WO2015189117A1 - Heterobicyclisch substituierte 4-oxobutansäure-derivate und ihre verwendung - Google Patents

Heterobicyclisch substituierte 4-oxobutansäure-derivate und ihre verwendung Download PDF

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Volkhart Min-Jian Li
Yolanda Cancho Grande
Andreas Timmermann
Dirk Brohm
Hannah JÖRIßEN
Pamela BOGNER
Michael Gerisch
Dieter Lang
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Definitions

  • the present application relates to novel, heterobicyclic substituted 4-oxobutanoic acid derivatives, processes for their preparation, their use alone or in combinations for the treatment and / or prevention of diseases and their use for the preparation of medicaments for treatment and / or prevention of diseases, in particular for the treatment and / or prevention of respiratory, pulmonary and cardiovascular diseases.
  • Human macrophage elastase belongs to the family of matrix metallo-peptidases (MMPs) and is also called human matrix metallo-peptidase 12 (hMMP-12).
  • MMPs matrix metallo-peptidases
  • hMMP-12 human matrix metallo-peptidase 12
  • the protein is increased i.a. formed by macrophages after contact with "irritating" substances or particles, activated and released.
  • Such substances and particles may, for example, be contained as impurities in suspended particles, as may be mentioned, inter alia. in cigarette smoke or industrial dusts.
  • endogenous and foreign body cell constituents and cellular debris are counted among these irritant particles, as they may be present in some cases in high concentrations in inflammatory processes.
  • the highly active enzyme is capable of degrading a variety of connective tissue proteins, e.g. primarily the protein elastin (hence the name), as well as other proteins and proteoglycans such as collagen, fibronectin, laminin, chondroitin sulfate, heparan sulfate and others.
  • This proteolytic activity of the enzyme enables macrophages to penetrate the basal membrane.
  • Elastin for example, occurs in high concentrations in all tissue types that exhibit high elasticity, e.g. in the lungs and arteries.
  • the HME plays an important role in tissue degradation (tissue remodeling).
  • the HME is an important modulator in inflammatory processes.
  • TGF-ß tumor necrosis factor-alpha
  • TGF-ß transforming growth factor -beta
  • MMP-12 also plays a role in host defense, particularly in the regulation of antiviral immunity, presumably through intervention in the interferon-alpha (IFN- ⁇ ) -mediated signaling pathway [A new transcriptional role-matrix matrix metalloproteinase -12 in antiviral immunity, Marchant et al., Nature Med. 20, 493-502 (2014)].
  • IFN- ⁇ interferon-alpha
  • HME plays an important role in many diseases, injuries and pathological changes, their emergence and / or progression with an infectious or non-infectious inflammatory event and / or a proliferative and hypertrophic tissue and vascular remodeling.
  • diseases and / or damage to the lung, the kidney or the cardiovascular system or these may be cancerous diseases or other inflammatory diseases [Macrophage metalloelasta.se (MMP-12) as a target for inflammatory respiratory diseases, Lagente et al., Expert Opin. Ther.
  • diseases and injuries of the lung are in particular the chronic obstructive pulmonary illness (COPD), the lung emphysema (lung emphysema), interstitial pulmonary diseases (interstitial lung diseases, ILD) such as the pulmonary fibrosis (ideopathic pulmonary fibrosis, IPF) and pulmonary sarcoidosis (pulmonary sareoidosis), acute lung injury (ALI), acute respiratory distress syndrome (ARDS), cystic fibrosis (CF), also called cystic fibrosis).
  • ILD interstitial lung diseases
  • ILD interstitial lung diseases
  • pulmonary fibrosis ideopathic pulmonary fibrosis, IPF
  • pulmonary sarcoidosis pulmonary sarcoidosis
  • CF cystic fibrosis
  • liver fibrosis and systemic sclerosis are mentioned as examples.
  • Atherosclerosis here in particular carotid arteriosclerosis
  • infective endocarditis in particular viral myocarditis
  • cardiomyopathy Cardiac insufficiency in particular viral myocarditis
  • cardiomyopathy Cardiac insufficiency in particular viral myocarditis
  • cardiomyopathy Cardiac insufficiency in particular viral myocarditis
  • cardiomyopathy Cardiac insufficiency CAD
  • cardiogenic shock acute coronary syndrome (ACS)
  • aneurysms myocardial infarct
  • AMDI myocardial infarct
  • CKD chronic kidney disease
  • Alport syndrome also mentioned here are the metabolic syndrome and obesity.
  • SIRS systemic inflammatory response syndrome
  • MODF multi-organ dysfunction
  • intravascular Coagulation dissminated intravascular coagulation, DIC
  • rheumatoid diseases for example rheumatoid arthritis, as well as chronic bowel inflammation (IBD; Crohn's disease, CD, ulcerative colitis, ulcerative colitis , UC).
  • elastase-mediated pathological processes underlie a shifted balance between free elastase (HME) and the body's own elastase inhibitor protein (tissue inhibitor of metalloproteinase, ⁇ ).
  • HME free elastase
  • ⁇ tissue inhibitor of metalloproteinase
  • MMP-2 oxidative stress, protease-antiprotease imbalance, and inflammation
  • MMP-7 Matrilysins
  • MMP-12 HME (MMP-12) is so far the only representative of metallo-elastase.
  • MMPs are assembled into the group of so-called MT-MMPs (membrane-type MMPs), since they have a characteristic domain that anchors the protein in the membrane (MMP-14, MMP-15, MMP-16, MMP-17 , MMP-24, MMP-25).
  • MMP-14, MMP-15, MMP-16, MMP-17 , MMP-24, MMP-25 common to all MMPs is a conserved zinc-binding region in the active site of the enzyme, which is important for catalytic activity and is also found in other metalloproteins (eg a disintegrin and metalloproteinase, ADAM).
  • ADAM disintegrin and metalloproteinase
  • the complexed zinc is masked by a sulfhydryl group in the N-terminal pro-peptide domain of the protein, resulting in an enzymatically inactive pro-form of the enzyme. Only after cleavage of this pro-peptide domain is the zinc in the active center of the enzyme freed from this coordination and the enzyme thereby activated (so-called activation by cysteine switch) [matrix metalloproteinase inhibitors as therapy for inflammatory and vascular diseases, Hu et al ., Nature Rev. Drug Discov. 6, 480-498 (2007)].
  • MMPs MMPs and other similar molecules
  • ADAMs eg ADAMs
  • Numerous in vitro and preclinical in vz 'vo experiments have contributed much to a better understanding of MMPs in different disease models (eg transgenic animals, knock-out animals and genetic data from human studies).
  • the validation of a target with regard to a possible drug therapy can ultimately only be carried out in clinical trials on humans or patients.
  • the first generation of MMP inhibitors has been clinically studied in cancer studies.
  • the desired effect on one or more MMP targets has been masked by an undesired effect on one or more MMP anti-targets or by an undesired effect on another target site (off-target) [Validating matrix metalloproteinases as drug targets and anti-targets for Cancer Therapy, Coverall & Kleifeld, Nature Rev. Cancer 6, 227-239 (2006)].
  • MMP-12 inhibitors Newer MMP inhibitors, which are characterized by increased selectivity, have now also been clinically tested, including compounds explicitly referred to as MMP-12 inhibitors, but so far also without any conclusive clinical success. At a closer Look here, too, the previously described as selective inhibitors have been found to be not so selective.
  • test compound MMP408 shows a significantly decreased affinity for the mouse orthologous MMP-12 target: IC 50 2 nM (human MMP-12), IC 50 160 nM (murine MMP-12), IC 50 320 nm (MMP-12 of the Rat) [see above Li et al., 2009; Mukhopadhyay et al., 2010].
  • the potency at the target MMP-12 itself is very important.
  • a highly potent compound will result in a lower therapeutic dose than a less potent compound, and generally a lower dose should be associated with a reduced likelihood of side effects.
  • the free fraction is defined as the available amount of one A compound that is not bound to components of the blood plasma, which are mainly blood protein components such as eg albumin).
  • the specificity is therefore of paramount importance.
  • novel macrophage elastase inhibiting agents should have high selectivity and specificity in order to be able to specifically inhibit HME.
  • a good metabolic stability of the substances is necessary (low clearance).
  • these compounds should be stable under oxidative conditions so as not to lose their inhibitory potency in disease.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • the first symptoms of the disease usually appear from the fourth to fifth decade of life. In the following years, the shortness of breath is often aggravated and it manifests cough, associated with an extensive and sometimes purulent sputum and a stenosis breathing to a dyspnea.
  • COPD is primarily a disease of smokers: smoking is responsible for 90% of all COPD cases and 80-90% of all COPD deaths. COPD is a major medical problem and is the sixth most common cause of death worldwide. About 4-6% of over 45's are affected.
  • the underlying mechanism involves immune cells that release various chemokines during the inflammatory response of the lungs.
  • neutrophilic cells and subsequently alveolar macrophages are lured to the lung connective tissue and lumen.
  • Neutrophils secrete a protease cocktail containing mainly HNE and proteinase 3.
  • Activated macrophages release the HME.
  • the protease / antiprotease balance is shifted locally in favor of the proteases, which leads inter alia to an uncontrolled elastase activity and, as a consequence thereof, to an excessive degradation of the elastin of the alveolar bodies. This tissue breakdown causes a collapse of the bronchi.
  • HME protein is associated with smoking or COPD status: detectable HME levels are lowest in non-smokers, slightly higher in former smokers and smokers, and in COPD - Patients significantly increased [Elevated MMP-12 protein levels in induced sputum from patients with COPD, Demedts et al., Thorax 61, 196-201 (2006)]. Similar data were collected with human sputum samples and bronchial alveolar washing fluid (BALF).
  • BALF bronchial alveolar washing fluid
  • HME could be detected and quantified on activated macrophages: HME amount COPD patient / smoker> COPD patient / former smoker> former smoker> Non-smoker [Patterns of airway inflammation and MMP-12 expression in smokers and ex-smokers with COPD, Babusyte et al., Respir. Res. 8, 81-90 (2007)].
  • IPD interstitial lung disease
  • IPF idiopathic pulmonary fibrosis
  • MMP-12 expression is also known in ischemic kidney injuries, as is the involvement of MMP-12 in further inflammatory kidney disease [JNK signaling in human and experimental renal ischemia / reperfusion injury, Kanellis et al., Nephrol. Dial. Transplant. 25, 2898-2908 (2010); Macrophage Metalloelastase as a Major Factor for Glomerular Injury in Anti-Glomerular Basement Membrane Nephritis, Kaneko et al., J. Immun. 170, 3377-3385 (2003); Role for macrophage metallo elastase in Glomerular Basement Membrane Damage Associated with Alport Syndrome, Rao et al., Am. J. Pathol.
  • the object of the present invention was therefore to identify and provide new substances which act as potent, selective and specific inhibitors of human macrophage elastase (HME / MMP-12) and as such for the treatment and / or prevention of, in particular, respiratory diseases, the Lungs and the cardiovascular system are suitable.
  • HME / MMP-12 human macrophage elastase
  • WO 98/09940 A1 and WO 99/18079 A1 other biarylbutanoic acid derivatives have been disclosed as inhibitors of MMP-2, MMP-3 and / or MMP-13, which are suitable for the treatment of various diseases.
  • WO 00/40539 A1 claims the use of 4-biaryl-4-oxobutanoic acids for the treatment of pulmonary and respiratory diseases, based on a different degree of inhibition of MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-12 and MMP-13 through these compounds.
  • WO 2012/014114-A1 describes 3-hydroxypropionic acid derivatives and WO 2012/038942-A1 describes oxy- or sulfonylacetic acid derivatives as dual MMP-9/12 inhibitors.
  • WO 96/38434 A1 disclose tricyclic heteroaromatic compounds as inhibitors, in particular of MMP-2 and MMP-3, and in WO 2005/026120 -A1, inter alia, tricyclic substituted 3-hydroxypentanoic acid derivatives are claimed as MMP-12 inhibitors.
  • heterobicyclic substituted 4-oxobutanoic acid derivatives have a significantly improved profile with respect to their potency and selectivity towards the human macrophage elastase (HME / hMMP-12) in comparison to the compounds known from the prior art.
  • This more targeted mode of action can be expected lower dosing of the compounds of the invention and a reduced risk of the occurrence of undesirable side effects in the therapy.
  • the compounds of the invention are characterized by a significant inhibitory activity against the rodent orthologous MMP-12 peptidases, such as mouse MMP-12 (also referred to as murine macrophage elastase, MME) and rat MMP-12.
  • mouse MMP-12 also referred to as murine macrophage elastase, MME
  • rat MMP-12 This enables preclinical evaluation of the substances in various established animal models of the diseases described above.
  • the present invention relates to compounds of the general formula (I)
  • substituent is hydrogen or a substituent selected from the group of fluorine, methyl, fluoromethyl, difluoromethyl and trifluoromethyl, where such substituent may be bonded in the designated position 5, 6, 7 or 8, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • Compounds according to the invention are the compounds of the formula (I) and their salts, solvates and solvates of the salts comprising the compounds of the formulas below and their salts, solvates and solvates of the salts and of the formula (I) encompassed by formula (I), hereinafter referred to as exemplary compounds and their salts, solvates and solvates of the salts, as far as the compounds of formula (I), the compounds mentioned below are not already salts, solvates and solvates of the salts.
  • Salts used in the context of the present invention are physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention. Also included are salts which are not suitable for pharmaceutical applications themselves, but can be used, for example, for the isolation, purification or storage of the compounds according to the invention.
  • Physiologically acceptable salts of the compounds according to the invention include, in particular, the salts derived from customary bases, such as, by way of example and by way of preference, alkali metal salts (eg sodium and potassium salts), alkaline earth salts (eg calcium and magnesium salts), zinc salts and ammonium salts derived from ammonia or organic amines having 1 to 16 C atoms, such as, by way of example and by way of preference, ethylamine, diethylamine, triethylamine, / V, / V-diisopropylethylamine, monoethanolamine, diethanolamine, triethanolamine, tromethamine, dimethylaminoethanol, diethylaminoethanol, choline, procaine, dicyclohexylamine, dibenzylamine, / V-methylmor - pholine, / V-methylpiperidine, arginine, lysine and 1,2-ethylenediamine.
  • customary bases such
  • solvates are those forms of the compounds according to the invention which form a complex in the solid or liquid state by coordination with solvent molecules. Hydrates are a special form of solvates that coordinate with water. As solvates, hydrates are preferred in the context of the present invention.
  • the compounds of the invention may exist in different stereoisomeric forms, i. in the form of configurational isomers or optionally also as conformational isomers (enantiomers and / or diastereomers, including those in atropisomers).
  • the present invention therefore includes the enantiomers and diastereomers and their respective mixtures. From such mixtures of enantiomers and / or diastereomers, the stereoisomerically uniform components can be isolated in a known manner; Preferably, chromatographic methods are used for this, in particular HPLC chromatography on achiral or chiral phase.
  • enantiomerically pure in the context of the present invention is understood to mean that the compound concerned with respect to the absolute configuration of the chiral center is present in an enantiomeric excess of more than 95%, preferably more than 98%.
  • the enantiomeric excess (ene, ee value) is calculated here by evaluating the chromatogram of a HPLC analysis on a chiral phase according to the following formula:
  • Enantiomer 1 (area%) + enantiomer 2 (area%)
  • the present invention encompasses all tautomeric forms.
  • the present invention also includes all suitable isotopic variants of the compounds of the invention.
  • An isotopic variant of a compound according to the invention is understood to mean a compound in which at least one atom within the compound according to the invention is exchanged for another atom of the same atomic number but with a different atomic mass than the atomic mass that usually or predominantly occurs in nature.
  • isotopes which can be incorporated into a compound of the invention are those of hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, phosphorus, sulfur, fluorine, chlorine, bromine and iodine, such as ⁇ (deuterium), ⁇ (tritium), 13 C, 14 C, 15 N, 17 0, 18 0, 32 P, 33 P, 33 S, 34 S, 35 S, 36 S, 18 F, 36 C1, 82 Br, 123 I, 124 I, 129 I and 131 I
  • Certain isotopic variants of a compound of the invention such as, in particular, those in which one or more radioactive isotopes are incorporated, may be useful, for example, for the study of the mechanism of action or drug distribution in the body; Due to the comparatively easy production and detectability, compounds labeled with 3 H or 14 C isotopes in particular are suitable for this purpose.
  • isotopes such as deuterium may result in certain therapeutic benefits as a result of greater metabolic stability of the compound, such as prolonging the body's half-life or reducing the required effective dose;
  • modifications of the compounds of the invention may therefore optionally also constitute a preferred embodiment of the present invention.
  • Isotopic variants of the compounds according to the invention can be prepared by generally customary processes known to the person skilled in the art, for example by the methods described below and the rules reproduced in the exemplary embodiments by using corresponding isotopic modifications of the respective reagents and / or starting compounds.
  • the present invention also includes prodrugs of the compounds of the invention.
  • prodrugs here denotes compounds which may themselves be biologically active or inactive, but are converted during their residence time in the body by, for example, metabolic or hydrolytic routes to compounds of the invention.
  • the present invention comprises, as prodrugs, hydrolyzable ester derivatives of the carboxylic acids of the formula (I) according to the invention.
  • esters which can be hydrolyzed in physiological media, under the conditions of the biological assays described below, and in particular in vivo enzymatically or chemically to the free carboxylic acids, as the main biologically active compounds.
  • esters preference is given to (C 1 -C -alkyl esters in which the alkyl group may be straight-chain or branched.) Particular preference is given to methyl, ethyl or ethyl-butyl esters.
  • (C 1 -C -alkyl and C 1 -C 7) -alkyl in the context of the invention represent a straight-chain or branched alkyl radical having 1 to 8 or 4 to 7 carbon atoms, by way of example: methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n- Butyl, isobutyl, sec-butyl, ieri-butyl, n-pentyl, 2-pentyl, 3-pentyl, neopentyl, 3-methylbutyl, n-hexyl, 2-hexyl, 3-hexyl, 4-methylpentyl, n- Heptyl, 5-methylhexyl, n-octyl and 6-methylheptyl
  • Preferred is a straight-chain or branched alkyl radical having 4 to 7 carbon atoms such as n-butyl, isobutyl, sec-butyl, ieri.-buty
  • (C 1 -C 6) -cycloalkyl in the context of the invention is a monocyclic saturated cycloalkyl group having 3 to 6 ring carbon atoms. Examples which may be mentioned are: cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl and cyclohexyl.
  • radicals are substituted in the compounds according to the invention, the radicals can, unless otherwise specified, be monosubstituted or polysubstituted. Substitution with one or two identical or different substituents is preferred. Particularly preferred is the substitution with a substituent.
  • R 1 is (C 4 -C 4) -alkyl or a group of the formula where *** denotes the link to the O atom,
  • L is -CH 2 - or -CH 2 -CH 2 - means and
  • R 2A and R 2B are both hydrogen or linked together and together form a -CH 2 CH 2 bridge and R 3 is hydrogen or a substituent selected from the group consisting of methyl and trifluoromethyl, such substituent being in the designated position 6 or 7, as well as their salts, solvates and solvates of the salts.
  • a particular embodiment of the present invention relates to compounds of the formula (I) in which for bicyclic heteroaryl of the formula
  • Another particular embodiment of the present invention relates to compounds of the formula (I) in which
  • R 1 is (C 4 -C 7 ) -alkyl, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • Another particular embodiment of the present invention relates to compounds of the formula (I) in which
  • R 1 is a group of the formula where *** denotes the link to the O atom
  • L is -CH 2 - or -CH 2 -CH 2 - means and
  • Another particular embodiment of the present invention relates to compounds of the formula (I) in which R 2A and R 2B are both hydrogen, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • Another particular embodiment of the present invention relates to compounds of the formula (I) in which R 3 is hydrogen or trifluoromethyl bound in the designated position 6, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • L is -CH 2 - or -CH 2 -CH 2 - means and
  • R 2A and R 2B are both hydrogen and
  • R 3 is hydrogen or trifluoromethyl bound in the designated position 6, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • R 3 is hydrogen or trifluoromethyl bound in the designated position 6, and their salts, solvates and solvates of the salts.
  • R 1 and R 3 have the abovementioned meanings
  • R 2A and R 2B are each hydrogen and the chiral carbon atom marked with * in enantiomerically pure form has the ⁇ -configuration depicted, and also its salts, solvates and solvates salts.
  • Another object of the invention is a process for the preparation of compounds of formula (I) wherein R 2A and R 2B are each hydrogen, which is characterized in that di-ieri.-butyl- (2-hydroxyethyl) malonate of the formula ( ⁇ )
  • a suitable temporary protecting group such as benzyl and
  • Tosylate is the compound of formula (VI)
  • reaction (II) + (III) - (IV) is carried out under the usual conditions of a "Mitsunobu reaction" in the presence of a phosphine and an azodicarboxylate [see, e.g. D.L. Hughes, Org. Reactions 42, 335 (1992); D.L. Hughes, Org. Prep. Proced. Int. 28 (2), 127 (1996)].
  • Suitable phosphine components are triphenylphosphine, tri-n-butylphosphine, 1,2-bis (diphenylphosphino) ethane (DPPE), diphenyl (2-pyridyl) phosphine, (4-dimethylaminophenyl) diphenylphosphine or tris (4-dimethylaminophenyl ) phosphine.
  • DPPE 1,2-bis (diphenylphosphino) ethane
  • diphenyl (2-pyridyl) phosphine diphenyl (2-pyridyl) phosphine
  • (4-dimethylaminophenyl) diphenylphosphine or tris (4-dimethylaminophenyl ) phosphine.
  • azodicarboxylate for example, diethyl azodicarboxylate (DEAD), diisopropyl azodicarboxylate (DIAD), Oi tert-butylazodicarboxylat, / V, / V, / VW tetramethylazodicarboxamide (TMAD), l, l '- (azodicarbonyl) di-piperidine (ADDP) or 4,7-dimethyl-3,5,7-hexahydro-l, 2,4,7-tetrazocine-3,8-dione (DHTD) can be used.
  • DEAD diethyl azodicarboxylate
  • DIAD diisopropyl azodicarboxylate
  • TMAD Oi tert-butylazodicarboxylat, / V, / V, / VW tetramethylazodicarboxamide
  • ADDP 4,7-dimethyl-3,5,7-hexahydro-l, 2,4,
  • Inert solvents for reaction (II) + (III) - (IV) are, for example, ethers, such as diethyl ether, diisopropyl ether, methyl ferric butyl ether, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, 1,2-dimethoxyethane or bis (2-methoxyethyl) ethers, hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, pentane, hexane or cyclohexane, or polar aprotic solvents such as acetonitrile, butyronitrile, dimethylsulfoxide (DMSO), N-dimethylformamide (DMF), N-dimethylacetamide (DMA), ⁇ , ⁇ '-dimethylpropyleneurea (DMPU) or -methylpyrrolidinone (NMP). It is also possible to use mixtures of such solvents. Preference is given to using tetrahydr
  • reaction (II) + ( ⁇ ) - (IV) is usually carried out in a temperature range from -20 ° C to + 60 ° C, preferably at 0 ° C to + 40 ° C.
  • the use of a microwave apparatus in this reaction may be advantageous.
  • Suitable bases for the alkylation reactions (IV) + (V) -> (VI) and (IV) + (Vit) -> (VIII) are particularly suitable alkali metal alkoxides such as sodium or potassium, sodium or potassium or sodium or Potassium feri.-butylate, alkali metal hydrides such as sodium or potassium hydride, amides such as lithium diisopropylamide or lithium, sodium or potassium bis (trimethylsilyl) amide, or conventional organometallic bases such as phenyllithium or n-, sec- or ieri.-butyllithium , Preferably, sodium hydride or potassium ieri.-butoxide is used.
  • Suitable inert solvents for process steps (IV) + (V) -> (VI) and (IV) + (VII) -> (VIII) are, for example, ethers, such as diethyl ether, diisopropyl ether, methyl ieri-butyl ether, tetrahydrofuran, 1 , 4-dioxane, 1,2-dimethoxyethane or bis (2-methoxyethyl) ether, hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, pentane, hexane or cyclohexane, or dipolar aprotic solvents such as acetonitrile, butyronitrile, A 1 -dimethylformamide ( DMF), dimethylacetamide (DMA), N, N'-dimethylpropyleneurea (DMPU), N-methylpyrrolidinone (NMP) or dimethylsulfoxide (DMSO).
  • ethers such as dieth
  • reaction (IV) + (V) -> (VI) and (IV) + (VII) -> (VIII) are generally in a temperature range from -70 ° C to + 100 ° C, preferably at -20 ° C. to + 50 ° C performed.
  • the reaction is preferably carried out in an alcoholic solvent such as methanol or ethanol, in acetic acid, ethyl acetate, tetrahydrofuran or 1,4-dioxane or in a mixture of such solvents, optionally with the addition of water, in a temperature range from + 20 ° C to + 80 ° C performed.
  • a silyl group such as trimethylsilyl, triethylsilyl, triisopropylsilyl, feri.-butyldimethylsilyl or ieri.-butyldiphenylsilyl can be used as the temporary protective group PG in (VII).
  • Suitable bases for the alkylation reaction ( ⁇ ) + (X) - (VI) are in particular alkali metal carbonates, such as lithium, sodium, potassium or cesium carbonate, alkali metal alcoholates, such as sodium or potassium methoxide, sodium or potassium ethoxide or sodium or potassium -iati-butoxide, alkali metal hydrides such as sodium or potassium hydride, amide bases such as lithium diisopropylamide or lithium, sodium or potassium bis (trimethylsilyl) amide, or conventional organometallic bases such as phenyllithium or n-, sec- or ieri.-butyllithium , Preference is given to using potassium carbonate or potassium ieri-butoxide.
  • alkali metal carbonates such as lithium, sodium, potassium or cesium carbonate
  • alkali metal alcoholates such as sodium or potassium methoxide, sodium or potassium ethoxide or sodium or potassium -iati-butoxide
  • alkali metal hydrides such as sodium or potassium
  • Inert solvents for this reaction are, for example, ethers, such as diethyl ether, diisopropyl ether, methyl tert. -b tyl ether, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, 1,2-dimethoxyethane or bis (2-mefh oxyethyl) ether, alcohols such as methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, ieri.-butanol or n-pentanol, hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, pentane, hexane or cyclohexane, or polar aprotic solvents such as acetone, methyl ethyl ketone, ethyl acetate, acetonitrile, butyronitrile, dimethyl sulfoxide (DMSO), N, N-dimethyl
  • reaction (IX) + (X) - (VI) is generally carried out in a temperature range from 0 ° C to + 120 ° C, depending on the reactivity of the components involved.
  • the ester cleavage and decarboxylation to the monocarboxylic acid in process step (VI) - (I-A) is achieved by treatment of the diester with a strong acid such as trifluoroacetic acid or hydrogen chloride and subsequent heating of the intermediately formed dicarboxylic acid.
  • the reaction can be carried out in a one-pot process, without isolation of the intermediate, or in two stages.
  • the ester cleavage is usually carried out in a temperature range from 0 ° C to + 30 ° C.
  • the subsequent decarboxylation is usually carried out in a temperature range from + 80 ° C to + 150 ° C in a correspondingly high-boiling inert solvent; Preferably, 1,4-dioxane is used for this purpose.
  • the use of a microwave apparatus in this reaction may be advantageous.
  • the process steps described above can be carried out at normal, at elevated or at reduced pressure (for example in the range from 0.5 to 5 bar); In general, one works at normal pressure.
  • the separation of stereoisomers (enantiomers and / or diastereomers) of the compounds of the formula (IA) according to the invention can be achieved by customary methods known to the person skilled in the art. Preferably, chromatographic methods for achiral or chiral separation phases are used for this purpose. Alternatively, it is also possible to carry out a separation via diastereomeric salts of the carboxylic acids of the formula (TA) with chiral amine bases.
  • R 3 has the abovementioned meaning, accessible with sodium nitrite in aqueous hydrochloric acid [see, eg, D. Fernandez-Forner et al. , Tetrahedron 47 (42), 8917-8930 (1991)].
  • ( ⁇ ) (XIII), in which Het, PG and R 1 have the meanings given above, are obtained by known processes for the ⁇ -halogenation of methyl ketones.
  • the compounds of the formulas ( ⁇ ) and ( ⁇ ) in turn can be prepared according to various methods described in the literature, depending on the nature and the substitution pattern of the relevant bicyclic heteroaryl group Het [cf. for example, to benzofuran derivatives: MF Wempe et al., J.Med.Chem.
  • R 3 has the meaning given above and X is a suitable leaving group such as, for example, chlorine, 1-imidazol-1-yl or methylsulfonyloxy (mesyloxy), to the product of the formula (XVI)
  • the cleavage of the 2- (trimethylsilyl) ethyl ester grouping in process step (XVI) - (IB) is carried out by customary methods either with the aid of a strong acid, in particular trifluoroacetic acid, in an inert solvent such as dichloromethane or with the aid of a fluoride, such as in particular tetra-n-butylammonium fluoride, in an ethereal solvent such as tetrahydrofuran.
  • the ester cleavage is generally carried out in a temperature range of -20 ° C to + 25 ° C.
  • the oxidation (XVIII) - (XVI) is preferably carried out with the aid of 1,1-triacetoxy-1,1-dihydro-1,2-benziodoxol-3 (1 /) -one ("Dess-Martin periodinan"). in an inert solvent such as dichloromethane at a temperature of 0 ° C to + 25 ° C.
  • pyridinium chlorochromate PCC
  • dimethyl sulfoxide oxalyl chloride
  • trifluoroacetic anhydride in the presence of an amine base such as triethylamine or diisopropylethylamine
  • organolithium compounds of the formula (XIV) can be prepared by customary processes, for example by deprotonation of a compound of the formula (XIX)
  • Hal is halogen, such as chlorine, bromine or iodine.
  • the compounds of the formulas (XV) and (XVII) can be prepared in various ways, based on published synthesis methods [see, for example, US Pat. the general preparative methods described in WO 96/15096-A1, pages 26-44, in particular the methods A, G, H and K].
  • (XV-A) (XVn-A) in which R 3 and X have the abovementioned meanings can be prepared, for example, by reacting a) e o-2- (trimethylsilyl) efhyl 2-oxocyclo [2.2. 1] heptane-7-carboxylate of the formula (XXI) into the enol triflate of the formula (XXII)
  • the end product is a racemic mixture (based on the configuration of the central cyclopentane ring) of the carboxylic acids (I-B 1) and (I-B2) according to the invention.
  • the compounds according to the invention have valuable pharmacological properties and can be used for the prevention and treatment of diseases in humans and animals.
  • the compounds of the present invention are potent, non-reactive and selective inhibitors of human macrophage elastase (HME / hMMP-12), which have a significantly improved profile of potency and selectivity compared to the compounds known in the art. This more targeted mode of action can be expected lower dosing of the compounds of the invention and a reduced risk of the occurrence of undesirable side effects in the therapy.
  • the compounds according to the invention are therefore particularly suitable for the treatment and / or prevention of diseases and pathological processes, in particular those in which, in the course of an infectious or non-infectious inflammatory event and / or a tissue or vascular remodeling, the macrophage elastase (HME / hMMP-12).
  • these include, in particular, diseases of the respiratory tract and the lungs, such as chronic obstructive pulmonary disease (COPD), asthma and the group of interstitial lung diseases (ILD), and diseases of the cardiovascular system, such as arteriosclerosis and aneurysms ,
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • ILD interstitial lung diseases
  • arteriosclerosis and aneurysms diseases of the cardiovascular system, such as arteriosclerosis and aneurysms
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • pulmonary emphysema e.g. Cigarette smoke-induced pulmonary emphysema, chronic bronchitis (CB), pulmonary hypertension in COPD (PH-COPD), bronchiectasis (BE) and combinations thereof, especially in acute exacerbating stages of the disease (AE-COPD).
  • CB chronic bronchitis
  • PH-COPD pulmonary hypertension in COPD
  • BE bronchiectasis
  • AE-COPD acute exacerbating stages of the disease
  • Types of asthma include asthmatic diseases of varying severity with intermittent or persistent events, such as refractory asthma, bronchial asthma, allergic asthma, intrinsic asthma, extrinsic asthma, and medication-induced or dust-induced asthma.
  • interstitial lung diseases includes idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), pulmonary sarcoidosis and acute interstitial pneumonia, non-specific interstitial pneumonia, lymphoid interstitial pneumonia, respiratory bronchiolitis with interstitial lung disease, cryptogenic organizing pneumonia, desquamative interstitial pneumonia and unclassifiable idiopathic interstitial pneumonia, granulomatous interstitial lung disease, interstitial lung disease of known cause, and other interstitial lung diseases of unknown cause.
  • IPF idiopathic pulmonary fibrosis
  • pulmonary sarcoidosis and acute interstitial pneumonia
  • non-specific interstitial pneumonia non-specific interstitial pneumonia
  • lymphoid interstitial pneumonia lymphoid interstitial pneumonia
  • respiratory bronchiolitis with interstitial lung disease cryptogenic organizing pneumonia
  • desquamative interstitial pneumonia and unclassifiable idiopathic interstitial pneumonia granulomatous interstitial lung disease
  • interstitial lung disease of known cause
  • the compounds of the invention may also be used for the treatment and / or prevention of other respiratory and pulmonary diseases, such as pulmonary arterial hypertension (PAH) and other forms of pulmonary hypertension (PH), bronchiolitis obliterans syndrome (BOS), of acute respiratory tract syndrome (ARDS), acute lung injury (ALI), alpha-1-antitrypsin deficiency (AATD) and cystic fibrosis (CF), of various forms of bronchitis (chronic bronchitis, infectious bronchitis, eosinophilic bronchitis) Bronchiectasis, pneumonia, farmer's lung and related diseases, infectious and non-infectious cough and cold diseases (chronic inflammatory cough, iatrogenic cough), nasal mucosal inflammation (including medicinal Rhinitis, vasomotor rhinitis and season-dependent allergic rhinitis, eg hay fever) and polyps.
  • PHO pulmonary arterial hypertension
  • PH bronchiolitis obliter
  • the group of diseases of the cardiovascular system includes, in particular, arteriosclerosis and its secondary diseases, such as stroke in the arteriosclerosis of the cervical arteries (carotid arteriosclerosis), myocardial infarction in arteriosclerosis of the coronary arteries, peripheral arterial disease (PAD) as a result of arteriosclerosis of the leg arteries, as well as aneurysms, especially aneurysms of the aorta, eg as a result of arteriosclerosis, hypertension, injuries and inflammations, infections (eg rheumatic fever, syphilis, Lyme disease), congenital connective tissue weaknesses (eg in Marfan syndrome and Ehlers-Danlos syndrome) or as a result of aortic volume burden in congenital heart defects with right-left shunt or shunt-dependent pulmonary perfusion, as well as coronary heart aneurysms due to Kawasaki syndrome and brain areas in patients with a congenital malformation the
  • the compounds of the invention may also be used for the treatment and / or prevention of other cardiovascular diseases such as hypertension, heart failure, coronary heart disease, stable and unstable angina pectoris, renal hypertension, peripheral and cardial vascular diseases, arrhythmias, atrial arrhythmias and of the ventricles as well as conduction disorders such as atrio-ventricular blockades of grade I-III, supraventricular tachyarrhythmia, atrial fibrillation, atrial flutter, ventricular fibrillation, ventricular flutter, ventricular tachyarrhythmia, torsades de pointes tachycardia, extrasystoles of the atrium and ventricle, atrioventricular extrasystoles, Sick sinus syndrome, syncope, AV nodal reentry tachycardia, Wolff-Parkinson-White syndrome, acute coronary syndrome (ACS), autoimmune heart disease (pericarditis, endocarditis, valvolitis, aortitis,
  • cardiac insufficiency includes both acute and chronic manifestations of heart failure, as well as specific or related forms thereof, such as acute decompensated heart failure, right heart failure, left heart failure, global insufficiency, ischemic cardiomyopathy, dilated cardiomyopathy, hypertrophic cardiomyopathy, idiopathic cardiomyopathy, congenital heart defects
  • Heart valve failure heart failure in heart valve defects, mitral valve stenosis, mitral valve insufficiency, aortic valve stenosis, aortic valve insufficiency, tricuspid stenosis, tricuspid insufficiency, pulmonary valve stenosis, pulmonary valvular insufficiency, combined valvular heart failure, myocarditis, chronic myocarditis, acute myocarditis, viral myocarditis, diabetic heart failure, alcoholic cardiomyopathy cardiac storage disorders as well as diastolic and systolic heart failure.
  • kidney diseases in particular renal insufficiency and kidney failure.
  • renal insufficiency and renal failure include both acute and chronic manifestations thereof as well as underlying or related renal diseases such as renal hypoperfusion, intradialytic hypotension, obstructive uropathy, glomerulopathies, glomerulonephritis, acute glomerulonephritis, glomerulosclerosis, tubulointerstitial disorders, nephropathic disorders such as primary and congenital kidney disease, nephritis, immunological kidney diseases such as renal transplant rejection and Alport syndrome, immune complex-induced kidney disease, toxicology-induced nephropathy, contrast-induced nephropathy, diabetic and non-diabetic nephropathy, pyelonephritis, renal cysts, nephrosclerosis , hypertensive nephrosclerosis and nephrotic syndrome, which are
  • the present invention also encompasses the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prevention of sequelae of renal insufficiency, such as hypertension, pulmonary edema, heart failure, uremia, anemia, electrolyte imbalances (e.g., hyperkalemia, hyponatremia) and disorders in bone and carbohydrate metabolism.
  • sequelae of renal insufficiency such as hypertension, pulmonary edema, heart failure, uremia, anemia, electrolyte imbalances (e.g., hyperkalemia, hyponatremia) and disorders in bone and carbohydrate metabolism.
  • the compounds according to the invention are suitable for the treatment and / or prevention of diseases of the genitourinary system, such as, for example, benign prostatic syndrome (BPS), benign prostatic hyperplasia (BPH), benign prostate enlargement (BPE), bladder emptying. mental disorders (BOO), lower urinary tract syndromes (LUTS), neurogenic overactive bladder (OAB), incontinence such as mixed, urgency, stress or overflow incontinence (MUI, UUI, SUI, OUI), pelvic pain, and erectile dysfunction and female sexual dysfunction.
  • BPS benign prostatic syndrome
  • BPH benign prostatic hyperplasia
  • BPE benign prostate enlargement
  • bladder emptying bladder emptying.
  • mental disorders BOO
  • LUTS lower urinary tract syndromes
  • OAB neurogenic overactive bladder
  • incontinence such as mixed, urgency, stress or overflow incontinence (MUI, UUI, SUI, OUI), pelvic pain, and erectile dysfunction and female sexual dysfunction.
  • the compounds of the invention have anti-inflammatory activity and can therefore be used as anti-inflammatory agents for the treatment and / or prevention of sepsis (SIRS), multiple organ failure (MODS, MOF), inflammatory diseases of the kidney, chronic intestinal inflammation (IBD, Crohn's disease, ulcerative colitis ), Pancreatitis, peritonitis, cystitis, urethritis, prostatitis, epidymitis, oophoritis, salpingitis, vulvovaginitis, rheumatoid diseases, inflammatory diseases of the central nervous system, multiple sclerosis, inflammatory skin diseases, and inflammatory ocular diseases.
  • SIRS sepsis
  • MODS multiple organ failure
  • MOF multiple organ failure
  • IBD chronic intestinal inflammation
  • IBD chronic intestinal inflammation
  • Crohn's disease chronic intestinal inflammation
  • ulcerative colitis ulcerative colitis
  • Pancreatitis peritonitis
  • cystitis cystitis
  • urethritis prostatitis
  • the compounds according to the invention are furthermore suitable for the treatment and / or prevention of fibrous diseases of the internal organs, such as, for example, the lung, the heart, the kidney, the bone marrow and in particular the liver, as well as dermatological fibroses and fibroid diseases of the eye .
  • the term fibrotic disorders includes in particular such diseases as liver fibrosis, liver cirrhosis, pulmonary fibrosis, endomyocardial fibrosis, nephropathy, glomerulonephritis, interstitial kidney fibrosis, fibrotic damage as a result of diabetes, bone marrow fibrosis, peritoneal fibrosis and similar fibrotic disorders, scleroderma, Morphaea, keloids, hypertrophic scarring, nevi, diabetic retinopathy, proliferative vitroretinopathy and connective tissue diseases (eg sarcoidosis).
  • the compounds of the invention may also be used to promote wound healing, to
  • the compounds of the present invention can be used for the treatment and / or prevention of anemias, such as hemolytic anemias, especially hemoglobinopathies such as sickle cell anemia and thalassemias, megaloblastic anemias, iron deficiency anemias, acute blood loss anemia, crowding anaemias and aplastic anemias.
  • anemias such as hemolytic anemias, especially hemoglobinopathies such as sickle cell anemia and thalassemias, megaloblastic anemias, iron deficiency anemias, acute blood loss anemia, crowding anaemias and aplastic anemias.
  • the compounds of the invention are also useful in the treatment of cancers, such as skin cancers, brain tumors, breast cancers, bone marrow tumors, leukemias, liposarcomas, carcinomas of the gastrointestinal tract, liver, pancreas, lung, kidney, ureter, prostate and genital tract, and of malignant tumors of the lymphoproliferative system, such as Hodgkin's and Non-Hodgkin's Lymphoma.
  • cancers such as skin cancers, brain tumors, breast cancers, bone marrow tumors, leukemias, liposarcomas, carcinomas of the gastrointestinal tract, liver, pancreas, lung, kidney, ureter, prostate and genital tract
  • malignant tumors of the lymphoproliferative system such as Hodgkin's and Non-Hodgkin's Lymphoma.
  • the compounds according to the invention can be used for the treatment and / or prevention of lipid metabolism disorders and dyslipidemias (hypolipoproteinemia, Hypertriglyceridemia, hyperlipidemia, combined hyperlipidemia, hypercholesterolemia, abetalipoproteinemia, sitosterolaemia), xanthomatosis, Tangier's disease, obesity, obesity, metabolic disorders (metabolic syndrome, hyperglycemia, insulin-dependent diabetes, non-insulin-dependent diabetes, Gestational diabetes, hyperinsulinemia, insulin resistance, glucose intolerance and diabetic sequelae such as retinopathy, nephropathy and neuropathy), diseases of the gastrointestinal tract and the abdomen (slovositis, gingivitis, periodontitis, esophagitis, eosinophilic gastroenteritis, mastocytosis, Crohn's disease, colitis, Proctitis, pruritis ani, diarrhea, celiac disease, hepatitis, liver fibrosis, liver cir
  • the compounds according to the invention are particularly suitable for the treatment and / or prevention of respiratory and pulmonary diseases, especially chronic obstructive pulmonary disease (COPD), in particular pulmonary emphysema, chronic bronchitis (CB), pulmonary Hypertension in COPD (PH-COPD) and bronchiectasis (BE) as well as combinations of these diseases, especially in acute exacerbating stages of COPD (AE-COPD), asthma and interstitial lung diseases, in particular idiopathic pulmonary fibrosis ( IPF) and pulmonary sarcoidosis, diseases of the cardiovascular system, in particular atherosclerosis, especially carotid arteriosclerosis, as well as viral myocarditis, cardiomyopathy and aneurysms, including their sequelae such as stroke, myocardial infarction and peripheral arterial occlusive disease (PAOD), as well as of chronic kidney diseases and the Alport syndrome.
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • CB chronic bronchit
  • treatment includes inhibiting, delaying, arresting, alleviating, attenuating, restraining, reducing, suppressing, restraining or curing a disease, a disease, a disease, an injury or a medical condition , the unfolding, the course or progression of such conditions and / or the symptoms of such conditions.
  • therapy is understood to be synonymous with the term “treatment”.
  • prevention means prevention, prophylaxis or “prevention” are used synonymously in the context of the present invention and designate the avoidance or reduction of the risk To get, to experience, to suffer or to have a disease, a disease, a disease, an injury or a health disorder, a development or progression of such conditions and / or the symptoms of such conditions.
  • the treatment or prevention of a disease, a disease, a disease, an injury or a health disorder can be partial or complete.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the treatment and / or prevention of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention for the manufacture of a medicament for the treatment and / or prevention of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is a pharmaceutical composition containing at least one of the compounds of the invention, for the treatment and / or prevention of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is the use of the compounds of the invention in a method for the treatment and / or prevention of diseases, in particular the aforementioned diseases.
  • Another object of the present invention is a method for the treatment and / or prevention of diseases, in particular the aforementioned diseases, using an effective amount of at least one of the compounds of the invention.
  • the compounds according to the invention can be used alone or as needed in combination with one or more other pharmacologically active substances, as long as this combination does not lead to undesired and unacceptable side effects.
  • a further subject of the present invention are therefore medicaments containing at least one of the compounds according to the invention and one or more further active compounds, in particular for the treatment and / or prevention of the aforementioned diseases.
  • Suitable combination active ingredients for this purpose are by way of example and preferably mentioned:
  • anti-obstructive / bronchodilatory agents such as those used for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease (COPD) or bronchial asthma, by way of example and preferably from the group of inhaled or systemically administered adrenergic receptor agonists (beta-mimetics), the inhaled anti-muscarinic substances and the PDE 4 inhibitors;
  • COPD chronic obstructive pulmonary disease
  • bronchial asthma by way of example and preferably from the group of inhaled or systemically administered adrenergic receptor agonists (beta-mimetics), the inhaled anti-muscarinic substances and the PDE 4 inhibitors;
  • organic nitrates and NO donors such as sodium nitroprusside, nitroglycerin, isosorbide mononitrate, isosorbide dinitrate, molsidomine or SIN-1, and inhaled NO;
  • Compounds which inhibit the degradation of cyclic guanosine monophosphate (cGMP) and / or cyclic adenosine monophosphate (cAMP) for example inhibitors of phosphodiesterases (PDE) 1, 2, 3, 4 and / or 5, in particular PDE 4 inhibitors such as roflumi last and PDE 5 inhibitors such as sildenafil, vardenafil, tadalafil, uddenafil, dasantafil, avanafil, mirodenafil or lodenafil;
  • PDE phosphodiesterases
  • roflumi last and PDE 5 inhibitors such as sildenafil, vardenafil, tadalafil, uddenafil,
  • sGC soluble guanylate cyclase
  • HNE human neutrophil elastase
  • Sivelastat Sivelastat
  • DX-890 Reltran
  • Prostacyclin analogs and IP receptor agonists such as by way of example and preferably iloprost, beraprost, treprostinil, epoprostenol or NS-304;
  • Endothelin receptor antagonists such as, by way of example and by way of preference, bosentan, darusentan, ambrisentan or sitaxsentan;
  • Antiinflammatory, immunomodulatory, immunosuppressant and / or cytotoxic agents by way of example and preferably from the group of systemic or inhaled corticosteroids, and acetylcysteine, montelukast, azathioprine, cyclophosphamide, hydroxycarbamide, azithromycin, IFN- ⁇ , pirfenidone or etanercept;
  • Antifibrotic agents such as, by way of example and by way of preference, lysophosphatidic acid receptor 1 (LPA-1) antagonists, lysyl oxidase (LOX) inhibitors, lysyl oxidase-like-2 inhibitors, Vasoactive intestinal peptide (VIP), VIP analogues, ⁇ v ⁇ 6 integrin antagonists, cholchicine, IFN- ⁇ , D-penicillamine, inhibitors of the WNT signaling pathway or CCR2 antagonists;
  • LPA-1 lysophosphatidic acid receptor 1
  • LOX lysyl oxidase
  • VIP Vasoactive intestinal peptide
  • VIP ⁇ v ⁇ 6 integrin antagonists
  • cholchicine IFN- ⁇
  • D-penicillamine inhibitors of the WNT signaling pathway or CCR2 antagonists
  • Lipid metabolism-modifying agents by way of example and preferably from the group of thyroid receptor agonists, cholesterol synthesis inhibitors such as by way of example and preferably HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors, ACAT inhibitors, CETP inhibitors, MTP inhibitors, PPAR alpha, PPAR gamma and / or PPAR delta agonists, cholesterol absorption inhibitors, lipase inhibitors, polymeric bile acid adsorbers, bile acid reabsorption inhibitors, and lipoprotein (a) antagonists;
  • cholesterol synthesis inhibitors such as by way of example and preferably HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors, ACAT inhibitors, CETP inhibitors, MTP inhibitors, PPAR alpha, PPAR gamma and / or PPAR delta agonists, cholesterol absorption inhibitors, lipase inhibitors, polymeric bile acid adsorbers, bile acid reabsorption inhibitors
  • Hypotensive agents for example and preferably from the group of calcium antagonists, angiotensin AII antagonists, ACE inhibitors, vasopeptidase inhibitors,
  • Endothelin antagonists renin inhibitors, alpha-receptor blockers, beta-receptor blockers, mineralocorticoid receptor antagonists and diuretics;
  • the signal transduction cascade inhibiting compounds by way of example and preferably from the group of kinase inhibitors, in particular from the group of tyrosine kinase and / or serine / threonine kinase inhibitors, such as, by way of example and by way of preference, nintedanib, dasatinib,
  • Nilotinib bosutinib, regorafenib, sorafenib, sunitinib, cediranib, axitinib, telatinib, imatinib, brivanib, pazopanib, vatalanib, gefitinib, erlotinib, lapatinib, canertinib, lestaurtinib, pelitinib, semaxanib or tandutinib;
  • Antagonists of growth factors, cytokines and chemokines by way of example and preferably antagonists of TGF- ⁇ , CTGF, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-13 and integrins;
  • Rho kinase inhibiting compounds such as by way of example and preferably Fasudil, Y-27632, SLx-2119, BF-66851, BF-66852, BF-66853, KI-23095 or BA-1049; Compounds which inhibit the soluble epoxide hydrolase (sEH), such as N, N'-cycloalkyloxyurea, 12- (3-adamantan-1-yl-ureido) -dodecanoic acid or 1-adamantan-1-yl-3 ⁇ 5- [2- (2-ethoxyethoxy) ethoxy] pentyl ⁇ urea;
  • SEH soluble epoxide hydrolase
  • the energy metabolism of the heart affecting compounds such as by way of example and preferably etomoxir, dichloroacetate, ranolazine or trimetazidine;
  • Antithrombotic agents by way of example and preferably from the group of platelet aggregation inhibitors, anticoagulants and profibrinolytic substances;
  • chemotherapeutic agents as e.g. used for the treatment of neoplasms of the lungs or other organs; and / or antibiotics, in particular from the group of fluoroquinolonecarboxylic acids, such as by way of example and preferably ciprofloxacin or moxifloxacin.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a beta-adrenergic receptor agonist such as, for example and preferably, albuterol, isoproterenol, metaproterenol, terbutaline, fenoterol, formoterol, repro sterol, salbutamol or salmeterol.
  • a beta-adrenergic receptor agonist such as, for example and preferably, albuterol, isoproterenol, metaproterenol, terbutaline, fenoterol, formoterol, repro sterol, salbutamol or salmeterol.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an anti-muscarinergic substance, such as by way of example and preferably ipratropium bromide, tiotropium bromide or oxitropium bromide.
  • an anti-muscarinergic substance such as by way of example and preferably ipratropium bromide, tiotropium bromide or oxitropium bromide.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a corticosteroid, such as by way of example and preferably prednisone, prednisolone, methylprednisolone, triamcinolone, dexamethasone, beclomethasone, betamethasone, flunisolide, budesonide or fluticasone.
  • a corticosteroid such as by way of example and preferably prednisone, prednisolone, methylprednisolone, triamcinolone, dexamethasone, beclomethasone, betamethasone, flunisolide, budesonide or fluticasone.
  • Antithrombotic agents are preferably understood as meaning compounds from the group of platelet aggregation inhibitors, anticoagulants and profibrinolytic substances.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a platelet aggregation inhibitor, such as, by way of example and by way of preference, aspirin, clopidogrel, ticlopidine or dipyridamole.
  • a platelet aggregation inhibitor such as, by way of example and by way of preference, aspirin, clopidogrel, ticlopidine or dipyridamole.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a thrombin inhibitor such as, by way of example and by way of preference, ximelagatran, melagatran, dabigatran, bivalirudin or Clexane.
  • a thrombin inhibitor such as, by way of example and by way of preference, ximelagatran, melagatran, dabigatran, bivalirudin or Clexane.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a GPIIb / nia antagonist, such as, by way of example and by way of preference, tirofiban or abciximab.
  • a GPIIb / nia antagonist such as, by way of example and by way of preference, tirofiban or abciximab.
  • the compounds according to the invention are used in combination with a factor Xa inhibitor, such as by way of example and preferably rivaraban, apixaban, fidexaban, razaxaban, fondaparinux, idraparinux, DU-176b, PMD-3112, YM-150, KFA -1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR-126512 or SSR-128428.
  • a factor Xa inhibitor such as by way of example and preferably rivaraban, apixaban, fid
  • the compounds according to the invention are administered in combination with heparin or a low molecular weight (LMW) heparin derivative.
  • LMW low molecular weight
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a vitamin K antagonist, such as by way of example and preferably coumarin.
  • antihypertensive agents are preferably compounds from the group of calcium antagonists, angiotensin AII antagonists, ACE inhibitors, endothelin antagonists, renin inhibitors, alpha-receptor blocker, beta-receptor blocker, mineralocorticoid receptor Antagonists and diuretics understood.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a calcium antagonist, such as, by way of example and by way of preference, nifedipine, amlodipine, verapamil or diltiazem.
  • a calcium antagonist such as, by way of example and by way of preference, nifedipine, amlodipine, verapamil or diltiazem.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an alpha-1-receptor blocker, such as by way of example and preferably prazosin.
