WO2007094134A1

WO2007094134A1 - 骨補填剤の製造方法，骨補填剤及び３次元細胞培養担体,クロマトグラフィー用分離担体

Info

Publication number: WO2007094134A1
Application number: PCT/JP2007/000082
Authority: WO
Inventors: Yuichi Tei; Kay Teraoka; Shigeki Suzuki; Koutaro Shimizu; Katsuhisa Takane
Original assignee: The University Of Tokyo; National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology; Next21 K.K.; Gauss K. K.
Priority date: 2006-02-14
Filing date: 2007-02-13
Publication date: 2007-08-23
Also published as: US20100262259A1; EP1985318A1; CA2642493A1; CN101415450A; JPWO2007094134A1; AU2007216103A1

Abstract

骨補填剤の新規製造方法を提供する。上記課題は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料を混練するための混練工程と；前記混練工程で得られた混練物を用いて，金型を有する射出成形機を用いた射出成形により所定の形状を持った成形体を得るための成形工程と；前記成形工程で得られた成形体に含まれるバインダを取り除き脱脂体を得るための脱バインダ（脱脂）工程と；前記脱バインダ工程後の脱脂体を加熱し，焼結し焼結体を得るための焼結工程と；を含む骨補填剤の製造方法などによって解決される。

Description

明細書

骨補填剤の製造方法，骨補填剤及び 3次元細胞培養担体，クロマトグラフィー用分離担体

技術分野

[0001 ] 本発明は，粉末射出成形法を応用した骨補填剤，骨補填剤及び 3次元細胞培養担体の製造方法などに関する。より詳しく説明すると，本発明は，粉末射出成形法を応用した，複数の突起部を有する微小な骨補填剤の製造方法，骨補填剤及び 3次元細胞培養担体などに関する。

背景技術

[0002] 従来，事故や治療のために骨の一部を欠損した場合，例えば欠損部に骨組織に置換される骨補填剤を充填することにより，欠損した骨が再生することを促進していた。このような骨補填剤の原料として，ハイド口キシァパタイ卜や^— T C Pなどのリン酸カルシウム系物質や，ポリ乳酸などの生分解性プラスチックなどが用いられていた。

[0003] 特開 2 0 0 4— 9 7 2 5 9号公報（特許文献 1 ) には，いわゆるテトラボッド（登録商標）の形状をした骨補填剤（骨固定材）が開示されている（例えば，同公報の図 1〜図 3 ) 。そして，テトラポッド（登録商標）形状の骨補填剤を製造する方法として，割型を用いて溶融成形する方法（同公報の段落 [ 0 0 1 4 ] 及び段落 [ 0 0 2 5 ] ) が開示されている。しかしながら，このような割型を用いた溶融成形によって製造された骨補填剤は，必ずしも十分な強度を有さない。また，リン酸カルシウム系物質や，生体分解性ポリマーを溶融成形によリ製造した場合は，得られる骨補填剤の寸法精度や成形密度が不ぞろいになるという問題がある。また，得られる骨補填剤の表面状態がばらばらであるという問題がある。また，同公報に記載の方法では，量産に向かないという問題もある。

[0004] 特開平 1 1—2 0 6 8 7 1号公報には，ポリ乳酸やハイドロキシァパタイ卜を用いて，射出成形した後に一軸延伸などをすることによリロッド状又はシート状の骨補填剤を製造する方法が開示されている（同公報の段落 [ 0 0 1 8 ] ) 。ただし，得られる骨補填剤は，ポリ乳酸などの高分子か，又はそのような高分子とリン酸カルシウム系物質の混合物である。また，同公報の実施例では，押出し成形によってシート状の骨補填剤を製造している（同公報の段落 [ 0 0 2 3 ] ) 。押出し成形では，例えばテトラポッド状のような複雑な形状を有する骨補填剤を製造することができない。

[0005] また，粉末射出成形法は，金属やセラミックスを製造するために用いられていた。しかし，粉末射出成形法は，バインダなどとして生体親和性に乏しいものを用いているので，生体内に埋没させ，しかも積極的に生体内で置換されるようなものを粉末射出成形法で成形するという発想はなかった。また，骨補填剤は，生体内で置換されやすいものとする必要があるので，単に力ルシゥム系物質などの粉末を用いて粉末射出成形法により骨補填剤を成形しても，好ましい骨補填剤を得ることができない。

特許文献 1 ：特開 2 0 0 4 _ 9 7 2 5 9号公報

特許文献 2：特開平 1 1—2 0 6 8 7 1号公報

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0006] 本発明は，骨補填剤を製造するための新たな方法を提供することを目的とする。

[0007] 本発明は，形状や密度のばらつきが少ない骨補填剤の製造方法を提供することを目的とする。

[0008] 本発明は，射出成形時などにおいて，金型から離しやすい骨補填剤の製造方法を提供することを目的とする。

[0009] 本発明は，所定の強度を有する骨補填剤，及びそのような骨補填剤の製造方法を提供することを目的とする。

[0010] 本発明は，所定の薬理効果を得ることができる骨補填剤，及びそのような骨補填剤の製造方法を提供することを目的とする。

[0011 ] 細胞培養は，これまで 2次元的にしか行われていなかった。本発明は，そのような概念を覆し， 3次元的に細胞を培養できる担体を提供することを目的とする。

[0012] 本発明は，上記のような骨補填剤のこれまでに考えられていなかった利用態様を提供することを目的とする。具体的には， 3次元細胞培養担体や，クロマ卜グラフィー用分離担体などの用途を提供する。

課題を解決するための手段

[0013] 通常の方法に基づいて，微小かつ複雑な形状を有する骨補填剤を粉末射出成形法により得ようとしても，例えば，固定側金型に成形体が固着するなどしてうまく製造することはできない。本発明では，好ましい物性を有する骨補填剤を，好ましくは量産できるように製造するため，様々な工夫を行い完成されたものである。本発明は，基本的には，金属やセラミックスを製造するために用いられていた粉末射出成形法を，原料粉末としてリン酸カルシゥム系物質などのカルシウム系物質を用いるものに適応させて，様々な工夫をこめて用いることにより，ひとつひとつの表面積や密度にばらつきが少なく，骨補填剤として適切な硬度などの物性をそろえた骨補填剤を製造できるという知見に基づくものである。このように，ひとつひとつの骨補填剤の表面積や密度が均一なので，骨補填剤に薬剤を含有させた場合であっても，適切な量の薬剤を投与できることとなる。さらには，大きさが均一なので，それぞれの骨補填剤の強度を維持しつつも，全体として適切な空隙率を得ることができることとなる。また，所定の創作をこめた金型を用いることや，所定の原料を用いることで，成形体が固定側金型に付着する事態を効果的に防止できるという知見に基づくものである。

[0014] 本発明の骨補填剤の製造方法は，基本的には，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料を混練するための混練工程と；前記混練工程で得られた混練物を用いて，金型を有する射出成形機を用いた射出成形によリ所定の形状を持った成形体を得るための成形工程と；前記成形工程で得られた成形体に含まれるバインダを取リ除き脱脂体を得るための脱バインダ（脱脂）工程と；前記脱バインダ工程後の脱脂体を加熱し，焼結し焼結体を得るための焼結工程と；を含む骨補填剤の製造方法などに関する。

[0015] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，カルシウム系物質として，リン酸カルシウム系物質又は炭酸カルシウム系物質のいずれか又は両方を含むものがあげられ前記リン酸カルシウム系物質として，水酸ァパタイ卜

，炭酸アパタイト，フッ素アパタイト，塩素アパタイト， β - T C P , (X - T C P , メタリン酸カルシウム，リン酸四カルシウム，リン酸水素カルシゥム，リン酸八カルシウム，リン酸二水素カルシウム，ピロリン酸カルシウム

，それらの塩，又はそれら又はそれらの溶媒和物のうちいずれか 1種又は 2 種以上である，ものがあげられる。これらを用いることで，骨細胞と効果的に置き換わり，骨再生に寄与する骨補填剤を提供できる。

[0016] 本発明の製造方法により得られる骨補填剤は，一般的に微小であり，骨補填剤としての適切な物性を得る必要がある。そこで，本発明の骨補填剤の製造方法の好ましい側面は，原料に加えるバインダの種類や量を特定のものとすることにより，好ましい骨補填剤を得るものである。具体的には，前記バインダが，（メタ）アクリル系樹脂，ロウ滑剤，及び滑剤を含む上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法があげられる。また，バインダが，ロウ滑剤を含み，前記口ゥ滑剤が，融点が 4 0 °C〜 1 0 0 °Cのワックスを含む請求項 1 に記載の骨補填剤の製造方法があげられる。ロウ滑剤として融点の低いものを用いるので，金型からとりやすくなり，効果的に骨補填剤を製造できることとなる。本発明の好ましい態様は，前記バインダが，（メタ）アクリル系樹脂，エチレン一酢酸ビニル共重合体，パラフィンワックス，ステアリン酸及びジブチルフタレートを含み，前記混練工程では，前記（メタ）アクリル系樹脂及び前記ェチレン一酢酸ビニル共重合体を混練機へ投入し，混練しつつ前記原材料，前記パラフィンワックス及び前記ステアリン酸を混練機へ投入し，混練しつつ前記ジブチルフタレートを混練機へ投入する，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。骨補填剤を製造することは容易ではないが，このように特定の樹脂を用いることで最適な骨補填剤を製造できる。

[0017] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダの他にガラス成分を含む，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。骨補填剤の強度を制御できることは骨補填剤の応用を広げることとなる。そして，ガラス成分を含むので，強度の高い骨補填剤を得ることができる。

[0018] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダの他に塩分又は糖分（好ましくは塩分）を含む，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。本発明の骨補填剤は，骨細胞などの細胞を生体内又は生体外（インビトロ）で培養することが予定されるので，できる限り細胞が付着しやすいものが望ましい。そして，塩分又は糖分を含んだ原料を用いて骨補填剤を製造すれば，後に水などに浸すことで塩分又は糖分を取り除き，多孔質の骨補填剤を得ることができる。すると，塩分又は糖分が抜けた部分が孔となり細胞の培養に好ましい物理的形状を得ることができることとなる。

[0019] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，前記骨補填剤は，複数

(たとえば 4つ以上）の突起部を有する形状であり，前記金型は，材料（例えば，混練物など）を注入するための注入口が設けられる固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，前記固定側金型は，前記複数の突起部のうちある突起部の先端部から射出成形用の材料が注入されるように，前記注入口を前記先端部に位置するようにし，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって注入口方向へ傾斜する傾斜面を有し，前記可動側金型は所定のくさびを設けるためのへこみ部を有する上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。骨補填剤を製造することは困難をともなう。当業者であれば，射出成形をするのであれば，突起部ごとに成形してそれらを組み合わせる製造方法を考える。しかし，本発明の骨補填剤は，微小であり，各突起部を別々に製造して，それらを組み合わせることは困難である。そこで，射出成形時の金型を工夫することで， 1回の射出成形で複数の突起部を有する射出体を得ることができるというものである。たとえば，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって注入口方向へ傾斜する傾斜面を有するような三次元的なあわせ面を有する金型を考案することで，固定側金型から成形体をとりやすいものとした。たとえば，あわせ面が平面な半割金型では，固定側金型に成形体が残る可能性が高くなリ，そのような場合，成形体を金型から取り除くことは困難となる。そして，金型に詰まった成形体をきれいに取り除くのは困難であった。しかしながら，上記の金型では，あわせ面に傾斜をつけることで，固定側金型に成形体が残る可能性を低くした。

[0020] 本発明に用いられる好ましい態様は，くさびの高さが， 1 m〜 1 X 1 0 ² mである。成形体が固定側金型に取り残されると，骨補填剤を製造できなくなる。このくさびの部分が，可動側金型へのくさびの役割をするので，金型を取り外した際に固定側金型に成形体がとり残される事態を防止できる。

[0021 ] 本発明に用いられる好ましい態様は，前記可動側金型は，深さが 1 m〜 2 X 1 0 // mである 1又は複数の溝を有する前記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。成形体が固定側金型に取り残されると，骨補填剤を製造できなくなる。この溝の部分が，可動側金型部分の表面積を増やすことになるので，金型を取り外した際に固定側金型に成形体がとリ残される事態を防止できる。

[0022] 本発明に用いられる好ましい態様は，前記骨補填剤は， 4つの突起部を有する形状であり（好ましくは 4つの突起が正四面体の各頂点の方向へ延びるいわゆるテトラポッド状である），前記可動側金型側には，突起部の内側に位置するように突き出しピンを配置する上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。金型から取り外すことは射出成形では非常に重要である。この態様では，突起部の内側に位置するように（ひとつの突起部の先端の反対方向から，中心やそのひとつの突起部の先端方向に向けて移動するように）突き出しピンを配置するので，効果的に成形体を取り外すことができる。

[0023] 本発明に用いられる好ましい態様は，前記骨補填剤は，複数の突起部を有する形状であり，前記金型は，固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，射出成形用の材料が注入される注入口を前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面に位置するようにし，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって前記骨補填剤の中心方向へ傾斜する傾斜面を有し，前記可動側金型は所定のくさびを設けるための溝を有する，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。射出成形時の金型を工夫することで， 1回の射出成形で複数の突起部を有する射出体を得ることができるというものである。

[0024] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，前記脱バインダ工程は， 1 1 0°C〜3 0 0°Cの第一の維持期間に達成するまでの間， 1 °CZ時間〜 3 X 1 0 ²°CZ時間（好ましくは 1 0°CZ時間〜 2 X 1 0 ²°CZ時間）で昇温する昇温工程を含む，前記に記載の骨補填剤の製造方法である。脱バインダ工程は，たとえば，バインダに含まれる樹脂の熱分解温度に応じて，複数段階の昇温時間と維持期間を有する。このように多段階に温度を上げて脱バインダを行うので，熱分解温度が低い樹脂から効果的に熱分解させることができ，効果的に脱バインダを行うことができる。そして，特に熱分解温度の低い樹脂を効果的に熱分解させることで，焼結性を上げることができる。本発明では，上記のように温度を上げるので，効果的に熱分解温度の低い樹脂を熱分解させることができる。

[0025] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，前記焼結工程で得られた焼結体に薬剤を含浸又は塗布する工程を含む上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。また，本発明の好ましい態様は，前記薬剤として，骨 •軟骨形成促進剤（軟骨形成促進因子を含む），関節疾患治療剤，骨 ·軟骨疾患予防 ·治療剤，骨再生剤，骨吸収抑制物質，血管新生促進剤，抗菌剤，抗生物質又は抗癌剤の 1種又は 2種以上を用いる上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。従来骨補填剤は，単に欠損部などに投与して骨を再生することしか意図されていなかった。本発明の骨補填剤では，その骨補填剤に薬剤を塗布することで，骨の再生を予防するほか，感染などを予防することができるというものである。すなわち，本発明は，表面に薬剤が含浸又は塗布された複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤をも提供する。

[0026] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，前記焼結工程で得られた焼結体に接着性付与剤を含浸又は塗布する工程を含む，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。前記接着性付与剤としてトロンビンがあげられる。また，本発明のある実施態様は，上記に記載の骨補填剤の製造方法に従って複数の骨補填剤（または焼結体）を製造し， 2種類の接着性付与剤を含有する組成物を用意し，ある骨補填剤群に第 1の組成物を含浸又は塗布して第 1の骨補填剤群とし，ある骨補填剤群に第 2の組成物を含浸又は塗布して第 2の骨補填剤群とし，前記第 1の骨補填剤群と前記第 2の骨補填剤群を含む骨補填剤群を骨補填剤として用い，前記第 1の組成物は，下記一般式（

