WO2015167213A1 - 빛의 조사를 이용한 지방 분해용 키트 - Google Patents

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WO2015167213A1
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light
irradiation
skin
less
kit
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최민식
김형준
정지용
이태룡
신동욱
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Definitions

  • the present disclosure relates to kits and slimming methods for breaking down fat.
  • Obesity is caused by the energy consumed in excess of energy consumed as fat fat accumulates in fat cells, causing various diseases such as arteriosclerosis, and because it is not cosmetically good, prevention is strongly required. have.
  • the present specification is to provide a lipolysis kit for lipolysis by irradiating light to fat cells of the skin or subcutaneous fat layer to enable the lipolysis of fat cells themselves.
  • the present specification is a light source irradiation device for irradiating light; And it provides a kit for lipolysis comprising a manual containing a method for decomposing fat by irradiation with light.
  • the light may have a wavelength of greater than 600nm to 1500nm or less.
  • the light may be visible or infrared light.
  • the light may have a pattern that amplifies skin transmittance.
  • the manual may include the irradiation intensity of light, the irradiation time of the light, the distance between the irradiation device and the skin, the irradiation method and the irradiation site.
  • the irradiation intensity of light may be 1J / cm 2 to 600J / cm 2 .
  • the irradiation time of light may be 0.5 minutes to 6 hours. In one embodiment of the present invention, the distance between the irradiation device and the skin may be 0cm to 200cm.
  • the irradiation method may be performed by direct irradiation.
  • the irradiation method may be performed through an auxiliary means capable of contacting the skin.
  • the auxiliary means may be one or more selected from the group consisting of filters, sheets, films, cosmetics, gels and creams.
  • the irradiation method may be performed using one or more selected from the group consisting of a needle, a cannula, and a microneedle.
  • the irradiated site may be any skin tissue that can accumulate fat except the eye, mouth, genitals, anus.
  • the present disclosure provides a slimming method comprising irradiating light to the skin.
  • the light may be the intensity of 1J / cm 2 to 600J / cm 2.
  • the irradiation may be for 0.5 minutes to 6 hours of irradiation.
  • the irradiation may be performed at a position where the distance from the skin is 0 cm to 200 cm.
  • the irradiation may be performed by direct irradiation.
  • the irradiation may be carried out through an auxiliary means capable of contacting the skin.
  • the irradiation may be to irradiate the skin subcutaneous fat layer with light.
  • the skin subcutaneous fat layer may comprise adipocytes or differentiated adipocytes that are in the course of differentiation or differentiation.
  • the irradiation may be to break down triglycerides (Triglyceride) of adipocytes into glycerol (Glycerol).
  • the conventional lipolysis method by irradiating light of a wavelength of light harmless to the body to decompose triglycerides in fat cells can safely and effectively decompose fat, the conventional lipolysis method It is more economical and simpler and can be applied to slimming methods.
  • Figure 1 is a measurement of the total triglycerides (Total TG) and serum glycerol (Serum Glycerol) amount in the media eluted from adipocytes after a specific wavelength light treatment of the light region according to an embodiment of the present invention at all stages of cell differentiation The result is.
  • Figure 2 is a result of measuring the total triglyceride and serum glycerol amount in the medium eluted from the adipocytes after a specific wavelength light treatment of the light region according to an embodiment of the present invention to the final differentiated adipocytes.
  • Figure 3 is a result of measuring the residual triglycerides (TG contents) in the adipocytes after a specific wavelength light treatment of the light region in accordance with an embodiment of the present invention after the final differentiated adipocytes.
  • Korean Patent Application No. 10-2014-0052315 filed April 30, 2014, is incorporated herein by reference in its entirety for all purposes. This application also claims the benefit of Korean Patent Application No. 10-2014-0052315, which is hereby incorporated by reference in its entirety.
  • the present specification is a light source irradiation device for irradiating light; And it provides a kit for lipolysis comprising a manual containing a method of decomposing fat by irradiation with light.
  • the light may be visible light or infrared light.
  • the light source irradiation device is a power supply; An input unit; A light source unit; sensor; Control unit; And a display unit, but is not limited thereto.
  • the input unit may be one capable of inputting light intensity, irradiation time, wavelength of light, and pattern of light as required for irradiation.
  • the light source unit may be one in which light is generated and irradiated.
  • the sensor includes various kinds of things, and may be for measuring the distance between the irradiation device and the skin.
  • the controller may control light irradiation through the light source unit as input to the input unit.
  • the display unit may display a content input through the input unit and a distance from the skin.
  • the light source unit may include a solar light transmitting material.
  • the solar light transmitting material can be used as long as it transmits the light, for example, a band pass that transmits only a quartz plate or a target ray region.
  • a band pass filter may be used, but is not limited thereto.
  • the light source unit LED (light emitting diode), OLED (organic light emitting diode), LD (laser diode), laser, electrodeless lamp, CNT (carbon nanotube), CCFL (cold cathode fluorescent lamp), FFL (Light Source Lamp), EEFL (External Electrode Fluorescent Lamp), Incandescent Lamp, Halogen Lamp, Fluorescent Lamp, Tungsten Lamp, Low Pressure / High Pressure Sodium Lamp, Low Pressure / High Pressure Mercury Lamp, Clenon Lamp, Metal Halide Lamp, HID Lamp, Remote light source illumination (optical fiber, prism light), xenon arc lamp, etc. may be used, but is not limited thereto.
  • the light source irradiating device means any device capable of emitting light, and although it is not intended to irradiate light, a person skilled in the art to which the specification belongs can easily change and irradiate light. It also includes a device that can.
  • the light source irradiating device may be a phototherapy device used in a hospital or a clinic, or may be a personal or portable light irradiation device.
  • the manual may include the irradiation intensity of light, the irradiation time of the light, the distance between the irradiation device and the skin, the irradiation method and the irradiation site.
  • the manual may include information for adjusting one or more of the irradiation intensity of the light, the irradiation time, the distance to the skin according to the user's state.
  • the irradiation intensity of light may be 1J / cm 2 to 600J / cm 2 .
  • the irradiation time of light may be 0.5 minutes to 6 hours. If the irradiation intensity is less than 1 J / cm 2 or the irradiation time is less than 0.5 minutes, the effect of the irradiation may be insignificant. If the irradiation intensity is more than 600 J / cm 2 or the irradiation time is more than 6 hours, the irradiation It can damage the skin.
  • the irradiation intensity of light is 1J / cm 2 or more, 10J / cm 2 or more, 50J / cm 2 or more, 100J / cm 2 or more, 150J / cm 2 or more, 200J / cm 2 or more, or 250J / cm 2 or more It may be, but is not limited thereto.
  • Irradiation intensity of the light in the present specification is 600J / cm 2 or less, 550J / cm 2 or less, 500J / cm 2 or less, 450J / cm 2 or less, 400J / cm 2 or less, 350J / cm 2 or less, or 300J / cm 2 or less days May be, but is not limited thereto.
  • the light irradiation time may be at least 10 minutes, at least 30 minutes, at least 1 hour, at least 1 hour 30 minutes, at least 2 hours, or at least 2 hours 30 minutes, but is not limited thereto. In the present specification, the light irradiation time may be 5 hours 30 minutes or less, 5 hours or less, 4 hours 30 minutes or less, 4 hours or less, 3 hours 30 minutes or less, or 3 hours or less, but is not limited thereto.
  • the distance between the irradiation device and the skin means the distance between the light source unit of the irradiation device and the skin by a sensor provided in the irradiation device, and in one embodiment of the present invention, the distance between the irradiation device and the skin may be 0 cm to 200 cm. have. If the distance from the skin is less than 0 cm, the skin does not come into contact but penetrates. If the distance is more than 200 cm, the effect of irradiation may be insignificant.
  • the distance between the irradiation device and the skin may be 5 cm or more, 10 cm or more, 15 cm or more, 20 cm or more, 25 cm or more, 30 cm or more, 35 cm or more, 40 cm or more, or 45 cm or more, but is not limited thereto.