  • the compounds according to the invention are used in combination with a beta-receptor blocker, such as by way of example and preferably propranolol, atenolol, timolol, pindolol, alprenolol, oxprenolol, penbutolol, bupranolol, metipropanol, nadolol, mepindolol, carazalol, Sotalol, metoprolol, betaxolol, celiprolol, bisoprolol, Carteolol, esmolol, labetalol, carvedilol, adaprolol, landiolol, nebivolol, epanolol or bucine dolol administered.
  • a beta-receptor blocker such as by way of example and preferably propranolol, atenolol, timolol
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an angiotensin AII antagonist, such as by way of example and preferably losartan, candesartan, valsartan, telmisartan or embursatan.
  • an angiotensin AII antagonist such as by way of example and preferably losartan, candesartan, valsartan, telmisartan or embursatan.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an ACE inhibitor such as, by way of example and by way of preference, enalapril, captopril, lisinopril, ramipril, delapril, fosinopril, quinopril, perindopril or trandopril.
  • an endothelin antagonist such as, by way of example and by way of preference, bosentan, darusentan, ambrisentan or sitaxsentan.
  • the compounds of the invention are administered in combination with a renin inhibitor, such as by way of example and preferably aliskiren, SPP-600 or SPP-800.
  • a renin inhibitor such as by way of example and preferably aliskiren, SPP-600 or SPP-800.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a mineralocorticoid receptor antagonist, such as by way of example and preferably spironolactone, eplerenone or finerenone.
  • a mineralocorticoid receptor antagonist such as by way of example and preferably spironolactone, eplerenone or finerenone.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a diuretic, such as by way of example and preferably furosemide, bumetanide, torsemide, bendroflumethiazide, chlorothiazide, hydrochlorothiazide, hydroflumethiazide, methyclothiazide, polythiazide, trichloromethiazide, chlorthalidone, indapamide, metolazone, quineth- azon, acetazolamide, dichlorophenamide, methazolamide, glycerol, isosorbide, mannitol, amiloride or triamterene.
  • a diuretic such as by way of example and preferably furosemide, bumetanide, torsemide, bendroflumethiazide, chlorothiazide, hydrochlorothiazide, hydroflumethiazide, methyclothiazide, polythiazide, trich
  • lipid metabolizing agents are preferably compounds from the group of CETP inhibitors, thyroid receptor agonists, cholesterol synthesis inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors, the ACAT inhibitors, MTP inhibitors, PPAR alpha- , PPAR gamma and / or PPAR delta agonists, cholesterol absorption inhibitors, polymeric bile acid adsorbers, bile acid reabsorption inhibitors, lipase inhibitors and the lipoprotein (a) antagonists understood.
  • CETP inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors
  • ACAT inhibitors such as HMG-CoA reductase or squalene synthesis inhibitors
  • MTP inhibitors MTP inhibitors
  • PPAR alpha- , PPAR gamma and / or PPAR delta agonists cholesterol absorption inhibitors
  • polymeric bile acid adsorbers bile acid rea
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a CETP inhibitor, such as by way of example and preferably torcetrapib (CP-529 414), JJT-705 or CETP vaccine (Avant).
  • a CETP inhibitor such as by way of example and preferably torcetrapib (CP-529 414), JJT-705 or CETP vaccine (Avant).
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a thyroid receptor agonist such as, by way of example and by way of preference, D-thyroxine, 3,5,3'-triiodothyronine (T3), CGS 23425 or axitirome (CGS 26214) ,
  • a thyroid receptor agonist such as, by way of example and by way of preference, D-thyroxine, 3,5,3'-triiodothyronine (T3), CGS 23425 or axitirome (CGS 26214)
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an HMG-CoA reductase inhibitor from the class of statins, such as by way of example and preferably lovastatin, simvastatin, pravastatin, fluvastatin, atorvastatin, rosuvastatin or pitavastatin.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a squalene synthesis inhibitor, such as by way of example and
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an ACAT inhibitor, such as by way of example and preferably avasimibe, melinamide, pactimibe, eflucimibe or SMP-797.
  • an ACAT inhibitor such as by way of example and preferably avasimibe, melinamide, pactimibe, eflucimibe or SMP-797.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with an MTP inhibitor such as, for example and preferably, implitapide, BMS-201038, R-103757 or JTT-130.
  • an MTP inhibitor such as, for example and preferably, implitapide, BMS-201038, R-103757 or JTT-130.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a PPAR-gamma agonist, such as, by way of example and by way of preference, pioglitazone or rosiglitazone.
  • a PPAR-gamma agonist such as, by way of example and by way of preference, pioglitazone or rosiglitazone.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a PPAR delta agonist, such as by way of example and preferably GW 501516 or BAY 68-5042.
  • a PPAR delta agonist such as by way of example and preferably GW 501516 or BAY 68-5042.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a cholesterol absorption inhibitor, such as by way of example and preferably ezetimibe, tiqueside or pamaqueside.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a lipase inhibitor, such as, for example and preferably, orlistat.
  • a lipase inhibitor such as, for example and preferably, orlistat.
  • the compounds of the invention are administered in combination with a polymeric bile acid adsorbent such as, by way of example and by way of preference, cholestyramine, colestipol, colesolvam, cholesta gel or colestimide.
  • a polymeric bile acid adsorbent such as, by way of example and by way of preference, cholestyramine, colestipol, colesolvam, cholesta gel or colestimide.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a bile acid absorption inhibitor, by way of example and by way of example.
  • the compounds according to the invention are administered in combination with a lipoprotein (a) antagonist, such as by way of example and preferably gemcabene calcium (CI-1027) or nicotinic acid.
  • a lipoprotein (a) antagonist such as by way of example and preferably gemcabene calcium (CI-1027) or nicotinic acid.
  • compositions according to the invention with one or more further active compounds selected from the group consisting of corticosteroids, beta-adrenergic receptor agonists, anti-muscarcinogenic substances, PDE 4 inhibitors, PDE 5 inhibitors, sGC activators, sGC Stimulants, HNE inhibitors, prostacyclin analogs, endothelin antagonists, statins, antifibrotic agents, antiinflammatory agents, immunomodulating agents, immunosuppressive agents, and cytotoxic agents.
  • compositions containing at least one compound of the invention usually together with one or more inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients, and their use for the purposes mentioned above.
  • the compounds according to the invention can act systemically and / or locally.
  • they may be applied in a suitable manner, e.g. oral, parenteral, pulmonary, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otic, or as an implant or stent.
  • the compounds according to the invention can be administered in suitable administration forms.
  • the compounds of the invention rapidly and / or modified donating application forms containing the compounds of the invention in crystalline and / or amorphized and / or dissolved form, such as tablets (uncoated or coated Tablets, for example with enteric or delayed-dissolving or insoluble coatings, which control the release of the compound according to the invention), tablets or films / wafers, films / lyophilisates, capsules (for example hard or soft gelatin capsules) which break quickly in the oral cavity, dragees, Granules, pellets, powders, emulsions, suspensions, aerosols or solutions.
  • tablets uncoated or coated Tablets, for example with enteric or delayed-dissolving or insoluble coatings, which control the release of the compound according to the invention
  • tablets or films / wafers films / lyophilisates
  • capsules for example hard or soft gelatin capsules
  • Parenteral administration can be done bypassing a resorption step (eg intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinally or intralumbarly) or using absorption (for example by inhalation, intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously or intraperitoneally).
  • a resorption step eg intravenously, intraarterially, intracardially, intraspinally or intralumbarly
  • absorption for example by inhalation, intramuscularly, subcutaneously, intracutaneously, percutaneously or intraperitoneally.
  • suitable application forms include injection and infusion preparations in the form of solutions, suspensions, emulsions, lyophilisates or sterile powders.
  • Inhalation medicaments including powder inhalers, nebulizers, metered dose aerosols
  • nasal drops solutions or sprays
  • lingual, sublingual or buccal tablets films / wafers or capsules
  • suppositories ear or ophthalmic preparations
  • vaginal capsules aqueous suspensions (lotions, shake mixtures)
  • lipophilic suspensions ointments
  • creams transdermal therapeutic systems (for example patches)
  • milk pastes, foams, scattering powders, implants or stents.
  • the compounds according to the invention can be converted into the stated administration forms. This can be done in a conventional manner by mixing with inert, non-toxic, pharmaceutically suitable excipients.
  • excipients for example microcrystalline cellulose, lactose, mannitol
  • solvents for example liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers and dispersants or wetting agents for example sodium dodecyl sulfate, polyoxysorbitanoleate
  • binders for example polyvinylpyrrolidone
  • synthetic and natural polymers for example albumin
  • Stabilizers eg, antioxidants such as ascorbic acid
  • dyes eg, inorganic pigments such as iron oxides
  • flavor and / or odoriferous include, among others.
  • Excipients for example microcrystalline cellulose, lactose, mannitol
  • solvents for example liquid polyethylene glycols
  • emulsifiers and dispersants or wetting agents for example sodium dodecy
  • the dosage is about 0.01 to 100 mg kg, preferably about 0.01 to 20 mg / kg and most preferably 0.1 to 10 mg / kg body weight.
  • the amount is generally about 0.1 to 50 mg per inhalation.
  • Purity specifications usually refer to corresponding peak integrations in the LC / MS chromatogram, but may additionally have been determined with the help of the--NMR spectrum. If no purity is specified, it is usually a 100% purity according to automatic peak integration in the LC / MS chromatogram, or purity was not explicitly determined.
  • a designation "IRS, 2SR, 5RS" in the IUP AC name of the relevant example, in conjunction with the term “racemate”, means that this is a racemic mixture of IR, 2S, 5R - Enantiomers (- each 1st letter after the position number in "IRS, 2SR, 5RS”) with the appropriate lS, 2R, 5S-enantiomer (- in each case 2nd letter after the position number) acts.
  • IRS in conjunction with the words “enantiomer 1” and “enanti “mer 2” means that these are the two enantiomers in separated, isolated form, with no assignment of the absolute configuration (IR, 2S, 5R or IS, 2R, 5S) to these enantiomers, similar terms as “IRS , 2RS, 3SR “or” IRS, 2RS, 5SR ", which result from the changed priority and / or sequence of name components based on the IUPAC nomenclature rules, shall be interpreted in an analogous manner in accordance with this manual.
  • Example 6A ⁇ -tert. -butyl ⁇ 2- [5- (benzyloxy) -1-benzofur-2-yl] -2-oxoethyl ⁇ [2- (4-oxo-1,2,3-benzotriazine-3 (4 /) -yl) ethyl] malonate
  • Example 8A di-tertiary-butyl- (2- ⁇ 5- [2- (2-chlorophenyl) -ethoxy] -1-benzofur-2-yl ⁇ -2-oxo-ethyl) [2- (4-oxo-1, 2 , 3-benzotriazine-3 (4 /) - yl) ethyl] malonate
  • Example 14A di-tert-butyl ⁇ 2- [5- (2-cyclopentylethoxy) -1-benzofur-2-yl] -2-oxoethyl ⁇ [2- (4-oxo-1,2,3-benzo) triazine-3 (4 /) - yl) ethyl] malonate
  • the aqueous phase was extracted once with 50 ml of ethyl acetate, and the combined organic phases were dried over sodium sulfate, filtered and concentrated. The residue was dissolved in 6 ml of acetonitrile while warm. After cooling to RT, the solid present was filtered off, washed twice with 2 ml of acetonitrile and dried. This gave 193 mg (19% of theory, purity 92%) of a first batch of the title compound. The filtrate was concentrated and the residue was purified by preparative HPLC (Method 9, two injections). The combined product-containing fractions were neutralized with saturated aqueous sodium bicarbonate solution and concentrated to a residual volume of aqueous phase.
  • Example 18A Di-ieri-butyl ⁇ 2- [5- (3-cyano-propoxy) -1-benzofur-2-yl] -2-oxoethyl ⁇ [2- (4-oxo-1,2,3-benzotriazine] 3 (4 /) - yl) ethyl] malonate
  • Example 100A di-tert-butyl- [2- (6-hydroxy-1,2-benzoxazol-3-yl) -2-oxoethyl] ⁇ 2- [4-oxo-6- (trifluoromethyl) -l, 2, 3-benzotriazine-3 (4 /) -yl] ethyl ⁇ malonate
  • the residue was purified by thick-layer chromatography (PLC Kieselgel 60 F 254, 1 mm, 20 ⁇ 20 cm with concentration zone, eluent cyclohexane / ethyl acetate 7: 3).
  • the product-containing zone was extracted with dichloromethane / methanol (95: 5) and the solvent was removed again and the residue was dried in vacuo. 141 mg (78% of theory, purity 99%) of the title compound were obtained.
  • Example 107A Di-ieri-butyl- (2- ⁇ 6- [(3-chlorobenzyl) oxy] -1,2-benzoxazol-3-yl ⁇ -2-oxoethyl) [2- (4-oxo-1,2-dicarboxylic acid) , 3-benzotriazine-3 (4 /) - yl) ethyl] malonate

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Abstract

Die vorliegende Anmeldung betrifft neue, heterobicyclisch substituierte 4-Oxobutansäure-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung allein oder in Kombinationen zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten, insbesondere zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen der Atemwege, der Lunge und des Herz-Kreislauf-Systems.

Description

Heterobicvclisch substituierte 4-Oxobutansäure-Derivate und ihre Verwendung
Die vorliegende Anmeldung betrifft neue, heterobicyclisch substituierte 4-Oxobutansäure-Deri- vate, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung allein oder in Kombinationen zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arznei- mittein zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten, insbesondere zur Behandlung und/ oder Prävention von Erkrankungen der Atemwege, der Lunge und des Herz-Kreislauf-Systems.
Die humane Makrophagen-Elastase (HME, EC 3.4.24.65) gehört zur Familie der Matrix-Metallo- Peptidasen (MMPs) und wird auch humane Matrix-Metallo-Peptidase 12 (hMMP-12) genannt. Das Protein wird vermehrt u.a. von Makrophagen nach Kontakt mit "reizenden" Stoffen oder Partikeln gebildet, aktiviert und freigesetzt. Solche Stoffe und Partikel können beispielsweise als Fremdstoffe in Schwebeteilchen enthalten sein, wie sie u.a. in Zigarettenrauch oder Industriestäuben vorkommen. Im weiteren Sinne werden auch körpereigene und körperfremde Zellbestandteile und Zelltrümmer zu diesen Reizpartikeln gezählt, wie sie in zum Teil hoher Konzentration bei entzündlichen Prozessen vorliegen können. Das hochaktive Enzym ist in der Lage, eine Vielzahl von Bindegewebs-Proteinen abzubauen, z.B. vornehmlich das Protein Elastin (daher der Name), sowie weitere Proteine und Proteoglykane wie Kollagen, Fibronektin, Laminin, Chondroitinsulfat, Hepa- ransulfat und andere mehr. Durch diese proteolytische Aktivität des Enzyms werden Makrophagen in die Lage versetzt, die basale Membran zu penetrieren. Elastin zum Beispiel kommt in hohen Konzentrationen in allen Gewebetypen vor, die eine hohe Elastizität zeigen, z.B. in der Lunge und in Arterien. Bei einer Vielzahl von pathologischen Prozessen, wie Gewebeverletzungen, spielt die HME eine wichtige Rolle beim Gewebeabbau und -umbau (engl, tissue remodeling). Darüber hinaus ist die HME ein wichtiger Modulator bei entzündlichen Prozessen. Es ist ein Schlüsselmolekül bei der Rekrutierung von Entzündungszellen, indem es zum Beispiel den zentralen Entzündungsmediator Tumor-Nekrosefaktor-alpha (TNF-α) freisetzt und in den durch transformieren- den Wachstumsfaktor -beta (TGF-ß) vermittelten Signalweg eingreift [Hydrolysis ofa Broad Spectrum of Extracellular Matrix Proteins by Human Macrophage Elastase, Gronski et al., J. Biol. Chem. 272, 12189-12194 (1997)] . MMP-12 spielt auch eine Rolle in der körpereigenen Abwehr (engl, host defense), insbesondere bei der Regulation der antiviralen Immunität, vermutlich durch einen Eingriff in den Interferon-alpha (IFN-a)-vermittelten Signalweg [A new transcriptional roleor matrix metalloproteinase-12 in antiviral immunity, Marchant et al., Nature Med. 20, 493-502 (2014)] .
Es wird daher angenommen, dass die HME bei vielen Erkrankungen, Verletzungen und pathologischen Veränderungen eine wichtige Rolle spielt, deren Entstehung und/oder Progression mit einem infektiösen oder nicht-infektiösen entzündlichen Geschehen und/oder einem proliferativen und hypertrophen Gewebe- und Gefäßumbau in Zusammenhang steht. Dies können insbesondere Erkrankungen und/oder Schädigungen der Lunge, der Niere oder des Herz-Kreislauf-Systems sein, oder es kann sich hierbei um Krebs-Erkrankungen oder um andere entzündliche Erkrankungen handeln [Macrophage metalloelasta.se (MMP-12) as a target for inflammatory respiratory dis- eases, Lagente et al., Expert Opin. Ther. Targets 13, 287-295 (2009); Macrophage Metalloelastase as a major Factor for Glomerular Injury in Anti-Glomerular Basement Membrane Nephritis, Kaneko et al., J. Immunol. 170, 3377-3385 (2003); A Selective Matrix Metalloelastase-12 Inhibitor Retards Atherosclerotic Plaque Development in Apolipoprotein E Knock-out Mice, Johnson et al., Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 31, 528-535 (2011); Impaired Coronary Collateral Growth in the Metabolie Syndrome Is in Part Mediated by Matrix Metalloelastase 12-dependent Production of Endo statin and Angiostatin, Dodd et al., Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 33, 1339- 1349 (2013); Matrix metalloproteinase pharmacogenomics in non-small-cell lung Carcinoma, Chetty et al., Pharmacogenomics 12, 535-546 (2011)] .
In diesem Kontext zu nennende Erkrankungen und Schädigungen der Lunge sind insbesondere die chronisch-obstruktive Lungenerkrankung (engl, chronic obstructive pulmonary disease, COPD), das Lungenemphysem (lung emphysema), interstitielle Lungenerkrankungen (interstitial lung diseases, ILD) wie z.B. die Lungenfibrose (ideopathic pulmonary fibrosis, IPF) und die Lungen- sarkoidose (pulmonary sareoidosis), die akute Lungenschädigung (acute lung injury, ALI), das akute Atemwegssyndrom (acute respiratory distress Syndrome, ARDS), zystische Fibrose (cystic fibrosis, CF; auch Mukoviszidose genannt), Asthma sowie infektiös, insbesondere viral bedingte Atemwegserkrankungen. Als andere fibrotische Erkrankungen seien hier beispielhaft die Leber - fibrose und die systemische Sklerose erwähnt. Erkrankungen und Schädigungen des Herz-Kreislauf-Systems, in denen die HME involviert ist, sind zum Beispiel Gewebe- und Gefäßveränderungen bei einer Arteriosklerose, hier insbesondere die karotide Arteriosklerose, die infektive Endo- karditis, hier insbesondere die virale Myokarditis, die Kardiomyopathie, die Herzinsuffizienz, der kardiogene Schock, das akute Koronarsyndrom (acute coronary Syndrome, ACS), Aneurysmen, Reperfusionsschäden nach einem Myokardinfarkt (acute myocardial infaret, AMI), ischämische Schädigungen der Niere oder der Retina sowie deren chronische Verläufe, wie zum Beispiel die chronische Nierenerkrankung (chronic kidney disease, CKD) und das Alport-Syndrom. Genannt seien hier auch das metabolische Syndrom und Adipositas. Erkrankungen in Zusammenhang mit einer Sepsis sind beispielsweise eine systemische entzündliche Reaktion (systemic inflammatory response Syndrome, SIRS), die schwere Sepsis, der septische Schock und das multiple Organversagen (multi-organ failure, MOF; multi-organ dysfunetion, MODS) sowie die intravaskuläre Gerinnung (disseminated intravascular coagulation, DIC). Beispiele für einen Gewebeab- und -umbau bei Krebsprozessen sind das Einwandern von Krebszellen in das gesunde Gewebe (Metastasenbildung) und die Neuausbildung von versorgenden Blutgefäßen (Neo-Angiogenese). Andere entzündliche Krankheiten, bei denen die HME eine Rolle spielt, sind rheumatoide Erkrankungen, zum Beispiel die rheumatoide Arthritis, sowie chronische Darmentzündungen (inflammatory bowel disease, IBD; Morbus Crohn, engl. Crohn 's disease, CD; Colitis ulcerosa, engl, ulcerative Colitis, UC). Im Allgemeinen geht man davon aus, dass Elastase-vermittelten pathologischen Prozessen ein verschobenes Gleichgewicht zwischen der freien Elastase (HME) und dem körpereigenen Elastase- Inhibitorprotein (tissue Inhibitor of metalloproteinase, ΤΓΜΡ) zugrunde liegt. In verschiedenen pathologischen, insbesondere entzündlichen Prozessen ist die Konzentration an freier Elastase (HME) erhöht, so dass lokal die Balance zwischen Protease und Anti-Protease zu Gunsten der Pro- tease verschoben ist. Ein ähnliches (Un-)Gleichgewicht besteht zwischen der Elastase der neutro- philen Zellen (human neutrophil elastase, HNE, ein Mitglied der Serinprotease-Familie) und der körpereigenen Anti-Protease AAT (alpha- 1 anti-Trypsin, ein Mitglied der Serinprotease-Inhibi- toren, SERPINs). Beide Gleichgewichte sind miteinander gekoppelt, da HME den Inhibitor der HNE spaltet und inaktiviert und umgekehrt HNE den HME-Inhibitor spaltet und inaktiviert, wo- durch sich die jeweiligen Protease/ Anti-Protease-Ungleichgewichte zusätzlich verschieben können. Außerdem herrschen im Umfeld von lokalen Entzündungen stark oxidierende Bedingungen (engl. oxidative burst), wodurch das Protease/ Anti-Protease-Ungleichgewicht weiter verstärkt wird [Pathogenic triad in COPD: oxidative stress, protease-antiprotease imbalance, and inflammation, Fischer et al., Int. J. COPD 6, 413-421 (2011)]. Es sind derzeit mehr als 20 MMPs bekannt, die historisch grob in verschiedene Klassen hinsichtlich ihrer prominentesten Substrate eingeteilt werden, z.B. Gelatinasen (MMP-2, MMP-9), Kollagenasen (MMP-1, MMP-8, MMP-13), Stromelysine (MMP-3, MMP-10, MMP-11) und Matri- lysine (MMP-7, MMP-26). HME (MMP-12) ist bisher einziger Vertreter der Metallo-Elastase. Darüber hinaus werden weitere MMPs zur Gruppe der sogenannten MT-MMPs (membrane-type MMPs) zusammengefügt, da diese eine charakteristische Domäne besitzen, die das Protein in der Membran verankert (MMP-14, MMP-15, MMP-16, MMP-17, MMP-24, MMP-25). Allen MMPs ist eine konservierte Zink-bindende Region im aktiven Zentrum des Enzyms gemeinsam, die für die kataly tische Aktivität wichtig ist und die auch in anderen Metallo-Proteinen zu finden ist (z.B. a disintegrin and metalloproteinase, ADAM). Das komplexierte Zink wird durch eine Sulfhydryl- Gruppe in der N-terminalen Pro-Peptid-Domäne des Proteins maskiert, was zu einer enzymatisch inaktiven Pro-Form des Enzyms führt. Erst durch eine Abspaltung dieser Pro-Peptid-Domäne wird das Zink im aktiven Zentrum des Enzyms von dieser Koordinierung befreit und das Enzym dadurch aktiviert (sog. Aktivierung durch cysteine switch) [Matrix metalloproteinase Inhibitors as therapy for inflammatory and vascular diseases, Hu et al., Nature Rev. Drug Discov. 6, 480-498 (2007)]. Die meisten bekannten synthetischen MMP-Inhibitoren verfügen über eine Zink-komplexierende funktionelle Gruppe, sehr häufig zum Beispiel ein Hydroxamat, ein Carboxylat oder ein Thiol [Recent Developments in the Design of Specific Matrix Metalloproteina.se Inhibitors aided by Structural and Computational Studies, B.G. Rao, Curr. Pharm. Des. 11, 295-322 (2005)]. Die Gerüststruktur (scaffold) dieser Inhibitoren ähnelt häufig noch Peptiden, man spricht dann von sogenannten Peptidomimetika (in der Regel mit einer schlechten oralen Bioverfügbarkeit), oder sie weist keine Ähnlichkeit zu Peptiden auf, man spricht dann allgemeiner von kleinen Molekülen (small molecules, SMOLs). Die physikochemischen und pharmakokinetischen Eigenschaften dieser Inhibitoren haben, ganz allgemein gesagt, einen großen Einfluss darauf, welche Zielmoleküle (targets) und welche unerwünschten Moleküle (anti-targets, off-targets) in welchem Gewebe und in welchem Zeitraum in welchem Ausmaß "getroffen" werden.
Es ist hierbei eine große Herausforderung, die spezifische Rolle einer bestimmten MMP in einem Krankheitsgeschehen zu bestimmen. Erschwert wird dies insbesondere durch den Umstand, dass es eine Vielzahl von MMPs und weiterer ähnlicher Moleküle (z.B. ADAMs) gibt, verbunden mit einer Vielzahl an jeweils möglichen physiologischen Substraten und damit unter Umständen auch einhergehenden inhibitorischen oder aktivatorischen Effekten in vielfältigen Signaltransduktions- wegen. Zahlreiche in vitro- und präklinische in vz'vo-Experimente haben viel zu einem besseren Verständnis der MMPs in verschiedenen Krankheitsmodellen beigetragen (z.B. transgene Tiere, knock-out-Tiere sowie genetische Daten aus Humanstudien). Die Validierung eines Targets hin- sichtlich einer möglichen medikamentösen Therapie kann letztendlich nur in klinischen Testreihen am Menschen bzw. Patienten erfolgen. Die erste Generation von MMP-Inhibitoren wurde hierbei in Krebsstudien klinisch untersucht. Zu dieser Zeit waren erst wenige Vertreter der MMP-Protein- familie bekannt. Keiner der untersuchten Inhibitoren konnte klinisch überzeugen, da bei wirksamen Dosierungen die aufgetretenen Nebenwirkungen nicht tolerierbar waren. Wie sich im Zuge der Kenntnis weiterer MMPs herausstellte, handelte es sich bei den Vertretern der ersten Inhibitor- Generation um nicht-selektive Inhibitoren, d.h. eine Vielzahl verschiedener MMPs wurde gleichermaßen inhibiert (pan-MMP-Inhibitoren, pan-MMPIs). Vermutlich wurde die erwünschte Wirkung an einem oder mehreren MMP-Targets überdeckt von einer unerwünschten Wirkung an einem oder mehreren MMP-anti-Targets oder durch eine unerwünschte Wirkung an einem sonstigen Ziel- ort (off-target) [Validating matrix metallo proteinases as drug targets and anti-targets for Cancer therapy, Overall & Kleifeld, Nature Rev. Cancer 6, 227-239 (2006)].
Neuere MMP-Inhibitoren, die sich durch eine erhöhte Selektivität auszeichnen, sind nun ebenfalls klinisch getestet worden, darunter auch explizit als MMP-12-Inhibitoren bezeichnete Verbindungen, bislang allerdings ebenso ohne durchschlagenden klinischen Erfolg. Bei einem genaueren Hinsehen haben sich auch hier die zuvor als selektiv beschriebenen Inhibitoren als nicht ganz so selektiv herausgestellt.
So wird für die klinische Testverbindung "MMP408" als ΜΜΡ-12-Inhibitor eine gewisse bis deutliche Selektivität in vitro gegenüber MMP-13, MMP-3, MMP-14, MMP-9, Agg-1, MMP-1, Agg-2, MMP-7 und TACE beschrieben [A Selective Matrix Metalloprotease 12 Inhibitor for Potential Treatment of Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD): Discovery of (S)-2-(8-(Methoxy- carbonylamino)dibenzo[b,d]furan-3-sulfonamido)-3-methylbutanoic acid (MMP408), Li et al., J. Med. Chem. 52, 1799-1802 (2009)] . In vitro -Wirkdaten zu MMP-2 und MMP-8 deuten auf eine weniger vorteilhafte Selektivität gegenüber diesen beiden MMP-Vertretern hin [Matrix metallo- proteinase-12 is a therapeutic targetfor asthma in children and young adults, Mukhopadhyay et al., J. Allergy Clin. Immunol. 126, 70-76 (2010)] .
Ähnlich verhält es sich mit der klinischen Testsubstanz AZD1236 zur Behandlung von COPD, die als dualer MMP-9/12-Inhibitor beschrieben wird [Effects of an oral MMP-9 and -12 Inhibitor, AZD1236, on biomarkers in moderate/ 'severe COPD: A randomised controlled trial, Dahl et al., Pulm. Pharmacol. Therap. 25, 169-177 (2012)] . Die Entwicklung dieser Verbindung ist im Jahr 2012 eingestellt worden; auch hier wird eine merkliche Inhibition von MMP-2 und MMP-13 angeführt [http://www.wipo.int/research/en/details.jsp?id=2301].
Bei der Bewertung der MMP-Selektivität ist zudem eine vorsichtige Einschätzung der Aussagekraft von Tiermodellen angezeigt. Die Testverbindung MMP408 beispielsweise zeigt eine wesent- lieh verringerte Affinität zum orthologen MMP-12-Target der Maus: IC50 2 nM (humanes MMP- 12), IC50 160 nM (murines MMP-12), IC50 320 nm (MMP-12 der Ratte) [siehe oben Li et al., 2009; Mukhopadhyay et al., 2010]. Angaben zur Wirkstärke gegenüber anderen MMPs der Maus sind nicht publiziert. Ähnlich scheint es sich bei der Testsubstanz AZD1236 darzustellen [siehe die unter http://www.wipo. int/research/en/details.jsp?id=2301 angegebenen Informationen zur Kreuz- reaktivität bei verschiedenen Tierspezies] .
Neben dem Selektivitätsprofil über Speziesgrenzen hinweg ist auch die Wirkstärke am Target MMP-12 selbst sehr wichtig. Bei einem vergleichsweise ähnlichen pharmakokinetischen Profil wird eine hochpotente Verbindung zu einer geringeren therapeutischen Dosis führen als eine weniger potente Verbindung, und im Allgemeinen sollte eine geringere Dosis mit einer vermin- derten Wahrscheinlichkeit von Nebenwirkungen einhergehen. Dies gilt insbesondere unter Einbeziehung der sogenannten "freien Fraktion" (fraction unbound, fu) einer Verbindung, die mit dem gewünschten Target bzw. unerwünschten anti- und off-Targets wechselwirken kann (die "freie Fraktion" ist definiert als die verfügbare Menge einer Verbindung, die nicht an Bestandteile des Blutplasmas gebunden ist; hierbei handelt es sich hauptsächlich um Bluteiweiß-Bestandteile wie z.B. Albumin). Neben der MMP-Selektivität ist also auch die Spezifität von herausragender Bedeutung.
Neue die Makrophagen-Elastase inhibierende Wirkstoffe sollten demnach eine hohe Selektivität und Spezifität aufweisen, um in der Lage zu sein, gezielt die HME zu inhibieren. Hierzu ist auch eine gute metabolische Stabilität der Substanzen notwendig (geringe Clearance). Außerdem sollten diese Verbindungen stabil sein unter oxidativen Bedingungen, um im Krankheitsgeschehen nicht an inhibitorischer Potenz zu verlieren.
Die chronisch-obstruktive Lungenerkrankung (COPD) ist eine langsam fortschreitende Lungenerkrankung, die durch eine Behinderung der Atemströmung charakterisiert ist, welche durch ein Lungenemphysem und/oder eine chronische Bronchitis hervorgerufen wird. Die ersten Symptome der Erkrankung zeigen sich in der Regel ab dem vierten bis fünften Lebensjahrzehnt. In den darauf folgenden Lebensjahren verschlimmert sich häufig die Kurzatmigkeit und es manifestiert sich Husten, verbunden mit einem ausgiebigen und stellenweise eitrigen Auswurf und einer Stenose- Atmung bis hin zu einer Atemnot (Dyspnoe). COPD ist in erster Linie eine Krankheit von Rauchern: Rauchen ist verantwortlich für 90% aller COPD-Fälle und 80-90% aller COPD-Todes- fälle. COPD ist ein großes medizinisches Problem und stellt weltweit die sechsthäufigste Todesursache dar. Von den über 45-jährigen Menschen sind ca. 4-6% betroffen.
Obwohl die Behinderung der Atemströmung nur partiell und zeitlich befristet sein kann, ist COPD nicht heilbar. Behandlungsziel ist folglich eine Verbesserung der Lebensqualität, die Linderung der Symptome, die Verhinderung akuter Verschlechterungen und die Verlangsamung der fortschreitenden Beeinträchtigung der Lungenfunktion. Bestehende Pharmakotherapien, die sich seit den letzten zwei bis drei Jahrzehnten kaum geändert haben, sind das Verwenden von Broncho- dilatoren, um blockierte Atemwege zu öffnen, und in bestimmten Situationen Kortikosteroide, um die Entzündung der Lunge einzudämmen [Chronic Obstructive Pulmonary Disease, PJ. Barnes, N. Engl. J. Med. 343, 269-280 (2000)] . Die chronische Entzündung der Lunge, hervorgerufen durch Zigarettenrauch oder andere Reizstoffe, ist die treibende Kraft der Krankheitsentwicklung. Der zugrunde liegende Mechanismus beinhaltet Immunzellen, die im Zuge der inflammatorischen Reaktion der Lunge verschiedene Chemokine ausschütten. Hierdurch werden neutrophile Zellen und im weiteren Verlauf alveolare Makrophagen zum Lungenbindegewebe und Lumen gelockt. Neutrophile Zellen sezernieren einen Protease-Cocktail, der hauptsächlich HNE und Proteinase 3 enthält. Aktivierte Makrophagen setzen die HME frei. Hierdurch wird lokal die Protease/ Antipro- tease-Balance zu Gunsten der Proteasen verschoben, was u.a. zu einer unkontrollierten Elastase- Aktivität und in Folge hiervon zu einem überschießenden Abbau des Elastins der Alveolaren führt. Dieser Gewebeabbau verursacht einen Kollaps der Bronchien. Dies geht einher mit einer vermin- derten Elastizität der Lunge, was zu einer Behinderung der Atemströmung und beeinträchtigter Atmung führt. Darüber hinaus kann eine häufige und andauernde Entzündung der Lunge zu einem Remodeling der Bronchien und in der Folge zu einer Ausbildung von Läsionen führen. Solche Läsionen tragen zum Auftreten des chronischen Hustens bei, der eine chronische Bronchitis kenn- zeichnet.
Aus Untersuchungen mit humanen Sputum-Proben ist bekannt, dass die Menge an HME-Protein mit dem Rauch- bzw. COPD-Status einhergeht: Die nachweisbaren HME-Mengen sind bei Nichtrauchern am niedrigsten, bei ehemaligen Rauchern und Rauchern etwas erhöht, sowie bei COPD- Patienten deutlich erhöht [Elevated MMP-12 protein levels in induced Sputum from patients with COPD, Demedts et al., Thorax 61, 196-201 (2006)] . Ähnliche Daten wurden mit humanen Sputumproben und der bronchial-alveolaren Waschflüssigkeit (bronchial alveolar washing fluid, BALF) erhoben. Hier konnte HME auf aktivierten Makrophagen nachgewiesen und quantifiziert werden: HME-Menge COPD-Patient / Raucher > COPD-Patient / ehemaliger Raucher > ehemaliger Raucher > Nichtraucher [Patterns of airway inflammation and MMP-12 expression in smokers and ex-smokers with COPD, Babusyte et al., Respir. Res. 8, 81-90 (2007)] .
Eine der COPD in gewisser Weise ähnliche entzündliche Lungenerkrankung ist die interstitielle Lungenerkrankung (ILD), insbesondere hier die Ausprägung als idiopathische Lungenfibrose (idiopathic pulmonary fibrosis, IPF) und Sarkoidose [Commonalities between the pro-fibrotic mechanisms in COPD and IPF, L.A. Murray, Pulm. Pharmacol. Therap. 25, 276-280 (2012); The pathogenesis of COPD and IPF: distinct horns of the same devil?, Chilosi et al., Respir. Res. 13:3 (2012)] . Auch hier ist die Homöostase der extrazellulären Matrix gestört. Daten aus Genom- weiten Assoziationsstudien lassen eine besondere Rolle der HME im Krankheitsgeschehen solcher fibro- tischen Erkrankungen vermuten [Gene Expression Profiling Identifies MMP-12 and ADAMDEC1 as Potential Pathogenic Mediators of Pulmonary Sarcoidosis, Crouser et al., Am. J. Respir. Crit. Care Med. 179, 929-938 (2009); Association of a Functional Polymorphism in the Matrix Metallo- proteinase-12 Promoter Region with Systemic Sclerosis in an Italian Population, Manetti et al., J. Rheumatol. 37, 1852-1857 (2010); Increased serum levels and tissue expression of matrix metallo- proteinase-12 in patients with systemic sclerosis: correlation with severity of skin and pulmonary fibrosis and vascular damage, Manetti et al., Ann. Rheum. Dis. 71, 1064-1070 (2012)]. Darüber hinaus gibt es weitere präklinische Evidenz für eine massgebliche Rolle der HME in ischämisch-entzündlichen Krankheitsprozessen [Macrophage Metalloelastase (MMP-12) Defici- ency Mitigates Retinal Inflammation and Pathological Angiogenesis in Ischemic Retinopathy, Li et al., PLoS ONE 7 (12), e52699 (2012)] . Eine deutlich höhere MMP-12-Expression ist auch bei ischämischen Nierenverletzungen bekannt, ebenso die Beteiligung von MMP-12 bei weiteren ent- zündlichen Nierenerkrankungen [JNK signalling in human and experimental renal ischaemia/ reperfusion injury, Kanellis et al., Nephrol. Dial. Transplant. 25, 2898-2908 (2010); Macrophage Metalloelastase as a Major Factor for Glomerular Injury in Anti-Glomerular Basement Membrane Nephritis, Kaneko et al., J. Immun. 170, 3377-3385 (2003); Role for Macrophage Metallo- elastase in Glomerular Basement Membrane Damage Associated with Alport Syndrome, Rao et al., Am. J. Pathol. 169, 32-46 (2006); Differential regulation ofmetzincins in experimental chronic renal allograft rejection: Potential markers and novel therapeutic targets, Berthier et al., Kidney Int. 69, 358-368 (2006); Macrophage Infiltration and renal damage are independent of Matrix Metalloproteinase 12 (MMP-12) in the obstructed kidney, Abraham et al., Nephrology 17, 322-329 (2012)] .
Aufgabe der vorliegenden Erfindung war somit die Identifizierung und Bereitstellung neuer Substanzen, welche als potente, selektive und spezifische Inhibitoren der humanen Makrophagen- Elastase (HME / MMP-12) agieren und als solche zur Behandlung und/oder Prävention insbesondere von Erkrankungen der Atemwege, der Lunge und des Herz-Kreislauf-Systems geeignet sind. Aus den Patentanmeldungen WO 96/15096-Al, WO 97/43237-Al, WO 97/43238-Al, WO 97/ 43239-A1, WO 97/43240-A1, WO 97/43245-A1 und WO 97/43247-A1 sind 4-Aryl- und 4-Biaryl- substituierte 4-Oxobutansäure-Derivate mit inhibitorischer Aktivität gegenüber MMP-2, MMP-3, MMP-9 und, in geringerem Ausmaß, MMP-1 bekannt; aufgrund dieses Wirkprofils wurden die Verbindungen als insbesondere für die Behandlung von Osteoarthritis, rheumatoider Arthritis und Tumorerkrankungen geeignet betrachtet. In WO 98/09940-A1 und WO 99/18079-A1 wurden weitere Biarylbutansäure-Derivate als Inhibitoren von MMP-2, MMP-3 und/oder MMP-13 offenbart, die zur Behandlung verschiedenartiger Erkrankungen geeignet sind. In WO 00/40539- AI wird die Verwendung von 4-Biaryl-4-oxobutansäuren zur Behandlung von Lungen- und Atemwegserkrankungen beansprucht, basierend auf einer unterschiedlich ausgeprägten Inhibition von MMP-2, MMP-3, MMP-8, MMP-9, MMP-12 und MMP-13 durch diese Verbindungen. Ferner werden in WO 2012/014114-A1 3-Hydroxypropionsäure-Derivate und in WO 2012/038942- AI Oxy- oder Sulfonylessigsäure -Derivate als duale MMP-9/12-Inhibitoren beschrieben.
Weiterhin werden in WO 96/38434-A1, WO 98/06711-A1, WO 00/06560-A1 und US 6 037 361 tricyclische heteroaromatische Verbindungen als Inhibitoren insbesondere von MMP-2 und MMP-3 offenbart, und in WO 2005/026120-A1 werden unter anderem tricyclisch substituierte 3-Hydroxypentansäure -Derivate als MMP-12-Inhibitoren beansprucht.
Vor dem Hintergrund der oben beschriebenen Aufgabe zeigte es sich allerdings, dass diese MMP- Inhibitoren aus dem Stand der Technik oftmals Nachteile besitzen, wie insbesondere eine unzu- reichende inhibitorische Potenz gegenüber MMP-12, eine ungenügende Selektivität für MMP-12 im Vergleich zu anderen MMPs und/oder eine eingeschränkte metabolische Stabilität.
Es wurde nun überraschenderweise gefunden, dass heterobicyclisch substituierte 4-Oxobutansäure- Derivate ein signifikant verbessertes Profil bezüglich ihrer Wirkstärke und Selektivität gegenüber der humanen Makrophagen-Elastase (HME / hMMP-12) im Vergleich zu den aus dem Stand der Technik bekannten Verbindungen aufweisen. Diese gezieltere Wirkungsweise lässt eine niedrigere Dosierbarkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen und ein vermindertes Risiko des Auftretens von unerwünschten Nebenwirkungen in der Therapie erwarten.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen zeichnen sich zudem durch eine signifikante inhibitorische Aktivität gegenüber den orthologen MMP-12-Peptidasen der Nagetiere aus, wie MMP-12 der Maus (auch als murine Makrophagen-Elastase, MME, bezeichnet) und MMP-12 der Ratte. Dies ermöglicht eine präklinische Evaluierung der Substanzen in verschiedenen etablierten Tiermodellen der oben beschriebenen Erkrankungen.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der allgemeinen Formel (I)
Figure imgf000010_0001
in welcher
Het für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000010_0002
steht, worin * die Verknüpfung zur R^-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbo- nylgruppe kennzeichnen, für (Ci-Cs)-Alkyl, das mit Cyano oder bis zu sechsfach mit Fluor substituiert sein kann, steht oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000011_0001
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2-, -CH2-CH2-, -C(=0)-CH2-*** oder -CH2-CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Oxetanyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydropyranyl, Phenyl, Thienyl, Pyridyl oder 2,1,3-Benzoxadiazolyl bedeutet, wobei (C3-C6)-Cycloalkyl, Oxetanyl, Tetrahydrofuranyl und Tetrahydropyranyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor und Methyl substituiert sein können und wobei Phenyl, Thienyl und Pyridyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Cyano, Methyl, Difluormethyl, Trifluormethyl, Methoxy, Ethoxy, Trifluormethoxy, (Trifluormethyl) - sulfanyl, Methylsulfonyl, Aminocarbonyl, Methoxycarbonylamino und 2-Oxo-l,3- oxazolidin-3-yl substituiert sein können, und R2B beide für Wasserstoff stehen oder miteinander verknüpft sind und zusammen eine -CH2CH2-Brücke bilden
für Wasserstoff oder für einen Substituenten ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Methyl, Fluormethyl, Difluormethyl und Trifluormethyl steht, wobei ein solcher Substituent in der bezeichneten Position 5, 6, 7 oder 8 gebunden sein kann, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze. Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formeln und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) umfassten, nachfolgend als Ausführungsbeispiele genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.
Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind, jedoch beispielsweise für die Isolierung, Reinigung oder Lagerung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.
Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen insbesondere die von üblichen Basen abgeleiteten Salze, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kaliumsalze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze), Zinksalze sowie Ammoniumsalze abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C- Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, /V,/V-Diisopro- pylethylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Tromethamin, Dimethylamino- ethanol, Diethylaminoethanol, Cholin, Procain, Dicyclohexylamin, Dibenzylamin, /V-Mefhylmor- pholin, /V-Mefhylpiperidin, Arginin, Lysin und 1,2-Ethylendiamin.
Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfindungsgemäßen Verbindun- gen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungsmittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt. Als Solvate sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung Hydrate bevorzugt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in unterschied- liehen stereoisomeren Formen existieren, d.h. in Gestalt von Konfigurationsisomeren oder gegebenenfalls auch als Konformationsisomere (Enantiomere und/oder Diastereomere, einschließlich solcher bei Atropisomeren). Die vorliegende Erfindung umfasst deshalb die Enantiomere und Diastereomere und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/ oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren; vorzugsweise werden hierfür chromatographische Verfahren verwendet, insbesondere die HPLC-Chromatographie an achiraler bzw. chiraler Phase.
Der Begriff "enantiomerenrein" wird im Rahmen der vorliegenden Erfindung dahingehend verstanden, dass die betreffende Verbindung hinsichtlich der Absolutkonfiguration des chiralen Zentrums in einem Enantiomerenüberschuss von mehr als 95%, bevorzugt von mehr als 98% vorliegt. Der Enantiomerenüberschuss (engl, enantiomeric excess, ee-Wert) wird hierbei durch Auswertung des Chromatogramms einer HPLC- Analyse an chiraler Phase nach der folgenden Formel berechnet:
Enantiomer 1 (Flächenprozent) — Enantiomer 2 (Flächenprozent)
ee = x 100%
Enantiomer 1 (Flächenprozent) + Enantiomer 2 (Flächenprozent) Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegende Erfindung sämtliche tautomere Formen.
Die vorliegende Erfindung umfasst auch alle geeigneten isotopischen Varianten der erfindungsgemäßen Verbindungen. Unter einer isotopischen Variante einer erfindungsgemäßen Verbindung wird hierbei eine Verbindung verstanden, in welcher mindestens ein Atom innerhalb der erfin- dungsgemäßen Verbindung gegen ein anderes Atom der gleichen Ordnungszahl, jedoch mit einer anderen Atommasse als der gewöhnlich oder überwiegend in der Natur vorkommenden Atommasse ausgetauscht ist. Beispiele für Isotope, die in eine erfindungsgemäße Verbindung inkorporiert werden können, sind solche von Wasserstoff, Kohlenstoff, Stickstoff, Sauerstoff, Phosphor, Schwefel, Fluor, Chlor, Brom und Iod, wie Ή (Deuterium), Ή (Tritium), 13C, 14C, 15N, 170, 180, 32P, 33P, 33S, 34S, 35S, 36S, 18F, 36C1, 82Br, 123I, 124I, 129I und 131I. Bestimmte isotopische Varianten einer erfindungsgemäßen Verbindung, wie insbesondere solche, bei denen ein oder mehrere radioaktive Isotope inkorporiert sind, können von Nutzen sein beispielsweise für die Untersuchung des Wirkmechanismus oder der Wirkstoff -Verteilung im Körper; aufgrund der vergleichsweise leichten Herstell- und Detektierbarkeit sind hierfür insbesondere mit 3H- oder 14C -Isotopen markierte Verbindungen geeignet. Darüber hinaus kann der Einbau von Isotopen, wie beispielsweise von Deuterium, zu bestimmten therapeutischen Vorteilen als Folge einer größeren metabolischen Stabilität der Verbindung führen, wie beispielsweise zu einer Verlängerung der Halbwertszeit im Körper oder zu einer Reduktion der erforderlichen Wirkdosis; solche Modifikationen der erfindungsgemäßen Verbindungen können daher gegebenenfalls auch eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung darstellen. Isotopische Varianten der erfindungsgemäßen Verbindungen können nach allgemein gebräuchlichen, dem Fachmann bekannten Verfahren hergestellt werden, so beispielsweise nach den weiter unten beschriebenen Methoden und den bei den Ausführungsbeispielen wiedergegebenen Vorschriften, indem hierbei entsprechende isotopische Modifikationen der jeweiligen Reagentien und/oder Ausgangsverbindungen eingesetzt werden. Außerdem umfasst die vorliegende Erfindung auch Prodrugs der erfindungsgemäßen Verbindungen. Der Begriff "Prodrugs" bezeichnet hierbei Verbindungen, welche selbst biologisch aktiv oder inaktiv sein können, jedoch während ihrer Verweilzeit im Körper auf beispielsweise metabolischem oder hydrolytischem Wege zu erfindungsgemäßen Verbindungen umgesetzt werden. Insbesondere umfasst die vorliegende Erfindung als Prodrugs hydrolysierbare Ester-Derivate der erfindungsgemäßen Carbonsäuren der Formel (I). Hierunter werden Ester verstanden, die in physiologischen Medien, unter den Bedingungen der im weiteren beschriebenen biologischen Tests und insbesondere in vivo auf enzymatischem oder chemischem Wege zu den freien Carbonsäuren, als den biologisch hauptsächlich aktiven Verbindungen, hydrolysiert werden können. Als solche Ester werden (Ci-C -Alkylester, in welchen die Alkylgruppe geradkettig oder verzweigt sein kann, bevorzugt. Besonders bevorzugt sind Methyl-, Ethyl- oder ieri.-Butylester.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:
(Ci -CsVAlkyl und (C -C7)-Alkyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 8 bzw. 4 bis 7 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft seien genannt: Methyl, Ethyl, n-Propyl, Isopropyl, n-Butyl, Isobutyl, sec.-Butyl, ieri.-Butyl, n-Pentyl, 2-Pentyl, 3-Pentyl, Neopentyl, 3-Methylbutyl, n-Hexyl, 2-Hexyl, 3-Hexyl, 4-Methylpentyl, n-Heptyl, 5-Methylhexyl, n-Octyl und 6-Methylheptyl. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 4 bis 7 Kohlenstoffatomen wie n-Butyl, Isobutyl, sec.-Butyl, ieri.-Butyl, n-Pentyl, 2-Pentyl, 3-Pentyl, Neopentyl, 3-Methylbutyl, n-Hexyl, 2-Hexyl, 3-Hexyl, 4-Methylpentyl, n-Hep- tyl und 5-Methylhexyl.
(Ci-C6)-Cycloalkyl steht im Rahmen der Erfindung für eine monocyclische gesättigte Cycloalkyl- gruppe mit 3 bis 6 Ring-Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Cyclo- propyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl und Cyclohexyl.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung gilt, dass für alle Reste, die mehrfach auftreten, deren Bedeutung unabhängig voneinander ist. Wenn Reste in den erfindungsgemäßen Verbindungen substituiert sind, können die Reste, soweit nicht anders spezifiziert, ein- oder mehrfach substituiert sein. Eine Substitution mit einem oder mit zwei gleichen oder verschiedenen Substituenten ist bevorzugt. Besonders bevorzugt ist die Substitution mit einem Substituenten.
Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000015_0001
steht, worin * die Verknüpfung zur P O-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbo- nylgruppe kennzeichnen,
R1 für (C4-Cv)-Alkyl oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000015_0002
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2- oder -CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Tetrahydropyranyl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausge- wählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Methyl, Trifluormethyl, Methoxy und Amino- carbonyl substituiert sein kann,
R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen oder miteinander verknüpft sind und zusammen eine -CH2CH2-Brücke bilden und R3 für Wasserstoff oder für einen Substituenten ausgewählt aus der Gruppe Methyl und Trifluormethyl steht, wobei ein solcher Substituent in der bezeichneten Position 6 oder 7 gebunden ist, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Eine besondere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I), in welcher für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000016_0001
steht, worin * die Verknüpfung zur RO-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbo- nylgruppe kennzeichnen, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Eine weitere besondere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I), in welcher
R1 (C4-C7)-Alkyl steht, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze. Eine weitere besondere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I), in welcher
R1 für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000016_0002
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2- oder -CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Tetrahydropyran-4-yl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Methyl, Trifluormethyl, Methoxy und Amino- carbonyl substituiert sein kann, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Eine weitere besondere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I), in welcher R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Eine weitere besondere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung betrifft Verbindungen der Formel (I), in welcher R3 für Wasserstoff oder für Trifluormethyl, das in der bezeichneten Position 6 gebunden ist, steht, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Besonders bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher Het für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000017_0001
steht, worin * die Verknüpfung zur R^-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbo- nylgruppe kennzeichnen, für (C4-C7)-Alkyl oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000017_0002
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2- oder -CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Tetrahydropyran-4-yl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Methyl, Trifluormethyl, Methoxy und Amino- carbonyl substituiert sein kann,
R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen und
R3 für Wasserstoff oder für Trifluormethyl, das in der bezeichneten Position 6 gebunden ist, steht, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze. Von besonderer Bedeutung im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I-A*)
Figure imgf000018_0001
in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, R2A und R2B jeweils für Wasserstoff stehen und das mit * gekennzeichnete chirale C-Atom in enantiomerenreiner Form die abgebildete ^-Konfiguration aufweist, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Die in den jeweiligen Kombinationen bzw. bevorzugten Kombinationen von Resten im einzelnen angegebenen Reste-Definitionen werden unabhängig von den jeweiligen angegebenen Kombinationen der Reste beliebig auch durch Reste-Definitionen anderer Kombinationen ersetzt.
Ganz besonders bevorzugt sind Kombinationen von zwei oder mehreren der oben genannten Vorzugsbereiche.
Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung von Verbindungen der Formel (I), worin R2A und R2B jeweils für Wasserstoff stehen, das dadurch gekennzeichnet ist, dass man Di-ieri.-butyl-(2-hydroxyethyl)malonat der Formel (Π)
Figure imgf000018_0002
in Gegenwart eines Phosphins und eines Azodicarboxylats mit einem Benzotriazin-4(3 /)-on- Derivat der Formel (ΙΠ)
Figure imgf000019_0001
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat,
zu einer Verbindung der Formel (IV)
Figure imgf000019_0002
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat,
umsetzt und die Verbindung der Formel (IV) dann entweder
[A] in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (V)
Figure imgf000019_0003
welcher Het und R1 die oben angegebenen Bedeutungen haben
und
für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom oder lod steht, zu einer Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000020_0001
in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert
oder
[B] zunächst mit einer Verbindung der Formel (VII)
Figure imgf000020_0002
in welcher Het die oben angegebene Bedeutung hat,
eine geeignete temporäre Schutzgruppe wie beispielsweise Benzyl steht und
für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom oder lod steht, in Gegenwart einer Base zu einer Verbindung der Formel (VIII)
Figure imgf000020_0003
(VIII), in welcher Het, PG und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert, anschließend die Schutzgruppe PG abspaltet und die resultierende Verbindung der Formel (IX)
Figure imgf000021_0001
in welcher Het und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, dann in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (X)
R1— Z3 (X), in welcher R1 die oben angegebene Bedeutung hat und Z3 für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom, lod, Mesylat, Triflat oder
Tosylat steht, zur Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000021_0002
in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert und die so nach Methode [A] oder [B] erhaltene Verbindung der Formel (VI) schließlich durch Behandlung mit einer Säure und nachfolgendes Erhitzen in die Carbonsäure der Formel (I-A)
Figure imgf000022_0001
in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, überführt und die Verbindungen der Formel (I-A) gegebenenfalls in ihre Enantiomere und/oder Diastereomere trennt und/oder gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen zu ihren Solvaten, Salzen und/oder Solvaten der Salze umsetzt.
Die Umsetzung (II) + (III)— (IV) wird unter den üblichen Bedingungen einer "Mitsunobu-Reak- tion" in Gegenwart eines Phosphins und eines Azodicarboxylats durchgeführt [siehe z.B. D. L. Hughes, Org. Reactions 42, 335 (1992); D. L. Hughes, Org. Prep. Proced. Int. 28 (2), 127 (1996)] . Als Phosphin-Komponente eignet sich beispielsweise Triphenylphosphin, Tri-n-butylphosphin, l,2-Bis(diphenylphosphino)ethan (DPPE), Diphenyl(2-pyridyl)phosphin, (4-Dimethylamino- phenyl)diphenylphosphin oder Tris(4-dimethylaminophenyl)phosphin. Als Azodicarboxylat kann beispielsweise Diethylazodicarboxylat (DEAD), Diisopropylazodicarboxylat (DIAD), Oi-tert.- butylazodicarboxylat, /V,/V,/VW-Tetramethylazodicarboxamid (TMAD), l,l'-(Azodicarbonyl)di- piperidin (ADDP) oder 4,7-Dimethyl-3,5,7-hexahydro-l,2,4,7-tetrazocin-3,8-dion (DHTD) eingesetzt werden. Bevorzugt wird hier Triphenylphosphin in Verbindung mit Diisopropylazodicarboxylat (DIAD) verwendet.
Inerte Lösungsmittel für die Reaktion (Π) + (III)— (IV) sind beispielsweise Ether wie Diethyl- ether, Diisopropylether, Methyl-feri.-butylether, Tetrahydrofuran, 1,4-Dioxan, 1,2-Dimethoxy- ethan oder Bis(2-methoxyethyl)ether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Pentan, Hexan oder Cyclohexan, oder polar-aprotische Lösungsmittel wie Acetonitril, Butyronitril, Dimethylsulfoxid (DMSO), N-Dimefhylformamid (DMF), N-Dimefhylacetamid (DMA), Ν,Ν'- Dimethylpropylenharnstoff (DMPU) oder -Mefhylpyrrolidinon (NMP). Auch können Gemische solcher Lösungsmittel eingesetzt werden. Bevorzugt wird Tetrahydrofuran verwendet.
Die Umsetzung (II) + (ΠΙ)— (IV) erfolgt in der Regel in einem Temperaturbereich von -20°C bis +60°C, bevorzugt bei 0°C bis +40°C. Gegebenenfalls kann die Verwendung einer Mikrowellenapparatur bei dieser Reaktion von Vorteil sein. Als Base für die Alkylierungsreaktionen (IV) + (V)— > (VI) und (IV) + (Vit)— > (VIII) sind insbesondere geeignet Alkali-Alkoholate wie Natrium- oder Kaliummethanolat, Natrium- oder Kaliumethanolat oder Natrium- oder Kalium-feri.-butylat, Alkalihydride wie Natrium- oder Kaliumhydrid, Amide wie Lithiumdiisopropylamid oder Lithium-, Natrium- oder Kalium-bis- (trimethylsilyl)amid, oder übliche metallorganische Basen wie Phenyllithium oder n-, sec- oder ieri.-Butyllithium. Bevorzugt wird Natriumhydrid oder Kalium-ieri.-butylat eingesetzt.
Als inerte Lösungsmittel für die Verfahrensschritte (IV) + (V)— > (VI) und (IV) + (VII)— > (VIII) eignen sich beispielsweise Ether wie Diethylether, Diisopropylether, Methyl-ieri.-butylether, Tetrahydrofuran, 1,4-Dioxan, 1,2-Dimethoxyethan oder Bis(2-methoxyethyl)ether, Kohlenwasser - Stoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Pentan, Hexan oder Cyclohexan, oder dipolar-aprotische Lösungsmittel wie Acetonitril, Butyronitril, A^ -Dimefhylformamid (DMF), -Dimefhylacet- amid (DMA), N, N'-Dimethylpropylenharnstoff (DMPU), N-Mefhylpyrrolidinon (NMP) oder Di- methylsulfoxid (DMSO). Auch Gemische solcher Lösungsmittel können eingesetzt werden. Bevorzugt wird A^ -Dimethylformamid (DMF) verwendet. Die Umsetzungen (IV) + (V)— > (VI) und (IV) + (VII)— > (VIII) werden im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -70°C bis +100°C, bevorzugt bei -20°C bis +50°C durchgeführt.
Die Abspaltung von Benzyl als temporärer Schutzgruppe PG im Verfahrensschritt (VIII)— (IX) erfolgt auf übliche Weise durch Hydrierung mit gasförmigem Wasserstoff oder, im Sinne einer Transfer-Hydrierung, mit Hilfe eines Wasserstoff-Donators wie Ammoniumformiat, Cyclohexen oder Cyclohexadien, jeweils in Gegenwart eines geeigneten Hydrierkatalysators wie insbesondere Palladium auf Aktivkohle. Die Reaktion wird vorzugsweise in einem alkoholischen Lösungsmittel wie Methanol oder Ethanol, in Essigsäure, Ethylacetat, Tetrahydrofuran oder 1,4-Dioxan oder in einem Gemisch solcher Lösungsmittel, gegebenenfalls unter Zusatz von Wasser, in einem Temperaturbereich von +20°C bis +80°C durchgeführt. Als temporäre Schutzgruppe PG in (VII) kann alternativ auch eine Silylgruppe, wie beispielsweise Trimethylsilyl, Triethylsilyl, Triisopropylsilyl, feri.-Butyldimethylsilyl oder ieri.-Butyldiphenyl- silyl, eingesetzt werden. Deren Abspaltung im Verfahrensschritt (VIII)— (IX) erfolgt auf übliche Weise mit Hilfe eines Fluorids wie beispielsweise Tetrabutylammoniumfluorid (TBAF). Eine weitere Alternative für PG ist Benzoyl; diese Schutzgruppe kann nach bekannter Methode durch Be- handlung mit einem Alkalihydroxid, wie Lithium-, Natrium- oder Kaliumhydroxid, oder einem Alkalialkoholat, wie Natrium- oder Kaliummethanolat oder Natrium- oder Kaliumethanolat, wieder entfernt werden [siehe auch T.W. Greene und P.G.M. Wuts, Protective Croups in Organic Synthesis, Wiley, New York, 1999]. Als Base für die Alkylierungsreaktion (ΓΧ) + (X)— (VI) eignen sich insbesondere Alkalicarbonate wie Lithium-, Natrium-, Kalium- oder Cäsiumcarbonat, Alkali-Alkoholate wie Natrium- oder Kaliummethanolat, Natrium- oder Kaliumethanolat oder Natrium- oder Kalium-ieri.-butylat, Alkalihydride wie Natrium- oder Kaliumhydrid, Amid-Basen wie Lithiumdiisopropylamid oder Lithium-, Natrium- oder Kalium-bis(trimethylsilyl)amid, oder übliche metallorganische Basen wie Phenyllithium oder n-, sec- oder ieri.-Butyllithium. Bevorzugt wird Kaliumcarbonat oder Kalium- ieri.-butylat eingesetzt.
Inerte Lösungsmittel für diese Reaktion sind beispielsweise Ether wie Diethylether, Diisopropyl- ether, Methyl- tert. -b ty lether, Tetrahydrofuran, 1,4-Dioxan, 1,2-Dimethoxyethan oder Bis(2-mefh- oxyethyl)ether, Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, Isopropanol, n-Butanol, ieri.-Butanol oder n-Pentanol, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Pentan, Hexan oder Cyclohexan, oder polar-aprotische Lösungsmittel wie Aceton, Methylethylketon, Ethylacetat, Acetonitril, Bu- tyronitril, Dimethylsulfoxid (DMSO), N, N-Dimethylformamid (DMF), N, N-Dimethylacetamid (DMA), N, N'-Dimefhylpropylenharnstoff (DMPU) oder N-Mefhylpyrrolidinon (NMP). Ebenso ist es möglich, Gemische solcher Lösungsmittel einzusetzen. Bevorzugt wird Acetonitril, N,N-Oime- thylformamid (DMF) oder n-Pentanol verwendet.
Die Umsetzung (IX) + (X)— (VI) wird im Allgemeinen, je nach Reaktivität der beteiligten Komponenten, in einem Temperaturbereich von 0°C bis +120°C durchgeführt.
Die Esterspaltung und Decarboxylierung zur Monocarbonsäure im Verfahrensschritt (VI)— (I-A) wird durch Behandlung des Diesters mit einer starken Säure wie Trifluoressigsäure oder Chlorwasserstoff und nachfolgendes Erhitzen der intermediär entstehenden Dicarbonsäure erreicht. Die Reaktion kann in einem "Eintopf-Verfahren", ohne Isolierung der Zwischenstufe, oder zweistufig durchgeführt werden. Für die Esterspaltung wird im Fall der Umsetzung mit Trifluoressigsäure bevorzugt Dichlormethan und im Fall der Umsetzung mit Chlorwasserstoff bevorzugt 1,4-Dioxan, jeweils unter wasserfreien Bedingungen, als Lösungsmittel verwendet. Die Esterspaltung wird in der Regel in einem Temperaturbereich von 0°C bis +30°C durchgeführt. Die nachfolgende Decarboxylierung erfolgt üblicherweise in einem Temperaturbereich von +80°C bis +150°C in einem entsprechend hochsiedenden inerten Lösungsmittel; bevorzugt wird hierfür 1,4-Dioxan eingesetzt. Gegebenenfalls kann die Verwendung einer Mikrowellenapparatur bei dieser Reaktion von Vorteil sein.
Die zuvor beschriebenen Verfahrensschritte können bei normalem, bei erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. im Bereich von 0.5 bis 5 bar); im Allgemeinen arbeitet man jeweils bei Normaldruck. Die Auftrennung von Stereoisomeren (Enantio- und/oder Diastereomeren) der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I-A) läßt sich nach üblichen, dem Fachmann geläufigen Methoden erreichen. Vorzugsweise werden hierfür chromatographische Verfahren an achiralen bzw. chiralen Trennphasen angewandt. Alternativ kann auch eine Trennung über diastereomere Salze der Car- bonsäuren der Formel (TA) mit chiralen Amin-Basen erfolgen.
Die Benzotriazin-4(3//)-on-Derivate der Formel (III) sind auf einfache Weise durch Behandlung von 2-Aminobenzamiden der Formel (XI)
Figure imgf000025_0001
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, mit Natriumnitrit in wässriger Salzsäure zugänglich [siehe z.B. D. Fernandez-Forner et al. , Tetrahedron 47 (42), 8917-8930 (1991)] .
Die Verbindungen der Formeln (V) und (VII) können ausgehend von Verbindungen der Formel (ΧΠ) bzw. (XIII)
Figure imgf000025_0002
(ΧΠ) (XIII), in welchen Het, PG und R1 die oben angegebenen Bedeutungen haben, nach bekannten Verfahren zur α-Halogenierung von Methylketonen erhalten werden. Bevorzugt werden als Intermediate (V) und (VII) die α-Brom- Verbindungen eingesetzt (Z1, Z2 = Br), welche aus (ΧΠ) bzw. (ΧΠΙ) beispielsweise durch Behandlung mit Phenyltrimethylammoniumtribromid gut zugänglich sind. Die Verbindungen der Formeln (ΧΠ) und (ΧΙΠ) ihrerseits können in Ab- hängigkeit von der Natur und dem Substitutionsmuster der betreffenden bicyclischen Heteroaryl- Gruppe Het nach verschiedenen in der Literatur beschriebenen Methoden hergestellt werden [vgl. z.B. zu Benzofuran-Derivaten: M. F. Wempe et al., J. Med. Chem. 54 (8), 2701-2713 (2011); J. Zhang et al., Org. Lett. 14 (17), 4528-4530 (2012); M. Inoue et al., Angew. Chem. Int. Ed. 39 (4), 761-764 (2000); M. Kuramoto et al., Org. Biomol. Chem. 6 (15), 2772-2781 (2008); W. Haefliger und D. Hauser, Synthesis, 3, 236-238 (1980); zu Benzothiophen-Derivaten: V. Fedi et ed., J. Med. Chem. 50 (20), 4793-4807 (2007); WO 2009/012430-Al, S. 211-212; EP 2 351 743-Al, S. 127; zu Benzisoxazol-Derivaten: D. S. Kemp und K. G. Paul, /. Am. Chem. Soc. 97 (25), 7305-7312 (1975); C. V. Ramana et al, Eur. J. Org. Chem., 31, 5955-5966 (2010)]. Beispiele hierzu sind auch in den nachfolgenden Reaktionsschemata 2a, 3a, 4a, 5a, 6a und 7a wiedergegeben.
Verbindungen der Formel (I), in welcher R2A und R2B miteinander verknüpft sind und zusammen eine -CEhCE -Brücke bilden, d.h. Verbindungen der Formel (I-B)
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in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, können, literaturbekannten Synthesemethoden folgend, beispielsweise durch Kupplung einer Lithium-Heteroaryl- Verbindung der Formel (XIV)
Figure imgf000026_0002
in welcher Het und R1 die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit einem 2-Acylcyclopentancarbonsäure-Derivat der Formel (XV)
Figure imgf000026_0003
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat und X für eine geeignete Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, l/i-Imidazol-l-yl oder Methylsulfonyloxy (Mesyloxy) steht, zum Produkt der Formel (XVI)
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in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, und nachfolgende Abspaltung der 2-(Trimethylsilyl)ethyl-Estergruppe erhalten werden [zur Kupplungsreaktion vgl. z.B. J. Rosen et al., Org. Lett. 9 (4), 667-669 (2007)] . Alternativ kann auch ein Aldehyd der Formel (XVII)
Figure imgf000027_0002
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, als Kupplungspartner eingesetzt werden, wobei das hier entstehende Produkt der Formel (XVIII)
Figure imgf000028_0001
(XVIII), in welcher Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, dann durch nachfolgende Oxidation in die oben beschriebene Keto- Verbindung der Formel (XVI) überführt wird [zur Kupplungsreaktion vgl. z.B. C.K. Lau et al, J. Med. Chem. 35 (7), 1299-1318 (1992); P. Wipf et al, J. Am. Chem. Soc. 122 (39), 9391-9395 (2000)].
Die Abspaltung der 2-(Trimethylsilyl)ethyl-Estergruppierung im Verfahrensschritt (XVI)— (I-B) erfolgt nach üblichen Methoden entweder mit Hilfe einer starken Säure, wie insbesondere Trifluor- essigsäure, in einem inerten Lösungsmittel wie Dichlormethan oder mit Hilfe eines Fluorids, wie insbesondere Tetra-n-butylammoniumfluorid, in einem etherischen Lösungsmittel wie Tetrahydro- furan. Die Esterspaltung wird im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -20°C bis +25°C durchgeführt.
Die Oxidation (XVIII)— (XVI) wird vorzugsweise mit Hilfe von l,l,l-Triacetoxy-l,l-dihydro- l,2-benziodoxol-3(l /)-on ("Dess-Martin-Periodinan") in einem inerten Lösungsmittel wie Dichlormethan bei einer Temperatur von 0°C bis +25°C durchgeführt. Als alternative Oxidations- mittel können für diese Reaktion beispielsweise auch Pyridiniumchlorochromat (PCC) oder die Kombination von Dimethylsulfoxid mit Oxalylchlorid oder Trifluoracetanhydrid in Gegenwart einer Amin-Base wie Triethylamin oder -Diisopropylethylamin ("Swern-Oxidation") verwendet werden.
Die lithiumorganischen Verbindungen der Formel (XIV) können nach üblichen Verfahren bei- spielsweise durch Deprotonierung einer Verbindung der Formel (XIX)
Figure imgf000028_0002
in welcher Het und R1 die oben angegebenen Bedeutungen haben, mit einer starken Base, wie Lithiumdiisopropylamid, Lithium-bis(trimethylsilyl)amid, Phenyl- lithium oder n-, sec- oder ieri.-Butyllifhium, oder durch Lithium-Halogen-Austausch ausgehend von einer Verbindung der Formel (XX)
Figure imgf000029_0001
in welcher Het und R1 die oben angegebenen Bedeutungen haben und
Hai für Halogen wie Chlor, Brom oder Iod steht, erhalten werden.
Die Verbindungen der Formeln (XV) und (XVII) können in Anlehnung an publizierte Synthese- verfahren auf verschiedenen Wegen hergestellt werden [siehe z.B. die in WO 96/15096-Al, Seite 26-44, beschriebenen allgemeinen präparativen Methoden, insbesondere die Methoden A, G, H und K]. Verbindungen der Formeln (XV) und (XVII) im Besonderen, welche eine relative transAnordnung der an den zentralen Cyclopentan-Ring gebundenen Gruppen aufweisen, d.h. Verbindungen der Formeln (XV-A) und (XVII- A)
Figure imgf000029_0002
(XV-A) (XVn-A), in welchen R3 und X die oben angegebenen Bedeutungen haben, können beispielsweise dadurch hergestellt werden, dass man a) e o-2-(Trimefhylsilyl)efhyl 2-oxo- bicyclo[2.2.1]heptan-7-carboxylat der Formel (XXI)
Figure imgf000030_0001
in das Enol-Triflat der Formel (XXII)
Figure imgf000030_0002
überführt, dieses b) in einem "Eintopf-Verfahren" zunächst mit -Mefhylmorpholin- -oxid in Ge- genwart von katalytischem Osmiumtetroxid und anschließend mit Natriumperiodat zum 3-Formyl- cyclopentan-l,2-dicarbonsäure-Derivat der Formel (ΧΧΠΙ)
Figure imgf000030_0003
umsetzt, nachfolgend c) mit Benzylchlorformiat in Gegenwart einer Base und 4-N,N-Dimethyl- aminopyridin als Katalysator in den korrespondierenden Benzylester der Formel (XXIV)
Figure imgf000030_0004
überführt, dann d) mit Natriumborhydrid zur Hydroxymethyl-Verbindung der Formel (XXV)
Figure imgf000031_0001
reduziert, anschließend e) in Gegenwart eines Alkyl- oder Arylphosphins und eines Azodicarboxy- lats mit einem Benzotriazin-4(3//)-on-Derivat der Formel (III)
Figure imgf000031_0002
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, zu einer Verbindung der Formel (XXVI)
Figure imgf000031_0003
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, umsetzt, f) den Benzylester durch Hydrogenolyse in Gegenwart eines Palladium-Katalysators ab- spaltet und die resultierende Carbonsäure der Formel (XXVII)
Figure imgf000032_0001
(XXVII), in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, schließlich gl ) nach üblichen Methoden in das gewünschte Derivat der Formel (XV- A) überführt oder g2) mit Boran oder einem Boran-Komplex zur Hydroxymethyl -Verbindung der Formel (XXVIII)
Figure imgf000032_0002
in welcher R3 die oben angegebene Bedeutung hat, reduziert und diese h) mit l,l,l-Triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benziodoxol-3(l /)-on ("Dess-Martin- Periodinan") zur Formyl-Verbindung der Formel (XVII-A) re-oxidiert [zu weiteren Details dieser Reaktionssequenz sei auf die entsprechenden Vorschriften im Experimentellen Teil der vorliegenden Anmeldung verwiesen] .
Bei der zuvor beschriebenen Synthesesequenz (XXI) -> (ΧΧΠ) -> (ΧΧΙΠ) -> (XXIV) -> (XXV) -> (XXVI) -> (XXVH) -> (XV-A) bzw. (XXVII) -> (XXVIII) -> (XVII-A) wurde zur vereinfachten Darstellung der relativen Konfiguration der chiralen Zentren jeweils nur die Strukturformel eines Enantiomers wiedergegeben, auch wenn die betreffenden Verbindungen in racemischer Form eingesetzt oder erhalten wurden; tatsächliches Produkt eines solcherart in racemischer Form durchgeführten Herstellverfahrens ist das racemische Gemisch der Verbindungen (XV-A) und (XV -B) bzw. (XVII-A) und (ΧΥΠ-Β)
Figure imgf000033_0001
Figure imgf000033_0002
(XVII-A) (XVII-B)
Entsprechend wird bei einer solchen Verfahrensweise als Endprodukt ein racemisches Gemisch (bezogen auf die Konfiguration des zentralen Cyclopentan-Rings) der erfindungsgemäßen Carbon- säuren (I-B 1 ) und (I-B2)
Figure imgf000033_0003
worin Het, R1 und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, erhalten. Derartige Gemische von Stereoisomeren (Enantio- und/oder Diastereomeren) der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I-B) können nach üblichen, dem Fachmann geläufigen Methoden aufgetrennt werden. Vorzugsweise werden hierfür chromatographische Verfahren an achiralen bzw. chiralen Trennphasen angewandt. Im Fall der Carbonsäuren (I-B1)/(I-B2) beispiels- weise kann alternativ auch eine Trennung über diastereomere Salze mit Hilfe chiraler Amin-Basen erfolgen.
Die Verbindungen der Formeln (Π), (X), (XI), (XIX), (XX) und (XXI) sind entweder kommerziell erhältlich oder als solche in der Literatur beschrieben, oder sie können, ausgehend von anderen kommerziell erhältlichen Verbindungen, nach dem Fachmann geläufigen, literaturbekannten Me- thoden hergestellt werden. Zahlreiche detaillierte Vorschriften und weitere Literaturangaben befinden sich auch im Experimentellen Teil im Abschnitt zur Herstellung der Ausgangsverbindungen und Intermediate.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch die folgenden Reaktionsschemata beispielhaft veranschaulicht werden: Schema 1
Figure imgf000034_0001
Figure imgf000034_0002
Figure imgf000035_0001
Figure imgf000036_0001
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Figure imgf000038_0001
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Schema 7b
Figure imgf000040_0001
Figure imgf000040_0002
Schema 8b
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(als racemisches Gemisch)
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(als racemisches Gemisch)
Figure imgf000041_0003
(als racemisches Gemisch) (als racemisches Gemisch) Schema 8c
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(als racemisches Gemisch)
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(als racemisches Gemisch)
Figure imgf000042_0003
(als racemisches Gemisch)
Enantiomeren- trennung
per HPLC
(+)-Enantiomer
und
(-)-Enantiomer
Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen wertvolle pharmakologische Eigenschaften und können zur Vorbeugung und Behandlung von Erkrankungen bei Menschen und Tieren verwendet werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen stellen potente, nicht-reaktive und selektive Inhibitoren der humanen Makrophagen-Elastase (HME / hMMP-12) dar, die ein signifikant verbessertes Profil bezüglich der Wirkstärke und Selektivität im Vergleich zu den aus dem Stand der Technik bekannten Verbindungen aufweisen. Diese gezieltere Wirkungsweise lässt eine niedrigere Dosierbarkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen und ein vermindertes Risiko des Auftretens von unerwünschten Nebenwirkungen in der Therapie erwarten. Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich daher in besonderem Maße zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen und pathologischen Prozessen, insbesondere solcher, bei denen im Zuge eines infektiösen oder nicht-infektiösen Entzündungsgeschehens und/oder eines Gewebe- oder Gefäßumbaus die Makrophagen-Elastase (HME / hMMP-12) involviert ist. Dazu zählen im Sinne der vorliegenden Erfindung insbesondere Erkrankungen der Atemwege und der Lunge, wie die chronisch-obstruktive Lungenerkrankung (COPD), Asthma und die Gruppe der interstitiellen Lungenerkrankungen (ILD), sowie Erkrankungen des Herz-Kreislauf-Systems, wie die Arteriosklerose und Aneurysmen.
Zu den Ausprägungen der chronisch-obstruktiven Lungenerkrankung (COPD) gehören insbeson- dere das Lungenemphysem, z.B. das durch Zigarettenrauch induzierte Lungenemphysem, die chronische Bronchitis (CB), die pulmonale Hypertension in der COPD (PH-COPD), Bronchiektasie (BE) und Kombinationen hiervon, insbesondere in akut exazerbierenden Stadien der Erkrankung (AE-COPD).
Zu den Ausprägungen von Asthma gehören asthmatische Erkrankungen unterschiedlicher Schwe- regrade mit intermittierendem oder persistierendem Verlauf, wie refraktäres Asthma, bronchiales Asthma, allergisches Asthma, intrinsisches Asthma, extrinsisches Asthma und durch Medikamente oder Staub induziertes Asthma.
Zu der Gruppe der interstitiellen Lungenerkrankungen (ILD) gehören die idiopathische pulmonale Fibrose (IPF), die Lungensarkoidose und die akute interstitielle Pneumonie, nicht-spezifische interstitielle Pneumonien, lymphoide interstitielle Pneumonien, respiratorische Bronchiolitis mit interstitieller Lungenerkrankung, kryptogene organisierende Pneumonien, desquamative interstitielle Pneumonien und nicht-klassifizierbare idiopathische interstitielle Pneumonien, ferner granulo- matöse interstitielle Lungenerkrankungen, interstitielle Lungenerkrankungen bekannter Ursache und andere interstitielle Lungenerkrankungen unbekannter Ursache. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch zur Behandlung und/oder Prävention von weiteren Erkrankungen der Atemwege und der Lunge verwendet werden, wie z.B. der pulmonalen arteriellen Hypertonie (PAH) und anderer Formen der pulmonalen Hypertonie (PH), des Bronchiolitis obliterans-Syndroms (BOS), des akuten Atemwegssyndroms (ARDS), der akuten Lungenschädigung (ALI), der alpha- 1-Antitrypsin-Defizienz (AATD) und der zystischen Fibrose (CF), von verschiedenen Formen der Bronchitis (chronische Bronchitis, infektiöse Bronchitis, eosinophile Bronchitis), von Bronchiektasie, Pneumonie, Farmerlunge und verwandten Krankheiten, infektiös und nicht-infektiös bedingten Husten- und Erkältungskrankheiten (chronischer entzündlicher Husten, iatrogener Husten), Nasenschleimhautentzündungen (einschließlich medikamentöse Rhinitis, vasomotorische Rhinitis und jahreszeitabhängige, allergische Rhinitis, z.B. Heuschnupfen) und von Polypen.
Zu der Gruppe der Erkrankungen des Herz-Kreislauf-Systems gehören im Sinne der vorliegenden Erfindung insbesondere die Arteriosklerose und deren Folgeerkrankungen, wie z.B. Schlaganfall bei einer Arteriosklerose der Halsarterien (karotide Arteriosklerose), Herzinfarkt bei einer Arteriosklerose der Herzkranzgefäße, periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK) in Folge einer Arteriosklerose der Beinarterien, sowie Aneurysmen, insbesondere Aneurysmen der Aorta, z.B. in Folge von Arteriosklerose, Bluthochdruck, Verletzungen und Entzündungen, Infektionen (z.B. bei rheumatischem Fieber, Syphilis, Lyme-Borreliose), angeborenen Bindegewebsschwächen (z.B. beim Marfan-Syndrom und Ehlers-Danlos-Syndrom) oder als Folge einer Volumenbelastung der Aorta bei angeborenen Herzfehlern mit Rechts-Links-Shunt oder einer Shunt-abhängigen Perfusion der Lungen, sowie Aneurysmen an Herzkranzgefäßen im Zuge einer Erkrankung am Kawa- saki-Syndrom und in Hirnarealen bei Patienten mit einer angeborenen Fehlbildung der Aortenklappe. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können darüber hinaus zur Behandlung und/oder Prävention weiterer kardiovaskulärer Erkrankungen eingesetzt werden, wie beispielsweise Bluthochdruck (Hypertonie), Herzinsuffizienz, koronare Herzerkrankung, stabile und instabile Angina pectoris, renale Hypertonie, periphere und kardiale Gefäßerkrankungen, Arrhythmien, Rhythmusstörungen der Vorhöfe und der Kammern sowie Überleitungsstörungen wie beispielsweise atrio-ventrikuläre Blockaden des Grades I-III, supraventrikuläre Tachyarrhythmie, Vorhofflimmern, Vorhofflattern, Kammerflimmern, Kammerflattern, ventrikuläre Tachyarrhythmie, Torsade de pointes-Tachykar- die, Extrasystolen des Vorhofs und des Ventrikels, AV-junktionale Extrasystolen, Sick-Sinus- Syndrom, Synkopen, AV-Knoten-Reentry-Tachykardie, Wolff-Parkinson-White-Syndrom, akutes Koronarsyndrom (ACS), autoimmune Herzerkrankungen (Perikarditis, Endokarditis, Valvolitis, Aortitis, Kardiomyopathien), Boxerkardiomyopathie, Schock wie kardiogener Schock, septischer Schock und anaphylaktischer Schock, ferner zur Behandlung und/oder Prävention von thrombo- embolischen Erkrankungen und Ischämien, wie myokardiale Ischämie, Herzhypertrophie, transito- rische und ischämische Attacken, Präeklampsie, entzündliche kardiovaskuläre Erkrankungen, Spasmen der Koronararterien und peripherer Arterien, Ödembildung wie beispielsweise pulmo- nales Ödem, Hirnödem, renales Ödem oder Herzinsuffizienz-bedingtes Ödem, periphere Durchblutungsstörungen, Reperfusionsschäden, arterielle und venöse Thrombosen, Mikroalbuminurie, Herzmuskelschwäche, endotheliale Dysfunktion, mikro- und makrovaskuläre Schädigungen (Vaskulitis), sowie zur Verhinderung von Restenosen beispielsweise nach Thrombolyse-Therapien, percutan-transluminalen Angioplastien (PTA), percutan-transluminalen Koronarangioplastien (PTCA), Herztransplantationen und Bypass-Operationen. Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Begriff Herzinsuffizienz sowohl akute als auch chronische Erscheinungsformen der Herzinsuffizienz wie auch spezifische oder verwandte Krankheitsformen hiervon, wie akute dekompensierte Herzinsuffizienz, Rechtsherzinsuffizienz, Linksherzinsuffizienz, Globalinsuffizienz, ischämische Kardiomyopathie, dilatative Kardiomyopathie, hypertrophe Kardiomyopathie, idiopathische Kardiomyopathie, angeborene Herzfehler, Herzklappenfehler, Herzinsuffizienz bei Herzklappenfehlern, Mitralklappenstenose, Mitralklappen- insuffizienz, Aortenklappenstenose, Aortenklappeninsuffizienz, Trikuspidalstenose, Trikuspidal- insuffizienz, Pulmonalklappenstenose, Pulmonalklappeninsuffizienz, kombinierte Herzklappenfehler, Herzmuskelentzündung (Myokarditis), chronische Myokarditis, akute Myokarditis, virale Myokarditis, diabetische Herzinsuffizienz, alkoholtoxische Kardiomyopathie, kardiale Speichererkrankungen sowie diastolische und systolische Herzinsuffizienz.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen eignen sich außerdem zur Behandlung und/oder Prävention von Nierenerkrankungen, insbesondere von Niereninsuffizienz und Nierenversagen. Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfassen die Begriffe Niereninsuffizienz und Nierenversagen sowohl akute als auch chronische Erscheinungsformen hiervon wie auch diesen zugrundeliegende oder verwandte Nierenerkrankungen, wie renale Hypoperfusion, intradialytische Hypotonie, obstruktive Uropathie, Glomerulopathien, Glomerulonephritis, akute Glomerulonephritis, Glomerulosklerose, tubulointerstitielle Erkrankungen, nephropathische Erkrankungen wie primäre und angeborene Nierenerkrankung, Nierenentzündung, immunologische Nierenerkrankungen wie Nierentransplan- tat-Abstoßung und das Alport-Syndrom, Immunkomplex-induzierte Nierenerkrankungen, durch toxische Substanzen induzierte Nephropathie, Kontrastmittel-induzierte Nephropathie, diabetische und nicht-diabetische Nephropathie, Pyelonephritis, Nierenzysten, Nephrosklerose, hypertensive Nephrosklerose und nephrotisches Syndrom, welche diagnostisch beispielsweise durch abnorm verminderte Kreatinin- und/oder Wasser-Ausscheidung, abnorm erhöhte Blutkonzentrationen von Harnstoff, Stickstoff, Kalium und/oder Kreatinin, veränderte Aktivität von Nierenenzymen wie z.B. Glutamylsynthetase, veränderte Urinosmolarität oder Urinmenge, erhöhte Mikroalbuminurie, Makroalbuminurie, Läsionen an Glomerula und Arteriolen, tubuläre Dilatation, Hyperphosphat- ämie und/oder die Notwendigkeit zur Dialyse charakterisiert werden können. Die vorliegende Erfindung umfasst auch die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prävention von Folgeerscheinungen einer Niereninsuffizienz, wie beispielsweise Hypertonie, Lungenödem, Herzinsuffizienz, Urämie, Anämie, Elektrolytstörungen (z.B. Hyperkalämie, Hyponaträmie) und Störungen im Knochen- und Kohlenhydrat-Metabolismus.
Darüber hinaus sind die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen des Urogenitalsystems geeignet, wie beispielsweise benignes Prostata-Syndrom (BPS), benigne Prostatahyperplasie (BPH), benigne Prostatavergrößerung (BPE), Blasenentlee- rangsstörungen (BOO), untere Harnwegssyndrome (LUTS), neurogene überaktive Blase (OAB), Inkontinenz wie beispielsweise Misch-, Drang-, Stress- oder Überlauf-Inkontinenz (MUI, UUI, SUI, OUI), Beckenschmerzen sowie erektile Dysfunktion und weibliche sexuelle Dysfunktion.
Zudem besitzen die erfindungsgemäßen Verbindungen anti-inflammatorische Wirkung und können daher als entzündungshemmende Mittel zur Behandlung und/oder Prävention von Sepsis (SIRS), multiplem Organversagen (MODS, MOF), entzündlichen Erkrankungen der Niere, chronischen Darmentzündungen (IBD, Morbus Crohn, Colitis ulcerosa), Pankreatitis, Peritonitis, Cystitis, Urethritis, Prostatitis, Epidimytitis, Oophoritis, Salpingitis, Vulvovaginitis, rheumatoiden Erkrankungen, entzündlichen Erkrankungen des Zentralnervensystems, multipler Sklerose, entzündlichen Hauterkrankungen und entzündlichen Augenerkrankungen eingesetzt werden.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind ferner zur Behandlung und/oder Prävention von fibro- tischen Erkrankungen der inneren Organe, wie beispielsweise der Lunge, des Herzens, der Niere, des Knochenmarks und insbesondere der Leber, sowie von dermatologischen Fibrosen und fibro- tischen Erkrankungen des Auges geeignet. Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Be- griff fibrotische Erkrankungen insbesondere solche Erkrankungen wie Leberfibrose, Leberzirrhose, Lungenfibrose, Endomyokardfibrose, Nephropathie, Glomerulonephritis, interstitielle Nieren- fibrose, fibrotische Schäden in Folge von Diabetes, Knochenmarksfibrose, Peritonealfibrose und ähnliche fibrotische Erkrankungen, Sklerodermie, Morphaea, Keloide, hypertrophe Narbenbildung, Naevi, diabetische Retinopathie, proliferative Vitroretinopathie und Erkrankungen des Bin- degewebes (z.B. Sarkoidose). Die erfindungsgemäßen Verbindungen können ebenso verwendet werden zur Förderung der Wundheilung, zur Bekämpfung postoperativer Narbenbildung, z.B. nach Glaukom-Operationen, und zu kosmetischen Zwecken bei alternder oder verhornender Haut.
Auch können die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prävention von Anämien verwendet werden, wie hämolytischen Anämien, insbesondere Hämoglobinopathien wie Sichelzellanämie und Thalassämien, megaloblastären Anämien, Eisenmangel-Anämien, Anämien durch akuten Blutverlust, Verdrängungsanämien und aplastischen Anämien.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind zudem zur Behandlung von Krebserkrankungen geeignet, wie beispielsweise von Hautkrebs, Hirntumoren, Brustkrebs, Knochenmarktumoren, Leukämien, Liposarcomen, Karzinomen des Magen-Darm-Traktes, der Leber, Bauchspeicheldrüse, Lunge, Niere, Harnleiter, Prostata und des Genitaltraktes sowie von bösartigen Tumoren des lymphoproliferativen Systems, wie z.B. Hodgkin's und Non-Hodgkin's Lymphom.
Darüber hinaus können die erfindungsgemäßen Verbindungen eingesetzt werden zur Behandlung und/oder Prävention von Lipidstoffwechselstörungen und Dyslipidämien (Hypolipoproteinämie, Hypertriglyceridämie, Hyperlipidämie, kombinierte Hyperlipidämien, Hypercholesterolämie, Abetalipoproteinämie, Sitosterolämie), Xanthomatose, Tangier-Krankheit, Fettsucht (Adipositas), Fettleibigkeit (Obesitas), metabolischen Erkrankungen (Metabolisches Syndrom, Hyperglykämie, Insulin-abhängiger Diabetes, nicht-Insulin-abhängiger Diabetes, Gestationsdiabetes, Hyperinsulin- ämie, Insulinresistenz, Glukose-Intoleranz und diabetische Spätfolgen wie Retinopathie, Nephropathie und Neuropathie), von Erkrankungen des Gastrointestinaltrakts und des Abdomen (Glos- sitis, Gingivitis, Periodontitis, Oesophagitis, eosinophile Gastroenteritis, Mastocytose, Morbus Crohn, Colitis, Proctitis, Pruritis ani, Diarrhöe, Zöliakie, Hepatitis, Leberfibrose, Leberzirrhose, Pankreatitis und Cholecystitis), von Erkrankungen des Zentralen Nervensystems und von neuro- degenerativen Störungen (Schlaganfall, Alzheimer'sche Krankheit, Parkinson'sche Krankheit, Demenz, Epilepsie, Depressionen, Multiple Sklerose), Immunerkrankungen, Schilddrüsenerkrankungen (Hyperthyreose), Hauterkrankungen (Psoriasis, Akne, Ekzeme, Neurodermitis, vielfältige Formen der Dermatitis wie z.B. Dermatitis abacribus, Dermatitis actinica, Dermatitis allergica, Dermatitis ammoniacalis, Dermatitis artefacta, Dermatitis autogenica, Dermatitis atrophicans, Der- matitis calorica, Dermatitis combustionis, Dermatitis congelationis, Dermatitis cosmetica, Dermatitis escharotica, Dermatitis exfoliativa, Dermatitis gangraenose, Dermatitis haemostatica, Dermatitis herpetiformis, Dermatitis lichenoides, Dermatitis linearis, Dermatitis maligna, Dermatitis medimencatosa, Dermatitis palmaris et plantaris, Dermatitis parasitaria, Dermatitis photoallergica, Dermatitis phototoxica, Dermatitis pustularis, Dermatitis seborrhoica, Dermatitis solaris, Derma- titis toxica, Dermatitis ulcerosa, Dermatitis veneata, infektiöse Dermatitis, pyogene Dermatitis und Rosazea-artige Dermatitis, sowie Keratitis, Bullosis, Vasculitis, Cellulitis, Panniculitis, Lupus erythematodes, Erythema, Lymphome, Hautkrebs, Sweet-Syndrom, Weber-Christian-Syndrom, Narbenbildung, Warzenbildung, Frostbeulen), von entzündlichen Augenerkrankungen (Saccoidosis, Blepharitis, Conjunctivitis, Iritis, Uveitis, Chorioiditis, Ophthalmitis), viralen Erkrankungen (durch Influenza-, Adeno- und Coronaviren, wie z.B. HPV, HCMV, HIV, SARS), von Erkrankungen des Skelettknochens und der Gelenke sowie der Skelettmuskel (vielfältige Formen der Arthritis wie z.B. Arthritis alcaptonurica, Arthritis ankylosans, Arthritis dysenterica, Arthritis exsudativa, Arthritis fungosa, Arthritis gonorrhoica, Arthritis mutilans, Arthritis psoriatica, Arthritis purulenta, Arthritis rheumatica, Arthritis serosa, Arthritis syphilitica, Arthritis tuberculosa, Arthritis urica, Arthritis villonodularis pigmentosa, atypische Arthritis, hämophile Arthritis, juvenile chronische Arthritis, rheumatoide Arthritis und metastatische Arthritis, des weiteren das Still-Syndrom, Felty- Syndrom, Sjörgen-Syndrom, Clutton-Syndrom, Poncet-Syndrom, Pott-Syndrom und Reiter-Syn- drom, vielfältige Formen der Arthropathien wie z.B. Arthropathie deformans, Arthropathie neuro- pathica, Arthropathie ovaripriva, Arthropathie psoriatica und Arthropathie tabica, systemische Sklerosen, vielfältige Formen der entzündlichen Myopathien wie z.B. Myopathie epidemica, Myopathie fibrosa, Myopathie myoglobinurica, Myopathie ossificans, Myopathie ossificans neurotica, Myopathie ossificans progressiva multiplex, Myopathie purulenta, Myopathie rheumatica, Myopathie trichinosa, Myopathie tropica und Myopathie typhosa, sowie das Günther-Syndrom und das Münchmeyer-Syndrom), von entzündlichen Arterienveränderungen (vielfältige Formen der Arteri- tis wie z.B. Endarteritis, Mesarteritis, Periarteritis, Panarteritis, Arteritis rheumatica, Arteritis de- formans, Arteritis temporalis, Arteritis cranialis, Arteritis gigantocellularis und Arteritis granulomatosa, sowie das Horton-Syndrom, Churg-Strauss-Syndrom und die Takayasu-Arteritis), des Mückle -Well-Syndroms, der Kikuchi-Krankheit, von Polychondritis, Sklerodermia sowie von weiteren Erkrankungen mit einer entzündlichen oder immunologischen Komponente, wie beispielsweise Katarakt, Kachexie, Osteoporose, Gicht, Inkontinenz, Lepra, Sezary-Syndrom und paraneo- plastisches Syndrom, bei Abstossungsreaktionen nach Organtransplantationen und zur Wundheilung und Angiogenese insbesondere bei chronischen Wunden.
Aufgrund ihres Eigenschaftsprofils eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen insbesondere zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen der Atemwege und der Lunge, vor allem der chronisch-obstruktiven Lungenerkrankung (COPD), hier insbesondere des Lungen- emphysems, der chronischen Bronchitis (CB), der pulmonalen Hypertension in der COPD (PH- COPD) und von Bronchiektasie (BE) sowie von Kombinationen dieser Krankheitsformen insbesondere in akut exazerbierenden Stadien der COPD-Erkrankung (AE-COPD), des weiteren von Asthma und von interstitiellen Lungenerkrankungen, hier insbesondere der idiopathischen Lungenfibrose (IPF) und der Lungensarkoidose, von Erkrankungen des Herz-Kreislauf-Systems, insbeson- dere von Arteriosklerose, speziell der karotiden Arteriosklerose, sowie viraler Myokarditis, Kardiomyopathie und Aneurysmen, einschließlich deren Folgeerkrankungen wie Schlaganfall, Myokardinfarkt und periphere arterielle Verschlusskrankheit (pAVK), sowie von chronischen Nierenerkrankungen und dem Alport-Syndrom.
Die zuvor genannten, gut charakterisierten Krankheiten des Menschen können mit vergleichbarer Ätiologie auch in anderen Säugetieren vorkommen und dort ebenfalls mit den Verbindungen der vorliegenden Erfindung behandelt werden.
Im Sinne der vorliegenden Erfindung umfasst der Begriff "Behandlung" oder "behandeln" ein Hemmen, Verzögern, Aufhalten, Lindern, Abschwächen, Einschränken, Verringern, Unterdrücken, Zurückdrängen oder Heilen einer Krankheit, eines Leidens, einer Erkrankung, einer Verletzung oder einer gesundheitlichen Störung, der Entfaltung, des Verlaufs oder des Fortschreitens solcher Zustände und/oder der Symptome solcher Zustände. Der Begriff "Therapie" wird hierbei als synonym mit dem Begriff "Behandlung" verstanden.
Die Begriffe "Prävention", "Prophylaxe" oder "Vorbeugung" werden im Rahmen der vorliegenden Erfindung synonym verwendet und bezeichnen das Vermeiden oder Vermindern des Risikos, eine Krankheit, ein Leiden, eine Erkrankung, eine Verletzung oder eine gesundheitliche Störung, eine Entfaltung oder ein Fortschreiten solcher Zustände und/oder die Symptome solcher Zustände zu bekommen, zu erfahren, zu erleiden oder zu haben.
Die Behandlung oder die Prävention einer Krankheit, eines Leidens, einer Erkrankung, einer Ver- letzung oder einer gesundheitlichen Störung können teilweise oder vollständig erfolgen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Ver- bindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Arzneimittel, enthaltend mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen, zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen. Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen in einem Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können allein oder bei Bedarf in Kombination mit einer oder mehreren anderen pharmakologisch wirksamen Substanzen eingesetzt werden, solange diese Kombination nicht zu unerwünschten und inakzeptablen Nebenwirkungen führt. Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind daher Arzneimittel, enthaltend mindestens eine der erfin- dungsgemäßen Verbindungen und einen oder mehrere weitere Wirkstoffe, insbesondere zur Behandlung und/oder Prävention der zuvor genannten Erkrankungen. Als hierfür geeignete Kombinationswirkstoffe seien beispielhaft und vorzugsweise genannt:
• anti-obstruktiv / bronchodilatorisch wirkende Mittel, wie sie z.B. zur Therapie der chronischobstruktiven Lungenerkrankung (COPD) oder eines Asthma bronchiale eingesetzt werden, bei- spielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der inhalativ oder systemisch angewendeten beta- adrenergen Rezeptor-Agonisten (beta-Mimetika), der inhalativ angewendeten anti-muscariner- gen Substanzen und der PDE 4-lnhibitoren;
• organische Nitrate und NO-Donatoren, wie beispielsweise Natriumnitroprussid, Nitroglycerin, Isosorbidmononitrat, Isosorbiddinitrat, Molsidomin oder SIN-1, sowie inhalatives NO; · Verbindungen, die den Abbau von cyclischem Guanosinmonophosphat (cGMP) und/oder cyclischem Adenosinmonophosphat (cAMP) inhibieren, wie beispielsweise Inhibitoren der Phosphodiesterasen (PDE) 1, 2, 3, 4 und/oder 5, insbesondere PDE 4-Inhibitoren wie Roflumi- last und PDE 5-Inhibitoren wie Sildenafil, Vardenafil, Tadalafil, Udenafil, Dasantafil, Avanafil, Mirodenafil oder Lodenafil; · NO- und Häm-unabhängige Aktivatoren der löslichen Guanylatcyclase (sGC), wie insbesondere die in WO 01/19355, WO 01/19776, WO 01/19778, WO 01/19780, WO 02/070462 und WO 02/070510 beschriebenen Verbindungen;
• NO-unabhängige, jedoch Häm-abhängige Stimulatoren der löslichen Guanylatcyclase (sGC), wie insbesondere Riociguat sowie die in WO 00/06568, WO 00/06569, WO 02/42301, WO 03/095451, WO 2011/147809, WO 2012/004258, WO 2012/028647 und WO 2012/059549 beschriebenen Verbindungen;
• Verbindungen, die die humane neutrophile Elastase (HNE) inhibieren, wie insbesondere Sivele- stat, DX-890 (Reltran) sowie die in WO 2004/020410, WO 2004/020412, WO 2004/024700, WO 2004/024701, WO 2005/080372, WO 2005/082863, WO 2005/082864, WO 2009/080199, WO 2009/135599, WO 2010/078953 und WO 2010/115548 beschriebenen Verbindungen;
• Prostacyclin-Analoga und IP-Rezeptor-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Iloprost, Beraprost, Treprostinil, Epoprostenol oder NS-304;
• Endothelin-Rezeptor-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Bosentan, Darusentan, Ambrisentan oder Sitaxsentan; · entzündungshemmende, immunmodulierende, immunsuppressive und/oder zytotoxische Mittel, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der systemisch oder inhalativ angewendeten Corticosteroide sowie Acetylcystein, Montelukast, Azathioprin, Cyclophosphamid, Hydroxy- carbamid, Azithromycin, IFN-γ, Pirfenidon oder Etanercept;
• antifibrotisch wirkende Mittel, wie beispielhaft und vorzugsweise Lysophosphatidsäure-Rezep- tor 1 (LPA-l)-Antagonisten, Lysyloxidase (LOX) -Inhibitoren, Lysyloxidase-like-2-lnhibitoren, Vasoaktives intestinales Peptid (VIP), VIP-Analoga, avß6-Integrin-Antagonisten, Cholchicin, IFN-ß, D-Penicillamin, Inhibitoren des WNT-Signalwegs oder CCR2 -Antagonisten;
• den Fettstoffwechsel verändernde Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Inhibitoren wie beispielhaft und vorzugs- weise HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese -Inhibitoren, der ACAT -Inhibitoren, CETP- Inhibitoren, MTP-Inhibitoren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta-Agonisten, Cholesterin-Absorptionshemmer, Lipase-Inhibitoren, polymeren Gallensäureadsorber, Gallensäure -Reabsorptionshemmer und Lipoprotein(a)-Antagonisten;
• den Blutdruck senkende Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Cal- cium-Antagonisten, Angiotensin AII-Antagonisten, ACE-Hemmer, Vasopeptidase-lnhibitoren,
Endothelin-Antagonisten, Renin-Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-Blocker, beta-Rezeptoren- Blocker, Mineralocorticoid-Rezeptor- Antagonisten sowie der Diuretika;
• die Signaltransduktionskaskade inhibierende Verbindungen, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Kinase-Inhibitoren, insbesondere aus der Gruppe der Tyrosinkinase- und/oder Serin/Threoninkinase-Inhibitoren, wie beispielhaft und vorzugsweise Nintedanib, Dasatinib,
Nilotinib, Bosutinib, Regorafenib, Sorafenib, Sunitinib, Cediranib, Axitinib, Telatinib, Imati- nib, Brivanib, Pazopanib, Vatalanib, Gefitinib, Erlotinib, Lapatinib, Canertinib, Lestaurtinib, Pelitinib, Semaxanib oder Tandutinib;
• Verbindungen, die die Bindung von Serotonin an dessen Rezeptor blockieren, beispielhaft und vorzugsweise Antagonisten des 5 -HT2B -Rezeptors wie PRX -08066;
• Antagonisten von Wachstumsfaktoren, Zytokinen und Chemokinen, beispielhaft und vorzugsweise Antagonisten von TGF-ß, CTGF, IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-13 und Integrinen;
• die Rho-Kinase inhibierende Verbindungen, wie beispielhaft und vorzugsweise Fasudil, Y-27632, SLx-2119, BF-66851, BF-66852, BF-66853, KI-23095 oder BA-1049; · Verbindungen, die die lösliche Epoxidhydrolase (sEH) inhibieren, wie beispielsweise N,N'-Oi- cyclohexylharnstoff, 12-(3-Adamantan-l-yl-ureido)-dodecansäure oder l-Adamantan-l-yl-3-{5- [2-(2-ethoxyethoxy)ethoxy]pentyl } -harnstoff ;
• den Energiestoffwechsel des Herzens beeinflussende Verbindungen, wie beispielhaft und vorzugsweise Etomoxir, Dichloracetat, Ranolazin oder Trimetazidin; • antithrombotisch wirkende Mittel, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien und der profibrinolytischen Substanzen;
• Chemotherapeutika, wie sie z.B. zur Therapie von Neubildungen (Neoplasien) der Lunge oder anderer Organe eingesetzt werden; und/oder · Antibiotika, insbesondere aus der Gruppe der Fluorchinoloncarbonsäuren, wie beispielhaft und vorzugsweise Ciprofloxacin oder Moxifloxacin.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem beta-adrenergen Rezeptor-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Albuterol, Isoproterenol, Metaproterenol, Terbutalin, Fenoterol, Formoterol, Repro- terol, Salbutamol oder Salmeterol, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einer anti-muscarinergen Substanz, wie beispielhaft und vorzugsweise Ipratropiumbromid, Tiotropiumbromid oder Oxitropiumbromid, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Corticosteroid, wie beispielhaft und vorzugsweise Prednison, Prednisolon, Methylprednisolon, Triamcinolon, Dexamethason, Beclomethason, Betamethason, Flunisolid, Budesonid oder Fluticason, verabreicht.