I) 又は（I I)で示される化合物か，下記一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3〜 8個含む化合物を 1種又は 2種以上含有する第 1の化合物，及び第 1 の希釈剤（又は担体）を具備し，前記第 2の組成物は，下記一般式（I) 又は（

I I)で示される化合物か，下記一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3〜8 個含む化合物を 1種又は 2種以上含有する第 2の化合物，及び第 2の希釈剤を具備する請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法である。 X _ (OCH₂C H₂) _n-X₂ (I)

(式（I)中， X 及び X₂は同一又は異なり， -R1C00NHS (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。）， -C0R¹C00NHS (R¹は， - アルキレン基を示す。）， -N0C0R¹- R 2 (R¹は， CrC?アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。）， -R¹NH₂ ( R¹は， - アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， d-C?アルキレン基を示す o ) 又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す）を示し， nは， 80 〜1000の整数を示す。）

[0027] [化 3]

[0028] (式 (I I) 中， X,ト ^Χ,Μは，それぞれ同一又は異なり， -R¹C00NHS (R¹は， C 广アルキレン基を示す。）， -C0R¹C00NHS (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。

) ， -N0C0R¹- R² (R¹は， i^-C?アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) ， -R¹NH₂ (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， C'-C?アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す）を示し， ^〜 ^は，それぞれ同一又は異なり， 20〜250の整数を示す。）

[0029] [化 4]

[0030] (式 (I I I) 中， X_Mは， -R'COONHS (R¹は， - アルキレン基を示す。 ) ， -C 0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R¹は， - アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) ， -R¹NH₂ (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， C- C₇アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す。）を示し， n_mは 10〜150の整数を示す。）。

[0031] 上記のさらに好ましい態様は，前記第 1の化合物は，一般式（又は（I I ) において， X ， X ₂，又は Χ Μ—^ Χ , Μが，それぞれ同一又は異なり， -N0C 0R¹-R²又は- R1NH₂である化合物を 1種又は 2種以上含有し，前記第 2の化合物は，一般式（又は（I において， X ， X ₂，又は Χ , Η Χ , Μが，それぞれ同一又は異なり， -C0R¹C00NHS， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂ (Phは， 0-, 01-又は -フェニレン基を示す）である化合物を 1種又は 2種以上含有する骨補填剤の製造方法である。

[0032] 骨補填剤は，生体に投与されることが意図される。そして，生体内で，複数の骨補填剤が結合しあって，立体構造を維持することが望ましい。従来の骨補填剤では，立体構図が崩れやすぐ従って，強度に乏しいものであった。しかし，上記のような接着性付与剤を用いることで，骨補填剤同士の接着性や骨への接着性を高めて，立体構造を維持できることとなる。また，接着性付与剤が熱で変性しにくいものの場合は，原料粉末に接着性付与剤を混ぜておき接着性付与剤が粉体混合された骨補填剤を得てもよい（このような場合，骨補填剤の表面にも接着性付与剤が存在するほか，表面が骨と置換され新たに現れる表面にも接着性付与剤が存在するので接着性を維持できることとなる）。また，接着性付与剤は，成形体又は焼結体の表面に粉状のまま散布してもよい。さらに，複数の骨補填剤と粉末の接着性付与剤とを混合し適宜攪拌することにより粉体混合し，これにより骨補填剤の表面に接着性付与剤を付着させてもよい。すなわち，本発明は，表面に接着性付与剤が含浸，塗布又は粉体混合された複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤をも提供する。

[0033] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の製造方法は，前記複数の突起部を有する骨補填剤は，正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 4つの突起部を有する形状である前記に記載の骨補填剤の製造方法である。このような形状を有する骨補填剤であれば，好ましい連通孔などを形成でき，細胞などを容易に培養できることとなる。

[0034] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の利用方法は，複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する上記いずれかの骨補填剤を含む 3次元細胞培養担体である。この 3次元細胞培養担体の好ましい態様は，前記骨補填剤は，その表面に薬剤又は接着性付与剤が含浸，塗布又は粉体混合された骨補填剤である 3次元細胞培養担体である。従来，細胞培養は，シャーレ内など 2次元的に培養することのみが意図されていた，本発明によれば，効果的に 3次元で細胞をインビトロ培養できることとなる。

[0035] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の利用方法は，複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤を含むクロマ卜グラフィー用分離担体である。後述の試験例で実証されたとおり，本発明の骨補填剤は，好ましい吸着性などを有するものであり，さらにその吸着性は，骨補填剤の空隙などを調整することにより制御できる。したがって，複数の骨補填剤を，クロマトグラフィー用の分離担体として用いることができる。

発明の効果

[0036] 本発明によれば，骨補填剤を製造するに当たり，原料粉末としてリン酸力ルシゥム系物質を用いるものに適応させた粉末射出成形法を用いたので，形状の精度が高ぐ体積のばらつきが少ない骨補填剤の製造方法を提供できる

[0037] 本発明によれば，バインダとして所定のワックスを含むものを用いたので，金型から離しやすい骨補填剤の製造方法を提供できる。

[0038] 本発明によれば，実施例で実証されたとおり，所定の強度を有する骨補填剤，及びそのような骨補填剤の製造方法を提供できる。

[0039] さらに，本発明の骨補填剤は，成形体の表面などに薬剤を塗布することで，所定の薬理効果を有する薬剤として機能しうるので，本発明によれば，所定の薬理効果を得ることができる骨補填剤，及びそのような骨補填剤の製造方法を提供できる。

[0040] 細胞培養は，これまで 2次元的にしか行われていなかつたが，本発明によれば，後述の実施例で実証されたとおり，そのような概念を覆し，複数の骨補填剤を効果的に用いることで 3次元的に細胞を培養できる担体を提供できる [0041] 本発明は，上記のような骨補填剤のこれまでに考えられていなかった利用態様を提として 3次元細胞培養担体や，クロマ卜グラフィー用分離担体などの用途を提供できる。

図面の簡単な説明

[0042] [図 1]図 1は，本発明の骨補填剤の製造方法において用いられる金型の例を示す概念図である。

[図 2]図 2は，テトラポッド形状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 2 (A) は，側面図，図 2 (B) は上面図，図 2 (C) は斜視図を示す。

[図 3]図 3は，頭切テトラポッド形状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 3 (A) 及び図 3 (B) は，側面図を示し，図 3 (C) は上面図を示し，図 3 (D) は斜視図を示す。

[図 4]図 4は， 3つの突起部を有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 4 (A) は斜視図を示し，図 4 (B) は上面から見た図を示す。

[図 5]図 5は，半球状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 5 ( A) は斜視図を示し，図 5 (B) は下面から見た図を示す。

[図 6]図 6は，下面に 1または複数のくりぬきを有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 6 (A) は斜視図を示し，図 6 (B) は下面から見た図を示す。

[図 7]図 7は，双頭状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 7 (

A) は斜視図を示し，図 7 (B) 及び図 7 (C) は側面図を示す。

[図 8]図 8は，胴体部に突起部を有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 8 (A) は斜視図を示し，図 8 (B) は側面図を示す。

[図 9]図 9は，十字状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 9 (

A) は斜視図を示し，図 9 (B) は上面図を示し，図 9 (C) は側面図を示し，図 9 (D) は底面図を示す。

[図 10]図 1 0は，略平面状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 1 0 (A) は斜視図を示し，図 1 0 (B) は上面図を示し，図 1 0 (C) は側面図を示す。

[図 11 ]図 1 1は，平面の一端または両端に突起部を有数する骨補填剤の例を説明するための概念図である。

[図 12]図 1 2は，傾斜する上面を有数する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 1 2 ( A) は斜視図を示し，図 1 2 ( B ) は側面図を示す。

[図 13]図 1 3は，骨補填剤の C A Dによる設計図である。

[図 14]図 1 4は，実施例 1で得られた骨補填剤の図面に替わる写真である。

[図 15]図 1 5は，実施例 1で得られた骨補填剤の図面に替わる電子顕微鏡写真である。

[図 16]図 1 6は，実施例 1で得られた骨補填剤が集積化したものの図面に替わる電子顕微鏡写真である。

[図 17]図 1 7は，実施例 1で得られた骨補填剤の焼結温度と曲げ強度の関係である。

[図 18]図 1 8は，実施例 1で得られた骨補填剤と，既存の人工骨製品が集合した様子を示す図面に替わるマイクロ X線による C T画像である。図 1 8 (A) は，本発明の骨補填剤が集合した様子を示し，図 1 8 (B)は従来の人工骨顆粒が集合した様子を示す。図 1 8 (C) は，本発明の骨補填剤がクライオチューブ内で充填された様子を示す。図 1 8 (D) は，既存の人工骨製品がクライオチューブ内で充填された様子を示す。

[図 19]図 1 9は，骨補填剤の細胞接着性を確認するための図面に替わる写真である。図 1 9 (A)は培養細胞がないものの 4日間培養後の写真を示し，図 1 9 (B)は骨芽系細胞株 M C 3 T 3を平面培養し 4日間培養後の写真を示し，図 1 9 (C)は培養細胞がないものの 6日間培養後にアルカリフォスターゼ（ALP) 染色したものの写真を示し，図 1 9 (0)は骨芽系細胞株!\ 1〇3丁3を平面培養し 6日間培養後にアルカリフォスターゼ染色したものの写真を示し，図 1 9 (E )は培養細胞がないものの 10日間培養後にアル力リフォスターゼ染色したものの写真を示し，図 1 9 (F)は骨芽系細胞株 M C 3 T 3を平面培養し 10日間培養後にアル力リフォスターゼ染色したものの写真を示す。符号の説明

1 金型の溝を合わせた形状

2注入口に対応する部分

3 あわせ面

4 くさび

1 1 骨補填剤

12 突起部

13 先端部

21 穴部

22 <リぬき部

23 骨補填剤の厚さ

31 胴体部

32 頭部

33 頭部

42 足部

43 テーブル部

発明を実施するための最良の形態

[0044] [骨補填剤の製造方法]

以下，本発明の骨補填剤の製造方法について説明する。本発明の骨補填剤の製造方法は，基本的には，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料を混練するための混練工程と；前記混練工程で得られた混練物を用いて，金型を有する射出成形機を用いた射出成形により所定の形状を持つた成形体を得るための成形工程と；前記成形工程で得られた成形体に含まれるバインダを取り除き脱脂体を得るための脱バインダ（脱脂）工程と；前記脱バインダ工程後の脱脂体を加熱し，焼結し焼結体を得るための焼結工程とを含む突起部を有する骨補填剤の製造方法である。なお，成形体の後処理を行うための後処理工程など公知の工程を適宜含んでもよい。

[0045] 本発明の骨補填剤の製造方法によって得られた骨補填剤は，ひとつひとつの骨補填剤の大きさが均一なので，骨補填剤に薬剤を含有させた場合であつても，適切な量の薬剤を投与できることとなる。さらには，密度が均一であリしかも大きさを制御できるので，それぞれの骨補填剤の強度を維持しつつも，複数の骨補填剤を投与した場合に適切な空隙率を得ることができることとなる。以下，骨補填剤の製造方法の各工程について説明する。

[0046] [混練工程]

混練工程は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料を混練するための工程である。原料として，粉末の原料を用いることが好ましい。混練工程では，原料粉末とバインダなどの副素材とを混ぜ，射出成形に適した状態のものとする。

[0047] [原料粉末の種類]

原料粉末として，カルシウム系の物質があげられる。前記カルシウム系物質は，リン酸カルシウム系物質，炭酸カルシウム系物質，乳酸カルシウム及びダルコン酸カルシウムがあげられ，これらの中ではリン酸カルシウム系物質又は炭酸カルシウム系物質が好ましい。原料粉末としてのリン酸カルシゥム系物質を，より具体的に説明すると，水酸アパタイト，炭酸アパタイト，フッ素アパタイト，塩素アパタイト， β - T C P , ひ一 T C P , メタリン酸カルシウム，リン酸四カルシウム，リン酸水素カルシウム，リン酸水素カルシゥムリン酸二水素カルシウム，ピロリン酸カルシウム，それらの塩，又はそれら又はそれらの溶媒和物二水和物などのいずれか 1種または 2種以上があげられ，これらの中では )S _ T C P，又は水酸アパタイトが好ましい。また，炭酸カルシウム系物質として，炭酸カルシウム及び炭酸水素カルシウムがあげられ，これらの中では炭酸カルシウムが好ましい。ただし，原料粉末は，これらに特に限定されず，骨補填剤の原料として用いられる公知のものを適宜用いることができる。

[0048] [原料粉末の大きさ]

原料粉末は，小さすぎると多くのバインダが必要となり，得られる骨補填剤の物性が悪くなる。一方，原料粉末が大きすぎると，成形機のスクリューとシリンダとの隙間に入り込んで嚙む場合や，焼結が進まない場合がある。本発明では，基本的には粉末射出成形を行うが，金属を原料粉末とするものでは必ずしも無い。よって，実験を行った結果，原料粉末の大きさは，例えば， 0 . 0 1 m〜 1 0 0 m ( 0 . 0 1 m以上 1 0 0 m以下。以下同様。）があげられ，好ましくは 0 . 1 m〜2 0 mである。通常の粉末冶金では，例えば， 1 0 0 m程度の大きさの粉末を用いる。例えば，特開 200 4-97259号公報（上記特許文献 1 ) では，粒径が 1 5 0 m以下の水酸ァパタイト粉を用いている（同公報の段落 [0025] ) 。しかし，本発明では，原料粉末をバインダと混合し，混練したものの流動性をよくし，焼結後の密度を向上させるために比較的小さい粒径を有する粉末を用いることが好ましい。一方，本発明によって製造される骨補填剤は，ある程度の強度が要求されるものの，生体内に埋め込んだ場合に破骨細胞などにより侵食されることが想定される。そのような観点からは，粉末の大きさをあえて 0 . 1 m〜5 0 m, 好ましくは 0 . 5 IT！〜 1 0 mとしてもよい。

[副素材]

混練工程では，バインダなどの原材料以外の材料（1又は複数種類の化合物）を，原材料に混ぜる。このようなバインダとして，（メタ）アクリル系樹脂，ロウ滑剤，（好ましくは（メタ）アクリル系樹脂以外の熱可塑性樹脂），及び滑剤を含むものがあげられる。メタクリル系樹脂又はアクリル系樹脂として，メタクリル樹脂又はアクリル樹脂があげられ，具体的には n _プチルメタクリレート又はメチルメタクリレートの重合体，又は n _ブチルメタクリレー卜及びメチルメタクリレー卜の共重合体があげられる。メタクリル系樹脂又はアクリル系樹脂の分子量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば，重量平均分子量で 1 X 1 0 ³〜 1 X 1 0 ⁵があげられる。バインダにおけるメタクリル系樹脂又はアクリル系樹脂の含有量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば， 1重量％〜5 0重量％があげられる。 [0050] ロウ滑剤として，融点が 4 0 °C〜 1 0 0 °Cのワックスがあげられ，好ましくは 4 0 °C〜7 0 °Cである。このような融点を有するワックスとして，例えば，公知のパラフィンワックスを適宜用いることができる。このような融点を有するヮックスを用いることで，射出成形時に成形体を金型からはずしゃすくすることができる。また，融点が， 6 0 °C〜6 5 °Cであるロウ滑剤を用いれば，金型をそれほど冷却せずに成形体を取り出すことができるので，よリ好ましい。

