/C (20.15 g, 18.93 mmol) at ambient temperature. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times, and then with hydrogen for 3 times. The mixture was stirred under hydrogen for 16 hrat ambient temperatureat  1.5 atm. The mixture was filtered and the filter cake was washed with DCM (3 x 10 mL) . The combined organic layers were concentrated under reduced pressure and purified by silica gel column chromatography, eluting with EA/PE (2/3) to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C12H19BN2O2 [M + H] +: 235, found 235； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 7.21 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.79 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.65 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 3.60 (br, 4H) , 1.34 (s, 12H) .
Step C: 2', 3'-diamino-4-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide.
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.77 g, 0.97 mmol) , 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine (0.50 g, 2.13 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (0.11 g, 0.10 mmol) in dioxane (10 mL) . This was followed by the addition ofsodium carbonate (0.31 g, 2.90 mmol) in water (1 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 18 hrunder argon. The mixture was allowed to cool to 20℃, quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3x50 mL) . The combined organic phase was washed with brine (3x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EA/PE (3/2) to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C37H36BrN7O5S [M + H] +: 770, 772 (1 : 1) , found 770, 772 (1 : 1) .
Step D: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 2', 3'-diamino-4-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (1.4g, 1.82 mmol) in MeOH (5 mL) and DCM (5 mL) . This was followed by the addition ofcyanogen bromide (0.19 g, 1.82 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 25℃ for 16 hrunder a atmosphere of argon. The reaction was quenched with aqueoussaturated sodium bicarbonate (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was recrystallized from DCM/EA/PE (10 mL/10 mL/50 mL) . The solid was collected by filtration and dried in vacuum. And then the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EtOAc in Petroleum ether (80％) to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C38H35BrN8O5S [M + H] +: 795, 797 (1 : 1) , found 795, 797 (1 : 1) ； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ 8.10-8.00 (m, 1H) , 7.78-7.71 (m, 1H) , 6.99-6.56  (m, 14H) , 6.44-6.38 (m, 1H) , 5.10 (d, J ＝ 15.6 Hz, 1H) , 4.90 (m, J ＝ 15.6 Hz, 1H) , 4.79 (d, J ＝15.3 Hz, 2H) , 3.89 (d, J ＝ 15.3 Hz, 2H) , 3.74-3.71 (m, 9H) .
Step E: tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) azetidine-1-carboxylate
A solution of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (100 mg, 0.14 mmol) , tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate (100 mg, 0.57 mmol) , Pd2 (dba) 3 (40 mg, 0.44 mmol) , DIEA (0.1 ml, 0.57 mmol) and XantPhos (30 mg, 0.05 mmol) in 1, 4-Dioxane (2 ml) was stirred at 150℃ for 1 hr in a microwave. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with DCM/MeOH (10/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC46H49N9O7S2 [M + H] +: 904, found: 904.
Step F: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) azetidine-1-carboxylate (60 mg, 0.07 mmol) and TFA (1 ml, 12.98 mmol) in Dichloromethane (10 ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to give the title compounds as an oil. LCMS (ESI) calc’ d forC33H33N9O4S2 [M + H] +: 684, found: 684.
Step G: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (40 mg, 0.059 mmol) and TFA (8.36 ml, 109 mmol) in Dichloromethane (1 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 μM；Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 35％B to 55％B in 8 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d forC17H17N9O2S2 [M + H] +: 444, found: 444. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 7.87-7.69 (m, 3H) , 7.13-7.11 (m, 1H) , 6.86 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.48-6.46 (m, 1H) , 6.08-6.06 (m, 3H) , 4.45-4.42 (m, 2H) , 4.21-4.14 (m, 1H) , 3.80-3.75 (m, 2H) .
EXAMPLE 3
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000074
Step A: tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
To a solution of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (from the synthesis of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, Step D, 200 mg, 0.251 mmol) in 1, 4-Dioxane (4 mL) was added tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate (109 mg, 0.503 mmol) , N, N-Diisopropylethylamine (97 mg, 0.754 mmol) , Pd2 (dba) 3 (46.0 mg, 0.050 mmol) and Xantphos (29.1 mg, 0.050 mmol) at ambient temperature. The flask was degassed with nitrogen for three times. Then the mixture was applied onto microwave reaction for 1 hr at 150℃ under an atmosphere of nitrogen. The reaction was black from yellow. The LCMS showed that the desired product was well in the reaction system. The solid was filtered out and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was then applied onto silica gel column to with methanol/dichloromethane (1:10) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C48H53N9O7S2 [M + H] +: 932, found 932.
Step B: 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) benzenesulfonamide.
To a solution of tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate (150 mg, 0.161 mmol) in Dichloromethane (1.5 ml) was added TFA (1.500 ml) at ambient temperature. After the resulting mixture was stirred for 1 hr at rt, it was concentrated under reduced pressure to give the crude product and it was used directly  for the next step. LCMS (ESI) calc’ d for C43H45N9O5S2 and C35H37N9O4S2 [M + H] +: 832 and 713, found 832 and 713.
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) benzenesulfonamide (50 mg, 0.060mmol) and 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylthio) benzenesulfonamide (50 mg, 0.070 mmol) were dissolved in TFA (5 ml) and strirred for 1 hr at ambient temperature. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to get the crude product. The crude product was then applied onto Prep-HPLC with the condition (Column: X Bridge RP C18, 19*150 mm, 5 μM；Mobile Phase A: water/10 mM NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5-15％B in 8 min； UV: 254 nm) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C19H21N9O2S2 [M + H] +: 472, found 472； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ7.62-7.44 (m, 4H) , 6.86-6.84 (m, 1H) , 6.49-6.44 (m, 1H) , 6.09-6.04 (m, 3H) , 3.89-3.87 (m, 2H) , 3.06-2.89 (m, 3H) , 2.16-2.12 (m, 2H) , 1.81-1.70 (m, 2H) .
EXAMPLE 4
4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000075
To a solution of tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate (30 mg, 0.029 mmol) in DCM (0.5mL) was added anisole (32 μL, 0.29 mmol) and TFA (0.23mL, 2.91 mmol) at rt. The resulting mixture was stirred at rt for 1 hr to remove both Boc and partial PMB protection. After removing the volatile under reduced pressure the residue was dissolved in TFA (0.23mL, 2.91 mmol) and anisole (32 μL, 0.291 mmol) . The resulting mixture was heated at 80℃ for 1 hr to remove the final PMB protection. After removing the volatile under reduced pressure the  residue was purified by reverse phase HPLC (eluting with 3-30％MeCN/water with 0.1％TFA as additive) to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 472.60.
EXAMPLE 5
4- (Azetidin-3-ylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000076
Step A: tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfinyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfinyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
To tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate (320 mg, 0.310 mmol) in DCM (5 mL) was added m-CPBA (83 mg, 0.372 mmol) . The reaction mixture was stirred at rt overnight, and then partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles were removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0 to 100％EtOAc in hexanes as eluent to give the title product. LC/MS [M+1] +: 1049.37.
Step B: 4- (Azetidin-3-ylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
The deprotection step was conducted in a similar fashion to that in 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide, immediately above, to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 488.54.
EXAMPLE 6
4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000077
Step A: tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylateandtert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
To tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate (80 mg, 0.077 mmol) in DCM (5 mL) was added m-CPBA (44 mg, 0.194 mmol) . The reaction mixture was stirred at rt overnight, and then partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles were removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using 0 to 100％EtOAc in hexanes as eluent to give the title product. LC/MS [M+1] +: 1065.37.
Step B: 4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
The deprotection step was conducted in a similar fashion to that in 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 504.68.
The following Examples 7-8 were prepared according to the general proceduresdescribed above for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -[1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE 4) and 4- (Azetidin-3-ylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE 5) , starting from REFERENCE EXAMPLE 45, tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert- butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate.
Figure PCTCN2015082514-appb-000078
EXAMPLE 9
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000079
Step A: tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfinyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfinyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.15 g, 0.161 mmol) , 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) imidazo [1, 2-a] pyridine (0.047 g, 0.193 mmol) , Na2CO3 (0.051 g, 0.483 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (0.020 g, 0.024 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (1.3 mL) and water (0.322 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 80℃.
The reaction mixture was filtered over celite to removepalladium. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 922.26.
Step B: 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-3-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that idescribed for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 461.39.
EXAMPLE 10
3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000080
Step A: 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 100-mL round bottom flask was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis(4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (2.00 g, 2.53 mmol) , 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine (0.89 g, 4.05 mmol) and Pd (PPh3) 4 (0.29 g, 0.25 mmol) and sodium carbonate (0.81 g, 7.59 mmol) in dioxane (40 mL) and water (8 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was degassed with nitrogen and stirred at 80℃ for 16 hr under nitrogen. The reation was quenched with water (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organics were washed with brine (3 x200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The  residue was purified by a silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (4 : 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C36H34BrN7O5S [M + H] +: 756, 758 (1 : 1) , found 756, 758 (1 : 1) .
Step B: tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
Into a 8mL sealed tube was placed 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (500 mg, 0.661 mmol) , tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate (287 mg, 1.322 mmol) , Pd2dba3 (60.5 mg, 0.066 mmol) , XANTPHOS (76 mg, 0.132 mmol) and DIEA (0.346 ml, 1.982 mmol) in Dioxane (7 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times andwas heated in a microwave oven at 150℃ for 30 min. After being cooled down to room temperature, the resulting solution was diluted with EtOAc, washed with NaOH (2N) and brine. The organic layer was dried over anhydrous Na2SO4, filtrated and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography (0-10％MeOH/DCM) to afford the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N8O7S2 [M + H] +: 893, found 893；
Step C: tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfinyl) piperidine-1-carboxylate
tert-Butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate (200 mg, 0.224 mmol) was dissolved in dichloromethane (5 ml) , mCPBA (77 mg, 0.448 mmol) was added and the reaction mixture was stirred for 1 hr at ambient temperature. The resulting mixture became a yellow solution and then was diluted with dichloromethane (15 mL) , washed withsodium carbonate aq. (15 mL) , and water (15 ml) . The organic layer was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with: Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％TFA, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30％B to 70％B in 10 min； detected at 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N8O8S2 [M + H] +: 909, found 909
Step D: 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL round bottom flask was placedtert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenyl) sulfinyl) piperidine-1-carboxylate (130 mg, 0.143 mmol) dissolved in dichloromethane (2.0ml) , and then trifluoroacetic acid (1.0mL) was added. The reaction was stirred at ambient temperature for 1 hr and then concentrated under vacuum. The residue was dissolved in anisole (1.0 mL) , trifluoroacetic acid (2.0 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at 80℃ for 3 hr. After the solvent was removed under reduced pressure, the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 12％B in 5 min； detected at 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N8O3S2 [M + H] +: 449, found 449； 1H NMR (300 MHz, DMSO/DCl) : δ8.31 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.79 (s, 1H) , 7.46 (d, J ＝ 9.3 Hz, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 9.3 Hz, 1H) , 3.53-3.29 (m, 3H) , 3.10-2.99 (m, 2H) , 2.43-1.97 (m, 3H) , 1.43-1.37 (m, 1H) .
EXAMPLE 11
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000081
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 10, Steps B-D) , except starting from 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- [2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl] benzenesulfonamide (EXAMPLE 1, Step A) andtert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate, prepared as described herein.
LCMS (ESI) calc’ d for C19H21N9O4S2 [M + H] +: 504, found 504；
1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.22 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.97 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.98 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 6.65-6.57 (m, 1H) , 6.16 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.53-4.40 (m, 1H) , 3.43 (d, J ＝ 12.9 Hz, 2H) , 3.03-2.93 (m, 2H) , 2.19-1.93 (m, 4H) .
EXAMPLE 12
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000082
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 10, Steps B-D) , except starting from 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- [2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl] benzenesulfonamide (EXAMPLE 1, Step A) and tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate. LCMS (ESI) calc’ d [M + H] +: 488, found 488.
EXAMPLE 13
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000083
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 10, Steps B-D) , except starting from 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 2, Step D) and tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate. LCMS (ESI) calc’ d for C33H33N9O5S2 [M + H] +: 460, found: 460； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 8.40-8.10 (m, 3H) , 6.92 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.51-6.40 (m, 1H) , 6.39-6.25 (m, 1H) , 6.10-6.03 (m, 1H) , 4.52-4.42 (m, 1H) , 4.37-4.30 (m, 1H) , 4.28-4.15 (m, 2H) , 3.86-3.80 (m, 1H) .
EXAMPLE 14
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000084
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 10, Steps B-D) , except starting from 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 2, Step D) and tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate. LCMS (ESI) calc’ d for C33H33N9O5S2 [M + H] +: 488, found: 488.
EXAMPLE 15
3- (2-Amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000085
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with Cs2CO3 (115 mg, 0.353 mmol) , 7-bromo-4-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (28.0 mg, 0.124 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4- methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid, (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (100 mg, 0.118 mmol) and Xphos precatalyst generation 2 (9.27 mg, 0.012 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (0.94 mL) and water (0.24mL) . The resulting mixture was heated overnight at 80℃.
The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phaseto afford the title compound LC/MS [M+1] +: 951.17.
Step B: 3- (2-amino-7-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that described for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 490.5.
EXAMPLE 16
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000086
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with Xphos precatalyst generation 2 (7.42 mg, 9.43 μmol) , K3PO4 (60.0 mg, 0.283 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (80 mg, 0.094 mmol) and 6-bromo-1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridine (27.9 mg, 0.141 mmol) . The  vial was sealed, degassed, and filled with THF (0.75 mL) and water (0.2 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 70℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 922.20.
Step B: 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-pyrrolo [3, 2-b] pyridin-6-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that described for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 461.54.
EXAMPLE 17
3- (6-Aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000087
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (6-aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (4- (6-aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with Pd (dppf) Cl2 (8.62 mg, 0.012 mmol) , sodium carbonate (18.73 mg, 0.177 mmol) , 3-bromoimidazo [1, 2-b] pyridazin-6-amine (12.55 mg, 0.059 mmol) and (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (50 mg, 0.059 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (0.5 mL) and water (0.1 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4,  filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 937.19.
Step B: 3- (6-Aminoimidazo [1, 2-b] pyridazin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that described for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 477.61.
EXAMPLE 18
3- (2-Amino-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000088
Step A: tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamateand tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
A microwave vial was charged with tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (200 mg, 0.221 mmol) , tBuXPhos precatalyst generation 3 (88 mg, 0.111 mmol) , cesium carbonate (216 mg, 0.663 mmol) , and 4-chloro-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine (66.2 mg, 0.265 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (0.88mL) and water (0.22mL) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 1006.39.
Step B: 3- (2-Amino-1- (2, 2, 2-trifluoroethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that described for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 546.32.
EXAMPLE 19
3- (2-Amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000089
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with 2, 2-dimethyl-1, 3-propanediol (123 mg, 1.178 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (200 mg, 0.236 mmol) in toluene (2 mL) . The reaction mixture was heated at 80℃ for 1 hr. After removing solvent, the rest of reagents were added, including tBuXPhos precatalyst generation 3 (94 mg, 0.118 mmol) , cesium carbonate (230 mg, 0.707 mmol) , and 7-chloro-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (51.4 mg, 0.283 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (1.26 mL) and water (0.32 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 950.58.
Step B: 3- (2-Amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that described for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 490.26.
EXAMPLE 20
3- (3-Amino-1H-indazol-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000090
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (3-amino-1H-indazol-6-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (3-amino-1H-indazol-6-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with 2, 2-dimethyl-1, 3-propanediol (73.6 mg, 0.707 mmol) , Xphos precatalyst generation 2 (11.12 mg, 0.014 mmol) , Cs2CO3 (138 mg, 0.424 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid, (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (120 mg, 0.141 mmol) and 6-bromo-2H-indazol-3-amine (36.0 mg, 0.170 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (1.2mL) and water (0.24 mL) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 936.48.
Step B: 3- (3-Amino-1H-indazol-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The deprotection step was conducted with TFA in a similar fashion to that idescribed for 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide above to afford the title compound. LC/MS [M+1] +: 476.56.
The following Examples 21-23 were prepared according to the general procedure described above for 3- (3-Amino-1H-indazol-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 20) , using the boronic acids or boronic esters (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid and (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (REFERENCE EXAMPLE 7) or tert-Butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (REFERENCE EXAMPLE 11) , and commercially available aryl halides listed below.
Figure PCTCN2015082514-appb-000091
Figure PCTCN2015082514-appb-000092
EXAMPLE 24
3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000093
Step A : tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate
Into a 100 mL round bottom flask was placedtert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (110 mg, 0.115 mmol) , 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine (50.5 mg, 0.229 mmol) , Na2CO3 (36.5 mg, 0.344 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (26.5 mg, 0.023 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (2.0 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred for 3 hr at 80℃. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl  acetate/petroleum ether (5 : 1) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N8O9S2 [M + H] +: 925, found 925；
Step B: 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL round bottom flask was placed a solution of tert-butyl 4- ( (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (67 mg, 0.072 mmol) in Dichloromethane (2.0 ml) and trifluoroacetic acid (1.0mL) . The resulting solution reaction was stirred at ambient temperature for 1 hr and then concentrated under vacuum. The residue was dissolved in anisole (1.0 ml, 0.072 mmol) , trifluoroacetic acid (2.0 mL) , stirred at 80℃ for 3 hr and then concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％ NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 15％B in 5 min； detected at 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N8O4S2 [M + H] +: 465, found 465； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.12 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.76 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.51 (br, 2H) , 7.49 (s, 1H) , 6.69-6.65 (m, 1H) , 6.12 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 5.99 (br, 2H) , 4.46-4.38 (m, 1H) , 3.37-3.32 (m, 2H) , 2.96-2.88 (m, 2H) , 2.19-1.83 (m, 4H) .
EXAMPLE 25
3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000094
Step A : tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate
The mixture of tert-butyl 3- (2- (bis (4-methoxybenzyl) aminooxysulfinyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate (150 mg, 0.161 mmol) , 6-aminopyridin-3-ylboronic acid (44.0 mg, 0.322 mmol) , Na2CO3 (51.2 mg, 0.483 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (37.2 mg, 0.032 mmol) in Dioxane (10 ml)  andwater (1 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. Afterthe resulting mixture was concentrated under vacuum, the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1 : 10) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C44H48N8O9S2 [M + H] +: 896, found [M+1] : 897； hr NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 8.75 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 8.09 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.53 (s, 1H) , 7.30-6.80 (m, 13H) , 6.61 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 5.24-5.01 (m, 1H) , 4.54-4.49 (m, 2H) , 4.38-4.10 (m, 5H) , 4.00-3.94 (m, 3H) , 3.73-3.68 (m, 9H) , 1.41 (s, 9H) .
Step B: 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution mixture of tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate (87mg, 0.1 mmol) and TFA (1 ml, 12.98 mmol) in Dichloromethane (5 ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C31H32N8O6S2 [M + H] +: 676, found [M+1] : 677
Step C : 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (65 mg, 0.1 mmol) in TFA (10 ml, 130 mmol) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 15％B in 7 min； detected at 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C15H16N8O4S2 [M + H] +436, found [M+1] : 437 
1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : δ 8.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.83 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.70 (brs, 1H) , 7.55 (d, J ＝ 2.4 Hz, 1H) , 6.73 (dd, J ＝ 8.4, 2.4Hz, 1H) , 6.16 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.05 (s, 2H) , 5.23-5.21 (m, 1H) , 4.26-4.20 (m, 4H) .
The compounds in the table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for 3- (6-aminopyridin-3-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 25) starting from tert-butyl 3- (2- (bis (4-methoxybenzyl) aminooxysulfinyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate and boronic acids or boronic esters prepared as described herein or available from commercial sources.
Figure PCTCN2015082514-appb-000095
Figure PCTCN2015082514-appb-000096
Figure PCTCN2015082514-appb-000097
EXAMPLE 38
2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000098
Step A: methyl 3- (3-benzoylthioureido) -4-bromobenzoate
Benzoyl isothiocyanate (3.12 g, 19.1 mmol) was added to a stirred mixture of methyl 3-amino-4-bromobenzoate (4.0 g, 17.4 mmol) in acetone (40 ml) and the mixture was stirred at 60℃ for 6 hr. After being cooled to room temperature, the reaction mixture was evaporated under vacuum. The residue was purified by column chromatography on silica gel Isolute Flash Si； 50 g prepacked, eluted with EA/PE (0-30％) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C16H13BrN2O3S [M + H] +: 393, 395 (1: 1) , found 393, 395 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ12.65 (s, 1H) , 11.91 (s, 1H) , 8.47 (d, J ＝ 2.0 Hz, 1H) , 8.02-8.00 (m, 2H) , 7.92-7.91 (m, 1H) , 7.81-7.80 (m, 1H) , 7.78-7.69 (m, 1H) , 7.58-7.54 (m, 2H) , 3.88 (s, 3H) .
Step B: methyl 2-amino-4-bromobenzo [d] thiazole-7-carboxylate
Sodium bromide (0.16 g, 1.53 mmol) was added to a stirred, cooled 0℃ mixture of methyl 3- (3-benzoylthioureido) -4-bromobenzoate (3 g, 7.63 mmol) in H2SO4 (4.5 ml, 84 mmol) and the mixture was stirred at 80℃ for 6 hr. LC-MS showed the starting material was gone. To the reaction mixture was added MeOH (30 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 16 hr. The reaction mixture was cooled, and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked, eluting with EA/PE (0-60％) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C9H7BrN2O2S [M + H] +: 287, 289 (1: 1) , found 287, 289 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.04 (brs, 2H) , 7.60 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.53 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 3.91 (s, 3H) .
Step C: 2-amino-7- (methoxycarbonyl) benzo [d] thiazol-4-ylboronic acid
To a solution of methyl 2-amino-4-bromobenzo [d] thiazole-7-carboxylate (2 g,6.97 mmol) in dioxane (20 ml) was added Pd (dppf) Cl2 (1.019 g, 1.393 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (3.54 g, 13.93 mmol) and potassium acetate (2.051 g, 20.90 mmol) . The mixture was degassed 3 times with N2, and stirring at 80℃ for 16 hr. The mixture was filtered through the celite, and washing with ethyl acetate (100 mL) . The filtration was extracted with 2N HCl (3 x 30 mL) . The aqueous was concentrated under reduced pressure. The crude material was dissolved in 3: 1 CHCl3: i-PrOH, dried over MgSO4. The MgSO4 was filtered off and the filtrate was concentrated to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC9H9BN2O4S [M + H] +: 253, found 253； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ10.35 (brs, 1H) , 9.35 (brs, 1H) , 7.89-7.86 (m, 1H) , 7.82-7.80 (m, 1H) , 3.95 (s, 3H) .
Step D: methyl 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylate
(2-Amino-7- (methoxycarbonyl) benzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.542 g, 2.149 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (1 g, 1.074 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (0.236 g, 0.322 mmol) , and Na2CO3 (0.455 g, 4.30 mmol) were added to a stirredmixture of dioxane (0.3 ml) , and water (0.1 ml) . The reaction mixture was degassed for 3 times with N2, and stirred at 80℃ for 16 hr. The reaction mixture was filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel Isolute Flash Si； 50 g prepacked, eluting with EA/PE (0-70％) to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC48H50N8O11S3 [M + H] +: 1011, found 1011.
Step E: 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid
To a solution of methyl 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylate (250 mg, 0.28 mmol) inTHF (2.5ml) and MeOH (2.5ml) was added 2 N NaOH (2.472 ml, 4.94 mmol) . The resulting mixture was stirred at room temperaturefor 4 hr, and then adjusted to pH ＝ 3 with 2Mhydrochloric acidand filtered. The filtrate was washed with water (5 ml) and dried over anhydrousMgSO4to givethe title compound. The product was used for the next step directly: LCMS (ESI) calc’ d for C47H48N8O11S3 [M + H] +: 997, found 997.
Step F: 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid
To a solution of 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid (120 mg, 0.120 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (0.093 ml, 1.203 mmol) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The residue was concentrated to afford 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid (80 mg, 0.082 mmol, 68.5 ％yield) as a yellow oil. The solution of 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid (80 mg, 0.103 mmol) inTFA (0.793 ml, 10.30 mmol) was stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 2 hr. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 5μM, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H16N8O6S3 [M + H] +: 537, found 537； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ8.69 (d, J ＝ 8 Hz, 1H) , 8.08 (d, J ＝ 8 Hz, 1H) , 7.73 (d, J ＝ 8 Hz, 1H) , 7.10 (d, J ＝ 8 Hz, 1H) , 5.34-5.30 (m, 1H) , 4.64-4.62 (m, 2H) , 4.51-4.49 (m, 2H) .
EXAMPLE 39
2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000099
Step A : 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid
To a solution of methyl 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylate (Step D immediately above, 250 mg, 0.247 mmol) inTHF (2.5 ml) was added NaOH (2.47 ml, 4.94 mmol) with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to room temperature and stirred for 4 hr. The pH value of the reaction solution was adjusted to 3 with hydrochloric acid (2M) . The mixture was filtered, the filtrate was washed with water (5 ml) and dried to give220 mg (71.4 ％yield) of 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid. The product was used for the next step directly without further purification: LCMS (ESI) calc’ d for C47H48N8O11S3 [M + H] +: 997, found 997.
Step B : tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-carbamoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of 2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxylic acid (220 mg, 0.221 mmol) , HATU (126 mg, 0.331 mmol) and ammonium chloride (47.2 mg, 0.883 mmol) inDMF (4 ml) was addedDIEA (0.058 ml, 0.331 mmol) with stirring at 0℃. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times. The resulting solution was warmed to 0℃ and stirred for 4 hr. The reaction mixture was diluted with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x10 mL) . The combined organic  layers were washed with brine (20mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford yellowoil. The residue was purified by silica gel column chromatography12 g, eluting with EtOAc/petroleum ether (1/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C47H49N9O10S3 [M + H] +: 996, found 996.
Step C: 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxamide
To a solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-7-carbamoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (140 mg, 0.141 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (1.083 ml, 14.05 mmol) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The residue was concentrated to afford 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxamide (100 mg, 0.103 mmol, 73.4 ％yield) as a yellow oil. The solution of 2-amino-4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-7-carboxamide (100 mg, 0.129 mmol) inTFA (3 ml) was stirred at room temperature. The resulting solution was warmed to 80℃ and stirred for 2 hr. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 15 mL/min； Gradient: 3％B to 23％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H17N9O5S3 [M + H] +: 536, found 536； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ8.69 (d, J ＝ 6 Hz, 1H) , 8.08 (d, J ＝ 6 Hz, 1H) , 7.81 (d, J ＝ 9 Hz, 1H) , 7.17 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 5.34-5.26 (m, 1H) , 4.64-4.59 (m, 2H) , 4.51-4.43 (m, 2H) .
EXAMPLE 40
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000100
Step A : tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (150 mg, 0.161 mmol) , 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine (84 mg, 0.32 mmol) , Na2CO3 (51.2 mg, 0.483 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (37.2 mg, 0.032 mmol) in Dioxane (10 ml) andwater (1 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1 : 10) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H49N9O9S2 [M + H] +: 935, found : 936； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 8.74 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.64 (brs, 2H) , 8.07 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.28-6.75 (m, 15H) , 5.16-5.10 (m, 1H) , 5.10-5.09 (m, 2H) , 4.54-4.51 (m, 2H) , 4.36-4.10 (m, 4H) , 4.02-3.98 (m, 2H) , 3.72 (s, 9H) , 1.40 (s, 9H) .
Step B: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution mixture of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (110 mg, 0.118 mmol) and TFA (1 ml, 12.98 mmol) in Dichloromethane (10 ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The resulting mixture was concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C33H33N9O6S2 [M + H] +: 715, found [M+1] : 716
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.112 mmol) in TFA (10 ml, 130 mmol) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Phenomenex, 150*21.2 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30-65％B in 8min； detected at 254 nm to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C17H17N9O4S2 [M + H] +: 475, found [M+1] : 476； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 8.30 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1 H) , 7.83 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1 H) , 6.87 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1 H) , 6.70 (s, 1H) , 6.47 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1 H) , 6.35 (brs, 1H) , 5.27-5.19 (m, 1H) , 4.20-4.16 (m, 2H) , 4.08-4.03 (m, 2H) .
EXAMPLE 41
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000101
The title compound was prepared in an analagous fashion as described for 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamideabove, except starting with tert-butyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) piperidine-1-carboxylate. LCMS (ESI) calc’ d [M + H] +: 454, found [M+1] : 454
EXAMPLE 42
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000102
Step A : tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate
Into a 100 mL round bottom flask was placed a mixture of tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (150 mg, 0.156 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (49.8 mg, 0.282 mmol) , Na2CO3 (49.7 mg, 0.469 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (36.2 mg, 0.031 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (5.0 ml) . The reaction mixture was  degassed with nitrogen for 3 times and stirred for 4 hr at 80℃ and then concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1 : 15) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C48H53N9O9S2 [M + H] +: 964, found 964
Step B : 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL round bottom flask was placed a solution of tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (90 mg, 0.093 mmol) dissolved in Dichloromethane (2.0 ml) and trifluoroacetic acid (1.0mL) was added. The reaction was stirred at ambient temperature for 1 hr. The solvent was removed under vacuum. The residue was dissolved in anisole (1.0 ml, 0.072 mmol) , and trifluoroacetic acid (2.0 mL) , then the reaction mixture was stirred at 80℃ for 3 hr. The solvent was removed under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 15％B in 5 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C19H21N9O4S2 [M + H] +: 504, found 504； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.22 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.97 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 6.98 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 6.65-6.57 (m, 1H) , 6.16 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.53-4.40 (m, 1H) , 3.43 (d, J ＝ 12.9 Hz, 2H) , 3.03-2.93 (m, 2H) , 2.19-1.93 (m, 4H) .
EXAMPLE 43
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000103
The title compound was prepared in an analagous fashion as described for 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide immediately above, except starting with tert-butyl 3- (2- (bis (4- methoxybenzyl) aminooxysulfinyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylateand (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid. LCMS (ESI) calc’ d [M + H] +: 476, found [M+1] : 476.
EXAMPLE 44
6- (1-acetylpiperidin-4-ylsulfonyl) -3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000104
Step A: (3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flaskwas placed a solution of tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (700 mg, 0.730 mmol) in DCM (2 ml) . This was followed by the addition of TFA (1.0 ml, 12.98 mmol) with stirring at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated under reduced pressure, the residue was washed with aqueous sodium hydrogen carbonate (saturated, 20 mL) and extracted with DCM (3 x 20 ml) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 50 ml) and dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C28H31IN6O6S2 [M + H] +: 739, found739.1.
Step B: 6- (1-acetylpiperidin-4-ylsulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide (120 mg, 0.130 mmol) in DCM (1 ml) . This were followed by the addition ofTEA (65.8 mg, 0.650 mmol) and acetic anhydrate (26.5 mg, 0.260 mmol) with stirring at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 1 hrunder an atmosphere of argon. The reaction was monitored by LCMS. The  solvent was evaporated under vacuum and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Petroleum ether (3 : 2) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC30H33IN6O7S2 [M + H] +: 781, found781.1 ； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) : δ8.32 (d, J ＝ ？ , 1H) , 7.99 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.33 (d, J ＝ 8.7 Hz, 2H) , 7.08 (d, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 6.84-6.73 (m, 4H) , 6.54-6.52 (m, 1H) , 4.78-4.69 (m, 1H) , 4.39-4.31 (m, 1H) , 4.05-3.91 (m, 3H) , 3.77 (s, 6H) , 3.73-3.69 (m, 1H) , 3.11-3.01 (m, 1H) , 2.53-2.45 (m, 1H) ， 2.04 (s, 3H) .
Step C: 6- (1-acetylpiperidin-4-ylsulfonyl) -3- (2-amino-3H-benzo [d] imidaz ol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6- ( (1-acetylpiperidin-4-yl) sulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (100 mg, 0.109 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (12.58 mg, 10.89 μmol) and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (19.27 mg, 0.109 mmol) in Dioxane (1 ml) . This was followed by the addition ofsodiumcarbonate (34.6 mg, 0.327 mmol) in water (0.2 ml) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 18 hrunder atmosphere of argon. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (10 ml) and extracted with EA (3 x 10 ml) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by Prep-TLC, eluted with DCM /MeOH (10 : 1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC37H39N9O7S2 [M + H] +: 786, found786.2 ； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) : δ8.36 (d, J ＝ ？ , 1H) , 7.85-7.78 (m, 1H) , 7.65-7.63 (m, 1H) , 7.15-6.85 (m, 4H) , 6.78-6.51 (m, 6H) , 4.71-4.61 (m, 1H) , 4.38-4.29 (m, 1H) , 4.09-3.94 (m, 2H) , 3.89-3.84 (m, 1H) , 3.76 (s, 6H) , 3.75-3.70 (m, 1H) , 3.15-3.01 (m, 1H) , 2.53-2.45 (m, 1H) ， 2.04 (s, 3H) .
Step D: 6- ( (1-acetylpiperidin-4-yl) sulfonyl) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of 6- ( (1-acetylpiperidin-4-yl) sulfonyl) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (40 mg, 0.051 mmol) in TFA. The mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction progress was monitored by LCMS/TLC. The reaction was allowed to cool to 20℃ and the solvent was evaporated. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Sunfire C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water /0.05％TFA, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5-30％B in 10 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing  pressure to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC21H23N9O5S2 [M + H] +: 546, found546.1； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ 8.27 (d, 1H) , 7.98 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.48 (br, 2H) , 7.19 (br, 2H) , 7.10 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.79 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.36 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 4.55-4.51 (m, 1H) , 4.47-4.38 (m, 1H) , 4.01-3.96 (m, 1H) , 3.17-3.08 (m, 1H) , 2.73-2.64 (m, 1H) , 2.04 (s, 3H) , 1.97-1.84 (m, 1H) , 1.80-1.73 (m, 1H) , 1.65-1.58 (m, 1H) .
In the similar way to that described for 6- (1-acetylpiperidin-4-ylsulfonyl) -3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 44) , the following compoundswere synthesized, except using methane sulfonyl chloride and ethyl chloroformate as the sulfonylating and acylating reagents.
Figure PCTCN2015082514-appb-000105
EXAMPLE 47
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000106
Step A: 3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (400 mg, 0.417 mmol) was dissolved in dichloromethane (3.0 ml) , then TFA (1.5 mL) was added. The mixture was stirred for 1.5 hr at ambient temperature. The solvent was removed under vacuum. The residue was diluted with dichloromethane (6.0 ml) and pH value of the resulting solution was adjusted to 7 with saturated aqueous sodium carbonate. The resultingmixture was extracted with dichloromethane (3 x10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 5mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C28H31IN6O6S2 [M + H] +: 739, found 739.
Step B: 6- ( (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25 mL flask was placed3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide (150 mg, 0.203 mmol) , 2-bromoethanol (50.8 mg, 0.406 mmol) and K2CO3 (84 mg, 0.609 mmol) in DMF (2.0 ml) . The mixture was stirred for 18 hrs at ambient temperature. The reaction mixture was quenched with water (5 mL) , diluted with water (15 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10mL) and then brine (2 x 10mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/15) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C30H35IN6O7S2 [M + H] +: 783, found 783；
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL flask was placed a mixture of 6- ( (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (110 mg, 0.141 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (62.2 mg, 0.351 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (24.36 mg, 0.021 mmol) and Na2CO3 (44.7 mg, 0.422 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (4.0 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirredovernight at 80℃. The reaction mixture was diluted with water (3 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 4 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C37H41N9O7S2 [M + H] +: 788, found 788.
Step D: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL flask was placed 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (1- (2-hydroxyethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (60 mg, 0.076 mmol) and TFA (3.0 mL, 38.9 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Sunfire, 19 x 250 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30-64％B in 8 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C21H25N9O5S2 [M + H] +: 548, found 548； 1H NMR (300 MHz, DMSO-D2O) : δ 8.25 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.95 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.06 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.74-6.67 (m, 1H) , 6.28 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.41-4.28 (m, 1H) , 3.78-3.63 (m, 2H) , 3.40-3.37 (m, 2 H) , 2.93-2.82 (m, 2H) , 2.71-2.50 (m, 2H) , 2.15-1.96 (m, 4H) .
EXAMPLE 48
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (1- (2-aminoethyl) piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000107
Step A : tert-butyl 2- (4- (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenylsulfonyl) piperidin-1-yl) ethylcarbamate.
Into a 25 mL flask was placed3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide (160 mg, 0.217 mmol) , tert-butyl (2-bromoethyl) carbamate (243 mg, 1.083 mmol) and triethylamine (110 mg, 1.083 mmol) in DMF (2.0 ml) . The reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hr and then quenched with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x15 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C35H44IN7O8S2 [M + H] +: 882, found 882；
Step B: tert-butyl (2- (4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidin-1-yl) ethyl) carbamate
Into a 10 mL flask was placed tert-butyl (2- (4- ( (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidin-1-yl) ethyl) carbamate (145 mg, 0.164 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (72.8 mg, 0.411 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (28.5 mg, 0.025 mmol) and Na2CO3 (52.3 mg, 0.493 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (3.0 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirredovernight at 80℃. The reaction mixture was diluted with water (3 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 4 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C42H50N10O8S2 [M + H] +: 887, found 887.
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (1- (2-aminoethyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL flask was placed tert-butyl (2- (4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidin-1-yl) ethyl) carbamate (130 mg, 0.147 mmol) in DCM (2.0 mL) . TFA (1.0 mL) was added at 0℃. The mixture was stirred for 2 hr at room temperature. The solvent was removed under vacuum. The residue was dissolved in TFA (3.0 mL) and was stirred for 2 hr at 80℃. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 20-40％B in 8 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C21H26N10O4S2 [M + H] +: 547, found 547； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.45 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.94 (d, J ＝8.1 Hz, 1H) , 7.22 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.09-7.06 (m, 1H) , 6.80 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 4.35-4.21 (m, 1H) , 3.13-2.99 (m, 4H) , 2.68-2.57 (m, 2 H) , 2.23-1.96 (m, 6H) .
EXAMPLE 49
4- (4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) piperidine-1-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000108
Step A: 4- ( (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxamide
Into a 25 mL flask was placed3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) benzenesulfonamide (200 mg, 0.271 mmol) , TEA (0.189 ml, 1.354 mmol) and dichloromethane (2.0 ml) . Then isocyanatotrimethylsilane (312 mg, 2.71 mmol) was added and the mixture was stirred for 2 hr at ambient temperature. The solvent was removed under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/15) . The  combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C29H32IN7O7S2 [M + H] +: 782, found 782
Step B: 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxamide
Into a 10 mL flask was placed 4- ( (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxamide (120 mg, 0.154 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (67.9 mg, 0.384 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (26.6 mg, 0.023 mmol) and Na2CO3 (48.8 mg, 0.461 mmol) in Dioxane/H2O (4: 1) (3.0 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred for overnight at 80℃. The reaction mixture was diluted with water (3 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 4 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C36H38N10O7S2 [M + H] +: 787, found 787.
Step C: 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxamide.
Into a 10 mL round bottom flask was placed 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxamide (60 mg, 0.076 mmol) and TFA (2.0 mL, 26.0 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Sunfire, 19 x 250 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％TFA, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 53-63％B in 8 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C20H22N10O5S2 [M + H] +: 547, found 547； 1H NMR (300 MHz, DMSO-D2O) : δ 8.28 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.91 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.14 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.92-6.77 (m, 1H) , 6.41 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 4.46-4.36 (m, 1H) , 4.13-4.05 (m, 2H) , 2.88-2.71 (m, 2 H) , 1.99-1.80 (m, 2H) , 1.75-1.56 (m, 2H) .
EXAMPLE 50
2- (3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000109
Step A: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared in a similar fashion to that of Step A in Example 47 starting from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate.
Step B: 2- (3- ( (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide
A solution of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (250 mg, 0.352 mmol) , 2-chloroacetamide (329 mg, 3.52 mmol) , KI (292 mg, 1.759 mmol) and TEA (0.490 ml, 3.52 mmol) in DMF (7 ml) was stirred at 25℃ for 48 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , diluted with water (40 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1 : 10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d forC28H30IN7O7S2 [M + H] +: 768, found : 768； 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) : 8.36 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.10 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.35-7.32 (m, 2H) , 7.20-7.05 (m, 2H) , 6.85-6.76 (m, 4H) , 5.03-5.00 (m, 1H) , 3.98-3.65 (m, 8H) , 3.00 (s, 2H) .
Step C: 2- (3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenylsulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide
A solution of 2- (3- ( (4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide (140 mg, 0.182 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (64.6 mg, 0.365 mmol) , Na2CO3 (38.7 mg, 0.365  mmol) and Pd (Ph3P) 4 (42.2 mg, 0.036 mmol) in 1, 4-Dioxane (1 ml) and water (0.25 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (20/80) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d forChemical Formula: C35H36N10O7S2 [M + H] +: 773, found : 773
Step D: 2- (3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide
A solution of 2- (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonyl) azetidin-1-yl) acetamide (140 mg, 0.181 mmol) in TFA (13.96 μl, 0.181 mmol) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 10-50％B in 10 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d forChemical Formula: C19H20N10O5S2 [M + H] +: 533, found : 533； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 8.36 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.98 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.50 (brs, 2H) , 7.20-7.00 (m, 4H) , 6.78 (brs, 2H) , 6.80-6.75 (m, 1H) , 6.22 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 5.04-5.00 (m, 1H) , 3.75-3.60 (m, 4H) , 3.10 (s, 2H) .
In the similar way as described for Examples 44-50, the following compounds were synthesized, starting from 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-iodo-N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
Figure PCTCN2015082514-appb-000110
Figure PCTCN2015082514-appb-000111
Figure PCTCN2015082514-appb-000112
EXAMPLE 58
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000113
Step A: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
In a reaction vessel 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine (40 mg, 0.203 mmol) and 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (155 mg, 0.609 mmol) were combined, followed by addition of potassium acetate (59.8 mg, 0.609 mmol) and PCy3Pd G2 (11.99 mg, 0.020 mmol) . Then Dioxane (1015 μl) was added. This mixture was degassed and then heated at 80℃ for 16 hr. After the reaction was cooled to rt, tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (189 mg, 0.203 mmol) , PdCl2 (dppf) -CH2Cl2Adduct (16.6 mg, 0.020 mmol) and potassium carbonate (168 mg, 1.22 mmol) dissolved in 0.3 mL of water were added. The reaction mixture was degassed and then heated at 60℃ for 16 hr. LC-MS showed the formation of the desired product along with deboronation product. The reaction was cooled and filtered, and the filtrates were concentrated and purified by column chromatography (100％hexane to 100％EtOAc/Hexane) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol- 5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC/MS [M+H] +: 921.8.
Step B: 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (36 mg, 0.039 mmol) was stirred at room temperature in TFA/DCM (1/1, 2 mL) for 1 hr. LC-MS showed the Boc and one PMB group were removed. The reaction was concentrated, co-evaporated with toluene 3X. The resulting compound was taken up in TFA (2 mL) and heated at 60℃ for 2 hr. LC-MS showed the completion of the reaction. The reaction was concentrated and purified with reverse phase HPLC (0-20％CH3CN/water with 0.05％TFA) . The correct fractions were combined, concentrated and lyophilized to give 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. LC/MS [M+H] +: 461.4 
The following EXAMPLES59-60 were prepared in an analogous fashion asdescribed above for 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 58) , starting from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand using boronic acids or boronic esters that are commercially available, known, or prepared as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000114
Figure PCTCN2015082514-appb-000115
EXAMPLE 61
8- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000116
Step A: Ethyl 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate and ethyl 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate
Ethyl 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate and ethyl 8- (3- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylatewas prepared in a similar fashion to that of tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (StepA) from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateyl and 8-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate. LC/MS [M+H] +: 993.7.
Step B: 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid and 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid
Ethyl 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate and ethyl 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylate (81 mg, 0.082 mmol) were dissolved in THF (1 mL) and water (0.5 mL) . LiOH (31 mg, 1.294 mmol) was added. The mixture was stirred at room temeprature for 12 hr. LC-MS showed the formation of the desired product. The reaction mixture was diluted with EtOAc and acidified to pH ＝ 4 by adding 1M HCl aqueous solution. The EtOAc layer was separated, washed with brine, filtered through a pad of anhydrous Na2SO4, and concentrtaed to give crude 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid and 8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid, which was used directly in the next step. LC/MS [M+H] +: 965.4.
Step C: 8- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid
8- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridine-2-carboxylic acid was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) . LC-MS [M+H] +: 505.4..
EXAMPLE 62
4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000117
Step A: tert-Butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
The title compoundswere prepared in a similar fashion to the synthesis of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (Example 58, StepA) fromtert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (REFERENCE EXAMPLE 6) and (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid. LC/MS [M+H] +: 953.6.
Step B: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (621 mg, 0.652 mmol) were added portionwise to a black solution of copper (II) bromide (175 mg, 0.782 mmol) and tert-butyl nitrite (107 mg, 1.042 mmol) in acetonitrile (2.4 mL) at room temeperature under N2. The mixture was stirred for 30 min. The reaction mixture was purified by column chromatography (100％hexane to 50％EtOAc/Hexane) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate.
LC/MS [M+H] +: 1016.1, 1018.5.
Step C: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Copper (I) Cyanide (59.5 mg, 0.664 mmol) was added to tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (563 mg, 0.554 mmol) in pyridine (2 mL) . The mixture was heated at 120℃ for 1 hr and then cooled to room temperature. The mixture was purified by column chromatography (100％hexane to 50％EtOAc/Hexane) to give a mixture of desired product tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate along with an impurity. LC-MS [M+H] +: 963.6.
Step D: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (122 mg, 0.127 mmol) in MeOH (0.5 mL) was added Sodium Methoxide (2.74 mg, 0.013 mmol) . The mixture was stirred at room temperature for 1 hr. Ammonium Chloride (13.55 mg, 0.253 mmol) was added and the mixture was continued to be stirred at room temperature for 24 hr. LC-MS showed the formation of the desired product. The reaction mixture was concentrated to give the crude tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate, which was used directly in the next step. LC-MS [M+H] +: 980.7.
Step E: 4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide was prepared from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate in a similar fashion to the preparation of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) . LC-MS [M+H] +: 520.3.
EXAMPLE 63
6- (Azetidin-3-ylthio) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000118
Step A: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate
(3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) thio) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (120 mg, 0.147 mmol) , 5-bromoimidazo [1, 2-a] pyridine (37.6 mg, 0.191 mmol) , Palladium Tetrakis (17.0 mg, 0.015 mmol) , sodium carbonate (31.1 mg, 0.294 mmol) were placed in a reaction vessel, and dioxane (1102 μl) and water (367 μl) were added. The reaction was sealed, degassed for 25 min, and then heated at 60℃ for 12 hr. The reaction was purified by column chromatography (0-10％MeOH/EtOAc) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 889.8.
Step B: 6- (Azetidin-3-ylthio) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
6- (Azetidin-3-ylthio) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate in a similar fashion to the preparation of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) .LC-MS [M+H] +: 429.4.
EXAMPLE 64
6- ( (2-Aminoethyl) sulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000119
Step A: tert-Butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
tert-Butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (1200 mg, 1.326 mmol) , Palladium Xphos precatalyst 2nd Generation (209 mg, 0.265 mmol) , 3-bromopyridin-2-amine (275 mg, 1.591 mmol) , sodium carbonate (281 mg, 2.65 mmol) were placed in a vial, then Dioxane (9946 μl) and water (3315 μl) were added. The reaction was sealed and degassed for 20 min and then heated at 60℃ for 12 hr. The reaction mixture was purified by column chromatography (0-80％EtOAc/Hexane) to give tert-butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 885.6.
Step B: tert-Butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
tert-Butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and and tert-butyl (2- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (171 mg, 0.193 mmol) and 2-chloroacetaldehyde (37.9 mg, 0.483 mmol) were heated in EtOH (500 ul) and THF (200 ul) at 75℃ for 12 hr. LC-MS showed that this reaction was a clean conversion. The reaction mixture was purified by  column chromatography (0-15％MeOH/EtOAc) to give tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 909.
Step C: 6- ( (2-Aminoethyl) sulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
6- ( (2-Aminoethyl) sulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 449.3.
EXAMPLE 65
3- (2-Aminoimidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000120
Step A: tert-Butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
(3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid and (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (1250 mg, 1.473 mmol) and 2, 2-dimethylpropane-1, 3-diol (767 mg, 7.36 mmol) were placed in a vial, then Dioxane (11 mL) was  added. The reaction mixture was degassed and heated at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was cooled to room temperature, to which, 2nd Generation Xphos Precatalyst (232 mg, 0.295 mmol) , sodium carbonate (312 mg, 2.95 mmol) , and 3-bromopyridin-2-amine (306 mg, 1.767 mmol) and water (3682 μl) were added. The reaction was sealed and degassed for 20 min and then heated at 40℃ for 12 hr. The reaction mixture was purified by column chromatography (0-80％EtOAc/Hexane) to give tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 897.6.
Step B: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (4-methylphenyl) sulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (4-methylphenyl) sulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (467 mg, 0.521 mmol) in Pyridine (1407 μl) , was added 4-methylbenzene-1-sulfonyl chloride (149 mg, 0.781 mmol) . The reaction mixture was sealed and heated at 80℃for 12 hr. LC-MS showed formation of the desired product. The reaction was concentrated and the residue was purified by column chromatography (0-100％EtOAc/Hexane) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (4-methylphenyl) sulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (4-methylphenyl) sulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 1051.6.
Step C: tert-Butyl (Z) -3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl (Z) -3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (4-methylphenylsulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (4-methylphenyl) sulfonamido) pyridin-3-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (218 mg, 0.207 mmol) , 2-iodoacetamide (78 mg, 0.421 mmol) and DIEA (73.5 μl, 0.421 mmol) were stirred in DMF (1000 uL) at 60℃ for 12 hr. LC-MS showed that reaction was completed. The reaction was purified by column chromatography (0-15％MeOH/EtOAc) to give tert-butyl (Z) -3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl (Z) -3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 1108.8.
Step D: N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide and N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide
(Z) -tert-Butyl 3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl (Z) -3- ( (4- (1- (2-amino-2-oxoethyl) -2- (tosylimino) -1, 2-dihydropyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (185 mg, 0.167 mmol) were placed in a vial. DCM (835 uL) was added followed by Trifluoroacetic Anhydride (584 μl, 4.14 mmol) . The reaction was sealed and stirred at rt for 1 hr then at 30℃ for 1.5 hr. LC-MS showed that the reaction was completed, that the Boc group was lost during the reaction and the azetidine was acylated with trifluoroactyl group. The reaction mixture was concentrated and the residue was purified by column chromatography (100％hexane to 50％EtOAc/Hexane) to give N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide and N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide. LC-MS [M+H] +: 1028.5.
Step E: 3- (2-Aminoimidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide and N- (8- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (1- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) phenyl) imidazo [1, 2-a] pyridin-2-yl) -2, 2, 2-trifluoroacetamide (134 mg, 0.130 mmol) was dissolved in MeOH (1300 uL) . Potassium Carbonate (180 mg, 1.304 mmol) and water (130 ul) were added. The reaction mixture was heated at 80℃ for for 5 hr. The resulting crude 3- (2-aminoimidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminoimidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (109 mg, 0.130 mmol) was heated in TFA (2 mL) at 60℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated and purified with reverse phase HPLC (3-40％CH3CN/water with 0.05％TFA) to afford 3- (2-aminoimidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. LC-MS [M+H] +: 476.4.
EXAMPLE 66
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000121
Step A: tert-Butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-Butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate were prepared in a similar fashion to  that of tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (Step A) . LC-MS [M+H] +: 897.7.
Step B: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate andtert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (140 mg, 0.156 mmol) and 2-chloroacetaldehyde (32 mg, 0.408 mmol) was heated in ethanol (411 μl) and THF (200 ul) at 80℃ for 3 hr. LC-MS showed the desired product was the major product. The reaction mixture was purified by column chromatography (0-15％MeOH/EtOAc) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 921.6.
Step C: 6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared in a similar fashion as the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (imidazo [1, 2-a] pyridin-5-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 461.2.
EXAMPLE 67
6-Amino-5- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000122
Step A: Methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate and methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate
Methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate and methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate was prepared in a similar fashion to the synthesis of of tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (Step A) . LC-MS [M+H] +: 955.6.
Step B: tert-Butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate and methyl 6-amino-5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinate (116 mg, 0.121 mmol) were treated with 7 M ammonia MeOH (2 mL) and heated at 80℃ for 3 hr. LC-MS showed this reaction was a clean conversion. The reaction was cooled and concentrated to afford tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5- yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate, which was used directly in the next step. LC-MS [M+H] +: 940.4.
Step C: 6-Amino-5- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinamide
6-Amino-5- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) picolinamide was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Step B) from tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-6-carbamoylpyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 480.4.
EXAMPLE 68
4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000123
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate.
To a mixture of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (1.00 g, 1.07 mmol) in water (6 mL) and dioxane (18 mL) was added (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.42 g, 2.15 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (79 mg, 0.11 mmol) and Na2CO3 (0.46 g, 4.30 mmol) under nitrogen. The mixture was stirred at 80℃ for 16hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (4 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and  filtered. The residue was purified by a silica gel chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50 to 1: 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H48N8O9S3 [M + H] +: 953, found 953； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 8.23 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.69-7.63 (m, 3H) , 7.00-6.96 (m, 4H) , 6.87-6.85 (m, 5H) , 6.75-6.70 (m, 3H) , 6.69 (brs, 2H) , 5.11-5.10 (m, 1H) , 4.88-4.86 (m, 2H) , 4.51-4.47 (m, 2H) , 4.33-4.31 (m, 2H) , 4.20-4.17 (m, 1H) , 4.06-3.97 (m, 3H) , 3.72 (s, 9H) , 1.42 (s, 9H) .
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Into a 10mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.70g, 0.734 mmol) in acetonitrile (5mL) under argon atmosphere, followed by the addition of tert-butyl nitrite (0.12g, 1.18 mmol) and copper (II) bromide (0.20 g, 0.88 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at under argon atmosphere at 20℃ for 2 hr. The reaction was quenched with water (20 mL) and extracted with EA (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by a silica gel column, eluted with EA/PE (1: 50 to 1/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H46BrN7O9S3 [M + H] +: 1016, 1018 (1: 1) found1016, 1018 (1: 1) ； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.72 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.16 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 7.28-7.26 (m, 2H) , 6.96-6.93 (m, 4H) , 6.84-6.81 (m, 4H) , 6.64-6.40 (m, 4H) , 5.16-5.12 (m, 1H) , 5.03-4.83 (m, 2H) , 4.44-4.38 (m, 2H) , 4.27-4.23 (m, 2H) , 4.20-3.92 (m, 4H) , 3.69 (s, 9H) , 1.38 (s, 9H) .
Step C: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Into a 10-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.10g, 0.10 mmol) in DMSO (2 mL) under argon atmosphere, followed by the addition of cyanocopper (18 mg, 0.20 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 100℃ for 8 hrunder argon atmosphere. The reaction was quenched with FeSO4 (aq., 20 mL) and extracted with EA (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with  brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EA/PE (2/3) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC47H46N8O9S3 [M + H] +: 963found963； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.31 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.21 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.54-7.53 (m, 2H) , 7.00-6.94 (m, 5H) , 6.88-6.86 (m, 4H) , 6.67-6.40 (m, 3H) , 5.22-5.18 (m, 1H) , 4.51-4.45 (m, 2H) , 4.33-4.21 (m, 4H) , 4.11-3.96 (m, 4H) , 3.73 (s, 9H) , 1.42 (s, 9H) .
Step D: 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid.
Into a 10-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl-3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.10g, 0.10 mmol) in MeOH (2 mL) and THF (0.3 mL) , followed by the addition of sodium methanolate (10.38 μl, 10.38 μmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 5 min. The mixture's pH value was adjusted to pH ～ 6 with HCl (0.1 M) , then the mixture was stirred at 20℃ for 30 min. Then NaOH (2 M, 1mL) was added into the mixture and stirred for 1 hr. The mixture's pH value was adjusted to pH ～ 6 with HCl (0.1 M) , The mixture was extracted with EA (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure to givethe crude title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC47H47N7O11S3 [M + H] +: 982found982； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.23 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.02 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.31-7.25 (m, 2H) , 7.00-6.95 (m, 5H) , 6.88-6.72 (m, 7H) , 5.21-5.16 (m, 2H) , 5.02-4.95 (m, 1H) , 4.49-4.45 (m, 2H) , 4.32-4.12 (m, 4H) , 3.96-3.88 (m, 2H) , 3.73 (s, 9H) , 1.42 (s, 9H) .
Step E: 4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid
A mixture of 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid (70 mg, 0.07 mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 25℃ for 30 min. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was dissolved in TFA (0.5 mL) and stirred at 60℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: Acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-20％in  8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC18H15N7O6S3 [M + H] +: 522found522； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.99 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.92 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 7.16 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.70 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 5.32-5.24 (m, 1H) , 4.39-4.33 (m, 2H) , 4.27-4.22 (m, 2H) .
EXAMPLE 69
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000124
Step A : tert-butyl 2- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (300 mg, 0.327 mmol) in 1, 4-Dioxane (3 mL) /water (0.6 mL) (5:1) was added 6- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine (85 mg, 0.327 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (377 mg, 0.327 mmol) and potassium acetate (32.0 mg, 0.327 mmol) at ambient temperature. The flask was degassed with nitrogen for three times. Then the mixture was stirred for 6 hr at 80℃ under an atmosphere of nitrogen. The reaction was black red from yellow. The solid was filtered out and the filtrate was concentrated under vacuum. The residue was then applied onto silica gel column with dichloromethane/methanol (20: 1) to give the title compound (mixture of two tetrazole regioisomers) : LCMS (ESI) calc’ d for C45H49N9O9S2 [M + H] +: 924, found 924；
Step B : 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (180 mg, 0.195 mmol) in dichloromethane (1.5 mL) was added trifluoroacid (1.5 mL) at ambient temperature. The reaction system was then kept for 1 hr at ambient temperature. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to get the crude product with a mixture of 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. The crude product was then used directly for the next step: LCMS (ESI) calc’ d for C40H41N9O7S2 [M + H] +: 824, found 824
Step C : 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (50 mg, 0.061 mmol) and 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (50 mg, 0.071 mmol) were dissolved in trifluoroacid (5 mL) at ambient temperature. The reaction was kept for 1 hr at 80℃. The reaction was yellow. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to get the crude product. The crude product was then applied onto Prep-HPLC with the condition (Column: Sunfire C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％TFA, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5-30％B in 10 min； 254 nm) to get the final product. LCMS (ESI) calc’ d for C16H17N9O4S2 [M + H] +: 464, found 464； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.43 (d, J ＝ 3.6 Hz, 1H) , 8.20 (bs, 2H) , 7.83 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.88 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.70 (d, J ＝ 1.2 Hz, 1H) , 6.48-6.45 (m, 1H) , 6.36 (bs, 1H) , 4.12-4.07 (m, 2H) , 3.16-3.10 (m, 2H) .
The EXAMPLES 70-80 in the Table below were prepared in an analogous fashion to that described for 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-5-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (immediately above) , starting from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and the corresponding boronic acids or boronic esters which were prepared as described herein, or which were available from commercial sources.
Figure PCTCN2015082514-appb-000125
Figure PCTCN2015082514-appb-000126
Figure PCTCN2015082514-appb-000127
EXAMPLE 81
6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2-aminothiazolo [5, 4-c] pyridin-7-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide hydrochloride
Figure PCTCN2015082514-appb-000128
Step A: N- (3, 5-dibromopyridin-4-ylcarbamothioyl) benzamide
Into a mixture of 3, 5-dibromopyridin-4-amine (10.00 g, 39.70 mmol) in acetone (100 mL) was added benzoyl isothiocyanate (12.96 g, 79.00 mmol) . The resulting mixture was stirred at 60℃ and for 3 hr. The reaction mixture was cooled to ambient temperature, quenched by Na2CO3 (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organic layer was washed with brine (4 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and concentrated under reduced pressure, the residue was purified by a silica gel column, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50～1: 5) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC13H9Br2N3OS [M + 1] + 414, 416, 418 (1: 2: 1) , found 414, 416, 418 (1: 2: 1) ； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 12.19 (s, 1H) , 12.04 (s, 1H) , 8.02 (s, 2H) , 7.75-7.57 (m, 5H) .
Step B: N- (7-bromothiazolo [5, 4-c] pyridin-2-yl) benzamide
In the 25 mL round bottom flask was placed a solution of N- ( (3-bromo-5-fluoropyridin-4-yl) carbamothioyl) benzamide (3.00 g, 7.27 mmol) in DMF (10 mL) , followed by the addition of Cs2CO3 (4.74 g, 14.54 mmol) . After the mixture was stirred at 80℃ for 3 hr in an oil bath, it was poured into water (300 mL) , then the solid was collected by filtration and dried in oven to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C13H8BrN3OS [M + 1] + 334, 336 (1: 1) found 334, 336 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.57 (s, 1H) , 9.22 (s, 1H) , 8.71 (s, 1H) , 8.19 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 7.73-7.69 (m, 1H) , 7.62-7.58 (m, 2H) .
Step C: 2-benzamidothiazolo [5, 4-c] pyridin-7-ylboronic acid
In a 25 mL round flask was placed a solution of N- (7-bromothiazolo [5, 4-c] pyridin-2-yl) benzamide (1.00 g, 2.99 mmol) in dioxane (10 mL) , followed by the addition of Pd (dppf) Cl2 (0.22 g, 0.30 mmol) , 5, 5, 5', 5'-tetramethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborinane) (1.35 g, 5.98 mmol) and potassium acetate (0.88 g, 8.98 mmol) . The resulting mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃ for 16 hr in an oil bath. The resulting mixture was then diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (2 x 100 mL) . The combined organic layer were washed with brine (2 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The crude was purified by com-flash with the following conditions: water (0.05％NH4CO3) and acetonitrile (hold 45％acetonitrile for 30 min, ) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give 0.15 g (10％yield) of (2-benzamidothiazolo [5, 4-c] pyridin-7-yl) boronic acid as a off-white solid: LCMS (ESI) calc’ d for C13H10BN3O3S: [M + 1] + 300 found 300； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 13.22 (brs, 1H) , 9.22 (s, 1H) , 8.72 (s, 1H) , 7.68-7.53 (m, 5H) .
Step D: tert-butyl (2- ( (4- (2-benzamidobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) -carbamate
In an 8 mL vial was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.10 g, 0.11 mmol) in dioxane (3 mL) and water (0.6 mL) , followed by the addition of (2-benzamidobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.11 g, 0.38 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (25 mg, 0.02 mmol) and Na2CO3 (35 mg, 0.33 mmol) . The mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃ for 16 hr in an oil bath. The resulting mixture was diluted with water (30 mL) and extracted with ethyl acetate (2 x 20 mL) . The combined organic layer was washed with water (2 x 40 mL) , brine (2 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-TLC with methanol/dichloromethane (1/60) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C51H51N9O10S3: [M + 1] + 1046 found 1046； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.13 (s, 1H) , 9.76 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.32 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 8.04 (s, 1H) , 7.67-7.55 (m, 5H) , 7.01-6.84 (m, 9H) , 6.87-6.83 (m, 4H) , 5.12-5.02 (m, 2H) , 4.49-4.42 (m, 2H) , 4.09-3.91 (m, 4H) , 3.71 (s, 7H) , 3.68 (s, 2H) , 3.48-3.46 (m, 2H) , 1.35 (s, 9H) .
Step E : 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2-aminothiazolo [5, 4-c] pyridin-7-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide hydrochloride
In a 25 mL round flask was placed tert-butyl (2- ( (4- (2-benzamidothiazolo [5, 4-c] pyridin-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (75 mg, 0.07 mmol) , followed by the addition of HCl (10 mL, 37％) . The mixture was stirred at 80℃ for 6 hr in an oil bath. LCMS confirmed production of the desired product. The solvent was concentrated under reduced pressure. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18 , 19 x 150 mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (5％～20％) for 8 min, hold 100％for 2 min, down to 5％in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum. To the product was added two drops HCl (aq. ) , then the reaction mixture was freeze dried to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C15H15N9O4S3: [M + 1] + 482 found 482； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (brs, 2H) , 9.03 (s, 1H) , 8.60 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.20-8.15 (m, 4H) , 7.44 (brs, 2H) , 4.18 (t, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 3.28-3.26 (m, 2H) .
EXAMPLE 82
N- (4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) acetamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000129
Step A: tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (1.5 g, 1.63 mmol) in dioxane (12 ml) was added Pd (dppf) Cl2 (0.096 g, 0.163 mmol) , Na2CO3 (0.692 g, 6.53 mmol) and (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.633 g, 3.27 mmol) with stirring at room temperature. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred for overnight. The solution was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography40 g, eluting with  Acetonitrile/water + 0.1％TFA (1/3) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C45H48N8O9S3 [M + H] +: 941, found 941.
Step B: tert-butyl (2- ( (4- (2-acetamidobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (180 mg, 0.191 mmol) inTHF (3 ml) was added acetic anhydride (39.1 mg, 0.383 mmol) and triethylamine (58.1 mg, 0.574 mmol) with stirring at room temperature. The resulting solution was warmed to 50℃ and stirred for overnight. The reaction solution was cooled down to ambient temperature, diluted with water (5 mL) and extracted with ethyl acetate (3x5 mL) . The combined organic layers were washed with brine (5 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford yellowoil. The residue was purified by silica gel column chromatography20 g, eluting with EtOAc/petroleum ether (2 : 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C47H50N8O10S3 [M + H] +: 983, found 983.
Step C: N- (4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) acetamide
To a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-acetamidobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (120 mg, 0.122 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (0.094 ml, 1.221 mmol) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The residue was concentrated, and dissolved again in TFA (2 mL) . The resulting mixture was dissolved at 80℃for 2 hr. After evaporation, the crude product was purified by reverse phase prep-HPLC to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H18N8O5S3 [M + H] +: 523, found 523； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.25 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.86-7.79 (m, 2H) , 7.08-7.05 (m, 1H) , 6.81 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 4.16-4.11 (m, 2H) , 3.27-3.24 (m, 2H) , 2.13 (s, 3H) .
The EXAMPLES 83-84 in the Table below were prepared in an analogous fashion as described for N- (4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) acetamide starting from tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and using alternative  acylating or sulfonylating reagents such as methane sulfonyl chloride and ethyl chloroformate.
Figure PCTCN2015082514-appb-000130
EXAMPLE 85
6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -3- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000131
Step A: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (300 mg, 0.319 mmol) in Pyridine (3 ml) was added trichloromethyl carbonochloridate (189 mg, 0.956 mmol) and DMAP (156 mg, 1.275 mmol)  with stirring at room temperature. The resulting solution was warmed to room temperature and stirred for 48 hr and then ammonia (5 ml) was added. The resulting solution was cooled down to ambient temperature, diluted with water (10 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x 10mL) . The combined organic layers were washed with brine (20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EtOAc/Petroleum ether (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H49N9O10S3 [M + H] +: 985, found 985.
Step B : 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -3- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide.
To a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (120 mg, 0.122 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (0.094 mL, 1.219 mmol) with stirring at room temperature. The resulting solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The residue was concentrated to afford 80 mg (77 ％yield) of 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide as a yellow title compound as an oil. The solution of 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2-ureidobenzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide (50 mg, 0.065 mmol) in TFA (0.504 mL, 6.55 mmol) was stirred at room temperature. The resulting solution was stirred at 80℃ for 2 hr and then cooled down to room temperature. After being concentrated under vacuum, the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column,
Figure PCTCN2015082514-appb-000132
5 μm, 19 mm X 250 mm； Mobile Phase A: water with 0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 15 mL/min； Gradient: 17％B to 45％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H17N9O5S3 [M + H] +: 524, found 524； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ 8.26 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.99-7.91 (m, 1H) , 7.72-7.68 (m, 1H) , 6.97-9.92 (m, 1H) , 6.70 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.15 (t, J ＝ 6.9 Hz, 2H) , 3.27-3.24 (m, 2H) .
EXAMPLE 86
4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000133
Step A: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 10mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl nitrite (0.11g, 1.02 mmol) and copper (II) bromide (0.17g, 0.77 mmol) in acetonitrile (3mL) , followed by the addition a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (described above, 0.60g, 0.64 mmol) in acetonitrile (3 ml) at 0℃. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 20℃ for 16 hr. The reaction was quenched with water (30 mL) and extracted with EA (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with brine 3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by Prep-TLC, eluted with EA/PE (2/3) to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC45H46BrN7O9S3: [M + 1] +1004, 1006 (1: 1) found 1004, 1006 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.00 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.71 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.21-7.19 (m, 1H) , 7.07-7.03 (m, 5H) , 6.82-6.77 (m, 4H) , 6.63-6.01 (m, 4H) , 5.32 (brs, 1H) , 4.94-4.92 (m, 2H) , 4.67-4.63 (m, 2H) , 4.19-4.12 (m, 4H) , 3.87-3.79 (m, 2H) , 3.77 (s, 9H) , 1.45 (s, 9H) .
Step B: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxy-benzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 10mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.60g, 0.60 mmol) in DMSO (4 mL) , followed by the addition of cyanocopper (0.11 g, 1.19 mmol) . The resulting mixture was stirred at 100℃ for 4 hr. The reaction was quenched with FeSO4 (aq., 100 mL) and extracted with EA (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (4 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium  sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EA/PE (2/3) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H46N8O9S3: [M + 1] +951 found 951； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.76 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.92 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.86 (d, J ＝ 9.2 Hz, 1H) , 7.41-7.35 (m, 1H) , 7.17-7.15 (m, 1H) , 7.05-7.02 (m, 4H) , 6.81-6.75 (m, 4H) , 6.55-6.53 (m, 4H) , 5.27 (brs, 1H) , 5.01-4.85 (m, 2H) , 4.63-4.59 (m, 2H) , 4.15-4.08 (m, 4H) , 3.87-3.83 (m, 2H) , 3.76 (s, 9H) , 1.40 (s, 9H) .
Step C : tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 25mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (60 mg, 0.05 mmol) in MeOH (3 mL) and THF (0.5 mL) , followed by the addition of sodium methanolate (5.05 μL, 0.05 mmol) . The resulting mixture was stirred at 20℃ for 0.5 hr. Then NH4Cl (27 mg, 0.505 mmol) was added. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 48 hr. The reaction was quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by Prep-TLC, eluted with EA/PE (5/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H49N9O9S3: [M + 1] +968 found 968； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.85 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.93-7.89 (m, 2H) , 7.37-7.32 (m, 1H) , 7.04-7.01 (m, 5H) , 6.88-6.79 (m, 8H) , 6.45-6.26 (m, 3H) , 6.31 (brs, 1H) , 5.07-4.95 (m, 2H) , 4.74-4.67 (m, 2H) , 4.14-4.08 (m, 4H) , 3.88 (s, 9H) , 3.80-3.76 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) .
Step D: 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
In the 25 mL round bottom flask, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamimidoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (40 mg, 0.041 mmol) in TFA (2 mL) . The mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The solvent was concentrated under reduced pressure. The crude product was resolved in TFA (2 mL) . The mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was concentrated under reduced pressure to give the crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18 , 19*150mm； mobile phase: water (0.05％HCOOH) and acetonitrile (5～30％acetonitrile for 10 min, hold 100％for 2 min, down to 5％in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254  nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum. Then two drops HCl (aq. ) were added and lyophilized to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC17H17N9O4S3: [M + 1] +508 found 508； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.77-8.70 (m, 4H) , 8.59 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.34 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.20-8.17 (m, 4H) , 7.63-7.52 (m, 3H) , 7.35-7.27 (m, 1H) , 4.21-4.16 (m, 2H) , 3.35-3.32 (m, 2H) .
EXAMPLE 87
6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000134
Step A: tert-butyl (2- ( (4- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 10-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (prepared as described above, 0.14 g, 0.15 mmol) in EtOAc (3 mL) , followed by the addition of Pd (OH) 2 (31 mg, 0.04 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 25℃ under hydrogen atmosphere for 16 hr. The mixture was filtered and the filtrate was evaporated. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Petroleum ether (3 : 2) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found955； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ8.71 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.00 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.81 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.16-7.14 (m, 1H) , 7.05-7.03 (m, 5H) , 6.80-6.78 (m, 4H) , 6.58-6.45 (m, 4H) , 5.30 (brs, 1H) , 4.88-4.85 (m, 2H) , 4.67-4.63 (m, 2H) , 4.15-4.06 (m, 4H) , 3.86-381 (m, 4H) , 3.76 (s, 9H) , 1.43 (s, 9H) .
Step B: 6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide 
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (4- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (80 mg, 0.08 mmol) in DCM (2 mL) , followed by the addition of TFA (0.5mL, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr and then the solvent was evaporated to give the crude productwhich was used directlyin the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found735.
Step C: 6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) benzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (60 mg, 0.07 mmol) in TFA (2 mL, 26.0 mmol) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column , 5μM, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 40％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found495； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.50 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.96 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.27 (t, J ＝8.0 Hz, 1H) , 7.10 (d, J ＝ 6.8 Hz, 1H) , 4.31 (s, 2H) , 4.10 (t, J ＝ 6.8 Hz, 2H) , 3.38 (t, J ＝ 6.8 Hz, 2H) .
EXAMPLE 88
4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000135
Step A: methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate
Into a 10-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (prepared as described above, 0.01 g, 0.11 mmol) in MeOH (2 mL) and THF (0.3 mL) . This was followed by the addition of sodium methanolate (10.51 μL, 10.51 μmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 20℃ for 5 min. The mixture's pH value was adjusted to pH ＝ 6 with HCl (0.1 M, 0.5 mL) , then the mixture was stirred at 20℃ for 30 min. The mixture was extracted with EtOAc (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC47H49N7O11S3 [M + H] +: 984, found984； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ8.73 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.01 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.87 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.33-7.31 (m, 1H) , 7.16-7.11 (m, 1H) , 7.04-7.02 (m, 4H) , 6.80-6.76 (m, 4H) , 6.62-6.53 (m, 4H) , 5.33 (brs, 1H) , 4.92-4.85 (m, 2H) , 4.69-4.64 (m, 2H) , 4.15-4.11 (m, 2H) , 4.00 (s, 3H) , 3.85-375 (m, 4H) , 3.75 (s, 9H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B: methyl 4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate.
Into a 25-mL round-bottom flask , was placed a solution of methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate (0.10g, 0.08 mmol) in DCM (2 mL) . This was followed by the addition of TFA (0.5mL, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The solvent was evaporated to give crude product, which was used directly to the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC34H33N7O8S3 [M + H] +: 764, found764.
Step C: (methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate (70 mg, 0.08 mmol) in TFA (3 mL) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated to give the  crude productwhich was used directly to the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC18H17N7O6S3 [M + H] +: 524, found524.
Step D: 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylic acid
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxylate (50 mg, 0.07 mmol) in MeOH (2 mL) , followed by the addition of sodium hydroxide (0.22 ml, 0.22 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column, 5 μm, 19 mm X 250 mm ； Mobile Phase A: water with 10mmol NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 15 mL/min； Gradient: 17％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC17H15N7O6S3 [M + H] +: 510, found510； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ 8.42 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.02 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.93 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.17 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.69 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.26-4.18 (m, 2H) ,3.29 (t, J ＝ 7.5 Hz, 2H) .
EXAMPLE 89
4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000137
Step A: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a mixture of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (from synthesis of 4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide, Step B, 70 mg, 0.07 mmol) in  methanol (2 mL) and H2O (2 mL) was added sodium hydroxide (6 mg, 0.14 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at25℃ for 2 hr and then was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by a silica gel chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50 ～ 1: 3) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H48N8O10S3 [M + H] +: 969, found969； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ8.75 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.17 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.08-8.06 (m, 1H) , 7.91-7.88 (m, 1H) , 7.38 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 7.15-7.11 (m, 1H) , 7.00-6.96 (m, 5H) , 6.87-6.84 (m, 4H) , 6.64-6.62 (m, 3H) , 4.95-4.91 (m, 2H) , 4.62-4.58 (m, 2H) , 4.05-3.89 (m, 4H) , 3.70 (s, 9H) , 3.51-3.49 (m, 2H) , 1.35 (s, 9H) .
Step B: 4- (4- (2-aminoethylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benz o [d] thiazole-2-carboxamide
A mixture of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamoylbenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.10 g, 0.10 mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 25℃ and for 45 min. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The crude product was put in TFA (2 mL) and stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboxamide and the residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x 150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 34％-95％in 8 min； Detector, UV 254 nm. RT: 6.82 min. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H16N8O5S3 [M + H] +: 509, found 509； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.37 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.09-8.03 (m, 3H) , 7.96-7.87 (m, 5H) , 7.33 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.87-6.85 (m, 1H) , 4.18 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 3.36-3.34 (m, 2H) .
EXAMPLE 90
6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (2- (methylamino) benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000138
Step A: tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (methylamino) benzo [d] thiazol-4-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placedtert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (synthesis described above, 0.16g, 0.16 mmol) . This was followed by the addition of methylamine (3.18 mL, 6.37 mmol) in THF (4 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 60℃ for 4 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and the solvent was evaporated under reduced pressure, the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Petroleum ether (1/1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found955.2； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ8.65 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 8.06 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 7.98 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.03-7.00 (m, 4H) , 6.88-6.85 (m, 2H) , 6.78-6.73 (m, 5H) , 6.65-6.63 (m, 2H) , 5.30 (brs, 1H) , 5.05-4.96 (m, 2H) , 4.67-4.64 (m, 2H) , 4.14-4.10 (m, 3H) , 3.79-377 (m, 1H) , 3.76 (s, 9H) , 3.02-2.98 (m, 5H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B: 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2- (methylamino) benzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2-(methylamino) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.14 g, 0.13 mmol) in DCM (2 ml) . This was followed by the addition of TFA (0.5ml, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated to afford the title compound, which was used directly into next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found735.1.