Unter antithrombotisch wirkenden Mittel werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien und der profibrinolytischen Substanzen verstanden.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Thrombozytenaggregationshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Aspirin, Clopidogrel, Ticlopidin oder Dipyridamol, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Thrombin-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Ximela- gatran, Melagatran, Dabigatran, Bivalirudin oder Clexane, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem GPIIb/nia-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Tirofiban oder Abciximab, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Faktor Xa-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Riva- roxaban, Apixaban, Fidexaban, Razaxaban, Fondaparinux, Idraparinux, DU-176b, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR- 126512 oder SSR-128428, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit Heparin oder einem low molecular weight (LMW)-Heparin-Derivat verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Vitamin K-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Coumarin, verabreicht.
Unter den Blutdruck senkenden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Calcium-Antagonisten, Angiotensin AII-Antagonisten, ACE-Hemmer, Endothelin-Antagonisten, Renin-Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-Blocker, beta-Rezeptoren-Blocker, Mineralocorticoid-Rezep- tor-Antagonisten sowie der Diuretika verstanden.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Calcium- Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Nifedipin, Amlodipin, Verapamil oder Diltiazem, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem alpha- 1 -Rezeptoren-Blocker, wie beispielhaft und vorzugsweise Prazosin, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem beta-Rezeptoren-Blocker, wie beispielhaft und vorzugsweise Propranolol, Atenolol, Timolol, Pindolol, Alprenolol, Oxprenolol, Penbutolol, Bupranolol, Meti- pranolol, Nadolol, Mepindolol, Carazalol, Sotalol, Metoprolol, Betaxolol, Celiprolol, Bisoprolol, Carteolol, Esmolol, Labetalol, Carvedilol, Adaprolol, Landiolol, Nebivolol, Epanolol oder Bucin- dolol, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Angiotensin AII-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugs- weise Losartan, Candesartan, Valsartan, Telmisartan oder Embursatan, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem ACE-Hemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Enalapril, Captopril, Lisinopril, Ramipril, Delapril, Fosinopril, Quinopril, Perindopril oder Trandopril, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Endothelin-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Bosentan, Darusentan, Ambrisentan oder Sitaxsentan, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Renin-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Aliskiren, SPP-600 oder SPP-800, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Mineralocorticoid-Rezeptor-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Spironolacton, Eplerenon oder Finerenon, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Diuretikum, wie beispielhaft und vorzugsweise Furosemid, Bumetanid, Torsemid, Bendroflumethiazid, Chlorthiazid, Hydrochlorthiazid, Hydroflumethiazid, Methyclothiazid, Polythiazid, Trichlormethiazid, Chlorthalidon, Indapamid, Metolazon, Quineth- azon, Acetazolamid, Dichlorphenamid, Methazolamid, Glycerin, Isosorbid, Mannitol, Amilorid oder Triamteren, verabreicht. Unter den Fettstoffwechsel verändernden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der CETP-Inhibitoren, Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Inhibitoren wie HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese-Inhibitoren, der ACAT-Inhibitoren, MTP-Inhibi- toren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta-Agonisten, Cholesterin-Absorptions- hemmer, polymeren Gallensäureadsorber, Gallensäure-Reabsorptionshemmer, Lipase -Inhibitoren sowie der Lipoprotein(a) -Antagonisten verstanden.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem CETP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Torcetrapib (CP-529 414), JJT-705 oder CETP-vaccine (Avant), verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Thyroidrezeptor-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise D-Thyroxin, 3,5,3'-Triiodothyronin (T3), CGS 23425 oder Axitirome (CGS 26214), verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem HMG-CoA-Reduktase-Inhibitor aus der Klasse der Statine, wie beispielhaft und vorzugsweise Lovastatin, Simvastatin, Pravastatin, Fluvastatin, Atorvastatin, Rosuvastatin oder Pitavastatin, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Squalensynthese-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise BMS-188494 oder TAK-475, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem ACAT-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Avasimibe, Melinamide, Pactimibe, Eflucimibe oder SMP-797, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem MTP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Implitapide, BMS-201038, R-103757 oder JTT-130, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem PPAR-gamma-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Pioglitazone oder Rosiglitazone, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem PPAR-delta-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise GW 501516 oder BAY 68-5042, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Cholesterin- Absorptionshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Ezetimibe, Tiqueside oder Pamaqueside, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Lipase-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Orlistat, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem polymeren Gallensäureadsorber, wie beispielhaft und vorzugsweise Cholestyramin, Colestipol, Colesolvam, CholestaGel oder Colestimid, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Gallensäure -Reabsorptionshemmer, wie beispielhaft und vor- zugsweise ASBT (= IB AT) -Inhibitoren wie z.B. AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI- 1741, SC-435 oder SC-635, verabreicht.
Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Lipoprotein(a)-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugs- weise Gemcabene calcium (CI-1027) oder Nicotinsäure, verabreicht.
Besonders bevorzugt sind Kombinationen der erfindungsgemäßen Verbindungen mit einem oder mehreren weiteren Wirkstoffen ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Corticosteroiden, beta- adrenergen Rezeptor-Agonisten, anti-muscarinergen Substanzen, PDE 4-Inhibitoren, PDE 5-Inhibi- toren, sGC-Aktivatoren, sGC-Stimulatoren, HNE-Inhibitoren, Pro stacyclin- Analoga, Endothelin- Antagonisten, Statinen, antifibrotisch wirkenden Mitteln, entzündungshemmend wirkenden Mitteln, immunmodulierend wirkenden Mitteln, immunsuppressiv wirkenden Mitteln und zytotoxisch wirkenden Mitteln.
Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nicht- toxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implan- tat oder Stent.
Für diese Applikationswege können die erfindungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Applikationsformen verabreicht werden.
Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende, die erfindungsgemäßen Verbindungen schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nicht-überzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophilisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weich- gelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen. Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. inhalativ, intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die parenterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusions- Zubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.
Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer, Dosieraerosole), Nasentropfen, -lösungen oder -sprays, lingual, sublingual oder buccal zu applizierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augenpräparationen, Vaginalkapseln, wäßrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipo- phile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme (z.B. Pflaster), Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.
Bevorzugt sind die orale, die intrapulmonale (inhalative) und die intravenöse Applikation.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Lactose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige Poly- ethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecyl- sulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispielsweise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.
Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 0.001 bis 1 mg kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 0.5 mg kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0.01 bis 100 mg kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 20 mg/kg und ganz besonders bevorzugt 0.1 bis 10 mg/kg Körpergewicht. Bei intrapulmonaler Applikation beträgt die Menge im Allgemeinen etwa 0.1 bis 50 mg je Inhalation.
Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.
Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele erläutern die Erfindung. Die Erfindung ist nicht auf die Beispiele beschränkt.
Beispiele
Abkürzungen und Akronyme: abs. absolut
Ac Acetyl
aq. wässrig, wässrige Lösung
br. breit (bei NMR-Signal)
Bsp. Beispiel
Bu Butyl
c Konzentration
ca. circa, ungefähr
cat. katalytisch
CI chemische Ionisation (bei MS)
d Dublett (bei NMR)
d Tag(e)
DC Dünnschichtchromatographie
DCI direkte chemische Ionisation (bei MS)
dd Dublett von Dublett (bei NMR)
DEAD Diethylazodicarboxylat
DIAD Diisopropylazodicarboxylat
DMAP 4-N, -Dimethylaminopyridin
DMF N, -Dimefhylf ormamid
DMP Dess-Martin-Periodinan
(1,1,1 -Triacetoxy- 1 , 1 -dihydro- 1 ,2-benziodoxol-3( l /)-on)
DMSO Dimethylsulfoxid
dt Dublett von Triplett (bei NMR)
d. Th. der Theorie (bei chemischer Ausbeute)
ee Enantiomerenüberschuss
EI Elektronenstoß-Ionisation (bei MS) ent enantiomerenrein, Enantiomer eq. Äquivalent(e)
ESI Elektrospray-Ionisation (bei MS)
Et Ethyl
GC Gaschromatographie
GC/MS Gaschromatographie -gekoppelte Massenspektrometrie h Stunde(n)
HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie iPr Isopropyl
KHMDS Kalium-hexamethyldisilazid
konz konzentriert (bei Lösung)
LC Flüssigchromatographie
LC/MS Flüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektrometrie
Lit. Literatur(stelle)
m Multiplett (bei NMR)
Me Methyl
min Minute(n)
MPLC Mitteldruckflüssigchromatographie
(über Kieselgel; auch "flash-Chromatographie" genannt)
Ms Methansulfonyl (Mesyl)
MS Massenspektrometrie
NMO N-Methylmorpholin-N-oxid
NMR Kernresonanzspektrometrie
Pd/C Palladium auf Aktivkohle
Ph Phenyl
Pr Propyl
q (oder quart) Quartett (bei NMR)
qd Quartett von Dublett (bei NMR)
quant. quantitativ (bei chemischer Ausbeute)
quint Quintett (bei NMR)
rac racemisch, Racemat
Rf Retentionsindex (bei DC)
RP reverse phase (Umkehrphase, bei HPLC)
RT Raumtemperatur
Rt Retentionszeit (bei HPLC, LC/MS)
s Singulett (bei NMR) sept Septett (bei NMR)
SFC superkritische Flüssigchromatographie
t Triplett (bei NMR)
tBu teri.-Butyl
td Triplett von Dublett (bei NMR)
Tf Trifluormethylsulfonyl (Triflyl)
TFA Trifluoressigsäure
THF Tetrahydrofuran
Ts £>ara-Tolylsulfonyl (Tosyl)
UV Ultraviolett-Spektrometrie
v/v Volumen zu Volumen- Verhältnis (einer Lösung)
zus. zusammen
HPLC-. LC/MS- und GC/MS-Methoden:
Methode 1 (LC/MS):
Instrument: Waters ACQUITY SQD UPLC System; Säule: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ, 50 x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.25 ml 99%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.25 ml 99%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -> 1.2 min 5% A -> 2.0 min 5% A; Ofen: 50°C; Fluss: 0.40 ml/min; UV-Detektion: 208-400 nm.
Methode 2 (LC/MS):
Instrument: Micromass Quattro Premier mit Waters UPLC Acquity; Säule: Thermo Hypersil GOLD 1.9 μ, 50 x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 97% A -> 0.5 min 97% A -> 3.2 min 5% A -> 4.0 min 5% A; Ofen: 50°C; Fluss: 0.3 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 3 (LC/MS):
Instrument MS: Waters Micromass QM; Instrument HPLC: Agilent 1100 Serie; Säule: Agilent ZORBAX Extend-C18 3.5 μ, 3.0 x 50 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.01 mol Ammoniumcarbonat, Eluent B: 1 1 Acetonitril; Gradient: 0.0 min 98% A -> 0.2 min 98% A -> 3.0 min 5% A -> 4.5 min 5% A; Ofen: 40°C; Fluss: 1.75 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.
Methode 4 (LC/MS):
Instrument MS: Waters SQD; Instrument HPLC: Waters UPLC; Säule: Zorbax SB-Aq (Agilent), 50 mm x 2.1 mm, 1.8 μιη; Eluent A: Wasser + 0.025% Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.025% Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 98% A -> 0.9 min 25% A -> 1.0 min 5% A -> 1.4 min 5% A -> 1.41 min 98% A min 98% A; Ofen: 40°C; Fluss: 0.60 ml/min; UV-Detektion: DAD, 210 nm.
Methode 5 (GC/MS):
Instrament: Thermo Scientific DSQII, Thermo Scientific Trace GC Ultra; Säule: Restek RTX- 35MS, 15 m x 200 μιη x 0.33 μιη; konstanter Fluss mit Helium: 1.20 ml/min; Ofen: 60°C; Met: 220°C; Gradient: 60°C, 30°C/min -» 300°C (3.33 min halten).
Methode 6 (präparative HPLC):
Säule: Reprosil C18, 10 μιη, 250 x 30 mm; Eluent: AcetonitrilAVasser mit 0.1% TFA; Gradient: 0-5.00 min 10:90, Probeninjektion bei 3.00 min; 5.00-23.00 min bis 95:5; 23.00-30.00 min 95:5; 30.00-30.50 min bis 10:90; 30.50-31.20 min 10:90.
Methode 7 (präparative HPLC):
Säule: Reprosil C18, 10 μιη, 250 x 40 mm; Eluent: AcetonitrilAVasser mit 0.1% TFA; Gradient: 0-6.00 min 10:90, Probeninjektion bei 3.00 min; 6.00-23.00 min bis 95:5; 23.00-38.00 min 95:5; 38.00-39.00 min bis 10:90; 39.00-40.20 min 10:90. Methode 8 (präparative HPLC):
Säule: Reprosil C18, 10 μιη, 250 x 30 mm; Eluent: AcetonitrilAVasser mit 0.1% TFA; Gradient: 0-5.00 min 10:90, Probeninjektion bei 3.00 min; 5.00-20.00 min bis 95:5; 20.00-30.00 min 95:5; 30.00-30.50 min bis 10:90; 30.50-31.20 min 10:90.
Methode 9 (präparative HPLC):
Säule: Reprosil C18, 10 μιη, 250 x 40 mm; Eluent: AcetonitrilAVasser mit 0.1% TFA; Gradient: 0-6.00 min 10:90, Probeninjektion bei 3.00 min; 6.00-27.00 min bis 95:5; 27.00-54.00 min 95:5; 54.00-55.00 min bis 10:90; 55.00-56.20 min 10:90.
Methode 10 (präparative HPLC):
Instrument MS: Waters; Instrument HPLC: Waters; Säule: Phenomenex Luna 5μ C18(2) 100A, AXIA Tech., 50 mm x 21.2 mm; Eluent A: Wasser + 0.05% Ameisensäure, Eluent B: Acetonitril + 0.05% Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 95% A -> 0.15 min 95% A -> 8.0 min 5% A -> 9.0 min 5% A; Fluss: 40 ml/min; UV-Detektion: DAD, 210-400 nm.
Weitere Angaben:
Die Prozentangaben in den folgenden Beispiel- und Testbeschreibungen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungs- Verhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.
Reinheitsangaben beziehen sich in der Regel auf entsprechende Peak-Integrationen im LC/MS- Chromatogramm, können aber zusätzlich auch unter Zuhilfenahme des ^-NMR-Spektrums er- mittelt worden sein. Wenn keine Reinheit angegeben ist, handelt es sich in der Regel um eine 100%-Reinheit laut automatischer Peak-Integration im LC/MS-Chromatogramm oder die Reinheit wurde nicht explizit ermittelt.
Angaben zu Ausbeuten in % d. Th. sind in der Regel reinheitskorrigiert, sofern eine Reinheit <100% angegeben ist. Bei lösungsmittelhaltigen oder verunreinigten Chargen kann die Ausbeute formal ">100%" betragen; in diesen Fällen ist die Ausbeute nicht lösungsmittel- bzw. reinheitskorrigiert.
Die nachfolgenden Beschreibungen der Kopplungsmuster von ^-NMR-Signalen wurden teilweise direkt den Vorschlägen des ACD SpecManagers (ACD/Labs Release 12.00, Product version 12.5) entnommen und nicht notwendigerweise streng hinterfragt. Teilweise wurden die Vorschläge des SpecManagers manuell angepasst. Manuell angepasste bzw. zugewiesene Beschreibungen orientieren sich in der Regel an dem optischen Erscheinungsbild der betreffenden Signale und entsprechen nicht notwendigerweise einer strengen, physikalisch korrekten Interpretation. In der Regel bezieht sich die Angabe zur chemischen Verschiebung auf das Zentrum des betreffenden Signals. Bei breiten Multipletts erfolgt die Angabe eines Intervalls. Durch Lösungsmittel oder Wasser verdeckte Signale wurden entweder tentativ zugeordnet oder sind nicht aufgeführt.
Schmelzpunkte und Schmelzbereiche, soweit angegeben, sind nicht korrigiert.
Für alle Reaktanden oder Reagenzien, deren Herstellung im Folgenden nicht explizit beschrieben ist, gilt, dass sie von allgemein zugänglichen Quellen kommerziell bezogen wurden. Für alle übrigen Reaktanden oder Reagenzien, deren Herstellung im Folgenden ebenfalls nicht beschrieben ist und die nicht kommerziell erhältlich waren oder von Quellen bezogen wurden, die nicht allgemein zugänglich sind, ist ein Verweis auf die veröffentlichte Literatur angegeben, in der ihre Herstellung beschrieben ist.
Bei den im Folgenden beschriebenen Intermediaten und Ausführungsbeispielen bedeutet eine im IUP AC -Namen des betreffenden Beispiels aufgeführte Bezeichnung " IRS,2SR,5RS" in Verbindung mit der Angabe "Racemat", dass es sich hierbei um ein racemisches Gemisch des IR,2S,5R- Enantiomeren (— jeweils 1. Buchstabe nach der Positionsziffer in " IRS,2SR,5RS") mit dem entsprechenden lS,2R,5S-Enantiomeren (— jeweils 2. Buchstabe nach der Positionsziffer) handelt. Die Bezeichnung " IRS,2SR,5RS" in Verbindung mit den Angaben "Enantiomer 1" und "Enantio- mer 2" bedeutet, dass es sich hierbei um die beiden Enantiomere in separierter, isolierter Form handelt, wobei eine Zuordnung der Absolutkonfiguration (IR,2S,5R oder IS,2R,5S) zu diesen Enantiomeren nicht vorgenommen wurde. Ähnliche Bezeichnungen wie " IRS,2RS,3SR" oder " IRS,2RS,5SR", die sich aus der veränderten Priorität und/oder Reihenfolge von Namensbestand- teilen aufgrund der IUPAC-Nomenklatur-Regeln ergeben, sind nach dieser Anleitung auf analoge Weise zu interpretieren.
Zur vereinfachten Darstellung der relativen stereochemischen Konfiguration chiraler Zentren wird im Folgenden bei den Strukturformeln racemischer Beispielverbindungen nur die Strukturformel eines der beteiligten Enantiomere wiedergegeben; wie aus der Angabe "Racemat" beim zugehöri- gen IUP AC -Namen ersichtlich, ist in diesen Fällen das zweite Enantiomer mit der jeweils entgegengesetzten Absolutkonfiguration immer mit eingeschlossen.
Ausgangsverbindungen und Intermediate:
Beispiel 1A 6-(Trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-4(3 /)-on
Figure imgf000063_0001
Zu einer Suspension von 24.4 g (119.51 mmol) 2-Amino-5-(trifluormethyl)benzamid in 174 ml eines 2: 1 -Gemisches von Wasser und konz. Salzsäure bei 0°C wurde eine Lösung von 9.08 g (131.47 mmol) Natriumnitrit in 74 ml Wasser langsam hinzugegeben, wobei die Innentemperatur unter 5°C gehalten wurde. Nach 30 min Rühren bei 0°C Badtemperatur wurden unter weiterer Eisbad-Kühlung langsam 74 ml (0.74 mol) 10 M Natronlauge hinzugegeben, wobei die Innentemperatur auf ca. 20°C anstieg. Es bildete sich zunächst eine Lösung, aus welcher dann eine Suspension entstand, die zur besseren Rührbarkeit mit 100 ml Wasser verdünnt wurde. Nach 1.5 h Rühren bei RT wurde das Gemisch vorsichtig mit konz. Salzsäure sauer gestellt (pH = 2). Der gebildete Nie- derschlag wurde abfiltriert und dreimal mit Wasser nachgewaschen. Nach Trocknen an der Luft und danach im Vakuum wurden 24.74 g (96% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 15.31 (br. s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.40 (d, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.78 min, m/z = 216 [M+H]+. Beispiel 2A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000064_0001
Eine Lösung von 100 g (0.321 mol, Reinheit 84%) Di-teri.-butyl-(2-hydroxyethyl)malonat (US- Patent 6,900,194, Intermediat 5E) in 1 Liter THF unter Argon wurde mit 100.96 g (0.385 mol) Tri- phenylphosphin und 56.63 g (0.385 mol) l,2,3-Benzotriazin-4(3 /)-on versetzt und dann 20 min bei RT gerührt. Anschließend wurden 75.8 ml (0.385 mol) Diisopropylazodicarboxylat (DIAD) langsam hinzugegeben, wobei die Innentemperatur unter leichter Kühlung auf ca. 30°C anstieg. Das Gemisch wurde anschließend über Nacht bei RT gerührt und danach in 5 Liter einer 10%-igen wässrigen Natriumchlorid-Lösung eingerührt. Nach Zugabe von 2 Liter Ethylacetat wurde die organische Phase abgetrennt, mit 750 ml 10%-iger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde in wenig Dichlormethan aufgenommen, mit etwas Petrolether versetzt und mittels Säulenchromatographie gereinigt (5 kg Kieselgel, Laufmittel Petrolether/Ethylacetat 8:2). Es wurden 109.4 g (88% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.26 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.93 (t, 1H), 4.43 (t, 2H), 3.40 (t, 1H), 2.25 (q, 2H), 1.37 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 390 [M+H]+.
Beispiel 3A Di-teri.-butyl- { 2- [4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000065_0001
Eine Lösung von 18.78 g (71.58 mmol) Triphenylphosphin in 210 ml THF wurde unter Argon bei RT mit 14.8 ml (71.58 mmol, Reinheit 95%) Diisopropylazodicarboxylat (DIAD) versetzt und kurz nachgerührt. Die Innentemperatur stieg dabei auf 40°C an und es bildete sich ein Niederschlag. Dann wurden 14.0 g (65.08 mmol) der Verbindung aus Beispiel 4A hinzugegeben, und die Mischung wurde einige weitere Minuten nachgerührt. Anschließend wurden 18.64 g (71.58 mmol) Di-ieri.-butyl-(2-hydroxyethyl)malonat (US-Patent 6,900,194, Intermediat 5E) hinzugegeben, wobei die Innentemperatur auf 60°C anstieg. Die Lösung wurde 1 h weiter gerührt. Danach wurde das Lösungsmittel entfernt, und der Rückstand wurde in 200 ml tert. -Butyl-methylether aufgenommen. Der gebildete Feststoff wurde abfiltriert, mit 30 ml tert. -Butyl-methylether nachgewaschen und verworfen. Das Filtrat wurde eingeengt und der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (1 kg Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 9: 1). Es wurden 26.44 g (89% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, CDCb): δ [ppm] = 8.65 (s, 1H), 8.28 (d, 1H), 8.15 (dd, 1H), 4.60 (t, 2H), 3.29 (t, 1H), 2.43 (q, 2H), 1.45 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.37 min, m/z = 457 [M+H]+.
Beispiel 4A
1 - [5 -(Benzy loxy) - 1 -benzofur-2-yl] ethanon
Figure imgf000065_0002
Zu einer Lösung von 240 g (1.05 mol) 5-Benzyloxy-2-hydroxybenzaldehyd in 3.6 Liter Aceton bei RT wurden 291 g (2.10 mol) Kaliumcarbonat gegeben und anschließend 110 ml (1.31 mol, Reinheit 96%) Chloraceton hinzugetropft. Nach 1 h Rühren unter Rückfluss und Abkühlen auf RT wurde das Reaktionsgemisch filtriert und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde mit 700 ml 90%-igem wässrigen Methanol verrührt, dann abfiltriert und mit Methanol nachgewaschen. Es wurden so 98 g (35% d. Th.) einer ersten Charge der Titelverbindung erhalten. Die Mutterlauge wurde eingeengt und ergab ca. 200 g eines Rohprodukts, welches zusammen mit 38 g eines auf ähnliche Weise erhaltenen Rohprodukts aus einem vorhergehenden Experiment mittels Säulenchromatographie gereinigt wurde (Kieselgel, Lauf mittel Petrolether/Ethylacetat 9: 1— 7:3). Auf diese Weise wurden 112 g (39% d. Th.) einer zweiten Charge der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.13 min, m/z = 267 [M+H]+.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.80 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.51-7.29 (m, 6H), 7.22 (dd, 1H), 5.16 (s, 2H), 2.54 (s, 3H, teilweise verdeckt).
Beispiel 5A l-[5-(Benzyloxy)-l-benzofur-2-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000066_0001
Zu einer Lösung von 280 g (1.05 mol) der Verbindung aus Beispiel 4A in 3.9 Liter THF unter Argon wurden bei RT insgesamt 415 g (1.10 mol) Phenyltrimethylammoniumtribromid in zehn Portionen innerhalb von 30 Minuten hinzugegeben. Nach 1 h Rühren bei RT wurde das Gemisch mit 20 Liter 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung versetzt. Es wurden 11 Liter Ethylacetat hinzugegeben, und mit ca. 18%-iger (halbkonzentrierter) Salzsäure wurde auf pH 1 gestellt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 11 Liter Ethylacetat extrahiert. Die vereinig- ten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde in Methanol verrührt, abfiltriert und mit Methanol nachgewaschen. Es wurden 260 g (58% d. Th., Reinheit 81%) der Titel Verbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.22 min, m/z = 344/346 [M+H]+.
Beispiel 6A ΌΊ-tert. -butyl- { 2- [5-(benzyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000067_0001
Zu einer Suspension von 5.39 g (134.79 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) in 297 ml DMF unter Argon wurde bei RT eine Lösung von 42.34 g (108.71 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 297 ml DMF gegeben. Nach 30 Minuten Rühren bei RT wurde eine Lösung von 38.00 g (86.96 mmol, Reinheit 79%) der Verbindung aus Beispiel 5A in 297 ml DMF zügig hinzugegeben und das Gemisch weitere 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung und Ethylacetat versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wäss- rige Phase mit Ethylacetat extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit 10%-iger Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan/Petrolether aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Petrolether/Ethylacetat 8:2). Es wurden 16.6 g (29% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.20 (dd, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.04-7.96 (m, 1H), 7.90- 7.81 (m, 2H), 7.63 (d, 1H), 7.52-7.45 (m, 2H), 7.44-7.30 (m, 4H), 7.23 (dd, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.51- 4.41 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 2.54-2.47 (2H, verdeckt), 1.40 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.51 min, m/z = 654 [M+H]
Beispiel 7A
Di-teri.-butyl-[2-(5-hydroxy-l-benzofur-2-yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000068_0001
21.0 g (32.12 mmol) der Verbindung aus Beispiel 6A wurden in einem Gemisch aus 630 ml Efhyl- acetat und 630 ml Ethanol gelöst, mit 1.71 g (1.61 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) und 10.13 g (160.62 mmol) Ammoniumformiat bei RT versetzt und anschließend 1 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch über Kieselgur filtriert und der Filter- Rückstand mit Ethanol nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt, und der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie vorgereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormefhan Methanol 95:5). Das so erhaltene Produkt wurde in 190 ml Diethylether 30 Minuten lang verrührt, dann abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 15.0 g (82% d. Th.) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.52 (s, 1H), 8.21 (dd, 1H), 8.14 (d, 1H), 8.03 (td, 1H), 7.92-7.84 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.00 (dd, 1H), 4.49-4.42 (m, 2H), 3.63 (s, 2H), 2.52-2.47 (2H, verdeckt), 1.40 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.25 min, m/z = 564 [M+H]+.
Beispiel 8A Di-teri.-butyl-(2- { 5- [2-(2-chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000068_0002
Zu einem Gemisch von 100 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 2.5 ml Acetonitril wurden 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-2-chlorbenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kaliumcarbo- nat gegeben und das Gemisch 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden erneut 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-2-chlorbenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kaliumcarbonat hinzugege- ben und das Gemisch weitere 4.5 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurde das Gemisch zunächst über Nacht bei RT stehengelassen und dann nach nochmaliger Zugabe von 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-2-chlorbenzol weitere 5 h bei 50°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit 1 ml Wasser versetzt und direkt mittels präparativer HPLC (Methode 7) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogen- carbonat-Lösung neutralisiert, bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt und zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 21 mg (17% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 702 [M+H]+. Beispiel 9A
Di-teri.-butyl-(2- { 5- [2-(4-chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000069_0001
Zu einem Gemisch von 100 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 2.5 ml Acetonitril wurden 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-chlorbenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kaliumcarbonat gegeben und das Gemisch 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden erneut 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-chlorbenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kaliumcarbonat hinzugegeben und das Gemisch weitere 4.5 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurde das Gemisch zunächst über Nacht bei RT stehengelassen und dann nach nochmaliger Zugabe von 47 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-chlorbenzol weitere 5 h bei 50°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit 1 ml Wasser versetzt und direkt mittels präparativer HPLC (Methode 7) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogen- carbonat-Lösung neutralisiert, bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt und zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 13 mg (10% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.57 min, m/z = 702 [M+H]+.
Beispiel 10A
Di-teri.-butyl-(2- { 5- [2-(4-methoxyphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000070_0001
Zu einem Gemisch von 100 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 2.5 ml Acetonitril wurden 46 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-methoxybenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kalium- carbonat gegeben und das Gemisch 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden erneut 46 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-methoxybenzol und 49 mg (0.36 mmol) Kaliumcarbonat hinzugegeben und das Gemisch weitere 4.5 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurde das Gemisch zunächst über Nacht bei RT stehengelassen und dann nach nochmaliger Zugabe von 46 mg (0.21 mmol) l-(2-Bromethyl)-4-methoxybenzol weitere 5 h bei 50°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit 1 ml Wasser versetzt und direkt mittels präparativer HPLC (Methode 7) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natrium- hydrogencarbonat-Lösung neutralisiert, bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt und zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 106 mg (85% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.52 min, m/z = 698 [M+H]+. Beispiel IIA
Di-teri.-butyl-(2- { 5- [2-(2-methylphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl] malonat
Figure imgf000071_0001
Zu einem Gemisch von 100 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 98 mg (0.71 mmol) Kaliumcarbonat in 2.5 ml Pentanol wurden bei 120°C 48 mg (0.24 mmol, Reinheit 97%) l-(2-Bromethyl)-2-methylbenzol gegeben und das Gemisch 1 h bei 120°C gerührt. Anschließend wurden erneut 48 mg (0.24 mmol, Reinheit 97%) l-(2-Bromethyl)-2-methylbenzol hinzugegeben und das Gemisch eine weitere Stunde bei 120°C gerührt. Danach wurden nochmals 48 mg (0.24 mmol, Reinheit 97%) l-(2-Bromethyl)-2-methylbenzol hinzugefügt und das Gemisch weitere 3 h bei 120°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch eingeengt, mit Wasser versetzt und zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 8) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wäss- riger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert, bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt und zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 80 mg (64% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ [ppm] = 8.29 (dd, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.88 (td, 1H), 7.78-7.70 (m, 1H), 7.51-7.40 (m, 2H), 7.30-7.23 (m, 1H), 7.21-7.13 (m, 3H), 7.12-7.03 (m, 2H), 4.60-4.52 (m, 2H), 4.18 (t, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.15 (t, 2H), 2.69-2.63 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 1.48 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 682 [M+H]+.
Beispiel 12A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[5-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)- 1 -benzofur-2-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000072_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 5 ml Acetonitril wurden bei 95°C Badtemperatur 147 mg (1.06 mmol) Kaliumcarbonat und 127 mg (0.71 mmol) 4-(Brommethyl)tetrahydro-2i7-pyran gegeben und das Gemisch 48 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde Wasser hinzugegeben, und die wässrige Phase wurde dreimal mit jeweils 3 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in 4 ml Acetonitril aufgenommen und mittels präparativer HPLC (Methode 8) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert und mit Ethylacetat extrahiert. Nach Einengen der organischen Phase und Trocknen des Rückstands im Vakuum wurden 106 mg (45% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.45 min, m/z = 662 [M+H]+.
Beispiel 13A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl](2-oxo-2-{5-[2-(tetrahydro
4-yl)ethoxy]-l-benzofur-2-yl}ethyl)malonat
Figure imgf000072_0002
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 0.75 ml DMF unter Argon wurden bei RT 45 mg (0.40 mmol) Kalium-feri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 86 mg (0.44 mmol) 4-(2-Bromethyl)tetrahydro-2i7-pyran, gelöst in 0.25 ml DMF, gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden jeweils 50 ml Wasser und Ethylacetat hinzugesetzt, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natrium- sulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 111 mg (43% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 676 [M+H]+.
Beispiel 14A Di-teri.-butyl- { 2- [5-(2-cyclopentylethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000073_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 0.75 ml DMF unter Argon wurden bei RT 45 mg (0.40 mmol) Kalium-feri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 99 mg (0.44 mmol) (2-Iodethyl)cyclopentan, gelöst in 0.25 ml DMF, gegeben. Das Gemisch wurde 5 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden weitere 52 mg (0.23 mmol) (2-Iod- ethyl)cyclopentan hinzugegeben, und das Gemisch wurde weitere 3 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit 5 ml Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, zweimal mit jeweils 2 ml Wasser gewaschen und unter Erhalt einer ersten Rohproduktcharge der Titelverbindung im Vakuum getrocknet. Das Filtrat wurde mit Wasser und Ethylacetat versetzt, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt und ergaben so eine zweite Rohproduktcharge der Titelverbindungen. Beide Chargen wurden vereinigt und mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclo- hexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 159 mg (64% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.67 min, m/z = 660 [M+H]+. Beispiel 15A
Di-ieri.-butyl- { 2-[5-(cyclohexylmethoxy)-l -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzo- triazin-3 (4//)-yl)efhyl] malonat
Figure imgf000074_0001
Zu einem Gemisch von 800 mg (1.42 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 3 ml DMF unter Argon wurden bei RT 179 mg (1.60 mmol) Kalium-ieri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 314 mg (1.77 mmol) (Brommethyl)cyclohexan gegeben. Das Gemisch wurde 4 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Anschließend wurden weitere 314 mg (1.77 mmol) (Brommethyl)cyclohexan hinzugefügt und das Gemisch eine weitere Stunde bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit jeweils 100 ml Wasser und Ethylacetat versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert, und die vereinten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in 6 ml Aceto- nitril in der Wärme gelöst. Nach Abkühlen auf RT wurde der vorhandene Feststoff abfiltriert, zweimal mit je 2 ml Acetonitril gewaschen und getrocknet. Es wurden so 193 mg (19% d. Th., Reinheit 92%) einer ersten Charge der Titelverbindung gewonnen. Das Filtrat wurde eingeengt und der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 9; zwei Injektionen) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat- Lösung neutralisiert und bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt. Nach zweimaliger Extraktion mit Ethylacetat wurden die vereinten organischen Phasen über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 314 mg (34% d. Th., Reinheit 100%) einer zweiten Charge der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.68 min, m/z = 660 [M+H]+. Beispiel 16A
Di-teri.-butyl 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2 5-(4,4,4 rifluorbutoxy)-l- benzofur-2-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000075_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 147 mg (1.07 mmol) Kaliumcarbonat in 8 ml Acetonitril unter Argon wurden bei RT 203 mg (1.07 mmol) 4-Brom-l,l,l-trifluorbutan gegeben und das Gemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Wasser versetzt und das Gemisch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 208 mg (84% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.49 min, m/z = 674 [M+H]+.
Beispiel 17A
Di-ieri.-butyl-(2-{5-[(4-fluortetrahydro-2ii-pyran-4-yl)methoxy]-l-benzofur-2-yl}-2-oxoethyl)- [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4#)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000075_0002
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 147 mg (1.07 mmol) Kaliumcarbonat in 8 ml Acetonitril unter Argon wurden bei RT 283 mg (1.07 mmol) (4-Fluortetrahydro-2ii-pyran-4-yl)methyltrifluormethansulfonat [Lit.: EP 2 090 570-A1, Reference example 23, Step 1] gegeben. Das Gemisch wurde 20 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und das Gemisch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Es wurden 264 mg (Reinheit 90%) einer Rohproduktcharge der Titelverbindung erhalten. Diese wurde mit 97 mg (Reinheit 83%) einer weiteren, aus einem ähnlich durchgeführten Experiment erhaltenen Rohproduktcharge der Titel Verbindung vereinigt und zusammen mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden so 182 mg der Titelverbindung erhalten (Reinheit 100%, 51% d. Th., bezogen auf 300 mg (0.53 mmol) insgesamt eingesetzter Menge der Verbindung aus Beispiel 7A).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.41 min, m/z = 680 [M+H]+.
Beispiel 18A Di-ieri.-butyl- { 2- [5-(3 -cyanopropoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000076_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 147 mg (1.07 mmol) Kaliumcarbonat in 8 ml Acetonitril unter Argon wurden bei RT 158 mg (1.07 mmol) 4-Brombutanonitril gegeben. Das Gemisch wurde zunächst 1 h bei RT, dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und das Gemisch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 221 mg (94% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.37 min, m/z = 631 [M+H]+. Beispiel 19A
Di-ieri.-butyl- { 2- [5-(cyclopentylmethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4//)-yl)efhyl] malonat
Figure imgf000077_0001
Zu einem Gemisch von 750 mg (1.33 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 552 mg (3.99 mmol) Kaliumcarbonat in 10 ml Acetonitril unter Argon wurden bei RT 759 mg (4.66 mmol) (Brommethyl)cyclopentan gegeben und das Gemisch 16 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 380 mg (2.33 mmol) (Brommethyl)cyclopentan hinzugefügt und das Gemisch nochmals 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und das Gemisch zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 580 mg (68% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.60 min, m/z = 646 [M+H]+. Beispiel 20A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[5-(2-phenylethoxy)-l-benzo- fur-2-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000078_0001
Zu einem Gemisch von 5.0 g (8.25 mmol, Reinheit 93%) der Verbindung aus Beispiel 7A und 4.56 g (33.00 mmol) Kaliumcarbonat in 100 ml Pentanol wurden bei 120°C 5 ml einer Lösung von 6.11 g (33.00 mmol) (2-Bromethyl)benzol in 15 ml Pentanol gegeben. Das Gemisch wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 5 ml der besagten (2-Bromefhyl)benzol- Lösung hinzugegeben und das Gemisch eine weitere Stunde unter Rückfluss gerührt. Schließlich wurden die verbliebenen 5 ml der (2-Bromethyl)benzol-Lösung hinzugefügt und das Gemisch nochmals 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Stehenlassen über Nacht wurde das Gemisch eingeengt, der Rückstand mit Wasser versetzt und zweimal mit Dichlormethan ex- trahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (300 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 8:2). Es wurden 3.53 g (62% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.54 min, m/z = 668 [M+H]+. Beispiel 21 A
Di-teri.-butyl-(2- { 5- [(4-fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000078_0002
Zu einem Gemisch von 400 mg (0.71 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A und 196 mg (1.41 mmol) Kaliumcarbonat in 4 ml Acetonitril wurden 161 mg (0.85 mmol) l-(Brommefhyl)-4-fluor- benzol gegeben und das Gemisch 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und das Gemisch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organi- sehen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 350 mg (65% d. Th., Reinheit 89%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.50 min, m/z = 672 [M+H]+. Beispiel 22A Di-teri.-butyl-(2- { 5- [(3,4-dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000079_0001
Zu einer Lösung von 600 mg (1.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 12 ml Acetonitril wurden bei RT 294 mg (2.13 mmol) Kaliumcarbonat und 312 mg (1.28 mmol, Reinheit 98%) 1,2- Dichlor-4-(chlormethyl)benzol gegeben und das Gemisch 10 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, mit wenig Wasser gewaschen und im Vakuum getrocknet. Nach Verrühren des Rohprodukts in Methanol, erneutem Abfiltrieren und Trocknen im Vakuum wurden 735 mg (90% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.20 (dd, 1H), 8.11 (d, 1H), 8.03-7.98 (m, 1H), 7.89- 7.84 (m, 2H), 7.77-7.75 (m, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.25 (dd, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.50-4.41 (m, 2H), 3.65 (s, 2H), 1.40 (s, 18H) [verdeckt 2H].
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.62 min, m/z = 722 [M+H]+. Beispiel 23A
Di-ieri.-butyl- { 2- [5-(heptyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonat
Figure imgf000080_0001
Zu einer Lösung von 120 mg (0.21 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 2.5 ml Acetonitril wurden 59 mg (0.43 mmol) Kaliumcarbonat und 47 mg (0.26 mmol, Reinheit 98%) 1-Bromheptan gegeben und das Gemisch 16 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, mit wenig Wasser nachgewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 123 mg (83% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.67 min, m/z = 662 [M+H]+. Beispiel 24A
Di-ieri.-butyl-(2- { 5- [(3-carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000080_0002
Zu einem Gemisch von 250 mg (0.44 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 5 ml Acetonitril wurden 123 mg (0.89 mmol) Kaliumcarbonat und 93 mg (0.53 mmol, Reinheit 97%) 3-(Chlor- methyl)benzamid gegeben und das Gemisch 16 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde mit Wasser versetzt und nach Phasentrennung die wässrige Phase mehrmals mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 240 mg (77% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 697 [M+H]+. Beispiel 25A
Di-ieri.-butyl-(2- { 5- [(4-carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3(4//)-yl)efhyl]malonat
Figure imgf000081_0001
Zu einem Gemisch von 262 mg (0.47 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A in 5 ml Acetonitril wurden bei RT 128 mg (0.93 mmol) Kaliumcarbonat und 98 mg (0.56 mmol) 4- (Chlormethyl) - benzamid gegeben und das Gemisch 16 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Ge- misch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, mit Wasser nachgewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 204 mg (63% d. Th., Reinheit 87%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 697 [M+H]+. Beispiel 26A (2- { 5-[2-(2-Chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonsäure
Figure imgf000082_0001
Zu einer Lösung von 21 mg (0.03 mmol) der Verbindung aus Beispiel 8A in 1 ml Dichlormethan wurden bei RT 0.5 ml (6.5 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1.5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von ca. 90% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.13 min, m/z = 590 [M+H]+. Beispiel 27A
(2- { 5-[2-(4-Chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000082_0002
Zu einer Lösung von 13 mg (0.018 mmol) der Verbindung aus Beispiel 9A in 1 ml Dichlormethan wurden bei RT 0.5 ml (6.5 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1.5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von ca. 90% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 590 [M+H]+.
Beispiel 28A
(2- { 5-[2-(4-Methoxyphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000083_0001
Zu einer Lösung von 105 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 10A in 6 ml Dichlormethan wurden bei RT 3 ml (39.0 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1.5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 88% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.04 min, m/z = 586 [M+H]+. Beispiel 29A
(2- { 5-[2-(2-Methylphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000083_0002
Zu einer Lösung von 72 mg (0.11 mmol) der Verbindung aus Beispiel 11A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2 ml (26.0 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 89% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 570 [M+H]+.
Beispiel 30A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[5-(tetrahydro-2ii-pyran-4-ylmethoxy)- 1 -benzofur-2-yl]ethyl Jmalonsäure
Figure imgf000084_0001
Zu einer Lösung von 99 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 12A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2 ml (26.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 30 min bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum ge- trocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 96% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.87 min, m/z = 550 [M+H]+. Beispiel 31 A
[2-(4-Oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl] (2-oxo-2- { 5- [2-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)efhoxy] - l-benzofur-2-yl }ethyl)malonsäure
Figure imgf000084_0002
Zu einer Lösung von 98 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 13A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (20.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 88% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.89 min, m/z = 564 [M+H]+. Beispiel 32A
{ 2-[5-(2-Cyclopentylethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]malonsäure
Figure imgf000085_0001
Zu einer Lösung von 147 mg (0.22 mmol) der Verbindung aus Beispiel 14A in 4.5 ml Dichlormethan wurden bei RT 2.3 ml (30.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 65% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 2.48 min, m/z = 548 [M+H]+. Beispiel 33A
{ 2-[5-(Cyclohexylmethoxy)-l -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)- ethyl]malonsäure
Figure imgf000085_0002
Zu einer Lösung von 496 mg (0.75 mmol) der Verbindung aus Beispiel 15A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2.0 ml (26.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 3 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 77% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 548 [M+H]+. Beispiel 34A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[5-(4,4,4-trifluorbutoxy)-l-benzofur-2-yl]- efhyljmalonsäure
Figure imgf000086_0001
Zu einer Lösung von 208 mg (0.31 mmol) der Verbindung aus Beispiel 16A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2.0 ml (26.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 95% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.04 min, m/z = 562 [M+H]+. Beispiel 35A
(2- { 5-[(4-Fluortetrahydro-2#-pyran-4-yl)mefhoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1,2,3- benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000086_0002
Zu einer Lösung von 326 mg (0.48 mmol) der Verbindung aus Beispiel 17A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (20.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 85% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.88 min, m/z = 568 [M+H]+. Beispiel 36A
{2-[5-(3-Cyanopropoxy)-l-benzofur-2-yl]-2-oxoethyl} [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonsäure
Figure imgf000087_0001
Zu einer Lösung von 195 mg (0.31 mmol) der Verbindung aus Beispiel 18A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2 ml (26.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 88% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.80 min, m/z = 519 [M+H]+. Beispiel 37A
{2-[5-(Cyclopentylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-2-oxoethyl} [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonsäure
Figure imgf000087_0002
Zu einer Lösung von 580 mg (0.90 mmol) der Verbindung aus Beispiel 19A in 12 ml Dichlormethan wurden bei RT 6 ml (78.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 89% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.09 min, m/z = 534 [M+H]+. Beispiel 38A
[2-(4-Oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] { 2-oxo-2-[5-(2-phenylethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] ethyl } - malonsäure
Figure imgf000088_0001
Zu einer Lösung von 5.53 g (5.29 mmol) der Verbindung aus Beispiel 20 A in 50 ml Dichlormethan wurden bei RT 25 ml (0.32 mol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 90% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.03 min, m/z = 556 [M+H]+. Beispiel 39A
(2-{5-[(4-Fluorbenzyl)oxy]-l-benzofur-2-yl}-2-oxoethyl)[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonsäure
Figure imgf000088_0002
Zu einer Lösung von 585 mg (0.83 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 21A in 10 ml Dichlormethan wurden bei RT 5 ml (0.65 mol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 93% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.02 min, m/z = 560 [M+H]+.
Beispiel 40A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzofur-2-yl]ethanon
Figure imgf000089_0001
Zu einer Lösung von 97.0 g (0.43 mol) 4-Benzyloxy-2-hydroxybenzaldehyd und 117.5 g (0.85 mol) Kaliumcarbonat in 200 ml Aceton wurden bei RT 42.6 ml (0.53 mol) Chloraceton hinzugetropft. Das Reaktionsgemisch wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wur- den Festbestandteile abfiltriert und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (4.5 kg Kieselgel, Lauf mittel Petrol- ether/Ethylacetat 9: 1, 130 Liter). Es wurden 87.0 g (77% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.85 (s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.51-7.31 (m, 6H), 7.07 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H), ca. 2.54 (s, 3H, verdeckt).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 267 [M+H]+.
Beispiel 41 A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzofur-2-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000089_0002
Zu einer Lösung von 87.0 g (0.33 mol) der Verbindung aus Beispiel 40A in 1.2 Liter THF unter Argon wurden bei RT insgesamt 129.0 g (0.34 mmol) Phenyltrimethylammoniumtribromid in zehn gleichen Portionen innerhalb von 15 min hinzugegeben. Das Gemisch wurde danach 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit 6 Liter 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung versetzt, 3 Liter Ethylacetat hinzugefügt und mit ca. 18%-iger (halbkonzentrierter) Salzsäure auf pH 1 ge- stellt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen, auf Kieselgel aufgezogen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Petrolether/Ethylacetat 95:5— 90: 10). Es wurden 87.0 g (77% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 345/347 [M+H]+. Beispiel 42A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000090_0001
Zu einer Suspension von 0.59 g (14.82 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) in 35 ml DMF unter Argon wurde bei RT eine Lösung von 4.65 g (11.95 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 35 ml DMF hinzugegeben. Nach 30 min Rühren bei RT wurde eine Lösung von 3.30 g (9.56 mmol) der Verbindung aus Beispiel 41 A in 35 ml DMF zügig bei RT hinzugegeben und das Reak- tionsgemisch weitere 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit 500 ml 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung und 250 ml Ethylacetat versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase mit 250 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (250 g Kieselgel, Laufmittel Petrolether/Ethylacetat 8:2). Es wurden 2.8 g (68% d. Th., Reinheit 91%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.53 min, m/z = 654 [M+H]+.
Beispiel 43A
Di-teri.-butyl-[2-(6-hydroxy-l-benzofur-2-yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000091_0001
Eine Lösung von 4.19 g (6.41 mmol) der Verbindung aus Beispiel 42A in 260 ml eines 1: 1- Gemisches aus Ethylacetat und Ethanol wurde bei RT mit 0.34 g (0.32 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) und 2.02 g (32.05 mmol) Ammoniumformiat versetzt und 1 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch über Kieselgur filtriert und der Filtrierrückstand mit Ethanol nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 3.40 g (94% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.17 (br. s, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.06-7.98 (m, 1H), 7.92-7.82 (m, 2H), 7.60 (d, 1H), 6.96 (s, 1H), 6.87 (dd, 1H), 4.49-4.41 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 1.40 (s, 18H) [verdeckt 2H] .
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.26 min, m/z = 564 [M+H]+.
Beispiel 44A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl](2-oxo-2-{6-[2-(tetrahydro
4-yl)ethoxy]-l-benzofur-2-yl}ethyl)malonat
Figure imgf000091_0002
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 0.75 ml DMF unter Argon wurden bei RT 45 mg (0.40 mmol) Kalium-feri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 86 mg (0.44 mmol) 4-(2-Bromethyl)tetrahydro-2i7-pyran, gelöst in 0.25 ml DMF, gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden jeweils 50 ml Wasser und Ethylacetat hinzugegeben, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natrium- sulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 82 mg (32% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ [ppm] = 8.30 (dd, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.89 (td, 1H), 7.77-7.72 (m, 1H), 7.57-7.51 (m, 2H), 7.01 (d, 1H), 6.93 (dd, 1H), 4.60-4.53 (m, 2H), 4.07 (t, 2H), 3.98 (dd, 2H), 3.71 (s, 2H), 3.42 (td, 2H), 2.69-2.63 (m, 2H), 1.84-1.76 (m, 3H), 1.73-1.65 (m, 2H), 1.54-1.30 (m, 2H, verdeckt), 1.49 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.48 min, m/z = 676 [M+H]+. Beispiel 45A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pentyloxy)-l-benzofur- 2-yl]ethyl}malonat
Figure imgf000092_0001
Zu einer Lösung von 220 mg (0.39 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 4 ml Acetonitril wurden bei RT 108 mg (0.78 mmol) Kaliumcarbonat und 72 mg (0.47 mmol, Reinheit 98%) 1-Brompentan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 222 mg (90% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.21 (dd, 1H), 8.14-8.11 (m, 1H), 8.02 (td, 1H), 7.90- 7.85 (m, 2H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.49-4.43 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.80-1.71 (m, 2H), 1.49-1.30 (m, 6H, teilweise verdeckt), 1.40 (s, 18H), 0.91 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 634 [M+H]+. Beispiel 46A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] [2-oxo-2-(6-propoxy-l-benzofur-2-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000093_0001
Zu einer Lösung von 110 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 2 ml Acetonitril wurden bei RT 53 mg (0.39 mmol) Kaliumcarbonat und 29 mg (0.23 mmol, Reinheit 98%) 1-Brompropan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Danach wurde das Gemisch mit weiteren 10 mg (0.08 mmol) 1-Brompropan versetzt und weitere 4 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 105 mg (88% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.21 (dd, 1H), 8.15-8.11 (m, 1H), 8.05-8.00 (m, 1H), 7.90-7.85 (m, 2H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.49-4.43 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.43-1.34 (m, 2H, verdeckt), 1.40 (s, 18H), 1.01 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.51 min, m/z = 606 [M+H]
Beispiel 47A
Di-teri.-butyl-[2-(6-butoxy-l-benzofur-2-yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000094_0001
Zu einer Lösung von 110 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 2 ml Acetonitril wurden bei RT 54 mg (0.39 mmol) Kaliumcarbonat und 33 mg (0.23 mmol, Reinheit 98%) 1 -Brombutan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückrluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 101 mg (84% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.21 (dd, 1H), 8.14-8.11 (m, 1H), 8.05-8.00 (m, 1H), 7.90-7.85 (m, 2H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.49-4.43 (m, 2H), 4.07 (t, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.79-1.70 (m, 2H), 1.52-1.36 (m, 4H, teilweise verdeckt), 1.40 (s, 18H), 0.95 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.56 min, m/z = 620 [M+H]+.
Beispiel 48A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(hexyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000094_0002
Zu einer Lösung von 110 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 2 ml Acetonitril wurden bei RT 54 mg (0.39 mmol) Kaliumcarbonat und 39 mg (0.23 mmol, Reinheit 98%) 1 -Bromhexan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 117 mg (93% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.21 (dd, 1H), 8.13 (d, 1H), 8.05-7.99 (m, 1H), 7.90- 7.85 (m, 2H), 7.67 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.49-4.43 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.49-1.28 (m, 8H, teilweise verdeckt), 1.40 (s, 18H), 0.93-0.83 (m, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.64 min, m/z = 648 [M+H]+.
