WO2004089338A1

WO2004089338A1 - Clathrate a base d'arbidol, son procede de preparation et son utilisation

Info

Publication number: WO2004089338A1
Application number: PCT/CN2004/000322
Authority: WO
Inventors: Zhen-Tao Liu; Hong-Wu Zhang; Zhan-Qi Niu; Li-Yun Liu; Dong-Min Shen; Su-Rui Chen; Min Liang; Ya-Li Liang
Original assignee: Shijiazhuang Pharma. Group Zhongqi Pharmaceutical Technology(Shijiazhuang) Co., Ltd.
Priority date: 2003-04-08
Filing date: 2004-04-08
Publication date: 2004-10-21
Also published as: CN100344283C; CN1535680A

Description

阿比朵尔包合物及其制备方法和应用技术领域

本发明涉及一种新的阿比朵尔与环糊精或者其生物的分子包合物，以及该包合物的制备方法和它们在药物制剂中的应用。背景技术

盐酸阿比朵尔（Arbidol hydrochloride, 以下简称为 ARB) 是一种新型抗病毒药物。它对具有 A、 B型抗原的流感病毒的抗病毒活性最为显著，能选择性抑制 A、 B型流感病毒在细胞培养基中的复制。 ARB同时具有免疫调节作用，能够诱导产生干扰素，激活巨噬细胞，提高机体对病毒感染的抵抗力，是用于治疗 A、 B型病毒引起的流感和急性呼吸道病毒性感染的新型抗病毒药物。

ARB几乎不溶于水，溶解度仅为 0.0024 g/100ml (25 ±2°C ) , 其水不溶性限制了其液体制剂如注射液及口服液的开发，已经上市或正在进行研究的制剂主要是其片剂和胶囊等口服固体剂型，现有制剂技术尚无法克服其水不溶性的缺点。发明内容

本发明的目的在于通过制备 ARB—环糊精包合物，提高 ARB的水溶性，使其能够被开发成为液体制剂，从而适应临床上的不同需要。同时也可改善 ARB固体制剂的体内吸收，提高其生物利用度。

环糊精（cyclodextrin, 以下简称为 CYD) 具有两端开口的环状中空圆筒形结构，有多种同系物，常见的 CYD是由 6、 7、 8个葡萄糖分子、通过 α — 1， 4苷键连接而成的环状化合物，分别称之为 α—、 β—和 γ -CYD, 其空洞大小不同，依次为 a— CYD< 3—CYD< Y— CYD，当药物分子的大小、形状合适时，可以进入 CYD空洞内，形成单分子包合物。在包合物中， CYD作为主分子，药物分子作为客分子，二者在范德华力、氢键、静电引力等一种或几种力的作用下形成包合物。 CYD的空洞内部由 C一 H键和醚键构成，呈疏水性，更有利于疏水性药物的包合；空洞外部和入口处富有亲水性，使形成的包合物溶解性显著提高。

ARB为 6—溴代一 4一（二甲氨甲基）一 5—羟基一 1一甲基一2 (苯硫甲基）一 1H—吲哚一 3—羧酸乙酯盐酸盐一水合物，结构式如下：

ARB分子中含一个吲哚环和一个苯环，分子量为 531.89。由于 ARB 分子中没有体积太大的基团，分子量也不是很大，可以与分子空洞较大的 β—和 Y— CYD形成摩尔比为 1 : 1的包合物，而对于空洞内径较小的 a -CYD, 一个药物分子则需要 2个以上的主分子才能形成稳定的包合物。 ARB分子呈强疏水性，经 CYD包合后，其溶解度得到显著提高, 例如在 25°C的羟丙基一 β -CYD(HP- β -CYD) (6.0 X 10— ²mol/L)水溶液中， ARB的溶解度由 0.0024g/100ml增加到 1.63g/100ml，提高了 680 倍。

ARB为盐酸盐，其 0.002%的水溶液（g/ml) PH为 4.85〜'5.05之间，在水溶液中和高温下不稳定，外观逐渐变黄。而在酸性条件下则可保持其水溶液的稳定性，如加入稀盐酸、酒石酸、柠檬酸、磷酸、乳酸等酸性调节剂，可明显改善样品颜色的变化。