  • the distance between the irradiation device and the skin may be 170 cm or less, 140 cm or less, 110 cm or less, 80 cm or less, 75 cm or less, 70 cm or less, 65 cm or less, 60 cm or less, or 55 cm or less, but is not limited thereto.
  • the irradiation method may be carried out by direct irradiation or via one or more auxiliary means selected from the group consisting of filters, sheets, films, cosmetics, gels and creams.
  • the irradiation method may also be performed using one or more selected from the group consisting of acupuncture, cannula, and microneedles.
  • the irradiated site may be any skin tissue where fat can accumulate except for the eye, mouth, genitals and anus.
  • the present specification provides a slimming method comprising irradiating light to the skin or subcutaneous fat layer thereof.
  • the term “slimming” may mean that the circumference or thickness of a body or a portion of a portion thereof is relatively small compared to its elongation or length. This "slimming” can also be a slimming, weight loss, or slimming of the body or a portion of the body, and weight loss in the process.
  • adipocytes are generally used adipocytes, and are not limited as long as they are cells storing fat. Includes differentiated cells, undifferentiated cells, and cells in differentiation.
  • the skin comprises the epidermis, dermis and subcutaneous fat layer and the fat cells present in each layer may be the subject of light irradiation herein.
  • the light is not limited as long as it is a light ray corresponding to the wavelength of the entire light region.
  • the light may be the wavelength of the light alone except heat. Only the wavelength of light can promote lipolysis.
  • Irradiation light used in the present specification may be one having a wavelength of more than 600nm to 1500nm even in the light region, specifically, in the present specification, light may have a real number in the range of more than 600nm to 1500nm or less as the wavelength.
  • the light region is greater than 600 nm, more than 605 nm, more than 610 nm, more than 615 nm, more than 620 nm, more than 625 nm, more than 630 nm, more than 640 nm, more than 641 nm, more than 643 nm, more than 645 nm, more than 647 nm, more than 649 nm, more than 650 nm, more than 660 nm.
  • the light region is 2000 nm or less, 1600 nm or less, 1500 nm or less, 1450 nm or less, 1400 nm or less, 1350 nm or less, 1300 nm or less, 1250 nm or less, 1200 nm or less, 1150 nm or less, 1100 nm or less, 1050 nm or less, 1000 nm or less, 950 nm or less, 900 nm or less 850 nm or less, 800 nm or less, 790 nm or less, 770 nm or less, 750 nm or less, 730 nm or less, 710 nm or less, 700 nm or less, 690 nm or less, 680 nm or less, 670 nm or less, 660 nm or less, 650 nm or less, 648 nm or less, 646 nm or less, 644 nm or less 640 nm or
  • the light may have a value of the wavelength described above as the maximum energy wavelength ( ⁇ max).
  • the light may have a wavelength region of ⁇ 100nm based on the ⁇ max of the light. More specifically, in one aspect of the invention, the light is ⁇ 90nm or less, ⁇ 80nm or less, ⁇ 70nm or less, ⁇ 60nm or less, ⁇ 50nm or less, ⁇ 40nm or less, ⁇ 30nm or less, based on the ⁇ max of the light, It may have a wavelength range of ⁇ 20nm or less, ⁇ 10nm or less, or ⁇ 5nm or less.
  • the wavelength of light exceeds 600nm to 700nm when lambda max is 660nm; 700 nm to 800 nm when lambda max is 740 nm; 800 nm to 900 nm when lambda max is 850 nm; 900 nm to 1,000 nm when lambda max is 940 nm; 1,000 nm to 1,100 nm when lambda max is 1,050 nm; 1,100 nm to 1,200 nm when lambda max is 1,150 nm; 1,200 nm to 1,300 nm when lambda max is 1,250 nm;
  • ⁇ max is 1,350 nm, it may be an area of 1,300 nm to 1,400 nm.
  • the maximum energy wavelength refers to a wavelength having the highest energy among lights having a wavelength of a specific region.
  • ⁇ max means a wavelength at the highest peak when the wavelength range of light exists in the same bell shape as a normal distribution graph in which the x axis is the wavelength and the y axis is the energy of the light.
  • the portion indicated by the dotted line means ⁇ max.
  • the irradiation may inhibit the fat formation process of the adipocytes in the step of passing from the undifferentiated adipocytes to the differentiated cells or in the middle of the differentiation or break down the produced fat, and the fat after the differentiation is completed Can break down fat in cells All the light irradiation before, during, and after the differentiation of adipocytes can confirm the effect of inhibiting or degrading fat formation, and when applying light to the skin or subcutaneous fat layer, various differentiation stages present in the skin It has a lipolytic effect on several fat cells in.
  • irradiation may be carried out on the skin or its subcutaneous fat layer prior to or during adipocyte differentiation. When carried out during the differentiation process, it is irrelevant at any time during the differentiation process, irradiation may be carried out only once, and may be carried out two or more times.
  • irradiating the undifferentiated cells of adipocytes with light in Phosphate Buffered Saline (PBS) medium Culturing the adipocytes in a cocktail medium for differentiation for 1 to 3 days and then irradiating the adipocytes with light in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium again; Irradiating the adipocytes with insulin in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium after incubation for 2 to 4 days in insulin medium; And culturing the adipocytes in FBS (fetal bovine serum) medium for 1 to 3 days.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • FBS fetal bovine serum
  • culturing the undifferentiated cells of adipocytes for 1 to 3 days and then irradiating with light in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium After culturing the adipocytes in a cocktail medium for differentiation for 1 to 3 days, after culturing for 2 to 4 days in insulin medium, culturing for 1 to 3 days in FBS (fetal bovine serum) medium; but may include; It is not limited to this.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • adipocytes In addition, after culturing the undifferentiated cells of adipocytes for 1 to 3 days, incubated for 1 to 3 days in a differentiation cocktail medium and then irradiated with light in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium; And culturing the adipocytes in insulin medium for 2 to 4 days and incubating for 1 to 3 days in FBS (fetal bovine serum) medium.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • FBS fetal bovine serum
  • adipocytes In addition, after incubating the undifferentiated cells of adipocytes for 1 to 3 days, incubated for 1 to 3 days in a cocktail medium for differentiation, then incubated for 2 to 4 days in insulin medium, and then again with light in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium Investigating; And culturing the adipocytes in FBS (fetal bovine serum) medium for 1 to 3 days.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • FBS fetal bovine serum
  • irradiation may be performed after completion of adipocyte differentiation.
  • adipocytes after culturing the undifferentiated cells of adipocytes for 1 to 3 days, incubated for 1 to 3 days in differentiation cocktail medium, incubated for 2 to 4 days in insulin medium, 1 to 3 in FBS (fetal bovine serum) medium Incubating for 3 days; And irradiating the adipocytes with light in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • adipocytes As the undifferentiated cells of adipocytes are cultured in a cocktail medium, insulin medium, and FBS medium, cell differentiation is completed to become differentiated cells, and the differentiated cells are irradiated with light.
  • Irradiation of differentiated adipocytes may promote lipolysis produced by adipocytes. This can be confirmed in the experimental example to be described later.
  • the cocktail medium for differentiation of the present specification is not particularly limited as long as it is a medium causing a change of state from proliferation to differentiation of cells, but is not limited to FBS (fetal bovine serum), insulin (insulin), and 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX )
  • FBS fetal bovine serum
  • insulin insulin
  • IBMX 3-isobutyl-1-methylxanthine
  • DEX dexamethasone
  • the concentration of each inclusion can vary depending on the adipocyte differentiation conditions.
  • FBS fetal bovine serum
  • IBMX 3-isobutyl-1-methylxanthine
  • DEX dexamethasone
  • Insulin medium of the present specification serves to form fat globules (pockets) in adipocytes, and FBS medium serves to supply energy by filling fat with fat globules.
  • the irradiation is not particularly limited, but is preferably performed when the adipocytes are in PBS (Phosphate Buffered Saline) medium. It is important that the wavelength of light affects the adipocytes without any special restrictions, and it is essential to apply the lipolytic effect intact through this.