Beispiel 49A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(heptyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonat
Figure imgf000095_0001
Zu einer Lösung von 110 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A in 2 ml Acetonitril wurden bei RT 54 mg (0.39 mmol) Kaliumcarbonat und 43 mg (0.23 mmol, Reinheit 98%) 1-Bromheptan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vaku- um getrocknet. Es wurden 123 mg (95% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.21 (d, 1H), 8.14-8.11 (m, 1H), 8.05-8.00 (m, 1H), 7.91-7.85 (m, 2H), 7.67 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.49-4.42 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.61 (s, 2H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.50-1.22 (m, 10H, teilweise verdeckt), 1.40 (s, 18H), 0.92-0.83 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.67 min, m/z = 662 [M+H]+. Beispiel 50A
[2-(4-Oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl] (2-oxo-2- { 6- [2-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)efhoxy] - 1 - benzofur-2-yl } ethyl)malonsäure
Figure imgf000096_0001
Zu einer Lösung von 71 mg (0.11 mmol) der Verbindung aus Beispiel 44 A in 2 ml Dichlormethan wurde bei RT 1 ml (14.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 88% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.90 min, m/z = 564 [M+H]+. Beispiel 51 A
1 -(6-Hydroxy- 1 -benzofur-3 -yl)ethanon
Figure imgf000096_0002
Zu einer Lösung von 113.0 g (0.45 mol) 3-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-(dimethylamino)but-3-en-2- on in 750 ml Dichlormethan wurden 199.0 g (0.79 mol) Tribromboran bei 0°C langsam zugetropft. Das Gemisch wurde danach 4 h bei 0°C gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung versetzt, und nach Phasentrennung wurde die wäss- rige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 45.0 g (53% d. Th., Reinheit 95%) der Titel Verbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.77 (s, 1H), 8.81 (s, 1H), 7.84 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.85 (dd, 1H), 2.48 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.70 min, m/z = 177 [M+H]+.
Beispiel 52A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzofur-3-yl]ethanon
Figure imgf000097_0001
Zu einem Gemisch von 159.0 g (0.90 mol) der Verbindung aus Beispiel 51A in 2.1 Liter Aceto- nitril wurden 249.5 g (1.81 mol) Kaliumcarbonat und 185.2 g (1.08 mol) Benzylbromid gegeben und das Gemisch 4 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 23.1 g (0.13 mol) Benzylbromid hinzugefügt und das Reaktionsgemisch nochmals 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde mit gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung versetzt und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurde über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Petrolether/ Ethylacetat 8:2). Es wurden 206.0 g (79% d. Th., Reinheit 79%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.90 (s, 1H), 7.98-7.91 (m, 1H), 7.50-7.45 (m, 2H), 7.43-7.31 (m, 4H), 7.08 (dd, 1H), 5.17 (s, 2H), 2.50 (s, 3H, teilweise verdeckt).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 267 [M+H]+.
Beispiel 53A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzofur-3-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000097_0002
Zu einer Lösung von 135.0 g (0.51 mol) der Verbindung aus Beispiel 52A in 1.9 Liter THF unter Argon wurden bei RT insgesamt 200.0 g (0.53 mol) Phenyltrimethylammoniumtribromid in zehn Portionen innerhalb von 15 Minuten zugegeben. Nach 1 h Rühren bei RT wurde das Gemisch mit 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung versetzt. Es wurde Ethylacetat hinzugegeben und mit ca. 18%-iger (halbkonzentrierter) Salzsäure auf pH 1 gestellt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Das Rohprodukt wurde in Dichlormethan aufgenommen, auf Kieselgel aufgezogen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Lauf- mittel Petrolether/Ethylacetat 95:5— 90: 10). Es wurden 30 g (17% d. Th.) einer Reinfraktion der Titelverbindung erhalten sowie 50 g (6% d. Th.) einer Mischfraktion, in der die Titelverbindung laut LC/MS zu 22% enthalten war.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.25 min, m/z = 345/347 [M+H]+.
In einem analog durchgeführten Experiment wurden 2.97 g (11.15 mmol) der Verbindung aus Bei- spiel 52A und 4.23 g (11.26 mmol) Phenyltrimethylammoniumtribromid eingesetzt. In diesem Fall wurde das Rohprodukt mit Methanol verrührt, abfiltriert, mit Methanol nachgewaschen und getrocknet. Es ergaben sich 3.17 g (74% d. Th., Reinheit 88%) der Titelverbindung.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.01 (s, 1H), 7.93 (d, 1H), 7.53-7.30 (m, 6H), 7.12 (dd, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.76 (s, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 345/347 [M+H]+.
Beispiel 54A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000098_0001
Zu einem Gemisch von 28.21 g (72.42 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 440 ml DMF unter Argon wurden bei RT 8.45 g (75.32 mmol) Kalium feri.-butylat gegeben. Nach 30 min Rühren bei RT wurde eine Lösung von 20.0 g (57.94 mmol) der Verbindung aus Beispiel 53A in 220 ml DMF zügig hinzugegeben, und das Reaktionsgemisch wurde eine weitere Stunde bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch mit 4 Liter 10%-iger wässriger Natriumchlorid-Lösung und 1.2 Liter Ethylacetat versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 1.2 Liter Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan/Petrolether aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (2 kg Kieselgel, Lauf mittel 40 Liter Petrolether/ Ethylacetat 8:2). Es wurden 25.0 g (56% d. Th., Reinheit 85%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.01 (s, IH), 8.21-8.16 (m, IH), 8.13-8.09 (m, IH), 8.03-7.98 (m, IH), 7.90-7.83 (m, 2H), 7.51-7.31 (m, 6H), 7.06 (dd, IH), 5.17 (s, 2H), 4.51-4.43 (m, 2H), 3.60 (s, 2H), 1.41 (s, 18H) [verdeckt 2H].
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.52 min, m/z = 654 [M+H]+. Beispiel 55A
Di-ieri.-butyl-[2-(6-hydroxy-l-benzofur-3-yl)-2-oxoethyi] [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000099_0001
Eine Lösung von 31.30 g (47.88 mmol) der Verbindung aus Beispiel 54A in 1.9 Liter eines 1: 1- Gemisches aus Ethylacetat und Ethanol wurde bei RT mit 2.55 g (2.39 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) und 15.09 g (0.24 mol) Ammoniumformiat versetzt und 1 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch über Kieselgur filtriert und der Filtrierrückstand mit Ethanol nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt und der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Die produkthal- tigen Fraktionen wurden vereinigt und eingeengt. Der Rückstand wurde in 250 ml Diethylether verrührt, abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 17.50 g (59% d. Th., Reinheit ca. 90% laut XH-NMR) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 9.79 (s, IH), 8.93 (s, IH), 8.20 (d, IH), 8.16-8.11 (m, IH), 8.07-8.01 (m, IH), 7.91-7.85 (m, IH), 7.77 (d, IH), 6.98 (d, IH), 6.84 (dd, IH), 4.50-4.42 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 2.55-2.46 (2H, verdeckt), 1.41 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.27 min, m/z = 564 [M+H]+. Beispiel 56A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl](2-oxo-2-{6-[2-(tetrahydro
4-yl)ethoxy] - 1 -benzofur-3 -yl }ethyl)malonat
Figure imgf000100_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55A in 0.75 ml DMF unter Argon wurden bei RT 45 mg (0.40 mmol) Kalium-feri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 86 mg (0.44 mmol) 4-(2-Bromethyl)tetrahydro-2i7-pyran, gelöst in 0.25 ml DMF, gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden jeweils 50 ml Wasser und Ethylacetat hinzugesetzt, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 158 mg (63% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ [ppm] = 8.31-8.27 (m, 2H), 8.08 (d, 1H), 8.02 (d, 1H), 7.91-7.86 (m, 1H), 7.77-7.71 (m, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.94 (dd, 1H), 4.59-4.53 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.98 (dd, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.42 (td, 2H), 2.73-2.67 (m, 2H), 1.88-1.74 (m, 3H), 1.72-1.64 (m, 2H), 1.47 (s, 18H), 1.41-1.33 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.49 min, m/z = 676 [M+H]+. Beispiel 57A Di-teri.-butyl- { 2- [6-(2-cyclopentylethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000101_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55A in 0.75 ml DMF unter Argon wurden bei RT 45 mg (0.40 mmol) Kalium-feri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 99 mg (0.44 mmol) (2-Iodethyl)cyclopentan, gelöst in 0.25 ml DMF, gegeben. Das Gemisch wurde 1 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden jeweils 50 ml Wasser und Ethylacetat hinzugesetzt, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 178 mg (73% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, CDCL): δ [ppm] = 8.30-8.25 (m, 2H), 8.07 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.91-7.84 (m, 1H), 7.76-7.70 (m, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.94 (dd, 1H), 4.60-4.53 (m, 2H), 4.01 (t, 2H), 3.64 (s, 2H), 2.74-2.67 (m, 2H), 2.06-1.92 (m, 1H), 1.90-1.79 (m, 4H), 1.70-1.50 (m, 4H), 1.47 (s, 18H), 1.24-1.11 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.69 min, m/z = 660 [M+H]+.
Beispiel 58A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(2-cyclohexylethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000102_0001
Zu einem Gemisch von 300 mg (0.53 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 221 mg (1.60 mmol) Kaliumcarbonat, gefolgt von 306 mg (1.60 mmol) (2-Brom- ethyl)cyclohexan, gegeben und das Gemisch 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 140 mg (37% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.71 min, m/z = 674 [M+H]+.
Beispiel 59A
Di-ieri.-butyl-(2- {6-[(3-chlorbenzyl)oxy] -1 -benzofur-3-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000102_0002
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55A in 2 ml Acetonitril wurden bei RT 147 mg (1.07 mmol) Kaliumcarbonat, gefolgt von 146 mg (0.71 mmol) l-(Brom- methyl)-3-chlorbenzol, gegeben und das Gemisch 2 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurden weitere 58 mg (0.28 mmol) l-(Brommethyl)-3-chlorbenzol hinzugefügt und das Gemisch eine weitere Stunde unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 137 mg (53% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 688 [M+H]+. Beispiel 60A Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(cyclopentylmethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000103_0001
Zu einem Gemisch von 600 mg (1.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 6 ml Acetonitril wurden bei RT 441 mg (3.19 mmol) Kaliumcarbonat, gefolgt von 521 mg (3.19 mmol) (Brom- methyl)cyclopentan, gegeben und das Gemisch 20 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 467 mg (64% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhal- ten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.60 min, m/z = 646 [M+H]+. Beispiel 61 A
Di-ieri.-butyl- { 2-[6-(cyclohexylmethoxy)-l -benzofur-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000104_0001
Zu einem Gemisch von 600 mg (1.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml DMF unter Argon wurden bei RT 134 mg (1.20 mmol) Kalium-ieri.-butylat und nach 5 min Rühren bei RT 236 mg (1.33 mmol) (Brommethyl)cyclohexan gegeben. Das Gemisch wurde 2 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Anschließend wurden weitere 141 mg (0.80 mmol) (Brommethyl)cyclohexan hinzugefügt, und es wurde erneut 2 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Danach wurden weitere 72 mg (0.64 mmol) Kalium-ieri. -butylat hinzugegeben, und es wurde nochmals 2 h bei 70°C Badtemperatur gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden jeweils 50 ml Wasser und Ethylacetat hinzugesetzt, und nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit 50 ml Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Di- chlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 383 mg (51% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.67 min, m/z = 660 [M+H]+.
Beispiel 62A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] [2-oxo-2-(6-propoxy-l-benzofur-3-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000105_0001
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 40 mg (0.32 mmol) 1-Brompropan gegeben und das Gemisch 3 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 40 mg (0.32 mmol) 1-Brompropan zugegeben, und das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Dann wurden nochmals 40 mg (0.32 mmol) 1-Brompropan hinzugefügt und das Gemisch weitere 3 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurden erneut 40 mg (0.32 mmol) 1-Brompropan zugegeben und das Gemisch weitere 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt, und die wässrige Phase wurde dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Acetonitril/W asser- Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 115 mg (70% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 606 [M+H]+. Beispiel 63A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pentyloxy)-l-benzofur- 3 -yl] ethyl } malonat
Figure imgf000105_0002
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 49 mg (0.32 mmol) 1-Brompentan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Danach wurden weitere 49 mg (0.32 mmol) 1-Brompentan zugegeben und das Gemisch nochmals 3 h unter Rück- fluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Acetonitril/Wasser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 125 mg (73% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 3.26 min, m/z = 634 [M+H]+.
Beispiel 64A
Di-ieri.-butyl-(2- { 6- [(3,4-dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000106_0001
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 80 mg (0.32 mmol, Reinheit 97%) 3,4-Dichlorbenzylbromid gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Acetonitril/Wasser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 109 mg (55% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.63 min, m/z = 722 [M+H]+. Beispiel 65A
Di-ier -butyH2-(4-oxo ,2,3-benzotria^^
methoxy)- 1 -benzofur-3-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000107_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.36 mmol) der Verbindung aus Beispiel 55A in 4 ml Acetonitril wurden bei RT 98 mg (0.71 mmol) Kaliumcarbonat und 79 mg (0.43 mmol, Reinheit 97%) 4-(Brommethyl)tetrahydro-2i7-pyran gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 79 mg (0.43 mmol, Reinheit 97%) 4-(Brommethyl)tetrahydro- 2i7-pyran hinzugefügt, und das Gemisch wurde nochmals 24 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethyl- acetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 89 mg (34% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.46 min, m/z = 662 [M+H]+.
Beispiel 66A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(hexyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000108_0001
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 56 mg (0.32 mmol, Reinheit 98%) 1-Bromhexan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 127 mg (73% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 3.34 min, m/z = 648 [M+H]+.
Beispiel 67A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(heptyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000108_0002
Zu einem Gemisch von 177 mg (0.30 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55A in 3.3 ml Acetonitril wurden bei RT 83 mg (0.60 mmol) Kaliumcarbonat und 64 mg (0.36 mmol) 1-Bromheptan gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Acetonitril/W asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 183 mg (90% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 3.42 min, m/z = 662 [M+H]+.
Beispiel 68A
Di-ieri.-butyl- [2-(6-isobutoxy- 1 -benzofur-3 -yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000109_0001
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 44 mg (0.32 mmol) l-Brom-2-methylpropan gegeben und das Gemisch 1 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 44 mg (0.32 mmol) l-Brom-2-methylpropan hinzugegeben, und das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Dann wurden weitere 63 mg (0.46 mmol) l-Brom-2-methyl- propan hinzugefügt, und das Gemisch wurde weitere 4 h unter Rückfluss gerührt. Danach wurden nochmals 63 mg (0.46 mmol) l-Brom-2-methylpropan hinzugegeben, und das Gemisch wurde erneut über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Acetonitril/W asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 85 mg (50% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.56 min, m/z = 620 [M+H]+. Beispiel 69A
Di-teri.-butyl-[2-(6-butoxy-l-benzofur-3-yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)- ethyl]malonat
Figure imgf000110_0001
Zu einem Gemisch von 160 mg (0.27 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 55 A in 3 ml Acetonitril wurden bei RT 75 mg (0.54 mmol) Kaliumcarbonat und 44 mg (0.32 mmol) 1-Brombutan gegeben. Das Gemisch wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 44 mg (0.32 mmol) 1-Brombutan hinzugegeben, und das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Danach wurden nochmals 44 mg (0.32 mmol) 1-Brombutan hinzugefügt, und das Gemisch wurde weitere 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent Aceto- nitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 41 mg (24% d. Th., Rein- heit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 620 [M+H]+.
Beispiel 70A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(2-phenylethoxy)-l-benzo- fur-3-yl]ethyl Jmalonat
Figure imgf000111_0001
Zu einem Gemisch von 200 mg (0.30 mmol, Reinheit 86%) der Verbindung aus Beispiel 55A in 3.4 ml Acetonitril wurden bei RT 84 mg (0.61 mmol) Kaliumcarbonat und 69 mg (0.37 mmol, Reinheit 98%) (2-Bromethyl)benzol gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden nochmals 69 mg (0.37 mmol, Reinheit 98%) (2-Bromethyl)benzol hinzugefügt, und das Gemisch wurde weitere vier Tage unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und dann vollständig eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und über Kieselgel filtriert. Das Filtrat wurde wieder eingeengt, und der Rückstand wurde in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Eluent AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure im Wasser). Es wurden 56 mg (22% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.57 min, m/z = 668 [M+H]+.
Beispiel 71 A
[2-(4-Oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] (2-oxo-2- { 6- [2-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)efhoxy] - 1 - benzofur-3-yl}ethyl)malonsäure
Figure imgf000111_0002
Zu einer Lösung von 147 mg (0.22 mmol) der Verbindung aus Beispiel 56A in 4.5 ml Dichlormethan wurden bei RT 2.2 ml (29.1 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 84% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.89 min, m/z = 564 [M+H]+. Beispiel 72A
{ 2-[6-(2-Cyclopentylethoxy )- 1 -benzofur-3 -yl] -2-oxoethy 1 ) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4H)-y\)- ethyl] malonsäure
Figure imgf000112_0001
Zu einer Lösung von 167 mg (0.25 mmol) der Verbindung aus Beispiel 57 A in 5.2 ml Dichlor- methan wurden bei RT 2.6 ml (33.9 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titel Verbindung wurde in einer Reinheit von 95% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 2, ESIpos): R, = 2.48 min, m/z = 548 [M+H]+. Beispiel 73A
{2-[6-(2-Cyclohexylethoxy)- l-benzofur-3-yl]-2-oxoethyl } [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4i -yD- ethyl] malonsäure
Figure imgf000112_0002
Zu einer Lösung von 140 mg (0.21 mmol) der Verbindung aus Beispiel 58A in 3.8 ml Dichlor - methan wurden bei RT 1.9 ml (24.8 mmol) Trinuoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titel Verbindung wurde in einer Reinheit von 97% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.30 min, m/z = 562 [M+H]+.
Beispiel 74A
(2- { 6-[(3 -Chlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-3-yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)- ethyl] malonsäure
Figure imgf000113_0001
Zu einer Lösung von 137 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 59A in 3.6 ml Dichlor - methan wurden bei RT 1.8 ml (23.5 mmol) Trinuoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 92% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.08 min, m/z = 576 [M+H]+.
Beispiel 75A
{2-[6-(Cyclopentylmethoxy)-l-benzofur-3-yl]-2-oxoethyl} [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl] malonsäure
Figure imgf000113_0002
Zu einer Lösung von 467 mg (0.65 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 60A in 7.9 ml Dichlormethan wurden bei RT 3.9 ml (50.9 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 92% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.10 min, m/z = 534 [M+H]+.
Beispiel 76A
{ 2-[6-(Cyclohexylmethoxy)-l -benzofur-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl] malonsäure
Figure imgf000114_0001
Zu einer Lösung von 380 mg (0.58 mmol) der Verbindung aus Beispiel 61A in 2.6 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.3 ml (17.0 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titel Verbindung wurde in einer Reinheit von 87% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 548 [M+H]+.
Beispiel 77A
Lzyloxy)-l-benzothiophen-2 -carbonsäure
Figure imgf000114_0002
Zu einer Lösung von 22.17 g (99.75 mmol) Ethyl-6-hydroxy-l-benzothiophen-2-carboxylat [EP 2 351 743-A1, Reference Example 39] in 220 ml Ethanol wurden 15.15 g (119.70 mmol) Benzyl- chlorid und 20.69 g (149.62 mmol) Kaliumcarbonat gegeben. Das Gemisch wurde 7.5 h bei 80°C gerührt. Anschließend wurden 500 ml einer 1 M wässrigen Kaliumhydroxid-Lösung langsam hinzugegeben, und das Gemisch wurde über Nacht bei 80°C weitergerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde unter Eiskühlung mit etwa 400 ml 2 M Salzsäure auf pH 3 angesäuert. Nach Verdünnen mit Wasser wurde der vorhandene Feststoff abfiltriert, mit Wasser gewaschen und zunächst im Vaku- um und dann im Trockenschrank bei 80°C getrocknet. Es wurden 26.23 g (80% d. Th., Reinheit 86%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 13.29 (br. s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.44-7.31 (m, 3H), 7.15 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.07 min, m/z = 285 [M+H]+. Beispiel 78A
Lzyloxy)-/V-methoxy-/V-methyl-l-benzothiophen-2-carboxamid
Figure imgf000115_0001
Zu einem Gemisch von 27.21 g (95.69 mmol) der Verbindung aus Beispiel 77A in 300 ml Dichlor - methan wurden 20.9 ml (287.08 mmol) Thionylchlorid gegeben. Das Gemisch wurde zunächst 6 h bei 40°C und dann 2 d bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Danach wurde der Rückstand in 250 ml Dichlormethan aufgenommen und langsam mit 12.14 g (124.40 mmol) /V,0-Dimethylhydroxylamin-Hydrochlorid und 66.7 ml (382.77 mmol) /V,/V-Diisopropylethylamin versetzt. Nach 30 min Rühren bei RT wurde mit Dichlormethan verdünnt und nacheinander mit gesättigter wässriger Ammoniumchlorid-Lösung und gesättigter wässriger Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 5: 1— > 2:1). Es wurden 31.34 g (95% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 8.11 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.45-7.31 (m, 3H), 7.13 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.32 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.18 min, m/z = 328 [M+H] Beispiel 79A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzothiophen-2-yl]ethanon
Figure imgf000116_0001
Zu einem Gemisch von 33.10 g (101.09 mmol) der Verbindung aus Beispiel 78A in 250 ml THF unter Argon wurden bei 0°C 47.4 ml (151.65 mmol) Methylmagnesiumbromid-Lösung (3.2 M in 2-Methyltetrahydrofuran) gegeben. Das Gemisch wurde nach Entfernen des Kältebades 1.5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch langsam mit gesättigter wässriger Ammoniumchlorid-Lösung versetzt und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Va- kuum getrocknet. Es wurden 25.05 g (79% d. Th., Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.26 (s, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.51-7.46 (m, 2H), 7.45-7.31 (m, 3H), 7.16 (dd, 1H), 5.21 (s, 2H), 2.61 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.21 min, m/z = 283 [M+H]+.
Beispiel 80A l-[6-(Benzyloxy)-l-benzothiophen-2-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000116_0002
Zu einem Gemisch von 10.0 g (33.29 mmol, Reinheit 94%) der Verbindung aus Beispiel 79A in 24 ml THF wurden 12.52 g (33.29 mmol) Phenyltrimethylammoniumtribromid gegeben. Das Gemisch wurde 5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Ethylacetat verdünnt und mit Wasser gewaschen. Die wässrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat rückextrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Verrühren in Methanol wurde der vorhandene Feststoff abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 11.29 g (64% d. Th., Reinheit 68%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 361/363 [M+H]+. Beispiel 81 A Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000117_0001
Zu einem Gemisch von 10.76 g (27.63 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 60 ml DMF unter Argon wurden 1.11 g (27.63 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) gegeben. Nach kurzem Erhitzen auf 50°C wurde das Gemisch auf -10°C abgekühlt und mit 11.29 g (21.25 mmol, Reinheit 68%) der Verbindung aus Beispiel 80A, gelöst in 40 ml DMF, versetzt. Nach Entfernen des Kältebades und 1 h Rühren bei RT wurde mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde zweimal mit Wasser und mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulen- Chromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 5: 1). Es wurden 11.32 g (54% d. Th., Reinheit 88%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.54 min, m/z = 670 [M+H]+.
Beispiel 82A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -2-oxoethyl } { 2- [4-oxo-6-(trifluormefhyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000118_0001
Zu einem Gemisch von 2.07 g (4.22 mmol, Reinheit 93%) der Verbindung aus Beispiel 3A in 30 ml DMF unter Argon wurden 202 mg (5.06 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) gegeben. Nach kurzem Erhitzen auf 50°C wurde das Gemisch auf 0°C abgekühlt und mit einer auf 0°C vorgekühlten Lösung von 1.88 g (4.22 mmol, Reinheit 81%) der Verbindung aus Beispiel 80A in 30 ml DMF versetzt. Nach Entfernen des Kältebades und 16 h Rühren bei RT wurde mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde zweimal mit Wasser und mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Methanol verrührt. Der entstandene Feststoff wurde abfiltriert und im Vakuum getrocknet. Es wurden 2.26 g (66% d. Th., Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 738 [M+H]+.
Beispiel 83A
Di-ieri.-butyl-[2-(6-hydroxy-l-benzothiophen-2-yl)-2-oxoethyl][2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000118_0002
Zu einem Gemisch von 10.88 g (16.24 mmol) der Verbindung aus Beispiel 81A in 400 ml eines l:l-Gemisches aus Essigsäure und Ethylacetat wurden 5.12 g (81.22 mmol) Ammoniumformiat gegeben, gefolgt von 5.0 g (4.69 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) unter Argon. Nach 16 h Rühren bei 80°C wurden nochmals 5.12 g (81.22 mmol) Ammoniumformiat hinzugefügt, gefolgt von weiteren 4.5 g (4.22 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle). Nach weiteren 7 h Rühren bei 80°C und Abkühlen auf RT wurde das Gemisch über Celite filtriert, der Filterrückstand mit einem THF/Ethylacetat-Gemisch (1: 1) nachgewaschen und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde in gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung aufgenommen und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in einem Gemisch aus 10 ml Methanol und 10 ml Dioxan aufgenommen und mittels präparativer SFC gereinigt [Säule: mit 2-Ethylpyridin modifiziertes Kieselgel, 5 μιη, 150 mm x 30 mm; Fluss: 100 ml/min; Detektion: 210 nm; Injektionsvolumen 0.50 ml; Temperatur: 40°C; Gradient 80% C02 / 20% Methanol -> 70% C02 / 30% Methanol; Gesamtlaufzeit 5.5 min]. Es wurden 5.72 g (61% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.19 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.14-8.10 (m 1H), 8.05-7.98 (m, 1H), 7.90-7.82 (m, 2H), 7.27 (d, 1H), 6.97 (dd, 1H), 4.50-4.43 (m, 2H), 3.70 (s 2H), 1.40 (s, 18H) [verdeckt 2H] .
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 580 [M+H]+. Beispiel 84A
Di-ieri.-butyl- [2-(6-hydroxy- 1 -benzothiophen-2-yl)-2-oxoethyl] { 2- [4-oxo-6-(trifluormefhyl)- 1 ,2,3 - benzotriazin-3 (4//)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000119_0001
Zu einem Gemisch von 1.46 g (1.98 mmol) der Verbindung aus Beispiel 82A in 160 ml eines 1: 1- Gemisches aus Essigsäure und Ethylacetat wurden 1.25 g (19.79 mmol) Ammoniumformiat gegeben, gefolgt von 1.25 g (1.17 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) unter Argon. Nach 3 d Rühren bei 80°C und Abkühlen auf RT wurde das Gemisch über Celite filtriert, der Fil- terrückstand mit einem THF/Ethylacetat-Gemisch (1: 1) nachgewaschen und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde in gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung aufgenommen und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 1.18 g (87% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 648 [M+H]+. Beispiel 85A
Di-ieri.-butyl- { 2-[6-(cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3- benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl]malonat
Figure imgf000120_0001
Ein Gemisch von 500 mg (0.86 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83A, 359 mg (2.59 mmol) l-(Brommethyl)cyclopropan und 358 mg (2.59 mmol) Kaliumcarbonat in 15 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 634 mg (91% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.50 min, m/z = 634 [M+H]+.
Beispiel 86A Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(2-phenylethoxy)-l-benzo- thiophen-2-yl]ethyl Jmalonat
Figure imgf000121_0001
Ein Gemisch von 100 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83 A, 96 mg (0.52 mmol) (2-Bromethyl)benzol und 72 mg (0.52 mmol) Kaliumcarbonat in 3 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der entstandene Feststoff wurde abfiltriert, mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 71 mg (60% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 684 [M+H]+.
Beispiel 87A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(2-cyclopropyl-2-oxoethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000121_0002
Ein Gemisch von 100 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83 A, 84 mg (0.52 mmol) 2-Brom-l-cyclopropylethanon und 72 mg (0.52 mmol) Kaliumcarbonat in 3 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 125 mg (100% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.41 min, m/z = 662 [M+H]+. Beispiel 88A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] [2-oxo-2-(6-propoxy-l-benzofhiophen- 2-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000122_0001
Ein Gemisch von 100 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83 A, 64 mg (0.52 mmol) 1-Brompropan und 72 mg (0.52 mmol) Kaliumcarbonat in 3 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt. Der entstandene Feststoff wurde abfiltriert, mit Diethylether gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 43 mg (40% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.54 min, m/z = 622 [M+H]+.
Beispiel 89A
Di-teri.-butyl 2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(tetrahydrofuran-2-yl- methoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000122_0002
Ein Gemisch von 100 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83 A, 85 mg (0.52 mmol) 2-(Brommethyl)tetrahydrofuran und 72 mg (0.52 mmol) Kaliumcarbonat in 3 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Anschließend wurde in einer Mikrowellenapparatur zunächst 10 min auf 150°C und dann 10 min auf 180°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 111 mg (76% d. Th., Reinheit 79%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.46 min, m/z = 664 [M+H]+. Beispiel 90A
Di-ieri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pentyloxy)-l-benzo- thiophen-2-yl]ethyl Jmalonat
Figure imgf000123_0001
Ein Gemisch von 100 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 83 A, 78 mg (0.52 mmol) 1-Brompentan und 72 mg (0.52 mmol) Kaliumcarbonat in 3 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 56 mg (47% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.63 min, m/z = 650 [M+H]+.
Beispiel 91 A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -2-oxoethyl } { 2- [4-oxo-6-(tri- fluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl]ethyl}malonat
Figure imgf000124_0001
Ein Gemisch von 500 mg (0.77 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A, 313 mg (2.32 mmol) l-(Brommethyl)cyclopropan und 320 mg (2.32 mmol) Kaliumcarbonat in 14 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 471 mg (70% d. Th., Reinheit 81%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 702 [M+H]+.
Beispiel 92A Di-teri.-butyl-[2-(6-methoxy-l-benzothiophen-2-yl)-2-oxoethyl] {2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3- benzotriazin-3 (4 /)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000124_0002
Ein Gemisch von 100 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A, 66 mg (0.46 mmol) Iod- methan und 64 mg (0.46 mmol) Kaliumcarbonat in 2 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 93 mg (86% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.53 min, m/z = 662 [M+H]+. Beispiel 93A
Di-ieri.-butyl-[2-oxo-2-(6-propoxy-l-benzothiophen-2-yl)ethyl] {2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3- benzotriazin-3 (4//)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000125_0001
Ein Gemisch von 100 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A, 79 mg (0.46 mmol) 1-Iodpropan und 64 mg (0.46 mmol) Kaliumcarbonat in 2 ml Acetonitril wurde 16 h bei 80°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch mit Wasser versetzt und mit Ethylacetat extrahiert. Die organische Phase wurde einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 104 mg (75% d. Th., Reinheit 76%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.60 min, m/z = 690 [M+H]
Beispiel 94A
6-(Benzyloxy)-/V-methoxy-/V-methyl-l,2-benzoxazol-3-carboxamid
Figure imgf000125_0002
Zu einem Gemisch von 40.03 g (0.41 mol) (Methoxyamino)methan-Hydrochlorid in 1 Liter THF unter Argon wurden bei -78°C 513 ml (0.82 mol) einer 1.6 M Lösung von Butyllithium in THF langsam hinzugegeben. Nach 5 min Rühren bei -78°C Badtemperatur wurde das Kältebad entfernt und das Gemisch weitere 15 min gerührt. Anschließend wurde wieder auf -78°C Badtemperatur abgekühlt, und es wurde eine Lösung von 24.40 g (82.07 mmol) Ethyl-6-(benzyloxy)-l,2-benz- oxazol-3-carboxylat [WO 2008/009487-A1, Beispiel 1, Stufe 1.1] in 500 ml THF langsam hinzugegeben. Nach 1 h Rühren bei -78°C wurde das Kältebad entfernt und das Gemisch weitere 30 min gerührt, wobei die Innentemperatur auf ca. -20°C anstieg. Anschließend wurde das Gemisch mit 790 ml gesättigter wässriger Zitronensäure-Lösung versetzt, mit Wasser verdünnt und rasch zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Trocknen im Vakuum wurden 26.6 g (87% d. Th., Reinheit 84%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.11 min, m/z = 313 [M+H]+.
In einem analog durchgeführten Experiment wurden aus 7.38 g (75.69 mmol) (Methoxyamino)- methan-Hydrochlorid und 4.50 g (15.14 mmol) Ethyl-6-(benzyloxy)-l,2-benzoxazol-3-carboxylat 4.67 g (97% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.78 (d, 1H), 7.54-7.33 (m, 6H), 7.14 (dd, 1H), 5.25 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.39 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.11 min, m/z = 313 [M+H]+.
Beispiel 95A l-[6-(Benzyloxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]ethanon
Figure imgf000126_0001
Zu einem Gemisch von 39.65 g (109.18 mmol, Reinheit 86%) der Verbindung aus Beispiel 94A in 365 ml THF wurden bei 0°C 109 ml (0.33 mol) einer 3 M Lösung von Methylmagnesiumbromid in Diethylether langsam hinzugegeben. Nach 20 min Rühren bei 0°C Badtemperatur wurden unter Eiskühlung ca. 150 ml gesättigte wässrige Ammoniumchlorid-Lösung langsam hinzugefügt. Anschließend wurde mit Wasser verdünnt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Trocknen im Vakuum wurden 35 g eines Rohprodukts erhalten, welches mit dem Rohprodukt (37 g) aus einem analog durchgeführten Experiment gleicher Ansatzgröße vereinigt wurde. Dieses Material wurde anschließend mittels Flash-Chromatographie gereinigt (1.2 kg Kieselgel, Laufmittel Cyclo- hexan/Ethylacetet 9: 1). Es wurden 16.2 g (27% d. Th., Reinheit 98%) einer ersten Charge der Titelverbindung sowie 36.3 g (57% d. Th., Reinheit 92%) einer zweiten und 7.1 g (9% d. Th., Reinheit 73%) einer dritten Charge der Titelverbindung erhalten [Ausbeuten bezogen auf 79.3 g (218.36 mmol, Reinheit 86%) der eingesetzten Verbindung aus Beispiel 94A].
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 268 [M+H]+.
In einem analog durchgeführten Experiment wurden aus 11.65 g (37.30 mmol) der Verbindung aus Beispiel 94A und 37.3 ml (0.11 mmol) einer 3 M Lösung von Methylmagnesiumbromid in Di- ethylether 10.40 g (quant., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.97 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.53-7.32 (m, 5H), 7.19 (dd, 1H), 5.25 (s, 2H), 2.70 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.22 min, m/z = 268 [M+H]+. Beispiel 96A l-[6-(Benzyloxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000127_0001
Zu einem Gemisch von 36.3 g (125.21 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 95A in 950 ml THF wurden bei RT 50.96 g (131.48 mmol, Reinheit 97%) Phenyltrimethylammonium- tribromid gegeben. Das Gemisch wurde 3 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Wasser verdünnt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde ca. 15 min in 270 ml Ethanol unter Rückfluss verrührt. Der entstandene Feststoff wurde abfiltriert und einmal mit wenig Ethanol und einmal mit wenig Pentan gewaschen. Nach Trocknen an der Luft wurden 35.28 g (77% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ [ppm] = 8.07-8.01 (m, 1H), 7.48-7.33 (m, 5H), 7.17-7.12 (m, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.70 (s, 2H). LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 2.88 min, m/z = 346 [M+H]+. Beispiel 97A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000128_0001
Zu einer Suspension von 642 mg (16.05 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) in 50 ml DMF unter Argon wurde bei RT eine Lösung von 5.0 g (12.84 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 50 ml DMF gegeben. Nach ca. 30 Minuten Rühren bei RT wurde das Gemisch auf -20°C abgekühlt, und eine Lösung von 5.31 g (14.12 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 96A in 50 ml DMF wurde zügig hinzugegeben. Nach 5 Minuten Rühren bei -20°C wurde das Kältebad entfernt, und das Gemisch wurde mit 250 ml Wasser und 250 ml 10%-iger wässriger Zitronensäure versetzt und zweimal mit ieri.-Butylmethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wurde zusammen mit dem Rohprodukt aus einem analog durchgeführten Experiment, bei dem 1.0 g (2.57 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A und 1.06 g (2.82 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 96A eingesetzt worden waren, mittels Säulenchromatographie gereinigt (700 g Kieselgel, Laufmittel Toluol/Ethylacetat 9: 1). Es wurden 5.38 g der Titelverbindung erhalten (49% d. Th., bezogen auf insgesamt 6.06 g (15.41 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.54 min, m/z = 655 [M+H]+. In einem analog durchgeführten Experiment, in dem 1.0 g (2.57 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A eingesetzt worden war, wurden nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 6) 170 mg (10% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.19 (d, 1H), 8.12 (d, 1H), 8.05-7.98 (m, 1H), 7.93- 7.84 (m, 2H), 7.56 (d, 1H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.46-7.33 (m, 3H), 7.19 (dd, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.53- 4.45 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.39 (s, 18H) [verdeckt 2H]. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.55 min, m/z = 655 [M+H]+. Beispiel 98A
Di-ieri.-butyl-{2-[6-(benzyloxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]-2-oxoethyl} {2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4//)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000129_0001
Zu einer Suspension von 22 mg (0.55 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) in 2 ml DMF unter Argon wurde bei RT eine Lösung von 200 mg (0.44 mmol) der Verbindung aus Beispiel 3A in 2 ml DMF gegeben. Nach ca. 30 Minuten Rühren bei 50°C wurde das Gemisch auf -20°C abgekühlt, und eine Lösung von 183 mg (0.48 mmol, Reinheit 91%) der Verbindung aus Beispiel 96A in 2 ml DMF wurde zügig hinzugegeben. Nach 5 Minuten Rühren bei -20°C wurde das Kältebad entfernt, und nach weiteren 15 min Rühren wurde das Gemisch mit 10 ml Wasser und 10 ml 10%-iger wässriger Zitronensäure versetzt und zweimal mit ieri.-Butylmethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 8) gereinigt. Die produkthaltigen Frak- tionen wurden vereinigt, mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert und bis auf Restvolumen an wässriger Phase eingeengt. Danach wurde zweimal mit Dichlormethan extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Nach Trocknen im Vakuum wurden 83 mg (24% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, CDCL): δ [ppm] = 8.58 (s, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.08 (dd, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.49-7.33 (m, 5H), 7.13-7.05 (m, 2H), 5.16 (s, 2H), 4.69-4.60 (m, 2H), 3.91 (s, 2H), 2.67-2.62 (m, 2H), 1.50 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.61 min, m/z = 723 [M+H]+. Beispiel 99A
Di-ieri.-butyl-[2-(6-hydroxy-l,2-benzoxazol-3-yl)-2-oxoethyl][2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonat
Figure imgf000130_0001
Eine Lösung von 5.35 g (7.52 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 97A in 330 ml eines l: l-Gemisches aus Ethylacetat und Ethanol wurde bei RT mit 0.40 g (0.38 mmol) Palladium- Katalysator (10% auf Aktivkohle) und 2.37 g (37.59 mmol) Ammoniumformiat versetzt und 1 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden Festbestandteile über Kieselgur abfiltriert und der Filterrückstand mit Ethylacetat nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt, der Rückstand anschließend wieder in Dichlormethan aufgenommen, die Lösung einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen und dann über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (200 g Kieselgel, Laufmittel Cyclo- hexan/Ethylacetat 7:3). Es wurden 1.89 g (45% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, CDC13): δ [ppm] = 8.31 (dd, 1H), 8.14 (d, 1H), 7.97-7.92 (m, 1H), 7.84-7.76 (m, 2H), 7.48 (br. s, 1H), 6.93 (d, 1H), 6.84 (dd, 1H), 4.68-4.59 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 2.75-2.65 (m, 2H), 1.51 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 565 [M+H]
Beispiel 100A Di-teri.-butyl-[2-(6-hydroxy-l,2-benzoxazol-3-yl)-2-oxoethyl] {2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3- benzotriazin-3 (4 /)-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000131_0001
Eine Lösung von 282 mg (0.37 mmol, Reinheit 94%) der Verbindung aus Beispiel 98A in 16 ml eines l: l-Gemisches aus Ethylacetat und Ethanol wurde bei RT mit 20 mg (0.018 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle) und 116 mg (1.83 mmol) Ammoniumformiat versetzt und 2 h bei 70°C gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden Festbestandteile über Kieselgur abfiltriert und der Filterrückstand mit Ethylacetat nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt, und der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (25 g Kieselgel, Laufmittel Cyclo- hexan/Ethylacetat 8:2). Es wurden 113 mg (49% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.66 (br. s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.35 (d, 2H), 7.82 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.55-4.47 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 2.59-2.54 (m, 2H), 1.40 (s, 18H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.39 min, m/z = 633 [M+H]+.
Beispiel 101A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] ethyl } malonat
Figure imgf000131_0002
Zu einem Gemisch von 1.30 g (2.30 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 35 ml Acetonitril wurden bei RT 955 mg (6.91 mmol) Kaliumcarbonat und 825 mg (4.61 mmol) 4-(Brommefhyl)- tetrahydro-2i7-pyran gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde Wasser hinzugegeben, und die wässrige Phase wurde zweimal mit Ethyl- acetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (120 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/ Ethylacetat 7:3). Es wurden 550 mg (28% d. Th., Reinheit 78%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.46 min, m/z = 663 [M+H]+. Beispiel 102A
Di-ieri.-butyl-(2- { 6- [(4-fluorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000132_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 73 mg (0.53 mmol) Kaliumcarbonat und 60 mg (0.32 mmol) l-(Brommethyl)- 4-fluorbenzol gegeben. Das Gemisch wurde 30 min unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde Wasser hinzugegeben, und die wässrige Phase wurde zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 163 mg (75% d. Th., Reinheit 82%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.55 min, m/z = 673 [M+H]+.
Beispiel 103A
Di-ieri.-butyl-(2- { 6- [(3-carbamoylbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3- benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000133_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 73 mg (0.53 mmol) Kaliumcarbonat und 54 mg (0.32 mmol) 3- (Chlormethyl) - benzamid gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde Wasser hinzugegeben, mit 10%-iger Zitronensäure neutralisiert und die wässrige Phase zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 196 mg (74% d. Th., Reinheit 70%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.32 min, m/z = 698 [M+H]+. Beispiel 104A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pentyloxy)-l,2-benz- oxazol-3 -y 1] ethyl } malonat
Figure imgf000133_0002
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 120 mg (0.80 mmol) 1-Brompentan gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Zugabe von Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (25 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 109 mg (57% d. Th., Reinheit 88%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.64 min, m/z = 635 [M+H]+. Beispiel 105A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(2-cyclohexylethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000134_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 152 mg (0.80 mmol) (2-Brom- ethyl)cyclohexan gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Zugabe von Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (25 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 134 mg (72% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.72 min, m/z = 675 [M+H]+. Beispiel 106A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(2-phenylethoxy)-l,2-benz- oxazol-3-yl]ethyl}malonat
Figure imgf000135_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 73 mg (0.53 mmol) Kaliumcarbonat und 89 mg (0.32 mmol, Reinheit 92%) 2-Phenylethyltrifluormethansulfonat [Lit.: Synthesis 1985, 8, 759-760] gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und die wässrige Phase zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Kieselgel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 7:3). Die produkthaltige Zone wurde mit Di- chlormethan/Methanol (95:5) extrahiert, und das Lösungsmittel wurde wieder entfernt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 141 mg (78% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.59 min, m/z = 669 [M+H]+.
Beispiel 107A Di-ieri.-butyl-(2- { 6- [(3-chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000135_0002
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 73 mg (0.53 mmol) Kaliumcarbonat und 65 mg (0.32 mmol) l-(Brommefhyl)- 3-chlorbenzol gegeben. Das Gemisch wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Versetzen mit Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 8) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert und bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt. Es wurde zweimal mit Dichlormethan extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 168 mg (92% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 689 [M+H]+. Beispiel 108A
Di-ieri.-butyl-(2- { 6- [(4-chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000136_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 73 mg (0.53 mmol) Kaliumcarbonat und 65 mg (0.32 mmol) l-(Brommethyl)- 4-chlorbenzol gegeben. Das Gemisch wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Versetzen mit Eis- wasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 8) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung neutralisiert und bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt. Es wurde zweimal mit Dichlormethan extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 241 mg (99% d. Th., Reinheit 75%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.58 min, m/z = 689 [M+H]+.
Beispiel 109A Di-ieri.-butyH2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4^
benzoxazol-3 -yl] ethyl } malonat
Figure imgf000137_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 81 mg (0.32 mmol) 3-(Brom- methyl)pyridin-Hydrobromid gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Anschließend wurden weitere 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 81 mg (0.32 mmol) 3-(Brom- methyl)pyridin-Hydrobromid hinzugefügt, und das Gemisch wurde nochmals 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde mit Wasser versetzt und die wässrige Phase dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrock- net, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Die vereinigten produkthaltigen Fraktionen wurden mit gesättigter wässriger Natriumhydro- gencarbonat-Lösung neutralisiert und bis auf ein Restvolumen an wässriger Phase eingeengt. Es wurde zweimal mit Dichlormethan extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde im Vakuum getrocknet. Es wurden 44 mg (25% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.34 min, m/z = 656 [M+H]+.
Beispiel 110A
Di-teri.-butyl-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl](2-oxo-2-{6-[2-(tetrahydro-2ii-pyran- 4-yl)ethoxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl }ethyl)malonat
Figure imgf000138_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 154 mg (0.80 mmol) 4-(2-Brom- ethyl)tetrahydro-2i7-pyran gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Ver- setzen mit Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/ Ethylacetat 7:3). Es wurden 132 mg (68% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.51 min, m/z = 677 [M+H]+. Beispiel 111A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(cyclopropylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000138_0002
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 108 mg (0.80 mmol) (Brom- methyl)cyclopropan gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Versetzen mit Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten orga- nischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Efhyl- acetat 8:2). Es wurden 119 mg (67% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.52 min, m/z = 619 [M+H]+. Beispiel 112A
Di-teri.-butyl- { 2- [6-(2-cyclopentylethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3- benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000139_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 179 mg (0.80 mmol) (2-Iodethyl)- cyclopentan gegeben. Das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Versetzen mit Eiswasser wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 131 mg (73% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.68 min, m/z = 661 [M+H]+.
Beispiel 113A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(cyclopentylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000140_0001
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 130 mg (0.80 mmol) (Brom- methyl)cyclopentan gegeben. Das Gemisch wurde 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Das Rohprodukt wurde mit dem Rohprodukt eines analog durchgeführten Experiments gleicher Ansatzgröße vereinigt und anschließend mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Lauf mittel Cyclohexan/ Ethylacetat 85: 15). Es wurden 143 mg der Titelverbindung erhalten (31% d. Th., bezogen auf insgesamt 300 mg (0.54 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A; Reinheit 75%).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.64 min, m/z = 647 [M+H]+. Beispiel 114A
Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(cyclohexylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonat
Figure imgf000140_0002
Zu einem Gemisch von 150 mg (0.27 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A in 1.5 ml Aceto- nitril wurden bei RT 110 mg (0.80 mmol) Kaliumcarbonat und 141 mg (0.80 mmol) (Brom- methyl)cyclohexan gegeben. Das Gemisch wurde 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurde die wässrige Phase zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Das Rohprodukt wurde mit dem Rohprodukt eines analog durchgeführten Experiments gleicher Ansatzgröße vereinigt und anschließend mittels Säulenchromatographie gereinigt (40 g Kieselgel, Lauf mittel Cyclohexan/ Ethylacetat 85: 15). Es wurden 113 mg der Titelverbindung erhalten (25% d. Th., bezogen auf insgesamt 300 mg (0.54 mmol) der Verbindung aus Beispiel 99A; Reinheit 75%).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.68 min, m/z = 661 [M+H]+.
Beispiel 115A
Di-ieri.-butyl- { 2-oxo-2- [6-(tetrahydro-2i7-pyran-4-ylmefhoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] ethyl } { 2- [4- oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl]ethyl}malonat
Figure imgf000141_0001
Zu einem Gemisch von 100 mg (0.16 mmol) der Verbindung aus Beispiel 100A in 1.0 ml Aceto- nitril wurden bei RT 66 mg (0.47 mmol) Kaliumcarbonat und 118 mg (0.47 mmol) Tetrahydro-2 ί- pyran-4-ylmethyltrifluormefhansulfonat gegeben. Das Gemisch wurde 1 h bei RT gerührt. Danach wurde das Gemisch direkt mittels Dickschicht-Chromatographie aufgereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Cyclohexan/ Ethylacetat 3:2). Die produkthaltige Zone wurde mit Dichlormethan/Methanol (95:5) extrahiert, und das Lösungsmittel wurde wieder entfernt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 75 mg (50% d. Th., Reinheit 76%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.56 min, m/z = 731 [M+H]+.
Beispiel 116A
{ 2-[6-(Benzyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] - malonsäure
Figure imgf000142_0001
Zu einer Lösung von 60 mg (0.092 mmol) der Verbindung aus Beispiel 97A in 1 ml Dichlormethan wurden bei RT 0.5 ml (6.5 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2.5 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrock- net. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 69% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.01 min, m/z = 543 [M+H]+. Beispiel 117A
{ 2-[6-(Benzyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } { 2- [4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4 /)-yl] ethyl } malonsäure
Figure imgf000142_0002
Zu einer Lösung von 80 mg (0.103 mmol, Reinheit 93%) der Verbindung aus Beispiel 98A in 1.25 ml Dichlormethan wurden bei RT 0.625 ml (8.11 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 85% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.15 min, m/z = 611 [M+H]+.
Beispiel 118A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-ylmethoxy)-l,2- benzoxazol-3 -yl] ethyl } malonsäure
Figure imgf000143_0001
Zu einer Lösung von 550 mg (0.65 mmol, Reinheit 78%) der Verbindung aus Beispiel 101A in 8.0 ml Dichlormethan wurden bei RT 4.0 ml (51.92 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 68% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 1.97 min, m/z = 551 [M+H]+.
Beispiel 119A
(2- { 6-[(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)ethyl]malonsäure
Figure imgf000143_0002
Zu einer Lösung von 155 mg (0.21 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 102A in 2.5 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.25 ml (16.23 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 88% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.05 min, m/z = 561 [M+H]+.
Beispiel 120A
(2- { 6-[(3 -Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonsäure
Figure imgf000144_0001
Zu einer Lösung von 190 mg (0.19 mmol, Reinheit 70%) der Verbindung aus Beispiel 103 A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (19.47 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 70% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.83 min, m/z = 586 [M+H]+.
Beispiel 121A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pentyloxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]ethyl}- malonsäure
Figure imgf000144_0002
Zu einer Lösung von 105 mg (0.15 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 104A in 2.5 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.25 ml (16.23 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 84% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.11 min, m/z = 523 [M+H]+.
Beispiel 122A
{ 2-[6-(2-Cyclohexylethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonsäure
Figure imgf000145_0001
Zu einer Lösung von 130 mg (0.19 mmol, Reinheit 97%) der Verbindung aus Beispiel 105A in 3.5 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.75 ml (22.71 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rück- stand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 90% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 563 [M+H]+.
Beispiel 123A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(2-phenylethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]- ethyljmalonsäure
Figure imgf000145_0002
Zu einer Lösung von 125 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 106A in 4 ml Dichlormethan wurden bei RT 2 ml (25.96 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 96% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.06 min, m/z = 557 [M+H]+. Beispiel 124A
(2- { 6-[(3 -Chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000146_0001
Zu einer Lösung von 150 mg (0.22 mmol) der Verbindung aus Beispiel 107A in 4.5 ml Dichlor- methan wurden bei RT 2.25 ml (29.21 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 98% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.08 min, m/z = 577 [M+H]+.
Beispiel 125A
(2- { 6-[(4-Chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -2-oxoethyl) [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000146_0002
Zu einer Lösung von 150 mg (0.22 mmol) der Verbindung aus Beispiel 108A in 4.5 ml Dichlor- methan wurden bei RT 2.25 ml (29.21 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 98% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.08 min, m/z = 577 [M+H]+. Beispiel 126A
[2-(4-Oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(pyridin-3-ylmethoxy)-l,2-benzoxazol- 3 -yl] ethyl } malonsäure
Figure imgf000147_0001
Zu einer Lösung von 44 mg (0.067 mmol) der Verbindung aus Beispiel 109A in 1.5 ml Dichlor - methan wurden bei RT 0.75 ml (9.74 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titel Verbindung wurde in einer Reinheit von 97% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.69 min, m/z = 544 [M+H]+.
Beispiel 127A
[2-(4-Oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] (2-oxo-2- { 6- [2-(tetrahydro-2#-pyran-4-yl)ethoxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } ethyl)malonsäure
Figure imgf000147_0002
Zu einer Lösung von 126 mg (0.17 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 110A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (19.47 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 89% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.94 min, m/z = 565 [M+H] Beispiel 128A
{ 2-[6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000148_0001
Zu einer Lösung von 112 mg (0.17 mmol, Reinheit 93%) der Verbindung aus Beispiel 111A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (19.47 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 86% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.97 min, m/z = 507 [M+H]+.
Beispiel 129A
{2-[6-(2-Cyclopentylethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo-l,2, 3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000148_0002
Zu einer Lösung von 120 mg (0.18 mmol, Reinheit 99%) der Verbindung aus Beispiel 112A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (19.47 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 95% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.20 min, m/z = 549 [M+H]+. Beispiel 130A
{ 2-[6-(Cyclopentylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000149_0001
Zu einer Lösung von 143 mg (0.17 mmol, Reinheit 75%) der Verbindung aus Beispiel 113A in 3 ml Dichlormethan wurden bei RT 1.5 ml (19.47 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 70% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.07 min, m/z = 535 [M+H]+.