在本发明所述的 ARB包合物中，含有活性成分 ARB和包合剂 CYD 或者其衍生物。

其中 CYD包括 α―、 β―、 y— CYD。

CYD衍生物包括羟乙基一 — CYD、羟丙基一 β— CTO、二甲基 — β— CYD、三甲基— P—CYD、葡糖基 _CYD、麦芽糖基一 CYD、麦芽三糖基一 CYD、磺丁醚一 β -CYD,羧甲基一 β -CYD以及 β—CYD 与 3—氯一 1， 2—环氧丙烷交联而成的聚合物（CDPS)。

本发明中 ARB与 CYD或者其衍生物的摩尔比为 1: 1〜10，优选是 1： 1〜3。

本发明中 ARB— CYD包合物的制备可以采用以下方法，如饱和水溶液法、超声波法、研磨法、冻干法、喷雾干燥法、溶液一搅拌法等。

饱和水溶液法：将 CYD或者其衍生物制成饱和水溶液，再加入适量酸性物质，依照 ARB与包合剂的摩尔比，用少量低级醇溶解 ARB, 将客分子药物加入上述饱和酸性溶液，搅拌使客分子药物被充分包合，沉淀物滤出并以适量的低级醇洗涤后干燥，得 ARB包合物。

超声波法：依照上述方法 ARB与包合剂混合后，用超声波替代上述饱和水溶液法中的电子或机械搅拌力，用超声波破碎仪或超声波清洗机，选择合适的强度，超声适当时间，代替搅拌力，将析出沉淀如上法处理即得 ARB包合物。

研磨法：取 CYD或者其衍生物加入 2〜5倍量水研匀，再加入适量酸性物质，依照 ARB与包合剂的摩尔比，加入客分子药物，自研磨机中充分研磨成糊状，低温干燥后用适当溶剂洗净，干燥，即得 ARB包合物。

溶液一搅拌法：对于在水中溶解度较大的 CYD或者其衍生物，可在未饱和的 CYD或者其衍生物水溶液中，加入适量酸性物质，加入客分子药物，经搅拌形成包合物。

在上述包合剂中， a— CYD、 Y— CYD、羟乙基一 β—CYD、羟丙基一 β -CYD,二甲基一 β -CYD,三甲基一 β -CYD,葡糖基一 CYD、麦芽糖基一 CYD、麦芽三糖基一 CYD、磺丁醚— β— CYD、羧甲基一 β -CYD包合物以及 β— CYD与 3—氯一 1， 2—环氧丙烷交联而成的聚合物（CDPS)等在水中的溶解度较大，尤其适合采用溶液一搅拌法制备包合物。

在采用溶液一搅拌法制备包合物的过程中，可在溶液中加入助溶剂 •或增溶剂以进一步提高 ARB的溶解度，以达到制备较高浓度 ARB液体制.剂的条件。助溶剂可使用聚乙二醇、丙二醇、丙三醇等多元醇中的一种或几种，增溶剂可使用下列非离子型表面活性剂的一种或几种：吐温类如吐温一 80、聚氧乙烯硬脂酸酯如卖泽一 25、聚氧乙烯蓖麻油如 Crmophor EL, 聚氧乙烯氢化蓖麻油如 Cremophor RH40、聚氧乙烯一聚氧丙烯共聚物如 Pluronic F— 68等。

喷雾干燥法：如果制得的 ARB包合物易溶于水，可用喷雾干燥法得到固体包合物，特点是干燥温度高，受热时间短，产率高。

冷冻干燥法：如制得的 ARB包合物易溶于水，可用冷冻干燥法得到固体包合物，使包合物外形疏松，溶解性能好。

可以将 ARB包合物进一步制备成片剂、硬胶囊或软胶囊、口服液、注射液、冻干粉等口服给药或注射给药剂型。

通过 ARB溶解度的提高，一方面可以提高 ARB片剂、胶囊等固体剂型的体内溶出速率，促进药物的体内吸收，提高生物利用度；另一方面克服了 ARB水溶性差所造成的制剂局限性，使制备其液体制剂成为可能，增加了 ARB的注射给药途径，从而能够满足临床上的不同用药需求。附图说明