Step C: 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2- (methylamino) benzo [d] thiazol-4-y l) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2- (methylamino) benzo [d] thiazol-4-yl) benzenesulfonamide (0.10 g, 0.11 mmol) in TFA (3 ml, 38.9 mmol) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column , 
Figure PCTCN2015082514-appb-000139
5 μm, 19 mm X 250 mm ； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 15  mL/min； Gradient: 17％B to 35％B in 8 min； RT: 5.1 Min, 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found495.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO) : δ 8.27 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.02 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.98-7.96 (m, 1H) , 7.71 (brs, 4H) , 7.51 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.68 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.37 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 4.15 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 3.29 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 2.88 (d, J ＝ 4.4 Hz, 4H) .
EXAMPLE 91
4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000140
Step A: tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulffamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Into a 50 mL round bottom flask was placed 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine (153 mg, 0.653 mmol) , tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (300 mg, 0.327 mmol) , Pd (PPh3) 4 (75 mg, 0.065 mmol) and sodium carbonate (104 mg, 0.980 mmol) in 1, 4-dioxane (1.5 ml) and water (0.375 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃ for 6 hr. Then the mixture was extracted with ethyl acetate (20 mL) and washed with water (20 mL) . Then theorganic layer was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with ethyl acetate/petrol ether (1/1) to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C44H50N8O9S2 [M + H] +: 899, found 899； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ 8.65-8.63 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.13-8.10 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.23-7.06 (m, 1H) , 7.06-6.89 (m, 6H) , 6.89-6.71 (m, 6H) , 6.55-6.39 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 6.31-6.12 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 5.96-5.80 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 5.02 (s, 2H) , 4.80-4.39 (m, 4H) , 4.10-3.92 (m, 2H) , 3.71 (s, 9H) , 3.53-3.38 (m, 2H) , 1.35 (s, 9H) .
Step B: tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Benzyl 2, 2, 2-trichloroacetimidate (47.7 mg, 0.189 mmol) was added to a solution of tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (170 mg, 0.189 mmol) in acetic acid (2 ml) . After the mixture was stirred at r.t. for 1hr, it was concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C46H47Cl3N8O9S2 [M + H] +: 1025, 1027, 1028 (8: 10: 5) , found 1025, 1027, 1028 (8: 10: 5) .
Step C: methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 50 mL round bottom flask was placed tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (170 mg, 0.166 mmol) and sodium carbonate (17.55 mg, 0.166 mmol) in methanol (2 ml) . After the resulting mixture was stirred at 75℃, it was concentrated under vacuum. The residue was extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) and washed with hydrogen chloride (1 mol in water 2 x 100 mL) . Then the organic layer was concentrated under vacuum. The residue wasapplied on a silica gel column with ethyl acetate/petrol ether (2/1) to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C47H50N8O11S2 [M + H] +: 967, found 967.
Step D: methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 50 mL round bottom flask was place methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (90 mg, 0.093 mmol) in dichloromethane (1 ml) and trifluoroacetic acid (0.500 ml) . The resulting mixture was stirred at r.t. for 1hr. Then the mixture was concentrated under vacuum. The residue was used for next step directly without purification.: LCMS (ESI) calc’ d for C34H34N8O8S2 [M + H] +: 747, found 747.
Step E: methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 25 mL round bottom flask was placed methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (70 mg, 0.094 mmol) in trifluoroacetic acid (1.5 ml) . Then the mixture was stirred at 80℃. Then it was was concentrated under vacuum. The residue was applied on flash with methanol/water (percent of methanol: 0-50 ％in 25 min) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H18N8O6S2 [M + H] +: 507, found 507.
Step F: 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Into a 25 mL round bottom flask was placed methyl 4- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (80 mg, 0.158 mmol) in methanol (1 ml) and water (1.000 ml) . NaOH (0.48 mL,0.48 mmol, 1M aqueous solution) was added. After the resulting mixture was stirred at r.t. for 2hr, it was adjustedto pH ＝ 4 with conc. HCl. The resulting mixture was applied on Prep-HPLC (condition: Column: Sunfire Prep C18 OBD Column 19*150mm 5μM 10nm； Mobile Phase A: WATER WITH 0.05％TFA, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O6S2 [M + H] +: 493, found 493； 1H NMR (400 MHz, d-DMSO) : δ8.58-8.56 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.18-8.16 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.00 (brs, 3H) , 7.52-7.50 (d, J ＝8.0 Hz, 1H) , 7.34 (brs, 2H) , 7.19-7.15 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.70-6.68 (d, J ＝ 6.8 Hz, 1H) , 4.23-4.14 (t, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 3.35-3.30 (t, J ＝ 7.2 Hz, 2H) .
EXAMPLE 92
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000141
Step A: (S) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (S) -tert-butyl (1-hydroxypropan-2-yl) carbamate (1.00 g, 5.71 mmol) and TEA (2.39 mL, 17.12 mmol) in DCM (10 mL) . This was followed by the addition of MsCl (0.53 mL, 6.85 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at ambient temperature for 20 min. The reaction was quenched with ice water (50 mL) and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (4 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford 1.4 g (crude) of (S) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonateas a light yellow oil, then it was used directly to next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC9H19NO5S [M + H-100] +: 154, found154； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) δ 4.59 (brs, 1H) , 4.24-4.21 (m, 1H) , 4.18-4.13 (m, 1H) , 3.98-3.96 (m, 1H) , 3.04 (s, 3H) , 1.45 (s, 9H) , 1.24 (d, J ＝ 6.9 Hz, 3H) .
Step B: (S) -S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate
Into a 50mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, were placed a solution of (S) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate (1.40 g, 4.42 mmol) in DMF (10 mL) , followed by the addition of potassium ethanethioate (2.02 g, 17.69 mmol) at ambient temperature. Theresulting mixture was stirred under argon atmosphere at 80℃ for 16 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with ice water (150 mL) and extracted with EtOAc (3 x 150 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (1/5) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC10H19NO3S [2M + H] +: 467, found467 ； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) δ4.54 (brs, 1H) , 3.87-3.85 (m, 1H) , 3.05-3.02 (m, 2H) , 2.36 (s, 3H) , 1.44 (s, 9H) , 1.22 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
Step C: (S) -tert-butyl (1-mercaptopropan-2-yl) carbamate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (S) -S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate (1.00 g, 3.64 mmol) in MeOH (10 mL) , followed by the addition of potassium carbonate (0.48 mL, 10.93 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at ambient temperature for 3 hr. The reaction's pH value was adjusted to pH ～ 7 at 0℃ and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (4 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford the crude title compound, which was used directly in the next step: LCMS (ESI) calc’ d  forC8H17NO2S [2M + H] +: 383, found 383； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ6.78 (brs, 1H) , 3.51-3.46 (m, 1H) , 2.54-2.48 (m, 1H) , 2.24-2.18 (m, 1H) , 1.38 (s, 9H) , 1.06 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
Step D: (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propan-2-yl) carbamate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.00 g, 1.27 mmol) and (S) -tert-butyl (1-mercaptopropan-2-yl) carbamate (0.97 g, 5.06 mmol) in DMF (10 mL) , followed by the addition of sodium hydride (0.20 g, 5.06 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr under atmosphere of argon. The reaction was quenched with water (100 mL) and extracted with EA (3 X 100 mL) . The combined layers were washed with brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EA/PE (1/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O7S2 [M + H] +: 901, found 901； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.06-7.93 (m, 1H) , 7.75-7.63 (m, 1H) , 7.31-7.21 (m, 2H) , 6.95-6.92 (m, 4H) , 6.79-6.75 (m, 5H) , 5.79-5.78 (m, 1H) , 5.52-5.47 (m, 0.5H) , 5.13-5.08 (m, 0.5H) , 4.74-4.62 (m, 2H) , 4.31-4.25 (m, 1H) , 3.98-3.87 (m, 2H) , 3.79 (s, 9H) , 3.38-3.28 (m, 1H) , 3.37-3.25 (m, 1H) , 1.45 (s, 9H) , 1.16 (d, J ＝ 6.3 Hz, 2H) , 1.09 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) .
Step E: (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propan-2-yl) carbamate (0.80 g, 0.76 mmol) in DCM (8 mL) , followed by the addition of m-CPBA (0.52g, 3.02 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 16 hrunder atmosphere of argon. The reaction was quenched with NaHSO4 (10％, 50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined layers were washed with NaHCO3 (saturated, 3 x 40 mL) , brine (3 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EA/PE (2/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC39H45IN6O9S2 [M + H] +: 933, found 933； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.32-8.21 (m, 2H) , 6.97-6.94 (m, 3H) , 6.89-6.87 (m, 2H) , 6.80-6.73 (m, 7H) , 5.78 (brs, 1H) , 5.54-5.46 (m, 0.5H) , 5.30-5.20 (m, 0.5H) , 4.85-4.76 (m, 1H) , 4.49-4.36 (m, 2H) , 4.15-4.02 (m, 4H) , 3.79-3.77 (m, 1H) , 3.76 (s, 9H) , 1.39 (s, 9H) , 1.37-1.34 (m, 3H) .
Step F : (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N- bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate.
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.20g, 0.18 mmol) , Pd (PPh3) 4 (42 mg, 0.04 mmol) and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (97 mg, 0.547 mmol) in dioxane (3 ml) followed by the addition of sodium carbonate (58 mg, 0.55 mmol) in water (0.5 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at under argon atmosphere at 80℃ for 16 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with MeOH/DCM (1/9) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found 938；
Step G: ( (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.10 g, 0.11 mmol) in DCM (3 mL) followed by the addition of TFA (0.5 mL, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The solvent was evaporated to give crude product. The crude product was used directly to the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC33H35N9O6S2 [M + H] +: 718, found 718.
Step H: (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (70 mg, 0.07 mmol) in TFA (3 mL) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 35％B in 8 min； RT, 5.4 Min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to givethe title  compound: LCMS (ESI) calc’ d forC17H19N9O4S2 [M + H] +: 478, found 478； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.93 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 6.52 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.27 (brs, 2H) , 6.10 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.16-4.01 (m, 2H) , 3.84-3.75 (m, 1H) , 1.36 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE 93
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000142
Step A: tert-butyl (S) -1- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propan-2-ylcarbamate
A mixture of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (prepared as described immediately above, Steps A-E, 250 mg, 0.268 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (78 mg, 0.402 mmol) , 1, 1'-Bis (diphenylphosphino) ferrocene-palladium (II) dichloride dichloromethane complex (43.7 mg, 0.054 mmol) and sodium carbonate (85 mg, 0.804 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (1.0 mL) was prepared. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred for 4 hr at 80℃. The desired product was detected by LCMS and the result showed satisfactory formation of the desired product. The reaction mixture was quenched with water (10 mL) , and extracted with dichloromethane (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with water (1 x15 mL) and brine (1 x15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, then eluted with petroleum ether/ethyl acetate (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found 955
Step B: (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide 
Into a 10 mL flask was placed (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (200 mg, 0.209 mmol) , anddichloromethane (2.0 mL) . Trifluoric acid (2 mL, 26.0 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The solvent was removed under vacuum to afford the title compound, which was used in next step directly without further purification: LCMS (ESI) calc’ d for C33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found 735.
Step C: (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25 mL flask was placed (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (120 mg, 0.163 mmol) , and Trifluoric acid (2 mL, 26.0 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: (Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 23-60％B in 8 min； 254nm) . The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found 495； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.26 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.90 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.85-7.54 (m, 4H) , 7.48 (t, J ＝ 3.3 Hz, 1H) , 6.71 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.53-6.47 (m, 1H) , 4.17-4.02 (m, 2H) , 3.81 (dd, Ja ＝ 6.6 Hz, Jb ＝ 12.6 Hz, 1H) , 1.38 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) ；
EXAMPLE 94
6- (2-amino-2-methylpropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000143
Step A: tert-butyl 1-hydroxy-2-methylpropan-2-ylcarbamate
In the 100 mL three-necked round bottom flask, 4-methylmorpholine (6.50 ml, 24.60 mmol) was added drop wise to a stirred mixture of 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- methylpropanoic acid (5.00 g, 24.60 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) at -10℃. Then isobutyl carbonochloridate (7.80 ml, 24.60 mmol) was added dropwise to the mixture under nitrogen. The reaction mixture was stirred at -10℃ for 1 hr. The solids were filtered out. The filtrate was added dropwise to thesodium borohydride (1.86 g, 49.2 mmol) in water (20 mL) . The reaction was stirred for 30 min. The reaction mixture was quenched with water/ice (20 mL) , extracted with ethyl acetate (3 x 100mL) . The combined organic layers were washed with brine (3x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C9H19NO3 [M + H] +: 190, found: 190. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 4.69 (t, J ＝5.6 Hz, 1H) , 3.29 (d, J ＝6.0 Hz, 2H) , 1.37 (s, 9H) , 1.16 (s, 6H) .
Step B: S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2-methylpropyl) ethanethioate
In the 50 mL three-necked round bottom flask, diisopropyl diazene-1, 2-dicarboxylate (5.13 g, 25.4 mmol) wasadded to a stirred mixture of tert-butyl (1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl) carbamate (1.60 g, 8.45 mmol) , and triphenylphosphine (6.65 g, 25.4 mmol) in tetrahydrofuran (10 ml) at -10℃ under nitrogen. The reaction mixture was stirred at -10℃ for 30 min. Ethanethioic S-acid (1.28 g, 16.91 mmol) was added dropwise to the mixture at that temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for overnight. The mixture was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C11H21NO3S [M + H-56] +: 1921found: 192. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 4.97 (s, 1H) , 3.46 (d, J ＝6.6 Hz, 2H) , 2.25 (s, 3H) , 1.39 (s, 9H) , 1.28 (s, 6H)
Step C: di-tert-butyl (disulfanediylbis (2-methylpropane-2, 1-diyl) ) dicarbamate
In the 50 ml round bottom flask, sodium hydroxide (0.51 g, 12.94 mmol) was added to a stirred mixture of S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2-methylpropyl) ethanethioate (1.6g, 6.47 mmol) in 10 ml methanol/water (20/1) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 0.5 hr. The mixture was adjusted pH to 5 with 1N HCl and then extracted with ethyl acetate (3 x50 mL) . The organic layer was combined, then dried over sodium sulfate. The filtrate was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C18H36N2O4S2 [M + H] +: 409, found: 409. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 2.85 (d, J ＝9.0 Hz 2H) , 1.45 (s, 9H) , 1.25 (s, 6H) .
Step D: tert-butyl (1-mercapto-2-methylpropan-2-yl) carbamate
In a 50 mL round bottom flask, zinc (0.88 g, 13.46 mmol) was added to a stirred mixture of di-tert-butyl ( (disulfanediylbis (2-methylpropane-2, 1-diyl) ) dicarbamate (1.10 g, 2.69 mmol) in zinc (0.88 g, 13.46 mmol) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 50℃ for overnight. The solids were filtered out and the filtrate was concentrated to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C9H19NO2S [M + H-56] +: 150, found: 150. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 4.78 (brs, 1H) , 2.85 (d, J ＝8.4Hz 2H) , 1.44 (s, 9H) , 1.27 (s, 6H) .
Step E: tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2-methylpropan-2-yl) carbamate
In the 50 mL three-necked round bottom flask, cesium carbonate (2.47 g, 7.59 mmol) were added to astirredmixture of tert-butyl (1-mercapto-2-methylpropan-2-yl) carbamate (0.78 g, 3.80 mmol) , 6-bromo-3iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.50 g, 1.89 mmol) in N, N-dimethylformamide (5ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperatureovernightunder nitrogen and then diluted with water (20 mLextracted with ethyl acetate (3 x50 mL) . The combined organic layer was dried over sodium sulfate, filteredand concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleumether (1/2) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C40H47IN6O7S2 [M + H] +: 915, found: 915. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ7.97 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝8.7 Hz, 1H) , 7.48-7.42 (m, 1H) , 7.32-7.26 (m, 1H) , 6.94-6.90 (m, 4H) , 6.82-6.75 (m, 6H) , 5.75-5.12 (m, 1H) , 4.73-4.68 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.76 (s, 9H) , 3.73 (s, 2H) , 1.43 (s, 9H) , 1.26 (s, 6H)
Step F: tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-methylpropan-2-yl) carbam
In the 50mLround bottom flask, 3-chlorobenzoperoxoic acid (1.30 g, 7.54 mmol) was added to a stirred mixture of tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2-methylpropan-2-yl) carbamate (1.15g, 1.257 mmol) in dichcloroemethane (5ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for overnight. The reaction mixture was quenched with sodiumbisulfate (10mL) , extracted with ethyl acetate (3x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1x10mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, elutedwith ethyl acetate/petroleum ether (1/2) to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d forC40H47IN6O9S2 [M + H] +: 947, found: 947. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ: 8.50 (d, J ＝8.4 Hz,  1H) , 8.25-8.21 (m, 1H) , 7.43-7.26 (m, 1H) , 7.32-7.26 (m, 1H) , 6.914-6.88 (m, 2H) , 6.79-6.6.69 (m, 8H) , 5.45-5.22 (m, 1H) , 4.62-4.10 (m, 2H) , 4.10-4.00 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.74 (s, 9 H) , 3.61 (s, 2H) , 1.48 (s, 9H) , 1.25 (s, 6H) .
Step G: tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-methylpropan-2-yl) carbamate
In a 50 three-necked round bottom flask, tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.18 g, 0.156 mmol) was added to a stirred mixture ofsodium carbonate (0.25 g, 2.345 mmol) , tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-methylpropan-2-yl) carbamate (0.74mg, 0.782 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.30 g, 1.563 mmol) in dioxane/water (4/1) (4 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The solids were filtrered out and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C47H52N8O9S3 [M + H] +: 969, found: 969. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ: 8.71 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 8.64 (d, J ＝8.0 Hz, 1H) , 8.15-7.94 (m, 1H) , 7.21-7.00 (m, 3H) , 6.99-7.26 (m, 1H) , 7.32-7.26 (m, 1H) , 6.99-6.80 (m, 2H) , 6.79-6.6.69 (m, 8H) , 5.53-4.80 (m, 1H) , 4.62-4.10 (m, 2H) , 4.10-4.00 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.74 (s, 9 H) , 3.61 (s, 2H) , 1.47 (s, 9H) , 1.25 (s, 6H) .
Step H: 6- ( (2-amino-2-methylpropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide 2, 2, 2-trifluoroacetate
In the 50 mL round bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml, 0.43 mmol) was added to a stirred mixture of tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-methylpropan-2-yl) carbamate (0.42 g, 0.433 mmol) in dichcloromethane (1 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr, it was concentrated under vacuum to give the title compound. The residue was used for thenext step directly without purification. LCMS (ESI) calc’ d for C42H44N8O7S3 [M + H] +: 869found: 869.
Step I: 6- ( (2-amino-2-methylpropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
In the 50 mL round bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml, 0.173 mmol) was added to a stirred mixture of 6- ( (2-amino-2-methylpropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) benzenesulfonamide 2, 2, 2-trifluoroacetate (0.17 g, 0.173 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr and then concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18 , 19*150mm； mobile phase: Phase A: water with 10mmolNH4HCO3； Phase B: MeCN for 11 min, hold 80％to85％in11min； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C18H20N8O4S3 [M + H] +: 509, found: 509； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 8.54 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 849 (d, J ＝4.5 Hz, 1H) , 7.86 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.44 (d, J ＝6.9 Hz, 1H) , 6.87 (d, J ＝4.8 Hz, 1H) , 6.75 (s, 1H) , 5.39-5.21 (m, 1H) , 4.59-4.41 (M, 2H) , 4.33-4.23 (m, 2H) .
EXAMPLE 95
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminocyclopropyl) methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000144
Step A: tert-butyl (1- (hydroxymethyl) cyclopropyl) carbamate
Into a 50mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 1- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclopropanecarboxylic acid (3.00 g, 14.91 mmol) in THF (10 mL) , followed by the addition of borane-tetrahydrofuran complex (44.70 mL, 44.70 mmol) at 0℃. After the resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 0℃ for 6 hr, the reaction was quenched with ice water (100 mL) and extracted with EtOAc (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (4 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (1/1) to affordthe title compound: 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ7.03 (brs, 1H) , 4.55 (t, J ＝ 6.0 Hz, 1H) , 3.75 (d, J ＝ 2.8 Hz, 2H) , 1.34 (s, 9H) , 0.63-0.59 (m, 2H) , 0.53-0.51 (m, 2H) .
Step B: ( (1- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclopropyl) methyl methanesulfonate
Into a 100mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (1- (hydroxymethyl) cyclopropyl) carbamate (0.40g, 1.71 mmol) and TEA (0.72 ml, 5.13 mmol) in DCM (4 mL) , followed by the addition of MsCl (0.16 mL, 2.05 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at ambient temperature for 20 min. The reaction was quenched with ice water (20 mL) and extracted with EA (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford crude product, which was used for the next stepdirectly: 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ5.08 (brs, 1H) , 4.25 (s, 2H) , 3.03 (s, 3H) , 1.44 (s, 9H) , 0.96-0.92 (m, 4H) .
Step C: S- ( (1- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclopropyl) methyl) ethanethioate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (1- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclopropyl) methyl methanesulfonate (0.50 g, 1.51 mmol) in DMF (5 mL) , followed by the addition of potassium ethanethioate (0.69 g, 6.03 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 80℃ for 16 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with ice water (50 mL) and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (1/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC11H19NO3S [2M + H] +: 491, found491； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ4.98 (brs, 1H) , 3.21 (s, 2H) , 2.37 (s, 3H) , 1.46 (s, 9H) , 0.86-0.84 (m, 4H) .
Step D: (tert-butyl (1- (mercaptomethyl) cyclopropyl) carbamate
Into a 25mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of S- ( (1- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclopropyl) methyl) ethanethioate (0.32g, 1.04 mmol) in MeOH (3 mL) , followed by the addition of sodiumhydroxide (83 mg, 2.09 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 20 min under argon atmosphere. The reaction's pH value was adjusted to pH ～ 7 at 0℃ and extracted with EtOAc (3 x 20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford crude title compound, which was used the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC9H17NO2S [2M + H] +: 407, found407； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ7.23 (brs, 1H) , 2.67 (d, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 2.51 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 1.38 (s, 9H) , 0.68-0.66 (m, 4H) .
Step E: tert-butyl (1- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) methyl) cycl-opropyl) carbamate
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.35g, 0.44 mmol) and tert-butyl (1- (mercaptomethyl) cyclopropyl) carbamate (0.18g, 0.89 mmol) in DMF (4 mL) , followed by the addition of sodium hydride (35 mg, 0.89 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1.5 hrunder argon atmosphere. The reaction was quenched with water (20 mL) and extracted with EtOAc (3 x 30 mL) . The combined layers were washed with brine (2 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (2/3) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC40H45IN6O7S2 [M + H] +: 913, found913； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) δ8.01 (d, J ＝ 5.1 Hz, 1H) , 7.90 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 6.96-6.94 (m, 5H) , 6.85-6.72 (m, 7H) , 5.50-5.45 (m, 1H) , 5.15 (brs, 1H) , 5.13-5.09 (m, 1H) , 4.69-4.64 (m, 2H) , 4.01-3.95 (m, 2H) , 3.79 (s, 2H) , 3.78 (s, 9H) , 1.41 (s, 9H) , 0.87-0.85 (m, 2H) , 0.76-0.74 (m, 2H) .
Step F: tert-butyl (1- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -sulfonyl) methyl) cyclopropyl) carbamate
Into a 25mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (1- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) methyl) cyclopropyl) carbamate (0.26g, 0.29 mmol) in DCM (3 mL) , followed by the addition of m-CPBA (0.20g, 1.14 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 16 hrunder argon atmosphere. The reaction was quenched with Na2SO3 (10％, 20 mL) and extracted with EtOAc (3 X 30 mL) . The combined layers were washed with NaHCO3 (saturated, 2 x 40 mL) , brine (2x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (2/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC40H45IN6O9S2 [M + H] +: 945, found945； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) : δ8.24-8.21 (m 2H) , 6.97-6.95 (m, 5H) , 6.78-6.73 (m, 7H) , 5.53-5.49 (m, 1H) , 5.40 (brs, 1H) , 5.23-5.18 (m, 1H) , 4.54-4.49 (m, 2H) , 3.97-3.87 (m, 2H) , 3.80 (s, 2H) , 3.78 (s, 9H) , 1.41 (s, 9H) , 1.19-0.95 (m, 4H) .
Step G: tert-butyl (1- ( ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) methyl) -cyclopropyl) carbamate
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl (1- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) methyl) cyclopropyl) carbamate (0.18g, 0.19 mmol) , 2nd generation Xphos precatalyst (0.02 g, 0.02 mmol) and (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (55 mg, 0.29 mmol) in dioxane (2 mL) , followed by the addition of sodium carbonate (60 mg, 0.57 mmol) in water (0.4 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 16 hr under argon atmosphere. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (10 mL) and extracted with EtOAc (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with DCM/MeOH (10/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC47H50N8O9S3 [M + H] +: 967, found967； 1H NMR (400 MHz, CD3Cl) : δ8.70 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 8.00 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.47 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.03-6.91 (m, 4H) , 6.89-6.82 (m, 2H) , 6.78-6.76 (m, 4H) , 6.66-6.64 (m, 4H) , 5.48-5.46 (m, 1H) , 5.11 (brs, 1H) , 4.86-4.84 (m, 2H) , 4.75-4.71 (m, 2H) , 4.29-4.21 (m, 2H) , 3.76 (s, 9H) , 3.74 (s, 2H) , 1.42 (s, 9H) , 1.07-0.96 (m, 4H) .
Step H: (3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( ( (1-aminocyclopropyl) methyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 50-mL round-bottom flask, was placed a solution of tert-butyl (1- ( ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) methyl) cyclopropyl) carbamate (0.10g, 0.10 mmol) in DCM (2 mL) , followed by the addition of TFA (0.5mL, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The solvent was evaporated to give the title compound, which was used to the next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC34H34N8O6S3 [M + H] +: 747, found747.
Step I: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( ( (1-aminocyclopropyl) methyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( ( (1-aminocyclopropyl) methyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.10g, 0.09 mmol) in TFA (2 mL) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min；  Gradient: 40-60％B in 10 min； RT, 5.18 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC18H18N8O4S3 [M + H] +: 507, found507； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ8.51 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.98 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.47 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.86 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.75 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 4.20 (s, 2H) , 1.20-1.16 (m, 4H) .
EXAMPLE 96
6- (2-amino-3-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000145
Step A: methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) oxy) propanoate
MsCl (5.33 ml, 68.4 mmol) was added in dropwase into a stirred solution of TEA (12.72 ml, 91 mmol) and methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-hydroxypropanoate (10 g, 45.6 mmol) in Dichloromethane (60 ml) under ice bath and then stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was quenched with water (30 mL) , diluted with water (40 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 40 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound.
Step B: methyl 3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoate
A solution of methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) oxy) propanoate (12 g, 40.4 mmol) and potassium thioacetate (4.61 g, 40.4 mmol) in DMF (70 ml) was stirred at ambient temperature for 3 hr. The reaction product was detected by LCMS. The reaction mixture was quenched with water (40 mL) , diluted with water (80 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 50 g prepacked column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound.  1H NMR (400 MHz, CD3OD) : 5.26 (bs, 1H) , 4.53 (bs, 1H) , 3.76 (s, 3H) , 3.37-3.32 (m, 2H) , 2.35 (s, 3H) , 1.45 (s, 9H) .
Step C: methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopropanoate
A solution of methyl 3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoate (6 g, 21.63 mmol) and NaOH (3.46 g, 87 mmol) in Methanol (50 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was adjustedto pH to 6 and extracted with DCM (150 mL) , then the organic layer was dried over Na2SO4 and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : 5.44 (bs, 1H) , 4.63 (bs 1H) , 3.79 (s, 3H) , 3.02-2.96 (m, 3H) , 1.46 (s, 9H) .
Step D: tert-butyl (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate
Lithium aluminum hydride (0.544 ml, 12.75 mmol) was added in portions to a stirred solution of methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopropanoate (1 g, 4.25 mmol) in THF (20 ml) at 0℃ and stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (0.25 ml) , 15％NaOH (0.25 ml) and water (0.75 mL) in sequence. Then, the solution was adjusted to pH＝6, extracted with DCM (3x50 mL) , and dried over Na2SO4. The solution was filtered and the filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : 6.59 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 4.70 (bs 1H) , 3.43-3.30 (m, 2H) , 2.65-2.45 (m, 2H) , 1.36, 1.38 (s, 9H) .
Step E: tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
A solution of tert-butyl (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate (393 mg, 1.898 mmol) , 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (500 mg, 0.633 mmol) and Cs2CO3 (824 mg, 2.53 mmol) in DMF was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , diluted with water (60 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluted with dichloromethane/petroleum ether (7/3) , then ethyl acetate/dichloromethaen (7/3) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound.
Step F: tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
A solution of tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (800 mg, 0.873 mmol) and m-CPBA (602 mg, 3.49 mmol) in dichloromethane (50 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with Na2SO3 and extracted with DCM (3 x 50 ml) , dried by Na2SO4, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluted with ethyl acetate/dichloromethane (70/30) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound.
Step G: tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
A solution of tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (500 mg, 0.527 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (204 mg, 1.054 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (122 mg, 0.105 mmol) and Na2CO3 (168 mg, 1.581 mmol) in 1, 4-Dioxane (10 ml) andwater (2 ml) was stirred at 80℃ for 3 hr under nitrogen. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O10S3 [M + H] +: 971, found 971
Step H: 6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (300 mg, 0.309 mmol) and TFA (2 ml, 26.0 mmol) in Dichloromethane (10 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give 230 mg (99 ％yield) of 6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide as a yellow oil. A solution of 6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (230 mg, 0.306 mmol) in TFA (10 ml, 130 mmol) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to  give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C18, 19*150mm； mobile phase: water (0.05％NH4HCO3) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B％: 40％-80％) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O5S3 [M + H] +: 511, found 511； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.25 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.49-7.47 (m, 3H) , 6.71-6.67 (m, 1H) , 6.48-6.46 (m, 1H) , 5.25 (bs, 1H) , 4.13-4.09 (m, 1H) , 3.91-3.89 (m, 1H) , 3.54-3.52 (m, 3H) .
EXAMPLE97
6- (3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000146
Step A: tert-butyl (2, 3-dihydroxypropyl) carbamate
A solution of 3-aminopropane-1, 2-diol (20 g, 220 mmol) , TEA (61.2 ml, 439 mmol) and BOC2O (61.2 ml, 263 mmol) in MeOH (200 ml) was stirred at ambient temperature for 6 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (with 0.1％TFA) ＝ 1/10. The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) : 3.76-3.73 (m, 1H) , 3.60-3.57 (m, 2H) , 3.28-3.25 (m, 2H) , 1.45 (s, 9H) .
Step B: tert-butyl (2, 3-bis ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate
A solution of tert-butyl (2, 3-dihydroxypropyl) carbamate (10 g, 52.3 mmol) , tert-butylchlorodimethylsilane (17.34 g, 115 mmol) and 1H-imidazole (14.24 g, 209 mmol) in Dichloromethane (200 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was filtered and filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/3) . The combined organic fractions were concentrated under reduced  pressure to give the title compound. 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) : 3.72-3.69 (m, 1H) , 3.49-3.43 (m, 2H) , 3.21-3.13 (m, 2H) , 1.39 (s, 9H) , 0.86-0.81 (m, 18H) , 0.04-0.00 (m, 12H) .
Step C: tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-hydroxypropyl) carbamate
A solution of tert-butyl (2, 3-bis ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate (10 g, 23.82 mmol) and acetic acid (50 ml, 23.82 mmol) in Dichloromethane (10 ml) and Methanol (10 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (30/70) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ) : 4.55-4.52 (m, 1H) , 3.65-3.62 (m, 1H) , 3.27-3.25 (m, 2H) , 3.03-2.82 (m, 2H) , 1.37 (s, 9H) , 0.86 (s, 9H) , 0.03 (s, 6H) .
Step D: 3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl methanesulfonate
MsCl (2.55 ml, 32.7 mmol) was added in dropwise to s stirred solution of TEA (4.56 ml, 32.7 mmol) and tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-hydroxypropyl) carbamate (5 g, 16.37 mmol) in Dichloromethane (5 ml) at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , diluted with water (20 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound. 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) : 4.75-4.72 (m, 1H) , 4.15-4.10 (m, 2H) , 3.26-3.23 (m, 2H) , 3.03 (s, 3H) , 1.44 (s, 9H) , 0.90 (s, 9H) , 0.11 (s, 6H) .
Step E: S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) ethanethioate
A solution of 3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl methanesulfonate (4 g, 10.43 mmol) and potassium ethanethioate (4.76 g, 41.7 mmol) in DMF (50 ml) was stirred at 60℃ for 16 hr. The product was detected by LCMS. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , diluted with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under  reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C11H25NO2SSi [M + H] +: 264, found 264.
Step F: tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-mercaptopropyl) carbamate
A solution of S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) ethanethioate (2.3 g, 6.33 mmol) and Na2CO3 (1.341 g, 12.65 mmol) in Methanol (30 ml) and water (4 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , diluted with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : 4.74 (bs, 1H) , 3.86 (m, 1H) , 3.32-3.28 (m, 2H) , 2.67-2.62 (m, 1H) , 2.54-2.51 (m, 1H) , 1.44 (s, 9H) , 0.90 (s, 9H) .
Step G: tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate
A solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1 g, 1.265 mmol) , tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-mercaptopropyl) carbamate (0.814 g, 2.53 mmol) and Cs2CO3 (0.824 g, 2.53 mmol) in DMF (15 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr under nitrogen. The reaction mixture was quenched with water (40 mL) , diluted with water (40 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C14H13N9O4S2 [M + H] +: 436, found 436； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.34 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.90 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.62-7.33 (m, 4H) , 7.11-6.94 (m, 2H) , 6.78 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.33 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) .
Step H: tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) -2-hydroxypropylcarbamate
A solution of tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate (1.1 g, 1.067 mmol) and TBAF (4.27 ml, 4.27 mmol) in THF (6 ml) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) , diluted with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 40 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ8.05 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.34-7.26 (m, 2H) , 6.93-6.90 (m, 4H) , 6.83-6.77 (m, 6H) , 5.79 (s, 2H) , 4.37-4.26 (m, 2H) , 4.10-4.05 (m, 2H) , 3.79 (s, 6H) , 3.80-3.71 (m, 3H) , 3.70-3.67 (m, 1H) , 3.40-3.32 (m, 1H) , 3.16-3.14 (m, 2H) , 3.01-2.97 (m, 1H) , 1.43 (s, 9H) .
Step I: tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2-hydroxypropylcarbamate
A solution of tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2-hydroxypropyl) carbamate (450 mg, 0.491 mmol) and m-CPBA (339 mg, 1.963 mmol) in DCM (5 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions wereconcentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O10S2 [M + H] +: 949, found 949.
Step J : tert-butyl 3- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2-hydroxypropylcarbamate
A solution of tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate (370 mg, 0.390 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (151 mg, 0.780 mmol) , Pd (PPh3) 4 (90 mg, 0.078 mmol) and Na2CO3 (83 mg, 0.780 mmol) in 1, 4-Dioxane (2 ml) and water (0.4 ml) was stirred at 80℃ for 16 hr under argon. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic  fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O10S3 [M + H] +: 971, found 971
Step K : 6- (3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl (3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate (250 mg, 0.257 mmol) in DCM (5 mL) was added TFA (1.983 ml, 25.7 mmol) at ambient temperature. The reaction was stirred for 1 hr at ambient temperature. The reaction was concnetrated under vacuum to afford the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C33H34N8O7S [M + H] +: 751, found 751.
Step L: 6- (3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 6- ( (3-amino-2-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (120 mg, 0.190 mmol) in TFA (3 ml) was stirred for 1 hr at 80℃. The desired product was detected on LCMS. The solution was concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 23％B in 8 min； 254/220 nm to afford the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O5S3 [M + H] +: 511, found 511； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.19 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) , 7.89 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) , 7.50-7.43 (m, 1H) , 6.72-6.69 (m, 1H) , 6.46-6.53 (m, 1H) , 5.86 (bs) , 4.25 (bs) , 4.17-4.09 (m, 1H) , 4.00-3.92 (m, 1H) , 3.18-3.06 (m, 1H) , 2.91-2.83 (m, 1H) .
EXAMPLE 98
4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000147
Step A : 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride (synthesis described above, 400 mg, 0.741 mmol) in Tetrahydrofuran (10 mL) was added ammonium hydroxide (78 mg, 2.222 mmol) at ambient temperature. The reaction was kept for 30 min at room temperature. The mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was then applied onto silica gel column with Dichloromethane/methanol (10: 1) to get the product as a mixture of regioisomers on the p-methoxybenzyl tetrazole: LCMS (ESI) calc’ d for C31H31IN6O7S2 [M + hr -15] +: 791, found 791.
Step B : 5- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (200 mg, 0.253 mmol) in 1, 4-Dioxane (2 mL) /water (0.2 mL) (5: 1) was added (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (90 mg, 0.506 mmol) , sodium carbonate (80 mg, 0.759 mmol) and 2nd generation Xphos precatalyst (39.8 mg, 0.051 mmol) at ambient temperature. The flask was degassed with nitrogen for three times. Then the mixture was stirred for 16 hr at 80℃ under an atmosphere of nitrogen. The reaction was black from yellow. LCMS showed good reaction. The solid was filtered out and the filtrate was extracted with ethyl acetate. The organic layers were combined and concentrated under reduced pressure. The residue was then applied onto silica gel column with dichloromethane/methanol (10: 1) to get the product as a mixture of PMB protected tetrazole regioisomers: LCMS (ESI) calc’ d for C38H37N9O7S2 [M + H] +: 796, found 796.
Step C : 4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
5- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (100 mg, 0.126 mmol) was dissolved in trifluoric acid (3 ml) at ambient temperature. The reaction was kept at 80℃ for 1 hr. The reaction was yellow. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to get the crude product. The crude product was then applied onto Prep-HPLC with the condition (Column: X Bridge RP C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/10 mM NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 10-35％B in 10 min； 254nm； Retention time: 5.89 min) to get the final product: LCMS (ESI) calc’ d for C14H13N9O4S2 [M + H] +: 436, found 436； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.34 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.90 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.62-7.33 (m, 4H) , 7.11-6.94 (m, 2H) , 6.78 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.33 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H)
The EXAMPLES 99-104 in the table below were prepared in an analogous fashion as described for 4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide immediately above EXAMPLE 98) , starting with 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (Step A, or the corresponding N-methyl sulfonamide, 4-iodo-N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -N1-methylbenzene-1, 2-disulfonamide, prepared in an analogous fashion) and coupling with boronic acids or boronic esters that are prepared as described herein or that are commercially available.
Figure PCTCN2015082514-appb-000148
Figure PCTCN2015082514-appb-000149
EXAMPLE 105
4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000150
Step A: 2', 3'-diamino-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Into a 50 mL round bottom flask was placed 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine (0.802 g, 3.43 mmol) , 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-  (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (Synthesis described above, 2.0 g, 2.3 mmol) , Pd (PPh3) 4 (0.528 g, 0.457 mmol) and sodium carbonate (0.726 g, 6.85 mmol) in 1, 4-dioxane (6 ml) and water (1.500 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃ for 16hr. The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (300 mL) and washed with water (250 mL) . Then the organic layer was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with ethyl acetate/petrol ether (1/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C42H49N7O7S2Si [M + H] +: 856, found 856； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ 8.57-8.54 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.92-7.89 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.06-6.73 (m, 13H) , 6.52-6.39 (m, 1H) , 6.23-6.10 (m, 1H) , 4.79-4.45 (m, 2H) , 4.30-4.11 (m, 2H) , 4.08-3.88 (m, 4H) , 3.724 (s, 12H) , 1.09-0.80 (m, 2H) , 0.029 (s, 9H) .
Step B: N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
Into a round bottom flask was placed 2', 3'-diamino-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (1.1 g, 1.285 mmol) and benzyl 2, 2, 2-trichloroacetimidate (0.324 g, 1.285 mmol) in acetic acid (6 ml) . Then the mixture was stirred at r.t. for 6hr. Then the mixture was concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C44H46Cl3N7O7S2Si [M + H] +: 982, 984, 985 (3: 4: 2) , found 982, 984, 985 (3: 4: 2) .
Step C: methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 50 mL round bottom flask was placed N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (500mg, 0.508 mmol) and sodium carbonate (162 mg, 1.525 mmol) in methanol (0.5 ml) . Then the mixture was stirred at 80℃ for overnight. Then the solvent was removed under vacuum. The residue was extracted with ethyl acetate (200 mL) and washed with hydrogen chloride (1 mol) in water (5*100 mL) . Then the organic layer was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with ethyl acetate/petrol ether (2/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C45H49N7O9S2Si [M + H] +: 924, found 924； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ8.70-8.58 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.14-8.11 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.74-7.40 (m, 3H) , 7.10-6.79 (m, 12H) , 5.66 (s, 1H) , 5.07-4.51 (m, 2H) , 4.09-3.87 (m, 7H) , 3.73 (s, 9H) , 3.21-2.90 (m, 2H) , 1.09-0.81 (m, 2H) , 0.03 (s, 9H) .
Step D: 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (methoxycarbonyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) benzenesulfinic acid
To a solution of methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (300 mg, 0.325 mmol) in tetrahydrofuran (2 ml) was added tetrabutylammonium fluoride (1.623 ml, 1.623 mmol) . Then the mixture was stirred at r.t. for 2hr. Then the mixture was extracted with ethyl acetate (50 mL) and washed with water (50 mL) . Then the organic layer was dried over sodium sulfate for 2hr. Then it was concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C40H37N7O9S2 [M + H] +: 824, found 824.
Step E: methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 50 mL round bottom flask was placed 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (methoxycarbonyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) benzenesulfinic acid (300 mg, 0.364 mmol) and 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (72.9 mg, 0.546 mmol) in tetrahydrofuran (2 ml) . Then the mixture was stirred at r.t. for 2hr. To the mixture was added ammonia (0.350 ml, 0.699 mmol) . Then the mixture was stirred at r.t. for 2hr. Then the mixture was extracted with ethyl acetate (50 mL) and washed with water (50 mL) . The organic layer was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with ethyl acetate/petrol ether (1/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C40H39N8O9S2 [M + H] +: 479, found 479； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ 8.70-8.51 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.12-8.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.74-7.40 (m, 3H) , 7.10-6.65 (m, 12H) , 5.66 (s, 2H) , 4.12-3.98 (m, 2H) , 3.97-3.80 (m, 5H) , 3.80-3.59 (m, 9H) .
Step F: methyl 4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 50 mL round bottom flask was placed methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (90 mg, 0.107 mmol) and trifluoroacetic acid (2 ml) was stirred at 60℃ for 2hr. Then the mixture was concentrated under vacuum. The residue was pH adjusted with sodium carbonate (50 mg) . Then it was applied on flash with methanol/water (percent of methanol: 5-60％in 25 min) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C16H14N8O6S2 [M + H] +: 465, found 465.
Step G: 4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
To a solution of methyl 4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (40 mg, 0.084 mmol) in methanol (1 ml) was added sodium hydroxide (13.38 mg, 0.334 mmol) in water (0.500 ml) . The reaction was stirred at r.t. for 1hr. Then the mixture was concentrated under vacuum. The residue was pH adjusted with hydrogen chloride (3 mol in methanol, 0.15 mL) . Then the mixture was dissolved in N, N-dimethylformamide and purified by Pre-HPLC (condition: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 5μM, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 8％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C15H12N8O6S2 [M + H] +: 346, found 346； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ8.59-8.50 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.07-8.04 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.56 (s, 2H) , 7.51-7.49 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.30 (s, 2H) , 7.20-7.15 (t, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.75-6.72 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) .
EXAMPLE 106
N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000151
Step A: tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethylcarbamate
To a solution of2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride (synthesis described above, 1.4 g, 1.73 mmol) in THF (20 ml) was added tert-butyl (2-aminoethyl) carbamate (0.554 g, 3.46 mmol) and triethylamine (0.525 g, 5.18 mmol) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x20 mL) . The combined organiclayers were washed with brine (50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford yellowoil. The residue was purified by silica gel column chromatography20 g, eluting with EtOAc/petroleum ether (2/1) to afford the title compound (as a mixture of protected tetrazole regioisomers) : LCMS (ESI) calc’ d for C38H44IN7O9S2 [M + H] +: 934, found 934.
Step B: tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethylcarbamate
To a solution of tert-butyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (200 mg, 0.214 mmol) inDioxane (4 ml) and water (1 ml) was added Na2CO3 (91 mg, 0.857 mmol) (1H-indazol-7-yl) boronic acid (69.4 mg, 0.428 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (49.5 mg, 0.043 mmol) with stirring at room temperature. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred for 3 hr. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (5mL) and extracted with ethyl acetate (2x 10mL) . The combined organiclayers were washed with brine (5 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford yellowoil. The residue was purified by silica gel column chromatography12 g, eluted with EtOAc/petroleum ether (2/1) to afford the title compound as a mixture of PMB tetrazole regioisomers: LCMS (ESI) calc’ d for C45H49N9O9S2 [M + H] +: 924, found 924.
Step C: N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of tert-butyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (120 mg, 0.130 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (0.100 ml, 1.299 mmol) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The residue was concentrated to afford 100 mg (109％yield) of N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide as a yellow oil. The solution of N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (80 mg, 0.114 mmol) inTFA (0.876 ml, 11.37 mmol) was stirring at room temperature. The resulting solution was warmed to 80℃ and stirred for 2 hr. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column , 
Figure PCTCN2015082514-appb-000152
5 μm, 19 mm X 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 15 mL/min； Gradient: 10％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C16H17N9O4S2 [M + H] +: 464, found 464； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.23 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 12 Hz, 1H) , 7.91-7.89 (m, 6H) , 6.80 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.48 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 3.16-3.14 (m, 2H) , 3.05-3.01 (m, 2H) .
The EXAMPLES 107-109 in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for the synthesis of N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide above (EXAMPLE 106) starting from tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethylcarbamate and boronic acids or boronic esters prepared as described herein or available from commercial sources.
Figure PCTCN2015082514-appb-000153
EXAMPLE 110
4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000154
Step A : ethyl 4-bromobenzo [d] oxazole-2-carboxylate
2-amino-3-bromophenol (1.0 g, 5.3 mmol) was added to ethyl 2-chloro-2-oxoacetate (1.1 g, 8.0 mmol) in 1, 4-Dioxane (12.0 ml) at room temperature. The reaction solution was stirred for 1 hr at 150℃ under microwave, cooled, and concentrated. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1 /10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C10H8BrO3 [M + 1] +: 270 /272, found 270 /272. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.64 (dd, J ＝ 8.4 Hz, 2H) , 7.42 (dd, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 4.60-4.55 (m, 2H) , 1.51-1.37 (m, 3H) .
Step B : (2- (ethoxycarbonyl) benzo [d] oxazol-4-yl) boronicacid
Potassium acetate (0.36 g, 3.7 mmol) was added to a stirred mixture of 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (1.9 g, 7.4 mmol) , ethyl 4-bromobenzo [d] oxazole-2-carboxylate (1.0 g, 3.7 mmol) and PdCl2 (dppf) (0.54 g, 0.74 mmol) in1, 4-dioxane (15.0 ml) at room temperature under Ar condition. The reaction mixture was stirred 1 hr at 80℃, monitored by LCMS found 70％desired product. The reaction mixture was quenched with water (25.0 mL) and extracted with EA (3 x30 mL) . The product was purified by Prep-MLC with the following conditions: Column, C-18, 120g, mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile； Detector, UV 210 and 254 nm. The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C10H10BNO5 [M + 1] +: 236, found 236. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6) δ8.27 (brs, 2 H) , 7.95 (dd, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.87 (dd, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.62 (dd, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 4.49-4.41 (m, 2H) , 1.41-1.35 (m, 1H) .
Step C: ethyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (N- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate
Na2CO3 (68 mg, 0.64 mmol) was added to a stirred mixture of tert-butyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (200 mg, 0.21 mmol) , (2- (ethoxycarbonyl) benzo [d] oxazol-4-yl) boronic acid (100 mg, 0.42 mmol) and Pd (PPh3) 4 (5 mg, 0.004mmol) indioxane (10.0 ml) at room temperature under Ar condition. The reaction mixture was stirred for 13 hr at 80℃, monitored by LCMS found desired product. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) and extracted with EA (3x20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2x20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with PE/EA (3/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C48H52N8O12S2 [M + 1] +: 997, found 997； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.45 (dd, J＝8.0 Hz, 1H) , 7.89 (dd, J＝8.4 Hz, 1H) , 7.70-7.65 (m, 2H) , 7.53-7.34 (m, 5H) , 7.05-6.91 (m, 4H) , 6.81 (dd, J＝8.8 Hz, 3H) , 6.70 (dd, J＝8.8 Hz, 2H) , 6.67-6.46 (m, 1H) , 5.43-5.40 (m, 1H) , 5.10-4.90 (m, 1H) , 4.50-4.40 (m, 2H) , 4.30-4.20 (m, 2H) , 4.15-4.10 (m, 2 H) , 3.78 (brs, 9H) , 3.40-3.10 (m, 3 H) , 1.47 (brs, 9H) , 1.38-1.24 (m, 3 H) .
Step D: ethyl 4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate
TFA (2.0ml) was added dropwise to a stirred solution of ethyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (N- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate (160 mg, 0.16 mmol) inCH2Cl2 (2.0 ml) at 0℃. The reaction solution was stirred for 1 hr at room temperature, monitored by LCMS found desired product, then concentrated to afford ethyl 4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate 200mg (crude) as a light brown oil. TFA (1.5 ml) was added to a stirred solution of ethyl 4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate (160 mg, crude) at 0℃. The reaction solution was stirred for 2 hr at 80℃, then concentrated afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C19H20N8O7S2 [M +] +: 537, found 537.
Step E: 4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylic acid.
NaOH (54 mg, 1.3 mmol) was added to a stirred solution of ethyl 4- (4- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] oxazole-2-carboxylate (120 mg, 0.224 mmol) in MeOH (1.5 ml) at 0℃. The reaction mixture was stirred for 3 hr  atroom temperature, adjusted to pH＝6.0 with HCl (～1M aq. ) . The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18, 19*150mm； mobile phase: water (0.05％NH4HCO3) and acetonitrile (hold 34％acetonitrile for 8 min, hold 100％for 2 min, down to 34％in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C17H16N8O7S2 [M + 1] +: 509, found 509； 1H NMR (400 MHz, DMSO d6) δ8.28-8.20 (m, 1H) , 7.93 (dd, J＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.51 (dd, J＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.06 (dd, J＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.52 (dd, J＝ 7.2 Hz, 1H) , 3.25-3.21 (m, 2H) , 2.96-2.92 (m, 2H) .
EXAMPLES 111-181
General procedure for parallel preparation of sulfonamide Examples 111-181:
Figure PCTCN2015082514-appb-000155
To a set of vials each containing the requisite commercially available or known amine (0.13 mmol) was added a solution of the sulfonyl chloride (45 mg, 0.044 mmol) followed by Et3N (0.018 mL, 0.13 mmol) . The vials were capped and the mixtures were stirred at RT for 5 hours. To the reaction mixture was then added TFA (0.5 mL) and the mixtures were stirred at RT for 1.5 hours. After that time, toluene (1 mL) was added to each vial and the mixtures were concentrated in vacuo. To each vial was then added TFA (1.0 mL) and anisole (0.019 mL, 0.17 mmol) . The vials were capped and the reaction mixtures were heated to 80℃ with stirring for 45 min. After that time, the reaction mixtures were concentrated in vacuo. The crude residues were then dissolved in DMSO (1.0 mL) and filtered. The crude products were purified by mass triggered preparative HPLC [Waters Sunfire C18 column, 5μm, 19x100 mm, using a gradient range from 8-10％initial to 21-36％final MeCN (0.1％TFA) in water (0.1％TFA) , 25 mL/min, 8-12 min run time] to afford EXAMPLES111-181.
Figure PCTCN2015082514-appb-000156
Figure PCTCN2015082514-appb-000157
Figure PCTCN2015082514-appb-000158
Figure PCTCN2015082514-appb-000159
Figure PCTCN2015082514-appb-000160
Figure PCTCN2015082514-appb-000161
Figure PCTCN2015082514-appb-000162
Figure PCTCN2015082514-appb-000163
Figure PCTCN2015082514-appb-000164
Figure PCTCN2015082514-appb-000165
Figure PCTCN2015082514-appb-000166
Figure PCTCN2015082514-appb-000167
Figure PCTCN2015082514-appb-000168
Figure PCTCN2015082514-appb-000169
Figure PCTCN2015082514-appb-000170
Figure PCTCN2015082514-appb-000171
Figure PCTCN2015082514-appb-000172
Figure PCTCN2015082514-appb-000173
Figure PCTCN2015082514-appb-000174
Figure PCTCN2015082514-appb-000175
EXAMPLES 182-224
General procedure for parallel preparation of sulfonamide examples 182-224:
Figure PCTCN2015082514-appb-000176
To a set of vials each containing the requisite amine (commercially available, known, or prepared as described herein, 0.13 mmol) was added a solution of the sulfonyl chloride (45 mg, 0.044 mmol) followed by Et3N (0.018 mL, 0.13 mmol) . The vials were capped and the mixtures were stirred at RT for 5 hours. To the reaction mixture was then added TFA (0.5 mL) and the mixtures were stirred at RT for 1.5 hours. After that time, toluene (1 mL) was added to each vial and the mixtures were concentrated in vacuo. To each vial was then added TFA (1.0 mL) and anisole (0.019 mL, 0.17 mmol) . The vials were capped and the reaction mixtures were heated to 80℃ with stirring for 45 min. After that time, the reaction mixtures were concentrated in vacuo. The crude residues were then dissolved in DMSO (1.0 mL) and filtered. The crude products were purified by mass triggered preparative HPLC [Waters Sunfire C18 column, 5μm, 19x100 mm, using a gradient range from 8％initial to 30％final MeCN (0.1％ TFA) in water (0.1％TFA) , 25 mL/min, 8 min run time] . The isolated products were each dissolved in MeOH (1 mL) and loaded onto an ion exchange cartridge [Agilent Bond Elut SCX (2 gram) ] . The TFA was eluted off the column with MeOH (20 mL) . The products were then eluted off using a solution of NH3 in MeOH (7N, 20 mL) . This fraction was then concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 1: 1 MeCN: distilled water (2 mL) . These fractions were then frozen and lyophillized overnight to afford Examples 182-224.
Figure PCTCN2015082514-appb-000177
Figure PCTCN2015082514-appb-000178
Figure PCTCN2015082514-appb-000179
Figure PCTCN2015082514-appb-000180
Figure PCTCN2015082514-appb-000181
Figure PCTCN2015082514-appb-000182
Figure PCTCN2015082514-appb-000183
Figure PCTCN2015082514-appb-000184
Figure PCTCN2015082514-appb-000185
Figure PCTCN2015082514-appb-000186
Figure PCTCN2015082514-appb-000187
Figure PCTCN2015082514-appb-000188
Figure PCTCN2015082514-appb-000189
EXAMPLE225
methyl (2R, 4R) -4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) pyrrolidine-2-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000190
(4R) -4- ( { [4- (2-amino-1, 3-benzothiazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl] sulfonyl} amino) -D-proline (TFA salt) was dissolved in MeOH (1 mL) and loaded onto an ion exchange cartridge [Agilent Bond Elut SCX (2 gram) ] . The TFA was eluted off the column with MeOH (20 mL) . The product were then eluted off using a solution of NH3 in MeOH (7N, 20 mL) . This fraction was then concentrated in vacuo. The residue was dissolved in 1: 1 MeCN: distilled water (2 mL) . These fractions were then frozen and lyophillized overnight. The crude product was purified by mass triggered HPLC [Waters Sunfire C18 column, 5μm, 19x100 mm, using a gradient range from 10％initial to 40％final MeCN (0.1％TFA) in water (0.1％TFA) , 25 mL/min, 12 min run time] to afford the title compound. LC/MS m/e [M+H] +579.9.
EXAMPLES 226-238
Figure PCTCN2015082514-appb-000191
General procedure for parallel preparation of examples 226-238: To a set of vials each containing the requisite boronic acid/ester (commercially available, known or prepared as described herein, 0.31 mmol) was added Pd (dppf) Cl2-CH2Cl2 (8.5 mg, 0.010 mmol) . The vials were capped and transferred into a glove box under an atmosphere of nitrogen. To each vial was then added a solution of the iodide (100 mg, 0.104 mmol) in dioxane (1 mL) . To each vial was then added a solution of Na2CO3 (1M, 0.156 mL, 0.313 mmol) . The vials were capped and placed into a preheated heating block at 80℃. The reaction mixtures were stirred at that temperature overnight. The mixtures were removed from the glove box and allowed to cool to RT. To each vial was added water (2 mL) followed by DCM (2 mL) . The mixtures were transferred to a set of fritted barrel filters and the organic layers were drained into a set of vials. To each mixture was added additional DCM (1 mL) . The organic layers were again drained into the vials to combine the extracts. The reaction mixtures were then concentrated in vacuo. The reaction mixtures weredissolved in DMSO (1.0 mL) and filtered. The crude intermediates were purified by mass triggered preparative HPLC [Waters XBridge C18 column, 5μm, 19 x100 mm, gradient ranges from 50-55％initial to 80-90％MeCN (0.1％NH4OH) in water (0.1％NH4OH) 25 mL/min, 8 min run time] to provide the requisite intermediates. To a set of vials containing  the intermediates was added TFA (1.0 mL) and the mixtures were stirred at RT for 1 hour. After that time, the mixtures were concentrated in vacuo. To each vial was then added TFA (1.0 mL) and anisole (0.055 mL, 0.50 mmol) . The vials were capped and the reaction mixtures were heated to 80℃ with stirring for 1 hour. After that time, the reaction mixtures were concentrated in vacuo. The crude residues were then dissolved in DMSO (1.0 mL) and filtered. The crude products were purified by mass triggered preparative HPLC [Waters Sunfire C18 column, 5μm, 19x100 mm, using a gradient range from a range of 5-8％initial to 15-35％final MeCN (0.1％ TFA) in water (0.1％TFA) , 25 mL/min, 8 min run time] to afford Examples 226-238
Figure PCTCN2015082514-appb-000192
Figure PCTCN2015082514-appb-000193
Figure PCTCN2015082514-appb-000194
EXAMPLES 239 -272
Parallel synthesis of 3-substituted 2- (1H-tetrazol-5-yl) -6- (azitidine sulfone) benzenesulfonamides
Figure PCTCN2015082514-appb-000195
Step A: Palladium catalyzed C-C coupling of arylboronic esters and arylboronic acids with tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate.
In a glove box under a dry nitrogen atomosphere, arylboronic acids or esters or potassium trifluoroaryl borates (0.129 mmol) (commercially available, known, or prepared as described herein) and Pd (PPh3) 4 (5 mg, 4.3 μmol) and 130 μL of 1N degassed aq. Na2CO3solution were added into 2 dram vials. 1.0 mL of a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateprepared as described herein (40 mg, 0.043 mmol) in 1, 4-Dioxane were added into each vial. The vials were capped and heated at 78℃ with stirring for 20 hr. After the vials were cooled to room temperature, the solvent was removed in a GeneVac. Into each residue was added 600 μL of H2O and 2 mL of EtOAc. The organic layers were transferred into 2 dram vials. The organic solvent was removed in GeneVac to afford the crude intermediates which were deprotected without further purification in the subsequent step.
Step B: Removal of one p-methoxybenzyl (PMB) protecting &BOC group by TFA treatment
The residues from Step A were each added TFA 0.7 mL alone with anilsole (0.3 mL) . The vials were shaked at 25℃ for 3 hours. Solvent were removed under reduced pressure using Genevac. The crude materials were dissolved in 1 mL DMSO solution and purified with HPLC.
Step C: Removal of the remaining p-methoxybenzyl (PMB) protecting groups by TFA treatment
In 2 dram vials containing the intermediates from last step. 1 mL TFA was added and reactions agitated at 65℃ for 4 hours. The reactions were concentrated in a GeneVac. The residues were dissolved in DMSO. Each crude mixture was filtered into a 96-well tray and purified with HPLC. The crude products were purified by mass triggered reverse phase HPLC using the following conditions: [column: Waters XBridge C18, or Waters Sunfire C18, 5μm , 19x100 mm； solvent: gradient range 3 -28％initial to 45-95％final MeCN (0.1％TFA) in water (0.1％TFA) 50 or 70 mL/min； 8 min run time] to afford Examples 239 to 272.
Figure PCTCN2015082514-appb-000196
Figure PCTCN2015082514-appb-000197
Figure PCTCN2015082514-appb-000198
Figure PCTCN2015082514-appb-000199
Figure PCTCN2015082514-appb-000200
Figure PCTCN2015082514-appb-000201
Figure PCTCN2015082514-appb-000202
Figure PCTCN2015082514-appb-000203
Figure PCTCN2015082514-appb-000204
EXAMPLES 273 -315
Parallel synthesis of 3-substituted 2- (1H-tetrazol-5-yl) -6- (ethylamine sulfone) benzenesulfonamides
Figure PCTCN2015082514-appb-000205
Step A: Palladium catalyzed C-C coupling of arylboronic ester and aryliodide
In a glove box under a dry nitrogen atomosphere, arylboronic acids or esters (0.129 mmol) (commercially available, known from the literature) and Pd (PPh3) 4 (5mg, 4.3 μmol) and 130 μL of 1N degassed aq. Na2CO3solution were added into 2 dram vials. 1.0 mL of a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (40 mg, 0.043 mmol) in 1, 4-Dioxane were added into each vial. The vials were capped and heated at 78℃ with stirring for 20 hr. After the vials were cooled to room temperature, the solvent was removed in a GeneVac. Into each residue was added 600 μL of H2O and 2 mL of EtOAc. The organic layers were transferred into 2 dram vials. The organic solvent was removed in GeneVac to afford the crude intermediates which were deprotected without further purification in the subsequent step.
Step B: Removal of onep-methoxybenzyl (PMB) protecting &BOC group by TFA treatment
The residues from Step A were each added TFA 0.7 mL alone with anisole (0.3 mL) . The vials were shaked at 25℃ for 3 hours. Solvent were removed under reduced pressure using Genevac. The crude materials were dissolved in 1 mL DMSO solution and purified with HPLC.
Step C: Removal of the remainingp-methoxybenzyl (PMB) protectinggroup by TFA treatment
In 2 dram vials containing the intermediates from last step. 1 mL TFA was added and reactions agitated at 65℃ for 4 hours. The reactions were concentrated in a GeneVac. The residues were dissolved in DMSO. Each crude mixture was filtered into a 96-well tray and  purified with HPLC. The crude products were purified by mass triggered reverse phase HPLC using the following conditions: [column: Waters XBridge C18, or Waters Sunfire C18, 5μm , 19x100 mm； solvent: gradient range 3 -28％initial to 45-95％final MeCN (0.1％TFA) in water (0.1％TFA) 50 or 70 mL/min； 8 min run time] to afford EXAMPLES273 to 315.
Figure PCTCN2015082514-appb-000206
Figure PCTCN2015082514-appb-000207
Figure PCTCN2015082514-appb-000208
Figure PCTCN2015082514-appb-000209
Figure PCTCN2015082514-appb-000210
Figure PCTCN2015082514-appb-000211
Figure PCTCN2015082514-appb-000212
Figure PCTCN2015082514-appb-000213
Figure PCTCN2015082514-appb-000214
Figure PCTCN2015082514-appb-000215
Figure PCTCN2015082514-appb-000216
EXAMPLES316 and 317
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1s, 3s) -3-aminocyclobutylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000217
Step A : tert-butyl 3-hydroxycyclobutylcarbamate
To a solution of tert-butyl (3-oxocyclobutyl) carbamate (200 mg, 1.08 mmol) in ethanol (3 mL) was slowly added sodium borohydride (41 mg, 1.08 mmol) at 0℃. The reaction mixture was warmed to room temperature and stirred at this temperature for 1 hr. It was quenched with water (5 mL) . The solvent was removed under reduced pressure. The water layer was extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The combined organic layer was washed with brine, dried over anhydrous magnesiumsulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography eluting withdichloromethane/methanol (10: 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C9H17NO3 [M + hr -56] +: 173, found 173； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ4.71-4.40 (m, 1H) , 4.13-4.00 (m, 1H) , 3.83-3.67 (m, 1H) , 2.81-2.72 (m, 1H) , 2.32-2.21 (m, 2H) , 2.08-1.74 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B: 3- (tert-butoxycarbonylamino) cyclobutyl methanesulfonate
In a round-bottomed flask charged with tert-butyl (3-hydroxycyclobutyl) carbamate (150 mg, 0.801 mmol) and triethylamine (243 mg, 2.403 mmol) was added dichloromethane (2 mL) . Methanesulfonyl chloride (0.187 ml, 2.403 mmol) was added dropwise via syringe at -20℃over 5 min. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2hr, then diluted with water (15 mL) and extracted with dichloromethane (2 x 15 mL) . The organic layer was washed with saturated NH4Cl and dried over MgSO4. It was filtered and concentrated in vacuo to affordthe title compound: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ5.22-5.19 (m, 0.5H) , 4.76-4.68 (m, 2H) , 5.32-4.16 (m, 0.5H) , 3.90-3.73 (m, 1H) , 3.01 (s, 4H) , 3.29-2.88 (m, 2H) , 2.67-2.64 (m, 1H) , 2.49-2.34 (m, 1H) , 2.23-2.09 (m, 1H) , 1.44 (s, 9H) .
Step C: S-3- (tert-butoxycarbonylamino) cyclobutyl ethanethioate
The mixture of 3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclobutyl methanesulfonate (3.0 g, 11.31 mmol) and potassium thioacetate (5.17 g, 45.2 mmol) in N, N-dimethylformamide (8 mL) was heated at 70℃for overnight. The reaction was detected by TLC and LCMS. The resulting mixture was diluted with ethyl acetate (15 mL) , washed with water (30 mL) and brine (2 x 30  mL) , dried over sodium sulfate and concentrated. The residue was purified by preparative thin layer chromatography eluting with a mixture of petroleum ether and ethyl acetate (1: 1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C11H19NO3S [M + hr -15] +: 231, found 231； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ4.87-4.60 (bs, 1H) , 4.36-4.21 (bs, 1H) , 3.96-3.90 (m, 1H) , 2.87-2.83 (m, 1H) , 2.46-2.29 (m, 2H) , 2.27 (d, J ＝ 1.2 Hz, 3H) , 1.95-1.91 (m, 1H) , 1.43 (s, 9H) .
Step D: di-tert-butyl 3, 3'-disulfanediylbis (cyclobutane-3, 1-diyl) dicarbamate
The solution of S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclobutyl) ethanethioate (2.5 g, 10.19 mmol) in MeOH (33 ml) was cooled to 0℃. Sodium hydroxide (4.08 mL, 40.8 mmol) was added slowly to the reaction system. The resulting mixture was then stirred for 2 hr at room temperature. The reaction was neutralized by HCl solution (2N) and extracted with ethyl acetate (3 x 20 mL) . The organic layers were concentrated under reduced pressure to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H32N2O4S2 [M + H] +: 405, found 405； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ4.81-4.67 (bs, 2H) , 4.46-4.37 (m, 1H) , 3.95-3.88 (m, 1H) , 3.59-3.51 (bs, 1H) , 3.17-3.02 (m, 1H) , 2.97-2.86 (m, 2H) , 2.45-2.36 (m, 2H) , 2.36-2.23 (m, 2H) , 1.91-1.76 (m, 2H) , 1.56 (s, 18H) .
Step E: tert-butyl (3-mercaptocyclobutyl) carbamate
To a solution of di-tert-butyl (disulfanediylbis (cyclobutane-3, 1-diyl) ) dicarbamate (1 g, 2.472 mmol) in Acetic acid (10 ml) was added Zinc (0.808 g, 12.36 mmol) at ambient temperature. The mixture was stirred for 16 hr at 50℃. The solid was filtered out and the filtrate was concentrated under vacuumto affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C9H17NO2S [M + hr -15] +: 189, found 189.
Step F: tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) cyclobutylcarbamate
Sodium hydride (45.5 mg, 1.898 mmol) was added to a stirred, cooled to a 0℃ mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (500 mg, 0.633 mmol) and tert-butyl (3-mercaptocyclobutyl) carbamate (257 mg, 1.265 mmol) in DMF (25 mL) and the mixture was stirred at room temperature for 2 hr. LC-MS and TLC showed the reaction completed. The mixture was quenched with NH4Cl solution, diluted with ethyl acetate. The mixturewas separated, and the aqueous layer was extracted with ethyl acetate. The combined extracts were washed with brine, dried over MgSO4, filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The  combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C40H45IN6O7S2 [M + H] +: 913, found 913
Step G: tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) cyclobutylcarbamate
The tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) cyclobutyl) carbamate (500 mg, 0.548 mmol) was dissolved in Dichloromethane (6 mL) , and 3-chlorobenzoperoxoic acid (473 mg, 2.74 mmol) was added. The reaction mixture was stirred for 8 hr at ambient temperature, and then partitioned between ethyl acetate and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with saturated aqueoussodium bicarbonate, dried (Na2SO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was applied onto silica gel column with ethyl acetate/petroleum ether (1: 1) to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C40H45IN6O9S2 [M + H] +: 945, found 945
Step H: tert-butyl 3- (4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) cyclobutylcarbamate
To a solution of tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) cyclobutyl) carbamate (500 mg, 0.529 mmol) in 1, 4-Dioxane (5 mL) /Water (1 mL) (5: 1) were added 1, 1'-bis (diphenylphosphino) ferrocene-palladium (ii) dichloride dichloromethane complex (86 mg, 0.106 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (187 mg, 1.058 mmol) and sodium carbonate (168 mg, 1.588 mmol) at ambient temperature. The flask was degassed with nitrogen for three times. Then the mixture was stirred for 16 hr at 80℃ under an atmosphere of nitrogen. The reaction was black. The LCMS and TLC showed that there was mostly desired product. The solid was filtered out and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was then purified by silica gel column with dichloromethane/methanol (90: 10) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C47H51N9O9S2 [M + H] +: 950, found 950
Step I: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) cyclobutyl) carbamate (500 mg, 0.526 mmol) in Dichloromethane (6 mL) was added triflroroacid (3 mL) at ambient temperature. The reaction system was then kept for 1 hr at  room temperature. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to affordthe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C34H35N9O6S2 [M + H] +: 730, found 730
Step J: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( ( (1s, 3s) -3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (340 mg, 0.466 mmol) was dissolved in triflroroacid (4 mL) at ambient temperature. The reaction was kept at 80℃ for 1 hr. The reaction was black. The resulting mixture was concentrated under reduced pressure to afford the crude product. The crude product was then applied onto Prep-HPLC with the condition (Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％ NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 27-40％B in 8 min； 254nm； Retention time: 6.45 min, 7.60 min) to afford the final product3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide: LCMS (ESI) calc’ d for C18H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found 490； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.30 (d, J ＝ 12.3 Hz, 1H) , 8.01 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.94-7.33 (m, 2H) , 6.98 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 6.62-6.52 (m, 2H) , 6.17 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.81-4.69 (m, 1H) , 3.78-3.67 (m, 1H) , 2.2.59-2.51 (m, 4H) and 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( ( (1s, 3s) -3-aminocyclobutyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. LCMS (ESI) calc’ d for C18H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found 490； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.29 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 8.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.85-7.33 (m, 2H) , 6.97 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.54 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.33 (bs, 1.5H) , 6.10 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 5.12-5.02 (m, 1H) , 3.97-3.89 (m, 1H) , 2.82-2.72 (m, 2H) , 2.56-2.51 (m, 1H) ；
The EXAMPLES 318-321 in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 317) and 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1s, 3s) -3-aminocyclobutylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 316) starting from 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, the appropriate boronic acids, and tert-butyl (3-mercaptocyclobutyl) carbamate or the corresponding thiol, tert-butyl (4-mercaptocyclohexyl) carbamate, which was prepared in a similar fashion astert-butyl (3-mercaptocyclobutyl) carbamate.
Figure PCTCN2015082514-appb-000218
EXAMPLE 322
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000219
Step A: (S) -tert-butyl 3- (methylsulfonyloxy) pyrrolidine-1-carboxylate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, were placed a solution of (S) -tert-butyl 3-hydroxypyrrolidine-1-carboxylate (3g, 16.02 mmol) and TEA (6.70 ml, 48.1 mmol) in DCM (30 ml) ) under argon atmosphere. This was followed by the addition of Ms-Cl (1.498 ml, 19.23 mmol) dropwised at 0℃. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at ambient temperature for 20 min. The reaction was quenched with ice water (100 ml) and extracted with EtOAc (3 x 100 ml) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 200 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford the title compound which was used directly in next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC10H19NO5S.
Step B: (R) -tert-butyl 3- (acetylthio) pyrrolidine-1-carboxylate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, were placed a solution of (S) -tert-butyl 3- ( (methylsulfonyl) oxy) pyrrolidine-1-carboxylate (4.0 g, 11.3 mmol) in DMF (40 ml) . This was followed by the addition of potassium ethanethioate (5.17 g, 45.2 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred under argon atmosphere at 80℃ for 16 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with ice water (150 ml) and extracted with EtOAc (3 x 150 ml) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 200 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (35％) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC11H19NO3S [2M + H] +: 491, found491.1 ； 1H NMR (300 MHz, CD3Cl) : δ 3.99-3.95 (m, 1H) , 3.79-3.73 (m, 1H) , 3.45-3.40 (m, 2H) , 3.28-3.18 (m, 1H) , 2.34 (s, 3H) , 2.32-2.27 (m, 1H) , 1.90-1.86 (m, 1H) , 1.47 (s, 9H) .
Step C: (R) -tert-butyl 3-mercaptopyrrolidine-1-carboxylate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, were placed a solution of (R) -tert-butyl 3- (acetylthio) pyrrolidine-1-carboxylate (1.8g, 7.34 mmol) in MeOH (20 ml) . This was followed by the addition of sodium hydroxide (0.587 g, 14.67 mmol) in water (1 ml) dropwise at 0℃. The resulting mixture was  stirred under argon atmosphere at ambient temperature for 20 min. The reaction's pH value was adjusted to pH＝7 at 0℃ and extracted with EtOAc (3 x 50 ml) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 100 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford the crude title compound which was used directly into next step: LCMS (ESI) calc’ d forC9H17NO2S [2M + H] +: 407, found407.
Step D: (R) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) pyrrolidine-1-carboxylate
Into a 100-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.5g, 1.898 mmol) and (R) -tert-butyl 3-mercaptopyrrolidine-1-carboxylate (0.772 g, 3.80 mmol) in DMF (15 ml) . This was followed by the addition of sodium hydrate (0.152 g, 3.80 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr under argon atmosphere. The reaction was monitored by LCMS. The reaction was quenched with water (100 ml) and extracted with EtOAc (3 X 100 ml) . The combined layers were washed with brine (saturated, 2 x 200 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (1/1) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC40H45IN6O7S2 [M + H] +: 913, found913.2； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ8.08 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.53 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.16 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 6.88 (d, J ＝ 5.7 Hz, 4H) , 6.77 (d, J ＝ 8.4 Hz, 6H) , 5.51 (d, J ＝ 14.7 Hz, 1H) , 5.20 (d, J ＝ 14.7 Hz, 1H) , 4.68 (dd, Ja ＝ 5.4 Hz, Jb ＝15.3 Hz, 2H) , 4.07 (bs, 1H) , 3.81 (d, J ＝ 15.6 Hz, 1H) , 3.77 (s, 9H) , 3.49-3.46 (m, 1H) , 3.15-3.11 (m, 1H) , 2.96-2.93 (m, 1H) , 2.17-2.16 (m, 1H) , 1.78-1.70 (m, 1H) , 1.39 (s, 9H) .
Step E: (R) -tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (R) -tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) pyrrolidine-1-carboxylate (1.3g, 1.424 mmol) in DCM (15 ml) . This was followed by the addition of m-CPBA (0.983 g, 5.70 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 16 hr under argon atmosphere. The reaction was monitored by LCMS. The reaction was quenched with NaHSO4 (10％, 50 ml) and extracted with EtOAc (3 X 50 ml) . The combined layers were washed with NaHCO3 (saturated, 3 x 40 ml) , brine (saturated, 3 x 40 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel  chromatography, eluting with EtOAc in Pet. ether (67％) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC40H45IN6O9S2 [M + H] +: 945, found945.1.
Step F: (R) -tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (R) -tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate (200 mg, 0.212 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (34.6 mg, 0.042 mmol) and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (74.9 mg, 0.423 mmol) in Dioxane (2 ml) . This was followed by the addition of Na2CO3 (67.3 mg, 0.635 mmol) in water (0.4 ml) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at under argon atmosphere at 80℃ for 16 hr. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (10 ml) and extracted with EtOAc (3 x 10 ml) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 20 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with DCM /MeOH (10/1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC47H51N9O9S2 [M + H] +: 950, found950.2； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : 8.75 (d, J ＝7.6 Hz, 1H) , 8.21 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.10-6.49 (m, 17H) , 4.96-4.92 (m, 1H) , 4.72-4.65 (m, 2H) , 4.06-4.01 (m, 2H) , 3.83-3.52 (m, 6H) , 3.75 (s, 9H) , 2.78-2.77 (m, 1H) , 2.50-2.45 (m, 1H) , 1.49 (s, 9H) .
Step G: (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyrrolidin-3-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask , was placed a solution of (R) -tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate (170 mg, 0.179 mmol) in DCM (2 ml) . This was followed by the addition of TFA (0.5ml, 6.49 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated and the residue was used directly into next step without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC34H35N9O6S2 [M + H] +: 730, found730.2.
Step H: (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyrrolidin-3-ylsulfonyl) benzenesulfonamide (110 mg, 0.128 mmol) in TFA (2 ml, 26.0 mmol) .  The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water /0.05％ NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 40-60％B in 10 min, 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC18H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found490.0； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ 8.52 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.98 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.12 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.90 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.60 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 5.15-5.11 (m, 1H) , 3.71 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 3.50-3.41 (m, 2H) , 3.26-3.20 (m, 1H) , 2.58-2.51 (m, 1H) , 2.40-2.32 (m, 1H) .
The EXAMPLES in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide starting from 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, the appropriate boronic acids, and (R) -tert-butyl 3-mercaptopyrrolidine-1-carboxylate or its (S) -enantiomer which is made in the same fashion, just starting from the enantiomeric alcohol.
Figure PCTCN2015082514-appb-000220
Figure PCTCN2015082514-appb-000221
Figure PCTCN2015082514-appb-000222
EXAMPLE 332
3- (1H-indazol-7-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000223
Step A: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide
A solution of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylthio) -benzenesulfonamide (prepared as described in the previous example, 0.10g, 0.13 mmol) and 3-chloroperoperoxybenzoic (91 mg, 0.53 mmol) in DCM (20 mL) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , and extracted with dichloromethane (3 x 30 mL) . The combined organiclayers were washed with water (1 x 20 mL) and brine (1 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS calcd for C32H32IN5O7S2 [M + 1] +790 found 790； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.62 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 8.27 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.22 (d, J ＝ 8.8 Hz, 2H) , 6.92-6.80 (m, 10H) , 5.42-5.38 (m, 1H) , 5.28-5.25 (m, 1H) , 4.57-4.53 (m, 2H) , 3.85-3.81 (m, 2H) , 3.73 (s, 9H) , 3.61 (s, 3H) .
Step B: 3- (1H-indazol-7-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfon-amide
To a mixture of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methyl-sulfonyl) benzenesulfonamide (0.20g, 0.25 mmol) in H2O (2.00 mL) and dioxane (10 mL) , was added 7- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-indazole (0.12g, 0.51 mmol) , Na2CO3 (81 mg, 0.76 mmol) and Pd (dppf) Cl2 CH2Cl2 (41 mg, 0.05 mmol) under nitrogen. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 3 hr. The reaction mixture was  concentrated under reduced pressure, the residue was purified by a silica gel column, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50 ～ 1: 1) to afford the title compound: LCMS calc’ d for C39H37N7O7S2 [M + 1] +780 found 780； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.04 (s, 1H) , 8.80 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.34 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.15 (s, 1H) , 7.05-6.99 (m, 5H) , 6.87-6.85 (m, 5H) , 6.78-6.76 (m, 1H) , 6.66-6.64 (m, 2H) , 6.49-6.46 (m, 1H) , 4.92-4.75 (m, 2H) , 4.60-4.56 (m, 2H) , 4.06-3.97 (m, 2H) , 3.81 (s, 3H) , 3.77 (s, 9H) .
Step C: 3- (1H-indazol-7-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of 3- (1H-indazol-7-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide (0.19g, 0.24 mmol) in TFA (10 mL) was stirred at 80℃ and for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, then the residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm；mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 34％-95％in 8 min； Detector, UV 254 nm. RT: 6.82 min. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to givethe title compound: LCMS calcd for C15H13N7O4S2 [M + 1] +420 found 420； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.97 (s, 1H) , 8.36 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.07 (s, 1H) , 7.94 (d, J ＝8.8 Hz, 1H) , 7.61 (brs, 1H) , 7.59 (d, J ＝ 7.6Hz, 1H) , 7.05 (brs, 2H) , 6.83 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.53 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 3.62 (s, 3H) .
The EXAMPLES in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for 3- (1H-indazol-7-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide starting from 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide (Step A) and the appropriate boronic acids or boronic esters which were prepared as described herein or which were commercially available.
Figure PCTCN2015082514-appb-000224
Figure PCTCN2015082514-appb-000225
EXAMPLE 335
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (3-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000226
Step A: 3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate
Into a 100 mL flask was placed tert-butyl (3-hydroxypropyl) carbamate (2.0 g, 11.41 mmol) , Et3N (1.591 ml, 11.41 mmol) and Dichloromethane (25 ml) . Then MsCl (0.889 ml, 11.41 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x40 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 25 mL) and brine (2 x 25mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to affordthe title compound, which was used in next step directly without further purification.
Step B: S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate
The mixture of 3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate (2.9 g, 11.45 mmol) and potassium ethanethioate (1.307 g, 11.45 mmol) in DMF (25 ml) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 18 hr. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) , and extracted with ethyl acetate (2 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (1 x40 mL) and brine (2 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/4) . The combined organic  fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C10H19NO3S [M +H-56] +: 178, found 178； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ4.76 (br, 1H) , 3.16-3.15 (m, 2H) , 2.91 (t, J ＝ 6.9 Hz, 2H) , 2.33 (s, 3H) , 1.77 (q, J ＝ 6.9 Hz, 2H) , 1.45 (s, 9H) .
Step C: tert-butyl 3-mercaptopropylcarbamate
S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate (2.0 g, 8.57 mmol) was dissolved in MeOH (20 ml) . A solution of NaOH (0.857 g, 21.43 mmol) in water was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The pH value of the reaction solution was adjusted to 5 with hydrochloric acid (1M) . The reaction mixture was extracted with ethyl acetate (2 x 30mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 15 mL) and brine (2 x 15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C8H17NO2S [M +H-56] +: 136, found 136； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ6.82 (br, 1H) , 3.03-2.97 (m, 2H) , 2.51-2.41 (m, 2H) , 2.31-2.26 (m, 1H) , 1.68-1.58 (m, 2H) , 1.37 (s, 9H) .
Step D: tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propyl) carbamate
A mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.5 g, 0.633 mmol) and tert-butyl (3-mercaptopropyl) carbamate (0.266 g, 1.392 mmol) in DMF (8.0 ml) was prepared. NaH (0.152 g, 3.80 mmol) was added at 0℃. The mixture was stirred at room temperature for 2 hr. LC-MS and TLC showed the reaction completed. The mixture was quenched with water (25 mL) , extracted with ethyl acetate (3x 15 mL) , washed with water (20 mL) brine (20 mL) , dried over MgSO4, filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O7S2 [M + H] +: 901, found 901；
Step E: tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propyl) carbamate (0.4 g, 0.444 mmol) was dissolved in Dichloromethane (10 ml) , to which 3-chlorobenzoperoxoic acid (0.306 g, 1.776 mmol) was added. The reaction mixture was stirred at ambient temperatureovernight, and then partitioned between EtOAc (20 mL) and 10％aq. sodium thiosulfate (30 mL) . The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate (50 mL) , dried (Na2SO4) and the  volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O9S2 [M + H] +: 933, found 933；
Step F: tert-butyl (3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
Into a 25 mL round bottom flask was placedtert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (170 mg, 0.182 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (53.0 mg, 0.273 mmol) , Na2CO3 (57.9 mg, 0.547 mmol) and PdCl2 (dppf) -CH2Cl2Adduct (22.32 mg, 0.027 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (5.0 ml) . The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred for 4 hr. at 80℃. The reaction mixture was quenched with water (10 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 10 mL) and brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/15) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found 955；
Step G: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL flask was placed tert-butyl (3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (100 mg, 0.105 mmol) and TFA (2.0 mL) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hr. The solvent was removed under vacuum. The residue was dissolved in TFA (3.0 mL) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 15％B in 5 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found 495； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.16 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.64 (br, 4H) ,  7.49-7.46 (m, 3H) , 6.72-6.67 (m, 1H) , 6.47 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 3.95-3.89 (m, 2H) , 3.01-2.96 (m, 2H) , 2.11-2.01 (m, 2H) .
EXAMPLE 336
3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (3-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000227
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide above starting from tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (Step E) , except (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid was used in Step F. LCMS (ESI) calc’ d for [M + H] +: 492, found 492.
EXAMPLE 337
3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000228
Step A: benzyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate
A solution of benzyl piperazine-1-carboxylate (1.14 mL, 5.81 mmol) ) , and tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (chlorosulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) - 2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate (1.5 g, 1.45 mmol) in DCM (25 mL) was stirred at rt for 1 hr. The mixture was diluted with EtOAc (50 mL) , washed with saturated KHSO4 aqueous and brine, dried (MgSO4) and concentrated. LCMS [M+1] : 1216.71.
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The crude benzyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylatewas dissolved in DCM (10 ml) , stirred at rt for 2 hr with TFA (3 ml) and a few drops of anisole. The mixture was concentrated, and the residue was heated at 80℃ in 2 ml TFA for 40 min. TFA was removed, and the crude material was purified by reverse phase HPLCHPLC (7-42％ACN in water with 0.1％TFA) . LCMS [M+1] : 522.28.
The following EXAMPLES338-349 were prepared according to the representative procedure described above for 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 337) from tert-butyl (4- (3-(N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (chlorosulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazol-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate and corresponding amines. The amines can optionally be protected as their tert-butoxy carbonyl carbamates which are similarly removed under the final deprotection condictions with TFA. The same is true when carboxylates are present and are protected as tert-buthyl esters.
Figure PCTCN2015082514-appb-000229
Figure PCTCN2015082514-appb-000230
Figure PCTCN2015082514-appb-000231
Figure PCTCN2015082514-appb-000232
EXAMPLE 350
4- (6-Aminopyridin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000233
Step A: 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Under N2, to a solution of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (2.0 g, 2.283 mmol) in THF (40 ml) was added TBAF (9.13 ml, 9.13 mmol) . The mixture was stirred at rt for 1 hr under N2. Sodium acetate (1.873 g, 22.83 mmol) in water (10 ml) was added followed by solid (aminooxy) sulfonic acid (2.58 g, 22.83 mmol) . The resultant mixture was stirred at rt under N2 for 3 days. 30％of starting material was not consumed. The reaction mixture was diluted with EtOAc, washed with brine, dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (0-100％EtOAc in hexane) to give 5-iodo-N1, N1-bis (4- methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide. LCMS [M+1] : 791.57.