Beispiel 131A
{2-[6-(Cyclohexylmethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]-2-oxoethyl} [2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]malonsäure
Figure imgf000149_0002
Zu einer Lösung von 113 mg (0.13 mmol, Reinheit 79%) der Verbindung aus Beispiel 114A in 2 ml Dichlormethan wurde bei RT 1 ml (12.98 mmol) Trirluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 75% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.15 min, m/z = 549 [M+H]+. Beispiel 132A
{ 2-Oxo-2- [6-(tetrahydro-2i7-pyran-4-ylmefhoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl] ethyl } { 2- [4-oxo-6-(trifluor- methyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl] ethyl } malonsäure
Figure imgf000150_0001
Zu einer Lösung von 75 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 115A in 1.5 ml Dichlor - methan wurden bei RT 0.75 ml (9.74 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 92% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.04 min, m/z = 619 [M+H]+.
Beispiel 133A
Lzyloxy)-2-nitro- 1 -(prop- 1 -in- 1 -yl)benzol
Figure imgf000150_0002
Zu einer Lösung von 4.68 g (15.19 mmol) 4-(Benzyloxy)-l-brom-2-nitrobenzol [Lit.: Bioorg. Med. Chem. 2003, 11 (4), 521-528] in 30 ml Toluol unter Argon wurden 878 mg (0.76 mmol) Tetrakis- (triphenylphosphin)palladium(O) gegeben und das Gemisch 10 min bei RT gerührt. Anschließend wurden 10.0 g (30.39 mmol) Tributyl(prop-l-in-l-yl)stannan hinzugefügt, und das Gemisch wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT wurden 10% -ige wässrige Kaliumfluorid- Lösung und Ethylacetat zugesetzt. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, worauf sich eine Phasentrennung einstellte. Die wässrige Phase wurde einmal mit Ethylacetat extrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Das so erhaltene Rohprodukt wurde mit dem Rohprodukt aus einem analog durchgeführten Experiment [eingesetzte Menge an 4-(Benzyloxy)-l- brom-2-nitrobenzol: 1.40 g (4.54 mmol)] vereinigt und mittels Säulenchromatographie gereinigt (300 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 9: 1). Es wurden 3.25 g einer ersten Charge der Titelverbindung erhalten (Reinheit 90%, 55% d. Th., bezogen auf insgesamt eingesetzte 6.08 g (19.93 mmol) 4-(Benzyloxy)-l-brom-2-nitrobenzol). Aus einer Mischfraktion, welche durch nochmalige Säulenchromatographie unter analogen Bedingungen nachgereinigt wurde, wurden weitere 813 mg (15% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung gewonnen.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.66 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.50-7.30 (m, 6H), 5.22 (s, 2H), 2.07 (s, 3H). LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 2.71 min, m/z = 268 [M+H]+. Beispiel 134A l-[6-(Benzyloxy)-2,l-benzoxazol-3-yl]ethanon
Figure imgf000151_0001
Zu einer Lösung von 4.0 g (13.77 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 133A in 125 ml Dichlormethan wurden 301 mg (0.69 mmol) Gold(III)bromid gegeben. Das Gemisch wurde 15 min bei RT gerührt. Anschließend wurde die Lösung einmal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (300 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 2.65 g (70% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 7.87 (d, 1H), 7.54-7.47 (m, 2H), 7.46-7.33 (m, 3H), 7.19 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 5.23 (s, 2H), 2.72 (s, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 268 [M+H]+.
Beispiel 135A l-[6-(Benzyloxy)-2,l-benzoxazol-3-yl]-2-bromethanon
Figure imgf000152_0001
Zu einer Lösung von 2.65 g (9.57 mmol, Reinheit 97%) der Verbindung aus Beispiel 134A in 70 ml THF wurden bei RT 3.98 g (10.05 mmol, Reinheit 97%) Phenyltrimethylammonium- tribromid gegeben. Nach 30 min Rühren bei RT wurde das Gemisch mit Ethylacetat versetzt und mit Wasser gewaschen. Die wässrige Phase wurde einmal mit Ethylacetat rückextrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und mittels Säulenchromatographie gereinigt (200 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/ Ethylacetat 20: 1— 10: 1). Es wurden 1.57 g (42% d. Th., Reinheit 89%) einer ersten Charge sowie 1.44 g (40% d. Th., Reinheit 91%) einer zweiten Charge der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.89 (d, 1H), 7.53-7.48 (m, 2H), 7.46-7.34 (m, 3H), 7.23 (d, 1H), 7.17 (dd, 1H), 5.24 (s, 2H), 4.98 (s, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 346/348 [M+H]+. Beispiel 136A Di-ieri.-butyl- { 2- [6-(benzyloxy)-2, 1 -benzoxazol-3 -yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]malonat
Figure imgf000152_0002
Zu einer Suspension von 21 mg (0.53 mmol) Natriumhydrid (60% in Paraffinöl) in 6 ml DMF unter Argon wurde bei RT eine Lösung von 165 mg (0.42 mmol) der Verbindung aus Beispiel 2A in 2 ml DMF gegeben. Nach ca. 30 Minuten Rühren bei 50°C wurde das Gemisch auf -20°C abge- kühlt, und eine Lösung von 170 mg (0.47 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 135A in 2 ml DMF wurde zügig hinzugegeben. Nach Entfernen des Kältebades wurde 5 Minuten bei RT nachgerührt und das Gemisch dann mit Ethylacetat und Wasser versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit Ethylacetat extrahiert, und die vereinigten organischen Pha- sen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 27 mg (10% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.51 min, m/z = 655 [M+H]+.
Beispiel 137A { 2-[6-(Benzyloxy)-2, l-benzoxazol-3-yl] -2-oxoethyl } [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] - malonsäure
Figure imgf000153_0001
Zu einer Lösung von 29 mg (0.044 mmol) der Verbindung aus Beispiel 136A in 1.0 ml Dichlor - methan wurden bei RT 0.5 ml (6.5 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titel Verbindung wurde in einer Reinheit von 97% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.08 min, m/z = 543 [M+H]+. Beispiel 138A 2-(Trimethylsilyl)ethyl-2-{ [(trifluormethyl)sulfonyl]oxy}bicyclo[2.2.1]hept-2-en-7-carboxylat
Figure imgf000153_0002
Zu einer Lösung von 20.0 g (79.62 mmol) 2-(Trimethylsilyl)ethyl-2-oxobicyclo[2.2.1]heptan-7- carboxylat [WO 96/15096, Beispiel 360 / Stufe 1] in 130 ml THF unter Argon wurden bei -78°C langsam 173 ml (86.48 mmol) einer 0.5 M Lösung von Kalium-bis(trimethylsilyl)amid in THF und dann eine Lösung von 40.13 g (0.10 mol) /V-(5-Chlorpyridin-2-yl)-l,l,l-trirluor-/V-[(trifluor- methyl)sulfonyl]methansulfonamid in 130 ml THF hinzugegeben. Nach 2 h Rühren bei -78°C wurde mit Wasser versetzt und zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Flash-Chromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 95:5— 90: 10— 85: 15). Es wurden 32.4 g (98% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 6.04 (dd, 1H), 4.14-4.06 (m, 2H), 3.16-3.10 (m, 2H), 2.67 (s, 1H), 1.84-1.72 (m, 2H), 1.41-1.28 (m, 1H), 1.22-1.11 (m, 1H), 0.97-0.87 (m, 2H), 0.02 (s, 9H).
Vom Produkt eines ähnlich durchgeführten Experiments [eingesetzte Menge an 2-(Trimethylsilyl)- ethyl-2-oxobicyclo[2.2.1]heptan-7-carboxylat: 312 mg (1.23 mmol)] wurde folgende LC/MS-Ana- lytik erhalten:
LC/MS (Methode 1, ESIneg): Rt = 1.49 min, m/z = 385 [M-H]". Beispiel 139A
(+/-)-l-Benzyl-2-[2-(trimethylsilyl)ethyl]-(lRlS,,2RlS,,3.S,R)-3-(hydroxymethyl)cyclopent:
dicarboxylat (Racemat)
Figure imgf000154_0001
Zu einer Lösung von 11.30 g (26.75 mmol, Reinheit 92%) der Verbindung aus Beispiel 138A in 67 ml Aceton unter Argon wurden bei 0°C 7.05 g (60.20 mmol) /V-Methylmorpholin-/V-oxid, gelöst in 19 ml entgastem Wasser, gegeben. Anschließend wurden 51.4 ml einer 2.5%-igen Lösung von Osmiumtetroxid in ieri.-Butanol langsam hinzugefügt, und das Gemisch wurde zunächst 1 h bei 0°C und dann 1 h bei RT gerührt. Danach wurde das Reaktionsgemisch bei RT mit 17.17 g (80.26 mmol) Natriumperiodat versetzt, wobei ein Feststoff ausfiel. Nach 1 h Rühren bei RT wurde das Gemisch mit Ethylacetat verdünnt und einmal mit 10%-iger wässriger Zitronensäure- Lösung und einmal mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Es wurden 14.8 g eines Rückstands erhalten [Zwischenprodukt (+/-)-( lRS,2RS,3SR)-3-Formyl-2-{ [2-(trimethylsilyl)ethoxy]carbonyl}- cyclopentancarbonsäure (Racemat)] .
Der oben erhaltene Rückstand wurde in 500 ml Dichlormethan aufgenommen und mit 327 mg (2.68 mmol) 4-/V,/V-Dimethylaminopyridin und 9.6 ml (55.11 mmol) /V,/V-Diisopropylethylamin versetzt. Anschließend wurden bei 0°C 4.70 g (27.56 mmol) Chlorameisensäurebenzylester hinzugefügt. Nach 2 h Rühren bei RT wurde mit Dichlormethan verdünnt und jeweils einmal mit 5%- iger wässriger Zitronensäure -Lösung, gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Flash-Chromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 3.0 g eines Feststoffs erhalten [ca. 70% Reinheit laut Dünnschichtchromatographie; Zwischenprodukt (+/-)-l-Benzyl-2-[2-(trimethyl- silyl)ethyl]-(lRlS',2RlS',3lS'R)-3-formylcyclopentan-l,2-dicarboxylat (Racemat)] .
Der oben erhaltene Feststoff wurde in 15 ml Ethanol aufgenommen und bei RT langsam mit 56 mg (1.49 mmol) Natriumborhydrid versetzt. Nach 30 min Rühren bei RT wurde mit 40 ml gesättigter wässriger Ammoniumchlorid-Lösung, 40 ml Wasser und mit Ethylacetat versetzt. Nach Phasentrennung wurde die wässrige Phase einmal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden auf diese Weise 1.26 g (12% d. Th., Reinheit 71%) der Titel Verbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 379 [M+H]+.
Beispiel 140A (+/-)-l-Benzyl-2-[2-(trimethylsilyl)ethy^
triazin-3(4 /)-yl]methyl}cyclopentan-l,2-dicarboxylat (Racemat)
Figure imgf000156_0001
Zu einem Gemisch von 4.95 g (10.46 mmol, Reinheit 80%) der Verbindung aus Beispiel 139A in 85 ml Toluol unter Argon wurden 2.70 g (12.55 mmol) der Verbindung aus Beispiel 1A gegeben. Anschließend wurde das Gemisch auf 0°C gekühlt, und es wurden 3.39 g (16.74 mmol) Tributyl- phosphan sowie 4.56 g (10.46 mmol) Diethylazodicarboxylat (als 40%-ige Lösung in Toluol) hinzugefügt. Das Gemisch wurde danach 20 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Ethylacetat verdünnt und einmal mit Wasser gewaschen. Die wässrige Phase wurde einmal mit Ethylacetat rückextrahiert, und die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid- Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wur- de mittels Säulenchromatographie gereinigt (300 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 3.46 g (51% d. Th., Reinheit 88%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 3.09 min, m/z = 576 [M+H]+.
Beispiel 141A
(+/-)-(lRS,2RS,3SR)-3-{ [4-Oxo-6-(triflTO
methylsilyl)ethoxy]carbonyl }cyclopentancarbonsäure (Racemat)
Figure imgf000156_0002
Zu 602 mg (0.57 mmol) Palladium-Katalysator (10% auf Aktivkohle, mit wenig Ethanol angefeuchtet) wurden unter Argon 3.46 g (5.23 mmol, Reinheit 87%) der Verbindung aus Beispiel 140A, gelöst in 70 ml Methanol, gegeben. Das Gemisch wurde 20 min bei RT unter Normaldruck hydriert. Anschließend wurde mit Ethylacetat versetzt, vorhandener Feststoff über Kieselgur abfiltriert und der Filterrückstand mit Ethylacetat nachgewaschen. Das Filtrat wurde eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 2.89 g der Titelverbindung erhalten (>100%, noch lösungsmittelhaltig, Reinheit 90% laut LC/MS).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.22 min, m/z = 486 [M+H]+.
Beispiel 142A
(+/-)-2-(Trimethylsilyl)ethyl-(lRlS',2RlS,,5lS,R)-2-(hydroxymethyl)-5-{ [4-oxo-6-(trifluormethyl)- l,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl]mefhyl}cyclopentancarboxylat (Racemat)
Figure imgf000157_0001
Zu 2.89 g (5.36 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 141A in 80 ml THF unter Argon wurden bei 0°C 13.4 ml einer 2 M Lösung von Boran-Dimethylsulfid in THF langsam hinzugegeben. Nach 5 min Rühren bei 0°C und 1 h bei RT wurden 400 ml 0.1 N Salzsäure hinzugefügt und das Gemisch zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Es wurden 2.93 g (Reinheit 75%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 472 [M+H]+.
Beispiel 143A
(+/-)-2-(Trimethylsilyl)ethyl-(lR5,2R5,55R)-2-formyl-5-{ [4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzo- triazin-3(4 /)-yl]methyl}cyclopentancarboxylat (Racemat)
Figure imgf000158_0001
Zu 2.93 g (5.28 mmol, Reinheit 85%) der Verbindung aus Beispiel 142A in 70 ml Dichlormethan wurden 4.48 g (10.56 mmol) l,l,l-Triacetoxy-l,l-dihydro-l,2-benziodoxol-3(l//)-on (Dess- Martin-Periodinan) gegeben und das Gemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Di- chlormethan verdünnt und einmal mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (300 g Kieselgel, Laufmittel Cyclo- hexan/Ethylacetat 8:2). Es wurden 1.59 g (63% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.34 min, m/z = 470 [M+H]+. Beispiel 144A
5-(2-Phenylethoxy)- 1 -benzofuran
Figure imgf000158_0002
Zu einem Gemisch von 1.06 g (7.90 mmol) l-Benzofuran-5-ol und 2.18 g (15.82 mmol) Kalium- carbonat in 40 ml Acetonitril wurden 2.69 g (9.48 mmol, Reinheit 90%) 2-Phenylefhyltrifluor- methansulfonat [Lit.: Synthesis 1985, 8, 759-760] gegeben und das Gemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Ethylacetat verdünnt und einmal mit Wasser gewaschen. Die wässrige Phase wurde einmal mit Ethylacetat rückextrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und ein- geengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (120 g Kieselgel, Lauf mit- tel Cyclohexan/Ethylacetat 95:5). Es wurden 1.39 g (72% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 7.93 (s, 1H), 7.47 (d, 1H), 7.38-7.15 (m, 6H), 6.92- 6.83 (m, 2H), 4.20 (t, 2H), 3.05 (t, 2H). LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 2.62 min, m/z = 239 [M+H]+.
Beispiel 145A
(+/-)-2-(Trimethylsilyl)ethyl-(lR5,25R,5R5)-2-{ [4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl]methyl } -5- { [5-(2-phenylethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] carbonyl } cyclopentancarboxylat
(Racemat)
Figure imgf000159_0001
Zu einem Gemisch von 883 mg (3.63 mmol, Reinheit 98%) der Verbindung aus Beispiel 144A in 30 ml THF unter Argon wurden bei -70°C Innentemperatur 2.3 ml (3.63 mmol) einer Butyllithium- Lösung (1.6 M in THF) langsam hinzugegeben, und das Gemisch wurde 5 min bei -70°C und weitere 30 min bei -30°C gerührt. Anschließend wurde wieder auf -70°C abgekühlt, und es wurde eine Lösung von 1.59 g (3.30 mmol, Reinheit 98%) der Verbindung aus Beispiel 143A in 20 ml THF hinzugefügt. Nach weiteren 20 min Rühren bei -70°C wurden gesättigte wässrige Ammoniumchlorid-Lösung und Wasser hinzugesetzt, und es wurde zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde in 30 ml Dichlormethan aufgenommen, mit 598 mg (1.41 mmol) 1,1,1-Tri- acetoxy-l,l-dihydro-l,2-benziodoxol-3(l /)-on (Dess-Martin-Periodinan) versetzt und 15 min bei RT gerührt. Anschließend wurde mit Dichlormethan verdünnt und einmal mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen. Die wässrige Phase wurde einmal mit Dichlormethan rückextrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet, filtriert und eingeengt. Der Rückstand wurde mittels Säulenchromatographie gereinigt (200 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 85: 15). Es wurden 695 mg (19% d. Th., Reinheit 69%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.56 min, m/z = 706 [M+H]+. Beispiel 146A [2-(4-Oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] {2-oxo-2-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-ylmethoxy)-l- benzofur-3-yl] ethyl } malonsäure
Figure imgf000160_0001
Zu einer Lösung von 405 mg (0.61 mmol) der Verbindung aus Beispiel 65A in 2.8 ml Dichlor- methan wurden bei RT 1.4 ml (18.1 mmol) Trinuoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 1 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 86% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.86 min, m/z = 550 [M+H]+. Beispiel 147A [2-(6-Isobutoxy- 1 -benzofur-3 -yl)-2-oxoethyl] [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] malonsäure
Figure imgf000160_0002
Zu einer Lösung von 326 mg (0.53 mmol) der Verbindung aus Beispiel 68A in 2.4 ml Dichlor- methan wurden bei RT 1.2 ml (15.6 mmol) Trifluoressigsäure gegeben und das Reaktionsgemisch 2 h bei RT gerührt. Anschließend wurde das Gemisch eingeengt und der Rückstand im Vakuum getrocknet. Die Titelverbindung wurde in einer Reinheit von 89% laut LC/MS erhalten und direkt in der Folgestufe eingesetzt.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.03 min, m/z = 508 [M+H]+.
Ausführungsbeispiele :
Beispiel 1
(+/-)-4- { 5- [2-(2-Chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000161_0001
Eine Lösung von 17 mg (0.03 mmol) der Verbindung aus Beispiel 26A in 2 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 14 mg (78% d. Th., Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, 1H), 8.41-6.98 (m, 12H), 4.63-4.42 (m, 2H), 4.33-4.12 (m, 2H), 3.84-2.74 (m, 5H), 2.35-1.92 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.25 min, m/z = 546 [M+H]+.
Beispiel 2
(+/-)-4- { 5- [2-(4-Chlorphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000162_0001
Eine Lösung von 11 mg (0.02 mmol) der Verbindung aus Beispiel 27A in 2 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrie- rungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 10 mg (77% d. Th., Reinheit 80%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.23 (dd, 2H), 8.13-8.04 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.40-7.36 (m, 4H), 7.31 (d, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.58- 4.43 (m, 2H), 4.24 (t, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.26-3.19 (m, 1H), 3.07 (t, 2H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.29- 2.17 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 546 [M+H]+.
Beispiel 3
(+/-)-4- { 5- [2-(4-Methoxyphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000162_0002
Eine Lösung von 88 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 28A in 4 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 58 mg (72% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.04 (m, IH), 7.97-7.89 (m, IH), 7.81 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.30 (d, IH), 7.26 (d, 2H), 7.13 (dd, IH), 6.88 (d, 2H), 4.59-4.42 (m, 2H), 4.19 (t, 2H), 3.73 (s, 3H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.04-2.93 (m, 3H), 2.30-2.17 (m, IH), 2.14-2.01 (m, IH). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 542 [M+H]+.
Beispiel 4
(+/-)-4- { 5- [2-(2-Methylphenyl)ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000163_0001
Eine Lösung von 60 mg (0.11 mmol) der Verbindung aus Beispiel 29A in 5 ml Dioxan wurde 6 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präpa- rativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 38 mg (68% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.44 (br. s, IH), 8.26 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.12- 8.05 (m, IH), 7.96-7.89 (m, IH), 7.81 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.33 (d, IH), 7.30-7.25 (m, IH), 7.21- 7.10 (m, 4H), 4.59-4.41 (m, 2H), 4.22 (t, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.07 (t, 2H), 3.02-2.92 (m, IH), 2.34 (s, 3H), 2.30-2.16 (m, IH), 2.13-2.02 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 526 [M+H]+.
Beispiel 5 (+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)- 1 -benzofur-2-yl]butansäure
Figure imgf000163_0002
Eine Lösung von 82 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 30A in 3 ml Dioxan wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Ethylacetat 9: 1). Es wurden 51 mg (65% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.13- 8.04 (m, 1H), 7.97-7.89 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.15 (dd, 1H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.94-3.83 (m, 4H), 3.49-3.39 (m, 1H), 3.38-3.32 (m, 2H, teilweise verdeckt), 3.27-3.18 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.13-1.96 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.43-1.28 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.87 min, m/z = 506 [M+H]+. Beispiel 6
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-{5-[2-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl)- ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl Jbutansäure
Figure imgf000164_0001
Eine Lösung von 103 mg (0.15 mmol, Reinheit 80%) der Verbindung aus Beispiel 31A in 1.5 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9: 1). Es wurden 53 mg (70% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.82 (br. s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.06 (dd, 2H), 3.84 (dd, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.30-3.20 (m, 3H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.28-2.20 (m, 1H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.74-1.61 (m, 5H), 1.29-1.19 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.04 min, m/z = 520 [M+H]+. Beispiel 7
(+/-)-4-[5-(2-Cyclopentylethoxy)4-benzofur-2-yl]-4-o^
ethyl]butansäure
Figure imgf000165_0001
Eine Lösung von 132 mg (0.22 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 32A in 2.5 ml Dioxan wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9: 1). Es wurden 94 mg (86% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.47 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.02 (dd, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.22 (dd, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.27-2.20 (m, 1H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.98-1.93 (m, 1H), 1.83-1.74 (m, 4H), 1.62-1.49 (m, 4H), 1.21-1.12 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 504 [M+H]+. Beispiel 8
(+/-)-4-[5-(Cyclohexylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000165_0002
Eine Lösung von 465 mg (0.75 mmol, Reinheit 88%) der Verbindung aus Beispiel 33A in 4.5 ml Dioxan wurde 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6; zwei Injektionen) gereinigt. Es wurden 310 mg (82% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.82 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.27 (d, IH), 7.14 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.82 (d, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.27-2.20 (m, IH), 2.12-2.04 (m, IH), 1.84 (d, 2H), 1.77-1.65 (m, 4H), 1.31-1.16 (m, 3H), 1.13-1.02 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.32 min, m/z = 504 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
246 mg der Verbindung aus Beispiel 8 wurden in 3 ml Acetonitril und 3 ml Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 9 und 10) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 290 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 25°C; Laufmittel 70% Ethanol / 30% Acetonitril + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 17 min]:
Beispiel 9
(-)-4-[5-(Cyclohexylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 87 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -33.5°, 589 nm, c = 0.37 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.81 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.27 (d, IH), 7.13 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.82 (d, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.28-2.20 (m, IH), 2.12-2.04 (m, IH), 1.84 (d, 2H), 1.77-1.65 (m, 4H), 1.31-1.16 (m, 3H), 1.13-1.02 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 504 [M+H]+.
Beispiel 10
(+)-4-[5-(Cyclohexylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2) Es wurden 90 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +30.1°, 589 nm, c = 0.38 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.45 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.81 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.27 (d, IH), 7.13 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.82 (d, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.28-2.20 (m, 1H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.84 (d, 2H), 1.77-1.65 (m, 4H), 1.31-1.16 (m, 3H), 1.13-1.02 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 504 [M+H]+.
Beispiel 11 (+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(4,4,4-trifluorbutoxy)-l-benzofur- 2-yl]butansäure
Figure imgf000167_0001
Eine Lösung von 173 mg (0.31 mmol) der Verbindung aus Beispiel 34A in 8 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 91 mg (57% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.46 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 7.17 (dd, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.09 (dd, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.48-2.40 (m, 2H), 2.29-2.20 (m, 1H), 2.13-2.04 (m, 1H), 2.01-1.94 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.13 min, m/z = 518 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
77 mg der Verbindung aus Beispiel 11 wurden in 4 ml Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 12 und 13) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 230 nm; Temperatur: 25°C; Eluent: 30% Acetonitril + 0.2% Essigsäure / 70% Ethanol + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 10 min] :
Beispiel 12
(-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] -4- [5-(4,4,4-trifluorbutoxy)- 1 -benzofur- 2-yl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 24 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 98%; [a]D 20 = -25.8°, 589 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.50 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.85 (s, IH), 7.63 (d, IH), 7.31 (d, IH), 7.17 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.09 (dd, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.48-2.40 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, IH), 2.13-2.04 (m, IH), 2.01-1.94 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 518 [M+H]+.
Beispiel 13
(+)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(4,4,4-trifluorbutoxy)-l-benzofur- 2-yl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 23 mg (ehem. Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 98%; [a]D 20 = +23.9°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.50 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.85 (s, IH), 7.63 (d, IH), 7.31 (d, IH), 7.17 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.09 (dd, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.48-2.40 (m, 2H), 2.28-2.19 (m, IH), 2.13-2.04 (m, IH), 2.01-1.94 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 518 [M+H]+.
Beispiel 14
(+/-)-4- { 5- [(4-Fluortetrahydro-2ii-pyran-4-yl)methoxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000168_0001
Eine Lösung von 275 mg (0.48 mmol) der Verbindung aus Beispiel 35A in 13 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 195 mg (77% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.85 (s, IH), 7.64 (d, IH), 7.35 (d, IH), 7.20 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 4.18 (s, IH), 4.13 (s, IH), 3.81-3.76 (m, 2H), 3.65-3.58 (m, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.24 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.29-2.20 (m, IH), 2.13-2.04 (m, IH), 1.97-1.79 (m, 4H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.98 min, m/z = 524 [M+H]+.
Beispiel 15
(+/-)-4-[5-(3-Cyanopropoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000169_0001
Eine Lösung von 164 mg (0.32 mmol) der Verbindung aus Beispiel 36A in 8 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 74 mg (48% d. Th., Reinheit 96%) der Titel- Verbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.84 (s, IH), 7.64 (d, IH), 7.33 (d, IH), 7.17 (dd, IH), 4.58-4.45 (m, 2H), 4.09 (dd, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.24 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.29 (t, 2H), 2.29-2.20 (m, IH), 2.13- 2.03 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.95 min, m/z = 475 [M+H]+. Beispiel 16
(+/-)-4-[5-(Cyclopentylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000170_0001
Eine Lösung von 479 mg (0.90 mmol) der Verbindung aus Beispiel 37A in 28 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 9: 1). Es wur- den 284 mg (62% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.47 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.89 (d, 2H), 3.44 (d, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.37-2.20 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.83-1.75 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 4H), 1.40-1.32 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 490 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
236 mg der Verbindung aus Beispiel 16 wurden in 5 ml Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 17 und 18) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 290 nm; Injektionsvolu- men: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin, iso- kratisch, Laufzeit 14 min] :
Beispiel 17
(-)-4- [5-(Cyclopentylmethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 79 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -33.7°, 589 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (dd, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.37-2.20 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.83-1.75 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 4H), 1.40-1.32 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 490 [M+H]+. Beispiel 18
(+)-4-[5-(Cyclopentylmethoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-^^
ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 84 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 97%; [a]D 20 = +30.9°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.82 (s, IH), 7.61 (d, IH), 7.29 (d, IH), 7.14 (dd, IH), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.37-2.20 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, IH), 1.83-1.75 (m, 2H), 1.64-1.51 (m, 4H), 1.40-1.32 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 490 [M+H]+.
Beispiel 19
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(2-phenylethoxy)-l-benzofur- 2-yl]butansäure
Figure imgf000171_0001
Methode A:
Eine Lösung von 3.23 g (5.29 mmol, Reinheit 91 %) der Verbindung aus Beispiel 38A in 50 ml Di- oxan wurde 6 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 2.20 g (81 % d. Th., Reinheit 84%) der Titelverbindung erhalten. Methode B:
88 mg (0.13 mmol) der Verbindung aus Beispiel 20A wurden in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan zunächst 1 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, die Lösung erneut zur Trockene eingeengt und der Rückstand im Vakuum weiter getrocknet. Es wurden 35 mg (49% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.38-7.29 (m, 5H), 7.26-7.20 (m, 1H), 7.13 (dd, 1H), 4.59-4.41 (m, 2H), 4.24 (t, 2H), 3.48-3.39 (m, 1H), 3.26-3.18 (m, 1H), 3.07 (t, 2H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.18 min, m/z = 512 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
2.20 g der Verbindung aus Beispiel 19 wurden in 30 ml Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 20 und 21) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 30 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolu- men: 0.11 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 62% Acetonitril / 30% Methanol / 8% Acetonitril-Eis- essig-Gemisch (95:5), isokratisch, Laufzeit 15 min] :
Beispiel 20
(-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] -4- [5-(2-phenylethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] - butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 870 mg (ehem. Reinheit 97%) der Titel Verbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -30.3°, 589 nm, c = 0.35 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.38-7.29 (m, 5H), 7.27-7.19 (m, 1H), 7.13 (dd, 1H), 4.59-4.42 (m, 2H), 4.24 (t, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.07 (t, 2H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.13-2.02 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.19 min, m/z = 512 [M+H]+.
Beispiel 21
(+)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(2-phenylethoxy)-l-benzofur-2-yl]- butansäure (Enantiomer 2) Es wurden zunächst 800 mg noch verunreinigtes Produkt erhalten, welches mittels präparativer HPLC (Methode 6) nachgereinigt wurde. Es wurden so 681 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99.6%; [a]D 20 = +34.1°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.11- 8.05 (m, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.37-7.29 (m, 5H), 7.26-7.20 (m, 1H), 7.13 (dd, 1H), 4.59-4.43 (m, 2H), 4.24 (t, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.07 (t, 2H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.14-2.01 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 512 [M+H]+.
Beispiel 22
(+/-)-4- { 5- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000173_0001
Eine Lösung von 463 mg (0.83 mmol) der Verbindung aus Beispiel 39A in 20 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 233 mg (55% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.46 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.93 (dd, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.26-7.21 (m, 3H), 5.14 (s, 2H), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.43 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.02-2.94 (m, 1H), 2.28- 2.19 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.14 min, m/z = 516 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
223 mg der Verbindung aus Beispiel 22 wurden in 5 ml eines l: l-Gemisches aus Methanol und Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 23 und 24) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 30 ml/min; Detektion: 290 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 21°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Ethanol + 0.2% Diethylamin, isokratisch, Laufzeit 14 min]: Beispiel 23
(+)-4- { 5- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 101 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99.6%; [a]D 20 = +28.4°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.93 (dd, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.26-7.21 (m, 3H), 5.14 (s, 2H), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.43 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.02-2.94 (m, 1H), 2.28- 2.19 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.14 min, m/z = 516 [M+H]+.
Beispiel 24
0-4- { 5- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 63 mg (ehem. Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99.6%; [a]D 20 = -31.2°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.93 (dd, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.26-7.21 (m, 3H), 5.14 (s, 2H), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.43 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.02-2.94 (m, 1H), 2.28- 2.19 (m, 1H), 2.13-2.03 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.14 min, m/z = 516 [M+H]+.
Beispiel 25
(+/-)-4- { 5- [(3,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000175_0001
Eine Lösung von 735 mg (0.96 mmol, Reinheit 94%) der Verbindung aus Beispiel 22A in 10 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mehrfach mit Dichlormethan ver- setzt, jeweils wieder zur Trockene eingeengt und schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 523 mg (90% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12- 8.05 (m, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.66 (t, 2H), 7.49 (dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.25 (dd, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.59-4.43 (m, 2H), 3.48-3.39 (m, 1H), 3.27-3.19 (m, 1H), 3.03- 2.93 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.14-2.02 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 566 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
483 mg der Verbindung aus Beispiel 25 wurden in 70 ml eines Gemisches aus Ethanol und Aceto- nitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 26 und 27) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 230 nm; Injektionsvolumen: 1.5 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 50% Acetonitril / 50% Ethanol + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 16 min] :
Beispiel 26
(-)-4- { 5- [(3 ,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 230 mg (ehem. Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -26.9°, 589 nm, c = 0.40 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.68-7.64 (m, 2H), 7.48 (dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.25 (dd, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.59-4.43 (m, 2H), 3.43 (dd, 1H), 3.22 (dd, 1H), 3.03-2.94 (m, 1H), 2.29-2.20 (m, 1H), 2.15-2.04 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 566 [M+H]+. Beispiel 27
(+)-4- { 5- [(3 ,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure (Enantiomer 2) Es wurden 172 mg (ehem. Reinheit 98%) der Titel Verbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +24.6°, 589 nm, c = 0.35 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.05 (m, IH), 7.97-7.90 (m, IH), 7.85 (s, IH), 7.76 (d, IH), 7.68-7.64 (m, 2H), 7.48 (dd, IH), 7.38 (d, IH), 7.25 (dd, IH), 5.19 (s, 2H), 4.59-4.43 (m, 2H), 3.43 (dd, IH), 3.22 (dd, IH), 3.03-2.94 (m, IH), 2.29-2.20 (m, IH), 2.15-2.04 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 566 [M+H]+.
Beispiel 28
(+/-)-4-[5-(Benzyloxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]- butansäure
Figure imgf000176_0001
Eine Lösung von 77 mg (0.12 mmol) der Verbindung aus Beispiel 6A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dioxan versetzt, wieder eingeengt und der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 62 mg (99% d. Th., Reinheit 95%) der Titel- Verbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.13-8.05 (m, IH), 7.97-7.90 (m, IH), 7.84 (s, IH), 7.64 (d, IH), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.45-7.31 (m, 4H), 7.23 (dd, IH), 5.16 (s, 2H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.02-2.93 (m, IH), 2.29- 2.20 (m, IH), 2.13-2.04 (m, IH). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.13 min, m/z = 498 [M+H]+. Trennung der Enantiomere:
43 mg der Verbindung aus Beispiel 28 wurden in 4 ml Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 29 und 30) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 30 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektions- volumen: 0.25 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Ethanol / 70% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 13 min] :
Beispiel 29
(-)-4- [5-(Benzyloxy 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 1) Es wurden 17 mg (ehem. Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -15.3°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.45-7.31 (m, 4H), 7.23 (dd, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.29- 2.20 (m, 1H), 2.13-2.04 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 498 [M+H]+.
Beispiel 30
(+)-4-[5-(Benzyloxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 2) Es wurden 13 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +29.6°, 589 nm, c = 0.30 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 7.45-7.31 (m, 4H), 7.23 (dd, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.44 (dd, 1H), 3.23 (dd, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.29- 2.20 (m, 1H), 2.13-2.04 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 498 [M+H] Beispiel 31
(+/-)-4- [5-(Heptyloxy) - 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl] - butansäure
Figure imgf000178_0001
Eine Lösung von 112 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 23 A in 1 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 10: 1). Es wurden 17 mg (20% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, IH), 8.25 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.13-8.05 (m, IH), 7.97-7.90 (m, IH), 7.81 (s, IH), 7.60 (d, IH), 7.27 (d, IH), 7.13 (dd, IH), 4.59-4.43 (m, 2H), 4.01 (t, 2H), 3.49-3.38 (m, IH), 3.26-3.17 (m, IH), 3.02-2.93 (m, IH), 2.29-2.18 (m, IH), 2.13-2.02 (m, IH), 1.80-1.67 (m, 2H), 1.49-1.20 (m, 8H), 0.92-0.83 (m, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.37 min, m/z = 506 [M+H]+. Beispiel 32
(+/ -)-4- { 5- [(3-Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000178_0002
Eine Lösung von 240 mg (0.34 mmol) der Verbindung aus Beispiel 24A in 4 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 190 mg (99% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.47 (br. s, IH), 8.26 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.12- 8.05 (m, IH), 8.04-7.97 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, IH), 7.87-7.80 (m, 2H), 7.64 (t, 2H), 7.52-7.45 (m, IH), 7.40 (d, 2H), 7.25 (dd, IH), 5.21 (s, 2H), 4.61-4.41 (m, 2H), 3.44 (dd, IH), 3.23 (dd, IH), 3.03-2.92 (m, IH), 2.29-2.17 (m, IH), 2.14-2.02 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.92 min, m/z = 541 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
110 mg der Verbindung aus Beispiel 32 wurden in 5 ml eines Gemisches aus Methanol, Acetonitril und Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 33 und 34) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Ethanol, isokratisch, Laufzeit 14 min]:
Beispiel 33 0-4- { 5- [(3 -Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)- yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 32 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 97%; [a]D 20 = -12.4°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.05 (m, IH), 8.04-7.98 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, IH), 7.88-7.82 (m, 2H), 7.69-7.60 (m, 2H), 7.50-7.47 (m, IH), 7.43-7.36 (m, 2H), 7.25 (dd, IH), 5.21 (s, 2H), 4.59-4.44 (m, 2H), 3.44 (m, IH), 3.23 (m, IH), 3.01-2.94 (m, IH), 2.29-2.18 (m, IH), 2.14-2.03 (m, IH).
LC/MS (Methode 1): Rt = 0.93 min; MS (ESIpos): m/z = 541 [M+H]+.
Beispiel 34 (+)-4- { 5- [(3 -Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3(4//)- yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 33 mg (ehem. Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +18.2°, 589 nm, c = 0.35 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.46 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 8.04-7.98 (m, 2H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.88-7.82 (m, 2H), 7.69-7.60 (m, 2H), 7.50-7.47 (m, 1H), 7.43-7.36 (m, 2H), 7.25 (dd, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.59-4.44 (m, 2H), 3.44 (m, 1H), 3.23 (m, 1H), 3.01-2.94 (m, 1H), 2.29-2.18 (m, 1H), 2.14-2.03 (m, 1H). LC/MS (Methode 1): Rt = 0.91 min; MS (ESIpos): m/z = 541 [M+H]+.
Beispiel 35
(+/ -)-4- { 5- [(4-Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000180_0001
Eine Lösung von 204 mg (0.29 mmol) der Verbindung aus Beispiel 25A in 3 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 7 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 50 mg (32% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.42 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 8.01-7.82 (m, 5H), 7.65 (d, 1H), 7.55 (d, 2H), 7.38 (d, 2H), 7.25 (dd, 1H), 5.23 (s, 2H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.48-3.39 (m, 1H), 3.27-3.18 (m, 1H), 3.04-2.90 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.14-2.02 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1): Rt = 0.88 min; MS (ESIpos): m/z = 541 [M+H]+. Beispiel 36
(+/ -)-4- [5-(2, 1 ,3 -Benzoxadiazol-5-ylmethoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin- 3 (AH) -y 1) ethy 1] butans äure
Figure imgf000181_0001
Auf einer Metall-Multititerplatte wurden 38 mg (0.18 mmol) 5-(Brommethyl)-2,l,3-benzoxadiazol vorgelegt und mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A, gelöst in 0.7 ml DMF, versetzt. Anschließend wurden 104 mg (0.75 mmol) Kaliumcarbonat hinzugegeben. Das Gemisch wurde 18 h bei 70°C geschüttelt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch filtriert und das Fil- trat eingeengt. Der Rückstand wurde mit 1.6 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt und zunächst 18 h bei RT, dann 18 h bei 80°C geschüttelt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch eingeengt. Der Rückstand wurde in 0.7 ml DMSO aufgenommen und mittels präpara- tiver HPLC (Methode 10) gereinigt. Es wurden 21 mg (26% d. Th., Reinheit 100%) der Titelver- bindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.17 min; MS (ESIpos): m/z = 540 [M+H]+.
Beispiel 37
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(3-phenylpropoxy)-l-benzofur- 2-yl]butansäure
Figure imgf000181_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 36 mg (0.18 mmol) (3-Brompropyl)- benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 42 mg (54% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 526 [M+H]+.
Beispiel 38
(+/-)-4-(5-{ [4-(Methylsulfonyl)benzyl]oxy}-l-benzofur-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzo- triazin- 3 (AH) -y 1) ethy 1] butans äure
Figure imgf000182_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 45 mg (0.18 mmol) l-(Brommethyl)-4- (methylsulfonyl)benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 20 mg (23% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 576 [M+H]+.
Beispiel 39
(+/-) -Oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-(5-{ [3-(trifluormethyl)benzyl]oxy}- 1 -benzofur-2-yl)butansäure
Figure imgf000182_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 43 mg (0.18 mmol) 1 -(Brommethyl) -3- (trifluormethyl)benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 30 mg (35% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 566 [M+H]+.
Beispiel 40
(+/-)-4- { 5- [(4-Methylpentyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000183_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 30 mg (0.18 mmol) l-Brom-4-methyl- pentan mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 30 mg (40% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 41
(+/-)-4- { 5- [(5-Methylhexyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000183_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 32 mg (0.18 mmol) l-Brom-5-methyl- hexan mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 31 mg (41% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 42
(+/-) -Oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-(5-{3-[4-(trifluormethyl)phenyl]- propoxy } - 1 -benzofur-2-yl)butansäure
Figure imgf000184_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 48 mg (0.18 mmol) l-(3-Brompropyl)- 4-(trifluormethyl)benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 21 mg (24% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.27 min; MS (ESIpos): m/z = 594 [M+H]+.
Beispiel 43
(+/-)-4-{5-[(3-Fluorbenzyl)oxy]-l-benzofur-2-yl}-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000184_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 34 mg (0.18 mmol) 1 -(Brommethyl) -3- fluorbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 27 mg (34% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]+.
Beispiel 44
(+/-)-4-Oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-(5-{ [4-(trifluormethyl)benzyl]oxy}- 1 -benzofur-2-yl)butansäure
Figure imgf000185_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 43 mg (0.18 mmol) l-(Brommethyl)-4- (trifluormethyl)benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 27 mg (30% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 566 [M+H]+.
Beispiel 45
(+/-)-4- { 5- [(2-Fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000185_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 34 mg (0.18 mmol) l-(Brommethyl)-2- fluorbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 27 mg (30% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.18 min; MS (ESIpos): m/z = 516 [M+H]+.
Beispiel 46
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4- { 5-[3 -(2-thienyl)propoxy] - 1 -benzo- fur-2-yl } butansäure
Figure imgf000186_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 37 mg (0.18 mmol) 2-(3-Brompropyl)- thiophen mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 18 mg (22% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]+.
Beispiel 47
(+/-) -Oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[5-(pyridin-4-ylmethoxy)-l-benzo- fur-2-yl]butansäure
Figure imgf000186_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 31 mg (0.18 mmol) 4-(Brommethyl)- pyridin mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 1.4 mg (2% d. Th., Reinheit 83%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 0.90 min; MS (ESIpos): m/z = 499 [M+H]+. Beispiel 48
(+/-)-4-(5-{ [2-Methyl-3-(trifluormethyl)benzyl]oxy}-l-benzofur-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3- benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000187_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 46 mg (0.18 mmol) l-(Brommethyl)-2- methyl-3-(trifluormethyl)benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 14 mg (16% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 580 [M+H]+.
Beispiel 49
(+/-)-4- { 5- [(2,5-Difluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000187_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 37 mg (0.18 mmol) 2-(Brommethyl)- 1,4-difluorbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 18 mg (21% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.19 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]+.
Beispiel 50
(+/-)-4-{5-[(3-Chlorbenzyl)oxy]-l-benzofur-2-yl}-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000188_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 37 mg (0.18 mmol) 1 -(Brommethyl) -3- chlorbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 11 mg (14% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]+.
Beispiel 51
(+/-)-4- { 5- [(3-Methylbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000188_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 33 mg (0.18 mmol) 1 -(Brommethyl) -3- methylbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 8 mg (10% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 512 [M+H]+.
Beispiel 52
(+/-)-4- { 5- [(2,4-Difluorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000189_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 37 mg (0.18 mmol) l-(Brommethyl)- 2,4-difluorbenzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 16 mg (19% d. Th., Rein- heit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.19 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]+.
Beispiel 53
(+/-)-4-[5-(4-Cyanobutoxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000189_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 29 mg (0.18 mmol) 5-Brompentanonitril mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 7A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 10 mg (13% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 489 [M+H]+.
Beispiel 54
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-{6-[2-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl)- ethoxy] - 1 -benzofur-2-yl Jbutansäure
Figure imgf000190_0001
Eine Lösung von 79 mg (0.11 mmol, Reinheit 75%) der Verbindung aus Beispiel 50A in 1 ml Dioxan wurde 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9: 1). Es wurden 44 mg (81% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.45 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.58-4.42 (m, 2H), 4.11 (t, 2H), 3.84 (dd, 2H), 3.45-3.35 (m, 1H), 3.31-3.26 (m, 2H), 3.23-3.15 (m, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.71 (t, 3H), 1.64 (d, 2H), 1.31-1.15 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.05 min, m/z = 520 [M+H]+.
Beispiel 55
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4- [6-(pentyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] - butansäure
Figure imgf000190_0002
Eine Lösung von 198 mg (0.31 mmol) der Verbindung aus Beispiel 45A in 3.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dioxan versetzt, wieder eingeengt, danach mehrfach mit Dichlormethan versetzt und jeweils wieder zur Trockene eingeengt. Nach ab- schließendem Trocknen im Vakuum wurden 137 mg (90% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12- 8.05 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.59-4.40 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.39 (dd, IH), 3.20 (dd, IH), 3.03-2.91 (m, IH), 2.29-2.17 (m, IH), 2.13- 2.00 (m, IH), 1.81-1.68 (m, 2H), 1.48-1.27 (m, 4H), 0.91 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 478 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
128 mg der Verbindung aus Beispiel 55 wurden in 5 ml Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 56 und 57) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Inj ektions Volumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Methanol / 70% Acetonitril + 0.2% Essigsäure, iso- kratisch, Laufzeit 20 min] : Beispiel 56
(-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] -4- [6-(pentyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 54 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -38.0°, 589 nm, c = 0.39 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.38 (br. s, IH), 8.26 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.97-7.90 (m, IH), 7.86 (s, IH), 7.68 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.59-4.40 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.39 (dd, IH), 3.19 (dd, IH), 3.03-2.91 (m, IH), 2.29-2.17 (m, IH), 2.13-2.01 (m, IH), 1.81-1.69 (m, 2H), 1.47-1.30 (m, 4H), 0.91 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 478 [M+H]+. Beispiel 57
(+)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(pentyloxy)-l-benzofur-2-yl]butan- säure (Enantiomer 2)
Es wurden 60 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +29.7°, 589 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.39 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.86 (s, IH), 7.68 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.59-4.41 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.39 (dd, IH), 3.18 (dd, IH), 3.03-2.91 (m, IH), 2.30-2.15 (m, IH), 2.13-1.99 (m, IH), 1.81-1.69 (m, 2H), 1.46-1.31 (m, 4H), 0.91 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 478 [M+H]+. Beispiel 58
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl] -4-(6-propoxy- 1 -benzofur-2-yl)butan- säure
Figure imgf000192_0001
Eine Lösung von 94 mg (0.16 mmol) der Verbindung aus Beispiel 46 A in 4 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dioxan versetzt, wieder eingeengt und der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 65 mg (93% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.11-8.07 (m, 1H), 7.95-7.91 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.58-4.41 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.37 (dd, 1H), 3.19 (dd, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.13-2.00 (m, 1H), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.00 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.10 min, m/z = 450 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
47 mg der Verbindung aus Beispiel 58 wurden in 30 ml eines Gemisches aus Methanol, Aceto- nitril, Isopropanol und Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 59 und 60) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μηι, 250 mm x 30 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 3 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Ethanol / 30% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 11 min]:
Beispiel 59
4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4-(6-propoxy-l-benzofur-2-yl)butansäure
(Enantiomer 1)
Es wurden 19 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Rt = 3.99 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 30°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.11-8.07 (m, IH), 7.95-7.91 (m, IH), 7.87 (d, IH), 7.69 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.99 (dd, IH), 4.58-4.41 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.37 (dd, IH), 3.19 (dd, IH), 3.03-2.92 (m, IH), 2.28-2.19 (m, IH), 2.13-2.00 (m, IH), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.00 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 450 [M+H]+.
Beispiel 60 4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-(6-propoxy-l-benzofur-2-yl)butansäure
(Enantiomer 2)
Es wurden 9 mg (ehem. Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 6.59 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 30°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.11-8.07 (m, IH), 7.95-7.91 (m, IH), 7.87 (d, IH), 7.69 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.99 (dd, IH), 4.58-4.41 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.37 (dd, IH), 3.19 (dd, IH), 3.03-2.92 (m, IH), 2.28-2.19 (m, IH), 2.13-2.00 (m, IH), 1.81-1.73 (m, 2H), 1.00 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 450 [M+H]
Beispiel 61
(+/-)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan-
Figure imgf000193_0001
Eine Lösung von 89 mg (0.14 mmol) der Verbindung aus Beispiel 47A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT, Einengen und mehrfachem Wiederaufnehmen und -einengen mit Dioxan, Dichlormethan und Acetonitril wurde der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 57 mg (86% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.58-4.43 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.39 (dd, 1H), 3.19 (dd, 1H), 3.03-2.93 (m, 1H), 2.29-2.18 (m, 1H), 2.14- 2.02 (m, 1H), 1.79-1.69 (m, 2H), 1.52-1.40 (m, 2H), 0.95 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 464 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
40 mg der Verbindung aus Beispiel 61 wurden in 5 ml Methanol/Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 62 und 63) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μηι, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 1 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Methanol / 70% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 18 min] :
Beispiel 62
(-)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
(Enantiomer 1) Es wurden 16 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -37.0°, 589 nm, c = 0.30 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.30-7.25 (m, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.58-4.43 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.39 (dd, 1H), 3.19 (dd, 1H), 3.03-2.93 (m, 1H), 2.29-2.18 (m, 1H), 2.14- 2.02 (m, 1H), 1.79-1.69 (m, 2H), 1.52-1.40 (m, 2H), 0.95 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.19 min, m/z = 464 [M+H]+.
Beispiel 63
(+)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
(Enantiomer 2) Es wurden 14 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +32.2°, 589 nm, c = 0.30 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.06 (m, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.87 (s, IH), 7.69 (d, IH), 7.30-7.25 (m, IH), 6.98 (dd, IH), 4.58-4.43 (m, 2H), 4.06 (t, 2H), 3.39 (dd, IH), 3.19 (dd, IH), 3.03-2.93 (m, IH), 2.29-2.18 (m, IH), 2.14- 2.02 (m, IH), 1.79-1.69 (m, 2H), 1.52-1.40 (m, 2H), 0.95 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.19 min, m/z = 464 [M+H]+.
Beispiel 64
(+/-)-4-[6-(Hexyloxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure
Figure imgf000195_0001
Eine Lösung von 109 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 48A in 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde mit Dioxan versetzt, erneut eingeengt und der Rück- stand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 72 mg (84% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.26 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.97-7.90 (m, IH), 7.86 (s, IH), 7.68 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.58-4.41 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.44-3.34 (m, IH), 3.23-3.14 (m, IH), 3.04-2.90 (m, IH), 2.29-2.17 (m, IH), 2.15- 2.01 (m, IH), 1.80-1.67 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 2H), 1.35-1.27 (m, 4H), 0.91-0.85 (m, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 492 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
53 mg der Verbindung aus Beispiel 64 wurden in 5 ml Ethanol/ Acetonitril gelöst und mittels prä- parativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 65 und 66) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injek- tionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Ethanol / 30% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 22 min] :
Beispiel 65
(-)-4- [6-(Hexyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 21 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -35.7°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.11- 8.06 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.60-4.42 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.44-3.33 (m, 1H), 3.18 (dd, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.14-2.00 (m, 1H), 1.81-1.67 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 2H), 1.36-1.27 (m, 4H), 0.92-0.82 (m, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 66
(+)-4-[6-(Hexyloxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 2)
Es wurden 21 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = +88.9°, 436 nm, c = 0.06 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.59-4.40 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.44-3.33 (m, 1H), 3.18 (dd, 1H), 3.03-2.90 (m, 1H), 2.29-2.16 (m, 1H), 2.14- 2.00 (m, 1H), 1.80-1.67 (m, 2H), 1.48-1.39 (m, 2H), 1.38-1.28 (m, 4H), 0.92-0.84 (m, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 67
(+/-)-4- [6-(Heptyloxy)- 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] - butansäure
Figure imgf000197_0001
Eine Lösung von 113 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 49A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT, Einengen und mehrfachem Wiederaufnehmen und -einengen mit Dioxan und Dichlormethan wurde der Rückstand schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 47 mg (34% d. Th., Reinheit 63%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.89 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.96 (dd, 1H), 4.58-4.44 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.52-3.50 (m, 1H), 3.39 (dd, 1H), 3.17 (dd, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.28-2.18 (m, 1H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.79-1.70 (m, 2H), 1.48-1.22 (m, 6H), 1.04 (d, 1H), 0.84 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 506 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
47 mg der Verbindung aus Beispiel 67 wurden in 5 ml Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 68 und 69) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μηι, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Inj ektions Volumen: 0.4 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Methanol / 30% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 20 min] :
Beispiel 68
(-)-4-[6-(Heptyloxy)-l-benzofur-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 9 mg (ehem. Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = -99.7°, 436 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.19 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.89 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.96 (dd, 1H), 4.58-4.44 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.52-3.50 (m, 1H), 3.39 (dd, 1H), 3.17 (dd, 1H), 3.02-2.91 (m, 1H), 2.28-2.18 (m, 1H), 2.12-2.01 (m, 1H), 1.79-1.70 (m, 2H), 1.48-1.22 (m, 6H), 1.04 (d, 1H), 0.84 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 506 [M+H]+. Beispiel 69
(+)-4 6-(Heptyloxy) -benzofur-2-yl]-4-oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 2) Es wurden 8 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = +101.2°, 436 nm, c = 0.26 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.43 (br. s, IH), 8.26 (d, IH), 8.19 (d, IH), 8.12-8.05 (m, IH), 7.97-7.89 (m, IH), 7.86 (s, IH), 7.68 (d, IH), 7.28 (s, IH), 6.96 (dd, IH), 4.58-4.44 (m, 2H), 4.05 (t, 2H), 3.52-3.50 (m, IH), 3.39 (dd, IH), 3.17 (dd, IH), 3.02-2.91 (m, IH), 2.28-2.18 (m, IH), 2.12-2.01 (m, IH), 1.79-1.70 (m, 2H), 1.48-1.22 (m, 6H), 1.04 (d, IH), 0.84 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 70
(+/-)-4- { 6- [(4-Methylpentyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000198_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 30 mg (0.18 mmol) l-Brom-4-methyl- pentan mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 34 mg (46% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 71
(+/ -)-4- [6-(3 -Cyclohexylpropoxy)- 1 -benzofur-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000199_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 40 mg (0.18 mmol) (3-Brompropyl)- cyclohexan mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43 A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 31 mg (38% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.31 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]+.