[0051 ] ロウ滑剤の例として，流動パラフィン，スクワレン，スクヮランなどの炭化水素油；ォレイン酸，トール油，及びィソステアリン酸などの高級脂肪酸；ラウリルアルコール，ォレイルアルコール，イソステアリルアルコール，及びォクチルドデカノールなどの高級アルコール；，メチルポリシロキサン，メチルフエ二ルポリシロキサン，メチルハイドロジエンポリシロキサン，及びデカメチルポリシロキサンなどのシリコーン油；ミリスチン酸イソプロピル，パルミチン酸イソプロピル，ラウリン酸へキシル，ォレイン酸ォレイル，ォレイン酸デシル，ミリスチン酸ォクチルドデシル，ジメチルオクタン酸へキシルデシル，フタル酸ジェチル，及びフタル酸ジブチルなどのエステル；アボカド油，ツバキ油，タートル油，マカデミアナッツ油，トウモロコシ油，ゴマ油，パーシック油，小麦胚芽油，サザン力油，ヒマシ油，アマ二油，サフラワー油，綿実油，エノ油，大豆油，落花生油，茶実油，カャ油，コメヌ力油，ホホバ油，キヨ一ニン油，ォリーブ油，力ロット油，グレープシード油，ナタネ油，ツバキ油，ホホバ油，卵黄油，ラノリン油及びミンク油などの動植物油類；及びグリセリン，ジグリセリン，トリグリセリン，卜リオクタン酸グリセリン，及び卜リイソパルミチン酸グリセリンなどのグリセリンの 1種又は 2種以上があげられる。なお，ロウ滑剤の融点は，これらの原料の分子量や組成比を適宜調整することにより調整できる。

[0052] ロウ滑剤の分子量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば，重量平均分子量で 1 X 1 0 ²〜 1 X 1 0 ⁶があげられる。バインダにおけるロウ滑剤の含有量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば， 1重量％〜 5 0重量％があげられる。

[0053] 熱可塑性樹脂として，ポリアセタール樹脂，（メタ）アクリル樹脂，ポリォレフィン樹脂，エチレン一酢酸ビニル共重合体，又はポリビニルプチラールのうちいずれか 1種又は 2種以上を用いることができる。ただし，本発明では，熱可塑性樹脂として（メタ）アクリル樹脂と（メタ）アクリル系樹脂以外の樹脂を有するものが好ましい。これらの中では，エチレン一酢酸ビニル共重合体が好ましい。

[0054] 熱可塑性樹脂の分子量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば，重量平均分子量で 1 X 1 0 ³〜 1 X 1 0 ⁵があげられる。バインダにおけるロウ滑剤の含有量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば， 1重量％〜 5 0重量％があげられる。

[0055] 滑剤（ロウ滑剤以外の滑剤）として，ステアリン酸，ステアリン酸の塩，ステアリン酸又はその塩の水和物， C^—C sアルキルステアリン酸（C^— C 5アルキルは炭素数が 1〜 5のアルキル基を示す。以下同様である）；又はこれらのいずれかと，ポリエチレングリコール又はポリグリセンがあげられる。滑剤含有量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば， 0 . 5重量％〜 1 5重量％があげられる。これら滑剤を用いるので，成形体を金型から容易に取り出すことができる。なお，滑剤は，分散剤として機能してもよい。

[0056] そのほかバインダを構成する化合物として，フタル酸エステル類があげられる。フタル酸エステル類は，生体への危険性が報告されているが，本発明の好ましい態様では，バインダをほぼ完全に熱分解させるので，このような生体親和性に乏しい化合物をもバインダに含めることができる。このようなフタル酸エステル類として，ジブチルフタレー卜などの d—C sアルキルフタレートがあげられる。後述する実施例で実証されたように，このようなフタル酸エステル類をあえて用いることで，より好ましい物性を有する骨補填剤を得ることができた。

[0057] フタル酸エステル類の分子量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば，重量平均分子量で 1 X 1 0 ⁴〜 1 X 1 0 ⁷があげられる。フタル酸エステル類は，揮発性に乏しいものが好ましい。バインダにおけるフタル酸エステル類の含有量は，特に限定されず，得られる骨補填剤の物性を損なわないよう適宜調整すればよいが，例えば， 0重量％〜 2 0重量％があげられ，好ましくは 0 . 5重量％〜 1 5 重量％である。

[0058] [バインダの添加量]

バインダは，後の脱バインダ工程などで，熱分解することなどにより除去される。すなわち，バインダが存在した部分は，基本的には空隙となる。よつて，原材料に加えるバインダの量を制御することで，得られる骨補填剤の空隙率や強度を調整できる。ただし，一般的には，バインダは，原材料の粒子間を埋めるに十分なだけの量が必要とされる。なぜなら，バインダの添加量が少なければ，適切な流動性を得ることができず，ショートモールドゃゥエルドなどの成形欠陥や，得られる成形体の形状や密度がばらつく原因となる。よって，バインダの添加量として，原材料の重量を 1 0 0重量部としたとき，バインダの添加量として， 1 0重量部〜 1 0 0重量部があげられ， 2 0重量部〜 5 0重量部でもよい。原材料とバインダにおけるバインダの配合割合は， 2 5容積％〜 7 0容積％があげられ，好ましくは 3 0容積％〜 5 5 容積⁰ /oであり，さらに好ましくは 3 5容積％〜 4 5容積％である。

[0059] [ガラス成分の添加]

本発明の骨補填剤の製造方法の好ましい態様は， "カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料" に，ガラス成分を含む骨補填剤の製造方法である。ガラス成分として，二酸化ケイ素を主成分とする石英ガラス； B ₂ 0₃を 5重量％〜2 0重量％含有するホウケィ酸ガラス；鉛を 5重量％〜 4 0重量％含有する鉛ガラス；力リウムを 5重量％〜 3 0重量％含有する力リウムガラス；フッ化ナトリウム，フッ化アルミニウム，及びフッ化スト口ンチウムを含むフルォロアルミノシリケ一卜ガラス；又はそれらのガラスに，ホウ酸，酸化ランタン，酸化ガドリニウム，酸化ニオブ，酸化ジルコニゥム，又はバリウムの 1種又は 2種以上を適宜混入したもの；を適宜用いることができる。ガラス成分をあえて加えることで，焼結体の焼結性をあえて低めて，微小なクラックゃ孔を入れることができ，その結果細胞を培養するために好ましい骨補填剤を得ることができる。一方，ガラス成分は，骨補填剤の強度を高めるので，クラックゃ孔を生じても，好ましい強度を有する骨補填剤を得ることができると考えられる。ガラス成分として，チタン，チタン合金，コバルト一クロム合金，ステンレス，アルミナ，ジルコニァを用いてもよいし，それらの適量を適宜混合してもよい。アパタイト（c _{a i}。（P O ₄

) ₆ 0) などのリン酸カルシウム系結晶や C a O— S i 0 ₂— M g O— P ₂0₅ 系結晶化ガラスなどのリン酸カルシウム系結晶化ガラスを適宜用いてもよい

[0060] ガラス成分の添加量は，要求される骨補填剤の物性に応じて適宜調整すればよいが，例えば，原材料の重量を 1 0 0重量部としたとき，ガラス成分の添加量として， 1重量部〜 2 0重量部があげられ， 2重量部〜 1 0重量部でもよい。混練材におけるガラス成分の配合割合は， 1容積％〜 2 0容積％があげられ，好ましくは 2容積％〜1 0容積％であり，さらに好ましくは 3容積％〜1 0容積％である。

[0061] [塩分又は糖分の添加]

本発明の骨補填剤の製造方法の好ましい態様は， "カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料" に，塩分又は糖分（好ましくは塩分）を含む，骨補填剤の製造方法である。このような塩分又は糖分を含めば，焼結体の焼結性をあえて低めて，微小なクラックゃ孔を入れることができ，その結果細胞を培養するために好ましい骨補填剤を得ることができる。また，骨補填剤を得た後に，水などに浸漬することで，塩分又は糖分を除去し，多孔質な骨補填剤を得ることができるので，細胞を培養するために好ましい骨補填剤を得ることができる。塩分又は糖分は，公知の塩分又は糖分を適宜用いることができる。塩分として，水などで溶解し，バインダが熱分解される温度で熱分解されないもの，特に無機塩が好ましぐ具体的には，塩化ナトリウム，塩化カリウム，塩化カルシウム，又は炭酸カルシウム，があげられる。糖分として，ショ糖，ブドウ糖，果糖など公知の糖分を適宜用いることができる。なお，塩分又は糖分とは別に，もしくは塩分又は糖分とともに熱分解性成分を適宜含むものは本発明の好ましい態様である。熱分解性成分とは，混合工程では，熱分解しないが，成形工程や焼結工程，又は成形工程や焼結工程における加熱温度よリも高い温度において熱分解する成分を意味する。そのような熱分解成分を適宜含有すれば，成形中，焼結中，焼結後のいずれかの段階で熱分解されるので，適切な空隙を有する骨補填剤を得ることができる。

[0062] 塩分又は糖分の添加量は，要求される骨補填剤の物性に応じて適宜調整すればよいが，例えば，原材料の重量を 1 0 0重量部としたとき，塩分又は糖分の添加量として， 1重量部〜 2 0重量部があげられ， 2重量部〜 1 0重量部でもよい。混練材における塩分又は糖分の配合割合は， 1容積％〜3 0容積％があげられ，好ましくは 2容積％〜2 0容積％であり，さらに好ましくは 3容積％〜1 0容積％である。なお，熱分解性成分を添加する場合も塩分又は糖分と同様の量を添加すればよい。

[0063] [混練]

混練工程では，上記した原料粉末とバインダなどとを混合する。これによリ射出成形用の材料であるコンパウンドを得る。原料粉末が均一に混合されていなければ，成形体の形状寸法が悪くなるなどの問題が生ずる。特に，本発明の製造方法によリ得られる骨補填剤は，薬物の投与量を一定にする観点から，一つ一つの形状が一定であることが望ましいので，できるだけ原料を均一に混合することが望ましい。

[0064] 混練工程における温度は，バインダの種類などに応じて適宜調整すればよいが，温度が低いと混ざらないし，温度が高いとバインダが熱分解してしまうので， 1 1 0 °C〜 2 4 0 °Cがあげられ，好ましくは 1 3 0 °C〜 1 9 0 °Cであり，より好ましくは 1 4 0°C〜 1 6 0°Cである。

[0065] 混練工程における時間は，原料を均一に混練するためには長時間を必要とし，時間が長すぎれば混練中にバインダが熱分解することがあるため，バインダの種類などに応じて適宜調整すればよいが， 3 0分〜 5時間があげられ， 4 5分〜1 . 5時間でもよい。

[0066] 混練工程における混練機として，例えば，加圧式ニーダー，一軸又は二軸の押出式ニーダーを適宜使用できる。本発明により得られる骨補填剤は，移植に用いることが考えれる医療機器であるから，混練機の羽根が磨耗して不純物が混入する事態を避けることが好ましい。このような観点から，混練機の羽根は高硬度の高いものを用いることが望ましぐ T i Nコーティングなどの表面保護層が形成されるように表面処理が施されている羽根を用いることが好ましい。

[0067] 混練工程は，例えば以下のようにすればよい。あらかじめ設定した温度にニーダーを加熱した後，融点が高いバインダをはじめに混練機へ投入する。バインダの溶融が進んだ後に原料粉末を投入する。その後，融点が低いバインダと原料粉末とをともに混練機へ投入し， 1 Z 2容積量〜 4 Z 5容積量の原料を投入した後， D B P (ジブチルフタレート）などの低揮発分を投入し，その後，残りの原材料を投入する。このように，高融点のバインダ（高粘性）と原料粉末をはじめに混練することで，粉末の凝集を分散させる効果を得ることができた。

[0068] 具体的には，（メタ）アクリル系樹脂及び前記エチレン一酢酸ビニル共重合体を混練機へ投入し，混練しつつ前記原材料，前記パラフィンワックス及び前記ステアリン酸を混練機へ投入し，混練しつつ前記ジブチルフタレートを混練機へ投入するものがあげられる。このように混練を行うことで，射出成形用の材料であるコンパウンドを得ることができる。

[0069] ただし，本発明では，得られる骨補填剤が，将来的には骨と置き換わるものであるから，あえて成形品に微小なクラックを入れて，骨と置き換わることを促進してもよい。そのような観点からは，例えば，混練時間を 1 5分〜 3 0分としてもよぐ混練温度を 8 0 °C〜 1 0 0 °Cとしてもよい。

[0070] [成形工程]

成形工程は，射出成形により所定の形状を持った成形体を得るための工程である。骨補填剤は，正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 4つの突起部を有する形状が好ましいので，以下このような骨補填剤を製造するための金型の例を説明する。図 1は，本発明の骨補填剤の製造方法において用いられる金型の例を示す概念図である。図中 1は，金型の溝を合わせた形状を示し， 2は注入口に対応する部分を示し， 3はあわせ面を示し， 4はくさびを示す。前記金型は，材料を注入するための注入口（ゲート）が設けられる固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側と接触するが，成形後は前記固定側から離れる可動側金型とを有するものがあげられる。そして，前記金型は，前記突起部のひとつの先端部が材料を注入するための注入口に位置するようにし，あわせ面（パーティング面）が残りの 3つの突起部に位置するようにし，前記残りの 3つの突起部の内側に突き出しピン（ェジェクタピン）を配置するものがあげられる。残りの 3つの突起部の内側とは，図 1 (A)の下方から符号 2の方に向かう方向を意味する。

[0071 ] 前記骨補填剤は，複数（たとえば 4つ以上）の突起部を有する形状であり，前記金型は，材料を注入するための注入口が設けられる固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，前記固定側金型は，前記複数の突起部のうちある突起部の先端部から射出成形用の材料が注入されるように，前記注入口を前記先端部に位置するようにし，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって注入口方向へ傾斜する傾斜面を有し，前記可動側金型は所定のくさびを設けるためのへこみ部を有する上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。図 1に示されるように，突起部に対応する部位に設けられるあわせ面は，水平ではなく中心に近づくにつれ注入口方向へ傾斜している。

[0072] 骨補填剤を 1回の成形で製造することは困難をともなう。当業者であれば，射出成形をするのであれば，突起部ごとに成形してそれらを組み合わせる製造方法を考える。しかし，本発明の骨補填剤は，微小であり，各突起部を別々に製造して，それらを組み合わせることは困難である。そこで，射出成形時の金型を工夫することで， 1回の射出成形で複数の突起部を有する射出体を得ることができるというものである。たとえば，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって注入口方向へ傾斜する傾斜面を有するような三次元的なあわせ面を有する金型を考案することで，固定側金型から成形体をとリやすいものとした。たとえば，あわせ面が平面な半割金型では，固定側金型に成形体が残る可能性が高くなリ，そのような場合，成形体を金型から取り除くことは困難となる。そして，金型に詰まった成形体をきれいに取り除くのは困難であった。しかしながら，上記の金型では，あわせ面に傾斜をつけることで，固定側金型に成形体が残る可能性を低くした。