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • Non-invasive irradiation is a direct irradiation on the skin, depending on the wavelength of the irradiated light to reach the skin epidermis, the lower epidermis, the fat cells located in the shallow depth such as the dermis.
  • Invasive irradiation is not particularly limited as long as it is a known invasive technique, and a deeper, for example, epidermis, is irradiated with light in the state of inserting a needle, a cannula or a microneedle or the like having a cutting surface for insertion into the skin. Light can reach the adipocytes located at a depth of 5 mm or more.
  • auxiliary means that can increase the wavelength transmission force or transmittance to the adipocytes upon light irradiation according to the present specification.
  • the auxiliary means can be in contact with the skin, the branched light irradiation according to the present specification may be performed through such an auxiliary means.
  • the light irradiation according to the present disclosure may increase the wavelength transmission force or transmittance to the adipocytes by using a specific pattern of light that amplifies skin transmittance.
  • Rat 3T3-L1 undifferentiated fibroblasts purchased from ATCC (CL-173) were prepared. Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) containing 4.5 g / L glucose containing 10% calf serum (Gibco BRL, NY, USA) in a humidified incubator containing 10% CO 2 (PAA, Austria) for 2 days.
  • DMEM Dulbecco's modified Eagle's medium
  • the undifferentiated adipocytes obtained in the above 1-1 are differentiation cocktail medium for differentiation experiments, 10% FBS (fetal bovine serum) (PAA, Austria), 10 mg / ml insulin (Sigma-Aldrich) ), St. Louis, USA, 0.5 mM 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX) (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA), and 1 mM dexamethasone (DEX) (Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) was replaced with DMEM containing 4.5 g / L glucose.
  • FBS fetal bovine serum
  • IBMX 3-isobutyl-1-methylxanthine
  • DEX dexamethasone
  • the medium was replaced with DMEM containing 4.5 g / L glucose containing 10% FBS and 10 mg / ml insulin and the cells were incubated for 3 days. It was then incubated in DMEM containing 4.5 g / L glucose containing 10% FBS without insulin for 2 days.
  • PBS Phosphate Buffered Saline, without CaCl and MgCl
  • Preadipocyte cultured undifferentiated cells obtained in 1-1 above with cocktail medium and immersed in fresh PBS again ⁇ max
  • the light having a wavelength of 660 nm, 740 nm, 850 nm, 940 nm, 1,050 nm, 1,150 nm, 1,250 nm and 1,350 nm was treated for 1 hour in a humid incubator containing 10% CO 2 , respectively.
  • the irradiation distance was 5 cm
  • the irradiation amount was 10 J / cm 2 .
  • Control (CTL) is the same for all conditions except no light treatment.
  • step 4 After washing the cells cultured in insulin medium for 3 days twice with PBS, and then immersed in PBS again for 1 hour and then treated with light for the same wavelength as step 1) and exchanged with FBS medium for 2 days, and then cultured cells After washing twice with PBS, and immersed in PBS again for 1 hour, light treatment of the same wavelength as in step 1) was performed.
  • the cultured cells were washed twice with PBS, and then 2% BSA (bovine serum albumin) (Sigma-Aldrich) to measure total triglyceride and glycerol eluted with medium. , St. Louis, USA) incubated for 6 hours in a limiting medium of 1,000 mg / L glucose-containing DMEM (PAA, Austria), CTL and the control group ⁇ max is 660nm, 740nm, 850nm, Culture medium was harvested from cells treated with light at wavelengths of 940 nm, 1,050 nm, 1,150 nm, 1,250 nm and 1,350 nm.
  • BSA bovine serum albumin
  • Adipocytes were differentiated in the same manner as in Example 1-2.
  • adipocytes obtained in 2-2 in PBS for 1 hour after light treatment with wavelengths of CTL and ⁇ max of 660 nm, 740 nm, 850 nm, 940 nm, 1,050 nm, 1,150 nm, 1,250 nm and 1,350 nm, respectively. It was incubated for 6 hours in a nutritional restriction medium such as In the case of treating light, the irradiation distance was 5 cm, and the irradiation amount was 10 J / cm 2 .
  • the culture medium was collected from cells treated with light having a wavelength of 660 nm, 740 nm, 850 nm, 940 nm, 1,050 nm, 1,150 nm, 1,250 nm, and 1,350 nm in the control group CTL and the experimental group ⁇ max. It was.
  • the amounts of triglyceride and glycerol eluted with the nutrient-limiting medium collected after the light treatment in Examples 1 and 2 were measured using Triglyceride reagent (Sigma-Aldrich, USA) and Free Glycerol Reagent (Sigma-Aldrich, USA), respectively. Calculated. The amount of glycerol was measured by absorbance at a wavelength of 540 nm after reacting for 15 minutes by mixing the medium and Free Glycerol Reagent. The amount of eluted triglycerides was indirectly measured using lipase.
  • the eluted triglyceride was decomposed into glycerol and fatty acid using lipase, and then the amount of glycerol was measured. From this measurement, only the amount of eluted triglycerides was calculated by subtracting the amount of glycerol already eluted by light treatment before lipase treatment.
  • Example 1 Experimental results of Example 1 are shown in Fig. 1 and Table 1, and experimental results of Example 2 are shown in Fig. 2 and Table 2.
  • Tables 1 and 2 are based on Fig. 1 and Fig. 2, respectively, showing the relative value of the result for each irradiation wavelength in percentage (%) with the control (CTL) test results in each figure as 100%.
  • the numerical values of the wavelengths represent lambda max values.
  • Example 1 As shown in FIG. 1 and Table 1, the results according to Example 1, it was possible to confirm the lipolysis effect at the entire wavelength treated during the light treatment during the differentiation process, in particular, eluted during the light treatment at a wavelength of 660 nm ⁇ max
  • the amount of triglyceride was increased to 150.4% compared to the control group, and the amount of glycerol eluted from the medium was increased to 160.6% compared to the control group, showing the highest decomposition effect, and the wavelength with ⁇ max of 1,350 nm showing the smallest decomposition effect.
  • the amount of triglycerides eluted was 139.6% higher than that of the control group, and the amount of glycerol eluted by disintegration into the medium was increased to 181.5% compared to the control group. It was confirmed. Therefore, it was confirmed that even when irradiated with light according to the present invention to the finally completed adipocytes has a very significant lipolysis effect, all these results are statistically significant.
  • the amount of residual triglycerides (triglycerides) in the differentiated adipocytes was shown to be reduced at all wavelengths treated, it was confirmed that the lipolysis effect through these results. It was confirmed that the amount of residual triglycerides in adipocytes decreased by 50.3% significantly compared to the control group when light treatment with ⁇ max of 660 nm showed the highest decomposition effect, and light with wavelength of 1,350 nm showed the smallest decomposition effect. Even after treatment, the residual fat amount in adipocytes decreased to 79.8%, which was statistically significant compared to the control group. The results are all statistically significant.
  • Irradiating light of a specific wavelength in the differentiation stage or the completed differentiation of adipocytes through the results of Experimental Examples 1 and 2 has a remarkable effect of degrading triglycerides in adipocytes into glycerol and neutralizing adipocytes. It can be seen that it has a significant effect on eluting fat out of cells. Therefore, it can be seen that the treatment of light according to the present invention has an effect on fat decomposition.

Abstract

명세서는 빛을 조사하는 광원 조사 장치 및 빛을 조사하여 지방을 분해하는 방법이 기재된 설명서를 갖는 지방 분해용 키트 및 피부에 빛을 조사하는 슬리밍 방법에 관한 것을 제공한다. 명세서에 따르면, 신체에 무해한 빛 영역의 파장의 빛을 조사하여 지방세포 내 중성지방을 분해시킬 수 있어 안전하면서도 효과적으로 지방을 분해 시킬 수 있고, 기존의 지방 분해 방법보다 경제적이며 간편하다는 이점이 있으므로, 슬리밍 방법에 이용할 수 있다.