以下将参考附图对本发明进行描述，其中：

图 1是显示不同浓度的 HP— β -CYD溶液对 ARB的增溶效果的图，图是显示 ARB— β -CYD包合物片剂的溶出度曲线的图，图 3是 HP— β -CYD的热重分析图谱，

图 4 是 ARB的热重分析图谱，

图 5是 ARB与 HP— β -CYD的物理混合物的热重分析图谱，以及图 6是 ARB— HP— β -CYD包合物的热重分析图谱。具体实施方式

在 ARB与 CYD或者其衍生物制备成的包合物中，优选 ARB— β一 CYD包合物或 ARB— HP— β -CYD包合物。

ARB— β— CYD包合物的制备可以采用饱和水溶液法。在 40〜60 °(水浴中将 β -CYD 加水溶解成为饱和水溶液，再加入适量酸性调节剂，使溶液 PH达到 4.0〜5.0；将 ARB (与 β— CYD摩尔比为 1 : 1〜1： 10) 加入少量甲醇或乙醇溶解后，将其加入 β— CYD 饱和水溶液中在 40〜60°C恒温搅拌 1〜4小时，将沉淀物滤出并以适量的甲醇或乙醇洗涤后干燥。

也可以用超声波替代上述饱和水溶液法中的电子或机械搅拌力。将 β -CYD加水适量，置超声波破碎仪或超声波清洗机中超声 5〜10分钟，使其溶解成为饱和水溶液，再加入适量酸性调节剂，使溶液 PH达到 4.0〜 5.0；取 ARB (与 β—CYD摩尔比为 1 : 1〜1： 10)，以少量甲醇或乙醇溶解，并将其加入 β— CYD饱和溶液中，继续超声 10〜60分钟，将沉淀物滤出并以适量的甲醇或乙醇洗涤后干燥。

还可以采用研磨法制备 ARB— β -CYD包合物。将 β -CYD用 2〜 5倍量水研匀，加入适量酸性调节剂使混悬液 PH达到 4.0〜5.0；将 ARB (与 β— CYD摩尔比为 1 : 1〜1： 10) 溶解于少量甲醇或乙醇中;将二者一同加入研磨机中研磨成糊状，在 45°C真空干燥,以适量的甲醇或乙醇洗涤，抽滤并干燥。对于在水中溶解度较大的 CYD或者其衍生物，除了可以采用上述制备方法外，还可以并且优选釆用溶液一搅拌法制备包合物，在制备包合物的过程中，可在溶液中加入助溶剂或增溶剂以进一步提高 ARB的溶解度。

采用溶液一搅拌法制备 ARB— CYD包合物的一般制备方法如下：将 CYD或其衍生物用适量蒸馏水溶解，再加入适量酸性调节剂，使溶液 PH达到 4.0〜5.0；另称取 ARB (与 β— CYD摩尔比为 1 : 1〜1： 10)加入上述 CYD溶液中，根据需要可加入适量助溶剂或增溶剂，混合液在 40〜60°C以磁力或电动搅拌方法恒温搅拌 10〜60分钟，溶液逐渐澄清，即得 ARB— CYD包合物溶液。

用以上方法制得的溶液进行喷雾干燥或冻干，即可得到固体状 ARB -CYD包合物。

使用水溶性 CYD采取溶液一搅拌法制备 ARB— CYD包合物可以显著提高 ARB 的溶解度，以优选的 HP— β— CYD包合物为例，测定了 ARB在不同浓度的 HP— β -CYD溶液中的溶解度，溶解度数据见以下表 1，而增溶曲线如图 1所示。表 1 不同浓度 HP- - β -CYD溶液对 ARB的增溶效果（25°C )

HP— β -CYD浓度

ARB溶解度（g/lOOml) 增溶倍数

(mol LX lO^-2)