[0073] 本発明に用いられる金型の好ましい態様は，くさび (4)の高さが， 1 m〜

1 X X 1 0 ² m (好ましくは 5 IT！〜 2 X 1 0 m，又は 5 rr！〜 1 X 1 0 m) である。くさびの形状は，くさびとしての機能を奏するものであれば，特に限定されるものではなぐ公知の形状を採用できる。図 1では，くさびの数は 3つ設けられるが（各突起部の先端に対応する部位にある），くさびの数や位置は特に限定されず，突起部の先端部以外の部分（例えば，突起部の胴体部）に設けられてもよい。成形体が固定側金型に取り残されると，骨補填剤を製造できなくなる。このくさびの部分が，可動側金型へのくさびの役割をするので，金型を取り外した際に固定型金型に成形体がとり残される事態を防止できる。

[0074] 本発明に用いられる金型の好ましい態様は，前記可動側金型は，深さが 1 m〜2 x 1 0 m (好ましくは 5 m〜1 X 1 0 m) である 1又は複数の溝（好ましくは平行な溝，又はスパイラル状の溝）を有する前記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。成形体が固定側金型に取り残されると，骨補填剤を製造できなくなる。この溝の部分が，可動側金型部分の表面積を増やすことになるので，金型を取り外した際に固定型金型に成形体がとり残される事態を防止できる。前記溝は，例えば，突起部の胴体部分に設けられるものがあげられる。

[0075] 本発明に用いられる好ましい態様は，前記骨補填剤は， 4つの突起部を有する形状であり，前記可動側金型側には，突起部の内側に位置するように突き出しピンを配置する上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。金型から取り外すことは射出成形では非常に重要である。この態様では，突起部の内側に位置するように（ひとつの突起部の先端の反対方向から，中心やそのひとつの突起部の先端方向に向けて移動するように）突き出しピンを配置するので，効果的に成形体を取り外すことができる。

[0076] 本発明に用いられる好ましい態様は，前記骨補填剤は，複数の突起部を有する形状であり，前記金型は，固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，射出成形用の材料が注入される注入口を前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面に位置するようにし，前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって前記骨補填剤の中心方向へ傾斜する傾斜面を有し，前記可動側金型は所定のくさびを設けるための溝を有する，上記いずれかに記載の骨補填剤の製造方法である。射出成形時の金型を工夫することで， 1回の射出成形で複数の突起部を有する成形体を得ることができるというものである。

[0077] 成形工程では，好ましくは射出成形機を用いて射出成形を行う。射出成形機は，特に限定されず公知の射出成形機を適宜用いることができる。射出成形機として，縦型又は横型；高圧式，中圧式又は低圧式；プランジャ式又はスクリュー式などがあげられる，ただし，このリン酸カルシウム系物質を用いて微小な突起部を有する骨補填剤を製造するためには，横型でスクリユー式（好ましくは高圧式）の射出成形機を好ましく用いることができる。ただし，スクリユー■シリンダが磨耗するなどして生ずる不純物が成形体へ混入すると，通常の成形体であれば，特に問題とならないが，本発明の骨補填剤は生体内に投与されることが意図されているので問題が生ずるおそれがある。そこで，スクリューの表面に， T i Nコーティング層などの磨耗保護層を設けることが好ましい。

[0078] [脱バインダ工程]

脱バインダ工程は，前記成形工程で得られた成形体に含まれるバインダを取り除き脱脂体を得るための工程である。脱バインダ工程は，脱脂工程ともよばれる。この脱バインダ工程で，バインダを十分に取り除いておかなければ，後の焼結工程で，成形体に亀裂が生じる場合や，ふくれが生ずる場合がある。脱脂工程では，変形やクラックなどの欠陥を発生させずに脱バインダを完了することが期待される。バインダを除去するための方法には，昇華法，自然乾燥法，溶剤抽出法及び加熱脱脂法などがあげられ，好ましくは加熱脱脂法である。加熱脱脂法には，大気雰囲気，減圧雰囲気，加圧雰囲気，及びガス雰囲気で行う方法などがあるが，好ましくは大気雰囲気下で加熱して脱脂を行うものである。脱脂炉に，成形体を投入する際は，好ましくはセラミックスセッター（多孔質，緻密質）に載せる。成形体が大きい場合（肉厚が厚い），アルミナなどの多孔質であるセッターが好ましい。また，セッターの汚れゃ，加熱によるセッタ一材質から来る成分が不純物にならないように配慮することが望ましい。

[0079] 脱バインダ工程は，たとえば，バインダに含まれる樹脂の熱分解温度に応じて，複数段階の昇温時間と維持期間を有する。そして，特に熱分解温度の低い樹脂を効果的に熱分解させることで焼結性を上げることができる。本発明では，上記のように温度を上げるので，効果的に熱分解温度の低い樹脂を熱分解させることができる。本発明の好ましい態様では，骨補填剤が生体内に投与されるにもかかわらず，生体親和性に優れない化合物をバインダに含めてもよい。そのような化合物は特に融点が低いバインダであることが多い。そこで，昇温工程では，融点が低いバインダを確実に蒸発させるため，比較的緩やかに温度をあげることが好ましぐ具体的には， 1 1 0 °C〜3 0 0 °Cの第一の維持期間に達成するまでの間（好ましくは 2 3 0 °C〜 2 5 0 °Cに達するまでの間）， 1°CZ時間〜 3 X 1 0²°CZ時間で昇温するものがあげられ，好ましくは 1 X 1 0°CZ時間〜 2 X 1 0²°CZ時間で昇温するものであり，さらに好ましくは 2 X 1 0°CZ時間〜 5 X 1 0°CZ時間で昇温するものであり， 3 X 1 0°CZ時間〜 4 X 1 0°CZ時間で昇温するものであってもよい。維持工程は，例えば 2 X 1 0分〜 5時間があげられ，好ましくは 3 X 1 0 分〜 2時間である。

[0080] [焼結工程]

焼結工程は，脱バインダ工程後の成形体を加熱するための工程である。例えば，特開 2004-97259号公報（上記特許文献 1 ) では， 1 250 で1時間焼結している（同公報の段落 [0025]) 。しかし，本発明の好ましい態様では，大気雰囲気から最高温度 9 X 1 0²°C〜 1. 1 X 1 0³°Cまで加熱する。これは，例えば， Qf— TCPなどの原材料を用いた場合に，効果的に) S—TCP に変換するためである。高温の維持時間は，例えば， 5 X 1 0_¹時間〜 3時間があげられる。なお，焼結工程には，昇温工程（及び維持工程）後に，通常冷却工程をともなう。冷却工程は，公知の冷却方法を適宜用いればよい。冷却時間を含んだ焼結時間は，例えば 6時間〜 5 X 1 0時間があげられ，好ましくは 1 X 1 0時間〜 3 X 1 0時間である。成形温度として 1 X 1 0²°C〜 1. 5 X 1 0²°Cがあげられる。また，金型温度として， 1 X 1 0°C〜3 X 1 0°Cがあげられる。

[0081] [後処理工程]

後処理工程は，焼結後の成形体の後処理を行うための任意の工程である。具体的には，ェジェクタピン跡をきれいにすることや，成形体を洗浄するものがあげられる。

[0082] 原料粉末の他に，公知の薬剤を添加するものは，本発明の好ましい態様である。このようにすれば，本発明により製造される骨補填剤の体積はほぼ一様なので，骨補填剤は適切な薬剤の担体として機能する。このように添加される薬剤は，高温にしても活性を損なわないものが好ましい。

[0083] [薬剤の含浸又は塗布] 製造された骨補填剤（又は，焼結工程後に得られた焼結体）に，適宜薬剤を含浸又は塗布するものは，本発明の別の好ましい実施態様である。薬剤の塗布方法として，薬剤を公知の薬学的に許容される希釈剤（溶媒）に溶解させて医薬組成物を得て，その医薬組成物を用いて浸漬塗布，スプレー塗布，又はスピンコート塗布するものがあげられる。これらの中では，浸漬塗布が好ましい。薬剤を浸漬塗布すると薬剤が骨補填剤の表面又は内部に含浸することとなる。すなわち，本発明では，所定の薬剤を含浸又は塗布した骨補填剤をも提供できる。

[0084] 本発明の骨補填剤の好ましい態様は，前記薬剤として，骨，軟骨形成促進剤（軟骨形成促進因子を含む），関節疾患治療剤，骨 ·軟骨疾患予防 ·治療剤，骨再生剤，骨吸収抑制物質，血管新生促進剤，抗菌剤，抗生物質又は抗癌剤を具備する上記に記載の骨補填剤である。本発明の骨補填剤の好ましい態様は，前記薬剤として，下記式（I )で示されるチエノインダゾール誘導体を具備する，上記に記載の骨補填剤である。式（I )で示されるチエノインダゾール誘導体（4 , 5 -ジヒロドロ _ 1 _メチル - 1 H—チエノ [ 3， 4 _ g ] インダゾール誘導体）は，例えば，特開 2002-356419号公報に記載の方法に従って製造できる。なお，薬剤は，所定の薬効を得るための有効量が，本発明の骨補填剤に含まれることが望ましい。すわなち，本発明では，公知の薬剤を用いることができるので，薬剤が特定の用途に有効に機能するために必要な量 (有効量）を投与できることとなるように，その薬剤の含有量を適宜調整すればよい。

[0085] [化 5]

(式（I)中， R¹は，カルボキシアミド基（-CH (NH₂) (C0₂H) ) ， -C H (NH₂) (S0₃H) ， -CH (NH₂) (S0₂N H R¹¹) ， -CH (NH₂ ) (PO (NH₂) OH) , 及び- CH (NH₂) (PO(OR^M)OH) があげられ（ただし，式中 R¹¹は炭素数が 1〜5の直鎖アルキル基を示す。），これらの中でもっとも好ましいものは，カルボキシアミド基である。）

[骨 ·軟骨形成促進剤]

骨■軟骨形成促進剤は，骨又は軟骨の形成を促進できる剤であれば公知の剤を適宜利用できる。具体的な，軟骨形成促進剤として，国際公開公報 20 02年 087620号に開示される， 2-[1-(2,2-ジェトキシ-ェチル) -3-(3-p -卜リル-ゥレジド) -2, 3-ジヒドロ- 1H-ィンドール- 3-ィル] -N-P-卜リル-ァセ卜アミド (2- [1 - (2, 2-D i ethoxy-ethy I ) -3-(3-p-tolyl-ureido) -2, 3-dihydr 0-1 H- i ndo I -3-y I ] -N-p-to I y I -acetam i de) があげられる。軟骨形成促進剤として，骨形成促進因子があげられる。骨形成促進因子は，一般に BMP (Bone morphogenetic protein)と称され，この BM Pは未分化の間葉系細胞に細胞外から作用し，その遺伝形質を軟骨細胞や骨芽細胞へと分化させ，軟骨誘導，骨誘導する物質である。骨形成促進因子として， BMP 1〜1 3があげられる。本発明において薬剤として BMPを用いる場合の BMPは，遺伝子組み換えあるいは Dunn骨肉腫から分離，精製して得られたもの（Takaoka, K. , B i 0 med i ca I Research, 2 (5) 466-471 (1981 ) )のいずれでもよぐ公知の製造方法により得ることができる。

[0087] [関節疾患治療剤]

関節疾患治療剤として， p 3 8 M A Pキナーゼ阻害剤（WO 0 0 Z 6 4 8 9 4などに記載のチアゾール系化合物等）；マトリックスメタ口プロテア一ゼ阻害剤（M M P I ) ；プレドニゾロン，ヒドロコルチゾン，メチルプレドニゾロン，デキサベタメタゾン，ベタメタゾン等の抗炎症ステロイド剤；及びインドメタシン，ジクロフエナク，ロキソプロフェン，イブプロフェン，ピロキシカム，スリンダク等の非ステロイド性消炎鎮痛剤があげられる。

[0088] [骨 ·軟骨疾患予防 ·治療剤]

骨 -軟骨疾患予防，治療剤として，例えば，プロスタグランジン A 1誘導体，ビタミン D誘導体，ビタミン K 2誘導体，エイコサペンタエン酸誘導体，ベンジルホスホン酸，ビスホスホン酸誘導体，性ホルモン誘導体，フエノ一ルスルフォフタレイン誘導体，ベンゾチォピランまたはべンゾチェピン誘導体，チエノインダゾール誘導体，メナテトレノン誘導体，ヘリォキサンチン誘導体などの非べプチド性骨形成促進作用物質，難溶性のぺプチド性骨形成促進物質のいずれか 1種又は 2種以上の混合物があげられる。これらはいずれも公知の方法により得ることができる。骨，軟骨疾患予防剤は，骨，軟骨疾患に罹患する事態を予防する剤又は骨 ·軟骨疾患が発症する事態を防止する剤のいずれか又は両方があげられる。

[0089] [骨再生剤]

骨再生剤として，カルモジュリン，ァクチノマイシン D，サイクロスポリン A，硫酸ダルコサミン，塩酸ダルコサミン，骨髄エキス，リン酸カルシゥム，乳酸 Zグリコール酸 Ζ ε _力プロラクトン共重合体，多血小板血漿，又はヒ卜骨髄間葉細胞のいずれか 1種又は 2種以上の混合物があげられる。これらはいずれも公知の方法により得ることができる。

[0090] [骨吸収抑制物質]

骨吸収抑制物質として，エストロゲン剤，カルシ卜ニン及びビスホスホネ一卜のいずれか 1種又は 2種以上の混合物があげられる。これらはいずれも公知の方法により得ることができる。

[0091] [血管新生促進剤]

血管新生促進剤として，インジゴカルミン， 4_ [1\1_メチル_1\1_ (2 —フエニルェチル）ァミノ] _ 1 _ (3， 5—ジメチル一 4_プロピオニルァミノべンゾィル）ピぺリジン， 4-(5H-7,8,9, 10-テトラヒドロ- 5, 7, 7, 10, 10 -ペンタメチルベンゾ [e]ナフ卜 [2, 3-b] [1,4]ジァゼピン- 13-ィル）安息香酸，活性化プロテイン C，ゥロテンシン I I様ペプチド化合物，繊維芽細胞成長因子（FG F) (塩基性 FG F及び酸性 FG Fを含む），血管内皮細胞成長因子（VEG F) (血小板由来が好ましい。），肝細胞成長因子（HG F) ，アンギオポェチン（アンギオポェチン一 1及びアンギオポェチン一 2を含む。），血小板由来成長因子（PDG F) ，インシュリン様成長因子（ I G F ) ，又は胎児型平滑筋ミオシン重鎖（SMemb) の 1種又は 2種以上の混合物があげられる。これらの中では，繊維芽細胞成長因子が好ましい（Hocke I , M. et

a I■， Arch. Surg. , No.128, p.423, 1993) 。繊維芽細胞成長因子として，塩基性繊維芽細胞成長因子（bFGF) が好ましく，より具体的には，トラフエルミン (遺伝子組み換え）があげられる。すなわち，本発明の骨補填剤の好ましい態様のひとつは，前記薬剤として，トラフエルミン，その塩，その溶媒和物又はそのプロドラッグを具備する，上記に記載の骨補填剤である。 "その塩 " は，トラフエルミンの塩を意味し，具体的な塩は，先に説明した塩と同様である。 "その溶媒和物" は，トラフエルミンの溶媒和物を意味し，具体的な溶媒和物は，先に説明した溶媒和物と同様である。 "そのプロドラッグ" は，トラフエルミンのプロドラッグを意味し，投与後，生体内などでトラフエルミン，その電離物（イオン)又はその塩などに替わる剤を意味する。具体的には，アミノ基などの保護基を有しており，生体内で保護基が外れて，卜ラフエルミンと同様の機能を有するものがあげられる。