Description

빛의 조사를 이용한 지방 분해용 키트
본 명세서는 지방을 분해하는 키트 및 슬리밍 방법에 관한 것이다.
비만은 소비에너지에 비해 과잉으로 섭취한 에너지가 지방세포에 중성지방으로 축적하여 생기는 것으로, 동맥경화 등의 여러 질병을 일으키는 원인이 될 뿐 아니라, 미용상 좋지 못하기 때문에, 그 예방개선이 강하게 요구되고 있다.
최근 선진국을 비롯한 전세계에서는 비만자의 비율이 매년 증가하고 있는데, 그 이유로는 과식, 운동부족, 스트레스 등을 들 수 있으며, 식사제한, 운동요법은 강한 의지와 오랜 기간 지속할 필요가 있어 중간에 포기하는 사람이 많다.
이러한 사실로부터, 비만의 예방, 개선에 도움을 주는 지방분해 방법 내지 지방분해 촉진제의 개발이 이루어지고 있다. 예를 들어, 천연 추출물에서 얻은 성분을 이용하여 지방 분해를 촉진하는 방법이 사용되나, 반드시 충분한 효과를 갖는다고 말할 수 없으며, 또한 그 중에서는 부작용의 우려가 있는 물질도 있었다. 한편 지방세포 단위 자체에서 지방 분해를 촉진하는 연구는 거의 없는 실정이었다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 본 명세서는 지방세포 자체의 지방분해를 가능하게 하도록, 피부 또는 그 피하지방층의 지방세포에 빛을 조사하여 지방분해를 시키는 지방분해용 키트를 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
상기와 같은 목적을 해결하기 위하여 본 명세서는 빛을 조사하는 광원 조사 장치; 및 빛을 조사하여 지방을 분해하는 방법이 포함된 설명서를 포함하는 지방 분해용 키트를 제공한다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛은 600nm 초과 내지 1500nm 이하의 파장을 가지는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛은 가시광선 또는 적외선일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛은 피부 투과도를 증폭시키는 패턴을 갖는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 설명서는 빛의 조사세기, 빛의 조사시간, 조사장치와 피부와의 거리, 조사방법 및 조사부위를 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛의 조사세기는 1J/cm2 내지 600J/cm2인 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛의 조사 시간은 0.5분 내지 6시간인 것 일 수 있다. 본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사장치와 피부와의 거리는 0cm 내지 200cm인 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사 방법은 직접조사로 수행하는 것 일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사 방법은 피부에 접촉될 수 있는 보조수단을 매개로 하여 수행하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 보조수단은 필터, 시트, 필름, 화장품, 젤 및 크림등으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사 방법은 침관, 캐뉼라, 및 마이크로 니들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 이용하여 수행하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사 부위는 안구, 구강, 성기, 항문을 제외한 지방이 축적될 수 있는 모든 피부조직인 것일 수 있다.
또한 본 명세서는 피부에 빛을 조사하는 것을 포함하는 슬리밍 방법을 제공한다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛은 1J/cm2 내지 600J/cm2의 세기인 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 0.5분 내지 6시간 동안 조사하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 피부와의 거리가 0cm 내지 200cm인 위치에서 수행하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 직접조사로 수행하는 것 일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 피부에 접촉될 수 있는 보조수단을 매개로 하여 수행하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 피부 피하지방층에 빛을 조사하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 피부 피하지방층은 미분화 또는 분화 도중에 있는 지방세포 또는 분화 완료된 지방세포를 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 조사는 지방세포의 트리글리세라이드(Triglyceride)를 글리세롤(Glycerol)로 분해시키는 것일 수 있다.
본 명세서의 지방 분해용 키트 및 슬리밍 방법에 따르면, 신체에 무해한 빛 영역의 파장의 빛을 조사하여 지방세포 내 중성지방을 분해시킬 수 있어 안전하면서도 효과적으로 지방을 분해시킬 수 있고, 기존의 지방 분해 방법보다 경제적이며 간편하다는 이점이 있으므로 슬리밍 방법에 적용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 빛 영역의 특정 파장 빛처리를 세포 분화 모든 단계에 실시한 후 지방세포로부터 용출된 배지 내 총 중성지방(Total TG) 및 혈청 글리세롤(Serum Glycerol) 양의 측정 결과이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 빛 영역의 특정 파장 빛처리를 최종 분화 완료된 지방세포에 실시한 후 지방세포로부터 용출된 배지 내 총 중성지방 및 혈청 글리세롤 양의 측정 결과이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 빛 영역의 특정 파장 빛처리를 최종 분화 완료된 지방세포에 실시한 후 지방세포 내 잔류 중성지방(TG contents) 측정 결과이다.
도 4는 빛의 파장과 λmax를 예시적으로 나타낸 것이다.
2014년 4월 30일에 출원된 한국 특허 출원번호 10-2014-0052315호는 모든 목적으로서 전체가 본 명세서에 참조로 포함된다. 또한, 본 출원은 그 전체가 본 며엣서에 참조로 포함되는 한국 특허 출원번호 10-2014-0052315호의 이익을 주장한다.
이하에서는, 본 명세서가 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 본 발명을 용이하게 실시할 수 있도록 하기 위하여, 본 발명의 바람직한 실시예들에 관하여 상세히 설명하기로 한다.
본 명세서는 빛을 조사하는 광원 조사 장치; 및 빛을 조사하여 지방을 분해하는 방법이 포함된 설명서를 포함하는 지방분해용 키트를 제공한다.
본 명세서에서 빛은 가시광선 또는 적외선 일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 광원 조사 장치는 전원부; 입력부; 광원부; 센서; 제어부; 및 표시부를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 입력부는 조사에 필요한 것으로서 광세기, 조사시간, 빛의 파장, 빛의 패턴을 입력 할 수 있는 것일 수 있다. 광원부는 빛이 생성되고 조사되는 것일 수 있다. 센서는 다양한 종류의 것을 포함하는 것으로서, 조사장치와 피부와의 거리를 측정하기 위한 것일 수 있다. 제어부는 입력부에 입력된 내용대로 광원부를 통한 빛 조사를 제어하는 것일 수 있다. 표시부는 입력부를 통해 입력한 내용 및 피부와의 거리를 표시하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 광원부는 태양광 투과성 물질을 포함할 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 태양광 투과성 물질은 상기 빛을 투과시키는 것이면 모두 사용이 가능하며, 예를 들면 석영판(Quartz Plate) 또는 목표로 하는 광선영역만 투과시키는 대역(帶域)통과필터(Band pass filter) 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 일 측면에 있어서, 광원부는 LED(발광다이오드), OLED(유기발광다이오드), LD(레이저다이오드), 레이저, 무전극램프, CNT(탄소나노튜브), CCFL(냉음극형광램프), FFL(연광원램프), EEFL(외부전극형광램프), 백열램프, 할로겐램프, 형광램프, 텅스텐램프, 저압/고압나트륨램프, 저압/고압수은램프, 크레논램프, 메탈할라이드램프, HID 램프, 원격광원조명(광화이버, 프리즘 라이트), 제논아크램프 등을 사용할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