Beispiel 72
(+/-)-4- { 6- [(5-Methylhexyl)oxy] - 1 -benzofur-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000199_0002
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 32 mg (0.18 mmol) l-Brom-5-methyl- hexan mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43 A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 29 mg (38% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.28 min; MS (ESIpos): m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 73
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(2-phenylethoxy)-l-benzofur- 2-yl]butansäure
Figure imgf000200_0001
Analog der in Beispiel 36 beschriebenen Methode wurden 33 mg (0.18 mmol) (2-Bromefhyl)- benzol mit 85 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 43 A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 10 mg (12% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.20 min; MS (ESIpos): m/z = 512 [M+H]+.
Beispiel 74
(+/-)-4-Oxo-2 2-(4-oxo ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-{6-[2-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl)- efhoxy] -1 -benzofur-3-yl Jbutansäure
Figure imgf000200_0002
Eine Lösung von 163 mg (0.22 mmol, Reinheit 75%) der Verbindung aus Beispiel 71 A in 2 ml Dioxan wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9: 1). Es wurden 90 mg (76% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95 (dd, IH), 7.88 (s, IH), 7.33 (d, IH), 6.99 (dd, IH), 4.57-4.44 (m, 2H), 4.07 (dd, 2H), 3.83 (dd, 2H), 3.39 (d, IH), 3.26-3.18 (m, 2H), 3.01-2.95 (m, IH), 2.29-2.18 (m, IH), 2.09-2.01 (m, IH), 1.71-1.62 (m, 5H), 1.28-1.18 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.06 min, m/z = 520 [M+H]+. Beispiel 75
(+/-)-4-[6-(2-Cyclopentylethoxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000201_0001
Eine Lösung von 142 mg (0.25 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 72A in 3 ml Dioxan wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9: 1). Es wurden 91 mg (70% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95 (dd, IH), 7.88 (s, IH), 7.30 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.44 (m, 2H), 4.03 (dd, 2H), 3.39 (d, IH), 3.20 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.27-2.09 (m, IH), 2.09-2.00 (m, IH), 1.99-1.93 (m, IH), 1.82-1.73 (m, 4H), 1.64-1.46 (m, 4H), 1.23-1.11 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 504 [M+H]+. Beispiel 76
(+/-)-4- [6-(2-Cyclohexylethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000201_0002
Eine Lösung von 117 mg (0.21 mmol) der Verbindung aus Beispiel 73A in 6.5 ml Dioxan wurde 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 43 mg (40% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.87 (d, IH), 7.30 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.44 (m, 2H), 4.05 (dd, 2H), 3.40 (d, IH), 3.20 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.27-2.09 (m, IH), 2.09-2.01 (m, IH), 1.74 (d, 2H), 1.69-1.61 (m, 5H), 1.50-1.44 (m, IH), 1.27-1.12 (m, 3H), 0.96 (dd, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 518 [M+H]+.
Beispiel 77
(+/-)-4-{6-[(3-Chlorbenzyl)oxy]-l-benzofur-3-yl}-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000202_0001
Eine Lösung von 115 mg (0.20 mmol) der Verbindung aus Beispiel 74A in 6 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 26 mg (25% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, IH), 8.97 (s, IH), 8.26 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95-7.88 (m, 2H), 7.55 (br. s, IH), 7.45-7.40 (m, 4H), 7.10 (dd, IH), 5.20 (s, 2H), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.37 (dd, IH), 3.21 (dd, IH), 3.01-2.94 (m, IH), 2.29-2.18 (m, IH), 2.09- 2.01 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 532 [M+H]+. Beispiel 78 (+/-)-4- [6-(Cyclopentylmethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000203_0001
Eine Lösung von 448 mg (0.76 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 75A in 21 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Säulenchromatographie gereinigt (80 g Kieselgel, Laufmittel Dichlormethan/ Methanol 97:3). Das so gewonnene Produkt wurde dann mittels präparativer HPLC (Methode 6) nachgereinigt. Es wurden 157 mg (42% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.41-3.34 (m, 1H), 3.25-3.17 (m, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.40-2.16 (m, 2H), 2.11-1.98 (m, 1H), 1.85-1.72 (m, 2H), 1.67-1.48 (m, 4H), 1.39-1.29 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.28 min, m/z = 490 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
110 mg der Verbindung aus Beispiel 78 wurden in 10 ml Ethanol und 1 ml Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 79 und 80) [Säule: Daicel Chiralcel OZ-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 15 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.6 ml; Temperatur: 40°C; Eluent: 50% Isohexan / 50% Ethanol + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 15 min] :
Beispiel 79
(-)-4- [6-(Cyclopentylmethoxy)- 1 -benzofur-3-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 41 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99%; [a]D 20 = -6.5°, 589 nm, c = 0.25 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.39 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.13-8.05 (m, 1H), 7.97-7.91 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.41-3.34 (m, IH), 3.25-3.16 (m, IH), 3.03-2.92 (m, IH), 2.39-2.16 (m, 2H), 2.11-1.99 (m, IH), 1.84-1.72 (m, 2H), 1.68-1.48 (m, 4H), 1.42-1.28 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.25 min, m/z = 490 [M+H]+. Beispiel 80 (+)-4-[6-(Cyclopentylmethoxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 48 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99%; [a]D 20 = +2.0°, 589 nm, c = 0.28 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (dd, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.97-7.91 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.29 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.58-4.43 (m, 2H), 3.90 (d, 2H), 3.41-3.34 (m, IH), 3.25-3.16 (m, IH), 3.03-2.92 (m, IH), 2.39-2.16 (m, 2H), 2.11- 2.00 (m, IH), 1.84-1.73 (m, 2H), 1.68-1.48 (m, 4H), 1.40-1.29 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.25 min, m/z = 490 [M+H]+.
Beispiel 81 (+/-)-4-[6-(Cyclohexylmethoxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure
Figure imgf000204_0001
Eine Lösung von 360 mg (0.57 mmol, Reinheit 87%) der Verbindung aus Beispiel 76A in 3 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 294 mg (97% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.34 min, m/z = 504 [M+H]+. Trennung der Enantiomere:
294 mg der Verbindung aus Beispiel 81 wurden in 60 ml eines Gemisches aus Acetonitril und Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 82 und 83) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Ethanol, isokratisch, Laufzeit 11 min]:
Beispiel 82
(+)-4- [6-(Cyclohexylmethoxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 28 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99.9%; [a]20 = +41.1°, 365 nm, c = 0.16 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.93 (dd, IH), 7.87 (d, IH), 7.29 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.84 (d, 2H), 3.40 (d, IH), 3.20 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.26-2.18 (m, IH), 2.09-2.01 (m, IH), 1.84-1.64 (m, 6H), 1.30-1.16 (m, 3H), 1.10-1.01 (dd, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 504 [M+H]+.
Beispiel 83
(-)-4-[6-(Cyclohexylmethoxy)-l -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo-l ,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2) Es wurden 25 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 83%; [a]20 = -49.9°, 365 nm, c = 0.25 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.94 (dd, IH), 7.87 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.44 (m, 2H), 3.84 (d, 2H), 3.40 (d, IH), 3.20 (dd, IH), 3.01-2.95 (m, IH), 2.26-2.18 (m, IH), 2.09-2.01 (m, IH), 1.84-1.64 (m, 6H), 1.31-1.16 (m, 3H), 1.10-1.01 (dd, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 504 [M+H] Beispiel 84
(+/-)-4-[6-(Benzyloxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]- butansäure
Figure imgf000206_0001
Eine Lösung von 80 mg (0.12 mmol) der Verbindung aus Beispiel 54A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dioxan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 72 mg eines Rohprodukts erhalten, von welchen 30 mg in Acetonitril verrührt wurden. Der vorhandene Feststoff wurde abfiltriert, mit Acetonitril gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 25 mg (41% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.36 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.50-7.45 (m, 2H), 7.43-7.30 (m, 4H), 7.07 (dd, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.58-4.43 (m, 2H), 3.37 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11- 1.98 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 498 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
40 mg der Verbindung aus Beispiel 84 wurden in 5 ml Acetonitril unter Zusatz von 3 ml Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiel 85) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 29% Acetonitril / 67% Ethanol / 4% Acetonitril mit 5% Eisessig, isokratisch, Laufzeit 12 min]:
Beispiel 85
(+)-4- [6-(Benzyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 8 mg (ehem. Reinheit 93%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [α]20 = +1.3°, 546 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.39 (br. s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.51-7.45 (m, 2H), 7.44-7.30 (m, 4H), 7.07 (dd, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.59-4.42 (m, 2H), 3.41-3.34 (m, 1H), 3.25-3.15 (m, 1H), 3.04-2.92 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 498 [M+H]+.
Das entsprechende Enantiomer 2 wurde in einer Ausbeute von 10 mg mit einer ehem. Reinheit von 60% laut LC/MS und einem ee-Wert von 98% erhalten:
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 498 [M+H]+. Beispiel 86
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4-(6-propoxy- 1 -benzofur-3 -yl)butan- saure
Figure imgf000207_0001
Eine Lösung von 109 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 62A in 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 80 mg (96% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.11-8.07 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.57-4.43 (m, 2H), 3.98 (t, 2H), 3.57 (s, 1H), 3.36 (dd, 1H), 3.20 (dd, 1H), 3.03-2.93 (m, 1H), 2.27-2.18 (m, 1H), 2.11-2.00 (m, 1H), 1.80-1.71 (m, 2H), 0.99 (t, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 450 [M+H]+. Trennung der Enantiomere:
65 mg der Verbindung aus Beispiel 86 wurden in 2 ml Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 87 und 88) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 30 ml/min; Detektion: 270 nm; Injektionsvolu- men: 0.1 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 70% Methanol / 30% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 13 min] :
Beispiel 87
(-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl] -4-(6-propoxy- 1 -benzofur-3-yl)butansäure
(Enantiomer 1) Es wurden 23 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -7.2°, 589 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, IH), 8.94 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.11-8.07 (m, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.43 (m, 2H), 3.98 (t, 2H), 3.57 (s, IH), 3.36 (dd, IH), 3.20 (dd, IH), 3.03-2.93 (m, IH), 2.27-2.18 (m, IH), 2.11-2.00 (m, IH), 1.80-1.71 (m, 2H), 0.99 (t, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.11 min, m/z = 450 [M+H]+.
Beispiel 88
(+)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4//)-yl)ethyi] -4-(6-propoxy-l-benzofur-3-yl)butan- säure (Enantiomer 2) Es wurden 22 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 97%; [a]D 20 = +4.1°, 589 nm, c = 0.36 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, IH), 8.94 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.11-8.07 (m, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.57-4.43 (m, 2H), 3.98 (t, 2H), 3.57 (s, IH), 3.36 (dd, IH), 3.20 (dd, IH), 3.03-2.93 (m, IH), 2.27-2.18 (m, IH), 2.11-2.00 (m, IH), 1.80-1.71 (m, 2H), 0.99 (t, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.11 min, m/z = 450 [M+H] Beispiel 89
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl] -4- [6-(pentyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] - butansäure
Figure imgf000209_0001
Eine Lösung von 117 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 63 A in 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 87 mg (97% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.95-7.90 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.51-4.44 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.36 (dd, 1H), 3.20 (dd, 1H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.28-2.17 (m, 1H), 2.12-1.98 (m, 1H), 1.77-1.70 (m, 2H), 1.45-1.31 (m, 4H), 0.9 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.26 min, m/z = 478 [M+H]+. Trennung der Enantiomere:
74 mg der Verbindung aus Beispiel 89 wurden in 5 ml Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 90 und 91) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Inj ektions Volumen: 0.2 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Methanol + 0.2% Essigsäure, iso- kratisch, Laufzeit 5.5 min]:
Beispiel 90
4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4-[6-(pentyloxy)-l-benzofur-3-yl]butansäure
(Enantiomer 1)
Es wurden 18 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. Rt = 6.90 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 30°C; Eluent: 50% Methanol + 0.2% Eisessig / 50% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, IH), 8.94 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.06 (m, IH), 7.95-7.90 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.51-4.44 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.36 (dd, IH), 3.20 (dd, IH), 3.02-2.93 (m, IH), 2.28-2.17 (m, IH), 2.12-1.98 (m, IH), 1.77-1.70 (m, 2H), 1.45-1.31 (m, 4H), 0.9 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.26 min, m/z = 478 [M+H]+.
Beispiel 91 4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(pentyloxy)-l-benzofur-3-yl]butansäure
(Enantiomer 2)
Es wurden 15 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 8.03 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 30°C; Eluent: 50% Methanol + 0.2% Eisessig / 50% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, IH), 8.94 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.06 (m, IH), 7.95-7.90 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.51-4.44 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.36 (dd, IH), 3.20 (dd, IH), 3.02-2.93 (m, IH), 2.28-2.17 (m, IH), 2.12-1.98 (m, IH), 1.77-1.70 (m, 2H), 1.45-1.31 (m, 4H), 0.9 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.26 min, m/z = 478 [M+H]+.
Beispiel 92
(+/ -)-4- { 6- [(3,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-3 -yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000210_0001
Eine Lösung von 100 mg (0.14 mmol) der Verbindung aus Beispiel 64A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 71 mg (78% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.97 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.33 (dd, 1H), 3.21 (m, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.30 min, m/z = 568 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
51 mg der Verbindung aus Beispiel 92 wurden in 10 ml Acetonitril/Ethanol angelöst, filtriert und dann mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 93 und 94) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 1 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Ethanol, iso- kratisch, Laufzeit 20 min] :
Beispiel 93
4- { 6- [(3,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-3 -yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 23 mg (ehem. Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 8.91 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 220 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.33 (dd, 1H), 3.21 (m, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 568 [M+H]+. Beispiel 94
4- { 6- [(3,4-Dichlorbenzyl)oxy] - 1 -benzofur-3 -yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 22 mg (ehem. Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten. Rt = 13.23 min, ee-Wert = 94% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 220 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.87 (m, 2H), 7.76 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.58-4.42 (m, 2H), 3.33 (dd, 1H), 3.21 (m, 1H), 3.01-2.95 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11-1.99 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 568 [M+H]+. Beispiel 95
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)- 1 -benzofur-3-yl]butansäure
Figure imgf000212_0001
Methode A:
Eine Lösung von 88 mg (0.13 mmol) der Verbindung aus Beispiel 65A in 1.5 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Dieser Rückstand wurde dann mit Dioxan versetzt, wieder eingeengt und nochmals im Vakuum getrocknet. Es wurden 40 mg (55% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.91 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.58-4.43 (m, 2H), 3.94-3.82 (m, 4H), 3.42-3.33 (m, 1H), 3.32-3.29 (m, 2H, verdeckt), 3.25-3.14 (m, 1H), 3.04-2.91 (m, 1H), 2.29-2.15 (m, 1H), 2.11-1.95 (m, 2H), 1.75-1.63 (m, 2H), 1.44-1.21 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.03 min, m/z = 506 [M+H]+.
Methode B:
Eine Lösung von 408 mg (0.66 mmol, Reinheit 89%) der Verbindung aus Beispiel 146A in 3.5 ml Dioxan wurde 1 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand im Vakuum getrocknet. Es wurden 223 mg (80% d. Th., Reinheit 83%) der Titelverbindung erhalten.
Trennung der Enantiomere:
322 mg der Verbindung aus Beispiel 95 wurden in 24 ml eines Ethanol/Methanol-Gemisches gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 96 und 97) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 230 nm; Injektionsvolumen: 0.12 ml; Temperatur: 25°C; Eluent 52% Acetonitril / 40% Ethanol / 8% Acetonitril-Eisessig-Gemisch (95:5), isokratisch, Laufzeit 7.5 min]: Beispiel 96
(+)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)-l-benzofur-3-yl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 112 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = +65.7°, 365 nm, c = 0.25 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.34 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.23 (dd, 2H), 8.09 (t, 1H), 7.96-7.84 (m, 2H), 7.30 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.62-4.39 (m, 2H), 3.94-3.81 (m, 4H), 3.42- 3.28 (m, 3H, teilweise verdeckt), 3.26-3.12 (m, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 2.29-2.16 (m, 1H), 2.10- 1.96 (m, 2H), 1.73-1.63 (m, 2H), 1.42-1.26 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.03 min, m/z = 506 [M+H]+. Beispiel 97
(-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-ylmethoxy)- l-benzofur-3-yl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 110 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 98%; [α]20 = -62.8°, 365 nm, c = 0.27 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.32 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.93 (t, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.93- 3.83 (m, 4H), 3.42-3.31 (m, 3H), 3.20 (dd, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 2.29-2.16 (m, 1H), 2.10-1.98 (m, 2H), 1.74-1.64 (m, 2H), 1.41-1.26 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.03 min, m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 98
(+/-)-4-[6-(Hexyloxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure
Figure imgf000214_0001
Eine Lösung von 120 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 66A in 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dioxan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 83 mg (85% d. Th., Reinheit 93%) der Titelverbindung er- halten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.36 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.58-4.42 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.40-3.32 (m, 1H), 3.24-3.16 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.29-2.17 (m, 1H), 2.11-1.98 (m, 1H), 1.78-1.68 (m, 2H), 1.48-1.37 (m, 2H), 1.35-1.26 (m, 4H), 0.91-0.83 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.33 min, m/z = 492 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
69 mg der Verbindung aus Beispiel 98 wurden in 2 ml Methanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 99 und 100) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 230 nm; Injektionsvolu- men: 0.3 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 45% Acetonitril / 50% Methanol / 5% Acetonitril-Eis- essig-Gemisch (95:5), isokratisch, Laufzeit 10 min]: Beispiel 99
(-)-4- [6-(Hexyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 24 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -3.8°, 589 nm, c = 0.32 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.37 (br. s, IH), 8.94 (s, IH), 8.25 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.04 (m, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.87 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.59-4.42 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.41-3.32 (m, IH), 3.23-3.15 (m, IH), 3.02-2.91 (m, IH), 2.29-2.16 (m, IH), 2.13-1.99 (m, IH), 1.78-1.67 (m, 2H), 1.48-1.38 (m, 2H), 1.36-1.26 (m, 4H), 0.91-0.83 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.33 min, m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 100
(+)-4-[6-(Hexyloxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 2)
Es wurden 22 mg (ehem. Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +2.3°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.36 (br. s, IH), 8.93 (s, IH), 8.25 (dd, IH), 8.20 (d, IH), 8.12-8.06 (m, IH), 7.96-7.90 (m, IH), 7.87 (d, IH), 7.28 (d, IH), 6.97 (dd, IH), 4.59-4.43 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.40-3.32 (m, IH), 3.24-3.14 (m, IH), 3.02-2.92 (m, IH), 2.28-2.17 (m, IH), 2.11-1.98 (m, IH), 1.78-1.66 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 2H), 1.37-1.27 (m, 4H), 0.91-0.84 (m, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.33 min, m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 101
(+/-)-4- [6-(Heptyloxy)- 1 -benzofur-3-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)ethyl] - butansäure
Figure imgf000215_0001
Eine Lösung von 175 mg (0.26 mmol) der Verbindung aus Beispiel 67A in 3 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 2.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dioxan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Anschließend wurde der Rückstand in THF aufgenommen und mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: AcetonitrilA asser mit 0.05% Ameisensäure). Es wurden 46 mg (34% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.13-8.09 (m, 1H), 7.98-7.92 (m, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.59-4.45 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.39 (dd, 1H), 3.22 (dd, 1H), 3.05-2.98 (m, 1H), 2.28-2.20 (m, 1H), 2.10-2.04 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.46-1.30 (m, 8H), 0.88 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.39 min, m/z = 506 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
37 mg der Verbindung aus Beispiel 101 wurden in 5 ml Methanol/ Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 102 und 103) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 30 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Acetonitril / 30% Methanol, isokra- tisch, Laufzeit 12 min] :
Beispiel 102
0-4- [6-(Heptyloxy)- 1 -benzofur-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 16 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -7.4°, 589 nm, c = 0.30 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.27 (d, 1H), 8.22 (d, 1H), 8.13-8.09 (m, 1H), 7.98-7.92 (m, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.30 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.59-4.45 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.39 (dd, 1H), 3.22 (dd, 1H), 3.05-2.98 (m, 1H), 2.28-2.20 (m, 1H), 2.10-2.04 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.46-1.30 (m, 8H), 0.88 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.39 min, m/z = 506 [M+H] Beispiel 103
(+)-4-[6-(Heptyloxy)-l-benzofur-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 2)
Es wurden 16 mg (ehem. Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +1.7°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, IH), 8.96 (s, IH), 8.27 (d, IH), 8.22 (d, IH), 8.13-8.09 (m, IH), 7.98-7.92 (m, IH), 7.89 (d, IH), 7.30 (d, IH), 6.99 (dd, IH), 4.59-4.45 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.39 (dd, IH), 3.22 (dd, IH), 3.05-2.98 (m, IH), 2.28-2.20 (m, IH), 2.10-2.04 (m, IH), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.46-1.30 (m, 8H), 0.88 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.39 min, m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 104
(+/-)-4-(6-Isobutoxy-l-benzofur-3-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan-
Figure imgf000217_0001
Methode A:
Eine Lösung von 120 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 68A in 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 3 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 56 mg (60% d. Th., Reinheit 97%) der Titelver- bindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.40 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.26 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.11-8.09 (m, IH), 7.95-7.92 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.29 (d, IH), 6.69 (dd, IH), 4.56-4.45 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.37 (dd, IH), 3.21 (dd, IH), 3.00-2.95 (m, IH), 2.26-2.19 (m, IH), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.00 (d, 6H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.18 min, m/z = 464 [M+H]+. Methode B:
Eine Lösung von 277 mg (0.49 mmol, Reinheit 89%) der Verbindung aus Beispiel 147A in 3 ml Dioxan wurde 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurden 255 mg der Titelverbindung erhalten (>100% d. Th., Reinheit ca. 93%, noch Lösungsmittel enthaltend). Trennung der Enantiomere:
255 mg der Verbindung aus Beispiel 104 wurden in 8 ml eines Ethanol/ Acetonitril -Gemisches (1 : 1) gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 105 und 106) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 15 ml/ min; Detektion: 270 nm; Injektionsvolumen: 0.3 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 95% Ethanol / 5% Acetonitril + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 10 min]:
Beispiel 105
(+)-4-(6-Isobutoxy-l-benzofur-3-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure (Enantiomer 1)
Es wurden 69 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = +82.0°, 365 nm, c = 0.27 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.11-8.08 (m, 1H), 7.95-7.92 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.56-4.45 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.36 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 3.00-2.95 (m, 1H), 2.26-2.19 (m, 1H), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.00 (d, 6H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.18 min, m/z = 464 [M+H]+.
Beispiel 106
(-)-4-(6-Isobutoxy- 1 -benzofur-3 -yl)-4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4//)-yl)efhyl]butan- säure (Enantiomer 2)
Es wurden 78 mg (ehem. Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 95%; [a]20 = -78.3°, 365 nm, c = 0.29 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.11-8.08 (m, 1H), 7.95-7.92 (m, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.99 (dd, 1H), 4.56-4.45 (m, 2H), 3.80 (d, 2H), 3.36 (dd, 1H), 3.21 (dd, 1H), 3.00-2.95 (m, 1H), 2.26-2.19 (m, 1H), 2.08-2.01 (m, 2H), 1.00 (d, 6H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.18 min, m/z = 464 [M+H]+. Beispiel 107 (+/-)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-3-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butan- säure
Figure imgf000219_0001
Eine Lösung von 38 mg (0.06 mmol) der Verbindung aus Beispiel 69 A in 1 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 2 d bei RT und dann 5.5 h unter Rückfluss ge- rührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Es wurden 29 mg (92% d. Th., Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.33 (br. s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.93 (t, 1H), 7.88 (d, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.61-4.42 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.42-3.32 (m, 1H), 3.20 (dd, 1H), 3.02-2.90 (m, 1H), 2.29-2.16 (m, 1H), 2.11-1.98 (m, 1H), 1.78-1.66 (m, 2H), 1.51-1.37 (m, 2H), 0.94 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.21 min, m/z = 464 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
21 mg der Verbindung aus Beispiel 107 wurden in 5 ml Ethanol gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 108 und 109) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Inj ektions Volumen: 0.2 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Ethanol / 30% Acetonitril, isokratisch, Laufzeit 10 min]:
Beispiel 108 (+)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-3-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
(Enantiomer 1) Es wurden 5 mg (ehem. Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = +46.2°, 365 nm, c = 0.15 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (500 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.35 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (dd, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.96-7.92 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.29 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.60-4.41 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.40-3.34 (m, IH), 3.21 (dd, IH), 3.02-2.93 (m, IH), 2.27-2.17 (m, IH), 2.09-1.99 (m, IH), 1.76-1.67 (m, 2H), 1.50-1.40 (m, 2H), 0.94 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 464 [M+H]+.
Beispiel 109
(-)-4-(6-Butoxy-l-benzofur-3-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 4 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 94%; [a]20 = -40.5°, 365 nm, c = 0.35 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.39 (br. s, IH), 8.95 (s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.12-8.07 (m, IH), 7.96-7.91 (m, IH), 7.88 (d, IH), 7.29 (d, IH), 6.98 (dd, IH), 4.58-4.42 (m, 2H), 4.02 (t, 2H), 3.41-3.33 (m, IH), 3.25-3.17 (m, IH), 3.02-2.92 (m, IH), 2.29-2.16 (m, IH), 2.10-1.98 (m, IH), 1.77-1.66 (m, 2H), 1.51-1.40 (m, 2H), 0.94 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.21 min, m/z = 464 [M+H]+.
Beispiel 110
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(2-phenylethoxy)-l-benzofur- 3-yl]butansäure
Figure imgf000220_0001
Eine Lösung von 39 mg (0.06 mmol) der Verbindung aus Beispiel 70A in 1 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde zunächst 16 h bei RT und dann 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mit Dichlormethan versetzt, erneut eingeengt und im Vakuum getrocknet. Anschließend wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.05% Ameisensäure). Es wurden 11 mg (35% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.39 (br. s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.25 (dd, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.90 (m, 1H), 7.87 (d, 1H), 7.37-7.28 (m, 5H), 7.26-7.19 (m, 1H), 6.98 (dd, 1H), 4.59-4.41 (m, 2H), 4.25 (t, 2H), 3.43-3.35 (m, 1H), 3.20 (dd, 1H), 3.07 (t, 2H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.28-2.16 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.20 min, m/z = 512 [M+H]+.
Beispiel 111 (+/ -)-4- [6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000221_0001
Eine Lösung von 507 mg (0.80 mmol) der Verbindung aus Beispiel 85 A in 10 ml Dioxan wurde mit 10 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde in einer Mikrowellenapparatur zunächst 10 min auf 113°C, dann 10 min auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/W asser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 222 mg (58% d. Th., Reinheit 99%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.91 (m, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 4.59-4.43 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.56-3.47 (m, 1H), 3.42-3.26 (m, 1H), 3.02-2.90 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.14- 2.01 (m, 1H), 1.33-1.20 (m, 1H), 0.63-0.54 (m, 2H), 0.40-0.30 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 478 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
222 mg der Verbindung aus Beispiel 111 wurden in 4 ml Acetonitril/Methanol (7:3) gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 112 und 113) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Temperatur: 20°C; Eluent: 70% Acetonitril + 0.2% Essigsäure / 30% Methanol, isokratisch, Laufzeit 16 min] :
Beispiel 112 (+)-4-[6-(Cyclopropylmethoxy)-l-benzothiophen-2-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 52 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = +33.6°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.05 (m, 1H), 7.97-7.86 (m, 2H), 7.56 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 4.59-4.43 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.51 (dd, 1H), 3.32-3.27 (m, 1H), 3.02-2.89 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.13-2.01 (m, 1H), 1.34-1.20 (m, 1H), 0.64-0.53 (m, 2H), 0.38-0.30 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 478 [M+H]+.
Beispiel 113 (-)-4- [6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 52 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -38.0°, 589 nm, c = 0.26 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.40 (br. s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.86 (m, 2H), 7.56 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 4.60-4.42 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.51 (dd, 1H), 3.31-3.26 (m, 1H), 3.01-2.89 (m, 1H), 2.30-2.16 (m, 1H), 2.13-2.00 (m, 1H), 1.34- 1.21 (m, 1H), 0.63-0.55 (m, 2H), 0.38-0.31 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 478 [M+H]+.
Beispiel 114 (+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(2-phenylethoxy)-l-benzothio- phen-2-yl]butansäure
Figure imgf000223_0001
Eine Lösung von 71 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 86A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/ Wasser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 30 mg (50% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.37-7.30 (m, 4H), 7.23 (dd, 1H), 7.07 (dd, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 4.30 (dd, 2H), 3.51 (dd, 1H), 3.31 (dd, 1H), 3.09 (dd, 2H), 2.99-2.93 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.12-2.03 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 528 [M+H]+.
Beispiel 115
(+/ -)-4- [6-(2-Cyclopropyl-2-oxoethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzo- triazin- 3 (AH) -y 1) ethy 1] butans äure
Figure imgf000223_0002
Eine Lösung von 125 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 87A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/ Wasser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 37 mg (38% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 3.32 (dd, 1H), 3.13-3.07 (m, 1H), 3.01-2.93 (m, 1H), 2.28-2.18 (m, 2H), 2.12-2.04 (m, 1H), 1.18 (t, 1H), 1.01-0.92 (m, 5H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.00 min, m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 116
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-(6-propoxy-l-benzothiophen-2-yl)- butansäure
Figure imgf000224_0001
Eine Lösung von 43 mg (0.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 88A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/ Wasser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 14 mg (39% d. Th., Reinheit 88%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.39 (br. s, 1H), 8.34-8.30 (m, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.97-7.85 (m, 2H), 7.59 (d, 1H), 7.08 (dd, 1H), 4.60-4.43 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.56-3.45 (m, 1H), 3.42-3.32 (m, 1H), 3.03-2.91 (m, 1H), 2.30-2.18 (m, 1H), 2.15-2.02 (m, 1H), 1.83-1.69 (m, 2H), 1.00 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.15 min, m/z = 466 [M+H]+.
Beispiel 117
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-{6-[tetrahydrofuran-2-ylmethoxy]-l- benzothiophen-2-yl } butansäure
Figure imgf000225_0001
Eine Lösung von 111 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 89 A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/ Wasser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 24 mg (28% d. Th., Reinheit 98%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.38 (br. s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.88 (m, 2H), 7.61 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 4.62-4.39 (m, 2H), 4.24-4.15 (m, 1H), 4.12-3.97 (m, 2H), 3.85-3.75 (m, 1H), 3.74-3.64 (m, 1H), 3.56-3.46 (m, 1H), 3.32-3.27 (m, 1H), 3.02-2.89 (m, 1H), 2.30-2.17 (m, 1H), 2.14-1.97 (m, 2H), 1.96-1.78 (m, 2H), 1.77-1.61 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.04 min, m/z = 508 [M+H]+. Beispiel 118 (+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(pentyloxy)-l-benzothiophen- 2-yl]butansäure
Figure imgf000225_0002
Eine Lösung von 56 mg (0.09 mmol) der Verbindung aus Beispiel 90A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/ Wasser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 15 mg (34% d. Th., Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 4.06 (dd, 2H), 3.51 (dd, 1H), 3.00-2.93 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.12-2.01 (m, 2H), 1.79-1.72 (m, 2H), 1.45-1.33 (m, 4H), 0.91 (t, 3H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 494 [M+H]+.
Beispiel 119
(+/ -)-4- { 6- [Oxetan-2-ylmethoxy] - 1 -benzothiophen-2-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000226_0001
Auf einer Metall-Multi titerplatte wurden 18.1 mg (0.12 mmol) 2-(Brommethyl)oxetan vorgelegt und mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A, gelöst in 0.6 ml DMF, versetzt. Anschließend wurden 69 mg (0.50 mmol) Kaliumcarbonat hinzugegeben, und das Gemisch wurde 18 h bei 70°C geschüttelt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat eingeengt. Der Rückstand wurde in 0.4 ml Dioxan aufgenommen und in eine Kunststoff -Multititer- platte überführt. Nach Zugabe von 0.4 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan wurde in einer Mikrowellenapparatur 7 min auf 150°C erhitzt. Anschließend wurden weitere 0.15 ml der 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan hinzugefügt, und es wurde nochmals 10 min in der Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT wurde das Gemisch eingeengt, der Rückstand in 0.6 ml DMF aufgenommen und mittels präparativer HPLC (Methode 10) gerei- nigt. Es wurden 5 mg (10% d. Th., Reinheit 95%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.08 min; MS (ESIpos): m/z = 494 [M+H]+. Beispiel 120
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(4,4,4-trifluorbutoxy)-l-benzo- thiophen-2-yl]butansäure
Figure imgf000227_0001
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 23 mg (0.12 mmol) 4-Brom- 1,1,1- trifluorbutan mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84 A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 5 mg (10% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 534 [M+H]+.
Beispiel 121
(+/ -)-4- [6-(Cyclobutylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000227_0002
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 18 mg (0.12 mmol) (Brommethyl)- cyclobutan mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 13 mg (26% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.23 min; MS (ESIpos): m/z = 492 [M+H]+.
Beispiel 122
(+/-)-4- [6-(3 -Methylbutoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000228_0001
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 18 mg (0.12 mmol) l-Brom-3-methyl- butan mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 15 mg (29% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.25 min; MS (ESIpos): m/z = 494 [M+H]+.
Beispiel 123
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)ethyl] -4- [6-(pyridin-4-ylmethoxy)- 1 -benzo- thiophen-2-yl]butansäure
Figure imgf000228_0002
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 21 mg (0.12 mmol) 4-(Brommethyl)- pyridin mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurde 1 mg (1.8% d. Th., Reinheit 92%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 0.97 min; MS (ESIpos): m/z = 515 [M+H]+.
Beispiel 124
(+/-)-4- { 6- [2-(3 -Methoxyphenyl)-2-oxoethoxy] - 1 -benzothiophen-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 - benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000229_0001
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 27 mg (0.12 mmol) 2-Brom-l-(3- methoxyphenyl)ethanon mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 5 mg (9% d. Th., Reinheit 94%) der Titelverbindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.16 min; MS (ESIpos): m/z = 572 [M+H]+.
Beispiel 125
(+/ -)-4- { 6- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 -benzothiophen-2-yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000229_0002
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 23 mg (0.12 mmol) l-(Brommethyl)-4- rluorbenzol mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 4 mg (8% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.21 min; MS (ESIpos): m/z = 532 [M+H]+.
Beispiel 126
(+/-) -(6-Butoxy-l-benzothiophen-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]- butansäure
Figure imgf000230_0001
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 16 mg (0.12 mmol) 1-Brombutan mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 9 mg (18% d. Th., Reinheit 100%) der Titelver- bindung erhalten.
LC/MS (Methode 4): Rt = 1.22 min; MS (ESIpos): m/z = 480 [M+H]+.
Beispiel 127
(+/-)-4-(6-Ethoxy-l-benzothiophen-2-yl)-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]- butansäure
Figure imgf000230_0002
Analog der in Beispiel 119 beschriebenen Methode wurden 13 mg (0.12 mmol) Bromethan mit 58 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 84A umgesetzt. Nach Reinigung des Rohprodukts mittels präparativer HPLC (Methode 10) wurden 6 mg (13% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten. LC/MS (Methode 4): Rt = 1.13 min; MS (ESIpos): m/z = 452 [M+H]+. Beispiel 128
(+/-)-4-[6-(Cyclopropylmethoxy)-l-benzothiophen-2-yl]-4-oxo-2-{2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4 /)-yl] ethyl } butansäure
Figure imgf000231_0001
Eine Lösung von 471 mg (0.54 mmol, Reinheit 81 %) der Verbindung aus Beispiel 91A in 10 ml Dioxan wurde mit 10 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Ein- engen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/W asser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 138 mg (47% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.41 (br. s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.45-8.35 (m, 2H), 8.32 (s, 1H), 7.89 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.09 (dd, 1H), 4.62-4.46 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.51 (dd, 1H), 3.33-3.26 (m, 1H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.30-2.19 (m, 1H), 2.15-2.00 (m, 1H), 1.32-1.19 (m, 1H), 0.63-0.55 (m, 2H), 0.39-0.30 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 546 [M+H]+. Trennung der Enantiomere:
128 mg der Verbindung aus Beispiel 128 wurden in 2.5 ml Acetonitril gelöst, mit 2 ml Ethanol versetzt und dann mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 129 und 130) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/ min; Detektion: 320 nm; Injektionsvolumen: 0.4 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 50% Ethanol / 50% Acetonitril + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 28 min]:
Beispiel 129 4-[6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- { 2- [4-oxo-6-(trifluormefhyl)- 1 ,2,3 - benzotriazin-3(4 /)-yl]ethyl}butansäure (Enantiomer 1)
Es wurden 34 mg (ehem. Reinheit 96%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 8.39 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 50% Ethanol + 0.2% Eisessig / 50% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch]. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.33 (br. s, IH), 8.48 (s, IH), 8.44-8.35 (m, 2H), 8.31 (s, IH), 7.89 (d, IH), 7.55 (d, IH), 7.09 (dd, IH), 4.62-4.46 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.51 (dd, IH), 3.32-3.27 (m, IH), 3.04-2.93 (m, IH), 2.32-2.19 (m, IH), 2.17-2.03 (m, IH), 1.32-1.20 (m, 2H), 0.63-0.55 (m, 2H), 0.39-0.31 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 546 [M+H]+.
Beispiel 130
4-[6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 -benzothiophen-2-yl] -4-oxo-2- { 2- [4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3 - benzotriazin-3(4//)-yl]efhyl}butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 29 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Rt = 16.40 min, ee-Wert = 97% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 50% Ethanol + 0.2% Eisessig / 50% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.36 (br. s, IH), 8.48 (s, IH), 8.44-8.35 (m, 2H), 8.32- 8.27 (m, IH), 7.89 (d, IH), 7.55 (d, IH), 7.09 (dd, IH), 4.63-4.44 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.56-3.43 (m, 2H), 3.30-3.24 (m, IH), 3.02-2.91 (m, IH), 2.31-2.20 (m, IH), 2.15-2.02 (m, IH), 1.33-1.20 (m, 2H), 0.63-0.54 (m, 2H), 0.39-0.30 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 546 [M+H]+.
Beispiel 131
(+/-)-4-(6-Methoxy- 1 -benzothiophen-2-yl)-4-oxo-2- { 2- [4-oxo-6-(trifluormethyl)- 1 ,2,3-benzo- triazin-3 (4 /)-yl] efhyl Jbutansäure
Figure imgf000232_0001
Eine Lösung von 93 mg (0.13 mmol, Reinheit 95%) der Verbindung aus Beispiel 91 A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: AcetonitrilA asser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 36 mg (53% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.42 (br. s, IH), 8.49 (br. s, IH), 8.43-8.37 (m, 2H), 8.33 (br. s, IH), 7.90 (d, IH), 7.60 (d, IH), 7.09 (dd, IH), 4.61-4.49 (m, 2H), 3.86 (s, 3H), 3.51 (dd, IH), 3.30 (d, IH), 3.02-2.95 (m, IH), 2.30-2.21 (m, IH), 2.14-2.06 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 506 [M+H]+.
Beispiel 132
(+/-)-4-Oxo-2- { 2- [4-oxo-6-(trifluormefhyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl] ethyl } -4-(6-propoxy- 1 - benzothiophen-2-yl)butansäure
Figure imgf000233_0001
Eine Lösung von 104 mg (0.12 mmol, Reinheit 76%) der Verbindung aus Beispiel 91A in 2 ml Dioxan wurde mit 2 ml einer 4 N Lösung von Chlorwasserstoff in Dioxan versetzt. Das Gemisch wurde 10 min in einer Mikrowellenapparatur auf 150°C erhitzt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC gereinigt (Säule: Reprosil C18; Laufmittel: Acetonitril/W asser-Gradient mit 0.2% Trifluoressigsäure im Wasser). Es wurden 35 mg (56% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.44 (br. s, IH), 8.49 (s, IH), 8.45-8.35 (m, 2H), 8.32 (s, IH), 7.89 (d, IH), 7.59 (d, IH), 7.08 (dd, IH), 4.62-4.46 (m, 2H), 4.03 (t, 2H), 3.51 (dd, IH), 3.33-3.26 (m, IH), 3.05-2.92 (m, IH), 2.31-2.20 (m, IH), 2.15-2.04 (m, IH), 1.83-1.70 (m, 2H), 1.00 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.24 min, m/z = 534 [M+H]+.
Beispiel 133
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3-yl]butansäure
Figure imgf000234_0001
Eine Lösung von 356 mg (0.65 mmol) der Verbindung aus Beispiel 118A in 10 ml Dioxan wurde 10 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 243 mg (74% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (dd, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (td, 1H), 7.96-7.90 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.60-4.43 (m, 2H), 3.98 (d, 2H), 3.89 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.45-3.29 (m, 3H), 3.12-3.00 (m, 1H), 2.34-2.21 (m, 1H), 2.20-1.98 (m, 2H), 1.74- 1.64 (m, 2H), 1.43-1.27 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.05 min, m/z = 507 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
233 mg der Verbindung aus Beispiel 133 wurden in 10 ml DMSO gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 134 und 135) [Säule: Daicel Chiralpak ΓΒ, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 285 nm; Injektionsvolumen: 0.08 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 5% Acetonitril / 95% Ethanol + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 3.5 min] :
Beispiel 134
(2R)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 68 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]D 20 = -2.3°, 589 nm, c = 0.34 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.54 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.14-8.05 (m, 1H), 7.98-7.88 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 4.60-4.43 (m, 2H), 3.98 (d, 2H), 3.89 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.45-3.27 (m, 3H), 3.11-3.00 (m, 1H), 2.34-2.21 (m, 1H), 2.20-1.97 (m, 2H), 1.70 (d, 2H), 1.36 (qd, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.05 min, m/z = 507 [M+H]+. Eine Einkristall-Röntgenstrukturanalyse, die mit diesem Enantiomer durchgeführt wurde, ergab für das chirale Kohlenstoffatom der Verbindung eine R-Konfiguration. Die erhaltenen Kristalldaten sind in der nachfolgenden Tabelle wiedergegeben:
Kristalldaten aus Röntgenstrukturanalyse zu Beispiel 134:
Figure imgf000235_0001
[Einkristall: erhalten durch Kristallisation aus Acetonitril/W asser (1 : 1) bei RT; Diffraktometer: Oxford Diffraction Xcalibur series, CCD-Flächendetektor (Modell Ruby); Strahlung: CuKa-Strah- lung 1.54178 Ä; Temperatur: 108 K; Auflösung: 0.89 Ä; Θ-Bereich: 3.511-65.735°; Scan-Typ: fullsphere Datensammlung Omega- und Phi-Scans; Index-Bereiche: -11 < h < 10, -11 < k < 6, -29 < 1 < 29; gesammelte Reflexe: 14201; unabhängige Reflexe: 4003 [R(int) = 0.0420] ; Vollständigkeit zu Theta = 67.679°: 94.4%] .
Beispiel 135
(2lS')-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl- methoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]butansäure (Enantiomer 2) Es wurden 62 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 98%; [a]D 20 = +1.3°, 589 nm, c = 0.31 g/100 ml, Chloroform Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.54 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.13-8.06 (m, 1H), 7.98-7.88 (m, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 4.60-4.44 (m, 2H), 3.98 (d, 2H), 3.89 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.45-3.27 (m, 3H), 3.12-2.99 (m, 1H), 2.35-2.21 (m, 1H), 2.19-1.98 (m, 2H), 1.70 (d, 2H), 1.36 (qd, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.05 min, m/z = 507 [M+H]+.
Beispiel 136
(+/ -)-4- { 6- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000236_0001
Eine Lösung von 116 mg (0.21 mmol) der Verbindung aus Beispiel 119A in 5 ml Dioxan wurde 20 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in Acetonitril verrührt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Pentan gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 75 mg (70% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.54 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.96-7.92 (m, 2H), 7.58-7.55 (m, 3H), 7.27 (dd, 2H), 7.19 (dd, 1H), 5.23 (d, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 3.65-3.57 (m, 1H), 3.42 (d, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.31-2.22 (m, 1H), 2.17-2.12 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.16 min, m/z = 517 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
51 mg der Verbindung aus Beispiel 136 wurden in 15 ml eines Acetonitril/Methanol-Gemisches in der Wärme gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 137 und 138) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 25 ml/min; Detektion: 210 nm; Injektionsvolumen: 1 ml; Temperatur: 40°C; Eluent: 30% Acetonitril / 70% Methanol + 0.2% Essigsäure, isokratisch, Laufzeit 6 min]:
Beispiel 137 4- { 6- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 15 mg (ehem. Reinheit 90%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 7.23 min, ee-Wert = 100% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch]. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.55 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.97-7.92 (m, 2H), 7.60-7.53 (m, 3H), 7.25 (dd, 2H), 7.20 (dd, 1H), 5.23 (d, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 3.68-3.56 (m, 1H), 3.39 (d, 1H), 3.11-3.02 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.15 min, m/z = 517 [M+H]
Beispiel 138 4- { 6- [(4-Fluorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3-yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin-3 (4 /)-yl)- ethyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 20 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Rt = 8.21 min, ee-Wert = 96% [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 250 mm x 4.6 mm, 5 μιη; Fluss: 1.0 ml/min; Detektion: 270 nm; Temperatur: 40°C; Eluent: 70% Methanol + 0.2% Eisessig / 30% Acetonitril + 0.2% Eisessig, isokratisch].
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.54 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.97-7.92 (m, 2H), 7.60-7.53 (m, 3H), 7.25 (dd, 2H), 7.18 (dd, 1H), 5.23 (d, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 3.65-3.58 (m, 1H), 3.39 (d, 1H), 3.11-3.02 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.15 min, m/z = 517 [M+H]+. Beispiel 139
(+/ -)-4- { 6- [(3-Carbamoylbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000237_0001
Eine Lösung von 112 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 120A in 5 ml Dioxan wurde 10 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in DMSO aufgenommen und mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 83 mg (81% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 8.05-7.99 (m, 2H), 7.96-7.91 (m, 2H), 7.86 (m, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.59 (d, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.42 (br. s, 1H), 7.20 (dd, 1H), 5.30 (s, 2H), 4.58-4.46 (m, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.41 (dd, 1H), 3.10- 3.03 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.94 min, m/z = 542 [M+H]+. Beispiel 140
(+/-)-4-Oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] -4- [6-(pentyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] - butansäure
Figure imgf000238_0001
Eine Lösung von 77 mg (0.15 mmol) der Verbindung aus Beispiel 121 A in 4 ml Dioxan wurde 8 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in 1.5 ml Acetonitril verrührt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Pentan gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 47 mg (64% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.10 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.10-3.03 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.80-1.13 (m, 2H), 1.46-1.33 (m, 4H), 0.91 (t, 3H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.26 min, m/z = 479 [M+H]+. Beispiel 141
(+/-)-4-[6-(2-Cyclohexylethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000239_0001
Eine Lösung von 109 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 122A in 6 ml Dioxan wurde 8 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in 1.5 ml Acetonitril verrührt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Pentan gewaschen und im Vakuum ge- trocknet. Es wurden 81 mg (79% d. Th., Reinheit 97%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.13 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.75 (d, 2H), 1.69-1.61 (m, 5H), 1.53-1.45 (m, 1H), 1.27-1.13 (m, 3H), 0.96 (dd, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.39 min, m/z = 519 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
60 mg der Verbindung aus Beispiel 141 wurden in 8 ml Ethanol/ Acetonitril gelöst und mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 142 und 143) [Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μιη, 250 mm x 20 mm; Fluss: 20 ml/min; Detektion: 230 nm; Injektionsvolumen: 0.08 ml; Temperatur: 25°C; Eluent: 22% Acetonitril / 70% Ethanol / 8% Acetonitril + 5% Eisessig, isokratisch, Laufzeit 15 min]:
Beispiel 142
(-)-4- [6-(2-Cyclohexylethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4 /)-yl)ethyl]butansäure (Enantiomer 1) Es wurden 12 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 100%; [a]20 = -32.9°, 365 nm, c = 0.28 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.55 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.13 (dd, 2H), 3.60 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.75 (d, 2H), 1.69-1.61 (m, 5H), 1.53-1.45 (m, 1H), 1.27-1.13 (m, 3H), 0.96 (dd, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.38 min, m/z = 519 [M+H] Beispiel 143
(+)-4-[6-(2-Cyclohexylethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]-4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure (Enantiomer 2)
Es wurden 13 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 95%; [a]20 = +26.1°, 365 nm, c = 0.30 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.55 (br. s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95 (d, IH), 7.90 (d, IH), 7.45 (d, IH), 7.10 (dd, IH), 4.58-4.46 (m, 2H), 4.13 (dd, 2H), 3.60 (dd, IH), 3.40 (dd, IH), 3.09-3.03 (m, IH), 2.32-2.23 (m, IH), 2.17-2.09 (m, IH), 1.75 (d, 2H), 1.69-1.61 (m, 5H), 1.53-1.45 (m, IH), 1.27-1.13 (m, 3H), 0.96 (dd, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.38 min, m/z = 519 [M+H]+.
Beispiel 144
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(2-phenylethoxy)-l,2-benzoxazol- 3-yl]butansäure
Figure imgf000240_0001
Eine Lösung von 104 mg (0.19 mmol) der Verbindung aus Beispiel 123 A in 6 ml Dioxan wurde 12 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 78 mg (81 % d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.53 (br. s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95 (d, IH), 7.90 (d, IH), 7.49 (s, IH), 7.37-7.31 (m, 4H), 7.25-7.22 (m, IH), 7.11 (dd, IH), 4.57.4.45 (m, 2H), 4.34 (dd, 2H), 3.61 (dd, IH), 3.40 (dd, IH), 3.11-3.03 (m, 3H), 2.32-2.22 (m, IH), 2.17-2.09 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.22 min, m/z = 513 [M+H]+. Beispiel 145
(+/-)-4- [6-(Benzyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4//)-yl)efhyl] - butansäure
Figure imgf000241_0001
Eine Lösung von 55 mg (0.09 mmol, Reinheit 90%) der Verbindung aus Beispiel 116A in 2 ml Dioxan wurde 8 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 39 mg (84% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.53 (br. s, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95-7.91 (m, 2H), 7.57 (d, IH), 7.50 (d, 2H), 7.42 (dd, 2H), 7.38-7.35 (m, IH), 7.19 (dd, IH), 5.25 (s, 2H), 4.57-4.45 (m, 2H), 3.62 (dd, IH), 3.40 (dd, IH), 3.11-3.03 (m, IH), 2.32-2.22 (m, IH), 2.17-2.09 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 499 [M+H]+. Beispiel 146 (+/-)-4- { 6- [(3-Chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000241_0002
Eine Lösung von 126 mg (0.22 mmol) der Verbindung aus Beispiel 124A in 7 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in Acetonitril verrührt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Pentan gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 94 mg (81% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (t, 1H), 7.98-7.91 (m, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.48-7.38 (m, 3H), 7.22 (d, 1H), 5.27 (s, 2H), 4.61-4.39 (m, 2H), 3.66-3.55 (m, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.12-3.00 (m, 1H), 2.35-2.20 (m, 1H), 2.19-2.07 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.22 min, m/z = 533 [M+H]+. Beispiel 147
(+/ -)-4- { 6- [(4-Chlorbenzyl)oxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000242_0001
Eine Lösung von 151 mg (0.26 mmol) der Verbindung aus Beispiel 125A in 9 ml Dioxan wurde 18 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in Acetonitril verrührt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Pentan gewaschen und im Vakuum getrocknet. Es wurden 102 mg (74% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.12-8.06 (m, 1H), 7.97-7.90 (m, 2H), 7.58-7.44 (m, 5H), 7.19 (dd, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.52 (tq, 2H), 3.68-3.54 (m, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.12-3.00 (m, 1H), 2.34-2.20 (m, 1H), 2.19-2.06 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.23 min, m/z = 533 [M+H]+.