[0092] [抗菌剤又は抗生物質]

抗菌剤又は抗生物質として，公知の抗菌剤や抗生物質を適宜用いることができる。具体的な抗菌剤又は抗生物質として，スルファセタミド（sulfaceta mide) ，スルファメチゾール（sufamethizol) ，スルフアジミジン（sulfadi midine) ，スルファメラシン (sulfamerazine) ，スルフアジアンン (sulfad iazine) などのサルファ剤；クロラムフエ二コール（chloramphenicol ： CP) ，チアムフエ二コール（t i amphen i co I ) ，などのクロラムフエニコール系抗菌剤；オフロキサシン（of loxacin： 0FLX) シプロフロキサシン（ciprofloxa cin： CPFX) ，ェンロフロキサシン（enrof loxacin) ，ロメフロキサシン（lo mef loxacin： LFLX) ，ルフロキサシン（rufloxacin) ，レポフロキサシン（I evof loxacin： LVFX) ，フレロキサシン（f leroxacin： FLRX) ，ナジフロキサシン（nadif loxacin： NDFX) ，ノルフロキサシン（norfloxacin： NFLX) ，スパフロキサシン（sparf loxacin： SPFX) ，などのキノロン系抗菌剤；フシジン酸（fusidic acid： FA) ；フサファンギン（fusafungine) ；フォスフォマイシン（fosfomycin： F0M) ；ムピロシン（mupirocin： MUP) ；ブロデモプリム (brodimopr im) ；ンリスロマイシン (di r ithromycin) ；ベンシレぺニシリン（benzylpenici 11 in： PCG) ，ペニシリン G .プロ力イン（ペニシリン G プロ力イン塩、 penici 11 in G procaine) ，ベンジルペニシリン■ベンザチン (ベンジルペニシリンベンザチン塩， benzathine penici 11 in) ，フエノキシメチレペニシリン (phenoxymethy I pen i c i 11 i n | ； Pen i c i 11 i n V) ，メチシリン（methici 11 in) ，アンピシリン（ampici 11 in : ABPC) ，クロキサシリン（ cloxaci 11 in： MCIPC) ，カルペニシリン (carbenici 11 in) ，ピヴアンピシリン（pivampici 11 in： PVPC) ，ァモキシシリン（AMPC) ，タランピシリン（ta lampici 11 in： TAPC) ， / カンピシリン (bacamp i c i 11 i n： BAPC) ，チカルシリン (ticarci 11 in： TIPC) ，ァゾシリン (azloci 11 in) ，メズロシリン (me z loci 11 in) ，ピブメシリナム (pivmeci 11 inam： PMPC) ，ピぺラシリン（pip eraci 11 in： PIPC) ，ァモキシシリン-クラブラン酸 (amoxici 11 in： AMPC/cla vu I an i c-ac i d： CVA； co-amox i c I av) )，ァパラシリン (apalci 11 in) ，テモシリン (temoci 11 in) ，チカルシリン-クラブラン酸 (ticarci 11 in/clavulani c acid： CVA) ，アンピシリン-スルバクタム（amp i c i 11 i n： ABPC/su I bactam ： SBT) ，スルタミシリン（suは amici 11 in： SBTPC) ，ピぺラシリン-タゾバクタム（piperaci 11 in： P I PC/tazobactam： TAZ) ，などのぺニシリン系抗生物質；ストレプトマイシン（str印 tomycin： SM) などのストレプトマイシン系抗生物質；クロ口テトラサイクリン（chlortetracycl ine) ，オーレォマイシン (aureomycin) ，クロラムフエニコ一レ (chloramphenicol ： CP) ，ォキシテトラサイクリン（oxytetracycl ine： 0TC) ，デメチルクロルテトラサイクリン（demethy I chlortetracycl ine、、デメクロサイクリン、レダマイシン ®) ，ライムサイクリン（lymecycl ine) ，ドキシサイクリン（doxycycl i ne： DOXY) ，ミノサイクリン（minocycl ine： MIN0) ，などのテトラサイクリン系抗生物質；ネオマイシン（neomycin) ，スぺクチノマイシン（spectinom ycin： SPCM) ，ゲンタマイシン（gentamycin： GM) ，卜ブラマイシン（tobra mycin： T0B) ，アミカシン (amikacin： AMK) ，ミクロノマイシン (micronom icin： MCR) ，イセ/《シン（isepamicin： ISP) ，アルべカシン（arbekacin： ABK) ，などのアミノグリコシド系抗生物質；エリスロマイシン（erythromyc in： EM) ，スピラマイシン（spiramycin： SPM) ，ロキシスロマイシン（roxi thromycin： RXM) ，ァジスロマイシン（azは hromycin： AZM) ，ミデカマイシン (m i decamyc i n： MDM) ，クラリスロマイシン (clar i thromycin： CAM) ，などのマクロライド系抗生物質；バンコマイシン（vancomycin： VCM) ，ティコブラニン（teicoplanin： TEIC) ，などのグリコペプチド系抗生物質；コリスチン（col istin： CL) などのポリペプチド系抗生物質；バージニアマイシン

(vi rginiamycin) ，プリスチナマイシン (pr istinamycin) なとのス卜レプトグラミン系抗生物質；クリンダマイシン（cl indamycin： CLDM) ，などのリンコマイシン系抗生物質；セファレキシン（c印 halexin： CEX) ，セファゾリン（cefazol in： CEZ) ，セフラジン（cefradine： CED) ，セフアド口キシル

(cefadroxi I ： CDX) ，セフアマンドール（cefamandole： CMD) ，セフロキシム（cefuroxime： CXM) ，セファクロル（cefaclor： CCL) ，セフオタキシム

(cefotaxime： CTX) ，セフスロジン（cefsulodin： CFS) ，セフペラゾン（c efperazone) ，セフォチアム（cefotiam： CTM) ，セフトリアキソン（ceftri axone : CTRX) セフメノキシム（cefmenoxime： CMX) ，セフタジジム（ceftaz idime： CAZ) ，セフトロキシム (cefti roxime) ，セフォニシド (cefonicid ) ，セフピラミド（cefpiramide： CPM) ，セフオペラゾン一スルバクタム（c efoperazone： CPZ/su I bactam： SBT) ，セフポドキシム (cefpodoxime： CPDX ) ，セフォジジム（cefozidime) ，セフジニル（cef d i n i r： CFDN) ，セフエタメト（cefetamet： CEMT) ，セフエピロム（cef p i rome： CPR) ，セフエプロジレ（cefprozil) ，セフェティブフェン（ceftibufen) ，セフエヒム (cefe pime： CFPM) ，などのセファロスポリン系抗生物質；セフォキシチン（cefox itin： CFX) ，セフメタゾール（cefmetazole： CMZ) ，セフォテタン（cefote tan： CTT) ，などのセファマイシン系抗生物質；ラタモキセフ（latamoxef : LM0X) ，フロモキセフ（f lomoxef ： FM0X) ，などのォキサセフエム系抗生物質；イミぺネム-シラスタチン（imipenem： IPM/ci I astat i n： CS；チェナム &r eg;) などの力ルバぺネム系抗生物質；ァズトレオナム（aztreonam： AZT) などのモノバクタム系抗生物質；口ラカルべフ（loracarbef ： LCBF) などの力ルバセフエム系抗生物質；パニネム-ぺタミブロン（panipenem： PAPM/betam i pron： BP) ，などの力ルバぺネム系抗生物質；リスロマイシン（telは hromyc in： TEL) などのケトライド系抗生物質のうち， 1種又は 2種以上を適宜混合したものがあげられる。

[抗癌剤]

抗癌剤は，癌を治療又は予防するための医薬である。抗癌剤として公知の抗癌剤を適宜用いることができる。具体的には， OK—432 (商品名ピシバニール）などの抗癌溶連菌製剤；クレスチン，レンチナン，レンチナン，シゾフィラン，ソニフイランなどの抗癌多糖体；マイトマイシン C (商品名マイトマイシン他），ァクチノマイシン D (商品名コスメゲン），塩酸ブレォマイシン（商品名ブレオ），硫酸ブレオマイシン（商品名ブレオ S) ，塩酸ダウノルビシン（商品名ダウノマイシン），塩酸ドキソルビシン（商品名アドリアシン），ネオカルチノスタチン（商品名ネオカルチノスタチン），塩酸アクラルビシン（商品名ァクラシノン），又は塩酸ェビルビシン（商品名フアルモルビシン）などの抗癌抗生物質；ビンブラスチンのような有糸分裂阻害剤；シス一ブラチン，カルポプラチン及びシクロホスフアミドのようなアルキル化剤；例えば 5 _フルォロウラシル，シトシンァラビノシド及びォキシ尿素（hydroxyurea) ， N- {5 - [N- (3, 4—ジヒドロ一 2—メチル _4_ォキソキナゾリン一 6_ィルメチル）一N—メチルァミノ] _2_ テノィル } _ L _ダルタミン酸のような抗代謝剤；アドリアマイシンゃブレォマイシンのような層間抗生物質；例えばァスパラギナーゼのような酵素；ェトポシドのようなトポイソメラーゼ阻害剤；インターフェロンのような生物的反応修飾剤； "NOLVADEX" (タモキシフェン）のような抗エストロゲン剤， "CAS0DEX"のような抗アンドロゲン物質；フルォロウラシル，テガフール，テガフール 'ゥラシル，及びメトトレキサー卜のような代謝拮抗剤；ビンクリスチンのような植物アル力ロイド；マイトマイシン C，ァクチノマイシン D，塩酸ブレオマイシン，硫酸ブレオマイシン，塩酸ダウノルビシン，塩酸ドキソルビシン，ネオカルチノスタチン，塩酸アクラルビシン，ァクラシノン，及び塩酸ェピルビシンのような抗癌抗生物質；シクロトリホスファゼン一白金錯体複合体，シスブラチン一白金錯体複合体のような白金錯体があげられる。

なお，本発明の骨補填剤は，生体内において骨と置き換わることを促進することが期待されるので，特定のポリべプチド又は遺伝子を含む薬剤が骨補填剤に含浸又は表面に塗布されていてもよい。そのようなポリべプチド又は遺伝子として，塩基性線維芽細胞増殖因子（b FG F) ，血小板分化増殖因子（PDG F) ，インスリン，インスリン様増殖因子（ I G F) ，肝細胞増殖因子（HG F) ，グリア誘導神経栄養因子（GDN F) ，神経栄養因子（ N F) ，ホルモン，サイト力イン，骨形成因子（BMP) ，トランスフォーミング増殖因子（TG F) ，血管内皮細胞増殖因子（VEG F) などがあげられる。これらのなかでは，血管新生および Zまたは骨形成を促す増殖因子が好ましい。そのような増殖因子としては，例えば骨形成因子（BMP) ，骨増殖因子（BG F) ，血管内皮細胞増殖因子（VEG F) およびトランスフォーミング増殖因子（TG F) があげられる。具体的には，特許 3713290号に開示される力ルポニン遺伝子などがあげられる。遺伝子は，骨補填剤中に，遺伝子治療に有効な量含まれていればよい。遺伝子は，そのまま（ネィキッド），ミセル状，又はウィルスベクターなどの公知のベクターに形質転換された組換えベクターの形で含まれればよい。また，薬剤は，公知の遺伝子の抗体であってもよい。

[0095] 遺伝子は，通常の方法に従い，公知の配列を基に調整することができる。

例えば，骨芽細胞から RN Aを抽出し，公知の配列を元にプライマーを作製し， PCR法でクローニングすることにより目的とする遺伝子の c DN Aが調整できる。また，市販のものを購入して用いても良い。

[0096] 本発明の骨補填剤の好ましい態様は，安定化剤を含む上記に記載の骨補填剤である。安定化剤として，ポリマーなどに用いられる公知の安定化剤，特に薬学的に許容される安定化剤を適宜用いることができる。なお，本発明の骨補填剤は，主に生体内において長期間にわたって強度が維持される。そして，生体内には，プロテアーゼなどの酵素が存在するので，骨補填剤が早期に分解される事態が想定される。そこで，本発明の好ましい態様では，安定化剤として，プロテアーゼインヒビターなどの阻害剤を含ませるものがあげられる。このような阻害剤として，公知の酵素阻害剤を適宜用いることができる。具体的な，プロテアーゼインヒビターとして， 4-(2-アミノエチル）ベンゼンスルフォニルフルオライド，ァプロチニン（Aprotinin) ，ベスティン (Bestain) ，カルパインインヒビター I，カルパインインヒビター 11，シモスティン（Chymostain) ， 3, 4-ジククロ口イソクマイン（3, 4-Dichloroisoco uma i n) ， E-64, EDTA, EGTA, ラクタシスチン（Lactacystin) ，ロイべプチン（Leup印 tin) ， MG-115, MG-132, ぺプスティン A (PepstainA) ，フエ二ルメチルスルフォニルフルオライド，プロテアソームインヒビター I， p_卜ルエンスルフォニル一L—リシンクロロメチルケトン， p—トルエンスルフォニル _ L—フエ二ルァラニンクロロメチルケトン，又はチロシンインヒビターのいずれか 1種または 2種以上があげられる。これらのプロテア一ゼインヒビタ一は，市販されており，これらのプロテアーゼインヒビターの阻害濃度も公知である。本発明の骨補填剤によって形成される化合物の好ましい態様は，生体内で長期間維持し，薬剤に対して徐放性を有するものである。したがって，本発明の骨補填剤は，好ましくは，上記のプロテアーゼィンヒビターの 1回当リの投与量の 2倍〜 100倍の量を含むものであり，よリ好ましくは 2倍〜 50倍の量を含むものである。プロテアーゼインヒビターの具体的な量は，用いるプロテアーゼインヒビターの種類などによっても異なるが，プロテアーゼインヒビターとして有効に機能する量（有効量）含まれることが好ましぐ一般的に，骨補填剤 1 g当たり， 0. 1 g〜0. 5mg含まれるものがあげられ， 1 g〜0. 1mg含まれるものでもよぐ 10 g〜0. 1mg含まれるものであつてもよい。具体的な投与量は，骨補填剤を投与する部位の容積にほぼ比例して増大することとなる。

[接着性付与剤]

製造された骨補填剤（又は，焼結工程後に得られた焼結体）に，適宜接着性付与剤を含浸又は塗布するものは，本発明の別の好ましい実施態様である。また，接着性付与剤が熱で変性しにくいものの場合は，原料粉末に接着性付与剤を混ぜておき接着性付与剤が粉体混合された骨補填剤を得てもよい（このような場合，骨補填剤の表面にも接着性付与剤が存在するほか，表面が骨と置換され新たに現れる表面にも接着性付与剤が存在するので接着性を維持できることとなる）。また，接着性付与剤は，成形体又は焼結体の表面に粉状のまま散布してもよい。さらに，複数の骨補填剤と粉末の接着性付与剤とを混合し適宜攪拌することにより粉体混合し，これにより骨補填剤の表面に接着性付与剤を付着させてもよい。接着性付与剤は，前記の薬剤とともに含浸又は塗布されてもよいし，接着性付与剤のみが含浸又は塗布されてもよし、。接着性付与剤は，骨補填剤同士の接着凝集性を高めるための剤であり，好ましくは接着性付与剤のみでは高い接着性を有しないが，生体内において体細胞などと接触することで接着凝集性が高くなる物質が好ましい。具体的な,接着性付与剤として，トロンビンがあげられる。トロンビンは，血液を固まりやすくする酵素の一種である。トロンビンの生体内での働きは，血液を固める血液凝固物質であるフイブリンを作り出すことである。トロンビンにより生成されたフイブリンによって，血液が固まりやすくなる。よって，接着性付与剤としてトロンビンを用いれば,骨補填剤表面の接着凝集性が高まり，これによつて骨補填剤同士が固定され，骨補填剤全体としての強度が高まることとなる。トロンビンは，上記の薬剤と同様の量を上記の薬剤と同様にして含浸又は塗布させることができる。