본 명세서에서 광원 조사 장치는 빛을 방출 할 수 있는 모든 장치를 의미하며, 비록 그것이 빛을 조사하기 위한 것이 아니라도, 명세서가 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 변경하여 빛을 조사할 수 있는 장치 또한 포함한다. 광원 조사 장치는 병원 또는 한의원에서 사용하는 광선치료기 일 수도 있으며, 개인용 또는 휴대용 광선조사기기 일 수도 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 설명서는 빛의 조사세기, 빛의 조사시간, 조사장치와 피부와의 거리, 조사방법 및 조사부위를 포함하는 것일 수 있다. 본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 설명서는 사용자의 상태에 따라 상기 빛의 조사세기, 조사시간, 피부와의 거리 중 하나 이상을 조절하는 정보를 포함할 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서 빛의 조사세기는 1J/cm2 내지 600J/cm2인 것일 수 있다. 본 발명의 일 실시 태양에 있어서 빛의 조사시간은 0.5분 내지 6시간 일 수 있다. 조사세기가 1J/cm2 미만이거나 조사시간이 0.5분 미만인 경우에는 그 조사로 인한 효과가 미미할 가능성이 있으며, 조사세기가 600J/cm2 초과이거나 조사시간이 6시간 초과인 경우에는 그 조사로 인해 피부에 손상을 가할 수 있다. 본 명세서에서 빛의 조사세기는 1J/cm2 이상, 10J/cm2 이상, 50J/cm2 이상, 100J/cm2 이상, 150J/cm2 이상, 200J/cm2 이상, 또는 250J/cm2 이상 일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 본 명세서에서 빛의 조사세기는 600J/cm2 이하, 550J/cm2 이하, 500J/cm2 이하, 450J/cm2 이하, 400J/cm2 이하, 350J/cm2 이하 또는 300J/cm2 이하 일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 본 명세서에서 빛 조사 시간은 10분 이상, 30분 이상, 1시간 이상, 1시간 30분 이상, 2시간 이상, 또는 2시간 30분 이상일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 본 명세서에서 빛 조사 시간은 5시간 30분 이하, 5시간 이하, 4시간 30분 이하, 4시간 이하, 3시간 30분 이하, 또는 3시간 이하 일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
조사장치와 피부와의 거리는, 조사 장치에 구비된 센서에 의해서 조사장치의 광원부와 피부와의 거리를 의미하는 것으로서, 본 발명의 일 실시 태양에 있어서 조사장치와 피부와의 거리는 0cm 내지 200cm일 수 있다. 피부와의 거리가 0cm 미만인 경우 피부에 접촉하는 것이 아니라 침투 하는 것이며, 200cm 초과인 경우에는 조사로 인한 효과가 미미할 가능성이 있다. 본 명세서에서 조사장치와 피부와의 거리는 5cm 이상, 10cm 이상, 15cm 이상, 20cm 이상, 25cm 이상, 30cm 이상, 35cm 이상, 40cm 이상 또는 45cm 이상 일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다. 본 명세서에서 조사장치와 피부와의 거리는 170cm 이하, 140cm 이하, 110cm 이하, 80cm 이하, 75cm 이하, 70cm 이하, 65cm 이하, 60cm 이하, 또는 55cm 이하 일 수 있으나 이에 제한되지는 않는다.
조사 방법은 직접조사로 수행하는 것 또는 필터, 시트, 필름, 화장품, 젤 및 크림으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 보조수단을 매개로 하여 수행하는 것일 수 있다. 또한 조사 방법은 침관, 캐뉼라, 및 마이크로 니들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 이용하여 수행하는 것일 수 있다.
조사 부위는 안구, 구강, 성기, 항문을 제외한 지방이 축적될 수 있는 모든 피부조직인 것일 수 있다.
본 명세서는 피부 또는 그 피하지방층에 빛을 조사하는 것을 포함하는 슬리밍 방법을 제공한다.
본 명세서에서 "슬리밍"이라 함은, 신체 또는 그 부위 중 일부분의 둘레 또는 두께를 그 신장 또는 길이에 비해 상대적으로 작게하는 것을 의미할 수 있다. 또한 이러한 "슬리밍"은 신체 또는 그 부위 중 일부분을 날씬하게 하거나, 살을 빼거나, 가느다랗게 하는 것 일 수 있으며 그 과정에서 체중이 감량 될 수도 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 지방세포(adipocyte)는 일반적으로 통용되는 지방세포를 말하며, 지방을 저장하는 세포이면 한정되는 것이 아니다. 분화세포, 미분화 세포 및 분화 도중에 있는 세포를 모두 포함한다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 피부는 표피, 진피 및 피하지방층을 포함하는 것이며 각 층에 존재하는 지방세포가 본 명세서에서 빛 조사의 대상이 될 수 있다.
본 발명의 일 실시 태양에 있어서, 빛은 빛 전 영역의 파장에 해당하는 광선이면 한정되지 않는다. 또한, 빛은 열이 제외된 빛의 파장 단독인 것일 수 있다. 빛의 파장만으로 지방 분해를 촉진시킬 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 조사 광선은 빛 영역 중에서도 600nm 초과 내지 1500nm 이하의 파장을 갖는 것일 수 있으며, 구체적으로 본 명세서에서 빛은 600nm초과 내지 1500nm 이하 범위의 실수를 파장으로서 가지는 것일 수 있다. 본 명세서에서 빛 영역은 600nm 초과, 605nm 이상, 610nm 이상, 615nm 이상, 620nm 이상, 625nm 이상, 630nm 이상, 640nm 이상, 641nm 이상, 643nm이상, 645nm 이상, 647nm이상, 649nm이상, 650nm 이상, 660nm 이상, 670nm 이상, 680nm 이상, 690nm 이상, 700nm 이상, 710nm 이상, 730nm 이상, 750nm 이상, 770nm 이상, 790nm 이상, 800nm 이상, 850nm 이상, 900nm 이상, 950nm 이상, 1000nm 이상, 1050nm 이상, 1100nm 이상, 1150nm 이상, 1200nm 이상, 1250nm 이상, 1300nm 이상, 1350nm 이상, 1400nm 이상, 1450nm 이상, 또는 1500nm 이상일 수 있다. 본 명세서에서 빛 영역은 2000nm 이하, 1600nm 이하, 1500nm 이하, 1450nm 이하, 1400nm 이하, 1350nm 이하, 1300nm 이하, 1250nm 이하, 1200nm 이하, 1150nm 이하, 1100nm 이하, 1050nm 이하, 1000nm 이하, 950nm 이하, 900nm 이하, 850nm 이하, 800nm 이하, 790nm 이하, 770nm 이하, 750nm 이하, 730nm 이하, 710nm 이하, 700nm 이하, 690nm 이하, 680nm 이하, 670nm 이하, 660nm 이하, 650nm 이하, 648nm 이하, 646nm 이하, 644nm 이하, 642nm 이하, 640nm 이하, 635nm 이하, 630nm 이하, 625nm 이하, 620nm 이하, 615nm 이하, 610nm 이하, 605nm 이하, 또는 601nm 이하일 수도 있다. 본 명세서에서 빛 영역은 600nm초과 내지 700nm이하 일 때 가장 바람직하다.
또한, 본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 빛은 상기에 기재된 파장의 수치를 최대 에너지 파장(λmax)으로 가지는 것일 수 있다. 구체적으로, 본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 빛은 그 빛의 λmax를 기준으로 ±100nm의 파장 영역을 가지는 것일 수 있다. 더 구체적으로, 본 발명의 일 측면에 있어서, 상기 빛은 그 빛의 λmax를 기준으로 ±90nm 이하, ±80nm 이하, ±70nm 이하, ±60nm 이하, ±50nm 이하, ±40nm 이하, ±30nm 이하, ±20nm 이하, ±10nm 이하, 또는 ±5nm 이하의 파장 영역을 가지는 것일 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 일 측면에 있어서, 빛의 파장은 λmax가 660nm인 경우에 600nm초과 내지 700nm 이하; λmax가 740nm인 경우에 700nm~800nm; λmax가 850nm인 경우에 800nm~900nm; λmax가 940nm인 경우에 900nm~1,000nm; λmax가 1,050nm인 경우에 1,000nm~1,100nm; λmax가 1,150nm인 경우에 1,100nm~1,200nm; λmax가 1,250nm인 경우에 1,200nm~1,300nm; λmax가 1,350nm인 경우에 1,300nm~1,400nm의 영역인 것일 수 있다.