Step B: 5- (6-aminopyridin-3-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A suspension of 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.1 g, 0.126 mmol) , (6-aminopyridin-3-yl) boronic acid (0.035 g, 0.253 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.015 g, 0.013 mmol) and sodium carbonate (0.040 g, 0.379 mmol) in dioxane (2 mL) and water (0.6 mL) was heated at 80℃ for 17 hr under N2. The mixture was filtered through a celite pad. The filtrate was concentrated, and the residue was dissolved in EtOAc (30 mL) , washed with brine, dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was directly used for the next deprotection. LCMS [M+1] : 757.80.
Step C: 4- (6-aminopyridin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
5- (6-Aminopyridin-3-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.08 g, 0.106 mmol) was heated at 80℃ in 2 mL TFA for 40 min. TFA was evaporated in vacuo, and the crude material was purified by reverse phase HPLC (2-30％acetonitrilein water with 0.05％TFA) . LCMS [M+1] : 397.23.
EXAMPLE 351
2'-Amino-4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3'-cyano-2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000234
Step A: tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-cyano-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (2.00 g, 2.15  mmol) , (2-amino-3-cyanophenyl) boronic acid (1.04 g, 6.45 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.248 g, 0.215 mmol) and sodium carbonate (0.683 g, 6.45 mmol) in dioxane (40 ml) and water (15 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with AcOEt, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (0-50％then 50％EtOAc in hexane) . LCMS [M+1] : 921.47.
Step B: 2'-amino-4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3'-cyano-2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
The tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-cyano-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (30 mg, 0.033 mmol) was dissolved in DCM (4 mL) , stirred at rt for 2 hr with 2ml TFA and two drops of anisole, and concentrated. The residue was heated at 80℃ in 2 ml TFA for 40 min. TFA was removed, and the crude material was purified by reverse phase HPLC (7-50％AcCN in water with 0.05％TFA) . LCMS [M+1] : 461.26.
The following EXAMPLES 352-353 were prepared from the indicated starting materials (SMs) according to the representative procedure described above for 2'-amino-4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3'-cyano-2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE 351) .
Figure PCTCN2015082514-appb-000235
Figure PCTCN2015082514-appb-000236
EXAMPLE 354
2-Amino-4'- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3'-sulfamoyl-2'- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000237
Methyl 2-amino-4’ - ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3’ -sulfamoyl-2’ - (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1’ -biphenyl] -3-carboxylate (0.10 g, 0.21 mmol) was dissolved in MeOH (10 ml) , and heated with sodium hydroxide (1 N, 2.077 mL, 2.077 mmol) at 60℃ for 0.5hr. The mixture was cooled to rt, 2N hydrochloric acid (3 mL) was added and the reaction mixture concentrated under vacuum. The residue was dissolved in methanol (5ml) . Solid was filtered off, and the filtrate was concentrated, and purified by reverse phase HPLC (10-50％AcCN in water with 0.05％ TFA) . LCMS [M+1] : 468.15.
EXAMPLE 355
3- (2- (Methylsulfonamido) benzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000238
Benzyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2- (N, N-bis (tert-butoxycarbonyl) amido) benzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate (0.185 g, 0.116) was dissolved in DCM (30 mL) , and stirred at rt for 2 hr with 3 mL TFA and a few drops of anisole. The mixture was concentrated. To a mixture of the residue obtained above and methanesulfonyl chloride (0.018 ml, 0.232 mmol) in DMF (10 mL) was added sodium hydride (4.64 mg, 0.116 mmol) at 0℃. The mixture was stirred at rt for 1 hr, quenched with water, and diluted with ether. The organic layer was separated, washed with brine, dried over MgSO4, and concentrated. The crude material was heated in 5mL TFA at 80℃ for 40 min. TFA was evaporated under vacuum, and the residue was purified with reverse phase HPLC (10-75％water in AcCN with 0.1％TFA. LCMS [M+1] : 600.28.
EXAMPLE 356
3- (3H- [1, 2, 3] triazolo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000239
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (5.00 g, 5.37 mmol) , (2, 3-diaminopyridin-4-yl) boronic acid (2.465 g, 16.11 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.621 g, 0.537 mmol) and sodium carbonate (1.708 g, 16.11 mmol) in 1, 4-dioxane (100 mL) and water (30 mL) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with AcOEt, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (0-50％then 50％3: 1 EtOAc/EtOH in hexane. LCMS [M+1] : 912.57.
Step B: 3- (3H- [1, 2, 3] triazolo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a cold (ice bath) mixture of tert-butyl nitrite (0.016 ml, 0.132 mmol) and copper (II) bromide (0.027 g, 0.121 mmol) in 10 ml MeCN was added tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.10 g, 0.11 mmol) in 5 mL acetonitrile. Reaction mixture was stirred cold for 1.5 hr then warmed to ambient temperature, and stirred overnight. Volatiles were removed under reduced pressure. The resulting pot residue was worked up with saturated KHSO4 (1N, 10 mL) , extracted with ethyl acetate followed by aqueous sodium hydrogen carbonate wash. The resulting extract was dried over Na2SO4, filtered and evaporated.
The residue was dissolved in DCM (30 mL) , and was stirred at rt for 4 hr with 3 mL TFA and a few drops of anisole, and concentrated. The residue was heated at 80℃ in 2 ml TFA for 40 min. TFA was removed under reduced pressure., The crude material was purified by reverse phase HPLC (7-42％AcCN in water with 0.1％TFA) . LCMS [M+1] : 463.27.
EXAMPLE 357
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000240
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (4 g, 4.30 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (1.667 g, 8.59 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.497 g, 0.430 mmol) in dioxane (60 ml) and water (20 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with AcOEt, washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (0-50％then 50％EtOAc in hexane. LCMS: 953.65.
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Copper (II) bromide (1.040 g, 4.66 mmol) was suspended in acetonitrile (80 mL) , and cooled to 0℃, then tert-butyl nitrite (0.769 mL, 5.82 mmol) was added and stirred for 5 min. A green solution was observed. The tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (3.7 g, 3.88 mmol) in acetonitrile (30 ml) was then added. The mixture was stirred at 0℃ for 2 hr, warmed to room temperature and stirred for 16 hrs. The resultant mixture was poured into /saturated aqueous KHSO4. The aqueous was extracted with EtOAc. The organic layers were combined, washed with brine, dried (MgSO4) and concentrated. The residue was purified by ISCO (120g column, eluting with 0-25％ EtOAc/hexane then 25％EtOAc. LCMS [M+1] : 1016.49, 1018.46.
Step C: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (1.8 g, 1.770 mmol) , N-ethyl-N-isopropylpropan-2-amine (0.925 ml, 5.31 mmol) ) , Pd2dba3 (0.162 g, 0.177 mmol) , (9, 9-dimethyl-9H-xanthene-4, 5-diyl) bis (diphenylphosphine) (0.205 g, 0.354 mmol) , and N-ethyl-N-isopropylpropan-2-amine (0.925 ml, 5.31 mmol) in dioxane (15 ml) was degassed, heated in microwave oven 135℃ for 30 min. The mixture was cooled to room temperature, diluted with EtOAc, washed with NaOH (2N) and brine. The  organic layer was dried (MgSO4) , and concentrated. The crude material was directly used in the next step without further purification. LCMS [M+1] : 1070.58.
Step D: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) thio) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (crude 2.8 g, 2.62 mmol) in DCM (50 ml) was added solid 3-chlorobenzoperoxoic acid (2.93 g, 13.08 mmol) in portion at 0℃. The mixture was stirred at 0℃ for 3 hr, diluted with ether (150 ml) , washed with 1 N NaOH and brine. The organic layer was dried (MgSO4) , and concentrated. The crude material was purified by ISCO (80 g column, EtOAc in hexane 0-30％then 30％then 30-60％and 60％) . LCMS [M+1] : 1102.45.
Step E: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (benzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.25 g, 0.227 mmol) in THF (20 ml) was stirred with tetrabutylammonium fluoride (0.907 ml, 0.907 mmol) at rt under N2 for 0.5 hr. The mixture was diluted with AcOEt, washed with KHSO4 aqueous, dried over MgSO4, and concentrated. LCMS [M+1] : 938.48. The residue was dissolved in DCM (30 ml) , stirred at rt for 2 hr with 3 ml TFA and a few drops of anisole, and concentrated. The residue was heated at 80℃ in 5 ml TFA for 60 min. TFA was evaporated under reduced pressure, and the crude material was purified by reverse phase HPLC (7-42％AcCN in water with 0.1％TFA) . LCMS [M+1] : 478.15.
EXAMPLE 358
3- (2-amino-1- (azetidin-3-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000241
Step A: tert-butyl (2- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-bromo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
A suspension of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (4.3 g, 4.68 mmol) , 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline (3.71 g, 14.04 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.541 g, 0.468 mmol) and sodium carbonate (1.488 g, 14.04 mmol) in dioxane (40 ml) and water (15 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with AcOEt, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (120 g column, 0-50％ then 50％EtOAc in hexane. LCMS [M+1] : 929.43.
Step B: tert-butyl (2- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-bromo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Copper (II) bromide (0.894 g, 4.00 mmol) was suspended in acetonitrile (40 ml) and cooled to 0℃, and then tert-butyl nitrite (0.661 ml, 5.01 mmol) was added and stirred for 5 min. A green solution was observed. tert-Butyl (2- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (3.71 g, 4.00 mmol) in acetonitrile (30 ml) was then added. The mixture was stirred at 0℃ for 2 hr, warmed to rt, stirred for 16 hr, poured into saturated aqueous KHSO4, and extracted with EtOAc. The combined organic layers were washed with brine, dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was purified by ISCO (120 g column, eluting with 0-50％EtOAc/hexane then 50％. LCMS [M+1] : 992.3, 994.3.
Step C: tert-butyl 3- ( (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2-nitro- [1, 1'-biphenyl] -3-yl) amino) azetidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl (2- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-bromo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (1.8g, 1.8 mmol) , tert-butyl 3-aminoazetidine-1-carboxylate (0.62 g, 3.6 mmol) , BINAP (0.169 g, 0.272 mmol) , cesium carbonate (1.181 g, 3.63 mmol) and palladium (II) acetate (0.041 g, 0.181 mmol) in toluene (50 ml) was degassed, stirred at 80℃ for 16 hr. The mixture was cooled to room temperature, poured into water, and extracted with EtOAc. The organic layers were dried over MgSO4, filtered, and concentrated in vacuo. The residue was purified by ISCO (80 g column, EtOAc in hexane (0-50％then 50％, 50％-90％and 90％) LCMS [M+1] : 1084.16.
Step D: tert-butyl 3- ( (2-amino-3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-yl) amino) azetidine-1-carboxylate
A solution of tert-butyl 3- ( (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2-nitro- [1, 1'-biphenyl] -3-yl) amino) azetidine-1-carboxylate (1.26 g, 1.16 mmol) in MeOH (30 mL) was hydrogenated at 50 psi H2 and over palladium hydroxide on carbon (0.106 g, 0.151 mmol) at rt overnight. The catalyst was filtered off and the filtrate was concentrated. The crude material was separated by ISCO column (80 g silica gel, 0-50％, then 50％EtOAc in hexane) . LCMS [M+1] : 1054.65.
Step E: tert-butyl 3- (2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazol-1-yl) azetidine-1-carboxylate
A solution of cyanogen bromide (0.015 mL, 0.285 mmol) in ethanol (10 mL) was added to a flask containing tert-butyl 3- ( (2-amino-3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-yl) amino) azetidine-1-carboxylate (0.15 g, 0.142 mmol) . The flask was sealed and its contents were allowed to stir for 2 hours at 50℃. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, diluted with DCM and washed twice with 1M NaOH and once with brine. The combined organic fractions were dried over MgSO4, filtered and concentrated under reduced pressure. The crude material was directly used in the next step.
Step F: 3- (2-amino-1- (azetidin-3-yl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The crude tert-butyl 3- (2-amino-4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazol-1-yl) azetidine-1-carboxylate was dissolved in DCM (4 mL) , and was stirred at rt for 2 hr with 2mL TFA and two drops anisole, and concentrated. The residue was heated at 80℃ in 2 mL TFA for 40 min. TFA was evaporated under reduced pressure, and the crude material was purified by reverse phase HPLC (10-50％AcCN in water with 0.05％TFA) . LCMS [M+1] : 519.30.
EXAMPLE 359
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000242
Step A : tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate
To a solution of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (1.8 g, 2.222 mmol) in Tetrahydrofuran (34 ml) was added tert-butyl piperazine-1-carboxylate (0.828 g, 4.44 mmol) and Et3N (0.619 ml, 4.44 mmol) at ambient temperature. The reaction was kept for 30 min at room temperature. The mixture was concentrated under vacuum. The residue was diluted with EA (300 mL) and washed with brine (3x100 mL) , dried over and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with ethyl acetate /petroleum ether (1: 1) to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C40H46IN7O9S2 [M + H] +: 960, found 960； 1H NMR (400 MHz, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : 8.15-8.13 (m, 1H) , 7.91-7.89 (m, 1H) , 7.03-6.95 (m, 6H) , 6.89-6.82 (m, 2H) , 6.81-4.71 (m, 4H) , 4.54-4.45 (m, 2H) , 4.15-4.09 (m, 4H) , 3.88-3.77 (m, 9H) , 3.61-3.45 (m, 8H) , 1.46-1.45 (m, 9H) .
Step B: tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate
To a solution of tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate (200 mg, 0.208 mmol) in dioxane (1.2 ml) /water (0.300 ml) (4: 1) were added (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) boronic acid (11.06 mg, 0.063 mmol) , Na2CO3 (66.3 mg, 0.625 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (72.2 mg, 0.063 mmol) at ambient temperature. The flask was degassed with nitrogen for three times. Then the mixture was stirred for 16 hr at 80℃ under an atmosphere of nitrogen. The reaction wasred from yellow. The reaction mixture was quenched with water (5 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 15mL) . The combined organic layers were washed  with water (1 x 15mL) and brine (1 x 15mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with CH2Cl2 /MeOH (1: 10) to givethe title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C47H52N10O9S2 [M + H] +: 965, found 965.
Step C: 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 10 mL two necked round bottom flask were placed a solution of tert-butyl 4- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate (200 mg, 0.207 mmol) in DCM (3 ml) and TFA (1 ml) at 0℃ and the mixture was stirred at room temperature for 1hr. The reaction solutionwas filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was added to stirred, cooled TFA (4 ml) . The mixture was stirred at 80℃ for 1hr. The mixture was evaporated under reduced pressure. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge RP18, 19 x 150 mm, 5 μm； Mobile Phase A: water (0.05％NH4HCO3) , Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 57％B to 92％B in 10 min； Detection: UV 254nm. The collected fractions were concentrated under vacuum to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d for C18H20N10O4S2 [M -H] +: 503, found 503； 1H NMR (400 MHz, DMSO) : δ8.09 (d, J ＝ 15.0 Hz, 1H) , 7.93-7.91 (m, 1H) , 7.58 (brs, 2H) , 6.94-6.91 (m, 1H) , 6.576.53 (m, 1H) , 6.47 (brs, 2H) , 6.12-6.11 (m, 1H) , 3.45-3.42 (m, 4H) , 3.16-3.13 (m, 4H) .
The EXAMPLES in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (piperazin-1-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 359) starting from tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperazine-1-carboxylate (EXAMPLE 359, Step A) and the appropriate boronic acids or boronic esters which were prepared as described herein or which were commercially available.
Figure PCTCN2015082514-appb-000243
Figure PCTCN2015082514-appb-000244
EXAMPLE 363
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (R) -pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000245
Step A: (R) -tert-butyl-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonami-do) pyrrolidine-1-carboxylate
To a solution of a mixture of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride and 2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonyl chloride (REFERENCE EXAMPLE 12, 0.46g, 0.48 mmol) in tetrahydrofuran (10 mL) was added (R) -tert-butyl 3-aminopyrrolidine-1-carboxylate (90 mg, 0.48 mmol) at ambient temperature. The reaction was kept at 25℃ for 30 min. The mixture was concentrated under vacuum. The residue was diluted with EA (3x20 mL) , and washed with brine (3x20 mL) , dried over and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50 to 1: 1) to give the title compound as a mixture of tetrazole para-methoxybenzyl regioisomers: LCMS (ESI) calc’ d forC40H46IN7O9S2: [M + 1] +960 found 960； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.52 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.29 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.29-7.25 (m, 2H) , 6.83-6.69 (m, 10H) , 5.95 (brs, 1H) , 5.55-5.50 (m, 0.5H) , 5.24-5.19 (m, 0.5H) , 4.58-4.53 (m, 1H) , 4.05-3.81 (m, 5H) , 3.85 (s, 9H) , 3.48-3.35 (m, 4H) , 2.02-1.82 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B: (R) -tert-butyl-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate
A mixture of (R) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (0.20g, 0.21 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (92 mg, 0.52 mmol) , Na2CO3 (66 mg, 0.63 mmol) and Pd (PPh3) 4 (48 mg, 0.04 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.5 mL) was stirred at 80℃ for 3 hr under argon. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The mixture was diluted with EA (20mL) and washed with water (3 x 50 mL) . The organic layer was washed with brine (3 x 50 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and then evaporated undervacuum. The residue was purified by silica gel column, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a mixture of tetrazole para-methoxybenzyl regioisomers: LCMS (ESI) calc’ d forC47H52N10O9S2: [M + 1] +965 found 965.
Step C: 3- (2-aminobenzo [d] oxazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (R) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
A mixture of (3R) -tert-butyl-3- ( (4- (2-aminobenzo [d] oxazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulf-amoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate (0.10g, 0.10mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 25℃ for 30 min. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to afford the crude title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC42H44N10O7S2: [M + 1] +865 found 865.
Step D: (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A mixture of (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-meth-oxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (70 mg, 0.07 mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 80℃for 1 hr. The reaction mixture was allowed to cool down to ambient temperature, quenched by water (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with brine (200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by preparative HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 10％-40％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC18H20N10O4S2: [M + 1] +505 found 505； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ8.21 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.06-8.01 (m, 1H) , 6.91 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.49 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.18 (brs, 2H) , 6.05 (d, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 4.13-4.09 (m, 1H) , 3.32-3.29 (m, 2H) , 3.19-3.08 (m, 2H) , 2.13-2.04 (m, 1H) , 1.94-1.85 (m, 1H) .
The EXAMPLES in the Table immediately below were prepared in an analogous fashion as described for (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (EXAMPLE 363) starting from (R) -tert-butyl-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonami-do) pyrrolidine-1-carboxylate (Step A, or the enantiomeric corresponding pyrolidine, prepared in the same fashion) and the appropriate boronic acids or boronic esters which were prepared as described herein or which were commercially available.
Figure PCTCN2015082514-appb-000246
Figure PCTCN2015082514-appb-000247
EXAMPLES367, 368 and 369
3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000248
Step A: tert-butyl 3- ( ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (tertbutoxycarbonyl) amino) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2', 3', 4', 5'-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) methyl) azetidine-1-carboxylate
A mixture of the tert-butyl 3- (mercaptomethyl) azetidine-1-carboxylate (231 mg, 1.134 mmol) , sodium 2-methylpropan-2-olate (109 mg, 1.134 mmol) and tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate (650 mg, 0.756 mmol) in DME in a sealed tube was deoxygenated by bubbling nitrogen for a period of 10 min. Then BRETTPHOS-PD-G3 (103 mg,  0.113 mmol) was added. The reaction tube was sealed and heated to 75℃ overnight. After cooling to RT, the reaction mixture was filtered through a pad of celite and the solid was thoroughly washed with ethyl acetate. The filtrate was washed with 1N aq. HCl, brine, dried (MgSO4) and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography usingEtOAc in hexanes as eluent to give the desired sulfide product.
Step B: tert-butyl 3- ( ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2', 3', 4', 5'-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) methyl) azetidine-1-carboxylate
mCPBA (158 mg, 0.704 mmol) was added to a stirred solution of starting material tert-butyl 3- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (4- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclohexyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) methyl) azetidine-1-carboxylate (630 mg, 0.640 mmol) in dichloromethane (5 mL) at room temperature and the mixture was stirred at room temperature for overnight. The reaction mixture was diluted with water (60 mL) and the mixture was extracted with dichloromethane (2x 60 mL) . The organic phase was combined and dried (MgSO4) . The residue was purified by column chromatography on silica gel, eluting with EtOAc/isohexane to give the sulfone product.
Step C: tert-butyl 3- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (4- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclohexyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) methyl) azetidine-1-carboxylate
Dihydroxypalladium (154 mg, 0.220 mmol) or PtO2was added to a solution of starting material tert-butyl 3- ( ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2', 3', 4', 5'-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) methyl) azetidine-1-carboxylate (223 mg, 0.220 mmol) in methanol (1 ml) and EtOAc (2 ml) at RT. The solution was degassed by reduced pressure, then hydrogenated (using 45 Psi) at room temperature for overnight. The reaction mixture was filtered through celite and washed with EtOAc, and concentrated to obtain the desired product.
Step D: 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
tert-butyl 3- ( ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (4- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) cyclohexyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) methyl) azetidine-1-carboxylate (0.7 mmol) was dissolved in DCM (4 mL) . Anisole (0.12 ml) and TFA (8 ml) were added at 0℃ and the mixture was stirred at 0℃ for 2 hr.  The reaction mixture was concentrated to afford the crude Boc deprotected product. The crude material was placed on the vacuum for at least 3 hours and used as is.
Step E: 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamideobtained from step D (0.16 mmol) was dissolved in anisole (0.3 ml) and TFA (3 ml) , heated to 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated. The residue was purified by reverse phase HPLC to give the final product, 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. LC/MS [M+2] /2: 228.75
3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was further separated by reverse phase HPLC to give two products, 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide. LC/MS [M+2] /2: 228.75
The followingEXAMPLES370-377were prepared according to the procedure describedimmediately above for3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamideEXAMPLES367, 368 and 369 using tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate and thiols that are commercially available, known, or prepared as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000249
Figure PCTCN2015082514-appb-000250
Figure PCTCN2015082514-appb-000251
EXAMPLE378
4- (4-aminocyclohexyl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000252
Step A: tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'-sulfamoyl-2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate
tert-Butyl (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) cyclohex-3-en-1-yl) carbamate (82 mg, 0.25 mmol) and sodium carbonate (26.8 mg, 0.253 mmol) , and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (17.5 mg, 0.015 mmol) were added to a stirred solution of starting material 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (From JJ, 100 mg, 0.126 mmol) in dioxane at room temperature and the mixture was degassed with N2 for 10 minutes, thenstirred at 80℃ for overnight. LCMS indicated the completion of the reaction. After the reaction cooled to rt, the reaction mixture was filtered through Celite. The liquid was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by columnchromatography on silica gel (12 g) and eluted with EtOEt/hexane to give the desired product.
Step B: tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) cyclohexyl) carbamate
Platinum (IV) oxide (46.5 mg, 0.205 mmol) was added to a stirred solution of starting material tert-butyl (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'-sulfamoyl-2, 3, 4, 5-tetrahydro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) carbamate (176 mg, 0.205 mmol) in EtOAc (2 ml) and MeOH (0.5 ml) at RT. The solution was degassed by reduced pressure, then hydrogenated (using small balloon) at room temperature for 2 hours. The reaction mixture was filtered through celite and washed with MeOH, concentrated and the residue was purified by column chromatography on silica gel 12 g, eluting with EtOAc/isohexane to give as asolid.
Step C: 4- (4-aminocyclohexyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
TFA (1.5 ml, 19.47 mmol) and anisole (1 ml, 9.15 mmol) were added to a stirred solution of starting material tert-butyl (4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) cyclohexyl) carbamate (160 mg, 0.186 mmol) in dichloromethane at room temperature and the mixture was stirred at room temperature for 2 hr. The mixture was concentrated. The residue was redissolved in EtOAc (3 ml) and toluene (5 ml) . The mixture was concentrated again, and this procedure was repeated two more times. The residue was placed on high vacuum for 3 hr and taken on as is for next step.
Step D: 4- (4-aminocyclohexyl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
TFA (2 mL, 26.0 mmol) and anisole (1 mL, 9.15 mmol) were added to starting material 4- (4-aminocyclohexyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide at room temperature and the mixture was stirred at 80℃ for 2 hr. The mixture was concentrated. The residue was purified by preparative reverse phase HPLC (C-18) , eluting with Acetonitrile/water + 0.1％TFA to give to give the title compound. LCMS: 402.35 [M+H] +
EXAMPLE379
3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000253
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A reaction flask was charged with 2, 2-dimethylpropane-1, 3-diol (0.614 g, 5.89 mmol) , 2nd generation Xphos precatalyst (0.232 g, 0.295 mmol) , cesium carbonate (0.768 g, 2.356 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (1g, 1.178 mmol) and 6-bromopyridin-2-amine (0.245 g, 1.414 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (15 ml) and water (3 ml) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography to give thetitle product.
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (6- (3- (ethoxycarbonyl) thioureido) pyridin-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Ethoxycarbonyl isothiocyanate (0.088 ml, 0.747 mmol) was added to a stirred solution of starting material tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (447 mg, 0.498 mmol) in dichloromethane (11 ml) at 0℃ and the mixture was allowed to warm to room temperature and stirred at room temperature for overnight. LCMS indicated an incomplete reaction. Another 0.5 eq. of O-ethyl carbonisothiocyanatidate was added at 0℃. The reaction mixture was continued to be stirred at RT for 3hr. The mixture was diluted with water (30 mL) , then extracted with dichloromethane (2 x 30mL) . The residue was purified by column chromatography on silica gel, eluting with EtOAc/isohexane to give the desired product.
Step C: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Hunig's base (0.313 ml, 1.79 mmol) was added to a suspension of hydroxylamine hydrochloride (156 mg, 2.24 mmol) in EtOH/MeOH (1: 1) and the mixture was stirred at RT for 30 min. The resulting mixture was then added to a solution of starting material tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (6- (3- (ethoxycarbonyl) thioureido) pyridin-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (461 mg, 0.448 mmol) in THF (1.5 mL) . The mixture was slowly heated to reflux (80℃) for 3 hr. LCMS  indicateda complete reaction. The mixture was diluted with water (50 mL) , and extracted with ethyl acetate (2 x 50 mL) . The residue was purified by column chromatography on silica gel, eluting with EtOAc/isohexane to give the title product.
Step D: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step E: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 477.35 [M+H] +
EXAMPLE380
3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000254
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-6-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A microwave vial was charged with cesium carbonate (235 mg, 0.721 mmol) , 6-bromo- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-2-amine (51.2 mg, 0.240 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (204 mg, 0.240 mmol) and 2nd generation Xphos precatalyst (18.91 mg, 0.024 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (1.8 ml) and water (0.6 ml) . The resulting mixture was heated overnight at 60℃. The mixture was filtered, washed with ethyl acetateand concentrated. The residue was purified by column chromatography on silica gel 12 g, eluting with EtOAc/isohexane to give the product.
Step B: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step C: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-6-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 477.34 [M+H] +.
EXAMPLE 381
3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000255
Step A: (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) boronic acid
Potassium acetate (691 mg, 7.04 mmol) and chloro [ (tricyclohexylphosphine) -2- (2'-aminobiphenyl) ] palladium (ii) (139 mg, 0.235 mmol) , bis (pinacolato) diboron (1192 mg, 4.69 mmol) were added to a stirred solution of starting material 8-bromo- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-2-amine (500 mg, 2.347 mmol) in dimethylsulfoxide at room temperature and the mixture was degassed and stirred at 90℃ for overnight. The mixture was filtered through a pad of celite, diluted with water (30 mL) and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 30 mL) . The residue was purified by reverse phase column chromatography on silica gel 86 g C18, eluting with Acetonitrile/water to give as a white solid after concentration.
Step B: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
(2-Amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) boronic acid (37.3 mg, 0.209 mmol) and sodium carbonate (42.7 mg, 0.403 mmol) , PdCl2 (dppf) 2 (23.58 mg, 0.032 mmol) were added to a stirred solution of starting material tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (150 mg, 0.161 mmol) in dioxane (5 ml) and water (1 ml) at room temperature and the mixture was degassed for 10 minutes, and then stirred at 80℃ for overnight. LCMS indicateda complete reaction. The mixture was diluted with water (60 mL) , extracted with ethyl acetate (2 x 60 mL) . The residue was purified by column chromatography on silica gel, eluting with EtOAc/isohexane to give the product.
Step C: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step D: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3- ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 477.48 [M+H]
EXAMPLES382 –386in the table below were made starting from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand boronic acids or boronic esters that are commercially available, known, or prepared as described herein by using the same method described above for making 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-8-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 381) .
Figure PCTCN2015082514-appb-000256
Figure PCTCN2015082514-appb-000257
EXAMPLE387
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000258
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
(3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl) boronic acid (27.5 mg, 0.215 mmol) and sodium carbonate (28.5 mg, 0.269 mmol) , PdCl2 (dppf) 2 (15.72 mg, 0.021 mmol) were added to a stirred solution of starting material tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (100 mg, 0.107 mmol) in Dioxane (2 ml) and water (0.5 ml) at room temperature and the mixture was degassed for 10 minutes, and then stirred at 80℃ for overnight. The mixture was diluted with water (30 mL) , extracted with ethyl acetate (2x 30 mL) . The organic phase was combined and concentrated. The residue was purified by column chromatography on silica gel 12g, eluting with EtOAc/isohexane to give as a solid product.
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Dihydroxypalladium (32.7 mg, 0.070 mmol) was added to a stirred solution of starting material tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (3, 6-dihydro-2H-pyran-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (62 mg, 0.070 mmol) in methanol (1 ml) and EtOAc (2 ml) at RT. The solution was degassed by reduced pressure and hydrogenated (using parr shaker, 45 Psi) at room temperature for overnight. The reaction mixture was filtered through celite and washed with EtOAc, concentrated and the residue was taken on as is.
Step C: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step D: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (tetrahydro-2H-pyran-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 429.33 [M+H] +.
EXAMPLE 388
3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000259
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (6-aminopyridin-2-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A reaction flask was charged with 2, 2-dimethylpropane-1, 3-diol (0.614 g, 5.89 mmol) , 2nd generation Xphos precatalyst (0.232 g, 0.295 mmol) , cesium carbonate (0.768 g, 2.356 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (1g, 1.178 mmol) and 6-bromopyridin-2-amine (0.245 g, 1.414 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (15 ml) and water (3 ml) . The resulting mixture was heated overnight at 40℃. The reaction mixture was filtered over celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography using EtOAc/Hex as mobile phase to give the product.
Step B: 3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide from Step A were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step C: 3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups of 3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4- aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 437.24 [M+H] +
EXAMPLE389
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000260
The title compound was prepared using the same methods as described above for 3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE22) . 1H NMR : 8.65 (1H, d, J＝8.34 Hz) , 8.15 (1H, d, J ＝ 8.56 Hz) , 6.95 (1H, d, 8.07 Hz) , 6.28 (1H, d, 8.13 Hz) , 5.25 (1H, m) , 4.6 (2H, m) , 4.45 (2H, m) .
EXAMPLE390
3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000261
Step A: 5- (tributylstannyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-2-amine
Sodium carbonate (533 mg, 5.03 mmol) and 1, 1, 1, 2, 2, 2-hexabutyldistannane (5.12 ml, 10.06 mmol) , PPh3PdG2 (288 mg, 0.503 mmol) were added to a stirred solution of starting material 5-bromo- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-2-amine (536 mg, 2.52 mmol) in DMF (6 ml) at room temperature. The mixture was degassed and stirred at 110℃ for overnight. The mixture was concentrated, extracted with EtOAc, washed with water and brine. The organic  phase was dried (MgSO4) , filtered and concentrated. The residue was purified by column chromatography on silica gel 40g, eluting with EtOAc/isohexane to give as a oil product.
Step B: tert-butyl (2- ( (4- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
Sodium carbonate (63.4 mg, 0.599 mmol) and 5- (tributylstannyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-2-amine (132 mg, 0.311 mmol) , chloro (triphenylphosphine) [2- (2'-amino-1, 1'-biphenyl) ] palladium (ii) (41.1 mg, 0.072 mmol) were added to a stirred solution of starting material tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (220 mg, 0.239 mmol) in dimethylformamide (3 ml) at room temperature and the mixture was degassedfor 10 minutes, and stirred at 80℃ for 3 hr. The reaction mixture was filtered and concentrated. The residue was purified by columnchromatography on silica gel, eluting with EtOAc/isohexane to give the title product.
Step C: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The Boc protective group and one para-metoxybenzyl protective group on the sulfonamide from Step A were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step D.
Step D: 3- (2-amino- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridin-5-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The last two para-methoxybenzyl protective groups of 3- (6-aminopyridin-2-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide were removed according to the procedure described for 3- (4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide； 3- ( (1r, 4r) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- ( (1s, 4s) -4-aminocyclohexyl) -6- ( (azetidin-3-ylmethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLES 367-369) , Step E. LCMS: 233.43； 465.39 [M+H] +.
EXAMPLES 391, 392, and 393
4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylthio) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide and 4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide and 4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000262
Step A: tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-bromo-2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl 4- (4- (4-, 5, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2—dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate (0.81g, 2.1 mmol) , the aryl iodides (1.10 g, 1.39 mmol) and sodium carbonate (0.44 g, 4.2 mmol) in dioxane (4.5 mL) and water (1.5ml) was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through the suspension for 10 min.
Tetrakis (triphenylphosphine) palladium (O) (0.08g, 0.07mmol) was added and deoxygenation was continued for a further 5min. The tube containing the reaction mixture was sealed and heated to 85℃ (oil bath temperature) overnight. After cooling, the reaction was partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40 g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent, giving the desired carbamates. LC/MS [M+H] +: 926.08 and 926.10.
Step B: tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) thio) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) thio) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
A mixture of the products from the previous step (0.50 g, 0.54 mmol) , tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate (0.14 g, 0.55 mmol) and sodiumtert-butoxide (0.057 g, 0.59 mmol) in DME (5 mL) was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through the  suspension for 15 min. Xphos Biphenyl precatalyst (CAS#1310584-14-5； 0.049 g, 0.054 mmol) was added and deoxygenation was continued for a further 5 min. The tube containing the reaction mixture was sealed and heated to 75℃ (oil bath temperature) overnight. After cooling, the mixture was filtered through a pad of celite and the solid was washed thoroughly with EtOAc. The filtrate was washed with 1N HCl, brine, dried (MgSO4) . and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent giving the desired sulfides. LC/MS [M+H] +: 1061.07 and 1061.11
Step C: 4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
TFA (3 mL) was added to a mixture of the protected tetrazoles (0.050 g, 0.09 mmol) and anisole (10 drops from a pipette) and the mixture was stirred at room temperature for 1hr. The volatiles were removed under reduced pressure and additional TFA (3 mL) was added to the residue. The mixture was heated to 85℃ (oil bath temperature) under an atmosphere of nitrogen for 2 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the crude product was purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired product. LC/MS [M+H] +: 500.64.
Step D: tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) piperidin-4-yl) sulfinyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
MCPBA (0.107g of 77％pure material, 0.48mmol) was added to a stirred solution of the sulfides (0.34g, 0.32mmol) in dichloromethane (5 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction was partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in  hexanes as eluent to give the sulfones { [LC/MS [M+H] +: 1093.19 followed by the sulfoxides. LC/MS [M+H] +: 1077.23.
Step E: 4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
TFA (5 mL) was added to a mixture of the bis-carbamates (0.10 g, 0.09mmol) and anisole (10 drops from a pipette) and the resulting reaction mixture heated to 80℃ (oil bath temperature) for a period of 2 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the residue purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) as gradient to obtain the titled compound as its TFA salt. LC/MS [M+H] +: 532.70.
Step F: 4'- (piperidin-4-yl) -4- (piperidin-4-ylsulfinyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Using the transformation described in Step E above, the sulfoxides obtained in step D were converted to the trifluoroacetate of the titled amine. LC/MS [M+H] +: 516.66.
EXAMPLES394 and 395
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1-methyl-3- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) -1H-indol-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -1-methyl-1H-indol-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000263
Step A: tert-butyl 3- ( (2- ( (l1-azanyl) sulfonyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (1-methyl-1H-indol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate compound with 1, 2-bis (4-methoxyphenyl) ethane and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1-methyl-1H-indol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A stream of nitrogen was bubbled through a mixture of 1-methyl-4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-indole (0.041 g, 0.11mmol) , tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.100g, 0.107mmol) and sodium carbonate (0.0342g, 0.32mmol) in dioxane (1.5 mL) and water (0.5 mL) for a period of 15min. PdCl2 (dppf) -methylene chloride adduct was added and the resulting reaction mixture was heated to 90℃ (oil bath temperature) under an atmosphere of nitrogen overnight. After cooling, the reaction was filtered through a pad of celite and the solid washed thoroughly with methanol. The filtrate was concentrated under reduced pressure and the residue partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The crude reaction product was purified by silica gel column chromatography using a 12g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent, giving the desired products.
Step B: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1-methyl-3- (2, 2, 2-trifluoroacetyl) -1H-indol-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -1-methyl-1H-indol-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
TFA (1 mL) was added to a mixture of the protected intermediate from the previous step (0.015g, 0.016mmol) and anisole (3 drops from a pipette) in dichloromethane (2ml) , cooled in an ice bath while a steam of nitrogen bubbled through the solution. After 1hr, the volatiles were removed under reduced pressure and additional TFA (1ml) was added to the residue and the mixture heated to 80℃ (oil bath temperature) for a period of 2hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the 3-trifluoroacetyl substituted indole (as the TFA salt) [LC/MS [M+H] +: 570.37] followed by 2-alkyl substituted indole (as the TFA salt) LC/MS [M+H] +: 595.46.
EXAMPLE 396
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -1H-indol-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000264
Using (1H-indol-4-yl) boronic acid instead of 1-methyl-4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-indole in Step A of the previous example and following the same protocols, the TFA salt of the titled compound was obtained. LC/MS [M+H] +: 580.66.
EXAMPLE 397
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (phenylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000265
Step A: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylthio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylthio) benzenesulfonamide
Sodium hydride (0.056g of a 60％dispersion in mineral oil, 1.27mmol) was added, in one portion, to a stirred solution of thiophenol (0.139g, 1.27mmol) in anhydrous DMF (5ml) at room temperature under an atmosphere of nitrogen. After stirring for 20 min, the aryl bromide (0.500g, 0.63mmol) was added and stirring was maintained for 4hr. The reaction was quenched by the addition of sat. aq. ammonium chloride and the organics extracted into EtOAc. The organic phase was separated, washed with water (3X) , dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent. LC/MS [M+H] +: 820.40.
Step B: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylsulfonyl) benzenesulfonamide
MCPBA (0.353g of 77％pure material, 1.57mmol) was added, in one portion, to a stirred solution of the sulfides from the previous step (0.43 g, 0.52mmol) in dichloromethane (10 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The reaction mixture was partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent, giving the desired sulfones. LC/MS [M+H] +: 852.59
Step C: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylsulfonyl) benzenesulfonamide
A stream of nitrogen was bubbled through a mixture of the sulfones from the previous step (0.050g, 0.06mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.017 g, 0.09mmol) and sodium carbonate (0.019 g, 0.18mmol) in dioxane (1 mL) and water (0.30 mL) for a period of 15min. The catalyst [PdCl2 (dppf) ] (0.0064g) was added and and the resulting reaction mixture was heated to 90℃ (oil bath temperature) overnight. After cooling, the mixture was filtered through a pad of celite and the solid was washed thoroughly with methanol. The filtrate was concentrated under reduced pressure and the residue partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The crude reaction product was purified by silica gel column chromatography using a 12g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the title compounds. LC/MS [M+H] +: 874.88.
Step D: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (phenylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
TFA was added to a mixture of the benzthiazoles from the previous step and the mixture was heated to 80℃ (oil bath temperature) for a period of 2 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the residue purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) as eluent to give the desired product. LC/MS [M+H] +: 514.46.
EXAMPLE 398
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000266
Step A: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (phenylthio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylthio) benzenesulfonamide
Using 2-mercaptopyridine instead of thiophenol in Step A of the synthesis of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (phenylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 397) , the title compounds were obtained. LC/MS [M+H] +: 821.36.
Step B: 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
Sodium periodate (0.328g, 1.54mmol) in water (2 mL) was added to a solution of the sulfides from the previous step (0.210g, 0.26mmol) in dichloromethane (2 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. Ether was added and stirring continued for a further 0.5hr. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The crude reaction product was purified by silica gel column chromatography using a 12g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired sulfones. LC/MS [M+H] +: 853.46
Step C: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide
The title compounds were prepared from 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo- N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide according to the procedure used in EXAMPLE 397 (3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (phenylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide) , Step C. LC/MS [M+H] +: 875.51
Step D: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The title compound was prepared from 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (pyridin-2-ylsulfonyl) benzenesulfonamide using the same procedure as described for the synthesis of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (phenylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 397, Step D) . LC/MS [M+H] +: 515.27
EXAMPLES 399, 400 and 401
4- (Methylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide and 4- (methylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide and 4- (methylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000267
Step A: 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (methylthio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylthio) benzenesulfonamide and N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3, 6-bis (methylthio) benzenesulfonamide and N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3, 6-bis (methylthio) benzenesulfonamide
Sodium methanethiolate (0.400g, 5.71mmol) was added to a stirred solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (2.10g, 2.66mmol) in anhydrous DMF  (1ml) under an atmosphere of nitrogen. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 10min, quenched with sat. aq. sodium bicarbonate and the organics extracted into EtOAc. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a gradient of EtOAc in hexanes as eluent. to give the monosulfides LC/MS [M+H] +: 758.76 and 758.76. followed by the disulfides LC/MS [M+H] +: 678.85
Step B: tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylthio) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylthio) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate
In a sealed tube, a mixture of tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate (0.276g, 0.71mmol) , the aryl iodides (0.360g, 0.48mmol) and sodium carbonate (0.151g, 1.43 mmol) in 1, 4-dioxane (4 mL) and water (1 mL) was degassed by bubbling a stream of nitrogen through for a period of 10min. Palladium tetrakis (triphenylphosphine) (0.028g, 0.02mmol) was added and bubbling was continued for a further 5min. The tube was sealed and the resulting reaction mixture was heated to 85℃ (oil bath temperature) overnight. After cooling, the reaction mixture was partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired products. LC/MS [M+H] +: 892.27 and 892.25
Step C: 4- (Methylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
TFA (2ml) was added to a mixture of the protected tetrazoles (0.076g, 0.09mmol) and anisole (afew drops from a pipette) in dichloromethane (4ml) and the mixture was stirred at room temperature for 1hr. The volatiles were removed under reduced pressure and additional TFA (2ml) was added to the residue. The mixture was heated to 80℃ for 4hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the crude product was purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired product. LC/MS [M+H] +: 431.55.
Step D: tert-Butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylsulfonyl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylsulfonyl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl  4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylsulfinyl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylsulfinyl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate compound with tert-butyl 4- (3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4'- (methylsulfinyl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) piperidine-1-carboxylate (1: 1)
MCPBA (1.41g of 77％pure material, 6.3mmol) was added to a stirred solution of the sulfides (1.36g, 1.80mmol) in dichloromethane (10 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 3 hr. The reaction was partitioned between EtOAc and 10％aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the sulfone LC/MS [M+H] +: 924.22 and 924.22 followed by the sulfoxides. LC/MS [M+H] +: 908.22.
Step E: 4- (Methylsulfinyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Using the transformation described in Step C above, the sulfoxides obtained in step D were converted to the trifluoroacetate of the titled amine. LC/MS [M+H] +: 447.49
Step F: 4- (Methylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Using the transformation described in Step C above, the sulfones obtained in step D were converted to the trifluoroacetate of the titled amine. LC/MS [M+H] +: 463.57
EXAMPLE 402
3- (6-Aminopyridin-3-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000268
Step A: 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide
MCPBA (1.41g of 77％pure material, 6.28mmol) was added, in one portion, to a stirred solution of the sulfides (1.36g, 1.80mmol) in dichloromethane (10 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 3hr, then partitioned between EtOAc and 10％ aq. sodium thiosulfate. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired sulfones. LC/MS [M+H] +: 790.81 and 790.82.
Step B: 3- (6-Aminopyridin-3-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (6-aminopyridin-3-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide
A mixture of (6-aminopyridin-3-yl) boronic acid hydrochloride (0.0497g, 0.29mmol) , the sulfones (0.150g, 0.19mmol) and sodium carbonate (0.060g, 0.57mmol) in dioxane (4ml) and water (1ml) in a sealed tube was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through for a period of 10min. Then [1, 1’ -Bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) complex with dichloromethane (0.016g, 0.02 mmol) was added and bubbling was continued for a further 5min. The tube was sealed and the reaction mixture was heated to 80℃ overnight. After cooling, the mixture was partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The crude product was purified by silica gel column chromatography to give the amino-pyridine. LC/MS [M+H] +: 756.89
Step C: 3- (6-Aminopyridin-3-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
TFA (2 mL) was added to a mixture of the protected tetrazoles (0.074 g, 0.1mmol) and the resulting solution was heated to 80℃ for 1.5 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the residue purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) as eluent to give the trifluoroacetate salt of the desired amino-pyridine. LC/MS [M+H] +: 756.89
The following EXAMPLES403-406 were prepared according to the general procedure described above for 3- (6-Aminopyridin-3-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, EXAMPLE402, using boronic acids or boronic esters that are commercially available, known, or prepared as described herein and 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6-  (methylsulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- (methylsulfonyl) benzenesulfonamide.
Figure PCTCN2015082514-appb-000269
EXAMPLE 407
4'- (Piperidin-4-yl) -4- (pyridin-4-ylthio) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000270
The title compound was prepared according to the general procedure described above for 4- (Methylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamideEXAMPLE399 (Steps A-C) utilizing 4-mercaptopyridine instead of methane thiolate. The trifluoroacetate salt of the desired amine was obatained following reverse phase HPLC, LC/MS [M+H] +: 494.42
EXAMPLE 408
4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000271
Step A: 4-Bromo-4'- (cyclopropanesulfonamido) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide and 4-bromo-4'- (cyclopropanesulfonamido) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
In a sealed tube, a mixture of (4- (cyclopropanesulfonamido) phenyl) boronic acid (0.457g, 1.90mmol) a mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.00g, 1.27mmol) and sodium carbonate (0.402g, 3.80mmol) in dioxane (4mL) and water (1mL) was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through for 10min. Palladium tetrakis (triphenylphosphine) was added and bubbling was continued for a further 5min. The tube  was sealed and the reaction mixture heated to 80℃ overnight. After cooling, the mixture was partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired sulfonamides. LC/MS [M+H] +: 861.73 and 861.74.
Step B: tert-Butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate
Sodium hydride (0.033g of a 60％dispersion in mineral oil, 0.84mmol) was added to tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate (0.145g, 0.77mmol) in anhydrous DMF (3ml) and the mixture stirred at room temperature under an atmosphere of nitrogen for 10minthen the aryl bromides (0.30 g, 0.35mmol) in anhydrous DMF (3 mL) were added. The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 2hr, then 50℃ for 10min. After cooling, the reaction was quenched by the addition of sat. aq. ammonium chloride and the organics extracted into EtOAc. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 40g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent. Gave the desired sulfides. LC/MS [M+H] +: 969.23.
Step C: 4- (Azetidin-3-ylthio) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
TFA (2mL) was added to a mixture of tert-Butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate (0.120g, 0.124mmol) and anisole (a few drops from a pipette) and the resulting reaction mixture was heated to 80℃ for 1.5 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the residue purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) as eluent, giving the trifluoroacetate salt of the desired amine. LC/MS [M+H] +: 508.45.
EXAMPLE 409
4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000272
Using the processes described in Steps D and E ofthe preparation of 4- (methylsulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide, EXAMPLE 401, the title compound was prepared from tert-Butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) thio) azetidine-1-carboxylate (Step B in EXAMPLE408) . LC/MS [M+H] +: 540.46
EXAMPLES410 and 411
3- ( (4'- (Cyclopropanesulfonamido) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) -N-cyclopropylazetidine-1-carboxamide and 3- ( (4'- (cyclopropanesulfonamido) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000273
Triethylamine (0.031 mL, 0.023g, 0.22mmol) followed by cyclopropylisocyanate (0.011g, 0.14mmol) were added to the trifluoroacetate salt of 4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -4'- (cyclopropanesulfonamido) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE409； 0.070g, 0.09mmol) in anhydrous dichloromethane (1 mL) . The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 0.5hr, followed by heating to 50℃ for 10min. After cooling, the reaction mixture was filtered and the filtrate concentrated under  reduced pressure. The resulting residue was dissolved in TFA (1ml) and the solution was heated to 80℃ for 1hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure and the crude reaction product was purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to obtain the desired cyclopropyl analogue. LC/MS [M+H] +: 623.54 and the unsubstituted derivative LC/MS [M+H] +: 583.51
EXAMPLE 412
4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3, 3'-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000274
StepA: tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3'-sulfamoyl- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3'-sulfamoyl- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A mixture of 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzenesulfonamide (23 mg, 0.081 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (50 mg, 0.054 mmol) and sodium carbonate (17.1 mg, 0.161 mmol) in aqueous dioxane (4 mL) in a sealed tube was deoxygenated by bubbling a stream of nitrogen through it for 10 min, then [1, 1′-Bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) , complex with dichloromethane (4.4 mg, 0.0054 mmol) was added and bubbling was continued for a further 5min. The tube was sealed and heated to 80℃ (oil bath temp, overnight) . After cooling, the reaction was partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was used next step without purification. LC/MS [M+H] +: 961.18
Step B: 4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3, 3'-disulfonamide
TFA (1 mL) was added to a mixture of the carbamates (0.050g, 0.05mmol) in dichloromethane (2 mL) and anisole (5 drops from a pipette) while cooled in an ice bath while a stream of nitrogen was bubbling through the solution. When the addition was complete, the  mixture was stirred for 1hr. The volatiles were removed under reduced pressure and TFA (1 mL) was added to the residue and the mixture heated to 80℃ for a period of 1.5 hr. After cooling the volatiles were removed under reduced pressure and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired product. LC/MS [M+H] +: 500.53.
EXAMPLE 413 was prepared according to the general procedure described immediately above for 4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3, 3'-disulfonamide EXAMPLE412, using 5- (4, 4, 5, 5-Tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1, 7-naphthyridin-8-amine, prepared as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000275
EXAMPLE 414
6- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1, 1-dioxido-3-oxo-2, 3-dihydrobenzo [d] isothiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000276
A mixture of [1, 1’ -Bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) complex with dichloromethane (0.006g) , 4-bromobenzo [d] isothiazole-3 (2H) -one 1, 1-dioxide (0.028g, 0.16mmol) and sodium carbonate (0.022g, 0.21mmol) in dioxane (2 mL) and water (0.5  mL) was deoxygenated by bubbling through a stream of nitrogen for a period of 10min. The reaction mixture was heated to 85℃ overnight. After cooling, the reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrate partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, washed with sat. aq. sodium bicarbonate, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure.
The crude reaction product was dissolved in dichloromethane (1 mL) , anisole (5 drops from a pipette) was added. After cooling in an ice bath, a stream of nitrogen was bubbled through the mixture. TFA (1 mL) was added and stirring was continued for a further 1hr. The volatiles were removed under reduced pressure and additional TFA (1 mL) was added before heating to 80 ℃ for a period of 1hr. After cooling, the mixture was concentrated under reduced pressure and the crude reaction product purified by reverse HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) , giving the trifluoroacetate salt of the desired amine. LC/MS [M+H] +: 526.99.
EXAMPLE 415
3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000277
Step A: 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
Using sodium 3- (trifluoromethyl) benzenethiolate instead of sodium methanethiolate in Step A of the preparation of 4- (Methylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamideEXAMPLE401 and subsequent oxidation of the resulting sulfides as described in Step A of the synthesis of 3- (6-Aminopyridin-3-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide EXAMPLE402, gave the desired sulfones. LC/MS [M+H] +: 920.51.
Step B: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
Using (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid and the iodides in Step A (above) and the procedure set forth in Step B of 3- (6-Aminopyridin-3-yl) -6- (methylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamideEXAMPLE 402, the titled benzthiazoles were obtained. LC/MS [M+H] +: 961.18
Step C: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (3- (trifluoromethyl) phenyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
The products obtained in Step B (above) were treated with TFA at 80℃ and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired titled compound. LC/MS [M+H] +: 582.32
EXAMPLE 416
3- (2-Amino-7-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000278
Step A: tert-Butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-fluoro-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-fluoro-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a 10mL microwave vial was charged Na2CO3 (68.3 mg, 0.645 mmol) , (2, 3-diamino-4-fluorophenyl) boronic acid (60 mg, 0.353 mmol) , (tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (200 mg, 0.215 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (25 mg, 0.021 mmol) . The vial was sealed, degassed,  and filled with Dioxane and water (4: 1) . The resulting mixture was heated overnight at 80℃. The reaction mixture was filtered through celite. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (RediSep gold column, 24 g) using 0-100％EtOAc/Hexane as mobile phase to give desired product. LC/MS [M+H] +: 929.70
Step B: tert-Butyl 3- ( (4- (2-amino-4-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-4-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To tert-Butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-fluoro-2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-fluoro-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (Step A； 0.05g, 0.05mmol) was added cyanogen bromide (0.007g, 0.07mmol) in a mixture of methanol (1mL) and water (2mL) and the reaction mixture was heated to 50℃ for 1 hr. After cooling, the volatiles were removed under reduced pressure to give the desired benzimidazoles. LC/MS [M+H] +: 954.78 and 954.80.
Step C: 3- (2-Amino-7-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To the solution of crude tert-Butyl 3- ( (4- (2-amino-4-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-4-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (88 mg, 0.092 mmol) was added 1 mL DCM and 5 drops of anisole with N2 bubbling in an ice bath. Then TFA (1 mL) was addedand the mixture wasstirred for 1 hr. The reaction mixture was concentrated and to the residue wasadded neat TFA. The resulting mixture was heated at 80℃ for 1.5 hr. After removing the volatiles the residue was purified by reverse phase HPLC using 3-50％13min ACN/H2O with 0.05％TFA. LC/MS [M+H] +: 494.34.
EXAMPLE 417
Methyl 4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Figure PCTCN2015082514-appb-000279
Step A: tert-butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Cesium carbonate (0.118g, 1.13mmol) , 3-bromobenzene-1, 2-diamine hydrochloride (0.076g, 0.34mmol) , 2, 2-dimethylpropane-1, 3-diol (0.118g, 1.131mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (0.100g, 0.118g) and 2nd generation XPHOS precatalyst (0.0185g, 0.024mmol) in dioxane (2ml) and water (0.5ml) was deoxygenated in a sealed vial and heated to 85℃ overnight. After cooling, the reaction mixture was filtered through a pad of celite and the filtrated partitioned between EtOAc and water. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography (40g column) using a gradient of EtOAc in hexanes as eluent to give the desired products. LC/MS [M+H] +: 911.62 and 911.67.
Step B: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Anisole (1 drop from a pipette) was added to a mixture of the diamines (Step A； 0.020g, 0.02mmol) and benzyl 2, 2, 2-trichloroacetimidate (0.005g, 0.02mmol) followed by AcOH (1ml) . The resulting reaction mixture was stirred at room temperature for 3hr, then the volatiles removed under reduced pressure to give the desired products. LC/MS [M+H] +: 1039.48, 1041.43.
Step C: Methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate and methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1-  (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
A mixture of the trichloromethylbenzimidazoles (0.020g, 0.02mmol) and sodium carbonate (0.002g, 0.02mmol) in anhydrous MeOH (1ml) was heated to 80℃ overnight. After cooling, the methanol was removed under reduced pressure and the residue partitioned between EtOAc and 10％aq. HCl. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure to give the desired methyl esters. LC/MS [M+H] +: 979.69
Step D: Methyl 4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
To a solution of Methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate and methyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1-(tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (20 mg, 0.020 mmol) was added 1 mL DCM and 5 drops of anisole with N2 bubbling in ice bath. Then TFA 1 mL was added and the mixture was stirred for 1hr. The mixture was concentrated and to the residue was added neat TFA. The mixture was then stirred at 80℃ for 1.5 hr. After removing the volatiles the residue was purified by reverse phase HPLC using 3-50％13min ACN/H2O with 0.05％TFA. LC/MS [M+H] +: 519.35.
EXAMPLE 418
4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000280
Trifluoroacetate salt: Lithium hydroxide (0.011g, 0.47mmol) was added to methyl 4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate: TFA (0.005g) in dioxane (2ml) and water (0.25ml) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. A few drops of aq. HCl was added and the volatiles were removed under reduced pressure. The residue was purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing  0.1％TFA) to give the desired trifluoroacetate salt of the titled compound. LC/MS [M+H] +: 505.36.
Hydrochloride salt: Excess 1N aq. HCl was added to the trifluoroacetate salt (obtained above) and the resulting mixture concentrated under reduced pressure to give the desired hydrochloride salt of the titled compound. LC/MS [M+H] +: 505.39.
EXAMPLE 419
4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000281
Step A: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamoyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-carbamoyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (2- (trichloromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.025g, 0.02mmol) in acetonitrile (1 mL) and water (0.25 mL) was added 7M ammonia in methanol (7μl, 0.05mmol) followed by potassium carbonate (0.010g, 0.07mmol) . The resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The volatiles were removed under reduced pressure to give the desired carboxamides. LC/MS [M+H] +: 964.69 and 964.54.
Step B: 4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxamide
Using the procedure and purification process outlined in Step D of Methyl 4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2- carboxylate (Example 417) , the carbamates obtained in Step A were tranformed into the trifluoroacetate salts of the titled compound. LC/MS [M+H] +: 504.37
EXAMPLE 420
4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -N-methyl-1H-benzo [d] imidazole-2-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000282
By following the exact protocol outlined in the previous example, 4- (4- (Azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxamide, and substituting methylamine for ammonia in Step A, the trifluoroacetate salt of the titled compound was obtained after purification. LC/MS [M+H] +: 518.36.
EXAMPLE 421
Methyl (4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carbonyl) glycinate
Figure PCTCN2015082514-appb-000283
By following the exact protocol outlined in the previous two examples and substituting glycine methyl ester for methylamine or ammonia, the trifluoroacetate salt of the titled compound was obtained after purification. LC/MS [M+H] +: 576.31.
EXAMPLE 422
(4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carbonyl) glycine
Figure PCTCN2015082514-appb-000284
Using the product from the previous Example, Methyl (4- (4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carbonyl) glycinate, and the procedures set out in EXAMPLE418, the trifluoroacetate and hydrochloride salts of the titled compound were obtained. LC/MS [M+H] +: 562.37.
EXAMPLES423 and 424
3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000285
Step A: 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) thio) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) thio) benzenesulfonamide
The title compounds were preparedfrom 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide according to the protocol set forth in Step A of 4- (Methylthio) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (1H-tetrazol- 5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide (EXAMPLE399) , substituting sodium 2-morpholinoethane-1-thiolate for sodium methanethiolate. LC/MS [M+H] +: 857.53 and 857.56.
Step B: 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
Sodium periodate (0.282g, 1.32mmol) in water (2ml) was added to a mixture of the sulfides from the previous step (0.188g, 0.219mmol) and ruthenium trichloride (0.002g) in dichloromethane (2 mL) and the resulting reaction mixture was stirred at room temperature overnight. Ether was added and stirring was continued for a further 30min. The organic phase was separated, dried (MgSO4) and the volatiles removed under reduced pressure. The residue was purified by silica gel column chromatography using a 12g column and a gradient of EtOAc in hexanes as eluent, givinga mixture of morpholines and and morpholinones. LC/MS [M+H] +: 889.4 and 903.3.
Step C: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide
A mixture of (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (21.1 mg, 0.109 mmol) and 3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide and 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (50 mg, 0.054 mmol) , [1, 1′-Bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) , complex with dichloromethane (4.4 mg,  0.0054 mmol) , Na2CO3 (17.3 mg, 0.163 mmol) and dioxane/water (4 mL/1 mL) was heated at 85℃ overnight. After cooling, the reaction mixture was filtered through ceilite and extracted wtih EtOAc. The organic layer was separated, dried, and concentrated. The residue was purified by ISCO (0-100％EtOAc/Hexane) to obtain two compounds. Each was carried to deprotection for NMR structure determination. LC/MS [M+H] +: 925.51 and LC/MS [M+H] +: 911.55
Step D: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-morpholinoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The morpholines obtained in Step C (above) were treated with TFA at 80℃ and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired titled compound. LC/MS [M+H] +: 551.33
Step E: 3- (2-Aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2- (3-oxomorpholino) ethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The morpholinones obtained in Step C (above) were treated with TFA at 80℃and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the trifluoroacetate salt of the desired titled compound. LC/MS [M+H] +: 565.25
EXAMPLES 425 and 426
(S) -5- (6- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (N- (1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium-3-yl) sulfamoyl) -2-sulfamoylphenyl) tetrazol-2-ide and (S) -5- (6- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (N- (1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium-3-yl) sulfamoyl) -2-sulfamoylphenyl) tetrazol-2-ide
Figure PCTCN2015082514-appb-000286
Step A: (S) -3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonamido) -1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium 2, 2, 2-trifluoroacetate and (S) -3- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H- benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) sulfonamido) -1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium
TFA (23.5 g, 206 mmol) was added to a mixture of (S) -tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (1.99 g, 2.06 mmol) in dichloromethane (10.3 mL) and anisole (1.13 g, 10.29 mmol) while cooled in an ice bath while a stream of nitrogen was bubbling through the solution. When the addition was complete, the mixture was stirred for 1hr. The volatiles were removed under reduced pressure. The resulting crude material from the above (0.4 g, 0.27 mmol) in THF (1 mL) was added CH3I (114 mg, 0.8 mmol) followed by Cs2CO3 (175 mg, 0.54 mmol) and stirred at 50℃ for 30 min. After cooling, the reaction mixture was filtered and the resulting filtrate was removed solvent under reduced pressure to give the mixture of products. LC/MS [M+H] +: 773.55 and 787.57
Step B: (S) -5- (6- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (N- (1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium-3-yl) sulfamoyl) -2-sulfamoylphenyl) tetrazol-2-ide and (S) -5- (6- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (N- (1, 1-dimethylpyrrolidin-1-ium-3-yl) sulfamoyl) -2-sulfamoylphenyl) tetrazol-2-ide
The products obtained in Step B (above) were treated with TFA at 80℃ and the crude reaction product purified by reverse phase HPLC using a gradient of acetonitrile (containing 0.1％TFA) in water (containing 0.1％TFA) to give the title compounds. LC/MS [M+H] +: 533.4 and 547.36
EXAMPLE 427
3- (2-amino-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000287
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a 10mL RBF was added cesium carbonate (57.6 mg, 0.177 mmol) , 7-bromo-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-2-amine (17.32 mg, 0.062 mmol) , (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (50 mg, 0.059 mmol) and Xphos Pd G2 (4.64 mg, 0.006 mmol) . The flask was sealed, degassed, and filled with dioxane (0.8ml) and water (0.200 ml) . The resulting mixture was heated at 80℃ for overnight. The reaction mixture was filtered through a celite pad to removed palladium. The filtrate was diluted with EtOAc and washed with water. The organic phase was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography (ISCO RediSep gold column, 40g) using 0-10％MeOH/DCM as mobile phase to get the title compound. LC/MS (M+H) +: 1005.01.
Step B: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -azetidine-1-carboxylate (20 mg, 0.020 mmol) in DCM (0.2 ml) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (21.65 μl, 0.199 mmol) and TFA (153 μl, 1.992 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at rt for 1.0 hr. LC-MS shown no SM left. The reaction mixture was concentrated in vacuum, then was dissolved in 0.5 mL of TFA, heated at 80℃ for 1hr. After removing the volatile, the residue was purified by reverse phase HPLC (3-60％Acetonitrile in H2O) to give the desired product. LC/MS [M+2H] 2+: 272.85.
The following EXAMPLES428-433were prepared according to the general procedure described above fortert-butyl 3- ( (4- (2-amino-5- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -sulfonyl) azetidine-1-carboxylate, EXAMPLE 427, starting from (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidor tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and using aryl/heteroaryl halides that are commercially available, known, or prepared as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000288
Figure PCTCN2015082514-appb-000289
EXAMPLE 434
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (3S, 4R) -4-hydroxypyrrolidin-3-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000290
Step A: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) -benzenesulfonamide
A suspension of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (2.0 g, 2.283 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.808 g, 4.57 mmol) , [1, 1'-bis (diphenylphosphino) -ferrocene] dichloropalladium (II) (0.251 g, 0.343 mmol) and sodium carbonate (0.726 g, 6.85 mmol) in dioxane (30 mL) and water (6 ml) was degassed and heated at 120℃ for 2 hr. The mixture was diluted with EtOAc, washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 80 g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 881.53.
Step B: tert-butyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -1H-benzo [d] imidazole-1-carboxylate.
To a solution of the Suzuki coupling product 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) -benzenesulfonamide (1.4 g, 1.59 mmol) in DCM (20.00 mL) , was added N, N-dimethylpyridin-4-amine (0.582 g, 4.77 mmol) and di-tert-butyl dicarbonate (1.04 g,  4.77 mmol) at 0℃. The reaction mixture was stirred at rt for 30 min. The volatiles wereremoved in vacuo and the residue was chromatographed over silica gel (ISCO 80 g, 0-100％EtOAc in hexanes) to give the title compound. LC/MS (M+H) +: 1181.87.
Step C: tert-butyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (N- ( (3S, 4R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -4-hydroxypyrrolidin-3-yl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -1H-benzo [d] imidazole-1-carboxylate
To a solution of the tri-Boc intermediate tert-butyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) phenyl) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -1H-benzo [d] imidazole-1-carboxylate (0.2 g, 0.169 mmol) in THF (10 mL) was added tetrabutylammonium fluoride (1.0 M in THF, 0.372 ml, 0.372 mmol) at 0℃ under N2. After stirring for 1 hr, the reaction mixture was diluted with 20 mL of EtOAc, washed sequentially with 5 mL of sat. aq. KHSO4, 5 mL of brine, dried (MgSO4) and concentrated. The residue was dissolved in 20 mL of DCM, cooled to 0℃, then to the reaction mixture was added (3S, 4R) -tert-butyl 3-amino-4-hydroxypyrrolidine-1-carboxylate (0.034 g, 0.169 mmol) , N, N-dimethylpyridin-4-amine (0.021 g, 0.169 mmol) and 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (0.045 g, 0.339 mmol) . The reaction mixture was stirred for 2hr. After removing the volatile in vacuo, the residue was chromatographed over silica gel (ISCO, 40g, 0-20％EtOAc in hexanes) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 1281.50.
Step D: 4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (3S, 4R) -4-hydroxypyrrolidin-3-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A solution of tert-butyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (N- ( (3S, 4R) -1- (tert-butoxycarbonyl) -4-hydroxypyrrolidin-3-yl) sulfamoyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -1H-benzo [d] imidazole-1-carboxylate (400 mg, 3.70 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuo. The residue was dissolved in anisole (400 mg, 3.7 mmol) and TFA (1000 mg, 8.77 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 2 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 4 mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+2H) 2+: 261.28.
The following EXAMPLES435-443were prepared according to the general procedure described above for4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (3S, 4R) -4-hydroxypyrrolidin-3-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide, EXAMPLE434, usingpyrrolidine derivatives that are commercially available, known, or prepared as described  herein. Note that all amine moieties are typically protected with a tert-butoxycarbonyl group, which is concurrently removed under the final PMB deprotection step with TFA and anisole. Alternatively, a Boc protected amine may be de-protected by treatedment with TFA at room temperature, followed by de-protection of the PMB group with heating as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000291
Figure PCTCN2015082514-appb-000292
EXAMPLE 444
(R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (piperidin-3-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000293
Step A: (R) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) piperidine-1-carboxylate
To a solution of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (1.0 g, 1.142 mmol) in THF (10 ml) was added tetrabutylammonium fluoride (1.0 M in THF, 2.51 ml, 2.51 mmol) at 0℃ under N2. After stirring for 1 hr, the reaction mixture was diluted with 20 mL of EtOAc, washed sequentially with 5 mL of sat. aq. KHSO4, 5 mL of brine, dried (MgSO4) and concentrated. The residue was dissolved in 20 mL of DCM, cooled to 0℃, then to the reaction mixture was added (R) -tert-butyl 3-aminopiperidine-1-carboxylate (0.343 g, 1.713 mmol) and N, N-dimethylpyridin-4-amine (0.209 g, 1.713 mmol) , followed by 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (0.305 g, 2.283 mmol) . The reaction mixture was stirred for 2 hr. After removing the volatile in vacuo, the residue was chromatographed over silica gel (ISCO, 40 g, 0-20％EtOAc in hexanes) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 974.53.
Step B: (R) -tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) piperidine-1-carboxylate
A suspension of (R) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) piperidine-1-carboxylate (935mg, 0.960 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (340 mg, 1.920 mmol) , [1, 1'-bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloroPd (II) (0.157 g, 0.192 mmol) and sodium carbonate (0.305 g, 2.88 mmol) in dioxane (10.00 mL) and water (2 ml) was degassed and heated at 120℃for 2 hr. The reaction mixture was diluted with EtOAc, then was washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 40 g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 979.73.
Step C: (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (piperidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A solution of (R) -tert-butyl 3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -piperidine-1-carboxylate (520mg, 0.531 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (400 mg, 3.7 mmol) and TFA (1000 mg, 8.77 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 2 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 4 mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+2H) 2+: 260.20.
The following EXAMPLES445-447 were prepared according to the general procedure described above for (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (piperidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide, EXAMPLE444, using amines that are commercially available, known, or prepared as described herein. Either (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid or (2-amino-6-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid were used for Suzuki coupling reactions. Note that all amine moieties are typically protected with a tert-butoxycarbonyl group, which is concurrently removed under the final PMB deprotection step with TFA and anisole. Alternatively, a Boc protected amine may be de-protected by treatedment with TFA at room temperature, followed by de-protection of the PMB group with heating as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000294
Figure PCTCN2015082514-appb-000295
EXAMPLE 448
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000296
Step A: tert-butyl- (3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -phenylsulfonamido) propyl) carbamate
To a solution of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (1.50 g, 1.48 mmol) in THF (10 mL) was added tert-butyl 3-aminopropylcarbamate (0.52 g, 2.96 mmol) at rt. The resulting solution was stirred at 25℃for 30 min and then concentrated under vacuum. The residue was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with ethyl acetate/petroleum ether (1: 50 to 1: 1) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H46IN7O9S2: [M + 1] +948 found 948； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.57-8.52 (m, 1H) , 8.12-8.07 (m, 1H) , 7.35-7.21 (m, 2H) , 6.99-6.81 (m, 10H) , 5.99 (brs, 1H) , 5.45-5.09 (m, 1H) , 4.95-4.52 (m, 2H) , 4.29-4.12 (m, 1H) , 3.96-3.92 (m, 2H) , 3.83-3.79 (m, 9H) , 2.95-2.91 (m, 4H) , 1.61-1.55 (m, 2H) , 1.34 (s, 9H) .
Step B: tert-butyl (3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate.
A solution of tert-butyl (3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.30g, 0.32 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.14g, 0.79 mmol) , Na2CO3 (0.10g, 0.95 mmol) and Pd (PPh3) 4 (73 mg, 0.06 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.5 mL) was stirred at 80℃ for 3 hr under argon. The resulting mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 70 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 70 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, elutingwith methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H52N10O9S2: [M + 1] +953 found 953； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H) , 8.46 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 8.3 Hz, 1H) , 7.09–6.80 (m, 12H) , 6.77-6.75 (m, 2H) , 6.45-6.42 (m, 1H) , 6.35 (s, 2H) , 5.76 (brs, 1H) , 5.70 (brs, 1H) , 4.70-4.52 (m, 2H) , 4.10-4.08 (m, 4H) , 3.73 (s, 6H) , 3.70 (s, 3H) , 3.02-2.98 (m, 4H) , 1.63-1.61 (m, 2H) , 1.36 (s, 9H) .
Step C: 4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A mixture of tert-butyl- (3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.16g, 0.17 mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 25℃for 30 min. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC33H36N10O6S2: [M + 1] +733 found 733.
Step D: 4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
A mixture of 4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.10g, 0.09mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure, the residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-40％in 8 min； Detector, UV 254 nm. RT: 5.5 min. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to give the ttile compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d  forC17H20N10O4S2: [M + 1] +493 found 493； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ8.49 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.03 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.31 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.02 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.52 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 3.16-3.12 (m, 2H) , 2.85 (t, J ＝ 7.5 Hz, 2H) , 1.88-1.83 (m, 2H) .
EXAMPLE 449
4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000297
Step A: tert-butyl (3- (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate
A solution of tert-butyl (3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (100 mg, 0.106 mmol) , (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (60.5 mg, 0.317 mmol) , Pd (PPh3) 4 (24.38 mg, 0.021 mmol) and Na2CO3 (22.36 mg, 0.211 mmol) in 1, 4-Dioxane (1 mL) and water (0.3 mL) was stirred at 80℃ for 2 hr under argon. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C47H54N10O9S2 [M + 1] +: 967, found 967； 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ) :
Step B: 4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
A solution of tert-butyl (3- (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (70 mg, 0.072 mmol) and TFA (1 mL, 12.98 mmol) in Dichloromethane (5 mL) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was  concentrated under vacuum to give the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d for C34H38N10O6S2 [M + 1] +: 967, found 967；
Step C: 4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
A solution of 4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (3-aminopropyl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (40 mg, 0.054 mmol) in TFA (5 mL, 64.9 mmol) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column 19 x 150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 30％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C18H22N10O4S2 [M + 1] +: 507, found 507； 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) : 8.16 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.00 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.70-7.20 (m, 3H) , 6.92 (d, J ＝ 7.9 Hz, 1H) , 6.50 (t, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.43 (brs, 2H) , 6.06 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 3.49 (s, 3H) , 3.12 (t, J ＝6.8 Hz, 2H) , 2.86 (t, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 1.80-1.76 (m, 2H) .
EXAMPLE 450
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (S) -2-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000298
Step A: (S) -tert-butyl (1-amino-1-oxopropan-2-yl) carbamate
Intoa 250 mL of round bottom flask, di-tert-butyl dicarbonate (13.14 g, 60.2 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of triethylamine (12.18 g, 120 mmol) , (S) -2-aminopropanamide hydrochloride (5.00 g, 40.1 mmol) in DCM (150 ml) . The reaction mixture was stirred at room temperature overnight at room temperature. The reaction mixture was diluted with water (100mL) and extracted with DCM (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel  columnchromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/20) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C8H16N2O3 [M + H] +: 189, found: 189. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 7.20 (brs, 1H) , 6.90 (brs, 1H) , 6.70 (d, J ＝6.4 Hz, 1H) , 3.90-3.85 (m, 1H) , 1.40 (s, 9 H) , 1.18 (d, J ＝7.2 Hz, 3H)
Step B: (S) -tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate
Intoa 250 round bottom flask, borane (6 ml, 60.0 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of (S) -tert-butyl (1-amino-1-oxopropan-2-yl) carbamate (6.50g, 34.5 mmol) in THF (100 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at 70℃ for 4 hr, it was cooled down to room temperature, quenched with water/ice (100 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3x 40mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum/ether (1/10) to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C8H18N2O2 [M + H] +: 175, found: 175. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 4.97 (s, 1H) , 3.46 (d, J ＝6.6 Hz, 2H) , 2.25 (s, 3H) , 1.39 (s, 9H) , 1.28 (s, 6H) . LCMS (ESI) calc’ d for C8H16N2O3 [M + H] +: 189, found: 189. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 7.22 (brs, 1H) , 6.93 (brs, 1H) , 6.58 (d, J ＝1.2Hz, 1H, , 3.88-3.81 (m, 1H) , 2.48 (d, J ＝3.3Hz, 2H) , 1.37 (s, 9H) , 1.16 (d, J ＝5.7Hz, 3H) .
Step C: 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid
Intoa 50 mL round bottom flask, tetrabutylammonium fluoride trihydrate (10 ml, 1.142 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of 3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (1.00 g, 1.142 mmol) in THF (10 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr, it was with diluted with water (100 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous magnisium sulfate and filtered. The filtrate was concentratedunder vacuum to give the title compound as a solid, which was used in next step directly without purification. LCMS (ESI) calc’ d for C31H30IN5O7S2 [M+1 ] +: 776 found: 776； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ8.54 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 8.18 (d, J ＝8.1 Hz, 1H) , 7.28 (d, J ＝8.7 Hz, 1H) , 7.20 (d, J ＝8.7 Hz, 1H) , 6.91-6.77 (m, 10H) , 5.95 (s, 1H) , 5.43-5.15 (m, 1H) , 4.30-4.21 (m, 1H) , 3.95-3.90 (m, 4H) , 3.72 (s, 9H) , .
Step D: (R) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate.
Intoa 50 mL round bottom flask, 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (0.15 g, 1.160 mmol) was added to a stirred mixtureof 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (0.45g, 0.580 mmol) in THF (20 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr, (S) -tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate (0.15 g, 0.870 mmol) was added at room temperature. The resulting mixture was stirred at room temperature overnight and then diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 100mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H46IN7O9S2 [M + H] +: 948, found: 948. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 8.23-8.12 (m, 6H) , 7.33-7.26 (m, 4H) , 6.96-6.86 (m, 4H) , 5.80 (s, 2H) , 4.10-3.70 (m, 4H) , 3.79 (s, 9H) , 3.70-3.68 (m, 3H) , 1.47 (s, 9H) , 1.16 (d, J ＝ 3.0Hz, 3H) .
Step E: (R) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate
Intoa 50 three-necked round bottom flask, [1, 1'-bis (diphenylphosphineo) ferrocene] dichoropalladium (II) (46.20 mg, 0.063 mmol) was added to a stirred mixture of sodium carbonate (0.10 g, 0.947 mmol) , (s) -tert-butyl1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-ylcarbamate (0.30 g, 0.316 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.112 g, 0.632 mmol) in dioxane/water ( (1: 1) 4/1) (12ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The solids were filtered out. The filtrate was concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N10O9S2 [M + H] +: 953, found: 9531H NMR (300 MHz, MeOD) : δ8.32- (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 8.19 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.45-7.40 (m, 4H) , 7.29-7.22 (m, 6H) , 6.87-6.64 (m, 4H) , 5.75-5.12 (m, 2H) , 4.73-4.68 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.73 (m, 1H) , 3.76 (s, 9 H) , 3.73 (s, 2H) , 1.43 (s, 9H) , 0.85 (d, J ＝6.9 Hz, 3H) .
Step F: 4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N- (2-aminoethyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
Intoa 50 mLround bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml) was added to a stirred mixture of (S) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N- (2-aminopropyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide 2, 2, 2- trifluoroacetate (80.00 mg, 0.083 mmol) in DCM (1 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 1hr and then concentrated under vacuum to give the residue (crude) which was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18, 19 x 150mm； mobile phase: Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Phase B: MeCN for 11 min, hold 80％to85％in11min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O4S2 [M + H] +: 493, found: 493. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : 8.38 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 7.87 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.00 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 6.74-6.69 (m, 1H) , 6.41 (d, J ＝7.8Hz, 1H) , 3.44-3.28 (m, 2H) , 3.09-3.03 (m, 1H) , 1.13 (d, J ＝6.6Hz, 3H) .
EXAMPLE 451
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (R) -2-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000299
Step A: (R) -tert-butyl (1-amino-1-oxopropan-2-yl) carbamate hydrochloride
Into a 250 mL round bottom flask, di-tert-butyl dicarbonate (35.0 g, 161 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of triethylamine (16.25 g, 161 mmol) , (S) -2-aminopropanamide hydrochloride in MeOH (150 ml) . After the resulting mixture was stirred at room temperature overnight, it was diluted with water (100mL) and extracted with dichloromethane (3 x100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum/ether (1/20) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C8H16N2O3 [M + H] +: 189, found: 189. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 7.21 (brs, 1H) , 6.89 (brs, 1H) , 6.74 (d, J ＝6.4 Hz, 1H) , 3.89-3.84 (m, 1H) , 1.39 (s, 9 H) , 1.18 (d, J ＝7.2 Hz, 3H) .
Step B: (R) -tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate
Intoa 500 mL round bottom flask, borane (20ml, 200 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of (R) -tert-butyl (1-amino-1-oxopropan-2-yl) carbamate (15.00g, 80 mmol) in  THF (150 ml) at room temperature. After the resulting mixture was stirred at 70℃ for 4 hr, it was cooled down to room temperature, quenched with sodium hydroxide (1N) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 40mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum/ether (1/1) to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C8H18N2O2 [M + H] +: 175, found: 175. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 3.88-3.79 (m, 2H) , 2.66-2.62 (m, 1H) , 1.49 (s, 9H) , 1.16 (d, J ＝5.7Hz, 3H) .