[0098] なお， 2種類の接着性付与剤を含有する組成物を用意し，ある骨補填剤群に第 1の組成物を含浸又は塗布して第 1の骨補填剤群とし，ある骨補填剤群に第 2の組成物を含浸又は塗布して第 2の骨補填剤群とし，前記第 1の骨補填剤群と前記第 2の骨補填剤群を含む骨補填剤群を骨補填剤として用いることは，本発明の好ましい実施態様である。前記第 1の組成物は，下記一般式（

I I)で示される化合物か，下記一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3〜8 個含む化合物を 1種又は 2種以上含有する第 2の化合物，及び第 2の希釈剤を具備するものがあげられる。

[0099] Χτ- (OCH₂CH₂) _n-X₂ (I)

[0100] [化 6]

[0101] (式 (I I) 中， X,ト ^Χ,Μは，それぞれ同一又は異なり， -R¹C00NHS (R¹は， C 广アルキレン基を示す。）， -C0R¹C00NHS (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。 ) ， -N0C0R¹- R² (R¹は， i^-C?アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) ， -R¹NH₂ (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， C'-C?アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す）を示し， ^〜 ^は，それぞれ同一又は異なり， 20〜250の整数を示す。）

[0102] [化 7]

[0103] (式 (III) 中， X_mは， -R'COONHS (R¹は， - アルキレン基を示す。 ) ， -C 0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R¹は， - アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) ， -R¹NH₂ (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， C- C₇アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す。）を示し， n_mは 10〜150の整数を示す。）。

[0104] 一般式（I)で示される化合物は，式（I)において， X 及び X₂は同一又は異なり， -R¹C00NHS， -C0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R²は，マレイミド基を示す。）， -R¹NH₂， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂を示し， nは， 80〜1000の整数を示す化合物である。一般式（において， X 及び X₂は，好ましくは同一である。一般式（ I) において， R¹は， ^- アルキレン基を示し，好ましくは d-Csアルキレン基であり，より好ましくは i^-Czアルキレン基又は C₅アルキレン基である。一般式 (I) において， Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示し，好ましくは P-フエ二レン基である。一般式（において， nは， 80〜1000の整数を示し，好ましくは 100〜500である。

[0105] 一般式（I I)で示される化合物は，式 (I I) において， X,ト，〜 X_IMは，それぞれ同一又は異なり， -R¹C00NHS， -C0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R²は，マレイミド基を示す。）， -R¹NH₂， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂を示し， ^〜 ^は，それぞれ同一又は異なり， 20〜250の整数を示す。一般式（I I) において， Χ,Η Χ,Μ は，好ましくは全て同一である。一般式（I において， R¹は， d-C?アルキレン基を示し，好ましくは i^-Csアルキレン基であり，より好ましくは d-Czアルキレン基又は C₅アルキレン基である。一般式（I I) において， Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示し，好ましくは P-フエ二レン基である。一般式（I I) において， ^〜 ^は，好ましくは全てが同一である。一般式（I I) において， η,Η η,Μは， 20〜250の整数を示し，好ましくは 40〜200の整数である。

[0106] 一般式（I I I) で示される繰り返し単位を有する化合物は，式（I I I) において， X_mは， -R¹C00NHS， -C0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R²は，マレイミド基を示す。 ) ， - R¹NH₂， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂を示し， n_mは 10〜150の整数を示す。 ) 。一般式（I I において， R¹は， i^-C?アルキレン基を示し，好ましくは d-Cs アルキレン基であり，より好ましくは d-Czアルキレン基又は C₅アルキレン基である。一般式（I I において， Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示し，好ましくは P-フエ二レン基である。一般式（I I で示される繰り返し単位を有する化合物の繰返し単位の数は， 3〜5が好ましぐ 4であるものがより好ましい。また，一般式（I I で示される化合物の末端にも，一般式（I I の X_m で示される官能基を有するものが好ましい。より具体的には,両末端に，式 Xm - (0CH₂CH₂) _nM|-0-CH₂-CH (-0- (CH具 0) _nlll— X_m) -CH₂-で示される基及び式 X - (0CH₂CH₂) _nM|-0-CH₂-CH (-0- (CH₂CH₂0) _nlll— X_m) -CH₂-0-で示される基を有するものが好ましい。

[0107] 本発明の接着性付与剤の好ましい態様は，前記第 1の化合物は，一般式（I ) 又は（I において， X ， Χ ₂，又は ΧΜ Χ,Μが，それぞれ同一又は異なり， -N0C0R1-R²又は- R1NH₂である化合物を 1種又は 2種以上含有し，前記第 2の化合物は，一般式（又は（I において， X ， X ₂，又は Χ,Η Χ,,- 4が，それぞれ同一又は異なり， -C0R¹C00NHS， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂(Phは， o- m- 又は p-フェ二レン基を示す）である化合物を 1種又は 2種以上含有する上記に記載の接着性付与剤である。

[0108] 第 1の組成物に混合される第 1の化合物は，官能基として， -N0C0R¹-R²又は -R¹NH₂である化合物（特に官能基が- R¹NH₂である化合物）を用いることが好ましい。また，第 2の化合物として，第 1の化合物と混合されることによリ架橋反応が迅速に行われ，最終的に得られる化合物が所定の強度（弾力性）及び形状安定性を有するものであることが好ましい。また，第 1の化合物と第 2の化合物との組み合わせとして，得られる化合物が特定の立体構造を形成することで，包含する薬剤を適切な量だけ放出し続ける化合物となるものが望ましい。そのような観点から，第 2の組成物に混合される第 2の化合物は，官能基として- C0R¹C00NHS， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂(Phは， ο-, m-又は p-フエニレン基を示す）を有する化合物（特に官能基が- C0R1C00NHSである化合物）が好ましい。また，第 1の化合物及び第 2の化合物とも一般式（I I)で示される化合物が好ましい。第 1の化合物の官能基及び第 2の化合物の官能基の組み合わせとして，プロピルアミン基とスクシンィミジル基の組み合わせが好ましい

[0109] 本発明の接着性付与剤の好ましい別の態様は，前記第 1の化合物は，一般式（又は（I において， X ， X ₂，又は Χ,Η Χ,Μが，それぞれ同一又は異なり， -N0C0R1-R2 (R1は， d-Csアルキル基を示す。 ) 又は- R¹NH₂ (R¹は， i^-Csアルキル基を示す。）である化合物を 1種又は 2種以上含有し，前記第 2の化合物は，一般式（又は（I において， X ， X₂，又は Χ_ΙΜ〜Χ_ιμ 4が，それぞれ同一又は異なり， -C0R¹C00NHS， -R¹SH (R¹は， - アルキル基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， P-フ二レン基を示す）である化合物を 1種又は 2種以上含有するものである。

[0110] 化合物を構成する化合物の分子量は，特に限定されないが，分子量（数平均分子量）が， 3x10³〜4x10⁴である化合物（化合物）を用いても良好な化合物を得ることができ，分子量が 1 X 10⁴〜3x 10⁴の化合物を含む化合物を用いればよリ良好な化合物を得ることができる。

[0111] 化合物の濃度は，特に限定されないが，化合物を構成する化合物の濃度が，第 1の組成物又は第 2の組成物において，それぞれ 5mM〜20mMの範囲のものである。そのような濃度の化合物を用いれば，特に良好な化合物を作成できる。また，化合物の濃度が，各組成物において 6mM〜30mMの場合に，特に有効な化合物を得ることができることが推測される。

[0112] 一般式（I) 又は（I I)で示される化合物及び，一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3〜 8個含む化合物は，市販されている他，公知の合成方法により合成することができる。

[0113] 一般式（I) 又は（I I)で示される化合物及び，一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3〜 8個含む化合物は，それぞれ，その塩，又はその溶媒和物であつてもよい。

[0114] "その塩" とは，上記化合物の塩，特に薬学的に許容される上記化合物の塩を意味する。本明細書において "薬学的に許容される" とは，受容者に有害でないことを意味する。本発明のポリリン酸は，常法に従って塩にすることができる。その塩としては，例えば，ナトリウム塩，カリウム塩，リチウム塩などのアルカリ金属塩；カルシウム塩，マグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩，鉄塩，亜鉛塩，銅塩，ニッケル塩，コバルト塩などの金属塩；アンモニゥム塩などの無機塩； t-ォクチルァミン塩，ジべンジルァミン塩，モルホリン塩，ダルコサミン塩，フエニルグリシンアルキルエステル塩，エチレンジァミン塩， N-メチルダルカミン塩，グァニジン塩，ジェチルァミン塩，卜リエチルァミン塩，ジシクロへキシルァミン塩， N ， N ' -ジベンジルエチレンジァミン塩，クロ口プロ力イン塩，プロ力イン塩，ジエタノールアミン塩， N -ベンジル - N -フエネチルァミン塩，ピぺラジン塩，テトラメチルアンモニゥム塩，卜リス（ヒドロキシメチル）ァミノメタン塩などの有機塩などのアミン塩；があげられる。これらのうちで，ポリリン酸の塩として，アルカリ金属塩が好ましく，ナトリウム塩がより好ましい。本明細書において， "その塩" には，無水塩のみならず含水塩が含まれても良い。これらの塩は，例えば，生体内などで電離して上記の化合物と同様に機能する。

[01 15] "その溶媒和物" とは，上記化合物の溶媒和物を意味する。溶媒和物として，水和物があげられる。また，本発明の剤は，大気中に放置したり，再結晶することにより，水分を吸収し，吸着水が付いたり，水和物となる場合がある。そのような溶媒和物を形成する場合も， "その溶媒和物" に含む。これらの溶媒和物は，生体内などで電離して上記の化合物と同様に機能する。

[01 16] 本発明の接着性付与剤の好ましい態様は，希釈剤として，公知の薬学的に許容される希釈剤を用いるものである。具体的な希釈剤として，水，リン酸緩衝液，クェン酸緩衝液，リン酸緩衝生理食塩水，又は生理食塩液のいずれか 1種又は 2種以上の混合液からなる溶媒を用いるものがあげられる。

[01 17] 希釈剤（又は溶媒）の酸性度は，特に限定されないが， ρΗ3〜ρΗ1 1があげられ，後述の実施例 4などで実証されたとおり，得られる化合物の強度をある程度高めるために好ましくは ρΗ5〜ρΗ10であり，より好ましくは ρΗ6〜ρΗ9であリ，さらに好ましくは ρΗ7〜ρΗ8である。希釈剤のモル濃度（Μ) は，特に限定されないが， 1mM〜1 Mがあげられ，後述の実施例 5などで実証されたとおり，得られる化合物の強度をある程度高めるために好ましくは 5mM〜300mMであり，より好ましくは 10mM〜200mMであり，さらに好ましくは 15mM〜100mMである

[01 18] 本発明の接着性付与剤の好ましい態様は，前記第 1の組成物，及び前記第

2の組成物のいずれか又は両方は，安定化剤を含む上記に記載の接着性付与剤である。安定化剤として，ポリマーなどに用いられる公知の安定化剤，特に薬学的に許容される安定化剤を適宜用いることができる。なお，本発明の接着性付与剤によって得られる化合物は，主に生体内において長期間にわたつて強度が維持されることが期待される。そして，生体内には，プロテア一ゼなどの酵素が存在するので，化合物が分解される事態が想定される。そこで，本発明の好ましい態様では，安定化剤として，プロテアーゼインヒビタ一などの阻害剤を含ませるものがあげられる。このような阻害剤として，公知の酵素阻害剤を適宜用いることができる。具体的な，プロテアーゼインヒビターとして， 4-(2-アミノエチル）ベンゼンスルフォニルフルオライド，ァプロチニン（Aprotinin) ，ベスティン（Bestain) ，カルパインインヒビタ一 I，カルパインインヒビター 11，シモスティン（Chymostain) ， 3, 4-ジククロロイソクマイン (3, 4-Dichloroisocoumain) ， E-64, EDTA, EGTA, ラクタシスチン（Lactacystin) ，ロイぺプチン（Leup印 tin) ， MG-115, MG-132, ぺプスティン A (PepstainA) ，フエ二ルメチルスルフォニルフルオライド，プロテアソームインヒビター I， p—トルエンスルフォニル一L—リシンクロロメチルケトン， p—トルエンスルフォニル _ L—フエ二ルァラニンクロロメチルケトン，又はチロシンインヒビターのいずれか 1種または 2種以上があげられる。これらのプロテアーゼインヒビターは，市販されており，これらのプロテアーゼインヒビターの阻害濃度も公知である。本発明の接着性付与剤によって形成される化合物の好ましい態様は，生体内で長期間維持し，薬剤に対して徐放性を有するものである。したがって，本発明の接着性付与剤は，好ましくは，上記のプロテアーゼインヒビターの 1回当りの投与量の 2倍〜 100倍の量を含むものであり，より好ましくは 2倍〜 50倍の量を含むものである。プロテアーゼインヒビターの具体的な量は，用いるプロテアーゼインヒビターの種類などによっても異なるが，プロテアーゼインヒビターとして有効に機能する量（有効量）含まれることが好ましぐ一般的に，接着性付与剤 1mL当たり， 0.1 g〜0.5mg含まれるものがあげられ， 1 g〜0.1mg含まれるものでもよぐ 10 g〜0.1mg含まれるものであってもよい。 [0119] なお，上記の接着性付与剤と薬剤とをともに用いた場合，接着性付与剤によって構成される化合物が薬剤を取り込み，適切な放出性を与えることで，徐放性を有する骨補填剤としても機能しうる。そして，接着性付与剤の構成を制御するのみならず，添加する安定化剤の量を制御することで，化合物の分解性を制御でき，これによつて薬剤の放出性を調整できる。すなわち，本発明は，接着性付与剤に添加する安定化剤の量を制御することによる薬剤の放出性を制御する方法をも提供できる。

[0120] なお，骨補填剤の表面に被覆層が設けられるものは，本発明の好ましい態様である。このような被覆層の厚さは適宜調整すればよいが，たとえば 1 m 〜5 X 1 0 mがあげられる。そして，被覆層には，たとえば，親水性の基を有し，生体親和性に優れた化合物が含有される。親水性の基として， OH 基， COOH基， NH₃ 基， C0₃ 基， S0₃ H基などがあげられ，被覆層が特に自然骨に含まれるァパタイ卜（Ca₁₀ (P0₄ ) 6 (OH) 2 ) の親水基と同じ OH基を有している化合物を含有することは，骨との馴染みが良く，骨再生反応が促進されるため好ましい。水ガラス（N a₂0 ' S i 0₂ ' n H₂0 ) に塩酸，硝酸，硫酸などの酸水溶液を攪拌しながら混合し，適当な粘度を示すようになった時点で骨補填剤を浸潰し，引き上げ，更に水に浸潰して N a+イオンを溶出することによって，骨補填剤表面にシリカゲル層を形成できる。ゲイ素（又はチタン）のアルコキシドであるテトラメトキシシラン（チタネート），テトラエトキシシラン（チタネート），テトラプロキシシラン (チタネート）、テトライソプロボキシシラン（チタネート）又はテトラブトキシシラン（チタネート）のアルコール溶液に，触媒として塩酸，硝酸，硫酸，酢酸などの酸水溶液又はアンモニアを含む水を適宜混合し，ゲイ素（チタン）のアルコキシドの加水分解，重合反応を進行させ，適当な粘度を示すようになった段階で骨補填剤を浸潰し，引き上げることにより，骨補填剤の表面にシリカゲル層（チタニアゲル層）を形成してもよい。