본 명세서에서 최대 에너지 파장, 즉 λmax는 특정 영역의 파장을 가지는 빛 중에서 가장 에너지가 높은 파장을 의미한다. 구체적으로, λmax는 빛의 파장 범위가 x축을 파장, y축을 빛의 에너지로 하는 정규 분포 그래프와 같은 종 모양으로 존재하는 경우에 있어서, 그 에너지가 가장 높은 최고점(peak)에서의 파장을 의미한다. 예를 들어 도 4의 각 빛 파장 영역에 있어서, 점선으로 표시된 부분이 λmax를 의미한다.
본 명세서의 일 측면에 있어서, 조사는 미분화 지방세포에서 분화 세포로 넘어가는 단계 또는 분화의 중간 과정에 있는 지방세포의 지방형성 과정을 억제 혹은 생성되는 지방을 분해시킬 수 있고, 분화 완료 이후의 지방세포의 지방을 분해시킬 수 있다. 지방세포 자체의 분화 전, 도중, 이후에 빛 조사를 실시하는 모든 경우에 지방 형성 억제 혹은 분해 효과를 확인할 수 있으며, 피부 또는 그 피하지방층에 빛 조사를 실시하는 경우에는 피부 내 존재하는 다양한 분화 단계에 있는 여러 지방세포에 대하여 지방 분해 효과를 가진다.
지방세포가 미분화 세포인 경우, 조사는 지방세포 분화 이전 또는 분화 과정 중에 있는 피부 또는 그 피하지방층에 실시될 수 있다. 분화 과정 중에 실시되는 경우, 분화 과정 중 어느 때에 조사가 이루어져도 상관이 없으며, 조사는 1회만 실시될 수 있고, 2회 이상 실시될 수 있다.
구체적으로, 지방세포의 미분화 세포를 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 상기 지방세포를 분화용 칵테일 배지에서 1 내지 3일간 배양한 후 다시 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 상기 지방세포를 인슐린 배지에서 2 내지 4일간 배양 후 다시 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 및 상기 지방세포를 FBS(fetal bovine serum) 배지에서 1 내지 3일간 배양하는 단계;를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 지방세포의 미분화 세포를 1 내지 3일간 배양한 후 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 상기 지방세포를 분화용 칵테일 배지에서 1 내지 3일간 배양한 후, 인슐린 배지에서 2 내지 4일간 배양 후, FBS(fetal bovine serum) 배지에서 1 내지 3일간 배양하는 단계;를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 지방세포의 미분화 세포를 1 내지 3일간 배양한 후, 분화용 칵테일 배지에서 1 내지 3일간 배양한 후 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 및 상기 지방세포를 인슐린 배지에서 2 내지 4일간 배양 후 FBS(fetal bovine serum) 배지에서 1 내지 3일간 배양하는 단계;를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
또한, 지방세포의 미분화 세포를 1 내지 3일간 배양한 후, 분화용 칵테일 배지에서 1 내지 3일간 배양한 후, 인슐린 배지에서 2 내지 4일간 배양 후, 다시 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계; 및 상기 지방세포를 FBS(fetal bovine serum) 배지에서 1 내지 3일간 배양하는 단계;를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
이러한 경우, 분화된 이후의 지방세포에서 생성된 지방을 분해하는 것뿐만 아니라, 미분화 세포가 분화 단계 중에 지방생성을 억제하도록 할 수 있다. 이는 후술할 실험예에서 확인할 수 있다.
또한, 조사는 지방세포 분화 완료 후에 실시될 수 있다.
구체적으로, 지방세포의 미분화 세포를 1 내지 3일간 배양한 후, 분화용 칵테일 배지에서 1 내지 3일간 배양하고, 인슐린 배지에서 2 내지 4일간 배양한 후, FBS(fetal bovine serum) 배지에서 1 내지 3일간 배양하는 단계; 및 상기 지방세포를 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에서 빛으로 조사하는 단계;를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.
지방세포의 미분화 세포가 칵테일 배지, 인슐린 배지, FBS 배지에서 배양되면서 세포 분화가 완료되어 분화 세포가 되고, 이러한 분화 세포에 빛을 조사하는 것이다.
분화 지방세포에 빛을 조사하는 경우, 지방세포에서 생성된 지방분해를 촉진할 수 있다. 이는 후술할 실험예에서 확인할 수 있다.
본 명세서의 분화용 칵테일 배지는 세포의 증식에서 분화로의 상태 변화를 일으키는 배지이면 특별히 한정되는 것은 아니나, FBS(fetal bovine serum), 인슐린(insulin), 3-이소부틸-1-메틸잔틴(IBMX) 및 덱사메타손(dexamethasone, DEX)으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 함유하는 배지일 수 있다. 지방세포 분화조건상 함유물 각각의 농도는 변동 가능하다. 구체적으로, 10% FBS(fetal bovine serum), 10 mg/ml 인슐린(insulin), 0.5 mM 3-이소부틸-1-메틸잔틴(IBMX) 및 1 mM 덱사메타손(dexamethasone, DEX)을 함유하는 4.5 g/L 글루코스 함유 DMEM이 바람직하다.
본 명세서의 인슐린 배지는 지방세포 내에 지방구(주머니)를 형성하는 역할을 하고, FBS 배지는 지방구에 지방을 채워주어 에너지를 공급하는 역할을 한다.
본 명세서에서 상기 조사는 특별히 한정되는 것은 아니나, 지방세포가 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지에 있을 때 실시되는 것이 바람직하다. 이는 빛의 파장이 지방세포에 특별한 제한조건 없이 미치는 것이 중요하고, 이를 통해 지방분해 효과를 온전하게 적용시키는 것이 핵심인바, 일반 배지를 사용할 경우 배지에 함유된 여러 성분들에 의하여 빛의 간섭 혹은 산란 등의 현상이 발생하여 빛의 특정 파장이 온전하게 지방세포에 전달되는 것이 방해되어 파장의 명확한 효과를 볼 수 없기 때문이다. 반면 PBS(Phosphate Buffered Saline) 배지는 간섭 혹은 산란 등의 현상을 방지하여 빛의 특정 파장의 전달력이 우수하다.
본 명세서에 따른 빛 조사는 비침습성 또는 침습성일 수 있다. 비침습성 조사는 피부상 직접적으로 빛을 조사하는 것으로, 조사되는 빛의 파장에 따라 피부 표피 및 하부 표피, 진피 등 얕은 깊이에 위치하는 지방세포에 도달하도록 하는 것이다. 침습성 조사는 공지의 침습성 기술이면 특별히 한정되는 것은 아니며, 피부에 삽입하기 위한 절단면을 가지는 침관, 캐뉼라(cannula) 또는 마이크로 니들 등을 피부에 삽입한 상태에서 빛을 조사하여 보다 깊은, 예를 들어 표피로부터 5mm 이상의 깊이에 위치하는 지방세포에 빛이 도달하도록 할 수 있다.
또한, 본 명세서에 따른 빛 조사시 지방세포로의 파장 전달력 내지 투과도를 증가시킬 수 있는 보조수단을 피부에 도포할 수 있다. 보조수단은 피부에 접촉 될 수 있는 것으로서, 본 명세서에 따른 가지광선 조사는 이러한 보조수단을 매개로 하여 수행 될 수 있다. 또한 본 명세서에 따른 빛 조사는 피부 투과도를 증폭시키는 특정 패턴의 빛을 이용하여 지방세포로의 파장 전달력 내지 투과도를 증가시킬 수 있다.
본 명세서에서, 특정 영역 파장의 빛 조사는 지방세포의 트리글리세라이드(Triglyceride)를 글리세롤(Glycerol)로 분해시킨다. 중성지방인 트리글리세라이드의 분해율이 상승되면서 지방분해 효능이 나타나게 된다.
본 명세서는 신체에 무해한 빛 영역의 파장의 빛을 조사하여 지방세포 내 중성지방을 분해시키는 것이므로 안전하면서도 효과적으로 지방을 분해시킬 수 있고, 기존의 지방 분해 방법보다 경제적이며 간편하다는 이점이 있어 슬리밍 방법으로서 효과적으로 사용될 수 있다.