Step C: (R) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate
Into a 50 mL round bottom flask, 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (172 mg, 1.289 mmol) was added to a stirred mixture of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (500mg, 0.645 mmol) in tetrahydrofuran (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction was determined to be complete by LCMS. (R) -tert-butyl 1-aminopropan-2-ylcarbamate (0.17g, 1.289 mmol) was added to the reaction mixture under room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for overnight. The reaction mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 100mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 60 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H46IN7O9S2 [M + H] +: 948, found: 948. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 8.42-8.24 (m, 4H) , 7.33-7.26 (m, 4H) , 6.96-6.86 (m, 6H) , 5.80 (s, 2H) , 4.10-3.70 (m, 4H) , 3.79 (s, 9H) , 3.70-3.68 (m, 3H) , 1.47 (s, 9H) , 1.16 (d, J ＝ 3.0Hz, 3H) .
Step D: (R) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate
Intoa 50 mL three-necked round bottom flask, tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (36.60 mg, 0.032 mmol) was added to a stirred mixture of sodium carbonate (0.10g, 0.950 mmol) , (R) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate (0.40 g, 0.422 mmol, (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.11 g, 0.633 mmol) in dioxane/water (4/1) (4 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The solids were  filtered out. The filtrate was concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography, elutedwith methanol/dichloromethane (1/10) to givethe title compound as a solid. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ7.97 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝8.7 Hz, 1H) , 7.48-7.42 (m, 1H) , 7.32-7.26 (m, 1H) , 6.94-6.90 (m, 4H) , 6.82-6.75 (m, 6H) , 5.75-5.12 (m, 1H) , 4.73-4.68 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.76 (s, 9 H) , 3.73 (s, 2H) , 1.43 (s, 9H) , 1.26 (s, 6H) .
Step E: (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (2-aminopropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
Into a 50 mL round bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (5 ml, 0.168 mmol) was added to a stirred mixture of (R) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate (0.16 g, 0.168 mmol) in DCM (3 ml) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr, it was concentrated under vacuum to give the residue. Then 3 mL CF3COOH was added to the residue and then the resulting solution was stirred for 1 hr at 80℃. The reation mixture was cooled down to room temperature and then concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Atlantis Prep T3OBD Column 19×150mm 5μM 10nm； Mobile Phase A: water with 50mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 28％B in 10 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid.: LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O4S2 [M + H] +: 493, found: 493. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 8.18 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.96 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.91-7.10 (brs, 4H) , 6.90 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 6.50-6.45 (m, 1H) , 6.11-6.00 (m, 3H) , 3.36-3.32 (m, 12H) , 3.09-3.03 (m, 2H) , 1.17 (d, J ＝5.4Hz, 3H) .
EXAMPLE 452
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (S) -1-aminopropan-2-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000300
Step A: (S) -benzyl tert-butyl propane-1, 2-diyldicarbamate
Into a 100 mL round bottom flask, benzyl carbonochloridate (2.94 g, 17.22 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of triethylamine (1.16 g, 11.48 mmol) , tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate (1.00 g, 5.74 mmol) in DCM (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hr. The reaction mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C16H24N2O4 [M + H] +: 309, found: 309. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : 7.29-7.21 (m, 5H) , 5.03 (s, 2H) , 4.63-4.55 (m, 1H) , 3.69-3.51 (m, 1H) , 3.25-3.18 (m, 1H) , 1.35 (s, 8H) , 1.06 (d, J ＝6.9 Hz 3 H) .
Step B: (S) -benzyl (2-aminopropyl) carbamate 2, 2, 2-trifluoroacetate.
Into a 50 mL round bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml, 1.621 mmol) was added to a stirred mixture of (S) -benzyl tert-butyl propane-1, 2-diyldicarbamate (0.50 g, 1.621 mmol) in DCM (1ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The mixture was concentrated under vacuum to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C11H16N2O2 [M + H] +: 209, found: 209.
Step C: (S) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propan-2-yl) carbamate.
Into a 50 mL round bottom flask, 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (0.15 g, 1.160 mmol) was added to a stirred mixture of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (0.45g, 0.580 mmol) in tetrahydrofuran (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. Triethymine (2 ml) , (S) -tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate (0.15 g, 0.870 mmol) was added to the reaction mixture at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature 2 hr and then it was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 100mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C42H44IN7O9S2 [M + H] +: 982, found: 982； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.40-7.91 (m, 7H) , 7.34-7.28 (m, 6H) , 6.98-6.71 (m, 6H) , 5.91 (s, 2H) , 5.19-5.12 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.77 (s, 9 H) , 3.68-3.51 (m, 2H) , 3.31-3.28 (m, 2H) , 0.91 (d, J ＝6.6 Hz, 3H) .
Step D: Benzyl (S) -2- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propylcarbamate.
Into a 50 three-necked round bottom flask, tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.259 g, 0.224 mmol) was added to a stirred mixture ofsodium carbonate (23.75 mg, 0.224 mmol) , benzyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.22g, 0.224 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (39.70 mg, 0.224 mmol) in dioxane/water (4/1) (12ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen. The solids were filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/20) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C49H50N10O9S2 [M + H] +: 987, found: 987； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.26 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝8.7 Hz, 1H) , 7.48-7.42 (m, 1H) , 7.32-7.26 (m, 5H) , 6.94-6.90 (m, 5H) , 6.82-6.75 (m, 6H) , 5.75-5.12 (m, 2H) , 5.56-5.41 (m, 2H) , 5.21-4.40 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.76 (s, 9 H) , 3.73 (s, 2H) , 1.24 (d, J ＝ 7.2 Hz, 3H) .
Step E: (S) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N- (1-aminopropan-2-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
Into a 50 mL round bottom flask, palladium hydroxide on carbon (49.80 mg, 0.071 mmol) was added to a stirredmixture of (S) -benzyl (2- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.14 g, 0.14 mmol) in MeOH (3 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight under hydrogen (2 atm) . The solid was filtered out and the filtrate was concentrated under vacuum to give the residue. 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml, 0.094 mmol) was added to the residue and the resulting mixture was stirred at 80℃. After being stirred for 1 hr, the reaction mixture was concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Shield RP18 OBD Column, 5μM, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 0％B to 15％B in 15 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O4S2 [M + H] +: 493, found: 493. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : 8.41 (d, J ＝8.1 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝8.1 Hz, 1H) , 6.99 (d, J ＝7.8Hz, 1H) , 6.76-6.70 (m, 1H) , 6.43-6.40 (m, 1H) , 3.69-3.64 (m, 1H) , 2.86-2.78 (m, 2H) , 1.11 (d, J ＝6.9Hz, 3H) .
EXAMPLE 453
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (R) -1-aminopropan-2-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000301
Step A: (R) -benzyl tert-butyl propane-1, 2-diyldicarbamate
Into a 100 mL round bottom flask, benzyl carbonochloridate (5.87 g, 34.4 mmol) was added dropwise to a stirred mixture of triethylamine (5.23 g, 51.7 mmol) , (R) -tert-butyl 1-aminopropan-2-ylcarbamate (4.00 g, 22.00 mmol) in DCM (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 2 hr and then was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 25 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/10) to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C16H24N2O4 [M + H] +: 309, found: 309. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : 7.41-715 (m, 5H) , 5.04 (s, 2H) , 4.63-4.55 (m, 1H) , 3.69-3.51 (m, 1H) , 3.25-3.18 (m, 1H) , 1.35 (s, 8H) , 1.06 (d, J ＝6.9 Hz 3 H) .
Step B: (R) -benzyl (2-aminopropyl) carbaate 2, 2, 2-trifluoroacetate
Into a 50 mLround bottom flask, 2, 2, 2-trifluoroacetic acid (2 ml) was added to a stirred mixture of (R) -benzyl tert-butyl propane-1, 2-diyldicarbamate (1.2 g, 3.8 mmol) in DCM (1ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperaturefor 1 hr and then it was concentrated under vacuum to the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C11H16N2O2 [M + H] +: 209, found: 209.
Step C: (R) -benzyl (2- (2- (N, N-bis4-metho (xybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate
Into a 50 mL round bottom flask, 1-chloropyrrolidine-2, 5-dione (0.15 g, 1.160mmol) was added to a stirred mixture of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (0.45g, 0.580 mmol) in THF (20 ml) at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. Triethylamine  (2 mL) , (R) -tert-butyl (1-aminopropan-2-yl) carbamate (0.15 g, 0.870 mmol) were added to the reaction mixture at room temperature. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight, it was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3x 100mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/5) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C42H44IN7O9S2 [M + H] +: 982, found: 982； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ8.23 (d, J ＝8.4 Hz, 2H) , 7.88 (d, J ＝8.7 Hz, 4H) , 7.48-7.42 (m, 4H) , 7.32-7.26 (m, 1H) , 6.95-6.85 (m, 4H) , 6.76-6.74 (m, 4H) , 5.81 (s, 2H) , 5.21-5.12 (m, 2H) , 4.21-4.13 (m, 2H) , 3.94-3.89 (m, 1H) , 3.68-3.51 (m, 2H) , 3.76 (s, 9 H) , 0.95 (d, J ＝6.6 Hz, 3H) .
Step D: Benzyl (2- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate
Into a 50 three-necked round bottom flask, tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.25 g, 0.224 mmol) was added to a stirred mixture of sodium carbonate (23.75 mg, 0.224 mmol) , benzyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.22g, 0.224 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (39.70 mg, 0.224 mmol) in 12 ml of dioxane/water (4/1) at room temperature. After the reaction mixture was stirred at 80℃ for 2 hr under nitrogen, the solids were filtered out. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/20) to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C49H50N10O9S2 [M + H] +: 987, found: 987；
Step E: (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N- (1-aminopropan-2-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Into a 50 mL round bottom flask, conc. HCl (10 mL) was added to a stirred mixture of (R) -benzyl (2- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate (0.16g, 0.162 mmol) in 20 ml ofMeOH at room temperature. The reaction mixture was stirred at 80℃overnight and then concentrated under vacuum to give the residue. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Column: XBridge Shield RP18 OBD Column, 5μM, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 0％B to 15％B in 15 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for  C17H20N10O4S2 [M + H] +: 493, found: 493. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : 8.42 (d, J ＝8.1 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.00 (d, J ＝7.8 Hz, 1H) , 6.76-6.70 (m, 1H) , 6.50-6.42 (m, 1H) , 3.77-3.71 (m, 2H) , 2.99-2.83 (m, 2H) , 1.19 (d, J ＝9.0Hz, 3H) .
EXAMPLE 454
(2R) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propanamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000302
Step A: (R) -tert-butyl (1-amino-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate.
A solution of (R) -3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (300 mg, 0.307 mmol) , ammonia hydrochloride (65.6 mg, 1.227 mmol) , HATU (175 mg, 0.460 mmol) and DIEA (0.107 ml, 0.614 mmol) in DMF (10 ml) was stirred at ambient temperature for 3 hr. The reaction mixture was quenched with water (30 mL) , diluted with water (70 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 10 mL) and brine (3 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H45IN8O10S2 [M + 1] +: 977, found 977.
Step B: (R) -tert-butyl (1-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate
A solution of (R) -tert-butyl (1-amino-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate (300 mg, crude) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (36.2 mg, 0.205 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (237 mg, 0.205 mmol) and Na2CO3 (21.7 mg, 0.21 mmol) in 1, 4-Dioxane (3 ml) and water (0.6 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated  under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H51N11O10S2 [M + 1] +: 982, found 982.
Step C: (S) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) -phenylsulfonamido) -propanamide.
A solution of (R) -tert-butyl (1-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate (200 mg, crude) and TFA (2 ml, 26.0 mmol) in DMC (10 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give 150 mg crude of (R) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenylsulfonamido) propanamide as a yellow oil: LCMS (ESI) calc’ d forC33H51N11O10S2 [M + 1] +: 762, found 762. This yellow oil was addedto 20 ml of TFA and the resulting solution was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum.. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X-Bridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 25％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solidLCMS (ESI) calc’ d forC17H19N11O5S2 [M + 1] +: 522, found 522. 1H NMR (DMSO-d6/D2O, 400 MHZ) : 8.22 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.93 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 6.96 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.59-6.55 (m, 1H) , 6.13 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 3.64-3.53 (m, 1H) , 3.35-3.30 (m, 1H) , 3.21-3.16 (m, 1H) .
EXAMPLE 455
(2S) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propanamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000303
Step A: (S) -3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid
A solution of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1-sulfonyl chloride (1.5 g, 1.85 mmol) , (S) -3-amino-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (1.14 g, 5.56 mmol) and TEA (0.77 ml, 5.56 mmol) in THF (15 ml) was stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction mixture was quenched with water (40 mL) , diluted with water (30 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 30 mL) and brine (2 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H44IN7O11S2 [M + H] +: 978, found 978； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 8.27-8.16 (m, 2H) , 6.94-6.65 (m, 12H) , 5.85-5.65 (m, 2H) , 5.60-5.48 (m, 1H) , 4.5-3.5 (m, 15H) , 1.44 (s, 9H) .
Step B: (S) -tert-butyl (1-amino-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate
A solution of (S) -3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (300 mg, 0.31mmol) , ammonia hydrochloride (65.6 mg, 1.23 mmol) , HATU (175 mg, 0.46 mmol) and DIEA (0.11 ml, 0.61 mmol) in DMF (10 ml) was stirred at ambient temperature for 3 hr. The reaction mixture was quenched with water (30 mL) , diluted with water (70 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 30 mL) and brine (2 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN8O10S2 [M + H] +: 977, found 977； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 8.32-8.15 (m, 2H) , 7.00-6.74 (m, 12H) , 5.85-5.75 (m, 2H) , 5.60-5.50 (m, 1H) , 4.5-3.5 (m, 15H) , 1.48 (s, 9H) .
Step C: (S) -tert-butyl (1-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate
A solution of (S) -tert-butyl (1-amino-3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2- yl) carbamate (200 mg, 0.21 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (36.2 mg, 0.205 mmol) , Pd (Ph3P) 4 (237 mg, 0.205 mmol) and Na2CO3 (21.70 mg, 0.205 mmol) in 1, 4-Dioxane (3 ml) and water (0.6 ml) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (10/90) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N11O10S2 [M + H] +: 982, found 982
Step D: (S) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2-sulfamoyl-3- (2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propanamide
A solution of (S) -tert-butyl (1-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -1-oxopropan-2-yl) carbamate (160 mg, 0.163 mmol) and TFA (2 ml, 26.0 mmol) in Dichloromethane (10 ml) was stirred at ambient temperature for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C33H35N11O7S2 [M + H] +: 762, found 762；
The solution of (S) -2-amino-3- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenylsulfonamido) propanamide (120 mg, 0.158 mmol) in TFA (20 ml, 260 mmol) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19 x 150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 25％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H19N11O5S2 [M + H] +: 977, found 977； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.23 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.96 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.73 (s, 1H) , 7.50 (s, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.64 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.50 (brs, 1H) , 6.14 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 3.66-3.64 (m, 1H) , 3.36-3.31 (m, 1H) , 3.18-3.13 (m, 1H) .
EXAMPLE456
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (R) -2-amino-3-hydroxypropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000304
Step A: (R) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
TEA (248 mg, in 0.2 ml THF) was added dropwise to a stirred solution of (R) -3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (800 mg, 0.82 mmol) and isobutyl carbonochloridate (223 mg, 1.64 mmol) in 6.0 ml of THF at 0℃. The reaction mixture was stirred for 2 hr at room temperature, and then NaBH4 (93 mg, 2.45 mmol) was added at 0℃. After the resulting mixture was stirred for 2 hr at room temperature, it was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with DCM/MeOH (20/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a foam: LCMS (ESI) calc’ d for C39H46IN7O10S2 [M + 1] +: 964, found 964.
Step B: (R) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
Pd(Ph3P) 4 (27.0 mg, 0.023 mmol) was added to a stirred mixture of (R) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (210 mg, crude) , and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (83 mg, 0.47 mmol) and Na2CO3 (74.2 mg, 0.70 mmol) in1, 4-Dioxane (3.0 ml) /water (0.6 ml) at room temperature under Ar condition. After the resulting mixture was degassed twice, it was heated for 12 hr at 80℃. The resulting mixture wascooled to room temperature, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-TLC (DCM/MeOH＝20/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N10O10S2 [M + 1] +: 969, found 969.
Step C: (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (2-amino-3-hydroxypropyl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
TFA (1.0 ml) was added dropwise to a stirred solution of (R) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (150 mg, crude) in 1.0 ml of DCM at 0℃. The reaction solution was stirred for 2 hr at room temperature and then concentrated under reduced pressure to afford 110 mg crude of (R) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (2-amino-3-hydroxypropyl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide as a light brown foam: LCMS (ESI) calc’ d for C33H36N10O7S2 [M + 1] +: 749, found 749.2.0 ml TFA was added to this brown foam at room temperature. The resultingsolution was stirred for 2 hr at 80℃ and then concentrated under reduced pressure. The crude was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18 , 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％NH4HCO3) and acetonitrile (hold 30％acetonitrile for 8 min, hold 100％for 2 min, down to 30％in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O5S2 [M + 1] +: 509, found 509. 1H NMR (MDOD, 400 MHZ) : 7.62 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.09 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.21 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.00-5.90 (m, 1H) , 5.62 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 2.78-2.75 (m, 2H) , 2.49-2.40 (m, 1H) , 2.30-2.20 (m, 1H) .
EXAMPLE 457
4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (S) -2-amino-3-hydroxypropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000305
Step A: (S) -benzyltert-butyl (3-hydroxypropane-1, 2-diyl) dicarbamate
TEA (4.1 ml) was added dropwise to a stirred solution of (S) -3- ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (5.0g, 14.9 mmol)  and isobutyl carbonochloridate (2.42 g, 17.7mmol) in THF (50.0 ml) at 0℃. The resultingsolution was stirred for 1 hr at room temperature, and then cooled to 0℃ and NaBH4 (1.12 g, 29.6 mmol) was added. After the resulting mixture was stirred for 2 hr at room temperature, it was quenched with ice/water (100 ml) , diluted with water (50ml) and extracted with EA (3 x 80ml) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 50 ml) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with DCM/MeOH (15 /1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a foam: LCMS (ESI) calc’ d for C16H24N2O5 [M + 1] +: 325, found 325. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 7.67 (m, 5H) , 5.53-5.33 (m, 2H) , 4.07 (brs, 1H) , 4.04-3.78 (m, 5H) , 3.79-3.53 (m, 1H) , 1.76 (brs, 9H) , 1.38-1.16 (m, 1H) .
Step B: (S) -tert-butyl (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
To a stirred mixtureof Pd (OH) 2/C (0.46 g) in 20 ml MeOH, (S) -benzyl tert-butyl (3-hydroxypropane-1, 2-diyl) dicarbamate (2.1g, 6.47 mmol) was added at ambient temperature. The resulting mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred under hydrogen (1.5 atm) for 12 hr at ambient temperature. The mixture was filtered. The filter cake was washed with methanol (3 x 20ml) . The combined organic layers were concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with DCM/methanol (4/3) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a foam: LCMS (ESI) calc’ d for C8H18N2O3 [M + 1] +: 191, found 191. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ5.76-5.23 (m, 3H) , 4.02-3.79 (m, 2H) , 3.80 -3.63 (m, 1H) , 3.39-3.17 (m, 1H) , 1.44 (brs, 9H) .
Step C: (S) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
1-Chloropyrrolidine-2, 5-dione (207 mg, 1.55 mmol) was added batchwise to a stirred solution of 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (600 mg, 0.77 mmol) inTHF (5.0 ml) at 0℃. After the resulting solution was stirred for 2 hr at room temperature, (S) -tert-butyl (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (294 mg, 1.55 mmol) was added and followed by the additionalof triethylamine (235 mg, 2.32 mmol) dropwise at 0℃. The resulting mixture wasstirred for 1 hr at room temperature and then concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1 /50) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a foam: LCMS (ESI) calc’ d for C39H46IN7O10S2 [M + 1] +: 964, found 963.
Step D: (S) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
Pd(PPh3) 4 (73.1 mg, 0.06 mmol) was added to a stirred mixture of (S) -tert-butyl (1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (610 mg, 0.633 mmol) and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (224 mg, 1.27 mmol) and Na2CO3 (201 mg, 1.90 mmol) in1, 4-Dioxane (5.0 ml) /water (1.0 ml) at room temperature under Ar condition. The resulting mixture was heated for 12 hr at 80℃, and then cooled to room temperature, filtered and concentrated under reduced pressure. The residue waspurified by Prep-TLC (DCM/MeOH＝20/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N10O10S2 [M + 1] +: 969, found 969.
Step E: (S) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (2-amino-3-hydroxypropyl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) -benzene-1, 2-disulfonamide.
TFA (2.0 ml) was added dropwise to a stirred solution of (S) -tert-butyl (1- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (300 mg, crude) in DCM (2.0 ml) at 0℃. The reaction solution was stirred for 2 hr at room temperature, and then concentrated to afford 150 mg crude of (S) -4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (2-amino-3-hydroxypropyl) -N2- (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide as a light brown foam: LCMS (ESI) calc’ d for C33H36N10O7S2 [M + 1] +: 749, found 749.
TFA (2.0 ml) was added to this brown foam and the resulting mixture was heated for 2 hr at 80℃. After the resulting mixture wascooled to room temperature, it was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Xbridge C18 , 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％ NH4HCO3) and acetonitrile (hold 34％acetonitrile for 8 min, hold 100％for 2 min, down to 34％ in 2 min) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O5S2 [M + 1] +: 509, found 509. 1H NMR (CD3OD, 400 MHZ) : δ 8.45 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 7.92 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 7.05 (d, J ＝ 7.9 Hz, 1H) , 6.79 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.49 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 3.74 –3.67 (m, 1H) , 3.63 (m, 1H) , 3.30 –3.20 (m, 3H) .
EXAMPLE 458
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000306
Step A: (R) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate.
To a stirred solution of (R) -tert-butyl (1-hydroxypropan-2-yl) carbamate (5.00 g, 28.50 mmol) in DCM (30 mL) were added methanesulfonyl chloride (6.54 g, 57.10 mmol) and TEA (8.65 g, 86.00 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction was quenched with ice water (50 mL) and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC9H19NO5S [M + H-100] +: 154, found154； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.66 (brs, 1H) , 4.25-4.24 (m, 1H) , 4.18-4.15 (m, 1H) , 3.99-3.97 (m, 1H) , 3.05 (s, 3H) , 1.46 (s, 9H) , 1.25 (d, J ＝ 6.8 Hz, 3H) .
Step B: (R) -S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate
To a solution of (R) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl methanesulfonate (7.00 g, 27.60 mmol) in DMF (60 mL) was added epotassium ethanethioate (6.30 g, 55.3 mmol) . The mixture was stirred at ambient temperature overnight. The reaction mixture was diluted with water (60mL) and extracted with EA (3 x 80 mL) . The combined organic layer was washed with water (3 x 100mL) and brine (3x80 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and filtered. The filtrate was concentrated undervacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 15％-17％EA in PE to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC10H19NO3S [2M + H] +: 467, found467； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ4.54 (brs, 1H) , 3.85-3.83 (m, 1H) , 3.04-2.96 (m, 2H) , 2.33 (s, 3H) , 1.42 (s, 9H) , 1.15 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
Step C: (R) -tert-butyl (1-mercaptopropan-2-yl) carbamate
To a solution of (R) -S- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) ethanethioate (4.70 g, 20.14 mmol) in MeOH (40 mL) was added potassium ethanethioate (8.34 g, 60.42 mmol) and stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction's pH was adjusted to ～ 7 at 0℃ and  extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC8H17NO2S [2M + H] +: 383, found 383； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ4.75 (brs, 1H) , 3.83-3.81 (m, 1H) , 2.66-2.62 (m, 2H) , 1.44 (s, 9H) , 1.15 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
Step D: (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propan-2-yl) carba-mate
To a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (2.00 g, 2.53 mmol) in DMF (40 mL) were added (R) -tert-butyl (1-mercaptopropan-2-yl) carbamate (1.94 g, 10.12 mmol) and sodium hydride (0.24 g, 10.12 mmol) under N2. The mixture was stirred at ambient temperaturefor 2 hr. The reaction was quenched with water (100 mL) and extracted with EA (3 x 100 mL) . The combined layers were washed with brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated. The crude was purified by silica gel chromatography, eluting with 30％EA in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O7S2 [M + H] +: 901, found 901； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (d, J ＝ 8.8 Hz, 1H) , 7.2 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.30-7.24 (m, 4H) , 6.89-6.84 (m, 8H) , 5.95-5.93 (m, 2H) , 4.30-4.26 (m, 1H) , 4.17-4.15 (m, 2H) , 4.03-3.98 (m, 1H) , 3.91-3.87 (m, 1H) , 3.73 (s, 9H) , 3.70-3.65 (m, 4H) , 1.34 (s, 9H) , 1.19 (d, J ＝ 6.4 Hz, 3H) .
Step E: (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
To a solution of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propan-2-yl) carbamate (1.50 g, 1.67 mmol) in DCM (20 mL) was added3-chlorobenzoperoxoic acid (2.30 g, 13.32 mmol) . The mixture was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction was quenched with NaHSO4 (10％, 50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined layers were washed with NaHCO3 (saturated, 3 x 40 mL) , brine (3 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated. The crude was purified by silica gel chromatography, eluting with 25％-29％EA in PE to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H45IN6O9S2 [M + H] +: 933, found 933.
Step F: (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
To a stirred solution of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.30g, 0.32 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.5 mL) were added (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.17g, 0.97 mmol) , Na2CO3 (0.10g, 0.97 mmol) and Pd (PPh3) 4 (74 mg, 0.06 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃overnight. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated. The crude was purified by silica gel chromatography, eluting with 2％-4％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found 938.
Step G: (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.12g, 0.13 mmol) and TFA (3 mL) was stirred at ambient temperature for 45 min. The reaction mixture was evaporated in vacuumto affordthe title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC33H35N9O6S2 [M + H] +: 718, found 718.
Step H: (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of (R) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.11 mmol) and TFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was purified by Prep-HPLC with following condition: Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 3％-23％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC17H19N9O4S2 [M + H] +: 478, found 478； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.28 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.94 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.52 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.27 (brs, 2H) , 6.10 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 4.17-4.02 (m, 2H) , 3.83-3.76 (m, 1H) , 1.36 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE 459
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (R) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000307
Step A: (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
Into a 25 mL round bottom flask was placed (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (200 mg, 0.214 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (83 mg, 0.429 mmol) , Pd (dppf) Cl2·CH2Cl2 (31 mg, 0.043 mmol) and Na2CO3 (68.2 mg, 0.643 mmol) in 1, 4-dioxane (0.9 ml) and water (0.3 ml) . Theresulting mixture was evacuated and purgedwith nitrogen for 3 timesand stirred at 80℃ for 16hr. Then the mixture was diluted with 50 mL of ethyl acetate and washed with water (3 x 50 mL) . The organic layer was collected, dried over anhydrous Na2SO4, filtrated and concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel columneluting with EA/PE (1/1) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found 955
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (R) -2-aminopropylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
In a 25 mL round bottom flask was placed (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (120 mg, 0.126 mmol) in DCM (1.0 ml) and TFA (1.0 ml) . After the resulting solution was stirred at r.t. for 1hr under N2, the solvent was removed under vacuum to give the title compound, which was used for the next step directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found 735.
Step C: (R) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25 mL round bottom flask was placed (R) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (70 mg, crude) in TFA (2 ml) . After the resulting solution was stirred at 80℃ for 1hr, it was concentrated under vacuum. The residue was adjusted pH to about 9 with NH4HCO3. Then it was applied on Prep-HPLC (condition: Column: XBridge Prep C18 OBD Column, 19 x 150mm, 5μM； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 30％B in 8 min； 254/220 nm) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found 495； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ8.27 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.91 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.48 (d, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 6.70 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.49 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 4.21-3.93 (m, 2H) , 3.90 (q, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 1.38 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE 460
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000308
Step A: tert-butyl 1- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propan-2-ylcarbamate
To a solution of tert-butyl 1- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propan-2-ylcarbamate (260 mg, 0.215 mmol) in dioxane (5 mL) and H2O (1 mL) , was added 2-aminobenzo [d] thiazol-4-ylboronic acid (97 mg, 0.5 mmol) and Na2CO3 (89 mg, 0.84 mmol) . Under an atmosphere of N2, Pd (dppf) Cl2 (20 mg, 0.03 mmol) was added to the mixture. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 12 hr. After cooling to room temperature, the reaction mixture was quenched with water (10 mL) . The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column  chromatography over silica gel using gradient of 0～50％methanolin dichloromethane as eluent to afford the title compound as an oil. MS (ESI) Calc’ d for (C46H50N8O9S3) [M+H] +, 955.0. found, 955.0； 1H NMR (CD3OD, 300 MHZ) δ: 8.70 (d, J ＝ 2.1 Hz , 1H) , 8.10 (t, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.49 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.95 (d, J ＝ 8.4 Hz, 4H) , 6.85-6.59 (m, 10H) , 4.70 (d, J ＝ 15.9 Hz, 2H) , 4.38-3.49 (m, 14 H) , 1.98 (s, 2H) , 1.52-1.11 (m, 12 H) .
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (2-aminopropylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl 1- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propan-2-ylcarbamate (170 mg, 0.178 mmol) in dichloromethane (4 mL) was added TFA (2 mL) . Then the mixture was stirred for 1hr at ambient temperature. The reaction mixture was concentrated under vacuum to givethe title compound as an oil, which was used for the next reaction directly without further purification. MS (ESI) Calc’ d for (C33H34N8O6S3) [M+H] +, 735.0, found, 735.0
Step C: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (2-aminopropylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (150 mg, 0.2 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 34％ B in 8 min； UV detection 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. MS (ESI) Calc’ d for (C17H18N8O4S3) [M+H] +, 495.0, found, 495.0. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ: 8.25 (d, J ＝ 2.1 Hz, 1H) , 7.98-7.41 (m, 8H) , 6.68 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.45 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.19-4.01 (m, 2H) , 3.79 (q, J ＝ 6.0 Hz, 1H) , 1.36 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) , 1.23 (s, 1H) .
EXAMPLE 461
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (3-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide dihydrochloride
Figure PCTCN2015082514-appb-000309
Step A: tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
Into a 50 mL round bottom flask was placed (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (3.79 mg, 0.021 mmol) , tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (200 mg, 0.214 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (127 mg, 0.214 mmol) and sodium carbonate (68.2 mg, 0.643 mmol) in 1, 4-dioxane (1.5 ml) and water (0.500 ml) . The reaction mixture was evacuated and backfilled with nitrogen 3 times and stirred at 80℃ for 4hr. Then the mixture was extracted with ethyl acetate (4 x 25 mL) and the combined organic layers were washed with water (4 x 25 mL) . The organic layer was collected and dried over sodium sulfate. Then it was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column eluted with ethyl acetate/petroleum ether (3/1) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found 938； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ10.93 (s, 1H) , 8.70-8.58 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.40-8.28 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 7.09-6.81 (m, 12H) , 6.78-6.55 (m, 3H) , 6.50-6.20 (m, 3H) , 4.88-4.53 (m, 2H) , 4.09-3.88 (m, 4H) , 3.83-3.70 (m, 2H) , 3.71 (s, 9H) , 3.19-2.93 (m, 2H) , 1.89-1.72 (m, 2H) , 1.36 (s, 9H) .
Step B: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (3-aminopropylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a 25 mL round bottom flask was placed tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (100 mg, 0.107 mmol) in DCM (1.0 ml) and trifluoroacetic acid (1.0 ml) . After the resulting mixture was stirred at r.t. for 1hr, the solvent was removed under vacuum to give the title compound, which was used for the next step directly without purification. LCMS (ESI) calc’ d for C33H35N9O6S2 [M + H] +: 718, found 718.
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide dihydrochloride
Into a 25 mL round bottom flask was placed 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide in trifluoroacetic acid (2 ml) . After the mixture was stirred at 80℃ for 1hr, it was concentrated under vacuum. The residue was adjusted pH to 9 with ammoniumbicarbonate and then applied on Prep-HPLC (condition: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 36％B in 8 min； 254/220 nm) to give the title compound as a solid.: LCMS (ESI) calc’ d for C17H19N9O4S2 [M + H] +: 478, found 478； 1H NMR (300 MHz, d-DMSO) : δ12.5 (brs, 1H) , 8.51-8.48 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.30-8.05 (brs, 3H) , 8.10-8.07 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.00 (brs, 2H) , 7.45 (s, 2H) , 7.28-7.25 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.05-6.99 (t, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.70-6.50 (m, 1H) , 3.95-3.92 (t, J ＝ 7.2 Hz, 2H) , 3.07-2.91 (m, 2H) , 2.13-2.08 (t, J ＝ 6.3 Hz, 2H) .
EXAMPLES462 and 463
6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6- (2-aminoethylsulfonyl) -3- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000310
Step A: 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) quinoline
To a stirred solution of 4-bromoquinoline (2.00 g, 9.61 mmol) in 1, 4-dioxane (15 mL) were added 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (3.66 g, 14.42 mmol) , acetylpotassium (2.37 g, 28.80 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (1.41 g, 1.92 mmol) under nitrogen at ambient temperature. After the resulting mixture was stirred at 100℃ for 2hr, it was diluted with water (100 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 10％-50％EA in PE to afford crude of 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2- dioxaborolan-2-yl) quinolineas a solid (purity ～ 60％) . LCMS (ESI) calc’ d forC15H18BNO2: [M + 1] +256 found 256； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (d, J ＝ 4.2 Hz, 1H) , 8.59 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.07 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.88-7.83 (m, 2H) , 7.71 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 1.40 (s, 12H) .
Step B: tert-butyl- (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (isoquinolin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamatas
Toa stirred solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.50g, 0.54 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) were added 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) quinoline (0.28 g, 1.09 mmol) , Na2CO3 (0.23g, 2.18 mmol) dissolved in water (1 mL) and Pd (dppf) Cl2 (40 mg, 0.05 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The mixture was stirred at 80℃ for 3 hr. The resulting mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 1％-3％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC47H49N7O9S2: [M + 1] +920 found 920.
Step C: tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate and tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (quinolin-4-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.35g, 0.38 mmol) in MeOH (15 mL) were added platinum (IV) oxide (86 mg, 0.38 mmol) and hydrogen chloride (37％aq, 14 mg, 0.38 mmol) and stirred at 15℃ at 15atm of H2 for 18 hr. The reaction mixture was filtered with celite and neutralized with NaOH solution (2M) to pH ～ 7, then evaporated. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 1-3％MeOH in DCM to afford the title compounds as a mixture. This mixture was used for the next step directly. LCMS (ESI) calc’ d forC47H53N7O9S2: [M + 1] +924 found 924.
Step D: 6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) benzenesulfonamide and 6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) benzenesulfonamide.
The mixture of tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate and tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate (0.10 g, 0.11 mol) in TFA (2 mL) was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure to give the title compounds as a mixture that was useddirectly in the next step: LCMS (ESI) calc’ d forC34H37N7O6S2: [M + 1] +704 found 704.
Step E: 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
The mixture of 6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) benzenesulfonamide and 6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) benzenesulfonamide (90 mg, 0.11 mmol) and TFA (3 mL) was stirred at 80℃ for1 hr. After being evaporated under reduced pressure, the residue was purified by Prep-HPLC (Column, Xbridge C18 , 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 2％-40％in 8 min； Detector, UV 254 nm. ) to afford6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (1, 2, 3, 4-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamideas a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N7O4S2: [M + 1] +464 found 464； hr NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.12 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 7.45 (brs, 4H) , 7.35 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.88 (t, J ＝ 6.9 Hz, 1H) , 6.51 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 6.43 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 6.36 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 5.82 (brs, 1H) , 4.32 (t, J ＝ 6.6 Hz, 1H) , 4.09-4.03 (m, 2H) , 3.20 (t, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 3.01-2.98 (m, 2H) , 1.80-1.74 (m, 1H) , 1.64-1.59 (m, 1H) and 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (5, 6, 7, 8-tetrahydroquinolin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N7O4S2: [M + 1] +464 found 464； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 8.10 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 7.98-7.95 (m, 1H) , 6.59 (d, J ＝ 4.8 Hz, 1H) , 4.15 (t, J ＝ 6.9 Hz, 2H) , 3.28-3.26 (m, 2H) , 2.75-2.73 (m, 2H) , 2.27-2.25 (m, 2H) , 1.69-1.53 (m, 4H) .
EXAMPLE 464
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -2-amino-3-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000311
Step A: (S) -methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) oxy) propanoate.
In the 250 mL round flask was placed (S) -methyl 2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-hydroxypropanoate (10.0 g, 45.60 mmol) in DCM (150 mL) , followed by the addtion of triethylamine (13.85 g, 137.00 mmol) and methanesulfonyl chloride (10.45 g, 91.00 mmol) at 0℃. The mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. The resulting mixture was diluted with water (20 mL) and extracted with dichloromethane (2 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 200 mL) , brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC10H19NO7S: [M + Na] +320 found 320； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.30 (brs, 1H) , 4.60-4.56 (m, 2H) , 4.52-4.51 (m, 1H) , 3.81 (s, 3H) , 3.02 (s, 3H) , 1.47 (s, 9H) .
Step B: (R) -methyl-3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoate.
In the 250 mL round flask was placed (S) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) -oxy) propanoate (13.00 g, 43.77 mmol) in DMF (150 mL) , followed by the addtion of potassium ethanethioate (9.98 g, 87.54 mmol) . The mixture was stirred at 20℃ for 16 hr. The resulting mixture was diluted with water (500 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 300 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 300 mL) , brine (3 x 500 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (5/95) and concentrated under vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC11H19NO5S: [M + Na] +320 found 320； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.23 (brs, 1H) , 4.54-4.52 (m, 1H) , 3.76 (s, 3H) , 3.37-3.32 (m, 2H) , 2.35 (s, 3H) , 1.47 (s, 9H) .
Step C: (R) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopropanoate. 
In the 100 mL round flask was placed (R) -methyl-3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) -amino) propanoate (2.00 g, 7.21 mmol) in MeOH (50 mL) , followed by the addtion of K2CO3 (2.99 g, 21.63 mmol) . The mixture was stirred at 20℃ for 16 hr. The resulting mixture was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (2 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 200 mL) , brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC9H17NO4S: [2M + 1] +471 found 471； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5.40 (brs, 1H) , 4.54-4.52 (m, 1H) , 3.76 (s, 3H) , 3.37-3.32 (m, 2H) , 2.35 (s, 3H) , 1.44 (s, 9H) .
Step D: (R) -tert-butyl (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate
In the 100 mL round flask was placed (R) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopro-panoate (1.60 g, 5.10 mmol) in THF (50 mL) , followed by the addtion of LiAlH4 (0.77 g, 20.40 mmol) . The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr. Water (0.8 mL) was added dropwise, then 15％NaOH aq. (2.4 mL) and water (0.8 mL) were added dropwise. The mixture was filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/2) and concentrated under vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC8H17NO3S: [M + 1] + 208 found 208.
Step E: (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate.
In the 50 mL round flask was placed 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxy-benzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.00 g, 1.27 mmol) in DMF (10 mL) , followed by the addition of (R) -tert-butyl (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate (0.52 g, 2.53 mmol) and Cs2CO3 (1.24 g, 3.80 mmol) . Under N2 protection, the mixture was stirred at 20℃ for 16 hr. The resulting mixture was diluted with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (2 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 200 mL) , brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (40/60) and concentrated under vacuum to afford the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O8S2: [M + 1] +917 found 917； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02-8.00 (m, 2H) , 7.23-7.21 (m, 2H) , 6.94-6.89 (m, 4H) , 6.81-6.71 (m, 6H) , 5.52-5.48 (m, 1H) , 5.15-5.11 (m, 2H) , 4.67-4.62 (m, 2H) , 3.97-3.87 (m, 3H) , 3.79 (s, 3H) , 3.78 (s, 6H) , 3.77-3.73 (m, 4H) , 1.41 (s, 9H) .
Step F: (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulf-onyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate.
In the 50 mL round bottom flask was placed a solution of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxy-benzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (0.69g, 0.75 mmol) in DCM (5 mL) , followed by the addition of m-CPBA (0.52 g, 3.01 mmol) . The mixture was stirred at 20℃ for 16 hr. The resulting mixture was diluted with NaHSO3 (saturated, 100 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with NaHCO3 (aq. ) (2 x 100 mL) , brine (2x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (30/70) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H45IN6O10S2: [M + 1] +949 found 949； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.25-8.20 (m, 2H) , 7.26-7.16 (m, 2H) , 6.97-6.94 (m, 4H) , 6.79-6.72 (m, 6H) , 5.55-5.46 (m, 1H) , 5.30-5.18 (m, 2H) , 4.48-4.38 (m, 2H) , 4.19-3.95 (m, 5H) , 3.88-3.83 (m, 2H) , 3.82 (s, 3H) , 3.81 (s, 6H) , 1.39 (s, 9H) .
Step G: (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxy-propan-2-yl) carbamate.
In the 50 mL round bottom flask was placed a solution of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxy-benzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (0.20g, 0.21 mmol) in dioxane (3 mL) and water (0.75 mL) . Followed by the addition Na2CO3 (67 mg, 0.63mmol) , Pd (dppf) Cl2 (31 mg, 0.04 mmol) and (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.11g, 0.63 mmol) . The mixture was evacuated and backfilled with nitrogen 3 times and stirred at 80℃ for 6 hr in an oil bath. The resulting mixture was diluted with water (100 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 200 mL) and brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (6/94) and concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H51N9O10S2: [M + 1] +954 found 954； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.77 (brs, 1H) , 7.95-7.86 (m, 2H) , 7.01-6.89 (m, 7H) , 6.77-6.55 (m, 10H) , 5.39-5.38 (m, 1H) , 4.99-4.89 (m, 1H) , 4.76-4.52 (m, 2H) , 4.37-3.08 (m, 5H) , 3.72 (s, 6H) , 3.71 (s, 3H) , 3.68-3.65 (m, 2H) , 1.45 (s, 9H) .
Step H: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -2-amino-3-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The title compound was prepared by removal of the PMB and Boc protective groups in the same fashion as described for EXAMPLES 462-463, Steps D-E. LC/MS [M+H] +494.
EXAMPLE 465
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -2-amino-3-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000312
Step A: (R) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) oxy) propanoate
To a solution of (R) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-hydroxypropanoate (15.00 g, 68.40 mmol) inDCM (80mL) were added methanesulfonyl chloride (15.68 g, 137.00 mmol) and Et3N (20.73 g, 205.00 mmol) at 0℃, and the mixture was stirred at ambient temperature for 4 hr. The reaction mixture was concentrated in vacuum and dissolved in EA (100 mL) . The EA mixture was washed with brine (3 x100 mL) and dried over brine and anhydrous Na2SO4. The organic layer was evaporated in vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC10H19NO7S [M+Na] +320, found 320； 1HNMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.41 (brs, 1H) , 4.62-4.60 (m, 2H) , 4.55-4.52 (m, 1H) , 3.83 (s, 3H) , 3.04 (s, 3H) , 1.48 (s, 9H) .
Step B: (S) -methyl-3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoate
To a solution of (R) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3- ( (methylsulfonyl) oxy) propanoate (13.00 g, 43.77 mmol) in DMF (80 mL) was added potassium ethanethioate (9.98 g, 87.54 mmol) and stirred at ambient temperature overnight. The reaction mixture was diluted with water (100 mL) and extracted by EA (3x 100 mL) . The combined organic layer was washed with water (2x 150 mL) and brine (2x 150 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum and purified by silica gel chromatography, eluted with 5％-10％EA in PE to afford the title compound as an oil: LCMS  (ESI) calc’ d forC11H19NO5S [M+Na] +300, found 300； 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.24 (brs, 1H) , 4.53-4.51 (m, 1H) , 3.76 (s, 3H) , 3.36-3.31 (m, 2H) , 2.35 (s, 3H) , 1.45 (s, 9H) .
Step C: (S) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopropanoate
To a solution of (S) -methyl-3- (acetylthio) -2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoate (1.50 g, 5.41 mmol) in MeOH (15 mL) was added K2CO3 (1.15 g, 10.82 mmol) . The mixture was stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction mixture was poured into ice water (50 mL) and neutralized with conc. HCl to pH 6 ～ 7. The solution was extracted with EA (3 x 50mL) . The organic layer was washed with water (3 x 50mL) and brine (3 x 50mL) , dried over anhydrous Na2SO4and filtered. The filtrate was concentrated under reduce pressure to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC9H17NO4S [2M+ 1] +471 found 471； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.29 (brs, 1H) , 4.15-4.13 (m, 1H) , 3.32 (s, 3H) , 2.84-2.79 (m, 1H) , 2.73-2.68 (m, 1H) , 2.66-2.57 (m, 1H) , 1.39 (s, 9H) .
Step D: (S) -tert-butyl- (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate
To a solution of (S) -methyl-2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -3-mercaptopropanoate (1.50 g, 6.37 mmol) in THF (15 mL) , was added LiAlH4 (0.77 g, 20.40 mmol) at 0℃. The mixture was stirred at 0℃ for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (0.8 mL) by slow dropwise addition followed by the dropwise addition of a NaOH solution (15％, 2.4 mL) . Then water (0.8 mL) was added. The mixture was filtered through celite and washed with THF several times. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/2) to afford the title compound: LCMS (ESI) calc’ d forC8H17NO3S [M+ 1] +208 found 208.
Step E: (S) -tert-butyl- (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
To a stirred solution of (S) -tert-butyl- (1-hydroxy-3-mercaptopropan-2-yl) carbamate (0.90g, 4.34 mmol) in DMF (10 mL) was added 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (0.86g, 1.09 mmol) and sodium hydride (0.10g, 4.34 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 3 hr. The mixture was diluted with water (50mL) and extracted with EA (3 x 50mL) . The combined organic layer was washed with water (3 x 60mL) and brine (3x 60 mL) , dried over anhydrous Na2SO4and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum and purified by silica gel chrotography, eluting with 17％-20％EA in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O8S2: [M + 1] +917 found 917； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.02-7.99 (m, 2H) , 7.23- 7.21 (m, 2H) , 6.94-6.87 (m, 4H) , 6.81-6.75 (m, 6H) , 5.52-5.47 (m, 1H) , 5.15-5.10 (m, 2H) , 4.71-4.61 (m, 2H) , 3.98-3.87 (m, 3H) , 3.79 (s, 3H) , 3.78 (s, 6H) , 3.77-3.73 (m, 4H) , 1.45 (s, 9H) .
Step F: (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate
To a solution of (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (0.50g, 0.55 mmol) in DCM (8 mL) was added 3-chlorobenzoperoxoic acid (0.38 g, 2.18 mmol) and the mixture was stirred at ambient temperature for 18 hr. The reaction mixture was diluted with EA (100mL) and washed with a Na2SO3 aqueous solution (3 x 50 mL) and a NaHCO3 aqueous solution (3 x 50 mL) . The organic layer was washed with brine (2x 50 mL) and dried over anhydrous Na2SO4andfiltered. The filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with 35％-40％EA in PE to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H45IN6O10S2: [M + 1] +949 found 949； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.65-8.62 (m, 1H) , 8.26-8.23 (m, 1H) , 7.33-7.28 (m, 2H) , 6.92-6.88 (m, 4H) , 6.87-6.78 (m, 6H) , 5.45-5.37 (m, 1H) , 5.17-5.12 (m, 1H) , 5.00 (brs, 1H) , 4.57-4.45 (m, 2H) , 4.15-3.83 (m, 7H) , 3.73 (s, 3H) , 3.72 (s, 6H) , 1.39 (s, 9H) .
Step G: (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamateas
To a stirred solution of (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (0.18 g, 0.19 mmol) in 1, 4-dioxane (0.8 mL) and water (0.2 mL) was added (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (67 mg, 0.38 mmol) , Na2CO3 (60 mg, 0.57 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (31 mg, 0.04 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 3 hr. The resulting mixture was diluted with water (100 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 200 mL) and brine (2 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 4％-10％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H51N9O10S2: [M + 1] +954 found 954.
Step H: (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -3-hydroxypropan-2-yl) carbamate (0.11g, 0.12 mmol) in TFA (5 mL) was stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction mixture was evaporated in vacuum and redissolved in DCM and concentrated again for three times to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC33H35N9O7S2: [M + 1] +734 found 734.
Step I: (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-amino-3-hydroxypropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.11 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was purified by Prep-HPLC with following condition: Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-20％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC17H19N9O5S2: [M + 1] +494 found 494； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.32 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.97 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.98 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.63-6.61 (m, 1H) , 6.18 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.24-4.17 (m, 1H) , 3.99-3.91 (m, 1H) , 3.63-3.61 (m, 3H) .
EXAMPLE 466
3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000313
Step A: (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate.
To a stirred solution of (R) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.25g, 0.27 mmol) in 1, 4-dioxane (0.8 ml) and water  (0.2 ml) was added (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (154 mg, 0.804 mmol) , Na2CO3 (85 mg, 0.80 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (44 mg, 0.05 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃overnight. The reaction was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated. The crude was purified by silica gel chromatography, eluting with 45％EA in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC47H53N9O9S2 [M + H] +: 952, found 952.
Step B: (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminop ropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfon-a mide
A solution of (R) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carba-mate (0.13g, 0.14 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction mixture was evaporated in vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC34H37N9O6S2 [M + H] +: 732, found 732.
Step C: (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (90 mg, 0.12 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-30％in 10 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N9O4S2 [M + H] +: 492, found 492； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (d, J ＝8.4 Hz, 1H) , 8.07 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.68 (brs, 4H) , 6.95 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.56 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.50 (brs, 2H) , 6.12 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 4.16-4.01 (m, 2H) , 3.82-3.73 (m, 1H) , 3.49 (s, 3H) , 1.36 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE 467
3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000314
Step A: (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
To a stirred solution of (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (0.18g, 0.19 mmol) in1, 4-dioxane (0.8 mL) and water (0.2 mL) wasadded (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.11g, 0.579 mmol) , Na2CO3 (61 mg, 0.58 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (35 mg, 0.04 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. After the resulting mixture was stirred at 80℃ overnight, it was allowed to cool to 20℃ and quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with 50％EA in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC47H53N9O9S2 [M + H] +: 952, found 952.
Step B: (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -tert-butyl (1- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carba-mate (0.12g, 0.13 mmol) in TFA (3 mL) was stirred at ambient temperature for 30 min. The reaction mixture was evaporated in vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC34H37N9O6S2 [M + H] +: 732, found 732.
Step C: (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2-aminopropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.11 mmol) inTFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated in vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC.Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 3％-30％in 8 min； Detector, UV 254 nm. RT: 4.5min. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N9O4S2 [M + H] +: 492, found 492； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.27 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.07 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.58 (brs, 4H) , 6.95 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.54 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.51 (brs, 2H) , 6.12 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.16-4.00 (m, 2H) , 3.84-3.82 (m, 1H) , 3.49 (s, 3H) , 1.36 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE468
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000315
Step A: tert-butyl (R) -2- (4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propylcarbamate
Into amixture of (R) -tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propylcarbamate (300 mg, 0.3 mmol) , Pd (PPh3) 4 (37 mg, 0.03 mmol) and 2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid (142 mg, 0.8 mmol) in dioxane (8 mL) , sodium carbonate (102 mg, 1.0 mmol) in water (2 mL) was added at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 12 hr under argon and then cooleddown to room temperature. The resulting mixture was quenched with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 5 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography,  eluting with 0～20 ％MeOH in DCM to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found938.
Step B: 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Into a solution of tert-butyl (R) -2- (4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propylcarbamate (200 mg, 0.21 mmol) in DCM (3 mL) . This was followed by the addition of TFA (1.5 mL) at 0℃. The resulting mixture was stirred at room temperature for 0.5 hr. The solvent was evaporated to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C33H35N9O6S2 [M + H] +: 718, found718.
Step C: 3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
After the solution of3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (140 mg, 0.2 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr, the solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 23％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reduced pressure to afford the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H19N9O4S2 [M + H] +: 478 found478.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO) : δ12.81-12.45 (brs, J ＝ 10 Hz, 2H) , 8.63-8.26 (m, J ＝ 5.2 Hz, 6H) , 8.12 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.59-7.41 (brs, 2H) , 7.28 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.05 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.72-6.48 (brs, 1H) , 4.68-4.52 (m, 1H) , 3.19-3.09 (m, 1H) , 1.45 (d, J ＝ 6.4 Hz, 3H) .
EXAMPLE469
3- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000316
Step A: tert-butyl (S) -2- (4- (2-amino-3H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propylcarbamate
Into a solution of (S) -tert-butyl 2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) propylcarbamate (300 mg, 0.3mmol) , Pd (PPh3) 4 (37 mg, 0.03 mmol) and 2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid (142 mg, 0.8 mmol) in dioxane (8 mL) . This was followed by the addition of sodium carbonate (102 mg, 1.0 mmol) in water (2 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 12 hr under argon atmosphere. The reaction was allowed to cool down to room temperature and quenched with water (10 mL) and extracted with EA (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 0～20 ％MeOH in DCM to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found938. 
EXAMPLE470
3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000317
Step A: (R) -tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
To a stirred solution of (R) -tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.20g, 0.25 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.6 mL) were added (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.14g, 0.74 mmol) , Na2CO3 (79 mg, 0.74 mmol) and Pd (PPh3) 4 (57 mg, 0.05 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃overnight. The reaction mixture was diluted with water (50mL) and extracted with EA (3 x 80 mL) . The organic layer was dried over brine (3 x80mL) , anhydrous Na2SO4 and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 4％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC47H53N9O9S2: [M + 1] +952 found 952.
Step B: (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfon-amide
A solution of (R) -tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.14 g, 0.15 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was evaporated in vacuumto affordthe title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC34H37N9O6S2: [M + 1] +732 found 732.
Step C: (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (R) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (90 mg, 0.12 mmol) in TFA (5 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-30％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum toafford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N9O4S2: [M + 1] +492 found 492； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.21 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.03 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.54 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.11 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.62 –4.57 (m, 1H) , 3.50 (s, 3H) , 3.35-3.31 (m, 1H) , 3.10-3.07 (m, 1H) , 1.41 (d, J ＝ 7.2 Hz, 3H) .
EXAMPLE471
3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000318
Step A: (S) -tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
To a stirred solution of (S) -tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.20g, 0.21 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.5 mL) was added (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.12g, 0.64 mmol) , Na2CO3 (68 mg, 0.64 mmol) and Pd (PPh3) 4 (49mg, 0.04 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for overnight. The reaction mixture was diluted with water (50mL) and extracted with EA (3 x 80 mL) . The organic layer was dried over brine (3 x80mL) , anhydrous Na2SO4 and filtered. The filtrate was concentrated in vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 4％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC47H53N9O9S2: [M + 1] +952 found 952.
Step B: (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfon-amide
To a solution of (S) -tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.13g, 0.13 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was evaporated in vacuumto afford the title compound as anoil: LCMS (ESI) calc’ d forC34H37N9O6S2: [M + 1] +732 found 732.
Step C: (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -3- (2-amino-1-methyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (90 mg, 0.12mmol) inTFA (4 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-30％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC18H21N9O4S2: [M + 1] +492 found 492； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.04 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 6.99 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.57 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.14 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 4.63 –4.58 (m, 1H) , 3.50 (s, 3H) , 3.34-3.32 (m, 1H) , 3.14-3.12 (m, 1H) , 1.42 (d, J ＝ 7.2 Hz, 3H) .
EXAMPLE472
6- ( (S) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000319
Step A: (S) -tert-butyl (2, 3-dihydroxypropyl) carbamate
In a 1000 mL round bottom flask, di-tert-butyl dicarbonate (93 g, 428 mmol) was added to a stirred mixture of (S) -3-aminopropane-1, 2-diol (30g, 329 mmol) , triethylamine (67 ml, 329 mmol) in MeOH (400 ml) at room temperature. The resulting mixture was stirred at room temperature for 2 hr and then concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) to givethe title compound as a solid. 1H NMR (DMSOd-6, 300 MHZ) : 6.59 (br, 1H) , 4.61 (d, J ＝ 4.5 Hz, 1H) , 4.46 (t, J ＝5.7 Hz, 1H) , 3.47-3.39 (m, 1H) , 3.31-3.22 (m, 2H) , 3.08-2.98 (m, 1H) , 2.89-2.79 (m, 1H) , 1.37 (s, 9H) .
Step B: (S) -tert-butyl (2, 3-bis ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate
A solution of (S) -tert-butyl (2, 3-dihydroxypropyl) carbamate (10 g, 52.3 mmol) , tert-butylchlorodimethylsilane (17.34 g, 115 mmol) and 1H-imidazole (14.24 g, 209 mmol) in  DCM (200 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was filtered and filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/3) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as an oil. 1H NMR (CDCl3, 300 MHZ) : 4.81 (br, 1H) , 3.77-3.65 (m, 1H) , 3.53-3.36 (m, 2H) , 3.23-3.05 (m, 2H) , 1.38 (s, 9H) , 0.86-0.81 (m, 18H) , 0.04-0.00 (m, 12H) .
Step C: (S) -tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-hydroxypropyl) carbamate
(S) -tert-butyl (2, 3-bis ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate (20 g, 47.6 mmol) was dissolved in dichloromethane (20 ml) , acetic acid (100 ml, 47.6 mmol) was added. The reaction mixture was stirred at room temperature for 24 hr and then concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (30/70) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as an oil.
Step D: (S) -3- (tert-butoxycarbonylamino) -2- (tert-butyldimethylsilyloxy) propyl methanesulfonate
(S) -tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-hydroxypropyl) carbamate (2.0 g, 6.55 mmol) was dissolved in DCM (20 ml) , then Et3N (1.825 ml, 13.09 mmol) was added, and MsCl (0.765 ml, 9.82 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr, and then quenched with water (30 mL) , extracted with ethyl acetate (3x 30mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x30 mL) and brine (2 x30 mL) , dried over anhydrous magnesium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give (S) -3- (tert-butoxycarbonylamino) -2- (tert-butyldimethylsilyloxy) propyl methanesulfonate, which was used in next step without furtyher purification. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 6.87 (br, 1H) , 4.18 –4.05 (m, 1H) , 4.03 –3.83 (m, 2H) , 3.12 (s, 3H) , 2.95 (t, J ＝ 6.0 Hz, 2H) , 1.34 (s, 9H) , 0.81 (s, 9H) , 0.08 (s, 6H) .
Step E: (S) -S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) ethanethioate
The mixture of (S) -3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl methanesulfonate (2.3 g, 6.00 mmol) and potassium ethanethioate (0.685 g, 6.00 mmol) in DMF (30 ml) was prepared. The reaction mixture was stirred at 50℃ for overnight. The reaction mixture was diluted with water (100mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine  (3 x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum/ether (1/6) to give the title compound as anoil. LCMS (ESI) calc’ d for C16H33NO4SSi [M + H] +364, found: 364； 1H NMR (300 MHz, Methanol-d4) δ 3.85-3.81 (m, 1H) , 3.04 (dd, J ＝ 5.9, 1.7 Hz, 2H) , 2.96 (dd, J ＝ 5.6, 1.2 Hz, 2H) , 2.30 (s, 3H) , 1.41 (s, 9H) , 0.87 (s, 9H) , 0.08 (d, J ＝ 4.4 Hz, 6H) .
Step F: (S) -tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-mercaptopropyl) carbamate
The mixture of (S) -S- (3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) ethanethioate (1.9 g, 5.23 mmol) and Na2CO3 (1.385 g, 13.06 mmol) in methanol (20 ml) and water (4.0 ml) was prepared. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction mixture was diluted with water (50mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuumto afford the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C14H31NO3SSi [M + H] +322, found: 322
Step G: (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate
The mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (1.3 g, 1.645 mmol) , (S) -tert-butyl (2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) -3-mercaptopropyl) carbamate (1.322 g, 4.11 mmol) in DMF (15 ml) was prepared. NaH (0.145 g, 3.62 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 3 hr. The reaction mixture was diluted with water (100mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum/ether (1/1) to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C45H59IN6O8S2Si [M + H] +1031, found: 1031.
Step H: (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2-hydroxypropyl) carbamate
To a solution of (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2- ( (tert-butyldimethylsilyl) oxy) propyl) carbamate (2.5 g, 2.425 mmol) was dissolved in THF (40 ml) ,  TBAF (4.85 ml, 4.85 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) , extracted with ethyl acetate (3x 50mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x30 mL) and brine (2 x30 mL) , dried over anhydrous magnesium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (2/1) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O8S2 [M + H] +917, found: 917
Step I: (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate
(S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) -2-hydroxypropyl) carbamate (1.3 g, 1.418 mmol) was dissolved in DCM (15 ml) . 3-chlorobenzoperoxoic acid (0.979 g, 5.67 mmol) was added in portion. The reaction mixture was stirred at room temperature overnight. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) .The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C39H45IN6O10S2 [M + H] +949, found: 949.
Step J: (S) -tert-butyl (3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate.
The mixture of (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate (500 mg, 0.527 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (204 mg, 1.054 mmol) , Na2CO3 (168 mg, 1.581 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (91 mg, 0.079 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (5.0 ml) was prepared. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 16 hr and then concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound. LCMS (ESI) calc’ d for C46H50N8O10S3 [M + H] +971, found: 971.
Step K: 6- ( (S) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide,
(S) -tert-butyl (3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2- hydroxypropyl) carbamate (330 mg, 0.340 mmol) was dissolved in DCM (8.0 ml) . TFA (3.0 ml, 38.9 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr. The reaction was concentrated under vacuum to give the title compound, which was used in next step directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C33H34N8O7S3 [M + H] +751, found: 751
Step L: (S) -6- ( (3-amino-2-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
(S) -6- ( (3-amino-2-hydroxypropyl) sulfonyl) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (180 mg, 0.240 mmol) was dissolved in TFA (5 mL, 64.9 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column 19 x 250mm 10μM； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 25 mL/min； Gradient: 10％B to 30％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H18N8O5S3 [M + H] +511, found: 511. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6/D2O) δ 8.21 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.77 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.41 (d, J ＝ 7.8Hz, 1H) , 6.69 (t, J ＝ 7.7 Hz, 1H) , 6.51 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.41-4.30 (m, 1H) , 4.18-3.91 (m, 1H) , 3.08-2.99 (m, 1H) , 2.89-2.78 (m, 1H) .
EXAMPLE473
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000320
Step A: (S) -tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate
The mixture of (S) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate (prepared as described in EXAMPLE 472, Steps A-H, 200 mg, 0.211 mmol) , (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (74.6 mg, 0.422 mmol) , Na2CO3 (67.0 mg, 0.632 mmol) and Pd (Ph3P) 4 (36.5 mg, 0.032 mmol) in Dioxane/H2O＝4/1 (0.5 ml) was prepared. The reaction mixture was stirred at 80℃ for 8 hr. The solids were filtered out and the filtrate was concentrated. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O10S2 [M + H] +954, found: 954
Step B: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
(S) -tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate (152 mg, 0.159 mmol) was dissolved in DCM (3.0 ml) , then TFA (1.5 ml, 19.47 mmol) was added at 0℃. The reaction mixture was stirred at room temperature for 1 hr and then concentrated under vacuum to give the title compound, which was used in next step directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C33H35N9O7S2 [M + H] +734, found: 734.
Step C: (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3-amino-2-hydroxypropyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
(S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3-amino-2-hydroxypropyl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (100 mg, 0.136 mmol) was dissolved in TFA (3.0 mL, 38.9 mmol) . The reaction mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was removed under vacuum. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column , 
Figure PCTCN2015082514-appb-000321
5 μm, 19 mm X 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 23％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H19N9O5S2 [M + H] +494, found: 494； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6/D2O) : δ 8.24 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.85 (d, J ＝ 8.3 Hz, 1H) , 6.91 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.63-6.60 (m, 1H) , 6.23-6.19 (m, 1H) , 4.28 –4.19 (m, 1H) , 4.11-3.98 (m, 2H) , 3.01 –2.83 (m, 1H) , 2.86-2.71 (m, 1H) .
EXAMPLE474
3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000322
Step A: 3-bromo-N-ethyl-2-nitrobenzenamine
To the solution of ethanamine in THF (2M) was added 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzene (10 g, 54 mmol) at ambienttemperature. The resulting solution was stirred in sealed tube at 80℃ for 2 hr and then concentrated under vacuum to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C8H9BrN2O2 [M + H] +: 244, found 244； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 689 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.71 (d, J ＝ 8.2 Hz, 1H) , 3.39 (q, J ＝ 3.9 Hz, 2H) , 1.45 (t, J ＝ 3.9 Hz, 3H) .
Step B: 3-bromo-N1-ethylbenzene-1, 2-diamine
To a stirred solution of 3-bromo-N-ethyl-2-nitrobenzenamine (10.5 g, 43 mmol) and Zn dust (14 g, 0.2 mmol) in MeOH (200 mL) , HCl (12 M) wasadded dropwise at room temperature. After the resulting mixture was stirred at 50℃ for 1 hr, it was filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C8H11BrN2 [M + H] +: 215, found 215； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 6.91 –6.81 (m, 1H) , 6.65 –6.58 (m, 2H) , 3.15 (q, J ＝ 7.1 Hz, 2H) , 1.30 (t, J ＝ 7.1 Hz, 3H) .
Step C: 4-bromo-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine
A solution of 3-bromo-N1-ethylbenzene-1, 2-diamine (8.3 g, 39 mmol) and BrCN (1.68 g, 16 mmol) in MeOH (100 mL) was stirred at ambient temperature for 4 hr. The reaction mixture was poured into the saturated NaHCO3 solution. The precipitate was collected and dried under vacuumto give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C9H10BrN3 [M + H] +: 240, found 240； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 7.14-7.10 (m, 2H) , 6.81 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.73 (s, 2H) , 4.01 (q, J ＝ 7.1 Hz, 2H) , 1.20 (t, J ＝ 7.1 Hz, 3H) .
Step D: 2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid
100 ml of 1, 4-Dioxane solution of 4-bromo-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (1 g, 4 mmol) , bis (pinacolato) diboron (4.7 g, 18.6 mmol) and potassium acetate (4.5 g, 46.5 mmol) was stirred at 80℃ for 4 hr under nitrogen. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column, Sunfire C18, 19 x 150mm； mobile phase: water (0.05％TFA) and acetonitrile (Gradient time: 7 min. B％: 10％-20％) ； Detector, UV 220 and 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C9H12BN3O2 [M + H] +: 206, found 206； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 7.70-7.20 (m, 3H) , 3.35-3.30 (m, 2H) , 1.42-1.39 (m, 3H) .
Step E: tert-butyl 3- (4- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate (200 mg, 0.215 mmol) , 2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid (67 mg, 0.322 mmol) , Na2CO3 (68 mg, 0.644 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (50 mg, 0.043 mmol) in Dioxane (4mL) and water (1 mL) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C48H53N9O9S2 [M + H] +: 964, found 964.
Step F: 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution mixture of tert-butyl 3- (4- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) azetidine-1-carboxylate (162 mg, 0.168 mmol) and TFA (1 mL, 12.98 mmol) in DCM (5 mL) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give the title compound, which was used in the next step directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C35H37N9O6S2 [M + H] +: 744, found 744.
Step G: 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (119 mg, 0.117 mmol) in TFA (5 mL, 65 mmol) was stirred at 80℃ for 2  hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％ACOH Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30％B to 70％B in 10 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C19H21N9O4S2 [M + H] +: 504, found 504. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz) : 8.26 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.80 (brs, 2H) , 6.98 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.54-6.49 (m, 3H) , 6.11 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 5.27-5.19 (m, 1H) , 4.27-4.13 (m, 4H) , 4.04-3.97 (m, 2H) , 1.23-1.15 (m, 3H) .
EXAMPLE475
3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000323
Step A: tert-butyl 2- (4- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate
A mixture of 6- (2-aminoethylsulfonyl) -3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (200 mg, 0.244 mmol) , 2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid (100 mg, 0.488 mmol) , Na2CO3 (77 mg, 0.732mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (56 mg, 0.049 mmol) in dioxane (4 mL) and water (1 mL) was stirred at 80℃ for 2 hr. The reaction mixture was then concentrated under vacuumand the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C47H53N9O9S2 [M + H] +: 952, found 952.
Step B: 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl 2- (4- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) ethylcarbamate (198 mg, 0.198 mmol) in DCM (5 mL) , TFA (1 mL, 12.98 mmol) was added dropwise at 0℃. The resulting solution was stirred at ambient temperature for 1 hr and then concentrated under vacuum to give the title compound, which was used in the next step directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C34H37N9O6S2 [M + H] +: 732, found 732.
Step C: 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of 3- (2-amino-1-ethyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (2-aminoethylsulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (139 mg, 0.190 mmol) in TFA (5 mL, 65 mmol) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuumand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5μm； Mobile Phase A: water/0.05％of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30-70％B in 10 min； 254nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C18H21N9O4S2 [M + H] +: 492, found 492； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.25 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.11 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.60 (brs, 4H) , 6.98 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 6.66-6.49 (m, 3H) , 6.09 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.14-4.09 (m, 2H) , 4.04-3.95 (m, 2H) , 3.32-3.23 (m, 2H) , 1.23-1.16 (m, 3H) .
EXAMPLE476
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (R) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000324
Step A: tert-butyl ( (2R) -2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate
In a 25 mlsealed tube was placed a solution of tert-butyl ( (2R) -2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.20g, 0.21 mmol) in dioxane (10 mL) and water (2 mL) , followed by the addition of Pd (PPh3) 4 (50 mg, 0.04 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (92 mg, 0.47 mmol) and Na2CO3 (68 mg, 0.64 mmol) . After the resulting mixture was degassed with nitrogen for 3 times and stirred at 80℃for 16 hr, it was diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 50 mL) , brine (2 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was applied onto a silica gel column chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/10) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found 955.
Step B: (R) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (R) -tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) -sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.13 g, 0.13 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at ambient temperature for 1 hr. The reaction mixture was evaporated in vacuum to afford the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d forC33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found 735.
Step C: (R) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (R) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (75 mg, 0.12 mmol) in TFA (5 mL) as stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction solvent was concentrated under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％TFA) , 5％-30％in 8 min； Detector, UV 254 nm to getthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found 495； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.19 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.46 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.70 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.48 (d, J ＝ 6.8 Hz, 1H) , 4.65-4.60 (m, 1H) , 3.37-3.32 (m, 1H) , 3.13-3.08 (m, 1H) , 1.40 (d, J ＝ 6.8 Hz, 3H) .
EXAMPLE477
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (S) -1-aminopropan-2-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000325
Step A: (S) -tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -propyl) carbamate
To a stirred solution of (S) -tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-meth-oxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.20g, 0.21 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) and water (0.5 mL) were added (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.10g, 0.54 mmol) , Na2CO3 (68 mg, 0.64 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (35mg, 0.04 mmol) under nitrogen atmosphere at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ overnight and then cooled down to room temperature, diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 50 mL) , brine (2 x 50 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with 3％MeOH in DCM to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC46H50N8O9S3 [M + H] +: 955, found 955.
Step B: (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulf-amoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propyl) carbamate (0.12g, 0.13 mmol) in TFA (4 mL) was stirred at ambient temperature for 1 hr and then evaporated in vacuum to afford the title compound as an oil, which was used in the next step directly without further purification: LCMS (ESI) calc’ d forC33H34N8O6S3 [M + H] +: 735, found 735.
Step C: (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (S) -3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (1-aminopropan-2-yl) sulfonyl) -N- (4-methoxybenzyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.13 mmol) in TFA (5 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction solvent was concentrated under vacuum. The residue was purified by Prep-HPLC. Column, Xbridge C18, 19 x150 mm； mobile phase: acetonitrile in water (0.05％NH4HCO3) , 5％-30％in 8 min； Detector, UV 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC17H18N8O4S3 [M + H] +: 495, found 495； 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.26 (d, J ＝ 9.0 Hz, 1H) , 7.94 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.51 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.74 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.60 (d, J ＝ 6.8 Hz, 1H) , 4.66-4.62 (m, 1H) , 3.38-3.35 (m, 1H) , 3.19-3.16 (m, 1H) , 1.43 (d, J ＝ 6.9 Hz, 3H) .
EXAMPLE478
4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000326
Step A: 5- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 5-iodo-N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (1g, 1.01 mmol) , Pd (dppf) Cl2CH2Cl2 (0.16 g, 0.20 mmol) and (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.393 g, 2.024 mmol) in dioxane (10 mL) . This was followed by the addition of sodium carbonate (0.32 g, 3.04 mmol) in water (1.5 mL) at ambient temperature. After the resulting mixture was stirred at 80℃ for 16 hr under argon, it was cooled to 20℃ and then quenched with water (50 mL) , extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EA/DCM (2/3) togive the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC38H36N8O7S3 [M + H] +: 813, found813.0 ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.55 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.99 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.61 (s, 2H) , 7.53-7.51 (m, 3H) ,  6.93 (d, J ＝ 8.4 Hz, 5H) , 6.83 (d, J ＝ 8.8 Hz, 5H) , 6.76 (d, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 6.64 (br, 1H) , 6.48 (br, 1H) , 5.67 (s, 2H) , 4.04-3.96 (m, 4H) , 3.73 (s, 6H) , 3.69 (s, 3H) .
Step B: 5- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of tert-butyl nitrite (81 mg, 0.79 mmol) and copper (II) bromide (0.13g, 0.59 mmol) in acetonitrile (2 ml) . This was followed by the addition of 5- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.40 g, 0.49 mmol) in acetonitrile (5 mL) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 0℃ for 16 hr under argon, and then the reaction was quenched with water (30 mL) and extracted with EA (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 70 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EA/PE (2/3) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC38H34BrN7O7S3 [M + H] +: 878, found878 ； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.54 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.99 (d, J ＝ 8.4 Hz, 7H) , 6.82 (d, J ＝ 8.8 Hz, 5H) , 6.71 (d, J ＝ 7.6 Hz, 2H) , 5.99 (s, 2H) , 5.47-05.45 (m, 2H) , 4.31-4.05 (m, 4H) , 3.77 (s, 6H) , 3.75 (s, 3H) .
Step C: 5- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 5- (2-bromobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.40 g, 0.39 mmol) and copper (I) cyanide (0.10g, 1.16 mmol) in DMSO (4 mL) . The resulting mixture was stirred at 100℃ for 6 hr under argon. The reaction was quenched with water (30 mL) , extracted with EA (3 x 30 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 70 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with EA/PE (2/3) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H34N8O7S3 [M + H] +: 823, found823.0 ； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.81 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.68 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.15-6.95 (m, 8H) , 6.82-6.68 (m, 5H) , 6.57-6.55 (m, 1H) , 5.99-5.94 (m, 2H) , 5.41 (brs, 2H) , 4.31-4.05 (m, 4H) , 3.77 (s, 6H) , 3.74 (s, 3H) .
Step D: 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide 
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of 5- (2-cyanobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1, N1-bis (4-methoxybenzyl) -6- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (0.15 g, 0.18 mmol) in MeOH (3 mL) and THF (0.5 mL) . This was followed by the addition of sodium methanolate (0.02 mL, 0.02 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 20℃ for 0.5 hr under argon, and then was followed by the addition of NH4Cl (0.98 g, 1.82 mmol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 40℃ for 16 hr under argon. The reaction was quenched with water (50 mL) and extracted with EA (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 200 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by Prep-TLC, eluted with EA/PE (5/1) togive the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC39H37N9O7S3: [M + 1] +: 840, found 840； 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.88 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 7.69 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 7.05-6.88 (m, 9H) , 6.79-6.76 (m, 5H) , 6.70-6.67 (m, 2H) , 6.52 (brs, 1H) , 5.39 (brs, 2H) , 4.85-4.61 (m, 1H) , 4.25-4.23 (m, 3H) , 3.77 (s, 6H) , 3.74 (s, 3H) , 3.73-3.65 (m, 2H) .
Step E: 4- (3, 4-disulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4-sulfamoylphenyl) benzo [d] thiazole-2-carboximidamide (0.80 g, 0.10 mmol) in TFA (3 mL) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 15％B in 8 min； RT: 5.0 Min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC15H13N9O4S3: [M + 1] +: 480, found 480.0； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.47 (br, 3H) , 8.32 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 8.21 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.93 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.72 (br, 2H) , 7.48 (t, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.35 (br, 2H) , 7.07 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) .
EXAMPLE479
2'-amino-4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-3, 3'-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000327
Step A: 5-bromo-2H-benzo [e] [1, 2, 4] thiadiazin-3 (4H) -one 1, 1-dioxide
A solution of 2-bromoaniline (1 g, 5.81 mmol) in EtNO2 (1 ml) was added to a stirred solution of sulfurisocyanatidic chloride (0.905 g, 6.39 mmol) in EtNO2 (9.00 ml) at -40℃ during 5 min (the chlorosulphonylurea intermediates crystallised out) . The reaction mixture was warmed up to 0℃, and aluminum chloride (0.853 g, 6.39 mmol) was added all at once. The resulting mixture washeated at 110 ℃ for 20 min, then cooled down to room temperature and poured into ice-water. The precipitated solid was collected, washed with water, and dried to givethe title compound as a solid.: LCMS (ESI) calc’ d for C7H5BrN2O3S [M + H] +: 277, 279 (1: 1) , found 277, 279 (1: 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ10.16 (s, 1H) , 7.94 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.80 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 7.30-7.21 (m, 1H) .
Step B: 2-amino-3-bromobenzenesulfonamide
5-bromo-2H-benzo [e] [1, 2, 4] thiadiazin-3 (4H) -one 1, 1-dioxide (100 mg, 0.361 mmol) was added to H2SO4 (3 ml, 28.1 mmol) and the mixture was stirred at 130℃ for 4 hr until a solution resulted. After dilution with ice-water and neutralizing with NaOH (40％) , the product was precipitated out. The solid wascollected, washed with water and driedto givethe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C6H7BrN2O2S [M + H] +: 251, 253 (1 : 1) , found 251, 253 (1 : 1) ； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ7.70-7.61 (m, 2H) , 7.48 (s, 2H) , 6.63-6.59 (m, 1H) , 5.86 (s, 2H) .
Step C: 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzenesulfonamide
To a solution of 2-amino-3-bromobenzenesulfonamide (500 mg, 1.991 mmol) in dioxane (5 ml) was added Pd (dppf) Cl2 (353 mg, 0.597 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (1011 mg, 3.98 mmol) and potassium acetate (586 mg, 5.97 mmol) with stirring at room temperature. The resulting mixture was degassed for 3 times with N2, then warmed to 80℃ and stirred for 16hr. The reaction mixture was filtrated； the filtrate was collected and concentrated under vacuum. The residue was purified by column chromatography  on silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked, eluting with EA/PE (0-10％) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C12H19BN2O4S [M + H] +: 299, found 299； 1H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ7.90-7.85 (m, 2H) , 6.86-6.82 (m, 1H) , 4.93 (s, 2H) , 1.36 (s, 12H) .
Step D: tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3'-sulfamoyl- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Pd(dppf) Cl2 (31.4 mg, 0.043 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (200 mg, 0.215 mmol) and Na2CO3 (45.5 mg, 0.430 mmol) were added to a stirredmixture of 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzenesulfonamide (128 mg, 0.430 mmol) in 1, 4-dioxane (0.3 ml) and water (0.1 ml) . The resulting mixture was degassed for 3 times with N2, and stirred at 80℃ for 3 hr. The mixture was filtered, washing with ethyl acetate (30 mL) . The organic layer was washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and concentrated. The residue was purified by column chromatography, eluted with EA/PE (0-60％) to givethe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C45H50N8O11S3 [M + H] +: 975, found 975
Step E: 2'-amino-4- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3, 3'-disulfonamide
tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3'-sulfamoyl- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (130 mg, 0.133 mmol) was added to DCM (3 ml) and TFA (1 ml) at 0℃ and the resulting solution was stirred at room temperature for 1hr. The reaction solution was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. Thereaction solution was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 8％B to 30％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were concentrated under vacuum to afford the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C16H18N8O6S3 [M + H] +: 515, found 515； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.30 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.77 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.45-7.43 (m, 1H) , 7.35 (s, 2H) , 6.55-6.53 (m, 1H) , 6.44-6.30 (m, 1H) , 5.33 (s, 2H) , 5.23-5.19 (m, 1H) , 4.30-4.22 (m, 4H) .
EXAMPLE480
2-amino-N- (2-aminoethyl) -4'- (azetidin-3-ylsulfonyl) -5'-sulfamoyl-6'- (2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-3-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000328
Step A: tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethoxy) (imino) methyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of 2-amino-3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxylic acid (160 mg, 0.170 mmol) , HATU (97 mg, 0.255 mmol) and tert-butyl (2-aminoethyl) carbamate (109 mg, 0.681 mmol) inDMF (2 ml) was addedDIEA (0.045 ml, 0.255 mmol) with stirring at 0℃. The reaction solution was degassed with nitrogen for 3 times. The resulted solution was warmed to 0℃ and stirred for 4 hr. The reaction solution was cooled down to ambient temperature, diluted with water (5 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford yellowsolid. The residue was purified by silica gel column chromatography20 g, eluted with EtOAc/petroleum ether (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C53H63N9O12S2 [M + H] +: 1082, found 1082.
Step B: 2-amino-N- (2-aminoethyl) -4'- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3'-sulfamoyl-2'- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxamide
To a solution of tert-butyl (2- (2-amino-4'- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-ylcarboxamido) ethyl) carbamate (100 mg, 0.102 mmol) inDCM (2 ml) was added TFA (0.5 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction solution was concentrated under vacuum to afford a residue. To the residuewas added TFA (2 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 1 hr. The resulted solution was concentrated under vacuumand the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column:  XBridge C18 OBD Prep Column , 