[0121] [骨補填剤]

上記のようにして得られた骨補填剤は，寸法精度が高ぐばらつきが少なし、。また，欠陥品が少なぐ量産することができる。本発明の骨補填剤は，好ましくは複数の突起部を有する形状であり，より好ましくは，複数の突起部が線対称，面対称，又は空間的に対称となるように配置されたものである。骨補填剤の好ましい具体的な形状として，テトラポッド状（正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 4つの突起部を有する形状），又は正 n 面体（n = 6， 8， 1 2など）の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる n個の突起部を有する形状のものである。骨補填剤の大きさ（骨補填剤を収容できる球の直径の大きさ）として， 1 X 1 0_²mm〜5mmがあげられ，好ましくは 5 X 1 0_²mm〜3mmであり，さらに好ましくは 1 X 1 0_¹mm〜 2mmであり，より好ましくは 2 X 1 0_¹mm〜 1. 5mmである。さらに，所定の薬剤をその表面に塗布した骨補填剤を用いれば，所定の疾患を有効に治療できるほか，適切な投与量を与えることができる。以下，図面を用いて，本発明の骨補填剤の好ましい形状を説明する。

[0122] 図 2は，テトラポッド形状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 2 (A) は，側面図，図 2 (B) は上面図，図 2 (C) は斜視図を示す。なお，図中， "Fig. " は "図" を意味する（以下同様である）。図 2に示される骨補填剤（11)は，テトラポッド状（正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 4つの突起部 (12)を有する形状）の骨補填剤である。なお，各突起部 (12)の先端部 (13)はテーパーが設けられておリ滑らかな形状とされているものが好ましい（以下同様である）。図 2に示されるように，各突起部（12)は，実質的に同一の形状を有するものがあげられるが，そのひとつまたは二つが小さい形状であっても構わない。また，各突起部は，先端部 (13) に近づくほど細くなる円錐台状の形状を有するものであるものがあげられる。各突起部の先端は，半球状とされるものであってもよい（以下同様である

) o

[0123] 図 3は，頭切テトラポッド形状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 3 (A) 及び図 3 (B) は，側面図を示し，図 3 (C) は上面図を示し，図 3 (D) は斜視図を示す。この態様に係る骨補填剤は，図 2に示すテトラポッド状の骨補填剤の突起部のひとつを途中から切断した形状を有する骨補填剤に関する。すなわち，正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 3つの突起部と，残りの一頂点へ向けた他の突起部より短い突起部を有する骨補填剤である。このような形状を有するので，複数の骨補填剤を用いた場合に連通孔の大きさをテトラポッド状の物に比べて少なくでき，骨補填剤全体の強度を高めることができる。

[0124] 図 4は， 3つの突起部を有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 4 (A) は斜視図を示し，図 4 ( B) は上面から見た図を示す。例えば，正四面体の稜線を形成する位置に突起部を有しているものがあげられる。そして，各突起部の先端は，半球状とされるものがあげられる。この態様に係る骨補填剤は，複数の骨補填剤が互に絡み合うので，強固な結合を有する骨補填剤を形成できる。

[0125] 図 5は，半球状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 5 (A ) は斜視図を示し，図 5 ( B) は下面から見た図を示す。この態様に係る骨補填剤は，図 5 (A) に示されるように，半球の頂点部分から下方へ抜けた穴部 (21)を有するものが好ましい。このような穴部を有するので，複数の骨補填剤が集まった場合に，効果的に細胞が浸透できる連通孔を形成できることとなる。穴部の形状は特に限定されないが，図 5 (A) に示されるように円柱状のくりぬきであることが好ましい。半球の半径を rとしたときに，この円柱状のくりぬきにおける円の半径として， r Z 1 0〜2 r Z 3があげられ， r Z 5〜 r Z 2が好ましい。この程度のくりぬきであれば，骨補填剤の強度を維持しつつ好ましい穴を形成できることとなる。この態様に係る骨補填剤は，更に下面にくりぬき部 (22)が設けられるものが望ましい。そして，骨補填剤の厚さ（23)として， r Z 2 0〜 r Z 3があげられ， r Z 1 0〜 r Z 4が好ましい。

[0126] 図 6は，下面に 1または複数のくりぬきを有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 6 (A) は斜視図を示し，図 6 ( B) は下面から見た図を示す。この態様に係る骨補填剤は，半球の下面に，半割り円柱状のくりぬきを 1つ又は複数有するものの例である。半球の下面と，半割り円柱の半割リ面（底面でも上面でもない平面部分）は，同じ平面を構成するものが好ましい。このような半割り面のくりぬき部 (24)を有するので，骨補填剤の強度を保ちつつ，穴を設けることができ，細胞を培養等するために好ましい物性を与えることができる。なお，図 6に記載する骨補填剤は，図 5に記載する骨補填剤の構成を適宜採用できる。さらに，下面に設けられる半割り円柱状のくリぬきにおける円の半径として r Z 1 0〜2 r Z 3があげられ， r Z 5 〜 r Z 2が好ましい。

[0127] 図 7は，双頭状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 7 ( A ) は斜視図を示し，図 7 ( B ) 及び図 7 ( C) は側面図を示す。この態様に係る骨補填剤は，胴体部 (31)の両端に， 2つの頭部 (32, 33)を具備する形状である。このような形状を有するので，複数の骨補填剤を用いた場合に，強固に絡み合い，また連通孔の大きさを適切なものとすることができ，骨補填剤全体の強度を高めることができる。なお，図 7では，頭部と胴部が T字状となるものの例をあげたが，頭部の形状は十字状のものであってもよく，更に多数の突起が所定の角度ごとに設けられるものであってもよい。また，図 7 では， 2つの頭部が 90度ずれているものの例をあげたが， 2つの頭部のなす角は， 45度でもよいし， 0度でもよいし， 30度でもよい。

[0128] 図 8は，胴体部に突起部を有する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 8 ( A) は斜視図を示し，図 8 ( B ) は側面図を示す。この態様に係る骨補填剤は，図 7に示される骨補填剤の胴体部 (31)にさらに胴体部を貫く突起部を有するものである。このような形状を有するので，複数の骨補填剤を用いた場合に，強固に絡み合い，また連通孔の大きさを適切なものとすることができ，骨補填剤全体の強度を高めることができる。この態様にかかる骨補填剤は，図 7の説明においてした構成を適宜採用できる。

[0129] 図 9は，十字状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 9 ( A ) は斜視図を示し，図 9 ( B ) は上面図を示し，図 9 ( C) は側面図を示し，図 9 ( D ) は底面図を示す。この態様に係る骨補填剤は，図 9 ( C) 及び図 9 ( D ) に示されるように，十字の先端の底面部分にそれぞれ足部を有しており，十字の中央の下部には空隙が設けられるものが好ましい。このような形状を有するので，連通孔の大きさを適切なものとすることができる。

[0130] 図 1 0は，略平面状の骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 1 0 ( A) は斜視図を示し，図 1 0 ( B ) は上面図を示し，図 1 0 ( C) は側面図を示す。この態様に係る骨補填剤は，中央に穴部を有し，側面にも溝部を有する。このような形状を有するので，連通孔の大きさを適切なものとすることができる。

[0131 ] 図 1 1は，平面の一端または両端に突起部を有数する骨補填剤の例を説明するための概念図である。この態様に係る骨補填剤は，扁平な胴体部の端部に，突起部を有するので，単に積み重ねることができない。このような形状を有するので，連通孔の大きさを適切なものとすることができる。また，この態様にかかる骨補填剤は，好ましくは図 11に示されるように胴体部にへこみ部分を有する。やはり，このような形状を有するので，連通孔の大きさを適切なものとすることができる。

[0132] 図 1 2は，傾斜する上面を有数する骨補填剤の例を説明するための概念図である。図 1 2 ( A) は斜視図を示し，図 1 2 ( B ) は側面図を示す。図 1 2に示すとおり，この態様に係る骨補填剤は，足部 (42)と，前記足部 (42)に搭載されたテーブル部 (43)とを具備し，足部 (42)の底面と，テーブル部 (43) の上面とは傾斜する構造を有するものである。このような形状を有するので，この態様に係る骨補填剤は，傾斜する上面を有するので単に積み重ねることができない。これにより，連通孔を確保することができる。

[0133] [骨補填剤の使用方法]

本発明の製造方法により製造された骨補填剤は，骨欠損部位，骨粗鬆症部位又は骨延長部位に注入する。また，骨欠損部位などの骨の間隙に骨補填剤を充填する他，所定の薬剤の担体として利用されうる。このようにすれば，骨関連の疾患のみならず，さまざまな疾患の治療又は予防に用いることがでさる。 [0134] [インビトロで用いられる 3次元細胞培養担体]

次に，本発明の好ましい側面に係る 3次元細胞培養担体について説明する。 3次元細胞培養担体は，基本的には，上記した骨補填剤を適宜用いるものである。すなわち，本発明の 3次元細胞培養担体は，複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤を含む 3次元細胞培養担体である。後述する実施例で実証されたとおり，本発明の骨補填剤は，好ましい空隙を有しており，その結果培養細胞がそれぞれの骨補填剤を昇るので， 3次元的に細胞を培養できることとなる。すなわち，本発明によれば，骨補填剤を応用したインビトロ細胞培養システムをも提供できることとなる。

[0135] なお， 3次元細胞培養担体は，上記いずれかに記載の骨補填剤を複数用いるものが好ましい。 3次元細胞培養担体の高さは，得ようとする細胞の量などに応じて適宜調整すればよいが， 1 m以上 1 m以下があげられ，好ましくは 3 m以上 1 0 c m以下であり，さらに好ましくは 10 m以上 5 c m以下であり，さらに好ましくは 5 0 m以上 1 c m以下である。

[0136] 骨補填剤を多孔質にすると効果的に細胞を昇らせることができるので，骨補填剤としては，例えば，上記の塩分を適宜含むものが好ましい。原料に塩化ナトリウムなどの塩成分を混入し，焼結後に焼結体を水につけて塩を溶解させることで多孔質な骨補填剤を得ることができる。また，焼結性を悪くすることで微小な亀裂などを設けると，細胞を骨補填剤の内部に取リ込むことができるので，細胞を好ましく培養できることとなる。焼結性を悪くするためには，例えば，焼結温度を低める，原料粉末の大きさを大きくするものがあげられる。

[0137] 本発明の 3次元細胞培養担体の好ましい態様は，骨補填剤の表面に薬剤又は接着性付与剤が含浸又は塗布された 3次元細胞培養担体である。特に骨補填剤の表面に接着性付与剤が含浸又は塗布された 3次元細胞培養担体は，長期間骨補填剤群が好ましい立体構造を維持し続けるので，効果的に細胞を培養し続けることができることとなる。ここで用いられる接着性付与剤は，上記に説明した接着性付与剤と同様のものを同様にして用いることができる。例えば，培養された細胞は，生体内に投与されることもありうるが，上記した接着性付与剤は，生体親和性に優れるので，培養された細胞をそのまま生体内に投与しても危険性が少ないこととなる。

[0138] ある側面にかかる本発明の骨補填剤の利用方法は，複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤を含むクロマ卜グラフィー用分離担体である。後述の試験例で実証されたとおり，本発明の骨補填剤は，好ましい吸着性などを有するものであり，さらにその吸着性は，骨補填剤の空隙などを調整することにより制御できる。したがって，複数の骨補填剤を，クロマトグラフィー用の分離担体として用いることができる。具体的なクロマトグラフィ一の利用方法として，適量の骨補填剤をクロマ卜グラフィー用のカラムに充填し，カラムに溶液を注入すればよい。

実施例 1

[0139] 以下，実施例を用いて，本発明の骨補填剤の製造方法を具体的に説明する。しかしながら，本発明は，実施例に限定されることなぐ当業者が考えうる様々な変形例を含むものである。

[0140] (1 ) 混練工程

原料粉末として，ひ一 TCP (太平化学産業製，粒径 1 O zm)を用いた。バインダは，原料粉末 1 00重量部に対して 24重量部となるように配合した。バインダとして，エチレン一酢酸ビニル共重合体，ポリブチルメタクリレート，パラフィンワックス，ジブチルフタレート及びステアリン酸が 30 : 30 : 30 : 5 : 5の重量比の配合割合で用いた。 300 c c加圧式ニーダーを， 1 50°Cに加熱し，融点が高いバインダから融点が低いバインダの順序で投入し，投入完了後 60分間混練して冷却した。得られた混練物を，セラミックス製のポッ卜ミルで粉砕して成形用の材料（コンパウンド又はべレツ卜）とした。

[0141] (2) 成形工程

金型は， C A Dを用いて骨補填剤のィメージを形成した後にその C A Dィメージに従って製造した。図 1 3は，骨補填剤の CADによる設計図である。金型は SKD 1 1焼入れ材料を使用し， 1 2個取りのものを用いた。金型は， 4箇所の突起部のうち， 1つの端面をゲート口とし，残り 3箇所の突起部の中央ラインに固定側と可動側の金型パーティング面を変形パー卜として， 3箇所の突起部の内側にェジェクタピンを配置する構造のものを用いた。射出成形機として，型締カ 1 2トン横型のものを用いた。射出圧力の初期設定値を 1 2 G P aとした。また，成形機シリンダの温度を 1 30°Cとし，金型温度を 20°Cとした。

[0142] (3) 脱バインダ工程

大気脱脂炉にて，大気雰囲気下最高温度 1 000°Cまで加熱し， 1時間保持後に炉冷した。脱バインダ工程は，冷却時間を含んで 1 8時間であった。セッターとして， 90%アルミナ（気孔率 20%)を用いた。

[0143] (4) 焼結工程

大気雰囲気から最高温度 1 000°Cまで加熱し， 1時間保持して冷却した。冷却時間を含み焼結時間は 1 8時間であった。セッターは，脱バインダェ程のものをそのまま用いた。得られた骨補填剤の曲げ強度は， 6. 1 MP a (n数 = 1 8) であった。得られた骨補填剤を図 1 4〜図 1 6に示す。図 1 4は，実施例 1で得られた骨補填剤の図面に替わる写真である。図 1 5は，実施例 1で得られた骨補填剤の図面に替わる電子顕微鏡写真である。図 1 6 は，実施例 1で得られた骨補填剤が集積化したものの図面に替わる電子顕微鏡写真である。

[0144] [試験例 1]

-骨補填剤の焼結温度と曲げ強度の検証一

骨補填剤を製造する際の焼結温度を変化させて複数種類の骨補填剤を製造し， JISの R1601に従って，得られた骨補填剤の曲げ強度を検証した。その結果を図 1 7に示す。図 1 7は，実施例 1で得られた骨補填剤の焼結温度と曲げ強度の関係である。図 1 7から，焼結温度が高いほど，得られる骨補填剤の曲げ強度が高くなることがわかる。また，焼結温度を制御することで得られる骨補填剤の曲げ強度を制御できることがわかる。さらに，本発明によれば，曲げ強度が， 2MPa〜1 OMPa (好ましくは 4MPa〜9MPa，さらに好ましくは 6MP_a〜9MPa) という強度を有する骨補填剤を得ることができることがわかる。