0 0.0024 1

1.0 0.35 145

2.0 0.56 233

3.0 0.88 367

4.0 1.07 446

5.0 1.34 558

6.0 1,63 680 从图 1的 ARB溶解度曲线图能够更为清楚地看出， ARB的溶解度随 HP— β -CYD溶液浓度的增加而直线上升，两者呈线性相关。实施例 1: 饱和水溶液法制备 ARB— β -CYD包合物

称取 β— CYD 5克 (0.0044 mol), 置于附有电动搅拌装置的 500 ml 三颈瓶中，加蒸馏水 135 ml，置 40°C水浴使其溶解，再加入适量稀盐酸使溶液 PH达到 4.0〜5.0；称取 ARB 1.17克 (0.0022 mol), 以 15 ml甲醇溶解，并将其滴入 β— CYD饱和溶液中，恒温搅拌 4小时，反应液静置沉淀、抽滤，沉淀物以适量的甲醇洗涤。于 45°C真空干燥，即得。

取此法得到的 ARB— β -CYD包合物 0.29 g (含 ARB 0.05 mg) 和 ARB 0.05 mg, 在 25°C分别加水 10 ml，充分振摇溶解后过滤，取滤液用紫外分光光度法测其吸收度，并计算其溶解度分别为 0.14 g/100 ml 和 0.0024 g/100 ml, ARB经 -CYD包合后溶解度提高了 58倍。实施例 2: 超声波法制备 ARB— β -CYD包合物

称取 β -CYD10克 (0.0088 mol),加蒸馏水 300 ml,将容器置超声波破碎仪中超声 5分钟，使其溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜 5.0；称取 ARB1.17克 (0.0022 mol)，以 15ml甲醇溶解，并将其滴入 β—

CYD饱和溶液中，继续超声 20分钟，反应液静置沉淀、抽滤，沉淀物以适量的甲醇洗涤。于 45°C真空干燥，即得。实施例 3: 研磨法制备 ARB— β— CYD包合物

取 10克（0.0088 mol) 'β—CYD用 30 ml水研匀，再加入适量柠檬酸使其 PH达到 4.0〜5.0；将 1.17克 (0.0022 mol)克 ARB溶解于 15 ml甲醇中，将二者一同置于研磨机中研磨 1小时，在 45°C真空干燥，以适量的甲醇洗涤，抽滤，在 45°C真空干燥、粉碎，即得 ARB— β— CYD包合物实施例 4: 溶液一搅拌法制备 ARB— γ -CYD包合物

( 1 ) 称取 46.69 g (0.036 mol) Y -CYD, 放入 400 ml蒸馏水中，搅拌溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜5.0；

(2) 另称取 ARB 10 g (0.018 mol), 加入上述 γ— CYD溶液中；

(3 ) 混合液以磁力搅拌方法搅拌 20分钟，溶液逐渐澄清，过滤，滤液即为 ARB— Y -CYD包合物溶液。

(4) 用以上方法制得的溶液进行喷雾干燥或冻干，即可得到固体状 ARB- γ -CYD包合物。

经紫外分光光度法检测，用此法制得的 ARB— γ— CYD 包合物在 25°CARB溶解度为 0.86 g/100 ml, ARB经 γ一 CYD包合后溶解度提高了 358倍。实施例 5: 溶液一搅拌法制备 ARB— HP— β -CYD包合物溶液

( 1 )称取 49.18 g (0.036 mol) HP— β -CYD, 放入 800 ml蒸馏水中，搅拌溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜5.0；