Figure PCTCN2015082514-appb-000329
5 μm, 19 mm x 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 30％B in 10 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid : LCMS (ESI) calc’ d for C19H23N9O5S2 [M +H] +: 522, found 522； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ8.51 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.82-7.79 (m, 1H) , 7.49-7.47 (m, 1H) , 6.81 (d, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 6.05 (d, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 5.34-5.32 (m, 1H) , 4.21-4.19 (m, 1H) , 3.96-3.94 (m, 2H) , 3.72-3.69 (m, 2H) , 3.67-3.65 (m, 1H) , 3.14-3.11 (m, 2H) .
EXAMPLE481
3- (2-amino-1-propyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000330
Step A: tert-butyl 3- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (10 g, 10.74 mmol) in dioxane (100 ml) and water (25 ml) was added Na2CO3 (4.55 g, 43.0 mmol) , 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline (5.67 g, 21.49 mmol) and Pd (PPh3) 4 (2.483 g, 2.149 mmol) with stirring at room temperature. The reaction mixture was degassed with nitrogen for 3 times. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred for overnight. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (50mL) and extracted with ethyl acetate (3 x100 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford a residue. The residue was purified by silica gel columnchromatography, eluting with EtOAc/isohexane (2/1) to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C45H48N8O11S2 [M + H] +: 941, found941.
Step B: tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-bromo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a solution of copper (II) bromide (28.5 mg, 0.128 mmol) inMeCN (1 ml) was addedtert-butyl nitrite (17.53 mg, 0.170 mmol) with stirring at 0℃. The reaction solution was evacuated and backfilled with nitrogen 3 times. The resulted solution was added tert-butyl 3- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (100 mg, 0.106 mmol) in MeCN (1ml) . The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 2 hr. The reaction solution was cooled down to ambient temperature, diluted with water (30mL) and extracted with ethyl acetate (3 x10 mL) . The combined organiclayers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford a residue. The residue was purified by silica gel column chromatography12 g, eluting with EtOAc/isohexane (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C45H46BrN7O11S2 [M + H] +: 1004: 1006 (1: 1) , found1004: 1006 (1: 1) .
Step C: tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro-3'- (propylamino) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A mixture of tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3'-bromo-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (1 g, 0.995 mmol) , BINAP (0.124 g, 0.199 mmol) , Cs2CO3 (0.648 g, 1.990 mmol) , diacetoxypalladium (0.022 g, 0.100 mmol) and propan-1-amine (0.118 g, 1.990 mmol) in dioxane (20 ml) was stirred at 80℃ for 16 hr. The dark color becomes red. The reaction mixture was poured into water (50 mL) , extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 30 mL) and brine (3 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C48H54N8O11S2 [M + H] +: 983, found983.
Step D: tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3'- (propylamino) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Palladium on carbon (43.3 mg, 0.407 mmol) was added to a mixture of tert-butyl 3- ( (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- 3'- (propylamino) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (400 mg, 0.407 mmol) in THF (2.500 ml) and MeOH (2.5 ml) , and the resulting mixture was evacuated and backfilled 3 times with H2. After the reaction mixture was stirred at room temperature overnight, it was filtered and concentrated under vacuum to give the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C48H56N8O9S2 [M + H] +: 953, found953.
Step E: tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-propyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
Cyanic bromide (36.7 mg, 0.346 mmol) was added to a stirred mixture of tert-butyl 3- ( (2'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3'- (propylamino) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (300 mg, 0.315 mmol) in EtOH (20 ml) and the mixture was stirred at 50℃ for 2 hr. After the mixture was cooled down to room temperature, aqueous sodium hydrogen carbonate (saturated, 50 mL) was added and the mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 30 mL) . The combined organic fractions were washed with brine (3 x 30 mL) , dried (Na2SO4) , filtered and concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel chromatography, eluted with EA/PE (0-70％) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C49H55N9O9S2 [M + H] +: 978, found978.
Step F: 3- (2-amino-1-propyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-1-propyl-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (100 mg, 0.102 mmol) inDCM (2 ml) was added TFA (0.5 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction solution was concentrated under vacuum to afford yellowoil. To the yellow oil was added TFA (2 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 1 hr. The resulting solution was concentrated under vacuum to afford yellow oil. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column, 5μM, 19 x 150mm； Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 40％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C20H23N9O4S2 [M + H] +: 518, found 518； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ8.27 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) ,  8.11 (d, J ＝ 8.7 Hz, 1H) , 7.01-6.97 (m, 1H) , 6.54-6.49 (m, 2H) , 6.13-6.10 (m, 1H) , 5.29-5.18 (m, 1H) , 4.39-4.10 (m, 4H) , 3.98-3.89 (m, 2H) , 1.71-1.59 (m, 2H) , 0.91-0.79 (m, 3H) .
EXAMPLE482
4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (R) -pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000331
Step A: (S) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of (S) -4-iodo-N2, N2-bis (4-methoxybenzyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (300 mg, 0.349 mmol) in dioxane (6 ml) and water (2 ml) was added Na2CO3 (148 mg, 1.396 mmol) (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (141 mg, 0.872 mmol) and Pd (dppf) Cl2 (51.0 mg, 0.070 mmol) with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred overnight. After the reaction mixture was cooled down to ambient temperature, it was diluted with water (15mL) and extracted with ethyl acetate (3 x15 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography20 g, eluted with EtOAc/petroleum ether (1/2) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C47H51N9O9S2 [M + H] +: 950, found 950.
Step B: (R) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of (R) -tert-butyl 3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate inDCM (5 ml) was added TFA (1 ml) with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to room temperature and stirred for 1 hr then concentrated under vacuum to affordanoil. To the oil was added TFA (5 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 1 hr. The solution was concentrated under vacuum and the residue was purified by Prep-HPLC with  the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column,
Figure PCTCN2015082514-appb-000332
5 μm, 19 mm x 250 mm；Mobile Phase A: water with 10mmol of NH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 30％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as a solid : LCMS (ESI) calc’ d for C18H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found 490； 1H NMR (300 MHz, DMSO) : δ9.76 (s, 1H) , 8.58-5.55 (m,1H) , 8.12-8.09 (m, 1H) , 7.81-7.78 (m, 1H) , 7.44-7.41 (m, 1H) , 6.99 (s, 1H) , 4.16-4.11 (m, 1H) , 3.41-3.14 (m, 4H) , 2.21-1.94 (m, 2H) .
EXAMPLE483
7- (4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000333
Step A: ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (S) -1- (tert-butoxycarbonyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
To a solution of (S) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1-carboxylate (300 mg, 0.3 mmol) in dioxane (5 mL) and H2O (1 mL) , were added ethyl 7- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (202 mg, 0.6 mmol) and Na2CO3 (101 mg, 1.0 mmol) . Under the atmosphere of N2, the Pd (PPh3) 4 (37 mg, 0.03 mmol) was added to the mixture. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 20 hr. After cooling to room temperature, the reaction mixture was quenched with water (8 mL) . The resulting mixture was extracted with ethyl acetate (3 x 8 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 8 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography over silica gel using gradient of 0～70 ％ethyl acetatein petroleum ether as eluent to afford the title compound as asolid. MS (ESI) Calc’ d for (C50H54N8O11S2) [M+H] +, 1007.0. found, 1007.0
Step B: ethyl 7- (2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Asolution of ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (S) -1- (tert-butoxycarbonyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (300 mg, 0.3 mmol) and TFA (2 mL ) in Dichloromethane (4 mL) was stirred at ambient temperature for 0.5 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil. MS (ESI) Calc’ d for (C37H38N8O8S2) [M+H] +, 787.0. found, 787.0
Step C: ethyl 7- (4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
A solution of ethyl 7- (2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (200 mg, 0.25 mmol) in TFA (2 mL) was stirred at 80℃ for 1 hr. The reactionmixture was concentrated under vacuum to givethe title compound as a solid. MS (ESI) Calc’ d for (C21H22N8O6S2) [M+H] +, 547.0. found, 547.0. 1H NMR (CD3OD, 300 MHZ) δ: 8.61 (q, J ＝3.6 Hz, 1H) , 7.97 (d, J＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.15-6.95 (m, 2H) , 6.75-6.61 (m, 1H) , 5.27-5.09 (m, 1H) , 4.05-3.35 (m, 6H) , 2.79-2.37 (m, 2H) , 1.51-1.09 (m, 3H) .
Step D: 7- (4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid.
A solution ofethyl 7- (4- ( (S) -pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (180 mg, 0.32 mmol) , LiOH (29 mg, 1.2 mmol) in methanol (3 mL) and H2O (0.6 mL) was stirred for 4 hr at ambient temperature. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 25％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as a solid. MS (ESI) Calc’ d for (C19H18N8O6S2) [M+H] +, 519.0. found, 519.0 
1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZ) δ: 8.28 (q, J＝ 2.7Hz, 1H) , 7.76 (q, J＝ 3.0Hz, 1H) , 7.03 (d, J＝ 1.2 Hz, 1H) , 6.85 (t, J＝ 1.8Hz, 1H) , 6.32 (t, J＝ 1.2 Hz, 1H) , 5.15-5.01 (m, J＝ 3.9Hz, 1H) , 3.75-3.51 (m, 2H) , 3.41-3.23 (m, 2H) , 2.45-2.26 (m, 2H) .
EXAMPLE484
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000334
Step A: (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate.
Into a solution of (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (900 mg, 0.9 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (70 mg, 0.1 mmol) and 2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-ylboronic acid (397 mg, 2.24 mmol) in dioxane (8 mL) . This was followed by the addition of sodium carbonate (286 mg, 2.7 mmol) in water (2 mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 12 hr under argon atmosphere. The reaction was allowed to cool down to ambient temperature and quenched with water (12 mL) and extracted with EA (3 x 12 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with DCM/MeOH (8/1) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC49H53N9O11S2 [M + H] +: 1008, found1008； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.72-8.67 (m, 1H) , 8.21-8.15 (m, 1H) , 7.02-6.48 (m, 15H) , 5.10-5.00 (m, 1H) , 4.70-4.52 (m, 3H) , 4.11-3.89 (m, 4H) , 3.80-3.53 (m, 14H) , 2.80-2.70 (m, 1H) , 2.59-2.38 (m, 1H) , 1.52 (s, 9H) .
Step B: (2S, 4R) -tert-butyl 4- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate
A solution of (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (450 mg, 0.45 mmol) in THF (3 mL) was prepared. This was followed by the addition of LiBH4 (29 mg, 1.32 mmol) at 0℃. The resulting  mixture was stirred at ambient temperaturefor 2 hr under an argon atmosphere. The reaction mixture was quenched with water (8 ml) and extracted withEA (3 x 8 mL) . The combined organic layers were washed with brine (1 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel chromatography, eluting with 0～20 ％MeOH in DCM to givethe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C48H53N9O10S2 [M + H] +: 980, found980； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.72-8.67 (m, 1H) , 8.19-8.15 (m, 1H) , 7.02-6.48 (m, 15H) , 5.10-4.90 (m, 2H) , 4.70-4.4.52 (m, 2H) , 4.21-3.89 (m, 5H) , 3.80-3.53 (m, 12H) , 2.80-2.70 (m, 1H) , 2.59-2.38 (m, 1H) , 1.52 (s, 9H) .
Step C: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of (2S, 4R) -tert-butyl 4- (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate (110 mg, 0.11 mmol) in DCM (2 mL) was prepared. This was followed by the addition of TFA (1 mL) at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 0.5 hr. The solvent was evaporated to affordthe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C43H45N9O8S2 [M + H] +: 880, found880.
Step D: 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
A solution of3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (80 mg, 0.110 mmol) in TFA (2 mL, 26.0 mmol) was prepared. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: SunFire C18 OBD Prep Column , 
Figure PCTCN2015082514-appb-000335
5 μm, 19 mm X 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3； Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 25 mL/min； Gradient: 10％B to 40％B in 8 min； 254&220nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C19H21N9O5S2 [M + H] +: 520 found520； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.31 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) , 8.02 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.88-7.21 (br, 1H) , 6.97 (d, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.65-6.37 (t, J ＝ 7.8 Hz, 1H) , 6.55 (s, 2H) , 6.15 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 5.05-4.88 (m, 1H) , 3.68-3.37 (m, 5H) , 2.59-2.38 (m, 1H) , 2.12-1.99 (m, 1H) .
EXAMPLE485
(R) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000336
Step A: (R) -tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate.
To a solution of (R) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (250 mg, 0.260 mmol) in dioxane (2.7ml) /water (0.3 ml) were added 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine (143 mg, 0.651 mmol) , Na2CO3 (83 mg, 0.781 mmol) and PdCl2 (dppf) (57.2 mg, 0.078 mmol) at ambient temperature. The flaskwas degassed with nitrogen for three times. The reaction mixture was irradiated with microwave radiation at 130℃for 0.5 hr under an atmosphere of nitrogen. The reaction was red from yellow. The reaction mixture was quenched with water (20 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 15 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 15 mL) and brine (3 x 15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was purified by silica gel column chromatography with CH2Cl2 /MeOH (1: 10) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC45H51N9O9S2 [M + H] +: 926, found 926；
Step B: (R) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -N- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
To a solution of (R) -tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (140 mg, 0.151 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (1.00 ml) with stirring at 0℃. The resulting solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction solution was filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 mL) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. The mixture was evaporated under reduced pressure. The product was purified byPrep-HPLC with the following conditions: Column: XSelect CSH Prep C18 OBD Column, 5μM, 19*150mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B:  MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to affordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C16H19N9O4S2 [M -H] +: 464, found 464. 1H NMR (400 MHz, MeOD) : δ8.64 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.03-8.00 (m, 1H) , 7.74-7.71 (m, 1H) , 7.53 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 6.91-6.81 (m, 1H) , 4.29-4.23 (m, 1H) , 3.45-3.40 (m, 2H) , 3.33-3.30 (m, 2H) , 2.30-2.21 (m, 1H) , 2.03-1.98 (m, 1H) .
EXAMPLE486
(S) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000337
Step A: (S) -tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate.
To a solution of (S) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (2 g, 2.084 mmol) in dioxane (9ml) /water (3 ml) was added 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine (0.917 g, 4.17 mmol) , Na2CO3 (0.663 g, 6.25 mmol) and PdCl2 (dppf) (0.305 g, 0.417 mmol) at ambient temperature. The flask was evacuated and backfilled with nitrogen three times. The reaction mixture was strring at 80℃ for 16 hr under an atmosphere of nitrogen. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 100mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 100 mL) and brine (3 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica gel column chromatography with CH2Cl2 /MeOH (1: 10) toaffordthe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC45H51N9O9S2 [M + H] +: 926, found 926
Step B: (S) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -N- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
To a solution of (S) -tert-butyl 3- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (150 mg, 0.162 mmol) in DCM (3 ml) was  addedTFA (1.00 ml) with stirring at 0℃. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction solution was filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. The mixture was evaporated under reduced pressure. The product was purified byPrep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 20％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C16H19N9O4S2 [M -H] +: 464, found 464. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.20 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.76-7.74 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.53 (s, 1H) , 6.68-6.67 (m, 1H) , 6.15-6.13 (m, 1H) , 5.99-5.96 (brs, 2H) , 4.08-4.02 (m, 1H) , 3.30-3.22 (m, 2H) , 3.19-3.10 (m, 2H) , 2.08-2.01 (m, 1H) , 1.89-1.80 (m, 1H) .
EXAMPLE 487
N1- (2-aminoethyl) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000338
Step A: tert-butyl 2- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethylcarbamate.
To a solution of (S) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (250 mg, 0.260 mmol) in dioxane (2.7ml) /water (0.300 ml) was added 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine (115 mg, 0.521 mmol) , Na2CO3 (83 mg, 0.781 mmol) and PdCl2 (dppf) (38.1 mg, 0.052 mmol) at ambient temperature. The flask was evacuated and backfilled with nitrogen three times. The reaction mixture was irradiated with microwave radiation at 80℃ for 3 hr under an atmosphere of nitrogen. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 15 mL) . The combined organic layers were washed with water (3 x 15 mL) and brine (3 x 15 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum. The residue was applied onto silica  gel column chromatography with MeOH /CH2Cl2 (1: 10) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C43H49N9O9S2 [M + H] +: 900, found 900；
Step B: N1- (2-aminoethyl) -4- (6-aminopyridin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
To a solution of tert-butyl (2- (4- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (150 mg, 0.167 mmol) in DCM (3 ml) was added TFA (1.00 ml) with stirring at 0℃. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The reaction solution was filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. The mixture was evaporated under reduced pressure. The product was purified byPrep-HPLCwith the following conditions: C Column: XBridge C18 OBD Prep Column,
Figure PCTCN2015082514-appb-000339
5 μm, 19 mm x 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 20％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C14H17N9O4S2 [M + H] +: 440, found 440. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ8.18 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.75 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.53-7.52 (m, 1H) , 6.71-6.68 (m, 1H) , 6.15-6.13 (m, 1H) , 5.99 (brs, 1H) , 3.20-3.17 (m, 2H) , 3.94-3.93 (m, 2H) .
EXAMPLE 488
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000340
Step A: (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate.
To a solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2- {2- [ (4-methoxyphenyl) methyl] -2H-1, 2, 3, 4-tetrazol-5-yl} benzene-1-sulfonamide (3.0g, 0.004 mol) in  DMF (15 mL) were added (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4-mercaptopyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (2.0 g, 0.008 mol) and Cs2CO3 (4.0 g, 0.01 mol) . The resulting mixture was stirred at 20℃ for 1 hr under argon atmosphere. The reaction was then quenched with water (20mL) and extracted with EA (3 x 20mL) . The combined layers were washed with brine (2 x 20mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel chromatography, eluted with 0～50 ％EA in PEto afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC42H47IN6O9S2 [M + H] +: 971, found971； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.06 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.61-7.55 (m, 1H) , 7.21-7.11 (m, 2H) , 6.92-6.68 (m, 10H) , 5.54 (d, J ＝ 14.4 Hz, 1H) , 5.22 (d, J ＝ 14.4 Hz, 1H) , 4.68-4.56 (m, 2H) , 4.18-4.01 (m, 3H) , 3.91-3.48 (m, 3H) , 3.73 (s, 12H) , 2.54-2.15 (m, 2H) , 1.51 (s, 9H) .
Step B: (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate.
Into a 50-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylthio) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (2.5 g, 2.58 mmol) in DCM (15 mL) . This was followed by the addition of m-CPBA (1.77 g, 0.01 mol) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 16 hr under argon atmosphere. The reaction was monitored by LCMS. The reaction was quenched with aqueous Na2SO3 (10％, 50 mL) and extracted with EtOAc (3 x 50 mL) . The combined layers were washed with saturated NaHCO3 (3 x 40 mL) , brine (3 x 40 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EtOAc in Pet. ether (2/1) to afford the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d forC42H47IN6O11S2 [M + H] +: 1003, found1003； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.41-8.38 (m, 1H) , 8.19-8.17 (m, 1H) , 7.21-7.11 (m, 2H) , 6.92-6.58 (m, 10H) , 5.58-5.50 (m, 1H) , 5.30-5.24 (m, 1H) , 4.99-4.80 (m, 1H) , 4.62-4.42 (m, 2H) , 3.98-3.80 (m, 3H) , 3.80-3.68 (m, 14H) , 3.13-3.01 (m, 0.5H) , 2.74-2.65 (m, 0.5H) , 2.55-2.25 (m, 1H) , 1.51 (s, 9H) .
Step C: (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate.
Into a 25-mL round-bottom flask purged and maintained with an inert atmosphere of argon, was placed a solution of (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (700 mg, 0.7 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (51 mg, 0.07 mmol) and 2-aminobenzo [d] thiazol-4-ylboronic acid (339 mg, 1.7 mmol) in dioxane (8mL) . This was followed by the addition of sodium carbonate (222 mg, 2.1 mmol) in water (1.5mL) at ambient temperature. The resulting mixture was stirred at 80℃ for 12 hr under argon atmosphere. The reaction was allowed to cool down to ambient temperature and quenched with water (10 mL) and extracted with EA (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 10 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with DCM/MeOH (10/1) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d forC49H52N8O11S3 [M + H] +: 1025, found1025； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.68-8.65 (m, 1H) , 8.15-8.12 (m, 1H) , 7.53-7.50 (m, 1H) , 6.99-6.95 (m, 4H) , 6.85-6.69 (m, 10H) , 5.03-4.90 (m, 3H) , 4.70-4.61 (m, 2H) , 4.58-4.39 (m, 1H) , 4.08-3.92 (m, 2H) , 3.88-3.80 (m, 2H) , 3.72 (s, 12H) , 3.13-3.01 (m, 0.5H) , 2.74-2.65 (m, 0.5H) , 2.55-2.25 (m, 1H) , 1.51 (s, 9H) .
Step D: (2S, 4R) -tert-butyl 4- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate.
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of (2S, 4R) -1-tert-butyl 2-methyl 4- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) pyrrolidine-1, 2-dicarboxylate (370 mg, 0.36 mmol) in THF (3mL) . This was followed by the addition of DIBAL-H (1.5 mL, 1.5 mmol) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 0℃ for 2 hr under argon atmosphere. The reaction mixture was quenched with saturated ammonium chloride (5 mL) and extracted withEA (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (2 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with 0～70 ％EA in PE to givethe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d forC48H52N8O10S3 [M + H] +: 997, found997； 1H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.68-8.65 (m, 1H) , 8.15-8.12 (m, 1H) , 7.53-7.50 (m, 1H) , 6.99-6.95 (m, 4H) , 6.85-6.69 (m, 10H) , 5.03-4.90 (m, 2H) , 4.70-4.61 (m, 2H) , 4.20-3.90 (m, 4H) , 3.72 (s, 9H) , 3.63-3.45 (m, 4H) , 2.90-2.75 (m, 0.5H) , 2.55-2.25 (m, 1.5H) , 1.51 (s, 9H) .
Step E: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
Into a 25-mL round-bottom flask , was placed a solution of (2S, 4R) -tert-butyl 4- (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4- methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonyl) -2- (hydroxymethyl) pyrrolidine-1-carboxylate (145 mg, 0.15 mmol) in DCM (2 mL) . This was followed by the addition of TFA (1 mL) at 0℃. The resulting mixture was stirred at ambient temperature for 0.5 hr. The solvent was evaporated to give the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C43H44N8O8S3 [M + H] +: 897, found897.
Step F: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
Into a 25-mL round-bottom flask, was placed a solution of3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (3R, 5S) -5- (hydroxymethyl) pyrrolidin-3-ylsulfonyl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (100 mg, 0.110 mmol) in TFA (2 mL, 26.0 mmol) . The resulting mixture was stirred at 80℃ for 1 hr. The reaction was monitored by LCMS. The solvent was evaporated and the residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column 19 x 250mm 10μM； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 25 mL/min； Gradient: 5％B to 35％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under reducing pressure to affordthe title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C19H20N8O5S3 [M + H] +: 537 found537； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.30 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.93 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.69-7.49 (m, 4H) , 6.72 (t, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 6.50 (d, J ＝ 7.6 Hz, 1H) , 5.34-5.26 (m, 1H) , 5.12-5.01 (m, 1H) , 3.81-3.48 (m, 5H) , 2.50-2.48 (m, 1H) , 2.19-2.05 (m, 1H) .
EXAMPLE 489
4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- ( (S) -pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000341
Step A: 1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid.
4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (5.16 g, 20.30 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (1.485 g, 2.030 mmol) and potassium acetate (2.99 g, 30.5 mmol) were added to a stirred mixture of 4-bromo-1H-benzo [d] imidazole (2 g, 10.15 mmol) in dioxane (10 ml) and the mixture was  degassed for 3 times with N2. The reaction mixture was stirred at 80℃overnight. The resulting mixture was cooled down to room temperature, diluted with ethyl acetate (50 mL) , washed with brine (3 x 30 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and filtered. The solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel chromatography, eluting with MeOH/AcOH to give the title compound as an oil: LCMS (ESI) calc’ d for C7H7BN2O2 [M + H] +: 163, found 163； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ9.26 (s, 1H) , 8.07-8.04 (m, 1H) , 7.91-7.89 (m, 1H) , 7.53-7.49 (m, 1H) .
Step B: (S) -tert-butyl 3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate.
(S) -tert-butyl 3- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (300 mg, 0.313 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (45.7 mg, 0.063 mmol) and Na2CO3 (99 mg, 0.938 mmol) were added to a stirred mixture of (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (152 mg, 0.938 mmol) in dioxane (10 ml) and water (2.5 ml) . The reaction mixture was degassed for 3 times with N2, and stirred at 80℃ for 16 hr. The mixture was cooled, diluted with ethyl acetate (30 mL) , washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous Na2SO4, filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel chromatography, eluting with EA/PE (30-90％) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C47H51N9O9S2 [M + H] +: 950, found 950.
Step C: (S) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N1- (pyrrolidin-3-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
(S) -tert-butyl 3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) pyrrolidine-1-carboxylate (220 mg, 0.232 mmol) was added to DCM (3 ml) and TFA (1 ml) at 0℃ and the solution was stirred at room temperature for 1hr. The reaction solution was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. Thereaction solution was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column, 
Figure PCTCN2015082514-appb-000342
5 μm, 19 mm x 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 30％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C18H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found 490； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ9.71 (s, 1H) , 8.54 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.09 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.79- 7.77 (m, 1H) , 7.42-7.38 (m, 1H) , 6.97-6.94 (m, 1H) , 4.17-4.10 (m, 1H) , 3.38-3.26 (m, 2H) , 3.18-3.11 (m, 2H) , 2.14-2.06 (m, 1H) , 1.96-1.87 (m, 1H) .
EXAMPLE 490
N1- (3-aminopropyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000343
Step A: 3- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide.、
3-Iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (1 g, 1.142 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (0.167 g, 0.228 mmol) and Na2CO3 (0.363 g, 3.43 mmol) were added to a stirred mixture of (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid (0.555 g, 3.43 mmol) in dioxane (10 ml) and water (2.5 ml) . The mixture was evacuated and backfilled 3 times with N2, and stirred at 80℃ for 6 hr. The mixture was cooled, diluted with ethyl acetate (30 mL) , washed with brine (3 x 20 mL) , dried (Na2SO4) , filtered and the solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by silica-gel chromatography, eluted with EA/PE (30-90％) to give the title compound as a solid.: LCMS (ESI) calc’ d for C43H47N7O7S2Si [M + H] +: 866, found 866.
Step B: 4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid.
TBAF (1M in THF) (3.00 ml, 3.00 mmol) was added to a stirred mixture of 3- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -6- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzenesulfonamide (650 mg, 0.750 mmol) in THF (10 ml) at 0℃. After the resulting mixture was stirred at 0℃ for 1 hr, it was diluted with ethyl acetate (30 mL) , washed with saturatedaqueous KHSO4 (5 x 30 mL) , dried over anhydrousNa2SO4, then filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure to give the title compound, which was used for the next step directly without further purification: LCMS (ESI) calc’ d for C38H35N7O7S2 [M + H] +: 766, found 766.
Step C: tert-butyl (3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propyl) carbamate.
tert-butyl (3-aminopropyl) carbamate (150 mg, 0.862 mmol) and Et3N (0.160 ml, 1.149 mmol) were added to a stirred, mixture of 4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (220 mg, 0.287 mmol) in THF (20 ml) at 0℃. The resulting mixture was stirred at 0℃ for 5 min and then NCS (77 mg, 0.575 mmol) was added. After the resulting mixture was stirred at 0℃ for 16 hr, it was diluted with ethyl acetate (40 mL) , washed with brine (3 x 30 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and filtered. The filtrate was evaporated under reduced pressure and the residue was purified by silica-gel chromatography, eluted with EA/PE (0-80％) to givethe title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O9S2 [M + H] +: 938, found 938.
Step D: N1- (3-aminopropyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
tert-butyl 3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) propylcarbamate (220 mg, 0.235 mmol) was added to DCM (3 ml) and TFA (1 ml) at 0℃ and the solution was stirred at room temperature for 1hr. The reaction solution was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. Thereaction solution was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge C18 OBD Prep Column, 
Figure PCTCN2015082514-appb-000344
5 μm, 19 mm x 250 mm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 5％B to 30％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were concentrated under vacuum to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C18H19N9O4S2 [M + H] +: 478, found 478； 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ9.75 (s, 1H) , 8.51 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.07 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.82-7.76 (m, 1H) , 7.41-7.37 (m, 1H) , 6.95-6.93 (m, 1H) , 3.14-3.11 (m, 2H) , 2.79-2.85 (m, 2H) , 1.87-1.80 (m, 2H) .
EXAMPLE 491
N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000345
Step A: tert-butyl (2- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate.
To a solution of tert-butyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (300 mg, 0.321 mmol) in dioxane (6 ml) and water (2 ml) was added Na2CO3 (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) boronic acid and Pd (dppf) Cl2with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred for overnight. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (10 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x20 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to afford a residue. The residue was purified by silica gel column chromatography20 g, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C45H49N9O9S2 [M + H] +: 924, found 924.
Step B: N1- (2-aminoethyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
To a solution of tert-butyl (2- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate inDCM (2 ml) was added TFA (0.5 ml) with stirring at room temperature. After the resulting solution was stirred at room temperature for 1 hr, it was concentrated under vacuum to afford yellowoil. To the yellow oil was added TFA (2 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 1 hr. The resulted solution was concentrated under vacuum to afford a residue. The residue was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile  Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 25％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C16H17N9O4S2 [M + H] +: 464, found 464； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ9.43 (s, 1H) , 8.70 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.10-8.08 (m, 1H) , 7.81 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.54 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.25-7.24 (m, 1H) , 3.46-3.41 (m, 2H) , 3.24-3.20 (m, 1H) .
EXAMPLE492
N1- ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000346
Step A: tert-butyl ( (1r, 3r) -3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) cyclobutyl) carbamate.
tert-Butyl ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutyl) carbamate (107 mg, 0.575 mmol) andEt3N (0.160 ml, 1.149 mmol) were added to a stirred, cooled 0℃ mixture of 4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (0.19 mmol) inTHF (10 ml) and the mixture was stirred at 0℃ for 5 min. To the resulting reaction mixture, NCS (77 mg, 0.575 mmol) was added, and the mixture was stirred at 0℃ for 16 hr. The mixture was cooled, diluted with ethyl acetate (30 mL) , washed with brine (3 x 30 mL) , dried over anhydrous Na2SO4 and filtered. The solvent was evaporated under reduced pressure. The residue was purified by column chromatography on silica gel Isolute Flash Si； 10 g prepacked, eluting with EA/PE (0-80％) to give the title compound as a solid.: LCMS (ESI) calc’ d for C46H51N9O9S2 [M + H] +: 950, found 950.
Step B: N1- ( (1r, 3r) -3-aminocyclobutyl) -4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -3- (2H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide.
tert-butyl ( (1r, 3r) -3- (4- (1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) cyclobutyl) carbamate (230 mg, 0.242 mmol) was added to DCM (3 ml) and TFA (1 ml) at 0℃ and the solution was stirred at room temperature for 1hr. The reaction  solution was evaporated under reduced pressure. To the residue was added TFA (4 ml) and the mixture was stirred at 80℃ for 1hr. Thereaction solution was evaporated under reduced pressure. The crude product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 23％B in 8 min； 254 nm. The collected fractions were concentrated under vacuum to afford the title compound as asolid: LCMS (ESI) calc’ d for C17H19N9O4S2 [M + H] +: 490, found 490； 1H NMR (400 MHz, MeOD) : δ9.43 (s, 1H) , 8.65 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 8.07 (d, J ＝ 8.0 Hz, 1H) , 7.81 (d, J ＝8.0 Hz, 1H) , 7.56-7.52 (m, 1H) , 7.26 (d, J ＝ 7.2 Hz, 1H) , 4.45-4.41 (m, 1H) , 3.85-3.83 (m, 1H) , 2.59-2.47 (m, 4H) .
EXAMPLE 493
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -2, 3-diaminopropylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000347
Step A: (isobutyl carbonic) (S) -10, 10-dimethyl-3, 8-dioxo-1-phenyl-2, 9-dioxa-4, 7-diazaundecane-6-carboxylic anhydride.
A solution of (S) -10, 10-dimethyl-3, 8-dioxo-1-phenyl-2, 9-dioxa-4, 7-diazaundecane-6-carboxylic acid (20 g, 59 mmol) , isobutyl carbonochloridate (9.6g, 71mmol) and 4-methylmorpholine (7.2g, 71 mmol) in THF (200 ml) was stirred at 0℃ for 6 hr. The reaction mixture was filtered, the filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil.
Step B: benzyl tert-butyl (3-hydroxypropane-1, 2-diyl) dicarbamate
A solution of (isobutyl carbonic) (S) -10, 10-dimethyl-3, 8-dioxo-1-phenyl-2, 9-dioxa-4, 7-diazaundecane-6-carboxylic anhydride (15 g, 34 mmol) and NaBH4 (5 g, 136mmol) in THF (100 ml) was stirred at room temperaturefor 2 hr. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x 100mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x30 mL) and brine (2 x 30mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was  purified by silica gel chromatography, eluted with methanol/dichloromethane (1/20) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as an oil.； LCMS (ESI) calc’ d for C16H24N2O5 [M + H] +: 325, found 325
Step C: (S) -3- (benzyloxycarbonylamino) -2- (tert-butoxycarbonylamino) propyl methanesulfonate.
MsCl (2.38 ml, 30 mmol) was added in dropwise to a stirred solution of benzyl tert-butyl (3-hydroxypropane-1, 2-diyl) dicarbamate (8.2 g, 25 mmol) and TEA (10.4 ml, 75 mmol) in Dichloromethane (100 ml) at 0℃ and stirred at room temperature for 2 hr. The reaction mixture was quenched with water (50 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x 100mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x30 mL) and brine (2 x 30mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/25) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C17H26N2O7S [M + H] +: 403, found 403
Step D: (S) -S-3- (benzyloxycarbonylamino) -2- (tert-butoxycarbonylamino) propyl ethanethioate
Asolutionof (S) -3- (benzyloxycarbonylamino) -2- (tert-butoxycarbonylamino) propyl methanesulfonate (8.0 g, 20 mmol) and potassium ethanethioate (9.1 g, 80 mmol) in DMF (80 ml) was stirred at 80℃ for 16 hr. The reaction mixture was quenched with water (100 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x 100 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 30mL) and brine (2 x 30mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel column chromatography, eluting with ethyl acetate/petroleum ether (1/9) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to givethe title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C18H26N2O5S [M + H] +: 383, found 383
Step E: benzyl tert-butyl (3-mercaptopropane-1, 2-diyl) dicarbamate.
Asolutionof (S) -S-3- (benzyloxycarbonylamino) -2- (tert-butoxycarbonylamino) propyl ethanethioate (6.3 g, 16.4 mmol) and K2CO3 (4.5 g, 32.4 mmol) in Methanol (60 ml) was stirred at room temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with water (100 mL) , and extracted with ethyl acetate (3 x25 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 20mL) and brine (2 x 20mL) , dried over anhydrous sodium sulfate  and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as an oil. LCMS (ESI) calc’ d for C16H24N2O4S [M + H] +: 341, found 341
Step F: (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propane-1, 2-diyl) dicarbamate.
A solution of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (4 g, 5 mmol) , benzyl tert-butyl (3-mercaptopropane-1, 2-diyl) dicarbamate (3.4 g, 10 mmol) and Cs2CO3 (4.8 g, 15 mmol) in DMF (40 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with water (30 mL) , diluted with water (80 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 30 mL) and brine (2 x 30 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give the title compound as asolid. LCMS (ESI) calc’ d for C47H52IN7O9S2 [M + H] +: 1050, found 1050
Step G: (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propane-1, 2-diyl) dicarbamate
A solution of (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) propane-1, 2-diyl) dicarbamate (4.8 g, 4.5 mmol) and m-CPBA (3.1 g, 18 mmol) in dichloromethane (50 ml) was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction mixture was quenched with Na2SO3 (50 mL) , diluted with water (50 mL) and extracted with dichloromethane (3 x 50 mL) . The combined organic layers were washed with water (2 x 20 mL) and brine (2 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 20 g prepacked column chromatography, eluting with EA/DCM (7/3) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C47H52IN7O11S2 [M + H] +: 1082, found 1082
Step H: (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propane-1, 2-diyl) dicarbamate
A solution of (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propane-1, 2-diyl) dicarbamate (1 g, 0.9 mmol) , 2-aminobenzo [d] thiazol-4-ylboronic acid (0.245 g, 1.4 mmol) , Pd (PPh3) 4 (0.491 g, 0.18 mmol) and Na2CO3 (0.286 g, 2.7 mmol) in 1, 4-dioxane (15 ml) and water (3 ml) was stirred at 80℃ for 3 hr under argon. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The residue was purified by silica gel Isolute Flash Si； 50 g  prepacked column chromatography, eluting with methanol/dichloromethane (1/10) . The combined organic fractions were concentrated under reduced pressure to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C54H58N10O11S2 [M + H] +: 1087, found 1087
Step I: methyl (S) -3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (2, 3-diaminopropyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide.
A solution of (S) -benzyl tert-butyl (3- ( (4- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propane-1, 2-diyl) dicarbamate (200 mg, 0.184 mmol) in HCl (15 ml, 0.180 mol) was stirred at 70℃ for 6 hr. The reaction mixture was concentrated under vacuum to give crude product. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: X Bridge C18, 19*150 mm, 5 μM； Mobile Phase A: water/0.05％ACOH Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 30％B to 70％B in 10 min； 254 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to givethe title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C17H20N10O4S2 [M + H] +: 492, found 492
EXAMPLE 494
4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000348
Step A: (S) -tert-butyl (1- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate
Into a 25 mL round bottom flask was placed (S) -tert-butyl (1- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (400 mg, 0.429 mmol) , 3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzene-1, 2-diamine (201 mg, 0.858 mmol) , Pd (PPh3) 4 (99 mg, 0.086 mmol) and Na2CO3 (136 mg, 1.286 mmol) in 1, 4-dioxane (1.2 ml) and water (0.40 ml) . Theresulting mixture was evacuated and backfilled with nitrogen 3 timesand stirred at 80℃ for 16hr. Then  the mixture was diluted with EA (200 mL) and washed with water (3 x 50 mL) . The organic layer was collected and washed with sat. NaCl (3 x 50 mL) and dried over anhydrous Na2SO4. Then the mixture was filtrated with the filtrate collected and concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with EA/PE (1/1) to give the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C45H52N8O9S2 [M + H] +: 913, found 913；
Step B: (S) -ethyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate.
Ethyl 2, 2, 2-triethoxyacetate (221.9 mg, 1.02 mmol) was added dropwise to a solution of (s) -tert-butyl (1- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) propan-2-yl) carbamate (300 mg, 0.328 mmol) in EtOH (5 ml) at 0℃. The mixture was evacuated and backfilled with nitrogen 3 timesand stirred at 80℃ for 16hr. The reaction progress was monitored by LCMS. When the reaction was completed, it was concentrated under vacuum. The residue was applied on a silica gel column with EA/PE (1/1) to give the title compound as a solid.: LCMS (ESI) calc’ d for C49H54N8O11S2 [M + H] +: 995, found 995.
Step C: ethyl 4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate
Into a 25 mL round bottom flask was placed ethyl 4- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (S) -2- (tert-butoxycarbonylamino) propylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (250 mg, 0.25 mmol) in DCM (3 mL) and TFA (1.5 mL) . Then the mixture was stirred at r.t. for 1hr. Then the solvent was removed under vacuum to give the title compound as anoil. The crude product was used for next step without purification. LCMS (ESI) calc’ d for C36H38N8O8S2 [M + H] +: 775, found 775.
Step D: ethyl 4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate.
Into a 25 mL round bottom flask was placed ethyl 4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (N- (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (120 mg, 0.155 mmol) in TFA (2.0 mL) . Then the mixture was stirred at 80℃for 1hr. Then the solvent was removed under vacuum to give the title compound as a solid. The crude product was used for next step without futher purification. LCMS (ESI) calc’ d for C20H22N8O6S2 [M + H] +: 535, found 535.
Step E: 4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylic acid.
A solution of LiOH (16 mg, 0.67 mmol) in water (0.6 mL) was added dropwise to a stirred solution of ethyl 4- (4- ( (S) -2-aminopropylsulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-benzo [d] imidazole-2-carboxylate (90 mg, 0.17 mmol) in 1, 4-dioxane (3 mL) . Then the mixture was stirred for 4hr. Then solvent was removed. The residue was dissolved in DMF (5 mL) and applied on Prep-HPLC (Condition: Column: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Column 19×150mm 5μM 13nm； Mobile Phase A: water with 10mmolNH4HCO3, Mobile Phase B: ACN； Flow rate: 20 mL/min； Gradient: 3％B to 25％B in 8 min； 254 nm ) to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C18H18N8O6S2 [M + H] +: 507, found 507；
1H NMR (300 MHz, d-CD3OD) : δ8.42 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.95 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.46 (d, J ＝ 8.1 Hz, 1H) , 7.05 (t, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 6.72 (d, J ＝ 7.5 Hz, 1H) , 4.27-4.01 (m, 3H) , 1.49 (d, J ＝ 6.6 Hz, 3H) .
EXAMPLE 495
3- (2-amino-4-cyano-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000349
Step A: tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-cyano-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
A suspension of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (200 mg, 0.221 mmol) , cesium carbonate (216 mg, 0.663 mmol) , 2, 3-diamino-4-bromobenzonitrile (56.2 mg, 0.265 mmol) and 2nd generation Xphos precatalyst (34.8 mg, 0.044 mmol) in dioxane (4ml) and water (1.0 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 40g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 924.54.
Step B: tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-7-cyano-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) -carbamate
To a 5 mL microwave tube was added a solution of tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'-cyano-2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (100 mg, 0.108 mmol) and cyanic bromide (11.46 mg, 0.108 mmol) in methanol (5 ml) and water (1.00 ml) . The mixture was stirred at 80℃ for 2hr. The solvent was removed in vacuum and the residue was purified by columnchromatography (ISCO RediSep Gold column 24 g) using 0-20％methanol/DCM as mobile phase to get the desired product. LC/MS (M+H) +: 949.31.
Step C: 3- (2-amino-4-cyano-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl (2- ( (4- (2-amino-7-cyano-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) -carbamate (20 mg, 0.021 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (22.9 μl, 0.211 mmol) and TFA (160 μl, 2.11 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 0.5 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 1mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％ acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+H) +: 489.22.
EXAMPLE 496
3- (2-amino-5-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000350
The title compound was prepared according to the general procedure described above for 3- (2-amino-4-cyano-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, EXAMPLE 495, using (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (2- (4- methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acidand (3- (N, N-Bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (1- (tert-butoxycarbonyl) azetidin-3-yl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) boronic acid (REFERENCE EXAMPLE 7) and 7-bromo-5-fluoro-1H-benzo [d] imidazol-2-amine (REFERENCE EXAMPLE 52) . LC/MS [M+H] +482.08.
EXAMPLE 497
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-indazol-7-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000351
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (500 mg, 0.537 mmol) , sodium carbonate (171 mg, 1.61 mmol) , 7- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) -1H-indazole (262 mg, 1.074 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) Pd (0) (62 mg, 0.054 mmol) in dioxane (4 ml) and water (1.0 ml) was degassed and heated at 120℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel chromatography 40g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 921.60.
Step B: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-indazol-7-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (1H-indazol-7-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (240 mg, 0.261 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (280 μl, 2.6 mmol) and TFA (2 ml, 26.1 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 2 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 1mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+H) +: 461.22.
The following EXAMPLES 498-500 were prepared according to the general procedure described above for 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (1H-indazol-7-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide, EXAMPLE 497, usingtert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate or tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylateand tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and boronic acids or boronic esters that are commercially available, known, or prepared as described herein.
Figure PCTCN2015082514-appb-000352
EXAMPLE 501
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2-oxo-2, 3-dihydro-1H-imidazo [4, 5-c] pyridin-7-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000353
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (4, 5-diaminopyridin-3-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (200 mg, 0.215 mmol) , sodium carbonate (68.3 mg, 0.645 mmol) , (4, 5-diaminopyridin-3-yl) boronic acid (65.7 mg, 0.430 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) Pd (0) (24.83 mg, 0.021 mmol) in dioxane (4ml) and water (1.0 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 40g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 912.60.
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2-oxo-2, 3-dihydro-1H-imidazo [4, 5-c] pyridin-7-yl) phenyl) sulfonyl) -azetidine-1-carboxylate
To a 5 mL microwave tube added a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (4, 5-diaminopyridin-3-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (18mg, 0.020 mmol) and di (1H-imidazol-1-yl) methanone (3.20 mg, 0.020 mmol) in toluene (5 ml) . The mixture was stirred at 80℃ for 2hr. The solvent was removed in vacuum and the residue was purified by column chromatography (ISCO RediSep Gold column 24g) using 0-20％methanol/DCM as mobile phase to get the desired product. LC/MS (M+H) +: 938.68.
Step C: 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2-oxo-2, 3-dihydro-1H-imidazo [4, 5-c] pyridin-7-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2-oxo-2, 3-dihydro-1H-imidazo [4, 5-c] pyridin-7-yl) phenyl) sulfonyl) -azetidine-1-carboxylate (15mg, 0.016 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (17.38 μl, 0.160 mmol) and TFA (123 μl, 1.6 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 0.5 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the  volatile, the residue was dissolved in 1mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+H) +: 478.25.
EXAMPLE 502
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000354
Step A: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
A suspension of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (200 mg, 0.215 mmol) , sodium carbonate (68.3 mg, 0.645 mmol) , (2, 3-diaminopyridin-4-yl) boronic acid (65.7 mg, 0.430 mmol) and tetrakis (triphenylphosphine) Pd (0) (24.83 mg, 0.021 mmol) in dioxane (4ml) and water (1.0 ml) was degassed and heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 40g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 912.72.
Step B: tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
To a 5 mL microwave tube was added a solution of tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2, 3-diaminopyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (82mg, 0.090 mmol) and di (1H-imidazol-1-yl) methanimine (14.5 mg, 0.090 mmol) in toluene (5 ml) . The mixture was stirred at 100℃ for 2hr. The solvent was removed in vacuum and the residue was purified by columnchromatography (ISCO RediSep Gold column 24 g) using 0-20％methanol/DCM as mobile phase to get the desired product. LC/MS (M+H) +: 938.60.
Step C: 3- (2-amino-3H-imidazo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-amino-3H-imidazo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (40mg, 0.043 mmol) in DCM (200 μl) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (46.4 μl, 0.427 mmol) and TFA (329 μl, 4.27 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 0.5 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1.0 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 1mL of DMSO and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product. LC/MS (M+H) +: 478.19.
EXAMPLE 503
3- (2-amino-1H-imidazo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000355
The title compound was prepared in an analogous fashion to that described for 3- (2-amino-3H-imidazo [4, 5-b] pyridin-7-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 502) starting from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and (2, 3-diaminopyridin-4-yl) boronic acid. LC/MS [M+H] +466.28.
EXAMPLE 504
5- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (1H-tetrazol-5-yl) phenyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylic acid
Figure PCTCN2015082514-appb-000356
Step A: methyl 5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylate
A suspension of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (5, 5-dimethyl-1, 3, 2-dioxaborinan-2-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (200 mg, 0.221 mmol) , cesium carbonate (216 mg, 0.663 mmol) , 2nd generation Xphos precatalyst (34.8 mg, 0.044 mmol) , and 5-bromo- [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylic acid (64.2 mg, 0.265 mmol) in dioxane (4.0 ml) and water (1.0 ml) was degassed and heated at 120℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc, washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The crude was chromatographed via silica gel (ISCO, 40g column, 0-20％MeOH in DCM) to give the desired product. LC/MS (M+H) +: 968.52.
Step B: 5- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylic acid
A solution of methyl 5- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylate (38 mg, 0.039 mmol) in DCM (200 μL) was concentrated in vacuum. The residue was dissolved in anisole (43 μl, 0.39 mmol) and TFA (0.3 ml, 4 mmol) at 0℃. After stirring at rt for 0.5 hr, the volatile was removed in vacuo. The residue was dissolved in 1 mL of TFA and stirred at 80℃ for 1 hr. After removing the volatile, the residue was dissolved in 1 mL of methanol and purified by reverse phase HPLC directly (3-60％acetonitrile in water) to give the product methyl 5- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) - [1, 2, 4] triazolo [1, 5-a] pyridine-2-carboxylate, which was dissolved in dioxane (2 mL) and water (1 mL) , and treated with LiOH (0.385 mg, 0.016 mmol) at rt for overnight to give the product. LC/MS (M+H) +: 494.16.
EXAMPLE 505
6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000357
Step A: tert-butyl (2- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
A suspension of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (11.5 g, 12.52 mmol) , 2-nitro-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) aniline (9.92 g, 37.5 mmol) , tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (1.446 g, 1.252 mmol) and sodium carbonate (3.98 g, 37.5 mmol) in a mixture solvent of dioxane (100 ml) and water (30 ml) was degassed and heated at 80 ℃ for 17 hr. The mixture was diluted with AcOEt, then washed with brine. The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated. The residue was purified by silica gel chromatography (0-60％the 60％EtOAc in Hexane) to give a mixture of tert-butyl (2- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate. LCMS [M+1] +: 899.59, 929.57.
Step B: tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
A mixture of tert-butyl (2- ( (3'-amino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -2'-nitro- [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (3.5 g, 3.77 mmol) and platinum (iv) oxide (0.086 g, 0.377 mmol) in MeOH (50 ml) was hydrogenated at room temperature on a shaker at 50 Psi H2 overnight. The catalyst was filtered off through a celite pad and the filtrated was concentrated. LCMS [M+1] +: 899.60
Step C: tert-butyl (2- ( (2'-amino-3'- (2- ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) acetamido) -3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a solution of tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.3 g, 0.334 mmol) , 2- ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) acetic acid (0.070 g, 0.334 mmol) and EDC (0.096 g, 0.501 mmol) in DCM (25 ml) was added DMAP (0.045 g, 0.367 mmol) at room temperature. The mixture was stirred at room temperature overnight, washed with KHSO4 aqueous and brine, dried (MgSO4) and concentrated. The crude material was directly used in the next step. LCMS [M+1] +: 1090.66.
Step D: tert-butyl (2- ( (4- (2- ( ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) methyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
tert-butyl (2- ( (2'-amino-3'- (2- ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) acetamido) -3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.36 g, 0.33 mmol) in AcOH (20 ml) was heated at 80℃ for 1 hr. The mixture was concentrated. The crude material was directly used in the next step. LCMS [M+1] +: 1072.70.
Step E: 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
tert-Butyl (2- ( (4- (2- ( ( ( (benzyloxy) carbonyl) amino) methyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamatewas dissolved in DCM (10 ml) , and stirred with TFA (3 ml) at room temperature for 1 hr. The solution was concentrated under vacuum, and the residue was heated at 80℃ in TFA (5 ml) for 1 hr. Volatiles were evaporated under reducedpressure, and the crude material was purified by reverse phase HPLC (3-37％water in acetonitrile with 0.05％TFA) . LCMS [M+1] +: 478.26.
The EXAMPLES 506-507 in tablebelow were synthesized using the procedure described above for 6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (2- (aminomethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 505) , starting from tert-butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (Step B) and commercially available carboxylic acids.
Figure PCTCN2015082514-appb-000358
EXAMPLE 508
6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) -3- (2- (trifluoromethyl) -1H-benzo [d] imidazol-4-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000359
tert-Butyl (2- ( (2', 3'-diamino-3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -4-yl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.17 g, 0.189 mmol) and TFA (0.029 ml, 0.378 mmol) in 4 N HCl (15 ml) were heated at 90℃ overnight. The mixture was concentrated, and the residue was purified by reverse phase HPLC (10-50％water in acetonitrile with 0.05％TFA) . LCMS 517.25.
EXAMPLE 509
6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (2-hydroxybenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000360
A mixture of sodium hydroxide (0.181 ml, 0.181 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (2- ( (2- (trimethylsilyl) ethyl) sulfonyl) benzo [d] thiazol-4-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (0.1 g, 0.091 mmol) and methyl 2-aminoacetate (0.024 g, 0.272 mmol) in MeOH (3 ml) was heated in microwave oven at 150℃ for 1 hr. The mixture was cooled to rt, diluted with EtOAc, and washed with KHSO4. The organic layer was dried over MgSO4 and concentrated. LCMS [M+1] +: 954.49.
The residue was dissolved in DCM (4 ml) , and stirred at rt for 1 hr with 2ml TFA and two drops anisole, and concentrated under reduced pressure. The residue was heated at 80℃ in 2 ml TFA for 60 min. Volatiles were removed under vacuum, and the crude material was purified byreverse phase HPLC (10-50％AcCN in water with 0.05％TFA) . LCMS 494.15.
EXAMPLE 510
3- (2'-Amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000361
Step A: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
2-Chloro-4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridine (425 mg, 1.773 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (1500 mg, 1.611 mmol) , sodium carbonate (342 mg, 3.22 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (118 mg, 0.161 mmol) were placed in a reaction vial. Dioxane (12.1 mL) and water (4.0 mL) were added. The reaction mixture was degassed and then heated at 80℃ for 12 hr. LC-MS showed the completion of the reaction. The reaction mixture was then purified by column chromatography (0-75％EtOAc/hexane) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 916.6.
Step B: tert-Butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-butyl (3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-yl) carbamate (57.6 mg, 0.180 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1- carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (150 mg, 0.164 mmol) , sodium carbonate (34.7 mg, 0.327 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (11.98 mg, 0.016 mmol) were placed in a reaction vial and Dioxane (1228 μl) and water (409 μl) were added. The reaction was degassed and then heated at 80℃ for 12 hr. The reaction mixture was purified by silica gel column chromatography (0-10％MeOH/EtOAc) to give tert-butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 974.
Step C: 3- (2'-Amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2'-Amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Example 1, Step C and D) from tert-butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2'-amino- [2, 3'-bipyridin] -4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 514.4.
EXAMPLE 511
3- (2'-amino- [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000362
Step A: tert-Butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate
tert-Butyl (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-yl) carbamate (57.6 mg, 0.180 mmol) , tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2-chloropyridin-4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate (Example 10, Step A) (150 mg, 0.164 mmol) , sodium carbonate (34.7 mg, 0.327 mmol) , Pd (dppf) 2Cl2 (11.98 mg, 0.016 mmol) were placed in a recation vial. Dioxane (1228 μl) and water (409 μl) were added. The reaction mixture was degassed and heated at 80℃ for 1 hr. The reaction mixture was cooled and purified by silica gel column chromatography (0-75％EtOAc/hexane) to give tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 1074.7.
Step B: 3- (2'-Amino- [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2'-Amino- [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Example 1, Steps C and D) from tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- (2'- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) - [2, 4'-bipyridin] -4-yl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) azetidine-1-carboxylate. LC-MS [M+H] +: 514.3.
EXAMPLE 512
(S) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000363
Step A: tert-Butyl (S) - (2-amino-3-hydroxypropyl) carbamate
To a solution of (S) -2-amino-3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid (888 mg, 4.35 mmol) in THF (1.67E+04 μl) , was added a solution of BH3 . THF (13 mL, 13.04 mmol) . The resulting mixture was stirred at 70℃ for 1 hr and then cooled to rt. The reaction was quenched by dropwise addition of MeOH, and the mixture was stirred with Celite and then filtered. The filtrates were concentrated to dryness. The residue was redissolved in MeOH, passed through an Agilent scx ion exchange cartridge. The cartridge was washed with ammonia MeOH solution. The eluents were concentrated to give an oil, which was lypholized from CH3CN/water to give tert-butyl (S) - (2-amino-3-hydroxypropyl) carbamate.
Step B: tert-Butyl (S) - (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate
2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid and 2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfinic acid (4.25 g, 5.48 mmol) was dissolved in THF (54.8 ml) and cooled to 0℃. NCS (1.464 g, 10.96 mmol) was added as solid. The mixtutre was kept at 0℃ for 1 hr. The reaction mixture was used directly for the next step. To 18 mL of the above reaction mixture was added (S) -tert-butyl (2-amino-3-hydroxypropyl) carbamate (381 mg, 2.002 mmol) and DIEA (699 μl, 4.00 mmol) . The mixture was stirred at rt under N2 for 12 hr. The reaction mixture was concentrated and redissolved in MeOH, and purified by column chromatography (0-70％EtOAc/Hexane) to give tert-Butyl (S) - (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 964.5.
Step C: tert-Butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate
(2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (127 mg, 0.656 mmol) , tert-butyl ( (2S) -2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate (527 mg, 0.547 mmol) , sodium carbonate (116 mg, 1.094 mmol) , Pd (dppf) Cl2 (40.0 mg, 0.055 mmol) were placed in a recation vial. Dioxane (4101 μl) and water (1367 μl) were added. The reaction mixture was degassed and heated at 80℃ for 12 hr. The reaction mixture was purified by silica gel column chromatography (0-15％meOH/EtOAc) to give tert-butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 986.7.
Step D: (S) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
(S) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide was prepared in a similar fashion to the synthesis of 6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -3- (imidazo [1, 2-a] pyridin-8-yl) -2- (1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (Example 1, Steps C and D) from give tert-butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate and tert-butyl (S) - (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonamido) -3-hydroxypropyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 526.4.
EXAMPLE 513
(R) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000364
(R) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide was prepared in an analogous way to the synthesis of (S) -N1- (1-amino-3-hydroxypropan-2-yl) -4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide (EXAMPLE 512) by using (R) -2-amino-3- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) propanoic acid. LC-MS [M+H] +: 526.4.
EXAMPLE 514
4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -N1- (2- (2-aminoethoxy) ethyl) -3- (1H-tetrazol-5-yl) benzene-1, 2-disulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000365
The title compound was prepared in an analogous way to the synthesis of EXAMPLES 182-224 by using tert-butyl (2- (2-aminoethoxy) ethyl) carbamate. LC-MS [M+H] +: 540.
EXAMPLE 515
2-amino-N- (2-aminoethyl) -4'- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -5'-sulfamoyl-6'- (2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-3-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000366
Step A: methyl 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzoate
To a solution of methyl 2-amino-3-bromobenzoate (15 g, 65.2 mmol) in dioxane (150 ml) was added2nd Generation PCy3 catalyst (11.55 g, 19.56 mmol) , 4, 4, 4', 4', 5, 5, 5', 5'-octamethyl-2, 2'-bi (1, 3, 2-dioxaborolane) (33.1 g, 130 mmol) and potassium acetate (19.20 g, 196 mmol) with stirring at room temperature. The mixture was evacuated and backfilled with nitrogen 3 timesand stirred at 80℃ for 16hr. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (200 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 200 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 500 mL) , dried over anhydrous sodiumsulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuumand the residue was purified by silica gel column chromatography 120 g, eluted with EtOAc/petroleum ether (1/20) to afford the title compound as an oil: 1H NMR (300 MHz, CDCl3) : δ7.97 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) , 7.79 (d, J ＝ 6.3 Hz, 1H) , 6.58-6.53 (m, 1H) , 3.85 (s, 3H) , 1.34 (s, 12H) .
Step B: methyl 2-amino-5'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (N- (2- (tert-butoxycarbonylamino) ethyl) sulfamoyl) -6'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-3-carboxylate
To a solution of tert-butyl (2- (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenylsulfonamido) ethyl) carbamate (850 mg, 0.910 mmol) in dioxane (20 ml) and water (7 ml) was added Pd (PPh3) 4 (210 mg, 0.182 mmol) , methyl 2-amino-3- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) benzoate (757 mg, 2.73 mmol) and Na2CO3 (289 mg, 2.73 mmol) with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to 80℃ and stirred overnight. The reaction mixture was cooled down to ambient temperature, diluted with water (50 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 50 mL) . The  combined organic layers were washed with brine (3 x 100 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuum and the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with ethyl acetate/petroleum ether (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C46H52N8O11S2 [M + H] +: 957, found 957.
Step C: 2-amino-5'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (N- (2- (tert-butoxycarbonylamino) ethyl) sulfamoyl) -6'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) biphenyl-3-carboxylic acid
To a solution of methyl 2-amino-3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (N- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxylate (600 mg, 0.627 mmol) in THF (3.00 ml) and MeOH (3 ml) was added sodium hydroxide with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to room temperature and stirred overnight. The pH value of the action solution was adjusted to 4 with hydrochloric acid (20 ％) . The mixture was filtered and the filtrate was washed with water to give crude title compound as a solid, which was used in the next reaction directly without further purification. LCMS (ESI) calc’ d for C45H50N8O11S2 [M + H] +: 943, found 943.
Step D: tert-butyl N- [2- ( { [ (4- {2-amino-3- [ (2- { [ (tert-butoxy) carbonyl] amino} ethyl) carbamoyl] phenyl} -2- {bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] sulfamoyl} -3- [ (2E, 4E) -11-methoxy-2, 4, 5, 6-tetraazabicyclo [6.3.1] dodeca-1 (11) , 2, 4, 8 (12) , 9-pentaen-3-yl] phenyl) - {3} -oxidane] sulfinyl} amino) ethyl] carbamate
To a solution of 2-amino-3'- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4'- (N- (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfamoyl) -2'- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxylic acid (500 mg, 0.530 mmol) , HATU (302 mg, 0.795 mmol) and tert-butyl (2-aminoethyl) carbamate (340 mg, 2.121 mmol) in DMF (2 ml) was added DIEA (0.139 ml, 0.795 mmol) with stirring at 0℃. The resulted solution was degassed with nitrogen for 3 times and then was warmed to 0℃ and stirred for 4 hr. The reaction solution was cooled down to ambient temperature, diluted with water (5 mL) and extracted with ethyl acetate (3 x 10 mL) . The combined organic layers were washed with brine (3 x 20 mL) , dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. The filtrate was concentrated under vacuumand the residue was purified by silica gel column chromatography, eluted with EtOAc/isohexane (1/1) to afford the title compound as a solid: LCMS (ESI) calc’ d for C52H64N10O12S2 [M + H] +: 1085, found 1085.
Step E: 2-amino-N- (2-aminoethyl) -4'- (N- (2-aminoethyl) sulfamoyl) -3'-sulfamoyl-2'- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-carboxamide
To a solution of tert-butyl N- [2- ( { [ (4- {2-amino-3- [ (2- { [ (tert-butoxy) carbonyl] amino} ethyl) carbamoyl] phenyl} -2- {bis [ (4-methoxyphenyl) methyl] sulfamoyl} - 3- [- (2E, 4E) -11-methoxy-2, 4, 5, 6-tetraazabicyclo [6.3.1] dodeca-1 (11) , 2, 4, 8 (12) , 9-pentan-3-yl] phenyl) - {3} -oxidane] sulfinyl} amino) ethyl] carbamate (300 mg, 0.276 mmol) in DCM (5 ml) was added TFA (1 ml) with stirring at room temperature. The resulting mixture was warmed to room temperature and stirred for 1 hr. The solution was concentrated under vacuum to afford yellowoil. To the yellow solid was added TFA (5 ml) with stirring at room temperature. The resulted solution was warmed to 80℃ and stirred for 1 hr. The solution was concentrated under vacuum to afford a residue. The product was purified by Prep-HPLC with the following conditions: Column: XBridge Prep C18 OBD Column 19 x 250mm 10μM； Mobile Phase A: water with 10mmol NH4HCO3, Mobile Phase B: MeCN； Flow rate: 25 mL/min； Gradient: 5％B to 30％B in 8 min； 254/220 nm. The collected fractions were combined and concentrated under vacuum to give the title compound as a solid. LCMS (ESI) calc’ d for C45H50N8O11S2 [M + H] +: 525, found 525； 1H NMR (400 MHz, CD3OD) : δ8.64 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.97 (d, J ＝ 8.4 Hz, 1H) , 7.85 (d, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 7.07 (d, J ＝ 6.4 Hz, 1H) , 6.39-6.97 (m, 1H) , 3.73-3.69 (m, 2H) , 3.68-3.66 (m, 2H) , 3.21-3.18 (m, 2H) .
EXAMPLE516
3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (R) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000367
The title compound was prepared in an analogous fashion as described for 3- (2-amino-1H-benzo [d] imidazol-4-yl) -6- ( (S) -3-amino-2-hydroxypropylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (EXAMPLE 473) starting from (R) -tert-butyl (3- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) -2-hydroxypropyl) carbamate, prepared as described in EXAMPLES 472 and 473, Steps A-H, except starting from (R) -3-aminopropane-1, 2-diol. LC/MS [M+H] +494.
EXAMPLE517
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000368
Step A: tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate
To a suspension of tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate (0.55 g, 0.599 mmol) , (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) boronic acid (0.348 g, 1.796 mmol) , was added tetrakis (triphenylphosphine) palladium (0) (0.069 g, 0.060 mmol) and sodium carbonate (0.190 g, 1.796 mmol) in dioxane (9 ml) and water (3 ml) . The solution was thoroughly degassed and was heated at 80℃ for 17 hr. The mixture was diluted with EtOAc (200 mL) , washed with brine (2 x 75 mL) . The organic layer was dried (MgSO4) and concentrated to isolate the title compound as an oil. LC/MS [M+H] +: 941.
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) ethyl) carbamate was treated with TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) and stirred at 80℃ for 30 min. The mixture was concentrated and purified by reverse phase HPLC to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 480.54 LC/MSobs [M+H] +: 481.18.
EXAMPLE 518
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000369
Step A: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (REFERENCE EXAMPLE 43, 300 mg, 0.369 mmol) was taken in dioxane (3691 μl) and the solution was degassed with nitrogen was added N-ethyl-N-isopropylpropan-2-amine (193 μl, 1.107 mmol) , Pd2dba3 (33.8 mg, 0.037 mmol) , and 4, 5-bis (diphenylphosphino) -9, 9-dimethylxanthene (42.7 mg, 0.074 mmol) . The solution was degassed and 2-mercaptoethanol (57.7 mg, 0.738 mmol) was added and the reaction heated at 150℃ for 30 min under microwave irradiation. The solution was brought to room temperature and diluted with EtOAc. The organic was filtered through celite and the resulting filter cake was washed with EtOAc. The combined organic were concentrated in vacuo and purified on flash chromatography to isolate the title compound as a yellow oil. LC/MS [M+H] +: 810
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
To a solution of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide dissolved in CH2Cl2 was added mCPBA (5 equivalents) and the mixture was stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％ sodium thiosulfate. The resulting organic was concentrated and purified by flash silica gel chromatography to isolate the sulfone intermediate. The intermediate was heated in a mixture of TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 481.52 LC/MSobs [M+H] +: 482.30.
EXAMPLES 519 and 520
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-amino-1-oxidobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000370
Step A: tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and t-butyl 4-mercaptopiperidine-mercaptopiperidine 1-carboxylatewas treated with tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate in the same fashion as in EXAMPLE 518, Step A to isolate the title compound as a clear oil. LC/MS [M+H] +: 949.
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate dissolved in CH2Cl2 was treated with mCPBA (5 equivalents) and the mixture was  stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％sodium thiosulfate. The resulting organic phase was concentrated and purified by flash silica gel chromatography to afford the sulfone intermediate along with the S-oxide intermediate. The resulting two intermediates were each dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) and stirred at 80℃ for thirty minutes. After this time the solutions were concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compounds. EXAMPLE 519: LC/MScalc [M+H] +: 520.60, LC/MSobs [M+H] +: 521.42； EXAMPLE 520: LC/MScalc [M+H] +: 536.60, LC/MSobs [M+H] +: 537.45.
EXAMPLE 521
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000371
Step A: tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (REFERENCE EXAMPLE 43) , was treated with tert-butyl 3-mercaptoazetidine-1-carboxylate in the same fashion as in EXAMPLE 518, Step A to isolate the title compound. LC/MS [M+H] +: 921.
Step B: 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- (azetidin-3-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A solution of tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate and tert-butyl 3- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4- methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) azetidine-1-carboxylate dissolved in CH2Cl2 was treated with mCPBA (5 equivalents) and the mixture was stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％sodium thiosulfate. The resulting organic was concentrated and purified on flash chromatography to isolate the sulfone intermediate. The resulting residue was dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) and stirred at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 492.55, LC/MSobs [M+H] +: 493.34.
EXAMPLE 522
3- (1-oxoisoindolin-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000372
Step A: 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (1-oxoisoindolin-4-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (1-oxoisoindolin-4-yl) benzenesulfonamide
A microwave vial was charged with 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide (2.2 g, 2.78 mmol) , 4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) isoindolin-1-one (772 mg, 2.98 mmol) , Na2CO3 (1475 mg, 13.92 mmol) and PdCl2 (dppf) -CH2Cl2 adduct (227 mg, 0.278 mmol) . The vial was sealed, degassed, and filled with dioxane (10 mL) and water (3.5 mL) . The resulting suspension was heated for 16 hr at 90℃. The reaction mixture was filtered over celite to removed palladium. The filtrate was diluted with EtOAc (200 mL) and washed with water (2 x 75 mL) . The organic layer was dried over anhydrous MgSO4, filtered, concentrated and purified by silica gel column chromatography to isolate the title compound as very light yellow colored foam. LC/MS [M+H] +: 795, 797.
Step B: tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (1-oxoisoindolin-4-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1-oxoisoindolin-4-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate
To a mixture of 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (1-oxoisoindolin-4-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (1-oxoisoindolin-4-yl) benzenesulfonamide with t-butyl 4-mercaptopiperidine-mercaptopiperidine 1-carboxylatewas treated with tert-butyl 4-mercaptopiperidine-1-carboxylate in the same fashion as in EXAMPLE 518, Step A to isolate the title compound as an oil. LC/MS [M+H] +: 933.
Step C: 3- (1-oxoisoindolin-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -4- (1-oxoisoindolin-4-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -4- (1-oxoisoindolin-4-yl) phenyl) thio) piperidine-1-carboxylate dissolved in CH2Cl2 was treated with mCPBA (5 equivalents) and the mixture was stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％sodium thiosulfate. The resulting organic was concentrated and purified on flash chromatography to isolate the sulfone intermediate. The resulting residue was dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 503.55, LC/MSobs [M+H] +: 504.45.
EXAMPLE 523
2-amino-8- (4- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) quinazoline 3-oxide
Figure PCTCN2015082514-appb-000373
Step A: 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
The title compound was prepared starting from 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and (2-aminoquinazolin-8-yl) boronic acid using the same method as described in EXAMPLE 522, Step A. LC/MS [M+H] +: 807, 809.
Step B: 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 2-mercaptoethan-1-ol was treated as in EXAMPLE 518, Step A to isolate the title compound as an oil. LC/MS [M+H] +: 805.
Step C: 2-amino-8- (4- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) quinazoline 3-oxide
A mixture of 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide compound with 3- (2-aminoquinazolin-8-yl) -6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was dissolved in CH2Cl2 and treated with mCPBA (5 equivalents) , and the mixture was stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％sodium thiosulfate. The resulting organic was concentrated and purified on flash chromatography to isolate the sulfone intermediate. The resulting sulfone was dissolved in TFA  (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 492.48, LC/MSobs [M+H] +: 493.45.
EXAMPLE 524
5- (4- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) quinoline 1-oxide
Figure PCTCN2015082514-appb-000374
Step A: 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide
The title compound was prepared starting from a mixture of 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-3-iodo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide and quinoline-5-boronic acid using the same method as described in EXAMPLE 522, Step A. LC/MS [M+H] +: 791, 793.
Step B: 6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide
A mixture of 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 6-bromo-N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 2-mercaptoethan-1-ol was treated as in EXAMPLE 518, Step A to isolate the tile compound. LC/MS [M+H] +: 789.
Step C: 5- (4- ( (2-hydroxyethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) quinoline 1-oxide
A mixture of 6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) -3- (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide and 6- ( (2-hydroxyethyl) thio) -N, N-bis (4-methoxybenzyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) -3-  (quinolin-5-yl) benzenesulfonamide was dissolved in CH2Cl2 and treated with mCPBA (5equivalents) , and the mixture was stirred for 16 hr. The solution was extracted with 10％sodium thiosulfate. The resulting organic was concentrated and purified on flash chromatography to isolate the sulfone intermediate. The resulting sulfone was dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 476.48, LC/MSobs [M+H] +: 477.37.
EXAMPLE 525
6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (6-aminopyridin-3-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000375
The title compound was prepared from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and 5- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) pyridin-2-amine using the same methods as described for the synthesis of EXAMPLE 517. LC/MScalc [M+H] +: 424.45, LC/MSobs [M+H] +: 425.31.
EXAMPLE 526
4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -4'- (piperidin-4-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) - [1, 1'-biphenyl] -3-sulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000376
A suspension tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5- yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate (100 mg, 0.109 mmol) , tert-butyl 4- (4- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) phenyl) piperidine-1-carboxylate (54.8 mg, 0.141 mmol) , [1, 1’ -bis (diphenylphosphino) ferrocene] dichloropalladium (II) (7.96 mg, 10.88 μmol) and sodium carbonate (34.6 mg, 0.327 mmol) in dioxane (816 μl) and water (272 μl) was heated at 80℃ for 4 hr. The solution was poured into EtOAc (50 mL) and washed with water (20 mL) , brine (20 mL) , dried (MgSO4) and concentrated and the resulting oil was dissolved in DCM (5 mL) and treated with TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) . The solution was stirred at 80℃ for 30 min. The solution was then concentrated to isolate an oil which was purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 491.58, LC/MSobs [M+H] +: 492.45.
EXAMPLE 527
7- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000377
Step A: ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylate and ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylate
The title compound was prepared from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate compound with tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and ethyl 7- (4, 4, 5, 5-tetramethyl-1, 3, 2-dioxaborolan-2-yl) indoline-2-carboxylate using the same method as in EXAMPLE 517, Step A. LC/MS [M+H] +: 980.
Step B: 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylic acid and 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylic acid
A suspension of ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylate and ethyl 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylate (139 mg, 0.142 mmol) , lithium hydroxide (16.98 mg, 0.709 mmol) in dioxane (1064 μl) and water (355 μl) and was stirred overnight. The solution was adjusted to pH＝7 and the solution was added to EtOAc (50 mL) and the organic was extracted with water (2 x 5 mL) . The organic was concentrated to isolate the title compound. LC/MS [M+H] +: 952.
Step C: 7- (4- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3-sulfamoyl-2- (2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxamide
7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylic acid and 7- (3- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4- ( (2- ( (tert-butoxycarbonyl) amino) ethyl) sulfonyl) -2- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) -1H-indole-2-carboxylic acid (135 mg, 0.142 mmol) was dissolved in DMF (3 mL) and EDC (68.0 mg, 0.354 mmol) , HOAt (1.930 mg, 0.014 mmol) , and Hunig's Base (0.099 mL, 0.567 mmol) was added. This was stirred for 5 minutes before the addition of bis (4-methoxybenzyl) amine (109 mg, 0.425 mmol) . The solution was stirred at ambient temperature for 16 hr. The reaction is concentrated and the oil was purified on flash chromatography to isolate an oil. The resulting oil was dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 490.51, LC/MSobs [M+H] +: 491.37.
EXAMPLE 528
6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -3- (quinolin-5-yl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000378
The title compound was prepared from tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and tert-butyl (2- ( (2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -4-iodo-3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) thio) ethyl) carbamate and quinolin-5-ylboronic acid using the same methods as described for the synthesis of EXAMPLE 517. LC/MScalc [M+H] +: 459.50, LC/MSobs [M+H] +: 460.29.
EXAMPLE 529
3- (2- (methylsulfonamido) benzo [d] thiazol-4-yl) -6- (piperidin-4-ylsulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000379
A solution of tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (1- (4-methoxybenzyl) -1H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate and tert-butyl 4- ( (4- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -2- (N, N-bis (4-methoxybenzyl) sulfamoyl) -3- (2- (4-methoxybenzyl) -2H-tetrazol-5-yl) phenyl) sulfonyl) piperidine-1-carboxylate (200 mg, 0.204 mmol) in DCM (1019 μl) at ambient temperature was treated with DMAP (24.90 mg, 0.204 mmol) and methanesulfonyl chloride (31.8 μl, 0.408 mmol) . The mixture was stirred for 16 hr and concentrated to isolate an oil. The oil was dissolved in EtOAc and extracted with water to isolate the protected intermediate. Purification on flash chromatography provided the intermediate compound. The resulting foam  was dissolved in TFA (100 equiv) and p-anisole (10 equiv) at 80℃ for thirty minutes. After this time the solution was concentrated and purified on reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MScalc [M+H] +: 598.69, LC/MSobs [M+H] +: 599.32.
EXAMPLE 530
3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2- (dimethylamino) ethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide
Figure PCTCN2015082514-appb-000380
To a solution of 3- (2-aminobenzo [d] thiazol-4-yl) -6- ( (2-aminoethyl) sulfonyl) -2- (2H-tetrazol-5-yl) benzenesulfonamide was dissolved in THF (1249 μl) and chilled to 0℃ in an ice bath. Formaldehyde (37.2 μl, 0.499 mmol) was added and the solution was stirred for 5 min. Sodium cyanoborohydride (39.2 mg, 0.624 mmol) was added stirred for 90 min at 0℃. The solution was brought to neutral pH and concentrated. The resulting oil was purified by reverse phase chromatography to isolate the title compound. LC/MS [M+H] +: 509.20.
BIOLOGICAL ASSAYS
Enzyme Activity: Determination of IC50
The Class B enzyme activities were measured in the presence of the test inhibitor in a fluorescence assay against a commercially available substrate consisting of a cephalosporin core linking 7-hydroxycoumarin to fluorescein (CCF2-FA) . The enzyme (NDM-1, IMP-1 or VIM-1) and the substrate were diluted in 100 mM KH2PO4 buffer (pH 7) containing 0.005％ Tween-20 and 10 μM ZnSO4. In the assay, the final concentration of enzyme was 1 pM, 2 pM and 30 pM for NDM-1, IMP-1 and VIM-1, respectively, and the final concentration of CCF2-FA was 1.25 μM. The test inhibitor was dissolved in dimethylsulfoxide and diluted 1: 50 in the assay, resulting in a final concentration range of 20 μM to 0.00063 μM. In a 384-well microplate, the test inhibitor was incubated with the metallo-β-lactamase enzyme and the substrate for 2 hours at 25℃. Fluorescence at 460 nm following excitation at 405 nm was measured. The IC50 value was determined from semi-logarithmic plots of enzyme inhibition versus inhibitor concentration,  with a curve generated using a 4-parameter fit.
Representative compounds of the present invention exhibit inhibition of Class B β-lactamases in this assay. For example, the compounds of Examples 1-530were tested in this assay and were found to have the IC50 values shown in Table 1.
Antibiotic Potentiation Activity: Determination of Synergistic Concentration
The concentrations of metallo-β-lactamase inhibitors required to restore the susceptibility of various strains of bacteria to inactive concentrations of antibiotics were determined in an assay that assessed bacterial growth by measuring the optical density at 600 nm (OD600) . The bacterial strains tested included the clinical strains Escherichia coli expressing NDM-1 (CLB30005, CLB30016) , Serratia marcescens expressing IMP-1 (CL5741) , and Klebsiella pneumoniae expressing VIM-1 (IHMA599644) . Inhibitor activity was measured in the presence and absence of imipenem in a 384-well microplate.
The clinical strains CLB30016, CL5741 and IHMA599644 were grown on trypticase soy agar containing 5％sheep’s blood. The bacteria on agar plates were incubated at 35℃ with humidity overnight. The following day, individual colonies from each clinical strain were picked and resuspended in 5 ml saline to attain an OD600 of 0.14, 0.11, 0.15 and 0.13, for CLB30016, CL5741 and IHMA599644, respectively. These were further diluted 1: 100 into 1.1X CAMHB and used to inoculate the test wells as described below.
Imipenem in 10 mM 3- (N-morpholino) propanesulfonic acid (MOPS, pH 7) was stored in single use aliquots at -80℃. Test inhibitors were dissolved in dimethylsulfoxide and diluted 1: 50 in the assay, resulting in a final concentration range of 200 μM to 0.195 μM. On the day of the assay, 4 μl of antibiotic was added to 45 ul of bacteria followed by 1 μl of test compound and mixed by pipetting and with an orbital shaker. The concentration of antibiotic used in the assay was 1 μg/ml. Microplates were covered and incubated at 35℃ for 22 hours to 24 hours. At the end of the incubation, absorbance was determined using a spectrophotometer. The synergistic concentration of MBLI was determined by identifying the lowest concentration of test compound in the presence of a given concentration of antibiotic that was required to inhibit 95％of the growth of the bacteria. The results for Examples 1-530are reported in Table 1, expressed as the concentration of compound that potentiated the action of antibiotic (imipenem) affecting 95％inhibition of bacterial growth (MITC95) .
Representative compounds of the present invention do not have any or have minimal intrinsic antibacterial activity but display a synergistic effect when used in combination  with a beta-lactam antibiotic. For example, in general, the compounds of Examples 1-530 were determined to restore susceptibility to imipenem for one or more of the test organisms at concentrations of 100 μM or less.
Table 1. Inhibition of metallo-β-lactamases (IMP-1, NDM-1, VIM-1) and antibiotic potentiation vs. MBL-expressing bacteria by Examples 1-530.
Figure PCTCN2015082514-appb-000381
Figure PCTCN2015082514-appb-000382
Figure PCTCN2015082514-appb-000383
Figure PCTCN2015082514-appb-000384
Figure PCTCN2015082514-appb-000385
Figure PCTCN2015082514-appb-000386
Figure PCTCN2015082514-appb-000387
Figure PCTCN2015082514-appb-000388
Figure PCTCN2015082514-appb-000389
Figure PCTCN2015082514-appb-000390
Figure PCTCN2015082514-appb-000391
Figure PCTCN2015082514-appb-000392
Figure PCTCN2015082514-appb-000393
Figure PCTCN2015082514-appb-000394
Figure PCTCN2015082514-appb-000395
Figure PCTCN2015082514-appb-000396
Figure PCTCN2015082514-appb-000397
Figure PCTCN2015082514-appb-000398
Figure PCTCN2015082514-appb-000399
Figure PCTCN2015082514-appb-000400
Figure PCTCN2015082514-appb-000401
Figure PCTCN2015082514-appb-000402
Figure PCTCN2015082514-appb-000403
Figure PCTCN2015082514-appb-000404
Figure PCTCN2015082514-appb-000405
Figure PCTCN2015082514-appb-000406
Efflux
In order to assess the contribution of efflux to lack of whole cell inhibition of metallo-beta-lactamase inhibitors of formula I, tool strains were constructed. The strain background is Pseudomonas aeruginosa PAO1. A wild-type (MB5919) and an isogenic strain in which multiple efflux pumps have been disrupted genetically were used. The MBL IMP-1, obtained from a clinical isolate was introduced into the strain pair by the following process:
Plasmid DNA (encoding IMP-1) was extracted from CL 5673 (IMP-1, P. aeruginosa clinical strain) by standard techniques. The plasmid DNA was transformed into parental MB5919 (oprD+, efflux+, inducible AmpC) and MB5890 (oprD+, efflux-, inducible  AmpC) isogenic strains by electroporation. These transformed strains were platedonto cation-adjusted Muller-Hinton agar plates containing ceftazidime at 32μg/ml (MB5919) and 16μg/ml (MB5890) to select for those cells in which the IMP-1-expressing plasmid was introduced successfully, resulting in resistance to ceftazidime. Agarose-gel electrophoresis of PCR product for IMP-1from the successful transformants was used to compare to control and to the original strain from which the plasmid was obtained, confirming transfer of the IMP-1 gene (data not shown) .
Minimum inhibitory concentrations of sentinel antibiotics were performed to quality control the new strains. The imipenem MIC went up dramatically, as expected, due to presence of the IMP-1, also meropenem (MEM) and ceftazidime (CAZ) . The efflux +/-set behaved similarly with non-BL antibiotics as they should with the efflux-strain exhibiting increased sensitivity to chloramphenicol (CAM) and ciprofloxacin (Cipro) .
Figure PCTCN2015082514-appb-000407
The strain set was then used as a pair to determine the effect of metallo-β-lactamase inhibitors of Formula I on the MIC of imipenem and/or ceftazidime. A fixed concentration of antibiotic is included in standard microbroth MIC tests, usually at the CLSI breakpoint concentration. A fixed amount of a class A/C beta-lactamase inhibitor is also included to inhibit the resident Pseudomonas AmpC enzyme. A serial titration of the metallo-β-lactamase inhibitor was included and the concentration of metallo-β-lactamase inhibitor which restores susceptibility of the strain to the included antibiotic was recorded. That concentration of metallo-β-lactamase inhibitor was then compared between the two strains to determine the fold difference between the efflux + (MB9798) and efflux – (MB9799) strains. This is taken as an indication of the extent to which the MBLi is subject to efflux.
Table 2: Concentration of metallo-β-lactamase inhibitors of Formula I which restores susceptibility of efflux + (MB9798) and efflux – (MB9799) strains to imipenem at 2 μg/mL in the presence of a class A, C, D serine β-lactamase inhibitor closely related to MK-7655 (relebactam) .
Figure PCTCN2015082514-appb-000408
Figure PCTCN2015082514-appb-000409
Figure PCTCN2015082514-appb-000410
Figure PCTCN2015082514-appb-000411
Figure PCTCN2015082514-appb-000412
Figure PCTCN2015082514-appb-000413
Figure PCTCN2015082514-appb-000414
Figure PCTCN2015082514-appb-000415
Figure PCTCN2015082514-appb-000416
Figure PCTCN2015082514-appb-000417
Figure PCTCN2015082514-appb-000418
Figure PCTCN2015082514-appb-000419
Figure PCTCN2015082514-appb-000420
Figure PCTCN2015082514-appb-000421
Figure PCTCN2015082514-appb-000422
Figure PCTCN2015082514-appb-000423
Figure PCTCN2015082514-appb-000424
Figure PCTCN2015082514-appb-000425
Figure PCTCN2015082514-appb-000426
Figure PCTCN2015082514-appb-000427
Figure PCTCN2015082514-appb-000428
Figure PCTCN2015082514-appb-000429
Figure PCTCN2015082514-appb-000430
Figure PCTCN2015082514-appb-000431
Figure PCTCN2015082514-appb-000432
Figure PCTCN2015082514-appb-000433
Figure PCTCN2015082514-appb-000434
Representative compounds of Formula I of the instant invention, particularly those where RB is –SO2R3, generally have a lower efflux ratio than compounds in which the atom or linker at the C-6 position is a carbon or hydrogen instead of -SO2 -.