[0145] [試験例 2]

一骨補填剤の生体内での充填状況の検証一

骨補填剤は，複数の骨補填剤が生体内で適切な連通孔を形成し，その連通孔に生体細胞が侵入することで，骨再生が促進される。したがって，骨補填剤は，生体内に投与された場合に，適切な連通孔を形成するものが好ましい。そこで，本試験例では，本発明による骨補填剤が生体内でどのように集合するかについて検証した。なお，比較のために，既存の人工骨顆粒が集合するかについても検証した。この人工骨顆粒は，ブロック状の骨補填剤（ォリンパス製ォスフエリオン）を顆粒状に粉砕したものである。具体的には，本発明の骨補填剤，及び既存人工骨顆粒を 2mlクライオチューブ内で集積した際に構築される空隙構造をマイクロ X線 CTにより確認した。その結果を図 1 8 に示す。図 1 8は，実施例 1で得られた骨補填剤と，既存の人工骨製品が集合した様子を示す図面に替わるマイクロ X線による CT画像である。図 1 8 ( A)は，本発明の骨補填剤が集合した様子を示し，図 1 8 (B)は従来の人工骨顆粒が集合した様子を示す。図 1 8 (C) は，本発明の骨補填剤がクライオチューブ内で充填された様子を示す。図 1 8 (D) は，既存の人工骨製品がクライォチューブ内で充填された様子を示す。

[0146] 図 1 8 (A)から，本発明の骨補填剤は，集積時にポッドが自己組織化的にポッドの継ぎ目に落ち着く傾向があることがわかる。その結果，集積した骨補填剤がお互いの移動を制限しあっている。また，上記のような集積状態が奏する空隙構造は，好ましい連通孔を形成することがわかる。また，空隙構造は，骨補填剤のポッ卜長さ及び角度を反映するので，ポッ卜長さ又は角度を調整することで，空間構造を調整できることがわかる。よって，本発明の骨補填剤は，形態保持性に優れるのみならず，骨伝導空間を任意に構築できるといえる。さらに，骨補填剤の密度は， CT画像に関してほぼ均一であった [0147] 一方，図 1 8 (B)に示されるとおり，人工骨顆粒は，集積時の粒子間距離のばらつきが大きぐ空隙構造の再現性と形態保持性に問題があると考えられる。特に，新鮮な創傷等の液性成分に富む領域に，人工骨顆粒が埋入された場合，液状化現象により，粒子間隙構造が破綻する可能性が高いと考えられる。従って，人工骨顆粒を用いても，治療効果が得られない可能性が高い。人工骨顆粒は，顆粒の間隙構造よりも，顆粒に内在する数百ミクロンの気泡が存在する。そして，人工顆粒は，生体内でその気泡に細胞などが入り込むと考えられる。しかし，気泡の形状は，均一ではなぐ骨形成を促進するためには必ずしも好ましい形状ではない。よって，この点からも，人工骨顆粒では，望ましい骨再生効果を得ることはできないと考えられる。また，既存の人工骨顆粒には，低密度部位が存在し，密度が均一ではない。

[0148] 図 1 8 (C) に示されるとおり，本発明の骨補填剤は，クライオチューブ内部の筒形状にそって充填されており，充填性に優れることがわかる。一方，図 1 8 (D) に示されるとおり，既存の人工骨製品は，クライオチューブ内部の筒形状に沿って充填されておらず，充填不良箇所（ポイド）を生ずることがわかる（図 18 (D)の矢印を参照）。このようなポイドは，人工骨細胞などが埋入する際の安定性を破綻させる基点となる。すなわち，本発明の骨補填剤は，複数の充填剤が集まった際に，適切な大きさの穴や連通孔が形成されることが望ましいが，充填不良箇所のように余リに大きな穴が形成されることは好ましくない。よって，本発明の骨補填剤は，複数が投与された場合に，好ましい骨補填剤として機能することがわかる。

[0149] [試験例 3]

一骨補填剤の 3次元細胞培養系としての検証一

骨芽系細胞株 M C 3 T 3 (M C 3 T 3 - E 1 (マウス頭蓋冠由来の骨芽細胞様細胞株））を，平面培養し，コンフルェントになったところで，実施例 1で得られた骨補填剤ュニッ卜をその上におき，培養を継続し経時的に顕微鏡で観察した。細胞培養は，ダルベッコイーグル改変培地（D E M培地）に 1 0 % F B S及び 1 %ぺニシリン一ス卜レブトマイシンを添加したものを培地として用いた。培地は， 4日に一度変えた。一方，対象のため，細胞株を添加していないものにも骨補填剤をおき，観察を行った。また， 6， 10日目でアルカリフォスターゼ（ALP) 染色を施し，骨芽細胞を染色した。本骨補填剤が良好な細胞接着性を有することが確認できた。その結果を図 1 9に示す。

[0150] 図 1 9は，骨補填剤の細胞接着性を確認するための図面に替わる写真である。図 1 9 (A)は培養細胞がないものの 4日間培養後の写真を示し，図 1 9 (B) は骨芽系細胞株 M C 3 T 3を平面培養し 4日間培養後の写真を示し，図 1 9 (C )は培養細胞がないものの 6日間培養後にアルカリフォスターゼ（ALP) 染色したものの写真を示し，図 1 9 (D)は骨芽系細胞株 M C 3 T 3を平面培養し 6日間培養後にアルカリフォスターゼ染色したものの写真を示し，図 1 9 (E)は培養細胞がないものの 10日間培養後にアル力リフォスターゼ染色したものの写真を示し，図 1 9 (F)は骨芽系細胞株 M C 3 T 3を平面培養し 10日間培養後にアル力リフォスターゼ染色したものの写真を示す。

[0151 ] 図 1 9 (A)及び図 1 9 (B)から，細胞の無しでは骨補填剤の表面には何も付着していないが，細胞の上で骨補填剤を培養した方では，表面に細胞が付着することが分かる。また，図 1 9 (D)に示す 6日間培養したものを A L P染色を施した写真から，骨芽細胞が骨補填剤の側部の勾配を昇る状況が確認できる。図 1 9 (F)から， 10日間細胞培養した骨補填剤は骨補填剤の表面全体に細胞が付着していることがわかる。したがって，本発明の骨補填剤は， 3次元培養担体としても有効であることがわかる。

産業上の利用可能性

[0152] 本発明の製造方法により製造された骨補填剤は，骨欠損部位，骨粗鬆症部位又は骨延長部位に注入し，又は骨欠損部位などの骨の間隙に充填する他，所定の薬剤の担体として利用されうる。よって，本発明の骨補填剤は，医薬産業などの分野で利用される。

[0153] また，本発明の 3次元培養担体は，これまで 2次元でしか細胞培養が行われていなかったが，そのような概念を覆し， 3次元的に細胞を培養できる担体を提供できるので，細胞培養を用いる医薬■バイオ産業の分野で利用されうる。

Claims

請求の範囲

[1] カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料を混練するための混練工程と；

前記混練工程で得られた混練物を用いて，金型を有する射出成形機を用いた射出成形により所定の形状を持った成形体を得るための成形工程と；前記成形工程で得られた成形体に含まれるバインダを取り除き脱脂体を得るための脱バインダ（脱脂）工程と；

前記脱バインダ工程後の脱脂体を加熱し，焼結し焼結体を得るための焼結工程と；

を含む

骨補填剤の製造方法。

[2] 前記カルシウム系物質は，リン酸カルシウム系物質又は炭酸カルシウム系物質のいずれか又は両方を含む請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[3] 前記カルシウム系物質は，リン酸カルシウム系物質を含み，

前記リン酸カルシウム系物質が，水酸アパタイト，炭酸アパタイト，フッ素アパタイト，塩素アパタイト， β - T C P , ひ一 T C P , メタリン酸カルシゥム，リン酸四カルシウム，リン酸水素カルシウム，リン酸八カルシウム，リン酸二水素カルシウム，ピロリン酸カルシウム，それらの塩，又はそれら又はそれらの溶媒和物のうちいずれか 1種又は 2種以上である，請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[4] 前記バインダが，（メタ）アクリル系樹脂，ロウ滑剤，及び滑剤を含む請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[5] 前記バインダが，ロウ滑剤を含み，

前記ロウ滑剤が，融点が 4 0 °C〜 1 0 0 °Cのワックスを含む請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[6] 前記バインダが，（メタ）アクリル系樹脂，エチレン一酢酸ビニル共重合体，パラフィンワックス，ステアリン酸及びジブチルフタレートを含み，前記混練工程では，前記（メタ）アクリル系樹脂及び前記エチレン一酢酸ビニル共重合体を混練機へ投入し，混練しつつ前記原材料，前記パラフィンヮックス及び前記ステアリン酸を混練機へ投入し，混練しつつ前記ジブチルフタレートを混練機へ投入する，請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[7] 前記 "カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料" は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダの他にガラス成分を含む，請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[8] 前記 "カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダを含む材料" は，カルシウム系物質を含む原材料，及びバインダの他に塩分又は糖分を含む，請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[9] 前記骨補填剤は，複数の突起部を有する形状であり，

前記金型は，材料を注入するための注入口が設けられる固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，

前記固定側金型は，前記複数の突起部のうちある突起部の先端部から射出成形用の材料が注入されるように，前記注入口を前記先端部に位置するようにし，

前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって注入口方向へ傾斜する傾斜面を有し，

前記可動側金型は所定のくさびを設けるためのへこみ部を有する

請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[10] 前記くさびの高さは， 1 m〜 1 X 1 0 ² mである請求項 9に記載の骨補填剤の製造方法。

[11 ] 前記可動側金型は，深さが 1 m〜2 x 1 O Z mである 1又は複数の溝を有する請求項 9に記載の骨補填剤の製造方法。

[12] 前記骨補填剤は， 4つの突起部を有する形状であり，

前記可動側金型側には，突起部の内側に位置するように突き出しピンを配置する請求項 9に記載の骨補填剤の製造方法。

[13] 前記骨補填剤は，複数の突起部を有する形状であり，前記金型は，固定側金型と，材料を注入する際は前記固定側金型と接触するが，成形後は前記固定側金型から離れる可動側金型とを有し，

射出成形用の材料が注入される注入口を前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面に位置するようにし，

前記固定側金型と前記可動側金型とのあわせ面が端面から中心方向へ向かうにしたがって前記骨補填剤の中心方向へ傾斜する傾斜面を有し，

前記可動側金型は所定のくさびを設けるための溝を有する，

請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[14] 前記脱バインダ工程は， 1 1 0 °C〜3 0 0 °Cの第一の維持期間に達成するまでの間， 1 °CZ時間〜 3 X 1 0 ²°CZ時間で昇温する昇温工程を含む，請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[15] 前記焼結工程で得られた焼結体に薬剤を含浸又は塗布する工程を含む請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[16] 前記焼結工程で得られた焼結体に薬剤を含浸又は塗布する工程を含み，前記薬剤として，骨 ·軟骨形成促進剤（軟骨形成促進因子を含む），関節疾患治療剤，骨 ·軟骨疾患予防 ·治療剤，骨再生剤，骨吸収抑制物質，血管新生促進剤，抗菌剤，抗生物質又は抗癌剤の 1種又は 2種以上を用いる請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[17] 前記焼結工程で得られた焼結体に接着性付与剤を含浸又は塗布する工程を含む，

請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[18] 前記焼結工程で得られた焼結体に接着性付与剤を含浸又は塗布する工程を含み，

前記接着性付与剤がトロンビンである，

請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[19] 請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法に従って複数の骨補填剤を製造し，

2種類の接着性付与剤を含有する組成物を用意し，ある骨補填剤群に第 1の組成物を含浸又は塗布して第 1の骨補填剤群とし，ある骨補填剤群に第 2の組成物を含浸又は塗布して第 2の骨補填剤群とし，前記第 1の骨補填剤群と前記第 2の骨補填剤群を含む骨補填剤群を骨補填剤として用い，

前記第 1の組成物は，下記一般式（I)

又は（I I)で示される化合物か，下記一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3 8個含む化合物を 1種又は 2種以上含有する第 1の化合物，及び第 1の希釈剤（又は担体）を具備し，前記第 2の組成物は，下記一般式（I) 又は（I I) で示される化合物か，下記一般式（I I I) で示される繰返し単位を 3 8個含む化合物を 1種又は 2種以上含有する第 2の化合物，及び第 2の希釈剤を具備する請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

X - (OCH₂CH₂) _n-X₂ (I)

(式（I)中， X 及び X₂は同一又は異なり， -R1C00NHS (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。）， -C0R¹C00NHS (R¹は， ^- アルキレン基を示す。）， -N0C0R¹- R 2 (R¹は， d-C?アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。）， -R¹NH₂ ( R¹は， - アルキレン基を示す。 ) ， -R¹SH (R¹は， d-C?アルキレン基を示す o ) 又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す。 )を示し， nは， 80 1000の整数を示す。）

[化 1]

(式 (I I) 中， Χ,,-^Χ,Μは，それぞれ同一又は異なり， -R'COONHS (R¹は， C 广アルキレン基を示す。）， -C0R¹C00NHS (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。 ) -N0C0R¹- R² (R¹は， d-C?アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) -R¹NH₂ (R¹は， d-C?アルキレン基を示す。 ) ， -R¹SH (R¹は， C「C₇アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す）を示し， n,ト '〜は，それぞれ同一又は異なり， 20〜250の整数を示す。 )

[化 2]

(式 (I I I) 中， X_mは， -R響 NHS (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -C 0R¹C00NHS， -N0C0R¹- R² (R¹は， - アルキレン基を示し， R²は，マレイミド基を示す。 ) ， -R¹NH₂ (R¹は， CfC?アルキレン基を示す。 ) ， -R'SH (R¹は， C- C₇アルキレン基を示す。）又は- C0₂PhN0₂(Phは， o-,m-又は P-フエ二レン基を示す。）を示し， n_mは 10〜150の整数を示す。）。

[20] 前記第 1の化合物は，一般式（又は（I において， X ， Χ₂，又は X, Μ Χ ,Μが，それぞれ同一又は異なり， -N0C0R1-R²又は- R1NH₂である化合物を 1種又は 2種以上含有し，前記第 2の化合物は，一般式（I) 又は（I I) において， X X ₂，又は Χ Μ-^ Χ ,Μが，それぞれ同一又は異なり， -C0R¹C00NHS ， -R¹SH又は- C0₂PhN0₂(Phは， ο-, m-又は p-フエ二レン基を示す）である化合物を 1種又は 2種以上含有する

請求項 1 9に記載の骨補填剤の製造方法。

[21] 前記骨補填剤は，正四面体の中心から各頂点へ向けた方向に伸びる 4つの突起部を有する形状である

請求項 1に記載の骨補填剤の製造方法。

[22] 表面に薬剤が含浸又は塗布された複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤。

[23] 表面に接着性付与剤が含浸，塗布又は粉体混合された複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤。

[24] 複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤を含む 3次元細胞培養担体。

[25] 前記骨補填剤は，その表面に薬剤又は接着性付与剤が含浸，塗布又は粉体混合された骨補填剤である請求項 2 4に記載の 3次元細胞培養担体。

[26] 複数の突起部を有し，カルシウム系物質を有する骨補填剤を含むクロマトグラフィー用分離担体。