(2) 另称取 ARB 10 g (0.018 mol), 加入上述 HP— — CYD溶液中；

(3 )混合液在 50°C以磁力搅拌方法恒温搅拌 20分钟，溶液逐渐澄清，即得 ARB— HP— β—CYD包合物溶液。

(4) 用以上方法制得的溶液进行喷雾干燥或冻干，即可得到固体状 ARB-HP- β -CYD包合物。

经紫外分光光度法检测，用此法制得的 ARB— HP— β -CYD包合物在 25°CARB溶解度为 1.56 g/100 ml, ARB经 HP— β—CYD包合后溶解度提高了 650倍。另外，还用热重分析法（TGA— DTA) 分别测定了 HP— — CYD、 ARB, ARB 与 HP_ _CYD 的物理混合物以及在本实施例中得到的 ARB— HP— β— CYD包合物的热重分析图谱，分别如图 3— 6所示。由这些图谱中的曲线可以看出，ΗΡ_ β _CYD在 345°C处具有一个吸热峰； ARB在 120°C和 186°C处各有一个吸热峰； ARB与 HP— β一 CYD的物理混合物在 109 °C和 201 Ό处各有一个吸热峰；而 ARB— HP— β一 CYD 包合物仅在 221 °C处有一个吸热峰，也就是说， HP— β— CYD和 ARB 的特征峰均已消失，说明有新的物相一包合物的形成。实施例 6: 溶液一搅拌法制备 ARB—二甲基一 β -CYD包合物溶液

( 1 )称取 40.72 g (0.036 mol) 2，6—二甲基一 β -CYD,放入 800 ml 蒸馏水中，搅拌溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜5.0；

(2) 另称取 ARB 10 g (0.018 mol), 加入上述二甲基一 β—CYD 溶液中；

(3 ) 混合液在 40°C以磁力搅拌方法恒温搅拌 40分钟，溶液逐渐澄清，即得 ARB—二甲基一 β— CYD包合物溶液。

(5) 用以上方法制得的溶液进行喷雾干燥或冻干，即可得到固体状 ARB—二甲基一 β -CYD包合物。

经紫外分光光度法检测，用此法制得的 ARB— HP— β -CYD包合物在 25°CA B溶解度为 1.56 g/100 ml, ARB经 HP— β—CYD包合后溶解度提高了 650倍。实施例 7: ARB- β -CYD包合物片剂的制备

( 1 ) ARB— β—CYD包合物的制备同实施例 1。

(2) 将上述 ARB— β— CYD包合物制备成片剂（每片含 ARB 50 mg)，配方如下： ARB- β -CYD包合物 287 mg 淀粉 150.4 mg

预胶化淀粉 ' 75.2 mg

交联聚乙烯吡咯烷酮 16.8 mg

2%羟丙基甲基纤维素 60 %乙适量

醇溶液

硬脂酸镁 5.6 mg

总重 535 mg

(3)将 ARB— β— CYD包合物、淀粉、预胶化淀粉、交联聚乙烯吡咯垸酮混合均匀，加入 2% 羟丙基甲基纤维素 60%乙醇溶液制软材，并制成约 20目大小的颗粒，干燥后加入硬脂酸镁压片。

将未经包合处理的 ARB普通片剂同采用本实施例方法制备的片剂进行了体外溶出度考察，溶出度测定方法如下：

取样品，按照溶出度测定法 (中国药典 2000 版二部附录 X C第一法)，以水 900 ml为溶剂，转速每分钟 100转，依法操作，经 45分钟时取溶液 10 ml滤过，精密量取续滤液 3 ml置 25 ml量瓶中，加水稀释到刻度，摇匀，照分光光度法（中国药典 2000版二部附录 IV A)，在 257 nm 的波长处测定吸收度；另精密称取阿比朵尔对照品适量，加水适量，超声使溶解，加水稀释制成每 1 ml含 10 μ g的溶液，同法操作，计算出每片的溶出量。溶出度结果见表 2，溶出曲线见图 2。 ' 表 2 溶出度结果

经 β—CYD包合的

0 18.4 43.88 69.3 89.13 96.75 99.86

ARB片

ARB普通片 0 7.34 23.56 41.75 63.22 78.83 90.12

从以上数据可以看出，经 β -CYD包合的 ARB片体外溶出度明显高于未经包合处理的 ARB普通片剂的体外溶出度。实施例 8: 制备 ARB— HP— β— CYD包合物注射液（5 ml: 100 mg)

( 1 )称取 49.18 g (0.036 mol) HP— β -CYD, 放入 360 ml蒸馏水和 40 ml丙二醇中，搅拌溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜 5.0；