Claims (22)

  1. A compound of formula I
    Figure PCTCN2015082514-appb-100001
    or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein
    X1 is N or CH；
    X2 is N or CH；
    Z is tetrazolyl, wherein Z is linked to the six-membered ring through a carbon to carbon bond；
    RA is – (CH2) 0-1-AryA1； – (CH2) 0-1-HetA1； – (CH2) 0-1-C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from –NH2, –OH, and–F； or – (CH2) 0-1-C4-6cycloalkenyl optionally substituted with –NH2；
    RB is –SR1, –SOR2 or –SO2R3；
    R1 is HetB1, AryB1, or –CH3；
    R2 is HetB1 or –CH3；
    R3 is
    1) C1-6alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NRaRb, –N+RaRbCH3, –OH, and cyclopropyl；
    2) C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –NRaRb, and –OH；
    3) –NH2；
    4) –NRa-C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1, 2, or 3 substituentsindependently selected from –CF3, –CH (NH2) C (O) NH2； –C (O) NRaRb； –C (O) OH； –NRaRb, –N+RaRbCH3, –NHCH2CH2OCH3, –ORa, and –O (CH2) 2-3NH2；
    5) –NRaC (O) C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1 or 2  substituentsindependently selected from –CF3, –C (O) NRaRb； –C (O) OH；
    –NRaRb, –N+RaRbCH3, –NHCH2CH2OCH3, –ORa, and
    –O (CH2) 2-3NH2；
    6) –NRa (CH2) 0-1-C3-6cycloalkyl, wherein the C3-6cycloalkyl is optionally substituted with –CH2OH or –NH2；
    7) –OH；
    8) – (CH2) 0-2AryB1；
    9) – (CH2) 0-2HetB1；
    10) –NRa-C0-3alkyl-AryB1, wherein the C0-3alkyl is optionally substituted with –NH2； and
    11) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ；
    AryA1 is an aromatic ring system selected from:
    1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0, 1, 2, or 3 heteroatom ring atoms independently selected from N, Oand S, optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected fromF, Cl, –C1-6alkyl, –CN, –CH2OH, –C (O) NRaRb, –C (O) NH (CH2) 2-4NH2, –C (O) ORa, – (CH2) 0-3NHRa, – (CH2) 0-2NRaC (＝NH) NH2； –NRaC (O) CH3； –NRaSO2-C1-6alkyl, –NRaSO2-cyclopropyl, –ORa, oxo, –SO2Ra, –SO2NRaRb, –SO2NH-cyclopropyl, –AryA2, – (CH2) 0-1NRaAryA2, or–HetA2,
    2) an8-to 10-membered bicyclic ring with 1, 2, 3 or 4 heteroatom ring atoms selected from N, O and S, wherein an S atom optionally has one or two oxo substituents and a N atom is optionally in the form of an N-oxide, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F； Cl； C1- 6alkyl optionally substituted with –NRaRb； – (CH2) 0-1CF3；–CF2CH2NH2； –C (＝NH) NH2； –CN； –C (O) CF3； –C (O) NRaRb；–C (O) NHCH2C (O) ORa； –C (O) ORa； –NRaRb； –NHCH2SO3H– (CH2) 0-1NHC (＝NH) NH2； –NHC (O) C1-6alkyl； –NHC (O) NH2；–NHC (O) ORa； –NHSO2CH3； –ORa； oxo； –SO2Ra,–CH2-phenyl-OCH3； and –HetA2；
    HetA1 is dihydrothiopyranyl or tetrahydropyranyl；
    AryA2 is a 5-6-membered aromatic monocyclic ring with 1, 2, or 3heteroatom ring atoms independently selected from N and S, or 4 N ring atoms, optionally substituted with – (CH2) 0-1NH2, –CH2OH, –COOH, or –CONH2；
    HetA2 is a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is optionally substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from C1-6alkyl, –CN, and oxo；
    AryB1 is
    1) a 5-6 membered monocyclic aromatic ring with 0, 1, 2, or 3 N ring atoms, optionally substituted with 1 substituent selected from –CF3, C1-6 alkyl, – (CH2) 0-1NH2and –OCH3； or
    2) a 9-membered bicyclic ring with 2 N ring atoms；
    HetB1 is
    1) a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is optionally substituted with one or two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected fromF, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –CN, –C (O) C1-C6 alkyl, –C0-4alkyl-NRaRb, – (CH2) 0-1C (O) NRaRb, –C (O) NH-cyclopropyl, –C (O) ORa, –OH, oxo, and –SO2-C1-C6 alkyl； or
    2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 to 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, optionally substituted with –C1-6alkyl, –CH2C3-6cycloalkyl or –NH2, wherein the S is substituted with two oxo groups, wherein the rings in the bicyclic ring are bridged or spirocyclic, and wherein the C3-C6cycloalkyl is optionally substituted with–CH2OH；
    HetB1’ is
    1) a 4-6 membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein a N ring atom is optionally in the form of a quaternary amine, wherein the S is substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently  selected from F, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –C (O) ORa, – (CH2) 0-4NRaRb, –ORa, and oxo； or
    2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and O, optionally substituted with –OH or –NH2, wherein the bicyclic ring is bridged or fused； and
    Ra and Rb are independently H or C1-C6 alkyl.
  2. The compound of claim 1, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, offormula Ia
    Figure PCTCN2015082514-appb-100002
    wherein
    RA is AryA1； HetA1； C4-6cycloalkyl optionally substituted with –NH2； or C4-6cycloalkenyl optionally substituted with –NH2；
    R3 is
    1) – (CH2) 0-2HetB1；
    2) C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –NRaRb, –OH, and cyclopropyl；
    3) C4-6cycloalkyl optionally substituted with –NH2；
    4) –NRaRb；
    5) –NRa-C1-6alkyl-NRaRb, wherein the C1-6alkyl is optionally substituted with 1 or 2 substituents selected fromF, –CF3, –OH, and –OCH3；
    6) –NH-C1-6hydroxyalkyl；
    7) –NH (CH2) C (O) NRaRb；
    8) –NHCH2CH (NH2) C (O) NH2；
    9) –NHCH2CH (NH2) C (O) OH；
    10) –NH (CH2) 2OCH3；
    11) –NHCH2CH2OCH2CH2NH2；
    12) –NHCH2-cyclopropyl, wherein the cyclopropyl is substituted with –CH2OH or –NH2；
    13) –NH-cyclobutyl-NH2；
    14) –OH；
    15) –AryB1；
    16) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ； and
    17) –NRa-C0-2alkyl-AryB1, wherein the C0-2alkyl is optionally substituted with –NH2；
    AryA1 is an aromatic ring system selected from:
    1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0, 1, or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and S, substituted with 1 or 2 substituents independently selected from:
    a) F,
    b) –C1-C6 alkyl,
    c) –CN,
    d) –CH2OH,
    e) –C (O) NRaRb,
    f) –C (O) NH (CH2) 2-4NH2,
    g) –C (O) ORa,
    h) – (CH2) 0-1NHRa,
    i) –NHC (＝NH) NH2；
    j) –NHC (O) CH3；
    k) –NRaSO2-C1-C6alkyl,
    l) –NHSO2-cyclopropyl,
    m) –ORa,
    n) –SO2NRaRb,
    o) –SO2NH-cyclopropyl,
    p) –AryA2, or
    q) –HetA2,
    2) a 8-to 10-membered bicyclic ring with 1, 2, 3 or 4 heteroatom ring atoms selected from N, O and S, wherein an S atom optionally has one or two oxo substituents and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, –CH2CF3, –CF2CH2NH2, –CF3, –C (＝NH) NH2, –CN,  –C (O) CF3, –C (O) NRaRb, –C (O) NHCH2C (O) ORa, –C (O) ORa, – (CH2) 0-2NRaRb, –NHC (O) CH3, –NHC (O) NH2, –NHC (O) ORa, –NHCH2SO3H, –NHSO2CH3, –ORa, oxo, –CH2-phenyl-OCH3, and –HetA2；
    AryB1 is
    1) a 5-6 membered monocyclic aromatic ring with 0, 1, 2, or 3 N ring atoms, optionally substituted with 1 substituent selected from C1-C6 alkyl, –CF3, and –OCH3； or
    2) a 9-membered bicyclic ring with 2 N ring atoms；
    HetB1 is
    1) a 4-6-membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is substituted with an oxo group, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from
    a) F,
    b) C1-C6 alkyl,
    c) C1-C6 hydroxyalkyl,
    d) –CN,
    e) –C (O) CH3,
    f) – (CH2) 0-1C (O) NRaRb,
    g) –C (O) NH-cyclopropyl,
    h) –C (O) ORa,
    i) –C0-4alkyl-NRaRb,
    j) –SO2-C1-C6 alkyl, and
    k) oxo； or
    2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 to 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, optionally substituted with C1-6alkyl, –CH2C3-C6cycloalkyl or –NH2, wherein the S is substituted with two oxo groups, wherein the rings in the bicyclic ring are bridged or spirocyclic, and wherein the C3-C6cycloalkyl is substituted with –CH2OH；
    HetB1’ is
    1) a 4-6 membered saturated monocyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N, O and S, wherein the S is substituted with two oxo groups, and wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, C1-C6 hydroxyalkyl, –NRaRb, –OH, C1-6alkoxy, –C (O) ORa, and oxo； or
    2) a 6-8-membered bicyclic ring with 1 or 2 heteroatom ring atoms independently selected from N and O, optionally substituted with –OH or –NH2, wherein the bicyclic ring is bridged or fused； and
    Ra and Rb are independentlyHor C1-C6 alkyl.
  3. The compound of claim 1, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein RA is AryA1.
  4. The compound of claim 1, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein RB is –SO2R3.
  5. The compound of claim 1, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein Ra and Rb are independently H or –CH3.
  6. The compound of claim 1, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein Formula I is
    Figure PCTCN2015082514-appb-100003
    wherein
    AryA1 is an aromatic ring system selected from:
    1) a 5-6 membered monocyclic ring with 0 or 1 N ring atoms substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –C1-C6 alkyl, –CONH-C2-4alkyl-NH2, or –NHRa； or
    2) a 9-membered bicyclic ring with 2 heteroatom ring atoms selected from N and S, wherein the ring is optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, C1-C6 alkyl, and – (CH2) 0-2NRaRb；
    R3 is
    1) C1-6alkyl optionally substituted with 1, 2 or 3 substituents independently selected from F, –NRaRb, –N+RaRbCH3, –OH, and cyclopropyl；
    2) C4-6cycloalkyl optionally substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –NRaRb, –OH；
    3) –NH2；
    4) –NRa-C1-6alkyl optionally substituted with 1 or 2 F substituents and optionally substituted with 1 or 2 substituentsindependently selected from –CF3, –CH (NH2) C (O) NH2； –C (O) NRaRb； –C (O) OH； –NRaRb, –N+RaRbCH3, –ORa, and –O (CH2) 1-2NH2；
    5) –NRa (CH2) 0-1-C3-6cycloalkyl, wherein the C3-6cycloalkyl is optionally substituted with –CH2OH or –NH2；
    6) –OH；
    7) – (CH2) 0-2AryB1；
    8) – (CH2) 0-2HetB1；
    9) –NRa-C0-3alkyl-AryB1； and
    10) –NRa-C0-3alkyl-HetB1’ ； and
    Ra and Rb are H or –CH3.
  7. The compound of claim 6, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein AryA is 1) phenyl substituted with –NH2 and –C (O) NHCH2CH2NH2； 2) phenyl substituted with–C (O) NHCH2CH2NH2； or 3) pyridinyl substituted with –NH2.
  8. The compound of claim 6, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein AryA is 1) benzoimidazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from F, –CH3 and – (CH2) 0-1NH2； or 2) benzothiazolyl substituted with 1 or 2 substituents independently selected from –CH3 and – (CH2) 0-1NH2.
  9. The compound of claim 6, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein R3 is 1) –NH2, 2) C1-3aminoalkyl optionally substituted with –OH, 3) azetidinyl, 4) pyrrolidinyl optionally substituted with –CH2NH2, 5) –NH-C2-3aminoalkyl optionally substituted with –OH, or 6) –NH-pyrrolidinyl optionally substituted with 1 – (CH2) 0-1OH or 2 –CH3.
  10. The compound of claim 1 which is
    Figure PCTCN2015082514-appb-100004
    Figure PCTCN2015082514-appb-100005
    Figure PCTCN2015082514-appb-100006
    Figure PCTCN2015082514-appb-100007
    Figure PCTCN2015082514-appb-100008
    Figure PCTCN2015082514-appb-100009
    Figure PCTCN2015082514-appb-100010
    Figure PCTCN2015082514-appb-100011
    Figure PCTCN2015082514-appb-100012
    Figure PCTCN2015082514-appb-100013
    Figure PCTCN2015082514-appb-100014
    Figure PCTCN2015082514-appb-100015
    Figure PCTCN2015082514-appb-100016
    Figure PCTCN2015082514-appb-100017
    Figure PCTCN2015082514-appb-100018
    Figure PCTCN2015082514-appb-100019
    Figure PCTCN2015082514-appb-100020
    Figure PCTCN2015082514-appb-100021
    Figure PCTCN2015082514-appb-100022
    Figure PCTCN2015082514-appb-100023
    Figure PCTCN2015082514-appb-100024
    Figure PCTCN2015082514-appb-100025
    Figure PCTCN2015082514-appb-100026
    Figure PCTCN2015082514-appb-100027
    Figure PCTCN2015082514-appb-100028
    Figure PCTCN2015082514-appb-100029
    Figure PCTCN2015082514-appb-100030
    Figure PCTCN2015082514-appb-100031
    Figure PCTCN2015082514-appb-100032
    Figure PCTCN2015082514-appb-100033
    Figure PCTCN2015082514-appb-100034
    Figure PCTCN2015082514-appb-100035
    Figure PCTCN2015082514-appb-100036
    Figure PCTCN2015082514-appb-100037
    or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  11. The compound of claim 1 which is
    Figure PCTCN2015082514-appb-100038
    Figure PCTCN2015082514-appb-100039
    Figure PCTCN2015082514-appb-100040
    Figure PCTCN2015082514-appb-100041
    Figure PCTCN2015082514-appb-100042
    or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  12. A pharmaceutical composition which comprises a compound acccording to any one of claims 1 to 11, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutically acceptable carrier.
  13. A pharmaceutical composition according to claim 12, which further comprises an effective amount of a beta-lactam antibiotic.
  14. The pharmaceutical composition according to claim 13, wherein the beta-lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, ceftolozane, and ceftazidime.
  15. The pharmaceutical composition according to claim 13, wherein the beta-lactam antibiotic is imipenem.
  16. The pharmaceutical composition according to claim 15, further comprising cilastatin or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
  17. A method for inhibiting beta-lactamasein a subject which comprises administering to the subject (i) an effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 11, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, optionally in combination with a beta-lactam antibiotic or (ii) a pharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 16.
  18. A method for treating a bacterial infection which comprises administering to a subject in need of such treatment (i) a therapeutically effective amount of a compound according to any one of claims 1 to 11, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, optionally in combination with a beta-lactam antibiotic or (ii) a pharmaceutical composition according to any one of claims 12 to 16.
  19. Use of a compound according to any one of claims 1 to 11, or a pharmaceutically acceptable salt thereof, for inhibiting beta-lactamase activity, in the manufacture of a medicament for inhibiting beta-lactamase activity, in combination with a beta-lactam antibiotic for treating a bacterial infection, or in combination with a beta-lactam in the manufacture of a medicament for treating a bacterial infection.
  20. The method of claim 17or 18or the use of claim 19, wherein the beta-lactam antibiotic is selected from the group consisting of imipenem, ertapenem, meropenem, doripenem, biapenem, panipenem, ticarcillin, ampicillin, amoxicillin, carbenicillin, piperacillin, azlocillin, mezlocillin, ticarcillin, cefoperazone, cefotaxime, ceftriaxone, ceftolozaneand ceftazidime.
  21. The method of claim 17or 18 or the use of claim 19, wherein the beta-lactam antibiotic is imipenem.
  22. The method of claim 17or 18or the use of claim 19, wherein the bacterial infection is due to Pseudomonas spp. , Klebsiella spp. , Enterobacter spp. , Escherichi spp. , Morganella spp. , Citrobacter spp. , Serratia, spp. or Acintetobacter spp.
PCT/CN2015/082514 2015-06-26 2015-06-26 Metallo-beta-lactamase inhibitors WO2016206101A1 (en)