이하의 실시를 통하여 본 발명이 더욱 상세하게 설명된다. 단, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것으로서 이들만으로 본 발명의 범위가 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
전단계 빛처리(Whole stage treatment)
1-1. 미분화 지방세포 배양
ATCC (CL-173)로부터 구입한 쥐의 3T3-L1 미분화 섬유아세포(fibroblast)를 준비하였다. 미분화 세포(Preadipocyte cell)를 10% CO2를 함유하는 습기 있는 인큐베이터에서 10% 송아지 혈청(calf serum) (Gibco BRL, NY, USA)을 함유하는 4.5 g/L 글루코스 함유 DMEM(Dulbecco's modified Eagle's medium) (PAA, 오스트리아)로 2일 동안 배양하였다.
1-2. 지방세포 분화
상기 1-1에서 얻은 미분화 지방세포는 분화 실험을 위하여 분화용 칵테일 배지로서, 10% FBS(fetal bovine serum) (PAA, 오스트리아), 10 mg/ml 인슐린(insulin) (시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 세인트루이스(St. Louis), 미국), 0.5 mM 3-이소부틸-1-메틸잔틴(IBMX) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국), 및 1 mM 덱사메타손(dexamethasone, DEX) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국)을 함유하는 4.5 g/L 글루코스 함유 DMEM으로 교체하였다. 배양 2일 후 배지를 10% FBS 및 10 mg/ml 인슐린을 함유하는 4.5 g/L 글루코스 함유 DMEM으로 교체하고 세포를 3일간 배양하였다. 그리고 나서 2일 동안 인슐린 없이 10% FBS을 함유하는 4.5 g/L 글루코스 함유 DMEM 내에서 배양하였다.
1-3. 빛 방출
1) 상기 1-1에서 얻은 배양된 미분화 세포(Preadipocyte)를 칵테일 배지로 교환 전 PBS(Phosphate Buffered Saline, CaCl 및 MgCl 없음) (웰진, 한국) 2회 세척(washing)후 다시 새 PBS에 담그어 λmax가 660nm, 740nm, 850nm, 940nm, 1,050nm, 1,150nm, 1,250nm, 1,350nm인 파장의 빛을 10% CO2를 함유하는 습기 있는 인큐베이터에서 각각 1시간 처리 실시하였다. 빛을 처리하는 경우에 조사거리는 5cm이고, 조사량은 10J/cm2로 처리하였다. 대조군(Control; CTL)은 빛처리가 없는 것을 제외한 모든 조건이 동일한 것이다.
2) 빛처리 후 실험군 및 대조군은 모두 동일하게 각각 상기 1-2에서 사용된 것과 동일한 칵테일 배지로 교환하고 2일간 배양하였다.
3) 칵테일 배지에서 48시간 배양된 세포를 PBS 2회 세척 후, 다시 PBS에 담그어 1시간 동안 각각 1) 단계와 동일한 파장의 빛처리 후, 인슐린(Insulin) 배지로 교환하고 3일간 배양하였다.
4) 인슐린 배지에서 3일간 배양된 세포를 PBS로 2회 세척 후, 다시 PBS에 담그어 1시간 동안 각각 1) 단계와 동일한 파장의 빛처리 후 FBS 배지로 교환 2일간 배양한 후, 배양된 세포를 PBS 2회 세척하고, 다시 PBS에 담그어 1시간 동안 각각 1) 단계와 동일한 파장의 빛처리 실시하였다.
1-4. 중성지방 및 글리세롤 측정용 배지 수거
상기 1-3의 빛처리 진행 후 배양된 세포를 PBS로 2회 세척 후, 배지로 용출된 총 중성지방 및 글리세롤을 측정하기 위하여 2% BSA (bovine serum albumin) (시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 세인트루이스(St. Louis), 미국)를 함유하는 1,000 mg/L 글루코스 함유 DMEM (PAA, 오스트리아)의 영양제한 배지에서 6시간 배양한 후, 대조군인 CTL과 실험군인 λmax가 660nm, 740nm, 850nm, 940nm, 1,050nm, 1,150nm, 1,250nm, 1,350nm인 파장의 빛을 처리한 세포에서 배양 배지를 수거하였다.
[실시예 2]
세포 분화단계 후 빛처리
2-1. 미분화 지방세포 배양
상기 실시예 1-1과 동일한 방법으로 미분화 세포를 얻었다.
2-2. 지방세포 분화
상기 실시예 1-2와 동일한 방법으로 지방세포를 분화하였다.
2-3. 빛 방출
상기 2-2에서 얻은 분화된 지방세포를 PBS에 담그어 1시간 동안 각각 CTL, λmax가 660nm, 740nm, 850nm, 940nm, 1,050nm, 1,150nm, 1,250nm, 1,350nm인 파장의 빛처리 후 1-4와 같은 영양제한 배지에서 6시간 배양하였다. 빛을 처리하는 경우에 조사거리는 5cm이고, 조사량은 10J/cm2로 처리하였다.
2-4. 중성지방 및 글리세롤 측정용 배지 수거
상기 실시예 1-4와 동일한 방법으로 대조군인 CTL과 실험군인 λmax가 660nm, 740nm, 850nm, 940nm, 1,050nm, 1,150nm, 1,250nm, 1,350nm인 파장의 빛을 처리한 세포에서 배양 배지를 수거하였다.
[실험예 1] 세포로부터 배지로 용출된 총 중성지방 및 글리세롤(Glycerol) 측정
상기 실시예 1 및 2 에서 빛처리 후 수거한 영양제한 배지로 용출된 중성지방 및 글리세롤 양을 각각 Triglyceride reagent(시그마-알드리치, 미국)와 Free Glycerol Reagent(시그마-알드리치, 미국) 를 이용하여 측정, 계산하였다. 글리세롤의 양은, 배지와 Free Glycerol Reagent 를 혼합하여 15분간 반응시킨뒤 540nm 의 파장에서 흡광도를 측정하였다. 용출된 중성지방의 양은 리파아제(lipase)를 이용하여 간접 측정하였다. 우선, 용출된 중성지방을 리파아제(lipase)를 이용해 글리세롤과 지방산으로 분해시킨 후 글리세롤의 양을 측정하였다. 이 측정값으로부터 리파아제(lipase) 처리 전 빛 처리에 의해 이미 용출되어 있던 글리세롤의 양을 빼줌으로써 용출된 중성지방의 양만을 계산해내었다.
실시예 1에 관한 실험 결과는 도 1 및 표 1에, 실시예 2에 관한 실험 결과는 도 2 및 표 2에 나타내었다. 표 1 및 표 2는 각각 도 1 및 도 2를 기초로 한 것으로서, 각 도면의 대조군(CTL)실험 결과를 100%로 하여 각 조사 파장에 대한 결과의 상대값을 퍼센트(%)로 나타낸 것이다. 도 1, 도 2, 표 1 및 표 2에서 파장의 수치들은 λmax값을 나타낸 것이다.
표 1
총 TG(%) CTL 100.0%
660nm 150.4%
740nm 138.4%
850nm 132.8%
940nm 129.6%
1,050nm 126.4%
1,150nm 123.2%
1,250nm 121.6%
1,350nm 115.2%
혈청 글리세롤(SerumGlycerol)(%) CTL 100.0%
660nm 160.6%
740nm 154.8%
850nm 151.0%
940nm 147.1%
1,050nm 144.2%
1,150nm 140.4%
1,250nm 140.4%
1,350nm 121.2%
표 2
총 TG(%) CTL 100.0%
660nm 219.8%
740nm 200.0%
850nm 185.4%
940nm 177.1%
1,050nm 168.8%
1,150nm 160.4%
1,250nm 156.3%
1,350nm 139.6%
혈청 글리세롤(SerumGlycerol)(%) CTL 100.0%
660nm 333.3%
740nm 311.1%
850nm 296.3%
940nm 281.5%
1,050nm 270.4%
1,150nm 255.6%
1,250nm 255.6%
1,350nm 181.5%
상기 실시예 1에 따른 결과인 도 1 및 표 1에서 볼 수 있듯이, 분화 전 과정 동안 빛 처리시 처리한 전체 파장에서 지방분해 효과를 확인할 수 있었으며, 특히 λmax가 660nm인 파장의 빛 처리시 용출된 중성지방의 양은 대조군에 비하여 150.4%로 증가하였고, 배지로 분해되어 용출된 글리세롤량은 대조군에 비하여 160.6%로 증가하여 가장 높은 분해 효과를 나타내었으며, 가장 작은 분해 효과를 나타낸 λmax가 1,350nm인 파장의 경우에도 용출된 중성지방의 양은 대조군에 비해 115.2%이고, 용출된 글리세롤량은 대조군에 비하여 121.2%으로서 지방분해 효과가 있음을 확인하였다. 이러한 결과들은 모두 통계적으로 유의성이 있는 것이다.