(2) 另称取 ARB 10 g (0.018 mol), 加入上述 HP— β—CYD溶液中；

(3)混合液在 50°C以磁力搅拌方法恒温搅拌 20分钟，溶液逐渐澄清，即得 ARB— HP— β— CYD包合物溶液。

(4) 加注射用水至 500 ml, 搅拌均匀后经 0.22 μπι微孔滤膜过滤，然后无菌灌装入 5 ml棕色安瓿即得。实施例 9: 制备 ARB— HP— β— CYD包合物无菌粉针（lOO mg /支）

( 1 )称取 49.18 g (0.036 mol) HP— β -CYD, 放入 400 ml蒸馏水中，搅拌溶解，再加入适量酒石酸使溶液 PH达到 4.0〜5.0_;

(2) 另称取 ARB 10 g (0.018 mol), 加入上述 HP— β—CYD溶液中；

(3 )混合液在 50 °C以磁力搅拌方法恒温搅拌 20分钟，溶液逐渐澄清，即得 ARB— HP— β— CYD包合物溶液。

(4) 加注射用水至 500 ml，搅拌均匀后经 0.22 μιη微孔滤膜过滤，然后无菌分装入西林瓶中（5 ml/瓶)，冷冻干燥压盖即得。

Claims

权利要求

1、一种阿比朵尔包合物，其含有活性成分阿比朵尔和包合剂环糊精或者其衍生物。

2、根据权利要求 1所述的阿比朵尔包合物，其中阿比朵尔与环糊精或者其衍生物的摩尔比为 1 : 1〜10。

3、根据权利要求 1所述的阿比朵尔包合物，其中所述环糊精包括 α 一、 β―、 Υ—环糊精；所述环糊精衍生物包括：羟乙基一 β—环糊精、羟丙基一 β—环糊精、二甲基一β—环糊精、三甲基一 β—环糊精、葡糖基一环糊精、麦芽糖基一环糊精、麦芽三糖基一环糊精、磺丁醚— β —环糊精、羧甲基一β—环糊精以及 —环糊精与 3—氯一 1， 2—环氧丙烷交联而成的聚合物。

4、根据权利要求 1所述的阿比朵尔包合物，其是阿比朵尔一 β—环糊精包合物。

5、一种阿比朵尔包合物的制备方法，其为饱和水溶液法并包括以下步骤：将作为包合剂的环糊精或者其衍生物制成饱和水溶液，依照阿比朵尔与包合剂的摩尔比，用少量低级醇溶解阿比朵尔，将阿比朵尔加入上述饱和水溶液，搅拌使阿比朵尔被充分包合，沉淀物滤出并以适量的低级醇洗涤后干燥，得阿比朵尔包合物。

6、一种阿比朵尔包合物的制备方法，其特征为溶液一搅拌法并包括

7、根据权利要求 6所述的制备方法，其特征为：环糊精或者其衍生物具有良好的水溶性，并选自于 α—环糊精、 Υ—环糊精、羟乙基一 β 一环糊精、羟丙基一 β—环糊精、二甲基一 β—环糊精、三甲基一 — 环糊精、葡糖基一环糊精、麦芽糖基一环糊精、麦芽三糖基一环糊精、磺丁醚一 β—环糊精、羧甲基一 β—环糊精包合物以及 β—环糊精与 3 一氯一 1， 2—环氧丙垸交联而成的聚合物。

8、一种阿比朵尔包合物的制备方法，其为研磨法并包括以下步骤：取作为包合剂的环糊精或者其衍生物加入 2〜5倍量水研匀，依照阿比朵尔与包合剂的摩尔比，加入阿比朵尔药物，置研磨机中充分研磨成糊状，用适当溶剂洗涤，'干燥，即得阿比朵尔包合物。

9、如权利要求 1一 4之一所述的阿比朵尔包合物在制备肠道给药或非肠道给药制剂中的用途。

10、如权利要求 9所述的用途，其中所述制剂是用于治疗由病毒引起的疾病。