Priority Applications (43)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2015/082514 WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2015-06-26 Metallo-beta-lactamase inhibitors
TW105120065A TWI715595B (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039185 WO2016210234A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
ARP160101905A AR105122A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 METALO-b-LACTAMASA INHIBITORS
GEAP201614683A GEP20207169B (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
CN201680049758.1A CN107922394B (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1, 2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
MDE20180446T MD3313832T2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
BR112017027719-0A BR112017027719B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 COMPOUND, ZWITTERION, PHARMACEUTICAL COMPOSITION, AND, USE OF A COMPOUND
HUE16734151A HUE054410T2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
TNP/2017/000509A TN2017000509A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
CR20170605A CR20170605A (en) 2015-06-26 2016-06-24 DERIVATIVES OF 3-TETRAZOLIL-BENCENO-1,2-DISULFONAMIDE AS METAL INHIBITORS -ß-LACTAMASA
PL16734151T PL3313832T3 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
EA201890150A EA032698B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
PE2017002827A PE20180600A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 METAL-BETA-LACTAMASE INHIBITORS
EP16734151.0A EP3313832B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
RS20210436A RS61696B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039156 WO2016210215A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
CA2990234A CA2990234C (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
LTEP16734151.0T LT3313832T (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
JP2017566836A JP6409141B2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-Tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-.beta.-lactamase inhibitors
US15/737,334 US10227331B2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-β-lactamase inhibitors
US15/737,351 US10221163B2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
AU2016281710A AU2016281710B2 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-Beta-lactamase inhibitors
KR1020187002095A KR102089878B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
MX2017016672A MX2017016672A (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors.
PT167341510T PT3313832T (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
DK16734151.0T DK3313832T3 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-TETRAZOLYL-BENZENE-1,2-DISULPHONAMIDE DERIVATIVES AS METALLO-BETA-LACTAMASE INHIBITORS
SI201631133T SI3313832T1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
EP16815358.3A EP3313828B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
MA42244A MA42244B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-Tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
ES16734151T ES2865284T3 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-sulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
JOP/2016/0132A JO3588B1 (en) 2015-06-26 2016-06-26 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
IL256265A IL256265B (en) 2015-06-26 2017-12-12 3-tetrazolyl-benzene-1, 2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
CL2017003325A CL2017003325A1 (en) 2015-06-26 2017-12-21 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
SV2017005604A SV2017005604A (en) 2015-06-26 2017-12-21 DERIVATIVES OF 3-TETRAZOLIL-BENZENO-1,2-DISULFONAMIDE AS INHIBITORS OF THE METALLO-BETA-LACTAMASA
CONC2017/0013360A CO2017013360A2 (en) 2015-06-26 2017-12-22 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PH12017502418A PH12017502418A1 (en) 2015-06-26 2017-12-22 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
DO2017000310A DOP2017000310A (en) 2015-06-26 2017-12-26 METALO-BETA-LACTAMASA INHIBITORS
ECIEPI20185828A ECSP18005828A (en) 2015-06-26 2018-01-24 METAL-BETA-LACTAMASE INHIBITORS
JP2018042502A JP6670333B2 (en) 2015-06-26 2018-03-09 3-Tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-β-lactamase inhibitors
US16/244,876 US10544130B2 (en) 2015-06-26 2019-01-10 Metallo-beta-lactamase inhibitors
HRP20210481TT HRP20210481T1 (en) 2015-06-26 2021-03-23 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
CY20211100376T CY1124086T1 (en) 2015-06-26 2021-04-29 3-TETRAZOLYL-BENZENE-1,2-DISULPHONAMIDE DERIVATIVES AS METALLO-BETA-LACTAMASE INHIBITORS