Beispiel 148
(+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-[6-(pyridin-3-ylmethoxy)-l,2-benz- oxazol-3-yl]butansäure
Figure imgf000242_0002
Eine Lösung von 36 mg (0.07 mmol) der Verbindung aus Beispiel 126A in 2.5 ml Dioxan wurde 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels Dickschicht-Chromatographie gereinigt (PLC Silicagel 60 F 254, 1 mm; 20 x 20 cm mit Konzentrierungszone; Laufmittel Dichlormethan/Methanol 95:5). Es wurden 27 mg (81% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.55 (br. s, IH), 8.73 (s, IH), 8.59 (d, IH), 8.25 (d, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (dd, IH), 7.95-7.92 (m, 3H), 7.62 (s, IH), 7.46 (d, IH), 7.20 (dd, IH), 5.30 (s, 2H), 4.58-4.45 (m, 2H), 3.61 (dd, IH), 3.40 (dd, IH), 3.11-3.03 (m, IH), 2.32-2.22 (m, IH), 2.17-2.09 (m, IH).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.88 min, m/z = 450 [M+H]+. Beispiel 149 (+/-)-4-Oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl]-4-{6-[2-(tetrahydro-2ii-pyran-4-yl)- ethoxy] - 1 ,2-benzoxazol-3 -yl } butansäure
Figure imgf000243_0001
Eine Lösung von 97 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 127A in 5 ml Dioxan wurde 4 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präpa- rativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 60 mg (67% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.53 (br. s, IH), 8.25 (dd, IH), 8.21 (d, IH), 8.09 (td, IH), 7.98-7.85 (m, 2H), 7.48 (d, IH), 7.10 (dd, IH), 4.60-4.42 (m, 2H), 4.16 (t, 2H), 3.84 (dd, 2H), 3.67-3.54 (m, IH), 3.44-3.34 (m, IH, teilweise verdeckt), 3.29 (td, 2H), 3.11-2.99 (m, IH), 2.34- 2.21 (m, IH), 2.20-2.05 (m, IH), 1.76-1.68 (m, 3H), 1.64 (d, 2H), 1.35-1.14 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 0.88 min, m/z = 521 [M+H]+.
Beispiel 150
(+/ -)-4- [6-(Cyclopropylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3(4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000244_0001
Eine Lösung von 85 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 128A in 5 ml Dioxan wurde 5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in DMSO aufgenommen und mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 72 mg (92% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.25 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.12 (dd, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 3.96 (d, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.34-1.23 (m, 1H), 0.61 (d, 2H), 0.36 (d, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.12 min, m/z = 463 [M+H]+.
Beispiel 151
(+/ -)-4- [6-(2-Cyclopentylethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3-benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000244_0002
Eine Lösung von 98 mg (0.18 mmol) der Verbindung aus Beispiel 129A in 5 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 52 mg (58% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-de): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.10 (dd, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 4.12 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.32-2.22 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.99-1.92 (m, 1H), 1.82-1.75 (m, 4H), 1.64-1.49 (m, 4H), 1.21-1.12 (m, 2H). LC/MS (Methode 2, ESIpos): Rt = 2.86 min, m/z = 505 [M+H]+. Beispiel 152
(+/-)-4-[6-(Cyclopentylmethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo-l,2,3-benzotriazin- 3 (4//)-yl)efhyl]butansäure
Figure imgf000245_0001
Eine Lösung von 88 mg (0.17 mmol) der Verbindung aus Beispiel 130A in 5 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 42 mg (52% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 3.98 (d, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.39-2.32 (m, 1H), 2.30-2.23 (m, 1H), 2.17-2.09 (m, 1H), 1.87-1.74 (m, 2H), 1.69-1.49 (m, 4H), 1.40-1.29 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.30 min, m/z = 491 [M+H]+. Beispiel 153
(+/ -)-4- [6-(Cyclohexylmethoxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2-[2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin- 3 (4 /)-yl)ethyl]butansäure
Figure imgf000245_0002
Eine Lösung von 73 mg (0.13 mmol) der Verbindung aus Beispiel 131A in 5 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 40 mg (58% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.26 (d, 1H), 8.21 (d, 1H), 8.09 (dd, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 7.10 (d, 1H), 4.58-4.45 (m, 2H), 3.92 (d, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.17-2.10 (m, 1H), 1.88-1.59 (m, 6H), 1.31-1.16 (m, 3H), 1.11-1.03 (m, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.36 min, m/z = 505 [M+H]+.
Beispiel 154
(+/ -)-4- [6-(Benzyloxy)- 1 ,2-benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- { 2- [4-oxo-6-(ttifluormethyl)- 1 ,2,3 -benzo- triazin-3 (4//)-yl] efhyl Jbutansäure
Figure imgf000246_0001
Eine Lösung von 62 mg (0.10 mmol) der Verbindung aus Beispiel 117A in 2.5 ml Dioxan wurde 24 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 43 mg (74% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.54 (br. s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.45-8.38 (m, 2H), 7.93 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.52-7.47 (m, 2H), 7.45-7.32 (m, 3H), 7.19 (dd, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.64-4.44 (m, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.40 (dd, 1H), 3.14-3.00 (m, 1H), 2.35-2.23 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.29 min, m/z = 567 [M+H]+.
Beispiel 155
(+/-)-4-Oxo-2-{2-[4-oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-3(4 /)-yl]ethyl}-4-[6-(tetrahydro- 2 i-pyran-4-ylmethoxy)-l,2-benzoxazol-3-yl]butansäure
Figure imgf000247_0001
Eine Lösung von 48 mg (0.08 mmol) der Verbindung aus Beispiel 132A in 2.5 ml Dioxan wurde 16 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 30 mg (60% d. Th., Reinheit 90%) der Titel- Verbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.46-8.35 (m, 2H), 7.90 (d, 1H), 7.46 (d, 1H), 7.11 (dd, 1H), 4.63-4.46 (m, 2H), 3.98 (d, 2H), 3.89 (dd, 2H), 3.61 (dd, 1H), 3.43-3.31 (m, 3H), 3.14-3.02 (m, 1H), 2.36-2.23 (m, 1H), 2.22-1.98 (m, 2H), 1.70 (d, 2H), 1.36 (qd, 2H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.17 min, m/z = 575 [M+H]+. Beispiel 156
(+/-)-4- [6-(Benzyloxy)-2, 1 -benzoxazol-3 -yl] -4-oxo-2- [2-(4-oxo- 1 ,2,3 -benzotriazin-3(4 /)-yl)ethyl] - butansäure
Figure imgf000247_0002
Eine Lösung von 23 mg (0.04 mmol) der Verbindung aus Beispiel 137A in 2 ml Dioxan wurde 3.5 h unter Rückfluss gerührt. Nach Abkühlen auf RT und Einengen wurde der Rückstand in DMSO aufgenommen und mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Das so erhaltene Produkt wurde in Pentan verrührt, und das Lösungsmittel wurde abfiltriert. Diese Prozedur wurde noch zweimal wiederholt und der Feststoff schließlich im Vakuum getrocknet. Es wurden 8 mg (36% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.53 (br. s, 1H), 8.43-7.69 (m, 5H), 7.60-6.96 (m, 7H), 5.24 (s, 2H), 4.70-4.29 (m, 2H), 3.75-3.50 (m, 1H), 3.48-3.37 (m, 1H), 3.10-2.93 (m, 1H), 2.33-1.99 (m, 2H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.13 min, m/z = 499 [M+H]+. Beispiel 157
(+/-)-(lR5,25R,5R5)-2-{ [4-Oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-3(4 ^-yl]methyl}-5-{ [5-(2- phenylethoxy)-l-benzofur-2-yl]carbonyl}cyclopentancarbonsäure (Racemat)
Figure imgf000248_0001
Eine Lösung von 695 mg (0.68 mmol, Reinheit 69%) der Verbindung aus Beispiel 145A in 16 ml Dichlormethan wurde unter Eiskühlung mit 8 ml (0.10 mol) Trifluoressigsäure versetzt und 15 min bei 0°C gerührt. Anschließend wurde das Kältebad entfernt und 1 h bei RT nachgerührt. Danach wurde eingeengt, und der Rückstand wurde mittels präparativer HPLC (Methode 6) gereinigt. Es wurden 289 mg (70% d. Th., Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten.
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.23 (br. s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.46-8.36 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.38-7.28 (m, 5H), 7.26-7.20 (m, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.23 (t, 2H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.20 (t, 1H), 3.06 (t, 2H), 2.96-2.82 (m, 1H), 2.19-2.07 (m, 1H), 2.03-1.90 (m, 1H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.65-1.50 (m, 1H).
LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.31 min, m/z = 606 [M+H]+.
Trennung der Enantiomere:
410 mg der Verbindung aus Beispiel 157 wurden in 6 ml Ethanol gelöst und mittels präparativer SFC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt (siehe Beispiele 158 und 159) [Säule: Daicel Chiralpak IC, 5 μιη, 250 mm x 4.6 mm; Fluss: 80 ml/min; Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.75 ml; Temperatur: 40°C; Eluent: 70% C02 / 30% Ethanol, isokratisch, Laufzeit 13 min] : Beispiel 158
(-)-(lR5,25R,5R^-2-{ [4-Oxo-6-(trifluormethyl)-l,2,3-benzotriazin-3(4 ^-yl]methyl }-5-{ [5-(2- phenylethoxy)-l-benzofur-2-yl]carbonyl}cyclopentancarbonsäure (Enantiomer 1)
Es wurden 187 mg (ehem. Reinheit 97%) der Titel Verbindung erhalten. ee-Wert = 99.9%; [a]D 20 = -71.4°, 589 nm, c = 0.35 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.23 (br. s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.46-8.38 (m, 2H), 7.86 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.38-7.27 (m, 5H), 7.26-7.19 (m, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.23 (t, 2H), 4.07-3.98 (m, 1H), 3.20 (t, 1H), 3.07 (t, 2H), 2.95-2.84 (m, 1H), 2.20-2.08 (m, 1H), 2.02-1.90 (m, 1H), 1.88-1.76 (m, 1H), 1.65-1.51 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.33 min, m/z = 606 [M+H]+.
Beispiel 159
(+)-(lRS,2SR,5RS)-2- { [4-Oxo-6-(trifluormefhyl)- 1 ,2,3 -benzotriazin-3 (4//)-yl] methyl } -5- { [5-(2- phenylethoxy)-l-benzofur-2-yl]carbonyl}cyclopentancarbonsäure (Enantiomer 2)
Es wurden 177 mg (ehem. Reinheit 100%) der Titelverbindung erhalten. ee-Wert = 99.9%; [a]D 20 = +70.5°, 589 nm, c = 0.33 g/100 ml, Chloroform
Ή-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 12.23 (br. s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.47-8.36 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.37-7.28 (m, 5H), 7.26-7.19 (m, 1H), 7.14 (dd, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.24 (t, 2H), 4.03 (q, 1H), 3.20 (t, 1H), 3.07 (t, 2H), 2.96-2.82 (m, 1H), 2.21-2.08 (m, 1H), 2.04-1.90 (m, 1H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.65-1.50 (m, 1H). LC/MS (Methode 1, ESIpos): Rt = 1.33 min, m/z = 606 [M+H]
B. Bewertung der pharmakologischen Wirksamkeit
Die pharmakologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen kann durch in vitro- und in vzvo-Untersuchungen, wie sie dem Fachmann bekannt sind, nachgewiesen werden. Die nachfolgenden Anwendungsbeispiele beschreiben die biologische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen, ohne die Erfindung auf diese Beispiele zu beschränken.
Abkürzungen und Akronyme:
APMA 4-Aminophenylquecksilberacetat
Brij®-35 Polyoxyethylenlaurylether
BSA bovines Serumalbumin
CYP Cytochrom P450
Dap (oder Dpa) L-2,3-Diaminopropionsäure (ß-Amino-L-alanin)
DMSO Dimethylsulfoxid
Dnp 2,4-Dinitrophenyl
EDTA Ethylendiamintetraessigsäure
HEPES 2-[4-(2-Hydroxyethyl)piperazin-l-yl]ethansulfonsäure
HME humane Makrophagen-Elastase
IC Inhibitionskonzentration
Mca (7 -Methoxycumarin-4-yl) acetyl
MMP Matrixmetallopeptidase
MTP Mikrotiterplatte
NADP+ Nikotinsäureamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat (oxidierte Form)
NADPH Nikotinsäureamid-Adenin-Dinukleotid-Phosphat (reduzierte Form)
Nval Norvalin
PEG Polyethylenglykol
Tris Tris(hydroxymethyl)aminomethan
v/v Volumen zu Volumen- Verhältnis (einer Lösung)
w/w Gewicht zu Gewicht- Verhältnis (einer Lösung)
B-l. In vitro HME-Inhibitionstest
Die Wirkstärke der erfindungsgemäßen Verbindungen gegenüber HME (MMP-12) wird in einem in vi tro -Hemmte st ermittelt. Die HME-vermittelte amidolytische Spaltung eines geeigneten Peptid- substrats führt hierin zu einer Fluoreszenzlichtzunahme. Die Signalintensität des Fluoreszenzlichtes ist direkt proportional zur Enzymaktivität. Die Wirkkonzentration einer Testverbindung, bei der die Hälfte des Enzyms inhibiert ist (50% Signalintensität des Fluoreszenzlichtes), wird als IC5o-Wert angegeben.
Standard-m vitro HME-Inhibitionstest:
In einer 384 Loch-Mikrotiterplatte werden in einem Testvolumen von insgesamt 41 μΐ der Test- puffer (0.1 M HEPES pH 7.4, 0.15 M NaCl, 0.03 M CaCh, 0.004 mM ZnCk, 0.02 M EDTA, 0.005% Brij®), das Enzym (0.5 nM HME; Fa. R&D Systems, 917-MP, autokatalytische Aktivierung nach Angaben des Herstellers) und das intramolekular gequenchte Substrat [5 μΜ Mca-Pro- Leu-Gly-Leu-Glu-Glu-Ala-Dap(Dnp)-NH2; Fa. Bachem, M-2670] bei An- und Abwesenheit der Testsubstanz (als Lösung in DMSO) zwei Stunden lang bei 37°C inkubiert. Die Fluoreszenzlicht- Intensität der Testansätze wird gemessen (Excitation 323 nm, Emission 393 nm). Die ICso-Werte werden durch eine Auftragung der Fluoreszenzlichtintensität gegenüber der Wirkstoffkonzentration ermittelt.
Hochsensitiver in vitro HME-Inhibitionstest:
Ergeben sich bei hochpotenten Testsubstanzen im oben beschriebenen Standard-HME-Inhibitions- test subnanomolare IC-Werte, so wird zu deren genauerer Ermittlung ein modifizierter Test verwendet. Hierbei wird eine zehnfach niedrigere Enzymkonzentration eingesetzt (finale Konzentration z.B. 0.05 nM), um eine erhöhte Sensitivität des Tests zu erreichen. Die Inkubationszeit des Tests wird entsprechend länger gewählt (z.B. 16 Stunden).
In vitro HME-Inhibitionstest in Anwesenheit von Serumalbumin im Reaktionspuffer:
Dieser Test entspricht dem oben beschriebenen Standard-HME-Inhibitionstest, jedoch unter Verwendung eines modifizierten Reaktionspuffers. Dieser Reaktionspuffer enthält zusätzlich Rinderserumalbumin (BSA, fettsäurefrei, A6003, Fa. Sigma-Aldrich) einer finalen Konzentration von 2% (w/w), was in etwa der Hälfte des physiologischen Serumalbumingehaltes entspricht. Die Enzymkonzentration in diesem modifizierten Test ist leicht erhöht (z.B. 0.75 nM), ebenso die Inkuba- tionsdauer (z.B. drei Stunden).
In der folgenden Tabelle 1 sind für individuelle Ausführungsbeispiele der Erfindung die ICso- Werte aus dem Standard- bzw. hochsensitiven HME-Inhibitionstest wiedergegeben (zum Teil als Mittelwerte aus mehreren unabhängigen Einzelbestimmungen und gerundet auf zwei signifikante Stellen): Tabelle 1: Hemmung der humanen Makrophagen-Elastase (HME / hMMP-12)
Beispiel HME / hMMP-12 Beispiel HME / hMMP-12 Nr. ICso [nM] Nr. ICso [nM]
1 2.6 28 3.1
2 2.6 29 770
3 4.1 30 0.99
4 4.3 31 4.8
5 2.1 32 0.68
6 4.0 33 350
7 2.8 34 1.1
8 2.0 35 2.0
9 370 36 0.33
10 0.62 37 4.6
11 4.3 38 0.72
12 900 40 4.6
13 6.1 41 3.9
14 0.65 42 3.2
15 4.8 43 1.3
16 24 44 0.62
17 94 45 2.3
18 6.0 46 1.9
19 4.7 47 0.94
20 860 48 4.0
21 2.2 49 0.55
22 2.5 50 1.6
23 0.81 51 4.1
24 210 52 2.1
25 0.2 53 2.9
26 160 54 5.6
27 0.19 55 3.7 Beispiel HME / hMMP-12 Beispiel HME / hMMP-12 Nr. ICso [nM] Nr. ICso [nM]
56 1400 86 1.4
57 2.1 87 470
58 5.0 88 1.1
59 980 89 0.35
60 1.8 90 81
61 4.6 91 0.23
62 570 92 1.3
63 2.2 93 97
64 2.9 94 0.82
65 340 95 0.6
66 2.4 96 0.81
67 3.8 97 25
68 890 98 0.4
69 1.0 99 100
70 4.1 100 0.18
71 2.2 101 0.53
72 3.1 102 2100
73 2.8 103 0.23
74 0.18 104 1.1
75 0.22 105 0.21
76 0.66 106 31
77 2.9 107 0.61
78 2.0 108 0.23
79 1900 109 10
80 0.46 110 0.54
82 0.089 111 3.3
83 1.4 112 2.2
84 4.0 113 4300
85 0.38 114 0.3 Beispiel HME / hMMP-12 Beispiel HME / hMMP-12
Nr. ICso [nM] Nr. ICso [nM]
115 3.1 138 0.33
116 4.2 139 0.58
117 5.9 140 0.28
118 2.7 141 0.12
119 3.7 142 15
120 3.6 143 0.019
121 3.1 144 1.4
122 4.5 145 0.71
123 2.7 146 1.1
124 0.95 147 1.7
125 4.0 148 1.8
126 2.9 149 0.58
127 2.8 150 3.8
128 1.1 151 0.27
129 13 152 1.4
130 0.12 153 1.3
131 1.2 154 0.75
132 0.51 155 0.39
133 0.24 156 2.4
134 24 157 0.055
135 0.16 158 260
136 0.63 159 0.063
137 35
B-2. In vitro MMP-Inhibitionstests
Die Wirkstärke der erfindungsgemäßen Verbindungen gegenüber anderen MMPs (und damit ihre Selektivität) wird ebenfalls in in vz'iro-Hemmtests ermittelt. Die MMP-vermittelte amidolytische Spaltung eines geeigneten Peptidsubstrats führt auch hier zu einer Fluoreszenzlichtzunahme. Die Signalintensität des Fluoreszenzlichtes ist direkt proportional zur Enzymaktivität. Die Wirkkon- zentration einer Testverbindung, bei der die Hälfte des Enzyms inhibiert ist (50% Signalintensität des Fluoreszenzlichtes), wird als ICso-Wert angegeben. a) Humane MMPs:
In vitro MMP-1 -Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-1 (Fa. R&D Systems, 901-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca- Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES- 001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-l-Reak- tion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C). In vitro MMP-2 -Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-2 (Fa. R&D Systems, 902-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Kon- zentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca- Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES- 001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-2-Reak- tion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-3 -Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-3 (Fa. R&D Systems, 513-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca- Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-002) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-3 -Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C). In vitro MMP-7 -Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-7 (Fa. R&D Systems, 907-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.5 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-7 - Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-8-Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-8 (Fa. R&D Systems, 908-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentra- tion z.B. 0.5 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-8- Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-9-Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-9 (Fa. R&D Systems, 911-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipet- tiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-9- Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro ΜΜΡ-10-Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-10 (Fa. R&D Systems, 910-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentra- tion z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca- Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-002) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-10-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP- 13 -Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP- 13 (Fa. R&D Systems, 511-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipet- tiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-13- Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro ΜΜΡ-14-Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-14 (Fa. R&D Systems, 918-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von rekombinantem Furin (Fa. R&D Systems, 1503-SE) enzymatisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.5 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/ HC1 pH 7.5, 10 mM CaCk, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-14-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro ΜΜΡ-16-Inhibitionstest:
Rekombinantes MMP-16 (Fa. R&D Systems, 1785-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von rekombinantem Furin (Fa. R&D Systems, 1503-SE) enzymatisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/ HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-16-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In den folgenden Tabellen 2A und 2B sind für repräsentative Ausführungsbeispiele der Erfindung die ICso-Werte aus diesen Tests zur Inhibition humaner MMPs wiedergegeben (zum Teil als Mittelwerte aus mehreren unabhängigen Einzelbestimmungen und gerundet auf zwei signifikante Stellen):
Tabelle 2A: Hemmung humaner MMPs
Beispiel MMP-1 MMP-2 MMP-3 MMP-7 MMP-8
Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
1 > 40000 > 40000 > 40000 > 40000 > 40000
2 > 40000 4600 25000 > 40000 14000
5 > 40000 5000 > 40000 > 40000 7700
6 > 40000 430 26000 > 40000 3900
7 > 40000 920 27000 > 40000 22000 Beispiel MMP-1 MMP-2 MMP-3 MMP-7 MMP-8 Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
8 > 40000 > 40000 > 40000 > 40000 30000
13 > 40000 1300 > 40000 > 40000 5000
21 > 40000 1900 22000 > 40000 14000
23 > 40000 1900 > 40000 > 40000 6300
30 > 40000 6100 > 40000 > 40000 32000
31 > 40000 4400 > 40000 > 40000 35000
34 > 40000 490 34000 25000 4900
37 > 40000 3300 39000 > 40000 12000
44 > 40000 > 40000 23000 > 40000 28000
50 > 40000 3800 34000 > 40000 36000
51 > 40000 19000 > 40000 35000 34000
58 > 40000 10000 > 40000 > 40000 10000
69 > 40000 2900 36000 > 40000 > 40000
71 > 40000 > 40000 > 40000 > 40000 > 40000
73 > 40000 1300 29000 > 40000 > 40000
74 > 40000 20 16000 > 40000 370
75 > 40000 390 > 40000 > 40000 3300
80 > 40000 490 5700 > 40000 440
82 > 40000 170 16000 > 40000 580
89 > 40000 290 > 40000 > 40000 6700
91 > 40000 96 17000 > 40000 940
100 > 40000 140 > 40000 > 40000 2800
101 > 40000 660 > 40000 > 40000 12000
111 > 40000 350 9700 4100 460
112 > 40000 220 6400 3200 240
114 > 40000 83 3200 5300 3200
118 > 40000 350 16000 30000 9300
135 > 40000 270 12000 > 40000 170
136 > 40000 320 15000 > 40000 1200 Beispiel MMP-1 MMP-2 MMP-3 MMP-7 MMP-8 Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
140 > 40000 95 14000 > 40000 570
144 > 40000 730 18000 > 40000 2500
145 > 40000 430 8900 > 40000 2800
148 > 40000 270 9100 > 40000 270
150 > 40000 510 33000 29000 400
153 > 40000 420 12000 > 40000 1700
154 > 40000 5600 10000 18000 970
155 > 40000 4500 19000 24000 82
156 > 40000 1400 13000 > 40000 2800
157 > 40000 880 1100 160 150
159 > 40000 1700 2200 300 310
Tabelle 2B: Hemmung humaner MMPs
Beispiel MMP-9 MMP-10 MMP-13 MMP-14 MMP-16 Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
1 > 40000 28000 > 40000 > 40000 > 40000
2 24000 16000 2200 > 40000 > 40000
5 9100 34000 13000 34000 > 40000
6 3400 7000 730 37000 > 40000
7 5000 9300 5000 > 40000 > 40000
8 13000 > 40000 22000 > 40000 > 40000
13 3800 15000 4600 17000 > 40000
21 5600 13000 1800 30000 > 40000
23 13000 11000 5300 15000 30000
30 27000 30000 10000 31000 > 40000
31 9700 > 40000 5100 > 40000 > 40000
34 38000 14000 1600 7900 > 40000
37 17000 29000 5200 > 40000 > 40000 Beispiel MMP-9 MMP-10 MMP-13 MMP-14 MMP-16 Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
44 9900 29000 2100 13000 > 40000
50 26000 20000 4000 > 40000 > 40000
51 30000 36000 11000 > 40000 > 40000
58 10000 > 40000 > 40000 2200 > 40000
69 13000 28000 3600 > 40000 > 40000
71 > 40000 > 40000 30000 > 40000 > 40000
73 2200 > 40000 4700 > 40000 > 40000
74 180 2100 250 1400 6400
75 450 7700 3800 6500 > 40000
80 280 12000 3600 1900 21000
82 94 6800 1300 2500 > 40000
89 230 22000 670 13000 > 40000
91 41 4700 370 4000 13000
100 74 11000 140 4000 > 40000
101 420 > 40000 1100 > 40000 > 40000
111 1100 4700 1900 6000 > 40000
112 590 2500 1300 2800 37000
114 240 3400 250 2100 28000
118 1200 10000 1100 19000 > 40000
135 1700 9000 1500 3500 36000
136 190 12000 970 4900 30000
140 43 6300 330 3400 24000
144 760 29000 1600 2500 15000
145 170 10000 1500 4000 25000
148 910 200 500 8500 > 40000
150 650 > 40000 2400 900 11000
153 450 14000 2800 5500 > 40000
154 250 3300 2300 26000 13000
155 2800 5100 2700 > 40000 30000 Beispiel MMP-9 MMP-10 MMP-13 MMP-14 MMP-16
Nr. ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM] ICso [nM]
156 170 28000 2200 9300 38000
157 190 190 290 700 4900
159 680 340 660 2600 3000
Beim Vergleich der in den Tabellen 1 und 2A/2B wiedergegebenen Inhibitionsdaten zeigt sich, dass die erfindungsgemäßen Verbindungen im Allgemeinen und deren aktivere Stereoisomere im Besonderen eine sehr hohe inhibitorische Potenz (häufig im nano- oder sub-nanomolaren Bereich) gegenüber HME und zugleich eine sehr hohe Selektivität (in der Regel zwei bis vier Größenordnungen oder noch darüber) gegenüber verwandten humanen MMPs aufweisen. b ) MMPs der Nager:
In vitro MMP-2 -Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-2 der Maus (Fa. R&D Systems, 924-MP) wird den Herstellerangaben ent- sprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Sub- strats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-2 -Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C). In vitro MMP-3 -Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-3 der Maus (Fa. R&D Systems, 548-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.5 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nval-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-002) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-3-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-7 -Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-7 der Maus (Fa. R&D Systems, 2967-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.5 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-7-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Tempera- tur von 32°C).
In vitro MMP-8-Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-8 der Maus (Fa. R&D Systems, 2904-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-8-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-9-Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-9 der Maus (Fa. R&D Systems, 909-MP) wird den Herstellerangaben ent- sprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-9-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro ΜΜΡ-12-Inhibitionstest der Maus:
Rekombinantes MMP-12 der Maus (Fa. R&D Systems, 3467-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend autokatalytisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly- Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-12-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
Hochsensitiver in vitro MMP-12-Inhibitionstest der Maus:
Ergeben sich bei hochpotenten Testsubstanzen im oben beschriebenen MMP-12-Inhibitionstest der Maus subnanomolare IC -Werte, so wird zu deren genauerer Ermittlung ein modifizierter Test ver- wendet. Hierbei wird eine zehnfach niedrigere Enzymkonzentration eingesetzt (finale Konzentration z.B. 0.1 nM), um eine erhöhte Sensitivität des Tests zu erreichen. Die Inkubationszeit des Tests wird entsprechend länger gewählt (z.B. 16 Stunden).
In vitro MMP-2 -Inhibitionstest der Ratte:
Rekombinantes MMP-2 der Ratte (Fa. R&D Systems, 924-MP) wird den Herstellerangaben ent- sprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Sub- strats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 10 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-2 -Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C). In vitro MMP-8-Inhibitioristest der Ratte:
Rekombinantes MMP-8 der Ratte (Fa. R&D Systems, 3245-MP) wird den Herstellerangaben entsprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 2 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCh, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Lys-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-010) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-8-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
In vitro MMP-9-Inhibitionstest der Ratte:
Rekombinantes MMP-9 der Maus (Fa. R&D Systems, 5427 -MM) wird den Herstellerangaben ent- sprechend durch Verwenden von APMA chemisch aktiviert. Zu 24 μΐ aktivierten Enzyms (finale Konzentration z.B. 0.1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-9-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Excitation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C). In vitro ΜΜΡ-12-Inhibitionstest der Ratte:
MMP-12 der Ratte (Uniprot NP_446415.1 ; Konstrukt L96-V277) wird mit einem zusätzlichen N-terminalen His-Tag und einer konsekutiven TEV-Spaltsequenz mittels eines pDEco7-Vektors in E. coli (BL21) exprimiert. Das so rekombinant exprimierte Protein bildet ein intrazelluläres unlösliches Proteinkomp artiment (sog. inclusion body). Dieses wird nach Trennen und intensivem Waschen unter denaturierenden Bedingungen solubilisiert. Hierzu wird die inclusion body-Pellet- Fraktion aus einer 250 ml-E. coli-Kultur in einem Volumen von 120 ml Puffer A (50 mM Tris pH 7.4, 100 mM NaCl, 0.03 mM ZnCh, 10 mM CaCh, 8 M Harnstoff) aufgenommen. Das lösliche Protein wird renaturiert, indem je 60 ml der Probe mehrmals bei 4-8°C gegen Puffer B (50 mM Tris pH 7.4, 100 mM NaCl, 0.03 mM ZnCl2, 10 mM CaCl2) dialysiert werden. Nach der Dialyse wird die Probe zentrifugiert (25.000 x g). Das rückgefaltete Protein wird im Überstand mit einer Ausbeute von 3.7 mg pro 250 ml-E. coli-Kultur erhalten. Das so gewonnene Protein ist ohne weitere Reinigungsoperationen oder Protease-vermittelte Spaltprozesse enzymatisch aktiv.
Zu 24 μΐ MMP-12-Protein (finale Konzentration z.B. 1 nM) in Reaktionspuffer (50 mM Tris/HCl pH 7.5, 10 mM CaCl2, 150 mM NaCl, 0.05% Brij®-35) wird 1 μΐ der zu untersuchenden Testverbindung (als Lösung in DMSO, geeignete Konzentrationen z.B. 1 nM bis 30 μΜ) in einer weißen 384 Loch-Mikrotiterplatte (MTP) pipettiert. Die enzymatische Reaktion wird durch Zugabe des intramolekular gequenchten Substrats Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa(Dnp)-Ala-Arg-NH2 (finale Konzentration z.B. 5 μΜ; R&D Systems, ES-001) gestartet, so dass ein Gesamttestvolumen von 50 μΐ resultiert. Der Verlauf der MMP-12-Reaktion wird durch Messung der Fluoreszenzintensität (Ex- citation 320 nm, Emission 410 nm) über einen geeigneten Zeitraum hinweg gemessen (z.B. über 120 min bei einer Temperatur von 32°C).
B-3. Tiermodell des Lungenemphysems
Elastase-induziertes Lungenemphysem bei Maus, Ratte oder Hamster ist ein weit verbreitetes Tier- modell für Lungenemphysem [The Fas/Fas-ligand pathway does not mediate the apoptosis in elastase-induced emphysema in mice, Sawada et al., Exp. Lung Res. 33, 277-288 (2007)]. Die Tiere erhalten eine orotracheale Instillation porciner Pankreas-Elastase. Die Behandlung der Tiere mit der Testsubstanz beginnt am Tag der Instillation der porcinen Pankreas-Elastase und erstreckt sich über einen Zeitraum von 3 Wochen. Am Studienende wird die Lungen-Compliance bestimmt und eine Alveolarmorphometrie durchgeführt.
B-4. Tiermodell der Silica-induzierten Lungeninflammation
Eine orotracheale Gabe von Silica bei Maus, Ratte oder Hamster führt zu einer Inflammation in der Lunge [Involvement of leukotrienes in the pathogenesis of silica-induced pulmonary fibrosis in mice, Shimbori et al., Exp. Lung Res. 36, 292-301 (2010)]. Die Tiere werden am Tag der Instil- lation des Silica mit der Testsubstanz behandelt. Nach 24 Stunden wird eine bronchio-alveoläre Lavage zur Bestimmung des Zellgehaltes und der Biomarker durchgeführt.
B-5. Tiermodell der Silica-induzierten Lungenfibrose
Silica-induzierte Lungenfibrose bei Maus, Ratte oder Hamster ist ein weit verbreitetes Tiermodell für Lungenfibrose [Involvement of leukotrienes in the pathogenesis of silica-induced pulmonary fibrosis in mice, Shimbori et al., Exp. Lung Res. 36, 292-301 (2010)] . Die Tiere erhalten eine orotracheale Instillation von Silica. Die Behandlung der Tiere mit der Testsubstanz beginnt am Tag der Instillation des Silica oder therapeutisch eine Woche später und erstreckt sich über einen Zeit- raum von 6 Wochen. Am Studienende werden eine bronchio-alveoläre Lavage zur Bestimmung des Zellgehaltes und der Biomarker sowie eine histologische Beurteilung der Lungenfibrose durchgeführt.
B-6. Tiermodell der ATP-induzierten pulmonalen Inflammation Eine intratracheale Gabe von ATP (Adenosintriphosphat) an der Maus führt zu einer Inflammation in der Lunge [Acute lung inflammation and ventilator-induced lung injury caused by ATP via the P2Y receptors: An experimental study, Matsuyama et al., Respir. Res. 9:79 (2008)]. Die Tiere werden am Tag der Instillation von ATP für eine Dauer von 24 h mit der Testsubstanz behandelt (per gavage, durch Zusatz im Futter oder Trinkwasser, per osmotischer Minipumpe, per subkutaner oder intraperitonealer Injektion oder per Inhalation). Am Versuchsende wird eine bronchio-alveoläre Lavage zur Bestimmung des Zellgehalts und der pro-inflammatorischen Marker durchgeführt.
B-7. CYP-Inhibitionstest
Die Fähigkeit von Substanzen, die CYP-Enzyme CYP1A2, CYP2C9, CYP2D6 und CYP3A4 im Menschen zu inhibieren, wird untersucht mit gepoolten Human-Lebermikrosomen als Enzym- quelle in Gegenwart von Standardsubstraten (s.u.), die CYP-spezifische Metaboliten bilden. Die Inhibitionseffekte werden bei sechs verschiedenen Konzentrationen der Testverbindungen untersucht [2.8, 5.6, 8.3, 16.7, 20 (oder 25) sowie 50 μΜ], mit dem Ausmaß der CYP-spezifischen Metabolitenbildung der Standardsubstrate in Abwesenheit der Testverbindungen verglichen und die entsprechenden ICso-Werte berechnet. Ein Standard-Inhibitor, der eine einzelne CYP -Isoform spezifisch inhibiert, wird immer mitinkubiert, um Ergebnisse zwischen verschiedenen Serien vergleichbar zu machen.
Die Inkubation von Phenacetin, Diclofenac, Tolbutamid, Dextromethorphan oder Midazolam mit Human-Lebermikrosomen in Gegenwart von jeweils sechs verschiedenen Konzentrationen einer Testverbindung (als potentiellem Inhibitor) wird auf einer Workstation durchgeführt (Tecan, Genesis, Crailsheim, Deutschland). Standard-Inkubationsgemische enthalten 1.3 mM NADP+, 3.3 mM MgC x 6 ELO, 3.3 mM Glukose -6-phosphat, Glukose-6-phosphat-Dehydrogenase (0.4 U/ml) und 100 mM Phosphat-Puffer (pH 7.4) in einem Gesamtvolumen von 200 μΐ. Testverbindungen werden bevorzugt in Acetonitril gelöst. 96-Lochplatten werden eine definierte Zeit bei 37°C mit gepoolten Human-Lebermikrosomen inkubiert. Die Reaktionen werden durch Zugabe von 100 μΐ Acetonitril, worin sich ein geeigneter interner Standard befindet, abgestoppt. Gefällte Proteine werden durch Zentrifugation abgetrennt, die Überstände werden vereinigt und mittels LC- MS/MS analysiert. B-8. Hepatozytenassav zur Bestimmung der metabolischen Stabilität
Die metabolische Stabilität von Testverbindungen gegenüber Hepatozyten wird bestimmt, indem die Verbindungen bei niedrigen Konzentrationen (bevorzugt unter oder um 1 μΜ) und bei niedrigen Zellzahlen (bevorzugt bei 1 * 106 Zellen/ml) inkubiert werden, um möglichst lineare kinetische Bedingungen im Versuch sicherzustellen. Sieben Proben aus der Inkubationslösung werden in einem festgelegten Zeitraster für die LC-MS-Analytik entnommen, um die Halbwertszeit (d.h. den Abbau) der jeweiligen Verbindung zu bestimmen. Aus dieser Halbwertszeit werden unterschiedliche "Clearance"-Parameter (CL) und "Fmax" - Werte berechnet (s.u.).
Die CL- und Fmax-Werte stellen ein Maß für den Phase 1- und Phase 2-Metabolismus der Ver- bindungen in den Hepatozyten dar. Um den Einfluss des organischen Lösungsmittels auf die Enzyme in den Inkubationsansätzen möglichst klein zu halten, wird dessen Konzentration im Allgemeinen auf 1% (Acetonitril) bzw. 0.1 % (DMSO) begrenzt.
Für alle Spezies und Rassen wird mit einer Hepatozyten-Zellzahl in der Leber von 1.1 * 108 Zellen/g Leber gerechnet. CL-Parameter, deren Berechnung auf Halbwertszeiten beruhen, die we- sentlich über die Inkubationszeit hinausgehen (üblicherweise 90 Minuten), können nur als grobe Richtwerte angesehen werden.
Die berechneten Parameter und deren Bedeutung sind:
Fmax well-stirred [ ] maximal mögliche Bioverfügbarkeit nach oraler Applikation
Berechnung: (l-CLbi00d well-stirred/QH) * 100
CLbiood well-stirred [L/(h*kg)] berechnete Blut-Clearance (well stirred-Modell)
Berechnung: (QH * CL'i„tri„Sic) / (QH + CL'i„tri„Sic)
CL'intrinsic [ml/(min*kg)] maximale Fähigkeit der Leber (der Hepatozyten), eine Verbindung zu metabolisieren (unter der Annahme, dass der Leber - blutfluss nicht geschwindigkeitslimitierend ist)
Berechnung: CL'mtrinsic, apparent * speziesspezifische Hepatozytenzahl [1.1 * 108/ g Leber] * speziesspezifisches Lebergewicht [g/kg]
CL'mtrinsic, apparent [ml/(min*mg)] normiert die Eliminationskonstante, indem diese durch die eingesetzte Hepatozyten-Zellzahl x (x * 106/ml) dividiert wird Berechnung: kei [1/min] / (Zellzahl [x * 106] / Inkubationsvolumen [ml])
(QH = speziesspezifischer Leberb lutfluss). Γη der folgenden Tabelle 3 sind für repräsentative Ausführungsbeispiele der Erfindung die CL- und Fmax-Werte aus diesem Assay nach Inkubation der Verbindungen mit Ratten-Hepatozyten wiedergegeben (zum Teil als Mittelwerte aus mehreren unabhängigen Einzelbestimmungen):
Tabelle 3: berechnete Blut-Clearance und Bioverfügbarkeit nach Inkubation mit Ratten- Hepatozyten
Figure imgf000269_0001
B-9. Metabolismus-Untersuchung
Zur Bestimmung des Metabolismus-Profils der erfindungsgemäßen Verbindungen werden diese mit Lebermikrosomen oder mit primären frischen Hepatozyten verschiedener Tierspezies (z.B. Ratte, Hund) als auch humanen Ursprungs inkubiert, um Informationen über einen möglichst kompletten hepatischen Phase I- und Phase II-Metabolismus sowie über die am Metabolismus beteiligten Enzyme zu erhalten und zu vergleichen. Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden mit einer Konzentration von etwa 1-10 μΜ inkubiert. Dazu werden Stammlösungen der Verbindungen mit einer Konzentration von 0.1-1 mM in Acetonitril hergestellt und dann mit einer l: 100-Verdünnung in den Inkubationsansatz pipettiert. Die Lebermikrosomen werden in 50 mM Kaliumphosphatpuffer pH 7.4 mit und ohne NADPH- generierendem System, bestehend aus 1 mM NADP+, 10 mM Glukose-6-phosphat und 1 Unit Glu- kose-6-phosphat-Dehydrogenase, bei 37°C inkubiert. Primäre Hepatozyten werden in Suspension in William's E-Medium ebenfalls bei 37°C inkubiert. Nach einer Inkubationszeit von 0-4 h werden die Inkubationsansätze mit Acetonitril abgestoppt (Endkonzentration ca. 30%) und das Protein bei ca. 15000 x g abzentrifugiert. Die so abgestoppten Proben werden entweder direkt analysiert oder bis zur Analyse bei -20°C gelagert.
Die Analyse erfolgt mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie mit Ultraviolett- und massenspektrometrischer Detektion (HPLC-UV-MS/MS). Dazu werden die Überstände der Inkubationsproben mit geeigneten C18-reverse phase-Säulen und variablen Eluenten-Gemischen aus Acetonitril und 10 mM wässriger Ammoniumformiat-Lösung oder 0.05% wässriger Ameisensäure chromatographiert. Die UV-Chromatogramme in Verbindung mit den massenspektrometrischen Daten dienen zur Identifizierung, Strukturaufklärung und quantitativen Abschätzung der Metabolite und zur quantitativen Bestimmung der metabolischen Abnahme der erfindungsgemäßen Verbindungen in den Inkubationsansätzen.
B-10. Pharmakokinetische Untersuchungen in vivo Die zu untersuchende Substanz wird Ratten oder Mäusen intravenös als Lösung appliziert (z.B. in entsprechendem Plasma mit geringem DMSO-Zusatz oder in einem PEG/EthanolA asser- Gemisch), die perorale Applikation erfolgt als Lösung (z.B. in Solutol/EthanolA asser- oder PEG/ Ethanol/Wasser-Gemischen) oder als Suspension (z.B. in Tylose) jeweils über eine Schlundsonde. Nach Substanzgabe wird den Tieren zu festgelegten Zeitpunkten Blut entnommen. Dieses wird heparinisiert, anschließend wird daraus durch Zentrifugation Plasma gewonnen. Die Testsubstanz wird im Plasma über LC -MS/MS analytisch quantifiziert. Aus den so ermittelten Plasmakonzentration-Zeit-Verläufen werden unter Verwendung eines internen Standards und mit Hilfe eines validierten Rechenprogramms die pharmakokinetischen Kenngrößen berechnet, wie AUC (Fläche unter der Konzentration-Zeit-Kurve), Cmax (maximale Plasmakonzentration), tm (Halbwertszeit), Vss (Verteilungsvolumen) und CL (Clearance) sowie die absolute und die relative Bioverfügbarkeit F und Frei (i.v./p.o. -Vergleich bzw. Vergleich von Suspension zu Lösung nach p.o.-Gabe). C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen
Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überführt werden:
Tablette: Zusammensetzung:
100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.
Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm. Herstellung:
Die Mischung aus erfindungsgemäßer Verbindung, Lactose und Stärke wird mit einer 5%-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat 5 Minuten gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet.
Oral applizierbare Suspension:
Zusammensetzung:
1000 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 1000 mg Ethanol (96%), 400 mg Rhodigel® (Xanthan gum der Firma FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.
Herstellung:
Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, die erfindungsgemäße Verbindung wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluß der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt. Oral applizierbare Lösung:
Zusammensetzung:
500 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 2.5 g Polysorbat und 97 g Polyethylenglycol 400. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 20 g orale Lösung. Herstellung:
Die erfindungsgemäße Verbindung wird in der Mischung aus Polyethylenglycol und Polysorbat unter Rühren suspendiert. Der Rührvorgang wird bis zur vollständigen Auflösung der erfindungsgemäßen Verbindung fortgesetzt. i.v.-Lösung: Die erfindungsgemäße Verbindung wird in einer Konzentration unterhalb der Sättigungslöslichkeit in einem physiologisch verträglichen Lösungsmittel (z.B. isotonische Kochsalzlösung, Glucose- lösung 5% und/oder PEG 400-Lösung 30%) gelöst. Die Lösung wird steril filtriert und in sterile und pyrogenfreie Injektionsbehältnisse abgefüllt.

Claims

Patentansprüche
1. Verbindung der Formel (I)
Figure imgf000273_0001
in welcher für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000273_0002
steht, worin * die Verknüpfung zur RO-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbonylgruppe kennzeichnen, für (Ci-Cs)-Alkyl, das mit Cyano oder bis zu sechsfach mit Fluor substituiert sein kann, steht oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000273_0003
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2-, -CH2-CH2-, -C(=0)-CH2-*** oder -CH2-CH2-CH2- bedeutet und Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Oxetanyl, Tetrahydrofuranyl, Tetrahydropyranyl, Phenyl, Thienyl, Pyridyl oder 2,1,3-Benzoxadiazolyl bedeutet, wobei (C3-C6)-Cycloalkyl, Oxetanyl, Tetrahydrofuranyl und Tetrahydropyranyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor und Methyl substituiert sein können und wobei Phenyl, Thienyl und Pyridyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Cyano, Methyl, Difluormethyl, Trifluormethyl, Methoxy, Ethoxy, Trifluormefh- oxy, (Trifluormethyl) sulfanyl, Methylsulfonyl, Aminocarbonyl, Methoxy- carbonylamino und 2-Oxo-l,3-oxazolidin-3-yl substituiert sein können,
R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen oder miteinander verknüpft sind und zusammen eine -CEbCE -Brücke bilden und
R3 für Wasserstoff oder für einen Substituenten ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Methyl, Fluormethyl, Difluormethyl und Trifluormethyl steht, wobei ein solcher Substituent in der bezeichneten Position 5, 6, 7 oder 8 gebunden sein kann, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1, in welcher
Het für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000274_0001
steht, worin * die Verknüpfung zur RO-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur Carbonylgruppe kennzeichnen, für (C4-Cv)-Alkyl oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000275_0001
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2- oder -CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Tetrahydropyranyl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Methyl, Trifluormethyl, Methoxy und Aminocarbonyl substituiert sein kann,
R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen oder miteinander verknüpft sind und zusammen eine -CEbCE -Brücke bilden und
R3 für Wasserstoff oder für einen Substituenten ausgewählt aus der Gruppe Methyl und Trifluormethyl steht, wobei ein solcher Substituent in der bezeichneten Position 6 oder 7 gebunden ist, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Verbindung der Formel (I) nach Anspruch 1 oder 2, in welcher für bicyclisches Heteroaryl der Formel
Figure imgf000275_0002
steht, worin * die Verknüpfung zur R^-Gruppierung und ** die Verknüpfung zur
Carbonylgruppe kennzeichnen,
R1 für (C4-Cv)-Alkyl oder für eine Gruppe der Formel
Figure imgf000276_0001
steht, worin *** die Verknüpfung zum O-Atom kennzeichnet,
L -CH2- oder -CH2-CH2- bedeutet und
Cy (C3-C6)-Cycloalkyl, Tetrahydropyran-4-yl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl ein- oder zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Gruppe Fluor, Chlor, Methyl, Trifluormethyl, Methoxy und Aminocarbonyl substituiert sein kann,
R2A und R2B beide für Wasserstoff stehen und
R3 für Wasserstoff oder für Trifluormethyl, das in der bezeichneten Position 6 gebunden ist, steht, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Figure imgf000276_0002
in welcher Het, R1 und R3 die in Anspruch 1, 2 oder 3 angegebenen Bedeutungen haben, R2A und R2B jeweils für Wasserstoff stehen und das mit * gekennzeichnete chirale C-Atom in enantiomerenreiner Form die abgebildete ^-Konfiguration aufweist, sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.
Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der Formel (I) gemäß Anspruch 1, 2, 3 oder 4, worin R2A und R2B jeweils für Wasserstoff stehen, dadurch gekennzeichnet, dass man Di- ieri.-butyl-(2-hydroxyethyl)malonat der Formel (II)
Figure imgf000277_0001
in Gegenwart eines Phosphins und eines Azodicarboxylats mit einem Benzotriazin-4(3 /)- on-Derivat der Formel (ΠΙ)
Figure imgf000277_0002
in welcher R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebene Bedeutung hat, zu einer Verbindung der Formel (IV)
Figure imgf000277_0003
in welcher R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebene Bedeutung hat, umsetzt und die Verbindung der Formel (IV) dann entweder
Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (V)
Figure imgf000277_0004
(V), in welcher Het und R1 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebenen Bedeutungen haben und
Z1 für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom oder Iod steht, zu einer Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000278_0001
in welcher Het, R1 und R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert
zunächst mit einer Verbindung der Formel (VII)
Figure imgf000278_0002
in welcher Het die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebene Bedeutung hat,
PG für eine geeignete temporäre Schutzgruppe wie beispielsweise Benzyl steht und
Z2 für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom oder Iod steht, in Gegenwart einer Base zu einer Verbindung der Formel (VIII)
Figure imgf000279_0001
in welcher Het, PG und R3 die oben angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert, anschließend die Schutzgruppe PG abspaltet und die resultierende Verbindung der Formel (ΓΧ)
Figure imgf000279_0002
in welcher Het und R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebenen Bedeutungen haben, dann in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (X)
R1— Z3 (X), in welcher R1 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebene Bedeutung hat und
Z3 für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Chlor, Brom, lod, Mesylat, Triflat oder Tosylat steht, zur Verbindung der Formel (VI)
Figure imgf000280_0001
in welcher Het, R1 und R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebenen Bedeutungen haben, alkyliert und die so nach Methode [A] oder [B] erhaltene Verbindung der Formel (VI) schließlich durch Behandlung mit einer Säure und nachfolgendes Erhitzen in die Carbonsäure der Formel (I-A)
Figure imgf000280_0002
in welcher Het, R1 und R3 die in den Ansprüchen 1 bis 4 angegebenen Bedeutungen haben, überführt und die Verbindungen der Formel (I-A) gegebenenfalls in ihre Enantiomere und/ oder Diastereomere trennt und/oder gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen zu ihren Solvaten, Salzen und/oder Solvaten der Salze umsetzt.
6. Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten. 7. Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, zur Verwendung in einem Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung (COPD), Lungenemphysem, chronischer Bronchitis, pulmonaler Hypertension in der COPD (PH-COPD), Bronchiektasie, Asthma, interstitiellen Lungenerkrankungen, idiopathischer Lungenfibrose (IPF) und Lungensarkoidose, von Arteriosklerose, karotider Arteriosklerose, viraler Myokarditis, Kardiomyopathie und Aneurysmen, einschließlich deren Folgeerkrankungen wie Schlaganfall, Myokardinfarkt und periphere arterielle Verschlusskrankheit, sowie von chronischen Nierenerkrankungen und dem Alport-Syndrom.
Verwendung einer Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prävention von chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung (COPD), Lungenemphysem, chronischer Bronchitis, pulmonaler Hypertension in der COPD (PH-COPD), Bronchiektasie, Asthma, interstitiellen Lungenerkrankungen, idiopathischer Lungenfibrose (IPF) und Lungensarkoidose, von Arteriosklerose, karotider Arteriosklerose, viraler Myokarditis, Kardiomyopathie und Aneurysmen, einschließlich deren Folgeerkrankungen wie Schlaganfall, Myokardinfarkt und periphere arterielle Verschlusskrankheit, sowie von chronischen Nierenerkrankungen und dem Alport-Syndrom.
Arzneimittel enthaltend eine Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, in Kombination mit einem oder mehreren inerten, nicht-toxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen.
Arzneimittel enthaltend eine Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, in Kombination mit einem oder mehreren weiteren Wirkstoffen ausgewählt aus der Gruppe bestehend aus Corticosteroiden, beta-adrenergen Rezeptor-Agonisten, anti-muscarinergen Substanzen, PDE 4-Inhibitoren, PDE 5-Inhibitoren, sGC- Aktivatoren, sGC-Stimulatoren, HNE-Inhibitoren, Prostacyclin-Analoga, Endothelin-Antagonisten, Statinen, antifibrotisch wirkenden Mitteln, entzündungshemmend wirkenden Mitteln, immunmodulierend wirkenden Mitteln, immunsuppressiv wirkenden Mitteln und zytotoxisch wirkenden Mitteln.
Arzneimittel nach Anspruch 9 oder 10 zur Behandlung und/oder Prävention von chronischobstruktiver Lungenerkrankung (COPD), Lungenemphysem, chronischer Bronchitis, pulmonaler Hypertension in der COPD (PH-COPD), Bronchiektasie, Asthma, interstitiellen Lungenerkrankungen, idiopathischer Lungenfibrose (IPF) und Lungensarkoidose, von Arteriosklerose, karotider Arteriosklerose, viraler Myokarditis, Kardiomyopathie und Aneurysmen, einschließlich deren Folgeerkrankungen wie Schlaganfall, Myokardinfarkt und periphere arterielle Verschlusskrankheit, sowie von chronischen Nierenerkrankungen und dem Alport-Syndrom.
Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von chronisch-obstruktiver Lungenerkrankung (COPD), Lungenemphysem, chronischer Bronchitis, pulmonaler Hypertension in der COPD (PH-COPD), Bronchiektasie, Asthma, interstitiellen Lungenerkrankungen, idiopathischer Lungenfibrose (IPF) und Lungensarkoidose, von Arteriosklerose, karotider Arteriosklerose, viraler Myokarditis, Kardiomyopathie und Aneurysmen, einschließlich deren Folgeerkrankungen wie Schlaganfall, Myokardinfarkt und periphere arterielle Verschlusskrankheit, sowie von chronischen Nierenerkrankungen und dem Alport-Syndrom bei Menschen und Tieren durch Verabreichung einer wirksamen Menge mindestens einer Verbindung, wie in einem der Ansprüche 1 bis 4 definiert, oder eines Arzneimittels, wie in einem der Ansprüche 9 bis 11 definiert.
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