또한, 상기 실시예 2에 따른 결과인 도 2 및 표 2에서 볼 수 있듯이, 분화 완료 후 빛 처리시에도 처리한 전체 파장에서 지방분해 효과를 확인할 수 있었으며, 특히 λmax가 660nm인 파장의 빛 처리시 용출된 중성지방의 양은 대조군에 비하여 약 219.8%로 증가하였고, 배지로 분해되어 용출된 글리세롤량은 대조군에 비하여 333.3%로 증가하여 가장 높은 분해 효과를 나타냄을 확인하였다. 또한, 가장 작은 분해효과를 나타낸 λmax가 1,350nm인 파장의 빛처리시에도 용출된 중성지방의 양은 대조군에 비해 139.6%이고, 배지로 분해되어 용출된 글리세롤량은 대조군 대비 통계적 유의성 있게 181.5%로 증가함을 확인하였다. 따라서 최종적으로 분화가 완료된 지방세포에 본 발명에 따른 빛을 조사하는 경우에도 매우 현저한 지방분해 효과가 있음을 확인 하였으며, 이러한 결과들은 모두 통계적으로 유의성이 있는 것이다.
[실험예 2] 세포내 잔류 중성지방(Triglyceride) 측정
상기 실험예 1에서 영양제한 배지를 수거 후 남은 세포에 3.7% 포름알데하이드 용액 (formaldehyde solution) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국)을 24시간 처리하여 상온에서 고정하고, 0.5 g ORO (Oil Red O) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국)를 100 ml 프로필렌 글라이콜 (propylene glycol) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국)에 녹인 용액을 1 ml 넣고 1시간 염색하였다. 상기 ORO로 염색된 세포에서 잔류 염색약을 제거하고 증류수로 3회 세척 후, 이소프로필알코올 (isopropyl alcohol, IPA) (시그마-알드리치, 세인트루이스, 미국)을 500 ml 넣고 1 시간 동안 세포에 염색되었던 염색약을 추출하였다. 다시 상기 ORO가 추출된 IPA를 490nm에서 흡광도 분석을 실시하였다. 이러한 결과를 도 3 및 표 3에 나타내었다. 표 3의 경우 도 3을 기초로 한 표로서 대조군(CTL)의 실험 결과를 100%로 하여 각 조사 파장에 대한 결과의 상대값을 퍼센트(%)로 나타낸 것이다. 표 3 및 도 3에서 파장의 수치들은 λmax값을 나타낸 것이다.
표 3
TG 함량 (contents)( % ) CTL 100.0%
660nm 50.3%
740nm 57.0%
850nm 59.6%
940nm 62.2%
1,050nm 62.2%
1,150nm 66.8%
1,250nm 69.9%
1,350nm 79.8%
도 3 및 표 3 에서 볼 수 있듯이, 분화된 지방세포 내 잔류 트리글리세라이드(중성지방)량은 처리한 모든 파장에서 감소되어 있는 결과를 나타냈으며, 이러한 결과를 통하여 지방분해 효과를 확인할 수 있었다. 가장 높은 분해 효과를 나타낸 λmax가 660nm인 파장의 빛 처리시 지방세포 내 잔류 중성지방량은 대조군 대비 통계적 유의성 있게 50.3%로 감소함을 확인하였고, 가장 작은 분해효과를 나타낸 λmax가 1,350nm인 파장의 빛 처리시에도 지방세포 내 잔류 지방량은 대조군 대비 통계적 유의성 있게 79.8%로 감소함을 확인하였다. 상기 결과들은 결과들은 모두 통계적으로 유의성이 있는 것이다.
상기 실험예 1 및 2의 결과를 통해서 특정 파장의 빛을 분화 단계상에 있거나 또는 분화가 완료된 지방세포에 조사하는 것은 지방세포 내에 있는 중성지방을 글리세롤로 분해하는 현저한 효과가 있으며, 지방세포 내의 중성지방을 세포 밖으로 용출 시키는데 현저한 효과가 있음을 확인 할 수 있다. 따라서 본 발명에 따른 빛을 처리할 경우 지방 분해에 효과가 있음을 알 수 있다.

Claims (19)

  1. 빛을 조사하는 광원 조사 장치; 및 빛을 조사하여 지방을 분해하는 방법이 포함된 설명서를 포함하는 지방 분해용 키트로서, 상기 빛은 600nm 초과 내지 1500nm 이하의 파장을 가지는 것인 키트.
  2. 제 1항에 있어서, 빛은 피부 투과도를 증폭시키는 패턴을 갖는 것인 키트.
  3. 제 1항에 있어서, 설명서는 빛의 조사세기, 빛의 조사시간, 조사장치와 피부와의 거리, 조사방법 및 조사부위를 포함하는 것인 키트.
  4. 제 3항에 있어서, 빛의 조사세기는 1J/cm2 내지 600J/cm2인 것인 키트.
  5. 제 3항에 있어서, 빛의 조사 시간은 0.5분 내지 6시간인 것인 키트.
  6. 제 3항에 있어서, 조사장치와 피부와의 거리는 0cm 내지 200cm인 것인 키트.
  7. 제 3항에 있어서, 조사 방법은 직접조사로 수행하는 것 또는 피부에 접촉될 수 있는 보조수단을 매개로 하여 수행하는 것인 키트.
  8. 제 7항에 있어서, 보조수단은 필터, 시트, 필름, 화장품, 젤 및 크림으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 것인 키트.
  9. 제 3항에 있어서, 조사 방법은 침관, 캐뉼라, 및 마이크로 니들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 이용하여 수행하는 것인 키트.
  10. 제 3항에 있어서, 조사 부위는 안구, 구강, 성기, 및 항문을 제외한 지방이 축적될 수 있는 모든 피부조직인 것인 키트.
  11. 피부에 빛을 조사하는 것을 포함하는 슬리밍 방법으로서,상기 빛은 600nm초과 내지 1500nm이하의 파장을 가지는 것인 슬리밍 방법.
  12. 제 11항에 있어서, 빛은 피부 투과도를 증폭시키는 패턴을 갖는 것인 슬리밍 방법.
  13. 제 11항에 있어서, 빛은 1J/cm2 내지 600J/cm2의 세기인 것인 슬리밍 방법.
  14. 제 11항에 있어서, 조사는 0.5분 내지 6시간 동안 조사하는 것인 슬리밍 방법.
  15. 제 11항에 있어서, 조사는 피부와의 거리가 0cm 내지 200cm인 위치에서 수행하는 것인 슬리밍 방법.
  16. 제 11항에 있어서, 조사는 직접조사로 수행하는 것 또는 피부에 접촉될 수 있는 보조수단을 매개로 하여 수행하는 것인 슬리밍 방법.
  17. 제 16항에 있어서, 보조수단은 필터, 시트, 필름, 화장품, 젤 및 크림으로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상인 것인 슬리밍 방법.
  18. 제 11항에 있어서, 조사는 침관, 캐뉼라, 및 마이크로 니들로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상을 이용하여 수행하는 것인 슬리밍 방법.
  19. 제 11항 내지 제 18항 중 어느 한 항에 있어서, 조사는 피부 피하지방층에 빛을 조사하는 슬리밍 방법.
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