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2015/082514 WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2015-06-26 Metallo-beta-lactamase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2016206101A1 true WO2016206101A1 (en) 2016-12-29

Family

ID=56297156

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/CN2015/082514 WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2015-06-26 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039185 WO2016210234A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039156 WO2016210215A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/US2016/039185 WO2016210234A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039156 WO2016210215A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors

Country Status (37)

Country Link
US (3) US10227331B2 (en)
EP (2) EP3313828B1 (en)
JP (2) JP6409141B2 (en)
KR (1) KR102089878B1 (en)
CN (1) CN107922394B (en)
AR (1) AR105122A1 (en)
AU (1) AU2016281710B2 (en)
BR (1) BR112017027719B1 (en)
CA (1) CA2990234C (en)
CL (1) CL2017003325A1 (en)
CO (1) CO2017013360A2 (en)
CR (1) CR20170605A (en)
CY (1) CY1124086T1 (en)
DK (1) DK3313832T3 (en)
DO (1) DOP2017000310A (en)
EA (1) EA032698B1 (en)
EC (1) ECSP18005828A (en)
ES (1) ES2865284T3 (en)
GE (1) GEP20207169B (en)
HR (1) HRP20210481T1 (en)
HU (1) HUE054410T2 (en)
IL (1) IL256265B (en)
JO (1) JO3588B1 (en)
LT (1) LT3313832T (en)
MA (1) MA42244B1 (en)
MD (1) MD3313832T2 (en)
MX (1) MX2017016672A (en)
PE (1) PE20180600A1 (en)
PH (1) PH12017502418A1 (en)
PL (1) PL3313832T3 (en)
PT (1) PT3313832T (en)
RS (1) RS61696B1 (en)
SI (1) SI3313832T1 (en)
SV (1) SV2017005604A (en)
TN (1) TN2017000509A1 (en)
TW (1) TWI715595B (en)
WO (3) WO2016206101A1 (en)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10221163B2 (en) 2015-06-26 2019-03-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
WO2019070044A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 武田薬品工業株式会社 Heterocyclic compounds
CN111484506A (en) * 2020-04-16 2020-08-04 天津大学 Preparation method of improved meropenem side chain intermediate thiolactone by adding surfactant
WO2021023813A1 (en) * 2019-08-06 2021-02-11 Domain Therapeutics 5-heteroaryl-pyridin-2-amine confounds as neuropeptide ff receptor antagonists
US11207312B2 (en) * 2017-07-17 2021-12-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof
EP3795149A4 (en) * 2018-05-14 2022-01-05 National University Corporation Tokai National Higher Education and Research System Beta-lactamase inhibitor

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106892845B (en) * 2017-02-28 2018-10-30 四川同晟生物医药有限公司 A kind of 2,4- diaminobutyric acid derivatives and preparation method thereof
WO2019135920A1 (en) * 2018-01-03 2019-07-11 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof
AR117788A1 (en) 2019-01-14 2021-08-25 Pi Industries Ltd 3-SUBSTITUTE PHENYLAMIDINE COMPOUNDS, PREPARATION AND USE
CN112390816B (en) * 2019-08-15 2023-05-26 福建广生中霖生物科技有限公司 Preparation method of oxazepine compound
CN114531850A (en) * 2019-10-04 2022-05-24 富士胶片株式会社 Pharmaceutical composition and kit characterized by containing novel penicillin derivative or salt thereof and 1 or more compounds selected from beta-lactamase inhibitory compound and antibacterial compound or salt thereof
CN110840897B (en) * 2019-11-28 2023-08-08 河北旺发生物科技有限公司 Metal beta-lactamase inhibitors
WO2021209265A1 (en) 2020-04-14 2021-10-21 Basf Se Tricyclic pesticidal compounds
CN116801720A (en) 2020-11-30 2023-09-22 皮埃企业有限公司 Novel agrochemical compositions comprising 3-substituted benzamidine compounds and uses thereof
CN114349711B (en) * 2022-02-28 2023-08-15 四川依维欣医药科技有限公司 Synthesis method of (R) -1-Boc-3-hydroxymethyl piperazine
WO2023250467A2 (en) * 2022-06-24 2023-12-28 Baylor College Of Medicine Inhibitors of antimicrobial resistance and methods using same
CN117342983B (en) * 2023-12-05 2024-02-06 康羽生命科学技术(苏州)有限公司 Synthesis method of peracetylated GalNAc-L96

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013103760A1 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 University Of South Florida Compositions, methods of use, and methods of treatment

Family Cites Families (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4616038A (en) 1978-07-24 1986-10-07 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US5071843A (en) 1978-07-24 1991-12-10 Merck & Co., Inc. Combination of 2-substituted carbapenems with dipeptidase inhibitors
US4880793A (en) 1978-07-24 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US4539208A (en) 1980-09-17 1985-09-03 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US4786311A (en) 1985-05-30 1988-11-22 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal sulfonamides
CA1231336A (en) 1985-05-30 1988-01-12 George Levitt Herbicidal sulfonamides
JPS62242679A (en) 1986-04-11 1987-10-23 イ−・アイ・デユポン・デ・ニモアス・アンド・カンパニ− Herbicidal sulfonamides
US4838925A (en) 1986-04-25 1989-06-13 E. I. Du Pont De Nemours And Company Heterocyclic acyl sulfonamides
CA1273336A (en) 1986-04-25 1990-08-28 Chi-Ping Tseng Herbicidal heterocyclic carbonyl sulfonamides
US4927453A (en) * 1986-10-17 1990-05-22 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal sulfonamides
CN1095549A (en) 1986-11-24 1994-11-30 纳幕尔杜邦公司 Herbicidal sulfonamide compositions and method for making thereof and application
ES2090393T3 (en) 1991-04-11 1996-10-16 Hoffmann La Roche BETA-LACTAMAS.
DE60024455T2 (en) 1999-07-06 2006-08-03 Methylgene, Inc., Saint-Laurent Sulfonamidomethylphosphonat-beta-lactamase inhibitors
FR2812635B1 (en) 2000-08-01 2002-10-11 Aventis Pharma Sa NOVEL HETEROCYCLIC COMPOUNDS, PREPARATION AND USE AS MEDICAMENTS IN PARTICULAR AS ANTI-BACTERIALS
US7439253B2 (en) 2002-12-06 2008-10-21 Novexel Heterocyclic compounds, their preparation and their use as medicaments, in particular as antibacterials and beta-lactamase inhibitors
EP2069347A2 (en) 2006-09-27 2009-06-17 Merck & Co., Inc. Novel inhibitors of beta-lactamase
CN103130686B (en) 2011-12-02 2016-09-14 天津市国际生物医药联合研究院 N, N '-asymmetric diaryl substitute urea compound and its production and use
CN103191091B (en) 2012-01-04 2016-12-14 天津市国际生物医药联合研究院 Sulfamide compound application in suppression NDM-1 activity
GB201310542D0 (en) 2013-06-13 2013-07-31 Antabio Sas Compounds
EP3054944B1 (en) 2013-10-07 2019-12-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Factor xia inhibitors
EP3096754B1 (en) 2014-01-22 2018-08-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
EP3139918B1 (en) 2014-05-09 2019-12-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Beta-tetrazolyl-propionic acids as metallo-beta-lactamase inhibitors
WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
PE20180500A1 (en) 2015-06-26 2018-03-09 Takeda Pharmaceuticals Co DERIVATIVES OF 2,3-DIHIDRO-4H-1,3-BENZOXAZIN-4-ONA AS MODULATORS OF THE MUSCARINIC CHOLINERGIC RECEPTOR M1
US11207312B2 (en) * 2017-07-17 2021-12-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013103760A1 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 University Of South Florida Compositions, methods of use, and methods of treatment

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BARBARA GORDON GREEN ET AL.: "Inhibition of bacterial peptide deformylase by biaryl acid analogs", ARCHIVES OF BIOCHEMISTRY AND BIOP, vol. 375, no. 2, 15 March 2000 (2000-03-15), XP055341178 *
JEFFREY H TONEY ET AL.: "Antibiotic sensitization using biphenyl tetrazoles as potent inhibitors of Bacteroides fragilis metallo-beta-lactamase", CHEMISTRY & BIOLOGY, vol. 5, no. 4, 6 April 1998 (1998-04-06), XP055341185 *
JEFFREY H TONEY ET AL.: "Structure-activity relationships of biphenyl tetrazoles as metallo- beta-lactamase inhibitors", BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY LETTERS, vol. 9, no. 18, 31 December 1999 (1999-12-31), XP004179963 *
LARS OLSEN ET AL.: "Docking and scoring of metallo-beta-lactamases inhibitors", JOURNAL OF COMPUTER-AIDED MOLECULAR DESIGN, vol. 18, no. 4, 31 December 2004 (2004-12-31), pages 287 - 302, XP055341193 *

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10221163B2 (en) 2015-06-26 2019-03-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
US10544130B2 (en) 2015-06-26 2020-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
US11207312B2 (en) * 2017-07-17 2021-12-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof
WO2019070044A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 武田薬品工業株式会社 Heterocyclic compounds
US11447488B2 (en) 2017-10-06 2022-09-20 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compounds
US11939327B2 (en) 2017-10-06 2024-03-26 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic compounds
EP3795149A4 (en) * 2018-05-14 2022-01-05 National University Corporation Tokai National Higher Education and Research System Beta-lactamase inhibitor
US11497731B2 (en) 2018-05-14 2022-11-15 National University Corporation Tokai National Higher Education And Research System β-lactamase inhibitor
WO2021023813A1 (en) * 2019-08-06 2021-02-11 Domain Therapeutics 5-heteroaryl-pyridin-2-amine confounds as neuropeptide ff receptor antagonists
CN111484506A (en) * 2020-04-16 2020-08-04 天津大学 Preparation method of improved meropenem side chain intermediate thiolactone by adding surfactant

Also Published As

Publication number Publication date
BR112017027719A2 (en) 2018-09-11
PT3313832T (en) 2021-04-21
AU2016281710A1 (en) 2017-12-21
GEP20207169B (en) 2020-10-12
PL3313832T3 (en) 2021-07-05
JP2018522864A (en) 2018-08-16
US20180179190A1 (en) 2018-06-28
HRP20210481T1 (en) 2021-08-20
ES2865284T3 (en) 2021-10-15
EP3313828B1 (en) 2023-07-12
MX2017016672A (en) 2018-07-06
EP3313828A1 (en) 2018-05-02
MD3313832T2 (en) 2021-06-30
US20190144432A1 (en) 2019-05-16
DOP2017000310A (en) 2018-04-30
CR20170605A (en) 2018-05-15
BR112017027719B1 (en) 2024-02-06
CA2990234A1 (en) 2016-12-29
CY1124086T1 (en) 2022-05-27
EP3313832B1 (en) 2021-02-24
IL256265A (en) 2018-02-28
HUE054410T2 (en) 2021-09-28
JO3588B1 (en) 2020-07-05
JP6409141B2 (en) 2018-10-17
IL256265B (en) 2021-08-31
CA2990234C (en) 2020-07-21
CO2017013360A2 (en) 2018-03-20
EP3313832A1 (en) 2018-05-02
US10544130B2 (en) 2020-01-28
SI3313832T1 (en) 2021-05-31
MA42244A (en) 2018-05-02
CN107922394A (en) 2018-04-17
JP2018104463A (en) 2018-07-05
WO2016210215A1 (en) 2016-12-29
PE20180600A1 (en) 2018-04-09
ECSP18005828A (en) 2018-04-30
TW201713633A (en) 2017-04-16
MA42244B1 (en) 2021-04-30
PH12017502418A1 (en) 2018-07-02
TN2017000509A1 (en) 2019-04-12
US20180244656A1 (en) 2018-08-30
BR112017027719A8 (en) 2023-04-11
TWI715595B (en) 2021-01-11
EA032698B1 (en) 2019-07-31
EP3313828A4 (en) 2019-01-09
US10227331B2 (en) 2019-03-12
LT3313832T (en) 2021-05-10
AU2016281710B2 (en) 2018-10-11
SV2017005604A (en) 2018-12-14
US10221163B2 (en) 2019-03-05
KR102089878B1 (en) 2020-03-16
CN107922394B (en) 2021-07-13
WO2016210234A1 (en) 2016-12-29
JP6670333B2 (en) 2020-03-18
RS61696B1 (en) 2021-05-31
DK3313832T3 (en) 2021-04-19
EA201890150A1 (en) 2018-05-31
CL2017003325A1 (en) 2018-05-11
AR105122A1 (en) 2017-09-06
KR20180015267A (en) 2018-02-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2016206101A1 (en) Metallo-beta-lactamase inhibitors
TWI597281B (en) Beta-lactamase inhibitor compounds
KR102537340B1 (en) Beta-Lactamase Inhibitor Compounds
WO2015112441A1 (en) Metallo-beta-lactamase inhibitors
EP3583096B1 (en) Macrocyclic broad spectrum antibiotics
KR102671585B1 (en) Macrocyclic broad-spectrum antibiotic
KR102667828B1 (en) Beta-lactamase inhibitor compounds
NZ756220B2 (en) Macrocyclic broad spectrum antibiotics

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 15895999

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 15895999

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1